# Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания

Институт фармакопеи и стандартизации в сфере обращения лекарственных средств
Министерство здравоохранения Российской Федерации

## Вступительное слово Министра здравоохранения Российской Федерации к Государственной фармакопее Российской Федерации XV издания

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания, сохраняя приверженность лучшим практикам и подходам отечественных фармакопей предыдущих изданий, вносит существенный вклад в обеспечение охраны здоровья населения Российской Федерации посредством установления единых, современных и адекватных требований к качеству лекарственных средств.

Сбережение народа России, развитие человеческого потенциала, повышение качества жизни и благосостояния граждан входят в число важнейших национальных интересов Российской Федерации, перечень которых определен Стратегией национальной безопасности Российской Федерации, утвержденной Указом Президента Российской Федерации от 02.07.2021 № 400.

Достижение целей государственной политики в данной сфере обеспечивается путем решения следующих задач:

- обеспечения устойчивости системы здравоохранения, ее адаптации к новым вызовам и угрозам, в том числе связанным с распространением инфекционных заболеваний;

- повышения качества и доступности медицинской помощи, включая вакцинацию, и лекарственного обеспечения;

- расширения производства лекарственных средств.

Одним из примеров достижения целей государственной политики является эффективное выполнение государственной программы Российской Федерации «Развитие фармацевтической и медицинской промышленности» на период до 2020 года, которое позволило обеспечить заметный прогресс российской фармацевтической промышленности, выразившийся в следующих достижениях:

- появление ряда оригинальных препаратов отечественного производства;

- значительное расширение номенклатуры воспроизведенных и биоаналоговых отечественных препаратов, которые в натуральном выражении составляют более 70 % лекарственных препаратов;

- создание в условиях пандемии новой коронавирусной инфекции (COVID-19) оригинальных лекарственных препаратов, в том числе ряда качественных, эффективных и безопасных вакцин.

Удовлетворение потребности системы здравоохранения Российской Федерации в среднесрочной и долгосрочной перспективе с учетом повышения ожидаемой продолжительности жизни в качественных, эффективных и безопасных лекарственных препаратах преимущественно локального производства выступает одной из ключевых задач государственной программы наряду с расширением производственной номенклатуры основных действующих веществ (фармацевтических субстанций и сырьевых ингредиентов, необходимых для их производства) для обеспечения лекарственной безопасности нашей страны.

Одним из ключевых инструментов для решения поставленных стратегических задач является система стандартизации качества лекарственных средств, центральное место в которой занимает Государственная фармакопея Российской Федерации.

Наличие единых фармакопейных требований представляется особенно актуальным в условиях стремительного развития фармацевтической промышленности, выражающегося в разработке новых молекул действующих веществ, совершенствовании состава лекарственных препаратов, расширении номенклатуры лекарственных форм и масштабном производстве воспроизведённых лекарственных препаратов.

Государственная фармакопея Российской Федерации не только устанавливает единые и научно-обоснованные требования к качеству лекарственных средств, лекарственного растительного сырья и вспомогательных веществ, к проведению испытаний продукции указанных категорий, но и определяет перспективные направления развития стандартизации качества лекарственных средств, способствуя внедрению современных, селективных и точных методов и методик анализа.

Один из базовых принципов разработки фармакопейных требований – стремление к полному охвату наиболее значимых для системы здравоохранения лекарственных средств. Немаловажно, что разработка общих фармакопейных статей и фармакопейных статей основывается на коллегиальности и открытости. Воспроизведение и валидация методик, включаемых в общие фармакопейные статьи и фармакопейные статьи, проводится в испытательных лабораториях, которые аккредитованы в установленном порядке, в том числе на соответствие требованиям Всемирной организации здравоохранения.

Формирование межгосударственных объединений и союзов, а также создание региональных рынков обращения лекарственных средств обусловили необходимость гармонизации фармакопейных требований. Разработка общих фармакопейных статей и фармакопейных статей, включенных в XV издание Государственной фармакопеи Российской Федерации, проводилась с учетом гармонизации с Фармакопеей Евразийского экономического союза и ведущими фармакопеями мира.

Настоящее XV издание Государственной фармакопеи Российской Федерации призвано, во-первых, обеспечить стандартизацию качества лекарственных средств на современном уровне и, во-вторых, способствовать интеграции российского фармацевтического рынка лекарственных средств в глобальную систему производства и потребления лекарств, в том числе посредством гармонизации требований к качеству.

Государственная фармакопея Российской Федерации XV издания будет способствовать достижению стратегических целей по повышению качества жизни населения на национальном уровне, обеспечению лекарственного суверенитета Российской Федерации, внесет безусловный вклад в развитие региональной и глобальной архитектуры здравоохранения.

Министр здравоохранения Российской Федерации Михаил Альбертович Мурашко

## Предисловие

Издание Государственной фармакопеи Российской Федерации (далее – Государственная фармакопея) осуществляется в целях охраны здоровья населения Российской Федерации посредством обеспечения единых, современных и адекватных требований к качеству лекарственных средств.

Государственная фармакопея является главным инструментом стандартизации качества лекарственных средств на российском фармацевтическом рынке и, наряду с нормативными правовыми актами, призвана служить фактором развития конкурентоспособности отечественной фармацевтической промышленности.

Государственная фармакопея имеет статус национальной фармакопеи. Круг пользователей Государственной фармакопеи включает разработчиков, производителей, изготовителей и поставщиков лекарственных средств, лаборатории контроля качества, регуляторные и экспертные органы, научные и образовательные учреждения, а также фармацевтические ассоциации.

История отечественной фармакопеи берёт своё начало в 1866 году, когда было выпущено первое её издание. Пятнадцатому изданию Государственной фармакопеи предшествует четырнадцатое издание, утверждённое в 2018 году, к которому дополнительно в качестве приложений приказами Министерства здравоохранения Российской Федерации был утвержден ряд общих фармакопейных статей и фармакопейных статей.

Процесс разработки и актуализации общих фармакопейных статей (ОФС) и фармакопейных статей (ФС) для Государственной фармакопеи основывается на принципах научной обоснованности, коллегиальности и открытости и включает следующие этапы:

- подготовка проектов ОФС/ФС в Институте фармакопеи и стандартизации в сфере обращения лекарственных средств ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России;

- рецензирование проектов ОФС/ФС членами экспертных секций;

- рассмотрение проектов ОФС/ФС экспертной секцией;

- рассмотрение проектов ОФС/ФС Фармакопейным комитетом ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России;

- публичное обсуждение проектов ОФС/ФС на официальном сайте Министерства здравоохранения Российской Федерации;

- рассмотрение проектов ОФС/ФС Советом Министерства здравоохранения по Государственной фармакопее;

- научно-техническое редактирование проектов ОФС/ФС;

- утверждение проектов ОФС/ФС приказом Министерства здравоохранения Российской Федерации.

Рассмотрение проектов ОФС/ФС осуществлялось следующими экспертными секциями:

1. Секция стандартизации химико-фармацевтических субстанций (№ 1).

2. Секция стандартизации химико-фармацевтических субстанций (№ 2).

3. Секция стандартизации биологических лекарственных средств.

4. Секция стандартизации растительных лекарственных средств (включая гомеопатические).

5. Секция стандартизации препаратов крови и иммунобиологических лекарственных средств.

6. Секция стандартизации радиофармацевтических препаратов.

7. Секция стандартизации медицинских газов и вспомогательных веществ.

8. Секция стандартизации лекарственных препаратов аптечного изготовления.

Государственная фармакопея XV издания была подготовлена с учетом поступивших комментариев, замечаний и предложений к содержанию общих фармакопейных статей и фармакопейных статей Государственной фармакопеи XIV издания.

## Введение

Государственная фармакопея Российской Федерации (далее – Государственная фармакопея) является официальным сборником общегосударственных стандартов и положений, устанавливающих требования к качеству лекарственных средств на национальном уровне.

Государственная фармакопея занимает центральное место в системе стандартизации лекарственных средств. Указанные в Государственной фармакопее требования к качеству лекарственных средств являются обязательными для всех субъектов обращения лекарственных средств.

Устанавливаемый субъектами обращения лекарственных средств уровень качества лекарственных средств должен быть не ниже фармакопейных требований.

Государственная фармакопея основана на принципах российского здравоохранения и на современных достижениях науки и промышленности.

Основу Государственной фармакопеи составляют общие фармакопейные статьи и фармакопейные статьи. Государственная фармакопея XV издания включает 322 общие фармакопейные статьи и 576 фармакопейных статей. В дальнейшем планируется дополнение Государственной фармакопеи XV издания общими фармакопейными статьями и фармакопейными статьями в составе приложений к Государственной фармакопее, утверждаемыми приказами Министерства здравоохранения Российской Федерации.

Общие фармакопейные статьи описывают принятые в фармакопейном анализе общие положения, а также включают в себя перечень показателей качества и (или) методов контроля лекарственных средств.

Фармакопейные статьи устанавливают требования к конкретным лекарственным средствам.

В условиях глобализации мирового фармацевтического рынка одним из основных векторов развития современных фармакопейных требований является их гармонизация. Наличие унифицированных требований к качеству лекарственных средств позволяет ускорить доступ лекарственных средств на рынок. Разработка отечественных фармакопейных требований проводится с учётом подходов, применяемых при разработке региональной фармакопеи – Фармакопеи Евразийского экономического союза.

Установлена новая система идентификации общих фармакопейных статей и фармакопейных статей, позволяющая обеспечить эффективное планирование периодического пересмотра и обновления фармакопейных текстов, а также удобство поиска и использования необходимой информации.

Общие фармакопейные статьи в Государственной фармакопее размещаются по тематическим разделам и подразделам с присвоением номеров формата #.#.#.#.####, отражающих положение общей фармакопейной статьи в иерархичной структуре.

Фармакопейные статьи размещаются в тематических разделах и подразделах Государственной фармакопее в алфавитном порядке.

Общие фармакопейные статьи и фармакопейные статьи, утверждаемые в качестве очередного издания Государственной фармакопеи, а также общие фармакопейные статьи и фармакопейные статьи, утверждаемые отдельными приказами Министерства здравоохранения Российской Федерации, равнозначны в правовом отношении и имеют одинаковую юридическую силу.

Одним из ключевых отличий Государственной фармакопеи XV издания от предыдущих издания является введение следующих разделов:

- общие фармакопейные статьи, описывающие методы, используемые на этапе фармацевтической разработки лекарственных средств;

- общие фармакопейные статьи, устанавливающие требования к упаковочным материалам, используемым в производстве лекарственных средств;

- общие фармакопейные статьи, определяющие подходы к изготовлению лекарственных препаратов в аптечных организациях.

Общая фармакопейная статья «Определение примесей N-нитрозаминов» разработана в связи с обнаружением данных генотоксичных примесей в ряде лекарственных средств, начиная с 2018 года, и вводится в практику отечественного фармакопейного анализа впервые.

Ряд общих фармакопейных статей, ранее представленных в Государственной фармакопее XIII и XIV изданий, не включен в Государственную фармакопею XV издания по причине их невостребованности в связи с совершенствованием и развитием практики современного фармакопейного анализа.

Общие фармакопейные статьи, содержавшиеся в Государственной фармакопее XIV издания, переработаны и дополнены с учетом современных достижений науки и техники в области контроля качества лекарственных средств.

## Перечень общих фармакопейных статей Государственной фармакопеи XV издания, которые вводятся в отечественную фармакопейную практику впервые

№ п/п | Наименование общей фармакопейной статьи | Номер общей фармакопейной статьи
--- | --- | ---
Общие положения (раздел 1.1)
1. | Контроль температуры и влажности с течением времени | ОФС.1.1.0028
2. | Определение фотостабильности лекарственных средств | ОФС.1.1.0029
3. | Перенос (трансфер) аналитических методик | ОФС.1.1.0030
4. | Изолирующие системы, применяемые при испытании стерильности лекарственных средств | ОФС.1.1.0031
5. | Индикаторные трубки | ОФС.1.1.0032
6. | Каплемеры | ОФС.1.1.0033
7. | Квалификация аналитического оборудования | ОФС.1.1.0034
8. | Элементные примеси | ОФС.1.1.0040
9. | Вспомогательные вещества | ОФС.1.1.0041
10. | Определение гигроскопичности | ОФС.1.1.0042
Фармацевтическая разработка (подраздел 1.1.1)
11. | Взаимодействие воды и твёрдого вещества с водой: построение изотерм сорбции-десорбции и определение активности воды | ОФС.1.1.1.0001
12. | Измельченность порошков | ОФС.1.1.1.0002
13. | Определение газовой пикнометрической плотности порошкообразного вещества | ОФС.1.1.1.0003
14. | Характеристическое растворение | ОФС.1.1.1.0004
15. | Определение дзета-потенциала методом электрофоретического рассеяния света | ОФС.1.1.1.0005
16. | Определение пористости методом адсорбции-десорбции азота | ОФС.1.1.1.0006
17. | Определение размера пор методом ртутной порозиметрии | ОФС.1.1.1.0007
18. | Определение удельной площади поверхности методом воздухопроницаемости | ОФС.1.1.1.0008
19. | Определение удельной площади поверхности порошков методом газовой адсорбции | ОФС.1.1.1.0009
20. | Определение характеристик кристаллических твёрдых веществ с помощью микрокалориметрии и калориметрии растворения | ОФС.1.1.1.0010
21. | Определение характеристик сыпучести порошков методом сдвиговых ячеек | ОФС.1.1.1.0011
22. | Плотность твердых веществ | ОФС.1.1.1.0012
23. | Смачиваемость пористых твердых веществ | ОФС.1.1.1.0013
24. | Истираемость гранул | ОФС.1.1.1.0014
25. | Наблюдаемая скорость растворения | ОФС.1.1.1.0016
Упаковка, материалы упаковки и методы их анализа (подраздел 1.1.2)
26. | Силиконовые эластомеры для укупорочных средств и трубок | ОФС.1.1.2.0001
27. | Силиконовые масла, используемые в качестве смазывающей добавки | ОФС.1.1.2.0002
28. | Вспомогательные элементы первичной упаковки для лекарственных форм | ОФС.1.1.2.0003
29. | Гидролитическая стабильность упаковки из стекла | ОФС.1.1.2.0004
30. | Добавки к полимерным материалам для фармацевтического применения | ОФС.1.1.2.0005
31. | Упаковка для фармацевтического применения из стекла | ОФС.1.1.2.0006
32. | Упаковка и укупорочные средства из полимерных материалов для фармацевтического применения | ОФС.1.1.2.0007
33. | Определение паропроницаемости упаковки из полимерных материалов для лекарственных препаратов для приёма внутрь | ОФС.1.1.2.0008
34. | Определение плотности полимерных материалов | ОФС.1.1.2.0009
35. | Определение светопропускания упаковки из полимерных материалов для лекарственных средств | ОФС.1.1.2.0010
36. | Упаковочные материалы и упаковка на основе полиэтилентерефталатов для лекарственных средств | ОФС.1.1.2.0011
37. | Упаковочные материалы на основе непластифицированного поливинилхлорида для лекарственных препаратов в твёрдой лекарственной форме для приёма внутрь | ОФС.1.1.2.0012
38. | Упаковочные материалы на основе непластифицированного поливинилхлорида для непарентеральных водных растворов | ОФС.1.1.2.0013
39. | Упаковка из полимерных материалов для водных растворов для инфузий | ОФС.1.1.2.0014
40. | Упаковочные материалы на основе полиамида 6 для лекарственных средств | ОФС.1.1.2.0017
41. | Резиновые укупорочные средства для упаковки водных парентеральных лекарственных препаратов, порошков и лиофилизированных порошков | ОФС.1.1.2.0018
42. | Упаковочные материалы на основе пластифицированного поливинилхлорида для водных растворов для инфузий | ОФС.1.1.2.0019
43. | Упаковочные материалы на основе поликарбонатов для лекарственных средств | ОФС.1.1.2.0020
44. | Упаковочные материалы на основе полиолефинов для лекарственных средств | ОФС.1.1.2.0021
45. | Упаковочные материалы на основе полипропилена для парентеральных и офтальмологических лекарственных форм | ОФС.1.1.2.0022
46. | Упаковочные материалы на основе полиэтилена без добавок для лекарственных препаратов парентерального и офтальмологического применения | ОФС.1.1.2.0023
47. | Упаковочные материалы на основе полиэтилена с добавками для лекарственных препаратов парентерального и офтальмологического применения | ОФС.1.1.2.0024
48. | Упаковочные материалы на основе полиэтиленвинилацетата для лекарственных препаратов для парентерального питания | ОФС.1.1.2.0025
Методы анализа лекарственных средств (раздел 1.2)
Методы физического и физико-химического анализа (подраздел 1.2.1)
49. | Сканирующая электронная микроскопия | ОФС.1.2.1.0001
50. | Инструментальные методы определения цветности жидкостей | ОФС.1.2.1.0002
51. | Определение запаха | ОФС.1.2.1.0029
52. | Потеря в массе при прокаливании | ОФС.1.2.1.0030
53. | Прямое амперометрическое и импульсное электрохимическое детектирование | ОФС.1.2.1.0031
Методы спектрального анализа (подраздел 1.2.1.1)
54. | Турбидиметрия | ОФС.1.2.1.1.0014
55. | Масс-спектрометрия с индуктивно связанной плазмой | ОФС.1.2.1.1.0015
56. | Нефелометрия | ОФС.1.2.1.1.0016
57. | Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой | ОФС.1.2.1.1.0017
58. | Химическая визуализация | ОФС.1.2.1.1.0018
Хроматографические методы анализа (подраздел 1.2.1.2)
59. | Гидрофобная хроматография | ОФС.1.2.1.2.0011
Испытание на предельное содержание примесей (подраздел 1.2.2.2)
60. | Калий | ОФС.1.2.2.2.0015
61. | Магний и другие щёлочноземельные металлы | ОФС.1.2.2.2.0016
62. | Фториды | ОФС.1.2.2.2.0017
63. | 4-Аминофенол | ОФС.1.2.2.2.0018
64. | Вода в газах медицинских | ОФС.1.2.2.2.0020
65. | Примесь кислорода в газах медицинских | ОФС.1.2.2.2.0023
66. | Этиленоксид и диоксан | ОФС.1.2.2.2.0024
67. | Этиленгликоль и диэтиленгликоль в этоксилированных субстанциях | ОФС.1.2.2.2.0025
68. | Серы диоксид во вспомогательных веществах | ОФС.1.2.2.2.0027
69. | Примеси углерода диоксида и углерода оксида в газах медицинских | ОФС.1.2.2.2.0029
70. | Примесь серы диоксида в газах медицинских | ОФС.1.2.2.2.0030
71. | Примеси N-нитрозаминов | ОФС.1.2.2.2.0031
72. | Азота оксид и азота диоксид в газах медицинских | ОФС.1.2.2.2.0032
Методы количественного определения (подраздел 1.2.3)
73. | Титриметрия (титриметрические методы анализа) | ОФС.1.2.3.0029
74. | Вольтаметрическое титрование | ОФС.1.2.3.0030
75. | Определение метокси- и этоксигрупп | ОФС.1.2.3.0033
76. | Определение уксусной кислоты в синтетических пептидах | ОФС.1.2.3.0035
Реактивы (раздел 1.3)
77. | Стандартные растворы | ОФС.1.3.0004
Лекарственные формы и методы их анализа (раздел 1.4)
Лекарственные формы (подраздел 1.4.1)
78. | Выбор лекарственных форм для детей | ОФС.1.4.1.0043
79. | Растворы для диализа, гемодиализа, гемофильтрации и гемодиафильтрации | ОФС.1.4.1.0044
Фармацевтико-технологические испытания лекарственных форм (подраздел 1.4.2)
80. | Время растворения или диспергирования | ОФС.1.4.2.0019
81. | Выход содержимого упаковки | ОФС.1.4.2.0020
82. | Давление в упаковке | ОФС.1.4.2.0021
83. | Испытания лекарственных форм для ингаляций, предназначенных для распыления с помощью небулайзера | ОФС.1.4.2.0022
84. | Металлические частицы в мазях глазных | ОФС.1.4.2.0023
85. | Насыпная плотность и плотность после уплотнения | ОФС.1.4.2.0024
86. | Определение герметичности упаковки | ОФС.1.4.2.0025
87. | Определение консистенции методом пенетрометрии | ОФС.1.4.2.0026
88. | Определение показателя «Размер частиц» в суспензиях, эмульсиях, мягких лекарственных формах | ОФС.1.4.2.0027
89. | Размер частиц (капель) и их распределение по размерам в эмульсиях для парентерального применения | ОФС.1.4.2.0028
90. | Седиментационная устойчивость | ОФС.1.4.2.0029
91. | Однородность массы (объёма) доз, отобранных из многодозовой упаковки | ОФС.1.4.2.0030
Лекарственное растительное сырье (раздел 1.5)
Масла для производства и изготовления лекарственных препаратов (подраздел 1.5.2)
92. | Жиры и жироподобные вещества | ОФС.1.5.2.0003
Методы анализа лекарственного растительного сырья, лекарственных средств растительного происхождения (1.5.3)
93. | Определение содержания жирных масел в лекарственном растительном сырье и лекарственных средствах растительного происхождения | ОФС.1.5.3.0014
94. | Показатель набухания | ОФС.1.5.3.0015
95. | Определение воды в эфирных маслах | ОФС.1.5.3.0016
96. | Определение состава жирных кислот в маслах жирных растительных и жирах | ОФС.1.5.3.0017
97. | Стерины в маслах жирных растительных и жирах | ОФС.1.5.3.0018
98. | Щелочные примеси в маслах жирных растительных и жирах | ОФС.1.5.3.0019
Гомеопатические лекарственные средства (раздел 1.6)
99. | Лекарственные средства гомеопатические | ОФС.1.6.0001
100. | Вспомогательные вещества для гомеопатических лекарственных средств | ОФС.1.6.0002
Биологические лекарственные средства (раздел 1.7)
101. | Биологические лекарственные препараты, полученные на основе градуальной технологии | ОФС.1.7.0001
Лекарственные препараты аптечного изготовления (раздел 1.8)
102. | Лекарственные препараты аптечного изготовления | ОФС.1.8.0001
103. | Лекарственные препараты аптечного изготовления для детей | ОФС.1.8.0002
104. | Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм | ОФС.1.8.0003
105. | Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде мягких лекарственных форм | ОФС.1.8.0004
106. | Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм | ОФС.1.8.0005
107. | Стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления | ОФС.1.8.0006
108. | Гомеопатические лекарственные препараты аптечного изготовления | ОФС.1.8.0007
Радиофармацевтические лекарственные препараты (раздел 1.11)
109. | Радиофармацевтические лекарственные препараты для позитронно-эмиссионной томографии | ОФС.1.11.0002
110. | Радиофармацевтические лекарственные препараты экстемпорального изготовления | ОФС.1.11.0004
111. | Химические предшественники для радиофармацевтических лекарственных препаратов | ОФС.1.11.0005

## Перечень фармакопейных статей Государственной фармакопеи XV издания, которые вводятся в отечественную фармакопейную практику впервые

№ п/п | Наименование фармакопейной статьи | Номер фармакопейной статьи
--- | --- | ---
1. | Абакавира сульфат | ФС.2.1.0340
2. | Абиратерона ацетат | ФС.2.1.0333
3. | Адеметионина бутандисульфонат | ФС.2.1.0334
4. | Азелаиновая кислота | ФС.2.1.0336
5. | Азота закись, газ сжиженный | ФС.2.2.0040
6. | Алендронат натрия тригидрат | ФС.2.1.0357
7. | Алимемазина тартрат | ФС.2.1.0341
8. | Аминосалициловая кислота | ФС.2.1.0473
9. | Амиодарона гидрохлорид | ФС.2.1.0626
10. | Аморолфина гидрохлорид | ФС.2.1.0371
11. | Анастрозол | ФС.2.1.0627
12. | Аргинин | ФС.2.1.0337
13. | Аспарагиновая кислота | ФС.2.1.0352
14. | Атазанавира сульфат | ФС.2.1.0380
15. | Ацеклофенак | ФС.2.1.0628
16. | Ацетазоламид | ФС.2.1.0629
17. | Ацетилкарнитина гидрохлорид | ФС.2.1.0631
18. | Баклофен | ФС.2.1.0632
19. | Беклометазона дипропионат | ФС.2.1.0381
20. | Бензидамина гидрохлорид | ФС.2.1.0382
21. | Бензиловый спирт | ФС.2.1.0376
22. | Бета-аланин | ФС.2.1.0635
23. | Бикалутамид | ФС.2.1.0636
24. | Бипериден | ФС.2.1.0384
25. | Бримонидина тартрат | ФС.2.1.0385
26. | Булевиртида ацетат | ФС.2.1.0386
27. | Бутамирата цитрат | ФС.2.1.0387
28. | Валацикловира гидрохлорид | ФС.2.1.0643
29. | Валганцикловира гидрохлорид | ФС.2.1.0644
30. | Валсартан | ФС.2.1.0388
31. | Вальпроевая кислота | ФС.2.1.0389
32. | Ванкомицина гидрохлорид | ФС.2.1.0645
33. | Варфарин натрия клатрат | ФС.2.1.0390
34. | Вилдаглиптин | ФС.2.1.0646
35. | Вориконазол | ФС.2.1.0647
36. | Габапентин | ФС.2.1.0648
37. | Гадобутрол моногидрат | ФС.2.1.0391
38. | Галоперидола деканоат | ФС.2.1.0392
39. | Гесперидин | ФС.2.4.0020
40. | Гестоден | ФС.2.1.0394
41. | Гефитиниб | ФС.2.1.0395
42. | Гидрокортизона бутират | ФС.2.1.0396
43. | Гидроксизина гидрохлорид | ФС.2.1.0650
44. | Гидроксикарбамид | ФС.2.1.0651
45. | Гидроксиникотиноилглутамат кальция | ФС.2.1.0652
46. | Гидроксихлорохина сульфат | ФС.2.1.0397
47. | Гимекромон | ФС.2.1.0398
48. | Глимепирид | ФС.2.1.0655
49. | Глутатион | ФС.2.1.0399
50. | Глюкозамина сульфат натрия хлорид | ФС.2.3.0003
51. | Гозерелина ацетат | ФС.2.1.0656
52. | Гранисетрона гидрохлорид | ФС.2.1.0657
53. | Дазатиниб | ФС.2.1.0400
54. | Дарунавир | ФС.2.1.0402
55. | Дарунавира этанолат | ФС.2.1.0403
56. | Дезлоратадин | ФС.2.1.0405
57. | Декскетопрофена трометамол | ФС.2.1.0406
58. | Декспантенол | ФС.2.1.0659
59. | Декстрин | ФС.2.4.0016
60. | Десмопрессина ацетат | ФС.2.1.0660
61. | Диацереин | ФС.2.1.0407
62. | Диданозин | ФС.2.1.0662
63. | Дидрогестерон | ФС.2.1.0408
64. | Дииндолилметан | ФС.2.1.0409
65. | Дименгидринат | ФС.2.1.0410
66. | Диметикон | ФС.2.1.0310
67. | Диметилсульфоксид | ФС.2.1.0411
68. | Диметилсульфон | ФС.2.1.0664
69. | Диметилфумарат | ФС.2.1.0412
70. | Диметиндена малеат | ФС.2.1.0413
71. | Диосмин | ФС.2.1.0665
72. | Дисульфирам | ФС.2.1.0415
73. | Доксиламина сукцинат | ФС.2.1.0416
74. | Доксициклина моногидрат | ФС.2.1.0311
75. | Домперидон | ФС.2.1.0666
76. | Дорзоламида гидрохлорид | ФС.2.1.0418
77. | Дорипенем моногидрат | ФС.2.1.0419
78. | Доцетаксел тригидрат | ФС.2.1.0668
79. | Дроспиренон | ФС.2.1.0420
80. | Дутастерид | ФС.2.1.0421
81. | Золедроновая кислота моногидрат | ФС.2.1.0601
82. | Ивабрадина гидробромид | ФС.2.1.0503
83. | Иматиниба мезилат | ФС.2.1.0422
84. | Имидазолилэтанамид пентандиовой кислоты | ФС.2.1.0603
85. | Имипенем моногидрат | ФС.2.1.0423
86. | Индолилметиламиноэтанол | ФС.2.1.0598
87. | Индометацин | ФС.2.1.0424
88. | Инозин пранобекс | ФС.2.1.0425
89. | Йопромид | ФС.2.1.0605
90. | Ирбесартан | ФС.2.1.0607
91. | Иринотекана гидрохлорид тригидрат | ФС.2.1.0608
92. | Ифосфамид | ФС.2.1.0609
93. | Каберголин | ФС.2.1.0599
94. | Кабозантиниба (S)-малат | ФС.2.1.0427
95. | Кавутилида гидрохлорид | ФС.2.1.0428
96. | Кальция глицерофосфат | ФС.2.1.0610
97. | Канамицина сульфат кислый | ФС.2.1.0429
98. | Кандесартана цилексетил | ФС.2.1.0430
99. | Капецитабин | ФС.2.1.0431
100. | Карбоплатин | ФС.2.1.0432
101. | Карведилол | ФС.2.1.0433
102. | Кармеллоза натрия | ФС.2.1.0377
103. | Кветиапина фумарат | ФС.2.1.0434
104. | Кетоконазол | ФС.2.1.0435
105. | Кетотифена фумарат | ФС.2.1.0436
106. | Кладрибин | ФС.2.1.0600
107. | Клиндамицина фосфат | ФС.2.1.0437
108. | Клоназепам | ФС.2.1.0438
109. | Ксантановая камедь | ФС.2.4.0010
110. | Ламивудин | ФС.2.1.0439
111. | Леветирацетам | ФС.2.1.0440
112. | Левокарнитин | ФС.2.1.0441
113. | Левосимендан | ФС.2.1.0442
114. | Левотироксин натрия гидрат | ФС.2.1.0443
115. | Леналидомид | ФС.2.1.0444
116. | Летрозол | ФС.2.1.0445
117. | Лефлуномид | ФС.2.1.0446
118. | Лизоцима гидрохлорид | ФС.2.3.0004
119. | Линезолид | ФС.2.1.0447
120. | Лития карбонат | ФС.2.2.0042
121. | Лоперамида гидрохлорид | ФС.2.1.0613
122. | Лопинавир | ФС.2.1.0449
123. | Лорноксикам | ФС.2.1.0450
124. | Магния оротат дигидрат | ФС.2.1.0614
125. | Магния стеарат | ФС.2.1.0378
126. | Мальтодекстрин | ФС.2.1.0379
127. | Мебендазол | ФС.2.1.0453
128. | Меглюмина акридонацетат | ФС.2.1.0455
129. | Мелатонин | ФС.2.1.0459
130. | Мемантина гидрохлорид | ФС.2.1.0460
131. | Мепивакаина гидрохлорид | ФС.2.1.0462
132. | Меропенема тригидрат | ФС.2.1.0463
133. | Месна | ФС.2.1.0464
134. | Метилпреднизолон | ФС.2.1.0467
135. | Метилцеллюлоза | ФС.2.2.0017
136. | Мефлохина гидрохлорид | ФС.2.1.0472
137. | Микофенолат натрия | ФС.2.1.0505
138. | Микофенолата мофетил | ФС.2.1.0506
139. | Митомицин | ФС.2.1.0507
140. | Моксифлоксацина гидрохлорид | ФС.2.1.0509
141. | Моксонидин | ФС.2.1.0510
142. | Молнупиравир | ФС.2.1.0511
143. | Мометазона фуроат | ФС.2.1.0512
144. | Налоксона гидрохлорид дигидрат | ФС.2.1.0513
145. | Налтрексона моногидрат | ФС.2.1.0514
146. | Натамицин | ФС.2.1.0515
147. | Натрия лаурилсульфоацетат | ФС.2.1.0517
148. | Натрия пикосульфат моногидрат | ФС.2.1.0518
149. | Нафтифина гидрохлорид | ФС.2.1.0521
150. | Невирапин | ФС.2.1.0522
151. | Никорандил | ФС.2.1.0523
152. | Нилотиниба гидрохлорид моногидрат | ФС.2.1.0524
153. | Нимодипин | ФС.2.1.0525
154. | Нитизинон | ФС.2.1.0457
155. | Нифуроксазид | ФС.2.1.0529
156. | Оксалиплатин | ФС.2.1.0532
157. | Оксиметазолина гидрохлорид | ФС.2.1.0534
158. | Окскарбазепин | ФС.2.1.0536
159. | Октенидина дигидрохлорид | ФС.2.1.0537
160. | Оланзапин | ФС.2.1.0539
161. | Орлистат | ФС.2.1.0540
162. | Орнидазол | ФС.2.1.0541
163. | Осельтамивира фосфат | ФС.2.1.0542
164. | Пазопаниба гидрохлорид | ФС.2.1.0543
165. | Паклитаксел | ФС.2.1.0544
166. | Пеметрексед динатрия гептагидрат | ФС.2.1.0545
167. | Перметрин | ФС.2.1.0546
168. | Пипекурония бромид | ФС.2.1.0547
169. | Пипемидовая кислота тригидрат | ФС.2.1.0548
170. | Пирибедил | ФС.2.1.0616
171. | Пиридостигмина бромид | ФС.2.1.0617
172. | Пиритион цинка | ФС.2.1.0618
173. | Помалидомид | ФС.2.1.0621
174. | Прамипексола дигидрохлорид моногидрат | ФС.2.1.0622
175. | Пропифеназон | ФС.2.1.0550
176. | Протионамид | ФС.2.1.0552
177. | Прукалоприда сукцинат | ФС.2.1.0553
178. | Рабепразол натрия | ФС.2.1.0554
179. | Разагилина мезилат | ФС.2.1.0555
180. | Ралтегравир калия | ФС.2.1.0556
181. | Рамиприл | ФС.2.1.0557
182. | Репаглинид | ФС.2.1.0558
183. | Ривароксабан | ФС.2.1.0560
184. | Рилпивирина гидрохлорид | ФС.2.1.0561
185. | Ритонавир | ФС.2.1.0563
186. | Рифабутин | ФС.2.1.0623
187. | Розувастатин кальция | ФС.2.1.0564
188. | Ропивакаина гидрохлорид моногидрат | ФС.2.1.0565
189. | Саквинавира мезилат | ФС.2.1.0566
190. | Салметерола ксинафоат | ФС.2.1.0568
191. | Севофлуран | ФС.2.1.0569
192. | Сибутрамина гидрохлорид моногидрат | ФС.2.1.0504
193. | Силденафила цитрат | ФС.2.1.0570
194. | Ситаглиптина фосфат моногидрат | ФС.2.1.0571
195. | Смектит диоктаэдрический | ФС.2.2.0044
196. | Сорафениба тозилат | ФС.2.1.0572
197. | Соталола гидрохлорид | ФС.2.1.0573
198. | Суксаметония хлорид дигидрат | ФС.2.1.0574
199. | Суматриптана сукцинат | ФС.2.1.0577
200. | Сунитиниба малат | ФС.2.1.0578
201. | Тадалафил | ФС.2.1.0579
202. | Такролимус моногидрат | ФС.2.1.0580
203. | Тамсулозина гидрохлорид | ФС.2.1.0582
204. | Телмисартан | ФС.2.1.0583
205. | Темозоломид | ФС.2.1.0584
206. | Тенофовира дизопроксила фумарат | ФС.2.1.0585
207. | Тербинафина гидрохлорид | ФС.2.1.0586
208. | Теризидон | ФС.2.1.0587
209. | Терифлуномид | ФС.2.1.0588
210. | Тетризолина гидрохлорид | ФС.2.1.0592
211. | Тикагрелор | ФС.2.1.0594
212. | Тиоуреидоиминометилпиридиния перхлорат | ФС.2.1.0484
213. | Тобрамицина сульфат | ФС.2.1.0486
214. | Толперизона гидрохлорид | ФС.2.1.0487
215. | Топирамат | ФС.2.1.0488
216. | Транексамовая кислота | ФС.2.1.0490
217. | Третиноин | ФС.2.1.0491
218. | Тримебутина малеат | ФС.2.1.0494
219. | Тримекаина гидрохлорид | ФС.2.1.0496
220. | Триметазидина дигидрохлорид | ФС.2.1.0498
221. | Трипторелина ацетат | ФС.2.1.0499
222. | Троксерутин | ФС.2.1.0500
223. | Тропикамид | ФС.2.1.0501
224. | Урапидил | ФС.2.1.0476
225. | Фабомотизола дигидрохлорид | ФС.2.1.0477
226. | Фавипиравир | ФС.2.1.0478
227. | Фенирамина малеат | ФС.2.1.0480
228. | Фенозановая кислота | ФС.2.1.0359
229. | Феноксиэтанол | ФС.2.1.0361
230. | Фенотерола гидробромид | ФС.2.1.0362
231. | Фенофибрат | ФС.2.1.0363
232. | Финастерид | ФС.2.1.0364
233. | Финголимода гидрохлорид | ФС.2.1.0365
234. | Флувоксамина малеат | ФС.2.1.0366
235. | Флударабина фосфат | ФС.2.1.0367
236. | Флуоксетина гидрохлорид | ФС.2.1.0368
237. | Флупентиксола дигидрохлорид | ФС.2.1.0369
238. | Флутиказона пропионат | ФС.2.1.0353
239. | Фонтурацетам | ФС.2.1.0354
240. | Формотерола фумарат дигидрат | ФС.2.1.0356
241. | Фосфомицин динатрия | ФС.2.1.0345
242. | Фуразидин натрия тетрагидрат | ФС.2.1.0349
243. | Хлорпротиксена гидрохлорид | ФС.2.1.0338
244. | Цефазолин натрия | ФС.2.1.0315
245. | Цефепима дигидрохлорид моногидрат | ФС.2.1.0314
246. | Цефокситин натрия | ФС.2.1.0313
247. | Цефоперазон натрия | ФС.2.1.0312
248. | Циклосерин | ФС.2.1.0317
249. | Циластатин натрия | ФС.2.1.0318
250. | Цинка бисвинилимидазола диацетат | ФС.2.1.0296
251. | Цитиколин натрия | ФС.2.1.0321
252. | Эбастин | ФС.2.1.0322
253. | Эзетимиб | ФС.2.1.0323
254. | Эзомепразол натрия | ФС.2.1.0324
255. | Эмтрицитабин | ФС.2.1.0325
256. | Эноксапарин натрия | ФС.2.3.0002
257. | Эрдостеин | ФС.2.1.0326
258. | Эрлотиниба гидрохлорид | ФС.2.1.0327
259. | Этопозид | ФС.2.1.0328
260. | Этосуксимид | ФС.2.1.0329
261. | Этравирин | ФС.2.1.0330
262. | Эфавиренз | ФС.2.1.0331

## Состав Совета Министерства здравоохранения Российской Федерации по Государственной фармакопее

Председатель:
Астапенко Елена Михайловна | к.т.н., директор Департамента регулирования обращения лекарственных средств и медицинских изделий Министерства здравоохранения Российской Федерации
Заместители председателя:
Косенко Валентина Владимировна | к.ф.н., и.о. генерального директора федерального государственного бюджетного учреждения «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Раменская Галина Владиславовна | д.ф.н., профессор, директор института фармации, заведующая кафедрой фармацевтической и токсикологической химии им. А.П. Арзамасцева федерального государственного автономного образовательного учреждения высшего образования Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский Университет)
Краснюк Иван Иванович | д.ф.н., профессор, заведующий кафедрой аптечной технологии федерального государственного автономного образовательного учреждения высшего образования Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский Университет)
Секретарь:
Багирова Валерия Леонидовна | д.ф.н., профессор, директор Института фармакопеи и стандартизации в сфере обращения лекарственных средств федерального государственного бюджетного учреждения «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Члены совета:
Ваганова Ольга Александровна | к.ф.н., начальник лаборатории биотехнологических препаратов Испытательного центра экспертизы качества лекарственных средств федерального государственного бюджетного учреждения «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Гуляева Анастасия Юрьевна | к.б.н., заместитель заведующего отделом контроля за безопасностью обращения фармакологических лекарственных средств федерального государственного бюджетного учреждения «Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов»
Денисова Елена Владимировна | заместитель директора Департамента развития фармацевтической и медицинской промышленности Министерства промышленности и торговли Российской Федерации
Елизарова Татьяна Евгеньевна | к.б.н., генеральный директор общества с ограниченной ответственностью «Контрольно-аналитическая лаборатория ФАРМАНАЛИЗ»
Зуев Юрий Владиславович | к.вет.н., заведующий отделом вирусологии федерального государственного бюджетного учреждения «Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов»
Зыкова Татьяна Александровна | к.х.н., начальник отдела контроля качества Центра позитронно-эмиссионной томографии федерального государственного бюджетного учреждения «Национальный медицинский исследовательский центр имени В.А. Алмазова» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Карякин Александр Вадимович | д.б.н., профессор, руководитель испытательной лаборатории отдела экспертизы, контроля и изучения качества, эффективности, безопасности средств трансфузионной и инфузионной терапии федерального государственного бюджетного учреждения «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Ковалева Елена Леонардовна | д.ф.н., заместитель директора Центра экспертизы и контроля готовых лекарственных средств федерального государственного бюджетного учреждения «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Кодина Галина Евгеньевна | к.х.н., доцент, ведущий научный сотрудник, профессор кафедры лучевой диагностики федерального государственного бюджетного учреждения «Государственный научный центр Российской Федерации - федеральный медицинский биофизический центр имени А.И. Бурназяна»
Константинов Алексей Владимирович | к.вет.н., заместитель руководителя службы качества федерального государственного бюджетного учреждения «Федеральный центр охраны здоровья животных»
Мирошниченко Юрий Владимирович | д.ф.н., профессор, заведующий кафедрой фармации федерального государственного бюджетного военного образовательного учреждения высшего образования «Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова» Министерства обороны Российской Федерации, главный специалист Министерства обороны Российской Федерации по лекарственному обеспечению
Михайлова Наталья Александровна | д.ф.н., профессор, заместитель директора федерального государственного бюджетного научного учреждения «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова»
Мовсесянц Арташес Авакович | д.м.н., профессор, начальник Испытательного центра экспертизы качества медицинских иммунобиологических лекарственных препаратов федерального государственного бюджетного учреждения «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Наркевич Игорь Анатольевич | д.ф.н., профессор, ректор федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Санкт-Петербургский государственный химико-фармацевтический университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Самылина Ирина Александровна | д.ф.н., профессор, член-корреспондент РАН, профессор кафедры фармацевтического естествознания федерального государственного автономного образовательного учреждения высшего образования Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (Сеченовский Университет)
Скляров Олег Дмитриевич | д.вет.н., главный научный сотрудник отдела научного планирования и НИР федерального государственного бюджетного учреждения «Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов»
Сомов Дмитрий Владимирович | к.ф.н., врио генерального директора федерального государственного бюджетного учреждения «Информационно-методический центр по экспертизе, учету и анализу обращения средств медицинского применения» Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения

## Организации, учреждения Российской Федерации и специалисты, принявшие участие в подготовке Государственной фармакопеи Российской Федерации XV издания

Министерство здравоохранения Российской Федерации

Астапенко Елена Михайловна

Чижова Диана Александровна

Полстянова Елена Николаевна

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Научный центр экспертизы средств медицинского применения» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ «НЦЭСМП» Минздрава России)

Косенко Валентина Владимировна

Трапкова Алла Аркадьевна

Овсиенко Сергей Васильевич

Меркулов Вадим Анатольевич

Багирова Валерия Леонидовна

Яруткин Алексей Викторович

Лякина Марина Николаевна

Баталова Татьяна Леонидовна

Бекетова Анастасия Викторовна

Корнилова Ольга Геннадьевна

Абакумова Елена Константиновна

Абрамова Яна Ильинична

Баданин Никита Сергеевич

Бармин Анатолий Вадимович

Болобан Екатерина Александровна

Бущик Кристина Сергеевна

Гордеев Константин Константинович

Гордеева Елена Сергеевна

Громаков Артём Сергеевич

Демидова Ольга Александровна

Евдокимова Ольга Владимировна

Каргина Татьяна Михайловна

Клинкова Ирина Васильевна

Ладыгина Лиана Александровна

Игнатов Алексей Анатольевич

Коновалова Евгения Валерьевна

Моисеева Нина Николаевна

Сокова Елена Андреевна

Митькина Ольга Игоревна

Муслимова Ольга Валерьевна

Наумова Ольга Анатольевна

Попкова Мария Анатольевна

Разов Александр Сергеевич

Сокил Юлия Александровна

Терёшина Наталья Сергеевна

Толмачева Ольга Владимировна

Шемерянкина Татьяна Борисовна

Шинева Надежда Валериевна

Шишова Лидия Ивановна

Щетинина Анастасия Павловна

Антонова Наталия Петровна

Бондарев Владимир Петрович

Ваганова Ольга Александровна

Горячев Дмитрий Владимирович

Ковалева Елена Леонардовна

Коровкин Алексей Сергеевич

Кривых Максим Андреевич

Кузнецов Михаил Анатольевич

Кулешова Светлана Ивановна

Ларионова Светлана Геннадьевна

Лутцева Анна Ивановна

Мамашина Ермония Арутюновна

Манаева Светлана Алексеевна

Мовсесянц Арташес Авакович

Прокопов Илья Алексеевич

Эпштейн Наталья Борисовна

Алпатова Наталья Александровна

Беланова Алла Ивановна

Боковикова Татьяна Николаевна

Боровик Тамара Степановна

Вдовиченко Марианна Валериевна

Волкова Рауза Асхатовна

Гайдерова Лидия Александровна

Гайнутдинов Максим Русланович

Герникова Евгения Петровна

Грецкая Татьяна Николаевна

Гунар Ольга Викторовна

Давыдов Дмитрий Сергеевич

Кахраманова Сабина Джейхуновна

Кузьмина Наталия Евгеньевна

Ланкина Екатерина Владимировна

Легонькова Ульяна Сергеевна

Мастеркова Татьяна Вячеславовна

Матвеева Оксана Анатольевна

Милкина Светлана Евгеньевна

Минаева Елена Дмитриевна

Моисеев Сергей Владимирович

Немировская Татьяна Ивановна

Неугодова Наталия Петровна

Панова Людмила Ивановна

Перелыгина Ольга Викторовна

Пономаренко Анна Александровна

Постнова Евгения Леонидовна

Припадчев Дмитрий Анатольевич

Прохватилова Светлана Степановна

Рузиев Рамзес Джауланович

Саркисян Каринэ Арташесовна

Семенова Наталья Евгеньевна

Смирнова Мария Сергеевна

Старчак Юлия Анатольевна

Стронова Лариса Александровна

Сумцов Михаил Александрович

Суханова Светлана Михайловна

Сюбаев Рашид Даутович

Трухачева Людмила Андреевна

Ульченко Евгений Геннадьевич

Устинникова Ольга Борисовна

Федорова Елена Павловна

Фролова Лариса Николаевна

Шведов Дмитрий Владимирович

Швец Сергей Витальевич

Шелестова Валентина Васильевна

Шефер Елена Павловна

Шимчук Людмила Федоровна

Федеральное государственное бюджетное военное образовательное учреждение высшего образования «Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова» Министерства обороны Российской Федерации (Военно-медицинская академия)

Мирошниченко Юрий Владимирович

Еникеева Римма Айратовна

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (ФГБУ «ВГНКИ»)

Гуляева Анастасия Юрьевна

Зуев Юрий Владиславович

Скляров Олег Дмитриевич

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Всероссийский научно-исследовательский институт лекарственных и ароматических растений» (ФГБНУ ВИЛАР)

Сидельников Николай Иванович

Мизина Прасковья Георгиевна

Зилфикаров Ифрат Назимович

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Государственный научный центр Российской Федерации – федеральный медицинский биофизический центр имени А.И. Бурназяна» (ФГБУ ГНЦ ФМБЦ им. А.И. Бурназяна ФМБА России)

Кодина Галина Евгеньевна

Ларенков Антон Алексеевич

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Информационно-методический центр по экспертизе, учету и анализу обращения средств медицинского применения» Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения (ФГБУ «ИМЦЭУАОСМП» Росздравнадзора)

Сомов Дмитрий Владимирович

Галеев Роман Рашитович

Галеева Екатерина Владимировна

Яичков Илья Игоревич

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Институт мозга человека им. Н.П. Бехтеревой Российской академии наук (ИМЧ РАН)

Красикова Раиса Николаевна

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Казанский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения российской Федерации (ФГБОУ ВО Казанский ГМУ Минздрава России)

Егорова Светлана Николаевна

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства» (ФГБУН КНИИГиПК ФМБА России)

Кормщикова Елена Сергеевна

Медицинский радиологический научный центр имени А.Ф. Цыба – филиал Федерального государственного бюджетного учреждения «Национальный медицинский исследовательский центр радиологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации (МРНЦ им. А.Ф. Цыба – филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России)

Власова Оксана Петровна

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Московский государственный медико-стоматологический университет имени А.И. Евдокимова» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО МГМСУ им. А.И. Евдокимова Минздрава России)

Прокопов Алексей Александрович

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова» (ФГБНУ НИИВС им. И.И. Мечникова»)

Михайлова Наталья Александровна

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр гематологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ «НМИЦ гематологии» Минздрава России)

Денисова Наталья Федоровна

Карякин Александр Вадимович

Скоцеляс Елена Дмитриевна

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр имени В.А. Алмазова» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ «НМИЦ им. В.А. Алмазова» Минздрава России)

Зыков Михаил Петрович

Зыкова Татьяна Александровна

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Пермская государственная фармацевтическая академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО ПГФА Минздрава России)

Лужанин Владимир Геннадьевич

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Российский научный центр радиологии и хирургических технологий имени академика А.М. Гранова» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ «РНЦРХТ им. ак. А.М. Гранова» Минздрава России)

Антуганова Юлия Олеговна

Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГАОУ ВО РНИМУ им. Н.И. Пирогова Минздрава России)

Шимановский Николай Львович

Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Российский университет дружбы народов имени Патриса Лумумбы» (ФГАОУ ВО РУДН)

Емшанова Светлана Витальевна

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Санкт-Петербургский государственный химико-фармацевтический университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО СПХФУ Минздрава России)

Наркевич Игорь Анатольевич

Ивкин Дмитрий Юрьевич

Тернинко Инна Ивановна

Юрочкин Дмитрий Сергеевич

Мамедов Деви Девивич

Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования Первый Московский государственный медицинский университет имени И.М. Сеченова Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский университет))

Раменская Галина Владиславовна

Щепочкина Ольга Юрьевна

Власов Александр Михайлович

Смирнов Валерий Валерьевич

Краснюк Иван Иванович

Демина Наталья Борисовна

Самылина Ирина Александровна

Растопчина Ольга Вячеславовна

Белобородов Владимир Леонидович

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Сибирский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО СибГМУ Минздрава России)

Ларькина Мария Сергеевна

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Тюменский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Тюменский ГМУ Минздрава России)

Бекетов Борис Никандрович

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Уральский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО УГМУ Минздрава России)

Петров Александр Юрьевич

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Федеральный исследовательский центр химической физики им. Н.Н. Семенова Российской академии наук (ФИЦ ХФ РАН)

Поскребышев Григорий Анатольевич

Федеральное государственное автономное научное учреждение «Федеральный научный центр исследований и разработки иммунобиологических препаратов имени М.П. Чумакова РАН» (ФГАНУ «ФНЦИРИП» им. М.П. Чумакова РАН» (Институт полиомиелита))

Гмыль Лариса Вениаминовна

Федеральное государственное бюджетное учреждение «Федеральный центр охраны здоровья животных» (ФГБУ «ВНИИЗЖ»)

Константинов Алексей Владимирович

Федеральное государственное унитарное предприятие «Федеральный центр по проектированию и развитию объектов ядерной медицины» Федерального медико-биологического агентства (ФГУП «Федеральный центр по проектированию и развитию объектов ядерной медицины» ФМБА России)

Иванова Татьяна Михайловна

Капутская Ирма Александровна

Государственное бюджетное учреждение здравоохранения города Москвы «Центр лекарственного обеспечения департамента здравоохранения города Москвы» (ГБУЗ «ЦЛО ДЗМ»)

Мягкова Ольга Григорьевна

АО «Акрихин»

Лагунова Светлана Анатольевна

АО «Активный компонент»

Игнатенко Олег Александрович

ООО «Амджен»

Степанова Татьяна Игоревна

Ассоциация международных фармацевтических производителей (AIPM)

Макарова Елена Владимировна

Конкина Татьяна Валерьевна

Стародубова Марина Викторовна

Ассоциация независимых аптек

Преснякова Виктория Валентиновна

АО «Байер»

Анохина Ольга Леонидовна

Долгина Евгения Николаевна

ООО «Безен Хелскеа Рус»

Пасхина Ольга Евгеньевна

ООО «Берингер Ингельхайм»

Дивянин Николай Николаевич

ООО «Бионорика»

Сокур Татьяна Викторовна

АО «Всесоюзный научный центр по безопасности биологически активных веществ» (АО «ВНЦ БАВ»)

Скачилова София Яковлевна

АО «ВЕРОФАРМ»

Крепак Ирина Геннадьевна

АО «Вертекс»

Черникова Юлия Александровна

АО «Гедеон-Рихтер РУС»

Карасев Роман Петрович

АО «Генериум»

Хамитов Равиль Авгатович

ООО «Гомеофарм»

Гаккель Василий Андреевич

АО «Государственный научный центр Российской Федерации – Физико-энергетический институт имени А.И. Лейпунского» (АО «ГНЦ РФ – ФЭИ»)

Самсонов Максим Дмитриевич

АО «Губернские аптеки»

Порубенко Евгения Михайловна

ООО «Джонсон & Джонсон»

Полякова Марина Васильевна

ООО «ДОКТОР Н»

Нечаева Наталия Петровна

ООО «ДСМК-инжиниринг»

Игумнов Сергей Николаевич

АО «Красногорсклексредства»

Трифонова Ольга Брониславовна

ООО «Контрольно-аналитическая лаборатория Фарманализ»

Елизарова Татьяна Евгеньевна

ООО «Лекарственные средства ВАЛА-Р»

Давидович Алиса Рашидовна

ООО «Лечебно-диагностический центр Международного института биологических систем имени Сергея Березина» (ООО «ЛДЦ МИБС»)

Двинских Людмила Юрьевна

ООО «Межбольничные аптеки»

Вагапов Алексей Владимирович

ЗАО «Московская фармацевтическая фабрика»

Воронова Татьяна Николаевна

Дулькис Мария Дмитриевна

ООО «Научно-производственная фирма «Материа Медика Холдинг»

Краснова Ирина Юрьевна

АО «Научно-производственное объединение по медицинским иммунобиологическим препаратам «Микроген»

Бубенчиков Роман Александрович

Валова Наталья Валерьевна

Алиева Зинфира Алислановна

Демичев Геннадий Алексеевич

Зубкова Наталья Васильевна

Орлова Татьяна Александровна

Некоммерческое партнерство «Объединение производителей гомеопатических лекарственных средств «Аконит» (НП «Аконит»)

Чередниченко Елена Анатольевна

Некоммерческое партнерство содействия развитию гомеопатии «Национальный совет по гомеопатии» (НП «Национальный совет по гомеопатии»)

Замаренов Николай Андреевич

Мифтахутдинов Салим Галиевич

АО «Ордена трудового красного знамени научно-исследовательский физико-химический институт имени Л.Я. Карпова» (АО «НИФХИ им. Л.Я. Карпова»)

Кочнева Валентина Васильевна

ООО «НПО Петровакс Фарм»

Маценко Ольга Валерьевна

ООО «Полисинтез»

Барыкина Елена Викторовна

Великодная Анастасия Викторовна

ГК «Промомед»

Лопатухин Эдуард Юрьевич

АО «Р-Фарм»

Фальковская Наталья Михайловна

ООО «Р-Фарм Компаунд»

Шутов Олег Николаевич

Российская ассоциация аптечных сетей

Игнатьева Нелли Валентиновна

АО «Рош-Москва»

Селиванчик Наталья Сергеевна

Филатова Татьяна Михайловна

АО «Русатом Хэлскеа»

Ломоносова Ольга Сергеевна

Представительство Акционерного общества «Санофи-авентис груп» (Франция)

Булатова Ксения Витальевна

Соломонова Екатерина Юрьевна

Ассоциация аптечных учреждений «СоюзФарма»

Бичевой Константин Николаевич

Союз фармацевтических работников по содействию развития профессии и фармацевтической отрасли «Национальная Фармацевтическая Палата»

Неволина Елена Викторовна

ООО «Такеда Фармасьютикалс»

Скударева Елена Юрьевна

Сьянова Дарья Павловна

ООО Испытательный центр «ФАРМОБОРОНА»

Сенченко Сергей Петрович

ООО «Медикэр»

Дороватовский Станислав Анатольевич

АО «Фармацевтическая производственная компания ФармВИЛАР» (АО «ФПК ФармВИЛАР»)

Воскобойникова Инна Васильевна

Землянухина Екатерина Сергеевна

ООО «Хеель Рус»

Соболева Людмила Михайловна

ООО «Эксперт Био»

Александрова Оксана Алексеевна

Физические лица, не являющиеся представителями организаций

Митькина Лидия Ивановна

## 1. Общие фармакопейные статьи

### 1.1. Общие положения

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0001 Общие положения

Взамен ОФС.1.1.0001.18

Настоящая общая фармакопейная статья определяет подходы и правила применения общих фармакопейных статьей и фармакопейных статьей, а также терминов и понятий, используемых в Государственной фармакопее. Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на все тексты Государственной фармакопеи.

Лекарственные средства, находящиеся в обращении на территории Российской Федерации, должны соответствовать предельно допустимому уровню качества, установленному Государственной фармакопеей, или достигать более высокого качества.

Лекарственные средства должны соответствовать требованиям Государственной фармакопеи на протяжении всего установленного срока годности.

В случае использования при оценке качества лекарственных средств методов и методик, отличающихся от приведенных в общих фармакопейных статьях и фармакопейных статьях Государственной фармакопеи, это отличие должно быть обосновано соответствующим образом с проведением надлежащих валидационных исследований.

При применении фармакопейных методик исполнитель должен оценить (верифицировать), пригодность методики в реальных условиях для достижения предназначенной цели и определить в какой степени она подходит для подтверждения соответствия требованиям общих фармакопейных статей и фармакопейных статей, а также систем качества. Оценка пригодности фармакопейной методики и степени ее пригодности должна проводиться в соответствии с требованиями общей фармакопейной статьи «Валидация аналитических методик».

Государственная фармакопея предназначена для применения квалифицированными в сфере проведения испытаний и контроля качества лекарственных средств специалистами, обладающими необходимым уровнем знаний, навыков и компетенций, поэтому издание Государственной фармакопеи не преследует образовательных целей.

При использовании материалов Государственной фармакопеи, представленных в общих фармакопейных статьях, фармакопейных статьях и приложениях, следует приводить ссылки на эти статьи и приложения.

##### Термины и понятия

Автоматизация методик. Автоматизированные и ручные методики, использующие один и тот же химический принцип, считаются эквивалентными при условии, что автоматизированная система надлежащим образом квалифицирована для выполнения ручного метода в соответствии со стандартом качества и аналитический метод валидирован на новом оборудовании.

Альтернативные методы и методики. При контроле качества лекарственных средств могут использоваться альтернативные методики. Альтернативные методики, включаемые в спецификации качества производителя и (или) нормативную документацию, должны обеспечивать возможность принятия такого же однозначного решения о соответствии лекарственного средства требованиям фармакопейной статьи, как и при использовании методик Государственной фармакопеи. Альтернативность предложенных методик подтверждается путем проведения валидации по тем же валидационным характеристикам, что и в случае фармакопейных методик (ОФС «Валидация аналитических методик»).

Буферный раствор – раствор с определённой концентрацией водородных ионов, поддерживаемой на постоянном уровне при прибавлении небольшого количества кислоты или основания. Если не указано иначе, заданное значение рН доводят с точностью ±0,05.

Вакуум. Термин «вакуум» означает, что давление не превышает 20 мм рт. ст. (2,67 кПа), если не указано иначе. Для высушивания в вакууме используют вакуумный сушильный шкаф, вакуумный пистолет или другие подобные приборы.

Вкус. Характеристика вкуса фармацевтических субстанций различного происхождения и лекарственных препаратов не подлежит определению.

Влажность. Основные режимы хранения лекарственных средств в нормальных условиях подразумевают обеспечение относительной влажности воздуха в помещениях хранения лекарственных средств 50–60 %. Под термином «сухое место» понимают место или помещение с влажностью не более 50 %.

Время

Понятия «сразу» и «немедленно» означают отрезок времени не более 30 с.

Понятие «свежеприготовленный раствор» означает раствор, приготовленный не более чем за 8 ч до его применения, если не указано иначе.

Понятие «непосредственно перед использованием» означает, что время между приготовлением соответствующего раствора и его использованием должно быть минимизировано в возможной для каждого случая степени.

Время реакции составляет 5 мин, если не указано иначе.

Высушенный до постоянной массы. Понятие «высушенный до постоянной массы» без конкретизации означает высушивание до тех пор, пока результаты двух последовательных взвешиваний после высушивания, второе из которых проводится после дополнительного периода высушивания, не будут различаться более чем на 0,5 мг на 1 г взятого вещества.

Гигроскопичность. Характеристика гигроскопичности фармацевтической субстанции и лекарственного препарата при необходимости приводится в разделе «Описание» и носит информационный характер.

Запах

Если запах не охарактеризован, то подразумевается его отсутствие у анализируемого лекарственного средства.

Испытание проводят сразу после вскрытия упаковки. 0,5–2,0 г лекарственного средства равномерно распределяют на часовом стекле диаметром 7±1 см; через 15 мин определяют запах на расстоянии 5±1 см или делают вывод о его отсутствии. В случае легко летучих жидких лекарственных средств наносят 0,5 мл испытуемого образца на фильтровальную бумагу и запах определяют сразу же после нанесения, если не указано иначе.

Защищённое от света место. См. Хранение.

Заявленное количество или концентрация. Под заявленным количеством или концентрацией понимают количество или концентрацию, указанную на этикетке соответствующего лекарственного средства.

Индикаторы. При титриметрических определениях раствор индикатора прибавляют, если не указано иначе, в количестве 0,2 мл или 3 капель.

Испытания в фармакопейной статье. Все прописанные в фармакопейной статье испытания, в том числе для одного и того же показателя качества, являются обязательными, если не указано иначе.

Количество. См. Масса и Объём.

Контрольный опыт. Под контрольным опытом подразумевают определение, проводимое с теми же количествами реактивов, обработанных тем же способом и в тех же условиях, что и раствор или смесь, содержащие испытуемое вещество, но без самого вещества.

Концентрации

Обозначение «ppm» (частей на миллион) подразумевает соотношение масса/масса (мкг/г).

Процентная концентрация раствора может иметь одно из трёх значений:

- массовый процент –% (м/м) – число грамм вещества в 100 г раствора;

- массо-объёмный процент –% (м/о) – число грамм вещества в 100 мл раствора;

- объёмный процент,% (о/о), – число миллилитров жидкого вещества в 100 мл раствора.

Если «%» используется без обозначения (м/м, м/о или о/о), то подразумевается массовый процент для смесей твёрдых веществ, массо-объёмный процент для растворов или суспензий твёрдых веществ в жидкостях, объёмный процент для растворов жидкостей в жидкостях и массо-объёмный процент для растворов газов в жидкостях. Например, 1 % раствор приготавливают растворением 1 г твёрдого вещества или 1 мл жидкости в растворителе с получением в последующем 100 мл раствора.

Если в методике требуется определённая концентрация, можно использовать раствор другой нормальности или молярности, при условии, что будет сделана поправка на разницу в концентрации и что это изменение не увеличит погрешность измерения.

Могут быть взяты пропорционально большие или меньшие количества, чем указанные массы и объёмы используемых веществ или испытуемых субстанций и стандартных образцов, при условии что это изменение не увеличит погрешность измерения.

Если не указано иное, концентрации аналитов должны быть подготовлены с точностью до 10 % от указанного значения. Если методика адаптирована к рабочему диапазону прибора, концентрации растворов могут отличаться от указанного значения более чем на 10 %, с соответствующими изменениями в соответствующих расчетах. Любые изменения должны быть в пределах допустимого диапазона прибора.

Растворы, используемые в рамках оценки качества лекарственных средств, проводимой в соответствии с требованиями фармакопейных статей, должны выдерживать установленные для них сроки годности.

Кристалличность

Твёрдые субстанции могут быть крупнокристаллическими, кристаллическими, мелкокристаллическими или аморфными.

Крупнокристаллический порошок. Не более 40 % частиц порошка должно быть размером менее 0,4 мм.

Кристаллический порошок. Не менее 95 % частиц порошка должно быть размером менее 0,4 мм и не более 40 % – размером менее 0,2 мм.

Мелкокристаллический порошок. Не менее 95 % частиц порошка должно быть размером менее 0,2 мм.

Аморфный порошок – это порошок, не имеющий признаков кристаллического строения.

Некоторым твёрдым субстанциям свойственно явление полиморфизма – способность существовать в различных кристаллических формах при одинаковом химическом составе (ОФС «Полиморфизм»).

Характеристики кристалличности, полиморфизма и гигроскопичности в описании приводятся для информации и испытанию не подлежат. При необходимости нормирования величины частиц в фармакопейной статье приводят специальный раздел.

Логарифмы. Логарифмы приводятся по основанию 10, если не указано иначе.

Масса

Если значение массы не используют для дальнейших расчётов, то точность её взвешивания должна составлять ± 5 единиц после указанной в фармакопейной статье цифры. Например, массу 0,25 г следует понимать как находящуюся в интервале от 0,245 до 0,255 г, а массу 0,2 г – как находящуюся в интервале от 0,15 до 0,25 г.

Если значение массы используют для дальнейших расчётов, то в фармакопейной статье приводится понятие «точная навеска». В данном случае следует произвести взвешивание на аналитических весах с погрешностью не более ±0,2 мг и зарегистрировать полученное значение; взятая навеска не должна отклоняться от заданного значения более чем на ±10 %.

При определении массы в граммах с точностью более 4 десятичных знаков следует пользоваться весами с метрологическими или техническими характеристиками, обеспечивающими требуемую точность взвешивания.

«Взвешивание по разности» (например, до и после высушивания или прокаливания при определении потери в массе при высушивании, золы общей или сульфатной золы) проводят при одинаковых условиях (температура, давление, влажность), используя одни и те же средства измерения и лабораторную посуду. Интервал времени между двумя взвешиваниями определяется свойствами и количеством высушиваемого или прокаливаемого остатка. После высушивания или прокаливания тигель или бюкс следует охлаждать в эксикаторе до температуры окружающей среды. Промежутки времени с момента извлечения тигля или стаканчика для взвешивания из эксикатора до момента взвешивания должны быть одинаковыми.

Постоянная масса. Массу следует считать постоянной, если разность результатов двух последовательных взвешиваний не превышает 0,5 мг для 1,0 г взятого вещества.

Термин «невесомый» означает, что масса не превышает 0,5 мг.

Методы испытаний в общей фармакопейной статье. В общей фармакопейной статье (ОФС) на методы контроля качества может быть приведено несколько методов анализа. Если в фармакопейной статье не указано, какой из них подлежит использованию, то применяют первый метод.

Молекулярная масса. Под молекулярной массой описанных в фармакопее соединений понимают относительную молекулярную массу, которая рассчитывается по таблице относительных атомных масс, определённых относительно изотопа 12C и утверждённых Международным союзом по теоретической и прикладной химии (IUPAC) в 2021 г. Рекомендуемые для расчётов относительные атомные массы приведены в Приложении.

Молярность. Молярность обозначается символом M, которому предшествует число, обозначающее количество моль указанного вещества, содержащихся в 1 литра раствора.

Объём

Для обеспечения требуемой точности измерений стеклянная мерная посуда должна соответствовать требованиям класса А Международного стандарта (ISO). Допускается использование стеклянной мерной посуды по ГОСТам не ниже 1 класса точности.

Объёмы отмеряют следующим образом. Если после десятичной запятой стоит «0» или число, заканчивающееся нулём (например, 10,0 мл или 0,50 мл), указанный объём отмеряют с помощью мерной пипетки (пипетки Мора), мерной колбы или бюретки. В остальных случаях можно использовать градуированный мерный цилиндр или градуированную пипетку. Объёмы, приведённые в микролитрах, отмеряют с помощью микропипетки или микрошприца.

Если в методике предусмотрено использование пипетки, она может быть заменена на подходящую по объёму и точности бюретку.

Понятие «капля» означает объём от 20 до 50 мкл в зависимости от растворителя (см. Приложение); для водных растворов объём капли, отмериваемый стандартным каплемером, равен 50 мкл (в 1 мл содержится 20 капель).

Округление. Полученные в испытании промежуточные числовые значения не следует округлять до получения окончательного отчётного значения. Промежуточные расчёты (например, наклон калибровочной кривой) могут быть округлены для целей отчётности, но для любых дополнительных расчётов должно использоваться исходное (не округленное) значение. Критерии приемлемости являются фиксированными числами и не подлежат округлению.

Предварительно высушенный. Понятие «предварительно высушенный» без конкретизации означает, что вещество перед использованием должно быть высушено, как описано в ОФС «Потеря в массе при высушивании».

Приборы. Указанный прибор может быть заменён на аналогичный, использующий те же фундаментальные принципы работы и имеющий эквивалентную или большую чувствительность и точность. Эти характеристики должны быть соответствующим образом квалифицированы.

Примеси

Определение примесей в лекарственных средствах и оценку их содержания проводят с помощью:

- визуального сравнения с эталонными растворами, устанавливающими предел содержания данной примеси, после проведения реакции c испытуемым и эталонным растворами. Окраска или опалесценция/помутнение испытуемого раствора должна быть не интенсивнее окраски или опалесценции/помутнения эталонного раствора;

- физико-химических методов (спектроскопические, хроматографические и другие методы).

При этом учитывают следующее:

- а) вода и все реактивы должны быть свободны от ионов, на содержание которых проводят испытания;

- б) пробирки, в которых проводят наблюдения, должны быть бесцветными, прозрачными, из нейтрального стекла, одинакового диаметра (около 1,5 см, если не указано иначе);

- в) навески для приготовления эталонных растворов отвешивают с точностью до 1 мг, если не указано иначе;

- г) наблюдения помутнения и опалесценции растворов проводят в проходящем свете на тёмном фоне, а окраски – по оси пробирок при дневном отражённом свете на матово-белом фоне;

- д) прибавление реактивов к испытуемому и эталонному растворам проводят одновременно и в одинаковых количествах.

Прокалённый до постоянной массы. Понятие «прокалённый до постоянной массы» без конкретизации означает прокаливание при температуре 800±25 °С до тех пор, пока результаты двух последовательных взвешиваний после прокаливания, второе из которых проводится после дополнительного периода прокаливания, не будут различаться более чем на 0,5 мг на 1 г взятого вещества.

Растворимость. Если в фармакопейной статье указывается, что вещество растворимо или растворяется в растворах разбавленных кислот и щелочей, но не приводится их наименование и/или концентрация, то такая запись носит информационный характер.

Растворители. Если для раствора не указан растворитель, то подразумевают водный раствор.

Под названием «вода», как растворитель, если нет особых указаний, следует понимать воду, соответствующую требованиям фармакопейной статьи «Вода очищенная». В хроматографических методах под водой следует понимать «воду для хроматографии». Термин «вода дистиллированная» распространяется на «воду очищенную», полученную путем дистилляции.

Под показателем качества лекарственного средства «Вода» следует понимать определение содержания в лекарственном средстве воды с использованием метода Фишера (полумикрометода и микрометода) или метода дистилляции в соответствии с ОФС «Определение воды».

Под названием «спирт», если нет особых указаний, следует понимать спирт этиловый 96 %, «этанол» − спирт этиловый абсолютированный; под названием «эфир» – эфир диэтиловый.

При определении спирта в лекарственных препаратах под процентом подразумевают процент объём/объём.

Если указано, что при приготовлении смеси растворителей их берут в соотношении а:в, то имеется в виду соотношение объёмов. Например, соотношение гексан—бензол 1:3 означает, что смешивают 1 объём гексана с 3 объёмами бензола.

Реактивы. В случае, если квалификация реактивов не указана, подразумевают квалификацию «чистый для анализа». Приготовление растворов реактивов, не указанное в фармакопейной статье, приводится в ОФС «Реактивы. Индикаторы».

Содержание. Предписанные нормы по содержанию учитывают все аналитические погрешности, допустимый разброс при производстве или изготовлении, а также допустимое ухудшение качества. При определении соответствия лекарственного средства фармакопейной статье никакие дополнительные допуски к указанным пределам содержания не подлежат применению.

Если в разделе «Количественное определение» для индивидуальных веществ не указан верхний предел содержания, следует считать, что последний составляет 100,5 % определяемого вещества.

В тех случаях, когда содержание вещества в препарате выражается в пересчёте на сухое или безводное вещество, следует понимать, что потеря в массе при высушивании или содержание воды определены тем методом, который описан в соответствующей фармакопейной статье.

При определении действующих веществ в лекарственном растительном сырье расчёт производят на массу сухого сырья.

При определении соответствия числовому пределу рассчитанный результат аналитической методики округляется до указанного числа значащих цифр. Пределы, выраженные в процентах или абсолютных значениях, считаются значимыми до последней указанной цифры. При округлении следует учитывать только цифру, стоящую непосредственно справа от последнего места в пределе. Если полученная цифра меньше 5, она исключается, а предыдущая цифра не изменяется. Если данная цифра равна или больше 5, она исключается, а предыдущая цифра увеличивается на 1.

Стандартный раствор – раствор с точно известным качественным и количественным составом и используемый для идентификации и/или количественного или полуколичественного определения действующих веществ и примесей. Приготовление стандартных растворов описывается в ОФС «Стандартные растворы» или в фармакопейной статье.

Сухое место. См. Хранение.

Температура

Помимо точного значения температуры используют также следующие понятия:

Глубокое замораживание | ниже −15 ºС
В морозильной камере | от −5 до −18 ºС
В холодном месте, в холодильнике, холодный | от +2 до +8 ºС
В прохладном месте, прохладный | от +8 до +15 ºС
При комнатной температуре | от +15 до +25 ºС
Тёплый | от +40 до +50 ºС
Горячий | от +80 до +90 ºС
Водяная баня | от +98 до +100 ºС
Температура ледяной бани | 0 ºС

Испытания следует проводить при комнатной температуре, если не указано иначе.

Под «водяной баней» понимают кипящую водяную баню, если в фармакопейной статье не указана температура нагревания. Водяная баня может быть заменена на другие способы нагрева при соблюдении эквивалентной температуры.

В испытании «Потеря в массе при высушивании» температурный интервал, если не указано иначе, должен составлять ±2,5 ºС от указанного значения.

Приборы для измерения температуры могут быть жидкостными или цифровыми. Термометры поверяют через установленные интервалы испытаний с использованием температурных стандартов.

Титрованный раствор – раствор с точно известной молярной концентрацией, предназначенный для титриметрического анализа. Приготовление титрованных растворов приводится в ОФС «Титрованные растворы».

Точная навеска. См. Масса.

Фильтр. Если не указан материал фильтра, то подразумевают любой фильтр.

Хранение. Понятие «не требует особых условий» означает хранение при комнатной температуре.

Понятие «в защищённом от света месте» означает выполнение одного из следующих условий:

- продукт хранится в упаковке из материала, поглощающего актинический свет в достаточной степени для защиты содержимого от изменений, вызываемых таким светом;

- продукт хранится в упаковке, помещённой во вторичную упаковку, обеспечивающую аналогичную защиту;

- продукт хранится в месте, из которого исключён любой свет.

Под термином «сухое место» понимают помещение с относительной влажностью не более 50 %.

Цвет лекарственного средства следует характеризовать названиями: белый, чёрный, красный, оранжевый, жёлтый, зелёный, голубой, синий и фиолетовый. При оттеночных цветах на первом месте указывают тот цвет, который содержится в меньшей доле, а затем через дефис – преобладающий цвет (например, красно-коричневый).

Слабоокрашенные образцы имеют оттенок цвета, название которого характеризуют суффиксом «-оват» (например, «желтоватый») или добавляют приставку «светло-» (например, «светло-жёлтый»).

Цвет твёрдых веществ следует определять на матово-белом фоне (белая плотная или фильтровальная бумага) при рассеянном дневном свете в условиях минимального проявления тени. Небольшое количество вещества (0,5–2,0 г) помещают на белую бумагу и без нажима равномерно распределяют по поверхности бумаги (осторожно разравнивают шпателем или другим приспособлением) так, чтобы поверхность оставалась плоской.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0002 Единицы международной системы (СИ), используемые в фармакопее

Взамен ОФС.1.1.0002.15

##### Международная система единиц (СИ)

Международная система единиц в настоящее время включает в себя два класса единиц физических величин: основные единицы и производные единицы[1]. Класс основных единиц состоит из семи независимых единиц, определения которых приведены в табл. 1.

Таблица 1. Основные единицы СИ
Величина | Единица
--- | ---
Наименование | Обозначение | Наименование | Обозначение
Время | t | секунда | с
Секунда определяется путём принятия фиксированного числового значения частоты перехода сверхтонкого расщепления невозмущённого основного состояния атома цезия-133 ΔνCs равным 9 192 631 770 при выражении в единице Гц, что соответствует с−1.
Длина | l | метр | м
Метр определяется путём принятия фиксированного числового значения скорости света в вакууме с равным 299 792 458 при выражении в единице м·с−1, где секунда определяется через частоту перехода в цезии ΔνCs.
Масса | m | килограмм | кг
Килограмм определяется путём принятия фиксированного числового значения постоянной Планка h равным 6,62607015·10−34 при выражении в единице Дж·с, что соответствует кг·м2·с−1, где метр и секунда определяются через c и ΔνCs.
Электрический ток (сила электрического тока) | I | ампер | А
Ампер определяется путём принятия фиксированного числового значения элементарного заряда e равным 1,602176634·10−19 при выражении в единице Кл, что соответствует А·с, где секунда определяется через ΔνCs.
Термодинамическая температура | T | кельвин | К
Кельвин определяется путём принятия фиксированного числового значения постоянной Больцмана k равным 1,380649·10−23 при выражении в единице Дж·К−1, что соответствует кг·м2·с−2·К−1, где килограмм, метр и секунда определяются через h, c и ΔνCs.
Количество вещества | n | моль | моль
Один моль содержит точно 6,02214076·1023 структурных элементов. Это число есть фиксированное числовое значение постоянной Авогадро NA, выраженное в единице моль−1 и называемое числом Авогадро. Количество вещества в системе, обозначение n, является мерой количества конкретных структурных элементов. Структурными элементами могут быть атомы, молекулы, ионы, электроны и любые другие частицы или определённые группы частиц.
Сила света | Iv | кандела | кд
Кандела определяется путём принятия фиксированного числового значения световой эффективности монохроматического излучения частотой 540·1012 Гц, Kкд, равным 683 в единице лм·Вт−1, что равно кд·ср·Вт−1 или кд·ср·кг−1·м−2·с3, где килограмм, метр и секунда определяются через h, c и ΔνCs.
Примечание – Определения основных единиц СИ даны в 9-м издании 2019 г. брошюры «Международная система единиц (SI)», опубликованной Международным Бюро мер и весов.

Производными единицами системы называются единицы физических величин, которые могут быть получены из основных единиц посредством соответствующих алгебраических отношений. Единицы таких величин, используемых в фармакопее, приведены в табл. 2.

В табл. 3 приведены внесистемные единицы, не входящие в систему СИ, допустимые к применению наравне с единицами СИ.

Множительные приставки, используемые для образования обозначений десятичных кратных и дольных единиц, приведены в табл. 4.

Другие единицы, используемые в фармакопее, приведены в табл. 5.

Таблица 2. Производные единицы СИ и их соответствие другим единицам
Величина | Единица | Преобразование других единиц в единицы СИ
--- | --- | ---
Наименование | Обозначение | Наименование | Обозначение | Выражение
в основных единицах СИ | в других единицах СИ
Плоский угол | α, β, γ | радиан | рад | м·м−1 = 1 |  | 1 рад = 180°/π
Телесный угол | Ω | стерадиан | ср | м2·м−2 = 1 |  |
Волновое число | v | метр в минус первой степени | м−1 | м−1 |  |
Длина волны | λ | микрометр | мкм | 10−6 м |  |
нанометр | нм | 10−9 м |  |
Площадь | A, S | квадратный метр | м2 | м2 |  |
Объём, вместимость | V | кубический метр | м3 | м3 |  | 1 мл = 1 см3 = 10−6 м3
Частота | v | герц | Гц | с−1 |  |
Плотность | ρ | килограмм на кубический метр | кг/м3 | кг·м−3 |  | 1 г/мл = 1 г·см−3 = 1 кг/л = 103 кг·м−3
Скорость | v | метр в секунду | м/с | м·с−1 |  |
Сила | F | ньютон | Н | кг·м·с−2 |  | 1 дин* = 1 г·см·с−2 = 10−5 Н 1 kp = 9,806 65 Н
Давление | Р | паскаль | Па | кг·м−1·с−2 | Н·м−2 | 1 дин/см2 = 10−1 Па = 10−1 Н∙м−2 1 атм = 101 325 Па = 101,325 кПа 1 бар* = 105 Па = 0,1 МПа 1 мм рт. ст. = 133,322 387 Па 1 Тоrr = 133,322 368 Па 1 psi = 6,894 757 кПа
Динамическая вязкость | η | паскаль-секунда | Па·с | кг·м−1·с−1 | Н·с·м−2 | 1 П* = 10−1 Па·с = 10−1 Н·с·м−2 1 сП = 10−3 кг·м−1·с−1 = 1 мПа·с
Кинематическая вязкость | v | квадратный метр на секунду | м2/с | м2∙с−1 | Па∙с∙м3∙кг−1 Н∙м∙с∙кг−1 | 1 Ст* = 1 см2∙с−1 = 10−4∙м2∙с−1
Угловая скорость | ω | радиан в секунду | рад/с | с−1 |  |
Энергия, работа, количество теплоты | W | джоуль | Дж | кг∙м2∙с−2 | Н∙м | 1 эрг* = 1 см2∙г∙с−2 = 1 дин∙см = 10−7 Дж 1 кал = 4,1868 Дж
Мощность, тепловой поток, поток излучения, мощность излучения | Р | ватт | Вт | кг·м2·с−3 | Н∙м∙с−1 Дж∙с−1 | 1 эрг/с =1 дин∙см∙с−1 = 10−7 Вт = 10−7 Н∙м∙с−1 = 10−7 Дж∙с−1
Поглощённая доза ионизирующего излучения | D | грей | Гр | м2·с−2 |  | 1 рад = 10−2 Гр
Электрическое напряжение, электрический потенциал, электродвижущая сила, разность электрических потенциалов | U | вольт | В | кг·м2·с−3·А−1 | Вт·А−1 |
Электрическое сопротивление | R | ом | Ом | кг·м2·с−3·А−2 | В·А−1 |
Количество электричества, электрический заряд | Q | кулон | Кл | А·c |  |
Температура Цельсия | t | градус Цельсия | °С | К |  | t = T – T0, где T0 = 273,15 К
Активность нуклида в радиоактивном источнике (активность радионуклида) | А | беккерель | Бк | с−1 |  | 1 Ки = 37∙109 Бк =37∙109 с−1
Молярная концентрация компонента | c | моль на кубический метр | моль/м3 | моль∙м3 |  | 1 моль/л = 1 М = 1 моль/дм3 = 103 моль/м3
Массовая концентрация компонента | ρ | килограмм на кубический метр | кг/м3 | кг∙м−3 |  | 1 г/л = 1 г/дм3 = 1 кг·м−3
Каталитическая активность | Z | катал | кат | моль∙с−1 |  |
* Производные единицы системы СГС (по названию основных единиц сантиметр-грамм-секунда): дина (дин), бар (бар), пуаз (П), стокс (Ст) и эрг (эрг).

Таблица 3. Внесистемные единицы, допустимые к применению наравне с единицами СИ
Величина | Единица | Значение в единицах СИ
--- | --- | ---
Наименование | Обозначение
| Время | минута | мин
1 мин = 60 с | час | ч
1 ч = 60 мин = 3600 с | сутки | сут
1 сут = 24 ч = 86 400 с | Плоский угол | градус | °
1° = (π/180) рад | Объём | литр | л
1 л = 1 дм3 = 1·10−3 м3 | Масса | тонна | т
1 т = 1·103 кг | дальтон* | Да
1 Да = 1,660539040(20)·10−27 кг | Частота вращения | оборот в секунду оборот в минуту | об/с об/мин
1 об/с = 1 с−1 1 об/мин = (1/60) с−1 | Энергия | электрон-вольт | эВ

Таблица 4. Множители и приставки, используемые для образования обозначений десятичных кратных и дольных единиц СИ
Множитель | Приставка | Обозначение | Множитель | Приставка | Обозначение
1024 | иотта | И | 10−1 | деци | д
1021 | зетта | З | 10−2 | санти | с
1018 | экса | Э | 10−3 | милли | м
1015 | пета | П | 10−6 | микро | мк
1012 | тера | Т | 10−9 | нано | н
109 | гига | Г | 10−12 | пико | п
106 | мега | М | 10−15 | фемто | ф
103 | кило | к | 10−18 | атто | а
102 | гекто | г | 10−21 | зепто | з
101 | дека | да | 10−24 | иокто | и

Таблица 5. Другие единицы, используемые в фармакопее
Величина | Единица
--- | ---
Наименование | Обозначение
Время | миллисекунда | мс
микросекунда | мкс
Длина | сантиметр | см
дециметр | дм
Масса | грамм | г
миллиграмм | мг
Объём | миллилитр | мл
микролитр | мкл
Сила | килограмм-сила | кгс
килопонд | kp
Давление | атмосфера | атм
бар | бар
миллиметр ртутного столба | мм рт. ст.
торр | Torr
фунт-сила на квадратный дюйм | psi
Количество теплоты | калория | кал
Активность радионуклида | кюри | Ки
Поглощённая доза ионизирующего излучения | рад | рад

Примечания

1. Радиан – это угол, стягиваемый в центре окружности дугой, длина которой равна её радиусу.

2. Условия центрифугирования определяются отношением центробежного ускорения к стандартному ускорению свободного падения (gn), которое принимается равным 9,80665 м∙с−2.

3. Некоторые величины без размерности, используемые в фармакопее: относительная плотность, оптическая плотность, удельный показатель поглощения, показатель преломления.

4. Микрокатал определяется как ферментативная активность, которая при указанных условиях приводит к превращению (например, к гидролизу) 1 микромоль субстрата в секунду.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0004 Отбор проб

Взамен ОФС.1.1.0004.15

Настоящая общая фармакопейная статья устанавливает общие требования к отбору проб (выборке) произведённых/изготовленных лекарственных средств, а также материалов для определения соответствия их качества требованиям установленным производителем (разработчиком).

Отбор проб лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов осуществляют в соответствии с требованиями ОФС «Отбор проб лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### Термины и понятия

Готовая продукция − лекарственное средство, прошедшее все этапы технологического процесса, в том числе окончательную упаковку.

Нерасфасованная продукция (ангро) – лекарственное средство в крупной фасовке, в том числе в опредёленной лекарственной форме, прошедшее все стадии технологического процесса, кроме упаковки, и предназначенное для последующей расфасовки или производства лекарственных препаратов.

Промежуточная продукция – материал, который получают в ходе технологического процесса производства лекарственных средств. Промежуточная продукция в ходе технологического процесса может подвергаться или не подвергаться выделению.

Материалы – общее понятие, обозначающее сырьё (исходное сырьё, реактивы, растворители), вспомогательные материалы, промежуточную продукцию, нерасфасованную продукцию и материалы, используемые для упаковки и маркировки.

Серия (партия) − лекарственное средство или материалы одного наименования, произведённые в одном технологическом цикле или в течение определённого интервала времени в одних и тех же условиях и одновременно представленного на контроль. Качество серии (партии) должно быть удостоверено одним документом.

Генеральная совокупность − серия (партия) готовой продукции, образующих единство материалов.

Выборочная единица − отобранное количество от серии (партии) лекарственных средств или образующих единство материалов, взятое из одного места в одно время для формирования части выборки.

Объём выборки − число выборочных единиц в выборке.

Выборка – одна или несколько выборочных единиц, отобранных в соответствии с установленной процедурой отбора проб из генеральной совокупности.

Проба − количество образца, отобранное от серии (партии) лекарственных средств или образующих единство материалов.

Точечная проба − количество материалов, взятое единовременно за один приём, из одного места, из большего объёма этих же материалов.

Объединённая проба − количество материалов, получаемое объединением нескольких точечных проб этих же материалов, предназначенное для проведения испытаний на соответствие требованиям установленным производителем (разработчиком) лекарственного средства или вспомогательного вещества.

Отбор проб − действия по изъятию (выборке) проб лекарственных средств и материалов для проведения испытаний на их соответствие требованиям установленным производителем (разработчиком) лекарственного средства или вспомогательного вещества или иных целей.

План отбора проб − план, который устанавливает объём выборки, необходимый для проведения испытаний и соответствующий определённому критерию приемлемости.

Процедура отбора проб − все операции по отбору проб, которые должны быть проведены с определённым лекарственным средством или материалом для реализации определённой цели.

Деление пробы – процесс отбора одной или нескольких проб материалов таким способом, как нарезание, механическое деление или квартование.

Загрязнение (контаминация) − внесение примесей химической или микробиологической природы или механических в материалы во время технологического процесса, отбора проб, упаковки или переупаковки, хранения или транспортирования.

Образец репрезентативный − образец, полученный с использованием такой процедуры выборки, которая гарантирует, что разные части объекта выборки или разные свойства неоднородной продукции представлены пропорционально.

Образец (для испытаний) (выборка конечная/финальная) – определённое количество конкретного лекарственного средства или материала, используемое в качестве представителя этих объектов при испытании.

Контроль качества – проведение испытаний на соответствие требованиям фармакопейной статьи или установленные производителем (разработчиком).

Упаковка − средство или комплекс средств, обеспечивающих защиту лекарственных средств от повреждения и потерь, окружающей среды, от загрязнений, а также обеспечивающих процесс обращения лекарственных средств. Различают первичную и вторичную упаковку в зависимости от непосредственного контакта с лекарственным средством.

Упаковка первичная (внутренняя) – упаковка, непосредственно соприкасающаяся с лекарственным средством.

Упаковка промежуточная – упаковка, в которую может быть помещена первичная упаковка с целью дополнительной защиты лекарственного средства или с учётом особенностей применения лекарственного препарата.

Упаковка вторичная (потребительская) – упаковка, в которую помещается лекарственное средство в первичной или промежуточной упаковке для реализации потребителю.

Упаковочная единица – упаковка, содержащая опредёленное количество готовой продукции или материалов.

Упаковка групповая – упаковка, объединяющая одинаковые упаковочные единицы готовой продукции в потребительской упаковке, скреплённая с помощью упаковочных или обвязочных материалов.

Тара – элемент упаковки, предназначенный для размещения готовой продукции и материалов.

Тара транспортная – тара, предназначенная для упаковки, хранения и транспортирования готовой продукции и материалов, образующая самостоятельную транспортную единицу. Для лекарственных средств транспортная тара обеспечивает транспортирование определённого количества лекарственных средств в потребительской или групповой упаковке (ящик, мешок, бочка, фляга).

Примечание – Определения, приведённые выше, относятся к терминам настоящей общей фармакопейной статье и могут иметь иные значения в других контекстах.

##### Общие положения

Отбор проб (выборка) произведённых/изготовленных лекарственных средств и материалов, используемых в процессе их производства/изготовления или характеризующих стадии технологического процесса производства/изготовления, должен проводиться в соответствии с утверждённой процедурой отбора проб, если иное не указано в требованиях установленных производителем (разработчиком).

Процедура отбора проб должна соответствовать определённым целям отбора, виду испытаний и специфике отбираемых образцов.

При проведении процедуры отбора проб должны быть предусмотрены и учтены:

- план или схема отбора проб;

- объём и метод отбора проб;

- место и время отбора проб;

- извлечение и подготовка проб для испытаний;

- специальные меры предосторожности, особенно в отношении стерильных лекарственных средств и материалов или материалов, обладающих опасными свойствами;

- перечень используемого оборудования для отбора проб;

- требования по очистке и хранению оборудования для отбора проб и др.;

- характеристика и маркировка тары для хранения проб;

- параметры окружающей среды при отборе и подготовке проб для испытаний.

При формировании плана отбора проб необходимо принимать во внимание конкретные цели отбора проб; физические, физико-химические, биологические и другие свойства исследуемого объекта, его однородность, стабильность; количество отбираемого образца; риски и последствия, связанные с ошибочными решениями по выбору плана отбора.

Отбору проб подлежат:

- лекарственные средства;

- нерасфасованная продукция, промежуточная продукция на критических стадиях процесса производства/изготовления;

- сырьё и вспомогательные вещества;

- упаковочные и печатные материалы.

Правила отбора проб

Пробы отбирают от генеральной совокупности.

При отборе проб, характеризующих стадии технологического процесса производства/изготовления, генеральная совокупность устанавливается внутренними документами предприятия-производителя (изготовителя) лекарственных средств.

В процессе проведения отбора проб необходимо учитывать и контролировать факторы, которые обеспечивают достоверность результатов испытаний.

Методика отбора должна предусматривать предотвращение загрязнения лекарственных средств и материалов, из которых отбираются пробы, самих отбираемых проб, а также других лекарственных средств, материалов и окружающей среды.

Методика отбора проб материалов при внутрипроизводственном процессе должна учитывать критические стадии производства/изготовления лекарственных средств и включать установленные контрольные точки отбора проб (ёмкости, места отбора и т.п.).

Не допускается отбор проб одновременно от двух и более наименований лекарственных средств или материалов, двух и более серий (партий) готовой продукции во избежание ошибок при отборе проб. К отбору от следующей серии (партии) готовой продукции или материалов можно приступать только после завершения текущей процедуры отбора проб.

Перед отбором проб необходимо провести внешний осмотр каждой предусмотренной для этой цели упаковочной единицы серии (партии) готовой продукции или материалов. При осмотре необходимо обратить внимание на соответствие упаковки, в которой находится готовая продукция или материалы, и её маркировки (при её наличии) требованиям установленным производителем (разработчиком), определить количество готовой продукции или материалов (если это возможно), целостность и наличие пломб на упаковке (при их наличии), правильность оформления сопроводительной документации и соответствия в ней данных серии (партии) готовой продукции или материалов, предназначенных для отбора проб.

Пробы отбирают только из неповреждённых, укупоренных и упакованных согласно требованиям производителя (разработчика) упаковочных единиц (при условии наличия их укупорки и упаковки). Готовая продукция и материалы в повреждённой упаковке, не соответствующей требованиям установленным производителем (разработчиком), должна быть отклонена.

Примечание – При соответствующем указании в документации предприятия-производителя допускается отбор проб от каждой единицы готовой продукции или материалов из повреждённой упаковки для проведения полного контроля качества анализируемых объектов.

##### Методы отбора проб

Случайный отбор проб. Пробы могут быть отобраны методом случайного отбора от установленного количества выборочных единиц при выборочном контроле; от каждой выборочной единицы при сплошном контроле или другим методом в соответствии с разработанным статистически обоснованным планом отбора.

Для осуществления случайного отбора проб необходимо последовательно пронумеровать каждую выборочную единицу, затем, воспользовавшись таблицей случайных чисел (или сгенерированными компьютером случайными числами), установить, из каких случайных выборочных единиц производить отбор необходимого количества проб.

Многоступенчатый отбор проб. При отсутствии указаний в фармакопейных статьях при отборе образцов (проб, выборок) лекарственных средств для проведения их испытаний на соответствие требованиям установленными производителем (разработчиком) проводят многоступенчатый отбор проб, считая при этом, что серия (партия) лекарственного средства является однородной продукцией. Аналогичным образом осуществляется отбор материалов.

При многоступенчатом отборе готовую продукцию или материалы в каждой ступени отбирают случайным образом в пропорциональных количествах из упаковочных единиц, отобранных в предыдущей ступени. Число ступеней определяется видом упаковки.

Например, если продукция в потребительской (вторичной) упаковке помещена в групповую упаковку, а затем и в транспортную тару, то возможен трёхступенчатый отбор проб:

- I ступень: отбор единиц транспортной тары (ящиков, коробок, мешков и др.);

- II ступень: отбор упаковочных единиц групповой упаковки (коробок, пакетов, рулонов и др.);

- III ступень: отбор продукции в потребительской (вторичной) упаковке (флаконов, туб, контурных упаковок и др.).

Для расчёта количества отбираемых упаковочных единиц (N) на каждой ступени используют формулу для однородной продукции:

где n – общее количество упаковочных единиц данной ступени одной серии (партии).

Полученное в результате подсчёта по формуле (1) дробное число округляют в сторону увеличения до целого числа, оно должно быть не менее 3 и не более 30.

В случае недостаточного количества упаковочных единиц для проведения испытания повторно отбирают упаковочные единицы, как указано выше.

Из отобранных на последней ступени упаковочных единиц после контроля по внешнему виду берут пробу (выборку) для исследования лекарственного средства на соответствие требованиям установленным производителем (разработчиком) в количестве, необходимом для реализации определённой цели (с учётом испытания на микробиологическую чистоту, стерильность, испытания парентеральных и офтальмологических растворов на механические включения и т.п.).

Примечание – Для твёрдых дозированных лекарственных средств количество единиц образцов для проведения микробиологического контроля рассчитывают путём деления требуемого количества образца в граммах (50 г) на среднюю массу таблетки, драже, капсулы или суппозитория.

Если подлинность однородной продукции достоверна, то для расчёта количества отбираемых упаковочных единиц следует использовать формулу:

Полученное в результате подсчёта по формуле (2) дробное число округляют в сторону увеличения или уменьшения до целого числа. Если упаковочных единиц 4 и менее, то отбираются все единицы.

Примечание – Не рекомендуется использовать формулу (2) при приёмочном (входном) контроле материалов, предназначенных для производства лекарственных средств.

Если продукция неоднородная и/или получена из неизвестного источника, для расчёта количества отбираемых упаковочных единиц использовать формулу:

Полученное в результате подсчёта по формуле (3) дробное число округляют в сторону увеличения до целого числа.

Требования к отбору проб материалов

Проба материалов должна представлять собой объединённые точечные пробы, взятые примерно в равных количествах, смешанные и, при необходимости, уменьшенные до массы (объёма) образца, необходимой для испытания продукции на соответствие требованиям установленным производителем (разработчиком) для реализации определённой цели.

Примечание- Если каждую точечную пробу анализируют по отдельности, то их массы (объёмы) могут быть неодинаковыми, но не менее количества, определённого требованиями установленными производителем (разработчиком) для конкретного вида испытаний.

Для отбора проб применяют пробоотборники, соответствующие физическому состоянию, виду упаковки продукции, изготовленные из материала, который не загрязняет продукцию и не реагирует с ней. Вместимость пробоотборника должна быть достаточной для отбора всей точечной пробы, а его конструкция должна быть доступна для очистки. Используемые пробоотборники должны быть чистыми и сухими, в случае использования пробы для определения микробиологической чистоты – стерильными.

Отбор точечных проб проводят подходящим пробоотборником с разных уровней: верхнего, среднего и нижнего слоёв каждой отобранной упаковочной единицы. Для отбора проб жидкостей их сначала тщательно перемешивают; в случае, если перемешивание затруднено (большие ёмкости), точечные пробы отбирают без перемешивания из разных слоёв.

В случае отбора проб продукции для проверки её однородности точечные пробы сыпучей, вязкой, гетерогенной или другой продукции исследуют по отдельности и при внешнем осмотре убеждаются в однородности отобранных точечных проб.

Примечание – Признаками неоднородности могут быть различия по форме, размеру или цвету частиц в кристаллической, гранулированной или порошкообразной массе твёрдого вещества; влажные корки на гигроскопических веществах; обнаруженные твёрдые вещества в жидкостях; расслоение жидкостей и др.

Если точечные пробы однородны, то их объединяют, тщательно перемешивая, на чистой сухой поверхности или в подходящей ёмкости для получения объединённой пробы.

При необходимости для деления (уменьшения) объединённой пробы применяют обоснованные ручные или автоматизированные методы.

Требования к отбору проб лекарственных
препаратов в потребительской упаковке

Лекарственные препараты одной серии одного производителя, полученные от одного поставщика, считаются однородными.

Выборка лекарственных препаратов должна состоять из ненарушенных упаковочных единиц.

Объём выборки лекарственных препаратов определяется целью отбора, требованиями метода испытания, видом лекарственной формы и другими факторами.

Отбор выборок лекарственных препаратов осуществляется в соответствии с требованиями ОФС на конкретные лекарственные формы, на методы испытаний или в соответствии с требованиями фармакопейных статей.

##### Упаковка, маркировка, хранение отобранных образцов

Отобранные образцы (конечная/финальная выборка) лекарственных средств и материалов помещают в подготовленную тару и/или упаковывают, при необходимости пломбируют или опечатывают на месте отбора.

Упаковка должна обеспечивать пригодность пробы для проведения последующих испытаний и не изменять исследуемые показатели качества при транспортировании и хранении.

Пробы, прошедшие отбор, должны соответствующим образом идентифицироваться с использованием единой маркировки и оформляться актом отбора или другим документом, включающим дату, время и место отбора, условия окружающей среды при отборе, фамилию, имя и отчество лица, проводившего отбор, и другую необходимую информацию.

До и после проведения испытаний пробы должны храниться в отдельном помещении в соответствии с требованиями установленными производителем (разработчиком) на лекарственные средства или материалы. В помещении должны быть созданы условия, обеспечивающие сохранность проб в течение срока хранения.

Упаковочные единицы, из которых были отобраны пробы, должны быть аккуратно вскрыты и закрыты; на них должна быть нанесена маркировка, показывающая, что из этой упаковки (тары) были взяты пробы, и указано оставшееся количество анализируемого объекта.

Если для отбора пробы был сделан прокол упаковки, то после отбора необходимо запечатать место прокола и промаркировать.

##### Требования к помещениям для отбора проб, оборудованию и персоналу

Все операции, связанные с отбором проб, следует выполнять должным образом в отдельном помещении или специально отведенном месте с использованием надлежащего оборудования и инструментов для отбора проб. Используемое при отборе проб испытательное оборудование и средства измерений должны пройти в установленном порядке аттестацию или поверку.

Персонал, выполняющий отбор проб, должен иметь соответствующую подготовку.

При отборе проб лекарственных средств и материалов, относящихся к наркотическим средствам, психотропным веществам и их прекурсорам, следует руководствоваться действующими законодательными документами Российской Федерации и фармакопейными статьями.

Документация по процедуре отбора проб должна находиться в местах отбора проб и быть доступной для персонала.

Перед отбором проб персонал, ответственный за отбор, должен изучить необходимую информацию, связанную с техникой безопасности и охраной труда, содержащую необходимые меры предосторожности и требования к персоналу по отбору проб и окружающей среде.

Персонал, занятый отбором проб, должен строго соблюдать инструкции, регламентирующие охрану труда и требования личной гигиены.

Персонал, ответственный за отбор проб, должен носить соответствующую защитную одежду, специальную обувь для выполнения задания, используя при необходимости перчатки, фартуки, очки, респираторы и другие средства индивидуальной защиты.

При отборе проб запрещается принимать пищу, пить, курить, а также хранить еду, средства для курения в специальной одежде или месте отбора проб.

При отборе проб необходимо соблюдать меры предосторожности и требования безопасности, учитывая токсичность, огне- и взрывоопасность, гигроскопичность и другие свойства продукции, а также меры, направленные на предохранение отбираемых проб от повреждения и загрязнения во время работы с ними, требования к их упаковке, транспортированию, складированию и хранению с учётом требований и методов последующих испытаний.

Необходимо принимать меры для предотвращения обрушения сложенных вместе в большом количестве упаковок.

Лица, ответственные за отбор проб, должны иметь безопасный доступ и выход из зоны отбора проб и места хранения образцов. Помещения для хранения образцов должны иметь надлежащее освещение, вентиляцию, соответствующие устройства/оборудование, поддерживающее климатические параметры, а также внутреннюю организацию отобранных образцов продукции, соответствующую требованиям безопасности, связанным с характером связанным с характером отобранных образцов продукции.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0005 Отбор проб лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов

Взамен ОФС.1.1.0005.15

Настоящая общая фармакопейная статья устанавливает единые требования к отбору проб лекарственного растительного сырья и сырья животного происхождения (далее – сырья), а также лекарственных растительных препаратов с целью определения соответствия их качества требованиям фармакопейных статей.

##### Термины и определения

Агрегация – процесс объединения ЛРП в групповую упаковку с сохранением информации о взаимосвязи средств идентификации каждого вложенного ЛРП с групповым кодом создаваемой групповой упаковкой и нанесением соответствующего группового кода на групповую упаковку.

Выборка – совокупность образцов (проб) сырья, отобранного из партии, или лекарственных растительных препаратов, при серийном выпуске, для принятия решения о соответствии партии или серии требованиям фармакопейной статьи.

Выборочная единица – определённое количество сырья и лекарственных растительных препаратов, образующее единство и взятое из одного места в одно время для формирования части выборки.

Генеральная совокупность – серия (партия) готовой продукции, образующая единство материалов.

Готовая продукция (готовый продукт, конечный продукт) – лекарственный растительный препарат, прошедший все этапы технологического процесса, в т.ч. окончательную упаковку.

Загрязнение (контаминация) − внесение примесей химической или микробиологической природы или инородных веществ (механические, включения, вредители запасов и др.) в материалы во время технологического процесса, отбора проб, упаковки или переупаковки, хранения или транспортирования.

Контроль качества – проведение испытаний на соответствие требованиям фармакопейной статьи.

Лекарственное растительное сырьё (ЛРС) – свежие или высушенные растения либо их части, используемые для производства лекарственных средств организациями-производителями лекарственных средств или изготовления лекарственных препаратов аптечными организациями, ветеринарными аптечными организациями, индивидуальными предпринимателями, имеющими лицензию на фармацевтическую деятельность.

Сырьё животного происхождения – органы, железы, ткани и жидкости, полученные от животных, признанных здоровыми по результатам ветеринарно-санитарной экспертизы. Сырьё животного происхождения используется для производства фармацевтических субстанций животного происхождения производителями лекарственных средств.

Лекарственный растительный препарат (ЛРП) – лекарственный препарат, произведенный или изготовленный из одного вида лекарственного растительного сырья или нескольких видов такого сырья и реализуемый в расфасованном виде во вторичной (потребительской) упаковке.

Образец репрезентативный – образец, полученный с использованием такой процедуры выборки, которая гарантирует, что разные части партии/серии или разные свойства неоднородной продукции представлены пропорционально. Для испытаний производителями в качестве образца нельзя отбирать маркированную готовую продукцию уже прошедшую операцию агрегации в групповую упаковку.

Объединённая проба – проба сырья/ЛРП, получаемая объединением нескольких точечных проб/потребительских упаковок, предназначенная для выделения проб для проведения испытания на соответствие требованиям фармакопейной статьи.

Объем выборки – число выборочных единиц в выборке.

Отбор проб – действия по изъятию проб сырья/ЛРП для проведения их испытаний на соответствие требованиям фармакопейной статьи.

Партия сырья – определенное количество цельного, обмолоченного, измельчённого, прессованного сырья одного наименования, однородно по способу подготовки и показателям качества и оформлено одним документом, удостоверяющим его качество, предназначенное для производства лекарственных средств организациями-производителями лекарственных средств или для изготовления лекарственных препаратов аптечными организациями, ветеринарными аптечными организациями, индивидуальными предпринимателями, имеющими лицензию на фармацевтическую деятельность.

План отбора проб − определенный план, который устанавливает количество выборочных единиц, необходимых для проведения испытаний и архивного хранения и соответствующих этому критерию приемлемости, формируется для каждой серии/партии готовой продукции до начала процесса упаковывания.

Проба – определённое количество сырья/ЛРП, отобранное из контролируемой партии/серии.

Промежуточная продукция из ЛРС – продукция, полученная путем переработки ЛРС, например, экстракцией, перегонкой, отжимом, разделением на фракции, очисткой, концентрацией или ферментацией. К промежуточной продукции относятся измельчённое или превращенное в порошок растительное сырьё, настойки, экстракты, эфирные масла и вещества, выделенные в процессе переработки.

Серия ЛРП – определенное количество однородного по всем показателям ЛРП (цельного, измельчённого, порошка) одного наименования, произведенное в течение одного технологического цикла или в течение определенного интервала времени, оформленное одним документом, удостоверяющим его качество. Серия ЛРП формируется из одной или нескольких (но не более 3) партий ЛРС.

Средняя проба – проба сырья/ЛРП, выделяемая из объединенной пробы и предназначенная для формирования аналитических проб.

Тара – основной элемент упаковки, предназначенный для размещения сырья/ЛРП.

Тара транспортная – тара, предназначенная для упаковки, хранения и транспортирования сырья/ЛРП, образующая самостоятельную транспортную единицу. Для ЛРП тара транспортная обеспечивает транспортирование определённого количества ЛРП в потребительской или групповой упаковке.

Точечная проба – минимальное количество пробы сырья/ЛРП, отобранное из каждой единицы продукции в установленном порядке за один прием для составления объединенной пробы.

Упаковка – средство или комплекс средств, обеспечивающих защиту сырья/ЛРП от повреждения и потерь, окружающей среды, загрязнений, а также обеспечивающих процесс обращения лекарственных средств. Различают первичную и вторичную упаковку в зависимости от непосредственного контакта с лекарственным средством.

Упаковка групповая – упаковка, объединяющая одинаковые упаковочные единицы в потребительской упаковке, скреплённая с помощью упаковочных или обвязочных материалов.

Упаковка потребительская (вторичная) – упаковка, поступающая к потребителю и обеспечивающая сохранность и неизменность свойств лекарственного растительного препарата в течение установленного срока годности.

Упаковочная единица – упаковка, содержащая определённое количество готовой продукции.

Примечание – Определения, приведённые выше, относятся к терминам настоящей ОФС и могут иметь иные значения в других контекстах.

##### Общие положения

Отбор проб (выборок) произведённых (изготовленных) лекарственных средств и промежуточной продукции, а также материалов, используемых в процессе их производства (изготовления) или характеризующих стадии технологического процесса производства (изготовления), должен проводиться в соответствии с утверждённой процедурой отбора проб, если иное не указано.

Проверка соответствия качества партии сырья/серии ЛРП требованиям фармакопейной статьи должна осуществляться путем отбора репрезентативной пробы и проведения испытаний.

Процедура отбора проб должна соответствовать цели отбора проб, виду анализа, специфике отбираемых образцов и проводиться установленным методом отбора проб с соблюдением действующих санитарно-гигиенических правил и условий, исключающих загрязнение сырья/ЛРП и обеспечивающих безопасность персонала.

При проведении процедуры отбора проб должны быть предусмотрены и учтены:

- план или схема отбора проб;

- объём и тип отбора проб;

- место и время отбора проб;

- выборка и подготовка проб для испытаний;

- специальные меры предосторожности, особенно в отношении ядовитых и сильнодействующих ЛРС/ЛРП;

- перечень используемого оборудования для отбора проб;

- требования по очистке и хранению оборудования для отбора проб и др.;

- тип, характеристика и маркировка тары для хранения проб;

- параметры окружающей среды при отборе и подготовке проб для испытаний.

Отбор проб для испытаний должен осуществлять уполномоченный представитель анализирующей организации или подразделения.

Пробы, отобранные в соответствии с настоящей ОФС, предназначены для проведения испытаний сырья/ЛРП на соответствие требованиям.

Отбору проб подлежит:

- лекарственное растительное сырьё (партия);

- сырьё животного происхождения (партия);

- лекарственные растительные препараты (серия);

- промежуточная продукция на критических стадиях процесса производства/изготовления ЛРП.

##### Правила отбора проб

Пробы отбирают от генеральной совокупности (партии/серии), состоящей из выборочных единиц. При отборе проб, характеризующих стадии технологического процесса производства/изготовления, генеральная совокупность устанавливается внутренними документами предприятия производителя/изготовителя.

Перед отбором проб необходимо произвести внешний осмотр каждой транспортной/упаковочной единицы всей партии/серии. При осмотре необходимо обратить внимание на соответствие упаковки и её маркировки установленным требованиям производителя (разработчика), установить количество транспортных единиц, целостность и (или) наличие пломб на упаковке, правильность оформления сопроводительной документации.

Пробы отбирают из неповреждённых транспортных единиц, упакованных согласно установленным требованиям.

Каждую партию/серию необходимо рассматривать как отдельную в отношении отбора проб и проведения испытаний. Не допускается отбор проб одновременно от двух наименований, двух партий/серий во избежание ошибок при отборе проб (при перемешивании или перепутывании проб). К отбору от следующей партии сырья/серии ЛРП можно переходить только после выполнения всей процедуры отбора от предыдущей партии/серии.

Пробы отбираются в количестве, необходимом для проведения трёх анализов (включая контрольный (партия)/архивный (серия) образцы) в соответствии с требованиями фармакопейной статьи. При получении сомнительных результатов анализа контролирующая организация/подразделение имеет право провести дополнительный отбор проб для повторных испытаний.

До выдачи разрешения на использование партии сырья/серии ЛРП должны содержаться в карантине в условиях, соответствующих установленным требованиям.

Процедура отбора проб оформляется записью в журнале регистрации отбора проб и актом отбора проб. Архивные образцы каждой серии ЛРП следует хранить, как минимум, в течение срока годности серии и одного года после истечения срока годности. Контрольные образцы партии сырья должны храниться в течение не менее 2 лет после выпуска серии лекарственного препарата из данной партии сырья, если более длительный период не предусмотрен соответствующими нормативно-правовыми актами.

##### Методы отбора проб

Пробы могут быть отобраны методом случайного отбора от установленного количества выборочных единиц при выборочном контроле; от каждой транспортной единицы при сплошном контроле или другим методом в соответствии с разработанным статистически обоснованным планом отбора.

Для осуществления случайного отбора проб необходимо последовательно пронумеровать каждую транспортную единицу, затем, воспользовавшись таблицей случайных чисел (или сгенерированными компьютером случайными числами), установить, из каких случайных транспортных единиц производить отбор необходимого количества проб.

Отбор проб сырья (партия)

Отбор проб от партии сырья должен быть проведен в соответствии с порядком, представленным на рис. 1.

Рисунок 1. Схема порядка отбора проб от партии сырья

Для проверки соответствия качества сырья требованиям фармакопейной статье отбирают методом случайного или систематического отбора и составляют выборку из неповрежденных транспортных единиц (табл. 1). Проверку качества сырья в поврежденных транспортных единицах производят отдельно от неповрежденных, вскрывая каждую единицу.

Таблица 1. Объем выборки партии сырья/серии ЛРП
Количество транспортных единиц в партии/серии, шт. | Объем выборки, шт.
От 1 до 5 | Все единицы
От 6 до 50 | 5 единиц
Свыше 50 | Одна транспортная единица от каждых 10 единиц, составляющих партию/серию

Неполные 10 единиц приравнивают к 10 единицам (например, при наличии в партии 51 транспортной единицы объем выборки составляет 6 транспортных единиц).

Попавшие в выборку транспортные единицы вскрывают, и путем внешнего осмотра определяют: однородность сырья по способу подготовки (цельное, резаное, обмолоченное, измельчённое, шинкованное); по цвету, запаху, засоренности; наличию плесени, гнили, устойчивого постороннего запаха, не исчезающего при проветривании; засоренность ядовитыми растениями и посторонними примесями (камни, стекло, помет грызунов и птиц и т.д.). Одновременно невооруженным глазом и с помощью лупы
(5-10×) определяют наличие вредителей запасов.

При установлении (при внешнем осмотре) неоднородности сырья, наличия плесени и гнили, засоренности посторонними растениями в количествах, явно превышающих допустимые пределы содержания примеси, партия может быть принята только после того, как будет рассортирована и вторично предъявлена к сдаче.

При обнаружении в сырьё затхлого, устойчивого постороннего запаха, не исчезающего при проветривании, недопустимых примесей (ядовитых растений, помет грызунов и птиц, стекло и др.), зараженности вредителями запасов II и III степеней партия ЛРС не подлежит приемке.

Из каждой транспортной единицы, попавшей в выборку, берут, избегая измельчения, 3 точечные пробы: сверху, снизу и из середины. Из мешков, тюков и кип точечные пробы отбирают на глубине не менее 10 см сверху, затем, после распарывания по шву, из середины и снизу; точечные пробы семян и сухих плодов отбирают зерновым щупом или пробоотборником. Из ящиков первую точечную пробу отбирают из верхнего слоя, вторую − из середины и третью − со дна ящика. Точечные пробы должны быть примерно одинаковыми по массе. Из всех точечных проб, осторожно перемешивая, составляют объединенную пробу.

Масса объединенной пробы должна быть не менее массы, указанной в табл. 2. В случае, если масса объединенной пробы недостаточна для проведения испытаний, отбор точечных проб повторяют.

Таблица 2. Масса объединенной пробы сырья
Наименование сырья | Масса пробы не менее, г
--- | ---
Березы почки | 1500
Сосны обыкновенной почки | 1600
Листья цельные, кроме нижеперечисленных: | 1700
сенны листья | 1500
Толокнянки обыкновенной листья, брусники листья | 1400
Листья резаные, обмолоченные, измельчённые, порошок | 1500
Цветки цельные, измельчённые, порошок, кроме нижеперечисленных: | 1600
полыни цитварной цветки | 1400
календулы лекарственной цветки, кукурузы столбики с рыльцами | 1500
бузины черной цветки | 1300
ромашки аптечной цветки | 1500
ромашки далматской цветки | 1700
Трава цельная, побеги, кроме нижеперечисленных: | 1900
анабазиса безлистного побеги | 1500
Трава, побеги резаные, обмолоченные, измельчённые, порошок | 1500
Сочные плоды цельные, измельчённые, порошок, кроме нижеперечисленных: | 1900
шиповника плоды, боярышника плоды | 2000
перца стручкового плоды | 2200
Сухие плоды и семена цельные, измельчённые, порошок, кроме нижеперечисленных: | 2000
дурмана индейского семена, термопсиса ланцетного семена, льна обыкновенного семена, хмеля обыкновенного соплодия, фасоли обыкновенной створки плодов | 1900
амми зубной плоды, джута семена | 1800
ольхи соплодия | 1900
Клубни, корни и корневища цельные, кроме нижеперечисленных: | 2800
марены корневища и корни, лапчатки прямостоящей корневища | 2100
салепа клубни | 1900
девясила высокого корневища и корни | 3200
папоротника мужского корневища, ревеня корни | 3700
туркестанский мыльный корень | 12500
солодки корни очищенные | 4700
солодки корни неочищенные, барбариса корни, элеутерококка колючего корневища и корни | 8200
Корни и корневища резаные, дробленные, измельчённые | 1900
Корни и корневища порошок | 1800
Кора цельная | 2800
Кора резаная, измельчённая, порошок | 1900
Прочее растительное сырьё: |
ликоподий | 800
спорыньи рожки | 900
чага цельная | 5300
чага измельчённая | 2100
ламинарии слоевища цельные | 7200
ламинарии слоевища шинкованные | 2700
ламинарии слоевища порошок | 2100
Сырьё животного происхождения: |
бадяга | 300

Формирование проб для проведения испытаний

Из объединенной пробы методом квартования выделяют следующие пробы в приведенной ниже последовательности:

- пробу для определения микробиологической чистоты массой 100 г, исключение составляет чага – 200 г;

- пробу для определения степени зараженности вредителями запасов массой 500 г для мелких видов ЛРС и массой 1000 г для крупных видов ЛРС;

- среднюю пробу (для выделения аналитических проб) в соответствии с указаниями табл. 3;

- пробу для проведения радиационного контроля в соответствии с указаниями табл. 5;

- пробу для определения содержания остаточных пестицидов, тяжелых металлов и мышьяка массой 50 г.

Для этого сырьё разравнивают на гладкой, чистой, ровной, сухой поверхности, предварительно обработанной дезинфицирующим средством, в виде квадрата по возможности тонким равномерным слоем и по диагонали делят на 4 треугольника. Два противоположных треугольника удаляют, а два оставшихся соединяют вместе и перемешивают. Эту операцию повторяют до тех пор, пока не останется количество сырья в двух противоположных треугольниках, соответствующее массе одной из заданных проб. Масса каждой пробы должно быть не менее указанной в табл. 2. Допустимые отклонения в массе каждой из проб не должны превышать ± 20%.

Перед квартованием каждой последующей объединенной пробы тщательно дезинфицируют руки, поверхности и инструмент для квартования.

Таблица 3. Масса средней пробы сырья и ЛРП
Наименование сырья/ЛРП | Масса средней пробы, г
--- | ---
Березы почки | 200
Сосны обыкновенной почки | 350
Листья цельные, кроме нижеперечисленных: | 400
сенны листья | 200
Толокнянки обыкновенной листья, брусники листья | 150
Листья резаные, обмолоченные, измельчённые, порошок | 200
Цветки цельные, измельчённые, порошок, кроме нижеперечисленных: | 300
полыни цитварной цветки | 150
календулы лекарственной цветки, кукурузы столбики с рыльцами | 200
бузины черной цветки | 75
ромашки аптечной цветки | 200
ромашки далматской цветки | 400
Трава цельная, побеги, кроме нижеперечисленных: | 600
анабазиса безлистного побеги | 200
Трава, побеги резаные, обмолоченные, измельчённые, порошок | 200
Сочные плоды цельные, измельчённые, порошок, кроме нижеперечисленных: | 200
шиповника плоды, боярышника плоды | 300
перца стручкового плоды | 550
Сухие плоды и семена цельные, измельчённые, порошок, кроме нижеперечисленных: | 300
дурмана индейского семена, термопсиса ланцетного семена, льна обыкновенного семена, хмеля обыкновенного соплодия, фасоли обыкновенной створки плодов | 200
амми зубной плоды, джута семена | 150
ольхи соплодия | 250
Клубни, корни и корневища цельные, кроме нижеперечисленных: | 600
марены корневища и корни, лапчатки прямостоящей корневища | 400
салепа клубни | 200
девясила высокого корневища и корни | 1000
папоротника мужского корневища, ревеня корни | 1500
туркестанский мыльный корень | 10300
солодки корни очищенные | 2500
солодки корни неочищенные, барбариса корни, элеутерококка колючего корневища и корни | 6000
Корни и корневища резаные, дробленные, измельчённые | 250
Корни и корневища порошок | 150
Кора цельная | 600
Кора резаная, измельчённая, порошок | 200
Прочее растительное сырьё: |
ликоподий | 100
спорыньи рожки | 200
чага цельная | 3000
чага измельчённая | 450
ламинарии слоевища цельные | 5000
ламинарии слоевища шинкованные | 1000
ламинарии слоевища порошок | 400
Сырьё животного происхождения: |
бадяга | 250

Пробу для определения степени зараженности вредителями запасов герметично упаковывают. Среднюю пробу и пробы для радиационного контроля, микробиологической чистоты, остаточных пестицидов, тяжелых металлов и мышьяка упаковывают каждую в полиэтиленовый или многослойный бумажный пакет. Упаковка проб для микробиологической чистоты должна отвечать требованиям стерильности. К пакету прикрепляют этикетку.

Формирование аналитических проб

Из средней пробы методом квартования выделяют аналитические пробы для определения:

- внешних признаков, микроскопии, качественных реакций, измельчённости и содержания примесей;

- влажности (аналитическую пробу для определения влажности отделяют сразу же после отбора средней пробы и упаковывают герметично);

- содержания золы и действующих веществ.

Масса аналитических проб должна соответствовать массе, указанной в табл. 4.

Таблица 4. Масса аналитических проб сырья и ЛРП
Наименование сырья/ЛРП | Масса аналитической пробы, г, для определения
--- | ---
внешних признаков, микроскопии, качественных реакций, измельчённости, примесей | влажности | содержания золы и действующих веществ
Березы почки | 50 | 25 | 100
Сосны обыкновенной почки | 200 | 25 | 100
Листья цельные, кроме нижеперечисленных: | 200 | 25 | 150
сенны листья | 100 | 15 | 50
Толокнянки обыкновенной листья, брусники обыкновенной листья | 50 | 25 | 50
листья резаные, обмолоченные, измельчённые, порошок | 50 | 25 | 100
Цветки цельные, измельчённые, порошок, кроме нижеперечисленных: | 200 | 25 | 50
полыни цитварной цветки | 25 | 15 | 50
календулы лекарственной цветки, кукурузы столбики с рыльцами | 100 | 25 | 50
бузины черной цветки | 20 | 15 | 25
ромашки аптечной цветки | 50 | 25 | 100
ромашки далматской цветки | 300 | 25 | 50
Трава цельная, побеги, кроме нижеперечисленных: | 300 | 50 | 200
анабазиса безлиственный побеги | 50 | 25 | 100
Трава, побеги резаные, обмолоченные, измельчённые, порошок | 50 | 25 | 100
Сочные плоды цельные, измельчённые, порошок, кроме нижеперечисленных: | 100 | 50 | 50
шиповника плоды, боярышника плоды | 200 | 25 | 50
перца стручкового плоды | 300 | 25 | 150
Сухие плоды и семена цельные, измельчённые, порошок, кроме нижеперечисленных: | 200 | 25 | 50
дурмана индейского семена, термопсиса ланцетного семена, льна обыкновенного семена, хмеля обыкновенного соплодия, фасоли обыкновенной створки плодов | 50 | 25 | 100
амми зубной плоды, джута семена | 10 | 25 | 100
ольхи соплодия | 100 | 25 | 100
Клубни, корни и корневища цельные, кроме нижеперечисленных: | 300 | 50 | 200
марены корневища и корни, лапчатки прямостоящей корневища | 200 | 50 | 100
салепа клубни | 100 | 25 | 50
девясила высокого корневища и корни | 600 | 50 | 100
папоротника мужского корневища, ревеня корни | 1000 | 100 | 300
туркестанский мыльный корень | 10000 | 200 | -
солодки корни очищенные | 2000 | 100 | 200
солодки корни неочищенные, барбариса корни, элеутерококка колючего корневища и корни | 5000 | 100 | 500
Корни и корневища резаные, дробленные, измельчённые | 100 | 25 | 100
Корни и корневища порошок | 50 | 15 | 50
Кора цельная | 400 | 50 | 100
Кора резаная, измельчённая, порошок | 100 | 25 | 50
Прочее растительное сырьё: |  |  |
ликоподий | 50 | 25 | 25
спорыньи рожки | 50 | 25 | 100
чага цельная | 2000 | 500 | 500
чага измельчённая | 200 | 25 | 200
ламинарии слоевища цельные | 3000 | 500 | 1000
ламинарии слоевища шинкованные | 500 | 100 | 300
ламинарии слоевища порошок | 100 | 50 | 200
Сборы измельчённые, порошок | 100 | 25 | 100
Сырьё животного происхождения: |  |  |
бадяга | 50 | 25 | 25

Таблица 5. Масса пробы сырья и ЛРП для проведения радиационного контроля
Морфологическая группа сырья/ЛРП | Масса пробы не менее, г
Листья | 600
Трава | 600
Цветки | 600
Плоды | 1000
Семена | 1000
Кора | 1000
Корни и корневища | 1000
Почки | 600
Прочее | 1000

Для таких видов ЛРС, как цельная трава, корни, корневища, клубни, после выделения аналитической пробы для определения внешних признаков, измельчённости и содержания примесей часть средней пробы, предназначенную для определения влажности, содержания золы и действующих веществ, измельчают ножницами или секатором на крупные куски, тщательно перемешивают и затем выделяют соответствующие аналитические пробы.

Перед формированием проб для проведения микробиологических испытаний каждой последующей партии сырья необходимо провести обработку применяемых инструментов и поверхности, на которой будет проводиться квартование, дезинфицирующими средствами. Если требуется измельчение, то перед измельчением каждой пробы инструмент (ножницы, секатор) также обрабатывают дезинфицирующими средствами.

Если при выделении аналитических проб в двух противоположных треугольниках масса сырья окажется меньше указанной в табл. 4, то следует из оставшихся при квартовании двух треугольников отделить сырьё по всей толщине слоя и присоединить к аналитической пробе. Если масса окажется больше указанной в табл. 4, то следует удалить из отобранных треугольников сырьё по всей толщине слоя, предварительно распределив его по поверхности стола.

При установлении в результате испытаний несоответствия качества сырья требованиям фармакопейной статьи следует проводить его повторную проверку. Для повторных испытаний от невскрытых транспортных единиц формируют выборку в соответствии с табл. 1 и отбирают пробы согласно настоящей ОФС. Результаты повторных испытаний являются окончательными и распространяются на всю партию.

Примечание – Статья не распространяется на отбор проб партии женьшеня корней.

Отбор проб ЛРП (серия)

ЛРП поступают в обращение в потребительских упаковках в виде цельного или измельчённого ЛРС, расфасованного в пачки с внутренним пакетом и в иные подходящие виды упаковки для недозированных форм фасовки, или порошка, расфасованного в пакеты из бумаги термосвариваемой пористой неразмокаемой (фильтр-пакеты) с вложением в пачку.

Отбор проб от серии ЛРП должен быть проведен в соответствии с порядком, представленным на рис. 2.

Рисунок 2. Схема порядка отбора проб от серии ЛРП

Единицы продукции в выборку необходимо отбирать случайным образом или методом систематического отбора. Объем выборки зависит от количества транспортных единиц в серии ЛРП (табл. 1).

Попавшие в выборку транспортные единицы следует вскрыть и из разных мест каждой транспортной единицы случайным образом или методом систематического отбора отобрать по 2 потребительские упаковки.

Из выборки, представленной 1-5 транспортными единицами, следует отобрать по 10 потребительских упаковок. Отобранные потребительские упаковки составляют объединённую пробу. Количество потребительских упаковок, отобранных в объединенную пробу, должно быть достаточно для проведения испытаний на соответствие требованиям фармакопейной статьи по меньшей мере в 2 повторностях и для формирования архивного образца.

Содержимое потребительских упаковок средней пробы следует высыпать на гладкую, чистую, ровную поверхность, тщательно перемешать и методом квартования выделить пробы, соответствующие по массе одной из заданных проб (табл. 3, 4).

Если отобранного количества недостаточно, из объединенной пробы следует выделить потребительские упаковки дополнительно.

Отклонения массы содержимого упаковки ЛРП, помещенного в пачку с внутренним пакетом, следует определять следующим образом: вскрыть пачку, взвесить внутренний пакет вместе с содержимым, затем пакет вскрыть, чтобы не были утеряны какие-либо фрагменты. Упаковку полностью очистить от содержимого при помощи щёточки. Взвесить пустую упаковку и вычислить массу содержимого упаковки путем вычитания. Взвешивание проводить с точностью ±0,01 г. Следует повторить данные действия на 9 оставшихся упаковках и вычислить отклонение массы содержимого каждой упаковки от номинальной.

Массу содержимого упаковки (mсу) вычисляют по формуле:

где mоб – масса упаковки ЛРП вместе с содержимым, г;
mуп – масса упаковки ЛРП без содержимого, г.

Отклонение массы содержимого каждой упаковки в процентах от номинальной (X) вычисляют по формуле:

где mоб – номинальная масса ЛРП, указанная на упаковке, г;
mуп – масса содержимого упаковки ЛРП, г.

Допустимые отклонения приведены в табл. 6.

Таблица 6. Допустимые отклонения массы содержимого упаковки ЛРП, помещенного в пачку с внутренним пакетом
Номинальная масса, г | Допустимые отклонения для одной упаковки, ±%
До 50 | 7,5
От 51 до 100 | 5
От 101 до 200 | 3

Для лекарственных растительных препаратов, расфасованных в фильтр-пакеты, отклонения в массе содержимого упаковки определяют по следующей методике: 10 пачек с фильтр-пакетами следует вскрыть, отобрать произвольно 20 фильтр-пакетов и определить среднюю массу содержимого одного фильтр-пакета. Для этого необходимо взвесить фильтр-пакеты вместе с содержимым, затем вскрыть, чтобы не были утеряны какие-либо фрагменты, полностью очистить упаковку от содержимого при помощи щёточки/кисточки. Взвесить пустую упаковку и вычислить массу содержимого фильтр-пакетов путем вычитания. Взвешивание следует проводить с точностью ± 0,01 г. Вычислить среднюю массу содержимого одного фильтр-пакета и её отклонение от номинальной. Допустимое отклонение средней массы содержимого одного фильтр-пакета от номинальной ± 5 %.

##### Требования к оборудованию при отборе проб

Для обеспечения процедуры отбора проб должны иметься в наличии все инструменты, необходимые для вскрытия упаковок, включая ножи, клещи, пилы, молотки, гаечные ключи, средства для удаления пыли (например, щетки) и материалы для повторного запечатывания упаковок (например, клейкая лента), а также самоклеящиеся этикетки, на которых следует указывать, что часть содержимого из упаковки или контейнера была извлечена.

Все инструменты и приспособления должны содержаться в чистоте. Перед повторным использованием их следует вымыть, прополоскать водой.

В качестве инструмента для отбора проб могут использоваться пробоотборники, щупы, совки и др.

##### Требования к персоналу, проводящему отбор проб

Требования к квалификации персонала

Сотрудник, проводящий отбор проб, должен руководствоваться в своей работе настоящими правилами. Персонал должен владеть знаниями о:

- технических приемах и оборудовании для отбора проб;

- риске перекрестной контаминации;

- подлежащих соблюдению мерах предосторожности в отношении ядовитых и сильнодействующих ЛРС и ЛРП;

- важности визуального осмотра исходного сырья, материалов, тары и этикеток;

- важности протоколирования любых непредвиденных или необычных обстоятельств.

Требования к личной гигиене персонала

При отборе проб запрещается принимать пищу, пить, курить, а также хранить еду, средства для курения в специальной одежде или месте отбора проб. Персонал, занятый отбором проб сырья и ЛРП, должен строго соблюдать инструкции, регламентирующие состояние здоровья и требования личной гигиены, носить технологическую одежду.

##### Маркировка отобранных проб

На тару с отобранной пробой сотрудник, ответственный за отбор проб, должен наклеить этикетку, содержащую следующую информацию:

- наименование сырья/ЛРП;

- поставщик/производитель;

- номер партии сырья/серии ЛРП, присвоенный на предприятии;

- номер записи в журнале регистрации отбора проб (присваивается и наносится на этикетку при поступлении образца в лабораторию);

- дата отбора пробы;

- количество отобранной пробы;

- указание, для какого вида анализа предназначена проба (заполняется при необходимости);

- Ф.И.О. и подпись сотрудника, ответственного за отбор проб.

На транспортную/упаковочную единицу, из которой отобрана проба, сотрудник, ответственный за отбор проб, должен наклеить этикетку, содержащую следующую информацию:

- «Проба отобрана»;

- дата отбора пробы;

- Ф.И.О. и подпись сотрудника, ответственного за отбор проб.

##### Документальное оформление отбора проб

Отбор проб для проведения контроля качества сырья/ЛРП должен проводиться комиссионно. Процедура отбора должна быть задокументирована.

После проведения отбора проб составляется акт отбора, в котором указываются лица, проводившие отбор (Ф.И.О., должность), дата и место отбора проб, наименование продукции, производитель, номер серии/партии, объем поставки, количество отобранных проб (с учетом контрольного/архивного образца), срок годности/хранения. Один экземпляр акта остается в организации, в которой отбирались образцы, второй − сопровождает образец.

В журнал регистрации отбора проб заносится:

- название сырья/ЛРП;

- производитель/поставщик сырья/ЛРП;

- дата поступления сырья/ЛРП;

- количество транспортных единиц, из которых отобрана проба;

- дата отбора проб;

- масса отобранной пробы;

- общие замечания (включая все выявленные при внешнем осмотре несоответствия);

- Ф.И.О. лица, проводившего отбор проб.

К образцу прикладывается копия акта отбора объединенной пробы, сопроводительные документы и вспомогательная документация (сертификаты или аналитический паспорт).

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0006 Субстанции для фармацевтического применения

Взамен ОФС.1.1.0006, ОФС.1.1.0041

##### Определение

Субстанции для фармацевтического применения представляют собой органические или неорганические вещества, используемые в качестве действующих (активных) веществ или вспомогательных веществ при производстве, изготовлении лекарственных препаратов.

Они могут быть природного происхождения или получены путём экстракции, ферментации или синтеза.

Данная общая фармакопейная статья не распространяется на:

- лекарственное растительное сырьё;

- субстанции для фармацевтического применения растительного происхождения;

- матричные настойки для гомеопатических препаратов;

- химические предшественники для радиофармацевтических препаратов.

Если в лекарственном препарате, изготовленном индивидуально для пациента, используется субстанция для фармацевтического применения, не описанная в фармакопейной статье, необходимость её соответствия требованиям данной общей фармакопейной статьи определяют на основании оценки риска с учётом приемлемого качества субстанции и её предполагаемого применения.

Если при производстве лекарственных препаратов используют субстанции для фармацевтического применения, получаемые из органов и тканей человека или животного происхождения, то они должны соответствовать требованиям ОФС «Вирусная безопасность»._

В зависимости от состава лекарственного препарата, некоторые субстанции могут применяться как действующие вещества или как вспомогательные вещества. Твёрдые субстанции могут быть уплотнены, покрыты оболочкой, гранулированы, измельчены до определённых размеров или обработаны другим способом. Фармакопейная статья применима к субстанции, обработанной с использованием вспомогательных веществ, только если такая обработка указана в разделе Определение в фармакопейной статье.

Субстанции для фармацевтического применения специальных категорий. Субстанция для фармацевтического применения должна иметь надлежащее качество для производства/изготовления всех лекарственных форм, в которых она может быть использована, при отсутствии других указаний в фармакопейной статье.

Полиморфизм. В фармакопейных статьях обычно не указывают кристаллические или аморфные формы, если это не влияет на биодоступность. При отсутствии иных указаний, все формы субстанции для фармацевтического применения должны соответствовать требованиям фармакопейной статьи.

##### Производство

Субстанции для фармацевтического применения производят в условиях, которые обеспечивают качество и соответствие требованиям фармакопейной статьи или установленным требованиям.

Производство действующих веществ должно осуществляться в условиях надлежащей производственной практики.

Контроль родственных примесей в субстанциях для фармацевтического применения должен осуществляться в соответствии с ОФС «Родственные примеси в фармацевтических субстанциях и лекарственных препаратах».

Независимо от того, указано в фармакопейной статье или нет, субстанции для фармацевтического применения должны отвечать следующим требованиям:

- рекомбинантные белки или другие субстанции, полученные путём генной модификации, должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные средства, получаемые с использованием технологии рекомбинантной ДНК», если применимо;

- субстанции, полученные от животных, восприимчивых к трансмиссионной губчатой энцефалопатии, за исключением экспериментально вызванных заболеваний, должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные средства с риском контаминации возбудителя губчатой энцефалопатии животных», если применимо;

- субстанции, полученные в результате процесса ферментации, независимо от того, модифицированы ли соответствующие микроорганизмы традиционными методами или технологией рекомбинантной ДНК (рДНК), должны также соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные средства, получаемые путём ферментации», если применимо.

Используемые в процессе производства растворители, должны быть надлежащего качества. Кроме того, учитывается их токсичность и остаточное содержание (ОФС «Остаточные органические растворители»). Вода, используемая в процессе производства тоже должна быть надлежащего качества.

Элементные примеси, образующиеся в результате прибавления катализаторов и реактивов, должны быть идентифицированы соответствующими методами, с использованием принципов управления рисками (ОФС «Элементные примеси»).

Субстанции для фармацевтического применения, произведённые или обработанные с целью получения необходимой формы или других характеристик, должны выдерживать требования фармакопейной статьи.

Для контроля показателей, способных повлиять на пригодность субстанции для фармацевтического применения и качество лекарственных форм, произведённых и(или) изготовленных из них, в фармакопейной статье должны быть описаны необходимые функциональные характеристики.

Порошкообразные субстанции для фармацевтического применения могут подвергаться обработке для получения определённой степени измельчённости (ОФС «Измельчённость порошков»).

Уплотнённые субстанции для фармацевтического применения получают для увеличения размера частиц или получения частиц специфической формы и(или) для получения субстанции с более высокой насыпной плотностью.

Покрытые оболочкой субстанции состоят из частиц действующих веществ, покрытых одним или несколькими подходящими вспомогательными веществами.

Гранулированные субстанции представляют собой частицы определённого размера и(или) формы, полученные из действующего вещества путём прямого гранулирования или гранулирования с одним или несколькими подходящими вспомогательными веществами.

Если действующее вещество обрабатывают вспомогательными веществами, последние должны выдерживать требования испытания соответствующей фармакопейной статьи или, при её отсутствии, утверждённым требованиям.

Процесс проводят в условиях надлежащей производственной практики в том случае, когда действующее вещество подвергают обработке вспомогательными веществами для получения, например, покрытых оболочкой или гранулированных субстанций.

N-Нитрозамины. Поскольку многие N-нитрозамины классифицируют как вероятные канцерогены для человека, производители действующих (активных) веществ должны оценивать потенциальный риск загрязнения N-нитрозаминов данными примесями в процессе их производства и при хранении. При подтверждении риска производители должны минимизировать присутствие N-нитрозаминов, например, путём изменения процесса производства, и внедрить алгоритм обнаружения и контроля этих примесей (ОФС «Примеси N-нитрозаминов»).

При необходимости, метод производства должен быть валидирован в отношении возможности получения лекарственного средства, выдерживающего испытание на аномальную токсичность. Данное требование применимо для действующих веществ, получаемых из органов, тканей человека или сырья животного происхождения, микроорганизмов и продуктов их жизнедеятельности, предназначенных для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

Метод производства должен быть валидирован в отношении возможности получения лекарственного средства, выдерживающего испытание на гистамин или депрессорные вещества. Данное требование применимо для получаемых из сырья животного происхождения или микроорганизмов субстанций для фармацевтического применения, которые могут содержать примеси, обладающие депрессорным действием.

##### Свойства

Сведения, приведённые в данном разделе фармакопейной статьи (например, растворимость или температура разложения), могут не рассматриваться в качестве обязательных показателей и носят информационный характер.

Если субстанция для фармацевтического применения обладает полиморфизмом, это должно быть указано в разделе "Свойства" с целью учёта данной характеристики при производстве лекарственных препаратов.

##### Идентификация

Фармакопейная статья может содержать подразделы "Первая идентификация" и Вторая идентификация. Испытания, описанные в подразделе "Первая идентификация", могут быть использованы во всех случаях. Испытания, описанные в подразделе "Вторая идентификация", могут быть использованы только в аптеках, если качество субстанции для фармацевтического применения данной серии полностью прослеживается на соответствие всем другим требованиям фармакопейной статьи.

В некоторых фармакопейных статьях приведены два или более видов испытаний для первой идентификации, которые являются равноценными и могут использоваться независимо друг от друга. В одном или нескольких таких показателях содержится перекрёстная ссылка на испытание, указанная в фармакопейной статье в разделе "Испытания", что может быть использовано для упрощения работы специалиста, проводящего идентификацию и предусмотренные испытания. Например, если в одном из испытаний для идентификации есть перекрёстная ссылка на определение энантиомерной чистоты, а в другом – на определение удельного оптического вращения: цель двух испытаний одна и та же – подтвердить присутствие соответствующего энантиомера.

##### Испытания

Полиморфизм (ОФС «Полиморфизм»). Если кристаллическая или аморфная форма субстанции для фармацевтического применения накладывает ограничения на её использование в лекарственных препаратах, то природу данных форм идентифицируют, её морфологию контролируют соответствующим образом и указывают в маркировке.

Родственные примеси. Данное испытание контролирует продукты деструкции действующих веществ и технологические примеси, обусловленные технологией производства. Родственные примеси подразделяются на идентифицированные, то есть соединения с установленным химическим строением, и неидентифицированные – соединения, строение которых не установлено.

Если иное не указано в фармакопейной статье или не обосновано, родственные примеси в действующих веществах должны контролироваться, должны быть идентифицированы (если применимо) и квалифицированы согласно таблице 1 или таблице 2 для синтетических пептидов.

Таблица 1. Пределы содержания родственных примесей в действующих веществах
Максимальная суточная доза | Доля от действующих веществ, выше которой примесь должна контролироваться | Доля от действующих веществ, выше которой примесь должна быть идентифицирована | Доля от действующих веществ, выше которой должна быть установлена биологическая безопасность примеси
--- | --- | --- | ---
≤ 2 г/сут | > 0,05 % | > 0,1 % или > 1,0 мг/сут (в зависимости от того, что меньше) | > 0,15 % или 1,0 мг/сут (в зависимости от того, что меньше)
> 2 г/сут | > 0,03 % | > 0,05 % | > 0,05 %

Таблица 2. Пределы содержания, идентификации и квалификации родственных примесей в пептидах, полученных синтетическим путём
Доля от действующих веществ, выше которой примесь должна контролироваться | Доля от действующих веществ, выше которой примесь должна быть идентифицирована | Доля от действующих веществ, выше которой должна быть установлена биологическая безопасность примеси
--- | --- | ---
> 0,1 % | > 0,5 % | > 1,0 %

Для примесей, обладающих повышенной токсичностью или вызывающих непредвиденное фармакологическое действие, могут быть установлены иные пределы.

Для мутагенных примесей должны быть применимы соответствующие требования.

Если фармакопейная статья не предусматривает подходящего контроля новой примеси, его необходимо разработать и включить в спецификацию на субстанцию.

Приведённые выше требования не распространяются на действующие (активные) вещества биологического происхождения, в том числе биотехнологические, олигонуклеотиды, радиофармацевтические, продукты ферментации и полученные из них полусинтетические продукты, сырьё животного происхождения.

Неорганические анионы (хлориды, сульфаты и др.). Выбор контролируемых анионов определяется технологией производства субстанции. Если неорганические анионы входят в состав субстанции для фармацевтического применения (например, субстанция является гидрохлоридом или сульфатом), то этот показатель не контролируют.

Элементные примеси. Оценку элементных примесей, в том числе их допустимые суточные дозы, проводят в соответствии с ОФС «Элементные примеси». Идентификация элементных примесей и стратегии их контроля должны быть разработаны с использованием принципов управления рисками.

Остаточные органические растворители. Содержание регламентируют в соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители» или другого подходящего метода. Если проводят количественное определение остаточных растворителей и не проводят испытание Потеря в массе при высушивании, то содержание остаточных количеств органических растворителей учитывают в расчёте количественного содержания субстанции для фармацевтического применения, удельного оптического вращения и удельного поглощения. Если остаточные органические растворители не используются и не образуются в процессе производства субстанции для фармацевтического применения, то этот показатель может не контролироваться.

Микробиологическая чистота. Субстанция для фармацевтического применения должна выдерживать требования испытания на микробиологическую чистоту.

В фармакопейной статье могут быть приведены или могут быть обоснованы другие критерии приемлемости по микробиологическим показателям в соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота». В зависимости от природы субстанции для фармацевтического применения и её применения могут быть обоснованы другие критерии приемлемости по микробиологическим показателям.

Стерильность (ОФС «Стерильность»). Если субстанция для фармацевтического применения предназначена для производства стерильных лекарственных препаратов без дальнейшей стерилизации или выпускается под категорией «Стерильно», она должна выдерживать требования испытания на стерильность.

Испытания на пирогенные вещества. Субстанция для фармацевтического применения должна выдерживать подходящее испытание на пирогенные вещества, если она предназначена для производства парентеральных лекарственных препаратов или для лекарственных препаратов для орошения без последующего удаления пирогенных веществ. При отсутствии указаний в фармакопейной статье предел содержания пирогенных веществ определяют в соответствии с ОФС «Бактериальные эндотоксины» или ОФС «Тест активации моноцитов».

Субстанция для фармацевтического применения должна выдерживать испытание:

Бактериальные эндотоксины (ОФС «Бактериальные эндотоксины»)._ Если для субстанции указано «Не содержит бактериальные эндотоксины».

Или

Испытание на активацию моноцитов (ОФС «Тест активации моноцитов»)._ Если для субстанции указано «Не содержит пирогенных веществ».

Пирогенность (ОФС «Пирогенность»)._ Если для субстанции указано «Апирогенно».

Дополнительные показатели качества. Контроль дополнительных показателей качества (например, функциональные характеристики и т.д.) может быть необходим для конкретного производственного процесса или конкретной лекарственной формы. Субстанции для фармацевтического применения разных категорий (например, «стерильно», «не содержит бактериальных токсинов», «не содержит пирогенных веществ», «апирогенно») могут быть предназначены для производства лекарственных препаратов для парентерального применения или других лекарственных препаратов; соответствующие требования могут быть указаны в фармакопейной статье.

##### Количественное определение

Количественное определение действующего вещества в субстанции для фармацевтического применения проводят подходящим методом.

В информации на субстанцию для фармацевтического применения указывают лишь те положения, которые необходимы для подтверждения соответствия или несоответствия субстанции для фармацевтического применения требованиям фармакопейной статьи.

Если применимо указывают, что субстанция для фармацевтического применения:

- предназначена для определённого применения;

- имеет отчётливую кристаллическую форму;

- определённой степени измельчённости;

- уплотнённая;

- покрыта оболочкой;

- гранулированная;

- стерильно;

- не содержит бактериальных эндотоксинов;

- не содержит пирогенных веществ;

- апирогенно;

- содержит скользящие вещества;

- степень гидратации;

- наименование и концентрацию всех вспомогательных веществ.

Данный список не является исчерпывающим.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0007 Стандартные образцы

Взамен ОФС.1.1.0007.23

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на стандартные образцы, используемые при разработке и контроле качества лекарственных средств.

Стандартные образцы утверждаются в установленном порядке, их пригодность для последующего использования устанавливается согласно программе испытаний с использованием подходящих методов.

Необходимость проведения испытаний лекарственных средств с использованием стандартных образцов должна быть предусмотрена общими фармакопейными статьями (ОФС) и фармакопейными статьями (ФС).

Стандартные образцы не предназначены для использования в качестве лекарственных средств.

##### Основные термины и определения

Стандартный(ые) образец(цы) (СО) – вещества независимо от природы происхождения, в сравнении с которыми
осуществляется контроль качества испытуемых лекарственных
средств. Стандартные образцы могут быть представлены стандартными образцами действующих веществ, примесей, вспомогательных веществ.

Первичный стандартный образец – стандартный образец, обладающий необходимыми свойствами для предполагаемого использования, аттестация которого осуществляется без сравнения с существующими стандартными образцами.

Вторичный стандартный образец (СО) – стандартный образец, аттестованный путём сравнения с первичным стандартным образцом.

Стандартный образец химического происхождения — вещество или смесь веществ, химического происхождения, предназначенные для использования в соответствии с фармакопейными статьями (ФС), а также отдельными общими фармакопейными статьями (ОФС). Содержание основного вещества в стандартном образце химического происхождения выражается в процентах, за исключением, как правило, антибиотиков, для которых установленное значение активности определяется по отношению к Международному стандартному образцу и выражается в МЕ. В последнем случае они являются вторичными стандартными образцами, аттестованными по международным стандартным образцам.

Стандартный образец биологического происхождения – препарат, вещество или смесь веществ биологического происхождения, которые предназначены для использования в соответствии с ФС, а также отдельными ОФС. Биологические стандартные образцы аттестуют по Международным стандартным образцам (при их наличии). Их активность, как правило, выражается в МЕ или других единицах.

Стандартный образец растительного происхождения – вещество или смесь веществ растительного происхождения, предназначенный для использования в соответствии с ФС, а также отдельными ОФС. Для лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов в качестве фармакопейных стандартных образцов могут быть использованы биологически активные вещества растений (вещества с известной фармакологической активностью), вещества-маркеры (вещества химического происхождения, используемые для идентификации и/или количественного определения биологически активных веществ).

Стандартный ИК-спектр – графическое изображение зависимости поглощения ИК-излучения (%) от волнового числа (см-1), зарегистрированное с использованием фармакопейного стандартного образца в условиях, указанных в фармакопейной статье.

Стандартный ЯМР-спектр – графическое изображение зависимости поглощения энергии ядрами одного типа от частоты радиочастотного магнитного поля, зарегистрированное с использованием фармакопейного стандартного образца в условиях, указанных в фармакопейной статье.

Международный стандартный образец – стандартный образец, активность которого выражена в Международных или других единицах. Международные стандартные образцы утверждает Всемирная Организация Здравоохранения (ВОЗ).

Региональный стандартный образец – стандартный образец, предназначенный для использования в соответствии с указаниями фармакопейных статей Фармакопеи Евразийского экономического союза. В качестве стандартных образцов Фармакопеи Союза принимаются стандартные образцы фармакопей государств-членов Союза и основных фармакопей, с которыми гармонизирована Фармакопея Союза.

Государственный стандартный образец – стандартный образец, состав которого установлен в результате испытаний, утверждён национальным органом по метрологии, применяемый во всех областях экономики.

Фармакопейный стандартный образец (ФСО) – стандартный образец, предназначенный для использования в соответствии с указаниями фармакопейных статей Государственной фармакопеи Российской Федерации.

Кандидат в ФСО – образец фармацевтической субстанции (независимо от природы происхождения), биологического лекарственного препарата или другого материала, предназначенный для проведения аттестационных испытаний. В качестве кандидатов в фармакопейные стандартные образцы выступают, как правило, образцы фармацевтических субстанций или биологических лекарственных препаратов, включённых в Государственный реестр лекарственных средств. Кандидат в фармакопейный стандартный образец может быть синтезирован или получен иным способом.

Аттестация стандартного образца – испытания, направленные на установление значений аттестованных характеристик и неопределенности в соответствии с программой аттестации и методиками для последующего оформления надлежащих документов (паспорт, инструкция по применению СО, этикетка первичной упаковки). Аттестация стандартного образца предполагает проведение испытаний по исследованию однородности. Аттестованные стандартные образцы должны быть заложены на хранение с целью определения оптимальных условий хранения и транспортирования.

Аттестованный фармакопейный стандартный образец – фармакопейный стандартный образец, аттестованный в соответствии с программой аттестации, внесённый в реестр фармакопейных стандартных образцов и хранящийся в банке фармакопейных стандартных образцов.

Реестр фармакопейных стандартных образцов (далее – Реестр ФСО) – перечень аттестованных фармакопейных стандартных образцов.

Банк фармакопейных стандартных образцов (далее – банк ФСО) – совокупность фармакопейных стандартных образцов, включающая в себя контрольные экземпляры фармакопейных стандартных образцов, аттестованные фармакопейные стандартные образцы, предназначенные для дополнительных исследований (в том числе исследование на стабильность) и аттестованные фармакопейные стандартные образцы, предназначенные для реализации.

##### Классификация

Стандартные образцы могут быть классифицированы на основании следующих признаков (табл. 1).

Таблица 1. Классификация стандартных образцов
№ п/п | Признак классификации | Вид стандартного образца
--- | --- | ---
1 | Программа установления значения | Первичный Вторичный
2 | Природа вещества | Химический Биологический Растительный
3 | Предназначение | Идентификация Чистота Количественное определение
4 | Уровень признания | Международный Региональный Государственный Фармакопейный

Стандартные образцы могут быть разработаны на основе лекарственных препаратов, фармацевтических субстанций, веществ, являющихся примесями субстанции, вспомогательных веществ и др. Кроме того, для разработки стандартного образца биологического происхождения может быть использована промышленная серия биологического лекарственного препарата, репрезентативная серии лекарственного препарата, использованного в клинических исследованиях.

##### Установление свойств стандартных образцов

Первичный стандартный образец

При проведении аттестации первичного стандартного образца используют различные взаимодополняющие методы анализа, приводимые в программе аттестационных испытаний. Объём испытаний и количество участвующих лабораторий зависит от предполагаемого назначения стандартного образца. При проведении межлабораторных испытаний стандартного образца протокол испытаний направляется каждому участнику.

Основные разделы испытаний включают:

1. Структурное описание – осуществляется с помощью подходящих химических характеристик, таких как: структурная формула, эмпирическая формула и молекулярная масса. При этом, могут быть использованы различные методы, включая:

   - спектрометрию ядерного магнитного резонанса;

   - масс-спектрометрию;

   - инфракрасную спектрометрию;

   - элементный анализ.

2. Определение чистоты:

   - определение содержания органических примесей;

   - определение содержания воды;

   - определение содержания остаточных растворителей;

   - определение потери в массе при высушивании, которое может в некоторых случаях заменить определение воды и остаточных растворителей;

   - определение неорганических примесей (тяжёлые металлы, сульфатная зола); результаты не используются при количественном определении устанавливаемого содержания основного компонента, за исключением значительного влияния на это содержание;

   - определение чистоты абсолютным методом, например: дифференциальная сканирующая калориметрия или фазовая растворимость; результаты этих определений используются для подтверждения результатов, полученных с использованием методов разделения; они не используются при количественном определении устанавливаемого содержания основного компонента.

3. Количественное определение. Содержание основного вещества, как правило, рассчитывают, исходя из значений, полученных при определении примесей (органические примеси, неорганические примеси, вода и остаточные растворители) с использованием метода баланса масс; могут применяться и другие пригодные методы.

Для биологических стандартных образцов подлинность, чистота подтверждается различными взаимодополняющими физико-химическими, иммунохимическими. биологическими методами анализа (in vitro, in vivo, ИФА, ПЦР и др.), а биологическая (специфическая) активность и количественное определение – биологическими, иммунохимическими, физико-химическими методами.

Для стандартных образцов, используемых только для установления подлинности содержание допускается не указывать.

##### Стандартные образцы химического происхождения

Для установления свойств стандартного образца химического происхождения объём испытаний, подтверждающих его пригодность для использования по назначению, зависит от предполагаемого применения данного стандартного образца.

Обычно кандидаты в стандартные образцы должны соответствовать требованиям соответствующей фармакопейной статьи, а также ряда общих фармакопейных статей.

СО для идентификации. Для испытания на подлинность (ИК- спектрометрия, ЯМР-спектроскопия и др.) в качестве кандидата в стандартные образцы можно использовать субстанцию, полная характеристика структуры которой была проведена на первой серии, без дополнительной очистки.

Если стандартные образцы производятся впервые, необходимо подтвердить его структуру различными взаимодополняющими химическими и физико-химическими методами анализа, такими как ИК- и ЯМР-спекроскопия, масс-спектрометрия.

СО для испытания на чистоту. Оценка качества стандартного образца, используемого для определения специфической примеси, проводится в два этапа: установление подлинности и определение чистоты. Стандартные образцы для испытаний на посторонние примеси могут представлять собой синтезированную или специально выделенную и очищенную примесь. При содержании основного вещества от 95 % и выше оно принимается за 100,0 %. При содержании основного вещества менее 95 % в расчётах необходимо учитывать значение фактического содержания.

Если примесь не может быть получена в достаточном количестве, возможны следующие варианты:

- подготовка стандартного образца, содержащего смесь основного вещества и примеси или примесей;

- подготовка стандартного образца, содержащего смесь указанных примесей.

Содержание примеси в таком стандартном образце определяют соответствующими методами разделения.

СО для количественного анализа. Оценку качества стандартных образцов, предназначенных для количественного определения, осуществляют различными физико-химическими методами.

Для определения содержания основного вещества в стандартном образце рекомендуется использовать метод, основанный на балансе масс: сумму всех определённых в СО веществ (основное вещество, вода и органические растворители, минеральные и родственные примеси) принимают за 100,0 %.

При вычислении результатов количественного определения, полученных с использованием СО, учитывают фактическое содержание основного вещества в стандартном образце.

Содержание основного вещества в стандартном образце может приводиться в пересчёте на действующую часть молекулы в соответствии с требованиями содержания действующего вещества лекарственного препарата.

Для стандартных образцов, получаемых лиофилизацией, содержание обычно указывают в миллиграммах или МЕ на упаковку, поскольку затем ее содержимое извлекают количественно.

Как правило (если нет других указаний в маркировке), для СО, в отличие от фармацевтической субстанции, обычно не используется пересчёт на безводное или сухое вещество; присвоенное значение содержания указывают «как есть».

В некоторых случаях СО необходимо высушивать перед использованием (не в оригинальной упаковке), и тогда содержание указывают в расчёте на высушенный стандарт. При этом в сопроводительной документации указывают условия высушивания и время, в течение которого достигается постоянство массы.

##### Стандартные образцы биологического происхождения

Стандартные образцы биологического происхождения для количественного определения аттестуют биологическим методом по Международному стандартному образцу и выражают активность в условных международных единицах (МЕ) или мкг/мг, единицах тканевой цитопатогенной дозы (ТИЦД), 50 % летальной дозы (LD50), минимальной иммунизирующей дозе (МИД). В случае отсутствия Международного стандартного образца, значение аттестуемой характеристики стандартного образца биологического происхождения может быть выражено в других единицах, например: бляшкообразующие единицы (БОЕ), колониеобразующие единицы (КОЕ), титр вируса и др. Установленное значение активности рассчитывается по результатам межлабораторных испытаний. Используются различные критерии валидности результатов, включая параллелизм, линейность и среднеквадратичное отклонение в соответствии со стандартными статистическими процедурами. Установленное значение активности с доверительными интервалами рассчитывается из валидных результатов.

##### Стандартные образцы растительного происхождения

Испытания для СО, используемых в фармакопейных статьях на лекарственное средство растительного происхождения, зависят от его предполагаемого назначения; характеризуют испытаниями на подлинность, чистоту и содержание с применением различных методов:

- тонкослойная хроматография;

- газовая хроматография;

- жидкостная хроматография;

- определение содержания воды;

- определение содержание остаточных органических растворителей;

- потеря в массе при высушивании;

- примеси;

- количественное определение компонентов (например, компонентов с известной терапевтической (фармакологической) активностью, маркеров).

##### Отчет по аттестации стандартного образца

В отчет об аттестации стандартного образца включают полные сведения (все первичные данные) о проведенных испытаниях, необходимые для оценки, и метрологической экспертизы представленных материалов, в том числе:

- назначение СО;

- методики аттестации с указанием средств измерений и их неопределенность;

- описание процедуры и экспериментальные данные по исследованию однородности СО.

##### Упаковка стандартных образцов

Упаковка стандартных образцов должна обеспечивать его стабильность в течение срока годности и быть пригодной для использования.

Твёрдые вещества расфасовывают в индивидуальную упаковку (предпочтительно флаконы), жидкости − обычно в запаиваемые ампулы.

Для всех стандартных образцов, включая лабильные вещества, необходим полномасштабный контроль за условиями внешней среды (освещение, влажность, температура).

##### Маркировка стандартных образцов

Информация, необходимая для правильного использования стандартного образца, приводится на этикетке первичной упаковки, а также на этикетке вторичной упаковки (для стандартных образцов биологического происхождения) и в сопроводительной документации (паспорте и инструкции по применению).

На этикетке упаковки (первичной) стандартных образцов указывают:

1. Наименование организации (сокращенное), проводившей аттестацию ФСО/СО;

2. Название ФСО/СО (для стандартных образцов биологического происхождения - при возможности);

3. Реестровый номер;

4. Количество ФСО/СО в миллиграммах или в миллилитрах в упаковке;

5. Номер серии;

6. Условия хранения;

7. Срок годности.

На этикетке упаковки (вторичной) стандартных образцов биологического происхождения указывают:

1. Полное и сокращённое наименование организации, проводившей аттестацию ФСО/СО;

2. Полный юридический и фактический адрес;

3. Название ФСО/СО;

4. Реестровый номер;

5. Номер серии;

6. Условия хранения и транспортирования;

7. Срок годности;

8. Предупредительные надписи (при необходимости).

Активность или аттестованное значение, указания по использованию, предупредительные надписи указываются в сопроводительной документации.

При отсутствии указаний об условиях высушивания, стандартный образец следует использовать в том виде, в котором он получен.

##### Хранение и перевозке стандартных образцов

Стандартные образцы должны храниться и перевозиться в условиях, обеспечивающих гарантию их стабильности. Используют подходящую упаковку для минимизации риска повреждения при хранении и перевозке.

Если требуются специальные условия хранения, они должны быть указаны на этикетке, в паспорте и инструкции по применению стандартного образца.

Невскрытый контейнер со стандартным образцом хранится в рекомендуемых условиях и используется сразу после вскрытия (если не указаны иные условия хранения).

##### Применение стандартных образцов

Стандартные образцы применяют при анализе фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов в испытаниях на подлинность, чистоту и определения содержания.

При оценке фармацевтической субстанции или лекарственного препарата различного происхождения на его соответствие фармакопейным статьям используются как фармакопейные стандартные образцы действующих веществ, вспомогательных веществ, так и фармакопейные стандартные образцы возможных примесей.

Фармакопейные стандартные образцы биологического происхождения также могут использоваться для определения валидационных характеристик диагностических наборов для выявления маркеров/возбудителей инфекционных заболеваний, а также для оценки пригодности системы при проведении испытаний на отсутствие маркеров/возбудителей инфекционных заболеваний с помощью указанных диагностических наборов.

Каждый фармакопейный стандартный образец имеет определённую область применения и не может быть использован в других целях. Например, вторичный стандартный образец используется для тех же целей, что и первичный СО, относительно которого он был аттестован.

Если фармакопейный стандартный образец предполагается использовать для целей, отличных от тех, для которых значение его свойства было установлено, его пригодность в этом случае должна быть доказана.

Требования к чистоте фармакопейного стандартного образца зависят от его предполагаемого использования.

В фармакопейном анализе могут быть использованы стандартные образцы различных категорий: фармакопейные стандартные образцы (ФСО ГФ РФ, фармакопея ЕАЭС и др. фармакопей), Международные, государственные стандартные образцы, стандартные образцы (вторичные) и химические вещества требуемой степени чистоты (для определения примесей − посторонних примесей, органических растворителей, оценки пригодности хроматографической системы и др.).

Для определения катионов металлов, пестицидов и остаточных органических растворителей и др. целей могут использоваться государственные стандартные образцы, утверждённые в установленном порядке.

Для установления подлинности лекарственных средств наряду с фармакопейными стандартными образцами могут быть использованы стандартные ИК- и ЯМР- спектры, приведённые в Государственной фармакопее РФ.

##### Исследование стабильности стандартного образца

Для подтверждения срока годности СО и возможной его пролонгации следует осуществлять мониторинг качества в процессе хранения. Любые признаки разложения должны быть изучены подходящими методами.

Периодичность и объём проводимых испытаний зависят от физико-химических свойств образца (физического состояния, стабильности, гигроскопичности), упаковки, условий хранения и области применения.

Целесообразно проводить следующие испытания:

- определение воды, потери в массе при высушивании и/или термогравиметрический анализ;

- определение продуктов распада методами разделения;

- другие специфичные испытания для обнаружения продуктов распада или потери активности.

Срок годности биологических СО устанавливают на основе результатов исследований стабильности СО в естественных условиях.

Если в качестве материала СО используется лекарственное средство, внесенное в Государственный реестр лекарственных средств, стабильность которого в течение определенного срока (срока годности) установлена, то срок годности СО устанавливают равным сроку годности ЛС.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0008 Остаточные органические растворители

##### Введение

Остаточные органические растворители – летучие органические вещества, которые используются или образуются на любой стадии производства фармацевтических субстанций, вспомогательных веществ или лекарственных препаратов и полностью не удаляются в применяемом технологическом процессе. Подходящий растворитель для синтеза субстанции может увеличить её выход или определить такие характеристики, как кристаллическая форма, чистота и растворимость. Таким образом, выбор растворителя иногда может быть критическим параметром для процесса синтеза.

Поскольку остаточные растворители не обладают терапевтическим действием, их необходимо удалять в максимально возможной степени до концентраций ниже допустимых норм содержания. Раздел «Предельные содержания остаточных органических растворителей» содержит классификацию остаточных растворителей по степени риска, допустимые нормы содержания некоторых остаточных растворителей в фармацевтических субстанциях, вспомогательных веществах и лекарственных препаратах, а также методы их расчёта. Указанные нормы считают приемлемыми для безопасности пациента. Содержание остаточных органических растворителей в лекарственных препаратах не должно превышать нормы, установленной данными по безопасности.

Полный список растворителей, включённых в общую фармакопейную статью, представлен в таблице 8. Данный перечень не является исчерпывающим, он может дополняться другими используемыми растворителями. Рекомендуемые допустимые нормы остаточных органических растворителей классов 1 и 2, а также классификация растворителей могут изменяться по мере появления новых данных относительно их безопасности.

Общая фармакопейная статья рекомендует использовать менее токсичные растворители. При производстве фармацевтических субстанций, вспомогательных веществ и лекарственных препаратов следует избегать использования высокотоксичных растворителей (класс 1, таблица 4), за исключением тех случаев, когда их применение достаточно обосновано. Содержание негенотоксичных растворителей (класс 2, таблица 5) должно быть ограничено с целью защиты пациентов от их потенциального неблагоприятного воздействия. Наиболее целесообразно использование малотоксичных растворителей (класс 3, таблица 6).

##### Область применения

Требования общей фармакопейной статьи распространяются на все фармацевтические субстанции, вспомогательные вещества и лекарственные препараты. Все фармацевтические субстанции, вспомогательные вещества и лекарственные препараты подлежат анализу на содержание в них возможных остаточных органических растворителей, но испытание необходимо только в том случае, если было установлено использование или образование таких растворителей в процессах производства или очистки. Проводить испытание необходимо только для тех растворителей, которые используются или образуются в процессе производства или очистки фармацевтических субстанций, вспомогательных веществ или лекарственных препаратов. Сведения о растворителях, используемых в процессе производства, должны быть представлены в составе регистрационного досье в уполномоченный орган.

Для определения содержания остаточных растворителей возможно как проведение испытания лекарственного препарата, так и использование совокупного метода расчёта, исходя из содержания растворителей в компонентах для производства лекарственного препарата. Если рассчитанная концентрация остаточных растворителей не превышает предела, рекомендуемого в общей фармакопейной статье, нет необходимости проводить испытания лекарственного препарата на содержание остаточных растворителей. Однако, если расчётная концентрация выше рекомендуемого предела, необходимо провести испытание лекарственного препарата, чтобы установить, способствует ли процесс производства лекарственной формы уменьшению уровня данного растворителя до приемлемого количества. Испытание лекарственного препарата также необходимо проводить, если растворитель используется в процессе его производства.

Общая фармакопейная статья не распространяется на растворители, намеренно используемые в качестве вспомогательных веществ или относящиеся по составу к сольватам. Однако содержание растворителей в таких продуктах должно быть обосновано и должно подлежать контролю.

Общая фармакопейная статья распространяется на все лекарственные формы и способы введения. В некоторых случаях, таких, как краткосрочное (30 дней или меньше) или местное применение, могут быть приемлемы более высокие уровни остаточных растворителей. Обоснование таких уровней должно проводиться в каждом конкретном случае.

Если используются растворители только класса 3, то для определения их предельного содержания можно либо провести неспецифичное испытание «Потеря в массе при высушивании», либо специфичное испытание на содержание конкретного растворителя. Если для растворителя класса 3 обосновано и разрешено предельное содержание более 0,5 %, то специфичное испытание на содержание данного растворителя является обязательным.

Для контроля остаточных растворителей классов 1 и 2 (и класса 3 с содержанием более 0,5 %) следует, по возможности, использовать методики, описанные в разделе «Аналитические методики». В противном случае необходимо применять подходящие валидированные методики.

При количественном определении остаточных растворителей полученный результат учитывают при расчёте количественного содержания субстанции, за исключением случаев, когда проводят определение потери в массе при высушивании.

##### Аналитические методики

Остаточные органические растворители, как правило, определяют с помощью хроматографических методов, в частности газовой хроматографии. Для этого могут быть использованы представленные в ОФС методики или иные подходящие валидированные методики. Валидация методик контроля остаточных органических растворителей должна соответствовать ОФС «Валидация аналитических методик».

Методики испытаний, описанные в данном общем методе, могут быть использованы:

а) для идентификации большинства остаточных растворителей классов 1 и 2 в фармацевтической субстанции, вспомогательном веществе или лекарственном препарате, когда остаточные растворители неизвестны;

б) для определения предельного содержания остаточных растворителей классов 1 и 2, если они присутствуют в фармацевтической субстанции, вспомогательном веществе или лекарственном препарате;

в) для количественного определения растворителей класса 2, если их предельные значения превышают 1000 ppm (0,1 %) или, при необходимости, для количественного определения растворителей класса 3.

Для испытуемых образцов ниже приведены три процедуры приготовления исходных испытуемых растворов с использованием трёх различных растворителей, а также статические условия ввода паровой фазы в хроматографическую систему. Выбор процедуры зависит от растворимости испытуемого образца и, в некоторых случаях, от остаточных растворителей, которые необходимо контролировать. Предусмотрены две хроматографические системы, но предпочтительной является система А, в то время как систему Б обычно используют для подтверждения подлинности.

При описанных условиях парофазного анализа затруднено обнаружение следующих остаточных растворителей: формамид, 2-этоксиэтанол, 2-метоксиэтанол, этиленгликоль, N-метилпирролидон и сульфолан. Для их контроля следует использовать другие подходящие методики.

Если методику испытаний применяют для количественного определения остаточных растворителей, она должна быть валидирована.

ОПИСАНИЕ МЕТОДИКИ

Определение проводят методом газовой хроматографии со статическим вводом паровой фазы («Газовая хроматография»).

Исходный испытуемый раствор 1. Для водорастворимых испытуемых образцов. Растворяют 0,200 г испытуемого образца в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 20,0 мл.

Исходный испытуемый раствор 2. Для нерастворимых в воде испытуемых образцов. Растворяют 0,200 г испытуемого образца в диметилформамиде (ДМФ) и доводят объём раствора тем же растворителем до 20,0 мл.

Исходный испытуемый раствор 3. Для испытуемых образцов, в которых известно или предполагается присутствие N,N-диметилацетамида и/или N,N-диметилформамида. Растворяют 0,200 г испытуемого образца в 1,3-Диметил-2-имидазолидиноне и доводят объём раствора тем же растворителем до 20,0 мл.

В некоторых случаях, когда ни одна из описанных выше процедур не подходит, возможно использование другого растворителя и других подходящих условий статического ввода паровой фазы, применимость которых должна быть доказана.

Раствор растворителя (а) готовят таким образом, чтобы в растворах сравнения (a) и (a1) содержание остаточных растворителей класса 1 соответствовало следующим допустимым нормам:

- бензол: 2 ppm;

- углерод четырёххлористый: 4 ppm;

- 1,2-дихлорэтан: 5 ppm;

- 1,1-дихлорэтан: 8 ppm;

- 1,1,1-трихлорэтан: 10 ppm.

Раствор растворителя (а). К 1,0 мл фармакопейного стандартного образца остаточных органических растворителей класса 1 прибавляют 9 мл диметилсульфоксида и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. 1,0 мл полученного раствора доводят водой до 100,0 мл. 1,0 мл полученного раствора доводят водой до 10,0 мл.

Раствор растворителя (б). Подходящие количества остаточных растворителей класса 2 растворяют в диметилсульфоксиде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл. Полученный раствор разводят водой так, чтобы концентрация каждого из растворителей составляла 1/20 от норм, указанных в таблице 5.

Раствор растворителя (в). 1,00 г растворителя или растворителей, присутствующих в испытуемом образце, растворяют в диметилсульфоксиде или воде, если допустимо, и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Полученный раствор разводят до концентрации(й), составляющей(их) 1/20 от предельного(ых) значения(й), указанного(ых) в таблице 4 или 5.

Контрольный раствор. Готовят как раствор растворителя (в), но без добавления растворителя(ей) (используют для подтверждения отсутствия мешающих пиков).

Испытуемый раствор. 5,0 мл исходного испытуемого раствора и 1,0 мл контрольного раствора помещают во флакон для ввода паровой фазы.

Раствор сравнения (a) (класс 1). 1,0 мл раствора растворителя (а) и 5,0 мл соответствующего растворителя помещают во флакон для ввода паровой фазы.

Раствор сравнения (a1) (класс 1). 5,0 мл исходного испытуемого раствора и 1,0 мл раствора растворителя (а) помещают во флакон для ввода паровой фазы.

Раствор сравнения (б) (класс 2). 1,0 мл раствора растворителя (б) и 5,0 мл соответствующего растворителя помещают во флакон для ввода паровой фазы.

Раствор сравнения (в). 5,0 мл исходного испытуемого раствора и 1,0 мл раствора растворителя (в) помещают во флакон для ввода паровой фазы.

Раствор сравнения (г). 1,0 мл контрольного раствора и 5,0 мл соответствующего растворителя помещают во флакон для ввода паровой фазы.

Флаконы плотно укупоривают резиновой мембранной крышкой, покрытой политетрафторэтиленом и обвальцовывают алюминиевым колпачком. Встряхивают содержимое флакона до получения гомогенного раствора.

Для статического парофазного анализа могут быть использованы условия, приведённые в таблице 1.

Таблица 1. Условия статического парофазного ввода пробы
| Процедура подготовки пробы
--- | ---
Параметры | 1 | 2 | 3
Температура уравновешивания, °C | 80 | 105 | 80
Время уравновешивания, мин | 60 | 45 | 45
Температура линии передачи, °C | 85 | 110 | 105
Газ-носитель: азот для хроматографии или гелий для хроматографии при подходящем давлении
Время поддувки, с | 30 | 30 | 30
Объём пробы, мл | 1 | 1 | 1

Для проведения хроматографического анализа могут быть использованы следующие системы:

Система А

Условия хроматографирования:

- колонка: кварцевая капиллярная колонка длиной 30 м и внутренним диаметром 0,32 мм или 0,53 мм, покрытая слоем поли(цианопропил)(3)(фенил)(3)(метил)(94)силоксана толщиной 1,8 мкм или 3 мкм;

- газ-носитель: азот для хроматографии или гелий для хроматографии;

- линейная скорость: около 35 см/с;

- деление потока: 1:5;

- детектор: пламенно-ионизационный детектор (для хлорированных остаточных растворителей класса 1 может быть также использован масс-спектрометр или детектор электронного захвата);

- режим изменения температуры:

- температура колонки: 40 °С в течение 20 мин, затем повышение температуры со скоростью 10 °С/мин до 240 °С и выдерживание при температуре 240 °С в течение 20 мин;

- температура блока ввода проб 140 °С;

- температура детектора 250 °С.

В тех случаях, когда матрица мешает определению, используют систему В.

Система Б

Условия хроматографирования:

- колонка: кварцевая капиллярная колонка длиной 30 м и внутренним диаметром 0,32 мм или 0,53 мм, покрытая слоем макрогола 20 000 толщиной 0,25 мкм;

- газ-носитель: азот для хроматографии или гелий для хроматографии;

- линейная скорость: около 35 см/с;

- деление потока: 1:5;

- детектор: пламенно-ионизационный детектор (для хлорированных остаточных растворителей класса 1 можно также использовать масс-спектрометр или детектор электронного захвата);

- режим изменения температуры:

- температура колонки: 50 °С в течение 20 мин, затем повышение температуры со скоростью 6 °С/мин до 165 °С и выдерживание при температуре 165 °С в течение 20 мин;

- температура блока ввода проб 140 °С;

- температура детектора 250 °С.

1 мл равновесной паровой фазы раствора сравнения (а) вводят в колонку, описанную для системы А, и записывают хроматограмму в условиях, позволяющих определить отношение сигнал/шум для пика 1,1,1-трихлорэтана. Отношение сигнал/шум должно быть
не менее 5. Типичная хроматограмма представлена на рисунке 1.

Рисунок 1. Типичная хроматограмма растворителей класса 1 при использовании системы А и исходного испытуемого раствора 1. Пламенно-ионизационный детектор. 1 – 1,1-дихлорэтан, 2 – 1,1,1-трихлорэтан, 3 – углерод четырёххлористый, 4 – бензол, 5 – 1,2-дихлорэтан.

1 мл равновесной паровой фазы раствора сравнения (а1) вводят в колонку, описанную для системы А. Пики, обусловленные остаточными растворителями класса 1, должны быть по-прежнему различимы.

1 мл равновесной паровой фазы раствора сравнения (б) вводят в колонку, описанную для системы А, и записывают хроматограмму в условиях, позволяющих определить разрешение между пиками ацетонитрила и дихлорметана. Хроматографическую систему считают пригодной, если полученная хроматограмма схожа с хроматограммой, представленной на рисунке 2, а разрешение между пиками ацетонитрила и метиленхлорида составляет не менее 1,0.

Рисунок 2. Типичная хроматограмма растворителей класса 2 при использовании системы А и исходного испытуемого раствора 1. Пламенно-ионизационный детектор. 1 – метанол, 2 – ацетонитрил, 3 – дихлорметан, 4 – гексан, 5 – 1,2-дихлорэтен, 6 – нитрометан, 7 – тетрагидрофуран, 8 – хлороформ, 9 – циклогексан, 10 – 1,2-диметоксиэтан, 11 – 1,1,2-трихлорэтен, 12 – метилциклогексан, 13 – 1,4-диоксан, 14 – пиридин, 15 – метилизобутилкетон, 16 – толуол, 17 * метилбутилкетон, 18 – хлорбензол, 19 – ксилоловая смесь: а) этилбензол, b) n-ксилол, c) м-ксилол, d) о-ксилол, 20 – кумол, 21 – тетралин.

1 мл равновесной паровой фазы испытуемого раствора вводят в колонку, описанную для системы А. Если на хроматограмме испытуемого раствора отсутствуют пики, соответствующие пикам остаточных растворителей на хроматограммах растворов сравнения (а) и (б), испытуемый образец выдерживает испытание. Если на хроматограмме испытуемого раствора обнаруживают пик, соответствующий пику любого остаточного растворителя на хроматограммах растворов сравнения (а) или (б), необходимо использовать систему Б.

1 мл равновесной паровой фазы раствора сравнения (а) вводят в колонку, описанную для системы Б, и записывают хроматограмму в условиях, позволяющих определить отношение сигнал/шум для пика бензола. Отношение сигнал/шум должно быть не менее 5. Типичная хроматограмма представлена на рисунке 3.

Рисунок 3. Типичная хроматограмма растворителей класса 1 при использовании системы Б и исходного испытуемого раствора 1. Пламенно-ионизационный детектор. 1 – 1,1-дихлорэтан, 2 – 1,1,1-трихлорэтан, 3 – углерод четырёххлористый, 4 – бензол, 5 – 1,2-дихлорэтан.

1 мл равновесной паровой фазы раствора сравнения (а1) вводят в колонку, описанную для системы Б. Пики, обусловленные органическими растворителями класса 1, должны быть по-прежнему различимы.

1 мл равновесной паровой фазы раствора сравнения (б) вводят в колонку, описанную для системы Б, и записывают хроматограмму в условиях, позволяющих определить разрешение между пиками ацетонитрила и 1,1,2-трихлорэтена. Хроматографическую систему считают пригодной, если полученная хроматограмма схожа с хроматограммой, представленной на рисунке 4, а разрешение между пиками ацетонитрила и 1,1,2-трихлорэтена составляет не менее 1,0.

1 мл равновесной паровой фазы испытуемого раствора вводят в колонку, описанную для системы Б. Если на хроматограмме испытуемого раствора отсутствуют пики, соответствующие пикам остаточных растворителей на хроматограммах растворов сравнения (а) и (б), испытуемый образец выдерживает испытание. Если на хроматограмме испытуемого раствора обнаруживают пик, соответствующий пику любого остаточного растворителя на хроматограмме раствора сравнения (а) или (b), обнаруживаемый также при использовании системы А, продолжают испытание, как описано ниже.

Рисунок 4. Типичная хроматограмма растворителей класса 2 при использовании системы Б и исходного испытуемого раствора 1. Пламенно-ионизационный детектор. 1 – метанол, 2 – ацетонитрил, 3 – дихлорметан, 4 – гексан, 5 – 1,2-дихлорэтен, 6 – нитрометан, 7 – тетрагидрофуран, 8 – хлороформ, 9 – циклогексан, 10 – 1,2-диметоксиэтан, 11 – 1,1,2-трихлорэтен, 12 – метилциклогексан, 13 – 1,4-диоксан, 14 – пиридин, 15 – метилизобутилкетон, 16 – толуол, 17 * метилбутилкетон, 18 – хлорбензол, 19 – ксилоловая смесь: а) этилбензол, b) п-ксилол, c) м-ксилол, d) о-ксилол, 20 – кумол, 21 – тетралин (tR = 27 мин).

1 мл равновесной паровой фазы раствора сравнения (в) вводят в колонку системы А или Б. При необходимости чувствительность системы регулируют таким образом, чтобы высота пика определяемого
остаточного(ых) растворителя(ей) на полученной хроматограмме составляла не менее 50 % от полной шкалы регистрирующего устройства.

Вводят 1 мл равновесной паровой фазы раствора сравнения (г). Не должны наблюдаться мешающие пики.

Хроматографируют по 1 мл равновесной паровой фазы испытуемого раствора и раствора сравнения (в). Повторное хроматографирование проводят не менее трёх раз.

Средняя площадь пика остаточного(ых) растворителя(ей) на хроматограммах испытуемого раствора не должна превышать половины средней площади пика соответствующего(их) растворителя(ей) на хроматограммах раствора сравнения (в). Результаты испытания считают достоверными, если относительное стандартное отклонение, рассчитанное для разницы площадей пиков растворителей на трёх хроматограммах раствора сравнения (в) и испытуемого раствора, составляет не более 15 %.

Алгоритм проведения методики представлен на рисунке 5.

Если содержание остаточных растворителей (классов 2 или 3) составляет 0,1 % и более, то для их количественного определения может быть использован метод стандартных добавок.

Рисунок 5. Схема проведения идентификации и определения предельного содержания остаточных растворителей

Следующий раздел приводится для информации

##### Предельные содержания остаточных органических растворителей

КЛАССИФИКАЦИЯ ОСТАТОЧНЫХ ОРГАНИЧЕСКИХ РАСТВОРИТЕЛЕЙ ПО СТЕПЕНИ РИСКА

Для описания предельно допустимого содержания остаточных растворителей в ОФС используется термин «допустимое суточное воздействие» (ДСВ) – максимально приемлемое суточное воздействие остаточного органического растворителя. Остаточные растворители, рассматриваемые в ОФС, приведены в таблице 8 в соответствии с их общепринятыми названиями и структурными формулами. Согласно классификации по степени возможного риска для здоровья человека остаточные растворители подразделяют на три следующих класса.

Класс 1: Растворители, использования которых следует избегать (высокотоксичные растворители). К ним относят вещества с известной канцерогенностью для человека либо высокой вероятностью её наличия, а также вещества, опасные для окружающей среды.

Класс 2: Растворители, использование которых нужно ограничивать (негенотоксичные растворители). К ним относят вещества, обладающие негенотоксичной канцерогенностью для животных или растворители, являющиеся возможной причиной таких необратимых явлений, как нейротоксичность или тератогенность. К данному классу также относят растворители, предположительно оказывающие значительное, но обратимое токсическое действие.

Класс 3: Растворители низкой токсичности (малотоксичные растворители). К ним относят растворители с низким потенциалом токсичности для человека; для них не требуется устанавливать предельное содержание, обусловленное информацией о риске для здоровья человека. Для растворителей класса 3 ДСВ составляет 50 мг/сут и более.

СПОСОБЫ РАСЧЁТА ПРЕДЕЛЬНОГО СОДЕРЖАНИЯ РАСТВОРИТЕЛЕЙ КЛАССА 2

Для растворителей класса 2 возможны два способа расчёта предельных значений.

Способ 1. Можно использовать предельно допустимые концентрации (ПДК) в частях на миллион (ppm), приведённые в таблице 5, рассчитываемые по нижеприведённой формуле при допущении, что суточная доза препарата (СДП) составляет 10 г:

Здесь ДСВ выражено в мг/сут, а СДП – в г/сут.

Такие нормы считают приемлемыми для всех субстанций, вспомогательных веществ и препаратов. Поэтому этот способ можно применять, если суточная доза неизвестна или не установлена. Если содержание остаточных органических растворителей во всех вспомогательных веществах и фармацевтических субстанциях, входящих в состав лекарственного препарата, удовлетворяет приведённым согласно этому способу расчёта нормам, то все эти компоненты можно использовать в любых пропорциях. Если СДП не превышает 10 г/сут, дальнейший расчёт не требуется. Расчёт предельного содержания остаточных органических растворителей в лекарственных препаратах, принимаемых в дозах, превышающих 10 г/сут, необходимо проводить с использованием способа 2.

Способ 2. Содержание остаточных органических растворителей в каждом компоненте лекарственного препарата не обязательно должно соответствовать нормам, рассчитанным способом 1. Определить предельное содержание остаточного органического растворителя в лекарственном препарате можно по приведённой в способе 1 формуле, используя ДСВ (мг/сут), приведённое в таблице 5, и известное значение максимальной суточной дозы лекарственного препарата. Такие нормы считают приемлемыми при наличии доказательств, что количество остаточного органического растворителя было снижено до минимума, который может быть достигнут практически. Допустимые нормы должны быть реалистичными относительно аналитической процедуры, производственной возможности, разумного изменения производственного процесса, а также должны соответствовать современным производственным стандартам.

Способ 2 предусматривает суммирование количеств остаточного органического растворителя, присутствующего в каждом из компонентов лекарственного препарата. Суммарное количество растворителя в сутки должно быть меньше ДСВ.

Рассмотрим примеры расчёта предельного содержания ацетонитрила в лекарственном препарате способом 1 и способом 2. ДСВ ацетонитрила составляет 4,1 мг/сут. Таким образом, допустимая норма ацетонитрила, рассчитанная способом 1, составляет 410 ppm. Максимальная суточная доза лекарственного препарата составляет 5,0 г. Лекарственный препарат содержит два вспомогательных вещества. Состав лекарственного препарата и расчётное предельное содержание ацетонитрила приведены в таблице 2.

Таблица 2. Состав лекарственного препарата и расчётное предельное содержание ацетонитрила (пример 1)
Компонент | Количество в составе, г | Содержание ацетонитрила, ppm | Суточное воздействие, мг
--- | --- | --- | ---
Фармацевтическая субстанция | 0,3 | 800 | 0,24
Вспомогательное вещество 1 | 0,9 | 400 | 0,36
Вспомогательное вещество 2 | 3,8 | 800 | 3,04
Лекарственный препарат | 5,0 | 728 | 3,64

Содержание ацетонитрила во вспомогательном веществе 1 не превышает допустимую норму, установленную способом 1. Содержание ацетонитрила в фармацевтической субстанции, вспомогательном веществе 2 и лекарственном препарате превышает допустимую норму, установленную способом 1. Тем не менее, содержание ацетонитрила в лекарственном препарате не превышает 4,1 мг/сут – допустимую норму, установленную способом 2, и, таким образом, соответствует нормам, приведённым в настоящей ОФС.

Рассмотрим другой пример для ацетонитрила в качестве остаточного органического растворителя. Максимальная суточная доза лекарственного препарата составляет 5,0 г. Лекарственный препарат содержит два вспомогательных вещества. Состав лекарственного препарата и расчётное предельное содержание ацетонитрила приведены в таблице 3.

Таблица 3. Состав лекарственного препарата и расчётное предельное содержание ацетонитрила (пример 2)
Компонент | Количество в составе, г | Содержание ацетонитрила, ppm | Суточное воздействие, мг
--- | --- | --- | ---
Фармацевтическая субстанция | 0,3 | 800 | 0,24
Вспомогательное вещество 1 | 0,9 | 2000 | 1,80
Вспомогательное вещество 2 | 3,8 | 800 | 3,04
Лекарственный препарат | 5,0 | 1016 | 5,08

В данном примере содержание ацетонитрила в лекарственном препарате не соответствует ни одной из допустимых норм, ни установленной способом 1, ни установленной способом 2. Производитель может определить, возможно ли снизить уровень ацетонитрила на стадии производства лекарственной формы. Если уровень ацетонитрила не снижается до допустимой нормы в процессе производства лекарственной формы, производитель лекарственного препарата должен предпринять другие меры для уменьшения концентрации ацетонитрила в лекарственном препарате. Если все предпринятые меры не позволяют снизить содержание остаточного органического растворителя, в исключительных случаях производитель может подготовить резюме о предпринятых усилиях, направленных на уменьшение содержания растворителя до допустимых норм, а также провести анализ «риск-польза», чтобы получить разрешение на использование лекарственного препарата, содержащего более высокий уровень остаточного органического растворителя.

ИНФОРМАЦИЯ О СОДЕРЖАНИИ ОСТАТОЧНЫХ ОРГАНИЧЕСКИХ РАСТВОРИТЕЛЕЙ

Для соответствия требованиям ОФС производителям лекарственных препаратов необходима точная информация о содержании остаточных органических растворителей во вспомогательных веществах или фармацевтических субстанциях. Поставщики фармацевтических субстанций или вспомогательных веществ могут представить производителям лекарственных препаратов такую информацию, используя один из следующих вариантов:

- могут присутствовать остаточные органические растворители только класса 3. Потеря в массе при высушивании менее 0,5 %;

- могут присутствовать остаточные органические растворители
  класса 2 (далее поставщик указывает наименование каждого из возможно присутствующих остаточных органических растворителей класса 2). Содержание каждого из них не превышает предельного содержания, рассчитанного способом 1;

- могут присутствовать остаточные органические растворители
  классов 2 (далее поставщик указывает наименование каждого из возможно присутствующих остаточных органических растворителей класса 2) и 3. Содержание каждого из растворителей класса 2 не превышает предельного содержания, рассчитанного способом 1, а содержание растворителей
  класса 3 – менее 0,5 %.

Если возможно присутствие растворителей класса 1, каждый из них должен быть идентифицирован и определён количественно. «Возможно присутствие» относится к растворителям, используемым на заключительном этапе производства, а также к растворителям, которые используются на более ранних этапах производства и полностью не удаляются с помощью валидированного процесса.

Если растворители класса 2 присутствуют в количествах, превышающих их предельные содержания, рассчитанные способом 1, или содержание растворителей класса 3 превышает 0,5 %, то каждый из растворителей должен быть идентифицирован и определён количественно.

РАСТВОРИТЕЛИ, ИСПОЛЬЗОВАНИЯ КОТОРЫХ СЛЕДУЕТ ИЗБЕГАТЬ

Растворители класса 1 не следует использовать в производстве фармацевтических субстанций, вспомогательных веществ и лекарственных препаратов из-за их высокой токсичности и вредного воздействия на окружающую среду. Однако, если их использование неизбежно для производства лекарственного препарата, который имеет сильно выраженный терапевтический эффект, их количества должны быть ограничены в соответствии с таблицей 4 при отсутствии другого обоснования. 1,1,1-Трихлорэтан включён в таблицу 4, поскольку представляет опасность для окружающей среды.

Таблица 4. Растворители класса 1, применение которых в производстве фармацевтических субстанций, вспомогательных веществ и лекарственных препаратов следует избегать
Растворитель | Предельно допустимая концентрация, ppm | Опасность
--- | --- | ---
Бензол | 2 | Канцероген
1,1-Дихлорэтен | 8 | Токсичен
1,2-Дихлорэтан | 5 | Токсичен
1,1,1-Трихлорэтан | 1500 | Опасен для окружающей среды
Углерод четырёххлористый | 4 | Токсичен и опасен для окружающей среды

РАСТВОРИТЕЛИ, ИСПОЛЬЗОВАНИЕ КОТОРЫХ СЛЕДУЕТ ОГРАНИЧИВАТЬ

Содержание растворителей, приведённых в таблице 5, должно быть ограничено в лекарственных средствах и вспомогательных веществах в связи с их токсичностью. Данные ДСВ приведены с точностью до 0,1 мг/сут, а их концентрации – до 10 ppm. Установленные значения не отражают необходимую аналитическую точность определения. Точность должна быть установлена в процессе валидации методик.

Таблица 5. Растворители класса 2, применение которых в производстве фармацевтических субстанций, вспомогательных веществ и лекарственных препаратов следует ограничивать
Растворитель | Допустимое суточное воздействие, мг/сут | Предельно допустимая концентрация, ppm
--- | --- | ---
Ацетонитрил | 4,1 | 410
Гексан | 2,9 | 290
N,N-Диметилацетамид | 10,9 | 1090
N,N-Диметилформамид | 8,8 | 880
1,2-Диметоксиэтан | 1,0 | 100
1,4-Диоксан | 3,8 | 380
1,2-Дихлорэтен | 18,7 | 1870
Ксилол* | 21,7 | 2170
Кумол | 0,7 | 70
Метанол | 30,0 | 3000
Метилбутилкетон | 0,5 | 50
Дихлорметан | 6,0 | 600
Метилизобутилкетон | 45,0 | 4500
N-Метилпирролидон | 5,3 | 530
Метилциклогексан | 11,8 | 1180
2-Метоксиэтанол | 0,5 | 50
Нитрометан | 0,5 | 50
Пиридин | 2,0 | 200
Сульфолан | 1,6 | 160
Тетрагидрофуран | 7,2 | 720
Тетралин | 1,0 | 100
Толуол | 8,9 | 890
трет-Бутиловый спирт | 35,0 | 3500
1,1,2-Трихлорэтен | 0,8 | 80
Формамид | 2,2 | 220
Хлорбензол | 3,6 | 360
Хлороформ | 0,6 | 60
Циклогексан | 38,8 | 3880
Циклопентилметиловый эфир | 15,0 | 1500
Этиленгликоль | 6,2 | 620
2-Этоксиэтанол | 1,6 | 160

*Обычно 60 % м-ксилола, 14 % n-ксилола, 9 % о-ксилола и 17 % этилбензола.

РАСТВОРИТЕЛИ С ПОТЕНЦИАЛЬНО НИЗКОЙ ТОКСИЧНОСТЬЮ

Растворители класса 3 (представлены в таблице 6) могут быть отнесены к менее токсичным и обладающим меньшим риском для здоровья человека растворителям. Класс 3 не включает растворители, известные как опасные для здоровья человека в концентрациях, которые обычно допускаются в лекарственных препаратах. Однако для многих растворителей класса 3 не проводилось долгосрочных исследований токсичности или канцерогенности. Имеющиеся данные указывают на то, что они менее токсичны в острых или краткосрочных испытаниях и дают отрицательный результат в испытаниях на генотоксичность (не проявляют генотоксичность). Допустимое суточное воздействие этих остаточных органических растворителей, равное 50 мг/сут или меньше (соответствует ПДК 5000 ppm или 0,5 % по способу 1), приемлемо без обоснования. Более высокие значения также могут быть допустимы при условии, что они определяются возможностями производства, которое отвечает требованиям надлежащей производственной практики (GMP).

Таблица 6. Растворители класса 3, подлежащие нормированию в соответствии с требованиями ОФС
Анизол | 2-Метилтетрагидрофуран
Ацетон | Метилэтилкетон
1-Бутанол | Муравьиная кислота
2-Бутанол | Пентан
Бутилацетат | 1-Пентанол
трет-Бутилметиловый эфир | 1-Пропанол
Гептан | 2-Пропанол
Диметилсульфоксид | Пропилацетат
Диэтиловый эфир | Триэтиламин
Изобутилацетат | Уксусная кислота
Изопропилацетат | Этанол
Метилацетат | Этилацетат
3-Метил-1-бутанол | Этилформиат
2-Метил-1-пропанол |

РАСТВОРИТЕЛИ, ДЛЯ КОТОРЫХ ОТСУТСТВУЮТ ДОСТОВЕРНЫЕ ДАННЫЕ О ТОКСИЧНОСТИ

Производители вспомогательных веществ, фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов также могут использовать растворители, представленные в таблице 7. Однако для них отсутствуют обоснованные данные о токсичности, на основании которых устанавливают ДСВ. Поэтому производители должны самостоятельно обосновывать остаточные содержания этих растворителей в лекарственных средствах и вспомогательных веществах.

Таблица 7. Растворители с недостаточно обоснованной токсичностью
1,1-Диэтоксипропан | Метилизопропилкетон
1,1-Диметоксиметан | Петролейный эфир
2,2-Диметоксипропан | Трихлоруксусная кислота
Изооктан | Трифторуксусная кислота
Изопропиловый эфир |

##### Термины и определения

Генотоксичные канцерогены – канцерогены, вызывающие рак, воздействуя на гены или хромосомы.

Доза, не оказывающая эффекта (ДНОЭ) – максимальная доза вещества, при которой не наблюдается биологически достоверного увеличения частоты или тяжести каких-либо эффектов у людей или животных, подвергшихся воздействию.

Допустимое суточное воздействие (ДСВ) – максимально допустимое суточное потребление остаточного органического растворителя в лекарственном средстве или вспомогательном веществе.

Модификатор (модифицирующий фактор) – поправочный коэффициент, определяемый профессиональным решением токсиколога и применяемый к данным биологического анализа для безопасной экстраполяции этих данных на человека.

Наименьшая доза, оказывающая эффект (НДОЭ) – минимальная доза вещества в исследовании или группе исследований, при которой наблюдается биологически достоверное увеличение частоты или тяжести каких-либо эффектов у людей или животных, подвергшихся воздействию.

Нейротоксичность – способность вещества оказывать неблагоприятное воздействие на нервную систему.

Обратимая токсичность – возникновение вредных эффектов, вызванных веществом, исчезающих после прекращения воздействия вещества.

Вещества с высокой вероятностью канцерогенности для человека – вещества, для которых нет эпидемиологических доказательств канцерогенеза, но есть положительные данные о генотоксичности и явные доказательства канцерогенеза у грызунов.

Тератогенность – возникновение структурных пороков развития у развивающегося плода при введении вещества во время беременности.

Таблица 8. Общий список растворителей
Растворитель | Второе название | Структура | Класс
--- | --- | --- | ---
Анизол | Метоксибензол |  | Класс 3
Ацетон | 2-Пропанон, пропан-2-он | CH3COCH3 | Класс 3
Ацетонитрил |  | CH3CN | Класс 2
Бензол |  |  | Класс 1
1-Бутанол | н-Бутиловый спирт, бутан-1-ол | CH3[CH2]3OH | Класс 3
2-Бутанол | втор-Бутиловый спирт, бутан-2-ол | CH3CH2CH(OH)CH3 | Класс 3
Бутилацетат | Бутиловый эфир уксусной кислоты | CH3COO[CH2]3CH3 | Класс 3
трет-Бутилметиловый эфир | 2-Метокси-2-метилпропан | (CH3)3COCH3 | Класс 3
трет-Бутиловый спирт | трет-Бутанол | (CH3)3COH | Класс 2
Гексан | н-Гексан | CH3[CH2]4CH3 | Класс 2
Гептан | н-Гептан | CH3[CH2]5CH3 | Класс 3
N,N-Диметилацетамид | ДМА | CH3CON(CH3)2 | Класс 2
Диметилсульфоксид | Метилсульфинилметан, метилсульфоксид, ДМСО | (CH3)2SO | Класс 3
N,N-Диметилформамид | ДМФА | HCON(CH3)2 | Класс 2
1,2-Диметоксиэтан | Диметиловый эфир этиленгликоля | H3COCH2CH2OCH3 | Класс 2
1,4-Диоксан | п-Диоксан, [1,4]диоксан |  | Класс 2
1,2-Дихлорэтан | сим-Дихлорэтан, этилендихлорид, этиленхлорид | CH2ClCH2Cl | Класс 1
1,1-Дихлорэтен | 1,1-Дихлорэтилен, винилиденхлорид | H2C=CCl2 | Класс 1
1,2-Дихлорэтен | 1,2-Дихлорэтилен, ацетилендихлорид | ClHC=CHCl | Класс 2
Диэтиловый эфир | Этиловый эфир, этоксиэтан, 1,1'-оксибисэтан | CH3CH2OCH2CH3 | Класс 3
Изобутилацетат | Изобутиловый эфир уксусной кислоты | CH3COOCH2CH(CH3)2 | Класс 3
Изопропилацетат | Изопропиловый эфир уксусной кислоты | CH3COOCH(CH3)2 | Класс 3
Ксилол* | Диметилбензол |  | Класс 2
Кумол | Изопропилбензол, (1-метилэтил)бензол |  | Класс 2
Метанол | Метиловый спирт | CH3OH | Класс 2
Метилацетат | Метиловый эфир уксусной кислоты | CH3COOCH3 | Класс 3
3-Метил-1-бутанол | Изоамиловый спирт, изопентиловый спирт, 3-метилбутан-1-ол | (CH3)2CHCH2CH2OH | Класс 3
Метилбутилкетон | 2-Гексанон, гексан-2-он | CH3[CH2]3COCH3 | Класс 2
Метиленхлорид | Дихлорметан | CH2Cl2 | Класс 2
Метилизобутилкетон | 4-Метилпентан-2-он, 4-метил-2-пентанон, МИБК | CH3COCH2CH(CH3)2 | Класс 3
N-Метилпирролидон | 1-Метилпирролидин-2-он, 1-метил-2-пирролидинон |  | Класс 2
2-Метил-1-пропанол | Изобутиловый спирт, 2-метилпропан-1-ол | (CH3)2CHCH2OH | Класс 3
2-Метилтетрагидрофуран | 2-Метилоксолан, тетрагидросильван |  | Класс 3
Метилциклогексан | Циклогексилметан |  | Класс 2
Метилэтилкетон | 2-Бутанон, МЭК, бутан-2-он | CH3CH2COCH3 | Класс 3
2-Метоксиэтанол | Монометиловый эфир этиленгликоля | CH3OCH2CH2OH | Класс 2
Муравьиная кислота |  | HCOOH | Класс 3
Нитрометан |  | CH3NO2 | Класс 2
Пентан | н-Пентан | CH3[CH2]3CH3 | Класс 3
1-Пентанол | Амиловый спирт, пентан-1-ол, пентиловый спирт | CH3[CH2]3CH2OH | Класс 3
Пиридин |  |  | Класс 2
1-Пропанол | Пропан-1-ол, Пропиловый спирт | CH3CH2CH2OH | Класс 3
2-Пропанол | Пропан-2-ол, Изопропиловый спирт | (CH3)CHOH | Класс 3
Пропилацетат | Пропиловый эфир уксусной кислоты | CH3COOCH2CH2CH3 | Класс 3
Сульфолан | Тетрагидротиофен-1,1-диоксид |  | Класс 2
Тетрагидрофуран | Тетраметиленоксид, Оксациклопентан |  | Класс 2
Тетралин | 1,2,3,4-Тетрагидронафталин |  | Класс 2
Толуол | Метилбензол |  | Класс 2
1,1,1-Трихлорэтан | Метилхлороформ | CH3CCl3 | Класс 1
1,1,2-Трихлорэтен | Трихлорэтен | HClC=CCl2 | Класс 2
Триэтиламин | N, N-диэтилэтанамин | N(CH2CH3)3, | Класс 3
Углерод четырёххлористый | Тетрахлорметан | CCl4 | Класс 1
Уксусная кислота | Этановая кислота | CH3COOH | Класс 3
Формамид | Метанамид | NCONH2 | Класс 2
Хлоробензол |  |  | Класс 2
Хлороформ | Трихлорметан | CHCl3 | Класс 2
Циклогексан | Гексаметилен |  | Класс 2
Циклопентилметиловый эфир | Метоксициклопентан |  | Класс 2
Этанол | Этиловый спирт | CH3CH2OH | Класс 3
Этилацетат | Этиловый эфир уксусной кислоты | CH3COOCH2CH3 | Класс 3
Этиленгликоль | 1,2-Дигидроксиэтан, 1,2-этандиол | HOCH2CH2OH | Класс 2
Этилформиат | Этиловый эфир муравьиной кислоты | HCOOCH2CH3 | Класс 3
2-Этоксиэтанол | Целлозольв | CH3CH2OCH2CH2OH | Класс 2

*Обычно 60 % м-ксилола, 14 % n-ксилола, 9 % о-ксилола и 17 % этилбензола.

##### Дополнительные сведения

ВЛИЯНИЕ ОРГАНИЧЕСКИХ ЛЕТУЧИХ РАСТВОРИТЕЛЕЙ НА ОКРУЖАЮЩУЮ СРЕДУ

Некоторые из остаточных органических растворителей, часто используемых в фармацевтическом производстве, внесены в перечень токсичных химических соединений. В задачи различных международных групп и организаций входит определение допустимых уровней воздействия химических веществ. Основная их цель – защита здоровья человека и охрана окружающей среды от возможного негативного влияния химических соединений в результате длительного воздействия. Методы, используемые для оценки максимально безопасных уровней воздействия, обычно основаны на долгосрочных исследованиях. Когда данные долгосрочных исследований недоступны, могут быть использованы данные краткосрочных исследований с модификацией подхода, например, с использованием более высоких коэффициентов безопасности (модификаторов). Подход, описанный в ОФС, относится, прежде всего, к долгосрочному или пожизненному воздействию на население в окружающей среде.

ОСТАТОЧНЫЕ ОРГАНИЧЕСКИЕ РАСТВОРИТЕЛИ В ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВАХ И ВСПОМОГАТЕЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВАХ

Допустимые нормы воздействия, представленные в ОФС, установлены в соответствии с методологией и данными по токсичности, приведёнными в международных документах. Однако при установлении допустимых норм воздействия должны быть приняты некоторые допущения относительно остаточных органических растворителей, используемых в синтезе и изготовлении лекарственных средств и вспомогательных веществ, а именно:

1. Пациенты (не всё население) используют лекарственные средства для лечения болезней или для профилактики с целью предотвращения возникновения инфекции или болезни.

2. Предположение о пожизненном воздействии на пациента не обязательно для большинства лекарственных средств, но может рассматриваться как рабочая гипотеза, чтобы уменьшить риск для здоровья человека.

3. Остаточные органические растворители являются неизбежными компонентами фармацевтического производства и часто входят в состав лекарственных препаратов.

4. Остаточные органические растворители не должны превышать рекомендуемые концентрации, кроме исключительных обстоятельств.

5. Данные токсикологических исследований, используемые для определения допустимых концентраций остаточных органических растворителей, должны быть получены с использованием соответствующих протоколов.

МЕТОДЫ УСТАНОВЛЕНИЯ ДОПУСТИМЫХ НОРМ ВОЗДЕЙСТВИЯ

Для оценки степени риска канцерогенных растворителей класса 1 используют метод Гейлора-Коделла. Для установления допустимых норм воздействия экстраполяцию с использованием математических моделей следует применять только в тех случаях, когда есть достоверные данные о канцерогенности. Нормы воздействия для растворителей класса 1 могут быть определены с использованием высокого коэффициента безопасности (например, от 10 000 до 100 000) применительно к ДНОЭ. Обнаружение и количественное определение этих растворителей необходимо проводить с помощью современных аналитических методик.

ДСВ для растворителей класса 2 в данной ОФС установлены путём расчёта их значений в соответствии с принятыми методиками определения допустимых норм воздействия в лекарственных средствах и методом оценки риска химических веществ в отношении здоровья человека. Метод описан ниже для лучшего понимания, как получают значения ДСВ. Для использования значений ДСВ, приведённых в таблицах 4–7, производить эти вычисления нет необходимости.

В экспериментах на животных значения ДСВ рассчитывают исходя из ДНОЭ или НДОЭ по формуле 1:

Значение ДСВ преимущественно получают на основании ДНОЭ. Если значения ДНОЭ неизвестны, могут быть использованы значения НДОЭ. Модифицирующие факторы, предложенные здесь для экстраполяции полученных на животных данных на человека, являются своеобразными «коэффициентами неопределённости». Во всех расчётах принимают предположение о 100 % системном воздействии независимо от способа применения лекарств.

Модифицирующие факторы:

F1 – модифицирующий коэффициент для расчёта экстраполяции между видами;

F1 = 2 при экстраполяции на человека данных, полученных при исследованиях на собаках;

F1 = 2,5 при экстраполяции на человека данных, полученных при исследованиях на кроликах;

F1 = 3 при экстраполяции на человека данных, полученных при исследованиях на обезьянах;

F1 = 5 при экстраполяции на человека данных, полученных при исследованиях на крысах;

F1 = 12 при экстраполяции на человека данных, полученных при исследованиях на мышах;

F1 = 10 при экстраполяции на человека данных, полученных при исследованиях на других животных.

F1 учитывает отношение площади поверхности тела к массе тела соответствующих видов животных и человека. Площадь поверхности (S) вычисляют по формуле 2:

где: m – масса тела;
k – константа, принятая равной 10.

Массы тела, используемые в уравнении, представлены в таблице 9.

Таблица 9. Значения, использованные при расчётах в данном документе
Масса крысы | 425 г
Масса беременной крысы | 330 г
Масса мыши | 28 г
Масса беременной мыши | 30 г
Масса морской свинки | 500 г
Масса макаки-резус | 2,5 кг
Масса кролика (беременного или нет) | 4 кг
Масса гончей собаки (бигль) | 11,5 кг
Дыхательный объём крысы | 290 л/сут
Дыхательный объём мыши | 43 л/сут
Дыхательный объём кролика | 1440 л/сут
Дыхательный объём морской свинки | 430 л/сут
Дыхательный объём человека | 28800 л/сут
Дыхательный объём собаки | 9000 л/сут
Дыхательный объём обезьяны | 1150 л/сут
Потребление воды мышью | 5 мл/сут
Потребление воды крысой | 30 мл/сут
Потребление пищи крысой | 30 г/сут

F2 = 10, учитывает индивидуальную изменчивость. Фактор, равный 10, обычно принимают для всех органических растворителей.

F3 – переменный фактор для расчёта в исследованиях токсичности при кратковременных воздействиях:

F3 = 1 для испытаний, которые длятся, по меньшей мере, в течение периода, равного половине продолжительности жизни животных (1 год для грызунов и кроликов; 7 лет для кошек, собак и обезьян);

F3 = 1 для испытаний на репродуктивную функцию, которые охватывают весь период органогенеза;

F3 = 2 для испытаний в течение 6 месяцев на грызунах, или в
течение 3,5 лет на других животных;

F3 = 5 для испытаний в течение 3 месяцев на грызунах, или в
течение 2 лет на других животных;

F3 = 10 для испытаний более короткой продолжительности.

Для всех промежуточных испытаний необходимо использовать более высокий фактор (например, для 9-месячных испытаний на грызунах используется фактор = 2).

F4 – фактор, который может применяться при высокой токсичности растворителя, например, негенотоксичной канцерогенности, нейротоксичности или тератогенности. В испытаниях репродуктивной токсичности используют следующие факторы:

F4 = 1 для эмбриональной токсичности, связанной с материнской интоксикацией;

F4 = 5 для эмбриональной токсичности, не связанной с материнской интоксикацией;

F4 = 5 для тератогенного эффекта, связанного с материнской интоксикацией;

F4 = 10 для тератогенного эффекта, не связанного с материнской интоксикацией.

F5 – переменный фактор, который может применяться, если ДНОЭ не была установлена. Когда известны только НДОЭ, то, в зависимости от уровня токсичности, может использоваться фактор вплоть до 10.

При расчётах массу тела взрослого человека любого пола принимают равной 50 кг. Эта относительно небольшая величина обеспечивает дополнительный коэффициент безопасности стандартной массе человека 60 или 70 кг, который часто используют в таких вычислениях. При расчёте ДСВ также учитывают, что многие взрослые пациенты весят менее 50 кг. Если лекарственное средство, содержащее растворитель, предназначено для педиатрии, то целесообразно сделать поправку на меньшую массу тела.

В качестве примера применения этого уравнения приведено испытание токсичности ацетонитрила на мышах. Установлено, что значение ДНОЭ – 50,7 мг/(кг·сут). ДСВ для ацетонитрила при этом рассчитывают следующим образом:

В этом примере:

F1 = 12, учитывает экстраполяцию на человека данных, полученных при исследованиях на мышах;

F2 = 10, учитывает индивидуальную изменчивость;

F3 = 5, так как продолжительность испытаний составила только 13 недель;

F4 = 1, так как с серьёзной токсичностью не сталкивались;

F5 = 1, так как был определён уровень, не вызывающий эффекта.

Для перерасчёта концентраций газов, используемых в дыхательных (ингаляторных) из ppm в мг/л или мг/м3, используют уравнение для идеального газа: . В качестве примера приведено испытание репродуктивной токсичности на крысах в результате вдыхания углерода четырёххлористого (Mr 153,84).

Для перевода в мг/м3 используют отношение 1000 л = 1 м3.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0009 Стабильность и сроки годности лекарственных средств

Взамен ОФС.1.1.0009.18

Настоящая общая фармакопейная статья устанавливает требования к изучению стабильности и установлению сроков годности фармацевтических субстанций химического и минерального происхождения и соответствующих лекарственных препаратов на их основе; фармацевтических субстанций растительного происхождения и лекарственных препаратов, полученных на их основе; гомеопатических лекарственных средств.

Требования к исследованию стабильности и установлению сроков годности биологических лекарственных средств устанавливает ОФС «Стабильность биологических лекарственных средств».

##### Термины и определения

Стабильность – способность лекарственного средства сохранять химические, физические, микробиологические, биофармацевтические и фармакологические свойства в определённых границах в течение установленного срока годности.

Новая фармацевтическая субстанция – фармацевтическая субстанция, содержащая новую молекулу химического вещества, которое ранее не было включено в состав какого-либо зарегистрированного лекарственного препарата. Новая соль, эфир или производное (с ковалентной связью) фармацевтической субстанции, разрешённой для применения, считается новой фармацевтической субстанцией, подлежащей испытанию стабильности в соответствии с требования настоящей общей фармакопейной статьи.

Существующая фармацевтическая субстанция – фармацевтическая субстанция, которая была разрешена к применению в составе соответствующего лекарственного препарата, зарегистрированного в установленном порядке.

Стабильная фармацевтическая субстанция – фармацевтическая субстанция считается стабильной, если соответствует требованиям спецификации при хранении при температуре 25 °С и относительной влажности 60 % или при температуре 30 °С и относительной влажности 60 % (65 %) в течение двух лет, а также при температуре 40 °С и относительной влажности 75 % при хранении в течение 6 мес.

Срок годности – период времени, в течение которого лекарственное средство должно полностью соответствовать спецификации на срок годности при надлежащем хранении в условиях, указанных в фармакопейной статье и на упаковке.

Период до проведения повторных испытаний стабильных фармацевтических субстанций – период времени до проведения повторных испытаний, в течение которого стабильная фармацевтическая субстанция соответствует спецификации качества и пригодна для производства лекарственного препарата при надлежащих условиях её хранения. По истечении этого периода серия стабильной фармацевтической субстанции, предназначенная для использования в производстве лекарственного препарата, должна быть повторно испытана на соответствие спецификации и затем незамедлительно использована. Серия стабильной фармацевтической субстанции может быть испытана многократно, и разные части серии могут быть использованы после каждого повторного испытания до тех пор, пока они продолжают соответствовать спецификации.

Дата производства лекарственного препарата – дата выполнения первой производственной операции, связанной со смешиванием фармацевтической субстанции с другими компонентами лекарственного препарата.

Дата производства фармацевтической субстанции – начальная дата производственной операции по фасовке и упаковке.

Примечание - для лекарственных препаратов, состоящих из одной фармацевтической субстанции, находящейся в первичной упаковке, датой производства считается начальная дата наполнения первичной упаковки.

Дата выпуска – дата поступления или разрешения поступления лекарственного средства в обращение.

Спецификация на выпуск (спецификация при выпуске) – перечень показателей качества, методов их определения и критериев приемлемости, с помощью которых определяют качество фармацевтической субстанции или лекарственного препарата на момент выпуска.

Спецификация на срок годности – перечень показателей качества, методов их определения и критериев приемлемости, которым должна соответствовать фармацевтическая субстанция или лекарственный препарат в течение срока годности (периода до проведения повторных испытаний для стабильных фармацевтических субстанций).

Промышленная серия – серия фармацевтической субстанции или лекарственного препарата промышленного масштаба, произведённая в производственном помещении с использованием производственного оборудования таким образом, как указано в регистрационном досье.

Опытно-промышленная серия – серия фармацевтической субстанции или лекарственного препарата, произведённая на промышленном оборудовании в соответствии с технологией (или посредством её моделирования), используемой при полномасштабном серийном производстве. Для твёрдых лекарственных форм для приёма внутрь опытно-промышленная серия, как правило, составляет не менее 1/10 объёма промышленной серии или 100 000 единиц дозированной лекарственной формы (в зависимости от того, что больше).

Полупроницаемая упаковка – упаковка, которая позволяет проникать через неё растворителю, обычно воде, но препятствует потере растворённого вещества. Механизм проникновения растворителя происходит за счет адсорбции одной поверхностью упаковки, диффузии через материал упаковки и десорбции растворителя с другой поверхности упаковки. Проникновение происходит в соответствии с градиентом парциального давления. К полупроницаемой упаковке относят ампулы, флаконы, бутылки, пакеты и другие типы упаковки из полимерных материалов (полиэтилена низкой плотности).

Примечание - термины и определения, используемые в настоящей общей фармакопейной статье, указаны также в ОФС «Лекарственные формы», ОФС «Упаковка лекарственных средств».

##### Общие положения

Целью изучения стабильности лекарственного средства является:

- получение данных об изменении качества фармацевтической субстанции или лекарственного препарата с течением времени под влиянием различных факторов окружающей среды, таких как, температура, влажность, свет и др.;

- получение данных о влиянии на качество лекарственного средства системы упаковки и её элементов, включая укупорочные средства и упаковочные материалы;

- изучение влияния на качество лекарственного препарата результатов взаимодействия фармацевтической субстанции со вспомогательными веществами или результатов взаимодействия двух или более фармацевтических субстанций в лекарственном препарате с фиксированными комбинациями доз и т.д.;

- получение данных о сохранении качества, эффективности и безопасности во время применения лекарственного препарата после вскрытия первичной многодозовой упаковки;

- получение данных о качестве восстановленного/разбавленного лекарственного препарата, в том числе стерильного, после подготовки к применению и в период его применения;

- получение сведений об эффективности антимикробных консервантов, антиоксидантов в лекарственных препаратах и др.

Данные, полученные в ходе изучения стабильности, необходимы:

- для установления срока годности малоустойчивых (нестабильных) фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов;

- для установления периода до проведения повторных испытаний стабильных фармацевтических субстанций;

- для установления рекомендуемых требований к надлежащим условиям хранения и перевозки лекарственного средства и последующего выбора необходимых указаний по его маркировке;

- для выбора надлежащих упаковочных материалов, системы упаковки/укупорки, включающей укупорочные средства и другие элементы упаковки для конкретного лекарственного средства;

- для установления периода применения и условий хранения восстановленного/разбавленного лекарственного препарата;

- для установления, при необходимости, периода применения и условий хранения лекарственного препарата в многодозовой упаковке после первого вскрытия упаковки;

- для обоснования использования необходимой концентрации антимикробных консервантов в лекарственных препаратах и др.

Изучение стабильности должно осуществляться по программе (плану), при разработке которой необходимо учитывать статус исследуемого лекарственного средства:

- новая или существующая фармацевтическая субстанция;

- новый или существующий лекарственный препарат;

- новая лекарственная форма лекарственного препарата.

Программа изучения стабильности лекарственных средств должна включать виды планируемых испытаний (стрессовые, ускоренные, долгосрочные), выбор серий, описание системы упаковки/укупорки; испытуемые характеристики; методики испытаний; периодичность (частоту) испытаний; требования к условиям хранения лекарственных средств при проведении испытаний.

Особое внимание необходимо обращать на разработку программы изучения стабильности новых лекарственных средств.

Программа изучения стабильности существующих лекарственных средств должна быть основана на уже имеющихся научных сведениях о свойствах исследуемого лекарственного средства в различных практических ситуациях. В зависимости от наличия и характера информации по стабильности существующих лекарственных средств, объём необходимых испытаний при изучении стабильности может быть сокращен.

##### Общие рекомендации по изучению стабильности лекарственных средств

Требования к выбору методов и методик изучения стабильности

Изучение стабильности должно включать испытания таких характеристик лекарственного средства, которые подвержены изменениям в процессе хранения и которые, вероятно, могут оказать влияние на качество, безопасность и/или эффективность лекарственного средства. В зависимости от конкретной ситуации объём испытаний по изучению стабильности должен охватить все физические, химические, биологические и микробиологические параметры лекарственного средства. При изучении стабильности лекарственного препарата необходимо также определять содержание антимикробных консервантов, антиоксидантов, проверять функциональные свойства, например, для системы доставки дозы лекарственной формы и т.д.

Должны быть применены валидированные аналитические методики, позволяющие охарактеризовать стабильность. Необходимость проведения повторных испытаний по изучению стабильности и их объём будут зависеть от результатов валидации.

Могут быть применены методы и методики испытаний, регламентированные фармакопейной статьей на конкретное лекарственное средство, если они позволяют выявить различия между показателями качества исследуемого лекарственного средства и продуктами его распада (деградации). При этом все возможные примеси и продукты разложения лекарственного средства, образующиеся в ходе процесса изучения стабильности, должны контролироваться.

В случае необходимости допустимо использование других специальных методов исследований, валидированных по отношению к фармакопейным методам.

Перечень показателей качества, методов их определения и критериев приемлемости, которым должны соответствовать фармацевтическая субстанция или лекарственный препарат, регламентируют спецификации: на выпуск и на срок годности лекарственного средства.

Для каждого конкретного испытания лекарственного средства должны быть определены критерии приемлемости, представляющие собой числовые пределы, интервалы или другие критерии. В случае испытания фармацевтической субстанции критерии приемлемости должны включать верхние пределы содержания отдельных примесей и продуктов разложения, а также пределы их суммарного содержания, установленные исходя из требований по безопасности и/или эффективности.

Особое внимание необходимо обратить на разработку критериев приемлемости при изучении стабильности нового лекарственного средства, изучение стабильности которого проводится впервые. Критерии приемлемости для существующего лекарственного средства следует устанавливать на основании уже имеющейся информации о его стабильности.

Допускаются приемлемые и обоснованные отклонения одних и тех же показателей качества для одного и того же лекарственного средства в спецификации на выпуск и в спецификации на срок годности, основанные на оценке стабильности и наблюдаемых изменениях при хранении.

Любые различия между критериями приемлемости в спецификациях на выпуск и на срок годности лекарственного препарата относительно содержания антимикробных консервантов, должны быть подтверждены обоснованной корреляцией химического состава и эффективности этих консервантов, доказанной на этапе фармацевтической разработки для окончательного состава (за исключением концентрации антимикробного консерванта) лекарственного препарата, предназначенного для обращения на фармацевтическом рынке. Необходимо провести испытания стабильности одной исходной серии лекарственного препарата относительно эффективности антимикробных консервантов (в дополнение к их количественному определению) в течение предполагаемого срока годности независимо от того, имеются ли различия между критериями приемлемости относительно содержания антимикробного консерванта в спецификации, применяемой при выпуске и спецификации, применяемой в течение срока годности.

При исследовании стабильности лекарственного препарата одновременно с изучением стабильности действующего и вспомогательного веществ оценивают их совместимость.

При необходимости, как часть официальных исследований стабильности, должны быть проведены испытания стабильности лекарственного препарата после его подготовки к применению или после восстановления/разведения, чтобы получить информацию для маркировки лекарственного препарата относительно подготовки к применению, условиям хранения и периоду использования после подготовки к применению или после восстановления/разведения.

При изучении стабильности возможно получение результатов, выходящих за пределы спецификации, называемых «значительными изменениями».

«Значительное изменение фармацевтической субстанции» означает изменение, после которого фармацевтическая субстанция перестает соответствовать спецификации.

«Значительное изменение лекарственного препарата» означает изменение следующих показателей:

- изменение количественного содержания действующего вещества на 5 % и более по сравнению с содержанием в начале испытания серии;

- превышение содержания любого продукта разложения (деградации) свыше критерия приемлемости;

- несоответствие критериям приемлемости в отношении внешнего вида, физических свойств и функциональных характеристик (например, таких как, цвет, разделение фаз, способность к ресуспендированию, спекаемость (комкование), твёрдость (прочность), доставка одной дозы аэрозоля при однократном нажатии клапана). Вместе с тем, некоторые изменения физических свойств могут быть прогнозируемы в условиях ускоренных испытаний, например, размягчение суппозиториев, расплавление кремов, частичная потеря адгезии для трансдермальных лекарственных препаратов.

Кроме того, в зависимости от лекарственной формы:

- несоответствие критериям приемлемости по значению «рН»;

- несоответствие критериям приемлемости относительно растворения для 12 единиц дозированного лекарственного средства.

Для изучения стабильности лекарственных средств используют долгосрочные, ускоренные, промежуточные испытания стабильности, а также стрессовые испытания, включая испытания на фотостабильность.

Долгосрочные испытания стабильности лекарственных средств представляют собой испытания по изучению стабильности физических, химических, биологических, биофармацевтических и микробиологических характеристик фармацевтической субстанции или лекарственного препарата, проводимые в условиях хранения, заявленных в фармакопейной статье и нормативной документации в период предполагаемого срока годности (предполагаемого периода до проведения повторных испытаний).

Полученные данные долгосрочных испытаний стабильности используют для установления срока годности (периода до проведения повторных испытаний), а также для подтверждения предполагаемого срока годности (периода до проведения повторных испытаний) и условий хранения, предлагаемых (или утвержденных) в маркировке лекарственного средства.

Долгосрочные испытания необходимо проводить в рекомендованной для данного лекарственного средства потребительской упаковке при постоянных верхних (наиболее высоких) показателях температуры и относительной влажности установленного режима хранения в течение всего предполагаемого срока годности (периода до проведения повторных испытаний).

В ряде случаев могут требоваться дополнительные испытания при нижней температуре установленного режима хранения (например, для мягких лекарственных форм, для которых возможны изменения их физико-химического состояния при пониженных температурах).

Ускоренные испытания стабильности лекарственных средств представляют собой испытания, спланированные таким образом, чтобы увеличить скорость химического разложения или физического изменения фармацевтической субстанции или лекарственного препарата посредством создания особенно неблагоприятных условий хранения.

Данные, полученные при ускоренных испытаниях стабильности лекарственного средства, являются, как правило, дополнительными к результатам его долгосрочных испытаний, и могут быть использованы для оценки более отдаленных химических эффектов при долгосрочных испытаниях, а также для оценки влияния кратковременных отклонений от условий хранения, заявленных в фармакопейной статье или нормативной документации, которые могут возникнуть, например, при перевозке. Результаты исследований при ускоренных испытаниях не всегда позволяют прогнозировать физические изменения.

Промежуточные испытания заключаются в изучении стабильности лекарственного средства в условиях, проводимых при температуре 30° С и относительной влажности 65 %, при которых прогнозируется умеренное повышение скорости/степени химического разложения (деградации) или физических изменений фармацевтической субстанции или лекарственного препарата, которые предполагается хранить продолжительное время при температуре 25 °С.

Стрессовые испытания представляют собой испытания стабильности лекарственного средства, проводимые в специально созданных стрессовых условиях, как правило, более неблагоприятных, чем условия ускоренных испытаний, с целью исследования вынужденного процесса разложения и установления продуктов и механизмов разложения лекарственного средства.

Стрессовые испытания проводят для оценки наиболее вредного влияния факторов внешней среды (высокие и низкие температуры, влага, кислород и другие компоненты воздуха, свет и т.п.) и зависимости от времени и условий их воздействия.

Стрессовые испытания фармацевтической субстанции – испытания, проводимые с целью оказания помощи в идентификации вероятных продуктов разложения (деградации) фармацевтической субстанции. Изучение продуктов разложения в стрессовых условиях помогает установить пути деградации и стабильность, присущую молекуле, а также подтвердить пригодность аналитических методик, используемых для изучения стабильности, при их разработке и валидации. Характер стрессовых испытаний зависит от конкретной фармацевтической субстанции и вида лекарственной формы лекарственного препарата, для производства которого она предназначена.

Стрессовые испытания фармацевтической субстанции проводят в том случае, если в документах или научной литературе отсутствуют данные о возможных продуктах ее разложения. Если продукты разложения фармацевтической субстанции известны, например, указаны в фармакопейной статье или научной литературе, то можно руководствоваться этими данными и стрессовые испытания не проводить. Отдельное изучение определенных продуктов разложения может не понадобиться, если известно, что эти продукты не образуются в условиях ускоренных или долгосрочных испытаний. Если таких данных нет, то необходимо провести стрессовые испытания.

Дополнительная информация о влиянии на стабильность лекарственных средств процессов их химической деградации, особенностей лекарственных форм, факторов окружающей среды указана в ОФС «Аспекты стабильности лекарственных средств».

Стрессовые испытания проводят на одной серии фармацевтической субстанции. Должно быть изучено влияние на фармацевтическую субстанцию:

- температур, превышающих температуры при ускоренных испытаниях с последовательным ее повышением на 10° С (например, 50 °С, 60 °С и т.д.);

- повышенной влажности (например, относительной влажности 75 % и выше);

- окисления, при необходимости;

- фотолиза, при необходимости;

- гидролиза в широком интервале значений рН, если действующее вещество находится в виде раствора или суспензии.

Стрессовые испытания лекарственного препарата включают испытания фотостабильности и параметров, специфических для определения лекарственных форм.

Испытания фотостабильности проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение фотостабильности лекарственных средств». Испытание фотостабильности является неотъемлемой частью стрессовых испытаний новых фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов. Объём исследований лекарственного средства определяется наличием или отсутствием изменений, возникающих в результате влияния света.

Объём испытаний фармацевтической субстанции или лекарственного препарата зависит от наличия или отсутствия допустимого изменения по окончании испытания под воздействием света.

План изучения стабильности лекарственного средства может быть полным, предусматривающим испытания образцов по каждому из предусмотренных факторов в каждой точке контроля, и может быть сокращённым. Любой план сокращённых исследований должен позволять адекватно прогнозировать срок годности (период до проведения повторных испытаний) лекарственного средства.

Необходимо учесть потенциальный риск плана сокращённых исследований и установить меньший срок годности (период до проведения повторных испытаний), чем они могли бы быть установлены при проведении полных исследований, вследствие меньшего количества собранных данных.

К планам сокращенных исследований стабильности лекарственных средств относят такие методы, как метод крайних вариантов (брэкетинг) и матричный метод. Планы сокращённых исследований могут быть применены при изучении стабильности большинства типов лекарственных препаратов. При изучении стабильности фармацевтических субстанций матричный метод имеет ограниченную пользу, а метод крайних вариантов вообще не применим.

Метод крайних вариантов (значений) (брэкетинг) предусматривает построение сокращённого плана исследований стабильности лекарственных препаратов таким образом, что испытывают образцы только с крайними (предельными) значениями в ряду определенного фактора во всех временных точках контроля, что и при проведении исследований по полному плану. План предполагает, что стабильность образцов с любыми промежуточными вариантами в ряду определённого фактора приравнивается к стабильности образцов с крайними значениями.

Факторы метода крайних вариантов — это переменные факторы (например, дозировка, размер упаковки и/или объём наполнения), влияние которых на стабильность лекарственного препарата должно быть оценено согласно плану исследований.

Применение метода крайних вариантов считается нецелесообразным, если нельзя показать, что значения дозировки или размеры системы упаковки и/или объёмы наполнения, выбранные для испытаний, являются действительно крайними.

Метод крайних вариантов может быть применим для лекарственных препаратов с разной дозировкой, но имеющих идентичный или очень сходный (близкий) состав, например, для:

- капсул с разной дозировкой, полученных путём заполнения одной и той же смесью порошков, содержимое которых имеет разную массу;

- таблеток с разной дозировкой, полученных путём прессования разных количеств одного и того же исходного гранулята;

- растворов для приёма внутрь с разной дозировкой, состав которых незначительно отличается только вспомогательными веществами (например, красителями, корригентами вкуса и запаха) и др.

При достаточном обосновании метод крайних вариантов можно применять при изучении стабильности лекарственных препаратов с разной дозировкой, в составе которых изменяется соотношение количества фармацевтической субстанции и вспомогательных веществ. Если же в лекарственных препаратах с разными дозировками использованы разные вспомогательные вещества, то метод крайних вариантов, как правило, не следует применять.

Выбор метода крайних вариантов может быть применим для лекарственных препаратов, имеющих одинаковую систему упаковки/укупорки, при условии, если один фактор (размер упаковки или объём наполнения) варьирует, а второй остается неизменным.

При наличии обоснования метод крайних вариантов можно применять при изучении лекарственных препаратов с одинаковой упаковкой, но с разными укупорочными средствами.

В табл. 1 приведён пример плана, предусматривающего применение метода крайних вариантов для лекарственного препарата, представленного в трёх дозировках (50, 75 и 100 мг) и в упаковках трёх размеров (15, 100 и 500 мл). В данном примере должно быть показано, что размеры упаковок из полиэтилена высокой плотности вместимостью 15 мл и 500 мл действительно представляют крайние значения фактора. Серии для каждой выбранной комбинации должны пройти испытания в каждой точке контроля, как предусмотрено в плане полных исследований.

Таблица 1. Пример плана, предусматривающего выбор метода крайних вариантов
Дозировка, мг | 50 | 75 | 100
--- | --- | --- | ---
Серия | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3 | 1 | 2 | 3
Размер упаковки, мл | 15 | Т | Т | Т |  |  |  | Т | Т | Т
100 |  |  |  |  |  |  |  |  |
500 | Т | Т | Т |  |  |  | Т | Т | Т
Примечание - «Т» означает образец, подлежащий испытаниям

Матричный метод предусматривает построение плана исследований стабильности таким образом, что в определенной момент времени отбирают и исследуют только часть от общего количества возможных образцов для всех комбинаций факторов. При последующем контроле (в последующий момент времени) исследуют другой комплект образцов из общего количества для всех комбинаций факторов. Метод предполагает, что стабильность испытанных образцов отождествляется со стабильностью всех образцов в данный момент времени. Должны быть выявлены отличия в образцах для одного и того же лекарственного препарата, например, отличия, связанные с разными сериями, разной дозировкой, разным размером системы упаковки и укупорочных средств одинакового типа и, возможно, в некоторых случаях с разными системами упаковки/укупорки.

Если стабильность лекарственного препарата зависит от вторичной упаковки, то матричный метод можно применять параллельно для всех систем упаковки/укупорки.

Каждое условие хранения должно подвергаться обработке отдельно по своему собственному плану, предусматривающему использование матриц. Матричный метод не следует применять для всех испытуемых факторов, но при наличии обоснования для различных испытуемых факторов могут быть применены альтернативные планы, предусматривающие использование матриц.

Матричный метод может быть применим для лекарственных препаратов с разной дозировкой, но имеющих идентичный или очень сходный состав, например, для:

- капсул с разной дозировкой, полученных путём заполнения одной и той же смесью порошков, содержимое которых имеет разную массу;

- таблеток с разной дозировкой, полученных путём прессования разных количеств одного и того же исходного гранулята;

- растворов для приёма внутрь с разной дозировкой, состав которых незначительно отличается только вспомогательными веществами (например, красителями, корригентами запаха, вкуса) и др.

Другими примерами факторов матричного метода являются серии лекарственного препарата, полученные с использованием одного и того же процесса и оборудования, а также размеры упаковки и (или) объём наполнения для одной и той же системы упаковки/укупорки.

При наличии обоснования матричный метод можно применять при изучении стабильности лекарственных препаратов с разной дозировкой, в составе которых изменяется соотношение количества фармацевтической субстанции и вспомогательных веществ, либо используются разные вспомогательные вещества, а также лекарственных препаратов с различной дозировкой, которые имеют разные системы упаковки/укупорки.

При построении плана исследований стабильности лекарственных препаратов матричным методом следует предусмотреть, чтобы в начальной и конечной точках контроля были испытаны образцы, соответствующие всем комбинациям выбранных факторов, а в промежуточных точках контроля – образцы с определёнными наборами выбранных комбинаций факторов.

Примеры матричного планирования точек контроля для лекарственного препарата с двумя значениями дозировки (S1 и S2) приведены в табл. 2 и табл. 3. Выражения «сокращение наполовину» и «сокращение на треть» означают степень сокращения испытаний относительно первоначального плана полного исследования. Например, «сокращение наполовину» — это исключение одной из каждых двух точек контроля, предусмотренных планом полного исследования, а «сокращение на треть» — исключение одной из каждых трёх точек контроля. В примерах, приведённых в табл. 2 и табл. 3, сокращение составляет менее половины и менее одной трети, поскольку включены полные исследования всех комбинаций факторов в некоторых точках контроля. Эти примеры включают полный комплекс испытаний в начальной и конечной точках контроля и на момент истечения срока 12 мес. от начала исследований. Следовательно, максимальное сокращение составляет менее половины (24/48) или одной трети (16/48), то есть реально составляет 15/48 или 10/48 соответственно.

Таблица 2. Пример плана матричного метода точек контроля для лекарственного препарата с двумя значениями дозировки «сокращение наполовину»
Точки контроля (месяцы) | 0 | 3 | 6 | 9 | 12 | 18 | 24 | 36
--- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | ---
Дозировка | S1 | Серия 1 | Т | Т |  | Т | Т |  | Т | Т
Серия 2 | Т | Т |  | Т | Т | Т |  | Т
Серия 3 | Т |  | Т |  | Т | Т |  | Т
S2 | Серия 1 | Т |  | Т |  | Т |  | Т | Т
Серия 2 | Т | Т |  | Т | Т | Т |  | Т
Серия 3 | Т |  | Т |  | Т |  | Т | Т
Примечание – «Т» означает образец, подлежащий испытаниям

Таблица 3. Пример плана матричного метода точек контроля для лекарственного препарата с двумя значениями дозировки «сокращение на треть»
Точки контроля (месяцы) | 0 | 3 | 6 | 9 | 12 | 18 | 24 | 36
--- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | ---
Дозировка | S1 | Серия 1 | Т | Т |  | Т | Т |  | Т | Т
Серия 2 | Т | Т | Т |  | Т | Т |  | Т
Серия 3 | Т |  | Т | Т | Т | Т |  | Т
S2 | Серия 1 | Т |  | Т | Т | Т | Т | Т | Т
Серия 2 | Т | Т |  | Т | Т |  | Т | Т
Серия 3 | Т | Т | Т |  | Т | Т | Т | Т
Примечание – «Т» означает образец, подлежащий испытаниям

В табл. 4 и табл. 5 приведены дополнительные примеры плана матричного метода для лекарственного препарата, представленного в трёх значениях дозировок и в упаковках трёх размеров. В табл. 4 приведено матричное планирование только точек контроля, а в табл. 5 — матричное планирование точек контроля и факторов. Согласно табл. 4 испытаниям подвергаются образцы, соответствующие всем комбинациям факторов, включая серии, значения дозировки и размеры упаковки, в то время как согласно табл. 5 образцы с определёнными комбинациями значений этих факторов испытанию не подлежат.

Таблица 4. Пример плана матричного метода точек контроля для лекарственного препарата с тремя значениями дозировки
Дозировка | S1 | S2 | S3
--- | --- | --- | ---
Размер упаковки | А | В | С | А | В | С | А | В | С
Серия 1 | Т1 | Т2 | ТЗ | Т2 | ТЗ | Т1 | ТЗ | Т1 | Т2
Серия 2 | Т2 | ТЗ | Т1 | ТЗ | Т1 | T2 | T1 | Т2 | ТЗ
Серия 3 | ТЗ | Т1 | Т2 | Т1 | Т2 | ТЗ | Т2 | ТЗ | T1
Примечание – Обозначения: S1, S2, S3 – различные значения дозировки; А, В, С – различные размеры упаковки; Т – образец, подлежащий испытанию; Т1, T2, Т3 – точки контроля, где:
Точка контроля (месяцы) | 0 | 3 | 6 | 9 | 12 | 18 | 24 | 36
--- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | ---
Т1 | Т |  | Т | Т | Т | Т | Т | Т
T2 | Т | Т |  | Т | Т |  | Т | Т
Т3 | Т | Т | Т |  | Т | Т |  | Т

Таблица 5. Пример плана матричного метода точек контроля для лекарственного препарата с тремя значениями дозировки
Дозировка | S1 | S2 | S3
--- | --- | --- | ---
Размер упаковки | А | В | С | А | В | С | А | В | С
Серия 1 | Т1 | Т2 |  | Т2 |  | Т1 |  | Т1 | Т2
Серия 2 |  | ТЗ | Т1 | ТЗ | Т1 |  | T1 |  | ТЗ
Серия 3 | ТЗ |  | Т2 |  | Т2 | ТЗ | Т2 | ТЗ |
Примечание – Обозначения: S1, S2, S3 – различные дозировки; А, В, С - различные размеры упаковки; Т – образец, подлежащий испытанию; Т1, T2, Т3 – точки контроля, где:
Точка контроля (месяцы) | 0 | 3 | 6 | 9 | 12 | 18 | 24 | 36
--- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | ---
Т1 | Т |  | Т | Т | Т | Т | Т | Т
T2 | Т | Т |  | Т | Т |  | Т | Т
Т3 | Т | Т | Т |  | Т | Т |  | Т

При применении плана матричного метода, необходимо учитывать следующие данные (перечень вопросов не является исчерпывающим):

- осведомлённость о вариабельности данных;

- ожидаемая стабильность лекарственного препарата;

- наличие данных, дополнительно подтверждающих стабильность;

- различия стабильности лекарственного средства в рамках одного фактора и между разными факторами;

- число комбинаций факторов при исследовании.

Как правило, использование матричного метода применимо, если дополнительные данные свидетельствуют о прогнозируемой стабильности лекарственного препарата. Использование матричного метода возможно, если дополнительные данные, подтверждающие стабильность, свидетельствуют о незначительной вариабельности. Вместе с тем, если дополнительные данные подтверждают среднюю вариабельность, то использование матричного метода должно быть обосновано статистически. Если дополнительные данные свидетельствуют о значительной вариабельности, то использование матричного метода неприменимо.

Статистическое обоснование должно основываться на оценке способности плана матричного метода обнаруживать различия между факторами, определяющими скорость деградации, или давать точные результаты при установлении срока годности.

Если принято решение об использовании плана матричного исследования, то необходимо определить возможную степень сокращения плана полных исследований в зависимости от количества комбинаций факторов, подлежащих оценке. Чем больше факторов, касающихся лекарственного препарата и чем больше уровней в каждом факторе, тем большая степень сокращения может быть обоснована. Однако любой сокращённый план исследований должен позволять адекватно прогнозировать срок годности лекарственного препарата.

Оборудование. При изучении стабильности должно быть использовано оборудование, обеспечивающее необходимые условия испытаний. Для обеспечения надлежащей температуры и, при необходимости, относительной влажности, используют термостаты, термошкафы, климатические камеры или другие устройства, позволяющие автоматически поддерживать заданную температуру с точностью ±2 °C и заданную относительную влажность с точностью ±5 %. Приемлемые колебания температуры и относительной влажности оборудования для хранения при проведении испытаний стабильности считают допустимыми.

Для обеспечения надлежащих условий при изучении фотостабильности используют соответствующие источники света (ОФС «Определение фотостабильности лекарственных средств»).

Используемое оборудование должно быть аттестовано, поверено и должно обслуживаться в соответствии с установленными требованиями.

Оборудование, используемое при изучении стабильности лекарственных средств, должно давать возможность контролировать и, по возможности, регистрировать необходимые параметры в рамках диапазонов, указанных в настоящей общей фармакопейной статье, в течение установленного периода испытаний.

Климатические зоны. При выборе условий проведения испытаний стабильности лекарственного средства, необходимо учитывать влияние климатических условий в том регионе мира, где предполагается применение лекарственного средства.

На основании преобладающих ежегодных климатических условий в регионе мир разделён на четыре климатические зоны.

Информация о средней годовой кинетической температуре и средней годовой относительной влажности в различных климатических зонах, определяет выбор условий проведения долгосрочных испытаний при изучении стабильности лекарственных средств. Средняя кинетическая температура включает ежегодные изменения, то есть, самые низкие и самые высокие температуры в регионе в течение зимы и лета, она может быть рассчитана на основании климатических данных.

В табл. 6 приведены рекомендуемые условия проведения долгосрочных испытаний при изучении стабильности лекарственных средств в климатических зонах мира, разработанные на основании представленных в таблице критериев (данных).

Таблица 6. Рекомендуемые условия проведения долгосрочных испытаний стабильности в зависимости от климатических зон
Климатическая зона | Описание | Критерии (средняя годовая температура, измеренная на открытом воздухе/среднее парциальное давление водяного пара) | Условия проведения долгосрочных испытаний
--- | --- | --- | ---
I | Умеренный климат | Менее или равно15 °С/ менее или равно 11 гПа | 21 °С/45 %
II | Субтропический или средиземноморский климат | От более 15 °С до 22 °С/ от более 11 гПа до 18 гПа | 25 °С/60 %
III | Жаркий и сухой климат | Более 22 °С/ менее или равно15 гПа | 30 °С/35 %
IV А | Жаркий и влажный климат | Более 22 °С/ более 15 гПа до 27 гПа | 30 °С/65 %
IVВ | Жаркий и очень влажный климат | Более 22 °С/ более 27 гПа | 30 °С/75 %

Для Российской Федерации применимы условия, указанные для климатических зон I и II.

Требования к выбору серий при изучении стабильности

В зависимости от масштаба производства для изучения стабильности рекомендуется использовать промышленные серии лекарственных средств, в установленных случаях допускается использовать опытно-промышленные серии. Информацию о стабильности лабораторных серий лекарственных средств можно использовать только как вспомогательную.

Отбираемые опытно-промышленные серии фармацевтической субстанции должны быть получены с использованием того же пути синтеза, как и промышленные серии, с использованием способа производства, моделирующего окончательный процесс, который будет использоваться при промышленном производстве. Качество фармацевтической субстанции, в целом для серий, отбираемых для изучения стабильности, должно быть репрезентативным в отношении качества фармацевтической субстанции, которая будет производиться в промышленном масштабе.

Производство отбираемых опытно-промышленных серий лекарственного препарата должно моделировать производство промышленных серий и обеспечивать получение лекарственного препарата такого же качества и соответствовать той же спецификации, что и серии, поступающие в обращение. Если возможно, опытно-промышленные серии лекарственного препарата должны быть получены с использованием разных серий фармацевтической субстанции.

Для лекарственных препаратов, имеющих различную дозировку и разную упаковку, исследования стабильности должны быть проведены отдельно для каждой индивидуальной дозировки лекарственной формы и каждого размера и типа упаковки лекарственного препарата, за исключением тех случаев, когда применяют методы сокращённых исследований в соответствии с планом исследования.

При изучении стабильности нового лекарственного средства данные по стабильности должны быть получены, как минимум, для трёх первичных серий. Серии новой фармацевтической субстанции должны быть, по крайней мере, опытно-промышленными. Две из трёх серий нового лекарственного препарата должны быть, как минимум, опытно-промышленные, третья серия может быть меньшей.

При изучении стабильности существующей фармацевтической субстанции должны быть использованы результаты долгосрочных и ускоренных исследований стабильности, по крайней мере, двух промышленных или трёх опытно-промышленных серий.

При выборе серий существующего лекарственного препарата необходимо учитывать свойства лекарственной формы и стабильность используемой фармацевтической субстанции. В случае лекарственных форм с обычным высвобождением (например, твёрдая лекарственная форма с немедленным высвобождением, растворы) и фармацевтических субстанций, о которых известно, что они стабильны, допускается использовать данные при исследовании стабильности, по меньшей мере, двух первичных опытно-промышленных серий.

Относительно лекарственных форм с модифицированным высвобождением (например, лекарственная форма с пролонгированным высвобождением, таблетки, диспергируемые в полости рта, и др.) или фармацевтических субстанций, о которых известно, что они нестабильны, необходимо использовать данные исследования стабильности трёх первичных серий, две из которых должны быть, по крайней мере, опытно-промышленными, третья серия может быть меньшей.

##### Требования к упаковке лекарственных средств при изучении стабильности

Упаковка, укупорочные средства и другие элементы упаковки лекарственного средства при изучении стабильности должны быть идентичны системе упаковки/укупорки, указанной в фармакопейной статье и рекомендованной при обращении лекарственного средства на фармацевтическом рынке, в том числе при хранении и перевозке.

При изучении стабильности фармацевтических субстанций, упаковка которых является крупногабаритной (фляги, бутыли, железные бочки, жестяные барабаны, пакеты полимерные, мешки бумажные трёх- и четырёхслойные и т.д.), допускается использование аналогичной упаковки меньшей ёмкости, достаточной для моделирования условий оригинальной упаковки. Например, если упаковка фармацевтической субстанции, предназначенная для её реализации, представляет собой пакеты, упакованные в фибровые барабаны, то образцы для исследования стабильности могут быть упакованы в пакеты из того же упаковочного материала, помещённые в барабаны меньшего размера, изготовленные из материала, аналогичного или идентичного материалу фибровых барабанов, в которых фармацевтическая субстанция поступает в обращение.

Испытания лекарственных препаратов при изучении стабильности необходимо проводить в потребительской упаковке. Любые испытания лекарственного препарата без первичной упаковки или в упаковке из иных упаковочных материалов, могут составлять полезную часть стрессовых испытаний лекарственной формы или, соответственно, рассматриваться как дополнительная подтверждающая информация.

Если есть вероятность, что на стабильность лекарственного препарата может оказать влияние система упаковки/укупорки, при взаимодействии с содержимым лекарственного препарата (например, при контакте укупорочного средства (пробки), с жидкой лекарственной формой при перевозке), то при изучении стабильности необходимо наряду с исследованием образцов в прямом (вертикальном) положении, исследовать образцы лекарственного средства в перевернутом или горизонтальном положениях, то есть такие образцы, которые контактируют с укупорочным средством (например, пробкой) для определения влияния материала укупорочного средства (пробки) на качество лекарственного препарата. Должны быть зафиксированы все сочетания различных систем упаковки/укупорки исследуемого лекарственного средства при изучении стабильности.

Кроме того, в случае изучения стабильности лекарственных препаратов после вскрытия первичной многодозовой упаковки, необходимо провести исследования, подтверждающие, что пробка, используемая в многодозовой упаковке, способна выдержать условия повторяемого открывания и закрывания и при этом способна полностью обеспечить сохраняемость эффективности, чистоты и качества лекарственного препарата на протяжении периода, указанного в инструкции по медицинскому применению.

##### Периодичность испытаний стабильности

Периодичность проводимых испытаний стабильности новых и существующих лекарственных средств должна быть достаточной для определения характеристик стабильности фармацевтической субстанции или лекарственного препарата. Количество точек контроля результатов испытаний зависит от запланированного метода изучения стабильности и предполагаемого срока годности лекарственного средства (периода до проведения повторных испытаний стабильной фармацевтической субстанции).

Если предполагаемый срок годности лекарственного средства (период до проведения повторных испытаний стабильной фармацевтической субстанции) составляет 12 мес. и более, то исследования стабильности в условиях долгосрочных испытаний, как правило, следует проводить:

- каждые 3 мес. в течение первого года;

- каждые 6 мес. в течение второго года;

- в дальнейшем ежегодно на протяжении всего предлагаемого срока годности (периода до проведения повторных испытаний).

При изучении стабильности в условиях ускоренных испытаний продолжительностью 6 мес. рекомендуется применять не менее трёх точек контроля, включая контроль в начале и при завершении исследований (например, 0, 3 и 6 мес.). Если на основании имеющегося опыта предполагают, что результаты ускоренных испытаний могут вплотную приблизиться к критериям «значительного изменения», то необходимо расширить исследования, увеличив количество образцов в конечной точке контроля, либо включив четвертую точку контроля в план исследования стабильности.

Если из-за «значительного изменения» при изучении стабильности в условиях ускоренных испытаний необходимо проведение промежуточных испытаний, то рекомендуется применять, как минимум, четыре точки контроля, включая контроль в начале и при завершении испытаний (например, 0, 3, 6 и 12 мес.), если продолжительность изучения составляет 12 мес.

Для лекарственных препаратов, при соответствующем обосновании, могут быть применены сокращенные планы исследования стабильности (метод крайних вариантов, матричный метод), в которых частота проведения испытаний может быть уменьшена или когда испытания комбинаций определенных факторов допускается проводить не в полном объёме.

##### Требования к условиям хранения лекарственных средств при изучении стабильности

Лекарственное средство следует изучать в условиях (с соответствующими допустимыми отклонениями), позволяющими исследовать его стабильность к влиянию температуры, и, при необходимости, его чувствительность к воздействию влаги, а для лекарственных препаратов проверить возможность потери растворителя. Выбранные условия исследований должны соответствовать условиям и продолжительности хранения, перевозки и последующего применения лекарственного средства, с учётом климатических условий местности, для реализации в которой предназначен лекарственный препарат.

Условия хранения лекарственных средств при изучении стабильности необходимо отслеживать и регистрировать.

Для изучения стабильности желательно использовать данные долгосрочных испытаний, охватывающие весь период предполагаемого срока годности (периода до проведения повторных испытаний) лекарственного средства.

Если таких данных нет, то для изучения стабильности допускается применять результаты долгосрочных испытаний, проведённых в течение:

- не менее 12 мес. – для новой фармацевтической субстанции, для нового лекарственного препарата и для существующего лекарственного препарата, представляющего собой лекарственную форму с модифицированным высвобождением (например, лекарственная форма с пролонгированным высвобождением; таблетки, диспергируемые в полости рта, и др.) или содержащего фармацевтическую субстанцию, о которой известно, что она нестабильна;

- не менее 6 мес. – для существующей фармацевтической субстанции и для существующего лекарственного препарата, представляющего собой обычную лекарственную форму (например, твёрдая дозированная лекарственная форма с немедленным высвобождением; растворы и др.) или содержащего фармацевтическую субстанцию, о которой известно, что она стабильна.

Во всех случаях изучения имеющихся данных по стабильности долгосрочные испытания необходимо продолжать в течение времени, достаточного для того, чтобы охватить предполагаемый срок годности (период до проведения повторных испытаний) лекарственного средства и дополнительно полученные результаты этих исследований также использовать при изучении стабильности. В установленных случаях могут быть использованы данные, полученные при ускоренных и, если необходимо, промежуточных испытаниях.

В зависимости от климатической зоны, в которой предполагается применение лекарственного средства, выбирают условия хранения при долгосрочных испытаниях в соответствии с данными, приведёнными в табл. 6.

Условия хранения и минимальная продолжительность изучения стабильности лекарственных средств при долгосрочных, ускоренных и, если необходимо, промежуточных испытаниях приведены в табл. 7–10. Могут быть применены и другие условия хранения, если это обосновано.

Общий случай. Если для лекарственного средства не требуются условия хранения, приведённые в табл. 8–10, то при исследовании стабильности должны быть обеспечены условия, указанные в табл. 7.

Таблица 7. Условия испытаний лекарственных средств «Общий случай»
Наименование испытаний | Условия хранения (температура и относительная влажность) | Минимальная продолжительность изучения стабильности на момент применения (месяцы)
--- | --- | ---
Долгосрочные1 | (25±2)°С и (60±5)% или (30±2)°С и (65±5)% или (30±2)°С и (75±5)% | 63 или 124,5
Промежуточные2 | (30±2)°С и (65±5)% | 6
Ускоренные | (40±2) °С и (75±5)% | 6
Примечания: Решение по выбору условий долгосрочных испытаний принимает заявитель. Испытания в неблагоприятных условиях могут быть альтернативными условиям испытаний при температуре (25±2) °С и относительной влажности (60±5) % или температуре (30±2) °С и относительной влажности (65±5) %. Если долгосрочные испытания проводят при температуре (30±2) °С и относительной влажности (65±5) % или при температуре (30±2) °С и относительной влажности (75±5) %, то промежуточные испытания не проводят. Для существующей фармацевтической субстанции и для существующего лекарственного препарата, представляющего собой обычную лекарственную форму или содержащего фармацевтическую субстанцию, о которой известно, что она стабильна. Для новой фармацевтической субстанции, для нового лекарственного препарата и для существующего лекарственного препарата, представляющего собой лекарственную форму с модифицированным высвобождением, или содержащим фармацевтическую субстанцию, о которой известно, что она нестабильна. Предварительный срок годности нового лекарственного препарата не должен превышать более чем в 2 раза период проведения долгосрочных испытаний лекарственного препарата.

Если в течение 6 мес. ускоренных испытаний наблюдается «значительное изменение» в любой момент времени, то необходимо выполнить дополнительно промежуточные испытания в рекомендованных условиях хранения. Результаты должны оцениваться по отношению к критерию «значительное изменение» (это применимо в том случае, если долгосрочные испытания проводят при температуре (25±2) °С и относительной влажности (60±5) %), и включать все исследования долгосрочных испытаний. Промежуточные испытания должны включать исследования всех критериев, если не обосновано иное, и должны быть выполнены, как минимум, в течение 6 мес. (при общей продолжительности исследований 12 мес.).

Хранение в холодильнике. При исследовании стабильности лекарственных средств, предназначенных для хранения в холодильнике, применяют условия, указанные в табл. 8.

Если в условиях ускоренных испытаний лекарственных средств, предназначенных для хранения в холодильнике, в промежуток времени между 3 и 6 мес испытаний наблюдается «значительное изменение», предполагаемый срок годности (период до проведения повторных испытаний) должен быть установлен на основании данных, полученных в реальном времени в условиях долгосрочных испытаний.

Таблица 8. Условия испытаний лекарственных средств, предназначенных для хранения в холодильнике
Наименование испытаний | Условия хранения (температура и относительная влажность) | Минимальная продолжительность изучения стабильности на момент применения (месяцы)
--- | --- | ---
Долгосрочные | (5±3)°С | 62 или 123
Ускоренные1 | (25±2) °С и (60+5) % или (30±2) °С и (65±5) % или (30±2) °С и (75±5) % | 6
Примечания: Выбор условий для ускоренных испытаний основан на оценке рисков. Испытания при неблагоприятных условиях могут быть альтернативой испытанию при температуре (25±2) °С и относительной влажности (60±5) % или температуре (30±2) °С и относительной влажности (65±5) %. Для существующей фармацевтической субстанции и для существующего лекарственного препарата, представляющего собой обычную лекарственную форму или содержащего фармацевтическую субстанцию, о которой известно, что она стабильна. Для новой фармацевтической субстанции, для нового лекарственного препарата и для существующего лекарственного препарата, представляющего собой лекарственную форму с модифицированным высвобождением, или содержащего фармацевтическую субстанцию, о которой известно, что она нестабильна.

Если «значительное изменение» наблюдается в течение первых 3 мес. в условиях ускоренных испытаний, то следует получить информацию о воздействии кратковременных отклонений от условий хранения, указанных в маркировке, которое может иметь место, например, при перевозке. Если целесообразно, рассмотрение данного вопроса должно быть подтверждено дальнейшими исследованиями одной серии лекарственного средства в течение периода менее 3 мес., но при большей, чем обычно, периодичности проведения испытаний. Считается, что нет необходимости продолжать ускоренные испытания лекарственного средства в течение 6 мес., если в течение первых 3 мес. произошло «значительное изменение».

Если лекарственный препарат, предназначенный для хранения в холодильнике, упакован в полупроницаемую упаковку, то дополнительно должны быть получены данные по оценке потери воды.

Хранение в морозильной камере. При исследовании стабильности лекарственных средств, предназначенных для хранения в морозильной камере, применяют условия, указанные в таблице 9.

Таблица 9. Условия испытаний лекарственных средств, предназначенных для хранения в морозильной камере
Наименование испытания | Условия хранения (температура) | Минимальная продолжительность изучения стабильности на момент применения (месяцы)
--- | --- | ---
Долгосрочные | -(20±5)°С | 61 или 122
Примечания: Для существующей фармацевтической субстанции и для существующего лекарственного препарата, представляющего собой обычную лекарственную форму или содержащего фармацевтическую субстанцию, о которой известно, что она стабильна. Для новой фармацевтической субстанции, для нового лекарственного препарата и для существующего лекарственного препарата, представляющего собой лекарственную форму с модифицированным высвобождением, или содержащего фармацевтическую субстанцию, о которой известно, что она нестабильна.

Для лекарственных средств, предназначенных для хранения в морозильной камере, срок годности лекарственного средства (период до проведения повторных испытаний) должен основываться на данных, полученных в реальном времени при хранении в условиях долгосрочных испытаний.

Поскольку условия хранения для ускоренных испытаний новых или существующих лекарственных средств, предназначенных для хранения в морозильной камере, отсутствуют, следует провести испытание на единичной серии лекарственного средства при повышенной температуре (например, (5±3) °С или (25±2) °С или (30±2) °С) в течение подходящего отрезка времени, чтобы изучить воздействие кратковременных отклонений от условий хранения, указанных в маркировке, например, при перевозке.

Хранение ниже –20 °С. Испытания новых и существующих лекарственных средств, подлежащих хранению при температуре
ниже –20 °С, следует проводить в условиях, обоснованных в каждом отдельном случае.

При установлении условий изучения стабильности лекарственных препаратов необходимо учитывать проницаемость рекомендуемой упаковки.

Проницаемость упаковки определяется толщиной и коэффициентом проницаемости. Для лекарственных препаратов, упакованных в герметичную упаковку, чувствительность к действию влаги или возможность потери растворителя не является критичным, так как упаковка обеспечивает постоянный барьер, препятствующий проникновению влаги или потере растворителя, например, алюминиевые тубы, запаянные стеклянные ампулы и др. Поэтому исследования стабильности лекарственных препаратов, которые хранят в герметичной упаковке, могут быть проведены при любых контролируемых условиях или в условиях влажности окружающей среды.

Для лекарственных препаратов на водной основе, упакованных в полупроницаемую упаковку, в дополнение к изучению физической, химической, биологической и/или микробиологической стабильности, необходимо оценить возможную степень потери воды.

Испытание лекарственных препаратов, упакованных в полупроницаемую упаковку, следует проводить в условиях хранения при сниженной относительной влажности (табл. 10). Необходимо доказать, что лекарственные препараты, хранящиеся в полупроницаемой упаковке, могут выдерживать условия хранения при низкой относительной влажности.

Для лекарственных препаратов, содержащих другие (неводные) растворители рекомендуется разрабатывать и применять сопоставимые подходы к изучению стабильности.

Таблица 10. Условия испытаний лекарственных средств, упакованных в полупроницаемую упаковку
Наименование испытаний | Условия хранения (температура и относительная влажность) | Минимальная продолжительность изучения стабильности на момент применения (месяцы)
--- | --- | ---
Долгосрочные1 | (25±2) °С и (40±5) % или (30±2) °С и (35±5) % | 63 или 124
Промежуточные2 | (30±2) °С и (35±5) % | 6
Ускоренные | (40±2) °С и не более 25 % | 6
Примечания: Решение по выбору условий долгосрочных испытаний принимает заявитель. Испытания при температуре (30±2) °С и относительной влажности (35±5) % могут быть альтернативными испытаниям при температуре (25±2) °С и относительной влажности (40±5) %. Если долгосрочные испытания проводят при температуре (30±2) °С и относительной влажности (35±5) %, то промежуточные испытания в этом случае не проводят. Для существующего лекарственного препарата, представляющего собой обычную лекарственную форму или содержащего фармацевтическую субстанцию, о которой известно, что она стабильна. Для нового лекарственного препарата и для существующего лекарственного препарата, представляющего собой лекарственную форму с модифицированным высвобождением, или содержащего фармацевтическую субстанцию, о которой известно, что она нестабильна.

Если в условиях ускоренных испытаний новых и существующих лекарственных препаратов, упакованных в полупроницаемую упаковку, в течение 6 мес. хранения наблюдается «значительное изменение», не связанное с потерей воды, следует провести дополнительные промежуточные испытания в условиях, указанных в табл. 7 «Общий случай» с целью оценки влияния температуры (30±2) °С.

Если при ускоренных испытаниях в течение 6 мес. хранения наблюдается «значительное изменение» только по показателю «Потеря воды», то нет необходимости проводить промежуточные испытания. Вместе с тем, необходимо установить данные, доказывающие, что в данном лекарственном препарате нет «значительного изменения» по показателю «Потеря воды» в течение предлагаемого срока хранения при температуре (25±2) °С и относительной влажности (40±5) %) или при температуре (30±2) °С и относительной влажности (35±5) %).

Если при ускоренных испытаниях наблюдается «значительное изменение» по показателю «Потеря воды» и другого показателя, а долгосрочные испытания проводятся при температуре (25±2) °С и относительной влажности (40±5) %), то необходимо провести дополнительно промежуточные испытания для оценки температурного эффекта при температуре (30±2) °С и относительной влажности (65±5) %).

Для нового или существующего лекарственного препарата, упакованного в полупроницаемую упаковку, после хранения в течение 3 мес. при температуре 40 °С и относительной влажности не более 25 % «значительным изменением» считается потеря воды, составляющая 5 % от изначального её содержания. Тем не менее, для упаковок вместимостью 1 мл или менее 1 мл, или для лекарственных препаратов в однодозовой упаковке, могут быть допустимы потери воды на 5 % или более при хранения в течение 3 мес. при температуре 40 °С и относительной влажности не более 25 %.

Альтернативным подходом изучения стабильности при низкой относительной влажности в условиях, рекомендованных в табл. 5, является изучение стабильности при более высокой относительной влажности, например, 60–75 %, и определение путём расчётов потери воды при низкой влажности. С этой целью экспериментальным путём определяют коэффициент проницаемости для системы упаковка/укупорочное средство или используют расчётный коэффициент потери воды во время испытания при двух различных значениях относительной влажности, но при одной и той же температуре. Коэффициент проницаемости для системы упаковка/укупорка может быть определён экспериментально с использованием условий «наихудшего случая» для исследуемого лекарственного препарата, например, в ряду лекарственных препаратов с разной концентрацией одного и того же действующего вещества для изучений выбирают лекарственный препарат с наименьшей концентрацией.

##### Обязательство продолжения программы изучения стабильности

Для изучения стабильности и установления срока годности (периода до проведения повторных испытаний) новых и существующих лекарственных средств могут быть использованы данные, охватывающие или не охватывающие период, равный предполагаемому сроку годности (периоду до проведения повторных испытаний) лекарственного средства.

Если имеются данные долгосрочных испытаний стабильности для трёх промышленных серий, охватывающие период, равный предлагаемому сроку годности (периоду до проведения повторных испытаний) лекарственного средства, то нет необходимости принимать обязательство проводить дальнейшее изучение стабильности.

Если имеющиеся данные долгосрочных испытаний стабильности не охватывают весь предлагаемый срок годности (предполагаемый период до проведения повторных испытаний) лекарственного средства, то следует принять обязательство продолжить изучение стабильности, чтобы точно и окончательно установить срок годности (период до проведения повторных испытаний) лекарственного средства.

Должно быть принято одно из следующих обязательств:

- 1) если имеются данные долгосрочных испытаний стабильности, как минимум, для трёх промышленных серий, необходимо принять обязательство продолжать эти испытания в течение всего предлагаемого срока годности (периода до проведения повторных испытаний);

- 2) если имеются данные долгосрочных испытаний стабильности менее чем для трёх промышленных серий лекарственного средства, то принимают обязательство продолжать испытания стабильности для этих серий в течение всего предполагаемого срока годности (периода до проведения повторных испытаний), кроме того, провести аналогичные долгосрочные испытания дополнительных промышленных серий на протяжении всего предполагаемого срока годности (периода до проведения повторных испытаний), а также дополнительно для лекарственных препаратов - провести ускоренные испытания в течение 6 мес. Таким образом, суммарное количество серий должно составить, по крайней мере, три, и они должны быть исследованы на протяжении всего предполагаемого срока годности (периода до проведения повторных испытаний);

- 3) если данных по стабильности промышленных серий лекарственного средства не имеется, то следует принять обязательство провести долгосрочные испытания стабильности исходных трёх промышленных серий в течение предполагаемого срока годности (предполагаемого периода до проведения повторных испытаний) и дополнительно для лекарственных препаратов провести ускоренные испытания в течение 6 мес.

##### Последующее изучение стабильности лекарственных средств

После регистрации лекарственного средства и выпуска его в обращение на фармацевтический рынок производитель (разработчик) обязан продолжить работу по изучению стабильности лекарственного средства с целью подтверждения, что все дальнейшие серии лекарственного средства будут соответствовать спецификации (требованиям фармакопейной статьи) при соблюдении условий хранения, указанных в маркировке, в течение установленного срока годности (периода до проведения повторных испытаний).

Количество серий лекарственного средства и периодичность испытаний должны обеспечивать достаточный объём данных для проведения анализа тенденций изменения. Для последующего изучения стабильности необходимо не менее одного раза в год использовать, как минимум, одну произведённую серию фармацевтической субстанции или одну серию произведённого лекарственного препарата в каждой дозировке и в каждом виде первичной упаковки, за исключением тех случаев, когда производственные серии лекарственных средств в данном году не выпускались. В некоторых случаях в последующее изучение стабильности могут быть включены дополнительные серии лекарственного средства.

Последующее изучение стабильности должно обеспечивать выявление любых изменений стабильности (например, изменения количества продуктов деградации, изменение скорости растворения и др.). Любое подтверждённое «значительное изменение», не соответствующие спецификации результаты испытаний или нетипичные тенденции должны быть проанализированы.

##### Особенности изучения стабильности отдельных лекарственных средств

Особенности изучения стабильности лекарственных препаратов

Изучение стабильности новых лекарственных форм. Новая лекарственная форма определяется как лекарственный препарат, который является другим видом фармацевтической продукции, но содержит то же действующее вещество (вещества), что и зарегистрированный в установленном порядке лекарственный препарат, находящийся в обращении на фармацевтическом рынке.

К таким видам фармацевтической продукции относят:

- лекарственные препараты, имеющие другой путь/способ введения/применения (например, приём внутрь в отличие от парентерального применения);

- лекарственные препараты, имеющие одинаковый путь/способ введения/применения, но в другой лекарственной форме (например, капсулы в отличие от таблеток, раствор в отличие от суспензии);

- лекарственные препараты с новыми особенными функциональными свойствами или системой доставки (например, таблетки с обычным высвобождением в отличие от таблеток с модифицированным высвобождением).

Изучение стабильности лекарственных препаратов в новых лекарственных формах осуществляется в основном так же, как для новых лекарственных препаратов.

Изучение стабильности лекарственных препаратов во время их применения после вскрытия первичной многодозовой упаковки. Лекарственные препараты в многодозовой упаковке после первого вскрытия системы укупоривания и последующего многократного открывания и закрывания упаковки во время применения, могут создавать риски для находящегося в них содержимого из-за микробиологической контаминации, пролиферации и/или физико-химического разложения.

Целью изучения стабильности лекарственного препарата во время его применения является установление периода, в течение которого после первого вскрытия системы укупоривания первичной многодозовой упаковки лекарственного препарата его качество будет соответствовать требованиям фармакопейной статьи и его можно применять по назначению.

Полученные данные по стабильности лекарственного препарата в многодозовой упаковке во время его применения необходимы для обоснования предполагаемого срока хранения во время применения или для обоснования, почему срок хранения во время применения лекарственного препарата не устанавливается.

Испытания следует проводить, как минимум, на двух опытно-промышленных сериях, при этом, по меньшей мере, срок хранения одной из выбранных серий лекарственного препарата должен подходить к концу.

Испытания должно, насколько возможно, моделировать применение лекарственного препарата пациентом, учитывая наполнение упаковки и любые разведения или подготовку перед использованием. Через интервалы времени, сопоставимые с интервалами времени при применении, удаляют из упаковки соответствующие количества лекарственного препарата, применяя методы извлечения, используемые обычно при применении и описанные в инструкции по медицинскому применению. Отбор проб следует проводить в условиях окружающей среды, при которых лекарственный препарат применяется.

Во время испытаний лекарственный препарат следует хранить в условиях, указанных в фармакопейной статье и в маркировке упаковки.

Лекарственный препарат следует контролировать на соответствие требованиям фармакопейной статьи по всем показателям качества, которые подвержены изменениям при хранении во время применения лекарственного препарата (например, цвет; прозрачность; механические включения; размер частиц; количественное определение действующих веществ, антимикробных консервантов и антиоксидантов; родственные примеси и др.) с обязательным контролем на микробиологическую чистоту или стерильность.

Исследуют образцы, отобранные в начальной точке вскрытия, если возможно, в промежуточных точках контроля, а также в конечной точке предполагаемого периода применения (срока годности после вскрытия упаковки) лекарственного препарата, используя оставшееся в упаковке количество лекарственного препарата.

На сериях лекарственного препарата, исследуемых в соответствии с обязательством продолжения изучения стабильности, исследования не повторяют.

Изучение стабильности лекарственных препаратов после разведения/восстановления или подготовки к применению. Необходимо проводить изучение стабильности лекарственных препаратов, полученных после специальной подготовки к применению путём разведения жидкого лекарственного препарата соответствующим растворителем (например, в виде лекарственной формы «концентрат») или путём восстановления (растворения или диспергирования в соответствующем растворителе) твёрдого лекарственного препарата (например, в виде лекарственных форм «таблетки», «порошки», «гранулы», «лиофилизаты»), и предназначенных для применения в течение определенного времени в виде разбавленного/восстановленного лекарственного препарата.

Цель изучения стабильности разбавленных/восстановленных лекарственных препаратов – определить максимальный период их применения (срок годности) после разведения/восстановления (после подготовки к применению), в течение которого качество разбавленного/восстановленного лекарственного препарата будет соответствовать требованиям фармакопейной статьи.

Изучению стабильности подлежат все разбавленные/восстановленные лекарственные препараты, полученные с использованием всех возможных для процесса растворения/восстановления растворителей или диспергентов, указанных в инструкции по медицинскому применению.

Условия хранения разбавленного/восстановленного лекарственного препарата могут отличаться от условий хранения исходного лекарственного препарата.

Испытания следует проводить, как минимум, на двух опытно-промышленных сериях, при этом, по крайней мере, одна выбранная серия лекарственного препарата должна быть с истекающим сроком годности.

Проверку показателей на соответствие требованиям фармакопейной статьи рекомендуется осуществлять в первую и последнюю временные точки предполагаемого срока годности разбавленного/восстановленного лекарственного препарата.

Испытания проводят по всем показателям качества, которые подвержены изменениям в процессе хранения и обязательно включают контроль на стерильность или микробиологическую чистоту.

Условия и период хранения (срок годности) отдельных категорий стерильных лекарственных препаратов после первого вскрытия упаковки, разведения/восстановления содержимого и, если допустимо, хранения лекарственного препарата до введения пациенту, зависят от наличия антимикробных консервантов в составе препарата и условий введения.

Стерильные лекарственные препараты на водной основе, не содержащие консервантов, как правило, должны вводиться сразу после разведения/восстановления. При наличии особых указаний в инструкции по медицинскому применению, например, об асептическом способе разведения/восстановления, может допускаться определённый период хранения указанных лекарственных препаратов, при этом он должен быть обоснован предоставлением соответствующих данных.

Изучение стабильности необходимо проводить также для стерильных лекарственных препаратов на водной основе, содержащих антимикробные консерванты, а также неводных препаратов, например, масляных, если в инструкции по медицинскому применению указан максимально допустимый период применения и условия хранения лекарственного препарата после вскрытия.

##### Особенности изучения стабильности лекарственных средств растительного происхождения

Под термином «Лекарственное средство растительного происхождения», используемого только для данного раздела общей фармакопейной статьи, подразумеваются лекарственные средства, представляющие собой фармацевтические субстанции растительного происхождения, в том числе, стандартизованное лекарственное растительное сырьё, экстракты, настойки, масла растительные жирные, масла эфирные, соки и т.д., а также лекарственные препараты, полученные на их основе.

Для изучения стабильности лекарственных средств растительного происхождения необходимо использовать данные долгосрочных испытаний, охватывающие весь период предполагаемого срока годности.

При изучении стабильности лекарственных средств растительного происхождения следует, используя соответствующий валидированный метод анализа, исследовать изменение содержания основного показателя, то есть изменение содержания биологически активных веществ.

Вместе с тем, следует изучить, насколько это возможно, изменение содержания других веществ, присутствующих в лекарственном средстве растительного происхождения.

Если лекарственное средство растительного происхождения содержит комбинацию нескольких групп биологически активных веществ растительного происхождения и возможность изучения стабильности каждой группы биологически активных веществ отсутствует, то определять стабильность лекарственного средства растительного происхождения можно с помощью набора соответствующих методов. Использование аналитического метода должно быть обосновано.

Если это обосновано, при исследовании стабильности отклонение содержания биологически активных веществ в лекарственном средстве растительного происхождения от заявленного, не должно быть больше, чем:

- ±5 % у известного активного компонента (в случае, если компонент с известной терапевтической активностью известен),

- ±10 % у маркера (в случае, если компоненты с известной терапевтической активностью неизвестны).

В случае лекарственных средств растительного происхождения, содержащих витамины и/или минералы, стабильность витаминов и/или минералов должна быть продемонстрирована.

При изучении стабильности лекарственных средств растительного происхождения применимы общие требования к выбору серий, периодичности испытаний, условиям хранения.

Вместе с тем, для существующих лекарственных средств растительного происхождения, относительно которых имеются данные по стабильности за определенный период, при наличии обоснования, частота испытаний может быть уменьшена.

При выборе условий хранения при изучении стабильности существующего лекарственного средства растительного происхождения, которое предполагается хранить при температуре не выше +25 °С (общий случай), ускоренные и промежуточные испытания могут не проводиться, если это будет обосновано, и если в маркировке будут чётко указаны условия хранения при температуре не выше +25 °С.

##### Особенности изучения стабильности гомеопатических лекарственных средств

Для изучения стабильности гомеопатических лекарственных средств необходимо использовать данные долгосрочных испытаний, охватывающие весь период предполагаемого срока годности гомеопатического лекарственного средства.

Выбор показателей качества и методов анализа при изучении стабильности гомеопатических лекарственных средств определяется специфическими свойствами его активного действующего компонента. Действующее вещество/компонент гомеопатического лекарственного средства может быть различного происхождения: биологического, растительного, минерального, синтетического.

При изучении стабильности гомеопатических лекарственных средств следует руководствоваться общими требованиями и учитывать особенности изучения стабильности биологических лекарственных средств, лекарственных растительных препаратов, лекарственных средств химического, минерального происхождения и др.

##### Оценка данных по стабильности при установлении срока годности (периода до проведения повторных испытаний) лекарственных средств

Срок годности (период до проведения повторных испытаний) устанавливается на основании экспериментально полученных данных при изучении стабильности, как минимум, трёх серий лекарственного средства в течение определенного периода времени в установленных оптимальных условиях хранения и рекомендованной надлежащей упаковке.

Экспериментально установленный срок годности (период до проведения повторных испытаний) будет применим для всех серий, которые будут впоследствии произведены и упакованы при одинаковых условиях. Степень вариабельности отдельных серий должна обеспечивать уверенность в том, что произведенные впоследствии промышленные серии лекарственного средства будут соответствовать требованиям спецификации в течение установленного срока годности (периода до проведения повторных испытаний).

Производитель (разработчик) лекарственного средства определяет предполагаемый (предварительный, первоначальный) срок годности (предполагаемый период до проведения повторных испытаний) лекарственного средства – срок годности (период до проведения повторных испытаний), установленный временно на основании приемлемых результатов ускоренных испытаний и имеющихся данных долгосрочных испытаний лекарственного средства в упаковке, предназначенной для реализации.

Срок годности лекарственных препаратов устанавливают независимо от сроков годности фармацевтических субстанций. Однако для лекарственных препаратов, произведенных путем фасовки фармацевтических субстанций, следует учитывать, что стабильность лекарственных препаратов может зависеть от остаточного срока годности используемой фармацевтической субстанции.

Под остаточным сроком годности подразумевается период времени, оставшийся до окончания установленного срока годности лекарственного средства.

Также необходимо учитывать и оценивать влияние на стабильность лекарственных препаратов факторов длительности и условий хранения нерасфасованной и промежуточной продукции до передачи с одного производственного участка на другой или на участок упаковки.

Оценка данных по стабильности при установлении срока годности (периода до проведения повторных испытаний) лекарственного средства, включает, в зависимости от ситуации, результаты физических, химических, физико-химических, биологических и микробиологических испытаний, а также специфических характеристик лекарственной формы (например, время растворения твёрдых лекарственных форм для применения внутрь и др.).

Допускается не включать в планы исследования стабильности лекарственного средства испытания по показателям, которые не изменяются в процессе хранения, а также испытания по показателям, изменения которых в процессе хранения не происходят в сторону ухудшения качества лекарственного средства.

Вместе с тем, для некоторых лекарственных препаратов в таких лекарственных формах, как растворы, суспензии, эмульсии и др., при необходимости должны быть проведены исследования по изучению влияния на их стабильность отрицательных температур (циклы замораживания и оттаивания).

Важно, чтобы лекарственное средство было разработано и производилось таким образом, чтобы количество действующего вещества на момент выпуска серии составляло 100 % от указанного на этикетке. Если результаты количественного определения на момент выпуска серии превышают 100 % от указанного на этикетке значения, то предполагаемый срок годности (предполагаемый период до проведения повторных испытаний) может быть завышен. С другой стороны, если результаты количественного определения на момент выпуска серии ниже 100 % от указанного на этикетке значения, количество действующего вещества может оказаться меньше нижнего критерия приемлемости еще до окончания предполагаемого срока годности (предполагаемого периода до проведения повторных испытаний).

Если данные испытаний стабильности свидетельствуют о настолько незначительном разложении и настолько низкой вариабельности, что уже при их рассмотрении, очевидно, что предполагаемый срок годности (предполагаемый период до проведения повторных испытаний) будет утверждён, то, как правило, нет необходимости в проведении формального статистического анализа; достаточно обосновать отсутствие такого анализа.

Приемлемый подход к оценке данных при установлении срока годности (периода до проведения повторных испытаний) заключается в проведении анализа относительно количественного показателя (например, количественного содержания, содержания продуктов разложения), посредством определения самого раннего момента времени, при котором усредненная кривая разложения (при доверительной вероятности 95 %) пересекается с допустимым нижним критерием приемлемости, установленным в спецификации на выпуск.

Если известно, что значение оцениваемого показателя уменьшается во времени, то с критерием приемлемости следует сравнивать нижнее граничное значение, вычисленное с доверительной вероятностью 95 %. Если известно, что значение оцениваемого показателя увеличивается во времени, то с критерием приемлемости следует сравнивать верхнее граничное значение, вычисленное с доверительной вероятностью 95 %. Если известно, что значение оцениваемого показателя может, как увеличиваться, так и уменьшаться, или направление его изменения неизвестно, следует вычислить с доверительной вероятностью 95 % нижнее и верхнее граничные значения и сравнить их с верхним и нижним пределами критерия приемлемости.

Если анализ показывает, что вариабельность от серии к серии невелика, то можно объединить результаты для одной общей оценки, используя методы статистического анализа.

Если объединение данных нескольких серий нецелесообразно, то срок годности (период до проведения повторных испытаний) будет зависеть от минимального времени, в течение которого предполагается, что характеристики серии будут оставаться в рамках критериев приемлемости.

Характер любой взаимосвязи с разложением веществ будет определять необходимость в преобразовании данных для анализа линейной регрессии. Как правило, взаимосвязь может быть представлена в виде линейной, квадратичной или кубической функции на арифметической или логарифмической шкале. Чтобы проверить пригодность данных, полученных в отношении каждой серии, а также, если необходимо, объединённых данных для серий, следует применять статистические методы для построения прямой и кривой разложения.

В целях увеличения предполагаемого срока годности (увеличения предполагаемого периода до проведения повторных испытаний) лекарственных средств, при наличии соответствующего обоснования, может быть проведена ограниченная экстраполяция данных, полученных при долгосрочных испытаниях, за пределы наблюдаемого диапазона.

Для лекарственных препаратов не рекомендуется устанавливать срок годности более 5 лет, даже если результаты изучения стабильности позволяют это сделать.

При любой оценке данных следует учитывать не только количественное определение лекарственного средства, но и содержание продуктов разложения, баланс масс (при необходимости) и другие подходящие характеристики.

На основании полученных результатов производитель (разработчик), изучающий стабильность лекарственного средства, определяет срок годности (период до проведения повторных испытаний) с указанием вида упаковки, требуемых условий хранения и перевозке и вносит эти данные в регистрационные документы.

Отсчёт срока годности (периода до проведения повторных испытаний) промышленной серии лекарственного средства проводят от даты выдачи разрешения на её реализацию (даты выпуска). При нормальных обстоятельствах период до даты выдачи такого разрешения не должен превышать 30 сут от даты производства.

Если разрешение на реализацию серии лекарственного средства выдано по истечении установленных 30 сут от даты производства, то началом отсчёта срока годности лекарственного средства следует считать дату производства.

После регистрации лекарственного средства и начала промышленного выпуска производитель (разработчик) обязан продолжить работу по изучению стабильности лекарственного средства с целью подтверждения или уточнения его срока годности (периода до проведения повторных испытаний).

По мере накопления данных срок годности (период до проведения повторных испытаний) лекарственного средства может быть изменен как в сторону увеличения, так и в сторону уменьшения предварительного срока годности. Изменение срока годности (периода до проведения повторных испытаний) лекарственного средства или условий его хранения утверждается в установленном порядке на основании данных, подтверждающих обоснованность заявленных изменений.

Экстраполяция − это практика использования совокупности имеющихся данных для того, чтобы сделать предположение относительно будущих данных.

Экстраполяцию проводят с помощью статистической обработки данных. В случае если полученные данные свидетельствуют о незначительной деградации и малой вариации, статистический анализ может не проводиться.

Целесообразность использования метода экстраполяции при оценке данных по стабильности лекарственных средств зависит от объема знаний о характере изменений, включая механизм деградации лекарственного средства, пригодности данных выбранной математической модели, результатов ускоренных испытаний, размера серии, наличии соответствующих вспомогательных данных и др.

Экстраполяция может быть предложена для увеличения срока годности (увеличения периода до проведения повторных испытаний) лекарственного средства, превышающего продолжительность долгосрочных испытаний, особенно если при ускоренных испытаниях не наблюдалось «значительного изменения». Экстраполяция должна быть проведена таким образом, чтобы увеличенный (расширенный) срок годности (увеличенный период до проведения повторных испытаний) был правомерен для произведенной в будущем серии лекарственного средства при условии, что результаты испытаний этой серии лекарственного средства будут близки к критериям приемлемости, установленным на момент выпуска.

При экстраполяции данных по стабильности предполагается, что и далее, за пределами долгосрочных испытаний (для которых имеются данные), будет сохраняться такой же характер изменения. При применении экстраполяции правильность предположения характера изменения является критической.

Используя метод экстраполяции, предполагаемый срок годности (предполагаемый период до проведения повторных испытаний) лекарственного средства может быть увеличен, но не более чем в два раза и не более чем на 12 мес. по сравнению с долгосрочными испытаниями.

Если при изучении стабильности предполагается в дальнейшем применение метода экстраполяции, то при долгосрочных испытаниях должны быть проведены дополнительные исследования стабильности лекарственных средств при температурах, превышающих верхнюю заявленную температуру хранения на 5 °C и 15 °C (например, при 30 °C и при 40 °C, если заявленные условия хранения – «Хранить при температуре не выше 25 °С»). При наличии «значительных изменений» в течение 6 мес. в указанных условиях экстраполяция не допускается.

Предложенный на основании экстраполяции срок годности (период до проведения повторных испытаний) всегда должен быть подтверждён дополнительными данными долгосрочных испытаний стабильности по мере получения таких данных в течение всего заявленного срока годности (периода до проведения повторных испытаний).

##### Оценка данных по стабильности при декларировании условий хранения и указаний по маркировке лекарственных средств

Условия хранения лекарственного средства должны быть установлены на основании оценки данных по изучению стабильности лекарственного средства при долгосрочных испытаниях, подтверждённых результатами ускоренных испытаний и, если применимо, результатами промежуточных испытаний.

Установленные условия хранения лекарственного средства должны быть включены в фармакопейную статью, нормативную документацию, в инструкцию по медицинскому применению (для лекарственных препаратов), отображены в маркировке лекарственного средства.

Для декларирования условий хранения лекарственных средств необходимо использовать унифицированные, стандартные формулировки, при этом предложенные условия хранения должны быть достижимы на практике, чтобы потребитель мог их соблюдать.

Указание условий хранения не может быть использовано для компенсации недостаточных данных по стабильности, например, в случае отсутствия данных по ускоренным и промежуточным испытаниям.

При выборе терминов для декларирования условий хранения лекарственных средств неприемлемо использование таких формулировок, как «комнатная температура», «прохладное место», «холодное место», «условия окружающей среды». Основные рекомендуемые формулировки указаний по маркировке лекарственных средств, связанных с декларированием условий хранения, приведены в табл. 11.

Таблица 11. Указания по маркировке лекарственных средств в зависимости от условий проведения испытаний стабильности
Условия проведения испытаний, при которых подтверждена стабильность (температура/относительная влажность) | Указание по маркировке | Дополнительное указание в маркировке1 (если необходимо)
--- | --- | ---
Долгосрочные испытания при (25±2)°С и (60±5)% и ускоренные при (40±2)°С и (75±5)% | Нет3 | «Не хранить в холодильнике» или «Не замораживать»
Долгосрочные испытания при (30±2)°С и (65±5)% и ускоренные при (40±2)°С и (75±5)% | Нет3 | «Не хранить в холодильнике» или «Не замораживать»
Долгосрочные испытания при (25±2)°С и (60±5)% и промежуточные при (30±2)°С и (60±5)% или (65±5)% | «Хранить при температуре не выше 30 °С» | «Не хранить в холодильнике» или «Не замораживать»
Долгосрочные испытания при (30±2)°С и (65±5)% | «Хранить при температуре не выше 30 °С» | «Не хранить в холодильнике» или «Не замораживать»
Долгосрочные испытания при (25±2)°С и (60±5)% | «Хранить при температуре не выше 25 °С» | «Не хранить в холодильнике» или «Не замораживать»
Долгосрочные испытания (5±3) °С | «Хранить в холодильнике» или «Хранить и перевозить в холодильнике»^2, 4^ | «Не замораживать»
Ниже 0 °С | «Хранить в морозильной камере» или «Хранить и перевозить в морозильной камере»2,5 |
Примечания: В зависимости от лекарственной формы и свойств лекарственного средства может возникнуть опасность снижения качества вследствие физических изменений при воздействии низких температур. Также в некоторых случаях низкие температуры могут оказывать воздействие на упаковку. Чтобы обратить внимание на такую возможность, может понадобиться дополнительное указание в маркировке. Должен быть указан температурный диапазон (например, «Хранить при температуре от 2 °С до 8 °С»). Должно быть указание: «Не требует специальных условий хранения». При принятии решения о необходимости перевозить в холодильнике следует учитывать данные по стабильности, полученные при долгосрочных испытаниях при температуре (25±2) °С и относительной влажности (60±5)%. Такое указание следует использовать в исключительных случаях. Такое указание следует использовать, только если это необходимо.

Другие указания в маркировке допускаются только в тех случаях, если этого нельзя избежать, а также, если обосновано, что приведённые в табл. 11 основные условия хранения являются неподходящими. Альтернативное предложение по указанию условий хранения лекарственного средства должно быть обосновано и подтверждено соответствующими данными.

Если необходимо, должны быть указаны специальные требования, особенно для лекарственных средств, которые нельзя замораживать или которые чувствительны к температурным отклонениям. Для лекарственных средств, подлежащих хранению и/или перевозке в холодильнике или морозильной камере, в маркировке необходимо указывать диапазон температур. Определения, характеризующие температурные режимы хранения лекарственных средств, указаны также в ОФС «Хранение лекарственных средств».

Если в ходе испытаний выявлена чувствительность лекарственного средства к воздействию влаги, то маркировка лекарственного средства должна содержать указание «Хранить в сухом месте».

Маркировка лекарственных средств, неустойчивость которых к воздействию света установлена при исследовании фотостабильности в ходе стрессовых испытаний, должна содержать указание «Хранить в защищённом от света месте».

В маркировке упаковки должна быть указана дата истечения срока годности (дата проведения повторных испытаний), установленная на основании оценки данных по стабильности.

Следует указывать период применения (срок годности) для лекарственных препаратов в многодозовой упаковке – после первого вскрытия упаковки, для разбавленных и восстановленных лекарственных препаратов — после разведения/восстановления (после подготовки к применению). Период применения лекарственного препарата и рекомендации по хранению лекарственного препарата во время применения (если необходимо) следует указывать в тексте маркировки потребительской упаковки и в инструкции по медицинскому применению.

При изучении стабильности должны быть установлены оптимальные требования к выбору упаковки, укупорочных средств и, если необходимо, других элементов упаковки для конкретного лекарственного средства. Критерии выбора упаковки указаны также в ОФС «Упаковка лекарственных средств».

Лекарственное средство следует помещать в упаковку, обеспечивающую стабильность и предотвращающую снижение его качества.

Указание в маркировке специальных условий хранения не следует использовать для компенсации неправильно выбранной системы упаковки/укупорки худшего качества. Тем не менее, чтобы подчеркнуть необходимость специальных мер предосторожности при выполнении условий хранения, в маркировке могут быть применены соответствующие указания, касающиеся использования упаковки, защищающей от факторов внешнего воздействия, например, «Хранить в плотно укупоренной упаковке», «Хранить во влагонепроницаемой упаковке», «Хранить в светозащитной упаковке» и др.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0010 Хранение лекарственных средств

Взамен ОФС.1.1.0010.18

Настоящая общая фармакопейная статья устанавливает общие требования к хранению лекарственных средств (фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов) и вспомогательных веществ.

Хранение лекарственных средств и вспомогательных веществ до момента их использования в пределах установленного срока годности, является составной частью обращения лекарственных средств. Хранение должно осуществляться в соответствии с заранее определёнными условиями (температура, влажность и т.п.), подтверждёнными данными по стабильности и указанными на упаковке.

##### Область применения

Требования настоящей общей фармакопейной статьи распространяются на процесс хранения лекарственных средств и вспомогательных веществ во всех субъектах обращения лекарственных средств, с учётом вида деятельности организации.

Требования настоящей общей фармакопейной статьи не распространяются на лекарственное растительное сырьё и лекарственные растительные препараты.

##### Общие требования

Хранение лекарственных средств и вспомогательных веществ должно осуществляться в предназначенных для этих целей помещениях. Устройство, состав, размеры площадей помещений для хранения, их эксплуатация и оборудование должны обеспечивать надлежащие условия хранения различных групп лекарственных средств и вспомогательных веществ.

Комплекс помещений для хранения должен включать:

- помещение (зону) приёмки, предназначенную для распаковки и приёма упаковок с лекарственными средствами и вспомогательными веществами и их предварительного осмотра;

- помещение (зону) для отбора проб лекарственных средств и вспомогательных веществ (ОФС «Отбор проб»);

- помещение (зону, оборудование) для карантинного хранения лекарственных средств;

- помещения (оборудование) для лекарственных средств и вспомогательных веществ, требующих особых условий хранения;

- помещение (зону, оборудование) для хранения забракованных и/или отозванных и/или лекарственных средств и вспомогательных веществ с истёкшим сроком годности.

Места хранения лекарственных средств и вспомогательных веществ должны быть идентифицированы.

Зона хранения выделяется в общем помещении для хранения при отсутствии отдельного изолированного помещения.

Отделка помещений для хранения лекарственных средств и вспомогательных веществ должна отвечать действующим санитарно-гигиеническим требованиям, внутренние поверхности стен и потолков должны допускать возможность проведения влажной уборки.

В каждом помещении для хранения необходимо поддерживать климатический режим, указанный в фармакопейной статье и на упаковке в соответствии с требованиями ОФС «Стабильность и сроки годности лекарственных средств». Необходимый воздухообмен в помещениях для хранения создаётся с помощью кондиционеров, приточно-вытяжной вентиляции или другого оборудования. Естественное и искусственное освещение в помещениях для хранения должно обеспечивать точное и безопасное осуществление всех выполняемых в помещении операций. При необходимости должна быть обеспечена защита лекарственных средств и вспомогательных веществ от воздействия прямых солнечных лучей.

Помещения для хранения лекарственных средств и вспомогательных веществ должны быть оснащены необходимым оборудованием (термометрами, гигрометрами, психрометрами и др.), относящимся к средствам измерений. Контроль и регистрация температуры и влажности должны осуществляться не реже 1 раза в сутки. Пределы допускаемой абсолютной погрешности для электронных температурных датчиков должны быть ±0,5 °С, для всех остальных ±1 °С, для приборов контроля влажности пределы допускаемой относительной погрешности должны быть не более ±5 %.

Оборудование, относящееся к средствам измерений, до ввода в эксплуатацию, а также после ремонта подлежит первичной поверке и/или калибровке, а в процессе эксплуатации – периодической поверке и/или калибровке в соответствии с требованиями законодательства Российской Федерации об обеспечении единства измерений.

Оборудование, относящееся к средствам измерений, для контроля температуры размещается в помещениях (зонах, оборудовании) в соответствии с результатами температурного картирования, на основании проведенного анализа и оценки рисков.

В помещениях (зонах, оборудовании) для хранения лекарственные средства и вспомогательные вещества размещают в соответствии с условиями хранения, указанными в фармакопейной статье и на упаковке в соответствии с требованиями ОФС «Стабильность и сроки годности лекарственных средств», с учётом:

- физико-химических свойств лекарственных средств;

- фармакологических групп (для аптечных и медицинских организаций);

- способа применения (внутреннее, наружное);

- агрегатного состояния фармацевтических субстанций (жидкие, сыпучие, газообразные).

При размещении лекарственных средств допускается использование компьютерных технологий (по алфавитному принципу, по кодам).

Лекарственные средства в помещениях для хранения должны размещаться в шкафах, на стеллажах, подтоварниках, поддонах и др. Не допускается размещение лекарственных средств на полу без поддона.

Хранение лекарственных средств и вспомогательных веществ осуществляется при относительной влажности не более 65 % с учётом соответствующей климатической зоны (I, II, III, IVА, IVВ) (ОФС «Стабильность и сроки годности лекарственных средств»), если специальные условия хранения не указаны в фармакопейных статьях и на упаковке.

Лекарственные средства и вспомогательные вещества следует хранить так, чтобы не допустить их загрязнения, смешивания и перекрёстной контаминации. Необходимо избегать посторонних запахов в помещениях для хранения.

Должна быть внедрена установленная в организации система учёта лекарственных средств и вспомогательных веществ с ограниченным сроком годности. Отгрузка лекарственных средств организуется таким образом, чтобы лекарственные препараты с меньшим сроком годности отпускались в первую очередь.

Забракованные, возвращённые и/или отозванные лекарственные средства и вспомогательные вещества должны быть идентифицированы и храниться в соответствующем помещении (зоне, оборудовании) в условиях, не допускающих их несанкционированного использования.

##### Особенности хранения отдельных групп лекарственных средств

При хранении лекарственных средств и вспомогательных веществ, требующих защиты от повреждающего влияния факторов внешней среды (света, температуры, атмосферного состава воздуха и др.), необходимо обеспечить выполнение требований, приведённых в фармакопейной статье и на упаковке.

Огнеопасные и взрывоопасные лекарственные средства

Лекарственные средства и вспомогательные вещества, обладающие опасными свойствами (огнеопасные, взрывоопасные, радиофармацевтические, едкие, коррозионные, медицинские газы (сжатые, сжиженные и криогенные) и др.), следует хранить в специально устроенных помещениях, оборудованных дополнительными средствами безопасности и охраны. При хранении необходимо обеспечить сохранность и заявленное качество лекарственных средств и вспомогательных веществ, предотвратить возможность проявления лекарственными средствами или вспомогательными веществами своих опасных свойств и создать безопасные условия труда сотрудников, осуществляющих работу с такими лекарственными средствами и вспомогательными веществами.

Для организации хранения опасных лекарственных средств и вспомогательных веществ необходимо руководствоваться требованиями федеральных законов и нормативных правовых актов Российской Федерации.

Наркотические и психотропные лекарственные средства

Хранение наркотических и психотропных лекарственных средств должно осуществляться в соответствии с требованиями федеральных законов и нормативных правовых актов Российской Федерации.

Лекарственные средства, требующие защиты от света

Лекарственные средства или вспомогательные вещества, которые под действием световой энергии могут изменять свои свойства (окисляться, восстанавливаться, разлагаться, изменять свой цвет и т.п.), являются фото- или светочувствительными. Влияние световой энергии может осуществляться в воздействии прямых солнечных лучей, рассеянного света видимой области светового спектра и излучения ультрафиолетовой области.

Обоснование условий хранения в защищённом от света месте должно быть подтверждено исследования фотостабильности.

Лекарственные средства, требующие защиты от действия света, должны храниться в упаковке, обеспечивающей защиту от естественного и искусственного освещения.

Маркировка светочувствительных лекарственных средств и вспомогательных веществ содержит указание: «Хранить в защищённом от света месте».

Фармацевтические субстанции, требующие защиты от действия света, следует хранить либо в упаковке из светозащитных материалов (ОФС «Упаковка лекарственных средств»), либо в тёмном помещении или шкафах. Если в качестве упаковки особо чувствительных к свету фармацевтических субстанций используется тара стеклянная для лекарственных средств, необходимо тару оклеить чёрной светонепроницаемой бумагой.

Лекарственные средства, требующие защиты от влаги

Фармацевтические субстанции, требующие защиты от воздействия влаги, следует хранить в прохладном месте, в плотно укупоренной таре из материалов, непроницаемых для паров воды (стекла, металла, алюминиевой фольги, толстостенной пластмассовой таре) или в первичной и вторичной (потребительской) упаковке.

Фармацевтические субстанции с выраженными гигроскопическими свойствами следует хранить в стеклянной таре с герметичной укупоркой, залитой сверху парафином.

Во избежание порчи и потери качества следует организовать хранение лекарственных средств и вспомогательных веществ в соответствии с требованиями, указанными в фармакопейной статье и на упаковке.

Маркировка лекарственных средств и вспомогательных веществ, требующих защиты от влаги, содержит указание: «Хранить в сухом месте».

Лекарственные средства, требующие защиты от газов окружающей среды

Некоторые группы лекарственных средств и вспомогательных веществ изменяют свои свойства под влиянием газов атмосферного воздуха, таких как кислород или углерода диоксид. Для обеспечения защиты от воздействия газов хранение лекарственных средств и вспомогательных веществ рекомендуется осуществлять в герметичной упаковке из материалов, не проницаемых для газов. Упаковка, по возможности, должна быть заполнена доверху и укупорена герметично.

Летучие и высыхающие лекарственные средства

Лекарственные средства и вспомогательные вещества, представляющие собой собственно летучие лекарственные средства и вспомогательные вещества, или лекарственные средства и вспомогательные вещества, содержащие летучий растворитель; растворы и смеси собственно летучих веществ; лекарственные средства и вспомогательные вещества, разлагающиеся с образованием летучих продуктов, требуют создания условий хранения, защищающих их от улетучивания и высыхания. Рекомендуется хранить в прохладном месте, в герметично укупоренной упаковке из непроницаемых для улетучивающихся веществ материалов или в первичной и вторичной (потребительской) упаковке в соответствии с требованиями, указанными в фармакопейной статье и на упаковке. Лекарственные средства и вспомогательные вещества, представляющие собой фармацевтические субстанции и вспомогательные вещества, содержащие кристаллизационную воду (кристаллогидраты), склонны к дегидратации. Хранение кристаллогидратов рекомендуется осуществлять в герметично укупоренной упаковке в соответствии с требованиями, установленными указанными в фармакопейной статье и на упаковке.

Термочувствительные (термолабильные) лекарственные средства

Лекарственные средства и вспомогательные вещества, изменяющие свои свойства под действием температуры окружающей среды, являются термочувствительными (термолабильными). Лекарственные средства и вспомогательные вещества могут изменять свои свойства под воздействием комнатной и более высокой температуры или под воздействием пониженной температуры, в том числе при замораживании. При хранении термочувствительных лекарственных средств и вспомогательных веществ необходимо обеспечить температурный режим, регламентированный требованиями фармакопейной статьи или указанный на первичной и/или на вторичной (потребительской) упаковке лекарственного средства или вспомогательного вещества.

Термочувствительные (термолабильные) лекарственные средства и вспомогательные вещества следует хранить в специально оборудованных помещениях (холодильных камерах) или в холодильных шкафов, холодильников и т.п.

Надлежащее качество иммунобиологических лекарственных средств, безопасность и эффективность обеспечивается условиями перевозки (транспортирования) и хранения от производителя до потребителя («холодовая цепь»).

В холодильниках (камерах, шкафах) должна быть установлена температура, соответствующая температурному режиму хранения находящихся в них лекарственных средств и вспомогательных веществ. Хранение термолабильных (например, иммунобиологических) лекарственных препаратов должно осуществляться при температуре, указанной в фармакопейной статье и на упаковке. Не допускается совместное хранение в холодильнике (камерах, шкафах) иммунобиологических лекарственных препаратов с другими лекарственными препаратами, которые могут повлиять на качество иммунобиологических лекарственных препаратов и/или повредить их упаковку.

Для мониторинга температурного режима хранения термолабильных лекарственных средств все холодильники (камеры, шкафы) должны быть обеспечены оборудованием, относящимся к средствам измерения (термометрами, терморегистраторами и т.п.).

Контроль температурного режима при хранении термочувствительных (термолабильных) лекарственных средств в холодильных камерах, шкафах, холодильниках осуществляют с помощью термографов, термометров и терморегистраторов не реже одного раза в сутки, а в случае иммунобиологических лекарственных препаратов – не реже двух раз в сутки.

##### Температурные режимы хранения

Используемые в Государственной фармакопее определения, характеризующие температурные режимы хранения лекарственных средств, приведены в таблице.

Таблица. Определения, характеризующие режимы хранения лекарственных средств и вспомогательных веществ
Режим хранения | Условия хранения
--- | ---
Хранить при температуре не выше 30 °C | от 2 до 30 °C
Хранить при температуре не выше 25 °C | от 2 до 25 °C
Хранить при температуре не выше 15 °C | от 2 до 15 °C
Хранить при температуре не выше 8 °C | от 2 до 8 °C
Хранить при температуре не ниже 8 °C | от 8 до 25 °C
Хранить при контролируемой комнатной температуре | от 15 до 25 °C
Хранить в прохладном месте | от 8 до 15 °C
Хранить в холодильнике, в холодном месте | от 2 до 8 °C
Хранить в морозильной камере | от –5 до –18 °C
Хранить при глубоком замораживании | от –18 °C и ниже
Не требует специальных условий хранения (в обычных условиях) | от 15 до 25 °C без требований к свето- и влагозащитной упаковке, хорошо проветриваемом месте
Не замораживать | Не ниже +2 °C, если иное не указано в фармакопейной статье
Хранить в сухом месте | Хранение в условиях, когда средний показатель относительной влажности не превышает 50 % при контролируемой комнатной температуре или соответствует эквивалентному давлению водяного пара при другой температуре.
Хранить в защищённом от света месте | Хранение в условиях, исключающих воздействие света, при отсутствии оригинальной светозащитной упаковке

В помещениях для хранения необходимо обеспечить условия хранения лекарственных средств и вспомогательных веществ, требующих защиты от воздействия пониженной температуры, для которых нижний предел температурного режима хранения указан в фармакопейной статье и на упаковке.

Критически важно не подвергать замораживанию лекарственные средства и вспомогательные вещества, имеющие соответствующие требования, указанные в фармакопейной статье и на первичной или вторичной упаковке, в том числе препараты инсулина, адсорбированные иммунобиологические препараты и др.

Не допускается подвергать замораживанию лекарственные средства и вспомогательные вещества, помещённые в упаковку, способную разрушаться при замораживании, например, лекарственные препараты в ампулах, стеклянных флаконах и др.

Необходимо обеспечить соблюдение условий хранения лекарственных средств и вспомогательных веществ и сохранения их целостности при перевозке (транспортировании).

Для лекарственных средств, особо чувствительных к изменению температурного режима (вакцины, сыворотки и другие иммунобиологические лекарственные препараты, препараты инсулина и др.), при перевозке (транспортировании) должен соблюдаться регламентируемый фармакопейной статьёй и на упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0011 Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов

Взамен ОФС.1.1.0011.15

Настоящая общая фармакопейная статья устанавливает требования к условиям хранения лекарственного растительного сырья, лекарственных растительных препаратов, в том числе в лекарственной форме гранулы резано-прессованные.

##### Общие требования к помещениям для хранения лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов

Условия хранения лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов в складских помещениях должны обеспечивать сохранность сырья и препаратов по показателям качества, которые могут изменяться в процессе хранения в течение установленных фармакопейной статьёй и на упаковке.

Лекарственное растительное сырьё должно храниться в специально оборудованных складских помещениях, имеющих ряд зон: приёмное отделение для оформления документов, проверки качества упаковки и маркировки, отбора проб для анализа; помещение для временного хранения лекарственного растительного сырья, заражённого вредителями запасов (изолятор); зона для временного хранения нестандартного сырья; зона для основного хранения сырья; зоны для раздельного хранения различных групп лекарственного растительного сырья и др.

Складские помещения для хранения лекарственных растительных препаратов должны отвечать требованиям, установленным в соответствующем порядке.

Лекарственное растительное сырьё и лекарственные растительные препараты должны храниться таким образом, чтобы избежать перекрёстной контаминации.

Помещения для хранения лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов должны быть чистыми и хорошо проветриваемыми, и, при необходимости, подвергаться дезинфекции, должны быть защищены от проникновения в них насекомых и животных, особенно грызунов.

Особое внимание должно быть уделено чистоте и надлежащему обслуживанию зон хранения, особенно там, где образуется пыль.

Если для хранения лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов требуются особые условия в отношении влажности, температуры и защиты от света, такие условия необходимо обеспечивать и контролировать.

Контроль или мониторинг условий хранения в складских помещениях, предназначенных для хранения лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов, должен проводиться в точках, определённых на основе анализа риска по результатам проведённого картирования складского помещения, средствами измерений, поверенными или аттестованными в установленном порядке.

Лекарственное растительное сырьё, требующее хранения при температуре, отличной от комнатной, должно иметь соответствующую маркировку.

Лекарственное растительное сырьё и лекарственные растительные препараты не должны подвергаться длительному воздействию прямого или яркого рассеянного солнечного света и должны храниться в защищённом от света месте и/или в светозащитной упаковке в соответствии с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Лекарственное растительное сырьё и лекарственные растительные препараты следует хранить при относительной влажности воздуха не более 65 % с учётом соответствующей климатической зоны (I, II, III и IVА) и физико-химических свойств лекарственного растительного сырья/препарата и биологически активных веществ, входящих в его состав, в упакованном виде в соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Основная масса лекарственного растительного сырья хранится в зонах для основного хранения сырья. Изолированно от других видов сырья следует хранить:

- плоды и семена;

- эфирномасличное сырьё, обладающее запахом, в хорошо укупоренной таре (в том числе плотно укупоренные мешки, тюки, кипы тканевые);

- лекарственное растительное сырьё, содержащие ядовитые и сильнодействующие вещества (в отдельном помещении или в отдельном шкафу под замком).

В процессе хранение лекарственного растительного сырья, содержащего сердечные гликозиды, осуществляют повторный контроль на биологическую активность.

Упакованное лекарственное растительное сырьё хранят в штабелях (с использованием поддонов), на стеллажах, в интейнерах (контейнерах стеллажного типа).

На каждый штабель или интейнер прикрепляется этикетка с указанием:

- наименования сырья;

- названия поставщика/заготовителя;

- номера партии/серии;

- года и месяца сбора/заготовки;

- даты поступления;

- срока хранения.

Лекарственное растительное сырьё должно храниться таким образом, чтобы не препятствовать свободной циркуляции воздуха в помещении.

Лекарственное растительное сырьё при хранении необходимо ежегодно перекладывать, обращая внимание на наличие вредителей запасов и на соответствие длительности хранения сроку годности, указанному в фармакопейной статье и на упаковке.

Лекарственные растительные препараты должны храниться в упаковке в соответствии с требованиями фармакопейных статей и на упаковке. Вторичная (и/или первичная) упаковка и/или транспортная тара лекарственных растительных препаратов должна обеспечивать защиту от воздействия влаги и солнечного света.

Лекарственные растительные препараты следует хранить на стеллажах или в шкафах.

Эфирномасличное сырьё, а также лекарственное растительное сырьё, содержащее действующие вещества, количество которых может изменяться в процессе хранения, должны подвергаться переконтролю по показателю «Количественное определение» перед использованием в производстве. По результатам проверки лекарственное растительное сырьё и лекарственные растительные препараты, не соответствующее требованиям фармакопейных статей, бракуют.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0012 Валидация аналитических методик

Взамен ОФС.1.1.0012.15

Валидация аналитической методики – это экспериментальное доказательство того, что методика, предназначенная для контроля качества лекарственных средств, пригодна для решения предполагаемых задач.

Аналитические методики, приводимые в фармакопейной статье, являются валидированными. Однако, правильность их использования в условиях конкретной лаборатории должна быть подтверждена. Для этих целей, а также для оценки применимости методики испытания для контроля качества лекарственных средств применяют процедуру верификации.

##### Термины и определения

Аналитическая методика - методика проведения испытаний лекарственных средств, включающая подробное описание последовательности действий, необходимых для выполнения аналитического испытания, в том числе описание подготовки испытуемых образцов, стандартных образцов, реактивов, использование оборудования, построения градуировочной кривой, используемых расчётных формул и т.д.

Верификация (оценка применимости) методики – экспериментальное доказательство того, что методика пригодна для достижения тех целей, для которых она предназначена, и может быть корректно воспроизведена в условиях конкретной лаборатории.

Воспроизводимость – свойство, характеризующеё прецизионность в межлабораторных испытаниях.

Диапазон применения (аналитическая область) – интервал между наибольшей и наименьшей концентрациями (количеством) определяемого вещества в образце (включая эти концентрации), для которого показано, что аналитическая методика имеет приемлемый уровень прецизионности, правильности и линейности.

Линейность – прямо пропорциональная зависимость аналитического сигнала от концентрации (количества) определяемого вещества в анализируемой пробе в пределах диапазона применения (аналитической области) методики.

Открываемость – соотношение между полученным средним и истинным значениями с учётом соответствующих доверительных интервалов.

Повторяемость (прецизионность внутри методики) – прецизионность методики при выполнении повторных испытаний в одинаковых регламентированных условиях в одной лаборатории (один и тот же исполнитель, одно и то же оборудование, один и тот же набор реактивов) в пределах короткого промежутка времени.

Правильность – близость полученного значения к истинному (опорному), которая выражается величиной открываемости. Характеризует систематическую ошибку.

Предел количественного определения – наименьшее количество (концентрация) вещества в образце, которое может быть количественно определено с требуемой правильностью и внутрилабораторной (промежуточной) прецизионностью.

Предел обнаружения – наименьшее количество (концентрация) определяемого вещества в образце, которое может быть обнаружено, но необязательно точно количественно определено.

Прецизионность – выражение близости (степени разброса) результатов (значений) между сериями измерений, взятых из одной и той же однородной пробы, в предписанных методикой условиях. Мерой прецизионности является величина стандартного отклонения результата отдельного определения, полученная для выборки достаточно большого объёма.

Промежуточная (внутрилабораторная) прецизионность – влияние вариаций внутри лаборатории (разные дни, разные аналитики, разное оборудование, разные серии (партии) реактивов и т.д.) на результаты испытаний идентичных образцов, отобранных из одной и той же серии.

Специфичность – способность аналитической методики однозначно оценивать определяемое вещество в присутствии сопутствующих компонентов.

Устойчивость (робастность) – способность аналитической методики быть устойчивой к влиянию небольших задаваемых изменений в условиях проведения испытания, которая указывает на её надежность при обычном (стандартном использовании).

##### Типы аналитических методик, подлежащих валидации

Валидации подлежат методики количественного определения, в том числе методики определения примесей и методики определения предела содержания. Методики проверки подлинности подвергаются валидации при необходимости подтвердить их специфичность.

При валидации проводится оценка аналитической методики по перечисленным ниже характеристикам, выбираемым с учётом типовых рекомендаций, приведённых в таблице:

- специфичности (specificity);

- пределу обнаружения (detection limit);

- пределу количественного определения (quantitation limit);

- линейности (linearity);

- правильности (trueness);

- прецизионности (precision);

- диапазону применения (аналитической области) (range);

- устойчивости (робастности) (robustness).

Таблица. Характеристики методик, определяемые при валидации
Наименование характеристики | Основные типы методик
--- | ---
Испытание на подлинность | Примеси | Количественные определения
Количественные методики | Предел содержания | Основного действующего вещества, нормируемых компонентов | Действующего вещества в тесте «Растворение»
Специфичность**) | Да | Да | Да | Да | Да
Предел обнаружения | Нет | *** | Да | Нет | Нет
Предел количественного определения | Нет | Да | Нет | Нет | Нет
Аналитическая область | Нет | Да | Нет | Да | Да
Линейность | Нет | Да | Нет | Да | Да
Правильность | Нет | Да | * | Да | Да
Прецизионность: – повторяемость (сходимость) – промежуточная (внутрилабораторная) прецизионность | Нет Нет | Да Да | Нет Нет | Да Да | Да Нет
Устойчивость (робастность) | Нет | * | * | * | *
*) может определяться при необходимости; **) отсутствие специфичности одной аналитической методики может быть компенсировано использованием другой аналитической методики; ***) может потребоваться в некоторых случаях (например, когда предел обнаружения и нормируемый предел содержания определяемой примеси близки).

Ревалидацию (повторную валидацию) методик проводят при:

- изменении технологии получения объекта анализа;

- изменении состава лекарственного средства (объекта анализа);

- изменении ранее утверждённой методики анализа.

1. Специфичность

Доказательство специфичности валидируемой методики обычно основывается на рассмотрении полученных с её использованием данных анализа модельных смесей известного состава.

Специфичность валидируемой методики может быть доказана также соответствующей статистической обработкой результатов анализов реальных объектов, выполненных с её использованием и, параллельно, с использованием другой, заведомо специфичной методики (методики, специфичность которой доказана).

1.1. Для методик испытаний на подлинность

Валидируемая методика (или совокупность методик) должна обеспечивать достоверную информацию о присутствии данного действующего вещества в субстанции или лекарственной форме при наличии в её составе предусмотренных рецептурой компонентов, что подлежит экспериментальному подтверждению.

Подлинность действующего вещества в фармацевтической субстанции или лекарственном препарате устанавливают в сравнении со стандартным образцом или по физико-химическим или химическим свойствам, не характерным для других компонентов.

Испытания на подлинность заключаются, как правило, в сравнении свойств (например, спектральных характеристик, хроматографического поведения, химической активности и т.д.) испытуемого и стандартного образцов.

Удовлетворительные испытания на подлинность должны обладать способностью различать между собой структурно близкородственные соединения.

1.2. Для методик количественного определения и испытания на примеси

Для валидируемой методики количественного определения должна быть оценена её специфичность в отношении определяемого вещества, то есть должно быть экспериментально подтверждено, что присутствие сопутствующих компонентов не влияет непредусмотренным образом на результат анализа.

Для валидируемой методики испытаний на примеси должно быть подтверждение того, что методика позволяет правильно распознать примеси в образце, например испытание на родственные соединения, тяжёлые металлы, содержание остаточных растворителей и т.д.

Допускается оценка специфичности валидируемой методики как путём анализа модельных смесей известного состава, содержащих определяемое вещество, так и путем сравнения результатов анализов реальных объектов, полученных одновременно с использованием валидируемой и другой, заведомо специфичной методики. Результаты соответствующих экспериментов должны быть статистически обработаны.

Недостаток специфичности испытания может быть компенсирован другим (другими) дополнительным испытанием.

При валидации методик, если это целесообразно, могут использоваться образцы лекарственных средств, подвергнутые с целью накопления в них примесей воздействию экстремальных условий (света, температуры, влажности) или химически модифицированные любым подходящим способом.

Для хроматографических методик показывают разрешение между двумя наиболее близко элюирующимися веществами при соответствующих концентрациях.

2. Предел обнаружения

Предел обнаружения в случаях, указанных в таблице, обычно выражается как концентрация определяемого вещества (в% или долях на миллион – ppm).

В зависимости от типа методики (визуальная или инструментальная) используют разные способы определения предела обнаружения.

2.1. Для методик с визуальной оценкой результата анализа

Проводят испытания образцов с различными известными количествами (концентрациями) определяемого вещества и устанавливают минимальное значение, при котором результат анализа может быть оценен визуально. Это значение является оценкой предела обнаружения.

2.2. Для методик с инструментальной оценкой результата анализа

2.2.1. По соотношению «сигнал/шум»

Этот подход применим к методам, для которых наблюдается шум базовой линии. Сравнивают величины сигналов, полученных для контрольного опыта и для образцов с низкими концентрациями анализируемого вещества. Для оценки предела обнаружения приемлемой считается величина отношения «сигнал/шум» от 3:1 до 2:1.

2.2.2. По величине стандартного отклонения аналитического сигнала и угловому коэффициенту калибровочного графика

Предел обнаружения (ПО) находят по формуле (1):

(1)

где S - стандартное отклонение аналитического сигнала;
b – коэффициент чувствительности, представляющий собой отношение аналитического сигнала к определяемой величине (тангенс угла наклона калибровочной кривой).

При наличии экспериментальных данных в широком диапазоне измеряемой величины S и b могут быть оценены методом наименьших квадратов.

Для линейного калибровочного графика значение S принимают равным стандартному отклонению Sa свободного члена уравнения этого графика. Полученное значение предела обнаружения при необходимости может быть подтверждено прямым экспериментом при количествах (концентрациях) определяемого вещества, близких к найденному значению предела обнаружения.

Как правило, если имеются данные о пригодности методики для надежного определения вещества в концентрациях, лежащих как выше, так и ниже нормы его содержания, установленной спецификацией, определять реальный предел обнаружения для такой методики не требуется.

3. Предел количественного определения

Предел количественного определения является необходимой валидационной характеристикой методик, используемых для оценки малых количеств (концентраций) веществ в образце и, в частности, для оценки содержания примесей и (или) продуктов деградации.

В зависимости от типа методики используют следующие способы нахождения предела количественного определения.

3.1. Для методик с визуальной оценкой результата анализа

Проводят испытания образцов с различными известными количествами (концентрациями) анализируемого вещества и устанавливают минимальное значение, при котором результат анализа может быть получен визуально с требуемой правильностью и внутрилабораторной (промежуточной) прецизионностью.

3.2. Для методик с инструментальной оценкой результата анализа

3.2.1. По соотношению сигнал/шум

Данный подход применим только к методам измерений, при которых наблюдается шум базовой линии.

Устанавливают минимальную концентрацию определяемого вещества в образце, при которой величина отношения аналитического сигнала к уровню шума составляет около 10:1.

3.2.2. По величине стандартного отклонения сигнала и угловому коэффициенту калибровочного графика

Предел количественного определения (ПКО) находят по формуле (2):

(2)

где S - стандартное отклонение аналитического сигнала;
b – коэффициент чувствительности, представляющий собой отношение аналитического сигнала к определяемой величине (тангенс угла наклона калибровочной кривой).

При наличии экспериментальных данных в широком диапазоне измеряемой величины S и b могут быть оценены методом наименьших квадратов.

Для линейного калибровочного графика значение S принимают равным стандартному отклонению Sa свободного члена уравнения этого графика. Полученное значение предела количественного определения при необходимости может быть подтверждено прямым экспериментом при количествах (концентрациях) определяемого вещества, близких к найденному значению предела количественного определения.

если имеются данные о способности методики надежно определять анализируемое вещество в концентрации выше и ниже установленной в спецификации нормы его содержания, определять реальное значение предела количественного определения для такой методики, как правило, не требуется.

4. Диапазон применения (аналитическая область) методики

В пределах диапазона применения результаты, получаемые с использованием валидируемой методики, должны иметь приемлемый уровень правильности и внутрилабораторной (промежуточной) прецизионности.

К величине аналитической области методик предъявляются следующие требования:

- методики количественного определения должны быть применимы в интервале от 80 до 120 % от номинального значения определяемой аналитической характеристики;

- методики оценки однородности дозирования должны быть применимы в интервале от 70 до 130 % от номинальной дозы, если для лекарственного препарата не обоснован более широкий диапазон в зависимости от лекарственной формы (например, дозированные ингаляторы);

- методики количественного определения, используемые при проведении испытания по показателю «Растворение», обычно должны быть применимы в пределах ±20 % (абсолютных) от номинального диапазона применения. Например, если спецификации препарата с модифицированным высвобождением охватывают область от 20 % за первый час до 90 % от заявленного содержания за 24 часа, валидированный диапазон применения должен быть от 0 до 110 % от заявленного содержания;

- методики испытаний на примеси должны быть применимы в интервале от «Предела обнаружения» до 120 % от нормируемого содержания.

Аналитическая область методики может быть установлена по диапазону экспериментальных данных, удовлетворяющих линейной модели.

5. Линейность

При валидации методики её линейность в диапазоне применения (аналитической области) проверяют экспериментально измерением аналитических сигналов для не менее чем 5 проб с различными количествами или концентрациями определяемого вещества. Экспериментальные данные обрабатывают методом наименьших квадратов с использованием линейной модели по формуле (3):

(3)

где x - количество или концентрация определяемого вещества;
y – величина отклика;
b - угловой коэффициент линейной зависимости;
a – свободный член (ОФС «Статистическая обработка результатов физических, физико-химических и химических испытаний»).

Должны быть рассчитаны и представлены величины b, a и коэффициент корреляции r. В большинстве случаев используют линейные зависимости, отвечающие условию |r≥| 0,99, и только при анализе следовых количеств рассматривают линейные зависимости, для которых |r≥| 0,9.

В отдельных случаях возможность линейной аппроксимации экспериментальных данных обеспечивается лишь после их математического преобразования (например, логарифмирования).

Для некоторых методик анализа, в основу которых в принципе не может быть положена линейная зависимость между экспериментальными данными, определение концентрации или количества вещества проводят с использованием нелинейных калибровочных графиков. При этом график зависимости аналитического сигнала от количества или концентрации определяемого вещества может быть аппроксимирован подходящей нелинейной функцией с использованием метода наименьших квадратов, что выполнимо при наличии соответствующего валидированного программного обеспечения.

6. Правильность

Валидируемая методика признается правильной, если значения, принимаемые за истинные, лежат внутри доверительных интервалов соответствующих средних результатов анализов, полученных экспериментально по данной методике.

Для оценки правильности методик количественного определения применимы следующие подходы:

- а) анализ с использованием валидируемой методики стандартных образцов или модельных смесей с известным содержанием (концентрацией) определяемого вещества;

- б) сравнение результатов, полученных с использованием валидируемой методики и образцовой методики, правильность которой ранее установлена.

Для подходов «а» и «б» возможно представление полученных данных в виде уравнения линейной зависимости (регрессии) между экспериментально найденными и истинными величинами. Для этого уравнения проверяются гипотезы о равенстве единице тангенса угла наклона b и о равенстве нулю свободного члена a. Как правило, если эти гипотезы признаются верными при степени надежности, равной 0,05, то использование валидируемой методики даёт правильные, то есть свободные от систематической ошибки, результаты.

Правильность оценивается не менее чем для 9 определений 3 различных концентраций, охватывающих весь диапазон применения (то есть 3 концентрации и 3 повтора каждой концентрации). Определения должны включать в себя все стадии методики.

Правильность выражается величиной открываемости в процентах по результатам количественного определения вещества, добавленного в известном количестве в анализируемый образец, или разностью между полученным средним и истинным значениями с учетом соответствующих доверительных интервалов.

Заключение о правильности можно сделать после установления прецизионности, линейности и специфичности.

7. Прецизионность

Прецизионность оценивается для любой методики количественного определения по результатам не менее 3 определений для каждого из 3 уровней определяемых величин (нижнего, среднего и верхнего), лежащих в пределах аналитической области методики. Повторяемость также может оцениваться для любой методики количественного определения по результатам не менее 6 определений для образцов с содержанием определяемого вещества, близким к номинальному. Во многих случаях оценка прецизионности может быть проведена по результатам обработки экспериментальных данных методом наименьших квадратов, как указано в ОФС «Статистическая обработка результатов физических, физико-химических и химических испытаний».

Прецизионность должна исследоваться на однородных образцах и может оцениваться в трёх вариантах:

- как повторяемость (сходимость);

- как внутрилабораторная (промежуточная) прецизионность;

- как межлабораторная прецизионность (воспроизводимость).

Для каждого вида прецизионности необходимо указывать стандартное отклонение, относительное стандартное отклонение (коэффициент вариации) и доверительный интервал.

Обычно при разработке оригинальной методики определяется повторяемость (сходимость) результатов, получаемых с её использованием. При необходимости включения разработанной методики в нормативную документацию дополнительно определяется её внутрилабораторная (промежуточная) прецизионность. Межлабораторная прецизионность (воспроизводимость) методики оценивается при предполагаемом её включении в проект ОФС, ФС.

7.1. Повторяемость (сходимость)

Повторяемость определяется путём выполнения не менее 9 определений концентраций, входящих в диапазон применения аналитической методики (3 концентрации и 3 повтора для каждой концентрации), или не менее 6 определений концентрации для образцов со 100 % содержанием определяемого вещества.

7.2. Внутрилабораторная (промежуточная) прецизионность

Степень установления промежуточной прецизионности зависит от условий использования аналитической методики. Необходимо установить влияние случайных факторов на прецизионность аналитической методики. Типичными исследуемыми (вариабельными) факторами являются разные дни, исполнители, оборудование и т.д.; изучать указанные влияния по отдельности не требуется. При изучении влияния различных факторов предпочтительно использовать планирование эксперимента.

7.3 Межлабораторная прецизионность (воспроизводимость)

Межлабораторная прецизионность (воспроизводимость) валидируемой методики оценивается при проведении испытаний в разных лабораториях.

8. Устойчивость (робастность)

Устойчивость методики не следует определять по отношению к легко контролируемым условиям проведения анализа. Это резко сокращает необходимость в специальном изучении устойчивости.

Устойчивость должна изучаться только в тех случаях, когда валидируемая методика основана на использовании особо чувствительных к внешним условиям методов анализа, таких как различные виды хроматографии и функционального анализа. При необходимости оценка устойчивости методики проводится на стадии её разработки. Если вероятна невысокая устойчивость методики, проверка её пригодности осуществляется в обязательном порядке непосредственно в процессе практического использования.

В целях обеспечения поддержания валидности аналитической методики при её использовании одним из последствий изучения устойчивости (робастности) должно стать установление серий параметров пригодности системы.

Общими вариациями параметров являются:

- стабильность растворов, используемых в аналитических методиках;

- время экстрагирования.

Параметрами вариации для жидкостной хроматографии являются:

- изменение рН подвижной фазы;

- изменение состава подвижной фазы;

- разные хроматографические колонки (разные серии и поставщики);

- температура;

- скорость подвижной фазы.

Параметрами вариации для газовой хроматографии являются:

- разные хроматографические колонки (разные серии и поставщики);

- температура;

- скорость газа-носителя.

Проверка пригодности аналитической системы

Проверка пригодности аналитической системы – это проверка выполнения основных требований, предъявляемых к ней. Система, пригодность которой проверяется, представляет собой совокупность конкретных приборов, реактивов, стандартов и анализируемых образцов. Требования к такой системе обычно конкретизированы в общей фармакопейной статье на соответствующий аналитический метод. Таким образом, проверка пригодности аналитической системы становится процедурой, включаемой в валидируемую методику.

##### Представление результатов валидации

Протокол валидации аналитической методики должен содержать:

- полное описание методики, достаточное для воспроизведения и отражающее все условия, необходимые для выполнения анализа;

- оцениваемые характеристики;

- все первичные результаты, которые вошли в статистическую обработку данных;

- результаты статистической обработки данных, полученных экспериментально при разработке или проверке валидируемой методики;

- иллюстративные материалы, такие как копии хроматограмм, полученных методами высокоэффективной жидкостной хроматографии или газовой хроматографии; электрофореграмм, электронных и ИК-спектров; фотографии или рисунки хроматограмм, полученных методами тонкослойной или бумажной хроматографии; рисунки кривых титрования, калибровочные графики;

- заключение о пригодности валидируемой методики для включения в нормативную документацию.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0013 Статистическая обработка результатов физических, физико-химических и химических испытаний

Взамен ОФС.1.1.0013.15

Настоящая общая фармакопейная статья содержит сведения об основных статистических подходах к обработке и оценке данных, полученных при проведении испытаний лекарственных средств физическими, физико-химическими и химическими методами анализа.

Задача статистической обработки результатов многократных измерений заключается в нахождении оценки измеряемой величины и доверительного интервала, в котором находится истинное значение. Статистические методы обработки результатов измерений используют для описания полученных данных, наиболее близких к истинному значению, для оценки систематических и случайных погрешностей измерений ‒ результатов испытаний.

Статистическая обработка результатов физических, физико-химических и химических испытаний, которые могут быть изменчивыми, позволяет научно обосновывать и корректно интерпретировать полученные аналитические данные, а затем на их основе решать ряд прикладных задач, связанных с определением статистической достоверности результатов испытаний лекарственных средств. Правильное применение статистических принципов к аналитическим данным испытаний лекарственных средств возможно при условии, что такие данные собраны, зарегистрированы прослеживаемым образом и не содержат систематических ошибок. Получение таких данных необходимо осуществлять в соответствии с требованиями ОФС «Отбор проб», ОФС «Стандартные образцы», ОФС «Валидация аналитических методик». В настоящей общей фармакопейной статье используются некоторые термины, определение которых приведено в ОФС «Отбор проб» и ОФС «Валидация аналитических методик».

Представленные в настоящей общей фармакопейной статье данные носят информационный характер и не являются исчерпывающими.

Условные обозначения

А – измеряемая величина;

a – свободный член линейной зависимости;

b – угловой коэффициент линейной зависимости;

F – критерий Фишера;

f – число степеней свободы; функция плотности вероятности нормального распределения;

i – порядковый номер варианты;

L – фактор, используемый при оценке сходимости результатов параллельных определений;

т, п – объемы выборки;

P – доверительная вероятность без конкретизации постановки задачи;

(P2), (P1) – доверительная вероятность соответственно при двух- и односторонней постановке задачи;

Q1, Qn – контрольные критерии для идентификации грубых погрешностей;

R – размах варьирования;

Rc – общий индекс корреляции (линейной);

r – (линейный) коэффициент корреляции;

– относительное стандартное отклонение среднего значения,%;

s – стандартное отклонение;

sr – относительное (по отношению к среднему результату) стандартное отклонение;

s2– дисперсия;

s2r – относительная дисперсия;

σ2 – дисперсия генеральной совокупности;

– стандартное отклонение среднего результата;

– относительное (по отношению к среднему результату) стандартное отклонение среднего результата;

slg – логарифмическое стандартное отклонение;

s2lg – логарифмическая дисперсия;

– логарифмическое стандартное отклонение среднего результата;

s20, s2b, s – общая дисперсия и дисперсия коэффициентов линейной зависимости;

t – критерий Стьюдента;

U – коэффициент для расчета границ среднего результата гарантии качества испытуемого продукта;

х, у – текущие координаты в уравнении линейной зависимости;

Хi, Yi – вычисленные, исходя из уравнения линейной зависимости, значения переменных х и у;

– средние значения выборки (координаты центра линейной зависимости);

хi, yi – i-тая варианта (i-тая пара экспериментальных значений х и у);

– граничные значения доверительного интервала среднего результата;

хi ± ∆х – граничные значения доверительного интервала результата единичного определения;

d или ∆ – разность некоторых величин;

p – уровень значимости, степень надежности;

∆х – полуширина доверительного интервала неопределенности единичного определения;

– полуширина доверительного интервала неопределенности среднего результата;

∆х,r – полуширина относительного доверительного интервала неопределенности единичного определения;

– полуширина относительного доверительного интервала неопределенности среднего результата;

ΔAS:r – суммарная неопределенность анализа;

ΔFAO,r – неопределенность конечной аналитической операции;

ΔRS,r – неопределенность аттестации стандартного образца;

ΔSP,r – неопределенность пробоподготовки;

δ – относительная величина систематической погрешности;

– относительные неопределенности, соответственно, результата отдельного определения и среднего результата;

µ – истинное значение измеряемой величины;

∑ – знак суммирования (сумма);

X2 – критерий хи-квадрат.

##### 1. Выборка и основные статистические характеристики однородной выборки

1.1. Выборка

При статистической обработке результатов физических, физико-химических и химических испытаний используют термин «выборка» для обозначения совокупности реально полученных, статистически эквивалентных результатов испытаний (вариант). В качестве такой совокупности можно, например, рассматривать ряд результатов, полученных при параллельных определениях содержания какого-либо вещества (величины x) в однородной по составу пробе. Количество полученных результатов представляет собой число наблюдений n, образующих выборку, называемых «объёмом выборки» Отдельные значения вариант выборки объема п обозначают через xi (1≤ i ≤n). Упорядоченная в порядке возрастания вариант выборка может быть представлена в виде:

(1.1)

При статистической обработке результатов физических, физико-химических и химических испытаний различают выборку малого (n ≤ 10) и большого объема (n > 10). В других случаях статистической обработки результатов выборка «малого объема» может быть определена, как не превышающая 30 (n ≤ 30).

1.2. Среднее значение, дисперсия, стандартное отклонение

В большинстве случаев среднее значение выборки является наилучшей оценкой истинного значения измеряемой величины µ, если его вычисляют как среднее арифметическое всех вариант:

(1.2)

При этом разброс вариант хi вокруг среднего значения характеризуется величиной стандартного отклонения s. При количественном определении веществ методами физического, физико-химического и химического анализа величину s часто рассматривают как меру случайной погрешности, свойственной данной методике анализа. Квадрат этой величины s2 называют дисперсией. Величина дисперсии может рассматриваться как мера прецизионности (сходимости) результатов, представленных в данной выборке. Вычисление величин s и s2 проводят по уравнениям (1.5) и (1.6). Иногда для этого предварительно определяют значения отклонений di и число степеней свободы (число независимых вариант) f:

(1.3) (1.4) (1.5) (1.6)

Стандартное отклонение среднего результата рассчитывают по уравнению:

(1.7)

При обработке результатов испытаний лекарственных средств во многих случаях целесообразно использовать относительные (по отношению к величины, например, относительное стандартное отклонение sr, относительную дисперсию s2r. Их рассчитывают по формулам:

(1.5a) (1.6a)

Указанные относительные величины в зависимости от решаемой задачи могут выражаться в процентах относительно . В этом случае их часто обозначают RSD:

(1.6б)

Относительное стандартное отклонение среднего результата, выраженное в процентах () называют коэффициентом вариации. При обработке результатов испытаний лекарственных средств абсолютные величины обычно используют для прямых, а относительные ‒ для косвенных методов анализа.

Если при измерениях получают логарифмы искомых вариант, среднее значение выборки вычисляют как среднее геометрическое, используя логарифм вариант:

(1.8)

где:

(1.9)

Значения s2, s и в этом случае также рассчитывают, исходя из логарифмов вариант, и обозначают соответственно через s, slg,

Пример вычисления среднего значения и дисперсии приведен в разделе 7.1.

1.3. Проверка однородности выборки. Исключение выпадающих значений вариант

Результаты, полученные при статистической обработке выборки, будут достоверными лишь в том случае, если эта выборка однородна, т.е. если варианты, составляющие выборку, не отягощены грубыми погрешностями, допущенными при измерении или расчете. Для принятия решения об исключении таких выпадающих значений вариант, перед окончательным вычислением статистических характеристик проводят проверку однородности выборки, используя различные подходы в зависимости от объема выборки.

Вместе с тем, следует учитывать, что могут быть такие испытания лекарственных препаратов, которые предусматривают проверку данных каждой из вариант выборки без предварительной оценки её однородности и исключения вариант, например, при определении показателя «Однородность дозированных» в соответствии с ОФС «Однородность дозирования», когда должны быть учтены и проанализированы все полученные результаты (значения вариант).

Для проверки однородности выборки и исключения резко выделяющихся, выпадающих, отягощенных грубыми погрешностями значений вариант используют различные подходы в зависимости от объёма выборки. Для проверки однородности выборок малого и большого объёма наиболее часто используют следующие подходы.

Подход 1. Проверку однородности выборок малого объема (n ≤ 10) осуществляют без предварительного вычисления статистических характеристик. С этой целью все значения выборки представляют в виде (1.1) и предполагают, что крайние, граничные значения вариант выборки, то есть, x1 и xn, являются выпадающими, отягощёнными грубыми погрешностями. Для этих крайних значений выборки рассчитывают значения контрольного критерия для идентификации грубых погрешностей Q, исходя из величины размаха варьирования (размаха вариации) R, то есть разности значений между x1 и xn.

Выборка признается неоднородной, если хотя бы одно из вычисленных значений Q превышает критическое значение контрольного критерия Q _(_Р, n), найденное для доверительной вероятности Р (таблица 8.1 Приложения). Варианты х1 или xn, которым соответствует значение Q > Q _(_Р, n), отбрасывают и для полученной выборки уменьшенного объема выполняют новый цикл вычислений по уравнениям (1.10) и (1.11) с целью проверки её однородности.

Если в исходной выборке следующие значения вариант: |x1 - x2| < |x2 - x3| и |xn - xn-1| < |xn-1 - xn-2|, то уравнения (1.11а) и (1.11б) принимают вид:

Полученная в конечном счёте однородная выборка используется для вычисления , s2, s и .

Пример проверки однородности выборки малого объёма приведён в разделе 6.2.

Подход 2. Для проверки однородности выборки большого объёма
(n > 10) целесообразно проводить предварительную статистическую обработку всей выборки, полагая её однородной, и уже затем на основании найденных статистических характеристик решать вопрос о справедливости сделанного предположения об однородности согласно уравнению (1.13).

Вычисляют статистические характеристики , s2, s и для выборки большого объёма и проверяют её однородность. Выборка признаётся однородной, если для всех вариант выполняется условие:

(1.13)

Если выборка признана неоднородной, то варианты, для которых
|di| > 3·s, отбрасывают как отягощённые грубыми погрешностями с доверительной вероятностью Р > 99,0 %. В этом случае для полученной выборки сокращённого объёма повторяют цикл вычислений статистических характеристик по уравнениям (1.2)–(1.7) и снова проводят проверку однородности. Вычисление статистических характеристик считают законченным, когда выборка сокращенного объёма оказывается однородной.

1.4. Объединение однородных выборок

1.4.1. Объединённая дисперсия и объединённое среднее значение

Если имеется g выборок из одной и той же генеральной совокупности с порядковыми номерами k (1 ≤ k ≤ g), расчёт объединённой дисперсии s2p проводят по формуле:

(1.14)

или для объединённых относительных величин:

При этом объединенное число степеней свободы fp равно:

(1.15)

где nk - число вариант в k-той выборке;
fk – число степеней свободы в k-той выборке;
sk2 – дисперсия k-той выборки;
s(k,r)2 – относительная дисперсия k-той выборки;
dik – отклонение i-той варианты в k-той выборке.

Если g выборок из одной и той же генеральной совокупности с порядковыми номерами k (1 ≤ k ≤ g) характеризуются выборочными средними значениями , полученными из nk вариант, объединенное среднее значение по всем выборкам рассчитывают по формуле:

(1.16)

Необходимым условием совместной статистической обработки нескольких однородных выборок является отсутствие статистически значимой разницы между отдельными значениями s2k в уравнении (1.14), s2k,r в уравнении (1.14а) или RSD2k в уравнении (1.14б), т. е. справедливость гипотезы равенства дисперсий. В простейшем случае можно ограничиться сравнением крайних значений s2k с использованием критерия Фишера F. В более общем случае можно использовать критерии Бартлетта и Кохрена.

1.4.2. Критерий Бартлетта

Для проверки гипотезы, что все s2k принадлежат к одной генеральной совокупности, используют выражение, приближенно распределенное как χ2:

(1.17)

При этом величины s2 и fp рассчитывают по уравнениям (1.14) и (1.15). Найденную таким образом величину χ2 сравнивают с процентной точкой хи-квадрат распределения χ2(P1, fχ) (таблица 8.5 Приложения). Если имеется g выборок, то число степеней свободы для χ2(P1, fχ) берут равным fχ = g – 1. Проверяемую гипотезу принимают при условии χ2 > χ2(P1, fχ). В противном случае вычисленное значение χ2 корректируют по формуле:

(1.18)

где:

(1.19)

и снова сравнивают с процентной точкой хи-квадрат распределения χ2(P1, fχ). Если _χ*2 > χ2(P1, fχ), то между некоторыми стандартными отклонениями имеются значимые различия. В этом случае необходимо провести анализ имеющихся данных, отбросить одно или несколько значений дисперсии, наиболее сильно отличающихся от остальных, и снова провести тест Бартлетта. Необходимо иметь в виду, что критерий Бартлетта, так же, как критерий Кохрена, очень чувствителен к нарушению требования нормального распределения. Но именно поэтому он может быть весьма полезен при сборе и формировании надёжного архива данных о тех или иных аналитических испытаниях.

Описанный критерий Бартлетта применим только при условии, что число степеней свободы у всех объединяемых дисперсий больше 3, т.е. все fk > 3.

1.4.3. Критерий Кохрена

В том случае, когда все объединяемые дисперсии имеют одинаковое число степеней свободы (т.е. f1 = f2 = … = fg = f) для проверки гипотезы равенства дисперсий (однородности дисперсий) можно применять значительно более простой критерий Кохрена со статистикой:

(1.20)

где

В формулах (1.17) и (1.20) вместо абсолютных величин s2k могут быть использованы относительные величины s2r,k и RSDk.

Критические значения критерия Кохрена приведены в таблице 8.6. Приложения. Для подтверждения гипотезы об однородности дисперсий рассчитанное значение G на выбранном уровне значимости (95 % или 99 %) не должно превосходить критическое значение (Gрассчитанное ≤ Gкритическое). В противном случае гипотеза равенства дисперсий не может быть принята: формулы (1.15)–(1.17) объединения выборок не являются корректными, наибольшую дисперсию в исследуемом наборе дисперсий считают выбросом.

1.5. Доверительные интервалы и оценка их величины

Если случайная однородная выборка конечного объёма n получена в результате последовательных измерений некоторой величины А, имеющей истинное значение µ, то среднее этой выборки следует рассматривать лишь как приближённую оценку величины А. Достоверность этой оценки характеризуется величиной доверительного интервала , для которой с заданной доверительной вероятностью Р выполняется условие:

(1.21)

Данный доверительный интервал не характеризует погрешность определения величины µ, поскольку найденная величина может быть в действительности очень близка к истинному значению µ, которое остается неизвестным. Полученный доверительный интервал характеризует степень неопределённости истинного значения µ величины А по результатам последовательных измерений выборки конечного объёма n. Поэтому правильно говорить о «неопределённости результатов анализа», которая характеризуется доверительным интервалом, вместо выражения «погрешность результатов анализа», которое нередко не совсем корректно используется.

Расчет граничных значений доверительного интервала при известном значении стандартного отклонения s или для выборок большого объема проводят по уравнению:

(1.22a)

предполагая, что варианты, входящие в выборку, распределены нормально. Здесь U(P) – табличное значение функции нормального распределения.

Для выборок небольшого объема расчёт граничных значений доверительного интервала проводят с использованием критерия Стьюдента, предполагая, что варианты, входящие в выборку, распределены нормально:

(1.22б)

Здесь t(P,f) – табличное значение критерия Стьюдента (таблица 7.2 Приложения).

Распределение по критерию Стьюдента t(P,f) является обобщением нормального распределения U(P) и переходит в него при достаточно большом числе степеней свободы f, т.е. t(P,f) → U(P). С учетом этого далее для единообразия везде используется более часто употребляемое соотношение (1.22б), даже в случае выборок достаточно большого объема.

Если при измерении одной и той же методикой двух близких значений А были получены две случайные однородные выборки с объемами n и m, то при m < n для выборки объема m справедливо уравнение:

(1.23)

где индекс указывает принадлежность величин к выборке объема m или n.

Уравнение (1.23) позволяет оценить величину доверительного интервала среднего , найденного, исходя из выборки объёма m. Иными словами, доверительный интервал среднего для выборки относительно малого объема m может быть сужен благодаря использованию известных величин s(n) и t(P, fn), найденных ранее для выборки большего объема n. Более общим подходом является объединение выборок с расчётом объединённого стандартного отклонения и степеней свободы по уравнениям (1.14)-(1.15).

Аналогично уравнениям (1.21)-(1.22) определяют доверительный интервал результата отдельного определения. Подставляя n = 1 в уравнение (1.22б) или m = 1 в уравнение (1.23), получают:

(1.24)

или с использованием относительных величин:

(1.24a)

Этот интервал является доверительным интервалом результата отдельного определения. Для него с доверительной вероятностью Р выполняются взаимосвязанные условия:

Значения и Δx из уравнений (1.22б) и (1.24) используют при вычислении относительных неопределенностей отдельной варианты (ε) и среднего результата (), выражая эти величины в процентах:

Пример расчёта доверительных интервалов в процентах и относительных неопределенностей приведен в разделе 7.3.

Если при измерениях получают логарифмы исходных вариант, то уравнения (1.22б) и (1.24) принимают вид:

Потенцирование выражений (1.29) и (1.30) приводит к несимметричным доверительным интервалам для значений и xi:

где:

При этом для нижних и верхних границ доверительных интервалов и x относительные неопределенности составляют:

1.5.1. Односторонние и двусторонние доверительные интервалы

Выражения (1.21)–(1.35) характеризуют так называемые «двусторонние» доверительные интервалы. Они основаны на двустороннем t-распределении и широко применяются при оценке правильности и прецизионности методик и представлении результатов. Вместе с тем, при решении некоторых задач, например, при контроле готовой продукции, в частности, при контроле качества лекарственных средств, нередко возникает необходимость использования так называемых «односторонних» доверительных интервалов. Например, для какого-нибудь лекарственного препарата допуски количественного содержания действующего вещества установлены от 90 % до 110 % от номинального. В процессе анализа получено среднее значение содержания = 94 % от номинального значения. Необходимо решить, не выходит ли доверительный интервал за допуски содержания (90–110%). Очевидно, что в данном случае этот доверительный интервал может выйти за пределы только нижнего допуска (90 %), но не верхнего (110 %) одновременно. Вопрос о возможности выхода истинной величины µ за пределы верхнего допуска не рассматривают, в связи с его крайне низкой вероятностью. Таким образом, истинное значение µ находится в интервале:

(1.36a)

Аналогичное выражение можно записать для случая, когда превышает 100 % (например, 105 %):

(1.36б)

Выражения (1.36а) и (1.36б) характеризуют односторонние доверительные интервалы, поскольку величина µ ими ограничивается только с одной стороны. Это отличает их от выражения (1.21), где величина µ ограничивается с обеих сторон.

Существует следующее соотношение между двусторонним (Р2) и односторонним (Р1) критериями Стьюдента:

(1.37)

В частности, односторонний критерий Стьюдента для вероятности 0,95 (т.е. 95 %) совпадает с двусторонним критерием Стьюдента для вероятности 0,90 (т.е. 90 %).

Таким образом, Р2 ‒ это вероятность того, что математическое ожидание (или истинное значение) оцениваемой величины находится в двусторонне ограниченных пределах (1.21)–(1.35), а Р1 ‒ это вероятность того, что оно находится в односторонне ограниченных пределах (1.36) - (1.35). Также могут использоваться величины, обозначаемые (1- P2) и (1- P1), которые характеризуют вероятность того, что математическое ожидание (или истинное значение) оцениваемой величины выходит за вышеуказанные пределы. Во многих случаях такие величины являются более удобными.

1.6. Проверка наличия значимой систематической погрешности

Для решения вопроса о наличии или отсутствии статистически значимой погрешности для выборки объема m, если величина | μ - | > 0 используют критерий Стьюдента, обозначаемый t и рассчитываемый по формуле:

(1.38)

или для относительных величин:

(1.38a)

Если, например, при Р = 95% и f = m − 1, реализуется неравенство:

(1.39)

то полученные данной методикой результаты отягощены систематической погрешностью, относительная величина которой δ может быть вычислена по формуле:

(1.40)

Статистически значимая систематическая погрешность может быть приемлема для решения поставленной аналитической задачи, если она критически не влияет на принятие решения по результатам анализа.

На статистическую значимость систематической погрешности влияет прецизионность. Вследствие высокой прецизионности систематическая погрешность может оказаться статистически значимой, и наоборот, низкая прецизионность может привести к статистической незначимости систематической погрешности (эффект маскировки).

Предположим, что для методики 1 систематическая погрешность
δ1 = 0,74 % и стандартное отклонение s1 = 1,20 %, а для методики 2 данные величины имеют значения δ2 = 0,37 % и s2 = 0,33 %. За счет худшей прецизионности систематическая погрешность методики 1 оказывается статистически незначимой. Лучшая прецизионность методики 2 приводит к статистической значимости систематической погрешности, несмотря на то, что её значение меньше в 2 раза, чем у методики 1. Поэтому создаётся ложное представление о невозможности использования методики 2 для конкретной аналитической задачи, например, количественного определения действующего вещества в лекарственном препарате. В действительности, для данной цели целесообразно использовать именно методику 2.

Таким образом, статистически значимая систематическая погрешность, может быть приемлемой и неприемлемой для решения поставленной аналитической задачи. В связи с этим статистически значимые систематические погрешности, т.е. погрешности, для которых выполняется неравенство (1.39), в дальнейшем оценивают на их практическую значимость.

##### 2. Сравнение двух методик анализа по прецизионности

Сравнение двух методик анализа по прецизионности проводят путём выяснения значимости различия выборочных дисперсий анализа этих двух методик. В более общем случае данный подход применяют для оценки значимости различия двух выборочных дисперсий, например, с целью выяснения, можно ли их считать выборочными оценками одной и той же дисперсии генеральной совокупности.

При сравнении прецизионности двух методик анализа с оценками дисперсий s21 и s22 (s21 > s22) вычисляют критерий Фишера F:

(2.1)

Критерий F характеризует при s21 > s22 достоверность различия между s21 и s22.

Вычисленное значение F сравнивают с табличным значением F _(_P, f1, f2), найденным при P1= 99 % (таблица 8.3 Приложения).

Если для вычисленного значения F выполняется неравенство:

(2.2)

то различие дисперсий s21 и s22 признается статистически значимым с вероятностью P1, что позволяет сделать заключение о более высокой прецизионности второй методики.

Если выполняется неравенство:

(2.3)

то различие значений s21 и _s22 не может быть признано значимым и заключение о различии прецизионности (сходимости) методов сделать нельзя ввиду недостаточного объема информации.

(2.4)

то целесообразно провести дальнейшие экспериментальные исследования для методики с лучшей прецизионностью (сходимостью).

При сравнении двух методик анализа результаты статистической обработки могут быть представлены в виде табл. 2.1.

Таблица 2.1. Данные для сравнительной статистической оценки двух методик анализа по прецизионности
Mетодика № п/п | µ | f |  | s | Р | t(P,f) (табл.) | Δx | ε | tвыч | F(P1,f1,f2) (табл.) при P = 99% | Fвыч | δ | Примечания
--- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | ---
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14
1 |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |
2 |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |

Сравнение методик анализа желательно проводить при µ1 = µ2, f1 > 10 и f2 > 10. Если точные значения µ1 и µ2 неизвестны, величины δ и tвыч не определяют.

Если при измерениях получают логарифмы исходных вариант, то вместо величин µ, и s в табл. 2.1. приводят величины lgµ, и slg. При этом в графу 8 вносят величину Δlgx , а в графу 9 – максимальное по абсолютной величине значение ε. Аналогичные замены проводят при вычислении t по уравнению (1.38) и F – по уравнению (3.1).

Пример сравнения двух методик анализа по прецизионности приведён в разделе 7.4.

##### 3. Сравнение средних результатов выборок

3.1. Данные для сравнения результатов выборок

Если с помощью данной методики анализа определяют значение некоторой величины А, то для экспериментально полученной однородной выборки объема m рассчитывают значения величин, приведённых в таблице 3.1. Если же для данной методики уже имеются данные для статистической обработки (например, полученные при сравнении методик по прецизионности (табл. 2.1)), то в целях значительного сужения границ доверительного интервала за счет большего числа степеней свободы (уравнение 1.23) возможно их использование при заполнении граф 2, 4, 5, 7, 8 и 9 таблицы 3.1.

Если , величины s и f целесообразно вычислять по уравнениям (1.21) и (1.15).

Таблица 3.1. Данные для сравнения средних результатов выборок
m | f |  | s |  | Р | t(P,f) | Δx | или |
--- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | ---
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10

Во многих случаях проще использовать относительные (по отношению к ) величины. В этом случае целесообразно использовать данные табл. 3.2.

Таблица 3.2. Данные для сравнения средних результатов выборок с использованием относительных величин
m | f |  | s | sr |  | Р | t(P,f) |  |
--- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | ---
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10

Таким образом, на основании уравнения (1.21) для измеряемой величины А при незначительной систематической погрешности с вероятностью Р выполняется условие:

(3.1)

т. е., величина А при незначительной систематической погрешности лежит в пределах:

(3.2)

или с использованием относительных величин:

(3.2a)

Если при измерениях получают логарифмы исходных вариант, в графе 9 таблицы 3.1 приводят величину , а каждую из граф 3, 9 и 10 разбивают на две (а, б). В графе 3а приводят значение , в графе 3б – значение , в графах 9а и 9б – соответственно значения нижней и верхней границ доверительного интервала для (уравнения (1.31) и (1.32)). Наконец, в графе 10 приводят максимальное по абсолютной величине значение (уравнение (1.33а)).

3.2. Сравнение средних результатов двух выборок

Если в результате измерений одной и той же величины А получены две выборки объема n1 и n2, причем , может возникнуть необходимость проверки статистической достоверности гипотезы:

(3.3)

т. е. значимости величины разности ( ).

Такая проверка необходима, например, если величина А определялась двумя разными методиками с целью их сравнения, или, если величина А определялась одной и той же методикой для двух разных объектов, идентичность которых требуется доказать. Для проверки гипотезы (3.3) следует установить, существует ли статистически значимое различие между дисперсиями s21 и s22 . Эта проверка проводится так же, как при сравнении двух методик анализа по воспроизводимости согласно уравнениям (2.1)–(2.3).

Рассматривают три случая.

Различие дисперсий s21 и s22 статистически незначимо, когда справедливо неравенство (2.3). В этом случае средневзвешенное значение s2, учитывающее не только количество выборок (дисперсий), но и их объем, вычисляют по уравнению (1.5), а дисперсию s2P разности – по уравнению:

Далее вычисляют критерий Стьюдента:

Если при выбранном значении Р2 (например, при Р2 = 95%):

(3.6)

то результат проверки положителен: разность ( ) является значимой и гипотезу отбрасывают. В противном случае надо признать, что эта гипотеза не противоречит экспериментальным данным.

Различие дисперсий _s21 и s22 статистически значимо, когда справедливо неравенство (2.2). Если s21 > _s22 , дисперсию _s21 разности находят по уравнению (3.7), а число степеней свободы _f' – по уравнению (3.8):

Следовательно, в данном случае:

(3.9)

Вычисленное по уравнению (3.9) значение t сравнивают с табличным значением t(Р2,f'), как это описано выше для первого случая.

Приведённые выше расчеты упрощаются, когда n1 ≈ n2 и s21 >> s22. Тогда в отсутствие систематической погрешности среднее выборки объёма n2 принимают за достаточно точную оценку величины А, т. е. принимают = µ. Справедливость гипотезы = µ, эквивалентной гипотезе (3.3), проверяют с помощью уравнений (1.38) и (1.39), принимая f1 = n1 –1. Гипотеза (3.3) отклоняется как статистически недостоверная, если выполнятся неравенство (1.39).

Известно точное значение величины А. Если A=µ, проверяют две гипотезы: = π и = µ. Проверку выполняют с помощью уравнений (1.38) и (1.39) отдельно для каждой из гипотез. Если обе проверяемые гипотезы статистически достоверны, то следует признать достоверной и гипотезу (3.3). В противном случае гипотеза (3.3) должна быть отброшена.

Если при измерениях получают логарифмы исходных вариант, при сравнении средних используют величины , s21g и s1g . В тех случаях, когда разность оказывается значимой, определяют доверительный интервал для разности соответствующих генеральных средних :

(3.10)

Пример сравнения средних результатов двух выборок приведен в разделе 7.5.

##### 4. Интерпретация результатов анализа

Оценка сходимости результатов параллельных определений. При рядовых исследованиях аналитик обычно проводит 2-3, реже 4 параллельных определения. Варианты полученной при этом упорядоченной выборки объёма m, как правило, довольно значительно отличаются друг от друга. Если метод анализа метрологически аттестован, то максимальная разность результатов двух параллельных определений должна удовлетворять неравенству:

(4.1)

где L(P, m) – фактор, вычисленный по Пирсону при Р = 95%.

Таблица 4.1. Фактор, вычисленный по Пирсону
m | 2 | 3 | 4
--- | --- | --- | ---
L(95%, m) | 2,77 | 3,31 | 3,65

Если неравенство (4.1) не выполняется, необходимо провести дополнительное определение и снова проверить, удовлетворяет ли величина | x1 - xn | неравенству (4.1).

Если для результатов 4 параллельных определений неравенство (4.1) не выполняется, одна из вариант (x1 или xn) должна быть отброшена и заменена новой. При невозможности добиться выполнения неравенства (5.1) следует считать, что конкретные условия анализа привели к снижению воспроизводимости метода и принятая оценка величины s применительно к данному случаю является заниженной. В этом случае поступают, как указано в разделе 1.

Определение необходимого числа параллельных определений. Если необходимо получить средний результат с относительной погрешностью c φ, причем метод анализа метрологически аттестован, необходимое число параллельных определений m находят учётом с уравнений (1.23) и (1.24):

(4.2)

Гарантия качества продукции. Предположим, что качество продукции регламентируется предельными значениями amin и amax величины А, которую определяют на основании результатов анализа. Примем, что вероятность соответствия качества продукта условию:

(4.3)

должна составлять %.

Пусть величину А находят экспериментально, как среднее выборки объема т, а метод еёе определения метрологически аттестован. Тогда условие (5.3) будет выполняться с вероятностью , если значение = А будет лежать в пределах:

Значения коэффициента U для вероятности = 95% и = 99% соответственно равны 1,65 и 2,33. Иными словами, для гарантии качества наблюдаемые пределы изменения величины А на практике следует ограничить значениями:

Наоборот, если заданы значения Amin и Amax, значения amin и amax, входящие в неравенство (4.3), могут быть найдены путем решения уравнений (4.6) и (4.7). Наконец, если заданы пары значений Amin, amin и Amax, amax, то уравнения (4.6) и (4.7) могут быть решены относительно т. Это может быть использовано для оценки необходимого числа параллельных определений величины А.

Примечание 4.1. В уравнениях (4.5), (4.6) и (4.7) величина коэффициента U( ) должна быть заменена величиной t ( , f ), если значение f, определённое по уравнениям (1.4) или (1.14), меньше 15.

Примечание 4.2. Для случая, предусмотренного примечанием 5.1, описанные в разделе 5 вычисления проводят с использованием величин , lg xi, slg и т. п.

Пример 4.1. Рассмотрим данные табл. 3, относящиеся к выборке 1, как метрологическую характеристику используемого метода анализа.

- а) Пусть amin = 98%, amax = 100,50%. Тогда для испытуемого образца продукта средний результат анализа при проведении трех параллельных определений (т = 3) должен находиться в пределах:

- б) Реальный средний результат анализа образца испытуемого продукта
  А = 99% (при т = 3). Тогда определение пределов amin и amax, гарантированно характеризующих качество данного образца с заданной доверительной вероятностью , проводим, исходя из уравнения (4.6) или (4.7), полагая

Полученные оценки amin и amax близки к границам доверительного интервала A = 99 ± 0,56, что соответствует примечанию 4.1.

##### 5. Расчёт и статистическая оценка параметров линейной зависимости

При использовании физических, физико-химических и химических методов анализа для количественного определения веществ непосредственному измерению подвергается некоторая величина у (аналитический сигнал), которая является, как правило, линейной функцией искомой концентрации (количества) х определяемого вещества или элемента. Иными словами, в основе таких методов анализа лежит экспериментально подтвержденная линейная зависимость:

(5.1)

где у - измеряемая величина (измеряемое значение аналитического сигнала);
х – концентрация (количество) определяемого вещества или элемента;
b – угловой коэффициент линейной зависимости;
а – свободный член линейной зависимости.

(Здесь b и а рассматривают как коэффициенты (параметры) линейной регрессии y на x).

Для использования зависимости (5.1) в аналитических целях, т. е. для определения конкретной величины х по измеренному значению у, необходимо заранее найти числовые значения констант b и а, т.е. провести калибровку. Иногда константы зависимости (5.1) имеют тот или иной физический смысл, и их значения должны оцениваться с учетом соответствующего доверительного интервала. Если калибровка проведена и значения констант а и b определены, величину хi находят по измеренному значению yi:

(5.2)

При калибровке величину х рассматривают как аргумент, а величину у – как функцию. Наличие линейной зависимости между х и у не всегда является очевидным, её наличие целесообразно подтверждать расчетным путем. Для этого по экспериментальным данным, полученным при калибровке, оценивают достоверность линейной связи между х и у с использованием корреляционного анализа и лишь затем рассчитывают значения констант а и b зависимости (7.1) и их доверительные интервалы. В первом приближении судить о достоверности линейной связи между переменными х и у можно по величине линейного коэффициента корреляции (или просто коэффициента корреляции) r, который вычисляют по формуле, исходя из экспериментальных данных:

(5.3)

Линейный коэффициент корреляции r изменяется в пределах от -1 до +1. Положительные значения r указывают на рост, а негативные - на уменьшение у с ростом х.

Линейный коэффициент корреляции r является частным случаем общего индекса корреляции R~c ~,который применим также и для нелинейных зависимостей между величинами у и х:

(5.3a)

где so - остаточное стандартное отклонение (стандартное отклонение линейной зависимости) (уравнение 5.7);
sy – стандартное отклонение величин у относительно среднего значения (5.15); рассчитывают с использованием уравнения (1.5).

Уравнение (5.3а) в силу своей простоты и наглядности нередко используют вместо уравнения (4.3) в том случае, когда знак коэффициента корреляции не имеет значения.

Чем ближе абсолютная величина |r| к единице, тем менее случайна наблюдаемая линейная зависимость между переменными х и у. Коэффициент корреляции r используют обычно для выявления стохастической взаимосвязи между величинами, функциональная зависимость между которыми может и отсутствовать. Коэффициент корреляции является значимым, если его величина для данной вероятности Р и числа степеней свободы f превышает значения, приведённые табл. 8.4. Приложения. В противном случае нельзя говорить о существовании значимых зависимостей (5.1)-(5.2).

Значимость коэффициента корреляции является обязательным, но не достаточным условием использования уравнений (5.1)–(5.2) для аналитических целей. При статистической обработке результатов физического, физико-химического или химического методов анализа лекарственных средств могут быть использованы линейные зависимости с коэффициентом корреляции |r| ≥ 0,98 (при соответствии требованиям табл. 8.4. Приложения), а при анализе следовых количеств определяемых веществ рассматривают линейные зависимости с коэффициентом корреляции |r| ≥ 0,90. При столь близких значениях величины |r| к единице формальное подтверждение наличия линейной связи между переменными x и y проводить не следует. Вместе с тем необходимо учитывать, что для различных методов анализа лекарственных средств, требования к линейности метода, могут быть различными.

Коэффициенты а и b и другие характеристики линейной зависимости (5.1) рассчитывают с использованием регрессионного анализа, т. е. методом наименьших квадратов по экспериментально измеренным значениям переменной у для заданных значений аргумента х. Пусть в результате эксперимента найдены представленные в таблице 5.1 пары значений аргумента х и функции у.

Таблица 5.1. Значения аргумента х и функции у.
i | xi | yi
--- | --- | ---
1 | x1 | y 1
2 | x2 | y2
… | … | …
m | xm | ym

Тогда, если величины у1 имеют одинаковую неопределенность (а такое допущение обычно выполняется для достаточно узкого диапазона варьирования величин у1), то

Если полученные значения коэффициентов а и b использовать для вычисления значений у по заданным в таблице 5.1 значениям аргумента х согласно зависимости (5.1), то вычисленные значения у обозначают через Y1, Y2, …​ , Yi, …​ Yn. Разброс значений у~i ~относительно значений Yi характеризует величина остаточной дисперсии s20 (дисперсии линейной зависимости), которую вычисляют по формуле:

(5.7)

Для того, чтобы уравнения (4.1) - (4.2) адекватно описывали экспериментальные данные, необходимо, чтобы остаточная дисперсия s20 не отличалась значимо по критерию Фишера (уравнения (2.1) и (2.2)) от дисперсии прецизионности величин у1. Последняя может быть найдена или спрогнозирована из паспортных данных оборудования.

В свою очередь, дисперсии констант b и а находят по уравнениям:

Стандартные отклонения sb и sa и величины Δb и Δa , необходимые для оценки доверительных интервалов констант уравнения регрессии, рассчитывают по уравнениям:

Коэффициенты а и b должны значимо отличаться от нуля, т.е. превышать, соответственно, величины ∆a и ∆b.

Уравнению (5.1) с константами а и b обязательно удовлетворяет точка с координатами и , называемая центром калибровочного графика:

Наименьшие отклонения значений yi от значений Yi наблюдаются в окрестностях центра графика. Стандартные отклонения sy и sx величин у и х, рассчитанных соответственно по уравнениям (4.1) и (4.2), исходя соответственно из известных значений х и у, определяют с учетом удаления последних от центра графика:

где - среднее значение;
nj – число вариант y, использованных при определении.

При выражения (5.16) и (5.17) принимают вид:

С учётом значений sy и sx могут быть найдены значения величин ∆y и ∆x:

Значения sx и ∆x, найденные при nj = 1, являются характеристиками прецизионности аналитической методики, если х – концентрация (количество), а у – функция х.

Обычно результаты статистической обработки по методу наименьших квадратов сводят в таблицу (табл. 5.2).

Таблица 5.2. Результаты статистической обработки экспериментальных данных, полученных при изучении линейной зависимости у = bx + a
f |  |  | b | a | t(P2; f) при P2 = 95% | Δb | Δa | s20 | r | sx при nj = 1, yj = | Δx |
--- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | ---
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13

Примечания 5.1:

1. Если целью экспериментальной работы являлось определение констант b и a, графы 11, 12 и 13 таблицы не заполняют.

2. Если y = b∙lg x + a, вычисления, описанные в настоящем разделе, выполняют с использованием уравнений (1.8), (1.9), (1.29)-(1.32).

3. Сравнение дисперсий s20 , полученных в разных условиях для двух линейных зависимостей, может быть проведено, как указано в разделе 2.

##### 6. Расчёт неопределённости функции нескольких случайных переменных

Описанные в разделах 1–4 настоящей общей фармакопейной статьи расчёты доверительных интервалов результатов методик анализа применимы лишь в том случае, если измеряемая величина (концентрация, содержание и т.д.) является функцией только одной случайной переменной. Однако большинство методик количественного определения при испытании лекарственных средств методами физического, физико-химического и химического анализа являются косвенными, то есть используют стандартные образцы. Следовательно, измеряемая величина является функцией, как минимум, двух случайных переменных – аналитических сигналов (оптическая плотность или поглощение, высота или площадь пика и т.д.) испытуемого и стандартного образцов. Кроме того, нередко возникает проблема прогнозирования неопределённости аналитической методики, состоящей из нескольких стадий (взвешивание, разведение, конечная аналитическая операция), каждая из которых является по отношению к другой случайной величиной.

Таким образом, возникает общая проблема оценки неопределенности косвенно измеряемой величины, зависящей от нескольких измеряемых величин, в частности, как рассчитывать неопределённость всей аналитической методики, если известны неопределенности отдельных ее составляющих (стадий).

Если измеряемая на опыте величина у является функцией п независимых случайных величин хi, то есть:

(6.1)

и число степеней свободы величин xi одинаково или достаточно велико (> 30, чтобы можно было применять статистику Гаусса, а не Стьюдента), то дисперсия величины у связана с дисперсиями величин xi соотношением (правило распространения неопределённостей):

(6.2)

Однако на практике степени свободы величин xt обычно невелики и не равны друг другу. Кроме того, обычно интерес представляют не сами дисперсии (стандартные отклонения), а доверительные интервалы, рассчитать которые, используя уравнение (5.2), при небольших и неодинаковых степенях свободы невозможно. Поэтому для расчета неопределённости величины у (Δу) предложены различные подходы, среди которых можно выделить два основных: линейная модель и подход Уэлча–Сатертуэйта.

6.1 Линейная модель

Если случайные переменные х~i ~статистически независимы, то доверительный интервал функции Δу связан с доверительными интервалами переменных Δxi соотношением (доверительные интервалы берутся для одной и той же вероятности):

(6.3)

Данное выражение является обобщением соотношения (6.2).

При испытании лекарственных средств методами физического, физико-химического и химического анализа, измеряемая величина у представляет собой обычно произведение или частное случайных и постоянных величин (масс навесок, разведений, поглощений или площадей пиков и т.д.), т.е. (К ‒ некая константа):

(6.4)

В этом случае соотношение (4.2) принимает вид:

(6.5)

где использованы относительные доверительные интервалы.

Соотношение (5.4) применимо при любых (разных) степенях свободы (в том числе и бесконечных) для величин xi. Его преимуществом является простота и наглядность. Использование абсолютных доверительных интервалов приводит к гораздо более громоздким выражениям, поэтому рекомендуется использовать относительные величины.

При проведении испытаний лекарственных средств в суммарной неопределённости (ΔAS:r) анализа обычно всегда можно выделить такие типы неопределённостей: неопределённость пробоподготовки (ΔSPr), неопределённость конечной аналитической операции (ΔFAO,r) и неопределённость аттестации стандартного образца (ΔRS,r). Величина ΔRS,r обычно мала, поэтому в приведённом выражении она не использована. Учитывая это, а также то, что анализ проводится и для испытуемого раствора (индекс «smp»), и для раствора сравнения (индекс «st»), выражение (5.5) можно представить в виде:

(6.6)

При этом каждое из слагаемых рассчитывают из входящих в него компонентов по уравнению (5.5).

Если число степеней свободы величин х~i ~одинаково или достаточно велико (> 30), выражение (5.5) даёт:

(6.7)

Это же соотношение получают при тех же условиях и из выражения (6.2).

6.2. Подход Уэлча-Сатертуэйта

В этом подходе дисперсию величины у (s2у) рассчитывают по соотношению (5.2), не обращая внимания на различие в степенях свободы (νi) величин xi Для полученной дисперсии s2у рассчитывают некое «эффективное» число степеней свободы veff (которое обычно является дробным), на основе которого затем по таблицам для заданной вероятности находят интерполяцией значения критерия Стьюдента. На основе его далее рассчитывают обычным путём доверительный интервал величины у (Δу):

(6.8)

Для определения величины у обычно выполняется уравнение (6.4). В этом случае в подходе Уэлча–Сатертуэйта соотношение (6.2) переходит в выражение (5.7), и соотношение (5.8) принимает более простой вид:

(6.9)

Здесь величину sy,r4 рассчитывают из соотношения (5.7).

Подход Уэлча–Сатертуэйта обычно даёт более узкие доверительные интервалы, чем линейная модель. Однако он гораздо сложнее в применении и не позволяет выделить так просто неопределённости разных этапов (с последующими рекомендациями по их минимизации), как линейная модель в форме выражения (6.6).

При прогнозе неопределённости анализа используют генеральные величины (с бесконечным числом степеней свободы). В этом случае подход Уэлча–Сатертуэйта совпадает с линейной моделью.

Пример расчета неопределённости функции нескольких переменных приведен в разделе 7.6.

##### 7. Примеры статистической обработки результатов испытаний

7.1. Вычисление среднего значения и дисперсии

При количественном определении действующего вещества в образце лекарственного препарата, были получены данные, указанные в табл. 7.1.

Содержание действующего вещества в образце | Порядковый номер варианты i
--- | ---
1 | 2 | 3 | 4 | 5
xi,% | 9,52 | 9,55 | 9,83 | 10,12 | 10,33

7.2. Проверка однородности выборки малого объема

При количественном определении действующего вещества в каждой из девяти (n = 9) выборок лекарственного препарата были получены данные, указанные в табл. 7.2 (в порядке возрастания).

Содержание действующего вещества | Порядковый номер варианты i
--- | ---
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9
xi,% | 0,62 | 0,81 | 0,83 | 0,86 | 0,87 | 0,90 | 0,94 | 0,98 | 0,99

По уравнениям (1.10б) и (1.11а) находим:

По табл. 8.1. Приложения находим:

Следовательно, гипотеза о том, что значение x1=0,62 должно быть исключено из рассматриваемой совокупности результатов измерений как отягощенное грубой погрешностью, может быть принята с доверительной вероятностью 95 %, но должна быть отвергнута, если выбранное значение доверительной вероятности равно 99%.

7.3.Вычисление доверительных интервалов и неопределённостей измерений

При определении количественного содержания действующего вещества в образце активной фармацевтической субстанции были получены данные (n = 10), указанные в таблице 7.3

Содержание действующего вещества | Порядковый номер варианты i
--- | ---
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10
xi,% | 49,80 | 49,83 | 49,87 | 49,87 | 49,92 | 50,01 | 50,05 | 50,06 | 50,10 | 50,11

Расчёты по уравнениям (1.2), (1.4), (1.5), (1.6) дали следующие результаты:

Доверительные интервалы результата отдельного определения и среднего результата при Р2 = 90% получаются согласно (1.24) и (1.22):

Тогда относительные неопределённости ε и , согласно (1.27) и (1.28), равны:

Обозначая истинное содержание действующего вещества в фармацевтической субстанции через µ, можно считать, что с 90 % доверительной вероятностью справедливы неравенства:

7.4.Сравнение двух методик анализа по прецизионности

Пусть для двух выборок аналитических данных (1 и 2), характеризующих, например, различные методики анализа, получены данные для статистической обработки, приведённые в графах 1–10 табл. 7.4.

Таблица 7.4.
Номер выборки | µ | f | ,% | s | Р2,% | t(P2, f) (табл.) | Δx | ε | tвыч | F(P1, f1, f2) (табл.) при P = 99% | Fвыч | δ
--- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | ---
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13
1 | 100 | 20 | 100,13 | 0,464 | 95 | 2,09 | 0,97 | 0,97 | 1,28 | 3,36 | 17,92 | -
2 | 100 | 15 | 98,01 | 0,110 | 95 | 2,13 | 0,23 | 0,24 | 72,36 | 3,36 | 17,92 | 1,99

Для заполнения графы 10 вычисляем значения tвыч(1) и tвыч(2):

Поскольку tвыч(1) = 1,28 < t1 (95%, 20) = 2,09, гипотеза может быть отвергнута, что позволяет считать результаты выборки 1 свободными от систематической ошибки.

Напротив, поскольку tвыч(2) = 72,36 >> t2 (95%, 15) = 2,13, гипотезу приходится признать статистически достоверной, что свидетельствует о наличии систематической ошибки в результатах выборки 2. В графу 13 вносим вычисленное значение δ2:

Заполним графы 11 и 12:

Следовательно, при Р1 = 99% гипотезу о различии дисперсий s21 и s22 следует признать статистически достоверной.

Выводы:

- результаты, полученные при использовании первой методики, являются правильными, т.е. они не отягощены систематической погрешностью;

- результаты, полученные при использовании второй методики, отягощены систематической погрешностью;

- по прецизионности вторая методика существенно превосходит первую методику.

7.5. Сравнение средних результатов двух выборок

При определении содержания действующего вещества в двух образцах лекарственного препарата, произведённых по разной технологии, получены данные для статистической обработки средних результатов, приведённые в таблице 7.5. Требуется определить, является ли первый образец по данному показателю лучшим в сравнении со вторым образцом.

Таблица 7.5.
№ образца | n | f | ,% | s |  | Р2,% | t(P2, f) | Δx |  | ,%
--- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | ---
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11
1 | 8 | 7 | 99,10 | 0,50 | 0,18 | 95 | 2,36 | 1,18 | 0,42 | 0,42
2 | 6 | 5 | 98,33 | 0,56 | 0,23 | 95 | 2,57 | 1,44 | 0,59 | 0,60

Поскольку то согласно неравенству (2.3) статистически достоверное различие величин s21 и s22 отсутствует.

Следовательно, гипотеза (3.3) проверяется с помощью уравнений (1.5), (1.7), (3.4) и (3.5).

Следовательно, с доверительной вероятностью Р2 = 95 % гипотеза может быть принята (т.е. первый образец лучше второго по содержанию действующего вещества). Однако с доверительной вероятностью Р~2 ~= 99% принять эту гипотезу нельзя из-за недостатка информации.

Если гипотеза принята, то определяют доверительный интервал разности генеральных средних (уравнение (3.10)):

7.6. Расчёт неопределённости результатов анализа лекарственных препаратов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

В таблетке со средней массой 0,50 г содержание вещества А составляет 0,050 г. Для количественного определения вещества А методом высокоэффективной жидкостной хроматографии готовили испытуемый раствор: навеску m=0,5052 г порошка растертых таблеток поместили в мерную колбу вместимостью 50 мл и довели объем раствора растворителем до метки. Параллельно готовили раствор сравнения: 0,0508 г стандартного образца поместили в мерную колбу на 50 мл и довели объем раствора растворителем до метки. Попеременно хроматографировали испытуемый раствор и раствор сравнения, получая по 5 хроматограмм. Площади полученных пиков представлены в таблице 7.6.

Таблица 7.6.
Наименование раствора | Площади пиков (S и Sst) для хроматограммы №
--- | ---
1 | 2 | 3 | 4 | 5
Испытуемый раствор | 13957605 | 13806804 | 13924245 | 13715195 | 14059478
Раствор сравнения | 14240777 | 14102192 | 14316388 | 14205217 | 14409585

7.6.1.Конечная аналитическая операция

Рассчитывают средние значения, содержание вещества А в одной таблетке и относительные стандартные отклонения площадей пиков для испытуемого раствора и раствора сравнения в конечной аналитической операции.

Средние значения площадей пиков:

- испытуемый раствор:
  (13957605+13806804+13924245+13715195+14059478)/5=13892665.

- раствор сравнения:
  (14240777+14102192+14316388+14205217+14409585)/5=14254832.

Содержание анализируемого вещества А в граммах в пересчёте на среднюю массу таблетки:

Относительные стандартные отклонения площадей пиков:

- испытуемый раствор:

- аналогично для раствора сравнения: RSDst = 0,81 %

7.6.2.Суммарная неопределённость пробоподготовки ΔSP,r

Неопределенности:

- неопределённость для мерной колбы вместимостью 50 мл - не более 0,17 %;

- неопределённость взвешивания на аналитических весах - не более 0,2 мг (0,0002 г), что составляет:

  - для испытуемого образца;

  - для стандартного образца.

Данные неопределённости можно считать доверительными интервалами для вероятности 95 %.

Суммарную неопределённость пробоподготовки рассчитывают по формуле

Приведенный расчёт является корректным для обоих подходов - линейной модели и подхода Уэлча-Сатертуэйта, поскольку число степеней свободы для каждого члена здесь бесконечно, то используется статистика Гаусса.

7.6.3. Расчёт суммарной неопределенности анализа ΔAs,r

Данный расчёт различен для линейной модели и подхода Уэлча-Сатертуэйта.

7.6.3.1 Линейная модель

Общий случай. Рассчитывают неопределённости конечной аналитической операции ΔFAO,r для испытуемого раствора и раствора сравнения. При расчете доверительных интервалов используют односторонний коэффициент Стьюдента для вероятности 95 % (равен 90 % для двустороннего распределения), который для числа степени свободы
(5-1=4) равен 2,13. Доверительные интервалы рассчитывают для среднего из 5 результатов, поэтому в знаменателе ставим :

- для испытуемого:

- для стандартного:

Суммарная неопределённость конечной аналитической операции:

Используя уравнение (5.7), рассчитывают суммарную неопределённость анализа ΔAs,r :

Использование объединённого стандартного отклонения.

Суммарную неопределённость анализа можно уменьшить за счет использования объединённого стандартного отклонения для конечной аналитической операции. Для этого нужно учесть, что RSD и RSDst являются выборочными величинами одной и той же генеральной совокупности. Проверяют вначале по Фишеру гипотезу о равенстве дисперсий:

Как видно, расчётное значение отношения дисперсий гораздо ниже табличного значения F-критерия на 95 % уровне значимости. Поэтому можно принять гипотезу о равенстве дисперсий и принять формулы подраздела 1.4. настоящей общей фармакопейной статьи для объединения выборок.

Рассчитывают объединенное стандартное отклонение по уравнению:

RSD~tot ~имеет число степеней свободы 2·(5-1)=8. Коэффициент Стьюдента для данного числа степеней свободы и односторонней вероятности 0,95 равен 1,86. Тогда доверительные интервалы результатов конечной аналитической операции для испытуемого и стандартного растворов будут равны:

Суммарная неопределенность конечной аналитической операции равна:

Используя уравнение (5.7) рассчитывают суммарную неопределенность анализа .

Как видно, данная величина меньше величины, полученной для обычного случая (1,29 %).

7.6.3.2 Подход Уэлча-Сатертуэйта

Находят стандартное отклонение пробоподготовки из доверительного интервала ΔSP,r = 0,83 %, используя коэффициент Гаусса 1,65 для односторонней вероятности 0,95 (поскольку число степеней свободы бесконечно, как для генеральной совокупности):

Из соотношения (5.5) найденное стандартное отклонение всей аналитической методики RSD2 и (RSDst)2 делят на 5, как для дисперсий среднего результата:

Находят эффективное число степеней свободы νeff . При этом для RSD и RSDst число степеней свободы равно 5-1=4, а для SSP,r ‒ бесконечность.

Находят коэффициент Стьюдента для числа степеней свободы 10,5 и односторонней вероятности 0,95 методом интерполяции - это 1,81. Тогда доверительный интервал всей аналитической методики будет:

Таким образом, рассчитанный доверительный интервал по подходу Уэлча-Сатертуэйта (1,10 %) получается меньше, чем для обычного случая и для линейной модели (1,29 % и 1,15 % соответственно).

##### 8. Приложения

Таблица 8.1. Критические значения контрольного критерия Q (P, n)
n | Q
--- | ---
P = 90 % | P = 95 % | P = 99 %
3 | 0,89 | 0,94 | 0,99
4 | 0,68 | 0,77 | 0,89
5 | 0,56 | 0,64 | 0,76
6 | 0,48 | 0,56 | 0,70
7 | 0,43 | 0,51 | 0,64
8 | 0,40 | 0,48 | 0,58
9 | 0,38 | 0,46 | 0,55

Таблица 8.2. Критические значения критерия Стьюдента
f | Доверительная вероятность | f | Доверительная вероятность
--- | --- | --- | ---
P = 95% | P = 99% | P = 99,9% | P = 95% | P = 99% | P = 99,9%
1 | 12,71 | 63,60 |  | 21 | 2,08 | 2,83 | 3,82
2 | 4,30 | 9,93 | 31,60 | 22 | 2,07 | 2,82 | 3,79
3 | 3,18 | 5,84 | 12,94 | 23 | 2,07 | 2,81 | 3,77
4 | 2,78 | 4,60 | 8,61 | 24 | 2,06 | 2,80 | 3,75
5 | 2,57 | 4,03 | 6,86 | 25 | 2,06 | 2,79 | 3,73
6 | 2,45 | 3,71 | 5,96 | 26 | 2,06 | 2,78 | 3,71
7 | 2,37 | 3,50 | 5,41 | 27 | 2,05 | 2,77 | 3,69
8 | 2,31 | 3,36 | 5,04 | 28 | 2,05 | 2,76 | 3,67
9 | 2,26 | 3,25 | 4,78 | 29 | 2,04 | 2,76 | 3,66
10 | 2,23 | 3,17 | 4,59 | 30 | 2,04 | 2,75 | 3,65
11 | 2,20 | 3,11 | 4,44 | 40 | 2,02 | 2,70 | 3,55
12 | 2,18 | 3,06 | 4,32 | 50 | 2,01 | 2,68 | 3,50
13 | 2,16 | 3,01 | 4,22 | 60 | 2,00 | 2,66 | 3,46
14 | 2,15 | 2,98 | 4,14 | 80 | 1,99 | 2,64 | 3,42
15 | 2,13 | 2,95 | 4,07 | 100 | 1,98 | 2,63 | 3,39
16 | 2,12 | 2,92 | 4,02 | 120 | 1,98 | 2,62 | 3,37
17 | 2,11 | 2,90 | 3,97 | 200 | 1,97 | 2,60 | 3,34
18 | 2,10 | 2,88 | 3,92 | 500 | 1,96 | 2,59 | 3,31
19 | 2,09 | 2,86 | 3,88 | ∞ | 1,96 | 2,58 | 3,29
20 | 2,09 | 2,85 | 3,85 |  |  |  |
f | p = 0,05 | p = 0,01 | p = 0,001 | f | p = 0,05 | p = 0,01 | p = 0,001
Уровень значимости | Уровень значимости

Таблица 8.3. Критические значения критерия Фишера
f2 – число степеней свободы для меньшей дисперсии | f1 – число степеней свободы для большей дисперсии
--- | ---
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 20 | ∞
3 | 10,13 34,12 | 9,55 30,81 | 9,28 29,46 | 9,12 28,71 | 9,01 28,24 | 8,94 27,91 | 8,88 27,67 | 8,84 27,49 | 8,66 26,69 | 8,53 26,12
6 | 5,99 13,74 | 5,14 10,92 | 4,76 9,78 | 4,53 9,15 | 4,39 8,75 | 4,28 8,47 | 4,21 8,26 | 4,15 8,10 | 3,87 7,39 | 3,67 6,88
9 | 5,12 10,56 | 4,26 8,02 | 3,86 6,99 | 3,63 6,42 | 3,48 6,06 | 3,87 5,80 | 3,29 5,62 | 3,23 5,47 | 2,93 4,80 | 2,71 4,31
12 | 4,75 9,33 | 3,89 6,93 | 3,49 5,95 | 3,26 5,41 | 3,11 5,06 | 3,00 4,82 | 2,91 4,64 | 2,85 4,50 | 2,54 3,86 | 2,30 3,36
15 | 4,54 8,68 | 3,68 6,36 | 3,29 5,42 | 3,06 4,89 | 2,90 4,56 | 2,79 4,32 | 2,71 4,14 | 2,64 4,00 | 2,33 3,37 | 2,07 2,87
20 | 4,35 8,10 | 3,49 5,85 | 3,10 4,94 | 2,87 4,43 | 2,71 4,10 | 2,60 3,87 | 2,51 3,70 | 2,45 3,56 | 2,12 2,94 | 1,84 2,42
30 | 4,17 7,56 | 3,32 5,39 | 2,92 4,51 | 2,69 4,02 | 2,53 3,70 | 2,42 3,47 | 2,33 3,30 | 2,27 3,17 | 1,93 2,55 | 1,62 2,01
60 | 4,00 7,08 | 3,15 4,98 | 2,76 4,13 | 2,53 3,65 | 2,37 3,34 | 2,25 3,12 | 2,17 2,95 | 2,10 2,82 | 1,75 2,20 | 1,39 1,60
∞ | 3,84 6,63 | 3,00 4,61 | 2,60 3,78 | 2,37 3,32 | 2,21 3,02 | 2,10 2,80 | 2,01 2,64 | 1,94 2,51 | 1,57 1,88 | 1,00 1,00

f для P = 95% напечатаны жирным шрифтом, а f для P = 99% – обычным.

Таблица 8.4. Процентные точки выборочного коэффициента корреляции r
| Вероятность P1 или P2
--- | ---
P1→ | 95% | 97,5% | 99% | 99,5% | 99,75% | 99,95%
P2→ | 90% | 95% | 98% | 99% | 99,5% | 99,9%
Число степеней свободы f↓ | Значения R (P, f)
1 | 0,9877 | 0,99692 | 0,999507 | 0,999877 | 0,999969 | 0,999999
2 | 0,900 | 0,950 | 0,980 | 0,990 | 0,9950 | 0,999000
3 | 0,805 | 0,878 | 0,9343 | 0,9587 | 0,9740 | 0,99114
4 | 0,729 | 0,811 | 0,882 | 0,9172 | 0,9417 | 0,9741
5 | 0,669 | 0,754 | 0,833 | 0,875 | 0,9056 | 0,9509
6 | 0,621 | 0,707 | 0,789 | 0,834 | 0,870 | 0,9249
7 | 0,582 | 0,666 | 0,750 | 0,798 | 0,836 | 0,898
8 | 0,549 | 0,632 | 0,715 | 0,765 | 0,805 | 0,872
9 | 0,521 | 0,602 | 0,685 | 0,735 | 0,776 | 0,847
10 | 0,497 | 0,576 | 0,658 | 0,708 | 0,750 | 0,823
11 | 0,476 | 0,553 | 0,634 | 0,684 | 0,726 | 0,801
12 | 0,457 | 0,532 | 0,612 | 0,661 | 0,703 | 0,780
13 | 0,441 | 0,514 | 0,592 | 0,641 | 0,683 | 0,760
14 | 0,426 | 0,497 | 0,574 | 0,623 | 0,664 | 0,742
15 | 0,412 | 0,482 | 0,558 | 0,606 | 0,647 | 0,725
16 | 0,400 | 0,468 | 0,543 | 0,590 | 0,631 | 0,708
17 | 0,389 | 0,456 | 0,529 | 0,575 | 0,616 | 0,693
18 | 0,378 | 0,444 | 0,516 | 0,561 | 0,602 | 0,679
19 | 0,369 | 0,433 | 0,503 | 0,549 | 0,589 | 0,665
20 | 0,360 | 0,423 | 0,492 | 0,537 | 0,576 | 0,652
25 | 0,323 | 0,381 | 0,445 | 0,487 | 0,524 | 0,597
30 | 0,296 | 0,349 | 0,409 | 0,449 | 0,484 | 0,554
35 | 0,275 | 0,325 | 0,381 | 0,428 | 0,452 | 0,519
40 | 0,257 | 0,304 | 0,358 | 0,393 | 0,425 | 0,490
45 | 0,243 | 0,288 | 0,338 | 0,372 | 0,403 | 0,465
50 | 0,231 | 0,273 | 0,322 | 0,354 | 0,380 | 0,443
60 | 0,211 | 0,250 | 0.295 | 0,325 | 0,352 | 0,408
70 | 0,195 | 0,232 | 0,274 | 0,302 | 0,327 | 0,380
80 | 0,183 | 0,217 | 0,257 | 0,283 | 0,307 | 0,357
90 | 0,173 | 0,205 | 0,242 | 0,267 | 0,290 | 0,338
100 | 0,164 | 0,195 | 0,230 | 0,254 | 0,276 | 0,321
P1 – вероятность того, что r< R или R< r (односторонний критерий); P2 – вероятность того, что коэффициент корреляции r находится в интервале R< r< R (двусторонний критерий); Выброчный коэффициент корреляции r значимо (с надежностью P1 или P2) отличается от нуля, если его абсолютная величина

Таблица 8.5. Процентные точки распределения
f | P1=95% | P1=99%
--- | --- | ---
1 | 3,841 | 6,635
2 | 5,991 | 9,210
3 | 7,815 | 11,345
4 | 9,488 | 13,277
5 | 11,070 | 15,086
6 | 12,592 | 16,812
7 | 14,067 | 18,475
8 | 15, 507 | 20,090
9 | 16,919 | 21,666
10 | 18,307 | 23,209
11 | 19,675 | 24,725
12 | 21,026 | 26,217
13 | 22,362 | 27,688
14 | 23,685 | 29,141
15 | 24,996 | 30,578
16 | 26,296 | 32,000
17 | 27,587 | 33,409
18 | 28,869 | 34,805
19 | 30,144 | 36,191
20 | 31,410 | 37,566
21 | 32,671 | 38,932
22 | 33,924 | 40,289
23 | 35,172 | 41,638
24 | 36,415 | 42,980
25 | 37,652 | 44,314
26 | 38,885 | 45,642
27 | 40,113 | 46,963
28 | 41,337 | 48,278
29 | 42,557 | 49,588
30 | 43,773 | 50,892
40 | 55,758 | 63,691
50 | 67,505 | 76,154
P1 – вероятность того, что оцениваемое значение χ2 не превышает табличное. Это оцениваемое значение рассматривается как значимое (P1 = 95%) или как высоко значимое (P1 = 99%).

Таблица 8.6. Критические значения критерия Кохрена
f→ g↓ | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 16 | 36 | ∞
--- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | ---
G(Р=95%)
2 | 0,9985 | 0,9750 | 0,9392 | 0,9057 | 0,8772 | 0,8534 | 0,8332 | 0,8159 | 0,8010 | 0,7880 | 0,7341 | 0,6602 | 0,5000
3 | 0,9669 | 0,8709 | 0,7977 | 0,7457 | 0,7071 | 0,6771 | 0,6530 | 0,6333 | 0,6167 | 0,6025 | 0,5466 | 0,4748 | 0,3333
4 | 0,9065 | 0,7679 | 0,6841 | 0,6287 | 0,5895 | 0,5598 | 0,5365 | 0,5175 | 0,5017 | 0,4884 | 0,4366 | 0,3720 | 0,2500
5 | 0,8412 | 0,6838 | 0,5981 | 0,5440 | 0,5063 | 0,4783 | 0,4564 | 0,4387 | 0,4241 | 0,4118 | 0,3645 | 0,3066 | 0,2000
6 | 0,7808 | 0,6161 | 0,5321 | 0,4803 | 0,4447 | 0,4184 | 0,3980 | 0,3817 | 0,3682 | 0,3568 | 0,3135 | 0,2612 | 0,1667
7 | 0,7271 | 0,5612 | 0,4800 | 0,4307 | 0,3974 | 0,3726 | 0,3535 | 0,3384 | 0,3259 | 0,3154 | 0,2756 | 0,2278 | 0,1429
8 | 0,6798 | 0,5157 | 0,4377 | 0,3910 | 0,3595 | 0,3362 | 0,3185 | 0,3043 | 0,2926 | 0,2829 | 0,2462 | 0,2022 | 0,1250
9 | 0,6385 | 0,4775 | 0,4027 | 0,3584 | 0,3286 | 0,3067 | 0,2901 | 0,2768 | 0,2659 | 0,2568 | 0,2226 | 0,1820 | 0,1111
10 | 0,6020 | 0,4450 | 0,3733 | 0,3311 | 0,3029 | 0,2823 | 0,2666 | 0,2541 | 0,2439 | 0,2353 | 0,2032 | 0,1655 | 0,1000
12 | 0,5410 | 0,3924 | 0,3264 | 0,2880 | 0,2624 | 0,2439 | 0,2299 | 0,2187 | 0,2098 | 0,2020 | 0,1737 | 0,1403 | 0,0833
15 | 0,4709 | 0,3346 | 0,2758 | 0,2419 | 0,2195 | 0,2034 | 0,1911 | 0,1815 | 0,1736 | 0,1671 | 0,1429 | 0,1144 | 0,0667
20 | 0,3894 | 0,2705 | 0,2205 | 0,1921 | 0,1735 | 0,1602 | 0,1501 | 0,1422 | 0,1357 | 0,1303 | 0,1108 | 0,0879 | 0,0500
24 | 0,3434 | 0,2354 | 0,1907 | 0,1656 | 0,1493 | 0,1374 | 0,1286 | 0,1216 | 0,1160 | 0,1113 | 0,0912 | 0,0743 | 0,0417
30 | 0,2929 | 0,1980 | 0,1593 | 0,1377 | 0,1237 | 0,1137 | 0,1061 | 0,1002 | 0,0958 | 0,0921 | 0,0771 | 0,0604 | 0,0333
40 | 0,2370 | 0,1576 | 0,1259 | 0,1082 | 0,0968 | 0,0887 | 0,0827 | 0,0780 | 0,0745 | 0,0713 | 0,0595 | 0,0462 | 0,0250
60 | 0,1737 | 0,1131 | 0,0895 | 0,0765 | 0,0682 | 0,0623 | 0,0583 | 0,0552 | 0,0520 | 0,0497 | 0,0411 | 0,0316 | 0,0167
∞ | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0
G(Р=99%)
2 | 0,9999 | 0,9950 | 0,9794 | 0,9586 | 0,9373 | 0,9172 | 0,8988 | 0,8823 | 0,8674 | 0,8539 | 0,7949 | 0,7067 | 0,5000
3 | 0,9933 | 0,9423 | 0,8831 | 0,8335 | 0,7933 | 0,7606 | 0,7335 | 0,7107 | 0,6912 | 0,6743 | 0,6059 | 0,5153 | 0,3333
4 | 0,9676 | 0,8643 | 0,7814 | 0,7212 | 0,6761 | 0,6410 | 0,6129 | 0,5897 | 0,5702 | 0,5536 | 0,4884 | 0,4057 | 0,2500
5 | 0,9279 | 0,7885 | 0,6957 | 0,6329 | 0,5875 | 0,5531 | 0,5259 | 0,5037 | 0,4854 | 0,4697 | 0,4094 | 0,3351 | 0,2000
6 | 0,8828 | 0,7218 | 0,6258 | 0,5635 | 0,5195 | 0,4866 | 0,4608 | 0,4401 | 0,4229 | 0,4081 | 0,3529 | 0,2858 | 0,1667
7 | 0,8376 | 0,6644 | 0,5685 | 0,5080 | 0,4659 | 0,4347 | 0,4105 | 0,3911 | 0,3751 | 0,3616 | 0,3105 | 0,2494 | 0,1429
8 | 0,7945 | 0,6152 | 0,5209 | 0,4627 | 0,4226 | 0,3932 | 0,3704 | 0,3522 | 0,3373 | 0,3248 | 0,2779 | 0,2214 | 0,1250
9 | 0,7544 | 0,5727 | 0,4810 | 0,4251 | 0,3870 | 0,3592 | 0,3378 | 0,3207 | 0,3067 | 0,2950 | 0,2514 | 0,1992 | 0,1111
10 | 0,7175 | 0,5358 | 0,4469 | 0,3934 | 0,3572 | 0,3308 | 0,3106 | 0,2945 | 0,2813 | 0,2704 | 0,2297 | 0,1811 | 0,1000
12 | 0,6528 | 0,4751 | 0,3919 | 0,3428 | 0,3099 | 0,2861 | 0,2680 | 0,2535 | 0,2419 | 0,2320 | 0,1961 | 0,1535 | 0,0833
15 | 0,5747 | 0,4069 | 0,3317 | 0,2882 | 0,2593 | 0,2386 | 0,2228 | 0,2104 | 0,2002 | 0,1918 | 0,1612 | 0,1251 | 0,0667
20 | 0,4799 | 0,3297 | 0,2654 | 0,2288 | 0,2048 | 0,1877 | 0,1748 | 0,1646 | 0,1567 | 0,1501 | 0,1248 | 0,0960 | 0,0500
24 | 0,4247 | 0,2871 | 0,2295 | 0,1970 | 0,1759 | 0,1608 | 0,1495 | 0,1406 | 0,1338 | 0,1283 | 0,1060 | 0,0810 | 0,0417
30 | 0,3632 | 0,2412 | 0,1913 | 0,1635 | 0,1454 | 0,1327 | 0,1232 | 0,1157 | 0,1100 | 0,1054 | 0,0867 | 0,0658 | 0,0333
40 | 0,2940 | 0,1915 | 0,1508 | 0,1281 | 0,1135 | 0,1033 | 0,0957 | 0,0898 | 0,0853 | 0,0816 | 0,0668 | 0,0503 | 0,0250
60 | 0,2151 | 0,1371 | 0,1069 | 0,0902 | 0,0796 | 0,0721 | 0,0668 | 0,0625 | 0,0594 | 0,0567 | 0,0461 | 0,0344 | 0,0167
∞ | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0017 Полиморфизм

Взамен ОФС.1.1.0017.15

Полиморфизм кристаллических веществ − способность соединений одинакового химического состава, в твёрдом состоянии, существовать в различных кристаллических формах (полиморфных модификациях) Каждая полиморфная модификация устойчива в определённых интервалах температуры, давления и других внешних условий.

Вещества, которые находятся в некристаллическом твёрдом состоянии, называются аморфными. В случае если это явление наблюдается у химического элемента (например, серы), вместо термина «полиморфизм» используется термин «аллотропия».

Оценка полиморфизма фармацевтической субстанции обязательна в тех случаях, когда полиморфная модификация определяет терапевтическую эффективность и безопасность лекарственного препарата.

В основе структурной классификации типов полиморфизма лежат как параметры кристаллической решётки, так и внутренние геометрические параметры − углы вращения, валентные углы и связи, определяющие конформацию молекулы (конформационный полиморфизм).

Полиморфные модификации являются термодинамическими фазами и устойчивы в определённом интервале температур, давлений или других внешних условий, например, воздействующего электрического или магнитного полей. Переход одной модификации в другую происходит при определённой температуре, сопровождается тепловым эффектом и скачкообразным изменением свойств.

Скорость полиморфного превращения определяется величиной преодолеваемого энергетического барьера и зависит от числа и характера связей, разрывающихся при переходе одной кристаллической структуры в другую.

С точки зрения термодинамики различают монотропные и энантиотропные полиморфные превращения (переходы). Энантиотропные (обратимые) превращения характеризуются обратимостью перехода полиморфных модификаций из одной в другую, т.е. в результате нагревания низкотемпературная модификация переходит в высокотемпературную, которая при определённых температурах и давлении может существовать в метастабильном состоянии или переходить в низкотемпературную модификацию. Монотропные (необратимые) переходы при любых температурах возможны лишь в одном направлении – от метастабильной к более термодинамически выгодной, стабильной модификации.

Монотропные полиморфные превращения часто наблюдаются у действующих веществ, которые могут иметь несколько метастабильных модификаций. Различие между температурами плавления модификаций является критерием их стабильности: чем оно меньше, тем более стабильна полиморфная модификация.

Полиморфные модификации проявляют различные физические и физико-химические свойства, такие как температура плавления, размер кристаллов, плотность, растворимость и скорость растворения, удельная теплоёмкость, электропроводность, угол смачивания, показатель преломления, коэффициент рассеяния света, ИК-спектры, КР-спектры, термограммы, рентгеновские дифрактограммы. Химические свойства полиморфных модификаций одинаковы в жидкой фазе (растворах или в расплавах).

Различные полиморфные модификации одной и той же фармацевтической субстанции могут проявлять различную терапевтическую (фармакологическую) активность, что должно быть учтено при разработке технологии получения лекарственного препарата.

Для новых фармацевтических субстанций необходимо зафиксировать то кристаллическое состояние, при котором наблюдалась соответствующая эффективность и токсичность при доклиническом изучении.

Свойства полиморфных модификаций действующего вещества проявляются в лекарственных формах с твёрдой дисперсной фазой: в суспензиях, гранулах, таблетках, капсулах и др., что необходимо контролировать соответствующими методами.

Конформационный (молекулярный) полиморфизм может оказывать влияние на сохранение разных свойств полиморфной модификации не только в твёрдом состоянии, но и в коллоидных растворах (термодинамически неравновесных, кинетически заторможенных).

В отличие от полиморфизма, сольватоморфизм (псевдополиморфизм) обусловлен сольватацией. Сольваты – молекулярные комплексы, которые в кристаллической решётке содержат молекулы растворителя при определённом стехиометрическом соотношении вещества и растворителя. Частный случай сольватов − гидраты (если растворителем является вода).

Физико-химические свойства кристаллических сольватов должны учитываться при разработке процессов грануляции, сушки, прессования, измельчения, таблетирования и др. Сольваты фармацевтических субстанций и их несольватированные формы обладают различной растворимостью, скоростью растворения и биодоступностью.

Для получения полиморфных модификаций и кристаллических сольватов применяют методы равновесной и неравновесной кристаллизации при варьировании условий кристаллизации (скорость кристаллизации, температура, тип растворителя, концентрация раствора и др.), а также метод осаждения и различные методы сушки.

Для обнаружения и исследования полиморфных модификаций фармацевтических субстанций используют различные методы, среди которых основными являются следующие.

1. Дифракция рентгеновских лучей:

   1. Рентгеноструктурный анализ;

   2. Метод порошкового рентгеноструктурного анализа.

2. Спектральные методы:

   1. Cпектрометрия в инфракрасной области;

   2. Рамановская спектрометрия;

   3. Твёрдофазная спектроскопия ядерного магнитного резонанса.

3. Термоаналитические методы:

   1. Термогравиметрия;

   2. Дифференциальная сканирующая калориметрия;

   3. Термомикроскопия.

4. Оптическая и сканирующая электронная микроскопия (в том числе поляризационная).

5. Растворимость и скорость растворения.

6. Плотность

7. Биологические методы.

Эти методы дополняют друг друга, поэтому часто используют комплекс различных методов исследования.

Диаграммы давление − температура и энергия − температура, основанные на экспериментальных данных, характеризуют стабильность полиморфных модификаций. Для изучения сольватов предпочтительно использовать дифференциальную сканирующую калориметрию и термогравиметрию в комбинации с определением растворимости, скорости растворения и Рамановской спектрометрией. При изучении гидратов определяют изотермы сорбции-десорбции воды для характеристики зон относительной стабильности.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0018 Кристалличность

Взамен ОФС.1.1.0018.15

Большинство органических и неорганических веществ, относящихся к субстанциям для фармацевтического применения, являются твёрдыми веществами, которые могут быть описаны структурами, находящимися в диапазоне от идеального кристалла до аморфного вещества.

Реальные кристаллы имеют структуры, занимающие положения между идеальным кристаллом и аморфным состоянием. Место кристалла на шкале, расположенной между этими двумя противоположными состояниями, называется кристалличностью.

Идеальный кристалл – это идеальное состояние вещества, которое достигается редко. Структурные единицы кристалла, называемые элементарными ячейками, равномерно и многократно повторяются в трёх измерениях пространства. Элементарная ячейка имеет определённую ориентацию и форму, которые определяются векторами трансляции a, b и c и углами α, β и γ, и, следовательно, она имеет определённый объём V, в котором находятся атомы и молекулы, необходимые для формирования кристалла. Кристаллическая система определятся тремя операторами симметрии дальнего порядка (трансляционным, ориентационным и конформационным); различные мезофазы (жидкие кристаллы, кристаллы и пластичные кристаллы) имеют один или два оператора симметрии дальнего порядка; а идеальное аморфное состояние определяется отсутствием всех трёх операторов.

Каждый кристалл может быть классифицирован как представитель одной из семи возможных кристаллических систем, которые определяются отношением между индивидуальными размерами a, b и c, а также между индивидуальными углами α, β и γ элементарной ячейки. Структура данного кристалла может быть классифицирована в соответствии с одной из семи систем, в соответствии с одной из 14 пространственных решёток Браве и в соответствии с одной из 230 пространственных групп. Все 230 возможных пространственных групп, видов их симметрии и симметрии их дифрактограмм собраны в Международных кристаллографических таблицах (International Tables for Crystallography).

При кристаллизации многие вещества могут иметь более чем один тип кристаллической решетки; это явление называется полиморфизмом.

Полиморфизм представляет собой общее явление среди органических молекул, обусловливая различие их физико-химических свойств. Кристаллические полиморфные модификации имеют тот же химический состав, но различную внутреннюю структуру кристаллов и, как следствие, обладают различными физико-химическими свойствами. Различие кристаллической структуры полиморфных модификаций обусловлено различным расположением атомов друг относительно друга (упаковкой атомов) и/или различными конформациями молекул (ОФС «Полиморфизм»).

Ещё одно крайнее кристаллическое состояние — это идеальное или истинное аморфное состояние, при котором отсутствует симметрия дальнего порядка. Для большинства органических систем сохраняется определённый ближний порядок, что, однако, не предполагает его продления намного дальше взаимодействия с ближайшим соседом или следующим ближайшим соседом, т.е. обычно на расстояние менее 2–2,5 нм в небольших органических молекулах.

Аморфное вещество характеризуется отсутствием отчётливых отражений на рентгеновских дифрактограммах порошка (РПД) (ОФС «Рентгеновская порошковая дифрактометрия»).

Кристалличность реальных порошков может быть рассмотрена с использованием двух моделей кристалличности. В однофазной модели все частицы имеют одинаковую кристалличность, а в двухфазной модели каждая частица может быть кристаллической либо аморфной, и, таким образом, реальная кристалличность порошка является средневзвешенным двух указанных крайних состояний. Такой порошок получают при физическом перемешивании чисто кристаллической и аморфной фаз. В действительности порошок может содержать частицы с различной степенью кристалличности, также как и частицы различных размеров и форм.

Степень неупорядоченности в кристаллическом твёрдом веществе может влиять на многие физико-химические свойства субстанций для фармацевтического применения. Большое значение указанных свойств обосновывает важность проведения оценки степени неупорядоченности или кристалличности твёрдого вещества подходящим количественным методом.

Для определения кристалличности твёрдых веществ используют различные методы. Многие методы не позволяют самостоятельно осуществить обнаружение или количественное определение указанного свойства, что обосновывает целесообразность комбинирования нескольких методов, описанных ниже. Эти методы часто не дают точных результатов и пределы количественного определения обычно значительно выше, чем в случае химических примесей. Кроме того, должны быть сделаны определённые допущения в отношении зависимости между стандартными образцами, используемыми для калибрования, обычно представляющими собой смеси кристаллических и аморфных частиц (двухфазная модель), и испытуемыми образцами, которые могут содержать небольшую часть вещества, ведущую себя в соответствии с однофазной моделью. В итоге, отсутствие вполне определённых стандартных образцов, состоящих на 100 % из кристаллического вещества или на 100 % из аморфного вещества, затрудняет валидацию таких методов. Таким образом, в твёрдом порошке существуют и сосуществуют различные аморфные и некристаллические фазы. Указанные различные некристаллические формы твёрдого вещества могут по-разному проявляться в зависимости от методик, используемых для определения степени кристалличности.

##### Метод 1. Рентгеновская порошковая дифрактометрия

Данный метод является наиболее часто используемым методом для определения степени кристалличности, хотя он имеет некоторые ограничения, связанные с уширением пиков, аморфным гало и предпочтительной ориентацией, что затрудняет интерпретацию и количественное определение.

Использование только рентгеновской порошковой дифрактометрии часто является недостаточным для того, чтобы различить отличающиеся некристаллические фазы. Дифрактограмма рентгеновского излучения чисто аморфной и нанокристаллической фазы представляет собой широкое диффузное гало. Тщательный анализ дифрактограммы рентгеновского излучения показывает, что диффузное гало на дифрактограмме нанокристаллического материала проявляет некоторую корреляцию с дифрактограммой родительской кристаллической фазой, тогда как в случае чистой аморфной фазы такой корреляции не существует. Для установления истинной природы материала, определённой с помощью рентгеновского излучения как аморфная, может потребоваться дополнительная процедура. (ОФС «Рентгеновская порошковая дифрактометрия»).

##### Метод 2. Термический анализ

Термический анализ кристаллических веществ показывает переходы при плавлении, сопровождающиеся разложением или испарением растворителей. В случае истинных аморфных веществ термический анализ обнаруживает переход в стеклообразное состояние, в то время как для нанокристаллических веществ будет наблюдаться только плавление (ОФС «Термический анализ»).

##### Метод 3. Микрокалориметрия

Микрокалориметрия представляет собой высокочувствительный метод, позволяющий проводить определение скорости и степени превращения химических реакций, изменения фаз или изменения структуры. Аморфные части вещества могут быть рекристаллизованы путём воздействия на образец высокой относительной влажности или атмосферы, содержащей пары органических веществ. Измерение теплоты рекристаллизации позволяет определить содержание аморфного вещества по величине энтальпии рекристаллизации. С помощью соотнесения данных микрокалориметра для испытуемого образца с данными, полученными для аморфного стандартного образца, можно рассчитать количественное определение аморфной части в испытуемом образце. Диапазон содержания аморфного вещества, охватываемый данным методом, зависит от испытуемого вещества; в благоприятных случаях могут быть достигнуты пределы обнаружения ниже 1 %. (ОФС «Определение характеристик кристаллических твёрдых веществ с помощью микрокалориметрии и калориметрии растворения»).

##### Метод 4. Калориметрия растворов

Кристалличность испытуемого твёрдого образца рассчитывают по разности энтальпии раствора твёрдого образца (ΔHsx) и энтальпии раствора выбранного стандартного образца того же вещества (ΔHsr), определённых в одинаковых условиях. Так как стандартный образец обычно выбирают в предположении его высокой кристалличности, энтальпия его раствора, как правило, алгебраически больше (более эндотермическая или менее экзотермическая), чем для испытуемого твёрдого образца в том же растворителе. Следовательно, определяемая кристалличность является отрицательной величиной, выраженной в единицах Международной системы кДж/моль или Дж/г (следует избегать использования единицы Дж/кг ввиду её громоздкости и возможности потенциальной ошибки). Предпочтительный выбор отрицательной величины в отношении высоко кристаллического стандартного образца подтверждает тот факт, что большинство образцов имеет более низкую кристалличность, чем данный стандартный образец (ОФС «Определение характеристик кристаллических твёрдых веществ с помощью микрокалориметрии и калориметрии растворения»).

##### Метод 5. Cпектрометрия в ближней инфракрасной (БИК) области

Другим методом, используемым для измерения степени кристалличности, является спектрометрия в БИК области, подтвердившая применимость также в исследованиях полиморфизма. БИК-спектр образца содержит и физическую, и химическую информацию. Метод используется для оценки изменений в аморфном и кристаллическом состояниях. Данный метод является неинвазивным, неразрушающим и проводится при комнатной температуре (ОФС «Cпектрометрия в ближней инфракрасной области»).

##### Метод 6. Cпектрометрия в инфракрасной области и Рамановская спектрометрия

Другими методами, используемыми для измерения степени кристалличности, являются спектрометрия в инфракрасной области и Рамановская спектрометрия, подтвердившие применимость также в исследованиях полиморфизма (ОФС «Cпектрометрия в средней инфракрасной области», ОФС «Рамановская спектрометрия»).

##### Метод 7. Спектроскопия ядерного магнитного резонанса

Спектрометрия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) веществ в твёрдом состоянии может быть использована для получения информации о полиморфизме и родственных молекулярных конформациях. Однако интерпретация результатов требует соблюдения определённой осторожности, так как не всегда просто установить различие между образцами, которые включают смесь различных физических форм (двухфазная модель) и теми из них, которые включают кристаллы, имеющие неупорядоченность и замещённость, медленно проявляющиеся на шкале времени ЯМР. Подобно этому, образцы, содержащие дефекты, возникающие из-за различных молекулярных конформаций или немного отличающихся молекулярных упаковок (однофазная модель), могут давать дополнительные сигналы. ЯМР веществ в твёрдом состоянии может быть достаточно чувствителен к указанным явлениям, даже если параметры кристаллической решётки едва подверглись воздействию и, следовательно, с помощью дифракции рентгеновского излучения на порошке изменения не наблюдаются или наблюдаются очень слабо. Очевидно, что кристалличность субстанций для фармацевтического применения может быть сложной, при этом кристаллические дефекты и аморфное вещество могут присутствовать одновременно (ОФС «Спектроскопия ядерного магнитного резонанса»).

##### Метод 8. Оптическая микроскопия

Метод обнаружения кристалличности частиц заключается в применении поляризационного микроскопа, при этом частицы проявляют двойное лучепреломление и положения экстинкции при вращении предметного столика микроскопа (ОФС «Оптическая микроскопия»).

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0019 Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов

Взамен ОФС.1.1.0019.15

Настоящая общая фармакопейная статья устанавливает требования к упаковке, маркировке и перевозке лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов.

##### Упаковка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов

Упаковка должна обеспечивать защиту лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов в процессе хранения и перевозки от повреждений, потерь, отрицательного действия факторов окружающей среды (температура, влажность, свет), а также сохранность и неизменность свойств лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов в течение установленного срока его годности.

Упаковка должна быть изготовлена в соответствии с действующими требованиями к данному виду упаковки из материалов, разрешённых к применению в Российской Федерации.

Упаковка должна быть однородной по типу для каждой партии сырья; чистой, сухой, без посторонних запахов. Материалы, из которых изготавливают упаковку, должны быть прочными, лёгкими, химически и физически индифферентными при контакте с лекарственным растительным сырьём/препаратом.

Для высушенного лекарственного растительного сырья используют следующие виды упаковки:

- мешки тканевые, мешки из химических волокон и мешки льно-джуто-кенафные. При упаковывании сырья в двойные мешки предварительно один мешок вкладывают в другой.

Масса сырья, упакованного в мешок, должна быть не более 40 кг.

- мешки бумажные многослойные, пакеты бумажные двойные или одинарные.

Масса сырья, упакованного в бумажный многослойный мешок, должна быть не более 25 кг, в одинарный или двойной пакет − не более 5 кг.

- полиэтиленовые мешки.

Масса сырья, упакованного в полиэтиленовый мешок, должна быть не более 15 кг.

Мешки используют для упаковки плодов, семян, измельчённых коры, корней и корневищ. В двойные мешки упаковывают тяжеловесное, гигроскопичное и сыпучее сырьё (цветки полыни, корни алтея, соплодия ольхи, сырьё в виде порошка, сборы).

- тюки продолговатой формы, изготовленные из тканей.

- тюки, имеющие форму ящика, − это тюки специального пошива, имеющие форму шестигранника, сшитые из одного или нескольких кусков упаковочной ткани специального кроя.

Масса сырья, упакованного в тюки, должна быть не более 50 кг.

В тюки обычно упаковывают лекарственное растительное сырьё, которое не может подвергаться прессованию (например, листья толокнянки, трава чабреца, соплодия ольхи и др.).

- кипы, обшитые тканью, получают прессованием сырья и обтягиванием кипы тканью.

Масса сырья, упакованного в кипы, должна быть не более 200 кг.

Кипы используют для упаковки коры, корней, корневищ, листьев и трав.

- ящики из гофрированного картона и листовых древесных материалов.

Масса сырья, упакованного в ящики из гофрированного картона, должна быть не более 25 кг, в ящики из листовых древесных материалов – не более 30 кг.

В ящики упаковывают хрупкие и сыпучие виды лекарственного растительного сырья.

- мягкие контейнеры.

Для упаковки лекарственных растительных препаратов (фасованной продукции) используют пачки картонные с внутренним пакетом, пакеты бумажные, фильтр-пакеты бумажные и др..

Лекарственные растительные средства, требующие защиты от света, должны храниться в защищённом от света месте и/или в светозащитной упаковке.

Светозащитная упаковка – упаковка, которая защищает содержимое от действия световой энергии за счёт материала упаковки.

Светозащитная упаковка может быть как первичной, так и вторичной (потребительской). В отдельных случаях может быть использована или первичная или вторичная светозащитная упаковка.

Для лекарственных растительных препаратов может быть использована вторичная светозащитная упаковка из картона, плотность которого не менее 230 г/м2.

Для упаковки лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов могут быть использованы другие виды упаковки, соответствующие требованиям настоящей ОФС.

Виды упаковки и масса лекарственного растительного сырья, упакованного в тару, устанавливают на конкретные виды лекарственного растительного сырья.

##### Маркировка лекарственного растительного сырья

Каждая упаковочная единица с лекарственным растительным сырьём должна быть промаркирована путём нанесения информации непосредственно на упаковку несмывающейся краской либо путём прикрепления этикетки (маркировочного ярлыка). Наносимая информация должна соответствовать требованиям действующего законодательства.

Если наименование поставщика лекарственного растительного сырья не совпадает с наименованием производителя, на упаковке дополнительно приводят информацию о производителе.

##### Маркировка лекарственных растительных препаратов

Маркировку наносят на вторичную упаковку лекарственных растительных препаратов. Наносимая информация должна соответствовать требованиям действующего законодательства и включать указание «Продукция прошла радиационный контроль».

Дополнительно на пачке с фильтр-пакетами указывают массу 1 фильтр-пакета, количество фильтр-пакетов.

##### Перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов

Лекарственное растительное сырьё и лекарственные растительные препараты должны перевозиться в сухи х, чистых, не имеющих постороннего запаха, крытых транспортных средствах, либо в контейнерах.

Укладка упакованного лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов в транспортное средство/контейнер должна исключать повреждение упаковки в процессе перевозки.

При перевозке лекарственного растительного сырья необходимо принимать меры для исключения контаминации. В частности, сырьё, обладающее сильным запахом, должно перевозиться упакованным в такую тару и таким образом, чтобы исключить контаминацию других видов сырья этим запахом.

Если нет других указаний, то во время перевозки лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов допускают отклонения от рекомендованных условий хранения, обоснованные данными по изучению стабильности.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0022 Мерная посуда

Взамен ОФС.1.1.0022.18

Требования настоящей общей фармакопейной статьи распространяются на мерную лабораторную посуду, используемую в фармакопейном анализе для измерения объёма жидкостей и растворов. К мерной лабораторной посуде относятся мерные колбы, пикнометры, пипетки, бюретки, а также мерные цилиндры, мерные стаканы, мензурки, пробирки с делениями. В отличие от лабораторной посуды общего назначения мерная лабораторная посуда имеет точную градуировку.

##### Виды мерной лабораторной посуды

Рисунок 1. Мерная лабораторная посуда для приблизительных измерений: а – цилиндры, б – стакан, в – мензурка.

Мерные цилиндры (рис. 1а) – стеклянные (могут быть пластиковые) толстостенные сосуды с нанесёнными на внешней стенке делениями, указывающими объём в см3 (мл) (5–2000 см3 (мл)). Цилиндры применяют в тех случаях, когда измерение объёма жидкости не требует большой точности. Существуют цилиндры, снабжённые притёртыми пробками.

Градуированные мерные стаканы (рис. 1б) дают самую большую ошибку в измерении объёма из-за редких делений, указывающих объём.

Мензурки (рис. 1в) – сосуды конической формы, на стенке которых нанесена шкала. Мензурки применяют в тех случаях, когда измерение объёма жидкости не требует большой точности. Вместимость
мензурок 50–1000 см3 (мл).

Пробирки с делениями – сосуды цилиндрической формы, имеющие полукруглое, коническое или плоское дно, объёмом от 5 до 25 см3 (мл) предназначены для химических реакций, проводимых в малых объёмах, биологических, микробиологических процедур, для отбора проб, отмеривания определённого объёма наливаемой или выливаемой жидкости, или определения объёма осадка (центрифужные пробирки). Шкала, соответствующая вместимости пробирки, нанесена на всей боковой поверхности. Пробирки могут быть со шлифом, без шлифа, соответственно с пробками и без пробок.

К посуде для точного измерения объёмов относят мерные колбы, мерные пипетки и бюретки.

Мерные колбы (рис. 2а) представляют собой стеклянные (могут быть пластиковые) круглые плоскодонные сосуды, предназначенные для точного измерения объёма (на «вливание») при приготовлении растворов известной концентрации. Различают узкогорлые и широкогорлые мерные колбы. Диаметр горла (шейки) последних приблизительно в полтора раза больше по сравнению с узкогорлыми. В большинстве случаев мерные колбы имеют пришлифованную стеклянную пробку и пришлифованный (притёртый) верх колбы (горло колбы). Часто для закрывания мерных колб используют пробки из полиэтилена или из полипропилена.

На шейке есть кольцевая метка, до которой следует наполнять колбу.

Рисунок 2. Мерная колба (а), пикнометры (б)

Мерные колбы имеют вместимость 1, 2, 5, 10, 25, 50, 100, 200, 250, 500, 1000, 2000 см3 (мл) (номинальная вместимость на колбах указана в мл) и служат для приготовления растворов с точной концентрацией.

Пикнометры – мерные колбы с очень узким горлом вместимостью
от 2 до 50 см3 (мл) (рис. 2б). Пикнометр обязательно имеет пришлифованную пробку. Его используют для определения плотности жидкости.

Пипетки (рис. 3) представляют собой стеклянные (могут быть пластиковые) узкие длинные трубки, оттянутые с одного конца, предназначены для точного измерения объёмов растворов (на «выливание»).

Различают следующие типы пипеток:

- неградуированные с одной кольцевой меткой – пипетки Мора (рис. 3а) – откалиброванные на полный слив. Жидкость в них набирают до кольцевой отметки и выливают до конца;

Рисунок 3. Мерные пипетки: неградуированные (а, б); градуированные (в); пипетки – дозаторы (г, д).

- неградуированные с двумя кольцевыми метками – пипетки Мора (рис. 3б) – жидкость в них набирают до верхней метки и выливают до нижней;

- градуированные (рис. 3в), на которых по всей длине есть деления; этими пипетками можно отмерять любой объём в пределах её ёмкости, указанной на клейме.

Вместимость пипетки – обычно от 1 до 100 см3 (мл) – указывается производителем в верхней или средней их части.

Пипетки вместимостью менее 1 см3 (мл) называются микропипетками; с их помощью можно отбирать объёмы, измеряемые десятыми и сотыми долями мл. Градуированные пипетки, у которых на шкале указан только минимальный (или максимальный) объём, называют пипетками на полный слив, максимальный объём этими пипетками отбирают, выливая жидкость от верхнего деления до конца. Большое распространение получили более удобные и безопасные в обращении пипетки-дозаторы, гарантирующие высокую точность и повторяемость объёма измеряемых жидкостей в пределах от 0,002 до 10 см3 (мл).

Унипипетки предназначены для измерения доз постоянного (фиксированного) объёма (рис. 3г).

Варипипетки – это пипетки регулируемой ёмкости для измерения доз любого объёма в указанных пределах (рис. 3д). Дозаторы в этих пипетках могут быть механическими и электронными.

Бюретки – цилиндрическая стеклянная трубка с делениями, краном или зажимом, проградуированная в миллилитрах. Бюретки применяют для точного измерения небольших объёмов (на «выливание») и титрования при определении количественного содержания вещества.

Бюретки бывают двух типов:

- тип I – без установленного времени ожидания 1-го и 2-го классов;

- тип II – с установленным временем ожидания только 1-го класса.

Объёмные бюретки (рис. 4а–4г) с ценой деления в 0,1 см3 (мл) позволяют вести отсчёт с точностью до 0,02 см3 (мл). Бескрановые бюретки Мора (рис. 4б) имеют в нижней части резиновую трубку с капилляром. Резиновая трубка пережимается либо зажимом Мора (рис. 4б), либо внутрь её закладывают стеклянный шарик или палочку с шарообразным утолщением. Жидкость из такой бюретки вытекает при нажатии пальцами на верхнюю часть шарика.

Рисунок 4. Бюретки: а – с одноходовым краном; б – резиновой трубкой; в – двухходовым краном; г – автоматическим нулём.

У бюретки с автоматическим нулём (рис. 4г) нулевой отметкой является верхний срез отростка.

Микробюретки отличаются от объёмных бюреток небольшим объёмом (2 см3 (мл), 5 см3 (мл)). Они имеют градуировку по 0,01 см3 (мл), что даёт возможность делать отсчёты с точностью до 0,005 см3 (мл).

##### Материал

Стеклянная мерная лабораторная посуда должна изготовляться из стекла, обладающего необходимыми химическими и термическими свойствами, обеспечивающими устойчивость к воздействию агрессивных сред, света и т.д.

Для производства стеклянной посуды используется боросиликатное стекло, в состав которого входят оксиды щелочных и щёлочноземельных металлов (кальция, натрия или калия), добавляемые к кремнезему в основе обычного (силикатного) стекла. При их замене на оксид бора стекло приобретает особые свойства - низкий коэффициент линейного теплового расширения, повышенную химическую и механическую устойчивость.

Стекло, из которого сделана посуда, должно быть без видимых дефектов, а внутреннее напряжение должно быть снято до необходимых пределов.

Пластиковая мерная лабораторная посуда, изготовленная, как правило, из полипропилена или полиэтилена высокой плотности, обладает отличной химической стойкостью к сильным окислителям, щелочам, углеводородам, кетонам и низкой адгезией.

##### Мытьё мерной лабораторной посуды

Мытьё (очистка) мерной лабораторной посуды проводят аналогично обычной лабораторной посуды, используемые средства не должны изменять состояние посуды. При очистке мерной лабораторной посуды последовательно выполняют следующие процедуры:

- предварительные работы: перед замачиванием салфеткой/ фильтровальной бумагой удаляют смазку с кранов бюреток и соединений (если имеются), другие жировые пятна и надписи, сделанные во время работы;

- замачивание и мытьё в моющем растворе; срок годности раствора для замачивания посуды – 24 ч, повторное использование этого раствора не допускается;

- ополаскивание – проводят проточной водопроводной водой, а затем три раза водой очищенной;

- сушка, не рекомендуется нагревать посуду выше 180 °С;

- контроль чистоты посуды проводят визуально; посуда считается чистой, если вода не оставляет капель на внутренних стенках.

Валидацию мытья (очистки) посуды проводят путём периодического определения соответствующих моющих средств в промывных водах. Валидация процесса очистки может включать как качественную, так и количественную оценку эффективности очистки посуды. Качественная оценка процесса мытья (очистки) мерной лабораторной посуды предусматривает нанесение на наиболее загрязнённую посуду растворов флуоресцирующих веществ (индикаторов) (например, натрия флуоресцеината раствор 0,02 %), осмотр посуды с использованием УФ-лампы для проверки наличия покрытия флуоресцирующего индикатора и мытьё (очистку) посуды. Посуду снова осматривают с использованием
УФ-лампы для качественной оценки чистоты. Количественная оценка процесса мытья (очистки) мерной лабораторной посуды сводится к сбору промывочной воды и определению в ней загрязняющих веществ. Состав промывочной воды не должен существенно изменяться после ополаскивания посуды или не должен снижать требования к уровню чистоты посуды.

Для мытья (очистки) мерной лабораторной посуды в зависимости от характера загрязнений используют:

- ультразвуковые бани;

- посудомоечные машины;

- органические растворители (полярные и неполярные), для мытья используют растворители категории чда, а для ополаскивания – растворители категории хч; при этом должны соблюдаться строгие меры безопасности (работа в вытяжном шкафу и др.), так как большинство органических растворителей токсичны и легко воспламеняемы;

- кислоты и окислители (концентрированные хлористоводородная, серная, азотная или их растворы, хромовая смесь – 1 часть калия дихромата; 1–2 части воды; 8–10 частей серной кислоты концентрированной).

Примечание – Работу с кислотами проводят в вытяжном шкафу. Раствором аммиака нельзя ополаскивать посуду, в которой проводятся работы с органическими растворителями. Хромовая смесь очень агрессивна, в связи с чем, требуется проведение особого комплекса мероприятий по уничтожению отходов.

Сушка посуды

После ополаскивания вымытую посуду переворачивают вверх дном, для чего используют устройство для сушки посуды, и оставляют при комнатной температуре до тех пор, пока она не высохнет. Чистые пипетки после мытья и сушки помещают в специальные подставки (штативы).

При указании производителя допускается сушить мерную лабораторную посуду в сухожаровом шкафу при температуре, рекомендованной производителем.

В случае крайней необходимости посуду высушивают с помощью ополаскивания ацетоном или этанолом категории хч. Остатки растворителей собирают и сдают в соответствии с правилами, принятыми в лаборатории.

##### Классы точности мерной лабораторной посуды

В лабораторных испытаниях используется отечественная мерная лабораторная посуда 1-го или 2-го класса точности или зарубежная мерная лабораторная посуда А/AS или В класса точности. 1-й класс или класс А/AS предназначен для измерений с более высокой степенью точности, используемых, например, при количественном определении; 2-й класс или класс В – для измерений с более низкой степенью точности.

##### Пределы погрешности измерения

Пределы погрешности по объёму устанавливаются для каждого вида мерной лабораторной посуды в зависимости метода применения (на «выливание» или на «вливание») и класса точности.

Допустимые погрешности от номинальной вместимости мерной лабораторной посуды при температуре 20 °С не должны превышать указанных в табл. 1 и 2.

Таблица 1. Пределы допустимой погрешности объёма колб, цилиндров и мензурок, см3 (мл)
Номинальная вместимость | Пределы допустимой погрешности объёма (±)
--- | ---
Колбы | Цилиндры | Мензурки
1-й класс | А класс | 2-й класс | 1-й класс | 2-й класс
5 | 0,025 | - | 0,05 | 0,10 | 0,10 | -
10 | 0,025 | 0,02 | 0,05 | 0,10 | 0,20 | -
25 | 0,04 | 0,03 | 0,08 | 0,25 | 0,50 | -
50 | 0,06 | 0,05 | 0,12 | 0,25 | 1,00 | 2,50
100 | 0,10 | 0,08 | 0,20 | 0,50 | 1,00 | 5,00
200 | 0,15 | - | 0,30 | - | - | -
250 | 0,15 | 0,12 | 0,30 | 1,25 | 2,00 | 5,00
300 | 0,20 | - | 0,40 | - | - | -
500 | 0,25 | 0,20 | 0,50 | 2,50 | 5,00 | 12,50
1000 | 0,40 | 0,03 | 0,80 | 5,00 | 10,00 | 25,00
2000 | 0,60 | - | 1,20 | 10,00 | 20,00 | -

Таблица 2. Пределы допустимой погрешности объёма пипеток, см3 (мл)
Номинальная вместимость | Цена наименьшего деления шкалы | Пределы допустимой погрешности объёма (±)
--- | --- | ---
1-й класс | А/AS класс | 2-й класс
0,5 | 0,01 | 0,005 | - | -
1 | 0,01 | 0,006 | 0,006 | 0,01
2 | 0,02 | 0,01 | 0,006 | 0,02
5 | 0,05 | 0,03 | 0,01 | 0,05
10 | 0,1 | 0,05 | 0,02 | 0,1
25 | 0,1 | 0,1 | 0,03 | -
| 0,2 | 0,01 |  | 0,2
50 | - | - | 0,05 | -
100 | - | - | 0,08 | -

Допустимые погрешности от номинальной вместимости мерной лабораторной посуды на «выливания» жидкости не должны превышать значений, указанных в табл. 3.

Таблица 3. Пределы допустимой погрешности объёма бюреток, см3 (мл)
Номинальная вместимость | Цена наименьшего деления шкалы | Пределы допустимой погрешности объёма (±)
--- | --- | ---
1-й класс | А/AS класс | 2-й класс
1 | 0,01 | 0,01 | - | 0,02
2 | 0,01 | 0,01 | - | 0,02
5 | 0,02 | 0,01 | - | 0,02
10 | 0,02 | 0,02 | 0,02 | 0,05
| 0,05 | 0,02 | - | 0,05
25 | 0,05 | 0,03 | - | 0,05
| 0,1 | 0,05 | 0,03 | 0,1
50 | 0,1 | 0,05 | 0,05 | 0,1
100 | 0,2 | 0,1 | - | 0,2

Для всей мерной лабораторной посуды со шкалой максимально допустимая погрешность для обоих классов точности не должна превышать объёма наименьшего деления шкалы. Для посуды 2 класса допустимые пределы погрешностей увеличены вдвое.

##### Калибровка мерной лабораторной посуды

Мерные колбы, пикнометры, пипетки и бюретки перед работой и ежегодно необходимо проверять на признаки износа или повреждения (царапины, замутнения, трещины или сколы, стирание калибровочных отметок). Не допускается использование повреждённой посуды. Перед калибровкой мерную посуду тщательно моют и высушивают.

Калибровка мерной лабораторной посуды может осуществляться 2 способами.

1. Внешняя калибровка, когда посуда имеет сертификаты калибровки серий или индивидуальные сертификаты калибровки, предоставленные производителем или поставщиком.

2. Внутренняя калибровка, проводимая в лаборатории по приведённой ниже процедуре.

Проверка мерной лабораторной посуды заключается в определении массы воды, не содержащей примесей и растворённого воздуха, налитой в посуду до метки (мерные колбы и пикнометры) или вылитой из неё (пипетки и бюретки) при данной температуре и атмосферном давлении.

При проверке пипеток воду из них спускают в бюкс с крышкой и взвешивают. Не выливая воду из бюкса, спускают в него снова полную пипетку и взвешивают. Так поступают и в третий раз. Из трёх значений массы воды берут среднее. При проверке бюреток измеряют массу всего её объёма, а затем – массу воды через каждые 10 см3 (мл). Для точной калибровки проверяют массу каждого миллилитра. Температура, при которой калибруется мерная лабораторная посуда стеклянная, должна быть равна 20 °С. На практике при калибровании и проверке мерной лабораторной посуды пользуются таблицами, показывающими, сколько воды определённой температуры надо отвесить в воздухе той же температуры, чтобы объём её соответствовал 1000 см3 (мл) при 20 °С. Данные таблицы рассчитаны на нормальное барометрическое давление (760 мм. рт. ст.) и на одну и ту же температуру воды и окружающего воздуха. Если барометрическое давление ниже нормального, на каждый миллиметр разницы прибавляют поправку, указанную в последнем столбце табл. 4. Если барометрическое давление выше нормального, поправку вычитают.

Таблица 4. Таблица массы 1000 мл воды, взвешенной в воздухе при помощи латунных гирь при разных температурах
Температура воды и воздуха, °С | Масса 1000 мл воды, г | Поправка на барометрическое давление
--- | --- | ---
10 | 998,386 | 0,00144
11 | 998,315 | 0,00144
12 | 998,234 | 0,00143
13 | 998,143 | 0,00143
14 | 998,042 | 0,00142
15 | 997,925 | 0,00142
16 | 997,798 | 0,00141
17 | 997,659 | 0,00141
18 | 997,510 | 0,00140
19 | 997,349 | 0,00140
20 | 997,177 | 0,00140
21 | 996,995 | 0,00139
22 | 996,802 | 0,00139
23 | 996,599 | 0,00138
24 | 996,386 | 0,00138
25 | 996,164 | 0,00137
26 | 995,930 | 0,00137
27 | 995,689 | 0,00136
28 | 995,438 | 0,00136
29 | 995,177 | 0,00136
30 | 994,908 | 0,00135
31 | 994,630 | 0,00135
32 | 994,343 | 0,00134
33 | 994,048 | 0,00134
34 | 993,744 | 0,00133
35 | 993,433 | 0,00133

Частота калибровки мерной лабораторной посуды зависит от её характеристик, вида и частоты использования, а также предыдущих калибровок.

##### Работа с мерной лабораторной посудой

Объём жидкости можно измерить с различной степенью точности, которая определяется задачей анализа. В зависимости от относительной погрешности, допускаемой при измерении объёма, мерная лабораторная посуда делится на две группы – для приблизительного (класс 2 или В) и точного (класс 1 или A/AS) измерения объёма. К посуде для приблизительного измерения объёма относятся мерные цилиндры, градуированные лабораторные стаканы, мензурки, пробирки с делениями. Относительная погрешность при измерении объёма с помощью такой посуды составляет 1 % и более. Данная посуда предназначена в основном на «выливание». Термин на «выливание» означает, что если перелить содержимое заполненного мерного сосуда в другой сосуд, то объём вылитой жидкости при температуре 20 °С будет соответствовать вместимости, обозначенной на сосуде.

Мерные цилиндры, градуированные мерные стаканы, мензурки, пробирки с делениями. Чтобы отмерить нужный объём жидкости, её наливают в мерный сосуд до тех пор, пока нижний край мениска не достигнет уровня нужного деления.

Мерные колбы. На каждой мерной колбе указана та температура, при которой она имеет точно обозначенный на ней объём (как правило 20 °С). Термин на «вливание» означает, что если наполнить мерную колбу жидкостью точно до метки, то объём жидкости при температуре 20 °С будет соответствовать вместимости, обозначенной на колбе.

Объём вылитой из колбы жидкости будет несколько меньше помеченного, так как часть её останется на стенках. Поэтому обычные мерные колбы не пригодны для отмеривания точного объема жидкости с последующим выливанием её. Мерные колбы, предназначенные для выливания, имеют две метки. Верхняя метка предназначена для «выливания», т.е. если наполнить колбу до этой метки и вылить содержимое, вылитая жидкость будет иметь объём, указанный на колбе. Раствор, находящийся в колбе, доводят до метки в несколько приёмов. Сначала наливают воды на 0,5–1 см ниже метки, затем, при помощи пипетки жидкость приливают по каплям до тех пор, пока край мениска раствора не коснется метки.

Рисунок 5. Правильное положение мениска: а – прозрачный водный раствор; б – мутный или окрашенный водный раствор; в – раствор органической жидкости, плохо смачивающей стекло.
Рисунок 6. Наблюдение за правильностью установки мениска в мерной колбе

Для прозрачных водных растворов касаться метки должен нижний край мениска, для мутных и ярко окрашенных водных растворов – верхний (рис. 5). При этом колбу держат перед собой за верхнюю часть шейки так, чтобы метка находилась на уровне глаз (рис. 6). В колбе большого объёма (500–2000 см3 (мл)) доводить до метки раствор следует, размещая колбу на ровной горизонтальной поверхности. Нельзя держать колбу за её нижнюю часть, так как может произойти искажение объёма за счёт тепла, сообщаемого рукой.

Растворитель, как и раствор в колбе, должен иметь температуру 20 °С. Доводить до метки горячие или холодные растворы нельзя, т.к. плотность жидкостей зависит от температуры и, следовательно, определяемый объём будет отличаться от объёма, указанного на мерной колбе. Спиртовые, водно-спиртовые растворы и растворы органических растворителей доводят до метки после выдерживания их при температуре 20 °С в течение 20 мин.

После доведения уровня жидкости до метки колбу закрывают пробкой, и, придерживая последнюю большим или указательным пальцем правой руки или ладонью, хорошо перемешивают полученный раствор, переворачивая колбу вверх-вниз не менее 7–10 раз. Несмотря на то, что после перемешивания уровень жидкости в мерной колбе опускается ниже кольцевой метки, т.к. часть раствора остается на пробке, доводить еще раз уровень жидкости до кольцевой метки после перемешивания нельзя.

При необходимости нагревают растворы в мерных колбах на водяной бане (до температуры, указанной в нормативной документации), затем перед доведением раствора до метки, колбы охлаждают и выдерживают при температуре 20 °С в течение 20–30 мин.

Мерные пипетки. Набирают жидкость в пипетку, используя дозатор или резиновую грушу.

Для наполнения любой пипетки уровень жидкости должен быть на 2–3 см выше метки. Пипетку следует держать строго вертикально, приподняв над раствором таким образом, чтобы метка находилась на уровне глаз, жидкость выпускать по каплям, пока край мениска раствора не совпадёт с меткой. Далее пипетку переносят в другой сосуд, прикасаясь её нижним концом к внутренней поверхности этого сосуда, и дают жидкости медленно стечь. При быстром выливании жидкости значительная часть её останется на стенках пипетки. Остаток жидкости (для пипеток с одной меткой или на полный слив) удаляют прикосновением кончика пипетки к краю наклоненного сосуда в течение нескольких секунд, затем слегка поворачивают пипетку вокруг оси. Остаток жидкости из пипетки выдувать нельзя, так как этот объём не учитывается при градуировке мерной лабораторной посуды. В случае полного выливания до носика, необходимо выдержать 15 с до удаления пипетки из приёмного сосуда.

Объёмные бюретки. Перед началом работы бюретку два раза промывают водой и дважды ополаскивают раствором, который в ней будет находиться.

Подготовленную к работе бюретку закрепляют вертикально в штативе, затем заполняют бюретку раствором через воронку с коротким концом, не доходящим до нулевого деления. Если бюретка имеет двухходовой кран (рис. 4в), то заполнение проводят, присоединяя к изогнутой трубке резиновый шланг от склянки с раствором. Бюретку наполняют жидкостью на несколько миллиметров выше нулевой линии и устанавливают опускающийся мениск на этой линии. Затем раствор спускают так, чтобы он заполнил бюретку до конца носика.

В бюретки со стеклянным краном забор жидкости осуществляется путём засасывания грушей через верхнее отверстие при открытом кране. Для удаления пузырьков воздуха кончик бюретки с резиновой трубкой поднимают под углом, слегка открывают зажим и выпускают жидкость до тех пор, пока весь воздух не будет удалён.

Бюретку устанавливают на нуль только после того, как убедятся, что кончик бюретки заполнен раствором. Воронку, с помощью которой в бюретку наливают раствор, удаляют. Капли, оставшиеся на воронке, могут увеличивать объём жидкости в бюретке, что может привести к неправильному результату анализа.

Во время титрования нельзя касаться носиком бюретки стенок приёмного сосуда. Каплю, оставшуюся на носике после завершения выливания, добавляют к вылившемуся объёму прикосновением к внутренней стороне приёмного сосуда. Если для бюретки не установлено время ожидания, дожидаться стекания жидкости, оставшейся на стенках, не нужно.

Время выливания не должно превышать 45 с для бюреток объёмом 1 см3 (мл). Для некоторых бюреток 1-го (А) класса установлено время ожидания длительностью в 30 с. Только после этого раствор в бюретке устанавливают на нулевое деление, при этом в нижней её части не должно остаться ни одного пузырька воздуха. Если они останутся, объём жидкости, пошедшей на титрование, будет определён неправильно.

При заполнении объёмных бюреток (а также другой мерной лабораторной посуды) легко пенящимися жидкостями время ожидания для оседания пены должно быть длительным – до исчезновения последнего пузырька, а доведение до мениска осуществляется осторожно по стенкам заполняемого сосуда. Местом отсчёта уровня раствора в бюретке всегда выбирают нижний край мениска (рис. 4). По этому краю и калибруют бюретку. Только в случае непрозрачных растворов (калия перманганата растворы, йода растворы в растворе калия йодида и др.) необходимо делать отсчёт по верхнему краю мениска.

В бюретку с автоматическим нулём раствор, подаваемый снизу через трубку, поднимается до верхнего среза отростка, избыток его будет стекать из бюретки через трубку. После прекращения подачи раствора уровень его установится автоматически на верхнем срезе отростка. Первую метку на шкале такой бюретки обозначают 1 мл. Стеклянные краны бюреток должны быть очень слабо смазаны вазелином или сплавом ланолина с воском. Особенно опасна обильная смазка у микробюреток, поскольку она может подниматься вверх по бюретке и, загрязняя внутреннюю поверхность её, нарушает нормальное смачивание стенок бюретки раствором.

Растворы едких и углекислых щелочей держат в бюретках с зажимами, так как при хранении этих растворов в бюретках со стеклянными кранами часто происходит «заедание» кранов. Верхний конец бюретки закрывают от попадания пыли и испарения раствора маленьким стаканчиком или широкой, но короткой пробиркой.

Установка мениска

Перед каждым титрованием нужно обязательно установить уровень жидкости в бюретке на нулевое деление шкалы. Отсчёт объёма по бюретке проводят по соответствующему краю мениска (рис. 5), при этом глаза наблюдателя должны находиться на уровне мениска во избежание ошибки измерения.

Точное определение нижнего края мениска затруднено явлением отражения, возможны погрешности и от параллакса (относительное смещение мениска вследствие перемещения глаза наблюдателя), если глаза не будут находиться точно на высоте мениска. У мерных колб и пипеток метка окружает горло или трубку целиком, что позволяет взять точный отсчёт. У бюреток же метка занимает только часть окружности трубки. Поэтому для правильного отсчёта уровня раствора в бюретке применяют разные приспособления. Например, держат позади бюретки кусок белого картона или матовую стеклянную пластинку, либо надевают на бюретку бумажную рамочку.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0023 Родственные примеси в фармацевтических субстанциях и лекарственных препаратах

Взамен ОФС.1.1.0023.18

В настоящей фармакопейной статье приведены требования к контролю родственных примесей в фармацевтических субстанциях и лекарственных препаратах, преимущественно синтетического и минерального происхождения.

Родственные примеси – технологические примеси и продукты деструкции действующего вещества. Родственные примеси и аналитические методики их определения описываются в соответствующем разделе фармакопейных статей на фармацевтические субстанции и лекарственные препараты.

В фармацевтических субстанциях и лекарственных препаратах должен осуществляться контроль родственных примесей, поскольку присутствие посторонних веществ в лекарственных средствах может влиять на их терапевтическую эффективность и безопасность.

Для аналитических методик, используемых для определения содержания примесей в лекарственных средствах, должна быть подтверждена их пригодность в соответствии с ОФС «Валидация аналитических методик».

При невозможности обнаружения и количественного определения каждой примеси в отдельности с помощью единой аналитической методики, допустимо использование нескольких методик для их контроля.

##### Термины и определения

Примесь – любой компонент лекарственного средства, который не является фармацевтической субстанцией и/или вспомогательным веществом.

Продукт деструкции – примесь, образующаяся в результате химического изменения фармацевтической субстанции в процессе производства и/или хранения лекарственного средства, и возникающая в результате воздействия, например, света, температуры, рН, воды или взаимодействия с материалом первичной упаковки и укупорочных средств.

Технологическая примесь – примесь, присутствие которой обусловлено технологическим процессом производства фармацевтической субстанции.

Идентифицированная примесь – примесь с установленным химическим строением.

Неидентифицированная примесь – примесь, структура которой не установлена, и которая определяется исключительно качественными аналитическими параметрами (например, относительным временем удерживания).

Специфицируемая примесь – примесь, которая указывается отдельно и имеет собственный критерий приемлемости. Специфицируемая примесь может быть идентифицированной или неидентифицированной.

Неспецифицируемая примесь – примесь, которая не указывается отдельно и её содержание нормируется общими критериями приемлемости.

Контролируемый предел – предел, выше которого примесь должна контролироваться.

Предел идентификации – предел, выше которого примесь должна быть идентифицирована.

Квалификация – процесс получения и оценки данных с целью определения биологической безопасности отдельной примеси или определенного профиля примесей.

Предел квалификации – предел, выше которого должна быть проведена квалификация примеси.

##### Родственные примеси в фармацевтических субстанциях

В фармацевтических субстанциях контролируются родственные примеси, обусловленные процессом её производства (исходные вещества, промежуточные продукты, продукты побочных реакций) и/или хранения. Данные примеси могут быть идентифицированными или неидентифицированными.

Требования к содержанию примесей приведены в соответствующих фармакопейных статьях и в ОФС «Фармацевтические субстанции».

Контроль родственных примесей осуществляется в соответствии с фармакопейными статьями на фармацевтические субстанции. Если фармацевтическая субстанция содержит примеси, отличные от указанных в фармакопейной статье, необходимо применить требования ОФС «Фармацевтические субстанции» в отношении идентификации и контроля примесей в ней, а также проверить пригодность методики, описанной в фармакопейной статье, для контроля данных примесей. В противном случае необходимо разработать новую методику и внести изменение в ранее утверждённую фармакопейную статью. В зависимости от обнаруженного содержания и предложенных пределов, необходимо рассмотреть возможность идентификации или квалификации этих примесей.

В случае если масштабирование производства или изменение в технологии получения субстанции приводят к образованию новой примеси, необходимо применить требования общей фармакопейной статьи «Фармацевтические субстанции» в отношении предела контроля, идентификации и квалификации. Если результаты идентификации и квалификации соответствуют указанным пределам, необходимо внести изменения в фармакопейную статью. Если результаты идентификации и квалификации превысят указанные пределы, необходимо провести исследования по безопасности.

При отсутствии фармакопейной статьи на фармацевтическую субстанцию пределы контроля, идентификации и квалификации родственных примесей формируются в соответствии с ОФС «Фармацевтические субстанции», раздел «Родственные примеси» (таблицы 1 и 2).

Более высокие пределы содержания примесей в субстанциях могут быть установлены только при наличии соответствующего обоснования, подтверждающего безопасность заявляемой нормы содержания отдельной примеси или определенного профиля примесей. Для высокотоксичных (например, генотоксичных) примесей или примесей, которые вызывают нежелательные фармакологические эффекты, должны применяться более низкие пределы содержания с учётом параметров их безопасности.

##### Родственные примеси в лекарственных препаратах

В лекарственных препаратах контролируются продукты, образующиеся в результате деструкции действующего вещества (фармацевтической субстанции) или при взаимодействии действующего вещества с вспомогательными веществами или с материалом первичной упаковки и укупорочных средств. Данные примеси могут быть идентифицированными или неидентифицированными. К родственным примесям в лекарственных препаратах не относятся примеси, которые образуются из вспомогательных веществ или экстрагируется из первичной упаковки и укупорочных средств.

Пределы контроля, идентификации и квалификации родственных примесей для лекарственных препаратов в зависимости от максимальной суточной дозы препарата приведены в таблице 1.

Таблица 1. Пределы содержания продуктов деструкции в лекарственных препаратах
Максимальная суточная доза1 | Предельное содержание примеси2,3
--- | ---
Контролируемый предел
≤1 г | 0,1 %
>1 г | 0,05 %
Предел идентификации
<1 мг | 1,0 % или 5 мкг суточного потребления примеси (что меньше)
1 мг–10 мг | 0,5 % или 20 мкг суточного потребления примеси (что меньше)
>10 мг–2 г | 0,2 % или 2 мг суточного потребления примеси (что меньше)
>2 г | 0,10 %
Предел квалификации
<10 мг | 1,0 % или 50 мкг суточного потребления примеси (что меньше)
10 мг–100 мг | 0,5 % или 200 мкг суточного потребления примеси (что меньше)
>100 мг–2 г | 0,2 % или 3 мг суточного потребления примеси (что меньше)
>2 г | 0,15 %
Максимальная суточная доза1 | Предельное содержание примеси2,3
Примечание 1 − количество фармацевтической субстанции, вводимое пациенту в течение суток; 2 − предельное содержание для продуктов деструкции выражается либо в процентном содержании по отношению к фармацевтической субстанции, либо в суточном потреблении примеси. Более низкие пределы содержания примеси устанавливаются, если продукт деструкции обладает повышенной токсичностью; 3 − выбор более высокого предела содержания должен быть научно обоснован с учётом безопасности примеси.

В лекарственных препаратах контроль технологических примесей, не являющихся продуктами деструкции фармацевтической субстанций, как правило, осуществляется, если содержание токсичной технологической примеси в лекарственном препарате превышает контролируемый предел.

В лекарственных препаратах, содержащих два и более действующих вещества, в случае если отнесение неидентифицированных примесей к одному или другому действующему веществу затруднено, то их оценку рекомендуется проводить относительно действующего вещества с наименьшим содержанием.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0025 Лекарственные препараты

Взамен ОФС.1.1.0026.19

Настоящая общая фармакопейная статья устанавливает общие требования к лекарственным препаратам для медицинского применения (далее – лекарственные препараты).

Лекарственные препараты – лекарственные средства в виде лекарственных форм, применяемые для профилактики, диагностики, лечения заболевания, реабилитации, для сохранения, предотвращения или прерывания беременности.

##### Общие положения

В Российской Федерации допускается обращение лекарственных препаратов промышленного производства и аптечного изготовления.

К лекарственным препаратам промышленного производства относят лекарственные препараты, произведённые организациями-производителями, имеющими соответствующие лицензии на производство лекарственных средств. Лекарственные препараты промышленного производства подлежат государственной регистрации в установленном порядке.

К лекарственным препаратам аптечного изготовления относят лекарственные препараты, изготовленные аптечными организациями, имеющими лицензию на фармацевтическую деятельность по изготовлению лекарственных препаратов по рецептам врачей и требованиям медицинских организаций. Лекарственные препараты аптечного изготовления не подлежат государственной регистрации.

Лекарственный препарат может содержать одно или более действующих веществ (фармацевтических субстанций) и, как правило, содержать одно или более вспомогательных веществ или основу. В ряде случаев лекарственный препарат может не содержать вспомогательных веществ.

Лекарственные препараты, в состав которых входит более одного действующего вещества (фармацевтических субстанций), называются комбинированными или многокомпонентными.

Наряду с требованиями настоящей ОФС лекарственные препараты должны соответствовать требованиям ОФС на группы лекарственных препаратов (например, ОФС «Биологические лекарственные препараты», ОФС «Иммунобиологические лекарственные препараты», ОФС «Лекарственные препараты из плазмы крови человека», ОФС «Биотехнологические лекарственные препараты», ОФС «Генотерапевтические лекарственные препараты», ОФС «Кровезаменители», ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты», ОФС «Лекарственные средства гомеопатические», ОФС «Стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления», ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм», ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде мягких лекарственных форм», ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм» и др.).

Лекарственные препараты также должны отвечать требованиям ОФС на лекарственные формы, в виде которых они выпущены (например, ОФС «Аэрозоли», ОФС «Таблетки», ОФС «Суппозитории», ОФС «Мягкие лекарственные формы» и др.).

Лекарственные препараты, полученные с использованием материалов от человека или животного, в случае приемлемости, должны выдерживать требования ОФС «Вирусная безопасность», ОФС «Вирусная безопасность лекарственных препаратов из плазмы крови человека», ОФС «Уменьшение риска передачи возбудителей губчатой энцефалопатии животных при применении лекарственных средств».

Примечание – Другие термины и определения, используемые в настоящей ОФС, приведены в ОФС «Лекарственные формы».

##### Особенности технологии

Получение лекарственных препаратов должно осуществляться на основе результатов фармацевтической разработки, включающей выбор фармацевтической субстанции (субстанций), вспомогательных веществ, подходящих материалов, процессов, испытаний и других параметров, обеспечивающих выпуск лекарственных препаратов, обладающих требуемым качеством, стабильностью и эффективностью в течение установленного срока годности.

Производство лекарственных препаратов − деятельность по производству лекарственных препаратов организациями-производителями лекарственных средств на одной стадии, нескольких или всех стадиях технологического процесса, а также по хранению, транспортированию и реализации произведенных лекарственных препаратов.

Производство и контроль качества зарегистрированных лекарственных препаратов должны осуществляться производителями лекарственных средств, имеющими лицензию на производство лекарственных средств, в соответствии с Правилами надлежащей производственной практики, утвержденными уполномоченным федеральным органом исполнительной власти, и отвечать, как общим требованиям Правил надлежащей производственной практики, так и требованиям к организации производства отдельных видов (типов) лекарственных препаратов, включая стерильные, растительные, биологические, радиофармацевтические лекарственные препараты, газы медицинские и др.

Изготовление лекарственных препаратов – деятельность по изготовлению лекарственных препаратов, осуществляемая аптечными организациями, имеющими лицензию на фармацевтическую деятельность по изготовлению лекарственных препаратов по рецептам врачей и требованиям медицинских организаций.

Как правило, выделяют следующие основные категории лекарственных препаратов, которые могут быть изготовлены аптечными организациями:

- лекарственные препараты, изготовленные по рецептам врачей или требованиям медицинских организаций для одного пациента или группы пациентов, отпускаемые после приготовления (экстемпоральные препараты);

- лекарственные препараты, изготовленные заранее в виде внутриаптечной заготовки по часто встречающимся прописям, хранящиеся до получения рецепта/требования на отпуск и предназначенные для отпуска без каких-либо дополнительных технологических действий.

Фармацевтические субстанции, используемые для получения лекарственных препаратов, должны отвечать требованиям фармакопейных статей и соответствующих общих фармакопейных статей: ОФС «Фармацевтические субстанции», ОФС «Лекарственное растительное сырьё. Фармацевтические субстанции растительного происхождения», ОФС «Эфирные масла», ОФС «Масла жирные растительные», ОФС «Настойки гомеопатические матричные», ОФС «Лекарственные средства, получаемые методами рекомбинантных ДНК» и др.

В зависимости от состава и назначения лекарственного препарата одно и то же вещество в ряде случаев может быть использовано в производстве/изготовлении лекарственного препарата как в качестве фармацевтической субстанции, так и в качестве вспомогательного вещества.

В зависимости от физико-химических свойств используемых фармацевтических субстанций, дозировки, классификационных признаков лекарственной формы (способ/путь введения и применения, агрегатное состояние, тип дисперсной системы, скорость и характер высвобождения действующих веществ и др.) для получения лекарственных препаратов используют различные группы вспомогательных веществ в соответствии с их назначением: антимикробные консерванты, антиоксиданты, стабилизаторы, солюбилизаторы, эмульгаторы, разрыхлители, смазывающие и красящие вещества, корригенты вкуса, ароматизаторы и др.

Подробная информация о вспомогательных веществах, используемых при получении лекарственных препаратов, включая характеристику их функциональных свойств, приведена в ОФС «Вспомогательные вещества».

Стабильность лекарственного препарата должна быть изучена в соответствии с требованиями ОФС «Аспекты стабильности лекарственных средств»: установлены и проконтролированы физико-химические, функциональные и другие характеристики фармацевтических субстанций, вспомогательных веществ, особенности лекарственной формы, системы упаковки/укупорки и другие факторы, способные оказать неблагоприятное воздействие на производственный процесс, на качество лекарственного препарата, в том числе, при его хранении, транспортировании и применении в течение предполагаемого срока годности и др.

В ходе изучения стабильности должен быть установлен и подтверждён заявленный срок годности лекарственного препарата, а также условия хранения, обеспечивающие его качество (т.е. соответствие требованиям фармакопейной статьи) в течение заявленного срока годности.

Методики, применяемые при изучении стабильности лекарственного препарата, должны быть валидированы в соответствии с ОФС «Валидация аналитических методик».

Произведённые/изготовленные лекарственные препараты могут быть стерильными и нестерильными.

Стерильные лекарственные препараты должны быть получены с применением материалов и методов, исключающих возможность микробного загрязнения и роста микроорганизмов, обеспечивающих их стерильность в соответствии с ОФС «Стерильность».

Методы, материалы и условия стерилизации, используемые при производстве/изготовлении стерильных лекарственных препаратов, должны отвечать требованиям ОФС «Стерилизация» и обеспечивать соответствие лекарственных препаратов требованиям ОФС «Стерильность».

Лекарственные препараты, которые в силу особенностей физико-химических свойств действующих веществ, вида лекарственной формы и др., не могут быть подвергнуты ни одному из видов стерилизации, производят/изготавливают в асептических условиях без последующей стерилизации.

Нестерильные лекарственные препараты должны быть получены с применением методов, материалов и условий, обеспечивающих их соответствие требованиям ОФС «Микробиологическая чистота». Выбранный состав, лекарственная форма, технология получения, система упаковки/укупорки и условия хранения должны обеспечить необходимую категорию микробиологической чистоты нестерильного лекарственного препарата при его применении.

Для достижения этой цели в состав лекарственного препарата могут быть введены вспомогательные вещества – антимикробные консерванты.

При разработке лекарственных препаратов в виде любых лекарственных форм, в состав которых входят антимикробные консерванты, необходимость их использования и эффективность должна быть подтверждена в соответствии с требованиями ОФС «Определение эффективности антимикробных консервантов».

Основные требования к производству/изготовлению лекарственных препаратов, обусловленные специфическими особенностями лекарственных форм, приведены в разделе «Особенности технологии» ОФС «Лекарственные формы» и ОФС на отдельные лекарственные формы (ОФС «Таблетки», ОФС «Пластыри трансдермальные», ОФС «Настои и отвары», ОФС «Суппозитории» и др.) и группы лекарственных форм (ОФС «Лекарственные формы для парентерального применения», ОФС «Лекарственные формы для офтальмологического применения» и др.).

Лекарственные препараты могут быть выпущены готовыми к применению или могут быть получены медицинским персоналом или пациентом в виде восстановленных или разбавленных лекарственных препаратов из зарегистрированных лекарственных препаратов, выпущенных в виде лиофилизатов, порошков, таблеток, гранул, гелей, паст, концентратов, путём их растворения/диспергирования/разведения в соответствующем растворителе, согласно информации, указанной в инструкции по медицинскому применению.

Для любого лекарственного препарата должна быть определена система упаковки/укупорки, представляющая собой совокупность упаковочных и укупорочных компонентов упаковки, совместно обеспечивающих защиту, сохранность лекарственного препарата, в установленных случаях – доставку, дозирование. Упаковка, укупорочные средства, материалы, используемые для производства упаковки, укупорочных средств и других элементов упаковки лекарственных препаратов, должны соответствовать общим фармакопейным статьям, которые устанавливают требования к упаковочным материалам, используемым для производства упаковки (например, ОФС «Упаковочные материалы на основе полиолефинов для лекарственных средств», ОФС «Упаковочные материалы на основе полиэтилена без добавок для лекарственных препаратов парентерального и офтальмологического применения» и др.), к упаковке (например, ОФС «Упаковка и укупорочные средства из полимерных материалов для фармацевтического применения», ОФС «Упаковка для фармацевтического применения из стекла», ОФС «Упаковка из полимерных материалов для водных растворов для инфузий» и др.) или к элементам упаковки (например, ОФС «Резиновые укупорочные средства для упаковки водных парентеральных лекарственных препаратов, порошков и лиофилизированных порошков», ОФС «Силиконовые эластомеры для укупорочных средств и трубок» и др.).

В установленных случаях система упаковки/укупорки лекарственных препаратов должна обеспечивать герметичность упаковки. Испытания на герметичность упаковки, в случае применимости, проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение герметичности упаковки». Если продукты вымывания из системы упаковки/укупорки лекарственных препаратов могут оказать влияние на их безопасность и эффективность, необходимо предусмотреть дополнительные испытания для оценки присутствия таких продуктов.

##### Испытания

Испытания, применяемые для оценки качества любого лекарственного препарата, включают показатели качества, характеризующие действующие и вспомогательные вещества, входящие в его состав и показатели качества лекарственной формы, в виде которой лекарственный препарат получен.

Испытания, применяемые к лекарственным формам лекарственных препаратов, указаны в ОФС «Лекарственные формы», общих фармакопейных статьях на отдельные лекарственные формы и общих фармакопейных статьях на группы лекарственных форм и в настоящей ОФС не приводятся.

Для достижения необходимого качества лекарственных препаратов, не подлежащих регистрации, их испытания проводят на основании требований соответствующих действующих нормативных документов, утвержденных уполномоченным федеральным органом исполнительной власти, как правило, при осуществлении внутриаптечного контроля их качества. Обычно лекарственные препараты в виде внутриаптечной заготовки подлежат испытаниям по большему количеству показателей качества, чем экстемпоральные препараты.

Для оценки качества лекарственных препаратов промышленного производства применяют общие испытания по таким показателям, как: описание, подлинность, чистота, количественное определение, а также специфичные (индивидуальные) испытания, зависящие от особенностей и/или от способа/пути введения и применения лекарственного препарата и др.

Описание. Приводят сведения, которые наиболее полно характеризуют требования, предъявляемые к внешнему виду (агрегатное состояние, форма, размеры и др., что применимо), органолептическим и другим свойствам (цвет, запах) лекарственного препарата; описание вкуса не приводят.

Подлинность. Выбор испытаний по определению подлинности действующего вещества/веществ и, в ряде случаев, входящих в состав лекарственного препарата вспомогательных веществ, определяется составом лекарственного препарата. Идентифицируют действующие вещества, антимикробные консерванты, антиоксиданты и другие вспомогательные вещества в зависимости от природы фармацевтической субстанции и особенностей лекарственной формы, в соответствии с указаниями фармакопейной статьи. Испытания проводят, используя наиболее специфичные методы анализа, включая химические (ОФС «Общие реакции на подлинность»), физико-химические (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области», ОФС «Хроматография» и др.), биологические (ОФС «Полимеразная цепная реакция» и др.), иные методы контроля качества лекарственных средств, а также их сочетание.

Чистота. Определение чистоты лекарственных препаратов включает испытания на отсутствие или нормируемое содержание различных примесей, представляющих собой любые компоненты, присутствующие в лекарственном препарате, наличие которых нежелательно. Как правило, для большинства лекарственных препаратов применимы испытания на определение содержания остаточных органических растворителей и испытания на родственные примеси. Испытания по определению элементных примесей и примесей нитрозаминов проводят, если указано в фармакопейной статье на конкретный лекарственный препарат.

Остаточные органические растворители. Испытание проводят для лекарственных препаратов в любых лекарственных формах, независимо от способа/пути введения и применения, если в технологическом процессе производства (при получении или очистке) были использованы органические растворители или они могли образоваться в процессе производства.

Предельно допустимое содержание органических растворителей в лекарственных препаратах определяется степенью их возможного риска для здоровья человека; требования к предельно допустимому содержанию различных классов органических растворителей указаны в ОФС «Остаточные органические растворители». Определение остаточного содержания органических растворителей проводят в соответствии с нормативными требованиями и валидированными методиками, указанными в фармакопейной статье на конкретный лекарственный препарат. Для определения содержания остаточных органических растворителей в лекарственных препаратах рекомендуется использовать метод газовой хроматографии (ОФС«Газовая хроматография») и другие методы анализа.

Для лекарственных препаратов в жидких лекарственных формах, содержащих в своём составе спирт этиловый в качестве действующего вещества, растворителя или экстрагента, на стадии технологического процесса производства проводят испытание по определению содержания метанола и 2-пропанола в соответствии с требованиями ОФС «Метанол и 2-пропанол» и указаниями в фармакопейной статье.

Родственные примеси. Испытания проводят для лекарственных препаратов, полученных на основе фармацевтических субстанций химического происхождения, если существует вероятность наличия токсичных родственных примесей фармацевтической субстанции, образования и накопления примесей (продуктов деструкции) в результате деградации фармацевтической субстанции (например, при способности к образованию изомеров, продуктов распада и др.) или в результате взаимодействия фармацевтической субстанции со вспомогательными веществами или с материалами первичной упаковки и укупорочных средств (например, в процессе хранения, транспортирования) и др.

Примеси в лекарственных препаратах могут быть идентифицированные с установленным химическим строением, и неидентифицированные, структура которых не установлена.

Родственные примеси определяют в соответствии с требованиями ОФС «Родственные примеси в фармацевтических субстанциях и лекарственных препаратах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье на конкретный лекарственный препарат.

Для определения родственных примесей рекомендуется использовать специфичные методы количественного анализа, например метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») и др. Неспецифичные или неколичественные методы (методики) можно применять только при отсутствии подходящего специфичного метода (методики).

В случае, если содержание какой-либо неидентифицированной примеси или содержание их суммы, влияет на установленные нормы, превышая их, то анализируют контрольный раствор, для приготовления которого используют все вспомогательные вещества в том же количестве и соотношении, в котором они включены в состав лекарственного препарата.

Элементные примеси. Испытания лекарственных препаратов проводят, если применимо, в соответствии с требованиями ОФС «Элементные примеси» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье на конкретный лекарственный препарат.

Примеси нитрозаминов. Испытания лекарственных препаратов проводят, если применимо, в соответствии с требованиями ОФС «Примеси N-нитрозаминов» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье на конкретный лекарственный препарат.

Количественное определение. Лекарственные препараты должны выдерживать данное испытание. Выбор испытаний количественного определения действующего вещества/веществ и отдельных вспомогательных веществ определяется составом конкретного лекарственного препарата. Количественное определение действующего вещества/веществ, антимикробных консервантов, антиоксидантов и других вспомогательных веществ проводят в зависимости от природы фармацевтической субстанции и особенностей лекарственной формы, в соответствии с указаниями фармакопейной статьи.

Испытания проводят, используя физико-химические (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях», ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография» и др.), химические (ОФС «Комплексонометрическое титрование», ОФС «Нитритометрия», ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)» и др.), биологические (ОФС «Метод иммуноферментного анализа» и др.) методы анализа; допускается применение других фармакопейных методов анализа, включая методы количественного определения конкретного действующего вещества/веществ (ОФС «Определение цинка в инсулине» и др.).

Любые используемые методы (методики) количественного определения лекарственных препаратов подлежат валидации согласно требованиям ОФС «Валидация аналитических методик».

При выборе методов (методик) испытаний количественного определения действующего вещества в лекарственном препарате:

- рекомендуется использовать специфические методы анализа, например, высокоэффективную жидкостную или газовую хроматографию, что позволяет исключить возможное влияние на результаты испытания со стороны вспомогательных веществ, которое, при использовании неспецифических методов анализа, может стать причиной значительной погрешности;

- использовать, по возможности, тот же метод, который согласно фармакопейной статье применяется для количественного определения фармацевтической субстанции (действующего вещества лекарственного препарата); при этом необходимо подтвердить, что присутствующие в лекарственном препарате вспомогательные вещества и/или лекарственная форма не оказывают влияния на полученный результат;

- методы (методики), применяемые при изучении стабильности этого лекарственного препарата.

Допускается использовать разные методы (методики) количественного определения при проведения испытаний лекарственного препарата по таким показателям, в ходе которых проводят количественное определение одного и того же действующего вещества (например, при определении показателей «Растворение», «Однородность дозирования», «Количественное определение»); при этом пригодность методов (методик) должна быть подтверждена соответствующими процедурами валидации.

В лекарственных препаратах, содержащих два и более действующих веществ, при невозможности количественного определения по отдельности каждого из действующих веществ с помощью единой аналитической методики (метода), допустимо использование нескольких соответствующих валидированных методов (методик) анализа.

Если действующее вещество лекарственного препарата является фармацевтической субстанцией, представляющей собой соль, то количественное определение допускается проводить по одному из ионов – предпочтительно по фармакологически активному.

Пределы содержания компонентов лекарственного препарата при проведении испытаний по показателям «Количественное определение», «Специфическая активность» должны быть обоснованы и указаны в фармакопейной статье на конкретный лекарственный препарат.

Если в фармакопейной статье нет других указаний, содержание определяемых веществ выражается:

- для лекарственных препаратов в дозированных лекарственных формах – в миллиграммах (мг) или единицах действия (ЕД) в одной дозе;

- для лекарственных препаратов в недозированных лекарственных формах – в 1 грамме (г) или миллилитре (мл) препарата.

Лекарственные препараты, полученные при растворении и диспергировании твёрдых или мягких лекарственных форм (таблеток, порошков, гранул, лиофилизатов, гелей, паст) или разведении жидких лекарственных форм (концентратов), предназначенных для их получения, должны соответствовать требованиям, указанным в фармакопейных статьях на исходный лекарственный препарат.

Следующие испытания являются специфичными, применяемыми к определённым лекарственным препаратам.

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для всех нестерильных лекарственных препаратов в соответствии требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Стерильность. Испытание проводят для всех лекарственных препаратов, к которым предъявляется требование стерильности, в соответствии с требованиями ОФС «Стерильность».

Бактериальные эндотоксины и/или Пирогенность. Испытание проводят для лекарственных препаратов, предназначенных для парентерального применения, растворов для орошения и, при указании в фармакопейной статье, для других лекарственных препаратов. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Бактериальные эндотоксины» или ОФС «Пирогенность».

Аномальная токсичность. Испытание проводят для лекарственных препаратов, содержащих вещества природного происхождения; содержащих вещества, получаемые из крови, органов, тканей человека или животного; растительного сырья; микроорганизмов и продуктов их жизнедеятельности в виде лекарственных форм, предназначенных, в основном, для парентерального применения. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Аномальная токсичность» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье на конкретный лекарственный препарат.

Стандартные образцы. Стандартные образцы, которые могут быть необходимы на различных стадиях испытания лекарственного препарата, должны соответствовать требованиям ОФС «Стандартные образцы».

Другие испытания лекарственных препаратов проводят, если имеются соответствующие указания в фармакопейной статье.

##### Упаковка

В соответствии с требованиями ОФС «Упаковка лекарственных средств».

##### Маркировка

В соответствии с требованиями ОФС «Маркировка лекарственных средств».

##### Хранение

В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств». Условия хранения должны обеспечивать стабильность лекарственного препарата в течение всего установленного срока его годности в заявленном виде системы упаковки/укупорки.

##### Срок годности

В соответствии с требованиями ОФС «Стабильность и сроки годности лекарственных средств».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0026 Аспекты стабильности лекарственных средств

Взамен ОФС.1.1.0026.18

В настоящей общей фармакопейной статье приведены аспекты, касающиеся стабильности лекарственных средств, которые рекомендуется использовать в качестве дополнительной информации при фармацевтической разработке и изучении стабильности лекарственных средств, при хранении и транспортировании, а также на других этапах обращения лекарственных средств, где это применимо.

Стабильность – способность лекарственного средства сохранять химические, физические, микробиологические, биофармацевтические и фармакологические свойства в определённых границах в течение установленного срока годности.

В зависимости от сохраняемых свойств определены условия, которые характеризуют тот или иной вид стабильности лекарственного средства.

##### Виды стабильности лекарственных средств

Химическая стабильность ‒ сохраняются химическая целостность и количественное содержание/активность каждого действующего вещества в пределах допустимых значений.

Физическая стабильность ‒ сохраняются исходные физические свойства лекарственного средства, включая внешний вид, вкус, однородность, растворимость, суспендируемость и др.

Микробиологическая стабильность ‒ сохраняются стерильность или микробиологическая чистота лекарственного средства в соответствии с установленными требованиями; эффективность присутствующих антимикробных консервантов сохраняется в пределах допустимых значений.

Терапевтическая стабильность ‒ терапевтический эффект лекарственного препарата не меняется.

Токсикологическая стабильность ‒ не происходит заметного повышения токсичности лекарственного препарата.

Для сохранения надлежащего качества, эффективности и безопасности лекарственного средства в течение установленного срока годности необходимо учитывать факторы, влияющие на его стабильность. Один и тот же фактор может привести к потере как одного, так и нескольких видов стабильности, при этом утрата стабильности может происходить на различных этапах обращения лекарственного средства.

Требования к изучению стабильности и установлению сроков годности лекарственных средств промышленного производства регламентированы ОФС «Стабильность и сроки годности лекарственных средств» и ОФС «Стабильность биологических лекарственных средств».

Стабильность лекарственных препаратов аптечного изготовления, как правило, обеспечивается выполнением требований ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления», а также действующих нормативных и правовых законодательных документов.

##### Влияние процессов химической деградации

На стабильность лекарственного средства может оказать влияние любой компонент, входящий в его состав, независимо от того обладает этот компонент терапевтической активностью или нет. К потере стабильности, деградации (разложению) фармацевтической субстанции или вспомогательного вещества могут привести протекающие в лекарственном средстве химические реакции. Процесс химической деградации лекарственного средства может не сопровождаться какими-либо изменениями его физических свойств, включая внешние признаки, запах и др. Для оценки химической стабильности лекарственных средств проводят, как правило, стрессовые испытания с целью выявления процессов разложения и установления продуктов и механизмов деградации компонентов лекарственного средства. Наиболее часто разложение лекарственного средства сопровождается указанными ниже химическими реакциями, которые могут проходить как самостоятельно, так и в сочетании друг с другом.

Гидролиз. Гидролитическому расщеплению подвержены компоненты лекарственного средства, относящиеся к таким классам, как сложные эфиры, амиды, лактамы. Чаще всего процесс катализируют ионы водорода и гидроксид-ионы, а также вещества кислотного или основного характера, используемые обычно в качестве компонентов в составе буферных систем. Скорость гидролиза увеличивается прямо пропорционально давлению водяного пара в окружающей среде, снижаясь до незначительного уровня при низком содержании водяного пара.

К сложным эфирам, подверженным гидролизу, относятся, например, прокаин, тетракаин, физостигмин, метилдопа, ацетилсалициловая кислота и др. Гидролиз амидной связи протекает в молекулах эргометрина, бензилпенициллина натрия, хлорамфеникола, некоторых местных анестетиков. При этом расщепление амидной связи происходит медленнее, чем сложноэфирной связи. Например, прокаин может гидролизоваться уже при автоклавировании, в то время как прокаинамид устойчив в этих условиях. Амидная (или пептидная) связь в пептидах и белках различается по способности к гидролизу. Лактамное кольцо и азометиновая (или иминная) связь также проявляют способность к гидролитическому расщеплению, например, в случае бензодиазепинов (нитразепам) и хлордиазепоксида. Катализаторами процесса являются не только неблагоприятные значения рН, но и некоторые вещества, например, декстроза и медь при гидролизе ампициллина.

Для подавления гидролиза и повышения устойчивости к нему лекарственных средств могут применяться следующие методы:

- определение значений рН, обеспечивающих максимальную устойчивость действующего вещества, и последующее получение лекарственной формы при установленных значениях рН, если применимо;

- изменение диэлектрической постоянной среды путём добавления неводных растворителей, например, спирта этилового, глицерина, пропиленгликоля и др.;

- уменьшение растворимости действующего вещества в лекарственной форме путём добавления цитратов, декстрозы, сорбитола, глюконата и др.;

- комплексообразование действующего вещества, например, добавление кофеина к водным растворам бензокаина и прокаина, приводящее к подавлению их гидролиза;

- использование поверхностно-активных веществ в составе лекарственного препарата.

Дегидратация. Реакция отщепления воды наиболее характерна для спиртов, этот процесс катализируют кислоты. Дегидратация действующего вещества может привести к потере его фармакологической активности, возникновению или повышению токсичности. Например, в результате дегидратации тетрациклина образуется эпиангидротетрациклин с низкой антибактериальной активностью и высокой токсичностью.

Окисление. Способность к окислению проявляют вещества, имеющие в структуре фенольную группу, например, морфин, фенилэфрин, катехоламины (эпинефрин, допамин), или соединения, представляющие собой сопряжённые диены (ретинолы, ненасыщенные свободные жирные кислоты), ароматические гетероциклические соединения, нитрозо- и нитропроизводные, альдегиды. Продукты окисления обычно не обладают терапевтической активностью. Визуальные признаки окисления лекарственного средства не всегда можно определить, например, переход окраски бесцветных растворов эпинефрина к продуктам его окисления, имеющим янтарно-жёлтый цвет, заметен не во всех разведениях и не для любого газа, используемого при наполнении ампул с эпинефрином.

В большинстве случаев процесс окисления лекарственных средств запускается, когда показатели рН превышают оптимальные, в присутствии многовалентных ионов тяжёлых металлов (медь, железо и др.), а также при воздействии кислорода воздуха и ультрафиолетового излучения.

Изомеризация. Вещества, являющиеся изомерами, могут подвергаться процессу изомеризации, который, как правило, протекает с более высокой скоростью при значениях рН среднего диапазона, как правило, при рН более 3,0. Изомеризация сопровождается превращением действующего вещества в его оптический (эпимеризация) или геометрический (цис-транс-изомеризация) изомер со слабой фармакологической активностью или даже с полной потерей активности. Например, значительное уменьшение активности эпинефрина в растворах при низких значениях рН связано с рацемизацией за счёт превращения фармакологически активной формы (левовращающий изомер) в менее активный правовращающий изомер.

Эпимеризации в наибольшей степени подвержены соединения группы тетрациклинов. Скорость реакции зависит от рН и достигает максимального значения при рН 3,2; процесс ускоряют фосфат- и цитрат-ионы. В результате реакции эпимеризации происходит пространственная перегруппировка диметиламиновой группы тетрациклина и образуется равновесная смесь тетрациклина с его эпимером (4-эпитетрациклин), который обладает более низкой фармакологической (антибактериальной) активностью.

В некоторых случаях реакция изомеризации протекает совместно с другими химическими процессами деградации веществ. Например, пилокарпин подвергается одновременно основному гидролизу с образованием пилокарпат-иона и эпимеризации под действием гидроксид-иона с образованием изопилокарпина, который в последующем также гидролизуется в изопилокарпат-ион.

Цис-транс-изомеризация также является причиной потери фармакологической активности, если геометрические изомеры различаются по активности. Изомеризация ретинола (витамин А) по атомам углерода в положениях 2 и 6 приводит к образованию цис-изомеров с общей активностью, сопоставимой с активностью одной молекулы полного транс-изомера.

Декарбоксилирование. Реакция характерна для веществ, содержащих карбоксильную или карбонильную группу, сопровождается выделением углерода диоксида. Как правило, образующееся соединение характеризуется меньшей фармакологической активностью. Декарбоксилированию подвергаются некоторые карбоновые кислоты, например, при нагревании растворов пара-аминосалициловой кислоты происходит потеря углерода диоксида из карбоксильной группы и снижение фармакологической активности лекарственного средства.

Реакция декарбоксилирования β-кетоновых кислот может возникать в некоторых твёрдых лекарственных формах антибиотиков, содержащих карбонильную группу при β-углероде карбоновой кислоты или карбоксилат-анион. Такие реакции декарбоксилирования характерны для карбенициллина динатриевой соли, карбенициллиновой кислоты, натрия тикарциллина и тикарциллиновой кислоты.

Полимеризация. Полимеризация двух и более молекул вещества приводит к образованию сложной молекулы (димер, олигомер, полимер). Реакция полимеризации может происходить при хранении концентрированных водных растворов аминопенициллинов, например, ампициллина натрия. В результате раскрытия β-лактамного кольца за счёт реакции с аминогруппой боковой цепи второй молекулы ампициллина образуется димер, который в дальнейшем может превращаться в соединения с большей степенью полимеризации. Образующиеся продукты полимеризации могут быть причиной возникновения специфических аллергических реакций к ампициллину. Способность к димеризации аминопенициллинов, определяемая скоростью димеризации, увеличивается от ампициллина к амоксициллину.

##### Влияние особенностей лекарственных форм

Основными факторами особенностей лекарственных форм, которые могут повлиять на стабильность лекарственной формы, в большинстве случаев являются такие, как размер частиц (это касается особенно суспензий и эмульсий), рН, состав системы растворителей (в том числе, присутствие в ней воды и её общая полярность), совместимость между анионами и катионами, ионная сила раствора, специальные химические добавки, а также особенности молекулярного связывания и диффузия действующих и вспомогательных веществ.

Процессы деградации лекарственных препаратов в твёрдых лекарственных формах протекают относительно медленнее по сравнению с лекарственными препаратами в жидких лекарственных формах. В присутствии влаги скорость разложения твёрдых веществ, входящих в состав лекарственного препарата, может измениться (ОФС «Взаимодействие воды и твёрдого вещества с водой: построение изотерм сорбции-десорбции и определение активности воды»). Некоторые твёрдые вещества, имеющие температуру плавления выше комнатной, при взаимодействии друг с другом образуют эвтектическую смесь, имеющую температуру плавления ниже комнатной, представляющую собой раствор, одновременно насыщенный обоими твёрдыми веществами.

Влияние рН. Скорость деградации многих лекарственных средств в растворе экспоненциально возрастает или замедляется при понижении или повышении уровня рН относительно определённого диапазона значений. По степени воздействия неподходящий уровень рН сопоставим с воздействием высокой температуры, т.е. является фактором, с наибольшей вероятностью вызывающим клинически значимое снижение различных видов стабильности в результате реакций гидролиза и окисления. Например, лекарственный препарат в виде лекарственной формы «Раствор» или «Суспензия» может сохранять стабильность в течение установленного срока годности (дней, месяцев, лет) пока он находится в исходной форме выпуска, но при смешивании с другими жидкостями, изменяющими рН, происходит потеря стабильности лекарственной формы в течение нескольких дней или даже минут. Отклонение значения рН даже на единицу (например, с 4 до 3 или с 8 до 9) может снизить стабильность лекарственного средства в 10 или более раз.

Для действующих веществ, склонных к гидролизу, влияние рН на скорость гидролиза, как правило, устанавливают в процессе разработки лекарственной формы. Полученный профиль «рН−скорость гидролиза» позволяет определить значение рН, обеспечивающее наибольшую стабильность. Однако оно не всегда может быть использовано при получении лекарственной формы ввиду ухудшения растворимости или ослабления терапевтического эффекта лекарственного препарата при данном значении рН. Такая зависимость особенно характерна для слабоосновных действующих веществ, например, физостигмина, пилокарпина и атропина, применяемых в виде глазных капель. Хотя их максимальная стабильность наблюдается в кислых растворах, терапевтический эффект в большей степени проявляется ими в основной форме, чем в солевой.

Для поддержания рН в пределах диапазона, обеспечивающего минимальную скорость деградации, в состав лекарственных препаратов, выпускаемых в виде жидких лекарственных форм, вводят буферные системы рН, обычно представляющие собой смесь слабой кислоты или слабого основания с их солями. Вместе с тем, необходимо проявлять осторожность при выборе буферных систем, так как их компоненты, добавленные для регулирования рН лекарственной формы, могут катализировать кислотно-основный гидролиз, кроме того, изменение уровня рН может привести к окислительной деградации веществ, склонных к окислению, например, эпинефрина, некоторых гормонов, витаминов.

Значение рН лекарственных препаратов в виде жидких лекарственных форм регулируют также для достижения растворимости веществ, входящих в состав лекарственного препарата. Например, значение рН, сопоставляемое с соответствующим значением показателя константы кислотности (рКа), позволяет контролировать содержание обычно более растворимых ионизированных и менее растворимых неионизированных частиц слабых органических электролитов.

Также необходимо учитывать влияние рН на физическую стабильность лекарственных форм в виде гетерогенных двухфазных дисперсных систем, особенно эмульсий. Например, эмульсии типа «масло в воде» для парентерального применения при значениях pH в кислой области дестабилизируются.

Межионная (катион-анионная) совместимость. Свободное существование противоположно заряженных ионов в растворе, исключающее образование нерастворимых соединений, указывает на их совместимость в растворённом состоянии. Межионная совместимость зависит, главным образом, от величины заряда и размера ионов. Как правило, многовалентные ионы с противоположным зарядом с большей вероятностью будут несовместимыми. Поэтому необходимо учитывать, что несовместимость может возникнуть при добавлении иона крупного размера с зарядом, противоположным заряду иона вещества лекарственного средства.

Ионная сила. Воздействие ионной силы раствора, т.е. интенсивности электрического поля, создаваемого ионами в растворе, может происходить при использовании электролитов в качестве вспомогательных веществ, предназначенных для изотонирования растворов лекарственных средств, предотвращения окисления действующих веществ или поддержания необходимого значения рН при применении в качестве компонентов буферной системы лекарственного средства. Влияние общей концентрации растворённых электролитов на скорость реакций гидролиза обусловлено влиянием ионной силы на межионное притяжение. Как правило, константа скорости гидролиза обратно пропорциональна ионной силе в случае противоположно заряженных ионов (например, катиона действующего вещества и анионов вспомогательного вещества) и прямо пропорциональна ионной силе для одноимённо заряженных ионов. Реакция, в результате которой из-за увеличения ионной силы образуются ионы, противоположные по заряду исходным ионам лекарственного средства, может повысить скорость гидролиза лекарственного средства. Кроме того, высокая ионная сила неорганических солей может снижать растворимость некоторых лекарственных средств.

Растворители. Многие вещества, склонные к гидролизу в водных растворах, стабилизируют путём использования неводных растворителей в процессе получения лекарственной формы. Часто в качестве таких растворителей применяют этанол, глицерин, пропиленгликоль. Влияние неводных растворителей на стабильность веществ обосновано их диэлектрической постоянной, уменьшение которой, как правило, понижает скорость деградации. Однако и в этом случае стабильность зависит от заряда ионной формы вещества и атакующего иона, например, иона водорода, катализирующего гидролиз катионных веществ или гидроксид-иона, катализирующего гидролиз анионных веществ. При одноимённых зарядах взаимодействующих ионов низкая диэлектрическая постоянная повышает устойчивость вещества в процессе получения лекарственной формы. Противоположные заряды взаимодействующих ионов не позволяют обеспечить стабильность лекарственной формы в растворителях с низкой диэлектрической постоянной.

Поверхностно-активные вещества. Присутствие поверхностно-активных веществ в мицеллярной форме оказывает влияние на скорость гидролиза веществ. Степень влияния зависит от различия констант скорости гидролиза вещества в водном растворе и солюбилизированном состоянии внутри мицеллы. Для стабилизации неполярных и малополярных веществ наиболее эффективны неионогенные поверхностно-активные вещества. В случае ионогенных поверхностно-активных веществ устойчивость к гидролизу веществ определяется зарядами мицеллы и атакующего иона. При основном гидролизе солюбилизация вещества в анионную мицеллу подавляет скорость гидролиза вследствие отталкивания от одноимённо заряженных гидроксид-ионов. Катионная мицелла, наоборот, может усилить основный гидролиз. Поверхностно-активные вещества могут предотвращать также окислительную деградацию лекарственных средств.

##### Влияние факторов окружающей среды

Основными факторами окружающей среды, способными оказать неблагоприятное влияние на стабильность лекарственного средства, являются температура, свет, влажность, кислород, углекислый газ. При изучении стабильности лекарственных средств обязательно исследуют его термическую стойкость при высоких и низких температурных режимах, а при необходимости, его чувствительность к воздействию влаги, света, кислорода и других компонентов воздуха. Такие испытания проводят, как правило, в стрессовых условиях в соответствии с требованиями ОФС «Стабильность и сроки годности лекарственных средств» и ОФС «Определение фотостабильности лекарственных средств».

Температура. Как правило, скорость химической реакции увеличивается экспоненциально при повышении температуры на каждые 10 °С. Данная зависимость характерна почти во всех случаях гидролиза лекарственных средств и в некоторых реакциях окисления. Фактический температурный коэффициент скорости определённой реакции зависит от её энергии активации. Энергию активации в данном случае рассматривают как функцию определённой реакционной способности химической связи действующего вещества и лекарственной формы (растворитель, рН, добавки). Например, если лекарственный препарат, который должен храниться при низкой температуре, так как содержит легкогидролизуемое действующее вещество, подвергнуть воздействию температуры на 20 °С выше, то ожидается, что в этих условиях срок годности лекарственного препарата может снизится на 1/4−1/25 от его срока годности при хранении в условиях низких температур.

Вместе с тем, неправильно установленные низкие температуры могут оказывать отрицательное воздействие на стабильность лекарственного средства. Например, хранение при низких температурах может привести к чрезмерному повышению вязкости или пересыщенности лекарственных препаратов в некоторых жидких лекарственных формах. Замораживание может вызвать увеличение размера капель эмульсий вплоть до их разрушения, денатурацию белков и в некоторых редких случаях образование менее растворимых полиморфных соединений веществ.

Влияние световой энергии. Воздействие, в первую очередь, ультрафиолетового излучения способно вызвать окисление (фотоокисление) и расщепление (фотолиз) ковалентных связей веществ. Фотоокислению в значительной степени подвержены нифедипин, нитропруссид, рибофлавин, фенотиазины и другие вещества. В светочувствительных соединениях под действием фотохимической энергии образуются промежуточные продукты свободных радикалов, которые могут привести к запуску цепных реакций. Процесс фотолиза, например, фенотиазина и хлорпромазина сопровождается обесцвечиванием их растворов. Устойчивость к фотохимической деградации веществ можно обеспечить использованием в лекарственных препаратах вспомогательных веществ с необходимыми функциональными свойствами (антиоксидантов, стабилизаторов и др.), наполнением ампул и флаконов лекарственным препаратом в атмосфере инертного газа (азота), надлежащей системой светозащитной упаковки, соблюдением правил хранения и др.

##### Признаки нестабильности лекарственных форм

Наиболее частым признаком нестабильности лекарственного средства являются результаты процессов его химической деградации, в первую очередь вызванные реакциями гидролиза, окислительно-восстановительными реакциями, фотолизом. Химическая нестабильность может быть обусловлена взаимодействием между компонентами лекарственного средства, взаимодействием между лекарственным средством и материалами системы упаковки и другими причинами. Заметное снижение активности действующего вещества может быть вызвано диффузией содержимого упаковки через проницаемую или полупроницаемую поверхность системы упаковки из полимерных материалов или комбинацией других реакций с диффузией.

Выявить признаки химической деградации лекарственных средств органолептическими методами довольно сложно, как правило, они могут быть определены при проведении испытаний лекарственных средств на соответствие их качества требованиям фармакопейной статьи. Вместе с тем, в некоторых случаях чрезмерно активный процесс химической деградации сопровождается физическими изменениями, которые могут быть обнаружены по внешним признакам. О возможной нестабильности лекарственного средства могут предупреждать такие физические признаки, как резкое изменение цвета и запаха, образование осадка, помутнение раствора и др. По внешним признакам также может быть обнаружено микробиологическое загрязнение лекарственного средства.

Данные по изучению стабильности лекарственного средства с учётом, при необходимости, результатов клинических, токсикологических исследований, позволяют производителю лекарственного средства подобрать условия, обеспечивающие его стабильность, включая оптимальный состав, необходимую лекарственную форму и систему упаковки, рекомендации по хранению и сроку годности лекарственного средства. Выполнение требований, указанных в ОФС «Упаковка лекарственных средств», ОФС «Маркировка лекарственных средств», ОФС «Перевозка лекарственных средств» и ОФС «Хранение лекарственных средств», позволяет обеспечить сохранение всех видов стабильности в течение установленного срока годности. Наиболее распространённые признаки физической нестабильности лекарственных препаратов в различных лекарственных формах, приведённые ниже, позволяют своевременно выявить лекарственные средства с признаками ухудшения качества.

Твёрдые лекарственные формы. Многие твёрдые лекарственные формы предназначены для хранения в условиях пониженной влажности. Запотевание, образование капель жидкости на внутренней поверхности упаковки, комкование лекарственного препарата указывают на нарушение регламентируемых условий хранения лекарственного препарата. Наличие внутри оригинальной упаковки осушителя (влагопоглотителя) указывает на необходимость проявления особой осторожности при хранении и отпуске лекарственного препарата. Некоторые продукты деградации, например, салициловая кислота, образующаяся при гидролизе ацетилсалициловой кислоты, могут появляться в виде отложения кристаллов на поверхности твёрдой лекарственной формы или на стенках упаковки.

Твёрдые и мягкие желатиновые капсулы. Поскольку содержимое капсулы заключено в желатиновую оболочку, изменение внешнего вида или целостности, включая затвердевание или размягчение оболочки, представляется основным признаком нестабильности желатиновых капсул. Выделение газа, вызывающее вздутие капсулы, является ещё одним признаком нестабильности.

Таблетки, не покрытые оболочкой. На физическую нестабильность таблеток, не покрытых оболочкой, указывает образование на дне упаковки чрезмерного количества порошка и/или кусочков (крошек), появившихся от истёртых, раздробленных или расколотых таблеток. Трещины или сколы, неравномерность окраски, изменение цвета или обесцвечивание окрашенных таблеток, набухание или слипание, отложение кристаллов на поверхности таблеток или на стенках упаковки, также являются признаками нестабильности.

Таблетки, покрытые оболочкой. Признаками физической нестабильности таблеток, покрытых оболочкой, является появление трещин, неравномерность окраски или липкости поверхности, слипание таблеток.

Порошки и гранулы. Порошки и гранулы, не предназначенные для растворения в оригинальной упаковке, могут слёживаться и превращаться в твёрдую массу или изменять цвет, что может быть признаком нестабильности лекарственного средства.

Порошки и гранулы, предназначенные для приготовления растворов или суспензий. Лекарственные препараты в таких лекарственных формах требуют особого внимания, так как обычно они содержат антибиотики или витамины, которые особенно чувствительны к влаге. Оригинальная упаковка лекарственных форм, как правило, обеспечивает защиту от воздействия влаги. О нестабильности лекарственной формы может свидетельствовать необычный внешний вид порошка или гранул, например, их слёживание, спекание в твёрдую массу. Запотевание или появление капель жидкости на внутренней поверхности упаковки обычно говорит о непригодности лекарственного препарата для применения. Неприятный запах также может свидетельствовать о нестабильности лекарственного препарата.

Таблетки, гранулы и порошки шипучие. Шипучие лекарственные формы особенно чувствительны к влаге. Набухание твёрдой массы, возникновение давления газа является специфическим признаком нестабильности, указывающим на преждевременно наступившую реакцию растворения/диспергирования лекарственного препарата

Жидкие лекарственные формы Первостепенное значение для сохранения стабильности при хранении жидких лекарственных форм имеют такие свойства, как гомогенность и отсутствие микробиологического загрязнения. На нестабильность жидких лекарственных форм может указывать помутнение раствора или образование осадка, расслоение эмульсии, седиментация суспензии, не поддающаяся ресуспендированию, а также изменение органолептических свойств. Микробный рост может сопровождаться изменением цвета, помутнением или выделением газа.

Растворы, эликсиры и сиропы. Основными признаками нестабильности этих лекарственных форм являются: образование осадка, признаки микробиологического загрязнения, выделение газа.

Эмульсии. Характерным признаком нестабильности эмульсий является расслоение, т.е. отделение масляной фазы, не поддающейся редиспергированию способом, указанным в инструкции по применению на конкретный лекарственный препарат.

Суспензии. Слёживание твёрдой фазы, которое не поддаётся ресуспендированию при достаточном интенсивном встряхивании способом, указанным в инструкции по применению на конкретный лекарственный препарат, является основным признаком нестабильности. Присутствие относительно крупных частиц может означать, что в суспензии произошёл чрезмерный рост кристаллов.

Настойки и жидкие экстракты. Признаком нестабильности настоек и жидких экстрактов может быть наличие осадка, хлопьев, мути, непредусмотренных в фармакопейной статье. Лекарственные препараты в виде указанных лекарственных форм, как правило, имеют тёмную окраску, поэтому необходимо особое внимание при их исследовании.

Стерильные жидкие лекарственные формы. Основным опасным признаком нестабильности стерильных лекарственных форм является потеря стерильности и микробиологическое загрязнение, которое обычно невозможно обнаружить визуально. Однако любое помутнение, изменение цвета, образование плёнок на поверхности раствора, появление взвешенных и хлопьевидных частиц или выделение газа могут служить основанием для подозрения на вероятность контаминации. Для стерильных растворов, предназначенных для офтальмологического или парентерального применения, первостепенное значение имеет прозрачность раствора. Возможное нарушение целостности и герметичности системы укупорки/запаивания также необходимо исследовать.

Мягкие лекарственные формы. Основным признаком нестабильности мягких лекарственных форм является либо изменение цвета, либо заметное изменение консистенции или запаха.

Мази. Признаками нестабильности мазей являются изменение консистенции и выделение чрезмерного количества жидкости, а также образование гранул или зернистости.

Кремы. Признаками нестабильности кремов, представляющих собой эмульсии, содержащие воду и масло, являются расслоение эмульсии, рост кристаллов, уменьшение массы в результате испарения воды, обширная контаминация.

Суппозитории. Основным признаком нестабильности суппозиториев является их чрезмерное размягчение, вместе с тем, некоторые суппозитории могут высыхать и затвердевать или сморщиваться. Появление масляных пятен на упаковке лекарственного препарата должно стать основанием для более тщательного исследования суппозиториев на нестабильность.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0027 Весы и взвешивание

Взамен ОФС.1.1.0027.18

Настоящая общая фармакопейная статья устанавливает общие требования к весам и процессу взвешивания при испытании лекарственных средств и материалов для фармацевтического применения.

Весы – средство измерений, предназначенное для определения массы тела через силу тяжести, воздействующую на это тело в условиях воздушной среды. Весы могут применяться для определения других физических величин, связанных с массой тела.

Взвешивание – процесс определения массы тела посредством сравнения с массой эталона (механические весы), компенсации силы (электронные весы) или с помощью других физических величин.

В качестве единиц измерения массы, которые могут быть применены в весах при испытании лекарственных средств, используют в основном, миллиграммы, граммы, иногда ‒ микрограммы, редко ‒ килограммы.

Гиря – материальная мера (эталон) массы, нормируемая по физическим и метрологическим характеристикам: форме, размерам, материалу, качеству поверхности, номинальному значению, плотности, магнитным свойствам и пределам допускаемой погрешности.

##### Область применения

Требования настоящей общей фармакопейной статьи относятся, как правило, к весам для измерения массы лекарственных средств и материалов для фармацевтического применения. Гири, характеризуемые в настоящей общей фармакопейной статье, применяют в качестве эталонных гирь для поверки, калибровки, настройки весов или в качестве рабочих гирь совместно с весами.

Взвешивание испытуемого и/или стандартного образца является, как правило, одним из основных процессов в аналитических методиках фармакопейных методов анализа лекарственных средств и материалов для фармацевтического применения. Ошибка на этапе взвешивания может повлиять на все последующие этапы испытания, увеличить погрешность конечного результата и привести к недостоверным данным о качестве испытуемого материала. Поэтому при испытании лекарственных средств и материалов для фармацевтического применения важно соблюдать принципы надлежащей практики взвешивания (Good wighing practice), основанной на строгом соблюдении требований, указанных в инструкции по эксплуатации используемых весов, оценке их технических и метрологических характеристик и применяемого процесса взвешивания.

Весы должны быть квалифицированы в соответствии с требованиями ОФС «Квалификация аналитического оборудования».

##### Основные виды весов

Существует множество весов, различающихся по принципу действия, эксплуатационному назначению, точности взвешивания, по способу установки, по виду уравновешивающего устройства и другим параметрам.

Определение массы тела основано на измерении веса тела, считающегося равным силе гравитации, с которой Земля оказывает воздействие на взвешиваемый объект, его называют силой тяжести (FG) (выраженной в ньютонах) и определяют следующим выражением:

(1)

где m - масса объекта, кг;
g - ускорение свободного падения под действием силы тяжести на уровне моря ≈ 9,81 м/с2 .

Двумя наиболее распространёнными принципами действия весов являются непосредственное измерение массы тела путём сравнения с известным значением массы и компенсация силы.

К весам, принцип взвешивания которых основан на компенсации силы гравитации, относятся электронные весы. Сила гравитации, действующая на взвешиваемый объект, может быть компенсирована за счёт:

- упругой деформации: взвешиваемый объект давит на пружинный элемент, который реагирует с компенсационной силой Fc, выраженной в ньютонах, согласно следующему уравнению:

(2)

- где С - постоянная пружины, в ньютонах на метр;
  Δs - изменение длины из-за упругой деформации в метрах; тензометрические датчики используются для преобразования степени деформации в величину электрического сопротивления.

- электромагнитной силы, которая удерживает датчик нагрузки в равновесии. В большинстве весов с высоким разрешением это сила Лоренца, которая генерируется током внутри катушки, окружающей постоянный магнит.

К весам, принцип взвешивания которых основан на сравнении массы с известной массой, относятся механические весы, которые в основном являются равноплечими. В механических равноплечих весах сравнение массы осуществляется с помощью двуплечего рычага и двух чаш весов. Масса взвешиваемого объекта компенсируется противовесами известной массы на противоположном конце рычага. Противовесы подобраны таким образом, чтобы плечи весов находились в положении равновесия.

В зависимости от способа работы с весами, а именно, участия или не участия человека в процессе взвешивания, весы подразделяют на весы автоматического и неавтоматического действия.

Весы автоматического действия ‒ это весы, которые взвешивают без вмешательства оператора и/или выполняют свои функции автоматически по заранее установленной программе автоматических процессов, характерных для весов. К этой группе относят весы специальных назначений, для которых установлены индивидуальные технические и метрологические требования. В фармацевтической практике возможно использование весов автоматического действия, интегрированных в автоматизированные процессы технологического производства или аналитических испытаний, например, для фасовки, автоматическом дозировании и др.

Весы неавтоматического действия ‒ это весы, требующие вмешательства оператора во время процесса взвешивания для принятия решения о приемлемости результата взвешивания. Весы этой группы имеют общие принципы работы, но разнообразны по конструкции, назначению, применению. Различают следующие виды весов неавтоматического действия:

- градуированные весы ‒ весы, позволяющие проводить прямое считывание полного или частичного результата взвешивания;

- неградуированные весы ‒ весы не имеющие числовой шкалы, градуированной в единицах массы;

- весы с автоматическим установлением показаний ‒ весы, в которых состояние равновесия наступает без вмешательства оператора;

- весы с полуавтоматическим установлением показаний ‒ весы с диапазоном автоматического установления показаний, границы которого изменяет оператор;

- весы с неавтоматическим установлением показаний ‒ весы, уравновешивание которых полностью выполняет оператор.

Весы неавтоматического действия, в состав которых входят электронные устройства относят к электронным весам.

В следующем случае весы классифицируют по техническим, метрологическим и другим, порой не очевидным, характеристикам. Для определения массы при испытании лекарственных средств и материалов в фармацевтической практике использование находят, в основном, весы, относящиеся к группе весов лабораторных, среди которых наибольшее применение находят весы лабораторные аналитические, имеющие различную модификацию, максимальную нагрузку, дискретность и др.

Весы лабораторные аналитические подразделяют в зависимости от цены деления шкалы (дискретности) на:

- ультрамикроаналитические (дискретность 0,1 мкг, т.е. 7 знаков после запятой);

- микроаналитические (дискретность 1 мкг, т.е. 6 знаков после запятой);

- полумикроаналитические (дискретность 0,001 мг, т.е. 5 знаков после запятой);

- аналитические (дискретность, в основном, 0,0001 г, т.е.4 знака после запятой).

Весы, имеющие дискретность более 1 мг, как правило, относят к весам лабораторным техническим, среди которых выделяют весы прецизионные, имеющие дискретность от 1 мг до 1 г , т.е. 3 знака и менее после запятой.

Весы лабораторные торсионные с дискретностью, как правило, 1 мг, имеют ограничение по максимальной нагрузке до 50, 100 или 500 мг.

Для предварительного взвешивания или взвешивания без установленной точности, могут быть также использованы подходящие по дискретности, максимальной нагрузке и другим параметрам весы ручные, весы тарирные и другие виды и типы весов.

По способу взвешивания различают весы для статического взвешивания, которые предназначены для взвешивания объекта, находящегося в неподвижном состоянии на грузоприемном устройстве, и весы для динамического взвешивания, предназначенные для взвешивания объекта в движении.

Результат взвешивания большинства весов указан на цифровом дисплее, весы могут иметь индикацию о стабилизации их при взвешивании, устройства для записи и печати результата взвешивания и другие особенности снятия показаний и определения результатов взвешивания.

##### Особенности технических требований

Технические требования касаются конструкции, установки, эксплуатации и других технических характеристик весов.

Весы должны иметь конструкцию, соответствующую своему предназначению. Предназначение в данном случае включает в себя такие характеристики и факторы, как особенность и обязательность применения, окружающая среда. Конструкция весов должна быть пригодной к эксплуатации, т.е. быть прочной и тщательно отработанной для обеспечения сохранения метрологических свойств в течение определенного периода эксплуатации. Если область применения весов необходимо ограничить, то может потребоваться соответствующая маркировка. Конструкция весов включает основные устройства: модуль (датчик, индикатор, устройство обработки аналоговых или цифровых данных и др.), электронные части, показывающее устройство весов, вспомогательные показывающие устройства, дополнительные устройства (установка по уровню, установка нуля, устройство тарирования, устройство предварительного задания массы тары, устройство арретирования, вспомогательное устройство для поверки, программное обеспечение) и др. Весы должны иметь маркировку, советующую модели весов с указанием товарного знака, условного обозначения типа весов, серийного номера, года выпуска, класса точности.

Весы должны быть устойчивыми к воздействию внешних факторов (влажность, температура, давление, вибрация, воздушные потоки, магнитные поля, электростатические силы), а также должны иметь необходимую степень защиты от проникновения внутрь воды, пыли и других посторонних твёрдых частиц, кроме того обладать необходимыми свойствами безопасности для человека.

Качество работы весов и результатов взвешивания зависят от места установки весов. Необходимо определить и выбрать помещение, зону для установки прибора. По возможности весы следует устанавливать в помещении с контролируемым и постоянно поддерживаемым, указанным в инструкции по эксплуатации прибора, уровнем температуры и относительной влажности.

Помещение не должно подвергаться воздействию различных вибраций. Для установки весов следует выбрать специальное место (весовой стенд), которое может быть закреплено на полу, прикреплено к стенке в виде кронштейна или отдельный весовой стол, представляющий собой устанавливаемый на пол стол для весов с гранитной столешницей, каменную плиту или другой лабораторный стол. Весы необходимо устанавливать на поверхность из твёрдого, ровного материала, который должен поглощать вибрации, обладать антимагнитными и антистатическими свойствами. Если для установки весов используют металлические части (например, опора стола), то их необходимо заземлять, чтобы предотвратить накопление статического заряда. Весовой стол должен быть устойчивым, не должен прогибаться, качаться и изменять результаты взвешивания, если кто-то прислонится к нему.

Необходимо обеспечить, чтобы на весы не падал прямой солнечный свет, для чего весы в помещении следует располагать у стены без окон или вдали от наружных окон. Используемые электроосветительные приборы не должны находиться вблизи весов, так как они выделяют тепло, при этом наибольшее количество тепла выделяют лампы накаливания.

В месте, где расположены весы, не должно быть воздушных потоков и сквозняков. Не рекомендуется устанавливать весы на пути прохождения воздушных потоков от кондиционеров, нагревательных приборов (сушильных шкафов, печей) и приборов отопления, от устройств, оборудованных вентиляторами и нагнетателями (компьютеров, электрообогревателей и др.), а также устанавливать весы рядом с дверью. Вблизи весов не должны находиться вещества, материалы, выделяющие вредные пары, газы. Для весов, предназначенных для применения в агрессивных средах, необходимо предусматривать дополнительную защиту в зависимости от типа (вида) воздействия.

Следует обеспечить безопасную бесперебойную подачу электроэнергии в помещение. Весы не следует располагать вблизи источников электромагнитного излучения, таких как высокочастотные генераторы, электродвигатели или портативные устройства связи (в том числе беспроводные телефоны, сотовые телефоны и рации). Весы не должны размещаться вблизи магнитных полей, создаваемых лабораторными приборами или другим оборудованием.

Весы устанавливают по уровню и уровень установки весов периодически проверяют. Весы могут иметь пузырьковый уровень, который устанавливается в центр весов изменением положения регулируемых опор. Существуют весы с автоматической системой выравнивания.

Весы, имеющие сложную конструкцию защитного кожуха необходимо устанавливать таким образом, чтобы открывание кожуха было наименьшим. У весов с обычным кожухом дверка должна открываться на ширину, позволяющую правильно расположить объект для взвешивания.

После первоначальной установки весов или смены их местоположения, необходимо выдержать весы в новом месте установки не менее 12 часов, не подключая их к электросети, если иное не указано в инструкции по эксплуатации прибора. После первого подключения весов к источнику питания или после включения весов после длительного отключения от источника питания, весы необходимо прогреть в течение не менее 2 часов, если иное не указано в инструкции по эксплуатации прибора. Не рекомендуется отключать весы от источника питания при регулярной эксплуатации, но при этом их необходимо переводить в режим ожидания. В этом случае, при последующем использовании весов, предварительного прогрева не потребуется.

При первом использовании весов, при перемещении и установке весов на новом месте, после настойки или корректировки уровня, после значительных изменений температуры, относительной влажности или атмосферного давления окружающей среды необходимо выполнить настройку (юстировку, калибровку) весов.

В некоторых видах электронных аналитических весов используют встроенные гири для ручной или автоматической настройки. Эту настройку обычно применяют для уменьшения дрейфа весов с течением времени и для компенсации дрейфа, связанного с колебаниями температуры окружающей среды.

Юстировка ‒ это операция, производимая для коррекции расхождения между показываемым результатом измерения и истинным значением массы, необходима для снижения расхождения между этими показателями. Некоторые марки весов имеют функцию самокалибровки или снабжены встроенной автоматической самокалибровкой, которую можно программировать.

Калибровка, проводимая при выполнении настройки прибора подразумевает определение разницы между результатом взвешивания образца и истинным значением его массы. Калибровка входит в квалификацию функционирования, но, как правило, также регулярно выполняется и в дальнейшем ‒ при проведении испытаний в ходе квалификации эксплуатации весов. Калибровка должна выполняться в том месте, в котором происходит повседневное использование весов.

После установки весов необходимо провести работы по квалификации функционирования (ОФС «Квалификация аналитического оборудования»), которые могут быть выполнены как квалифицированными сторонними организациями, так и пользователями весов. В качестве обязательного условия для проведения таких работ к весам должно быть подключено питание и весы должны быть уравновешены перед началом использования в течение времени, указанного в инструкции по эксплуатации, как правило, от 1 до 24 ч, в зависимости от типа весов. В зависимости от типа весов перечень испытаний при квалификации функционирования весов может включать следующие параметры:

- механическая мобильность подвижных частей;

- контроль стабильной индикации;

- ручная или автоматическая настройка с помощью встроенных гирь;

- функционирование вспомогательного оборудования;

- функция тарирования.

##### Особенности метрологических требований

Метрологические требования касаются метрологических свойств средств измерений, т.е таких свойств, которые влияют на результаты и погрешности измерений. Для оценки метрологических свойств средств измерений применяют соответствующие метрологические характеристики средств измерений (МХСИ), которые необходимы для определения результатов и расчёта характеристик инструментальной составляющей погрешности измерений, для оценки технического уровня и качества средств измерений при выборе конкретного средства измерений, кроме того, они также могут быть использованы в качестве количественных критериев при оценке соответствия средств измерений установленным нормам и т.д. Нормированные МХСИ (по номенклатуре, по критериям приемлемости метрологических характеристик и др.) устанавливают при испытаниях в целях утверждения средств измерений и указывают в соответствующих нормативных документах на средства измерений. Основными метрологическими характеристиками весов являются такие как: нагрузка, деление шкалы и др.

Максимальная нагрузка (Max) – максимальное значение нагрузки без учёта диапазона компенсации массы тары. Эта метрологическая характеристика указана в документации к весам как параметр «Наибольший предел взвешивания» (НПВ) или Max, обозначающий предельную массу образца, определяемую за одно взвешивание на этих весах. Превышение Max при эксплуатации весов может привести к выходу оборудования из строя и необратимым изменениям их характеристик.

Минимальная нагрузка (Min) – значение нагрузки, ниже которой результат взвешивания может иметь чрезмерную относительную погрешность. Эта метрологическая характеристика указана в документации к весам как параметр «Наименьший предел взвешивания» (НМВ) или Min, обозначающий минимальную массу образца, определяемую за одно взвешивание на этих весах. При взвешивании образца, имеющего массу ниже установленного значения Min, весы могут отображать результаты измерения, но их достоверность не гарантирована.

Диапазон взвешивания – диапазон между минимальной и максимальной нагрузками. Для увеличения точности измерения весь интервал взвешивания от Min до Max может быть разбит на два или три диапазона. Для каждого диапазона задается своя допустимая погрешность, что позволяет компенсировать рост погрешности с увеличением массы взвешиваемого образца.

Длина деления шкалы – это расстояние между двумя следующими друг за другом отметками шкалы. В документации к весам, как правило, указана действительная цена деления шкалы, называемая также дискретностью, обозначаемая d – это значение, выраженное в единицах массы, равное разности между двумя значениями, соответствующими двум последовательным отметкам шкалы для аналогового отображения измеряемого значения массы (например, для электронных весов) или разности между следующими друг за другом последовательно отраженных показаний для цифрового отображения измеряемого значения массы.

Поверочное деление или цена поверочного деления, обозначаемое е, – это условное значение, выраженное в единицах массы, применяемое для классификации весов, оценке соответствия, при поверке весов. Для многих типов весов гарантировано соотношение: d = e, но для некоторых типов весов, соотношение может быть другим, например, 2d = e и др.

Число поверочных делений, обозначаемое n, определяют как частное от деления максимальной нагрузки весов на значение поверочного деления весов: n = Max/е.

Метрологические требования также касаются классификации весов по классу точности, установлению предела допускаемой погрешности весов и некоторых других аспектов.

Класс точности весов – это обобщённая характеристика весов, определяемая пределами допускаемой погрешности, а также рядом других свойств, влияющих на точность измерений.

Для весов установлено четыре класса точности: специальный, высокий, средний и обычный.

В табл. 1 отражены значения МХСИ, характеризующие класс точности весов.

Таблица 1. Классификация весов для статического взвешивания
Класс точности и принятое обозначение | Поверочное деление е | Число поверочных делений n=Max/ е | Минимальная нагрузка Min (нижний предел)
--- | --- | --- | ---
минимальное | максимальное
Специальный I | 0,001 г ≤ е1 | 50000 | - | 100 е
Высокий II | 0,001 г ≤ е ≤ 0,05 г 0,1 г ≤ е | 100 5000 | 100 000 100 000 | 20 е 50 е
Средний III | 0,1 г ≤ е ≤ 2 г 5 г ≤ е | 100 500 | 10 000 10 000 | 20 е 20 е
Обычный IIII | 5 г ≤ е | 100 | 1000 | 10 е
Примечание – Обычно невозможно выполнить испытания или поверку весов с е <1 мг из-за большой неопределённости испытательных нагрузок.

Для установления метрологических требований к пределу допускаемой погрешности весов необходимо определить понятие «показание весов».

Показание весов – это обозначаемое значение величины/результата измерения массы тела, показываемое, отображаемое весами. Полученные показания весов в результате окончательного взвешивания могут различаться по виду их представления, по результатам взвешивания, по снятию отсчёта, по определяемым погрешностям. Показания весов могут быть представлены в визуальном виде при непосредственном считывании показаний с циферблата или экрана, либо суммированием значением уравновешивающих гирь, и/или в распечатанном виде. Если измерение проводили с участием гирь (уравновешивание гирями), то показание весов – это масса метрологически контролируемых гирь, уравновешивающих нагрузку; в случае аналоговой индикации показания будут отображены в виде информации, позволяющей определить состояние равновесия в долях цены деления шкалы, а в случае цифровой индикации показания будут представлять собой тип отображения информации, при котором отметки шкалы образуют последовательность упорядоченных цифр, не позволяющую проводить интерполяцию до долей цены деления шкалы.

В зависимости от настройки весов результатом взвешивания может быть масса брутто (G) (масса образца с ёмкостью для взвешивания), масса нетто (N) (масса образца) или масса тары (T) (масса ёмкости для взвешивания), а также и другие заданные значения.

Достичь при взвешивании абсолютно точного (истинного) значения величины/результата массы тела практически невозможно из-за различных факторов, влияющих на погрешность измерения.

Погрешность показания (погрешность измерения) (Е) – это разность между показанием весов и истинным значением соответствующей условной массы.

Существуют различные классификации погрешностей измерения: по форме выражения (абсолютная погрешность весов, относительная погрешность весов), по источникам возникновения (инструментальные, методические, погрешности работы пользователя), по закономерности возникновения и проявления (систематические, случайные, чрезмерные) и др.

Показания весов считают достоверными при учёте погрешностей измерения, характерных для конкретного взвешивания и в пределах допустимых значений погрешностей. Как правило, учитывают следующие погрешности измерения:

- основная погрешность (абсолютная, относительная) – погрешность весов, определённая при нормальных условиях;

- Примечание – Нормальные условия – это совокупность установленных значений влияющих факторов, при которых правомерно проводить сравнение результатов измерений.

- основная первоначальная погрешность – основная погрешность весов, определённая до проведения эксплуатационных испытаний и испытаний на стабильность чувствительности;

- ошибка – разность между погрешностью и основной погрешностью весов;

- промах – ошибка, превышающая значение проверочного деления е ;

- погрешность долговечности – разность между основной погрешностью весов после некоторого периода эксплуатации и их основной первоначальной погрешностью;

- стабильность чувствительности – способность весов на протяжении периода эксплуатации сохранять в заданных пределах разность между показанием весов при максимальной нагрузке и показанием весов без нагрузки.

Наибольшее значение погрешности показания, допускаемой техническими условиями, правилами и другими документами для данного средства измерений, определяет величину предела допускаемой погрешности. Погрешность показаний весов в диапазоне измерений по абсолютному значению не должна превышать предела допускаемой погрешности.

Предел допускаемой погрешности (maximum permissible error) (mpe) – максимальная разность (положительная или отрицательная) между показанием весов и соответствующим истинным значением, задаваемая эталонными гирями, устанавливаемая для весов, находящихся в нормальном положении и имевших до нагружения нулевые показания. Предел допускаемой погрешности весов определяется ценой поверочного деления e.

Для весов четырёх классов точности в табл. 2 приведены установленные метрологические требования ‒ пределы допускаемой погрешности весов при поверке и при эксплуатации. Пределы допускаемой погрешности при эксплуатации весов равны удвоенному значению при их поверке.

Таблица 2. Пределы допускаемой погрешности весов при увеличении или уменьшении нагрузки
Для нагрузки m, выраженной в поверочных делениях е | Пределы допускаемой погрешности при первичной поверке | Пределы допускаемой погрешности при эксплуатации
--- | --- | ---
Класс I | Класс II | Класс III | Класс IIII
0≤ m ≤50000 | 0≤ m ≤5000 | 0≤ m≤500 | 0≤ m≤50 | ±0,5 е | ±1,0 е
50000≤m≤200000 | 5000≤ m≤20000 | 500≤ m≤2000 | 50≤ m≤200 | ±1,0 е | ±2,0 е
200000< m | 20000<m≤100000 | 2000<m≤10000 | 200000<m≤1000 | ±1,5 е | ±3,0 е

##### Испытания весов

В течение жизненного цикла весы подвергают различным испытаниям в соответствии с действующими законодательными и нормативными документами.

В сфере государственного регулирования средств измерений допускается использовать весы утвержденного типа, подвергшиеся поверке, соответствующие обязательным требованиям к измерениям.

При утверждении типа средств измерений устанавливаются показатели точности, интервал между поверками, а также методика поверки данного типа средства измерений. Решение об утверждении типа принимается федеральным органом исполнительной власти на основании положительных результатов испытаний в целях утверждения типа, проведенных аккредитованным в национальной системе аккредитации юридическим лицом.

Поверка – совокупность операций, выполняемых в целях подтверждения соответствия средств измерений метрологическим требованиям, установленным при утверждении типа. Поверку средств измерений осуществляют аккредитованные в национальной системе аккредитации юридические лица и индивидуальные предприниматели.

Первичную поверку весов выполняют при их выпуске из производства или после ремонта, последующие поверки (периодическую, внеочередную, инспекционную и др.) проводят в течение всего жизненного цикла весов в соответствии с установленными сроками и нормативными требованиями.

Весы, предназначенные для применения вне сферы государственного регулирования, могут подвергаться калибровке. Калибровка средств измерений – совокупность операций, выполняемых в целях определения действительных значений метрологических характеристик. Калибровка выполняется с применением эталонов единиц величин, прослеживаемых к государственным первичным эталонам или к национальным эталонам единиц величин иностранных государств. О калибровке и юстировке, проводимых при установке, перемещении весов указано в разделе «Основные виды весов».

Для проверки работоспособности весов должны быть предусмотрены такие виды испытаний, как квалификация и регулярная проверка работоспособности.

В настоящей общей фармакопейной статье приведены наиболее важные характеристики весов, используемых в аналитических целях, испытание которых проводят для оценки точности весов. Указанные характеристики и их оценка могут быть применимы для определения и подтверждения соответствия метрологических свойств, характеристик весов установленным требованиям при калибровке, поверках и в случае других испытаний весов, выполняемых пользователями, в том числе, на этапе квалификации эксплуатации весового оборудования (ОФС «Квалификация аналитического оборудования»), вместе с тем, указанные данные по испытанию весов не являются исчерпывающими.

Периодичность, объём испытаний, критерии приемлемости определяемых метрологических свойств весов и другие аспекты испытаний, зависят от жизненного цикла, технических и метрологических характеристик, назначения и предполагаемого использования весов, а также от рисков, связанных с применением и допустимой погрешностью взвешивания весов, в зависимости от которых некоторые из этих испытаний могут быть пропущены. Испытания также могут быть не проведены, если согласно имеющимся данным определяемая характеристика весов оказывает минимальное влияние на точность взвешивания весов.

Например, для весов, предназначенных для «точного взвешивания», особенно важно, чтобы такие весы были откалиброваны в рабочем диапазоне и соответствовали установленным требованиям, прежде всего, по таким параметрам, как повторяемость и точность весов, а простые равноплечие весы, предназначенные для предварительного взвешивания или взвешивания без установленной точности, оценивают, как правило, по чувствительности, нецентральному нагружению, проверке отношения плеч весов, рейтера и градуированного коромысла.

Проведение испытаний весов, их порядок и периодичность могут варьироваться в зависимости от значимости конкретной характеристики, но эти условия для конкретных весов должны соответствовать утверждённым внутренним стандартным операционным процедурам (СОП) организации, использующей весы и должны быть надлежащим образом обоснованы. Проведение испытаний весов должно быть подтверждено записями об испытаниях в соответствии с СОП. Такие записи должны позволять легко проследить использование весов, и, если это необходимо, содействовать в лабораторных расследованиях.

Гири. Испытания весов проводят методом непосредственной оценки с помощью нагрузки –эталонных гирь подходящего класса точности. Пределы допускаемой погрешности (отклонение значения массы от номинального значения) используемых гирь подходящего класса точности, как правило, не должны превышать 1/3 предела допускаемой погрешности весов при данной нагрузке, что является обязательным требованием при испытании весов на чувствительность, линейность. В некоторых случаях, например, при испытании на повторяемость, нецентральное нагружение, достаточно использовать номинальную массу гири (гирь), но при этом необходимо следить, чтобы во время испытания масса гири (гирь) не изменялась и оставалась стабильной.

Эталонные гири, используемые для испытаний, следует хранить и обращаться с ними таким образом, чтобы минимизировать их загрязнение. Перед выполнением испытаний эталонные гири необходимо поместить и оставить рядом с весами в течение времени, необходимого для того, чтобы установилось достаточное тепловое равновесие. По возможности, в испытаниях рекомендуется использовать одну эталонную гирю, чтобы минимизировать ошибки из-за неправильного обращения, но допускается также использование нескольких эталонных гирь.

Перед началом испытаний проводят внешний осмотр и опробование весов, изучают данные о метрологических характеристиках, которые указаны на весах.

Реагирование. Испытание на реагирование оценивает способность весов реагировать на малые изменения нагрузки: порог реагирования весов для данной нагрузки равен наименьшему значению дополнительной нагрузки, которая при ее плавном приложении к грузоприемному устройству или снятии с него, вызывает заметное изменение показания.

Реагирование проверяют на весах с неавтоматическим установлением показаний и весах с аналоговой индикацией, кроме весов с цифровой индикацией. Испытание проводят при трёх различных нагрузках: Min, 1/2Max и Max; испытание на реагирование допускается проводить при определении погрешности весов.

Плавная установка на весы с неавтоматическим установлением показаний или снятие с этих весов, находящихся в состоянии равновесия, эталонных гирь массой, равной 0,4 абсолютного значения предела допускаемой погрешности при данной нагрузке | mpe | , но не менее 1 мг, должна вызывать заметное смещение показывающего элемента.

Плавная установка на весы с аналоговой индикацией (автоматическим или полуавтоматическим установлением показаний) или снятие с этих весов, находящихся в состоянии равновесия, эталонных гирь массой, равной абсолютному значению предела допускаемой погрешности при данной нагрузке |mpe| , но не менее 1 мг, должна вызывать постоянное смещение показывающего элемента на значение, большее или равное 0,7 массы эталонных гирь.

Чувствительность. Испытание весов на чувствительность оценивает способность весов выходить из состояния равновесия при самом незначительном увеличении или уменьшении нагрузки в точках приложения. Определение минимальной чувствительности применяют, как правило, для весов с неавтоматическим установлением показаний.

Во время испытания на чувствительность грузоприёмное устройство весов не должно быть заблокировано, т.е. весы должны находиться в режиме взвешивания. На грузоприёмное устройство весов, находящихся в состоянии равновесия (нуля или Max), помещают испытательную нагрузку – эталонные гири массой, равной абсолютному значению предела допускаемой погрешности | mpe | для приложенной нагрузки к весам. Эталонные гири на грузоприемное устройство помещают с легким нажимом для преодоления порога чувствительности весов.

Чувствительность весов для данного значения измеряемой массы m представляет собой частное от деления изменения Δl наблюдаемой величины l на соответствующее изменение Δm измеряемой массы m (или иначе ‒ на величину массы эталонных гирь (нагрузку), которая вызывает это изменение). При этом, чем меньше разница в величине нагрузки, которую можно определить этими весами, тем выше их чувствительность, тем точнее результаты взвешивания, следовательно, выше точность весов.

Для весов с неавтоматическим установлением показаний установлены следующие требования к минимальной чувствительности: дополнительная нагрузка, эквивалентная абсолютному значению предела допускаемой погрешности | mpe | , приложенная к весам, находящимся в состоянии равновесия, должна вызывать постоянное смещение показывающего элемента не менее чем:

- на 1 мм – для весов классов точности I и II;

- на 2 мм – для весов классов точности III и IIII с Max≤ 30 кг;

- на 5 мм – для весов классов точности III и IIII с Max> 30 кг.

Линейное расстояние между положениями показывающего элемента до и после наложения дополнительных гирь следует принимать как постоянное смещение.

При регулярных проверках работоспособности допускается оценивать чувствительность с использованием одной испытательной нагрузки массой от 5 % Max до 100 % Max следующим образом: обнулить весы, поместить выбранную нагрузку на грузоприемное устройство и снять показания весов.

Линейность. Если весы способны сохранять равномерность показаний чувствительности во всем диапазоне допустимой нагрузки, то считается, что весы обладают свойством линейности. Как правило, чувствительность в этом случае определяют 3–6 раз в диапазоне интервала испытаний. Нелинейность обычно выражают как наибольшее значение любого отклонения от линейности в пределах интервала испытания.

Повторяемость (размах показаний). Испытание весов на повторяемость (размах показаний) – это способность весов показывать близкие друг к другу результаты для одной и той же нагрузки, прикладываемой к грузоприемному устройству несколько раз практически одним и тем же способом, при достаточно постоянных условиях испытаний.

Повторяемость (размах) показаний оценивают по разности между максимальным и минимальным значениями погрешностей (с учётом знаков), полученными при проведении серии измерений. Эта разность не должна превышать абсолютного значения предела допускаемой погрешности весов (| mpe |), при этом погрешность любого отдельного (единичного) результата взвешивания не должна превышать пределов допускаемой погрешности весов (mpe) для данной нагрузки.

В случае испытаний на повторяемость показаний весов, проводимых в целях утверждения типа весов, выполняют две серии взвешиваний: одна ‒ с нагрузкой около 50 % Max, другая ‒ с нагрузкой, близкой к 100 % Max. Для весов Max которых менее 1000 кг, каждая серия должна состоять из 10 взвешиваний. При испытаниях на повторяемость при поверке весов величина нагрузки приблизительно равна 0,8 Max, проводят шесть взвешиваний для весов I и II классов точности и не менее трех взвешиваний для весов III и IIII классов точности.

Для испытания на повторяемость используют эталонную гирю (испытательную нагрузку), масса которой составляет установленный процент от Max (от 50 до 100% Max или около 80% Max). При испытании весы несколько раз нагружают одной и той же нагрузкой, предпочтительная масса которой соответствует нижней части диапазона измерений, не более 5 % от Max, но не менее 100 мг.

Рекомендуемая последовательность проведения испытания: обнулить весы, поместить выбранную нагрузку на грузоприёмное устройство, снять показания весов, повторить всю процедуру, включая обнуление, не менее 10 раз. Считывание показаний весов следует проводить, когда весы нагружены, и когда разгруженные весы возвращаются к положению равновесия между взвешиваниями. Перед каждым нагружением необходимо убедиться в том, что весы показывают нуль, или, при необходимости, установить нулевое показание с помощью устройства установки нуля. Если весы снабжены автоматическим устройством установки на нуль или устройством слежения за нулем, то это устройство должно быть включено во время испытания.

Повторяемость считается удовлетворительной, если удвоенное стандартное отклонение взвешиваемого значения (s), делённое на наименьшую массу нетто (т.е. наименьшую чистую массу образца, которую планируют взвешивать на этих весах), не превышает установленных критериев приемлемости:

(3)

где s - стандартное (среднеквадратичное) отклонение для взвешиваний при определении повторяемости (не менее 10 раз), в г или мг;
msnw - наименьшая масса нетто, г или мг.

Рабочие характеристики весов для аналитических целей в нижней части диапазона измерений ограничены конечным значением повторяемости, и обычно можно пренебречь ограничениями, вызванными систематическими отклонениями. Поэтому весь бюджет погрешности точности весов (0,1%) может быть перенесен на критерий приемлемости для испытания на повторяемость. Поэтому при оценке точности весов для аналитических целей, предназначенных для «точного взвешивания», максимально допустимое отклонение для повторяемости, как правило, не должно превышать 0,1 %, в остальных случаях действуют требования, установленные пользователем.

На основании испытаний на повторяемость можно определить минимальную нагрузку.

Минимальная нагрузка. Минимальная нагрузка весов (Min) различных классов точности указана в табл. 1; эта метрологическая характеристика показывает, что взвешивание нагрузок ниже заданного значения на указанных весах приведёт к большим относительным погрешностям.

Определение минимальной нагрузки (M min) для конкретных весов для аналитических целей необходимо для того, чтобы предупредить взвешивание образца с получением результата с превышением допустимой погрешности взвешивания.

Минимальная нагрузка (M min) весов для аналитических целей может быть рассчитана на основании результатов, полученных при определении повторяемости и выражена уравнением:

(4)

где k - коэффициент охвата (обычно равный 2 или более);
s - стандартное (среднеквадратичное) отклонение для взвешиваний при определении повторяемости (не менее 10 раз), в г или мг.

Если полученное стандартное отклонение менее «0.41· d», где d ‒ деление шкалы испытуемых весов, то стандартное отклонение принимают за «0,41· d». Нижний предел «0,41· d» для стандартного отклонения связан с погрешностью округления цифрового индикатора весов, который рассчитывают, исходя из следующих данных. Операция взвешивания всегда состоит из двух показаний весов – одного до и другого после помещения образца на грузоприёмное устройство/снятия с грузоприёмного устройства весов, а чистым весом образца считается разница между этими двумя показаниями. Погрешность округления, отнесённая к одному показанию взвешивающего прибора рассчитывается как «0,29·d». Для двух индивидуальных погрешностей округления обычно используют квадратичное суммирование, что дает результат «0,41· d». Тарирование прибора после помещения на грузоприемное устройство тары не влияет на погрешность округления, поскольку нулевое показание также округляется.

Минимальная нагрузка описывает нижний предел весов, ниже которого допустимая погрешность взвешивания не соблюдается. Приведённое выше уравнение учитывает, что рабочие характеристики весов для аналитических целей в нижней части диапазона измерений ограничены допустимой погрешностью повторяемости.

В случае взвешивания на весах образцов, требующих «точного взвешивания», чтобы повторяемость являлась удовлетворительной, как правило, необходимо, чтобы двукратное стандартное отклонение для результата взвешивания, делённое на целевой наименьший чистый вес (наименьшую чистую массу образца, которую пользователи планируют использовать для этих весов), должен быть не более 0,10 %. В этом случае приведённое выше уравнение приобретает вид:

(5)

Если значение полученного стандартного отклонения (s) меньше «0,41· d», то стандартное отклонение (s) принимают за «0,41· d» и формула приобретет вид:

(6)

В других случаях взвешивания на весах для аналитических целей, не требующих «точного взвешивания», значение минимальной нагрузки может варьироваться в зависимости от допустимой погрешности взвешивания и конкретного использования весов.

Чтобы обеспечить допустимую погрешность взвешивания, масса образца (т.е. чистый вес) при взвешивании должна быть не меньше минимальной нагрузки. Понятие «минимальная нагрузка» относится к массе образца, а не к таре или весу брутто.

Факторы, которые могут повлиять на повторяемость при использовании весов, включают:

- рабочие характеристики весов и, как следствие, минимальная нагрузка, могут меняться со временем в связи с изменением условий окружающей среды;

- разные операторы могут по-разному выполнять взвешивание на весах, т.е. минимальная нагрузка, установленная разными операторами, может различаться;

- стандартное отклонение конечного числа повторных взвешиваний является лишь оценкой истинного стандартного отклонения, которое неизвестно;

- определение минимальной нагрузки с помощью эталонной гири может не быть полностью репрезентативным для используемой области применения;

- ёмкость для взвешивания также может влиять на минимальную нагрузку, поскольку её поверхность взаимодействует с окружающей средой.

По этим причинам, по возможности, взвешивание должно проводиться для масс, превышающих минимальную нагрузку, т.е. целевой наименьший чистый вес, который пользователи планируют использовать для определенных весов, должен превышать минимальную нагрузку.

Погрешность показания (погрешность измерения). Определение погрешности показания весов проводят, учитывая все погрешности, установленные при различных состояниях весов: при установке весов на нуль, при центрально-симметричном нагружении, при нецентральном нагружении, при наклоне весов, при работе устройства тарирования и др.

Погрешность показания (Ес), скорректированная с учётом указанных выше погрешностей, не должна превышать пределов допускаемой погрешности весов (mpe) для данной нагрузки. Скорректированная погрешность показания (Ес) может быть рассчитана суммированием квадратичных погрешностей, если они не являются взаимозаменяемыми, но также применяют и другие методы вычисления погрешности показания.

При проведении испытания по определению любой погрешности, если весы снабжены автоматическим устройством установки на нуль или устройством слежения за нулём, то данное устройство может быть включено.

Определение погрешности при установке на нуль. Испытание проводят только для весов с цифровой индикацией, у которых e = d или e = 2d.

Испытание для весов с неавтоматическим или полуавтоматическим устройством установки на нуль, без отключенного устройства или с отключенным устройством слежения за нулём, проводят следующим образом: устанавливают показание весов на нуль при пустом грузоприёмном устройстве весов, затем последовательно нагружают весы дополнительными гирями, увеличивая нагрузку с шагом 0,1 е до момента возрастания показания на одно поверочное деление по отношению к нулю. Погрешность при установке на нуль (Е0) рассчитывают по формуле:

(7)

где ΔL0 - масса дополнительных гирь;
d - дискретность.

Испытание для весов с автоматическим устройством установки на нуль и/или устройством слежения за нулём проводят следующим образом: погрешность при установке на нуль определяют при нагрузке, близкой к нулю, например 10 d (L0), чтобы вывести показания весов за диапазон автоматической установки на нуль. Записывают показание весов и последовательно помещают на грузоприёмное устройство весов дополнительные гири, увеличивая нагрузку с шагом 0,1 d до тех пор, пока при какой-то нагрузке ΔL~0 ~показание не повысится на значение, равное цене деления, и не достигнет значения (I0 +d). Погрешность при установке на нуль (Е0) рассчитывают по формуле:

(8)

где I0 - показание весов при начальной нагрузке, близкой к нулю;
L0 - масса первоначально установленных гирь (10d);
ΔL0 - масса дополнительных гирь.

Принимают, что погрешность при нагрузке 10 d соответствует погрешности при установке на нуль.

Погрешность установки на нуль не должна превышать ±0,25 е.

Определение погрешности при центрально-симметричном нагружении весов. Для определения этой погрешности перед нагружением весов показание весов должно быть установлено на нуль, т.е. установлено центральное положение нулевой точки, или должно быть определено значение погрешности при установке на нуль.

Для проведения испытания устанавливают испытательные нагрузки — эталонные гири. Определение проводят постепенным нагружением весов эталонными гирями, масса которых должна постепенно возрастать от нуля до Max, затем, при разгружении весов, масса эталонных гирь должна постепенно уменьшаться. Эталонные гири устанавливают на грузоприёмное устройство весов симметрично относительно его центра. Для испытания используют, как правило, не менее пяти значений нагрузок, приблизительно равномерно делящих диапазон весов. Значения выбранных нагрузок должны включать в себя значения Max и Min (если Min ≥100 мг), а также значения нагрузок, равные или близкие тем, при которых происходит изменение пределов допускаемой погрешности весов (mpe). В установленных случаях может быть использовано большее количество испытательных нагрузок.

На грузоприёмное устройство весов с цифровой индикацией e = d или e= 2d помещают эталонную гирю массой (L) и записывают соответствующее показание весов (I). Затем на грузоприёмное устройство последовательно помещают дополнительные эталонные гири массой, увеличивая нагрузку с шагом 0,1e до тех пор, пока при какой-то нагрузке (ΔL) показание не возрастёт на значение, равное цене деления, и не достигнет (I + d). Показание весов (I) считывают после каждого нагружения, дождавшись стабилизации показания. С учётом значения массы дополнительных гирь (ΔL) скорректированное показание весов рассчитывают по формуле:

(9)

где P - скорректированное показание весов до округления;
I - показание весов;
ΔL - суммарное значение массы дополнительных гирь.

Погрешность при центрально-симметричном нагружении весов (E) при каждом значении нагрузки рассчитывают по формуле:

(10)

где P - скорректированное показание весов до округления;
I - показание весов;
ΔL - суммарное значение массы дополнительных гирь;
L - масса эталонных гирь, установленных на весах.

Скорректированную погрешность измерения (Ес) (с учётом погрешности установки на нуль) рассчитывают по формуле:

(11)

Весы, у которых диапазон устройства первоначальной установки нуля превышает значение 20 % Max, должны быть подвергнуты дополнительному испытанию на взвешивание. При этом нулевой точкой диапазона взвешивания весов служит верхняя граница диапазона устройства первоначальной установки нуля.

Определение погрешности при нецентральном нагружении весов. Нецентральное нагружение весов – отклонение результата испытания, вызванное нецентральным положением нагрузки, т.е. асимметричным положением центра тяжести нагрузки по отношению к грузоприёмному устройству.

В самом начале испытания достаточно определить погрешность установки на нуль, но в некоторых случаях, например, для весов специального класса точности I, весов с большим разрешением и т.д., рекомендуется определять погрешность установки на нуль перед каждым нецентральным нагружением. В случае превышения предела допускаемой погрешности (mpe) определение погрешности при установке на нуль должно быть выполнено перед каждым нагружением.

В случае, если весы с грузоприёмным устройством имеют не более четырёх опор, испытание проводят следующим образом: грузоприёмное устройство весов условно делят приблизительно на четыре равные части и последовательно в центр грузоприёмного устройства и далее в центр каждой части однократно помещают эталонные гири массой: близкой к 1/3 Мах– для весов, снабжённых устройством выборки массы тары, и близкой к 1/3 суммы значения Мах и наибольшего предела компенсации массы тары – для весов, снабжённых устройством компенсации массы тары.

При выборе нагрузок предпочтительно использовать гири большей массы, чем несколько маленьких гирь. В случае использования нескольких гирь, гири маленькой массы устанавливают сверху на большие или равномерно распределяют по всей площади исследуемого участка грузоприёмного устройства, избегая чрезмерного нагромождения гирь в нём. Нагрузка должна быть установлена по центру сегмента при использовании одной гири и равномерно распределена по всей площади исследуемого сегмента грузоприёмного устройства при использовании нескольких небольших гирь.

Погрешность при нецентральном нагружении при каждом положении нагрузки определяют так же, как при центрально-симметричном нагружении весов, она не должна превышать пределов допускаемой погрешности весов при данной нагрузке.

Зависимость погрешности показания весов от нецентрального нагружения весов выражают, как наибольшее значение любых различий между показаниями весов при нецентральном и центрально-симметричным нагружении весов конкретным значением испытательной нагрузки.

Точность (правильность). Точность (правильность) весов – это качественная характеристика весов, как средства измерений, обозначающая степень приближения результата измерения к эталонному значению, которое может быть истинным или ожидаемым в зависимости от определения или соглашения, т.е. точность весов отражает близость погрешности показаний (измерений) весов к нулю и чем меньше значение погрешности показаний, тем точнее средство измерений.

Для весов, используемых для аналитических целей, принято считать, что точность весов удовлетворительна, если при испытании с надлежащей внешней эталонной гирей (гирями) значение массы, установленное испытуемыми весами, находится в пределах не более 0,10 % от значения массы эталонной гири (гирь).

Испытание по определению точности весов следует проводить только по месту их эксплуатации.

Влияние метрологических характеристик на точность. Наиболее существенное влияние на точность весов оказывают такие их характеристики, как повторяемость и чувствительность. Ограничивают точность весов, внося систематические отклонения, линейность и нецентральное нагружение весов. Погрешности таких характеристик, как чувствительность, линейность и нецентральное нагружение мало зависят друг от друга, и считается маловероятным, что они будут происходить одновременно и иметь один и тот же алгебраический знак. Поэтому оценка точности весов посредством арифметического сложения отклонений указанных характеристик рассматривалась бы как достаточно консервативный подход. Установлено, что более реалистичный подход к оценке точности весов обеспечивает квадратичное сложение отклонений (погрешностей) этих отдельных характеристик.

Перераспределяя 50 % бюджета погрешности точности весов на критерии приемлемости для отдельных характеристик можно обеспечить соблюдение допустимой погрешности точности весов. Для этого критерий приемлемости для каждой отдельной характеристики, которая вносит вклад в систематические отклонения точности весов, может быть установлен на уровне погрешности точности весов, делённой на 2, т.е. если допустимая погрешность точности весов установлена как 0,10 %, то для каждого отдельного параметра она может быть установлена на уровне 0,05 %.

Такие критерии приемлемости (50 % от 0,10 %), допускающие максимальное отклонение 0,05 % для чувствительности, линейности и нецентрального нагружения используют, как правило, для определения точности весов для аналитических целей, предназначенных для «точного взвешивания»; для других случаев – соответствующее требование к погрешности, деленное на 2.

##### Требования к взвешиванию

Точность взвешивания. Для взвешивания выбирают подходящие весы с учётом взвешиваемого количества образца и необходимых технических и метрологических характеристик, включая одну из основных - обеспечивающую надлежащую точность взвешивания. Для достижения заданной точности взвешивания необходимо проверить соответствие массы взвешиваемого образца (с учётом массы тары), Min и Max весов, принять во внимание все возможные погрешности весов, гирь, применяемого метода и методики взвешивания, ёмкостей для взвешивания, а также исключить или учитывать погрешности, обусловленные влиянием внешних факторов (действием аэростатических, электрических и магнитных сил, колебаниями температуры и влажности воздуха и др.).

При обозначении в общей фармакопейной статье, фармакопейной статье массы образца (навески), которое необходимо взвесить, указывают или подразумевают необходимую точность измерения (степень точности), зависящую от конкретного испытания и расчетов.

Точность измерения обозначают числом десятичных знаков после запятой данного числового значения массы образца. Точность взвешивания должна быть ±5 единиц после последней указанной цифры; например, навеска 0,25 г должна быть взята в пределах от 0,245 до 0,255 г.

Если при написании массы навески имеется указание «точная навеска», то это означает взвешивание на весах, обеспечивающих заданную точность взвешивания, и использование полученного значения для дальнейших расчетов с необходимой точностью.

Если масса навески обозначена с указанием «около», то отклонение от заданного значения массы навески допускается в пределах ±10 % от указанного, но при этом необходимо взвесить навеску вещества с указанной точностью измерения и все расчёты производить с использованием полученного точного количества.

Методы взвешивания. Различают две принципиально различные группы методов взвешивания: метод непосредственной оценки и метод сравнения с мерой. Метод непосредственной оценки заключается в определении массы образца по показывающему устройству весов без применения гирь. При использовании метода сравнения с мерой измеряемую величину сравнивают с величиной, воспроизводимой мерой. Метод сравнения с мерой может использоваться в виде таких разновидностей, как: дифференциальный метод, метод дополнения и метод замещения. В большинстве современных весов, применяемых при испытании лекарственных средств и материалов для фармацевтического применения, используется дифференциальный метод взвешивания, при котором большая часть измеряемой массы образца (свыше 99 %) уравновешивается гирями или противовесом (это относится к нулевому методу, как разновидности дифференциального), а оставшаяся малая разность между массой взвешиваемого образца и массой гирь измеряется по углу отклонения коромысла от исходного положения равновесия (метод непосредственной оценки) с помощью отсчётных шкал.

Методы взвешивания в некоторых источниках классифицированы на простое взвешивание ‒ если массу образца принимают равной массе сравниваемых с ним гирь, и на точное взвешивание, когда массу образца вычисляют как сумму значений массы гирь и показаний весов.

Ёмкости для взвешивания. Выбор подходящих ёмкостей для взвешивания зависит от физико-химических, токсикологических и других свойств конкретного взвешиваемого образца. Выбранные ёмкости для взвешивания должны быть чистыми, сухими, изготовленными из инертных материалов.

Суммарная масса ёмкости для взвешивания и взвешиваемого в ней образца не должна превышать максимальную нагрузку весов. Размер и масса ёмкости для взвешивания не должны снижать повторяемость и точность весов. Взвешивание с использованием ёмкостей для взвешивания небольшой массы и поверхности, как правило, приводит к наиболее точным результатам, особенно в случае образцов с небольшой массой. Однако иногда может быть более практичным использование более крупных ёмкостей для взвешивания, например, мерной колбы в случае образцов, которые необходимо разбавить после взвешивания, чтобы избежать потенциальных ошибок при переносе. При необходимости влияние ёмкости для взвешивания на повторяемость и точность весов может быть оценено путём включения ёмкости для взвешивания в качестве предварительной нагрузки при проведении испытаний весов на соответствующие характеристики.

Ёмкости для взвешивания должны быть получены из материалов, совместимых с взвешиваемыми образцами. Для взвешивания образцов лекарственных средств и материалов для фармацевтического применения используют ёмкости из стекла, фарфора, полимерных материалов, алюминия, которые могут быть открытыми (чашки, стекла часовые, лодочки-воронки, колбы, тигли, стаканчики) или закрытые крышками, пробками (бюксы, колбы, тигли). Твёрдые образцы, обладающие летучими, гигроскопичными свойствами, а также любые жидкие образцы, необходимо взвешивать в ёмкостях, закрытых притёртыми пробками (бюксы, колбы). По возможности закрытые ёмкости для взвешивания должны быть с небольшим отверстием, чтобы уменьшить потерю массы образца из-за улетучивания или увеличения массы образца в результате сорбции влаги из окружающей среды. Конструкция лодочки-воронки сочетает в себе характеристики чашки для взвешивания и воронки, что помогает переносить взвешенный образец в ёмкость с узким горлышком, например, в мерную колбу. Для взвешивания твёрдых образцов не рекомендуется использовать бумагу из-за возможного взаимодействия компонентов бумаги с образцом.

Методики взвешивания. Перед каждым взвешиванием необходимо убедиться в том, что весы установлены на нуль. При необходимости, для исключения ошибки, выполняют тарирование весов.

Для взвешивания «точной навески» образца необходимо использовать весы с необходимой точностью, например, весы аналитические с точностью до 0,0001 г. Возможно предварительное взвешивание образца испытуемого материала на весах с меньшей точностью, например, на весах с точностью до 0,01 г.

Методика 1. Применяют для взвешивания твёрдых или нелетучих жидких образцов. Ёмкость для взвешивания помещают на весы и взвешивают, после стабилизации дисплея весов регистрируют значение массы ёмкости для взвешивания. Затем в ёмкость для взвешивания помещают образец испытуемого материала в количестве, указанном в фармакопейной статье и/или нормативной документации, после стабилизации весов регистрируют значение массы ёмкости для взвешивания с образцом. Образец количественно переносят из ёмкости для взвешивания в ёмкость для дальнейшего проведения испытания или приготовления растворов и др. Массу взятой навески образца определяют как разность двух указанных взвешиваний. В случае, если невозможно гарантировать, что образец будет перенесён количественно, ёмкость снова взвешивают после переноса образца из ёмкости для взвешивания в ёмкость для проведения испытаний. В этом случае массу взятой навески образца определяют как разность взвешиваний ёмкости с образцом и ёмкости после переноса образца.

Методика 2. Используют для точного взвешивания образцов, представляющих собой эмульсии, мази и другие вязкие вещества, применяя предварительное взвешивание. На весах с меньшей точностью, например, технических, взвешивают вначале подходящую ёмкость для взвешивания таких образцов, затем в неё помещают испытуемый образец в количестве, немного больше указанного в фармакопейной статье и/или нормативной документации и выполняют предварительное взвешивание ёмкости с образцом. Затем ёмкость с образцом переносят на весы для точного взвешивания, например, аналитические, и взвешивают, обращая внимание на чистоту внешней поверхности ёмкости для взвешивания. После стабилизации весов регистрируют значение массы ёмкости для взвешивания с образцом и необходимое количество образца переносят в ёмкость для дальнейшего проведения испытания. Ёмкость для взвешивания с остатками образца взвешивают на весах с необходимой точностью. Массу перенесённого для анализа образца определяют как разность между двумя взвешиваниями на весах с необходимой точностью.

Методика 3. Эта методика в некоторых источниках называется «методом гравиметрического дозирования», применяемого, как правило, для взвешивания точных навесок при приготовлении испытуемых и/или стандартных растворов. При таком взвешивании вместо ёмкости для взвешивания используют непосредственно мерную колбу или другую лабораторную посуду, предназначенную для приготовления раствора или проведения испытания. Вначале регистрируют массу лабораторной посуды, затем массу лабораторной посуды с образцом, который прибавляют во взвешенную лабораторную посуду с помощью соответствующих дозирующих устройств.

Меры предосторожности при взвешивании. Взвешивание на весах неавтоматического действия предполагает обязательное присутствие при этом процессе оператора, который может быть подвергнут неблагоприятному и даже опасному воздействию взвешиваемых веществ, обладающих опасными, токсическими, едкими, биологически опасными и т.п. свойствами. Поэтому прежде чем взвешивать образец вещества, необходимо ознакомиться с его свойствами и, если необходимо, определить и выполнять меры предосторожности при взвешивании этого вещества.

Работу с веществами, обладающими опасными, токсичными (возможно, аллергенными) и т.п. свойствами, которыми могут являться жидкости или твёрдые мелкодисперсные частицы, необходимо осуществлять в условиях надлежащего воздухообмена, фильтрации воздуха. Взвешивание стерильных или биологически опасных образцов должно осуществляться в ламинарном боксе, боксе биологической безопасности, изоляторе или аналогичном защитном устройстве. Так как поток воздуха в системе воздухообмена потенциально может привести к нестабильности весов, поэтому после установки весов под вытяжной системой необходимо определить приемлемость характеристик функционирования весов в данных условиях окружающей среды.

При взвешивании опасных веществ оператор должен использовать маску, закрывающую нос и рот, чтобы предотвратить вдыхание вещества, а также перчатки, чтобы предотвратить контакт вещества с кожей. Использование перчаток рекомендуется при работе с любыми химическими веществами. Если оператор дотрагивается до взвешиваемой ёмкости, то перчатки нужны не только для защиты рук, но и для предотвращения попадания влаги и масел на емкость для взвешивания.

Многие химические вещества могут оказать неблагоприятное воздействие не только на оператора, но и вызвать коррозию весов, особенно при неосторожном их взвешивании и попадании вещества на грузоприёмное устройство или внутрь корпуса весов. Взвешивание таких веществ должно осуществляться в герметичных ёмкостях.

Должны быть предусмотрены меры по предотвращению воздействия на процесс взвешивания неблагоприятных факторов окружающей среды: аэростатических, электрических и магнитных сил, колебаний температуры и влажности воздуха и др.

##### Уход за весами

Необходимо содержать весы, весовую камеру, грузоприёмное устройство весов в чистоте и для взвешивания использовать только чистые ёмкости. Если показания на дисплее весов становятся нестабильными и колеблются в ту или другую сторону, или на дисплее отображаются ошибочные показания, то в большинстве случаев это связано с нежелательным воздействием физических факторов. Самыми распространённым причинами являются: неверное расположение весов, неправильное обращение с образцом, сорбция или десорбция влаги образцом, намагничивание образцов или ёмкостей для взвешивания, электростатический заряд образцов или ёмкостей для взвешивания. Для устранения подобных проблем должны быть приняты корректирующие меры.

Влияние температуры. Если показания весов постоянно отклоняются в одну сторону, то это может быть связано в разными температурами окружающей среды и взвешиваемым образцом. Разница температур вызывает возникновение потоков воздуха вдоль образца и стенок ёмкости для взвешивания, которые создают восходящую или нисходящую силу, искажающую результат взвешивания. В случае с тёплыми образцами, кажущаяся масса взвешиваемого образца меньше истинной из-за конвекции тепла. Например, колба, которая теплее окружающего воздуха, нагревает этот воздух, который затем поднимается вверх вдоль колбы и уменьшает кажущуюся массу взвешиваемого образца (содержимого) за счёт вязкого трения. Проявляется эффект, называемый динамической выталкивающей силой (динамической плавучестью): холодный объект кажется тяжелее, тёплый – легче. Он проявляет себя до тех пор, пока не будет достигнуто равновесие температур.

Для предупреждения и устранения проблемы необходимо выполнять следующие рекомендации:

- для переноса образцов использовать пинцет, предназначенный для этого;

- не погружать кисть руки внутрь шкафа и не дотрагиваться руками до внутренней поверхности камеры взвешивания;

- использовать емкости для взвешивания с наименьшими размерами;

- никогда не взвешивать образцы, которые только что извлечены из холодильника или сушильного шкафа;

- обязательно дождаться выравнивания температур весов и окружающей среды перед взвешиванием.

Влияние влаги (поглощение или испарение). Если при взвешивании наблюдается постепенное медленное повышение или уменьшение массы взвешиваемого образца, то это может быть связано с влиянием влаги окружающей среды. При взвешивании в случае испарения влаги происходит измерение потери массы воды или массы летучих веществ, в случае поглощения влаги, происходит измерение увеличения массы гигроскопических образцов. Для предупреждения такого эффекта необходимо использовать для взвешивания чистые, сухие, закрытые ёмкости, желательно, с узкой горловиной, а также не допускать загрязнений грузоприёмного устройства весов или попаданий капель воды на него.

Влияние электростатики. Не совпадают результаты взвешивания одного и того же образца, показания дисплея весов нестабильны, плохие результаты испытания на повторяемость. Это может быть связано с накоплением электрического заряда ёмкостью для взвешивания или образцом. Материалы с низкой электропроводностью, например, стекло, полимеры, порошковые и гранулированные вещества, могут накапливать и удерживать электростатический заряд в течение нескольких часов. Это происходит в основном при трении в процессе производства или транспортирования материалов. Сухие тонкоизмельчённые порошки могут быть заряжены статическим электричеством, из-за которого порошок может либо притягиваться к ёмкости для взвешивания из материала-диэлектрика или весам, либо отталкиваться от них, приводя к ошибкам в измерении массы веса и потери образца во время переноса. При относительной влажности менее 40 % проявляется плохая поверхностная проводимость, в связи с чем вероятность возникновения эффекта электростатики повышается, усиливается статистический заряд. Ошибки при взвешивании возникают вследствие взаимодействия между окружающей средой и образцом, которое происходит по законам физики: одинаково заряженные предметы отталкиваются, в случае разных потенциалов они взаимно притягиваются. Эти взаимодействия фиксируются весами и приводят к проблемам при взвешивании. В определённых условиях статический заряд при взвешивании возникает из-за ткани, из которой сшита одежда или защитные перчатки оператора.

Для снятия электростатического заряда применяют следующие корректирующие меры:

- повышение относительной влажности в помещении, где установлены весы. Влияние электростатики особенно проявляется в холодное время года в отапливаемых помещениях. Для взвешивания оптимальной считается относительная влажность воздуха в помещении 45–60 %;

- подобрать ёмкость для взвешивания из другого материала, учитывая, что полимеры плохо проводят электричество, стекло – лучше, металл – лучше всего. Поэтому лучше использовать металлические ёмкости или устанавливать ёмкость для взвешивания в металлический контейнер;

- весы и стол для установки весов должны быть заземлены;

- одежда и защитные перчатки оператора должны быть антистатическими;

- при возможности использовать антистатические блюдца для взвешивания, антистатические пистолеты и антистатические экраны с учётом их эффективности для конкретных материалов;

- при возможности, использовать весы со встроенным антистатическим устройством. В таких устройствах могут применяться пьезоэлектрические компоненты или очень небольшое количество радиоактивного вещества (как правило, полония) для генерации потока ионов, которые рассеивают статический заряд при прохождении над взвешиваемым образцом;

Влияние магнетизма. Если при взвешивании на надлежаще установленных и настроенных весах масса взвешиваемого образца изменяется в зависимости от его местоположения на чаше весов, то есть, плохая повторяемость результатов взвешивания, то причина может заключаться в том, что взвешивают магнитный материал, который реагирует на наличие рядом находящихся металлических деталей. Возникающие при этом силы магнетизма интерпретируются весами неверно, то есть, как нагрузка. Практически все предметы, изготовленные из железа (стали), отличаются сильной магнитной проницаемостью (ферромагнетизмом). Для устранения этого воздействия необходимо по возможности нейтрализовать магнитные силы, проведя размагничивание образца, имеющего в своём составе частицы железа, стали и т.д. Так как магнитная сила уменьшается с увеличением расстояния, то нужно образец как можно дальше удалить от грузоприемного устройства весов, например, используя подставки из диэлектрических, немагнитных материалов (стеклянный стакан, алюминиевый штатив); можно воспользоваться специальными устройствами весов для взвешивания под весами или весами, имеющими антимагнитную чашку и др.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0028 Контроль температуры и влажности с течением времени

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на теорию и практику контроля температуры и влажности с течением времени. В ней описываются имеющиеся технологии и эксплуатационные характеристики, а также даются рекомендации по их определению.

Срок годности лекарственного средства зависит не только от его химических и физических свойств, но и от температуры и влажности во время его хранения и перевозки. По этой причине целесообразно контролировать эти условия, особенно в случае лекарственных средств, чувствительных к температуре и влаге. Данная ОФС посвящена как электронным, так и химическим устройствам контроля температуры и влажности.

Температуры хранения и перевозки могут отличаться друг от друга, если это обосновано соответствующими исследованиями стабильности и указано в маркировке. Влияние влажности обычно наблюдается в течение более длительных периодов воздействия, чем влияние температуры, из-за создаваемого первичной и вторичной упаковкой лекарственного препарата препятствия для проникновения влаги.

Устройства, описанные в этой статье, наиболее часто используются для контроля хранения и перевозки лекарственных средств. Для всех устройств должны применяться соответствующие методы утилизации или переработки согласно действующему законодательству.

##### Приборы для измерения температуры

Спиртовые или ртутные термометры. Эти приборы основаны на изменении объёма жидкости в зависимости от температуры. Спиртовые термометры могут иметь точность до 0,01 °С, но они должны быть достаточно большими, чтобы измерять температуры в диапазоне более нескольких градусов. Ртутные термометры обычно используются в диапазоне от 0 °С до 50 °С с точностью измерения около 0,1 °С. В настоящее время ртутные термометры целесообразно по мере возможности заменять на не менее точные, но более безопасные альтернативные устройства, не содержащие ртути. Спиртовые и ртутные термометры более хрупки, чем другие приборы для измерения температуры, описанные в данной ОФС.

Инфракрасные приборы. Эти устройства используются для измерения инфракрасного (ИК) излучения от предметов, температура которых подлежит определению, так как степень ИК-излучения изменяется в зависимости от температуры объекта. Преимущество данного типа устройств заключается в том, что предмет может находиться на некотором расстоянии от ИК-датчика. Недостатком является то, что ИК-устройства могут давать неточные показания при высоких или низких температурах из-за свойств поверхности упаковок (например, чёрные и белые поверхности), кроме того они допускают возможность ошибки оператора из-за неправильного использования ИК-считывателя (неправильный угол).

Резистивные датчики температуры (РДТ). Работа этих приборов основана на изменении электрического сопротивления материала в зависимости от температуры. Их прецизионность и точность зависят от качества электроники, используемой для измерения сопротивления. Хотя РДТ относятся к наиболее стабильным и точным датчикам температуры, их точность может со временем меняться, поскольку электронные компоненты подвержены влиянию возраста и частоты использования. Для этих приборов особенно важна регулярная калибровка.

Твёрдотельные устройства. Твёрдотельные устройства основаны на воздействии температуры либо на интегральную схему (см. термисторы), либо на микромеханическую или микроэлектрическую систему. Эти устройства обычно называют регистраторами данных, они могут достигать высокой точности и имеют преимущество в виде цифрового вывода.

Термисторы. Термистор является полупроводниковым прибором, сопротивление которого изменяется в зависимости от температуры. Термисторы способны обнаруживать очень малые изменения температуры и точны в широком диапазоне температур.

Термопары. Термопары основаны на изменении потенциала спая двух разнородных металлов в зависимости от температуры. Можно использовать множество пар металлов, и каждая пара обеспечивает уникальный диапазон, точность и прецизионность. Прецизионность и точность зависят от качества электроники, используемой для измерения напряжения на обоих металлах, и типа используемого эталона температуры.

Термомеханические устройства. Термомеханические устройства основаны на изменении длины твёрдого материала в зависимости от температуры. Примером такого устройства является механическая пружина, которая расширяется или сжимается в зависимости от температуры, тем самым размыкая и замыкая электрическую цепь или перемещая перо самописца. Типичными примерами являются самописцы, используемые в холодильных камерах.

##### Электронные регистраторы температуры-времени

Эти регистраторы используют одну из описанных выше электронных технологий измерения температуры и записывают историю наблюдаемой температуры.

Электронные время-температурные индикаторы. Электронные время-температурные индикаторы (ВТИ) могут быть настроены на подачу предупреждающей информации после отклонения от заданной температуры в какую-либо сторону или после нескольких отклонений температуры и могут обеспечивать визуальное информирование с помощью светового сигнала или ЖК-дисплея. Сигнализация обычно программируется и может отображать такие параметры, как дата, время, температура и продолжительность отклонения. Сертификат калибровки выдаётся на отдельные устройства или партии. Устройства многократного использования должны иметь расписание калибровки, а устройства однократного использования могут снабжаться сертификатами калибровки производителей.

Электронные регистраторы температурных данных. Электронные регистраторы температурных данных – это регистраторы, которые отслеживают температуру через программируемые интервалы времени и сохраняют историю температуры в периферийной системе, например, в персональном компьютере. Кроме того, регистраторы могут регистрировать влажность с помощью датчиков, описанных ниже. Электронные регистраторы отслеживают и сохраняют выборочные значения температуры за определённый период времени, и обладают тем преимуществом, что на основе их измерений можно рассчитать среднюю кинетическую температуру (СКТ). Регистраторы данных, оснащённые передающими устройствами (проводными или радиопередающими), могут использоваться для мониторинга температуры и влажности продукта во время перевозки. На основании своих коммуникационных возможностей регистраторы данных можно разделить на несколько различных категорий.

Радиочастотные регистраторы данных

Помимо регистраторов данных, требующих жёсткого проводного соединения с базовым блоком или компьютером (проводные), существуют беспроводные (радиочастотные или совместимые с радиочастотами) регистраторы температуры и влажности.

Влияние использования радиочастотной идентификации (РЧИ) на биологические препараты было изучено на различных видах крови, компонентах крови, моноклональных антителах и вакцинах и показало отсутствие какого-либо эффекта. Данные регистраторы интегрированы с чипами, способными к беспроводной радиочастотной связи, которые представляют собой метки РЧИ-датчиков. РЧИ-чип внутри метки может быть либо активным, для работы которого требуется питание от батареи, либо пассивным, для которого требуется радиочастотное поле, создаваемое считывающим устройством в непосредственной близости от метки. Метки датчиков (температуры и/или влажности) с поддержкой РЧИ имеют дополнительную возможность беспроводной передачи записанной истории температуры на главный компьютер или в базу данных для последующей обработки. Существует множество стандартов для контроля связи между меткой и считывающим устройством при использовании активных и пассивных технологий.

При выборе между активными и пассивными технологиями необходимо иметь в виду, что активные технологии обычно обладают увеличенной дальностью связи и расширенными возможностями памяти. В настоящее время дальность считывания достигает 100 м, а с ретрансляторами можно достичь и большего расстояния. Независимо от того, является ли схема связи пассивной или активной, данные радиочастотные регистраторы относятся к электронным регистраторам температуры, что означает, что их сенсорные схемы используют внешнее питание от батарей или других источников.

Существуют работающие в качестве датчиков полностью пассивные беспроводные РЧИ-метки с антеннами. В этих метках используются резонансные антенные структуры РЧИ-меток, на которые нанесены специальные сенсорные плёнки. Пассивные беспроводные РЧИ-метки работают в качестве аналоговых датчиков, показывающих при запросе беспроводным считывателем текущую температуру. Плёнка изменяет характеристики отражения антенны в зависимости от контролируемой переменной окружающей среды (например, температуры и/или влажности), которая затем декодируется считывающим устройством. Сенсорная плёнка может быть разработана для работы с различными переменными, такими как температура, влажность, различные газы и химические пары. Несмотря на отсутствие некоторых функций памяти, присущих электронным регистраторам, пассивные беспроводные датчики экономически выгоднее регистраторов данных.

##### Химические индикаторы температуры

Химические индикаторы температуры экономически более выгодны по сравнению с электронными регистраторами данных и могут рассматриваться как изделия медицинского назначения. Существует два основных типа химических индикаторов температуры: 1) пороговые индикаторы, которые срабатывают при определённой температуре, и 2) время-температурные индикаторы, реагирующие на суммарное тепловое воздействие.

Химические пороговые индикаторы температуры

Эти индикаторы, иногда называемые индикаторами критической температуры, основаны на изменении фазы или химической реакции, которая происходит в зависимости от температуры. Примерами могут служить жидкие кристаллы, воски, полимеры и лаки, изменяющие своё фазовое состояние и, таким образом, свой внешний вид в зависимости от температуры. Химические индикаторы температурного порога являются обратимыми или необратимыми и подходят как для высоких, так и для низких температур. Пороговые индикаторы температуры не предусматривают какой-либо определённой временной задержки для проявления реакции и обычно являются одноразовыми устройствами. Эти индикаторы подают сигнал только при воздействии температуры выше (восходящий индикатор) или ниже (нисходящий индикатор) заранее определённой пороговой температуры.

Индикаторы порога восходящей температуры – поставляются в виде самоклеящихся этикеток или карточек и обычно состоят из термоплавкого соединения, которое плавится при критической температуре. Плавление соединения приводит к изменению или появлению цвета. Другие типы поставляются в виде чернил, лаков, гранул или мелков. Индикаторы пороговых температур с восходящей температурой доступны в диапазоне от 0 °С до более чем 200 °С со шкалой до 10 делений на одной полоске. Некоторые пороговые индикаторы температуры, используемые для контроля температуры в замороженном или охлаждённом состоянии, требуют активации (например, вытягиваемый язычок или разрываемый под давлением резервуар).

Индикаторы порога понижающейся температуры – показывают отклик при воздействии температуры ниже пороговой. Эти индикаторы не включают специальную временную задержку для проявления реакции, но реакция обычно задерживается на время, необходимое для застывания жидкости при пороговой температуре. Застывание жидкости вызывает визуальное изменение индикатора, например, 1) расширение жидкости для растрескивания ампулы и высвобождения красителя, 2) сжатие жидкости для смешивания компонентов с образованием цвета, или 3) агрегация коллоидных частиц для изменения цвета.

Химические индикаторы времени-температуры

Эти индикаторы, иногда называемые время-температурными интеграторами (ИВТ), включают системы, в которых скорость реакции или процесс диффузии используется для оценки температурного эквивалента, интегрированного во времени. Таким образом, ИВТ определяют меру накопленного тепла, а не текущую температуру в виде скачка или критического порога. Реакции, как правило, необратимы – как только произошло изменение цвета, его появление или процесс диффузии, воздействие низких температур не вернёт индикатор в исходное состояние, хотя более низкие температуры (охлаждение) замедлят изменение цвета. Точность и прецизионность этих индикаторов в определённой степени зависит от субъективной интерпретации. Некоторые версии химических индикаторов выполнены в формате штрих-кода и могут быть считаны с помощью считывателей штрих-кодов. Другие разработки включают считывание химического индикатора с помощью устройства обработки изображений, например, камеры в смартфоне.

ИВТ не отражают напрямую состояние препаратов, к которым они прикреплены. На практике характеристики деградации конкретного препарата известны из ускоренных исследований и долгосрочных исследований стабильности. Энергия активации ИВТ не обязана точно соответствовать энергии активации деградации контролируемого препарата, и последняя на самом деле может быть точно неизвестна. Поэтому ИВТ выбирают для обеспечения своевременного предупреждения о воздействии на препарат чрезмерной тепловой нагрузки до истечения срока годности.

Важной характеристикой химических ИВТ является точность, с которой можно определить конечную точку. В ИВТ, меняющих окраску, в активную часть обычно включают для сравнения эталонный цвет конечной точки, чтобы упростить интерпретацию результата. Точность может сильно варьироваться в зависимости от контроля и качества производственного процесса. Как указано ниже в разделе «Калибровка приборов для контроля температуры и влажности», по определению невозможно откалибровать любое отдельное устройство одноразового использования, однако сам процесс их производства должен быть валидирован.

Существуют два типа ИВТ – индикаторы с частичной историей и индикаторы с полной историей. Индикаторы с частичной историей обеспечивают реакцию, зависящую от времени и температуры, когда температура превышает заданное значение. Индикатор с частичной историей обычно состоит из окрашенного термоплавкого соединения, которое диффундирует по пористой полосе или фитилю, когда температура превышает температуру плавления соединения. Процесс диффузии соединения вниз по фитилю зависит от температуры, поэтому индикатор частичной истории ИВТ обеспечивает временной и температурный отклик выше точки плавления соединения. Миграция соединения вниз по фитилю прекращается, когда индикатор перемещают на более низкую температуру, при которой соединение застывает. Такие ИВТ обычно имеют одно или несколько смотровых окон для контроля длины перемещения окрашенного соединения по фитилю. Некоторые индикаторы активируются путём удаления барьерной плёнки, отделяющей окрашенное соединение от фитиля, или путём разрыва резервуара, содержащего окрашенное соединение. Другие индикаторы не требуют активации и должны храниться ниже температуры плавления соединения перед использованием. Эти ИВТ с частичной историей могут иметь продолжительность (срок службы) от нескольких часов до нескольких лет. ИВТ с полной историей обеспечивают непрерывную реакцию на температуру. Они изменяют цвет или внешний вид в результате воздействия времени, и скорость изменения увеличивается с ростом температуры, поэтому они чувствительны к кумулятивному воздействию тепла. ИВТ с полной историей реагируют на среднюю кинетическую температуру и обычно являются одноразовыми и необратимыми, поскольку после изменения окраски они не способны возвратиться к исходному цвету.

Химико-физические индикаторы времени-температуры. Этот тип ИВТ основан на зависящем от температуры процессе диффузии или химической реакции. Он состоит из чувствительного к давлению ленточного устройства, включающего индикаторную ленту и активаторную ленту. Индикаторная лента содержит, например, исходный краситель, диспергированный в полимерном носителе. Активатор входит в состав клея на активаторной ленте. Надавливание на активаторную ленту поверх индикаторной ленты вызывает активацию индикаторной ленты. После проникновения активатора в индикатор в зависимости от температуры и времени появляется изменение окраски или текстовое сообщение.

Индикаторы времени-температуры на основе химической полимеризации. Этот тип ИВТ использует процесс твёрдотельной полимеризации, при которой интенсивность окрашивания увеличивается в зависимости от времени и температуры. Изменение цвета происходит в результате полимеризации бесцветного мономера в сильно окрашенный полимер. Данный тип ИВТ может быть нанесён методом печати, что позволяет непосредственно включить их в общую или отдельную этикетку продукта. Поскольку этот тип ИВТ не требует активации, относящиеся к нему индикаторы должны поставляться от производителя на сухом льду или в замороженном состоянии и храниться до использования при температуре в соответствии с инструкциями производителя, обычно ниже –24 °С. ИВТ на основе химической полимеризации могут быть разработаны таким образом, чтобы достигать конечной точки в течение нескольких недель при температуре холодильника или и в течение нескольких лет при контролируемой комнатной температуре.

Индикаторы времени и температуры на основе химических ферментов. Этот тип ИВТ использует катализируемую ферментами реакцию окрашивания, происходящую в зависимости от времени и температуры. Изменение цвета вызывается реакцией фермента с субстратом, сопровождающейся изменением pH. Фермент и субстрат находятся в отдельных растворах в соседних отсеках. Нарушение барьера между двумя отсеками и смешивание двух растворов активирует ИВТ.

Индикаторы времени-температуры на основе химико-органических пигментов. В этом типе ИВТ используется органический пигмент, который активируется под воздействием ультрафиолетового света для получения тёмно-синего начального цвета. Затем на этикетку накладывается фильтр для защиты от преднамеренной или случайной реактивации. Цветной пигмент исчезает со временем в зависимости от температуры.

##### Технологии измерения относительной влажности

Относительная влажность – это отношение парциального давления водяного пара в воздухе к давлению пара насыщенного воздуха при данной температуре. Другими словами, относительная влажность – это количество присутствующего водяного пара, делённое на теоретическое количество влаги, которое может быть удержано данным объёмом воздуха при данной температуре. Существуют обширные таблицы данных об относительной влажности. Приборы для измерения относительной влажности называются гигрометрами. Для измерения относительной влажности существует несколько различных технологий.

Слинг-психрометр. Простейший тип гигрометра основан на разнице температур, наблюдаемой между двумя одинаковыми термометрами – обычным и с фитилем из влажной ткани над колбой. Оба термометра вращаются на конце цепи, и испарение воды с фитиля охлаждает (по принципу испарительного охлаждения) термометр с влажным фитилем. Затем разница температур между влажным и сухим термометрами сравнивается с таблицей, составленной для данного психрометра на основе температуры сухого термометра, и определяется относительная влажность воздуха.

Волосяной гигрометр. Этот тип устройств основан на том, что длина синтетического или человеческого волоса увеличивается в зависимости от относительной влажности. Это изменение используется для перемещения индикатора или воздействия на тензометрический датчик. Волосяной гигрометр может обладать точностью до ±3 %, но он не способен реагировать на быстрые изменения влажности и теряет точность при очень высоких или очень низких уровнях относительной влажности.

Инфракрасный гигрометр. Этот тип гигрометра определяет относительную влажность путём сравнения поглощения при двух различных длинах волн инфракрасного излучения в воздухе. Одна из длин волн соответствует поглощению водяным паром, а другая – нет. Этот тип гигрометра может точно измерять относительную влажность в больших или малых объёмах воздуха. Он чувствителен к быстрым изменениям влажности и может быть интегрирован с электронной системой обработки данных.

Гигрометр точки росы. Этот тип прибора использует охлаждённое зеркало для определения точки росы образца воздуха. Точка росы – это температура, при которой водяной пар в воздухе начинает конденсироваться, то есть температура, при которой относительная влажность составляет 100 %. Относительная влажность воздуха может быть рассчитана на основе измерения температуры точки росы и точного измерения температуры окружающей среды. Гигрометр точки росы является стандартом, по которому калибруется большинство имеющихся в продаже приборов.

Ёмкостной тонкоплёночный гигрометр. Принцип работы этого типа гигрометра заключается в том, что сопротивление непроводящего полимера изменяется прямо пропорционально относительной влажности. Это изменение измеряется как изменение ёмкости. Гигрометры этого типа имеют точность ±3 %.

Резистивный тонкоплёночный гигрометр. Этот тип гигрометра похож на ёмкостной тонкоплёночный тип, поскольку также использует эффект зависимости величины электрического тока от изменения относительной влажности. В резистивном тонкоплёночном гигрометре датчик представляет собой органический полимер, электрическое сопротивление которого изменяется в логарифмической пропорции к относительной влажности. Гигрометры этого типа имеют точность ±5 %.

##### Калибровка приборов для контроля температуры и влажности

Термометры и гигрометры, используемые для получения данных о температуре и влажности продукта, должны быть пригодны для использования по назначению. В частности, они должны быть надлежащим образом откалиброваны. Программа калибровки гарантирует пользователю, что устройство пригодно для использования по назначению. Калибровка должна проводиться с соответствующей частотой для обеспечения постоянного использования. Допустимо использовать калибровку, выполненную производителем устройства на основании сертификата калибровки и срока годности.

Для устройств, контролирующих температуру и влажность, точность измерения означает близость значения, полученного с помощью конкретного устройства, к истинному значению измеряемого объекта или среды. На практике это определяется путём сравнения с прибором, откалиброванным по государственному или международному стандарту.

Любому измерительному прибору требуется время, чтобы отреагировать на изменение температуры или влажности. Реактивность измерений обычно указывается в технических характеристиках устройства для его рабочего диапазона. Для различных целей подходят различные интервалы записи данных, например, при перевозке морем подходящими могут быть интервалы в 30 мин, а при перевозке воздушным транспортом – 15 мин. Чаще всего точность времени выражается в виде процента от общей продолжительности периода записи. Для фармацевтического применения достаточной является точность времени ±0,5 %.

Электронные индикаторы требуют регулярной калибровки. Производительность индикаторов однократного применения может быть определена пользователем путём отбора проб и тестирования нескольких производственных партий. Для ИВТ, которые рассчитывают среднюю кинетическую температуру, производительность партии можно оценить статистически, подвергая выборку соответствующего размера воздействию повышенной температуры в течение определённого периода времени и наблюдая за результатами. В этом случае должны быть установлены соответствующие критерии приемлемости. Вместо калибровки или квалификации допустимо использовать выпускающий контроль качества, проводимый производителем индикатора (на основании сертификата калибровки или сертификата анализа и срока годности).

##### Использование архивных данных о температуре

Несмотря на то, что исторические географические и сезонные тенденции (отклонение температуры помещений или во время перевозки от температуры окружающей среды в летние и зимние дни) могут быть использованы в качестве инструмента планирования при выборе типов устройств для мониторинга температуры и влажности, наблюдаемая температура окружающей среды не всегда является надёжным показателем действительной температуры различных объектов. Поэтому при разработке профиля условий окружающей среды важен контроль температуры, что является ценным фактором для оценки рисков в управлении качеством продукции.

На качество лекарственного препарата (подлинность, активность и чистоту) могут существенно повлиять колебания температуры и влажности в течение срока годности, поэтому производители должны надлежащим образом контролировать эти условия окружающей среды. Производители лекарственных средств должны проводить испытания на стабильность в соответствии с ОФС «Стабильность и сроки годности лекарственных средств», чтобы оценить влияние температуры и влажности. На основании результатов исследований стабильности выбираются упаковка, условия хранения и перевозки, рекомендуемые для лекарственных средств, и устанавливается срок годности. Поскольку воздействие температуры может происходить быстро, контроль температуры должен учитывать потенциальные риски, которые могут поставить под угрозу качество продукта. Влияние относительной влажности проявляется в течение гораздо более длительного периода времени. Контроль влажности допускается не проводить, если первичная упаковка защищает лекарственное средство от влаги в достаточной мере согласно исследованиям стабильности. Контроль влажности рекомендуется проводить, если для лекарственного средства определены специальные ограничения по влажности окружающей среды.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0029 Определение фотостабильности лекарственных средств

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения фотостабильности лекарственных средств, которое проводят при фармацевтической разработке и исследовании стабильности лекарственных средств.

##### Область применения

Определение фотостабильности проводят для доказательства того, что воздействие света не приводит к недопустимым изменениям лекарственного средства. Определение также необходимо для получения данных, по условиям хранения, выбора упаковки и указаний по маркировке лекарственных средств.

Общие требования к исследованию фотостабильности лекарственных средств при изучении их стабильности регламентированы ОФС «Стабильность и сроки годности лекарственных средств».

Исследование фотостабильности является неотъемлемой частью стрессовых испытаний (испытаний по принудительной деградации) новых фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов.

Систематизированный подход к исследованию на фотостабильность предусматривает проведение таких исследований, как (если применимо):

- исследования фармацевтической субстанции;

- исследования лекарственного препарата без первичной упаковки;

- исследования (при необходимости) лекарственного препарата в первичной упаковке;

- исследования (при необходимости) лекарственного препарата во вторичной (потребительской) упаковке.

##### Источники света

Определение фотостабильности лекарственных средств проводят в условиях требуемой интенсивности света, создаваемой источниками света, в соответствии со спецификацией спектрального распределения, предоставляемой изготовителем источника света.

Вариант 1. Любой источник света, предназначенный для излучения в диапазоне, эквивалентном эмиссионному стандарту излучения D65 либо ID65, например, флуоресцентная лампа искусственного дневного света, излучающая в видимом и ультрафиолетовом диапазонах, ксеноновая или галогеновая (металлгалогеновая) лампы.

Источник света, испускающий значительную часть излучения в области менее 320 нм, допускается оснастить соответствующим фильтром/фильтрами для устранения этого излучения.

Вариант 2. В этом варианте одну и ту же пробу следует подвергнуть экспозиции:

- лампы с холодной белой флуоресценцией, предназначенной для выработки света;

- лампы с излучением в ближней ультрафиолетовой области со спектральным диапазоном от 320 до 400 нм с максимальным излучением энергии в диапазоне длин волн 350–370 нм; при этом значительная часть ультрафиолетового излучения лампы должна быть в диапазоне 320-360 нм и 360–400 нм.

При исследовании фотостабильности следует поддерживать необходимую температуру и осуществлять соответствующий контроль температуры для сведения к минимуму влияния её локальных изменений. Вместе с тем, при тех же условиях окружающей среды, допустимо параллельно проводить контрольные исследования в темноте, если не обосновано иное.

Примечание – Для исследования фотостабильности лекарственных средств возможно использование специальных камер (климатических, испытательных и др.), в которых достигается и равномерно распределяется по всей полезной поверхности необходимая интенсивность света, а также поддерживается и контролируется заданная температура.

##### Принцип исследований фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов на фотостабильность

При подтверждающих исследованиях фотостабильности пробы фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов подвергают воздействию света при условии общей световой экспозиции не менее 1,2 млн. люкс/ч и энергетической экспозиции в ближней ультрафиолетовой области не менее 200 Вт ч/м2.

Пробы могут подвергаться световой экспозиции со всех сторон при применении валидированной химической актинометрической системы, обеспечивающей получение определенного воздействия света или необходимую продолжительность воздействия, если условия контролируют с помощью калиброванных радиометров (люксметров).

При определении фотостабильности в ходе стрессовых испытаний могут быть использованы разные условия воздействия света.

Если параллельно в качестве «тёмного» контроля, необходимого для оценки вклада термически-обусловленного изменения в общее наблюдаемое изменение, используют защищённые пробы (например, завёрнутые в алюминиевую фольгу), их следует размещать рядом с исследуемыми пробами.

При отборе проб для определения фотостабильности должны быть учтены физические свойства испытуемых лекарственных средств и обеспечены условия (например, охлаждение, запечатывание упаковки) для минимизации эффектов, влияющих на изменение их физического состояния, например, таких как возгонка, испарение, плавление. Вместе с тем, должны быть приняты меры по сведению к минимуму помех, препятствующих воздействию света на испытуемые пробы. Также следует оценивать и устранять возможные взаимодействия между исследуемыми пробами и материалом упаковок или материалами, используемыми для общей защиты проб, если они имеют отношение к проводимым испытаниям.

Репрезентативную пробу фармацевтической субстанции, представляющей собой твёрдое вещество, в количестве, необходимом для изучения прямого воздействия света, помещают в подготовленную стеклянную или полимерную ёмкость, накрытую, если показано, подходящей прозрачной крышкой. Фармацевтическую субстанцию необходимо распределить в ёмкости таким образом, чтобы толщина слоя не превышала 3 мм. Фармацевтические субстанции, представляющие собой жидкости, необходимо испытывать в химически инертных прозрачных ёмкостях.

Подготовку и определение фотостабильности проб лекарственных препаратов без первичной упаковки, по возможности, осуществляют способом, аналогичным фармацевтической субстанции. Пробы необходимо располагать так, чтобы обеспечить максимальную площадь воздействия источника света. Такие лекарственные формы, например, как таблетки, капсулы и др. должны быть размещены в один слой.

Если прямое воздействие света на лекарственный препарат не применимо, например, вследствие его окисления, то пробу необходимо поместить в подходящую защитную инертную прозрачную ёмкость, в частности, кварцевую.

При определении фотостабильности лекарственного препарата в первичной или вторичной упаковке, пробы необходимо располагать горизонтально или в поперечном направлении по отношению к источнику света для обеспечения равномерного воздействия света на них. При исследовании упаковок больших объёмов допускается некоторая корректировка условий испытаний.

Исследование фотостабильности фармацевтических субстанций включает определение фотостабильности в условиях стрессовых испытаний (принудительной деградации) и в условиях подтверждающих исследований.

Целью стрессовых испытаний фотостабильности является оценка общей фоточувствительности фармацевтической субстанции и последующая разработка аналитической методики и/или выяснение путей деградации фармацевтической субстанции на основании полученных данных.

При стрессовых испытаниях фотостабильности создают различные условия воздействия света в зависимости от фоточувствительности исследуемой фармацевтической субстанции и интенсивности используемых источников света. При этом уровни экспозиции должны быть указаны и обоснованы при разработке плана изучения стабильности.

Если в ходе определения фотостабильности фармацевтической субстанции при стрессовых испытаниях наблюдается значительная декомпозиция (разделение на части), то целесообразно ограничить время световой экспозиции и завершить исследование. Для светоустойчивых фармацевтических субстанций исследования могут быть завершены по достижению запланированного уровня экспозиции.

Подтверждающие исследования фотостабильности фармацевтической субстанции или лекарственного препарата вначале проводят на стадии разработки, испытывая, как правило, одну серию. Определение фотостабильности необходимо повторить для подтверждения полученных результатов, как правило, также на одной серии. Если полученные результаты сомнительны, то подтверждающие исследования фотостабильности должны быть проведены не менее чем на двух дополнительных сериях.

Исследование фотостабильности лекарственного препарата следует проводить последовательно, начиная с испытания пробы лекарственного препарата без первичной упаковки, полностью находящегося под воздействием света, и переходя, к исследованиям лекарственного препарата в первичной упаковке, а затем во вторичной упаковке. Исследования должны проводиться до получения данных, подтверждающих, что лекарственный препарат достаточно защищён от воздействия света.

Если показано, что первичная упаковка лекарственного препарата, например, такая как алюминиевые тубы или банки, полностью непроницаема для света, то исследование проводят только в отношении пробы лекарственного препарата без первичной упаковки, полностью находящейся под воздействием света.

В некоторых случаях необходимо изучить фотостабильность лекарственных препаратов в момент их применения, например, инфузионных растворов, кремов для наружного применения и др. Объём таких исследований зависит от рекомендаций, указанных в инструкции по применению, и определяется заявителем самостоятельно.

Используемые методики исследований должны быть надлежащим образом валидированы.

По окончании воздействия света необходимо проанализировать пробы на наличие любых изменений их физических свойств, например, внешнего вида, прозрачности или цветности растворов, а также растворения (распадаемости) для лекарственных препаратов в таких лекарственных формах, как таблетки, капсулы и др. Необходимо провести количественное определение фармацевтической субстанции или количественное определение действующих веществ в лекарственном препарате, определение продуктов деградации с помощью валидированного в отношении тех продуктов, образования которых можно ожидать в результате процесса фотохимической деградации.

При определении фотостабильности твёрдых фармацевтических субстанций, лекарственных препаратов в виде порошков, в отдельных случаях, необходимо использовать достаточное количество репрезентативных образцов. Такой подход при отборе проб применяют и к другим веществам, которые могут стать неоднородными вследствие воздействия света. В случае лекарственных препаратов в твёрдых лекарственных формах для приёма внутрь исследование необходимо осуществлять на достаточном количестве лекарственных препаратов, например, на 20 таблетках или капсулах и т.д.

Анализ пробы лекарственных средств, которые могут потерять гомогенность после воздействия света (в том числе лекарственные препараты в виде кремов, мазей, суспензий и др.), проводят после гомогенизации или растворения образцов всей пробы. Исследование подвергнутых воздействию света проб необходимо осуществлять одновременно с изучением всех защищённых от света проб, которые были использованы в качестве средств контроля, находящихся в темноте, если такой контроль был предусмотрен.

##### Анализ результатов

В условиях стрессовых испытаний (при принудительной деградации) могут быть обнаружены продукты деградации, образование которых маловероятно в условиях подтверждающих исследований. Исследования при принудительной деградации необходимо планировать таким образом, чтобы обеспечить получение сведений, которые можно применить для разработки и валидации аналитических методик, используемых в подтверждающих исследованиях. Такие методики должны обладать способностью различать и обнаруживать продукты фотолитической деградации, образующиеся в ходе подтверждающих исследований. При анализе результатов этих исследований необходимо понимать, что они являются частью стрессовых исследований и, следовательно, не предназначены для установления качественных и количественных пределов изменений.

Для валидации аналитических методик, применяемых при этих исследованиях, может быть использована как непосредственно фармацевтическая субстанция, так и/или её растворы/суспензии, при этом пробы должны находиться в химически инертных и прозрачных ёмкостях.

Подтверждающие исследования для фармацевтической субстанции должны определять меры предосторожности, требуемые при производстве или изготовлении лекарственного препарата, а также необходимость использования упаковки, устойчивой к воздействию света.

Для лекарственных препаратов в зависимости от степени изменений, полученных при подтверждающих исследованиях, могут быть определены специальные указания о необходимости упаковки, позволяющей ослабить воздействие света, о дополнительной маркировке, специальных условиях хранения и т.д.

При анализе результатов подтверждающих исследований в отношении того, является ли изменение вследствие воздействия света приемлемым, важно учитывать результаты других надлежащим образом проведённых исследований стабильности (ОФС «Стабильность и сроки годности лекарственных средств»), чтобы гарантировать качество лекарственного средства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи в течение заявленного срока годности.

##### Метод хининовой химической актинометрии

Готовят достаточное количество хинина моногидрохлорида дигидрата раствора 2 % , в случае необходимости растворяют при нагревании.

В качестве источника света используют флуоресцентную лампу, генерирующую излучение в ближней ультрафиолетовой области.

Методика 1. По 10 мл хинина моногидрохлорида дигидрата раствора 2 % помещают в бесцветные ампулы вместимостью 20 мл (рис. 1), герметично укупоривают. Одну из ампул используют в качестве образца, другую заворачивают в алюминиевую фольгу для полной защиты от света и используют в качестве контрольного образца. Образец и контрольный образец подвергают воздействию источника света в течение заданного времени (ч).

Рисунок 1. Форма и размеры ампулы

После прекращения воздействия источника света определяют оптическую плотность образца (Ат) и контрольного образца (Ао) при 400 нм с использованием 1 см поглощающего слоя.

Рассчитывают разность показателей оптической плотности: А=Ат–Ао

Продолжительность воздействия света должна быть достаточной для обеспечения изменения оптической плотности не менее чем на 0,9.

Методика 2. Приготовленным раствором заполняют кварцевую ячейку с толщиной слоя 1 см и используют в качестве образца. Отдельно заполняют кварцевую ячейку с толщиной слоя 1 см, заворачивают в алюминиевую фольгу для полной защиты от света и используют в качестве контрольного образца. Образец и контрольный образец подвергают воздействию источника света в течение заданного времени (ч). После прекращения воздействия источника света определяют оптическую плотность образца (Ат) и контрольного образца (Ао) при 400 нм с использование 1 см поглощающего слоя.

Рассчитывают разность показателей оптической плотности: А=Ат–Ао

Продолжительность воздействия света должна быть достаточной для обеспечения изменения оптической плотности не менее чем на 0,5.

Возможно использование иных конфигураций упаковки (ампул, ячеек, кювет) при условии их соответствующей валидации. Допускается использование альтернативных валидированных химических актинометров.

Для других источников света/актинометрических систем может быть использован аналогичный подход, но каждая актинометрическая система должна быть откалибрована для используемого источника света.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0030 Перенос (трансфер) аналитических методик

Вводится впервые

В настоящей общей фармакопейной статье устанавливаются общие требования к проведению переноса (трансфера) аналитических методик, приведены рекомендации по составлению документации трансфера, а также указаны случаи, не требующие трансфера.

Трансфер аналитических методик может осуществляться при переносе производства на другую производственную площадку как в рамках трансфера технологии, так и когда лаборатория разработала методику и передаёт в другие/другую лаборатории/лабораторию контроля качества вне переноса технологии. Аналитические методики, предполагаемые к трансферу, должны быть внедрены в лаборатории до начала проведения испытаний образцов при валидации технологического процесса принимающей стороной.

Трансфер распространяется на испытания:

- активных фармацевтических субстанций;

- нерасфасованной продукции;

- лекарственных препаратов;

- промежуточной продукции;

- исходных веществ для производства активных фармацевтических субстанций;

- вспомогательных веществ;

- образцов на стадии очистки для определения остаточных количеств веществ после проведения очистки.

##### Термины и определения

Перенос (трансфер) аналитических методик – процесс передачи аналитических методик от лаборатории передающей стороны в лабораторию принимающей стороны, который предоставляет полномочия лаборатории принимающей стороны использовать аналитические методики, разработанные в лаборатории передающей стороны.

Передающая сторона – организация или подразделение, которое осуществляет трансфер для передачи лекарственного средства/трансфер методик при передаче лекарственного средства.

Принимающая сторона – организация или подразделение, в которые осуществляется трансфер для передачи лекарственного средства/трансфер методик при передаче лекарственного средства.

Протокол трансфера – документ, содержащий информацию о целях, задачах, области применения, процедуре трансфера, включая перечень аналитических методик, критерии их приемлемости, и выражающий согласованность между сторонами в отношении выполняемых требований и их ответственность.

Отчёт о трансфере – документально оформленный краткий обзор специфического проекта по трансферу, описывающий процедуры, в соответствии с которыми осуществлялся трансфер, критерии приемлемости, полученные результаты и выводы, а также любые отклонения с оценкой их критичности для качества лекарственного средства.

Аналитические методики – совокупность документированных операций и правил, выполнение которых обеспечивает получение результата анализа с установленными характеристиками методик погрешностью (неопределённостью) или для методик качественного анализа – с установленной достоверностью. Аналитические методики (физические, химические, физико-химические, биологические) используются для проведения испытаний активных фармацевтических субстанций, лекарственных препаратов, исходного сырья, вспомогательных веществ, промежуточной продукции, отбираемых в процессе производства образцов, упаковочных и печатных материалов (если это применимо).

##### Виды переноса аналитических методик

В случае если валидация аналитической методики была осуществлена на этапе фармацевтической разработки, то перенос (трансфер) аналитических методик может быть осуществлён следующими способами:

- проведение сравнительных испытаний передающей стороной и принимающей стороной (межлабораторная прецизионность);

- проведение верификации методики принимающей стороной,

- проведение повторной валидации (ревалидации) аналитических методик принимающей стороной;

- проведение совместной валидации аналитических методик в двух или нескольких лабораториях (для специфических аналитических методик, для которых необходимо провести валидацию при трансфере).

Перед началом трансфера необходимо проверить статус валидации методик в регистрационном досье от передающей стороны, поскольку для методик, валидация которых не была проведена в полном объёме либо не соответствует современным требованиям к валидации аналитических методик или критериям приемлемости, должна быть проведена их валидация в период трансфера. Иными словами, может быть и некая комбинация вышеописанных видов.

##### Сравнительные испытания

Сравнительные испытания – независимые перекрёстные испытания (перепроверка) образцов одних и тех же серий в передающей и принимающей лабораториях. Испытания проводятся по утверждённому протоколу трансфера, в котором приведено подробное описание аналитических методик, образцов, предполагаемых к использованию, и заданных критериев приемлемости, в том числе допустимой вариабельности результатов испытаний в передающей и принимающей лабораториях.

Выполнение заданных критериев приемлемости необходимо для подтверждения того, что специалисты принимающей стороны обладают требуемой для воспроизведения методики квалификацией.

Сравнительные испытания проводятся на одних и тех же образцах, отобранных от промышленных серий готовой продукции, или образцах продукции, специально подготовленных для испытаний (например, путём добавления соответствующих точных количеств известных примесей в образец).

##### Совместная валидация

Передающая сторона может привлечь принимающую сторону к проведению совместной межлабораторной валидации методик, включив её сотрудников в группу для проведения валидации на своей территории. Лаборатория принимающей стороны, осуществляющая валидацию аналитических методик совместно с передающей, квалифицируется в дальнейшем для выполнения методики при условии выполнения критериев трансфера. Оценка воспроизводимости методики проводится по заранее одобренному протоколу трансфера или валидации, где описаны подробности методики, используемые образцы и критерии приемлемости. Требования к проведению валидационных испытаний и полученным результатам приведены в ОФС «Валидация аналитических методик».

##### Повторная валидация (ревалидация)

Ревалидация методики принимающей стороной обычно выполняется для специфических аналитических методик при наличии соответствующего обоснования. В зависимости от сложности аналитической методики её ревалидация может проводиться в полном или частичном объёме с определением валидационных характеристик, которые предположительно будут затронуты при трансфере.

##### Практическое осуществление трансфера аналитических методик

Практическое осуществление трансфера состоит из следующих этапов:

1. Выбор аналитических методик, предполагаемых для трансфера на основании анализа статуса валидности методик в регистрационном досье.

2. Обучение аналитическим методикам специалистов принимающей стороны.

3. Проведение сравнительных испытаний. Выбор способа переноса методики и параметров валидации/верификации зависит от типа методики, сложности анализа, задач конкретной лаборатории, осваивающей новую процедуру.

Передающая сторона является ответственной за:

- предоставление аналитической методики и стандартных образцов;

- проведение обучения и оказание помощи принимающей стороне, требующихся в процессе трансфера;

- предоставление валидационных отчётов для переносимых методик и любой необходимой документации;

- определение экспериментального плана трансфера, предоставление валидационных отчетов, включая материалы по устойчивости аналитических методик;

- сведения об эксплуатации используемого оборудования, используемых стандартных образцов;

- предоставление утверждённых стандартных процедур;

- проверку и утверждение отчёта о трансфере.

Все аналитические методики, включённые в процесс трансфера, спецификации качества и нормативные документы по качеству лекарственных средств должны предоставляться в письменном виде (актуальные версии). Аналитическая методика должна быть подробно описана, чтобы обученный специалист после изучения методики смог воспроизвести её без затруднений. Процесс обучения аналитическим методикам также должен быть задокументирован.

Отчёты о результатах полной или частичной валидации методик должны быть предоставлены вместе с подробным описанием технических аспектов, необходимых для выполнения испытания.

Принимающая сторона является ответственной за:

- воспроизведение аналитических методик;

- предоставление квалифицированного персонала, прошедшего надлежащее обучение до начала трансфера;

- квалификацию и калибровку необходимого оборудования. Оборудование, используемое принимающей стороной в процессе трансфера, должно соответствовать предоставленным передающей стороной спецификациям;

- размещение и соответствие лабораторных систем применяемым правилам и общим лабораторным процедурам предприятия;

- выполнение работ согласно протоколу трансфера;

- оформление отчёта по полученным результатам и направлению его принимающей стороне.

Передающая и принимающая стороны должны выполнить протокол трансфера и совместно подготовить отчёт о трансфере аналитических методик. Отчёт о трансфере должен содержать заключение о квалификации принимающей стороны для воспроизведения каждой аналитической методики. Необходимые поправки и любые отклонения, возникшие в процессе трансфера, должны быть обсуждены и отражены в отчёте.

Так как цель трансфера связана не с производственным процессом, а с оценкой воспроизводимости передаваемых методик в принимающей лаборатории, для трансфера может быть использована одна партия или серия лекарственного препарата.

##### Протокол трансфера аналитических методик

Для трансфера аналитических методик от передающей лаборатории в принимающую лабораторию должен быть подготовлен протокол, определяющий стадии переноса, с обязательным указанием номера документа и названия объекта трансфера (лекарственного средства, стадии процесса, испытания, аналитической методики).

Протокол трансфера разрабатывается с учётом согласованного сторонами соглашения и содержит необходимые последовательные этапы трансфера в зависимости от вида трансфера и включает в себя следующие разделы (но не ограничивается этим):

- область применения (границы и (или) объект) трансфера;

- цели и задачи применения трансфера;

- ключевой персонал и области его ответственности;

- сроки (временные рамки) трансфера;

- стратегия трансфера;

- порядок обучения персонала, оценку результатов;

- идентификация критических контрольных точек;

- критерии приемлемости;

- спецификации на исходное сырье, материалы, лекарственное средство, детали образцов для трансфера (исходные материалы, промежуточные продукты и готовая продукция);

- оценка готового продукта;

- информация о мероприятиях по хранению архивных образцов активной фармацевтической субстанции, промежуточной продукции, нерасфасованной продукции и готовой продукции, а также информация о стандартных образцах и порядке проведения мониторинга стабильности;

- объём квалификационных и валидационных работ (включая валидацию аналитических методик);

- изменения в трансфере;

- порядок действий при отклонениях или при получении результатов, не соответствующих критериям приемлемости;

- порядок действий при выявлении несоответствия качества лекарственных средств, произведённых в процессе трансфера, после его завершения;

- перечень документации, представляемой передающей стороной;

- приложения.

При описании образцов для испытаний, стандартных образцов, реактивов и материалов необходимо указывать наименования, номера серии/партии, используемые количества, сроки годности. Для оборудования также указывают сведения о метрологической поверке, параметры, необходимые для проведения испытаний.

Если протокол трансфера предполагает использование в процедуре сравнительные испытания не менее двух химиков-аналитиков как в передающей, так и в принимающей лабораториях, проведение измерений в разные дни, независимое приготовление реактивов и растворов, а также количество испытаний (не менее 6), выполняемых каждым специалистом. Объём испытаний определяется в протоколе трансфера в зависимости от передаваемой методики (количество испытуемых образцов, число параллельных определений) и вида трансфера методики.

Критерии приемлемости трансфера должны основываться на воспроизводимости передаваемой методики, ретроспективных данных исследования стабильности лекарственного препарата и результатах контроля его качества при выпуске. Для установления критериев приемлемости используются различные статистические методы в зависимости от показателей качества лекарственного препарата. При прямом методе проводят непосредственное сравнение относительного стандартного отклонения (RSD,%) для всех исследуемых объектов (в случае их доступности). Также критерии приемлемости трансфера могут быть получены на основе принципов статистики по разности в средних значениях результатов испытаний в установленных диапазонах их измерений между принимающей стороной и передающей стороной, которые сопровождаются расчётом вариабельности для каждого участка при заданной доверительной вероятности (Р=95 %), особенно промежуточной прецизионности для принимающей стороны. При сравнении средних значений результатов количественного определения испытаний на однородность дозирования для установления критериев приемлемости может быть использован статистический метод. Допускается использование простого описательного подхода в испытаниях на примеси с низкой прецизионностью, например, в случае следов примесей.

Так как протокол трансфера основан на результатах валидации аналитической методики, в нём должны быть указаны конкретные результаты для валидационных характеристик, необходимые для их последующей оценки, а также метод анализа результатов трансфера. Каждая валидационная характеристика, не включённая в оценку, требует соответствующего обоснования от лабораторий.

Раздел «Документация» в протоколе трансфера может или должен включать формы отчётов для обеспечения согласованной записи результатов и согласованной работы между лабораториями. Данный раздел должен содержать дополнительную информацию о первичных результатах испытаний, например, типичные хроматограммы и спектры, а также дополнительную информацию на случай отклонения. В протоколе трансфера должно быть указано, каким образом будет происходить управление любых отклонений от критериев приемлемости. Все изменения, вносимые в протокол трансфера, в случае несоответствия критериям приемлемости должны быть одобрены до начала сбора дополнительных данных.

##### Отчёт о трансфере аналитической методики

После завершения трансфера принимающая сторона должна подготовить отчёт с заключением о подтверждении квалификации принимающей стороны для выполнения передаваемой методики. Любые возникшие в результате испытаний отклонения от критериев приемлемости трансфера должны быть обоснованы и документально оформлены. Аналитическая методика может считаться переданной принимающей стороне только после проведения эффективных корректирующих мероприятий для обеспечения соответствия критериям приемлемости трансфера. Корректирующие мероприятия могут варьироваться от дополнительной подготовки специалистов и разъяснений особенностей методики до более сложных подходов в зависимости от передаваемой аналитической методики.

##### Отмена процедуры трансфера

В определённых обстоятельствах трансфер, проводимый в обычном порядке, может не осуществляться, а принимающая сторона считается квалифицированной для выполнения аналитических методик без проведения сравнительных испытаний. Отказ от проведения трансфера должен быть обоснован и документально оформлен принимающей стороной.

Отмена трансфера обоснована в следующих случаях:

- состав нового ЛС сопоставим с составом ранее разработанного ЛС и/или концентрация действующего вещества подобна концентрации в ранее разработанном препарате, а у принимающей стороны уже есть опыт по выполнению аналитических методик, используемых для данных испытаний;

- передаваемая аналитическая методика описана в Государственной фармакопее РФ и не изменена; в этом случае принимающая сторона проводит только её верификацию (однако, когда в фармакопейной методике отсутствуют подробное описание или критические параметры, требующиеся для получения правильных результатов, трансфер для таких методик необходимо проводить);

- передаваемая методика анализа идентична или сходна в значительной степени с методикой, уже используемой в лаборатории принимающей стороны;

- персонал передающей стороны, отвечающий за разработку, валидацию или регулярный контроль, переходит на работу в лабораторию принимающей стороны.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0031 Изолирующие системы, применяемые при испытании стерильности лекарственных средств

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на изолирующие системы (изоляторы), применяемые для обеспечения асептических условий при испытании стерильности лекарственных средств и предназначенные для минимизации риска загрязнения испытуемых образцов микроорганизмами, частицами и пирогенами, а также для работы с опасными материалами.

Изолятор – герметичная конструкция для проведения испытания на стерильность, в которой создаются контролируемые и регулируемые условия, обеспечивающие класс чистоты А, при отсутствии прямого контакта оператора с исследуемыми образцами лекарственных средств.

Использование изоляторов позволяет избежать реконструкции имеющихся лабораторных помещений, оптимизирует материальные затраты на создание и обслуживание чистых помещений, обеспечивает максимальную защиту оператора от потенциально опасных веществ, находящихся в камере, снижает риск микробиологической контаминации исследуемых образцов.

Изолирующие системы для анализа стерильности лекарственных средств могут устанавливаться в контролируемых условиях помещений класса чистоты D для производства лекарственных средств или неклассифицируемого помещения.

Для уменьшения загрязнения и нарушений в работе изолятор располагают как можно дальше от источников тепла и входной двери. Должен быть организован беспрепятственный доступ к источнику электропитания.

Персоналу необходимо пройти обучение технике безопасности при работе с изолятором.

##### Особенности устройства изоляторов

Изолятор должен быть:

- изготовлен из материалов (пластмасс, стекла, нержавеющей стали), испытанных и устойчивых к многократной бактерицидной обработке и механически устойчивых к деформации при работе в условиях перепада давлений;

- оснащён высокоэффективными фильтрами очистки воздуха (не хуже НЕРА);

- снабжён микробиологическим пробоотборником и счётчиком нежизнеспособных частиц с целью проведения мониторинга;

- оборудован системой контроля для отслеживания, регулирования и включения систем сигнализации на основании параметров среды внутри камеры.

В камере изолятора может быть создан однонаправленный или турбулентный поток воздуха.

При необходимости изолятор оборудуют специальным шлюзом для быстрой передачи стерильных материалов.

##### Обеспечение асептических условий в камере изолятора

Во избежание загрязнения корпуса изолятора могут использоваться только стерильные перчатки.

Перед испытанием стерильности лекарственных средств проводят подготовку изолятора: проверку герметичности и цикл биодеконтаминации внутренней камеры с помощью спороцидных средств, например, паров водорода пероксида. После окончания работы необходимо повторно провести проверку герметичности с целью подтверждения отсутствия утечек и проникновения загрязнений в камеру. В случае получения неудовлетворительного результата проверки герметичности системы вывод о правильности выполненного испытания стерильности лекарственного средства делают на основании мониторинга внутри камеры изолятора. Безопасность работы сотрудников контролируют с помощью специальных датчиков уровня водорода пероксида в помещении.

Микробиологический мониторинг (контроль воздушной среды и поверхностей внутри камеры) проводится постоянно в изолирующей системе для подтверждения асептических условий класса чистоты А.

Постоянный контроль механических частиц необходим для своевременного определения и быстрого устранения выявленной неисправности в работе воздушного фильтра.

##### Квалификация изолятора

Для подтверждения возможности использования изолятора следует выполнить квалификацию монтажа (IQ), функционирования (OQ) и эксплуатации (PQ).

1. IQ выполняется производителем/поставщиком оборудования с целью подтверждения того, что изолятор соответствует спецификации и имеет необходимый пакет технической документации.

- Документация должна содержать:

  - детальное описание системы и параметров ее работы с нормируемыми критериями, типом измерений, внутренней конфигурации, материалов конструкции;

  - схематические изображения системы с интерфейсами;

  - описание программного обеспечения с указанием версии и даты последнего обновления;

  - сертификаты на высокоэффективные фильтры очистки воздуха;

  - руководство по эксплуатации.

- Если с изолятором используется другое оборудование, то оно должно быть подробно описано и включено в спецификацию вместе с сертификатами соответствия.

- В ходе выполнения IQ требуется подтвердить соответствие:

  - документации требованиям спецификации;

  - типа подачи воздуха, вакуума, внешнего выхлопа, температуры и влажности заявленным нормативам;

  - оборудования требованиям изготовителя;

  - программного обеспечения руководству по эксплуатации.

- Предполагаемый метод биодеконтаминации должен быть совместим с материалом конструкции изолятора.

2. Квалификация функционирования (OQ) выполняется производителем/поставщиком оборудования для доказательства того, что работа всех компонентов системы соответствует установленным требованиям. При OQ определяют критические условия/параметры системы.

- OQ включает:

- 1. Проверку целостности изолятора в течение всего нормального эксплуатационного состояния. Проводят проверку герметичности (спада давления) системы на соответствие функциональным спецификациям изготовителя.

- Проверка герметичности – автоматическая функция системы для подтверждения безопасности работы изолятора перед проведением процедуры биодеконтаминации и переходом в обычный режим работы, которая позволяет убедиться, что камера надежно изолирована от окружающей среды. Во время данного испытания создается высокое давление внутри камеры, усиливающее нагрузку на изоляцию, что позволяет обнаружить негерметичность. Квалификационные исследования должны показать, что контрольные процедуры соответствуют нормативам и могут управляться во время испытания лекарственного средства.

- 2. Проверку процедуры биодеконтаминации. Все фактические результаты должны соответствовать стадиям цикла и контрольным операциям. В ходе квалификационных исследований должна быть определена и подтверждена безопасность персонала при использовании стерилизующих агентов.

- Процедура биодеконтаминации – автоматическая функция системы, обеспечивающая стерилизацию камеры изолятора путём равномерного распыления стерилизующего агента (например, перуксусная кислота, диоксид хлора, озон и водорода пероксид).

- При биодеконтаминации парами водорода пероксида обязательным является проведение контроля температуры и влажности в помещении, а также важен контроль температуры в изоляторе для поддержания концентрации ниже точки конденсации, если в системе не установлены температурные датчики.

- Некоторые стерилизующие агенты, например, диоксид хлора и озон, требуют увеличения влажности в изоляторе до проведения цикла биодеконтаминации. Когда требуется определенная относительная влажность, способность создать её должна быть подтверждена в ОQ.

- Стерилизующий агент поступает в камеру изолятора через распределители, местоположение и ориентация которых должны гарантировать равномерное распределение стерилизующего агента. Проверить концентрацию и распределение спороцидного средства можно с помощью химических индикаторов, спектроскопических методов или электронных датчиков.

- Спороцидные средства должны быть удалены после использования, что осуществляется путём подключения изолятора к системе вентиляции или с помощью специального оборудования.

- В случае, если изолятор подключён к вентиляции, требуется подтверждение, что установленная система обеспечивает безопасное удаление спороцидного средства до пределов, установленных в спецификации.

- 3. Проведение цикла стерилизации для установления параметров, необходимых для управления процессом биодеконтаминации. Для этого используют соответствующие биологические индикаторы, которые устанавливают в критических точках камеры изолятора.

3. Квалификация эксплуатации (РQ). Данный этап проводят с целью подтверждения, что система функционирует в соответствии с заданными требованиями спецификации и обеспечивает эффективность цикла стерилизации при необходимой загрузке изолятора.

- PQ включает:

- 1. Проверка очистки изолирующей системы. Необходимо регламентировать метод очистки, частоту, материалы, используемые для очистки изолятора после завершения испытания на стерильность, что позволит избежать получения ложноотрицательных или ложноположительных результатов анализа.

- 2. Апробация режима стерилизации для подтверждения создания асептических условий. Перед проведением цикла биодеконтаминации подготавливают внутреннюю камеру изолятора, оборудование в пределах изолятора, материалы, питательные среды и образцы лекарственных средств в соответствии с разработанной процедурой, чтобы минимизировать риски микробного обсеменения. Проводят испытание герметичности, полный цикл биодеконтаминации с использованием химических и биологических индикаторов. После завершения процесса стерилизации в пределах изолятора должны поддерживаться асептические условия класса А.

- Биологические индикаторы с количеством спор не менее 105 должны соответствовать применяемому методу стерилизации. Используют достаточное количество биологических индикаторов с учётом критических зон в камере и степени загрузки изолятора. Для контроля концентрации и распределения стерилизующего агента используют химические индикаторы.

- Воспроизводимость процесса стерилизации подтверждают результатами трёх последовательных испытаний.

- В зависимости от условий обеспечения стерильности можно установить частоту повторной стерилизации изолятора от нескольких дней до нескольких недель.

- Результаты проведённой квалификации (IQ, OQ, PQ) анализируют, вносят в Протокол, который хранят вместе с технической документацией.

##### Проверка целостности упаковки испытуемого лекарственного средства

Требуется проверить, что применяемый стерилизующий агент не приводит к ингибированию роста микроорганизмов в упакованном лекарственном средстве. Для этой цели используют химические и микробиологические методики.

Необходимо подтвердить, что испытание на стерильность в соответствии с разработанной процедурой подготовки и стерилизации исследуемых образцов и вспомогательных материалов позволяет обнаружить низкие уровни загрязнения микроорганизмами.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0032 Индикаторные трубки

Вводится впервые

В настоящей общей фармакопейной статье приведена характеристика индикаторных трубок, используемых в фармацевтической практике для определения веществ, как правило, примесей, в газах медицинских.

Индикаторная трубка (газодетекторная трубка) ‒ это измерительный преобразователь, представляющий собой цилиндрическую герметичную трубку из инертного, оптически прозрачного материала, сконструированную таким образом, чтобы пропускать газ. Индикаторная трубка заполнена сорбентом (индикаторным порошком, индикаторным наполнителем), изменяющим оптические свойства под действием проникающих внутрь трубки веществ.

##### Виды индикаторных трубок

- колористическая: индикаторная трубка, позволяющая измерять содержание вещества в анализируемой газовой среде, пропускаемой через индикаторную трубку, по длине изменившего первоначальную окраску слоя индикаторного порошка;

- колориметрическая: индикаторная трубка, позволяющая судить о содержании определяемого вещества в анализируемой газовой среде, просасываемой через индикаторную трубку, путём сравнения изменившейся окраски индикаторного порошка с прилагаемой цветной шкалой (или цветным образцом).

##### Сорбенты (индикаторные порошки)

В качестве основы для индикаторного порошка обычно используют сорбент с высокоразвитой удельной поверхностью для более полного поглощения анализируемого вещества, например, силикагель определённых марок. Реже применяют сорбенты с малой удельной поверхностью, например, дроблёные фарфор или нейтральное стекло. При получении индикаторных порошков основу пропитывают растворами соответствующих реактивов и индикаторов, которые должны вступить в реакцию с анализируемым веществом ‒ компонентом испытуемого газа, заполняющего трубку, с образованием окрашенного продукта реакции, изменяющего первоначальный цвет трубки. Индикаторные трубки при необходимости могут содержать адсорбирующие фильтры и/или слои так называемых «предварительных сорбентов» для устранения компонентов газа, мешающих обнаруживаемому веществу. Слой индикатора может содержать реактивы для обнаружения какой-либо одной примеси (монослойная трубка) или реактивы для обнаружения нескольких веществ (многослойная трубка). После пропитывания реактивами индикаторный порошок высушивают и помещают в индикаторную трубку.

##### Требования к индикаторным трубкам

Габаритные размеры индикаторных трубок должны быть установлены в стандартах и/или технических документах на индикаторные трубки конкретных типов, при этом длина индикаторных трубок должна быть 80–160 мм (с предельными отклонениями ±10 мм), а диаметр – 4,0–6,5 мм (с предельными отклонениями ±0,25 мм).

Технические требования к исполнению шкал индикаторных трубок должны быть установлены в стандартах и/или технических документах на индикаторные трубки конкретных типов.

Масса индикаторных трубок должна быть установлена в стандартах и/или технических документах на индикаторные трубки конкретных типов.

Индикаторные трубки должны быть откалиброваны. Химическое преобразование анализируемого вещества в индикаторной трубке пропорционально массе реагирующего газа.

##### Методы определения

Определение анализируемых веществ осуществляют одним из двух методов: или по длине окрашенного слоя индикаторного порошка – линейно-колористический метод, или по степени интенсивности окрашивания – колориметрический метод. Калибровка индикаторных трубок в линейно-колористическом методе заключается в нахождении зависимости длины окрашенного слоя (в мм) от концентрации анализируемого вещества. Полученный в результате калибровки цветовой стандарт, отградуированный в концентрациях определяемого вещества, используют для установления количества последнего в точке контроля с помощью индикаторной трубки.

Испытание проводят путём пропускания необходимого объёма исследуемого газа через индикаторную трубку. Содержание примесей или других анализируемых веществ интерпретируют, исходя из длины окрашенного слоя индикаторного порошка или интенсивности изменения цвета по градуированной шкале.

Для колористических и колориметрических трубок вместо объёма пробы газовой среды допускается нормировать продолжительность просасывания пробы через индикаторную трубку и её объёмный расход.

##### Устройство для определения веществ с помощью индикаторных трубок

Схема устройства для определения веществ в газах с помощью индикаторных трубок представлена на рис 1.

Рисунок 1. Схема устройства для определения веществ с помощью индикаторных трубок: 1 ‒ подача газа; 2 ‒ регулятор давления; 3 ‒ игольчатый клапан; 4 ‒ Т-образный участок; 5 ‒ индикаторная трубка; 6 ‒ насос для индикаторной трубки; 7 ‒ открытый конец для выхода газа в атмосферу.

Устройство для подачи газа подсоединяют к регулятору давления с игольчатым клапаном. Соединяют гибкую трубку, имеющую Т-образный участок, к игольчатому клапану и продувают собранную систему, регулируя поток испытуемого газа так, чтобы его параметры соответствовали установленным требованиям испытания. Подготавливают индикаторную трубку в соответствии с инструкцией производителя по ее эксплуатации. Устанавливают индикаторную трубку на дозирующий насос, а открытый конец индикаторной трубки подсоединяют к короткому отрезку Т-образного участка трубки. Приводят насос в действие, регулируя соответствующим числом ходов необходимый объём испытуемого газа, проходящего через индикаторную трубку.

##### Анализ результатов

Значение, соответствующее длине окрашенного слоя или интенсивности цвета на градуированной шкале, определяют визуально.

Если при испытании получен отрицательный результат, то индикаторная трубка может быть проверена с помощью калибровочного газа, содержащего соответствующую исследуемую примесь.

##### Номенклатура индикаторных трубок по назначению

Индикаторная трубка для арсина. Герметичная стеклянная трубка, содержащая адсорбирующие фильтры и подходящие носители для индикатора – соли золота или другого подходящего индикатора. Минимальная определяемая концентрация – 0,25 ppm или меньше, с относительным стандартным отклонением не более 20 %.

Индикаторная трубка для углерода диоксида. Герметичная стеклянная трубка, содержащая адсорбирующие фильтры и подходящие носители для индикаторов – гидразина и кристаллического фиолетового. Минимальная определяемая концентрация – 100 ppm с относительным стандартным отклонением не более 15 %.

Индикаторная трубка для углерода монооксида. Герметичная стеклянная трубка, содержащая адсорбирующие фильтры и подходящие носители для индикаторов – йода(V) оксида, селена диоксида и серной кислоты дымящей. Минимальная определяемая концентрация – 5 ppm или меньше, с относительным стандартным отклонением не более 15 %.

Индикаторная трубка для сероводорода. Герметичная стеклянная трубка, содержащая адсорбирующие фильтры и подходящие носители для индикатора – соли свинца. Минимальная определяемая концентрация 0,2 ppm или меньше, с относительным стандартным отклонением не более 10 %.

Индикаторная трубка для азота монооксида и азота диоксида. Герметичная стеклянная трубка, содержащая адсорбирующие фильтры и подходящие носители для окисляющего слоя (соль Cr (VI)) и индикатора – дифенилбензидина. Минимальная определяемая концентрация – значение составляет 0,5 ppm с относительным стандартным отклонением не более 15 %.

Индикаторная трубка для масел. Герметичная стеклянная трубка, содержащая адсорбирующие фильтры и подходящие носители для индикатора – серной кислоты. Минимальная определяемая концентрация – 0,1 мг/м 3 с относительным стандартным отклонением не более 30 %.

Примечание – Ввиду широкого использования разнообразных компрессорных (смазочных) масел необходимо проверить реакцию трубки для масел на используемое масло. Информация о реакционной способности для различных масел приводится в сопроводительном листке, прилагаемом к трубке. Если используемое масло не указано в сопроводительном листке, изготовитель трубки должен проверить реакционную способность и, при необходимости, обеспечить прибор специальной трубкой для данного масла.

Индикаторная трубка для фосфина. Герметичная стеклянная трубка, содержащая адсорбирующие фильтры и подходящие носители для индикатора – соли золота или другого подходящего индикатора. Минимальная определяемая концентрация – 0,2 ppm или меньше, с относительным стандартным отклонением не более 20 %.

Индикаторная трубка для серы диоксида. Герметичная стеклянная трубка, содержащая адсорбирующие фильтры и подходящие носители для индикаторов – йода и крахмала. Минимальная определяемая концентрация – 0,5 ppm с относительным стандартным отклонением не более 15 %.

Индикаторная трубка для паров воды. Герметичная стеклянная трубка, содержащая адсорбирующие фильтры и подходящие носители для индикатора – магния перхлората. Минимальная определяемая концентрация – 67 ppm или меньше, с относительным стандартным отклонением не более 20 %.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0033 Каплемеры

Вводится впервые

В настоящей общей фармакопейной статье приведена характеристика каплемеров, используемых в фармацевтической практике.

Каплемеры предназначены для дозирования, отмеривания каплями растворов, жидкостей при изготовлении, контроле качества, применении лекарственных средств.

Под термином «капли», указанным в фармакопейной статье понимают стандартные капли, отмеренные стандартным каплемером.

Стандартный каплемер представляет собой бесцветную стеклянную трубку, форма и размеры которой указаны на рис. 1. Нижний каплеобразующий конец трубки имеет круглое отверстие, расположенное в плоскости, перпендикулярной оси трубки.

В качестве стандартного можно использовать и другие каплемеры, имеющие наружный диаметр каплеобразующей трубки 3 мм, выдерживающие требования следующего испытания. При температуре (20±1) °С 20 капель воды должны свободно, с постоянной скоростью в 1 каплю в секунду, истекать из находящегося в вертикальном положении каплемера, при этом общая масса капель должна составлять (1000±50) мг. Для стандартного каплемера проводят три определения. Ни один из результатов не должен отклоняться более чем на 5 % от среднего значения трёх определений.

Перед использованием каплемер очищают хромовой смесью, тщательно промывают водой и высушивают, защищая от ударов каплеобразующий конец каплемера.

Рисунок 1. Стандартный каплемер

При необходимости стандартный каплемер может быть заменён на нестандартный (эмпирический), например, стеклянную глазную пипетку. Нестандартный каплемер должен быть откалиброван по соответствующей жидкости, для отмеривания которой он будет предназначен. Пятикратно взвешивают 20 капель этой жидкости, определяют среднюю массу, вычисляют количество капель, отмеренных нестандартным каплемером в 1 г испытуемой жидкости. Определяют соотношение капель стандартного каплемера, указанное в таблице, и вычисленного количества капель нестандартного каплемера для этой жидкости. Перед проведением испытания каплемер (пипетка) должен быть тщательно вымыт. Проводят пять определений. Ни один из результатов не должен отклоняться более чем на 5 % от среднего значения пяти определений.

Таблица. Количество капель в 1 г, в 1 мл и масса 1 капли жидких лекарственных средств, используемых в фармацевтической практике, отмеренных стандартным каплемером при температуре 20°С.
№ п/п | Наименование жидкого лекарственного средства | Количество капель | Масса 1 капли, мг
--- | --- | --- | ---
в 1 г | в 1 мл
1 | Адонизид | 35 | 34 | 29
2 | Боярышника плодов экстракт жидкий | 53 | 52 | 19
3 | Валерианы лекарственной корневища с корнями настойка (Валерианы настойка) | 56 | 51 | 18
4 | Левоментола в ментилизовалерате раствор (Валидол) | 54 | 48 | 19
5 | Вода очищенная | 20 | 20 | 50
6 | Йода спиртовой раствор 5 % | 63 | 56 | 16
7 | Красавки белладонны листьев настойка | 46 | 44 | 22
8 | Кордиамин | 29 | 29 | 34
9 | Ландыша травы настойка (Ландыша настойка) | 56 | 50 | 18
10 | Мяты перечной листьев масло эфирное (Масло мяты перечной) | 51 | 47 | 20
11 | Мяты перечной листьев настойка (Мяты перечной настойка) | 61 | 52 | 16
12 | Аммиака раствор 10%+Аниса обыкновенного плодов масло эфирное, капли для приема внутрь | 56 | 49 | 18
13 | Нитроглицерина раствор 1 % | 65 | 53 | 15
14 | Полыни горькой травы настойка (Полыни настойка) | 56 | 51 | 18
15 | Пустырника травы настойка (Пустырника настойка) | 56 | 51 | 18
16 | Ретинола ацетата раствор масляный | 45 | 41 | 22
17 | Хлористоводородная кислота разведённая 8,3 % | 20 | 21 | 50
18 | Эфир диэтиловый | 87 | 62 | 11

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0034 Квалификация аналитического оборудования

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья является информационной и содержит общие рекомендации по научному, основанному на оценке рисков, подходу к проведению квалификации аналитического оборудования.

Квалификация аналитического оборудования – действия, удостоверяющие и подтверждающие документально тот факт, что оборудование или вспомогательные системы смонтированы должным образом, правильно функционируют и действительно приводят к ожидаемым результатам. Использование квалифицированного оборудования в аналитических целях повышает уверенность в достоверности полученных данных.

##### Основные термины и определения

Оборудование – любой прибор, аналитическая система, установка или устройство, используемые в целях испытания лекарственных средств.

Процедура – документально оформленное описание операций, подлежащих выполнению, мер предосторожности и мероприятий.

Квалификация аналитического оборудования – процесс документального подтверждения того, что установка, сборка, монтаж, функционирование и эксплуатация аналитического оборудования соответствует спецификации целевого назначения оборудования, а также требованиям пользователя.

Проверка – испытание на соответствие спецификации.

Спецификация – перечень испытаний, норм для этих испытаний, а также ссылок на аналитические методики, по которым эти испытания проводят и их критериев приемлемости. Спецификация устанавливает набор критериев, которым должен соответствовать объект, чтобы считаться приемлемым для его предполагаемого применения. Понятие «соответствие требованиям спецификации» означает, что объект, прошедший испытания согласно перечисленным аналитическим методикам, соответствует приведённым критериям приемлемости.

Калибровка (внешняя калибровка) – процедура, которая на первом этапе квалификации устанавливает связь между значениями величин, предусмотренными стандартами измерений, и соответствующими показаниями прибора, а на втором этапе использует эту информацию для получения результата измерения из показаний.

1. Калибровка может быть выражена с помощью отчёта, функции калибровки, калибровочной диаграммы, калибровочной кривой или калибровочной таблицы.

2. Внешняя калибровка не является регулировкой измерительной системы и не является внутренней встроенной калибровкой.

Техническое обслуживание – мероприятия, нацеленные на поддержание работоспособности аналитического оборудования в надлежащем состоянии, т.е. в пределах, установленных в ходе квалификации.

Поставщик – производитель или поставщик оборудования, сервисный инженер или консультант.

##### Общие положения

В фармацевтической промышленности используется разнообразное оборудование – от простого устройства до сложных компьютеризированных систем, сочетающих метрологической оценкой результата. Для подтверждения того, что оборудование работает правильно и обеспечивает ожидаемые результаты, существуют различные подходы, включающие квалификацию, калибровку, техническое обслуживание. При этом рекомендуется использовать комплекс мер, основанный на оценке рисков и обеспечивающий пригодность оборудования для целей его использования. Оценка рисков позволяет классифицировать оборудование для определения объёма проводимой квалификации, демонстрирующей соответствие оборудования цели его использования. Как правило, чем сложнее прибор или чем выше критичность измерения, тем больший объём работ требуется. При этом выбранный подход к квалификации оборудования должен обеспечивать целостность и безопасность получаемых данных.

Оборудование, как правило, может быть классифицировано по группам A, B или C.

Таблица 1. Классификация аналитического оборудования
А | В | С
--- | --- | ---
Наименее сложное оборудование, не обладающее измерительной способностью и не требующее проведения калибровки. Например, мешалки магнитные, мешалки вихревые, бани ультразвуковые, шейкеры и т.п. | Оборудование, с помощью которого возможно измерение или обеспечение экспериментальных условий, которые могут влиять на результаты измерений. Оборудование может иметь встроенное программное обеспечение, не подлежащее изменению пользователем в течение срока эксплуатации оборудования (но не программное обеспечение, которое может быть изменено или настроено пользователем). Например, рН-метры, термометры, таймеры, насосы, бани водяные, центрифуги и т.п.). | Оборудование высокой степени сложности и компьютеризации, имеющие внешнее программное обеспечение, которое может быть изменено и настроено пользователем. Например, хроматографы, системы для капиллярного электрофореза, спектрофотометры, анализаторы частиц и т.п.)
Не требует проведения квалификации. Подтверждение надлежащего функционирования оборудования обеспечивается только наблюдением в процессе его эксплуатации. | Требуется проведение квалификации либо иных действий, подтверждающих работоспособность оборудования. Для подтверждения надлежащей работоспособности приборов данной группы, может быть использована полная квалификация, так же допустима только калибровка, или техническое обслуживание или отдельные этапы квалификации (например, квалификация функционирования (III уровень) | Требует обязательного проведения всех этапов квалификации, включая квалификацию программного обеспечения.

Примечание – Одно и то же оборудование может относиться как к одной, так и к нескольким категориям одновременно в зависимости от его назначения.

##### Процесс квалификации аналитического оборудования

Этапы квалификации

Квалификация аналитического оборудования не является однократным мероприятием, а представляет собой результат взаимосвязанных действий, выполняемых на протяжении всего срока эксплуатации оборудования.

Проведению квалификации предшествует этап документированного процесса принятия решения, в основе которого лежит решение задач, связанных с предполагаемым использованием оборудования, разработка спецификации требований пользователя, определяющей его конкретные потребности и определение технических и эксплуатационных характеристик, которым должно соответствовать оборудование.

Последующие квалификационные мероприятия, необходимые для установления соответствия оборудования его назначению, группируются в четыре этапа:

- этап I – квалификация проекта;

- этап II – квалификация установки и ввода в эксплуатацию;

- этап III – квалификация функционирования;

- этап IV – квалификация эксплуатации.

Эксплуатационная квалификация (IV этап) иногда называется пользовательским приёмочным тестированием.

При необходимости перечисленные этапы квалификации могут быть расширены для оборудования высокой степени сложности (группа «С») и включать дополнительные критерии и требования спецификации к квалификации функционирования а так же дополнительные приёмочные испытания производителя оборудования. Процедуры квалификаций установки, функционирования обычно выполняются во время размещения и запуска оборудования на месте его эксплуатации. IV этап квалификации проводится на месте и в процессе постоянного использования оборудования (квалификация эксплуатации) с целью постоянного подтверждения удовлетворительной работы оборудования, а также соответствия критериям пригодности системы согласно применяемой аналитической методике.

Такой комплекс действий иногда называют приёмочным тестированием на месте эксплуатации оборудования. При выборе перечня этапов и процедур, осуществляемых в ходе приёмочного тестирования на месте эксплуатации более важным является научное обоснование и выполнение в логическом порядке проводимых квалификационных мероприятий, чем их точное распределение в рамках каждой отдельной квалификации (IQ / OQ / PQ). Квалификационные процедуры могут являться как самостоятельным процессом, проводимым пользователем оборудования, так и частью более общих мероприятий, встроенных в неё как комплексная рамочная программа.

После проведённого капитального ремонта или модификации аналитического оборудования необходимо провести проверку с помощью процедуры контроля изменений. Для того, чтобы подтвердить, что оборудование продолжает работать удовлетворительно, следует повторить испытания этапов II, III и/или IV.

После проведённых перемещений аналитического оборудования следует произвести оценку работоспособности оборудования, с помощью которой выяснить, какой этап квалификации необходимо повторить, и есть ли в этом необходимость.

При изменении способов использования аналитического оборудования или в случае его модернизации/модификации, требуется провести пересмотр и/или обновление утверждённой программы квалификации оборудования.

1. Квалификация проекта (этап I)

Квалификация проекта (КП) – это документированный перечень требований, которые будут определять функциональные и эксплуатационные характеристики и предполагаемое назначение оборудования. КП демонстрирует заявляемые цели использования прибора, цели его эксплуатации и технические характеристики.

Обычно, требования, указываемые в КП, являются минимальными для полностью готового к использованию оборудования, поставляемого пользователю в стандартных комплектациях поставщика.

Документальной проверки, подтверждающей, что технические характеристики, заявленные производителем оборудования, соответствуют требованиям пользователя, может быть достаточно.

Поставщик ответственен за надёжное проектирование, изготовление и ведение документации, описывающей, как само произведённое и предоставляемое пользователю оборудование, так и любое связанное с ним управляющее программное обеспечение. Так же ответственностью поставщика оборудования является его тестирование при выпуске в ходе заводских приёмочных испытаний. Ответственностью пользователя является проверка соответствия оборудования его предполагаемому применению на месте постоянной эксплуатации, оценка системы качества производителя оборудования, которая обеспечивает надежность самого оборудования, его программного обеспечения и сетевого подключения. Ответственностью пользователя также является определить способность поставщика оборудования поддерживать его функционирование в ходе эксплуатации пользователем, способность проводить его техническое обслуживание и обучение пользователей.

В случае изменения целей использования оборудования или его серьёзного обновления, может потребоваться просмотр и/или новая квалификация проектирования.

2. Квалификация установки и ввода в эксплуатацию (этап II)

Квалификация установки и ввода в эксплуатацию – это документированные действия, необходимые для подтверждения того, что оборудование поставляется в соответствии с проектом, прошедшим квалификацию, и спецификациями, правильно установлено в выбранном месте эксплуатации и что выбранное место эксплуатации подходит для данного оборудования.

Требования данного этапа квалификации распространяются как на новое оборудование, так и на оборудование, бывшее ранее в эксплуатации и перемещённое на новое место использования. Все имеющиеся документы на оборудование, установленное у пользователя, но не проходившее ранее квалификацию следует проверить, используя подход, основанный на оценке рисков эксплуатации и определить план дальнейших действий с оборудованием данного типа.

Соответствующие процессы этапа квалификации установки и ввода в эксплуатацию, так же применяются к оборудованию после его перемещения на другое место эксплуатации или повторного введения в эксплуатацию после длительного хранения и/или ремонта.

Этапу квалификации установки и ввода в эксплуатацию предшествует оценка документации поставщика по инсталляционной квалификации на предмет их приемлемости для пользователя и возможности их выполнения на месте постоянной эксплуатации оборудования.

Ниже приведён перечень мероприятий и документации, требуемых при проведении этапа квалификации установки.

2.1 Доставка лабораторного оборудования

Должно быть подтверждено, что квалифицируемое оборудование, программное обеспечение, инструкции по эксплуатации, расходные материалы и любые другие вспомогательные элементы, необходимые для установки, ввода в эксплуатацию, квалификации и использования оборудования поставлены в соответствии с требованиями пользователя и не повреждены.

2.2 Информация по оборудованию

Данные по оборудованию должны быть полностью документированы и включать в себя полную информацию об оборудовании и всех его комплектующих, включая наименование поставщика, его адрес, наименование модели и серийный номер оборудования, версию программного обеспечения и др.

2.3 Место эксплуатации оборудования / Инженерные коммуникации, окружающая среда

Соответствие места установки и эксплуатации оборудования требованиям поставщика должно быть задокументировано.

2.4 Сборка и монтаж

Этап включает в себя сборку и монтаж оборудования, проведение первоначальной диагностики работоспособности.

После установки и монтажа, которые могут выполняться поставщиком или квалифицированным персоналом пользователя, выполняют первоначальную диагностику оборудования. Все отклонения от установленных поставщиком требований и норм документируются.

2.5 Установка программного обеспечения, подключение к сети, хранение данных

В случае использования квалифицируемым оборудованием внешнего программного обеспечения, такое программное обеспечение, а также используемый компьютер, сеть и место хранения данных, должны быть квалифицированы на соответствие требованиям поставщика в ходе данного этапа и задокументированы.

2.6 Подтверждение установки

При проведении квалификации установки оборудования, заявленные производителем требования, являются основными критериями приемлемости. Результаты проведения данного этапа документируются.

3. Квалификация функционирования

Квалификация функционирования – это документированные действия, необходимые для подтверждения того, что оборудование будет работать в соответствии с его спецификацией в условиях эксплуатации пользователя.

Квалификация функционирования демонстрирует пригодность оборудования для желаемого применения и должна отражать требования пользователя.

Ниже приведён перечень мероприятий и параметров испытаний, требуемых при проведении этапа квалификации функционирования.

3.1 Неизменяемые параметры оборудования

Тесты, проводимые на данном этапе, подтверждают соответствие неизменяемых параметров оборудования, таких как: длина, высота, вес, входное напряжение, допустимое давление, нагрузка и т.п., заявленной спецификации. Указанные параметры могут быть подтверждены только документально, без проведения испытаний пользователем. Если пользователь хочет подтвердить параметры, тестирование проводится непосредственно на месте эксплуатации оборудования. Оцениваемые на данном этапе квалификации параметры не нуждаются в повторном тестировании, поскольку относятся к характеристикам, неизменяемым в течение срока эксплуатации оборудования. Тестирование неизменяемых параметров оборудования так же может быть осуществлено при проведении этапа II квалификации – квалификации установки. В таких случаях, их повторного тестирования на этапе III (квалификации функционирования) уже не требуется.

3.2 Квалификация функций программного обеспечения

В случае если эксплуатация квалифицируемого аналитического оборудования требует применения внешнего программного обеспечения, квалификационные испытания в рамках данного этапа должны включать в себя проверку критических параметров настроенных компьютерных систем и критических параметров программного обеспечения. Проверки требуют системы и программы сбора и анализа данных, регистрации результатов испытаний, а также системы безопасности, контроля доступа и ведения журнала регистрации событий.

Применяя методологию оценки рисков, пользователь может протестировать программное обеспечение поставщика с целью достижения полноты выполняемой квалификации функционирования.

3.3 Безопасные обработки и хранение данных, создание резервных копий и архивирование

Необходима проверка безопасности обработки данных, хранения, резервного копирования, ведения журнала регистрации событий и архивирования, в соответствии с документированными процедурами.

3.4 Функциональные испытания оборудования. Объём тестирования

Объём испытаний, определяется функциями оборудования, необходимыми пользователю и проводится в соответствие со спецификациями поставщика или пользователя на месте эксплуатации оборудования.

Функциональные испытания могут быть модульными или комплексными. Модульное испытание отдельных составляющих системы может обеспечить установление взаимозаменяемости таких компонентов без повторной квалификации, однако для обоснования целесообразности выбора данной разновидности квалификации, требуется оценка возможных рисков. Комплексный вариант квалификации демонстрирует соответствие всей системы спецификациям пользователя.

Параметры и/или характеристики оборудования, подверженные изменениям или изменённые в ходе эксплуатации оборудования подлежат периодической проверке в рамках квалификации функционирования.

После перемещения оборудования в другие эксплуатационные условия или ремонта или работ по техническому обслуживанию, требуется произвести серию проверок в рамках квалификации функционирования для подтверждения рабочих характеристик оборудования.

3.5 Конфигурация и настройка внешнего программного обеспечения

Любые действия, связанные с выбором конфигураций или с настройкой внешнего программного обеспечения, должны производиться до проведения квалификации функционирования и должны быть задокументированы, за исключением случаев, когда требуется внести изменения в испытания отдельных модулей.

Квалификация функционирования должна проводиться с использованием той конфигурации программного обеспечения, которая будет использоваться в повседневной эксплуатации оборудования.

4. Квалификация эксплуатации

Квалификация эксплуатации – это документированные действия, которые необходимо проводить в ходе его повседневного использования и которые подтверждают, что оборудование работает в соответствии с эксплуатационной спецификацией, установленной пользователем при испытаниях на месте использования оборудования и демонстрирующие пригодность оборудования для выбранных пользователем целей.

С помощью квалификации эксплуатации устанавливается пригодность аналитического оборудования для работы в конкретных условиях.

Должен быть разработан план проведения данного этапа квалификации, включая процедуры испытаний, критерии приемлемости и частоту проведения. Помимо этого, для комплексной квалификации аналитического оборудования необходима документация, отражающая этапы обслуживания оборудования в процессе его эксплуатации.

4.1 Проверка работоспособности

Проверка работоспособности аналитического оборудования – испытание, проводимые с целью подтверждения соответствия эксплуатационных характеристик назначению оборудования.

Испытания в рамках этапа квалификации эксплуатации могут иметь сходство с испытаниями, которые проводились на этапе проведения квалификации функционирования. На данном этапе квалификации должна быть продемонстрирована бесперебойная работа аналитического оборудования в рамках его эксплуатационного назначения. Так же, как испытания в рамках квалификации функционирования, испытания в рамках данного этапа могут быть модульными или комплексными.

Периодичность проведения испытаний зависит от надёжности аналитического оборудования и критичности реализуемых на нём аналитических методик. Испытания могут быть плановыми и внеплановыми.

4.2 Планово-профилактические работы и ремонт

В пакет документов по квалификации эксплуатации аналитического оборудования должны быть включены планово-профилактические работы, в том числе перечень проводимых процедур и частоту повторения проверки. Когда аналитическое оборудование не соответствует критериям квалификации эксплуатации или выявлены его неисправности, следует провести расследование причин неполадки и оформить соответствующие документы.

После проведения ремонта или необходимого технического обслуживания аналитического оборудования проводится его эксплуатационная квалификация в установленных объёмах.

4.3 Контроль изменений и периодические проверки

После каждого зафиксированного эпизода квалификации аналитического оборудования, перемещения, технического обслуживания, ремонта и мероприятий, связанных с калибровкой оборудования, должны быть составлены соответствующие документы. Необходимо утверждение процедуры контроля за изменениями, с целью отслеживания осуществлённых изменений, включая изменения в конфигурации аналитического оборудования (как в его аппаратной части, так и в его программном обеспечении) Необходимо проведение периодических проверок аналитического оборудования. Ответственность за осуществление таких проверок несёт пользователь аналитического оборудования. Эта работа выполняется персоналом пользовательской организации или, по поручению пользователя, внешними исполнителями или внешними сервисными службами.

##### Квалификация программного обеспечения

При проведении квалификации программного обеспечения, необходимо учитывать невозможность разделения аппаратной и программной частей аналитического оборудования, так как для проведения квалификации оборудования необходимо наличие программного обеспечения, а при проверке или квалификации программного обеспечения важно, чтобы оборудование работало. Таким образом, во избежание наложения данных и потенциального дублирования квалификацию аппаратной части оборудования и квалификацию программного обеспечения рекомендуется интегрировать в единое мероприятие.

Программное обеспечение, используемое на аналитическом оборудовании, может быть разделено на 2 группы: встроенное программное обеспечение и внешнее программное обеспечение. Внешнее программное обеспечение предназначено либо для управления аналитическим оборудованием и сбора данных либо для обработки данных.

Квалификация встроенного программного обеспечения

Встроенное программное обеспечение (прошивка) обычно считается микропрограммное обеспечение низкого уровня (со встроенными чипами), которое пользователи не имеют возможности изменить.

Такое программное обеспечение считается частью самого аналитического оборудования и управляет им через прошивку. Без правильной работы встроенного ПО, использующее его оборудование не может функционировать.

Отдельной квалификации микропрограммного обеспечения не требуется. Там, где применимо, используемая версия встроенного ПО прописывается как часть действий, выполняемых в ходе квалификации установки аналитического оборудования. Изменения используемой версии встроенного программного обеспечения должны отслеживаться с помощью процедуры контроля, которая проводится в отношении любого аналитического оборудования.

При использовании аналитическим оборудованием встроенного ПО, позволяющим производить вычисления, используя полученные данные из встроенного ПО, с помощью которого пользователь сам может выбирать программы для работы аналитического оборудования, в первом случае, полученные вычисления подлежат проверке; во втором случае, выбранные пользователем программы должны проверяться на их пригодность для использования по назначению работы аналитического оборудования. Любые программы, выбираемые пользователями, должны стать предметом процедуры контроля изменений и, по возможности, доступ к ним должен быть ограничен.

Квалификация ПО для управления приборами, сбора и обработки данных, внешнего программного обеспечения

Программное обеспечение для управления приборами сбора и обработки данных и внешнее ПО для многих современных компьютеризированных приборов загружается на компьютер, подключённый к прибору. Затем управление прибором осуществляется с помощью программного обеспечения, в результате чего на приборе остается меньше элементов управления. Кроме того, программное обеспечение данных типов необходимо для сбора данных и расчётов после сбора данных. Таким образом, как аппаратное, так и программное обеспечение, их функции неразрывно связаны и имеют решающее значение для получения аналитических результатов.

Программное обеспечение в этой группе можно разделить на три типа:

- неконфигурируемое программное обеспечение, которое нельзя модифицировать;

- конфигурируемое программное обеспечение, включающее инструменты поставщика для модификаций под требования пользователя;

- конфигурируемое программное обеспечение с пользовательскими дополнениями (например, пользовательское программное обеспечение или макросы).

Поставщик системы должен разрабатывать и тестировать программное обеспечение в соответствии с определённым жизненным циклом и предоставлять пользователям краткое описание проведённых испытаний.

На месте пользователя комплексная квалификация прибора в сочетании с проверкой программного обеспечения включает в себя всю систему. Это более эффективно, чем отделять квалификацию прибора от проверки программного обеспечения.

##### Контроль изменений

Изменения в квалифицированных инструментах, включая программное обеспечение, становятся неизбежными, например, при добавлении новых функций оборудования, исправления известных дефектов или изменения целей использования оборудования пользователем.

Перед внесением каких-либо изменений в функциональность аналитического оборудования, в т. ч. прошедшего квалификацию, пользователям рекомендуется удостовериться, что вносимые изменения действительно необходимы.

Изменения в конфигурациях и функциональности аналитического оборудования могут так же происходить при проведении его ремонта, технического обслуживания или при перемещении.

Контроль изменений распространяется на все элементы квалификации и может проводиться в рамках общего процесса квалификации аналитического оборудования. Пользователи должны оценить влияние вносимых изменений и, при необходимости, определить необходимость проведения повторной квалификации.

При внедрении изменений в систему требуется оценить способность аналитического оборудования отвечать требованиям пользователя и как эти требования изменились. Необходимо определить, какие испытания из существующих в рамках квалификации функционирования и квалификации эксплуатации должны быть изменены, удалены или добавлены после внесения изменения в конфигурации аналитического оборудования.

После внедрения изменений, необходимо проведение любого вида испытаний, для оценки влияния, оказанного изменением. При проведении документирования процесса внесения изменений в конфигурации аналитического оборудования необходимо провести описание изменений, причины изменений и указать соответствующие идентификаторы (например, номер детали или серийный номер нового компонента и версий нового программного обеспечения или «прошивки»).

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0035 Упаковка лекарственных средств

Взамен ОФС.1.1.0025.18

Упаковка фармацевтических субстанций, лекарственных препаратов и вспомогательных веществ представляет собой материал, изделие или устройство, содержащее или предназначенное для содержания лекарственного средства, гарантирующее сохранение его качества в течение установленного срока годности (срока хранения), обеспечивающее защиту лекарственного средства от повреждений и потерь, а также предохраняющее окружающую среду от загрязнений.

В зависимости от непосредственного контакта с лекарственным средством различают первичную упаковку и вторичную упаковку.

Требования данной статьи не распространяются на лекарственное растительное сырьё и лекарственные растительные препараты.

Примечание – Другие термины и определения, используемые в настоящей общей фармакопейной статье, приведены в ОФС «Отбор проб».

##### Классификация упаковки

К комплексу средств, образующих упаковку лекарственных средств, то есть к элементам упаковки, относят тару, укупорочные средства, комплектующие средства и другие вспомогательные, дополнительные элементы упаковки, регламентированные требованиями фармакопейной статьи на конкретное лекарственное средство.

По степени защиты

Упаковка может иметь несколько слоёв защиты лекарственного средства.

Элементы первичной (внутренней) упаковки находятся в непосредственном физическом контакте с лекарственным средством и обеспечивают его защиту от влияния воздействий окружающей среды в процессе обращения лекарственного средства. В некоторых случаях первичная упаковка представляет собой специализированную систему доставки лекарственного средства, например, аэрозоль или дозирующее устройство, отрегулированное на отпуск одной дозы лекарственного средства.

Элементы вторичной (внешней) упаковки не вступают в прямой контакт с лекарственным средством, но обеспечивают необходимую защиту в целях сохранения стабильности. Вторичная упаковка содержит одну или несколько единиц первичной упаковки, в установленных случаях может содержать комплектующие средства (стаканчик мерный, насадку-капельницу, аппликатор, нож ампульный, устройство для подвешивания и др.). Вторичная упаковка, содержащая необходимую информацию для применения по назначению является потребительской упаковкой.

С целью дополнительной защиты лекарственного препарата или, исходя из особенностей его применения, первичная упаковка может быть помещена в промежуточную упаковку.

Лекарственные средства во вторичной (потребительской) упаковке могут быть помещены в групповую (объединённую) упаковку, представляющую собой, как правило, картонные коробки или стопы, с последующим обертыванием стоп бумагой, термоусадочной плёнкой в соответствии с указаниями фармакопейной статьи. При необходимости групповая упаковка может быть склеена или обвязана с использованием вспомогательных упаковочных и обвязочных средств, обеспечивающих прочность упаковки.

В случае реализации лекарственных препаратов только в лечебно-профилактических учреждениях допускают использование упаковки «для стационаров», объединяющей установленное количество лекарственных препаратов в первичной упаковке, помещённых в групповую упаковку в соответствии с указаниями фармакопейной статьи.

Каждая упаковочная единица любого вида групповой упаковки должна быть снабжена этикеткой или оклеена бандерольной лентой с нанесённой на неё маркировкой. При склеивании или обвязывании групповой упаковки концы обвязки должны быть заклеены этикеткой, обеспечивающей контроль вскрытия.

При транспортировании лекарственных средств, находящихся в потребительской или групповой упаковке, их помещают в транспортную упаковку, предназначенную для хранения и транспортирования лекарственных средств с целью защиты их от повреждений при перемещении. В установленных случаях допускается транспортировать лекарственные средства в групповой упаковке в контейнерах грузовых без укладки в транспортную упаковку.

По защите от вскрытия

Упаковка с защитой от несанкционированного вскрытия (упаковка с контролем первого вскрытия) - упаковка, предусматривающая невозможность использования её содержимого без очевидного нарушения специального элемента упаковки, необратимо изменяющегося при первом вскрытии, что позволяет отслеживать признаки любого нарушения целостности упаковки.

Упаковка с защитой от вскрытия детьми – упаковка, труднодоступная для вскрытия маленькими детьми, но возможная к использованию взрослыми людьми.

По защите от факторов внешнего воздействия

Хорошо укупоренная упаковка – упаковка, обеспечивающая защиту содержимого от попадания извне посторонних твёрдых и жидких веществ, и/или потери содержимого при обычных условиях хранения, транспортирования и реализации.

Примечание – Для данного контекста обычными считаются условия хранения в помещении при относительной влажности не более 65 % и температуре от 15 до 25 °С или, в зависимости от климатической зоны, до 30 °С, при исключении посторонних запахов, источников загрязнения и интенсивного освещения.

Плотно укупоренная упаковка – упаковка, обеспечивающая защиту содержимого от попадания извне посторонних твёрдых, жидких и газообразных веществ, и/или потери содержимого, выветривания, расплывания или испарения при обычных условиях хранения, транспортирования и реализации.

Герметично укупоренная упаковка – упаковка, обеспечивающая защиту содержимого от попадания извне посторонних веществ, и/или потери содержимого, обеспечивающая непроницаемость для твёрдых, жидких и газообразных веществ при обычных условиях хранения, транспортирования и реализации.

Если указана плотно укупоренная упаковка, её можно заменить герметично укупоренной упаковкой, но не наоборот.

Герметично запаянная упаковка – упаковка, обеспечивающая герметичность с помощью расплавления материала упаковки.

Воздухонепроницаемая упаковка – плотно укупоренная упаковка, обеспечивающая непроницаемость для воздуха, газов, паров и других газообразных веществ при обычных условиях хранения, транспортирования и реализации.

Влагонепроницаемая упаковка – плотно укупоренная упаковка, обеспечивающая непроницаемость для воды, влаги и других жидких веществ при обычных условиях хранения, транспортирования и реализации.

Если указана воздухо- или влагонепроницаемая упаковка, её можно заменить на герметично укупоренную.

Светозащитная упаковка – упаковка, обеспечивающая защиту содержимого от действия световой энергии за счёт особенных свойств используемого упаковочного материла или специального покрытия упаковки. Светонепроницаемость упаковки также можно обеспечить, помещая светопроницаемую упаковку внутрь подходящего светозащитного материала.

Изотермическая упаковка – упаковка, внутри которой сохраняется заданная температура в течение установленного времени.

Вакуумная упаковка – упаковка, внутреннее давление в которой ниже атмосферного.

По количеству использований и количеству доз

Одноразовая упаковка – упаковка, содержащая лекарственное средство в количестве, предназначенном для полного использования непосредственно после вскрытия упаковки.

Многоразовая упаковка – упаковка, содержащая лекарственное средство в количестве, которое предполагается использовать многократно по частям, последовательно отбирая содержащееся в ней лекарственное средство без изменения безопасности, качества или чистоты оставшейся части лекарственного средства до его полного использования.

Однодозовая упаковка – упаковка, содержащая лекарственный препарат в количестве, соответствующем одной или части дозы для однократного применения.

Многодозовая упаковка – упаковка, содержащая лекарственный препарат в количестве, соответствующем более одной дозы лекарственного препарата. Многодозовая упаковка может содержать лекарственный препарат в виде дозированной (содержимое упаковки распределено на дозы) и недозированной лекарственной формы. Многодозовая упаковка, содержащая лекарственный препарат в виде недозированной лекарственной формы, представляет собой многоразовую упаковку.

По типу и виду

Классификационная единица, характеризующая упаковку по материалу и конструкции, определяет тип упаковки. Классификационная единица, характеризующая упаковку по форме, определяет вид упаковки.

Ампула – первичная упаковка из медицинского бесцветного или светозащитного стекла или полимерного материала, имеющая цилиндрический корпус с вытянутой горловиной, герметично запаиваемой после наполнения лекарственным средством, с плоским или выпуклым (вогнутым) дном, открываемая исключительно путём разламывания. Содержимое предназначено для однократного применения.

Баллон – упаковка, имеющая корпус каплеобразной, шарообразной или цилиндрической формы, со сферическим или вогнутым дном, с узкой горловиной.

Баллон аэрозольный (аэрозольная упаковка) – герметично закрытая первичная упаковка из стекла, полимерных материалов или металла, имеющая корпус цилиндрической формы с узкой горловиной, укупориваемая с помощью клапанно-распылительной системы (дозирующей или недозирующей), внутри которой сохраняется заданное давление, позволяющее проводить распыление.

Баллон газовый – упаковка из металла, обычно цилиндрической формы, предназначенная для сжатого, сжиженного или растворённого газа, снабжённая устройством, регулирующим спонтанный выход газа при атмосферном давлении и комнатной температуре.

Банка – первичная упаковка из медицинского бесцветного или светозащитного стекла или из полимерного материала, имеющая корпус преимущественно цилиндрической или другой формы с горловиной, диаметр которой равен диаметру корпуса или меньше его, с плоским или вогнутым дном.

Барабан – упаковка из полимерного материала, металла или фибрового картона, имеющая корпус цилиндрической формы без обручей или зигов катания, с плоским дном и съёмной или несъёмной крышкой.

Бочка – транспортная упаковка, имеющая корпус цилиндрической или параболической формы, с обручами или зигами катания с двумя плоскими торцами (доньями) равного диаметра.

Примечание – Бочки не классифицируются как барабан.

Бутылка – первичная упаковка из медицинского бесцветного или светозащитного стекла или из полимерного материала, имеющая преимущественно цилиндрический корпус разнообразной формы, переходящий в узкую горловину, с плоским или вогнутым дном.

Бутыль – упаковка из медицинского бесцветного или светозащитного стекла или из полимерного материала с цилиндрическим корпусом, переходящим в более или менее выраженную узкую горловину, с плоским или вогнутым дном вместимостью свыше 3000 мл.

Инъекционный шприц – первичная упаковка из медицинского стекла или полимерных материалов цилиндрической формы с канюлеобразным носиком, без или с фиксированной иглой, подвижным поршнем со штоком, с защитным колпачком, обычно используемая для введения лекарственных форм для парентерального применения. Инъекционный шприц с лекарственным препаратом представляет собой предварительно наполненный шприц.

Канистра – упаковка из полимерного материала или металла с корпусом, имеющим в сечении, параллельном дну, форму, близкую к прямоугольной или многоугольной, с приспособлением для переноса, сливной горловиной и крышкой с затвором или полимерной навинчиваемой крышкой.

Примечание – Сливное отверстие и устройство для переноса обычно располагаются в верхней части корпуса или сбоку.

Картридж – первичная упаковка из медицинского стекла или полимерных материалов, обычно цилиндрической формы, подходящая для жидких или твёрдых дозированных лекарственных форм; предназначенная, главным образом, для использования в специально сконструированных аппаратах (например, шприц-ручках).

Контейнер грузовой – единица транспортного оборудования многократного применения, предназначенная для перевозки и временного хранения грузов без промежуточных перегрузок, удобная для механизированной загрузки и разгрузки, погрузки и выгрузки, внутренним объёмом, равным 1 м3 и более.

Контейнер полимерный для крови и ее компонентов однократного применения – упаковка, представляющая собой замкнутую эластичную, герметичную, стерильную систему однократного применения, предназначенную для взятия крови, разделения её на компоненты, хранения, транспортирования и переливания крови и её компонентов; состоящая из основной ёмкости для крови и дополнительных ёмкостей для компонентов крови и соединительных трубок. Контейнер полимерный для крови и её компонентов однократного применения состоит из основной ёмкости для крови и дополнительных ёмкостей для компонентов крови и соединительных трубок. Каждая ёмкость упаковки имеет штуцеры с внутренним мембранным клапаном, основная ёмкость имеет узел взятия крови. Различают упаковку, содержащую и не содержащую антикоагулянт и/или раствор консерванта, а также одно, -двух, -трёх и четырёхкамерную упаковку.

Коробка – упаковка из картона или полимерного материала, имеющая корпус разнообразной формы, с плоским дном, закрываемая клапанами, или крышкой съёмной, или на шарнире, или крышкой в форме обечайки.

Примечания

1. Коробку, выполненную из одной заготовки, закрываемую клапанами, допускается называть пачкой.

2. Коробку, закрываемую крышкой в форме обечайки, допускается называть пеналом.

Мешок – транспортная мягкая упаковка, имеющая корпус в форме рукава с дном и открытым верхом (горловиной) или закрытым верхом с клапаном.

Пакет – упаковка, произведенная на основе бумаги, фольги, полимерного материала, имеющая корпус в виде рукава с дном и открытым верхом, преимущественно гибкая, состоящая из поверхностей, без или с плоским дном, закрываемая на дне или по сторонам методом склеивания, термосваривания или сшивания; верх может быть закрыт путём сплавления материалов, в зависимости от предназначения.

Примечание – Пакет небольшой ёмкости допускают называть пакетиком, саше.

Пробирка – первичная упаковка из медицинского бесцветного стекла, полимерного материала или металла (алюминия), с цилиндрическим корпусом, с плоским или выпуклым дном, с горловиной, диаметр которой равен диаметру корпуса, укупориваемая пробкой или крышкой, вместимостью до 5 мл.

Стопа – групповая упаковка, представляющая собой наложенные одна на другую, как правило, плоские, одинаковые по размеру, потребительские упаковки, например, пачки.

Туба – первичная упаковка, изготовленная из гибких металлических, полимерных или комбинированных материалов, имеющая корпус преимущественно цилиндрической формы с узкой горловиной, укупориваемой колпачком (бушоном), и дном, закрываемым после наполнения лекарственным препаратом. Высвобождение лекарственного препарата осуществляют через горловину путём сдавливания упаковки.

Тюбик-капельница – первичная упаковка из эластичного полимерного материала с клапаном или винтовой горловиной, с защитным колпачком, обеспечивающая принудительное истечение находящегося в ней лекарственного препарата (жидкости) через каплеобразователь при надавливании на корпус упаковки.

Упаковка контурная безъячейковая (стрип) – гибкая упаковка из комбинированных материалов с лекарственным препаратом, запечатанным между двумя слоями упаковки, из которых лекарственный препарат извлекается путём разрыва упаковки.

Упаковка контурная ячейковая (блистер) – гибкая упаковка из комбинированных материалов, состоящая из двух слоёв, один из которых представляет собой термоформованные ячейки, из которых лекарственный препарат извлекается путём выдавливания или вскрытия.

Флакон – первичная упаковка из медицинского бесцветного или светозащитного стекла или полимерного материала, имеющая корпус разнообразной формы, резко переходящий в горловину, диаметр венчика которой значительно меньше диаметра корпуса, с плоским или вогнутым дном.

Флакон-капельница – система упаковки, представляющая собой флакон из медицинского бесцветного или светозащитного стекла или полимерного материала, с винтовой горловиной, укомплектованный навинчиваемой крышкой и пробкой-капельницей, обеспечивающей свободное или принудительное истечение жидких лекарственных средств с заданной скоростью.

Флакон из трубки стеклянной (из дрота) – первичная упаковка, представляющая собой флакон с гладкой горловиной и прямоугольным венчиком, предназначенный для укупоривания пробкой и алюминиевым закатываемым или обжимным колпачком, вместимостью от 5 мл до 30 мл.. Содержимое лекарственного препарата для парентерального применения из флакона, укупоренного резиновой пробкой, извлекается путём прокалывания пробки иглой.

Фляга – транспортная многооборотная упаковка, предназначенная для многократного применения, имеющая цилиндрический корпус и широкую цилиндрическую горловину, диаметр которой меньше диаметра корпуса, с приспособлением для переноса и крышкой с затвором.

Шприц-тюбик – первичная упаковка из эластичного полимерного материала с нанесённой на горловину резьбой и инъекционной иглой с защитным колпачком, обеспечивающая принудительное истечение находящегося в ней содержимого (растворов для инъекций) через иглу при сжатии корпуса упаковки.

Ящик – транспортная жёсткая упаковка с прямоугольными или многоугольными сторонами, с дном, двумя торцевыми и боковыми стенками, с крышкой или без неё.

Примечания

1. Ящик без крышки с выступающими или не выступающими угловыми планками высотой не более 130 мм допускается называть лотком.

2. Стороны ящика могут содержать отверстия для манипуляции, вентиляции, демонстрации содержимого.

Примечание – Приведённый перечень типов и видов упаковки не является исчерпывающим, он может быть дополнен в соответствии с указаниями действующих нормативных документов.

По механическим свойствам

Жёсткая упаковка – упаковка, форма и размеры которой не изменяются при наполнении или удалении содержимого.

Мягкая упаковка – упаковка, форма и размеры которой изменяются при наполнении или удалении содержимого.

Хрупкая упаковка – упаковка, чувствительная к воздействию динамических нагрузок.

Гибкая упаковка – упаковка, изготовленная из легко сгибаемых упаковочных материалов на основе бумаги, фольги, полимеров, картона.

##### Элементы упаковки

Тара – основной элемент упаковки, предназначенный для размещения лекарственных средств, конструкция которого может предусматривать наличие укупорочных средств для создания герметичности или замкнутого пространства.

Укупорочное средство – изделие, предназначенное для укупоривания упаковки и сохранения её содержимого.

Укупорочные средства имеют различный вид (форма, внешние очертания) и тип (материал и модель).

Основные виды и типы укупорочных средств:

- пробка – укупорочное средство, вставляемое внутрь горловины тары;

- крышка – укупорочное средство, закрепляемое по всему наружному периметру верха упаковки или тары;

- бушон – крышка, навинчиваемая на горловину тубы;

- пробка-крышка – укупорочное средство, состоящее их двух частей – верхней крышки и внутренней пробки;

- колпачок – укупорочное средство, надеваемое или навинчиваемое на венчик горловины тары.

Комплектующее средство – изделие, помещаемое во вторичную (потребительскую) упаковку лекарственного препарата и используемое для правильного дозирования, введения или применения лекарственного препарата.

Средство дозирования (дозатор, дозирующее устройство) – функциональное устройство для отмеривания (дозирования) заданной массы или объёма лекарственного препарата, которое может быть элементом первичной упаковки, например, элементом укупорочного средства (вставки-капельницы, глазные и назальные капельницы и др.) или элементом вторичной упаковки, т.е. комплектующим средством (мерные ложки/ложечки, мерные колпачки/стаканчики, шприцевые дозаторы, пипетки, аппликаторы вагинальные и ректальные и др.).

Градуировка средств дозирования должна быть чёткой, нестираемой. Должно быть гарантировано соответствие рекомендованной к приёму дозы лекарственного препарата той дозе, которая будет отмерена с помощью дозирующего устройства упаковки и доставлена пациенту.

Насадка-дозатор – укупорочное средство, часть которого вдавливается внутрь горловины упаковки (тары) и при надавливании на эластичный корпус этой упаковки (тары) обеспечивает принудительное истечение жидкого лекарственного препарата дозами.

Дозатор-ограничитель - функциональное устройство упаковки, предназначенное для отмеривания жидкого лекарственного препарата по объёму и препятствующее или затрудняющее повторное заполнение упаковки.

Средство доставки лекарственного препарата – функциональное устройство, элемент упаковки (укупорочного средства), обеспечивающий доставку лекарственного препарата к месту его введения.

Аэрозольный клапан – затвор для аэрозольной упаковки, сохраняющий давление внутри упаковки и позволяющий при нажатии проводить распыление упакованной продукции.

Дозирующий клапан для аэрозолей является сложным элементом упаковки, обеспечивающим дозирование и доставку лекарственного препарата к месту его введения.

Средством доставки лекарственного препарата могут быть комплектующие средства, такие как: ингалятор, небулайзер, насос для спрея. мундштук и др.

Защитное приспособление – элемент укупорочного средства, предохраняющий упаковку от несанкционированного вскрытия и обеспечивающий визуальный контроль первого вскрытия.

Защитными приспособлениями упаковки являются: диск выдвижного клапана, предохранительное кольцо, контрольное стопорное кольцо, отрывной поясок, перфорация, мембрана из фольги и т.д.

Этикетка-бандероль – элемент упаковки и маркировки, представляющий собой полосу (ленту) упаковочного материала из бумаги или комбинированных материалов, предназначенную для оклеивания (обандероливания) групповой или потребительской упаковки (коробки) по всему периметру с соединением концов полосы, для обеспечения контроля первого вскрытия и последующего нанесения маркировки на полосу (бандероль).

Герметизирующее приспособление – элемент укупорочного средства, предохраняющий содержимое упаковки от потери и от воздействия внешних климатических факторов (крышки самоуплотняющиеся, крышки с герметизирующими прокладками, крышки со вставкой из силикагеля и др.).

Прокладка уплотнительная – элемент упаковки, представляющий собой плоский или рельефный горизонтальный вкладыш в виде диска или кольца, предназначенный для плотного соединения (герметизации) укупорочного средства с поверхностью тары.

Вспомогательные элементы первичной упаковки используют для поддержания и улучшения выполнения упаковкой предусмотренных функций.

Вкладыши, уплотнители, уплотнители-амортизаторы, наполнители – вспомогательные элементы, помещаемые внутрь первичной упаковки с лекарственным препаратом в виде твёрдой лекарственной формы, с целью предохранения содержимого упаковки от разрушения из-за перемещений, ударов, соприкосновений.

Осушители, влагопоглотители – вспомогательные элементы, помещаемые внутрь первичной упаковки с лекарственным препаратом в виде твёрдой лекарственной формы, а также помещаемые, как правило, между первичной и промежуточной упаковками фармацевтических субстанций, с целью защиты содержимого упаковки лекарственного средства от влаги атмосферного воздух и/или удаления влаги из воздуха упаковки.

##### Общие требования к упаковке лекарственных средств

Упаковка лекарственного средства должна быть надлежащего качества.

Упаковка и составляющие систему упаковки/укупорки элементы (тара, укупорочные средства и др.), должны быть выполнены в соответствии с требованиями действующих в Российской Федерации стандартов по утверждённым в установленном порядке нормативным документам (и/или чертежам) на упаковку (тару, укупорочные средства и др.) для конкретных видов продукции. Форма (конструкция), размеры, допустимые отклонения от размеров упаковки и составляющих её элементов, а также регламентируемые показатели качества и безопасности упаковки и элементов упаковки, должны отвечать требованиям действующих стандартов.

Для производства упаковки и составляющих её элементов должны применять упаковочные материалы, пригодные для контакта с упаковываемой продукцией, в соответствии с требованиями, указанными в соответствующих общих фармакопейных статьях, стандартов и технической документации на конкретные виды упаковки и рекомендациями по использованию определенных видов упаковочных материалов для упаковки лекарственных средств. Упаковочные материалы должны быть нетоксичными, совместимыми с лекарственными средствами, пригодными для производства первичной упаковки с учётом способа/пути введения и применения лекарственных препаратов, для которых первичная упаковка предназначена.

Физико-химические и механические свойства упаковочных материалов, используемых для первичной и вторичной упаковки фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов определяют на стадии фармацевтической разработки и производственного процесса лекарственных средств в соответствии с нормативными документами на упаковочные материалы.

Для каждой серии упаковываемых лекарственных средств упаковка должна быть аналогичной.

Упаковка лекарственных средств должна быть чистой, сухой, без посторонних запахов.

Упаковка должна обеспечить сохранение эффективности, качества и безопасности лекарственного средства на всех этапах его обращения: она не должна приводить к потере лекарственного средства, в том числе, посредством диффузии или проникновения лекарственного средства через неё; быть достаточно прочной, чтобы удерживать содержимое при использовании; не изменяться под действием компонентов лекарственного препарата.

Упаковка должна обладать свойствами, защищающими лекарственное средство от неблагоприятного воздействия факторов внешней среды, способных повлиять на его качество или эффективность, таких как свет, температура, атмосферные газы и пары воздуха (кислород, углерода оксиды, влага и др.), микробиологическое загрязнение; а также препятствовать проницаемости (проникновению) указанных факторов к лекарственному средству через материалы упаковки и укупорочные средства. Упаковка должна защищать лекарственное средство от физического (механического) повреждения.

Упаковка должна обеспечивать сохранение массы (объёма), качества и стабильности лекарственного средства в течение установленного срока годности в заявленных условиях хранения.

Выбранные вид и тип упаковки не должны взаимодействовать физически или химически с лекарственным средством, находящимся внутри упаковки, так как это может привести к изменению качества последнего.

Выбранные для упаковки лекарственного препарата укупорочные средства должны быть инертны по отношению к содержимому упаковки, обеспечивать надёжность укупорки, не быть причиной нежелательного взаимодействия между содержимым упаковки и внешней средой.

Между элементами первичной упаковки и компонентами лекарственного средства, включающими действующие и вспомогательные вещества, в том числе растворители, используемые в различных лекарственных формах, возможно множество вероятных взаимодействий, включая:

- высвобождение (например, выщелачивание) химических веществ из элементов упаковки;

- высвобождение видимых/невидимых частиц;

- абсорбция или адсорбция компонентов лекарственного средства материалами упаковки и её элементами;

- химическое взаимодействие между лекарственным средством и элементами упаковки;

- разрушение элементов упаковки при контакте с лекарственным средством;

- влияние производственного процесса (например, стерилизации) на упаковку и т.д.

Упаковка должна обеспечить соблюдение условий хранения лекарственного средства в соответствии с разделом «Хранение» фармакопейной статьи.

Маркировка, нанесённая на упаковку, должна обеспечить идентификацию лекарственного средства и предоставить установленный нормативными документами объём информации о лекарственном средстве потребителю и специалистам, осуществляющим с ним работу.

Упаковка должна способствовать защите потребителя от подделки, фальсификации, предотвращения вскрытия лекарственного средства до использования, а также обеспечить удобство и безопасность при его использовании. Должно быть обеспечено дозированное или поштучное извлечение лекарственного препарата из многодозовой упаковки.

Упаковка должна иметь эстетичный внешний вид, быть удобной для транспортирования и хранения, экономичной и соответствовать современным экологическим нормам, требовать минимальных затрат на утилизацию.

Упаковка, предназначенная для наркотических и психотропных лекарственных средств, радиофармацевтических лекарственных препаратов и некоторых других лекарственных средств, должна соответствовать требованиям, предъявляемым к ней соответствующими Федеральными законами и нормативно-правовыми актами Российской Федерации.

##### Упаковочные материалы

Упаковочный материал – любой материал, предназначенный для производства упаковки и элементов упаковки фармацевтической субстанции, лекарственного препарата, вспомогательного вещества или промежуточной продукции.

Основными упаковочными материалами для лекарственных средств являются стекло, полимерные и эластомерные материалы, металл, бумага, картон. Упаковочные материалы, состоящие из двух и более видов сырья, относят к комбинированным упаковочным материалам.

Стекло

Стекло является упаковочным материалом для производства одного из основных элементов первичной упаковки лекарственных средств – стеклянной тары.

Для производства упаковки для фармацевтического применения используют различные марки (типы) стекла медицинского, отличающиеся между собой по химическому составу. Выбор марки стекла зависит от физико-химических свойств, способа применения и других характеристик лекарственного средства и/или лекарственной формы, контактирующих со стеклом.

Химический состав, физико-химические свойства стекла медицинского должны соответствовать установленным требованиям, перечень и критерии приемлемости которых зависят от марки стекла медицинского (от предполагаемого использования). Характеристика и классификация марок и типов стекла, используемого для производства упаковки для фармацевтического применения, особенности производства упаковки из стекла, а также основные требования к упаковке из стекла по содержанию мышьяка и светопропусканию регламентированы ОФС «Упаковка для фармацевтического применения из стекла», требования по объёму наполнения и гидролитической устойчивости - ОФС «Гидролитическая стабильность упаковки из стекла».

Полимерные материалы

Полимерные материалы широко применяют в производстве упаковки для лекарственных средств и различных элементов упаковки – тары, укупорочных средств, средств дозирования и доставки, вспомогательных упаковочных средств и др.

Для лекарственных средств в качестве упаковочных материалов используют только определенные виды и марки полимерных материалов. При выборе подходящего вида и марки полимерного материала, предназначенного для производства упаковки и её элементов для конкретного лекарственного средства, необходимо иметь информацию о его химическом составе, физико-химических и токсикологических свойствах, чтобы оценить потенциальный риск при использовании в качестве упаковочного материала, особенно для производства первичной упаковки.

Для производства упаковки для фармацевтического применения и её элементов используют различные полимерные материалы: полиэтилен низкого и высокого давления и их смеси, полипропилен, полиолефины, поливинилхлорид пластифицированный и непластифицированный, полиэтилентерефталат, полиэтиленвинилацетат, поликарбонат, полиамид 6 и др.

Требования, предъявляемые к полимерным материалам, используемым в фармацевтической практике, зависят от назначения производимой упаковки и её элементов, при этом наиболее жёсткие требования предъявляют к полимерным материалам для упаковки, предназначенной для лекарственных препаратов для парентерального и офтальмологического применения. Первичная упаковка из полимерных материалов для лекарственных препаратов в виде растворов для парентерального применения представляет собой флакон, бутылку или пакет, помещённый, в установленных случаях, в мешок из пленки полимерной. По сравнению со стеклянной, полимерная упаковка имеет некоторые преимущества: она небьющаяся, гибкая и легкая, что особенно важно в случае выбора упаковки для растворов для парентерального применения. Вместе с тем, при выборе упаковки для лекарственных препаратов в виде растворов для парентерального применения следует учитывать свойство полупроницаемости полимерных упаковочных материалов.

Полимерные материалы, используемые для упаковки, предназначенной для лекарственных препаратов для парентерального, офтальмологического применения, парентерального питания, должны соответствовать требованиям, указанным в следующих общих фармакопейных статьях:

- «Упаковочные материалы на основе полиэтилена без добавок для лекарственных препаратов парентерального и офтальмологического применения»;

- «Упаковочные материалы на основе полиэтилена с добавками для лекарственных препаратов парентерального и офтальмологического применения»;

- «Упаковочные материалы на основе полипропилена для парентеральных и офтальмологических лекарственных форм»;

- «Упаковочные материалы на основе полиолефинов для лекарственных средств»;

- «Упаковочные материалы на основе полиэтиленвинилацетата для лекарственных препаратов для парентерального питания»;

- «Упаковочные материалы на основе пластифицированного поливинилхлорида для водных растворов для инфузий».

Полимерные материалы, используемые для упаковки, предназначенной для лекарственных препаратов непарентерального применения, должны соответствовать требованиям, указанным в следующих общих фармакопейных статьях:

- «Упаковочные материалы на основе непластифицированного поливинилхлорида для непарентеральных водных растворов»;

- «Упаковочные материалы на основе непластифицированного поливинилхлорида для лекарственных препаратов в твёрдой лекарственной форме для приёма внутрь»;

- «Упаковочные материалы и упаковка на основе полиэтилентерефталатов для лекарственных средств»;

- «Упаковочные материалы на основе поликарбонатов для лекарственных средств»;

- «Упаковочные материалы на основе полиамида 6 для лекарственных средств».

В состав упаковочных полимерных материалов могут быть включены специальные добавки, представляющие собой антиоксиданты, стабилизаторы, пластификаторы, смазывающие вещества, красители, модификаторы ударной прочности и др. Перечень добавок, допустимых для использования в полимерных материалах для фармацевтического применения, с указанием формулы вещества и возможных наименований по номенклатуре IUPAC, по правилам номенклатуры химических соединений Химической реферативной службы (CAS) с указанием регистрационного номера, приведён в ОФС «Добавки к полимерным материалам для фармацевтического применения». В ОФС «Силиконовые масла, используемые в качестве смазывающей добавки» приведена характеристика указанной добавки и требования к ее качеству.

Первичная упаковка из полимерных материалов, как правило, укомплектована полимерными укупорочными средствами, представляющими собой различные конструкции крышек и пробок с дозирующими, герметизирующими и другими устройствами. Упаковка и элементы упаковки из полимерных материалов должны соответствовать требованиям действующих стандартов на этот вид упаковки и элементов упаковки. Показатели качества и критерии приемлемости установлены в нормативных документах для конкретных видов упаковки в зависимости от её назначения и характера упаковываемых лекарственных средств. Основные общие требования к упаковке и укупорочным средствам из полимерных материалов, а также дополнительные требования к упаковке, предназначенной для водных растворов для инфузий, указаны в следующих общих фармакопейных статьях:

- «Упаковка и укупорочные средства из полимерных материалов для фармацевтического применения»;

- «Упаковка из полимерных материалов для водных растворов для инфузий».

Эластомерные материалы

В фармацевтической практике резиновые и силиконовые эластомерные материалы используют, в основном, как упаковочный материал для производства укупорочных средств и соединительных трубок некоторых видов первичной упаковки.

Эластомерные материалы представляют собой сложный многокомпонентный полимерный эластичный материал, включающий эластомерную составляющую и различные добавки. Основные свойства и характеристики эластомерного материала существенно зависят от состава и типа вулканизации (сшивания) её базового эластомера, а также от добавок, вводимых для обеспечения заданных свойств (ускорители, наполнители, пластификаторы, мягчители, стабилизаторы, антиоксиданты и др.), которые могут составлять до 50 % эластомерной смеси. В производстве резиновых пробок, предназначенных для упаковки лекарственных средств, наибольшее использование имеет резиновая смесь на основе бутилкаучуков и галобутилкаучуков (хлор-бутилового и бром-бутилового каучука). Силиконовый эластомер получают поперечным сшиванием линейного полисилоксана, в качестве обязательной добавки используют кремния диоксид.

При выборе марки материала для производства резиновых и силиконовых укупорочных средств и соединительных трубок необходимо учитывать возможность отрицательного влияния состава эластомерной смеси на эффективность, чистоту, стабильность и безопасность лекарственного средства. Резиновые и силиконовые укупорочные средства, предназначенные для укупорки лекарственных средств, должны по своим физико-химическим, биологическим и функциональным свойствам соответствовать требованиям действующих стандартов. Если резиновые или силиконовые укупорочные средства являются элементом первичной упаковки и предназначены для прямого контакта с лекарственным средством, то необходимо иметь информацию о наличии частиц, которые могут попасть в лекарственное средство с поверхности пробок.

Характеристика силиконовых и резиновых эластомерных материалов, применяемых для производства укупорочных средств и соединительных трубок для упаковки лекарственных средств, требования к качеству эластомерных материалов и отдельных элементов упаковки из эластомерных материалов, включая испытание резиновых укупорочных средств на соответствие функциональных параметров (проницаемость, фрагментация, самозакупорка), приведены в ОФС «Резиновые укупорочные средства для упаковки водных парентеральных лекарственных препаратов, порошков и лиофилизированных порошков» и ОФС «Силиконовые эластомеры для укупорочных средств и трубок».

Металл

Для производства упаковки и некоторых элементов упаковки лекарственных средств в качестве упаковочного материала используют стальные и алюминиевые сплавы металлов.

Алюминий является основным компонентом алюминиевых сплавов, используемых для получения первичной упаковки (баллонов аэрозольных, туб, банок, пробирок и др.), транспортной упаковки (барабанов, бочек, фляг), укупорочных средств (колпачков, крышек) и других элементов упаковки.

Алюминиевую фольгу используют в производстве гибкой контурной упаковки, различных герметизирующих и защитных элементов упаковки, а также совместно с бумагой и/или полимерным материалом применяют для производства комбинированной упаковки.

Из стали различных марок, включая нержавеющую сталь, выпускают в основном крупногабаритную упаковку – бочки, фляги и др. Жесть, представляющую собой сплав стали с соответствующим покрытием из металла, используют в основном для производства первичной упаковки – банок металлических, жестяных и крышек для них.

По сравнению с упаковкой из полимерных материалов и стекла, упаковка из металлов является более прочной, непроницаемой для газов, небьющейся, обеспечивает хорошую защиту упаковки от вскрытия.

Соответствующие марки сплавов металлов рекомендованы для производства упаковки для лекарственных препаратов, выпускаемых в виде лекарственных форм под давлением, например, аэрозолей, пен, сжиженных газов и др. Вместе с тем, металл не предназначен для производства первичной упаковки лекарственных препаратов для парентерального применения.

Колпачки алюминиевые, используемые в качестве укупорочного средства, закатываемого или обжимного на горловине бутылки или флакона после заполнения их лекарственным средством и укупорки резиновыми пробками, обеспечивают герметичность укупорки и контроль первого вскрытия и могут быть выполнены либо из алюминиевой фольги, либо из двух материалов – алюминия и полимерного материала (полипропилена) с добавлением красителей.

Выбор марок металлов для производства упаковки и элементов упаковки, предназначенных для лекарственных средств, осуществляется в соответствии с указаниями действующих стандартов на конкретный вид упаковки.

Выбранные материалы должны обладать физико-механическими свойствами, обеспечивающими устойчивость к воздействию неблагоприятных факторов технологических процессов их производства, транспортирования, хранения и использования. По показателям безопасности материалы должны соответствовать действующим техническим регламентам или санитарным правилам, нормам и гигиеническим нормативам.

Форма, внешний вид, основные параметры и размеры, вместимость, масса, а также другие показатели качества готовой упаковки (элемента упаковки), должны соответствовать требованиям действующих стандартов на этот вид упаковки (элемент упаковки).

Бумага и картон

Для производства первичной и вторичной упаковки для лекарственных средств применяют определенные марки различных видов бумаги ‒ бумага парафинированная, пергамент растительный и др. Картон (картон для потребительской тары, картон гофрированный и др.) чаще всего применяют при производстве вторичной (потребительской), групповой или транспортной упаковки (коробок, пачек и др.).

Качество бумаги и картона, используемых в производстве упаковки для лекарственных средств, должны соответствовать требованиям действующих стандартов, а показатели качества упаковки, выполненной с использованием этих материалов, должно соответствовать документации на этот вид и тип упаковки, утверждённой в установленном порядке.

Комбинированные упаковочные материалы

Бумага, картон, фольга, полимерные материалы являются основой для производства комбинированных упаковочных материалов, используемых для производства упаковки: первичной (гибкие контурные упаковки (блистеры, стрипы), тубы и др.), вторичной (пачки, коробки и др.), групповой и др.

Комбинированный материал на основе бумаги или картона представляет собой двух- или многослойный материал, в котором бумага или картон прочно соединены склеиванием, припрессовкой или иными способами с полимерными пленками, алюминиевой фольгой или другими материалами в различных сочетаниях слоев, с дополнительной поверхностной обработкой слоёв или без неё.

Примечание – Склеенные слои бумаги и картона не являются комбинированными материалами.

Комбинированные материалы на основе фольги представляют собой трёх- или четырёхслойный материал, включающий алюминиевую фольгу, полиэтиленовую плёнку и бумагу в различных сочетаниях в зависимости от марки материала.

Ламинат – комбинированный упаковочный материал, используемый в производстве туб для лекарственных препаратов, представляет собой многослойный материал, состоящий из срединного барьерного слоя (алюминиевой фольги или полимерного материала), внешнего и внутреннего слоёв из полимерных материалов (полиэтилен) и двух адгезионных слоёв, которые связывают вместе три основных слоя.

##### Критерии выбора упаковки

При выборе оптимальной упаковки и её элементов, включающих упаковочные материалы, тару, укупорочные средства и др., образующих систему упаковки/укупорки для конкретного лекарственного средства, необходимо учитывать:

- назначение упаковки (первичная, вторичная (потребительская), групповая и т.д.);

- предназначение упаковываемого лекарственного средства и его количество;

- свойства фармацевтической субстанции и компонентов лекарственного препарата, включая действующие и вспомогательные вещества, в том числе, растворители;

- свойства лекарственной формы лекарственного препарата;

- совместимость каждого элемента первичной упаковки с компонентами лекарственного средства;

- требуемую степень защиты лекарственного средства от влияния внешних факторов (атмосферных, микробиологических, физических) на всех этапах обращения, включая хранение, транспортирование и реализацию;

- защитные характеристики упаковочных материалов, тары, укупорочных средств, конструкции упаковки и т.п.,

- продолжительность хранения лекарственного средства;

- метод наполнения упаковки;

- способ маркировки лекарственного средства;

- удобство использования упаковки лекарственного препарата для потребителя (количество доз, параметры упаковки, способ открывания/закрывания, разборчивость маркировки, способ дозирования и применения лекарственного препарата).

Выбор надлежащей системы упаковки/укупорки, способной обеспечить требуемую стабильность лекарственного средства в течение определённого периода времени, решается производителем (разработчиком) в процессе исследования стабильности на стадии разработки лекарственного средства (ОФС «Стабильность и сроки годности лекарственных средств»).

При выборе системы упаковки/укупорки для лекарственных средств необходимо использовать представленные в настоящей общей фармакопейной статье данные о видах и типах упаковки, тары, укупорочных средств, упаковочных материалов и прочих элементов упаковки.

Выбранная система упаковки/укупорки должна соответствовать требованиям раздела «Общие требования к упаковке» настоящей общей фармакопейной статьи в течение всего заявленного срока годности лекарственного средства. Содержимое выбранной системы упаковки/укупорки может быть предназначено для последующего производства/изготовления лекарственных средств (фармацевтические субстанции, вспомогательные вещества), для окончательной фасовки и последующей маркировки (нерасфасованные лекарственные средства), для распределения медицинским персоналом по назначению стационарным больным (лекарственные препараты «для стационаров»), для индивидуального приёма пациентом (лекарственные препараты).

Упаковка лекарственных препаратов, изготовленных аптечными организациями, должна соответствовать правилам изготовления и отпуска лекарственных препаратов, утверждённым уполномоченным федеральным органом исполнительной власти.

Упаковка лекарственных средств, предназначенных для экспорта, должна соответствовать требованиям договора (контракта) поставщика с внешнеэкономической организацией или иностранным покупателем.

При выборе упаковки для лекарственных средств и вспомогательных веществ, обладающих опасными свойствами (огнеопасные, взрывоопасные, радиофармацевтические, едкие, коррозионные, газы сжатые и сжиженные и др.) следует руководствоваться указаниями фармакопейной статьи на такие лекарственные средства и требованиями соответствующих Федеральных законов и нормативно-правовых актов Российской Федерации.

Лекарственные средства, содержащие летучие, выветривающиеся, гигроскопические или окисляющиеся вещества, должны быть упакованы в банки или флаконы, укупоренные навинчивающимися крышками в комплекте с пробками или прокладками с уплотнительными элементами; пробками с уплотнительными элементами; закатываемыми металлическими колпачками в комплекте с пробками или прокладками с уплотнительными элементами, закатываемыми металлическими крышками. Каждое лекарственное средство, содержащее летучее вещество или обладающее запахом, должно быть упаковано отдельно от прочих лекарственных средств.

Лекарственные средства, чувствительные к воздействию света, должны быть упакованы в светонепроницаемую тару. Защиту от света также можно обеспечить, помещая лекарственное средство в упаковке, проницаемой для света, внутрь подходящего светозащитного материала.

В качестве первичной упаковки для фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ рекомендованы банки, бутыли из медицинского бесцветного и светозащитного стекла или банки и канистры из полимерных материалов; пакеты и мешки из полимерных, комбинированных материалов или бумаги; бидоны металлические; баллоны газовые и т.п. Вторичной упаковкой являются барабаны, бочки, ящики, коробки и другая упаковка; групповая упаковка для фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ может отсутствовать.

Выбор надлежащей упаковки для фармацевтической субстанции также зависит от её массы (объёма), поступающей в обращение. В случае необходимости использования ёмкостей больших объёмов для хранения и транспортирования некоторых фармацевтических субстанций, например, спирта этилового, выбор материала первичной упаковки, способной обеспечить требуемую стабильность фармацевтической субстанции в течение определенного периода времени, решается производителем (разработчиком) на стадии разработки лекарственного средства.

При выборе упаковки для фармацевтических субстанций, предназначенных для производства/изготовления стерильных лекарственных препаратов, необходимо обеспечить их максимальную защиту от микробиологического загрязнения, в установленных случаях – обеспечить стерильность.

Для фармацевтических субстанций используют, как правило, плотно укупоренную или герметично укупоренную, при необходимости дополнительно, светонепроницаемую, упаковку. Для вспомогательных веществ, обычно имеющих крупно-объёмную (крупногабаритную) фасовку, подходящей, по умолчанию, является плотно укупоренная упаковка.

При выборе первичной и вторичной (потребительской) упаковки лекарственного препарата и оценке удобства её использования потребителем, необходимо учитывать, что такие упаковки, как однодозовая, одноразовая, а также многодозовая, содержащая лекарственный препарат в виде дозированной лекарственной формы, гарантируют более безопасное применение лекарственного препарата, уменьшают вероятность ошибки при применении, то есть являются более практичными для пациента. Одноразовая упаковка также может быть полезна для лекарственных препаратов, имеющих ограниченный срок годности.

Укупорочные средства выбранной системы упаковки/укупорки должны способствовать быстрому и безопасному использованию лекарственных препаратов. Они могут быть удаляемыми или не удаляемыми. Тип упаковки, который не требует удаления укупорочного средства во время применения, является более предпочтительным, так как такая система упаковки/укупорки минимизирует риск микробиологического и иного загрязнения и/или фальсификации лекарственного препарата.

Упаковка может иметь повторно закрывающееся укупорочное средство или представлять собой упаковку без возможности повторного закрытия, т.е. упаковку, укупоренную методом запаивания, склеивания, термосваривания и т.д.

При выборе упаковки лекарственного препарата необходимо учитывать классификационные признаки, свойства лекарственной формы, в виде которой он будет использоваться, т.е. агрегатное состояние, способ/путь введения/применения, количество доз (ОФС «Лекарственные формы»), условия производства/изготовления и другие характеристики лекарственного препарата.

Особенности упаковки твёрдых лекарственных форм

Первичной многодозовой упаковкой для твёрдых, как правило, недозированных лекарственных форм, могут быть банки, флаконы, пробирки из медицинского бесцветного или светозащитного стекла, полимерного материала или металла, укупоренные пробками, крышками, колпачками, имеющими, как правило, уплотнители-амортизаторы.

Для твёрдых дозированных лекарственных форм первичной многодозовой упаковкой, имеющей перфорации или ячейки для вмещения индивидуальных доз твёрдых лекарственных форм, являются упаковки контурные – стрипы и блистеры, изготовленные из фольги алюминиевой, комбинированных материалов на основе фольги, бумаги, полимерных материалов, укупоренные методом термосваривания.

В качестве первичной однодозовой упаковки для порошков и гранул, как правило, используют пакетики, саше из комбинированных материалов на основе бумаги, алюминиевой фольги полимерных материалов, укупоренных методом термосваривания.

Упаковка твёрдых лекарственных форм должна быть хорошо или плотно укупоренной, обеспечивающей защиту от микробиологического загрязнения и от того вида атмосферного фактора, к которому чувствителен содержащийся в упаковке лекарственный препарат.

Чувствительные к действию влаги шипучие твёрдые лекарственные формы (таблетки, гранулы, порошки) должны храниться в плотно укупоренной упаковке, обеспечивающей защиту от проникновения влаги (влагонепроницаемой). Упаковка таких лекарственных форм может содержать влагопоглощающие агенты, например, силикагель (ОФС «Вспомогательные элементы первичной упаковки для лекарственных форм»).

Если в состав гранул и других твёрдых лекарственных форм входят летучие вещества или вещества, требующие защиты от воздействия воздуха, то упаковка должна быть воздухонепроницаемой. Таблетки, содержащие эфирные масла и упаковываемые в пробирки, должны быть завернуты в парафинированную бумагу или пергамент.

Первичная упаковка суппозиториев представляет собой ячейковую или безъячейковую контурную упаковку или ячейковую контурную упаковку с открытым хвостиком из комбинированных материалов с различными покрытиями и разными размерами, укупоренную методом термосваривания.

Вторичной (потребительской) упаковкой для твёрдых лекарственных форм является, как правило, пакет, пачка или коробка.

Особенности упаковки мягких лекарственных форм и пластырей

Упаковка мягких лекарственных форм должна быть хорошо укупоренной, обеспечивающей защиту от микробиологического загрязнения и от того вида атмосферного фактора, к которому чувствительно содержащийся в упаковке лекарственный препарат.

Первичной многодозовой упаковкой для мягких лекарственных форм наиболее часто являются тубы из гибких материалов – металла (алюминия), полимерных или комбинированных материалов, укупоренные бушонами, крышками, колпачками из полимерных материалов; реже используют банки из стекла медицинского бесцветного или светозащитного, укупоренные пластмассовой крышкой с прокладкой или без прокладки.

При выборе туб для упаковки, предпочтительно использование металлических туб с внутренним лаковым покрытием или туб из полимерных материалов с защитной мембраной и латексным кольцом. Применение туб для упаковки мягких лекарственных форм обеспечивает защиту лекарственного препарата от микробного загрязнения при его использовании, возможность снабжения упаковки средством доставки к месту нанесения лекарственного препарата, защитным приспособлением и другими необходимыми элементами, комплектующими средствами.

Упаковка стерильных мягких лекарственных форм должна быть герметично укупоренной и обязательно иметь защитное приспособление для контроля первого вскрытия. Упаковка мягких лекарственных форм, предназначенных для назального, ушного, вагинального или ректального применения может иметь дополнительное устройство для введения лекарственного препарата или укомплектована соответствующим аппликатором.

Первичной упаковкой для пластырей, могут быть безъячейковые контурные упаковки различных размеров, а также укупоренные соответствующим образом пачки, пакеты с клапаном, банки из полимерных материалов. Каждый пластырь трансдермальный и пластырь медицинский должен быть помещён в индивидуальную первичную упаковку.

Тубы, банки и контурные упаковки с мягкими лекарственными формами или пластырями помещают, как правило, во вторичную (потребительскую) упаковку, представляющую собой пачку или коробку.

Особенности упаковки жидких нестерильных лекарственных форм

Первичная многодозовая упаковка для жидких нестерильных недозированных лекарственных форм наиболее часто представляет собой различного объёма и дизайна флаконы из бесцветного или светозащитного стекла или полимерного материала, укупоренные средствами (крышками, пробками и др.), имеющими или не имеющими защиту от несанкционированного вскрытия, а также устройство с защитой от вскрытия детьми.

Элементом укупорочного средства многодозовой упаковки лекарственных препаратов для приёма внутрь, представляющих собой жидкие недозированные лекарственные формы, является дозирующее (мерное) устройство для отмеривания, в том числе каплями, предписанной дозы лекарственного препарата. Дозирующее устройство также может быть самостоятельным элементом упаковки (комплектующим средством) – ложка мерная, стаканчик мерный, пипетка и др.

Первичная упаковка суспензий и эмульсий для приёма внутрь может быть однодозовой, снабжённой при необходимости приспособлением, обеспечивающим удобство применения лекарственного препарата, а также устройством с защитой от вскрытия детьми.

Флаконы с жидкими нестерильными лекарственными формами помещают, как правило, во вторичную (потребительскую) упаковку, представляющую собой пачку или коробку.

Особенности упаковки аэрозолей, пен, спреев, лекарственных форм для ингаляций

Первичная упаковка для аэрозолей, пен представляет собой, как правило, аэрозольный баллон металлический или стеклянный с защитным полимерным покрытием, для спреев – это может быть флакон из полимерных материалов. Укупорочным средством и одновременно средством доставки и дозирования лекарственного препарата из аэрозольного баллона служит нажимной (распылительный) клапан, который может быть как непрерывного действия, так и дозирующий. В систему упаковки также входит предохранительный колпачок, в некоторых случаях – распылительная насадка (распылитель).

Системы распыления и дозирования аэрозолей, пен, спреев могут быть различных типов и видов, например, флакон может быть укупорен обжимным микроспеером с дозатором и распылительной насадкой с направляющей трубкой и др. устройствами.

Упаковка лекарственных форм для ингаляций может включать дозирующее устройство и может быть многодозовой или однодозовой.

Упаковка для дозированных порошков для ингаляций представляет собой индивидуальные ингаляторы: капсульные, резервуарные, мультидозированные − обеспечивающие дозирование и введение (доставку) действующего вещества в дыхательные пути.

Вторичной (потребительской) упаковкой для аэрозолей, пен, спреев, лекарственных форм для ингаляций являются пачки из картона.

Особенности упаковки стерильных лекарственных форм, в том числе, лекарственных форм для парентерального, для офтальмологического применения

Выбор упаковки стерильных лекарственных форм зависит от технологии производства лекарственного препарата, его назначения и других факторов. В соответствии с технологическим процессом лекарственные препараты в виде стерильных лекарственных форм могут быть подвергнуты окончательной (финишной) стерилизации, или получены в условиях асептического производства, или произведены по технологии «выдувание-наполнение-стерилизация» и др. Упаковка лекарственных препаратов, подвергаемых окончательной стерилизации, должна позволять стерилизовать лекарственные препараты, как минимум, одним из указанных в ОФС «Стерилизация» методом.

Для стерильных лекарственных форм для парентерального применения используют различные типы и виды первичной упаковки:

- запаянные ампулы различной конфигурации из стекла и полимерного материала;

- флаконы из дрота или стекломассы, укупоренные резиновыми пробками, обжатые колпачками;

- бутылки для крови, трансфузионных и инфузионных препаратов из стекла, укупоренные резиновыми пробками, обкатанные алюминиевыми колпачками, или двумя колпачками, или с алюминиевой прокладкой и двумя алюминиевыми колпачками;

- бутылки (флаконы) из полимерного материала, герметично запаянные;

- пакеты (мешки) из полимерного материала, герметично запаянные;

- шприц-тюбики;

- предварительно наполненные шприцы;

- картриджи и др.

Упаковка стерильных лекарственных форм для парентерального применения может быть однодозовой (ампулы, картриджи, шприц-тюбики, предварительно наполненные шприцы, пакеты) или многодозовой (флаконы, бутылки).

Если не указано другое в фармакопейной статье, упаковка лекарственных препаратов в виде стерильных лекарственных форм для парентерального применения должна быть достаточно прозрачной для проведения визуальной оценки содержимого, за исключением упаковки для имплантатов.

Первичные упаковки стерильных лекарственных форм для парентерального применения должны быть укупорены соответствующими способами (запайка; укупорка резиновой или силиконовой пробкой, обжатой колпачком), прошедшими валидацию. Используемые эластомерные укупорочные средства могут быть различными по форме, размеру, иметь специальный дизайн, что обусловлено производственными процессами, например, такими как лиофилизация. Резиновые и силиконовые укупорочные средства должны быть достаточно эластичными, прочными, чтобы в случае прокалывания их иглой сохранялась целостность и обеспечивалась герметичность упаковки после извлечения иглы из укупорочного средства. Система укупоривания первичной упаковки лекарственных форм для парентерального применения резиновыми и силиконовыми пробками считается целостной только после того, как на укупоренной пробкой упаковке (флаконе, бутылке) будет обжат (закатан) колпачок. Колпачки алюминиевые или полимерные являются, как правило, контролем первого вскрытия упаковки со стерильной лекарственной формой.

Потребительской упаковкой стерильных лекарственных форм для парентерального применения являются коробки (включая коробки с перегородками), пачки; при этом лекарственные формы в первичной упаковке (ампулы, флаконы, картриджи и др.) предварительно могут быть помещены в промежуточную упаковку (блистеры и др.).

При упаковывании ампул с хлорэтилом допускается применять в качестве амортизатора медицинский алигнин.

В соответствии с фармакопейной статьёй потребительская (внешняя) упаковка на конкретный лекарственный препарат для парентерального применения может содержать первичную упаковку на лекарственную форму для инъекций в комплекте с первичной упаковкой с растворителем.

В упаковку с ампулами, не имеющими кольца излома, должно быть вложено приспособление для вскрытия ампул – нож ампульный, скарификатор и т.п.

Имплантаты и таблетки для имплантации упаковывают в индивидуальные стерильные упаковки.

Для стерильных лекарственных форм для офтальмологического применения используют однодозовую и многодозовую упаковку с защитой от несанкционированного вскрытия.

Первичная упаковка глазных капель представляет собой стерильные флаконы, флаконы-капельницы, тюбик-капельницы объёмом не более 10 мл, если в фармакопейной статье не указано другое. Однодозовая упаковка глазных капель обеспечивает сохранение стерильности содержимого и дозирующего устройства до момента использования.

Первичная упаковка глазных мазей и гелей представляет собой стерильные, сжимаемые тубы со встроенным или приложенным наконечником, содержимое упаковки, если .не указано другое – не более 10 г.

Объём глазной примочки в многодозовой упаковке должен быть не более 200 мл, если нет других указаний в фармакопейной статье.

Каждую глазную пленку/имплантат перед помещением в блистеры, пеналы и т.д. упаковывают индивидуально.

Суспензии и эмульсии для парентерального применения, в форме капель глазных или предназначенных для нанесения на поврежденную кожу, выпускают в стерильной воздухонепроницаемой герметичной упаковке.

Для обеспечения требуемой защиты лекарственного средства от влияния внешних факторов, при выборе упаковки необходимо знать и учитывать защитные свойства элементов упаковки – упаковочных материалов, укупорочных средств.

Упаковочные материалы из стекла и металла, комбинированный упаковочный материал на основе алюминиевой фольги защищают содержимое упаковки от улетучивания (испарения, проницаемости), влаго- и газообмена, от проникновения микроорганизмов извне.

Полимерные материалы и комбинированные материалы на основе бумаги и картона обеспечивают защиту содержимого упаковки от проникновения атмосферной микрофлоры; степень защиты лекарственных средств от улетучивания, влаго-, паро- и газопроницаемость этих материалов зависят как от вида применяемого упаковочного материала, так и от свойств действующих и вспомогательных веществ, входящих в состав лекарственного препарата, от требований к стабильности и сроку годности лекарственного средства, от условий его хранения.

Паропроницаемость системы упаковки/укупорки из полимерных материалов, предназначенной для лекарственных препаратов для приёма внутрь в виде твёрдых и жидких лекарственных форм, определяют в соответствии с ОФС «Определение паропроницаемости упаковки из полимерных материалов для лекарственных препаратов для приёма внутрь».

Паро- и газопроницаемость полимерных материалов необходимо учитывать при выборе оптимальной упаковки для лекарственных препаратов, подлежащих стерилизации, в связи с тем, что упаковки из отдельных марок полимерных материалов являются полупроницаемыми.

В наименьшей степени от взаимодействия лекарственного средства с атмосферной средой защищает упаковка из бумаги и картона.

Защиту лекарственного средства от светового потока обеспечивает упаковка из оранжевого светозащитного стекла, из металла, из алюминиевой фольги, из полимерных материалов, окрашенных или замутнённых титана диоксидом. Упаковку особо чувствительных к свету фармацевтических субстанций (серебра нитрат, прозерин) из светозащитного стекла рекомендуется оклеивать чёрной светонепроницаемой бумагой.

Определение светопропускания упаковок из стекла и из полимерных материалов приведено в ОФС «Упаковка для фармацевтического применения из стекла» и ОФС «Определение светопропускания упаковки из полимерных материалов для лекарственных средств» соответственно.

Применение упаковки из картона, бумаги для обеспечения защиты лекарственного средства от воздействия светового излучения, возможно при подтверждении светозащитных свойств в соответствующей области спектра используемых марок упаковочных материалов из картона и бумаги.

Если при хранении и транспортировании лекарственного средства допускается воздействие низкой температуры, то при выборе упаковочного материала необходимо учитывать риск повреждения упаковки и потери содержимого при замерзании последнего.

Защитные свойства тем выше, чем толще материал (стенки) упаковки и чем выше герметичность укупоривания упаковки.

Материал резиновых пробок способен обеспечить защиту от воздействия света, проникновения микроорганизмов, улетучивания (испарения, проницаемости); степень защиты от газопроницаемости зависит от физико-химических свойств резинового материала, состава и свойств лекарственного средства, его количества, температуры.

На защитную функцию упаковки оказывает влияние соблюдение правил GMP при производстве упаковки.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0036 Маркировка лекарственных средств

Взамен ОФС.1.1.0025.18

Настоящая общая фармакопейная статья устанавливает общие требования к маркировке фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов.

Требования данной статьи не распространяются на лекарственное растительное сырьё и лекарственные растительные препараты.

Маркировка – информация в виде надписей, знаков, символов, пиктограмм, цифровых, цветовых и условных обозначений, наносимая на упаковку и/или этикетку и/или сопроводительные документы для обеспечения идентификации, информирования потребителей, а также информация о способах обращения с упакованной продукцией при перевозке и хранении, для ускорения обработки информации при погрузочно-разгрузочных работах.

##### Общие требования к маркировке лекарственных средств

Маркировка лекарственных средств должна соответствовать требованиям Федеральных законов и нормативных правовых актов Российской Федерации.

Маркировка лекарственных препаратов, изготовленных аптечными организациями (экстемпоральных лекарственных препаратов), осуществляется в соответствии с правилами изготовления и отпуска лекарственных препаратов, утверждёнными уполномоченным федеральным органом исполнительной власти.

Способ нанесения маркировки должен обеспечить её сохранность в течение всего срока годности лекарственного средства при соблюдении установленных условий хранения.

Содержание маркировки и оформление надписей на вторичной (потребительской) и групповой упаковке должно быть указано на упаковке.

Маркировка лекарственного средства должна быть нанесена хорошо читаемым шрифтом на русском языке, при этом цвет надписей, знаков и символов должен быть контрастным по отношению к фону, на который нанесена маркировка.

Маркировка и оформление упаковки должны быть едиными для каждой серии упакованных лекарственных средств.

Каждая единица вторичной (потребительской) упаковки лекарственного препарата должна быть снабжена инструкцией по медицинскому применению (листком-вкладышем).

Если размеры вторичной (потребительской) упаковки лекарственного препарата допускают, то содержание инструкции по медицинскому применению (листка-вкладыша) может быть нанесено непосредственно на упаковку.

Каждая единица групповой упаковки должна быть снабжена этикеткой.

На первичной упаковке фармацевтических субстанций должны быть указаны:

- наименование фармацевтической субстанции (международное непатентованное, или группировочное, или химическое);

- торговое наименование фармацевтической субстанции;

- наименование производителя фармацевтической субстанции;

- номер серии и дата производства;

- количество в упаковке и единицы измерения количества;

- срок годности;

- условия хранения.

На первичной и вторичной (потребительской) упаковке лекарственного препарата должны быть указаны:

- наименование лекарственного препарата (международное непатентованное, или группировочное, или химическое, или торговое наименование);

- номер серии;

- дата выпуска (для иммунобиологических лекарственных препаратов);

- срок годности;

- дозировка или концентрация;

- объём;

- активность в единицах действия или количество доз.

Дополнительно на вторичной (потребительской) упаковке лекарственного препарата должны быть указаны (нанесены):

- торговое наименование лекарственного препарата;

- наименование производителя лекарственного препарата;

- номер регистрационного удостоверения;

- способ применения;

- лекарственная форма;

- условия отпуска;

- условия хранения;

- предупредительные надписи;

- штриховой код.

Маркировка лекарственных средств должна содержать следующие предупредительные надписи и символы:

- «Хранить в недоступном для детей месте» (на вторичной (потребительской) упаковке лекарственных препаратов);

- «Стерильно» (для стерильных лекарственных средств);

- указание животного, из крови, плазмы крови, органов и тканей которого получены лекарственные средства в качестве сывороток;

- «Антитела к ВИЧ-1, ВИЧ-2, к вирусу гепатита C и поверхностный антиген вируса гепатита B отсутствуют» (на вторичной (потребительской) упаковке лекарственных средств, полученных из крови, плазмы крови, органов и тканей человека);

- «Гомеопатический» (на вторичной (потребительской) упаковке гомеопатических лекарственных препаратов);

- знак радиационной опасности (на первичной упаковке и вторичной (потребительской) упаковке радиофармацевтических лекарственных средств).

На первичную упаковку и/или вторичную (потребительскую) упаковку лекарственных препаратов дополнительно может быть нанесена иная маркировка в соответствии с регистрационным досье.

Маркировка лекарственных средств не должна содержать информацию рекламного характера.

Упаковка лекарственных средств, предназначенных исключительно для экспорта, маркируется в соответствии с требованиями страны-импортёра.

На транспортной таре, в которую помещено лекарственное средство, должны быть указаны (нанесены):

- наименование лекарственного средства;

- серия;

- дата выпуска;

- количество вторичных (потребительских) упаковок;

- наименование производителя лекарственного средства, его местонахождение (адрес, в том числе страна и/или место производства лекарственного средства);

- срок годности;

- условия хранения и перевозки;

- необходимые предупредительные надписи и манипуляционные знаки.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0037 Перевозка лекарственных средств

Взамен ОФС.1.1.0025.18

Настоящая общая фармакопейная статья устанавливает общие требования к перевозке фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов.

Требования данной статьи не распространяются на лекарственное растительное сырьё и лекарственные растительные препараты.

Перевозка (транспортирование) лекарственных средств – процесс перемещения лекарственных средств по договору между субъектами обращения лекарственных средств, имеющими лицензии на производство лекарственных средств и/или фармацевтическую деятельность и/или медицинскую деятельность, с использованием транспортных средств и оборудования, обеспечивающих соблюдение условий хранения и мер безопасности для подтверждения их качества, эффективности и безопасности. Перевозка является составной частью процесса обращения лекарственных средств.

##### Общие требования к перевозке лекарственных средств

Перевозка лекарственных средств осуществляется всеми видами транспорта (автомобильным, железнодорожным, воздушным, морским, речным) в закрытых транспортных средствах, соблюдая правила перевозки грузов, установленные для соответствующего вида транспорта.

Транспортная тара

Лекарственные средства должны перевозиться в транспортной таре, которая обеспечивает надёжную защиту от внешнего воздействия и возможной контаминации.

Выбор транспортной тары основывается на:

- установленных требованиях к условиям хранения и перевозки лекарственных средств;

- объёме, необходимом для их размещения;

- предполагаемых колебаниях температуры окружающей среды;

- длительности перевозки, включая промежуточное хранение.

На транспортную тару должна быть нанесена необходимая информация (ОФС «Маркировка лекарственных средств»), обеспечивающая возможность идентификации груза и его происхождения.

Перевозка

Перевозку лекарственных средств необходимо осуществлять в условиях, обеспечивающих:

- их сохранность и целостность;

- защиту от неблагоприятного воздействия факторов окружающей среды;

- соблюдение необходимого температурного режима (условий хранения);

- защиту от фальсификации.

Требуемые условия хранения лекарственных средств должны соблюдаться в течение всего времени перевозки, а случаи отклонений от установленных норм должны быть документально оформлены и расследованы.

Транспортные средства и оборудование, используемые для перевозки лекарственных средств, должны соответствовать целям их использования, содержаться в чистоте и подвергаться очистке и уборке по мере необходимости в соответствии с требованиями установленных санитарных норм.

Оборудование, установленное внутри транспортного средства или в контейнере и используемое для контроля и поддержания температурного режима в процессе перевозки лекарственных средств, подлежит периодическому техническому обслуживанию, поверке и калибровке (ОФС «Контроль температуры и влажности с течением времени»).

Планирование перевозки лекарственных средств должно осуществляться на основании анализа и оценки возможных рисков.

Перевозку лекарственных средств в районы Крайнего Севера и приравненные к ним труднодоступные районы проводят в соответствии с требованиями нормативных правовых актов Российской Федерации.

Лекарственные средства, требующие особого обращения

При перевозке лекарственных средств, обладающих опасными свойствами (огнеопасные, взрывоопасные, радиофармацевтические, ядовитые и др.), необходимо соблюдать требования Федеральных законов и нормативных правовых актов Российской Федерации, регламентирующих правила перевозки опасных грузов. При этом групповая упаковка и транспортная тара должны соответствовать классу опасности и иметь маркировку с указанием знака опасности.

Порядок перевозки наркотических средств, психотропных веществ и их прекурсоров, обеспечивающий их сохранность, а также порядок оформления необходимых для этого документов устанавливаются Правительством Российской Федерации.

Перевозка термолабильных лекарственных средств, включая иммунобиологические лекарственные препараты, проводится с соблюдением «холодовой цепи» – комплекса организационно-технических мероприятий по обеспечению оптимальных условий перевозки и хранения лекарственных средств на всех этапах (уровнях) их движения от производителя до потребителя.

В системе «холодовой цепи» используется следующее оборудование для перевозки (ОФС «Контроль температуры и влажности с течением времени»):

- термоконтейнеры, в том числе сумки-холодильники;

- хладоэлементы;

- авторефрижераторы.

Термоконтейнеры обеспечивают соблюдение требуемого интервала температур в течение всего времени перевозки с учётом сезонных колебаний температуры в конкретной климатической зоне.

Термоконтейнеры подразделяются на:

- активные, рефрижераторного типа с встроенной холодильной установкой;

- пассивные (однократного и многократного применения), изотермического типа, в которых в качестве хладагентов используются хладоэлементы.

Хладоэлементы используются в соответствии с инструкцией их производителя и размещаются в изотермических контейнерах таким образом, чтобы отсутствовал прямой контакт с лекарственными средствами.

Порядок подготовки изотермических контейнеров, требования к повторному использованию хладоэлементов и процесс перевозки термолабильных лекарственных средств с учётом сезонных особенностей должны быть описаны в документированной процедуре.

Упаковку термолабильных лекарственных средств в термоконтейнеры осуществляют в специально оборудованных и предназначенных для этих целей помещениях, в которых контролируются температурный режим, влажность воздуха, освещённость и чистота.

Санитарная обработка термоконтейнеров многократного применения проводится перед загрузкой и после использования с применением моющих и (или) дезинфицирующих средств в соответствии с утверждённой инструкцией.

Для перевозки без дополнительных изотермических средств защиты используется авторефрижератор с изотермическим кузовом, оборудованный холодильно-обогревательной установкой с автоматической системой поддержания заданной температуры внутри кузова, оснащённый средствами измерения и контроля температуры, а также теплоизолирующей завесой в дверном проёме кузова.

Санитарная обработка кузовов авторефрижераторов проводится перед каждым рейсом и после выгрузки с применением моющих средств и (или) дезинфицирующих средств.

Температурный режим при перевозке термолабильных лекарственных средств должен соответствовать установленным требованиям, гарантирующим сохранность их качества.

Для контроля температурного режима в системе «холодовой цепи» используются:

- средства измерения температуры (термометры, термографы, терморегистраторы);

- средства выявления (индикации) нарушений температурного режима (термоиндикаторы).

В пассивных термоконтейнерах применяются термоиндикаторы или терморегистраторы. Активные термоконтейнеры оборудуются встроенными или автономными терморегистраторами.

В качестве дополнительного средства контроля температуры в авторефрижераторе допускается использование термоиндикаторов, которые закладываются в одну или несколько транспортных упаковок.

Контроль показаний термоиндикаторов и терморегистраторов осуществляется после окончания каждого этапа перевозки во время выгрузки лекарственных средств.

Продолжительность перевозки термоконтейнеров с термолабильными лекарственными средствами не должна превышать времени, в течение которого используемые термоконтейнеры гарантируют поддержание в них требуемого температурного режима.

Операции по разгрузке и обратной загрузке, а также транзитное хранение в процессе перевозки лекарственных средств осуществляются при соблюдении условий хранения и мер безопасности, которые определены договорными отношениями между субъектами обращения лекарственных средств и законодательством Российской Федерации.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0038 Сита

Взамен ОФС.1.1.0003.15

В настоящей статье приведены характеристики сит, применяемых в производстве и контроле качества лекарственных средств.

Материал сита должен быть индифферентным по отношению к просеиваемому веществу.

Для аналитических процедур используют сита с квадратными отверстиями. Для неаналитических процедур могут быть использованы также сита с круглыми отверстиями, диаметр которых в 1,25 раза превышает размер стороны квадратного отверстия сита соответствующего номера. Требования к степени измельчённости приводят в фармакопейной статье с указанием номера сита, соответствующего номинальному размеру стороны отверстия в микрометрах, который приводится в скобках после названия вещества.

Максимальный допуск для размера отверстия (+Х) вычисляют по формуле:

где w – номинальный размер отверстия.

Не должно быть отверстий, размер которых превышает номинальный размер более чем на величину X.

Допуск для среднего значения размера отверстия (±Y) вычисляют по формуле:

Средний размер отверстия не должен отклоняться от номинального размера более чем на величину ±Y.

Промежуточный допуск (+Z) вычисляют по формуле:

Не более 6 % общего числа отверстий могут иметь размеры между «номинальным значением +X» и «номинальным значением +Z».

Диаметр d проволоки, применяемой для плетения металлической проволочной ткани, вставленной в раму, должен находиться в пределах от dmin до dmax, что соответствует допускам (±15 %) от рекомендованного номинального диаметра. Диаметр проволоки должен быть одинаковым по всей площади сита.

Номер сита (номинальный размер отверстия в мкм), допуски для отверстий, диаметр проволоки и допустимые пределы для её номинального диаметра представлены в табл. 3.

Таблица 3. Характеристика сит
Номер сита (номинальный размер отверстия, мкм) | Допуск для отверстия, мкм | Диаметр проволоки, мкм
--- | --- | ---
Максимальный допуск для отверстия | Допуск для среднего значения размера отверстия | Промежуточный допуск | Рекомендованный номинальный диаметр | Допустимые пределы
+Х | ±Y | +Z | d | dmax | dmin
11200 | 770 | 350 | 560 | 2500 | 2900 | 2100
8000 | 600 | 250 | 430 | 2000 | 2300 | 1700
5600 | 470 | 180 | 320 | 1600 | 1900 | 1300
4000 | 370 | 130 | 250 | 1400 | 1700 | 1200
2800 | 290 | 90 | 190 | 1120 | 1300 | 950
2000 | 230 | 70 | 150 | 900 | 1040 | 770
1400 | 180 | 50 | 110 | 710 | 820 | 600
1000 | 140 | 30 | 90 | 560 | 640 | 480
710 | 112 | 25 | 69 | 450 | 520 | 380
500 | 89 | 18 | 54 | 315 | 360 | 270
355 | 72 | 13 | 43 | 224 | 260 | 190
250 | 58 | 9,9 | 34 | 160 | 190 | 130
180 | 47 | 7,6 | 27 | 125 | 150 | 106
125 | 38 | 5,8 | 22 | 90 | 104 | 77
90 | 32 | 4,6 | 18 | 63 | 72 | 54
63 | 26 | 3,7 | 15 | 45 | 52 | 38
45 | 22 | 3,1 | 13 | 32 | 37 | 27
38 | − | − | − | 30 | 35 | 24

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0039 Пористость стеклянных фильтров

Взамен ОФС.1.1.0003.15

В настоящей статье приведены области применения фильтров, пределы которых являются приблизительными и величины пористости стеклянных фильтров (диаметр в микрометрах).

В зависимости от диаметра пор фильтры используются для следующих целей (табл. 1):

Таблица 1. Области применения фильтров в зависимости от диаметра пор
Размер пор, мкм | Область применения фильтра
--- | ---
< 2,5 | Бактериальная фильтрация
4,0–10 | Ультратонкая фильтрация, отделение микроорганизмов большого диаметра
10–40 | Аналитическая фильтрация, очень тонкая фильтрация ртути, очень тонкое диспергирование газов
40–100 | Тонкая фильтрация, фильтрация ртути, тонкое диспергирование газов
100–160 | Фильтрация крупнозернистых материалов, диспергирование и промывка газов, использование в качестве подложки для других фильтрующих материалов
160–500 | Фильтрация очень крупнозернистых материалов, диспергирование и промывка газов

В табл. 2 приведён максимальный размер пор стеклянных фильтров различной пористости.

Таблица 2. Пористость стеклянных фильтров
Пористость фильтра | Приблизительный максимальный размер пор, мкм
--- | ---
ПОР 1,0 | менее 1,0
ПОР 1,6 | 1,0–1,6
- | 1–2,5
ПОР 3,0 | 1,6–3
- | 1,6–4
- | 4–6
ПОР 10 | 3–10
- | 4–10
ПОР 16 | 10–16
ПОР 40 | 16–40
- | 40–50
ПОР 100 | 40–100
- | 100–120
ПОР 160 | 100–160
- | 150–200
ПОР 250 | 160–250
- | 200–500
ПОР 500 | 250–500

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0040 Элементные примеси

Вводится впервые

В настоящей общей фармакопейной статье приведены основные подходы к оценке содержания элементных примесей и методах их определения в лекарственных средствах.

Элементные примеси – это потенциально токсичные химические элементы, которые присутствуют в окружающей среде, используются при производстве лекарственных средств, но не входят в состав лекарственного средства.

##### Область применения

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на фармацевтические субстанции полученные путём химического синтеза и произведённые на их основе лекарственные препараты. Кроме того, настоящая общая фармакопейная статья распространяется на лекарственные средства, содержащие очищенные белки и полипептиды (включая белки и полипептиды, получаемые из рекомбинантных и нерекомбинантных источников), их производные и продукты, компонентами которых они являются (например, конъюгаты), а также на лекарственные средства, содержащие синтетические полипептиды, полинуклеотиды и олигосахариды.

Настоящая общая фармакопейная статья не распространяются на:

- лекарственные средства растительного происхождения;

- радиофармацевтические лекарственные препараты;

- вакцины;

- продукты клеточного метаболизма;

- препараты ДНК;

- экстракты аллергенов;

- клетки, цельную кровь, клеточные компоненты крови или производные крови, включая плазму и производные плазмы;

- лекарственные средства, полученные на основе генов (генная терапия), на основе клеток (клеточная терапия), на основе тканей (тканевая инженерия);

- растворы для диализа, не предназначенные для введения в системный кровоток;

- лекарственные препараты для полного парентерального питания;

- лекарственные средства, в состав которых элементы включены преднамеренно для оказания терапевтического эффекта или в качестве вспомогательных веществ.

Настоящая общая фармакопейная статья не распространяется на лекарственные средства, находящиеся на этапах клинических исследований и/или разработки, но по мере развития промышленного процесса производства принципы, содержащиеся в настоящей общей фармакопейной статье, могут быть полезны для оценки элементных примесей, которые могут присутствовать в новых лекарственных средствах.

Поскольку при использовании лекарственного средства непреднамеренно добавленные или появившиеся элементные примеси не несут какой-либо терапевтической пользы для пациента, а риск должен быть сопоставим с эффектом, оказываемым лекарственным препаратом, их содержание в лекарственном средстве должно подлежать контролю и не превышать допустимых пределов, установленных на основании критериев безопасности и достижения надлежащего качества фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов. Возможности технологического процесса не являются основанием для ужесточения пределов содержания примесей элементов при условии, что их содержание в лекарственном препарате не превышает допустимые суточные дозы (PDE ‒ Permitted Daily Exposures); для которых также принят термин «допустимое суточное воздействие (ДСВ)». Указанные в настоящей общей фармакопейной статье (PDE) считаются безопасными для здоровья всех групп пациентов.

В случае, если показано, что элементные примеси оказывают влияние на характеристики качества лекарственного средства (например, элемент катализирует деградацию компонентов лекарственного препарата), необходимо установление более низких, ниже пределов токсичности, уровней содержания элементных примесей.

Пределы содержания элементных примесей в лекарственном препарате устанавливают, исходя из продолжительности лечения, максимальной суточной дозы, способа/пути введения лекарственного препарата, а также (PDE) элементной примеси. Стратегию контроля для ограничения содержания элементных примесей в лекарственных средствах разрабатывают с использованием принципов управления рисками. Процесс оценки рисков содержания элементных примесей состоит из следующих этапов:

- идентификация известных и потенциальных источников элементных примесей;

- анализ наличия элементной примеси в лекарственном средстве путём определения наблюдаемого или прогнозируемого уровня содержания элементной примеси и сравнения её с установленным значением (PDE);

- обобщение и документирование данных оценки рисков и мер контроля.

##### Источники элементных примесей

Элементные примеси могут присутствовать в фармацевтических субстанциях, вспомогательных веществах и в лекарственных препаратах. Эти примеси могут возникать естественным образом, быть добавленными преднамеренно или внесёнными самопроизвольно. К потенциальным источникам появления элементных примесей в лекарственных средствах относят катализаторы или реактивы, которые целенаправленно добавляют в процессе синтеза фармацевтической субстанции, вспомогательных веществ или других компонентов лекарственного средства. Элементные примеси могут быть внесены в лекарственное средство из производственного оборудования, трубопроводов, при взаимодействии с упаковочными материалами, элементами системы упаковки/укупорки и т.п.. Кроме того, элементные примеси могут потенциально присутствовать в субстанциях, вспомогательных веществах, воде и других материалах, используемых в процессе производства лекарственных средств. Наличие элементных примесей в фармацевтических субстанциях и вспомогательных веществах, приводит, как правило, к появлению их и в лекарственных препаратах.

В лекарственном средстве каждая из элементных примесей может присутствовать в различных состояниях, называемых «формах нахождения», - состояниях окисления, комплексообразования и/или комбинации этих состояний. Элементные примеси в различных «формах нахождения» могут различаться степенью их токсического воздействия на организм человека. Особое внимание необходимо обратить на элементные примеси мышьяка и ртути из-за различной токсичности их неорганических и сложных органических форм.

##### Классификация

На основе оценки степени возможного риска для здоровья человека определены 24 элемента, примеси которых могут представлять токсикологическую опасность и присутствие которых в лекарственных препаратах наиболее вероятно. В зависимости от токсичности и вероятности наличия элементной примеси в лекарственном препарате, они классифицированы на три класса, указанные в табл. 1. Вероятность присутствия элемента в лекарственном препарате и его вероятное использование зависит от нескольких основных факторов, в том числе:

- вероятности преднамеренного использования в технологических процессах производства таких веществ как катализаторы, реактивы, содержащих элементы, подлежащие учёту при оценке рисков;

- вероятности непреднамеренного использования обусловленного тем, что элемент является попутно выделяемой примесью с другими элементными примесями в материалах, используемых в технологических процессах производства;

- распространение элемента в природе и его экологическое распределение, что также приводит к непреднамеренному его использования.

Токсичность элементной примеси связана с биодоступностью лекарственного препарата, которая, в свою очередь, во многом зависит от классификационных признаков лекарственной формы, включая путь введения/способ применения.

В настоящей общей фармакопейной статье элементом с низкой распространённостью в природе и экологическим распределением считают элемент с зарегистрированной распространённостью не более 1 атома на 106 атомов кремния.

Таблица 1. Элементы, подлежащие учёту при оценке рисков
Элемент | Класс | Преднамеренное использование (для всех путей введения) | Непреднамеренное использование
--- | --- | --- | ---
при приёме внутрь | при парентеральном введении | при ингаляционном введении
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6
Кадмий | 1 | да | да | да | да
Свинец | 1 | да | да | да | да
Мышьяк | 1 | да | да | да | да
Ртуть | 1 | да | да | да | да
Кобальт | 2А | да | да | да | да
Ванадий | 2А | да | да | да | да
Никель | 2А | да | да | да | да
Таллий | 2B | да | нет | нет | нет
Золото | 2B | да | нет | нет | нет
Палладий | 2B | да | нет | нет | нет
Иридий | 2B | да | нет | нет | нет
Осмий | 2B | да | нет | нет | нет
Родий | 2B | да | нет | нет | нет
Рутений | 2B | да | нет | нет | нет
Селен | 2B | да | нет | нет | нет
Серебро | 2B | да | нет | нет | нет
Платина | 2B | да | нет | нет | нет
Литий | 3 | да | нет | да | да
Сурьма | 3 | да | нет | да | да
Барий | 3 | да | нет | нет | да
Молибден | 3 | да | нет | нет | да
Медь | 3 | да | нет | да | да
Олово | 3 | да | нет | нет | да
Хром | 3 | да | нет | нет | да

Для обозначения предельно возможного воздействия элементных примесей установлены допустимые суточные дозы (PDE ) для примеси каждого элемента в лекарственных препаратах. Токсичность элементной примеси связана с биодоступностью лекарственного препарата, которая в свою очередь во многом зависит от свойств лекарственной формы лекарственного препарата. Для каждой элементной примеси определены PDE для одного из трёх способов/путей введения и применения лекарственного препарата: для приёма внутрь, для парентерального и для ингаляционного применения. Как правило, эти предельные значения основаны на длительном воздействии.

Класс 1, иногда называемый «большой четвёркой», включает высокотоксичные, широко распространённые элементы: кадмий, свинец, мышьяк, ртуть, которые требуют обязательного учёта при оценке рисков по всем потенциальным источникам их появления и по всем путям введения. При производстве лекарственных препаратов элементы этой группы, как правило, используют очень редко, их присутствие в лекарственных препаратах связано, как правило, с часто применяемыми материалами, например, природными минеральными веществами, выступающими в качестве вспомогательных веществ. Из-за своей уникальности эти 4 элемента при оценке рисков требуют проведения проверки на вероятность загрязнения для всех потенциальных источников элементных примесей и для всех способов/путей введения. По результатам проведённой оценки рисков определяют те компоненты, для которых может понадобиться дополнительный контроль, заключающийся в виде испытаний этих компонентов на содержание элементов класса 1. Не ожидается, что при оценке рисков все компоненты лекарственного препарата потребуют проверки на наличие элементных примесей класса 1. Такие испытания могут быть применены только в том случае, если при оценке рисков они будут определены, как необходимая мера контроля для обеспечения установленного значения PDE.

Класс 2 включает элементы, токсичность которых для человека зависит от пути введения; элементы подразделяют на класс 2А и класс 2В в зависимости от относительной вероятности их присутствия в лекарственном средстве.

Элементные примеси класса 2 А (кобальт, ванадий, никель) обладают достаточной токсичностью, что требует проведения оценки риска по всем потенциальным источникам и путям введения из-за их достаточно высокого относительного распространения. Элементные примеси класса 2 В имеют более изменчивую токсичность и низкую вероятность присутствия в лекарственных средствах ввиду низкой распространённости в природе, они требуют оценки по всем их потенциальным источникам только в том случае, если намеренно добавлены в процесс производства компонентов лекарственных средств.

Класс 3 включает элементы, обладающие относительно низкой токсичностью при приёме внутрь, характеризуются высокими значениями PDE, как правило, превышающими 500 мкг/сут. Такие элементы могут не включаться в оценку рисков для лекарственных препаратов для приёма внутрь, если только их не используют преднамеренно в процессе производства фармацевтических субстанций или других компонентов лекарственного препарата. При парентеральном и ингаляционном путях введения, вероятность их присутствия в лекарственном препарате необходимо оценивать во время проведения оценки рисков. Исключением является случаи, когда значения PDE для определённого пути введения превышают 500 мкг/сут.

Другие элементы. В индивидуальных случаях при оценке риска элементных примесей, для которых PDE не установлен из-за их низкой токсичности (например, алюминий, бор, кальций, железо, калий, марганец, магний, натрий, вольфрам, цинк), но которые могут содержаться и/или преднамеренно включаться в лекарственный препарат, необходимо руководствоваться требованиями относительно допустимого содержания таких элементов и соответствующими методами их определения, указанными в соответствующих нормативных документах, при наличии.

##### Оценка безопасности и установление допустимых суточных доз (PDE) элементных примесей

Оценку безопасности элементных примесей, наличие которых в лекарственных препаратах возможно, проводят для установления допустимых суточных доз (PDE ) каждого элемента. Полученные значения PDE предоставляют информацию о максимально допустимом количестве элемента, которое может содержаться в максимальном количестве лекарственного препарата, принимаемом в течение суток. При оценке безопасности и установлении PDE элементных примесей рассматривают следующие факторы:

- вероятную степень окисления (форму нахождения) элемента в лекарственном препарате;

- данные о воздействии на организм человека и данные о безопасности, если они содержат необходимые сведения;

- наиболее релевантное исследование на животных;

- способ/путь введения лекарственного препарата;

- релевантное конечное значение(я) PDE.

Оценка безопасности и разработка PDE элементных примесей осуществлена, в основном, для каждого из трёх способов/путей введения и применения: для приёма внутрь, для парентерального и ингаляционного применения. Значения PDE элементных примесей, подлежащих учёту при оценке рисков для лекарственных препаратов, указанных путей введения, установленные на основании имеющихся данных о безопасности, приведены в табл. 2. При любом пути введения для иридия, осмия, родия и рутения, PDE были установлены на основании их схожести с палладием.

Таблица 2. Допустимые суточные дозы элементных примесей (PDE) для лекарственных препаратов
Элемент | Класс | Допустимые суточные дозы (PDE)*, мкг/сут
--- | --- | ---
при приёме внутрь | при парентеральном введении | при ингаляционном введении
1 | 2 | 3 | 4 | 5
Кадмий | 1 | 5 | 2 | 3
Свинец | 1 | 5 | 5 | 5
Мышьяк | 1 | 15 | 15 | 2
Ртуть | 1 | 30 | 3 | 1
Кобальт | 2А | 50 | 5 | 3
Ванадий | 2А | 100 | 10 | 1
Никель | 2А | 200 | 20 | 5
Таллий | 2B | 8 | 8 | 8
Золото | 2B | 100 | 100 | 1
Палладий | 2B | 100 | 10 | 1
Иридий | 2B | 100 | 10 | 1
Осмий | 2B | 100 | 10 | 1
Родий | 2B | 100 | 10 | 1
Рутений | 2B | 100 | 10 | 1
Селен | 2B | 150 | 80 | 130
Серебро | 2B | 150 | 10 | 7
Платина | 2B | 100 | 10 | 1
Литий | 3 | 550 | 250 | 25
Сурьма | 3 | 1200 | 90 | 20
Барий | 3 | 1400 | 700 | 300
Молибден | 3 | 3000 | 1500 | 10
Медь | 3 | 3000 | 300 | 30
Олово | 3 | 6000 | 600 | 60
Хром | 3 | 11000 | 1100 | 3
Примечание – Для удобства практического применения значения PDE менее 10 имеют одну значащую цифру и округлены до ближайшего целого числа. Значения PDE более 10 округлены до одной или двух значащих цифр в установленном порядке.

При разработке PDE и оценке риска элементных примесей, присутствие которых достаточно вероятно в испытуемом лекарственном препарате, необходимо иметь определённую информацию о содержании элементных примесей в фармацевтических субстанциях, вспомогательных веществах, которые были использованы при производстве лекарственного препарата. Рекомендуется проводить оценку риска фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ на присутствие элементных примесей, указанных в табл. 2, с учётом следующих данных. Если известно, что в лекарственный препарат, предназначенный для любого пути введения, из указанных в табл. 2, элемент из табл. 2 внесён преднамеренно, то соответствующая элементная примесь должна быть обязательно оценена. При оценке риска должны быть учтены элементы групп 1 и 2 А, добавленные непреднамеренно при производстве лекарственного препарата, предназначенного для любого из трёх путей введения, указанных в табл. 2. Должны быть учтены при оценке рисков такие элементы, как литий, сурьма и медь, непреднамеренно добавленные в лекарственный препарат для парентерального введения, а также все элементы 3 класса, непреднамеренно добавленные в лекарственный препарат для ингаляционного введения.

Данные табл. 2 можно использовать, если необходимо установить PDE элементных примесей для лекарственных препаратов, путь введения которых в этой таблице не указан, при этом полученная оценка безопасности может как снижать, так и повышать указанные в табл. 2 значения PDE. В качестве исходных значений для установления PDE элементных примесей для лекарственных препаратов, путь введения которых в табл. 2 не указан, обычно используют PDE элементных примесей лекарственных препаратов, предназначенных для приёма внутрь, и в последующем проводят оценку вероятности возникновения местных реакций и, по возможности, биодоступности элемента при предполагаемом пути введения посредством применения поправочных коэффициентов. Также в качестве исходных значений могут быть использованы значения PDE элементных примесей при парентеральном или ингаляционном пути введения лекарственного препарата.

При установлении PDE элементных примесей для лекарственных препаратов для парентерального введения, максимальный суточный объём которых не превышает 2 л, можно использовать величину максимального суточного объёма. Если суточный объём лекарственного препарата для парентерального введения превышает 2 л, то объём 2 л может быть использован для расчёта допустимых концентраций по PDE.

В отдельных случаях может быть установлено значение PDE элементных примесей, превышающее значение, указанное в табл. 2. Такие случаи могут включать следующие ситуации, но не ограничиваться ими:

- интермиттирующий режим дозирования;

- краткосрочный приём лекарственного препарата, например, в течение 30 дней или менее;

- специфические показания к применению лекарственного препарата, например, заболевания, угрожающие жизни, редкие заболевания.

##### Контроль элементных примесей

Контроль элементных примесей является частью общей стратегии контроля лекарственных средств, обеспечивающей содержание элементных примесей в лекарственных препаратах в пределах значений PDE. Для оценки содержания элементных примесей используют понятие контрольного порога.

Контрольный порог ‒ предел, который применяют при оценке элементных примесей, чтобы определить, могут ли потребоваться дополнительные контрольные элементы для обеспечения того, чтобы PDE не превышалось в лекарственном препарате. Предел принимается как 30 % от PDE конкретной рассматриваемой элементной примеси. В случае превышения контрольного порога необходимо принять дополнительные меры, которые могут включать следующие подходы, в то же время, не ограничиваясь ими:

- модификация стадий процесса производства, способствующая сокращению содержания элементных примесей ниже контрольного порога посредством специфических или неспецифических стадий очистки;

- внедрение внутрипроизводственных или предварительных видов контроля, направленных на ограничение содержания концентрации элементной примеси в лекарственном препарате ниже контрольного порога;

- установление пределов содержания элементных примесей для вспомогательных веществ или материалов, например, синтетических промежуточных продуктов и др.;

- установление пределов содержания элементных примесей для фармацевтической субстанции;

- установление пределов содержания элементных примесей для лекарственного препарата;

- выбор соответствующих систем упаковки/укупорки.

В некоторых случаях может быть установлен более низкий контрольный порог содержания элементных примесей, если было показано, что их содержание хотя и ниже порогов токсичности, но оказывает влияние на качественные характеристики лекарственного препарата, например, ускоряет деградацию действующих веществ.

##### Преобразование PDE в предельно допустимые концентрации. Варианты демонстрации соответствия требованиям

Установленные допустимые суточные дозы (PDE) элементных примесей отражают максимально допустимое количество каждого элемента в микрограммах, которое может быть в общем количестве лекарственного препарата, принятого пациентом в течение суток указанным способом применения. Для оценки допустимого содержания элементных примесей в лекарственном препарате или компонентах лекарственного препарата, значения PDE элементных примесей могут быть преобразованы в соответствующие им значения предельно допустимых концентраций (ПДК) элементных примесей.

Величина ПДК представляет собой максимально допустимую концентрацию элемента в микрограммах, содержащуюся в одном грамме лекарственного препарата или его компонентах.

Установленные ПДК элементных примесей могут быть использованы:

- в качестве инструмента при оценке рисков с целью сравнения наблюдаемого и предполагаемого уровней содержания элементной примеси относительно PDE;

- при контроле со стороны поставщиков сырья на этапах, предшествующих производству лекарственного препарата, для обеспечения того, чтобы значение PDE не было превышено;

- для установления необходимых целевых концентраций при разработке внутрипроизводственного контроля в отношении элементных примесей;

- для предоставления сведений о контроле элементных примесей в соответствующие организации, включая регуляторные органы.

Для установления ПДК элементной примеси в лекарственном препарате или его компонентах применяют несколько вариантов расчёта.

При применении любого из вариантов расчёта необходимо убедиться, что дополнительное элементные примеси не могли быть непреднамеренно добавлены в процессе производства или через систему упаковки/укупорки. Если во время оценки риска определено, что системы упаковка/укупорка и производственное оборудование не вносят вклад в содержание элементных примесей в лекарственном препарате, учитывать их не требуется. Если вклад систем упаковка/укупорка и производственного оборудования имеет место, его можно учесть, вычитая оценённое ежедневное поступление элементных примесей из этих источников из PDE перед расчётом ПДК в отдельных компонентах лекарственного препарата (фармацевтической субстанции, вспомогательных веществах).

При любом варианте расчёта необходима информация о количестве лекарственного препарата, принимаемого пациентом в течение суток.

Для расчёта ПДК элементной примеси (С) в лекарственном препарате используют формулу:

(1)

где С – предельно допустимая концентрация (ПДК) элементной примеси, мкг/г;
PDE – допустимая суточная доза элементной примеси, мкг/сут;
m – масса (количество) лекарственного препарата, принятого пациентом в течение суток, г/сут.

В зависимости от массы (количества) лекарственного препарата, принятого пациентом в течение суток, возможны различные варианты расчётов.

Расчёт ПДК элемента в каждом компоненте лекарственного препарата, принимаемого пациентом в количестве, не превышающем 10 г в течение суток.

Это наиболее упрощённый вариант расчёта ПДК элементной примеси для каждого компонента лекарственного препарата, который предполагает, что элементные примеси, указанные при оценке риска, так называемые целевые элементы, присутствуют во всех компонентах лекарственного препарата. ПДК целевого элемента рассчитывают по формуле (1), с учётом того, что масса лекарственного препарата, принятого пациентом в течение суток, составляет 10 г. Такой вариант позволяет рассчитать фиксированную общую ПДК для каждого целевого элемента. Полученные данные о ПДК для каждого элемента, подлежащего учёту при оценке рисков, приведены в табл. 3. Эти показатели служат предельно допустимыми значениями концентраций элементных примесей по умолчанию для оказания помощи при решении вопроса об определении ПДК элементных примесей в лекарственных препаратах.

Таблица 3. Предельно допустимые концентрации (ПДК) элементных примесей в отдельном компоненте лекарственного препарата, суточная доза которого не превышает 10 г
Элемент | Класс | ПДК, мкг/г
--- | --- | ---
при приёме внутрь | при парентеральном введении | при ингаляционном введении
Кадмий | 1 | 0,5 | 0,2 | 0,3
Свинец | 1 | 0,5 | 0,5 | 0,5
Мышьяк | 1 | 1,5 | 1,5 | 0,2
Ртуть | 1 | 3 | 0,3 | 0,1
Кобальт | 2А | 5 | 0,5 | 0,3
Ванадий | 2А | 10 | 1 | 0,1
Никель | 2А | 20 | 2 | 0,5
Селен | 2В | 15 | 8 | 13
Серебро | 2В | 15 | 1,5 | 0,7
Платина | 2В | 10 | 1 | 0,1
Таллий | 2B | 0,8 | 0,8 | 0,8
Золото | 2B | 10 | 10 | 0,1
Палладий | 2B | 10 | 1 | 0,1
Иридий | 2B | 10 | 1 | 0,1
Осмий | 2B | 10 | 1 | 0,1
Родий | 2B | 10 | 1 | 0,1
Рутений | 2B | 10 | 1 | 0,1
Литий | 3 | 55 | 25 | 2,5
Сурьма | 3 | 120 | 9 | 2
Барий | 3 | 140 | 70 | 30
Молибден | 3 | 300 | 150 | 1
Медь | 3 | 300 | 30 | 3
Олово | 3 | 600 | 60 | 6
Хром | 3 | 1100 | 110 | 0,3

Если ПДК целевых элементных примесей всех компонентов (фармацевтических субстанций, вспомогательных веществ) лекарственного препарата, максимальная суточная доза которого составляет не более 10 г, не превышают значения ПДК соответствующих элементных примесей, указанных в табл. 3, то все эти компоненты могут быть использованы в лекарственном препарате в любом соотношении. По отдельным компонентам могут быть установлены значения ПДК, отличающиеся от указанных в табл. 3, обусловленные смягчающимися факторами.

Если значения ПДК целевых элементных примесей превышают данные табл. 3, то можно применить следующие варианты расчётов.

Расчёт ПДК элемента в каждом компоненте лекарственного препарата, принимаемого в любом установленном количестве в течение суток.

В первом случае для расчёта ПДК целевой элементной примеси используют формулу (1), при этом учитывают фактическую массу (количество) лекарственного препарата, принятого пациентом в течение суток. Этот вариант позволяет рассчитать фиксированную общую ПДК для каждого целевого элемента. Полученные в результате расчёта значения ПДК целевых элементных примесей сравнивают с данными табл. 3. Если ПДК целевых элементных примесей всех компонентов лекарственного препарата не превышают значения ПДК соответствующих элементных примесей, указанных в табл. 3, то все эти компоненты могут быть использованы в лекарственном препарате в любом соотношении.

Второй случай предполагает расчёт ПДК элементных примесей в отдельных определённых компонентах лекарственного препарата. Выбор таких компонентов лекарственного препарата должен быть основан на сведениях о распределении элементных примесей в компонентах лекарственного препарата, например, более высокие концентрации в компонентах, в которых присутствует рассматриваемый элемент.

Для каждого элемента, указанного в качестве потенциально присутствующего в компонентах лекарственного препарата, максимальная масса элементной примеси может быть рассчитана посредством умножения массы каждого компонента лекарственного препарата на допустимую концентрацию, которая была установлена индивидуально для каждой элементной примеси компонента, и сложением полученных результатов для всех компонентов в лекарственном препарате в соответствии с уравнением (2). При отсутствии других обоснований, значение максимальной массы не должно превышать значение PDE элементной примеси.

(2)

где PDE – допустимая суточная доза элементной примеси, мкг/сут;
k – индекс для каждого из n компонентов в лекарственном препарате;
Ck – ПДК элементной примеси в компоненте k, мкг/г;
Mk – масса компонента k в максимальном количестве лекарственного препарата, принятая пациентом в течение суток, г/сут.

Этот подход допускает максимально более высокую ПДК элемента в определённых компонентах лекарственного препарата, чем ПДК, установленная в первых двух случаях. Вместе с тем, высокое значение ПДК целевого элемента впоследствии должно быть компенсировано более низкими ПДК этого элемента в остальных компонентах лекарственного препарата.

Уравнение (2) можно использовать для демонстрации того, что ПДК каждой элементной примеси в каждом компоненте лекарственного препарата обеспечивают соответствие значению PDE.

Если при оценке рисков определено, что некоторый элемент не является потенциальной примесью в некотором компоненте, то устанавливать ПДК для такого элемента в этом компоненте лекарственного препарата не требуется.

Анализ лекарственного препарата. Фактическое количественное содержание элементной примеси в лекарственном препарате можно определить в ходе проведения соответствующего анализа лекарственного препарата. Полученное в результате анализа «измеренное значение» элементной примеси пересчитывают с учётом массы (количества) лекарственного препарата, принимаемого пациентом в течение суток (максимальная суточная доза) и сравнивают со значением PDE в табл. 2.

Измеренное количество каждой элементной примеси не должно превышать допустимую суточную дозу PDE, если в фармакопейной статье на анализируемый лекарственный препарат не указано иное.

Если производители лекарственных средств могут продемонстрировать соответствие элементных примесей в компонентах с помощью мониторинга технологического процесса производства и последующего контроля за цепочкой поставок таких лекарственных средств, то дальнейшие испытания по определению элементных примесей для них могут не потребоваться.

##### Определение элементных примесей

Для оценки уровня содержания элементных примесей в лекарственных средствах и подтверждения их соответствия установленным требованиям, могут быть использованы различные методы анализа, отличающиеся выбранной системой измерения, включая методики пробоподготовки, способы измерения и другие характеристики, обусловленные существенными различиями химической структуры испытуемых материалов и нормируемых пределов содержания элементных примесей. Результаты проведённых испытаний могут быть приняты лишь в том случае, если пригодность выбранной фармакопейной системы измерения, подтверждена. Пригодность альтернативных, не фармакопейных методик, должна быть подтверждена в рамках валидационных испытаний в соответствии с ОФС «Валидация аналитических методик».

Для определения элементных примесей могут быть применены методы фармакопейного анализа, регламентируемые требованиями таких ОФС, как: «Атомно-эмиссионная спектрометрия», «Атомно-абсорбционная спектрометрия», «Рентгеновская флуоресцентная спектрометрия», «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой», «Масс-спектрометрия с индуктивно связанной плазмой», «Мышьяк», «Тяжёлые металлы», «Железо», «Селен», «Ртуть», «Свинец в глюкозе», «Никель в полиолах» и др.

В некоторых случаях для описания методов и методик определения элементных примесей используют следующие термины и определения.

Целевые элементы ‒ это элементы, которые должны быть определены и оценены при испытании. К целевым относят элементы, потенциально присутствующие в испытуемом материале, включая добавленные преднамеренно в процессе производства, хранения и т.д. При испытании любых образцов к целевым элементам при обосновании, как правило, относят элементные примеси класса 1, т.е. кадмий, свинец, мышьяк, ртуть.

Целевое предельное значение или целевая концентрация (ПДК) ‒ это допустимое значение оцениваемой элементной примеси. Превышение целевого предельного значения свидетельствует о том, что испытуемый материал имеет превышенное значение допустимой концентрации оцениваемой элементной примеси.

Рабочая концентрация (J) ‒ это концентрация (по массе) целевых элементов, содержащихся в целевом предельном значении, надлежащим образом доведённая до рабочего диапазона прибора. Например, если целевыми элементами являются свинец и мышьяк, то для анализа твёрдого лекарственного препарата для приёма внутрь с суточной дозой 10 г/сут, целевое предельное значение (ПДК) в соответствии с данными табл. 3 составит 0,5 мкг/г и 1,5 мкг/г соответственно.

Контрольный раствор (сопоставимая матрица) ‒ это раствор, имеющий тот же состав растворителя, что и раствор испытуемого образца. В случае водных растворов контрольный раствор будет обозначать, что в обоих растворах используются те же самые кислоты одной и той же концентрации, а также стабилизатор ртути.

Форма нахождения элементной примеси. Выбор метода определения элементной примеси зависит от формы её нахождения в испытуемом образце. Необходимо обратить внимание на выбор метода определения мышьяка и ртути, так как предельные значения этих элементных примесей разработаны на основе их неорганических, наиболее токсичных, форм нахождения. Количественное содержание мышьяка может быть установлено с использованием методики определения общего содержания мышьяка. В этом случае исходят из предположения, что если общее содержание мышьяка ниже нормативного предела, то материал должен содержать неорганического мышьяка в количестве ниже нормативного предела, даже в том случае, если весь мышьяк в материале присутствует в виде арсенитов As (III) или арсенатов As (V). Если же общее количество мышьяка превышает PDE, то для количественной оценки различных форм нахождения мышьяка в материале необходимо выбрать соответствующий метод анализа.

PDE ртути установлены на основании определения содержания Hg (II) в неорганической форме. Форма метилртути, которая является более токсичной, редко обнаруживается в лекарственных средствах, хотя до настоящего времени имеет место использование тиомерсала как антимикробного консерванта в вакцинах. PDE для лекарственных средств, которые потенциально могут содержать метилртуть, например, вещества, полученные из рыбы, рекомендуется указывать в фармакопейной статье.

Пробоподготовка. Выбор способа подготовки образцов для определения элементных примесей является важным моментом, так как многие методики, не использующие прямое измерение, в значительной степени зависят от переноса образца. Если в фармакопейной статье не указан способ пробоподготовки образца, то может быть использована любая надлежащим образом валидированная методика пробоподготовки из перечисленных ниже. В тех случаях, когда для получения сигнала приемлемой интенсивности в испытуемый образец необходимо ввести стандартную добавку (стандартный раствор), те же определяемые целевые элементы следует добавить в контрольный раствор, используя, по возможности, тот же стандартный раствор. Стандартные растворы могут содержать несколько определяемых целевых элементов. Все жидкие образцы должны быть взвешены.

При использовании системы атомизации наиболее распространённым способом введения образца является распыление раствора. Если исследуемый образец представляет собой жидкость, то испытание можно проводить без растворения или иной подготовки образца лекарственного средства. Некоторые методики определения элементных примесей также позволяют исследовать нерастворенные образцы. Но, как правило, твёрдые образцы необходимо предварительно растворить в подходящем растворителе.

Если образец растворим в водном растворителе, то используют прямое растворение образца в воде или водных растворах азотной кислоты разведённой ввиду минимальных мешающих факторов по сравнению с другими растворителями. В установленных случаях для растворения образца могут быть применены другие кислоты различных концентраций: хлористоводородная, фтористоводородная, хлорная, серная, а также разведённые основания, водорода пероксид, комбинации кислот и оснований и др. Вязкость серной кислоты выше, чем у других кислот, что необходимо учитывать из-за её влияния на текучесть раствора. Используемые кислоты, основания и водорода пероксид должны быть высокой чистоты; для приготовления водных растворов необходимо использовать воду дистиллированную деионизированную.

Если образец растворим в органическом растворителе, то используют прямое растворение, растворяя образец непосредственно в органическом растворителе, возможно использование комбинации органических растворителей. Поскольку не всегда возможно получение органических растворителей, не содержащих элементных примесей, следует применять органические растворители наиболее высокой чистоты в отношении определяемых элементных примесей. При использовании методов, особенно методов с использованием индуктивно связанной плазмы, в которых образцы вводят в плазму путём распыления растворов, важно учитывать возможное влияние матрицы и мешающих факторов, исходящих от растворителя.

Если установлено, что образец не растворим ни в водных, ни в органических растворителях, то могут быть применены разнообразные способы его высокотемпературного разложения, озоления, минерализации, сжигания и т.п. Полное извлечение, экстрагирование элементной примеси в виде, например, ионов металла, является предпочтительным при выборе способа подготовки образца для последующего растворения и получения косвенного (опосредованного) раствора. Схема пробоподготовки образца должна обеспечить получение достаточного количества пробы для количественного определения предельного значения каждого целевого элемента.

Разложение образца может быть проведено в открытой или закрытой ёмкости в зависимости от природы образца, определяемой элементной примеси и её концентрации. Если элементная примесь является летучей, то применять разложение образца в открытой ёмкости не рекомендуется. Методику разложения образца считают пригодной, если полученный раствор является прозрачным.

Примером пробоподготовки образцов в закрытой ёмкости является разложение образца в концентрированной кислоте в закрытой системе, позволяющей минимизировать потерю летучих элементных примесей. Для пробоподготовки может быть пригодна любая концентрированная кислота, но для каждой из них характерны свои риски, поэтому в любом случае необходимо соблюдать соответствующие меры безопасности. При отсутствии других указаний, можно использовать следующую методику пробоподготовки: для предварительного разложения к 0,5 г испытуемого образца прибавляют 5 мл концентрированной кислоты и в неплотно закрытой ёмкости помещают в вытяжной шкаф на 30 мин, затем прибавляют ещё 10 мл концентрированной кислоты и подвергают дальнейшему разложению в системе закрытого типа до завершения разложения или экстрагирования. Допускается варьировать количество концентрированной кислоты в зависимости от особенностей (вместимости) оборудования. При необходимости процедуру разложения повторяют, прибавив дополнительно 5 мл концентрированной кислоты.

В качестве альтернативного варианта пробоподготовки допускают экстрагирование элементных примесей выщелачиванием, если это обосновано результатами научных исследований конкретной элементной примеси в лекарственном средстве.

Все реактивы, используемые для подготовки образцов и стандартных растворов, не должны содержать определяемые элементные примеси.

Важно учитывать выбор типа, материала конструкции, предварительную обработку и очистку аналитического лабораторного оборудования, используемого в анализе элементных примесей. Материал должен быть инертным и, в зависимости от конкретного применения, устойчивым к щелочам, кислотам и/или органическим растворителям. Некоторые анализы, особенно в случае ультраследовых количеств элементных примесей, необходимо проводить с осторожностью для предотвращения адсорбции элементных примесей на поверхности сосуда. Химическая контаминация раствора образца примесями элементов и ионами, извлекаемыми из материала сосуда, также может привести к искажению результата определения.

Допускается использование мерной посуды из стекла, не отвечающего требованиям класса А, если валидация методики, предусматривающей использование такой посуды, или испытание на пригодность системы экспериментально подтверждают пригодность методики для предполагаемой цели.

При использовании реакционных сосудов высокого давления и микроволнового лабораторного оборудования необходимо соблюдать требования инструкции по технике безопасности и эксплуатации оборудования производителя.

Измерение. Выбор методики, способа измерения зависит, в основном, от матрицы испытуемого образца, характеристик и целевого предельного значения определяемого целевого элемента(ов). Определение проводят в соответствии с инструкциями производителя используемого прибора в отношении программы и длины волны.

Пригодность системы. Испытание на пригодность системы необходимо проводить в день выполнения анализа для обеспечения приемлемости пробоподготовки и системы измерения.

Критерии приемлемости для испытуемого раствора. Полученный в ходе пробоподготовки испытуемый раствор должен быть прозрачным.

Критерии приемлемости для системы измерения: измеренная концентрация стандартного раствора целевого элемента в диапазоне концентраций на используемой калибровочной кривой не должна отличаться от фактической концентрации более чем на 20 %.

Расчёт. Для расчёта содержания целевых элементов используют значение, полученное для контрольного раствора, учитывающее загрязнение используемых реактивов. После завершения анализа концентрацию целевого элемента в образце вычисляют с помощью программного обеспечения прибора по концентрации целевого элемента в испытуемом растворе. При отсутствии программного обеспечения или указаний для расчёта в общей фармакопейной статье на соответствующий метод испытания, концентрация целевого элемента в образце может быть рассчитана по концентрации целевого элемента в растворе по следующему выражению:

(4)

где C – концентрация целевого элемента в анализируемом образце, мкг/г;
А – концентрация целевого элемента в растворе, определённая по показаниям прибора, мкг/мл;
m – масса испытуемого образца, используемого для приготовления исходного раствора, г;
V1 – объём исходного раствора, мл;
V2 общий объём раствора, приготовленного разведением исходного раствора, мл;
V3 – объём исходного раствора, используемого для разведения, мл.

Особенности определения элементных примесей методами атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (АЭС-ИСП) и масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (МС-ИСП). Эти методы позволяют определять любые элементные примеси в рамках одного многоэлементного измерения. При определении элементных примесей методом АЭС-ИСП, как правило, используют приборы, измеряющие излучения с помощью оптического детектирования при длинах волн, характеристических для определяемых элементов, вследствие чего метод также называют методом оптико-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (ОЭС-ИСП). По сравнению с методом АЭС-ИСП, метод МС-ИСП, несомненно, обладает лучшими показателями линейности и чувствительности.

В день выполнения испытания необходимо провести стандартизацию и оценку пригодности системы с использованием надлежащих стандартных образцов.

При расчёте рабочей концентрации (J) необходимо учитывать не только целевое предельное значение (ПДК) определяемой элементной примеси (табл. 3), на также исходить из линейного динамического диапазона используемого прибора. Ранее было указано, что ПДК для целевых элементов свинца и мышьяка для лекарственного препарата для приёма внутрь, согласно табл. 3, составляет 0,5 мкг/г и 1,5 мкг/г соответственно. При использовании метода МС-ИСП для этих элементов установлен линейный динамический диапазон от 0,01 нг/мл до 0,1 мкг/мл, поэтому для того, чтобы анализ был проведён в линейном динамическом диапазоне прибора, требуется взять коэффициент разведения не менее 1:100. Таким образом, при прибавлении коэффициента разведения величина рабочей концентрации (J) будет равна 5 нг/мл для свинца и 15 нг/мл для мышьяка.

При определении элементных примесей методами АЭС-ИСП и МС-ИСП в случаях, когда правильность и прецизионность не достаточны, используют подходящий внутренний стандарт и/или стандартную матрицу, соответствующую испытуемым образцам. В любом случае при подборе подходящего внутреннего стандарта следует учитывать определяемый целевой элемент(ы), его энергию ионизации, длины волн или массу, а также природу матрицы образца.

Определение проводят в соответствии с ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой» или ОФС «Масс-спектрометрия с индуктивно связанной плазмой» и рекомендациями производителя: в отношении выбора программы и длины волны для метода АЭС-ИСП, в отношении выбора программы и m/z для метода МС-ИСП. Должны быть приняты необходимые меры по корректировке интерференций, вызываемых матрицей, например, наложения длин волн в АЭС-ИСП или интерференции аргона хлорида при определении мышьяка методом МС-ИСП.

Готовят необходимые растворы для определения.

Стандартный раствор 1. Должен содержать целевые элементы в концентрации, соответствующей (1,5 J) в сопоставимой матрице.

Стандартный раствор 2. Должен содержать целевые элементы в концентрации, соответствующей (0,5 J) в сопоставимой матрице.

Исходный испытуемый раствор. Раствор готовят, исходя из особенностей его пробоподготовки; при необходимости раствору дают остыть. При определении содержания элементной примеси ртути к испытуемому раствору добавляют соответствующий стабилизатор.

Рабочий испытуемый раствор. Исходный испытуемый раствор разбавляют соответствующим растворителем до получения конечной концентрации целевых элементов не более, чем концентрация (1,5 J) в сопоставимой матрице.

Контрольный раствор. Сопоставимая матрица.

Методика. Настраивают параметры соответствующих приборов для определения методом МС-ИСП или АЭП-ИСП согласно рекомендациям производителя.

Измеряют значения стандартного раствора 1, стандартного раствора 2 и контрольного раствора.

Измеряют значение рабочего испытуемого раствора и получают результат количественного определения.

Вновь измеряют значение стандартного раствора 1.

Проверка пригодности системы. Сравнивают результаты измерения стандартного раствора 1 до и после измерения рабочего испытуемого раствора.

Критерии пригодности системы. Не более 20 % для каждого целевого элемента. Если испытуемый образец содержит большое количество элементов, то перед его введением необходимо тщательно промыть систему для минимизации переноса веществ из предыдущей пробы.

Обработка данных. Анализ проводят в соответствии с рекомендациями производителя приборов. Полученные результаты испытания пересчитывают на исходный испытуемый раствор образца.

##### Требования к валидации альтернативных методик

Если приведённые в настоящей общей фармакопейной статье и фармакопейных статьях на лекарственные средства методики не отвечают потребностям конкретной области применения по определению элементных примесей, то может быть разработана альтернативная методика. Альтернативные методики необходимо валидировать и подтверждать их пригодность, руководствуясь требованиями ОФС «Валидация аналитических методик». Объём валидации, необходимый для обеспечения приемлемости альтернативной методики, зависит от того, предназначена ли она для определения предельного содержания элементных примесей или для количественного определения элементной примеси. Любая альтернативная методика, которая была валидирована и отвечает нижеуказанным критериям приемлемости, считается пригодной для применения.

Валидационные требования к методикам для определения предельного содержания элементных примесей. Выполнение этих требований должно быть продемонстрировано в рамках эксперимента с использованием соответствующей методики определения пригодности системы и стандартных материалов.

Пригодность метода должна быть определена путём проведения исследований с исследуемым материалом или смесью с добавлением известных концентраций каждого целевого элемента в соответствующей предельной концентрации. Перед выполнением любых этапов подготовки образца в испытуемый материал или смесь должны быть добавлены целевые элементы.

Предел обнаружения (только в случае определения предельного содержания элементных примесей). Определяют наименьшую концентрацию, для которой аналитический сигнал чётко отличается от аналитического сигнала контрольного раствора.

Стандартный раствор целевых элементов. Готовят раствор целевого элемента(ов) в целевой концентрации.

Испытуемый раствор 1 с целевыми элементами. Готовят раствор испытуемого образца с добавлением известного количества стандартного раствора целевых элементов в целевой концентрации, подготовленных в соответствии с подразделом «Пробоподготовка».

Испытуемый раствор 2 с целевыми элементами. Готовят раствор испытуемого образца с добавлением известного количества стандартного раствора целевых элементов в концентрации 80 % от целевой концентрации для целевых элементов, подготовленных в соответствии с подразделом «Пробоподготовка».

Испытуемый раствор без целевых элементов. Раствор испытуемого образца, растворённый или подвергшийся разложению в соответствии с подразделом «Пробоподготовка».

Критерии приемлемости для неинструментальных методик. Испытуемый раствор 1 с целевыми элементами должен давать сигнал или иметь интенсивность, равную или превышающую значение сигнала или интенсивности стандартного раствора с целевыми элементами. Испытуемый раствор 2 с целевыми элементами должен давать сигнал или иметь интенсивность меньшую, чем испытуемый раствор 1 с целевыми элементами.

Сигнал или интенсивность любого испытуемого раствора, содержащего целевые элементы, должен быть более интенсивным, чем сигнал испытуемого раствора без целевых элементов.

Критерии приемлемости для инструментальных методик. Среднее значение трёх повторных измерений испытуемого раствора 1 с целевыми элементами должен находиться в диапазоне ±15 % от среднего значения повторных измерений стандартного раствора целевых элементов. Среднее значение повторных измерений испытуемого раствора 2 с целевыми элементами должно быть меньше среднего значения стандартного раствора целевых элементов. Значения, полученные для каждого из испытуемых растворов с целевыми элементами корректируют, используя испытуемый раствор без добавления целевых элементов.

Прецизионность (повторяемость) инструментальных методик.

Испытуемый образец. Готовят шесть независимых образцов испытуемого материала с добавлением соответствующих стандартных растворов целевых элементов в установленной целевой концентрации.

Критерии приемлемости. Относительное стандартное отклонение должно быть не более 20 % для каждого целевого элемента.

Прецизионность неинструментальных методик демонстрируют выполнением требований по показателю «Предел обнаружения».

Специфичность. Специфичность представляет собой способность аналитической методики (пробоподготовка, измерение) обеспечивать достоверное определение элемента(ов) в присутствии предполагаемых компонентов, например, газа-носителя, примесей, матрицы.

Критерии приемлемости. Методика должна давать однозначные результаты для каждого целевого элемента в присутствии предполагаемых компонентов, включая другие элементные примеси, компоненты матрицы и других мешающих факторов. Специфичность подтверждают соответствием требованию для правильности определения элемента(ов).

Валидационные требования к методикам для количественного определения элементных примесей. Выполнение требований необходимо подтверждать в рамках эксперимента с использованием соответствующей методики испытания пригодности системы и стандартных образцов. Выполнение требований свидетельствует об эквивалентности такой фармакопейной методики в отношении количественного определения целевых элементов.

Правильность. Правильность подтверждают с помощью стандартного образца или выполнением испытания на открываемость. Открываемость может быть определена на образце испытуемой субстанции, в который добавлено известное количество стандартного образца целевого элемента.

Стандартные растворы. Готовят растворы с целевыми элементами в концентрациях в диапазоне 50–150 % от значения рабочей концентрации (J), используя соответствующие стандартные материалы.

Испытуемые образцы. Готовят испытуемые образцы с добавлением соответствующих стандартных материалов перед любым этапом подготовки образцов (разложением или растворением) в концентрациях в диапазоне 50-150 % от значения рабочей концентрации (J )для каждого целевого элемента.

Критерии приемлемости. Степень извлечения добавленных целевых элементов: 70–150 % от среднего значения трёх параллельных измерений образца в каждой концентрации.

Прецизионность (повторяемость)

Испытуемые образцы: Готовят шесть отдельных образцов испытуемого вещества (взятых из одной партии), в которые добавляют соответствующий стандартный образец целевых элементов в установленной концентрации.

Критерии приемлемости. Относительное стандартное отклонение должно быть не более 20 % (n = 6) для каждого целевого элемента.

Промежуточная прецизионность. Должно быть установлено влияние случайных факторов (внутрилабораторное варьирование) на аналитическую прецизионность методики. Испытания включают повторение анализа либо в другой день (разные дни), либо на другом оборудовании, либо с привлечением другого специалиста, либо при условии всего вышеперечисленного. Прибавляют результаты данного анализа к результатам анализа повторяемости, чтобы общее количество анализов равнялось 12.

Критерии приемлемости. Относительное стандартное отклонение должно быть не более 25 % (n равно 12) для каждого целевого элемента.

Специфичность. Специфичность представляет собой способность аналитической методики (пробоподготовка, измерение) обеспечивать достоверное определение элемента(ов) в присутствии предполагаемых компонентов, например, газа-носителя, примесей, матрицы.

Критерии приемлемости. Методика должна давать однозначные результаты для каждого целевого элемента в присутствии предполагаемых компонентов, включая другие элементные примеси, компоненты матрицы и других мешающих факторов. Специфичность подтверждают соответствием требованию для правильности определения элемента(ов).

Предел количественного определения. Используют результаты определения правильности. Определяют наименьшую концентрацию, соответствующую критериям приемлемости.

Критерии приемлемости. Предел количественного определения элементных примесей должен быть ниже предела, указанного в фармакопейной статье.

Диапазон применения методики и линейность. Валидационные требования демонстрируют за счёт соответствия требованию для значения правильности (открываемости).

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0041 Вспомогательные вещества

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на вспомогательные вещества, предназначенные для производства/изготовления лекарственных препаратов.

Вспомогательные вещества – вещества неорганического или органического происхождения, используемые в процессе производства/ изготовления лекарственных препаратов для придания им необходимых физико-химических свойств.

##### Общие положения

Вспомогательные вещества применяют при производстве/изготовлении лекарственных препаратов, выпускаемых в виде различных лекарственных форм, при этом, количество вспомогательного (-ых) вещества (-в), в отдельных случаях, может составлять наибольшую часть общей массы (объема) лекарственного препарата.

Для производства/изготовления лекарственных препаратов используют вспомогательные вещества, позволяющие получать лекарственные препараты надлежащего качества.

Основная цель использования вспомогательных веществ заключается в обеспечении требуемых механических, физико-химических и биофармацевтических характеристик лекарственных препаратов, для достижения которой вспомогательные вещества должны выполнять различные функции, включая следующие, наиболее общие:

- обеспечение и повышение безопасности, эффективности, биодоступности лекарственного препарата;

- обеспечение и улучшение стабильности лекарственного препарата в течение заявленного срока годности;

- обеспечение оптимизации технологического процесса производства/изготовления лекарственного препарата;

- обеспечение физиологической комфортности лекарственного препарата для пациента, корригирование органолептических свойств, идентификация лекарственного препарата и др.

Источником получения вспомогательных веществ может быть сырье минерального, растительного или животного происхождения. Вспомогательные вещества могут быть получены синтетическим, полусинтетическим, биохимическим, микробиологическим путем, методом экстракции или извлечения из сырья и др. Вспомогательные вещества природного происхождения могут представлять собой смеси химически родственных компонентов.

Дополнительные данные и, если применимо, требования к вспомогательным веществам, используемым при производстве различных групп лекарственных препаратов, могут быть указаны в соответствующих ОФС, например, ОФС «Фармацевтические субстанции», ОФС «Биологические лекарственные препараты», ОФС «Кровезаменители, ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты», ОФС «Вспомогательные вещества для гомеопатических лекарственных средств» и др. Информация об использовании основных функциональных классов вспомогательных веществ в составе лекарственных препаратов, выпускаемых в различных лекарственных форм, как правило, приведена в соответствующих ОФС на лекарственные формы, например, ОФС «Аэрозоли», ОФС «Таблетки», ОФС «Суппозитории», ОФС «Мягкие лекарственные формы» и др.

Если в процессе производства лекарственных препаратов применяют вспомогательные вещества, полученные с использованием материалов от человека или животного, то к ним должны быть применены требования соответствующих ОФС, включая ОФС «Вирусная безопасность»; ОФС «Вирусная безопасность лекарственных препаратов из плазмы крови человека»; ОФС «Уменьшение риска передачи возбудителей губчатой энцефалопатии животных при применении лекарственных средств».

##### Функциональные характеристики вспомогательных веществ

При осуществлении фармацевтической разработки лекарственного препарата применение выбранных вспомогательных веществ, их содержание, функциональные характеристики и другие параметры, обеспечивающие выпуск лекарственного препарата, обладающего требуемым качеством, эффективностью в течение заявленного срока годности, должно быть обосновано.

Функциональные характеристики вспомогательных веществ – измеряемые физические или химические параметры вспомогательных веществ, обуславливающие их пригодность к функциональному назначению.

Выполнение вспомогательными веществами требуемых функций определяется их физическими и химическими свойствами и, в некоторых случаях, содержанием в них добавок, предназначенных для улучшения желаемых функциональных характеристик вспомогательных веществ.

Кроме того, результативность выполнения вспомогательными веществами необходимых функций может зависеть от комплекса взаимодействий между компонентами лекарственного препарата, а также особенностей технологического процесса производства. В связи с этим требуемые функциональные характеристики (параметры) вспомогательных веществ могут быть определены только в контексте конкретного состава и процесса производства/изготовления лекарственного препарата.

Одно и то же вспомогательное вещество может обладать многоцелевыми функциональными характеристиками и присутствовать в составе различных лекарственных препаратов с разным назначением, поэтому для достижения требуемых характеристик конкретного лекарственного препарата могут быть обозначены требуемые в этом случае функциональные характеристики вспомогательного (-ых) вещества (-в).

Некоторые свойства, функциональные характеристики вспомогательных веществ (например, такие как размер частиц вспомогательного вещества при его использовании в производстве, или молекулярная масса полимерного материала, используемого в качестве компонента, увеличивающего вязкость лекарственного препарата) могут быть критическими для определенного процесса производства и конкретного лекарственного средства.

Критические характеристики вспомогательных веществ – это физические, химические, биологические или микробиологические свойства вспомогательных веществ, оказывающие значительное влияние на безопасность и эффективность лекарственного препарата. Для обеспечения надлежащего качества лекарственного препарата в течение установленного срока годности, критические характеристики вспомогательных веществ должны соответствовать установленным нормам.

##### Классификация

В зависимости от основной функции, выполняемой вспомогательным веществом в лекарственном препарате, вспомогательные вещества разделяются на функциональные классы. В настоящее время различают более 40 функциональных классов вспомогательных веществ.

Одно и то же вспомогательное вещество может быть отнесено к двум и более функциональным классам в зависимости от выполняемых функций для конкретного лекарственного препарата и технологического процесса его производства/изготовления.

В настоящей общей фармакопейной статье приведены информационные сведения, характеризующие некоторые основные функциональные классы вспомогательных веществ; данные сведения не следует рассматривать как ограничивающие или всеобъемлющие.

Антиадгезивные вещества (Anti-adhesives) – вспомогательные вещества, уменьшающее налипаемость или прилипаемость гранулята или таблеточной массы к поверхности пуансона, используемые в технологическом процессе производства/изготовления таблеток.

Антимикробные консерванты (Preservatives) – вспомогательные вещества органической или неорганической природы, обладающие антимикробным действием: предотвращающие и замедляющие рост и развитие микроорганизмов (бактерий, плесневых грибов, дрожжей и др.), которые могут попасть в лекарственный препарат в процессе производства / изготовления или при использовании препарата в многодозовой упаковке.

Антиоксиданты (Antioxidants) – вспомогательные вещества, препятствующие нежелательному окислению действующего или других вспомогательных веществ за счет сильных восстановительных свойств или других механизмов взаимодействия.

Антислеживающие вещества (Anticaking agents) – вспомогательные вещества, препятствующие затвердеванию, слеживанию, комкованию порошкообразных лекарственных форм, используемые для стабилизации их агрегатного состояния.

Ароматизаторы, корригенты запаха (Flavoring agents) – вспомогательные вещества, предназначенные для придания лекарственному препарату желаемого запаха, например, запаха фруктов, ягод, мяты, ванили и др.

Буферные вещества (Buffers) – вспомогательные вещества, предназначенные для регулирования рН среды лекарственной формы лекарственного препарата.

Вещества маскирующие (исправляющие) вкус, корригенты вкуса (Taste-masking agents) – вспомогательные вещества, предназначенные для придания лекарственному препарату желаемого вкуса, например, вкуса фруктов, ягод, шоколада и др.

Вещества, обеспечивающие требуемую осмолярность (Osmotic agents, Tonicity agents) – вспомогательные вещества, предназначенные, в установленных случаях, для установления требуемых значений осмолярности некоторых лекарственных препаратов, прежде всего в лекарственных препаратах жидких лекарственных форм, например, растворов для инфузий, глазных капель и др.

Дезинтегранты (Disintegrants) – вспомогательные вещества, обеспечивающие распадаемость (дезинтегрирование) таблеток и других твердых дозированных лекарственных форм.

Загустители (Thickeners) – вспомогательные вещества, предназначенные для получения и сохранения желаемой консистенции твердых или жидких лекарственных форм, используемые в технологическом процессе производства/изготовления лекарственных препаратов. Как правило, загустители представляют собой высокомолекулярные вещества, способные адсорбировать воду или другие жидкости, образуя гомогенные, вязкие и коллоидные растворы.

Красители (Colourants) – вспомогательные вещества, используемые для придания окраски лекарственным препаратам.

Криопротекторы (Crioprotectors) – вспомогательные вещества, способные препятствовать образованию кристаллов льда и разрушению оболочки и денатурации белковой молекулы лекарственного препарата в процессе замораживания.

Наполнители, разбавители (Filling agents) – вспомогательные вещества, используемые для придания твердым лекарственным формам заданного объема или массы.

Основа лекарственного препарата (Basis of the drug) – вспомогательное вещество или смесь вспомогательных веществ, являющееся носителем действующего вещества/веществ, обеспечивающее требуемый объем/массу, необходимую консистенцию и другие характеристики лекарственного препарата в определенной лекарственной форме. Основы лекарственных препаратов могут быть отнесены, например, мазевые, суппозиторные, гелеобразующие и другие основы.

Пенетраторы (Penetration enhancers) – вспомогательные вещества, усиливающие проницаемость, ускоряющие всасывание и способствующие проникновению действующего вещества лекарственного препарата через кожу или иной покров.

Пенообразователи (Foaming agents) – вспомогательные вещества, используемые для образования пены и создающие условия для равномерной диффузии действующего вещества в виде газообразной фазы в жидкую лекарственную форму.

Пластификаторы (Plasticizers) – вспомогательные вещества, придающие полимерным материалам пластичность или эластичность, упругость, износостойкость, прочность на разрыв, используемые для облегчения технологического процесса производства/изготовления лекарственных препаратов.

Подкисляющие вещества (Acidifying agents) – вспомогательные вещества, используемые для создания кислого значения среды и подавляющее гидролиз действующего вещества, образованного сильной кислотой и слабым основанием.

Подщелачивающие вещества (Аlkalizing agents) – вспомогательные вещества, используемые для создания щелочного значения среды и, таким образом, подавляющее гидролиз действующего вещества, образованного слабой кислотой и сильным основанием.

Пролонгаторы (Extenders) – вспомогательные вещества, увеличивающие время нахождения и действия лекарственного препарата в организме.

Пропелленты (Propellants) – вспомогательные газообразные вещества, на потенциальной энергии которых основан принцип вытеснения лекарственного препарата, находящегося в аэрозольном баллоне и его диспергирование.

Растворители (Solvents) – жидкие вспомогательные вещества, представляющие собой химическое соединение или их смеси, используемые в качестве дисперсионной среды, способные растворять действующие и другие вспомогательные вещества с образованием однородных систем – растворов; растворители участвуют в формировании объема лекарственной формы лекарственного препарата и являются неотъемлемой ее частью.

Связывающие вещества (Binders) – вспомогательные вещества, используемые в технологическом процессе производства/изготовления лекарственных препаратов для обеспечения прочности таблеток и других твердых лекарственных форм за счет связывания компонентов.

Скользящие вещества (Glidants) – вспомогательные вещества, используемые в технологическом процессе производства/изготовления лекарственных препаратов в форме таблеток для улучшения текучести гранул или порошка за счет уменьшения трения между частицами.

Смазывающие вещества (Lubricants) – вспомогательные вещества, способствующие уменьшению силы трения между боковой поверхностью таблетки и стенками матрицы кюветы пуансона, в которой таблетка формируется, используемые в технологическом процессе производства/изготовления лекарственных препаратов в форме таблеток.

Смачивающие вещества, увлажнители (Humectants) – вспомогательные вещества, используемые для связывания компонентов в таблетках и других твердых лекарственных формах; в технологическом процессе производства/изготовления лекарственных препаратов используются в виде раствора.

Солюбилизаторы (Solubilizers) – поверхностно-активные вспомогательные вещества, способствующие растворению нерастворимых или труднорастворимых действующих или других вспомогательных веществ в растворителе.

Сорастворители (Cosolvents) – вспомогательные вещества, представляющие собой комплекс (смесь) растворителей, предназначенных для растворения действующих и других вспомогательных веществ, которые не могут быть растворены каждым отдельным растворителем.

Стабилизаторы (Stabilizers) – наиболее общий термин, объединяющий вспомогательные вещества, обладающие способностью обеспечивать стабильность лекарственного препарата в течение заявленного срока годности, за счет связывания различных химических соединений, активирующих деструкцию лекарственного препарата.

Экстрагенты (Extractants) – вспомогательные вещества, используемые для экстракции действующих веществ или комплекса действующих веществ из сырья растительного, животного или другого происхождения.

Эмульгаторы (Emulsifiers) – вспомогательные вещества, используемые для стабилизации эмульсий.

Вспомогательные вещества также могут быть классифицированы в зависимости от способа/пути введения и применения лекарственного препарата, для производства/изготовления которого они использованы: для приема внутрь, для наружного, местного, парентерального, ингаляционного, офтальмологического, трансдермального применения.

##### Испытания

В зависимости от состава и назначения лекарственного препарата одно и то же вещество в ряде случаев может быть использовано как в качестве фармацевтической субстанции (действующего вещества), так и в качестве вспомогательного вещества. Такие вспомогательные вещества считаются фармакопейного качества лишь при их соответствии всем требованиям фармакопейной статьи.

Если вспомогательные вещества не являются хорошо изученными для нового пути введения лекарственного препарата, в состав которого они включены, безопасность их применения должна быть подтверждена.

Для оценки качества вспомогательных веществ могут быть применены универсальные испытания по определению показателей: «Описание», «Подлинность», «Чистота», «Количественное определение». Дополнительные требования к качеству вспомогательных веществ устанавливают в случае использования их для получения лекарственных препаратов для парентерального, офтальмологического, ингаляционного применения, а также лекарственных препаратов, к которым предъявляются требования по показателям «Стерильность», «Пирогенность» или «Аномальная токсичность», «Бактериальные эндотоксины» и др.

Аналитические методики, используемые при осуществлении контроля качества вспомогательных веществ, должны быть валидированы в соответствии с ОФС «Валидация аналитических методик».

Если вспомогательные вещества не являются хорошо изученными, для оценки их качества могут быть применены химические характеристики. Например, вспомогательные вещества, относящиеся к полимерам определенного класса, могут различаться по составу в зависимости от структуры гомополимеров, блоков полимеров и сополимеров, степени полимеризации и, следовательно, по массе и молекулярно-массовому распределению, степени замещения и, в некоторых случаях, даже по заместителям в полимерной цепи. При фармацевтической разработке определяют приемлемые диапазоны значений для каждого параметра, критического как для процесса производства, так и для характеристик лекарственного препарата.

Испытания для оценки физических характеристик вспомогательных веществ. Для определения и нормирования необходимых функциональных характеристик вспомогательных веществ, включая критические, при фармацевтической разработке, технологическом процессе производства/изготовления лекарственных веществ могут быть проведены соответствующие фармацевтико-технологические испытания.

Многие вспомогательные вещества, используемые в производстве/ изготовлении лекарственных препаратов, представляют собой твердые порошкообразные сыпучие вещества с различными физическими характеристиками. На функциональные характеристики вспомогательных веществ могут оказать влияние такие свойства твердых сыпучих веществ, как распределение частиц по размерам, пористость, удельная площадь поверхности, насыпная плотность, сыпучесть, смачиваемость, водопоглощение. В зависимости от диапазона размеров частиц, распределение частиц по размерам может быть определено с помощью методов анализа, указанных в ОФС «Ситовой анализ» или в ОФС «Определение распределения частиц по размеру методом лазерной дифракции света». Для определения пористости твердых веществ можно использовать методы, указанные в ОФС «Определение размера пор методом ртутной порозиметрии» или в ОФС «Определение пористости методом адсорбции-десорбции азота», для определения удельной площади поверхности порошкообразных веществ – методы, указанные в ОФС «Определение удельной площади поверхности методом воздухопроницаемости» или в ОФС «Определение удельной площади поверхности порошков методом газовой адсорбции». Методы оценки сыпучести и насыпной плотности порошков описаны в ОФС «Сыпучесть порошков», ОФС «Насыпная плотность и плотность после уплотнения», ОФС «Определение характеристик сыпучести порошков методом сдвиговых ячеек». Свойства, обусловленные твердым состоянием вещества, могут оказывать влияние на смачиваемость (ОФС «Смачиваемость пористых твёрдых веществ») и на взаимодействие «вода-твердое вещество» частиц твердого вещества с водой (ОФС «Взаимодействие воды и твёрдого вещества с водой: построение изотерм сорбции-десорбции и определение активности воды»).

Примерами свойств, которые следует учитывать при разработке лекарственных препаратов в твердых лекарственных формах, обусловленных твердым состоянием вспомогательного вещества, являются такие как, полиморфизм, псевдополиморфизм, кристалличность, плотность. Методики оценки этих свойств приведены в соответствующих ОФС («Полиморфизм», «Кристалличность», «Плотность твёрдых веществ» и др.)

Испытания для оценки вспомогательных веществ в лекарственных препаратах. В зависимости от вида лекарственной формы и других аспектов, в состав лекарственных препаратов могут быть включены вспомогательные вещества различных функциональных классов в различных количествах. Наличие и содержание отдельных групп вспомогательных веществ, входящих в состав лекарственных препаратов, подлежит контролю.

Например, вспомогательные вещества – антимикробные консерванты, могут быть добавлены в лекарственные препараты в многодозовой упаковке, предназначенные для парентерального, офтальмологического применения, в жидкие лекарственные формы для приема внутрь, для местного применения и т.д., за исключением тех случаев, когда фармацевтическая субстанция, находящаяся в составе лекарственного препарата, обладает достаточной антимикробной активностью. При разработке любых лекарственных препаратов, в состав которых включены антимикробные консерванты, необходимость их использования и эффективность этой группы вспомогательных веществ должна быть подтверждена в соответствии ОФС «Определение эффективности антимикробных консервантов».

При осуществлении контроля качестве лекарственных препаратов для парентерального применения, содержащих антимикробные консерванты и антиоксиданты, необходимо проводить испытания этих вспомогательных веществ по показателям «Подлинность» и «Количественное определение» (ОФС «Лекарственные формы для парентерального применения»).

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.1.0035 Определение гигроскопичности

Вводится впервые

Метод основан на определении степени гигроскопичности веществ, (увеличение массы испытуемого образца (далее – образца) в процентах) после выдержки образца в течение определённого времени при определённой относительной влажности воздуха.

Исследование гигроскопичности лекарственных средств основано на их экспериментальном хранении в атмосфере с повышенным парциальным давлением водяного пара. Создание фиксированного парциального давления водяных паров или фиксированной относительной влажности воздуха возможно за счёт использования специального оборудования, например климатических камер, а также за счёт применения эксикаторов с содержанием растворов веществ с известным значением парциального давления водяного пара при определённой температуре.

Гигроскопичность – свойство некоторых веществ поглощать водяные пары (влагу) из воздуха.

Гигроскопичностью обладают смачиваемые гидрофильные вещества капиллярно-пористой структуры и вещества, хорошо растворимые в воде, особенно соединения, образующие с водой кристаллогидраты. Поглощение водяных паров веществами, нерастворимыми в воде, как правило, обусловлено другими процессами, например, адсорбцией, и не относится к гигроскопичности.

Гигроскопические свойства веществ различны. Степень и интенсивность поглощения водяных паров зависят как от химического состава вещества, так и от содержания водяных паров в воздухе. Различают вещества, незначительно поглощающие влагу из воздуха без изменения внешнего вида, вещества, поглощающие влагу из воздуха с увеличением объёма и увлажнением, а также вещества, разлагающиеся или расплывающиеся на воздухе при поглощении влаги.

##### Область применения

Гигроскопичность определяют:

- при разработке лекарственных средств: исследование устойчивости к воздействию водяного пара (фармацевтические субстанции, вспомогательные вещества, лекарственные препараты в виде некоторых лекарственных форм: порошков, гранул, лиофилизатов, экстрактов сухих и др.);

- при технологическом процессе производства лекарственных препаратов: степень гигроскопичности твёрдых лекарственных средств определяет их физико-химические характеристики: сыпучесть, слёживаемость, способность к разложению;

- при установлении срока годности, при установлении условий хранения, для указаний по маркировке и для других рекомендаций, связанных с хранением, упаковкой, маркировкой и транспортированием лекарственных средств;

- при контроле качества лекарственных средств, для которых предусмотрено испытание по показателю «Потеря в массе при высушивании» или испытание по показателю «Определение воды», указанное в фармакопейной статье.

##### Методика

Для экспериментального изучения хранения лекарственного средства используют подготовленный эксикатор или климатическую камеру.

Навеску анализируемого вещества в количестве, указанном в фармакопейной статье для проведения испытания «Потеря в массе при высушивании» или «Определение воды», помещают в предварительно взвешенный стеклянный бюкс высотой 15 мм и внешним диаметром 50 мм. Закрывают бюкс крышкой и взвешивают.

Эксикатор подготавливают следующим образом: нижнюю часть эксикатора заполняют насыщенным раствором аммония хлорида или аммония сульфата при температуре 25 °С (для поддержания температуры, при необходимости, собранный эксикатор можно поместить в термостат).

Затем образец помещают на решётку подготовленного эксикатора или в климатическую камеру с температурой (25±1) °С и относительной влажностью (80±2) %, снимают крышку с бюкса и выдерживают образец в течение 24 ч. По истечении времени бюкс закрывают крышкой, достают из эксикатора или климатической камеры и взвешивают.

Если в процессе изучения хранения образец анализируемого вещества расплылся с образованием жидкости, то взвешивание не проводят.

Рассчитывают увеличение массы исследуемого вещества в процентах (Х) по формуле:

где m1 − масса пустого стеклянного бюкса, г;
m2 − масса стеклянного бюкса с испытуемым образцом до экспозиции во влажной среде, г;
m3 − масса стеклянного бюкса с испытуемым образцом после экспозиции во влажной среде, г.

##### Анализ результатов

Полученные результаты трактуют, применяя для анализируемого вещества следующие термины:

- расплывается на воздухе, если поглощает достаточное количество водяных паров с образованием жидкости;

- очень гигроскопично, если увеличение в массе составляет 15 % и более;

- гигроскопично, если увеличение в массе составляет 2 % и более, но менее 15 %;

- слегка гигроскопично, если увеличение в массе составляет 0,2 % и более, но менее 2 %.

Полученные данные о гигроскопичности (степени гигроскопичности) фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов, приводят при указании внешнего вида лекарственного средства в разделе «Описание» фармакопейной статьи. Эти данные носят, как правило, информационный характер, хотя они и могут опосредованно способствовать предварительной оценке качества лекарственного средства.

#### 1.1.1. Фармацевтическая разработка

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.1.0001 Взаимодействие воды и твёрдого вещества с водой: построение изотерм сорбции-десорбции и определение активности воды

Вводится впервые

Твёрдые фармацевтические вещества в качестве сырья или компонентов лекарственных форм чаще всего вступают в контакт с водой во время обработки и хранения. Это может происходить (а) во время кристаллизации, лиофилизации, влажной грануляции или распылительной сушки; и (б) из-за воздействия атмосферы, содержащей водяной пар, при обработке и хранении, или воздействия других материалов в лекарственной форме, содержащей воду, способную распределяться среди других ингредиентов. В результате контакта твёрдых веществ с водой изменяется ряд свойств: скорость химического распада в «твёрдом состоянии», рост и растворение кристаллов, дисперсность и смачиваемость, текучесть порошка, смазываемость, уплотняемость порошка, твёрдость и микробное загрязнение.

Хотя, когда вода нежелательна, можно принять предупредительные меры, например, устранить всю влагу, уменьшить контакт с атмосферой или контролировать её относительную влажность, это обычно увеличивает затраты без гарантии избегания дальнейших проблем, связанных с влагой, в течение срока годности продукта. Также важно понимать, что существует множество ситуаций, когда для правильной работы требуется определённый уровень содержания воды в твёрдом веществе, например, при уплотнении порошка. Поэтому по обеим причинам важно как можно больше знать о влиянии влаги на твёрдые вещества до того, как будут разработаны стратегии по их обработке, хранению и использованию.

К числу наиболее важных частей необходимой информации о взаимодействии воды и твёрдого тела относятся:

- общее количество присутствующей воды;

- степень адсорбции и абсорбции;

- образуются ли гидраты;

- удельная площадь поверхности твёрдого тела, а также такие свойства, как степень кристалличности, степень пористости, температура стеклования и плавления;

- участок взаимодействия с водой, степень связывания и степень молекулярной подвижности;

- влияние температуры и относительной влажности;

- принципиально необратимая гидратация;

- кинетика поглощения влаги;

- различные факторы, которые могут повлиять на скорость поглощения водяного пара твёрдым телом;

- для водорастворимых твёрдых веществ, способных растворяться под действием сорбированной воды, при каких условиях будет происходить растворение.

###### Физические состояния сорбированной воды

Физическое взаимодействие воды с твёрдым веществом может быть в виде адсорбции − взаимодействия с его поверхностью, или в виде абсорбции (поглощения) − проникновения воды в структуру твёрдого тела. Когда происходит как адсорбция, так и абсорбция, часто используют термин «сорбция». Особенно важно учитывать адсорбцию при взаимодействии воды с твёрдыми веществами, характеризующимися большим значением удельной площади поверхности, например, имеющих очень мелкие частицы или высокую степень внутриклеточной пористости. Абсорбция характеризуется ассоциацией такого количества воды на грамм твёрдого вещества, которое, во-первых, намного превосходит количество воды, способное образовать мономолекулярный слой на поверхности, и, во-вторых, не зависит от удельной площади поверхности.

Большинство кристаллических твёрдых веществ не будут поглощать воду в свою внутреннюю структуру из-за плотной упаковки и высокой степени упорядоченности кристаллической решетки. И наоборот, степень поглощения в твёрдых веществах, имеющих частичную кристалличность и частичную аморфную структуру, часто обратно пропорциональна степени кристалличности. Однако в некоторых кристаллических твёрдых веществах могут образовываться кристаллогидраты. Эти гидраты могут иметь определённое стехиометрическое количество молекул воды, связанных с одной молекулой твёрдого вещества, или быть нестехиометрическими. При дегидратации кристаллогидраты либо сохраняют свою первоначальную кристаллическую структуру, либо теряют свою кристалличность и переходят в аморфное состояние, либо превращаются в новую безводную или менее гидратированную кристаллическую форму.

Аморфные или частично аморфные твёрдые вещества способны поглощать значительное количество воды, поскольку в твёрдом веществе имеется достаточный молекулярный беспорядок, допускающий проникновение воды, набухание или растворение. Такое взаимодействие происходит с большинством аморфных полимеров и с твёрдыми веществами с низкой молекулярной массой, ставшими аморфными во время производства, например, при лиофилизации или после измельчения. Введение дефектов в высококристаллические твёрдые вещества также приводит к такому свойству. Чем больше химическое сродство воды к твёрдому веществу, тем большее её количество может быть им поглощено. Когда вода поглощается аморфным твёрдым веществом, объёмные свойства твёрдого вещества могут значительно измениться. Хорошо известно, например, что аморфные твёрдые вещества в зависимости от температуры могут существовать по крайней мере в одном из двух состояний: «стеклообразном» или «текучем»; температура, при которой одно состояние переходит в другое, называется температурой стеклования Tg.

Вода, поглощённая в объёмную твёрдую структуру, в силу своего влияния на свободный объём твёрдого вещества может действовать в качестве эффективного пластификатора и снижать значение температуры стеклования. Поскольку реологические свойства «текучего» и «стеклообразного» состояний сильно отличаются, т.е. «текучее» состояние обладает гораздо меньшей вязкостью при увеличении температуры стеклования, неудивительно, что содержание влаги влияет на ряд важных объёмных свойств, зависящих от реологии твёрдого тела. Поскольку аморфные твёрдые вещества метастабильны по сравнению с кристаллической формой материала, в случае веществ с малой молекулярной массой поглощённая влага может инициировать возврат твёрдого вещества в кристаллическую форму, особенно если твёрдое вещество переводится сорбированной водой в «текучее» состояние. Это часто происходит при лиофилизации. Дополнительным явлением, характерным для водорастворимых твёрдых веществ, является их склонность к «разжижению», то есть к растворению в собственной сорбированной воде при относительной влажности воздуха, превышающей относительную влажность насыщенного раствора твёрдого вещества. Такое «разжижение» происходит из-за высокой растворимости твёрдого вещества в воде и оно оказывает значительное влияние на коллигативные свойства воды. Это динамический процесс, продолжающийся до тех пор, пока относительная влажность атмосферы превышает относительную влажность насыщенного раствора твёрдого вещества.

Ключ к пониманию того, как вода может влиять на свойства твёрдых тел и наоборот, лежит в понимании расположения молекулы воды и её физического состояния. Вода, связанная с твёрдыми веществами, может существовать в состоянии, непосредственно связанном с твёрдым веществом или в состоянии подвижности, приближающейся к подвижности объёмной воды. Это различие в подвижности воды в твёрдых веществах наблюдалось в измерениях теплоты сорбции, температуры замерзания, ядерного магнитного резонанса, диэлектрических свойств и диффузии. Выявленные изменения в подвижности воды были интерпретированы как происходящие из-за изменения её термодинамического состояния по мере сорбции всё большего количества воды твёрдым веществом. Таким образом, вода, связанная непосредственно с твёрдым веществом, часто считается недоступной для влияния на свойства твёрдого вещества, в то время как возрастающее количество сорбированной воды может стать более кластерным и образовать воду, более похожую на таковую, проявляющую свойства растворителя. В случае кристаллогидратов сочетание межмолекулярных сил (водородная связь) и кристаллической упаковки может привести к очень сильным взаимодействиям воды и твёрдого вещества. Признавая, что присутствие воды в аморфном твёрдом веществе может влиять на температуру стеклования и, следовательно, на физическое состояние твёрдого вещества, при низком содержании воды большинство полярных аморфных твёрдых веществ находится в высоковязком стеклообразном состоянии из-за высоких значений их температуры стеклования. Таким образом, вода «вмораживается» в твёрдую структуру и становится неподвижной при высокой вязкости порядка 1013 Па·с. По мере увеличения количества сорбированной воды и уменьшения температуры стеклования, при приближении к температуре окружающей среды стеклообразное состояние стремится к состоянию «жидкости» и подвижность воды вместе с подвижностью самого твёрдого тела значительно увеличивается. При высокой относительной влажности степень пластификации твёрдого вещества водой может быть достаточно высокой, так что вода и твёрдое вещество достигают значительной подвижности. В целом, таким образом, представленное описание природы сорбированной воды помогает объяснить довольно значительное влияние влаги на ряд объёмных свойств твёрдых веществ, таких как химическая реакционная способность и механическая деформация. Это убедительно свидетельствует о том, что методы оценки химической и физической стабильности твёрдых веществ и твёрдых лекарственных форм должны учитывать влияние, которое вода может оказывать на твёрдое вещество при её сорбции, особенно когда она проникает в твёрдую структуру и действует как пластификатор.

Скорость поглощения воды. Скорость и степень, с которой твёрдые вещества, подверженные воздействию атмосферы, могут сорбировать или десорбировать водяной пар, могут быть критическим фактором при обращении с твёрдыми веществами. Даже простое взвешивание образцов твёрдого вещества на аналитических весах и, следовательно, выдержка тонкого слоя порошка в атмосфере в течение нескольких минут может привести к значительной ошибке, например, при оценке потери в массе при высушивании. Хорошо известно, что водорастворимые твёрдые вещества, подвергающиеся воздействию относительной влажности, превышающей влажность насыщенного раствора этого вещества, самопроизвольно растворяются в сорбируемой воде в течение длительного периода времени. Скорость поглощения воды в целом зависит от ряда параметров, не являющихся критическими при равновесных измерениях, поскольку скорость сорбции в основном контролируется массопереносом с некоторым вкладом механизмов теплопередачи. Таким образом, важную роль могут играть такие факторы, как коэффициенты диффузии пара в воздухе и в твёрдом веществе, конвективный поток воздуха, а также площадь поверхности и геометрия твёрдого слоя и окружающей среды. Поэтому, учитывая влияние указанных факторов, определяющим фактором скорости часто может быть метод, используемый для проведения измерений.

###### Определение изотерм сорбции-десорбции

Принцип. Тенденцию поглощения водяного пара лучше всего оценивать путём измерения сорбции или десорбции в качестве функции относительной влажности, при постоянной температуре и в условиях, когда сорбция или десорбция не зависят от времени, то есть в условиях равновесия.

Относительная влажность воздуха (RH), определяется следующим выражением:

где Рс – давление водяного пара в системе;
Р0 – давление насыщения водяного пара при тех же условиях.

Отношение Pc/P0 называется относительным давлением. Сорбцию или поглощение воды лучше всего оценивать, начиная с высушенных образцов и подвергая их воздействию известной относительной влажности. Десорбцию изучают начиная с системы, уже содержащей сорбированную воду, снижая относительную влажность. Как следует из названия, изотерма сорбции-десорбции действительна только для соответствующей температуры, поэтому для каждой температуры существует своя изотерма. Обычно при равновесии содержание влаги при определенной относительной влажности должно быть одинаковым, независимо от того, определяется ли оно измерением сорбции или десорбции. Однако часто наблюдается гистерезис сорбции-десорбции.

Методы. Образцы выдерживаются в камерах при различной относительной влажности (см. рис. 1). Затем измеряется прирост или убыль массы каждого образца.

Основным преимуществом этого метода является удобство, а основными недостатками – медленная скорость достижения постоянной массы, особенно при высоких значениях относительной влажности, и погрешность, вносимая при открытии и закрытии камеры для взвешивания.

Рисунок 1. Схема прибора для определения сорбции воды: A – регулятор влажности, B – камера с регулируемой температурой, C – весы, D – модуль регулировки влажности воздуха, E – стандартный образец, F – испытуемый образец, G – увлажнитель пара, H – модуль управления потоком, I – сухой газ.

Динамические гравиметрические системы сорбции воды позволяют взвешивать образец в контролируемой системе в режиме реального времени для оценки взаимодействия материала с влагой при различных программируемых уровнях относительной влажности при постоянной температуре. Основным преимуществом контролируемой системы является то, что более надёжно могут быть установлены изотермические условия и что можно следить за динамическим откликом образца на изменяющиеся условия. Точки данных для определения изотермы сорбции (например, от 0 % до примерно 95 % относительной влажности, без конденсации) берутся только после того, как достаточно постоянный сигнал указывает на то, что образец достиг равновесия при данном уровне влажности. В некоторых случаях, например при расплывании вещества от атмосферной влаги, максимальное время может быть сокращено, хотя уровень равновесия не достигается. Устройство должно надлежащим образом регулировать температуру для обеспечения стабильности базовой линии, а также точно контролировать создание относительной влажности. Требуемая относительная влажность может быть создана, например, путём точного смешивания сухого и насыщенного паром газа с помощь регуляторов потока. Необходимо также учитывать электростатическое поведение порошка. Проверка температуры и относительной влажности (контролируемых, например, с помощью сертифицированного гигрометра, сертифицированных солевых растворов или точек расплывания сертифицированных солей в соответствующем диапазоне), должна соответствовать спецификации прибора. Весы должны обеспечивать достаточное разрешение по массе и долговременную стабильность.

Количество поглощаемой воды, не обнаруживаемое гравиметрическим методом, можно определить также, используя объёмные методы. В некоторых случаях предпочтительным может быть прямой анализ содержания воды различными методами, такими как определение температуры кипения, определение воды путём дистилляции, потери в массе при высушивании или газовой хроматографией. В случае адсорбции для повышения чувствительности можно увеличить удельную площадь поверхности образца, уменьшив размер частиц или используя более крупные образцы для увеличения общей площади. Вместе с тем, важно, чтобы такое измельчение твёрдого вещества не изменяло его поверхностную структуру и не делало его более аморфным или иным образом менее упорядоченным по кристалличности. Для абсорбции, когда поглощение воды не зависит от удельной площади поверхности, полезным является только увеличение размера образца. Увеличение размера образца, однако, увеличивает и время установления равновесия. Для установления точных значений важно как можно тщательнее провести десольватацию образца. Более высокие температуры и более низкие давления (вакуум) облегчают этот процесс; однако следует помнить о любых неблагоприятных воздействиях, которые это может оказать на твёрдое вещество, таких как дегидратация, химическая деградация или сублимация. Использование более высоких температур для вызова десорбции, как в термогравиметрическом приборе, также должно проводиться с осторожностью из-за этих возможных проблем.

Обработка результатов. Данные о сорбции обычно представляют в виде графика видимого изменения массы в процентах от массы сухого образца в зависимости от относительной влажности или времени. Изотермы сорбции представляют как в виде таблицы, так и в виде графика. Метод измерения должен быть прослеживаемым вместе с данными.

Гистерезис адсорбции-десорбции можно интерпретировать, например, с точки зрения пористости образца, его состояния агломерации (капиллярной конденсации), образования гидратов, полиморфного изменения или разжижения образца. Некоторые типы систем, особенно с микропористыми и аморфными твёрдыми веществами, способны сорбировать большое количество водяного пара. В этом случае количество воды, связанной с твёрдым веществом при уменьшении относительной влажности, больше того количества, которое первоначально сорбировалось при увеличении относительной влажности. Для микропористых твёрдых веществ гистерезис адсорбции-десорбции пара является равновесным явлением, связанным с процессом капиллярной конденсации. Это происходит из-за высокой степени неравномерности кривизны микропор и того факта, что они «заполняются» (адсорбция) и «опустошаются» (десорбция) при различных равновесных условиях. В случае непористых твёрдых веществ, способных поглощать воду, гистерезис возникает из-за изменения степени взаимодействия пара с твёрдым веществом вследствие изменения равновесного состояния твёрдого вещества, например, конформации полимерных цепей, или из-за того, что временная шкала структурного равновесия длиннее временной шкалы десорбции воды. Поэтому при измерении изотерм сорбции-десорбции важно установить, что достигнуто состояние, близкое к равновесному. Особенно для гидрофильных полимеров при высокой относительной влажности установить значения сорбции или десорбции воды, не зависящие от времени, довольно сложно, поскольку обычно приходится иметь дело с полимером, пластифицированным до «жидкого» состояния, когда твёрдое вещество претерпевает значительные изменения.

В случае образования кристаллогидрата график зависимости поглощения воды от давления или относительной влажности демонстрирует резкое увеличение поглощения при определённом давлении, а количество поглощённой воды обычно соответствует определённому стехиометрическому соотношению моль/моль. В некоторых случаях, однако, кристаллические гидраты не претерпевают фазовых изменений или безводная форма выглядит аморфной. В результате сорбция или десорбция воды могут выглядеть более похожими на те, которые наблюдаются при адсорбционных процессах. Для изучения таких систем особенно полезны рентгеновский кристаллографический анализ и термический анализ.

Для ситуаций, когда преимущественно происходит адсорбция водяного пара, целесообразно независимым методом измерить удельную площадь поверхности твёрдого вещества и выразить адсорбцию как массу сорбированной воды на единицу площади поверхности вещества. Это может быть очень полезно для выявления насколько сорбция воды влияет на свойства твёрдого вещества. Например, при поглощении 0,5% м/м воды едва ли можно достичь покрытия поверхности в 100 м2/г, в то время как для 1,0 м2/г степень покрытия будет в 100 раз больше. В случае фармацевтических твёрдых веществ, имеющих удельную площадь поверхности в диапазоне от 0,01 м2/г до 10 м2/г, кажущегося низким содержания воды может быть достаточно для покрытия доступной поверхности. Поскольку при абсорбции не актуально понятие «площадь сухой поверхности», сорбция воды аморфными или частично аморфными твёрдыми веществами может быть приведена к единице массы с поправкой на кристалличность, если кристаллическая форма не сорбирует значительное количество воды относительно аморфных областей.

###### Определение активности воды

Принцип. Активностью воды (Aw) называется отношение давления водяного пара в продукте (P) к давлению насыщенного водяного пара (P0) при той же температуре. Численно активность воды равна 1/100 относительной влажности (RH), создаваемой продуктом в закрытой системе. Относительная влажность (RH) может быть рассчитана на основе прямых измерений парциального давления пара, или точки росы, или косвенных измерений датчиками, физические или электрические характеристики которых изменяются в зависимости от величины относительной влажности, которой они подвергаются.

Если пренебречь коэффициентами активности, то взаимосвязь между Aw и равновесной относительной влажностью (ERH, в процентах) выражается следующими уравнениями:

Метод. Активность воды определяют путём помещения образца в небольшую герметичную ёмкость, внутри которой можно установить равновесие между водой в твёрдом веществе и свободном пространстве. Объём свободного пространства должен быть небольшим по отношению к объёму образца, чтобы не изменять состояние сорбции образца во время испытания. Уравновешивание, как термодинамический процесс, требует времени, но может быть ускорено принудительной циркуляцией внутри герметической емкости. Полученное значение активности воды действительно только для одновременно определенной температуры. Это требует наличия в составе оборудования точного устройства для измерения температуры. Кроме того, образец должен быть теплоизолирован, чтобы гарантировать постоянную температуру во время испытания. Ключевым компонентом является датчик, измеряющий влажность воздуха в свободном пространстве над образцом. Теоретически можно использовать гигрометры любого типа, но для аналитических целей необходимы миниатюризация и надёжность. Измерение активности воды может быть проведено с использованием метода точки росы/охлаждённого зеркала. В качестве конденсирующей поверхности используют полированное охлаждённое зеркало. Система охлаждения соединена с фотоэлементом, на который отражается свет от конденсирующего зеркала. Воздушный поток, находящийся в равновесии с испытуемым образцом, направляется на зеркало, которое охлаждается до тех пор, пока на зеркале не образуется конденсат. Температура, при которой эта конденсация начинается, является точкой росы, из которой определяется равновесная относительная влажность (ERH). Коммерчески доступные приборы, использующие метод точки росы/охлаждённого зеркала или другие технологии, должны быть оценены на пригодность, квалифицированы и откалиброваны при использовании для определения активности воды. Эти приборы обычно калибруются в соответствующем диапазоне при температуре 25° C, например, с использованием насыщенных солевых растворов, приведённых в табл. 1.

Таблица 1. Стандартные насыщенные растворы солей при температуре 25 °С
Насыщенный раствор соли | Равновесная относительная влажность (ERH), % | Активность воды, Aw
--- | --- | ---
Калия сульфат (K2SO4) | 97,3 | 0,973
Бария хлорид (BaCl2) | 90,2 | 0,902
Натрия хлорид (NaCl) | 75,3 | 0,753
Магния нитрат (Mg (NO3)2) | 52,9 | 0,529
Магния хлорид (MgCl2) | 32,8 | 0,328
Лития хлорид (LiCl) | 11,2 | 0,112

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.1.0002 Измельчённость порошков

Вводится впервые

В настоящей общей фармакопейной статье приведена простая описательная классификация измельчённости порошков.

Измельчённость порошков определяется соответствующим размером отверстия сита, через которое проходит анализируемый порошок.

Для определения измельчённости порошков проводят, как правило, ситовой анализ с использованием сит определённого размера в соответствии с требованиями ОФС «Ситовой анализ» и ОФС «Сита». Ситовой анализ является наиболее пригодным, если размер частиц порошка превышает 75 мкм, а также для отдельных порошков, имеющих и меньший размер частиц, если такая методика валидирована.

Определение фракционного состава порошка или распределения по размерам частиц порошков осуществляют методами просеивания, указанными в ОФС «Ситовой анализ» или, при необходимости, другими подходящими методами. Для определения распределения по размерам частиц широкого диапазона используют также метод дифракции света, позволяющий измерять частицы порошка в диапазоне от 0,1 мкм до 3,0 мм, в соответствии с требованиями ОФС «Определение распределения частиц по размеру методом лазерной дифракции света».

При определении суммарного распределения методами просеивания или другими подходящими методами, размер частиц может быть описан следующим образом:

- х90 – размер частиц, соответствующий 90 % от суммарного распределения частиц, проходящих сквозь сито;

- х50 – средний размер частиц (т.е. 50 % частиц меньшего размера и 50 % частиц большего размера);

- х10 – размер частиц, соответствующий 10 % от суммарного распределения частиц, проходящих сквозь сито.

Для обозначения указанных величин, характеризующих измельчённость порошков, широко применяют также символ d и соответственно символы d90, d50, d10.

На основе суммарного распределения (Qr (x)) могут быть определены параметры порошка, используемые, например, в технологических процессах производства лекарственных средств. Эти параметры отражены в табл. 1.

Таблица 1. Тип распределения
r | Тип распределения
--- | ---
0 | Число
1 | Длина
2 | Площадь
3 | Объём

Qr (x) – суммарное распределение частиц с размерами не более x, где индекс r отражает тип распределения.

Таким образом, согласно этому определению:

- Qr (x) = 0,90, если х = х90

- Qr (x) = 0,50, если х = х50

- Qr (x) = 0,10, если х = х10

Также может быть применён другой, менее информативный метод классификации измельчённости порошков, использующий указанные данные для описания распределения частиц по размерам, и характеризующий измельчённость порошков определёнными терминами, представленный в табл. 2.

Таблица 2. Классификация порошков по их измельчённости
Термин, используемый для описания порошков | х50 (мкм) | Суммарное распределение на основе объема, Q3 (x)
--- | --- | ---
Крупный | 355–1400 | Q3 (355) < 0,50 и Q3 (1400) ≥ 0,50
Среднемелкий | 180–355 | Q3 (180) < 0,50 и Q3 (355) ≥ 0,50
Мелкий | 125–180 | Q3 (125) < 0,50 и Q3 (180) ≥ 0,50
Очень мелкий | 90–125 | Q3 (90) < 0,50 и Q3 (125) ≥ 0,50

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.1.0003 Определение газовой пикнометрической плотности порошкообразного вещества

Вводится впервые

Метод основан на определении объёма образца порошкообразного вещества известной массы по измерению эквивалентного объёма газа, вытесненного в определённых условиях из газового пикнометра при введении испытуемого образца. Объём образца, установленный в данном испытании, включает объём, занимаемый открытыми порами частиц твёрдого порошкообразного вещества, а объём закрытых пор и пор, недоступных для газа, не учитывается. Благодаря высокому коэффициенту диффузии гелия, который является наиболее предпочтительным для определения газом, большинство открытых пор доступны газу. Поэтому газовая пикнометрическая плотность тонко измельчённого порошка, незначительно отличается от значения истинной плотности.

Плотность твёрдых частиц порошкообразного вещества, установленная методом с применением газового пикнометра, характеризуется как газовая пикнометрическая плотность в соответствии с ОФС «Плотность твёрдых веществ».

###### Область применения

Пикнометрическая плотность является достоверной оценкой истинной плотности аморфного или частично кристаллического образца и поэтому широко применяется для образцов лекарственных средств в форме порошков.

###### Оборудование

Типичная схема прибора (рис. 1):

- герметичная испытательная ячейка, содержащая пустую ячейку объёмом Vc, которая соединена посредством клапана со стандартной ячейкой стандартного объёма (Vr);

- система, способная под давлением заполнять ячейки газом до достижения определённого давления (Р), измеряемого манометром М;

- система, которая соединена с источником газа, предпочтительно гелия, если не указан другой газ для выполнения измерений.

При использовании вместо гелия других газов, полученные значения могут отличаться от значений при использовании в качестве газа гелия. Проникновение газа зависит от размера пор и площади поперечного сечения проникающей молекулы.

Температура в газовом пикнометре должна быть 15–30 °С и не должна изменяться в течение всего процесса измерения более чем на 2 °С.

Прибор калибруют. Объёмы Vc и Vr должны быть определены при помощи калиброванного стандарта, объём которого установлен с точностью до 0,001 см3. Методика определения выполняется в два этапа: с использованием пустой ячейки для проведения испытания и с использованием калиброванного стандарта, помещённого в стандартную ячейку. Объемы Vc и Vr рассчитывают при помощи уравнения для определения объёма образца Vs, с учётом того, что на первом этапе этот объём равен нулю.

Рисунок 1. Схема газового пикнометра

Vr – объём стандартной ячейки, см3;
Vc – объём испытательной ячейки, см3;
Vs – объём образца, см3; М – манометр.

###### Методика

Взвешивают ячейку для проведения испытания и регистрируют её массу. Наполняют испытательную ячейку навеской порошка испытуемого вещества. Навеска испытуемого образца подбирается согласно инструкции прибора. Плотно закрывают испытательную ячейку в пикнометре. Предварительно удаляют из порошка летучие примеси, дегазируя порошок в токе газа, в некоторых случаях порошки дегазируют вакуумом. Регистрируют указанное на манометре исходное давление (Рr) в системе при открытом клапане, который соединяет стандартную ячейку с испытательной ячейкой. Закрывают клапан для отделения стандартной ячейки от испытательной ячейки. Заполняют испытательную ячейку под давлением газом и определяют давление (Рi), регистрируют полученное значение. Открывают клапан для соединения стандартной ячейки с испытательной ячейкой. Регистрируют конечный показатель давления (Рf). Повторяют измерения порошков того же образца до тех пор, пока последовательные измерения объёма образца (Vs) не совпадут с точностью до 0,2%. Разгружают ячейку для проведения испытания и измеряют конечную массу порошка (m), выраженную в граммах. Поскольку во время измерения могут выделяться летучие вещества, для проведения расчётов нужно использовать массу испытуемого образца после пикнометрического измерения объёма.

###### Анализ данных

Объём образца (Vs) вычисляют по формуле:

Плотность (ρ) вычисляют по уравнению:

При определении плотности (ρ) необходимо учитывать влажность или потерю в массе при высушивании испытуемого образца.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.1.0004 Характеристическое растворение

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на определение показателя скорости характеристического (истинного, собственного) растворения твёрдых действующих и вспомогательных веществ после прессования.

###### Область метода

Скорость характеристического растворения является теоретической величиной, которая относится к твёрдым веществам, имеющим нулевую пористость, однако практически скорость характеристического растворения определяют на образцах веществ, имеющих минимальную пористость.

Скорость характеристического растворения определяют как скорость растворения твёрдых действующих и вспомогательных веществ после прессования при условии постоянной площади поверхности испытуемого вещества. Так как определение проводят с использованием спрессованных образцов твёрдых веществ, то перед проведением испытания необходимо убедиться в соблюдении установленных параметров прессования испытуемого образца. Скорость характеристического растворения определяют путём воздействия на постоянную площадь поверхности спрессованного образца твёрдого вещества подходящей среды растворения при постоянной скорости перемешивания, температуре, ионной силе и значении pH.

Скорость характеристического растворения веществ зависит от всех свойств, характерных для твёрдого состояния вещества, таких как кристалличность, аморфность, полиморфизм, гидратация, сольватация, размер частиц, удельная площадь поверхности и др. Кроме того, на скорость растворения могут влиять внешние факторы (условия проведения испытания): гидродинамические параметры, температура, вязкость, pH, буферная ёмкость и ионная сила среды растворения.

Скорость характеристического растворения выражается в единицах массы растворённого вещества в единицу времени на единицу площади поверхности, подвергшейся обработке, обычно в миллиграммах в минуту на сантиметр квадратный (мг·мин-1·см-2).

###### Область применения

Полученные данные о скорости характеристического растворения дают информацию при описании свойств действующих и вспомогательных веществ, которая может быть использована, например, при фармацевтической разработке лекарственных препаратов, так как позволяет прогнозировать и выявлять потенциальные проблемы с биодоступностью действующих веществ с известными данными об их скорости характеристического (истинного, собственного) растворения.

###### Оборудование

Оборудование для проведения испытания по определению скорости характеристического растворения обычно включает прибор для получения спрессованного испытуемого образца из твёрдого вещества и устройство для растворения испытуемого спрессованного образца.

Прибор для получения спрессованного испытуемого образца для определения скорости характеристического растворения (рис. 1), состоит из пуансона и матрицы, изготовленных из закалённой стали. В основании матрицы имеются три отверстия с резьбой для крепления наружной плиты, изготовленной из полированной стали, обеспечивающей зеркально-гладкое основание для спрессованного образца.

Матрица имеет полость диаметром около 0,1–1,0 см, в которую помещают навеску испытуемого образца. После этого пуансон, обычно с помощью настольного таблеточного пресса, вводят в полость матрицы, сжимая, уплотняя и спрессовывая испытуемый образец. Сквозное отверстие в головке пуансона позволяет вставить в него металлический стержень, облегчающий удаление пуансона из матрицы после испытания. Спрессованный испытуемый образец образуется в полости матрицы и имеет одну сторону с известной площадью, которая сформировалась на нижней стороне (дне) матрицы. Нижняя сторона (дно) полости матрицы изготовлена так, чтобы не менее 50–75 % спрессованного образца могло раствориться, не выпадая при этом из матрицы. В верхней части матрицы находится выступ с резьбой, что позволяет присоединять его к держателю. Держатель монтируют на лабораторном перемешивающем/вращающем устройстве, а матрицу с прессованным образцом погружают в среду растворения и приводят в движение перемешивающим/вращающим устройством.

Примечание – Допускается использование других приборов при условии соответствующей валидации методик определения. Например, прибор с держателем матрицы, на котором спрессованный образец держится в вертикальном положении, при этом перемешивание производят с помощью лопастной мешалки, установленной на определённом расстоянии от поверхности спрессованного образца.

Рисунок 1. Прибор для прессования, используемый для определения характеристического растворения: А − наружная плита; Б – матрица; В – неопреновая прокладка; Г – пуансон; Д – держатель и вал; Е – нижняя сторона (дно) матрицы. Размеры указаны в миллиметрах.

###### Методика

С помощью трёх болтов к нижней стороне матрицы прикрепляют наружную плиту. В полость матрицы вносят навеску испытуемого образца, измельчённого до порошка, вставляют пуансон и в верхней части устройства закрепляют металлическую пластину. Сжимают порошок с использованием гидравлического пресса и выдерживают в течение достаточного времени для получения стабильного спрессованного образца с минимальной пористостью. Для многих кристаллических органических твёрдых веществ обычно бывает достаточно сжатия в течение 1 мин при 15 МПа для получения спрессованного, не распадающегося образца. Спрессованный испытуемый образец как можно тщательнее защищают от возможного разрушения, так как при разрушении образца происходит увеличение площади его поверхности, что приводит к увеличению показателя скорости характеристического растворения вещества. Отсоединяют наружную плиту, привинчивают матрицу с пуансоном к держателю и плотно зажимают. С поверхности матрицы удаляют весь лишний порошок путём продувания сжатым воздухом или азотом.

Матрицу на держателе плавно вставляют в зажимное устройство прибора для определения растворения и закрепляют в нём. Вал устанавливают таким образом, чтобы при погружении устройства внешняя поверхность испытуемого спрессованного образца находилась на расстоянии 3,8 см от дна сосуда. Сборный диск располагают таким образом, чтобы минимизировать его колебание, раскачивание; нельзя допускать образования пузырьков на поверхности матрицы, так как они способны уменьшать площадь поверхности спрессованного испытуемого образца, находящегося в контакте со средой растворения. По возможности условия погружения должны поддерживаться в течение всего испытания. Однако в целях получения раствора испытуемого вещества с концентрацией выше предела детектирования из-за ограниченной поверхности, доступной для растворения, может быть необходимым использование относительно небольшого объёма среды растворения.

Среду растворения нагревают до температуры, выбранной для проведения испытания. Сборное устройство погружают в среду растворения перед началом вращения/перемешивания. Необходимо убедиться, что на поверхности спрессованного испытуемого образца отсутствуют пузырьки воздуха. Включают прибор для растворения на выбранной для испытания скорости вращения. Отбор проб осуществляют через установленные интервалы времени, затем проводят количественное определение растворившегося вещества, используя аналитическую методику, обладающую достаточной чувствительностью и точностью.

###### Анализ результатов

Данные о суммарном количестве растворённого вещества в каждую единицу времени корректируют с учетом потерь при отборе проб. Скорость характеристического растворения определяют с помощью графика зависимости суммарного количества растворившегося вещества с единицы площади спрессованного образца от времени. Суммарное количество растворившегося вещества с единицы площади спрессованного образца, получают делением суммарного количества растворившегося в определённое время вещества на рабочую площадь поверхности. Далее на основании нормализованных данных испытания, полученных в интервал времени от начала испытания до возможного разрушения спрессованного образца, рассчитывают уравнение линейной регрессий. По наклону линии регрессии определяют скорость характеристического растворения, выраженную в (мг·мин-1·см-2).

Полученные результаты скорости характеристического растворения для конкретного вещества должны сопровождаться указанием точных условий прессования и методики определения этого вещества (скорость растворения, состав и объём среды растворения, скорость перемешивания, температура и т.д.).

Если для отбора проб образцы извлекаются из среды растворения, то данные относительно суммарного количества вещества, растворившегося в каждый момент времени, должны быть скорректированы с учетом потерь при отборе проб.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.1.0005 Определение дзета-потенциала методом электрофоретического рассеяния света

Вводится впервые

Дзета-потенциал представляет собой параметр, используемый для характеристики физической стабильности дисперсных систем с жидкой дисперсионной средой ‒ суспензий, эмульсий, коллоидных растворов и др.

Дзета-потенциал или электрокинетический потенциал, обозначаемый греческой буквой ζ (отсюда и название), ‒ это разность между электрическими потенциалами на поверхности скольжения и в основном объёме жидкости. Под поверхностью (плоскостью) скольжения подразумевают абстрактную, воображаемую поверхность вблизи границы раздела между дисперсной фазой и жидкой дисперсионной средой, где становится заметным движение (скольжение) жидкости относительно поверхности этой границы.

Дзета-потенциал определяют косвенно на основании экспериментально полученных данных какого-либо электрокинетического явления ‒ электрофоретического, электроосмотического, электроакустического и др. В случае использования явлений электрофореза измеряют значение электрофоретической подвижности, например, оптическими методами, такими как микроскопия (микроэлектрофорез) или рассеяние света (электрофоретическое рассеяние света).

В настоящей общей фармакопейной статье приведено определение дзета-потенциала посредством измерения электрофоретической подвижности дисперсных, в том числе коллоидных систем, методом электрофоретического рассеяния света.

###### Область применения

Определение дзета-потенциала методом электрофоретического рассеяния света может быть применено для исследования и характеристик физической стабильности дисперсных систем (например, суспензий и эмульсий), используемых в фармацевтической практике. Физическая нестабильность суспензий может привести лекарственные препараты к флокуляции, осаждению, нестабильность эмульсий ‒ к разрушению, разделению фаз, кроме того флокуляция также может повлиять на внешний вид, эффективность, биодоступность лекарственных препаратов. Метод широко используется для характеристики коллоидных систем, где важно контролировать их стабильность, например, изучение возможности флокуляции субмикронных материалов, взвешенных в жидкости. Также определение дзета-потенциала может проводится на этапе фармацевтической разработки составов лекарственных препаратов в виде дисперсных систем для оценки путей деградации и характеристики выбранных композиционных вариантов.

###### Принцип метода

В жидкой дисперсионной среде частицы дисперсной фазы участвуют в броуновском хаотическом движении, а приложение электрического поля вызывает их направленное перемещение. На поверхности частиц дисперсной фазы (на границе раздела «частица-жидкость») возникает двойной электрический слой. На поверхности частицы закрепляется слой ионов определенного знака, равномерно распределённый по поверхности и создающий на ней поверхностный заряд (потенциалопределяющие ионы). К этому слою из жидкой дисперсионной среды притягиваются ионы противоположного знака (противоионы). Слой противоионов состоит из плотного адсорбционного слоя, прочно связанного с частицей и движущегося вместе с ней, и диффузного слоя, который связан менее прочно и при движении частицы отрывается от неё. Граница между адсорбционным и диффузионным слоями называется поверхностью скольжения. Электрический потенциал, возникающий на поверхности скольжения за счёт взаимодействия частицы и дисперсной среды, называется электрокинетическим или дзета-потенциалом. Дзета-потенциал – основной показатель стабильности коллоидных систем в жидких средах. Чем больше дзета-потенциал, тем устойчивее коллоидная система. Значение дзета-потенциала, равное 30 мВ, характерное значение для условного разделения низко-заряженных поверхностей и высоко-заряженных поверхностей.

В основу измерения дзета-потенциала частиц дисперсной фазы в жидких дисперсионных системах методом электрофоретического рассеяния положено явление электрофореза, то есть направленного движения заряженных частиц, взвешенных в жидкости, под действием электрического поля. Репрезентативный образец, диспергированный в подходящей дисперсионной среде, помещают в измерительную ячейку, в которой имеется пара электродов. Эти электроды могут быть расположены либо на концах цилиндрического или прямоугольного капилляра, либо быть выполненными в виде специальной вставки, в которой они находятся на фиксированном расстоянии друг от друга, и погружаются в стандартную кювету или другой сосуд (рис. 1).

Рисунок 1. Схема электрофоретической ячейки: a ‒ область измерения; d ‒ расстояние между электродами.

На электроды подают известное постоянное напряжение. Между электродами образуется потенциал известной силы, и в результате электрофореза частицы мигрируют к электроду с противоположным зарядом. В случае заряженных стенок капилляров наряду с электрофорезом имеет место электроосмос, то есть течение дисперсионной среды вдоль стенок капилляра. Направление и скорость частиц зависят от знака и значения их заряда. Общее движение частиц в ячейке является суммой скоростей обоих процессов. При этом, время необходимое частицам для достижения равновесной скорости электрофоретического движения после приложения электрического поля, значительно меньше времени, необходимого жидкости для установления равновесного электроосмотического потока. Измеряют скорость движения частиц в системе отсчёта, связанной с ячейкой, а также и направление этого движения частиц. Так как напряжение, приложенное к электродам, и расстояние между ними известны, можно определить электрофоретическую подвижность, по которой затем можно вычислить дзета-потенциал.

Электрофоретическая подвижность (µ) ‒ электрофоретическая скорость, приходящаяся на единицу напряженности электрического поля. Если частицы движутся в направлении более низкого потенциала (к отрицательному электроду) величина электрофоретической подвижности положительная, если в противоположном направлении ‒ отрицательная. Единицы измерения электрофоретической подвижности ‒ м2/В·с.

Для измерения электрофоретической подвижности частиц дисперсионной фазы используют метод электрофоретического рассеяния света ‒ косвенный метод, основанный на измерении допплеровского сдвига, например, с помощью фотоэлектрического детектора (наблюдаемого изменения частоты волны, когда измерительное устройство и источник волны находятся в относительном движении) в рассеянном свете. Частицы, диспергированные в жидкости и находящиеся в электрическом поле, освещаются монохроматическим когерентным световым лучом, как правило, генерируемым лазером. Заряженные частицы движутся либо к катоду, либо к аноду, в зависимости от знака своего заряда. Вследствие этого движения частота и фаза излучения, рассеянного частицами, изменяется в соответствии с эффектом Доплера. По распределению сдвига частоты определяют распределение электрофоретической подвижности. Затем, принимая во внимание вязкость и диэлектрическую проницаемость основной жидкости, электрофоретическая подвижность используется для расчёта дзета-потенциала. Дзета-потенциал выводят из электрофоретической подвижности с использованием функции Генри, для которой может использоваться приближение Смолуховского или Хюккеля, в соответствии с относительной толщиной двойного электрического слоя по сравнению с гидродинамическим радиусом частицы.

###### Оборудование

Измерение дзета-потенциала методом электрофоретического рассеяния света целесообразно проводить при малых углах рассеяния (от 12° до 30°), чтобы минимизировать спектральное уширение лазерных линий вследствие эффекта Доплера.

Для определения дзета-потенциала могут быть применены оптические устройства с использованием опорного излучения, реже ‒ устройства с использованием кросс-корреляции излучения. Определение электрофоретической подвижности частиц осуществляют, используя данные анализа интенсивности или спектра сдвига частоты, поэтому такой метод называют частотным методом анализа (ELS). Метод ELS является основным экспериментальным методом для определения дзета-потенциала дисперсных, в том числе коллоидных систем, имеющих частицы дисперсной фазы от 3,8 нм до 100 мкм.

На рис. 2 представлена схема прибора для определения дзета-потенциала с использованием опорного излучения.

Рисунок 2. Схема прибора для определения дзета-потенциала с использованием опорного излучения: 1 ‒ оптический модулятор; 2 ‒ аттенюатор (ослабитель); 3 ‒ источник излучения (лазер); 4 ‒ ячейка для образца с электродами; 5 ‒ оптический поглотитель; 6 ‒ разделитель луча; 7 ‒ опорное излучение; 8 ‒ рассеянный свет; 9 ‒ процессор; 10 ‒ фотоэлектрический детектор.

Испытуемый образец помещают в ячейку с электродами (4), которая должна быть не только термостатирумой, но и терморегулируемой, так как вязкость, проницаемость, показатель преломления образца зависят от температуры. Между электродами ячейки, расстояние между которыми точно известно, прикладывается напряжение. Излучение лазерного источника (3) известной длины волны при помощи разделителя (6) разделяют на два луча ‒ падающий и опорный. Падающий луч направляют в ячейку с образцом для возбуждения рассеяния. Опорный луч (7) после разделителя проходит через оптический модулятор (1) и аттенюатор (2), в результате частота излучения опорного луча смещается на несколько герц относительно частоты исходного лазерного излучения (3), что позволяет определять знак доплеровского сдвига и измерять его значения, малые по абсолютной величине. Рассеянное излучение (8) и опорный луч совмещают, используя стандартную или волоконную оптику, и регистрируют фотоэлектрическим детектором (10). Сигнал фотоэлектрического детектора передается на модуль обработки сигнала, которым может быть цифровой коррелятор или анализатор спектра. Управление процессом осуществляют, используя компьютерную систему и соответствующее программное обеспечение для обработки полученных данных для вычисления дзета-потенциала.

Прибор для определения дзета-потенциала с использованием кросс-корреляции излучения отличается от приборов с использованием опорного излучения тем, что в них лазерный луч (3) разделяется на два луча равной интенсивности, частоты которых изменяются. Лучи пересекаются и входят в образец через одну и ту же стенку ячейки. Фотоэлектрический детектор в приборе расположен за противоположной стенкой ячейки, между двумя лучами. Рассеивание от каждой частицы является результатом воздействия излучения под разными углами. Доплеровский сдвиг вследствие рассеяния света зависит только от угла пересечения лучей.

Обычно доплеровские сдвиги, возникающие во время электрофореза, довольно малы (от нескольких герц до нескольких сотен герц) и не могут быть измерены напрямую. Для решения этой проблемы используют интерферометры, которые объединяют свет, сдвинутый по частоте образцом, с опорным лучом. В результате интерференции луча рассеянного света и опорного луча возникает биение. Частота биений – это разность частот между двумя нижележащими лучами, которая представляет собой доплеровский сдвиг, вызванный частицами.

Однако простой интерферометр не может определить знак доплеровского сдвига и, следовательно, не может определить знак дзета-потенциала. Измеренная частота биений всегда положительна, независимо от того, положительный или отрицательный доплеровский сдвиг. Поэтому в современных приборах для измерения дзета-потенциала используют частотный модулятор опорного луча. Этот модулятор вызывает контролируемый доплеровский сдвиг на частоте опорного луча. Это означает, что измеренный доплеровский сдвиг представляет собой сумму доплеровского сдвига, индуцированного модулятором, плюс доплеровский сдвиг, вызванный движением частиц. Таким образом, использование частотного модулятора позволяет определять знак (положительное или отрицательное напряжение) дзета-потенциала.

В тех случаях, когда доплеровский сдвиг очень мал (менее 1 Гц) и метод частотного анализа не имеет достаточного разрешения для определения изменения, можно использовать метод фазового анализа на основе рассеяния света (PALS), называемый также, как амплитудно-взвешенный метод обработки частотной функции. Малые значения доплеровского сдвига имеют место при измерениях дисперсных систем в неполярных растворителях или в водных растворителях с высокой электропроводностью, когда во избежание нагрева образца и возможной его деградации необходимо прикладывать к ячейке слабое электрическое поле.

На рис. 3 представлена схема прибора для определения дзета-потенциала на базе PALS.

Метод PALS основан на измерении разности фаз между опорным и предметным лучами, возникающей за счёт электрофоретического движения частиц, что даёт возможность определять очень малые значения скорости частиц и электрофоретической подвижности, например, частотные сдвиги от 0,002 Гц. Метод PALS позволяет вычислить только среднее значение электрофоретической подвижности и дзета-потенциала, но не предоставляет никакой информации о его распределении. Для получения информации о распределении значений показателя объединяют метод PALS и спектральный анализ с быстрой и медленной сменой напряжения.

Рисунок 3. Схема прибора для определения дзета-потенциала на основе PALS: 1 ‒ лазер; 2 ‒ разделитель; 3 ‒ пара зеркал; 4 ‒ ячейка образца с электродами; 5 ‒ зеркало; 6 ‒ аттенюатор переменный; 7 ‒ детектор рассеяния; 8 ‒ компьютер.

Оборудование для определения дзета-потенциала должно быть размещено в помещении, в котором отсутствуют электрические помехи, механические вибрации, температурные колебания, защищённом от прямых солнечных лучей и потоков воздуха. Прибор должен быть установлен на твёрдой поверхности, исключающей воздействие вибраций, оптическая система прибора должна быть устойчивой во избежание необходимости частой ее калибровки.

###### Проведение измерений

Меры предосторожности. Излучение в приборах, оборудованных лазером, может вызвать повреждение глаз. Поэтому категорически запрещается смотреть на прямое лазерное излучение и его отражение.

Перед проведением измерений необходимо проверить настройки прибора, например, время готовности к работе, требуемый диапазон измерений и положение линзы, угол анализа, температурное равновесие и др.

Во время проведения измерений следует избегать образования пузырьков воздуха, испарения жидкости или появления других неоднородностей в испытуемой дисперсной системе.

Измерительная ячейка. Измерительная ячейка в приборах для определения дзета-потенциала выполняет следующие функции:

- удерживает заданный объём испытуемого образца в области воздействия светового излучения;

- обеспечивает приложение к испытуемому образцу заданного напряжения;

- обеспечивает подачу падающего и сбор рассеянного излучения.

Тип ячейки выбирают в зависимости от прибора, она также должна быть совместима с испытуемой дисперсной системой. Перед и после измерений ячейка и электрод должны быть тщательно промыты во избежание искажения результатов измерений. Важен постоянный контроль температуры в ячейке, так как вязкость дисперсной системы зависит от температуры и оказывает существенное влияние на результаты измерений. Предпочтительно, чтобы вязкость дисперсной системы была ниже 10 мПа∙с, то есть чтобы система не отклонялась от ньютоновской жидкости.

Потенциал, приложенный к электродам ячейки, может быть выражен постоянным напряжением, применяемым в течение определённого промежутка времени, до изменения полярности. В случае высокой проводимости дисперсной системы, изменение полярности достигается в течение короткого промежутка времени, при этом возможен усиленный нагрев содержимого ячейки. Поэтому проводимость ячейки должна поддерживаться на уровне, как можно более низком, рекомендуется, чтобы проводимость находилась в пределах 1–5 мСм/см (миллисименс на сантиметр).

Пробоподготовка. Испытуемый образец должен представлять собой частицы дисперсной фазы, диспергированные в жидкой дисперсионной среде. Образец не должен содержать крупных частиц или осадка, седиментация которых может произойти непосредственно во время измерения, в результате чего измерение будет невозможным, так как частицы не попадут в луч лазера.

Важно избегать изменения электрофоретической подвижности образца в процессе его подготовки. Используемая для отбора проб и пробоподготовки посуда и инвентарь (пипетки, лопатки, шприцы, мензурки и т.п.) могут иметь поверхности, притягивающие определённые ионы из образца или добавляющие в образец загрязнения, оставшиеся после более ранних процессов очистки. Предпочтительнее использовать одноразовую посуду и инвентарь из полимерных материалов, которые химически совместимы с образцом.

Электрофоретическая подвижность образца, а следовательно и дзета-потенциал, зависит от химических характеристик дисперсионной среды. Важными характеристиками для дисперсионной среды являются значения показателя рН и ионная концентрация, особенно в случае разбавления концентрированных дисперсных систем, поэтому необходимо контролировать значение pH, тип и концентрацию ионов испытуемой дисперсной системы.

Определение диапазона концентраций дисперсной фазы в образце дисперсной системы. Для проведения надёжных измерений необходимо, чтобы концентрация дисперсной фазы была приемлемой для установления постоянного дзета-потенциала, то есть установления приемлемого соотношения сигнал-шум детектора. Для достижения этой цели концентрация дисперсной фазы должна превышать определённый уровень, но при этом она не должна приводить к множественному рассеянию и взаимодействию частиц дисперсной фазы, то есть должна быть ниже определённого максимального уровня. На диапазон концентраций влияют ширина лазерного луча, длина пути между электродами, оптические свойства используемых веществ, чувствительность детектора. Для установления подходящего диапазона концентраций для любого конкретного испытуемого образца выполняют измерения при различных концентрациях дисперсной фазы.

Стабильность испытуемых образцов. При определении дзета-потенциала учитывают следующие аспекты стабильности испытуемых образцов.

В зависимости от характера испытуемой дисперсной системы электроды в ячейке для образца и сама дисперсная система могут измениться после измерения дзета-потенциала. Поэтому, при повторном использовании того же объёма образца или ячейки для измерения дзета-потенциала данные следует тщательно проверять, чтобы гарантировать приемлемость измерений. Для некоторых дисперсных систем может потребоваться испытание аликвоты вновь приготовленной дисперсной системы для каждого повторного измерения.

Определение дзета-потенциала концентрированной дисперсной системы может потребовать разведение её перед измерением, чтобы снизить концентрацию частиц и избежать артефактов измерения из-за множественного рассеяния или взаимодействия между частицами. В этом случае применяют так называемую равновесную процедуру разбавления, при которой в качестве разбавителя используют ту же дисперсионную среду, что в испытуемом образце, в испытуемом образце в этом случае меняется только один параметр ‒ концентрация частиц. Если разведённая дисперсная система была подготовлена задолго до измерения, то её стабильность должна быть оценена путём измерения дзета-потенциала в течение ожидаемого времени измерения, чтобы гарантировать отсутствие зависимости измеренного дзета-потенциала от времени. Также может быть целесообразно испытание серийных разведений для ограничения ожидаемого целевого коэффициента разведения.

Повторные измерения. Количество повторных измерений (с отдельной подготовкой образцов), которые необходимо выполнить, зависит от требуемой прецизионности измерений. Это количество следует устанавливать в зависимости от свойств испытуемой дисперсной системы. Как правило, выполняют три последовательных измерения.

###### Анализ данных

Обработка данных производится с помощью спектрального анализа, автокорреляционной функции и фазового анализа рассеяния света.

Определение электрофоретической подвижности. Отношение между доплеровским сдвигом частоты рассеянного света (Δω) в приложенном электрическом поле (E) и электрофоретической подвижностью частиц (µ) зависит от оптического устройства прибора. Для оптических устройств с использованием опорного излучения электрофоретическую подвижность вычисляют по формуле (1), для приборов, основанных на методе кросс-корреляции излучения ‒ по формуле (2).

(1) (2)

где Δω - доплеровский сдвиг частоты;
λ - длина волны лазерного излучения в вакууме;
n - показатель преломления среды (или основной жидкости);
E - напряженность электрического поля;
θ - угол между падающим на ячейку и рассеянным светом;
ξ - угол между рассеянным светом и направлением электрического поля;
θ' - угол между двумя лучами.

Определение дзета-потенциала. Для непроводящих сфер дзета-потенциал (ζ) обычно вычисляют с использованием расширенного уравнения Генри, описывающего зависимость между дзета-потенциалом и электрофоретической подвижностью (формула 3):

(3)

где ε - средняя диэлектрическая проницаемость среды (или основной
жидкости);
η0 - средняя вязкость среды (или основной жидкости);
κ - обратная величина толщины двойного слоя Дебая;
α - радиус сферы;
ƒ(κα) - монотонная функция, изменяющаяся от ƒ(κα) = 1, как κα → 0, до ƒ(κα) = 3/2, как κα → ∞

Большинство дисперсных сред являются полидисперсными, имеющими различные значения (κα), поэтому получение полного распределения дзета-потенциала является сложной задачей.

Если κα >> 1, что типично для крупных частиц в водных суспензиях (гидродинамический радиус велик по сравнению с толщиной электрического двойного слоя), ƒ(κα) принимает значение 3/2 в формуле (3). Это приводит к уравнению Смолуховского (уравнение 4):

(4)

При κα << 1, что типично для мелких частиц в органических жидкостях (гидродинамический радиус мал по сравнению с толщиной электрического двойного слоя), ƒ(κα) принимает значение 1 в формуле (3). Это приводит к уравнению Хюккеля (уравнение 5):

(5)

Таким образом, в зависимости от природы частиц и дисперсионной среды дзета-потенциал (ζ) вычисляют по электрофоретической подвижности (µ) с использованием либо уравнения Смолуховского (уравнение 4), либо уравнения Хюккеля (уравнение 5).

###### Интерпретация результатов

Дзета-потенциал, выраженный в единицах милливольт (мВ), в основном используют для характеристики физической стабильности дисперсных систем. В целом, увеличение значения дзета-потенциала ведёт к повышению стабильности суспензии, а его уменьшение – к снижению стабильности. Несмотря на то, что об изменении относительной устойчивости дисперсной системы можно судить по изменению величины дзета-потенциала, прямой связи между дзета-потенциалом и абсолютной стабильностью нет. Кроме того, для того чтобы сделать общие выводы относительно стабильности различных дисперсных систем, может потребоваться многократное определение различных образцов или их партий.

Данные, полученные при определении дзета-потенциала, сочетают с другими методами количественной или качественной характеристики для мониторинга и характеристики стабильности дисперсных систем, такими как мониторинг внешнего вида или мутности с течением времени.

Дзета-потенциал также зависит от состава дисперсной системы. Как правило, не существует чёткого значения дзета-потенциала, которое можно было бы использовать в качестве порога стабильности.

Дзета-потенциал является характеристикой всей дисперсной системы, а не только частиц дисперсной фазы, поэтому его определение зависит не только от частиц дисперсной фазы, но и от жидкой дисперсионной среды с различными ионами или химическими веществами, присутствующими в равновесии. Если не соблюдать осторожность, выполнение многократных разведений дисперсионной среды при определении может изменить эту среду и изменить значение дзета-потенциала. Важно также отметить, что поскольку измерение опирается на миграцию частиц в электрическом поле, выполнение повторных измерений (не менее 3–5 в зависимости от образца) на одной и той же аликвоте может вызвать сдвиг дзета-потенциала. Изменение дзета-потенциала дисперсной системы может также изменять наблюдаемый гидродинамический диаметр частиц за счёт динамического рассеяния света.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.1.0006 Определение пористости методом адсорбции-десорбции азота

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на метод определения пористости твёрдых веществ, применяемых в фармацевтической практике, методом адсорбции-десорбции азота.

###### Введение

Термин «пористость» часто используют для характеристики физико-химических свойств твёрдых веществ – фармацевтических субстанций, вспомогательных веществ, применяемых в фармацевтической практике. Поры существуют во множестве твёрдых веществ, помимо спрессованных и агрегатов, таких как порошки и таблетки. От количества, размера, формы пор зависят прочность, реакционная способность, проницаемость, адсорбционные свойства твёрдых веществ.

Более точно «пористость» определяют как отношение объёма открытых пор и пустот к общему объёму, занимаемому данным количеством твёрдого вещества. Кроме открытых, доступных пор, твёрдые вещества могут иметь закрытые или недоступные поры, изолированные от внешней поверхности, в которые не проникает жидкость и газ. Различные типы пор могут представлять собой отверстия, каналы или полости внутри твёрдого вещества или промежутки (пустоты) между твёрдыми частицами в спрессованных веществах или агрегатах.

Характеристика пористых веществ (порозиметрия или порометрия) обычно включает определение общего объёма пор или пористости, а также распределение пор по размерам. По размеру поры классифицируются на следующие группы:

- микропоры – менее 2 нм;

- мезопоры – от 2 до 50 нм;

- макропоры – более 50 нм.

Для порозиметрии твёрдых веществ, используемых в фармацевтической практике, применяют указанный в настоящей общей фармакопейной статье метод низкотемпературной адсорбции-десорбции азота, а также метод ртутной порозиметрии, указанный в ОФС «Определение размера пор методом ртутной порозиметрии».

###### Область применения

Определение пористости по методу адсорбции-десорбции азота используют для характеристики пор размером до 300 нм, но наиболее он пригоден для определения мезопор и для определения макропор в нижнем диапазоне (от 2 до 100 нм). Данный метод дополняет результаты испытания, полученные методом ртутной порозиметрии (ОФС «Определение размера пор методом ртутной порозиметрии»).

###### Основные положения

Определение пористости по методу адсорбции-десорбции азота, как и определение удельной площади поверхности порошков (ОФС «Определение удельной площади поверхности порошков методом газовой адсорбции»), основано на физической адсорбции инертного газа на поверхностях твёрдых веществ при низких температурах, в данном случае температуре кипения жидкого азота.

Инертный газ, адсорбируясь на поверхности твёрдого вещества, может проникать и конденсироваться в открытых порах вещества. При давлении, равном давлению насыщенного пара, происходит заполнение газом всех открытых пор испытуемого образца.

Общий объём пор и распределение пор по размерам определяют по изотерме адсорбции-десорбции газа, которая представляет собой зависимость количества газа адсорбата от его парциального давления при постоянной температуре. Газ азот является предпочтительным для использования, изотерма адсорбции-десорбции определяется при температуре кипения жидкого азота –195,8 °С. Для специальных целей могут быть использованы другие адсорбаты, но в данной ОФС они не рассматриваются.

В зависимости от пористости испытуемого вещества и характера взаимодействия адсорбат-адсорбент различают шесть основных типов изотерм адсорбции-десорбции, представленных на рис. 1.

Рисунок 1. Типы изотерм адсобции-десорбции

Изотерма I типа характеризует адсорбцию на микропористых веществах с размером пор менее 2 нм.

Изотермы II и III типов характерны для макропористых материалов с сильным и слабым взаимодействием адсорбат-адсорбента соответственно.

Изотермы типов IV и V имеют петлю гистерезиса, нижнюю ветвь которой получают, измеряя адсорбцию при последовательном добавлении газа в систему (изотерма адсорбции), а верхнюю ветвь – при последовательном его убавлении (изотерма десорбции). Изотермы типов IV и V отражают протекание процесса капиллярной конденсации в мезопорах и макропорах, а выгнутый и вогнутый характер начального участка указывает, соответственно, на сильное или слабое взаимодействие адсорбат-адсорбента. Явление капиллярной конденсации связано с тем, что пары адсорбируемого газа конденсируются в порах твёрдого вещества при давлениях ниже давления насыщенного пара. Допускают, что поры имеют цилиндрическую форму, поэтому краевой угол смачивания равен 0 и мениск не поврежден. Появление петли гистерезиса на изотерме адсорбции-десорбции связано с тем, что заполнение пор и последующая десорбция протекает по разному механизму, в результате чего изотерма десорбции оказывается сдвинутой в область меньших относительных давлений по отношению к изотерме адсорбции.

Макропористые материалы, имеющие поры более 100 нм, могут давать изотерму IV типа, имеющую гистерезис, который может быть трудно наблюдать, что приводит к изотерме II типа.

Изотерма ступенчатого вида (тип VI) отражает послойное заполнение поверхности молекулами адсорбата, этот тип изотермы на практике встречается крайне редко.

###### Подготовка к испытаниям

Измерения выполняют с использованием методов, указанных в ОФС «Определение удельной площади поверхности порошков методом газовой адсорбции» – чаще всего с использованием объёмного статистического метода, но также может быть применим метод динамического потока.

Необходимо внимательно изучать инструкции производителя, содержащие описание конкретного устройства и использовать оборудование с необходимыми параметрами. Например, оборудование для проведения объёмного статического метода должно обеспечивать: вакуумирование системы до давления менее 10 Па, подачу известных объёмов высокочистого азота и гелия, точное измерение давления и температуры, а также иметь средство охлаждения образца до температуры жидкого азота.

В соответствии с рекомендациями производителя необходимо своевременно проводить калибровку и аттестацию производительности системы.

Дегазация. Перед проведением определения пористости необходимо удалить газы и пары, которые могли физически адсорбироваться на поверхности образца твёрдого вещества.

Дегазация многих веществ часто достигается применением вакуума, путём продувки образца в токе инертного, сухого газа или применением метода циклической адсорбции-десорбции. Для увеличения скорости дегазации, могут быть применены повышенные температуры, которые могут оказать влияние на характер поверхности и целостность образца. В связи с этим при использовании нагревания рекомендуемая температура и время дегазации должны быть минимальными, необходимыми для достижения воспроизводимого измерения изотермы адсорбции-десорбции.

Пригодность условий дегазации должна быть подтверждена по получению воспроизводимой изотермы адсорбции-десорбции, обеспечению постоянной массы испытуемого образца и отсутствию обнаруживаемых физических или химических изменений в образце.

Количество образца. Определение массы образца проводят после дегазации или после измерения адсорбции-десорбции. Общая площадь поверхности образца должна быть больше 1 м2, предпочтительно больше 5 м2.

*Измерение изотермы*. Конкретные детали процесса измерения зависят от используемой методики. Необходимо также следовать инструкции производителя для конкретного используемого оборудования. В любом случае необходимо соблюдать следующие указания:

- необходимо заранее определить давление насыщенного пара адсорбата (Р0). Предпочтительно определять Р0 экспериментально во время измерения, но допускается и использование расчётного значения;

- необходимо определить изотерму адсорбции азота и измерить объём адсорбируемого вещества (Va), при наименьшем требуемом относительном давлении (Р/Р0), отношение измеренного давления адсорбата к давлению его насыщенного пара;

- необходимо повторять измерение (Va) при последовательно повышающихся значениях относительного давления до максимального желаемого относительного давления (обычно 0,99). Затем относительное давление последовательно уменьшают для определения количества сорбента на изотерме десорбции. Следует измерить не менее 20 точек как на изотерме адсорбции, так и на изотерме десорбции, охватывая диапазон относительного давления (Р/Р0) приблизительно 0,05–0,99. Значения Р/Р~0 ~могут быть распределены для достижения наилучшего разрешения распределения пор по размерам. Если для расчёта распределения пор по размерам используется только изотерма десорбции, то для изотермы адсорбции можно использовать меньшее число точек.

###### Анализ данных

Исследование изотермы. Изотерма изображена в виде графика зависимости количества адсорбированного азота (по объему, Va или в молях, na от Р/Р0). Данные изотермы также могут быть представлены в виде таблицы. По графику определяют типы изотермы и типы гистерезиса путём сравнения с примерами на рис. 1 и 2.

На рис. 2 приведена классификация типов петель капиллярно-конденсационного гистерезиса. Каждый тип петли связан с определённым типом пористой структуры вещества. Петли типа Н1 характерны для агломератов или таблеток из сферических частиц-глобул, однородно упакованных и близких по размеру. Для некоторых глобулярных систем, например, силикагелей, характерен тип Н2, однако, в этом случае распределение и форма пор неоднозначны. Петли типов Н3 и Н4 получены для адсорбентов, имеющих щелевидные поры или, как в случае Н3, состоящих из плоскопараллельных частиц.

Изотермы типа I с гистерезисом типа Н4 указывают на наличие микропористости. Изотерма типа IV обычно наблюдается для веществ, содержащих мезопоры или небольшие макропоры.

Рисунок 2. Типы петель гистерезиса

Методы t-графика или aS-графика. Построение t-графика или
aS-графика для сравнения изотермы исследуемого образца со стандартной изотермой также помогает проиллюстрировать наличие микро- и мезопористости. Стандартная изотерма может быть рассчитана с использованием математического выражения, но рекомендуется использовать экспериментально определённую стандартную изотерму адсорбента с химическими свойствами, аналогичными свойствам исследуемого образца.

Метод построения t-графика основан на t-кривой, которая представляет собой график зависимости количества азота, адсорбированного на непористом твёрдом теле, от статистической толщины адсорбированного слоя (t). Значение t вычисляют по формуле:

(1)

где na – молярный объём
δa – толщина слоя в одну молекулу, для азота принята 0,354 нм
nm – ёмкость монослоя

В методе построения aS-графика количество азота, адсорбированного стандартным непористым твёрдым веществом, нормализуют, используя количество, адсорбированное при некотором фиксированном относительном давлении (n'а,x), часто равном 0,4. Затем строят график нормализованной адсорбции aS (равной na/n'а,x) от Р/Р0 для получения кривой aS..

t-график или aS-график строят, используя зависимость количества азота, адсорбированного испытуемым образцом, от значений t или aS как для стандартного вещества, а не от Р/Р0. Преобразование Р/Р~0 ~в t или aS осуществляется по t-кривой или aS-кривой. Форма графика зависит от характера пористости, присутствующей в испытуемом образце, следующим образом:

- если t- или aS-график является линейным и проходит через начало координат, то испытуемый образец является непористым или макропористым;

- если испытуемый образец содержит мезопоры, то график показывает отклонение вверх при относительном давлении, соответствующем началу капиллярной конденсации в самых маленьких мезопорах;

- если испытуемый образец содержит микропоры, то график показывает отклонение вниз, так как многомолекулярные слои не могут полностью сформироваться в ограниченном пространстве внутри микропор.

Некоторые материалы содержат сочетание разных видов пор, что может привести к сложному графику, который трудно интерпретировать. В таких случаях следует быть внимательными при анализе данных изотермы.

*Расчёт распределения пор по размерам*. Данный анализ применим только для расчёта распределения по размерам мезопор.

Расчёт распределения пор по размерам проводят на основании уравнения Кельвина:

(2)

где rK – радиус коры поры (или радиус Кельвина для поры), нм;
σI – поверхностное натяжение жидкого адсорбата (азота), Н/м;
VI – молярный объём конденсированного адсорбата (азота), см3/моль;
R – универсальная газовая постоянная, 8.3144, Дж· К-1·моль-1;
T – температура, К;
θ – угол смачивания адсорбата (допускается равным 0 для увлажнённой поверхности).

Для азота уравнение (2) сводится к следующему:

(3)

Фактический радиус пор (rp) рассчитывают путём поправки радиуса Кельвина на толщину (t) адсорбата на стенках пор. Для цилиндрических пор rp = rK + t, а диаметр пор (dp) рассчитывают по формуле dp = 2(rK + t). Из-за различной геометрии плоскопараллельных щелевидных пор, ширину щели рассчитывают по формуле: rK + 2t.

Объёмное распределение пор по размерам можно рассчитать, используя метод Барретта-Джойнера-Халенды (метод БДХ). Эта модель предполагает, что поры являются жёсткими и имеют правильную форму (например, цилиндрическую или щелевидную), микропоры отсутствуют, и распределение пор по размерам прекращается при достижении самого большого размера, измеряемого этой методикой, что подразумевает, что все оцениваемые поры заполнены при максимальном относительном давлении.

Расчёты пористости и распределения пор по размерам, в которых используется уравнение Кельвина, необходимо выполнять с использованием изотермы десорбции. Это связано с тем, что уравнение Кельвина было получено для макроскопических систем, для описания экспериментальных явлений оно опирается на неповреждённый мениск. Для систем, обсуждаемых в настоящей ОФС, это достижимо только для изотермы десорбции. Вместе с тем, применение уравнения Кельвина для десорбции при меньших размерах пор ограничено поверхностным натяжением адсорбата. Предел иллюстрируется точкой замыкания петли гистерезиса в изотерме. Для азота эта точка возникает при относительном давлении около 0,45, что соответствует предельному радиусу цилиндрических пор около 2 нм. Таким образом, уравнение Кельвина неприменимо для микропор.

Расчёт объёма микропор. Если t- или aS-график указывает на наличие микропор, объём микропор может быть получен экстраполяцией экстраполированной линейной части кривой.

Результаты определения. Результаты определения пористости методом адсорбции-десорбции азота включают такие показатели, как общий объём пор или пористость, объём микропор, медианный или средний диаметр пор, распределение пор по размерам, площадь поверхности пор.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.1.0007 Определение размера пор методом ртутной порозиметрии

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на определение размера пор методом ртутной порозиметрии (порометрии) в твёрдых веществах. Испытание проводят на этапе фармацевтической разработки лекарственных средств.

###### Принцип метода

Данный метод основан на измерении объёма ртути при определении пористости и распределения пор по размерам в твёрдых веществах. При проведении испытания объём ртути, проникающий в пору или пустоту твёрдого вещества, определяют как функцию приложенного избыточного гидростатического давления, которое может быть соотнесено с размером пор.

Оборудование, используемое в данном методе, как правило, обеспечивает максимальное приложенное гидростатическое давление до 400 МПа, что соответствует минимальному определяемому диаметру пор – приблизительно 3 нм. Максимальный диаметр пор ограничен для образцов, имеющих значительную толщину (глубину), вследствие значительной разницы гидростатического давления ртути при проникновении её от верхней к нижней части образца. В большинстве случаев этот предел считают равным 400 мкм, поэтому методом ртутной порозиметрии в твёрдых веществах можно определять поры размером от 3 нм до 400 мкм. Метод наиболее применим для определения пор размером от 100 нм до 200 мкм.

С помощью данного метода можно определить пористость внутри частиц и между частицами, но при наличии в образце обоих типов пор различить их невозможно.

Метод ртутной порозиметрии относят к сравнительным методам испытания, поскольку для большинства пористых веществ отсутствует теоретическое обоснование для получения абсолютных результатов измерения размера пор.

Ртутная порозиметрия является разрушающим методом анализа. При проведении измерения, под воздействием применяемого избыточного давления, может происходить деформация и, в некоторых случаях, разрушение образцов. Деформация образцов может быть упругой или остаточной. В случае упругой деформации (сжатие, уплотнение) уменьшается объём, размер пор испытуемого образца, искажаются результаты измерений. В некоторых случаях для веществ, подвергшихся упругой деформации, при внесении соответствующих поправок на сжимаемость (прессуемость) образца, можно использовать результаты определения методом ртутной порозиметрии.

Этим методом не могут быть оценены образцы веществ, образующих амальгаму со ртутью, например, некоторые металлы. В некоторых случаях, после предварительной инактивации, такие образцы могут быть оценены.

При проведении испытаний с использованием ртути, которая обладает высокой токсичностью, необходимо соблюдать особые меры предосторожности, установленные в нормативно-правовых и законодательных актах.

Ртуть, представляющая собой несмачивающуюся жидкость, проникает в поры твёрдого вещества только под давлением. Применяемое давление, которое необходимо приложить, обратно пропорционально внутреннему диаметру отверстия пор. В случае цилиндрических пор, корреляцию между диаметром пор и давлением рассчитывают по уравнению Вашбурна:

где dp – диаметр пор, м;
σ – поверхностное натяжение, н/м;
θ – краевой угол ртути на образце;
ρ – применяемое давление, Па.

###### Оборудование

Для проведения измерения образец твёрдого вещества дегазируют, помещают в ртуть, последовательно повышают давление над ней, вызывая проникновение ртути в поры вещества (интрузию). Одновременно измеряют объём проникающей ртути. Размер заполненных ртутью пор обратно пропорционален приложенному давлению. Обратный процесс высвобождения ртути из пор (экструзия) может дать дополнительные данные для характеристики пор.

Схема комплектации оборудования, используемого для метода ртутной порозиметрии (рис. 1).

Рисунок 1. Схема комплектации оборудования для метода ртутной порозиметрии: А – резервуар с низким давлением для гидравлической жидкости; Б – умножитель давления; В – гидравлический насос; Г – датчик давления; Д – вакуумный насос с измерительным прибором; Е – резервуар с высоким давлением для гидравлической жидкости; Ж – резервуар для ртути; И – индикатор объёма проникновения; К– капиллярная трубка; Л – камера с высоким давлением; М – ртуть; Н – масло; П – испытуемый образец.

Пенетрометр или дилатометр имеет калиброванную капиллярную трубку, через которую образец может быть удалён и через которую может поступать ртуть. Капиллярная трубка прикреплена к более широкой трубке, в которую помещают испытуемый образец. Изменение объёма проникающей ртути обычно измеряют по изменению ёмкости между ртутным столбом в капиллярной трубке и металлическом кольце, зафиксированном вокруг внешней стороны капиллярной трубки. Если требуются точные измерения, внутренний объём капиллярной трубки должен составлять от 20 % до 90 % от предполагаемого общего объёма пор и пустот образца. Так как различные материалы имеют широкий диапазон открытых пор, для измерений может потребоваться несколько пенетрометров с различными диаметрами капиллярных трубок и различные объёмы образца. Прибор для метода ртутной порозиметрии может иметь отдельные порты для измерений при высоком и низком давлением, или измерение при низком давлении может быть выполнено на отдельном приборе.

Диапазон давления обычно составляет от 4 до 300 кПа для испытаний при низком давлении и более 300 кПа для испытаний при высоком давлении, в зависимости от конструкции конкретного оборудования и цели испытания.

Для контроля за работой оборудования и его калибровки рекомендуется использовать стабильный материал сравнения.

###### Методика

Пробоподготовка образца. Для удаления с поверхности образца адсорбированных веществ, которые могут препятствовать определению доступной пористости, образец предварительно обрабатывают-дегазируют, например, нагреванием и/или вакуумированием, или продувкой образца в токе инертного газа.

В случае образцов смачиваемых или образующих амальгаму твёрдых веществ, их поверхность можно пассивировать, например, путём образования тонкой оксидной плёнки, или покрытия воском.

Обработанные образцы твёрдого вещества перед испытанием взвешивают и переносят на пенетрометр. Затем систему пор образца дегазируют под вакуумом при максимальном остаточном давлении 7 Па.

Наполнение пенетрометра ртутью. Образец покрывают слоем ртути под вакуумом. Вакуум обеспечивает перенос ртути из резервуара в пенетрометр. В заполненном пенетрометре давление наполнения складывается из приложенного давления и давления, возникающего при контакте ртути с образцом. Обычно давление наполнения должно составлять около 4 кПа. Гидростатическое давление ртути над образцом может быть сведено к минимуму путём заполнения пенетрометра в горизонтальном положении.

Измерение низкого давления. Подают воздух или азот при контролируемых условиях, увеличивая давление: либо поэтапно, в соответствии с конкретными размерами пор, представляющими интерес, либо непрерывно с медленной скоростью. Регистрируют сопутствующее изменение высоты ртутного столба в капиллярной трубке. Когда максимальное требуемое давление будет достигнуто, давление уменьшают до атмосферного.

Измерение высокого давления. После измерения в условиях низкого давления пенетрометр, наполненный ртутью, переносят в порт высокого давления или в соответствующую часть прибора и наносят слой гидравлической жидкости. Ртуть проникает в систему пор через гидравлическую жидкость. Увеличивают давление в системе до максимального уровня, примененного при измерении при низком давлении, и регистрируют объём проникания при этом давлении; все последующие объёмы проникания рассчитывают, исходя из значения этого начального объёма. Увеличивают давление либо на стадии, соответствующей определенному размеру пор, либо непрерывно на низкой скорости. Измеряют уменьшение высоты ртутного столба при максимально достижимом давлении. При необходимости давление можно снижать поэтапно или непрерывно с медленной скоростью для определения кривой вытеснения (экструзии) ртути.

Необходимо вносить поправки с учётом изменения объёма ртути, пенетрометра и других компонентов системы оценки объёма при высоком давлении. Степень поправок может быть определена путём проведения контрольных измерений при тех же условиях.

Экспериментально определённая кривая зависимости объёма от давления приведена на рис. 2.

Рисунок 2. Кривая зависимости объёма от давления в виде полулогарифмического графика

###### Анализ данных

Значения давления преобразуют в диаметры пор с помощью уравнения Вашбурна или другим способом.

Поверхностное натяжение ртути (σ) зависит не только от температуры и материала, но также, в случае заметно искривлённой площади поверхности, от радиуса кривизны. Как правило, измеряют значения поверхностного натяжения ртути между 0,41 Н·м−1 и 0,52 Н·м−1 при комнатной температуре. Если значение неизвестно, то можно принять, что σ = 0.48 Н·м−1.

Угол смачивания ртути (θ) в большинстве случаев более 90°. Он может быть определён с помощью соответствующего прибора (ОФС «Смачиваемость пористых твёрдых веществ»). Если значение неизвестно, то можно принять, что θ = 130°. Регистрируют значения угла смачивания и поверхностного натяжения, а также модель, используемую при расчете.

На основании полученных данных строят несколько типов графиков. Часто в графической интерпретации для получения распределения пор по размерам величины диаметра пор откладывают по оси абсцисс, а отношение объёма проникания к массе образца – по оси ординат. В этом случае допустимо применять логарифмическую шкалу абсциссы (рис. 3). Пространство между частицами твёрдого образца учитывается при расчётах как поры. Если поры отличаются по размеру от пустот, то последние можно исключить, выбрав для расчёта соответствующий диапазон размера пор.

Рисунок 3. Распределение пор по размерам в виде полулогарифмического графика

Кривые вытеснения (экструзии) ртути из пор не используются для расчёта распределения пор по размерам (для гистерезиса на рис. 2), потому что часть высвобождающейся ртути всегда остаётся в системе пор. Однако коэффициент удерживания может быть полезен для качественной характеристики пор, которые заполняются только через узкие отверстия («поры чернильницы»).

На основе распределения пор по размерам можно определить наиболее распространённые характеристические значения, такие как общий удельный объём проникания, средний и медианный диаметр пор.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.1.0008 Определение удельной площади поверхности методом воздухопроницаемости

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на метод определения удельной площади поверхности сухих порошков, прошедших сквозь сито.

Удельная поверхность порошка образована внешней поверхностью всех частиц порошка и внутренней поверхностью открытых пор.

Удельная площадь поверхности порошков – это общая площадь поверхности раздела между твёрдой и газообразной фазами в порошке, приходящаяся на 1 г твёрдой фазы; единица измерения удельной площади поверхности – м2/г.

В основе определения удельной площади поверхности методом воздухопроницаемости лежит измерение сопротивления, оказываемого дисперсной фазой протеканию воздуха (газа), который либо разрежён, либо находится под атмосферным давлением. Чем меньше размер частиц порошка, тем больше величина удельной площади поверхности порошка, тем выше оказываемое сопротивление протеканию воздуха (газа). Молекулярный поток, который может повлиять на результаты испытания порошков, размеры частиц которых составляют несколько микрометров, не учитывают в уравнении, используемом в настоящей общей фармакопейной статье для расчёта удельной площади поверхности.

###### Оборудование

Основными частями прибора для определения удельной площади поверхности методом воздухопроницаемости являются пропускная камера, поршень и манометр.

Пропускная камера (ячейка проницаемости, кювета) (рис. 1) состоит из цилиндра с внутренним диаметром 12,6±0,1 мм (А), изготовленного из стекла, или нержавеющего материала, или нержавеющего сплава, или нержавеющей стали. Нижняя часть камеры образует герметичное соединение (например, через адаптер) с манометром (рис. 2). На расстоянии 50±15 мм от верхней части камеры имеется выступ шириной 0,5–1 мм, который является неотъемлемой частью камеры или герметично прикреплён к ней. Выступ фиксирует перфорированный металлический диск (Б), выполненный из нержавеющего металла, толщиной 0,9±0,1 мм с 30–40 отверстиями диаметром 1 мм, равномерно распределёнными по всей поверхности.

Поршень (плунжер) (В) изготовлен из нержавеющего металла и плотно входит в камеру с зазором не более 0,1 мм. Нижняя часть поршня имеет острые квадратные кромки под прямым углом по отношению к центральной оси. На одной стороне поршня имеется воздушный канал длиной 3 мм и глубиной 0,3 мм. Верхняя часть поршня имеет воротник, который при погружении поршня в камеру соприкасается с верхом перфорированного диска (Б). Расстояние между нижней частью поршня и верхом перфорированного диска (Б) составляет 15±1 мм.

Диски из фильтровальной бумаги (Г) имеют мягкие края и диаметр, совпадающий с внутренним диаметром камеры.

Рисунок 1. Пропускная камера. Размеры указаны в мм.

U-образный манометр (Д) (рис. 2) изготовлен из стеклянной трубки с внешним диаметром 9 мм и внутренним диаметром 7 мм. Верхняя часть одного плеча манометра герметично соединена с пропускной камерой (Е). На плечо манометра, соединённое с пропускной камерой, нанесена линия на 125–145 мм ниже верхней части бокового выпускного отверстия и трёх других линий, расположенных на 15 мм, 70 мм и 110 мм выше этой линии (Ж). Боковое выпускное отверстие, расположенное на 250–305 мм выше дна манометра, используется для освобождения плеча манометра, соединённого с пропускной камерой. Кран бокового выпускного отверстия располагается на расстоянии не более 50 мм от плеча манометра.

Манометр установлен таким образом, чтобы его плечи были расположены вертикально. Он заполнен до самой нижней отметки окрашенной жидкостью, рекомендованной производителем оборудования, или окрашенной водой.

Рисунок 2. Манометр. Размеры указаны в мм.

###### Калибровка прибора

Насыпной объём уплотнённого слоя порошка определяют методом ртутного смещения: два диска из фильтровальной бумаги помещают в пропускную камеру, придавливая края стержнем, имеющим немного меньший диаметр, чем диаметр ячейки, до тех пор, пока диски из фильтровальной бумаги не станут плоскими на перфорированном металлическом диске. Заполняют камеру ртутью, удаляя со стенок камеры пузырьки воздуха и, при необходимости, убирая избыток ртути, чтобы поверхность ртути в верхней части камеры была плоской. Если камера изготовлена из материала, который взаимодействует с ртутью, предварительно смазывают камеру и металлический диск тонким слоем жидкого парафина (вазелинового масла). Сливают ртуть в предварительно взвешенный стакан и определяют массу (МА) и температуру ртути.

Формируют уплотнённый слой из порошка, используемого в качестве стандартного (контрольного), и снова наполняют камеру ртутью до получения плоской поверхности в верхней части камеры. Сливают ртуть в предварительно взвешенный стакан и измеряют массу (МB) ртути.

Рассчитывают насыпной объём (V) уплотнённого слоя порошка по формуле:

(1)

где MA–MB – разность измеренных масс ртути, г;
ρHg - плотность ртути при определённой температуре, г/мл.

Измерения повторяют ещё дважды с различными порциями стандартного порошка. Диапазон значений рассчитанного объёма (V) стандартного порошка не должен быть более 0,01 мл. Используют среднее значение трёх рассчитанных объёмов.

Константу прибора (К) определяют с помощью стандартного порошка с известной удельной площадью поверхности и плотностью. Рассчитывают необходимое количество стандартного порошка по формуле 3, используя известную плотность и объём уплотнённого слоя стандартного порошка, рассчитанный по формуле 1. Гомогенизируют и разрыхляют порошок, встряхивая его в течение 2 мин в контейнере вместимостью 100 мл. Готовят уплотнённый слой стандартного порошка и измеряют время, необходимое для опускания столбика жидкости со второй до третьей метки, как описано ранее.

Константу прибора (К) рассчитывают по формуле:

(2)

где S – известная удельная площадь поверхности стандартного порошка;
ρ − плотность испытуемого вещества, г/мл;
ε − пористость уплотнённого слоя порошка;
t – время, необходимое для опускания столбика жидкости со второй до третьей метки, с;
η − динамическая вязкость воздуха, мПа·c (таблица).

Таблица 1. Плотность ртути и вязкость воздуха при различных температурах
Температура, °С | Плотность ртути, г/мл | Вязкость воздуха (η), мПа·с |
--- | --- | --- | ---
16 | 13,56 | 0,01800 | 0,1342
17 | 13,56 | 0,01805 | 0,1344
18 | 13,55 | 0,01810 | 0,1345
19 | 13,55 | 0,01815 | 0,1347
20 | 13,55 | 0,01819 | 0,1349
21 | 13,54 | 0,01824 | 0,1351
22 | 13,54 | 0,01829 | 0,1353
23 | 13,54 | 0,01834 | 0,1354
24 | 13,54 | 0,01839 | 0,1356

Примечание – Приобрести ртуть металлическую ГОСТ 4658-73 могут организации и предприятия, имеющие разрешительный документ на работу с опасными веществами. Ртуть по степени воздействия на организм человека относится к 1-му классу опасности в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005 Система стандартов безопасности труда. ОБЩИЕ САНИТАРНО-ГИГИЕНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ К ВОЗДУХУ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ и ГОСТ 12.1.007. Система стандартов безопасности труда. ВРЕДНЫЕ ВЕЩЕСТВА.

Методика. Испытуемый порошок необходимо предварительно высушить до постоянной массы и просеять через соответствующее сито (например, № 125, ОФС «Сита») для разрушения агломератов. Массу порошка (М), необходимую для выполнения испытания, рассчитывают по формуле:

(3)

где V – насыпной объём уплотнённого слоя порошка;
ρ − плотность испытуемого вещества, г/мл;
ε − пористость уплотнённого слоя порошка.

Изначально пористость принимают равной 0,5 и учитывают при расчёте массы (М) испытуемого порошка по формуле 3.

Диск из фильтровальной бумаги помещают поверх перфорированного металлического диска (Б). Взвешивают необходимое количество испытуемого порошка (М) с точностью до 1 мг. Аккуратно помещают порошок в чистую взвешенную пропускную камеру, осторожно заполняют камеру, постукивая по ней при необходимости так, чтобы поверхность слоя порошка была ровной, накрывают слой порошка вторым диском из фильтровальной бумаги. Медленно уплотняют порошок с помощью поршня, избегая вращательных движений. Надавливают на поршень до тех пор, пока он полностью не погрузится в пропускную камеру. Если это невозможно, следует уменьшить количество порошка, взятого для испытания. Если, напротив, сопротивление недостаточное, следует увеличить количество порошка. В этом случае пористость нужно рассчитать ещё раз. Через 10 с поршень удаляют.

Пропускную камеру соединяют с манометром через герметичный патрубок. Удаляют из манометра воздух с помощью резиновой груши до тех пор, пока уровень окрашенной жидкости не достигнет уровня самой высокой отметки. Перекрывают кран и проверяют герметичность прибора, закрыв конец камеры, например, резиновой пробкой. Удаляют пробку и с помощью таймера замеряют время, необходимое для того, чтобы столбик жидкости упал со второй до третьей отметки.

Используя измеренное время потока, рассчитывают удельную площадь поверхности (S) в м2/г по формуле:

(4)

где t – время, необходимое для опускания столбика жидкости со второй до третьей метки, с;
η − динамическая вязкость воздуха, мПа·c (таблица 1);
K − константа прибора, которая рассчитывается по формуле (2);
ρ − плотность испытуемого вещества, г/мл;
ε − пористость уплотнённого слоя порошка.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.1.0009 Определение удельной площади поверхности порошков методом газовой адсорбции

Вводится впервые

Удельная поверхность порошка определяется физической адсорбцией газа на поверхности твёрдого тела и расчётом количества газа адсорбента, соответствующе мономолекулярному слою на поверхности. Физическая адсорбция является результатом относительно слабых сил (сил Ван-дер-Ваальса), действующих между молекулами адсорбированного газа и адсорбирующей поверхностью испытуемого порошка.

По количеству газа, адсорбированного мономолекулярным слоем поверхности порошка, определяют удельную площадь поверхности порошка. Количество адсорбированного газа может быть измерено статистическими и динамическими методами.

###### Область применения

Определение удельной площади поверхности проводят для оценки технологических характеристик фармацевтических субстанций и порошков, используемых в качестве сорбентов, катализаторов, фильтрующих материалов и др.

###### Основные положения

Для математического описания физической адсорбции, основанной на теории мономолекулярной адсорбции, используют метод БЭТ, названный по начальным буквам фамилий авторов этого метода (Брунауэр, Эмметт и Теллер). Авторы предложили в качестве адсорбируемого газа использовать азот и проводить его адсорбцию на частицах порошка при температуре кипения жидкого азота, то есть при –195,8 °С.

Полученные данные обрабатывают в соответствии с уравнением изотермы адсорбции (БЭТ):

(1)

где Р − парциальное давление паров адсорбируемого газа в состоянии равновесия при соприкосновении с поверхностью при температуре –195,8 ºС, Па;
Ро − давление насыщения адсорбируемого газа;
Va – объём газа, адсорбированного при стандартной температуре и давлении (далее – СТД) [0º С и атмосферном давлении (1,013·105 Па)], мл;
Vm – объём газа, адсорбированного при СТД, достаточный для образования видимого мономолекулярного слоя на поверхности образца, мл;
С – безразмерная константа, характеризующая энтальпию адсорбции газа на образце порошка.

Различают многоточечное и одноточечное измерение.

Многоточечное измерение. Как правило, для определения удельной площади поверхности методом динамического потока адсорбции газа или методом объёмного анализа газовой адсорбции требуется, как минимум, три измерения Va, каждое измерение при различных значениях Р/Ро.

Значение Va измеряют для каждого, из не менее чем трёх, значений Р/Ро. Затем значение БЭТ.

наносят на график относительно Р/Ро в соответствии с уравнением (1). Этот график должен, как правило, представлять прямую линию при приблизительном диапазоне относительных давлений от 0,05 до 0,3. Данные считают приемлемыми, если коэффициент корреляции (r) линейной регрессии составляет не менее 0,9975; то есть r2 составляет не менее 0,995. Из полученного линейного графика тангенс угла наклона, равный (С-1)/VmC, и точку пересечения, равную 1/VmC, оценивают методом линейной регрессии. Исходя из данных значений рассчитывают Vm как 1/(тангенс угла наклона+ пересечение), и рассчитывают С как (тангенс угла наклона/пересечение)+1.

Из определённого таким образом значения Vm, рассчитывают удельную площадь поверхности (S) в м2·г–1, по уравнению:

(2)

где Na - постоянная Авогадро (6,023×1023 моль-1);
Vm − эффективная площадь поперечного сечения одной молекулы адсорбируемого газа в м2 (0,162 нм2 для азота и 0,195 нм2 для криптона);
m − масса испытуемого порошка, г;
22400 - объём, занимаемый одним молем адсорбируемого газа при СТД, учитывающий незначительное отклонение от нормы, мл.

Измерение проводят не менее чем по трём точкам. Могут быть проведены дополнительные измерения, особенно когда наблюдается нелинейность измеряемой величины при значении P/P~o, ~близком к 0,3. Поскольку нелинейность часто отмечается при значении P/Po ниже 0,05, то значения, получаемые в этом диапазоне, использовать при расчётах не рекомендуется. Для определения линейности данные обрабатывают, и описанным выше методом рассчитывают удельную площадь поверхности образца порошка.

Одноточечное измерение. При определённых условиях приемлемо определять удельную площадь поверхности порошка на основании единственного значения Va, измеренного при единственном значении Р/Ро, например 0,300 (что соответствует 0,300 моль азота или 0,001038 мольной доли криптона), используя следующее уравнение для расчета Vm:

(3)

Затем на основании Vm рассчитывают удельную площадь поверхности согласно уравнению (2).

Одноточечный метод измерения может быть использован непосредственно для серии образцов порошка определённого вещества, для которого константа вещества С намного больше единицы. Эти обстоятельства могут быть проверены путём сравнения значений удельной площади поверхности, определяемых одноточечным методом со значениями, определяемыми многоточечным методом, для серии образцов порошка. Близкое сходство между значениями, полученными при одноточечных и многоточечных измерениях, предполагает, что 1/С приближается к нулю.

Одноточечный метод измерения можно применять косвенно для ряда аналогичных образцов порошка определённого материала, для которых константа материала С не является бесконечной, но может считаться неизменной. В этих условиях погрешность, связанная с одноточечным методом, может быть уменьшена или устранена путём применения многоточечного метода для оценки С одного из образцов серии по графику БЭТ, из которого С рассчитывается как (1+тангенс угла наклона/пересечение). Затем Vm рассчитывают на основании единственного значения Va, измеряемого при единственном значении Р/Ро согласно уравнению:

(4)

Удельную площадь поверхности рассчитывают на основании значения Vm согласно уравнению (2).

###### Подготовка к испытаниям

Дегазация. Перед определением удельной площади поверхности образца необходимо удалить газы и пары, которые могли физически адсорбироваться на поверхности образца после производства, во время обработки, транспортирования, хранения. Если дегазация не проведена, то удельная площадь поверхности может быть уменьшена или может меняться, так как промежуточная площадь поверхности покрыта молекулами ранее адсорбировавшихся газов и паров. Условия проведения дегазации имеют решающее значение для получения требуемой воспроизводимости и точности измерения удельной площади поверхности фармацевтических субстанций, вспомогательных веществ из-за чувствительности поверхностей этих материалов.

Пригодность условий дегазации подтверждают по получению воспроизводимых графиков БЭТ, постоянной массе испытуемого порошка и отсутствия обнаруживаемых физических или химических изменений в испытуемом порошке.

Условия дегазации, определяемые температурой, давлением и временем, должны быть выбраны таким образом, чтобы исходная поверхность твёрдого вещества воспроизводилась как можно более точно. Дегазация многих веществ часто достигается применением вакуума, путём продувки образца в токе инертного, сухого газа или применением метода циклической десорбции-адсорбции.

При всех способах дегазации для повышения скорости очистки поверхности от загрязняющих веществ иногда применяют повышенные температуры. Дегазация путём нагревания образца порошка может изменить природу поверхности и целостность образца, поэтому данную процедуру не следует выполнять, если нет особых указаний. При использовании нагревания рекомендуемая температура и время дегазации должны быть как можно меньшими для достижения воспроизводимого измерения удельной площади поверхности за приемлемый интервал времени. Для дегазации чувствительных образцов веществ могут быть использованы другие методы дегазации, например, такие как цикличный метод десорбции и адсорбции.

Адсорбируемый газ. Стандартным методом является адсорбция азота при температуре жидкого азота.

Для порошков с низкой удельной площадью поверхности (менее 0,2 м2·г–1), доля адсорбируемого газа является небольшой. В этом случае предпочтительно использовать криптон при температуре жидкого азота, так как низкое давление пара этого газа значительно уменьшает погрешность.

Увеличение количества испытуемого образца, там, где это возможно (эквивалентно 1 м2 или более от общей площади поверхности при использовании азота), может компенсировать ошибки при определении малых площадей поверхности.

Все используемые газы не должны содержать влаги, то есть быть сухими.

Количество образца Точно взвешивают такое количество испытуемого порошка, чтобы общая поверхность образца составляла не менее 1 м2, если в качестве адсорбируемого газа используется азот, и 0,5 м2, если в качестве адсорбируемого газа используется криптон. Меньшие количества образца можно применять после проведения соответствующей валидации.

Измерения. Измерение адсорбции, как правило, проводят при низкой температуре: при температуре –195,8 °С, температуре кипения жидкого азота, так как количество адсорбируемого газа при соответствующем давлении имеет тенденцию к увеличению при понижении температуры.

###### 1. Метод динамического потока

Метод динамического потока относится к динамическим, проточным методам измерения адсорбции. Схема прибора, используемого для метода динамического потока, приведена на рис. 1. Рекомендуемый адсорбируемый газ для этого метода – сухой азот или криптон; в качестве газа-разбавителя, который не адсорбируется в рекомендуемых условиях, используют гелий. Газы смешивают в определенных соотношениях для получения необходимого парциального давления адсорбируемого газа.

Если значение Р/Ро находится в диапазоне от 0,05 до 0,30, то требуется, как минимум, три смеси соответствующего адсорбируемого газа с гелием.

Газовый детектор-интегратор должен обеспечивать сигнал, приблизительно пропорциональный объёму проходящего через него газа при заданных значениях температуры и давления. С этой целью применяют детектор по теплопроводности с электронным интегратором, как один из множества вариантов. Определяют, как минимум, три точки данных в рекомендованном диапазоне от 0,05 до 0,30 для Р/Ро.

Схема прибора для метода динамического потока

Определённую смесь газов, как правило, азота и гелия, пропускают через ячейку теплопроводности, потом через образец и снова через ячейку теплопроводности, а затем в записывающий потенциометр.

Погружают ячейку с образцом в жидкий азот, испытуемый образец адсорбирует жидкий азот из подвижной фазы. Это приводит к разбалансировке ячейки электропроводности, импульс регистрируют записывающим прибором.

Извлекают испытуемый образец из охлаждающей среды, это обуславливает появление равных по площади, но противоположных по направлению пика десорбции и пика адсорбции. Так как пик десорбции определяется лучше, чем пик адсорбции, именно его используют для определения.

Для проведения калибровки в систему вводят достаточное количество адсорбируемого газа, чтобы получить пик аналогичной величины с пиком десорбции, и рассчитывают долю объёма газа на единицу площади пика.

Для одноточечного метода измерения используют смесь азота и гелия; для многоточечного метода измерения используют несколько таких смесей или предварительно смешивают два потока газа.

Расчёты проводят так же, как в объёмном методе.

###### 2. Объёмный метод

Метод объёмного анализа относят к статистическим методам измерения адсорбции. Схема прибора, используемого для объёмного метода определения адсорбции, приведена на рис. 2. Рекомендуемым адсорбируемым газом для этого метода является азот, который подаётся в разряженное пространство над предварительно дегазированным образцом порошка, чтобы обеспечить определённое парциальное давление газа (Р). Использование газа-разбавителя, например, гелия, не является обязательным; в то же время, гелий может быть использован, но для других целей, например, для измерения объёма пустот (мёртвого объёма).

Поскольку в данном методе вместо газовой смеси применяют только чистый адсорбируемый газ, то это способствует устранению мешающих эффектов, возникающих при термальной диффузии.

В пробирку для образца впускают небольшое количество сухого азота для предотвращения загрязнения чистой поверхности, вносят образец, закрывают пробирку пробкой и взвешивают. Рассчитывают массу образца. Присоединяют пробирку к прибору для проведения объёмного анализа. Образец осторожно вакуумируют до определенного давления (например, от 2 до 10 Па). В качестве альтернативы некоторые приборы работают за счёт вакуумирования до определённой скорости изменения давления (например, менее 13 Па/30 с) и выдерживания в течение определённого периода времени перед переходом к следующей стадии.

Схема прибора для объёмного метода

Если принцип работы прибора требует измерения пустот (мёртвого объёма) пробирки, например, путём подачи неадсорбируемого газа, такого как гелий, то данная операция выполняется после извлечения образца. Определение измерения пустот можно не проводить при использовании разности измерений, а именно, стандартной пробирки и пробирки с образцом, соединённых дифференциальным преобразователем. Затем измеряется адсорбция азота, как указано ниже.

Поднимают сосуд Дьюара, содержащий жидкий азот при температуре –195,8 °С, до определённой точки испытуемой ячейки. Добавляют необходимое количество азота до обеспечения самой низкой величины относительного давления. Измеряют адсорбированный объём Va. Для многоточечных измерений повторяют измерение Va при последовательно больших значениях Р/Ро. При использовании в качестве адсорбируемого газа азота, обычно используют значения Р/Ро, равные 0,10, 0,20 и 0,30.

Периодически необходимо проверять работу прибора, используя соответствующие эталонные материалы с известной площадью поверхности, которые должны иметь удельную площадь поверхности, аналогичную площади поверхности испытуемого образца.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.1.0010 Определение характеристик кристаллических твёрдых веществ с помощью микрокалориметрии и калориметрии растворения

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на методы определения характеристик кристаллических твёрдых веществ с помощью микрокалориметрии и калориметрии растворения.

###### Область применения

При разработке и последующем производстве лекарственного средства большое значение имеет биодоступность высоко кристаллической субстанции и количественное определение аморфного вещества.

###### Основные термины и понятия

Полностью упорядоченная кристаллическая решётка, в которой каждая молекула занимает предположительно известное положение, является идеальной, но редко встречающейся, если вообще может быть возможной. Другим крайним состоянием является аморфное, где твёрдое вещество содержит максимально возможную плотность дефектов (дефектов различных порядков), обуславливающую полную потерю дальнего порядка и присутствие только ближнего, представленного ближайшими соседними частицами. Реальные кристаллы находятся между кристаллическим и аморфным состояниями твёрдых веществ.

Кристалличность - состояние кристалла, находящегося между кристаллическим и аморфным состоянием.

Все реальные кристаллы, даже в чистом состоянии, обладают некоторыми дефектами кристаллической решётки, которые увеличивают как энергию (энтальпию при условии постоянного атмосферного давления), так и неупорядоченность (выраженную через энтропию) кристаллической решётки. Кристалл, имеющий относительно низкую плотность дефектов, называют высоко кристаллическим и обладающим высокой кристалличностью. И наоборот, частицу с относительно высокой плотностью дефектов называют частично аморфной и обладающей низкой кристалличностью. В идеальных условиях полностью аморфной частице соответствует нулевая кристалличность. Аморфные частицы могут содержать в некоторой степени упорядоченные домены, которые могут играть роль ядра кристаллизации; о подобных так называемых аморфных частицах говорят, что они обладают низкой, но ограниченной степенью кристалличности.

При разработке и последующем производстве лекарственного средства большое значение имеет биодоступность и количественное определение аморфного вещества в высоко кристаллической субстанции.

Порошок может содержать частицы различной степени кристалличности и частицы с различными размерами и формой. Чем ниже кристалличность твёрдого вещества, тем больше его энтальпия и энтропия. Увеличение энтальпии не компенсируется полностью увеличением энтропии; поэтому свободная энергия Гиббса, отражающая равновесие между ними, фактически увеличивается. Следовательно, чем меньше кристалличность вещества (порошка) и больше выражен его аморфный характер, тем выше его кажущаяся характеристическая растворимость и скорость растворения, но ниже его термодинамическая стабильность.

Кристалличность также является важным свойством и требует измерения соответствующим методом.

Полиморфизм - способность вещества находиться в различных кристаллических формах.

Гидраты или сольваты - кристаллы, содержащие молекулы воды или растворителя в кристаллических решётках.

Как правило, гидраты проявляют разные физические свойства, что связано с разной упаковкой кристалла и/или молекулярной структурой и энергией решётки. Для простоты проведения калориметрических измерений при определении степени кристалличности, в данном случае подразумевается, что испытуемый образец имеет только одну кристаллическую форму.

Теория и экспериментальный метод могут распространяться на полиморфную способность веществ при тщательном изучении различий в энтальпии полиморфных веществ.

###### Микрокалориметрия (Определение содержания аморфной части)

Большинство химических, физических и биологических процессов связано с теплообменом. Микрокалориметрия является высокочувствительным методом мониторинга и расчёта экзотермических (выделяющих теплоту) и эндотермических (поглощающих теплоту) превращений, сопровождающих эти процессы.

Метод позволяет определять скорость и глубину протекания химических реакций, фазовых превращений или изменений структуры.

Методом микрокалориметрии могут быть исследованы тепловые процессы. Микрокалориметрия использует принцип теплового потока (тепловое рассеивание), когда теплота, выделяемая (или поглощаемая) в определённом термостойком сосуде, перемещается из (в) него с целью повторного установления теплового равновесия с окружающей средой. Исключительная термическая стабильность по отношению к окружающей среде должна достигаться с помощью теплоотвода или окружающих электронно-регулируемых устройств.

Тепловая энергия испытуемого образца в реакционном сосуде обычно направляется через элементы Пельтье, которые являются термоэлектрическими преобразователями, использующими эффект Зеебека (тепловая энергия конвертируется в сигнал напряжения, пропорциональный тепловому потоку).

Результаты представляют обычно в виде количественной характеристики тепловой энергии, которая образуется в единицу времени (Вт), как функции времени.

###### Оборудование

Микрокалориметры представляют собой парные системы с измерительным сосудом и сосудом сравнения. Сосуды обычно сделаны из стекла или нержавеющей стали. Для определённых целей могут применяться специально сконструированные сосуды, позволяющие добавлять газ, жидкость или твёрдое вещество.

###### Калибровка

Микрокалориметр калибруется по тепловому потоку (энергия в единицу времени) с использованием откалиброванных внешних или внутренних электрических тепловых источников или соответствующей стандартной реакции.

###### Чувствительность

Чувствительность микрокалориметрического метода может быть оценена с использованием подходящего стандартного образца, проанализированного соответствующим методом, в совокупности с определением флуктуационного шума измерительного прибора.

###### Методика

Испытуемый образец взвешивают в подходящую колбу. Колбу плотно закрывают, чтобы избежать испарения растворителей и помещают колбу в держатель образца. При необходимости уравновешивают колбу при температуре измерения перед помещением её в положение для проведения измерения.

Начинают испытание и фиксируют значения величины теплового потока, откладывая значения времени на оси абсцисс, а теплового потока – на оси ординат (устанавливают направление экзотермического и эндотермического теплового потока).

###### Обнаружение и количественное определение содержания аморфной части в порошках

Аморфное состояние является метастабильным по отношению к кристаллическому состоянию; поэтому может происходить перекристаллизация. Измерение теплоты перекристаллизации позволяет определять содержание аморфной части, используя площадь пика перекристаллизации. Рассчитать содержимое аморфной части образца можно с помощью отношения выходных данных для испытуемого образца к выходным данным для аморфного стандартного образца. Диапазон значений содержания аморфной части, охватываемый данным методом, зависит от конкретного испытуемого образца; в благоприятных случаях могут быть достигнуты пределы обнаружения ниже 1 %.

Перекристаллизация может быть инициирована путем воздействия на испытуемый образец воздушной смесью более высокой относительной влажности или воздушной смесью, содержащей органический пар. Образец обычно помещают в ампулу, которая также содержит небольшую пробирку с водным насыщенным раствором соли, органическим растворителем или смесью растворителей.

Теплота перекристаллизации обычно измеряется с использованием образца фиксированной массы, помещённого в стеклянный или стальной сосуд. Пробирка, содержащая насыщенный раствор соли или органический растворитель, выбирается таким образом, чтобы она была достаточно большой для полного насыщения воздуха над образцом. Масса испытуемого образца и природа пара над ним выбираются таким образом, чтобы в процессе перекристаллизации наблюдался отчётливый пик, чётко отделённый от исходных тепловых эффектов, вызванных введением образца.

Условия, при которых происходит переход аморфной фазы в термодинамически более стабильное кристаллическое состояние, оказывают значительное влияние на время перекристаллизации. В частности, физические смеси из чистых аморфных и чистых кристаллических веществ будут отличаться от частично кристаллического вещества в проявлении своих свойств. Такие влияния следует учитывать при разработке методики.

Типичный отклик для перекристаллизации преимущественно аморфного вещества показан на рисунке. Первая часть кривой отображает несколько конкурирующих процессов, происходящих одновременно, таких как поглощение водяного пара аморфными частями порошка и выделение водяного пара из пробирки. После первоначального отклика отмечается большой экзотермический отклик, вызванный перекристаллизацией аморфного вещества. Имеет место также удаление избытка воды из перекристаллизованных частей и её конденсация.

Таким образом, площадь под этим экзотермическим откликом перекристаллизации пропорциональна теплоте перекристаллизации.

Рисунок. Типичные для микрокалориметрического

измерения выходные данные по мощности (в мкВт) в виде функции времени (в часах): пик разрушения аморфной структуры (I) и пик кристаллизации (II) для преимущественно аморфной лактозы при температуре 25 оС и относительной влажности 75 %.

###### Калориметрия растворения (Определение кристалличности)

Калориметрия растворения устанавливает способы определения энтальпии растворения вещества (то есть теплоту растворения при постоянном атмосферном давлении). Энтальпия растворения определяется как разность между энтальпией вещества, растворенного до определенной концентрации, и энтальпией исходного вещества. Для растворения должен использоваться такой растворитель, чтобы твёрдое вещество определённой массы растворялось в течение периода времени, соответствующего времени отклика калориметра, как это описано ниже.

Энтальпия растворения пропорциональна количеству растворённого твёрдого вещества. Это количество может приниматься за 1 моль – для молярной энтальпии или 1 г – для удельной энтальпии. Если вещество имеет достаточную чистоту (определённую с требуемой степенью точности) и известна его молекулярная масса, то предпочтительной является молярная энтальпия, в ином случае должна использоваться удельная энтальпия. Энтальпия растворения слабо зависит как от температуры, которая обычно составляет 25оС, так и от конечной концентрации растворённого вещества.

Кристалличность вещества (Pc), как правило, выражают в процентах. Для данного метода необходимы два стандарта сравнения, а именно: высококристаллический образец, при условии, что он имеет кристалличность 100 % и измеренную энтальпию растворения ΔHSc, и аморфный образец, при условии, что он имеет кристалличность 0 % и измеренную энтальпию растворения ΔHSα. Кристалличность твёрдого вещества (Pc) в процентах может быть рассчитана, используя значения указанных величин и измеренную энтальпию растворения исследуемого твёрдого вещества ΔHSS по формуле:

Кристалличность, представленная на шкале процентного содержания, зависит от трёх измеренных величин, а энтальпии растворения могут быть заменены другими подходящими физическими величинами, зависящими от кристалличности. Значение кристалличности образца в процентах зависит не только от природы и метода приготовления двух стандартов сравнения, но также от выбора измеряемой физической величины.

Энтальпия растворения измеряется с помощью изопериболической жидкостной калориметрии (температура оболочки (рубашки) поддерживается постоянной), а температура калориметрической системы отличается от температуры оболочки) или изотермической жидкостной калориметрии (оболочка и калориметрическая система имеют постоянную и равную температуру). Обычно проводится не менее 3 измерений для каждого образца. Затем рассчитывается среднее значение этих величин. Конкретные требования будут зависеть от возможностей оборудования и необходимой степени точности.

Изопериболическая жидкостная калориметрия

В изопериболическом жидкостном калориметре теплообмен в течение процесса растворения вызывает соответствующее изменение температуры в системе растворитель-растворенное вещество (т.е. раствор). Данное изменение температуры измеряется температурным датчиком, включённым в электрическую цепь, который записывает электрический сигнал, соответствующий изменению температуры. Обычно такое изменение температуры, представляемое в электронной форме, измеряется в точно определенные интервалы времени для получения данных температура-время, которые регистрируются, анализируются с помощью компьютера и затем отображаются графически. Контрольный опыт без прибавления твердого вещества к растворителю обычно не показывает заметное изменение наклона графика зависимости температура-время.

Для изопериболических жидкостных калориметров отклик достаточно быстрый, но необходимо делать поправки на возможные потери теплоты на баню или на поступление теплоты от неё. Следовательно, если процесс растворения относительно быстрый, то изопериболические жидкостные калориметры имеют преимущества перед изотермическими жидкостными калориметрами. Для измерения энтальпии растворения с использованием изопериболических жидкостных калориметров важным является выбор растворителя. Природа растворителя и масса испытуемого образца должны быть такими, чтобы общий теплообмен, соответствующий полному растворению твёрдого вещества, закончился в течение 5 минут при интенсивном перемешивании со скоростью вращения в пределах 400-600 об/мин.

Эффективная теплоёмкость калориметрической ячейки и её содержимого определяется для каждого калориметрического измерения. Это определение сопровождается электрическим нагревом содержимого калориметрической ячейки. Эффективная теплоёмкость определяется следующим образом: выполнение первого определения перед растворением, а второго – после растворения и затем – усреднение двух результатов. Точность и надёжность электрического нагрева устанавливаются на основании точности и надёжности вышеупомянутых химических калибровок.

###### Изотермическая жидкостная калориметрия

В изотермическом (постоянная температура) жидкостном калориметре изменение теплоты в течение процесса растворения компенсируется равным, но противоположным, изменением энергии – таким, чтобы температура системы растворитель-растворённое вещество (то есть раствора) оставалась преимущественно постоянной. Измеряется равное, но противоположное, изменение энергии, которое при изменении знака на обратный, обуславливает энтальпию растворения. Для изотермических калориметров отклик относительно медленный, но компенсационный процесс уменьшает эффекты потери теплоты на баню или поступления теплоты от неё. Следовательно, изотермические жидкостные калориметры имеют преимущества перед изопериболическими жидкостными калориметрами в случае, когда процесс растворения относительно медленный.

###### Калибровка калориметров растворения

Для обеспечения точности калориметра необходимо регулярно проводить калибровку. Для эндотермического процесса растворения калибровка калориметра выполняется посредством измерения теплоты, поглощённой в течение процесса растворения калия хлорида в дистиллированной воде при температуре 298,15 K (25 оС). Установленное изменение энтальпии в данном эндотермическом процессе составляет 235,5 Дж/г (17,56 кДж/моль). Для экзотермического процесса растворения проверка калориметра осуществляется измерением теплоты, выделенной при растворении 5 г/л трометамола (Трис(гидроксиметил)аминометан) в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М при температуре 25оС. Установленная теплота для указанного выше процесса составляет -246,0 Дж/г (-29,80 кДж/моль).

###### Правила работы с образцами

Химическая и физическая стабильность твёрдых веществ может снижаться с уменьшением кристалличности. Твёрдые вещества с низкой кристалличностью, особенно аморфные твёрдые вещества, стремятся поглощать пары воды из атмосферы, что приводит к кристаллизации и соответствующему увеличению кристалличности. В связи с этим перед проведением определения кристалличности безводные образцы должны храниться при нулевой влажности или при значениях влажности ниже критического уровня в закрытых камерах, содержащих поглотитель влаги, предпочтительно, с индикатором эффективности. Если необходимо провести исследования кристалличность-влажность, то для обеспечения определенной влажности образец должен храниться в герметично закрытой камере, содержащей насыщенный раствор соли.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.1.0011 Определение характеристик сыпучести порошков методом сдвиговых ячеек

Вводится впервые

Испытание позволяет определить различные параметры, описывающие характеристики сыпучести порошков.

Под сыпучестью (текучестью) порошков понимают, как правило, подвижность частиц порошка относительно друг друга, которая обуславливает способность порошков течь (сыпаться) под воздействием силы тяжести. Комплекс характеристик, описывающих сыпучесть порошков, обозначения характеристик и методики определения приведены также в ОФС «Сыпучесть порошков», ОФС «Насыпная плотность и плотность после уплотнения».

###### Область применения

Методология сдвиговых ячеек широко используется при изучении порошков, применяемых в фармацевтической промышленности. Использование метода сдвиговых ячеек предполагает изучение характеристик сыпучести порошков на более фундаментальной основе, что важно при фармацевтической разработке и технологическом процессе производства лекарственных средств, особенно для моделирования, прогнозирования поведения порошков в загрузочных ёмкостях ‒ воронках, бункерах, смесителях, установления оптимальных параметров для такого производственного оборудования. Для изучения и описания этих характеристик проводят испытания, основанные на определении сыпучести порошков путём приложения к ним разных состояний напряжения и деформации, называемых методом сдвиговых ячеек. Анализ результатов испытаний позволяет получить и исследовать широкий спектр параметров, описывающих характеристики сыпучести порошков, включая кривую сыпучести, угол внутреннего трения, прочность на сжатие, прочность на растяжение и множество производных параметров, например, таких как коэффициент сыпучести. Благодаря возможности точного контроля экспериментальных параметров проводимого испытания, характеристики сыпучести порошков также могут быть определены в зависимости от напряжения консолидации (уплотнения), времени и условий окружающей среды, таких как температура и влажность.

###### Оборудование

В зависимости от определяемых параметров сыпучести испытуемых порошков, учитывая технологические, физико-химические свойства порошков и другие факторы, для проведения испытаний может быть применимо разнообразное оборудование, имеющее сдвиговые ячейки различной конфигурации. Рекомендуется, чтобы результаты определения характеристик сыпучести порошков, полученные методом сдвиговых ячеек, включали полное описание оборудования и используемой методики проведения испытаний.

Основной принцип действия приборов со сдвиговыми ячейками заключается в плоскостном сдвиге. Сдвиговая ячейка состоит, как правило, из двух частей, имеющих горизонтальную плоскость разъёма. Ячейку заполняют испытуемым образцом, предусматривая для уплотнения порошка и обеспечения необходимого напряжения консолидации специальную крышку, плунжер. За счёт прикладываемого напряжения сдвига при испытании происходит смещение (сдвиг) частей ячейки относительно друг друга и в плоскости разъёма (сдвига) возникает сдвиговое деформирование образца. В зависимости от типа сдвиговой ячейки её части могут смещаться по прямой линии (приборы линейного сдвига) или по кругу (приборы кольцевого сдвига).

Один из типов сдвиговых ячеек представляет собой цилиндрическую сдвиговую ячейку, которая в горизонтальном разрезе формирует плоскость сдвига между нижним неподвижным основанием и верхней подвижной частью кольца сдвиговой ячейки. После консолидации слоя порошка в сдвиговой ячейке определяют силу, необходимую для сдвига слоя порошка за счёт перемещения верхнего кольца. Модели кольцевой сдвиговой ячейки имеют несколько преимуществ по сравнению с цилиндрической сдвиговой ячейкой, включая использование меньшего количества испытуемого образца. Недостатком кольцевой ячейки, обусловленным ее конструкцией, является то, что слой порошка сдвигается неоднородно, так как частицы порошка на внешней части кольца сдвигаются больше, чем частицы внутренней области. Сдвиговая ячейка типа пластины представляет собой тонкий слой порошка между шероховатыми поверхностями ‒ неподвижной нижней и подвижной верхней.

Наибольшее практическое применение для определения характеристик сыпучести порошков находят методики, основанные на использовании поступательных сдвиговых ячеек Дженике, круговых сдвиговых ячейках Шульце, ротационных сдвиговых ячейках. Сдвиговая ячейка Дженике относится к типу ячеек линейного плоскостного сдвига, она может быть использована в приборах для измерения характеристик сыпучих порошков с размером частиц не более 6 мм. Недостатком таких приборов является невозможность определения размеров и формы зоны сдвига. В приборах кольцевого сдвига может быть использована сдвиговая ячейка Шульце, которая обеспечивает неограниченность сдвигового деформирования образца по длине. Это упрощает процедуру подготовки образца и дает возможность проведения многократных испытаний на одной и той же пробе. Сдвиговыми ячейками могут быть оснащены универсальные приборы (тестеры), предназначенные также для определения и других характеристик сыпучести порошков, включая, например, скорость сыпучести через отверстие, угол естественного откоса, коэффициент прессуемости и др.

Сдвиговая ячейка является составной частью измерительной системы универсального порошкового реометра, позволяющего проводить измерения характеристик сыпучих порошков с размером частиц не более 1 мм. Определение характеристик в таком приборе выполняют после цикла кондиционирования, проводимого за счёт движения изогнутого лезвия через слой порошка по спиральной траектории с постоянной скоростью. Такая процедура позволяет устранить внутренние напряжения, возникающие при загрузке образца и получить легко воспроизводимый образец порошка.

При изучении характеристик сыпучести порошков методом сдвиговых ячеек в исследовательских целях также может быть использован метод простого сдвига, согласно которому сдвиг осуществляется по всему объёму образца ‒ происходит деформация слоя частиц прямоугольной формы до состояния формы параллелограмма. За счёт последующего изменения направления деформации достигается состояние неограниченной деформации. Прибор для испытания порошков, основанный на этом методе, был сконструирован Шведесом.

Методики с использованием любого типа сдвиговых ячеек имеют свои преимущества и недостатки. Существенное преимущество любой методики заключается в возможности в значительной степени контролировать экспериментальный процесс. Вместе с тем, метод определения характеристик сыпучести порошков с использованием сдвиговых ячеек является достаточно трудоёмкими, требующими значительного количества испытуемого порошка, наличия хорошо обученного оператора.

###### Испытание на одноосное сжатие

Испытание на одноосное сжатие, схема которого приведена на рис. 1, иллюстрирует концепцию сыпучести порошков.

Образец порошка загружают в измерительную ячейку, представляющую собой полый цилиндр, имеющий область поперечного сечения А, внутренняя стенка которого не создаёт трения. Переводят порошок в консолидированное состояние, т.е. уплотняют, прикладывая сверху в вертикальном направлении определённое напряжение консолидации (σ1). Чем больше сокращается объём порошка, тем выше его сжимаемость. В дополнение к увеличению насыпной плотности (ρb) порошка под действием напряжения консолидации наблюдается также увеличение прочности (силы сопротивления) порошка. Таким образом, на 1-ом этапе испытания порошок одновременно консолидируется (уплотняется) и сжимается под действием напряжения консолидации.

Рисунок 1. Испытание на одноосное сжатие

На промежуточном этапе, после консолидации, порошок освобождают от напряжения консолидации (σ1), удаляя полый цилиндр, при этом, порошок продолжает держать принятую форму. Затем консолидированный порошок нагружают вертикальным увеличивающимся сжимающим напряжением. На определённом уровне прикладываемое напряжение превышает силы сцепления частиц порошка, образец начинает деформироваться, разрушаться вдоль плоскости сдвига и порошок начинает течь (2-ой этап испытания). Предел прочности на сжатие (σc), или неограниченный предел текучести, определяют как напряжение, вызывающее деформацию, разрушение. Так как деформирование консолидированного порошка происходит, как правило, после воздействия достаточно большого вертикального сжимающего напряжения, то для порошка существует определённый предел сыпучести ‒ ещё одна характеристика его сыпучести.

Предел сыпучести порошка зависит от параметров его предшествующей консолидации: чем больше напряжение консолидации (σ1), тем больше насыпная плотность (ρb) и прочность на сжатие (σc). Таким образом, при испытаниях методом одноосного сжатия, проведённых при различных значениях напряжения консолидации (σ1), можно получить различные пары значений (σ1, σc) и (σ1, ρb). Если данные пары значений нанести в виде точек на диаграмму А (σ1, σc) и диаграмму А (σ1, ρb), соответственно, а затем построить на каждой диаграмме кривые через нанесённые точки, то полученные кривые обычно аналогичны тем, которые показаны для образца А на рис. 2, где насыпная плотность (ρb) и прочность на сжатие (σc) обычно увеличиваются при повышении напряжения консолидации (σ1). Увеличивающийся угол подъёма кривой, подобный представленному в левой части кривой В, наблюдается очень редко. График зависимости значения σc от значения σ1 называется функцией сыпучести (функцией текучести).

Числовая характеристика сыпучести. Функция сыпучести может быть использована для описания характеристики порошка с точки зрения коэффициента сыпучести (коэффициента текучести) (ffc), определяемого следующей формулой:

(1)

где ffc – коэффициент сыпучести (коэффициент текучести);
σ1 – напряжение консолидации;
σc – прочность на сжатие.

Рисунок 2. Насыпная плотность (ρb) и прочность на сжатие (σc) в зависимости от напряжения консолидации (σ1)

Чем больше значение коэффициента сыпучести ffc, тем порошок более сыпучий. В таблице приведена классификация сыпучести порошков в зависимости от значения коэффициента сыпучести ffc.

Таблица. Классификация порошков по коэффициенту сыпучести ffc
Значение коэффициента сыпучести ffc. | Наименование порошка
--- | ---
ffc < 1 | не сыпучий
1 < ffc < 2 | очень связанный, очень когезивный
2 < ffc < 4 | связанный, когезивный
4 < ffc < 10 | легко сыпучий
10 < ffc | свободно сыпучий

На рисунке 3 показана функция сыпучести А, взятая из диаграммы (σ1, σс) на рис. 2. Кроме того, границы диапазонов приведённой выше классификации, изображены в виде прямых линий, каждая из которых соответствует постоянному значению коэффициента сыпучести (ffc). Данная диаграмма чётко демонстрирует, что коэффициент сыпучести (ffc) конкретного порошка зависит от приложенного напряжения консолидации (σ1).

Рисунок 3. Функция сыпучести и линии постоянного значения коэффициентов сыпучести

Кроме того, функция сыпучести образца может изменяться в зависимости от времени консолидации, например, при том же уровне σ1 более высокие значения σc могут быть получены при более длительном времени консолидации; эта характеристика известна как «эффект консолидации по времени». Возможными механизмами в этом случае могут быть процессы образования твёрдых и жидкостных мостиков, кристаллизация твёрдых тел, вязкоупругая или вязкопластическая деформация или протекание химических реакций в местах контакта частиц.

Предел сыпучести (текучести) и круг напряжений Мора. Если предположить, что силой тяжести и эффектами трения стенки можно пренебречь, тогда испытание на одноосное сжатие можно представить так, как показано на диаграмме (σ, τ) рис. 4, где σ – нормальное напряжение, а τ – напряжение сдвига. На такой диаграмме все пары значений (σ, τ) образуют окружность, представляющую уровни напряжения в порошке; это называется «кругом напряжений Мора». Центр круга Мора расположен на оси «сигма» (σ), как правило, это ось абсцисс. Две точки пересечения с осью «сигма» называют малым и большим главными напряжениями. На рис. 4 представлены круги напряжений Мора, отображающие соответствующие результаты испытания на одноосное сжатие и возможные пределы сыпучести образца. Вместе с тем, следует учитывать, что реальное значение предела сыпучести не может быть определено только с помощью испытания на одноосное сжатие.

Круг напряжений Мора A на диаграмме рис. 4 описывает напряжения в образце порошка при консолидации. Поскольку никакое напряжение сдвига на этом, 1-ом этапе испытания на одноосное сжатие, не приложено, то (σ1) соответствует нормальному напряжению или вертикальному напряжению (σv), а (σ2) соответствует горизонтальному напряжению (σh).

Рисунок 4. Измерение прочности на сжатие и соответствующая диаграмма (σ, τ)

На 2-ом этапе испытания на одноосное сжатие (рис. 1), образец нагружают увеличивающимся вертикальным напряжением после того, как он был освобождён от напряжения консолидации и полый цилиндр был удалён. По мере увеличения вертикальной нагрузки, напряжённые состояния при различных уровнях нагрузки представляются кругами напряжений с увеличивающимся диаметром (круги напряжений B1, B2, B3 на диаграмме рис 4). Наименьшее основное напряжение, то есть горизонтальное напряжение, равно нулю для всех кругов напряжений, так как боковая поверхность образца не закрыта и не нагружена.

Круг напряжений Мора B3 представляет собой напряжения в образце порошка при разрушении образца. Поскольку нагрузка, соответствующая этому кругу напряжений Мора, вызывает зарождающуюся сыпучесть (начало стекания) образца, круг напряжений Мора B3 должен пройти по касательной к линии предела сыпучести, показанной на диаграмме (σ, τ) рис. 4.

Если во время 2-го этапа испытания на одноосное сжатие (рис. 1), т.е. измерения прочности на сжатие, в дополнение к вертикальному напряжению (σv) приложить к образцу ещё и постоянное горизонтальное напряжение (σh > 0), то аналогичным образом можно найти круги напряжений, соответствующие разрушению образца и проходящие по касательной относительно линии предела сыпучести, например, круг напряжений C на диаграмме рис. 4. Таким образом, предел сыпучести на диаграмме – это линия, соприкасающаяся со всеми кругами напряжений, указывающая на разрушение образца порошка.

###### Измерение с использованием сдвиговых ячеек

Подготовка к испытанию. Испытуемый образец для измерения параметров сыпучести с использованием сдвиговых ячеек, должен быть репрезентативным для исследуемого порошка с точки зрения его гранулометрического состава, влажности, температуре и другим свойствам, которые могут оказать влияние на характеристики сыпучести. Испытуемый образец загружают в сдвиговую ячейку используемого прибора. Для достижения однородного и репрезентативного слоя порошка заполнение ячейки следует проводить равномерно небольшими горизонтальными слоями с помощью ложки или шпателя, не прикладывая усилия к поверхности материала, до тех пор, когда ячейка не окажется слегка переполненной. После этого излишки порошка соскребают лезвием, чтобы уровень порошка в ячейке сровнялся с верхней частью сдвиговой ячейки. Заполненную образцом ячейку накрывают крышкой. Последний этап может отличаться в зависимости от типа используемого прибора, поэтому, для получения однородного и репрезентативного слоя порошка, этот этап должен быть выполнен в соответствии с инструкциями производителя прибора.

Принцип измерения. Как правило, в ходе испытаний на сдвиг измеряют предел сыпучести слоя консолидированного порошка. Измеряемый предел сыпучести так же называют кривой сыпучести, параметры которой в определенной степени зависят от используемого оборудования и условий испытания. Обычно кривую сыпучести измеряют сразу после консолидации слоя порошка. Однако если кривую сыпучести измеряют спустя некоторое время после консолидации, то эту характеристику называют «кривой сыпучести во времени».

При проведении испытания на сдвиг, принцип которого приведён на рис. 5, к образцу порошка, помещённому в сдвиговую ячейку, прикладывается вертикально нормальное напряжение (σ). После этого вызывается деформация образца за счёт смещения крышки сдвиговой ячейки в горизонтальном направлении относительно её дна с постоянной скоростью (V). Из-за трения между частицами порошка в плоскости сдвига, возникает горизонтальное напряжение сдвига (τ). Крышка сдвиговой ячейки может смещаться в вертикальном направлении, чтобы приспособиться к изменениям насыпной плотности образца при деформации образца.

При измерении с помощью сдвиговых ячеек какой-либо точки на кривой сыпучести, также как при испытании на одноосное сжатие, необходимы два этапа: сначала образец порошка консолидируют в рамках «предварительного» этапа, а затем, на этапе «сдвига» или «сдвига до разрушения», измеряют точку на кривой сыпучести.

Рисунок 5. Принцип возникновения деформации при сдвиге в ячейке.

Предварительный этап. На предварительном этапе образец порошка вертикально загружается при определённом нормальном напряжении (σ = σpre), а затем подвергается сдвигу. Предварительный этап прекращается при достижении постоянной сыпучести, которая характеризуется постоянным значением напряжения сдвига (τpre).

Рисунок 6. График зависимости напряжения сдвига от времени (слева) и соответствующая кривая сыпучести (справа)

Пара значений нормального напряжения и напряжения сдвига при достижении постоянного напряжения сдвига (σpre, τpre) отображена на диаграмме нормального напряжения ‒ напряжения сдвига (диаграмма (σ, τ), рис. 6, справа). Точка (σpre, τpre) называется точкой предварительного сдвига.

Этап сдвига до разрушения. После консолидации порошка на предварительном этапе, напряжение сдвига (τ) снижается до нуля из-за изменения движения крышки относительно дна сдвиговой ячейки.

На следующем этапе процедуры испытания, так называемом «этапе сдвига или сдвига до разрушения», нормальное напряжение, действующее на образец, снижается до значения (σsh), которое меньше нормального напряжения, поддерживаемого на предварительном этапе (σpre).

Если при нормальном напряжении (σsh <σpre ) консолидированный образец сдвигается, то он начнёт сыпаться при достижении достаточно большого значения напряжения сдвига (τsh). В этот момент частицы начинают двигаться относительно друг друга, порошок начнет расширяться, т.е. будет уменьшаться его насыпная плотность и сопротивление сдвигу, следовательно напряжение сдвига уменьшится. Максимальное напряжение сдвига (τsh) характеризует начало возникновения сыпучести порошка. Соответствующая пара значений (σsh, τsh) является точкой на кривой сыпучести на диаграмме (σ, τ) (рис. 6, справа). Такая точка называется точкой сдвига или точкой начала стекания.

Чтобы измерить процесс развития кривой сыпучести, необходимо выполнить несколько описанных выше испытаний, в которых образцы сначала должны быть консолидированы под действием одинакового нормального напряжения (σpre, предварительный этап). Затем образцы подвергают сдвигу до разрушения при различных значениях нормального напряжения (σsh <σpre.). Кривая сыпучести следует за кривой, построенной через все измеренные точки сдвига (рис. 6, справа). Как правило, необходимо измерить не менее трёх точек сдвига.

При использовании таких сдвиговых ячеек, как в приборе Дженике, необходимо подготавливать новый образец для каждой точки сдвига, обозначенный на рис. 6, как «следующее испытание». Вместе с тем, с помощью ячеек кольцевого сдвига, как в приборе Шульца, кривую сыпучести полностью можно измерить, используя один образец.

###### Анализ данных

Параметры, которые описывают характеристики сыпучести порошка, могут быть определены по кривой сыпучести, как показано на рис. 7.

Напряжение консолидации (σ1) равно малому главному основному напряжению круга напряжений Мора, которое соприкасается с кривой сыпучести и пересекается в точке установившейся постоянной равномерной сыпучести порошка (σpre, τpre). Этот круг напряжений представляет собой распределение напряжений в образце в конце процедуры консолидации (напряжения при установившейся сыпучести), он соответствует кругу напряжений в конце консолидации в испытании на одноосное сжатие.

Рисунок 7. Кривая сыпучести, круги напряжений Мора и аналогия с испытанием на одноосное сжатие

Предел прочности на сжатие (σc) определяют по кругу напряжений, соприкасающегося с кривой сыпучести и проходящего через начало координат (малое главное напряжение σ2 = 0). Этот круг напряжений представляет собой напряжение, аналогичное тому, которое преобладает на втором этапе испытания на одноосное сжатие.

Эффективная кривая сыпучести ‒ это прямая линия, проходящая через точку начала диаграммы (σ, τ), касательная к наибольшему кругу напряжений Мора, она представлена пунктирной линией на рис. 7. Эта прямая охватывает ось (σ) с эффективным углом внутреннего трения (φe). Поскольку наибольший круг напряжений Мора указывает на установление равномерной сыпучести порошка, угол φe можно рассматривать как меру внутреннего трения при равномерной сыпучести.

Дальнейшие характеристики сыпучести порошка можно определить по кривой сыпучести, как показано на рис. 8.

Рисунок 8. Кривая сыпучести и характерные параметры сыпучести

Во многих случаях, кривая сыпучести является линеаризованной, как и касательной относительно обоих кругов напряжений Мора. Линеаризованная кривая сыпучести характеризуется углом наклона φlin.

Когезия (τc) – это значение напряжения сдвига в месте пересечения кривой сыпучести с осью τ, т.е. при нормальном напряжении (σ = 0). Предел прочности при одноосном растяжении (σt) – это нормальное напряжение на левом конце кривой сыпучести при напряжении сдвига (τ = 0). Поскольку при малых и отрицательных уровнях напряжения проводить измерения сложно, точку когезии можно получить, экстраполируя кривую сыпучести на точку пересечения с осью τ. Из-за выраженной нелинейности кривой сыпучести при низких значениях напряжения, полученное таким образом значение когезии будет менее точным, чем значение прочности на сжатие, поэтому маловероятно, что экстраполяцией можно определить предел прочности на растяжение.

Если измерения нескольких кривых сыпучести проводят при разных значениях напряжений, то есть при разных значениях нормальных напряжений на предварительном этапе (σpre), то каждая кривая сыпучести будет представлять собой другое состояние консолидации порошка и другую насыпную плотность. Такие характеристики сыпучести порошка как: прочность на сжатие, эффективный угол внутреннего трения или угол наклона линеаризованной кривой сыпучести, можно определять, как функции напряжения консолидации, такие как на графиках рис. 2, где насыпная плотность и прочность на сжатие построены в зависимости от напряжения консолидации.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.1.0012 Плотность твёрдых веществ

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья содержит общие положения и распространяется на методы определения плотности твёрдых веществ.

Плотность твёрдых тел соответствует их средней массе в единице объёма и обычно выражается в граммах на сантиметр кубический (г/см3), при том, что международной единицей является килограмм на метр кубический (1 г/см3 = 1000 кг/м3).

В отличие от газов и жидкостей (ОФС «Плотность»), плотность твёрдого вещества также зависит от его структуры и поэтому меняется в зависимости от структуры кристалла и степени кристалличности. Если твёрдое вещество является аморфным, его плотность может зависеть от способа получения, обработки и хранения. Поэтому, в отличие от жидкостей, плотности двух химически эквивалентных твёрдых веществ могут быть различными, и это отличие отражает соответствующие различия в строении твёрдых веществ. Плотность частицы – важная характеристика фармацевтических порошков.

Плотность твёрдой частицы может иметь различные значения в зависимости от метода, используемого для измерения её объёма.

Следует различать три вида плотности твёрдых тел:

- истинная плотность, которая используется только для твёрдой фракции материала; истинную плотность также называют кристаллической;

- плотность частиц, которая также включает объём пор внутри твёрдых частиц;

- насыпную плотность, которая включает объёмы пустот между частицами, образованные в слое порошка.

###### Истинная плотность

Истинная плотность – это средняя масса единицы объёма вещества, за исключением всех пустот, которые не являются неотъемлемой характеристикой кристаллической решетки вещества. Это внутреннее свойство определённой кристаллической структуры вещества и поэтому ее величина не должна зависеть от способа определения. Истинную плотность определяют расчётным путём.

Значение истинной плотности получают, используя данные кристаллографии (объём и состав элементарной ячейки кристаллической решетки), либо с помощью рентгеноструктурного анализа монокристалла, либо путём изучения тонкой кристаллической структуры на основе данных дифракции рентгеновских лучей на порошке (ОФС «Рентгеновская порошковая дифрактометрия»).

###### Плотность частиц

Плотность частиц учитывает как истинную плотность, так и пористость вещества (закрытые и/или экспериментально недоступные открытые поры). Таким образом, плотность частиц зависит от величины установленного объёма, который, в свою очередь, зависит от метода измерения. Плотность частиц вещества может быть установлена одним из двух следующих методов.

Газовая пикнометрическая плотность (ОФС «Определение газовой пикнометрической плотности порошкообразного вещества») определяется путём измерения объёма, занимаемого известной массой порошкообразного вещества, который эквивалентен объёму газа, вытесненного веществом, определяемому с помощью газового пикнометра. Объём вещества, установленный таким способом, включает объём, занимаемый открытыми порами, однако он не включает объём закрытых недоступных для газа пор.

Благодаря высокому коэффициенту диффузии гелия, который является наиболее предпочтительным для этого определения газом, большинство открытых пор доступны газу. Поэтому газовая пикнометрическая плотность тонкоизмельчённого порошка не сильно отличается от значения истинной плотности. Следовательно, пикнометрическая плотность является лучшей оценкой истинной плотности аморфного или частично кристаллического образца и поэтому широко применяется для определения плотности фармацевтических порошков.

Плотность, установленная при помощи ртутного порозиметра (ОФС «Определение размера пор методом ртутной порозиметрии»), также называется гранулярной плотностью. Определяемый этим методом объём включает объём, занимаемый закрытыми порами или порами, недоступными для ртути, однако определяемый объём включает объём открытых пор только определенного размера, которые меньше некоторого предельного размера.

Значение этой предельной величины пор зависит от давления, под которым подаётся ртуть во время измерения, например, при обычных условиях измерения ртуть не проникает в мельчайшие поры, доступные для гелия. Для одного образца могут быть получены различные значения гранулярной плотности для каждого используемого интрузионного давления, которые будут соответствовать различным значениям предельных величин пор при этих давлениях.

###### Насыпная плотность и плотность после уплотнения.

Насыпная плотность порошка учитывает вклад свободного объёма между частицами порошка. Поэтому насыпная плотность зависит как от плотности частиц порошка, так и от их пространственного расположения в слое порошка.

Надлежащей воспроизводимости результатов измерения насыпной плотности сложно достичь, так как самые незначительные нарушения в слое могут приводить к получению нового результата. Таким образом, обязательно следует вместе со значением насыпной плотности указать, каким образом она была определена.

Насыпная плотность и плотность после уплотнения определяются в соответствии с ОФС «Насыпная плотность и плотность после уплотнения».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.1.0013 Смачиваемость пористых твёрдых веществ

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на методы определения смачиваемости пористых твёрдых веществ, например, порошков или гранул, жидкостями.

###### Область применения

Методы оценки смачиваемости пористых твёрдых веществ применяют при фармацевтической разработке для исследования следующих параметров:

- постоянство образцов твёрдых веществ от серии к серии по показателю «Смачиваемость»;

- влияние вязкости жидкости на смачиваемость;

- влияние поверхностного натяжения жидкости на смачиваемость;

- изменение свойств поверхности испытуемых образцов.

###### Термины и определения

Смачивание представляет собой поверхностное явление, заключающееся во взаимодействии жидкости с поверхностью твёрдого вещества или другой жидкости.

Степень смачивания или смачиваемость – это мера взаимодействия поверхности твёрдого вещества с другими фазами, для настоящей общей фармакопейной статьи – с жидкостями. Смачиваемость твёрдых веществ определяют, как правило, путём прямого или непрямого измерения угла смачивания.

Угол смачивания или краевой угол смачивания (Ѳ) между жидкостью и твёрдым веществом представляет собой угол, образующийся после помещения капли жидкости на твёрдую поверхность (рис. 1).

Рисунок 1. Угол смачивания «неподвижной капли», наблюдаемый на непористой поверхности

У несмачиваемых твёрдых веществ угол смачивания составляет 90° и более, у смачиваемых – менее 90°.

Если жидкостью является вода, то твёрдые вещества, смачиваемые водой называют гидрофильными, не смачиваемые водой – гидрофобными.

Для проведения испытания используют: метод лежачей (неподвижной) капли или метод Вашбурна.

###### Метод 1. Лежачей (неподвижной) капли

Метод основан на непосредственном измерении угла смачивания «неподвижной капли» на диске уплотнённого порошка. Метод может быть использован для прямой характеристики смачиваемости покрытых и спрессованных лекарственных форм, таких как таблетки, или для динамического измерения угла смачивания пор системы твёрдое вещество/жидкость при уменьшении угла смачивания (рис. 2). При нескольких измерениях угла смачивания, как функции времени, можно установить скорость растекания, сопровождаемого проникновением капель жидкости в твёрдое вещество с незначительным количеством пор.

Рисунок 2. Определение «неподвижной капли» с визуальным изучением капли

При достижении равновесных условий угол смачивания лежачей (неподвижной) капли (θ) зависит от трёх взаимодействующих поверхностей натяжения. Его определяют, используя уравнение Юнга (рис. 2, первая часть).

(1)

где YS − поверхностное натяжение твёрдого вещества на границе с воздухом;
YSL − межфазное натяжение (взаимодействие) твёрдого вещества с жидкостью;
YL − поверхностное натяжение жидкости на границе с воздухом.

Методика

Чтобы сделать поверхность твёрдого вещества в виде порошка более ровной, порошки уплотняют в виде диска. Каплю жидкости определённого объёма помещают на полученный диск (рис. 2) и проводят непосредственное измерение угла смачивания при помощи подходящего прибора для изменения углов (гониометра) с окуляром транспортира, или путём геометрического построения на фотомикрографе. Возможно применение других физических и математических методик оценки результатов. Объём капли может оказывать влияние на результат. Для каждого образца проводят по шесть определений и рассчитывают среднее значение.

###### Метод 2. Вашбурна

Угол смачивания в данном методе измеряют непрямым способом, позволяющим определить угол смачивания пористого твёрдого вещества жидкостью в диапазоне от 0° до 90°. Метод основан на капиллярном эффекте пор порошка. Эффект (увеличение массы) регистрируют с помощью специальных электронных весов, начинающих работу в момент соприкосновения жидкости с поверхностью испытуемого твёрдого вещества – нерастворимого или плохо растворимого порошка. Измерение очень мало или совсем не влияет на состояние образца.

Этим методом можно определить только кажущиеся значения угла смачивания, определение истинного значения не представляется возможным. Вместе с тем, краевой угол смачивания представляет собой функциональное свойство, от которого существенно зависят результаты испытания. Результатом испытания является перечень, представляющий собой порядок ранжирования смачиваемости различных веществ или составов, характеризующихся кажущимся углом смачивания.

Принцип метода. Если поры твёрдого вещества находятся в контакте с жидкостью таким образом, что твёрдое вещество не погружается в жидкость, а просто касается поверхности жидкости, то будет происходить проникновение жидкости в поры твёрдого вещества вследствие капиллярного эффекта, который описывается следующими уравнениями:

(2)

где m − масса жидкости, поглощенной твёрдым веществом;
t − время, в течение которого контактировали твёрдое вещество и жидкость;
A − константа, зависящая от свойств жидкости и испытуемого твёрдого вещества, рассчитанная с использованием следующего уравнения:

(3)

где η − вязкость жидкости;
ρ − плотность жидкости;
γ − поверхностное натяжение жидкости
θ − угол смачивания между твёрдым веществом и жидкостью;
c − константа материала, зависящая от структуры пор твёрдого вещества.

Из уравнений 1 и 2 выводится уравнение (4):

(4)

При определении методом Вашбурна используют жидкость с известным значением плотности (ρ), вязкости (η) и поверхностного натяжения (γ). В этих условиях масса жидкости, проникающая в поры твёрдого вещества, рассматривается как функция времени (таким образом, скорость капиллярного проникновения является экспериментальной величиной); два оставшихся неизвестных рассчитывают по уравнению (4): угол смачивания (θ) жидкости с твёрдым веществом и константа твёрдого материала (с).

Константу материала (с) для пористого твёрдого вещества определяют по следующему уравнению, считая поры цилиндрическими:

(5)

где r − средний радиус капилляров внутри пор твёрдого вещества;
N − количество капилляров на единицу объёма.

Если определение методом Вашбурна выполняют с жидкостью, угол смачивания которой на твёрдом материале считается равным 0° (соs 0° = 1), то константа твёрдого материала (с) остается единственной неизвестной величиной в уравнении (4), которую можно затем определить.

Для определения константы твёрдых материалов в качестве жидкости выбирают н-гептан, так как он имеет низкое поверхностное натяжение 20,14 мН·м–1 при температуре 25 оС. Также допустимо использовать н-гексан с поверхностным натяжением 18,43 мН·м–1 при температуре 25 °С, но он более летуч. Если исследуемые твёрдые материалы быстро растворяются в этих жидкостях, то вместо них может быть использован гексаметилдисилоксан с поверхностным натяжением 15,9 мН·м–1 при температуре 25 оС.

Для каждого образца проводят по шесть определений и рассчитывают среднее значение.

Если для твёрдого вещества определена его константа (с), то это вещество может быть использовано при определении его смачиваемости другой жидкостью. Константу материала определяют по методу Вашбурна с использованием н-гептана совместно с отношением капиллярного проникновения , полученного при испытании с жидкостью, используемой для определения. Это позволяет рассчитать угол смачивания.

Если ряд жидкостей (по крайней мере, две жидкости в дополнение к жидкостям, используемым при определении константы материала) исследуют для данного твёрдого вещества, то полученное значение угла смачивания может быть использовано для расчёта поверхностной энергии пористого твёрдого вещества.

На рис. 3 приведена схема прибора определения смачиваемости по методу Вашбурна. Главным механизмом являются электронные весы с подходящим процессором, обеспечивающим соответствующее разрешение при измерениях сил и при приближении жидкости к образцу.

Прибор для измерения угла смачивания по методу Вашбурна: А – электронные весы; Б – компьютер; В – держатель образца твёрдого вещества; Г – фильтр; Д – жидкость погружения; Е – подъёмное устройство.

В табл. 1 приведены параметры электронных весов (А) (рис. 3), которые обычно считаются пригодными.

Таблица 1. Технические параметры электронных весов
| Подъем | Измеряемая масса
--- | --- | ---
Интервал | ˃110 мм | 0–210 г
Разрешение (дискретность) | 0,1 мкм | 10 мкг
Скорость | 0,099–500 мм/мин |

Держатель образца твёрдого вещества (В) (рис. 3) может представлять собой маленький стеклянный цилиндр с фильтром из пористого стекла на одном конце.

Держатели порошкообразного вещества (рис. 4) могут быть также сделаны из алюминия, при этом они менее хрупкие, чем стеклянные, и имеют маленькие отверстия на дне, что облегчает очистку по сравнению с фильтром из пористого стекла. Крышка для ячейки оснащена двумя винтовыми нарезками. Одна соединена с камерой для образца, другая позволяет направлять поршень на поверхность образца и уплотнять его. Прибор аналогичен автоматическому тензиометру, за исключением держателя образца.

Методика

Заполнение держателя образца. Помещают диск фильтровальной бумаги на дно алюминиевого или стеклянного держателя образца. Это предотвращает просыпание порошка через дно ячейки. Если нет в наличии бумажного фильтра, то допускается использование другого материала, который легко смачивается испытуемой жидкостью. Рекомендуется использовать фильтр «черная лента», имеющий высокую пористость и минимальное сопротивление потоку.

Помещают известное количество порошка в ячейку. Постоянство константы материала и угла смачивания зависят от возможности взвешивать одинаковое количество порошка для каждого исследования, и уплотнять порошок каждый раз одинаковым способом (т.е. постукивание/уплотнение порошка).

Пример держателя образца с поршнем для уплотнения порошка: А – фиксатор; Б – крышка; В – нарезка, Г – поршень; Д – капиллярные отверстия; Е – капиллярные отверстия.

Для большинства порошков подходящее для испытания количество составляет несколько грамм, обычно заполняют 2/3 ёмкости держателя. Помещают второй кусочек фильтровальной бумаги сверху порошка в ячейке. Это не позволяет порошку забивать отверстия поршня в процессе уплотнения и/или в ходе определения.

Постукивание/уплотнение порошка. Слой массы порошка является очень рыхлым и чувствительным к малейшему воздействию, что может легко изменить пористость и постоянство константы (с). Поэтому предпочтительно оценивать уплотнённый порошок, что обеспечивает более воспроизводимые результаты. Вначале необходимо оценивать подходящее количество постукиваний: обычно достаточно 50–100 постукиваний. При использовании алюминиевого держателя образца его монтируют в цилиндр штампованного волюметра, который может работать с установленным количеством постукиваний.

Если уплотнение порошка постукиванием непригодно, то порошок уплотняют путём завинчивания поршня в алюминиевый держатель образца при указанном давлении. Еще одним способом уплотнения является центрифугирование в указанных условиях. Где применимо, уплотнённый диск испытуемого порошка может быть также установлен на электронных весах. В этом случае держатель образца не требуется.

После присоединения весов держатель образца фиксируют на пористом твёрдом веществе надлежащим образом над поверхностью жидкости, используя подъёмное устройство.

Жидкость перемещается до тех пор, пока не достигнет дна пористого образца. Затем регистрируют данные зависимости массы от времени для жидкости, проникающей в твёрдое вещество. Данные могут быть представлены в графическом или табличном виде. Прибор может выполнять все испытания автоматически.

Критические параметры. Должны быть учтены следующие моменты.

Для исследуемого твёрдого вещества, включая порошки:

- пробоподготовка*;

- содержание воды в образце;

- кристалличность или свойство твёрдого вещества (полиморфные формы, тип сольватации);

- однородность любого испытуемого смешанного порошка;

- размер частиц; перед испытанием иногда рекомендуется просеять образец (например, используя сито диаметром 250 мкм);

- должны быть определены оптимальные параметры уплотнения различных порошкообразных образцов;

- состояние уплотнения различных образцов порошка должно быть однородным;

- держатель образца должен быть тщательно очищен;

- однородность результатов может быть улучшена с помощью держателя образца из алюминия.

Для жидкости для погружения должны быть указаны технические характеристики.

* Пробоподготовка может существенно повлиять на результат, так как свойства образца могут быть значительно изменены. Уплотнение порошка в виде диска может уменьшить энергию свободной поверхности при изменении кристаллического состояния порошка (например, метастабильные формы) или может увеличить поверхностную свободную энергию путём создания кристаллических дефектов (недостаток метода лежачей капли, когда тестируются уплотнённые порошковые диски).

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.1.0014 Истираемость гранул

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения показателя истираемость гранул, при определённых условиях, т.е. повреждения гранул под воздействием механического удара или истирания в процессе обработки (встряхивание, вибрация и т.д.).

Истираемость определяют как уменьшение массы гранул или образование их фрагментов и выражают потерей в массе, вычисленной в процентах от исходной массы испытуемых гранул.

###### Область применения

Испытания применяют при фармацевтической разработке лекарственных средств, при контроле качества гранул, в рамках технологического процесса производств.

Допускается использование других приборов при условии соответствующей валидации методик.

###### Метод 1

Оборудование. Прибор 1 (для создания псевдоожиженного слоя). Состоит из стеклянного цилиндра (А) (рис. 1) с конусовидной нижней частью. Цилиндр снабжён решётчатой крышкой (Б), изготовленной из сетки с размером отверстий 500 мкм, или любым другим подходящим ситом. Конусовидный конец прикреплён к U-образной стеклянной трубке (В), которая может отсоединяться от цилиндра для удаления гранул. U-образная трубка прикреплена к Т-образному элементу (Г). Т-образный элемент при помощи силиконовых трубок одним концом соединён с манометром, регулирующим поток сжатого воздуха, а другим ‒ с измерителем скорости потока (Д) в диапазоне от 0,1 до 1,0 м3·ч-1.

Рисунок 1. Устройство и размеры составных частей прибора 1 для определения истираемости гранул: А – стеклянный цилиндр; Б – решётчатая крышка; В – стеклянная трубка; Г – Т-образный элемент; Д – измеритель скорости потока.

Методика. Мелкие частицы удаляют путём просеивания через сито, имеющее размер отверстий 710 мкм или любое другое подходящее сито. Около 8 г (m1) гранул помещают в стеклянный цилиндр (А). Закрывают прибор решетчатой крышкой (Б). Устанавливают скорость потока сжатого воздуха на уровне 0,45 м3·ч–1. Через 15 мин удаляют гранулы из прибора путём отсоединения U-образной трубки. Просеивают, используя сито с размером отверстий 710 мкм, или то же сито, которое использовали в начале испытания, и снова взвешивают гранулы (m2). Проводят не менее 3 определений и рассчитывают среднее значение. После каждого определения рекомендуется опрыскивать внутреннюю поверхность прибора антистатическим реагентом для снятия электростатического электричества.

Примечания

1. Сжатый воздух должен выдерживать испытание на содержание примеси воды (не более 0,0067 %) в соответствии с ОФС «Вода в газах медицинских», метод 2.

2. Образец высушивают в сушильном шкафу при температуре 105º С или другими методами в соответствии с ОФС «Потеря в массе при высушивании».

###### Метод 2

Оборудование. Прибор 2 (Вибрационный прибор). Состоит из стеклянного сосуда, содержащего испытуемые гранулы, которые подвергают горизонтальным вибрациям при помощи вибрационного прибора (рис. 2). Частота и продолжительность движений могут быть различными. Частоту движений регулируют при помощи шкалы, значения которой установлены в пределах от 0 до 400 вибраций/мин. Продолжительность движений устанавливают в диапазоне от 0 до 9999 с.

Рисунок 2. Прибор 2 (Вибрационный прибор) для определения истираемости гранул: А – стеклянный сосуд; Б – время; В – частота.

Стеклянный сосуд (рис. 3) представляет собой ёмкость с завинчивающейся крышкой, вместимостью 105 мл, внутренним диаметром 49 мм и высотой 85 мм.

Рисунок 3. Стеклянный сосуд

Методика. Мелкие частицы удаляют путём просеивания через сито, имеющее размер отверстий 355 мкм или любое другое подходящее сито. Около 10 г (m1) гранул взвешивают в стеклянном сосуде. Устанавливают сосуд в прибор. Встряхивают при наибольшей или наименьшей частоте, например, 140 вибраций/мин в течение 2 мин. Просеивают, используя сито с размером отверстий 355 мкм, или то же сито, которое использовали в начале испытания, и снова взвешивают гранулы (m2). Проводят не менее 3 определений и рассчитывают среднее значение.

Примечание – Образец высушивают в сушильном шкафу при температуре 105 °С или другими методами в соответствии с ОФС «Потеря в массе при высушивании».

###### Обработка результатов

Истираемость гранул F (%) вычисляют по формуле:

где T1 – потеря в массе при высушивании перед испытанием, среднее значение двух определений, %;
T2 – потеря в массе при высушивании после испытания, среднее значение двух определений, %;
m1 – масса гранул перед испытанием, г;
m2 – масса гранул после испытания, г.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.1.0015 Истираемость таблеток

Взамен ОФС.1.4.2.0004.15

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения показателя истираемости таблеток при определённых условиях, т.е. повреждении таблеток под воздействием механического удара или истирания в процессе обработки (встряхивание, вибрация и т.д.).

Истираемость выражают потерей в массе, вычисленной в процентах от исходной массы испытуемых таблеток.

Методики испытания, приведённые в данной статье, применимы для большинства таблеток без оболочек, полученных методом прессования.

###### Область применения

Испытания применяют при фармацевтической разработке лекарственных средств, при контроле качества таблеток, в рамках технологического процесса производства.

###### Метод 1

Оборудование. Прибор 1 (рис. 1). Используют барабан с внутренним диаметром 287±4 мм и глубиной 38±2 мм, изготовленный из прозрачного синтетического полимера; внутренние поверхности барабана должны быть отполированы и не должны электризоваться. Одна сторона барабана является съёмной. При каждом обороте барабана таблетки приводятся в движение посредством изогнутой лопасти с внутренним радиусом 80,5±5 мм, расположенной между центром барабана и его наружной стенкой. Барабан крепится к горизонтальной оси устройства, обеспечивающего скорость вращения барабана 25±1 об/мин. Таким образом, при каждом обороте барабана таблетки падают, переворачиваясь или скользя, на стенку барабана или друг на друга.

Рисунок 1. Устройство и размеры составных частей прибора 1 для определения истираемости таблеток. Размеры указаны в мм.

Методика. При массе одной таблетки 0,65 г и менее для испытания берут количество таблеток общей массой около 6,5 г, при массе одной таблетки более 0,65 г для испытания берут 10 таблеток. Перед испытанием таблетки тщательно обеспыливают, взвешивают с точностью 0,001 г и помещают в барабан. После 100 оборотов барабана таблетки извлекают, снова обеспыливают и взвешивают с точностью 0,001 г.

Примечание – Если форма или размер таблеток затрудняют их перемещения внутри барабана, прибор регулируют так, чтобы лежащие рядом таблетки не упирались друг в друга и имели возможность падать свободно. Обычно достаточно установить ось барабана под углом 10° к горизонтальной поверхности.

Интерпретация результатов. Потеря в массе не должна превышать 1 %.

Если после испытания обнаруживают треснутые, расколотые или разбитые таблетки, результат испытания на истираемость признают неудовлетворительным.

Если результаты испытания вызывают сомнение (имеются лишь единичные незначительные трещины или сколы, или потеря в массе незначительно превышает нормированное значение), испытание повторяют ещё дважды. Потеря в массе в каждом из дополнительных испытаний или средняя потеря в массе, вычисленная по результатам трёх испытаний, не должна превышать нормированное значение.

###### Метод 2

Оборудование. Прибор 2 (рис. 2). Состоит из барабана со съёмной крышкой, диаметром около 200 мм и глубиной около 38 мм, изготовленного из прозрачного синтетического полимера; внутренние поверхности барабана должны быть отполированы и не должны электризоваться. По внутреннему периметру стенки барабана расположены 12 лопастей размером 35×35 мм, под углом 20° к касательной барабана, которые при его вращении приводят в движение таблетки. Барабан крепится к горизонтальной оси устройства, обеспечивающего вращение барабана со скоростью 20 об/мин. Прибор должен автоматически выключаться по истечении заданного времени испытания.

Методика. В барабан помещают 10 таблеток, обеспыленных и взвешенных с точностью до 0,001 г, привинчивают крышку и включают устройство на 5 мин, что соответствует 100 оборотам барабана. По истечении установленного времени таблетки извлекают из барабана, обеспыливают и снова взвешивают с точностью до 0,001 г.

Интерпретация результатов. Потеря в массе не должна превышать 3 %.

Если после испытания обнаруживают треснутые, расколотые или разбитые таблетки, результат испытания на истираемость признают неудовлетворительным.

Если результаты испытания вызывают сомнение (имеются лишь единичные незначительные трещины или сколы, или потеря в массе незначительно превышает нормированное значение), испытание повторяют ещё дважды. Потеря в массе в каждом из дополнительных испытаний или средняя потеря в массе, вычисленная по результатам трёх испытаний, не должна превышать нормированное значение.

Рисунок 2. Устройство и размеры составных частей прибора 2 для определения истираемости таблеток: а – барабан, б – лопасть. Размеры указаны в мм

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.1.0016 Наблюдаемая скорость растворения

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения показателя наблюдаемая скорость растворения твёрдых веществ, в том числе действующих веществ, как в форме фармацевтических субстанций, так и в лекарственных формах, представляющих собой порошки или гранулы.

###### Область применения

Данные о наблюдаемой скорости растворения используют при описании свойств действующих и вспомогательных веществ; эти данные могут быть применены, например, при фармацевтической разработке лекарственных препаратов с целью прогнозирования и выявления потенциальных проблем с биодоступностью действующих веществ, для которых известны данные об их наблюдаемой скорости растворения.

###### Оборудование

Для проведения испытания используют прибор с проточной ячейкой, (рис. 1). Все части прибора, которые могут контактировать с образцом или средой растворения, должны быть химически инертными и не должны адсорбировать, реагировать или влиять каким-либо другим способом на испытуемый образец. Во время работы прибора не должно быть никаких заметных движений, колебаний, вибраций, перемещений, происходящих от частей прибора, или влияния окружающей среды, кроме тех, которые создаются непосредственно проточной системой.

Предпочтительно использовать прибор, позволяющий наблюдать за испытуемым образцом.

Прибор с проточной ячейкой, (рис. 1), состоит из следующих частей:

- резервуар для среды растворения (А);

- насос, который прокачивает среду растворения через проточную ячейку (Б);

- термостатируемая проточная ячейка из прозрачного инертного материала, установленная вертикально с фильтрующей системой, предотвращающей удаление не растворившихся частиц, с водяной баней, поддерживающей выбранную температуру среды растворения при диапазоне 37±0,5 °С (В);

- сосуды-сборники для анализируемых растворов (Г).

Рисунок 1. Прибор с проточной ячейкой: А − резервуар для среды растворения; Б – насос; В – термостатируемая проточная ячейка и система фильтров; Г сосуды-сборники для анализируемых растворов.

Проточная ячейка (рис. 2), состоит из трёх прозрачных частей, вставляемых одна в другую. Нижняя часть, на которую помещают испытуемый образец, поддерживает систему сеток и фильтров. Средняя часть, которую устанавливают на нижнюю, содержит вкладыш, который отсеивает образец во время прохождения среды растворения через ячейку. Этот вкладыш состоит из двух частей: конического сита, которое размещается на образце, и зажима, расположенного на половине расстояния до средней части, для удерживания сита на месте при прохождении среды растворения. Второй фильтрующий элемент (сетка и фильтр) расположен на вершине средней части перед соединением её с верхней частью проточной ячейки, через которую среда растворения вытекает из ячейки.

Рисунок 2. Проточная ячейка: А − нижняя часть; Б – вкладыш; В – сито; Г – зажим; Д – средняя часть; E – верхняя часть. Размеры указаны в миллиметрах.

Среда растворения. Если среда растворения представляет собой буферный раствор, то доводят значение pH до заданного с точностью ±0,05. Перед использованием из среды растворения удаляют растворённые газы для предупреждения образования пузырьков, значительно влияющих на результат испытания.

###### Методика

На дно конической нижней части проточной ячейки помещают шарик диаметром 5±0,5 мм, затем на него помещают стеклянные шарики подходящего размера, предпочтительно диаметром 1±0,1 мм. Сверху на нижнюю часть ячейки помещают сито с отверстиями размером 0,2 мм, подходящий фильтр и второе сито. Среднюю часть проточной ячейки соединяют с нижней частью и взвешивают собранную часть ячейки. Испытуемый образец помещают на фильтрующий элемент и взвешивают его в ячейке.

Сито помещают на испытуемый образец коническим концом вверх, фиксируют зажимом посередине средней части. На среднюю часть помещают сито с размером отверстий 0,2 мм, подходящий фильтр и присоединяют к средней части верхнюю часть проточной ячейки. Нагревают среду растворения до подходящей температуры. При помощи подходящего насоса нагретую среду растворения направляют через дно ячейки с заданной скоростью потока (±5 %) по открытому или закрытому циклу.

###### Отбор проб

Отбор проб для испытания производят из выпускного отверстия проточной ячейки, независимо от использования при испытании открытого или закрытого цикла.

Отобранный образец жидкости немедленно фильтруют через фильтр из инертного материала с подходящим размером пор, который не вызывает значительной адсорбции испытуемого вещества из раствора и не содержит веществ, экстрагируемых средой растворения, влияющих на результаты, получаемые применяемым для определения аналитическим методом. Полученный фильтрат анализируют.

###### Анализ результатов

Для определения наблюдаемой скорости растворения при выпуске серии проводят достаточное количество испытаний.

Результаты испытания выражают как:

- количество растворившегося испытуемого вещества в единицу времени (если растворение линейное);

- время растворения всего количества испытуемого образца и на соответствующих промежуточных стадиях.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.1.0017 Прочность таблеток на раздавливание

Взамен ОФС.1.4.2.0011.15

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения показателя прочности таблеток на раздавливание (устойчивости таблеток к давлению) при определённых условиях путём измерения силы, необходимой для разрушения таблеток.

Определение и нормирование механической прочности таблеток необходимо при фармацевтической разработке лекарственных средств, в условиях промышленного производства (например, процесс покрытия таблеток и фасовка) и для обеспечения потребительских свойств препарата (сохранение целостности таблетки при извлечении из упаковки).

###### Оборудование

Прибор представляет собой два расположенных друг против друга зажима (плунжера, пуансона), один из которых может перемещаться по направлению к другому. Допускается использование прибора, в котором оба зажима могут перемещаться с постоянной скоростью по направлению друг к другу. Сдавливающие поверхности зажимов должны быть гладкими, плоскими, перпендикулярными направлению движения и превосходить по размеру зону контакта с таблеткой. Прибор должен обеспечивать прекращение сдавливания при любом нарушении целостности таблеток.

Прибор калибруют с использованием системы, обеспечивающей точность 1 Н (ньютон).

###### Методика

Таблетку помещают между зажимами ребром по отношению к движущейся части прибора и сжимают до разрушения, если нет других указаний в фармакопейной статье. Измерения проводят для 10 таблеток. Перед каждым измерением тщательно удаляют все фрагменты предыдущей таблетки.

Если на таблетке есть разделительная линия (риска) или надпись, каждая таблетка должна быть ориентирована одинаково по отношению к направлению прилагаемой силы.

Таблетки овальной или продолговатой формы помещают между зажимами длинным ребром перпендикулярно по отношению к сдавливающим поверхностям прибора (вдоль направления прилагаемой нагрузки), если нет других указаний в фармакопейной статье.

###### Интерпретация результатов

Указывают среднее, минимальное и максимальное значения измеренной силы в ньютонах (Н), а также тип использованного прибора и, при необходимости, ориентацию (направление) таблеток в приборе.

Таблетки круглой формы должны иметь прочность не ниже значений, приведенных в табл. 1, если нет других указаний в фармакопейной статье. Данные, приведенные в табл. 1, носят рекомендательный характер.

Таблица 1. Минимально допустимая прочность в зависимости от диаметра таблеток.
Диаметр, мм | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13
Прочность, Н | 30 | 30 | 30 | 30 | 40 | 40 | 50 | 50

Примечание – При использовании полностью автоматизированного оборудования методика неприменима.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.1.0018 АНОМАЛЬНАЯ ТОКСИЧНОСТЬ

Взамен ОФС.1.2.4.0004.15

###### ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Общая фармакопейная статья распространяется на метод определения аномальной токсичности, применяемый при фармацевтической разработке лекарственных средств, а также при оценке пригодности технологического процесса в отношении возможности получения лекарственного средства, выдерживающего испытание на аномальную токсичность.

###### ОСНОВНАЯ МЕТОДИКА ИСПЫТАНИЯ

Испытание проводят на 5 здоровых белых аутбредных мышах массой от 19 г до 21 г (допустимо от 17 г до 24 г), ранее не использованных в испытаниях. Условия содержания и кормления должны обеспечивать нормальную жизнедеятельность животных. Испытуемый образец растворяют или разводят (в случае необходимости) в подходящем растворителе. Тест-доза должна содержаться в объёме 0,5 мл испытуемого раствора или восстановленного испытуемого образца, который вводят в хвостовую вену животного с подходящей скоростью введения. Период наблюдения за животными составляет 48 ч.

Испытуемый образец считают прошедшим испытание, если в течение предусмотренного срока наблюдения не погибнет ни одно из подопытных животных.

В случае гибели одного животного, испытание повторяют. Если при повторном испытании не погибнет ни одна мышь, испытуемый образец считают прошедшим испытание.

Испытуемый образец не выдерживает испытание, если в течение предусмотренного срока наблюдения погибнет более чем одно животное.

###### ИСПЫТАНИЯ ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ

Испытания проводят на животных двух видов, ранее не использованных в экспериментах: на 5 здоровых белых аутбредных мышах любого пола массой от 18 г до 20 г (допустимо от 17 г до 24 г) и(или) на 2 здоровых морских свинках, массой от 250 г до 300 г (допустимо от 250 г до 400 г). Испытуемый образец при необходимости восстанавливают в подходящем растворителе.

ИСПЫТАНИЕ НА БЕЛЫХ МЫШАХ

Испытуемый образец или восстановленный испытуемый образец вводят внутрибрюшинно каждому из 5 животных в одной максимальной разовой дозе, но не более 1,0 мл. Период наблюдения за животными составляет 7 сут.

Испытуемый образец считают выдержавшим испытание, если в течение всего срока наблюдения:

- отсутствует гибель подопытных животных;

- ни у одного из животных не проявились признаки интоксикации;

- отсутствует снижение массы тела животных, по сравнению с исходной.

Если погибает более чем одно животное, испытуемый образец или восстановленный испытуемый образец считают не выдержавшим испытание. Если погибает одно животное, проявились признаки интоксикации или отмечено снижение массы тела, то испытание повторяют на удвоенном количестве животных. Испытуемый образец или восстановленный испытуемый образец считают прошедшим испытание, если ни одно животное из второй группы не погибнет, не проявятся признаки интоксикации и не будет отмечено снижение массы тела за период наблюдения.

ИСПЫТАНИЕ НА МОРСКИХ СВИНКАХ

Испытуемый образец или восстановленный испытуемый образец вводят подкожно двум животным в дозе, равной одной максимальной разовой дозе, но не более 5,0 мл. Период наблюдения за животными составляет 7 сут.

Испытуемый образец считают выдержавшим испытание, если в течение всего срока наблюдения:

- отсутствует гибель подопытных животных;

- ни у одного из животных не проявились признаки интоксикации;

- отсутствует снижение массы тела каждого животного в день окончания наблюдения по сравнению с исходной;

- ни у одного животного не развился некроз или абсцесс в месте введения испытуемого образца или восстановленного испытуемого образца (развитие других проявлений реакции в месте введения испытуемого образца или восстановленного испытуемого образца допустимо).

Если оба животных погибают, испытуемый образец или восстановленный испытуемый образец считают не выдержавшим испытание.

Если в течение периода наблюдения регистрируют гибель одного животного, заболевание, снижение массы тела, развитие некроза или абсцесса в месте введения испытуемого образца или восстановленного испытуемого образца хотя бы у одного животного, испытание повторяют на удвоенном количестве животных.

Испытуемый образец или восстановленный испытуемый образец считают прошедшим испытание, если ни одно животное из второй группы не погибнет или не проявятся признаки интоксикации, не будет отмечено снижение массы тела за период наблюдения и развитие некроза или абсцесса в месте введения испытуемого образца или восстановленного испытуемого образца.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.1.0019 ИСПЫТАНИЕ НА ГИСТАМИН

Взамен ОФС.1.2.4.0007.15

Общая фармакопейная статья распространяется на метод определения содержания гистамина, применяемый при фармацевтической разработке лекарственных средств, а также при оценке пригодности технологического процесса в отношении возможности получения лекарственного средства, выдерживающего испытания на гистамин.

Испытуемый раствор. Испытуемый образец с концентрацией гистамина в пересчёте на гистамина дигидрохлорид в пределах от 1,3 мкг/мл до 2,5 мкг/мл.

Если максимальная концентрация гистамина в пересчёте на гистамина дигидрохлорид в испытуемом образце выше 2,5 мкг/мл, испытуемый образец разводят раствором 9 г/л натрия хлорида до расчётной концентрации гистамина дигидрохлорида 2,5 мкг/мл.

Если значение максимальной концентрации гистамина в пересчёте на гистамина дигидрохлорид в испытуемом образце меньше указанного предела или близко к его нижнему значению, допустимо увеличение объёма вводимого испытуемого образца до 1/20 от объёма ванночки.

При необходимости испытуемый образец растворяют раствором 9 г/л натрия хлорида до расчётной концентрации гистамина 1,3–2,5 мкг/мл.

Растворы сравнения. В качестве растворов сравнения используют растворы гистамина дигидрохлорида (квалификации ч. или ч.д.а):

- раствор сравнения 1 с концентрацией 1,3 мкг/мл;

- раствор сравнения 2 с концентрацией 2,5 мкг/мл;

- раствор сравнения 3 с концентрацией 5,0 мкг/мл, вызывающие 50 %, 75 % и 100 % сокращение кишки соответственно.

В качестве растворителя используют раствор 9 г/л натрия хлорида.

Калия хлорида раствор. 2,00 г калия хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000 мл.

Кальция хлорида раствор. 1,30 г кальция хлорида дигидрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000 мл.

Магния хлорида раствор. 2,10 г магния хлорида гексагидрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000 мл.

Натрия дигидрофосфата раствор. 0,58 г натрия дигидрофосфата моногидрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000 мл.

Гипокальциевый раствор Тироде. 80,0 г натрия хлорида, 10,0 г натрия гидрокарбоната и 11,0 г глюкозы в любой последовательности, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000 мл. Полученный раствор переносят в стеклянную ёмкость с притёртой пробкой вместимостью 10 000 мл или полиэтиленовый сосуд с завинчивающейся крышкой того же объёма, в который последовательно переносят калия хлорида раствор, кальция хлорида раствор, магния хлорида раствор, натрия дигидрофосфата раствор, доводят объём водой до 10 000 мл и тщательно перемешивают. Раствор хранят при температуре от 3 °С до 5 °С не более суток. Помутневший раствор не используют.

Раствор А

Натрия хлорид | 160,0 г
Калия хлорид | 4,0 г
Кальция хлорид безводный | 2,0 г
Магния хлорид безводный | 1,0 г
Натрия дигидрофосфат додекагидрат | 0,1 г
Вода | до 1000 мл

Раствор Б

Раствор А | 50,0 мл
Атропина сульфат | 0,5 мг
Натрия гидрокарбонат | 1,0 г
Глюкоза | 0,5 г
Вода | до 1000 мл

Раствор Б используют свежеприготовленным или хранят не более суток.

В качестве дополнительной меры по предупреждению спонтанной активности изолированного органа, в состав гипокальциевого раствора Тироде добавляют атропина сульфат в концентрации 0,5 мг/л или применяют вместо раствора Тироде раствор Б.

###### ПОДГОТОВКА ИЗОЛИРОВАННОГО ОРГАНА

Морскую свинку массой 200–350 г за сутки до испытания лишают пищи. После эвтаназии у свинки извлекают повздошную кишку длиной 2 см. Подготавливают подходящим методом и помещают в чашку Петри с гипокальциевым раствором Тироде, которым тщательно промывают с помощью шприца до полного удаления содержимого.

###### РЕГИСТРИРУЮЩАЯ СИСТЕМА

Для регистрации сокращений изолированного отрезка подвздошной кишки морской свинки в изотонических условиях в ответ на введение растворов сравнения и испытуемого раствора используют регистрирующую систему, состоящую из термостатируемой при температуре от 34 °С до 36 °С ванночки вместимостью от 10 мл до 20 мл с гипокальциевым раствором Тироде, а также электронного датчика (с подходящим регистрирующим устройством) или механического рычага с кимографом. Ванночку аэрируют карбогеном (95 % кислорода и 5 % углекислого газа) или воздухом. Применяют подходящую нагрузку. Натяжение кишечника должно быть около 9,8 мH и должно соответствовать чувствительности органа.

###### МЕТОДИКА

Изолированный отрезок подвздошной кишки помещают в ванночку и прикрепляют к регистрирующей системе с помощью лигатуры по диагонали за противоположные концы: один – к крючку на дне ванночки, а другой – к датчику или рычагу. Прикладывают к отрезку нагрузку и оставляют его в покое на 30 мин. За это время необходимо не менее 3 раз сменить в ванночке гипокальциевый раствор Тироде.

1. АДАПТАЦИЯ ИЗОЛИРОВАННОГО ОТРЕЗКА ПОВЗДОШНОЙ КИШКИ МОРСКОЙ СВИНКИ К СУБМАКСИМАЛЬНОЙ ДОЗЕ ГИСТАМИНА

В термостатируемую ванночку вводят раствор сравнения 3 в объёме, равном 1/100 от её ёмкости. Через 30 с (время экспозиции) ванночку промывают тройным объёмом гипокальциевого раствора Тироде (предпочтительно переливом без опорожнения ванны). После первого отмывания проводят второе таким же объёмом раствора. Не менее чем через 4 мин после первого введения снова повторяют цикл «введение – экспозиция – два отмывания». Эти циклы повторяют до достижения постоянной величины ответа отрезка кишки (не менее двух одинаковых пиков, высоту которых принимают за 100 %). Струю вводимого раствора направляют не прямо на изолированный отрезок кишки, а в сторону стенки ванночки, не меняя её направления. Скорость введения должна быть максимально высокой и постоянной. Регистрацию сокращений проводят непрерывно (скорость ленты 2 мм/мин). При использовании механического рычага и кимографа писчик во время отмывания отводят и прекращают запись. Временные интервалы между введениями испытуемого раствора и между двумя отмываниями должны быть постоянными.

2. ИСПЫТАНИЕ ИСПЫТУЕМОГО ОБРАЗЦА

2.1. Предварительное испытание

Однократно в случайном порядке с интервалом не менее 4 мин вводят раствор сравнения 1, раствор сравнения 3 и испытуемый раствор. Циклы «введение – экспозиция – два отмывания» должны быть аналогичны таковым при проведении адаптации органа к субмаксимальной дозе гистамина.

В случае если пик, полученный в ответ на введение испытуемого раствора, по высоте не меньше, чем пик раствора сравнения 1, проводят количественное определение содержания гистамина в испытуемом образце (см. п. 2.2). Если пик, полученный в ответ на введение испытуемого раствора, меньше пика раствора сравнения 1 или вообще отсутствует, проводят контрольное испытание (см. п. 2.3).

2.2. Количественное испытание испытуемого образца на гистамин

В случайном порядке поочерёдно вводят раствор сравнения 1 и раствор сравнения 3 (1/100 от объёма ванночки), и испытуемый раствор (тот же объём введения, что и при предварительном испытании) до получения не менее четырёх пиков в ответ на введение каждого раствора. Получают среднее значение ответа отрезка кишки на каждый раствор. С помощью регрессионного анализа вычисляют параметры линейной зависимости среднего ответа кишки на введение растворов сравнения от логарифма их концентрации. Вычисляют концентрацию гистамина в том испытуемом растворе, которому соответствует средняя высота его пика, и рассчитывают содержание гистамина в испытуемом образце. Коэффициент пересчёта гистамина дигидрохлорида на гистамин-основание равен 0,6038.

2.3. Контрольное испытание

Схема проведения контрольного испытания такая же, как и при количественном определении содержания гистамина в испытуемом образце, только вместо испытуемого раствора используют раствор сравнения 2 (1/100 от объёма ванночки). При соответствии средней высоты пика вводимой концентрации гистамина дигидрохлорида в данном растворе (2,50 мкг/мл), результаты испытания считают достоверными.

Результаты испытания считают недостоверными, если:

1. Средняя высота пика раствора сравнения 2 не соответствует вводимой концентрации гистамина дигидрохлорида в данном растворе (2,50 мкг/мл).

2. При количественном определении содержания гистамина в испытуемом образце отсутствует воспроизводимость ответов отрезка кишки на введение испытуемого образца.

3. При испытании происходит значительное снижение высоты пиков.

В каждом из этих трёх случаев следует провести испытание лекарственных средств на вещества депрессорного действия в соответствии с ОФС «Испытание на депрессорные вещества».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.1.0020 ИСПЫТАНИЕ НА ДЕПРЕССОРНЫЕ ВЕЩЕСТВА

Взамен ОФС.1.2.4.0008.18

Общая фармакопейная статья распространяется на метод определения содержания веществ депрессорного действия, применяемого при фармацевтической разработке лекарственных средств, а также при оценке пригодности технологического процесса в отношении возможности получения лекарственного средства, выдерживающего испытания на депрессорные вещества.

Испытание проводят на здоровых кошках массой не менее 2 кг, анестезированных подходящим средством для наркоза, позволяющего поддерживать стабильный уровень артериального давления. У животного поддерживают температуру тела в физиологических пределах.

В отпрепарированную сонную артерию вставляют канюлю, заполненную подходящим раствором, предупреждающим свёртывание крови, например, 50 ЕД гепарина в 1 мл раствора 9 г/л натрия хлорида. Канюлю присоединяют к системе, обеспечивающей постоянную регистрацию артериального давления. В бедренную вену вставляют вторую канюлю, наполненную выбранным антикоагулянтом, через которую вводят раствор гистамина дигидрохлорида (гистамина раствор в методике 1, раствор сравнения – в методике 2), а затем испытуемый раствор.

###### МЕТОДИКА 1

Испытуемый раствор. Испытуемый образец растворяют или разводят в растворе 9 г/л натрия хлорида или в другом подходящем растворителе до обоснованной концентрации.

Для определения чувствительности кошки к гистамину готовят гистамина раствор. Затем животному через равные промежутки времени вводят гистамина раствор в объёме 1,0 мл и 1,5 мл на кг массы тела.

Введение гистамина раствора в объёме 1,0 мл/кг повторяют не менее трёх раз. Вторую и последующие инъекции проводят не ранее, чем через одну минуту после того, как артериальное давление вернётся к уровню, наблюдавшемуся непосредственно перед предыдущей инъекцией. Животное используют в испытании в случае, если при повторных введениях гистамина раствора в объёме 1,0 мл/кг регистрируют близкие значения снижения артериального давления, а при введении гистамина раствора в объёме 1,5 мл/кг – более выраженную реакцию.

Вводят гистамина раствор в объёме 1,0 мл/кг, затем две последовательные инъекции испытуемого раствора и заканчивают введением гистамина раствора в объёме 1,0 мл/кг. Выполняют два цикла введения испытуемого образца и гистамина раствора в объёме 1,0 мл/кг. Завершают испытание введением гистамина раствора в объёме 1,5 мл/кг.

Результаты испытания признают недостоверными, если реакция артериального давления на введение гистамина раствора в объёме 1,5 мл/кг не превышает реакцию на гистамин в объёме 1,0 мл/кг.

Испытуемый образец не выдерживает испытание, если:

- среднее значение реакции артериального давления на его введение превышает среднее значение реакции на введение гистамина раствора в объёме 1,0 мл/кг;

- любая из инъекций испытуемого образца вызывает более выраженную депрессорную реакцию, чем ответ на гистамина раствор в объёме 1,5 мл/кг.

Животное не следует использовать для испытаний если:

- любая из инъекций испытуемого образца вызывает более выраженную депрессорную реакцию, чем ответ на гистамина раствор в объёме 1,5 мл/кг;

- если ответ на введение гистамина раствора в объёме 1,5 мл/кг, после испытуемого образца меньше, чем средний ответ на инъекции гистамина раствора в объёме 1,0 мл/кг.

###### МЕТОДИКА 2

Раствор сравнения. Для приготовления раствора сравнения используют гистамина дигидрохлорид в пересчёте на гистамин-основание (коэффициент пересчёта гистамина дигидрохлорида на гистамин-основание равен 0,6038) и раствор 9 г/л натрия хлорида для инъекций или воду для инъекций. Концентрация растворов сравнения должна составлять 0,5 мкг/мл (раствор сравнения 1) и 1,0 мкг/мл (раствор сравнения 2).

Введение растворов на протяжении всего испытания проводят со скоростью 0,1 мл/с и интервалом между введениями не менее 5 мин.

В начале опыта проверяют чувствительность животного к гистамину. Для этого в вену последовательно вводят раствор сравнения 1 и раствор сравнения 2 в объёме 0,2 мл/кг. Животных, у которых при введении раствора сравнения 2 величина артериального давления снизится менее чем на 20 мм рт. ст., из опыта исключают. Раствор сравнения 1 вводят дважды, чтобы подтвердить стабильность реакции артериального давления кошки на гистамин.

Далее кошке однократно вводят испытуемый раствор в обоснованных объёме и концентрации.

При анализе на одном животном двух и более испытуемых образцов перед каждой инъекцией, необходимо проверять величину снижения артериального давления на введение раствора сравнения 1. В случае значительного уменьшения реакции артериального давления на введение раствора сравнения 1 по сравнению с величиной артериального давления, полученной после его введения в начале испытания, необходимо вновь проверить чувствительность животного к действию раствора сравнения 2. Если снижение артериального давления составляет не менее 20 мм рт. ст., продолжают проводить испытание в соответствии с указанными выше требованиями.

Испытуемый образец считают выдержавшим испытание, если в течение 60 с после его введения снижение артериального давления не превышает реакцию на введение раствора сравнения 1.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0001 Силиконовые эластомеры для укупорочных средств и трубок

Вводится впервые

Силиконовые эластомеры применяют для изготовления укупорочных средств и трубок.

###### Особенности технологии

Силиконовый эластомер получают поперечным сшиванием линейного полисилоксана, состоящего в основном из диметилсилокси-групп, с небольшим количеством метилвинилсилокси-групп; концы цепи блокированы триметилсилокси- или диметилвинилсилокси-группами.

Общая формула полисилоксана – рис. 1.

Рисунок 1. Общая формула полисилоксана

В качестве катализаторов при производстве силиконовых эластомеров используют пероксиды или платину.

Производство силиконовых укупорочных средств методами экструзии или формования поперечного сшивания материала проводят при нагревании, используя в качестве катализатора 2,4-дихлорбензоилпероксид. Формованные силиконовые эластомеры также могут быть получены с использованием таких пероксидов, как дикумилпероксид или ОО-(1,1-диметилэтил) O-изопропилмонопероксикарбонат или 2,5-бис [(1,1-диметилэтил)диокси]-2,5-диметилгексан. Платину в качестве катализатора применяют при сшивании силиконовых эластомеров из полисилоксана гидросилилированием [SiH]-группами. Во всех случаях производства силиконовых эластомеров в качестве обязательной добавки используют кремния диоксид, иногда небольшие количества кремнийорганических добавок (α,ω-дигидроксиполидиметилсилоксан), а также другие необходимые добавки.

Полимеры для производства укупорочных средств для лекарственных средств представлены различными видами, марками силикона, которые относят к эластомерным материалам, обладающим особым функциональным свойством – упругости или эластичности. Эластомерные материалы легко изменяют форму при сжимании, скручивании, сгибании, а при снятии напряжения моментально возвращаются к своей первоначальной форме.

При применении эластомерных укупорочных средств для парентеральных лекарственных форм, силиконовые эластомеры перед использованием должны подвергаться обработке в соответствии с действующими нормативными требованиями и выдерживать условия обработки (мойки, высушивания), включая стерилизацию в соответствии с ОФС «Стерилизация» и дополнительные требования, указанные в настоящей общей фармакопейной статье.

Прозрачный или полупрозрачный материал.

Общие требования к упаковке лекарственных средств, элементам упаковки, включая укупорочные средства, приведены в ОФС «Упаковка лекарственных средств».

###### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр испытуемого образца силиконового эластомерного материала, регистрируемый с помощью методики многократного отражения для твёрдых веществ, должен соответствовать ИК-спектру стандартного образца силиконового эластомера.

2. Качественная реакция. В первую пробирку помещают 1,0 г силиконового эластомера и нагревают над слабым пламенем до появления белых паров. Во вторую пробирку помещают 1 мл хромотроповой кислоты натриевой соли раствора 0,1 %. Первую пробирку поворачивают ко второй пробирке так, чтобы пары достигли раствора. Затем вторую пробирку встряхивают в течение около 10 с и нагревают на водяной бане в течение 5 мин. Раствор должен окраситься в фиолетовый цвет.

3. Качественная реакция. После сжигания силиконового эластомера 50 мг остатка дают характерную реакцию на силикаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

###### Испытания

Пробоподготовка

Образцы эластомерного материала при необходимости разрезают на кусочки с размером сторон не более 1 см.

Испытуемый раствор. В колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 25 г испытуемого образца, прибавляют 500 мл воды и кипятят с обратным холодильником в течение 5 ч. Полученному извлечению дают остыть до комнатной температуры, затем декантируют.

Растворимость. Силиконовые эластомеры практически нерастворимы в органических растворителях, некоторые из которых, например, циклогексан, гексан и метиленхлорид, вызывают обратимое набухание образца.

Относительная плотность. От 1,05 до 1,25 (ОФС «Определение плотности полимерных материалов»).

При определении относительной плотности силиконовых эластомеров методом жидкостного пикнометра в качестве рабочей (иммерсионной) жидкости используют этанол.

Прозрачность раствора. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Фенилированные соединения

В колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 2,0 г испытуемого образца и прибавляют 100 мл гексана. Кипятят с обратным холодильником в течение 4 ч. Полученному извлечению дают остыть до комнатной температуры, затем быстро фильтруют через стеклянный фильтр ПОР 16 (ОФС «Пористость стеклянных фильтров») в колбу, которую немедленно закрывают притёртой пробкой для предотвращения испарения.

Оптическая плотность фильтрата гексанового извлечения силиконового эластомера в области длин волн от 250 до 340 нм, не должна превышать 0,4 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Вещества, растворимые в гексане

Не более 3 %. В предварительно высушенной при
температуре 100–105° С до постоянной массы и взвешенной стеклянной выпарительной чашке выпаривают на водяной бане 25 мл фильтрата гексанового извлечения силиконового эластомера, полученного в испытании на фенилированные соединения, высушивают в сушильном шкафу при температуре 100–105° С в течение 1 ч и взвешивают. Масса полученного сухого остатка должна быть не более 15 мг.

Кислотность или щёлочность

К 100 мл испытуемого раствора прибавляют 0,15 мл БКФ (BRP) индикатора раствора. Раствор должен окраситься в синий цвет при прибавлении не более 2,5 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида.

К 100 мл испытуемого раствора прибавляют 0,2 мл раствора метилового оранжевого. Окраска раствора должна изменяться от жёлтой к оранжевой при прибавлении не более 1,0 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты.

Восстанавливающие вещества

К 20,0 мл испытуемого раствора прибавляют 1 мл серной кислоты разведённой 9,8 % и 20,0 мл 0,002 М раствора калия перманганата, раствор выдерживают в течение 15 мин. Прибавляют 1 г калия йодида и немедленно титруют 0,01 М раствором натрия тиосульфата до обесцвечивания (индикатор – 0,25 мл 1 % раствора крахмала).

Параллельно проводят контрольный опыт, используя 20,0 мл воды вместо 20,0 мл испытуемого раствора.

Разность между израсходованным объёмом 0,01 М раствора натрия тиосульфата при титровании контрольного и испытуемого растворов не должна превышать 1,0 мл.

Минеральные масла

В коническую колбу вместимостью 100 мл, содержащую 30 мл смеси раствора аммиака и пиридина (5:95, об/об) помещают 2 г испытуемого образца и выдерживают в течение 2 ч при частом встряхивании. Затем образовавшуюся смесь пиридина с извлечением силиконового эластомера декантируют и полученный раствор исследуют в ультрафиолетовом свете при длине волны 365 нм. Интенсивность флуоресценции полученного раствора не должна превышать интенсивность флуоресценции раствора, содержащего 0,0001 % раствор хинина сульфата в 0,005 М растворе серной кислоты, при исследовании в тех же условиях.

Летучие вещества

Не более 0,5 % для силиконовых эластомеров, полученных с использованием пероксидов; не более 2,0 % для силиконовых эластомеров, полученных с использованием платины.

Испытуемый образец помещают в эксикатор и выдерживают над кальция хлоридом безводным в течение 48 ч. Взвешивают 10,0 испытуемого образца, выдержанного в эксикаторе, и нагревают в сушильном шкафу при температуре 200° С в течение 4 ч. Затем охлаждают в эксикаторе до комнатной температуры и снова взвешивают. Рассчитывают количество летучих веществ в силиконовом эластомере в процентах.

Остаточные пероксиды

Не более 0,08 % в пересчёте на 2,4-дихлорбензоилпероксид. Испытание проводят для силиконовых эластомеров, полученных с использованием пероксидов.

В колбу из боросиликатного стекла помещают 5 г испытуемого образца, прибавляют 150 мл метиленхлорида, закрывают колбу и перемешивают механической мешалкой в течение 16 ч. Затем быстро фильтруют в колбу с притёртой пробкой. Заменяют воздух в колбе на азот, не содержащий кислорода, прибавляют 1 мл раствора натрия йодида 20 % в уксусной кислоте безводной, закрывают колбу, тщательно встряхивают и помещают в защищённое от света место на 30 мин. Прибавляют 50 мл воды и немедленно титруют 0,01 М раствором натрия тиосульфата до обесцвечивания (индикатор – 0,25 мл 1 % раствора крахмала).

Параллельно проводят контрольный опыт.

Разность между израсходованным объёмом 0,01 М раствора натрия тиосульфата при титровании контрольного и испытуемого растворов не должна превышать 2,0 мл.

Платина

Не более 0,003 %. Испытание проводят для силиконовых эластомеров, полученных с использованием платины.

В кварцевый тигель помещают 1 г испытуемого образца и сжигают, постепенно повышая температуру, до получения белого остатка. Остаток переносят в графитовый тигель. В кварцевый тигель прибавляют 10 мл свежеприготовленной смеси азотной кислоты концентрированной и хлористоводородной кислоты концентрированной (1:3, об/об), нагревают на водяной бане в течение 1–2 мин и переносят содержимое в графитовый тигель. Прибавляют 5 мг калия хлорида и 5 мл фтористоводородной кислоты и выпаривают досуха на водяной бане. Прибавляют 5 мл фтористоводородной кислоты и снова выпаривают досуха; повторяют эту процедуру дважды. Полученный остаток растворяют в 5 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты при нагревании на водяной бане и охлаждают. Полученный раствор прибавляют к 1 мл олова (II) хлорида раствора 25 % в 1 М растворе хлористоводородной кислоты, промывают графитовый тигель несколькими мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты, присоединяя их к тому же раствору, и доводят объём раствора той же кислотой до 10,0 мл.

Раствор сравнения (готовят параллельно с испытуемым). К 1 мл олова (II) хлорида раствора 25 % в 1 М растворе хлористоводородной кислоты прибавляют 1,0 мл стандартного раствора 30 мкг/мл платины-иона и доводят объём раствора 1 М раствором хлористоводородной кислоты до 10,0 мл.

Окрашивание испытуемого раствора должно быть не более интенсивным, чем окрашивание раствора сравнения.

###### Маркировка

Указывают, что материал получен с использованием пероксидов или платины.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0002 Силиконовые масла, используемые в качестве смазывающей добавки

Вводится впервые

Силиконовое масло, используемое в качестве смазывающей добавки, представляет собой полидиметилсилоксан, полученный гидролизом и поликонденсацией дихлордиметилсилана и хлортриметилсилана.

Марки силиконового масла характеризуются числом, указанным после наименования, которое обозначает величину его номинальной вязкости. Степень полимеризации силиконовых масел, используемых в качестве смазывающих добавок (n = от 400 до 1200), должна быть такой, чтобы их кинематическая вязкость находилась в номинальных пределах от 1000 мм2·с-1 до 30000 мм2·с-1.

###### Свойства

Описание. Прозрачная бесцветная жидкость различной вязкости.

Растворимость. Практически нерастворимо в воде и метаноле, очень мало растворимо в этаноле, смешивается с этилацетатом, метилэтилкетоном и толуолом.

###### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр испытуемого образца силиконового масла в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца силиконового масла.

- Область спектра от 850 см-1 до 750 см-1 не принимают во внимание, так как в ней могут выявляться незначительные различия, обусловленные степенью полимеризации.

2. Качественная реакция. Помещают 0,5 г испытуемого образца силиконового масла в пробирку и нагревают над слабым пламенем до появления белых паров. Пробирку наклоняют над другой пробиркой, содержащей 1 мл хромотроповой кислоты натриевой соли раствора 0,1 %, таким образом, чтобы пар достиг раствора. Другую пробирку встряхивают в течение 10 с и нагревают на водяной бане в течение 5 мин. Раствор должен приобрести фиолетовую окраску.

3. Качественная реакция. Сульфатная зола, полученная в платиновом тигле из 50 мг испытуемого образца силиконового масла (ОФС «Сульфатная зола»), даёт реакцию на силикаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

###### Испытания

Кинематическая вязкость. Не менее 95 % и не более 105 % от заявленной (ОФС «Вязкость»). Определяют динамическую вязкость испытуемого образца силиконового масла при 25 °С. Рассчитывают кинематическую вязкость, используя значение относительной плотности, равное 0,97.

Кислотность. К 2,0 г испытуемого образца силиконового масла прибавляют 25 мл смеси равных объёмов этанола безводного и эфира, 0,2 мл бромтимолового синего раствора 0,05% и взбалтывают. Окраска раствора должна измениться на синюю при прибавлении не более 0,15 мл натрия гидроксида раствора 0,01 М.

Тяжёлые металлы. Не более 0,0005 % (ОФС «Тяжёлые металлы»).

Смесь растворителей. Аммиака раствор разведённый—гидроксиламина гидрохлорида раствор 0,2 % (1:9).

Испытуемый раствор. Смешивают 1,0 г испытуемого образца силиконового масла с метиленхлоридом и доводят объём раствора тем же растворителем до 20,0 мл. Прибавляют 0,1 мл свежеприготовленного дитизона раствора 0,002 % в метиленхлориде, 0,5 мл воды и 0,5 мл смеси растворителей.

Раствор сравнения. К 20 мл метиленхлорида прибавляют 1,0 мл свежеприготовленного дитизона раствора 0,002 % в метиленхлориде, 0,5 мл стандартного раствора 10 мкг/мл свинец-иона и 0,5 мл смеси растворителей.

Испытуемый раствор и раствор сравнения, подготовленные параллельно, немедленно энергично встряхивают в течение 1 мин. Красная окраска испытуемого раствора не должна быть интенсивнее окраски раствора сравнения.

Летучие вещества. Не более 2,0 %. В бюкс диаметром 60 мм и высотой 10 мм помещают 2,00 г (точная навеска) испытуемого образца силиконового масла, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 150 °С в течение 24 ч, охлаждают в эксикаторе до комнатной температуры и взвешивают.

Минеральные масла. В пробирку помещают 2 мл испытуемого образца силиконового масла и просматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 365 нм. Интенсивность флуоресценции силиконового масла не должна превышать интенсивность флуоресценции раствора, содержащего хинина сульфата стандартный раствор 0,1 мкг/мл в 0,005 М растворе серной кислоты, исследуемый в тех же условиях.

Фенилированные соединения. Показатель преломления силиконового масла должен быть не более 1,410 (ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)»).

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0003 Вспомогательные элементы первичной упаковки для лекарственных форм

Вводится впервые

Требования настоящей общей фармакопейной статьи относятся к многодозовой упаковке (банки, флаконы, пеналы и др.) для твёрдых лекарственных форм для приёма внутрь (таблетки, драже, капсулы, пилюли и др.) и распространяются на следующие вспомогательные элементы первичной упаковки:

- вкладыши, уплотнители, уплотнители-амортизаторы (далее вкладыши) – вспомогательные элементы, помещаемые внутрь первичной упаковки с целью предохранения её содержимого от разрушения из-за перемещений, ударов, соприкосновений;

- осушители, влагопоглотители (далее осушители) – вспомогательные элементы, помещаемые внутрь первичной упаковки с целью защиты её содержимого от влаги атмосферного воздух и/или удаления влаги из воздуха упаковки.

Вкладыши и осушители, помещённые в многодозовую упаковку вместе с лекарственным препаратом, могут оказывать неблагоприятное физико-химическое, микробиологическое и иное воздействие на cодержимое упаковки, представляющее собой лекарственный препарат, предназначенный для приёма внутрь.

Общие требования к упаковке лекарственных средств, элементам упаковки установлены ОФС «Упаковка лекарственных средств». В настоящей общей фармакопейной статье приведены требования к отдельным вспомогательным элементам первичной упаковки лекарственных средств и материалам, используемым для производства вспомогательных элементов первичной упаковки.

###### Вкладыши

Вкладыши представляют собой вспомогательные элементы упаковки, которые при использовании компенсируют свободный объём первичной упаковки с лекарственным препаратом в виде твёрдой лекарственной формы. Использование вкладышей в первичной упаковке особенно необходимо при транспортировании лекарственных средств. После открытия первичной упаковки для последующего применения лекарственного препарата вкладыш рекомендуется удалить и выбросить.

Для производства вкладышей используют волокно природного и синтетического происхождения, полимерные материалы. Вкладыши из волокон могут содержать один вид волокон или включать различные их виды. Например, используемая в качестве вкладышей вата медицинская гигроскопическая, может быть выработана только из хлопкового волокна или из хлопкового волокна с вискозным штапельным волокном.

###### Хлопковое волокно

Хлопковое волокно получают из очищенного хлопка, представляющего собой волокна семян культурных сортов растения Gossypium hirsutum Linne или других видов Gossypium (семейство Malvaceae). Хлопковое волокно должно быть обезжирено, отбелено, не содержать остатков листьев, околоплодника, оболочки семян и других примесей.

###### Идентификация

1. Микроскопические признаки (ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»). При исследовании под микроскопом должно быть видно, что каждое хлопковое волокно состоит из клеток длиной до 4 см и шириной до 40 мкм в форме сплюснутой трубки с толстыми округлыми стенками, которые часто скручены.

2. Качественная реакция. Хлопковое волокно обрабатывают цинка хлорида раствором йодированным, волокно должно приобрести фиолетовый цвет.

3. Качественная реакция. К 0,1 г хлопкового волокна прибавляют 10 мл цинка хлорида раствора в муравьиной кислоте, нагревают до 40 °С и оставляют на 2 ч, периодически встряхивая. Хлопковое волокно не должно раствориться (отличие от вискозного волокна).

4. Качественная реакция. Смачивают водой 5,0 г хлопкового волокна, отжимают лишнюю воду стеклянной палочкой и помещают в 100 мл кипящего раствора для идентификации волокон «DuPont Fiber Identification Stain № 4», осторожно кипятят не менее 1 мин. Извлекают волокно из раствора, промывают холодной водой, отжимают лишнюю воду. Волокно должно приобрести зелёную окраску.

- Раствор для идентификации волокон «DuPont Fiber Identification Stain № 4». Растворяют 3,8 г порошка «DuPont Fiber Identification Stain № 4» в 378,5 мл воды деионизированной.

5. Флуоресценция. При рассмотрении, в ультрафиолетовом свете при 365 нм, слоя хлопкового волокна толщиной около 5 мм должна наблюдаться слабая флуоресценция коричнево-фиолетового цвета и несколько жёлтых частиц; не должно наблюдаться флуоресценции синего цвета, за исключением допустимой флюоресценции несколькими изолированными волокнами.

###### Испытания

Кислотность или щёлочность. Погружают 10,0 г хлопкового волокна в 100 мл свежепрокипячённой и охлаждённой воды, оставляют вымачиваться на 2 ч. Декантируют по 25 мл полученной жидкости в две колбы, удерживая волокно в ёмкости с водой стеклянной палочкой. В одну колбу добавляют 3 капли фенолфталеина раствора 1 %, в другую – 1 каплю метилового оранжевого раствора 0,1 %; ни в одной из двух колб не должно наблюдаться розового окрашивания при просмотре на белом фоне.

Остаточное содержание водорода пероксида

Не более 0,005 %. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»). В химический стакан помещают 20,0 г (точная навеска) хлопкового волокна, прибавляют 400 мл воды, перемешивают, добавляют 20 мл серной кислоты раствора 20 % (м/о) перемешивают. Полученный раствор титруют 0,02 М раствором калия перманганата до слабого розового окрашивания, которое сохраняется в течение 30 с.

1 мл 0,02 М раствора калия перманганата соответствует 1,701 мг водорода пероксида Н2О2.

Водорастворимые вещества. Не более 0,35 %. В химический стакан, содержащий 1000 мл воды, помещают 10,0 г (точная навеска) хлопкового волокна, осторожно кипятят в течение 30 мин, добавляя воду по мере необходимости для поддержания объёма. Сливают воду через воронку в другую ёмкость и отжимают излишки воды из хлопкового волокна на воронке стеклянной палочкой. Промывают волокно на воронке два раза кипящей водой порциями по 250 мл, отжимая волокно стеклянной палочкой после каждого промывания. Весь слитый объём и промывные воды фильтруют, фильтр тщательно промывают горячей водой, вновь добавляя промывные воды в фильтрат. Выпаривают отфильтрованную жидкость до небольшого объёма, переносят в предварительно взвешенную фарфоровую или платиновую чашку, выпаривают досуха, остаток высушивают при температуре 105° С до постоянной массы.

Жирные масла

Не более 0,7 %. (ОФС «Определение содержания жирных масел в лекарственном растительном сырье и лекарственных средствах растительного происхождения»).

В аппарат Сокслета, снабжённый предварительно взвешенным приёмником, помещают 10,0 г (точная навеска) хлопкового волокна и экстрагируют эфиром в течение 4 ч со скоростью, при которой эфир проходит через сифон не менее 4 раз в час. Полученный эфирный экстракт не должен иметь следов синего, зелёного или коричневатого оттенка. Приёмник с экстрактом оставляют в вытяжном шкафу до испарения эфира, затем высушивают при 105° С в течение 1 ч.

Красящие вещества. В узкий перколятор помещают 10,0 г хлопкового волокна и медленно экстрагируют спиртом до тех пор, пока объём фильтрата (перколята) не достигнет 50 мл. При просмотре в пробирке длиной 20 см перколят может иметь жёлтоватый оттенок, и не должен иметь синего или зелёного оттенка.

Другие посторонние вещества. При визуальном контроле хлопкового волокна не должны обнаруживаться масляные пятна или металлические частицы.

Cульфатная зола. Не более 0,20 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 5 г (точная навеска) хлопкового волокна смачивают серной кислоты раствором 1 М, осторожно нагревают до обугливания волокна, затем прокаливают до превращения остатка в пепел.

###### Вискозное волокно

Вискозное волокно – это искусственное волокно, получаемое переработкой природной целлюлозы. Для вкладышей используют вискозное волокно, представляющее собой волокнистую форму белёной регенерированной целлюлозы. Вискозное волокно состоит исключительно из вискозных волокон, но допускается присутствие небольшого количества отдельных посторонних волокон.

Из-за взаимодействия вкладышей из вискозного волокна с желатином, не рекомендуется использовать такие вкладыши для первичной упаковки лекарственных препаратов в лекарственных формах в виде желатиновых капсул или таблеток с покрытием, содержащим желатин.

###### Идентификация

1. Качественная реакция. При обработке вискозного волокна цинка хлорида раствором йодированным, волокно должно приобретать фиолетовый цвет.

2. Качественная реакция. К 0,1 г вискозного волокна прибавляют 10 мл цинка хлорида раствора в муравьиной кислоте, нагревают до 40 °С и оставляют на 2 ч, периодически встряхивая. Вискозное волокно должно полностью раствориться, за исключением матированных вискозных волокон, от которых остаются частицы титана (отличие от хлопкового волокна).

3. Качественная реакция. Смачивают водой 5,0 г вискозного волокна, отжимают лишнюю воду стеклянной палочкой и помещают в 100 мл кипящего раствора для идентификации волокон «DuPont Fiber Identification Stain № 4»), осторожно кипятят в течение не менее 1 мин. Извлекают волокно из раствора, промывают холодной водой, отжимают лишнюю воду. Волокно должно приобрести сине-зелёную окраску.

4. Флуоресценция. При рассмотрении в ультрафиолетовом свете при 365 нм слоя вискозного волокна толщиной около 5 мм должна наблюдаться слабая флуоресценция коричнево-фиолетового цвета и несколько жёлтых частиц; не должно наблюдаться флуоресценции синего цвета, за исключением допустимой флюоресценции несколькими изолированными волокнами.

###### Испытания

Кислотность или щёлочность. Проведение испытания и нормативные требования такие же, как для хлопкового волокна.

Потеря в массе при высушивании. Не более 11 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 5 г (точная навеска) вискозного волокна.

Водорастворимые вещества. Не более 1,0 %. Испытание проводят так же, как для хлопкового волокна.

Жирные масла. Не более 0,5 %. Для определения используют около 5,0 г (точная навеска) вискозного волокна. Испытание проводят так же, как для хлопкового волокна.

Красящие вещества. Проведение испытания и нормативные требования такие же, как для хлопкового волокна.

Другие посторонние вещества. Проведение испытания и нормативные требования такие же, как для хлопкового волокна.

Сульфатная зола. Не более 1,5 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 5 г (точная навеска) вискозного волокна.

Зола, нерастворимая в кислотах. Не более 1,25 %. Для определения используют остаток, полученный после испытания «Сульфатная зола». К остатку в тигле прибавляют 25 мл хлористоводородной кислоты раствора 3 М и кипятят в течение 5 мин. Содержимое тигля переносят в тарированный фильтрующий тигель, промывают горячей водой, фильтрующий тигель с нерастворённым остатком прокаливают и взвешивают.

###### Полиэфирное волокно

Полиэфирное волокно – это синтетическое волокно, формируемое из расплава полиэтилентерефталата или его производных, представляет собой волокна белого цвета без запаха.

###### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр испытуемого образца полиэфирного волокна в области от 4000 до 650 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать инфракрасному спектру фармакопейного стандартного образца полиэтилентерефталата (спектру материала, выбранного для типового образца) и иметь аналогичные максимумы поглощения.

- Пробоподготовка. Способ 1 (диск с калия бромидом): полиэфирное волокно (1–3 мг) нарезают на части размером 1 мм, смешивают с 0,2 г порошка калия бромида и растирают в шаровой мельнице в течение 1–2 мин. Переносят в пресс-форму и формируют диск с калия бромидом.

- Способ 2 (расплавленная плёнка): плёнку получают путём прессования полиэфирных волокон между листами из ТФЭ-фторуглерода под нагретыми пластинами.

2. Качественная реакция. Смачивают водой 5,0 г полиэфирного волокна, отжимают лишнюю воду стеклянной палочкой и помещают в 100 мл кипящего раствора для идентификации волокон «DuPont Fiber Identification Stain № 4», осторожно кипятят в течение не менее 1 мин. Извлекают волокно из раствора, промывают холодной водой, отжимают лишнюю воду. Волокно должно приобрести бледно-оранжевую окраску.

Кислотность или щёлочность. Проведение испытания и нормативные требования, такие же, как для хлопкового волокна.

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 5 г (точная навеска) полиэфирного волокна.

Сульфатная зола. Не более 0,5 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 5 г (точная навеска) полиэфирного волокна.

###### Осушители

Осушители, применяемые в качестве вспомогательных элементов первичной упаковки лекарственных форм, представляют собой вещества, помещённые, в специальную упаковку (контейнер) из соответствующего упаковочного материала–основы (хлопок, вискоза, полиэстер, полимерные плёнки и др.), имеющую сигнальную окраску и предупредительные надписи, например, «несъедобно». Так же осушители могут быть введены непосредственно в стенку первичной упаковки или в укупорочное средство первичной упаковки (крышку, пробку). Для защиты лекарственного препарата от влаги осушители могут находиться в первичной упаковке до полного использования лекарственного препарата.

В качестве осушителей (водопоглотителей) используют различные вещества природного и синтетического происхождения, наиболее применяемые из которых: бентонит, кальция хлорид, кальция оксид, молекулярные сита, силикагель.

Если осушители интегрированы непосредственно в стенку первичной упаковки или укупорочное средство первичной упаковки, а также если осушитель находится в упаковке из материала–основы, то для выполнения испытаний должен быть использован неинтегрированный осушитель. Для осушителей, в которые заранее внесено определённое количество влаги, испытания проводят до введения влаги или после того, как осушитель будет регенерирован.

###### Определение влагоёмкости осушителей

Оборудование. Для определения влагоёмкости осушителей (показатель также может быть указан как «адсорбционная ёмкость» или «адсорбционная способность по влаге») используют климатическую камеру, способную контролировать относительную влажность от 35 до 45 % и от 75 до 85 % при температуре от 23 до 27 °С. Так же можно использовать подготовленный эксикатор, способный обеспечивать необходимый процент относительной влажности при температуре от 23 до 27 °С. Эксикатор заполняют аммония хлорида или аммония сульфата насыщенным раствором и для поддержания необходимой температуры от 23 до 27 °С подготовленный эксикатор помещают в термостат.

Методика

Испытание проводят сразу же после вскрытия первичной упаковки с осушителем. В предварительно взвешенный стеклянный бюкс массой (m1), помещают образец осушителя массой 5,0–10,0 г, закрывают бюкс крышкой и взвешивают (m2). Затем бюкс с образцом помещают в климатическую камеру или на решётку подготовленного эксикатора, снимают крышку с бюкса и выдерживают в регламентируемых условиях относительной влажности и температуры, взвешивая бюкс с образцом через установленное время. Прирост массы образца измеряют до тех пор, пока не настанет равновесия, когда два последовательных взвешивания не будут отличаться более чем на 3 мг/г от первоначально взятой массы образца осушителя, при этом второе взвешивание должно быть проведено после дополнительного выдерживания образца в течение 2–4 ч в климатической камере при необходимой температуре и относительной влажности. По истечении времени бюкс закрывают крышкой, достают из эксикатора или климатической камеры и взвешивают (m3).

Влагоёмкость (Х) определяют как процентное содержание от первоначальной массы образца по формуле:

где m1 – масса пустого стеклянного бюкса, г;
m2 – масса стеклянного бюкса с испытуемым образцом до экспозиции во влажной среде, г;
m3 – масса стеклянного бюкса с испытуемым образцом после экспозиции во влажной среде, г.

Если осушитель первичной упаковки представлен смесью двух веществ–адсорбентов, то влагоёмкость рассчитывают пропорционально смеси.

Например, при испытании в условиях относительной влажности от 35 до 45 % и температуры от 23 до 27 °С из расчёта минимальной влагоёмкости осушителей, для смеси, состоящей из 60 % молекулярного сита (влагоёмкость не менее 15 %), и 40 % силикагеля (влагоёмкость не менее 19 %), суммарная влагоёмкость будет не менее 16,6 %.

Расчёт проводят следующим образом:

- влагоёмкость молекулярного сита: (60×15)/100=не менее 9,0 %;

- влагоёмкость силикагеля: (40×19)/100=не менее 7,6 %;

- суммарная влагоёмкость смеси осушителей 9,0+7,6=не менее 16,6 %.

###### Бентонит

Бентонит или бентонитовая глина, представляет собой природный коллоидный алюминия силикат гидратированный, обладающий свойством разбухать при гидратации в 14–16 раз с образованием плотного геля. Так как основным компонентом бентонита является монтмориллонит, то бентонит часто называют монтмориллонитовой глиной.

###### Свойства

Описание. Серовато-белый порошок или гранулы с желтоватым или розоватым оттенком.

###### Идентификация

1. Рентгеновская дифракция (ОФС «Рентгеновская порошковая дифрактометрия»). Для испытуемого образца А наибольший пик соответствует значению d между 15,0 и 17,2 Å. Основной пик в области между 1,48 и 1,54 Å по схеме приготовления испытуемого образца Б находится между 1,492 и 1,504 Å.

- Испытуемый образец А. К 100 мл воды небольшими порциями при интенсивном перемешивании прибавляют 2,0 г бентонита, смесь оставляют на 12 ч для обеспечения полной гидратации (увлажнения). На предметное стекло помещают 2 мл полученной смеси, высушивают при комнатной температуре для получения ориентированной пленки. Предметное стекло помещают в вакуумный эксикатор над свободной поверхностью этиленгликоля. Эксикатор вакуумируют и закрывают запорный кран, чтобы этиленгликоль насыщал камеру эксикатора. Оставляют стекло в эксикаторе на 12 ч.

- Испытуемый образец Б. Готовят порошковую пробу образца произвольно.

- Записывают рентгеновскую дифрактограмму подготовленных образцов А и Б и определяют значения d.

2. Качественная реакция. В металлический тигель помещают 5,0 г бентонита, прибавляют 1 г калия нитрата и 3 г натрия карбоната безводного, нагревают до расплавления смеси, оставляют остывать. К остатку прибавляют 20 мл воды кипящей, перемешивают, фильтруют и промывают остаток 50 мл воды. К остатку прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и 5 мл воды и фильтруют. К фильтрату прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 40 %, фильтруют и добавляют 3 мл аммония хлорида раствора 10,7 %. Образуется белый желеобразный осадок.

###### Испытания

pH. От 4,0 до 10,5 (ОФС «Ионометрия», метод 3). Для определения 4,0 г бентонита диспергируют в 200 мл воды при энергичном перемешивании.

Потеря в массе при высушивании. Не более 3,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 5,0–10,0 г (точная навеска) бентонита; испытание проводят сразу же после вскрытия первичной упаковки с осушителем.

Влагоёмкость. Не менее 13 % при относительной влажности от 35 до 45 % и температуре от 23 до 27 °С. Не менее 23 % при относительной влажности от 75 до 85 % и температуре от 23 до 27 °С. Испытание проводят в соответствии с определением влагоёмкости для осушителей.

Мышьяк

Не более 0,001 %.

Растворитель. Хлористоводородная кислота концентрированная—вода 1:24.

Испытуемый раствор. В химический стакан вместимостью 250 мл, содержащий 100 мл растворителя, помещают 8,0 г высушенного образца бентонита, перемешивают и накрывают стакан часовым стеклом. Осторожно кипятят в течение 15 мин при периодическом перемешивании, не допуская чрезмерного пенообразования. Горячую надосадочную жидкость фильтруют через бумажный фильтр с высокой скоростью фильтрации (примерный размер пор фильтра 12–15 мкм) в мерную колбу вместимостью 200 мл. Фильтр промывают четырьмя порциями по 25 мл горячего растворителя, собирая промывные воды в мерную колбу. Объединённые фильтраты охлаждают до комнатной температуры, при необходимости объём раствора доводят до метки растворителем.

Стандартные растворы. Разводят мышьяка стандартный раствор 1 мг/мл (ОФС «Стандартные растворы») водой для получения стандартных растворов подходящих концентраций мышьяка, адаптируемых к линейному или рабочему диапазону используемого прибора. Растворы используют свежеприготовленными.

Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой») или методом масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (ОФС «Масс-спектрометрия с индуктивно связанной плазмой») в соответствии с методикой, приведённой в ОФС «Элементные примеси».

Свинец

Не более 0,0015 %.

Растворитель. Хлористоводородная кислота концентрированная—вода 1:24.

Испытуемый раствор. В химический стакан вместимостью 250 мл, содержащий 100 мл растворителя, помещают 3,75 г бентонита, перемешивают и накрывают стакан часовым стеклом. Кипятят в течение 15 мин, охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через бумажный фильтр с высокой скоростью фильтрации (примерный размер пор фильтра 12–15 мкм) в химический стакан вместимостью 400 мл, фильтр промывают четырьмя порциями по 25 мл горячей воды, собирая промывные воды в тот же химический стакан на 400 мл. Объединённые жидкости концентрируют примерно до 20 мл при осторожно кипячении (упаривании). При образовании осадка добавляют 2–3 капли азотной кислоты, нагревают до кипения и охлаждают до комнатной температуры. Полученный концентрированный раствор фильтруют через бумажный фильтр с высокой скоростью фильтрации (примерный размер пор фильтра 12–15 мкм) в мерную колбу вместимостью 50 мл. Оставшееся содержимое из стакана вместимостью 400 мл фильтруют в эту же мерную колбу и содержимое мерной колбы доводят водой до объёма.

Свинца стандартные растворы. Разводят свинца стандартный раствор 1 мг/мл (ОФС «Стандартные растворы») водой для получения стандартных растворов подходящих концентраций, адаптируемых к линейному или рабочему диапазону используемого прибора. Растворы используют свежеприготовленными.

Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой») или методом масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (ОФС «Масс-спектрометрия с индуктивно связанной плазмой») в соответствии с методикой, приведёной в ОФС «Элементные примеси».

###### Кальция хлорид безводный

###### Свойства

Описание. Порошок или гранулы белого цвета.

###### Идентификация

1. Качественная реакция. Кальция хлорид безводный должен давать характерную реакцию А на кальций (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

2. Качественная реакция. Кальция хлорид безводный должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

###### Испытания

рН. От 4,5 до 11,0 (ОФС «Ионометрия», метод 3). Для определения используют 5 % водный раствор кальция хлорида безводного.

Влагоёмкость. Не менее 28 % при относительной влажности от 75 до 85 % и температуре от 23 до 27 С. Испытание проводят в соответствии с определением влагоёмкости для осушителей.

Магний и щелочные металлы. Не более 5 %. Растворяют 1,0 г кальция хлорида безводного в 50 мл воды, прибавляют 0,5 г аммония хлорида, перемешивают и кипятят в течение 1 мин. Быстро прибавляют 40 мл щавелевой кислоты раствора 0,5 М и энергично перемешивают до образования осадка. Незамедлительно прибавляют 2 капли метилового красного спиртового раствора 0,1 % и затем по каплям прибавляют аммиака раствора 10 % до тех пор, пока окраска смеси не измениться на жёлтую. Смесь охлаждают и переносят с помощью воды в цилиндр вместимостью 100 мл, доводят водой до 100 мл и оставляют на 4 ч или на ночь. Декантируют прозрачную надосадочную жидкость через сухой фильтр и переносят 50 мл полученного прозрачного фильтрата в платиновую посуду. К фильтрату прибавляют 0,5 мл серной кислоты концентрированной и выпаривают смесь на водяной бане до небольшого объёма. Оставшуюся жидкость осторожно выпаривают досуха на открытом пламени и продолжают нагревание до тех пор, пока соли аммония не будут полностью разложены и выпарены. Затем остаток прокаливают до постоянной массы при температуре от 550 до 650 °C. Масса остатка должна быть не более 25 мг.

Мышьяк

Не более 0,0003 %.

Испытуемый раствор. Растворяют 1 г кальция хлорида безводного в 10 мл воды.

Приготовление стандартных растворов и определение мышьяка проводят так же, как указано для Бентонита.

Фториды

Не более 0,004 %.

Испытуемый раствор. В стеклянный стакан вместимостью 150 мл, помещают 1,00 г кальция хлорида безводного, прибавляют 10 мл воды и, постоянно перемешивая, медленно прибавляют 20 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М для растворения образца, кипятят в течение 1 мин, затем переносят в полимерный стакан вместимостью 250 мл и быстро охлаждают в ледяной воде. Прибавляют 15 мл натрия цитрата раствора 1 М и 10 мл натрия эдетата раствора 0,2 М, перемешивают. При необходимости доводят рН раствора до 5,5 с помощью хлористоводородной кислоты раствора 1 М или натрия гидроксида раствора1 М. Содержимое полимерного стакана переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора водой до метки. В полимерный лабораторный стакан вместимостью 125 мл переносят 50 мл полученного раствора для потенциометрического определения.

Фторида стандартный раствор 5 мкг/мл. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 12,5 мл фторида стандартного раствора 200 мкг/мл (ОФС «Стандартные растворы»), доводят объём раствора водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Растворы сравнения. В шесть полимерных лабораторных стаканов вместимостью 250 мл помещают 1,0, 2,0, 3,0, 5,0, 10,0 и 15,0 мл фторида стандартного раствора 5 мкг/мл. В каждый из шести cтаканов прибавляют 50 мл воды, 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М, 10 мл натрия цитрата раствора 1 М и 10 мл натрия эдетата раствора 0,2 М, перемешивают. Раствор из каждого стакана переносят в отдельные мерные колбы вместимостью 100 мл и доводят объём раствора в каждой колбе водой до метки. Переносят из мерных колб по 50 мл каждого из шести растворов в отдельные полимерные лабораторные стаканы вместимостью 125 мл для потенциометрического определения.

Измеряют величину потенциала каждого из шести растворов сравнения с помощью подходящего фтор-селективного электрода, используя подходящий электрод сравнения. Строят калибровочную кривую зависимости значения величины потенциала от содержания фторида в мкг в растворах сравнения.

Измеряют величину потенциала испытуемого раствора и определяют содержание фторида в мкг в образце кальция хлорида безводного по калибровочной кривой. Рассчитывают содержание фторида в процентах.

Свинец

Не более 0,0005 %.

Испытуемый раствор. Растворяют 1 г кальция хлорида безводного в 20 мл воды.

Приготовление стандартных растворов и определение свинца проводят так же, как указано для Бентонита.

Количественное определение

Не менее 93,0 % и не более 100,5 % кальция хлорида безводного (CaCl2) (ОФС «Комплексонометрическое титрование»).

В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 1,5 г (точная навеска) кальция хлорида безводного, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. К 25,0 мл приготовленного раствора прибавляют 5 мл аммония хлорида буферного раствора рН 10,0, и 0,1 г индикаторной смеси хромового тёмно-синего или 0,15 мл хромового тёмно-синего раствора и титруют 0,05 М раствором натрия эдетата до сине-фиолетового окрашивания.

1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 5,55 мг кальция хлорида безводного СаСl2.

###### Кальция оксид

###### Свойства

Описание. Порошок, слипающийся в комки, белого цвета.

###### Идентификация

Качественная реакция. Смешивают 1 г кальция оксида с 20 мл воды при встряхивании и прибавляют уксусную кислоту ледяную до полного растворения испытуемого образца. Полученный раствор должен давать характерную реакцию А на кальций (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

###### Испытания

Вещества, нерастворимые в кислоте. Не более 1 %. Смешивают при встряхивании 5,0 г кальция оксида с 100 мл воды, прибавляют по каплям хлористоводородную кислоту концентрированную до полного растворения испытуемого образца. Раствор нагревают до кипения, охлаждают, при необходимости добавляют хлористоводородную кислоту концентрированную для явно кислой реакции среды и фильтруют через тарированный стеклянный фильтр. Осадок на фильтре промывают водой до удаления хлоридов, фильтр с осадком высушивают при 105° С в течение 1 ч, охлаждают и взвешивают.

Потеря в массе при прокаливании. Не более 10,0 % (ОФС «Потеря в массе при прокаливании»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) кальция оксида, образец прокаливают до постоянной массы в платиновом тигле при температуре от 1050 до 1150° С.

Влагоёмкость. Не менее 28 % при относительной влажности от 75 до 85 % и температуре от 23 до 27 °С. Испытание проводят в соответствии с определением влагоёмкости для осушителей.

Магний и щелочные металлы. Не более 3,6 %. Растворяют 0,5 г кальция оксида в 30 мл воды и 15 мл хлористоводородной кислоты раствора 2,7 М. Раствор нагревают, кипятят в течение 1 мин, быстро прибавляют 40 мл щавелевой кислоты раствора 0,5 М и энергично перемешивают. Прибавляют 2 капли метилового красного спиртового раствора 0,1 % и нейтрализуют аммиака раствором 10 % для полного осаждения осадка. Нагревают смесь на водяной бане в течение 1 ч, дают остыть. Доводят смесь водой до 100 мл, тщательно перемешивают и фильтруют. Переносят 50 мл прозрачного фильтрата в платиновую посуду, прибавляют 0,5 мл серной кислоты концентрированной и выпаривают смесь на водяной бане до небольшого объёма. Осторожно выпаривают оставшуюся жидкость на открытом пламени досуха и продолжают нагревание до тех пор, пока соли аммония не будут полностью разложены и выпарены. Затем прокаливают остаток до постоянной массы при температуре от 775 до 825 °C в платиновом тигле.

Свинец

Не более 0,0002 %.

Испытуемый раствор. Растворяют 1 г кальция оксида в 15 мл хлористоводородной кислоты раствора 2,7 М.

Приготовление стандартных растворов и определение свинца проводят так же, как указано для Бентонита.

Мышьяк

Не более 0,0003 %.

Испытуемый раствор. Растворяют 1 г кальция оксида в 15 мл хлористоводородной кислоты раствора 2,7 М.

Приготовление стандартных растворов и определение мышьяка проводят так же, как указано для Бентонита.

Фторид.

Не более 0,015 %.

Испытуемый образец. Кальция оксида 1,0 г.

Приготовление стандартных растворов и определение фторида проводят так же, как указано для кальция хлорида безводного.

###### Количественное определение

Не менее 95,0 % и не более 100,5 % кальция оксида (CaО) в пересчёте на прокалённое вещество (ОФС «Комплексонометрическое титрование»).

В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 1,0 г (точная навеска) прокалённого до постоянной массы кальция оксида («Потеря в массе при прокаливании»), растворяют в 20 мл хлористоводородной кислоты раствора 2,7 М, при необходимости раствор охлаждают, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают. К 25,0 мл полученного раствора прибавляют 5 мл аммония хлорида буферного раствора рН 10,0, 0,1 г индикаторной смеси хромового тёмно-синего или 0,15 мл хромового тёмно-синего раствора и титруют 0,05 М раствором натрия эдетата до сине-фиолетового окрашивания.

1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 2,804 мг кальция оксида (СаО).

Молекулярные сита

Молекулярные сита представляют собой синтетические кристаллические алюмосиликаты, имеющие трёхмерную структуру из тетраэдров кремния оксида и алюминия оксида и характеризующиеся точным, однородным, контролируемым размером пор. Поры в молекулярных ситах достаточно велики, чтобы пропускать небольшие молекулы, но в то же время они задерживают более крупные молекулы, что определило их использование в качестве осушителей и адсорбентов.

Молекулярные сита, наиболее часто используемые в качестве осушителей, относятся к типам 3А, 4А, 5А и 13Х с размером пор приблизительно 3–10 Å.

###### Идентификация

1. Качественная реакция. Смешивают 0,5 г молекулярного сита с 2,5 г калия карбоната безводного, нагревают смесь в платиновом тигле до полного расплавления. Охлаждают, прибавляют 5 мл воды и дают отстояться в течение 3 мин. Осторожно нагревают дно тигля, удаляют расплав и переносят его в лабораторный стакан с помощью примерно 50 мл воды. Прибавляют постепенно хлористоводородную кислоту концентрированную до прекращения образования пузырьков, добавляют еще 10 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и выпаривают на водяной бане досуха. После охлаждения к остатку прибавляют 20 мл воды, кипятят и фильтруют через фильтр беззольный. Фильтрат оставляют для проведения второго и третьего определения идентификации. Оставшийся после фильтрации нерастворимый желеобразный остаток кремния двуоксида переносят в платиновую чашку и осторожно прибавляют 5 мл фтористоводородной кислоты, соблюдая при этом необходимые меры предосторожности при работе с опасными реактивами. Остаток должен раствориться, если он не растворяется, то повторно обрабатывают фтористоводородной кислотой. Нагревают раствор и помещают стеклянную палочку для перемешивания с каплей воды на кончике в образовавшиеся пары; капля воды должна помутнеть (кремний).

- Оставшийся фильтрат разделяют на две части и проводят следующие испытания.

2. Качественная реакция. К одной части фильтрата прибавляют аммиака раствора 6 М, должен образоваться желеобразный осадок белого цвета, нерастворимый в избытке этого реактива (алюминий).

3. Качественная реакция. К второй части фильтрата прибавляют натрия гидроксида раствора 1 М, должен образоваться осадок белого цвета, который растворяется в избытке этого реактива (алюминий).

###### Испытания

рН. От 6,5 до 12,0. (ОФС «Ионометрия», метод 3) Для определения используют суспензию 10,0 г молекулярного сита в 50 мл дегазированной воды.

Потеря в массе при прокаливании. Не более 4,5 %. (ОФС «Потеря в массе при прокаливании»). Для определения используют 5,0–10,0 г (точная навеска) молекулярного сита прокаливают до постоянной массы при температуре от 550 до 600° С. Испытание проводят сразу же после вскрытия первичной упаковки с осушителем.

Влагоёмкость. Не менее 15,0 % по массе относительной влажности от 35 до 45 % и температуре от 23 до 27 °С. Не менее 16,5 % по массе при относительной влажности от 75 до 85 % и температуре от 23 до 27 °С. Испытание проводят в соответствии с определением влагоёмкости для осушителей.

Свинец. Не более 0,0005%.

Испытуемый раствор. В стакан вместимостью 250 мл помещают 10,0 г молекулярного сита, прибавляют 50 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,5 М, накрывают часовым стеклом и медленно нагревают до кипения. Осторожно кипятят в течение 15 мин, охлаждают и дают отстояться нерастворенному образцу. Декантируют надосадочную жидкость через фильтр (марки Whatman № 4 или аналогичной) в мерную колбу вместимостью 100 мл, оставляя как можно больше нерастворённого образца в стакане. Промывают нерастворённый остаток и стакан тремя порциями горячей воды по 10 мл, каждый раз декантируя промывную воду и профильтровывая ее в колбу. Наконец промывают фильтр 15 мл горячей воды, охлаждают фильтрат до комнатной температуры, раствор доводят водой до метки.

Приготовление стандартных растворов и определение свинца проводят так же, как указано для Бентонита.

###### Силикагель

Силикагель представляет собой высушенный гель, образующийся из перенасыщенных растворов кремниевых кислот. Силикагель получают в виде желеобразного осадка при взаимодействии водного раствора силиката натрия и минеральных кислот; затем осадок промывают и образовавшийся гель обезвоживают (высушивают).

Силикагель имеет пористую структуру, развитую внутреннюю поверхность, состоящую из активных центров (групп SiOН), расположенных на расстоянии 0,5 нм друг от друга. Поглощающая способность силикагеля зависит от количества и активности таких центров.

###### Свойства

Описание. Белые или прозрачные гранулы, сферы или микронизированные частицы.

###### Идентификация

1. Качественная реакция. В платиновый тигель помещают 5 мг силикагеля, смешивают с 0,2 г калия карбоната безводного и прокаливают над горелкой при температуре от 550 до 650 °С в течение 10 мин. Охлаждают, растворяют расплав в 2 мл свежеперегнанной воды, при необходимости при подогревании, затем медленно добавляют 2 мл аммония молибдата раствора в азотной кислоте; должно наблюдаться тёмно-жёлтое окрашивание. Содержимое оставляют для проведения 2 качественной реакции.

2. Качественная реакция. Помещают 1 каплю раствора (1 качественная реакция) на фильтровальную бумагу, высушивают на воздухе. Прибавляют 1 каплю насыщенного раствора о-толидина в ледяной уксусной кислоте, помещают бумагу над пробиркой с аммиака раствором концентрированным 25 %, на бумаге должно появиться зелёно-синее пятно (алюминий).

###### Испытания

рН. От 4,0 до 8,0. (ОФС «Ионометрия», метод 3). Для определения используют суспензию 1,0 силикагеля в 20 мл воды.

Потеря в массе при высушивании. Не более 3,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании»). Для определения используют 5,0–10,0 г (точная навеска) силикагеля, высушивают в течение 3 ч при температуре 145° С. Испытание проводят сразу же после вскрытия первичной упаковки с осушителем.

Влагоёмкость. Не менее 19 % по массе относительной влажности от 35 до 45 % и температуре от 23 до 27 °С. Не менее 27 % по массе относительной влажности от 75 до 85% и температуре от 23 до 27 °С. Испытание проводят в соответствии с определением влагоёмкости для осушителей.

Растворимые ионизируемые соли. Не более 5,0 % в пересчёте на натрия сульфат Na2SO4 (ОФС «Электропроводность»).

Испытуемый раствор. Смешивают 5,0 г предварительно высушенного испытуемого образца силикагеля (как указано для показателя «Потеря в массе при высушивании») со 150 мл воды в течение не менее 5 мин в высокоскоростной мешалке. Фильтруют под вакуумом в мерную колбу вместимостью 250 мл и промывают мешалку и фильтр 100 мл воды порциями, прибавляя промывные воды к фильтрату, доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор натрия сульфата 1 мг/мл. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 0,25 г натрия сульфата безводного, растворяют в воде деионизированной и доводят тем же растворителем до метки.

Определяют электропроводность испытуемого раствора и стандартного раствора натрия сульфата 1 мг/мл, используя подходящее оборудование (ячейки электропроводности). Электропроводность испытуемого раствора силикагеля не должна превышать электропроводность стандартного раствора натрия сульфата.

Свинец. Не более 0,0005%.

Испытуемый раствор. В стакан вместимостью 250 мл помещают 5,0 г силикагеля, прибавляют 50 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,5 М, накрывают часовым стеклом и медленно нагревают до кипения. Осторожно кипятят в течение 15 мин, охлаждают и дают отстояться нерастворённому остатку образца. Декантируют надосадочную жидкость через фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл, оставляя как можно больше нерастворённого образца в стакане. Промывают нерастворенный остаток и стакан тремя порциями горячей воды по 10 мл, каждый раз декантируя промывную воду и профильтровывая её в колбу. Наконец, промывают фильтр 15 мл горячей воды, охлаждают фильтрат до комнатной температуры и объём раствор доводят водой до метки.

Приготовление стандартных растворов и определение свинца проводят так же, как указано для Бентонита.

###### Количественное определение

Не менее 94,0 % кремния диоксида (SiO2) в пересчёте на прокалённый силикагель.

В предварительно взвешенный платиновый тигель помещают 1,0 г (точная навеска) предварительно высушенный испытуемый образец силикагеля (как указано для показателя «Потеря в массе при высушивании»), прокаливают при температуре от 975 до 1025 °С до постоянной массы, охлаждают в эксикаторе и взвешивают, чтобы получить массу прокалённого образца (m1). Смачивают остаток несколькими каплями спирта, прибавляют 3 капли серной кислоты концентрированной, затем прибавляют количество фтористоводородной кислоты, достаточное для покрытия смоченного образца. Выпаривают досуха при температуре от 95 до 105° С, затем прибавляют несколько миллилитров фтористоводородной кислоты, достаточных для покрытия образца, осторожно вращают тигель, чтобы смыть смесь с краёв, и снова выпаривают досуха, следя за тем, чтобы образец не разбрызгивался при высыхании. Нагревают тигель до температуры 550-650 °С и прокаливают остаток при температуре от 975 до 1025 °С в течение 30 мин, охлаждают в эксикаторе и взвешивают, чтобы получить итоговую массу (m2). Если остаток остается и постоянная масса не достигнута, повторяют процедуру, начиная с добавления фтористоводородной кислоты, пока не будет получена постоянная масса. Разница между массой прокалённого образца и итоговой массой (m1–m2) представляет собой массу (в граммах) кремния диоксида (SiO2) в изначально прокалённом образце.

Содержание кремния диоксида в силикагеле в процентах по массе (Х) в пересчёте на прокалённый силикагель, определяют по формуле:

где m1 – масса тигля с изначально прокалённым испытуемым образцом силикагеля, г;
m2 – масса тигля с прокалённым остатком испытуемого образца силикагеля после взаимодействия с фтористоводородной кислотой (итоговая масса), г.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0004 Гидролитическая стабильность упаковки из стекла

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья устанавливает общие требования к определению гидролитической стабильности упаковки из стекла.

###### Термины и определения

Нейтральное стекло – боросиликатное стекло, содержащее значительное количество оксида бора, оксида алюминия, оксидов щёлочных металлов и/или оксидов щёлочноземельных металлов. Согласно своему составу нейтральное стекло характеризуется высокой гидролитической и термической устойчивостью.

Силикатное стекло – стекло на основе диоксида кремния, содержащего оксиды щёлочных металлов, в основном, оксид натрия и оксиды щёлочноземельных металлов, в основном, оксид кальция. Согласно своему составу, силикатное стекло характеризуется только средней гидролитической устойчивостью.

Гидролитическая стабильность упаковки из стекла – устойчивость стекла (внутренней поверхности стеклянной упаковки) к выделению растворимых минеральных веществ в воду в установленных условиях контакта между внутренней поверхностью упаковки и водой. Гидролитическая устойчивость оценивается путём титрования выделившихся активных ионов щёлочи.

Упаковка для фармацевтического применения из стекла (далее – упаковка) – изделия из стекла, находящиеся в непосредственном контакте с лекарственными средствами, которые вместе c укупорочной системой представляют первичную упаковку, обеспечивающую защиту и сохранность лекарственных средств на протяжении всего срока годности.

Общие требования к стеклу медицинскому, как одному из видов упаковочных материалов, предназначенных для производства упаковки и элементов упаковки лекарственных средств, классификация марок стекла медицинского и перечень производимой из стекла медицинского упаковки регламентированы ОФС «Упаковка лекарственных средств».

Классификация упаковки из стекла в зависимости от показателя гидролитической устойчивости

Упаковка из стекла типа I – упаковка, изготовленная из нейтрального стекла с высокой гидролитической устойчивостью, обусловленной химическим составом самого стекла.

Упаковка из стекла типа II – упаковка, изготовленная обычно из силикатного стекла с высокой гидролитической устойчивостью, обусловленной соответствующей обработкой внутренней поверхности.

Упаковка из стекла типа III – упаковка, изготовленная чаще всего из силикатного стекла со средней гидролитической устойчивостью.

Типы упаковок из стекла, которые используют для различных видов лекарственных препаратов являются следующие:

- упаковка из стекла типа I пригодна для большинства лекарственных препаратов, в том числе и для парентерального применения;

- упаковка из стекла типа II пригодна для лекарственных препаратов с кислой и нейтральной средами, в том числе и для парентерального применения;

- упаковка из стекла типа III пригодна для неводных лекарственных препаратов парентерального применения, порошков парентерального применения (за исключением лиофилизированных порошков), а также лекарственных препаратов, не предназначенных для парентерального применения.

Как правило, также могут быть использованы упаковки из стекла, имеющие более высокую гидролитическую устойчивость, чем рекомендуемые выше для конкретных видов лекарственных препаратов.

Внутренняя поверхность упаковки из стекла может быть специально обработана для улучшения гидролитической устойчивости, придания водоотталкивающих свойств и т.п., внешняя поверхность также может быть обработана, например, для снижения трения и улучшения устойчивости к истиранию.

Обработка внешней поверхности не должна вызывать загрязнение внутренней поверхности упаковки.

Упаковки из стекла для лекарственных препаратов не используют повторно, за исключением упаковок из стекла типа I.

Упаковку для компонентов крови не используют повторно.

###### Гидролитическая устойчивость

Упаковка для фармацевтического применения из стекла должны выдерживать испытания на гидролитическую устойчивость. Если упаковка из стекла имеет детали, изготовленные из других материалов, испытанию подлежит только стеклянная часть упаковки.

Для определения качества упаковки из стекла, в зависимости от предполагаемого применения, необходимо проведение одного или нескольких следующих испытаний (табл. 1).

Испытания на гидролитическую устойчивость упаковки проводят с целью контроля и определения типа стекла (I, II или III).

Таблица 1. Виды испытания в зависимости от типа упаковок из стекла
Тип упаковки | Методы испытания
--- | ---
Упаковки из стекла типа I и типа II (для различия от упаковок из стекла типа III) | А (испытание на поверхностную гидролитическую устойчивость)
Упаковки из стекла типа I (для различия от упаковок из стекла типа II от типа III) | Б (испытание измельченного в порошок стекла) или В (испытание упаковок с обработанной поверхностью)
Упаковки из стекла типа I и типа II (определение влияния химического состава или степени обработки поверхности стекла на гидролитическую устойчивость) | A и Б, или A и В

Испытание проводят путём титрования испытуемых растворов, полученных в условиях, описанных в методах испытаниях A, Б и В. Метод В проводят в случае отсутствия информации о типе стекла.

###### Оборудование

Используемое оборудование включает следующие компоненты:

- автоклав, способный поддерживать температуру от 120 до 122 ºС и давление 0,25 МПа или 2,5 бар, оборудованный термометром или манометром, вентиляционным краном и поддоном, а также имеющий достаточную вместимость для размещения над поверхностью воды такого количества упаковок из стекла, которое необходимо для проведения испытания; перед использованием автоклав и всё вспомогательное оборудование следует очистить водой;

- бюретки соответствующей вместимости;

- мерные колбы вместимостью 1000 мл;

- пипетки и стаканы;

- конические колбы вместимостью 100 мл и 250 мл;

- водяная баня;

- металлическая фольга (например, из алюминия, нержавеющей стали).

Колбы и стаканы перед использованием следует заполнить водой и выдержать в автоклаве при температуре от 120 до 122 ºС в течение не менее 1 ч.

###### Определение объёма наполнения

Объём наполнения – это объём воды, которым следует наполнить упаковку для проведения испытания. Для бутылок и флаконов объём наполнения составляет 90 % от полной вместимости упаковки (до краёв). Для ампул этот объём соответствует объёму до высоты плеча.

Флаконы и бутылки. Отбирают случайным образом из партии 6 упаковок (или 3, если их вместимость более 100 мл), очищают от грязи и осколков. Пустые упаковки взвешивают с точностью до 0,1 г, помещают на горизонтальную поверхность и наполняют до края водой, избегая переполнения и образования воздушных пузырьков. Уровень жидкости регулируют по нижнему мениску и взвешивают заполненные упаковки с точностью до 0,01 г для упаковок, имеющих номинальный объём меньше или равный 30 мл, и с точностью до 0,1 г для упаковок с номинальным объёмом более 30 мл и получают массу воды. Рассчитывают среднее значение полной вместимости в миллилитрах и умножают на 0,9. Полученный объём с точностью до 0,1 мл является объёмом наполнения для конкретной упаковки.

Ампулы. Помещают не менее 6 сухих ампул на плоскую, горизонтальную поверхность и наполняют водой из бюретки до высоты плеча (точка А) (рис. 1). Определяют вместимость (с точностью до 0,01 мл) и вычисляют среднее значение. Этот объём (с точностью до 0,1 мл), является объёмом наполнения для конкретной партии ампул. Объём наполнения может также быть определён путем взвешивания.

Рисунок 1. Объём наполнения ампул (до точки А).

Шприцы и картриджи. Выбирают 6 шприцев или картриджей, закрывают отверстие (горловина картриджей и иглы и/или посадочный конус Луера), используя инертный материал (например, защитный колпачок) или любое другое подходящее средство для предотвращения утечки воды. Определяют средний объём наполнения в соответствии с процедурой, описанной в разделе «Флаконы и бутылки», и умножают на 0,9. Этот объём, выраженный с точностью до 0,1 мл, является объёмом наполнения для конкретной партии упаковок.

###### Метод А. Гидролитическая устойчивость внутренних поверхностей упаковок из стекла (испытание поверхности)

Определение проводят на упаковках, которые ранее не использовались. Объёмы испытуемых растворов, необходимые для заключительного определения, приведены в таблице 2.

Таблица 2. Объёмы испытуемой жидкости и количество титрований
Объём наполнения (мл) | Объём испытуемого раствора для титрования (мл) | Количество титрований
--- | --- | ---
До 3,0 | 25,0 | 1
От 3,0 до 30,0 | 50,0 | 2
От 30,0 до 100,0 | 100,0 | 2
Более 100,0 | 100,0 | 3

Очистка

Упаковки очищают от грязи и осколков. Непосредственно перед проведением испытания каждую упаковку наполняют водой до краёв, дают отстояться в течение от 15 до 25 мин. Воду из упаковок сливают, затем их дважды тщательно промывают водой, один раз водой свободной от углерода диоксида и дают воде стечь.

Закрытые ампулы не промывают перед испытанием. Закрытые ампулы перед открытием нагревают на водяной бане или в сушильном шкафу при температуре около 40 °С в течение около 2 мин для выравнивания давления внутри ампул.

Наполнение

Упаковки наполняют водой свободной от углерода диоксида до соответствующего объёма наполнения. Упаковки в виде картриджей или шприцов для предварительного заполнения закрывают соответствующим материалом, который не влияет на результаты измерений. Каждая упаковка, в том числе ампулы, неплотно закрывают инертными материалами из нейтрального стекла или алюминиевой фольги, предварительно промытыми водой. Бутылки и флаконы закрывают пробками из нейтрального стекла или алюминиевой фольгой, предварительно промытыми водой. Шприцы и картриджи помещают в стакан и накрывают стакан алюминиевой фольгой. Упаковки вместимостью 2 мл и менее, в которых при автоклавировании вода не удерживается в достаточном количестве, закупоревают подходящим образом, например, пробкой из инертного материала (силикона), фиксируемой плунжером или зажимом. Упаковки помещают на поддон автоклава, загружают в автоклав, содержащий воду, таким образом, чтобы они находились выше уровня воды в автоклаве.

Процесс автоклавирования

Закрывают автоклав и выполняют следующие действия:

- нагревают автоклав с постоянной скоростью в течение 20-30 мин до температуры 100 ºС;

- поддерживают температуру 99–100 ºС в течение 9–11 мин;

- повышают температуру от 100 ºС до 121 ºС в течение 20–22 мин;

- поддерживают температуру 120–122 ºС в течение 59–61 мин;

- снижают температуру от 121 ºС до 100 ºС в течение 40–44 мин, избегая при этом образования вакуума;

- автоклав не открывают, пока вода в упаковках не достигнет температуры 95 °C;

- упаковки вынимают из автоклава с соблюдением обычных мер предосторожности, охлаждают до комнатной температуры в течение 30 мин.

Перед первым использованием автоклав и системы измерения температуры калибруют, чтобы гарантировать температуру внутри упаковок 120–122 ºС.

Примечание – Могут наблюдаться значительные различия между температурой в автоклаве и температурой внутри упаковок.

Испытуемые растворы анализируют путём титрования в соответствии с методикой, описанной ниже.

В случае упаковки из стекла, произведённой для водных лекарственных препаратов для парентерального применения, экстракционный раствор подвергается определению мышьяка в соответствии с ОФС «Упаковка для фармацевтического применения из стекла».

Методика

Титрование проводят в течение 1 ч после изъятия упаковок из автоклава. Испытуемые растворы, полученные из упаковок, объединяют и перемешивают. Необходимый объём испытуемого раствора (табл. 1) помещают в коническую колбу. Во вторую аналогичную колбу добавляют такой же объём воды свободной от углерода диоксида (контрольный раствор). В каждую колбу добавляют 0,05 мл раствора метилового красного раствор 0,05 % на каждые 25 мл раствора. Контрольный раствор титруют 0,01 М раствором хлористоводородной кислоты. Испытуемый раствор титруют тем же титрантом до окраски контрольного раствора. Разница между объёмами титранта выражается в мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты на 100 мл. Объём титранта меньше 1,0 мл указывают с точностью до 0,01 мл, а объём титранта больше или равный 1,0 мл указывают с точностью 0,1 мл.

Допустимые нормы

Полученные результаты не должны превышать значений, приведённых в табл. 3.

Таблица 3. Допустимые нормы при испытании поверхностной гидролитической устойчивости
Объём наполнения (мл) | Максимальный объём 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты на 100 мл испытуемого раствора (мл)
--- | ---
Класс стекла для упаковок
Тип I и II | Тип III
До 0,5 | 3,0 | 30,0
От 0,5 до 1 | 2,0 | 20,0
От 1 до 2 | 1,8 | 17,6
От 2 до 3 | 1,6 | 16,1
От 3 до 5 | 1,3 | 13,2
От 5 до 10 | 1,0 | 10,2
От 10 до 20 | 0,80 | 8,1
От 20 до 50 | 0,60 | 6,1
От 50 до 100 | 0,50 | 4,8
От 100 до 200 | 0,40 | 3,8
От 200 до 500 | 0,30 | 2,9
Более 500 | 0,20 | 2,2

###### Метод Б. Гидролитическая устойчивость измельчённого в порошок стекла (испытание измельчённого в порошок стекла)

Проверяют, были ли эти изделия подвергнуты обжигу для получения приемлемого качества.

Испытание проводят на трубках, используемых для производства упаковок из стекла или на самих упаковках.

Оборудование

Используемое оборудование включает следующие компоненты:

- ступка, пестик (рис. 2) и молоток из закаленной магнитной стали;

- в качестве альтернативы ступке, пестику и молотку может быть использована шаровая мельница из агата, диоксида циркония или нержавеющей стали объёмом 250 мл; используются 2 шарика диаметром 40 мм или 3 шарика диаметром 30 мм;

- комплект из трёх сит с квадратными отверстиями из нержавеющей стали, установленных на рамках из того же материала и состоящий из:

  - (а) сита номер 710;

  - (б) сита номер 425;

  - (в) сита номер 300;

- для просеивания стекла используют механический просеиватель или просеивающую машину.

- постоянный магнит;

- металлическая фольга (например, алюминий, нержавеющая сталь);

- сушильный шкаф, способный поддерживать температуру 135–145 ºС;

- эксикатор;

- весы для взвешивания до 500 г с точностью 0,005 г;

- ультразвуковая баня.

Методика

Испытуемые упаковки промывают водой и высушивают в сушильном шкафу. Для получения двух образцов стекла массой около 100 г каждый, не менее трёх упаковок заворачивают в чистую бумагу и разбивают молотком таким образом, чтобы получить осколки с размерами, не превышающими 30 мм.

При использовании ступки, пестика и молотка поступают следующим образом: 30–40 г одного образца с осколками размером 10–30 мм переносят в ступку, ставят пестик и сильно ударяют один раз молотком. Содержимое ступки переносят на большее сито (а) из комплекта. Операцию повторяют несколько раз, пока все осколки не будут перенесены на сито. Встряхивают комплект сит в течение короткого времени и удаляют стекло, оставшееся на ситах (а) и (б). Затем подвергают эти порции дальнейшему дроблению, повторяя операции до тех пор, пока на сите (а) не останется около 10 г стекла. Выбрасывают эту часть и часть, проходящую через сито (в). Встряхивают комплект сит в течение 5 мин.

Переносят в бюкс часть стеклянных осколков, проходящих через сито (б) и оставшихся на сите (в).

При использовании шаровой мельницы поступают следующим образом. К около 50 г осколков размером 10–30 мм, взятых из 1 образца, добавляют шарики и измельчают тонкостенное стекло (толщина стенки до 1,5 мм) в течение 2 мин и толстостенное стекло (толщина стенки более 1,5 мм) в течение 5 мин. Переносят стекло в сито (а), просеивают в течение 30 с и собирают оставшуюся часть на сите (в). Переносят стекло из сита (a) и (б) в шаровую мельницу и снова измельчают и просеивают, как указано выше. Объединяют все части, оставшиеся на сите (в).

Повторяют операцию измельчения и просеивания со вторым образцом. Таким образом, получают 2 образца, каждый массой не менее 10 г. Каждый образец выкладывают на чистую глянцевую бумагу и удаляют из стеклянных осколков любые металлические примеси, проводя над ними магнитом. Образцы стекла переносят в стакан, добавляют 30 мл ацетона и очищают осколки с помощью стеклянной палочки, покрытой резиной или пластиком. Затем дают отстояться и декантируют слой ацетона. Прибавляют еще 30 мл ацетона, встряхивают, сливают и прибавляют новую порцию 30 мл ацетона.

Рисунок 2. Прибор для измельчения стекла. Размеры в миллиметрах.

Ультразвуковую баню наполняют водой комнатной температуры, помещают стаканы с образцами стекла и закрепляют так, чтобы уровень воды был на уровне ацетона и обрабатывают в течение 1 мин. Жидкость в стаканах отстаивают, максимально сливают ацетон, затем добавляют 30 мл ацетона и повторно обрабатывают на ультразвуковой бане. Промывание ацетоном проводят до тех пор, пока раствор не станет прозрачным. Затем ацетон декантируют, выпаривают, стеклянные осколки сушат в сушильном шкафу при температуре 140 ºС в течение 20 мин. Высушенные осколки стекла из каждого стакана помещают раздельно во взвешенные бюксы, закрывают крышками и охлаждают в эксикаторе. Взвешивают по 10 г высушенных стеклянных осколков, помещают в две конические колбы, прибавляют по 50 мл воды свободной от углерода диоксида с помощью пипетки (испытуемые растворы). В третью коническую колбу прибавляют 50 мл воды свободной от углерода диоксида (контрольный раствор). Стеклянные осколки равномерно распределяют на дне колбы осторожным встряхиванием. Колбы закрывают пробками из нейтрального стекла или алюминиевой фольгой, промытыми водой или перевернутыми стаканами так, чтобы внутренняя часть стакана плотно прилегала к горловине колбы. Колбы помещают в автоклав с водой комнатной температуры так, чтобы уровень воды в колбе был выше, чем в автоклаве и выдерживают при температуре 120–122 ºС в течение 30 мин, выполняя те же операции, что и при проведении испытания методом А на поверхностную гидролитическую устойчивость. Автоклав не открывают, пока температура не снизится до 95 ºС. Колбы вынимают из автоклава и сразу охлаждают под проточной водопроводной водой.

В каждую колбу добавляют 0,05 мл метилового красного раствор 0,05 % и немедленно титруют 0,02 М раствором хлористоводородной кислоты в первую очередь контрольный раствор. Испытуемые растворы титруют тем же титрантом до появления жёлтой окраски. Вычисляют разницу между объёмами титранта испытуемого раствора и контрольного раствора.

Примечание – для точного установления конечной точки титрования надосадочную жидкость декантируют в отдельную колбу вместимостью 250 мл; стеклянные осколки в каждой пробе промывают круговыми движениями три раза по 15 мл водой свободной от углерода диоксида, добавляя промывные воды к основному раствору. К испытуемым растворам и контрольному раствору прибавляют по 0,05 мл метилового красного раствора. Титруют и рассчитывают, как описано ниже. В контрольный раствор прибавляют также 45 мл воды свободной от углерода диоксида и 0,05 мл метилового красного раствор 0,05 %.

Рассчитывают среднее значение в мл 0,02 М раствора хлористоводородной кислоты на 1 г образца результатов трёх определений. Отклонение каждого определения от среднего значения не должно превышать ±10 % – для стекла типа I и типа II; ±5 % – для стекла типа III. При необходимости рассчитывают его эквивалент в пересчёте на высвобождаемую щёлочь, рассчитанный в мкг натрия оксида на грамм стеклянных зёрен, при этом 1 мл 0,02 М раствор хлористоводородной кислоты эквивалентен 620 мкг натрия оксида.

Пределы

Используют не более 0,1 мл 0,02 М раствора хлористоводородной кислоты на 1 г стекла типа I, не более 0,85 мл 0,02 М раствора хлористоводородной кислоты на 1 г стекла типа II или типа III.

###### Метод В. Испытание упаковок с обработанной поверхностью (испытание обработанной поверхности)

Испытание методом В проводят для упаковок с обработанной поверхностью в дополнение к испытанию методом А с целью определения, обрабатывалась ли поверхность стекла и/или с целью установления различий стекла типа I и II. Альтернативно используют методы А и Б. Испытание методом В проводят на неиспользованных образцах или на образцах, использованных ранее при методе А.

Флаконы и бутылки

Объёмы необходимых испытуемых растворов приведены в таблице 2. Упаковки дважды промывают водой, заполняют до края смесью фтористоводородной кислоты и хлористоводородной кислоты концентрированной (1:9) и выдерживают в течение 10 мин. Затем упаковки освобождают от содержимого и тщательно промывают водой 5 раз. Непосредственно перед испытанием снова промывают водой. Упаковки, подготовленные таким образом, подвергают процедуре автоклавирования и определяют в соответствии с указаниями в методе А поверхностную гидролитическую устойчивость. Если полученные результаты значительно выше, чем полученные при испытании необработанных поверхностей (примерно в 5–10 раз), то считают, что образцы имеют обработанную поверхность.

Ампулы, картриджи, шприцы

Испытаний такие же, как для флаконов и бутылок. В случае ампул с необработанной поверхностью полученные значения несколько ниже, чем значения, полученные в испытаниях, описанные выше.

Примечание – Ампулы, картриджи, шприцы, изготовленные из стеклянных трубок, обычно не подвергаются внутренней обработке поверхности, так как их высокая химическая устойчивость зависит от химического состава стекла как материала.

Различия между упаковками из стекла типа I и типа II, полученные в испытании методом В, по сравнению с результатами, полученными в испытании методом А, приведены в таблице 4.

Таблица 4. Различия между упаковками из стекла типа I и типа II
Тип I | Тип II
--- | ---
Значения очень близки к величинам, полученным при испытании поверхностной гидролитической устойчивости для упаковок из стекла типа I | Значения значительно превышают величины, полученные при испытании поверхностной гидролитической устойчивости и подобны значениям, полученным для упаковок из стекла типа III, но не превышают их

###### Метод Г. Испытание на поверхностную гидролитическую устойчивость – определение атомно-абсорбционной спектрометрией (ААС) и атомно-эмиссионной спектрометрией (АЭС)

Поверхностная гидролитическая устойчивость стекла типов I и II может быть определена анализом щелочных растворов после выщелачивания стекла методами ААС и АЭС (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия»). Установлено, что ряд химических элементов, присутствующих в стекле в виде оксидов, влияют на щёлочность раствора, что используют для определения эквивалента щёлочности данным методом. Спектрометрический метод имеет преимущество, так как позволяет использовать значительно меньшие объёмы извлечения и может применяться для анализа небольших индивидуальных упаковок. Это позволяет объективно оценить качество упаковок определенной партии, где такой показатель может быть критичным. Оба метода не могут считаться взаимозаменяемыми, и результаты этих измерений не эквивалентны значениям, полученным при методе титриметрии. Корреляция между двумя методами зависит от типа стекла, а также от размера и формы упаковки. Титриметрический метод является стандартным методом; спектрометрический метод может быть использован при необходимости и в обоснованных случаях.

Методика

Определение проводят на неиспользованных ранее упаковках. Количество упаковок для испытаний приведено в табл. 5.

Таблица 5. Количество упаковок, которые могут быть использованы для испытаний на поверхностную гидролитическую устойчивость
Объём наполнения (мл) | Количество упаковок | Количество упаковок, необходимое для дополнительных измерений
--- | --- | ---
До 2 | 20 | 2
От 2 до 5 | 15 | 2
От 5 до 30 | 10 | 2
От 30 до 100 | 5 | 1
Более 100 | 3 | 1

Методика по определению объёма наполнения, очистки упаковок, наполнения и процесса автоклавирования приведена в разделах «Гидролитическая устойчивость» и испытании А.

Буферный раствор. Растворяют 80 г цезия хлорида в 300 мл воды, свободной от углерода диоксида, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл, прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты раствора 6 М и доводят водой, свободной от углерода диоксида до метки, перемешивают.

Эталонный раствор натрия оксида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 мл натрия оксида стандартного раствора 1 мг/мл и доводят водой, свободной от углерода диоксида до метки.

Эталонный раствор калия оксида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2мл калия оксида стандартного раствора 1 мг/мл и доводят водой, свободной от углерода диоксида до метки.

Эталонный раствор кальция оксида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 мл кальция оксида стандартного раствора 1 мг/мл и доводят водой, свободной от углерода диоксида до метки.

Калибровочный раствор. Готовят растворы для построения калибровочного графика (набор калибровочных растворов) путём разбавления подходящих эталонных растворов водой, свободной от углерода диоксида, учитывая нормальные рабочие диапазоны конкретных элементов, используемого для измерения. Нормальные диапазоны концентраций растворов:

- для определения методом атомно-эмиссионной спектрометрии натрия оксида и калия оксида – до 10 мкг/мл;

- для определения методом атомно-абсорбционной спектрометрии натрия оксида и калия оксид – до 3 мкг/мл;

- для определения методом атомно-абсорбционной спектрометрии кальция оксида – до 7 мкг/мл.

Методика

Предварительно определяют концентрацию калия оксида и кальция оксида на одном из испытуемых растворах. В случае, если концентрация калия оксида составляет менее 0,2 мкг/мл и кальция оксида составляет менее 0,1 мкг/мл, остальные испытуемые растворы из этого типа упаковки не испытывают на содержание этих ионов. Испытуемый раствор из каждого образца вводят непосредственно в пламя атомно-абсорбционного или атомно-эмиссионного прибора и определяют приблизительную концентрацию натрия оксида (калия оксида и кальция оксида, если они присутствуют) по калибровочному графику.

Анализ результатов

Если разбавление не требуется, в каждую упаковку прибавляют объём буферного раствора, эквивалентный 5 % объёма наполнения, тщательно перемешивают и определяют, при наличии, натрия оксид, кальция оксид и калия оксид по калибровочному графику. Для определения концентрации кальция оксида методами ААС и АЭС используют пламя ацетилен/азота оксид.

Если необходимо разбавление, определение натрия оксида, кальция оксида и калия оксида, при их наличии, проводят в соответствии с процедурами, описанными выше. Испытуемые растворы должны содержать 5 % буферного раствора. Значения концентраций менее 1,0 мкг/мл должны быть выражены с точностью до второго знака после запятой, значения больше или равные 1,0 мкг/мл – с точностью до первого знака после запятой.

При расчётах необходимо учитывать добавление буферного раствора и дополнительные разведения.

Рассчитывают среднее значение концентрации отдельных оксидов, найденных в каждом из испытанных образцов, в мкг/мл испытуемого раствора и вычисляют сумму отдельных оксидов, выраженную в мкг натрия оксида на мл испытуемого раствора, используя следующие массовые коэффициенты пересчёта:

- 1 мкг калия оксида соответствует 0,658 мкг натрия оксида;

- 1 мкг кальция оксида соответствует 1,105 мкг натрия оксида.

Допустимые нормы. Для каждой испытуемой упаковки предельные значения поверхностной гидролитической устойчивости представлены в табл. 6.

Таблица 6. Допустимые нормы поверхностной гидролитической устойчивости, полученные методами атомно-абсорбционной спектрометрией и атомно-эмиссионной спектрометрией для упаковок из стекла + типа I и типа II
Объём наполнения (мл) | Допустимые нормы концентрации оксидов, выраженные в виде натрия оксида (мкг/мл)
--- | ---
До 0,5 | 7,50
От 0,5 до 1 | 5,00
От 1 до 2 | 4,50
От 2 до 3 | 4,10
От 3 до 5 | 3,20
От 5 до 10 | 2,50
От 10 до 20 | 2,00
От 20 до 50 | 1,50
От 50 до 100 | 1,20
От 100 до 200 | 1,00
От 200 до 500 | 0,75
Более 500 | 0,50

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0005 Добавки к полимерным материалам для фармацевтического применения

Вводится впервые

Добавки (наполнители) вводят в полимерные материалы с целью придания необходимых химических, физических, механических свойств упаковочному материалу, готовой упаковке или элементам упаковки для лекарственных средств. Специальные добавки оказывают влияние на следующие характеристики полимерных материалов: прочность, эластичность, устойчивость к воздействию агрессивных факторов окружающей среды, а также позволяют оптимизировать протекание производственных процессов и способствуют формированию необходимой конфигурации упаковки.

Вещества, присутствующие в готовом упаковочном материале или упаковке, которые не были добавлены в процессе производства с целью модификации свойств продукта, являются примесями, представляют собой продукты реакции и разложения и должны быть нормированы.

В зависимости от химического состава, добавки к полимерным материалам различаются на монокомпонентные, полимерные или смешанные.

По функциональным свойствам добавки к полимерным упаковочным материалам представляют собой антиоксиданты, стабилизаторы, пластификаторы, смазывающие вещества, антиблокирующие вещества, красители, модификаторы ударной прочности, антистатики, антиадгезивы и другие. Антиоксиданты предотвращают или замедляют окислительные процессы в полимерном материале при производстве, использовании и хранении упаковки; в установленных случаях защищают полимерный материал от воздействия агрессивных сред. Пластификаторы придают эластичность материалу, облегчают обработку, повышают устойчивость упаковки к воздействию низких температур. Модификаторы ударной прочности обеспечивают компенсацию внешней нагрузки на полимер. Смазывающие вещества применяются для снижения липкости, предотвращения прилипания полимеров к рабочим поверхностям оборудования. Антиблокирующие вещества (антиблокинги) препятствуют слипанию поверхностей при производстве полимерных пленок. Минеральные наполнители применяют для снижения усадки, остаточных напряжений и склонности к растрескиванию, а также повышения прочностных характеристик полимеров.

Выбор добавки с необходимыми функциональными свойствами зависит от назначения полимерного материала. Антиоксиданты, антиблокирующие добавки, модификаторы, пластификаторы могут быть добавлены, например, в упаковочный материал, предназначенный для лекарственных препаратов для парентерального, офтальмологического применения, а антистатики и антиадгезивы используют только в составе полимеров для упаковки, предназначенной для лекарственных препаратов для приёма внутрь или наружного применения.

С учетом параметров безопасности при использовании в фармацевтической практике, должны быть установлены допустимые нормы для контроля, идентификации или квалификации каждой добавки и, в случае присутствия в конечном упаковочном материале или готовой упаковке, её примесей. Необходимо учитывать максимально возможное неблагоприятное воздействие добавок и их примесей при вымывании, выщелачивании их в содержимое упаковки с лекарственным средством, а также воздействие образовавшегося продукта загрязнения.

Полимерный упаковочный материал должен содержать не более установленного минимального количества добавок в самой низкой эффективной концентрации для предполагаемого использования и для обеспечения стабильности и качества конечного упаковочного материала, готовой упаковки или элемента упаковки.

Перечень и количественное содержание добавок, вводимых в полимерные материалы, регламентируется в зависимости от вида упаковочного материала и классификационных признаков лекарственной формы лекарственного препарата. Нормативные требования к содержанию некоторых добавок в упаковочных материалах на основе отдельных полимеров (полиэтилена, полипропилена, поливинилхлорида, полиэтилентерефталата и др.), а также методы и методики их определения, указаны в соответствующих общих фармакопейных статьях.

Общие требования к упаковочным материалам и упаковке из полимерных материалов для фармацевтического применения установлены ОФС «Упаковка лекарственных средств», ОФС «Упаковка и укупорочные средства из полимерных материалов для фармацевтического применения».

###### Перечень добавок

Приведена информация по наименованиям и формулам веществ, используемых в виде добавок к полимерным упаковочным материалам.

Наименование соединения, применяемого в виде добавки, приведено в соответствии с правилами IUPAC. Синоним, выделенный полужирным шрифтом, соответствует названию добавки, используемому в текстах общих фармакопейных статей на упаковочные материалы на основе полимеров. Также приведен синоним вещества в соответствии с правилами номенклатуры химических соединений Химической реферативной службы (CAS). Иногда добавку к полимерным материалам указывают согласно порядковому номеру, например, добавка 01.

Добавка 01. [117-81-7]. C24H38O4.

Бис[(2RS)-2-этилгексил](бензол-1,2-дикарбоксилат).

Синонимы:

- ди(2-этилгексил)фталат;

- бис-2-этилгексиловый эфир 1,2-бензолдикарбоновой кислоты;

- DEHP.

Добавка 02. [136-53-8]. C16H30O4Zn.

Бис[(2RS)-2-этилгексаноат] цинка.

Синонимы:

- цинка октаноат;

- гексановая кислота, 2-этил, соль цинка (2:1);

- 2-этилкапроат цинка.

Добавка 03. [05518-18-3]/[00110-30-5].

N,N'-(этан-1,2-диил)диалканамид (с n и m =14 или 16).

Синонимы:

- N,N'-диацилэтилендиамины;

- N, N'-диацилэтилендиамин (в данном контексте ацил означает, в частности, пальмитоил и стеароил).

Добавка 04. [8013-07-8].

Эпоксидированное соевое масло.

Добавка 05. [8016-11-3].

Эпоксидированное льняное масло.

Добавка 06. [57455-37-5] (TSCA) / [101357-30-6] (EINECS)/Пигмент синий 29 (CI 77007).

Ультрамарин синий.

Добавка 07. [128-37-0]. C15H24O.

2,6-ди(трет-бутил)-4-метилфенол.

Синонимы:

- бутилгидрокситолуол,

- фенол, 2,6-бис(1,1-диметилэтил)-4 метил-;

- 2,6-бис(1,1-диметилэтил)-4-метилфенол.

Добавка 08. C50H66O8. [32509-66-3].

(Этан-1,2-диил)бис[3,3-бис(3-трет-бутил-4-гидроксифенил)бутаноат].

Синонимы:

- этилен-бис[3,3-бис[3-(1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]бутаноат];

- бензолпропановая кислота, 3-(1,1-диметилэтил)-β-[3-(1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]-4-гидрокси-β-метил-, 1,1′-(1,2-этандиил) сложный эфир;

- этилен-бис [3,3-бис(3-трет-бутил-4-гидроксифенил) бутират].

Добавка 09. [6683-19-8]. C73H108O12.

{2,2-бис[({3-[3,5-ди(трет-бутил)-4-гидроксифенил]пропаноил}окси)метил]пропан-1,3-диил}бис{3-[3,5-ди(трет-бутил)-4-гидроксифенил]пропаноат}.

Синонимы:

- пентаэритритил тетракис[3-(3,5-ди- трет- бутил-4-гидроксифенил)пропионат];

- бензолпропановая кислота, 3,5-бис(1,1-диметилэтил)-4-гидрокси-, 1,1'-[2,2-бис[[3-[3,5-бис(1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]-1-оксопропокси]метил]-1,3-пропандиил] эфир;

- 2,2-бис[[[3-[3,5-бис(1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]пропаноил]окси]метил]пропан-1,3-диил 3-[3,5-бис(1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]пропионат,

- 2,2-бис(гидроксиметил)пропан-1,3-диол тетракис[3-(3,5-ди- трет- бутил-4-гидроксифенил)пропионат]. |

Добавка 10. [1709-70-2]. C54H78O3.

4,4′,4″-[(2,4,6-триметилбензол-1,3,5-триил)трис(метилен)]трис(2,6-ди-трет-бутилфенол).

Синонимы:

- 2,2',2",6,6',6"-гексa- трет - бутил-4,4',4"-[(2,4,6-триметил-1,3,5-бензолтриил)трисметилен]трифенола;

- фенол, 4,4',4''-[(2,4,6-триметил-1,3,5-бензолтриил)трис(метилен)]трис[2,6-бис(1,1-диметилэтил)-;

- 1,3,5-трис[3,5-ди- трет- бутил-4-гидроксибензил]-2,4,6-триметилбензол.

Добавка 11. [2082-79-3]. C35H62O3.

Октадецил {3-[3,5-ди(трет-бутил)-4-гидроксифенил]пропаноат}.

Cинонимы:

- октадецил-3-(3,5-ди- трет- бутил-4-гидроксифенил)пропионат;

- бензолпропановой кислоты, 3,5-бис(1,1-диметилэтил)-4-гидрокси-, октадецилового эфира.

Добавка 12. [31570-04-4]. C42H63O3P.

Трис[2,4-ди(трет-бутил)фенил]фосфит.

Синонимы:

- трис(2,4-ди- трет- бутилфенил) фосфит;

- фенол, 2,4-бис (1,1-диметилэтил)-,1,1′,1′′ - фосфит;

- 2,4-бис(1,1-диметилэтил)фенил, фосфит.

Добавка 13. [27676-62-6]. C48H69N3O6.

1,3,5-трис{[3,5-ди(трет-бутил)-4-гидроксифенил]метил}-1,3,5-триазаин-2,4,6(1Н,3Н,5Н)-трион.

Синонимы:

- 1,3,5-трис(3,5-ди - трет - бутил-4-гидроксибензил)-с -триазин-2,4,6- (1Н,3Н,5Н)-трион;

- 1,3,5-триазин-2,4,6(1Н, 3Н, 5Н)-трион, 1,3,5-трис[[3,5-бис(1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]метил]-.

Добавка 14. [3806-34-6]. C41H82O6P2.

3,9-бис (октадецилоксите) -2,4,8,10-тетраокс-3,9-дифосфаспиро [5,5] ундекан.

Синонимы:

- 2,2'-бис(октадецилокси)-5,5'-спироби[1,3,2-диоксафосфинан];

- 2,4,8,10-тетраокса-3,9-дифосфаспиро[5.5]ундекан,3,9-бис(октадецилокси).

Добавка 15. [2500-88-1]. С36Н74S2.

(Oктадецилдисульфанил) октадекан.

Cинонимы:

- диоктадецилдисульфид;

- октадекан,1,1'-дитио-.

Добавка 16. [123-28-4]. С30Н58О4С.

Дидодецил(3,3'-сульфандиилдипропаноат).

Cинонимы:

- дидодецил 3,3'-тиодипропионат,

- пропановая кислота, 3,3'-тиобис-, 1,1'-дидодециловый эфир,

- лаурилтиодипропионат.

Добавка 17. [693-36-7]. C42H82O4S.

Диоктадецил(3,3'-сульфандиилдипропаноат).

Cинонимы:

- диоктадецил 3,3'-тиодипропионат,

- пропановая кислота, 3,3'-тиобис-,1,1'-диоктадециловый эфир,

- стеарил тиодипропионат.

Добавка 18. [119345-01-6].

Смесь 7 продуктов, соответствующих продукту реакции ди- трет- бутилфосфонита с трихлоридом фосфора, продуктов реакции с 1,1'-бифенилом и 2,4-ди- трет- бутилфенолом.

компонент I.
тетракис[2,4-ди(трет-бутил)фенил]([1,1′-бифенил]-4,4′-диил)бис(фосфонит)

компонент II.
тетракис[2,4-ди(трет-бутил)фенил]([1,1'-бифенил]-3,4′-диил)бис(фосфонит)

компонент III
тетракис[2,4-ди(трет-бутил)фенил]([1,1'-бифенил]-3,3'-диил)бис(фосфонит)

компонент IV
бис[2,4-ди(трет-бутил)фенил]([1,1'-бифенил]-4-ил)фосфонит

компонент V.
трис[2,4-ди(трет-бутил)фенил]фосфит

компонент VI.
бис[2,4-ди(трет-бутил)фенил]4'-[бис(2,4-ди(трет-бутил)фенокси)фосфанил]([1,1'-бифенил]-4-ил)фосфонат

компонент VII
Р-ОН: 2,4-ди(трет-бутил)фенол

Добавка 19. [57-11-4]. C18H36O2.

Октадекановая кислота.

Cинонимы:

- стеариновая кислота.

Добавка 20. [301-02-01]. C18H35NO.

(9 Z)-октадек-9-енамид.

Cинонимы:

- олеамид;

- 9-октадеценамид, (9 Z)-;

- 9-_цис-_олеамид.

Добавка 21. [112-84-5]. C22H43NO.

(13 Z ) -докос-13-енамид.

Cинонимы:

- эрукамид;

- 13-докозенамид, (13 Z)13-докозенамид, (13 Z); -13- цис- докосенамид.

Добавка 22. [65447-77-0].

Сополимер диметилбутандиоата и 1-(2-гидроксиэтил) -2,2,6,6-тетраметилпиперидин-4-ола.

Cинонимы:

- сополимер диметилсукцината и (4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-ил) этанола;

- бутандиовая кислота, 1,4-диметиловый эфир, полимер с 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметил-1-пиперидинэтанолом.

Добавка 23.

Cмесь компонента I и около 27 процентов компонента II.

компонент I. [26401-97-8].
Бис[(2 RS)-2-этилгексил][(диоктилстаннантриил)бис(сульфандиил)] диацетат.

Cинонимы:

- ди(изооктил) 2,2'-[(диоктилстаннилен)бис(тио)]диацетат;

- уксусная кислота, 2,2'-[(диоктилстаннилен)бис(тио)]бис-,1,1'-диизооктиловый эфир.

компонент II. [26401-86-5].
Трис [(2 RS)-2-этилгексил] [(октилстаннантриил) трис(сульфандиил)] триацетат.

Cинонимы:

- три(изооктил)2,2',2''-[(монооктилстаннилидин)трис(тио)]триацетат;

- уксусная кислота, 2,2′,2′′-[(октилстаннилидин)трис(тио)]трис-,1,1',1''-триизооктиловый эфир.

Добавка 24. [166412-78-8]. С26Н48О4.

Смесь изомеров конституционных диизононил (1 £, 2 Ξ) циклогексан-1,2-дикарбоксилат.

Cинонимы:

- циклогексан 1,2-дикарбоновая кислота, диизонониловый эфир;

- 1,2-циклогександикарбоновая кислота, 1,2-диизонониловый эфир.

Добавка 25. [82469-79-2]. C28H50O8.

Тригексил 2-(бутаноилокси) пропан-1,2,3-трикарбоксилат.

Cинонимы:

- бутирил три- н -гексил цитрат;

- 1,2,3-пропантрикарбоновая кислота,2-(1-оксобутокси)-,1,2,3-тригексиловый эфир.

Добавка 26. [3319-31-1]. C33H54O6.

Трис [(2 RS)-2-этилгексил]бензол-1,2,4-трикарбоксилат.

Cинонимы:

- трис(2-этилгексил) тримеллитат;

- 1,2,4-бензентрикарбоновая кислота, 1,2,4-трис(2-этилгексил)эфиртрикарбоксилат.

Добавка 27. [6422-86-2]. C24H38O4.

Бис [(2 RS)-2-этилгексил]бензол-1,4-дикарбоксилат.

Cинонимы:

- бис(2-этилгексил) терефталат;

- 1,4-бензолдикарбоновая кислота;

- 1,4-бис(2-этилгексил) сложный эфир.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0006 Упаковка для фармацевтического применения из стекла

Вводится впервые

Упаковка для фармацевтического применения из стекла (далее – упаковка из стекла) представляет собой изделие из стекла медицинского, содержащее или предназначенное для содержания лекарственного средства, гарантирующее сохранение его качества в течение установленного срока годности (хранения), обеспечивающее защиту лекарственного средства от повреждений и потерь, а также предохраняющее окружающую среду от загрязнений. Упаковка из стекла, как правило, находится в непосредственном контакте с лекарственным средством, так как стекло медицинское используют для производства основного элемента системы упаковки – тары стеклянной.

Упаковка из стекла является выбором для многих лекарственных препаратов в виде лекарственных форм различного агрегатного состояния (жидких, твердых, мягких), способа/пути введения и применения, включая лекарственные формы для парентерального, офтальмологического применения, радиофармацевтические, биологические лекарственные препараты и др.

###### Особенности технологии

Упаковка из стекла обладает высокой химической, термической устойчивостью, допускает возможность проведения стерилизации лекарственных средств, может быть герметично укупорена или запаяна, может быть использована для упаковки агрессивных веществ, может обеспечивать сохранность скоропортящихся веществ и т.д. Упаковку из стекла характеризует разнообразие форм и размеров, вместимость её варьирует от нескольких миллилитров до 20 и более литров. Если необходимо, упаковка из стекла может быть прозрачной, обеспечивающей визуальный контроль лекарственных средств, или окрашенной для защиты от действия света.

Упаковку из стекла получают из расплавленной стекломассы различными методами: выдувания, литья, прессования, проката. Стеклянную тару (для бутылок, флаконов, банок) вырабатывают на выдувных автоматах, полуавтоматах или ручным способом непосредственно из стекломассы. Ампулы, картриджи, флаконы небольшого объёма производят из дрота медицинского (стеклянных трубок) определённого диаметра, предварительно полученного из стекломассы.

Стекло медицинское состоит из расплавленной смеси силикатов, оксидов металлов и солей. Основной компонент стекла медицинского – кремния диоксид, имеющий температуру плавления более 1700 °С. Для придания стеклу медицинскому необходимых характеристик используют различные добавки. Для понижения температуры плавления стекломассы (что необходимо при запаивании ампул) добавляют оксиды натрия, калия, но их введение резко уменьшает химическую устойчивость стекла. Повышения химической устойчивости стекломассы достигают введением оксидов алюминия, бора, кальция. Добавление в состав стекломассы оксидов магния в значительной мере увеличивает термическую устойчивость. Регулирование содержания оксидов бора, алюминия и магния повышает ударную прочность и снижает хрупкость стекла.

Светозащитное окрашенное стекло получают при добавлении небольших количеств оксидов металлов, например, оксидов железа, марганца, выбранных в соответствии с желаемой спектральной оптической плотностью упаковки. Бесцветное стекло имеет высокую светонепроницаемость в видимой области спектра.

Для производства упаковки из стекла применяют стекло медицинское различных марок, отличающихся химическим составом и физико-химическими свойствами. Нейтральное стекло, которое характеризует высокая гидролитическая и термическая устойчивость, представляет собой боросиликатное стекло, содержащее значительное количество оксидов: бора, алюминия, щелочных и/или щелочноземельных металлов. Силикатное стекло, имеющее среднюю гидролитическую устойчивость, – это стекло на основе кремния диоксида, содержащее оксиды щелочных и щелочноземельных металлов, в основном натрия оксид и кальция оксид. Характеристика марок стекла медицинского и номенклатура производимой в Российской Федерации упаковки для фармацевтического применения из стекла медицинского, приведены в ОФС «Упаковка лекарственных средств» (раздел «Упаковочные материалы. Стекло»).

Внешняя и внутренняя поверхность упаковки из стекла может быть специально обработана. Внутреннюю поверхность упаковки из стекла обрабатывают для повышения гидролитической устойчивости, придания водоотталкивающих свойств, внешнюю – для повышения устойчивости к истиранию, снижению трения, увеличению абразивной устойчивости. Обработку внешней поверхности упаковки из стекла проводят таким образом, чтобы не затрагивать внутреннюю. Для защиты от действия света упаковка из стекла может быть покрыта защитным слоем.

Внутренняя поверхность упаковки из стекла может подвергаться расслаиванию – отделению стекла тонкими слоями, чешуйками. На расслоение стекла может оказывать влияние процесс производства упаковки из стекла в стрессовых условиях (воздействие высокой температуры в течение продолжительного времени), химическая обработка внутренней поверхности упаковки. Расслоение стекла может произойти в результате химического воздействия, называемого коррозией стекла, происходящим в соответствии с хорошо известными механизмами, такими как растворение, вызванное гидролизом и ионным обменом (выщелачиванием) в зависимости от рН. Склонность стекла к расслоению увеличивают лекарственные препараты, содержащие разрушающие стекло буферные компоненты, такие как цитраты, фосфаты, а также особенности технологического процесса производства лекарственных препаратов в упаковке из стекла: финишная стерилизация, операции, проводимые на линии заполнения и др.

При контакте внутренней поверхности упаковки из стекла с содержимым, в зависимости от марки стекла, значения рН среды и других факторов, могут происходить процессы растворения или выщелачивания. При растворении в содержимое упаковки переходят компоненты стекла в тех же соотношениях, что и в стекле; выщелачивание преимущественно подразумевает выход из стекла оксидов щелочных и щелочноземельных металлов. Взаимодействие между внутренней поверхностью упаковки из стекла и лекарственным препаратом может иметь отсроченный период, результат расслоения может быть заметен только через несколько месяцев после заполнения упаковки из стекла содержимым.

Подверженность упаковки из стекла к расслоению, растворению, выщелачиванию должна быть оценена и классифицирована при изучении стабильности лекарственных средств, помещенных в упаковку из стекла, в соответствии с ОФС «Стабильность и сроки годности лекарственных средств». Рекомендуется оценивать совместимость используемой упаковки из стекла и лекарственного препарата, учитывая лекарственную форму, свойства фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ, входящих в состав лекарственного препарата, марку стекла. Данные, полученные при ускоренных и/или стрессовых испытаниях стабильности, проводимых при предписанных температурах в течение короткого промежутка времени, могут быть использованы в качестве элемента прогнозирования и для выбора наиболее подходящей упаковки для конкретного лекарственного препарата. П олную совместимость состава лекарственного препарата и упаковки из стекла оценивают только путем изучения стабильности при долгосрочных испытаниях, проводимых в заявленных условиях хранения в течение предполагаемого срока годности (хранения).

Упаковка, выбранная для конкретного лекарственного средства, должна быть изготовлена из стекла, не выделяющего вещества в количествах, влияющих на стабильность лекарственного средства или обладающих токсичным действием. В обоснованных случаях может быть необходима детальная информация о составе стекла для оценки влияния упаковки на качество её содержимого, например, при длительном применении лекарственного препарата пациентами и/или определёнными группами пациентов, при использовании упаковки из стекла для лекарственных препаратов для парентерального, офтальмологического применения.

Лекарственные препараты для парентерального применения, как правило, выпускают в упаковках из бесцветного стекла, но для светочувствительных препаратов целесообразнее использование упаковки из окрашенного светозащитного стекла. Рекомендуется, чтобы все упаковки из стекла для жидких лекарственных препаратов и порошков для парентерального применения позволяли проводить визуальный контроль содержимого упаковок.

Основные параметры и размеры, геометрические допуски, косметические дефекты, номинальная и/или полная вместимость и другие характеристики упаковки из стекла должны соответствовать требованиям к конкретному типу и виду упаковки из стекла.

Общие требования к упаковке лекарственных средств приведены в ОФС «Упаковка лекарственных средств» и ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

###### Классификация

Упаковка из стекла относится к первичной (внутренней) упаковке, так как находится в непосредственном физическом контакте с лекарственным средством.

По способу производства упаковку из стекла классифицируют на упаковку, полученную непосредственно из стекломассы (формованная упаковка, например, бутылки, флаконы, банки, бутыли) и упаковку, полученную из дрота медицинского (трубчатая упаковка, например, ампулы, картриджи, пробирки, флаконы небольшого объема). Полученная упаковка различается по типу (материалу, конструкции), виду (форме) и другим классификационным признакам, применимым к упаковке из стекла и указанным в ОФС «Упаковка лекарственных средств» (раздел «Классификация»).

В зависимости от качества, состава стекла для производства упаковки, определяющего значение гидролитической устойчивости, различают упаковку из стекла типа I, упаковку из стекла типа II и упаковку из стекла типа III. Характеристика упаковки из стекла трех указанных типов, а также рекомендации по её использованию для лекарственных препаратов, приведены в ОФС «Гидролитическая стабильность упаковки из стекла».

Система упаковки/укупорки из стекла может иметь укупорочное средство (укупоренная упаковка) или укупорочное средство может отсутствовать (герметично запаянная упаковка). Различают укупорочные средства, которое во время применения лекарственного препарата не требует удаления, например, пробка из эластомерного материала, которая может быть проткнута иглой для взятия лекарственного препарата, и укупорочные средства, от которых во время применения лекарственного препарата упаковка должна быть освобождена.

###### Испытания

Герметичность. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение герметичности упаковки» методами, применимыми к упаковке из стекла.

Гидролитическая устойчивость. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Гидролитическая стабильность упаковки из стекла» с целью контроля и определения типа стекла (I, II или III). Если упаковка из стекла имеет детали, изготовленные из другого материала, то испытание проводят только на стеклянных частях упаковки.

Мышьяк

Не более 0,00001 %. Испытание проводят для упаковок из стекла, предназначенных для водных лекарственных препаратов для парентерального применения.

Испытание проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии с использованием приставки для образования гидрида мышьяка в соответствии с ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия» (Метод 1 – метод калибровочной кривой).

Пробоподготовка. Используют экстракционный водный раствор, полученный после заполнения водой и автоклавирования при 121 °С в течение 1 часа упаковок из стекла типа I или упаковок из стекла типа II в условиях, указанных в ОФС «Гидролитическая стабильность упаковки из стекла» (Метод А. Гидролитическая устойчивость внутренних поверхностей упаковок из стекла (испытание поверхности)).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл экстракционного раствора подготовленного образца, прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и 5 мл калия йодида раствора 20 %, выдерживают на водяной бане при температуре 80 °С в течение 20 мин, охлаждают при комнатной температуре и доводят объём раствора водой до метки.

Калибровочные растворы. Готовят не менее трёх калибровочных растворов, содержащих мышьяк в диапазоне концентраций от 0,005 мкг/мл до 0,015 мкг/мл, с использованием мышьяка стандартного раствора 1 мкг/мл.

Например, в три мерные колбы вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл, 1,0 мл и 1,5 мл мышьяка стандартного раствора 1 мкг/мл. В каждую колбу прибавляют по 10 мл хлористоводородной кислоты и 5 мл калия йодида раствора 20 %, выдерживают на водяной бане при температуре 80 °С в течение 20 мин, охлаждают при комнатной температуре и доводят объём раствора в каждой колбе водой до метки.

Кислотный реактив. Хлористоводородная кислота концентрированная.

Восстанавливающий реактив. Натрия тетрагидробората восстанавливающий раствор.

Используют устройство для получения гидрида мышьяка, который вносят в кювету атомно-абсорбционного спектрометра. Устанавливают и стандартизуют инструментальные и эксплуатационные режимы согласно инструкциям по эксплуатации прибора, настраивают скорость перистальтического насоса, затем присоединяют трубки к резервуарам с кислотным реактивом, восстанавливающим реактивом и испытуемым раствором.

Условия испытания

- Источник излучения: лампа с полым мышьяковым катодом;

- Длина волны: 193,7 нм;

- Атомизация: пламя;

- Состав горючего газа: ацетилен – воздух.

Измеряют поглощение испытуемого раствора и калибровочных растворов. Строят калибровочную кривую зависимости средних результатов измерений, полученных для калибровочных растворов, от их концентрации. Содержание мышьяка в испытуемом растворе определяют по калибровочному графику.

Светопропускание

Испытание проводят для упаковки из стекла нейтрального светозащитного (окрашенного) методом спектрофотометрии в ультрафиолетовой и видимой областях (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Оборудование. Спектрофотометр, снабженный фотодиодным детектором или двухсторонним фотоэлектронным умножителем в сочетании с интегрирующей сферой.

Пробоподготовка. Упаковку из стекла (стеклянную тару) разбивают или разрезают циркуляционной пилой с диском для влажного абразивного шлифования, например, карборундовым или металлизированным алмазным диском. Выбирают или вырезают образец из цилиндрической части стеклянной тары, репрезентативный по толщине стенки, и подрезают, если необходимо, по размерам ячейки спектрофотометра. Если образец настолько мал, что не может заполнить держатель для образца в спектрофотометре, то незаполненную часть образца закрывают непрозрачной бумагой или лентой, таким образом, чтобы ширина образца была больше, чем ширина щели.

Образец перед помещением в держатель промывают, высушивают. Не должно быть царапин на поверхности образца. Закрепляют образец в держателе спектрофотометра с помощью липкого воска или другими подходящими способами, аккуратно, чтобы не оставить на образце следов пальцев или других следов. Перед измерением поверхности образца должны быть тщательно вытерты тканью для протирания линз.

Методика. Чистый образец помещают в спектрофотометр таким образом, чтобы его цилиндрическая ось была параллельна плоскости щели, луч света был перпендикулярным к измеряемой поверхности стекла, и потери из-за отражения были минимальны. Измеряют светопропускание образца относительно воздуха в диапазоне длин волн от 290 нм до 450 нм непрерывно с интервалами 20 нм.

Результат. Для упаковки из нейтрального светозащитного (окрашенного) стекла для лекарственных препаратов, не предназначенных для парентерального применения, светопропускание не должно превышать 10 % при любой длине волны в диапазоне длин волн от 290 нм до 450 нм, независимо от типа и объёма упаковки из стекла.

Для упаковки из нейтрального светозащитного (окрашенного) стекла для лекарственных препаратов, предназначенных для парентерального применения, светопропускание не должно превышать допустимые пределы, указанные в табл. 1.

Таблица 1. Допустимые пределы светопропускания для упаковки из нейтрального светозащитного (окрашенного) стекла, предназначенной для лекарственных препаратов для парентерального применения
Номинальный объем, мл | Максимальное светопропускание при любой длине волны в диапазоне от 290 нм до 450 нм, в %
--- | ---
Запаянная упаковка | Укупоренная упаковка
До 1 | 50 | 25
От 1 до 2 | 45 | 20
От 2 до 5 | 40 | 15
От 5 до 10 | 35 | 13
От 10 до 20 | 30 | 12
От 20 до 50 | 25 | 10
Свыше 50 | 15 | 10

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0007 Упаковка и укупорочные средства из полимерных материалов для фармацевтического применения

Вводится впервые

Упаковка из полимерных материалов для фармацевтического применения представляет собой средство или комплекс средств, полученных из полимерных материалов, содержащих или предназначенных для содержания, защиты, сохранности лекарственных средств в процессе обращения (хранения, транспортирования, реализации). Укупорочное средство является частью упаковки.

Общие требования к упаковке лекарственных средств приведены в ОФС «Упаковка лекарственных средств», ОФС «Маркировка лекарственных средств», ОФС «Перевозка лекарственных средств», ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов» и ОФС «Стерилизация».

Полимерные материалы широко применяют для производства основного элемента упаковки – тары, а также для производства других компонентов упаковки – укупорочных средств, средств дозирования, средств доставки лекарственного препарата, защитных и герметизирующих приспособлений и т.д. Упаковка из полимерных материалов может быть контактирующей с лекарственным средством (первичная, внутренняя упаковка) или представлять собой внешнюю упаковку, не контактирующую с содержимым лекарственного средства.

Упаковка из полимерных материалов является выбором для многих лекарственных препаратов различного фармакологического действия, содержащих действующие вещества различного происхождения, в том числе препараты из крови человека, для лекарственных препаратов, выпускаемых в лекарственных формах, имеющих различное агрегатное состояние, различный способ/пути введения и применения, в том числе лекарственные формы высокого риска, предназначенные для парентерального, офтальмологического, ингаляционного применения.

К достоинствам упаковки из полимерных материалов относят долговечность, механическую прочность, легкость, гибкость, химическую и термическую устойчивость, низкую теплопроводность, высокую технологичность, низкую хрупкость, возможность проведения стерилизации лекарственных средств, возможность герметичной укупорки или запайки, возможность повторной переработки. Упаковка из полимерных материалов может быть прозрачной, обеспечивающей визуальный контроль лекарственных средств, или окрашенной для защиты от действия света.

Методы анализа и нормы по показателям качества приведены в соответствующих ОФС на упаковочные материалы, полученные на основе полиэтилена с добавками и без добавок, полипропилена, поликарбонатов, полиолефинов, полиэтилентерефталатов, полиэтиленвинилацетата, полиамида 6, полиэтиленвинилацетата, непластифицированного поливинилхлорида, пластифицированного поливинилхлорида. Так как разработки новых упаковочных материалов проводят постоянно, то представленный перечень синтетических полимеров не является исчерпывающим.

В фармацевтической практике используют как нестабилизированные полимерные материалы (базовые), так и стабилизированные, представляющие собой композиции базовых материалов с добавками (наполнителями) (ОФС «Добавки к полимерным материалам для фармацевтического применения»), необходимыми для придания упаковке определённых свойств, предотвращения старения и обеспечения условий хранения в течение установленного срока годности и др. По функциональным свойствам добавки, используемые для производства упаковки, представляют собой антиоксиданты, стабилизаторы, пластификаторы, смазывающие вещества, красители, модификаторы ударной прочности. Антистатики и антиадгезивы могут использоваться только в составе полимеров для упаковки, предназначенной для лекарственных препаратов для приёма внутрь или наружного применения. Выбор необходимой добавки и её количества зависит от типа полимера.

Полимерная упаковка, выбранная для любого конкретного лекарственного средства, должна соответствовать следующим требованиям:

- компоненты лекарственного средства, находящиеся в соприкосновении с полимерным материалом, не должны в значительной мере адсорбироваться его поверхностью и существенно мигрировать внутрь полимера или сквозь него;

- полимерный материал не должен выделять в содержимое упаковки никаких веществ в таком количестве, которое оказывало бы воздействие на эффективность или стабильность лекарственного средства или могло быть потенциально опасным с точки зрения токсичности.

Используя один или несколько материалов, выбранных в соответствии с этими критериями, изготавливают ряд образцов упаковки идентичного типа (типовые образцы) в соответствии с чётко определенным процессом и подвергают практическим испытаниям в условиях, которые воспроизводят условия предполагаемого использования, включая, при необходимости, стерилизацию. Для того, чтобы подтвердить совместимость упаковки и его содержимого и убедиться в отсутствии изменений, отрицательно влияющих на качество лекарственного средства, проводят различные испытания, такие как контроль отсутствия изменений физических характеристик, оценка каких-либо потерь или прироста содержимого упаковки из-за проницаемости упаковки, определение изменения рН, оценка изменений, вызванных влиянием света, химические испытания и при необходимости биологические испытания.

Метод производства должен гарантировать возможность его воспроизводства при последующем производстве в больших объёмах, а условия производства подбирают таким образом, чтобы воспрепятствовать возможности загрязнения другими полимерными материалами или их ингредиентами. Изготовитель должен гарантировать, что упаковки промышленного производства по всем показателям идентичны типовым образцам.

Для достоверности результатов испытаний образцов важно, чтобы:

- не было изменений в составе материала, указанного для типовых образцов;

- не было изменений в производственном процессе, указанном для типовых образцов, особенно температуры в процессе переработки материала или в ходе последующих процедур, таких как стерилизация;

- не использовался материал из отходов или брака.

При условии удовлетворительных испытаний на совместимость для каждой комбинации упаковки и её содержимого, материалы, описанные в Фармакопее, считаются пригодными для предполагаемого использования.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0008 Определение паропроницаемости упаковки из полимерных материалов для лекарственных препаратов для приёма внутрь

Вводится впервые

Для определения паропроницаемости систем упаковки из полимерных материалов, предназначенной для лекарственных препаратов для приёма внутрь в виде твёрдых и жидких лекарственных форм, применяют методы с использованием осушителя (метод 1) и с использованием воды (метод 2).

Упаковочные материалы на основе полимеров, как правило, обладают свойством проницаемости, т.е. возможностью прохождения газа или жидкости через их непористую стенку. Проницаемость полученных систем упаковки из полимерных материалов различается по количеству (объёму) проникающих газов и/или паров жидкостей, а также по времени их проникновения через барьерные стенки упаковки. Проникающий газ по своему составу различается в зависимости от свойств полимерного упаковочного материала, так как некоторые полимеры более проницаемы, например, для кислорода воздуха, другие ‒ для паров воды, жидкостей и т.п.

Таким образом, проницаемость полимерных материалов определяет различие функциональных (барьерных, защитных, сохранение содержимого и др.) свойств систем упаковки, полученных на их основе, оказывая значительное влияние на стабильность лекарственного средства, помещённого в такую систему упаковки.

Для оценки проницаемости (или непроницаемости) систем упаковки из полимерных материалов для лекарственных средств при фармацевтической разработке и изучении стабильности лекарственных средств могут быть проведены испытания функциональных свойств упаковки.

Частным случаем проницаемости системы упаковки из полимерных материалов является паропроницаемость, то есть её способность пропускать водяной пар через непористые стенки. Проникновение водяных паров через систему упаковки из полимерных материалов, которое может происходить при обращении лекарственного средства (хранении, транспортировании, реализации, применении и т.д.), приводит к несоответствию количественного содержания действующих веществ лекарственного препарата, появлению продуктов разложения и других признаков нестабильности лекарственного средства.

Оценка паропроницаемости систем упаковки из полимерных материалов методами, приведёнными в настоящей общей фармакопейной статье, не заменяет требования по изучению стабильности лекарственных препаратов в виде твёрдых и жидких лекарственных форм в испытуемых системах упаковки, указанные в ОФС «Стабильность и сроки годности лекарственных средств».

Общие требования к системам упаковки из полимерных материалов для лекарственных средств, а также определения и термины, используемые в настоящей общей фармакопейной статье, приведены в ОФС «Упаковка лекарственных средств», ОФС «Упаковка и укупорочные средства из полимерных материалов для фармацевтического применения».

###### Термины и определения

Паропроницаемость системы упаковки характеризуют по скорости проницаемости водяного пара через её барьерные стенки.

Скорость проницаемости водяного пара системы упаковки ‒ это количество водяного пара, проникающего в течение установленного времени при равновесном состоянии через испытуемую единицу системы упаковки при заданных параметрах температуры и относительной влажности.

На основании полученных значений скорости проницаемости водяного пара оценивают влагозащитные свойства различных систем упаковки и полученные данные используют при выборе системы упаковки с необходимыми параметрами паропроницаемости, или параметрами непроницаемости для водяного пара, для конкретного состава лекарственного препарата, выпускаемого в виде твёрдой или жидкой лекарственной формы для приёма внутрь.

Испытуемым образцом многодозовой системы упаковки является флакон, бутылка, банка и т.п., или все ячейки многодозовой контурной ячейковой упаковки. Испытуемым образцом однодозовой контурной ячейковой упаковки является одна ячейка.

Единица измерения скорости проницаемости водяного пара системы многодозовой упаковки: мг/24 ч/испытуемый образец. Для многодозовой упаковки в виде флакона, бутылки, банки вместо испытуемого образца в расчётах может быть использован объём упаковки в литрах, в этом случае единица измерения: мг/24 ч/л.

Единица измерения скорости проницаемости водяного пара системы однодозовой контурной ячейковой упаковки: мг/24 ч/ячейка. Аналогичная единица измерения может быть использована и для многодозовой контурной ячейковой упаковки с учётом количества ячеек в упаковке.

Методы определения скорости проницаемости водяного пара в системах упаковки из полимерных материалов предполагают проведение гравиметрических измерений. Для взвешивания используют аналитические весы, имеющие метрологические характеристики, позволяющие измерять небольшие различия массы в разных временных точках, погрешность взвешивания весов должна быть, как правило, не более ±0,0001 г.

Осушители (влагопоглотители). В качестве осушителей при проведении испытания используют кальция хлорид безводный, молекулярные сита, силикагель, которые должны соответствовать установленным требованиям по содержанию влаги. Перед использованием осушители предварительно высушивают.

Примечание 1 – Применяемые методы определения скорости проницаемости водяного пара предполагают скорее не классификацию упаковки, а присвоение системам упаковки определённого значения паропроницаемости, чтобы различать системы упаковки с разной непроницаемостью для влаги с целью дальнейшего их надлежащего использования. Принято, если при проведении испытания запечатанной (запаянной) контурной ячейковой упаковки в условиях температуры от 38 до 42 °С и относительной влажности от 70 до 80 %, скорость проницаемости водяного пара:

- выше 1 мг/24 ч/ячейка, то это контурная ячейковая упаковка с низкой непроницаемостью водяного пара;

- ниже 1 мг/24 ч/ячейка, но выше 0,01 мг/24 ч/ячейка, то это контурная ячейковая упаковка с высокой непроницаемостью водяного пара;

- ниже 0,01 мг/24 ч/ячейка, то это контурная ячейковая упаковка с ультравысокой непроницаемостью водяного пара.

При проведении испытания любым методом и по любой методике вместе с рассчитанными результатами скорости проницаемости водяного пара описывают испытуемую систему упаковки (с указанием используемого полимерного материала, формы, размера, цвета упаковки и всех её элементов ‒ средств укупорки, герметизирующих и элементов контроля первого вскрытия и т.п.) для дальнейшего выбора упаковки с необходимыми влагозащитными свойствами, а также для сравнения систем упаковки по паропроницаемости и возможности выбора эквивалентных по скорости проницаемости водяного пара систем упаковки.

###### Метод 1

Определение скорости проницаемости водяного пара системы упаковки из полимерного материала методом с использованием осушителя основано на измерении увеличения массы осушителя, находящегося внутри испытуемой системы упаковки, помещенной в климатическую камеру, которая обеспечивает температуру от 38 до 42 °С и относительную влажность от 70 до 80 % в течение установленного периода времени.

Методика 1

Предназначена для многодозовых систем упаковки, представляющих собой флаконы, банки и т.п.

Испытание проводят с использованием 15 образцов испытуемой системы упаковки. Каждую из 15 многодозовых упаковок заполняют на две трети от номинального объёма осушающим веществом, как правило, кальция хлорида безводным, и как можно быстрее укупоривают средством укупорки, выбранным для испытуемой системы упаковки, включая герметизирующие элементы и/или элементы контроля первого вскрытия, если это предусмотрено. Наполнение ёмкостей необходимо проводить в условиях как можно более низкой относительной влажности, но не выше 50 %. Если средство укупорки закручивается, то его закручивают с приложением крутящего момента, зависящего от диаметра средства укупорки, указанного в таблице 1.

Таблица 1. Усилие, прикладываемое к закручивающемуся средству укупорки системы упаковки
Диаметр средства укупорки, мм | Рекомендуемый крутящий момент, Н·м | Диаметр средства укупорки, мм | Рекомендуемый крутящий момент, Н·м
--- | --- | --- | ---
8 | 0,56 | 48 | 2,15–3,39
10 | 0,68 | 53 | 2,37–4,07
13 | 0,90 | 58 | 2,60–4,52
15 | 0,56–1,02 | 63 | 2,82–4,86
18 | 0,79–1,13 | 66 | 2,94–5,08
20 | 0,90–1,36 | 70 | 3,16–5,65
22 | 1,02–1,58 | 83 | 3,62–7,35
24 | 1,13–2,03 | 86 | 4,52–7,35
28 | 1,36–2,37 | 89 | 4,52–7,91
30 | 1,47–2,60 | 100 | 5,09–7,91
33 | 1,69–2,82 | 110 | 5,09–7,91
38 | 1,92–2,94 | 120 | 6,22–10,74
43 | 1,92–3,05 | 132 | 6,78–10,74

Если в системе укупорки используют герметизирующий или защитный элемент в виде мембраны, необходимо убедиться, что мембрана надлежащим образом запечатала упаковку. Образцы маркируют без использования этикеток. Если нужна большая прецизионность результатов измерений, дополнительно включают испытание системы упаковки только с запечатанной мембраной, т.е. без закрывания, закручивания средством укупорки.

Каждый образец взвешивают в условиях температуры и относительной влажности окружающей среды (среда взвешивания), регистрируют массу в во временной точке 0. Не позднее чем через 1 ч после взвешивания испытуемые образцы системы упаковки помещают в климатическую камеру, имеющую температуру от 38 до 42 °С и относительную влажность воздуха от 70 до 80 %, выдерживают в течение установленного срока, взвешивают образцы системы упаковки с интервалом от 6 до 8 сут, те, через 7, 14, 21, 28 и 35 дней, получают для расчёта 5 результатов взвешивания системы упаковки в равновесном состоянии, которое достигается в течение первой недели; показание во временной точке 0 для расчета не используют. Перед каждым взвешиванием образцы системы упаковки выдерживают в течение около 30 мин при температуре и относительной влажности среды взвешивания. При проведении испытания время нахождения образцов системы упаковки вне климатической камеры должно быть не более 2 ч. Результаты взвешивания фиксируют для проведения дальнейшего расчёта.

Методика 2

Предназначена для контурных ячейковых упаковок (блистеров) с высокой и ультравысокой непроницаемостью водяного пара.

Испытание проводят с использованием 10 образцов упаковок, в каждой из которых должно быть минимум 10 ячеек. Если упаковка имеет меньше 10 ячеек или упаковка однодозовая, то для испытания скрепляют несколько упаковок, чтобы получить испытуемую единицу, по меньшей мере, с 10 ячейками. Это нужно, чтобы прибавка в массе в каждой временной точке была достаточной. Ячейки заполняют предварительно высушенным осушителем, как правило, представляющим собой молекулярные сита, и запечатывают полимерным материалом или фольгой на соответствующем оборудовании. Осушитель должен заполнить всю ячейку. Общий вес осушителя должен быть достаточным для того, чтобы избежать полного пропитывания его влагой до завершения испытания. Ячейки упаковки заполняют, по возможности, в условиях как можно более низкой относительной влажности, но не выше 50 %. Осушители до запечатывания ячеек не должны находиться в условиях относительной влажности помещения для взвешивания более 30 мин. Образцы маркируют, не используя этикетки. Необходимо учитывать, что скрепление нескольких упаковок влияет на потоки воздуха при нахождении в климатической камере, а значит, повысит вариабельность данных.

Каждый образец системы упаковки взвешивают в условиях температуры и относительной влажности окружающей среды (среда взвешивания) во временной точке 0 и не позднее, чем через 1 ч после взвешивания все образцы помещают в климатическую камеру для проведения испытания, в которой поддерживается температура от 38 до 42 °С и относительную влажность воздуха от 70 до 80 %. Образцы выдерживают в указанных условиях в течение определённого времени, взвешивая их с интервалом в 7 сут±1 ч на 7, 14, 21, 28 и 35 день для получения 5 результатов взвешивания системы упаковки в равновесном состоянии, которое достигается в течение первой недели. Перед каждым взвешиванием образцы системы упаковки выдерживают в течение от 25 до 35 мин при температуре и относительной влажности среды взвешивания. При проведении испытания время нахождения образцов системы упаковки вне климатической камеры должно быть не более 2 ч. Результаты взвешивания фиксируют для дальнейшего расчёта.

Примечание 2. – При испытании контурных ячейковых упаковок с ультравысокой непроницаемостью водяного пара для получения более точного результата рекомендуется формировать испытуемый образец в виде упаковки с числом ячеек более 10, но не более 30. Также может быть использован альтернативный подход, когда в два-три раза удлиняют интервалы между взвешиваниями для того, чтобы масса каждого испытуемого образца успевала увеличиваться минимум на 6 мг.

Методика 3

Предназначена для контурных ячейковых упаковок (блистеров) с низкой непроницаемостью водяного пара.

Образцы подготавливают так же, как описано в методике 2, взвешивают и в течение часа после взвешивания помещают в климатическую камеру для проведения испытания, обеспечивающую температуру от 38 до 42 °С и относительную влажность воздуха от 70 до 80 %. В указанных условиях осушитель в упаковке с низкой непроницаемостью водяного пара быстро пропитывается влагой. Поэтому образцы не взвешивают пять раз, как в методике 2, а взвешивают спустя двое суток, т.е. через 47-49 ч, используя для расчёта результаты двух взвешиваний ‒ первоначальное во временной точке 0 по истечении двух суток.

Примечание 3 – Количество упаковок для испытания по методикам 2 и 3 зависит от паропроницаемости материала, из которого они изготовлены, размера ячейки упаковки и чувствительности используемых весов. Рекомендуют, чтобы прибавка в массе при каждом взвешивании была в 20 раз выше чувствительности весов, а чувствительность в три раза выше прецизионности, т.е. минимальная прибавка в массе за один промежуток времени, как правило, должна быть минимум в 60 раз больше прецизионности весов.

Обработка результатов

Устанавливают линейную регрессию зависимости массы образцов от времени для данных во всех временных точках, которые, как правило, образуют прямую линию. Регрессионный анализ проводят для каждой испытуемой единицы, используют уравнение регрессии, при этом данные во временной точке 0 при аппроксимации линии регрессии методик 1 и 2 обычно не используют. Наклон линии регрессии – это скорость проницаемости водяного пара для каждой испытуемой единицы.

Для методики 1 ‒ это скорость проницаемости водяного пара для соответствующей многодозовой системы упаковки.

Для методики 2 скорость проницаемости водяного пара вычисляют или для каждой упаковки (многодозовой, однодозовой) или для каждой ячейки многодозовой контурной ячейковой упаковки путем деления наклона линии регрессии на количество ячеек в каждой испытуемой единице.

Для методики 3 вычисляют прирост массы каждой из 10 испытуемых единиц с нулевого по второй день. Скорость проницаемости водяного пара для каждой ячейки контурной ячейковой упаковки вычисляют путем деления прироста массы за двое суток на количество ячеек в каждой испытуемой единице и количество суток (двое). При испытании упаковок с низкой непроницаемостью водяного пара прирост массы испытуемых образцов спустя два дня криволинеен, что характерно для приближения к насыщенности осушителя влагой, поэтому проводить пять взвешиваний в течение 2 дней нецелесообразно, это, скорее всего, приведёт к увеличению вариабельности данных.

Уравнение регрессии:

Расчёт:

где W ‒ измеренная масса, мг;
I ‒ точка пересечения линии регрессии с вертикальной осью;
M ‒ наклон линии регрессии, перехват линии регрессии;
T ‒ точка времени;
N ‒ количество точек данных, каждая из которых состоит из времени и массы;
‒ среднее значение общей массы, мг;
‒ среднее значение временных точек;

Выражение:

равняется сумме перекрёстных произведений (например, для каждой из N точек данных вычитают среднее значение общей массы из измеренной массы и среднее значение временных точек из точки времени, и умножают две полученные разности друг на друга, чтобы получить перекрёстное произведение, а затем суммируют все N перекрёстных произведений).

Выражение:

равняется сумме квадратичных отклонений (например, для каждой из N точек данных вычитают среднее значение временных точек из точки времени и возводят разность в квадрат, затем используют сумму всех N возведенных в квадрат разностей).

По методике 1 скорость проницаемости водяного пара определяют как среднее значение в мг/24 ч/упаковка и стандартное отклонение (15 наклонов).

По методике 2 скорость проницаемости водяного пара определяют как среднее значение в мг/24 ч/ячейка упаковки (блистера) и стандартное отклонение наклонов 10 испытуемых образцов.

По методике 3 скорость проницаемости водяного пара определяют как среднее значение с нулевого до второго дня, в мг/24 ч/ячейка (блистера) и стандартное отклонение наклонов 10 испытуемых единиц.

###### Метод 2

Определение скорости проницаемости водяного пара системы упаковки из полимерного материала методом с использованием воды основано на измерении потери массы в результате выхода водяного пара из системы упаковки, т.е. потери воды, находящейся внутри испытуемой системы упаковки, помещенной в климатическую камеру, которая обеспечивает температуру 38–42 °С и относительную влажность 20–30 % в течение установленного периода времени.

Метод предназначен для контурных ячейковых упаковок (блистеров) с низкой, высокой и ультравысокой непроницаемостью водяного пара.

Количество воды

Необходимо предварительно рассчитать примерное количество воды, добавляемое в упаковку при проведении испытания методом с использованием воды. Количество воды рассчитывают на одну ячейку упаковки, учитывают предполагаемую непроницаемость упаковки для водяного пара.

Например, необходимо рассчитать количество воды для контурной ячейковой упаковки из поливинилхлорида. Рассматриваемая упаковка является упаковкой с низкой непроницаемостью водяного пара, ожидаемая скорость проницаемости водяного пара составляет около 1,5 мг/24 ч/ячейка в условиях испытания при температуре от 38 до 42 °С и относительной влажности от 70 до 80 %. Начальное количество воды, необходимое для создания 100 % относительной влажности при температуре от 38 до 42 °С в ячейке контурной упаковки объемом приблизительно 0,5 мл, составляет 0,025 мг, исходя из абсолютной влажности. В предполагаемом испытании на доведение упаковки до равновесного состояния отводится 7 сут, после чего следует период испытания продолжительностью 28 сут для получения 3-5 результатов измерения массы, т.е. общее время воздействия/проникновения водяных паров составляет 35 сут. Минимальное количество воды рассчитывают следующим образом:

1,5 мг/24 ч/ячейка·35 сут + 0,025 мг = 52,525 мг воды на ячейку.

Для получения достаточного количества воды, которое необходимо добавить при проведении испытания контурной упаковки с низкой непроницаемостью для водяного пара, рекомендуют полученное минимальное количество воды увеличить примерно в 2 раза, то есть добавляют около 100 мг воды на ячейку, используют, например, шприц, дозатор необходимого объема.

Приведенный расчёт используют для определения минимального количества воды для контурных ячейковых упаковок с любой непроницаемостью водяного пара, затем рассчитанное количество умножают на коэффициент между 2 и 3 для получения необходимого количества воды для проведения испытания.

Для проведения испытания используют воду деионизированную.

Методика 4

Испытание проводят с использованием 10 образцов упаковок, в каждой из которых должно быть минимум 10 ячеек. Если упаковка имеет меньше 10 ячеек или упаковка однодозовая, то для испытания скрепляют несколько упаковок, чтобы получить испытуемый образец, по меньшей мере, с 10 ячейками. Это нужно, чтобы потеря в массе в каждой временной точке была достаточной. Каждую ячейку заполняют рассчитанным количеством воды, отслеживают, чтобы ячейки не были переполнены и, чтобы вода не попала в место запечатывания. Образцы маркируют без использования этикеток.

Испытуемые образцы выдерживают в течение 60 мин в боксе (изоляторе) в условиях контролируемой относительной влажности от 20 до 30 %. Затем образцы извлекают из бокса и взвешивают с точностью до 0,1 мг, фиксируют время взвешивания. Образцы помещают в климатическую камеру, обеспечивающую температуру от 38 до 42 °С и относительную влажность от 20 до 30 %. Образцы выдерживают в указанных условиях в течение определённого времени, взвешивают их с интервалом в 7 сут±1 ч на 7, 14, 21, 28 и 35 сут для получения 5 результатов взвешивания системы упаковки в равновесном состоянии. Допустимо добавление временных точек, например, при испытании упаковок с высокой или ультравысокой непроницаемостью водяного пара. В каждой временной точке испытуемые образцы помещают в бокс (изолятор) с контролируемой относительной влажностью от 20 до 30 %, дают прийти в равновесное состояние в течение 60 мин, после чего образцы взвешивают и фиксируют время. После взвешивания образцы помещают обратно в климатическую камеру с температурой от 38 до 42 °С и относительной влажностью от 20 до 30 %. Порядок взвешивания образцов обязательно должен быть одинаковым во всех временных точках определения их массы.

Примечание 4 – При испытании контурных ячейковых упаковок с ультравысокой непроницаемостью водяного пара для получения более точного результата рекомендуют формировать испытуемый образец в виде упаковки с числом ячеек более 10, но не более 30. Также может быть использован альтернативный подход, когда в два-три раза удлиняют интервалы между взвешиваниями для того, чтобы масса каждого испытуемого образца успевала потерять в массе минимум 6 мг.

Все испытуемые образцы проверяют на наличие воды во всех временных точках. Непрозрачные контурные ячейковые упаковки открывают по завершении испытания, чтобы подтвердить наличие воды в каждой ячейке, поскольку визуальная проверка невозможна.

Обработка результатов

Проводят регрессионный анализ для каждого испытуемого образца аналогично анализу данных для методик 1 и 2, но при этом наклон линии является отрицательным ввиду выхода воды и потери в массе с течением времени. Скорость проницаемости водяного пара вычисляется для каждой ячейки контурной ячейковой упаковки путём деления абсолютного значения наклона на количество ячеек в каждом испытуемом образце.

По методике 4 скорость проницаемости водяного пара определяют как среднее значение в мг/24 ч/ячейка и стандартное отклонение наклонов 15 испытуемых единиц.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0009 Определение плотности полимерных материалов

Вводится впервые

Методы определения плотности полимерных материалов, в виде листов, пластин, трубок, пленок, гранул, порошков, хлопьев и т.п., используемых для производства упаковки и её элементов для фармацевтического применения основаны на использовании: метода погружения (метод 1); метода жидкостной пикнометрии (метод 2); метода титрования (метод 3); метода градиентной колонки (метод 4); метода газовой пикнометрии (метод 5).

Определение плотности необходимо для исследования физических, химических изменений структуры полимерных материалов, для определения степени кристалличности полимеров, количества добавок и т.д.

Методы не применяют при определении плотности пористых и ячеистых полимерных материалов.

###### Пробоподготовка

Из полимерных материалов в виде листов, пластин, плёнок и других полуфабрикатов, готовой упаковки или элементов упаковки вырезают образцы для испытания, избегая при этом давлений, способных вызвать деформацию материала с изменением его плотности. Образцы должны иметь гладкую, ровную поверхность, без вздутий, сколов, неровностей, надрезов, царапин, трещин и других видимых невооруженным глазом дефектов. Если не указано иное в фармакопейной статье, рекомендуемые размеры образца: объем около 1 см3, масса от 1,0 до 5,0 г.

Полимерные материалы в виде гранул, хлопьев и/или порошков подвергают испытанию без предварительной подготовки.

В установленных случаях испытуемые образцы полимерных материалов высушивают при определенных условиях или выдержаны при определенной влажности и т.д.

Рабочие жидкости (гидростатирующие, иммерсионные, жидкости для погружения), используемые в методах определения плотности полимерных материалов, должны хорошо смачивать образцы материалов, не должны растворять, пропитывать и/или вступать с образцами в реакцию, не должны улетучиваться во время определения. При плохом смачивании образца в жидкость можно ввести не более 0,1 % смачивающих и/или обезжиривающих веществ. При отсутствии подходящей жидкости образцы покрывают слоем парафина известной плотности, что потом учитывают при расчете плотности.

Если плотность полимерного материала более 1 г/см3 (поливинилхлорид, полиэтилентерефталат, полистирол и др.), то в качестве рабочей жидкости, как правило, используют воду. Если плотность полимерного материала менее и/или равна 1 г/см3 (полиэтилен, полипропилен и другие полиолефины), то в качестве рабочей жидкости используют спирт этиловый различной концентрации.

Плотность рабочей жидкости, используемой в методах испытаний настоящей общей фармакопейной статьи, определяют в соответствии с ОФС «Плотность» с точностью до ±0,001 г/см3(ρж).

Испытания по определению плотности полимерных материалов проводят, как правило, при температуре 23 °С или 27 °С.

###### Метод 1

Применяют для определения плотности полимерных материалов, образцы которых могут быть в любой, свободной от пустот форме. Метод не используют для определения полимерных материалов в виде порошка, хлопьев. Образцы должны быть подходящего размера, чтобы обеспечить достаточный зазор между образцом и сосудом в виде стакана для погружения. Метод обеспечивает точность измерения плотности до 0,1 %.

Сущность метода заключается в сравнении масс одинаковых объемов полимерного материала и рабочей жидкости, плотность которой известна.

Для обеспечения полного погружения образца в рабочую жидкость или в случае, если плотность образца полимерного материала меньше плотности рабочей жидкости, используют груз, массой примерно на 20 % больше массы образца. Груз должен иметь правильную форму, гладкую поверхность и плотность вещества груза должна быть не менее 7,0 г/см3.

Определяют массу образца полимерного материала, взвешивая на аналитических весах на воздухе с точностью до 0,0001 г (m1).

С помощью проволоки-подвески из гибкого, устойчивого к коррозии материала, диаметром 0,04–0,06 мм, испытуемый образец подвешивают к коромыслу весов. Если предполагаемая плотность образца менее 1 г/см3 и в жидкости он будет всплывать, то к подвеске подвешивают дополнительный груз. Образец с грузом опускают в погружной стакан с рабочей жидкостью до полного его погружения, не касаясь стенок и дна стакана, удаляя прилипшие к образцу пузырьки воздуха тонкой проволокой. Определяют массу образца полимерного материала с подвеской и грузом в рабочей жидкости, взвешивая на аналитических весах с точностью до 0,0001 г (m2). Для сведения к минимуму поглощения образцом рабочей жидкости, продолжительность нахождения образца в рабочей жидкости рекомендуют ограничивать.

Образец снимают с подвески. Подвеску с грузом, если он применялся, опускают в погружной стакан с рабочей жидкостью, не касаясь стенок и дна стакана, на ту же глубину, которая использовалась на предыдущем этапе, определяют массу подвески с грузом в рабочей жидкости, взвешивая на аналитических весах с точностью до 0,0001 г (m3).

Плотность испытуемого образца полимерного материала ρ (г/см3) вычисляют по формуле:

где m1 – масса образца полимерного материала на воздухе, г;
m2 – масса образца полимерного материала с подвеской и грузом в рабочей жидкости, г;
m3 – масса подвески с грузом в рабочей жидкости, г;
ρж – плотность рабочей жидкости в соответствии с ОФС «Плотность.

За результат испытания принимают среднее арифметическое трёх параллельных определений, допустимые расхождения между которыми не должны быть более 0,0005 г/см3, если нет других указаний в фармакопейной статье.

Примечание. Взвешивание образца на воздухе и в рабочей жидкости проводят с использованием специальных аналитических весов для гидростатического взвешивания, имеющих, как правило, возможность автоматического вычисления плотности. Также используют аналитические весы, оснащенные дополнительным устройством для проведения испытания по методу гидростатического взвешивания.

###### Метод 2

Применяют для определения плотности полимерных материалов, представляющих собой гранулы, порошки, хлопья и т.п. Образцы подвергаются испытанию в том виде, в котором они получены. Метод обеспечивает точность измерения плотности до 0,05 %.

Сущность метода заключается в сравнении масс одинаковых объемов полимерного материала и рабочей жидкости, плотность которой известна.

Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Плотность», метод 1, с использованием подготовленного к испытанию пикнометра с боковой капиллярной трубкой, имеющего необходимый размер горловины (необходимый диаметр шлифа).

Определяют массу чистого сухого, пустого пикнометра (m4), взвешивая его с точностью до 0,0001 г, в него помещают образец полимерного материала и определяют массу пикнометра с образцом (m5).

Пикнометр заполняют рабочей жидкостью, из которой предварительно удален воздух, вытирают его снаружи сухой тканью, помещают в термостат и выдерживают при соответствующей температуре в течение 30 мин. Избыток жидкости удаляют, снова вытирают пикнометр снаружи и взвешивают с точностью до 0,0001 г, определяют массу пикнометра с рабочей жидкостью (m6).

Пикнометр с образцом заполняют рабочей жидкостью так, чтобы она покрывала образец, удаляют воздух, поместив пикнометр в вакуумный эксикатор, присоединенный к вакуум-насосу. После вакуумирования пикнометр с рабочей жидкостью и образцом помещают в термостат, выдерживают в течение 30 мин при соответствующей температуре, доводят рабочей жидкостью до метки, вытирают пикнометр снаружи и взвешивают, определяя массу пикнометра с рабочей жидкостью и образцом (m7).

Плотность испытуемого образца полимерного материала ρ (г/см3) вычисляют по формуле:

где m4 – масса пикнометра, г;
m5 – масса пикнометра с образцом полимерного материала в воздухе, г;
m6 – масса пикнометра c рабочей жидкостью, г;
m7 масса пикнометра с образцом полимерного материала в рабочей жидкости, г;
ρж – плотность рабочей жидкости в соответствии с ОФС «Плотность»

За результат испытания принимают среднее арифметическое трех параллельных определений, допустимые расхождения между которыми не должны быть более 0,0002 г/см3, если нет других указаний в фармакопейной статье.

###### Метод 3

Применяют для определения плотности полимерных материалов, преимущественно полиолефинов плотностью менее 1 г/см3, представляющих собой гранулы или формованные упаковочные материалы.

Сущность метода заключается в сравнении плотности образца полимерного материала с плотностью рабочей жидкости в момент перехода образца во взвешенное состояние.

Из полимерных материалов в виде пластин, листов, пленок, готовых упаковок и т.п. вырезают несколько образцов (кусочков) для испытания; гранулы используют без предварительной подготовки.

Для проведения испытания требуются две рабочие смешиваемые жидкости различной плотности. Одна жидкость должна иметь плотность немного ниже плотности испытуемого материала (далее – менее плотная жидкость), а плотность другой жидкости должна быть выше, чем плотность испытуемого материала (далее – более плотная жидкость).

Образцы помещают в ёмкость с менее плотной жидкостью, опускают на дно ёмкости. При постоянном размешивании содержимого ёмкости, из бюретки по каплям прибавляют более плотную жидкость, титруют до тех пор, пока падающие вначале на дно образцы остаются взвешенными в смеси жидкостей в течение 1 мин. Плотность полученной смеси двух рабочих жидкостей в момент перехода испытуемого образца во взвешенное состояние, соответствует плотности испытуемого образца и определяется с помощью пикнометра в соответствии с ОФС «Плотность», метод 1.

Для определения плотности полиолефинов плотностью менее 1 г/см3 методом 3в качестве одной из рабочих жидкостей используют водный раствор спирта этилового с плотностью 0,9100 г/см3. Раствор готовят смешиванием 1000 мл спирта этилового 96,2 %, 629 мл воды и 2,5 мл смачивающей жидкости. В соответствии с ОФС «Плотность», метод 1, определяют плотность приготовленной рабочей жидкости не менее двух раз двумя пикнометрами. Второй рабочей жидкостью является вода.

Прибор для определения плотности полимерных материалов флотационным методом представлен на рис. 1.

Рисунок 1. Прибор для определения плотности полимерных материалов флотационным методом: 1 – ультратермостат; 2 – бюретка; 3 – штатив; 4 – термометр; 5 – крышка термостата; 6 – стакан; 7 – водяная ванна; 8 – магнитная мешалка.

В стакан (6) прибора для определения плотности полимерных материалов флотационным методом помещают 50,0 мл водного раствора этилового спирта плотностью 0,9100 г/см3, три образца или три гранулы полимера и опускают в стакан ротор магнитной мешалки (8) прибора. Стакан устанавливают в водяную ванну (7), присоединенную к ультратермостату (1), закрывают крышкой (5), через отверстие которой в стакан вводят термометр (4) и носик бюретки (2) с водой, закрепленных на штативе (3). Для достижения температурного равновесия содержимое стакана термостатируют при перемешивании в течение 15 мин. Затем порциями по 1 мл прибавляют из бюретки воду до тех пор, пока образцы не проявят склонность к переходу во взвешенное состояние. После этого воду прибавляют по 0,2 мл, а затем по каплям, до тех пор, пока образец не поднимется не менее чем на 1 см под мениском раствора. В этот момент прекращают титрование водой и испытание заканчивают.

Плотность образцов определяют по количеству добавленной воды с помощью калибровочной кривой зависимости плотности спирто-водного раствора от количества добавленной воды (рис. 2).

Рисунок 2. Калибровочная кривая зависимости плотности спирто-водного раствора (г/см3) от объёма добавленной воды (мл)

По оси абсцисс откладывают количество добавленной воды, по оси ординат – значения плотности раствора. Калибровочная кривая зависимости плотности спирто-водного раствора от объёма добавленной воды строится на основе данных, приведённых в табл. 1.

Таблица 1. Зависимость плотности спирто-водного раствора от количества воды, добавленной к 50 мл спирто-водного раствора с плотностью 0,9100 г/см3
Количество добавленной воды, см3 (МЛ) | Плотность раствора, г/ см3 | Количество добавленной воды, см3 (МЛ) | Плотность раствора, г/см3 | Количество добавленной воды, см3 (МЛ) | Плотность раствора, г/см3
--- | --- | --- | --- | --- | ---
0 | 0,91000 | 26 | 0,94880 | 52 | 0,96290
1 | 0,91265 | 27 | 0,94965 | 53 | 0,96325
2 | 0,91500 | 28 | 0,95040 | 54 | 0,96360
3 | 0,91715 | 29 | 0,95115 | 55 | 0,96395
4 | 0,91920 | 30 | 0,95185 | 56 | 0,96425
5 | 0,92130 | 31 | 0,95255 | 57 | 0,96455
6 | 0,32330 | 32 | 0,95320 | 58 | 0,96455
7 | 0,92520 | 33 | 0,95385 | 59 | 0,96515
8 | 0,92700 | 34 | 0,95455 | 60 | 0,96545
9 | 0,92880 | 35 | 0,95515 | 61 | 0,96575
10 | 0,93040 | 36 | 0,95575 | 62 | 0,96604
11 | 0,93190 | 37 | 0,95620 | 63 | 0,96635
12 | 0,93330 | 38 | 0,95685 | 64 | 0,96600
13 | 0,93470 | 39 | 0,95740 | 65 | 0,96685
14 | 0,93615 | 40 | 0,95790 | 66 | 0,96710
15 | 0,93750 | 41 | 0,95840 | 67 | 0,96735
16 | 0,93870 | 42 | 0,95890 | 68 | 0,96760
17 | 0,93990 | 43 | 0,95935 | 69 | 0,96780
18 | 0,94110 | 44 | 0,95980 | 70 | 0,96805
19 | 0,94220 | 45 | 0,96020 | 71 | 0,96830
20 | 0,94330 | 46 | 0,96060 | 72 | 0,95855
21 | 0.94425 | 47 | 0,96100 | 73 | 0,96875
22 | 0,94520 | 48 | 0,96140 | 74 | 0,96900
23 | 0,94620 | 49 | 0,96180 | 75 | 0,96925
24 | 0,94710 | 50 | 0,96220 | 76 | 0,96950
25 | 0,94800 | 51 | 0,96255 | 77 | 0,96970

За результат испытания принимают среднее арифметическое результатов расчета плотности по калибровочной кривой для каждого образца, допускаемые расхождения не должны отличаться более чем на 0,0004 г/см3, если нет других указаний в фармакопейной статье.

###### Метод 4

Применяют для определения плотности полимерных материалов в виде плёнок, гранул и любых формованных упаковочных материалов.

Метод основан на сравнении глубин погружения испытуемого образца и эталонов плотности в цилиндре или трубке с раствором меняющейся по высоте плотности, называемых градиентной колонкой.

Образцы для испытания состоят из кусочков плёнок, формованных упаковочных материалов, упаковки с линейными размерами не более 5 мм, нарезанных в такой форме, чтобы конфигурация образца обеспечивала как можно более точное определение центра тяжести образца. Гранулы используют в том виде, в котором они получены.

Для проведения испытания требуются две рабочие смешиваемые свежеперегнанные, если применимо, жидкости различной плотности. В табл. 2 указаны системы рабочих жидкостей, применяемые для наполнения градиентных колонок.

Таблица 2. Системы рабочих жидкостей, применяемые для наполнения градиентных колонок
Системы рабочих жидкостей | Плотность, г/см3 при температуре 20 °С
--- | ---
Метиловый спирт – бензиловый спирт | 0,80-0,92
Изопропиловый спирт – вода | 0,79-1,00
Изопропиловый спирт – диэтиленгликоль | 0,79-1,11
Этиловый спирт – четыреххлористый углерод | 0,79-1,59
Этиловый спирт – вода | 0,79-1,00
Толуол – четыреххлористый углерод | 0,87-1,59
Вода – бромистый натрий | 1,00-1,41
Вода – азотнокислый кальций | 1,00-1,60
Хлористый цинк – этанол – вода | 0,80-1,70
Четыреххлористый углерод – 1,3-дибромпропан | 1,60-1,99
1,3-Дибромпропан – бромистый этилен | 1,99-2,18
Бромистый этилен – бромоформ | 2,18-2,89
Четыреххлористый углерод – бромоформ | 1,60-2,89

В системах могут быть использованы также и другие рабочие жидкости, например: н-октан 0,70; диметилформамид 0,94; тетрахлорэтан 1,59; йодистый этил 1,93; йодистый метилен 3,33.

Для испытания необходимы откалиброванные по плотности стеклянные поплавки, охватывающие весь диапазон измеряемых плотностей и приблизительно равномерно распределяемые по всему этому диапазону.

Стеклянные поплавки, полученные любым способом, должны быть полностью отожженными, иметь приблизительно сферическую форму и диаметр от 0,3 до 1,0 см.

Для калибровки отбирают группу поплавков, имеющих плотности, соответствующие требуемому интервалу измерений. Готовят около 500 мл рабочей жидкости, используя, одну из систем, предусмотренных в таблице 2, например, метиловый спирт–бензиловый спирт или этиловый спирт–вода и т.д. Относительное количество каждой жидкости, составляющих систему, выбирают так, чтобы получить рабочую жидкость с наименьшей желаемой плотностью.

В приготовленную рабочую жидкость осторожно вводят подготовленные поплавки и отбирают те, которые погружаются медленно. Введением в смесь жидкости, имеющей большую плотность, увеличивают плотность рабочей жидкости и таким образом отбирают поплавки, приблизительно соответствующие по плотности всему предполагаемому интервалу измерений, то есть калибруют. Если необходимо уменьшить плотность поплавков, то их шлифуют, натирая поплавок на стеклянной пластине, покрытой тонкой суспензией кремния карбида с размером частиц менее 38 мкм, или другим подходящим абразивом, или же травлением поплавка фтористоводородной кислотой.

Для калибровки стеклянных поплавков по плотности используют не одну, изменяемую по плотности жидкость, а заранее приготовленную серию рабочих жидкостей, охватывающую диапазон плотностей метода градиентной колонки.

Устанавливают точную плотность каждого откалиброванного стеклянного поплавка, то есть эталонируют.

Стеклянный цилиндр, наполненный приблизительно на две трети раствором из двух жидкостей, плотность которого может быть изменена добавлением одной из этих жидкостей, устанавливают в термостат, имеющий температуру, при которой будут определять плотность образца. Когда цилиндр и раствор достигнут температуры равновесия, в раствор помещают эталонируемый поплавок и, если он погружается, добавляют по каплям жидкость, имеющую большую плотность, если поплавок всплывает, добавляют жидкость, имеющую меньшую плотность. При каждом добавлении жидкости смесь осторожно перемешивают для гомогенизации. Процедуру повторяют до тех пор, пока поплавок останется неподвижным в середине столба жидкости в течение не менее 30 мин. Во время наблюдения за положением и перемещением поплавка цилиндр должен быть закрытым.

Определяют плотность рабочей жидкости, в которой поплавок оставался в равновесии, в соответствии с ОФС «Плотность», метод 1, Полученное значение плотности рабочей жидкости эквивалентно плотности поплавка. Таким же образом эталонируют каждый из отобранных поплавков для требуемого интервала плотностей, изменяя соответственно плотность смеси рабочих жидкостей.

Подготавливают градиентную колонку, состоящую из градуированного стеклянного цилиндра с притертой стеклянной пробкой. Диаметр колонки должен быть не менее 4 см, высота ее должна соответствовать требуемой точности и составлять, как правило, не менее 25 см и не более 100 см, интервал градуировки – 1 мм. Подготовку градиентной колонки осуществляют непрерывным наполнением с помощью двух растворов, плотность которых является пределами интервала измерения. Способ непрерывного наполнения выполняют методами А и Б: А – непрерывное наполнение, при котором жидкость, наливаемая в градиентную колонку, постепенно становится менее плотной; Б – непрерывное наполнение, при котором жидкость, наливаемая в градиентную колонку, постепенно становится более плотной.

Схема прибора для наполнения градиентной колонки по методу А представлена на рис. 3. Собирают прибор, используя стаканы одинакового диаметра.

Рисунок 3. Схема прибора для наполнения градиентной колонки по методу А: 1 – стакан, 2 – стакан с мешалкой.

Из табл. 2 выбирают группу жидкостей, соответствующую требуемому интервалу плотности и чувствительности градиентной колонки. Предварительно жидкости должны быть подвергнуты деаэрации (нагреванием или в вакууме).

Плотность исходной жидкости (ρA) в г/см3 вычисляют по формуле:

где ρ0 – верхний предел желаемой плотности – плотность первоначальной жидкости в стакане (2), выбранная так, чтобы её плотность была на 0,005 г/см3 больше, чем плотность наиболее плотного эталонного поплавка (для соответствующей трубки градиента), г/см3;
ρ – нижний предел плотности, выбранный так, чтобы он был на 0,01 г/см3 меньше, чем плотность наименее плотного эталонного поплавка, г/см3;
V2 – объём исходной жидкости с большей плотностью в стакане (2), мл;
V – общий объём, необходимый для заполнения градиентной колонки, мл.

В стакан (2) наливают некоторый объём жидкости с большей плотностью и перемешивают пропеллерной мешалкой с приводом от небольшого электродвигателя. Скорость перемешивания должна быть такой, чтобы избежать образования вихревых воронок на поверхности жидкости. Затем такой же объём жидкости с меньшей плотностью наливают в стакан (1), рис. 3.

После наполнения и заливки сифона, который должен иметь капиллярный конец на выходе для регулирования струи, жидкость осторожно сливают в градиентную колонку по стенке до тех пор, пока она не достигнет верхней метки. Приготовление градиентной колонки длится несколько часов, в зависимости от объема жидкости, необходимого для наполнения колонки.

Схема прибора для наполнения градиентной колонки по методу Б представлена на рис. 4. Прибор собирают из двух стаканов вместимостью 1000 мл, нижние части которых соединены трубкой с краном, мешалки во втором стакане и капиллярной трубки диаметром 1–2 мм, соединяющей второй стакан с градиентной колонкой. Капилляр на несколько миллиметров не должен доходить до ее дна. Соединительная трубка между стаканом (2) и колонкой имеет кран для регулирования подачи. Колонки с приготовленными растворами (не более шести) устанавливают в термостат.

Рисунок 4. Схема прибора для наполнения градиентной колонки по методу Б: 1 – стакан, 2 – стакан с мешалкой

В стакан (2) наливают некоторый объём менее плотной жидкости, а в стакан (1) – такой же объем более плотной жидкости и, открыв краны, сливают из стакана (2) жидкость, которая постепенно, по мере заполнения колонки более тяжелой жидкостью, вытесняется наверх. Заполнение колонки прекращают, когда уровень жидкости достигнет верхней метки.

В градиентную колонку, подготовленную методом А или Б, вводят не менее пяти эталонированных чистых поплавков на каждые 25 см длины колонки, которые перекрывают своими плотностями весь интервал плотности колонки. Если поплавки не распределяются равномерно по всей длине колонки, то градиентную колонку заполняют повторно.

После введения эталонированных поплавков закрытую колонку выдерживают в термостате не менее суток, после чего измеряют высоты, на которых находятся поплавки, и строят калибровочную кривую зависимости плотности от высоты равновесия эталонных поплавков. Полученная кривая должна быть плавной, практически прямой линией, без разрывов, и должна иметь не более чем одну точку изгиба. В противном случае градиентную колонку заполняют повторно. Калибровочная кривая зависимости плотности от высоты равновесия эталонных поплавков строится в таком масштабе, чтобы можно было отсчитывать высоту с точностью до 1 мм и плотность с точностью до 0,0001 г/см3. Градиент плотности обычно остается стабильным в течение нескольких месяцев. Колонки проверяют ежедневно для своевременного обнаружения потери стабильности.

Определение плотности осуществляют следующим образом. Образцы смачивают менее плотной из двух жидкостей, используемых в колонке, и медленно вводят их в колонку. Образцы оставляют в колонке на 10 мин или более до достижения равновесия. По центру объёма измеряют уровень погружения трех образцов, расположенных друг от друга не более чем на 1,5 мм.

Для пленок, толщиной менее 0,05 мм необходимо не менее 1,5 ч для достижения равновесия. Рекомендуют повторную проверку тонкопленочных образцов через несколько часов.

При определении с образцов должны быть удалены пузырьки воздуха, которые могут являться источником ошибок; их осторожно удаляют с образцов тонкой проволокой, осторожно перемещаемой в колонке.

Образцы полимерных материалов, прошедшие испытания, удаляют из колонки, не нарушая градиента плотности. Для этого их собирают проволочной корзиночкой, подвешенной на тонкой нити к барабану, вращаемому при помощи часового механизма. Скорость выемки испытанных образцов приблизительно 1 см длины колонки в минуту. Корзиночку после освобождения от образцов, прошедших испытания, опускают с этой же скоростью на дно колонки, где она может оставаться постоянно. После очистки колонки необходимо перепроверить зависимость плотности от высоты равновесия эталонных поплавков.

Плотность образца может быть определена графически по калибровочной кривой зависимости плотности от высоты равновесия эталонных поплавков, исходя из уровня погружения, на котором образцы уравновешиваются.

Используют метод расчёта, основанный на том, что плотность образца эквивалентна плотности эталонного поплавка на одинаковом с образцом уровне погружения. Посредством интерполяции между значениями двух плотностей эталонных поплавков, между которыми расположен образец, плотность образца ρt (г/см3) определяют по формуле:

где h1 и h2 – глубина погружения обоих эталонных поплавков мм;
ρ2 и ρ1 – плотности обоих эталонных поплавков, г/см3;
h – глубина погружения образца, мм.

За результат испытания принимают среднее арифметическое значение параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны быть более 0,0002 г/см, если нет других указаний в фармакопейной статье.

Точность этого метода зависит от перепада плотности в градиентной колонке на 1 мм высоты, называемого чувствительностью колонки. При чувствительности колонки 0,0001 г/см3 на миллиметр точность метода до 0,05 %.

Примечание – Определение плотности полимеров методом градиентной колонки проводят с использованием специального оборудования, оснащенного различными микропроцессорными системами, автоматизированными устройствами.

###### Метод 5

Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение газовой пикнометрической плотности порошкообразного вещества»)

Применяют для определения полимерных материалов в виде порошка, гранул, хлопьев в том виде, в котором они получены. Другие полимерные материалы могут быть нарезаны в виде любой формы, удобной для размера используемого объема пикнометра. Желательно, чтобы образцы не содержали закрытых пор. При наличии закрытых пор образцы должны быть подготовлены подходящим способом, например, шлифовкой.

Сущность метода заключается в определении объёма образца полимерного материала известной массы по измерению изменения объема газа в газовом пикнометре при введении образца.

Необходимо учитывать, что измеренный объем образца полимерного материала, относится только к твёрдому веществу без его пор. Точность измерения увеличивается, если образец для испытаний заполняет как можно большую часть газового пикнометра. Для более точных измерений предпочтительнее использование газа гелия, который может проникать в поры диаметром не менее 1 мкм и имеет низкую склонность к адсорбции на поверхности испытуемого материала.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0010 Определение светопропускания упаковки из полимерных материалов для лекарственных средств

Вводится впервые

Испытание применяют для определения светопропускания светозащитной упаковки из полимерных материалов, предназначенной для лекарственных средств.

Испытание не применяют в случае, если светозащитная система упаковки, полученная на основе бесцветных, прозрачных или полупрозрачных полимерных материалов, обеспечена за счёт нанесения покрытия или оболочки на используемый полимерный материал.

Как правило, определение светопропускания системы упаковки из полимерных материалов проводят при фармацевтической разработке лекарственного препарата. Если светозащитные свойства системы упаковки подтверждены при изучении его стабильности согласно ОФС «Стабильность и сроки годности лекарственных средств», то определение светопропускания не проводят.

###### Испытания

Оборудование

Используют спектрофотометр, адаптированный для измерения количества света, пропускаемого полимерными материалами, применяемыми для производства упаковки для лекарственных средств, способный измерять и регистрировать свет, проходящий как в рассеянных, так и в параллельных лучах. Определение светопропускания проводят в соответствии с ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях».

Пробоподготовка

Выбирают участки упаковки репрезентативные по толщине стенки и вырезают образцы из двух или более частей системы упаковки, подрезают их по размерам ячейки спектрофотометра. Если образец настолько мал, что не может заполнить держатель для образца в спектрофотометре, то незаполненную часть закрывают непрозрачной бумагой или маскировочной липкой лентой при условии, чтобы ширина образца была больше, чем ширина щели.

Образцы должны быть промыты и высушены. Не допускают царапин на поверхности образцов. Закрепляют образец в держателе спектрофотометра с помощью липкого воска или другими подходящими способами, аккуратно, чтобы не оставить на поверхностях образцов, через которые должен проходить свет, следов пальцев или других следов. Непосредственно перед установкой в держатель спектрофотометра поверхности образца тщательно протирают тканью для линз.

Методика

Чистый образец помещают в спектрофотометр таким образом, чтобы его цилиндрическая ось была параллельна плоскости щели, луч света был направлен перпендикулярно к измеряемой поверхности образца и потери за счёт отражения были минимальны.

Непрерывно измеряют светопропускание образца относительно воздуха в диапазоне длин волн от 290 до 450 нм с помощью регистрирующего прибора или с интервалами около 20 нм с помощью неавтоматизированного прибора.

Интерпретация результатов

Для светозащитной системы упаковки, полученной из полимерных материалов и предназначенной для лекарственных препаратов для парентерального применения, светопропускание не должно превышать предельных значений, указанных в табл. 1.

Для светозащитной системы упаковки, полученной из полимерных материалов и предназначенной для лекарственных препаратов для приёма внутрь и местного применения, светопропускание не должно превышать 10 % при любой длине волны в диапазоне от 290 до 450 нм.

Таблица 1. Предельные значения светопропускания светозащитной системы упаковки и её элементов, полученной из полимерных материалов, предназначенной для лекарственных препаратов для парентерального применения
Номинальный объём, мл | Максимальное светопропускание при любой длине волны в диапазоне от 290 до 450 нм, %
--- | ---
До 1 | 25
От 1 до 2 | 20
От 2 до 5 | 15
От 5 до 10 | 13
От 10 до 20 | 12
От 20 до 50 | 10
Свыше 50 | 10

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0011 Упаковочные материалы и упаковка на основе полиэтилентерефталатов для лекарственных средств

Вводится впервые

Полиэтилентерефталат получают полимеризацией терефталевой кислоты или диметилтерефталата с этиленгликолем. Для полимеризации могут быть использованы кислота изофталевая, диметилизофталат, 1,4-бис(гидроксиметил)циклогексан (цикло-гексан-1,4-диметанол) или диэтиленгликоль.

Упаковочные материалы и упаковку на основе полиэтилентерефталатов не используют для лекарственных препаратов, предназначенных для парентерального применения.

Упаковочный материал и упаковка на основе полиэтилентерефталатов может содержать не более 0,5 % кремния диоксида или силикатов и красителей. Красящие вещества могут быть включены в состав полиэтилентерефталатов, если установлено, что они не мигрируют в содержимое упаковки.

###### Особенности технологии

Упаковочные материалы и упаковка для лекарственных средств на основе полиэтилентерефталатов, как правило, не содержат пластификаторов, технологических добавок, антиоксидантов.

Метод получения полиэтилентерефталата должен гарантировать остаточное содержание ацетальдегида в гранулах не более 10 ppm (0,001 %).

Полимер полиэтилентерефталат выпускают в виде прозрачных или матовых гранул. После трансформации представляет собой плёнку, пластинки различной толщины, готовую упаковку и др.

Общие требования к упаковочным материалам и упаковке из полимерных материалов для лекарственных средств приведены ОФС «Упаковка лекарственных средств», ОФС «Упаковка и укупорочные средства из полимерных материалов для фармацевтического применения».

###### Свойства

Растворимость. Практически нерастворим в воде, спирте 96% и метиленхлориде.

###### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр испытуемого образца в области от 3800 до 650 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца полиэтилентерефталата (спектру материала, выбранного для типового образца) и иметь максимумы при следующих волновых числах: 1725 см-1, 1410 см-1, 1265 см-1, 1120 см-1, 1100 см-1, 1020 см-1, 875 см-1 , 725 см-1.

- Пробоподготовка. Растворяют 0,05 г упаковочного материала в 2,0 мл 1,1,1,3,3,3-гексафторопропан-2-ола. На стеклянную пластину, помещённую на водяную баню в вытяжном шкафу, наносят несколько капель раствора, чтобы получить плёнку размером примерно 15х15 мм. Растворитель выпаривают, плёнку удаляют, используя струю воды и скребок. Высушивают плёнку в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С в течение 1–2 ч.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 210 нм до 330 нм должен иметь максимум поглощения при длине волны 240 нм.

- Испытуемый раствор. В колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой вместимостью 100 мл помещают 0,1 г испытуемого образца и прибавляют 25 мл раствора калия гидроксида 20 % в спирте 50 %. Кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин. Охлаждают и доводят водой до метки, при необходимости фильтруют. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл фильтрата и доводят объем раствора водой до метки.

3. Дифференциальная сканирующая калориметрия (ОФС «Термический анализ», метод 2). Термограмма испытуемого образца должна соответствовать термограмме фармакопейного стандартного образца полиэтилентерефталата, а температура пика плавления, полученная от термограммы испытуемого образца не должна отличаться от температуры стандартного образца больше, чем на 4 °С для полиэтилентерефталата и не более, чем на 6 °С для полиэтилентерефталата-гликоль.

- Помещают 12 мг испытуемого образца в тигель и проводят испытание в соответствии с ОФС «Термический анализ». Регистрируют термограммы испытуемого и стандартного образцов в атмосфере азота в установленных для полимера условиях нагревания/охлаждения.

- Образец полиэтилентерефталата нагревают в диапазоне от комнатной температуры до 280 °С со скоростью 20 °С/мин. Выдерживают при 280°С в течение 1 мин. Быстро охлаждают до комнатной температуры и повторно нагревают до 280 °С со скоростью 5 °С/мин.

- Образец полиэтилентерефталата-гликоль нагревают в диапазоне от комнатной температуры до 120 °С со скоростью 20 °С/мин. Выдерживают при 120 °С в течение 1 мин. Быстро охлаждают до комнатной температуры и повторно нагревают до 120 °С со скоростью 10 °С/мин.

###### Испытания

Пробоподготовка

Образцы полиэтилентерефталата для проведения испытания могут представлять собой вырезанные из полимерного материала (плёнки, пластин, листов готовой упаковки и т.п.) кусочки необходимых размеров, или растворы и жидкости, полученные экстрагированием полиэтилентерефталатов различными растворителями. Испытуемый материал, предназначенный для экстрагирования, как правило, разрезают на части с максимальной длиной стороны не более 1 см и подготавливают несколько образцов, проводя экстрагирование полиэтилентерефталатов различными растворителями: водой (испытуемый раствор А), спиртом (испытуемый раствор Б), кислотой (испытуемый раствор В), щёлочью (испытуемый раствор Г).

Испытуемый раствор А. В колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 10 г испытуемого образца, прибавляют 200 мл воды и выдерживают при температуре 50 °C в течение 5 ч. Раствору дают остыть и декантируют. Полученный раствор используют в течение 4 ч после приготовления.

Испытуемый раствор Б. В колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 10 г испытуемого образца, прибавляют 100 мл спирта 96 % и выдерживают при температуре 50 °C в течение 5 ч. Раствору дают остыть и декантируют. Полученный раствор используют в течение 4 ч после приготовления.

Испытуемый раствор В. В колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 20 г испытуемого образца, прибавляют 50 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты и выдерживают при 50° С в течение 5 ч. Раствору дают остыть и декантируют. Полученный раствор используют в течение 4 ч после приготовления.

Испытуемый раствор Г. В колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 20 г испытуемого образца, прибавляют 50 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида и выдерживают при температуре 50° С в течение 5 ч. Раствору дают остыть и декантируют. Полученный раствор используют в течение 4 ч после приготовления.

###### Испытания упаковочного материала

Плотность. Полиэтилентерефталат – от 1,38 до 1,42 г/см3; полиэтилентерефталат-гликоль – 1,26 до 1,28 г/см3 (ОФС «Определение плотности полимерных материалов»).

Прозрачность раствора. Испытуемый раствор Б должен быть прозрачным. (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Испытуемый раствор Б должен быть бесцветным. (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

Светопоглощающие примеси. (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Оптическая плотность испытуемого раствора А в области длин волн от 220 до 340 нм в кварцевой кювете с толщиной слоя 1 см, измеренная относительно воды, не должна превышать 0,2.

Оптическая плотность испытуемого раствора А из окрашенного (цветного) полиэтилентерефталата в области длин волн от 400 до 800 нм не должна превышать 0,05.

Оптическая плотность испытуемого раствора Б в области длин волн от 400 до 800 нм в кварцевой кювете с толщиной слоя 1 см, измеренная относительно воды, не должна превышать 0,05.

Кислотность или щёлочность

К 50 мл испытуемого раствора А прибавляют 0,15 мл раствора бромфенолового синего. Окраска раствора должна изменяться от жёлтой к синей при прибавлении не более 0,5 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида.

К 50 мл испытуемого раствора А прибавляют 0,2 мл раствора метилового оранжевого. Окраска раствора должна изменяться от жёлтой до оранжевой при прибавлении не более 0,5 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты.

Восстанавливающие вещества

В мерную колбу с притёртой пробкой вместимостью 100 мл помещают 20 мл испытуемого раствора А, прибавляют 2 мл 0,5 М раствора серной кислоты и 20 мл 0,002 М раствора калия перманганата и кипятят с обратным холодильником в течение 3 мин, сразу охлаждают. Прибавляют в колбу 1,0 г калия йодида и полученный раствор немедленно титруют 0,01 М раствором натрия тиосульфата до обесцвечивания, используя в качестве индикатора 0,25 мл крахмала раствора 1 %.

Параллельно проводят контрольный опыт, используя 20 мл воды вместо 20 мл испытуемого раствора А.

Разность между израсходованным объёмом 0,01 М раствора натрия тиосульфата при титровании контрольного и испытуемого раствора не должна превышать 0,5 мл.

Вещества, растворимые в диоксане. Не более 3 %.

В колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 2,0 г испытуемого образца, прибавляют 20 мл диоксана и нагревают с обратным холодильником в течение 2 ч. Выпаривают на водяной бане досуха 10 мл полученного раствора и высушивают остаток при температуре 100–105° C. Масса остатка должна быть не более 30 мг.

Алюминий. Не более 1 ppm (0,0001 %). Испытание проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (ОФС«Атомно-эмиссионная спектрометрия»).

Испытуемый раствор В.

Стандартные растворы. Готовят разведением алюминия стандартного раствора 200 мкг/мл (ОФС «Алюминий») хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М.

Длина волны. Измеряют интенсивность эмиссии алюминия при длине волны 396,15 нм, регулируя спектральный фон на уровне 396,25 нм.

Проверяют отсутствие алюминия в используемой хлористоводородной кислоте.

Сурьма. Не более 0,0001 %. Испытание проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (ОФС«Атомно-эмиссионная спектрометрия»).

Испытуемый раствор Г.

Стандартный раствор 100 мкг/мл сурьмы-иона. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,274 г (точная навеска) сурьмы калия тартрата C4H4K2O6, растворяют в 500 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартные растворы. Готовят разведением стандартного раствора 100 мкг/мл сурьмы-иона натрия гидроксида раствором 0,01 М.

Длина волны. Измеряют интенсивность эмиссии сурьмы при длине волны 231,15 нм или 217,58 нм, регулируя спектральный фон на уровне 231, 05 нм.

Барий. Не более 1 ppm (0,0001 %). Испытание проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия»).

Испытуемый раствор В.

Стандартный раствор 50 мкг/мл барий-иона. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,178 г (точная навеска) бария хлорида BaCl2·2H2O, растворяют в воде, перемешивают и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор разводят в 20 раз водой непосредственно перед использованием.

Стандартные растворы. Готовят разведением стандартного раствора 50 мкг/мл барий-иона хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М.

Длина волны. Определение проводят, измеряя интенсивность эмиссии бария при длине волны 455,40 нм, регулируя спектральный фон на уровне 455,30 нм.

Проверяют отсутствие бария в используемой хлористоводородной кислоте.

Кобальт. Не более 1 ppm (0,0001 %). Испытание проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия»).

Испытуемый раствор В.

Стандартный раствор 100 мкг/мл кобальт-иона. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,494 г (точная навеска) кобальта нитрата Co(NO3)2·6H2O, растворяют в 500 мл азотной кислоты раствора 1 М и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартные растворы кобальт-иона. Готовят разведением стандартного раствора 100 мкг/мл кобальт-иона хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М.

Длина волны. Определение проводят, измеряя интенсивность эмиссии кобальта при длине волны 228,62 нм, регулируя спектральный фон на уровне 228,50 нм.

Проверяют отсутствие кобальта в используемой хлористоводородной кислоте.

Германий. Не более 1 ppm (0,0001 %). Испытание проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия»).

Испытуемый раствор Г.

Стандартный раствор 100 мкг/мл германий-иона. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,307 г (точная навеска) аммония гексафторгерманиата (NH4)2GeF6, растворяют фтористоводородной кислоты растворе 0,01 %, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают.

Стандартные растворы. Готовят разведением стандартного раствора 100 мкг/мл германий-иона натрия гидроксида раствором 0,01 М.

Длина волны. Определение проводят, измеряя интенсивность эмиссии германия при длине волны 206,87 нм или 265,12 нм, регулируя спектральный фон на уровне 206,75 нм.

Марганец. Не более 1 ppm (0,0001 %). Испытание проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия»).

Испытуемый раствор В.

Стандартный раствор 100 мкг/мл марганец-иона. в мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,308 г (точная навеска) марганца сульфата MnSO4·H2O, растворяют в 500 мл азотной кислоты раствора 1 М, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают.

Стандартные растворы. Готовят разведением стандартного раствора 100 мкг/мл марганец-иона хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М.

Длина волны. Измеряют интенсивность эмиссии марганца при длине волны 257,61 нм, регулируя спектральный фон на уровне 257,50 нм.

Проверяют отсутствие марганца в используемой хлористоводородной кислоте.

Титан. Не более 1 ppm (0,0001 %). Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия»).

Испытуемый раствор В.

Стандартный раствор 100 мкг/мл титан-иона. Растворяют 0,100 г (точная навеска) титана, при необходимости нагревая, в 100 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, разведённой водой до объёма 150 мл, после охлаждения доводят объём раствора водой до 1000 мл.

Стандартные растворы. Готовят разведением стандартного раствора 100 мкг/мл титан-иона хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М.

Длина волны. Измеряют интенсивность эмиссии титана при длине волны 323, 45 нм или 334,94 нм, регулируя спектральный фон на уровне 323,35 нм.

Проверяют отсутствие титана в используемой хлористоводородной кислоте.

Цинк. Не более 1 ppm (0,0001 %). Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (ОФС«Атомно-эмиссионная спектрометрия»).

Испытуемый раствор В.

Стандартный раствор 100 мкг/мл цинк-иона. В мерной колбе вместимостью 100 мл помещают 0,440 г (точная навеска) ZnSO4·7H2O, растворяют в 1,0 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и доводят объём раствора водой до метки и перемешивают.

Раствор разводят водой в 10 раз непосредственно перед использованием.

Стандартные растворы. Готовят разведением стандартного раствора 100 мкг/мл цинк-иона хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М.

Длина волны. Измеряют интенсивность эмиссии цинка при длине волны 213,86 нм, регулируя спектральный фон на уровне 213,75 нм.

Проверяют отсутствие цинка в используемой хлористоводородной кислоте.

Сульфатная зола. Не более 0,5 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют около 1 г (точная навеска) испытуемого образца.

###### Испытания упаковки

Готовую упаковку (систему упаковки) из полиэтилентерефталатов подвергают испытаниям по показателям, указанным для упаковочных материалов на основе полиэтилентерефталатов и дополнительно по показателям «Общее количество терефталоильных компонентов» и «Этиленгликоль».

Пробоподготовка

Достаточное количество упаковок (систем упаковок) из полиэтилентерефталата и полиэтилентерефталата-гликоль заполняют соответствующими экстрагентами на 90 % от их номинального объёма, чтобы получить не менее 30 мл образца для испытаний. Заполняют экстрагентами такое же количество аналогичных упаковок из стекла, используемых в качестве контрольных растворов. Полимерные и стеклянные упаковки закрывают герметично, используя укупорочные средства. Выдерживают упаковки с испытуемыми и контрольными растворами при 49° С в течение 10 суток. После охлаждения до комнатной температуры, образцы используют для дальнейших испытаний. Испытуемые образцы в другие ёмкости (упаковки) не переносят.

Испытуемый раствор Д. Экстрагент для полиэтилентерефталата – спирт 50 %, для полиэтилентерефталата-гликоля – спирт 25 %.

Испытуемый раствор Е. Экстрагент – п-гептан.

Испытуемый раствор Ё. Экстрагент – вода.

Общее количество терефталоильных компонентов. Не более 1 ppm (0,0001%). Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Оптическая плотность испытуемых растворов Д, экстрагированных спиртом 50 % (для полиэтилентерефталата) или спиртом 25 % (для полиэтилентерефталата-гликоля) в области длины волны с максимумом поглощения около 244 нм, в кварцевой кювете с толщиной слоя 1 см, измеренная по сравнению с соответствующим контрольным образцом из стеклянной упаковки, не должна превышать 0,15.

Оптическая плотность испытуемых растворов Е,
экстрагированных п-гептаном (для полиэтилентерефталата и полиэтилентерефталата-гликоля) в области длины волны с максимумом поглощения около 240 нм, в кварцевой кювете с толщиной слоя 1 см, измеренная по сравнению с соответствующим контрольным образцом раствора из стеклянной упаковки, не должна превышать 0,15.

Этиленгликоль. Не более 1 ppm (0,0001%). Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Стандартный раствор 1 мкг/мл этиленгликоля. Точную навеску этиленгликоля растворяют в рассчитанном объёме воды для получения стандартного раствора этиленгликоля 1 мкг/мл.

Испытуемые растворы. Используют испытуемые растворы Ё, экстрагированные водой (для полиэтилентерефталата и полиэтилентерефталата-гликоля).

Испытание рекомендуется проводить под вытяжкой. В три мерные колбы вместимостью 10 мл помещают: в первую – 1,0 мл стандартного раствора 1 мкг/мл этиленгликоля, во вторую – 1,0 мл испытуемого раствора, в третью – 1,0 мл контрольного раствора из стеклянной упаковки с водой. В каждую из трёх колб прибавляют по 100 мкл раствора йодной кислоты 1,25 %, перемешивают, вращая колбы, оставляют на 60 мин. В каждую колбу добавляют по 1,0 мл раствора натрия гидросульфита 1 %, перемешивают. В каждую колбу добавляют по 100 мкл раствора хромотроповой кислоты натриевой соли 0,1 % в серной кислоте концентрированной, перемешивают. Осторожно, не допуская сильного вспенивания, в каждую колбу добавляют по 6 мл серной кислоты концентрированной, перемешивают и дают остыть до комнатной температуры. Каждый из трёх растворов осторожно доводят серной кислотой разведённой до метки и перемешивают. Разбавление серной кислоты приводит к существенному нагреву смеси, раствор может вскипеть.

Определяют оптическую плотность стандартного и испытуемого растворов.

Оптическая плотность испытуемых растворов Ё, экстрагированных водой (для полиэтилентерефталата и полиэтилентерефталата-гликоля) в области длины волны с максимумом поглощения примерно 575 нм, в кварцевой кювете с толщиной слоя 1 см, измеренная по сравнению с соответствующим контрольным образцом из стеклянной упаковки, не должна превышать оптическую плотность стандартного раствора.

Примечания

1. Все растворы следует анализировать в течение 1 часа после добавления раствора хромотроповой кислоты натриевой соли 0,1 % в серной кислоте концентрированной.

2. Приготовление серной кислоты разбавленной.

К 50 мл воды медленно, при постоянном перемешивании, прибавляют 50 мл серной кислоты концентрированной, дают остыть до комнатной температуры.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0012 Упаковочные материалы на основе непластифицированного поливинилхлорида для лекарственных препаратов в твёрдой лекарственной форме для приёма внутрь

Вводится впервые

Непластифицированный поливинилхлорид (винипласт), используемый в производстве упаковки, предназначенной для твёрдых лекарственных форм, может состоять из поливинилхлорида/винилацетата или смеси поливинилхлорида и поливинилацетата или поливинилхлорида. В упаковочном материале на основе непластифицированного поливинилхлорида содержание поливинилхлорида, рассчитанное по содержанию хлора, должно быть не менее 80 %. Упаковочный материал может содержать не более 15 % сополимеров на основе акриловой и/или метакриловой кислот и/или их эфиров, и/или на основе стирола и/или бутадиена.

###### Особенности технологии

Методы полимеризации, используемые при производстве непластифицированного поливинилхлорида, должны гарантировать остаточное содержание винилхлорида в материале менее 0,0001 % (1 ppm). Производственный процесс должен быть валидирован для подтверждения того, что производимый упаковочный материал выдерживает следующие испытания.

Винилхлорид. Испытание проводят методом газовой хроматографии (ОФС «Газовая хроматография») во время производственного процесса.

Раствор внутреннего стандарта. С помощью микрошприца, погружая кончик иглы в растворитель, к 20,0 мл диметилацетамида прибавляют 10 мкл эфира. Непосредственно перед использованием разбавляют раствор диметилацетамидом в 1000 раз.

Испытуемый раствор. Во флакон вместимостью 50 мл помещают 1,000 г испытуемого образца и прибавляют 10,0 мл раствора внутреннего стандарта. Флакон герметично закрывают пробкой, встряхивают, избегая контакта жидкости и пробки. Помещают флакон на водяную баню при температуре 60±1 °С, выдерживают в течение 2 ч.

Раствор винилхлорида. Готовят в вытяжном шкафу. Во флакон вместимостью 50 мл помещают 50,0 мл диметилацетамида, закрывают герметично пробкой и взвешивают с точностью до 0,1 мг. Полиэтиленовый или полипропиленовый шприц вместимостью 50 мл наполняют газообразным винилхлоридом, чтобы газ оставался в контакте со шприцем в течение 3 мин, затем газ удаляют и шприц снова наполняют 50 мл газообразного винилхлорида. К шприцу присоединяют иглу для подкожного введения и уменьшают объём газа в шприце с 50 до 25 мл. Оставшиеся 25 мл винилхлорида медленно вводят во флакон, осторожно встряхивая и избегая контакта жидкости с иглой. Выполняют повторное взвешивание флакона; увеличение массы должно составлять около 60 мг (1 мкл полученного раствора содержит около 1,2 мкг винилхлорида). Флакон выдерживают в течение 2 ч. К 1 объёму раствора винилхлорида прибавляют 3 объёма диметилацетамида. Раствор винилхлорида хранят в холодильнике.

Растворы сравнения. В 6 одинаковых флаконов вместимостью 50 мл помещают по 10,0 мл раствора внутреннего стандарта и герметично закрывают пробками. В 5 флаконов с помощью микрошприца вводят 1 мкл, 2 мкл, 3 мкл, 5 мкл и 10 мкл раствора винилхлорида, получая 6 растворов с содержанием 0 мкг, около 0,3 мкг, около 0,6 мкг, около 0,9 мкг, около 1,5 мкг и около 3 мкг винилхлорида. Встряхивают, избегая контакта жидкости с пробкой. Помещают флаконы на водяную баню при температуре 60±1 °С и выдерживают в течение 2 ч.

Условия хроматографирования

Колонка | 3 м × 3 мм, диатомит силанизированный для газовой хроматографии, импрегнированный 5 % диметилстеарамида и 5 % макрогола 400;
Газ-носитель | азот для хроматографии;
Скорость газа-носителя | 30 мл/мин;
Детектор | пламенно-ионизационный;
Объем вводимой пробы | 1 мл парогазовой фазы.

Температурная программа

| Температура, °С;
Колонка | 45;
Инжектор | 100;
Детектор | 150.

Хроматографируют растворы сравнения и испытуемый раствор.

Добавки (ОФС «Добавки к полимерным материалам для фармацевтического применения»). Для придания упаковке, предназначенной для твёрдых лекарственных форм, необходимых химических, физических и механических свойств, обеспечения стабильности лекарственного средства, возможности использовать непластифицированный поливинилхлорид по назначению, в полимер могут быть введены добавки, перечень и содержание которых должны быть регламентированы.

В непластифицированный поливинилхлорид, независимо от назначения производимой из него упаковки, могут быть введены следующие добавки в максимально допустимом количестве:

- эпоксидированное соевое масло с содержанием кислорода в эпоксидной группе от 6 % до 8 % и йодным числом не более 6 для материалов стабилизированных оловом – не более 2 %;

- эпоксидированное соевое масло с содержанием кислорода в эпоксидной группе от 6 % до 8 % и йодным числом не более 6 для материалов нестабилизированных оловом – не более 3 %;

- кальциевые, магниевые или цинковые соли алифатических жирных кислот, содержащие более семи атомов углерода или смеси этих веществ – не более 1,5 %;

- воск – не более 4 %;

- парафин жидкий (вазелиновое масло) – не более 1,5 %;

- гидрогенизированные масла или эфиры алифатических жирных кислот – не более 2 %;

- суммарное содержание трёх приведённых выше смазывающих добавок – не более 4 %;

- эфиры макрогола – не более 1,5 %;

- сорбит – не более 1,5 %;

- 2,4-динонилфенилфосфит или ди(4-нонилфенил)фосфит или трис(нонилфенил)фосфит – не более 1 %;

- кальция карбонат – не более 1 %;

- кремния диоксид – не более 1 %.

Упаковочные материалы на основе непластифицированного поливинилхлорида могут содержать одну из следующих групп стабилизаторов (где изооктилом является, например, 2-этилгексил):

- олово в виде добавки, состоящей из смеси ди (изооктил)2,2'-[(диоктилстаннилен)бис(тио)]диацетата и содержащей около 27 % три (изооктил)2,2',2″-[(монооктилстаннилидин)трис(тио)] триацетата – не более 0,25 %;

- олово в виде смеси, содержащей не более 76 % ди(изооктил)2,2'-[(диметилстаннилен)бис(тио)]диацетата и не более 85 % три (изооктил)2,2',2″-[(монооктилстаннилидин)трис(тио)] триацетата – не более 0,25 %;

- олово, как три(изооктил)2,2',2″-[(монооктилстаннилидин)трис(тио)] триацетата – не более 0,25 %;

- 1-фенилэйкозан-1,3-дион(бензоилстеароилметан) – не более 1 %.

Упаковочные материалы на основе непластифицированного поливинилхлорида могут содержать красители или пигменты при условии, что подтверждена безопасность материала. Для обеспечения непрозрачности упаковки в упаковочный материал в качестве добавки вводят титана диоксид.

Упаковка для твёрдых лекарственных форм, получаемая с использованием упаковочного материала на основе непластифицированного поливинилхлорида, представляет собой упаковку (флаконы, банки, ленты, контурные ячейковые упаковки и др.), отличающуюся, как правило, достаточной твёрдостью, жёсткостью. При проведении необходимых испытаний на совместимость упаковки и её содержимого, упаковочные материалы на основе непластифицированного поливинилхлорида могут быть подходящими для производства упаковки для суппозиториев.

Общие требования к упаковочным материалам и упаковке из полимерных материалов для лекарственных средств установлены ОФС «Упаковка лекарственных средств», ОФС «Упаковка и укупорочные средства из полимерных материалов для фармацевтического применения».

###### Свойства

Описание. Непластифицированный поливинилхлорид выпускают в виде порошка, гранул. После трансформации полимер может представлять собой пластинки, листы различной толщины, плёнку, готовую упаковку.

Растворимость. Растворим в тетрагидрофуране, мало растворим в метиленхлориде, нерастворим в воде и этаноле.

При сжигании пламя окрашивается в оранжево-жёлтый цвет с зелёной каймой с выделением густого чёрного дыма.

###### Идентификация

Пробоподготовка. Образцы непластифицированного поливинилхлорида для проведения испытания могут представлять собой вырезанные из полимерного материала (из пластин, листов, плёнки, готовой упаковки и т.п.) кусочки необходимых размеров, или растворы и жидкости, полученные экстрагированием непластифицированного поливинилхлорида различными растворителями. Испытуемый материал, предназначенный для экстрагирования, как правило, разрезают на части с максимальным размером не более 1 см и подготавливают несколько образцов, проводя экстрагирование упаковочного материала различными растворителями: водой, органическими растворителями, кислотой.

Испытуемый раствор А. В колбу из боросиликатного стекла помещают 25 г испытуемого образца, прибавляют 500 мл воды, закрывают горлышко колбы стаканом из боросиликатного стекла. Выдерживают в автоклаве при температуре 121° С в течение 20 мин. Полученное извлечение охлаждают до комнатной температуры, затем раствор декантируют, и объём раствора доводят водой до 500 мл.

Испытуемый раствор Б. Растворяют 5,0 г испытуемого образца в 80 мл тетрагидрофурана и доводят объём раствора тем же растворителем до 100 мл. При необходимости раствор фильтруют, при этом раствор может иметь опалесценцию. К 20 мл полученного раствора по каплям и при осторожном перемешивании прибавляют 70 мл спирта 96 %. Охлаждают на ледяной бане в течение 1 ч, затем фильтруют или центрифугируют (Остаток А). Остаток А промывают спиртом 96 %, прибавляя промывные воды к фильтрату или надосадочной жидкости, доводят объём раствора спиртом 96 % до 100 мл.

Испытуемый раствор В. В колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 5 г испытуемого образца, прибавляют 100 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты и кипятят с обратным холодильником при постоянном перемешивании в течение 1 ч. Полученный раствор охлаждают до комнатной температуры и декантируют.

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр испытуемого образца в области от 3800 до 650 см-1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца непластифицированного поливинилхлорида и иметь максимумы поглощения при: 2910 см−1 , 1425 см−1, 1330 см−1, 1252 см−1, 958 см−1, 690 см−1 (допустимое отклонение ±5 см−1).

Испытуемый образец. Остаток А, полученный при подготовке испытуемого раствора Б, растворяют в 5 мл тетрагидрофурана. Несколько капель полученного раствора помещают на плёнку натрия хлорида и выпаривают в сушильном шкафу при температуре 100-105 °С досуха.

###### Испытания

Прозрачность раствора. Опалесценция испытуемого раствора А не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Испытуемый раствор А должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод II.).

Светопоглощающие примеси. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях».

Испытание для испытуемого раствора А. Выпаривают 100 мл испытуемого раствора А досуха. Сухой остаток растворяют в 5,0 мл гексана и, при необходимости, фильтруют через фильтр, предварительно промытый гексаном. Оптическая плотность полученного раствора в области длин волн от 250 до 310 нм не должна превышать 0,3 для материала, предназначенного для производства упаковки твёрдых лекарственных форм.

Испытание для испытуемого раствора Б. Оптическая плотность испытуемого раствора Б в области длин волн от 250 до 330 нм не должна превышать 1,0 для упаковочных материалов, не содержащих 1-фенилэйкозан-1,3-дион (бензоилстеароилметан).

Оптическая плотность испытуемого раствора Б, разбавленного в 10 раз спиртом 96 % в области длин волн от 250 до 330 нм не должна превышать 1,0 для упаковочных материалов, содержащих 1-фенилэйкозан-1,3-дион (бензоилстеароилметан).

Олово. Не более 0,25 % олова. Испытание упаковочных материалов на основе непластифицированного поливинилхлорида, стабилизированных оловом.

Раствор стандартного образца олова. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 81 мг фармакопейного стандартного образца, состоящего из смеси ди(изооктил)2,2'-[(диоктилстаннилен)бис(тио)] диацетата и примерно 27 % три(изооктил)2,2',2″-[(монооктилстаннилидин)трис(тио)] триацетата, растворяют в тетрагидрофуране и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мл полученного раствора и доводят объём раствора до метки спиртом 96 %.

В пробирку помещают 0,1 мл испытуемого раствора Б, прибавляют 0,05 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты, 0,5 мл раствора калия йодида 16,6 % и 5 мл спирта 96 %, тщательно перемешивают и оставляют на 5 мин. К полученному раствору прибавляют 9 мл воды и 0,1 мл раствора натрия сульфита 0,5 %, тщательно перемешивают. Прибавляют 1,5 мл раствора дитизона 0,05 %, только что разбавленного в 100 раз метиленхлоридом, встряхивают в течение 15 с и выдерживают в течение 2 мин.

Параллельно готовят раствор сравнения, используя 0,1 мл раствора стандартного образца олова.

Любое фиолетовое окрашивание нижнего слоя в пробирке с испытуемым раствором Б должно быть менее интенсивным, чем окрашивание в пробирке с раствором сравнения. Зеленовато-синее окрашивание раствора дитизона в присутствии олова переходит в розовое.

Олово. Не более 0,0025 % олова. Испытание упаковочных материалов на основе непластифицированного поливинилхлорида, не стабилизированных оловом.

В пробирку помещают 5,0 мл испытуемого раствора Б, прибавляют 0,05 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты и 0,5 мл раствора калия йодида 16,6 %, тщательно перемешивают и оставляют на 5 мин. К полученному раствору прибавляют 9 мл воды и 0,1 мл раствора натрия сульфита 0,5 % и тщательно перемешивают. Если полученный раствор бесцветный, прибавляют раствор натрия сульфита 0,5 % порциями по 0,05 мл. Прибавляют 1,5 мл раствора дитизона 0,05 %, только что разбавленного в 100 раз метиленхлоридом, встряхивают в течение 15 сек. и выдерживают в течение 2 мин.

Параллельно готовят раствор сравнения, используя 0,05 мл раствора стандартного образца олова.

Любое фиолетовое окрашивание нижнего слоя в пробирке с испытуемым раствором Б должно быть менее интенсивным, чем окрашивание в пробирке с раствором сравнения.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3Б).

Испытуемый раствор. Испытуемый раствор В, для определения используют 12 мл раствора.

Стандартный раствор. Готовят, используя 10 мл стандартного раствора 1 мкг/мл свинец-иона, приготовленного из стандартного раствора 10 мкг/мл свинец-иона разбавлением водой в 10 раз. Срок хранения 1 сутки.

Цинк. Не более 0,01 %. Определение проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Испытуемый раствор. Испытуемый раствор В, разбавленный в 10 раз водой.

Стандартный раствор цинка 0,5 мкг/мл. Разводят цинка стандартный раствор 5 мг/мл 0,01 М раствором хлористоводородной кислоты в 1000 раз. Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Проверяют отсутствие цинка в используемой хлористоводородной кислоте.

Величина абсорбции испытуемого раствора при длине волны 214,0 нм не должна превышать величину абсорбции эталонного раствора цинка 0,5 мкг/мл.

Сульфатная зола. Не более 1,0 %. (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют около 1,0 г (точная навеска) испытуемого образца.

Для упаковочных материалов на основе непластифицированного поливинилхлорида, содержащих добавку титана диоксида, добавляемую для придания материалу непрозрачности, содержание сульфатной золы должно быть не более 4,0 %.

###### Количественное определение

Определение проводят методом сжигания в кислороде (ОФС «Метод сжигания в колбе с кислородом»), используя 50,0 мг испытуемого образца.

Продукты сжигания растворяют в 20 мл 1 М раствора натрия гидроксида. К полученному раствору прибавляют 2,5 мл кислоты азотной концентрированной. Титруют 0,1 М раствором серебра нитрата, определяя конечную точку потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 6,25 мг поливинилхлорида.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0013 Упаковочные материалы на основе непластифицированного поливинилхлорида для непарентеральных водных растворов

Вводится впервые

Упаковка водных растворов, получаемая с использованием упаковочного материала на основе непластифицированного поливинилхлорида, представляет собой первичную упаковку (флаконы, банки, контурные ячейковые упаковки и др.), отличающуюся, как правило, достаточной твёрдостью, жёсткостью. При проведении необходимых испытаний на совместимость упаковки и её содержимого, упаковочные материалы на основе непластифицированного поливинилхлорида могут быть подходящими для производства упаковки для суппозиториев.

Непластифицированный поливинилхлорид (винипласт), используемый в производстве упаковки, предназначенной для водных растворов, может состоять из поливинилхлорида/винилацетата или смеси поливинилхлорида и поливинилацетата или поливинилхлорида. Содержание поливинилхлорида, рассчитанное по содержанию хлора, должно быть не менее 80 %. Упаковочный материал может содержать не более 15 % сополимеров на основе акриловой и/или метакриловой кислот и/или их эфиров, и/или на основе стирола и/или бутадиена.

Общие требования к упаковочным материалам и упаковке из полимерных материалов для лекарственных средств установлены ОФС «Упаковка лекарственных средств», ОФС «Маркировка лекарственных средств», ОФС «Упаковка и укупорочные средства из полимерных материалов для фармацевтического применения».

###### Особенности технологии

Методы полимеризации, используемые при производстве непластифицированного поливинилхлорида, должны гарантировать остаточное содержание винилхлорида в материале менее 0,0001 % (1 ppm). Производственный процесс должен быть валидирован для подтверждения того, что производимый упаковочный материал выдерживает следующие испытания.

Винилхлорид. Испытание проводят методом газовой хроматографии (ОФС «Газовая хроматография») во время производственного процесса.

Раствор внутреннего стандарта. С помощью микрошприца, погружая кончик иглы в растворитель, к 20,0 мл диметилацетамида прибавляют 10 мкл эфира. Непосредственно перед использованием разбавляют раствор диметилацетамидом в 1000 раз.

Испытуемый раствор. Во флакон вместимостью 50 мл помещают 1,000 г испытуемого образца и прибавляют 10,0 мл раствора внутреннего стандарта. Флакон герметично закрывают пробкой, встряхивают, избегая контакта жидкости и пробки. Помещают флакон на водяную баню при температуре 60±1 °С и выдерживают в течение 2 ч.

Раствор винилхлорида. Раствор готовят в вытяжном шкафу. Во флакон вместимостью 50 мл помещают 50,0 мл диметилацетамида, закрывают герметично пробкой и взвешивают с точностью до 0,1 мг. Полиэтиленовый или полипропиленовый шприц вместимостью 50 мл наполняют газообразным винилхлоридом, таким образом, чтобы газ контактировал со шприцем в течение 3 мин, затем газ удаляют и шприц снова наполняют 50 мл газообразного винилхлорида. К шприцу присоединяют иглу для подкожного введения и уменьшают объём газа в шприце с 50 мл до 25 мл. Оставшиеся 25 мл винилхлорида медленно вводят во флакон, осторожно встряхивая и избегая контакта жидкости с иглой. Выполняют повторное взвешивание флакона; увеличение массы должно составлять около 60 мг (1 мкл полученного раствора содержит около 1,2 мкг винилхлорида). Флакон выдерживают в течении 2 ч. Раствор винилхлорида А—диметилацетамид 1:3. Раствор винилхлорида хранят в холодильнике.

Растворы сравнения. В 6 одинаковых флаконов вместимостью 50 мл помещают по 10,0 мл раствора внутреннего стандарта и герметично закрывают пробками. В 5 флаконов с помощью микрошприца вводят 1 мкл, 2 мкл, 3 мкл, 5 мкл и 10 мкл раствора винилхлорида Б, получая 6 флаконов с содержанием винилхлорида около 0 мкг, около 0,3 мкг, около 0,6 мкг, около 0,9 мкг, около 1,5 мкг и около 3 мкг, соответственно. Встряхивают, избегая контакта жидкости с пробкой. Помещают флаконы на водяную баню при температуре 60±1 °С и выдерживают в течение 2 ч.

Условия хроматографирования

Колонка | 3 м × 3 мм, диатомит силанизированный для газовой хроматографии, импрегнированный 5 % диметилстеарамида и 5 % макрогола 400;
Газ-носитель | азот для хроматографии;
Скорость потока | 30 мл/мин;
Детектор | пламенно-ионизационный;
Объём пробы | 1 мл парогазовой фазы.

Температурная программа

| Температура, °С;
Колонка | 45;
Инжектор | 100;
Детектор | 150.

Хроматографируют растворы сравнения и испытуемый раствор.

Добавки (ОФС «Добавки к полимерным материалам для фармацевтического применения»). Для придания упаковке, предназначенной для водных растворов и твёрдых лекарственных форм, необходимых химических, физических и механических свойств, обеспечения стабильности лекарственного средства, возможности использовать непластифицированный поливинилхлорид по назначению, в полимер могут быть введены добавки, перечень и содержание которых должны быть регламентированы.

В непластифицированный поливинилхлорид, независимо от назначения производимой из него упаковки, могут быть введены следующие добавки в максимально допустимом количестве:

- эпоксидированное соевое масло с содержанием кислорода в эпоксидной группе от 6 % до 8 % и йодным числом не более 6 – не более 8 %;

- кальциевая соль или цинковые соли алифатических жирных кислот, содержащие более семи углеродных атомов, или смеси этих веществ – не более 1,5 %;

- парафин жидкий (вазелиновое масло) – не более 1,5 %;

- воск – не более 1,5 %;

- гидрогенизованные масла или эфиры алифатических жирных кислот – не более 2 %;

- эфиры макрогола – не более 1,5 %;

- сорбит – не более 1,5 %;

- 2,4-динонилфенилфосфит или ди(4-нонилфенил)фосфит или трис(нонилфенил)фосфит – не более 1 %.

Максимально допустимое содержание следующих добавок зависит от назначения упаковки, получаемой из непластифицированного поливинилхлорида.

Упаковочные материалы на основе непластифицированного поливинилхлорида могут содержать одну из следующих групп стабилизаторов:

- олово в виде добавки, состоящей из смеси ди(изооктил) 2,2'-[(диоктилстаннилен)бис(тио)]диацетата, содержащей около 27 % три(изооктил)2,2',2″-[(монооктилстаннилидин)трис(тио)]триацетата – не более 0,25 %;

- олово в виде смеси, содержащей не более 76 % ди(изооктил) 2,2'-[(диметилстаннилен)бис(тио)]диацетата и не более 85 % три(изооктил)2,2',2″-[(монооктилстаннилидин)трис(тио)]триацетата – не более 0,25 %;

- 1-фенилэйкозан-1,3-дион (бензоилстеароилметан) или 2-(4-додецил-фенил)индол или дидодецил 1,4-дигидропиридин-2,6-диметил-3,5-дикарбоксилат – не более 1 % или не более 1 % смеси обоих веществ для материала, предназначенного для производства упаковки водных растворов.

Упаковочные материалы на основе непластифицированного поливинилхлорида могут содержать красители или пигменты при условии, что подтверждена безопасность материала. Для обеспечения непрозрачности упаковки в упаковочный материал в качестве добавки вводят титана диоксид.

###### Свойства

Описание. Непластифицированный поливинилхлорид выпускают в виде порошка, гранул. После трансформации полимер может представлять собой пластинки, листы различной толщины, плёнку, готовую упаковку.

Растворимость. Растворим в тетрагидрофуране, мало растворим в метиленхлориде, нерастворим в воде и этаноле.

При сжигании пламя окрашивается в оранжево-жёлтый цвет с зелёной каймой с выделением густого чёрного дыма.

###### Идентификация

Пробоподготовка. Образцы непластифицированного поливинилхлорида для проведения испытания могут представлять собой вырезанные из полимерного материала (из пластин, листов, плёнки, готовой упаковки и т.п.) кусочки необходимых размеров или растворы и жидкости, полученные экстрагированием непластифицированного поливинилхлорида различными растворителями. Испытуемый материал, предназначенный для экстрагирования, как правило, разрезают на части с максимальным размером не более 1 см и подготавливают несколько образцов, проводя экстрагирование упаковочного материала различными растворителями: водой, органическими растворителями, кислотой.

Испытуемый раствор А. В колбу из боросиликатного стекла помещают 25 г испытуемого материала, прибавляют 500 мл воды, закрывают горлышко колбы стаканом из боросиликатного стекла. Выдерживают в автоклаве при температуре 121 °С в течение 20 мин. Полученное извлечение охлаждают до комнатной температуры, затем раствор декантируют и доводят объём раствора водой до 500 мл.

Испытуемый раствор Б. Растворяют 5,0 г испытуемого образца в 80 мл тетрагидрофурана и доводят объём раствора тем же растворителем до 100 мл. При необходимости раствор фильтруют, при этом раствор может иметь опалесценцию. К 20 мл полученного раствора по каплям и при осторожном перемешивании прибавляют 70 мл спирта 96 %. Охлаждают на ледяной бане в течение 1 ч, фильтруют или центрифугируют (Остаток А). Остаток А промывают спиртом 96 %, прибавляя промывные воды к фильтрату или надосадочной жидкости, доводят объём раствора спиртом 96 % до 100 мл.

Испытуемый раствор В. В колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 5 г испытуемого образца, прибавляют 100 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты и кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч при постоянном перемешивании. Полученный раствор охлаждают до комнатной температуры и декантируют.

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр испытуемого образца в области от 3800 до 650 см-1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца непластифицированного поливинилхлорида и иметь максимумы поглощения при: 2910 см−1 , 1425 см−1, 1330 см−1, 1252 см−1, 958 см−1, 690 см−1 (допустимое отклонение ±5 см−1).

Испытуемый образец. Остаток А, полученный при подготовке испытуемого раствора Б, растворяют в 5 мл тетрагидрофурана. Несколько капель полученного раствора помещают на плёнку натрия хлорида и выпаривают в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С досуха.

###### Испытания

Прозрачность раствора. Опалесценция испытуемого раствора А не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Испытуемый раствор А должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод II.)

Светопоглощающие примеси. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях».

Испытание для испытуемого раствора А. Выпаривают досуха 100 мл испытуемый раствор А. Сухой остаток растворяют в 5,0 мл гексана и, при необходимости, фильтруют через фильтр, предварительно промытый гексаном. Оптическая плотность полученного раствора в области длин волн от 250 до 310 нм не должна превышать 0,25 для упаковочного материала на основе непластифицированного поливинилхлорида для водных растворов.

Испытание для испытуемого раствора Б. Оптическая плотность испытуемого раствора Б в области длин волн от 250 до 310 нм не должна превышать:

- 0,2 – для упаковочных материалов, стабилизированных оловом;

- 0,4 – для упаковочных материалов, не стабилизированных оловом.

Барий. Не более 0,0002 %. Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой»).

Испытуемый раствор. Испытуемый раствор В.

Стандартный раствор бария 0,1 мкг/мл. Раствор готовят разбавлением бария стандартного раствора 50 мкг/мл 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты.

Измеряют интенсивность эмиссии бария при длине волны 455,40 нм, регулируя спектральный фон на уровне 455,30 нм.

Проверяют отсутствие бария в используемой хлористоводородной кислоте.

Поглощение испытуемого раствора при длине волны 455,40 нм не должно превышать интенсивность поглощения раствора сравнения.

Кадмий. Не более 0,00006 %. Определение проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Испытуемый раствор. Испытуемый раствор В.

Стандартный раствор кадмия 0,03 мкг/мл. Раствор готовят разбавлением кадмия стандартного раствора 0,1 мкг/мл 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты.

Проверяют отсутствие кадмия в используемой хлористоводородной кислоте.

Величина абсорбции испытуемого раствора при длине волны 228,8 нм не должна превышать величину абсорбции кадмия стандартного раствора 0,03 мкг/мл.

Олово. Не более 0,25 %. Испытание упаковочных материалов на основе непластифицированного поливинилхлорида, стабилизированных оловом.

Раствор стандартного образца олова. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 81 мг фармакопейного стандартного образца, состоящего из смеси ди(изооктил)2,2'-[(диоктилстаннилен)бис(тио)]диацетата и примерно 27 % три(изооктил)2,2',2″-[(монооктилстаннилидин)трис(тио)]триацетата, растворяют в тетрагидрофуране и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

В пробирку помещают 0,10 мл испытуемого раствора Б, прибавляют 0,05 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты, 0,5 мл раствора калия йодида 16,6 % и 5 мл спирта 96 %, тщательно перемешивают и оставляют на 5 мин. К полученному раствору прибавляют 9 мл воды и 0,1 мл натрия сульфита раствора 0,5 %, тщательно перемешивают. Прибавляют 1,5 мл дитизона раствора 0,05 %, только что разбавленного в 100 раз метиленхлоридом, встряхивают в течение 15 с и выдерживают в течение 2 мин.

Параллельно готовят раствор сравнения, используя 0,1 мл раствора стандартного образца олова.

Любое фиолетовое окрашивание нижнего слоя в пробирке с испытуемым раствором Б не должно быть более интенсивным, чем окрашивание в пробирке с раствором сравнения. Зеленовато-синее окрашивание раствора дитизона в присутствии олова переходит в розовое.

Олово. Не более 0,0025 %. Испытание упаковочных материалов на основе непластифицированного поливинилхлорида, не стабилизированных оловом.

В пробирку помещают 5,0 мл испытуемого раствора Б, прибавляют 0,05 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты и 0,5 мл калия йодида раствора 16,6 %, тщательно перемешивают и оставляют на 5 мин. К полученному раствору прибавляют 9 мл воды и 0,1 мл натрия сульфита раствора 0,5 % и тщательно перемешивают. Если полученный раствор бесцветный, прибавляют порциями по 0,05 мл натрия сульфита раствор 0,5 %. Прибавляют 1,5 мл дитизона раствора 0,05 %, только что разбавленного в 100 раз метиленхлоридом, встряхивают в течение 15 с и выдерживают в течение 2 мин.

Параллельно готовят раствор сравнения, используя 0,05 мл раствора стандартного образца олова.

Любое фиолетовое окрашивание нижнего слоя в пробирке с испытуемым раствором Б не должно быть более интенсивным, чем окрашивание в пробирке с раствором сравнения.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 4).

Испытуемый раствор. Испытуемый раствор В, для определения используют 12 мл раствора.

Стандартный раствор. Готовят, используя 10 мл стандартного раствора 1 мкг/мл свинец-иона, приготовленного из стандартного раствора 10 мкг/мл свинец-иона разбавлением водой в 10 раз. Срок хранения 1 сутки.

Цинк. Не более 0,01 %. Определение проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Испытуемый раствор. Испытуемый раствор В, разбавленный в 10 раз водой.

Стандартный раствор цинка 0,5 мкг/мл. Разводят цинка стандартный раствор 5 мг/мл 0,01 М раствором хлористоводородной кислоты в 1000 раз. Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Проверяют отсутствие цинка в используемой хлористоводородной кислоте.

Величина абсорбции испытуемого раствора при длине волны 214,0 нм не должна превышать величину абсорбции эталонного раствора цинка 0,5 мкг/мл.

Сульфатная зола. Не более 1,0 %. (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют около 1,0 г (точная навеска) испытуемого материала.

Для упаковочных материалов на основе непластифицированного поливинилхлорида, содержащих добавку титана диоксида, добавляемую для придания материалу непрозрачности, содержание сульфатной золы должно быть не более 4,0 % .

###### Количественное определение

Определение проводят методом сжигания в кислороде (ОФС «Метод сжигания в колбе с кислородом»), используя 50,0 мг испытуемого образца.

Продукты сжигания растворяют в 20 мл 1 М раствора натрия гидроксида. К полученному раствору прибавляют 2,5 мл азотной кислоты концентрированной и титруют 0,1 М раствором серебра нитрата. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 6,25 мг поливинилхлорида.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0014 Упаковка из полимерных материалов для водных растворов для инфузий

Вводится впервые

Упаковка из полимерных материалов для водных растворов для инфузий в соответствии с классификацией по типу и виду (ОФС «Упаковка лекарственных средств») представляет собой первичную упаковку различных модификаций, в которой полимерные материалы непосредственно контактируют с водным раствором для инфузий.

Упаковка из полимерных материалов для водных растворов для инфузий, как правило, имеет специальные дополнительные элементы, включая защитные и герметизирующие приспособления, обеспечивающие визуальный контроль первого вскрытия, а также герметичность и надежность соединения с инфузионной системой.

Пакеты и флаконы для инфузионных растворов, могут иметь приспособление, позволяющее осуществлять введение лекарственного препарата во время использования. Например, выпускаются полимерные пакеты, имеющие один или два порта (штуцера): один для дополнительного введения лекарственных препаратов, второй, при наличии, для подключения инфузионной системы введения с металлической или пластиковой иглой.

Упаковка из полимерных материалов для инфузионных растворов обычно снабжена элементом (кольцом), устойчивым к растяжению, который обеспечивает возможность подвешивания упаковки на стойку во время инфузионного введения лекарственного препарата.

Для сохранения стерильности первичные упаковки из полимерных материалов с водными растворами для инфузий помещают в стерильную вторичную вакуумную упаковку, представляющую собой пакет (мешок) из полимерных материалов. При вскрытии вторичной упаковки лекарственного препарата в помещениях с нормируемым классом чистоты, вводят инфузионный раствор, находящийся в стерильной упаковке, исключая при этом риск контаминации лекарственного препарата микроорганизмами окружающей среды.

Допускается, что упаковка, описанная в настоящей общей фармакопейной статье, не пригодна к применению с лекарственными препаратами в лекарственной форме эмульсии для инфузий.

Общие требования к упаковочным материалам и упаковке из полимерных материалов для лекарственных средств установлены ОФС «Упаковка лекарственных средств», ОФС «Упаковка и укупорочные средства из полимерных материалов для фармацевтического применения».

Требования к лекарственным формам, представляющим собой водные растворы для инфузий, указаны в ОФС «Лекарственные формы для парентерального применения».

###### Особенности технологии

Для производства упаковки, предназначенной для водных растворов для инфузий, используют один или несколько полимерных материалов, содержащих или не содержащих добавки (ОФС «Добавки к полимерным материалам для фармацевтического применения»). Как правило, полимерными материалами для первичной упаковки водных растворов для инфузий являются полиолефины, полиэтилен, полипропилен, поливинилхлорид.

Полимерные материалы, используемые для производства упаковки, предназначенной для водных растворов для инфузий, должны соответствовать требованиям, указанным в соответствующих ОФС на конкретный полимерный материал: ОФС «Упаковочные материалы на основе полиэтилена без добавок для лекарственных препаратов парентерального и офтальмологического применения»; ОФС «Упаковочные материалы на основе полиэтилена с добавками для лекарственных препаратов парентерального и офтальмологического применения»; ОФС «Упаковочные материалы на основе полипропилена для парентеральных и офтальмологических лекарственных форм»; ОФС «Упаковочные материалы на основе полиолефинов для лекарственных средств»; ОФС «Упаковочные материалы на основе пластифицированного поливинилхлорида для водных растворов для инфузий».

Полимерные флаконы и бутылки могут быть получены, например, из гранул полиэтилена, полипропилена методом экструзии и, при непрерывном производстве, могут быть заполнены водным раствором для инфузий и укупорены или запаяны на одной технологической линии.

Пакеты для инфузионных растворов получают с использованием моно- и многослойных полимерных пленок на основе поливинилхлорида и полиолефинов, к которым относят такие полимеры, как полиэтилен, полипропилен, полибутилен и их сополимеры.

Полученная упаковка из полимерных материалов должна выдерживать условия стерилизации, которые будут применены для стерилизации водных растворов для инфузий, помещаемых в эту упаковку. Конструкция упаковки и выбранные условия стерилизации (ОФС «Стерилизация») должны быть такими, чтобы обеспечивать возможность стерилизации всех элементов первичной упаковки, которые находятся в контакте с водным раствором для инфузий.

Система упаковки/укупорки из полимерных материалов для инфузионных растворов после наполнения и последующего укупоривания или запаивания должна быть непроницаемой для микроорганизмов.

Система упаковки/укупорки из полимерных материалов с водным раствором для инфузий должна выдерживать непредвиденные низкие температуры, которые возможны при транспортировании готового лекарственного препарата.

Упаковка должна быть достаточно прозрачной для того, чтобы обеспечить возможность визуального осмотра содержимого в любой момент времени, если это обосновано.

###### Свойства

Описание. Основные параметры и размеры, геометрические допуски, косметические дефекты, номинальная и/или полная вместимость и другие характеристики упаковки должны отвечать нормативной документации на конкретный тип и вид упаковки из полимерных материалов.

Герметичность. Пустая упаковка, предназначенная для наполнения водным раствором для инфузий, не должна иметь визуальных дефектов, которые могли бы привести к утечке жидкости.

Наполненная, закрытая укупорочными средствами или запаянная система упаковки, не должна иметь признаков потери герметичности. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение герметичности упаковки» методами, применимыми к упаковке из полимерных материалов.

###### Испытания

Упаковка, предназначенная для водных растворов для инфузий, полученная из одного или нескольких полимерных материалов, должна выдерживать испытания, указанные в ОФС «Упаковка и укупорочные средства из полимерных материалов для фармацевтического применения», а также следующие испытания, характерные для данной упаковки.

Пробоподготовка. Для проведения испытаний по показателям, характеризующим физико-химические свойства упаковки из полимерных материалов, готовят испытуемый раствор путём водной экстракции веществ из внутренней поверхности первичной упаковки из полимерного материала.

Испытуемый раствор. Упаковку наполняют водой до номинального объема, закрывают ее, по возможности используя применяемые укупорочные средства; можно закрыть упаковку чистой алюминиевой фольгой. Нагревают упаковку в автоклаве таким образом, чтобы в течение от 20 до 30 мин температура достигла 121±2 °С и выдерживают при этой температуре в течение 30 мин. Если нагревание при температуре 121 °С приводит к повреждению упаковки, то нагревание проводят при температуре 100 °С в течение 2 ч. Полученный раствор охлаждают до комнатной температуры и проводят испытания. Раствор используют в течение 4 ч после приготовления.

Контрольный раствор готовят нагреванием воды в колбе из боросиликатного стекла, закрытой чистой алюминиевой фольгой при температуре и в течение такого же времени, что и раствор испытуемого образца.

Прозрачность раствора. Испытуемый раствор должен быть прозрачным в соответствии с требованиями ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей».

Цветность раствора. Испытуемый раствор должен быть бесцветным в соответствии с требованиями ОФС «Степень окраски жидкостей».

Кислотность или щелочность. К объёму испытуемого раствора, соответствующему 4 % номинального объёма упаковки, прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствора 1 %, раствор должен оставаться бесцветным. Прибавляют 0,4 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида, окраска раствора должна измениться на розовую. Прибавляют 0,8 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты и 0,1 мл метилового красного раствора 0,05 %, окраска раствора должна измениться на оранжево-красную или красную.

Светопоглощающие примеси. Оптическая плотность испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 360 нм в кварцевой кювете с толщиной слоя 1 см, измеренная по сравнению с контрольным раствором, не должна превышать 0,20 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Восстанавливающие вещества. В колбу с притертой пробкой вместимостью 100 мл помещают 20,0 мл испытуемого раствора, прибавляют 1 мл серной кислоты разведённой 9,8 % и 20 мл 0,002 М раствора калия перманганата, кипятят в течение 3 мин и сразу охлаждают. Добавляют в колбу 1 г калия йодида и полученный раствор немедленно титруют 0,01 М раствором натрия тиосульфата до обесцвечивания, используя в качестве индикатора 0,25 мл крахмала раствора 1 %.

Параллельно проводят контрольный опыт, используя 20 мл контрольного раствора вместо 20,0 мл раствора испытуемого образца.

Разность между израсходованным объемом 0,01 М раствора натрия тиосульфата при титровании контрольного и испытуемого раствора не должна превышать 1,5 мл.

Дополнительное испытание на прозрачность и степень мутности. Упаковку, использованную до этого испытания для приготовления испытуемого раствора, после освобождения, наполняют до номинального объема «исходным эталоном» (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»), разведённым 1:200 для упаковки, полученной из полиэтилена или полипропилена и 1:400 для упаковок из других полимерных материалов.

При просматривании упаковки в проходящем свете и сравнением с аналогичной упаковкой, наполненной водой, должно быть заметно помутнение (опалесценция) суспензии в упаковке, которая была использована для приготовления испытуемого раствора.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0017 Упаковочные материалы на основе полиамида 6 для лекарственных средств

Вводится впервые

Полиамиды являются одним из самых обширных классов синтетических полимерных материалов, имеющих многочисленное количество модификаций в зависимости от метода получения и строения основного полимера, от характера специальных добавок и др.

Полиамиды относят к классу термопластических полимеров, содержащих амидную группу. В составе мономеров полиамидов присутствует амидная связь и метиленовые группы, повторяющиеся от 2 до 10 раз. Наибольшее применение для производства упаковочного материала для лекарственных средств находит полиамид 6 (химическая формула n), относящийся к группе алифатических кристаллизующихся гомополимеров, состоящий из мономеров, содержащих шесть атомов углерода, поэтому цифра 6 указана в названии полимера.

###### Особенности технологии

Полиамид 6 производят методом гидролитической полимеризации капролактама (лактама ε- аминокапроновой кислоты). В состав полиамида 6 могут быть введены добавки, представляющие собой пластификаторы, красители и др.

Метод производства полиамида 6 должен гарантировать остаточное содержание капролактама, используемого в синтезе полимера в качестве мономера, в конечном продукте – не более 1 %.

Полиамид 6 обладает высокой прочностью, эластичностью, химической устойчивостью к воздействию щелочей, разбавленных кислот, спирта, масел; изделия из полиамида 6 гипоаллергенны, прозрачны. Вместе с тем, полиамид 6 является гидрофильным полимером и может поглощать от 2,5 до 3,5 % влаги из атмосферы окружающей среды.

Для производства упаковочного материала используют, как правило, полиамидные плёнки, получаемые из расплавов или растворов полиамида 6 методами экструзии или полива. В составе комбинированного упаковочного материала многослойные плёнки, состоящие из плёнок полиамидных ориентированных, а также плёнок других полимерных материалов (например, полиэтилена, полипропилена, полиэтилентерефталата и др.), используют для производства первичных упаковок (блистеров, стрипов, саше) и различных типов и видов вторичной упаковки.

Общие требования к упаковочным материалам из полимерных материалов для лекарственных средств установлены ОФС «Упаковка лекарственных средств», ОФС «Упаковка и укупорочные средства из полимерных материалов для фармацевтического применения».

###### Свойства

Растворимость. Растворим в концентрированных минеральных кислотах, фторированных спиртах, муравьиной и уксусной кислотах концентрированных, фенолах. Нерастворим в воде, спирте, разведённых кислотах, щелочах, маслах.

###### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр испытуемого образца, в области от 3800 до 650 см-1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца полиамида 6.

- Испытуемый образец. Готовят плёнку для горячего пресса или 0,5 г испытуемого образца растворяют в 10 мл дихлорметана посредством кипячения с обратным холодильником в течение 15 мин. На стеклянную пластину с натрия хлоридом наносят несколько капель полученного раствора и выпаривают растворитель в сушильном шкафу при температуре 80° С.

2. Дифференциальная сканирующая калориметрия (ОФС «Термический анализ», метод 2). Термограмма испытуемого образца должна соответствовать термограмме стандартного образца полиамида 6. Максимальная температура плавления, полученная на кривых стандартного и испытуемого образцов не должна различаться более чем на 8,0° С.

- В тигель помещают около 12 мг испытуемого образца и проводят испытание в соответствии с ОФС «Термический анализ». Регистрируют термограммы испытуемого и стандартного образцов в атмосфере азота в установленных для полимера условиях нагревания/охлаждения. Результаты анализа значительно зависят от количества пластификатора в испытуемом образце.

- Образец полиамида 6 нагревают от комнатной температуры до 500 °С со скоростью нагревания около 20 °С/мин. Незамедлительно охлаждают образец до комнатной температуры.

###### Испытания

Пробоподготовка

Испытуемые образцы полиамида 6 для проведения испытания могут представлять собой вырезанные из полимерного материала (плёнки, пластины, листы, готовая упаковка и т.п.) кусочки необходимых размеров, или растворы, полученные экстрагированием полиамида 6 различными растворителями. Испытуемый образец, предназначенный для экстрагирования, как правило, разрезают на части с максимальной длиной стороны не более 1 см и подготавливают несколько образцов, проводя экстрагирование полиамида 6 различными растворителями: водой (Испытуемый раствор А), кислотой (Испытуемый раствор Б), фенолом (Испытуемый раствор В). Для полиамида 6 не применяют экстракцию органическими растворителями: толуолом, спиртом, тетрагидрофураном.

Испытуемый раствор А. В колбу из боросиликатного стекла с притёртой стеклянной пробкой помещают 25 г испытуемого образца, прибавляют 500 мл воды и кипятят с обратным холодильником в течение 5 ч. Остужают до комнатной температуры и фильтруют через стеклянный фильтр в мерную колбу вместимостью 500 мл, объём раствора доводят водой до метки. Срок годности раствора 4 часа.

Испытуемый раствор Б. В колбу из боросиликатного стекла с притёртой стеклянной пробкой помещают 100 г испытуемого образца, прибавляют 250 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты и кипятят с обратным холодильником при постоянном перемешивании в течение 1 ч. Охлаждают и декантируют в мерную колбу вместимостью 250 мл, доводят объём раствора 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до метки. Срок годности раствора 4 часа.

Испытуемый раствор В. В колбу помещают 1,0 г испытуемого образца, прибавляют 50 мл жидкого фенола, нагревают при 50 °С в течение 4 ч при постоянном перемешивании.

Плотность. От 1,084 до 1,235 г/см3 (ОФС «Определение плотности полимерных материалов»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность испытуемого раствора А измеренная в области длин волн от 220 до 340 нм в кварцевой кювете с толщиной слоя 1 см (по сравнению с водой), не должна превышать 0,25 ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Кислотность или щёлочность

К 100 мл испытуемого раствора А прибавляют 0,15 мл БКФ (BRP) индикатора раствора. Для изменения окраски раствора на синюю должно потребоваться не более 1,5 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида.

К 100 мл испытуемого раствора А прибавляют 0,2 мл раствора метилового оранжевого. Для изменения окраски раствора от жёлтой до оранжевой должно потребоваться не более 4,0 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты.

Активность свободного основания

Испытание проводят методом кислотно-основного титрования в неводной среде (ОФС «Кислотно-основное титрование в неводных средах»).

Титруют 50 мл испытуемого раствора В раствором хлорной кислоты, определяют конечную точку титрования потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт, используя 50 мл испытуемого раствора В.

Разность между объёмом титрованного раствора, израсходованного на контрольный и испытуемый раствор, не должна превышать 0,4 мл.

Раствор хлорной кислоты. Растворяют около 0,72 г хлорной кислоты в 50 мл фенола.

Экстрагируемые металлы (мышьяк, кадмий, свинец, ртуть, кобальт, никель, ванадий). Не более 0,000001 %, (если иное не указано). Используют испытуемый раствор Б.

Проводят определение металлов, экстрагируемых из упаковочного материала на основе полиамида 6, используют приборы и методы, указанные в ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия», ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», ОФС «Масс-спектрометрия», ОФС «Масс-спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой» и др.

Капролактам. Не более 1,0 %. Определение проводят методом ГХ (парофазный анализ) (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл, помещают 1,0 г испытуемого образца, растворяют в муравьиной кислоте безводной и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца капролактама. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 125 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца капролактама, растворяют в муравьиной кислоте безводной и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Контрольный раствор. Муравьиная кислота безводная 20 мл.

Калибровочные растворы. В пять мерных колб вместимостью 20 мл помещают 2, 4, 6, 8 и 10 мл раствора стандартного образца капролактама, доводят объём каждого раствора муравьиной кислотой безводной до метки.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капилярная 30 м × 0,25 мм, покрытая слоем макрогол 20 000 терефталата, 0,25 мкм;
Детектор | пламенно-ионизационный;
Газ-носитель | гелий для хроматографии;
Деление потока | 1:3;
Скорость потока | 1,5 мл/мин;
Объём пробы | 1 мкл.

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °С
--- | --- | ---
Колонка | 2 | 160
| 5 °С/мин | 160 → 210
| 10 | 210
Инжектор |  | 250
Детектор |  | 250

Перед хроматографированием трижды вводят контрольный раствор для кондиционирования.

Хроматографируют калибровочные растворы и испытуемый раствор.

Для промывки хроматографической системы используют контрольный раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме калибровочного раствора с концентрацией 750 мг/л фактор асимметрии пика (AS) капролактама должен быть не более 1,3.

Строят калибровочный график зависимости площади пика Si капролактама от концентрации капролактама. Определяют параметры линейной регрессии.

Коэффициент корреляции должен быть не менее 0,99. Относительное стандартное отклонение площади пика при концентрации капролактама должно быть не более 5,0 %.

С помощью уравнения линейной регрессии находят концентрацию капролактама в испытуемом растворе (мг/мл).

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0018 Резиновые укупорочные средства для упаковки водных парентеральных лекарственных препаратов, порошков и лиофилизированных порошков

Вводится впервые

Резиновые укупорочные средства для упаковки водных парентеральных лекарственных препаратов, порошков и лиофилизированных порошков на укупорочные средства можно разделить на пробки, изготовленные из резины одного вида, укупорочные пробки с покрытием, на двухслойные и смазанные пробки. Укупорочные пробки с покрытием изготавливают в основном из резины, на всей поверхности или на части поверхности которой имеется слой другой полимерной резины. Двухслойные пробки состоят из 2 различных видов резины. Один вид обладает высоким уровнем химической чистоты и предназначен для контакта с лекарственным препаратом, другой обладает более высокой эластичностью и предназначен для улучшения уплотнения и устойчивости к разрушению резины. Смазанные резиновые пробки – это пробки, обработанные силиконовым маслом (ОФС «Силиконовые масла, используемые в качестве смазывающей добавки») или другими смазочными материалами, например, химически или механически связанными с пробками.

Требования данной ОФС не распространяются на укупорочные средства, изготовленные из силиконового эластомера, которые должны соответствовать требованиям ОФС «Силиконовые эластомеры для укупорочных средств и трубок».

###### Особенности технологии

Резиновые укупорочные средства для упаковки, предназначенной для лекарственных препаратов в виде водных растворов, порошков и лиофилизатов для парентерального применения изготавливают из эластомеров, полученных вулканизацией (поперечной сшивкой) макромолекулярных органических веществ с использованием соответствующих добавок. Эластомеры представляют собой полимерные вещества природного происхождения или полученные путём химического синтеза. Выбор основных компонентов и различных добавок (например, вулканизаторов, катализаторов, стабилизаторов, пигментов) зависит от требуемых свойств готового изделия. К резиновым укупорочным средствам относятся все типы резиновых пробок, включая пробки для флаконов, уплотнительные кольца и поршни для картриджей, а также резиновые колпачки для наконечников, защитные колпачки для игл и плунжерные пробки для шприцев.

Резиновые укупорочные средства классифицируют на два типа: тип I и тип II. Укупорочные средства типа I, которые соответствуют более строгим требованиям по отношению к укупорочным средствам типа II, обычно используют для водных растворов для парентерального применения. Резиновые укупорочные средства типа II, как правило, предназначены для неводных лекарственных средств, и, обладая свойствами, оптимизированными для специального использования (например, многоразового прокалывания), они могут не отвечать всем требованиям, предъявляемым к укупорочным средствам типа I из-за своего внешнего вида, химического состава эластомера.

К укупорочным средствам, применяемым для упаковки конкретного лекарственного препарата, предъявляются следующие требования:

- компоненты лекарственного средства, находящиеся в контакте с укупорочным средством, не должны адсорбироваться на его поверхности, а также проникать в укупорочное средство в количестве, способном оказать неблагоприятное воздействие на качество лекарственного препарата;

- из укупорочных средств в содержимое упаковки не должны высвобождаться какие-либо вещества в количествах, оказывающих влияние на стабильность лекарственного средства или имеющих возможное токсическое действие;

- укупорочное средство должно быть совместимо с содержимым упаковки (лекарственным средством) в течение всего его срока годности;

- укупорочное средство должно обеспечивать полное укупоривание;

- укупорочное средство должно позволять легко и безопасно использовать лекарственное средство.

Эластомерные укупорочные средства для лекарственных форм для парентерального применения перед использованием должны подвергаться обработке в соответствии с действующими нормативными требованиями, должны выдерживать условия обработки (мойки, высушивания), включая стерилизацию в соответствии с ОФС «Стерилизация» и дополнительные требования, указанные в настоящей общей фармакопейной статье.

Общие требования к упаковке лекарственных средств, элементам упаковки, включая укупорочные средства, установлены ОФС «Упаковка лекарственных средств».

###### Свойства

Описание. Резиновые укупорочные средства эластичны, являются полупрозрачными или непрозрачными, не имеющими характерного окрашивания, которое зависит от используемых добавок. Готовые укупорочные средства гомогенны, практически не имеют заусениц и посторонних включений, таких как, волокна, механические включения, отходы резины.

Растворимость. Резиновые эластомеры практически нерастворимы в тетрагидрофуране, в котором может происходить значительное обратимое набухание эластомера.

###### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр испытуемого образца резинового эластомерного материала, регистрируемый с помощью методики многократного отражения для твёрдых веществ, должен соответствовать ИК-спектру стандартного образца резинового эластомера.

Если необходимо, образец испытуемого эластомерного материала разрезают вдоль соответствующей оси и регистрируют ИК-спектр поверхности среза, который должен соответствовать ИК-спектру среза стандартного образца эластомерного материала, выбранного для типового образца укупорочного средства, подготовленного аналогичным образом.

Для резиновых эластомеров с покрытием, с двухслойными уплотнениями, смазанных укупорочных средств, испытанию подвергают каждую отдельную часть укупорочного средства, за исключением силиконового масла, используемого в качестве смазки.

При невозможности прямого измерения ИК-спектра поверхности эластомера по методу нарушенного полного внутреннего отражения, например, для укупорочных средств на основе резиновых эластомеров, содержащих технический углерод, нагревают необходимое количество образца испытуемого материала в термостойкой пробирке над открытым пламенем до высушивания образца, продолжая нагревание до конденсации продуктов пиролиза (паров) у верхнего края пробирки. Затем регистрируют ИК-спектр продуктов пиролиза образца испытуемого эластомера методом нарушенного полного внутреннего отражения, который должен соответствовать ИК-спектру продуктов пиролиза стандартного образца эластомерного материала, выбранного для типового образца укупорочного средства, подготовленного аналогичным образом.

###### Испытания

Пробоподготовка

Образцы эластомерного материала для проведения испытания могут представлять собой вырезанные из испытуемого эластомерного материала кусочки необходимых размеров, или растворы и жидкости, полученные экстрагированием эластомерного материала, как правило, водой. Для экстрагирования используют целое изделие или разрезанное на части с максимальным размером не более 1 см.

Испытуемый раствор А. Помещают целые, неразрезанные укупорочные средства из резинового эластомера, площадь поверхности которых составляет 100±10 см2, в подходящую стеклянную ёмкость, прибавляют 200 мл воды или воды для инъекций, так, чтобы укупорочные средства были полностью покрыты. Если невозможно получить предписанную площадь поверхности, не разрезая укупорочные средства, отбирают такое их количество, площадь поверхности которых будет ближе всего к 100 см2, и корректируют объём используемой воды, чтобы он составлял 2 мл на каждый 1 см2 фактической площади поверхности укупорочных средств, взятых для испытания. Укупорочные средства кипятят в течение 5 мин, затем ополаскивают пять раз холодной водой или водой для инъекций.

Промытые укупорочные средства помещают в широкогорлую колбу из нейтрального стекла типа I, прибавляют 200 мл воды или воды для инъекций (или такое же количество воды или воды для инъекций, как первоначальное), взвешивают. Закрывают горлышко колбы лабораторным стаканом из боросиликатного стекла. Нагревают в автоклаве таким образом, чтобы за 20-30 мин температура достигла от 119 до 123° С, выдерживают при такой температуре в течение 30 мин. В течение следующих 30 мин охлаждают до комнатной температуры, взвешивают и доводят колбу с укупорочными средствами до первоначальной массы водой или водой для инъекций. Колбу встряхивают и сразу отделяют раствор от укупорочных средств декантированием. Полученный раствор перед применением, в каждом из указанных далее испытаний, обязательно встряхивают.

Если при получении испытуемого раствора А используют колбу из стекла типа I, плотно закрытую пробкой из инертного материала, вместо широкогорлой колбы, закрытой стаканом из боросиликатного стекла, то доводить массу колбы с испытуемым материалом до первоначальной в этом случае не требуется.

Контрольный раствор. Готовят так же, используя 200 мл воды или воды для инъекций, без укупорочных средств.

Прозрачность раствора. Определение проводят в соответствии с ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей».

Опалесценция испытуемого раствора А для укупорочных средств типа I не должна превышать эталон сравнения II.

Опалесценция испытуемого раствора А для укупорочных средств типа II не должна превышать эталон сравнения III.

В случае определения опалесценции методом нефелометрии для укупорочных средств типа I из резинового эластомера нефелометрическая единица мутности составляет 6 NTU, для укупорочных средств типа II из резинового эластомера ‒ 18 NTU (ОФС «Нефелометрия»).

Цветность раствора. Испытуемый раствор А должен выдерживать сравнение с эталоном GY5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2.)

Общая зола. Испытание проводят для резиновых эластомеров в соответствии с ОФС «Зола общая».

Дополнительно кроме тиглей из платины и кремния оксида, могут быть использованы фарфоровые тигли. Сжигание образцов можно проводить в микроволновой печи вместо муфельной печи.

Если образец резинового эластомера не подвергался стерилизации паром, то при проведении испытания высушивание образца при 100–105 °С можно исключить.

Содержание золы общей в процентах в образце испытуемого резинового эластомера (А) должно соответствовать нормативным требованиям, указанным в таблице 1, установленным в зависимости от содержания золы общей в соответствующем образце стандартного типового резинового эластомера (А0). Если данные о содержании золы общей в соответствующем стандартном типовом образце отсутствуют, то содержание золы общей в образце испытуемого резинового эластомера (А) должно соответствовать требованиям, которые определены как допустимые для конкретного типа резинового эластомера.

Таблица 1. Содержание золы общей в резиновом эластомере
В стандартном типовом образце, А0,% | В испытуемом образце, А,%
--- | ---
A 0≤5,0 | от (А0–0,75) до (А0 +0,75)
5,0<A 0≤ 10 | от (А0–1,0) до (А0 +1,0)
A 0>10 | от (А0–2,0) до (А0 +2,0)

Оптическая плотность. Испытание проводят в течение 5 ч с момента приготовления испытуемого раствора А.

Испытуемый раствор А фильтруют через мембранный фильтр с размером пор около 0,45 мкм, отбрасывая первые несколько миллилитров фильтрата. Оптическая плотность фильтрата испытуемого раствора А в области длин волн от 220 до 360 нм, в кварцевой кювете с толщиной слоя 10 мм, измеренная по сравнению с контрольным раствором, не должна превышать 0,2 для укупорочных средств типа I и не должна превышать 4,0 для укупорочных средств типа II (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

При необходимости, перед определением оптической плотности, фильтрат испытуемого раствора А может быть разбавлен, а результат откорректирован в соответствии с разбавлением.

Кислотность или щёлочность

К 20 мл раствора испытуемого раствора А прибавляют 0,1 мл бромтимолового синего раствора. Если после прибавления индикатора раствор приобретает зелёную окраску, то раствор нейтрален и соответствует требованиям. Появившаяся жёлтая или синяя окраска раствора должна меняться при прибавлении не более 0,3 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида или не более 0,8 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты соответственно, учитывая результаты контрольного опыта. Контрольный опыт проводят параллельно с 20 мл контрольного раствора испытуемого раствора.

Восстанавливающие вещества

Испытание проводят в течение 4 ч с момента приготовления раствора испытуемого раствора А.

К 20,0 мл испытуемого раствора А прибавляют 1 мл серной кислоты разведенной 9,8 % и 20,0 мл 0,002 М раствора калия перманганата и кипятят в течение 3 мин. Охлаждают до комнатной температуры. Прибавляют 1 г калия йодида и полученный раствор немедленно титруют 0,01 М раствором натрия тиосульфата до обесцвечивания, используя в качестве индикатора 0,25 мл 1 % раствора крахмала.

Параллельно проводят контрольный опыт, используя 20 мл контрольного раствора.

Разность между израсходованным объёмом 0,01 М раствора натрия тиосульфата при титровании контрольного и испытуемого раствора не должна превышать 3,0 мл для укупорочных средств типа I и 7,0 мл для укупорочных средств типа II.

Аммоний. Не более 0,0002 %.

Испытуемый раствор. Разводят водой 5 мл испытуемого раствора А до 14 мл. При необходимости подщелачивают раствором натрия гидроксида 8,5 % и доводят объём раствора водой до 15 мл. Прибавляют 0,3 мл калия тетрайодмеркурата щелочного раствора и закрывают ёмкость.

Стандартный раствор. Аммония стандартный раствор 2,5 мкг/мл.

Раствор разводят водой в 100 раз непосредственно перед использованием.

Стандартный раствор 1 мкг/мл аммоний-иона. Разводят стандартный раствор 2,5 мкг/мл аммоний-иона водой в 2,5 раза непосредственно перед использованием.

Раствор сравнения. К 10 мл стандартного раствора 1 мкг/мл аммоний-иона прибавляют 5 мл воды и 0,3 мл калия тетрайодмеркурата щелочного раствора и закрывают ёмкость.

Через 5 мин жёлтая окраска испытуемого раствора не должна быть интенсивнее окраски раствора сравнения.

Цинк. Не более 0,0005 %. Определение проводят методом ААС (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 1).

Испытуемый раствор. Испытуемый раствор А. Если при испытании результаты выходят за пределы диапазона калибровки, то 10,0 мл испытуемого раствора разбавляют до соответствующего объёма 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты.

Стандартный раствор 100 мкг/мл цинк-иона. Раствор разводят водой в 10 раз непосредственно перед использованием.

Стандартный раствор 10 мкг/мл цинк-иона. Разводят стандартный раствор 100 мкг/мл цинк-иона в 10 раз непосредственно перед использованием.

Растворы сравнения. Готовят разбавлением стандартного раствора 10 мкг/мл цинк-иона 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты.

Источник излучения: лампа с полым цинковым катодом.

Длина волны: 213,9 нм.

Атомизация: воздушно-ацетиленовое пламя.

Тяжёлые металлы. Не более 0,0002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2).

Испытуемый раствор. Испытуемый раствор А.

Стандартный раствор. Готовят, используя 2,5 мл стандартного раствора 10 мкг/мл свинец-иона.

Сухой остаток. Выпаривают досуха на водяной бане 50,0 мл испытуемого раствора А и высушивают при температуре 100-105° C. Масса остатка не должна превышать 2,0 мг для укупорочных средств типа I и не должна превышать 4,0 мг для укупорочных средств типа II.

Летучие сульфиды. Укупорочные средства, при необходимости разрезанные, с общей площадью поверхности 20±2 см2 помещают в коническую колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл раствора лимонной кислоты 2 %. Кусочек свинцово-ацетатной бумаги помещают на горлышко колбы и удерживают бумагу в таком положении, поместив сверху перевернутый флакон для взвешивания. Нагревают в автоклаве при температуре от 119 до 123° С в течение 30 мин. Любое появившееся на бумаге черное пятно не должно быть интенсивнее, чем пятно, появившееся при испытании стандартного раствора, приготовленного путём смешивания 50 мл раствора лимонной кислоты 2 % и 5,0 мл свежеприготовленного водного раствора сульфида натрия 0,00308 %.

###### Испытания функциональных свойств

Испытания проводят для укупорочных средств из резиновых эластомеров, используя целые изделия.

Пробоподготовка. Для проведения испытаний на функциональные свойства используют образцы укупорочных средств, подготовленных так же, как указано для приготовления , высушенного на воздухе.

Для выполнения испытаний функциональных свойств, для каждого укупорочного средства используют новую смазанную иглу для подкожных инъекций с длинным срезом (угол среза 12±2 °) с внешним диаметром 0,8 мм. Прокалывают укупорочное средство иглой с указанными параметрами перпендикулярно поверхности, без вращения иглы.

Проницаемость. Определение проводят для укупорочных средств, которые должны быть проколоты иглой для подкожных инъекций при применении укупоренного ими лекарственного препарата.

Заполняют до номинального объёма водой 10 подходящих флаконов, закрывают испытуемыми укупорочными средствами и закрепляют колпачками. Каждое укупорочное средство прокалывают перпендикулярно поверхности, используя для каждой пробки новую иглу с указанными параметрами. Усилие, необходимое для прокалывания, измеренное с точностью до ±0,25 Н, должно быть не более 10 Н для каждого укупорочного средства.

Фрагментация. Определение проводят для укупорочных средств, которые должны быть проколоты иглой для подкожных инъекций при применении укупоренного ими лекарственного препарата.

Если укупорочные средства предназначены для укупоривания лекарственных препаратов в виде водных растворов, в 12 чистых флаконов помещают объём воды меньше номинального объёма на 4 мл, укупоривают флаконы испытуемыми укупорочными средствами, закрепляют колпачками и выдерживают в течение 16 ч.

Если укупорочные средства должны использоваться для укупоривания лекарственных препаратов в виде твёрдых лекарственных форм, предназначенных для последующего приготовления жидкой лекарственной формы для парентерального применения в этой же упаковке, укупорочными средствами, предназначенными для исследования, укупоривают 12 чистых флаконов.

В каждый подготовленный флакон, предназначенный для жидких или для твёрдых лекарственных форм для парентерального применения, вводят по 1 мл воды и удаляют 1 мл воздуха с помощью чистого шприца, снабжённого иглой с вышеуказанными параметрами, используя для каждого укупорочного средства новую иглу. Процедуру повторяют по 4 раза для каждого флакона, каждый раз прокалывая укупорочное средство в другом месте. Используют новую иглу для каждого укупорочного средства, проверяя, чтобы игла не затупилась в ходе испытания.

Жидкость во флаконах фильтруют через один фильтр с размером пор не более 0,5 мкм. Подсчитывают количество фрагментов (кусочков) резины на поверхности фильтра, видимых невооружённым глазом.

Не должно быть более пяти видимых фрагментов. Эта норма установлена на основании предположения, что невооружённым глазом видны фрагменты (частицы) диаметром 50 мкм и более. В случае сомнений или разногласий фрагменты исследуют под микроскопом для проверки принадлежности их к фрагментам укупорочных средств и уточнения их размера.

Самогерметизация. Определение проводят для укупорочных средств, предназначенных для укупоривания лекарственного препарата в многоразовой упаковке.

Наполняют водой до номинального объёма 10 флаконов, имеющих соответствующий тип (конструкцию) для укупорки исследуемыми укупорочными средствами, укупоривают исследуемыми укупорочными средствами и закрепляют колпачками. Прокалывают каждое укупорочное средство 10 раз, каждый раз прокалывая новый участок укупорочного средства. Для прокалывания используют иглу с указанными выше параметрами. Для каждого укупорочного средства используют новую иглу.

Помещают флаконы в вертикальном положении в камеру, содержащую раствор метиленового синего 0,1 %, и в течение 10 мин понижают внешнее давление до 27 кПа. Затем восстанавливают давление до атмосферного и выдерживают флаконы в камере в течение 30 мин. Промывают флаконы снаружи. Содержимое ни одного из флаконов не должно иметь каких-либо следов окрашенного раствора.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0019 Упаковочные материалы на основе пластифицированного поливинилхлорида для водных растворов для инфузий

Вводится впервые

Упаковочный материал на основе пластифицированного поливинилхлорида должен содержать не менее 55 % поливинилхлорида, рассчитанного по содержанию хлора, и необходимые добавки.

###### Особенности технологии

Методы полимеризации, используемые в производстве пластифицированного поливинилхлорида для упаковки водных растворов для инфузий, должны гарантировать остаточное содержание винилхлорида менее 0,0001 % (1 ppm).

Винилхлорид. Не более 1 ppm. Испытание проводят методом газовой хроматографии (ОФС «Газовая хроматография») в ходе технологического процесса производства пластифицированного поливинилхлорида.

Раствор внутреннего стандарта. К 20,0 мл диметилацетамида с помощью микрошприца прибавляют 10 мкл эфира, погружая кончик иглы в растворитель. Непосредственно перед использованием разбавляют раствор диметилацетамидом в 1000 раз.

Испытуемый раствор. Во флакон вместимостью 50 мл помещают 1,000 г испытуемого образца и прибавляют 10,0 мл раствора внутреннего стандарта. Флакон герметично закрывают пробкой, встряхивают, избегая контакта жидкости и пробки. Помещают флакон на водяную баню при температуре 60±1 °С, выдерживают в течение 2 ч.

Основной раствор винилхлорида. Готовят в вытяжном шкафу. Во флакон вместимостью 50 мл помещают 50,0 мл диметилацетамида, закрывают герметично пробкой и взвешивают с точностью до 0,1 мг. Полиэтиленовый или полипропиленовый шприц вместимостью 50 мл наполняют газообразным винилхлоридом, чтобы газ оставался в контакте с шприцем в течение 3 мин, затем газ удаляют и шприц снова наполняют 50 мл газообразного винилхлорида.

К шприцу присоединяют иглу для подкожного введения и уменьшают объём газа в шприце с 50 мл до 25 мл. Оставшиеся 25 мл винилхлорида медленно вводят во флакон, осторожно встряхивая и избегая контакта жидкости с иглой. Выполняют повторное взвешивание. Увеличение массы должно составлять около 60 мг (1 мкл полученного раствора содержит около 1,2 мкг винилхлорида). Флакон выдерживают 2 ч. Основной раствор винилхлорида хранят в холодильнике.

Стандартный раствор винилхлорида. Основной раствор винилхлорида—диметилацетамид 1:3.

Растворы сравнения. В 6 одинаковых флаконов вместимостью 50 мл помещают по 10,0 мл раствора внутреннего стандарта. Флаконы герметично закрывают пробками. В 5 флаконов с помощью микрошприца вводят 1 мкл, 2 мкл, 3 мкл, 5 мкл и 10 мкл стандартного раствора винилхлорида соответственно. Полученные таким образом 6 растворов содержат 0 мкг, около 0,3 мкг, около 0,6 мкг, около 0,9 мкг, около 1,5 мкг и около 3 мкг винилхлорида соответственно. Встряхивают, избегая контакта жидкости с пробкой. Помещают флаконы на водяную баню при температуре 60±1 °С и выдерживают в течение 2 ч.

Хроматографические условия

Колонка | нержавеющая сталь 3 м × 3 мм, диатомовая земля силанизированная для газовой хроматографии, импрегнированная 5 % диметилстеариламида и 5 % макрогола 400;
Детектор | пламенно-ионизационный;
Газ-носитель | азот для хроматографии;
Скорость потока | 30 мл/мин;
Температура | Инжектор 100 °С
| Колонка 45°С
| Детектор 150°С
Объём пробы | 1,0 мл.

Хроматографируют растворы сравнения и испытуемый раствор.

Добавки (ОФС «Добавки к полимерным материалам для фармацевтического применения»). Для придания упаковке, предназначенной для водных растворов для инфузий, необходимых химических, физических, механических свойств в поливинилхлорид вводят пластификаторы, получая различные композиции упаковочного материала.

Добавки-антиоксиданты, как правило, в пластифицированный поливинилхлорид не вводят; очень малые количества антиоксидантов могут быть добавлены только к мономеру винилхлорида.

В качестве красителя при необходимости используют ультрамарин синий или другие красящие вещества, если они безопасны.

Пластифицированный поливинилхлорид, предназначенный для производства упаковки для водных растворов для инфузий, должен содержать определённое количество добавок. В качестве основной добавки-пластификатора, придающего упаковочному материалу гибкость, используют ди(2-этилгексил)фталат, которого в полимере должно быть не более 40 %.

Упаковочный материал на основе пластифицированного поливинилхлорида для водных растворов для инфузий должен содержать не более 1 % следующих добавок:

- цинка октаноата (2-этилгексаноат цинка);

- кальция стеарата, или цинка стеарата, или смеси обоих;

- N,N ′-диацилэтилендиаминов.

Пластифицированный поливинилхлорид может содержать до 10 % одного или смеси двух из следующих эпоксидированных масел:

- эпоксидированное соевое масло с содержанием кислорода в эпоксидной группе от 6 до 8 % и йодным числом не более 6;

- эпоксидированное льняное масло с содержанием кислорода в эпоксидной группе не более 10 % и йодным числом не более 7 .

Общие требования к упаковочным материалам и упаковке из полимерных материалов для лекарственных средств установлены ОФС «Упаковка лекарственных средств», ОФС «Упаковка и укупорочные средства из полимерных материалов для фармацевтического применения».

Упаковочные материалы на основе пластифицированного поливинилхлорида, предназначенные для упаковки лекарственных препаратов в виде водных растворов для инфузий, должны обеспечивать возможность стерилизации произведённой упаковки в соответствии с требованиями и методами, указанными в ОФС «Стерилизация».

###### Свойства

Описание. Порошок или гранулы бесцветного, бледно-голубого или бледно-жёлтого цвета. После трансформации полимер может представлять собой полупрозрачные пластинки, листы различной толщины, плёнку или готовую упаковку. При сжигании выделяет густой чёрный дым.

Растворимость. Практически нерастворим в воде, этаноле, растворим в тетрагидрофуране.

###### Идентификация

Пробоподготовка

Испытуемый образец, предназначенный для экстрагирования, при необходимости, разрезают на части с максимальным размером не более 1 см и подготавливают несколько образцов, проводя экстрагирование упаковочного материала различными растворителями.

К 2,0 г испытуемого образца прибавляют 200 мл эфира, не содержащего пероксидов, и нагревают в колбе с обратным холодильником в течение 8 ч. После охлаждения при комнатной температуре извлечение фильтруют, получая фильтрат и осадок.

Полученный фильтрат выпаривают под вакуумом на водяной бане при температуре 30° С. Сухой остаток растворяют в 10 мл толуола (Испытуемый раствор А).

Осадок растворяют в 60 мл этиленхлорида, нагревая на водяной бане в колбе с обратным холодильником, и фильтруют. Полученный раствор по каплям и при интенсивном встряхивании прибавляют к 600 мл гептана, нагретого почти до кипения. Горячую смесь фильтруют, отделяя образующийся осадок-коагулянт от фильтрата с органическими растворителями (осадок Б1). Охлаждают фильтрат с органическими растворителями; образуется осадок (осадок Б2), который отделяют фильтрованием через предварительно взвешенный стеклянный фильтр с размером пор 40 мкм.

Испытуемый раствор Б. В колбу для сжигания помещают 5,0 г испытуемого образца, прибавляют 30 мл серной кислоты концентрированной и нагревают до получения чёрной сиропообразной массы. После охлаждения до комнатной температуры в колбу осторожно прибавляют 10 мл водорода пероксида, осторожно нагревают, после охлаждения прибавляют 1 мл водорода пероксида. Повторяют поочерёдно выпаривание при нагревании и прибавление водорода пероксида до получения бесцветной жидкости. Объём раствора уменьшают приблизительно до 10 мл, после охлаждения разбавляют водой до 50,0 мл.

Испытуемый раствор В. В колбу из боросиликатного стекла помещают 25,0 г испытуемого образца, прибавляют 500 мл воды, закрывают горлышко колбы стаканом из боросиликатного стекла. Нагревают в автоклаве при температуре от 119 до 123 °С в течение 20 мин. Охлаждают полученное извлечение до комнатной температуры, декантируют, переносят раствор в мерную колбу вместимостью 500 мл и доводят объём раствора водой до метки.

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр испытуемого образца в области от 3800 см-1 до 650 см-1, должен соответствовать спектру стандартного образца пластифицированного поливинилхлорида.

- Испытуемый образец. Осадок Б1 растворяют в 30 мл тетрагидрофурана и прибавляют небольшими порциями при встряхивании 40 мл этанола. Выпавший осадок (Осадок Б3) отделяют фильтрованием и высушивают в вакууме над фосфора(V) оксидом при температуре, не превышающей 50 °С. Несколько миллиграммов осадка Б3 растворяют в 1 мл тетрагидрофурана, помещают несколько капель полученного раствора на пластинку с натрия хлоридом и выпаривают в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С досуха.

2. Дифференциальная сканирующая калориметрия (ОФС «Термический анализ», метод 2). Термограмма испытуемого образца пластифицированного поливинилхлорида должна соответствовать термограмме стандартного образца пластифицированного поливинилхлорида.

- Примечание - Для получения воспроизводимого результата необходим близкий контакт между тиглем и термопарой.

- Около 12 мг испытуемого образца помещают в тигель и проводят испытание в соответствии с ОФС «Термический анализ». Термограммы испытуемого и стандартного образцов регистрируют в атмосфере азота, нагревая образец от 20 °С до 120 °С со скоростью около 10 °С /мин, затем быстро охлаждая до комнатной температуры.

3. Испытуемый образец должен выдерживать дополнительные испытания на соответствующие добавки (при их наличии), указанные в разделе «Испытания» настоящей общей фармакопейной статьи.

###### Испытания

Плотность. От 1,35 до 1,45 г/см3 (ОФС «Определение плотности полимерных материалов»).

Прозрачность раствора. Испытуемый раствор В должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Испытуемый раствор В должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Оптическая плотность. Оптическая плотность испытуемого раствора, измеренная в области длин волн от 250 до 310 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать 0,25 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. Выпаривают досуха 100 мл испытуемого раствора В. Сухой остаток растворяют в 5,0 мл гексана.

Кислотность или щёлочность

К 100 мл испытуемого раствора В прибавляют 0,15 мл БКФ (BRP) индикатора раствора. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 1,5 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида.

К 100 мл испытуемого раствора В прибавляют 0,2 мл метилового оранжевого раствора 0,1%. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 1,0 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты.

Восстанавливающие вещества. Испытание проводят в течение 4 ч после приготовления испытуемого раствора В.

В колбу с притёртой пробкой вместимостью 100 мл помещают 20,0 мл испытуемого раствора В, прибавляют 1 мл раствора серной кислоты 16 % и 20 мл 0,002 М раствора калия перманганата, кипятят с обратным холодильником в течение 3 мин и сразу охлаждают до комнатной температуры. Прибавляют в колбу 1 г калия йодида и полученный раствор немедленно титруют 0,01 М раствором натрия тиосульфата до обесцвечивания, используя в качестве индикатора 0,25 мл крахмала раствора 1 %.

Параллельно проводят контрольный опыт, используя 20,0 мл воды вместо 20,0 мл испытуемого раствора В.

Разность между израсходованным объёмом 0,01 М раствора натрия тиосульфата при титровании контрольного и испытуемого раствора не должна превышать 2,0 мл.

Первичные ароматические амины. Не более 0,002 %.

К 2,5 мл испытуемого раствора А, полученного в разделе «Идентификация», прибавляют 6 мл воды и 4 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты. Энергично встряхивают и отбрасывают верхний слой (толуол). К водному слою прибавляют 0,4 мл свежеприготовленного натрия нитрита раствора 1 %, перемешивают и выдерживают в течение 1 мин. Прибавляют 0,8 мл аммония сульфамата раствора 2,5 % выдерживают в течение 1 мин, затем прибавляют 2 мл нафтилэтилендиамина дигидрохлорида раствора 0,5 %. Через 30 мин окрашивание полученного раствора должно быть не более интенсивным, чем окрашивание стандартного раствора, приготовленного параллельно аналогичным образом, но с заменой водного слоя смесью 1 мл раствора нафтиламина 0,001 % в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты, 5 мл воды и 4 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты.

Добавки. Испытания проводят полностью или частично в случае их применимости к составу испытуемого упаковочного материала на основе поливинилхлорида пластифицированного, предназначенного для производства упаковки для водных растворов для инфузий.

1. Добавки. Ди(2-этилгексил)фталат. Не более 40 %. Определение проводят методом газовой хроматографии (ОФС «Газовая хроматография») в сочетании с масс-спектрометрией (ОФС «Масс-спектрометрия»).

- Раствор внутреннего стандарта 1. Раствор ди-н-октил фталата в тетрагидрофуране для хроматографии 1 мг/мл.

- Раствор внутреннего стандарта 2. Раствор ди-н-октил фталата в этаноле 5 мкг/мл.

- Испытуемый раствор. Разрезают (при необходимости) 0,2 г испытуемого образца на кусочки размером около 0,5 см и растворяют в 12,5 мл раствора внутреннего стандарта 1 с использованием магнитной мешалки из политетрафторэтилена. Полное растворение испытуемого образца наблюдается после перемешивания в течение 20–30 мин. К полученному раствору прибавляют по каплям 37,5 мл этанола, выпадает белый осадок поливинилхлорида. Жидкость центрифугируют. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл надосадочной жидкости и доводят объём раствора этанолом до метки.

- Концентрация ди-н-октил фталата в испытуемом растворе составляет 5 мкг/мл.

- Исходный стандартный раствор А. 20,0 мг стандартного образца ди-(2-этилгексил) фталата растворяют в растворе внутреннего стандарта 2 и доводят до объема 20,0 мл тем же растворителем. Срок хранения раствора – 14 суток при температуре 4 °С.

- Стандартные растворы А1-А5. Готовят из исходного стандартного раствора А путём разбавления раствором внутреннего стандарта 2 для получения пяти эталонных растворов, содержащих от 10 до 40 мкг/мл ди-(2-этилгексил) фталата.

- Хроматографические условия

Колонка | кварцевая, 3 м × 25 мм, фенил(5)метил(95) полисилоксан (толщина пленки 0,25 мкм)
Детектор | пламенно-ионизационный;
Газ-носитель | гелий для хроматографии;
Скорость потока | 1 мл/мин;
Деление потока | 1:20;
Объём пробы | 1 мкл.

- Температурная программа

| Время, мин | Температура, °C
--- | --- | ---
Колонка | 0-3,3 | 100 → 200
3,3-20 | 200 → 250
20-22,5 | 250
22,5-23 | 250 → 270
23-25 | 270
25-25,6 | 270 → 320
25,6-30,6 | 320
Инжектор |  | 300

- Условия МС/МС

Детектор | квадрупольный масс-спектрометр с режимом электронной ударной ионизации (70 эВ);
Источник ионизации | электроспрей (ESI);
Режим ионизации | положительный (ESI+);
Режим детектирования | мониторинг избранного иона (SIM) в режиме полного сканирования и в режимах одноионного мониторинга
Режим сканирования | 40–350 m/z
Температура источников ионов | 230 °С;
Задержка растворителя | 2,5 мин.

- Параметры масс-спектрометра для фрагментометрического режима устанавливают следующим образом:

Компонент | Относительное время удерживания | Ион 1 [m/z] | Ион 2 [m/z] | Ион 3 [m/z]
--- | --- | --- | --- | ---
Ди(2-этилгексил)фталат | Около 0,8 | 149 | 167 | 279
Ди-н-октилфталат | 1 (около 22 мин) | 149 | 279 | 167

- Специфика обнаружения проверяется путём мониторинга трёх разных ионов для каждого вещества с помощью масс-спектрометра в режиме одноионного мониторинга. Соотношения ионов определяют по площадям пиков после введения стандартного раствора. Для информации в таблице приведены соотношения ионов:

Компонент | Ион 1 [m/z] | Ион 2 [m/z] | Ион 3 [m/z] | Соотношение ионов 2:1,% | Соотношение ионов 3:1,%
--- | --- | --- | --- | --- | ---
Ди(2-этилгексил) фталат | 149 | 167 | 279 | 50 | 30
Ди-н-октилфталат | 149 | 279 | 167 | / | /

- Пригодность системы. На хроматограмме стандартного раствора, расположенного в середине диапазона калибровки (например, 20 мкг/мл):

  - относительное стандартное отклонение времени удерживания пика, обусловленного ди(2-этилгексил)фталатом, должно быть не более 1,0 % (6 введений);

  - относительное стандартное отклонение отношения площади пика, обусловленного ди(2-этилгексил)фталатом, к площади пика, обусловленного внутренним стандартом, должно быть не более 3,0 %(6 введений).

- По калибровочному графику, полученному со стандартными растворами А1-А5, рассчитывают содержание добавки ди(2-этилгексил)фталата в испытуемом материале в процентах.

2. Добавки. N,N'-диацилэтилендиамины. Не более 1 %. Определение проводят методом ИК-спектрометрии (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»).

- Испытуемый образец. Осадок Б 2, находящийся на предварительно взвешенном стеклянном пористом фильтре с размером пор 40 мкм, полученный при подготовке образца для ИК-спектрометрии, промывают этанолом и высушивают до постоянной массы над фосфора(V) оксидом. Фильтр с остатком взвешивают. Масса остатка не должна превышать 20 мг.

- Инфракрасный спектр полученного остатка испытуемого образца поливинилхлорида пластифицированного должен соответствовать спектру стандартного образца N,N'-диацилэтилендиамина.

- Если количество остатка недостаточно для подготовки диска, можно регистрировать спектр остатка, помещённого между двумя пластинами, прозрачными для инфракрасного излучения, или применить метод нарушенного полного внутреннего отражения.

3. Добавки. Эпоксидированное соевое масло, эпоксидированное льняное масло. Не более 10 % одного из масел или не более 10 % смеси масел. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Стандартные растворы. Готовят растворы эпоксидированного соевого масла и эпоксидированного льняного масла в толуоле 10 мг/мл.

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

- Подвижная фаза. Толуол.

- На линию старта пластинки в виде полосы длиной 30 мм и шириной не более 3 мм наносят 0,5 мл испытуемого раствора А и по 5 мкл каждого стандартного раствора. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт не менее 2/3 длины пластинки её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, помещают на 5 мин в камеру, насыщенную парами йода, и просматривают в видимом свете.

- Определяют зону адсорбции, соответствующую добавкам – эпоксидированному соевому маслу и эпоксидированному льняному маслу (RF=0). Удаляют участок силикагеля, соответствующий этой зоне адсорбции. Аналогичным образом удаляют идентичный по размеру зоны участок силикагеля для контрольного опыта. Оба образца раздельно встряхивают в течение 15 мин с 40 мл метанола. Фильтруют, промывают фильтр двумя порциями метанола по 10 мл каждая, прибавляя их к фильтрату и выпаривают досуха.

- Разность между массами высушенных остатков не должна превышать 10 мг.

Барий. Не более 0,0005 %. Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой в соответствии с требованиями ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой».

Испытуемый раствор. Прокаливают 1,0 г испытуемого образца в кварцевом тигле. Остаток растворяют в 10 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и выпаривают на водяной бане досуха. Полученный сухой остаток растворяют в 20 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты.

Эталонный раствор бария 0,25 мкг/мл. Раствор готовят разбавлением бария стандартного раствора 50 мкг/мл 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты.

Длина волны: измеряют интенсивность эмиссии бария при длине волны 455,40 нм, регулируя спектральный фон на уровне 455,30 нм.

Проверяют отсутствие бария в используемой хлористоводородной кислоте.

Кадмий. Не более 0,6 ppm. Определение проводят методом ААС (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 1).

Испытуемый раствор. Выпаривают досуха 10 мл испытуемого раствора Б. Сухой остаток растворяют в 5 мл раствора хлористоводородной кислоты 1 %, фильтруют и доводят объём фильтрата тем же растворителем до 10,0 мл.

Эталонные растворы. Растворы готовят разбавлением кадмия стандартного раствора 0,1% хлористоводородной кислоты раствором 1 %.

Источник излучения: лампа для определения кадмия .

Длина волны: 228,8 нм.

Атомизация: воздушно-ацетиленовое пламя.

Проверяют отсутствие кадмия в используемой хлористоводородной кислоте.

Кальций. Не более 0,07 %. Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой в соответствии с ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой».

Испытуемый раствор. Используют испытуемый раствор, приготовленный для определения бария.

Эталонный раствор 50 мкг/мл кальций-иона. Раствор готовят разбавлением кальция стандартного раствора 400 мкг/мл 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты.

Длина волны. Измеряют интенсивность эмиссии кальция при длине волны 315,89 нм, регулируя спектральный фон на уровне 315,60 нм.

Проверяют отсутствие кальция в используемой хлористоводородной кислоте.

Олово. Не более 0,002%. Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой»).

Испытуемый раствор. Образец 1, разбавленный в 10 раз водой непосредственно перед использованием.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2 мл олова ионов, содержащую 5 мл серной кислоты раствора 20 % и доводят объём раствора водой до метки. Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Длина волны: измеряют интенсивность эмиссии олова при длине волны 189,99 нм, регулируя спектральный фон на уровне 190,10 нм.

Проверяют отсутствие олова в используемой хлористоводородной кислоте.

Цинк. Не более 0,2 %. Определение проводят методом ААС (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Испытуемый раствор. Разбавляют испытуемый раствор Б в 100 раз 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты.

Растворы стандартных образцов. Растворы готовят разбавлением стандартного раствора 100 мкг/мл цинк-иона 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты.

Примечание. Стандартный раствор цинка 100 мкг/мл разводят водой в 10 раз непосредственно перед использованием.

Источник излучения: лампа с полым цинковым катодом.

Длина волны: 213,9 нм.

Атомизация: воздушно-ацетиленовое пламя.

Проверяют отсутствие цинка в используемой хлористоводородной кислоте.

Тяжёлые металлы. Не более 0,005% (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2).

Испытуемый раствор. К 10,0 мл раствора Образца 1 прибавляют 0,5 мл фенолфталеина раствора и затем натрия гидроксида раствора концентрированный до бледно-розового окрашивания раствора. Объём раствора доводят водой до 25 мл . Для определения используют 12 мл полученного раствора.

Стандартный раствор 2 мкг/мл свинец-иона. Раствор готовят непосредственно перед использованием, используя стандартный раствор 10 мкг/мл свинец-иона.

Стандартный раствор. Готовят, используя стандартный раствор 2 мкг/мл свинец-иона.

Вещества, экстрагируемые водой. Не более 0,3 %.

Выпаривают 50 мл испытуемого раствора В на водяной бане досуха и высушивают при 100–105 °C до постоянной массы. Параллельно проводят контрольный опыт, используя 50 мл воды. Масса сухого остатка не должна превышать 7,5 мг с учётом контрольного опыта.

###### Количественное определение

Определение проводят методом сжигания в колбе с кислородом (ОФС «Метод сжигания в колбе с кислородом»), используя 50,0 мг испытуемого образца.

Продукты сжигания растворяют в 20 мл 1 М раствора натрия гидроксида. К полученному раствору прибавляют 2,5 мл азотной кислоты концентрированной и титруют 0,1 М раствором серебра нитрата, определяя конечную точку потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 6,25 мг поливинилхлорида.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0020 Упаковочные материалы на основе поликарбонатов для лекарственных средств

Вводится впервые

Поликарбонаты относят к классу синтетических термопластических полимеров, представляющих собой сложные полиэфиры угольной кислоты и двухатомных спиртов. Наибольшее промышленное значение имеют ароматические поликарбонаты, в первую очередь, поликарбонат на основе мономера бисфенола А, получаемого конденсацией фенола и ацетона.

###### Особенности технологии

Поликарбонат синтезируют путем фосфогенирования бисфенола А в растворе хлоралканов (обычно метиленхлоридом) методом межфазной полимеризации (межфазная поликонденсация) или поликонденсацией в растворе или методом переэтерификации в расплаве диарилкарбонатов (например, дифенилкарбоната) бисфенолом А (полимеризация в расплаве), который позволяет избежать использование фосгена, в присутствии щелочных катализаторов (например, натрия метилата) при
температуре 150–300 °С. В состав поликарбонатов могут быть введены добавки, представляющие собой термостабилизаторы, светостабилизаторы, пластификаторы, красители и др.

Поликарбонаты обладают высокой термостойкостью, уникальной ударопрочностью, химической устойчивостью. Изделия из поликарбоната прозрачны.

Для производства упаковки для лекарственных средств на основе упаковочных материалов из поликарбонатов применяют все методы, используемые для переработки термопластов, в том числе, формование, литье, экструзию и др. При включении поликарбонатов в состав комбинированных упаковочных материалов при производстве упаковки для лекарственных средств может быть использована сварка.

Упаковочные материалы на основе поликарбонатов применяют для производства первичной упаковки для лекарственных средств, контурных упаковок (блистеров, стрипов), флаконов, банок, а также различных видов и типов вторичной упаковки.

Поликарбонаты выпускают в виде прозрачных, бесцветных или слегка окрашенных гранул. После трансформации поликарбонаты могут представлять собой плёнку, пластинки различной толщины, готовую упаковку и др.

Наименование испытаний для упаковочных материалов на основе поликарбоната зависит от классификационных признаков как самой упаковки (имеет ли она непосредственный контакт с содержимым), а также от физико-химических, токсикологических свойств действующих и вспомогательных веществ лекарственного препарата, классификационных признаков лекарственной формы лекарственного препарата и т.д. Возможно проведение испытаний упаковочных материалов на основе поликарбоната по показателям «Прозрачность», «Стерильность», «Бактериальные эндотоксины» для упаковочных материалов, предназначенных для парентеральных лекарственных форм, а также по другим показателям, указанным в нормативной документации.

Поликарбонаты выпускают в виде прозрачных, бесцветных или слегка окрашенных гранул. После трансформации поликарбонаты могут представлять собой плёнку, пластинки различной толщины, готовую упаковку и др.

Общие требования к упаковочным материалам из полимерных материалов для лекарственных средств установлены ОФС «Упаковка лекарственных средств», ОФС «Упаковка и укупорочные средства из полимерных материалов для фармацевтического применения», ОФС «Упаковка из полимерных материалов для водных растворов для инфузий».

###### Свойства

Растворимость. Мало растворимы в ароматических углеводородах и сложных эфирах, практически нерастворимы в воде, спирте, минеральных кислотах. Неустойчивы к действию сильных оснований, хлорированных углеводородов (метиленхлориду).

###### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр испытуемого образца поликарбоната, снятый в области от 3800 см-1 до 650 см-1, должен соответствовать
   ИК - спектру фармакопейного стандартного образца поликарбоната.

- Испытуемый образец. Растворяют в 10 мл метиленхлорида 0,5 г испытуемого образца посредством кипячения с обратным холодильником в течение 15 мин. На стеклянную пластину с натрия хлоридом наносят несколько капель полученного раствора и выпаривают растворитель в сушильном шкафу при температуре 80° С.

2. Дифференциальная сканирующая калориметрия (ОФС «Термический анализ», метод 2). Термограмма испытуемого образца поликарбоната должна соответствовать термограмме фармакопейного стандартного образца поликарбоната, а температура пика плавления, полученного от термограммы испытуемого образца не должна отличаться от температуры пика плавления фармакопейного стандартного образца больше, чем на 8° С.

- В тигель помещают около 12 мг (точная навеска) испытуемого образца. Образец поликарбоната нагревают в диапазоне температур от –20 до 300 °С со скоростью нагревания около 10 °С/мин. Незамедлительно охлаждают образец до комнатной температуры.

- Регистрируют термограммы испытуемого и фармакопейного стандартного образцов в атмосфере азота в установленных для полимера условиях нагревания/охлаждения. Результаты анализа сильно зависят от количества пластификатора в испытуемом образце.

3. Добавки. Определение проводят в случае содержания добавок в соответствии с методами, указанными в документах на полимерные материалы.

###### Испытания

Подготовка испытуемых образцов. Образцы эластомерного материала при необходимости разрезают на кусочки с размером сторон не более 1 см.

Светопоглощающие примеси. (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 25,0 г испытуемого образца, прибавляют 500 мл воды и кипятят с обратным холодильником в течение 5 ч. Раствору дают остыть и фильтруют через стеклянный фильтр в мерную колбу вместимостью 500 мл, объём раствора доводят водой до метки.

Испытуемый раствор используют в течение 4 ч после приготовления.

Оптическая плотность раствора А в области длин волн от 220 до 340 нм в кварцевой кювете с толщиной слоя 10 мм, измеренная по сравнению с водой, не должна превышать 0,2.

Кислотность или щёлочность. К 100 мл испытуемого раствора (раздел «Светопоглощающие примеси») прибавляют 0,2 мл метилового оранжевого раствора 0,1 %. Для изменения окраски раствора от жёлтой до оранжевой должно потребоваться не более 1,5 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты.

Герметичность. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение герметичности упаковки», если упаковка предназначена для сохранения герметичности.

Остаточные органические растворители. Испытание проводят методом ГХ (парофазный анализ) (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. Во флакон для хроматографирования вместимостью 20 мл помещают 1,0 г испытуемого образца, прибавляют 10 мл диметилформамида, закрывают флакон пробкой и обрабатывают ультразвуком в течение 4 ч. Охлаждают до комнатной температуры. Готовят два раствора.

Контрольный раствор. Готовят аналогичным образом без добавления испытуемого образца.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 500 мг метиленхлорида, 500 мг толуола, 500 мг этилбензола и 1250 мг хлорбензола (точные навески), растворяют в диметилформамиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мл полученного раствора и доводят объём раствора диметилформамидом до метки.

Калибровочные растворы. В 5 мерных колб вместимостью 100 мл каждая помещают по 2, 3, 4, 5 и 6 мл, соответственно, стандартного раствора. Объём раствора в каждой колбе доводят диметилформамидом до метки. Полученные растворы (1-5) содержат соответственно по 10, 15, 20, 25 и 30 мг/л метиленхлорида, толуола и этилбензола и по 25, 37,5, 50, 62,5 и 75 мг/л хлорбензола, соответственно.

По 10 мл каждого из калибровочных растворов помещают во флаконы для хроматографирования вместимостью 20 мл и закрывают флаконы пробками.

Хроматографические условия

Колонка | 30 м × 0,32 мм, макрогол 1500, толщина плёнки 0,5 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |
Газ-носитель | гелий для хроматографии ; |
Скорость потока | подбирают таким образом, чтобы обеспечить постоянное давление в 10 psi; |
Режим | деление потока; |
Температура | колонки | 50 ºC, удержание в течение 20 мин, поднятие до 165 ºC со скоростью 6 ºC/мин, в течение 20 мин;
| инжектора | 140 ºC;
| детектора | 250 ºC;
Объём пробы | 1 мкл. |

Условия равновесного пара

Температура уравновешивания | 115 °С;
Температура петли | 110 °С;
Температура линии переноса | 120 °С;
Время установления равновесия | 60 мин;
Время нагнетения давления | 0,5 мин;
Время ввода газовой пробы | 0,1 мин;
Время выдерживания | 0,2 мин;
Давление при заполнении флакона | 20 psi.

Хроматографируют контрольный раствор дважды. Хроматографируют калибровочный раствор 3 пять раз и проверяют пригодность хроматографической системы. Промывают хроматографическую систему контрольным раствором.

Хроматографируют калибровочные растворы 1–5 и строят графики зависимости площади пика от концентрации соответствующего органического растворителя в мг/л. Коэффициент корреляции (r) должен составлять не менее 0,99. Промывают хроматографическую систему холостым раствором и хроматографируют испытуемый раствор.

Проверка пригодности хроматографической системы:

- относительное стандартное отклонение, рассчитанное по площадям пиков соответствующего растворителя на хроматограммах калибровочного раствора 3 пяти повторных введений, должно составлять не более 5 %.

По калибровочному графику находят концентрацию соответствующего органического растворителя в испытуемом растворе в мг/л.

Количество каждого органического растворителя в испытуемом образце (Х) в % вычисляют по формуле:

где С – концентрация соответствующего растворителя, найденная по калибровочному графику, мг/л;
а – навеска испытуемого образца, г;
P – чистота стандартного образца растворителя, %.

Допустимое содержание остаточных органических растворителей:

- метиленхлорида: не более 0,02 %;

- толуола: не более 0,02 %;

- сумма толуола и этилбензола: не более 0,02 %;

- хлорбензола: не более 0,05 %.

Бисфенол А. Не более 0,01 %. Является остаточным мономером, а не добавкой к поликарбонатам. Испытание проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. В круглодонную колбу вместимостью 250 мл помещают 1,0 г испытуемого образца, прибавляют 50 мл метиленхлорида, кипятят с обратным холодильником при температуре 35° С в течение 1 ч. Охлаждают раствор до комнатной температуры. Медленно прибавляют 75 мл метанола при непрерывном перемешивании и охлаждают в холодильнике в течение 2 ч. Фильтруют охлаждённый раствор через стеклянный фильтр. Промывают круглодонную колбу двумя порциями метанола по 15 мл, объединяя промывные воды с фильтратом. Выпаривают фильтрат досуха при температуре 45 °С под вакуумом. Растворяют остаток в 5 мл метиленхлорида. 0,5 мл полученного раствора и 0,5 мл N,O-бис(триметилсилил)трифторацетамида помещают во флакон вместимостью 1,5 мл, флакон сразу же закрывают. Закрытый флакон нагревают при температуре 40 °С в течение 2 ч, затем охлаждают до комнатной температуры.

Контрольный раствор. Готовят аналогичным образом без добавления испытуемого образца.

Раствор стандартного образца бисфенола А. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают около 20,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца бисфенола А, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора этим же растворителем до метки. Концентрация бисфенола А – около 100 мг/мл.

Калибровочные растворы. В мерные колбы вместимостью 100 мл помещают 5, 10, 20, 30 и 40 мл исходного раствора стандартного образца бисфенола А. Доводят объём раствора в каждой колбе метиленхлоридом до метки и перемешивают. Полученные растворы содержат соответственно 5, 10, 20, 30 и 40 мг/л бисфенола А. По 0,5 мл каждого из растворов и по 0,5 мл N,O-бис(триметилсилил)трифторацетамида помещают во флаконы вместимостью 1,5 мл, флаконы сразу же закрывают. Закрытые флаконы нагревают при температуре 40 °С в течение 2 ч, затем охлаждают до комнатной температуры.

Хроматографические условия

Колонка | 25 м × 0,25 мм, поли(диметилсилоксан), толщина пленки 0,25 мкм; |
Детектор | плазменно-ионизационный; |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |
Скорость потока | подбирают таким образом, чтобы обеспечить постоянное давление в 13 psi; |
Режим | деление потока; |
Температура | инжектора | 300 °C;
| колонки | 250 °C;
| детектор | 300 °C;
Объём пробы | 2 мкл. |

Хроматографируют контрольный раствор трижды. Хроматографируют калибровочный раствор 3 пять раз и проверяют пригодность хроматографической системы. Промывают хроматографическую систему контрольным раствором дважды.

Проверка пригодности хроматографической системы:

- относительное стандартное отклонение, рассчитанное по площадям пиков бисфенола А на хроматограммах калибровочного раствора 3 пяти повторных введений, должно составлять не более 5 %.

Хроматографируют калибровочные растворы 1–5 и строят графики зависимости площади пика от концентрации бисфенола А в мг/л. Коэффициент корреляции (r) должен составлять не менее 0,99. Промывают хроматографическую систему холостым раствором и хроматографируют испытуемый раствор.

По калибровочному графику находят концентрацию бисфенола А в испытуемом растворе в мг/л.

Количество бисфенола А в испытуемом образце (Х) в % вычисляют по формуле:

где С – концентрация соответствующего растворителя, найденная по калибровочному графику, мг/л;
а – навеска испытуемого образца, г;
P – чистота стандартного образца бисфенола А, %.

Экстрагируемые металлы: мышьяк, кадмий, свинец, ртуть, кобальт, никель, ванадий. Не более 0,01 ppm (0,001 %), если в фармакопейной статье не указано другое.

В колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 100,0 г испытуемого образца, прибавляют 250 мл 0,1 М хлористоводородной кислоты раствора и кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч, постоянно помешивая. Раствору дают остыть и декантируют в мерную колбу вместимостью 250 мл, доводят объём раствора 0,1 М хлористоводородной кислоты раствором до метки. Полученный раствор используют в течение 4 ч после приготовления.

Индивидуальное определение металлов экстрагируемых из упаковочного материала на основе поликарбонатов, проводят методами атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»), атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия») и др.

Общий органический углерод. ОФС «Содержание общего органического углерода в воде для фармацевтического применения».

Несмотря на то, что данное испытание предназначено для анализа воды высокой чистоты с низкими значениями общего органического углерода, экстракты полимерных материалов могут иметь значения общего органического углерода, которые выше, чем у воды очищенной из-за экстрагированных органических веществ. Используемая методика определения содержания общего органического углерода, должна иметь предел обнаружения 0,2 мг/л и диапазон линейности от 0,2 до 20 мг/л. Допускается использование более широкого диапазона, если его линейность доказана. Если результат выходит за верхнее значение линейного диапазона, то испытуемый раствор следует соответствующим образом разбавить.

Испытуемый раствор. В колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 25,0 г испытуемого образца, прибавляют 500 мл воды и кипятят с обратным холодильником в течение 5 ч. Раствору дают остыть и фильтруют через стеклянный фильтр в мерную колбу вместимостью 500 мл, доводят объём раствора водой до метки. Раствор используют в течение 4 ч после приготовления.

Разница между концентрациями общего органического углерода в испытуемом растворе и холостом растворе не должна превышать 5 мг/л, если нет других указаний в фармакопейной статье.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0021 Упаковочные материалы на основе полиолефинов для лекарственных средств

Вводится впервые

Полиолефины – это полимеризованный этилен или пропилен, или сополимеризованный этилен с пропиленом с содержанием не более 25 % гомологов высших алкенов (от С4 до С10) или карбоновых кислот или сложных эфиров.

###### Особенности технологии

Некоторые упаковочные материалы могут представлять собой смесь полиолефинов.

В зависимости от предполагаемого использования полимеров они могут содержать добавки для оптимизации их обработки или их химических, физических и механических свойств.

Полиолефины могут содержать не более трёх добавок-атиоксидантов, одну или несколько добавок, обладающих смазывающими или антиблокирующими функциональными свойствами. В качестве добавки для полиолефинов, предназначенных для светозащитной упаковки, и придающей полиолефину свойство непрозрачности, используют титана диоксид.

Если иное не обосновано и не разрешено, эти добавки выбираются из нижеперечисленого перечня, в котором для каждой добавки указано максимально допустимое содержание:

- бутилгидрокситолуола – не более 0,125 %;

- пентаэритритил тетракис [3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидрокси-фенил) пропионат] – не более 0,3 %;

- 1,3,5-трис (3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксибензил)- S-триазин-2,4,6 (1Н,3Н,5Н)- трион – не более 0,3 %;

- октадецил (3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионат – не более 0,3 %;

- этиленбис [3,3-бис[3- (1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]бутаноат];

- диоктадецилдисульфид – не более 0,3 %;

- 2,2',2",6,6',6"-гекса-трет-бутил-4,4',4"-[(2,4,6-триметил-1,3,5-бензолтриил)трис- метилен]трифенол – не более 0,3 %;

- 2,2'-бис (октадецилокси)-5, 5'-спироби [1,3,2-диоксафосфинан];

- дидодецил 3,3' -тиодипропионат – не более 0,3 %;

- диоктадецил 3,3' -тиодипропионат – не более 0,3 %;

- трис [2,4-бис(1,1-диметилэтил)фенил]фосфит – не более 0,3 %;

- сополимер диметилсукцината и (4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-ил)этанола – не более 0,3 %.

- добавка 18 к полимеру – не более 0,1 %.

Общее количество перечисленных выше антиоксидантных добавок должно быть не более 0,3 %:

- гидротальцит – не более 0,5 %;

- алканамиды – не более 0,5 %;

- алкенамиды – не более 0,5 %;

- натрия алюмосиликат – не более 0,5 %;

- кремния диоксид (натуральный или синтетический, с покрытием или без покрытия) – не более 0,5 %;

- натрия бензоат – не более 0,5 %;

- эфиры или соли жирных кислот не более 0,5 %;

- тринатрия фосфат не более 0,5 %;

- парафин жидкий (вазелиновое масло) – не более 0,5 %;

- цинка оксид – не более 0,5 %;

- тальк – не более 0,5 %;

- кальция стеарат или цинка стеарат или их смесь – не более 0,5 %;

- магния оксид – не более 0,2 %;

- титана диоксид – не более 4 %.

Общие требования к упаковочным материалам на основе полиолефинов для фармацевтического применения представлены в ОФС «Упаковка лекарственных средств», ОФС «Упаковка и укупорочные средства из полимерных материалов для фармацевтического применения», ОФС «Добавки к полимерным материалам для фармацевтического применения».

Упаковочные материалы на основе полиолефинов, предназначенные для упаковки лекарственных средств, подлежащих стерилизации, должны обеспечивать возможность стерилизации произведённой упаковки в соответствии с требованиями и методами, указанными в ОФС «Стерилизация».

###### Описание

Полиолефины выпускают в виде порошка, гранул. После трансформации полиолефины могут представлять собой, полупрозрачные пластинки, листы различной толщины, плёнку, готовую упаковку.

Размягчается при температуре от 65 °С до 165 °С.

При сжигании пламя окрашивается в синий цвет.

###### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр испытуемого образца полиолефинов, в области от 3800 до 650 см-1по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца полиолефинов.

- Подготовка образца для ИК-спектрометрии. К 0,25 г испытуемого образца полиолефинов прибавляют 10 мл толуола и кипятят с обратным холодильником в течение 15 мин. Несколько капель раствора помещают на плёнку натрия хлорида или на диск калия бромида и выпаривают растворитель в сушильном шкафу при температуре 80 °С.

- Идентификация также может быть выполнена непосредственно на вырезанном кусочке подходящего размера гранул или плёнок горячего прессования с использованием полного внутреннего отражения. Полученный спектр должен соответствовать спектру стандартного образца полиолефина.

2. Качественная реакция (для непрозрачного материала). В платиновом тигле смешивают около 20 мг испытуемого материала с 1 г калия гидросульфата и нагревают до полного расплавления. После охлаждения прибавляют 20 мл серной кислоты разведённой, слегка нагревают и фильтруют полученный раствор. К фильтрату прибавляют 1 мл фосфорной кислоты и 1 мл водорода пероксида. Должно появиться оранжево-жёлтое окрашивание, если материал содержит добавку титана диоксида.

3. Образец должен выдерживать дополнительные испытания на соответствующие добавки (при их наличии), указанные в разделе «Испытания» настоящей ОФС.

###### Испытания

Пробоподготовка. Испытуемый образец, предназначенный для экстрагирования, как правило, разрезают на части с максимальной длиной стороны не более 1 см и подготавливают несколько растворов, проводя экстрагирование полиолефинов различными растворителями: водой (Испытуемый раствор А), толуолом (Испытуемый раствор Б), кислотой (Испытуемый раствор В).

Испытуемый раствор А. В колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 25,0 г испытуемого образца, прибавляют 500 мл воды и кипятят с обратным холодильником в течение 5 ч. После охлаждения полученный раствор декантируют и оставляют часть раствора для испытания по показателям «Прозрачность раствора» и «Цветность раствора», а оставшуюся часть раствора фильтруют через стеклянный фильтр ПОР 16 (ОФС «Оборудование»).

Испытуемый раствор А используют в течение 4 ч после приготовления.

Испытуемый раствор Б. В коническую колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 2,0 г испытуемого образца, прибавляют 80 мл толуола и кипятят с обратным холодильником при постоянном перемешивании в течение 90 мин. Охлаждают до 60 °С, прибавляют 120 мл метанола при постоянном перемешивании. Полученный раствор фильтруют через стеклянный фильтр ПОР 16 (ОФС «Оборудование») в мерную колбу вместимостью 250 мл. Колбу для экстрагирования и фильтр промывают 25 мл смеси толуол—метанол 40:60 (о/о), промывную жидкость прибавляют к фильтрату и доводят объём раствора той же смесью растворителей до метки.

Параллельно готовят контрольный раствор.

Испытуемый раствор В. В коническую колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 100 г испытуемого образца, прибавляют 250 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и кипятят с обратным холодильником при постоянном перемешивании в течение 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры полученный раствор декантируют.

Растворимость. Практически нерастворим в воде, этаноле гексане, метаноле, растворим в горячих ароматических углеводородах.

Прозрачность раствора. Испытуемый раствор А, полученный при декантировании, должен быть прозрачным. (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Испытуемый раствор А, полученный при декантировании, должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

Светопоглощающие примеси. Оптическая плотность испытуемого раствор А в области длин волн от 220 до 340 нм в кварцевой кювете с толщиной слоя 1 см, измеренная по сравнению с водой, не должна превышать 0,2 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Кислотность или щёлочность

К 100 мл испытуемого раствор А прибавляют 0,15 мл БКФ (BRP) индикатора раствора. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 1,5 мл натрия гидроксида раствор 0,01 М.

К 100 мл испытуемого раствор А прибавляют 0,2 мл метилового оранжевого раствора. Окраска раствора должна изменяться от жёлтой до оранжевой при прибавлении не более 1,0 мл хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М.

Восстанавливающие вещества

В колбу с притёртой пробкой вместимостью 100 мл помещают 20,0 мл испытуемого раствора А, прибавляют 1 мл серной кислоты раствор 16 % и 20 мл калия перманганата раствор 0,002 М, кипятят с обратным холодильником в течение 3 мин, сразу охлаждают. В колбу прибавляют 1 г калия йодида и полученный раствор немедленно титруют натрия тиосульфата раствором 0,01 М до обесцвечивания, используя в качестве индикатора 0,25 мл крахмала раствор 1 %.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Разность между израсходованным объёмом 0,01 М раствора натрия тиосульфата при титровании контрольного и испытуемого раствора не должна превышать 3,0 мл.

Алюминий

Не более 0,0001%. Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия»).

Используют испытуемый раствор В.

Раствор сравнения. Готовят разбавлением стандартного раствора 200 мкг/мл алюминий-иона (ОФС «Алюминий») хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М.

Измеряют величину эмиссии алюминия при длине волны 396,15 нм, регулируя спектральный фон на уровне 396,25 нм.

Проверяют отсутствие алюминия в используемой хлористоводородной кислоте.

Титан (не для полиолефинов, содержащих титана диоксид).

Не более 0,0001%. Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия»).

Используют испытуемый раствор В.

Раствор сравнения. Готовят разбавлением титана стандартного раствор 100 мкг/мл хлористоводородной кислотой раствором 0,1 М.

Измеряют величину эмиссии титана при длине волны 336,12 нм, регулируя спектральный фон на уровне 336,16 нм.

Проверяют отсутствие титана в используемой хлористоводородной кислоте.

Цинк

Не более 0,0001 % Определение проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 1).

Используют испытуемый раствор В.

Стандартный раствор 10 мкг/мл цинк. Непосредственно перед использованием цинка стандартный раствор 1 мг/мл разводят водой в 100 раз.

Стандартные растворы. Готовят разбавлением стандартного раствора 10 мкг/мл цинк 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты.

Источник излучения: лампа с полым цинковым катодом.

Длина волны: 213,9 нм

Атомизация: воздушно-ацетиленовое пламя.

Проверяют отсутствие цинка в используемой хлористоводородной кислоте.

Тяжёлые металлы

Не более 0,00025 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3Б).

Испытуемый раствор. На водяной бане упаривают 50 мл испытуемого раствора В до объёма около 5 мл, доводят объём раствора водой до 20 мл. Для определения используют 12 мл полученного раствора.

Стандартный раствор. Готовят, используя 2,5 мл стандартного раствора 10 мкг/мл свинца.

Сульфатная зола. Не более 1,0 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют около 5,0 г (точная навеска) испытуемого материала.

Эта норма не распространяется на полиолефины, содержащие добавку титана диоксида, добавляемую для придания непрозрачности материалу.

Дополнительные испытания

Испытания проводят полностью или частично, если применимо к составу полиолефинов, используемых для производства упаковки для лекарственных средств.

Фенольные антиоксиданты. Определение проводят методом высокоэффективной жидкостной хроматографией (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворитель. Ацетонитрил-тетрагидрофуран 50:50.

Подвижная фаза: Вода для хроматографии: ацетонитрил (30:70).

Испытуемый раствор 1. Выпаривают досуха 50 мл испытуемого раствора Б под вакуумом при температуре 45oС. Сухой остаток растворяют в 5,0 мл смеси растворителей.

Контрольный раствор. Контрольный раствор готовят аналогичным образом испытуемому раствору Б.

Испытуемый раствор 2. Выпаривают досуха 50 мл испытуемого раствора Б под вакуумом при температуре 45 °С. Остаток растворяют в 5,0 мл смеси равных объёмов ацетонитрила и раствора трет-бутилгидропероксид в тетрагидрофуране 1 % Закрывают колбу и оставляют на 1 ч. Контрольный раствор готовят аналогичным образом испытуемому раствору Б.

Стандартные растворы. Готовят только те стандартные растворы, которые необходимы для определения фенольных антиоксидантов, входящих в состав испытуемых полиолефинов.

Стандартный раствор А. Растворяют 25,0 мг фармакопейного стандартного образца бутилгидрокситолуола и 60,0 мг фармакопейного стандартного образца этилен бис [3,3-бис[3- (1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]бутаноат] в 10 мл растворителя. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят растворителем до метки.

Стандартный раствор Б. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца пентаэритритил тетракис [3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионат] и 60,0 мг фармакопейного стандартного образца 2,2',2'',6,6',6''-гекса-трет-бутил-4,4',4''-[(2,4,6-триметил- 1,3,5-бензолтриил) трисметилен)] трифенол в 10 мл растворителя. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят растворителем до метки.

Стандартный раствор В. 60,0 мг фармакопейного стандартного образца октадецил (3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионат и 60,0 мг фармакопейного стандартного образца трис (2,4-ди-трет-бутилфенил)фосфит в 10 мл растворителя. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят растворителем до метки. Готовят непосредственно перед использованием.

Стандартный раствор Г. Растворяют 25,0 мг фармакопейного стандартного образца бутилгидрокситолуола в 10 мл растворителя. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят растворителем до метки.

Стандартный раствор Д. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца этилен бис [3,3-бис[3- (1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]бутаноат] в 10 мл растворителя. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят растворителем до метки.

Стандартный раствор Е. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца 1,3,5-трис(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксибензил)- S-триазин-2,4,6 (1Н,3Н,5Н)-трион в 10 мл растворителя. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят растворителем до метки.

Стандартный раствор Ж. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца пентаэритритил тетракис [3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионат] в 10 мл растворителя. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят растворителем до метки.

Стандартный раствор З. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца октадецил-3- (3,5-ди- трет- бутил-4-гидроксифенил) пропаноат в 10,0 мл растворителя. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят растворителем до метки.

Стандартный раствор И. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца 2,2',2'',6,6',6''-гекса-трет-бутил-4,4',4''-[(2,4,6-триметил- 1,3,5-бензолтриил) трисметилен)] трифенол в 10 мл растворителя. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят растворителем до метки.

Стандартный раствор К. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца октадецил (3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионат в 10 мл растворителя. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят растворителем до метки.

Стандартный раствор Л. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца трис (2,4-ди-трет-бутилфенил)фосфита растворяют в 10 мл растворителя. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят растворителем до метки. Готовят непосредственно перед использованием.

Стандартный раствор М. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца, представляющего собой смесь семи продуктов, соответствующих продукту реакции ди-трет-бутилфосфонита с фосфора трихлоридом, продуктам реакции с бифенил- и 2,4-бис (1,1-диметилэтил) фенола, в 10 мл смеси равных объёмов ацетонитрила и раствора трет-бутилгидропероксида в тетрагидрофуране 1 %. Закрывают ёмкость для приготовления и оставляют на 1 ч. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят растворителем до метки. Готовят непосредственно перед использованием.

Метод 1. Для проведения испытания, если в испытуемом материале содержатся добавки бутилгидрокситолуола и/или этилен бис [3,3-бис[3- (1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]бутаноат].

Полиолефины должны содержать не более 0,125 % бутилгидрокситолуола и не более 0,3 % этилен бис [3,3-бис[3- (1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил] бутаноата].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Скорость потока | 2,0 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм;
Объём пробы | 20 мкл;
Время хроматографирования | 30 мин.

Хроматографируют испытуемый раствора 1, соответствующий контрольный раствор, стандартный раствор А, стандартные растворы Г и Д.

Пригодность хроматографической системы:

- разрешение между пиками добавок бутилгидрокситолуола и этилен бис [3,3-бис[3-(1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]бутаноат] на хроматограмме стандартного раствора А должно быть не менее 5,0;

- на хроматограмме испытуемого раствора 1 имеются только пики, соответствующие антиоксидантам, указанным в составе исследуемого материала, и незначительные пики, соответствующие пикам на хроматограмме контрольного раствора.

Нормы площади пиков на хроматограмме испытуемого раствора 1 не должны превышать площади соответствующих пиков на хроматограммах стандартных растворов Г и/или Д.

Метод 2. Для проведения испытания, если испытуемый материал содержит одну или несколько следующих добавок - антиоксидантов:

- пентаэритритил тетракис [3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидрокси-фенил)пропионат];

- 2,2',2'',6,6',6''-гекса-трет-бутил-4,4',4''-[(2,4,6-триметил-1,3,5-бензолтриил) трисметилен)] трифенол;

- октадецил (3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионат;

- трис (2,4-ди-трет-бутилфенил)фосфит;

- 1,3,5-трис (3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксибензил)- S-триазин-2,4,6 (1Н,3Н,5Н)- трион.

Содержание каждой указанной добавки в полиолефинах должно быть не более 0,3 %.

Выполняют испытание по методу 1 со следующими изменениями.

Подвижная фаза: вода для хроматографии, тетрагидрофуран, ацетонитрил (10:30:60).

Хроматографические условия

- Скорость потока: 1,5 мл/мин.

Хроматографируют испытуемый раствор 1, соответствующий контрольный раствор, стандартный раствор Б, стандартный раствор В и стандартные растворы антиоксидантов из вышеперечисленного перечня, которые входят в состав испытуемого материала.

Пригодность хроматографической системы:

- разрешение между пиками добавок пентаэритритил тетракис [3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидрокси-фенил)пропионат] и 2,2',2'',6,6',6'' -гекса-трет-бутил-4,4',4''-[(2,4,6-триметил-1,3,5-бензолтриил) трисметилен)] трифенол на хроматограмме стандартного раствора Б должно быть не менее 2,0.

- между пиками добавок октадецил (3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионат и трис (2,4-ди-трет-бутилфенил)фосфит в хроматограмме, полученной со стандартным раствором В должно быть не менее 2,0;

- на хроматограмме испытуемого раствора 1 имеются только пики, соответствующие антиоксидантам, указанным в составе исследуемого материала, и незначительные пики, соответствующие пикам на хроматограмме контрольного раствора.

Метод 3. Если испытуемый материал содержит добавку (№18 к полимеру), представляющую собой смесь семи продуктов, соответствующих продукту реакции ди-трет-бутилфосфонита с фосфора трихлоридом, продуктам реакции с бифенил- и 2,4-бис (1,1-диметилэтил) фенола, и/или трис (2,4-ди-трет-бутилфенил)фосфит, то испытание выполняют по методу 1 со следующими изменениями.

Подвижная фаза: тетрагидрофуран, ацетонитрил (20:80).

Хроматографические условия

- Скорость потока: 1,5 мл/мин;

- Детектор спектрофотометрический, 270 нм;

Хроматографируют испытуемый раствор 2, соответствующий контрольный раствор, стандартный раствор М.

Идентификация пиков: используют хроматограмму стандартного образца добавки, представляющей собой смесь семи продуктов, соответствующих продукту реакции ди-трет-бутилфосфонита с фосфора трихлоридом, продуктам реакции с бифенил- и 2,4-бис (1,1-диметилэтил) фенола и хроматограмму, полученную со стандартным раствором М, чтобы идентифицировать пики.

Время удерживания: 2 основных пика исследуемой добавки: около 3,3 мин и около 6,6 мин.

На хроматограмме испытуемого раствора 2 должно быть 2 основных пика исследуемой добавки. Сумма площадей этих пиков должна быть не менее 50 % от суммы площадей всех пиков исследуемой добавки, представляющей собой смесь семи продуктов, соответствующих продукту реакции ди-трет-бутилфосфонита с фосфора трихлоридом, продуктам реакции с бифенил- и 2,4-бис (1,1-диметилэтил) фенола.

Пригодность хроматографической системы:

- разрешение: не менее 6,0 между двумя основными пиками на хроматограмме, полученной со стандартным раствором М;

- на хроматограмме испытуемого раствора 2 имеются только пики, соответствующие антиоксидантам, указанным в составе исследуемого материала, и незначительные пики, соответствующие пикам на хроматограмме контрольного раствора.

Расчет содержания добавки. Суммируют площади всех пиков добавки, представляющей собой смесь семи продуктов, соответствующих продукту реакции ди-трет-бутилфосфонита с фосфора трихлоридом, продуктам реакции с бифенил- и 2,4-бис (1,1-диметилэтил) фенола, элюированной между 2,0 и 9,5 мин, для расчета используют концентрацию исследуемой добавки в стандартном растворе.

Сумма площадей пиков добавки должна быть не более 0,1 %, без учёта любого пика с площадью менее 0,3 % от общей площади.

Нефенольные антиоксиданты. Определение проводят методом тонкослойной хроматографии (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Испытуемый раствор. Выпаривают досуха под вакуумом 100 мл Раствора 2 при температуре 45°С. Остаток растворяют в 2 мл метиленхлорида подкисленного.

Стандартный раствор Н. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца 2,2'-бис (октадецилокси)-5,5'-спироби[1,3,2-диоксафосфинан] в 10 мл метиленхлорида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят метиленхлоридом подкисленным до метки.

Стандартный раствор П. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца диоктадецил дисульфида в 10 мл метиленхлорида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят метиленхлоридом подкисленным до метки

Стандартный раствор Р. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца дидодецил 3,3' -тиодипропионат в 10 мл метиленхлорида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят метиленхлоридом подкисленным до метки

Стандартный раствор С. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца диоктадецил 3,3' -тиодипропионат в 10 мл метиленхлорида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят метиленхлоридом подкисленным до метки

Стандартный раствор Т. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца дидодецил 3,3' -тиодипропионат и 60 мг стандартного образца диоктадецил 3,3' -тиодипропионат в 10 мл метиленхлорида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят метиленхлоридом подкисленным до метки.

Пластинка: ТСХ пластинки со слоем силикагеля GF254.

Подвижная фаза А (ПФА). Гексан.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метиленхлорид.

На линию старта хроматографической пластинки наносят по 20 мкл испытуемого раствора, стандартного раствора Т и стандартных растворов, которые соответствуют всем фенольным и нефенольным антиоксидантам, входящим в состав испытуемого материала.

Хроматографирование А: расстояние, пройденное подвижной фазой А (ПФ А) от линии старта должно быть не менее 18 см; высушивание – на воздухе.

Хроматографирование Б: расстояние, пройденное подвижной фазой Б (ПФ Б) от линии старта должно быть не менее 17 см; высушивание – на воздухе.

Детектирование: пластинку опрыскивают йода спиртовым раствором и через 10–15 мин исследуют в ультрафиолетовом свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора Т должны проявляться два чётко разделённых пятна.

На хроматограмме испытуемого раствора интенсивность любых пятен не должна превышать интенсивность соответствующих пятен на хроматограммах стандартных образцов.

Добавка: сополимер диметилсукцината и (4-гидроокиси-2.2.6.6-тетраметилпиперидин-1-ил) этанола. Не более 0,3 %. Определение проводят методом Высокоэффективной жидкостной хроматографией. (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза: Этанол—гексан 11:89

Испытуемый раствор 1. Выпаривают досуха 25 мл испытуемого раствора Б под вакуумом при температуре 45 °С. Остаток растворяют в 10 мл толуола и 10 мл раствора тетрабутиламмония гидроксида 1 % в растворителе: толуол—этанол 35:65. Кипятят с обратным холодильником в течение 3 ч. Дают остыть и при необходимости фильтруют.

Стандартный раствор У. Растворяют 30,0 мг фармакопейного стандартного образца сополимера диметилсукцината и (4-гидроокиси-2.2.6.6-тетраметилпиперидин-1-ил)этанола в 50 мл толуола. Добавляют 1 мл полученного раствора к 25 мл контрольного раствора Раствора 2 и выпаривают досуха в вакууме при 45° C. Остаток растворяют в 10 мл толуола и 10 мл тетрабутиламмония гидроксида раствор 1 % в смеси 35 объёмов толуола и 65 объёмов спирта безводного. Кипятят с обратным холодильником в течение 3 ч. Дают остыть и при необходимости фильтруют.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм силикагель аминопропилсилильный, 5 мкм;
Скорость потока | 2,0 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 227 нм;
Объём пробы | 20 мкл;
Время хроматографирования | 10 мин.

Хроматографируют испытуемый раствор 1 и стандартный раствор У.

Пригодность хроматографической системы:

- разрешение между пиками компонента «диол» и разбавителя стандартного раствора должно быть не менее 7,0.

Площадь пика, обусловленная компонентом «диол» добавки сополимер диметилсукцината и (4-гидроокиси-2.2.6.6-тетраметилпиперидин-1-ил)этанола на хроматограмме, полученной с испытуемым раствором, меньше, чем соответствующий пик на хроматограмме, полученной со стандартным раствором.

Амиды и стеараты. Определение проводят методом тонкослойной хроматографии (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Испытуемый раствор. Выпаривают досуха 100 мл испытуемого раствора Б под вакуумом при температуре 45oС. Сухой остаток растворяют в 2,0 мл метиленхлорида подкисленного.

Стандартный раствор Ф. Растворяют 20,0 мг фармакопейного стандартного образца стеариновой кислоты в 10 мл метиленхлорида.

Стандартный раствор Ц. Растворяют 40,0 мг фармакопейного стандартного образца олеамида в 20 мл метиленхлорида.

Стандартный раствор Ч. Растворяют 40,0 мг фармакопейного стандартного образца эрукамида в 20 мл метиленхлорида.

Пластинка. ТСХ пластинки со слоем силикагеля GF254 (2 пластины).

- А. Подвижная фаза. Этанол—триметилпентан 25:75

  - На линию старта хроматографической пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора и стандартного раствора Ф.

  - Хроматографирование. Расстояние, пройденное подвижной фазой от линии старта должно быть не менее 10 см; высушивание – на воздухе.

  - Детектирование: опрыскивают раствором дихлорфенолиндофенола натриевой соли в спирте безводном 0,2 % и нагревают в сушильном шкафу при температуре 120 С в течение нескольких минут для усиления интенсивности пятен.

  - На хроматограмме испытуемого раствора пятно, соответствующее добавке «стеариновая кислота», должно быть идентично ему по расположению (Rf около 0,5), но не быть более интенсивным, чем соответствующее пятно пятно на хроматограмме стандартного раствора Ф.

- Б. Подвижная фаза А. Гексан.

- Подвижная фаза В. Метанол—метиленхлорид 5:95.

  - На линию старта хроматографической пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора и стандартных растворов Ц и Ч.

  - Хроматографирование: расстояние, пройденное подвижной фазой А от линии старта должно быть не менее 13 см; высушивание – на воздухе.

  - Хроматографирование В: расстояние, пройденное подвижной фазой В от линии старта должно быть не менее 10 см; высушивание – на воздухе.

  - Детектирование: опрыскивают раствором фосфорномолибденовой кислоты в спирте безводном 4 % и нагревают в сушильном шкафу при температуре 120 С до появления пятен.

  - На хроматограмме испытуемого раствора пятна, соответствующие добавкам олеамид или эрукамид, должны быть идентичны по расположению (Rf около 0,2) и не более интенсивны, чем соответствующие пятна на хроматограммах стандартных растворов Ц и Ч.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0022 Упаковочные материалы на основе полипропилена для парентеральных и офтальмологических лекарственных форм

Вводится впервые

Полипропилен, используемый как упаковочный материал для парентеральных и офтальмологических лекарственных форм, состоит из гомополимера пропилена, из сополимера пропилена с содержанием не более 25 % этилена, а также представляет смесь (сплав) полипропилена с содержанием не более 25 % полиэтилена.

Упаковочный материал на основе полипропилена применяют для производства упаковки (флаконы, бутылки, ампулы, пакеты и др.), укупорочных средств, средств дозирования, плёнки (как полуфабриката для получения упаковки) и других компонентов упаковки, предназначенных для лекарственных препаратов, выпускаемых в виде парентеральных и офтальмологических лекарственных форм.

###### Особенности технологии

В зависимости от цели предполагаемого назначения в полипропилен вводят добавки для оптимизации его химических, физических и механических свойств.

Полипропилен может содержать не более трёх антиоксидантов, одно или несколько смазывающих или антиадгезивных веществ, а также титана диоксид в качестве средства, обеспечивающего непрозрачность, предназначенного для защиты от света.

Если иное не обосновано, добавки выбирают из перечня, в котором указано их максимально допустимое содержание:

- бутилгидрокситолуол – не более 0,125 %;

- пентаэритритилтетракис[3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидрокси-фенил)пропионат] – не более 0,3 %;

- 1,3,5-трис (3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксибензил)- S-триазин-2,4,6 (1Н,3Н,5Н)-трион – не более 0,3 %;

- октадецил-3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропионат – не более 0,3 %;

- этилен-бис[3,3-бис[3-(1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]бутаноат] – не более 0,3 %;

- диоктадецилдисульфид – не более 0,3 %;

- 2,2',2'',6,6',6''-гекса-трет-бутил-4,4',4''-[(2,4,6-триметил-1,3,5-бензолтриил)трисметилен]трифенол – не более 0,3 %;

- 2,2'-бис(октадецилокси)-5,5'-спироби[1,3,2-диоксафосфинан] – не более 0,3 %;

- дидодецил-3,3'-тиодипропионат – не более 0,3 %;

- диоктадецил-3,3' -тиодипропионат – не более 0,3 %;

- трис[2,4-ди-трет-бутилфенил]фосфит – не более 0,3 %.

Общая сумма перечисленных выше антиоксидантных добавок не должна превышать 0,3 %.

Количество следующих добавок:

- гидротальцита – не более 0,5 %;

- алканамидов – не более 0,5 %;

- алкенамидов – не более 0,5 %;

- натрия алюмосиликат – не более 0,5 %;

- кремния диоксида – не более 0,5 %;

- натрия бензоата – не более 0,5 %;

- эфиров и солей жирных кислот – не более 0,5 %;

- тринатрия фосфата – не более 0,5 %:,

- жидкого парафина (вазелинового масла) – не более 0,5 %;

- цинка оксида – не более 0,5 %;

- талька – не более 0,5 %;

- магния оксида – не более 0,2 %;

- кальция стеарат или цинка стеарат или их сумма – не более 0,5 %;

- титана диоксида, только для материалов упаковки предназначенных для офтальмологических лекарственных препаратов – не более 4 %.

Упаковочный материал должен выдерживать дополнительные испытания на соответствующие добавки (при их наличии).

Полипропилен выпускают в виде порошка, гранул. После трансформации представляет собой полупрозрачные пластинки различной толщины, плёнку, первичную упаковку, укупорочные средства или другие комплектующие элементы упаковки.

Размягчается при температуре около 120°С.

Общие требования к упаковочным материалам и упаковке из полимерных материалов для лекарственных средств приведены в ОФС «Упаковка лекарственных средств», ОФС «Упаковка и укупорочные средства из полимерных материалов для фармацевтического применения».

Упаковочные материалы на основе полипропилена, предназначенные для парентеральных и офтальмологических лекарственных форм, должны обеспечивать возможность стерилизации произведённой упаковки в соответствии с ОФС «Стерилизация».

###### Свойства

Растворимость. Растворим в горячих ароматических углеводородах, практически нерастворим в воде, этаноле, гексане, метаноле.

###### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр испытуемого образца полипропилена, в диапазоне от 3800 см-1 до 650 см-1, должен соответствовать спектру стандартного образца полипропилена и иметь максимумы при следующих волновых числах (допустимое отклонение ±5 см-1): 1375 см-1; 1170 см-1; 995 см-1; 973 см-1.

- Для определения к 0,25 г испытуемого образца полипропилена прибавляют 10 мл толуола и кипятят с обратным холодильником в течение 15 мин. Несколько капель раствора помещают на плёнку натрия хлорида или на диск калия бромида и выпаривают растворитель в сушильном шкафу при температуре 80 °С.

- Если испытуемый образец представляет собой пластинку или плёнку, то идентификацию выполняют непосредственно на отрезанном кусочке подходящего размера.

2. Дифференциальная сканирующая калориметрия (ОФС «Термический анализ», метод 2). Термограмма испытуемого образца полипропилена должна соответствовать термограмме стандартного образца полипропилена.

- В тигель помещают 12 мг испытуемого образца. Регистрируют термограммы испытуемого и стандартного образцов в атмосфере азота при температурах от комнатной до 30° С выше температуры плавления. Достигнутую температуру поддерживают в течение 10 мин, затем охлаждают до 50 °С ниже температуры кристаллизации со скоростью от 10 до 20 °С в мин.

3. Качественная реакция (для непрозрачного материала). В платиновом тигле смешивают 20 мг испытуемого образца с 1 г калия гидросульфата и нагревают до полного расплавления. После охлаждения прибавляют 20 мл серной кислоты разведённой, осторожно нагревают и фильтруют. К полученному фильтрату прибавляют 1 мл фосфорной кислоты и 1 мл водорода пероксида. Появляется оранжево-жёлтое окрашивание, если испытуемый образец содержит добавку титана диоксида.

###### Испытания

Плотность. От 0,880 до 0,913г/см3 (ОФС «Определение плотности полимерных материалов»).

Пробоподготовка

Образцы полипропилена для проведения испытания могут представлять собой вырезанные из полимерного материала (пластин, листов, плёнки и т.п.) кусочки необходимых размеров, или растворы и жидкости, полученные экстрагированием полипропилена различными растворителями. Испытуемый образец, предназначенный для экстрагирования, при необходимости, разрезают на части с максимальной длиной стороны не более 1 см и подготавливают несколько испытуемых растворов, проводя экстрагирование упаковочного материала на основе полипропилена водой (испытуемый раствор А), толуолом (испытуемый раствор Б) и кислотой (испытуемый раствор В).

Испытуемый раствор А. В колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 25 г испытуемого образца, прибавляют 500 мл воды и кипятят с обратным холодильником в течение 5 ч. После охлаждения полученный раствор фильтруют через стеклянный фильтр ПОР 16 (ОФС «Пористость стеклянных фильтров») в мерную колбу вместимостью 500 мл и доводят объём раствора водой до метки. Раствор используют в течение 4 ч после приготовления.

Испытуемый раствор Б. В коническую колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 2,0 г испытуемого образца, прибавляют 80 мл толуола и кипятят с обратным холодильником при постоянном перемешивании в течение 90 мин. Охлаждают до 60 °С и прибавляют при постоянном перемешивании 120 мл метанола. Полученный раствор фильтруют через стеклянный фильтр ПОР 16 (ОФС «Пористость стеклянных фильтров») в мерную колбу объёмом 250 мл. Промывают колбу для экстрагирования и фильтр 25 мл смеси толуол-метанол в соотношении 40:60, полученную промывную жидкость прибавляют к фильтрату в мерную колбу и доводят объём раствора той же смесью растворителей до метки.

Параллельно готовят контрольный раствор.

Испытуемый раствор В. В коническую колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 100 г испытуемого образца, прибавляют 250 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты и кипятят с обратным холодильником при постоянном перемешивании в течение 1 ч. Охлаждают и декантируют раствор.

Прозрачность раствора. Опалесценция испытуемого раствора А не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Испытуемый раствор А должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Светопоглощающие примеси. Оптическая плотность испытуемого раствора А в области длин волн от 220 до 340 нм в кварцевой кювете с толщиной слоя 1 см (по сравнению с водой для инъекций), не должна превышать 0,2 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Кислотность или щёлочность

К 100 мл испытуемого раствора А прибавляют 0,15 мл БКФ (BRP) индикатора раствора. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 1,5 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида.

К 100 мл испытуемого раствора А прибавляют 0,2 мл раствора метилового оранжевого. Окраска раствора должна изменяться с жёлтой на оранжевую при прибавлении не более 1,0 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты.

Восстанавливающие вещества

В колбу с притёртой пробкой вместимостью 100 мл помещают 20,0 мл испытуемого раствора А, прибавляют 1 мл раствора серной кислоты 16 % и 20 мл 0,002 М раствора калия перманганата и кипятят с обратным холодильником в течение 3 мин, сразу охлаждают. Прибавляют 1 г калия йодида и немедленно титруют 0,01 М раствором натрия тиосульфата до обесцвечивания (индикатор – 0,25 мл 1 % раствора крахмала).

Параллельно проводят контрольный опыт, используя 20 мл воды вместо 20,0 мл испытуемого раствора А.

Разность между израсходованным объёмом 0,01 М раствора натрия тиосульфата при титровании контрольного и испытуемого растворов не должна превышать 0,5 мл.

Алюминий

Не более 0,0001%. Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой»).

Испытуемый раствор. Испытуемый раствор В.

Калибровочные растворы. Разводят алюминия стандартный раствор 200 мкг/мл хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М.

Измеряют величину эмиссии алюминия при длине волны 396,15 нм, регулируя спектральный фон на уровне 396,25 нм.

Проверяют отсутствие алюминия в используемой хлористоводородной кислоте.

Хром

Не более 0,000005 %. Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой»).

Испытуемый раствор. Испытуемый раствор В.

Калибровочные растворы. Разводят стандартный раствор 100 мкг/мл хром-иона смесью хлористоводородной кислоты и воды (2:8, об/об).

Измеряют величину эмиссии хрома при длине волны 205,55 нм, регулируя спектральный фон на уровне 205,50 нм.

Проверяют отсутствие хрома в используемой хлористоводородной кислоте.

Титан

Не более 0,0001 %. Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой»)

Испытуемый раствор. Испытуемый раствор В.

Калибровочные растворы. Разводят титана стандартный раствор 100 мкг/мл хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М.

Измеряют величину эмиссии титана при длине волны 336,12 нм, регулируя спектральный фон на уровне 336,16 нм.

Проверяют отсутствие титана в используемой хлористоводородной кислоте.

Ванадий

Не более 0,00001%. Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой»)

Испытуемый раствор. Испытуемый раствор В.

Калибровочные растворы. Разводят ванадия стандартный раствор 1 мг/мл смесью хлористоводородная кислота концентрированная—вода в соотношении 2:8 (о/о).

Измеряют величину эмиссии ванадия при длине волны 292,40 нм, регулируя спектральный фон на уровне 292,35 нм.

Проверяют отсутствие ванадия в используемой хлористоводородной кислоте.

Цинк

Не более 0,0001 %. Определение проводят методом ААС (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 1).

Испытуемый раствор. Испытуемый раствор В.

Калибровочные растворы. Разводят цинка стандартный раствор 10 мкг/мл хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М.

Условия испытания

Источник излучения | лампа с полым цинковым катодом;
Длина волны | 213,9 нм;
Атомизация | воздушно-ацетиленовое пламя

Проверяют отсутствие цинка в используемой хлористоводородной кислоте.

Тяжёлые металлы

Не более 0,00025 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3 Б).

Испытуемый раствор. Упаривают 50 мл испытуемого раствора В на водяной бане до объёма 5 мл, доводят объём раствора водой до 20 мл. Для определения используют 12 мл полученного раствора.

Раствор сравнения. Стандартный раствор свинца 10 мкг/мл 2,5 мл доводят водой до 10 мл.

Сульфатная зола. Не более 1,0 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 5 г (точная навеска) испытуемого образца. Испытание не распространяется на полипропилен, который содержит добавку титана диоксида.

В зависимости от состава упаковочных материалов на основе полипропилена, проводят полностью или частично дополнительные испытания.

Фенольные антиоксиданты

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Вода—ацетонитрил 300:700.

Растворитель. Ацетонитрил—тетрагидрофуран 50:50.

Испытуемый раствор. Выпаривают 50 мл испытуемого раствора Б досуха под вакуумом при температуре 45 °С. Остаток растворяют в 5,0 мл растворителя.

Контрольный раствор. Готовят из контрольного раствора, соответствующего испытуемому раствору Б.

Готовят только те стандартные растворы, которые необходимы для определения фенольных антиоксидантов, входящих в состав испытуемого образца – полипропилена.

Стандартный раствор А. Растворяют 25,0 мг фармакопейного стандартного образца бутилгидрокситолуола и 60,0 мг фармакопейного стандартного образца этилен-бис[3,3-бис[3- (1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]бутаноат] в растворителе. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор Б. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца пентаэритритилтетракис [3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионат] и 60,0 мг фармакопейного стандартного образца 2,2',2'',6,6',6''-гекса-трет-бутил-4,4',4''-[(2,4,6-триметил- 1,3,5-бензолтриил) трисметилен)] трифенол в растворителе. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор В. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца октадецил (3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионат и 60,0 мг фармакопейного стандартного образца трис (2,4-ди-трет-бутилфенил)фосфит в 10 мл метиленхлорида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метиленхлоридом до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Стандартный раствор Г. Растворяют 25,0 мг фармакопейного стандартного образца бутилгидрокситолуола в 10 мл растворителя. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор Д. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца этилен-бис[3,3-бис[3-(1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]бутаноат] в 10 мл растворителя. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор Е. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца 1,3,5-трис(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксибензил)- S-триазин-2,4,6 (1Н,3Н,5Н)-трион в 10 мл растворителя. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор Ж. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца пентаэритритилтетракис [3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионат] в 10 мл растворителя. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор И. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца 2,2',2'',6,6',6''-гекса-трет-бутил-4,4',4''-[(2,4,6-триметил- 1,3,5-бензолтриил) трисметилен)] трифенол в 10 мл растворителя. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор К. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца октадецил (3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионат в 10 мл метиленхлорида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метиленхлоридом до метки.

Стандартный раствор Л. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца трис (2,4-ди-трет-бутилфенил) фосфит в 10 мл метиленхлорида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метиленхлоридом до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Метод 1. Испытание проводят, если в испытуемом образце содержатся добавки бутилгидрокситолуола и/или этилен-бис[3,3-бис[3-(1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]бутаноат].

Хроматографические условия

Колонка | 250×4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Скорость потока | 2,0 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм;
Объём пробы | 20 мкл;
Время хроматографирования | 30 мин.

Хроматографируют по 20 мкл стандартного раствора А и либо стандартного раствора Г или Д, или стандартных растворов Г и Д, контрольного раствора и испытуемого раствора.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора А разрешение (Rs) между пиками добавок бутилгидрокситолуола и этилен-бис[3,3-бис[3-(1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]бутаноат] должно быть не менее 5,0.

На хроматограмме испытуемого раствора имеются только пики, соответствующие антиоксидантам, указанным в составе исследуемого образца, и незначительные пики, соответствующие пикам на хроматограмме контрольного раствора.

Расчёт содержания добавок. Для добавок бутилгидрокситолуола и/или этилен-бис[3,3-бис[3-(1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]бутаноат] используют концентрацию соответствующих веществ в стандартных растворах Г или Д.

- бутилгидрокситолуола – не более 0,125%;

- этилен-бис[3,3-бис[3-(1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]бутаноат] – не более 0,3 %.

Метод 2. Испытание проводят, если испытуемый образец содержит одну или несколько следующих добавок-антиоксидантов:

- пентаэритритилтетракис[3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидрокси-фенил)пропионат];

- 2,2',2'',6,6',6''-гекса-трет-бутил-4,4',4''-[(2,4,6-триметил-1,3,5-бензолтриил) трисметилен)] трифенол;

- октадецил (3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионат;

- трис(2,4-ди-трет-бутилфенил)фосфит;

- 1,3,5-трис(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксибензил)- S-триазин-2,4,6 (1Н,3Н,5Н)-трион.

Испытание проводят по методу 1 со следующими изменениями.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—тетрагидрофуран—ацетонитрил 100:300:600

Хроматографические условия

- Скорость потока: 1,5 мл/мин;

Хроматографируют по 20 мкл стандартного раствора Б и стандартных растворов антиоксидантов из вышеперечисленного перечня, которые входят в состав испытуемого образца, контрольного раствора и испытуемого раствора.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме стандартного раствора Б разрешение (Rs) между пиками добавок пентаэритритилтетракис [3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидрокси-фенил)пропионат] и 2,2',2'',6,6',6'' -гекса-трет-бутил-4,4',4''-[(2,4,6-триметил-1,3,5-бензолтриил) трисметилен)]трифенол должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме стандартного образца В разрешение (Rs) между пиками добавок октадецил-3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионат и трис (2,4-ди-трет-бутилфенил)фосфит должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме испытуемого раствора имеются только пики, соответствующие антиоксидантам, указанным в составе исследуемого образца, и незначительные пики, соответствующие пикам на хроматограмме контрольного раствора.

Расчёт содержания добавок. Для исследуемых добавок используют концентрацию соответствующих веществ в стандартных растворах Ж, И, К, Л и/или Е. Содержание каждой из добавок пентаэритритил тетракис [3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидрокси-фенил)пропионат]; 2,2',2'',6,6',6''-гекса-трет-бутил-4,4',4''-[(2,4,6-триметил-1,3,5-бензолтриил) трисметилен)] трифенол; октадецил (3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионат; трис (2,4-ди-трет-бутилфенил)фосфит;1,3,5-трис (3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксибензил)- S-триазин-2,4,6 (1Н,3Н,5Н)- трион должно быть не более 0,3 %.

Нефенольные антиоксиданты

Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинки со слоем силикагеля GF254.

Испытуемый раствор. Выпаривают 100 мл испытуемого раствора Б досуха под вакуумом при температуре 45°С. Остаток растворяют в 2 мл метиленхлорида подкисленного.

Стандартный раствор М. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 60,0 мг фармакопейного стандартного образца 2,2'-бис (октадецилокси)-5, 5'-спироби [1,3,2-диоксафосфинан], растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мл полученного раствора и доводят объём раствора метиленхлоридом подкисленным до метки.

Стандартный раствор Н. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 60,0 мг фармакопейного стандартного образца диоктадецил дисульфида, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мл полученного раствора и доводят объём раствора метиленхлоридом подкисленным до метки.

Стандартный раствор П. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 60,0 мг фармакопейного стандартного образца дидодецил 3,3' –тиодипропионат, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мл полученного раствора и доводят объём раствора метиленхлоридом подкисленным до метки.

Стандартный раствор Р. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 60,0 мг фармакопейного стандартного образца диоктадецил 3,3' –тиодипропионат, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мл полученного раствора и доводят объём раствора метиленхлоридом подкисленным до метки.

Стандартный раствор С. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 60,0 мг фармакопейного стандартного образца дидодецил 3,3' -тиодипропионат и 60 мг стандартного образца диоктадецил 3,3' –тиодипропионат, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мл полученного раствора и доводят объём раствора метиленхлоридом подкисленным до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Гексан.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метиленхлорид.

На линию старта хроматографической пластинки наносят по 20 мкл испытуемого раствора, стандартного раствора С и стандартных растворов, которые соответствуют всем фенольным и нефенольным антиоксидантам, входящим в состав испытуемого материала.

Хроматографирование А: расстояние, пройденное ПФА от линии старта должно быть не менее 18 см; высушивание – на воздухе.

Хроматографирование Б: расстояние, пройденное ПФБ от линии старта должно быть не менее 17 см; высушивание – на воздухе.

Детектирование. Пластинку опрыскивают йода раствором спиртовым и через 10–15 мин исследуют в ультрафиолетовом свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора С в основной зоне адсорбции должны проявляться два чётких пятна.

На хроматограмме испытуемого раствора в основной зоне адсорбции интенсивность любых пятен не должна превышать интенсивность соответствующих пятен на хроматограммах стандартных образцов.

Амиды и стеараты. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинки со слоем силикагеля GF254.

Испытуемый раствор. Готовят так же, как описано в разделе нефенольные антиоксиданты.

Стандартный раствор Т. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20,0 мг фармакопейного стандартного образца стеариновой кислоты, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор У. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 40,0 мг фармакопейного стандартного образца олеамида, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор Ф. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 40,0 мг фармакопейного стандартного образца эрукамида, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

###### Метод 1

Подвижная фаза (ПФ). Этанол безводный— триметилпентан 25:75

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора и стандартного раствора Т.

Хроматографирование: расстояние, пройденное ПФ от линии старта должно быть не менее 10 см; высушивание – на воздухе.

Детектирование. Пластинку опрыскивают раствором 2 г/л дихлорфенолиндофенола натриевой соли в этаноле и нагревают в сушильном шкафу при температуре 120 С в течение нескольких минут для усиления интенсивности.

На хроматограмме испытуемого раствора зоны адсорбции, соответствующие добавке «стеариновая кислота», должны быть идентичны по расположению (Rf около 0,5) и не более интенсивны, чем зона адсорбции на хроматограмме стандартного раствора Т.

###### Метод 2

Подвижная фаза А (ПФА). Гексан.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол— метиленхлорид 5:95.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора и стандартных растворов У и Ф.

Хроматографирование А: расстояние, пройденное ПФА от линии старта должно быть не менее 13 см; высушивание – на воздухе.

Хроматографирование Б: расстояние, пройденное ПФБ от линии старта должно быть не менее 10 см; высушивание – на воздухе.

Детектирование. Пластинку опрыскивают раствором 40 г/л фосфорномолибденовой кислоты в этаноле и нагревают в сушильном шкафу при температуре 120 ºС до появления зон адсорбции.

На хроматограмме испытуемого раствора зоны адсорбции, соответствующие добавкам олеамида или эрукамида, должны быть идентичны по расположению (Rf около 0,2) и не более интенсивны, чем соответствующие зоны адсорбции на хроматограммах стандартных растворов У и Ф.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0023 Упаковочные материалы на основе полиэтилена без добавок для лекарственных препаратов парентерального и офтальмологического применения

Вводится впервые

Полиэтилен низкой плотности без добавок получают полимеризацией этилена при высоком давлении в присутствии кислорода или инициаторов образования свободных радикалов как катализаторов.

Для производства упаковки, предназначенной для лекарственных препаратов для парентерального и офтальмологического применения, используют базовые марки полиэтилена низкой плотности.

Общие требования к упаковочным материалам и упаковке из полимерных материалов для лекарственных препаратов установлены
ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов» и ОФС «Упаковка и укупорочные средства из полимерных материалов для фармацевтического применения».

Упаковка, полученная на основе полиэтилена низкой плотности без добавок, должна обеспечивать возможность стерилизации лекарственных препаратов для парентерального и офтальмологического применения в соответствии с требованиями и методами, указанными в ОФС «Стерилизация».

###### Свойства

Описание. Полиэтилен низкой плотности без добавок (базовые марки) выпускают в виде гранул одинаковой геометрической формы размером 2-5 мм или в виде шариков, порошка. После трансформации полиэтилен низкой плотности без добавок может представлять собой прозрачную плёнку, пластинки различной толщины или изготовленную упаковку.

Размягчается при температуре выше 65 °C.

Растворимость. Растворим в горячих ароматических углеводородах, практически нерастворим в воде, безводном спирте, гексане, метаноле.

###### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр испытуемого образца в области от 3800 до 650 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца полиэтилена низкой плотности без добавок, выбранного для производства упаковочного материала для лекарственных форм, и иметь максимумы при следующих волновых числах (допустимое отклонение ±5 см-1): 2915 см-1 , 2848 см-1, 1471 см-1, 1465 см-1, 729 см-1 и 719 см-1 .

- Испытуемый образец. К 0,25 г испытуемого образца прибавляют 10 мл толуола и нагревают в колбе с обратным холодильником в течение 15 мин. Несколько капель раствора помещают на плёнку натрия хлорида или на диск калия бромида и выпаривают растворитель в сушильном шкафу при температуре 80°С.

- Если испытуемый образец представляет собой пластинку, то идентификация может быть выполнена непосредственно на отрезанном кусочке подходящего размера по методу нарушенного полного внутреннего отражения.

2. Дифференциальная сканирующая калориметрия (ОФС «Термический анализ», метод 2). Термограмма испытуемого образца должна соответствовать термограмме стандартного образца полиэтилена низкой плотности без добавок, выбранного для производства упаковочного материала для лекарственных препаратов. Максимальная температура плавления, полученная на кривых стандартного и испытуемого образцов не должна различаться более чем на 8,0 °

Примечание: для получения воспроизводимого результата необходим близкий контакт между тиглем и термопарой.

В тигель помещают 12 мг испытуемого образца и проводят испытание в соответствии с ОФС «Термический анализ» в атмосфере азота при температуре в диапазоне от 40 до 200 °С со скоростью нагревания от 2 до 10 °С в мин, после чего охлаждая до 40 °С со скоростью от 2 до 10 °С в мин., и получая при этом результаты испытаний в виде термограммы испытуемого и стандартного образцов.

###### Испытания

Относительная плотность. От 0,910 до 0,937 (ОФС «Определение плотности полимерных материалов»).

Пробоподготовка. Испытуемые образцы полиэтилена низкой плотности без добавок для проведения испытания могут представлять собой вырезанные из полимерного материала (из плёнки, пластин, листов, готовой упаковки и т.п.) кусочки необходимых размеров, или растворы, полученные экстрагированием полимера различными растворителями. Испытуемый образец, предназначенный для экстрагирования, разрезают на части с максимальной длиной стороны не более 1 см и подготавливают несколько образцов, проводя экстрагирование полиэтилена низкой плотности без добавок различными растворителями: водой, толуолом, кислотой.

Испытуемый раствор А. В колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 25 г испытуемого образца, прибавляют 500 мл воды и кипятят с обратным холодильником в течение 5 ч. Остужают до комнатной температуры и декантируют. Срок годности раствора 4 часа.

Испытуемый раствор Б. Часть испытуемого раствора А фильтруют через стеклянный фильтр ПОР 16 (ОФС «Пористость стеклянных фильтров»).

Испытуемый раствор В. В коническую колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 2,0 г испытуемого образца, прибавляют 80 мл толуола и кипятят с обратным холодильником при постоянном перемешивании в течение 90 мин. Охлаждают до 60 °С и прибавляют, при постоянном перемешивании, 120 мл метанола. Полученный раствор фильтруют через стеклянный фильтр ПОР 16 (ОФС «Пористость стеклянных фильтров») в мерную колбу вместимостью 250 мл. Промывают колбу для экстрагирования и фильтр 25 мл смесью толуол—метанол 40:60, прибавляют промывную жидкость и доводят объём раствора той же смесью до метки.

Параллельно готовят контрольный раствор без использования испытуемого образца.

Испытуемый раствор Г. В коническую колбу из боросиликатного стекла с притертой пробкой помещают 100 г испытуемого образца, прибавляют 250 мл 0,1 М раствора кислоты хлористоводородной и кипятят с обратным холодильником при постоянном перемешивании в течение 1 ч. Охлаждают до комнатной температуры и декантируют.

Прозрачность раствора. Испытуемый раствор А должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Испытуемый раствор А должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Оптическая плотность. Оптическая плотность испытуемого раствора Б в области длин волн от 220 до 340 нм в кварцевой кювете с толщиной слоя 1 см (по сравнению с водой) не должна превышать 0,2. (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Кислотность или щёлочность

К 100 мл испытуемого раствора Б прибавляют 0,15 мл БКФ (BRP) индикатора раствора. Для изменения окраски раствора на голубую должно потребоваться не более 1,5 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида.

К 100 мл испытуемого раствора Б прибавляют 0,2 мл раствора метилового оранжевого. Для изменения окраски раствора на оранжевую не более 1,0 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты.

Окисляющие вещества

В колбу с притёртой пробкой вместимостью 100 мл помещают 20,0 мл испытуемого раствора Б, прибавляют 1 мл серной кислоты разведённой 16 % и 20 мл 0,002 М раствора калия перманганата и кипятят с обратным холодильником в течение 3 мин. Немедленно охлаждают и прибавляют 1 г калия йодида. Полученный раствор немедленно титруют 0,01 М раствором натрия тиосульфата до обесцвечивания, используя в качестве индикатора 0,25 мл крахмала раствор 1 %.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Разность между израсходованным объёмом 0,01 М раствора натрия тиосульфата при титровании контрольного и испытуемого раствора не должна превышать 0,5 мл.

Сульфатная зола. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 5 г (точная навеска) испытуемого образца.

Тяжёлые металлы. Не более 0,00025 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2).

Испытуемый раствор. Упаривают на водяной бане 50 мл испытуемого раствора Г до 5 мл, доводят объём раствора водой до 20 мл. Для определения используют 12 мл полученного раствора.

Эталонный раствор. В колбу помещают 2,5 мл свинца стандартного раствора 10 мкг/мл и доводят водой до 10 мл.

Наличие добавок. Добавки должны отсутствовать.

Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля G.

Подвижная фаза А (ПФА). Гексан.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол—метиленхлорид 5:95.

Испытуемый раствор. Выпаривают досуха под вакуумом 50 мл испытуемого раствора В при температуре 45°С. Полученный остаток растворяют в 5 мл метиленхлорида.

Контрольный раствор. Раствор, полученный в испытании «Пробоподготовка», испытуемый раствор В.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг (точная навеска) стандартного образца
1,1'-дисульфандиилдиоктадекан и 20 мг (точная навеска) стандартного образца добавки к пластмассе этилен-бис [3,3-бис[3-(1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил] бутаноат], растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора этим растворителем до метки.

Реактив для детектирования. Фосфорномолибденовой кислоты спиртовой раствор 4 %.

Хроматографирование А. На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора, контрольного раствора и стандартного раствора. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФА и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФА пройдет около 80—90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры и сушат до удаления следов растворителей.

Хроматографирование В. На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора, контрольного раствора и стандартного раствора. Пластинку с нанесёнными пробами помещают в камеру с ПФБ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80—90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей.

Пластины опрыскивают реактивом для детектирования, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 120°С, до появления зон адсорбции на хроматограмме стандартного раствора.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора должны обнаруживаться две чётко разделённые зоны адсорбции.

Результат. На хроматограмме испытуемого раствора не должно быть зон адсорбции, за исключением пятна, которое может находиться на фронте растворителя с первого проявления и соответствует олигомерам. Любыми зонами адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора, которые соответствуют аналогичным зонам адсорбции на хроматограмме контрольного раствора, пренебрегают.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0024 Упаковочные материалы на основе полиэтилена с добавками для лекарственных препаратов парентерального и офтальмологического применения

Вводится впервые

Полиэтилен низкой плотности с добавками – это полимеризованный при высоком давлении в присутствии катализатора этилен или сополимеризованный этилен с содержанием не более 25 % гомологов высших алкенов (от С3 до С10).

###### Особенности технологии

В зависимости от предполагаемого использования полимеров они могут содержать добавки для оптимизации их обработки или их химических, физических и механических свойств.

Полиэтилен низкой плотности может содержать не более трех добавок-антиоксидантов, одну или несколько добавок, обладающих смазывающими или антиадгезивными свойствами, а также титана диоксид, который придает полимеру свойство непрозрачности.

Если иное не обосновано и не разрешено, эти добавки выбираются из нижеперечисленого перечня, в котором для каждой добавки указано максимально допустимое содержание.

Полиэтилен низкой плотности должен содержать не более 0,125 % бутилгидрокситолуола.

Максимальное содержание нижеперечисленных добавок должно быть не более 0,3 %:

- пентаэритритил тетракис [3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидрокси-фенил) пропионат];

- 1,3,5-трис (3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксибензил)- S-триазин-2,4,6 (1Н,3Н,5Н)- трион;

- октадецил (3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионат;

- этилен бис [3,3-бис[3- (1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]бутаноат];

- диоктадецил дисульфид;

- 2,2',2'',6,6',6''-гекса-трет-бутил-4,4',4''-[(2,4,6-триметил-1,3,5-бензен-триил) трисметилен]трифенол;

- 2,2'-бис (октадецилокси)-5, 5'-спироби [1,3,2-диоксафосфинан];

- дидодецил 3,3' -тиодипропионат;

- диоктадецил 3,3' -тиодипропионат;

- трис[2,4-бис(1,1-диметилэтил)фенил]фосфит.

При совместном присутствии в составе полимера двух и более перечисленных выше добавок-антиоксидантов, общее их количество должно быть не более 0,3 %.

Количество следующих добавок должно быть не более 0,5%: гидротальцит, алканамиды, алкенамиды, натрия алюмосиликат, кремния диоксид (натуральный или синтетический, с покрытием или без покрытия), натрия бензоат, эфиры и соли жирных кислот, натрия фосфат, вазелиновое масло, цинка оксид, кальция стеарат или цинка стеарат или их смесь. Добавки магния оксида должно быть не более 0,2 %. Для полиэтилена, используемого для производства упаковки для офтальмологических лекарственных препаратов, содержание титана диоксида должно быть не более 4 %.

Испытуемый материал должен выдерживать дополнительные испытания на соответствующие добавки (при их наличии), указанные в разделах «Испытания» и «Дополнительные испытания» настоящей общей фармакопейной статьи.

Упаковочные материалы на основе полиэтилена низкой плотности с добавками, предназначенные для производства упаковки для лекарственных препаратов для парентерального и офтальмологического применения, должны обеспечивать возможность стерилизации полученной из них упаковки в соответствии с требованиями и методами, указанными в ОФС «Стерилизация».

Общие требования к упаковочным материалам на основе полиэтилена низкой плотности с добавками для фармацевтического применения представлены в ОФС «Упаковка лекарственных средств», ОФС «Упаковка и укупорочные средства из полимерных материалов для фармацевтического применения», ОФС «Добавки к полимерным материалам для фармацевтического применения».

###### Описание

Полиэтилен низкой плотности с добавками выпускают в виде порошка, гранул. После трансформации полиэтилен низкой плотности с добавками может представлять собой прозрачную плёнку, пластинки или листы различной толщины, готовую упаковку или комплектующие элементы упаковки.

Размягчается при температуре от 70 до 140 °С.

###### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр испытуемого образца полиэтилена низкой плотности с добавками, в области от 3800 до 650 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца полиэтилена с добавками, и иметь максимумы при следующих волновых числах (допустимое отклонение ±5 см-1): 2915 см-1, 2848 см-1, 1471 см-1, 1465 см-1, 729 см-1, 719 см-1.

- Подготовка образца для ИК-спектрометрии. К 0,25 г испытуемого образца полиэтилена низкой плотности с добавками прибавляют 10 мл толуола и кипятят с обратным холодильником в течение 15 мин. Несколько капель раствора помещают на плёнку натрия хлорида или на диск калия бромида и выпаривают растворитель в сушильном шкафу при температуре 80 °С.

- Если испытуемый материал представляет собой пластинку или плёнку, то идентификация может быть выполнена непосредственно на отрезанном кусочке подходящего размера по методу нарушенного полного внутреннего отражения.

2. Дифференциальная сканирующая калориметрия (ОФС «Термический анализ», метод 2). Термограмма испытуемого образца полиэтилена низкой плотности с добавками должна соответствовать термограмме стандартного образца полиэтилена низкой плотности с добавками, выбранного для производства упаковочного материала для лекарственных препаратов парентерального и офтальмологического применения. Максимальная температура плавления, полученная на кривых стандартного и анализируемого образцов не должна различаться более чем на 8,0 °.

- Примечание – для получения воспроизводимого результата необходим близкий контакт между тиглем и термопарой.

- Около 12 мг исследуемого образца помещают в тигель и проводят испытание в соответствии с ОФС «Термический анализ». Термограммы испытуемого и стандартного образцов регистрируют в атмосфере азота при температуре в диапазоне от 40 до 200 °С со скоростью нагревания, варьирующей от 2 до 10 °С в мин, после чего охлаждают до 40 °С со скоростью от 2 до 10 °С в мин.

3. Качественная реакция (для непрозрачного материала). В платиновом тигле смешивают около 20 мг испытуемого материала с 1 г калия гидросульфата и нагревают до полного расплавления. После охлаждения прибавляют 20 мл серной кислоты разведённой, слегка нагревают и фильтруют полученный раствор. К фильтрату прибавляют 1 мл фосфорной кислоты и 1 мл водорода пероксида раствора концентрированного. Должно появиться оранжево-жёлтое окрашивание, если материал содержит добавку титана диоксида.

###### Испытания

Пробоподготовка. Испытуемый образец, предназначенный для экстрагирования, как правило, разрезают на части с максимальными размерами не более 1 см и готовят несколько растворов, проводя экстрагирование полиэтилена низкой плотности с добавками различными растворителями: водой (Испытуемый раствор А), толуолом (Испытуемый раствор Б), кислотой (Испытуемый раствор В).

Испытуемый раствор А. В колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 25 г испытуемого образца, прибавляют 500 мл воды и кипятят с обратным холодильником в течение 5 ч. Полученному извлечению дают остыть до комнатной температуры, затем декантируют и одну часть раствора после декантирования оставляют для испытания по показателям «Прозрачность раствора» и «Цветность раствора», а оставшуюся часть раствора фильтруют через стеклянный фильтр ПОР 16 (ОФС «Пористость стеклянных фильтров»).

Испытуемый раствор А используют в течение 4 ч после приготовления.

Испытуемый раствор Б. В коническую колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 2,0 г испытуемого образца, прибавляют 80 мл толуола и кипятят с обратным холодильником при постоянном перемешивании в течение 90 мин. Охлаждают до 60 °С, прибавляют 120 мл метанола при постоянном перемешивании. Полученный раствор фильтруют через стеклянный фильтр ПОР 16 (ОФС «Пористость стеклянных фильтров») в мерную колбу вместимостью 250 мл. Колбу для экстрагирования и фильтр промывают 25 мл смеси толуол—метанол 40:60 (о/о), промывную жидкость прибавляют к фильтрату и доводят объём раствора той же смесью растворителей до метки.

Параллельно готовят контрольный раствор.

Испытуемый раствор В. В коническую колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 100 г испытуемого образца, прибавляют 250 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и кипятят с обратным холодильником при постоянном перемешивании в течение 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры полученный раствор декантируют.

Растворимость. Практически нерастворим в воде, безводном спирте, гексане, метаноле, растворим в горячих ароматических углеводородах.

Относительная плотность. От 0,890 до 0,965 (ОФС «Определение плотности полимерных материалов»).

Прозрачность раствора. Испытуемый раствор А должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Испытуемый раствор А должен быть бесцветным. (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Светопоглощающие примеси. Оптическая плотность испытуемого раствора А в области длин волн от 220 до 340 нм в кварцевой кювете с толщиной слоя 10 мм, измеренная по сравнению с водой, не должна превышать 0,2. (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Кислотность или щёлочность

К 100 мл испытуемого раствора А прибавляют 0,15 мл БКФ (BRP) индикатора раствора. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 1,5 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида

К 100 мл испытуемого раствора А прибавляют 0,2 мл раствора метилового оранжевого. Окраска раствора должна изменяться от жёлтой до оранжевой при прибавлении не более 1,0 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты.

Восстанавливающие вещества

В колбу с притёртой пробкой вместимостью 100 мл помещают 20,0 мл испытуемого раствора А, прибавляют 1 мл серной кислоты раствора 16 % и 20 мл калия перманганата раствора 0,002 М, кипятят с обратным холодильником в течение 3 мин и сразу охлаждают. В колбу прибавляют 1 г калия йодида и полученный раствор немедленно титруют натрия тиосульфата раствором 0,01 М до обесцвечивания, используя в качестве индикатора 0,25 мл крахмала раствор 1 %.

Параллельно проводят контрольный опыт, используя 20 мл воды вместо 20,0 мл испытуемого раствора А.

Разность между израсходованным объёмом 0,01 М раствора натрия тиосульфата при титровании контрольного и испытуемого раствора не должна превышать 0,5 мл.

Алюминий

Не более 0,0001 %. Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой»).

Используют испытуемый раствор В.

Раствор сравнения. Готовят разбавлением алюминия стандартного раствора 200 мкг/мл хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М.

Измеряют величину эмиссии алюминия при длине волны 396,15 нм, регулируя спектральный фон на уровне 396,25 нм.

Проверяют отсутствие алюминия в используемой хлористоводородной кислоте.

Хром

Не более 0,000005 %. Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой»).

Используют испытуемый раствор В.

Раствор сравнения. Готовят разбавлением хрома стандартного раствора 100 мкг/мл смесью хлористоводородная кислота—вода 2:8 о/о.

Измеряют величину эмиссии хрома при длине волны 205,55 нм, регулируя спектральный фон на уровне 205,50 нм.

Проверяют отсутствие хрома в используемой хлористоводородной кислоте.

Титан (для полиэтилена низкой плотности, не содержащего добавку титана диоксида)

Не более 0,0001%. Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой»).

Используют испытуемый раствор В.

Раствор сравнения. Готовят разбавлением титана стандартного раствора 100 мкг/мл хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М.

Измеряют величину эмиссии титана при длине волны 336,12 нм, регулируя спектральный фон на уровне 336,16 нм.

Проверяют отсутствие титана в используемой хлористоводородной кислоте.

Ванадий

Не более 0,00001 %. Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (ОФС«Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой»).

Используют испытуемый раствор В

Раствор сравнения. Готовят разбавлением ванадия стандартного раствора 1 мг/мл смесью хлористоводородная кислота концентрированная—вода 2:8 (о/о).

Измеряют величину эмиссии ванадия при длине волны 292,40 нм, регулируя спектральный фон на уровне 292,35 нм.

Проверяют отсутствие ванадия в используемой хлористоводородной кислоте.

Цинк

Не более 0,0001%. Определение проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 1).

Используют испытуемый раствор В.

Раствор сравнения. Готовят разбавлением цинка стандартного раствора 10 мкг/мл хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М.

Источник излучения: лампа с полым цинковым катодом.

Длина волны: 213,9 нм.

Атомизация: воздушно-ацетиленовое пламя.

Проверяют отсутствие цинка в используемой хлористоводородной кислоте.

Цирконий

Не более 0,00001 %. Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой»).

Используют испытуемый раствор В.

Раствор сравнения. Готовят разбавлением циркония стандартного раствора 1 мг/мл раствором, состоящим из 2 частей хлористоводородной кислоты концентрированной и 8 частей воды.

Измеряют величину эмиссии циркония при длине волны 343,82 нм, регулируя спектральный фон на уровне 343,92 нм.

Проверяют отсутствие циркония в используемой хлористоводородной кислоте.

Тяжёлые металлы. Не более 0,00025 %. (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3Б).

Испытуемый раствор. На водяной бане упаривают 50 мл испытуемого раствора В до объёма около 5 мл, доводят объём раствора водой до 20 мл. Для определения используют 12 мл полученного раствора.

Для приготовления эталонного раствора к 2,5 мл свинца стандартного раствора 10 мкг/мл прибавляют 10 мл воды.

Сульфатная зола. Не более 1,0 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют около 5,0 г (точная навеска) испытуемого образца.

Эта норма не распространяется на полиэтилен, содержащий добавку титана диоксида, добавляемую для придания непрозрачности материалу.

###### Дополнительные испытания

Испытания проводят полностью или частично, если применимо к составу испытуемого упаковочного материала на основе полиэтилена низкой плотности с добавками, предназначенного для производства упаковки для лекарственных препаратов парентерального и офтальмологического применения.

Фенольные антиоксиданты. Определение проводят методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Смесь растворителей: ацетонитрил—тетрагидрофуран 50:50 (о/о).

Испытуемый раствор. Выпаривают досуха 50 мл испытуемого раствора Б под вакуумом при температуре 45oС. Сухой остаток растворяют в 5,0 мл смеси растворителей.

Контрольный раствор. Контрольный раствор готовят аналогичным образом испытуемому раствору Б.

Стандартные растворы. Готовят только те стандартные растворы, которые необходимы для определения фенольных антиоксидантов, входящих в состав конкретного испытуемого материала – полиэтилена высокого давления с добавками.

Стандартный раствор А. Растворяют 25,0 мг фармакопейного стандартного образца бутилгидрокситолуола и 60,0 мг фармакопейного стандартного образца этилен бис [3,3-бис[3- (1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]бутаноат] в 10 мл смеси растворителей. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Стандартный раствор Б. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца пентаэритритил тетракис [3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионат] и 60,0 мг фармакопейного стандартного образца 2,2',2'',6,6',6''-гекса-трет-бутил-4,4',4''-[(2,4,6-триметил- 1,3,5-бензолтриил) трисметилен)] трифенол в 10 мл смеси растворителей. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Стандартный раствор В. Готовят непосредственно перед использованием. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца октадецил (3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионат и 60,0 мг фармакопейного стандартного образца трис (2,4-ди-трет-бутилфенил)фосфит в 10 мл метиленхлорида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Стандартный раствор Г. Растворяют 25,0 мг фармакопейного стандартного образца бутилгидрокситолуола в 10 мл смеси растворителей. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Стандартный раствор Д. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца этилен бис [3,3-бис[3- (1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]бутаноат] в 10 мл смеси растворителей. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Стандартный раствор Е. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца 1,3,5-трис (3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксибензил)- S-триазин-2,4,6(1Н,3Н,5Н)-трион в 10 мл смеси растворителей. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Стандартный раствор Ж. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца пентаэритритил тетракис [3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионат] в 10 мл смеси растворителей. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Стандартный раствор И. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца 2,2',2'',6,6',6''-гекса-трет-бутил-4,4',4''-[(2,4,6-триметил- 1,3,5-бензолтриил) трисметилен)] трифенол в 10 мл смеси растворителей. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Стандартный раствор К. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца октадецил (3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионат в 10 мл метиленхлорида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Стандартный раствор Л. Готовят непосредственно перед использованием. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца трис (2,4-ди-трет-бутилфенил)фосфит в 10 мл метиленхлорида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Метод 1. Определение проводят, если испытуемый материал содержит добавки бутилгидрокситолуола и/или этиленбис [3,3-бис[3-(1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]бутаноат].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Подвижная фаза | вода для хроматографии—ацетонитрил 30:70;
Скорость потока | 2,0 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм;
Объём пробы | 20 мкл;
Время хроматографирования | 30 мин.

Хроматографируют по 20 мкл испытуемого раствора, контрольного раствора, стандартного раствора А и либо стандартного раствора Г или Д, либо стандартных растворов Г и Д, в зависимости от того, какая из добавок содержится в испытуемом материале.

Пригодность хроматографической системы:

- разрешение: не менее 8,0 между пиками бутилгидрокситолуола и этилен бис [3,3-бис[3-(1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]бутаноат] на хроматограмме стандартного раствора А.

На хроматограмме испытуемого раствора должны регистрироваться только основные пики, соответствующие пикам стандартных образцов антиоксидантов, указанных в составе испытуемого материала, и незначительные пики, соответствующие пикам на хроматограмме контрольного раствора.

Содержание добавок. Для расчёта содержания добавок бутилгидрокситолуола и/или этилен бис [3,3-бис[3- (1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]бутаноат] в испытуемом материале используют концентрацию соответствующих веществ в стандартных растворах Г или Д. Содержание бутилгидрокситолуола должно быть не более 0,125%; содержание этилен бис [3,3-бис[3- (1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил]бутаноат] – не более 0,3 %.

Метод 2. Определение проводят, если испытуемый материал содержит одну или несколько следующих добавок-антиоксидантов:

- пентаэритритил тетракис [3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидрокси-фенил) пропионат];

- 2,2',2'',6,6',6''-гекса-трет-бутил-4,4',4''-[(2,4,6-триметил-1,3,5-бензолтриил) трисметилен)] трифенол;

- октадецил (3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионат;

- трис (2,4-ди-трет-бутилфенил)фосфит;

- 1,3,5-трис (3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксибензил)- S-триазин-2,4,6 (1Н,3Н,5Н)- трион.

Определение выполняют по методу 1 со следующими изменениями.

Подвижная фаза: вода для хроматографии—тетрагидрофуран—ацетонитрил 10:30:60.

Скорость потока: 1,5 мл/мин.

Хроматографируют по 20 мкл испытуемого раствора, контрольного раствора, стандартного раствора Б, стандартного раствора В и стандартных растворов антиоксидантов из вышеперечисленного перечня, которые входят в состав испытуемого материала.

Пригодность хроматографической системы:

- разрешение: не менее 2,0 между пиками пентаэритритил тетракис
  [3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидрокси-фенил)пропионат] и 2,2',2'',6,6',6'' -гекса-трет-бутил-4,4',4''-[(2,4,6-триметил-1,3,5-бензолтриил) трисметилен)] трифенол на хроматограмме стандартного раствора Б;

- не менее 2,0 между пиками октадецил (3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионат и трис (2,4-ди-трет-бутилфенил)фосфит на хроматограмме стандартного раствора В.

На хроматограмме испытуемого раствора должны регистрироваться только основные пики, соответствующие пикам стандартных образцов антиоксидантов, указанных в составе испытуемого материала, и незначительные пики, соответствующие пикам на хроматограмме контрольного раствора.

Содержание добавок. Для расчёта содержания определяемых добавок в испытуемом материале используют концентрацию соответствующих веществ в стандартных растворах Ж, И, К, Л и/или Е. Содержание каждой из добавок, определяемых по методу 2, в упаковочном материале на основе полиэтилена высокого давления с добавками должно быть не более 0,3 %. При совместном присутствии в составе полимера двух и более добавок-антиоксидантов, общее их содержание должно быть не более 0,3%.

Нефенольные антиоксиданты. Определение проводят методом тонкослойной хроматографии (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Испытуемый раствор. Выпаривают досуха 100 мл испытуемого раствора Б под вакуумом при температуре 45oС. Сухой остаток растворяют в 2,0 мл смеси растворителей.

Стандартный раствор М. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца 2,2'-бис (октадецилокси)-5, 5'-спироби [1,3,2-диоксафосфинан] в метиленхлориде и доводят объём тем же растворителем до 10 мл. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мл полученного раствора и доводят метиленхлоридом подкисленным до метки.

Стандартный раствор Н. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца диоктадецил дисульфида в метиленхлориде и доводят объём тем же растворителем до 10 мл. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мл полученного раствора и доводят метиленхлоридом подкисленным до метки.

Стандартный раствор П. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца дидодецил 3,3' -тиодипропионат в метиленхлориде и доводят объём тем же растворителем до 10 мл. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мл полученного раствора и доводят метиленхлоридом подкисленным до метки.

Стандартный раствор Р. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца диоктадецил 3,3' -тиодипропионат в метиленхлориде и доводят объём тем же растворителем до 10 мл. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мл полученного раствора и доводят метиленхлоридом подкисленным до метки.

Стандартный раствор С. Растворяют 60,0 мг фармакопейного стандартного образца дидодецил 3,3' -тиодипропионат и 60 мг стандартного образца диоктадецил 3,3' -тиодипропионат в метиленхлориде и доводят объём тем же растворителем до 10 мл. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мл полученного раствора и доводят метиленхлоридом подкисленным до метки.

Пластинка: ТСХ пластинки со слоем силикагеля GF254.

Подвижная фаза А (ПФА): гексан.

Подвижная фаза Б (ПФБ): метиленхлорид.

На линию старта хроматографической пластинки наносят по 20 мкл испытуемого раствора, стандартного раствора С и стандартных растворов, которые соответствуют всем фенольным и нефенольным антиоксидантам, входящим в состав испытуемого материала.

Хроматографирование А: расстояние, пройденное ПФА от линии старта должно быть не менее 18 см; высушивание пластинки – на воздухе.

Хроматографирование Б: расстояние, пройденное ПФБ от линии старта должно быть не менее 17 см; высушивание пластинки – на воздухе.

Детектирование: пластинку опрыскивают раствором йода спиртовым 1 % и через 10–15 мин исследуют в ультрафиолетовом свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора С должны проявляться две чётко разделённые зоны адсорбции.

На хроматограмме испытуемого раствора интенсивность окраски любых зон адсорбции не должна превышать интенсивность окраски соответствующих зон адсорбции на хроматограммах стандартных образцов.

Амиды и стеараты. Определение проводят методом тонкослойной хроматографии (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Испытуемый раствор. Выпаривают досуха 100 мл испытуемого раствора Б под вакуумом при температуре 45oС. Сухой остаток растворяют в 2,0 мл метиленхлорида подкисленного.

Стандартный раствор Т. Растворяют 20,0 мг фармакопейного стандартного образца стеариновой кислоты в метиленхлориде и доводят объём тем же растворителем до 10 мл.

Стандартный раствор У. Растворяют 40,0 мг фармакопейного стандартного образца олеамида в метиленхлориде и доводят объём тем же растворителем до 20 мл.

Стандартный раствор Ф. Растворяют 40,0 мг фармакопейного стандартного образца эрукамида в метиленхлориде и доводят объём тем же растворителем до 20 мл.

Пластинка: ТСХ пластинки со слоем силикагеля GF254 (две пластинки).

Испытание 1.

Подвижная фаза: спирт безводный—триметилпентан 25:75.

На линию старта хроматографической пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора и стандартного раствора Т.

Хроматографирование: расстояние, пройденное подвижной фазой от линии старта, должно быть не менее 10 см; высушивание пластинки – на воздухе.

Детектирование: опрыскивают дихлорфенолиндофенола натриевой соли раствором 0,2 % в спирте безводном и нагревают в сушильном шкафу при температуре 120 °С в течение нескольких минут для усиления интенсивности окраски зон адсорбции.

На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции, соответствующая добавке «стеариновая кислота», должна быть идентична по положению (Rf около 0,5) и не должна превышать по интенсивности окраски соответствующей зоны адсорбции на хроматограмме
стандартного раствора Т.

Испытание 2.

Подвижная фаза А: гексан.

Подвижная фаза Б: метанол—метиленхлорид 5:95.

На линию старта хроматографической пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора и стандартных растворов У и Ф.

Хроматографирование: расстояние, пройденное подвижной фазой А от линии старта, должно быть не менее 13 см; высушивание пластины ‒ на воздухе.

Хроматографирование Б: расстояние, пройденное подвижной фазой Б от линии старта, должно быть не менее 10 см; высушивание пластины ‒ на воздухе.

Детектирование: опрыскивают раствором фосфорномолибденовой кислоты в спирте безводном 4 % и нагревают в сушильном шкафу при температуре 120 °С до обнаружения зон адсорбции.

На хроматограмме испытуемого раствора зоны адсорбции, соответствующие добавкам олеамид или эрукамид, должны быть идентичны по положению (Rf около 0,2) и не должны превышать по интенсивности окраски соответствующие зоны адсорбции на хроматограммах стандартных растворов У и Ф.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.1.2.0025 Упаковочные материалы на основе полиэтиленвинилацетата для лекарственных препаратов для парентерального питания

Вводится впервые

Полиэтиленвинилацетат, используемый в производстве упаковки для лекарственных средств, получают сополимеризацией смеси этилена и мономера винилацетата. От содержания винилацетата зависят механические свойства сополимера, а также тип полимера, то есть является полимер термопластом или эластомером.

При высоком содержании винилацетата полимер приобретает устойчивость к маслам, растворителям, озону и высокой температуре. Упаковочный материал на основе полиэтиленвинилацетата используют для производства первичной упаковки для лекарственных средств, применяемых для полного парентерального питания (содержащих белковые, жировые, углеводные компоненты питания, витамины, макро- и микроэлементы и т.п.), представляющих собой флаконы, бутылки, пакеты, а также некоторые детали упаковки для полного парентерального питания, например соединительные трубки.

Содержание винилацетата в упаковочном материале на основе полиэтиленвинилацетата для производства упаковки, используемой для лекарственных средств полного парентерального питания, должно быть не более 25 %, в упаковочном материале для производства первичной упаковки – не более 30 % для производства трубок для лекарственных препаратов полного парентерального питания.

###### Особенности технологии

В зависимости от предполагаемого использования полимеров по назначению, они могут содержать добавки для оптимизации их химических, физических и механических свойств. Если иное не обосновано, добавки выбирают из перечня, в котором для каждого указано максимально допустимое содержание.

Полиэтиленвинилацетат может содержать не более трёх из следующих антиоксидантов:

- бутилгидрокситолуола: не более 0,125 %;

- пентаэритритил тетракис [3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропионат]: не более 0,2 %;

- октадецил 3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропионат: не более 0,2 %;

- трис [2,4-ди-трет-бутилфенил] фосфит: не более 0,2 %;

- 2,2',2'',6,6',6''-гекса-трет-бутил-4,4',4''-[(2,4,6-триметил-1,3,5-бензол-триил)трисметилен]трифенола: не более 0,2 %.

Полиэтиленвинилацетат также может содержать:

- олеамид: не более 0,5 %;

- эрукамид: не более 0,5 %;

- кальция стеарат или цинка стеарат или смесь обоих компонентов: не более 0,5 %;

- кальция карбонат или калия гидроксид: не более 0,5 %;

- кремния диоксид коллоидный: не более 0,2 %.

Полиэтиленвинилацетат выпускают в виде порошка, гранул. После трансформации представляет собой полупрозрачные пластинки, листы различной толщины, плёнку или готовую упаковку.

Температура размягчения полиэтиленвинилацетата изменяется в зависимости от содержания винилацетата; она снижается от температуры размягчения около 100 °С для испытуемого образца, содержащего несколько процентов винилацетата, до температуры размягчения около 70 °С для материала, содержащего 30 % винилацетата.

Общие требования к упаковочным материалам и упаковке из полимерных материалов для лекарственных средств приведены в ОФС «Упаковка лекарственных средств», ОФС «Упаковка и укупорочные средства из полимерных материалов для фармацевтического применения».

Упаковочные материалы на основе полиэтиленвинилацетата, предназначенного для упаковки лекарственных средств, подлежащих стерилизации, должны обеспечивать возможность стерилизации произведённой упаковки в соответствии с требованиями и методами, указанными в ОФС «Стерилизация».

###### Свойства

Растворимость. Практически нерастворимы в воде, этаноле, гексане, метаноле, растворимы в горячих ароматических углеводородах.

###### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр испытуемого образца, снятый в диске с калия бромидом, в области от 3800 до 650 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру образца, выбранного для производства упаковки лекарственных средств, и иметь максимумы при следующих волновых числах (допустимое отклонение ±5 см-1): 2920–2850 см-1; 1740 см-1; 1240 см-1; 1020 см-1; 720 см-1 и 610 см-1.

- Пробоподготовка. Растворяют 0,25 г упаковочного материала в 10 мл толуола и кипятят с обратным холодильником в течение 15 мин. Несколько капель полученного раствора помещают на предметное стекло с натрия хлоридом или на диск с калия бромидом и выпаривают растворитель в сушильном шкафу при температуре 80 °С.

- Если испытуемый образец представляет собой пластинку или плёнку, то идентификация может быть выполнена непосредственно на отрезанном кусочке подходящего размера.

2. Дифференциальная сканирующая калориметрия (ОФС «Термический анализ», метод 2). Термограмма испытуемого образца должна соответствовать термограмме стандартного образца полиэтиленвинилацетата, а температура пика плавления, полученного от термограммы испытуемого образца, не должна отличаться от температуры пика плавления стандартного образца более чем на 6 °С.

- В тигель помещают около 12 мг (точная навеска) испытуемого образца и проводят испытание в соответствии с ОФС «Термический анализ». Регистрируют термограммы испытуемого и стандартного образцов в атмосфере азота, в установленных для полимера условиях нагревания/охлаждения. Результаты анализа сильно зависят от количества пластификатора в испытуемом образце.

- Образец полиэтиленвинилацетата нагревают в диапазоне температур от –50 °С до 120 °С со скоростью нагревания около 10 °С/мин. Незамедлительно охлаждают образец до комнатной температуры.

- Примечание – для получения воспроизводимого результата необходим близкий контакт между тиглем и термопарой.

###### Испытания

Пробоподготовка

Образцы полиэтиленвинилацетата для проведения испытания могут представлять собой вырезанные из полимерного материала (плёнки, пластины, листы, готовой упаковки и т.п.) кусочки необходимых размеров, или растворы и жидкости, полученные экстрагированием полиэтиленвинилацетата различными растворителями. Испытуемый образец, предназначенный для экстрагирования разрезают на части с максимальным размером стороны не более 1 см и подготавливают несколько испытуемых растворов, проводя экстрагирование полиэтиленвинилацетата различными растворителями: толуолом (испытуемый раствор А), водой (испытуемый раствор Б).

Испытуемый раствор А. В коническую колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 2,0 г испытуемого образца, прибавляют 80 мл толуола и кипятят с обратным холодильником при постоянном перемешивании в течение 90 мин. Охлаждают до температуры 60 °С и прибавляют при постоянном перемешивании 120 мл метанола. Полученный раствор фильтруют через стеклянный фильтр ПОР 16 (ОФС «Пористость стеклянных фильтров») в мерную колбу вместимостью 250 мл. Промывают колбу для экстрагирования и фильтр 25 мл смеси толуол—метанол 40:60, полученную промывную жидкость прибавляют к фильтрату в мерную колбу и доводят объём раствора той же смесью растворителей до метки.

Испытуемый раствор Б. В коническую колбу из боросиликатного стекла с притёртой пробкой помещают 25 г испытуемого образца, прибавляют 500 мл воды и кипятят с обратным холодильником в течение 5 ч. После охлаждения полученный раствор декантируют и оставляют часть раствора для испытания по показателям «Прозрачность раствора» и «Цветность раствора», а оставшуюся часть раствора фильтруют через стеклянный фильтр ПОР 16 (ОФС «Пористость стеклянных фильтров»). Испытуемый раствор Б используют в течение 4 ч после приготовления.

Прозрачность раствора. Испытуемый раствор Б, полученный при декантировании, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Испытуемый раствор Б, полученный при декантировании, должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Светопоглощающие примеси. Оптическая плотность испытуемого раствора Б в области длин волн от 220 до 340 нм в кварцевой кювете с толщиной слоя 1 см, измеренная по сравнению с водой, не должна превышать 0,2. (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Кислотность или щёлочность

К 100 мл испытуемого раствора Б прибавляют 0,15 мл БКФ (BRP) индикатора раствора. Окраска раствора должна изменяться до голубой при прибавлении не более 1,5 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида.

К 100 мл испытуемого раствора Б прибавляют 0,2 мл метилового оранжевого спиртового раствора 0,1 %. Окраска раствора должна изменяться от жёлтой до оранжевой при прибавлении не более 1,5 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты.

Восстанавливающие вещества

В колбу с притёртой пробкой вместимостью 100 мл помещают 20 мл испытуемого раствора Б, прибавляют 1,0 мл серной кислоты разведённой раствора 16 % и 20 мл 0,002 М раствора калия перманганата и кипятят с обратным холодильником в течение 3 мин, сразу охлаждают. Прибавляют в колбу 1,0 г калия йодида и полученный раствор немедленно титруют 0,01 М раствором натрия тиосульфата до обесцвечивания, используя в качестве индикатора 0,25 мл крахмала раствора 1 %.

Параллельно проводят контрольный опыт, используя 20 мл воды вместо 20 мл испытуемого раствора Б.

Разность между израсходованным объёмом 0,01 М раствора натрия тиосульфата при титровании контрольного и испытуемого раствора не должна превышать 0,5 мл.

Амиды и стеариновая кислота. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Испытуемый раствор. Выпаривают под вакуумом 100 мл испытуемого раствора А при температуре 45 °С досуха. Сухой остаток растворяют в 2,0 мл метиленхлорида подкисленного.

Раствор стандартного образца А. Растворяют 20 мг фармакопейного стандартного образца стеариновой кислоты в 10 мл метиленхлорида.

Раствор стандартного образца Б. Растворяют 40 мг фармакопейного стандартного образца олеамида в 20 мл метиленхлорида.

Раствор стандартного образца В. Растворяют 40 мг фармакопейного стандартного образца эрукамида в 20 мл метиленхлорида.

Пластинка. ТСХ пластинки со слоем силикагеля GF254 (2 пластинки).

- А. Подвижная фаза: Этанол— триметилпентан 25:75.

  - На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца А.

  - Хроматографирование: расстояние, пройденное подвижной фазой от линии старта должно быть не менее 10 см; высушивание – на воздухе.

  - Детектирование: опрыскивают раствором 2 г/л дихлорфенолиндофенола натриевой соли в этаноле и нагревают в сушильном шкафу при температуре 120 °С в течение нескольких минут для усиления интенсивности пятен.

  - На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции, соответствующая добавке «стеариновая кислота», должна быть идентична по положению (Rf около 0,5) и не должна превышать по интенсивности окраски соответствующей зоны адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца А.

- Б. Подвижная фаза А: Гексан.

- Подвижная фаза В: Метанол—метиленхлорид 5:95.

  - На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора, раствора стандартного образца Б и раствора стандартного образца В.

  - Хроматографирование: расстояние, пройденное подвижной фазой А от линии старта должно быть не менее 13 см; высушивание – на воздухе.

  - Хроматографирование: расстояние, пройденное подвижной фазой В от линии старта должно быть не менее 10 см; высушивание – на воздухе.

  - Детектирование: опрыскивают фосфорномолибденовой кислоты спиртовым раствором 4 % и выдерживают в сушильном шкафу при температуре 120 °С до обнаружения зон адсорбции.

  - На хроматограмме испытуемого раствора зоны адсорбции, соответствующие добавкам олеамид или эрукамид, должны быть идентичны по положению (Rf около 0,2) и не должны превышать по интенсивности окраски соответствующие зоны адсорбции на хроматограммах растворов стандартных образцов Б и В.

Фенольные антиоксиданты. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворитель: Ацетонитрил—тетрагидрофуран 50:50.

Подвижная фаза: Вода—тетрагидрофуран—ацетонитрил 100:300:600.

Испытуемый раствор 1. Выпаривают под вакуумом досуха 50 мл испытуемого раствора А при температуре 45 °С. Сухой остаток растворяют в 5,0 мл смеси растворителей.

Испытуемый раствор 2. Выпаривают под вакуумом досуха 50 мл испытуемого раствора А при температуре 45 °С. Сухой остаток растворяют в 5,0 мл метиленхлорида.

Стандартный раствор А. Растворяют 25 мг фармакопейного стандартного образца бутилгидрокситолуола, 40 мг фармакопейного стандартного образца 2,2',2'',6,6',6''-гекса-трет-бутил-4,4',4''-[(2,4,6-триметил-1,3,5-бензолтриил)трисметилен)] трифенола, 40 мг фармакопейного стандартного образца пентаэритритил тетракис [3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионата] и 40 мг фармакопейного стандартного образца октадецил (3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионата в 10 мл смеси растворителей. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Стандартный раствор Б. Растворяют 40 мг фармакопейного стандартного образца октадецил 3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионата и 40 мг фармакопейного стандартного образца трис (2,4-ди-трет-бутилфенил)фосфита в 10 мл метиленхлорида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метиленхлоридом до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Скорость потока | 1,5 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм;
Объём пробы | 20 мкл.

Хроматографируют стандартный раствор А и испытуемый раствор 1.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора А:

- разрешение (RS) между пиками добавок пентаэритритил тетракис [3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионата] и 2,2',2'',6,6',6''-гекса-трет-бутил-4,4',4''-[(2,4,6-триметил-1,3,5-бензолтриил) трисметилен)] трифенола должно быть не менее 2,0;

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная для пика, соответствующего добавке бутилгидрокситолуола, должна составлять не менее 2500 теоретических тарелок.

На хроматограмме испытуемого раствора 1 должны появиться только основные пики, соответствующие пикам на хроматограмме стандартного раствора А со временем удерживания более 2 мин.

На хроматограмме испытуемого раствора 1 площади пиков не должны превышать площади соответствующих пиков на хроматограмме стандартного раствора А, исключая последний пик на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Если на хроматограмме испытуемого раствора 1 появляется пик с таким же временем удерживания, как у последнего пика антиоксиданта на хроматограмме стандартного раствора А, выполняют испытание, как описано выше, но со следующими изменениями.

Подвижная фаза: Вода—2-пропанол—метанол 50:450:500.

Хроматографируют стандартный раствор Б и испытуемый раствор 2.

Пригодность хроматографической системы. На хромматограмме стандартного раствора Б разрешение (RS) между пиками добавок октадецил (3-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил) пропионата и трис (2,4-ди-трет-бутилфенил)фосфита не менее 2,0.

На хроматограмме испытуемого раствора 2 должны появляться только основные пики, соответствующие пикам на хроматограмме стандартного раствора Б со временем удерживания более 3 мин.

На хроматограмме испытуемого раствора 2 площади пиков не должны превышать площадей соответствующих пиков на хроматограмме стандартного раствора Б.

Сульфатная зола. Не более 1,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют около 5 г (точная навеска) испытуемого образца.

###### Количественное определение

Винилацетат

Не более 25 % для упаковочного материала на основе полиэтиленвинилацетата для производства упаковки для лекарственных средств полного парентерального питания. Не более 30 % для упаковочного материала на основе полиэтиленвинилацетата, используемого для производства трубок для системы упаковки полного парентерального питания.

От 0,250 г до 1,000 г (точная навеска) испытуемого образца, в зависимости от содержания винилацетата в сополимере, помещают в коническую колбу с притёртой пробкой вместимостью 300 мл с магнитной мешалкой. Прибавляют 40 мл ксилола и кипятят с обратным холодильником при перемешивании в течение 4 ч. Охлаждают при непрерывном перемешивании до начала образования осадка и медленно прибавляют 25 мл 1 М раствора калия гидроксида спиртового. Снова кипятят с обратным холодильником при перемешивании в течение 3 ч. Охлаждают при постоянном перемешивании, промывают холодильник 50 мл воды и прибавляют в колбу 30 мл 0,05 М раствора серной кислоты.

Содержимое колбы переносят в лабораторный стакан вместимостью 400 мл. Колбу ополаскивают двумя порциями по 50 мл натрия сульфата безводного раствора 20 % и тремя порциями по 20 мл воды и прибавляют смывы в тот же стакан. Титруют избыток серной кислоты 0,1 М раствором натрия гидроксида, определяя конечную точку титрования потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора серной кислоты соответствует 8,609 мг винилацетата.

### 1.2. Методы анализа лекарственных средств

#### 1.2.1. Методы физического и физико-химического анализа

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.0001 Сканирующая электронная микроскопия

Вводится впервые

Метод сканирующей электронной микроскопии является электронно-оптическим методом наблюдения (визуализации) и исследования изображений поверхности, а также получения информации о составе и некоторых других свойствах испытуемых образцов веществ, применяемых в фармацевтической практике.

По сравнению с традиционной оптической (световой) микроскопией (ОФС «Оптическая микроскопия»), сканирующая электронная микроскопия позволяет исследовать испытуемые образцы при более высоких увеличениях, например, 250000 × по сравнению с увеличением 1000 × в оптической микроскопии, с большим разрешением по плоскости (например, 3 нм или больше по сравнению с примерно 200 нм в оптической микроскопии), а также с большей глубиной резкостью. Для исследования деталей испытуемого образца размером до 10 нм могут быть применены самые простые системы сканирующей электронной микроскопии.

Совместное использование сканирующей электронной микроскопии и элементного рентгеновского микроанализа (ОФС «Рентгеновская флуоресцентная спектрометрия») позволяет получать данные об элементном составе испытуемого образца и осуществлять его элементное картирование.

###### Область применения

Сканирующая электронная микроскопия (СЭМ) может быть применена для исследования и определения характеристик широкого спектра твёрдых веществ, используемых в фармацевтической практике: исходные материалы; сырьё; фармацевтические субстанции; вспомогательные вещества; нерасфасованная продукция; лекарственные препараты; материалы первичной и вторичной упаковки и т.д.; вещества в мягком и жидком агрегатных состояниях при использовании специальных методов подготовки образцов.

Исследование веществ методом сканирующей электронной микроскопии проводят на различных этапах обращения лекарственных средств: при фармацевтической разработке, технологическом процессе производства, контроле качества готового лекарственного препарата и т.п.

Изучение изображений, полученных с помощью сканирующей электронной микроскопии, позволяет качественно и количественно оценить однородность и постоянство порошков, находящихся в качестве сырья или после обработки, например, после технологического процесса прессования в виде таблеток, в отношении формы, размеров и распределения частиц в порошках, а также текстуры, пористости и формы кристаллов. Эта информация может коррелировать с профилем растворения, биодоступностью и степенью кристалличности веществ в твёрдых лекарственных формах. Сканирующая электронная микроскопия имеет особое значение для поддержки разработки и оптимизации производственных процессов для большинства твёрдых лекарственных форм, таких как таблетки, порошкообразные смеси для приготовления суспензии для приёма внутрь, гранулы, порошки для ингаляций, порошки лиофилизированные или распылительной сушки, порошки для приготовления растворов для парентерального применения.

Сканирующая электронная микроскопия может быть использована для получения дополнительной информации при разработке методов определения размера частиц, включая возможность распределения частиц по размеру. Кроме того, используя сканирующую электронную микроскопию можно не только определить механические включения в лекарственных препаратах для парентерального применения, но и установить источник загрязнения.

###### Метод

Для получения увеличенных изображений в методе сканирующей электронной микроскопии используют точно сфокусированный пучок ускоренных электронов вместо источника света, как в оптической микроскопии. Увеличение разрешающей способности реализуется за счёт того, что длина волны электронного пучка в три раза меньше длины волны видимого света. Сфокусированный пучок электронов сканирует (растрирует) поверхность испытуемого образца с применением различных типов детекторов, в результате чего генерируются различные типы сигналов, используемые для получения соответствующей информации об испытуемом образце.

Электроны, находящиеся в сканирующем электронном пучке, называемые первичными (ускоренными, бомбардирующими, падающими), не только взаимодействуют с поверхностью образца, но и проникают с поверхности образца на глубину до нескольких десятков микрометров. Взаимодействие, рассеивание, поглощение электронов происходит на участке испытуемого образца чуть ниже его поверхности, известном как объём взаимодействия, имеющем каплеобразную форму, представленном на рис. 1.

Глубина проникновения первичных электронов зависит от элементного состава образца, плотности образца, угла наклона образца и энергии падающего луча, определяемого ускоряющим напряжением. Глубина, на которую проникает пучок первичных электронов, прямо пропорциональна энергии пучка и обратно пропорциональна среднему атомному номеру составляющих элементов образца. Электронный пучок высокой энергии проникает на большую глубину образца, чем электронный пучок низкой энергии. Электронный пучок проникает гораздо глубже в испытуемый образец, содержащий лёгкие элементы, чем в образец, богатый тяжёлыми элементами.

###### Типы излучаемых сигналов

В результате взаимодействия пучка ускоренных первичных электронов с испытуемым образцом происходит ряд различных процессов, приводящих к выходу из испытуемого образца электронов или квантов электромагнитного излучения, регистрируемых в виде излучаемых сигналов, используемых для построения изображений и, в определённых случаях, для получения информации об элементном составе образца.

Основные типы сигналов, которые регистрируют при использовании метода сканирующей электронной микроскопии, показаны на рис. 1.

Рисунок 1. Схема объёма взаимодействия и типов излучаемых сигналов

Вторичные электроны ‒ это электроны низкой энергии от 5 эВ до 20 эВ. Они испускаются непосредственно из-под поверхности образца в результате столкновения первичных электронов с образцом и неупругого их рассеяния. Вторичные электроны выходят с небольшой глубины образца, как правило, в пределах от 2 до 30 нм от поверхности, на которой рассеяние пучка в плоскости изображения не очень значительно, поэтому они генерируют изображения с высоким разрешением. Количество вторичных электронов определяется углом падения пучка электронов на поверхность, т.е. морфологией поверхности образца. Для большинства испытуемых веществ характерны участки возбуждения диаметром 0,5–5 мкм.

Обратно рассеянные электроны ‒ это электроны высокой энергии, возникающие в результате упругого рассеяния ускоренных первичных электронов. Обратно рассеянные электроны выходят с глубины, составляющей примерно половину глубины проникновения первичных электронов в образец, как правило, 0,1–5 мкм. При этом размер области выхода в плоскости изображения существенно больше, чем у вторичных электронов, что приводит к генерированию изображения с более низким разрешением, чем в случае вторичных электронов, показывая меньше деталей поверхности. Количество отражённых обратно рассеянных электронов определяется атомным номером атомов, входящих в состав испытуемого образца, плотностью образца, морфологией поверхности образца.

Рентгеновское излучение образуется при взаимодействии ускоренных первичных электронов с элементами вещества испытуемого образца. Когда электрон из ускоренного пучка электронов сталкивается с орбитальным электроном атома вещества испытуемого образца, возникающее взаимодействие может поднять данный орбитальный электрон на более высокий энергетический уровень, либо ионизировать атом. Рентгеновское излучение, возникающее в результате торможения ускоренных электронов в веществе, называется тормозным или белым излучением, а возникающее в результате возбуждения атомов вещества ‒ характеристическим рентгеновским излучением.

Стабилизация орбитального электрона происходит за счёт ослабления электрона с более высоким энергетическим уровнем, что приводит к испусканию рентгеновского излучения. Эти энергии рентгеновского излучения, являющиеся дискретными и специфическими для конкретного элемента, представляют собой характеристическое дискретное излучение и они равны разности между энергиями электронов оболочки для различных оболочек данного элемента. Спектр характеристического излучения представлен набором линий, соответствующих переходам на внутренние оболочки атома. Внутренние оболочки обозначают латинскими буквами по алфавиту, начиная с K, соответствующие переходы обозначают той же буквой, что и уровень, на который происходит переход. При этом добавляют греческую букву, обозначающую, насколько выше лежит уровень, с которого происходит переход.

Например, испущенный электрон K-оболочки может стабилизироваться за счёт более высокого энергетического состояния электрона L-оболочки, и произвести чистую энергию (EL – EK), специфическую для энергии рентгеновского фотона элементной K-линии. Линии рентгеновского излучения классифицируют в соответствии с оболочкой электрона, в которой была вакансия, например, K, L, M. Данные линии затем распределяют по категориям в соответствии с оболочкой, из которой исходит расслабляющий электрон. Таким образом, линия рентгеновского излучения Kα появится из вакансии в K-оболочке, заполненной электроном из L-оболочки; линия рентгеновского излучения Kβ появится из вакансии в K-оболочке, заполненной электроном из М-оболочки, и так далее в соответствии с рис. 2.

Рисунок 2. Модель атома

Рентгеновское излучение выходит практически из всей области взаимодействия, при этом часть рентгеновского излучения поглощается в испытуемом образце. Глубина генерации рентгеновского излучения определяется глубиной проникновения в образец первичных электронов пучка. В случае непрерывного тормозного излучения возбуждение может идти на всей глубине проникновения электронов. Пространственное разрешение изображения при регистрации рентгеновского излучения определяется размерами области генерации излучения и составляет порядка нескольких микрон (мкм). Для получения минимального размера области генерации и максимального отношения интенсивности характеристических линий к фону используют энергии электронного пучка в 2–3 раза больше критических для данного материала. Еcr – критическая энергия, необходимая для возбуждения данной линии излучения, равна энергии необходимой для ионизации соответствующей внутренней оболочки. Значения энергии характеристических линий для разных химических элементов хорошо известны, и слабо зависят от химического соединения, что позволяет качественно анализировать элементный состав образца. Интенсивности характеристических линий определяются концентрацией атомов соответствующего химического элемента и используются для количественного анализа состава образца. В основе количественного анализа лежит измерение отношения интенсивностей характеристической линии в исследуемом образце к интенсивности той же линии в стандарте.

Катодолюминесценция ‒ это испускание фотонов в видимой области спектра, когда атомы и молекулы внутри объёма взаимодействия возвращаются в своё основное состояние после возбуждения электронным пучком.

###### Оборудование

Выпускается большое количество разнообразных конструкций и типов сканирующих электронных микроскопов, оснащённых детекторами разных типов. На рис. 3 представлена схема электронного микроскопа, который состоит из следующих основных частей:

- электронная пушка ‒ размещается в верхней части электронно-лучевой колонны и испускает пучок электронов. Электроны ускоряются вниз по колонне под воздействием высокого напряжения, которое обычно изменяется от 100 В до 30 кВ;

- колонна электронного микроскопа, содержащая различные детали, используемые для управления и фокусировки пучка электронов;

- камера для образцов, расположенная в нижней части колонны. В ней находится образец и набор детекторов, которые ловят излучаемые сигналы;

- система насосов, которая поддерживает камеру электронной пушки и колонну микроскопа в условиях глубокого вакуума для сохранения стабильности источника электронов.

Колонна электронного микроскопа содержит следующие основные детали:

- систему конденсорных линз, контролирующую диаметр и энергию электронного пучка;

- сканирующие катушки, которые используются для перемещения пучка растровым способом по прямоугольной области образца;

- линзу объектива, которая фокусирует пучок в точную точку и направляет его на образец.

Рисунок 3. Схема сканирующего электронного микроскопа

Основные системы сканирующей электронной микроскопии. Традиционную стандартную систему сканирующей электронной микроскопии (СЭМ) проводят в условиях, когда электронная колонна и камера для образцов находятся в условиях глубокого вакуума, чтобы можно было исследовать образцы, способные выдерживать высокое давление до 10–6 торр, используемое для построения изображений. Образцы должны обладать свойствами проводников, либо на них должно быть нанесено специальное покрытие, обеспечивающее проведение больших поверхностных зарядов.

Системы сканирующей электронной микроскопии в режиме естественной среды (ССЭМ) и сканирующей электронной микроскопии в режиме переменного давления (СЭМПД) позволяют исследовать непроводящие образцы и гидратированные материалы либо во влажной атмосфере с использованием средовой СЭМ (ССЭМ), либо в сухом неполном вакууме с применением СЭМ в режиме переменного давления (СЭМПД) от 10 до 103 Па (до 50 торр). Дифференциальная система вакуумирования оборудования, поддерживая в камере электронной пушки глубокий вакуум, создает относительно неглубокий вакуум, иногда близкий к атмосферному давлению, в камере для образца. Преимущество использования систем ССЭМ или СЭМПД заключается в том, что они также могут работать в условиях глубокого вакуума.

Сканирующая просвечивающая электронная микроскопия сочетает традиционную систему просвечивающей электронной микроскопии и регулировки сканирования, обеспечивая при исследовании образцов получение микрофотографий с высоким разрешением, информацией на уровне атомов, такой, как атомная структура, химический состав, межфазные связи. Значительное увеличение разрешения достигается за счёт регулировки мощности зонда электронного пучка до размеров атомов. Но при этом образцы должны выдерживать бомбардировку электронами, что не всегда могут выдержать фармацевтические материалы.

Излучатели электронов. Основой для формирования электронного изображения служит генерация сильноточного потока электронов, сталкивающихся с поверхностью образца. При слишком высокой интенсивности пучка, образец может сгореть по мере распространения пучка по его поверхности. Это важный фактор, который необходимо учитывать при исследовании фармацевтических материалов. Различают два основных типа источников электронов – электронных пушек.

Термоионная эмиссия. Широко распространённый термоионный источник представляет собой нить накала, обычную вольфрамовую проволоку, нагреваемую путём пропускания электрического тока непосредственно через неё. Альтернативным вариантом может являться эмиттер на основе лантана гексаборида (LaB6), который состоит из нагретого косвенным путём монокристалла. Он имеет гораздо больший выход электронов и намного ярче, чем вольфрамовый эмиттер.

Автоэлектронная (полевая) эмиссия. Электроны испускаются из сверхострого наконечника тонкой вольфрамовой проволоки, погружённой в сильное электростатическое поле. Такие эмиттеры, называемые также полевыми эмиттерами, используемые в электронных микроскопах высокого разрешения, излучают очень яркий слаботочный электронный пучок малого диаметра. Они довольно стабильны и имеют срок службы в несколько тысяч часов. Автоэлектронная сканирующая микроскопия обладает значительными преимуществами, поскольку создаёт изображения в высоком разрешении при низких ускоряющих напряжениях (до нескольких сотен вольт), с повышенным отношением сигнал/шум, обеспечивая высококачественные изображения с низким уровнем шумов, и с большей глубиной резкости. Приборы для полевой эмиссии лучше подходят для анализа фармацевтических материалов, поскольку они производят очень яркий пучок, который меньше повреждает образец. Кроме того, сканирующая электронная микроскопия, выполняемая методами полевой эмиссии, отличается более высокой разрешающей способностью по спектру, что делает их более подходящими для определения механических включений.

Детекторы. В сканирующем электронном микроскопе на оптимальных расстояниях вблизи образца находятся необходимые детекторы, регистрирующие различные сигналы, испускаемые при взаимодействии образца с электронным пучком.

Детекторы вторичных электронов. Как правило, традиционные сканирующие электронные микроскопы, используемые в режиме глубокого вакуума, оснащены детектором Эверхарта-Торнли (Э-T), расположенным с одной стороны образца. Детекторы Э-T чувствительны к вторичным электронам низкой энергии, которые возникают на небольшой глубине, обычно менее 50 нм, под поверхностью образца.

Детектор Э-T имеет перед собой проволочную сетку с положительным потенциалом для притягивания электронов к сцинтиллятору, который преобразует вторичные электроны в световые вспышки, направленные в фотоумножитель. Вторичные электроны могут следовать по криволинейным траекториям из участков образца, которые могут находиться вне прямой видимости детектора. Как следствие, изображения в режиме детектирования вторичных электронов обычно имеют высокую контрастность и показывают значительные детали поверхности, которые подчеркивают топографические элементы и различия в шероховатости поверхности разных образцов.

Помимо вторичных электронов, детекторы Э-T также чувствительны к обратно рассеянным электронам, испускаемым из участков образца, которые находятся в прямой видимости детектора. Как следствие, изображения, созданные с помощью вторичных электронов, включают сигналы как вторичных, так и обратно рассеянных электронов, и именно это сочетание создает трёхмерный эффект, являющийся отличительной характеристикой изображений во вторичных электронах.

Детектор Э-T не может быть использован в ССЭМ или СЭМПД, поскольку вторичные электроны, испускаемые образцом, рассеиваются и поглощаются молекулами газа в камере. Для наблюдения изображений во вторичных электронах в ССЭМ или СЭМПД используют детектор, чувствительный к небольшому количеству света, испускаемого ионизированными молекулами газа, окружающими образец (процесс, называемый люминесценцией газов) в камере для образца. Именно это облако положительно заряженных ионов вокруг образца также нейтрализует любое накопление отрицательного заряда.

Детекторы обратно рассеянных электронов. Обратно рассеянные электроны имеют более высокие энергии, чем вторичные электроны, и излучаются в широком угловом диапазоне. Следовательно, детектор располагается вблизи образца и над ним. Большинство глубоковакуумных и неглубоковакуумных электронных микроскопов оснащены специальным детектором обратного рассеяния электронов, использующим либо сцинтиллятор, либо полупроводниковые диоды.

Сцинтилляционные детекторы работают так же, как детекторы вторичных электронов типа Э-T, обнаруживая электроны как вспышки света, но не имеют сетку с положительным потенциалом для притяжения электронов к ним. Полупроводниковые детекторы обратно рассеянных электронов состоят из зубчатого колеса, содержащего 4 или 5 отдельных фотодиодов, расположенных в виде широкого ряда. Диоды могут быть включены или выключены в различных комбинациях, что позволяет создавать топографические изображения, структурные изображения или и то, и другое вместе.

Испускание обратно рассеянных электронов увеличивается со средним атомным номером различных компонентов (чистых или составных) образца. Такое поведение может быть использовано для изучения пространственного распределения и однородности образцов, содержащих атомы лёгких и тяжёлых элементов в таких смесях, как порошкообразные смеси, таблетки, полученные путём прессования, образцы, загрязнённые посторонними включениями. Структурные изображения в обратно рассеянных электронах не показывают, какие элементы присутствуют в образце, но они показывают, где находятся материалы с высоким атомным номером относительно материалов с низким атомным номером. Материалы, состоящие в основном из атомов тяжёлого элемента (например, железа, брома), выглядят ярче, чем те, которые имеют атомы более лёгких элементов (например, углерода, азота, кислорода, алюминия). Чтобы определить, какие элементы действительно присутствуют, используется рентгеновский микроанализ элементного состава.

В отличие от детекторов вторичных электронов, детекторы обратно рассеянных электронов не сильно подвержены воздействию электрического заряда на поверхности образца. Следовательно, изображения в непроводящих образцах можно получить в условиях глубокого и неглубокого вакуума с помощью детектора обратно рассеянных электронов.

Как сцинтилляционные, так и полупроводниковые детекторы обратного рассеяния электронов очень чувствительны к видимому свету и поэтому могут также функционировать как катодолюминесцентные детекторы.

Катодолюминесцентные детекторы. Свет слабой интенсивности, излучаемый катодолюминесцентными материалами, собирается выдвижным параболоидным зеркалом и направляется в светочувствительный сцинтилляционный детектор, который на рис. 3 не показан. Зеркало располагают непосредственно над образцом и убирают, когда оно не используется. Электронный пучок проходит через небольшое отверстие в зеркале, попадая на образец и вызывая излучение света в видимой части спектра.

Упрощённый детектор не различает разные длины волн света, и получаются полутоновые изображения с катодолюминесцентными участками образца, показываемыми как яркие. Более сложные детекторы имеют возможность выбирать различные длины волн света для получения монохромных изображений, настроенных на одну длину волны, представляющую определенный материал. Катодолюминесцентный спектральный анализ достигается пропусканием полихроматического света, испускаемого образцом, в спектрометр, где он рассеивается для получения видимого диапазона спектра.

Спектральный анализ излучаемого света не получил широкого распространения, но нашёл применение для исследования и определения характеристик некоторых органических и неорганических материалов. Он может быть использован для получения диагностической информации о химическом составе и структуре отдельных материалов, а спектральная визуализация может быть использована для анализа смесей материалов.

Детекторы для рентгеновского микроанализа элементного состава. Рентгеновский анализатор, встроенный в камеру для образцов электронного микроскопа, позволяет проводить мгновенный и неразрушающий анализ элементного состава исследуемых материалов. Существует два основных типа детекторов: первый обнаруживает дисперсию энергий (энергодисперсионный рентгеновский микроанализ), второй – дисперсию длин волн (волнодисперсионный рентгеновский микроанализ) характеристических рентгеновских лучей, испускаемых образцами, которые описаны в ОФС «Рентгеновская флуоресцентная спектрометрия».

###### Пробоподготовка

Максимальная производительность электронного микроскопа зависит от ряда факторов, связанных с пробоподготовкой, при этом свойства самого образца оказывают существенное влияние на качество итогового изображения.

Перед подготовкой образца для анализа путём сканирующей электронной микроскопии необходимо определить цель испытания, так как от неё может зависеть способ обработки образца.

Также необходимо учесть удельную электрическую проводимость образцов, чтобы свести к минимуму накопление электрического заряда на его поверхности при прохождении пучка электронов по образцу. Для непроводящих образцов могут потребоваться специальные процедуры подготовки, чтобы можно было рассеять накопленные заряды.

Обычно для выполнения традиционной сканирующей микроскопии требуется всего небольшое количество твёрдого образца: от 10–3 до 10–12 г в зависимости от способа применения.

Разработано множество методов подготовки образцов таким образом, чтобы они сохраняли свою целостность при минимальном влиянии артефактов. Подготовка большинства образцов фармацевтической продукции проста и быстра в осуществлении и не требует специального оборудования или сложных процедур.

Для фиксации порошков, отдельных частиц, таблеток, лиофилизированных масс, капсул используют держатель образцов. Быстроотвердевающий, совместимый с вакуумом клей или электропроводная углеродная или серебряная краска идеально подходят для фиксации крупных образцов диаметром до нескольких миллиметров. Мелкодисперсные порошки и небольшие образцы можно зафиксировать на держателе с помощью двухсторонней клейкой ленты или полосок с клеевым слоем. Крупные образцы может понадобиться уменьшить, чтобы они помещались на держатель или в камеру образцов, а таблетки перед надёжной фиксацией на держателе допустимо разламывать для доступа к ядру образца.

Порошки можно просто распылить или высыпать на держатель с тонко нанесённым клейким слоем; при этом незафиксированный излишек стряхивают или сдувают с помощью тонкой струи инертного сжатого газа. Быстро и легко порошки можно зафиксировать путём нанесения двухсторонней клейкой ленты на держатель и его аккуратного погружения в порошок таким образом, чтобы лента оказалась покрыта тонким слоем порошка, после чего излишек сдувают, избегая вдыхания порошка, оказавшегося в воздухе.

При подготовке образцов порошков необходимо исключить перекрёстную контаминацию, поскольку присутствие в образце даже единичной частицы другого материала может привести к неверной интерпретации изображения или химического анализа. По этой причине не рекомендуется наносить частицы порошка на держатель с помощью кисти, поскольку кисть необходимо очищать или утилизировать после каждого применения. При проведении микроанализа для манипуляций с образцом рекомендуется использовать инструменты, например, иглы, лопаточки, пинцеты и т.д., из инертных материалов или пластмассы, поскольку инструменты из металла могут быть источником загрязняющих частиц.

Покрытие образцов. Большинство фармацевтических материалов готовы к анализу и не требуют длительной и сложной процедуры подготовки. Однако такие материалы, в основном, не являются электропроводными, поэтому образцы для испытания с помощью сканирующей электронной микроскопии в высоковакуумном режиме необходимо покрывать сверхтонким слоем проводящего материала. Без проводящего покрытия образцы получат чистый отрицательный заряд при прохождении по ним электронного пучка; это приведёт к яркому свечению образца, и при разряде на изображении будут видны помехи в виде вспышек и ярких полос. Подходящими материалами для покрытия являются металлы, например, платина и золото. Их можно наносить на неровные и гладкие поверхности образцов с помощью устройства для плазменного напыления. При использовании углерода его необходимо выпарить в условиях очень высокого вакуума, поскольку его невозможно напылить. Помимо сокращения влияния заряда проводящее покрытие увеличит испускание вторичных электронов для получения более ярких изображений, а также перенесёт с образца локализированную тепловую энергию, вызванную прохождением пучка электронов. Некоторые порошки, состоящие из очень мелких частиц, например, кремния диоксид коллоидный, для предотвращения получения заряда могут требовать трёх-четырёхкратного напыления, поскольку при однократном напылении материал покрытия не сможет сформировать цельный проводящий слой.

Некоторые образцы, чувствительные к пучку электронов, такие как полутвёрдые или влажные материалы, может потребоваться охладить или заморозить с использованием этапа охлаждения с целью минимизации деградации или испарения. Учитывая это, автоэлектронная сканирующая микроскопия позволяет анализировать поверхности чувствительных образцов с помощью пучка электронов с очень низкой энергией, например, 500 В или меньше, что может способствовать снижению или устранению деградации под влиянием пучка.

Образцы для рентгеновского микроанализа элементного состава, как правило, не покрывают металлом, поскольку такое покрытие станет причиной дополнительных пиков в рентгеновском спектре, что может повлиять на анализ или даже перекрыть малые количества некоторых элементов, тем самым препятствуя возможности количественного определения неизвестных элементов. Большинство анализаторов элементного состава способы обнаруживать лёгкие элементы, поэтому даже тонкий слой углерода может отрицательно сказаться на интерпретации спектра. Для минимизации или исключения потенциальных проблем и артефактов из-за покрытия образца материалы, не обладающие электрической проводимостью, можно анализировать без покрытия с помощью средовой ССЭМ или СЭМПД в режиме переменного давления. Для любого покрытия может понадобиться коррекция с помощью программного обеспечения.

###### Настройки оборудования и условия исследования

Параметры используемого оборудования, необходимые для получения качественного изображения, могут в значительной степени зависеть от типа и подготовки образцов. Некоторые важные свойства образцов включают форму (порошки, цельные образцы, волокна, стекловидные жидкости и т.д.), общие размеры, текстуру, атомный состав и присущую им проводимость. К параметрам, влияющим на качество изображения, можно отнести необходимые настройки оборудования и условия исследования.

Стандартные настройки и компоненты оборудования, способные повлиять на качество изображения, включают ускоряющее напряжение, ток эмиссии, рабочее расстояние, детекторы вторичных или обратно рассеянных электронов, если используется несколько режимов, настройки тока конденсаторной линзы и диаметр линз объектива.

Ускоряющее напряжение является наиболее важным из настроек. Необходимо использовать электронный микроскоп с ускоряющим напряжением луча, подходящим для получения изображений, на которых отражены искомые данные об образце. Например, низкое напряжение, менее 5 кВ, может использоваться для получения изображения деталей поверхности, а напряжение выше 10 кВ увеличивает разрешающую способность и может быть использовано для анализа широкого диапазона элементов. Наиболее пригодный диапазон ускоряющего напряжения составляет от 2 кВ до 20 кВ, поскольку большинство искомых элементов можно ионизировать электронами с энергией в данном диапазоне.

Регулировка линзы объектива позволяет сфокусировать пучок на образце в широком диапазоне рабочих расстояний, чтобы можно было охватить образцы как большого, так и малого размера. Глубину резкости также можно увеличить за счёт выбора меньших апертур пучка, чтобы вся глубина толстых образцов находилась в приемлемом фокусе единовременно.

В зависимости от образца, при использовании сканирующей электронной микроскопии в высоком вакууме можно достичь очень высокого увеличения, более чем в 10 000 раз, для получения чёткого изображения мелких деталей размером до 3 нм, за счёт того, что пучок электронов можно сфокусировать без рассеяния молекулами газа. В случае ССЭМ или СЭМПД ввиду присутствия газа и водяного пара в камере образцов электронный пучок подвергается некоторому боковому рассеянию. Такое рассеяние может отрицательно влиять на получение изображений высокого разрешения, поскольку пучок не может быть настолько чётко сфокусирован, как это происходит в высоком вакууме. Более короткое рабочее расстояние и оптимизация давления газа могут позволить минимизировать данный нежелательный эффект.

Боковые пространственные разрешения в 1 нм и выше возможны при использовании автоэлектронной сканирующей микроскопии. Для достижения такой высокой разрешающей способности может потребоваться ускоряющее напряжение луча выше примерно 15 кВ, но высокое напряжение луча может повредить чувствительные к лучу материалы. В случае большинства органических твёрдых материалов пучок электронов проникнет внутрь образца на много микрометров, и детали поверхности будут утеряны из-за рассеивания и поглощения испущенных электронов. Чтобы получить детали поверхности образцов, электронный микроскоп необходимо использовать с гораздо более низким напряжением, но за счёт этого ухудшится разрешение. Большинство образцов фармацевтической продукции, исследуемых с помощью сканирующей электронной микроскопии, с большой долей вероятности анализируют с увеличением менее чем в 10 000 раз, поэтому высокая разрешающая способность обычно не требуется.

Сочетание сканирующей электронной микроскопии и рентгеновского микроанализа. Данная комбинация позволяет определять элементный состав образцов и осуществлять элементное картирование для визуализации распределения элементов, например, в таблетках и смесях.

Карты элементов легко и быстро генерируются для визуализации пространственного распределения элементов в образце при использовании слабого и сильного увеличения. Разрезанные поперек или раздробленные ядра таблеток и порошки, слегка спрессованные до формирования плоской поверхности, можно картировать, чтобы установить взаимосвязи между их компонентами. Данная техника целесообразна при сравнении различий между образцами, чтобы установить, почему одни имеют лучшие характеристики, чем другие. Важно, чтобы поверхности были ровными, поскольку испущенные рентгеновские лучи имеют прямую траекторию, а значит, могут быть не детектированы в зонах (по факту, в тени), которые находятся не в прямой видимости рентгеновского детектора. Такие артефакты можно уменьшить путём наклона образца к детектору. Рентгеновский микроанализ также используют для изучения механических включений. Видимый дефект в виде чёрных точек в таблетках, например, зачастую появляется из-за частиц металла или резины, попадающих в таблетки в процессе прессования из-за износа таблеточных прессов. Сканирующая электронная микроскопия в сочетании с рентгеновским микроанализом идеально подходит для их определения, поскольку она может использоваться для различения металлов, что позволяет установить источник и первопричину появления таких точек. Кроме того, этот способ испытания подходит для выявления и последующего изучения выявленных механических включений в растворах для парентерального применения, глазных каплях.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.0002 Инструментальные методы определения цветности жидкостей

Вводится впервые

Определение цветности жидкостей и растворов проводят инструментальными методами.

###### Область применения

Неотъемлемой характеристикой внешнего вида лекарственных средств, включая жидкости и растворы, является одно из их органолептических свойств – цвет. Цветность является условно принятой количественной характеристикой для жидкостей и растворов, имеющих окраску.

Инструментальные методы определения цветности жидкостей и растворов устраняют субъективность оценки их цвета и предоставляют объективные показания, не зависящие от оператора (наблюдателя) и внешних условий. Если применимо, цветность жидкостей и растворов можно оценить по значению оптической плотности, полученному при спектрофотометрическом методе определения (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях») с использованием валидированной методики и указанных в фармакопейной статье на конкретное лекарственное средство нормативных требований (критериев приемлемости).

Вместе с тем, при использовании соответствующего оборудования и необходимой его калибровки, применяя характеристические для «стандартного колориметрического наблюдателя» коэффициенты распределения (весовые коэффициенты), инструментальные методы определения цветности жидкостей и растворов, описанные в настоящей общей фармакопейной статье, позволяют получить численные значения цветности, могут предоставить надёжные, точные, последовательные результаты измерения цветности и цветовых различий, которые не изменяются со временем. В зависимости от используемого оборудования и некоторых других аспектов, результаты измерения цветности, могут представлять собой, как спектральные единицы измерения (например, спектральный коэффициент пропускания), так и «цветовые» единицы цветового пространства CIELAB (например, координаты цвета L*, a*, b*, значение цветового контраста ΔE*). Полученные количественные характеристики при измерении цвета могут быть использованы для объективной оценки цветности испытуемых лекарственных средств, для оценки разницы в цвете сравниваемых образцов и принятии решения о соответствии или различии их цвета; определения величины отклонений цветности образца от заданной и решения других задач. Исследование показателя цветности, например, изменчивости его значений с течением времени или за счёт присутствия определённых веществ и их примесей, может быть востребовано при фармацевтической разработке, изучении стабильности, контроле процесса производства, хранении и на других этапах жизненного цикла лекарственных средств.

###### Визуальная оценка цвета

Оценка цвета любого объекта складывается из субъективных и объективных факторов. Цвет является органолептической характеристикой лекарственных средств, то есть характеристикой, зависящей от субъективного восприятия и оценки его человеком (наблюдателем). На восприятие цвета влияют многие объективные факторы, из которых наиболее важными являются такие как: спектральные характеристики образца, спектральные свойства источника излучения, визуальная чувствительность человека в видимом диапазоне испытания. Таким образом, цвет может быть определён как восприятие или субъективная реакция наблюдателя на объективный раздражитель, представляющий собой электромагнитное излучение в видимой области спектра, охватывающей диапазон длин волн от 400 до 700 нм.

При субъективной оценке цвета учитывают явления метамеризма и цветового непостоянства. Понятие метамеризма связано с двумя и более испытуемыми образцами и их сравнением между собой. Если при оценке цвета двух образцов одним и тем же человеком при освещении образцов одним и тем же источником, обнаруживается равенство или сильное сходство цвета образцов, но при изменении источника освещения или оценке этих же образцов другим человеком, обнаруживается различие в цвете, то такая пара образцов называется метамерной, а явление – метамеризмом. Например, одному человеку два образца могут показаться одинаковыми по цвету, а для другого они будут различными даже при том же самом источнике освещения. Либо не сохраняется равенство двух цветов для одного и того же человека при переходе к другому источнику освещения. Соответствие цвета двух образцов при освещении любым источником освещения наблюдается, если их абсорбционные и отражательные спектры идентичны. Цветовое непостоянство – это свойство одного и того же образца изменять свой цвет при смене источника освещения при оценке цвета одним и тем же человеком.

Ахроматизм или бесцветность подразумевает полное отсутствие окраски (оттенка, цветового тона) образца из-за отсутствия поглощения в видимой области спектра. Вместе с тем, к ахроматическим цветам относят так же все возможные оттенки серого и чёрного цветов, при этом образцы чёрного цвета поглощают любые цвета в видимой области спектра. Наиболее ярким ахроматическим цветом является белый, наиболее тёмным – чёрный.

###### Атрибуты цвета и координаты цветового пространства

Как правило, для идентификации цвета используют три его атрибута:

- оттенок (угол оттенка, цветовой тон, цветовое измерение) – доминирующая характеристика цвета в чистом виде, отвечающая за положение цвета в спектре – это красный, жёлтый, синий, зелёный и промежуточные цвета;

- яркость (светлота) – качество, которое отличает цвет одинаково насыщенных оттенков одного и того же цвета спектра степенью яркости, т.е. отличает светлый цвет от такого же тёмного. Любой цвет при увеличении светлоты приближается к белому, а при максимальном снижении светлоты становится чёрным;

- насыщенность – качество, которое позволяет отличать интенсивный цвет от слабого, либо степень отличия любого цвета спектра (хроматического цвета) от равного ему по яркости (светлоте) ахроматического, иначе, это «глубина» цвета. Два оттенка одного и того же цвета спектра могут отличаться степенью блёклости. При уменьшении насыщенности каждый хроматический цвет приближается к ахроматическому серому.

Эти три атрибута цвета (три цветовых стимула) могут быть использованы для определения трёхмерного цветового пространства, в котором любой цвет расположен по своим координатам. Цветовое пространство – это трёхмерное пространство для геометрического представления воспринимаемого цвета объекта. Выбранное цветовое пространство визуально однородно, если геометрическое расстояние между двумя цветами в нем коррелирует с воспринимаемой разницей между этими двумя цветами.

Цилиндрическая система координат считается более удобной для геометрического построения цветового пространства. Точки вдоль вертикальной оси координат представляют диапазон яркости от тёмного к светлому (или от чёрного к белому), имеют неопределённый оттенок и отсутствие насыщенности. Фокусируясь на поперечном сечении, перпендикулярном оси яркости, оттенок определяют углом относительно длинной оси, а насыщенность – геометрическим расстоянием от вертикальной оси. Красный, жёлтый, зелёный, синий и промежуточные оттенки отличаются различными углами оттенков. Цвета с одинаковым углом оттенка становятся более интенсивными (насыщенными) по мере удаления от вертикальной оси. Например, бесцветная ахроматичная вода имеет неопределённый оттенок (угол оттенка), высокую яркость (светлоту) и низкую насыщенность, либо не имеет насыщенности вообще. При добавлении цветного растворяемого вещества вода приобретает определённый оттенок (угол оттенка). По мере добавления цветного растворяемого вещества цвет становится темнее, интенсивнее или глубже, то есть увеличивается насыщенность и уменьшается яркость. Однако если растворённое вещество имеет нейтральный цвет, такой как серый, яркость уменьшается, но не происходит повышение насыщенности и оттенок (угол оттенка) остается неопределённым.

Существует несколько моделей цветовых пространств, из которых наиболее распространённой в настоящее время является цветовое пространство CIELAB, разработанное Международной комиссией по освещению (МКО), (International Commission on Illumination, CIE) в 1976 г. Это цветовое пространство также известно, как CIE L*a*b* или просто «Lab». Для построения координат цветового пространства CIELAB были использованы результаты измерений атрибутов цвета (цветовых стимулов) так называемым «стандартным колориметрическим наблюдателем», математически преобразованные для получения значений переменных (X, Y и Z) трёхцветных координат. Координаты цвета или трёхцветные координаты (tristimulus values) – это количество трёх основных цветовых стимулов в данной трёхцветной колориметрической системе, необходимое для уравнивания по цвету с измеряемым стимулом. Значения X, Y и Z трёхцветных координат являются воображаемой интерпретацией того цвета, что видит глаз человека (т.е. глаз «стандартного колориметрического наблюдателя»), они характеризуются следующим образом: значение X – представляет красный возбудитель глаза, значение Y – представляет зелёный возбудитель глаза, значение Z – представляет синий возбудитель глаза. Значение Y используют также для характеристики светлоты образца. Значения X, Y и Z трёхцветных координат не являются координатами визуально однородного цветового пространства, они преобразуются в цветовое пространство CIELAB, более однородное по насыщенности и оттенку. Цветовое пространство CIELAB было разработано таким образом, чтобы одинаковое количество числовых изменений в этих значениях соответствовало примерно одинаковому количеству визуально воспринимаемых изменений цвета.

Таким образом, цветовое пространство CIE 1976 (L*a*b*) – трёхмерное приблизительно равноконтрастное цветовое пространство, полученное построением в прямоугольных координатах (L*a*b*), однозначно связанных со значениями X, Y и Z трёхцветных координат в системе Международной комиссии по освещению (МКО). В диаграмме цветового пространства значение L* представляет собой вертикальную ось, идущую через центр, две другие координаты a* и b* лежат перпендикулярно друг к другу в одной плоскости, перпендикулярной оси L* (рис. 1).

Графическое отображение цветового пространства CIE 1976 (L*a*b*)

Координаты цвета и другие полученные значения в цветовом пространстве CIELAB обозначают следующее:

- L* – координата характеризует светлоту (lightness), которую можно интерпретировать как показатель ощущения яркости. Значение L* всегда положительное, находится в диапазоне от 0 до 100: если оно равно нулю, то образец соответствует абсолютно чёрному цвету, если равно 100, то образец соответствует абсолютно белому цвету (бесцветный образец);

- a* – координата характеризует изменение оттенка (угла оттенка, цветового тона) образца от зелёного до красного цвета и наоборот. Это необязательно значит, что образец зелёного или красного цвета, это значит только то, что образец имеет красноватые или зеленоватые оттенки, которые являются комплементарными цветами спектра. Если значение a* отрицательное, то это соответствует появлению оттенка образца в зелёном диапазоне цветового пространства, если значение a* положительное, то оттенок появится в красном диапазоне цветового пространства;

- b* – координата характеризует изменение оттенка (угла оттенка, цветового тона) образца от синего до жёлтого цвета и наоборот. Это необязательно значит, что образец синего или жёлтого цвета, это значит только то, что образец имеет жёлтые или синие оттенки, которые являются комплементарными цветами спектра. Если значение b* отрицательное, то это соответствует появлению оттенка образца в синем диапазоне цветового пространства, если значение b* положительное, то оттенок появится в жёлтом диапазоне цветового пространства;

- C*ab – это значение характеризует насыщенность (chromaticity) образца, расположено на плоскости координат (a*, b*), начиная от центра цветового пространства. Значения C*ab не могут быть отрицательными, чем дальше от центра диаграммы находится значение C*ab, тем выше насыщенность цвета образца. Значение C*ab вычисляют по формуле:

(2)

- h*ab – это значение характеризует оттенок (угол оттенка, цветовой тон) образца в плоскости координат (a*, b*), измеренный от оси a*, увеличивающийся против часовой стрелки. Значение h*ab определяется углом относительно центра координат цветового пространства и отображается в градусах (геометрических) угла от 0 до 360 градусов, значение h*ab. никогда не может быть отрицательным. Установленные значения h*ab (оттенка, угла оттенка, цветового тона) для основных цветов спектра в градусах составляют приблизительно: 25 градусов для красного цвета, 92 – для жёлтого, 162 – для зелёного, 220 – для голубого, 271 – для синего, 337 – для пурпурного.

Иногда вместо координат цветового пространства CIELAB используют значения координат цветового пространства CIELCh, представляющей собой цилиндрическую версию CIELAB, в которой вместо прямоугольных используются полярные координаты. Параметр C (Chroma – хроматическая составляющая, насыщенность) отвечает за длину радиуса и удалённость от центра цветового круга, а h (Hue) за угол поворота в градусах, т.е. за цветовой тон.

###### Метод

Основой любого инструментального измерения цветности является то, что человеческий глаз, как было указано выше, распознаёт цвет с помощью трёх «рецепторов». Поэтому все цвета могут быть разложены на смесь из трёх излучающих стимулов, которые соответствующим образом подобраны для возбуждения сразу трёх таких рецепторов глаза. Несмотря на то, что ни один набор реальных источников света не может быть использован для соответствия всем цветам (т.е. для любых трёх выбранных источников цвета, некоторые цвета требуют отрицательной величины одного или более источников света), были определены три наиболее подходящих стимула, с помощью которых возможно измерить все реальные цвета. В ходе обширных экспериментов по подбору цвета с участием людей с нормальным цветовым зрением были измерены и определены функции сложения цветов в виде коэффициентов распределения (весовых коэффициентов) для каждой длины волны в видимой области спектра от 400 до 700 нм, которые дают относительную величину стимуляции каждого типа рецепторов, вызванной светом этой длины волны. Коэффициенты распределения , и , отражающие чувствительность глаза «стандартного колориметрического наблюдателя», показаны на рисунке. В моделях, использованных при вычислении значений цвета, учитывались источник света и угол поля зрения, под которым «стандартный колориметрический наблюдатель» смотрит на объект. Вычисление значений цвета в цветовом пространстве CIELAB, как правило, проводят с использованием либо источника света C (рассеянный дневной свет) и наблюдением под углом 2 градуса CIELAB (С/2), либо источника света D65 (рассеянный солнечный свет) и наблюдением под углом 10 градусов CIELAB (D65/10).

Рисунок 2. Коэффициенты распределения , и в диапазоне длин волн от 400 до 700 нм, отражающие чувствительность глаза «стандартного колориметрического наблюдателя», вычисленные с использованием CIELAB (С/2) (D - коэффициент распределения, λ - длина волны в нанометрах).

Для любого цвета величина стимуляции каждого типа рецептора в глазу определяется набором значений (X, Y и Z) трёхцветных координат для конкретного исследуемого цвета.

Взаимосвязь между коэффициентами распределения ( , и ), указанными на рисунке 2, и значениями (X, Y и Z) трёхцветных координат устанавливают по следующим уравнениям, выраженным в терминах интегралов:

где k – нормализующая константа, характеризующая стимуляцию одного типа рецепторов и используемое освещение;
Sλ – относительное распределение спектральной мощности источника света;
, и – коэффициенты распределения соответствия цветов для стандартного наблюдателя CIELAB (С/2);
fλ – спектральный коэффициент пропускания Tλ материала;
λ – длина волны, нм.

В практических расчётах значений (X, Y и Z) трёхцветных координат интегрирование аппроксимируется суммированием следующим образом:

Значения (X, Y и Z) трёхцветных координат, рассчитанные на основании фактически измеренных значений (fλ) спектрального коэффициента пропускания материала образца и табличных данных весовых коэффициентов, используют для дальнейших расчётов инструментальной оценки цветности испытуемого образца.

Примечание – Весовые коэффициенты для таблиц получают путём умножения мощности источника света на определённой длине волны на коэффициент отклика на этой длине волны.

###### Методика

Оборудование. Цветоизмерительное оборудование различается по типу измеряемого излучения, условиям применения, оптической конфигурации измерения, методу определения координат цвета. Для определения цветности жидкостей могут быть применены спектрофотометрический или фотоколориметрический метод с использованием соответствующих приборов (спектрофотометров, фотоколориметров и т.п.) для измерения поглощения света в видимой области спектра – рабочем диапазоне от 400 нм до 700 нм.

Калибровка. Используемые приборы должны быть откалиброваны в соответствии с рекомендациями производителя, указанными в инструкции по эксплуатации прибора и требованиями пользователя, разработанными на основании ОФС «Квалификация аналитического оборудования». Калибровку приборов проводят перед каждым измерением или с установленной периодичностью в зависимости от конкретного использования прибора.

Для целей калибровки применяют эталонные материалы в пределах предполагаемого диапазона измерений и с учётом конфигурации прибора. Приборы, предназначенные для измерения цветности прозрачных жидкостей, калибруют по коэффициенту пропускания, используя в качестве эталона белого цвета, как правило, воду очищенную, присвоив ей коэффициент пропускания 100,0 % на всех длинах волн в видимой области спектра. В этом случае значения (X, Y и Z) трёхцветных координат для источника CIELAB (С/2) составят 98,0; 100.0; и 118,1 соответственно.

После калибровки эталонными материалами желательно всякий раз подбирать эталон по возможности ближе к цвету образца. Если образец испытуемого материала не подходит для использования в качестве долгосрочно действующего эталона, существуют цветовые чипы (поля цветовой шкалы), которые охватывают всё визуально однородное цветное пространство с небольшими приращениями. Использование такого эталона рекомендуется в качестве средства контроля функционирования оборудования, даже для определения абсолютного цвета.

Пробоподготовка. Образцы испытуемых жидкостей для определения их цветности, должны быть прозрачными, так как методы, указанные в настоящей общей фармакопейной статье, не применимы к мутным, непрозрачным жидкостям. Непосредственно перед определением дисперсную фазу мутного, непрозрачного образца следует удалить центрифугированием или фильтрацией. Кроме того, на пути прохождения излучения прибора не должно быть пузырьков воздуха или пены, поэтому следует избегать их образования в испытуемых образцах, и если применимо, удалять с помощью, например, центрифугирования.

Спектрофотометрическое определение. Используя подходящий спектрофотометр, регистрируют значение спектрального коэффициента пропускания прозрачного образца испытуемой жидкости в диапазоне длин волн на протяжении всего видимого спектра (от 380 до 770 нм или, по крайней мере, от 400 до 700 нм), с интервалами не более 10 нм. Если результаты получены с более частыми интервалами, то для расчёта инструментальных значений цветности используют только результаты для интервалов 10 нм. Результаты выражают в процентах, максимально возможная величина 100,0. Рассчитывают значения (X, Y и Z ) трёхцветных координат по формулам (6), (7) и (8) соответственно.

Для измерения спектрального коэффициента пропускания прозрачных жидкостей, образец освещают с отклонением в пределах 5° от перпендикуляра к его поверхности, а переданную энергию измеряют светом ограниченным отклонением на 5° от перпендикуляра. Цвет растворов изменяется в зависимости от толщины измеряемого слоя. Если нет иных указаний, должен использоваться слой толщиной 1 см.

Сравнительные измерения могут быть выполнены с использованием цветовых координат воды или свежеприготовленных фармакопейных эталонных растворов, или с использованием соответствующих цветовых координат, хранящихся в базе данных производителя прибора, при условии, что последние были получены в тех же условиях испытания.

Фотоколориметрическое определение. В фотоколориметрическом методе определение проводят с помощью светофильтров, используя подходящий прибор для получения значений, эквивалентных значениям (X, Y и Z) трёхцветных координат. Точность, с которой результаты, полученные со светофильтра фотоколориметра соответствуют значениям (X, Y и Z) трёхцветных координат, может быть указана путём определения значений трёхцветных координат светофильтров с сильно насыщенными цветами и сравнения этих значений с величинами, вычисленными на основе спектральных измерений на спектрофотометре.

###### Анализ данных

Координаты цвета в цветовом пространстве. Полученные значения (X, Y и Z) трёхцветных координат по формулам (6), (7) и (8) используют для вычисления координат цвета в цветовом пространстве CIELAB: L*, a* и b*, которые затем могут быть применены для расчёта отклонения цветности испытуемого образца от выбранной точки сравнения.

Координаты цвета в цветовом пространстве CIELAB: L*, a* и b*определяют по формулам:

где Xn, Yn и Zn – значения (X, Y и Z) трёхцветных координат воды – номинально белого или бесцветного эталона;
Y/Yn > 0,01;
и f(X/Xn) = (X/Xn)1/3 , если X/Xn > (6/29)3 , иначе: f(X/Xn) = 841/108(X/Xn)+4/29 (13);
f(Y/Yn) = (Y/Yn)1/3 , если Y/Yn > (6/29)3 , иначе: f(Y/Yn) = 841/108(Y/Yn)+4/29 (14);
f(Z/Zn) = (Z/Zn)1/3 , если Z/Zn > (6/29)3 , иначе: f(Z/Zn) = 841/108(Z/Zn)+4/29 (15).

Как правило, при вычислении для цветового пространства CIELAB (С/2)Yn = 100,0; в этом случае Xn = 98,0 и Zn = 118,1.

Наряду с координатами цвета в цветовом пространстве CIELAB для расчёта могут быть применены координаты цвета в цветовом пространстве CIELCh.

Цветовой контраст. Для расчёта цветового контраста или разницы цветов между двумя точками (ΔE*) в цветовом пространстве CIELAB используют следующую формулу:

где – ΔL*, Δa* и Δb* различия в координатах цвета цветового пространства сравниваемых образцов.

При визуальном сравнении незначительные различия цвета образцов не воспринимаются. Несмотря на то, что глаз человека способен различать цвета со значением приблизительно равным 1, зачастую человеку с нормальным цветовым зрением сложно достоверно определить разницу между цветами со значением ΔE* менее 3. Поэтому когда требуется точные, надежные сравнения, предпочтительно полагаться на количественную оценку цвета и цветовых различий.

Сравнение значений CIELAB. Значения CIELAB для испытуемого образца и для раствора для подбора цветности (или эталонного раствора) используют для определения приемлемости (допустимости) цветности испытуемого образца. В таблице перечислены показатели испытаний, которые могут быть применены для сравнения «цветовых» значений испытуемого образца с «цветовыми» значениями раствора для подбора цветности (или эталонного раствора), указано проводимое испытание и критерий приемлемости для показателя. Если испытание проводят при исследовании стабильности лекарственных средств, то «цветовые» значения отслеживают за определённый период времени для оценки возможных изменений. Изменчивость «цветовых» значений используют для оценки контроля процессов, при этом причиной изменчивости «цветовых» значений могут быть исходные материалы, их обработка.

Таблица 1. Интерпретация сравнений «цветовых» значений испытуемого образца и раствора для подбора цветности (эталонного раствора)1,2
Показатель испытания | Испытание | Критерий приемлемости
--- | --- | ---
Почти бесцветный | Сравнивают образец с водой очищенной | Измеряют3 образец и воду очищенную и рассчитывают ΔE* относительно воды очищенной. Критерий приемлемости: ΔE*<1
Максимальный уровень цветности | Определяют раствор для подбора цветности со сходным углом оттенка (Δh*ab< 15), различимо более окрашенный, чем образец | Измеряют3 раствор для подбора цветности и рассчитывают ΔE0* относительно воды очищенной. Измеряют3 образец и рассчитывают ΔE* относительно воды очищенной. Критерий приемлемости: ΔE* < ΔE0*.
Минимальный уровень цветности | Определяют раствор для подбора цветности со сходным углом оттенка (Δh*ab< 15), различимо менее окрашенный, чем образец | Измеряют3 раствор для подбора цветности и рассчитывают ΔE0* относительно воды очищенной. Измеряют3 образец и рассчитывают ΔE* относительно воды очищенной. Критерий приемлемости: ΔE*> ΔE0*.
Неотличимо от эталона цветности | Готовят эталон цветности; сравнивают испытуемый образец с эталоном цветности | Рассчитывают ΔE* относительно выбранного эталона цветности. Критерий приемлемости: ΔE* < 3

Необходимо учитывать, что переменные параметры оборудования могут влиять на результаты измерений цветности. Несмотря на то, что надежные сравнения могут быть сделаны между сходными цветами, измеренными одновременно, результаты, полученные на разных приборах или в различных рабочих условиях, должны сравниваться с осторожностью. Если необходимо сравнить данные, полученные на различных приборах или в разное время и т.д., целесообразно одновременно иметь данные, полученные для эталонного образца, это поможет выявить вариабельность, связанную с работой прибора.

###### Оценка местоположения цветности образца в цветовом пространстве CIEL*a*b*

Данные сравнительного анализа «цветовых» значений CIELAB испытуемого образца и раствора для подбора цветности могут быть непосредственно использованы для количественной оценки цветности (цветовых характеристик образца). Цветоизмерительные приборы могут предоставить информацию о фактическом расположении испытуемого образца в цветовом пространстве L*a*b*. Используя полученные результаты инструментального метода определения цветности и применяя соответствующие алгоритмы, можно сформулировать требования к цветности испытуемого раствора таким образом:

- по цветности испытуемый раствор равен эталону XY;

- по цветности испытуемый раствор близок к эталону XY;

- по цветности испытуемый раствор находится между эталонным значением XY и эталонным значением XZ.

Если на этапе фармацевтической разработки лекарственного средства необходимо установить требования к цветности, то предпочтительнее регламентировать не визуальное, а инструментальное определение цветности, при котором устраняются недостатки, связанные с ограничением пространства контроля тем, что оно охватывается существующими визуальными эталонами. Кроме того, для лекарственных средств, находящихся на этапе разработки, приемлемые числовые пределы координат цвета в цветовом пространстве должны определяться на основе возможностей процесса производства, стабильности, аналитической вариабельности лекарственного средства. В этом случае требования к цветности испытуемого раствора могут быть указаны следующим образом:

- раствор с: L* – не менее XX, не более XX; a* – не более XX, не менее XX; b* – не более XX, не менее XX , где XX – это числовое значение;

- ΔE* по сравнению с одной точкой в трёхмерном пространстве. В идеале эта точка должна отражать среднее значение, основанное на нескольких сериях или репрезентативном материале, например, хорошо охарактеризованном эталонном образце. Использование других точек также может быть обосновано.

Допустимые значения оценки цветности лекарственных средств при промышленном производстве, испытании стабильности могут быть заданы для отдельных координат цвета в цветовом пространстве CIEL*a*b* (или другом должным образом валидированном цветовом пространстве) или в виде ΔE* по сравнению с одной точкой в цветовом пространстве.

Предоставление результатов. Рассчитанные значения цвета цветового пространства CIELAB зависят от используемого источника света и угла наблюдения, поэтому при оформлении результатов измерения цветности эти параметры должны быть указаны вместе со значениями координат цвета в цветовом пространстве L*, a* и b*. Значения цветности (C*ab) и угла оттенка (h*ab), которые могут быть получены из значений a* и b*, можно не предоставлять. Возможные способы предоставления результатов инструментального определения цветности лекарственных средств – жидкостей:

- CIELAB ([источник света]/[угол наблюдения]) = (L*, a*, b*);

- CIELAB (С/2) = (50.70, -11.30, -33.30) или

- CIELAB (D65/10) = (52.69, -19.43, 29.61).

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.0003 Осмолярность

Взамен ОФС.1.2.1.0003.15

Осмолярность – это характеристика растворов, выражающая их осмотическое давление через суммарную концентрацию кинетически активных частиц в единице объёма раствора (мОсм/л).

Существующие инструментальные методы позволяют определить не осмолярность, а осмоляльность – концентрацию кинетически активных частиц на килограмм растворителя (мОсм/кг). Осмолярность не может быть измерена, но её рассчитывают теоретически исходя из экспериментально найденных значений осмоляльности.

Кинетически активные частицы – это молекулы, ионы или ионные комплексы одного или нескольких растворённых веществ, свободно распределённые во всём объёме растворителя и обладающие способностью к хаотическому перемещению внутри раствора.

Осмолярность и осмоляльность характеризуют создаваемое растворами осмотическое давление.

Осмолярность является одной из важнейших характеристик инфузионных растворов. На этикетках растворов для инфузий должно быть указано теоретическое значение их осмолярности. В случае, когда теоретическая осмолярность не может быть рассчитана, указывают среднее значение экспериментально определённой осмоляльности для данного лекарственного средства.

Показатель «Осмолярность» является обязательным для глазных лекарственных форм и инфузионных препаратов. При этом для капель глазных и инфузионных препаратов, являющихся водными растворами, контроль проводят по показателю «Осмолярность», а для капель глазных суспензионного и эмульсионного типа вводят показатель «Осмоляльность», поскольку их плотность отличается от плотности воды. Данный показатель также используют при контроле качества эмульсий для инфузий.

Теоретическая осмолярность может быть рассчитана по формуле:

(1)

где Cосм – осмолярность раствора, миллиосмоль на литр (мОсм/л);
m - содержание вещества в растворе, г/л;
M - молярная масса вещества, г/моль;
n - суммарное число ионов, образующихся из одной молекулы растворённого вещества в результате диссоциации (n = 1 для недиссоциирующих веществ, n = 2, 3… для веществ, образующих при растворении соответствующее количество ионов).

На практике количество частиц (n) несколько меньше теоретически рассчитанного и приближённо может быть описано формулой:

(2)

где n – реальное количество частиц, образующихся при растворении данного вещества;
n0 - теоретически рассчитанное количество частиц (n=1,2,3…);
φ - молярный осмотический коэффициент, учитывающий взаимодействие между частицами в растворе и зависящий только от количества растворённого вещества.

Коэффициент φ определяется экспериментально.

Растворы, равные по осмолярности натрия хлорида раствору 0,9 %, называют изотоническими. Для изотонических растворов теоретически рассчитанные значения осмолярности находятся в пределах 239–376 мОсм/л.

Осмолярность растворов, состоящих из нескольких компонентов, может быть определена как сумма осмолярностей всех компонентов.

Концентрацию инфузионных растворов принято выражать как массо-объёмную (г/л), поэтому удобным представляется контролировать содержание кинетически активных частиц в миллиосмолях на литр (осмолярность), а не на килограмм (осмоляльность) раствора.

Различиями между значениями осмолярности и осмоляльности растворов с осмолярностью, близкой к осмолярности 0,7–1,1 % раствора натрия хлорида или ниже, можно пренебречь (теоретическое значение осмотического давления натрия хлорида раствора 0,9 % – 308 мОсм/л; экспериментальное значение – 286 мОсм/л); для более концентрированных растворов (например, натрия хлорида раствора 10 %) осмолярность может быть определена по формуле:

(3)

где ρ – плотность раствора, кг/л.

Примечания

1. Расчёт теоретических границ осмолярности проводят следующим образом: минимальное значение – осмолярность раствора, содержащего минимально допустимые количества ингредиентов; максимальное значение – осмолярность раствора, содержащего максимально допустимые количества ингредиентов.

2. При наличии в растворе высокомолекулярного вещества за его молярную массу берут среднюю молекулярную массу фракции.

3. Гидрокарбонаты при расчёте осмолярности учитываются как соли одноосновной кислоты.

###### Определение осмоляльности жидких лекарственных средств

Для определения осмоляльности могут быть использованы следующие методы: криоскопический метод, мембранная и паровая осмометрия.

Криоскопический метод

Метод основан на понижении температуры замерзания растворов по сравнению с температурой замерзания чистого растворителя.

1 осмоль на килограмм воды понижает температуру замерзания на 1,86 °C. Измерение этих изменений лежит в основе криоскопического метода.

Данная зависимость может быть выражена следующей формулой:

(4)

где Cосм – осмоляльность раствора, мОсм/кг;
Т2 - температура замерзания чистого растворителя, °С;
T1 - температура замерзания испытуемого раствора, °С;
К - криометрическая постоянная растворителя (для воды 1,86).

В настоящее время определение осмоляльности растворов проводят с использованием автоматических криоскопических осмометров.

Прибор. Составными частями осмометра являются:

- приспособление для охлаждения сосуда с измерительной ячейкой;

- система для измерения температуры, состоящая из чувствительного к температуре сопротивления (термистора) с соответствующим устройством для измерения тока или разности потенциалов. Измерительное устройство может быть откалибровано в градусах понижения температуры или непосредственно в единицах осмоляльности;

- приспособление для перемешивания образца.

Методика. Готовят калибровочные растворы в соответствии с таблицей или используют готовые стандартные растворы от производителя для автоматического криоскопического осмометра. Устанавливают нулевое значение на шкале прибора, используя воду. Проводят калибровку прибора с помощью калибровочных растворов натрия хлорида, которые полностью включают определяемый диапазон осмолярности (табл. 1). Испытания проводят в соответствии с инструкцией к прибору.

Результаты определяют непосредственно по шкале прибора либо рассчитывают по измеренному понижению температуры замерзания.

Таблица 1. Калибровочные растворы
Масса натрия хлорида Р, г/кг H2O | Фактическая осмоляльность (мОсм/кг) | Теоретическая осмоляльность идеального раствора (мОсм/кг) | Моляльный осмотический коэффициент | Криоскопическое понижение температуры (°С)
--- | --- | --- | --- | ---
3,087 | 100 | 105,67 | 0,9463 | 0,186
6,260 | 200 | 214,20 | 0,9337 | 0,372
9,463 | 300 | 323,83 | 0,9264 | 0,558
12,684 | 400 | 434,07 | 0,9215 | 0,744
15,916 | 500 | 544,66 | 0,9180 | 0,930
19,147 | 600 | 655,24 | 0,9157 | 1,116
22,380 | 700 | 756,86 | 0,9140 | 1,302

Метод мембранной осмометрии

Метод основан на использовании свойства полупроницаемых мембран избирательно пропускать молекулы веществ.

Движущей силой процесса является процесс осмоса. Растворитель проникает в испытуемый раствор до установления равновесия; возникающее при этом дополнительное гидростатическое давление приближённо равно осмотическому давлению и может быть рассчитано по формуле:

(5)

где πосм – осмотическое давление, Па;
Pгидр. - гидростатическое давление, Па;
ρ - плотность жидкости, кг/м3;
g - ускорение свободного падения, м/с2;
Δh - высота столба жидкости, м.

Осмоляльность может быть рассчитана по формуле:

(6)

где R – универсальная газовая постоянная (8,314 Дж/моль·К);
Т - абсолютная температура, К.

Определение осмоляльности испытуемого раствора проводят с помощью мембранного осмометра. Предварительную калибровку прибора и измерения проводят в соответствии с инструкцией к прибору.

Примечание – Данный метод применим только для растворов высокомолекулярных веществ (104–106 г/моль). При анализе растворов, содержащих электролиты и другие низкомолекулярные вещества, будет определяться только осмотическое давление, создаваемое высокомолекулярными компонентами раствора.

Метод паровой осмометрии

Один осмоль на килограмм воды понижает давление пара на 0,3 мм рт. ст. при температуре 25 °С. Измерение этих изменений лежит в основе метода паровой осмометрии.

Метод основан на измерении разности температур, которая возникает на термисторах, помещённых в измерительную ячейку, насыщенную парами растворителя в случае, если на один из них нанесена капля чистого растворителя, а на другой – испытуемого раствора. Разница температур возникает вследствие конденсации паров растворителя на капле раствора, так как давление пара растворителя над этой поверхностью меньше. При этом температура капли раствора повышается за счёт экзотермического процесса конденсации до тех пор, пока давление пара над каплей раствора и давление чистого растворителя в ячейке не сравняются. При нанесении на оба термистора капли растворителя разность температур равна нулю. Разность температур практически пропорциональна моляльной концентрации раствора.

Определение осмоляльности испытуемого раствора проводят с помощью парового осмометра. Предварительную калибровку прибора и измерения проводят в соответствии с инструкцией к прибору.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.0004 Ионометрия

Взамен ОФС.1.2.1.0004.15

Метод ионометрии основан на измерении активности (концентрации) определяемых ионов с помощью ионоселективных (индикаторных) электродов. Ионоселективный электрод обладает избирательной чувствительностью к определенному виду ионов, от содержания которых зависит его потенциал. В основу ионометрии положен принцип потенциометрического анализа, заключающийся в измерении разности потенциалов (электродвижущей силы) индикаторного ионоселективного электрода и электрода сравнения, потенциал которого постоянен.

Зависимость электродвижущей силы электродной системы от активности потенциалопределяющего иона описывается уравнением Нернста:

(1)

где E – разность потенциалов между индикаторным ионселективным электродом и электродом сравнения (электродвижущая сила), мВ;
Е0 – стандартное значение электродвижущей силы при а=1, мВ;
R – универсальная газовая постоянная, Дж/(моль∙К);
T – абсолютная температура, К;
F – число Фарадея, Кл/моль;
z – заряд определяемого иона;
a – активность или эффективная концентрация свободных ионов в растворе, связанная с концентрацией соотношением.

(2)

где С – молярная концентрация, моль/л;
f – коэффициент активности;

Для очень разбавленных растворов коэффициент активности близок к единице и активность ионов равна концентрации.

Если коэффициент активности поддерживается постоянным, уравнение Нернста принимает вид:

(3)

где - коэффициент, который означает изменение электродвижущей силы на единицу изменения lg a, и может быть рассчитан по формуле при любой температуре:

(4)

Значения коэффициента k при различных температурах приведены в табл. 1.

Таблица 1. Значения k при различных температурах
Температура, ^о ^С | k, вольт
15 | 0,0572
20 | 0,0582
25 | 0,0592
30 | 0,0602
35 | 0,0611

Коэффициент активности f считается постоянным, если при измерениях во всех анализируемых и калибровочных растворах поддерживается одинаковая ионная сила. Для создания постоянной ионной силы к раствору прибавляют раствор индифферентного электролита (фоновый раствор) с концентрацией в 10–100 раз больше, чем суммарная концентрация других ионов в растворе, с тем, чтобы различные количества анализируемого иона не влияли на ионную силу раствора и коэффициент активности определяемого иона оставался постоянным.

Если , где S – крутизна электродной функции, то:

(5)

где: рС = – lgС

Таким образом, при постоянной ионной силе раствора и постоянной температуре наблюдается линейная зависимость электродвижущей силы электродной системы от концентрации определяемого иона.

###### Измерение активности и концентрации ионов

Ионометрические измерения осуществляют с использованием иономера (высокоомного потенциометра с входным сопротивлением по крайней мере в 100 раз большим, чем сопротивление используемых электродов), который включает в себя электродную систему и измерительный преобразователь.

В качестве ионоселективных электродов используют различные электроды: с жидкой (пластифицированные электроды) или с твёрдой мембраной (монокристаллические, поликристаллические или стеклянные электроды); электроды с заряженными (положительно или отрицательно) или нейтральными подвижными носителями; сенсибилизированные электроды (электроды с ферментативной подложкой, газ-индикаторные электроды). Электродом сравнения служит, главным образом, хлорсеребряный электрод или каломельный электрод с соответствующими индифферентными соединительными жидкостями.

Показания прибора снимают в милливольтах или в единицах рХ. Подготовка иономера к работе и проведение измерений проводят согласно инструкциям, прилагаемым к прибору. Измерения выполняют при постоянной температуре ±0,5 ºC и постоянной ионной силе раствора.

Помещают электроды в испытуемый раствор и снимают установившееся показание при медленном и постоянном перемешивании.

При частых измерениях периодически проверяют стабильность отклика и линейность градуировочного графика в диапазоне концентраций испытуемого раствора. В противном случае проверку проводят перед каждым измерением.

1. Метод градуировочного графика

Метод градуировочного графика заключается в построении графика зависимости электродвижущей силы электродной системы от логарифма концентрации стандартных растворов и последующем нахождении концентрации испытуемого раствора по измеренному в нем значению электродвижущей силы электродной системы. Градуировочный (калибровочный) график строится микропроцессором измерительного преобразователя автоматически на основе введённых в него значений электродвижущей силы электродной системы и соответствующих им значений рХ при калибровке иономера в стандартных растворах (двух и более). Подбор концентраций стандартных растворов должен соответствовать диапазону концентраций испытуемых растворов: крайние значения концентраций испытуемых растворов должны находиться внутри линейной области калибровочного графика. Значение рХ в испытуемом растворе находится автоматически с использованием градуировочного графика по измеренному значению электродвижущей силы электродной системы (Е) – рис. 1.

Поскольку в разбавленных растворах рХ = -lgC, значение молярной концентрации (моль/л) вычисляют по уравнению:

(6)

Значение массовой концентрации иона (г/л) рассчитывают, исходя из уравнения:

(7)

где: М – молярная масса иона, г/моль.

Рисунок 1. Градуировочный график зависимости электродвижущей силы электродной системы от концентрации потенциалопределяющего иона

При наличии влияния других компонентов испытуемого раствора на потенциал ионоселективного электрода используют метод стандартных добавок.

2. Метод стандартных добавок

Метод применим в линейных областях калибровочной кривой.

2.1. Метод многократных добавок

В испытуемый раствор объёмом V, приготовленный как указано в фармакопейной статье, вводят несколько (не менее трёх) порций объёмом V0 (V~0 ~≤ 0,01 V) раствора с известной концентрацией определяемого иона, соблюдая условие неизменной ионной силы в растворе. Измеряют потенциал до и после каждой добавки, и вычисляют разность ΔЕ между потенциалом, измеренным после прибавления раствора с известной концентрацией, и исходным потенциалом испытуемого раствора. Полученная величина связана с концентрацией определяемого иона уравнением:

(8)

или

(9)

где V – объём испытуемого раствора, л;
С – молярная концентрация определяемого иона в испытуемом растворе, моль/л;
V0 – добавленный объём стандартного раствора, л;
С0 – концентрация определяемого иона в стандартном растворе, моль/л;
S – крутизна электродной функции, определяемая экспериментально при постоянной температуре измерением разности потенциалов двух стандартных растворов, концентрации которых отличаются в 10 раз и соответствуют линейной области калибровочной кривой, мВ.

Строят график зависимости от объёма добавки V0 и экстраполируют полученную прямую до пересечения с осью абсцисс. В точке пересечения концентрация испытуемого раствора определяемого иона выражается уравнением:

(10)

2.2. Метод однократной добавки

К объёму V испытуемого раствора, приготовленного как описано в фармакопейной статье, прибавляют объём V0. стандартного раствора с концентрацией C0.. Контрольный раствор готовят в тех же условиях. Измеряют потенциалы испытуемого и контрольного раствора до и после прибавления стандартного раствора. Вычисляют концентрацию C анализируемого иона, используя следующее уравнение и делая необходимые поправки на контрольный раствор:

(11)

где V – объём испытуемого или контрольного раствора, л;
С – концентрация определяемого иона в испытуемом растворе, моль/л;
V0 – добавленный объём стандартного раствора, л;
С0 – концентрация определяемого иона в стандартном растворе, моль/л;
S – крутизна электродной функции, определяемая экспериментально при постоянной температуре измерением разности потенциалов двух стандартных растворов, концентрации которых отличаются в 10 раз и соответствуют линейной области калибровочной кривой, мВ; ΔЕ – разность потенциалов, измеренных до и после добавки, мВ.

3. Потенциометрическое определение рН

Водородным показателем рН, характеризующим концентрацию ионов водорода в водных растворах, называют отрицательный десятичный логарифм активности ионов водорода

(12)

Потенциометрическое определение рН заключается в измерении электродвижущей силы электродной системы, где в качестве ионоселективного электрода используют чувствительный к ионам водорода электрод (обычно стеклянный), в качестве электрода сравнения – стандартный электрод с известной величиной потенциала (насыщенный каломельный или хлорсеребряный электроды). На практике для измерения рН применяют метод градуировочного графика. рН испытуемого раствора связан с рН стандартного раствора следующим уравнением:

(13)

где E – потенциал электрода в испытуемом растворе, мВ;
Es – потенциал того же электрода в растворе с известным значением рН (стандартном растворе), мВ;
k – коэффициент, который означает изменения электродвижущей силы на единицу изменения рН, мВ;
рНs – pH стандартного раствора.

Оборудование. В качестве прибора для потенциометрического определения рН используют иономеры или рН-метры с чувствительностью не менее 0,05 единиц рН или 3 мВ. Калибровку приборов проводят по стандартным буферным растворам.

Методика. Все измерения проводят при одной и той же температуре в интервале от 20 до 25 ºС, если нет других указаний в фармакопейной статье. В табл. 2 приведена зависимость значений рН от температуры для различных стандартных буферных растворов, используемых для калибровки прибора. Для приготовления указанных растворов могут быть использованы стандарт-титры для приготовления буферных растворов − рабочих эталонов рН промышленного производства.

Таблица 2. рН стандартных буферных растворов при различных температурах
Температура, ºС | 15 | 20 | 25 | 30 | 35 |
--- | --- | --- | --- | --- | --- | ---
0,05 М раствор калия тетраоксалата | 1,67 | 1,68 | 1,68 | 1,68 | 1,69 | 0,001
Насыщенный при 25оС раствор калия гидротартрата |  |  | 3,56 | 3,55 | 3,55 | -0,0014
0,05М раствор калия дигидро цитрата | 3,80 | 3,79 | 3,78 | 3,77 | 3,76 | -0,0022
0,05М раствор калия гидрофталата | 4,00 | 4,00 | 4,01 | 4,02 | 4,02 | 0,0012
0,025М раствор калия фосфата и однозамещенного 0,025М раствор динатрия гидрофосфата безводного | 6,90 | 6,88 | 6,87 | 6,85 | 6,84 | -0,0028
0,0087М раствор калия фосфата однозамещенного и 0,0303М раствор динатрия гидрофосфата безводного | 7,45 | 7,43 | 7,41 | 7,40 | 7,39 | -0,0028
0,01М раствор натрия тетрабората | 9,28 | 9,23 | 9,18 | 9,14 | 9,10 | -0,0082
0,025М раствор натрия карбоната и 0,025М раствор натрия гидрокарбоната | 10,12 | 10,06 | 10,01 | 9,97 | 9,93 | -0,0096
Насыщенный при 25оС раствор кальция гидроксида | 12,81 | 12,63 | 12,45 | 12,29 | 12,29 | -0,034
* – изменение рН на градус Цельсия

Прибор калибруют при помощи буферного раствора калия гидрофталата (первичный стандарт) и одного из буферных растворов с другим значением рН (табл. 2). Показания прибора для третьего буферного раствора с промежуточным значением рН не должны отличаться больше, чем на 0,05 единиц рН от табличного значения рН этого раствора. Электроды прибора погружают в испытуемый раствор и измеряют рН в тех же условиях, что и для буферных растворов.

Все испытуемые растворы и стандартные буферные растворы должны быть приготовлены на воде очищенной, не содержащей углерода диоксид, для чего перед употреблением её необходимо прокипятить. Вода, не содержащая углерода диоксид, должна иметь рН 5,8–7,0.

Приготовление стандартных буферных растворов

0,05 М раствор калия тетраоксалата. 12,61 г KC4H3O8∙2H2O растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Насыщенный при 25 °С раствор калия гидротартрата. Избыток КС4Н5О6 энергично встряхивают с водой при температуре 25 °С в течение 30 мин. Фильтруют или декантируют. Раствор используют свежеприготовленным.

0,05 М раствор калия дигидроцитрата. 11,41 г KС6Н7О7 растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл. Раствор используют свежеприготовленным.

0,05 М раствор калия гидрофталата. 10,13 г KC8Н5О4, предварительно высушенного при температуре от 110 до 135 °С до постоянной массы, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

0,025 М раствор калия фосфата однозамещённого и 0,025 М раствор динатрия гидрофосфата безводного. 3,39 г KН2РО4 и 3,53 г Na2HPO4, предварительно высушенных в течение двух часов при температуре от 110 до 130 °С до постоянной массы, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

0,0087 М раствор калия фосфата однозамещённого и 0,0303 М раствор динатрия гидрофосфата безводного. 1,18 г KH2PO4 и 4,30 г Na2HPO4, предварительно высушенных при температуре от 110 до 130 °С, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

0,01 М раствор натрия тетрабората. 3,80 г Na2B4O710H2O растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл. Хранят, защищая от углерода диоксида.

0,025 М раствор натрия карбоната и 0,025 М раствор натрия гидрокарбоната. 2,64 г Na2CO3 и 2,09 г NaHCO3 растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

При измерении рН в неводных и смешанных растворителях, а также в некоторых коллоидных системах, следует иметь ввиду, что полученные значения рН являются условными.

Примечание – Буферные растворы хранят в хорошо закрытых флаконах нейтрального стекла в течение 3 мес. При образовании осадков и видимых изменений буферные растворы не подлежат использованию.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.0005 Растворимость

Взамен ОФС.1.2.1.0005.15

Растворимость является характеристикой приблизительной растворимости фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ (далее – веществ) при фиксированной температуре. Испытание, если нет других указаний в фармакопейной статье, следует проводить при температуре от 24,5 до 25,5 °C.

Если растворимость является показателем чистоты вещества, то в фармакопейной статье должны быть представлены конкретные количественные соотношения вещества и растворителей.

Рекомендуется использовать растворители разной полярности (обычно три); не рекомендуется использование легкокипящих и легковоспламеняющихся (например, эфир) или токсичных (например, бензол, метиленхлорид) растворителей.

Растворимость вещества (в пересчёте на 1 г вещества) выражают в следующих терминах, приведённых в табл. 1.

Таблица 1. Обозначения растворимости фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ
Термин | Примерное количество растворителя (мл), необходимое для растворения 1 г вещества
--- | ---
Очень легко растворим | до 1
Легко растворим | от 1 до 10
Растворим | от 10 до 30
Умеренно растворим | от 30 до 100
Мало растворим | от 100 до 1000
Очень мало растворим | от 1000 до 10 000
Практически нерастворим | более 10 000

Вещество считают растворившимся, если в растворе при наблюдении в проходящем свете не обнаруживаются частицы вещества. В растворе могут присутствовать следовые количества физических примесей, например, таких как волокна фильтровальной бумаги. Для веществ, образующих при растворении опалесцирующие растворы, соответствующее указание должно быть приведено в фармакопейной статье.

Термин «частично растворим» используется для характеристики смеси, содержащей растворимые и нерастворимые компоненты.

Термин «смешивается с…​» используют для характеристики жидкостей, смешивающихся с указанным растворителем во всех соотношениях.

Если указано, что вещество растворимо в жирных маслах, то имеется в виду, что оно растворимо в любом масле, относящемся к классу жирных масел.

###### Методика

Методика растворения

К навеске растёртого в тонкий порошок вещества прибавляют отмеренное количество растворителя и непрерывно встряхивают в течение 1 мин и помещают в термостат с температурой от 24,5 до 25,5 °C на 15 мин. Если вещество растворилось не полностью, повторяют встряхивание в течение 1 мин и выдерживают в термостате при температуре от 24,5 до 25,5 °C в течение 15 мин.

Для веществ с неизвестной растворимостью. В пробирку (внутренний диаметр – 14 мм или 16 мм, длина – 150 мм или 160 мм) с пробкой помещают 1,0 г растёртого вещества, прибавляют 1,0 мл растворителя и проводят растворение, как описано в методике растворения. Если вещество полностью растворилось, оно очень легко растворимо.

Если вещество растворилось не полностью, то к 100 мг растёртого вещества прибавляют 1,0 мл растворителя и проводят растворение, как описано в методике растворения. Если вещество полностью растворилось, оно легко растворимо.

Если вещество растворилось не полностью, то добавляют 2,0 мл растворителя и продолжают растворение. Если вещество полностью растворилось, оно растворимо.

Если вещество растворилось не полностью, то добавляют 7,0 мл растворителя и продолжают растворение. Если вещество полностью растворилось, оно умеренно растворимо.

Если вещество растворилось не полностью, то к 10 мг растёртого вещества прибавляют 10 мл растворителя и проводят растворение, как описано в методике растворения. Если вещество полностью растворилось, оно мало растворимо.

Если вещество растворилось не полностью, то к 10 мг растертого вещества прибавляют 100 мл растворителя и проводят растворение, как описано в методике растворения. Если вещество полностью растворилось, оно очень мало растворимо.

Если вещество не растворилось, оно практически нерастворимо в данном растворителе.

Для веществ с известной растворимостью. Испытание проводят по описанной методике определения для веществ с неизвестной растворимостью, но только для крайних значений, относящихся к указанному термину. Например, если вещество растворимо, то 100 мг растёртого вещества не должны растворяться в 1,0 мл растворителя, но должны раствориться полностью в 3,0 мл растворител

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.0006 Степень окраски жидкостей

Взамен ОФС.1.2.1.0006.15

Определение цветности или степени окраски жидкостей проводят визуально одним из методов, приведённых ниже, путём сравнения испытуемых образцов с соответствующими эталонами. Цветность является условно принятой количественной характеристикой для жидкостей, имеющих окраску.

Цвет – это восприятие или субъективная реакция наблюдателя на объективный раздражитель в виде энергии, излучаемой в видимой области спектра и охватывающей диапазон длин волн от 400 до 700 нм. Окраска двух растворов совпадает (при определённом источнике света), если их спектры поглощения и отражения идентичны и наблюдатель не замечает разницы между ними.

Ахроматизм или отсутствие окраски означает отсутствие у испытуемого раствора абсорбции в видимой области спектра.

Для визуальной оценки окраски жидкостей в зависимости от интенсивности в области коричневых, жёлтых и красных цветов используют один из двух методов, описанных в статье.

Бесцветной считается жидкость, если её окраска не отличается от воды (в случае растворов – от соответствующего растворителя) или она окрашена не более интенсивно, чем эталон В9.

Сравнение степени окраски жидкости с эталонами (В, BY, Y, GY, R)1–3 обычно проводят по методу 1; в случае использования эталонов В4–9, (BY, Y, GY, R)4–7 применяют метод 2; допустимо определение окраски жидкости инструментальными методами в соответствии с ОФС «Инструментальные методы определения цветности жидкостей».

###### Метод 1

Испытания проводят в одинаковых пробирках из бесцветного, прозрачного, нейтрального стекла с внешним диаметром около 12 мм, используя равные объёмы – 2,0 мл испытуемой жидкости и воды, или растворителя, или эталона сравнения, описанного в статье. Сравнивают окраску при рассеянном дневном свете, горизонтально (перпендикулярно оси пробирок) на матово-белом фоне.

###### Метод 2

Испытания проводят в одинаковых пробирках с плоским дном из бесцветного, прозрачного, нейтрального стекла с внутренним диаметром от 15 до 25 мм, используя равные слои высотой 40 мм испытуемой жидкости и воды, или растворителя, или эталона сравнения, описанного в статье. Сравнивают окраску при рассеянном дневном свете сверху вдоль вертикальной оси пробирок на матово-белом фоне.

###### Приготовление исходных растворов

Жёлтый раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 46,0 г (точная навеска) железа(III) хлорида, растворяют в 900 мл смеси, приготовленной из 25 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и 975 мл воды, доводят объём раствора этой же смесью до метки и перемешивают. Определяют содержание железа(III) хлорида в 1 мл раствора. Объём раствора железа(III) хлорида разбавляют этой же смесью таким образом, чтобы содержание железа(III) хлорида в 1 мл составляло 45,0 мг.

Раствор защищают от света.

Количественное определение: В коническую колбу с притёртой пробкой вместимостью 250 мл помещают 10,0 мл раствора железа(III) хлорида, прибавляют 15 мл воды, 5 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и 4 г калия йодида, закрывают пробкой, перемешивают и выдерживают в течение 15 мин в тёмном месте, затем прибавляют 100 мл воды. Титруют выделившийся йод 0,1 М раствором натрия тиосульфата, прибавляя 0,5 мл крахмала раствора 1 % в конце титрования в качестве индикатора.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 27,03 мг железа(III) хлорида FеС13∙6Н2О.

Красный раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 60,0 г (точная навеска) растёртого кобальта хлорида, растворяют в 900 мл смеси, приготовленной из 25 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и 975 мл воды, доводят объём раствора этой же смесью до метки и перемешивают. Определяют содержание кобальта хлорида в 1 мл раствора. Объём раствора кобальта хлорида разбавляют этой же смесью таким образом, чтобы содержание кобальта хлорида в 1 мл раствора составляло 59,5 мг.

Количественное определение. В коническую колбу с притёртой стеклянной пробкой вместимостью 250 мл помещают 5,0 мл раствора кобальта хлорида, прибавляют 5 мл водорода пероксида раствора разведённого и 30 мл натрия гидроксида раствора 10 %. Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 10 мин, затем охлаждают до комнатной температуры и прибавляют 60 мл серной кислоты раствора 1 М и 2 г калия йодида. Закрывают колбу и растворяют осадок, осторожно помешивая. Выделившийся йод титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата до бледно-розового окрашивания, используя в качестве индикатора 0,5 мл крахмала раствора 1 % в конце титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 23,79 мг кобальта хлорида СоС12∙6Н2О.

Голубой раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 63,0 г (точная навеска) меди(II) сульфата, растворяют в 900 мл смеси, приготовленной из 25 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и 975 мл воды, доводят объём раствора этой же смесью до метки и перемешивают. Определяют содержание меди(II) сульфата в 1 мл раствора. Объём раствора меди(II) сульфата разбавляют этой же смесью таким образом, чтобы содержание меди(II) сульфата в 1 мл раствора составляло 62,4 мг.

Количественное определение. В коническую колбу с притёртой стеклянной пробкой вместимостью 250 мл помещают 10,0 мл раствора меди(II) сульфата, прибавляют 50 мл воды, 12 мл уксусной кислоты раствора 2 М, 3 г калия йодида и перемешивают. Выделившийся йод титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата до бледно-коричневого окрашивания, используя 0,5 мл крахмала раствора 1 % в качестве индикатора в конце титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 24,97 мг меди(II) сульфата CuSO4∙5H2O.

###### Приготовление стандартных растворов

Смешивают исходные растворы железа(III) хлорида, кобальта хлорида, меди(II) сульфата с хлористоводородной кислотой 1 %, отмеривая их с помощью калиброванной пипетки или бюретки с точностью до 0,02 мл, табл. 1.

Таблица 1. Стандартные растворы
Стандартные растворы | Жёлтый исходный раствор, мл | Красный исходный раствор, мл | Голубой исходный раствор, мл | Хлористо-водородной кислоты 1 %, мл
--- | --- | --- | --- | ---
В (коричневый) | 30,0 | 30,0 | 24,0 | 16,0
ВY (коричневато-жёлтый) | 24,0 | 10,0 | 4,0 | 62,0
Y (жёлтый) | 24,0 | 6,0 | 0 | 70,0
GY (зеленовато-жёлтый) | 96,0 | 2,0 | 2,0 | 0
R (красный) | 10,0 | 20,0 | 0 | 70,0

Приготовленные исходные и стандартные растворы помещают в сухие колбы с притёртыми пробками, хранят при температуре от 17 до 23 °С и защищают от света. Срок годности исходных и стандартных растворов – 1 год.

При хранении исходных и стандартных растворов следует перед употреблением убедиться в отсутствии в них мути, осадка и хлопьев. Помутневшие растворы не используют и заменяют свежеприготовленными.

###### Приготовление эталонов

Готовят эталоны из пяти стандартных растворов путём разбавления их хлористоводородной кислотой 1 %.

Отмеряют исходные и стандартные растворы для приготовления шкал при помощи калиброванной пипетки или бюретки с точностью до 0,02 мл.

Эталоны для определения степени окраски жидкостей по методу I хранят в ампулах из бесцветного прозрачного нейтрального стекла с внешним диаметром 12 мм, в защищённом от света месте в течение 1 года.

Эталоны, используемые для определения степени окраски жидкостей по методу II, готовят из соответствующих стандартных растворов непосредственно перед использованием.

Количества компонентов для приготовления эталонов цветности – табл. 2 – 6.

Таблица 2. Эталоны коричневых оттенков (шкала В)
Эталоны шкалы В | Стандартный раствор В, мл | Хлористоводородной кислоты 1 %,мл
--- | --- | ---
В1 | 75,0 | 25,0
В2 | 50,0 | 50,0
В3 | 37,5 | 62,5
В4 | 25,0 | 75,0
В5 | 12,5 | 87,5
В6 | 5,0 | 95,0
В7 | 2,5 | 97,5
В8 | 1,5 | 98,5
В9 | 1,0 | 99,0

Таблица 3. Эталоны коричневато-жёлтых оттенков (шкала ВY)
Эталоны шкалы ВY | Стандартный раствор ВY, мл | Хлористоводородной кислоты 1 %,мл
--- | --- | ---
ВY1 | 100,0 | 0,0
ВY2 | 75,0 | 25,0
ВY3 | 50,0 | 50,0
ВY4 | 25,0 | 75,0
ВY5 | 12,5 | 87,5
ВY6 | 5,0 | 95,0
ВY7 | 2,5 | 97,5

Таблица 4. Эталоны жёлтых оттенков (шкала Y)
Эталоны шкалы Y | Стандартный раствор Y, мл | Хлористоводородной кислоты 1 %, мл
--- | --- | ---
Y1 | 100,0 | 0,0
Y2 | 75,0 | 25,0
Y3 | 50,0 | 50,0
Y4 | 25,0 | 75,0
Y5 | 12,5 | 87,5
Y6 | 5,0 | 95,0
Y7 | 2,5 | 97,5

Таблица 5. Эталоны зеленовато-жёлтых оттенков (шкала GY)
Эталоны шкалы GY | Стандартный раствор Y, мл | Хлористоводородной кислоты 1 %, мл
--- | --- | ---
GY1 | 25,0 | 75,0
GY2 | 15,0 | 85,0
GY3 | 8,5 | 91,5
GY4 | 5,0 | 95,0
GY5 | 3,0 | 97,0
GY6 | 1,5 | 98,5
GY7 | 0,75 | 99,25

Таблица 6. Эталоны красных оттенков (шкала R)
Эталоны шкалы R | Стандартный раствор R, мл | Хлористоводородной кислоты 1 %, мл
--- | --- | ---
R1 | 100,0 | 0,0
R2 | 75,0 | 25,0
R3 | 50,0 | 50,0
R4 | 37,5 | 62,5
R5 | 25,0 | 75,0
R6 | 12,5 | 87,5
R7 | 5,0 | 95,0

Степень окраски испытуемого раствора не должна превышать степень окраски соответствующего эталона. Цвет испытуемого образца должен быть максимально приближен к цвету соответствующего эталона.

При сравнении окраски испытуемого раствора с эталонами указывают номера эталона и букву шкалы. Например, окраска раствора не должна превышать эталон В7.

При необходимости используют другие эталоны, приготовленные путём смешения стандартных растворов разных цветовых шкал с точным указанием их объёмов для достижения нужной окраски, приближённой к окраске испытуемого раствора, если это предусмотрено фармакопейной статьёй.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.0007 Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей

Взамен ОФС.1.2.1.0007.15

Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей определяют путём сравнения испытуемой жидкости с растворителем или эталонами визуальным или инструментальным методом.

Визуальное испытание проводят в одинаковых пробирках с притёртой пробкой из прозрачного бесцветного и нейтрального стекла с плоским дном, имеющим внутренний диаметр от 15 мм до 25 мм. Для сравнения берут равные объёмы эталона и испытуемой жидкости (высота слоя 40 мм). Испытание проводят при рассеянном дневном освещении или при освещении электрической лампой матового стекла мощностью 40 Вт, расположенной над образцом, просматривая растворы перпендикулярно вертикальной оси пробирок на чёрном фоне через 5 мин после приготовления эталона.

Испытуемую жидкость считают прозрачной, если она по прозрачности не отличается от воды или растворителя, используемого при приготовлении испытуемой жидкости, или её опалесценция (мутность) не превышает опалесценцию (мутность) эталона I при просмотре в описанных выше условиях.

Эталонами служат взвеси из гидразина сульфата и гексаметилентетрамина.

Раствор гидразина сульфата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,50 г гидразина сульфата, растворяют в 40 мл воды, доводят объём раствора тем же растворителем до метки и перемешивают. Раствор выдерживают в течение 4–6 ч.

Раствор гексаметилентетрамина. Растворяют 3,00 г гексаметилентетрамина в 30,0 мл воды.

Исходный эталон (4000 NTU (Nephelometric Turbidity Units – нефелометрические единицы мутности)). К 25,0 мл раствора гидразина сульфата прибавляют 25,0 мл раствора гексаметилентетрамина, перемешивают и оставляют на сутки.

Исходный эталон стабилен в течение 2 месяцев при хранении в стеклянной посуде, не имеющей дефектов поверхности (взвесь не должна прилипать к стеклу), с притёртой пробкой.

Основной эталон (60 NTU). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 15,0 мл исходного эталона, доводят объём жидкости водой до метки и перемешивают.

Срок годности основного эталона – 24 ч.

Эталоны сравнения. Отмеренное количество основного эталона, указанное в табл. 1, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объём жидкости водой до метки и перемешивают.

Таблица 1. Состав эталонов сравнения
| Эталоны сравнения
--- | ---
I 3 NTU | II 6 NTU | III 18 NTU | IV 30 NTU
Основной эталон, мл | 5,0 | 10,0 | 30,0 | 50,0
Вода, мл | 95,0 | 90,0 | 70,0 | 50,0
Примечание – Перед применением исходный, основной эталон и эталоны сравнения перемешивают и встряхивают в течение 3 мин.

Эталоны сравнения I, II, III и IV используют свежеприготовленными.

Для оценки прозрачности и степени опалесценции (мутности) жидкостей допустимо использование методов спектрофотометрии (в соответствии с ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»), турбидиметрии (в соответствии с ОФС «Турбидиметрия»), нефелометрии (в соответствии с ОФС «Нефелометрия») или других, если это предусмотрено фармакопейной статьёй. В таком случае в фармакопейной статье должны быть указаны необходимые условия проведения испытания.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.0009 Оптическая микроскопия

Взамен ОФС.1.2.1.0009.15

Оптической микроскопией называют совокупность методов исследования частиц фармацевтических образцов лекарственных средств, невидимых невооруженным глазом, с помощью оптического микроскопа.

Размер частиц, которые могут быть исследованы данным методом, определяется разрешающей способностью микроскопа и обычно составляет 1 мкм и более. Используют также микроскопы с общим увеличением более 1500 крат, что позволяет характеризовать объекты размером от 0,5 мкм с разрешением отдельных структур объекта до 0,1 мкм.

###### Область применения

Оптическую микроскопию применяют:

- в фармакопейном анализе для определения размера частиц при контроле качества мягких лекарственных форм, суспензий, эмульсий, аэрозолей;

- в технологии лекарственных форм для определения степени измельчения фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ;

- для исследования кристаллической структуры фармацевтических субстанций;

- для определения характеристик (формы и размера) частиц фармацевтических субстанций, которые не являются сферическими (не имеют сферическую форму).

###### Оборудование

Оптический микроскоп имеет двухступенчатую систему увеличения, образованную объективом и окуляром. Все узлы микроскопа монтируются на массивном основании. На основании микроскопа установлен трубодержатель, в котором укреплён тубус с объективом и окуляром. Под объективом находится предметный столик, под которым расположена осветительная система (зеркало, коллектор, конденсор).

Для освещения объекта наблюдения может быть использован как естественный свет, так и специальные источники света (встроенные или внешние осветители).

Микроскоп может быть снабжён дополнительными приспособлениями (фазово-контрастными устройствами, конденсорами тёмного поля, поляризаторами, анализаторами и др.) и, в зависимости от выбранного метода исследования, может быть светлопольным, тёмнопольным, фазово-контрастным, поляризационным и др.

Испытуемый образец помещают на предметный столик. Свет от источника света, проходя через осветительную систему, испытуемый образец (далее – образец) и объектив, попадает в окуляр или установленную вместо него систему регистрации, фото- или видеокамеру. Через окуляр осуществляют визуальное исследование образца, а соединённая с компьютером цифровая фото- или видеокамера позволяет регистрировать изображения образца, после чего их можно обрабатывать по специальным программам в полу- или полностью автоматическом режиме.

###### Условия калибровки и измерения

Увеличение микроскопа (произведение увеличений объектива, окуляра и дополнительных приставок) должно быть достаточным для адекватного описания и определения размеров самых мелких частиц испытуемого образца.

Для каждого диапазона увеличения следует выбирать максимальную числовую апертуру объектива. Для контроля контрастности и детализации изображения окрашенных образцов необходимо использовать цветные фильтры с относительно узким спектром пропускания. Цветные фильтры могут применяться и для ахроматических (бесцветных) образцов.

Настройку всех элементов оптической системы и фокусировку проводят в соответствии с прилагаемой к микроскопу инструкцией. Калибровку проводит сертифицированная специализированная организация.

###### Методика

Испытуемые образцы исследуют с использованием или без использования иммерсионной жидкости. Природа применяемой иммерсионной жидкости в значительной степени определяется физическими свойствами испытуемого образца, который не должен в ней растворяться. В качестве иммерсионной жидкости при исследовании фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ, если нет других указаний в фармакопейной статье, используют минеральные масла: вазелиновое масло, иммерсионное масло для микроскопии классическое или профессиональное, водный раствор глицерина и др.

Частицы порошка должны находиться в одной плоскости и должны быть диспергированы так, чтобы были видны отдельные частицы (недопустимо слипание частиц).

При приготовлении образца для микроскопии (в том числе, при диспергировании в иммерсионной жидкости) должны быть сохранены первоначальный размер частиц и их распределение по размерам, свойственные испытуемому образцу.

Лекарственные формы анализируют без разведения или разводят, как указано в фармакопейной статье.

При исследовании порошков от 5 мг до 100 мг порошка суспендируют в подходящем объёме, например, 10 мл иммерсионной жидкости, добавляя при необходимости смачивающий агент (поверхностно-активные вещества).

На предметное стекло в счётное поле микроскопа помещают 1–2 капли полученной гомогенной суспензии, содержащей не менее 10 мкг вещества.

Предел размера частиц и допустимое количество частиц, превышающее этот предел, для каждой фармацевтической субстанции указан в фармакопейной статье или определяется в зависимости от задач проводимых испытаний.

Анализ лекарственных форм (по показателю «Размер частиц») проводят, как указано в соответствующей фармакопейной статье.

Определение кристаллического состояния вещества. Если не указано иное, испытуемый образец в минеральном масле помещают на предметное стекло и исследуют при помощи поляризационного микроскопа: при вращении предметного столика частицы проявляют двойное лучепреломление (демонстрируют интерференционную окраску) и положение экстинкции (поглощение и рассеяние света).

Фотографирование объекта. При необходимости фотографирования объекта используют цифровую фото- или видеокамеру, соединённую с компьютером с установленным программным обеспечением.

Испытуемый образец нужно чётко сфокусировать на плоскости фотоэмульсии; затем определить фактическое увеличение с помощью калиброванного объект – микрометра, используя фотопленку с достаточной светосилой, разрешающей способностью и контрастностью; экспозиция и обработка должны быть одинаковы как для фотографий испытуемого образца, так и для определения увеличения.

На видимый размер фотографии влияют процессы экспонирования, проявления и печати, разрешающая способность микроскопа.

###### Характеристика формы частиц

На рис. 1 представлены наиболее часто встречающиеся формы частиц.

Рисунок 1. Формы частиц: 1 – равносторонние: частицы с одинаковой длиной, шириной и толщиной, включая кубические и сферические частицы; 2 – игольчатые: тонкие, похожие на иглу частицы, или сходные с ней по соотношению длины и толщины; 3 – колоннообразные: длинные, тонкие частицы с шириной и толщиной больше, чем игольчатые; 4 – чешуйчатые: тонкие, плоские с одинаковой шириной и длиной; 5 – пластинчатые: плоские, одинаковые по длине и ширине, но с большей толщиной, чем чешуйчатые; 6 – планкообразные: крупные, тонкие, пластинчатые частицы.

Частицы могут быть иной, неопределённой формы.

###### Характеристика размера частиц

Способ определения размера частицы зависит от её формы. Для сферических частиц размер определяется диаметром. Размер частиц, представленных на рис. 1, обычно определяют по значению максимальной длины. На рис. 2 представлены размеры, обычно используемые для характеристики частиц неправильной формы.

Рисунок 2. Способы определения размеров частиц неправильной формы: 1 – Диаметр Фере – расстояние между параллельными линиями, касательными к случайно ориентированной частице и перпендикулярными к шкале окуляра; 2 –Диаметр Мартина – длина хорды, которая делит площадь проекции случайно ориентированной частицы на две равные части; 3 – Эквивалентный диаметр – диаметр окружности, площадь которой равна площади проекции частицы; 4 –Максимальный размер по горизонтали; 5 – Длина – максимальный размер частицы, ориентированной параллельно шкале окуляра, от одного её конца до другого; 6 – Ширина – максимальный размер частицы, измеренный под прямым углом к длине.

Под единичной частицей, как правило, подразумевают мельчайшее образование. Частица может быть жидкой или вязкой каплей, моно- или поликристаллической, аморфной или агломератом; частицы могут быть ассоциированными.

По степени ассоциации частицы могут быть описаны следующими терминами:

- ламеллары – скученные пластинки;

- агрегаты – масса слипшихся частиц;

- агломераты – сплавленные или сцементированные частицы;

- конгломераты – смесь двух или более типов частиц;

- сферолиты – сферический кластер тонких игольчатых кристаллов;

- друзы – частицы, покрытые очень мелкими частицами.

Поверхность частиц может быть описана следующим образом:

- гладкая – свободная от неровностей, шероховатости или налипаний;

- шероховатая – неровная, негладкая;

- ломкая – частично расщеплённая, разрушенная, с трещинами;

- пористая – имеющая отверстия или ходы;

- изрытая – с маленькими выемками.

Частицы могут быть описаны также:

- по форме краёв – угловатые, зазубренные, гладкие, острые, ломкие;

- по оптическим свойствам – окрашенные, прозрачные, полупрозрачные, непрозрачные;

- по наличию дефектов – без включений, с включениями.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.0010 Потеря в массе при высушивании

Взамен ОФС.1.2.1.0010.15

Под потерей в массе при высушивании подразумевают уменьшение массы испытуемого образца за счёт испарения гигроскопической влаги и летучих веществ, при его высушивании до постоянной массы или в течение времени, указанного в фармакопейной статье.

Определение потери в массе при высушивании проводят одним из приведённых ниже способов или иными методами, указанными в фармакопейной статье (например, с использованием анализатора влажности – инфракрасного, галогенового и т.д.). Результат выражают в виде массовой доли в процентах.

###### Методика определения потери в массе при высушивании в лекарственных средствах (за исключением иммунобиологических лекарственных препаратов)

Точную навеску испытуемого образца, указанную в фармакопейной статье, помещают в предварительно высушенный до постоянной массы в условиях проведения испытания и взвешенный бюкс. Пробу сушат в бюксе с открытой крышкой до постоянной массы или в течение времени, указанного в фармакопейной статье, одним из следующих способов.

Способ 1. Испытуемый образец высушивают в сушильном шкафу, проверку пригодности которого проводят в соответствии с установленными процедурами системы качества, например, с использованием подходящих сертифицированных стандартных образцов. Высушивание проводят в течение 2 ч при температуре 105 °С, если не указано иначе. Затем открытый бюкс вместе с крышкой помещают в эксикатор для охлаждения на 50 мин, после чего закрывают крышкой и взвешивают. Последующие взвешивания проводят после каждого часа дальнейшего высушивания до достижения постоянной массы.

Способ 2. Высушивание проводят над фосфора(V) оксидом одним из следующих методов:

- при атмосферном давлении и комнатной температуре в эксикаторе;

- в вакууме при комнатной температуре или температуре, указанной в фармакопейной статье, и давлении от 1,5 до 2,5 кПа;

- в «глубоком вакууме»: при давлении не более 0,1 кПа при температуре, указанной в фармакопейной статье.

Возможно использование иных условий, указанных в фармакопейной статье.

Способ 3. Испытуемый образец высушивают в течение 2 ч в вакуумном сушильном шкафу при давлении от 1,5 до 2,5 кПа в пределах температурного интервала, указанного в фармакопейной статье. Затем давление в шкафу уравнивают с атмосферным, открытый бюкс вместе с крышкой помещают в эксикатор для охлаждения на 50 мин, после чего закрывают крышкой и взвешивают. Последующие взвешивания проводят после каждого часа дальнейшего высушивания до достижения постоянной массы. При отсутствии других указаний испытуемый образец сушат до постоянной массы при остаточном давлении 2,66 кПа (20 мм рт. ст.).

###### Методика определения потери в массе при высушивании в иммунобиологических лекарственных препаратах

Для проведения анализа используют бюксы высотой 35 мм и диаметром 25 мм. Около 0,15–0,20 г (точная навеска) испытуемого образца помещают в предварительно высушенный до постоянной массы в условиях проведения испытания и взвешенный бюкс. Испытуемый образец высушивают в бюксе с открытой крышкой в вакуумном сушильном шкафу при температуре 60±1 °С и остаточном давлении, не превышающем 0,667 кПа (5 мм рт. ст.), в течение 3 ч. Открытый бюкс вместе с крышкой помещают в эксикатор для охлаждения на 40 мин, после чего закрывают крышкой и взвешивают.

Потерю в массе при высушивании в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где m1 – масса бюкса, доведённого до постоянной массы, г;
m2 - масса бюкса с испытуемым образцом до высушивания, г;
m3 - масса бюкса с испытуемым образцом после высушивания, г.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.0011 Температура плавления

Взамен ОФС.1.2.1.0011.18

Температурой плавления называют температуру, при которой происходит переход вещества из твёрдого состояния в жидкое.

Для определения температуры плавления в зависимости от физических свойств вещества применяют капиллярный метод (метод 1), открытый капиллярный метод (метод 2), метод мгновенного плавления (метод 3) или метод каплепадения (метод 4). Для твёрдых веществ, легко превращаемых в порошок, применяют методы 1 и 3, для аморфных веществ, не растирающихся в порошок и плавящихся ниже температуры кипения воды (таких как жиры, воск, парафин, вазелин, смолы) – методы 2 и 4.

Для веществ, неустойчивых при нагревании, определяют температуру разложения. Температурой разложения называют температуру, при которой происходит резкое изменение физического состояния или окраски вещества (вспенивание, побурение).

Для определения температуры плавления используют описанные ниже приборы и методы. Для калибровки приборов используют подходящие для этих целей стандартные вещества, имеющие температуру плавления, близкую к температуре плавления испытуемого вещества.

###### 1. Капиллярный метод

Температура плавления, определённая капиллярным методом, представляет собой температуру, при которой последняя твёрдая частичка уплотнённого столбика вещества в капилляре переходит в жидкую фазу.

Визуальная детекция

Прибор 1. Составными частями прибора являются:

- стеклянный сосуд с жидкостью (например, водой, вазелиновым или силиконовым маслом), используемый в качестве бани и оснащённый подходящим устройством для нагрева. Жидкость в бане следует выбирать в зависимости от требуемой температуры;

- устройство для перемешивания, обеспечивающее однородность температуры внутри бани;

- подходящий термометр с ценой деления не более 0,5 °С; разность между верхним и нижним делениями термометра в области измеряемой температуры должна составлять не более 100 °С;

- запаянные с одного конца капилляры из нейтрального прочного стекла диаметром от 0,9 до 1,1 мм, толщиной стенок от 0,10 до 0,15 мм и длиной 10 см;

- увеличительное стекло.

Прибор 2. Прибор для определения температуры плавления с диапазоном измерений в пределах от 20 до 360 °С с электрическим обогревом типа ПТП или типа ПТП-М (рис. 1) с диапазоном измерений в пределах от 20 до 340 °С.

Составными частями прибора являются:

- основание со щитком управления и номограммой;

- стеклянный блок-нагреватель, обогрев которого осуществляется константановой проволокой, навитой бифилярно;

- оптическое приспособление;

- приспособление для установки термометра;

- приспособление для установки капилляров;

- термометр укороченный с ценой деления 0,5 °С;

- источник нагрева (электрический обогрев);

- капилляры длиной 20 см для прибора типа ПТП; капилляры длиной 8 см для прибора типа ПТП-М.

Допускается применение других приборов, использующих капиллярный метод, если точность и правильность измерений будут не хуже, чем в случае применения приборов, описанных выше.

Рисунок 1. Прибор ПТП-М для определения температуры плавления

Методика. Если нет других указаний в фармакопейной статье, тонкоизмельчённое в порошок вещество сушат одним из трёх способов:

- при температуре от 100 до 105 °С в течение 2 ч;

- в эксикаторе над серной кислотой в течение 24 ч;

- в вакууме над безводным силикагелем в течение 24 ч.

Достаточное количество вещества помещают в капилляр до получения уплотнённого столбика высотой около 5 мм. Необходимое уплотнение вещества при заполнении капилляра можно получить, если его несколько раз бросить запаянным концом вниз в стеклянную трубку длиной 0,5–1,0 м, поставленную вертикально на стекло. Капилляр с веществом хранят до начала определения в эксикаторе.

Помещают капилляр в прибор и повышают температуру капилляра. При температуре приблизительно на 10 °С ниже предполагаемой температуры плавления регулируют нагрев прибора так, чтобы последующая скорость подъёма температуры составляла около 1 °С в мин. Когда температура достигнет значения на 5−10 °С ниже предполагаемой температуры плавления, капилляр с веществом прикрепляют к термометру так, чтобы его запаянный конец находился на уровне центра шарика термометра, и помещают в прибор.

Продолжают нагревание со скоростью:

- для устойчивых при нагревании веществ при определении температуры плавления ниже 100 °С – от 0,5 до 1,0 °С в мин;

- при определении температуры плавления от 100 до 150 °С – от 1,0 до 1,5 °С в мин;

- при определении температуры плавления выше 150 °С – от 1,5 до 2,0 °С в мин;

- для неустойчивых при нагревании веществ – от 2,5 до 3,5 °С в 1 мин.

Отмечают температуру, при которой последняя твёрдая частичка перейдёт в жидкую фазу.

Проводят не менее двух определений. За температуру плавления принимают среднее арифметическое значение определений, проведённых в одинаковых условиях и отличающихся друг от друга не более чем на 1 °С.

Инструментальная детекция

В данной модификации метода измерение температуры плавления с помощью капилляра проводится с использованием фотодатчика.

Прибор. Существуют два способа автоматической регистрации:

- способ А: измерение пропускания света через капиллярную трубку, заполненную образцом;

- способ Б: измерение отражения света от образца в капиллярной трубке.

В обоих способах капиллярную трубку помещают в полость металлического блока с электрическим нагревом, контролируемым с помощью температурного датчика, размещённого в другой полости металлического блока. Нагревательный элемент в блоке должен поддерживать заданную температуру с точностью ±0,1 °С, а также обеспечивать медленный и постоянный подъём температуры со скоростью 1 °С/мин после начального изотермического периода.

В способе А луч света проходит через горизонтальную полость в нагревательном блоке и пересекает капиллярную трубку. Фотодатчик регистрирует луч в конце цилиндрического отверстия за капиллярной трубкой. В способе Б луч света освещает капиллярную трубку спереди, а фотодатчик записывает отражённый сигнал.

Температуру, при которой сигнал фотодатчика впервые меняет своё начальное значение, считают началом плавления, а температуру, при которой сигнал датчика достигает своего конечного значения – концом плавления, или температурой плавления.

Используют стеклянные капиллярные трубки, открытые с одного конца, со следующими параметрами: длина около 100 мм, наружный диаметр от 1,3 до 1,5 мм, внутренний диаметр от 0,8 до 1,3 мм, толщина стенки от 0,1 до 0,3 мм.

Некоторые модели приборов позволяют дополнительно проводить визуальное определение точки плавления, а также определять температуру плавления более чем на одной капиллярной трубке.

Методика. Вещество, предварительно обработанное согласно указаниям в фармакопейной статье, помещают в капиллярную трубку в количестве, достаточном для формирования плотного столбика высотой около 4 мм в каждой капиллярной трубке, и выдерживают в течение определённого времени при температуре, указанной в фармакопейной статье.

Далее поступают в соответствии с инструкцией производителя прибора или следующим образом. Нагревают нагревательный блок до температуры примерно на 5 °С ниже ожидаемой температуры плавления. Помещают капиллярную трубку в нагревательный блок запаянным концом вниз. Включают температурную программу.

Когда вещество начинает плавиться, изменяется его внешний вид в капиллярной трубке. Температура нагревательного блока записывается одновременно с изменением сигнала фотодатчика. Вследствие этого автоматически регистрируется температура плавления.

Проводят испытание ещё для двух других образцов и рассчитывают среднее значение трёх результатов.

Рисунок 2. Способ А – пропускание: А – стеклянная капиллярная трубка; Б – испытуемый образец; В – фотодатчик; Г – температурный датчик; Д – нагревательный блок; Е – источник излучения.
Рисунок 3. Способ Б – отражение: А – стеклянная капиллярная трубка; Б – испытуемый образец; В – датчик; Г – температурный датчик; Д – нагревательный блок; Е – источник излучения; Ж – прозрачная пластинка.

Калибровка. Температурная шкала прибора подлежит периодической поверке путём измерения температуры плавления сертифицированных стандартных образцов. Для этого используют капиллярные трубки таких же размеров, что и при измерении температуры плавления испытуемых образцов (см. подраздел «Прибор»).

Готовят три капиллярные трубки для каждого из не менее двух сертифицированных стандартных образцов. Проводят испытание и рассчитывают среднее значение трёх определений для каждого стандартного образца.

Пригодность системы. В дополнение к калибровке перед измерениями проводят верификацию с использованием подходящего сертифицированного стандартного образца с температурой плавления, близкой к предполагаемому значению температуры плавления вещества (табл. 1).

Таблица 1. Стандартные температуры плавления
Стандартный образец | CAS | Температура плавления
--- | --- | ---
Азобензол | 103-33-3 | 68,9 °С
Ванилин | 121-33-5 | 83,2 °С
Бензил | 134-81-6 | 95,9 °С
Ацетанилид | 103-84-4 | 115,7 °С
Фенацетин | 62-44-2 | 136,0 °С
Бензанилид | 93-98-1 | 164,7 °С
Сульфаниламид | 63-74-1 | 165,9 °С
Сульфапиридин | 144-83-2 | 192,7 °С
Цианогуанидин | 461-58-5 | 210,2 °С
Сахарин | 81-07-2 | 230,0 °С
Кофеин | 58-08-2 | 237,2 °С
Фенолфталеин | 77-09-8 | 263,1 °С

Готовят три капиллярные трубки, проводят испытание и рассчитывают среднее значение трёх определений. Среднее значение должно находиться в пределах допустимых отклонений, указанных в сертификате, прилагаемом к стандартному образцу.

Допустимо использование и других сертифицированных стандартных образцов, не включённых в таблицу.

###### 2. Открытый капиллярный метод

Используют стеклянный капилляр, открытый с обоих концов, длиной около 80 мм, наружным диаметром от 1,40 до 1,50 мм и внутренним диаметром от 1,0 до 1,2 мм.

Вещество, предварительно подготовленное, как указано в фармакопейной статье, помещают в каждый из 5 капилляров в количестве, достаточном для формирования в каждом капилляре столбика высотой около 10 мм. Капилляры оставляют на определённое время при температуре, указанной в фармакопейной статье.

Прикрепляют один из капилляров к термометру с ценой деления 0,2 °С таким образом, чтобы вещество находилось около шарика термометра.

Термометр с прикреплённым капилляром помещают в стакан таким образом, чтобы расстояние между дном стакана и нижней частью шарика термометра составляло 1 см. Стакан наполняют водой до высоты слоя 5 см. Повышают температуру воды со скоростью 1 °С в мин.

За температуру плавления принимают температуру, при которой вещество начинает подниматься по капилляру. В тех случаях, когда столбик вещества не поднимается в капилляре, за температуру плавления принимают температуру, при которой столбик вещества в капилляре становится прозрачным.

Повторяют эту операцию с 4 другими капиллярами и рассчитывают результат как среднее арифметическое 5 значений. Расхождение между всеми значениями не должно превышать 1 °С.

###### 3. Метод мгновенного плавления

Прибор. Прибор состоит из металлического блока, изготовленного из материала, обладающего высокой теплопроводностью и не взаимодействующего с испытуемым веществом, например, из латуни. Верхняя поверхность блока должна быть плоской и тщательно отполированной. Блок равномерно нагревают по всей массе газовой горелкой с микрорегулировкой или электрическим нагревателем с тонкой регулировкой. Блок имеет достаточно широкую цилиндрическую полость для размещения термометра, столбик ртути которого должен находиться в одном и том же положении, как при калибровке, так и при определении температуры плавления испытуемого вещества. Цилиндрическая полость размещена параллельно отполированной верхней поверхности блока на расстоянии около 3 мм от неё.

Методика. Блок быстро нагревают до температуры, которая на 10 °C ниже предполагаемой температуры плавления, и затем устанавливают скорость нагрева около 1 °C в мин. Несколько частичек тонкоизмельчённого в порошок вещества, высушенного в вакууме над безводным силикагелем в течение 24 ч, бросают через равные промежутки времени на поверхность блока в непосредственной близости от шарика термометра, очищая поверхность после каждого испытания. Записывают температуру t1, при которой вещество плавится мгновенно при соприкосновении с металлом. Останавливают нагрев. Во время охлаждения через равные промежутки времени бросают несколько частичек вещества на поверхность блока, очищая её после каждого испытания. Записывают температуру t2, при которой вещество прекращает мгновенно плавиться при соприкосновении с металлом.

Температуру плавления рассчитывают как среднее арифметическое значений температуры t1 и t2.

###### 4. Метод каплепадения

В данном методе определяют температуру, при которой в условиях, приведённых ниже, первая капля расплавленного испытуемого вещества падает из чашечки.

Прибор. Прибор (рис. 4) состоит из двух металлических гильз (А и Б), соединённых посредством резьбы. Гильза (А) прикреплена к ртутному термометру. В нижней части гильзы (Б) с помощью двух уплотнителей (Г) свободно закреплена металлическая чашечка (Д). Точное положение чашечки определяется фиксаторами (Е) длиной 2 мм, которые используются также для центровки термометра. Отверстие (В) в стенке гильзы (Б) предназначено для выравнивания давления. Отводящая поверхность чашечки должна быть плоской, а края выходного отверстия расположены под прямым углом к поверхности. Нижняя часть ртутного термометра имеет форму и размер, как показано на рис. 4. Термометр градуирован от 0 до 110 °С и расстояние на шкале в 1 мм соответствует разности температур в 1 °С. Ртутный шарик термометра имеет диаметр от 3,3 до 3,7 мм и высоту от 5,7 до 6,3 мм.

Прибор устанавливают по оси пробирки длиной около 200 мм и наружным диаметром около 40 мм.

Рисунок 4. Прибор для определения температуры каплепадения. Размеры указаны в миллиметрах.

Прибор прикрепляют к пробирке с помощью пробки, в которую вставлен термометр и которая имеет боковую прорезь. Отверстие чашечки должно находиться на расстоянии около 15 мм от дна пробирки. Всё устройство погружают в стакан вместимостью около 1 л, заполненный водой. Дно пробирки должно находиться на расстоянии около 25 мм от дна стакана. Уровень воды должен достигать верхней части гильзы (А). Для равномерного распределения температуры в стакане используют мешалку.

Методика. Заполняют чашечку до краёв нерасплавленным испытуемым веществом, если нет других указаний в фармакопейной статье. Избыток вещества удаляют с обеих сторон шпателем. После соединения гильз (А) и (Б) проталкивают чашечку внутрь на её место в гильзе (Б) до упора. Удаляют шпателем вещество, выдавленное термометром. Прибор помещают на водяную баню, как описано выше. Водяную баню нагревают до температуры примерно на 10 °С ниже предполагаемой температуры плавления и устанавливают скорость нагрева около 1 °С в минуту. Отмечают температуру падения первой капли.

Проводят не менее трёх определений, каждый раз с новым образцом вещества, и рассчитывают среднее арифметическое полученных значений. Разность между показаниями не должна превышать 3 °С.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.0012 Температура затвердевания

Взамен ОФС.1.2.1.0012.15

Температурой затвердевания называют температуру, при которой вещество переходит из жидкого состояния в твёрдое при охлаждении. Для определения температуры затвердевания используют две методики.

###### Методика 1

Прибор. Прибор (рис. 1) состоит из толстостенной пробирки с внутренним диаметром около 25 мм и длиной около 150 мм, помещённой внутрь другой пробирки диаметром около 40 мм и длиной около 160 мм. Внутренняя пробирка закрыта пробкой, снабжённой термометром длиной около 175 мм с ценой деления 0,2 °С, который закреплён таким образом, чтобы ртутный резервуар или температурный датчик находился на расстоянии около 15 мм от дна пробирки. Во внутренней пробирке имеется отверстие, через которое проходит вал мешалки, изготовленный из стеклянного стержня или другого подходящего материала, согнутый на конце под прямым углом в виде петли, внешний диаметр которой около 18 мм. Внутреннюю пробирку вместе с внешней пробиркой размещают в центре стакана вместимостью 1 л, содержащего подходящую охлаждающую жидкость, уровень которой находится на расстоянии около 20 мм от края стакана. Охлаждающая баня также должна быть снабжена термометром.

Рисунок 1. Прибор для определения температуры затвердевания. Размеры указаны в миллиметрах.

Методика. Достаточное количество испытуемого вещества (около 10 г), расплавленного при температуре, превышающей не более чем на 20 °С ожидаемую температуру затвердевания, помещают в сухую внутреннюю пробирку прибора. Укрепляют термометр таким образом, чтобы ртутный резервуар или температурный датчик находился посередине слоя испытуемого вещества. Затем внутреннюю пробирку помещают во внешнюю пробирку и, при быстром охлаждении, определяют приблизительную температуру затвердевания. После этого внешнюю пробирку вместе с внутренней помещают на водяную баню с температурой на 5 °С выше приблизительно определённой температуры затвердевания до полного расплавления испытуемого вещества. Затем заполняют стакан водой или насыщенным раствором натрия хлорида с температурой на 5 °С ниже ожидаемой температуры затвердевания. Внешнюю пробирку вместе с внутренней помещают в стакан. При постоянном перемешивании испытуемого вещества отмечают температуру каждые 30 с. Вначале происходит постепенное понижение температуры, затем, при появлении твёрдой фазы, она остаётся некоторое время постоянной или повышается перед тем, как стать постоянной (в этот момент прекращают перемешивание), а затем снова падает. Отмечают наиболее высокую температуру, остающуюся короткое время постоянной при переходе вещества из жидкого состояния в твёрдое. Эту температуру и принимают за температуру затвердевания.

Если вещество остаётся жидким при ожидаемой температуре затвердевания, его охлаждают на 1–2 °С ниже ожидаемой температуры затвердевания и вызывают затвердевание введением малых количеств (нескольких кристаллов) испытуемого вещества или потиранием стенок внутренней пробирки термометром.

Условия проведения испытания должны быть указаны в фармакопейной статье или нормативной документации.

###### Методика 2

Данная методика предназначена для твёрдых веществ, имеющих температуру затвердевания в диапазоне от +30 до +100 °С (парафины и высокоплавкие кристаллические вещества).

Прибор. Прибор (прибор Жукова) представляет собой дьюаровский сосуд из прозрачного стекла (рис. 2). Снабжён пробкой, в которой укреплён термометр с диапазоном температур от +30 до +100 °С и ценой деления 0,2 °С.

Рисунок 2. Прибор Жукова. Размеры указаны в миллиметрах.

Методика. Испытуемое вещество, расплавленное на водяной бане или в термостате при температуре на 15–20 °С выше ожидаемой температуры затвердевания, тщательно перемешивают и заливают в подогретый прибор (рис. 2) на 3/4 его высоты. Температура испытуемого вещества после помещения в прибор должна превышать ожидаемую температуру затвердевания не менее чем на 8 °С. В отверстие прибора вставляют термометр по оси прибора так, чтобы ртутный резервуар или температурный датчик находился приблизительно на половине высоты слоя расплавленного вещества. Оставляют прибор до достижения температуры на 3–4 °С выше температуры затвердевания. По достижении этой температуры записывают температуру через каждую минуту. Сначала температура понижается быстро. Затем понижение замедляется, и температура в течение нескольких минут сохраняется постоянной или снижается очень медленно. После этого температура снова быстро понижается. За температуру затвердевания вещества принимают то показание термометра, при котором температура оставалась постоянной или снижалась наиболее медленно.

Рассчитывают среднее арифметическое трёх определений и округляют результат до 0,1 °С. Расхождение между определениями не должно превышать 0,2 °С.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.0013 Температурные пределы перегонки и точка кипения

Взамен ОФС.1.2.1.0013.15

Температурными пределами перегонки называют интервал между начальной и конечной температурой кипения при нормальном давлении 101,3 кПа (760 мм рт. ст.).

Начальной температурой кипения считают температуру, при которой в приёмник в процессе перегонки попали первые 5 капель жидкости. Конечной температурой кипения считают температуру, при которой в приёмник перешло 95 % жидкости.

Точкой кипения называют скорректированную температуру, при которой давление пара жидкости достигает 101,3 кПа.

Определение температурных пределов перегонки

Прибор. Прибор (рис. 1) состоит из колбы Вюрца (А), пришлифованного к её боковому отводу нисходящего прямого холодильника (B) и пришлифованного к концу холодильника аллонжа ©. Термометр помещают в горло перегонной колбы так, чтобы конец ртутного шарика находился на 5 мм ниже нижнего края отводной трубки перегонной колбы. Применяют укороченный термометр с верхним значением шкалы около 50 °С и ценой деления 0,2 °С.

Во время испытания колбу защищают от охлаждения подходящим экраном.

Рисунок 1. Прибор для определения температурных пределов перегонки: А − колба Вюрца; B – прямой холодильник; C – аллонж. Размеры указаны в миллиметрах.

Для жидкостей, кипящих при температуре ниже 150 °С, применяют водяное охлаждение; для жидкостей, кипящих при температуре выше 150 °С, достаточно воздушного охлаждения.

Методика. В колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мл исследуемой жидкости и несколько тонких запаянных с одного конца капилляров или кусочков пористого керамического материала. Для отгона используют приёмник – цилиндр вместимостью 50 мл с ценой деления 1 мл. Приёмник устанавливают так, чтобы аллонж входил в него на 2,5 см. Начинают нагревание колбы c помощью газовой горелки (чаще всего горелки Бунзена, с использованием защитного экрана) или электрической плитки. Колбу нагревают таким образом, чтобы быстро достичь кипения, и отмечают начальную температуру, при которой в цилиндр поступает первая капля отгона. Продолжают нагревание таким образом, чтобы в 1 мин перегонялось 2–3 мл жидкости. Отмечают конечную температуру, при которой отогнана вся жидкость или требуемый её объём.

Наблюдаемую температуру перегонки (t1) приводят к нормальному давлению (101,3 кПа или 760 мм рт. ст.) по формуле:

где t2 – исправленная температура, °С;
t1 – наблюдаемая температура, °С;
K – поправочный коэффициент; значения K зависят от температуры кипения перегоняемой жидкости и приведены в таблице;
P – нормальное барометрическое давление, кПа или мм рт. ст.;
P1 – барометрическое давление во время испытания, наблюдаемое по ртутному барометру или анероиду, кПа или мм рт. ст., с учётом поправок, указанных в поверочном свидетельстве и в инструкции по эксплуатации.

Таблица. Поправочный коэффициент для приведения к нормальному значению
Наблюдаемая температура кипения, °С | Поправочный коэффициент K при давлении, выраженном в
--- | ---
мм рт. ст. | кПа
до 100 | 0,040 | 0,30
100–140 | 0,045 | 0,34
141–190 | 0,050 | 0,38
191–240 | 0,055 | 0,41
выше 240 | 0,060 | 0,45

Допустимое расхождение между результатами двух параллельных определений температуры кипения не должно превышать 1 °С.

Примечания

1. Если во время испытания давление измеряют ртутным барометром, то после внесения поправок, указанных в поверочном свидетельстве и в инструкции по эксплуатации, давление приводят к показаниям при температуре 0 °С. Для этого из показаний барометра вычитают:

   - 0,27 кПа или 2 мм рт. ст. при температуре окружающей среды 13–20 °С;

   - 0,4 кПа или 3 мм рт. ст. при температуре окружающей среды 21–28 °С;

   - 0,53 кПа или 4 мм рт. ст. при температуре окружающей среды 29–35 °С.

2. Перегонку эфира следует проводить на предварительно нагретой водяной бане при температуре от 54 до 58 °С.

###### Определение точки кипения

Испытание проводят в приборе для определения температурных пределов перегонки. Термометр помещают в горло колбы так, чтобы нижний конец ртутного шарика находился на уровне нижнего конца горла колбы. Саму колбу располагают на пластине из изолирующего материала со сквозным отверстием диаметром 35 мм. Применяют укороченный термометр с верхним значением шкалы около 50 °С и ценой деления 0,2 °С.

В колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мл испытуемой жидкости и несколько кусочков пористого керамического материала, быстро нагревают до кипения. Отмечают температуру, при которой жидкость начинает поступать по отводной трубке колбы в холодильник, и приводят отмеченную температуру кипения к нормальному давлению по формуле (1).

Микрометод определения температуры кипения обычно используется для идентификации веществ.

В тонкостенную стеклянную запаянную с одного конца трубочку диаметром 3 мм и длиной около 8 см помещают несколько капель исследуемой жидкости, чтобы образовался слой высотой от 1,0 до 1,5 см. В трубочку вставляют открытым концом вниз запаянный с одного конца капилляр длиной около 10 см и диаметром около 1 мм. Трубочку прикрепляют с помощью резинового колечка или тонкой проволоки к укороченному термометру так, чтобы нижний конец трубочки находился на уровне середины ртутного шарика, и помещают термометр в прибор для определения температуры плавления. Нагревание ведут таким образом, чтобы температура поднималась на 2−3 °С в минуту до того момента, когда из капилляра вместо отдельных воздушных пузырьков начнёт выделяться непрерывная цепочка пузырьков пара, после чего прекращают или уменьшают нагрев.

Момент, когда прекратится выделение пузырьков и жидкость начнёт подниматься в капилляр, принимают за температуру кипения. Полученную температуру кипения приводят к нормальному давлению по формуле (1).

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.0014 Плотность

Взамен ОФС.1.2.1.0014.15

Плотностью называют массу единицы объёма вещества: Если массу m измеряют в граммах, а объём V − в кубических сантиметрах, то плотность представляет собой массу 1 см3 вещества: ρ, г/см3. Плотность вещества ρ20 представляет собой отношение массы вещества к его объёму при температуре 20 °С.

Относительная плотность вещества d2020 представляет собой отношение массы определённого объёма вещества к массе равного объёма воды при температуре 20 °С. Относительная плотность вещества d204 представляет собой отношение массы определённого объёма вещества при температуре 20 °С к массе равного объёма воды при температуре 4 °С.

Формулы пересчёта между относительной плотностью (d) и плотностью (ρ), выраженной в кг/м3, следующие:

Определение плотности проводят с помощью пикнометра, ареометра или плотномера.

###### Метод 1

Применяют для определения плотности жидкостей с точностью до 0,001 г/cм3 с помощью пикнометра.

Чистый сухой пикнометр взвешивают с точностью до 0,2 мг, заполняют с помощью маленькой воронки водой немного выше метки, закрывают пробкой и выдерживают в течение 20 мин в термостате при температуре 20oС. При такой температуре уровень воды в пикнометре доводят до метки, отбирая излишек воды при помощи пипетки или свёрнутой в трубку полоски фильтровальной бумаги. Пикнометр снова закрывают пробкой и выдерживают в термостате ещё 10 мин. Затем пикнометр вынимают из термостата, проверяют положение мениска воды, который должен находиться на уровне метки. Вытирают фильтровальной бумагой внутреннюю поверхность горлышка и весь пикнометр снаружи, закрывают пробкой. Выдерживают пикнометр под стеклом аналитических весов в течение 10 мин и взвешивают с той же точностью.

Пикнометр освобождают от воды, высушивают, ополаскивая последовательно спиртом 96 % и эфиром (сушить пикнометр нагреванием не допускается), удаляют остатки эфира продуванием воздуха, заполняют пикнометр испытуемой жидкостью и проводят те же операции, что и с водой.

Плотность ρ20 (г/см3) вычисляют по формуле:

где m – масса пустого пикнометра, г;
m1 - масса пикнометра с водой, г;
m2 - масса пикнометра с испытуемой жидкостью, г;
0,99703 - значение плотности воды при температуре 20 °С, г/см3 (с учётом плотности воздуха);
0,0012 - значение плотности воздуха при температуре 20 °С и барометрическом давлении 101,1 кПа (760 мм рт.ст.).

###### Метод 2

Применяют для определения плотности твёрдых жиров и воска с точностью до 0,001 г/cм3.

Проводят все операции с водой и высушивают пикнометр, как описано в методе 1. При помощи пипетки или небольшой воронки с оттянутым концом вносят в пикнометр расплавленный жир или воск в таком количестве, чтобы он занимал 1/3–1/2 объёма пикнометра. Пикнометр без пробки выдерживают в течение 1 ч в горячей воде, затем охлаждают до температуры 20 °С, взвешивают, доводят до метки водой при температуре 20 °С, вытирают насухо и снова взвешивают. В обеих фазах и на поверхности их раздела не должно быть пузырьков воздуха.

Величину плотности ρ20 вычисляют по формуле:

где m – масса пустого пикнометра, г;
m1 - масса пикнометра с водой, г;
m2 - масса пикнометра с испытуемым образцом, г;
m3 - масса пикнометра с испытуемым образцом и водой, г.

###### Метод 3

Применяют для определения плотности жидкостей с точностью до 0,01 г/см3 с помощью ареометра.

Испытуемую жидкость помещают в цилиндр и при температуре 20 °С осторожно опускают в неё чистый сухой ареометр, на шкале которого предусмотрена ожидаемая величина плотности. Ареометр не должен касаться стенок и дна цилиндра. Через 3–4 мин после погружения ареометра производят отсчёт по делению шкалы ареометра, соответствующему нижнему мениску жидкости (глаз должен быть на уровне мениска).

Примечание

1. Определение плотности сильно летучих веществ ареометром не допускается.

2. В случае определения плотности тёмноокрашенных жидкостей отсчёт производят по верхнему мениску.

###### Метод 4

Применяют для определения плотности жидкостей и газов в малом объёме (1–2 мл) с точностью до 0,0001 г/cм3 с помощью цифрового денсиметра (плотномера) с осциллирующим датчиком.

Прибор состоит из следующих основных составляющих:

- U-образной трубки, обычно из боросиликатного стекла, в которую помещают испытуемую жидкость;

- генератора магнитоэлектрического или пьезоэлектрического возбуждения, заставляющего колебаться U-образную трубку с характеристической частотой, зависящей от плотности испытуемой жидкости;

- измерительного аппарата, определяющего период колебаний (Т), который может быть преобразован прибором непосредственно в плотность или использован для расчёта плотности с использованием постоянных А и В, как описано ниже.

Принцип измерения плотности плотномером основан на определении периода колебаний U-образной измерительной трубки определённого объёма, вызываемых электромагнитным генератором.

Частота собственных колебаний трубки зависит от её конструктивных особенностей (упругости и массы) и определяется в процессе калибровки при заполнении её веществом с известной плотностью. При заполнении трубки испытуемым веществом частота колебаний трубки меняется в зависимости от массы (плотности) вещества. Измеряемый специальным датчиком период колебаний измерительной трубки автоматически пересчитывается на плотность образца в г/см3 либо проводят расчёт по следующим формулам.

Резонансная частота (f) является функцией константы упругости (с) и массы (m) системы:

Отсюда:

где M – масса трубки;
V - внутренний объём трубки.

Введение двух постоянных А = с / (4π2·V) и В = M / V приводит уравнение к классическому виду для осциллирующего датчика:

Постоянные А и В определяют для конкретного прибора, заполняя U-образную трубку двумя различными образцами с известной плотностью, например, дегазированной водой и воздухом. Проверку получаемых данных проводят ежедневно с использованием дегазированной воды. Результаты, полученные при проверке с использованием дегазированной воды, не должны отличаться от стандартных значений (ρ20 = 0,998203 г/см3, d2020 = 1,000000) более чем на погрешность измерений, указанную в спецификации. Например, прибор с погрешностью измерений до ±0,0001 г/см3 считается пригодным для дальнейших измерений, если выдаёт значение 0,9982±0,0001 г/см3. В противном случае требуется перенастройка. Регулярно должны проводить калибровку с использованием сертифицированных стандартных образцов. Измерения должны проводиться при тех же условиях, что и калибровка. Перед помещением в трубку испытуемую жидкость при необходимости термостатируют при 20 °С для предотвращения образования пузырьков газа и для уменьшения времени, необходимого для измерения.

Факторы, влияющие на точность измерения:

- неравномерность температуры во всём объёме трубки;

- отсутствие линейности в диапазоне измеряемого значения плотности;

- мешающие резонансные эффекты;

- вязкость, вследствие чего растворы с вязкостью большей, чем у раствора, по которому проводилась калибровка, показывают плотность заметно более высокую, чем истинная.

Проблемы, связанные с эффектами отсутствия линейности и вязкости, могут быть решены при использовании для калибровки веществ со значениями плотности и вязкости близкими к таковым для испытуемой жидкости (±5 % для плотности и ±50 % для вязкости). Денсиметр может иметь функцию автоматической корректировки вязкости и коррекции ошибок, связанных с отсутствием линейности и с изменениями температуры.

Прецизионность является функцией воспроизводимости и стабильности частоты осциллирующего датчика, которая зависит от стабильности объёма, массы и константы упругости ячейки.

Денсиметры способны проводить измерения с точностью от 1·10–3 до 1·10–5 г/см3 и повторяемостью от 1·10–4 до 1·10–6 г/см3.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.0015 Вязкость

Взамен ОФС.1.2.1.0015.15

Вязкость (внутреннее трение) – свойство текучих тел оказывать сопротивление перемещению одной их части относительно другой при различных видах деформации.

Основными кинематическими переменными для жидкостей служат деформация и её скорость. Поэтому для изучения реологических характеристик жидких сред устанавливают связь между приложенными внешними нагрузками и кинематическими параметрами.

Жидкости, вязкость которых не зависит от напряжения сдвига и при определённой концентрации и температуре является постоянной величиной в соответствии с законом внутреннего трения Ньютона, называют ньютоновскими. Жидкости, вязкость которых не подчиняется закону Ньютона и зависит от напряжения сдвига, называют неньютоновскими.

###### Классификация

Различают динамическую, кинематическую, относительную, удельную, приведённую и характеристическую вязкости. Для неньютоновских жидкостей, главным образом, характерна структурная, а также кажущаяся вязкость. Структурная вязкость – вязкость, вызванная образованием структуры в жидкости, зависимая от градиента скорости течения. Кажущаяся (эффективная) вязкость – вязкость при данном напряжении сдвига.

Динамическая вязкость – действующая на единицу поверхности сила, необходимая для сдвига этой поверхности относительно находящейся на единичном расстоянии параллельной поверхности на единицу длины за единицу времени. Динамическая вязкость (η) является отношением напряжения сдвига (τ) к скорости сдвига D и определяется по формуле:

(1)

где η – динамическая вязкость, Па·с;
τ – напряжение сдвига, Па;
D – градиент скорости сдвига (dv/dx), с−1.

Динамическая вязкость (η) в системе СИ выражается в паскаль-секундах (Па∙с) или миллипаскаль-секундах (мПа∙с); в системе СГС – в пуазах (П) или сантипуазах (сП). Также динамическая вязкость может измеряться в дин∙с/см2 и кгс∙с/м2 и производных от них единицах.

Кинематическая вязкость (ν) является отношением динамической вязкости (η) к абсолютной плотности (ρ):

(2)

где ν – кинематическая вязкость, м2/с;
η – динамическая вязкость, Па·с;
ρ – абсолютная плотность, кг/м3.

В капиллярных вискозиметрах определяют кинематическую вязкость ньютоновских жидкостей.

Кинематическая вязкость в системе СИ выражается в метрах квадратных на секунду (м2/с) или миллиметрах квадратных на секунду (мм2/с); в системе СГС – в стоксах (Ст) или сантистоксах (сСт).

Относительная вязкость (ηотн) - отношение вязкости раствора к вязкости растворителя:

(3)

Удельная вязкость (ηуд) показывает, какая часть вязкости раствора обусловлена присутствием в нём растворённого вещества:

(4)

где η – вязкость раствора;
η0 – вязкость растворителя.

Удельная вязкость, отнесённая к единице концентрации раствора, называется приведённой вязкостью (ηприв):

(5)

Для растворов полимеров вязкость является функцией молекулярных масс, формы, размеров и гибкости макромолекул. Чтобы определить структурные характеристики полимеров, приведённую вязкость экстраполируют к нулевой концентрации. В этом случае вводится понятие характеристической вязкости [η]:

(6)

Характеристическая вязкость выражается в единицах, обратных единицам концентрации.

При включении в фармакопейную статью показателя «Вязкость», должно быть уточнено, какой из перечисленных видов вязкости подлежит определению.

###### Приборы

Для определения вязкости применяют капиллярные, ротационные вискозиметры, вискозиметры с падающим шариком и вискозиметры, основанные на измерении разницы давления.

Капиллярные вискозиметры обычно используют для определения вязкости при одном значении скорости сдвига, поэтому их применяют в основном для исследования ньютоновских жидкостей.

Ротационные вискозиметры позволяют определять реологические свойства жидкостей в широком диапазоне скоростей сдвига, что особенно важно для неньютоновских жидкостей.

Вискозиметр с падающим шариком (вискозиметр Гепплера) предназначен для измерения вязкости прозрачных ньютоновских жидкостей.

Вискозиметры, основанные на измерении разницы давления, используют для измерения вязкости как ньютоновских, так и неньютоновских жидкостей.

Капиллярные вискозиметры

Для измерения кинематической вязкости применяют капиллярные вискозиметры типа Оствальда и Уббелоде различной модификации.

Стеклянные капиллярные вискозиметры предназначены для определения вязкости:

- 1) прозрачных жидкостей – серии ВПЖ и ВПЖТ;

- 2) малых объёмов прозрачных жидкостей – серии ВПЖМ и ВПЖТМ;

- 3) непрозрачных жидкостей – серии ВНЖ и ВНЖТ.

На рис. 1 и 2 представлен общий вид вискозиметров серии ВПЖ.

Рисунок 1. Вискозиметр стеклянный капиллярный ВПЖ-1: 1, 2, 4 – трубки; 3 – измерительный резервуар; М1, М2 – отметки измерительного резервуара. | Рисунок 2. Вискозиметр стеклянный капиллярный ВПЖ-2: 1, 2 – трубки; 3 – измерительный резервуар; М1, М2 – отметки измерительного резервуара.

Вискозиметр состоит из капилляра с радиусом R и длиной L, через который под действием силы тяжести протекает жидкость объёма V.

Если Н – средняя высота жидкости, g – ускорение силы тяжести, то кинематическая вязкость (ν) в миллиметрах в квадрате на секунду (мм2/с) равна:

(7)

где K – постоянная прибора, обычно выражаемая в миллиметрах в квадрате на секунду в квадрате (мм2/с2).

Если известна плотность испытуемой жидкости ρ, то, зная ν, можно вычислить динамическую вязкость η (мПа∙с):

(8)

где ρ – плотность испытуемой жидкости (мг/мм3), полученная умножением относительной плотности (d ) на 0,9982.

Для определения вязкости в каждом конкретном случае капиллярные вискозиметры выбирают в соответствии с табл. 1 и 2 по известным значениям К и V в зависимости от характера испытуемой жидкости, её объёма и значения вязкости.

###### Методика

Перед проведением измерений вискозиметр следует тщательно промыть и высушить.

В колено трубки 2 вискозиметра наливают измеренный объём жидкости и вискозиметр помещают в вертикальном положении в водяной термостат с температурой 20 °С, если в фармакопейной статье не указана другая температура. Вискозиметр удерживают в этом положении не менее 30 мин для установления температурного равновесия и в течение всего испытания. Производят повышение уровня жидкости в вискозиметре через отверстие 1 (в случае вискозиметра ВПЖ-1 закрывают трубку 4) до тех пор, пока жидкость не поднимется выше отметки М1, примерно на 8 мм, тогда повышение уровня прекращают, и жидкость опускается. Время t, которое требуется, чтобы мениск прошёл расстояние между отметками М1 и М2, замеряют секундомером с точностью до 0,2 с. Минимальное время t должно составлять 200 с.

Проводят повторное наполнение измерительного резервуара вискозиметра, как описано выше. Определяют время истечения испытуемой жидкости как среднее значение не менее чем в трёх последовательных измерениях. Полученные данные являются приемлемыми при условии, что относительное стандартное отклонение трёх измерений составляет не более 2,0%.

Для определения относительной вязкости жидкости ηотн измеряют время истечения между верхней и нижней меткой мениска той жидкости, относительно которой проводят измерения t0ср. Время истечения испытуемой жидкости tcp определяют в том же чистом и сухом вискозиметре при тех же условиях.

Одновременно измеряют плотности испытуемых жидкостей ρо и ρ пикнометрическим методом при той же температуре, при которой определяют вязкость, и рассчитывают относительную вязкость по формуле:

(9)

Для определения характеристической вязкости готовят не менее 5 испытуемых растворов различной концентрации. При этом должно выполняться условие линейной экстраполяции приведённой вязкости к нулевой концентрации, т.е. концентрации раствора следует выбирать минимальными в пределах чувствительности и точности метода измерения. Для каждой концентрации раствора определяют tcp и рассчитывают приведённую вязкость. Затем строят зависимость ηприв от концентрации с и графически или линейным методом наименьших квадратов экстраполируют приведённую вязкость к нулевой концентрации, т.е. находят характеристическую вязкость.

Ротационные вискозиметры

Ротационные вискозиметры различаются по типу измерительных систем: коаксиальные (соосные) цилиндры, конус-плоскость, плоскость-плоскость.

Ротационные вискозиметры представляют собой системы, в которых осуществляется сдвиговое течение жидкости (рис. 3 – 5).

Принцип действия наиболее часто используемых ротационных вискозиметров заключается в измерении силы вращения ротора (крутящий момент) при его вращении с постоянной угловой скоростью (скорость вращения) в жидкости, расположенной между двумя коаксиальными цилиндрами, один из которых вращается двигателем, а второй стационарный.

Таблица 1. Характеристики капиллярных вискозиметров серии ВПЖ-1 и ВПЖТ-1
Номинальное значение постоянной К, мм2/с2 | Диапазон измерения вязкости, мм2/с (включительно) | Диаметр капилляра, мм | Объём измерительного резервуара V, см3
--- | --- | --- | ---
ВПЖ-1 | ВПЖТ-1
Номинальный | Предельное отклонение | Номинальный | Предельное отклонение | ВПЖ-1 | ВПЖТ-1
0,003 | от 0,6 до 3 | 0,34 | ±0,02 | 0,34 | +0,007 | 1,5±0,2 | 1,5±0,08
0,01 | от 2 до 10 | 0,54 | 0,54 | ±0,01 | 3±0,3 | 3,0±0,15
0,03 | от 6 до 30 | 0,86 | ±0,03 | 0,86 | ±0,02 | 6,2±0,3 | 6,2±0,30
0,1 | от 20 до 100 | 1,16 | 1,16
0,3 | от 60 до 300 | 1,52 | ±0,04 | 1,52 | ±0,03
1 | от 200 до 1000 | 2,10 | — | — | —
3 | от 600 до 3000 | 2,75 | — | —
10 | от 2000 до 10 000 | 3,75 | ±0,05 | — | —
30 | от 6000 до 30 000 | 5,10 | — | —
100 | от 20 000 до 100 000 | 6,85 | ±0,06 | — | —

Таблица 2. Характеристики капиллярных вискозиметров серии ВПЖ-2 и ВПЖТ-2
Номинальное значение постоянной К, мм2/с2 | Диапазон измерения вязкости, мм2/с (включительно) | Диаметр капилляра, мм | Объём измерительного резервуара V, см3
--- | --- | --- | ---
ВПЖ-2 | ВПЖТ-2
Номинальный | Предельное отклонение | Номинальный | Предельное отклонение | ВПЖ-2 | ВПЖТ-2
0,003 | от 0,6 до 3. | 0,34 | ±0,02 | 0,34 | ±0,007 | 1,5±0,2 | 1,5±0,08
0,005 | от 1 до 5 | 0,39 | 0,39 | ±0,008
0,01 | от 2 до 10 | 0,56 | 0,56 | ±0,01 | 3,8±0,3 | 3,8±0,2
0,03 | от 6 до 30 | 0,73 | 0,73
0,1 | от 20 до 100 | 0,99 | ±0,03 | 0,99 | ±0,02
0,3 | от 60 до 300 | 1,31 | ±0,04 | 1,31 | ±0,03
1 | от 200 до 1000 | 1,77 | 1,77
3 | от 600 до 3000 | 2,37 | — | — | —
10 | от 2000 до 10 000 | 3,35 | ±0,05 | — | —

Ротационные вискозиметры применяют для измерения вязкости ньютоновских (вязкость, независящая от сдвига) или неньютоновских жидкостей (вязкость, зависящая от сдвига, или кажущаяся вязкость). При измерении вязкости (структурной, эффективной или кажущейся) определяют момент силы М (крутящий момент), выраженный в ньютон-метрах (Н∙м), который пропорционален углу, на который поворачивается внутренний цилиндр.

Ротационные вискозиметры подразделяют на две группы: абсолютные и относительные вискозиметры. В абсолютных вискозиметрах поток жидкости в измеряемой форме вполне определённый. Измерения приводят к значениям абсолютной вязкости, которые можно сравнить с любыми другими абсолютными значениями. В относительных вискозиметрах поток жидкости в измеряемой форме не вполне определён. Измерения приводят к значениям относительной вязкости, которые нельзя сравнить с любыми другими абсолютными значениями или другими относительными значениями, если они не определены с помощью того же метода относительной вискозиметрии.

Для заданных диапазонов вязкости предназначены различные измерительные системы, а также различные скорости вращения.

Наиболее распространены следующие типы приборов.

Вискозиметры с концентрическим цилиндром (абсолютные вискозиметры)

В вискозиметрах с концентрическими цилиндрами (вискозиметр с коаксиальным двойным цилиндром или вискозиметр с простым коаксиальным цилиндром) вязкость определяют путём помещения жидкости в промежуток между внешним и внутренним цилиндром (рис. 3).

Рисунок 3. Геометрия вискозиметров с концентрическим цилиндром: М – момент сопротивления; Ri – радиус внутреннего цилиндра; R0 – радиус внешнего цилиндра; h – высота испытуемой жидкости; ω – угловая скорость вращения внутреннего цилиндра.

В случае ламинарного потока, динамическую вязкость η, выраженную в паскаль-секундах (Па∙с), рассчитывают по формуле:

(10)

где М – крутящий момент на поверхности цилиндра, Н∙м;
h – глубина погружения внутреннего цилиндра в жидкую среду, м;
RA – радиус внутреннего цилиндра, м;
RB – радиус внешнего цилиндра, м;
ω – угловая скорость, рад/с;
К – постоянная вискозиметра, рад/м3.

Вискозиметры с системой конус-плоскость (абсолютные вискозиметры)

В вискозиметрах с системой конус-плоскость исследуемая жидкость вводится в просвет между плоским диском и конусом, образуя определённый угол. Измерения вязкости выполняют путём вращения конуса или плоского диска (рис. 4).

Рисунок 4. Геометрия вискозиметров с системой конус – плоскость: М – момент сопротивления; R – радиус конуса; α – угол конуса; ω – угловая скорость вращения конуса.

В случае ламинарного потока, динамическую вязкость η, выраженную в паскаль-секундах (Па∙с), рассчитывают по формуле:

(11)

где М – крутящий момент на поверхности цилиндра, Н∙м;
R – радиус конуса, м;
ω – угловая скорость, рад/с;
α – угол между плоским диском и конусом, рад;
К – постоянная вискозиметра, рад/м3.

Вискозиметр со шпинделем (относительные вискозиметры)

В вискозиметрах со шпинделем вязкость определяют путём вращения шпинделя (цилиндрического или в форме диска). Относительные значения вязкости (или кажущейся вязкости) могут быть рассчитаны непосредственно с использованием преобразующих факторов из показаний для данной скорости вращения (рис. 5).

Рисунок 5. Геометрия вискозиметров со шпинделем.

Постоянная вискозиметра К может быть определена при разных скоростях вращения с использованием градуировочных жидкостей для калибровки вискозиметров.

При этом динамическая вязкость η рассчитывается по формуле:

(12)

где М – крутящий момент на поверхности цилиндра, Н∙м;
ω – угловая скорость, рад/с;
К – постоянная вискозиметра, рад/м3.

К выпускаемым приборам прилагаются таблицы, в которых приведена постоянная вискозиметра в зависимости от площади поверхности используемого цилиндра и скорости его вращения.

Вязкость измеряют в соответствии с инструкцией по применению ротационного вискозиметра.

Условия определения вязкости на ротационном вискозиметре указывают в фармакопейной статье на лекарственное средство.

К ним относят:

- модель вискозиметра;

- температура, при которой проводится исследование;

- тип измерительной системы;

- угловая скорость (число оборотов шпинделя) или скорость сдвига;

- размер контейнера для испытуемого образца лекарственного средства;

- объём испытуемого образца лекарственного средства.

Вискозиметры с падающим шариком

Измерение вязкости путём определения скорости падения шарика в жидкости проводят с помощью вискозиметра Гепплера.

На рис. 6 показан общий вид вискозиметра с падающим шариком. В комплект вискозиметра входят шарики с диаметром от 10,00 до 15,80 мм, что обеспечивает измерение динамической вязкости градуировочных жидкостей в диапазоне от 0,6 до 8∙104 мПа∙с.

Рисунок 6. Вискозиметр с падающим шариком: 1 – калибровочные отметки; 2 – шарик.

Методика. Для измерения вязкости испытуемую жидкость заливают в трубку, опускают шарик и термостатируют вискозиметр в течение примерно 30 мин при температуре 20 °С, если не указано иное в фармакопейной статье. Ставят шарик в исходное положение, включают секундомер, когда нижняя часть шарика коснется верхней метки, и останавливают, когда шарик достигнет нижней метки. Время движения шарика измеряют
не менее 5–7 раз. При этом разность между наибольшим и наименьшим значениями времени движения шарика не должна превышать 0,5% от его среднего значения.

Динамическую вязкость испытуемой жидкости вычисляют по формуле:

(13)

где η – динамическая вязкость, мПа∙с;
К – постоянная вискозиметра;
ρш и ρж – плотности шарика и жидкости соответственно, г/см3;
tср – среднее время движения шарика между крайними метками, с.

Постоянная вискозиметра (К) определяется по формуле:

(14)

где η0 – динамическая вязкость градуировочной жидкости, мПа∙с;
ρш и ρ0ж – плотности шарика и градуировочной жидкости соответственно, г/см3;
t0ср – среднее значение времени движения данного шарика в градуировочной жидкости, с.

Число постоянных вискозиметра соответствует числу шариков, входящих в комплект вискозиметра.

Постоянные прибора могут быть проверены по вышеуказанной формуле с помощью градуировочных жидкостей с известными значениями динамической вязкости. Плотность шариков ρш вычисляют по формуле:

(15)

где m – масса шарика, определяемая взвешиванием, г;
d – диаметр шарика, см.

Перед проведением измерений вискозиметр следует тщательно промыть и высушить.

Вискозиметры, основанные на измерении разницы давления

Данные приборы используют для измерения вязкости как ньютоновских, так и неньютоновских жидкостей. Приборы включают щелевые вискозиметры/реометры и капиллярно-экструзионные вискозиметры.

Капиллярные вискозиметры основаны на принципе движения потока под действием силы тяжести, и эти вискозиметры можно отнести к одному из методов, основанных на давлении. Однако ограничения стеклянных капиллярных вискозиметров делают их непригодными для использования при определении характеристик неньютоновских жидкостей, и их использование для измерения высоковязких жидкостей.

Щелевые вискозиметры/реометры

Основная конструкция щелевого вискозиметра/реометра состоит из прямоугольного щелевого канала с неизменной площадью поперечного сечения. Испытуемую жидкость прокачивается с постоянной скоростью потока через этот канал. Несколько датчиков давления, установленных вдоль потока, измеряют перепад давления на определённых расстояниях.

Принцип измерения. Щелевой вискозиметр/реометр основан на принципе сопротивления вязкой жидкости течению, выражающемся в уменьшении давления по длине щели. Падение давления (ΔP) коррелирует с напряжением сдвига на границе со стенкой. Кажущийся градиент скорости сдвига напрямую связан со скоростью потока и размером щели.

Напряжение сдвига (τ), кажущийся градиент скорости сдвига (Da) и кажущаяся динамическая вязкость (ηa), соответственно, рассчитываются по формулам:

где Da – кажущийся градиент скорости сдвига, с-1;
Q – скорость потока, мкл/с;
w – ширина проточной ячейки, мм;
h – высота проточной ячейки, мм;
τ – напряжение сдвига, Па;
△P – разница давлений между датчиками давления, Па;
l – расстояние между датчиками давления, мм;
ηa – кажущаяся динамическая вязкость, Па·с.

Для определения вязкости жидкости испытуемый образец прокачивают при постоянной скорости потока через щелевой канал и измеряют перепад давления. Используя приведённые выше уравнения, рассчитывают кажущуюся вязкость для кажущейся скорости сдвига. Для ньютоновской жидкости кажущаяся вязкость совпадает с истинной вязкостью, и достаточно одного измерения скорости сдвига. Для неньютоновских жидкостей кажущаяся вязкость не является истинной вязкостью. Чтобы получить истинную вязкость, измеряют кажущуюся вязкость при нескольких кажущихся скоростях сдвига. Рассчитывают динамическую вязкость (η) при различных скоростях сдвига, используя поправочный коэффициент Вайссенберга-Рабиновича-Муни:

(19)

Рассчитанная динамическая вязкость должна быть такой же, как значение, полученное с помощью вискозиметра системы конус-плоскость при той же скорости сдвига.

Методика. Выбирают размеры щели и чувствительность датчиков давления для достижения желаемого диапазона вязкости и скорости сдвига. Испытуемый образец забирают в стеклянный шприц с помощью шприцевого насоса при контроле скорости потока или скорости сдвига. Контролируют температуру образца с помощью шприца и щелевого вискозиметра, указанного в индивидуальной методике, с точностью ±0,1 °С, если не указано иное в фармакопейной статье. Выдерживают образец при указанной температуре в течение 3–5 мин. Устанавливают каждый датчик давления на ноль, выбирают первую скорость потока или скорость сдвига, прокачивают образец при заданной скорости потока и регистрируют показания давления после их стабилизации. Регулируют скорость потока или скорость сдвига. Выбирают среднее значение показаний каждого датчика давления за определённое время и рассчитывают падение давления. Рассчитывают кажущуюся динамическую вязкость. Если испытуемый образец относится к неньютоновским жидкостям, меняют скорость сдвига, и рассчитывают соответствующую каждой скорости кажущуюся вязкость.

Обработка результатов. После расчёта кажущейся вязкости для неньютоновских жидкостей применяют поправочный коэффициент Вайссенберга-Рабиновича-Муни, чтобы получить кривую истинной вязкости. Существуют вискозиметры, имеющие встроенную поправку.

Калибровка датчиков давления выполняют в соответствии с рекомендациями производителя. Щелевой вискозиметр можно также откалибровать с помощью стандарта ньютоновской жидкости известной вязкости. Для этого выбирают стандарт, охватывающий интересующий диапазон вязкости для выбранной щели и датчиков давления. Измеряют вязкость при скоростях сдвига, составляющих 10%, 50% и 90% от полной шкалы ведущего датчика давления и выбирают среднее значение. Рассчитывают константу (k) для отношения стандартного значения (ηcт) к измеренному значению (ηизм).

(20)

где ηст – стандартная вязкость, Па·с;
ηизм – измеренная вязкость, Па·с.

Умножают значение вязкости испытуемого образца на константу k, корректирующую неопределённость и изменение геометрии щели. В идеале значение k должно оставаться постоянным в пределах изменения температуры на 100 °С. Если значение k изменяется более чем на 1%, целесообразно использовать температурную компенсацию датчиков давления.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.0017 Показатель преломления (индекс рефракции)

Взамен ОФС.1.2.1.0017.15

Метод основан на определении показателя преломления (индекса рефракции).

Преломление световых лучей на границе раздела двух различных оптических сред называют рефракцией, она характеризуется показателем преломления. Показатель преломления среды относительно воздуха равен отношению синуса угла падения луча света в воздухе к синусу угла преломления преломленного луча в данной среде.

Метод применяют для установления подлинности и чистоты лекарственных средств и вспомогательных веществ (далее – веществ), а также для определения концентрации вещества в растворе.

###### Оборудование

Для определения показателя преломления (индекса рефракции) применяют рефрактометры. Рефрактометры обычно определяют критический (предельный) угол преломления или критический (предельный) угол полного внутреннего отражения. В таком приборе главной частью является измерительная призма с известным показателем преломления, которая контактирует с испытуемым раствором.

При использовании белого света рефрактометры должны быть оборудованы компенсационной системой. Прибор должен давать показания с точностью как минимум до третьего десятичного знака и обеспечивать возможность проведения операций при заданной температуре. Цена деления термометра не должна превышать 0,5 °C.

Диапазон измеряемых показателей преломления при измерении в проходящем свете должен составлять 1,3000–1,7000 (при использовании некоторых типов рефрактометров 1,2000–2,000). Точность измерения показателя преломления должна быть не ниже ±2·10–4.

###### Условия калибровки и измерений

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье определение проводят при температуре 20±0,5 °C и длине волны линии D спектра натрия 589,3 нм. Показатель преломления, определённый при таких условиях, обозначается индексом n20D.

Для калибровки прибора используют сертифицированные стандартные образцы, значения показателей преломления которых обозначены на этикетке, или по дистиллированной воде, для которой n20D = 1,3330 и n25D = 1,3325 ( ∆n/n= –0,000085).

###### Обработка результатов

Строят график зависимости показателя преломления раствора от концентрации раствора. На графике выбирают интервал концентраций, в котором наблюдается линейная зависимость между показателем преломления и концентрацией. В этом интервале концентрацию испытуемого раствора (X, %) вычисляют по формуле:

где n - показатель преломления испытуемого раствора;
n0 – показатель преломления растворителя при той же температуре;
F – фактор, равный величине прироста показателя преломления при увеличении концентрации испытуемого раствора на 1% (устанавливается экспериментально).

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.0018 Оптическое вращение

Взамен ОФС.1.2.1.0018.15

Метод определение оптического вращения (поляриметрии) основан на свойстве вещества вращать плоскость поляризации при прохождении через него поляризованного света.

Оптическое вращение считают положительным (+) для правовращающих веществ (вращают плоскость поляризации по часовой стрелке, если смотреть на источник света) и отрицательным (-) для левовращающих веществ (вращают плоскость поляризации против часовой стрелки, если смотреть на источник света).

###### Область применения

Испытание по определению оптического вращения, позволяющее различать оптически активные изомеры, применяют для установления подлинности и чистоты оптически активного вещества или для определения его концентрации в растворе.

###### Определения

Угол оптического вращения (угол вращения) (α) – это величина отклонения плоскости поляризации от начального положения, выраженная в угловых градусах (о), при длине волны линии D спектра натрия (λ=589,3 нм), измеренная при температуре 20°С в толщине слоя 1 дм. Для растворов способ приготовления указывают в фармакопейной статье.

Удельное оптическое вращение (удельное вращение) [α]20D представляет собой угол оптического вращения (α) плоскости поляризации монохроматического света, приведённый к концентрации вещества, равной 1 г/мл. Удельное оптическое вращение выражают без размерности, реальная размерность выражается в градус-миллилитрах на дециметр-грамм [(о)·мл·дм–1·г–1].

Для растворов величина угла вращения зависит от природы растворителя и концентрации оптически активного вещества. Замена растворителя может привести к изменению [α] не только по величине, но и по знаку. Поэтому, приводя величину удельного вращения, необходимо указывать растворитель и выбранную для измерения концентрацию раствора.

Удельное вращение определяют в пересчете на безводное и/или свободное от органических растворителей вещество, и указывают в фармакопейной статье.

###### Оборудование

Для определения оптического вращения используют поляриметр. Прибор обычно состоит из следующих составляющих:

- источник света, обеспечивающий излучение на желаемой длине волны (589,3 нм);

- поляризатор и анализатор;

- кювета для образца длиной 1,0 дм;

- система обнаружения для измерения угла оптического вращения;

- система контроля температуры.

###### Условия калибровки и измерения

Измерение угла вращения проводят на поляриметре, позволяющем определить величину угла вращения с точностью ±0,02º при температуре (20±0,5) °С. Измерения оптического вращения могут проводиться и при других значениях температуры, но в таких случаях в фармакопейной статье должен быть указан способ учёта температуры.

В некоторых случаях измерение угла вращения проводят при других длинах волн и/или в кювете для образца с длиной пути, отличной от 1,0 дм. Изменения должны быть приведены в фармакопейной статье.

Шкалу обычно тестируют при помощи сертифицированных кварцевых пластинок. Линейность шкалы проверяют с помощью растворов сахарозы.

###### Методика

Оптическое вращение растворов измеряют в течение 30 мин с момента их приготовления; растворы или жидкие вещества должны быть прозрачными.

При измерении, прежде всего, устанавливают нулевую точку прибора или определяют величину поправки с трубкой, заполненной чистым растворителем (при работе с растворами), или с пустой трубкой (при работе с жидкими веществами). После установки прибора на нулевую точку или определения величины поправки проводят основное измерение, которое повторяют не менее 3 раз. Для получения величины угла вращения α показания прибора, полученные при измерениях, суммируют алгебраически с ранее найденной величиной поправки.

Величину удельного вращения [α]20D рассчитывают по одной из следующих формул:

Удельное оптическое вращение [α]20D жидкости рассчитывают по формуле:

где α − угол оптического вращения, измеренный при температуре (20±0,5) °С, в градусах (°);
l − толщина слоя испытуемого вещества, дм;
20 − плотность жидкого вещества, г/см3.

Удельное оптическое вращение [α]20D вещества в растворе рассчитывают по формуле:

где α − угол оптического вращения, измеренный при температуре (20±0,5) °С, в градусах (°);
l − толщина слоя испытуемого вещества, дм;
c − концентрация вещества в растворе, г в 100 мл раствора.

Концентрацию оптически активного вещества в растворе (г/100 мл) находят по формуле:

где α − угол оптического вращения, измеренный при температуре (20±0,5) °С, в градусах (°);
l − толщина слоя испытуемого вещества, дм;
[α]20D − удельное оптическое вращение вещества в растворе.

Так как величина удельного оптического вращения [α]20D постоянна только в определённом значении интервала концентраций, возможность использования формулы (3) ограничивается этим интервалом.

В фармакопейной статье указывают величину угла вращения, измеренную в градусах, концентрацию раствора для которого проводились измерения, растворитель и длину кюветы.

В фармакопейной статье указывают величину удельного вращения, рассчитанную без указания размерности, концентрацию раствора для которого проводились измерения, и растворитель.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.0020 Электропроводность

Взамен ОФС.1.2.1.0020.15

Электропроводностью называют способность тела (среды) пропускать электрический ток под воздействием электрического поля. Ток, текущий через проводник, прямо пропорционален приложенной электродвижущей силе и обратно пропорционален сопротивлению проводника:

где I – сила тока;
U – электродвижущая сила;
R – сопротивление проводника.

Электропроводность по определению является величиной, обратной сопротивлению. Единицей сопротивления в международной системе СИ является Ом. Единицей электропроводности в международной системе СИ является См (сименс). Удельная электрическая проводимость (удельная электропроводность) выражается в См/м, См/см или в мкСм/см.

Удельная электропроводность раствора обеспечивается движением присутствующих в нём ионов, а её величина определяется суммой произведения молярной электропроводности ионов на их концентрацию:

где ᴋ – удельная электропроводность, См/см;
Ci – концентрация ионов, моль/л;
λi – молярная электропроводность ионов, См·см2/моль.

Из этого уравнения следует, что удельная электропроводность не является ионно-селективной, поскольку вызвана всеми ионами. Кроме того, удельная молярная проводимость каждого иона различна. В результате, если неизвестно соотношение ионов в растворе, нельзя определить точные концентрации ионов на основе измерений проводимости. Однако для таких случаев, как раствор одной соли, кислоты или основания, точная концентрация может быть определена напрямую из удельной электропроводности.

Ионная проводимость увеличивается с увеличением температуры жидкости. Поэтому при измерениях удельной электропроводности необходима температурная компенсация.

Удельная электропроводность прямо пропорциональна расстоянию между задающими напряжение электродами и обратно пропорциональна площади этих электродов:

где ᴋ – удельная электропроводность, См/см;
G – электропроводность, См;
d – расстояние между электродами, см;
А – площадь электродов, см2;
K – постоянная ячейки, см–1.

Оборудование и методика, описанные ниже, применимы для измерения удельной электропроводности, превышающей 10 мкСм·см−1. Определение электропроводности воды проводят как описано в соответствующих фармакопейных статьях.

###### Оборудование

Прибор, предназначенный для измерения удельной электропроводности растворов, называется кондуктометром. Он состоит из кондуктометрической ячейки и измерительного блока.

Кондуктометрическая ячейка состоит из двух электродов, обычно платиновых, с площадью каждого А, расположенных напротив друг друга на расстоянии d. Оба электрода обычно впаяны в стеклянную трубку.

Измерительный блок состоит из источника переменного напряжения и прибора для измерения электропроводности. Измерение электропроводности проводят при переменном токе, чтобы избежать поляризации электродов и электролиза.

Прибор снабжают термометром и температурным компенсатором, так как электропроводность растворов зависит от температуры. Измерения обычно проводят при температуре 20 °С, если не указано иначе. В таблице приведены значения электропроводности и сопротивления растворов калия хлорида при 20 °С.

Таблица 1. Удельная электропроводность и сопротивление растворов калия хлорида при 20 °С
Концентрация калия хлорида, г/1000 г | Удельная электропроводность, мкСм·см–1 | Удельное сопротивление, Ом·см
--- | --- | ---
0,7455 | 1330 | 752
0,0746 | 133,0 | 7519
0,0149 | 26,6 | 37594

Точность измерений электропроводности должна быть не хуже ±5 %.

###### Методика

1. Определение постоянной ячейки

Кондуктометрическую ячейку выбирают таким образом, чтобы она соответствовала электропроводности испытуемого раствора. Чем больше ожидаемая электропроводность, тем более высокое значение постоянной ячейки должно быть выбрано (низкое сопротивление). Обычно используемые ячейки электропроводности имеют константы порядка 0,1, 1 и 10 см–1. Для определения постоянной ячейки используют сертифицированные стандартные растворы (например, раствор калия хлорида), которые готовят в воде, свободной от диоксида углерода. Для ячеек, имеющих постоянную около 0,1 см–1, могут использоваться другие сертифицированные стандарты.

Кондуктометрическую ячейку 3 раза промывают водой, свободной от диоксида углерода, и 3 раза стандартным раствором, используемым для определения постоянной ячейки. Заполняют ячейку стандартным раствором. Измерение сопротивления ячейки проводят при температуре 20 °С. Постоянная ячейки K (в см–1) определяется уравнением:

где Rст – измеренное сопротивление стандартного раствора, мегаОм (МОм);
ᴋст – удельная электропроводность стандартного раствора, мкСм∙см–1.

Измеренное значение константы K кондуктометрической ячейки не должно отличаться от указанного значения более чем на 5 %.

Если определение постоянной ячейки проводят при температуре, которая отличается от 20 °С, исправленное значение электропроводности для этой температуры вычисляют по уравнению:

где KT – удельная электропроводность стандартного раствора при температуре T;
K20°С – удельная электропроводность стандартного раствора при 20 °С;
T – температура, установленная при калибровке в соответствии с фармакопейной статьёй, °С;
α – температурный коэффициент для электропроводности стандартного раствора (для калия хлорида α = 0,021).

2. Проверка пригодности аппаратуры

Для проверки пригодности аппаратуры используют стандартный раствор KCl, соответствующий ожидаемой проводимости раствора образца. Кондуктометрическую ячейку 3 раза промывают дистиллированной водой и затем 3 раза выбранным стандартным раствором. Заполняют ячейку стандартным раствором. Термостатируют измерительную систему на уровне 20 °C и измеряют проводимость стандартного раствора.

При многократном повторении измерения средняя проводимость должна соответствовать значению, приведённому в табл. 1, в пределах 5 %, относительное стандартное отклонение не должно превышать 2 %.

3. Определение электропроводности испытуемого раствора

Кондуктометрическую ячейку промывают водой, свободной от углерода диоксида, до тех пор, пока электропроводность смывной воды не будет по крайней мере в 20 раз меньше ожидаемой электропроводности исследуемого раствора. Затем ячейку 2 раза промывают испытуемым раствором и заполняют им. Термостатируют измерительную систему на уровне 20 °C, если не указано иначе, и измеряют сопротивление R или электропроводность G испытуемого раствора.

Рассчитывают удельную электропроводность испытуемого раствора (ᴋисп) согласно формуле:

где K – постоянная ячейки, см-1;
Gисп – электропроводность испытуемого раствора, См;
R – сопротивление испытуемого раствора, Ом·см.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.0024 Автоматический элементный анализ

Взамен ОФС.1.2.1.0024.15

Автоматический элементный анализ основан на высокотемпературном (от 1100 ºС до 1800 ºС) окислительном разложении с последующим хроматографическим определением компонентов образовавшейся газовой смеси.

Для определения содержания элементов C, H, N и S в фармацевтических субстанциях проводят высокотемпературное окислительное разложение в потоке гелия, либо его смеси с кислородом в присутствии катализатора окисления. Последующее восстановление, как правило, протекает в присутствии катализатора и определение образующихся продуктов: углерода в виде CO2, водорода в виде H2O, азота в виде N2, серы в виде SO2, кислорода в виде СО, соответствующих определяемым элементам, проводят методом газовой хроматографии.

###### Область применения

Метод автоматического элементного анализа может быть использован:

- для установления эмпирических формул вещества, в состав молекул которого входят: углерод (С), водород (Н), азот (N), сера (S), а в ряде случаев и кислород (О) на основании данных элементного анализа на любой из этих элементов;

- с целью идентификации активной фармацевтической субстанции по молекулярной формуле вещества на этапе фармацевтической разработки.

###### Оборудование

Определение проводят на приборе – элементном анализаторе, основными составными частями которого являются:

- электронные микровесы или ультрамикровесы;

- узел (или блок) ввода пробы – автодозатор капсулированных (запечатанных в контейнеры из оловянной фольги) проб испытуемых образцов;

- окислительный и восстановительный реакторы, помещённые в электропечь;

- ловушки (поглотители);

- хроматографическая колонка;

- детектор по теплопроводности (входящий в стандартную комплектацию) или пламенно-фотометрический, или изотопный масс-спектрометр, или катарометрический;

- система для обработки данных и управления прибором.

###### Условия измерения

Вследствие присутствия наполнителей при окислительном разложении фармацевтических субстанций образуется большое количество углерода диоксида (СО2), мешающего определению азота. В связи с этим газохроматографическое определение азота проводится после предварительного поглощения углерода диоксида (вместе с серы диоксидом) и воды.

В качестве катализатора окисления обычно используют меди(II) оксид (CuO) с добавкой ванадия(V) оксида (V2O5) или кобальта(II,III) оксид (Со3О4) посеребрённый. В качестве катализатора восстановления используют электролитическую медь.

Для поглощения углерода диоксида и серы диоксида (CO2 и SO2) используют ловушки с натронной известью, воды – с магния перхлоратом или освобождаются от воды в соединительных трубках, стенки которых селективно проницаемы для воды.

Метод применим как для твёрдых, так и для жидких фармацевтических субстанций.

###### Методика

Используемые реактивы:

Меди(II) оксид (CuO). Кусочки проволоки длиной 1–3 мм, толщиной около 1 мм, серого цвета. Поставляется фирмой-производителем элементного анализатора.

Кобальта(II,III) оксид (Со3О4) посеребрённый. Гранулы чёрного цвета диаметром около 1 мм. Поставляется фирмой-производителем элементного анализатора.

При анализе испытуемых образцов в твёрдом или жидком состоянии используют дозаторы для твёрдых или жидких проб. Испытуемые образцы твёрдых фармацевтических субстанций тщательно растирают в агатовойступке.

В качестве стандартных образцов используют ацетанилид, цистеин, метионин с установленным содержанием элементов – стандартные образцы для микроанализа.

Точные навески (от 0,5 до 1,5 мг стандартного образца или фармацевтических субстанции, или от 1,0 до 5,0 мг лекарственного препарата), взятые на ультрамикровесах с точностью до 0,001 мг, помещают в предварительно взвешенные пустые оловянные контейнеры. Запечатывают контейнеры с помощью специального устройства, взвешивают капсулированные образцы и помещают в кассету автодозатора. При увеличении количества катализаторов окисления и восстановления навеска может быть увеличена в 5–10 раз, при этом точность взвешивания может составлять 0,01 мг.

Проводят контрольный опыт, для чего с помощью автодозатора в реактор помещают пустые оловянные контейнеры (количество проб не больше трёх); при этом регистрируется содержание определяемого элемента для каждой из них.

Затем последовательно сжигают по 3–4 навески капсулированных образцов (стандартного и испытуемого).

По полученным значениям площадей пиков стандартных образцов с учётом значения контрольного опыта автоматически строится калибровочный график и рассчитывается поправочный коэффициент (K) к площади пика определяемого элемента по формуле:

где y – содержание определяемого элемента в стандартном образце для микроанализа,%;
a0 – навеска стандартного образца для микроанализа, мг;
S0 – площадь пика на хроматограмме стандартного образца;
Sk – площадь пика на хроматограмме контрольного образца.

Содержание определяемого элемента в испытуемом образце действующего вещества (субстанции) в процентах (Хэ) автоматически вычисляют по формуле:

где S − площадь пика на хроматограмме испытуемого образца;
a − навеска фармацевтической субстанции (в пересчёте на сухое или безводное вещество), мг.

Содержание действующего вещества в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где M.м − молекулярная масса фармацевтической субстанции;
А.м. − атомная масса определяемого элемента;
n − число атомов определяемого элемента в молекуле фармацевтической субстанции.

* Навеску испытуемой фармацевтической субстанции выбирают такой, чтобы количество определяемого элемента, образовавшееся в результате сжигания навески испытуемого образца, было близко к количеству, образующемуся при сжигании навески стандартного образца.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.0029 Определение запаха

Вводится впервые

Запах характеризуют терминами: «без запаха» или «с характерным запахом». При необходимости приводят характеристику интенсивности запаха – слабый, сильный и др. Если запах не охарактеризован, следовательно он отсутствует у анализируемого лекарственного средства.

Испытание проводят сразу после вскрытия упаковки.

От 0,2 г до 0,5 г испытуемого образца равномерно распределяют на часовом стекле диаметром 6–8 см; через 15 мин на расстоянии 4–6 см определяют наличие запаха и характеризуют его, или делают вывод об отсутствии запаха.

В случае легколетучих жидких лекарственных средств (лекарственные средства, содержащие спирт; растворы и смеси летучих веществ (эфирные масла, растворы аммиака, формальдегида и др.); лекарственное растительное сырьё, содержащее эфирные масла и др.) наносят 0,5 мл испытуемого образца на фильтровальную бумагу и запах определяют сразу же после нанесения, если нет других указаний.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.0030 Потеря в массе при прокаливании

Вводится впервые

Под потерей в массе при прокаливании подразумевают уменьшение массы испытуемого образца за счёт испарения, улетучивания при нагревании до высоких температур, как правило, выше 400 °С, но ниже температуры плавления. Методика прокаливания не должна разрушать испытуемый образец, возможен переход в другую форму, например, ангидрид.

Определение потери в массе при прокаливании проводят в соответствии с методикой, приведённой в настоящей общей фармакопейной статье, или иными методиками, указанными в фармакопейной статье. Результат выражают в виде массовой доли в процентах.

При отсутствии других указаний в методике, прокаливание проводят в подходящей муфельной печи, способной поддерживать температуру в пределах ±25 °С от температуры, требуемой для прокаливания.

Для проведения испытания используют подходящий тигель с крышкой, который предварительно прокаливают в течение часа при температуре, указанной для испытания вещества, затем охлаждают в эксикаторе до комнатной температуры и точно взвешивают. Могут быть использованы тигли, полученные из различных материалов: фарфоровые, платиновые, кварцевые, графитовые и др.

Испытание проводят с тонко измельчённым образцом, при необходимости, перед взвешиванием, измельчают крупные частицы испытуемого образца с помощью ступки и пестика.

Если в фармакопейной статье нет других указаний, то количество испытуемого образца для определения (Х) вычисляют по формуле:

где L – предел (или среднее значение пределов) для потери в массе при прокаливании,%.

###### Методика

Точную навеску испытуемого образца, как правило, массой 1,0–2,0 г помещают в предварительно прокалённый до постоянной массы и взвешенный в условиях проведения испытания подходящий тигель с крышкой.

Если в фармакопейной статье не указано предварительное высушивание испытуемого образца при более низкой температуре, чем температура прокаливания, или другая особая предварительная обработка, то тигель с испытуемым образцом помещают в муфельную печь и прокаливают в пределах температурного интервала, указанного в фармакопейной статье. Испытуемый образец прокаливают с открытой крышкой тигля до постоянной массы или в течение периода времени, указанного в фармакопейной статье. Два повторных одночасовых взвешивания после прокаливания и охлаждения не должны отличаться на более чем 0,5 мг.

Если указано прокаливание до постоянной массы, то прокаливание осуществляют в течение одночасовых периодов. По завершении каждого периода прокаливания тигель закрывают прокалённой крышкой, не доставая из муфельной печи, и перед взвешиванием оставляют для охлаждения до комнатной температуры в эксикаторе.

Потерю в массе при прокаливании в процентах (Х), рассчитывают по формуле:

где m1 – масса тигля с испытуемым образцом после прокаливания, г;
m2 - масса пустого тигля, г;
a - навеска испытуемого образца, г.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.0031 Прямое амперометрическое и импульсное электрохимическое детектирование

Вводится впервые

Прямое амперометрическое и импульсное электрохимическое детектирование используют для обнаружения электроактивных соединений путём окисления/восстановления испытуемых образцов в сочетании с разделением веществ, например с методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Электрохимическое определение использует окислительно-восстановительный потенциал анализируемых веществ и поэтому справедливо только для электроактивных веществ.

###### Метод

Амперометрический метод основан на измерении предельного диффузного тока, проходящего через раствор электролита при фиксированном потенциале (напряжении) между индикаторным электродом и электродом сравнения. При постоянном потенциале окисление/восстановление электролита создаёт между двумя электродами ток, пропорциональный количеству электроактивного испытуемого образца, проходящего через поверхность электрода. Для этого необходимо постоянное нахождение поддерживающего электролита в электрохимической ячейке. При использовании электрохимического детектирования в методе высокоэффективной жидкостной хроматографии электролит может быть добавлен после колонки, если его нет в подвижной фазе. В большинстве случаев применение электрохимического детектирования предполагает окисление представляющих интерес соединений (ароматические гидрокси-соединения, ароматические амины, индолы, меркаптаны и др.). Детектирование по восстановлению практически не используют из-за мешающего влияния растворённого кислорода. Потенциал, приложенный к индикаторному электроду, может служить одним из параметров селективности для испытуемого образца. Верхний предел диапазона электроактивности определяется кривой окисления подвижной фазы, поддерживающего электролита или индикаторного электрода.

При прямом амперометрическом детектировании используют только постоянный потенциал. Недостатком этого метода является сильная адсорбция промежуточных продуктов окислительно-восстановительной реакции поверхностью индикаторного электрода, что приводит к снижению активности (переходу электронов) электрода, изменчивости сигнала, снижению отклика. Такое явление пассивации электродов особенно часто наблюдается при испытании сахаров, тиолов, фенолов.

Проблема загрязнения электродов может быть уменьшена за счёт применения серии импульсов ‒ процесса, известного под общим термином, как метод импульсного электрохимического детектирования. Наиболее широко используемым режимом указанного метода является режим импульсного (пульсирующего) амперометрического детектирования, включающего в себя трёхступенчатую серию импульсов, сигналов в форме волны, при котором работа детектора разбита на 3 шага: детектирование, анодная чистка поверхности электрода, реактивация. Схема трёхступенчатой последовательности импульсов амперометрического детектирования представлена на рис. 1.

Рисунок 1. Схема трёхступенчатой последовательности импульсов амперометрического детектирования в системе координат «потенциал-время»

Edet — потенциал детектирования, применяется в течение времени tdet;
Eoxd — окислительный потенциал, применяется в течение времени toxd;
Ered — восстановительный потенциал, применяется в течение времени tred.

После применения потенциала детектирования (Edet) прикладывают высокий положительный потенциал (Eoxd) (поляризация анода), чтобы очистить поверхность индикаторного электрода, а потом прикладывают отрицательный потенциал (Ered) (поляризация катода), чтобы восстановить её. Затем можно начинать новый трёхступенчатый цикл в форме волны. После изменения потенциала с Ered на Edet появятся фоновые сигналы и, несмотря на то, что они быстро затухают, необходимо сделать небольшую задержку, прежде чем станет возможно измерить сигнал электролита должным образом. Разработаны и другие варианты формы волны, содержащие больше 3 перепадов потенциала.

###### Оборудование

Система электрохимического детектирования, представленная на рис. 2, включает 3 вида электродов: индикаторный/измерительный электрод (золотой, платиновый или стеклоуглеродный), электрод сравнения (обычно хлорсеребряный) и вспомогательный электрод (например, титановый корпус ячейки). Выбор индикаторного электрода зависит от свойств испытуемого образца. Электроды соединены с потенциостатом, который управляет потенциалами, прикладываемыми к индикаторному электроду, без воздействия тока на электрод сравнения. Когда индикаторный электрод выполняет функцию анода, вспомогательный электрод функционирует как катод, и наоборот.

Рисунок 2. Система для электрохимического детектирования: А — электрод сравнения, В — вспомогательный электрод, С — индикаторный/измерительный электрод.

Настройки системы электрохимического детектирования должны быть соответствующим образом отрегулированы и адаптированы к применяемым потенциалам, зависящим в свою очередь от свойств испытуемого образца и типа используемых электродов. Все электроды должны быть в хорошем состоянии, рекомендуется периодическая замена. При использовании детектора для количественного анализа испытуемых веществ целесообразно проверить валидационные характеристики метода: диапазон линейности, чувствительность, повторяемость. Применяемые реактивы должны быть самой высокой чистоты.

###### Дополнительная информация

Техническое обслуживание электрохимической ячейки.

Очистку индикаторного электрода необходимо проводить очень осторожно, чтобы избежать образования выемок или царапин. Одновременно с очисткой индикаторного электрода рекомендуется протереть вспомогательный электрод, чтобы удалить осаждённые вещества. После процесса полировки электродов электрохимической ячейке требуется некоторое время для стабилизации.

Использование раствора натрия гидроксида. Детектирование может быть улучшено в щелочных средах (по крайней мере, pH 12), как в случае, например, с аминогликозидными антибиотиками. Если подвижная фаза недостаточно щелочная, для повышения рН раствора электрохимической ячейки в раствор после колонки (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») можно добавить раствор натрия гидроксида. Указанные растворы смешиваются в спирали, связанной с электрохимической ячейкой. Очень важно, чтобы длина смесительной спирали обеспечивала получение однородного раствора, но с минимальным уширением пика на хроматограмме. Раствор натрия гидроксида не должен содержать карбонатов. Перед использованием раствор натрия гидрокарбоната следует дегазировать, в систему добавлять равномерно, поддерживая его постоянный поток между циклами испытания. Части хроматографической системы, вступающие в контакт с растворами, содержащими натрия гидроксид, должны быть устойчивы к щелочам.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.0032 Рентгеновская порошковая дифрактометрия

Взамен ОФС.1.2.1.1.0011.15

Рентгеновская порошковая дифрактометрия позволяет качественно и количественно определять кристаллическое состояние фаз порошкового образца аморфной, монокристаллической или поликристаллической структуры испытуемого образца путём анализа дифракционной картины, создаваемой при облучении исследуемого образца рентгеновскими лучам.

###### Область применения

Метод рентгеновской порошковой дифрактометрии применяют для:

- изучения аморфности, кристалличности и степени кристалличности (ОФС «Кристалличность»);

- изучения полиморфизма (ОФС «Полиморфизм»);

- подтверждения подлинности твердого кристаллического вещества (если оно не обладает полиморфизмом).

Преимуществами метода являются высокая достоверность и экспрессность; метод даёт сведения непосредственно о структуре вещества; и не требует его большого количества (не более 0,15 г); испытание можно проводить без разрушения испытуемого образца; метод позволяет оценить количество фаз порошкового образца.

###### Метод

Каждая кристаллическая фаза испытуемого образца даёт характерную картину дифракции рентгеновского излучения. Картину дифракции (при использовании дифрактометра—дифрактограмму, при использовании рентгеновской пленки—рентгенограмму) можно получить из случайно ориентированного кристаллического порошка, состоящего из кристаллитов и кристаллических фрагментов ограниченного размера.

На основе картины дифракции на порошке можно вычислить: угловое расположение дифракционных линий (зависит от геометрии и размера кристаллической ячейки); интенсивность дифракционных линий (зависит, главным образом, от типа и структуры атома, а также ориентации частиц внутри испытуемого образца); профиль дифракционных линий (зависит от разрешения прибора, размера кристаллита, типа и толщины испытуемого образца).

Определение углового расположения и интенсивности линий может быть использовано для качественного фазового анализа (например, идентификация кристаллической фазы) и количественного фазового анализа кристаллических веществ. Так же можно рассчитать содержание аморфной и кристаллической фракций.

Дифракция рентгеновских лучей происходит в результате взаимодействия между рентгеновским излучением и электронными облаками атомов.

К рентгеновским лучам относят излучение, занимающее участок электромагнитного спектра от нескольких сотен до десятых долей ангстрема (Å) (1 Å = 0,1 нм). Расстояние между атомами в кристаллической решетке твёрдых тел колеблется от единиц до полутора десятков ангстрем. Прохождение рентгеновских лучей через вещество сопровождается разными видами взаимодействия, одним из которых является рассеяние рентгеновских лучей. Вещество, которое подвергается действию рентгеновского излучения, испускает вторичное излучение, длина волны которого равна длине волны падающих лучей (когерентное рассеяние). Каждый изолированный атом рассеивает излучение равномерно во все стороны в виде концентрических сфер. Если падающая волна рентгеновского излучения перпендикулярна атомному ряду, то все атомы ряда одновременно излучают электромагнитные колебания. Поскольку расстояние между атомами соизмеримо с длиной волны вторичного когерентного излучения, то кристалл может служить для него дифракционной решёткой. Энергия этого излучения рассеивается в разных направлениях с различной интенсивностью: по одним направлениям усиливается, по другим – ослабляется и даже полностью гасится. Усиление колебаний происходит по тем направлениям, где разность хода рентгеновских лучей равна целому числу волн или чётному числу полуволн. Это правило (условие интерференции) справедливо для любого излучения. В результате образуется серия плоских волн, которые распространяются в особых направлениях. Дифрагированный луч можно рассматривать как результат отражения от одной из плоскостей атомной решётки. Любая трёхмерная решётка рассматривается как совокупность бесконечного числа параллельных атомных плоскостей, расположенных на равном расстоянии друг от друга. Отражение лучей будет происходить не только от внешней поверхности, а от всех атомных плоскостей (их серий), так как рентгеновский луч, в отличие от оптического излучения, проникает вглубь кристалла.

Серия плоскостей характеризуется межплоскостным расстоянием d (рис. 1). Каждая плоскость отражает луч под одним и тем же углом, так как рентгеновские лучи распространяются в веществе практически без преломления. При отражении лучи могут интерферировать в том случае, если их разность хода (АОВ) будет равна целому числу волн Δ (АОВ) = nλ; АОВ = 2d∙sinθ.

Рисунок 1. Схема отражения лучей от серии плоскостей атомной решётки

Условие дифракции рентгеновских лучей (уравнение Вульфа–Брэгга) имеет вид:

(1)

где n – порядок отражения (n = 1, 2, 3);
λ – длина волны рентгеновского излучения;
θ – угол между падающим лучом и системой плоскостей решётки;
dhkl – расстояние между последовательными отражающими плоскостями кристаллической решётки.

При выполнении условия Вульфа-Брэгга рентгеновский луч регистрируют детектором или на фотоплёнке. Интенсивность максимума зарегистрированного луча зависит от количества и типов атомов, составляющих данное семейство плоскостей, то есть от «заселённости» атомной плоскости. Поэтому интенсивность отраженного луча также является характеристикой изучаемого объекта.

Широкое распространение из-за простоты и универсальности получил метод порошка (метод Дебая-Шеррера), когда монохроматический пучок рентгеновских лучей направляют на поликристаллический образец. Так как кристаллы, из которых состоит испытуемый образец, очень малы (микрокристаллы), то в испытуемом объёме образца их оказываются десятки миллионов. Отраженные разными микрокристаллами лучи различной интенсивности фиксируются либо на специальной фотоплёнке, либо детектором. Рассчитав полученную таким путем рентгенограмму (дифрактограмму), получают сведения о межплоскостных расстояниях в кристалле. Значение межплоскостных расстояний для каждого вещества строго индивидуально, поэтому рентгенограмма (дифрактограмма) однозначно характеризует испытуемый образец.

###### Оборудование

В зависимости от проводимого типа испытания (фазовая идентификация, количественный анализ, определение параметров решётки и др.) используют приборы различной комплектации.

Самыми простыми приборами для определения картины дифракции на порошке являются порошковые дифрактометры или порошковые камеры. Порошковый дифрактометр обычно состоит из пяти основных частей: источник рентгеновского излучения; оптика, образующая падающий луч; гониометр; дифракционная оптика; детектор. Дополнительно требуются блоки сбора и обработки данных. Замена фотографической плёнки как способа детектирования фотонного детектора привела к разработке дифрактометров, в которых геометрическая расстановка оптики является скорее не фокусирующей, а парафокусирующей, как в геометрии Брэгга-Брентано (рис. 2).

Рисунок 2. Пространственное представление парафокусирующей геометрии Брэгга-Брентано: А – рентгеновская трубка; В – рассеивающая щель; С – образец; D – антирассеивающая щель; Е – принимающая щель; F – монохроматор; G – принимающая щель детектора; Н – детектор; J – круг дифрактометра; К – фокусирующий круг.

Основная геометрическая модель представлена на (рис. 2). Расходящийся луч из рентгеновской трубки (исходный луч) проходит через коллиматоры, через рассеивающую щель и облучает плоскую поверхность образца. Все лучи дифрагируют от ориентированных соответствующим образом в образце кристаллитов под углом 2θ и собираются в линию у принимающей щели. Второй набор из коллиматоров и рассеивающей щели может быть помещён до или после принимающей щели. Оси фокусной линии и принимающей щели находятся на равном расстоянии от оси гониометра. Кванты рентгеновского излучения подсчитывают при помощи детектора радиоактивности (сцинтилляционный счётчик, пропорциональный счётчик, пространственно-чувствительный или полу-проводниковый детектор). Принимающая щель и детектор образуют единый блок и движутся по касательной к фокусирующей окружности. Для θ/2θ сканирования гониометр вращает образец вокруг той же оси, что и ось детектора, но с половинной скоростью вращения, в θ/2θ движении. Таким образом, поверхность образца находится по касательной к фокусирующей окружности. Коллиматор ограничивает осевое расхождение луча и, таким образом, частично контролирует форму профиля дифрагированной линии. Дифрактометрические методы съёмки рентгенограмм отличаются от фотографических тем, что дифракционная картина регистрируется последовательно во времени.

По способу регистрации рентгеновских лучей вся аппаратура делится на два типа. К первому типу относятся приборы с фотографическим методом регистрации рентгеновских лучей на специальной рентгеновской плёнке (в данном случае дифракционная картина представляет собой ряд концентрических пар чёрных полос), ко второму — приборы с ионизационным методом регистрации, при котором рентгеновское излучение регистрируется с помощью различного типа счётчиков (сцинтилляционных, пропорциональных, полупроводниковых). Усиленный сигнал записывается в файл, а совокупность сигналов затем обрабатывается специальной программой. Условия фокусировки при ионизационном методе регистрации рентгеновских лучей таковы, что максимальную светосилу получают при облучении рентгеновским пучком максимально большой поверхности образца.

В качестве рентгеновского излучения используют откачанные (вакуумные) рентгеновские трубки (с вакуумом 10−5–10−6 мм рт. ст.), представляющие собой мощный диод, в котором поток ускоренных, обладающих высокой энергией, электронов бомбардирует материал анода. Зеркало анода изготавливают из металлов, для которых длины волн рентгеновского излучения лежат в пределах от 2,29 до 0,71 Å (W, Cr, Fe, Cu, Ni, Co, Mo, Ag).

Для дифракционных методов исследования органических веществ используют только характеристическое рентгеновское излучение, полученное на основе медных, молибденовых или кобальтовых анодов. Длины волн, используемые в рентгеновской порошковой дифрактометрии, соответствуют К~α ~– излучению анода. В качестве фильтра используют либо металлическую пластину (Кβ – фильтр, имеющий край полосы поглощения между Кα и Кβ длинами волн рентгеновского излучения, такие фильтры обычно вставляют между рентгеновской трубкой и образцом), либо большой специальный кристалл-монохроматор, преломляющий Кα и Кβ линии рентгеновского луча под различными углами (этот кристалл помещается перед образцом или после него). Другим способом разделения Кα и Кβ длин волн является использование изогнутых рентгеновских зеркал, которые одновременно монохромируют и фокусируют или делают параллельными рентгеновские лучи.

###### Меры предосторожности

Рентгеновское излучение является опасным для здоровья человека, поэтому необходимо соблюдать рекомендации по мерам предосторожности и пределам уровней воздействия рентгеновского излучения, установленным национальным законодательством.

###### Проверка пригодности дифрактометра (юстировка)

Оптико-механическая система рентгеновского порошкового дифрактометра требует точной настройки (юстировки) и периодической проверки с использованием сертифицированных стандартных образцов. Минимизация систематических ошибок и оптимизация интенсивности дифрагируемых лучей, регистрируемых детектором, напрямую зависят от точности настройки и определяют качество результатов испытание методом рентгеновской порошковой дифрактометрии. Данную работу должен проводить только высококвалифицированный инженер-специалист.

###### Градуировка, испытания пригодности и контроль дифрактометров

Для установления величины потенциальных ошибок в дифрактометре после его настройки, используя подходящие внутренние и внешние градуировки, можно построить градуировочную кривую следующего типа:

- градуировка по углам;

- градуировка по интенсивностям;

- градуировка по форме сигнала.

Градуировка обычно производится с использованием сертифицированных стандартов сравнения (выбор зависит от типа анализа). Испытание пригодности дифрактометра следует проводить и контролировать периодически, используя рабочие стандарты и/или стандарты сравнения (в зависимости от типа анализа).

###### Пробоподготовка порошкового материала

Степень измельчённости испытуемого образца

Для получения чётких рентгенограмм для сьёмки по методу «порошка» необходима тщательная подготовка испытуемых образцов. Испытуемый образец, состоящий из крупных кристаллов даёт нечёткие, мало интенсивные рентгенограммы, поэтому испытуемый образец растирают в агатовой ступке агатовым пестиком (для исключения загрязнения пробы). Оптимальный размер кристаллов составляет около 5–10 мкм. Нельзя сильно перетирать пробу, так как сильное воздействие (особенно с давлением) может привести к нарушению кристаллической структуры испытуемого образца, появлению напряжений в кристаллах, к изменению полиморфной модификации, если вещество обладает полиморфизмом (а значит, к ухудшению качества рентгенограммы). Если размер кристаллов менее 0,1 мкм, то интерференционные линии могут быть размыты (уширение полос спектра), и при малом количестве фазы её линии могут сливаться с фоном. Целесообразно сравнить дифракционную картину необработанного образца с дифракционной картиной, соответствующей образцу с более мелким размером частиц (например, измельчённый образец). Если полученная рентгеновская дифракционная картина имеет качество, соответствующее её предполагаемому назначению, то измельчение не требуется.

Размещение образца

Тонко измельчённый испытуемый образец, который является поликристаллическим телом, набивают в капилляр диаметром 0,5–1 мм или насыпают и фиксируют в углублении специальной кюветы из кварцевого стекла (при съёмке в дифрактометре).

Для фиксации образца в кювете достаточно придавливания: можно применять органические клеи (БФ, цапонлак и т.д.), а также обычные технические масла. Порошок можно спрессовать и применить для съёмки в виде таблетки диаметром до 25 мм.

###### Качественный фазовый анализ (идентификация фаз)

Идентификация фазового состава неизвестного образца методом рентгеновской порошковой дифрактометрии обычно основана на визуальном или компьютерном сравнении части его дифракционной картины с экспериментальной или рассчитанной картиной дифракции вещества сравнения.

Каждое кристаллическое вещество даёт специфическую интерференционную картину с определённым количеством, расположением и интенсивностью интерференционных линий, которые определяются природой и расположением атомов в данном веществе.

Рентгенограмма порошкового образца представляет собой сумму (наложение) ряда рентгенограмм индивидуальных кристаллических веществ или полиморфных фаз одного кристаллического вещества при проявлении им полиморфизма.

При съёмке дифрактограммы с органических веществ используют излучение Сu-Кα (интервал значений углов 2θ от 4° до 40°). При этом значения углов 2θ для одной кристаллической формы исследуемого вещества и стандартного образца находится в пределах ±0,2°, тогда как относительные интенсивности сигналов могут значительно различаться из-за поликристалличности вещества.

Трудно или даже невозможно идентифицировать кристаллические фазы в следующих случаях:

- если компоненты, которые нужно идентифицировать, присутствуют в малых массовых долях от анализируемых количеств (обычно менее 10 % м/м);

- при резко выраженной поликристалличности;

- при отсутствии кристаллической фазы в используемой базе данных;

- при образовании твёрдых растворов;

- при наличии разупорядоченности в положении атомов молекул в элементарной ячейке;

- если образец представляет собой многокомпонентную смесь кристаллических веществ;

- при наличии деформации кристаллической решётки;

- при структурном подобии различных кристаллических фаз.

###### Количественный фазовый анализ

Количественный рентгеновский фазовый анализ применяют для оценки содержания полиморфных фаз в кристаллическом веществе или содержания одного кристаллического вещества в смеси с другими кристаллическими веществами. Метод основан на зависимости интенсивности дифракционных отражений от содержания кристаллической фазы в испытуемом многофазном поликристаллическом образце – интенсивность сигнала пропорциональна мольной доле данной фазы. При одинаковом содержании определяемой фазы интенсивность дифракционного отражения будет меняться в зависимости от величины среднего коэффициента поглощения рентгеновских лучей в испытуемом образце. Поэтому необходимо либо найти эту зависимость и определить коэффициент поглощения образца, либо использовать методы, позволяющие устранить влияние фактора поглощения. Методы количественного фазового анализа:

- метод добавок (метод стандартных добавок). К смеси с неизвестной концентрацией кристаллической фазы a прибавляют стандартный образец, содержащий её. Измеряют интенсивности сигналов образцов, содержащих пропорционально увеличивающиеся концентрации добавок, и строят график зависимости интенсивности от концентрации.

- Средний коэффициент поглощения стандартного образца должен быть близким к коэффициенту поглощения определяемой кристаллической фазы. Исследуемый и стандартный образцы должны быть достаточно измельчены и тщательно перемешаны;

- метод внешнего стандарта_ основан на сравнении дифрактограмм испытуемого и стандартного образцов, последовательно зарегистрированных в одинаковых условиях;

- метод внутреннего стандарта_ используют внутреннее вещество сравнения с размером кристаллитов и коэффициентом рентгеновской абсорбции, сопоставимыми с таковыми для компонентов образца, а также с картиной дифракции, которая не перекрывается картиной дифракции испытуемого образца. Известное количество вещества сравнения прибавляют к испытуемому образцу. Соотношение мольных концентраций испытуемого вещества и вещества сравнения пропорционально отношению интенсивностей их сигналов;

- метод гомологических пар_ основан на получение серии рентгенограмм смесей из одинаковых компонентов, но в различном соотношении и нахождение на них линий различных фаз одинаковой интенсивности;

- метод наложения_ основан на сравнении рентгенограмм испытуемого образца и рентгенограмм отдельных составляющих в чистом виде;

- метод съёмки без стандартного образца_ предназначен для определения мольной доли кристаллической фазы в смеси кристаллических фаз. Он основан на том, что интенсивность сигнала фазы на рентгенограмме пропорциональна её мольной доле в смеси фаз. Относительную мольную концентрацию кристаллической фазы определяют как отношение интенсивности её сигнала к сумме интенсивностей сигналов кристаллических фаз, присутствующих в смеси.

###### Оценка аморфной и кристаллической фаз в образце

Количество кристаллической и аморфной фаз в испытуемом образце можно оценить несколькими способами в зависимости от его природы:

- если испытуемый образец представляет собой смесь различных веществ, каждое из которых может состоять из кристаллической и аморфной фаз, то количество кристаллических фаз каждого вещества можно рассчитать, используя подходящие стандартные образцы. Суммарное содержание аморфных фаз определяется косвенно путём вычитания.

- если образец состоит из одной аморфной и одной кристаллической фазы или представляет собой однофазную или двухфазную смесь с одинаковым элементным составом, количество кристаллической фазы (степень кристалличности, ОФС «Кристалличность») рассчитывают путём измерения трёх площадей дифрактограммы. Процент кристалличности (X) рассчитывают по формуле:

(2)

где А – общая площадь сигналов, возникающих в результате дифракции кристаллической фракции образца;
В – общая площадь за исключением площади А;
С – площадь фонового излучения (обусловлено рассеиванием в воздухе, флуоресценцией, оборудованием и так далее).

Этот метод не даёт абсолютных величин степени кристалличности и поэтому обычно используют только для сравнительных целей.

Содержание аморфной фазы определяют либо по разности единицы и всех кристаллических фаз (в долях), либо независимым способом. При втором способе учитывают, что интенсивность когерентного рассеяния рентгеновского излучения аморфной фазы пропорциональна её содержанию. Кривая рассеяния на рентгенограмме образца имеет один или несколько пологих максимумов, обычно в области небольших углов рассеяния. При определении содержания аморфной фазы (Сa) с помощью эталонов используют соотношение:

(3)

где Ia0, Iа – интенсивности рассеяния полностью аморфным (эталон) и испытуемыми образцами под некоторым фиксированным углом 2θ;
Ib – интенсивность рассеяния смесью кристаллических фаз, имеющей аналогичный полностью аморфному образцу химический состав.

Более точной мерой интенсивности рассеяния аморфной фазой служит интегральная интенсивность одного или нескольких максимумов.

Безэталонный метод основан на выделении средней интенсивности рассеяния рентгеновского излучения аморфной фазой Iа из средней интенсивности рассеяния образца In. Содержание аморфной фазы (Сa) определяют по формуле:

(4)

где Iа – средняя интенсивность рассеяния рентгеновского излучения;
In – средняя интенсивность рассеяния образца.

##### 1.2.1.1. Методы спектрального анализа

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.1.0001 Спектрометрия в ближней инфракрасной области

Взамен ОФС.1.2.1.1.0001.15

Спектрометрия в ближней инфракрасной (БИК) области – метод, основанный на способности веществ поглощать электромагнитное излучение в диапазоне длин волн от 780 нм до 2500 нм (от 12800 см−1 до 4000 см−1).

Поглощение в БИК диапазоне связано, как правило, с обертонами основных колебательных частот связей C-H, N-H, O-H, S-H и их комбинациями. Наиболее информативным диапазоном является область от 1700 нм до 2500 нм (от 6000 см−1 до 4000 см−1).

Полосы в БИК области значительно более слабые, чем полосы основных колебаний в средней ИК области, от которых они происходят. Поскольку абсорбционные способности в БИК области малы, излучение способно проникать в материал (включая твёрдые вещества) на несколько миллиметров. Кроме того, многие вещества, такие как стекло, являются относительно прозрачными в этой области длин волн.

Для спектрометрии в БИК области характерны простота подготовки проб или отсутствие пробоподготовки, быстрота измерений, неразрушающий характер анализа (без вскрытия упаковки лекарственного препарата), одновременная оценка нескольких параметров (показателей), проведение дистанционного контроля, в том числе в технологических потоках в режиме реального времени.

###### Область применения

БИК-спектрометрия имеет широкую область применения для химического, физического и производственного анализа. Метод позволяет прямо или косвенно проводить качественную и количественную оценку химических, физических и физико-химических характеристик анализируемого объекта.

Химический анализ:

- установление подлинности субстанций, вспомогательных веществ, готовых лекарственных форм, промежуточных продуктов производственного процесса, химического сырья и упаковочных материалов;

- квалификация субстанций, вспомогательных веществ, готовых лекарственных форм, промежуточных продуктов производственного процесса и упаковочных материалов, включая спектральное сравнение серий и оценку смены поставщика;

- количественное определение содержания субстанций в матрице образца, определение химических чисел, таких как гидроксильное и йодное число, степень гидроксилирования, определение содержания воды и органических растворителей.

Физический анализ:

- установление кристаллической формы и степени кристалличности, полиморфизма, размеров частиц;

- определение распадаемости, твёрдости;

- исследование свойств плёнок.

Производственный анализ:

- мониторинг производственных операций, например, синтеза, смешивания, высушивания, гранулирования и покрытия оболочкой с целью контроля производственного процесса;

- контроль и определение конечных точек.

Анализ информации, извлекаемой из БИК-спектров, проводят с применением хемометрических алгоритмов.

###### Оборудование

БИК-спектрометры состоят из:

- источника излучения, например, высокостабильной кварцево-вольфрамовой лампы или её аналога;

- монохроматора (дифракционная решетка, призма, оптико-акустический фильтр) или интерферометра (для Фурье-спектрометров);

- регистрирующего устройства – детектора (на основе кремния, сульфида свинца, арсенида индия, арсенида индия-галлия, теллурида ртути-кадмия, дейтерированного триглицина сульфата и др.);

- устройства размещения образца и/или дистанционного оптоволоконного зонда.

Спектрометры могут быть оснащены кюветным отделением, интегрирующей сферой (представляет собой оптический компонент, состоящий из сферической полости с покрытием из хорошо отражающего материала, и предназначена для получения спектров отражения неоднородных образцов), внешними модулями для измерения пропускания сильно рассеивающих образцов, устройствами автоматической подачи образцов, оптоволоконными зондами и т.д. Выбор того или иного приспособления для анализа зависит от типа образца и выбранного способа измерения.

Для размещения образцов используют стеклянные или кварцевые кюветы, флаконы, стеклянные стаканы, держатели капсул или таблеток и другие приспособления.

Обработку данных и анализ полученных результатов проводят с использованием специального программного обеспечения.

###### Проверка работы оборудования

Для каждого режима измерения (пропускание, диффузное отражение и их комбинация) должна быть предусмотрена своя методика проверки, включающая проверку точности и воспроизводимости волновой шкалы, линейности, стабильности откликов и фотометрического шума.

Проверка и калибровка шкалы длин волн или волновых чисел

Для проверки точности волновой шкалы регистрируют спектр одного или нескольких стандартных образцов, имеющих характеристические максимумы и минимумы поглощения в диапазоне используемых длин волн, и сравнивают полученные значения длин волн с заявленными характеристиками. В качестве стандартов используют метиленхлорид, тальк, лампы с референсными длинами волн, смесь оксидов редкоземельных элементов, пары воды в атмосфере и др. Снимают спектр и измеряют положения не менее 3 пиков, находящихся в рабочем диапазоне.

В приборах с Фурье-преобразованием шкала волновых чисел линейна во всём рабочем диапазоне, поэтому для проверки точности волновой шкалы достаточно использовать один стандарт с контролем заявленных характеристик по одной полосе поглощения. Приборы других типов могут иметь нелинейный характер шкалы волновых чисел и требуют проверки заявленных метрологических характеристик не менее чем по 3 пикам (один или несколько стандартов) с охватом всего рабочего диапазона.

Погрешность при установке длин волн должна быть не более ±1 нм (или эквивалентная ему величина волнового числа) в диапазоне длин волн до 1900 нм и не более ±1,5 нм для диапазона длин волн ≥ 1900 нм.

Воспроизводимость установки длины волны. Должна соответствовать требованиям завода-изготовителя или требованиям нормативных документов, действующих на территории Российской Федерации.

Проверка и калибровка фотометрической линейности и стабильности откликов

Для проверки фотометрической линейности регистрируют БИК-спектры стандартных образцов с известными значениями пропускания или отражения и строят графическую зависимость полученных значений пропускания или отражения от известных значений. Результатом построения такой зависимости должна являться прямая линия с отсечением 0,00±0,05 и тангенсом угла наклона прямой 1,00±0,05.

Для проверки фотометрической линейности в режиме отражения в качестве стандартов используют полимеры, допированные углеродом, или аналоги. Если прибор используется для измерения образцов с поглощением 1,0 и менее, то достаточно использовать 4 стандарта в диапазоне значений отражения от 10 % до 90 %, например, 10, 20, 40 и 80 % с соответствующими значениями поглощения 1,0; 0,7; 0,4 и 0,1. При измерении образца с поглощением выше 1,0 к указанному набору стандартов добавляют стандарт отражения 2 % и/или 5 %.

Для проверки фотометрической линейности в режиме пропускания в качестве стандартов используют 3 фильтра со значениями пропускания в области от 10 % до 90 % и линию 100 % пропускания, т.е. регистрируют спектр пропускания пустого канала.

Для проверки стабильности отклика периодически проводят измерение стандарта с неизмененными физическими и химическими свойствами. Измерение фона должно проводиться с помощью одного и того же внутреннего или внешнего стандарта. Отклонение фотометрического отклика не должно превышать ±2 %.

Спектры стандартных образцов отражения и пропускания подвержены вариабельности вследствие различий экспериментальных условий, в которых производилась их заводская калибровка, и условий, в которых они впоследствии использовались. Поэтому процентные значения коэффициентов отражения, предоставляемые вместе с набором калибровочных стандартных образцов, могут быть неприменимы для получения «абсолютной» калибровки конкретного прибора. Однако при условии отсутствия изменений физических или химических свойств стандартных образцов и использования такого же фонового материала сравнения, как и при получении сертифицированных значений, последующие измерения этих стандартных образцов при идентичных условиях, включая точное положение пробы, используется для оценки периода сохранения стабильности фотометрического отклика. Отклонение ±2 % от значения поглощения является приемлемым для длительной стабильности. Данная проверка необходима только в случае использования спектров без предварительной обработки.

Проверка фотометрического шума

Для оценки фотометрического шума при измерении пропускания записывают линию 100 % по воздуху; при измерении отражения регистрируют линию 100 % с применением подходящих стандартов с отражением не менее 99 %. При этом под линией 100 % подразумевается измерение, при котором стандарт является измеряемым образцом и фоном одновременно. При высоких значениях поглощения проводят оценку фотометрического шума с применением стандартов со значениями пропускания или отражения около 10 %.

Фотометрический шум должен соответствовать требованиям, указанным в спецификации производителя.

###### Способы измерения

БИК-спектр представляет собой зависимость соответствующей фотометрической величины (оптической плотности (А), коэффициента пропускания (Т), коэффициента отражения (R) и производных величин) от длины волны или частоты излучения. При измерениях в БИК области реализуются следующие способы:

- измерение пропускания (или поглощения) при прохождении излучения через образец;

- измерение излучения, отражённого или рассеянного от образца;

- комбинация вышеуказанных способов.

Измерения всегда проводят относительно фона.

Измерение пропускания. Пропускание является мерой снижения интенсивности излучения при прохождении через образец. Образец помещают в оптический луч между источником и детектором. Этот принцип реализован в большинстве используемых спектрометров, и результат может быть представлен непосредственно в единицах пропускания (T) и/или оптической плотности (A):

где I0 – интенсивность падающего излучения;
I - интенсивность излучения, прошедшего через образец.

Измерение диффузного отражения. В методе диффузного отражения измеряют коэффициент отражения (R), представляющий отношение интенсивности света, отражённого от образца (I), к интенсивности света, отражённого от фона (Ir). В зависимости от химического состава и физических характеристик образца БИК излучение может проникать на более или менее существенное расстояние вглубь образца, где может быть поглощено колебательными комбинациями и обертонами аналита, присутствующего в образце. Непоглощённое излучение отражается от образца на детектор. БИК спектр отражения обычно получают путём расчёта и построением графика зависимости log10(1/R) от длины волны или волнового числа.

где I – интенсивность излучения, диффузно отражённого от образца;
Ir - интенсивность излучения, диффузно отражённого от фона или отражённого от поверхности сравнения.

Измерение пропускания–отражения

Данный способ является комбинацией пропускания и отражения благодаря специальной конструкции кювет и датчиков, в которых излучение дважды проходит через образец, что позволяет анализировать образцы с низкой поглощающей и рассеивающей способностью. При измерении пропускания-отражения используют зеркало или диффузную отражающую поверхность для отражения излучения, прошедшего сквозь образец, второй раз, удваивая таким образом, оптический путь. Непоглощённое излучение отражается от образца на детектор.

В качестве фотометрической величины используют коэффициент двойного пропускания (Т*) и величину, аналогичную оптической плотности (А*):

где I – интенсивность пропущенного и отражённого излучения, измеренная с образцом;
IT - интенсивность излучения после двойного пропускания, без образца.

###### Пробоподготовка

Приготовление и подача образца могут различаться в зависимости от режима измерения. Следующие требования являются обязательными для всех методик пробоподготовки:

- оптимизируют время измерения и число сканирований для оптимизации отношения сигнал/шум;

- находят наиболее подходящий способ измерения для предполагаемого применения (пропускание, диффузное отражение, пропускание-отражение);

- находят наилучшую ориентацию образца (например, для минимизации влияния присутствующего тиснения на таблетках);

- находят наиболее подходящее приспособление (например, ячейка пропускания или погружной зонд);

- оптимизируют длину пути в режимах пропускания и пропускания-отражения;

- находят подходящий спектроскопический фоновый стандартный образец;

- подтверждают, что фоновый стандартный образец не меняется во времени, а показания фона являются воспроизводимыми и стабильными с течением времени;

- при измерении движущихся материалов или образцов (для измерений, касающихся производственных процессов) важным является получение репрезентативного спектра (например, с помощью корректировки времени измерения, количества сканирований, сложения индивидуальных спектров или увеличения размера луча);

- проверяют сенсор на возможное засорение, например, от налипшего материала или загрязнения;

- должны быть обоснованы условия проведения измерения (время измерения, размер луча) в отношении минимального размера образца.

При контроле процесса производства в некоторых случаях является невозможным извлечение датчика для сбора справочных данных, получаемых от сравнительного фона; при этом необходимо предусмотреть различные варианты, включая внутреннее сравнение, измерение сравнительного фона с использованием второго детектора и др. Прямое сравнение спектров возможно только при условии получения спектров относительно фона, обладающего аналогичными оптическими свойствами.

Измерение пропускания. Измерение и расчёт пропускания зависит от фонового пропускания. Для определения фонового пропускания обычно используют воздух, полимерный диск, пустую кювету, используемый растворитель или в специальных случаях стандартный образец. Метод в основном применяется для исследования разведённых и неразведённых жидкостей, дисперсионных систем, растворов и твёрдых образцов (включая таблетки и капсулы). Для измерения пропускания твёрдых образцов необходимо использовать подходящие приспособления для образцов. Жидкие образцы исследуют либо в кюветах подходящей длины (от 0,5 мм до 4 мм), прозрачных в БИК области, либо путём погружения оптоволоконного зонда подходящей конфигурации.

Измерение диффузного отражения. Данный способ измерения обычно используется для твёрдых тел. Образцы исследуют непосредственно, либо с помощью подходящего устройства (например, держателя образца), либо путём прямого контакта с оптоволоконным зондом. Материалы могут контролироваться через полированное окошко (например, сапфировое) или с использованием оптоволоконного зонда. Должны быть приняты меры для обеспечения воспроизводимости условий измерения спектров от образца к образцу. Для получения базовой линии сканируется отражённое излучение фона, а затем измеряется отражение одного или нескольких исследуемых образцов. В качестве стандартной отражательной поверхности обычно используются керамика, термопластические смолы, золото либо другие подходящие материалы.

Измерение пропускания-отражения. Данный режим обычно используется для жидкостей, суспензий и прозрачных полимерных материалов. Отражатель размещают позади образца таким образом, чтобы удваивать оптический путь. Такая конфигурация может быть адаптирована для совместного использования одной и той же геометрии прибора для системы с отражателем и системы с оптоволоконным зондом, когда источник излучения и детектор располагаются по одну сторону образца. Образец исследуется в кювете с зеркалом или подходящим диффузным отражателем, изготовленным либо из металла, либо из инертного вещества (например, высушенного титана диоксида), которое не поглощает в БИК области. Жидкости также могут быть измерены в поточном режиме с использованием in-line зондов пропускания-отражения.

###### Факторы, влияющие на результаты измерений

Окружающая среда. При проведении испытаний должны учитываться температура и влажность окружающей среды.

Область контакта образца. Область контакта образца или конец зонда должны быть очищены перед проведением измерения. В области контакта с образцом также не должно быть значительного налипания продукта либо загрязнений, которые могут влиять на измерение.

Температура образца. Температура образца может влиять как на его пропускание, так и на его отражение. Контроль температуры важен при анализе водных растворов и многих жидкостей, когда разница в несколько градусов может приводить к существенным спектральным изменениям. Кроме того, температура играет важную роль при исследовании твёрдых образцов, содержащих воду, дисперсных систем, аморфных объектов и др.

Влага и остаточные количества растворителей. Наличие воды и остаточных количеств растворителей может оказать влияние на характер спектра и результаты анализа. Необходимость и условия высушивания должны быть указаны в фармакопейной статье.

Толщина образца. Определяет степень пропускания. С увеличением толщины слоя наблюдается увеличение поглощения. Поэтому при сравнительных измерениях пропускания толщина образца должна быть одинаковой или учитываться. При измерении отражения толщина слоя не имеет принципиального значения, но нужно учитывать, что толщина слоя должна быть сопоставимой с глубиной проникновения луча в образец. В случае недостаточной толщины за образцом ставится дополнительный рефлектирующий материал, например штамп с золотым покрытием.

Оптические свойства образца. При анализе твёрдых образцов необходимо обеспечивать максимально возможную однородность пробы, так как различия в плотности или размерах частиц сказываются на характере спектра. Спектры физически, химически или оптически гетерогенных образцов следует регистрировать либо с увеличенным размером пучка света, либо используя устройства, вращающие образцы во время измерений. При этом желательно проводить измерения каждого образца несколько раз с последующим усреднением спектров.

Формы твёрдого состояния. На вибрационные спектры оказывают влияние различия в формах твёрдого состояния (полиморфные формы, гидраты, сольваты и аморфные формы). Разница в кристаллической структуре (полиморфизм) оказывает влияние на спектр, что позволяет отличать друг от друга кристаллические или аморфные формы на основании их БИК-спектров. При проведении анализа необходимо учитывать кристаллическую структуру (модификацию) эталонного спектра или калибровочного стандартного образца, используемого в методе анализа.

Возраст образца. Свойства образцов могут изменяться во времени, и эти изменения могут обуславливать спектральные различия для одних и тех же образцов. В зависимости от условий хранения твёрдые образцы могут абсорбировать или терять воду, а части аморфного вещества могут кристаллизоваться. Данные изменения должны быть учтены при построении калибровочных моделей, как для целей идентификации, так и для целей количественного анализа.

###### Предварительная обработка данных БИК-спектров

Перед разработкой классификации или калибровочной модели во многих случаях и, в частности, для спектров, получаемых в режиме отражения, может понадобиться некоторая форма предварительной математической обработки спектра. Это может быть сделано с целью, например, уменьшения вариабельности базовой линии, уменьшения воздействия известных помех, которые оказывают влияние на последующие математические модели, или для упрощения данных перед их использованием. В некоторых случаях спектры также могут быть нормализованы или скорректировано рассеяние, например, с использованием преобразования стандартного отклонения случайной величины с нормальным распределением. Предварительная спектральная обработка может включать, например, кадрирование, снижение шума и численный расчёт производных спектра первого или второго порядка. Производные более высоких порядков использовать не рекомендуется ввиду увеличивающегося спектрального шума.

###### Качественный анализ

Качественный анализ (квалификация и идентификация) в БИК-спектрометрии основан на схожести спектров одного и того же вещества.

Для проведения качественного анализа первоначально создают библиотеку стандартных спектров, подбирают оптимальную математическую модель для обработки спектров и реализации алгоритмов их сравнения. Далее проводят валидацию библиотеки в совокупности с выбранной математической моделью (см. раздел «Валидация метода качественного анализа»). Качественный анализ проводят путём сравнения спектра испытуемого образца со спектрами в библиотеке (см. раздел «Анализ данных»).

Создание библиотеки стандартных спектров

Библиотека представляет совокупности спектров, содержащих характеристическую информацию о каждом объекте анализа. Для каждой совокупности спектров при помощи соответствующих методов и алгоритмов определяют оптимальные параметры идентификации. Заданные установки действительны для всей библиотеки. Для близких объектов, неразличимых при заданных установках, создаются подбиблиотеки, в которых могут быть использованы другие методы предварительной обработки спектров и алгоритмы анализа. Количество спектров в библиотеке зависит от её применения. Все спектры в используемой библиотеке должны иметь одинаковые спектральный диапазон и количество исходных точек, технику измерения и предварительную обработку данных.

В библиотеку включают спектры веществ, соответствующих предъявляемым требованиям, качество которых подтверждено фармакопейными или другими аттестованными методами.

Для учёта возможных вариаций свойств каждого вида анализируемых объектов регистрируют спектры нескольких серий (партий). Регистрацию спектров проводят в схожих условиях измерений и выполняют одинаковую предварительную обработку. Выбранная предварительная обработка включённых в библиотеку спектров сохраняется неизменной при последующих измерениях.

Прямое сравнение спектров испытуемого вещества и стандартного образца. Если позволяет специфичность, для целей качественной химической или физической идентификации использование спектральной библиотеки сравнения может не требоваться.

Анализ данных

Сравнение спектров испытуемых образцов при качественном анализе проводят с индивидуальными или усреднёнными спектрами в библиотеке, в том числе с помощью различных математических методов.

Библиотека может использоваться для построения алгоритмов классификации. Возможно использование разных алгоритмов, например, метода главных компонент (МГК), комбинированного с кластерным анализом, метода SIMCA (soft independent modeling of class analogy – независимого моделирования аналогий классов), а также других алгоритмов, как включённых в математическое обеспечение БИК-спектрометров, так и разработанных третьей стороной. Надёжность используемого метода должна быть проверена. Например, коэффициент корреляции, сумма квадратов отклонений, расстояния внутри модели и прочие показатели должны быть согласованы с уровнем принятия решений, представленным в процедуре валидации.

Метод анализа должен быть валидирован.

Валидация метода качественного анализа

Валидация метода призвана продемонстрировать его пригодность для целей анализа.

Валидацию метода проводят на проверочном наборе объектов, не участвовавших в построении метода, и предполагает проверку специфичности, чувствительности и устойчивости (робастности).

Чувствительность показывает, какая часть объектов проверочного набора, схожих с объектами библиотеки, правильно распознаётся как «свои».

Специфичность показывает, какая часть объектов проверочного набора, отличных от библиотечных, правильно распознаётся как «чужие».

Особое внимание уделяется результатам классификации объектов, спектры которых визуально схожи со спектрами объектов библиотеки, но отличаются от них по композиции или химической структуре. Такие образцы должны правильно определяться как «чужие».

Устойчивость показывает, что незначительные изменения условий (например, температура, влажность воздуха, вибрации, температура образца, степень уплотнения материала, глубина погружения зонда, толщина слоя и т.д.) не влияют на результаты и надёжность идентификации или квалификации.

###### Анализ предельного содержания

Относительное сравнение спектров. Для целей такого анализа предельного содержания, как максимальная или минимальная оптическая плотность, при которых поглощает анализируемое вещество, когда происходит сравнение спектров, калибровка не требуется. Кроме того, для контроля конечной точки сушки в пределах специфичных длин волн поглощения может быть использован такой же подход, как и в качественном анализе. Необходимо продемонстрировать пригодность спектрального диапазона и предварительной обработки данных (при её использовании) для намеченных целей.

Специфичность. Для предельного испытания должна быть продемонстрирована относительная отличительная способность. Объём испытаний по определению специфичности зависит от применения и контролируемых рисков. Изменчивость в концентрациях матрикса в пределах рабочего диапазона не должна оказывать влияние на измерение.

###### Анализ трендов

Относительное сравнение спектров. Калибровка не обязательна при сравнении спектров с целью анализа трендов, таких как подход подвижного блока для расчёта статистических параметров (среднее, медианное и стандартное отклонение). Например, для контроля однородности смеси с использованием БИК спектрометрии принят такой метод анализа данных. Для анализа трендов должны использоваться подходящие спектральные диапазоны и алгоритмы.

Специфичность. Должна быть продемонстрирована относительная отличительная способность анализа трендов. Объём испытаний по определению специфичности зависит от применения и контролируемых рисков. Изменчивость в концентрациях матрикса в пределах рабочего диапазона не должна оказывать влияние на анализ трендов.

###### Количественный анализ

Разработка калибровочной модели

При разработке модели устанавливается зависимость изменения интенсивности поглощения или отражения в спектре образцов от изменения свойств и/или состава веществ. При этом регистрируют спектры образцов с известными значениями их состава и/или их свойств, подтверждённых аттестованными методами. Так как хемометрические алгоритмы не допускают экстраполяций, необходимо, чтобы область калибровочных концентраций была не менее ожидаемого диапазона анализируемых концентраций или других количественных характеристик. Калибровочные образцы должны быть по возможности равномерно распределены внутри диапазона рабочих концентраций.

Регистрацию спектров проводят при соблюдении параметров эксперимента, факторов, влияющих на результаты измерений, и первичной обработки, которые предварительно оптимизированы для всех анализируемых объектов и сохраняются постоянными при последующих измерениях.

Калибровочную модель оптимизируют при помощи подходящего способа предварительной обработки спектров, выбора спектральной области и математического алгоритма.

Предварительная обработка данных. Выбор длины волны или исключение некоторых диапазонов длин волн могут увеличить правильность и робастность калибровочных моделей. К данным может быть применено сжатие длин волн (усреднение длин волн).

Анализ данных. Для построения калибровочной модели может использоваться любой обоснованный математический алгоритм. Так как в области БИК диапазона наблюдается сильное перекрывание полос поглощения, количественный анализ проводят преимущественно хемометрическими алгоритмами, например, такими, как метод проекций на латентные структуры, метод регрессии на главные компоненты, метод множественной линейной регрессии, метод частных наименьших квадратов. Для калибровочных моделей, полученных методом регрессии главных компонент и методом частных наименьших квадратов, по коэффициентам регрессии и/или весовым коэффициентам можно построить график и области наибольших коэффициентов или весовых коэффициентов сопоставить со спектром анализируемого вещества.

Валидация калибровочной модели

Валидация модели калибровки предполагает демонстрацию её пригодности для решения поставленной цели. При этом должны быть определены следующие валидационные характеристики: специфичность (селективность), линейность, рабочий диапазон концентраций (аналитическая область), правильность, прецизионность и устойчивость (робастность).

При построении калибровочных моделей с помощью хемометрических методов анализа качество калибровки оценивается по среднеквадратичному остатку калибровки (RMSEC) и среднеквадратичному остатку прогноза (RMSEP):

где Nc – число образцов калибровочного набора;
yi – количественная характеристика, полученная по аттестованной методике;
– количественная характеристика, полученная по калибровочной модели.

где Np – число образцов проверочного набора, схожих с образцами калибровочного набора;
yj – количественная характеристика, полученная по аттестованной методике;
– предсказанная с помощью калибровочной модели количественная характеристика.

Для сравнения результатов калибровки, построенной по БИК-спектрам, с результатами, полученными по аттестованной методике, могут быть использованы альтернативные статистические методы (парный t-тест, оценка смещения и др.).

При анализе БИК методом следует учитывать, корректировать и обоснованно исключать резко выделяющиеся результаты.

Все выбросы подлежат анализу и, в случае их информативной важности или подтверждения правильности с помощью аттестованной методики, они могут быть включены в модель.

###### Ревалидация, или повторная валидация

Прошедший валидацию и признанный пригодным для применения метод качественного или количественного анализа нуждается в периодической повторной валидации, или ревалидации. При выявлении отклонений необходимо провести корректировку метода.

БИК метод повторно валидируют, если:

- в библиотеку добавлен новый объект (для качественного анализа);

- есть предпосылки к изменению характеристик объектов, спектры которых уже включены в библиотеку (изменение технологии производства (синтеза), состава, качества исходного сырья, упаковки и т. д.);

- обнаружены иные изменения и/или несоответствия в свойствах анализируемых объектов или методике.

###### Перенос моделей

При переносе моделей качественного и количественного анализа с одного прибора на другой должны учитываться спектральные характеристики используемых спектрометров (разрешение, диапазон волновых чисел и др.). Под процедурами переноса моделей понимаются различные хемометрические алгоритмы (математические и статистические). После переноса на другой прибор для подтверждения работоспособности модели её необходимо ревалидировать.

###### Хранение данных

Хранение данных осуществляют в электронном виде в соответствии с требованиями программного обеспечения. При этом необходимо сохранять исходные спектры, не подвергшиеся математической обработке, с целью их возможного дальнейшего использования при оптимизации библиотек или методов.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.1.0002 Спектрометрия в средней инфракрасной области

Взамен ОФС.1.2.1.1.0002.15

Спектрометрия в средней инфракрасной области (ИК-спектрометрия) – метод, основанный на взаимодействии инфракрасного излучения с веществом, в результате которого возникают межмолекулярные и внутримолекулярные колебания со специфической частотой. Инфракрасные спектры (колебательные спектры) (ИК-спектры) возникают вследствие поглощения энергии электромагнитного излучения при колебаниях ядер атомов в молекулах или ионах, которые сопровождаются изменением дипольных моментов, и представляют собой зависимость пропускания или поглощения от длины волны (λ) или частоты колебаний (ν).

Под инфракрасной областью (ИК-область) подразумевают электромагнитное излучение в области длин волн от 0,8 до 1000 мкм. Область от 0,8 до 2,5 мкм относится к ближней ИК-области спектра, область от 2,5 до 25 мкм – к средней ИК-области, область от 25 до 1000 мкм – к дальней ИК-области.

Длину волны (λ) в ИК-спектрах обычно измеряют в микрометрах (микронах), мкм.

Поскольку частота колебаний в ИК-спектрах имеет большие числовые значения, обычно используют не частоты (ν), а волновые числа (), которые измеряются в см−1 и связаны с частотой (ν) уравнением:

где ν – частота, Гц (с−1);
с – скорость света в вакууме, см∙с−1.

Волновое число () связано с длиной волны (λ, мкм) соотношением:

Таким образом, область 12500–4000 см−1 относится к ближней ИК-области, область 4000–400 см−1 – к средней, а область 400–10 см−1 – к дальней ИК-области.

В данной ОФС рассматривается метод спектрометрии в средней области, то есть в области от 4000 до 400 см−1 (2,5–25 мкм). Это область, в которой основные колебания функциональных групп молекул проявляются на спектре в виде полос поглощения. Область ниже 1500 см−1, называемая также областью «отпечатков пальцев», является наиболее информативной частью спектра, которая характеризует исследуемые молекулы.

В ОФС также рассматриваются метод нарушенного полного внутреннего отражения и метод диффузного отражения. Измерение нарушенного полного внутреннего отражения основано на явлении общего внутреннего отражения. Образец с коэффициентом преломления n2 приводят в плотный контакт с кристаллом (из алмаза, германия, селенида цинка или другого подходящего вещества), имеющим коэффициент преломления n1, который больше, чем n2. Через кристалл подают ИК-излучение. Теоретически полное отражение всего излучения (полное внутреннее отражение) происходит, когда угол α между падающим лучом и границей раздела образец-кристалл превышает критическое значение αс. Однако на самом деле излучение слегка проникает в образец и при этом частично поглощается. Полное отражение нарушается, в результате чего становится возможной запись спектра поглощения. На практике для увеличения интенсивности поглощения часто используют многократное внутреннее отражение, хотя некоторые приспособления позволяют проводить измерения при однократном отражении.

В отличие от зеркального отражения на идеально гладких поверхностях, диффузное отражение возникает на «идеально» шероховатой поверхности. Принцип измерения диффузного отражения основан на фокусировке ИК-излучения эллипсоидным зеркалом на поверхности образца, находящегося в открытой чашечке. Затем диффузно-отраженное от образца излучение собирается вторым эллипсоидным зеркалом и с помощью отклоняющего плоского зеркала направляется к детектору спектрометра.

###### Область применения

Поскольку полосы поглощения в ИК-спектре характеризуют входящие в состав молекулы функциональные группы, спектрометрия в средней инфракрасной области широко используется для установления подлинности субстанций и получения информации об их структуре.

ИК-спектрометрия широко используется в химическом и физическом анализе, а также на различных стадиях производственного процесса лекарственных средств. Основными областями применения данного метода являются:

- установление подлинности действующих и вспомогательных веществ, промежуточных продуктов производственного процесса и упаковочных материалов;

- оценка качества действующих и вспомогательных веществ, промежуточных продуктов производственного процесса и упаковочных материалов, включая контроль «от серии к серии»;

- определение количества действующих веществ в образце;

- определение количества примесей, например, в газах, неорганических веществах;

- контроль за химическими реакциями, например при химическом синтезе;

- установление свойств твёрдых веществ, таких как полиморфизм (испытание по этому показателю проводятся аналогично испытанию по показателю «Подлинность», при этом используется СО определённой полиморфной модификации).

ИК-спектрометрия наиболее часто используется для идентификации веществ, но также может применяться и для количественного анализа. Определение количества действующего вещества основано на законе Бугера-Ламберта-Бера, который устанавливает отношение поглощения образца к его концентрации. Измерение выполняют с использованием приготовленного подходящим образом образца. Затем данные обрабатываются и анализируются для идентификации веществ или количественного определения (например, на основании интегрирования полос поглощения ИК-спектра). Качество спектра можно повысить с помощью предварительной математической обработки. На практике она заключается в спектральной нормализации и вычитании полос, соответствующих диоксиду углерода и парам воды. Для спектров образца и раствора сравнения выполняется одинаковая предварительная математическая обработка.

Однако применение данного метода имеет некоторые ограничения. Метод не подходит для анализа следовых количеств веществ при ограниченном объёме образца. Кроме того, установление подлинности методом ИК требует использования СО. При отсутствии СО необходимо применение дополнительных методов, так как метод ИК не дает однозначной информации о последовательности соединения функциональных групп в молекуле. Метод ИК-спектрометрии также не позволяет отличить энантиомеры вещества, поскольку они будут давать одинаковый спектр.

###### Оборудование

Наиболее часто используются ИК-спектрофотометры с Фурье-преобразованием, которые обычно состоят из подходящего источника полихроматического излучения (например, проводящего керамического стержня), интерферометра, держателя образца, детектора и специального программного обеспечения для контроля работы спектрофотометра, записи спектров и обработки данных. В спектрофотометрах с Фурье-преобразованием используется полихроматическое излучение и рассчитывается спектр в заданной области частот путём Фурье-преобразования исходных данных.

Также могут быть использованы инфракрасные спектрофотометры, снабжённые оптической системой (призмы или дифракционные решетки), выделяющей монохроматическое излучение в измеряемой области.

Для записи спектра по методу нарушенного полного внутреннего отражения оборудование должно быть оснащено специальной приставкой, которая позволяет проводить измерение при однократном или многократном отражении. Она состоит из отражающего элемента и подходящего крепления, позволяющего её установку в спектрофотометр для достижения максимального пропускания.

ИК-спектрофотометры также могут работать вместе с микроскопом для исследования мелких частиц в составе образца или для химической визуализации.

ИК-спектрометрия может применяться в комбинации с другими аналитическими методами, такими как термический анализ или хроматография.

###### Подготовка образца

Для записи спектра пропускания или поглощения готовят образец субстанции по одной из следующих методик.

Жидкости. Жидкости исследуют в форме плёнки между двумя пластинками, прозрачными для инфракрасного излучения, или в кювете с малой (обычно 0,01–0,05 мм) толщиной слоя, также прозрачной для инфракрасного излучения.

Жидкости или твёрдые вещества в растворе. Готовят раствор испытуемой субстанции в подходящем растворителе. Выбирают концентрацию вещества и толщину слоя кюветы, позволяющие получить удовлетворительный спектр.

Обычно хорошие результаты получают при концентрациях от 10 до 100 г/л при толщине слоя от 0,5 до 0,1 мм.

Поглощение растворителя компенсируют путём помещения в канал сравнения аналогичной кюветы, содержащей выбранный растворитель. Если кюветы, заполненные растворителем, обладают разным поглощением при выбранной длине волны, то вносят поправку на измеренное поглощение испытуемого раствора. При использовании спектрофотометров с Фурье-преобразованием коррекция кювет не требуется, поскольку одна и та же кювета может быть использована и для растворителя, и для испытуемого раствора. Кюветы для спектрометрии в инфракрасной области изготавливают из солевых материалов (NaCl, KBr, CaF2, LiF и др.). Область прозрачности кюветы в ИК-области зависит от использованного материала.

Не существует растворителей, которые при значительной толщине слоя были бы полностью прозрачными для ИК-спектров. Четырёххлористый углерод (при толщине слоя до 5 мм) практически прозрачен до области 6 мкм (1666 см−1). Углерода дисульфид (при толщине слоя 1 мм) подходит как растворитель до области 40 мкм (250 см−1) за исключением областей от 4,2 до 5,0 мкм (от 2381 до 2000 см−1) и от 5,5 до 7,5 мкм (от 1819 до 1333 см−1), где он имеет сильное поглощение. Другие растворители прозрачны в относительно узкой области.

Растворители, применяемые в спектрометрии в инфракрасной области, должны быть инертны к материалу, из которого сделана кювета.

Твёрдые вещества. Твёрдые вещества исследуют в твёрдом состоянии (диски из галогенидов щелочных металлов), диспергированными в подходящей жидкости в виде суспензии или в виде плёнки из расплавленной массы между двумя пластинами, прозрачными для инфракрасного излучения. Способ подготовки образца должен быть указан в методике испытания.

Диски. Растирают 1–2 мг испытуемого вещества с 0,3–0,4 г (если не указано иначе в методике испытания) тщательно измельчённого и высушенного калия бромида или калия хлорида (если вещество является гидрохлоридом, рекомендуется использовать калия хлорид). Обычно такого количества достаточно для приготовления диска диаметром 13±2 мм и получения спектра подходящей интенсивности. Смесь тщательно растирают, добиваясь необходимой однородности, и прессуют диск при давлении около 800 МПа (8 т/см2). Диски из нестабильных при обычных атмосферных условиях или гигроскопичных веществ прессуют в вакууме.

Причиной образования некачественных дисков могут быть такие факторы, как недостаточное или чрезмерное растирание, влага или иные примеси в дисперсионной среде. Диск непригоден для испытания, если в области прохождения луча на диске имеются трещины, или при визуальном осмотре он неоднороден по прозрачности, или его пропускание при 2000 см-1 (5 мкм) составляет менее 60 % без компенсации при отсутствии специфической полосы поглощения.

Суспензии. Небольшое количество вещества, предназначенного для испытания, растирают с минимальным количеством вазелинового масла или другой подходящей жидкости (смешивают 5–20 мг твёрдого вещества с 1–2 каплями иммерсионной жидкости). Полученную суспензию сжимают между двумя пластинками (NaCl или KBr), прозрачными для инфракрасного излучения.

Газы. Газы исследуют в кювете, прозрачной для инфракрасного излучения, с длиной оптического пути около 100 мм. Откачивают воздух из кюветы и заполняют её анализируемым газом через кран или при помощи игольчатого клапана.

Если необходимо, доводят давление в кювете до атмосферного, используя газ, прозрачный для инфракрасного излучения (например, азот или аргон). Для исключения помех, связанных с поглощением воды, углерода диоксида или других атмосферных газов, в канал сравнения помещают идентичную кювету, которая либо вакуумирована, либо заполнена газом, прозрачным для инфракрасного излучения.

Для записи спектра по методу нарушенного полного внутреннего отражения подготовку образца проводят одним из нижеприведённых способов.

Растворы. Вещество растворяют в соответствующем растворителе, соблюдая условия, приведённые в методике испытания. Раствор испаряют на поверхности внутреннего элемента отражения, который может быть изготовлен из алмаза, германия, цинка селенида, таллия бромида – таллия йодида (KRS-5) или другого подходящего минерала с большим показателем преломления.

Твёрдые вещества. Вещество помещают на поверхность внутреннего элемента отражения таким образом, чтобы достичь как можно более плотного и полного контакта со всей поверхностью кристалла (обычно подготовку таких образцов проводят под давлением).

Подготовка образцов для спектрометрии в инфракрасной области диффузного отражения: испытуемое вещество растирают с тщательно измельчённым и высушенным калия бромидом или калия хлоридом. Содержание испытуемого вещества в полученной смеси должно составлять около 5 %, если не указано иначе в методике испытания. Смесь тщательно растирают и регистрируют спектр.

###### Идентификация с использованием стандартных образцов

Образец испытуемого вещества и стандартный образец готовят по одной и той же методике и записывают спектры, если не указано иначе в методике испытания, в области от 4000 до 650 см−1, в некоторых случаях до 200 см−1, в одних и тех же условиях. Полосы поглощения (минимумы пропускания и максимумы поглощения) в спектре испытуемого образца должны соответствовать по положению полосам поглощения в спектре стандартного образца.

Несовпадение спектров испытуемого образца и СО может быть вызвано их различной степенью чистоты или различными полиморфными модификациями. В обоих случаях рекомендуется перекристаллизация испытуемого образца и СО в одинаковых условиях, если иное не указано в методике испытания.

Идентификация с использованием эталонных спектров

Контроль разрешающей способности. В случае приборов с монохроматором записывают спектр плёнки полистирола толщиной около 0,04 мм. Разность х (рис. 1) между процентом пропускания в максимуме пропускания А при 2870 см−1 (3,48 мкм) и минимуме пропускания В при 2849,5 см−1 (3,51 мкм) должна быть более 18. Разность y между процентом пропускания в максимуме пропускания С при 1589 см−1 (6,29 мкм) и минимуме пропускания D при 1583 см−1 (6,32 мкм) должна быть более 10.

Контроль разрешающей способности ИК-спектрометров с Фурье-преобразованием проводят в соответствии с рекомендациями производителя прибора.

Проверка шкалы волновых чисел. Шкала волновых чисел может быть проверена с помощью плёнки полистирола, которая имеет минимум пропускания (максимум поглощения) при волновых числах (в см−1), приведённых в таблице.

Методика. Субстанцию готовят к испытанию в соответствии с инструкцией, прилагаемой к эталонному спектру. Используя условия, при которых проводилась проверка разрешающей способности и получен эталонный спектр, записывают спектр испытуемого образца и на него накладывают полосы полистирола при 2849,5 см−1 (3,51 мкм), 1601,2 см−1 (6,25 мкм) и 1028,3 см−1 (9,72 мкм). Сравнивают два спектра (эталонный и спектр испытуемой субстанции) и полосы полистирола, указанные выше. При использовании положения полос полистирола в качестве стандартных величин положения значимых полос в спектре испытуемой субстанции и в эталонном спектре должны соответствовать друг другу в пределах 0,5 % от шкалы волновых чисел. Относительная величина полос обоих спектров должна согласовываться между собой.

Рисунок 1. Типичный спектр полистирола, используемый для проверки разрешающей способности

Таблица 1. Минимумы пропускания и допустимые отклонения для плёнки полистирола
Минимумы пропускания, см−1 | Допустимые отклонения, см−1
--- | ---
ИК-спектрометр с монохроматором | ИК-спектрометр с Фурье-преобразованием
3060,0 | ±1,5 | ±1,0
2849,5 | ±2,0 | ±1,0
1942,9 | ±1,5 | ±1,0
1601,2 | ±1,0 | ±1,0
1583,0 | ±1,0 | ±1,0
1154,5 | ±1,0 | ±1,0
1028,3 | ±1,0 | ±1,0

###### Примеси в газах

Для анализа примесей в газах используют кювету, прозрачную для инфракрасного излучения и имеющую соответствующую длину оптического пути. Кювету заполняют так, как указано в разделе «Газы». Для обнаружения и количественной оценки примесей используют методики, указанные в фармакопейных статьях.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.1.0003 Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях

Взамен ОФС.1.2.1.1.0003.15

Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях спектра – это метод молекулярной абсорбционной спектроскопии, основанный на измерениях и изучении спектров поглощения электромагнитного излучения молекулами в оптической области. Измерения обычно проводят в ближней ультрафиолетовой области (диапазон волн приблизительно 180–400 нм) и видимой области (диапазон волн приблизительно 400–800 нм).

###### Область применения

Метод спектрофотометрии в ультрафиолетовой и видимой областях спектра предназначен для количественного и качественного анализа лекарственных средств, вспомогательных веществ, упаковочных и других материалов, используемых в фармацевтической практике, при этом испытуемые образцы могут находиться в жидком, твёрдом или газообразном состоянии. Метод также может быть использован для исследования строения, состава, определения физических и химических свойств различных светопоглощающих соединений.

Спектрофотометрию в ультрафиолетовой и видимой областях спектра применяют для контроля качества веществ и материалов (например, промежуточных продуктов) при фармацевтической разработке, технологическом процессе производства лекарственных средств, исследовании стабильности и на других этапах жизненного цикла лекарственных средств.

При анализе веществ методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») спектрофотометрию в ультрафиолетовой и видимой областях применяют в качестве метода детектирования, используя детекторы в ультрафиолетовой и видимой областях спектра и диодно-матричные детекторы.

###### Метод

Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях основана на способности молекул и ионов поглощать свет при определённых длинах волн в ультрафиолетовом и видимом диапазонах спектра. Поглощение световой энергии приводит к переходу валентных электронов на более высокий энергетический уровень (возбуждение). Пребывание валентного электрона в возбуждённом состоянии краткосрочно, возвращение его в основное состояние происходит посредством безизлучательной релаксации избыточной энергии. Разность энергий основного и возбуждённого состояний определяет длину волны полосы поглощения. Поскольку каждый энергетический уровень молекулы или молекулярного иона также связан с колебательными и вращательными подуровнями, это приводит к множеству допустимых переходов электронов, которые, как правило, невозможно разделить, в результате чего образуются полосы поглощения, а не отчетливые линии. Эти полосы являются характеристикой сопряжённых хромофорных систем в структуре соединений.

При использовании метода спектрофотометрии в ультрафиолетовой и видимой областях испытуемый образец подвергают воздействию света, затем измеряют уменьшение интенсивности (режим пропускания) и/или рассеяние (режим диффузного отражения) выходящего (прошедшего или отражённого), как правило, монохроматического светового потока (электромагнитного излучения) при конкретной длине волны или в определенном диапазоне длин волн.

Режим пропускания

В этом режиме определяют пропускание образца, помещённого между источником света и детектором при заданной длине волны ультрафиолетового/видимого диапазона. Пропускание (T) представляет собой отношение интенсивности светового потока, прошедшего через образец, к интенсивности падающего на образец светового потока и определяется по формуле:

(1)

где Т – пропускание;
I – интенсивность прошедшего монохроматического излучения;
I0 – интенсивность падающего монохроматического излучения.

Спектр может быть получен построением зависимости пропускания или оптической плотности от длины волны. Оптическая плотность (A) является измеряемой безразмерной величиной, представляющей собой десятичный логарифм величины, обратной пропусканию для монохроматического излучения; она определяется по формуле:

(2)

где A – оптическая плотность;
Т – пропускание;
I – интенсивность прошедшего монохроматического излучения;
I0 – интенсивность падающего монохроматического излучения.

В соответствии с законом Бугера-Ламберта-Бера для прозрачных разбавленных поглощающих растворов, при отсутствии мешающих физико-химических факторов, оптическая плотность пропорциональна длине оптического пути (толщине поглощающего слоя) и концентрации вещества в растворе в соответствии со следующей формулой:

(3)

где A – оптическая плотность;
ε – молярный коэффициент поглощения, л/моль·см;
с – молярная концентрация вещества в растворе, моль/л;
l – длина оптического пути (толщина поглощающего слоя), см.

В фармакопейных статьях используют удельный показатель поглощения вещества (), который связан с оптической плотностью следующей формулой:

(4)

где A – оптическая плотность;
– удельный показатель поглощения вещества;
сm – массовая концентрация вещества в растворе, г/100 мл;
l – длина оптического пути или толщина слоя кюветы, см.

представляет собой удельный показатель поглощения раствора вещества с концентрацией 1 г/100 мл (или 1 %, (м/о)), находящегося в кювете или ячейке с длиной оптического пути 1 см и измеряется при определенной длине волны. Величины и ε связаны между собой следующим соотношением:

(5)

где М.м – относительная молекулярная масса испытуемого вещества.

Режим диффузного отражения

В этом режиме измеряют отражение (R) в соответствии с формулой:

(6)

где R – отражение;
I – интенсивность отражённого и/или рассеянного света испытуемым образцом;
I0 – интенсивность отражённого и/или рассеянного света образцом сравнения или эталонной отражающей поверхностью.

Спектры отражения в ультрафиолетовой/видимой области обычно получают путём расчёта и построения графика зависимости log10 (1/R) от длины волны.

###### Оборудование

Спектрофотометры или иные приборы, предназначенные для измерений в ультрафиолетовой и видимой областях спектра, состоят из оптической системы, выделяющей монохроматическое излучение в области от 180 до 800 нм и обеспечивающей его прохождение через образец, а также устройства для детектирования прошедшего излучения. Основными составляющими частями этих приборов, как правило, являются:

- подходящий источник света (излучения), например, дейтериевая лампа для ультрафиолетовой области, вольфрамово-галогенная лампа для видимой области или ксеноновая лампа для всей ультрафиолетовой и видимой области спектра;

- монохроматор, например, дифракционная решётка, призма или светофильтры;

- другие оптические элементы, например, линзы или зеркала, которые обеспечивают прохождение пучка света через основные узлы прибора, а также формируют два луча света, например, в двухлучевых спектрофотометрах, в отличие от однолучевых;

- контейнер для образца, держатель или устройство для отбора проб; например, подходящие обычные кюветы, оптоволоконные зонды и погружённые передающие ячейки (например, из кварца высокой чистоты или сапфира, прозрачного для ультрафиолетового и видимого излучения); выбор зависит от предполагаемого применения, при этом особое внимание уделяют его пригодности для данного типа анализируемого образца;

- детектор излучаемой энергии, который может быть одноканальным (фотоумножитель, фотодиод) или многоканальным (фотодиодный матричный детектор или устройство с зарядовой связью);

- подходящие компьютеризированные системы для получения, обработки и оценки данных.

Кюветы

Кюветы или ячейки с определённой длиной оптического пути (толщиной слоя), могут быть изготовлены из разных материалов, например, кварца или стекла. Допустимое отклонение длины оптического пути кварцевой или стеклянной кюветы составляет ±0,5 %, то есть для кюветы с толщиной слоя 1 см допустимое отклонение – не более ±0,005 см. Можно использовать кюветы из полимерных материалов, но в этом случае интервал допустимого отклонения будет больше, поэтому применение таких кювет должно быть тщательно обосновано, основываясь на оценке рисков.

Кюветы, предназначенные для испытуемого раствора и раствора сравнения, должны иметь одинаковое пропускание (или оптическую плотность) при заполнении одним и тем же растворителем. В противном случае это различие следует учитывать.

Для проверки чистоты оптических кювет и любых значительных различий в их толщине или параллельности может быть использован следующий метод: кювету заполняют водой и измеряют её наблюдаемую оптическую плотность по сравнению с воздухом при длине волны 240 нм для кварцевых кювет и 650 нм для стеклянных кювет; поворачивают кювету в держателе на 180 ° и снова измеряют наблюдаемую оптическую плотность при той же длине волны.

При использовании сканирующих приборов рекомендуется проводить сканирование в пределах интересующего оптического диапазона.

При использовании двухлучевых спектрофотометров следует принять меры (например, выбрать соответствующие друг другу кюветы), чтобы гарантировать, что любые различия между оптическими плотностями кювет не окажут значительного влияния на результаты анализа, который необходимо выполнить.

Критерии приемлемости:

- наблюдаемая оптическая плотность должна быть не более 0,093 для кварцевых кювет с длиной оптического пути 1 см (ультрафиолетовая область) и 0,035 для стеклянных кювет с длиной оптического пути 1 см (видимая область);

- оптическая плотность, измеренная после поворота на 180 °, не должна отличаться более чем на 0,005 от ранее полученного значения.

###### Условия проведения испытаний

Выбор режима измерения

Режим измерения выбирают в соответствии с предполагаемым применением и типом образца. Режим измерения пропускания или измерения оптической плотности обычно применяют для жидкостей (растворов, дисперсий), но при использовании соответствующих приспособлений такой режим также может быть использован и для твёрдых образцов (таблетки, капсулы). Измерение жидких образцов проводят, используя ячейки или кюветы с подходящей длиной оптического пути (от 0,01 до 5 см), изготовленных из материала, пропускающего ультрафиолетовое и видимое излучение, или, применяя оптоволоконный зонд подходящей конфигурации, погружённый в жидкость.

Для твёрдых образцов может быть выбран режим диффузного отражения. В зависимости от химического состава и физических свойств испытуемого образца ультрафиолетовое и видимое излучение может поглощаться по мере его прохождения через образец. В режиме диффузного отражения непоглощённое излучение частично отражается и/или рассеивается образцом и измеряется детектором прибора. При испытании образец находится в подходящем устройстве, например, держателе образца, или в прямом контакте с зондом.

При использовании метода спектрофотометрии в ультрафиолетовой и видимой областях для мониторинга технологического процесса производства испытание вещества может быть проведено через окно производственного резервуара, которое имеет полированную поверхность, например, кварцевую или сапфировую, или в потоке (in-line) с использованием зонда. При таком использовании необходимо, чтобы при последовательных измерениях образцов условия измерения были максимально воспроизводимыми.

Подготовка прибора

После выбора режима измерения следует, учитывая размер и тип образца, определить условия измерения (размер луча, время измерения, количество измерений) таким образом, чтобы получить удовлетворительное отношение сигнал/шум. Для сканирующих спектрофотометров также выбирают диапазон и скорость сканирования, ширину щели, которые обеспечивают необходимое оптическое разрешение для предполагаемого применения с сохранением требуемого отношения сигнал/шум или линейности аналитического метода. Выполнять коррекцию размера луча, диапазона и скорости сканирования, ширины щели для спектрофотометров с матричными преобразователями нет необходимости, поскольку оптическое разрешение обычно фиксировано, и всегда записывается полный спектр.

Перед измерением оптической плотности необходимо установить или определить положение «ноль» для поглощения (коррекция базовой линии) при данной длине волны или в пределах соответствующего диапазона длин волн.

При проведении испытания движущихся веществ (образцов) при технологическом процессе производства необходимо убедиться, что на показания датчика (сенсора) не влияют возможные загрязнения, налипания вещества и др.

Коррекция фона

Выбирают подходящий спектрофотометрический контрольный образец (раствор сравнения), например, воздух, растворитель, твёрдое вещество.

Растворители, используемые для растворения образца анализируемого вещества при спектрофотометрическом определении в ультрафиолетовой и видимой областях, должны быть оптически прозрачными в используемой области длин волн. Для этих областей длин волн пригодны многие растворители, в том числе вода, спирты, хлороформ, низшие углеводороды, эфиры, разбавленные растворы сильных кислот и оснований.

Для спектрофотометрических детекторов в ультрафиолетовой и видимой областях, используемых в методе высокоэффективной жидкостной хроматографии, в качестве контрольного раствора (раствора сравнения) может быть использована подвижная фаза.

В некоторых случаях при использовании метода спектрофотометрии в ультрафиолетовой и видимой областях для мониторинга технологического процесса производства может оказаться, что извлечь зонд для сбора фоновых данных невозможно. В этом случае рассматривают различные варианты, включая использование внутренних опорных сигналов, измерение контрольных образцов с применением второго детектора и т.д. Напрямую можно сравнивать друг с другом только спектры, снятые по отношению к контрольному образцу, обладающему одинаковыми оптическими свойствами.

В случае измерения отражения используют общепринятые контрольные образцы, включая керамические вещества, фторполимеры, например, политетрафторэтилен, и порошки, такие как бария сульфат (BaSO4) и магния оксид (MgO), а также другие подходящие вещества.

Измерение оптической плотности

Если в фармакопейной статье не указано иное, измерение оптической плотности испытуемого образца проводят в условиях комнатной температуры при указанной длине волны с использованием кювет с толщиной слоя 1 см (используя длину оптического пути 1 см), по сравнению с тем же растворителем или той же смесью растворителей, в которой растворено вещество. Параллельно с испытуемым образцом измеряют оптическую плотность контрольного образца при использовании двухлучевого спектрофотометра или измерение проводят последовательно в короткий промежуток времени при использовании однолучевого спектрофотометра. Значения оптической плотности контрольного и испытуемого образцов должны находиться в пределах рабочего диапазона оборудования, указанного производителем в инструкции по эксплуатации прибора.

Если в фармакопейной статье не указано иное, то при измерении оптической плотности раствора при заданной длине волны оптическая плотность растворителя, измеренная по отношению к воздуху при той же длине волны, не должна превышать 0,4 и, желательно, чтобы она была менее 0,2.

Если в фармакопейной статье для максимума или минимума поглощения указано требование к значению только одной длины волны, то это означает, что полученное значение максимума или минимума поглощения не должно отличаться от указанного более чем на ±2 нм, если не указано иное в фармакопейной статье.

Следует избегать проведения количественных измерений при значениях оптической плотности более 2,0.

###### Обработка и анализ данных

В случае определения концентрации испытуемого образца путём измерения оптической плотности при одной длине волны, обработка данных заключается в определении регрессионной зависимости фотометрических показаний прибора (оптической плотности) от концентрации стандартных образцов.

В случае регистрации спектров в режимах отражения и пропускания перед систематизацией полученных данных или разработкой модели калибровки может потребоваться их предварительная обработка. Целью может быть, например, уменьшение сдвига базовой линии или внесение поправок на рассеяние, вызванное изменениями размера частиц в твёрдых образцах. Например, спектры производных первого, второго и более высокого порядка, как правило, могут использоваться для улучшения разрешения или чувствительности. Такая предварительная обработка позволяет упростить данные и, таким образом, уменьшить возможность вариаций, которые могут вызвать помехи в применяемых впоследствии математических моделях. Различные методы обработки, например, масштабирование, сглаживание, нормализация и дериватизация, могут быть применены по отдельности или в комбинации.

В методе спектрофотометрии в ультрафиолетовой/видимой области спектры поглощения представляют таким образом, чтобы оптическая плотность или её некоторая функция были приведены по оси ординат, а длина волны или некоторая функция длины волны – по оси абсцисс.

###### Проверка работы оборудования

Работоспособность, надлежащее функционирование оборудования для метода спектрофотометрии в ультрафиолетовой и видимой областях проверяют в течение всего периода его эксплуатации. Периодичность проверок, объём режимов измерения и соответствующих критериев приемлемости непосредственно зависят от характеристик используемого оборудования, его предназначения и определяются требованиями, установленными в соответствии с ОФС «Квалификация аналитического оборудования». Например, для оборудования, подверженного воздействию меняющихся условий окружающей среды (температуры, влажности), может потребоваться более частая проверка его функционирования. В табл. 1 приведён минимальный перечень испытаний для различных режимов измерений, выполняемых для проверки работоспособности используемого оборудования. При необходимости могут быть проведены другие подобные испытания. Правильность шкалы длин волн, правильность шкалы оптической плотности и фотометрическую линейность проверяют с использованием либо сертифицированных стандартных образцов, например, твёрдых фильтров или жидких фильтров, находящихся в подходящих герметично укупоренных ёмкостях, либо с использованием специально приготовленных растворов.

Проверка шкалы длин волн в ультрафиолетовой и видимой области

Правильность шкалы длин волн в требуемом спектральном диапазоне проверяют с использованием одного или более стандартных образцов. В зависимости от контролируемого спектрального диапазона длин волн для проверки точности калибровки прибора по шкале длин волн в спектральном ряду могут быть использованы:

Таблица 1. Минимальный перечень испытаний, выполняемых для проверки функционирования оборудования при его эксплуатации
Назначение испытания | Режим измерения | Правильность шкалы длин волн | Правильность шкалы оптической плотности | Фотометрическая линейность | Рассеянный свет | Разрешение/ширина спектральной щели
--- | --- | --- | --- | --- | --- | ---
Количественное определение или испытание на предельное содержание примесей | На основании измерения оптической плотности при одной или более длинах волн | Х | Х | Х | Х a | При наличии требований в фармакопейной статье
Подлинность (идентификация) | На основании длины волны максимума и минимума поглощения | Х | - | - | Х | -
На основании измерения поглощения и длины волны максимума поглощения | Х | Х | - | Х | -
На основании сравнения спектра со спектром стандартного образца | Х | Х | - | - | -

- положения спектральных линий эмиссии газоразрядных ламп (дейтериевой, неоновой, ксеноновой) или линий паров ртути кварцево-ртутной дуговой лампы низкого давления:

- положения полос поглощения твёрдых или жидких фильтров (светофильтров).

В качестве жидких фильтров могут быть применены растворы оксидов редкоземельных элементов – гольмия, церия, смеси неодима и празеодима; твёрдые фильтры представляют собой стёкла, полученные сплавлением оксида редкоземельного металла (гольмия, неодима) в матрице базового стекла. Могут быть использованы как готовые сертифицированные стандартные образцы, так и приготовленные растворы (например, реактив для калибровки спектрофотометра представляет собой гольмия перхлората раствор 4 % в растворе хлорной кислоты 14,1 %). В случае использования готовых стандартных образцов, при проверке положения полос сравнивают их со значениями, указанными в соответствующей сопроводительной документации. В табл. 2 приведены примеры значений максимумов поглощения стандартных образцов, рекомендованных для проверки правильности длин волн.

Некоторые приборы могут иметь автоматическую или встроенную функцию для контроля правильности шкалы длины волны.

Таблица 2. Примеры значений длин волн (максимумов поглощения) стандартных образцов для проверки правильности шкалы длин волн
Стандартный образец | Длина волны, нм*
--- | ---
Растворы | Церий в серной кислоте | 201,1; 211,4; 222,6; 240,4; 253,7
Дидимий в хлорной кислоте | 511,8; 731,6; 794,2
Гольмий в хлорной кислоте | 241,1; 287,2; 361,3; 451,4; 485,2; 536,6; 640,5
Твёрдые фильтры | Неодимовое стекло | 513,5
Гольмиевое стекло | 279,3; 360,9; 453,4; 637,5
Лампы | Дейтериевая | 486,0; 656,1
Ртутная (низкое давление) | 184,9; 253,7; 312,5; 365,0; 404,7; 435,8; 546,1; 577,0; 579,1
Неоновая | 717,4
Ксеноновая | 541,9; 688,2; 764,2
Примечание – Определяемое значение зависит от разрешения прибора

Проверку правильности шкалы длин волн спектрофотометрических детекторов в ультрафиолетовой и видимой областях, используемых в методе высокоэффективной жидкостной хроматографии, также можно осуществлять, измеряя оптическую плотность кофеина раствора 0,05 мг/мл в метаноле, максимум поглощения должен быть при длине волны 272 нм, а минимум поглощения – при длине волны 244 нм.

Критерии приемлемости

Рекомендуется проводить проверку правильности шкалы длин волн не менее чем при 2 длинах волн, которые ограничивают предполагаемый спектральный диапазон.

Допустимое отклонение при определении правильности шкалы длин волн для приборов с использованием кювет составляет ±1 нм при длинах волн менее 400 нм (ультрафиолетовая область) и ±3 нм при длинах волн 400 нм и более (видимая область).

Для спектрофотометрических детекторов в ультрафиолетовой и видимой областях, используемых в методе высокоэффективной жидкостной хроматографии, и при использовании спектрофотометрии в ультрафиолетовой и видимой областях в технологическом процессе производства, допустимое отклонение при проверке правильности шкалы длин волн составляет ±2 нм во всём ультрафиолетовом/видимом диапазоне спектра. Однако в некоторых случаях для технологического процесса производства возможен контроль шкалы длин волн с большими допусками; в этом случае необходимая правильность длины волны должна быть определена пользователем в зависимости от требуемого назначения с использованием подхода, основанного на оценке рисков.

Параметры прибора, особенно его оптических составляющих, таких как ширина щели или диаметр оптического волокна, влияют на разрешение и должны быть такими же, как те, которые предназначены для рутинных измерений.

Проверка шкалы оптической плотности

Для проверки шкалы оптической плотности при подходящем количестве длин волн в предполагаемом спектральном диапазоне используют соответствующие твёрдые или жидкие фильтры для подтверждения того, что оптическая плотность, измеренная на выбранной длине волны, соответствует сертифицированному значению оптической плотности фильтра или значению оптической плотности, рассчитанному из удельного показателя поглощения.

Для приготовления жидких фильтров могут быть использованы растворы стандартного образца никотиновой кислоты для квалификации оборудования (в этом случае значения сертифицированных удельных показателей поглощения должны быть указаны в сопроводительных документах) или растворы калия дихромата при длинах волн, указанных в табл. 3, в которой для каждой длины волны приведено точное значение удельного показателя поглощения и его допустимые пределы, которые основаны на допустимой погрешности при измерении поглощения ±0,01.

Таблица 3. Удельные показателя поглощения и его допустимые пределы растворов калия дихромата при различных длинах волн
Длина волны, нм | Удельный показатель поглощения | Допустимые пределы для
--- | --- | ---
235 | 124,5 | от 122,9 до 126,2
257 | 144,5 | от 142,8 до 146,2
313 | 48,6 | от 47,0 до 50,3
350 | 107,3 | от 105,6 до 109,0
430 | 15,9 | от 15,7 до 16,1

Для приготовления растворов калия дихромат предварительно сушат до постоянной массы при температуре 130 °С. Для проверки шкалы оптических плотностей при длинах волн 235 нм, 257 нм, 313 нм и 350 нм растворяют 57,0–63,0 мг калия дихромата в 0,005 М растворе серной кислоты и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000 мл. Для проверки шкалы оптических плотностей при длине волны 430 нм растворяют 57,0–63,0 мг калия дихромата в 0,005 М растворе серной кислоты и доводят объём раствора тем же растворителем до 100 мл. Для контроля правильности различных уровней оптической плотности объёмы можно корректировать для получения растворов калия дихромата, имеющих другую концентрацию.

Раствор никотиновой кислоты можно приготовить следующим образом: 57,0–63,0 мг никотиновой кислоты стандартного образца для аттестации оборудования растворяют в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты, доводят до объёма 200,0 мл этим же растворителем; затем 2,0 мл полученного раствора доводят до объёма 50,0 мл этим же растворителем для получения конечной концентрации никотиновой кислоты 12 мг/л. Для контроля правильности различных уровней оптической плотности объёмы можно корректировать для получения растворов никотиновой кислоты с другими концентрациями (до концентрации около 40 мг/л). Оптическую плотность измеряют при длинах волн 213 нм и 261 нм.

Проверку правильности шкалы оптической плотности при выбранных длинах волн рекомендуется проводить с использованием одного или нескольких твёрдых или жидких фильтров с различными уровнями оптической плотности; необходимо проверять как минимум 2 значения диапазона, приблизительно соответствующих границам ожидаемых значений оптической плотности.

Для спектрофотометрических детекторов в ультрафиолетовой и видимой областях, используемых в методе высокоэффективной жидкостной хроматографии, и при использовании спектрофотометрии в ультрафиолетовой и видимой областях в технологическом процессе производства, исследование точности определения абсолютного поглощения не требуется при условии того, что строится калибровочная кривая по стандартным растворам различной концентрации.

Критерии приемлемости

Допустимые пределы удельного показателя поглощения для используемой длины волны при проверке шкалы оптической плотности с применением раствора калия дихромата, указаны в таблице 3.

В случае использования сертифицированного стандартного образца, разница между измеренной оптической плотностью и оптической плотностью, указанной в сопроводительной документации на сертифицированный стандартный образец, должна составлять ±0,010 или ±1 % (в зависимости от того, какая из этих величин больше) для каждой проанализированной комбинации длины волны и оптической плотности (применительно к значениям оптической плотности не более 2). Отклонения для значений оптической плотности более 2 следует определять на основании оценки рисков.

Проверка фотометрической линейности

Проверяют фотометрический отклик (линейность) в предполагаемом спектральном диапазоне. Для ультрафиолетового диапазона могут быть применены фильтры, используемые для проверки правильности оптической плотности, а также растворы никотиновой кислоты и кофеина. Для видимого диапазона можно использовать нейтральные стеклянные фильтры. Также могут быть применены растворы калия дихромата. Перед проведением испытания необходимо убедиться в том, что оптическая плотность используемых фильтров сопоставима с предполагаемым линейным диапазоном.

Для проверки могут быть использованы растворы с возрастающими концентрациями, например:

- растворы никотиновой кислоты стандартного образца для квалификации оборудования в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты в концентрации от 5 мг/л до 40 мг/л; оптическую плотность в этом случае измеряют при длинах волн 213 нм и 261 нм;

- растворы предварительно высушенного до постоянной массы при 130° С калия дихромата в 0,005 М растворе серной кислоты в концентрации от 20 мг/л до 120 мг/л для измерений при длинах волн 235 нм, 257 нм, 313 нм и 350 нм, и в концентрации от 60 мг/л до 800 мг/л для измерений при длине волны 430 нм.

Проверку фотометрической линейности хроматографических систем можно выполнить, используя растворы кофеина в воде для хроматографии в подходящей концентрации; оптическую плотность измеряют при длине волны 273 нм.

Критерий приемлемости. Коэффициент детерминации (R²) должен быть не менее 0,999.

Предельный уровень рассеянного света

Рассеянный свет может быть обнаружен при подходящей длине волны с использованием соответствующих твёрдых или жидких фильтров или приготовленных растворов. Параметры прибора, используемые для проверки, такие как ширина щели и тип источника света, например, дейтериевая или вольфрамовая лампа, должны быть такими же, как для реальных измерений.

Критерии приемлемости. Критерии приемлемости зависят от используемых фильтров или растворов, например:

- оптическая плотность должна быть не менее 3,0 при использовании натрия йодида раствора 10 г/л при длине волны 220 нм, калия йодида раствора 10 г/л при длине волны 250 нм или натрия нитрита раствора 50 г/л при длинах волн 340 нм и 370 нм;

- оптическая плотность должна быть не менее 2,0 при использовании калия хлорида раствора 12 г/л при длине волны 198 нм.

Эти значения применимы при использовании кюветы с длиной оптического пути 1 см и воды в качестве контрольного раствора (раствора сравнения).

Проверка разрешающей способности (для качественного анализа)

Если указано в фармакопейной статье, проверяют разрешающую способность оборудования, используя подходящие сертифицированные стандартные образцы или записывают спектр толуола раствора 0,02 % (о/о) в гексане или гептане, применяя гексан или гептан в качестве контрольного раствора (раствора сравнения/растворителя).

Критерии приемлемости

Для измерений, выполненных с использованием раствора, приготовленного как описано выше, минимально допустимое значение отношения оптической плотности в максимуме поглощения при 269 нм к оптической плотности в минимуме поглощения при 266 нм указывают в фармакопейной статье.

Проверка ширины спектральной щели (для количественного анализа)

При применении оборудования с изменяемой шириной спектральной щели при выбранной длине волны возможны погрешности, связанные с шириной этой щели. Для их исключения ширина щели должна быть малой по сравнению с полушириной полосы поглощения (шириной на половине оптической плотности) и в то же время должна быть максимально велика для получения высокого значения интенсивности падающего монохроматического излучения. Таким образом, ширина щели должна быть такой, чтобы дальнейшее её уменьшение не изменяло величину измеряемой оптической плотности.

Проверка пригодности системы

Перед проведением анализа испытуемого образца может потребоваться проверка пригодности системы для контроля критических параметров, которые могут повлиять на результат испытания. Проверка может включать определение правильности длины волны, правильности оптической плотности, рассеянного света и фотометрической линейности. Испытания функционирования системы, например, те, которые выполняют при автоматической проверке оборудования, могут считаться частью испытаний проверки пригодности системы.

Для спектрофотометрических детекторов в ультрафиолетовой и видимой областях, используемых в методе высокоэффективной жидкостной хроматографии, применимы дополнительные испытания на пригодность системы, если это указано в фармакопейной статье и/или ОФС «Хроматография».

###### Идентификация

Абсорбционную спектрофотометрию в ультрафиолетовой и видимой областях спектра применяют для определения подлинности лекарственных средств путём:

- сравнения спектров поглощения испытуемого раствора и раствора стандартного образца; в указанной области спектра должно наблюдаться совпадение положений максимумов, минимумов, плеч и точек перегиба;

- указания положений максимумов, минимумов, плеч и точек перегиба спектра поглощения испытуемого раствора; расхождение между наблюдаемыми и указанными длинами волн в максимумах и минимумах поглощения не должно обычно превышать ±2 нм;

- указания отношения значений оптических плотностей испытуемого раствора при двух значениях длин волн в указанной области спектра.

Возможны и другие варианты применения, оговоренные в фармакопейных статьях.

###### Количественное определение

Концентрацию веществ спектрофотометрическим методом определяют на основании закона Бугера-Ламберта-Бера, используя для расчета формулу:

(7)

где C – концентрация вещества в растворе, г/100 мл;
A – оптическая плотность испытуемого раствора;
– удельный показатель поглощения вещества;
l – длина оптического пути или толщина слоя кюветы, см.

В ряде случаев, даже при использовании монохроматического излучения, могут наблюдаться отклонения от закона Бугера-Ламберта-Бера, обусловленные процессами диссоциации, ассоциации и комплексообразования. Поэтому предварительно следует проверить линейность зависимости оптической плотности раствора от концентрации в аналитической области. При наличии отклонений от линейной зависимости следует пользоваться не формулой (7), а экспериментально найденной зависимостью.

Обычно определение концентрации спектрофотометрическим методом проводят с использованием стандартного образца. Расчёт концентрации основан на использовании уравнения:

(8)

где С – концентрация испытуемого раствора;
С0 – концентрация раствора стандартного образца;
А – оптическая плотность испытуемого раствора;
А0 – оптическая плотность раствора стандартного образца.

Концентрации испытуемого раствора и раствора стандартного образца должны быть близки.

Вначале измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца, приготовленного, как указано в фармакопейной статье, затем проводят измерение оптической плотности испытуемого раствора. Второе измерение проводят сразу после первого с использованием той же кюветы, в тех же экспериментальных условиях.

Метод с использованием раствора стандартного образца является более точным и надёжным. Возможность применения значения удельного показателя поглощения в каждом конкретном случае следует обосновывать. Обычно метод с использованием значения удельного показателя поглощения применим при допусках содержания анализируемого вещества не менее ±10 % от номинального содержания.

###### Многокомпонентный спектрофотометрический анализ

Многокомпонентный спектрофотометрический анализ (анализ смесей) применяют для одновременного количественного определения нескольких компонентов лекарственных средств, каждое из которых подчиняется закону Бугера-Ламберта-Бера.

Количественное определение в многокомпонентном спектрофотометрическом анализе основывается обычно на использовании уравнения:

(9)

где i – 1,…n
Аi – оптическая плотность испытуемого раствора при i-ой длине волны;
Еij – показатели поглощения (зависящие от способа выражения концентрации) j-го компонента образца при i-ой аналитической длине волны;
cj – концентрация j-го компонента образца.

Соответствующие методики проведения анализа и расчётные формулы указываются в фармакопейных статьях.

###### Производная спектрофотометрия

Производная спектрофотометрия может быть использована как для целей идентификации веществ, так и для их количественного определения в многокомпонентных смесях, а также в тех случаях, когда имеется фоновое поглощение, вызванное присутствием веществ, содержание которых не регламентируется.

В производной спектрофотометрии используют преобразование исходных спектров поглощения (нулевого порядка) в спектры производных первого, второго и более высоких порядков.

Спектр производной первого порядка представляет собой график зависимости скорости изменения оптической плотности от длины волны (dA/dλ). Спектр производной первого порядка начинается и заканчивается на нуле; он также проходит через ноль на той же длине волны, что и λmax полосы поглощения. Производные первого порядка применяют, как правило, для минимизации или устранения фонового поглощения при измерениях мутных, опалесцирующих жидкостей, суспензий, а также для анализа микрокомпонентов в сложных составах поглощающих веществ.

Спектр производной второго порядка представляет собой график зависимости кривизны спектра поглощения от длины волны (d2A/dλ2). Вторая производная при любой длине волны связана с концентрацией следующим соотношением:

(10)

где А – оптическая плотность при длине волны λ;
– удельный показатель поглощения при длине волны λ; c – концентрация вещества в растворе, г/100 мл;
l – длина оптического пути или толщина слоя, см.

Производные второго и более высокого порядка могут быть использованы для:

- повышения разрешения перекрывающихся пиков для разделения наложенных спектров, что особенно полезно при многокомпонентном спектрофотометрическом анализе;

- количественного определения микроэлементов;

- дополнительных данных о физико-химических свойствах отдельных соединений, которые были получены с использованием, например, таких методов как, спектрофотометрия в инфракрасной области спектра, спектроскопия ядерного магнитного резонанса, масс-спектроскопия;

- для определения чистоты лекарственных средств.

Минимальное количество наблюдаемых полос при производной спектрофотометрии равно порядку производной плюс один.

Приборы

Используют спектрофотометры, отвечающие общим требованиям и дополнительно оснащенные аналоговым резистентноёмкостным дифференцирующим модулем, цифровым дифференциатором или другими устройствами получения производных спектров, в соответствии с инструкцией производителя по эксплуатации прибора. Некоторые методы получения спектров производной второго порядка приводят к смещению длин волн относительно исходного спектра нулевого порядка, что следует учитывать там, где это необходимо.

Разрешающая способность

Если указано в фармакопейной статье, записывают спектр производной второго порядка для толуола раствора 0,2 г/л в метаноле, используя метанол в качестве контрольного раствора (раствора сравнения/растворителя). На спектре должен присутствовать небольшой отрицательный экстремум, расположенный между двумя большими отрицательными экстремумами при длинах волн 261 нм и 268 нм. Если иное не указано в фармакопейных статьях, отношение А/B должно быть не менее 0,2 как указано на рисунке.

Методика

Процедура анализа аналогична применяемой в обычной спектрофотометрии, но вместо оптических плотностей используют производные. Готовят раствор испытуемого образца, настраивают прибор в соответствии с инструкцией производителя по эксплуатации прибора, проводят испытание и рассчитывают количество определяемого вещества, как указано в фармакопейной статье.

Рисунок 1. Спектр производной второго порядка раствора толуола 0,2 г/л в метаноле

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.1.0004 Атомно-эмиссионная спектрометрия

Взамен ОФС.1.2.1.1.0004.15

Атомная эмиссия – это процесс испускания (эмиссии) электромагнитного излучения термически возбуждёнными атомами или одноатомными ионами.

Атомно-эмиссионная спектрометрия представляет собой инструментальный метод определения концентрации химических элементов в испытуемом образце путём измерения интенсивности одной из эмиссионных линий атомного пара элемента. Определение проводят при длине волны, соответствующей выбранной эмиссионной линии.

###### Область применения

Метод атомно-эмиссионной спектрометрии может быть использован для идентификации и количественного определения элементов. Качественный анализ проводят по положению линий в спектре. Для количественного анализа достоверной мерой концентрации определяемого элемента является интенсивность линии.

Метод атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой указан в ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой».

###### Метод

В методе атомно-эмиссионной спектрометрии испытуемый образец подвергают воздействию достаточно высоких температур, чтобы вызвать не только диссоциацию молекул на атомы, но также вызвать значительное количество соударений, приводящих к возбуждению и ионизации атомов испытуемого образца. Эти процессы являются равновесными и зависимыми от температуры. При термическом возбуждении атома или иона валентные электроны переходят с основного уровня на уровни с более высокой энергией. Обратный переход, т.е. возвращение валентного электрона на основной энергетический уровень, происходит с передачей тепловой или излучающей энергии и испусканием (эмиссией) электромагнитного излучения определённой длины волны (λ) в соответствии с соотношением:

(1)

где ΔE – разница в энергиях двух энергетических уровней, Дж;
h – постоянная Планка (6,626·10-34Дж·с);
с – скорость света (299 792 458 м/с);
λ – длина волны, нм.

Зависимость интенсивности испускаемого электромагнитного излучения от длины волны называется эмиссионным спектром. Число линий в эмиссионном спектре элемента определяется числом валентных электронов и числом разрешённых межуровневых переходов. Эмиссионный спектр элемента содержит несколько больше линий, чем соответствующий абсорбционный спектр. Спектры атомов с малым числом валентных электронов (щелочные, щёлочноземельные металлы) имеют мало линий. Атомы со сложно построенными внешними оболочками (особенно атомы элементов побочных подгрупп периодической системы) дают спектры с большим числом линий. Линии, соответствующие переходам на основной энергетический уровень, называют резонансными. В эмиссионном спектре резонансные линии наблюдаются в видимой и ультрафиолетовой областях. Интенсивность (I) линии эмиссионного спектра элемента прямо пропорциональна числу возбуждённых атомов или однозарядных ионов (N*). Возбуждённые и невозбуждённые атомы и однозарядные ионы находятся между собой в термодинамическом равновесии, положение которого описывается законом распределения Больцмана:

(2)

где N0 – число невозбуждённых атомов или однозарядных ионов;
g* и g0 – статистический вес возбуждённого и невозбуждённого состояния;
E – энергия возбуждения, Дж;
k – постоянная Больцмана, (1,381·10-23Дж/К);
T – абсолютная температура, К.

При постоянной температуре интенсивность спектральной линии элемента прямо пропорциональна числу невозбуждённых атомов элемента, которое при заданных условиях атомизации пропорционально концентрации определяемого элемента в растворе образца (С). Поэтому между интенсивностью спектральной линии элемента в эмиссионном спектре и концентрацией определяемого элемента существует прямо пропорциональная зависимость:

(3)

где I – интенсивность спектральной линии элемента;
k – коэффициент пропорциональности;
С – концентрация определяемого элемента в растворе, %.

Коэффициент пропорциональности (k) является эмпирической величиной, зависящей от источника атомизации и возбуждения (атомизатора).

###### Оборудование

Основными составляющими частями атомно-эмиссионного спектрометра или иного прибора для определения являются:

- система для ввода образца;

- система для распыления образца;

- атомизатор;

- монохроматор;

- детектор, преобразующий энергию излучения в электрическую;

- блок сбора данных.

Атомизатор прибора должен обеспечить достаточную энергию для возбуждения и распыления атомов и ионов испытуемого образца. Основным типом источника атомизации в атомно-эмиссионной спектрометрии является пламя, реже используют дуговые и искровые атомизаторы. Определяющей характеристикой любого атомизатора является его температура, от которой зависит совокупность равновесий процессов, протекающих в атомизаторе, и, как следствие, интенсивность спектральных линий и метрологические характеристики методики. Типы атомизаторов, используемых для атомно-эмиссионной спектрометрии, температурные и метрологические характеристики атомизаторов, приведены в табл. 1.

Таблица 1. Температурные и метрологические характеристики различных типов атомизаторов
Атомизатор | Температура, °С | Агрегатное состояние образца | Минимальная концентрация Сmin, (% масс.) | Относительное стандартное отклонение (Sr)
--- | --- | --- | --- | ---
Пламя | 1500−3000 | Раствор | 10-7–10-2 | 0,01–0,05
Электрическая дуга | 3000−7000 | Твёрдое | 10-4–10-2 | 0,1–0,2
Электрическая искра | 10 000−12 000 | Твёрдое | 10-3–10-1 | 0,05–0,10

Пламя – самый низкотемпературный атомизатор, используемый в атомно-эмиссионной спектрометрии. Эмиссионные спектры, полученные с использованием пламенного атомизатора, имеют преимущества, будучи более простыми, по сравнению со спектрами, полученными с использованием генераторов атомного пара других типов, однако главное ограничение заключается в том, что пламя недостаточно мощное для возбуждения атомов многих элементов. Достигаемые в пламени температуры оптимальны для определения наиболее легко атомизируемых и возбудимых элементов – щелочных и щёлочноземельных металлов. Для них чувствительность метода пламенной атомно-эмиссионной спектрометрии составляет 10–7 % масс. Для большинства других элементов нижние пределы определения на несколько порядков выше. Важным достоинством пламени, как источника возбуждения, является высокая стабильность и связанная с ней хорошая воспроизводимость результатов измерений (среднее стандартное отклонение Sr 0,01–0,05).

Для образования пламени атомизатора используют газовую смесь, состоящую из горючего газа (водород, ацетилен, пропан, бутан) и газа-окислителя (кислород, воздух). Выбор компонентов той или иной газовой смеси определяется требуемой температурой пламени, которая зависит от энергии возбуждения определяемого элемента. В табл. 2 приведены некоторые данные об используемых видах пламени.

Таблица 2. Характеристика пламени наиболее часто используемых газовых смесей
Горючий газ | Окислитель | Температура, °C | Скорость горения, см/с | Характер пламени | Возбуждаемые элементы
--- | --- | --- | --- | --- | ---
метан | воздух | 1800 | 55 | ламинарный | щелочные металлы
ацетилен | воздух | 2200 | 266 | ламинарный | щелочные и щёлочноземель-ные металлы
водород | кислород | 2800 | 3680 | турбулентный | щелочные, щёлочноземель-ные, тяжёлые металлы
ацетилен | кислород | 3100 | 2480 | турбулентный | Ag, Cu, Mn и др.
ацетилен | закись азота | 3200 | 120 | ламинарный | тяжёлые металлы

Многие металлы в пламени имеют тенденцию образовывать тугоплавкие, устойчивые к диссоциации оксиды. Для повышения степени образования свободных атомов создают восстановительную атмосферу пламени путём повышения скорости потока горючего газа. Такое пламя называют обогащённым. Главное ограничение применения пламенного атомизатора – недостаточная способность вызывать эмиссию у многих элементов, необходимую для их определения.

Электрическая дуга. В качестве источников возбуждения атомов испытуемого вещества в атомно-эмиссионной спектрометрии используют дуговые разряды постоянного и переменного тока. Между парой электродов, как правило, угольных, пропускают электрический разряд. При этом в углубление одного из электродов помещают испытуемый образец в твёрдом состоянии. Температура дугового разряда составляет 3000–7000 °C. Таких значений температуры достаточно для атомизации и возбуждения большинства элементов, кроме наиболее трудновозбудимых неметаллов – галогенов. Поэтому для большого числа элементов пределы обнаружения в дуговом разряде ниже, чем в пламени. Дуговые атомизаторы, в отличие от пламенных, не обладают высокой стабильностью работы, воспроизводимость результатов невелика (Sr 0,1–0,2), поэтому их используют, как правило, для качественного анализа.

Электрическая искра. Искровой атомизатор устроен так же, как и дуговой и предназначен в первую очередь для качественного анализа твёрдых образцов.

Эксплуатацию прибора осуществляют в строгом соответствии с инструкцией завода-производителя. Необходимо проверять надлежащее функционирование атомно-эмиссионного спектрометра. Для проверки выполняют соответствующие испытания, включающие, как правило, проверку эффективности и стабильности распылителя; измерение разрешения оптической системы путём измерения ширины пика на уровне половины его высоты; расчёт пределов обнаружения элементов в выбранном диапазоне длин волн и др.

###### Интерференция

Появлению интерференции могут способствовать следующие причины. На установление равновесия между процессами испарения и диссоциации молекул на атомы испытуемого образца в ходе атомной эмиссии могут оказывать влияние конкурирующие химические реакции, например, реакции образования труднолетучих и малодиссоциирующих соединений – фосфатов, силикатов, боратов, образование оксидов и карбидов металлов и т.д. под действием анионов. Мешающее влияние анионов становится особенно заметным при понижении температуры. Присутствие легко ионизируемых катионов смещает равновесие процессов возбуждения и ионизации в сторону образования возбуждённых атомов, при этом помехи от присутствия катионов возрастают с повышением температуры. Изменение интенсивности определяемого элемента под влиянием других присутствующих в пробе элементов называют эффектом матрицы, который устраняют добавлением в испытуемый образец химических модификаторов или ионизационных буферов.

Спектральную интерференцию при измерениях методом атомной эмиссии уменьшают или исключают путём выбора для измерения подходящей линии спектра либо подбора ширины щели. Физическую интерференцию корректируют разведением раствора испытуемого образца, подбором матрицы или использованием метода стандартных добавок. Химическую интерференцию уменьшают использованием химических модификаторов или ионизационных буферов.

###### Эффект памяти

Влияние эффекта памяти, вызванного осаждением испытуемого образца в приборе, может быть снижено тщательным промыванием прибора между испытаниями; разведением, если это возможно, измеряемых растворов, и таким образом снижающим содержания в них солей, а также как можно быстрым впрыскиванием растворов.

###### Условия проведения испытания

Подготовка прибора. Атомно-эмиссионный спектрометр выводят на рабочий режим в соответствии с инструкцией завода-производителя и устанавливают рабочие параметры эксплуатации прибора, указанные в методике испытания (скорость подачи образца в атомизатор, длину волны, температуру пламени, время интегрирования – время для измерения интенсивности эмиссии на каждой длине волны; число повторов измерения эмиссии и т. д.). В атомизатор вводят контрольный раствор и устанавливают регистрирующее устройство на нулевое значение или на значение контрольного раствора. Вводят калибровочный раствор определяемого элемента с наибольшей концентрацией и настраивают прибор так, чтобы получить регистрируемый сигнал в оптимальном диапазоне измерений. Контрольный, испытуемый и калибровочные растворы вводят в прибор в одинаковом количестве повторов. После каждого измерения прибор промывают.

Пробоподготовка зависит от типа атомизатора. В случае пламенной атомно-эмиссионной спектрометрии приготовление пробы для испытания заключается в растворении испытуемого образца и обеспечении концентрации испытуемого раствора, соответствующей рабочему диапазону прибора. Предпочтительным растворителем для приготовления испытуемых и калибровочных растворов является вода либо растворы кислот. Используемые кислоты должны быть качеством не ниже квалификации «ос.ч.». Используемая вода должна быть деионизованной на ионообменных смолах, полученная непосредственно перед использованием, соответствующая требованиям, предъявляемым к воде очищенной. Некоторые системы ввода проб допускают применение высоких концентраций кислот или использование органических растворителей, если при этом подтверждено отсутствие влияния такого растворителя на стабильность пламени. При применении органических растворителей следует учитывать необходимость введения кислорода для предупреждения образования органических слоёв. Для устранения эффектов матрицы готовят контрольный раствор и добавляют, в случае необходимости, в испытуемый раствор химический модификатор или ионизационный буфер. При проведении количественных измерений готовят калибровочные растворы, представляющие собой стандартные растворы определяемого элемента известной концентрации. Если в методике испытания не указано иное, все реагенты, используемые при приготовлении испытуемого раствора, прибавляют к калибровочным растворам определяемого элемента и контрольному раствору в одних и тех же концентрациях. Испытуемый, контрольный и калибровочные растворы готовят, как указано в методике испытания.

Во всех возможных случаях, на любых этапах проведения испытания, включая пробоподготовку, рекомендуется использование лабораторной посуды из полимерных материалов.

При вводе испытуемого образца в прибор в твёрдом виде, все условия испытания должны быть указаны в методике испытания.

Предпочтительно, чтобы концентрации растворов находились в линейной части калибровочной кривой. Если это невозможно, то могут быть использованы криволинейные калибровочные графики с применением подходящего программного обеспечения.

Измерение содержания определяемого элемента проводят путём сравнения эмиссии испытуемого раствора с эмиссией калибровочных растворов известной концентрации с использованием метода калибровочной кривой (метод 1) или метода стандартных добавок (метод 2).

В некоторых случаях наряду с методами калибровочной кривой и стандартных добавок для определения концентрации элемента в испытуемых образцах могут быть использованы метод сравнения и метод ограничивающих растворов. При методе сравнения для определения используют один стандартный раствор (раствор сравнения), концентрация которого должна находиться в линейной области и не превышать предельно допустимое содержание элемента в испытуемом растворе (для испытания на содержание примесей). При методе ограничивающих растворов для определения используют два стандартных раствора, концентрация одного из которых приблизительно на 20 % выше, а другого приблизительно на 20 % ниже ожидаемого содержания элемента в испытуемом растворе. Использование подобных методов допускается при документальном подтверждении линейности в требуемом диапазоне концентраций в рамках проведения валидационных испытаний.

Метод 1. Готовят не менее трёх калибровочных растворов определяемого элемента и контрольный раствор. Калибровочные растворы готовят таким образом, чтобы ожидаемое значение концентрации определяемого элемента в испытуемом растворе находилось внутри диапазона концентраций растворов сравнения.

Испытуемый раствор готовят в соответствии с указаниями в методике испытания.

Для количественных определений оптимальные значения концентрации калибровочных растворов должны быть в диапазоне от 0,7 до 1,3 ожидаемого значения концентрации определяемого элемента или в диапазоне, указанном в методике испытания. Для испытания по определению содержания примесей оптимальные значения концентрации калибровочных растворов должны находиться в диапазоне от предела количественного определения, установленного в ходе валидационных испытаний, до 1,2 предельного значения концентрации определяемого элемента. Любые реактивы, используемые для приготовления испытуемого раствора, прибавляют в контрольный и калибровочные растворы в таких же количествах, как и в испытуемый раствор. Все растворы вводят в прибор в одинаковом количестве повторов для получения устойчивых показаний.

Расчёт. Строят калибровочную кривую зависимости средних значений эмиссии калибровочных растворов от концентрации, по которой определяют концентрацию элемента в испытуемом растворе. Калибровочную кривую рассчитывают методом регрессии наименьших квадратов по всем измеренным данным калибровочного испытания. По графику определяют концентрацию определяемого элемента в испытуемом растворе.

Метод 2. Испытуемый раствор готовят в соответствии с указаниями в методике испытания. Равные объёмы испытуемого раствора помещают не менее чем в три мерные колбы одинакового объёма. Для получения ряда разведений, во все мерные колбы, кроме одной, прибавляют пропорционально увеличивающиеся объёмы стандартного раствора с известной концентрацией определяемого элемента, сопоставимой с ожидаемой концентрацией определяемого элемента, получая серию растворов, содержащих устойчиво возрастающие концентрации определяемого элемента, значения эмиссии которого, если это возможно, находятся в линейной области калибровочной кривой. Доводят содержимое каждой колбы растворителем до метки, получая серию калибровочных растворов со стандартными добавками. Все растворы вводят в прибор одинаковое количество раз для получения устойчивых результатов.

Расчёт. Методом наименьших квадратов рассчитывают параметры линейного уравнения зависимости среднего значения результата измерения эмиссии от концентрации раствора и вычисляют концентрацию определяемого элемента в испытуемом растворе. Расчёт концентрации может быть произведён графическим методом. Для этого строят график зависимости среднего результата измерения эмиссии от добавленного количества определяемого элемента. Экстраполируют линию, соединяющую эти точки на графике, до пересечения с осью абсцисс. Расстояние от начала координат до полученной точки пересечения даёт концентрацию определяемого элемента в испытуемом растворе.

###### Валидация

Проверяют удовлетворительное выполнение методик, описанных в фармакопейных статьях, через определённые временные интервалы.

Линейность. Готовят и анализируют не менее четырёх калибровочных растворов, концентрация которых находится в пределах диапазона калибровки, и контрольный раствор. Проводят не менее пяти измерений. Используя все полученные данные, рассчитывают калибровочную кривую методом наименьших квадратов. Строят кривую регрессии, отмечая средние значения, измеренные значения и доверительный интервал калибровочного графика.

Метод является пригодным при условии соблюдения следующих требований:

- коэффициент корреляции должен быть не менее 0,99;

- на калибровочном графике погрешности каждого калибровочного уровня должны быть распределены случайным образом.

Рассчитывают среднее значение и относительное стандартное отклонение для наименьшего и наибольшего калибровочного уровня. В случае если отношение рассчитанного стандартного отклонения наименьшего и наибольшего калибровочного уровня менее 0,5 или более 2,0, то более точная оценка калибровочного графика может быть получена с использованием взвешенной линейной регрессии. Линейную и квадратичную весовые функции применяют к полученным данным для нахождения наиболее подходящей для использования весовой функции. Если средние значения при сравнении с калибровочным графиком проявляют отклонение от линейности, используют двухмерную линейную регрессию.

Правильность. Предпочтительно оценивать правильность с использованием сертифицированных стандартных образцов. Если это невозможно, то правильность проверяют через открываемость. В случае методик количественного определения открываемость должна быть от 90 % до 110 %. Для других определений, например для определения следовых количеств элемента, открываемость должна быть от 80 % до 120 % от теоретического значения. Открываемость может быть определена с использованием подходящего раствора сравнения (матричного раствора), содержащего известное количество определяемого элемента (средняя концентрация калибровочной кривой).

Повторяемость. Для количественного определения – не более 3 %; при определении примесей – не более 5 %.

Предел количественного определения. Удостоверяются, что предел количественного определения, например, определённый с использованием приближения 10σ, ниже измеряемого значения.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.1.0005 Атомно-абсорбционная спектрометрия

Взамен ОФС.1.2.1.1.0005.18

Атомная абсорбция – это процесс, при котором атом в основном (невозбуждённом) состоянии поглощает электромагнитное излучение с определённой энергией (длиной волны) и переходит в возбуждённое состояние.

Атомно-абсорбционная спектрометрия представляет собой инструментальный метод количественного элементного анализа, который применяют для определения концентрации химических элементов в испытуемом образце путём измерения величины поглощения (абсорбции) электромагнитного излучения атомным паром элемента, генерируемым из испытуемого образца.

###### Область применения

Метод атомно-абсорбционной спектрометрии предназначен в основном для количественного определения элементов, включая испытания по определению содержания примесей элементов. Метод также может быть использован для идентификации элементов, как правило, в тех случаях, когда атомно-абсорбционная спектрометрия регламентирована для количественного определения испытуемого вещества. Чувствительность метода атомно-абсорбционной спектрометрии определяется свойствами аналитической линии, составом испытуемого образца, классом используемого оборудования и может достигать 0,001 мкг/мл.

###### Метод

В процессе атомной абсорбции атомы в основном (невозбуждённом) состоянии поглощают энергию с резонансной частотой, и вследствие такого резонансного поглощения электромагнитное излучение ослабляется. Поглощённая энергия фактически прямо пропорциональна количеству присутствующих атомов.

Испытание проводят при длине волны одной из линий поглощения (резонансных линий) определяемого элемента. Количество поглощённого излучения, согласно закону Бугера-Ламберта-Бера, пропорционально концентрации элемента:

где I0 – интенсивность падающего излучения;
I – интенсивность излучения, прошедшего через вещество;
а – показатель поглощения света, рассчитанный на единицу концентрации поглощающего компонента и на единицу толщины слоя;
с – концентрация поглощающего компонента;
l – толщина поглощающего слоя.

Резонансное излучение от лампы проходит через слой атомного пара, получаемого с помощью атомизатора. Излучение попадает на входную щель монохроматора, установленного таким образом, что из спектра выделяется только резонансная линия определяемого элемента, интенсивность которой измеряется фотоэлектрическим способом. Измеряют уменьшение интенсивности резонансной линии вследствие поглощения её атомами определяемого элемента, принимая интенсивность неослабленной линии за 100 %. Величина поглощения резонансного излучения пропорциональна числу атомов, находящихся в поглощающем слое.

###### Оборудование

Основными составляющими частями атомно-абсорбционного спектрометра или иного прибора для определения являются:

- источник излучения;

- система для ввода образца;

- система для распыления образца;

- атомизатор образца;

- монохроматор или полихроматор;

- детектор;

- блок сбора данных.

Большинство приборов также оснащают системой коррекции фона. Для каждого определяемого элемента должен быть выбран специфический источник, излучающий спектральную линию, которая должна быть абсорбирована. В качестве источника излучения используют лампы с полым катодом и безэлектродные газоразрядные лампы (главным образом для определения таких элементов, как мышьяк, селен, теллур, фосфор, ртуть, рубидий, цезий). Излучение таких ламп имеет спектр определяемого элемента, состоящий из очень узких линий с полушириной около 0,002 нм. Требуемая спектральная линия также может быть выделена с помощью монохроматора высокого разрешения из сплошного спектра, излучаемого короткодуговой ксеноновой лампой непрерывного спектра излучения.

В зависимости от типа атомизаторов атомно-абсорбционная спектрометрия может быть пламенной и беспламенной.

Пламенная атомизация. Пламенный атомизатор состоит из системы распыления с пневматическим приспособлением для получения аэрозоля, регулятора газа и горелки. Испытуемый образец вводится в пламя через распылительную систему в виде аэрозоля. Для распыления образцов используют подкислённую воду, как предпочтительный растворитель для приготовления испытуемых растворов и растворов сравнения. Также могут быть использованы и органические растворители, если приняты меры, гарантирующие, что растворитель не повлияет на стабильность пламени.

Для создания пламени с нужной температурой (от 2000 до 3000 °С) используют газовые смеси, состоящие из горючих газов (пропан, водород, ацетилен) и окислителей (воздух, закись азота). Конфигурацию горелки адаптируют к используемым газам, скорость подачи газа регулируется.

Так как для реализации метода нужны невозбуждённые атомы, а атомы в возбуждённом состоянии способны испускать излучение на характерных резонансных линиях, следует избегать чрезмерного образования возбуждённых атомов, что может привести к существенным искажениям закона Бугера-Ламберта-Бера. При повышении температуры пламени, например, при добавлении к горючим газам окислителей, количество возбуждённых атомов увеличивается. Изменяя соотношение горючего газа и окислителя можно создать необходимую температуру пламени для атомизации испытуемого образца. В таблице приведена температура газовых смесей, наиболее часто используемых для создания пламени.

Таблица 1. Температура наиболее часто используемых газовых смесей
Состав газовой смеси | Температура, °С
--- | ---
Метан + воздух | 1840
Ацетилен + воздух | 2250
Ацетилен + кислород | 3050
Водород + кислород | 2680
Ацетилен + закись азота | 2955

К беспламенной атомно-абсорбционной спектрометрии относят методы электротермической атомизации (графитовой печи), метод холодного пара и гидридный метод. Вместе с тем, гидридный метод анализа может осуществляться как в беспламенном, так и в пламенном варианте.

Электротермическая атомизация. Электротермический атомизатор состоит из нагреваемой графитовой трубки (печи) и источника электроэнергии. Образцы как жидкие, так и твёрдые вводят непосредственно в графитовую трубку, которая нагревается поэтапно, по заданной программе: на первом этапе удаляется растворитель, на втором – удаляются основные компоненты матрицы путём пиролиза, затем атомизируется остаток образца. Две первые стадии обычно проводят в токе инертного газа (аргона или азота), чтобы избежать какого-либо окисления. Поток инертного газа останавливают во время атомизации. Анализируемый элемент в образце полностью атомизируется, и его атомы остаются в трубке, расположенной на пути излучения, в течение длительного периода времени, что существенно улучшает чувствительность и пределы определения элементов. Печь очищают путём нагревания до температуры более высокой, чем температура атомизации. Продувание графитовой печи инертным газом во время пиролиза приводит к более качественному процессу атомизации.

Метод холодного пара и гидридный метод. Атомный пар также может быть получен вне спектрометра, например, методом «холодного пара» для определения ртути или гидридным методом для определения некоторых гидридообразующих элементов, таких как олово, мышьяк, селен, сурьма и висмут. В случае определения ртути методом «холодного пара», атомы генерируют химическим восстановлением с использованием олова хлорида или натрия борогидрида, после чего атомный пар вносится потоком инертного газа в холодную кварцевую кювету (абсорбционную ячейку), расположенную на пути излучения, испускаемого лампой прибора. В случае гидридного метода реакцией с натрия борогидридом и хлористоводородной кислотой получают гидрид определяемого элемента, который либо смешивают с газом, питающим горелку, либо вносят инертным газом в нагретую кварцевую или графитовую ячейку, где он диссоциирует на атомы.

###### Коррекция фона

Значение измеренного поглощения электромагнитного излучения атома элемента при пламенной или при электротермической атомизации увеличивает рассеяние и фоновое излучение, которые, как правило, характерны для этих типов атомизации. В отличие от атомов, которые поглощают в очень узких диапазонах длин волн, порядка 0,005–0,02 нм, поглощение фоном охватывает широкий диапазон длин волн.

Для коррекции фонового излучения возможно использование нескольких схем. В принципе, поглощение фоном можно скорректировать, используя контрольный раствор, имеющий точно такой же состав, что и испытуемый образец, но без элемента, который необходимо определить; вместе с тем, такая схема часто является неосуществимой. Для устранения продуктов разложения матрицы, вызывающих фоновое поглощение при электротермической атомизации необходимо обратить внимание на оптимальный подбор температуры.

Коррекцию фона можно выполнить, используя два разных источника энергии: лампы с полым катодом, измеряющей общее поглощение (элемент+фон), и дейтериевой лампы с непрерывным излучением, у которой измерено фоновое поглощение. Фон корректируют путём вычитания сигнала дейтериевой лампы из сигнала лампы с полым катодом. Этот способ ограничен спектральным диапазоном дейтериевой лампы: от 190 до 400 нм.

Фон также может быть измерен путём регистрации значений поглощения при двух длинах волн: резонансной и длине волны, рядом с резонансной, но при которой поглощение образцом не наблюдается; результат определяют вычитанием значений на «непоглощающей» линии из значений резонансной линии.

Коррекция фона с помощью эффекта Зеемана предполагает использование эффекта Зеемана, заключающегося в расщеплении линии поглощения элемента на две или более оптически поляризованных составляющих в присутствии интенсивного магнитного поля. Как правило, эти составляющие поглощают только одно направление поляризованного света, и, следовательно, сочетание магнитного поля и поляризатора может быть использовано для измерения и коррекции фона. Использование коррекции фона с помощью эффекта Зеемана устраняет мешающие линии и мешающие факторы при молекулярном поглощении при электротермической атомизации. Данный способ особенно полезен в случае, если фон имеет тонкую структуру, а также позволяет значительно скорректировать фон в диапазоне от 185 до 900 нм.

###### Интерференция

Наиболее распространёнными типами интерференций (помех, мешающих воздействий) при измерениях атомной абсорбции являются химическая, физическая, ионизационная и спектральная интерференции.

Химическую интерференцию компенсируют использованием модификаторов матрицы, высвобождающих агентов или использованием высоких температур, создаваемых пламенем азота закиси и ацетилена.

Использование специальных ионизационных буферов, например, лантановых или цезиевых, компенсирует ионизационные помехи. В электротермической атомизации применяют химические модификаторы, обычно представляющие собой растворы неорганических солей (например, магния нитрат, никеля нитрат, аммония нитрат и др.) для предотвращения реакций определяемого элемента с поверхностью графита. Физическое мешающее воздействие, обусловленное высоким содержанием соли или вязкостью, можно устранить разведением образца с помощью метода стандартных добавок или подбором матриц.

Спектральная интерференция возникает из-за перекрывания резонансных линий, и её можно избежать, используя другую резонансную линию. Использование коррекции фона с помощью эффекта Зеемана также компенсирует спектральную интерференцию и помехи от молекулярного поглощения, особенно при электротермической атомизации. Спектральную интерференцию может вызвать использование многоэлементных ламп с полым катодом. Cпецифическое или неспецифическое поглощение измеряют в спектральном диапазоне, определяемом выбранной шириной щели монохроматора (0,2–2 нм).

###### Условия проведения испытания

Для конкретного определяемого элемента испытуемого образца подбирают подходящую длину волны и ширины щели и рассматривают следующие моменты:

- коррекция неспецифического фонового поглощения;

- необходимость использования химических модификаторов или ионизационных буферов, добавляемых к образцу, а также к контрольному раствору и калибровочным растворам;

- необходимость разведения образца, например, для минимизации физической интерференции;

- подробные сведения о температурной программе, предварительном нагреве, высушивании, пиролизе, атомизации, последующей атомизации со временем линейного нарастания и временем удерживания;

- расход инертного газа;

- матричные модификаторы для электротермической атомизации (печь);

- химические восстанавливающие реагенты для определения ртути или других гидридообразующих элементов, а также температуры кюветы холодного пара или температуры нагреваемой кюветы;

- технические требования по конструкции печи (камера, платформа Львова и др.).

Подготовка прибора. Атомно-абсорбционный спектрометр выводят на рабочий режим в соответствии с инструкцией по эксплуатации завода-производителя и устанавливают необходимую длину волны. В генератор атомного пара вводят контрольный раствор и настраивают регистрирующее устройство на максимальное пропускание. Значение для контрольного раствора можно определить, используя растворитель для установки прибора на нулевое значение. Вводят калибровочный раствор определяемого элемента с наибольшей концентрацией и настраивают чувствительность прибора для получения максимального регистрируемого сигнала. Во избежание загрязнения и эффекта памяти прибор тщательно промывают водой или подкислённой водой после завершения испытания.

Пробоподготовка испытуемого образца может заключаться в его растворении или минерализации, включая сухое озоление, влажной минерализации, микроволновом разложении или сочетании указанных операций для того, чтобы очистить матрицу образца и/или удалить углеродсодержащие вещества. Если процесс происходит в открытой системе, то из-за летучести некоторых металлов температура прокаливания не должна превышать 600° С, если другое не указано в методике испытания. При вводе испытуемого образца в прибор в твёрдом виде, все условия испытания должны быть указаны в методике испытания.

Во всех возможных случаях и на любых этапах проведения испытания, включая пробоподготовку, рекомендуется использование лабораторной посуды из полимерных материалов.

При пробоподготовке образца для испытания методом атомно-абсорбционной спектрометрии, необходимо учитывать природу используемого растворителя и концентрацию твёрдых частиц. Идеальным считается растворитель с минимальными помехами в процессах поглощения или эмиссии, при использовании которого в пламени образуются нейтральные атомы. Если имеются значительные различия между поверхностным натяжением или вязкостью испытуемого и стандартного/калибровочного растворов, то такие растворы будут иметь различную скорость всасывания и атомизации, что может обусловить существенное различие в генерированных сигналах. Предпочтительным растворителем для приготовления испытуемых и стандартных/калибровочных растворов является вода либо растворы кислот. Используемая вода должна быть деионизированной на ионообменных смолах, полученная непосредственно перед применением, отвечающая требованиям, предъявляемым к воде очищенной. Концентрация кислоты в растворах также влияет на процессы абсорбции. Растворители, используемые для приготовления испытуемого и стандартного/калибровочных растворов в методе атомно-абсорбционной спектрометрии, должны быть одними и теми же или максимально похожими и должны образовывать растворы, которые легко всасываются через трубку форсунки аспиратора прибора.

Присутствие в растворе частиц нерастворённого твёрдого вещества может вызвать помехи при выполнении анализа, поэтому общее содержание нерастворимых твёрдых частиц в растворах должно быть менее 2 %.

Предпочтительно, чтобы концентрации растворов находились в линейной части калибровочной кривой. Если это невозможно, то могут быть использованы криволинейные калибровочные графики с применением подходящего программного обеспечения.

Определение проводят путём сравнения величины поглощения испытуемого и калибровочных растворов с известными концентрациями определяемого элемента методом калибровочной кривой (метод 1) или методом стандартных добавок (метод 2).

В некоторых случаях, наряду с методами калибровочной кривой и стандартных добавок для определения концентрации элемента в испытуемых образцах, могут быть использованы метод сравнения и метод ограничивающих растворов. При использовании метода сравнения, для определения используют один стандартный раствор (раствор сравнения), концентрация которого должна находиться в линейной области и не превышать предельно допустимое содержание элемента в испытуемом растворе (для испытания на содержание примесей). При методе ограничивающих растворов для определения используют два стандартных раствора, концентрация одного из которых приблизительно на 20 % выше, а другого приблизительно на 20 % ниже ожидаемого содержания элемента в испытуемом растворе. Использование подобных методов допускается при документальном подтверждении линейности в требуемом диапазоне концентраций в рамках проведения валидационных испытаний.

Метод 1. Готовят не менее трёх калибровочных растворов определяемого элемента, контрольный раствор и измеряют их поглощение. Калибровочные растворы готовят таким образом, чтобы ожидаемое значение концентрации определяемого элемента в испытуемом растворе находилось внутри диапазона концентраций калибровочных растворов.

Испытуемый раствор готовят в соответствии с указаниями в методике испытания.

Для количественных определений оптимальные значения концентраций калибровочных растворов должны быть в пределах от 0,7 до 1,3 ожидаемого значения концентрации определяемого элемента или в диапазоне, указанном в методике испытания. Для испытания по определению содержания примесей оптимальные значения концентраций калибровочных растворов должны находиться в диапазоне от предела количественного определения, установленного в ходе валидационных испытаний, до 1,2 предельного содержания определяемого элемента. Любые реактивы, используемые при приготовлении испытуемого раствора, должны быть прибавлены в контрольный раствор и каждый калибровочный раствор в таких же количествах, как и в испытуемый раствор. Все растворы вводят в прибор одинаковое количество раз, чтобы получить устойчивые результаты.

Должно быть проведено не менее 3 измерений, если иное не указано в методике испытания.

Расчёты. Строят калибровочную кривую зависимости средних значений поглощения (абсорбции) калибровочных растворов от концентрации определяемого элемента и по кривой определяют концентрацию элемента в испытуемом растворе. Для обработки данных испытания обычно применяют линейные функции. В отдельных случаях, при невозможности получения линейной зависимости, могут быть использованы квадратичные функции. Использование квадратичной функции должно быть обосновано. Если в методике испытания не указано другое, коэффициент корреляции калибровочной кривой должен быть не менее 0,99.

Метод 2. Испытуемый раствор готовят в соответствии с указаниями в методике испытания. Равные объёмы испытуемого раствора помещают не менее чем в три мерные колбы одинакового объёма. Для получения ряда разведений во все мерные колбы, кроме одной, прибавляют пропорционально увеличивающиеся объёмы стандартного раствора с известной концентрацией определяемого элемента, сопоставимой с ожидаемой концентрацией определяемого элемента, получая серию растворов, содержащих устойчиво возрастающие концентрации определяемого элемента. Доводят содержимое каждой колбы растворителем до метки, получая серию калибровочных растворов со стандартными добавками. При этом значение абсорбции растворов со стандартными добавками должно находиться в линейной области калибровочной кривой. Все растворы вводят в прибор одинаковое количество раз, чтобы получить устойчивые результаты. Должно быть проведено не менее 3 измерений, если иное не указано в методике испытания.

Расчёты. Методом наименьших квадратов рассчитывают линейное уравнение калибровочной кривой и из него получают концентрацию определяемого элемента в испытуемом растворе.

Расчёт концентрации может быть произведён графическим методом. Для этого строят график зависимости среднего значения результата измерения от добавленного количества определяемого элемента (от содержания элементов в калибровочном растворе со стандартной добавкой). Экстраполируют линию, соединяющую эти точки на графике, до пересечения с осью абсцисс. Расстояние от начала координат до полученной точки пересечения дает концентрацию определяемого элемента в испытуемом растворе.

###### Валидация

Проверяют удовлетворительное выполнение методик, описанных в фармакопейных статьях, через определённые временные интервалы.

Линейность. Готовят и анализируют не менее четырёх калибровочных растворов, концентрация элементов в которых находится в пределах диапазона калибровки, и контрольный раствор. Проводят не менее пяти измерений. Используя все полученные данные, рассчитывают калибровочную кривую методом наименьших квадратов. Строят кривую регрессии, отмечая средние значения, измеренные значения и доверительный интервал калибровочного графика.

Метод является пригодным при условии соблюдения следующих требований:

- коэффициент корреляции должен быть не менее 0,99;

- на калибровочном графике погрешности каждого калибровочного уровня должны быть распределены случайным образом.

Рассчитывают среднее значение и относительное стандартное отклонение для наименьшего и наибольшего калибровочного уровня. В случае если отношение рассчитанного стандартного отклонения наименьшего и наибольшего калибровочного уровня менее 0,5 или более 2,0, то более точная оценка калибровочного графика может быть получена с использованием взвешенной линейной регрессии. Линейную и квадратичную весовую функции применяют к полученным данным для нахождения наиболее подходящей для использования весовой функции. Если средние значения при сравнении с калибровочным графиком проявляют отклонение от линейности, используют двухмерную линейную регрессию.

Правильность. Правильность оценивают с использованием подходящих стандартных образцов. Если это невозможно, то правильность выражают через открываемость. В случае методик количественного определения основных компонентов открываемость должна быть от 90 % до 110 %. Для определения следовых количеств элемента открываемость должна быть от 80 % до 120 % от теоретического значения. Открываемость может быть определена с использованием подходящего раствора сравнения (матричного раствора), содержащего известное количество определяемого элемента (средняя концентрация калибровочной кривой).

Повторяемость. Для количественного определения – не более 3 %; при определении примесей – не более 5 %.

Предел количественного определения. Удостоверяются, что предел количественного определения, например, определённый с использованием приближения 10°σ, ниже измеряемого значения.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.1.0006 Флуориметрия

Взамен ОФС.1.2.1.1.0006.15

Метод флуориметрии (или флуоресцентная спектрофотомерия), основан на измерении интенсивности флуоресценции, излучаемой испытуемым образцом относительно флуоресценции, излучаемой стандартным образцом.

###### Область применения

Спектры флуоресценции специфичны для определяемых веществ, поэтому данный метод может быть применён для их идентификации. При количественных определениях интенсивность флуоресценции раствора испытуемого образца сравнивают с интенсивностью флуоресценции раствора стандартного образца флуоресцирующего вещества известной концентрации, измеренной в идентичных условиях на одном и том же приборе.

Метод флуориметрии в 10–100 раз чувствительнее абсорбционной спектрофотометрии, но флуоресцентными свойствами обладает только ограниченный круг соединений: ароматические, особенно с конденсированными структурами, гетероциклические и карбонильные соединения. Из фармацевтических субстанций определению методом флуориметрии подлежат, например: аминокислоты (фенилаланин, триптофан, тирозин), алкалоиды (стрихнин, резерпин, хинин), витамины (фолиевая кислота, рибофлавин, ретинола ацетат), стероидные гормоны (этинилэстрадиол).

###### Метод

Флуоресценция (один из видов люминесценции) – испускание света химическим веществом, находящимся в возбуждённом состоянии, при переходе в основное состояние. Первоначальный переход вещества из основного в возбуждённое состояние происходит при этом виде люминесценции за счёт поглощения им световой энергии при облучении ультрафиолетовым, видимым или иным электромагнитным излучением. Флуоресценция органических соединений охватывает область спектра от 200 до 830 нм.

Как правило, длина волны флуоресцентного излучения больше длины волны возбуждения на 20–30 нм и более из-за потери части энергии в возбуждённом состоянии (Стоксов сдвиг). Поглощение и испускание излучения осуществляется благодаря переходу электронов между различными энергетическими уровнями или молекулярными орбиталями. Испускание света происходит через определённый промежуток времени после его поглощения; этот промежуток времени представляет собой длительность пребывания молекулы в возбуждённом состоянии. Для большинства флуоресцирующих веществ время затухания флуоресценции составляет обычно 10−9 – 10−8 с. Короткое время жизни флуоресценции отличает этот тип люминесценции от фосфоресценции, которая представляет собой долгоживущее свечение, имеющее время жизни от 10−3 с до нескольких мин.

Интенсивность флуоресценции измеряется в условных единицах, пропорциональных отклику детектора и обозначается символом I.

Спектр испускания флуоресценции представляет собой зависимость интенсивности флуоресценции от длины волны (в нм) или частоты (в см−1) при заданной длине волны возбуждения. Спектр возбуждения флуоресценции представляет собой зависимость интенсивности излучения в максимуме испускания флуорофора от длины волны или частоты возбуждающего света. При этом спектр возбуждения обычно совпадает со спектром поглощения, так же как и интенсивность флуоресценции пропорциональна светопоглощению. Комбинирование спектров испускания, полученных при различных длинах волн возбуждения, даёт трёхмерную карту испускания.

Интенсивность флуоресценции зависит от:

- температуры;

- растворителя;

- величины рН испытуемого раствора;

- присутствия в растворе посторонних частиц;

- концентрации кислорода в испытуемом растворе;

- постороннего освещения.

Эффективность флуоресценции обратно пропорциональна температуре. Для некоторых веществ эффективность флуоресценции может снижаться на 1,0–2,0 % при повышении температуры на 1 °С. В таких случаях требуется термостатирование образцов.

Флуоресценцию определяют в растворах с концентрацией от 10^−5 ^М и менее, в диапазоне, для которого наблюдается прямая зависимость интенсивности флуоресценции от концентрации. При более высоких концентрациях всё более значительная часть поступающего света абсорбируется образцом вблизи поверхности кюветы, и линейная зависимость величины сигнала от концентрации определяемого вещества нарушается.

Интенсивность и спектральное распределение флуоресценции зависит от растворителя. Растворитель, используемый для измерения, должен быть правильно подобран. Его чистота и рН могут заметно влиять на результат испытаний. Многие соединения, флуоресцирующие в органических растворителях, практически не флуоресцируют в воде. Все замеры интенсивности флуоресценции должны быть скорректированы относительно растворителя.

Перед измерением флуоресценции из испытуемого раствора фильтрованием или центрифугированием должны быть удалены твёрдые частицы, так как они могут поглощать некоторую долю возбуждающей энергии, дезактивировать возбужденные молекулы или завышать измеряемую величину из-за многократных отражений в кювете с образцом. При фильтровании через фильтр следует учитывать, что материал фильтра может содержать флуоресцентные примеси.

Интенсивность флуоресценции обратно пропорциональна концентрации кислорода, являющегося сильным гасителем флуоресценции. По степени тушения флуоресценции можно определять концентрацию кислорода в окружающей среде. Для удаления кислорода через испытуемый образец пропускают азот или гелий.

Большинство флуоресцирующих веществ чувствительно к свету. Во время облучения во флуориметре они могут подвергаться фоторазложению с образованием других флуоресцирующих продуктов. Такие эффекты обнаруживают при наблюдении за показаниями детектора во времени и могут быть снижены путём приглушения света с помощью светофильтров или экранов.

Шкала длин волн фильтрационных флуориметров и спектрофлуориметров должна периодически калиброваться.

###### Оборудование

Для проведения флуориметрического испытания используют приборы двух типов: фильтрационный флуориметр и спектрофлуориметр.

Фильтрационный флуориметр состоит из источника излучения, первичного фильтра длин волн, камеры для образца, вторичного фильтра длин волн и системы детектирования флуоресценции. Как правило, детектор помещён под углом 90° к возбуждающему световому потоку. Геометрия прямого угла предусматривает детектирование только произведённого флуоресцентного сигнала. Детектор получает часть возбуждающего излучения в результате рассеивающих свойств самого раствора, а также из-за присутствия в растворе твёрдых частиц. Для устранения этого остаточного рассеяния используют спектральные фильтры. Первичный фильтр отбирает коротковолновое излучение, способное к возбуждению испытуемых образцов, вторичный фильтр пропускает флуоресценцию в длинноволновой области, но блокирует рассеянное возбуждение.

Детекторы флуориметров преобразуют оптический сигнал в электрический с помощью фотоумножителей разных типов. Каждый тип детектора имеет специальные характеристики: спектральная область максимальной чувствительности, степень усиления, соотношение сигнал/шум.

Спектрофлуориметры отличаются от фильтрационных флуориметров тем, что вместо спектральных фильтров в них используют монохроматоры типа призмы или решётки. Эти приборы более предпочтительны для аналитических целей. В спектрофлуориметрах монохроматоры снабжены щелями. Чем уже щель, тем выше разрешение и спектральная чистота, но меньше чувствительность. Выбор размера щели определяется разделением между длинами волн возбуждающего и испускаемого излучения и необходимым уровнем чувствительности.

В качестве источников возбуждающего излучения в флуориметрах используют:

- ртутные лампы низкого давления, предоставляющие большое количество длин волн возбуждения, но не являющиеся источником излучения равномерного спектра;

- ксеноновые газоразрядные лампы, обеспечивающие высокоинтенсивное почти равномерное излучение в широком диапазоне спектра (300–800 нм) и достаточно интенсивное в коротковолновой области до 200 нм;

- лазеры, излучающие свет высокой интенсивности в очень узком интервале длин волн (не более 0,01 нм) и позволяющие благодаря этому не использовать монохроматоры или первичные светофильтры;

- светодиоды и светодиодные матрицы, излучающие свет в определённых диапазонах длин волн.

Для размещения испытуемых образцов в флуориметрах используют, как правило, прямоугольные кварцевые кюветы, отполированные со всех 4 вертикальных сторон, иногда – цилиндрические кюветы или пробирки. Обычно объём испытуемых образцов составляет 2–3 мл, но к некоторым приборам прилагаются кюветы вместимостью от 100 до 300 мкл или капиллярные держатели для ещё меньшего объёма.

###### Методика

Испытуемый образец растворяют в растворителе или смеси растворителей, указанных в фармакопейной статье. Настраивают прибор в соответствии с инструкцией производителя. Полученный раствор помещают в кювету или камеру флуориметра и облучают возбуждающим светом, имеющим как можно большую монохроматичность, при длине волны, указанной в фармакопейной статье.

Измеряют интенсивность испускаемого света под углом 90° относительно возбуждающего света после прохождения сквозь светофильтр или монохроматор, избирательно пропускающий свет с длиной волны максимальной флуоресценции.

Последовательность выполнения количественного определения

В прибор помещают растворитель или смесь растворителей, используемые для растворения испытуемого образца, и устанавливают регистрирующее устройство на нулевое значение. Затем помещают раствор стандартного образца и устанавливают чувствительность прибора таким образом, чтобы отклик показаний был не менее 50. Если для регулировки чувствительности требуется изменение ширины щели, должны быть повторены обнуление прибора относительно растворителя и измерение интенсивности флуоресценции стандартного образца. После этого в прибор помещают раствор испытуемого образца с неизвестной концентрацией и регистрируют показания прибора. В случае линейной зависимости интенсивности испускаемого света от концентрации вещества рассчитывают последнюю в растворе испытуемого образца (C) по формуле:

где С – концентрация испытуемого раствора;
C0 – концентрация вещества в стандартном растворе;
I – интенсивность света, испускаемого испытуемым раствором;
I0 – интенсивность света, испускаемого стандартным раствором.

Если значение интенсивности флуоресценции не прямо пропорционально значению концентрации раствора, измерение может быть произведено с использованием калибровочного графика.

В некоторых случаях измерения флуоресценции испытуемого образца могут производиться с использованием независимого стандарта (флуоресцентного стекла или раствора другого флуоресцентного вещества). В качестве стандартов могут быть использованы: раствор известной концентрации хинина в серной кислоты растворе 0,05 М или раствор флуоресцеина в растворе натрия гидроксида 0,1 М. В таких случаях концентрацию испытуемого образца следует определять с использованием предварительно полученного в тех же условиях калибровочного графика.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.1.0007 Спектроскопия ядерного магнитного резонанса

Взамен ОФС.1.2.1.1.0007.15

Спектроскопия ядерного магнитного резонанса (ЯМР) – метод, основанный на поглощении радиочастотного электромагнитного излучения ядрами образца с ненулевым магнитным моментом, помещённого в постоянное магнитное поле (B0). Ненулевые магнитные моменты имеют изотопы ядер элементов с нечётной атомной массой (1H, 13C, 15N, 19F, 31P и др.).

###### Область применения

Многообразие структурной и аналитической информации, содержащейся в спектрах ЯМР, позволяет использовать метод ЯМР для проведения качественного и количественного анализа. Применение спектроскопии ЯМР в количественном анализе основано на прямой пропорциональности молярной концентрации магнитно-активных ядер интегральной интенсивности соответствующего сигнала поглощения в спектре.

###### Метод

Вращающееся вокруг своей оси ядро имеет собственный момент количества движения (угловой момент, или спин) P. Магнитный момент ядра μ прямо пропорционален спину: μ = γ ∙ P (γ – коэффициент пропорциональности или гиромагнитное отношение). Угловой и магнитный моменты являются квантованными, т.е. могут находиться в одном из 2I + 1 спиновых состояний (I – спиновое квантовое число). Различные состояния магнитных моментов ядер обладают одинаковой энергией, если на них не действует внешнее магнитное поле. При помещении ядер во внешнее магнитное поле B0 энергетическое вырождение ядер снимается и возникает возможность энергетического перехода с одного уровня на другой. Процесс распределения ядер между различными энергетическими уровнями протекает в соответствии с законом распределения Больцмана и приводит к появлению макроскопической равновесной продольной намагниченности Мz. Время, которое требуется для создания Мz после включения внешнего магнитного поля В0, называется временем продольной или спин-решёточной релаксации (Т1). Нарушение равновесного распределения ядер происходит под действием радиочастотного магнитного поля (B1), перпендикулярного B0, которое вызывает дополнительные переходы между энергетическими уровнями, сопровождающиеся поглощением энергии (явление ядерного магнитного резонанса). Частота ν0, при которой возникает поглощение энергии ядрами (Ларморова или резонансная частота поглощения), изменяется в зависимости от величины постоянного поля B0: ν0 = γB0/2π. В момент резонанса происходит взаимодействие между индивидуальными ядерными магнитными моментами и полем В1, которое выводит вектор Мz из его равновесного положения вдоль оси z. В результате появляется поперечная намагниченность Мxy. Её изменение, связанное с обменом внутри спиновой системы, характеризуют временем поперечной или спин-спиновой релаксации (Т2).

Зависимость интенсивности поглощения энергии ядрами одного типа от частоты радиочастотного магнитного поля при фиксированном значении В0 называют одномерным спектром ядерного магнитного резонанса ядра данного типа. Спектр ЯМР может быть получен 2 способами: при непрерывном облучении образца радиочастотным полем с изменяющейся частотой, в результате чего регистрируют непосредственно спектр ЯМР (спектроскопия с непрерывным облучением), или при воздействии на образец короткого радиочастотного импульса (импульсная спектроскопия). В импульсной спектроскопии ЯМР регистрируют затухающее во времени когерентное излучение, испускаемое ядрами при возвращении в исходное спиновое состояние (сигнал спада свободной индукции) с последующим преобразованием временной шкалы в частотную (Фурье-преобразование).

В молекулах электроны атомов уменьшают величину действующего внешнего магнитного поля B0 в месте нахождения ядра, т.е. проявляется диамагнитное экранирование:

где Влок – напряжённость результирующего поля;
σ - константа экранирования.

Разница в резонансных частотах сигналов ядер, равная разнице в их константах экранирования, называют химическим сдвигом сигналов, обозначается символом δ, измеряется в миллионных долях (м.д.). Взаимодействие магнитных моментов ядер через посредство электронов химической связи (спин-спиновое взаимодействие) вызывает расщепление сигнала ЯМР (мультиплетность, m). Количество компонент в мультиплетах определяют спином ядра и количеством взаимодействующих ядер. Мерой спин-спинового взаимодействия является константа спин-спинового взаимодействия (J, измеряется в герцах, Гц). Значения δ, m и J не зависят от величины постоянного магнитного поля.

Интенсивность сигнала ЯМР ядра в спектре определяют заселённостью его энергетических уровней. Из ядер с естественным содержанием изотопов наиболее интенсивные сигналы дают ядра водорода. На интенсивность сигналов ЯМР также влияет время продольно-поперечной релаксации (большие Т1 ведут к уменьшению интенсивности сигнала).

Ширина сигналов ЯМР (разница между частотами на полувысоте сигнала) зависит от Т1 и Т2. Малые времена T1 и Т2 обуславливают широкие и мало интерпретируемые сигналы спектра.

Чувствительность метода ЯМР (предельно обнаруживаемая концентрация вещества) зависит от интенсивности сигнала ядра. Для ядер 1Н чувствительность составляет 10−9–10−11 моль.

Корреляции различных спектральных параметров (например, химических сдвигов различных ядер в пределах одной молекулярной системы) получают гомо- и гетероядерными методами в формате 2D или 3D.

###### Оборудование

Импульсный спектрометр ЯМР (ЯМР-спектрометр) с высокой разрешающей способностью состоит из:

- магнита для создания постоянного магнитного поля B0;

- термостатируемого датчика с держателем образца для подачи радиочастотного импульса и определения излучения, испускаемого образцом;

- электронного устройства для создания радиочастотного импульса, регистрации, усиления и преобразования сигнала спада свободной индукции в цифровую форму;

- устройства для настройки и регулировки электронных контуров;

- устройства сбора и обработки данных (компьютер);

и может также включать:

- проточную кювету для проведения жидкостной хроматографии ядерного магнитного резонанса или проточно-инъекционного анализа;

- систему для создания импульсного градиента магнитного поля.

Сильное магнитное поле генерируется катушкой сверхпроводимости в сосуде Дьюара, заполненном жидким гелием.

Проверяют надлежащее функционирование ЯМР-спектрометра. Для проверки проводят соответствующие испытания, включающие, как правило, измерение ширины спектральной линии на полувысоте определённых пиков при определённых условиях (разрешение), воспроизводимость положения сигнала и отношение сигнал/шум (отношение между интенсивностью определённого сигнала в спектре ЯМР и случайных колебаний в области спектра, не содержащего сигналов от анализируемого вещества, S/N) для стандартных смесей. В программном обеспечении спектрометров имеются алгоритмы по определению S/N. Все изготовители приборов предоставляют спецификации и протоколы измерения этих параметров.

###### Установление подлинности действующего вещества

Установление подлинности действующего вещества осуществляют путём сравнения спектра испытуемого образца со спектром фармакопейного стандартного образца или с известным эталонным спектром. Спектры стандартных и испытуемых образцов должны быть получены с использованием одних и тех же методик и условий. Пики в сравниваемых спектрах должны совпадать по положению (отклонения значений δ испытуемого и стандартных образцов в пределах ±0,1 м.д. для ядерного магнитного резонанса 1Н и ±0,5 м.д. для ядерного магнитного резонанса 13С), интегральной интенсивности и мультиплетности, значения которых приводят при описании спектров. При отсутствии фармакопейного стандартного образца можно используют образец сравнения, идентичность которого подтверждают самостоятельной структурной интерпретацией спектральных данных или альтернативными методами.

При подтверждении подлинности образцов нестехиометрического состава (например, природных полимеров переменного состава) допускают несовпадение пиков испытуемого и стандартных образцов по положению и интегральной интенсивности сигналов. Сравниваемые спектры должны быть подобны, т.е. содержать одинаковые характеристические области сигналов, подтверждающие совпадение фрагментного состава испытуемого и стандартных образцов.

Для установления подлинности смеси веществ (экстрактов) допускают использование одномерных спектров ЯМР целиком, как «отпечатков пальца» объекта, без детализации значений δ и мультиплетности отдельных сигналов. В случае использования двумерной спектроскопии ЯМР при описании спектров (фрагментов спектра), заявленных на подлинность, следует приводить значения кросс-пиков.

###### Идентификация посторонних примесей/остаточных органических растворителей

Идентификацию посторонних примесей/остаточных органических растворителей осуществляют аналогично установлению подлинности действующего вещества, ужесточая требования к чувствительности и цифровому разрешению.

###### Определение содержания посторонних примесей/остаточных органических растворителей относительно действующего вещества

Метод ЯМР является прямым абсолютным методом определения мольного соотношения действующего вещества и примесного соединения (n/nпр):

где S' и S'пр – нормированные значения интегральных интенсивностей сигналов действующего вещества и примеси.

Нормирование проводят по числу ядер в структурном фрагменте, обуславливающих измеряемый сигнал.

Массовую долю примеси/остаточного органического растворителя относительно действующего вещества (Xпр) определяют по формуле:

где Mпр – молекулярная масса примеси;
M - молекулярная масса действующего вещества;
S'пр - нормированное значение интегральной интенсивности сигнала примеси;
S' - нормированное значение интегральной интенсивности сигнала действующего вещества.

###### Количественное определение содержания вещества (действующего вещества, примеси/остаточного органического растворителя) в фармацевтической субстанции

Абсолютное содержание вещества в фармацевтической субстанции определяют методом внутреннего стандарта, в качестве которого выбирают вещество, сигналы которого находятся вблизи сигналов определяемого вещества, не перекрываясь с ними. Интенсивности сигналов определяемого вещества и стандарта не должны существенно различаться.

Содержание определяемого вещества в испытуемом образце в пересчёте на сухое вещество в процентах (X масс) вычисляют по формуле:

где M – молекулярная масса определяемого вещества; M0 - молекулярная масса вещества-стандарта; S' - нормированное значение интегральной интенсивности сигнала определяемого вещества; S'0 - нормированное значение интегральной интенсивности сигнала стандарта; a - навеска испытуемого образца; a0 - навеска вещества-стандарта; W - содержание влаги, %.

В качестве веществ-стандартов используют следующие соединения: малеиновая кислота (2H; 6,60 м.д., M = 116,07), бензилбензоат (2H; 5,30 м.д., M = 212,24), малоновая кислота (2H; 3,30 м.д., M = 104,06), сукцинимид (4H; 2,77 м.д., M = 99,09), ацетанилид (3H; 2,12 м.д., M = 135,16), трет-бутиловый спирт (9H; 1,30 м.д., M = 74,12).

Относительное содержание вещества как доля компонента в смеси компонентов фармацевтической субстанции определяют методом внутренней нормализации. Мольная (Xмоль) и массовая (Xмасс) доля компонента i в смеси n веществ определяется по формулам:

###### Определение молекулярной массы белков и полимеров

Молекулярные массы белков и полимеров определяют сравнением их подвижности с подвижностью соединений-стандартов с известной молекулярной массой, используя методики DOSY. Измеряют коэффициенты самодиффузии (D) испытуемых и стандартных образцов, строят график зависимости логарифмов молекулярных масс соединений-стандартов от логарифмов D. По полученному таким образом графику методом линейной регрессии определяют неизвестные молекулярные массы испытуемых образцов.

###### Спектроскопия ЯМР образцов в растворах

Испытуемый образец растворяют в растворителе, к которому добавляют соответствующий эталон для калибровки химического сдвига, как указано в фармакопейной статье. Величина относительного химического сдвига ядра вещества (δв-во) определяют следующим выражением:

где νв-во – частота резонанса ядра вещества, Гц;
νэталон - частота резонанса ядра эталона, Гц;
νприбора - рабочая частота ЯМР-спектрометра (частота, на которой выполняются условия резонанса для ядер водорода при данном В0, МГц).

Для растворов в органических растворителях химический сдвиг в спектрах 1H и 13C измеряют относительно сигнала тетраметилсилана, положение которого принято за 0 м.д. Отсчёт химических сдвигов ведут в сторону слабого поля (влево) от сигнала тетраметилсилана (δ–шкала химических сдвигов). Для водных растворов в качестве эталона в спектрах ЯМР 1H используют 2,2-диметил-2-силанпентан-5-сульфонат натрия или триметилсилилпропионат натрия, принимая химический сдвиг протонов метильных групп равным 0,0 м.д. Для спектров 13C водных растворов в качестве эталона используют диоксан, химический сдвиг которого равен 67,19 м.д.

При калибровке спектров 19F в качестве первичного эталона с нулевым значением химического сдвига используют трифторуксусную кислоту или трихлорфторметан; спектров 31P – 85 % раствор ортофосфорной кислоты или триметилфосфат; спектров 15N – нитрометан либо насыщенный раствор аммиака. В 1Н и 13С ЯМР, как правило, используют внутренний эталон, который непосредственно прибавляют к испытуемому образцу. В 15N, 19F и 31Р ЯМР часто используют внешний эталон, который находится отдельно в коаксиальной цилиндрической пробирке или капилляре.

При описании спектров ЯМР указывают растворитель, в котором растворен образец, и его концентрацию. В качестве растворителей используют легкоподвижные жидкости, в которых для уменьшения интенсивности сигналов растворителей атомы водорода заменены атомами дейтерия. Дейтерированный растворитель выбирают, исходя из следующих критериев:

- 1) растворимости в нём испытуемого образца;

- 2) отсутствия перекрывания сигналов остаточных протонов дейтерированного растворителя с сигналами испытуемого образца;

- 3) отсутствия взаимодействия между растворителем и испытуемым образцом, если не указано иначе.

Атомы растворителя дают сигналы, которые легко идентифицируют по их химическому сдвигу и используют для калибровки оси химического сдвига (вторичный эталон). Химические сдвиги сигналов остаточных протонов дейтерированных растворителей имеют следующие значения (м.д.): хлороформ − 7,26; бензол − 7,16; вода − 4,79; метанол − 3,31; диметилсульфоксид − 2,50; ацетон − 2,05; положение сигнала воды и протонов гидроксильных групп спиртов зависит от pH среды и температуры.

Для количественного анализа растворы не должны содержать нерастворённых частиц. При некоторых количественных определениях может потребоваться добавление внутреннего стандарта для сравнения интенсивности испытуемого и стандартного образцов. Соответствующие стандартные образцы и их концентрации должны быть указаны в фармакопейной статье. После помещения образца в пробирку и укупорки образец вводят в магнит ЯМР-спектрометра, устанавливают параметры испытания (параметры настройки, регистрации, оцифровки сигнала спада свободной индукции). Основные параметры испытания, приводимые в фармакопейной статье, записывают или сохраняют в компьютере.

Для предотвращения дрейфа спектра во времени выполняют стабилизационную процедуру (дейтериевый лок), используют сигнал дейтерия, вызываемый дейтерированными растворителями, если не указано иное. Прибор регулируют для получения наиболее оптимальных условий резонанса и максимального соотношения S/N (шиммирование).

В ходе испытания возможно выполнение многократных последовательностей циклов «импульс–сбор данных–пауза» с последующим суммированием отдельных сигналов спада свободной индукции и усреднением уровня шума. Время задержки между импульсными последовательностями, в течение которого система ядерных спинов восстанавливает свою намагниченность (D1), для количественных измерений должно превышать время продольной релаксации T1: D1 ≥5 T1. В программном обеспечении спектрометров имеются алгоритмы по определению T1. Если величина T1 неизвестна, рекомендуют использовать значение D1 = 25 c.

При количественных измерениях рекомендуют проводить испытание без вращения образца во избежание появления боковых сигналов.

После проведения Фурье-преобразования сигналы в частотном представлении калибруют под выбранный эталон и измеряют их относительную интенсивность путём интегрирования – измерения отношения площадей резонансных сигналов. В спектрах 13С интегрируют только однотипные сигналы. Точность интегрирования сигнала зависит от соотношения сигнал–шум (S/N):

где u(I)% – стандартная неопределённость интегрирования.

Число накоплений спада свободной индукции, необходимое для достижения удовлетворительного соотношения S/N, должно быть приведено в фармакопейной статье.

Наряду с одномерными в аналитических целях используют гомо- и гетероядерные двумерные корреляционные спектры, основанные на определённой последовательности импульсов (COSY, NOESY, ROESY, HSQC, HMBC, HETCOR, CIGAR, INADEQUATE и др.). В двумерных спектрах взаимодействие между ядрами проявляется в виде сигналов, называемых кросс-пиками. Положение кросс-пиков определяют значениями химических сдвигов двух взаимодействующих ядер. Двумерные спектры предпочтительно использовать для определения состава сложных смесей и экстрактов, т.к. вероятность наложения сигналов (кросс-пиков) в двумерных спектрах существенно ниже, чем вероятность наложения сигналов в одномерных спектрах.

Для быстрого получения спектров гетероядер (13C, 15N и др.) применяют методики (HSQC, HMBC), которые позволяют получать на ядрах 1H спектры других ядер, используя механизмы гетероядерного взаимодействия.

Методика DOSY, основанная на регистрации потери фазовой когерентности ядерных спинов за счёт трансляционных перемещений молекул под действием градиента магнитного поля, позволяет получать спектры индивидуальных соединений (спектральное разделение) в смеси без их физического разделения и определять размеры, степени агрегированности и молекулярные массы молекулярных объектов (молекул, макромолекул, молекулярных комплексов, супрамолекулярных систем).

###### Спектроскопия ЯМР твёрдых веществ

Испытуемые образцы в твёрдом состоянии анализируют с помощью специально оборудованных ЯМР-спектрометров. Определённые технические операции (вращение порошкообразного образца в роторе, наклонённом под «магическим» углом (54,7°) к оси магнитного поля В0, силовое распаривание, перенос поляризации от легковозбудимых ядер к менее поляризуемым ядрам – кросс-поляризация) позволяют получать спектры органических и неорганических соединений с высокой разрешающей способностью. Полное описание процедуры должно быть приведено в фармакопейной статье. Применяют данную разновидность спектроскопии ЯМР при изучении полиморфизма твёрдых лекарственных средств.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.1.0008 Масс-спектрометрия

Взамен ОФС.1.2.1.1.0008.15

Масс-спектрометрия – метод качественного и количественного анализа лекарственных средств, основанный на прямом измерении отношений массы к числу элементарных положительных или отрицательных зарядов ионов (m/z) в газовой фазе, полученных из испытуемого вещества. Заряд может быть обусловлен присоединением или потерей электрона, протона, катиона или аниона в зависимости от условий ионизации и состава образца. Данное отношение выражается в атомных единицах массы (а.е.м.) или в дальтонах (Да). Ионы, образовавшиеся в ионном источнике прибора, ускоряются и перед попаданием в детектор разделяются с помощью масс-анализатора. Эти процессы происходят в камере, в которой насосная система поддерживает вакуум от 10−3 до 10−6 Па. Сигнал, отвечающий иону, представлен несколькими пиками, соответствующими статистическому распределению различных изотопов этого иона. Такой сигнал называют изотопным профилем (для небольших молекул), а отдельный пик, представляющий наиболее распространённый изотоп для атома, − моноизотопным пиком. Полученный масс-спектр является графиком зависимости относительного содержания различных ионных частиц от отношения m/z. При анализе сложных молекул возникает необходимость в двух и более последовательных масс-анализаторах для расшифровки молекулярной структуры. В приборе МС/МС (MSn) (тандемный масс-спектрометр) масс-анализаторы выстраивают последовательно друг за другом. Из ионов, разделённых в первом масс-анализаторе, отбирают ионы-прекурсоры (родительские ионы) и разбивают их на более мелкие фрагменты столкновением с атомами инертного газа (диссоциация, активированная соударением, − CID) или лазерным излучением. Этот процесс реализуют перед вторым масс-анализатором, при помощи которого анализируют продукты распада (дочерние ионы).

###### Область применения

Масс-спектрометрический метод даёт важную качественную и количественную (с использованием внешнего или внутреннего стандартов) информацию (определение молекулярных масс, молекулярной формулы, структуры фрагментов определяемых молекул) с пределом обнаружения от пикомоль [пмоль (10−12)] до фемтомоль [фмоль (10−15)].

Установление подлинности лекарственных веществ. Фрагментированный масс-спектр является «отпечатком пальцев» химического строения. Поэтому идентичность масс-спектров однозначно свидетельствует об идентичности молекул, особенно в сочетании с использованием библиотек масс-спектров и хроматографических данных. Масс-спектр высокого разрешения позволяет определять атомный состав молекулы (брутто-формулу) по точной массе.

Количественное определение фармацевтических субстанций и примесей в лекарственных формах. Количественное определение проводится с использованием стандартных образцов в комбинации с традиционными хроматографическими методиками, причём не требуется точного воспроизведения условий хроматографирования, поскольку пик на хроматограмме идентифицируют по масс-спектру, а интегрирование по площадям пиков избранных ионов или пиков избранных реакций образования конкретного иона, как правило, позволяет количественно определять компонент при неполном разделении пиков на хроматограмме.

Идентификация примесей и установление неизвестной структуры. Масс-спектр позволяет определить молекулярную массу соединения по молекулярному иону, а во многих случаях выяснить, из каких фрагментов состоит молекула, что в сочетании с применением библиотек спектров и данными спектроскопии ЯМР даёт возможность однозначно установить химическую структуру.

###### Технические характеристики масс-спектрометров

Важнейшими техническими характеристиками масс-спектрометров являются скорость сканирования, чувствительность, динамический диапазон, разрешение.

Скорость сканирования

Масс-анализатор пропускает ионы с определённым соотношением массы и заряда (m/z) в определённое время (кроме многоколлекторных приборов, ионно-циклотронного резонанса, орбитальной ловушки ионов). Для того чтобы проанализировать все ионы по отношению m/z, масс-анализатор должен сканировать все значения, нужные для пропускания к детектору всех интересующих ионов. Скорость развёртывания поля называется скоростью сканирования, которая должна быть максимальна (соответственно, время сканирования должно быть как можно меньше), поскольку масс-спектрометр должен зарегистрировать сигнал за время выхода хроматографического пика, которое может составлять несколько секунд. При этом чем больше масс-спектров будет измерено за время выхода хроматографического пика, тем точнее будет описан хроматографический пик и тем меньше будет вероятность пропустить его максимальное значение.

Самым медленным масс-анализатором является магнит, минимальное время сканирования которого без особой потери чувствительности составляет доли секунды. Квадрупольный масс-анализатор может разворачивать спектр за десятые доли секунды, ионная ловушка и линейная ионная ловушка − быстрее, а масс-спектрометр ионно-циклотронного резонанса − медленнее.

Любое сканирование во всех перечисленных типах масс-анализаторов является компромиссным – с увеличением скорости сканирования понижается чувствительность, т.к. меньше времени тратится на запись сигнала на каждое массовое число. Для типичных методов анализа скорости сканирования квадрупольного анализатора или ионной ловушки оказывается достаточно для получения удовлетворительных результатов. В то же время для высокопроизводительного анализа сложных молекулярных систем желательно использовать времяпролётный масс-спектрометр, который способен записывать масс-спектры со скоростью 40000 спектров в секунду.

Разрешение

Разрешение или разрешающую способность масс-спектрометра определяют как возможность масс-анализатора разделять ионы с близкими массами. Очень важно определить массы ионов максимально точно, это позволяет вычислить атомный состав иона или идентифицировать молекулу путём сравнения с базой данных, сократив число возможных кандидатов с тысяч и сотен до единиц или одного-единственного. Для магнитных масс-анализаторов, в которых расстояние между пиками масс-спектра не зависит от масс ионов, разрешение представляет собой величину равную M/ΔM. Эта величина, как правило, определяется по 10 %-ой высоте пика. Таким образом, разрешение 1000 означает, что пики с массами 100,0 а.е.м. и 100,1 а.е.м. отделяются друг от друга, то есть не накладываются вплоть до 10 % высоты.

Для анализаторов, в которых расстояние между пиками меняется в рабочем диапазоне масс (чем больше масса, тем меньше расстояние), таких как квадрупольные анализаторы, ионные ловушки, времяпролётные анализаторы, разрешение (M/ΔM) имеет другой смысл: оно характеризует конкретную массу. Поэтому эти масс-анализаторы характеризуют по ширине пиков – величине, остающейся постоянной во всём диапазоне масс. Ширину пиков измеряют на уровне 50 % их высоты. Для таких приборов ширина пика на полувысоте, равная 1, является неплохим показателем и означает, что такой масс-анализатор способен различить номинальные массы, отличающиеся на атомную единицу массы практически во всём его рабочем диапазоне.

Номинальной массой или массовым числом называют ближайшее к точной массе иона целое число в шкале атомных единиц массы. Например, масса иона водорода Н+ равна 1,00787 а.е.м., а его массовое число равно 1. Масс-анализаторы, которые измеряют номинальные массы, называют анализаторами низкого разрешения. Масс-спектрометры с двойной фокусировкой (магнитной и электростатической), ионно-циклотронного резонанса относят к приборам среднего или высокого разрешения. Типичным разрешением для магнитного спектрометра является величина, превышающая 60000, а работа на уровне разрешения 10000–20000 является рутинной. На масс-спектрометре ионно-циклотронного резонанса при анализе образца с массой около 500 а.е.м. можно легко достичь разрешения 500000, что позволяет проводить измерения масс ионов с точностью до 4-го–5-го знака после запятой. Разрешения в несколько тысяч можно добиться при использовании времяпролётных масс-анализаторов; однако, исследуя образцы с большой молекулярной массой, для которых этот тип приборов имеет преимущество перед другими анализаторами, этого разрешения хватает лишь для того, чтобы измерить массу иона с точностью ± десятки а.е.м.

Разрешение масс-анализатора тесно связано с другой важной характеристикой − точностью измерения массы иона. Например, массы молекулярных ионов азота (N2+) и углерода монооксида (СО+) составляют 28,00615 и 27,99491 а.е.м. соответственно, оба иона характеризуются массовым числом 28. Эти ионы будут регистрироваться масс-спектрометром порознь при разрешении 2500, а измеренное точное значение массы покажет, какой из этих газов регистрируется. Измерение точной массы доступно на приборах с двойной фокусировкой, на времяпролётных масс-спектрометрах (в низкомолекулярном диапазоне) и на масс-спектрометрах ионно-циклотронного резонанса.

Динамический диапазон. Динамический диапазон − соотношение максимального и минимального детектируемых сигналов. При анализе смеси, содержащей 99,99 % одного соединения или какого-либо элемента и 0,01 % какой-либо примеси, диапазон линейности должен быть четвёртого порядка. Масс-спектрометры для анализа органических соединений характеризуются динамическим диапазоном в 5–6 порядков, а масс-спектрометры для элементного анализа – в 9–12 порядков.

Чувствительность

Чувствительность является одной из важнейших характеристик аналитических приборов. Обычно рассматривают связанный с чувствительностью параметр – минимальное определяемое количество вещества или порог обнаружения. Типичная величина порога обнаружения хроматомасс-спектрометра, используемого для анализа органических соединений, составляет 1∙10−12 г при вводе 1 мкл раствора.

Пределы обнаружения неорганических веществ методом ICP/MS (ИСП/МС – масс-спектрометрия с индуктивно связанной плазмой) составляют 1∙10−15 (одна доля на квадриллион).

###### Оборудование

Масс-спектрометр состоит из следующих блоков, имеющих несколько разновидностей: системы ввода образца, ионного источника, масс-анализатора, детектора и системы обработки данных.

###### Система ввода образца

Первой стадией анализа является ввод образца испытуемого вещества в прибор без существенного нарушения вакуума.

Наиболее применимы системы ввода, позволяющие анализировать компоненты смеси, разделяемые при помощи соответствующего прибора, соединённого с масс-спектрометром.

Газовая хроматография/масс-спектрометрия (ГХ/МС) (GC/MS)

При использовании подходящих капиллярных колонок возможно непосредственное введение конца колонки в ионный источник прибора без применения сепаратора.

Применяется для анализа химических соединений, имеющих температуру кипения примерно до 400 ºС.

Жидкостная хроматография/масс-спектрометрия (ЖХ/МС) (LC/MS). Такая комбинация приборов особенно эффективна при анализе нелетучих полярных соединений либо термолабильных веществ. В связи с трудностью получения ионов в газовой фазе при данном методе требуется применение специальных интерфейсов: электроспрей (ESI), термоспрей (TSI), химическая ионизация при атмосферном давлении (APCI), фотоионизация при атмосферном давлении (APPI) и др., которые представляют собой самостоятельные методы ионизации и будут рассмотрены ниже.

Сверхкритическая флюидная хроматография/масс-спектрометрия. Этот метод ввода образца заключается в том, что подвижная фаза, обычно состоящая из находящегося в сверхкритическом состоянии углерода диоксида, переходит в газообразное состояние после прохождения через нагретую заслонку, находящуюся между колонкой и ионным источником.

Капиллярный электрофорез/масс-спектрометрия (CE/MS). Элюент вводится в ионный источник, в некоторых случаях после добавления дополнительного растворителя, при этом скорость потока может достигать нескольких миллилитров в минуту. Ограничениями данного метода являются малые количества вводимого образца и необходимость использовать летучие буферные растворы.

Устройства для прямого ввода образца. Образец вводится в прибор через вакуумный шлюз при помощи клапана, штанги, транспортёра или автосамплера, испаряется термически или в процессе десорбции с поверхности непосредственно в ионном источнике. При таком способе ввода необходимо использовать чистые образцы или иметь в виду, что полученный масс-спектр может представлять собой спектр смеси нескольких соединений.

###### Ионный источник

Электронная ионизация (EI). Образец испытуемого вещества, находящийся в газообразном состоянии, ионизируют потоком электронов, энергия которых (обычно 70 эВ) больше энергии ионизации образца. При этом, кроме молекулярного иона М+, образуются осколочные (фрагментные) ионы меньшей массы, характерные для данной молекулярной структуры. Главным ограничением данного способа является необходимость испарения образца, что делает невозможным исследование полярных, термолабильных или высокомолекулярных соединений. Электронная ионизация может быть использована в газовой хроматографии в сочетании с масс-спектрометрией и лишь в отдельных случаях – в жидкостной хроматографии.

Химическая ионизация (CI)

При этом способе ионизации используют газ-реагент (метан, изобутан, аммиак, азота монооксид, азота диоксид или кислород). В спектре присутствуют ионы типа (М + Н)+, (М – Н)−, а также ионные комплексы, образованные аналитом с используемым газом-реагентом. Фрагментация при химической ионизации проявляется в меньшей степени, чем при ионизации электронным ударом.

Для термолабильных веществ используют разновидность данного метода ионизации, при которой образец, нанесённый на проволоку, очень быстро испаряется вследствие эффекта Джоуля – Томсона (десорбционная химическая ионизация).

Бомбардировка быстрыми атомами (FAB) или ионизация бомбардировкой быстрыми ионами (вторично-ионная масс-спектрометрия – SIMS). Образец, растворённый в вязкой матрице (глицерин или м-нитробензиловый спирт), наносят на металлическую поверхность, ионизируют потоком нейтральных атомов (аргон или ксенон) или обладающими большой кинетической энергией ионами цезия. Наблюдают ионы (М + Н)+ и (М – Н)− типов или ионные комплексы, образованные средой (матрицей) и образцом. Данный тип ионизации хорошо подходит для полярных, термолабильных соединений, позволяя получать спектры молекул с массой до 10000 Да. Важно, чтобы образец был равномерно распределён в матрице, в противном случае качество спектра сильно ухудшается, а попытки количественного анализа смесей приводят к непредсказуемым результатам. Известен проточный вариант FAB, который может быть использован для жидкостной хроматографии, однако скорость потока подвижной фазы должна быть очень низкой (менее 10 мкл/мин).

Полевая десорбция и полевая ионизация

Образец испаряют около вольфрамового проволочного эмиттера, покрытого микроиглами (полевая ионизация) или помещают на эту проволоку (полевая десорбция).

Электрическое поле (напряжение около 10 кВ), образуемое эмиттером, ионизирует образец. Энергия, переносимая при данных способах ионизации, составляет всего доли эВ, т.е. избыточная энергия молекулярного иона значительно ниже, чем при других способах ионизации. Кроме того, другие электроны ионизирующейся молекулы не возбуждаются, и М+ оказывается в основном (невозбуждённом) электронном состоянии, и спектр зачастую представляет собой единственный пик, принадлежащий молекулярному иону.

Матричная лазерная десорбционная ионизация (MALDI). Образец, смешанный с соответствующей средой (матрицей) и помещённый на металлическую подложку, ионизируют короткими лазерными импульсами с длиной волны от УФ- до ИК-диапазона (продолжительность импульсов может составлять от пикосекунды до нескольких наносекунд). В качестве матрицы обычно используют УФ-поглощающие органические соединения (2,5-дигидроксибензойная, синаповая кислоты, 2,6-дигидроксиацетофенон и др.). Данный способ ионизации применяют главным образом, при анализе соединений с очень большой молекулярной массой (более 100 000 Да).

Индуктивно связанная плазма (ICP). Образец, растворённый в сильной минеральной кислоте (азотная кислота, хлористоводородная кислота, фтористоводородная кислота, в смеси азотной кислоты концентрированной и соляной кислоты 1:3 и т.д.), подаётся в зону горения аргоновой плазмы, где при температуре в несколько тысяч градусов происходит распад образца на атомы с ионизацией. Метод применяют для определения более 70 элементов. Ввиду наличия молекулярных интерференций оптимально использовать приборы высокого разрешения или комбинированные масс-анализаторы с камерой соударений. Изотопные интерференции, как правило, могут быть разрешены математическими методами.

Электроспрей (электрораспыление) (ESI). Образец, находящийся в растворе, вводится в источник через капилляр, на конце которого имеется потенциал порядка 5 кВ. На выходе из капилляра образуется аэрозоль из заряженных капель с высоким поверхностным зарядом. Испарение молекул растворителя из образующихся микрокапель приводит к образованию в газовой фазе однозарядных (М + Н)+, (М – Н)− или многозарядных ионов (М + nН)n+, (М – nН)n−. Скорость потока подвижной фазы при данном виде ионизации может меняться от нескольких нл/мин до 1–2 мл/мин. Такой способ ионизации применяют для полярных соединений. Использование электроспрея особенно эффективно для установления структуры полипептидов, белков и нуклеиновых кислот с молекулярными массами до 1000 000 Да и выше. Очень хорошо электроспрей сочетается с жидкостной хроматографией и капиллярным электрофорезом.

Химическая ионизация при атмосферном давлении (APCI). Ионизацию образца проводят при атмосферном давлении в зоне коронного разряда, помещённой на пути подвижной фазы, которая распыляется как вследствие тепловых эффектов, так и благодаря использованию потока азота. Образуются однозарядные ионы (М + Н)+ или (М – Н)−. Метод хорошо зарекомендовал себя для анализа сравнительно небольших полярных и неполярных молекул с массой менее 1200 Да. Возможность использования высоких скоростей потока подвижной фазы (до 2 мл/мин) делает этот способ ионизации идеальным для сочетания с жидкостной хроматографией.

Фотоионизация при атмосферном давлении (APPI)

В ионном источнике APPI используют криптоновую лампу, которая излучает фотоны с энергией 10,0 и 10,6 эВ. Эти фотонные энергии достаточны для ионизации большинства анализируемых соединений, в то время как для ионизации типичных растворителей (вода, метанол, ацетонитрил и т.д.) для обращённо-фазовой жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием необходимо излучение с большей энергией. Использование низкоэнергетичных фотонов в качестве источника ионизации приводит к получению масс-спектров, свободных от «химического шума», а также гарантирует минимальную фрагментацию ионов, позволяя идентифицировать протонированные ионы или радикальные катионы.

Кроме перечисленных разновидностей ионных источников существует целый ряд менее распространённых способов ионизации, таких как термоспрей, плазменная десорбция, лазерная абляция и др.

Масс-спектрометрия DART. Масс-спектрометрия DART (Direct Analysis in Real Time) – быстрый метод получения спектров низкомолекулярных соединений в режиме on-line непосредственно во время анализа, практически не требующий пробоподготовки. Метод позволяет проводить сверхбыструю идентификацию компонентов любых твёрдых или жидких объектов. Процедура сводится к тому, что объект вносят пинцетом (в случае твёрдых образцов) или палочкой (в случае жидких объектов) в ионный источник DART, где происходит испарение вещества и его ионизация с последующей регистрацией ионов масс-спектрометром. При этом образуются очень простые спектры, обычно содержащие протонированные молекулярные ионы низкомолекулярных компонентов пробы. Метод масс-спектрометрии DART применим для отслеживания полноты протекания реакций органического синтеза новых лекарственных веществ, прямого анализа компонентов смесей, разделённых на пластинке ТСХ, с её поверхности, обнаружения фальсификатов при анализе фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов.

###### Масс-анализатор

Двойная фокусировка. Принцип действия всех масс-анализаторов основан на физических законах движения заряженных частиц, согласно которым траектория заряженных частиц в магнитном поле искривляется, а радиус кривизны зависит от массы частиц. Именно в регистрирующем устройстве ионы распределяются по массам. Для увеличения разрешения на пути ионов устанавливают дополнительно электростатический анализатор. Магнитные масс-спектрометры имеют высокое разрешение, что позволяет использовать их при исследовании органических соединений с высоким разрешением, при анализе изотопных соотношений, элементном анализе на предельной чувствительности.

Квадрупольный анализатор

Устройство анализатора указанного типа основано на принципе квадруполя, который представляет собой 4 стержня, на которые попарно в противоположной полярности подаётся определённая комбинация постоянного и радиочастотного переменного электрического напряжения. Ионы, перемещающиеся параллельно осям этих стержней, попадают в гиперболическое поле. Возможность пропускания ионов зависит от соотношения m/z и напряжения радиочастотного поля. Изменяя напряжение поля, сканируют все значения m/z в рабочем диапазоне прибора (обычно от 1 до 2000). Некоторые приборы сканируют до 4000 а.е.м.

Квадрупольные масс-спектрометры не требуют использования высоких напряжений порядка тысячи вольт, в отличие от магнитных масс-спектрометров. Это позволяет упростить конструкцию, поскольку для создания вакуума в приборе требуются меньшие размеры вакуумной камеры.

Времяпролётный анализатор (Time of Flight, TOF)

В таких анализаторах ионы распределяются по массе в бесполевом пространстве, а не за счёт закономерностей движения заряженных частиц в поле (магнитном или электростатическом). Ионы из источника разгоняются электрическим полем, приобретая достаточно большую кинетическую энергию, и попадают в бесполевое пространство. На входе в это пространство все ионы имеют одинаковую кинетическую энергию и, в соответствии с формулой E = mv2/2, будут двигаться с разными скоростями. В зависимости от массы ионы в разное время достигнут детектора. Регистрация ионов и измерение времени при попадании в детектор позволяет рассчитать их массу.

На основе времяпролётного масс-анализатора сконструированы очень быстрые (и чувствительные) масс-спектрометры.

Времяпролётный масс-анализатор, в отличие квадрупольного анализатора, позволяет регистрировать широкий диапазон масс и измерять массы очень больших молекул, а наиболее подходящим способом ионизации оказался описанный выше метод MALDI.

Времяпролётные масс-анализаторы используют, в основном, благодаря их простоте, быстродействию и относительно невысокой стоимости.

Квадрупольная ионная ловушка

Развитие квадрупольных анализаторов привело к созданию «ионной ловушки».

В квадрупольной ионной ловушке ионы фиксируются внутри квадруполя за счёт запирающих потенциалов на входном и выходном концах ловушки. Затем при наложении изменяемой резонансной радиочастоты ионы выводятся из ловушки в соответствии с величиной m/z и регистрируются электронным умножителем. Такой механизм позволяет значительно увеличить популяцию захваченных ловушкой ионов, что ведёт к расширению динамического диапазона и к улучшению чувствительности.

Ионная ловушка позволяет удерживать ионы, которые необходимы для установления строения, не акцентируясь на остальных фрагментах молекулы, при этом процесс фрагментации можно повторять многократно, до 10–15 раз (общепринятое обозначение MSn).

Ионно-циклотронный резонанс

Ионы, подвергнутые действию сильного магнитного поля, движутся по круговым траекториям с частотами, которые могут быть непосредственно связаны с величинами m/z для этих ионов посредством Фурье-преобразования. Анализаторы такого типа обладают очень высокой разрешающей способностью (до 1000 000 и выше), а также позволяют получать МSn спектры.

Недостатком масс-анализаторов на основе ионно-циклотронного резонанса является необходимость использования очень низкого давления (порядка 10−7 Па) и применение сверхпроводящих магнитов, работающих при температуре жидкого гелия 4,2 К.

Орбитальная ловушка ионов

В орбитальной ловушке ионов (Orbitrap) не используют магнитные поля (масс-спектрометр с двойной фокусировкой или ионно-циклотронного резонанса) или радиочастоты (квадрупольные ионные ловушки). Принцип работы масс-анализаторов этого типа основан на электростатической аксиально-гармонической орбитальной ловушке ионов, которая использует симметричное статическое электрическое поле между внешним и внутренним электродами специальной формы.

По аналогии с масс-анализаторами на основе ионно-циклотронного резонанса в спектрометре с орбитальной ионной ловушкой ион детектируют по наведённому значению тока на внешних электродах; частоты, соответствующие различным m/z, выделяют с помощью алгоритма Фурье-преобразования, а затем конвертируют в масс-спектр.

Орбитальная ловушка характеризуется также большей ёмкостью ионов. Большая ёмкость пространственного заряда по сравнению с ионно-циклотронной и квадрупольной ловушками позволяет достичь большей точности измерения массы (разрешение порядка 100 000 на полувысоте пика), более широкого динамического диапазона и диапазона отношений величин m/z.

###### Обнаружение сигнала и обработка данных

Ионы, разделённые анализатором, преобразуются в электрические сигналы детектирующими системами, в частности, электронным умножителем, фотоумножителем или цилиндром Фарадея. Контроль различных физических параметров, требуемых для согласованной работы всех систем прибора, обработка данных, включая калибровку, визуализацию спектров, автоматические количественные расчёты, архивирование данных, создание и использование библиотек масс-спектров, осуществляются компьютером с соответствующим программным обеспечением.

###### Регистрация спектров

Различают три основных способа регистрации спектров: по полному ионному току (TIC); мониторинг избранного иона (SIM) или нескольких ионов (MIM); селективная регистрация избранных реакций распада иона (SRM) или нескольких ионов (MRM).

Регистрация по полному ионному току и по диссоциации, инициированной соударением, позволяют получать масс-спектры, однозначно связанные со строением конкретной молекулы.

На основе полученных таким образом спектров созданы библиотеки (базы данных), позволяющие определять структуру молекулы по эталонным спектрам.

Селективная регистрация ионов позволяет определять малые концентрации аналита на фоне сложной матрицы, а также приводит к огромному выигрышу в чувствительности: время, которое тратится на запись полного масс-спектра, при селективной регистрации используется для записи только одного или нескольких ионов.

Регистрация избранных реакций является ещё более избирательным методом определения искомого соединения в сложной смеси.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.1.0009 Рамановская спектрометрия

Взамен ОФС.1.2.1.1.0009.15

Рамановский спектр (он же спектр комбинационного рассеяния) возникает при облучении вещества монохроматическим лазерным излучением ультрафиолетового или видимого диапазона (диапазон длин волн от ультрафиолетовой до ближней инфракрасной области).

###### Область применения

Рамановская спектрометрия используют для анализа таких физических свойств, как кристалличность, фазовые переходы и полиморфные состояния.

Данный метод является экспрессным (1–2 с) и неразрушающим аналитическим методом идентификации и контроля качества лекарственных средств, поскольку даёт возможность получить индивидуальный спектр молекулы вещества.

К преимуществам Рамановской спектрометрии следует отнести: возможность бесконтактного анализа твёрдых, жидких и газообразных веществ; метод не требует большого количества вещества (около 50 мг); анализ проводится без разрушения образца; метод позволяет анализировать вещества в стеклянной и пластиковой упаковке.

Спектры комбинационного рассеяния очень чувствительны к природе химических связей – как в органических молекулах и полимерных материалах, так и в кристаллических решётках и кластерах, что обуславливает индивидуальность спектра конкретного вещества. Спектры комбинационного рассеяния органических материалов в основном состоят из линий, отвечающих деформационным и валентным колебаниям химических связей углерода с водородом, кислородом и азотом, а также характеристическим колебаниям различных малополярных функциональных групп: связей С – С, С = С и С ≡ С, а также гидроксильной – OH, аминогруппы –NH2 и т.д. Эти линии проявляются в диапазоне от 600 см−1 (валентные колебания одинарных С–С связей) до 3600 см−1 (колебания – OH группы). Кроме того, в спектрах ряда органических соединений в диапазоне 250−400 см−1 проявляются деформационные колебания алифатических цепочек.

В результате анализа можно идентифицировать молекулярные фрагменты − определять строение вещества или изучать внутримолекулярные взаимодействия, наблюдая положение и интенсивность полос в Рамановском спектре. При этом достаточно просто идентифицировать фрагменты, используя поиск по библиотекам спектров.

###### Метод

Под действием монохроматического лазерного излучения ультрафиолетового или видимого диапазона молекулы вещества поляризуются и рассеивают свет в интервале от 2 до 4000 см−1. Если взаимодействие кванта падающего излучения с молекулой, находящейся в основном или возбуждённом колебательном состоянии является упругим, то энергетическое состояние молекулы не меняется, и частота рассеянного излучения будет такая же, как падающего (рэлеевская полоса Рамановского спектра). В случае неупругого взаимодействия происходит обмен энергией между квантом излучения и молекулой, за счёт чего возникает рассеянное излучение, которое может быть большей или меньшей частоты (антистоксова и стоксова полоса соответственно). Таким образом, формируется Рамановский спектр. Основными характеристиками Рамановского спектра являются Рамановский сдвиг и волновое число.

Рамановский сдвиг описывают уравнением:

где Δω –_ разность энергий между начальным и конечным колебательными уровнями, (см-1); λ0 – длина волны падающего фотона, (см); λ1 – длина волны Рамановского рассеянного фотона,(см).
Волновое число () связано с длиной волны соотношением: .

Рамановские спектры могут быть получены для твёрдых веществ, жидкостей, суспензий, эмульсий, гелей, плёнок и газов, причём как напрямую, так и помещённых в стеклянные контейнеры или трубки, как правило, без предварительной подготовки образца или растворения. Испытуемый образец и стандартный образец подвергают одинаковой обработке и затем при одинаковых условиях получают их спектры.

Вследствие небольшого пространственного разрешения метода обращают внимание на качество испытуемых образцов и стандартных образцов, например, необходимо быть уверенным в том, что они находятся в одном и том же физическом состоянии либо использовать внутренний стандарт для жидких образцов.

Если спектры, полученные для твёрдых веществ, имеют различия в положениях максимумов, испытуемый образец и стандартный образец подвергают одинаковой обработке для того, чтобы они выкристаллизовались или образовались в одинаковой форме, либо поступают так, как описано в фармакопейной статье, и затем снимают спектры.

Основным ограничением Рамановской спектрометрии является флуоресценция примесей, которая мешает детектору улавливать значительно более слабый Рамановский сигнал. Флуоресценции можно избежать при использовании в качестве возбуждающего света лазерного излучения с большой длиной волны, например, находящейся в ближней инфракрасной области. Интенсивность некоторых Рамановских линий может быть усилена несколькими способами, например, путём использования резонансной Рамановской спектрометрии или усиленной поверхностью Рамановской спектрометрии.

Из-за узости светового потока падающего лазерного излучения для получения спектра необходимо всего лишь несколько микролитров образца. Учитывают неоднородность образца, если только его объём не увеличен, например, путём вращения.

Рамановский метод не всегда можно считать неразрушающим. Энергия, передаваемая лазером, зависит от продолжительности воздействия и длины волны. Избыток энергии может изменить физическое состояние или изменить образец.

Подготовка образца должна быть адаптирована к оборудованию. Например, для спектрометров, оснащённых микроскопом, могут потребоваться образцы с плоской поверхностью.

###### Оборудование

Спектрометры для получения Рамановских спектров обычно состоят из следующих компонентов:

- источник монохроматического света, чаще всего лазер с длиной волны в ультрафиолетовой, видимой или ближней инфракрасной области;

- подходящая оптика (линзы, зеркала, оптико-волоконные устройства), которые направляют возбуждающее излучение на образец и собирают свет, рассеиваемый образцом;

- оптическое устройство (монохроматор или фильтр), которое пропускает сдвинутое по частоте Рамановское рассеяние и препятствует попаданию на детектор интенсивного света, частота которого равна частоте возбуждающего света (рэлеевское рассеяние);

- диспергирующее устройство (дифракционная решётка или призма), соединённое со щелью, регулирующей длину волны, и детектором (обычно фотоумножитель);

или:

- диспергирующее устройство (дифракционная решётка или призма), соединённое с многоканальным детектором (обычно прибор с зарядовой связью (ПЗС);

или:

- интерферометр с детектором, регистрирующий интенсивность рассеянного света во времени (например, компьютер и соответствующее программное обеспечение), и устройство обработки данных, которое с помощью Фурье-преобразования переводит данные в диапазон частот или волновых чисел.

Рамановские спектрометры подразделяются на: спектрометры дисперсионного рассеяния и спектрометры дисперсионного рассеяния с преобразованием Фурье.

Дисперсионный Рамановский спектрометр

В дисперсионном Рамановском спектрометре используют лазеры в видимой области. Типичные длины волн лазеров 780 нм, 633 нм, 532 нм и 483 нм. Одним из преимуществ использования более коротковолновых лазеров является увеличение Рамановского сигнала, которое происходит при более коротких длинах волн. Рассеянное Рамановское излучение фокусируется на дифракционной решётке, которая выделяет различные длины волн, фиксируемые на детекторе ПЗС, представляющем собой двумерную кремниевую матрицу светочувствительных элементов (пикселей). Ограничением использования лазера с более короткой длиной волны для получения усиленного Рамановского сигнала от образца является флуоресцентное излучение, превышающее Рамановский сигнал при облучении образца коротковолновым лазером.

Фурье - Рамановский спектрометр

Рамановская спектрометрия с Фурье преобразованием позволяет устранить проблемы с флуоресценцией образцов, которая характерна для дисперсионной Рамановской спектрометрии. В Фурье-Рамановском спектрометре используют возбуждающий лазер 1 мкм, интерферометр и высокочувствительный детектор в ближнем инфракрасном диапазоне. При использовании возбуждающего лазера с большей длиной волны снижается энергия облучения, поэтому уменьшается вероятность наложения высоких электронных уровней, что значительно снижает вероятность возникновения флуоресценции. В Рамановской спектрометрии с Фурье преобразованием используют чувствительные детекторы на основе галлия индия арсенида, или охлаждаемый жидким азотом германиевый детектор, которые посредством Фурье-трансформаций превращают сигналы в набор частот или волновых чисел.

###### Идентификация и количественное определение с использованием стандартного образца

Идентификацию испытуемого образца по спектру комбинационного рассеяния осуществляют сравнением его спектра со спектром стандартного образца, зарегистрированных на одном и том же приборе в одних и тех же условиях. Количественное определение проводят с использованием известных количеств или концентраций стандартного образца.

Количественный анализ основан на прямо пропорциональной зависимости между интенсивностью (I) линий спектра и числом молекул (N) в единице объёма:

где i – интенсивность рассеиваемого света на одну молекулу;
k – коэффициент, зависящий от условий эксперимента, постоянная величина для данного прибора.

При количественном анализе смеси проводят последовательную регистрацию спектров в одинаковых условиях и сравнение интенсивностей линий образцов, с учётом предварительной идентификации всех компонентов смеси и наличия соответствующих стандартов. Сравнение может быть осуществлено также по методу внутреннего стандарта при добавлении в анализируемую смесь определённого количества стандартного вещества. Максимумы в спектре испытуемого образца должны совпадать по расположению и интенсивности с соответствующими максимумами в спектре фармакопейного стандартного образца (ФСО).

Идентификация и количественное определение с использованием библиотек спектров, статистических методов классификации и калибровки

Контроль за работой прибора

При использовании прибора следуют инструкциям производителя; регулярно, в зависимости от применения прибора и испытуемых образцов, проводят предписанные калибровки и испытания работы системы. При использовании Рамановской спектрометрии для количественных определений либо при создании спектральных библиотек сравнения для (хемометрической) классификации или калибровки обращают внимание на то, чтобы были сделаны все поправки к измерениям либо предприняты меры для контроля за изменяемостью величин волновых чисел и интенсивностью сигнала прибора.

Проверка шкалы волновых чисел

Шкалу волновых чисел Рамановских сдвигов (обычно выражаемую в обратных сантиметрах) проверяют с помощью подходящих стандартов, которые имеют характерные максимумы при исследуемых величинах волновых чисел (например, органическое вещество).

Калибровка прибора

Должна соответствовать типу образца, т.е. для твёрдых испытуемых образцов следует использовать твёрдые стандартные образцы, а для жидких – жидкие. Интенсивность в максимуме спектральной линии (I0) выражают либо в произвольной относительной шкале, либо в условной, принимая в качестве эталона интенсивность линии образцов сравнения. Шкалу волновых чисел проверяют по характерным максимумам стандартов. Выбирают подходящее вещество (например, полистирол, парацетамол, циклогексан), для которого установлены точные значения сдвигов волновых чисел. Рекомендуют выбирать стандарт с полосами, присутствующими во всем спектральном диапазоне Рамана, чтобы можно было оценить точность длины волны прибора в нескольких точках спектра.

Таблица 1. Сдвиги волновых чисел (и допустимые отклонения) для полистирола, парацетамола и циклогексана.
| Сдвиги волновых чисел, см−1 | Допустимые отклонения
--- | --- | ---
Настольный прибор, см−1 | Портативный прибор, см−1
Полистирол[2] | 620,9 | ±1,5 | ±2,5
1001,4 | ±1,5 | ±2,0
1031,8 | ±1,5 | ±2,0
1602,3 | ±1,5 | ±3,0
3054,3 | ±3,0 | Не применимо[3]
Парацетамол[4] | 797,2 | ±1,5 | ±2,5
857,9 | ±1,5 | ±2,0
1168,5 | ±1,5 | ±2,0
1236,8 | ±1,5 | ±2,0
1323,9 | ±1,5 | ±2,5
1648,4 | ±1,5 | ±3,0
2931,1 | ±2,0 | Не применимо[3]
Циклогексан[5] | 801,3 | ±1,5 | ±2,5
1028,3 | ±1,0 | ±2,0
1266,4 | ±1,0 | ±2,0
1444,4 | ±1,0 | ±2,5
2852,9 | ±2,0 | ±3,0

Проверка шкалы интенсивностей.

На абсолютную и относительную интенсивность Рамановских полос оказывают влияние следующие факторы:

- поляризация падающего света;

- поляризация собирающей оптической системы;

- интенсивность падающего света;

- различия в отклике прибора;

- различия в фокусе и геометрии образца;

- различия в насыпной плотности для твёрдых образцов;

- показатель преломления n или изменение n (Δn) между образцом и окружающей средой;

- размер частиц и распределение частиц по размерам;

- сечение рассеяния;

- сечение поглощения.

Подходящие критерии приемлемости могут изменяться в зависимости от применения, но в большинстве случаев допустимы колебания (изо дня в день) в относительных интенсивностях полос ±10 %.

Создание спектральных библиотек сравнения. Снимают спектры подходящего числа полностью исследованных (например, так, как описано в фармакопейной статье) веществ, имеющих отличия в производителе, серии, кристаллической модификации, размерах частиц и т.д., типичные для анализируемого материала. Набор спектров, полученных на данном спектрометре, и образующих спектральную библиотеку, содержит информацию, определяющую границы подобия или количественные пределы, которые могут быть применены при идентификации вещества, установлении его количественного состава, при анализе примесей в лекарственных средствах.

Количество веществ в базе данных зависит от особенностей её применения. Использование библиотек позволяет провести качественный анализ испытуемых образцов с определением пропорций содержания отдельных компонентов. Селективность базы данных, которая позволяет уверенно идентифицировать конкретное вещество или отличить его от других материалов базы данных, устанавливают при валидации. Для уверенности в пригодности базы данных эта селективность должна регулярно проверяться; в особенности это необходимо делать после любых значительных изменений, произошедших с веществом (например, изменения поставщика или производственного процесса), либо при настройке прибора для Рамановской спектрометрии (например, при проверке шкалы волновых чисел или повторяемости отклика спектрометра).

Полученная таким образом спектральная библиотека пригодна только для использования с данным прибором, либо с аналогичным, при условии подтверждения достоверности работы библиотеки после переноса.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.1.0010 Рентгеновская флуоресцентная спектрометрия

Взамен ОФС.1.2.1.1.0010.15

Рентгеновская флуоресцентная спектрометрия, основана на зависимости интенсивности рентгеновской флуоресценции от концентрации элемента в образце.

###### Область применения

Метод используется для определения концентраций элементов от бериллия 4Be до урана 92U в диапазоне от долей ppm до 100 % в веществах и материалах различного происхождения. Погрешность рентгенофлуоресцент-ного анализа варьируется в пределах 0,2–3 %.

###### Метод

При облучении образца потоком рентгеновского излучения возникает характеристическое флуоресцентное излучение, которое пропорционально концентрации элемента в образце. Излучение разлагается в спектр при помощи кристалл-анализаторов, далее с помощью детекторов и счетной электроники измеряется его интенсивность. Математическая обработка спектра позволяет проводить количественный и качественный анализ.

При облучении атомов образца фотонами с высокой энергией первичным рентгеновским излучением от рентгеновской трубки атомы переходят в возбужденное состояние, но спустя доли секунды возвращаются к стабильному (основному) состоянию.

Такой переход электронов сопровождается испусканием энергии в виде вторичного фотона с возникновением флуоресценции. Энергия вторичного фотона находится в диапазоне энергий рентгеновского излучения, которое располагается в спектре электромагнитных колебаний между ультрафиолетом и гамма-излучением.

Рентгенофлуоресцентный анализ охватывает следующие диапазоны энергий или длин волн: E = 0,11 - 60 кэВ, λ = 11,30 - 0,02 нм.

Разница энергии между энергетическими уровнями и частота колебаний поглощенного кванта соотносятся между собой уравнением:

(1)

где E1 и E2 – энергии орбиталей, между которыми произошел переход электрона, эВ;
h – постоянная Планка (6,625·10-34 Дж·с);
c – скорость света, с;
λ – длина волны, нм;
ν – частота испускаемого (вторичного) фотона.

Длина волны флуоресценции является индивидуальной характеристикой каждого элемента и называется характеристической флуоресценцией. В то же время интенсивность (число квантов, поступающих за единицу времени) пропорциональна концентрации (количеству атомов) соответствующего элемента. Это позволяет проводить количественный элементный анализ вещества.

В качестве единицы измерения интенсивности используется величина, равная числу рентгеновских квантов, измеренных за секунду, имп/с (количество импульсов за секунду) или кимп/с (количество килоимпульсов за секунду).

Существуют два метода регистрации рентгеновской флуоресценции: волнодисперсионная и энергодисперсионная.

###### Меры предосторожности

Рентгеновское излучение является опасным для здоровья человека, поэтому необходимо соблюдать рекомендации по мерам предосторожности и пределам уровней воздействия рентгеновского излучения, установленным национальным законодательством.

###### Оборудование

Измерение рентгеновского излучения производят с помощью волнодисперсионных или энергодисперсионных рентгенофлуоресцентных спектрометров, различающихся способом детектирования. Приборы рентгенофлуоресцентного анализа состоят из рентгеновского источника, держателя пробы, спектрометра и детектора. Спектрометр измеряет длину волны (λ) или энергию (Е) и интенсивность флуоресцентного излучения, испускаемого пробой. Рентгеновские источники, используемые для возбуждения атомов в пробе, как правило, не имеют принципиальных отличий в приборах с волновой и энергетической дисперсией. Наиболее широко используемым источником первичного рентгеновского излучения являются рентгеновские трубки.

Волнодсперсионные спектрометры

Для разложения излучения в спектр (выделения различных длин волн) в волнодисперсионном методе используют разные кристаллы-анализаторы с кристаллическим плоскостями, параллельными поверхности и имеющими межплоскостное расстояние d. Для волнодисперсионнных спектрометров существуют разные типы детекторов. Для относительно больших длин волн при анализе легких элементов используются газонаполненные пропорциональные детекторы (проточные и запаянные). Их действие основано на ионизации газа излучением и измерении числа электрических импульсов, прошедших через ионизированный газ. Для коротких длин волн (соответствуют тяжелым элементам) применяются сцинтилляционные детекторы, в которых измеряется ток фотоэлемента, чувствительного к светимости специального вещества - сцинтиллятора (NaI/Tl) при попадании на него рентгеновского излучения. Количество регистрируемых импульсов прямо пропорционально содержанию элемента в пробе. Многоэлементный анализ для фиксированного набора элементов на спектрометре с волновой дисперсией можно выполнить за несколько минут.

Энергодисперсионные спектрометры

В энергодисперсионных спектрометрах диапазон энергий вторичного (характеристического) излучения от пробы регистрируется в один этап. Спектр представляет зависимость интенсивности пиков от энергий излучения элементов. Выделенное излучение поступает в детектор рентгеновского излучения для измерения его интенсивности. Детектирование флуоресцентного излучения основано на преобразовании энергии квантов флуоресцентного излучения в импульсы напряжения определённой амплитуды. Для детектирования флуоресцентного излучения используются полупроводниковые твердотельные детекторы, действие которых основано на ионизации внутри полупроводника. Полупроводниковый детектор изготавливается из кремния 14Si или германия 32Ge. Энергодисперсионные спектрометры также можно комбинировать со сканирующим электронным микроскопом.

Энергодисперсионный метод обладает очень высокой чувствительностью и экспрессностью, что позволяет определять в образцах элементы от натрия 11Na до урана 92U, получать рентгенограммы в проходящих лучах, проводить двумерное и трёхмерное картирование образцов по содержанию тех или иных элементов.

###### Пробоподготовка

Образцы для анализа методом Рентгеновской флуоресцентной спектрометрии могут быть твердыми и жидкими.

Твёрдые образцы

Одинаковые навески стандарта и образца, тщательно растирают по отдельности в ступке и прессуют в таблетки (гранулы), иногда после смешивания с подходящим связывающим материалом. Разбавление испытуемого образца прозрачным для рентгеновских лучей веществом (полистирол, борная кислота, крахмал, алюминия гидроксид и т.д.) применяют для уменьшения эффектов поглощения и возбуждения, искривляющих калибровочные графики в соответствии с указанием в материалах на метод. Порошкообразную пробу с равномерно распределённым разбавителем и внутренним стандартом брикетируют или растворяют. Толщина брикета (таблетки) должна быть достаточно большой (около 1-2 мм), чтобы интенсивность излучения образца не зависела от величины навески. Если критическая толщина не достигнута, то интенсивность флуоресценции зависит от толщины образца, вследствие чего возникают ошибки измерения. Оценить критическую толщину образца можно по формуле:

(2)

где d - критическая толщина образца (см), ниже которой интенсивность флуоресценции зависит от толщины;
μ(λc) - коэффициент ослабления образца для флуоресцентного излучения с длиной волны λc (см–1).

Приготовленные брикеты (таблетки) пригодны для многократных измерений. Испытуемое вещество может быть помещено в виде порошка непосредственно в кювету прибора. Порошок образца может быть помещён в держатель из плексигласа и запрессован под полимерной плёнкой или нанесён на клейкую плёнку. При необходимости может применяться метод сплавления анализируемой пробы с флюсовым реагентом в платиновом тигле, при условии, что анализируемое вещество не является летучим.

Жидкие образцы

Помещают непосредственно в кювету прибора, при условии, что раствор состоит из одной фазы, прозрачен и обладает достаточно низкой летучестью. В ходе испытаний используют специальный держатель для жидких образцов и опорное окно, состоящее из подходящей полимерной плёнки (прозрачной для рентгеновских лучей и стойкой к растворителям). В качестве альтернативы жидкие образцы могут быть перенесены на поверхность диска и высушены перед анализом. Жидкий образец может быть предварительно смешан со стандартным раствором в соответствующих концентрациях для обеспечения точности и специфичности испытаний.

###### Методика

Настройку и использование прибора проводят в соответствии с инструкциями производителя.

Для определения концентрации элемента в образце измеряют скорость счета для нескольких стандартных образцов, содержащих известные количества данного элемента в матрицах определенного состава и рассчитывают или измеряют массовый коэффициент ослабления матрицы анализируемого образца. Для повышения чувствительности при количественном определении легких элементов измерения могут проводиться в вакууме, в среде азота или гелия.

Для калибровки прибора, проверки пригодности системы и контроля работоспособности используют подходящие стандартные образцы, при анализе лекарственных средств - предпочтительно с высоким содержанием углерода.

Проверка пригодности системы

Перед проведением испытания для подтверждения правильности работы системы проверяют ее пригодность. Проверка считается пройденной, если полученные результаты не отличаются от действительного значения более чем на 5 % в случае количественного определения содержания компонентов лекарственных средств или вспомогательных веществ, и более чем на 20 % в случае количественного определения содержания примесей элемента. Сравнение с результатами, полученными альтернативным методом, например, с помощью атомно-абсорбционной спектрометрии, также может быть использовано для проверки пригодности системы, при этом в случае количественного определения критерий приемлемости может быть принят равным 10 %.

Контроль работоспособности прибора

Для обеспечения достоверности результатов измерений необходимо гарантировать стабильную работу прибора в течение продолжительного периода времени. Выбор процедур, критериев приемлемости и временных интервалов для этого должен отталкиваться от типа используемого оборудования и его предполагаемого использования. Например, контроль можно осуществлять путем оценки x-оси (угол или энергия) и y-оси (интенсивность), а также разрешающей способности детектора (с требованиями, что значения разрешающей способности не должны отклоняться от значения, определенного при калибровке оборудования, более чем на 20 % для количественного определения компонентов и более чем на 25 % для подлинности и количественного определения примесей элементов).

Валидационные требования

В случае методик определения примесей руководствуются требованиями к валидации, представленными в ОФС «Элементные примеси». В остальных случаях пользуются ОФС «Валидация аналитических методик».

Если при проведении испытания требуется проведение пробоподготовки, то введение добавок в испытуемый образец осуществляют до начала ее первой стадии.

Калибровка

С целью точной оценки состава образца необходимо установить зависимость между измеренной интенсивностью линии и концентрацией соответствующего элемента в образце.

При анализе водных растворов и сложных по составу образцов для калибровки применяют метод разбавления (прямой способ внешнего стандарта) добавлением к изучаемому образцу больших количеств слабого поглотителя или малых количеств сильного поглотителя. На графике зависимости определяют наклон калибровочной кривой b0 по уравнению:

(3)

где μM – рассчитанный или измеренный массовый коэффициент ослабления матрицы М;
ICN – суммарная интенсивность испускаемого излучения(скорость счёта);
С – концентрация определяемого элемента в стандартном образце.

Массовый коэффициент ослабления матрицы образца

При прохождении рентгеновского излучения через образец происходит ослабление его интенсивности. Степень ослабления зависит как от энергии излучения, так и от химического состава поглощающего образца. Удельной характеристикой поглощения элемента является массовый коэффициент ослабления μM, связанный с плотностью ρ [г/см3] поглощающего материала и линейным коэффициентом поглощения μ [1/см]:

(4)

Коэффициент μM имеет размерность [см2/г]. Он зависит лишь от атомного номера поглощающего элемента и от энергии поглощаемых рентгеновских квантов. Если эмпирическая формула анализируемого образца известна, его массовый коэффициент ослабления рассчитывают исходя из справочных значений массовых коэффициентов ослабления составляющих элементов.

В случае если элементный состав образца неизвестен измеряют интенсивность рассеянного рентгеновского излучения IU (Комптоновское рассеяние) и рассчитывают величину массового коэффициента ослабления матрицы образца по уравнению:

(5)

где a и b – угловые коэффициенты калибровочной кривой;
μMP – рассчитанный или измеренный массовый коэффициент ослабления образца;
IU – рассеянное рентгеновское излучение.

Определение суммарной интенсивности элемента в образце

Интенсивность флуоресценции, например, Кα-линии элемента, (NКα) пропорциональна числу квантов, поглощенных К-уровнем, и выходу флуоресценции для К-серии.

Рассчитывают суммарную интенсивность излучения (ICN) определяемого элемента по измеренным интенсивностям флуоресцентной и фоновой линий, в предположении наличия в образце посторонних примесей.

Определение следовых количеств элемента

Для разбавленных растворов, если концентрация элемента находится в линейной части калибровочной кривой, методом рентгенофлуоресцентного анализа можно рассчитать концентрацию (C) по уравнению:

(6)

где f – коэффициент разбавления;
μMP – рассчитанный или измеренный массовый коэффициент ослабления образца;
ICN – суммарная интенсивность излучения;
C – концентрация определяемого элемента в стандартном образце;
b0 – наклон калибровочной кривой.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.1.0013 Спектроскопия кругового дихроизма

Взамен ОФС.1.2.1.1.0013.18

Спектроскопия кругового дихроизма (КД-спектроскопия) основана на анизотропии оптически активных молекул при пропускании света, поляризованного по правому или левому кругу.

###### Область применения

КД-спектроскопию используют в основном для изучения структуры органических молекул, обладающих оптической изомерией. С помощью данного метода можно дифференцировать вклады полос поглощения различных изомеров в суммарную оптическую активность исследуемого образца. Этот метод используют для анализа смесей оптических изомеров биологически активных веществ, для контроля качества лекарственных средств. Кроме того, КД-спектроскопию широко используют для определения количества белка и контроля за его вторичной структурой в растворах (т.е. за денатурационными изменениями).

###### Метод

При прохождении через любую оптически активную среду плоскополяризованного света он становится эллиптически поляризованным. Данное явление связано с различными величинами поглощения средой двух волн, составляющих этого света, с противоположной круговой поляризацией. Разность этих величин поглощения называют круговым дихроизмом. Полученные в ходе эксперимента спектры кругового дихроизма сравнивают со стандартными спектрами КД. Благодаря этому получают качественный и количественный состав исследуемого образца. Метод КД обладает высокой чувствительностью (вплоть до анализа десятков микрограммов субстанции).

Методика

Из образцов готовят растворы одинаковой концентрации. Концентрацию подбирают таким образом, чтобы при максимуме поглощения исследуемого вещества оптическая плотность составляла примерно 1.

Растворы помещают в кварцевую кювету и проводят измерение КД на соответствующем приборе в указанном диапазоне длин волн. Далее проводят анализ полученных спектров, сравнивая их со стандартными спектрами.

Непосредственное измерение оптической плотности даёт следующее выражение:

где ΔA – оптическая плотность кругового дихроизма;
A1 - оптическая плотность для света с левой круговой поляризацией;
A2 - оптическая плотность для света с правой круговой поляризацией.

Величину кругового дихроизма рассчитывают по следующей формуле:

где Δε – молярный круговой дихроизм или молярный дифференциальный дихроичный коэффициент поглощения, л/моль−1/см−1;
ε1 - молярный коэффициент поглощения для света с левой круговой оляризацией;
ε2 - молярный коэффициент поглощения для света с правой круговой поляризацией;
c - концентрация испытуемого раствора, моль/л−1;
l - длина оптического пути, см.

Кроме того, для характеристики кругового дихроизма также используют следующие единицы:

Коэффициент асимметрии:

где ε – молярный коэффициент поглощения.

Молярная эллиптичность

Некоторые типы приборов непосредственно показывают величину молярной эллиптичности Θ, выраженную в градусах. При использовании таких приборов молярная эллиптичность может быть рассчитана по следующему уравнению:

где [Θ] – величина молярной эллиптичности, градус/см2/децимоль-1;
Θ - величина эллиптичности, показываемая прибором;
M - относительная молекулярная масса исследуемого вещества;
c - концентрация испытуемого раствора, г/мл;
l - длина оптического пути, см.

Молярная эллиптичность также связана с молярным круговым дихроизмом уравнением:

Молярную эллиптичность используют в анализе белков и нуклеиновых кислот. В этом случае молярную концентрацию, выраженную в единицах мономерных остатков, рассчитывают исходя из отношения молекулярной массы к числу аминокислот.

Для белков среднее значение относительной молекулярной массы мономерного остатка составляет от 100 до 120 (обычно 115), для нуклеиновых кислот (в виде натриевой соли) – около 330.

###### Оборудование

Основные составляющие КД-спектрометра или, по-другому, дихрографа:

- источник излучения (обычно ксеноновая лампа);

- система круговой поляризации света (двойной монохроматор, кварцевые призмы, двоякопреломляющий модулятор);

- детектор (фотоумножитель);

- усилитель сигнала.

Источником излучения (S) является ксеноновая лампа (рис. 1). Свет проходит через двойной монохроматор (М), оснащённый кварцевыми призмами (Р1, Р2). Линейный пучок, пройдя через первый монохроматор, разделяется на 2 части, поляризованные под прямыми углами во втором монохроматоре. Поляризованный и монохроматический свет проходит через двоякопреломляющий модулятор (Cr), в результате чего получается переменный свет с круговой поляризацией. Затем пучок проходит через испытуемый образец (С) и достигает фотоумножителя (PM), после чего попадает на усилитель, который производит 2 электрических сигнала: одним является прямой ток Vc, а другим – переменный ток с частотой модуляции Vac, характерной для испытуемого образца. Отношение Vac/Vc пропорционально изменению поглощения ΔА, которое создаёт сигнал.

Дихрограф способен производить измерения в диапазоне длин волн от 170 нм до 800 нм.

Рисунок 1. Оптическая схема дихрографа

###### Калибровка прибора

Для проверки правильности шкалы оптической плотности используют раствор изоандростерона в диоксане (10 мг изоандростерона растворяют в 10,0 мл диоксана). Снимают КД-спектр в диапазоне от 280 нм до 360 нм. Величина Δε, измеренная при 304 нм, должна быть равна +3,3. Возможно также использование раствора (1S)-(+)-10-камфорсульфоновой кислоты.

Линейность модуляции проверяют обычно с помощью раствора (1S)-(+)-10-камфорсульфоновой кислоты в воде (10 мг кислоты растворяют в 10,0 мл воды). Сначала спектрофотометрически определяют точную концентрацию камфорсульфоновой кислоты, используя удельный показатель поглощения при 285 нм, равный 1,49. Далее снимают КД-спектр в диапазоне от 185 нм до 340 нм. Величина Δε, измеренная при 290,5 нм, должна быть равна от +2,2 до +2,5, а измеренная при 192,5 нм – от −4,3 до −5. Также возможно использование (1S)-(+)- или (1R)-(−)-аммония 10-камфоросульфоната.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.1.0014 Турбидиметрия

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на метод турбидиметрии.

###### Область применения

Турбидиметрический метод используют для определения степени мутности различных лекарственных форм (суспензий, эмульсий, экстрактов, растворов и др.) и коллоидной устойчивости белков.

Также метод применяют для количественного определения лекарственных средств или биомаркеров в жидкостях организма, таких как сыворотка, плазма или моча, а также при проведении иммунологических исследований с целью регистрации образования иммунных комплексов антиген-антитело, сопровождающихся образованием соответствующего преципитата и др.

Турбидиметрический метод применим, главным образом, для определения степени мутности в образцах, не содержащих окрашенных компонентов, а также представляющих собой устойчивые суспензии.

###### Метод

Метод основан на линейном измерении ослабления интенсивности светового потока, прошедшего через раствор, содержащий взвешенные частицы, вследствие поглощения и рассеивания светового потока.

Требования к методу турбидиметрии

1. Применяют сильноразбавленные растворы. Полученные взвеси должны иметь очень низкую растворимость.

2. Точность результата при анализе суспензий зависит от методики получения суспензий и от воспроизводимости их оптических свойств. На это влияют следующие факторы:

   - 1) концентрация ионов, образующих осадок;

   - 2) отношение между концентрациями смешиваемых растворов;

   - 3) скорость смешивания;

   - 4) порядок смешивания;

   - 5) время, требуемое для получения максимальной мутности;

   - 6) стабильность дисперсности;

   - 7) присутствие посторонних веществ;

   - 8) температура;

   - 9) наличие защитных коллоидов.

3. Взвеси должны быть устойчивы во времени. Для увеличения стойкости взвеси часто применяют защитные коллоиды.

Таким образом, стандартизация условий подготовки растворов к турбидиметрическому определению необходима для получения правильных результатов.

Оборудование

В качестве прибора используют турбидиметры, нефелометры, мутномеры, спектрофотометры и т.п. Если растворитель и рассеивающие частицы бесцветны, то максимальная чувствительность достигается при использовании излучения голубой или ближней ультрафиолетовой области. Если системы окрашены, то оптимальную длину волны подбирают экспериментально.

Рисунок 1. Схема турбидиметрического анализа

При турбидиметрических исследованиях интенсивность прошедшего светового потока It может быть определена по уравнению:

где It – интенсивность светового потока, прошедшего через раствор;
I0 – интенсивность падающего светового потока;
α, k – константы, зависящие от природы суспензии и метода измерения;
C – концентрация рассеивающих частиц в растворе;
b – толщина поглощающего слоя раствора;
d – средний диаметр рассеивающих частиц; λ – длина волны.

###### Относительная турбидиметрия

Определение опалесценции (мутности) как бесцветных, так и окрашенных жидкостей проводят методом относительной турбидиметрии. Метод относительной турбидиметрии сочетает принципы турбидиметрии и нефелометрии.

Окрашенные жидкости имеют свойство понижать величину мутности, так как при прохождении через них падающего, и рассеянного света происходит его ослабление. Эффект настолько выражен, что даже для образцов с умеренной окраской, обычные приборы для измерения мутности использовать нельзя.

В относительной турбидиметрии определяют отношение интенсивности прошедшего света к интенсивности рассеянного света. Эта процедура компенсирует влияние окрашивания испытуемого образца. В приборах в качестве источника света используют вольфрамовую лампу со спектральной чувствительностью около 550 нм, работающую при температуре нити 2700 К. В качестве альтернативы для окрашенных растворов можно использовать инфракрасный светоизлучающий диод (ИК-светодиод), имеющий максимум излучения при 860 нм с шириной спектральной полосы 60 нм в качестве источника света прибора. Допускается использование других подходящих источников света.

В качестве детекторов используют кремниевые фотодиоды и фотоумножители. Свет, рассеянный под углом 90±2,5°, измеряется первичным детектором. Другие детекторы измеряют обратное и прямое рассеяние (отраженный свет), а также проходящий свет.

Используемые приборы должны быть откалиброваны по эталонам мутности и могут автоматически измерять мутность. Полученные значения выражаются в относительных единицах NTU (Nephelometric Turbidity Units – нефелометрические единицы мутности). Измерение мутности эталонов сравнения I-IV с помощью относительной турбидиметрии показывает линейную зависимость между концентрацией и значениями NTU. Линейность достигается путём вычисления отношения измерения рассеянного света под углом 90° к сумме измерения прямого рассеянного света и измерения проходящего света. Эталоны суспензии I–IV могут использоваться для калибровки. Допускается для калибровки приборов использование эталонов с другими значениями величин NTU или в других единицах мутности, согласно указаниям в методике испытания.

Таблица 1. Эталоны для калибровки приборов
| Значения величин NTU
--- | ---
Эталон сравнения I | 3
Эталон сравнения II | 6
Эталон сравнения III | 18
Эталон сравнения IV | 30
Основной эталон | 60
Исходный эталон | 4000

Технические условия пригодности прибора

Единица измерения NTU основана на мутности первичного стандартного образца формазина. Также могут использоваться FTU (Formazin Turbidity Units – единицы мутности по формазину) или FNU (Formazin Nephelometry Units – формазиновые нефелометрические единицы), которые эквивалентны NTU при низких значениях мутности (до 40 NTU).

Диапазон измерений: 0,01–1100 NTU.

Разрешение: 0,01 NTU в диапазоне 0–10 NTU; 0,1 NTU в диапазоне от 10–100 NTU; 1 NTU в диапазоне более 100 NTU. Прибор должен быть откалиброван с помощью эталонов сравнения.

Точность: в диапазоне 0–10 NTU: ±(2% показания прибора + 0,01) NTU; в диапазоне 10–1000 NTU: ±5 %.

Повторяемость: в диапазоне 1–10 NTU: ±0,01 NTU; в диапазоне 10-1000 NTU: ±2 % от измеренного значения.

Калибровка: проводят с помощью 4 эталонов сравнения в интересующем диапазоне значений. Для этого могут использоваться эталонные суспензии или подходящие стандартные растворы, откалиброванные с помощью исходного эталона. При определении мутности лекарственных средств допускается использовать для калибровки приборов эталоны сравнения, приготовленные в соответствии с требованиями ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей».

Посторонний свет является существенным источником ошибок при низких значениях измеряемой мутности. Посторонний свет попадает в детектор из оптической системы, а не от испытуемого образца; менее 0,15 NTU в диапазоне 0–10 NTU; менее 0,5 NTU, в диапазоне 10–1000 NTU.

Приборы, соответствующие перечисленным характеристикам и откалиброванные с использованием эталонов сравнения, можно использовать вместо визуального метода исследования для определения соответствия требованиям фармакопейных статей. Приборы, у которых технические характеристики (диапазон, разрешение, точность, повторяемость) отличаются от указанных выше, могут использоваться в случае, если они валидированы надлежащим образом и пригодны для использования по назначению. Методика испытания также должна быть валидирована в целях подтверждения её аналитической пригодности. Прибор и методика должны соответствовать параметрам испытуемого образца.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.1.0015 Масс-спектрометрия с индуктивно связанной плазмой

Вводится впервые

Масс-спектрометрия с индуктивно связанной плазмой (ИСП-МС) представляет собой масс-спектрометрический метод, в котором в качестве источника ионизации атомов используется индуктивно связанная плазма (ИСП). Данный метод основан на прямом измерении отношений массы к заряду (m/z) элементарных положительно заряженных ионов, полученных из анализируемого вещества в газовой фазе.

###### Область применения

Метод ИСП-МС применяется для качественного и количественного элементного анализа лекарственных средств и их примесей. Данным методом возможно провести количественное определение более 70 элементов (аналитов) с пределами измерения от 10000 ppm (parts per million) до 0,1 ppt (parts per trillion). Минимальное определяемое содержание элементов в образце методом ИСП-МС может достигать 1·10−15 (одна часть на квадриллион).

###### Метод

ИСП представляет собой сильно ионизированный инертный газ (обычно аргон) с равновесным количеством электронов и ионов, поддерживаемый радиочастотным (РЧ) полем.

Плазма формируется в специальной горелке за счёт поглощения аргоном высокочастотного электромагнитного излучения от индуктора, присоединённого к РЧ генератору. Горелка помещается соплом в индуктор. При подаче на индуктор напряжения высокой мощности (обычно 700–1600 Вт) в горелке образуется переменное электромагнитное поле с частотой, соответствующей частоте генератора (в большинстве случаев 27 или 40 МГц). В качестве первичного источника ионизации выступает искровой разряд между специальным электродом и индуктором, срывающий с атомов аргона электроны. Захватываемые и ускоряемые магнитным полем электроны вызывают дальнейшую ионизацию вновь поступающего газа в виде цепной реакции. Процесс увеличения энергии электронов под действием электромагнитного поля индуктора называется индуктивным связыванием. Ударная ионизация аргона превращает газ в плазму, состоящую из атомов аргона, электронов и ионов аргона. Плазма самоподдерживается внутри горелки за счёт процесса индуктивного связывания. ИСП проявляется в виде очень яркого факела, имеющего в основании тороидальную форму. Этот участок ИСП называют зоной индукции – областью, в которой происходит индуктивная передача РЧ энергии от индуктора к плазме (рис. 1).

Рисунок 1. Строение плазменного факела

Важной особенностью ИСП является ввод аэрозоля пробы сквозь зону индукции в центр плазмы, вследствие чего компоненты пробы, включая аналит, последовательно десольватируют, превращаются в пар, атомизируются и ионизируются (рис. 2). Окружение ионов аналита высокотемпературной плазмой сравнительно продолжительное время (приблизительно 2 мс) обуславливает малые помехи матрицы в ИСП относительно других методов ионизации.

Рисунок 2. Пример масс-спектрометрического метода анализа

Ионы транспортируются из плазмы, находящейся при атмосферном давлении, в вакуумную часть масс-спектрометра через набор конусов (интерфейс). За интерфейсом находится ионная оптика. Основными функциями ионной оптики являются: экстракция анализируемых ионов из плазменного потока и их осевое концентрирование; организация управляемого движения потока ионов от интерфейса до масс-анализатора; освобождение потока ионов от электронов, нейтральных частиц и фотонов; ослабление матричных помех и уменьшение количества двухзарядных и полиатомных ионов; защита ионного тракта от загрязнений.

Масс-анализатор, представляющий собой обычно квадрупольную, магнитную или времяпролётную систему, разделяет ионы компонентов пробы в зависимости от соотношения m/z. После разделения ионы с определённой величиной m/z направляются на детектор, где поток ионов преобразуется в электрические сигналы. Количество аналита в пробе определяют на основании числа ионов, генерирующих электрические импульсы в единицу времени.

###### Оборудование

Прибор состоит из следующих основных компонентов (рис. 3):

- система ввода проб для жидких или твёрдых образцов;

- генератор радиочастотных сигналов;

- плазменная горелка;

- интерфейс;

- ионная оптика, включающая в себя ионные линзы и реакционно-столкновительную ячейку;

- масс-спектрометр;

- детектор;

- блок обработки данных.

Рисунок 3. Принципиальная схема прибора

Основная характеристика прибора ИСП-МС – его разрешение, т.е. эффективность разделения двух близких масс. Магнитные, секторные и времяпролётные ИСП-масс-спектрометры характеризуются лучшим разрешением по сравнению с квадрупольными приборами.

###### Мешающие факторы, приводящие к интерференциям

Основными мешающими факторами, искажающими результаты измерения, являются матричные эффекты (неспектральные интерференции) и спектральные наложения (спектральные интерференции).

Матричные эффекты проявляются в случаях:

- сильного отличия вязкости испытуемого раствора от вязкости градуировочных растворов, следствием которого является различие в эффективности распыления и составе аэрозоля по размеру капель для указанных выше растворов;

- высокой общей концентрации ионов в аэрозоле, что снижает эффективность ионизации трудно ионизируемых элементов вследствие недостаточности энергии плазмы и увеличивает рассеивание ионного потока.

Матричные эффекты могут быть смягчены увеличением степени разбавления образца в испытуемом растворе, практикуется также экстракция матрицы. Для учёта мешающего влияния матрицы широко применяют методы внутреннего стандарта и/или стандартных добавок. Элемент, используемый в качестве внутреннего стандарта, выбирают в зависимости от потенциала ионизации и массы анализируемого элемента, а также состава матрицы.

К спектральным интерференциям относится изменение интенсивности сигналов определяемых ионов за счёт наложения на них сигналов других ионов, обладающих таким же значением величины m/z. Спектральные интерференции подразделяются на:

- изобарные наложения, вызванные перекрыванием сигналов ионов изотопов различных элементов с близкой номинальной массой, например, 40Ar на 40Ca, 58Fe на 58Ni, 87Sr на 87Rb;

- наложения двухзарядных ионов на однозарядные с той же величиной m/z, например 48Ti2+ на 24Mg+, 138Ва2+ на 69Ga+;

- полиатомные наложения, вызванные образованием в плазме ионов, содержащих более чем один атом элемента (оксиды, аргиды, гидриды, хлориды и т.д.), например, 14N14N и 12C16O на 28Si, 32S16O на 48Ti, 40Ar16O на 56Fe, 40Ar35Cl на 75As, 40Ar40Ar на 80Se.

Для учёта спектральных наложений используют системы подавления интерференций (реакционно-столкновительные ячейки), варьируют условия проведения эксперимента (режим холодной плазмы, охлаждение распылительной камеры, устранение вторичного разряда), применяют уравнения математической коррекции. Современное программное обеспечение ИСП-масс-спектрометров позволяет проводить математическую коррекцию интерференций непосредственно в процессе измерений, а уравнения для изобарных наложений включены в программы.

Основными методами анализа в ИСП-МС являются:

1. метод калибровочной кривой;

2. метод стандартных добавок;

3. метод изотопного разбавления.

Раздел с описанием метода стандартных добавок и метода калибровочной кривой приведён в ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия».

Самым точным методом анализа в ИСП-МС, свободным от неспектральных и спектральных интерференций, является метод изотопного разбавления. В рамках данного метода образец с неизвестным содержанием элементов смешивают с точным количеством добавки с известной концентрацией изотопов определяемого элемента. Измеряют изотопное отношение элемента в образце до и после введения добавки. Расчёт изотопных отношений осуществляют по интенсивностям сигналов соответствующих изотопов, скорректированных на эффект дискриминации масс (систематическое отклонение измеренных интенсивностей ионных токов изотопов от их точной концентрации или соотношения концентраций этих изотопов в анализируемой пробе в зависимости от отношения массы к заряду ионов m/z).

Метод изотопного разбавления реализован в программном обеспечении современных ИСП-масс-спектрометров.

###### Методика

Подготовка и ведение проб

Способы пробоподготовки включают в себя:

- прямое введение жидких образцов;

- прямое введение растворов твёрдых образцов в подходящих растворителях;

- введение микрочастиц твёрдых образцов после лазерной абляции поверхности.

Приготовление раствора может включать стадию минерализации пробы подходящим методом (например, в микроволновой печи в закрытых сосудах с использованием сильных окислителей). При минерализации пробы предпочтительно использовать азотную кислоту. В случае необходимости применяют хлористоводородную кислоту, однако наличие хлорид-ионов в растворе приводит к возникновению полиатомных спектральных наложений. Использование фосфорной и серной кислот увеличивает вязкость раствора и снижает эффективность распыления образца; присутствие серы и фосфора дополнительно повышает количество полиатомных ионов. Допускается добавление в пробу небольшого количества фтористоводородной кислоты для стабилизации растворов некоторых элементов при использовании кварцевых или стеклянных систем ввода образца. Использование высоких концентраций фтористоводородной кислоты возможно только в случае применения системы ввода образца и горелок, изготовленных из стойких к HF материалов. При использовании органических растворителей возможно дополнительное введение кислорода для обеспечения полного сгорания органической матрицы.

Жидкие образцы доводят до необходимой концентрации аналита в пределах рабочего диапазона прибора путём разведений или концентрирования образца. Введение пробы жидкого образца осуществляется перистальтическим насосом, направляющим раствор с постоянной скоростью потока через распылитель в распылительную камеру для образования жидкого аэрозоля.

При лазерной абляции поверхность исследуемого твёрдого образца подвергается воздействию лазерного импульса, при этом образуется аэрозоль из твёрдых частиц, который транспортируется потоком газа (обычно аргоном или гелием) с постоянной скоростью непосредственно в ИСП.

Выбор рабочих условий

Эксплуатацию прибора осуществляют в строгом соответствии с инструкциями производителя. В зависимости от типа растворителя выбирают различные рабочие условия, в частности:

- материал распылителя, распылительной камеры, конусов, горелки и подводящих шлангов;

- тип распылителя и распылительной камеры;

- вспомогательный газ и скорости потоков газа-носителя и вспомогательного газа;

- РЧ мощность;

- скорость насоса подачи анализируемого раствора;

- температуру распылительной камеры;

- режим работы реакционно-столкновительной ячейки;

- изотопы анализируемого элемента.

Выбор изотопов

Выбор изотопов осуществляется по нескольким критериям:

- обеспечение максимальной селективности (выбирают наиболее широко распространённый изотоп для данного элемента);

- минимизация возможных интерференций. Информация по спектральным интерференциям обычно содержится в программном обеспечении к приборам, предоставляемом производителями.

###### Контроль работы прибора

Пригодность системы

В ходе проверки пригодности системы определяют чувствительность прибора, точность измерения масс, способность плазмы разлагать оксиды и не образовывать двухзарядные ионы, кратковременную и долговременную стабильность работы оборудования.

Точность измерения масс и чувствительность прибора проверяют с использованием настроечного раствора, содержащего несколько изотопов в широком диапазоне масс, например, 7Li, 9Be, 59Co, 89Y, 115In, 140Ce, 205Tl и 209Bi, измеряя интенсивности сигналов в размерности скорости счёта.

Способность плазмы разлагать оксиды определяют для оценки вклада полиатомных интерференций. Для этого используют настроечные растворы, измеряя соотношения CeO+/Ce+ и/или BaО+/Ba+ (уровень содержания оксидов не должен превышать 3 %).

Уровень образования двухзарядных ионов оценивают, измеряя соотношение Ce2+/Ce+ и/или Ba2+/Ba+ с использованием настроечных растворов этих элементов. Отношение сигнала для двухзарядных ионов к обозначенному элементу должно быть менее 2 %.

Кратковременную стабильность оценивают по величине относительного стандартного отклонения (RSD) результатов пяти измерений интенсивности сигналов определяемых изотопов одного анализируемого раствора. Критерий приемлемости кратковременной стабильности: RSD ≤ 5 % (для основного компонента), RSD ≤ 10 % (для примесей с концентрацией более 1 мг/кг), RSD ≤ 20 % (для примесей с концентрацией менее 1 мг/кг).

Долговременную стабильность проверяют проведением испытания для градуировочного раствора в начале и конце последовательности измерений. Концентрацию градуировочного раствора выбирают в пределах диапазона концентраций используемой градуировочной кривой. Измеренные концентрации не должны отличаться от фактических более чем на 10 % (моноэлементный стандартный раствор) и на 20 % (мультиэлементный стандартный раствор).

В ходе проверки пригодности системы необходимо оптимизировать параметры прибора (скорость подачи образца и потоков газов, энергию плазмы, напряжение на ионных линзах и т.д.) для получения наибольшей интенсивности сигнала.

Валидация методики

Линейность. Готовят и анализируют не менее пяти калибровочных растворов, концентрация элементов в которых находится в пределах диапазона калибровки, и контрольный раствор. Проводят не менее пяти измерений. Используя все полученные данные, рассчитывают калибровочную кривую методом наименьших квадратов. Строят кривую регрессии, отмечая средние значения, измеренные значения и доверительный интервал калибровочного графика.

Метод является пригодным при условии соблюдения следующих требований:

- коэффициент корреляции должен быть не менее 0,99;

- на калибровочном графике погрешности каждого калибровочного уровня должны быть распределены случайным образом.

Рассчитывают среднее значение и относительное стандартное отклонение для наименьшего и наибольшего калибровочного уровня. В случае если отношение рассчитанного стандартного отклонения наименьшего и наибольшего калибровочного уровня менее 0,5 или более 2,0, то более точная оценка калибровочного графика может быть получена с использованием взвешенной линейной регрессии. Линейную и квадратичную весовую функции применяют к полученным данным для нахождения наиболее подходящей для использования весовой функции. Если средние значения при сравнении с калибровочным графиком проявляют отклонение от линейности, используют двухмерную линейную регрессию.

Правильность. Предпочтительно оценивать правильность с использованием сертифицированных стандартных образцов. Если это невозможно, то правильность выражают через открываемость. В случае методик количественного определения основных компонентов открываемость должна быть от 90 % до 110 %. Для определения следовых количеств элемента открываемость должна быть от 80 % до 120 % от теоретического значения. Открываемость может быть определена с использованием подходящего раствора сравнения (матричного раствора), содержащего известное количество определяемого элемента (средняя концентрация калибровочной кривой). Для ЛРС и ЛРП открываемость для растворов сравнения составляет от 70 % до 150 % из-за сложной органической матрицы испытуемых образцов.

Повторяемость. Критерии приемлемости: относительное стандартное отклонение не более 3 % для основного компонента, не более 5 % для вспомогательного вещества. Для ЛРС и ЛРП: не более 10 % для примесей с концентрацией, превышающей 1 мг/кг, не более 20 % для примесей с концентрацией менее 1 мг/кг (при условии, что определяемая величина лежит в диапазоне калибровки).

Предел количественного определения. Удостоверяются, что предел количественного определения, например, определённый с использованием приближения 10°σ, ниже измеряемого значения.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.1.0016 Нефелометрия

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на метод нефелометрии.

###### Область применения

Метод нефелометрии используют в качестве инструментального метода для определения степени мутности различных лекарственных форм (суспензий, эмульсий, экстрактов, растворов и др.). Кроме того, нефелометрия позволяет с высокой точностью посредством реакции преципитации проводить анализ:

- иммуноглобулинов (IgG, включая подклассы; IgM и IgA);

- белков системы комплемента (компоненты С3, С4, фактор В и др.);

- С-реактивного и некоторых других сывороточных белков;

- полисахаридов вакцинальных серотипов, входящих в состав поливалентных полисахаридных вакцин.

###### Метод

Метод основан на измерении интенсивности светового потока, рассеянного под определённым углом (обычно под углом 90 °) частицами, распределёнными в объёме испытуемого образца и находящимися в растворе во взвешенном состоянии. Интенсивность рассеянного света зависит, главным образом, от количества взвешенных частиц, их размеров, а также длины волны падающего на образец электромагнитного излучения.

Для получения воспроизводимых и достоверных результатов при проведении анализа частицы в исследуемых образцах не должны растворяться и оседать с течением времени.

Взвеси исследуемых и стандартных веществ готовят параллельно одним и тем же способом. Необходимые условия проведения испытания должны быть указаны в методиках испытаний.

Для измерения мутности окрашенных растворов используют относительную нефелометрию. Нефелометрические процедуры выполняются аналогично турбидиметрическим процедурам как для прямых измерений, так и для измерений в режиме отношения в соответствии
с ОФС «Турбидиметрия».

Для количественного анализа необходимо построение калибровочного графика, поскольку соотношения между оптическими свойствами суспензии и концентрацией дисперсной фазы являются полуэмпирическими. Количественные значения мутности (опалесценции) используют для контроля и анализа качества и стабильности образцов.

Если смотреть на суспензию под прямым углом к направлению падающего на неё света, появляется опалесценция (эффект Тиндаля). Подобное явление объясняется тем, что при прохождении через взвесь частиц световой поток не только частично поглощается, но и рассеивается ими.

Метод нефелометрии наиболее пригоден для измерений при низких значениях мутности, при которых существует линейная зависимость между значением NTU (Nephelometric Turbidity Units – нефелометрические единицы мутности) и сигнала детектора. С повышением мутности не все частицы подвергаются воздействию падающего света, и рассеянный остальными частицами свет блокируется на пути к детектору. Максимальные нефелометрические значения, при которых возможно производить достоверные измерения, лежат в диапазоне 1750–2000 NTU.

На практике удобно использовать метод сравнительной нефелометрии, в котором используется стандарт-система той же природы, что и исследуемая, для которой известны концентрация или размер частиц дисперсной фазы.

В случае применения нефелометрии для качественного и количественного определения белков и полисахаридов в реакции преципитации, как правило, используют автоматический анализатор, возможно с функцией кинетики. Взаимодействие антиген-антитело (реакция преципитации) происходит в жидкой фазе. Образовавшиеся иммунные комплексы образуют нерастворимый осадок, вызывающий помутнение среды. Учёт результатов реакции может проводиться по конечной точке (нефелометрия) или по мере нарастания мутности (опалесценции), обусловленной образованием осадка (кинетическая нефелометрия).

Оборудование

Действие нефелометра основано на уравнивании двух световых потоков: одного от рассеивающей искомой взвеси, другого со стандартом. Радиус частиц вычисляют, исходя из уравнения Релея по пропорции:

где I – интенсивность света;
r – радиус;
C – концентрация частиц (моль/л).

Обычно, у приборов, работающих в режиме отношения, источником света излучения служит вольфрамовая лампа накаливания с максимумом интенсивности излучения при длине волны около 550 нм и температурой нити накаливания 2700 К. Также могут использоваться другие подходящие источники света. Альтернативным источником излучения, нивелирующим эффекты, связанные с окраской образцов, может быть инфракрасный светодиод с максимумом излучения при длине волны 860 нм и шириной спектральной линии 60 нм.

В качестве детекторов обычно используют кремниевые фотодиоды или фотоэлектронные умножители. Свет, рассеянный под углом (90±2,5)°, определяют на первичном детекторе.

Рисунок 1. Схема нефелометрического анализа

А – нефелометр, регистрирующий малоугловое рассеяние; Б – нефелометр, регистрирующий рассеяние под углом 90°.

Другие детекторы определяют прямой или обратный рассеянный свет или светопропускание. Калибровку приборов проводят с помощью растворов стандартов с известной мутностью. Приборы должны быть способны к автоматическому определению мутности.

Результаты испытаний, выраженные в NTU, регистрируют непосредственно с оборудования и сравнивают с требованиями, указанными в методиках испытаний.

Эталоны для калибровки приборов. В соответствии с требованиями ОФС «Турбидиметрия».

Технические условия пригодности прибора. В соответствии с требованиями ОФС «Турбидиметрия».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.1.0017 Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой

Вводится впервые

Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой (АЭС-ИСП) представляет собой метод атомно-эмиссионной спектрометрии (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия»), в котором в качестве атомизатора – источника возбуждения атомов, используется индуктивно связанная плазма (ИСП).

###### Область применения

Метод АЭС-ИСП применяют для идентификации и количественного определения элементов в лекарственных средствах, а также содержания примесей элементов в лекарственных средствах. Определение элементов в испытуемом образце методом АЭС-ИСП проводят, измеряя интенсивность испускаемого излучения возбуждённых атомов при определённых длинах волн. Данный метод в отдельных источниках может быть указан как метод оптико-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (ОЭС-ИСП) на основании того, что измерение интенсивности эмиссии осуществляют с помощью оптического детектирования.

Метод АЭС-ИСП может быть использован для одно- и многоэлементных методов анализа, которые предоставляют данные последовательных или одновременных измерений на обширном линейном интервале. Пределы обнаружения элементов для метода АЭС-ИСП находятся, как правило, в диапазоне менее микрограмма на литр.

###### Метод

В основе метода АЭС-ИСП находятся принципы атомно-эмиссионной спектрометрии, указанные в ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия». Использование в методе АЭС-ИСП индуктивно связанной плазмы в качестве источника возбуждения атомов, определяет также общие принципы с инструментальными методами анализа на основе плазмы, включая указанные в ОФС «Масс-спектрометрия с индуктивно связанной плазмой».

Индуктивно связанная плазма представляет собой сильно ионизированный инертный газ (обычно аргон) с равным количеством электронов и ионов, поддерживаемый радиочастотным полем. Характеристика индуктивно связанной плазмы приведена в ОФС «Масс-спектрометрия с индуктивно связанной плазмой». Под воздействием высокой температуры, достигаемой в плазме, последовательно происходит десольватация, превращение образца в пар, возбуждение и ионизация атомов испытуемого образца. При возбуждении атом испускает массив различных частот света, характерных для определённого энергетического перехода, разрешённого для конкретного элемента. Интенсивность светового излучения, как правило, пропорциональна концентрации анализируемого элемента. Метод АЭС-ИСП обеспечивает качественное и/или количественное измерение оптической эмиссии возбуждённых атомов при определённых длинах волн. Данные полученных измерений затем используют для определения концентрации анализируемого элемента в испытуемом образце.

###### Оборудование

Главными составляющими частями оборудования для метода АЭС-ИСП являются:

- система ввода образца, состоящая из перистальтического насоса, подающего с постоянной скоростью раствор в распылитель;

- радиочастотный генератор;

- плазменная горелка;

- передающая оптика, фокусирующая световой поток, испускаемый атомами образца;

- дисперсионные устройства, состоящие из дифракционных решёток, призм, фильтров или интерферометров;

- детекторы, преобразующие энергию излучения в электрическую;

- устройство сбора данных.

Для детектирования в методе АЭС-ИСП используют оптическую систему, при которой определение анализируемого атома зависит от интенсивности излучения на характеристичной (специфичной для данного атома) длине волны. Существуют различные оптические системы детектирования, с помощью которых можно анализировать один элемент или несколько элементов одновременно (синхронно) или последовательно. При использовании последовательных систем, происходит перемещение от одной длины волны к следующей и в этом случае для выбора предоставляется больший набор аналитических линий. Синхронные системы способны анализировать множество элементов одновременно. Использование в современных приборах матричных детекторов позволяет сочетать преимущества как одновременных, так и последовательных систем, обеспечивающих ускоренный анализ и широкий выбор вариантов анализа.

В используемых приборах предусмотрены аксиальный (осевой) и/или радиальный (боковой) обзор плазмы. Осевой обзор плазмы может обеспечить более чувствительный отклик сигнала, но в некоторых ситуациях, где фон или наложение образца значительны при интересующей волне, радиальное рассмотрение может привести к более надёжным результатам. Радиальный способ обзора также используют, если интенсивность излучения в аксиальном обзоре слишком высока. Методики испытания, валидированные на приборе с радиальной конфигурацией ИСП, не могут быть полностью перенесены на прибор с осевой конфигурацией ИСП, так как осевой обзор плазмы обеспечивает большую чувствительность и интенсивность излучения и при тех же концентрациях определяемого элемента может выйти за диапазон измерения. Вместе с тем, существуют приборы с двойной ориентацией, позволяющие воспользоваться преимуществом аксиального или радиального способов обзора плазмы.

###### Интерференция

Интерференцией называется явление, вызывающее несоответствие интенсивности аналитического сигнала элемента в образце сигналу того же самого элемента в калибровочном растворе такой же концентрации.

В методе АЭС-ИСП химическая интерференция, которая характерна для метода атомно-абсорбционной спектроскопии, проявляется слабо. В редких случаях, когда она имеет место, для её устранения в методе АЭС-ИСП может потребоваться увеличение мощности радиочастот или уменьшение потока внутреннего газа-носителя.

Интерференция в АЭС-ИСП может быть вызвана спектральными факторами или может быть результатом высоких концентраций определённых элементов или компонентов матрицы. Физическая интерференция, возникающая из-за различий в вязкости и поверхностном натяжении раствора образца и калибровочного раствора, может быть уменьшена путём разведения образца, подбора соответствующей матрицы, использования внутренних стандартов или применением метода стандартных добавок.

Другим типом интерференции, иногда встречающимся в АЭС-ИСП, является матричный эффект. В растворах, которые содержат высокие концентрации легко ионизируемых элементов (более 0,1 %), может происходить подавление или увеличение эмиссии определяемых элементов.

Спектральная интерференция может быть вызвана присутствием других линий или сдвигов в интенсивности базовой линии. Такие линии могут соответствовать аргону (наблюдаются после 300 нм), ОН линиям, появляющимся из-за разложения воды (около 300 нм), NO линиям, появляющимся из-за взаимодействия азота из окружающей среды с плазмой (между 200 нм и 300 нм), а также линиям других элементов, особенно тех, которые находятся в растворе в высокой концентрации. Спектральная интерференция распадается на четыре различных категории: простой сдвиг базовой линии, наклонный сдвиг базовой линии, прямое спектральное наложение, сложный сдвиг базовой линии.

Абсорбционная интерференция возникает тогда, когда часть сигнала эмиссии элемента поглощается до достижения детектора. Например, это наблюдается, когда концентрация элемента с сильной эмиссией так высока, что атомы или ионы этого элемента, находящегося в более низком энергетическом состоянии перехода, абсорбируют значительное количество излучения, испускаемого соответствующими возбужденными атомами или ионами. Такой эффект, называемый самопоглощением, предопределяет верхнюю границу линейного участка рабочего диапазона для данной длины волны эмиссии.

Многокомпонентная спектральная аппроксимация. Во избежание проблем со спектральной интерференцией обычно проводят определение с использованием нескольких эмиссионных линий. Для более точной коррекции спектральной интерференции применяют информацию, полученную с использованием усовершенствованной системы детекторов при помощи многокомпонентной спектральной аппроксимации. Этот способ учитывает не только интерференцию, но также фоновый вклад матрицы, тем самым создавая формулу поправки. Многокомпонентная спектральная аппроксимация использует модель множественных линейных квадратов, основанную на анализе чистого элемента, матрицы и контрольного раствора, создавая математическую модель с учётом интерференции. Это позволяет определять эмиссию элемента в сложной матрице с более низкими пределами детектирования и более высокой точностью.

###### Условия проведения испытания

Пробоподготовка является важным моментом при определении элементов методом АЭС-ИСП, так как применяемые методики связаны с переносом образца в плазму. Основной целью приготовления испытуемого образца является обеспечение попадания концентрации определяемого элемента, после использования процедуры разведения или концентрирования, в рабочий диапазон прибора и получения раствора испытуемого образца, способного воспроизводимо распыляться.

Наиболее распространённым способом введения образцов в плазму является распыление раствора, при этом твёрдые образцы необходимо растворить. Образцы могут быть растворены в любом подходящем растворителе. Предпочтительнее использовать водные растворы или растворы азотной или хлористоводородной кислоты разбавленные, так как эти растворители обеспечивают минимальную интерференцию. Для растворения образцов также могут быть использованы водорода пероксид, серная, фосфорная, хлорная кислоты, комбинации кислот в различных концентрациях. Можно использовать фтористоводородную кислоту разбавленную, соблюдая при этом меры безопасности и применяя устойчивые к растворителю (например, из перфторалкоксиполимера), системы ввода образца и горелок. Также могут быть применены альтернативные способы растворения образца, включающие использование разбавленных оснований, разбавленных и не разбавленных органических оснований, комбинаций кислот или оснований, комбинаций органических растворителей и др.

Если образец не растворим ни в одном приемлемом растворителе, можно применять различные методы разложения, нагревая или помещая образец в микроволновую печь в открытой или закрытой ёмкости. Разложение образцов, содержащих летучие элементы (например, ртуть, селен), не рекомендуется проводить при нагревании в открытой ёмкости (ОФС «Элементные примеси»).

Введение образца. При выборе способа ввода образца необходимо учитывать требования по чувствительности, стабильности, скорости, размеру образца, устойчивости к коррозии и устойчивости к закупорке. Образец вводят в распылитель прибора с помощью перистальтического насоса или способом самораспыления. Перистальтический насос предпочтителен, он обеспечивает одинаковую скорость потока стандартного и испытуемого раствора (для АЭС-ИСП обычно на уровне 1 мл/мин или менее), независимо от вязкости образца. С помощью распылителя раствор образца преобразуется в аэрозоль. Существует широкий выбор типов распылителей, включая пневматические (концентрический и поперечно-потоковый), решётчатые, ультразвуковые. Также возможны микрораспылители, высокоэффективные и высокоэффективные прямого ввода и проточно-инжекторные.

В случае использования органических растворителей следует учитывать необходимость введения кислорода для предупреждения образования органических слоёв.

После распылителя образец в виде аэрозоля попадает в распылительную камеру, предназначенную для пропуска к плазме только мельчайших капель испытуемого раствора. В результате, как правило, только 1–2 % аэрозоля образца достигает ИСП. Имеется несколько типов распылительных камер, пригодных для использования в методе АЭС-ИСП. Применение распылителя с поперечным потоком, соединённого с распылительной камерой и горелкой, соответствует большинству требований.

Выбор условий проведения испытания. При выборе условий проведения испытаний необходимо руководствоваться рекомендациями производителя прибора. Надлежащим образом должны быть выбраны следующие аналитические параметры:

- длины волн;

- скорости потоков поддерживающего газа (внешняя, промежуточная и внутренняя трубки горелки);

- мощность радиочастотного излучения;

- положение обзора плазмы (радиальное или аксиальное);

- скорость насоса;

- условия для детектора (коэффициент усиления/напряжение для детектора с фотоумножающей трубкой, другие - для матричного детектора);

- время интегрирования (установленное время для измерения интенсивности эмиссии на каждой длине волны).

При наличии спектральных интерференций допускается коррекция измеряемой площади интенсивности сигнала определяемого элемента с использованием программного обеспечения прибора.

Для определения водных растворов образцов и образцов в органических растворителях обычно требуются различные рабочие условия. При использовании органических растворителей, в отличие от водных растворов, часто необходимо использовать более высокую мощность радиочастотного излучения, снижение потока газа-распылителя, кроме того, может потребоваться введение в горелку небольшого количества кислорода для предотвращения накопления в горелке сажи.

Измерение содержания определяемого элемента в испытуемом образце проводят в соответствии с методикой, указанной в методике испытания, используя, как правило, метод калибровочной кривой или метод стандартных добавок, указанные в ОФС «Атомно-эмиссионная спектроскопия».

Методика и другие особенности определения элементных примесей в лекарственных средствах методом АЭС-ИСП указаны в ОФС «Элементные примеси».

###### Контроль работоспособности прибора

Пригодность системы. Проверку пригодности системы следует проводить в соответствии с процедурами, рекомендованными производителем конкретного оборудования для метода АЭС-ИСП.

Для подтверждения надлежащей работоспособности прибора для метода АЭС-ИСП с использованием многоэлементного контрольного раствора могут быть проведены следующие испытания:

- передача энергии (генератор, горелка, плазма); может быть использовано соотношение интенсивностей эмиссии Mg(II) (280,270 нм)/Mg(I) (285,213 нм) или интенсивность эмиссии Mn (257,610 нм);

- подача образца, путём проверки эффективности и стабильности распылителя;

- разрешение (оптическая система), путём измерения ширины пика на половине высоты, например, для As (189,042 нм), Mn (257,610 нм), Cu (324,754 нм) или Ba (455,403 нм);

- аналитические параметры, путём расчёта пределов обнаружения выбранных элементов в выбранном диапазоне длин волн.

###### Валидация

Проверяют удовлетворительное выполнение методик, описанных в фармакопейных статьях через определённые временные интервалы.

Линейность. Готовят и анализируют не менее четырёх калибровочных растворов, концентрация которых находится в пределах диапазона калибровки, и контрольный раствор. Проводят не менее пяти измерений. Используя все полученные данные, рассчитывают калибровочную кривую методом наименьших квадратов. Строят кривую регрессии, отмечая средние значения, измеренные значения и доверительный интервал калибровочного графика.

Метод является пригодным при условии соблюдения следующих требований:

- коэффициент корреляции должен быть не менее 0,99;

- на калибровочном графике погрешности каждого калибровочного уровня должны быть распределены случайным образом.

Рассчитывают среднее значение и относительное стандартное отклонение для наименьшего и наибольшего калибровочного уровня. В случае если отношение рассчитанного стандартного отклонения наименьшего и наибольшего калибровочного уровня менее 0,5 или более 2,0, то более точная оценка калибровочного графика может быть получена с использованием взвешенной линейной регрессии. Линейную и квадратичную весовые функции применяют к полученным данным для нахождения наиболее подходящей для использования весовой функции. Если средние значения при сравнении с калибровочным графиком проявляют отклонение от линейности, используют двухмерную линейную регрессию.

Правильность. Предпочтительно оценивать правильность с использованием сертифицированных стандартных образцов. Если это невозможно, то правильность проверяют через открываемость. В случае методик количественного определения открываемость должна быть от 90 % до 110 %. Для других определений, например для определения следовых количеств элемента, открываемость должна быть от 80 % до 120 % от теоретического значения. Открываемость может быть определена с использованием подходящего раствора сравнения (матричного раствора), содержащего известное количество определяемого элемента (средняя концентрация калибровочной кривой).

Повторяемость. Критерии приемлемости: относительное стандартное отклонение не более 3 % для основного компонента, не более 5% для вспомогательного вещества, не более 10 % для примесей с концентрацией, превышающей 1 мг/кг, не более 20 % для примесей с концентрацией менее 1 мг/кг (при условии, что определяемая величина лежит в диапазоне калибровки).

Предел количественного определения. Удостоверяются, что предел количественного определения, например, определённый с использованием приближения 10σ, ниже измеряемого значения.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.1.0018 Химическая визуализация

Вводится впервые

Химическая визуализация представляет собой способ создания визуальных изображений распределения компонентов испытуемого образца на основе одновременных измерений спектров и пространственной, временной информации.

Химическая визуализация сочетает в себе технологии зондирования с пространственным разрешением и анализ данных для описания физико-химических свойств испытуемого образца, используя для этого информацию, полученную, в основном, с его поверхности.

При использовании химической визуализации для оценки количественного содержания компонентов испытуемого образца, метод может быть также назван «химическим картированием».

Для создания изображений с пространственным разрешением применяют системы химической визуализации, осуществляющие анализ состояния поверхности испытуемого образца с использованием методов колебательной спектрометрии (спектрометрии в ближней и средней инфракрасной областях, рамановской спектрометрии и др.), требования к которым указаны в соответствующих общих фармакопейных статьях (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области», ОФС «Спектрометрия в ближней инфракрасной области», ОФС «Рамановская спектрометрия»). В тех случаях, когда системы химической визуализации в первую очередь предназначены для исследовательских целей, требования, указанные в общих фармакопейных статьях к перечисленным методам спектрометрии, могут быть изменены.

###### Область применения

Химическую визуализацию применяют для анализа твёрдых, мягких и жидких испытуемых образцов с учётом свойств испытуемых материалов, включая определение подлинности компонентов (фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ), размер домена и распределение по размерам, полиморфизм и морфологию частиц. Метод химической визуализации может быть использован для оценки подлинности, качественных и количественных показателей действующих, промежуточных, вспомогательных веществ, которые могут содержаться в нерасфасованных продуктах (in balk) или в твёрдых лекарственных формах лекарственных препаратов, в упаковке и системах упаковки/укупорки. С помощью метода химической визуализации, сочетающего исследование пространственных и химических характеристик, могут быть подвергнуты испытанию образцы любых размеров.

Функциональность многих материалов, как производимых, так и природных, определяется пространственным распределением компонентов материала. Визуальное отображение распределения физико-химических свойств поверхности испытуемого образца методом химической визуализации, во многих случаях без разрушения образцов, дополняет классические аналитические методы, способствуя быстрому сравнению образцов. Химическая визуализация проявляется при изменении компонентов и морфологических характеристик материала, поэтому метод прежде всего рекомендован для анализа образцов, которые неоднородны по химическому составу и физической морфологии. Визуализация фиксирует распределение выбранных компонентов и свойств, т.е. характеристик разных частей образца.

В фармацевтической практике химическая визуализация может быть использована для исследования однородности образца, выявления физических дефектов образца, например, трещин в ядрах или покрытиях таблеток, и определения посторонних частиц или загрязняющих веществ. Например, для таблеток, покрытых оболочкой, этот метод можно применить для измерения толщины и однородности оболочки, а также для характеристики свойств поверхности, таких как распределение компонентов, определение силы адгезии и глубины деформации. Особенности частиц могут быть изучены путём измерения размера, агломерации и морфологии, определения шероховатости поверхности, обнаружения разрушенных частиц и посторонних включений. Визуализации чаще всего применяют для исследования неоднородных поверхностей, если же изначально известно, что поверхность образца однородна, то полученные данные будут такими же, как при использовании классической одноточечной спектрометрии.

Анализ частиц также может быть выполнен методом химической визуализации в жидкостях, но метод визуализации жидкостей имеет ограниченное применение.

Химическая визуализация способствует пониманию процесса и определению первопричин дефектов лекарственных средств и материалов для фармацевтического применения. Кроме того, визуализация является инструментом для оценки фальсифицированных и контрафактных лекарственных средств.

Методы химической визуализации могут быть использованы в исследовательских целях, например, для анализа пространственного распределения различных полиморфных форм, для исследования полиморфных переходов и многофазных материалов, например, твёрдых дисперсий. Для отслеживания структурных изменений в стрессовых условиях и с течением времени, а также для оценки дефектов в кристаллах, например, возникающих в результате измельчения и микронизации, может быть выполнено определение характеристик нано- и микрокристаллических материалов.

Определение свойств испытуемых образцов, основанное на химической визуализации, в основном используют для установления подлинности, характеристик распределения и содержания отдельных компонентов испытуемого материала на основе спектральных характеристик. Такой анализ может быть выполнен для определения как молекулярных, так и атомарных элементарных частиц, присутствующих на поверхности. Можно смоделировать кинетику, механизм растворения и высвобождения действующего вещества, и, в качестве другого примера, можно определить градиент концентрации лекарственного препарата между поверхностью раздела твёрдое вещество/раствор и отдельным раствором.

###### Метод

Химическая визуализация основана на использовании принципов методов спектрометрии, но с предоставлением дополнительной информации посредством одновременного получения спектров с пространственным разрешением. Метод сочетает преимущества цифровых химических изображений с характеристиками спектрометрических измерений.

Химическая визуализация лекарственных средств и материалов для фармацевтического применения – это метод, который состоит из сбора откликов на воздействие излучения с различными длинами волн в разных точках, распределенных по поверхности испытуемого образца. Для единичного заданного местоположения поверхности, далее называемого «пикселем», набор откликов будет связан с воздействующими длинами волн. При последовательном изменении координат x и y во всём диапазоне длин волн, в каждом местоположении выполняется сбор откликов и затем строится изображение всей поверхности образца. Используемое для химической визуализации оборудование позволяет получать пространственную информацию главным образом на поверхности образца. Химические и морфологические характеристики или особенности образца объединяются в изображение, составленное из вкладов нескольких доменов (областей), распределённых по поверхности образца. В результате каждая отображённая точка образца, то есть пиксель, содержит огромный объём информации, а записанный сигнал отражает химические и физические свойства, такие как подлинность вещества, концентрация, кристалличность, ориентация, размер домена (области распределения) и размер частиц.

###### Оборудование

Система химической визуализации (система химического картирования) включает источник спектрального излучения, оптические приборы, держатель образца, детектор для сбора изображений и соответствующее программное обеспечение. Система химической визуализации и её составляющие должны соответствовать всем необходимым требованиям, предъявляемым как к системе, так и отдельным её элементам.

Выбор конкретного оборудования, составляющего систему химической визуализации, а также метода визуализации, зависит от конкретной цели испытания анализируемого образца. Система химической визуализации характеризуется многочисленными составляющими: настройкой, пространственным и спектральным разрешением, увеличением, типом и размером образца, подготовкой и способом подачи образца, перемещением образца или нахождением его в покое, временем сбора данных, количеством измерений, алгоритмами анализа данных, программным обеспечением и т.д.

Спектрометрические методы, применяемые в системах химической визуализации:

Химическая визуализация в ближней инфракрасной области спектра. Спектрометрия в ближней инфракрасной области спектра обнаруживает молекулярные колебания, происходящие от обертонов C-H, N-H, O-H и S-H, а также комбинации основных типов колебаний в диапазоне средней инфракрасной области; электромагнитный спектр обычно охватывает диапазон длин волн от 780 нм до 2500 нм (от 12500 см-1 до 4000 см-1) (0,8–2,5 мкм). Измерение образцов различной толщины может быть проведено без пробоподготовки, неразрушающим, бесконтактным методом, позволяющим получить химические изображения в ближнем инфракрасном диапазоне через некоторые упаковочные материалы. В определённых пределах метод может быть использован для исследования гидратированных образцов. Измерение осуществляется, как правило, в режиме диффузного отражения и обеспечивает получение информации по основным физическим и химическим свойствам испытуемых образцов.

Химическая визуализация в средней инфракрасной области спектра. Метод основан на взаимодействии света с образцом для изучения внутримолекулярных колебаний испытуемого образца. Диапазон электромагнитного спектра обычно охватывает область 2500–25000 нм (4000–400 см-1) (2,5–25 мкм). Полученное изображение может быть использовано для характеристики химических соединений, содержащихся в смеси компонентов. Измерения часто проводят с использованием режима нарушенного полного внутреннего отражения, когда образец контактирует с прозрачным в инфракрасной области спектра кристаллом, показатель преломления которого выше, чем у образца. Измерение может быть затруднено для образцов с избыточной влажностью из-за мешающего влияния полос поглощения воды.

Химическая визуализация в дальней инфракрасной области спектра и терагерцовая спектрометрия. Электромагнитное излучение в дальней инфракрасной области спектра и терагерцовое излучение (спектр частот которого расположен между инфракрасным и микроволновым диапазонами) обычно охватывает диапазон от 400 см-1 до 10 см-1 (25–1000 мкм), позволяющий исследовать межмолекулярные виды колебаний и колебания кристаллической решётки испытуемого образца. Селективность метода по отношению к структуре водородных связей позволяет идентифицировать и характеризовать свойства твёрдых форм, например, полиморфные формы и степень кристалличности. Излучение может проходить через широкий спектр непроводящих материалов, но не может проходить через проводящие материалы, такие как металл и вода, и проникает глубоко в образец.

Рамановская химическая визуализация

Рамановская визуализация основана на сочетании методов рамановской спектрометрии и оптической микроскопии, обнаруживает частотные сдвиги, исходящие при неупругом рассеянии оптического излучения на молекулах образца, предварительно облучённого интенсивным монохроматическим световым лучом, как правило, лазером. Спектральный диапазон химического построения изображения рамановского сдвига составляет приблизительно от 60 см-1 до 4000 см-1. Рамановские спектры – спектры комбинационного рассеяния света, содержат множество узких полос частот, позволяющих определить подлинность химических веществ. В результате рамановская визуализация предоставляет информацию о химических соединениях в образце, включая полиморфные формы. Исказить измеренный сигнал рамановской визуализации может флуоресценция.

На рис. 1 приведены примеры определения характеристик компонентов испытуемого образца лекарственного препарата на основе характерных особенностей спектров рамановской визуализации.

Рисунок 1. Пример определения характеристик компонентов испытуемого образца лекарственного препарата с помощью рамановской визуализации

Подготовка, контроль, настройка, калибровка оборудования системы химической визуализации являются необходимыми первоначальными этапами процесса создания химических изображений. Далее выполняется пробоподготовка, измерение, обработка изображений, отображение и хранение данных, анализ изображений и расчёт полученных данных.

###### Режимы визуализации

Химические изображения могут быть получены в различных режимах визуализации. Примером широкополосного режима является применение в системе химической визуализации камеры, фильтры которой используют для оценивания относительной важности различных длин волн для трёх переменных цвета: красного, зелёного и синего.

Мультиспектральная визуализация. Измеряет разнесённые спектральные полосы, то есть включает в себя выборку спектральных полос, которые могут быть распределены неравномерно, в отличие от комбинации различных детекторов в разных частотных диапазонах.

Гиперспектральная визуализация. Представляет собой режим двумерной (2D) визуализации, измеряющий непрерывные спектральные полосы, записывая для каждого пикселя полный спектр во всём диапазоне. Фактически гиперспектральная визуализация расширяет спектральный одноточечный анализ образцов до двумерных проекций среза конечной глубины для каждой измеренной области образца. Гиперспектральные датчики используют преимущества многочисленных смежных каналов для выявления особенностей, которые обычно не могут быть установлены с применением спектров среднего инфракрасного диапазона, полученных в результате одного измерения в классической одномерной спектрометрии. Получение изображений со спектральным качеством, аналогичным качеству традиционно полученных спектров, как правило, происходит за счёт более длительного времени измерений, получения больших объёмов данных и сложных вычислений. Спектральное качество иногда специально снижают для увеличения скорости обработки изображения. Области испытуемого образца, выбранные для исследования, могут включать сложные спектральные структуры, встроенные в данные отдельных пикселей, которые не могут быть идентифицированы исключительно визуальной оценкой, и для извлечения аналитической информации из такого множества измерений требуется соответствующий анализ изображения. Для обработки, извлечения и анализа изображений гиперспектральной визуализации необходимы различные вычислительные методы, статистическая обработка полученных данных и другие математические алгоритмы. В гиперспектральной визуализации каждый пиксель связан с одним спектром. Измерения проводятся по обоим пространственным размерам поверхности образца, то есть по координатам x и y. При каждом измерении связывается вектор-столбец с размерами, равными числу зарегистрированных точек спектральных данных. В результате измерения полученные данные «упаковываются» в трёхмерный массив, называемый кубом данных или гиперкубом. Куб данных представляет собой набор данных об интенсивности сигнала, состоящий из координат x-y пикселей и соответствующей серии откликов (например, поглощения или пропускания) в сканируемом диапазоне (рис. 2).

Рисунок 2. Пример куба данных n × p × k, полученного посредством записи спектров k волновых чисел при n × p пикселей образца; изображение в градациях серого было получено при волновом числе Vk-4

В отличие от классической одномерной спектрометрии, которая собирает химическую и физическую информацию об одной исследуемой области образца, спектрометрия при химической визуализации фиксирует спектральные и пространственные характеристики участков поверхности испытуемого образца. Спектральный и пространственный анализ пикселей изображения может быть итерационным или комбинированным в произвольном порядке.

Многомерная химическая визуализация. Получение трёхмерных изображений (3D) с пространственным разрешением можно рассматривать как расширение пространственного разрешения вдоль третьего направления (z), которое дополняет изображение x-y. Это процесс наложения массива изображений, охватывающих глубину образца, которая больше по сравнению с обычно анализируемой глубиной анализа. Этот результат может быть достигнут косвенным способом (инвазивный, деструктивный процесс) путём последовательного сбора изображений надлежащим образом подготовленных твёрдых образцов, например, поэтапным разделением поверхности на слои с помощью микротома. Вместе с тем существуют методы, позволяющие получать прямую (неинвазивный, неразрушающий процесс) 3D-визуализацию твёрдых образцов с использованием спектрометрии с пространственным разрешением x-y-z. К ним относят: спектроскопия в дальней инфракрасной области спектра/терагерцовая спектроскопия, терагерцовая спектроскопия во временной области, конфокальная рамановская спектроскопия, методы томографии (оптическая когерентная томография, рентгеновская томография, ядерная магнитно-резонансная томография и др.). В целом получение (4D)- и более высокоразмерных изображений будет означать одновременное отображение c пространственным (x, y и z) и спектральным разрешением.

###### Режимы сбора данных

Для создания химического изображения используют методы пространственного или спектрального секвенирования, то есть сбора данных последовательно измеренных спектров каждого пикселя (куба данных) испытуемого образца. Для записи измерений каждого куба данных возможно использование следующих режимов сбора данных: точечное, линейное и глобальное.

Точечное отображение. Является самым простым методом и обычно выполняется по схеме прямоугольной сетки. Спектр регистрируют в каждой точке сетки, при этом каждый последующий этап выбора точки последовательно перемещают в следующее соседнее местоположение до тех пор, пока вся интересующая область образца не будет нанесена на сетку. В зависимости от «размера шага», то есть определённого расстояния перемещения, собирают спектральную информацию с соответствующим этому шагу пространственным разрешением. Сканирование точек выполняют с помощью компьютера по обеим осям пространственной системы координат.

Линейное отображение (линейном сканировании). Испытуемый образец освещают вдоль линии, и сигнал изображения регистрируют детектором вдоль одной пространственной оси. Образец перемещают вдоль другой пространственной оси, чтобы захватить следующую соседнюю линию, пока, в конечном итоге, не будет достигнуто полное отображение путём «сшивания» полученных линейных последовательностей спектров. В этом случае скорость и универсальность экспериментального оборудования с линейным расположением чувствительных элементов (с линейной решёткой) позволяют в режиме реального времени применять непрерывную химическую визуализацию.

Глобальная визуализация. Метод сканирование в фокальной плоскости, выполняют, когда все точки изображения образца одновременно отображаются на матрице детектора сразу, без «сшивания». Это может быть сделано для каждой длины волны с помощью фильтров или перестраиваемых фильтров. Такой режим сбора данных позволяет получать изображения с высоким разрешением при определённом пиксельном формате.

Разрешение

Пиксели изображений, полученных в ходе любого режима сбора данных, содержат большой объём информации о химических и физических особенностях, наблюдаемых на поверхности и в приповерхностном слое образца. В химической визуализации рассматривают два типа разрешения (разрешающей способности), которые могут быть достигнуты выбранной системой химической визуализации – пространственное и спектральное.

Спектральное разрешение относится к способности разрешать небольшие различия в энергии, это относится к спектральной оси. В зависимости от метода визуализации на спектральное разрешение могут влиять: длина волны источника излучения, лазера, решётка, фокусное расстояние детектора и спектрометра. Спектральное разрешение оказывает воздействие на выделение химических признаков, что, в свою очередь, влияет на эффективность качественного и количественного анализа изображений, например, идентификацию компонентов.

Пространственное разрешение – это минимальное расстояние между двумя последовательными точками (пикселями), которое требуется для их обнаружения как отдельных пикселей. Пространственное разрешение оказывает влияние на обработку изображений, так как полученная информация может казаться неразрешённой. Необходимо, чтобы размер области (домена) анализируемого компонента испытуемого образца соответствовал пространственному разрешению, достигаемому системой. Получаемое пространственное разрешение ограничено характеристиками выбранного для системы химической визуализации детектора, например, размером пятна лазера, пределами дифракции, размером детектора, увеличением, числовой апертурой и т.д. Пространственное разрешение, получаемое конкретной системой химической визуализации, также зависит от распространения излучения по поверхности образца. Рассеяние, происходящее под поверхностью, может привести к искажению полученного изображения и ограничению пространственного разрешения. На пространственное разрешение влияет поле зрения, физическая мера размера области, исследуемой при анализе. При формировании изображения поле зрения является произведением увеличения и количества пикселей в матрице детекторов. Увеличение рассматривают, как отношение физической площади матрицы детекторов к площади поля зрения образца. Чем выше увеличение для того же изображения детектора, тем меньше площадь образца.

Системы визуализации, работающие в режиме линейного отображения, более чувствительны к пространственным помехам, в то время как спектральное разрешение имеет важное значение при сборе данных при сканировании в фокальной плоскости в ходе глобальной визуализации.

Репрезентативность поверхности образца

В зависимости от настройки используемой системы химической визуализации топология поверхности образца может оказать влияние на эффективность обработки изображений, то есть на эффективность сбора данных. Испытуемая поверхность образца должна быть репрезентативной для предполагаемой цели анализа, в зависимости от которой проводят оценку влияния однородности образца. Например, при исследовании свойств образца, основанных на отражающей способности, из-за ограничения глубины проникновения и пространственного разрешения, оценивается только истинная мера морфологии структуры или распределения форм частиц в образце. Таким образом, результаты, полученные при анализе изображений поверхности, могут не быть репрезентативными для всего образца, поскольку он может быть неоднородным.

Одним из подходов к преодолению этого ограничения было бы измерение ряда поперечных сечений выборки для улучшения оценок для всей выборки. Другой подход мог бы заключаться в использовании альтернативной оптической конструкции, в которой глубина проникновения могла быть увеличена, например, конфокальные или пространственно разрешённые измерения для сбора информации вблизи поверхности, измерения с помощью томографии или послойной визуализации для сбора информации всей матрицы.

###### Пробоподготовка

Подготовку образцов для проведения испытания осуществляют в соответствии с используемой методикой химической визуализации. Измерения на месте (in situ) с помощью датчиков (зондов) можно проводить без подготовки образца. С другой стороны, системы для комбинационного рассеяния, например, основывается на бесконтактной фокусировке, а это означает, что поверхность образца, возможно, потребуется подготовить для получения достаточно ровной плоской поверхности. Если приборы не в состоянии компенсировать топографические изменения, то поверхности образцов могут быть изменены механически, например, путём выравнивания вогнутой поверхности таблетки. Регулировка фокусировки путём автоматической перефокусировки во время отображения данных компенсирует слегка неровные поверхности. Подготовка поверхности образца должна быть учтена при использовании метода спектрометрии нарушенного полного внутреннего отражения, для которого необходим контакт оптики прибора и испытуемого образца.

Способ размещения образца в приборе определяется параметрами прибора. Конкретная система визуализации должна быть более или менее адаптирована к определённому типу образца и аналитической задаче. Образец размещают таким образом, чтобы его изображение было оптимальным. Система визуализации должна быть оптимизирована для максимального уменьшения зеркального отражения. Углы и расстояния между датчиком (зондом или лучом), образцом и детектором должны соответствовать требованиям настройки оборудования.

###### Обработка изображений

Для визуального отображения, последующего испытания и надлежащей оценки характеристик полученных изображений, требуется проведение некоторых действий по их обработке, например, для управления яркостью и контрастностью, уменьшения шума, повышения резкости на краях и границах, удаления нежелательных элементов и т.д. Такое улучшение позволяет распознать характерные особенности полученного отображения, то есть отделять их от фона и различать между собой. Изображения химической визуализации обычно обрабатывают с помощью хемометрического моделирования для качественного или количественного анализа.

Выбор спектральных параметров для необходимой контрастности изображения основывается на конкретных признаках компонентов на поверхности образца и выводится из данных спектрального анализа, таких как интенсивность и положение пика, изменения базовой линии (различия рассеяния) или значений, рассчитанных с помощью многомерного анализа.

Предварительную обработку изображений для разделения химических и физических воздействий используют в случае, если только испытание не основано на физических эффектах. На собранные данные влияют шум или инструментальные искажения, поэтому для улучшения качества изображения часто применяют предварительную обработку. Также может возникнуть необходимость в удалении не подлежащих учёту источников изменений, таких как пики или полосы космических лучей, из-за конфигурации детектора. Общими операциями предварительной обработки спектров являются: коррекция базовой линии, сглаживание производной, фильтрация сигнала с использованием вейвлет-преобразования, стандартное отклонение случайной величины с нормальным распределением, мультипликативная коррекция рассеивания, нормализация, усечение и преобразование Фурье. Предварительная обработка не должна вызывать дефектов изображения.

###### Анализ изображений

Расположение пикселей на изображении испытуемого образца представляет собой карту распределения химических или физических свойств или особенностей. В зависимости от цели испытания данные могут быть исследованы на предмет спектральных характеристик, пространственных характеристик и их сочетания. Исследование куба данных может быть выполнено прямым способом, как для классической одномерной спектрометрии (например, путём анализа высоты пиков или соотношения площадей), или с помощью методов, включающих обработку изображений, многомерный анализ данных и т.д.

Визуальное исследование

Изображения могут быть проанализированы на наличие особенностей поверхности образца, таких как местоположение, распределение, размер и форма доменов, идентификация компонентов и т.д. Стандартные инструменты обработки изображений, такие как морфологическая фильтрация и статистический учёт частиц, могут быть непосредственно применены к значительно неоднородным образцам.

Для химических изображений одинаково важны как спектральный, так и пространственный анализы, которые представляют собой различные этапы анализа изображений при химической визуализации. Спектральный и пространственный анализы часто являются итеративными по своей природе. На практике используемые методы зависят от того, что представляет больший интерес – спектральная информация или пространственная. Цель состоит в том, чтобы уменьшить размерность данных и извлечь как можно больше показателей. Для получения нужных информационных характеристик, содержащихся в изображении, может быть применён неконтролируемый многомерный метод анализа, например, метод главных компонент (Principal Component Analysis, PCA), как один из основных применяемых способов по уменьшению размерности данных при потере наименьшего количества информации. Предварительная сегментация изображений, полученных методом главных компонент (PCA), может быть использована для облегчения идентификации областей на изображении, представляющих интерес, для дальнейшей их обработки. Если компоненты образца известны и доступны для сравнительных стандартных измерений, то соответствующие данные используют для уменьшения числа спектральных слоёв в гиперкубе до нескольких химически или физически значимых слоёв с помощью соответствующих методов контролируемой регрессии, например, алгоритма, который разрешает базовую билинейную модель многомерного разрешения кривых с использованием ограниченного алгоритма чередующихся наименьших квадратов (Multivariate Curve Resolution-Alternating Least Squares, MCR-ALS), анализа/метода независимых компонент (Independent Component Analysis, ICA), регрессии частично наименьших квадратов (Partial least squares regression, регрессия PLS).

Выделение характерных признаков. Выделение химических или морфологических признаков испытуемого образца включает методы контроля для уменьшения размерности (количества характеристик). Такой процесс концентрирует дальнейшую обработку изображений на характеристиках, которые имеют значение для результатов испытания. Если образец состоит из компонентов, спектральные характеристики которых хорошо разделены, то можно перейти непосредственно к одномерному методу, основанному на одной длине волны для каждого признака, таким образом, используя лишь небольшую часть имеющихся данных. Однако во многих случаях наложение спектров является значительным и одномерный подход недостаточен. Извлечение признаков в этом случае может быть улучшено за счёт включения большей части спектральной информации и применения многомерного подхода, такого как кластеризация, классификация, дискриминантный анализ регрессии PLS (PLS-DA), линейный дискриминантный анализ (LDA) и т.д.

Количественное определение веществ

Существует несколько способов измерения изменения количества составляющих веществ с помощью методов регрессии. Количественная модель может быть рассчитана с использованием усреднённых спектров или биннинга изучаемых областей на поверхности образца. Известная объёмная концентрация может использоваться в том случае, когда содержание вещества изменяется в зависимости от используемого метода анализа. Это может быть выполнено путём интегрирования пиков на одной длине волны или альтернативными хемометрическими методами.

Когда спектры отдельных пикселей становятся всё более смешанными, хемометрические методы, обычно многомерный анализ данных, могут быть развёрнуты с использованием стратегий анализа данных, аналогичных стратегиям одноточечной спектрометрии.

Стандартные спектры сравнения, используемые для создания библиотеки, собирают из отдельных образцов чистых компонентов. Эти спектры могут быть измерены с помощью спектрометра без визуализации или в виде отдельных изображений чистых компонентов. Присущее изменение спектров чистых компонентов при получении изображения с регистрацией большого количества пикселей, обеспечивает дополнительную статистическую надёжность (устойчивость). Стандартные спектры сравнения и неизвестный образец также могут быть измерены одновременно в одном и том же поле зрения для создания единого набора данных. Если стандартные спектры сравнения чистых компонентов могут быть получены непосредственно из изолированной области отображаемого образца, нет необходимости получать дополнительные спектры сравнения для калибровки. Многомерная модель может быть разработана либо на основе внешних спектров сравнения, либо на основе спектров из отдельных областей соответствующего изображения.

Пространственный анализ особенностей изображения. Пространственный анализ изображений может быть выполнен в отношении распределения форм, размеров и расположения доменов (областей) и т.д. Анализ формы и распределения основан на различных численных методах и алгоритмах. Изображения отображают образцы, устанавливая пороговое значение и преобразуя данные в набор цветов или оттенков в соответствии с монохромной или псевдоцветовой шкалой интенсивности, чтобы подчеркнуть наличие или пропорциональную долю интересующих компонентов в каждом пикселе. В качестве альтернативы распределение нескольких испытуемых образцов может быть объединено в цветные изображения. Может быть выполнен дальнейший анализ, такой как подсчёт пикселей, оценка распределения по размерам частиц одного и того же химического происхождения и сегментация, которая представляет собой процесс разделения изображения между областями, соответствующими областям поверхности, представляющим интерес.

Параметры для измерения. Изображения можно использовать для определения площади, размеров, периметра, соотношения сторон и округлости.

Статистические вычисления. Для облегчения дальнейшего анализа изображения может быть выполнен статистический учёт пикселей. Применение таких методов, как дисперсионный анализ и диаграмма размаха для определения размера домена, формы, распределения и расстояний между доменами, позволяет оценить изменчивость изображения. Эти методы обеспечивают сжатое описание отношений между доменами на изображениях с упрощением анализа изображений. Оценки свойств также могут быть получены на основе этих значений.

###### Контроль работы оборудования

Оценка как эксплуатационных характеристик системы химической визуализации, так и используемых методов анализа изображений, имеет важное значение для предотвращения неправильной интерпретации или дефектов изображения. Оборудование необходимо использовать в соответствии с инструкцией по эксплуатации производителя.

Проверка эксплуатационных характеристик оборудования включает выполнение квалификации эксплуатации (ОФС «Квалификация аналитического оборудования»), и испытаний пригодности системы. Периодичность проверок зависит от использования прибора и его применения. Проверку пригодности системы проводят непосредственно перед измерением.

Параметры, подлежащие оценке, и критерии приемлемости, применяемые во время квалификации эксплуатации и проверки пригодности системы, должны быть обоснованы и зависеть от метода химической визуализации и цели анализа.

Настройка и регулировка

Источники излучения, оптические устройства и детекторы.

Интенсивность источника излучения контролируют как часть проверки настройки, например, интенсивность источника должна быть проверена перед началом процедур калибровки или новой серии измерений образцов. Должно быть проверено соответствие установленным требования таких параметров, как путь светового луча, конфокальность (софокусность), точность установки длины волны и пропускная способность источника излучения в любом положении x-y (пиксель).

Регулировка оптических приборов, образца и детекторов должна соответствовать требованиям к измерениям с точки зрения расстояний, углов и поляризации, но регулировка может меняться в зависимости от температуры. Необходимо, чтобы освещение образца или испытуемых областей образца, было как можно более равномерным и воспроизводимым.

Необходимо контролировать паразитные или неблагоприятные эффекты, например, рассеяние, фон, шум, дефектные пиксели, космическое излучение и флуоресцентное освещение, а также побочные явления, такие как флуоресценция образца. Рассеянный свет, ложные спектральные линии и ложные (побочные) изображения могут быть вызваны отражениями от элементов с негладкой поверхностью.

Многоволновые и мультиспектральные системы. Многоволновые системы следует контролировать на длинах волн, распределённых по шкале длин волн, с использованием пиков выбранного стандартного образца с надлежащим отношением сигнал/шум. Мультиспектральные системы необходимо проверять для всех задействованных источников сигнала.

Отображение. Когда изображения с более чем одного прибора будут выровнены, важно иметь проверенные шкалы x-y.

Увеличение. В случае, когда система химической визуализации допускает различные увеличения изображения, необходимо оптимизировать уровень оптического или электронного увеличения. Если увеличения недостаточно для разрешения соответствующих свойств, качество изображения может снизиться; в то же время, если увеличение установлено выше требуемого, поле зрения уменьшается.

Калибровка

Целью калибровки является преобразование регистрируемого сигнала в данные, пригодные для испытания, интерпретации или сравнения с эталонными данными. Базовая калибровка систем визуализации состоит из калибровки по осям x и y как по длине волны, так и по интенсивности.

Спектральная ось. Оптимальная точность волнового числа имеет решающее значение и должна быть достигнута на том же уровне, что и для стандартного спектрометра. Калибровка по спектральной оси присваивает значения длины волны и интенсивности каждому отображённому пикселю поверхности образца. Для определения этих соотношений можно использовать хорошо охарактеризованные источники света или стандартные образцы. Калибровку следует проводить с использованием стандартных и аттестованных/стандартизированных образцов внутренних или внешних стандартов, предоставленных поставщиком или сторонней организацией. Другими критическими моментами являются методика и условия окружающей среды.

Пространственные оси. Калибровка по пространственной оси влияет на область наблюдения системы химической визуализации и выбранную площадь поверхности, то есть на размещение пикселей. Калибровка корректирует такие искажения на пространственной оси, которые обусловлены оптическим прибором. Так, например, положение пикселя может сопровождаться изменением спектрального разрешения от центра к границам детектора. Кроме того, может происходить смешивание сигналов от соседних пикселей. Обе погрешности изменяют спектральные характеристики пикселей и могут снизить точность последующего анализа данных. Если невозможно определить положение отображаемых пикселей на поверхности детектора по рисунку на поверхности мишени, то для этого может быть использована или разработана специальная тестовая мишень. Пространственное разрешение в обоих направлениях x и y также ограничено, например, размером изображения и размером шага подвижного стола или конвейерной ленты.

Методика калибровки. Для получения информации о свойстве, которое коррелирует с наблюдаемыми особенностями на изображениях, необходимы соответствующая обработка и моделирование данных. Калибровка, связанная с задачей испытания, требует, например, определения и оценки характерной идентичности или морфологических особенностей образца.

##### 1.2.1.2. Хроматографические методы анализа

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.2.0001 Хроматография

Взамен ОФС.1.2.1.2.0001.15

Хроматографией называется метод разделения смесей веществ, основанный на их многократном перераспределении между двумя контактирующими фазами, одна из которых неподвижна, а другая имеет постоянное направление движения. Неподвижная фаза может быть твёрдым веществом, жидкостью, нанесённой на твёрдый носитель или гелем. Неподвижная фаза может помещаться в колонку или наноситься в виде тонкого слоя или плёнки и т.п. Подвижная фаза может быть газом (ГХ), жидкостью (ЖХ) или сверхкритическим флюидом. По механизму, лежащему в основе разделения, различают адсорбционную, распределительную, ионообменную и другие виды хроматографии.

В настоящее время используют следующие основные хроматографические методы анализа, представленные на рис. 1.

Рисунок 1. Методы хроматографического анализа

Результат хроматографического разделения представляют в виде хроматограммы.

Для установления пригодности хроматографической системы и расчёта критериев приемлемости в фармакопейных статьях использованы приведённые ниже определения. Ряд параметров (например, отношение сигнал/шум и разрешение) может быть рассчитан с помощью программного обеспечения, предоставляемого производителем используемого оборудования. Обеспечение соответствия способов расчёта, используемых в программном обеспечении, требованиям Фармакопеи и внесение необходимых поправок в случае их несоответствия входит в ответственность пользователя.

###### Хроматограмма и хроматографические параметры

Хроматограмма (Chromatogram) представляет собой графическое или иное представление сигнала детектора, концентрации веществ в элюате или другой количественной величины, используемой для измерения концентрации веществ в элюате, от времени или объёма подвижной фазы. В планарной (плоскостной) хроматографии хроматограммой называют также зафиксированную на бумаге (бумажная хроматография) или ТСХ-пластинке (тонкослойная хроматография) последовательность зон адсорбции веществ исходной (анализируемой) смеси.

Оптимальная хроматограмма представляет собой последовательность гауссовых пиков на базовой линии (рис. 2).

Базовая линия (Base line) – участок хроматограммы, соответствующий сигналу детектора от подвижной фазы, не содержащей разделяемых веществ.

Пик (Peak) – часть хроматограммы, регистрирующая отклик детектора во время элюирования из колонки одного или более компонентов. Пик отображает постепенное нарастание концентрации детектируемого вещества в элюате и последующее её уменьшение. В случае линейной изотермы сорбции кривая, описывающая пик, приближается к кривой гауссова распределения. Часть пика, на которой зарегистрировано возрастание концентрации вещества до максимума, называется фронтом пика, а часть, которая отвечает уменьшению концентрации вещества, называется тылом (тыльной частью) пика.

Основание пика (Peak base) − продолжение базовой линии, соединяющее начало и конец пика.

Площадь пика (S) (Peak area)– площадь хроматограммы, заключённая между кривой, описывающей пик, и его основанием.

Высота пика (H) (Height of the peak) – расстояние от максимума пика до его основания, измеренное параллельно оси отклика детектора.

Рисунок 2. Хроматограмма и основные хроматографические параметры: 1 и 2 – пики соединений 1 и 2; t1 и t2 – соответствующие времена удерживания; t0 – время удерживания несорбирующегося вещества; W1 и W2 – ширина пиков у основания; W0,5 – ширина пика на половине его высоты, σ – стандартное отклонение пика (предполагается гауссова форма пиков)

Зона адсорбции – часть хроматографической пластинки, содержащая адсорбированное определяемое вещество и визуализируемая в виде пятна (круглого или эллипсовидного) или полосы.

###### Интерпретация хроматографических данных

Время удерживания (tR или t) (Retentiontime) – время, необходимое для элюирования вещества. Соответствует времени появления максимума пика на хроматограмме.

Объём удерживания (VR) (Retention volume)– объём подвижной фазы, необходимый для элюирования вещества. Может быть вычислен по времени удерживания и скорости потока (F).

Объём удерживания, в отличие от времени удерживания, не зависит от скорости потока.

Время удерживания неудерживаемого вещества (t0) или мёртвое время (tM) (Hold-up time (tM) или Retention time of an unretained compound (tо)) (рис. 3) – время, необходимое для элюирования неудерживаемого на сорбенте вещества. В эксклюзионной хроматографии – (t0), соответствует времени удерживания веществ, размер молекул которых больше, чем наибольшие поры сорбента.

Рисунок 3. Временные/объёмные показатели хроматограмм

Объём удерживания неудерживаемого вещества (V0) или мёртвый объём (VM) (Hold-up volume (VM) или Retention volume of an unretained compound (Vо)) – объём подвижной фазы, необходимый для элюирования неудерживаемого вещества. Может быть вычислен по времени удерживания неудерживаемого вещества и скорости потока (F):

В эксклюзионной хроматографии (V0), соответствует объёму удерживания веществ, размер молекул которых больше, чем наибольшие поры сорбента и соответствует объёму пространства между частицами сорбента в колонке (межгранульному объёму).

Время удерживания вещества, проникающего во все поры (tt) (Total mobile phase time) – в эксклюзионной хроматографии время удерживания веществ, молекулы которых меньше, чем наименьшие поры сорбента, и которым доступен весь объём пор сорбента.

Общий объём подвижной фазы (Vt) (Total mobile phase volume) – в эксклюзионной хроматографии объём удерживания веществ, молекулы которых меньше, чем наименьшие поры сорбента и которым доступен весь объём пор сорбента. Он соответствует общему свободному объёму колонки (сумме межгранульного объёма и объёма пор сорбента) и может быть вычислен по общему времени удерживания вещества, проникающего во все поры сорбента, и скорости подвижной фазы (F):

Константа (коэффициент) распределения (K0) (_Distribution constant) _– в эксклюзионной хроматографии характеристика элюирования вещества из определенной колонки, которую рассчитывают с помощью выражения:

Приведённое (исправленное) время удерживания вещества (t′R) (Adjusted retention time) ‒ время удерживания вещества за вычетом времени удерживания несорбирующегося вещества. Может быть рассчитано по формуле:

Исправленное время удерживания не зависит от объёма капилляров хроматографической системы, установленных между инжектором и колонкой, и между колонкой и детектором.

Относительное время удерживания (r) (Relative retention) – относительное приведённое (исправленное) время удерживания вещества 2 по веществу 1:

где tR1 – время удерживания пика вещества 1;
tR2 – время удерживания пика вещества 2;
tM – время удерживания несорбирующегося вещества.

Нескорректированное относительное время удерживания (RRT) (Relative retention, unadjusted (RRT)) – относительное время удерживания вещества 2 по веществу 1:

Если нет других указаний, значения относительного времени удерживания, указанные в методике приведённые в фармакопейных статьях, соответствуют нескорректированному относительному времени удерживания.

Коэффициент ёмкости или фактор удерживания (k′) (Retention factor) - коэффициент ёмкости колонки по веществу с временем удерживания tR, показывающий, во сколько раз исправленное время удерживания вещества больше, чем время удерживания несорбирующегося вещества.

Эффективность (Plate number) хроматографической системы ‒ параметр, характеризующий степень размывания хроматографического пика. Эффективность выражается числом теоретических тарелок (N) (Number of theoretical plates):

или

где tR – время удерживания пика вещества;
W – ширина пика у основания;
W0,5 – ширина пика на половине высоты.

При расчёте числа теоретических тарелок значения времени удерживания и ширины пика должны быть приведены к одинаковой размерности.

Число теоретических тарелок зависит от природы определяемого вещества, его концентрации и объёма, вводимого в систему, от колонки, температуры колонки, состава и скорости подвижной фазы, от внеколоночного размывания.

Высота, эквивалентная теоретической тарелке (H) (Plate height (H) (synonym: Height equivalent to one theoretical plate (HETP)) равна отношению длины колонки (L), выраженной в мкм к числу теоретических тарелок (N).

Приведённая высота, эквивалентная теоретической тарелке (h) (Reduced plate height) равна отношению высоты, эквивалентной теоретической тарелке (H), выраженной в мкм к диаметру частиц, выраженному в мкм (dp).

Если нет других указаний, то эффективность хроматографической системы, требования к которой приведено в фармакопейной статье, рассчитывается по формуле, использующей ширину пика на половине его высоты.

Фактор асимметрии (фактор симметрии) пика (As) (Symmetry factor) – характеристика симметричности пика, рассчитываемаяпо формуле:

где W0,05 – ширина пика на 5 % (1/20) его высоты;
f – расстояние между перпендикуляром, опущенным из вершины пика, и восходящей стороной пика на 5 % его высоты (рис. 4).

Если фактор асимметрии равен 1, то пик симметричен. Если фактор асимметрии больше 1, то это означает, что растянут тыл пика. Если фактор асимметрии меньше 1, то растянут фронт пика.

Рисунок 4. Схема расчёта фактора асимметрии пика

Разрешение (Rs) (Resolution)

Разрешение между пиками двух веществ смеси рассчитывают по формулам:

или

где tR2 ≥ tR1
tR2 и tR1 – времена удерживания пиков;
W1 и W2 – ширина пиков у основания;
(W0,5)1 и (W0,5)2 – ширина пика на половине его высоты.

В количественной планарной хроматографии с использованием денситометрии расстояния миграции используются вместо времени удерживания, и разрешение между пиками 2 компонентов может быть рассчитано с использованием следующего уравнения:

где + Rf2 ≥ R_f1 + Rf2 и Rf1 – факторы замедления пиков; + Wh1 и Wh2 – ширина пиков на половине его высоты; + a – расстояние от линии старта до линии фронта элюента.

При расчёте разрешения величины времени удерживания и ширины пиков должны быть приведены к одинаковой размерности.

Если нет других указаний, то разрешение, требования к которому приведены в фармакопейной статье, рассчитывается по формуле, использующей ширину пиков на половине высоты.

В случае, если пики несимметричны и если высота пиков значительно различается, параметр Rs не всегда корректно описывает разделение хроматографических пиков. Таким образом, даже при значениях Rs ≥ 1,5 может наблюдаться неполное разделение пиков. В этих случаях при оценке разделяющей способности можно заменить параметр Rs на параметр «отношение максимум/минимум».

Отношение максимум/минимум (p/v) (Peak-to-valley ratio), называемое также отношением «пик/долина», «пик/впадина», рассчитывается по формуле:

где Hp – высота меньшего пика относительно экстраполированной базовой линии;
Hv – высота низшей точки (долины) кривой, разделяющей пики, относительно экстраполированной базовой линии (рис. 5).

Рисунок 5. Хроматограмма не полностью разделяемых веществ

Данное соотношение применяется для оценки разделительной способности хроматографической системы, если вещества смеси разделяются не полностью (не до базовой линии). Рассчитанное отношение максимум/минимум в значительной степени зависит от выбранного варианта интегрирования хроматограммы. Расчёт соотношения p/v невозможен в случае разметки меньшего пика в виде пика-наездника.

Отношение сигнал/шум (S/N) (Signal-to-noise ratio)

Краткосрочный шум сигнала детектора (шум базовой линии) влияет на прецизионность количественного определения. Отношение сигнал/шум рассчитывают по формуле:

где Н – высота пика, соответствующего рассматриваемому веществу на хроматограмме указываемого стандартного раствора, измеренная от максимума пика до экстраполированной базовой линии. Экстраполяция базовой линии проводится для сигнала на участке базовой линии во временном интервале, продолжительность которого равна 5 - кратному значению ширины пика на его полувысоте;
h – размах фонового шума, измеряемый либо на хроматограмме холостого раствора (или раствора плацебо), либо на хроматограмме того же раствора стандартного образца.

Измерение размаха фонового шума проводится во временном интервале, продолжительность которого равна 5 – кратному значению ширины пика на его полувысоте, расположенном, если это возможно, равномерно по обе стороны от места возможного обнаружения пика. В случае использования для измерения шума хроматограммы холостого раствора (или раствора плацебо) измерение размаха фонового шума проводится во временном интервале, включающем в себя время удерживания рассматриваемого вещества (рис. 6).

Рисунок 6. Вычисление отношения сигнал/шум

Объём задержки градиента (D) (Dwell volume (D) (так же referred to as VD)) представляет собой объём системы между точкой, в которой происходит смешение элюентов, и входом в колонку.

Объём задержки градиента влияет на времена удерживания веществ и общий профиль хроматограммы, получаемой при использовании градиентного элюирования. Объём задержки градиента хроматографической системы может быть определён в приведённых ниже условиях.

Колонка. Заменяют хроматографическую колонку капилляром (например, 1 м × 0,12 мм).

Подвижная фаза A (ПФА). Вода.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетона раствор 0,1 %.

Время, мин | ПФA, % | ПФБ, %
--- | --- | ---
0–20 | 100 → 0 | 0 → 100
20–30 | 0 | 100

Скорость потока. Необходимая для создания давления, достаточного для стабильной работы насоса (например, 2 мл/мин).

Детектор. Спектрофотометрический при длине волны 265 нм.

Определяют время (t0,5) в минутах, когда оптическая плотность увеличилась на 50 % (рис. 7). Вычисляют объём задержки градиента:

где tD = t_0,5- 0,5t_G, мин;
tG – время градиента (20 мин);
F – скорость потока, мл/мин.

Рисунок 7. Определение объёма задержки градиента

Прецизионность системы в условиях повторяемости (System repeatability)

Прецизионность системы в условиях повторяемости выражается в виде рассчитанного относительного стандартного отклонения в процентах (RSD, %) по результатам последовательных измерений аналитического сигнала (площади или высоты пика, отношения площадей пиков определяемого вещества и внутреннего стандарта) для не менее чем трёх введений или нанесений раствора сравнения и рассчитывается по формуле:

где – среднее значение аналитического сигнала;
Xi – результаты единичных измерений аналитического сигнала;
n – число измерений.

В планарной хроматографии характеристикой удерживания является фактор замедления (используется так же как «фактор удерживания») (Rf) (Retardation factor):

где a – расстояние от точки нанесения пробы до центра пятна, характеризующего зону адсорбции;
b – расстояние от линии старта до линии фронта элюента.

На экспериментально определяемые значения Rf заметно влияют условия хроматографирования. Оценкой хроматографической подвижности, менее чувствительной к влиянию отклонений в условиях проведения эксперимента, является величина Rs (Relative retardation), представляющая собой отношение величины Rf одного вещества к величине Rf другого, принятого за стандарт:

Величины Rf и Rs используют для идентификации веществ. Обычно выбор стандарта осуществляется так, чтобы значение Rs определяемого вещества было в пределах от 0,5 до 2,0. Схема определения этих величин приведена на рис. 8.

Рисунок 8. Схема определения значений Rf и Rs : – место нанесения образца на линию старта; 1 – испытуемое вещество (а); 2 – вещество-стандарт (ast); b – расстояние от линии старта до линии фронта элюента.

Данные планарной хроматографии могут быть представлены в виде денситограмм.

###### Расчёт содержания определяемых веществ

При расчётах содержания определяемых веществ пики растворителей и реактивов, подвижной фазы или среды (матрицы) образца не учитывают.

Существуют 4 основных метода расчёта концентрации вещества по хроматографическим данным.

1. Метод нормирования (метод внутренней нормализации). Применение данного метода основано на предположении, что на хроматограмме зарегистрированы все вещества, входящие в состав анализируемой смеси, и что доля площади каждого пика от суммы площадей всех пиков в процентах соответствует содержанию вещества в массовых процентах. Содержание каждого вещества в смеси в процентах может быть вычислено по формуле:

где Si – площадь (высота) i-го пика;
- сумма площадей всех учитываемых пиков на хроматограмме.

- Если чувствительность детектора различна по отношению к каждому из веществ, то вводят поправочные коэффициенты ki. Относительный коэффициент отклика детектора (относительный фактор отклика, RRF) характеризует чувствительность детектора для данного вещества относительно стандартного вещества. Поправочный коэффициент – это число, обратное относительному фактору отклика.

- Поправочные коэффициенты рассчитывают относительно основного вещества анализируемой смеси или другого стандартного вещества по формуле:

- где Ci и C0 – концентрация i-го вещества и стандартного вещества соответственно;
  Si и S0 – площадь пика i-го вещества и стандартного вещества соответственно.

- Данные коэффициенты могут не учитываться в случае, если они находятся в пределах диапазона 0,8–1,2.

- При использовании поправочных коэффициентов выражение для расчёта содержания приобретает вид:

- При проведении испытания на примеси методом нормализации или методом внешнего стандарта с использованием разведения раствора испытуемого образца в качестве раствора сравнения учитывают все указанные в методике поправочные коэффициенты, значение которых выходит за пределы диапазона 0,8–1,2.

2. Метод внешнего стандарта. Концентрацию испытуемого вещества определяют путём сравнения сигнала (площади или высоты пика), полученного на хроматограммах испытуемого раствора, и сигнала (площади или высоты пика), полученного на хроматограммах раствора стандартного образца. Предпочтительно использовать площадь пика. Использование высоты пика должно быть обосновано.

- Концентрацию определяемого вещества в испытуемом растворе рассчитывают по формуле:

- где S и S0 – средние значения площадей (высот) пиков на хроматограммах испытуемого и стандартного растворов соответственно;
  С и С0 – концентрации определяемого вещества в испытуемом и стандартном растворах соответственно.

- Количественное определение содержания примесей методом внешнего стандарта предпочтительнее проводить с использованием стандартных растворов примесей с концентрациями, близкими к их ожидаемым концентрациям в испытуемом растворе.

- В качестве раствора стандартного образца для количественного определения примесей возможно использование раствора основного вещества. В этом случае разведение подбирается таким образом, чтобы концентрация основного соединения в растворе стандартного образца по отношению к его концентрации в испытуемом растворе была близка к ожидаемой концентрации примесей в испытуемом растворе. При этом следует учесть относительные факторы отклика примесей (по отношению к основному веществу), если их значения выходят за рамки 0,8−1,2.

- Эмпирическую зависимость измеренного или обработанного сигнала (у) от количества (концентрации, массы или объёма) определяемого вещества (х) аппроксимируют уравнением калибровочной функции (y=f(x)) подходящего вида. Результаты испытания рассчитывают из измеренного или обработанного сигнала с помощью обратной функции (x=f-1(y)).

3. Метод внутреннего стандарта. Концентрацию вещества определяют путём сравнения отношения сигналов (площадей или высот пиков), соответствующих определяемому веществу и внутреннему стандарту, на хроматограмме испытуемого раствора и отношения сигналов (площадей или высот пиков), соответствующих определяемому веществу и внутреннему стандарту, на хроматограмме раствора стандартного образца. В испытуемый и стандартный растворы вводят одинаковые количества внутреннего стандарта, хроматографируют растворы и определяют отношения площадей (высот) пиков определяемого вещества к площади (высоте) пика внутреннего стандарта в испытуемом и стандартном растворах.

- Концентрацию определяемого вещества (Х) рассчитывают по формуле:

- где
  – отношение площади (высоты) пика определяемого вещества к площади (высоте) пика внутреннего стандарта в испытуемом растворе;
  – отношение площади (высоты) пика определяемого вещества к площади (высоте) пика внутреннего стандарта в растворе стандартного образца;
  C0 – концентрация определяемого вещества в растворе стандартного образца.

- В качестве внутреннего стандарта выбирается вещество, отсутствующее в испытуемой пробе, не взаимодействующее с определяемым веществом и другими веществами пробы, обладающее достаточной стабильностью, полностью отделяющееся от веществ пробы и не содержащее примесейс временами удерживания, совпадающими с временем удерживания определяемого вещества. Концентрация внутреннего стандарта должна быть близка к концентрации определяемых веществ, а структура и свойства по возможности аналогичны структуре и свойствам определяемых веществ.

4. Метод стандартных добавок. Концентрация вещества определяется путём сравнения сигнала (площади или высоты пика), соответствующего этому веществу, на хроматограмме испытуемого раствора, и сигнала (площади или высоты пика) определяемого вещества на хроматограмме испытуемого раствора с известной добавкой определяемого вещества. При внесении стандартной добавки стараются минимизировать разбавление испытуемого образца, чтобы измерения раствора со стандартной добавкой и без добавки проходили в одинаковых условиях с одинаковым влиянием матрицы. Количество вводимого в стандартной добавке определяемого вещества должно быть соизмеримо с его предполагаемым содержанием в испытуемом образце. После проведения испытания сравнивают полученные значения сигнала детектора и рассчитывают содержание определяемого вещества Cx по формуле:

- где Cстд – концентрация стандартной добавки;
  Sx – площадь (высота) пика определяемого вещества для испытуемого раствора без стандартной добавки;
  S(стд+x) – площадь (высота) пика определяемого вещества для испытуемого раствора со стандартной добавкой.

- При необходимости формулу корректируют с учётом разбавлений испытуемого раствора за счёт введения стандартной добавки.

###### Рекомендации по разметке и интегрированию хроматограмм при определении примесей

Если нет других указаний, в испытаниях на содержание примесей в качестве порога игнорирования (reporting threshold) (содержания вещества, ниже которого его пик не учитывают) принимают величину 0,05 % от содержания основного вещества.

В случаях, когда при испытании на примеси требуется определение суммарного содержания примесей или количественное определение примеси, при интерпретации хроматограммы важно выбрать подходящие условия интегрирования и значение порога интегрирования (интенсивность сигнала пика соединения в виде высоты или площади), при котором (и при меньшем) пик не учитывается системой сбора данных и не участвует в количественных расчётах.

С целью разметки на хроматограмме всех пиков, подлежащих учёту, заданный порог интегрирования системы сбора данных не должен превышать величины сигнала, соответствующей половине порога игнорирования.

Интегрирование площади пика любой примеси, пик которой не полностью разделяется с основным пиком, в общем случае проводится в виде пика-наездника. Использование других способов интегрирования должно быть специально оговорено в методике.

###### Оценка пригодности хроматографической системы

Данный раздел применим для жидкостной и газовой хроматографии.

Испытания пригодности системы являются неотъемлемой частью методики и используются для того, чтобы убедиться в надлежащем функционировании хроматографической системы и обеспечить выполнение предъявляемых к ней требований.

При проведении испытаний используемое оборудование должно быть квалифицировано и способно к функционированию надлежащим образом.

Для оценки пригодности системы указывают:

- требования к параметрам, характеризующим форму пика (эффективность хроматографической системы N и фактор асимметрии, As);

- требования к разделительной способности (разрешение между пиками RS или отношение «пик/долина» p/v (при неполном разделении пиков));

- требования к повторяемости (относительное стандартное отклонение, RSD) значений площади или высоты пиков, а также времен удерживания пиков в случае оценки подлинности соединений;

- требования к чувствительности при проведении испытания на примеси (минимально определяемая концентрация, нижний предел количественного определения примеси (ПКО)). Кроме того, оценка чувствительности требуется при анализе профиля хроматограммы, который содержит множественные пики различной интенсивности, и к которому предъявляются строгие требования к наличию или, наоборот, отсутствию тех или иных идентифицированных и/или неидентифицированных малоинтенсивных пиков. В общем случае оценивается посредством расчёта отношения сигнал/шум для раствора соответствующей концентрации.

Дополнительные требования оценки пригодности системы приводятся в методике и определяются спецификой проводимого испытания.

Если в методике нет других указаний, должны выполняться следующие нормы и все дополнительные требования, приведённые в фармакопейной статье:

- в испытаниях на примеси или количественное содержание для пика на хроматограмме раствора стандартного образца, используемого для количественных определений, значение величины фактора асимметрии As должно находиться в пределах от 0,8 до 1,8;

- разрешение между пиками Rs ≥ 1,5 для критичной пары (пар) пиков (в случае не полностью разделённых пиков вместо разрешения предпочтительно использование соотношения p/v; при этом нормы к минимальному значению соотношения p/v устанавливаются в фармакопейной статье);

- отношение сигнал/шум для пика вещества, полученное для раствора с концентрацией, равной требуемому уровню минимально определяемой концентрации, должно быть не менее 10.

Требуемый уровень минимально определяемой концентрации (предел количественного определения, ПКО) зависит от того, предполагает ли методика вычисление содержания примесей, или только полуколичественную оценку, когда результат представляется в виде «менее Х» или «не более Х», где Х – допустимое содержание примеси. Для методик, предполагающих вычисление содержания примесей, ПКО не должен превышать значение порога игнорирования (если нет других указаний – 0,05 % относительно концентрации основного вещества в испытуемом растворе). Для полуколичественных методик ПКО не должен превышать максимально допустимое содержание примеси. При необходимости оценки содержания нескольких примесей требуемый ПКО определяется примесью, нормы содержания которой наиболее строги. В случаях, когда факторы отклика примесей отличаются, и для примеси с меньшим допустимым содержанием наблюдается больший поправочный коэффициент, в первую очередь принимают во внимание факторы отклика примесей с учётом которых готовят растворы для оценки чувствительности хроматографической системы. При этом, если наименьшее допустимое содержание соответствует одновременно нескольким примесям, для оценки чувствительности выбирают ту примесь, которой соответствует наибольший поправочный коэффициент. Если в фармакопейной статье нет других указаний, то раствор вещества минимально определяемой концентрации для оценки чувствительности детектирования можно приготовить растворением стандартного образца в том же растворителе, который используется для приготовления испытуемого раствора или разбавлением испытуемого раствора тем же растворителем, с уровнем концентрации 0,05 % относительно концентрации основного вещества в испытуемом растворе.

В некоторых случаях для оценки чувствительности может быть применён раствор стандартного образца (или разбавленный испытуемый раствор) с большей концентрацией, чем порог игнорирования, с пропорциональным увеличением требований к значению отношения «сигнал/шум» для целевого пика.

###### Требования к прецизионности системы в условиях повторяемости при количественном определении основного вещества в фармацевтических субстанциях или вспомогательных веществах

При количественном определении основного вещества в фармацевтических субстанциях, содержание которого близко к 100 %, максимально допустимое относительное стандартное отклонение значений интенсивности (площади или высоты) пика основного вещества для заданного количества повторных последовательных введений стандартного раствора RSDmax вычисляется по формуле:

где K – константа (0,349), полученная из выражения:

в котором множитель соответствует значению RSDmax после 6 повторных инжекций для В = 1,0;
B – верхний предел содержания основного вещества, приведённый в фармакопейной статье, минус 100 %;
n – число повторных введений стандартного раствора, (3 ≤ n ≤ 6);
t90%,n-1 – коэффициент Стьюдента (двусторонний) при доверительной вероятности 90 % с n–1 степенью свободы.

Если в фармакопейной статье нет других указаний, то значение RSD не должно превышать величин RSDmax, приведённых в таблице 1.

Таблица 1. Максимально допустимое относительное стандартное отклонение RSDmax в зависимости от верхнего предела содержания и числа повторных введений проб
В, % | Число повторных введений проб
--- | ---
3 | 4 | 5 | 6
Максимально допустимое относительное стандартное отклонение RSDmax
2,0 | 0,41 | 0,59 | 0,73 | 0,85
2,5 | 0,52 | 0,74 | 0,92 | 1,06
3,0 | 0,62 | 0,89 | 1,10 | 1,27

Соответствие критериям пригодности системы должно поддерживаться на протяжении всего испытания. В зависимости от различных факторов, например, частоты использования методики и опыта работы с хроматографической системой, аналитик выбирает соответствующую схему проверки, подтверждающую соответствие этим требованиям.

В планарной хроматографии при проведении испытаний, регламентирующих наличие посторонних примесей/родственных соединений, должны быть предусмотрена оценка предела обнаружения примесей и разделительной способности хроматографической системы.

Для подтверждения пригодности системы возможно одновременное использование двух испытаний: «Подтверждение разделительной способности» и «Подтверждение чувствительности».

Подтверждение разделительной способности проводят путём нанесения на пластинку и последующего хроматографирования специального стандартного раствора, содержащего два или более веществ с известными значениями Rf. После хроматографирования эти вещества должны разделиться, образуя зоны адсорбции, значения Rf которых соответствуют допустимым диапазонам.

Подтверждение чувствительности позволяет оценить чувствительность проявления и заключается в нанесении определённого количества стандартного образца хроматографируемого в условиях предыдущего испытания и проявляемого тем же реагентом. Зона адсорбции стандартного образца должна чётко обнаруживаться.

В каждом случае используемые стандартные образцы, состав стандартного раствора, наносимые количества, приблизительные значения Rf указывают методиках испытаний.

При необходимости для достижения требуемых критериев пригодности хроматографической системы проводится корректировка хроматографических условий.

###### Корректировка условий хроматографирования

Приведённые в методике хроматографические условия валидируют при её разработке. Тем не менее, для выполнения требований пригодности хроматографической системы на практике может потребоваться корректировка указанных условий.

Далее приводятся допустимые пределы изменений различных параметров хроматографической методики, которые могут быть внесены в неё аналитиком. При внесении изменений, выходящих за указанные ниже пределы, требуется ревалидация (повторная валидация) методики.

Многочисленные корректировки могут оказывать кумулятивное воздействие на работоспособность системы и должны быть правильно оценены пользователями. Это особенно важно в тех случаях, когда хроматограмма подлежит сравнению с хроматографическим профилем в методике.

Для проверки того, что обеспечены условия для приемлемого выполнения испытания, необходимо подтверждение соответствия критериям пригодности системы.

Корректировка условий градиентного элюирования (ВЭЖХ) или температурной программы (ГХ) является более критичной, чем изократических (ВЭЖХ) или изотермических (ГХ) условий, так как может вызвать сдвиг пиков на другую стадию градиента или температурной программы и, таким образом, привести к наложению пиков, изменению порядка элюирования, некорректной идентификации и маскировке пиков или к таким сдвигам, при которых элюирование интересующих соединений происходит после указанного времени регистрации хроматограммы.

Для некоторых параметров методики корректировки с целью достижения пригодности системы могут быть указаны непосредственно в методике.

Если в методике нет других указаний, допустимы следующие изменения параметров хроматографической системы.

Тонкослойная хроматография

Состав подвижной фазы: количество растворителя, содержание которого в смеси наименьшее, может изменяться в пределах ±30 % (относительное изменение) или ±2 % (абсолютное изменение) в зависимости от того, какая из величин будет больше. Содержание других веществ не может быть изменено по абсолютной величине более чем на 10 %. Наименьшим компонентом считается тот, содержание которого не превышает 100/n процентов, где n – общее число компонентов подвижной фазы.

Пример 1: для вещества, содержание которого составляет 10 % подвижной фазы, относительное изменение содержания на 30 % соответствует абсолютному изменению содержания на 3 % (диапазон содержаний 7–13 %), что больше 2 % (диапазон содержаний 8–12 %). Таким образом, допускается содержание наименьшего компонента в диапазоне 7–13 %.

Пример 2: для вещества, содержание которого составляет 5 % подвижной фазы, относительное изменение содержания на 30 % соответствует абсолютному изменению содержания на 1,5 % (диапазон содержаний 3,5–6,5 %), что меньше 2 % (диапазон содержаний 3–7 %). Таким образом, допускается содержание наименьшего компонентов диапазоне 3–7 %.

pH водного компонента подвижной фазы: ±0,2 единицы pH, если в фармакопейной статье не указано иначе.

Концентрация солей в буферном компоненте подвижной фазы: ±10 %.

Объём наносимой пробы: ±20 % от заявленного объёма при использовании пластинок с малым размером частиц сорбента (2–10 мкм).

Жидкостная хроматография: изократическое элюирование

Неподвижная фаза:

- замена типа неподвижной фазы недопустима (например, недопустима замена фазы С18 на фазу С8); физико-химические параметры альтернативных фаз должны быть сходными; переход от полностью пористых частиц к поверхностно-пористым возможен при соблюдении указанных выше требований.

Размеры колонки и частиц:

- размер частиц и/или длина колонки могут быть изменены при условии, что отношение длины колонки к размеру частиц остаётся постоянным или изменяется на величину до –25 % от предписанного значения. При переходе от полностью пористых частиц к поверхностно-пористым можно использовать другие комбинации длины колонки и размера частиц, при условии, что число теоретических тарелок изменяется на величину до –25 % по сравнению с результатами, полученными для исходной колонки; эти изменения допустимы при условии выполнения требований пригодности системы и сохранении селективности и порядка выхода примесей, подлежащих контролю;

- внутренний диаметр колонки может быть изменён при условии выполнения требований пригодности системы.

В случае, если в результате корректировки условий хроматографического разделения ширина зоны элюирующегося вещества в единицах объёма уменьшается вследствие меньшего размера частиц или меньшего внутреннего диаметра колонки, что могут потребоваться действия, направленные на минимизацию внеколоночного уширения пиков под влиянием таких факторов, как диаметр капилляров прибора и их соединения, объём ячейки детектора, частота сбора данных детектором и объём вводимой пробы.

При изменении размера частиц требуется регулировка скорости потока, поскольку колонки с меньшими частицами требуют более высоких линейных скоростей для достижения той же эффективности (выраженной через приведенную высоту, эквивалентную теоретической тарелке). При изменении размера частиц и диаметра колонки скорость потока пересчитывают, используя следующее уравнение:

где F1 – скорость потока, указанная в методике, мл/мин;
F2 – скорректированная скорость потока, мл/мин;
dc1 - внутренний диаметр колонки, указанный в методике, мм;
dc2 – внутренний диаметр используемой колонки, мм;
dp1 – размер частиц, указанный в методике, мкм;
dp2 – размер используемыхчастиц, мкм.

При переходе от частиц размером ≥ 3 мкм к частицам размером < 3 мкм при изократическом элюировании может быть оправдано дополнительное увеличение линейной скорости (путём регулирования скорости потока) при условии, что эффективность колонки не снизится более чем на 20 %. Аналогично, при переходе от частиц размером < 3 мкм к частицам размером ≥ 3 мкм может быть оправдано дополнительное снижение линейной скорости во избежание снижения эффективности колонки более чем на 20 %.

После корректировки, связанной с изменением размеров колонки, допускается дополнительное изменение скорости потока на ±50 %.

Температура колонки: ±10 °C от указанной рабочей температуры. После корректировки параметров колонки и скорости потока может потребоваться дополнительная корректировка условий аналитической методики (подвижной фазы, объёма пробы и др.) в пределах допустимых диапазонов, описанных в разделах «Пригодность хроматографической системы» и «Корректировка условий хроматографирования».

Состав подвижной фазы: количество растворителя, содержание которого в смеси наименьшее, может изменяться в пределах ±30 % (относительное изменение) или ±2 % (абсолютное изменение) в зависимости от того, какая из величин будет больше (см. примеры для тонкослойной хроматографии). Наименьшим компонентом считается тот, содержание которого менее 100/n процентов, где n – общее число компонентов подвижной фазы.

pH водного компонента подвижной фазы: ±0,2 единицы pH. Концентрация солей в буферном компоненте подвижной фазы: ± 10 %.

Скорость потока подвижной фазы: ± 50 % при отсутствии изменений параметров колонки. При одновременном изменении размеров колонки допустима большая степень изменений. При необходимости одновременного изменения размеров колонки и скорости потока сначала рассчитывается номинальная скорость потока для колонки, размеры которой отличаются от приведённой в методике, а затем допускается корректировка полученного значения скорости потока на ± 50 %.

Длина волны детектора: изменения не допускаются.

Объём вводимой пробы. При изменении размеров колонки для корректировки объёма ввода пробы можно использовать следующее уравнение:

где V1 – объём ввода пробы, указанный в методике, мкл;
V2 – скорректированная объём ввода пробы, мкл;
L1 – длина колонки, указанная в методике, мм;
L2 – длина используемой колонки, мм;
dc1 - внутренний диаметр колонки, указанный в методике, мм;
dc2 – внутренний диаметр используемой колонки, мм.

Это уравнение может быть неприменимо при замене колонок с полностью пористыми частицами на колонки с поверхностно-пористыми частицами.

Даже при отсутствии изменения размеров колонки объём ввода пробы может быть изменён при условии, что критерии пригодности системы остаются в пределах установленных границ приемлемости. При уменьшении объёма ввода пробы особое внимание уделяется пределу обнаружения и повторяемости площади (высоты) пика. Увеличение объёма ввода допустимо при условии, что линейность отклика и разрешение пиков остаются удовлетворительными.

Жидкостная хроматография: градиентное элюирование

Изменение хроматографических условий для систем с градиентом требует большей осторожности, чем для изократических.

Неподвижная фаза: замена типа неподвижной фазы недопустима (например, недопустима замена С18 на С8); физико-химические параметры альтернативных фаз должны быть сходными; переход от полностью пористых частиц к поверхностно-пористым возможен при соблюдении указанных выше требований.

Размеры колонки и частиц:

- размер частиц и/или длина колонки могут быть изменены при условии, что отношение длины колонки к размеру частиц остаётся постоянным или изменяется на величину до –25 % от предписанного значения. При переходе от полностью пористых частиц к поверхностно-пористым можно использовать другие комбинации длины колонки и размера частиц, при условии, что отношение (tR/w0,5)2 для каждого пика, используемого в проверке пригодности системы, изменяется в пределах до –25 % по сравнению с результатами, полученными для исходной колонки; эти изменения допустимы при условии выполнения требований пригодности системы и сохранении селективности и порядка выхода примесей, подлежащих контролю;

- внутренний диаметр колонки может быть изменёнпри условии выполнения требований пригодности системы.

В случае, если в результате корректировки условий хроматографического разделения ширина зоны элюирующегося вещества в единицах объёма уменьшается вследствие меньшего размера частиц или меньшего внутреннего диаметра колонки, что могут потребоваться действия, направленные на минимизацию внеколоночного уширения пиков под влиянием таких факторов, как диаметр капилляров прибора и их соединения, объём ячейки детектора, частота сбора данных детектором и объём вводимой пробы.

При изменении размера частиц необходима регулировка скорости потока, поскольку колонки с меньшими частицами требуют более высоких линейных скоростей для достижения той же эффективности (выраженной через приведенную высоту, эквивалентную теоретической тарелке). При изменении размера частиц и диаметра колонки скорость потока пересчитывают, используя следующее уравнение:

где F1 – скорость потока, указанная в методике, мл/мин;
F2 – скорректированная скорость потока, мл/мин;
dc1 - внутренний диаметр колонки, указанный в методике, мм;
dc2 – внутренний диаметр используемой колонки, мм;
dp1 – размер частиц, указанный в методике, мкм;
dp2 – размер используемыхчастиц, мкм.

Изменение размеров колонки, а значит, и её объема, влияет на объём градиента, который контролирует селективность. Градиенты подстраиваются под объём колонки путём изменения объёма градиента пропорционально объёму колонки. Это относится к объёму каждой стадии градиента. Поскольку объём градиента равен времени градиента (tG), умноженному на скорость потока (F), время каждой стадии градиента должно быть отрегулировано для поддержания постоянного отношения объёма градиента к объёму колонки (пропорциональному произведению L × dc2). Таким образом, новое время градиента (tG2) может быть рассчитано на основе исходного времени градиента (tG1), скорости потока и размеров колонки следующим образом:

Таким образом, изменение условий для градиентного элюирования включает 3 этапа:

- 1) отрегулировать длину колонки и размер частиц с учётом отношения L/dp;

- 2) отрегулировать скорость потока с учётом изменения размера частиц и диаметра колонки;

- 3) отрегулировать время каждой стадии градиента с учётом изменений длины колонки, её диаметра и скорости потока.

Приведённый ниже пример иллюстрирует этот процесс.

Таблица 2. Пример корректировки для градиентного режима жидкостной хроматографии
Параметр | Исходные условия | Скорректированные условия | Комментарий
--- | --- | --- | ---
Длина колонки (L), мм | 150 | 100 | Выбор пользователя
Диаметр колонки (dc), мм | 4,6 | 2,1 | Выбор пользователя
Размер частиц (dp), мкм | 5 | 3 | Выбор пользователя
L/dp | 30,0 | 33,3 | (1)
Скорость потока (F), мл/мин | 2,0 | 0,7 | (2)
Фактор корректировки градиента (tG2/tG1) | 0,4 | (3)
Условия градиента
ПФБ, % | Время, мин | Время, мин |
30 | 0 | 0 |
30 | 3 | 3 · 0,4 = 1,2 |
70 | 13 | 1,2 + (13 – 3) ·0,4 = 5,2 |
30 | 16 | 5,2 + (16 – 13) ·0,4 = 6,4 |
(1) 11-процентное увеличение в пределах допустимого изменения L/dp от –25 % до +50 %; (2) рассчитано с использованием F2 = F1·[(dc22 × dp1) / (dc12 × dp2)]; (3) рассчитано с использованием tG2 = tG1 × (F1/F2) [(L2 × dc22) / (L1 × dc12)].

После корректировки параметров колонки и скорости потока может потребоваться дополнительная корректировка условий методики (подвижной фазы, температуры и др.) в пределах допустимых диапазонов, описанных в разделах «Пригодность хроматографической системы» и «Корректировка условий хроматографирования».

Температура колонки: ±5 °C от указанной рабочей температуры. Состав подвижной фазы/профиль градиентного элюирования: изменения состава подвижной фазы и программы градиента являются приемлемыми при условиях, если:

- выполняются требования пригодности системы;

- основной пик элюируется в пределах ±15 % от указанного времени удерживания; требование не применяется, если изменены размеры колонки;

- состав подвижной фазы и градиент таковы, что компоненты, элюирующиеся первыми, в достаточной степени удерживаются, а сильно удерживаемые компоненты элюируются, не оставаясь в колонке.

pH водного компонента подвижной фазы: ±0,2 единицы pH. Концентрация солей в буферном компоненте подвижной фазы: ±10 %.

Если при использовании градиентного элюирования не может быть достигнуто соответствие требованиям пригодности системы, рекомендуется оценить объём задержки градиента или сменить используемую колонку.

Объём задержки градиента. Конфигурация используемого оборудования может значительно изменить разрешение, указанные абсолютные и относительные времена удерживания. Это может произойти из-за отличия объёма задержки градиента используемой системы от объёма задержки градиента системы, с помощью которой проводилась валидация методики. В методике часто перед началом программы градиента включена изократическая стадия, чтобы можно было адаптировать систему к временным точкам градиента с учётом разницы объёма задержки у системы, использованной при разработке методики, и у фактически использующейся системы. Решение о необходимости адаптации длительности изократической стадии для данного аналитического оборудования принимается пользователем. Если в методике приведён объём задержки, использованный при разработке методики, то интервалы времени (t), указанные в таблице градиента, можно заменить адаптированными интервалами времени (tc), рассчитанными с помощью уравнения:

где D – объём задержки градиента, мл;
D0 – объём задержки градиента, использованный при разработке методики, мл;
F – скорость потока, мл/мин.

Изократическая стадия, введённая с целью адаптации системы, может быть исключена, если имеются данные валидации по применению методики без неё.

Длина волны детектора: изменения не допускаются.

Объём вводимой пробы. При изменении размеров колонки для корректировки объёма ввода пробы можно использовать следующее уравнение:

где V1 – объём ввода пробы, указанный в методике, мкл;
V2 – скорректированный объём ввода пробы, мкл;
L1 – длина колонки, указанная в методике, мм;
L2 – длина используемой колонки, мм;
dc1 - внутренний диаметр колонки, указанный в методике, мм;
dc2 – внутренний диаметр используемой колонки, мм.

Это уравнение может быть неприменимо при замене колонок с полностью пористыми частицами на колонки с поверхностно-пористыми частицами.

Даже при отсутствии изменения размеров колонки объём ввода пробы может быть изменён при условии, что критерии пригодности системы остаются в пределах установленных границ приемлемости. При уменьшении объёма ввода пробы особое внимание уделяется пределу обнаружения и повторяемости площади (высоты) пика. Увеличение объёма ввода допустимо при условии, что линейность отклика и разрешение пиков остаются удовлетворительными.

Газовая хроматография

Неподвижная фаза:

- размер частиц: максимальное уменьшение на 50 %, увеличение не допускается (набивные колонки);

- толщина плёнки: от –50 % до +100 % (капиллярные колонки).

Размеры колонки:

- длина колонки: от –70 % до +100 %;

- внутренний диаметр колонки: ±50 %.

Температура колонки: ±10 %.

Температурная программа: допускается регулировка температуры, как указано выше; допускается регулировка скорости изменения температуры и времени выдержкипри постоянной температуре до ±20 %.

Скорость потока: ±50 %.

Объём вводимой пробы: может быть изменён при условии выполнения требований пригодности системы. При уменьшении объёма ввода или увеличении деления потока особое внимание уделяется пределу обнаружения и повторяемости площади пика определяемого вещества. Увеличение объёма ввода или уменьшение деления потока допускается при условии, что линейность отклика и разрешение пиков остаются удовлетворительными.

Температура испарителя и линии передачи в условиях статического парофазного анализа: ±10 °C, при условии отсутствия разложения или конденсации.

Сверхкритическая флюидная хроматография

Состав подвижной фазы: для наполненных колонок количество растворителя, содержание которого в смеси наименьшее, может изменяться в пределах ±30 % (относительное изменение) или ±2 % (абсолютное изменение) в зависимости от того, какая из величин будет больше; для систем с капиллярной колонкой изменения не допускаются.

Длина волны детектора: изменения не допускаются.

Параметры колонки:

Неподвижная фаза:

- размер частиц: максимальное уменьшение на 50 %, увеличение не допускается (набивные колонки).

Размер колонки:

- длина колонки: ±70 %;

- внутренний диаметр колонки: ±25 % (набивные колонки), ±50 % (капиллярные колонки).

Скорость потока: ±50 %.

Температура: ±5 °C, если температура указана в фармакопейной статье.

Объём вводимой пробы: может быть уменьшен при условии, что чувствительность фактически применяемой хроматографической системы (предел количественного определения) и прецизионность системы в условиях повторяемости для определяемых соединений остаются удовлетворительными; увеличение не допускается.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.2.0002 Хроматография на бумаге

Взамен ОФС.1.2.1.2.0002.15

Хроматография на бумаге представляет собой процесс перемещения подвижной фазы по капиллярам и по поверхности листа фильтровальной бумаги.

В качестве неподвижной фазы выступает сама бумага, либо вещества, предварительно нанесённые на её волокна. Основными механизмами, лежащими в основе хроматографии на бумаге, являются распределительный и адсорбционный. Перемещение подвижной фазы происходит либо только под действием капиллярных сил (восходящая хроматография), либо под действием капиллярных сил и силы тяжести (нисходящая хроматография).

При хроматографировании испытуемый образцы образуют на бумаге зоны адсорбции в виде круглых или овальных пятен или полос в зависимости от способа нанесения (в точку или полосой). Совокупность зон адсорбции, полученных при хроматографировании данного испытуемого образца, называется хроматограммой.

###### Область применения

Бумажная хроматография может использоваться для установления подлинности, чистоты и количественного определения испытуемого образца.

Подлинность подтверждается при одновременном хроматографировании на одном листе бумаги испытуемого и стандартного образцов. Если образцы идентичны, то соответствующие им зоны адсорбции на хроматограммах имеют одинаковый вид и равные значения Rf (ОФС «Хроматография»). Для идентификации иногда целесообразно хроматографировать смесь равных количеств испытуемого и стандартного образцов. На хроматограмме должно наблюдаться одно пятно, характеризующее зону адсорбции. Условия хроматографирования подбирают так, чтобы значения Rf были отличны от 0 и не превышали 1. Кроме того, для подтверждения подлинности испытуемого образца могут быть использованы конкретные условия его детекции, указанные в фармакопейной статье.

При испытаниях на чистоту примеси и основное вещество должны иметь разные значения Rf. О степени чистоты испытуемого образца можно судить по величине и интенсивности окраски (или поглощения) обнаруживаемых на хроматограмме зон адсорбции примесей. Содержание примесей может быть определено полуколичественно. Для этого на одном листе бумаги одновременно хроматографируют определённое количество испытуемого образца и несколько образцов определяемой примеси (свидетеля) c различными, точно известными концентрациями. Содержание примеси в испытуемом образце оценивают, сравнивая её зону адсорбции на хроматограмме по совокупности площади зоны адсорбции и интенсивности окраски (или поглощения) с зонами адсорбции свидетеля.

Для количественного анализа применяют специальные приборы, позволяющие проводить измерения в ультрафиолетовой и видимой областях спектра. Для обработки хроматограмм в видимой области спектра целесообразно использовать планшетные сканеры и соответствующее программное обеспечение.

можно также проводить количественное определение веществ после их экстракции с хроматограммы. Для этого зоны адсорбции вырезают и экстрагируют определяемое вещество подходящим растворителем. Содержание испытуемого образца в извлечении или сухом остатке после отгонки растворителя находят любым методом, пригодным для определения малых концентраций и учитывающим строение испытуемого образца.

Проба испытуемой смеси может наноситься либо точечно на линию старта, либо в виде равномерной полосы вдоль всей линии старта, при этом первичная зона адсорбции будет иметь вид пятна, а во втором случае – полосы, параллельной линии старта.

###### Оборудование

Для проведения хроматографии на бумаге используют герметизированные камеры, изготовленные из инертного материала и позволяющие наблюдать за ходом процесса разделения при закрытой крышке камеры. Часто в качестве камер используют стеклянные стаканы или цилиндры с пришлифованной крышкой и дополнительно герметизированные. На крышке могут быть входные отверстия (шлюзы) для добавления растворителя или снятия избыточного давления в камере.

При проведении нисходящей хроматографии в верхней части камеры помещают сосуд для подвижной фазы (лодочку). Лодочка должна вмещать объём подвижной фазы, достаточный для проведения, по крайней мере, однократного хроматографирования. Длина лодочки должна превышать ширину листа хроматографической бумаги. Камера должна быть снабжена устройствами для закрепления листа хроматографической бумаги в рабочем положении и для ввода в лодочку подвижной фазы.

При проведении восходящей хроматографии подвижную фазу помещают либо в лодочку, установленную в нижней части камеры, либо наливают на дно камеры.

При соответствующем указании в фармакопейной статье внутренние стенки камеры обкладывают фильтровальной бумагой, что способствует более быстрому и полному её насыщению парами растворителей, входящих в состав подвижной фазы.

Подготовку оборудования, хроматографической бумаги и подвижной фазы приводят в фармакопейных статьях.

###### Методика

Бумажная хроматография может быть одномерной и двумерной.

Одномерная бумажная хроматография предполагает точечное нанесение или нанесение в виде полосы пробы исследуемой смеси на линию старта и последующее хроматографирование в одном направлении (рис. 1).

Рисунок 1. Примерная схема одномерной бумажной хроматографии

Двумерная хроматография предполагает последовательное прохождение подвижной фазы в двух перпендикулярных направлениях, что позволяет обеспечить более чёткое разделение смеси испытуемого образца (рис. 2).

Рисунок 2. Примерная схема двумерной бумажной хроматографии

Нисходящая хроматография. На дно хроматографической камеры помещают неподвижную или подвижную фазу в количестве, достаточном для образования слоя глубиной 2,5 см. Камеру закрывают и оставляют для насыщения на 24 ч при постоянной комнатной температуре. В отдельных случаях, при использовании достаточно летучих растворителей, это время может быть сокращено.

Растворы веществ наносят на линию старта микропипеткой или микрошприцем так, чтобы расстояние между точками нанесения отдельных проб было не менее 3 см. Если минимальное, необходимое для проведения хроматографирования количество испытуемого раствора может образовывать на бумаге первичную зону адсорбции в виде пятна, превышающего в диаметре 10 мм, нанесение проводят в несколько приёмов, предотвращая путём подсушивания чрезмерную диффузию на линии старта. После нанесения растворов испытуемых веществ и высыхания образовавшейся при этом первичной хроматограммы полосу бумаги закрепляют в рабочем положении в камере, не касаясь её стенок, и оставляют на 1,5 ч. В рабочем положении полоса хроматографической бумаги должна висеть вертикально так, чтобы между её верхним концом, погружённым в лодочку, и линией старта был лишь один, по возможности плавный, перегиб. По окончании выдержки начинают хроматографирование, для чего в лодочку вливают подвижную фазу. Хроматографирование обычно заканчивают при приближении фронта подвижной фазы к нижнему концу полосы бумаги. Если в фармакопейной статье нет специальных указаний, полосу вынимают из камеры и сушат на воздухе, отметив графитовым карандашом конечное положение фронта подвижной фазы. Детекцию зон адсорбции осуществляют согласно указаниям фармакопейной статьи.

Восходящая хроматография. Для проведения восходящей хроматографии на бумаге используют камеры, в которых сосуд (лодочка) с подвижной фазой располагается в нижней части или на дне. Полоса хроматографической бумаги закрепляется в верхней части камеры так, чтобы обеспечить возможность погружения нижнего конца полосы в лодочку с подвижной фазой. В рабочем положении полосы линия старта должна отстоять от поверхности подвижной фазы на 2–3 см. В остальном приёмы работы при проведении восходящей хроматографии на бумаге не отличаются от описанных выше.

###### Подготовка фаз и бумаги

При приготовлении несмешивающихся систем растворителей, совместно используемых при хроматографии в качестве подвижной и неподвижной фазы, необходимо обеспечить их взаимное насыщение, например, путём встряхивания в делительной воронке. При этом в фармакопейной статье должно быть указано, какую из фаз используют для хроматографирования.

Фильтровальную бумагу нужной плотности квалификации «для хроматографии» разрезают в направлении волокон, на листы (полосы), длина которых приблизительно равна высоте камеры. Ширина этих полос может быть приблизительно определена по формуле:

где:
А – ширина полосы (см);
К – количество хроматограмм на полосе.

На каждой полосе бумаги для обозначения мест нанесения хроматографируемых веществ графитовым карандашом проводят прямую линию, называемую линией старта. Расстояние от конца полосы бумаги до линии старта выбирается так, чтобы при погружении бумаги в лодочку исключалось непосредственное соприкосновение нанесённых на линию старта веществ с жидкостью, находящейся в лодочке.

На приготовленные таким образом листы фильтровальной бумаги, если указано в фармакопейной статье, наносят неподвижную фазу. Для этого соответствующие труднолетучие растворители (формамид, пропиленгликоль и т.п.) смешивают с легколетучими растворителями и в полученную смесь на 1–2 с погружают подлежащие обработке листы бумаги. Избыток смеси с поверхности листов снимают, обжимая их между двумя слоями фильтровальной бумаги, после чего летучий компонент смеси удаляют высушиванием на воздухе в течение 15–20 мин.

Если в качестве неподвижной фазы рекомендован водный раствор нелетучих веществ, то бумагу обрабатывают этим раствором, сушат, как указано выше, а перед хроматографированием выдерживают в камере, содержащей пары воды. Нанесение на бумагу легколетучих компонентов неподвижных фаз осуществляется путём выдерживания её в парах фазы в камере непосредственно перед хроматографированием.

###### Детекция зон адсорбции

По окончании хроматографирования хроматограммы подсушивают до удаления следов растворителей и просматривают в видимом или ультрафиолетовом свете (при определенной длине волны детектора, указанной в фармакопейной статье), отмечая при этом зоны адсорбции. В ряде случаев для обнаружения зон адсорбции хроматограмму подвергают обработке специальными реагентами, образующими с испытуемыми образцами окрашенные продукты реакции, путём опрыскивания или погружения в раствор реагента.

Способ детекции зон адсорбции должен быть обязательно указан в соответствующей фармакопейной статье на лекарственное средство.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.2.0003 Тонкослойная хроматография

Взамен ОФС.1.2.1.2.0003.15

Тонкослойная хроматография (ТСХ, TLC) – вид хроматографии, основанный на различии в скорости перемещения компонентов смеси в плоском тонком слое сорбента при их движении в потоке подвижной фазы. Разделение происходит по адсорбционному, распределительному или ионообменному механизму, или какой-либо их комбинации.

###### Область применения

ТСХ используется для исследования как однокомпонентных, так и многокомпонентных лекарственных средств при испытаниях на подлинность (идентификация анализируемых веществ), родственные примеси (испытание на чистоту) полуколичественным и количественным методами, а также, иногда, для количественного определения анализируемых веществ.

###### Метод

ТСХ включает следующие этапы: подготовка образца, подготовка хроматографических пластин, подготовка хроматографической камеры, нанесение образца, элюирование анализируемых веществ, удаление элюата (подвижной фазы) с пластины, детектирование и идентификация компонентов, исследование на родственные примеси и количественное содержание.

Хроматографическое разделение осуществляется в результате движения анализируемых веществ в тонком слое (неподвижной фазе), растворенных в растворителе или соответствующей смеси растворителей (подвижная фаза, элюент). При разделении вещества образуют на поверхности сорбента зоны адсорбции в виде круглых или эллипсовидных пятен, или полос.

Адсорбционная ТСХ основана на сорбции растворенного вещества поверхностью сорбента.

В распределительной ТСХ пористый носитель, закрепленный на пластинке, пропитывается неподвижным растворителем, который удерживает распределяемые вещества.

В ионообменной ТСХ разделение основано на различной способности ионов смеси обмениваться на одноименно заряженные ионы твёрдого сорбента – ионита.

Нанесение проб

Осуществляют двумя способами: в виде пятен диаметром 2–5 мм и в виде горизонтальных полос длиной 10–20 мм и шириной 1–2 мм с промежутком между пятнами или полосами не менее 10 мм. При большем размере пятна, происходит изменение его формы, и границы разделяемых компонентов могут перекрываться. В процессе нанесения проб недопустимо повреждение слоя сорбента на линии старта.

Расстояние до линии старта от нижнего края пластинки должно составлять не менее 10–20 мм. Расстояния на стартовой линии от боковых краёв пластинки до мест нанесения первой и последней проб должны составлять не менее 10 мм.

В некоторых случаях для нанесения используют шаблоны или трафареты, которые предназначены для предварительной разметки пластин или для нанесения проб на пластины вручную через специальные отверстия.

Для исключения так называемого «краевого эффекта» боковые края пластинок на стеклянной подложке очищают от сорбента на расстояние около 0,5 см, а нижние углы пластинок на алюминиевой или пластиковой подложке срезают.

Для исключения ошибок и получения воспроизводимых результатов следует наносить на одной пластинке равные объёмы веществ (мкл). В методике испытания должны быть указаны количества нанесенных веществ в мкл и мкг.

Подсушивание проб осуществляют в токе холодного или тёплого воздуха, либо на специальном столе с электроподогревом.

В случае использования в методике наряду с обычными пластинками высокоэффективных пластинок, условия нанесения проб должны быть указаны в квадратных скобках.

В зависимости от направления движения подвижной фазы и от положения пластинки с сорбентом в хроматографической камере используют следующие способы элюирования: восходящее (двукратная, многократная, двумерная хроматография), горизонтальное, радиальное.

Восходящая хроматография

Этот вид хроматографии наиболее распространен в фармацевтическом анализе и основан на том, что фронт подвижной фазы поднимается по пластинке снизу вверх под действием капиллярных сил.

Метод восходящей тонкослойной хроматографии имеет ряд своих недостатков. Например, скорость поднятия фронта по пластинке происходит неравномерно, т.е. в нижней части она самая высокая, а по мере поднятия фронта уменьшается. Это связано с тем, что в верхней части камеры насыщенность парами растворителя меньше, поэтому растворитель с хроматографической пластинки испаряется интенсивнее, следовательно уменьшается его концентрация и скорость движения замедляется. Для устранения этого недостатка по стенкам хроматографической камеры прикрепляют полоски фильтровальной бумаги, либо выкладывают стенки камеры фильтровальной бумагой с трёх сторон, по которой поднимающаяся хроматографическая система насыщает парами камеру по всему объёму. Недостатком также можно считать необходимость следить за фронтом растворителя, так как возможно «убегание» линии фронта растворителя до верхнего края. В таком случае определить действительное значение Rf уже не представляется возможным.

Если не указано иначе в методике испытания, пластинку с нанесёнными пробами помещают вертикально в камеру. При необходимости камеру предварительно насыщают парами подвижной фазы (в этом случае в методике испытания должно быть указано время насыщения). Для этого перед проведением испытания обычно внутренние стенки камеры выкладывают фильтровальной бумагой, смоченной подвижной фазой. Уровень подвижной фазы должен быть расположен ниже линии старта. Камеру закрывают и проводят процесс при 20–25 °С в защищённом от света месте. После прохождения фронтом подвижной фазы расстояния, указанного в методике испытания, пластинку вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, проявляют и детектируют зоны адсорбции указанным способом.

Двумерная хроматография. После хроматографирования в одном направлении пластинку сушат и затем хроматографируют в направлении с поворотом пластинки на 90° или на 180°.

Нисходящая хроматография

Этот метод хроматографии основан на опускании фронта хроматографической системы по пластинке, в основном под действием сил тяжести, т.е. фронт подвижной фазы движется сверху вниз.

В верхней части хроматографической камеры крепится кювета с хроматографической системой, из которой с помощью фитиля на хроматографическую пластинку поступает растворитель, который стекает и происходит хроматографирование исследуемого образца.

К недостаткам метода можно отнести усложнение оборудования. Метод используется в основном в бумажной хроматографии.

Горизонтальная хроматография

Применяется для разделения веществ с близкими значениями Rf. Пластинку с нанесёнными пробами помещают в камеру и направляют поток подвижной фазы из лотка в камеру согласно инструкции к прибору для горизонтального элюирования. Процесс проводят при 20–25 °С одновременно с противоположных сторон пластинки, в том случае, если в методике испытания нет иных указаний. Когда подвижная фаза пройдёт расстояние, указанное в методике испытания, пластинку вынимают, сушат до удаления следов растворителей, проявляют и детектируют зоны адсорбции.

К достоинствам метода можно отнести то, что в горизонтальной кювете насыщение парами системы происходит гораздо быстрее, скорость движения фронта постоянная.

Радиальная хроматография

Заключается в нанесении исследуемого вещества в центр пластинки и туда же подаётся система, которая движется от центра к краю пластинки.

Визуальная обнаружение (детектирование) зон адсорбции

Осуществляют следующими способами:

- в видимом и ультрафиолетовом свете (при определённой длине волны);

- опрыскиванием растворами обнаруживающих реагентов;

- выдерживанием в парах обнаруживающего реагента;

- погружением в растворы обнаруживающих реагентов с использованием для этих целей специальных камер.

Для просмотра хроматографических пластинок используют ультрафиолетовое освещение двух типов:

- длинноволновое, с длиной волны 365 нм, под которым разделённые вещества на пластинах флуоресцируют на тёмном фоне яркими пятнами, часто разного цвета;

- коротковолновое, с длиной волны 254 нм, под которым вещества, поглощающие свет, становятся видимыми как тёмные пятна на ярком зелёном или синем фоне пластины, содержащей УФ-индикатор.

Для просмотра хроматограмм используются ультрахемископы с УФ лампами с длинами волн 254 нм и 365 нм.

При проведении анализов расстояние между лампой и хроматографической пластинкой не должно превышать расстояния, используемого при проверке работы лампы.

Примечание – Используемый спирт должен быть свободен от флуоресцирующих веществ.

###### Оборудование

1. Хроматографические пластинки с закреплённым слоем сорбента (неподвижной фазы) различных модификаций.

2. Хроматографические камеры.

3. Оборудование для нанесения веществ на хроматографическую пластинку: калиброванные капилляры и микрошприцы, шаблоны, трафареты, полуавтоматическое или автоматическое устройство для точного и воспроизводимого нанесения необходимого количества вещества в определённом месте пластинки.

4. Оборудование для сушки пластинок: фен, сушильный шкаф, плитка или специальный столик для сушки пластинок.

5. Оборудование для проявления хроматограм:

   - ультрахемископы с УФ-лампами с длиной волны 254 и 365 нм;

   - пульверизаторы: с резиновой грушей или электропневматический (с использованием сжатого воздуха);

   - спрей-камера для орошения (опрыскивания) хроматограмм различными детектирующими реагентами;

   - фотометр (денситометр) для количественных измерений непосредственно на хроматографической пластинке.

6. Системы обработки и хранения данных.

Хроматографические пластинки

Пластинка для ТСХ представляет собой твёрдую подложку (стеклянную, металлическую или полимерную) с нанесённым слоем сорбента, толщина слоя сорбента от 0,10 до 0,25 мм для аналитического варианта и от 0,5 до 2,0 мм для препаративного. Готовые хроматографические пластинки могут содержать флуоресцентный индикатор (зелёного или синего цвета) для детектирования веществ, поглощающих в ультрафиолетовой области спектра при 254 нм и 365 нм.

Выбор сорбента ТСХ зависит от вида хроматографии. В адсорбционной ТСХ в качестве сорбентов применяют модифицированный и немодифицированный силикагели, оксид алюминия, целлюлозу. В распредилительной ТСХ неподвижная фаза может быть гидрофильная - силикагель, целлюлоза, или гидрофобная – тефлон, полиэтилен, поливинилхлоид. В ионообменных хроматографических пластинках в качестве адсорбента используют ионообменные смолы, содержащие четвертичный аммоний или активные сульфогруппы, специальные сорта ионообменной целлюлозы, а также иониты на основе сефадексов - сшитых декстранов, участвующие в ионном обмене.

Вышеперечисленные сорбенты являются наиболее распространенными, но помимо этих существуют множество веществ, используемых как сорбенты – тальк, сульфат кальция, крахмал и т.д., которые также могут быть модифицированы для придания им новых сорбционных свойств (пропитка сорбентов реактивами, например AgNO3, создание пластин с обращённой фазой). Для закрепления сорбента применяют гипс, крахмал, силиказоль и др., которые удерживают зерна сорбента на подложке. Толщина слоя может быть различна (0,1 мм и более), но самый важный критерий – слой должен быть равномерный по толщине в любом месте хроматографической пластинки.

Размер частиц сорбента для классического аналитического варианта ТСХ составляет 10–20 мкм. Наряду с такими пластинками можно использовать пластинки для высокоэффективной тонкослойной хроматографии, содержащие сорбент с частицами размером 5–7 мкм. Такие пластинки позволяют увеличить эффективность разделения и уменьшить предел обнаружения.

выпускаются также пластинки с монолитными сорбентами и пластинки с концентрирующей зоной (двухфазовые пластинки), разделение на которые основано на различных свойствах двух сорбентов: инертного концентрирующего силикагеля с большими порами в зоне нанесения пробы и селективно разделяющего силикагеля. Такие пластинки применяются в фармацевтическом испытании для разделения сложных и гетерогенных смесей (экстракты из лекарственного растительного сырья, растворы таблеток со вспомогательными компонентами, мягкие лекарственные формы, смеси, содержащие пигменты, суспензии и др.).

Предварительная подготовка пластинок. В некоторых случаях перед хроматографированием предусмотрена предварительная обработка пластинок.

Очистка пластинок от сорбированных примесей – обычно проводится погружением в какой-либо органический растворитель (метанол, диэтиловый эфир), либо элюированием пластинки в этих растворителях (в последнем случае эффективность отмывки выше).

Импрегнирование пластинок органическими или неорганическими растворителями для изменения сорбционных свойств слоя сорбента проводится погружением, опрыскиванием или предварительным элюированием импрегнирующим раствором.

Активирование пластинок предназначено для удаления связанной воды из слоя сорбента, как правило, проводится путём нагревания пластинок в сушильном шкафу в течение 1 ч при температуре 100–105 °C.

Чрезмерное нагревание может привести к удалению химически связанной воды и необратимому изменению свойств сорбента. Активированные пластинки по сравнению с неактивированными пластинками, обладают бо́льшими удерживающими свойствами, подвижность веществ на них замедляется.

Хроматографические камеры

Используют хроматографические камеры для вертикального или горизонтального элюирования с герметичными крышками.

Камера для вертикального элюирования с плоским дном позволяет проводить процедуру хроматографирования в условиях частичного или полного насыщения атмосферы камеры парами подвижной фазы. Размер камер предназначен для пластин разных стандартных размеров: 10 × 10 см, 15 × 15 см и 20 × 20 см.

Камера для горизонтального элюирования снабжена устройствами для подачи подвижной фазы на пластинку. Использование камеры для горизонтального элюирования, за счёт нанесение треков с двух сторон, позволяет осуществлять одновременное элюирование с противоположных сторон пластинки, что увеличивает производительность испытания в два раза, а расход подвижной фазы меньше приблизительно в 10 раз, по сравнению с использованием камеры для вертикального элюирования. В горизонтальной камере движение подвижной фазы по пластинке происходит только за счёт капиллярных сил, вклад гравитации при этом отсутствует, что повышает эффективность разделения по сравнению с камерами для вертикального элюирования.

Двужелобковая камера позволяет не только уменьшить расход подвижной фазы, но и использовать дополнительный желоб, в случае необходимости, для насыщения камеры другим растворителем (аммиаком, ацетоном и др.).

Камера для окрашивания пластин и камера для проявления в парах йода – плоские стеклянные камеры, предназначенные для окрашивания хроматографических пластинок растворами реагентов в легколетучих растворителях методом погружения. Камеры позволяют равномерно по площади окрасить поверхность пластины, потребляют малое количество детектирующего реагента. Размер камер предназначен для пластин размером 10 × 10 и 15 × 15 см.

Оборудование для проявлений хроматограмм

Пульверизатор для агрессивных жидкостей предназначен для работы с агрессивными жидкостями (например, концентрированные кислоты и щелочи). Пульверизатор может работать как с использованием резиновой груши (маловязкие жидкости), так и с использованием сжатого воздуха, что позволяет распылять вязкие жидкости.

Пульверизатор для маловязких жидкостей работает с использованием резиновой груши; используют для распыления маловязких и неагрессивных жидкостей, т.е. водных и спиртовых растворов.

Спрей-камера предназначена для окрашивания хроматограмм методом орошения (опрыскивания) различными детектирующими реагентами; устойчива к агрессивным средам, что гарантирует безопасность процесса распыления вредных веществ для организма человека. Камера, по желанию, может быть укомплектована гибкой трубой для соединения с вытяжной вентиляцией.

Сушка пластин после хроматографирования. После процесса разделения исследуемых веществ, пластинки сушат. Если в состав подвижной фазы входят только легкокипящие компоненты, то достаточно естественной сушки в течение 3–5 мин. Если же в состав подвижной фазы входят высококипящие жидкости (спирты, вода, органические кислоты и т.д.), сушку пластин нужно проводить не менее 10 мин (до удаления запаха растворителей), возможно использование фена (теплый воздух) или специальной плитки (столика) для сушки пласстин, или сушильного шкафа.

###### Растворители для наносимых веществ

При выборе растворителей в ТСХ пользуются любым известным элюотропным рядом, в котором растворители расположены в соответствии с увеличивающейся элюирующей силой, т.е. в порядке возрастания полярности. Использование полярных растворителей препятствует чрезмерному концентрированию вещества в точке за счёт размывания вещества в стартовом пятне.

Требования к растворителям:

- полная растворимость испытуемых веществ в растворителе или полная нерастворимость в случаях, когда необходимо, чтобы растворились отдельные компоненты испытуемого образца;

- хорошая смачиваемость слоя сорбента;

- химическая чистота;

- относительная летучесть, необходимая для быстрого удаления с пластины.

###### Подвижные фазы

Подвижные фазы (ПФ) должны быть предпочтительно малотоксичными, содержать минимум компонентов, не вступать в химические реакции ни с сорбентом (неподвижной фазой), ни с компонентами разделяемой смеси (за исключением специальных добавок для улучшения детектирования веществ). ПФ также должны достаточно быстро испаряться с поверхности хроматограмм после элюирования.

Для подавления диссоциации полярных молекул компонентов разделяемой смеси к подвижной фазе добавляют вещества кислого или основного характера (модификаторы).

Для получения воспроизводимых результатов ПФ для каждого эксперимента следует готовить вновь, поскольку растворители испаряются. В этом случае можно приготовить рассчитанный больший объём ПФ (с небольшим запасом) и для каждого эксперимента отбирать от него необходимую порцию.

###### Проверка пригодности хроматографической системы

Для получения воспроизводимых результатов при определении подлинности, родственных примесей, количественного содержания методом ТСХ устанавливают пригодность хроматографической системы.

Для этой цели определяют:

- чувствительность хроматографической системы, которая считается удовлетворительной, если зона адсорбции чётко обнаруживается на хроматограмме стандартного раствора основного вещества/примеси или раствора сравнения наименьшей концентрации, соответсвующей чувствительности системы (пределу количественного определения) наиболее разбавленного раствора основного вещества/примеси или раствора сравнения;

- разделительная способность – зоны адсорбции примесей должны быть чётко отделены от зоны адсорбции основного вещества и друг от друга.

Положение каждой зоны адсорбции характеризуется величиной Rf, которая является индивидуальной характеристикой соединения, хроматографируемого в условиях опыта, и изменяется от 0 до 1. Оптимальным для практической ТСХ является интервал изменения Rf от 0,2 до 0,8. Наиболее точной величиной для оценки разделительной способности хроматографической системы является величина Rst – отношение величины Rf одного вещества к величине Rf другого (ОФС «Хроматография»).

Требования к оценке пригодности хроматографической системы системы должны быть приведены в методике испытания.

Критерии оценки пригодности системы, а также допустимые пределы изменения параметров хроматографической системы для выполнения условий пригодности описаны в ОФС «Хроматография».

Идентификация

Испытание на подлинность (идентификация) анализируемых веществ проводится при одновременном хроматографировании одинакового количества анализируемого вещества и стандартного образца на одной и той же хроматографической пластинке. Основную зону адсорбции (пятно или полосу) на хроматограмме испытуемого раствора сравнивают с основной зоной адсорбции (пятном или полосой) на хроматограмме стандартного раствора (раствора сравнения) по положению на пластинке (значению фактора Rf), размеру, нтенсивности окраски, поглощения или флуоресценции в УФ свете.

Испытание на родственные примеси

При испытаниях на чистоту основное вещество и примеси в условиях хроматографирования должны иметь разные значения Rf. При этом о степени чистоты испытуемого вещества можно судить по величине и интенсивности зон адсорбции обнаруживаемых на хроматограмме примесей. Их содержание может быть определено полуколичественно. Для этого на пластинку наносят определенное количество испытуемого вещества – свидетеля или стандартного образца.

Для определения идентифицированных примесей в качестве свидетелей используют стандартные образцы идентифицированных примесей в количествах, соответствующих их предельно допустимому содержанию. Для определения неидентифицированных примесей чаще всего используют растворы сравнения, приготовленные путём разведения испытуемого раствора или раствора стандартного образца.

В некоторых случаях при отсутствии стандартных образцов примесей используют метод разложения основного вещества при определенных условиях, либо другой метод получения примеси при одновременно протекающей реакции ее образования «in situ» (условия должны быть указаны в методике испытания).

Наличие или отсутствие примесей в анализируемом лекарственном средстве может быть оценено:

- при сравнии зон адсорбции примесей по совокупности величины и интенсивности поглощения или окраски с соответствующими зонами адсорбции на хроматограмме свидетелей. Дополнительное пятно (пятна) на хроматограмме испытуемого раствора сравнивают визуально с дополнительным пятном (пятнами) на хроматограмме стандартного раствора, содержащего примесь (примеси), или с пятном на хроматограмме раствора сравнения, приготовленного из разбавленного испытуемого раствора;

- при сравнении зон адсорбции с определенным (рассчитанным) количеством основного вещества, взятого в качестве свидетеля (наносят шкалу из растворов основного вещества разной концентрации; используют, когда чувствительности обнаружения испытуемого вещества и стандартного образца примеси близки);

- по отсутствию посторонних пятен на хроматограмме испытуемого вещества при нанесении его в соответствующем количестве (менее объективный способ).

Количественное определение веществ в ТСХ

Осуществляют двумя способами:

- основано на том, что площадь и интенсивность окраски зон адсорбции пропорциональны количеству вещества. При этом испытуемое вещество (пятно) вымывают из слоя сорбента после механического вырезания зоны и полученный раствор анализируют каким-либо методом, например, спектрофотометрическим (полуколичественное определение);

- непосредственно на хроматограмме, используя инструментальные методы, такие как фотоденситометрия, флуориметрия. Фотоденситометрия основана на количественном сканировании окрашенных зон лучём монохроматического света и измерении доли поглощённого или отражённого веществом света. Электрический сигнал регистрируется в виде кривых. Количество вещества находят по величине площади пика.

Вещества, содержащие радионуклиды, могут быть количественно определены непосредственно на пластинке с использованием соответствующего счётчика радиоактивных веществ, а также удалением неподвижной фазы в районе зон адсорбции и измерением радиоактивности с использованием жидкостного сцинциляционного счётчика.

###### Высокоэффективная тонкослойная хроматография

По сравнению с классической ТСХ использование высокоэффективных пластинок позволяет:

- увеличить число испытуемых проб за счёт уменьшения размеров зон адсорбции первичной хроматограммы: диаметра пятен (до 1–2 мм) или длины полос (до 5–10 мм);

- значительно увеличить разделительную способность системы;

- снизить пределы обнаружения и количественного определения испытуемых веществ в 10–100 раз.

Эффективность разделения увеличивается как вследствие увеличения площади раздела подвижной и неподвижной фазы за счёт уменьшения диаметра частиц сорбента, так и благодаря большей однородности размеров этих частиц. Применяют пластинки для высокоэффективной тонкослойной хроматографии, выполненные как в нормально-фазовом (полярная неподвижная фаза), так и в обращённо-фазовом (неполярная неподвижная фаза) вариантах, содержащие сорбент с частицами размером 5–7 мкм.

Применение высокоэффективной тонкослойной хроматографии обеспечивает получение более компактных зон адсорбции разделяемых соединений, что улучшает метрологические характеристики количественного определения с помощью сканирующей хроматоденситометрии.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.2.0004 Газовая хроматография

Взамен ОФС.1.2.1.2.0004.15

Газовая хроматография (ГХ) представляет собой метод хроматографического разделения, основанный на различном распределении веществ между двумя несмешивающимися фазами, в котором газ-носитель, являющийся подвижной фазой, проходит через неподвижную фазу, находящуюся в колонке. Метод применим к веществам или их производным, летучим при используемых температурах.

Газовая хроматография основана на механизмах адсорбции или распределения по массам.

###### Область применения

Газовую хроматографию используют для оценки чистоты, установления подлинности и количественного определения лекарственных средств в испытаниях по показателям «Посторонние примеси», «Однородность дозирования», «Растворение», «Количественное определение», «Остаточные органические растворители» и др.

###### Оборудование

Газовый хроматограф состоит из устройства ввода пробы (инжектора), хроматографической колонки, помещённой в термостат, одного или нескольких детекторов и регистрирующего устройства (интегрирующее устройство со специальным программным обеспечением или самописцем).

Газ-носитель проходит с заданной скоростью или давлением через колонку, а затем через детектор.

Хроматографирование проводят при постоянной температуре или в соответствии с заданной температурной программой.

Устройство ввода пробы

Ввод жидкой пробы осуществляют либо непосредственно в начало колонки с использованием шприца или инжекторного клапана, либо в испаритель, который оснащён делителем потока.

Ввод газообразной пробы осуществляют непосредственно в колонку с помощью соответствующего крана-дозатора, который оснащён дозирующей петлей и делителем потока. На вход крана дозатора пробу подают с помощью газоплотного шприца или напрямую из источника анализируемого газа с помощью регулятора давления (редуктора или вентиля точной регулировки).

Ввод паровой фазы осуществляют с использованием статической или динамической системы ввода.

Статическая парофазная система ввода включает термостатируемую нагревающую камеру для образцов, в которую помещены закрытые флаконы с твёрдыми или жидкими образцами на фиксированный период времени, позволяющая летучим компонентам образца достичь равновесия между негазовой и паровой фазами. После достижения равновесия заданное количество паровой фазы из флаконов вводят в газовый хроматограф.

Динамическая парофазная система ввода (продувка и улавливание) включает барботажную установку, при помощи которой летучие вещества в растворе продувают газом-носителем через поглотительную трубку (ловушку) при невысокой температуре. Удерживаемые вещества затем десорбируются в подвижную фазу при быстром нагревании поглотительной трубки.

Колонки

Используют несколько типов хроматографических колонок: насадочные (набивные), микронасадочные, капиллярные, поликапиллярные.

Насадочные колонки изготавливают из металла (обычно нержавеющая сталь), стекла, фторопласта, которым придают спиральную форму. Внутренний диаметр насадочных колонок составляет от 2 до 4 мм, а длина – от 0,5 до 4–5 м.

Микронасадочные колонки отличаются от насадочных колонок только диаметром трубок, равным 0,5–1,0 мм. Длина таких колонок обычно от 0,5 до 2 м.

Капиллярные колонки изготавливают из плавленого кварца или металла. Внутренний диаметр составляет от 0,10 мм до 0,53 мм, длина не менее 5 м, толщина неподвижной жидкой фазы от 0,1 мкм до 5,0 мкм.

Поликапиллярные колонки представляют собой пакеты параллельно работающих капилляров, внутренний диаметр которых составляет около 40 мкм, длина до 1 м, общим числом до 1000 и более.

Неподвижные фазы

Газовую хроматографию подразделяют на два вида: газоадсорбционную и газожидкостную хроматографии. В фармацевтическом анализе наиболее распространена газожидкостная хроматография.

В газоадсорбционной хроматографии в качестве сорбентов (адсорбентов) используют неорганические (силикагель, графитированная термическая сажа, молекулярные сита – алюмосиликаты натрия и кальция) и полимерные пористые сорбенты.

В газожидкостной хроматографии неподвижная фаза (абсорбент) представляет собой жидкость, нанесённую на твёрдый носитель. Носитель – относительно инертный адсорбент с низкой удельной поверхностью, на которой должна удерживаться неподвижная фаза в виде плёнки равномерной толщины. Применяют минеральные и полимерные носители. Большинство минеральных носителей представляют собой переработанные диатомиты. Обычно используют носители с размерами частиц в интервалах от 125 до 150 мкм или от 150 до 180 мкм.

В капиллярных колонках слой сорбента наносят на внутреннюю поверхность капилляра в виде слоя жидкой неподвижной фазы или в виде слоя адсорбента, роль которого чаще всего выполняет полимерная плёнка.

Подвижная фаза

В качестве газа-носителя для насадочных колонок обычно используют гелий, азот и аргон, для капиллярных – азот, гелий и водород.

Скорость потока газа-носителя влияет на время удерживания и характеристики пика: время удерживания прямо пропорционально длине колонки, а разрешение пропорционально квадратному корню из длины колонки. Для набивных колонок скорость потока газа-носителя выражают в миллилитрах в минуту при атмосферном давлении и комнатной температуре. Скорость потока измеряют при рабочей температуре колонки на выходе из детектора с помощью калиброванного механического устройства или пенного измерителя. Линейная скорость газа-носителя через набивную колонку обратно пропорциональна корню квадратному из внутреннего диаметра колонки для заданного объёма потока. Скорости потока 60 мл/мин при внутреннем диаметре колонки 4 мм и 15 мл/мин при внутреннем диаметре 2 мм дают идентичные линейные скорости и, следовательно, близкие времена удерживания.

Детекторы

В зависимости от цели анализа применяют следующие типы детекторов: пламенно-ионизационный, электронного захвата, азотно-фосфорный, масс-спектрометрический, термокондуктометрический, ИК-спектрофотометрический с Фурье-преобразованием и другие.

Обычно используют пламенно-ионизационные детекторы. Выбор детектора определяется основными характеристиками (чувствительность, предел детектирования, линейность, быстродействие и селективность), которые в наибольшей степени соответствуют цели анализа и условиям его проведения.

###### Метод

Хроматографирование в газовой хроматографии проводят валидированными методиками в соответствии с установленными параметрами хроматографической системы.

В описании должны быть указаны: тип детектора, тип колонки (насадочная или капиллярная), материал и геометрические параметры колонки, сорбент (тип твёрдого носителя и его характеристики, неподвижная жидкая фаза и её количество), метод введения пробы и его параметры, температура испарителя, колонки и детектора, газ-носитель и его расход.

Оценка хроматографического разделения проводится на основании пригодности хроматографической системы, указанной в методике испытаний. Критерии оценки пригодности хроматографической системы описаны в ОФС «Хроматография».

Cтатическая парофазная газовая хроматография

Cтатическая парофазная газовая хроматография является наиболее подходящим методом для разделения и определения летучих соединений, которые присутствуют в твёрдых или жидких образцах. Метод основан на анализе паровой фазы, находящейся в равновесии с твёрдой или жидкой фазой.

Прибор

Состоит из газового хроматографа, снабжённого блоком для ввода испытуемого образца, который связан с модулем автоматического контроля давления и температуры. При необходимости используют устройство для удаления растворителей.

Испытуемый образец вносят во флакон, снабжённый подходящей пробкой и клапанной системой, которая регулирует прохождение газа-носителя. Флакон помещают в термостатируемую камеру с температурой, устанавливаемой в соответствии со свойствами испытуемого образца. Флакон выдерживают при заданной температуре в течение времени, достаточного для установления равновесия между твёрдой или жидкой фазой и паровой фазой.

Во флакон вводят газ-носитель и по истечении указанного времени открывают клапан, чтобы газ поступал в хроматографическую колонку, перенося с собой перешедшие в паровую фазу компоненты.

Вместо специально оснащённого блока для ввода проб хроматографа возможно использование газовых шприцов обычного хроматографа. Уравновешивание в таком случае проводят в отдельной термостатируемой камере, а паровую фазу вводят в колонку с соблюдением необходимых мер предосторожности для предотвращения любых изменений в равновесной системе.

Настраивают прибор для получения необходимого сигнала, используя подготовленные образцы сравнения.

Метод прямой калибровки

В одинаковые флаконы раздельно помещают испытуемый образец и каждый из образцов сравнения, приготовленные, как указано в методике испытаний, избегая контакта между блоком для ввода проб и образцами. Флаконы герметично закрывают и помещают в термостатируемую камеру с температурой и давлением, указанными в методике испытаний. После установления равновесия паровую фазу хроматографируют в указанных условиях.

Метод стандартных добавок

Равные объёмы испытуемого образца помещают в одинаковые подходящие флаконы. Во все флаконы, кроме одного, прибавляют указанные количества раствора сравнения, содержащего известную концентрацию определяемого вещества, для получения ряда образцов с равномерно увеличивающимися концентрациями этого вещества. Флаконы герметично закрывают и помещают в термостатируемую камеру с температурой и давлением, указанными в методике испытаний. После установления равновесия хроматографирование проводят в указанных условиях.

Уравнение линейной зависимости рассчитывают методом наименьших квадратов. По полученному уравнению вычисляют концентрацию определяемого вещества в испытуемом образце.

Допустимо определение концентрации с использованием графического метода. Для этого по оси ординат откладывают средние значения полученных результатов, а по оси абсцисс — концентрации стандартных добавок определяемого вещества. Экстраполируют линию, проходящую через полученные точки, до пересечения с осью абсцисс. Расстояние между этой точкой и началом координат представляет собой концентрацию определяемого вещества в испытуемом образце.

Метод последовательных отборов (многократная парофазная экстракция). При использовании многократной парофазной экстракции следуют методике испытаний.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.2.0005 Высокоэффективная жидкостная хроматография

Взамен ОФС.1.2.1.2.0005.15

Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) представляет собой вариант колоночной жидкостной хроматографии, в котором неподвижная фаза (сорбент) обычно состоит из частиц размером менее 10–20 мкм. Малый размер частиц необходим для высокой эффективности разделения, но увеличивает давление, требуемое для прокачивания подвижной фазы через колонку.

ВЭЖХ, в которой используют колонки с размером частиц неподвижной фазы около 2 мкм и менее называется сверхвысокоэффективной жидкостной хроматографией (СВЭЖХ).

###### Классификация

ВЭЖХ в зависимости от механизма разделения веществ может быть:

- адсорбционная – разделение происходит за счёт различной способности веществ адсорбироваться на поверхности сорбента с развитой поверхностью, например силикагеля;

- распределительная – разделение происходит за счёт различия коэффициентов распределения веществ между неподвижной и подвижной фазами;

- ионообменная – разделение основано на обратимом взаимодействии ионов веществ, с ионообменными группами сорбента;

- ион-парная – разделение происходит за счёт различия в способности веществ к образованию ионных пар и/или в коэффициентах распределения ионных пар между неподвижной фазой и подвижной фазой, содержащей сорбируемое ионогенное вещество (ион-парный реагент);

- эксклюзионная – разделение происходит в результате различия в размерах молекул веществ и/или их форме и способности проникать в поры неподвижной фазы;

- хиральная – разделение энантиомеров, которое происходит за счёт селективности их взаимодействия с хиральными компонентами (хиральными селекторами) неподвижной и/или подвижной фазы. Разделение оптических изомеров осуществляется на хиральных неподвижных фазах или на обычных ахиральных неподвижных фазах с использованием подвижных фаз с добавлением хиральных комплексов металлов, нейтральных хиральных лигандов, хиральных ион-парных реагентов и др.;

- другие, в соответствии с характером основных проявляющихся межмолекулярных взаимодействий (гидрофобных, лигандообменных, биоспецифических).

Адсорбционная ВЭЖХ в зависимости от типа подвижной и неподвижной фазы может быть:

- нормально-фазовая, где неподвижная фаза – полярная (чаще всего силикагель или силикагель с привитыми NH2- или CN-группами и др.), подвижная фаза – неполярная (гексан, либо смеси гексана с более полярными органическими растворителями – хлороформом, спиртами и т.д.); элюирующая способность подвижной фазы увеличивается с ростом её полярности и удерживание веществ растёт с увеличением их полярности;

- обращённо-фазовая, где неподвижная фаза – неполярная (гидрофобные силикагели с привитыми группами С4, С8, С18 и др.); подвижная фаза – полярная (смеси воды и полярных растворителей: ацетонитрила, метанола, тетрагидрофурана и др.); чем больше содержание органического растворителя, тем выше элюирующая способность подвижной фазы и удерживание веществ растёт с увеличением их гидрофобности (неполярности).

Возможна одновременная реализация нескольких механизмов разделения, выраженных в той или иной степени, за счёт строения и специфики неподвижной фазы, выбора условий элюирования и природы разделяемых соединений.

###### Область применения

Метод применяют для установления подлинности, определения чистоты, родственных соединений, пептидного и олигосахаридного картирования, установления состава молекулярных вариантов продукта по заряду (изоформы), определения содержания действующих и вспомогательных веществ.

###### Оборудование

Для проведения анализа используют жидкостные хроматографы. В состав жидкостного хроматографа обычно входят следующие основные узлы:

- узел подготовки подвижной фазы, включая ёмкость с подвижной фазой (или ёмкости с отдельными растворителями и растворами, входящими в состав подвижной фазы) и систему дегазации подвижной фазы;

- насосная система;

- смеситель подвижной фазы (при необходимости);

- блок ввода пробы (инжектор), который может быть ручным или автоматическим (автосамплер);

- хроматографическая колонка (может быть установлена в термостате);

- детектор (один или несколько с разными способами детектирования);

- система управления хроматографом, сбора и обработки данных.

Помимо этого в состав хроматографа могут входить: система пробоподготовки и предколоночный реактор, система переключения колонок, постколоночный реактор и другое оборудование.

Для СВЭЖХ требуется оборудование, обеспечивающее поток подвижной фазы при давлении вплоть до 1000 – 1500 бар (100 – 150 МПа или 15000 – 22000 фунтов/кв. дюйм), уменьшенное внеколоночное уширение пиков, улучшенные параметры градиентного смешивания и высокую частоту сбора данных системой детектирования.

Насосная система

Насосная система необходима для поддержания контролируемой скорости подачи подвижной фазы. Проводящая система капилляров и соединительные узлы должны выдерживать давление, которое развивается при работе насосной системы.

Системы подачи подвижной фазы, контролируемые микропроцессором, должны обеспечивать точную подачу подвижной фазы постоянного (изократическое элюирование) или переменного (градиентное элюирование) состава в соответствии с определенной программой. В случае градиентного элюирования используют насосные системы, подающие растворитель (растворители) из нескольких ёмкостей, смешивание которых происходит при низком либо высоком давлении, создаваемом насосами.

Смесители

В смесителе происходит перемешивание отдельных элюентов, подаваемых в многоканальный градиентный насос по индивидуальным каналам, для получения подвижной фазы требуемого состава, как при градиентном, так при изократическом элюировании. Смешение компонентов подвижной фазы в смесителе может происходить как при низком давлении (до насоса), так и при высоком давлении (после насосов, подающих отдельные компоненты подвижной фазы).

Объём смесителя может влиять на времена удерживания определяемых веществ при градиентном элюировании.

Блок ввода проб (инжектор). Раствор испытуемого образца вводится в поток подвижной фазы, поступающей в колонку, при помощи блока ввода проб (инжектора), функционирующего при высоком давлении. Для ввода пробы используют петлевые дозаторы фиксированного объёма или устройства с регулируемым объёмом. Частичное заполнение петли петлевого дозатора вручную снижает точность вводимого объема пробы. Автоматические инжекторы могут обладать рядом дополнительных функций, например, выполнять функцию станции пробоподготовки: осуществлять смешение и разбавление образцов, проводить реакцию предколоночной дериватизации.

Хроматографическая колонка

Хроматографические колонки обычно представляют собой трубки из нержавеющей стали, стекла или пластика, заполненные неподвижной фазой и закрытые с обеих сторон фильтрами с диаметром пор от 0,2 до 5 мкм. Длина колонки может находиться в диапазоне от 1 до 60 см и более, внутренний диаметр – от 2 до 10 мм. Реже используют колонки с внутренним диаметром 1 – 2 мм. Существуют также капиллярные колонки с внутренним диаметром 0,05 – 1 мм.

Перед колонкой могут устанавливаться короткие колонки (предколонки), выполняющие различные вспомогательные функции, основная из которых - защита хроматографической колонки. Анализ может проводиться при комнатной температуре, однако для увеличения эффективности разделения, сокращения продолжительности анализа, а также для улучшения стабильности времен удерживания и отклика детектора может быть использовано термостатирование колонок при различных температурах. Возможность использования повышенной температуры при разделении ограничивается стабильностью неподвижной фазы и разделяемых соединений, поскольку при повышенных температурах возможна их деструкция.

Неподвижная фаза (сорбент)

В качестве сорбентов обычно применяют:

- силикагель и оксид алюминия используют в нормально-фазовой хроматографии;

- химически модифицированные сорбенты (сорбенты с привитыми гидрофобными или гидрофильными группами), приготовленные чаще всего на основе силикагеля. Область применения – обращённо-фазовая или нормально-фазовая хроматография в зависимости от типа привитых функциональных групп. Некоторые сорбенты могут использоваться как в обращенно-фазовой и ион-парной хроматографии, так и в нормально-фазовой хроматографии;

- полимерные неподвижные фазы и модифицированные силикагели с ионообменными группами (полимерные ионообменные смолы или силикагели с привитыми ионообменными группами —NH3+, —NR3+, —NHR2+, —NH2R+ и др. используются для разделения анионов (аниониты), а сорбенты с группами —SО3–, –СОО–, —PО3– и др. — для разделения катионов (катиониты)). Область применения – ионообменная, ионная хроматографии;

- углеродные сорбенты (пористый графит). Область применения – главным образом для обращённо-фазовой ВЭЖХ;

- полимерные сорбенты (без ионообменных групп). Область применения – для различных вариантов ВЭЖХ в зависимости от структуры функциональных групп полимера;

- пористый силикагель или полимерные сорбенты с заданным распределением размеров пор. Область применения – эксклюзионная хроматография;

- хиральные сорбенты с поверхностью, модифицированной группами или веществами, имеющими хиральные центры, например, производными целлюлозы и амилозы, химически модифицированные белками и пептидами, циклодекстринами, хитозанами и др. (хиральные селекторы). Область применения – хиральная хроматография (для разделения энантиомеров).

Наиболее широко используют обращенно-фазовую ВЭЖХ и модифицированные силикагели в качестве неподвижных фаз. Силанольные группы на поверхности силикагеля реагируют с различными силановыми реагентами с образованием ковалентно связанных силильных производных, замещающих различное число активных групп на поверхности носителя. Природа привитых функциональных групп является важной характеристикой, определяющей разделяющие свойства хроматографической системы.

В качестве привитых групп наиболее часто применяются:

- октадецильные группы [Si-(CH2)17-CH3] (октадецил (ODS) или С18);

- октильные группы [Si-(CH2)7-CH3] (октил или С8);

- фенильные группы [Si-(CH2)n-(C6H5)] (фенил или С6Н5);

- цианопропильные группы [Si-(CH2)3-CN] (цианопропил или CN);

- аминопропильные группы [Si-(CH2)3-NH2] (аминопропил или NH2);

- диольные группы [Si-(CH2)3-OCH(OH)-CH2-OH] (диол).

Размер частиц для большинства неподвижных фаз составляет от 1,7 до 10 мкм. Частицы могут иметь сферическую или неправильную форму, различную пористость и удельную площадь поверхности. Эти параметры влияют на хроматографическое поведение конкретных неподвижных фаз.

В обращенно-фазовой ВЭЖХ дополнительными определяющими факторами являются природа неподвижной фазы, количество привитых групп, выражаемое содержанием углерода, и эндкепирование (т.е. силилирование остаточных силанольных групп). Остаточные силанольные группы могут являться причиной размывания тыльной части пика, особенно для веществ оснόвного характера.

Кроме пористых частиц могут быть использованы поверхностно-пористые или монолитные материалы.

Высокая эффективность разделения обеспечивается микроскопическим размером частиц сорбента, равномерностью состава сорбента и плотной и равномерной его упаковкой.

Подвижная фаза (элюент)

Подвижная фаза может состоять из одного растворителя, часто из двух, при необходимости – из трёх и более. Состав подвижной фазы указывают как объёмное соотношение входящих в неё растворителей. В отдельных случаях может указываться массовое соотношение, что должно быть специально оговорено. В качестве компонентов подвижной фазы могут быть использованы буферные растворы с определенным значением рН, различные соли, кислоты и основания и другие модификаторы.

В нормально-фазовой хроматографии обычно используют малополярные органические растворители (гексан, циклогексан, гептан и др.) с небольшими добавками полярных органических соединений, которые регулируют элюирующую силу подвижной фазы. Для получения воспроизводимых результатов в нормально-фазовой хроматографии необходимо строго контролировать содержание воды в растворителях, использующихся в подвижной фазе.

В обращённо-фазовой хроматографии используют водные подвижные фазы, содержащие или не содержащие органические растворители. Органическими модификаторами обычно служат полярные органические растворители (ацетонитрил и метанол). Для оптимизации разделения могут использоваться водные растворы с определённым значением pH, в частности буферные растворы, а также различные добавки в подвижную фазу: кислоты (фосфорная, уксусная и другие) при разделении соединений кислотного характера; аммиак и алифатические амины при разделении соединений основного характера, и другие модификаторы.

На хроматографический анализ большое влияние оказывает степень чистоты подвижной фазы, поэтому предпочтительно применять растворители, выпущенные специально для жидкостной хроматографии (включая воду).

Компоненты подвижной фазы обычно фильтруют для удаления взвешенных частиц через фильтры с размерамипор 0,1–0,45 мкм. При приготовлении многокомпонентных подвижных фаз предварительно смешивают необходимые количества индивидуальных компонентов. Отдельные растворители могут подаваться индивидуальными насосами, снабжёнными дозирующими клапанами, с помощью которых осуществляют смешивание растворителей в необходимых пропорциях. Во избежание образования пузырьков газа и попадания их в ячейку детектора растворители обычно дегазируют путём пропускания через них гелия, обработкой ультразвуком и/или использованием мембранно-вакуумных модулей, работающих в режиме "on-line".

Для приготовления подвижных фаз, как правило, используют растворители, не содержащие стабилизаторов. При использовании спектрофотометрических детекторов предъявляются особые требования к максимально допустимым значениям оптической плотности растворителей в ультрафиолетовом диапазоне длин волн (190 – 400 нм).

Значение pH подвижной фазы при необходимости корректируют (в случае водно-органического элюента изменяют pH только для водного компонента перед смешением с органическим растворителем, а не для конечной водно-органической смеси). При использовании буферных или солевых растворов для предотвращения кристаллизации солей по окончании работы систему промывают водой или смесью воды с небольшой долей органического растворителя (например, от 5 до 15 % (об/об)).

Подвижные фазы могут содержать другие компоненты, например, ион-парные реагенты для ион-парной хроматографии или хиральные селекторы для хроматографии, использующей ахиральные неподвижные фазы.

Детекторы

Наиболее часто для детектирования используют спектрофотометрические детекторы, работающие в ультрафиолетовой/видимой областях. Детектирование проводят при одной заданной длине волны из рабочего диапазона детектора
(как правило, 190–950 нм), либо при нескольких длинах волн одновременно с использованием многоволновых детекторов. С помощью диодноматричных детекторов можно регистрировать оптическую плотность одновременно во всём рабочем диапазоне длин волн и регистрировать спектры поглощения проходящих через ячейку детектора компонентов. При использовании спектрофотометрического детектора, работающего в ультрафиолетовой области, подвижная фаза должна иметь минимальное значение поглощения, не оказывающее влияния на результаты испытания при выбранной для детектирования длине волны.

Флуоресцентный детектор применяют для определения флуоресцирующих соединений или не флуоресцирующих соединений в виде их флуоресцирующих производных, и обладает очень высокой чувствительностью и селективностью.

Для определения соединений, слабо поглощающих в ультрафиолетовой и видимой областях спектра (например, углеводов), используют рефрактометрические детекторы (рефрактометры). Недостатки этих детекторов – их относительно низкая чувствительность и значительная температурная зависимость интенсивности сигнала (детектор необходимо термостатировать), а также невозможность их использования в режиме градиентного элюирования.

Кроме того, могут использоваться электрохимические детекторы (амперометрический, кондуктометрический). Амперометрический детектор применяют для определения электроактивных соединений, которые могут быть окислены или восстановлены на поверхности твердого электрода. Кондуктометрический детектор используют для детектирования анионов и катионов в ионной хроматографии. Принцип его работы основан на измерении электропроводности подвижной фазы в процессе элюирования вещества.

Также используют детекторы светорассеяния, детекторы заряженных аэрозолей, масс-спектрометрические детекторы, обладающие очень высокой чувствительностью и селективностью, ИК-Фурье-детекторы, детекторы радиоактивности и другие.

Система сбора и обработки данных. Современная система обработки данных представляет собой сопряженный с хроматографом персональный компьютер с установленным программным обеспечением, позволяющим регистрировать и обрабатывать хроматограмму, а также управлять работой хроматографической системы и следить за основными параметрами её работы.

###### Порядок проведения анализа

Колонку уравновешивают при указанном составе и скорости подвижной фазы, а также при комнатной температуре или температуре, указанной в методике, до получения стабильной базовой линии. Готовят все необходимые для проведения испытания растворы в соответствии с указаниями в методике. Растворы не должны содержать твёрдых частиц. Выполняют проверку пригодности хроматографической системы в соответствии с процедурами, предусмотренными в ОФС «Хроматография», используя для этого необходимое число инжекций соответствующих растворов (стандартных растворов/растворов сравнения, раствора для проверки разрешения, раствора для проверки чувствительности и пр.). При необходимости (в случае невыполнения требований пригодности) выполняют корректирующие действия: проверяют работоспособность прибора/заменяют прибор, выполняют регенерацию/замену хроматографической колонки, корректируют в допустимых пределах условия хроматографического разделения (в соответствии с ОФС «Хроматография»), заново готовят растворы для проверки пригодности.

Вводят испытуемые растворы и регистрируют результаты хроматографирования. Определяют площади или высоты пиков определяемых компонентов в зависимости от способа расчёта, предусмотренного методикой испытания.

Вычисляют содержание определяемого компонента или компонентов, а также проводят прочие расчёты, предусмотренные методикой. Оценивают приемлемость полученных результатов.

Рекомендации по разметке и интегрированию хроматограмм при определении примесей и минорных компонентов

Разметку и интегрирование хроматограмм проводят в соответствии с ОФС «Хроматография».

В общем случае пик любой единичной примеси, который не полностью разделяется с основным пиком, предпочтительно размечать пиком-наездником. В частных случаях (см. рис. 1 (а – ж)) выбор разметки не полностью разделённых пиков должен учитывать профиль базовой линии (хроматограммы подвижной фазы, растворителя образцов, раствора плацебо); форму интересующих пиков на хроматограммах растворов индивидуальных веществ, модельных смесей и реальных образцов (фактор асимметрии пиков; характер размывания (выраженность) областей, соответствующих началу и концу пика; результаты валидации методики (оценка правильности методом «введено-найдено»). При необходимости расчёта значений нормализованной площади пиков и суммы площадей всех интегрируемых пиков на хроматограммах веществ, характеризующихся сложным профилем, отдельные размеченные пики, элюирующиеся в единой группе не полностью разделённых до базовой линии пиков, учитываются в любом случае (независимо от относительного содержания каждого отдельного пика внутри интегрируемой группы). При этом разметка пиков осуществляется путём опускания перпендикуляра к базовой линии (рис. 1 (г)).

Рисунок 1. Примеры выбора корректной разметки не полностью разделённых пиков в различных случаях (пунктирной линией на рисунках показана хроматограмма холостого раствора/раствора плацебо или раствора основного вещества).

Оценка пригодности хроматографической системы

Оценку пригодности системы проводят в соответствии с ОФС «Хроматография».

При оценке чувствительности хроматограграфической системы, в случае невозможности выполнения оценки отношения сигнал/шум на хроматограмме раствора соответствующей концентрации (например, в случае сорбции целевого вещества на низких уровнях концентраций или, наоборот, выраженном переносе), допускают использование раствора большей концентрации с пропорциональным пересчётом (расчёт значения предела количественного определения в %, соответствующего значению отношения сигнал/шум, равного 10) исходя из фактического значения отношения сигнал/шум, рассчитанного для пика целевого вещества, и фактической концентрации раствора.

«Перенос» - тип специфического загрязнения анализируемой пробы образца, одним из проявлений которого является повторное появление пика(ов) меньшей интенсивности для определяемого компонента(ов) (или других компонентов пробы) на хроматограммах «холостых» проб, анализируемых сразу после анализа образца, содержащего высокие концентрации компонентов, по которым наблюдается перенос.

Чувствительность системы также подлежит проверке при проведении испытаний, подразумевающих учёт множества минорных пиков или всех пиков с содержанием выше порога игнорирования.

Частные случаи оценки чувствительности хроматографической системы, например, если соединения имеют различный отклик приводят в методике, с учётом положений ОФС «Хроматография».

При использовании расчётного способа определения чувствительности, полученное значение должно быть не выше заявляемого предела количественного определения (в %).

При проверке разделительной способности системы концентрации соединений, между которыми проводится оценка разрешения, подбираются таким образом, чтобы их концентрации в растворе для оценки разделительной способности соответствовали наихудшему случаю в испытуемом растворе: концентрации примесей были близки к их максимально допустимому содержанию, концентрация основного вещества к ожидаемой номинальной концентрации.

Перечень условий хроматографирования, подлежащих указанию

В методике должны быть приведены:

- полное коммерческое наименование колонки с указанием производителя и каталожного номера (указывается только в нормативной документации);

- геометрические размеры колонки (длина и внутренний диаметр), тип сорбента с указанием размера частиц, размерапор,

- температура колонки,

- температура автоматического инжектора (если необходимо термостатирование),

- объем вводимой пробы (объем петли),

- состав подвижной фазы и способ ее приготовления,

- скорость подачи подвижной фазы,

- режим элюирования(изократический или градиентный)

- тип смешения для градиентного элюирования (при необходимости),

- объем градиентного смесителя (при необходимости),

- объем задержки градиента (если необходимо) для ВЭЖХ и СВЭЖХ,

- тип детектора и условия детектирования (параметры используемой проточной ячейки детектора, если необходимо),

- температура проточной ячейки (если необходимо термостатирование),

- описание градиентного режима (если используется), включающее в себя стадию переуравновешивания к исходным условиям,

- время хроматографирования,

- время регистрации хроматограммы.

В случае использования предколоночной дериватизации в автосамплере приводится информация о программе работы автосамплера. В случае использования постколоночной дериватизации указывается скорость подачи дериватизирующего реагента, объём петли смешения и её температура.

Корректировка условий хроматографирования. Корректировку условий хроматографирования проводят в соответствии с ОФС «Хроматография».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.2.0006 Сверхкритическая флюидная хроматография

Взамен ОФС.1.2.1.2.0006.15

Cверхкритическим флюидом или сверхкритической жидкостью называется вещество, находящееся при значениях температуры и давления выше критических, при которых свойства вещества являются промежуточными между свойствами жидкости и газа. Хроматографический процесс, в котором в качестве подвижной фазы используют жидкость в сверхкритическом состоянии или около него, называется сверхкритической флюидной хроматографией.

Сверхкритическая флюидная хроматография основана на механизмах адсорбции или распределения масс.

С точки зрения применения флюида в качестве подвижной фазы в хроматографии важны его плотность, коэффициенты диффузии и вязкость:

- коэффициенты диффузии в сверхкритических фазах примерно на порядок больше коэффициентов диффузии в жидкостях, но примерно на порядок меньше, чем в газах;

- вязкость сверхкритических флюидов примерно на порядок меньше, чем жидкостей, но примерно на порядок больше, чем газов;

- растворяющая способность вещества в состоянии сверхкритического флюида больше, чем в состоянии газа;

- плотность основных флюидов, используемых в хроматографии, примерно на 2–3 порядка больше плотности газов и в несколько раз меньше плотности соответствующих жидкостей.

Применительно к сверхкритической флюидной хроматографии это означает что:

- достигаются меньшие времена анализа по сравнению с высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ);

- оптимальное значение линейной скорости потока выше, чем в ВЭЖХ;

- падение давления на колонке значительно меньше, чем в ВЭЖХ, что даёт возможность использования колонок большей длины;

- хроматографическая эффективность в сверхкритической флюидной хроматографии выше, чем в ВЭЖХ (хотя и ниже, чем в газовой хроматографии).

- проведение разделения при более низких температурах, чем это принято в газовой хроматографии, без существенной потери эффективности;

- проведение разделения соединений с большей молекулярной массой, чем это допускается в газовой хроматографии.

###### Оборудование

хроматографическая система для сверхкритической флюидной хроматографии состоит из охлаждаемой насосной системы, инжектора, хроматографической колонки, помещённой в термостат, детектора, автоматического регулятора давления и системы сбора и обработки данных.

Насосная система необходима для подачи подвижной фазы с постоянной скоростью потока. Колебания давления должны быть сведены к минимуму, например, путём пропускания растворителя под давлением через устройство гашения импульсов. Трубки и соединения должны выдерживать создаваемое насосной системой давление.

Системы с микропроцессорным управлением подают подвижную фазу в постоянных или изменяющихся условиях в соответствии с заданной программой. В случае градиентного элюирования используют насосные системы, подающие растворители из нескольких резервуаров, а смешивание растворителей достигается как положительным, так и отрицательным давлением насосов.

Инжекторы. Ввод пробы осуществляют непосредственно в колонку с помощью специального крана-дозатора.

Неподвижные фазы, используемые в сверхкритической флюидной хроматографии, аналогичны применяемым в ВЭЖХ (набивные колонки) и в газовой хроматографии (капиллярные колонки). Максимальный внутренний диаметр капиллярной колонки 100 мкм. Хроматографическая колонка должна быть термостатирована и в ней должно поддерживаться определённое давление. Для этого используют специальные устройства – автоматические регуляторы давления.

Подвижные фазы. В качестве подвижной фазы в сверхкритической флюидной хроматографии используют различные жидкости, однако чаще всего используют углерода диоксид с различными полярными модификаторами. Это обусловлено его прозрачностью в ультрафиолетовой и видимой областях спектра, низкой токсичностью, отсутствием запаха и дешевизной. В качестве полярных модификаторов используют метанол, 2-пропанол, ацетонитрил и циклические эфиры.

В качестве других подвижных фаз применяют азота(I) оксид, аммиак, метанол, н-бутан, диэтиловый эфир, дифтордихлорметан.

Состав, давление или плотность, температура и скорость потока предписанной подвижной фазы могут быть либо постоянными на протяжении всей хроматографической процедуры (изократическое, изоплотностное, изотермическое элюирование), либо могут изменяться в соответствии с заданной программой (градиентное элюирование модификатора, давление или плотность, температура или скорость потока).

Детекторы. Наиболее часто в сочетании со сверхкритической флюидной хроматографией используют спектрофотометрический и пламенно-ионизационный детекторы. Кроме того, возможно применение и других детекторов, используемых в ВЭЖХ и газовой хроматографии, таких как масс-спектрометрический, пламенно-фотометрический, электронозахватный, флуориметрический, ИК-детектор, катарометр и детектор светового рассеяния.

###### Методика

Готовят испытуемые и стандартные растворы, проводят определение как описано в методике испытания. Растворы не должны содержать твёрдых частиц.

Критерии пригодности хроматографической системы и диапазоны допустимых изменений хроматографических параметров описаны в ОФС «Хроматография».

Проводят определение, как описано в методике испытания.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.2.0007 Эксклюзионная хроматография

Взамен ОФС.1.2.1.2.0007.18

Эксклюзионная хроматография (гель-хроматография) – это метод хроматографии, позволяющий разделять молекулы в растворе в соответствии с их размерами в диапазоне молекулярных масс от 102 до 108.

###### Область применения

Эксклюзионную хроматографию применяют для разделения смесей, компоненты которых различают по молекулярной массе, например, в лекарственных средствах белковой природы, а также может быть использована для определения молекулярной массы веществ и её распределения путём сравнения с соответствующими стандартными веществами для калибровки.

###### Метод

В эксклюзионной хроматографии неподвижная фаза (НП) остаётся инертной и с разделяемыми веществами не взаимодействует, в отличие от адсорбционной хроматографии. В зависимости от природы подвижной фазы эксклюзионную хроматографию подразделяют на две разновидности. При использовании органической подвижной фазы метод называют гель-проникающей хроматографией, при использовании водной подвижной фазы – гель-фильтрационной хроматографией.

Образец вносится в колонку, заполненную гелем или пористыми частицами НП, и проходит её вместе с подвижной фазой. Разделение происходит благодаря многократному обмену молекул компонентов образца между подвижной фазой, протекающей в пространстве между частицами НП (в межгранульном объёме) и подвижной фазой, находящейся в порах частиц.

Диапазон размеров разделяемых молекул определяется диапазоном размеров пор НП. Высокомолекулярные вещества, размер которых превышает максимальный размер пор, мигрируют только между частицами НП, не задерживаясь, и элюируются объёмом подвижной фазы, равным межгранульному объёму колонки (мёртвый объём, V0). Молекулы с наименьшей молекулярной массой свободно проходят в поры частиц НП вместе с молекулами растворителя, и, задерживаясь в порах, элюируются последними. Их объём удерживания равен общему свободному объёму колонки (Vt, или общий объём подвижной фазы, соответствующий объёму удерживания компонентов, размер молекул которых меньше, чем наименьшие поры сорбента и которым доступен весь объём пор сорбента). Элюирование разделяемых молекул происходит в диапазоне объёмов подвижной фазы между межгранульным (мёртвым) объёмом (V0) и общим свободным объёмом колонки (Vt). Этот диапазон объёмов представляет собой рабочий диапазон колонки – диапазон эксклюзии, где V0 соответствует верхнему пределу эксклюзии, а Vt – нижнему пределу эксклюзии. Наиболее селективное разделение происходит в первых двух третях этого диапазона.

Определение относительного компонентного состава смесей. Разделение проводят по методике испытаний. Регистрируют хроматограмму и измеряют площадь или высоту соответствующих пиков. Содержание каждого компонента рассчитывают в соответствии с ОФС «Хроматография». Наиболее часто используют метод нормирования.

Определение молекулярных масс соединений и молекулярно-массового распределения полимеров

По стандартным образцам с известными значениями молекулярной массы, соответствующей максимуму хроматографического пика (Mмакс., MP), строят калибровочную кривую зависимости объёма или времени удерживания (х) от логарифма Mмакс. (y). Если диапазон молекулярных масс стандартных образцов входит в рабочий диапазон колонки, калибровочная кривая для данной колонки обычно аппроксимируется функцией первой степени (если калибровочный диапазон молекулярных масс узок) или полиномом третьей степени (для широкого калибровочного диапазона молекулярных масс). Используя калибровочную функцию с помощью специализированного программного обеспечения рассчитывают молекулярную массу испытуемого образца (Mмакс.), а также характеристики молекулярно-массового распределения (среднемассовую молекулярную массу (MW), среднечисловую молекулярную массу (Mn), «z-среднюю» молекулярную массу (MZ) и коэффициент полидисперсности Kd).

Следует учитывать, что значения времени или объёма удерживания анализируемых полимеров не характеризуются прямой связью с молекулярной массой исследуемого вещества и зависят от условий разделения (типа полимера, колонки и подвижной фазы). Фактически разделение обеспечивается за счёт разного гидродинамического объёма молекул образца, то есть разного размера молекул, имеющего определенную связь с молекулярной массой. Поэтому для корректного определения молекулярной массы и оценки молекулярно-массового распределения необходима точная калибровка хроматографической системы, выполненная в условиях анализа исследуемого образца. При этом природа стандартных образцов по возможности должна быть аналогична природе испытуемого вещества.

###### Оборудование

Оборудование для эксклюзионной хроматографии как варианта высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) принципиально не отличается от используемого в других видах ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Основное отличие заключается в применении хроматографических колонок, заполненных специализированными неподвижными фазами.

Из всех видов жидкостной хроматографии в эксклюзионной хроматографии наиболее жёсткие требования предъявляются к стабильности потока подвижной фазы. Поэтому при эксклюзионной хроматографии необходимо использовать насосные системы с точностью подачи подвижной фазы не хуже 0,3–0,5%. Разделение в эксклюзионной хроматографии всегда изократическое.

Точность результатов в эксклюзионной хроматографии значительно зависит от температуры, поэтому, как правило, требуется термостатирование разделительной системы.

Неподвижные фазы

Неподвижные фазы для эксклюзионной хроматографии представляют собой полужёсткие или жёсткие гели или пористые частицы на основе поперечно-сшитой агарозы, декстрана, полимеров, таких как полиметакрилаты или полистирол-дивинилбензол, а также гидроксилированного силикагеля. Главной характеристикой таких сорбентов являются размеры пор, определяющие диапазон молекулярных масс, которые можно разделить на данном сорбенте. Если анализируемая смесь содержит вещества, отличающиеся по молекулярной массе не более чем на 2–2,5 порядка, её обычно удаётся разделить на хроматографической колонке с одним номинальным размером пор неподвижной фазы. При более широком диапазоне молекулярных масс следует использовать единовременно несколько последовательно соединённых колонок, номинальные размеры пор, которых, различны. Кроме того, существуют колонки, неподвижная фаза которых состоит из смеси частиц одного размера, но с разными номинальными размерами пор, что обеспечивает линейную калибровочную зависимость в широком диапазоне молекулярных масс.

Детекторы

В эксклюзионной хроматографии используются следующие основные детекторы: рефрактометрический, спектрофотометрический и флуориметрический. Специально для анализа полимеров разработаны вискозиметрический детектор и детектор многоуглового лазерного светорассеяния, используемые в комбинации с рефрактометром или другим концентрационным детектором.

Подвижная фаза

Подвижную фазу выбирают исходя из свойств испытуемого образца, типа сорбента и условий детектирования.

Подвижные фазы для анализа водорастворимых соединений обычно представляют собой растворы неорганических солей таких как хлорид, нитрат или сульфат натрия иногда с добавкой антимикробного агента (например, азида натрия). Наличие соли в подвижной фазе необходимо для предотвращения нежелательных сорбционных эффектов.

Оценка пригодности хроматографической системы

Критерии оценки пригодности хроматографической системы, корректировки условий хроматографирования для достижения заявленных требований указаны в ОФС «Хроматография». В методике должны быть указаны дополнительные критерии связанные с оценкой пригодности калибровочной кривой, если это необходимо при определении молекулярной массы и молекулярно-массового распределения полимеров.

Разметка и интегрирование хроматограмм проводится в соответствии с ОФС «Хроматография».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.2.0008 Ионообменная хроматография

Взамен ОФС.1.2.1.2.0008.18

Ионообменная хроматография представляет собой физико-химический метод разделения веществ, основанный на стехиометрическом обмене ионов анализируемого раствора и сорбента (ионообменника).

###### Область применения

Данный метод предназначен для разделения и определения ионов при помощи ионообменников в результате их работы в динамическом режиме ионного обмена. Особенно широко ионообменная хроматография используют для определения неорганических анионов. Метод также используют для разделения сахаров, органических кислот, аминогликозидов, аминокислот, аминов, пептидов, белков, гликопротеинов, аминокислотного анализа с постколоночной дериватизацией и др.

В зависимости от природы анализируемого соединения ионообменную хроматографию применяют на всех стадиях производства лекарственных средств, включая характеристику действующих и вспомогательных веществ, продуктов разложения, примесей. Анализируют следующие типы образцов: исходные материалы, промежуточные продукты (включая микробиологические среды и культуральные жидкости), разбавители, лекарственные формы, растворы для чистки производственного оборудования и отходы. Данный вид хроматографии является особенно ценным для анализа ионных и ионизируемых в подвижной фазе веществ, имеющих слабое поглощение или вовсе не имеющих поглощения в УФ области. Возможность связать ионообменное разделение с множеством способов детектирования, например, с пульсирующим амперометрическим детектированием, детектированием в УФ или видимой области, масс-спектрометрическим детектированием и масс-спектрометрическим детектированием с индуктивно связанной плазмой, позволяет применять ионообменную хроматографию в тех случаях, когда детектирование, подходящее для конкретного вещества, обеспечивает требуемую степень чувствительности и специфичности. Ионэксклюзионное разделение позволяет расширить применение данного метода на некоторые неионизируемые соединения (например, многоатомные спирты, углеводы). Широкий динамический диапазон данного метода даёт возможность применять его для количественного анализа как следовых веществ, так и основных компонентов.

###### Метод

В основе ионообменной хроматографии лежит обратимая сорбция ионов анализируемого раствора ионогенными группами сорбента. Обратимый обмен ионами в системе сорбент – растворитель протекает в этом случае с соблюдением стехиометрических отношений.

В зависимости от характера ионогенных групп ионообменные сорбенты (иониты) разделяют на катионообменные (катиониты) и анионообменные (аниониты).

Выделяют следующие варианты ионообменной хроматографии.

Классический метод ионообменной хроматографии

Этот вариант подразумевает разделение ионов в условиях низкого давления подачи элюента в колонку.

Ионная хроматография

Высокоэффективный вариант ионообменной хроматографии, в котором для детектирования определяемых соединений (ионов) используют кондуктометрический детектор и другие детекторы, в частности спектрофотометрический, амперометрический, рефрактометрический. Ионную хроматографию используют в испытаниях на подлинность и количественном определении неорганических катионов и анионов, органических кислот, углеводов, многоатомных спиртов, аминогликозидов, аминокислот, белков, гликопротеинов и других веществ. В ионной хроматографии проводят разделение с использованием ионообменного, ион-эксклюзионного или ион-парного подходов. Разделение в ионной хроматографии основано на различии в плотности заряда анализируемых образцов, что, в свою очередь, зависит от заряда и размера индивидуальных анализируемых ионов. Разделение также проводят на основе гидрофобных различий ионов.

Для высокочувствительного кондуктометрического определения фоновая электропроводность подвижной фазы, проходящей через детектор, должна быть низкой.

Существуют два основных варианта ионной хроматографии с кондуктометрическим детектированием.

Первый из них основан на подавлении электропроводности подвижной фазы с помощью второй ионообменной колонки или специальной мембранной системы подавления, находящейся между аналитической колонкой и детектором. При прохождении подвижной фазы через подавляющее устройство электропроводность снижается за счёт преобразования входящих в состав подвижной фазы компонентов в менее электропроводящие (менее диссоциированные) соединения. Например, разбавленные растворы натрия гидроксида (10–50 мМ), используемые в качестве подвижной фазы при разделении анионов, при прохождении через подавляющее устройство превращаются в воду, обладающую очень низкой проводимостью. Аналогичные реакции протекают и при разделении катионов, когда кислотные подвижные фазы превращаются в воду, а анализируемые катионы – в высокопроводящие гидроксильные формы.

Во втором варианте ионной хроматографии используют подвижную фазу с изначально низкой электропроводностью без дополнительного подавления фоновой электропроводности. В качестве электролитов широко применяют слабые органические кислоты: бензойную, салициловую, изофталевую и их соли.

При вариантах детектирования, отличных от кондуктометрического, как правило, нет необходимости добиваться снижения фоновой электропроводности подвижной фазы, что позволяет использовать при приготовлении элюентов более широкий спектр веществ.

Ионэксклюзионная хроматография

В основе механизма ионэксклюзионной хроматографии лежит эффект, в результате которого соединения в ионизированной форме не удерживаются на сорбенте-ионообменнике, тогда как соединения в молекулярной форме распределяются между неподвижной и подвижной фазами внутри пор ионообменного сорбента, и подвижной фазой, мигрирующей в пространстве между частицами сорбента. Разделение основано на электростатическом отталкивании, полярных и гидрофобных взаимодействиях между растворёнными соединениями и сорбентом.

Анионогенные группы на поверхности сорбента действуют как полупроницаемая «мембрана» между стационарной и подвижной фазами. Отрицательно заряженные компоненты не достигают стационарной фазы, так как отталкиваются одноимённо заряженными функциональными группами и элюируются в «мёртвом» (свободном) объёме колонки. Компоненты в молекулярном виде не «отторгаются» катионообменным сорбентом и распределяются между стационарной и подвижной фазами. Различие в степени удерживания неионных компонентов смеси продиктовано совокупностью полярных взаимодействий неионных компонентов с функциональными группами катионообменного сорбента и гидрофобных взаимодействий неионных компонентов с неполярной матрицей сорбента.

###### Оборудование

Основные компоненты ионохроматографической системы для всех разновидностей ионообменной хроматографии совпадают с набором узлов для любой колоночной жидкостной хроматографии. При этом в ионообменной хроматографии используют дополнительные устройства, например для подавления электропроводности подвижной фазы в случае кондуктометрического детектирования, блок генерации элюента и т.д.

Неподвижные фазы

Неподвижные фазы, используемые в методе ионообменной хроматографии, являются катионо- или анионообменниками. Значительно реже используют фазы, обладающие обеими функциями. Неподвижная фаза представляет собой сорбент, состоящий, в основном, либо из полимерных ионообменных смол (обычно сополимеры стирола и дивинилбензола, этилвинилбензола и дивинилбензола, поливиниловый спирт, полиметакрилат с привитыми ионообменными группами), либо являющихся силикагелем с привитыми ионообменными группами. При использовании щелочной подвижной фазы применение силикагеля ограничено, вследствие его растворимости в воде при щелочных значениях рН. В этих случаях рекомендуют использовать полимерные основы. Такие материалы обладают большей устойчивостью по отношению к крайним значениям рН и во многих случаях совместимы с органическими растворителями. Для ионной хроматографии используют сорбенты на основе сферических частиц непористого стекла или высокопрочного полимера, покрытые тонким слоем пористого ионообменника.

Обычно для разделения анионов используют анионообменные материалы на основе полимеров и разбавленные растворы оснований в качестве подвижной фазы. Однако для разделения катионов не требуется стабильность во всём диапазоне рН, что характерно для органических полимеров, поскольку в качестве подвижной фазы используют разбавленные растворы кислот. Поэтому обычно для разделения катионов применяют катионообменные материалы на основе силикагеля, который проявляет значительно более высокую хроматографическую эффективность.

Катиониты содержат кислотные группы различной силы, например, сульфогруппы (–SО3H), карбоксильные (–СООН) и фосфоновые (–PO(OH)2) группы.

Аниониты, наоборот, имеют в своем составе основные группы, например, алифатические или ароматические аминогруппы различной степени замещённости (вплоть до четвертичных,—NH3OH, —R3NOH, —R2HNOH, —RH2NOH и –NH3+, –NRH2+, –NR2H+, –NR3+).

В H-форме катиониты и в OH-форме аниониты соответственно содержат в способном к обмену состоянии только ионы водорода или гидроксила. В солевых формах ионы водорода заменены катионами металлов или органических оснований, а гидроксид-ионы – анионами кислот.

Подвижные фазы

В качестве подвижной фазы в ионообменной хроматографии применяют водные растворы кислот, оснований и солей. Часто используют буферные растворы, позволяющие поддерживать определённые значения рН. Возможно также использование небольших добавок смешивающихся с водой органических растворителей – ацетонитрила, метанола, этанола, тетрагидрофурана. Часто состав подвижной фазы и используемый способ детектирования определяется природой анализируемого вещества.

При использовании кондуктометрического детектора кислоты и основания, используемые в качестве подвижной фазы, превращают в воду или слабо диссоциирующие соединения. Если анализируемым веществом являются анионы, в качестве подвижных фаз используют растворы натрия или калия гидроксида, натрия карбоната, натрия гидрокарбоната и реже натрия тетрабората. При анализе катионов подвижными фазами являются метансульфоновая кислота, серная кислота и реже хлористоводородная кислота.

При использовании спектрофотометрического детектора большое количество растворов кислот может быть использовано для приготовления подвижной фазы, включая фталевую кислоту и n-гидроксибензойную кислоту для определения анионов и метансульфоновую кислоту для определения катионов.

При амперометрическом детектировании в качестве подвижной фазы используют растворы сильных кислот или оснований, хотя в некоторых случаях используют растворы солей с близким к нейтральному значению рН или растворы кислот и оснований, содержащие соль. При использовании щелочных подвижных фаз контакт с углерода диоксидом и карбонатами должен быть минимизирован путём использования реагентов высокой чистоты и хранения под слоем азота или гелия.

В ионной хроматографии для повышения качества анализа возможно использование специфического оборудования. Например, для подачи чистого элюента в колонку возможно применение различных насосных систем и генераторов элюента (диффузионный генератор, электрогенератор с мембраной). Скорость подачи регулируют. Для создания градиента возможно использование различных смесителей. Объём смесителя может влиять на время удерживания компонентов при градиентном элюировании. В высокоэффективном варианте для нанесения на колонку исследуемого вещества зачастую используют инжектор.

Для подавления собственной электропроводности подвижной фазы в ионной хроматографии возможно использование подавляющих колонок или мембранных подавителей. С помощью колоночного подавления раствор подвижной фазы с собственными ионами и высокой электропроводностью превращается при ионном обмене в малодиссоциированный и обладающий малой электропроводностью раствор. Определяемые ионы при этом не претерпевают никаких химических превращений и сохраняют свою электропроводность. При определении анионов подавляющую колонку заполняют катионообменником высокой ёмкости в Н-форме. При определении катионов подавляющую колонку заполняют анионообменником высокой ёмкости в ОН-форме. Эту колонку устанавливают после разделяющей перед кондуктометрическим детектором. Недостаток использования подавляющих колонок состоит в том, что после определённого времени работы (обычно не более 10 ч) ёмкость ионообменника падает, и его приходится регенерировать с помощью NaOH или HCl в зависимости от природы ионообменника (NaOH для анионообменника, HCl для катионообменника). Поэтому для уменьшения собственной электропроводности подвижной фазы используют мембранные подавители, непрерывно регенерируемые в процессе работы.

Обычно используемые химические подавители делят на две категории. В подавителях первого типа реакции протекают на ионообменной мембране с ионами, регенерируемыми химически или за счёт продуктов электролиза воды. В подавителях второго типа подавляющие реакции протекают в слое смолы с высокой ионообменной ёмкостью, регенерируемой химически или за счёт продуктов электролиза воды.

Рисунок 1. Мембранный подавитель

###### Методика разделения

Процесс разделения проводят как при комнатной температуре, так и в термостатируемых колонках при заданной температуре, с указанием температуры и при уверенности в термостабильности неподвижной фазы, элюента и определяемых соединений. Эффективность разделения зависит от размера частиц и пор сорбента, которые формируют площадь поверхности соприкосновения неподвижной фазы с разделяемым веществом и элюентом, плотности прививки функциональных групп и их природы.

###### Методы детектирования

Для детектирования возможно использование различных методов. Самым распространённым является спектрофотометрический метод. Для этого используют специальные проточные кюветы, в которых измеряется оптическая плотность проходящего сквозь неё элюента при выбранной длине волны. Спектрофотометрический детектор используют, как правило, для определения неорганических и органических ионов, которые поглощают УФ излучение в диапазоне длин волн 190–600 нм. К ним относят органические кислоты, бромиды, йодиды, нитраты, нитриты, тиосульфаты и металлоцианатные комплексы. Для детектирования ионов, не обладающих собственным светопоглощением, применяют косвенное фотометрическое детектирование. В этом случае в качестве элюента используют раствор вещества, поглощающего в УФ области, например фталевой кислоты. При выходе из колонки разделяемых ионов поглощение излучения уменьшается. Для прямого фотометрического детектирования не обладающих собственным светопоглощением ионов используют их химическое превращение в другие вещества, напротив, светопоглощающие. Для этих целей используют мембранное устройство, через которое пропускают раствор реагента, образующего с определяемыми ионами поглощающие комплексы.

В случае ионной хроматографии в качестве метода детектирования используют кондуктометрическое детектирование. Для водных растворов электролитов электропроводность прямо пропорциональна их концентрации. Однако ввиду того, что в ионной хроматографии элюент сам представляет собой раствор электролита достаточно высокой концентрации, и поэтому обладает собственной электропроводностью, детектирование путём простого измерения электропроводности зачастую затруднено. Поэтому в ионной хроматографии для решения проблем детектирования при высокой собственной электропроводности подвижной фазы используют дополнительную подавляющую колонку. Если собственная электропроводность подвижной фазы достаточно мала, то системы подавления не используют. В этом случае используют разделяющие колонки с ионообменником малой ёмкости. В качестве элюентов, обладающих малой электропроводностью, используют растворы слабых органических кислот (бензойной, фталевой, салициловой и др.). В этом случае очень точно поддерживают значение pH раствора.

Возможны и другие методы детектирования, например, масс-спектрометрическое или импульсное электрохимическое детектирование. Амперометрическое детектирование применяют для анализа электрохимически активных соединений, таких как углеводы, аминокислоты, амины и органические соединения серы, которые легко окисляются.

Основные этапы методики разделения для классической ионообменной хроматографии и высокоэффективной ионной хроматографии одинаковы. Основная разница заключается в способе подачи элюента, давлении в системе и способе детектирования.

###### Оценка пригодности хроматографической системы

Критерии оценки пригодности хроматографической системы, а также допустимая степень изменения её параметров указаны в ОФС «Хроматография». Если при проведении анализа требуются дополнительные критерии, они должны быть указаны в методике.

###### Перечень условий хроматографирования, подлежащих указанию в методике

В методике должны быть приведены: параметры колонки (длина и внутренний диаметр), тип сорбента с указанием размера частиц, размера пор, температура колонки (если необходимо термостатирование), объём вводимой пробы, состав подвижной фазы и способ её приготовления, скорость подачи подвижной фазы, тип детектора и условия детектирования (при необходимости параметры используемой ячейки детектора), описание градиентного режима (если используется), включающее в себя стадию переуравновешивания к исходным условиям, время хроматографирования, описания приготовления стандартных и испытуемых растворов. В случае необходимости должно быть указание об использовании систем подавления фоновой электропроводности и их рабочие параметры.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.2.0009 Аффинная хроматография

Взамен ОФС.1.2.1.2.0009.18

Аффинная хроматография является методом очистки и разделения биомолекул из смесей, основанным на высокоспецифичном взаимодействии между биомолекулой и другим веществом (лигандом), ковалентно связанным с инертным носителем. При этом используются следующие типы связывающего взаимодействия:

- антиген-антитело;

- фермент-субстрат;

- фермент-ингибитор;

- фермент-кофактор;

- гормон-рецептор;

- белок-белок;

- белок-полисахарид;

- белок-металл;

- нуклеотид-нуклеотид.

Аффинная хроматография отличается от других хроматографических методов высокой селективностью и разрешающей способностью разделения определяемой молекулы и посторонних примесей, хотя родственные примеси этим методом обычно отделить нельзя.

###### Область применения

Данный метод предназначен для разделения, определения и очистки белков, пептидов, нуклеотидов и полисахаридов.

###### Основы метода

В основе аффинной хроматографии лежит взаимодействие определяемого вещества из смеси с лигандом или рецептором, связанным с инертным носителем, образующими неподвижную фазу. Главной особенностью аффинной хроматографии является высокая специфичность лиганда, иммобилизованного на носителе, к определяемому веществу, или так называемая аффинность.

Существует несколько разновидностей метода аффинной хроматографии таких, например, как колоночная аффинная хроматография, мембранная аффинная хроматография и тонкослойная аффинная хроматография.

Колоночная аффинная хроматография. Обычно идёт в 3 этапа:

- 1) сорбция определяемого вещества или группы веществ на носителе путём их реакции с иммобилизованным на носителе лигандом;

- 2) промежуточная промывка сорбента для удаления неспецифически связанных компонентов;

- 3) десорбция исследуемого компонента смеси с носителя.

Для первого этапа подбирают такие условия (состав буферного раствора, pH, ионная сила буферного раствора, температура), которые являются наиболее благоприятными для взаимодействия аффинной пары. После освобождения носителя от неспецифически связанных компонентов проводят десорбцию определяемого вещества. Это обычно достигается с помощью повышения ионной силы буферного раствора, повышением или понижением его pH, добавлением различных органических растворителей или введением в буферный раствор различных хаотропных агентов. Также можно проводить десорбцию раствором конкурирующего лиганда или хелатирующего агента. Иногда для более эффективного разделения соединений со схожими физико-химическими свойствами используют линейный градиент pH, ионной силы или содержания органического растворителя.

Мембранная аффинная хроматография. Состоит из тех же этапов, что и колоночная аффинная хроматография, при этом основным преимуществом мембранной хроматографии является большая динамическая ёмкость. В мембранной аффинной хроматографии вместо колонки с сорбентом используют фильтрационный элемент с иммобилизованным на нём специфическим лигандом. Кроме того, в мембранном варианте резко возрастает скорость очистки при близкой к колоночной хроматографии эффективности.

Тонкослойная аффинная хроматография. Представляет собой вариант тонкослойной хроматографии, при котором на пластинку иммобилизован специфический лиганд.

###### Оборудование

В колоночной аффинной хроматографии используют стандартное оборудование для колоночной хроматографии. Набор необходимых узлов системы обычно включает в себя хроматографическую колонку, насос, систему ввода пробы, систему детектирования, систему сбора и обработки данных. Возможно использование коллектора фракций и градиентного смесителя.

Неподвижная фаза. Неподвижная фаза аффинной хроматографии представляет собой специально синтезированный сорбент, состоящий из инертного носителя, соединённого со специфическим лигандом (возможно использование «спейсера» для сшивки). В качестве инертного носителя используют модифицированную агарозу или другие носители. Ёмкость носителя можно выразить содержанием лиганда на единицу массы носителя, которое обычно составляет 1–15 мкмоль/г. Лиганд и его связь с матрицей должны быть достаточно стабильны в установленных хроматографических условиях (температура, pH, ионная сила).

Подвижная фаза. Подвижная фаза (элюент) аффинной хроматографии представляет собой жидкость, инертную по отношению к неподвижной фазе и определяемому веществу. Подвижная фаза должна обладать низкой вязкостью и быть совместимой с используемыми методами детектирования. В качестве подвижной фазы обычно используют буферные растворы с различными значениями pH, состав элюента подбирается в зависимости от условий хроматографирования. Чаще всего, из-за сильного удерживания компонентов смеси сорбентом, необходимо использовать ступенчатый или линейный градиент элюирования.

###### Методика

Методика проведения колоночной аффинной хроматографии аналогична методике любой колоночной хроматографии. Прежде всего, подготавливают хроматографическую колонку. Для этого осуществляют заполнение колонки сорбентом суспензионным методом. После этого колонку обязательно уравновешивают. Затем в колонку под давлением подают элюент. Проба может вводиться как фронтальным методом, так и через специальный дозирующий кран с известным объёмом петли. После сорбции аналита на колонке инициируется стадия элюирования, во время которой на выходе из колонки раствор элюента с разделёнными определяемыми компонентами проходит через детектор. В качестве детектора возможно использование любой детектирующей системы для колоночной жидкостной хроматографии, позволяющей детектировать определяемую молекулу и примеси (ОФС «Хроматография», ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Возможно проведение постколоночной дериватизации для увеличения чувствительности детектирования. Результаты хроматографирования регистрируются с помощью компьютерной системы сбора и обработки данных или самописца. Для сбора проб возможно использование коллектора фракций, подключённого к хроматографической системе.

Вновь заполненная колонка, особенно аналитическая, должна быть протестирована на эффективность разделения и допустимую асимметрию пиков.

Перечень условий хроматографирования, подлежащих указанию

В фармакопейной статье должны быть приведены:

- состав подвижной фазы и способ её приготовления;

- приготовление стандартных и испытуемых растворов.

- параметры колонки (длина и внутренний диаметр), мембраны (площадь, рабочий объём мембранного сорбента, максимальное рабочее давление, материал носителя) или пластинки;

- тип сорбента с указанием иммобилизованного лиганда;

- температура колонки,

- скорость подачи подвижной фазы,

- объём вводимой пробы (объём петли);

- тип детектора и условия детектирования (при необходимости параметры используемой ячейки детектора);

- время хроматографирования,

- условия элюирования, при необходимости, в градиентном режиме, включая стадию переуравновешивания к исходным условиям.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.2.0010 Термический анализ

Взамен ОФС.1.2.1.0027.18

Термический анализ включает группу методов, при помощи которых определяется зависимость различных физических и физико-химических свойств действующих и вспомогательных веществ (далее – веществ) от температуры.

Термические методы анализа позволяют получить информацию о кристаллической структуре веществ, температуре кипения, способности к сублимации, дегидратации, твёрдофазном взаимодействии.

###### Область применения

Термический анализ применяют для идентификации, определения чистоты, влажности и стабильности веществ, количественного определения термолабильных веществ, выявления присутствия полиморфных форм, для характеристики совместимости фармацевтических веществ в лекарственных препаратах и выбора упаковки.

###### Классификация

Наиболее распространёнными методами являются:

- термогравиметрия (ТГ);

- дифференциальная сканирующая калориметрия (ДСК), дифференциальный термический анализ (ДТА);

- термомикроскопия.

###### Метод 1. Термогравиметрия

Термогравиметрия (термогравиметрический анализ) – метод, при котором регистрируется изменение массы испытуемого образца в зависимости от контролируемого и программируемого изменения температуры.

Область применения:

- измерение температуры деградации полимеров;

- изучение потери массы при высушивании;

- исследование полиморфных модификаций фармацевтических субстанций;

- исследование процессов обезвоживания/десольватации и разложения соединений;

- определение термической стабильности фармацевтических субстанций;

- анализ состава соединений, их тепловой и окислительной стабильности;

- изучение сольватов в комбинации с некоторыми другими физико-химическими методами (ОФС «Полиморфизм»).

Оборудование

Прибор для термогравиметрии состоит из следующих узлов:

- программируемый нагревательный элемент;

- герметичная камера с контролируемой температурой атмосферы;

- электронные весы;

- регистрирующее устройство.

Условия калибровки и измерения

Для подготовки прибора к работе необходимо провести калибровку температурной шкалы и калибровку электронных весов.

Проверка температурной шкалы. Поверку температурного датчика, находящегося близко к образцу или контактирующего с ним, проводят, используя температуру фазового перехода II рода (точка Кюри) ферромагнитного вещества (например, никеля). В том случае, если прибор позволяет одновременно проводить ТГ анализ и ДТА или ДСК анализы, могут быть использованы те же стандартные образцы, что и для ДТА и ДСК, например, индий, олово и/или цинк.

Калибровка электронных весов. Для калибровки используют фармакопейный стандартный образец кальция оксалата моногидрата, если не указаны другие стандартные образцы. Указанное количество фармакопейного стандартного образца помещают в камеру для нагревания. Программируют скорость и параметры нагрева в соответствии с методикой и начинают нагревание фармакопейного стандартного образца. Термогравиметрическую кривую регистрируют в виде графика: величины температуры или времени указывают по оси абсцисс по возрастанию значений слева направо; показания массы фармакопейного стандартного образца – по оси ординат по возрастанию значений снизу вверх. При температуре около 250 °С повышение температуры останавливают. На графике измеряют расстояние между начальным и конечным плато масса-температура или плато масса-время, что соответствует изменению массы фармакопейного стандартного образца. Полученную величину потери в массе фармакопейного стандартного образца сопоставляют с величиной, указанной на маркировке.

При регулярном использовании прибора периодически проводят калибровку и проверку температурной шкалы.

Методика

Условия проведения анализа указывают в фармакопейной статье. Потерю в массе испытуемого образца при нагревании (Δm/m) определяют по начальному и конечному плато на термогравиметрической кривой,
выражают в %.

Так как условия проведения испытания являются критичными, для каждого измерения отмечают следующие параметры: давление или скорость потока, состав газа, масса испытуемого образца, скорость нагревания, диапазон температуры и предварительная обработка испытуемого образца, включая любой изотермический период.

###### Метод 2. Дифференциальный термический анализ, дифференциальная сканирующая калориметрия

Дифференциальная сканирующая калориметрия (ДСК) и дифференциальный термический анализ (ДТА) – это группа методов термического анализа, основанных на измерении теплоты как теплового потока во время нагревания испытуемого образца.

При этом в ДСК образец сравнения и испытуемый образец поддерживаются при одной и той же температуре, и измеряется теплота, необходимая для поддержания одинаковой температуры образца сравнения и испытуемого образца.

В отличие от этого в ДТА измеряют разницу температур между испытуемым образцом и образцом сравнения при одинаковом количестве подводимой к ним теплоты.

В дифференциальном термическом анализе (ДТА) происходит сравнение процессов нагрева (или охлаждения) испытуемого образца и инертного, не испытывающего существенных химических или фазовых превращений образца сравнения.

Метод дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК) позволяет количественно измерять эндотермические или экзотермические изменения энтальпии в испытуемом образце. При ДСК-сканировании капсула с испытуемым образцом либо нагревается, либо охлаждается с линейной скоростью (это «сканирующая» часть ДСК). В процессе сканирования выход теплоты или поглощение её испытуемым образцом сравнивается количественно с фармакопейным стандартным образцом
(т.е. дифференциально). ДСК-кривые представляют собой зависимость теплового потока от температуры (времени).

Область применения

Фазовые изменения. Методы используют для определения фазовых изменений происходящих с веществом в зависимости от температуры. В табл. 1 приведены возможные наблюдаемые переходы.

Таблица 1. Фазовые превращения. Изменения теплоёмкости и энтальпии при фазовых превращениях, происходящих с веществом, как функции температуры.
переход твёрдое вещество — твёрдое вещество: | аллотропия-полиморфизм прозрачность стекла десольватация аморфность-кристалличность
переход твёрдое вещество — жидкость: | плавление
переход твёрдое вещество — газ: | сублимация
переход жидкость — твёрдое вещество: | замерзание перекристаллизация
переход жидкость — газ: | испарение

Изменения химического состава. Измеряя теплоту и температуру реакции при данных условиях, определяют, например, кинетику разложения или десольватацию.

Использование для построения диаграмм фазового равновесия для твёрдых смесей может быть важным этапом при предварительной разработке и оптимизации процесса лиофилизации.

Определение чистоты. Измерение теплоты плавления и температуры плавления с помощью ДСК используют для определения содержания примесей в веществе по одной диаграмме с использованием нескольких миллиграммов образца без необходимости проведения повторных точных измерений истинной температуры.

Область применения метода ДСК для определения примесей ограничена природой испытуемого образца. Так этот метод неприменим для аморфных веществ, сольватов или полиморфов, примесей, образующих твёрдые растворы с основным веществом, нерастворимых примесей.

ДТА чаще всего используют для определения чистоты испытуемого образца. Этот метод позволяет по одной термограмме определить с помощью измерения точки плавления и теплоты плавления процентное содержание примесей в испытуемом образце.

Оборудование

Для ДТА используют прибор, измеряющий тепловой поток. Прибор обеспечивает постоянную скорость нагревания образцов и определяет температурный дифференциал, как различие тепловых потоков испытуемого образца и образца сравнения. Он состоит из печи, в которой находится одна ячейка с держателем образца для тигля с испытуемым образцом и для тигля с образцом сравнения.

В приборе для ДСК используется печь, имеющая держатель образцов с ячейкой для испытуемого образца и ячейкой для образца сравнения.

К прибору присоединяют: устройство для программирования температуры, температурный детектор (детекторы) и регистрирующую систему, подсоединённую к компьютеру. Измерения проводят в контролируемой среде.

Условия калибровки и измерения

Калибровка температуры. Калибровку по температуре проводят с использованием фармакопейных стандартных образцов, имеющих характеристическое теплофизическое свойство, такое как температура плавления чистых металлов или органических веществ или температура фазового перехода кристаллических неорганических солей или оксидов. Обычно для калибровки используют значения температуры плавления фармакопейного стандартного образца индия, олова и/или цинка.

Калибровка количества теплоты. Проводится для точной оценки изменения количества теплоты (изменение энтальпии) испытуемого образца, вызванного определенным физическим изменением, происходящим при изменении температуры. Калибровку проводят с использованием подходящих стандартных образцов. По аналогии с калибровкой температуры, калибровка количества теплоты может быть выполнена с использованием фармакопейных стандартных образцов с известными установленными значениями изменения энтальпии, вызванной физическими изменениями, такими как плавление чистых металлов и/или органических веществ или фазовый переход кристаллических неорганических солей. Обычно для калибровки используют значения теплоты плавления фармакопейного стандартного образца индия, олова и/или цинка.

Методика

Условия проведения анализа указывают в фармакопейной статье. В подходящий тигель взвешивают испытуемый образец в количестве, указанном в фармакопейной статье и помещают в держатель образца. Параметры нагрева (начальная и конечная температуры, скорость нагревания) устанавливают согласно указаниям в фармакопейной статье. Начинают анализ и регистрируют дифференциальную термическую кривую зависимости теплоты от температуры или времени (рис. 1), одновременно определяя эндотермичность или экзотермичность изменения. Температура начала соответствует пересечению базовой линии с касательной в точке перегиба кривой. Концом теплового явления считается экстремум кривой. Энтальпия явления пропорциональна площади под пиком, ограниченной базовой линией. Коэффициент пропорциональности для расчёта абсолютного значения энтальпии определяют, измеряя температуру вещества с известной температурой плавления при тех же условиях проведения испытания.

Рисунок 1. Дифференциальная термическая кривая (термограмма)

Каждая термограмма сопровождается следующими данными: условия испытания, запись последней калибровки, масса испытуемого образца, идентификация (включая тепловые изменения) образца, ёмкость (контейнер), среда (состав, скорость потока, давление), направление и скорость температурных изменений, чувствительность прибора и регистрирующего устройства.

Полученные данные используют для построения фазовых диаграмм, которые в свою очередь используют для определения предварительного состава.

Плавление чистого кристаллического вещества при постоянном давлении характеризуется теплотой плавления ΔH. Чем чище вещество, тем уже пик, соответствующий точке плавления T0 на термограмме (рис. 2), а степень расширения основания термической кривой служит надежным индикатором примесей.

Рисунок 2. Термические диаграммы вещества в зависимости от чистоты

Определение молярной доли примеси испытуемого образца методом ДСК основано на использовании математического приближения интегральной формы уравнения Вант-Гоффа применительно к концентрациям (не к активностям) в бинарной системе:

Для небольших содержаний примесей (х2<<1) и для значений температуры, близких к температуре плавления, уравнение может быть представлено, как приведено ниже, где температура образца и молярная доля примеси являются переменными:

где T − температура образца, (К);
T0 − температура плавления химически чистого вещества, (K);
x2 − молярная доля примеси, т.е. количество молекул примеси, делённое на общее количество молекул в жидкой фазе (или расплавленной фазе) при температуре T (в К);
ΔHf − молярная теплота плавления вещества, (Дж/моль);
R − универсальная газовая постоянная для идеальных газов, Дж/K моль.

С помощью этого метода определяют примеси, содержанием не более 1,5–2,0 % от общего количества.

Поскольку выше температуры эвтектики смеси твёрдая фаза содержит только чистое вещество, при дальнейшем увеличении температуры молярная фракция примеси в жидкой фазе постоянно уменьшается из-за плавления чистого вещества.

Для всех температур выше точки эвтектики справедливо выражение:

где F − расплавленная доля испытуемого образца;
х2* − молярная доля примеси в испытуемом образце.

Соответственно, с повышением температуры значение F стремится к единице, а x2 – к х2*.

При объединении уравнений (1) и (2) получается следующее выражение:

Величину теплоты плавления рассчитывают с помощью интегрирования пика плавления (площадь под пиком). Температура плавления T₀ экстраполируется из графика зависимости от температуры, выраженной в кельвинах (К). Наклон (α) графика, при необходимости полученного после линеаризации, соответствующий позволяет определить значение х2*. Общую молярную долю примесей можно рассчитать путём умножения х2* на 100 %.

###### Метод 3. Термомикроскопия

Термомикроскопия – метод термического анализа, визуализирующий фазовые переходы испытуемого образца. Метод основан на микроскопическом исследовании испытуемого образца, подвергнутого программируемому нагреванию, в поляризованном свете.

Область применения

Термомикроскопию используют для идентификации фазовых переходов (плавление, перекристаллизация и др.), обнаруженных с использованием термогравиметрии и дифференциальной сканирующей калориметрии.

Оборудование

Прибор состоит из оптического микроскопа, оснащённого источником поляризованного света, нагревательного элемента с возможностью программируемого нагревания и охлаждения, системы регистрации температур фазового перехода.

Условия калибровки и измерения

Микроскоп с горячей стадией должен быть откалиброван по температуре.

Методика

Методика микроскопии проводится в соответствии с требованиями ОФС «Оптическая микроскопия».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.1.2.0011 Гидрофобная хроматография

Вводится впервые

Гидрофобная хроматография является разновидностью метода жидкостной колоночной обращённо-фазовой хроматографии по механизму разделения. В гидрофобной хроматографии удерживание разделяемых веществ обусловлено гидрофобным взаимодействием их молекул с относительно неполярной неподвижной фазой, а для изменения элюирующей силы подвижной фазы используют, в первую очередь, изменение ионной силы (концентрации соли в подвижной фазе).

Гидрофобная хроматография – жидкостная хроматография на неполярных сорбентах, в которой в качестве подвижной фазы используют водные или водно-органические буферные растворы и разделение смеси веществ происходит в результате различия в их взаимодействии с гидрофобными группами сорбента в условиях убывающего градиента солей в элюенте с высокой разрешающей способностью. Гидрофобная хроматография сохраняет биологическую активность белков благодаря более слабому взаимодействию, чем другие хроматографические методы.

Основное назначение гидрофобной хроматографии – разделение и очистка биополимеров (прежде всего, белков).

###### Область применения

Гидрофобная хроматография – один из эффективных методов разделения сложных смесей белков, основанный на различиях в гидрофобности их молекул и широко применяемый как в аналитической химии, так и в химической технологии. Метод применяют как для качественного, так и для количественного анализа лекарственных средств в испытаниях «Подлинность», «Родственные примеси» и «Количественное определение».

Различные модификации метода широко используют для очистки и разделения пептидов (таких как окситоцин, липрессин, пептидный гормон роста – соматотропин), антибиотиков, лейкоцитарного интерферона, высокомолекулярных белков (химотрипсиногена, ферритина и др.), моноклональных антител и др.

###### Основы метода

Разделение белковых молекул основано на различиях в их поверхностной гидрофобности, обусловленной отличиями в первичной структуре молекул белков (наличие гидрофобных функциональных групп в молекулах исходных аминокислот) и третичной структурой этих молекул в водном растворе: гидрофобные участки белковых молекул (например, фенилаланин, тирозин и триптофан) обратимо взаимодействуют с гидрофобными функциональными группами неподвижной фазы (фенил, октил, бутил и др.). Эти взаимодействия, немаловажную роль в которых играет гидратация молекул белка и функциональных групп неподвижной фазы в водном растворе, усиливаются прямо пропорционально увеличению ионной силы подвижной фазы при постоянных температуре и pH среды. После связывания разделяемых белков с неподвижной фазой состав подвижной фазы изменяют таким образом, что ионная сила подвижной фазы уменьшается (плавно или ступенчато), а разделяемые белки поочерёдно элюируются с колонки в порядке увеличения их гидрофобности (рис. 1). Для детектирования белков, как правило, используют спектрофотометрический детектор (λ = 214 или 280 нм).

Рисунок 1. Типичная хроматограмма разделения смеси белков методом гидрофобной хроматографии

Свойства разделяемых белков и функциональных групп неподвижной фазы, а также состав подвижной фазы (выбор соли, обеспечивающей ионную силу подвижной фазы, и её концентрации) являются основными параметрами, влияющими на конечные характеристики хроматографического разделения белков методом гидрофобной хроматографии (селективность и разрешающая способность, эффективность, экспрессность и др.).

###### Оборудование

Для проведения гидрофобной хроматографии используют оборудование, применяемое в методе высокоэффективной жидкостной хроматографии. Основные компоненты хроматографической системы совпадают с набором узлов для любой жидкостной колоночной хроматографии (узел подготовки подвижной фазы, насосная система, система ввода пробы, хроматографическая колонка, система детектирования, система сбора и обработки данных и др.).

###### Неподвижная фаза

Неподвижная фаза в гидрофобной хроматографии, как правило, представляет собой полимерную матрицу (полиметилакрилат или агароза с различной степенью сшивки, стирол-дивинилбензол и др.) в виде пористых или непористых сферических частиц со средним диаметром 101–102 мкм, поверхность которых модифицирована относительно гидрофобными функциональными группами (табл. 1).

Таблица 1. Функциональные группы, используемые в неподвижных фазах для гидрофобной хроматографии
Функциональная группа | Структурная формула | Функциональная группа | Структурная формула
--- | --- | --- | ---
Фенил |  | Октил | -O-(CH2)7-CH3
Бутил-S | -S-(CH2)3-CH3 | Пропиленгликоль | -O-CH2-CHOH-CH2-OH
Бутил | -O-(CH2)3-CH3 | Изопропил | -O-CH-(CH3)2

Неподвижные фазы, обладающие сравнительно более высокой гидрофобностью, как правило, показывают большую ёмкость по отношению к белку при низких концентрациях соли в подвижной фазе.

###### Состав подвижной фазы и её pH

При использовании гидрофобной хроматографии следует учитывать способность определённых ионов в растворе влиять на гидрофобные взаимодействия белков. Способность ионов элюировать или осаждать белки показана в ряду Гофмейстера (рис. 2).

Рисунок 2. Ряд Гофмейстера

Небольшие ионы (например, хлориды, сульфаты), несущие большой заряд, являются сильными "соосадителями" (антихаотропными агентами), тогда как органические кислоты и основания, некоторые другие соединения повышают растворимость и стабилизируют белки в растворе (хаотропные агенты). В качестве хаотропных агентов обычно используют бутанол, 2-пропанол, этанол, гуанидина гидрохлорид, лития перхлорат и ацетат, магния хлорид, натрия тиоцианат, натрия лаурилсульфат, мочевину и тиомочевину. Хаотропные агенты способствуют разрушению структурированной системы водородных связей между молекулами воды, изменению гидратации макромолекул белков в растворе и ослаблению гидрофобных взаимодействий. Антихаотропные агенты, напротив, способствуют образованию упорядоченной системы водородных связей и усиливают гидрофобные взаимодействия.

Необходимо отметить, что соли кальция и магния являются менее выраженными «соосадителями», чем это следует из ряда Гофмейстера, за счёт специфического связывания с сайтами на поверхности белка.

Сульфаты натрия, калия и аммония являются сильными осаждающими агентами и оказывают стабилизирующее действие на белки. Именно поэтому эти соли, а также натрия хлорид, калия хлорид и аммония ацетат, наиболее часто используются в гидрофобной хроматографии (рис. 3). С целью достижения требуемых характеристик разделения для приготовления подвижной фазы могут также использоваться бинарные смеси солей.

Рисунок 3. Сравнительная выраженность антихаотропного эффекта различных солей

Увеличение концентрации соли в подвижной фазе приводит к увеличению ионной силы и гидрофобных взаимодействий. Исходная концентрация соли в подвижной фазе обычно составляет от 0,5 до 3 М (в зависимости от используемой неподвижной фазы, свойств разделяемых белков и антихаотропного эффекта соли). При выборе исходной концентрации соли в подвижной фазе (при которой происходит введение образца в колонку) для разделения конкретного набора белков в образце следует учитывать, что при превышении определённой концентрации соли (специфичной для каждой конкретной пары соль-белок) в подвижной фазе происходит выпадение белка в осадок из раствора, чего следует избегать при введении образца в хроматографическую колонку.

Удерживание белков неподвижными фазами для гидрофобной хроматографии происходит не только в присутствии «классических» солей. Некоторые цвиттер-ионные органические соединения (например, аминокислоты – глицин и аргинин) могут использоваться для этих же целей. Добавка этих соединений в подвижную фазу также способствует улучшению воспроизводимости получаемых результатов.

Обычно pH подвижной фазы сохраняют неизменным в ходе разделения и, как правило, выбирают максимально близким к изоэлектрическим точкам разделяемых белков. Чаще всего разделение проводят в нейтральной среде (pH 7,0). В то же время изменение характеристик разделения при варьировании pH подвижной фазы в области 5–8,5 в общем случае выражено незначительно, при этом увеличение pH ослабляет гидрофобные взаимодействия.

В качестве отправной точки при выборе условий разделения белков методом гидрофобной хроматографии можно использовать элюенты следующего состава:

Начальный буфер (А): | 50 мМ раствор натрия фосфата, рН 7,0 + 0,5–1,5 М аммония сульфата. |  |
Элюирующий буфер (В): | 50 мМ раствор натрия фосфата, рН 7,0 |  |

###### Термостатирование колонки и образцов

Влияние температуры на разделение в гидрофобной хроматографии до конца не изучено и имеет сложный характер. По этой причине разделение рекомендуют проводить при постоянной температуре (обычно в диапазоне 20–25 °С). В общем случае увеличение температуры колонки усиливает гидрофобные взаимодействия. Температуру термостатирования образцов, как правило, устанавливают такую же, как и для разделяющей колонки. Низкая температура образца перед введением, по сравнению с температурой разделяющей колонки, может послужить причиной снижения времени удерживания белка и ухудшения его воспроизводимости.

###### Подготовка и введение образцов

Образцы должны быть свободны от твёрдых частиц. В качестве растворителя для образцов, как правило, используют подвижную фазу, состав и pH которой соответствуют начальным условиям элюирования. Общее количество белка, вводимое в колонку, не должно превышать общую связывающую способность (ёмкость) колонки по отношению к белку. При градиентном элюировании белок в колонку, как правило, вводят в количестве, не превышающем 30 % от максимальной ёмкости колонки, что обеспечивает оптимальное разрешение. Нагрузка белка на колонку может быть увеличена при условии сохранения приемлемого разрешения или в случае ступенчатого изменения концентрации соли в ходе элюирования. Для оптимального разделения при градиентном элюировании используют примерно одну пятую общей связывающей способности колонки. При подборе условий разделения смеси белков при обращённо-фазовой хроматографии обязательно учитывают рН раствора, вязкость и температуру.

Максимальная динамическая ёмкость колонки по отношению к белку зависит от скорости потока подвижной фазы (обратно пропорционально) и/или размеров разделяемых белков и пор частиц неподвижной фазы. Крупные и несимметричные молекулы с трудом проникают вглубь частиц неподвижной фазы, и их удерживание обеспечивается в основном гидрофобными взаимодействиями на поверхности частиц, что снижает динамическую ёмкость неподвижной фазы по отношению к таким молекулам.

#### 1.2.2. Методы химического анализа

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.0001 Общие реакции на подлинность

Взамен ОФС.1.2.2.0001.15

Алюминий. Если не указано иначе в фармакопейной статье, около 15 мг лекарственного средства растворяют в 2 мл воды. К полученному раствору прибавляют 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и 0,5 мл реактива тиоацетамида; осадок не образуется. Затем по каплям прибавляют натрия гидроксида раствор 8,5 %; образуется гелеобразный белый осадок, растворимый при последующем прибавлении натрия гидроксида раствора 8,5 %. Постепенно прибавляют аммония хлорида раствор 10 %; снова образуется гелеобразный белый осадок.

Амины ароматические первичные

Щелочной раствор β-нафтола, содержащий 0,5 г натрия ацетата. Растворяют 2 г β-нафтола в 40 мл натрия гидроксида раствора 10 % и прибавляют 0,5 г натрия ацетата. После растворения доводят объём раствора водой до 100 мл и перемешивают. Раствор используют свежеприготовленным.

Около 50 мг лекарственного средства растворяют в 1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, нагревают при необходимости, охлаждают во льду, прибавляют 2 мл натрия нитрита раствора 1 %; полученный раствор прибавляют к 1 мл щелочного раствора β-нафтола, содержащего 0,5 г натрия ацетата; образуется осадок от жёлто-оранжевого до оранжево-красного цвета.

Аммоний. Нагревают 1 мл раствора соли аммония (2–6 мг аммоний-иона) с 0,5 мл натрия гидроксида раствора 10 %; выделяется аммиак, обнаруживаемый по запаху и по посинению влажной красной лакмусовой бумаги.

Ацетаты

А. Нагревают 2 мл раствора ацетата (20–60 мг ацетат-иона) с равным количеством серной кислоты концентрированной и 0,5 мл спирта 96 %; появляется характерный запах этилацетата.

Б. К 2 мл нейтрального раствора ацетата (20–60 мг ацетат-иона) прибавляют 0,2 мл железа(III) хлорида раствора 3 %; появляется красно-бурое окрашивание, исчезающее при прибавлении разведённых минеральных кислот.

Бензоаты. К 2 мл нейтрального раствора бензоата (10–20 мг бензоат-иона) прибавляют 0,2 мл железа(III) хлорида раствора 3 %; образуется розовато-жёлтый осадок, растворимый в эфире.

Бромиды

А. К 1 мл раствора бромида (2–30 мг бромид-иона) прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, 0,5 мл хлорамина раствора 5 %, 1 мл хлороформа и взбалтывают; хлороформный слой окрашивается в жёлто-бурый цвет.

Б. К 2 мл раствора бромида (2–10 мг бромид-иона) прибавляют 0,5 мл азотной кислоты разведённой 16 % и 0,5 мл серебра нитрата раствора 2 %; образуется желтоватый творожистый осадок, нерастворимый в азотной кислоте разведённой 16 % и трудно растворимый в аммиака растворе 10 %.

Висмут

А. Указанное в фармакопейной статье количество лекарственного средства (около 50 мг висмут-иона) взбалтывают с 3 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и фильтруют. К фильтрату прибавляют 1 мл натрия сульфида раствора 2 %; образуется коричневато-чёрный осадок, растворимый при прибавлении равного объёма азотной кислоты концентрированной.

Б. Указанное в фармакопейной статье количество лекарственного средства (около 50 мг висмут-иона) взбалтывают с 5 мл серной кислоты разведённой 16 % и фильтруют. К фильтрату прибавляют две капли калия йодида раствора 10 %; образуется чёрный осадок, растворимый в избытке реактива с образованием раствора желтовато-оранжевого цвета.

Железо(II). К 2 мл раствора соли железа(II) (около 20 мг железо(II)-иона) прибавляют 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и 1 мл калия феррицианида раствора 5 %; образуется синий осадок.

Железо(III)

А. К 2 мл раствора соли железа(III) (около 1 мг железо(III)-иона) прибавляют 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и 1–2 капли калия ферроцианида раствора 5 %; образуется синий осадок.

Б. К 2 мл раствора соли железа(III) (около 1 мг железо(III)-иона) прибавляют 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и 1–2 капли аммония тиоцианата раствора 5 %; появляется красное окрашивание.

Йодиды

А. К 2 мл раствора йодида (3–20 мг йодид-иона) прибавляют 0,2 мл серной кислоты разведённой 16 %, 0,2 мл натрия нитрита раствора 10 % или железа(III) хлорида раствора 3 % и 2 мл хлороформа; при взбалтывании хлороформный слой окрашивается в фиолетовый цвет.

Б. К 2 мл раствора йодида (2–10 мг йодид-иона) прибавляют 0,5 мл азотной кислоты разведённой 16 % и 0,5 мл серебра нитрата раствора 2 %; образуется жёлтый творожистый осадок, нерастворимый в азотной кислоте разведённой 16 % и аммиака растворе 10 %.

В. При нагревании 0,1 г лекарственного средства с 1 мл серной кислоты концентрированной выделяются пары фиолетового цвета.

Калий

А. К 2 мл раствора соли калия (10–20 мг калий-иона) прибавляют 1 мл винной кислоты раствора 20 %, 1 мл натрия ацетата раствора 10 %, 0,5 мл спирта 96 % и встряхивают; постепенно образуется белый кристаллический осадок, растворимый в разведённых минеральных кислотах и растворах гидроксидов щелочных металлов.

Б. К 2 мл раствора соли калия (5–10 мг калий-иона), предварительно прокалённой для удаления солей аммония, прибавляют 0,5 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и 0,5 мл 10 % раствора натрия кобальтинитрита; образуется жёлтый кристаллический осадок.

В. Соль калия, внесённая в бесцветное пламя, окрашивает его в фиолетовый цвет или при рассматривании через синее стекло – в пурпурно-красный.

Кальций

А. К 1 мл раствора соли кальция (2–20 мг кальций-иона) прибавляют 1 мл аммония оксалата раствора 4 %; образуется белый осадок, нерастворимый в уксусной кислоте разведённой 30 % и аммиака растворе 10 %, растворимый в разведённых минеральных кислотах.

Б. Соль кальция, смоченная хлористоводородной кислотой 25 % и внесенная в бесцветное пламя, окрашивает его в кирпично-красный цвет.

Карбонаты (гидрокарбонаты)

А. К 0,2 г карбоната (гидрокарбоната) или к 2 мл раствора карбоната (гидрокарбоната) 1:10 прибавляют 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %; выделяется газ, при пропускании которого через раствор кальция гидроксида образуется белый осадок.

Б. К 2 мл раствора карбоната 1:10 прибавляют 5 капель насыщенного раствора магния сульфата; образуется белый осадок (гидрокарбонат образует осадок только при кипячении смеси).

В. Раствор карбоната 1:10 при прибавлении одной капли фенолфталеина раствора 1 % окрашивается в красный цвет (отличие от гидрокарбоната).

Лактаты. Навеску испытуемой субстанции, соответствующую около 5 мг молочной кислоты, растворяют в 5 мл воды, если не указано иначе в фармакопейной статье. Прибавляют 1 мл бромной воды, 0,5 мл серной кислоты разведённой 9,8 %. Нагревают на водяной бане до обесцвечивания, периодически перемешивая раствор стеклянной палочкой. Прибавляют 4 г аммония сульфата и перемешивают. Прибавляют по каплям, без перемешивания, 0,2 мл натрия нитропруссида раствора 10 % в серной кислоте разведённой 9,8 %. Прибавляют без перемешивания 1 мл аммиака раствора концентрированного 25 %. Выдерживают 30 мин при комнатной температуре. В месте соединения двух жидкостей должно появиться тёмно-зелёное кольцо.

Магний. К 1 мл раствора соли магния (2–5 мг магний-иона) прибавляют 1 мл аммония хлорида раствора 10 %, 1 мл аммиака раствора 10 % и 0,5 мл динатрия гидрофосфата безводного раствора 5 %; образуется белый кристаллический осадок, растворимый в разведённых минеральных кислотах и уксусной кислоте.

Мышьяк

1. Арсениты

   - А. К 0,3 мл раствора соли мышьяка(III) (около 30 мг арсенит-иона) прибавляют 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и две капли натрия сульфида раствора 2 %; образуется жёлтый осадок, нерастворимый в хлористоводородной кислоте концентрированной, растворимый в аммиака растворе 10 %.

   - Б. К 0,3 мл раствора соли мышьяка(III) (около 3 мг арсенит-иона) прибавляют 1–2 капли серебра нитрата раствора 2 %; образуется жёлтый осадок, растворимый в азотной кислоте разведённой 16 % и аммиака растворе 10 %.

2. Арсенаты

   - А. К 0,3 мл раствора соли мышьяка(V) (около 30 мг арсенат-иона) прибавляют 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, две капли натрия сульфида раствора 2 % и нагревают; образуется жёлтый осадок, нерастворимый в хлористоводородной кислоте концентрированной, растворимый в аммиака растворе 10 %.

   - Б. К 0,3 мл раствора соли мышьяка(V) (около 1 мг арсенат-иона) прибавляют 1–2 капли серебра нитрата раствора 2 %; образуется коричневый осадок, растворимый в азотной кислоте разведённой 16 % и аммиака растворе 10 %.

   - В. К 0,3 мл раствора соли мышьяка(V) (около 1 мг арсенат-иона) прибавляют 1 мл аммония хлорида раствора 10 %, 1 мл аммиака раствора 10 % и 1 мл магния сульфата раствора 10 %; образуется белый кристаллический осадок, растворимый в хлористоводородной кислоте разведённой 8,3 % (отличие от арсенитов).

Натрий

А. К 2 мл раствора натриевой соли (7–10 мг натрий-иона) прибавляют 2 мл калия карбоната раствора 15 % и нагревают до кипения; осадок не образуется. К раствору прибавляют 4 мл раствора калия пироантимоната и нагревают до кипения. Охлаждают в ледяной воде и, при необходимости, потирают внутренние стенки пробирки стеклянной палочкой; образуется плотный осадок белого цвета.

Б. Соль натрия, смоченная хлористоводородной кислотой 25 % и внесённая в бесцветное пламя, окрашивает его в жёлтый цвет.

Нитраты

А. К лекарственному средству (около 1 мг нитрат-иона) прибавляют две капли раствора дифениламина; появляется синее окрашивание.

Б. К лекарственному средству (2–5 мг нитрат-иона) прибавляют по 2–3 капли воды и серной кислоты концентрированной, 0,05–0,10 г металлической меди и нагревают; выделяются пары бурого цвета.

В. Нитраты (около 2 мг нитрат-иона) не обесцвечивают раствор калия перманганата 0,1 %, подкисленный серной кислотой разведённой 16 % (отличие от нитритов).

Нитриты

А. К лекарственному средству (около 1 мг нитрит-иона) прибавляют две капли раствора дифениламина; появляется синее окрашивание.

Б. К лекарственному средству (около 30 мг нитрит-иона) прибавляют 1 мл серной кислоты разведённой 16 %; выделяются жёлто-бурые пары (отличие от нитратов).

В. Несколько кристаллов феназона растворяют в фарфоровой чашке в двух каплях хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, прибавляют две капли раствора нитрита (около 1 мг нитрит-иона); появляется зелёное окрашивание (отличие от нитратов).

Ртуть(II)

А. К 2 мл раствора соли ртути(II) (около 50 мг ртуть(II)-иона) прибавляют 0,5 мл натрия гидроксида раствора 10 %; образуется жёлтый осадок.

Б. К 1 мл раствора соли ртути(II) (10–30 мг ртуть(II)-иона) прибавляют осторожно по каплям калия йодида раствор 10 %; образуется красный осадок, растворимый в избытке реактива.

Салицилаты. К 2 мл нейтрального раствора салицилата (2–10 мг салицилат-иона) прибавляют 2 капли железа(III) хлорида раствора 3 %; появляется сине-фиолетовое или красно-фиолетовое окрашивание, которое сохраняется при прибавлении небольшого количества уксусной кислоты разведённой 30 %, но исчезает при прибавлении хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %. При этом образуется белый кристаллический осадок.

Серебро

А. К 1 мл раствора соли серебра (около 5 мг серебра-иона) прибавляют 0,2 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %; образуется белый творожистый осадок, нерастворимый в азотной кислоте, но растворимый в аммиака растворе 10 %.

Б. К 1 мл раствора соли серебра (около 5 мг серебра-иона) прибавляют аммиака раствор до растворения образующегося вначале осадка, затем прибавляют 0,2 мл формальдегида раствора 35 % и нагревают; на стенках пробирки образуется блестящий налёт металлического серебра.

Силикаты. Указанное в фармакопейной статье количество субстанции смешивают в свинцовом или платиновом тигле медной проволокой с около 10 мг натрия фторида и несколькими каплями серной кислоты концентрированной до получения жидкой суспензии. Тигель накрывают тонкой прозрачной пластиковой пластиной с подвешенной снизу каплей воды и осторожно нагревают. Вокруг капли образуется белое кольцо.

Сульфаты. К 2 мл раствора сульфата (5–50 мг сульфат-иона) прибавляют 0,5 мл бария хлорида раствора 5 %; образуется белый осадок, нерастворимый в разведённых минеральных кислотах.

Сульфиты

А. К 2 мл раствора сульфита (10–30 мг сульфит-иона) прибавляют 2 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и встряхивают; постепенно выделяется сернистый газ, обнаруживаемый по характерному резкому запаху.

Б. К 2 мл раствора сульфита (2–20 мг сульфит-иона) прибавляют 0,5 мл бария хлорида раствора 5 %; образуется белый осадок, растворимый в хлористоводородной кислоте разведённой 8,3 % (отличие от сульфатов).

Тартраты

А. К 1 мл раствора тартрата (около 20 мг тартрат-иона) прибавляют кристаллик калия хлорида, 0,5 мл спирта 96 %; образуется белый кристаллический осадок, растворимый в разведённых минеральных кислотах и растворах гидроксидов щелочных металлов.

Б. 0,25 мл раствора тартрата (около 5 мг тартрат-иона) нагревают с 1 мл серной кислоты концентрированной и несколькими кристаллами резорцина; через 15–30 с появляется вишнёво-красное окрашивание.

Фосфаты

А. К 1 мл раствора фосфата (10–30 мг фосфат-иона), нейтрализованного до рН около 7,0, прибавляют несколько капель серебра нитрата раствора 2 %; образуется жёлтый осадок, растворимый в азотной кислоте разведённой 16 % и аммиака растворе 10 %.

Б. К 1 мл раствора фосфата (10–30 мг фосфат-иона) прибавляют 1 мл аммония хлорида раствора 10 %, 1 мл аммиака раствора 10 % и 0,5 мл магния сульфата раствора 10 %; образуется белый кристаллический осадок, растворимый в разведённых минеральных кислотах.

В. К 1 мл раствора фосфата (10–30 мг фосфат-иона) в азотной кислоте разведённой 16 % прибавляют 2 мл аммония молибдата раствора 10 % и нагревают; образуется жёлтый кристаллический осадок, растворимый в аммиака растворе 10 %.

Хлориды

А. К 2 мл раствора хлорида (2–10 мг хлорид-иона) прибавляют 0,5 мл азотной кислоты разведённой 16 % и 0,5 мл серебра нитрата раствора 2 %; образуется белый творожистый осадок, нерастворимый в азотной кислоте разведённой 16 % и растворимый в аммиака растворе 10 %. Для солей органических оснований испытание растворимости образовавшегося осадка проводят после отфильтровывания и промывания осадка водой.

Б. В пробирку помещают указанное в фармакопейной статье количество испытуемой субстанции или соответствующее около 15 мг хлорид-иона. Прибавляют 0,2 г калия дихромата и 1 мл серной кислоты концентрированной. Над пробиркой помещают полоску фильтровальной бумаги, пропитанную 0,1 мл дифенилкарбазида раствора. Бумага должна окраситься в фиолетово-красный цвет. Пропитанная бумага не должна соприкасаться с калия дихроматом.

Цинк

А. К 2 мл нейтрального раствора соли цинка (5–20 мг цинк-иона) прибавляют 0,5 мл натрия сульфида раствора 2 %; образуется белый осадок, нерастворимый в уксусной кислоте разведённой 30 % и легко растворимый в хлористоводородной кислоте разведённой 8,3 %.

Б. К 2 мл раствора соли цинка (5–20 мг цинк-иона) прибавляют 0,5 мл калия ферроцианида раствора 5 %; образуется белый осадок, нерастворимый в хлористоводородной кислоте разведённой 8,3 %.

Цитраты

А. К 1 мл нейтрального раствора цитрата (2–10 мг цитрат-иона) прибавляют 1 мл кальция хлорида раствора 20 %; раствор остаётся прозрачным; при кипячении образуется белый осадок, растворимый в хлористоводородной кислоте разведённой 8,3 %.

Б. К лекарственному средству (1–2 мг цитрат-иона) прибавляют 0,5 мл уксусного ангидрида и нагревают; через 20–40 с появляется красное окрашивание.

##### 1.2.2.2. Испытание на предельное содержание примесей

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0001 АЛЮМИНИЙ

МЕТОД 1

Испытуемый раствор. Указанный в фармакопейной статье раствор помещают в делительную воронку, встряхивают с двумя порциями, по 20 мл каждая, а затем с одной порцией 10 мл раствора 5 г/л гидроксихинолина в хлороформе. После прибавления каждой порции хлороформные слои отделяют, объединяют и доводят объём раствора хлороформом до 50,0 мл.

Раствор сравнения. Готовят таким же образом, используя стандартный раствор, указанный в фармакопейной статье.

Контрольный раствор. Готовят таким же образом, используя растворитель, указанный в фармакопейной статье.

Измеряют интенсивность флуоресценции (ОФС «Флуориметрия») испытуемого раствора (I1), раствора сравнения (I2) и контрольного раствора (I3) при длине волны возбуждения 392 нм и дополнительным фильтром с пропусканием при длине волны 518 нм или монохроматором, настроенным на пропускание при этой же длине волны.

Флуоресценция испытуемого раствора (I1 – I3) не должна превышать флуоресценцию раствора сравнения (I2 – I3).

МЕТОД 2

Данный метод применяют для субстанций, предназначенных для использования в гемодиализе.

Определение проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Испытуемый раствор. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, навеску испытуемого образца, содержащую от 1,2 мкг до 3,8 мкг алюминий-иона, помещают в полимерную мерную колбу объёмом 100 мл, прибавляют 50 мл воды и растворяют на ультразвуковой бане в течение 30 мин. Добавляют 4 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Растворы сравнения. Алюминиевую проволоку опускают на несколько минут в хлористоводородной кислоты раствор 6 М, нагретый до температуры 80 °С. Около 0,1 г обработанной проволоки растворяют в смеси 10 мл хлористоводородной кислоты 25 % и 2 мл азотной кислоты концентрированной при температуре около 80 °С, и продолжают нагревание до получения объёма смеси около 4 мл. Смесь охлаждают до комнатной температуры и прибавляют 4 мл воды, упаривают до объёма около 2 мл, охлаждают, переносят в мерную колбу объёмом 100 мл, доводят водой до объёма 100,0 мл и перемешивают. 10 мл полученного раствора доводят водой до объёма 100,0 мл и перемешивают. 1,0 мл полученного раствора доводят водой до объёма 100,0 мл. 1,0 мл, 2,0 мл и 4,0 мл полученного раствора помещают в отдельные мерные колбы объёмом 100 мл и доводят азотной кислотой разведённой 25 % до объёма 100,0 мл (0,01 мкг/мл, 0,02 мкг/мл и 0,04 мкг/мл Al, соответственно).

Контрольный раствор. Азотная кислота разведённая 25 %.

Измеряют поглощение испытуемого раствора и растворов сравнения при 309,3 нм, используя в качестве источника излучения лампу с полым алюминиевым катодом и беспламенную электрическую печь.

Концентрацию алюминия в испытуемом растворе определяют по калибровочному графику, построенному по растворам сравнения. Рассчитывают содержание алюминия в субстанции.

МЕТОД 3

Испытуемый раствор. К 1,0 мл раствора испытуемого образца, приготовленного, как указано в фармакопейной статье, прибавляют 10 мкл воды, содержащей не более 1 нг/мл алюминия, и доводят объём раствора подвижной фазой до 10,0 мл.

Растворы сравнения. В пять отдельных мерных колб объёмом 20 мл помещают 0 мл, 0,25 мл, 0,5 мл, 1,0 мл и 2,0 мл алюминия стандартного раствора 100 мкг/мл и доводят объём азотной кислоты 0,5 М раствором, содержащим не более 1 нг/мл алюминия, до метки (0 мкг/мл, 1,25 мкг/мл, 2,5 мкг/мл, 5 мкг/мл и 10 мкг/мл Al, соответственно). В пять отдельных мерных колб объёмом 10 мл помещают по 1,0 мл воды, содержащей не более 1 нг/мл алюминия, 10 мкл одного из полученных калибровочных растворов алюминия и доводят объём подвижной фазой до метки (0 нг/мл, 1,25 нг/мл, 2,5 нг/мл, 5 нг/мл и 10 нг/мл алюминий-иона, соответственно).

Условия хроматографирования:

- колонка: длиной 150 мм и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная силикагелем фенилсилильным для хроматографии с размером частиц 5 мкм;

- температура колонки: 40 °С;

- подвижная фаза: гидроксихинолина раствор в ацетонитриле 3 % – аммония ацетата раствор 0,2 М (1:1 об/об);

- скорость подвижной фазы: подбирают таким образом, чтобы время удерживания комплекса алюминий-гидроксихинолин было около 9 мин;

- детектор: флуориметрический, возбуждение 380 нм, испускание 520 нм;

- вводимый объём пробы: 100 мкл.

Строят калибровочный график зависимости площади пика Si от концентрации алюминия (нг/мл). Определяют параметры линейной регрессии (ОФС «Статистическая обработка результатов физических, физико-химических и химических испытаний»).

Пригодность системы. Коэффициент корреляции должен быть не менее 0,99. Относительное стандартное отклонение оптической плотности для каждого калибровочного раствора должно быть не более 2 % (3 ввода).

С помощью уравнения линейной регрессии находят концентрацию алюминия (нг/мл) в испытуемом растворе и испытуемом образце.

МЕТОД 4

Определение проводят одним из приведённых ниже способов:

1. Растворяют точную навеску препарата (соответствующую 20–30 мг алюминия) в смеси 2 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М и 50 мл воды. Прибавляют 50,0 мл 0,05 М раствора натрия эдетата и нейтрализуют натрия гидроксида раствором 1 М по метиловому красному. Нагревают раствор до кипения и выдерживают на водяной бане в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 50 мг индикаторной смеси ксиленолового оранжевого, 5 г гексаметилентетрамина и титруют избыток натрия эдетата 0,1 М раствором цинка сульфата до красно-фиолетового окрашивания.

   1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 1,349 мг алюминия.

2. К 20,0 мл раствора препарата, приготовленного, как описано в фармакопейной статье, прибавляют 25,0 мл 0,1 М раствора натрия эдетата и 10 мл смеси равных объёмов аммония ацетата раствора 15,5 % и уксусной кислоты разведённой 12 %. Кипятят в течение 2 мин, охлаждают до комнатной температуры, добавляют 50 мл этанола и 3 мл дитизона раствора 0,25 % в этаноле. Избыток натрия эдетата титруют 0,1 М раствором цинка сульфата до перехода окраски от зеленовато-голубой до красно-фиолетовой. 9 1 мл 0,1 М раствора натрия эдетата соответствует 2,698 мг алюминия.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0002 АММОНИЯ СОЛИ

МЕТОД 1

Испытуемый раствор. Указанный в фармакопейной статье раствор помещают в пробирку или растворяют в пробирке указанную навеску испытуемого образца в 14 мл воды. При необходимости подщелачивают натрия гидроксида раствором 8,5 % и доводят объём раствора водой до 15 мл.

Раствор сравнения. К 10 мл аммония стандартного раствора (1 ppm NH4) прибавляют 5 мл воды.

К испытуемому раствору и раствору сравнения прибавляют по 0,3 мл калия тетрайодомеркурата щелочного раствора и закрывают пробирки.

Через 5 мин жёлтая окраска испытуемого раствора не должна быть интенсивнее окраски раствора сравнения.

МЕТОД 2

Испытуемый раствор. Указанную в фармакопейной статье навеску испытуемого образца растирают в мелкий порошок, помещают в колбу с пробкой объёмом 25 мл и растворяют или суспендируют в 1 мл воды.

Раствор сравнения. Готовят одновременно и таким же образом, используя указанный в фармакопейной статье объём аммония стандартного раствора (1 ppm NH4) и 1 мл воды.

К испытуемому раствору и раствору сравнения прибавляют по 0,30 г магния оксида тяжёлого. Колбы немедленно закрывают, предварительно поместив под пробку полоску серебряно-марганцевой бумаги размером 5 × 5 мм и обработанную несколькими каплями воды. Перемешивают, не допуская разбрызгивания жидкости, и выдерживают при температуре 40 °С в течение 30 мин.

Серая окраска полоски бумаги над испытуемым раствором не должна быть интенсивнее окраски полоски бумаги над раствором сравнения.

МЕТОД 3

Метод предназначен для определения аммония солей в присутствии щёлочноземельных и тяжёлых металлов.

Испытуемый раствор. Навеску испытуемого образца, указанную в фармакопейной статье, растворяют в возможно меньшем количестве воды, прибавляют при охлаждении 2 мл натрия гидроксида раствора 10 % и 2 мл натрия карбоната раствора 10 %. Полученный раствор разводят водой до требуемой концентрации, взбалтывают и фильтруют. Для определения используют 10 мл полученного фильтрата.

Раствор сравнения. 10 мл аммония стандартного
раствора (2 ppm NH4).

К испытуемому раствору и раствору сравнения прибавляют
по 0,15 мл калия тетрайодомеркурата щелочного раствора и перемешивают. Через 5 мин сравнивают окраску растворов.

Окраска испытуемого раствора не должна быть интенсивнее окраски раствора сравнения.

МЕТОД 4

Метод предназначен для определения аммония солей в присутствии не более 0,03 % примесей железа.

Испытуемый раствор. К 10 мл раствора, приготовленного, как указано в фармакопейной статье, прибавляют две капли натрия гидроксида раствора 10 % и 3 мл калия-натрия тартрата раствора 20 % и перемешивают.

Раствор сравнения. К 10 мл аммония стандартного
раствора (2 ppm NH4) прибавляют две капли натрия гидроксида раствора 10 % и 3 мл калия-натрия тартрата раствора 20 %.

К испытуемому раствору и раствору сравнения прибавляют
по 0,15 мл калия тетрайодомеркурата щелочного раствора и перемешивают. Через 5 мин сравнивают окраску растворов.

Окраска испытуемого раствора не должна быть интенсивнее окраски раствора сравнения.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0003 КАЛЬЦИЙ

МЕТОД 1

При приготовлении всех растворов, применяемых в данном испытании, должна использоваться вода дистиллированная.

Испытуемый раствор. Смесь 1 мл уксусной кислоты разведённой 12 % и 15 мл указанного в фармакопейной статье раствора или раствора, содержащего указанную навеску испытуемого образца.

Раствор сравнения. Готовят таким же образом, используя 10 мл кальция стандартного раствора (10 ppm Ca), 1 мл уксусной кислоты разведённой 12 % и 5 мл воды дистиллированной.

В каждую из двух пробирок, предварительно, помещают по 0,2 мл кальция стандартного раствора спиртового (100 ppm Ca) и 1 мл аммония оксалата раствора 4 %. Через 1 минуту в одну из пробирок прибавляют испытуемый раствор, а во вторую раствор сравнения. Пробирки встряхивают.

Через 15 мин опалесценция испытуемого раствора не должна быть интенсивнее опалесценции раствора сравнения.

МЕТОД 2

Испытуемый раствор. 10 мл раствора, приготовленного, как указано в фармакопейной статье.

Раствор сравнения. 10 мл кальция стандартного раствора 30 мкг/мл.

К испытуемому раствору и раствору сравнения прибавляют по 1 мл аммония хлорида раствора 10 %, 1 мл аммиака раствора 10 % и 1 мл аммония оксалата раствора 4 %, перемешивают.

Через 10 мин сравнивают опалесценцию растворов. Опалесценция, появившаяся в испытуемом растворе, не должна превышать опалесценцию раствора сравнения.

МЕТОД 3

Раствор лантана(III) хлорида. К 58,65 г лантана(III) оксида медленно и осторожно прибавляют 100 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и нагревают до кипения. Затем раствор охлаждают и доводят объём раствора водой до 1000 мл.

Испытуемый раствор. В тефлоновую чашку помещают указанную в фармакопейной статье навеску испытуемого образца, прибавляют 5 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, 5 мл азотной кислоты, свободной от свинца, 5 мл хлорной кислоты и осторожно перемешивают. Затем прибавляют 35 мл фтористоводородной кислоты и медленно выпаривают досуха. К остатку прибавляют 5 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, накрывают чашку часовым стеклом и нагревают до кипения. После охлаждения часовое стекло и чашку промывают водой, сливая полученный раствор в мерную колбу объёмом 50 мл и доводят объём раствора водой до метки (раствор А). 5,0 мл раствора А помещают в мерную колбу объёмом 100 мл, прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, 10 мл раствора лантана(III) хлорида и доводят объём раствора водой до метки.

Параллельно готовят холостой раствор, с использованием тех же реактивов, за исключением испытуемого образца.

Растворы сравнения (1,0; 2,0; 3,0 и 4,0 мкг/мл). В 4 мерные колбы объёмом 100 мл, содержащие по 10 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и 10 мл раствора лантана(III) хлорида,
помещают 1,0; 2,0; 3,0 и 4,0 мл кальция стандартного раствора 100 мкг/мл, соответственно, и доводят объёмы растворов водой до метки. Растворы используют свежеприготовленными.

Проводят не менее трёх измерений атомной абсорбции или эмиссии растворов сравнения и испытуемого раствора при длине волны 422,7 нм или 239,85 нм, используя пламя закись азота–ацетилен и лампу с полым кальциевым катодом в качестве источника излучения. За результат принимают среднее из трёх измерений. Допускается использовать пламя воздух–ацетилен. Концентрацию кальция в испытуемом растворе находят по калибровочному графику, построенному по растворам сравнения с вычитанием сигнала холостого раствора из сигнала испытуемого раствора. Концентрация кальция в испытуемом растворе должна находиться внутри диапазона калибровочной кривой.

МЕТОД 4

Для приготовления азотной кислоты 0,3 М раствора используют азотную кислоту, свободную от тяжёлых металлов. Для приготовления всех растворов используют посуду из полимерных материалов.

Испытуемый раствор. В мерную колбу объёмом 100 мл помещают 50 мл раствора, приготовленного, как указано в фармакопейной статье, прибавляют 2,1 мл азотной кислоты, свободной от тяжёлых металлов, и доводят объём раствором испытуемого образца до метки.

Растворы сравнения (1,0; 2,0; 3,0 и 4,0 мкг/мл). В мерную колбу объёмом 25 мл помещают 1,0 мл кальция стандартного раствора 1 мг/мл и доводят объём азотной кислоты 0,3 М раствором до метки. В 4 мерные колбы объёмом 20 мл помещают 0,5; 1,0; 1,5 и 2,0 мл полученного раствора, соответственно, и доводят объём азотной кислоты 0,3 М раствором до метки. Растворы используют свежеприготовленными.

Контрольный раствор. Азотной кислоты 0,3 М раствор.

Проводят не менее трёх измерений атомной абсорбции или эмиссии растворов сравнения и испытуемого раствора при длине волны 393,37 нм или 239,85 нм, используя пламя закись азота–ацетилен и лампу с полым кальциевым катодом в качестве источника излучения. За результат принимают среднее из трёх измерений. Допускается использовать пламя воздух–ацетилен. Концентрацию кальция в испытуемом растворе находят по калибровочному графику, построенному по растворам сравнения. Концентрация кальция в испытуемом растворе должна находиться внутри диапазона калибровочной кривой.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0004 МЫШЬЯК

МЕТОД А

Прибор (см. рисунок 1) состоит из конической колбы объёмом 100 мл, закрытой стеклянной притёртой пробкой, через которую проходит стеклянная трубка длиной около 200 мм и внутренним диаметром около 5 мм. Нижняя часть трубки сужается до внутреннего диаметра 1 мм; на расстоянии около 20 мм от кончика трубки расположено боковое отверстие диаметром от 2 мм до 3 мм. Трубка помещена таким образом, чтобы боковое отверстие находилось минимум на 3 мм ниже нижней поверхности пробки. Другая стеклянная трубка с таким же внутренним диаметром соединяется с первой трубкой. Вторая трубка дважды изогнута под прямым углом, её свободный конец сужается до внутреннего диаметра 1 мм. Этот конец погружён в пробирку, содержащую 3,0 мл раствора серебра диэтилдитиокарбамата. Первую трубку неплотно заполняют 50–60 мг свинцово-ацетатной ваты или помещают небольшой ватный тампон и скрученную в трубочку полоску свинцово-ацетатной бумаги массой 50–60 мг.

Рисунок 1. Прибор для определения мышьяка в лекарственных средствах. Размеры указаны в миллиметрах. А – свинцово-ацетатная бумага/свинцово-ацетатная вата.

Испытуемый раствор. Указанный в фармакопейной статье раствор помещают в коническую колбу и доводят объём раствора водой до 25 мл или растворяют в конической колбе указанную навеску испытуемого образца в 25 мл воды.

Раствор сравнения. Готовят таким же образом, используя 1 мл мышьяка стандартного раствора (1 ppm As) разбавленного водой до 25 мл.

Раствор серебра диэтилдитиокарбамата. Раствор готовят непосредственно перед использованием. 0,100 г серебра диэтилдитиокарбамата растворяют в пиридине и доводят объём раствора тем же растворителем до 20,0 мл.

К испытуемому раствору и раствору сравнения прибавляют по 15 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, 0,1 мл олова(II) хлорида раствора (1), 5 мл калия йодида раствора 1 М, выдерживают в течение 15 мин и прибавляют 5 г цинка активированного. Сразу соединяют две части прибора, колбу помещают в водяную баню, температура которой поддерживается такой, чтобы обеспечить равномерное выделение газа.

По истечении не менее 2 ч окраска свинцово-ацетатной бумаги/ваты, полученная с испытуемым раствором, не должна быть интенсивнее окраски свинцово-ацетатной бумаги/ваты, полученной с раствором сравнения.

Испытание пригодности. Интенсивность окраски раствора сравнения должна соответствовать интенсивности окраски 3 мл смеси, приготовленной из 3,0 мл жёлтого исходного раствора, 0,6 мл красного исходного раствора и 11,40 мл раствора хлористоводородной кислоты концентрированной (10 г/л HCl) (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 1]).

МЕТОД Б

Испытуемый раствор. Указанную в фармакопейной статье навеску испытуемого образца помещают в пробирку, содержащую 4 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и около 5 мг калия йодида.

Раствор сравнения. Готовят таким же образом, используя 0,5 мл мышьяка стандартного раствора (10 ppm As).

К испытуемому раствору и раствору сравнения прибавляют по 3 мл натрия гипофосфита раствора и нагревают на водяной бане в течение 15 мин, периодически встряхивая.

После нагревания на водяной бане окраска испытуемого раствора не должна быть интенсивнее окраски раствора сравнения.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0005 Ртуть

МЕТОД 1

Испытуемый раствор. В делительную воронку объёмом 100 мл помещают 15 мл водного раствора испытуемого образца, приготовленного, как указано в фармакопейной статье, и прибавляют 5 мл серной кислоты раствора 1 М.

Раствор сравнения. В делительную воронку объёмом 100 мл помещают 10 мл воды, 5 мл ртути стандартного раствора 1 мкг/мл и 5 мл серной кислоты раствора 1 М.

Контрольный раствор. В делительную воронку объёмом 100 мл помещают 15 мл воды и 5 мл серной кислоты раствора 1 М.

К каждому из полученных растворов прибавляют по 5 мл уксусной кислоты раствора 6 М и перемешивают. Затем прибавляют по 10 мл дитизона раствора 0,0012 % (0,00125 %), взбалтывают в течение 2 мин, дают отстояться и фильтруют органическую фазу.

Измеряют оптическую плотность фильтратов испытуемого раствора и раствора сравнения относительно фильтрата контрольного раствора в максимуме поглощения при длине волны 498 нм (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Оптическая плотность испытуемого раствора не должна превышать оптическую плотность раствора сравнения.

МЕТОД 2

Метод беспламенной атомизации заключается в восстановлении ионов ртути до металлической ртути, получении с помощью генератора атомного пара паров ртути, последующей их отгонке потоком воздуха или инертного газа в абсорбционную ячейку атомно-абсорбционного спектрометра и измерении поглощения монохроматического излучения от ртутной лампы при резонансной длине волны 253,6 нм.

Испытуемый раствор. Указанную в фармакопейной статье навеску испытуемого образца помещают в химический стакан объёмом 100 мл и растворяют в 35 мл воды, нагревают и перемешивают, при необходимости. Прибавляют 2 капли фенолфталеина раствора 1 % и при необходимости медленно нейтрализуют при постоянном перемешивании, используя натрия гидроксида раствор 1 М или серной кислоты раствор 1 М.

Раствор сравнения. В химический стакан объёмом 100 мл помещают 2,0 мл ртути стандартного раствора 1 мкг/мл и прибавляют 35 мл воды.

Контрольный раствор. В химический стакан объёмом 100 мл помещают 35 мл воды.

К испытуемому раствору и раствору сравнения прибавляют по 3 мл серной кислоты концентрированной и по 1 мл калия перманганата раствора 5 %. Накрывают стаканы часовым стеклом, кипятят несколько секунд и охлаждают. Избыток калия перманганата разрушают прибавлением по каплям гидроксиламина гидрохлорида раствора 10 % до обесцвечивания. Немедленно промойте растворы водой в аэрационной установке и разбавьте водой до 100 мл.

К полученным растворам прибавляют по 2 мл олова(II) хлорида раствора 10 % и немедленно помещают в генератор атомного пара. Скорость потока воздуха или инертного газа устанавливают таким образом, чтобы избежать бурного выделения пузырьков из раствора.

Измеряют поглощение испытуемого раствора и раствора сравнения при длине волны 253,6 нм (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Поглощение испытуемого раствора не должно превышать поглощение раствора сравнения.

В случае трудносжигаемых веществ предварительно проводят разложение вещества смесью концентрированных азотной и серной кислот в присутствии водорода пероксида. Некоторые вещества могут реагировать с водорода пероксидом со взрывом. Необходимо соблюдать меры предосторожности.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0006 Селен

МЕТОД 1

Испытуемый раствор. Навеску испытуемого образца от 0,1 г до 0,2 г, если не указано иначе в фармакопейной статье, помещают в колбу для сжигания с кислородом вместимостью 1000 мл, прибавляют 25 мл смеси азотная кислота концентрированная – вода (1:30 об/об) и проводят сжигание (ОФС «Метод сжигания в колбе с кислородом»). Для веществ, сгорающих не полностью и образующих сажу, рекомендуется прибавление магния оксида, что должно быть указано в фармакопейной статье. После завершения сжигания пробку, держатель образца и стенки колбы промывают 10 мл воды. Раствор переносят с помощью 20 мл воды в химический стакан вместимостью 150 мл и осторожно нагревают до кипения. Кипятят в течение 10 мин и оставляют до охлаждения.

Раствор сравнения. 6 мл селена стандартного раствора 1 мкг/мл помещают в химический стакан вместимостью 150 мл, прибавляют 25 мл смеси азотная кислота концентрированная – вода (1:30 об/об) и 25 мл воды.

Раствор 2,3-диаминонафталина. 0,1 г 2,3-диаминонафталина и 0,5 г гидроксиламина гидрохлорида растворяют в 100 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М. Раствор используют свежеприготовленным.

Контрольный раствор. К 25 мл смеси азотная кислота концентрированная – вода (1:30 об/об) прибавляют 25 мл воды и перемешивают.

К испытуемому раствору, раствору сравнения и контрольному раствору прибавляют смесь аммиака раствор концентрированный 25 % – вода (1:2 об/об) до значения рН 2,0 ± 0,2. Растворы разбавляют водой до объёма 60 мл и переносят в защищённые от света делительные воронки с помощью 10 мл воды. Прибавляют по 0,2 г гидроксиламина гидрохлорида, закрывают пробками и встряхивают до растворения. Сразу после растворения прибавляют по 5 мл раствора 2,3-диаминонафталина, закрывают пробками и снова встряхивают. Растворы выдерживают при комнатной температуре в течение 100 мин, затем прибавляют по 5 мл циклогексана, энергично встряхивают в течение 2 мин и отстаивают до разделения слоёв.

Водные слои отделяют, циклогексановые извлечения центрифугируют для удаления диспергированной воды. Измеряют оптические плотности циклогексановых извлечений испытуемого раствора и раствора сравнения в кювете с толщиной слоя 1 см в максимуме поглощения при длине волны около 380 нм, используя циклогексановое извлечение контрольного раствора в качестве компенсационного раствора (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Оптическая плотность испытуемого раствора не должна превышать оптическую плотность раствора сравнения при навеске испытуемого вещества 0,2 г. При проведении испытания с 0,1 г испытуемого образца оптическая плотность испытуемого раствора не должна превышать половину оптической плотности раствора сравнения.

МЕТОД 2

Испытуемый раствор. К 50,0 мл раствора испытуемого образца, приготовленного, как указано в фармакопейной статье, прибавляют 1,5 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствором испытуемого образца до 100,0 мл.

Раствор сравнения. 10,0 мл селена стандартного раствора 1 мкг/мл доводят азотной кислоты 0,3 М раствором до 100,0 мл.

Контрольный раствор. Азотной кислоты 0,3 М раствор.

Проводят измерение атомной эмиссии раствора сравнения и испытуемого раствора при длине волны 203,96 нм по сравнению с контрольным раствором (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой»).

Величина атомной эмиссии испытуемого раствора не должна превышать величину атомной эмиссии раствора сравнения.

МЕТОД 3

В химический стакан помещают указанное в фармакопейной статье количество испытуемого образца, прибавляют 20 мл аммиака раствора 10 %, нагревают на водяной бане до температуры 35–40 °С и выдерживают в течение 30 мин при той же температуре, часто взбалтывая, после охлаждения фильтруют. Фильтрат выпаривают на водяной бане досуха. К остатку прибавляют 1 мл азотной кислоты, вновь выпаривают досуха. Сухой остаток растворяют в 6 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %. К 3 мл полученного раствора прибавляют 5 мл натрия гипофосфита раствора и выдерживают на водяной бане в течение 15 мин; не должно быть покраснения раствора.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0007 Сульфаты

МЕТОДИКА 1

При приготовлении всех растворов, применяемых в данном испытании, должна использоваться вода дистиллированная.

Испытуемый раствор. К 4,5 мл сульфата стандартного раствора спиртового (10 ppm SO4) прибавляют 3 мл раствора 250 г/л бария хлорида, встряхивают и выдерживают в течение 1 мин. К 2,5 мл полученной суспензии прибавляют 15 мл раствора испытуемого образца, указанного в фармакопейной статье, и 0,5 мл уксусной кислоты разведённой 30 %.

Раствор сравнения. Готовят таким же образом, используя вместо раствора испытуемого образца 15 мл сульфата стандартного раствора (10 ppm SO4).

Через 5 мин любая опалесценция испытуемого раствора не должна быть интенсивнее опалесценции раствора сравнения.

МЕТОДИКА 2

Испытуемый раствор. 10 мл раствора, приготовленного, как указано в фармакопейной статье.

Раствор сравнения. 10 мл сульфата стандартного раствора 10 мкг/мл.

К испытуемому раствору и раствору сравнения прибавляют по 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и 1 мл раствора 50 г/л бария хлорида и перемешивают.

Через 10 мин сравнивают опалесценцию испытуемого раствора и раствора сравнения. Опалесценция, появившаяся в испытуемом растворе, не должна превышать опалесценцию раствора сравнения.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0008 Фосфаты

МЕТОД 1

Испытуемый раствор. Готовят в соответствии с указаниями фармакопейной статьи и, при необходимости, нейтрализуют.

Раствор сравнения. Готовят таким же образом, используя 2,0 мл фосфата стандартного раствора (5 ppm PO4) прибавляют 98 мл воды.

К испытуемому раствору и раствору сравнения прибавляют по 4 мл сульфомолибденового реактива 2,5 %. Встряхивают и прибавляют по 0,1 мл олова(II) хлорида раствора (2). Через 10 мин сравнивают окраски, используя по 20 мл каждого раствора.

Любая окраска испытуемого раствора не должна быть интенсивнее окраски раствора сравнения.

МЕТОД 2

К 10 мл испытуемого раствора, приготовленного, как указано в фармакопейной статье, прибавляют 5 мл молибденованадиевого реактива, перемешивают и выдерживают 5 мин. Появляющееся жёлтое окрашивание не должно превышать окрашивания раствора сравнения, приготовленного таким же образом с использованием 10 мл фосфата стандартного раствора 5 мкг/мл.

МЕТОД 3

Указанную в фармакопейной статье навеску испытуемого образца нагревают до кипения с 10 мл азотной кислоты и после охлаждения фильтруют. К фильтрату прибавляют 5 мл аммония молибдата раствора 10 %; в течение 1 ч не должен образовываться жёлтый осадок.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0009 Хлориды

МЕТОДИКА 1

Испытуемый раствор. К 15 мл указанного в фармакопейной статье раствора прибавляют 1 мл азотной кислоты разведённой 12,5 % и переливают смесь в пробирку, содержащую 1 мл серебра нитрата раствора 0,1 М.

Раствор сравнения. Готовят таким же образом, используя 10 мл хлорида стандартного раствора (5 ppm Cl) и 5 мл воды.

Пробирки помещают в защищённое от света место. Через 5 мин пробирки просматривают на чёрном фоне.

Любая опалесценция испытуемого раствора, не должна быть интенсивнее опалесценции раствора сравнения.

МЕТОДИКА 2

Испытуемый раствор. 10 мл раствора, приготовленного, как указано в фармакопейной статье.

Раствор сравнения. 10 мл хлорида стандартного раствора 2 мкг/мл.

К испытуемому раствору и раствору сравнения прибавляют по 0,5 мл азотной кислоты и 0,5 мл серебра нитрата раствора 2 %. Перемешивают и помещают пробирки в защищённое от света место. Через 5 мин пробирки просматривают на чёрном фоне в проходящем свете (перпендикулярно оси пробирок).

Опалесценция, появившаяся в испытуемом растворе, не должна превышать опалесценцию раствора сравнения.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0010 Цинк

МЕТОД 1

В слабокислой среде ионы цинка образуют с раствором калия ферроцианида, в зависимости от концентрации ионов цинка, белое помутнение раствора или белый осадок, не растворимый в хлористоводородной кислоте разведённой 8,3 %. Предельная чувствительность реакции – 1 мкг/мл цинк-иона. При концентрации цинк-иона 5 мкг/мл наблюдают помутнение раствора.

Испытуемый раствор. 10 мл раствора испытуемого образца, приготовленного, как указано в фармакопейной статье.

Раствор сравнения. 10 мл цинка стандартного раствора 5 мкг/мл.

К испытуемому раствору и раствору сравнения прибавляют по 2 мл хлористоводородной кислоты 25 % и по 0,2 мл раствора 50 г/л калия ферроцианида. Через 10 мин сравнивают опалесценцию растворов. Опалесценция, появившаяся в испытуемом растворе, не должна превышать опалесценцию раствора сравнения.

Примечание: в случае появления в испытуемом растворе синего окрашивания, следует предварительно отделить ионы железа. Для этого к испытуемому раствору, нагретому до кипения, прибавляют
аммиака раствор 10 % до отчётливого запаха, смесь фильтруют и проводят определение цинк-ионов в фильтрате.

МЕТОД 2

Атомно-абсорбционная спектрометрия (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Испытуемый раствор. К навеске испытуемого образца, соответствующей от 20 мкг до 160 мкг цинк-иона, если не указано иное в фармакопейной статье, прибавляют 50 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М, обрабатывают ультразвуком в течение 30 мин и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Растворы сравнения. 4,0 мл, 8,0 мл и 16,0 мл цинка стандартного раствора 10 мкг/мл доводят хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М до объёма 100,0 мл (0,4 мкг/мл, 0,8 мкг/мл и 1,6 мкг/мл цинк-иона, соответственно).

Условия определения:

- источник: цинковая лампа с полым катодом;

- длина волны: 213,9 нм;

- атомизатор: воздушно-ацетиленовое пламя.

Определяют концентрацию цинка в испытуемом растворе по калибровочному графику, построенному по растворам сравнения, и рассчитывают содержание цинка в испытуемом образце.

МЕТОД 3

Растворяют точную навеску препарата (соответствующую 60–80 мг цинка), как указано в фармакопейной статье. Прибавляют 50 мл воды, 50 мг индикаторной смеси ксиленолового оранжевого, 5 г гексаметилентетрамина и титруют 0,05 М раствором натрия эдетата до жёлтого окрашивания.

1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 3,269 мг цинка.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0011 Железо

МЕТОД 1

Испытуемый раствор. 10 мл указанного в фармакопейной статье раствора помещают в пробирку или растворяют в пробирке указанную навеску испытуемого образца в 10 мл воды.

Раствор сравнения. Готовят таким же образом, используя 10 мл железа стандартного раствора (1 ppm Fe).

К испытуемому раствору и раствору сравнения прибавляют по 2 мл раствора 200 г/л лимонной кислоты моногидрата и 0,1 мл тиогликолевой кислоты, перемешивают, подщелачивают аммиака раствором и доводят объём раствора водой до 20 мл.

Через 5 мин розовая окраска испытуемого раствора не должна быть интенсивнее окраски раствора сравнения.

МЕТОД 2

Испытуемый раствор. 10 мл раствора испытуемого образца, приготовленного, как указано в фармакопейной статье.

Раствор сравнения. 10 мл железа стандартного раствора 3 мкг/мл.

К испытуемому раствору и раствору сравнения прибавляют по 2 мл сульфосалициловой кислоты раствора 10 %, 1 мл аммиака раствора 10 %, перемешивают и через 5 мин сравнивают окраску растворов.

Определение солей железа в соединениях магния

Испытуемый раствор. 10 мл раствора испытуемого образца, приготовленного, как указано в фармакопейной статье.

Раствор сравнения. 10 мл железа стандартного раствора 3 мкг/мл.

К испытуемому раствору и раствору сравнения прибавляют по 2 мл сульфосалициловой кислоты раствора 10 %, 0,5 мл аммония хлорида раствора 10,7 %, 1 мл аммиака раствора 10 % и через 5 мин сравнивают окраску растворов.

Определение солей железа в соединениях алюминия

Испытуемый раствор. 10 мл раствора испытуемого образца, приготовленного, как указано в фармакопейной статье.

Раствор сравнения. 10 мл железа стандартного раствора 3 мкг/мл.

К испытуемому раствору и раствору сравнения прибавляют по 5 мл сульфосалициловой кислоты раствора 10 %, 2 мл натрия гидроксида раствора 10 % и через 5 мин сравнивают окраску растворов.

МЕТОД 3

Испытуемый раствор. 10 мл раствора испытуемого образца, приготовленного, как указано в фармакопейной статье.

Раствор сравнения. К 3 мл железа стандартного раствора 3 мкг/мл прибавляют 7 мл воды.

К испытуемому раствору и раствору сравнения прибавляют по 0,5 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, 10 мг аммония персульфата и 1,5 мл раствора 150 г/л аммония тиоцианата, перемешивают и через 5 мин сравнивают окраску растворов.

Определение солей железа в зольном остатке органических соединений

Испытуемый раствор. Зольный остаток, полученный после сжигания навески испытуемого образца с серной кислотой концентрированной, обрабатывают при нагревании на водяной бане 2 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и прибавляют 2 мл воды.

Содержимое тигля при необходимости фильтруют в пробирку, тигель и фильтр промывают 3 мл воды, присоединяя промывные воды к фильтрату. Раствор нейтрализуют аммиака раствором концентрированным 25 % (контроль по универсальной индикаторной бумаге) и доводят объём раствора водой до 10 мл.

Раствор сравнения. В тигель помещают серную кислоту в количестве, взятом для сжигания испытуемого образца, и далее поступают как с испытуемым образцом, но объём раствора доводят водой до 9 мл, после чего прибавляют 1 мл железа стандартного раствора (30, 10 или 3 мкг в зависимости от метода определения).

Далее определение проводят любым из описанных выше методов определения железа в растворах лекарственных средств.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0012 Тяжёлые металлы

В методах, описанных ниже, используют тиоацетамида реактив (кроме методов 1 и 3А). Допускается использование натрия сульфида водно-глицеринового раствора (0,1 мл). Если указанная в фармакопейной статье методика разработана с использованием тиоацетамида реактива, но вместо него используют натрия сульфида водно-глицериновый раствор, то для методов 4, 5 и 11 необходимо включить проверочный раствор, приготовленный из такого же количества испытуемого образца, что и при приготовлении испытуемого раствора, к которому прибавляют такой же объём свинца стандартного раствора, что и при приготовлении раствора сравнения. Результаты испытания считают достоверными, если интенсивность окраски проверочного раствора равна или превышает интенсивность окраски раствора сравнения.

МЕТОД 1

Испытуемый раствор. 10 мл раствора испытуемого образца, приготовленного, как указано в фармакопейной статье.

Раствор сравнения. Смесь 2 мл свинца стандартного раствора 5 мкг/мл и 8 мл воды.

Контрольный раствор. 10 мл воды.

Примечание: если при приготовлении испытуемого раствора используется органический растворитель, то раствор сравнения, контрольный и стандартный растворы готовят с использованием того же растворителя.

К каждому раствору прибавляют по 1 мл уксусной кислоты разведённой 30 %, 2 капли натрия сульфида раствора 2 %, перемешивают и через 1 мин сравнивают окраску растворов.

В сравниваемых растворах допустима слабая опалесценция от выделившейся серы.

Требование: интенсивность окраски испытуемого раствора не должна превышать интенсивность окраски раствора сравнения.

МЕТОД 2

Испытуемый раствор. 10 мл раствора испытуемого образца, приготовленного, как указано в фармакопейной статье.

Раствор сравнения. Смесь 2 мл свинца стандартного раствора 5 мкг/мл и 8 мл воды.

Контрольный раствор. 10 мл воды.

Примечание: если при приготовлении испытуемого раствора используется органический растворитель, то раствор сравнения, контрольный и стандартный растворы готовят с использованием того же растворителя.

К каждому раствору прибавляют по 2 мл буферного раствора рН 3,5, перемешивают, прибавляют по 1 мл тиоацетамида реактива, перемешивают и через 2 мин сравнивают окраску растворов.

Требование: интенсивность окраски испытуемого раствора не должна превышать интенсивность окраски раствора сравнения.

МЕТОД 3А

Испытуемый раствор. Зольный остаток, полученный после сжигания 1,0 г (если не указано иначе в фармакопейной статье) испытуемого образца в присутствии серной кислоты концентрированной, обрабатывают при нагревании на сетке 2 мл аммония ацетата насыщенного раствора, нейтрализованного натрия гидроксида раствором 10 %, прибавляют 3 мл воды и фильтруют в пробирку через беззольный фильтр, предварительно промытый уксусной кислоты раствором 1 %, а затем горячей водой. Тигель и фильтр промывают 5 мл воды, пропуская её через тот же фильтр в ту же пробирку.

Раствор сравнения 1. В тигель помещают серную кислоту концентрированную в количестве, взятом для сжигания испытуемого образца, далее поступают как с испытуемым образцом, но промывание тигля и фильтра производят лишь 3 мл воды, после чего к фильтрату прибавляют 2 мл свинца стандартного раствора 5 мкг/мл.

Раствор сравнения 2. В тигель помещают серную кислоту концентрированную в количестве, взятом для сжигания испытуемого образца, и далее поступают как с испытуемым образцом, но промывание тигля и фильтра производят лишь 3 мл воды, после чего к фильтрату прибавляют 2 мл свинца стандартного раствора 10 мкг/мл.

Контрольный раствор. Готовят так же, как и испытуемый раствор, но без испытуемого образца.

К каждому раствору прибавляют по 1 мл уксусной кислоты разведённой 30 %, 2 капли натрия сульфида раствора 2 %, перемешивают и через 1 мин сравнивают окраску растворов.

В сравниваемых растворах допустима слабая опалесценция от выделившейся серы.

Требование: интенсивность окраски испытуемого раствора не должна превышать интенсивность окраски раствора сравнения. Номер раствора сравнения должен быть указан в фармакопейной статье.

МЕТОД 3Б

Испытуемый раствор. Зольный остаток, полученный после сжигания 1,0 г (если не указано иначе в фармакопейной статье) испытуемого образца в присутствии серной кислоты концентрированной, обрабатывают при нагревании на сетке 2 мл аммония ацетата насыщенного раствора, нейтрализованного натрия гидроксида раствором 10 %, прибавляют 3 мл воды и фильтруют в пробирку через беззольный фильтр, предварительно промытый уксусной кислоты раствором 1 %, а затем горячей водой. Тигель и фильтр промывают 5 мл воды, пропуская её через тот же фильтр в ту же пробирку.

Раствор сравнения 1. В тигель помещают серную кислоту концентрированную в количестве, взятом для сжигания испытуемого образца, и далее поступают как с испытуемым образцом, но промывание тигля и фильтра производят лишь 3 мл воды, после чего к фильтрату прибавляют 2 мл свинца стандартного раствора 5 мкг/мл.

Раствор сравнения 2. В тигель помещают серную кислоту концентрированную в количестве, взятом для сжигания испытуемого образца, и далее поступают как с испытуемым образцом, но промывание тигля и фильтра производят лишь 3 мл воды, после чего к фильтрату прибавляют 2 мл свинца стандартного раствора 10 мкг/мл.

Контрольный раствор. Готовят так же, как и испытуемый раствор, но без испытуемого образца.

К каждому раствору прибавляют по 2 мл буферного раствора рН 3,5, перемешивают, прибавляют по 1 мл тиоацетамида реактива, перемешивают и через 2 мин сравнивают окраску растворов.

Требование: интенсивность окраски испытуемого раствора не должна превышать интенсивность окраски раствора сравнения. Номер раствора сравнения должен быть указан в фармакопейной статье.

МЕТОД 4

Испытуемый раствор. 12 мл раствора указанного в фармакопейной статье испытуемого образца.

Раствор сравнения. Смесь 10 мл свинца стандартного раствора 1 мкг/мл или свинца стандартного раствора 2 мкг/мл, указанного в фармакопейной статье, и 2 мл раствора указанного в фармакопейной статье испытуемого образца.

Контрольный раствор. Смесь 10 мл воды и 2 мл раствора указанного в фармакопейной статье испытуемого образца.

К каждому раствору прибавляют 2 мл буферного раствора рН 3,5, перемешивают, прибавляют 1,2 мл тиоацетамида реактива и немедленно перемешивают. Через 2 мин сравнивают окраску полученных растворов.

Пригодность системы. Раствор сравнения должен иметь светло-коричневую окраску по сравнению с контрольным раствором.

Требование: интенсивность коричневой окраски испытуемого раствора не должна превышать интенсивность окраски раствора сравнения.

При затруднении в однозначной оценке результата растворы фильтруют через подходящий мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм. Фильтрование проводят медленно и равномерно при умеренном и постоянном давлении на поршень. Сравнивают пятна на фильтрах, полученные при фильтровании разных растворов.

МЕТОД 5

Испытуемый раствор. 12 мл указанного в фармакопейной статье раствора испытуемого образца, приготовленного с использованием органического растворителя, содержащего минимальное количество воды (например, диоксан или ацетон, содержащие 15 % воды).

Раствор сравнения. Смесь 10 мл свинца стандартного раствора (1 мкг/мл или 2 мкг/мл), указанного в фармакопейной статье, и 2 мл указанного в фармакопейной статье раствора испытуемого образца в органическом растворителе. Свинца стандартный раствор (1 мкг/мл или 2 мкг/мл) готовят путём разведения свинца стандартного раствора 100 мкг/мл органическим растворителем, используемым для растворения испытуемого образца.

Контрольный раствор. Смесь 10 мл растворителя, используемого для приготовления испытуемого раствора, и 2 мл указанного в фармакопейной статье раствора испытуемого образца в органическом растворителе.

К каждому раствору прибавляют 2,0 мл буферного раствора рН 3,5, перемешивают, прибавляют 1,2 мл тиоацетамида реактива и немедленно перемешивают. Через 2 мин сравнивают окраску полученных растворов.

Пригодность системы. Раствор сравнения должен иметь светло-коричневую окраску по сравнению с контрольным раствором.

Требование: интенсивность коричневой окраски испытуемого раствора не должна превышать интенсивность окраски раствора сравнения.

При затруднении в однозначной оценке результата растворы фильтруют через подходящий мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм. Фильтрование проводят медленно и равномерно при умеренном и постоянном давлении на поршень. Сравнивают пятна на фильтрах, полученные при фильтровании разных растворов.

МЕТОД 6

Испытуемый раствор. В кварцевый тигель помещают указанное в фармакопейной статье количество испытуемого образца (не более 2 г), прибавляют 4 мл магния сульфата раствора 25 % в серной кислоты растворе 9,8 %, перемешивают тонкой стеклянной палочкой и осторожно нагревают. Если смесь жидкая, осторожно упаривают досуха на водяной бане, затем постепенно нагревают до обугливания и продолжают нагревание до получения почти белого или, в крайнем случае, сероватого остатка. Прокаливание проводят при температуре не выше 800 °C. Полученный остаток охлаждают, смачивают несколькими каплями серной кислоты раствора 9,8 %, выпаривают досуха, повторно прокаливают и охлаждают. Общее время прокаливания не должно превышать 2 ч. Полученный остаток из тигля количественно переносят в подходящую ёмкость двумя порциями по 5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 %, прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствора 0,1 %, затем осторожно прибавляют аммиака раствор концентрированный 25 % до появления розового окрашивания. Охлаждают, прибавляют уксусную кислоту ледяную до обесцвечивания раствора и дополнительно прибавляют 0,5 мл уксусной кислоты ледяной. При необходимости фильтруют и промывают фильтр водой. Доводят объём раствора водой до 20 мл.

Раствор сравнения. Готовят, как описано для испытуемого раствора, используя вместо испытуемого образца указанный в фармакопейной статье объём свинца стандартного раствора 10 мкг/мл. К 10 мл полученного раствора прибавляют 2 мл испытуемого раствора.

Проверочный раствор. Готовят, как описано для испытуемого раствора, предварительно прибавляя к испытуемому образцу объём свинца стандартного раствора 10 мкг/мл, указанный в фармакопейной статье для приготовления раствора сравнения. К 10 мл полученного раствора прибавляют 2 мл испытуемого раствора.

Контрольный раствор. Смесь 10 мл воды и 2 мл испытуемого раствора.

К 12 мл каждого раствора прибавляют по 2 мл буферного раствора рН 3,5, перемешивают, прибавляют 1,2 мл тиоацетамида реактива и немедленно перемешивают. Через 2 мин сравнивают окраску полученных растворов.

Пригодность системы:

- раствор сравнения должен иметь светло-коричневую окраску по сравнению с контрольным раствором;

- интенсивность окраски проверочного раствора должна быть равна или должна превышать интенсивность окраски раствора сравнения.

Требование: интенсивность коричневой окраски испытуемого раствора не должна превышать интенсивность окраски раствора сравнения.

При затруднении в оценке результата растворы фильтруют через подходящий мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм. Фильтрование проводят медленно и равномерно при умеренном и постоянном давлении на поршень. Сравнивают пятна на фильтрах, полученные при фильтровании разных растворов.

МЕТОД 7

Испытуемый раствор. В кварцевом тигле тщательно смешивают количество испытуемого образца, указанное в фармакопейной статье, с 0,5 г магния оксида, прокаливают при слабом красном калении до получения однородного остатка белого или серовато-белого цвета. Если после 30 мин прокаливания смесь остаётся окрашенной, тигель охлаждают, содержимое перемешивают тонкой стеклянной палочкой и повторяют прокаливание. При необходимости операцию повторяют. Нагревают при температуре 800 °C в течение 1 ч. Остаток из тигля количественно переносят в подходящую ёмкость двумя порциями, каждая по 5 мл, смесью равных объёмов хлористоводородной кислоты 25 % и воды, прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствора 0,1 %, затем осторожно прибавляют аммиака раствор концентрированный 25 % до появления розового окрашивания. Охлаждают, прибавляют уксусную кислоту ледяную до обесцвечивания раствора и дополнительно прибавляют 0,5 мл уксусной кислоты ледяной. При необходимости фильтруют и промывают фильтр водой. Доводят объём раствора водой до 20 мл.

Раствор сравнения. Готовят, как описано для испытуемого раствора, используя вместо испытуемого образца указанный в фармакопейной статье объём свинца стандартного раствора 10 мкг/мл; высушивают в сушильном шкафу при температуре от 100 °C до 105 °С. К 10 мл полученного раствора прибавляют 2 мл испытуемого раствора.

Проверочный раствор. Готовят, как описано для испытуемого раствора, прибавляя к испытуемому образцу объём свинца стандартного раствора 10 мкг/мл, указанный в фармакопейной статье для приготовления раствора сравнения; высушивают в сушильном шкафу при температуре от 100 °C до 105 °С. К 10 мл полученного раствора прибавляют 2 мл испытуемого раствора.

Контрольный раствор. Смесь 10 мл воды и 2 мл испытуемого раствора.

К 12 мл каждого раствора прибавляют по 2 мл буферного раствора рН 3,5, перемешивают, прибавляют 1,2 мл тиоацетамида реактива и немедленно перемешивают. Через 2 мин сравнивают окраску полученных растворов.

Пригодность системы:

- раствор сравнения должен иметь светло-коричневую окраску по сравнению с контрольным раствором;

- интенсивность окраски проверочного раствора должна быть равна или должна превышать интенсивность окраски раствора сравнения.

Требование: интенсивность коричневой окраски испытуемого раствора не должна превышать интенсивность окраски раствора сравнения.

При затруднении в однозначной оценке результата растворы фильтруют через подходящий мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм. Фильтрование проводят медленно и равномерно при умеренном и постоянном давлении на поршень. Сравнивают пятна на фильтрах, полученные при фильтровании разных растворов.

МЕТОД 8

Испытуемый раствор. Количество испытуемого образца, указанное в фармакопейной статье, растворяют в 30 мл воды или в объёме воды, указанном в фармакопейной статье.

Раствор сравнения. Указанный объём свинца стандартного раствора 1 мкг/мл разводят до объёма испытуемого раствора, при отсутствии других указаний в фармакопейной статье.

Подготавливают прибор для фильтрования. В держатель мембранного фильтра (размер пор – 3 мкм), сверху которого помещён предфильтр, устанавливают шприц вместимостью 50 мл без поршня (Рисунок 1).

Испытуемый раствор помещают в шприц, устанавливают поршень на место и равномерно надавливают на него до тех пор, пока вся жидкость не будет отфильтрована. Открывают держатель, извлекают предфильтр и проверяют отсутствие примесей на мембранном фильтре. В противном случае его заменяют другим мембранным фильтром и операцию повторяют в тех же условиях.

Рисунок 1. Прибор для определения тяжёлых металлов методом 8. Размеры указаны в миллиметрах

К полученному предфильтрату или к указанному объёму предфильтрата прибавляют 2 мл буферного раствора pH 3,5, перемешивают, прибавляют 1,2 мл тиоацетамида реактива, немедленно перемешивают и оставляют на 10 мин. Затем снова фильтруют, как описано выше, но расположение фильтров изменяют так, чтобы жидкость сначала проходила через мембранный фильтр, а затем – через предфильтр (Рисунок 1). Фильтрование проводят медленно и равномерно при умеренном и постоянном давлении на поршень. После завершения фильтрования открывают держатель, снимают мембранный фильтр и высушивают его с помощью фильтровальной бумаги.

Параллельно в условиях, указанных для испытуемого раствора, проводят испытание с раствором сравнения.

Сравнивают пятна на фильтрах, полученные при фильтровании разных растворов.

Требование: интенсивность коричневой окраски пятна, полученного на фильтре после фильтрования испытуемого раствора, не должна превышать интенсивность окраски пятна, полученного на фильтре после фильтрования раствора сравнения.

МЕТОД 9

Испытуемый раствор. Количество или объём испытуемого образца, указанные в фармакопейной статье, помещают в чистую сухую длинногорлую колбу Кьельдаля вместимостью 100 мл (в случае интенсивного пенообразования необходимо использовать колбу вместимостью 300 мл). Колбу закрепляют под углом 45°. Если испытуемый образец представляет собой твёрдое вещество, то прибавляют
смесь 8 мл серной кислоты концентрированной и 10 мл азотной кислоты концентрированной в количестве, достаточном для полного смачивания испытуемого образца. Если испытуемый образец представляет собой жидкость, прибавляют несколько миллилитров вышеуказанной смеси кислот. Осторожно нагревают до начала реакции. После прекращения реакции прибавляют дополнительные порции смеси кислот, нагревая после каждого прибавления. Операцию повторяют до тех пор, пока объём добавленной смеси кислот не достигнет 18 мл. Усиливают нагревание и осторожно кипятят до потемнения раствора. Охлаждают, прибавляют 2 мл азотной кислоты концентрированной и снова нагревают до потемнения раствора. Продолжают нагревание с последующим прибавлением азотной кислоты концентрированной до прекращения дальнейшего потемнения раствора, затем сильно нагревают до появления плотных белых паров. Охлаждают, осторожно прибавляют 5 мл воды, осторожно кипятят до появления плотных белых паров и продолжают нагревание до получения
остатка объёмом 2–3 мл. Охлаждают, осторожно прибавляют 5 мл воды и определяют окраску раствора. Если раствор имеет жёлтую окраску, осторожно прибавляют 1 мл водорода пероксида и снова нагревают до появления плотных белых паров и получения остатка объёмом 2–3 мл. Если окраска раствора все ещё жёлтая, то повторяют прибавление 5 мл воды и 1 мл водорода пероксида до обесцвечивания раствора.
Охлаждают, осторожно разводят водой и переносят в пробирку вместимостью 50 мл, контролируя, чтобы общий объём раствора не превышал 25 мл. Доводят рН раствора до значения 3,0–4,0 аммиака раствором концентрированным 25 % (при приближении к указанному значению рН можно использовать аммиака раствор 10 %), используя в качестве внешнего индикатора индикаторную бумагу с узким диапазоном значений рН, затем доводят объём раствора водой до 40 мл и перемешивают. Прибавляют 2 мл буферного раствора рН 3,5, перемешивают, прибавляют 1,2 мл тиоацетамида реактива и немедленно перемешивают. Доводят объём раствора водой до 50 мл, перемешивают.

Раствор сравнения. Готовят параллельно в таких же условиях, как описано для испытуемого раствора, используя вместо испытуемого образца указанный в фармакопейной статье объём свинца стандартного раствора 10 мкг/мл.

Проверочный раствор. Готовят, как описано для испытуемого раствора, прибавляя к испытуемому образцу объём свинца стандартного раствора 10 мкг/мл, указанный в фармакопейной статье для приготовления раствора сравнения.

Контрольный раствор. Готовят, как описано для испытуемого раствора, но без добавления испытуемого образца.

Через 2 мин сравнивают окраску полученных растворов при рассеянном дневном свете, просматривая их сверху вдоль вертикальной оси пробирок на матово-белом фоне.

Пригодность системы:

- раствор сравнения должен иметь коричневую окраску по сравнению с контрольным раствором;

- интенсивность окраски проверочного раствора должна быть равна или должна превышать интенсивность окраски раствора сравнения.

Требование: интенсивность коричневой окраски испытуемого раствора не должна превышать интенсивность окраски раствора сравнения.

При затруднении в однозначной оценке результата растворы фильтруют через подходящий мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм. Фильтрование проводят медленно и равномерно при умеренном и постоянном давлении на поршень. Сравнивают пятна на фильтрах, полученные при фильтровании разных растворов.

МЕТОД 10

ПРЕДОСТЕРЕЖЕНИЕ! При использовании сосудов для разложения под высоким давлением необходимо соблюдать меры предосторожности и инструкции по эксплуатации, предоставляемые производителем. Циклы сжигания должны быть разработаны в зависимости от типа используемой микроволновой печи (например, микроволновые печи с контролем мощности, микроволновые печи с контролем температуры или печи высокого давления). Цикл сжигания должен соответствовать требованиям инструкции производителя. Цикл сжигания считают пригодным, если получается прозрачный раствор.

Испытуемый раствор. Количество испытуемого образца, указанное в фармакопейной статье (не более 0,5 г), помещают в подходящий чистый химический стакан. Последовательно прибавляют 2,7 мл серной кислоты концентрированной, 3,3 мл азотной кислоты концентрированной и 2,0 мл водорода пероксида, перемешивая компоненты с использованием магнитной мешалки, прибавляя каждый последующий реактив после того, как испытуемый образец полностью прореагирует с предыдущим реактивом. Полученную смесь переносят в сухой реакционный сосуд, устойчивый к высокому давлению (например, из фторполимера или кварцевого стекла).

Раствор сравнения. Готовят, как описано для испытуемого раствора, используя вместо испытуемого образца указанный объём свинца стандартного раствора 10 мкг/мл.

Проверочный раствор. Готовят, как описано для испытуемого раствора, прибавляя к испытуемому образцу объём свинца стандартного раствора 10 мкг/мл, указанный в фармакопейной статье для приготовления раствора сравнения.

Контрольный раствор. Готовят, как описано для испытуемого раствора, но без добавления испытуемого образца.

Сосуды закрывают крышкой и помещают в лабораторную микроволновую печь. Проводят сжигание, используя последовательно две подходящие программы. В зависимости от типа используемой микроволновой печи разрабатывают многоступенчатые программы для контроля процесса реакции, мониторинга давления, температуры или мощности. После завершения первой программы реакционные сосуды охлаждают, перед тем как их открыть. К содержимому каждого сосуда прибавляют 2,0 мл водорода пероксида, снова закрывают и продолжают сжигание с использованием второй программы. После завершения второй программы реакционные сосуды охлаждают, перед тем как их открыть. При необходимости получения прозрачного раствора повторно прибавляют водорода пероксид и проводят сжигание, используя вторую программу.

Охлаждают, осторожно разводят содержимое каждого сосуда водой, переносят в колбу, ополаскивая сосуд водой, и следят за тем, чтобы общий объём раствора не превышал 25 мл. Доводят значение рН растворов до 3,0–4,0 аммиака раствором концентрированным 25 % (при приближении к указанному значению рН можно использовать аммиака раствор 10 %) с использованием в качестве внешнего индикатора индикаторной бумаги с узким интервалом значений рН. Во избежание нагревания растворов используют ледяную баню и магнитную мешалку. Доводят объёмы растворов водой до 40 мл и перемешивают. Прибавляют по 2 мл буферного раствора рН 3,5, перемешивают, прибавляют 1,2 мл тиоацетамида реактива и немедленно перемешивают. Доводят объёмы полученных растворов водой до 50 мл и оставляют на 2 мин.

Растворы фильтруют через подходящий мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм. Фильтрование проводят медленно и равномерно при умеренном и постоянном давлении на поршень. Сравнивают пятна на фильтрах, полученные при фильтровании разных растворов.

Пригодность системы:

- пятно, полученное после фильтрования раствора сравнения, должно быть окрашено в коричневый цвет по сравнению с пятном, полученным после фильтрования контрольного раствора;

- интенсивность окраски пятна, полученного после фильтрования проверочного раствора должна быть равна или должна превышать интенсивность окраски пятна, полученного после фильтрования раствора сравнения.

Требование: интенсивность коричневой окраски пятна, полученного на фильтре после фильтрования испытуемого раствора, не должна превышать интенсивность окраски пятна, полученного на фильтре после фильтрования раствора сравнения.

МЕТОД 11

Испытуемый раствор. Количество испытуемого образца, указанное в фармакопейной статье, растворяют в 20 мл указанного в фармакопейной статье растворителя или смеси растворителей.

Раствор сравнения. Указанный в фармакопейной статье объём свинца стандартного раствора 10 мкг/мл доводят указанным растворителем или смесью растворителей до 20 мл.

Контрольный раствор. 20 мл указанного в фармакопейной статье растворителя или смеси растворителей.

К каждому раствору прибавляют по 2 мл буферного раствора pH 3,5 и перемешивают. В случае выпадения осадка необходимо провести повторное растворение в определённом объёме растворителя, как указано в фармакопейной статье. Каждый полученный раствор прибавляют к 1,2 мл тиоацетамида реактива, немедленно перемешивают и оставляют на 2 мин.

Растворы фильтруют через подходящий мембранный фильтр с номинальным размером пор 0,45 мкм. Сравнивают пятна на фильтрах, полученные при фильтровании разных растворов.

Пригодность системы. Пятно, полученное после фильтрования раствора сравнения, должно быть окрашено в коричневато-чёрный цвет по сравнению с пятном, полученным после фильтрования контрольного раствора.

Требование: интенсивность коричневато-чёрной окраски пятна, полученного на фильтре после фильтрования испытуемого раствора, не должна превышать интенсивность окраски пятна, полученного на фильтре после фильтрования раствора сравнения.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0013 ОБЩАЯ ЗОЛА

Кварцевый или платиновый тигель нагревают до красного каления в течение 30 мин, охлаждают в эксикаторе и взвешивают. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье 1,00 г испытуемого образца или порошкообразной растительной фармацевтической субстанции помещают в тигель и равномерно распределяют по дну тигля. Сушат при температуре от 100 °С до 105 °С в течение 1 ч и затем сжигают до постоянной массы в муфельной печи при температуре (600 ± 25) °С. Тигель после каждого сжигания охлаждают в эксикаторе. В течение всей процедуры в тигле не должно появляться пламя. Если после длительного сжигания зола всё ещё содержит тёмные частицы, содержимое тигля количественно переносят горячей водой на беззольный фильтр и сжигают остатки и фильтр. Фильтрат объединяют с золой, осторожно упаривают досуха и прокаливают до постоянной массы.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0014 Сульфатная зола

Подходящий тигель (например, кремниевый, платиновый, фарфоровый или кварцевый) прокаливают при температуре 600 ± 50 °С в течение 30 мин, охлаждают в эксикаторе над слоем силикагеля или другого подходящего осушителя и точно взвешивают. Указанную в фармакопейной статье навеску испытуемого образца помещают в тигель и взвешивают. Испытуемый образец смачивают небольшим количеством серной кислоты концентрированной (обычно 1 мл), осторожно нагревают при минимально возможной температуре до полного обугливания испытуемого образца. После охлаждения остаток смачивают небольшим количеством серной кислоты концентрированной (обычно 1 мл), осторожно нагревают до прекращения выделения белых паров и прокаливают при температуре 600 ± 50 °С до полного сгорания остатка. Необходимо обеспечить отсутствие пламени во время проведения испытания. Тигель охлаждают в эксикаторе над слоем силикагеля или другого подходящего осушителя, повторно взвешивают и рассчитывают количество остатка в процентах.

Если количество полученного остатка превышает предел, указанный в фармакопейной статье, его повторно смачивают серной кислотой концентрированной и сжигают, как описано выше, в течение 30 мин. Сжигание повторяют до тех пор, пока при двух последовательных взвешиваниях разница составит не более чем 0,5 мг или содержание остатка в процентах не будет соответствовать указанному пределу.

Навеску испытуемого образца, используемую в испытании
(обычно 1–2 г) выбирают таким образом, чтобы указанный предел массы остатка (обычно около 1 мг) можно было измерить с достаточной точностью.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0015 Калий

МЕТОД 1

Испытуемый раствор. Готовят 10 мл раствора испытуемого образца, как указано в фармакопейной статье.

Раствор сравнения. Готовят таким же образом, используя 5 мл калия стандартного раствора (20 ppm K) и 5 мл воды.

К испытуемому раствору и раствору сравнения прибавляют по 2 мл свежеприготовленного натрия тетрафенилбората раствора 1 %. Через 5 мин сравнивают опалесценцию растворов.

Через 5 мин опалесценция испытуемого раствора не должна быть интенсивнее опалесценции раствора сравнения.

МЕТОД 2

Испытуемый раствор. Готовят раствор испытуемого образца, как указано в фармакопейной статье.

Параллельно готовят холостой раствор, с использованием тех же реактивов, за исключением испытуемого образца.

Растворы сравнения. Готовят не менее трёх калибровочных растворов определяемого элемента, контрольный раствор и измеряют их поглощение. Калибровочные растворы готовят таким образом, чтобы ожидаемое значение концентрации определяемого элемента в испытуемом растворе находилось внутри диапазона концентраций калибровочных растворов. Оптимальные уровни калибровки находятся между 0,7 и 1,3 ожидаемого содержания определяемого элемента или предела, указанного в фармакопейной статье.

Проводят не менее трёх измерений атомной абсорбции или эмиссии растворов сравнения и испытуемого раствора при длине волны 766,5 нм или 769,98 нм, используя пламя воздух–ацетилен и лампу с полым калиевым катодом в качестве источника излучения (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия»). За результат принимают среднее из трёх измерений. Концентрацию калия в испытуемом растворе находят по калибровочному графику, построенному по растворам сравнения с вычитанием сигнала холостого раствора из сигнала испытуемого раствора. Концентрация калия в испытуемом растворе должна находиться внутри диапазона калибровочной кривой.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0016 МАГНИЙ И ЩЁЛОЧНОЗЕМЕЛЬНЫЕ МЕТАЛЛЫ

Испытуемый раствор. Указанный в фармакопейной статье раствор или указанную навеску испытуемого образца растворяют в 100 мл воды.

К 200 мл воды прибавляют 0,1 г гидроксиламина гидрохлорида, 10 мл аммония хлорида буферного раствора рН 10,0, 1,0 мл 0,1 М раствора цинка сульфата и около 15 мг эриохрома чёрного Т индикаторной смеси. Нагревают до температуры около 40 °С и титруют 0,01 М раствором натрия эдетата до изменения фиолетовой окраски на синюю. К полученному раствору прибавляют испытуемый раствор. Если окраска раствора изменилась на фиолетовую, снова титруют 0,01 М раствором натрия эдетата до появления синей окраски.

Объём 0,01 М раствора натрия эдетата, израсходованный на второе титрование, не должен превышать объём титранта, указанный в фармакопейной статье.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0017 Фториды

МЕТОД 1

Испытуемый раствор. Указанную в фармакопейной статье навеску испытуемого образца, 0,1 г промытого кислотой песка и 20 мл смеси равных объёмов серной кислоты концентрированной и воды помещают во внутреннюю пробирку прибора изображённого на рисунке 1. Рубашку, заполненную тетрахлорэтаном, нагревают до температуры кипения (146 °С). Нагревают парогенератор и перегоняют, собирая дистиллят в мерную колбу объёмом 100 мл, содержащую 0,3 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида и 0,1 мл фенолфталеина раствора 0,1 %. Во время перегонки в пробирке поддерживают постоянный объём (20 мл), а в мерной колбе – щелочную среду, прибавляя при необходимости 0,1 М раствор натрия гидроксида. Полученный дистиллят доводят водой до объёма 100 мл.

Раствор сравнения. Готовят таким же образом, используя вместо испытуемого образца 5 мл фторида стандартного раствора (10 ppm F).

В один цилиндр со стеклянной пробкой помещают 20 мл испытуемого раствора, в другой такой же цилиндр – 20 мл раствора сравнения. В каждый цилиндр прибавляют по 5 мл ализаринкомплексона реактива.

Через 20 мин любая синяя окраска испытуемого раствора, появившаяся вместо первоначальной красной, не должна быть интенсивнее окраски раствора сравнения.

Рисунок 1. Прибор для определения примесей фторидов. Размеры приведены в миллиметрах

МЕТОД 2

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Смешанный раствор реагентов. Ацетатный буферный раствор рН 4,3 – лантана(III) нитрата раствор 0,0005 М – ализаринкомплексона раствор – ацетон (1:5:6,5:11 об/об/об). Раствор используют свежеприготовленным.

Испытуемый раствор. Готовят, как указано в фармакопейной статье. Содержание алюминия в испытуемом растворе не должно превышать 0,2 мг/л, железа – 0,7 мг/л.

Компенсационный раствор. В мерную колбу объёмом 50 мл помещают 25,0 мл смешанного раствора реагентов и доводят объём раствора водой для хроматографии до метки.

Построение калибровочного графика. В пять отдельных мерных колб объёмом 50 мл помещают по 0,1 мл, 0,2 мл, 0,3 мл, 0,4 мл и 0,5 мл фторида стандартного раствора 10 мкг/мл (соответствуют концентрациям в испытуемом растворе 0,04 мг/л, 0,08 мг/л, 0,12 мг/л, 0,16 мг/л и 0,20 мг/л фторид-иона) прибавляют 20 мл воды для хроматографии и 25,0 мл смешанного раствора реагентов, доводят объём раствора водой для хроматографии до метки. Через 15 мин измеряют оптическую плотность полученных растворов на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 600 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно контрольного раствора.

К 25,0 мл испытуемого раствора прибавляют 25,0 мл смешанного раствора реагентов и через 15 мин измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 600 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно компенсационного раствора. По калибровочному графику находят концентрацию фторид-иона.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0018 4-Аминофенол

Вводится впервые

Метод определения 4-аминофенола в лекарственных средствах, содержащих парацетамол, основан на использовании ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы, содержащие парацетамол или 4-аминофенол, защищают от света и используют свежеприготовленными.

###### Методика 1

Буферный раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 4,0 г натрия цитрата и 1,5 г лимонной кислоты безводной, растворяют в воде и доводят объём тем же растворителем до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,60 г калия дигидрофосфата и 0,82 г динатрия гидрофосфата безводного.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Вода.

Подвижная фаза В (ПФВ). Ацетонитрил.

Растворитель. Ацетонитрил—буферный раствор 10:90.

Испытуемый раствор А. Готовят раствор субстанции или препарата в растворителе с концентрацией парацетамола 10 мг/мл и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мл испытуемого раствора А, доводят объём раствора растворителем до метки и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Раствор стандартного образца 4-аминофенола. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают около 5 мг (точная навеска) стандартного образца 4-аминофенола, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл раствора стандартного образца 4-аминофенола и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мл испытуемого раствора А и 15 мл раствора стандартного образца 4-аминофенола, доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, сорбент комбинированный для ВЭЖХ, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 300 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА, % | ПФБ, % | ПФВ, %
--- | --- | --- | ---
0–7 | 90 | 5 | 5
7–7,1 | 90 → 10 | 5 → 10 | 5 → 80
7,1–10 | 10 → 90 | 10 → 5 | 80 → 5
10–15 | 90 | 5 | 5

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор Б.

Время удерживания 4-аминофенола – около 5 мин.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика 4-аминофенола должно быть не менее 20.

На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками 4-аминофенола и ближайшим к нему должно быть не менее 1;

- фактор асимметрии пика (AS) 4-аминофенола должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика 4-аминофенола должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Содержание 4-аминофенола С6Н7NO в субстанции или препарате в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика 4-аминофенола на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика 4-аминофенола на хроматограмме стандартного раствора;
a0 – навеска стандартного образца 4-аминофенола, мг;
P – содержание 4-аминофенола в стандартном образце 4-аминофенола, %.

Допустимое содержание 4-аминофенола: Не более 0,15 % по отношению к парацетамолу, если в фармакопейной статье не указано иначе.

Настройка хроматографической системы. При необходимости, время удерживания 4-аминофенола может быть уменьшено или увеличено в соответствии с таблицей:

Изменение во времени удерживания 4-аминофенола: | Изменение условий хроматографирования:
--- | ---
Уменьшение: | Увеличение доли ПФВ
Уменьшение доли ПФБ
Увеличение доли ПФА
Увеличение: | Понижение рН ПФА
Увеличение температуры колонки

###### Методика 2

Подвижная фаза. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,6 г натрия бутансульфоната, растворяют в смеси муравьиная кислота—метанол—вода 4:150:850 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Растворитель. Метанол—вода 15:85.

Испытуемый раствор. Готовят раствор субстанции или препарата в растворителе с концентрацией парацетамола 10 мг/мл и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Раствор стандартного образца 4-аминофенола. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают около 10 мг (точная навеска) стандартного образца 4-аминофенола, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г стандартного образца парацетамола и доводят объём раствором стандартного образца 4-аминофенола до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора для проверки пригодности хроматографической системы и доводят объём растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,4 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 272 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца 4-аминофенола.

Время удерживания соединений. Парацетамол − около 6 мин; 4-аминофенол − около 3 мин.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика 4-аминофенола должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками 4-аминофенола и парацетамола должно быть не менее 5;

- фактор асимметрии пика (AS) 4-аминофенола должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика 4-аминофенола должно быть не более 5,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику 4-аминофенола, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

Содержание 4-аминофенола С6Н7NO в субстанции или препарате в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика 4-аминофенола на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика 4-аминофенола на хроматограмме раствора стандартного образца 4-аминофенола;
a0 – навеска стандартного образца 4-аминофенола, мг;
P – содержание 4-аминофенола в стандартном образце 4-аминофенола, %.

Допустимое содержание 4-аминофенола: Не более 0,01 % по отношению к парацетамолу, если в фармакопейной статье не указано иначе.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0019 N,N-Диметиланилин

Взамен ОФС.1.2.3.0025.18

Методы определения N,N-диметиланилина основаны на использовании газовой хроматографии (ОФС «Газовая хроматография»).

###### Метод А

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают около 50 мг (точная навеска) N,N-диэтиланилина, растворяют в 4,0 мл хлористоводородной кислоты 0,1 М и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В колбу с притёртой пробкой помещают около 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 30 мл воды и прибавляют 1,0 мл раствора внутреннего стандарта. Прибавляют 1,0 мл натрия гидроксида раствора 40 % и перемешивают до полного растворения. Прибавляют 2,0 мл триметилпентана. Встряхивают в течение 2 мин и выдерживают до разделения слоёв. Используют верхний слой.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают около 50 мг (точная навеска) N,N-диметиланилина, растворяют в 4,0 мл хлористоводородной кислоты 0,1 М и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. В колбу с притёртой пробкой помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 29 мл воды, 1,0 мл раствора внутреннего стандарта, 1,0 мл натрия гидроксида раствора 40 % и 2,0 мл триметилпентана. Встряхивают в течение 2 мин и выдерживают до разделения слоёв. Используют верхний слой.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная,25 м × 0,32 мм, покрытая поперечносшитым полиметилфенилсилоксаном, 0,52 мкм; |  |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:20; |  |
Давление в инжекторе | 50 кПа; |  |
Поток на сброс | 20 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1 мкл. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °С | Скорость нагрева, °С/мин
--- | --- | --- | ---
Колонка | 0–5 | 150 | –
5–11,3 | 150 → 275 | 20
11,3–14,3 | 275 | –
Инжектор |  | 220 |
Детектор |  | 300 |

Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор.

Времена удерживания. N,N-диметиланилин - около 3,6 мин; N,N-диэтиланилин - около 5,0 мин.

###### Метод Б

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают около 50 мг (точная навеска) нафталина, растворяют в циклогексане и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора циклогексаном до метки.

Испытуемый раствор. В колбу с притёртой пробкой помещают около 1 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 5,0 мл натрия гидроксида раствора 1 М. Энергично взбалтывают в течение 1 мин с 1,0 мл раствора внутреннего стандарта. Выдерживают до разделения фаз (при необходимости центрифугируют для лучшего разделения). Используют верхний слой.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают около 50 мг (точная навеска) N,N-диметиланилина, прибавляют 2,0 мл хлористоводородной кислоты и 20 мл воды, встряхивают до полного растворения и доводят объём раствора до метки. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. В колбу с притёртой пробкой помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 5,0 мл натрия гидроксида раствора 1 М и 1,0 мл раствора внутреннего стандарта. Энергично взбалтывают в течение 1 мин. Выдерживают до разделения фаз (при необходимости центрифугируют для лучшего разделения). Используют верхний слой.

Хроматографические условия

Колонка | стеклянная, 2 м × 2 мм, силанизированный диатомит для газовой хроматографии, импрегнированный 3 % (м/м) полиметилфенилсилоксаном; |  |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | азот для хроматографии; |  |
Скорость потока | 30 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1 мкл; |  |
Температура | Колонка | 120 °С; |
| Инжектор | 150 °С; |
| Детектор | 150 °С. |

Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0020 Вода в газах медицинских

Вводится впервые

Методы определения воды в газах медицинских основаны на использовании кулонометрии (метод 1), электрохимического метода (метод 2), конденсационного метода по «точке росы» (метод 3) и индикаторных трубок (метод 4).

###### Метод 1

Определение проводят в соответствии c ОФС «Определение воды», метод 2.

###### Метод 2

Метод основан на явлении протекания электрохимической реакции в электрохимической ячейке. Водяной пар вступает в химическую реакцию с фосфора (V) оксидом с образованием электролита – фосфорной кислоты. В результате этого в растворе возникают заряженные ионы, и между электродами начинает протекать электрический ток, пропорциональный концентрации анализируемого компонента в пробе.

Электрический датчик обрабатывает возникающий электрический сигнал (рис. 1).

Рисунок 1. Схема электрохимической ячейки

Определение проводят на электролитическом гигрометре, состоящем из измерительной камеры с тонкой плёнкой фосфора(V) оксида, расположенной между двумя спирально скрученными платиновыми проводами, используемыми в качестве электродов.

Водяной пар в исследуемом газе поглощается фосфора(V) оксидом, который преобразуется в фосфорную кислоту, являющуюся электрическим проводником. Постоянное напряжение вокруг электродов приводит к электролизу воды и регенерации фосфора(V) оксида. Затем измеряется возникающий электрический ток, который пропорционален содержанию воды в исследуемом газе. Данная система является самокалибрующейся, так как соответствует закону Фарадея. Образец исследуемого газа оставляют для уравновешивания при комнатной температуре. Газ пропускают через камеру.

Диапазон измерения электролитического гигрометра составляет от 0 до 90 ppm с погрешностью измерений не более ±5 %. Прибор в автоматическом режиме определяет долю содержания воды (водяных паров). Межкалибровочный интервал соблюдают согласно документации производителя прибора. Фиксируют показатели прибора. Необходимо следить, чтобы в течение всего периода работы прибора температура была постоянной. Для калибровки нуля прибора используют азот повышенной чистоты (с объёмной долей азота не менее 99,999 и объёмной долей кислорода не более 0,0005). Для линеаризации и калибровки шкалы используют поверочные газовые смеси (эталонные газы) с содержанием воды.

###### Метод 3

Метод основан на измерении температуры насыщения газа водяными парами при появлении росы на охлаждённой зеркальной поверхности, при которой достигается термодинамическое равновесие между конденсацией и испарением водяного пара с поверхности зеркала при установившейся толщине конденсированного слоя воды либо льда.

Чувствительный элемент гигрометров представляет собой плоское полированное зеркало, выполненное из меди с золотым покрытием, установленное на термоэлектрической батарее Пельтье, и оптическую систему фиксации толщины конденсированного слоя воды или льда. Оптическая система в непрерывном режиме определяет толщину осаждаемого на поверхности зеркала слоя воды или льда и управляет охлаждением и нагревом термоэлектрической батареи Пельтье. Измеренное значение температуры точки росы фиксируется встроенным в зеркало платиновым термометром сопротивления (рис. 2). Светодиод (1) создаёт луч света постоянной интенсивности, который фокусируется системой линз (2) и падает на поверхность зеркала (3). Прежде чем луч света достигнет зеркала (3), светоделитель (4) направляет часть пучка через систему линз (5) на фотоприёмник (6), который контролирует интенсивность света и создаёт контур обратной связи. Два фотоприёмника (7 и 8) контролируют интенсивность света, отражаемого зеркалом. Один из фотоприёмников (7) определяет интенсивность отражённого пучка, другой (8) – интенсивность рассеянного света вследствие образования воды или льда на поверхности зеркала.

Рисунок 2. Схема светочувствительного элемента гигрометра точки росы

Каждый фотоприёмник имеет собственную систему оптических линз (9) и (10). Выходные сигналы каждого фотоприёмника сравниваются, а затем используются для управления термоэлектрической батареей Пельтье (11). В зависимости от результата сравнения система управления даёт команду термоэлектрической батарее (11) нагревать или охлаждать зеркало (3), чтобы поддерживать необходимую толщину слоя конденсата на поверхности зеркала. Температура зеркала определяется платиновым термометром сопротивления (12), встроенным в зеркало. «Горячая» сторона термоэлектрической батареи Пельтье соединена с вспомогательной системой охлаждения посредством теплообменника (13). Система охлаждения отводит тепло от термоэлектрической батареи, охлаждая её до необходимой температуры.

Пробу газа медицинского отбирают, непосредственно присоединяя прибор к источнику анализируемого газа. В пробоотборных линиях не должно быть конденсации паров и их десорбции со стенок пробоотборных линий. Для этого температура на пробоотборной линии должна быть не менее чем на 3 °С выше предполагаемой температуры точки росы газа. Перед анализом пробоотборную линию и линию прибора продувают не менее 10 мин осушённым испытуемым газом. При необходимости пробоотборную линию теплоизолируют или нагревают. В измерительную камеру гигрометра направляют поток испытуемого газа со скоростью 1–3 дм3/мин, измеренной при атмосферном давлении при полностью открытом впускном вентиле гигрометра. Скорость регулируют выпускным вентилем так, чтобы давление в измерительной камере соответствовало давлению в контролируемой системе. Поток испытуемого газа пропускают через генератор точки росы и регистрируют показатели прибора. Предел допускаемой абсолютной погрешности ±2^ ^°С. Концентрацию водяных паров в газе (W) при температуре 20 °C и давлении 101,325 кПа в г/м3 вычисляют по формуле:

где A – коэффициент зависимости содержания воды от давления водяного пара при измеренной температуре точки росы влаги;
P - абсолютное давление испытуемого газа в измерительной камере, кПа;
B - коэффициент зависимости содержания воды от температуры точки росы влаги и состава газа;
101,325 - нормальное атмосферное давление, кПа.

Коэффициенты А и В определяют по таблице.

Промежуточные значения коэффициентов находят интерполяцией.

Таблица 1. Значения коэффициентов А и В для газов средней плотности 0,7 кг/м3
Температура точки росы, °С | А | В | Температура точки росы, °С | А | В
--- | --- | --- | --- | --- | ---
-40 | 0,1451 | 0,00347 | +2 | 5,400 | 0,04610
-38 | 0,1780 | 0,00402 | +4 | 6,225 | 0,05150
-36 | 0,2189 | 0,00465 | +6 | 7,150 | 0,05710
-34 | 0,2670 | 0,00538 | +8 | 8,200 | 0,06300
-32 | 0,3235 | 0,00623 | +10 | 9,390 | 0,06960
-30 | 0,3910 | 0,00710 | +12 | 10,72 | 0,07670
-28 | 0,4715 | 0,00806 | +14 | 12,39 | 0,08550
-26 | 0,5660 | 0,00921 | +16 | 13,94 | 0,09300
-24 | 0,6775 | 0,01043 | +18 | 15,75 | 0,1020
-22 | 0,8090 | 0,01168 | +20 | 17,87 | 0,1120
-20 | 0,9600 | 0,01310 | +22 | 20,15 | 0,1227
-18 | 1,1440 | 0,01510 | +24 | 22,80 | 0,1343
-16 | 1,350 | 0,01705 | +26 | 25,50 | 0,1463
-14 | 1,590 | 0,01927 | +28 | 28,70 | 0,1595
-12 | 1,868 | 0,02155 | +30 | 32,30 | 0,1710
-10 | 2,188 | 0,02290 | +32 | 36,10 | 0,1895
-8 | 2,550 | 0,02710 | +34 | 40,50 | 0,2070
-6 | 2,990 | 0,03035 | +36 | 45,20 | 0,2240
-4 | 3,480 | 0,03380 | +38 | 50,80 | 0,2425
-2 | 4,030 | 0,03770 | +40 | 56,25 | 0,2630
0 | 4,670 | 0,04180 |  |  |

###### Метод 4

Метод основан на изменении окраски массы-наполнителя индикаторных трубок при взаимодействии с определяемым компонентом в анализируемой пробе и измерении длины прореагировавшего слоя.

Длина слоя, изменившего окраску, является функцией и мерой содержания определяемого компонента и объёма отобранной на анализ пробы. Значение содержания определяемого компонента в анализируемой пробе определяется по шкале, нанесённой на индикаторную трубку.

Испытания проводят путём пропускания требуемого объёма газа через индикаторную трубку. Длина окрашенного слоя или интенсивность изменения цвета на градуировочной шкале являются функцией и мерой массовой концентрации определяемого компонента. Проверка индикаторных трубок проводится в соответствии с инструкциями изготовителя.

Подготовка к измерению. Проводится согласно инструкциям изготовителя или следующим образом. Устройство для подачи газа подсоединяют к регулятору давления с игольчатым клапаном. Соединяют гибкий шланг трубки с Т-образным участком клапана и продувают систему (рис. 3).

Рисунок 3. Прибор для индикаторных трубок: 1 – подача газа; 2 – регулятор давления; 3 – игольчатый клапан; 4 – T-образный участок; 5 – индикаторная трубка; 6 – насос для индикаторной трубки; 7 – открытый конец для выхода газа в атмосферу.

Открытый конец индикаторный трубки присоединяют к короткому концу шланга и регулируют насосом объём анализируемого газа, проходящего через трубку. Записывают значения, соответствующие длине окрашенного слоя или интенсивности цвета на градуировочной шкале.

При отрицательном результате анализа индикаторная трубка должна быть проверена с помощью калибровочного газа, содержащего пары воды.

Индикаторная трубка для паров воды. Герметичная стеклянная трубка, содержащая адсорбирующие фильтры и подходящие носители для индикатора – магния перхлората. Минимальная определяемая концентрация – 67 ppm и менее с погрешностью измерений не более 20 %.

Метод применим для оценки качества газа в нестационарных, полевых условиях.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0021 Метанол и 2-пропанол

Взамен ОФС.1.2.3.0024.18

Методы определения метанола и 2-пропанола основаны на использовании газовой хроматографии (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытание применяют для количественного определения метанола и 2-пропанола в фармацевтических субстанциях, представленных настойками, настойками гомеопатическими матричными, экстрактами жидкими, а также в лекарственных препаратах, представленных в жидких лекарственных формах (настойки, экстракты, растворы спиртовые и др.), содержащих в своём составе спирт этиловый. Испытание по данному показателю в лекарственных средствах осуществляют только на стадии производственного процесса.

Предельно допустимое содержание метанола и 2-пропанола в лекарственных средствах должно составлять не более 0,05 % для метанола и не более 0,05 % для 2-пропанола, если нет других указаний в фармакопейной статье.

###### Метод 1

Определение проводят методом статической парофазной газовой хроматографии (ОФС «Газовая хроматография»).

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл пропанола и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 4,0 мл лекарственного средства, прибавляют 1,0 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объём раствора водой до метки. Помещают 2,0 мл полученного раствора в виалу, укупоривают резиновой пробкой, покрытой политетрафторэтиленом, и запечатывают алюминиевым колпачком.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл метанола и 1,0 мл 2-пропанола, доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл этанола и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения В. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора внутреннего стандарта, 2,0 мл раствора сравнения А, 2,0 мл раствора сравнения Б и доводят объём раствора водой до метки. Помещают 2,0 мл полученного раствора в виалу, укупоривают резиновой пробкой, покрытой политетрафторэтиленом, и запечатывают алюминиевым колпачком.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,53 мм, покрытая слоем поли[(цианопропил)(фенил)][диметил]силоксана, 3 мкм; |  |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:50; |  |
Скорость потока | 3 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1 мкл газо-паровой фазы. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °C
--- | --- | ---
Колонка | 0–1,6 | 40
| 1,6–9,9 | 40 → 65
| 9,9–13,6 | 65 → 175
| 13,6–20,0 | 175
Инжектор |  | 200
Детектор |  | 200

Камеру с испытуемым образцом предварительно термостатируют при температуре 85 °С в течение 20 мин.

Хроматографируют раствор сравнения В и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Этанол – 1 (около 5,3 мин); метанол – около 0,8, 2-пропанол – около 1,2; пропанол – около 1,6.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения С разрешение (RS) между пиками
метанола и этанола должно быть не менее 5,0.

Содержание метанола СН4О в лекарственном средстве в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где B1 – отношение площади пика метанола к площади пика пропанола на хроматограмме испытуемого раствора;
B0 – отношение площади пика метанола к площади пика пропанола на хроматограмме раствора сравнения В.

Содержание 2-пропанола С3Н8О в лекарственном средстве в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где B1 – отношение площади пика 2-пропанола к площади пика пропанола на хроматограмме испытуемого раствора;
B0 – отношение площади пика 2-пропанола к площади пика пропанола на хроматограмме раствора сравнения В.

###### Метод 2

Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл пропанола и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 4,0 мл лекарственного средства, прибавляют 1,0 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл метанола и 1,0 мл 2-пропанола, доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл этанола и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения В. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора внутреннего стандарта, 2,0 мл раствора сравнения А, 1,0 мл раствора сравнения Б и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,53 мм, покрытая слоем поли[(цианопропил)(фенил)][диметил]силоксана, 3 мкм; |  |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:50; |  |
Скорость потока | 3 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1 мкл. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °C
--- | --- | ---
Колонка | 0–1,6 | 40
| 1,6–9,9 | 40 → 65
| 9,9–13,6 | 65 → 175
| 13,6–20,0 | 175
Инжектор |  | 200
Детектор |  | 200

Хроматографируют раствор сравнения В и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Этанол – 1 (около 5,3 мин); метанол – около 0,8, 2-пропанол – около 1,2; пропанол – около 1,6.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения С разрешение (RS) между пиками
метанола и этанола должно быть не менее 5,0.

Содержание метанола СН4О в лекарственном средстве в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где B1 – отношение площади пика метанола к площади пика пропанола на хроматограмме испытуемого раствора;
B0 – отношение площади пика метанола к площади пика пропанола на хроматограмме раствора сравнения В.

Содержание 2-пропанола С3Н8О в лекарственном средстве в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где B1 – отношение площади пика 2-пропанола к площади пика пропанола на хроматограмме испытуемого раствора;
B0 – отношение площади пика 2-пропанола к площади пика пропанола на хроматограмме раствора сравнения В.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0022 Никель в полиолах

Определение никеля проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 2).

Испытуемый раствор. 20,0 г испытуемого образца растворяют в смеси равных объёмов уксусной кислоты разведённой 12 % и воды и доводят объём раствора той же смесью растворителей до 100,0 мл. К полученному раствору прибавляют 2,0 мл аммония пирролидиндитиокарбамата раствора 1 % и 10,0 мл метилизобутилкетона, встряхивают в течение 30 с в защищённом от яркого света месте. Оставляют до разделения слоёв и используют слой метилизобутилкетона.

Растворы сравнения. Готовят три раствора таким же образом, с добавлением к 20,0 г испытуемого образца 0,5 мл, 1,0 мл и 1,5 мл никеля стандартного раствора (10 ppm Ni), соответственно.

Устанавливают нулевую точку на приборе, используя метилизобутилкетон, подготовленный таким же образом, как и испытуемый раствор, но без добавления испытуемого образца. Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора и растворов сравнения при длине волны 232,0 нм, используя в качестве источника излучения лампу с полым никелевым катодом и воздушно-ацетиленовое пламя.

Испытуемый образец должен содержать не более 1 ppm никеля, если в фармакопейной статье не указано иное.

________________________________________________________________________________________________________________

==

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0023 Примесь кислорода в газах медицинских

Вводится впервые

Методы определения примеси кислорода в газах медицинских основаны на использовании парамагнитного метода (метод 1), электрохимического метода (метод 2), индикаторных трубок (метод 3) и метода газовой хроматографии (метод 4).

###### Метод 1

Метод основан на способности кислорода проявлять сильные парамагнитные свойства и «втягиваться» в магнитное поле.

Все другие газы, за редким исключением, проявляют слабые парамагнитные свойства или диамагнитны. Это свойство кислорода может быть использовано для селективного анализа.

Три основные методики обнаружения кислорода:

- в первой методике элемент, представляющий собой гантелевидное тело на крутящейся подвеске, помещён в сильное магнитное поле. Молекулы кислорода втягиваются в магнитное поле на том участке, где напряжённость его максимальна, при этом гантелевидное тело отклоняется от своего исходного (нулевого) положения. Сила, необходимая для возвращения гантелевидного тела в его нулевое положение, пропорциональна содержанию кислорода в смеси;

- во второй методике используется зависимость парамагнитного эффекта от температуры. Парамагнитный эффект обратно пропорционален абсолютной температуре. При наличии в среде парамагнитного газа градиента температуры и градиента магнитного поля возникает термомагнитная конвекция кислорода. Скорость потока (магнитный ветер) является функцией содержания кислорода и может быть определена, например, на основе измерения теплопроводности;

- в третьей методике используют сильное поле, приложенное к трубке. Молекулы кислорода будут втягиваться в поле, создавая сопротивление потоку газа сравнения (обычно) проходящего через трубку. Снижение скорости потока газа-носителя в трубке является мерой содержания кислорода.

На вход автоматической измерительной системы подают исследуемый газ, не содержащий определяемого компонента. Исследуемый газ должен содержать равномерно перемешанную смесь с известным содержанием влияющего газа (yi), соответствующим ожидаемым значениям. Записывают результат измерения (χsi), выраженный в единицах объёмной доли, и массовую концентрацию (psi) мешающего газа. Измерения следует проводить при нулевом содержании мешающего газа в испытуемом газе и при содержании, соответствующем 90 % верхнего предела диапазона измерений. Мешающие газы, такие как Н2О, СO2, СО, SO2, NOx, не должны оказывать влияния более 4 % диапазона измерений. Если зависимость результата измерений от массовой концентрации мешающего вещества линейна, то эффект влияния этого вещества может быть задан как . Если зависимость результата измерений от массовой концентрации мешающего вещества нелинейна, то эффект влияния этого вещества от массовой концентрации определяют для нескольких различных значений yi. Для установления максимально возможного суммарного влияния нескольких мешающих веществ определяют эффект влияния каждого мешающего вещества отдельно, а также общий эффект влияния смеси всех мешающих веществ. Эффект влияния Ei для типичной смеси мешающих веществ вычисляют по полученным эффектам индивидуальных мешающих веществ yi по формуле:

где: ρmi – массовая концентрация мешающего вещества в смеси;
ρFS – верхнее значение диапазона измерения массовой концентрации;
n – число мешающих веществ.

Сравнивают вычисленное значение с результатом измерения массовой концентрации смеси мешающих веществ. Если эти значения различаются не более чем на 20 %, то эффектом комбинирования пренебрегают и вычисляют эффекты влияния для других смесей этого же состава.

Парамагнитный метод анализа предназначен для использования в диапазоне значений объёмной доли кислорода вплоть до 25 %.

###### Метод 2

Метод количественного определения кислорода основан на измерении электрического тока, который вырабатывается при окислительно-восстановительных реакциях с участием кислорода на электродах электрохимического чувствительного элемента и прямо пропорционален количеству определяемого кислорода. Электрохимический метод измерения молярной доли кислорода является косвенным методом, при котором первично измеряемая плотность электрического тока, возникающего при окислительно-восстановительных реакциях с участием кислорода в качестве окислителя на электродах электрохимического чувствительного элемента, преобразуется в соответствующее значение молярной доли кислорода. На катоде протекает реакция (1), а на аноде – реакция (2):

(1) (2)

Измерение плотности электрического тока проводят при постоянно прикладываемом электрическом потенциале. При отсутствии кислорода ток не генерируется.

Схема протекания электрохимической реакции в электрохимической ячейке представлена на рис. 1.

Схема электрохимической ячейки

Кислород вступает в химическую реакцию с электролитом, заполняющим ячейку. В результате в растворе возникают заряженные ионы, между электродами начинает протекать электрический ток, пропорциональный концентрации анализируемого компонента в пробе.

Электрический датчик обрабатывает возникающий электрический сигнал.

Газ пропускают через камеру, пока не будут достигнуты стабильные показатели прибора. Прибор в автоматическом режиме определяет долю содержания кислорода. Межкалибровочный интервал соблюдают согласно документации производителя прибора. Фиксируют показатели прибора. Необходимо следить, чтобы в течение всего периода работы прибора температура была постоянной. Для калибровки нуля прибора используют азот повышенной чистоты (с объёмной долей азота не менее 99,999 и объёмной долей кислорода не более 0,0005). Для линеаризации и калибровки шкалы используют поверочные газовые смеси (эталонные газы) с известным содержанием кислорода. Калибровка прибора проводится в соответствии с инструкцией производителя.

###### Метод 3

Метод основан на изменении окраски массы-наполнителя индикаторных трубок при взаимодействии с определяемым компонентом в анализируемой пробе и измерении длины прореагировавшего слоя.

Длина слоя, изменившего окраску, является функцией и мерой содержания определяемого компонента и объёма отобранной на анализ пробы. Значение содержания определяемого компонента в анализируемой пробе определяется по шкале, нанесенной на индикаторную трубку.

Испытания проводят путем пропускания требуемого объёма газа через индикаторную трубку. Длина окрашенного слоя или интенсивность изменения цвета на градуировочной шкале являются функцией и мерой массовой концентрации определяемого компонента. Проверка индикаторных трубок проводится в соответствии с инструкциями изготовителя.

Подготовка к измерению. Проводится согласно инструкциям изготовителя или следующим образом. Устройство для подачи газа подсоединяют к регулятору давления с игольчатым клапаном. Соединяют гибкий шланг трубки с Т-образным участком клапана и продувают систему (рисунок 2).

Рисунок 2. Схема действия индикаторных трубок: 1– подача газа; 2 – регулятор давления; 3 – игольчатый клапан; 4 – T-образный участок; 5 – индикаторная трубка; 6 – насос для индикаторной трубки; 7 – открытый конец для выхода газа в атмосферу.

Открытый конец индикаторный трубки присоединяют к короткому концу шланга и регулируют насосом объём анализируемого газа, проходящего через трубку. Записывают значения, соответствующие длине окрашенного слоя или интенсивности цвета на градуировочной шкале.

При отрицательном результате анализа индикаторная трубка должна быть проверена с помощью калибровочного газа, содержащего соответствующую примесь.

Диапазон измерений от 1 до 21 % с относительным стандартным отклонением ±25 %.

Метод применим для оценки качества газа в нестационарных, полевых условиях.

###### Метод 4

Газ-носитель из баллона под давлением проходит через устройство ввода пробы, колонку, а затем через детектор. Хроматографирование проводится при постоянной температуре или в соответствии с заданной температурной программой.

Анализ проводится в соответствии с установленными параметрами хроматографической системы. В описании метода необходимо указать: тип детектора, тип колонки (насадочная или капиллярная), материал и геометрические параметры колонки, сорбент (тип твёрдого носителя и его характеристики, неподвижная жидкая фаза и её количество), метод введения пробы и его параметры, температура колонки и детектора, газ-носитель и его расход.

Оценка хроматографического разделения проводится на основании теста пригодности хроматографической системы, приведённого в фармакопейной статье.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0024 Этиленоксид и диоксан

Вводится впервые

Метод определения этиленоксида и диоксана основан на использовании газовой хроматографии (ОФС «Газовая хроматография», парофазный анализ).

Испытание применяют для количественного определения примесей этиленоксида и диоксана в фармацевтических субстанциях, растворимых в воде и диметилацетамиде. Для субстанций, нерастворимых или недостаточно растворимых в этих растворителях, приготовление испытуемого раствора и условия определения методом парофазной газовой хроматографии указывают в соответствующей фармакопейной статье.

###### Пробоподготовка

1. Для субстанций, растворимых или смешивающихся с водой

- Испытуемый раствор. Помещают 1,0 г (точная навеска) испытуемого образца во флакон для парофазного анализа вместимостью 10 мл и прибавляют 1,0 мл воды. Флакон закрывают и перемешивают до получения гомогенного раствора. Выдерживают при температуре 70 °С в течение 45 мин.

- Раствор сравнения А. Помещают 1,0 г (точная навеска) испытуемого образца во флакон для парофазного анализа вместимостью 10 мл (в зависимости от условий проведения испытания могут применяться флаконы другого объёма), прибавляют 0,5 мл диоксана раствора 0,002 % и 0,5 мл этиленоксида раствора 0,0002 %. Флакон закрывают и перемешивают до получения гомогенного раствора. Выдерживают при температуре 70 °С в течение 45 мин.

- Раствор сравнения Б (эталонный раствор). 0,5 мл этиленоксида раствора 0,0002 % помещают во флакон для парофазного анализа вместимостью 10 мл, прибавляют 0,1 мл свежеприготовленного раствора ацетальдегида 10 мг/л и 0,1 мл диоксана раствора 0,01 %. Флакон закрывают и перемешивают до получения гомогенного раствора. Выдерживают при температуре 70 °С в течение 45 мин.

2. Для субстанций, растворимых или смешивающихся с диметилацетамидом

- Испытуемый раствор. Помещают 1,0 г (точная навеска) испытуемого образца во флакон для парофазного анализа вместимостью 10 мл и прибавляют 0,2 мл воды и 1,0 мл диметилацетамида. Флакон закрывают и перемешивают до получения гомогенного раствора. Выдерживают при температуре 90 °С в течение 45 мин.

- Раствор сравнения А. Помещают 1,0 г (точная навеска) испытуемого образца во флакон для парофазного анализа вместимостью 10 мл, прибавляют 0,1 мл диоксана раствора 0,01 %, 0,1 мл этиленоксида раствора 0,001 % и 1,0 мл диметилацетамида. Флакон закрывают и перемешивают до получения гомогенного раствора. Выдерживают при температуре 90 °С в течение 45 мин.

- Раствор сравнения Б (эталонный раствор). 0,1 мл этиленоксида раствора 0,001 % помещают во флакон для парофазного анализа вместимостью 10 мл, прибавляют 0,1 мл свежеприготовленного раствора ацетальдегида 10 мг/л и 0,1 мл диоксана раствора 0,01 %. Флакон закрывают и перемешивают до получения гомогенного раствора. Выдерживают при температуре 70 °С в течение 45 мин.

###### Методика

Хроматографические условия

Колонка | стеклянная или кварцевая капиллярная 30 м × 0,32 мм, покрытая слоем поли(диметил)силоксана, 1,0 мкм; |  |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии или азот для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:20; |  |
Линейная скорость | 20 см/с; |  |
Объём пробы | как указано в фармакопейной статье; |  |
Температура уравновешивания | 70 °С (90 °С для растворов в диметилацетамиде); |  |
Время уравновешивания | 45 мин; |  |
Температура переходной линии | 75 °С (150 °С для растворов в диметилацетамиде); |  |
Время подачи газа-носителя во флакон с пробой | 1 мин; |  |
Время ввода газовой пробы | 12 с. |  |

Температура

| Время, мин | Температура, °С
--- | --- | ---
Колонка | 0–5 | 50
| 5–31 | 50 → 180
| 31–32,5 | 180 → 230
| 32,5–37,5 | 230
Инжектор |  | 150
Детектор |  | 250

Хроматографируют по 1 мл газовой фазы испытуемого раствора и по 1 мл газовой фазы растворов сравнения А и Б. Для каждой пробы получают по три хроматограммы.

Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме раствора сравнения Б (эталонного раствора):

- разрешение (RS) между пиками ацетальдегида и этиленоксида должно быть не менее 2,0;

- отношение сигнал/шум (S/N) для пиков этиленоксида и диоксана должно быть не менее 5.

###### Проверка точности

Вычисляют разность площадей пиков этиленоксида между хроматограммами раствора сравнения А и испытуемого раствора, а также разность площадей пиков диоксана между хроматограммами раствора сравнения А и испытуемого раствора.

Хроматографическая система считается пригодной, если выполняются следующие условия:

- относительное стандартное отклонение, рассчитанное для трёх полученных значений площади пика этиленоксида, должно быть не более 15 %;

- относительное стандартное отклонение, рассчитанное для трёх полученных значений площади пика диоксана, должно быть не более 15 %.

Учитывают различия в навесках, взятых для приготовления испытуемого раствора и раствора сравнения А, при их отличии от 1,0 г более чем на 0,5 %.

###### Обработка результатов

Содержание этиленоксида в субстанции в ppm (Хэо) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика этиленоксида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика этиленоксида на хроматограмме раствора сравнения А;
a1 - навеска субстанции, взятой для приготовления испытуемого раствора, г;
a0 - навеска субстанции, взятой для приготовления раствора сравнения А, г;
mЭО - количество этиленоксида, прибавляемое к раствору сравнения А, мкг.

Содержание диоксана в субстанции в ppm (Хд) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика диоксана на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика диоксана на хроматограмме раствора сравнения А;
a1 - навеска субстанции, взятой для приготовления испытуемого раствора, г;
a0 - навеска субстанции, взятой для приготовления раствора сравнения А, г;
mД - количество диоксана, прибавляемое к раствору сравнения А, мкг.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0025 Этиленгликоль и диэтиленгликоль в этоксилированных субстанциях

Вводится впервые

Метод определения этиленгликоля и диэтиленгликоля в этоксилированных субстанциях основан на использовании газовой хроматографии (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытание проводят для количественного определения этиленгликоля и диэтиленгликоля, которые могут образовываться в качестве примесей в технологическом процессе получения таких поверхностно-активных веществ, как макроголглицерола рицинолеат, макроголглицерола гидроксистеарат, макрогол 15 гидроксистеарат, ноноксинол 9 и макрогол цетостеариловый эфир.

###### Методика

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) 1,2-пентандиола, растворяют в ацетоне и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ацетоном до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г (точная навеска) испытуемой субстанции, растворяют в растворе внутреннего стандарта и доводят объём раствора тем же раствором до метки.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца этиленгликоля, смешивают с ацетоном и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора раствором внутреннего стандарта до метки.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца диэтиленгликоля, смешивают с ацетоном и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора раствором внутреннего стандарта до метки.

Условия хроматографирования
Колонка | Кварцевая капиллярная 30 м × 0,53 мм, макрогол 20000,1 мкм
Детектор | пламенно-ионизационный
Газ-носитель | гелий для хроматографии
Деление потока | 1:3
Скорость потока | 10 мл/мин
Объём пробы, мкл | 2
Температура | Колонка | 0–40 мин | 80 → 200 °С |
| 40–45 мин | 200 → 230 °С |
| 45–65 мин | 230 °С |
Инжектор | 250 °С |
Детектор | 250 °С |

Относительное время удерживания соединений. 1,2-пентандиол – 1 (около 19 мин); этиленгликоль – 0,7; диэтиленгликоль – около 1,3.

Содержание этиленгликоля или диэтиленгликоля в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где B1 – отношение площади пика этиленгликоля или диэтиленгликоля к площади пика 1,2-пентандиола на хроматограмме испытуемого раствора; B0 – отношение площади пика этиленгликоля или диэтиленгликоля к площади пика 1,2-пентандиола на хроматограмме стандартного раствора А или стандартного раствора Б; a1 – навеска субстанции, мг; a0 – навеска фармакопейного стандартного образца этиленгликоля или диэтиленгликоля, мг; P – содержание этиленгликоля или диэтиленгликоля в фармакопейном стандартном образце этиленгликоля или диэтиленгликоля, %.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0026 Содержание общего органического углерода в воде для фармацевтического применения

Взамен ОФС.1.2.1.0026.18

Метод определения содержания общего органического углерода в воде для фармацевтического применения основан на использовании аттестованного оборудования – анализатора. Общий органический углерод присутствует в воде в виде органических соединений в растворённом и нерастворённом состоянии и является показателем её качества. Определение содержания общего органического углерода также проводится для оценки чистоты технологического оборудования, используемого при производстве лекарственных препаратов.

###### Основные термины и определения

Вода для фармацевтического применения – вода очищенная и вода для инъекций.

Общий углерод (ОУ) – углерод, присутствующий в воде в виде органических и неорганических соединений, включая элементарный углерод.

Общий неорганический углерод (ОНУ) – углерод, присутствующий в воде в виде неорганических соединений: карбонатов, гидрокарбонатов, элементарного углерода, оксида углерода (IV), оксида углерода (II), цианатов, цианидов и тиоцианатов.

Общий органический углерод (ООУ) – углерод, присутствующий в воде в виде органических соединений в растворённом и нерастворённом состоянии.

###### Оборудование

Для определения ООУ должно использоваться аттестованное оборудование – анализаторы ООУ, подключённое к производственной линии или работающее в автономном режиме. Оборудование должно быть зарегистрировано в Государственном реестре средств измерений России. В инструкции по эксплуатации прибора должен быть указан предел обнаружения ООУ, составляющий 0,05 мг/л или менее.

Общий принцип работы анализаторов ООУ основан на полном окислении органических соединений углерода, находящихся в исследуемом образце воды, до образования углерода диоксида с последующим измерением его количества и вычислением концентрации ООУ в исследуемом образце воды.

Анализаторы, предназначенные для определения ООУ, должны различать ООУ и ОНУ. Поддерживание низкого уровня ООУ в воде, предназначенной для фармацевтического применения, позволяет обеспечить низкое содержание эндотоксинов, что является индикатором роста микроорганизмов.

Анализаторы ООУ, работающие в режиме on-line, могут непрерывно функционировать в автоматическом режиме путём подключения к информационной системе. Должна проводиться регулярная проверка работы анализаторов в соответствии с инструкцией по эксплуатации оборудования.

Установление градуировочной характеристики анализатора углерода, выражающей зависимость площади или высоты сигнала от содержания ОУ в пробе воды, проводят в соответствии с инструкцией по эксплуатации анализатора углерода.

###### Методика

Методика определения ООУ должна быть валидирована. Анализ воды для фармацевтического применения включает обработку образца кислотой и окисление до углерода диоксида с последующим измерением количества углерода.

Процедура определения ООУ проходит по общей схеме в три основных этапа:

1. Подкисление и продувка пробы для удаления ОНУ. Пробу подкисляют, как правило, хлористоводородной кислоты раствором 2 М до рН 2–3. Обработка кислотой проводится для устранения ОНУ. При этом карбонаты и гидрокарбонаты образуют оксид углерода (IV), который удаляют путём продувания воздухом, азотом или кислородом. В процессе продувания из испытуемого образца могут удаляться и органические молекулы, но часть связанного с ними углерода в воде для фармацевтического применения незначительна.

2. Окисление оставшегося органического углерода до оксида углерода (IV). Сорг + О2 (окислительный агент) = СО2. Окисление органического углерода до СО2 в анализаторах ООУ может проводиться несколькими способами:

- Термическое окисление:

  - окисление проходит через прямое высокотемпературное сгорание при температуре от 800 до 1300 °С в присутствии катализаторов селена оксида или платины (Pt). Этот вид разложения эффективен для разрушения любого типа связей;

  - каталитическое окисление при температуре ~ 680 °С в токе кислородсодержащего газа до оксида углерода (IV) с использованием детектора инфракрасного излучения.

  - Ультрафиолетовое облучение (УФ) (фотоокисление). Ультрафиолетовое облучение (УФ) обычной интенсивности при длине волны 254 нм или при длине волны 185 нм.

  - Примечание – Использование для окисления УФ-излучения с длиной волны 185 нм обеспечивает количественное окисление компонентов пробы даже без добавления калия персульфата.

  - Термохимическое окисление с добавлением калия персульфата. Готовят раствор калия персульфата в воде для определения ООУ по методике, указанной в инструкции по эксплуатации прибора.

2. Детектирование образующегося оксида углерода (IV). Регистрация ООУ осуществляется методом кондуктометрии или методом инфракрасной спектроскопии на максимальной полосе поглощения углерода диоксида, имеющего уникальную характеристическую полосу поглощения в инфракрасном диапазоне. Преимущество метода инфракрасной спектроскопии заключается в возможности точно настроить анализатор на полосу поглощения СО2, в результате исключается влияние мешающих веществ и представляется возможность напрямую измерить уровень ООУ, получаемого в процессе окисления.

Вода, используемая для определения ООУ. Вода для определения ООУ (ООУвода) должна соответствовать следующим требованиям:

- электропроводность – не более 1,0 мкСм·см-1 при температуре 25 °С;

- содержание ООУ – не более 0,1 мг/л.

ООУ воду используют для приготовления стандартных, калибровочных растворов, растворов для проверки пригодности системы.

Подготовка посуды. Методика подготовки лабораторной посуды с применением средств, гарантирующих обеспечение удаления органических примесей, должна быть изложена в фармакопейной статье с описанием приготовления моющего средства. Заключительное ополаскивание вымытой посуды проводят водой, используемой для определения ООУ.

Испытуемые образцы. Испытуемые образцы воды для определения ООУ отбирают в асептических условиях, используя ёмкости из воздухонепроницаемого материала с плотным укупориванием, оставляя минимальное воздушное пространство, непосредственно перед проведением испытания.

Стандартный раствор. Должен содержать 0,5 мг/л углерода. Стандартный раствор готовят из раствора легкоокисляющегося вещества в ООУ воде с такой концентрацией, чтобы чувствительность прибора соответствовала измеряемому пределу содержания ООУ (например, самое легкоокисляющееся вещество – сахароза). Растворяют сахарозу, предварительно высушенную при температуре 105 °С в течение 3 ч, в воде для определения ООУ в количестве, необходимом для получения раствора с концентрацией сахарозы 1,19 мг/л (что соответствует 0,5 мг/л углерода).

Раствор для проверки пригодности системы. Должен содержать 0,5 мг/л углерода. Раствор готовят по методике, указанной в инструкции по эксплуатации прибора, с использованием трудно окисляющегося вещества в ООУ воде (например, 1,4-бензохинона).

Проверка пригодности системы. Проводят испытания следующих растворов: воды, используемой для определения ООУ, стандартного раствора и раствора для проверки пригодности системы. Далее рассчитывают относительную эффективность сигнала (чувствительность) прибора (Эотн.) в процентах по следующей формуле:

где ООУвода – сигнал прибора для воды, используемой для определения ООУ;
Рст. - сигнал прибора для стандартного раствора;
Рсист - сигнал прибора для раствора для проверки пригодности системы.

На основании полученных результатов система считается пригодной, если эффективность сигнала прибора составляет не менее 85 % и не более 115 % от теоретического сигнала.

Калибровочные растворы. Готовят соответствующие калибровочные и другие растворы, указанные в инструкции по эксплуатации прибора, для регулирования калибровки прибора в автоматическом режиме.

Порядок проведения измерений должен быть указан в инструкции по эксплуатации прибора. Как правило, измерения проводятся в следующей последовательности: раствор для проверки пригодности системы, стандартный раствор для определения чувствительности прибора, калибровочные растворы для установления градуировочных характеристик в соответствии с инструкцией по эксплуатации прибора и далее испытуемый образец воды. Все измерения фиксируются с помощью программного обеспечения ООУ – анализатора.

Определение содержания ООУ в испытуемом образце может осуществляться двумя методами:

1. Содержание ООУ вычисляется по результатам прямого измерения уровня ООУ или по разнице содержания ОУ и ОНУ с помощью программного обеспечения к анализатору углерода:

ООУ = ОУ – ОНУ

2. Измеряют содержание ООУ на максимальной полосе поглощения углерода диоксида методом инфракрасной спектроскопии.

Может быть использован другой подходящий валидированный метод, указанный в фармакопейной статье.

Испытуемый раствор выдерживает испытание, если значение ООУ испытуемого образца воды для фармацевтического применения не превышает значения разницы между показателями стандартного раствора и воды, используемой в испытаниях для определения ООУ (Рст. – ООУвода).

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0027 Серы диоксид во вспомогательных веществах

Вводится впервые

Методы определения серы диоксида во вспомогательных веществах основаны на её извлечении из анализируемых веществ в виде серной или сернистой кислот с последующим титрованием растворами натрия гидроксида (методы 1 и 2) или йода (методы 3 и 4) соответственно.

###### Метод 1

Определение диоксида серы проводят с использованием установки, изображённой на рис. 1.

В колбу А вносят 150 мл воды и в течение 15 мин пропускают углерода диоксид со скоростью около 100 мл/мин.

К 10 мл водорода пероксида раствора разведённого прибавляют 0,15 мл бромфенолового синего раствора 0,1 % и 0,1 М раствор натрия гидроксида до фиолетово-синего окрашивания. Помещают полученный раствор в приёмную пробирку Г вместимостью 20 мл и подсоединяют её к установке с помощью соединительной трубки Д.

Не прерывая потока углерода диоксида, снимают капельную воронку Б и с помощью 100 мл воды вносят в колбу А 25,0 г (точная навеска) испытуемой субстанции. Закрепляют капельную воронку Б в установке, закрывают кран и помещают в неё 80 мл хлористоводородной кислоты разведенной 7,3 %. Открывают кран воронки Б и прибавляют в колбу А хлористоводородную кислоту со скоростью 1–2 капли/с. Закрывают кран воронки Б, когда в ней останется 1–2 мл хлористоводородной кислоты. Кипятят содержимое колбы А в течение 1 ч.

Открывают кран капельной воронки и отключают поток углерода диоксида. При помощи 10–15 мл воды переносят содержимое приёмной пробирки Г в коническую колбу вместимостью 200 мл. Нагревают на водяной бане в течение 15 мин и медленно охлаждают до комнатной температуры. Прибавляют 0,1 мл бромфенолового синего раствора 0,1 % и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до перехода окраски из жёлтой в фиолетово-синюю.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Рисунок 1. Схема установки для определения содержания серы диоксида: А – стеклянная трёхгорлая круглодонная колба; Б – капельная воронка; В – обратный холодильник; Г – приёмная пробирка; Д – соединительная трубка; Е – газовый порт углерода диоксида.

Содержание серы диоксида в частях на миллион (X, ppm) вычисляют по формуле:

где V1 – объём 0,1 М раствора натрия гидроксида, израсходованный на титрование в основном опыте, мл;
V0 – объём 0,1 М раствора натрия гидроксида, израсходованный на титрование в контрольном опыте, мл;
K – поправочный коэффициент 0,1 М раствора натрия гидроксида;
a – навеска испытуемого образца, г;
3,203 – количество серы диоксида, соответствующее 1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида, мг;
1000 – коэффициент пересчёта мг в мкг.

###### Метод 2

Смешивают 20,0 г (точная навеска) испытуемого образца с 200,0 мл растворителя, указанного в соответствующей фармакопейной статье, взбалтывают до получения однородной суспензии. Дают смеси отстояться до осаждения большей части испытуемого образца, надосадочную жидкость фильтруют через бумажный фильтр. Мерной пипеткой Мора отбирают 100,0 мл фильтрата и прибавляют к нему растворитель, указанный в соответствующей фармакопейной статье, 3 мл крахмала раствора 1 %, содержащего 0,1 % салициловой кислоты, и титруют 0,01 М раствором йода до появления неисчезающего голубого или фиолетового окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Содержание серы диоксида в частях на миллион (X, ppm) вычисляют по формуле:

где V1 – объём 0,01 М раствора йода, израсходованный на титрование в основном опыте, мл;
V0 – объём 0,01 М раствора йода, израсходованный на титрование в контрольном опыте, мл;
K – поправочный коэффициент 0,01 М раствора йода;
a – навеска испытуемого образца, г;
0,32 – количество серы диоксида, соответствующее 1 мл 0,01 М раствора йода, мг;
1000 – коэффициент пересчёта мг в мкг.

###### Метод 3

Испытание проводят при температуре 7,5±2,5 °С с растворами, охлаждёнными до той же температуры. В колбу вместимостью 250 мл помещают 75±25 г (точная навеска) испытуемого образца, прибавляют 125±25 мл воды и перемешивают. Прибавляют при перемешивании 10 мл натрия гидроксида раствора 1,5 М. Дополнительно перемешивают в течение 20 с, прибавляют 10 мл крахмала раствора 1 %, содержащего 0,1 % салициловой кислоты и 10 мл 1,0 М раствора серной кислоты и сразу титруют 0,005 М раствором йода до появления устойчивого светло-голубого окрашивания, не исчезающего в течение 1 мин.

Параллельно проводят контрольный опыт, используя 200 мл воды и выполняя все действия, аналогично испытуемому раствору. Вносят необходимые корректировки в результат титрования испытуемого образца.

Содержание серы диоксида в частях на миллион (X, ppm) вычисляют по формуле:

где V1 – объём 0,005 М раствора йода, израсходованный на титрование в основном опыте, мл; V0 – объём 0,005 М раствора йода, израсходованный на титрование в контрольном опыте, мл;
K – поправочный коэффициент 0,005 М раствора йода;
a – навеска испытуемого образца, г;
0,16 – количество серы диоксида, соответствующее 1 мл 0,01 М раствора йода, мг;
1000 – коэффициент пересчёта мг в мкг.

###### Метод 4

Определение диоксида серы проводят с использованием установки, показанной на рис. 2.

Рисунок 2. Схема установки для определения содержания серы диоксида методом 4: А ‒ входной переходник, Б ‒ воронка капельная, В ‒ колба круглодонная трёхгорлая, Г ‒ трубка для подачи газа ‒ азота, Д ‒ холодильник обратный шариковый Аллина, Е ‒ барботёр, Ж ‒ приёмный сосуд.

Установку помещают в колбонагревательное устройство с регулятором температуры. В колбу В вносят 400 мл воды и в течение 15 мин подают газ ‒ азот, свободный от кислорода, со скоростью 200 мл/мин. В капельную воронку Б при закрытом запорном кране помещают 90 мл хлористоводородной кислоты раствора 4 М. Запускают циркуляцию охлаждающей жидкости в обратном холодильнике Д.

К 30 мл водорода пероксида раствора разведённого прибавляют 0,15 мл метилового красного раствора спиртового 0,1 % и прибавляют 0,01 М раствор натрия гидроксида до появления жёлтого окрашивания без превышения конечной точки титрования. Полученный раствор помещают в приёмный сосуд Ж.

Не прекращая поток азота, свободного от кислорода, вынимают капельную воронку Б и с помощью 100 мл спиртового раствора (5:100) вносят в колбу В 50,0 г (точная навеска) испытуемого образца. Закрепляют в установке капельную воронку Б. С помощью устройства для повышения давления через переходник А создают повышенное давление над раствором хлористоводородной кислоты. Открывают кран и прибавляют из капельной воронки Б в колбу В раствор хлористоводородной кислоты со скоростью 1–2 капли/с. Закрывают кран, когда в капельной воронке останется около 2 мл раствора хлористоводородной кислоты. Кипятят содержимое колбы В в течение 1,75 ч, подбирая такую температуру, при которой с обратного холодильника скапывает около 85 капель/мин.

Открывают кран капельной воронки и останавливают поток азота, свободного от кислорода. К содержимому приемного сосуда Ж прибавляют 0,15 мл метилового красного спиртового раствора 0,1 % и, используя бюретку вместимостью 10 мл, соединённую с трубкой, поглощающей углекислый газ, титруют содержимое 0,01 М раствором натрия гидроксида до жёлтого окрашивания, сохраняющегося в течение не менее 20 с.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Содержание серы диоксида в частях на миллион (X, ppm) вычисляют по формуле:

где V1 – объём 0,01 М раствора натрия гидроксида, израсходованный на титрование в основном опыте, мл; V0 – объём 0,01 М раствора натрия гидроксида, израсходованный на титрование в контрольном опыте, мл; K – поправочный коэффициент 0,01 М раствора натрия гидроксида; a – навеска испытуемого образца, г; 0,320 – количество серы диоксида, соответствующее 1 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида, мг; 1000 – коэффициент пересчёта мг в мкг.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0028 Свинец в сахарах

МЕТОД 1

Определение свинца проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 2).

Испытуемый раствор. 20,0 г испытуемого образца растворяют в смеси равных объёмов уксусной кислоты разведённой 12 % и воды и доводят объём раствора той же смесью растворителей до 100,0 мл. К полученному раствору прибавляют 2,0 мл аммония пирролидиндитиокарбамата раствора 1 % и 10,0 мл метилизобутилкетона, встряхивают в течение 30 с в защищённом от яркого света месте. Оставляют до разделения слоёв и используют слой метилизобутилкетона.

Растворы сравнения. Готовят три раствора таким же образом, с добавлением к 20,0 г испытуемого образца 0,5 мл, 1,0 мл и 1,5 мл свинца стандартного раствора (10 ppm Pb), соответственно.

Устанавливают нулевую точку на приборе, используя метилизобутилкетон, подготовленный таким же образом, как и испытуемый раствор, но без добавления испытуемого образца. Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора и растворов сравнения при длине волны 283,3 нм, используя в качестве источника излучения лампу с полым свинцовым катодом и воздушно-ацетиленовое пламя.

Испытуемый образец должен содержать не более 0,5 ppm свинца, если в фармакопейной статье не указано иное.

МЕТОД 2

Определение свинца проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой»).

Испытуемый раствор. 5,0 г испытуемого образца растворяют в 10,0 мл азотной кислоты, свободной от свинца, разведённой 6 % при нагревании до температуры 60 °С, периодически перемешивая в течение 20 мин, и доводят объём раствора тем же растворителем до 25,0 мл.

Азотная кислота, свободная от свинца, разведённая 6 %. 6 мл азотной кислоты, свободной от свинца, доводят водой до 100,0 мл.

Растворы сравнения. Готовят два раствора сравнения аналогично испытуемому раствору с добавлением 0,5 мл, 1,0 мл свинца стандартного раствора 10 мкг/мл, соответственно.

Устанавливают нулевую точку на приборе, используя азотную кислоту, свободную от свинца, разведённую 6 %, обработанную аналогично испытуемому раствору, без добавления испытуемого образца. Измеряют эмиссию испытуемого раствора и растворов сравнения при длине волны 220,353 нм, используя в качестве атомизатора индуктивно связанную аргоновую плазму.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0029 Примеси углерода диоксида и углерода оксида в газах медицинских

Вводится впервые

Определение примесей углерода диоксида и углерода оксида в газах медицинских проводят адсорбционным методом (метод 1), недисперсионным инфракрасным методом (метод 2), методом газовой хроматографии (метод 3), электрохимическим методом (метод 4) или с применением индикаторных трубок (метод 5).

Содержание примеси углерода диоксида в медицинских газах должно быть не более 0,05 %, углерода оксида – не более 0,001 %, если в фармакопейной статье не указано иначе.

###### Метод 1

Раствор натрия карбоната. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг натрия карбоната безводного, растворяют в предварительно прокипячённой и охлаждённой воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Склянку для промывания газов (рис. 1А) вместимостью 500 мл продувают в течение 1–2 мин анализируемым газом, который отбирают из баллона с помощью редуктора через резиновую трубку.

В склянку для промывания газов наливают 100 мл свежеприготовленного прозрачного бария гидроксида раствора 5 % (поглотительный раствор). Пропускают (1000±50) мл газа (испытуемый раствор) в течение 15–20 мин через поглотительный раствор. Объём газа измеряют с помощью склянки с тубусом (рис. 1Б) или прибором для отбора проб газа (рис. 1В), присоединённым к короткой трубке склянки (рис. 1А) на выходе газа.

Рисунок 1. Склянки для отбора проб газа: А – Склянка для промывания газов СН-1: 1 – насадка, 2 – сосуд; Б – Склянка с тубусом: 1 – воронка, 2 – пробка стеклянная, 3 – газоотводная трубка с краном, 4 – склянка, 5 – переходник, 6 – кран нижнего тубуса типа К1Х-40-4,0, 7 – пружина; В – Прибор для отбора проб газа: 1 – футляр, 2 – пипетка, 3 – склянка, 4 – трубка резиновая, 5 – гребёнка распределительная (размеры указаны в мм).

Для приготовления контрольного раствора к 100 мл свежеприготовленного и профильтрованного прозрачного бария гидроксида раствора 5 % прибавляют 1 мл раствора натрия карбоната и перемешивают.

Сравнивают опалесценцию 10 мл испытуемого раствора и 10 мл контрольного раствора в соответствии с требованиями ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей». Опалесценция испытуемого раствора не должна превышать опалесценцию контрольного раствора.

###### Метод 2

Метод недисперсионного ИК поглощения основан на способности газов, состоящих из молекул с различными атомами, поглощать ИК излучение на характеристичной длине волны.

Технически этот принцип измерений выполняется следующим образом:

- a) двухлучевой метод

- Излучение от ИК источника делится на два параллельных пучка, при этом один из них проходит через кювету сравнения, а другой – через кювету с пробой. Интенсивность отдельных пучков измеряется подходящим детектором для определения содержания целевого газа.

- б) однолучевой метод

- Существует три способа реализации однолучевого метода:

  - использование двух интерференционных фильтров: первого – настроенного на поглощение целевого газа, второго – на длину волны сравнения. Определяемое содержание газа будет зависеть от интенсивностей световых потоков, прошедших через фильтры;

  - использование корреляционного газового фильтра, при котором интерференционный фильтр заменяется на газовый фильтр, в остальном способ аналогичен предыдущему. За счёт этого обеспечивается более высокая чувствительность и устраняются влияния, связанные с перекрёстной чувствительностью. Для уменьшения влияния мешающих газов можно использовать дополнительные газовые фильтры;

  - однолучевой метод с излучением на одной характеристической длине волны, на которой происходит поглощение целевого газа. В приборах такого типа отсутствуют компенсация потери излучения на кювете, старение источника/детектора и т.д., а также наблюдается тенденция к дрейфу показаний. Влияние этих факторов компенсируют за счёт регулярных автоматических калибровок.

- в) ИК-Фурье спектроскопия

С помощью движущегося зеркала получают спектр поглощения пробы в широком диапазоне длин волн ИК излучения. Для вычисления содержания определяемого газообразного соединения полученный в результате Фурье преобразования спектр сравнивают с библиотекой спектров.

Могут быть использованы инфракрасные спектрофотометры, снабжённые оптической системой (призмы или дифракционные решётки), выделяющей монохроматическое излучение в измеряемой области, или спектрофотометры с Фурье-преобразованием. В последних используется полихроматическое излучение и рассчитывается спектр в заданной области частот путём Фурье-преобразования исходных данных. В таких приборах вместо диспергирующего прибора используется интерферометр, а обработка спектральных данных производится с помощью компьютера.

Применение инфракрасного метода реализовано в газоанализаторах, работающих по недисперсионному инфракрасному (НДИК) методу (рис. 2).

Рисунок 2. Схема недисперсионного инфракрасного газоанализатора: 1 – источник излучения; 2 – мотор модулятора; 3 – модулятор; 4 – измерительная кювета; 5 – кювета сравнения; 6 – детектор; 7 – блок электронной обработки данных; 8 – блок регистрации данных.

Метод абсорбционной ИК-спектрометрии применим для определения объёмной доли CO2 при его концентрации до 20 %. При анализе CO диапазон измерений массовой концентрации составляет от 6 мг/м3 (объёмная доля 5·10-6) до 62 500 мг/м3 (объёмная доля приблизительно 5 %). Для получения такого диапазона измерений может потребоваться применение многоходовых кювет.

Определение содержания CO2 и CO осуществляется с использованием инфракрасных газоанализаторов по валидированным методикам.

###### Метод 3

Определение проводят в соответствии с ОФС «Газовая хроматография».

В описании метода необходимо указать: тип детектора, тип колонки (насадочная или капиллярная), материал и геометрические параметры колонки, сорбент (тип твёрдого носителя и его характеристики, неподвижная жидкая фаза и её количество), метод введения пробы и его параметры, температура испарителя, колонки и детектора, газ-носитель и его расход.

Показатели пригодности хроматографической системы приводятся в фармакопейной статье.

###### Метод 4

Метод основан на протекании электрохимической реакции в электрохимической ячейке (рис. 3). Анализируемый газ вступает в химическую реакцию с электролитом, заполняющим ячейку. В результате в растворе возникают заряженные ионы, между электродами начинает протекать электрический ток, пропорциональный концентрации анализируемого компонента в пробе.

Электрический датчик обрабатывает возникающий электрический сигнал.

Рисунок 3. Схема электрохимической ячейки

Определение проводят с помощью газоанализатора, принцип действия которого основан на методе потенциостатической амперометрии, заключающемся в измерении тока при электрохимическом окислении углерода оксида на рабочем электроде трёхэлектродной электрохимической ячейки при постоянном потенциале. Электрод сравнения (опорный) в реакции не участвует и используется для установления необходимого потенциала рабочего электрода.

При этом на рабочем электроде протекает следующая реакция:

CO + H2O → CO2 + 2H+ +2е-.

На вспомогательном (отчётном) электроде ячейки протекает реакция:

1/2O2 + 2H+ + 2е- → H2O.

Суммарная реакция:

2CO + O2 → 2CO2.

Потенциал рабочего электрода относительно электрода сравнения поддерживается с помощью потенциостата, расположенного в измерительном блоке газоанализатора. Потенциостат вместе с электрохимической ячейкой образуют систему автоматического регулирования, которая при окислении углерода оксида на рабочем электроде генерирует ток, поддерживающий потенциал рабочего электрода на постоянном уровне (ток поляризации). Ток поляризации протекает в цепи вспомогательный электрод–рабочий электрод. Сила тока пропорциональна концентрации углерода оксида в анализируемом газе.

Поток испытуемого газа пропускают через газоанализатор с электрохимической ячейкой на углерода оксид (СО) с постоянной скоростью до установления показаний. Регистрируют концентрацию углерода оксида в анализируемом газе.

Диапазон измерения газоанализатора с электрохимической ячейкой составляет от 0 до 50 ppm с погрешностью измерений не более ±5 %. Для калибровки нуля прибора используют азот повышенной чистоты (с объёмной долей азота не менее 99,999 и объёмной долей кислорода не более 0,0005). Для линеаризации и калибровки шкалы используют поверочные газовые смеси (эталонные газы) с определённым содержанием углерода оксида. Прибор в автоматическом режиме определяет долю содержания углерода оксида. Межкалибровочный интервал соблюдают согласно документации производителя прибора.

###### Метод 5

Индикаторные трубки – герметичные цилиндрические трубки, состоящие из инертного прозрачного материала и сконструированные с учётом возможности пропускания через них газа. Они содержат реагент, подходящий для визуализации обнаруживаемого вещества, адсорбированный на инертном носителе, и, при необходимости, дополнительные верхние слои и/или адсорбирующие фильтры для удаления веществ, которые могут взаимодействовать с обнаруживаемым веществом. Слой индикатора содержит либо один реагент, позволяющий обнаружить определённое вещество, либо несколько реагентов для обнаружения нескольких веществ (однослойные и многослойные трубки).

Метод основан на изменении окраски массы-наполнителя индикаторных трубок при взаимодействии с определяемым компонентом в анализируемой пробе и измерении длины прореагировавшего слоя.

Длина слоя, изменившего окраску, является функцией и мерой содержания определяемого компонента и объёма отобранной на анализ пробы. Значение содержания определяемого компонента в анализируемой пробе определяется по шкале, нанесённой на индикаторную трубку.

Испытания проводят путём пропускания требуемого объёма газа через индикаторную трубку. Длина окрашенного слоя или интенсивность изменения цвета на градуировочной шкале является функцией и мерой массовой концентрации определяемого компонента. Проверка индикаторных трубок проводится в соответствии с инструкциями изготовителя.

Подготовка к измерению. Проводится согласно руководству по эксплуатации прибора или следующим образом. Устройство для подачи газа подсоединяют к регулятору давления с игольчатым клапаном. Соединяют гибкий шланг трубки с Т-образным участком клапана и продувают систему (рис. 4). Присоединяют открытый конец индикаторный трубки к короткому концу шланга и регулируют насосом объём анализируемого газа, проходящего через трубку. Записывают значения, соответствующие длине окрашенного слоя или интенсивности цвета на градуировочной шкале. При отрицательном результате анализа индикаторная трубка должна быть проверена с помощью калибровочного газа, содержащего соответствующую примесь.

Рисунок 4. Прибор для индикаторных трубок: 1 – подача газа; 2 – регулятор давления; 3 – игольчатый клапан; 4 – T-образный участок; 5 – индикаторная трубка; 6 – насос для индикаторной трубки; 7 – открытый конец для выхода газа в атмосферу.

Индикаторная трубка для углерода диоксида. Герметичная стеклянная трубка, содержащая адсорбирующие фильтры и подходящие носители для индикаторов: гидразина и кристаллического фиолетового. Минимальная определяемая концентрация – 100 ppm с относительным стандартным отклонением ±15 %.

Индикаторная трубка для углерода оксида. Герметичная стеклянная трубка, содержащая адсорбирующие фильтры и подходящие носители для индикаторов: йода(V) оксида, селена(IV) оксида и серной кислоты концентрированной. Минимальная определяемая концентрация – 5 ppm или менее с относительным стандартным отклонением ±15 %.

Метод применим для оценки качества газа в нестационарных, полевых условиях.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0030 Примесь серы диоксида в газах медицинских

Вводится впервые

Методы определения примеси серы диоксида в газах медицинских основаны на использовании флуориметрического метода (метод 1) и индикаторных трубок (метод 2).

###### Метод 1

Определение проводят в соответствии с ОФС «Флуориметрия».

Диапазон измерений – от 0,01 до 2,0 ppm.

При облучении пробы газа, содержащего серы диоксид, ультрафиолетовым светом (максимум поглощения при λ=210 нм) молекулы SO2 переходят сначала в возбуждённое состояние, а затем возвращаются из него в прежнее состояние, разряжаясь частично на флуоресценцию (максимум флуоресценции при λ=350 нм). Интенсивность излучения, пропорциональная содержанию серы диоксида, детектируется фотоэлектронным умножителем.

Определение проводят с помощью ультрафиолетового флуоресцентного анализатора. Схема флуоресцентного газоанализатора изображена на рисунке 1.

Аппаратура состоит из следующих компонентов:

- системы, генерирующей ультрафиолетовое излучение с длиной волны 210 нм с помощью ультрафиолетовой лампы, коллиматора и оптического фильтра на входе в камеру; луч периодически блокируется прерывателем, вращающимся с высокой скоростью;

- реакционной камеры, через которую проходит испытуемый газ;

- системы, регистрирующей излучение при длине волны 350 нм с помощью оптического фильтра на выходе из камеры, фотоэлектронного умножителя и синхронного электронного усилителя.

Рисунок 1. Схема ультрафиолетового флуоресцентного газоанализатора для измерений содержания SO2: 1 - проба газа; 2 - фильтр на входе газоанализатора; 3 - селективные ловушки для мешающих веществ; 4 - реакционная камера; 5 - оптический фильтр на входе в камеру; 6 - оптическая ловушка, поглощающая излучение; 7 - ультрафиолетовая лампа; 8 - коллиматор; 9 - оптический фильтр на выходе из камеры; 10 - фотоэлектронный умножитель; 11 - стабилизатор давления; 12 - насос; 13 - линия сброса; 14 - синхронный электронный усилитель.

Проба газа поступает на вход газоанализатора, где удаляются мешающие соединения, а далее в реакционную камеру, где её подвергают воздействию ультрафиолетового излучения с длиной волны в диапазоне от 200 до 220 нм.

Флуоресцентное излучение в диапазоне длин волн от 240 до 420 нм фильтруется с помощью оптического фильтра на выходе из камеры и затем с помощью детектора, например, фотоэлектронного умножителя и синхронного электронного усилителя, преобразуется в электрический сигнал.

Выходной сигнал газоанализатора прямо пропорционален числу молекул SO2 в реакционной камере.

Величина сигнала зависит от температуры и давления в камере, поэтому они должны поддерживаться постоянными или, если ожидается их изменение, то результаты измерений должны быть скорректированы.

Методика

Стандартный газ А (для калибровки нуля). Поверочная газовая смесь основного газа или смеси газов, не содержащая серы диоксида.

Стандартный газ Б. Поверочная газовая смесь из основного газа или смеси газов, содержащая от 0,5 ppm (о/о) до 2 ppm (о/о) серы диоксида.

Калибруют аппаратуру и устанавливают подходящую чувствительность с использованием стандартных газов А и Б. По валидированной методике не менее трёх раз измеряют содержание серы диоксида в испытуемом газе, определяют среднее арифметическое и относительное стандартное отклонение.

###### Метод 2

Герметичная стеклянная трубка, содержащая адсорбирующие фильтры и подходящие носители для индикаторов – йода и крахмала.

Определение проводят в соответствии с ОФС «Индикаторные трубки».

Диапазон измерений – от 0,1 до 20 ppm. Относительное стандартное отклонение при 3 последовательных измерениях не должно превышать 15 %.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0031 Примеси N-нитрозаминов

Вводится впервые

Методики определения примесей N-нитрозаминов в фармацевтических субстанциях синтетического происхождения группы сартана основаны на использовании масс-спектрометрии.

N-нитрозамины – это класс органических веществ, молекулы которых содержат алкилнитрозаминогруппу:

Соединения N-нитрозаминов классифицируются как вероятные канцерогены для человека. В силу потенциальной токсичности этих примесей рекомендуется применять меры по контролю и ограничению их присутствия в фармацевтических субстанциях.

Целесообразность определения примесей N-нитрозаминов в лекарственных препаратах устанавливается на этапе фармацевтической разработки.

Особое значение имеют соединения, приведенные в таблице 1.

Химическое название | Структурная формула | Брутто-формула | Молекулярная масса
--- | --- | --- | ---
N-нитрозо-диметиламин |  | C2H6N2O | 74,082
N-нитрозо-диэтиламин |  | C4H10N2O | 102,135
N-нитрозо-дибутиламин |  | C8H18N2O | 158,241
N-нитрозо-N-метил-4-аминобутановая кислота |  | C5H10N2O3 | 143,145
N-нитрозо-диизопропиламин |  | C6H14N2O | 130,188
N-нитрозо-этил-изопропиламин |  | C5H12N2O | 116,162
N-нитрозо-дипропиламин |  | C6H14N2O | 130,188
N-нитрозо-метил-фениламин |  | C7H8N2O | 136,151

Нормы содержания примесей N-нитрозаминов должны быть приведены в фармакопейной статье. В случае их отсутствия нормы содержания должны быть рассчитаны с использованием значений максимально допустимой суточной дозы примесей указанных веществ (табл. 2).

Таблица 2. Максимально допустимая суточная доза примесей N-нитрозаминов
Наименование примеси | Допустимая суточная доза, нг/сут
--- | ---
N-нитрозо-диметиламин (НДМА) | не более 96,0
N-нитрозо-диэтиламин (НДЭА) | не более 26,5
N-нитрозо-N-метил-4-аминобутановая кислота (НМАК) | не более 96,0
N-нитрозо-диизопропиламин (НДИПА) | не более 26,5
N-нитрозо-этил-изопропиламин (НЭИПА) | не более 26,5

К наиболее вероятным причинам образования примесей N-нитрозаминов в лекарственных средствах относятся:

- использование натрия нитрита или других нитрозирующих соединений в синтезе фармацевтической субстанции.

- Например:

- использование загрязнённых сырьевых материалов (растворителей, реагентов и катализаторов) в синтезе фармацевтической субстанции;

- регенерация растворителей, реагентов и катализаторов в процессе синтеза;

- использование контаминированных исходных материалов;

- контаминация от перекрёстно протекающих процессов синтеза;

- деградация исходных материалов, промежуточных продуктов или лекарственных веществ, в том числе при хранении;

- использование определенных видов упаковки (например, возможна контаминация лекарственного препарата в его первичной упаковке; в контурной ячейковой упаковке (блистере), так как покрывающая фольга, содержащая нитроцеллюлозный праймер, способна реагировать с аминами в чернилах с образованием нитрозаминов, которые могут быть перенесены в препарат при определенных условиях упаковки).

Определение N-нитрозаминов проводят приведёнными ниже методиками или иными методиками, указанными в фармакопейной статье.

###### Методика 1

Методика распространяется на определение семи примесей N-нитрозаминов в валсартане, ирбесартане и лозартане калия: N-нитрозо-диметиламина (НДМА), N-нитрозо-диэтиламина (НДЭА), N-нитрозо-этил-изопропиламина (НЭИПА), N-нитрозо-диизопропиламина (НДИПА), N-нитрозо-дибутиламина (НДБА), N-нитрозо-метил-фениламина (НМФА) и N-нитрозо-N-метил-4-аминобутановой кислоты (НМАК).

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») с использованием масс-спектрометрии (ОФС «Масс-спектрометрия»).

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 10 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 500 мл воды и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 10 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 500 мл метанола и доводят объём раствора метанолом до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 4 мл метанола, интенсивно перемешивают до растворения, доводят объём раствора метанолом до метки и фильтруют через шприцевой мембранный фильтр из поливинилиденфторида с размером пор 0,22 мкм, отбрасывая первый 1 мл фильтрата.

Стандартный раствор примесей N-нитрозамина. Готовят раствор фармакопейных стандартных образцов НДМА, НДЭА, НДБА, НМАК, НДИПА, НЭИПА и НМФА в метаноле с концентрацией по 6 нг/мл.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. Готовят раствор фармакопейных стандартных образцов НДМА, НДЭА, НДБА, НМАК, НДИПА, НЭИПА, НМФА в метаноле с концентрацией по 1 нг/мл.

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель пентафторфенилпропильный, эндкепированный, для хроматографии, 2,6 мкм; |  |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Температура образца | 4 °С; |  |
Скорость потока | 0,6 мл/мин; |  |
Объём пробы | 3 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА, % | ПФБ, %
--- | --- | ---
0–1,5 | 90 | 10
1,5–7,0 | 90 → 45 | 10 → 55
7,0–17,0 | 45 | 55
17,0–17,1 | 45 → 10 | 55 → 90
17,1–21,0 | 10 | 90
21,0–21,1 | 10 → 90 | 90 → 10
21,1–25,0 | 90 | 10

Условия детектирования

Источник ионизации | электронная ионизация
--- | ---
Примесь | НДМА | НМАК | НДЭА | НЭИПА | НДИПА | НМФА | НДБА
Режим сканирования | SIM | SIM | PRM | SIM | SIM | SIM | PRM
Полярность | + | – | + | + | + | + | +
Начало-окончание сканирования, мин | 1,0–3,5 | 3,5–5,5 | 5,5–7,0 | 7,0–8,5 | 8,5–10 | 8,5–10 | 13,0–15,5
Величина m/z (PRM) | – | – | 103,0866 | – | – | – | 159,1492
Нормализованная энергия столкновения | – | – | 25 | – | – | – | 20
Диапазон сканирования | m/z 74,3–75,8 | m/z 144,3–145,8 | m/z 50,0–114,0 | m/z 116,4–117,9 | m/z 130,4–131,9 | m/z 136,3–137,8 | m/z 50,0–170,0
Микросканирования | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3
Разрешение | 30000 | 60000 | 30000 | 60000 | 60000 | 60000 | 60000
Автоматический контроль усиления (%) | 250 | 250 | 250 | 250 | 250 | 250 | 250

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений: НДБА – 1,0 (около, 14,2 мин); НДМА – около 0,20; НМАК – около 0,31, НДЭА – около 0,46; НЭИПА – около 0,57; НДИПА – около 0,66; НМФА – около 0,67.

Пригодность ВЭЖХ-МС системы

На хроматограмме стандартного раствора относительное стандартное отклонение площади каждого из пиков примесей
N-нитрозаминов должно быть не более 20,0 % (6 введений).

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности отношение сигнал/шум (S/N) для каждого из пиков примесей N-нитрозаминов должно быть не менее 10.

Обработка результатов

Для количественного определения используются площади пиков целевых ионов с допуском m/z 15 ppm. Ниже перечислены целевые значения m/z:

Примесь | НДМА | НМАК | НДЭА | НЭИПА | НДИПА | НМФА | НДБА
--- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | ---
Целевое значение m/z | 75,0553 | 145,0619 | 75,0553, 103,0866 | 117,1022 | 131,1179 | 137,0709 | 57,0704, 103,0872, 159,1492

Примечание – Примеси НМАК и НЭИПА существуют как синконформационный и антиконформационный изомеры из-за ограниченного вращения связи N–N. Эти изомеры в условиях метода разделяются частично. Пик НМАК наблюдается как дублет, для расчёта концентрации НМАК интегрируют оба пика и используют суммарную площадь. Пик НЭИПА может быть как дублетом, так и одиночным пиком с хвостовым плечом. Если конформеры разделяются, для расчёта концентрации НЭИПА интегрируют оба пика и суммируют их площади, если же конформеры разделены не полностью (наблюдается полупик), для расчёта концентрации НЭИПА интегрируют основной пик и полупик как единый.

Содержание каждой из примесей N-нитрозаминов в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей N-нитрозаминов на хроматограмме испытуемого раствора; S0 – площадь пика соответствующей примеси N-нитрозаминов на хроматограмме стандартного раствора; С1 – концентрация субстанции в испытуемом рвстворе, нг/мл; С0 – концентрация каждой из примеси НДМА, НДЭА, НДБА, НМАК, НДИПА, НЭИПА и НМФА в стандартном растворе, нг/мл; P – содержание основного вещества в стандартном образце соответствующей примеси, %.

###### Методика 2

Методика распространяется на определение четырёх примесей
N-нитрозаминов в валсартане, ирбесартане, лозартане калия, олмесартане медоксомиле, кандесартане цилексетиле и телмисартане:
N-нитрозодиметиламина (НДМА), N-нитрозодиэтиламина (НДЭА), нитрозоэтилизопропиламина (НЭИПА) и N-нитрозодиизопропиламина (НДИПА).

Определение проводят методом ГХ (парофазный анализ, ОФС «Газовая хроматография») с использованием масс-спектрометрии (ОФС «Масс-спектрометрия»).

Раствор внутреннего стандарта А. Готовят раствор N-нитрозо-диметиламина-d6 в метаноле с концентрацией 0,4 мкг/мл.

Раствор внутреннего стандарта Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл раствора внутреннего стандарта А и доводят объём раствора метанолом до метки.

Испытуемый раствор. В хроматографический флакон для парофазного анализа помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции, 0,1 г имидазола, 1,0 мл раствора внутреннего стандарта Б и 1,0 мл ацетонитрила. Укупоривают пробкой, закрывают крышкой и плотно прижимают их обкаткой.

Стандартный раствор А. Готовят раствор фармакопейных стандартных образцов НДМА, НДЭА, НДИПА и НЭИП в метаноле с концентрацией по 0,4 мкг/мл.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл стандартного раствора А и 2,0 мл раствора внутреннего стандарта А и доводят объём раствора метанолом до метки.

Стандартный раствор В. Помещают 1,0 мл стандартного раствора Б во флакон для парофазного анализа, содержащий 0,1 г имидазола и 1,0 мл ацетонитрила. Укупоривают пробкой, закрывают крышкой и плотно прижимают их обкаткой.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,5 мл стандартного раствора А и 2,0 мл раствора внутреннего стандарта А и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы Б. Во флакон для парофазного анализа, содержащий 0,1 г имидазола и 1,0 мл ацетонитрила, помещают 1,0 мл раствора для проверки чувствительности хроматографической системы А. Укупоривают пробкой, закрывают крышкой и плотно прижимают их обкаткой.

Контрольный раствор. В хроматографический флакон помещают около 0,1 г (точная навеска) имидазола, прибавляют 1,0 мл раствора внутреннего стандарта Б и 1,0 мл ацетонитрила. Укупоривают пробкой, закрывают крышкой и плотно прижимают их обкаткой.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,32 мм, покрытая слоем макрогола 20 000, 1,0 мкм;
Детектор | масс-спектрометрический;
Газ-носитель | гелий для хроматографии;
Деление потока | 1:1 или 1:3;
Скорость потока | 1,8 мл/мин;
Температура | колонка | 0–3 мин | 45 °С
|  | 3–10 мин | 45 → 130 °С
|  | 10 мин | 190 → 240 °С

Условия парофазного анализа

Температура уравновешивания | 95–110 °С;
Время уравновешивания | 10 мин;
Температура петли | 150 °С;
Температура линии переноса | 160 °С.

Условия детектирования

Источник ионизации | электронная ионизация (EI);
Режим детектирования | мониторинг реакций заданных ионов (MRM).

Переходы сканирования масс и энергии столкновений

Наименование примеси | Относительное время удерживания | Переходы сканирования масс | Энергия столкновений, эВ
НДМА | около 0,8 | 74 → 44 74 → 42 | 4 15
НДМА-d6 | около 0,8 | 80 → 50 | 5
НДЭА | около 0,9 | 102 → 85,1 102 → 56,1 | 6 15
НЭИПА | около 0,96 | 116 → 99,1 99 → 44,1 | 6 9
НДИПА | 1 (около 14 мин) | 130 → 42 130 → 43,1 | 10 18

Хроматографируют контрольный раствор, стандартный раствор В, раствор для проверки чувствительности хроматографической системы Б и испытуемый раствор.

Пригодность ГХ-МС системы

На хроматограмме стандартного раствора В относительное стандартное отклонение отношения площади каждого из пиков примесей НДМА, НДЭА НЭИПА и НДИПА к площади пика НДМА-d6 должно быть не более 20 % (6 введений).

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности отношение сигнал/шум (S/N) для каждого из пиков примесей НДМА, НДЭА НЭИПА и НДИПА должно быть не менее 10.

Содержание каждой из примесей N-нитрозаминов в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

###### Методика 3

Методика распространяется на определение пяти примесей
N-нитрозаминов в валсартане, ирбесартане и лозартане калия, кандесартане цилексетиле и олмесартане медоксомиле: N-нитрозо-диметиламина (НДМА), N-нитрозо-диэтиламина (НДЭА), N-нитрозо-этил-изопропиламина (НЭИПА), N-нитрозо-диизопропиламина (НДИПА) и N-нитро-N-метил-4-аминобутановой кислоты (НМАК).

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») с использованием масс-спектрометрии (ОФС «Масс-спектрометрия»)

Подвижная фаза А (ПФА). Муравьиной кислоты раствор 0,1 %.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Раствор внутреннего стандарта. Готовят раствор НДЭА-d10 в метаноле с концентрацией 9,0 нг/мл.

Испытуемый раствор. Суспендируют 0,150 г (точная навеска) субстанции в 0,5 мл метанола, прибавляют 0,5 мл раствора внутреннего стандарта, тщательно перемешивают, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 15 мин, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 4,0 мл воды, тщательно перемешивают, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 15 мин, центрифугируют в течение 5 мин при 3000 g и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,2 мкм.

Стандартный раствор примесей N-нитрозаминов. Готовят раствор фармакопейных стандартных образцов НДМА, НДЭА, НМАК, НДИПА и НЭИПА в метаноле с концентрацией по 500 мкг/мл. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,3 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,3 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Стандартный раствор А. Суспендируют около 0,15 г (точная навеска) субстанции в 0,5 мл стандартного раствора примесей N-нитрозаминов, прибавляют 0,5 мл раствора внутреннего стандарта и тщательно перемешивают в течение 5 мин, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 15 мин, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 4,0 мл воды, тщательно перемешивают в течение 5 мин, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 15 мин, охлаждают до комнатной температуры и центрифугируют в течение 5 мин при 3000 g и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,2 мкм.

Стандартный раствор Б. Смешивают 0,5 мл стандартного раствора примесей N-нитрозаминов и 0,5 мл раствора внутреннего стандарта, тщательно перемешивают в течение 5 мин, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 15 мин, охлаждают до комнатной температуры прибавляют 4,0 мл воды, тщательно перемешивают в течение 5 мин, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 15 мин, охлаждают до комнатной температуры и центрифугируют в течение 5 мин при 3000 g, фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,2 мкм.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 3,0 мкм; |  |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Температура образца | 5 °С; |  |
Скорость потока | 0,5 мл/мин; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА, % | ПФБ, %
--- | --- | ---
0–1,0 | 80 | 20
1,0–6,0 | 80 → 55 | 20 → 45
6,0–14,0 | 55 | 45
14,0–16,0 | 55 → 5 | 45 → 95
16,0–35,0 | 5 | 95

Детектирование: трёхквадрупольный масс-спектрометр в режиме мониторинга множественных реакций (MRM). Следующие настройки были признаны подходящими и приведены в качестве примера; настройки могут быть скорректированы таким образом, чтобы выполнялись требования пригодности системы.

Условия МС/МС

Режим ионизации | APCI-положительный;
--- | ---
Температура нагревателя | 350 °C;
Давление в распылителе | 310 кПа;
Температура газа: | 300 °C;
Расход осушающего газа | 5 л/мин;
Ток в короне | 6 мкА;
Время выдержки | 200 мс;
Напряжение в капилляре (Vкап): | 1,5 кВ;
Напряжение ускорения ячейки: | 3 В.

Параметры режима MRM

Наименование примеси | Относительное время удерживания | Переходы MRM (m/z) | Энергия столкновений, В | Напряжение фрагментора, В
--- | --- | --- | --- | ---
НДМА | около 0,6 | 74 → 58 (75 → 43) | 11 15 | 20 15
НМАК | около 0,7 | 147 → 117 (147 → 87) | 2 6 | 41 46
НДЭА | около 1 | 103 → 75 (103 → 47) | 9 17 | 25 20
НЭИПА | около 1,3 | 117 → 75 (117 → 47) | 7 15 | 54 59
НДИПА | около 1,6 | 131 → 89 (131 → 47) | 2 10 | 20 25
НДЭА-d10 | 1 (около 8,6 мин) | 113 → 81 (117 → 75) | 6 14 | 76 81

Хроматографируют стандартный раствор Б, стандартный раствор А, испытуемый раствор.

Пригодность хроматографический системы

На хроматограмме стандартного раствора Б относительное стандартное отклонение отношения площади каждого из пиков примесей НДМА, НДЭА, НМАК, НДИПА и НЭИПА к площади пика НДЭА-d10 должно быть не более 20 % (6 введений).

На хроматограмме стандартного раствора А:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика НДМА, соответствующего основному переходу, должно быть не менее 5;

- отношение сигнал/шум (S/N) для каждого из пиков примесей НДЭА, НМАК, НДИПА, НЭИПА, соответствующего основному переходу, должно быть не менее 10;

- отношение сигнал/шум (S/N) для каждого из пиков примесей НДМА, НДЭА, НМАК, НДИПА, НЭИПА, соответствующего переходу классификатора, должно быть не менее 3.

Рассчитывают отношения площади пика каждой примеси
N-нитрозамина к площади пика внутреннего стандарта на хроматограмме испытуемого раствора (B1).

Рассчитывают отношения площади пика каждой примеси
N-нитрозамина к площади пика внутреннего стандарта на хроматограмме стандартного раствора А (B0).

Для каждой обнаруженной примеси N-нитрозамина отношение В1/В0 должно быть менее 0,50.

Испытание действительно, если соотношение между площадью пика, соответствующего основному переходу, и площадью пика, соответствующего переходу квалификатора, для испытуемого раствора отличается не более чем на 20 % от того же соотношения, рассчитанного для стандартного раствора А.

###### Методика 4

Методика распространяется на определение шести примесей
N-нитрозаминов: N-нитрозодиметиламина (НДМА), N-нитрозодиэтиламина (НДЭА), N-нитрозо-этил-изопропиламина (НЭИПА), N-нитрозо-диизопропиламина (НДИПА), N-нитрозо-дибутиламина (НДБА) и N-нитрозо-дипропиламина (НДПА).

Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»). С использование масс-спектрометрии (ОФС «Масс-спектрометрия»)

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг (точная навеска) НЭМА (N-нитрозо-этилметиламина, 10595-95-6), растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для экстракции. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 40,0 мг натрия гидроксида, растворяют в 500 мл воды, прибавляют 100 мкл раствора внутреннего стандарта и 50 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,25 г (точная навеска) субстанции, суспендируют в растворе для экстракции и доводят объём раствора тем же растворителем до метки, встряхивают в течение 5 мин, экстрагируют 2 мл метиленхлорида, встряхивая в течение 5 мин и центрифугируя в течение 5 мин при10 000 g. Для анализа используют нижний слой (органический).

Стандартный раствор примесей N-нитрозаминов. Готовят раствор фармакопейных стандартных образцов НДМА, НДЭА, НДБА, НДПА, НДИПА и НЭИПА в метаноле с концентрацией по 500 мкг/мл. В мерную колбу 10 мл помещают 100 мкл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,3 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор с добавками. Суспендируют 0,25 г субстанции в 10 мл раствора для экстракции, прибавляют 0,1 мл стандартного раствора примесей N-нитрозаминов, интенсивно перемешивают в течение 5 мин, экстрагируют с помощью 2 мл метиленхлорида и встряхивают в течение 5 мин, центрифугируют в течение 5 мин при 10 000 g. Для анализа используют нижний слой (органический).

Стандартный раствор А. К 10 мл раствора для экстракции прибавляют 50 мкл стандартного раствора примесей N-нитрозаминов, интенсивно перемешивают в течение 5 мин, экстрагируют 2,0 мл метиленхлорида и встряхивают в течение 5 мин, центрифугируют в течение 5 мин при 10 000 g. Для анализа используют нижний слой (органический).

Стандартный раствор Б. К 10 мл раствора для экстракции прибавляют 100 мкл стандартный раствор примесей N-нитрозаминов, интенсивно перемешивают в течение 5 мин, экстрагируют 2,0 мл метиленхлорида и встряхивают в течение 5 мин, центрифугируют в течение 5 мин при 10 000 g. Для анализа используют нижний слой (органический).

Стандартный раствор В. К 10 мл раствора для экстракции прибавляют 200 мкл стандартного раствора примесей N-нитрозаминов, интенсивно перемешивают в течение 5 мин, экстрагируют 2,0 мл метиленхлорида и встряхивают в течение 5 мин, центрифугируют в течение 5 мин при 10 000 g. Для анализа используют нижний слой (органический).

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,25 мм, покрытая слоем поли(цианопропилфенил)(6)(метил)(94)силоксана, 1,4 мкм;
Детектор | масс-спектрометрический;
Газ-носитель | гелий для хроматографии;
Скорость потока | 1,3 мл/мин;
Объём пробы | 3 мкл;
Температура | колонка | 0–0,5 мин | 40 °С
|  | 0,5–2,2 мин | 40 → 140 °С
|  | 2,2–4,2 мин | 140 °С
|  | 4,2–6,2 мин | 140 → 180 °С
|  | 6,2–6,7 мин | 180 °С
|  | 6,7–8,7 мин | 180 → 240 °С
|  | 8,7–10,5 | 240 °С
|  | 10,5–11,5 | 240 → 280 °С
|  | 11,5–14,0 | 280 °С
| Инжектор |  | 250 °С
| Линия переноса |  | 240

Условия детектирования

Источник ионизации | электронная ионизация;
--- | ---
Режим детектирования | мониторинг реакций заданных ионов (MRM);
Температура источников ионов | 230 °С;
Температура квадруполя | 150 °С;
Энергия электронов | 40 эВ;
Задержка растворителя | 4,5 мин;
Коэффициент усиления | 15
Газ для соударений | азот;
Скорость потока газа для соударений | 1,5 мл/мин;
Газ для охлаждения | гелий.

Переходы сканирования масс и энергии столкновений

Компонент | Относительное время удерживания | Переходы сканирования масс | Энергия столкновений, эВ
--- | --- | --- | ---
НДМА | около 0,9 | 74 → 44 (74 → 42) | 5 22
НЭМА | 1 (около 5,50 мин) | 88 → 71 | 5
НДЭА | около 1,1 | 102 → 85 (102 → 56) | 3 19
НЭИПА | около 1,3 | 116 → 99 (116 → 44) | 5 14
НДИПА | около 1,4 | 130 → 88 (130 → 71) | 5 14
НДПА | около 1,5 | 130 → 113 130 → 88 | 1 1
НДБА | около 1,8 | 158 → 141 158 → 99 | 1 7

Хроматографируют стандартный раствор А, стандартный раствор Б, стандартный раствор В и испытуемый раствор.

Пригодность ГХ-МС системы

Пригодность хроматографический системы

На хроматограмме стандартного раствора Б относительное стандартное отклонение отношения площади каждого из пиков примесей НДМА, НДЭА, НДБА, НДПА, НДИПА и НЭИПА к площади пика внутреннего стандарта должно быть не более 20 % (6 введений).

На хроматограмме испытуемого раствора с добавками:

- отношение сигнал/шум (S/N) для каждого из пиков примесей НДМА, НДЭА, НДБА, НДПА, НДИПА и НЭИПА, соответствующего основному переходу, должно быть не менее 10;

- отношение сигнал/шум (S/N) для каждого из пиков примесей НДМА, НДЭА, НДБА, НДПА, НДИПА и НЭИПА, соответствующего переходу квалификатора, должно быть не менее 3.

Для расчёта содержания используют основные MRM-переходы.

Рассчитывают отношения площади пика каждой примеси
N-нитрозамина к площади пика внутреннего стандарта на хроматограмме испытуемого раствора (B1).

Рассчитывают отношения площади пика каждой примеси
N-нитрозамина к площади пика внутреннего стандарта на хроматограммеиспытуемого раствора с добавками (B0).

Для каждой обнаруженной примеси N-нитрозамина отношение В1/В0 должно быть менее 0,50.

Испытание действительно, если соотношение между площадью пика, соответствующего основному переходу, и площадью пика, соответствующего квалификационному переходу, для испытуемого раствора отличается не более чем на 20 % от того же соотношения, рассчитанного для раствора с добавками.

Для расчёта содержания используют основные MRM-переходы.

Количественное определение примесей

Хроматографируют по 3 мкл раствора с добавками, испытуемого раствора и стандартных растворов А, Б и В.

Пригодность хроматографической системы

Для каждого N-нитрозамина:

- относительное стандартное отклонение отношения площади пика каждого нитрозамина к площади пика внутреннего стандарта на хроматограмме стандартного раствора Б не должно превышать 20 %
  (6 введений);

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика, соответствующего основному переходу, должно быть не менее 10;

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика, соответствующего переходу квалификатора, должно быть не менее 3.

Расчёт: используют основные MRM-переходы.

Строят калибровочную кривую зависимости отношения площади пика каждого N-нитрозамина к площади пика внутреннего стандарта в зависимости от концентрации N-нитрозамина на хроматограммах стандартных растворов А, Б и В. По полученной калибровочной кривой определяют концентрацию N-нитрозамина в испытуемом растворе.

Пригодность системы:

- отношение площади пика, соответствующего основному переходу, к площади пика, соответствующего переходу квалификатора, для испытуемого раствора не должно отличаться от того же отношения для раствора с добавками более чем на 20 %;

- рассчитанное извлечение для всех растворов с добавками должно составлять от 70 до 130 %.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0032 Азота оксид и азота диоксид в газах медицинских

Вводится впервые

Методы определения азота оксида и азота диоксида в газах основаны на использовании хемилюминесценции (метод 1), индикаторных трубок (метод 2), недисперсионного инфракрасного метода (метод 3), спектрофотомерии (метод 4), газовой хроматографии (метод 5) и элекрохимической детекции (метод 6).

###### Метод 1

Метод основан на реакции азота оксида (NO) с озоном (O3), при которой образуется азота диоксид (NO2). Часть образовавшегося NО2находится в фотохимическом возбуждённом состоянии. При переходе в основное состояние возбуждённые молекулы NО2 излучают свет в диапазоне длин волн от 590 до 3000 нм. Интенсивность излучения зависит от содержания NО, давления и присутствия других газов.

Схема хемилюминесцентного анализатора показана на рис. 1.

Рисунок 1. Схема хемилюминесцентного анализатора: 1 – ввод пробы; 2 – насос для прокачивания пробы; 3 – электромагнитный клапан; 4 – конвертер NO2/NO; 5 – регулятор потока; 6 – регулятор давления; 7 – реакционная камера; 8 – фотоэлектронный множитель; 9 – блок электронной обработки данных; 10 – ввод кислорода; 11 – регулятор давления; 12 – регулятор озона; 13 – фильтр для озона; 14 – блок регистрации данных; 15 – сброс газа

В зависимости от давления в реакционной камере различают газоанализаторы атмосферного и низкого давления. Газоанализаторы, имеющие встроенные конвертеры NO2/NO, выдают аналитические сигналы по NO, NOх и NО2 одновременно или последовательно.

Диапазон измерений хемилюминесцентных газоанализаторов составляет от 0 до 20000 мг/м3. Минимальный рабочий диапазон измерений составляет от 0 до 200 мг/м3. Интенсивность хемилюминесцентного свечения (химической люминесценции) пропорциональна концентрации азота оксида и регистрируется фотоэлектронным умножителем, используемым в качестве детектора.

Точность результатов измерений достигается введением поправок выходного сигнала газоанализатора с помощью корректировочных кривых (указывается производитель газоанализатора) или калибровкой с использованием газов.

###### Метод 2

Метод основан на изменении окраски массы-наполнителя индикаторных трубок при взаимодействии с определяемым компонентом в анализируемой пробе и измерении длины прореагировавшего слоя.

Метод применим для оценки качества газа в нестационарных, полевых условиях.

Индикаторные трубки – герметичные цилиндрические трубки, состоящие из инертного прозрачного материала и сконструированные с учётом возможности пропускания через них газа. Содержат реагент, подходящий для визуализации обнаруживаемого вещества, адсорбированный на инертном носителе, и, при необходимости, дополнительные верхние слои и/или адсорбирующие фильтры для удаления веществ, которые могут взаимодействовать с обнаруживаемым веществом. Слой индикатора содержит либо один реагент, позволяющий обнаружить определённое вещество, либо несколько реагентов для обнаружения нескольких веществ (однослойные и многослойные трубки).

Длина слоя, изменившего окраску, является функцией и мерой содержания определяемого компонента и объёма отобранной на анализ пробы. Значение содержания определяемого компонента в анализируемой пробе определяется по шкале, нанесённой на индикаторную трубку.

Испытания проводят путём пропускания требуемого объёма газа через индикаторную трубку. Длина окрашенного слоя или интенсивность изменения цвета на градуировочной шкале является функцией и мерой массовой концентрации определяемого компонента. Проверка индикаторных трубок проводится в соответствии с инструкциями изготовителя.

Подготовка к измерению. Проводится согласно инструкциям изготовителя или следующим образом. Устройство для подачи газа подсоединяют к регулятору давления с игольчатым клапаном. Соединяют гибкий шланг трубки с Т-образным участком клапана и продувают систему (рис. 2).

Рисунок 2. Прибор для индикаторных трубок: 1 – подача газа; 2 – регулятор давления; 3 – игольчатый клапан; 4 – T-образный участок; 5 – индикаторная трубка; 6 – насос для индикаторной трубки; 7 – открытый конец для выхода газа в атмосферу.

Открытый конец индикаторный трубки присоединяют к короткому концу шланга и регулируют насосом объём анализируемого газа, проходящего через трубку. Записывают значения, соответствующие длине окрашенного слоя или интенсивности цвета на градуировочной шкале. При отрицательном результате анализа индикаторная трубка, на которой был получен отрицательный результат, должна быть проверена с помощью калибровочного газа, содержащего соответствующую примесь. При этом в составе калибровочного газа оксиды азота должны превышать по содержанию полученный отрицательный результат.

Индикаторная трубка для азота оксида и азота диоксида. Герметичная стеклянная трубка, содержащая адсорбирующие фильтры и подходящие носители для окисляющего слоя (соль Cr(VI)) и индикатора – дифенилбензидина. Минимальная определяемая концентрация – 0,5 ppm с относительным стандартным отклонением ±15 %.

###### Метод 3

Газы, которые состоят из молекул, содержащих различные атомы, поглощают свет с характеристичной длиной волны в ИК области спектра.

Для измерений используют суммарное поглощение молекулой NO при максимальной частоте νmax = 1876 см−1 или длине волны 5,3 мкм.

Один пучок проходит через измерительную ячейку, другой – через ячейку сравнения, содержащую газ, не поглощающий ИК-излучение, обычно азот. Если проба содержит NO, часть энергии ИК-излучения поглощается, и доля энергии ИК-излучения, достигшего детектора, будет пропорциональна количеству NO, присутствующему в пробе. Детектор сконструирован так, что он обладает чувствительностью к излучению с длиной волны, являющейся характеристичной для NO.

Минимальный диапазон измерений массовой концентрации может составлять от 0 до 200 мг/м3. Каждый газоанализатор может быть использован только для заданного диапазона массовых концентраций.

Применение инфракрасного метода реализовано в газоанализаторах, работающих по НДИК методу (рис. 3).

Рисунок 3. Схема недисперсионного инфракрасного газоанализатора: 1 – источник излучения; 2 – мотор модулятора; 3 – модулятор; 4 – измерительная кювета; 5 – кювета сравнения; 6 – детектор; 7 – блок электронной обработки данных; 8 – блок регистрации данных.

На результаты измерений НДИК-методом могут оказывать влияние мешающие вещества, особенно водяной пар.

###### Метод 4

Метод оптической абсорбционной спектроскопии, используемый для определения диоксида азота и оксида азота, основан на измерении оксидов азота по поглощению в УФ области. При длине волны 395 нм наблюдается поглощение излучения только диоксидом азота (ближний ультрафиолет (УФ) – видимый диапазон спектра), а характеристичная для NO длина волны находится в области 226 нм.

Отбор пробы на анализ производят на установке, изображённой на рис. 4.

Рисунок 4. Установка для отбора проб газа: 1 – регулирующий игольчатый вентиль; 2 – зажим Мора; 3 – увлажнитель газа (сосуд с дистиллированной водой); 4 – устройство для превращения NО в NO2, заполненное раствором хромового ангидрида; 5, 9 – трёхходовые стеклянные краны; 6, 8 – абсорберы для поглощения NO2 с 15 мл Грисса-Илосвая реактива в каждом; 7 – капилляр; 10 – термометр; 11 – реометр.

Предварительно увлажнитель (3) заполняют на 2/3 водой. В устройство (4) для окисления азота оксида в азота диоксид заливают 3 мл хрома(VI) оксида насыщенного раствора, который обновляется в процессе работы 1 раз в сутки.

Установку подключают к аналитической точке отбора анализируемого газа, ставят трёхходовые краны (5 и 9) в положение каналов, показанное сплошной линией, открывают вентиль (1) и устанавливают расход газа через установку по газосчётчику (реометру) 2 см3/с. Используют газосчётчик класса точности 1 со шкалой 0–5 дм3 и ценой деления 20 см3. Размеры капилляра (7) должны быть подобраны таким образом, чтобы сопротивление его газовому потоку равнялось сопротивлению абсорберов (6 и 8), в которые заливают по 15 мл Грисса-Илосвая реактива. Продувают установку анализируемым газом в течение 10 мин, затем ставят краны (5 и 9) в положение их каналов, показанное пунктирной линией, одновременно фиксируя показания реометра (11).

Рисунок 5. Оптическая схема газоанализатора: 1 – источник излучения (лампа), 2, 5 – оптическая система формирования параллельного пучка, 3 – кювета, 4 – призма, 6 – дифракционная решетка, 7 – приёмник оптического излучения (ПЗС – линейка).

В качестве источника излучения используют лампу, излучающую в УФ- и видимой областях спектра. С помощью дифракционной решётки «вырезается» излучение в диапазоне длин волн от 218 до 233 нм и 350–450 нм. Детектор представляет собой линейку фотодиодов.

Раствор натрия нитрита. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,233 г натрия нитрита, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. Полученный раствор содержит 1 мкг/мл азота оксида.

Для построения градуировочного графика в 10 градуированных пробирок с пришлифованной пробкой вместимостью 15 мл помещают от 0,2 до 2,0 мл с интервалом 0,2 мл раствора натрия нитрита, в каждую пробирку прибавляют Грисса-Илосвая реактив до объёма 15 мл, перемешивают и через 10 мин проводят измерение оптической плотности при длине волны 540 нм в кювете с толщиной слоя 2 см. В качестве раствора сравнения используют Грисса-Илосвая реактив. Периодичность построения градуировочного графика – 1 раз в 3 мес.

После окончания поглощения оксидов азота в абсорберах (по окончании продувания установки анализируемым газом) отсоединяют абсорберы 6 и 8. Содержимое первого абсорбера заливают в кювету и измеряют оптическую плотность раствора.

Аналогичным образом измеряют оптическую плотность раствора из второго абсорбера и по градуировочному графику определяют содержание азота моноксида в миллиграммах, соответствующее оптическим плотностям.

Определяют объём пропущенного газа в л (V0), приведённый к нормальным уловиям:

где P – барометрическое давление, кПа;
101,3 – нормальное давление, кПа;
t – температура газа, °С;
273 – нормальная температура, К;
V – объём пропущенного газа, л.

Содержание азота моноксида в мг/м3 (С) в пересчёте на азота диоксид NО2 в газе вычисляют по формуле:

где a1 и a2 – масса азота монооксида NO, соответствующая измеренной оптической плотности в первом и во втором абсорберах, мг;
1000 – коэффициент для пересчёта объёма газа;
2 – стехиометрический коэффициент при образовании нитрит-иона из диоксида азота;
46,01 – молекулярная масса азота диоксида, г/моль;
30,01 – молекулярная масса азота монооксида, г/моль.

###### Метод 5

Определение проводят в соответствии с ОФС «Газовая хроматография».

Ввод газовой фазы осуществляется с помощью оборудования для статического или динамического парофазного анализа, что позволяет повысить чувствительность определения летучих соединений.

В статическом парофазном анализе в термостатируемую камеру помещается герметично закрытый сосуд, содержащий твёрдый или жидкий образец пробы, и нагревается в течение определённого периода времени для достижения равновесия между двумя фазами. После достижения равновесия из сосуда отбирается определённый объём газовой фазы и вводится в испаритель хроматографа.

В динамическом парофазном анализе через образец пробы в течение определённого времени пропускается инертный газ. Летучие компоненты выдуваются из образца пробы и концентрируются на сорбенте, находящемся в ловушке. После этого ловушка быстро нагревается, и летучие компоненты переносятся потоком инертного газа в хроматографическую колонку.

Анализ в газовой хроматографии проводится в соответствии с установленными параметрами хроматографической системы. В описании метода необходимо указать: тип детектора, тип колонки (насадочная или капиллярная), материал и геометрические параметры колонки, сорбент (тип твёрдого носителя и его характеристики, неподвижная жидкая фаза и её количество), метод введения пробы и его параметры, температура испарителя, колонки и детектора, газ-носитель и его расход.

Оценка хроматографического разделения проводится на основании теста пригодности хроматографической системы, приведённого в фармакопейной статье.

###### Метод 6

Метод основан на протекании электрохимической реакции в электрохимической ячейке (рис. 6). Анализируемый газ вступает в химическую реакцию с электролитом, заполняющим ячейку. В результате в растворе возникают заряженные ионы, между электродами начинает протекать электрический ток, пропорциональный концентрации анализируемого компонента в пробе.

Электрический датчик обрабатывает возникающий электрический сигнал.

Рисунок 6. Схема электрохимической ячейки

Определение проводят с помощью газоанализатора, принцип действия которого основан на методе потенциостатической амперометрии, заключающемся в измерении тока при электрохимическом окислении азота диоксида на рабочем электроде трёхэлектродной электрохимической ячейки при постоянном потенциале. Электрод сравнения (опорный) в реакции не участвует и используется для установления необходимого потенциала рабочего электрода.

Потенциал рабочего электрода относительно электрода сравнения поддерживается с помощью потенциостата, расположенного в измерительном блоке газоанализатора. Потенциостат вместе с электрохимической ячейкой образуют систему автоматического регулирования, которая при окислении азота диоксида на рабочем электроде генерирует ток, поддерживающий потенциал рабочего электрода на постоянном уровне (ток поляризации). Ток поляризации протекает в цепи вспомогательный электрод–рабочий электрод. Сила тока пропорциональна концентрации азота диоксида в анализируемом газе.

Поток испытуемого газа пропускают через газоанализатор с электрохимической ячейкой на азота диоксид с постоянной скоростью до установления показаний. Регистрируют концентрацию азота диоксида в анализируемом газе.

Диапазон измерения газоанализатора с электрохимической ячейкой составляет от 0 до 50 ppm с погрешностью измерений не более ±5 %. Для калибровки нуля прибора используют азот повышенной чистоты (с объёмной долей азота не менее 99,999 и объёмной долей кислорода не более 0,0005). Для линеаризации и калибровки шкалы используют поверочные газовые смеси (эталонные газы) с определённым содержанием азота диоксида. Прибор в автоматическом режиме определяет долю содержания азота диоксида. Межкалибровочный интервал соблюдают согласно документации производителя прибора.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.2.0033 2-Этилгексановая кислота

Взамен ОФС.1.2.3.0026.18

Метод определения 2-этилгексановой кислоты основан на использовании газовой хроматографии (ОФС «Газовая хроматография»).

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают около 0,1 г (точная навеска) 3-циклогексилпропионовой кислоты, растворяют в циклогексане и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. К 0,3 г (точная навеска) субстанции прибавляют 4,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 4 М. Энергично взбалтывают в течение 1 мин с 1,0 мл раствора внутреннего стандарта. Выдерживают до разделения фаз (при необходимости центрифугируют для лучшего разделения). Используют верхний слой.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 75 мг (точная навеска) 2-этилгексановой кислоты, растворяют в растворе внутреннего стандарта и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. К 1,0 мл полученного раствора прибавляют 4,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 4 М. Энергично взбалтывают в течение 1 мин. Выдерживают до разделения фаз (при необходимости центрифугируют для лучшего разделения). Используют верхний слой.

Хроматографические условия

Колонка | макрокапиллярная из плавленого кварца 10 м × 0,53 мм, покрытая макрогол 20 000 2-нитротерефталатом, 1,0 мкм;
Детектор | пламенно-ионизационный;
Газ-носитель | гелий для хроматографии;
Скорость потока | 10 мл/мин;
Объём пробы | 1 мкл.

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °С | Скорость нагрева, °С/мин
--- | --- | --- | ---
Колонка | 0–2 | 40 | –
2–7,3 | 40 → 200 | 30
7,3–10,3 | 200 | –
Инжектор |  | 200 |
Детектор |  | 300 |

Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения разрешение (RS) между пиками 2-этилгексановой кислоты и 3-циклогексилпропионовой кислоты должно быть не менее 2,0.

Содержание 2-этилгексановой кислоты С8Н16О2 в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где B1 – отношение площади пика 2-этилгексановой кислоты к площади пика 3-циклогексилпропионовой кислоты на хроматограмме испытуемого раствора;
B0 – отношение площади пика 2-этилгексановой кислоты к площади пика 3-циклогексилпропионовой кислоты на хроматограмме раствора сравнения;
a1 – навеска субстанции, взятая для приготовления испытуемого раствора, г;
a0 – навеска 2-этилгексановой кислоты, взятая для приготовления раствора сравнения, г.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.2.0001 ОБЩИЕ РЕАКЦИИ НА ПОДЛИННОСТЬ

###### АЛКАЛОИДЫ

Навеску испытуемого образца, указанную в фармакопейной статье, растворяют в 5 мл воды, прибавляют хлористоводородную кислоту разведённую 7,3 % до кислой реакции (ОФС «Зависимость между реакцией раствора, приблизительным значением рН и цветом индикаторов»), прибавляют 1 мл калия йодвисмутата раствора, тотчас образуется осадок оранжевого или оранжево-красного цвета.

###### АЛЮМИНИЙ

Около 15 мг испытуемого образца растворяют в 2 мл воды. К полученному раствору или к 2 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % и около 0,5 мл тиоацетамида реактива; осадок не образуется. Затем по каплям прибавляют натрия гидроксида раствор 8,5 %; образуется гелеобразный белый осадок, растворимый при последующем прибавлении натрия гидроксида раствора 8,5 %. Постепенно прибавляют аммония хлорида раствор 10,7 %; вновь образуется гелеобразный белый осадок.

###### АМИНЫ АРОМАТИЧЕСКИЕ ПЕРВИЧНЫЕ

Испытуемый раствор, указанный в фармакопейной статье, подкисляют хлористоводородной кислотой разведённой 7,3 %, прибавляют 0,2 мл натрия нитрита раствора 10 % и через 1–2 мин прибавляют 1 мл β-нафтола щелочного раствора 5 %; появляется интенсивное оранжевое или красное окрашивание и, как правило, образуется осадок такого же цвета.

###### АММОНИЯ СОЛИ

К испытуемому раствору, указанному в фармакопейной статье, прибавляют 0,2 г магния оксида. Через полученную смесь пропускают поток воздуха и направляют образующийся при этом газ в смесь 1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты и 0,05 мл метилового красного раствора 0,05 _%; окраска индикатора становится жёлтой. При прибавлении 1 мл свежеприготовленного _натрия кобальтинитрита раствора 10 % образуется осадок жёлтого цвета.

###### АММОНИЯ СОЛИ И СОЛИ ЛЕТУЧИХ ОСНОВАНИЙ

Около 20 мг испытуемого образца растворяют в 2 мл воды. К полученному раствору или к 2 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 2 мл натрия гидроксида раствора 8,5 %. При нагревании раствора выделяются пары аммиака и летучих оснований, обнаруживаемые которые по запаху и щелочной реакции (ОФС «Зависимость между реакцией раствора, приблизительным значением рН и цветом индикаторов»).

###### АЦЕТАТЫ

А. Испытуемый образец нагревают с равным количеством щавелевой кислоты дигидрата; выделяется уксусная кислота, обнаруживаемая по запаху и кислой реакции (ОФС «Зависимость между реакцией раствора, приблизительным значением рН и цветом индикаторов»).

Б. Около 30 мг испытуемого образца растворяют в 3 мл воды. К полученному раствору или к 3 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, последовательно прибавляют 0,25 мл лантана(III) нитрата
раствора 5 %, 0,1 мл 0,05 М раствора йода и 0,05 мл аммиака раствора разведённого 3,4 %, Смесь осторожно нагревают до кипения; в течение нескольких минут образуется синий осадок или появляется тёмно-синее окрашивание.

В. К 2 мл нейтрального раствора испытуемого образца, содержащего 20–60 мг ацетат-иона, прибавляют 0,2 мл железа(III) хлорида раствора 3 %; появляется красно-бурое окрашивание, исчезающее при прибавлении разведённых минеральных кислот.

Г. 2 мл раствора испытуемого образца, содержащего 20–60 мг ацетат-иона, нагревают с равным количеством серной кислоты концентрированной и 0,5 мл этанола (96 %); образуется этилацетат, обнаруживаемый по характерному запаху.

###### АЦЕТИЛЬНЫЕ ГРУППЫ

Около 15 мг испытуемого образца или навеску испытуемого образца, указанную в фармакопейной статье, помещают в пробирку длиной около 180 мм и наружным диаметром 18 мм, прибавляют 0,15 мл фосфорной кислоты концентрированной. Пробирку закрывают пробкой, через которую пропущена небольшая пробирка длиной около 100 мм и наружным диаметром 10 мм, содержащая воду и выполняющая роль холодильника. На внешнюю поверхность меньшей пробирки
помещают 1 каплю лантана(III) нитрата раствора 5 %. Если субстанция относительно легко гидролизуется, устройство помещают на 5 мин в водяную баню, затем вынимают меньшую пробирку. Каплю снимают и смешивают на фарфоровой пластинке с 0,05 мл 0,01 М раствора йода. На край капли наносят 0,05 мл аммиака раствора разведённого 3,4 %;
через 1–2 мин в месте соединения двух капель появляется синее окрашивание, которое усиливается и сохраняется в течение короткого промежутка времени.

Для трудногидролизуемых субстанций смесь медленно нагревают на открытом пламени до кипения и выполняют испытание в соответствии с вышеприведёнными указаниями.

###### БАРБИТУРАТЫ (ЗА ИСКЛЮЧЕНИЕМ АЗОТЗАМЕЩЁННЫХ)

Около 5 мг испытуемого образца растворяют в 3 мл метанола, прибавляют 0,1 мл раствора, содержащего 100 г/л кобальта нитрата и 100 г/л кальция хлорида, перемешивают и добавляют при встряхивании 0,1 мл натрия гидроксида раствора 8,5 %, появляется фиолетово-синее окрашивание и осадок.

###### БЕНЗОАТЫ

А. К 1 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 0,5 мл железа(III) хлорида раствора 10,5 %; образуется светло-жёлтый осадок, растворимый в эфире.

Б. 0,2 г испытуемого образца, при необходимости обработанного в соответствии с указаниями в фармакопейной статье, помещают в пробирку, смачивают 0,2–0,3 мл серной кислоты концентрированной и осторожно нагревают дно пробирки; на внутренних стенках пробирки появляется белый налёт.

В. 0,5 г испытуемого образца растворяют в 10 мл воды. К полученному раствору или к 10 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 0,5 мл хлористоводородной кислоты концентрированной; образуется осадок, который после перекристаллизации из тёплой воды и высушивания в вакууме имеет температуру плавления от 120 °С до 124 °С (ОФС «Температура плавления», метод).

###### БРОМИДЫ

А. Навеску испытуемого образца, соответствующую около 3 мг бромид-иона, растворяют в 2 мл воды. Полученный раствор или 2 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, подкисляют азотной кислотой разведённой 12,5 %, прибавляют 0,4 мл серебра нитрата раствора 4,25 %, перемешивают и отстаивают; образуется светло-жёлтый творожистый осадок. Осадок отделяют центрифугированием и промывают тремя порциями воды, каждая по 1 мл. Данную операцию проводят быстро в защищённом от яркого света месте. При этом надосадочная жидкость может иметь опалесценцию. Полученный осадок суспендируют в 2 мл воды и прибавляют 1,5 мл аммиака раствора; осадок медленно растворяется.

Б. Навеску испытуемого образца, соответствующую около 5 мг бромид-иона или указанную в фармакопейной статье, помещают в небольшую пробирку, прибавляют 0,25 мл воды, около 75 мг свинца(IV)оксида, 0,25 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и осторожно встряхивают. Верхнюю внутреннюю часть пробирки высушивают с помощью фильтровальной бумаги и оставляют на 5 мин. Полоску фильтровальной бумаги необходимого размера пропитывают, погружая её конец в каплю фуксина обесцвеченного раствора 0,1 %, и тотчас помещают пропитанную часть в пробирку. В течение 10 с на нижнем конце фильтровальной бумаги появляется фиолетовое окрашивание, которое чётко отличается от красной окраски фуксина, наблюдаемой в верхней пропитанной части полоски бумаги.

В. К 1 мл раствора испытуемого образца, содержащего 2–30 мг бромид-иона, прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 %, 0,5 мл свежеприготовленного хлорамина раствора 5 %, 1 мл хлороформа и взбалтывают; хлороформный слой окрашивается в жёлто-коричневый цвет.

###### ВИСМУТ

А. К 0,5 г испытуемого образца прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 %. Полученный раствор или 10 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, кипятят в течение 1 мин, охлаждают и, при необходимости, фильтруют. К 1 мл полученного фильтрата прибавляют 20 мл воды; образуется белый или светло-жёлтый осадок, цвет которого после прибавления от 0,05 мл до 0,1 мл натрия сульфида раствора в глицерине изменяется на коричневый.

Б. К 45 мг испытуемого образца прибавляют 10 мл азотной кислоты разведённой 12,5 %. Полученный раствор или 10 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, кипятят в течение 1 мин, охлаждают и при необходимости фильтруют. К 5 мл полученного раствора прибавляют 2 мл раствора 100 г/л тиомочевины; появляется желтовато-оранжевое окрашивание или оранжевый осадок. Прибавляют 4 мл раствора 25 г/л натрия фторида; раствор не обесцвечивается в течение 30 мин.

В. Навеску испытуемого образца, соответствующую около 50 мг висмут-иона или указанную в фармакопейной статье, взбалтывают с 5 мл серной кислоты разведённой 16 % и фильтруют. К фильтрату прибавляют 0,1 мл калия йодида раствора 10 %; образуется чёрный осадок, растворимый в избытке реактива с образованием раствора желтовато-оранжевого цвета.

###### ЖЕЛЕЗО

А. Навеску испытуемого образца, соответствующую около 10 мг железо(II)-иона, растворяют в 1 мл воды. К полученному раствору или к 1 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 1 мл калия феррицианида раствора 5 %; образуется синий осадок, не растворяющийся при прибавлении 5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 %.

Б. Навеску испытуемого образца, соответствующую около 1 мг железо(III)-иона, растворяют в 30 мл воды. К полученному раствору или к 3 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % и 1 мл калия тиоцианата раствора 9,7 %; появляется красное окрашивание. Отбирают 2 порции полученного раствора по 1 мл. К одной порции прибавляют 5 мл изоамилового спирта или 5 мл эфира, встряхивают и оставляют до разделения слоёв; органический слой окрашивается в розовый цвет. К другой порции прибавляют 2 мл ртути(II) хлорида раствора 0,2 М; красное окрашивание раствора исчезает.

В. Навеску испытуемого образца, соответствующую не менее 1 мг железо(III)-иона, растворяют в 1 мл воды. К полученному раствору или к 1 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 1 мл калия ферроцианида раствора 5,3 %; образуется синий осадок, не растворяющийся при прибавлении 5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 %.

###### ЙОДИДЫ

А. Навеску испытуемого образца, соответствующую около 4 мг йодид-иона, растворяют в 2 мл воды. Полученный раствор или 2 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, подкисляют азотной кислотой разведённой 12,5 %, прибавляют 0,4 мл серебра нитрата раствора 4,25 %, перемешивают и отстаивают; образуется светло-жёлтый творожистый осадок. Осадок отделяют центрифугированием и промывают тремя порциями воды, каждая по 1 мл. Данную операцию проводят быстро в защищённом от яркого света месте. При этом надосадочная жидкость может иметь опалесценцию. Полученный осадок суспендируют в 2 мл воды и прибавляют 1,5 мл аммиака раствора; осадок не растворяется.

Б. К 0,2 мл раствора испытуемого образца, содержащего около 5 мг йодид-иона в 1 мл, или к 0,2 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 0,5 мл серной кислоты раствора 1 М, 0,1 мл раствора калия дихромата раствора 10,6 %, 2 мл воды, 2 мл хлороформа, встряхивают в течение нескольких секунд и оставляют до расслоения; хлороформный слой окрашивается в фиолетовый или фиолетово-красный цвет.

В. При нагревании 0,1 г испытуемого образца с 1 мл серной кислоты концентрированной выделяются пары фиолетового цвета.

###### КАЛИЙ

А. 0,1 г испытуемого образца растворяют в 2 мл воды. К полученному раствору или к 2 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 1 мл натрия карбоната раствора 1 М и нагревают; осадок не образуется. К горячему раствору прибавляют 0,05 мл натрия сульфида раствора в глицерине; осадок не образуется. Раствор охлаждают на ледяной бане, прибавляют 2 мл раствора 150 г/л винной кислоты и отстаивают; образуется белый кристаллический осадок.

Б. Около 40 мг испытуемого образца растворяют в 1 мл воды. К полученному раствору или к 1 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 1 мл уксусной кислоты разведённой 12 % и 1 мл свежеприготовленного натрия кобальтинитрита раствора 10 %; тотчас образуется осадок жёлтого или оранжево-жёлтого цвета.

В. Соль калия, внесённая в бесцветное пламя, окрашивает его в фиолетовый цвет или при рассмотрении через синее стекло – в пурпурно-красный.

###### КАЛЬЦИЙ

А. К 0,2 мл нейтрального раствора испытуемого образца, содержащего около 0,2 мг кальций-иона в 1 мл, или к 0,2 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 0,5 мл раствора
2 г/л глиоксальгидроксианила в этаноле (96 %), 0,2 мл натрия гидроксида раствора 8,5 % и 0,2 мл натрия карбоната раствора 1 М. Смесь встряхивают с 1–2 мл хлороформа и прибавляют 1–2 мл воды; хлороформный слой окрашивается в красный цвет.

Б. Около 20 мг испытуемого образца или навеску испытуемого образца, указанную в фармакопейной статье, растворяют в 5 мл уксусной кислоты разведённой 30 _%, прибавляют 0,5 мл _калия ферроцианида раствора 5,3 %; раствор остаётся прозрачным. К раствору прибавляют около 50 мг аммония хлорида; образуется белый кристаллический осадок.

В. К 1 мл раствора испытуемого образца, содержащего 2–20 мг кальций-иона, прибавляют 1 мл аммония оксалата раствора 4 %; образуется белый осадок, нерастворимый в уксусной кислоте разведённой 12 % и аммиака растворе, растворимый в разведённых минеральных кислотах.

Г. Соль кальция, смоченная хлористоводородной кислотой концентрированной и внесённая в бесцветное пламя, окрашивает его в оранжево-красный цвет.

###### КАРБОНАТЫ И ГИДРОКАРБОНАТЫ

А. 0,1 г испытуемого образца помещают в пробирку и суспендируют в 2 мл воды. К полученной суспензии или к 2 мл суспензии, указанной в фармакопейной статье, прибавляют 3 мл уксусной кислоты разведённой 12 %. Пробирку сразу же закрывают притёртой пробкой со стеклянной трубкой, дважды изогнутой под прямым углом; наблюдается бурное выделение пузырьков газа без цвета и запаха. Пробирку осторожно нагревают и пропускают выделяющийся газ через 5 мл бария гидроксида раствора 5 %; образуется белый осадок, растворяющийся при прибавлении избытка хлористоводородной кислоты 25 %.

Б. 0,2 г испытуемого образца растворяют в 2 мл воды. К полученному раствору прибавляют 0,5 мл магния сульфата насыщенного раствора; образуется белый осадок (в отличие от гидрокарбонатов, растворы которых образуют осадок только при кипячении смеси).

В. 0,2 г испытуемого образца растворяют в 2 мл воды. К полученному раствору прибавляют 0,05 мл фенолфталеина раствора 0,1 %; раствор окрашивается в красный цвет (в отличие от гидрокарбонатов, растворы которых остаются бесцветными).

###### КСАНТИНЫ

К навеске испытуемого образца, указанной в фармакопейной статье, прибавляют 0,1 мл водорода пероксида и 0,3 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 %. Упаривают на водяной бане до получения сухого желтовато-красного остатка. Прибавляют 0,1 мл аммиака раствора разведённого 3,4 %; окраска остатка изменяется на фиолетово-красную.

###### ЛАКТАТЫ

Навеску испытуемого образца, соответствующую около 5 мг молочной кислоты, растворяют в 5 мл воды. К полученному раствору или к 5 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 1 мл бромной воды, 0,5 мл серной кислоты разведённой 9,8 %. Нагревают на водяной бане до обесцвечивания, периодически перемешивая раствор стеклянной палочкой. Прибавляют 4 г аммония сульфата и перемешивают. Прибавляют по каплям, не перемешивая, 0,2 мл натрия нитропруссида раствора 10 % в серной кислоте разведённой 9,8 % и осторожно, не перемешивая, прибавляют 1 мл аммиака раствора концентрированного 25 %. Выдерживают в течение 30 мин; на границе раздела двух слоёв жидкости образуется тёмно-зелёное кольцо.

###### МАГНИЙ

Около 15 мг испытуемого образца растворяют в 2 мл воды. К полученному раствору или к 2 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 1 мл аммиака раствора 10 %; образуется белый осадок, растворяющийся при прибавлении 1 мл аммония хлорида раствора 10,7 _%. Прибавляют 1 мл _динатрия гидрофосфата додекагидрата раствора 9 %; образуется белый кристаллический осадок.

###### МЫШЬЯК

А. 5 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, нагревают на водяной бане с равным объёмом натрия гипофосфита раствора; образуется коричневый осадок.

Б. К 0,3 мл раствора испытуемого образца, содержащего около 30 мг арсенит-иона, прибавляют 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % и 0,1 мл натрия сульфида раствора в глицерине; образуется жёлтый осадок, нерастворимый в хлористоводородной кислоте концентрированной, растворимый в аммиака растворе (в отличие от арсенатов, растворы которых образуют жёлтый осадок только при нагревании).

В. К 0,3 мл раствора испытуемого образца, содержащего около 1 мг арсенат-иона, прибавляют 1 мл аммония хлорида раствора 10 %,
1 мл аммиака раствора и 1 мл магния сульфата раствора 10 %; образуется белый кристаллический осадок, растворимый в хлористоводородной кислоте разведённой 7,3 % (в отличие от арсенитов).

###### НАТРИЙ

А. 0,1 г испытуемого образца растворяют в 2 мл воды. К полученному раствору или к 2 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 2 мл калия карбоната раствора 15 % и нагревают до кипения; осадок не образуется. К раствору прибавляют 4 мл калия пироантимоната раствора и нагревают до кипения. Охлаждают в ледяной воде и, при необходимости, потирают внутренние стенки пробирки стеклянной палочкой; образуется плотный осадок белого цвета.

Б. Навеску испытуемого образца, соответствующую около 2 мг натрий-иона, растворяют в 0,5 мл воды. К полученному раствору или к 0,5 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 1,5 мл метоксифенилуксусной кислоты реактива, охлаждают на ледяной бане в течение 30 мин; образуется объёмный белый кристаллический осадок. Смесь помещают в воду при температуре 20 °С и перемешивают в течение 5 мин; осадок не исчезает. К смеси прибавляют 1 мл аммиака раствора 10 %; осадок полностью растворяется. К полученному раствору прибавляют 1 мл аммония карбоната раствора 15,8 %; осадок не образуется.

В. Соль натрия, смоченная хлористоводородной кислотой концентрированной и внесённая в бесцветное пламя, окрашивает его в жёлтый цвет.

###### НИТРАТЫ

А. Навеску испытуемого образца, соответствующую около 1 мг нитрат-иона или указанную в фармакопейной статье, прибавляют к смеси 0,1 мл нитробензола, 0,2 мл серной кислоты концентрированной и через 5 мин охлаждают на ледяной бане. Продолжая охлаждение, медленно при перемешивании прибавляют 5 мл воды, 5 мл натрия гидроксида раствора концентрированного, 5 мл ацетона, встряхивают и отстаивают; верхний слой приобретает тёмно-фиолетовую окраску.

Б. К испытуемому образцу, содержащему около 1 мг нитрат-иона, прибавляют 0,1 мл дифениламина раствора; появляется синее окрашивание.

В. К испытуемому образцу, содержащему 2–5 мг нитрат-иона, прибавляют по 0,1–0,15 мл воды и серной кислоты концентрированной,
0,05–0,10 г металлической меди и нагревают; выделяются пары коричневого цвета.

Г. Раствор испытуемого образца, содержащий около 2 мг нитрат-иона, не обесцвечивает калия перманганата раствор 0,1 %, подкислённый серной кислотой разведённой 16 % (в отличие от нитритов).

###### НИТРИТЫ

А. Несколько кристаллов феназона растворяют в фарфоровой чашке в 0,1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 %, прибавляют 0,1 мл раствора, содержащего около 1 мг нитрит-иона; появляется зелёное окрашивание (в отличие от нитратов).

Б. К испытуемому образцу, содержащему около 1 мг нитрит-иона прибавляют 0,1 мл дифениламина раствора; появляется синее окрашивание.

В. К испытуемому образцу, содержащему около 30 мг нитрит-иона, прибавляют 1 мл серной кислоты разведённой 16 %; выделяются жёлто-коричневые пары (в отличие от нитратов).

###### РТУТЬ(II)

А. Около 0,1 мл раствора испытуемого образца помещают на тщательно очищенную поверхность медной фольги; появляется тёмно-серое пятно, которое при натирании становится блестящим. Фольгу сушат и нагревают в пробирке; пятно исчезает.

Б. К раствору, указанному в фармакопейной статье, прибавляют натрия гидроксида раствор 8,5 % до сильнощелочной реакции среды (ОФС «Зависимость между реакцией раствора, приблизительным значением рН и цветом индикаторов»); образуется плотный жёлтый осадок.

В. К 1 мл раствора испытуемого образца, содержащего 10–30 мг ртуть(II)-иона, прибавляют осторожно по каплям калия йодида раствор 10 %; образуется красный осадок, растворимый в избытке реактива.

###### САЛИЦИЛАТЫ

А. К 1 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 0,5 мл железа(III) хлорида раствора 10,5 %; появляется фиолетовое окрашивание, не исчезающее при прибавлении 0,1 мл уксусной кислоты разведённой 30 %.

Б. 0,5 г испытуемого образца растворяют в 10 мл воды. К полученному раствору или к 10 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 0,5 мл хлористоводородной кислоты концентрированной. Полученный осадок после перекристаллизации из горячей воды и высушивания в вакууме имеет температуру плавления от 156 °С до 161 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

###### СВИНЕЦ

А. 0,1 г испытуемого образца растворяют в 1 мл уксусной кислоты разведённой 30 %. К полученному раствору или к 1 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 2 мл калия хромата раствора 5 %, образуется жёлтый осадок, растворяющийся при добавлении 2 мл натрия гидроксида раствора концентрированного.

Б. 50 мг испытуемого образца растворяют в 1 мл уксусной кислоты разведённой 30 %. К полученному раствору или к 1 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 10 мл воды и 0,2 мл калия йодида раствора 16,6%; образуется жёлтый осадок. Смесь кипятят в течение 1–2 мин, осадок растворяется. Раствор охлаждают, при этом образуется осадок в виде блестящих жёлтых пластинок.

###### СЕРЕБРО

А. Около 10 мг испытуемого образца растворяют в 10 мл воды. К полученному раствору или к 10 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 0,3 мл хлористоводородной кислоты 25 %; образуется белый творожистый осадок, растворяющийся при прибавлении 3 мл аммиака раствора 10 %.

Б. К 1 мл раствора испытуемого образца, содержащего около 5 мг серебра-иона, прибавляют аммиака раствор до растворения образующегося вначале осадка, затем прибавляют 0,2 мл формальдегида раствора 35 % и нагревают; на стенках пробирки образуется блестящий налёт металлического серебра.

###### СИЛИКАТЫ

Навеску испытуемого образца, указанную в фармакопейной статье, смешивают в свинцовом или платиновом тигле с помощью медной проволоки с около 10 мг натрия фторида и несколькими каплями серной кислоты концентрированной до получения тонкодисперсной суспензии. Тигель накрывают тонкой прозрачной полимерной пластинкой с висящей каплей воды и осторожно нагревают; через короткий промежуток времени вокруг капли воды быстро образуется белое кольцо.

###### СУЛЬФАТЫ

А. Около 45 мг испытуемого образца растворяют в 5 мл воды. К полученному раствору или к 5 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % и 1 мл бария хлорида раствора 6,1 %; образуется белый осадок.

Б. К суспензии, полученной в результате реакции (А), прибавляют 0,1 мл 0,05 М раствора йода; жёлтая окраска йода не исчезает (в отличие от сульфитов и дитионитов), но обесцвечивается при прибавлении по каплям олова(II) хлорида раствора (в отличие от йодатов). Смесь кипятят; осадок не окрашивается (в отличие от селенатов и вольфраматов).

###### СУЛЬФИТЫ

А. К 2 мл раствора испытуемого образца, содержащего 10–30 мг сульфит-иона, прибавляют 2 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % и встряхивают; постепенно выделяется серы диоксид, обнаруживаемый по характерному резкому запаху.

Б. К 2 мл раствора испытуемого образца, содержащего 2–20 мг сульфит-иона, прибавляют 0,5 мл бария хлорида раствора 5 %; образуется белый осадок, растворимый в хлористоводородной кислоте разведённой 7,3 % (в отличие от сульфатов).

###### СУРЬМА

Около 10 мг испытуемого образца растворяют, осторожно нагревая в растворе 0,5 г калия-натрия тартрата в 10 мл воды, и охлаждают. К 2 мл полученного раствора или раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют по каплям натрия сульфида раствор в глицерине; образуется оранжево-красный осадок, растворяющийся при прибавлении натрия гидроксида раствора 8,5 %.

###### ТАРТРАТЫ

А. Около 15 мг испытуемого образца растворяют в 5 мл воды. К полученному раствору или к 5 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 0,05 мл железа(II) сульфата раствора 1 % и 0,05 мл водорода пероксида раствора разведённого; появляется неустойчивое жёлтое окрашивание. После обесцвечивания раствора к нему прибавляют по каплям натрия гидроксида раствор 8,5 %; появляется фиолетовое или пурпурное окрашивание.

Б. К 0,1 мл раствора испытуемого образца, содержащего около 15 мг/мл винной кислоты, или к 0,1 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 0,1 мл калия бромида раствора 10 %, 0,1 мл резорцина раствора 2 % и 3 мл серной кислоты концентрированной. Смесь нагревают на водяной бане в течение 5–10 мин; появляется тёмно-синее окрашивание. Раствор охлаждают и вливают в воду; окрашивание изменяется на красное.

В. К 1 мл раствора испытуемого образца, содержащего около 20 мг тартрат-иона, прибавляют кристаллик калия хлорида, 0,5 мл этанола (96 %); образуется белый кристаллический осадок, растворимый в разведённых минеральных кислотах и растворах гидроксидов щелочных металлов.

###### ФОСФАТЫ (ОРТОФОСФАТЫ)

А. К 5 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, при необходимости нейтрализованного, прибавляют 5 мл серебра нитрата раствора 4,25 %; образуется жёлтый осадок, цвет которого не изменяется при кипячении и который растворяется при прибавлении аммиака раствора.

Б. К 1 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 2 мл молибденованадиевого реактива и перемешивают; появляется жёлтое окрашивание.

В. К 1 мл раствора испытуемого образца, содержащего 10–30 мг фосфат-иона, прибавляют 1 мл аммония хлорида раствора 10 %, 1 мл аммиака раствора 10 % и 0,5 мл магния сульфата раствора 10 %; образуется белый кристаллический осадок, растворимый в разведённых минеральных кислотах.

Г. К 1 мл раствора испытуемого образца, содержащего 10–30 мг фосфат-иона в азотной кислоте разведённой 16 %, прибавляют 2 мл аммония молибдата раствора 10 % и нагревают; образуется жёлтый кристаллический осадок, растворимый в аммиака растворе 10 %.

###### ХЛОРИДЫ

А. Навеску испытуемого образца, соответствующую около 2 мг хлорид-иона, растворяют в 2 мл воды. Полученный раствор или 2 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, подкисляют азотной кислотой разведённой 12,5 %, прибавляют 0,4 мл серебра нитрата раствора 4,25 %, перемешивают и отстаивают; образуется белый творожистый осадок, который центрифугируют и промывают тремя порциями воды по 1 мл. Данную операцию проводят быстро, защищая от яркого света. При этом надосадочная жидкость может иметь опалесценцию. Осадок суспендируют в 2 мл воды и прибавляют 1,5 мл аммиака раствора; осадок быстро растворяется. Допускается наличие нескольких медленно растворяющихся крупных частиц.

Б. Навеску испытуемого образца, соответствующую около 15 мг хлорид-иона или указанную в фармакопейной статье, помещают в пробирку, прибавляют 0,2 г калия дихромата и 1 мл серной кислоты концентрированной. На отверстие пробирки помещают полоску фильтровальной бумаги, пропитанную 0,1 мл дифенилкарбазида раствора (при этом пропитанная бумага не должна соприкасаться с калия дихроматом); бумага окрашивается в фиолетово-красный цвет.

###### ЦИНК

А. 0,1 г испытуемого образца растворяют в 5 мл воды. К полученному раствору или к 5 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 0,2 мл натрия гидроксида раствора концентрированного; образуется белый осадок. Прибавляют ещё 2 мл натрия гидроксида раствора концентрированного; осадок растворяется. К полученному раствору прибавляют 10 мл аммония хлорида раствора 10,7 %; раствор остаётся прозрачным. К раствору прибавляют 0,1 мл натрия сульфида раствора в глицерине; образуется белый хлопьевидный осадок.

Б. К 2 мл раствора испытуемого образца, содержащего 5–20 мг цинк-иона, прибавляют 0,5 мл калия ферроцианида раствора 5,3 %; образуется белый осадок, нерастворимый в хлористоводородной кислоте разведённой 7,3 %.

###### ЦИТРАТЫ

А. Навеску испытуемого образца, соответствующую около 50 мг лимонной кислоты, растворяют в 5 мл воды. К полученному раствору или к 5 мл раствора, указанного в фармакопейной статье, прибавляют 0,5 мл серной кислоты концентрированной и 1 мл калия перманганата раствора 3 %. Раствор нагревают до обесцвечивания, прибавляют 0,5 мл натрия нитропруссида раствора 10 % в серной кислоте разведённой 9,8 % и 4 г сульфаминовой кислоты. К смеси прибавляют аммиака раствора концентрированного 25 % до щелочной реакции среды, прибавляя его по каплям до полного растворения сульфаминовой кислоты. Прибавление избытка аммиака раствора концентрированного 25 % приводит к появлению фиолетового окрашивания, переходящего в фиолетово-синее.

Б. К 1 мл нейтрального раствора испытуемого образца, содержащего
2–10 мг цитрат-иона, прибавляют 1 мл кальция хлорида раствора 20 %; раствор остаётся прозрачным. При кипячении раствора образуется белый осадок, растворимый в хлористоводородной кислоте разведённой 7,3 %.

В. К испытуемому образцу, содержащему 1–2 мг цитрат-иона, прибавляют 0,5 мл уксусного ангидрида и нагревают; через 20–40 с появляется красное окрашивание.

###### ЭФИРЫ СЛОЖНЫЕ

К 30 мг испытуемого образца или указанному в фармакопейной статье количеству прибавляют 0,5 мл раствора 70 г/л гидроксиламина гидрохлорида в метаноле и 0,5 мл калия гидроксида раствора спиртового 10 %. Нагревают до кипения, охлаждают, подкисляют хлористоводородной кислотой разведённой 7,3 % и прибавляют 0,2 мл железа(III) хлорида раствора 10,5 %, разбавленного в 10 раз; появляется синевато-красное или красное окрашивание.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0002 Определение воды

Взамен ОФС.1.2.3.0002.15

Методы определения воды, как гигроскопической, так и кристаллизационной, основаны на использовании реактива К. Фишера (и его модификации) волюмометрическим титрованием (метод 1, полумикрометод), кулонометрическим титрованием (метод 2, микрометод) или методом дистилляции (метод 3) азеотропной смеси (с толуолом) в субстанциях органического и неорганического происхождения и лекарственных препаратах, представленных в различных лекарственных формах.

###### Метод 1

Определение воды полумикрометодом (метод К. Фишера) основано на количественной реакции воды с серы диоксидом и йодом в подходящей безводной среде в присутствии основания с достаточной буферной ёмкостью.

Реактив К. Фишера. Реактив К. Фишера представляет собой раствор серы диоксида, йода и азотистого основания (пиридина или имидазола) в органическом растворителе (метаноле).

Реакция протекает в две стадии стехиометрически по уравнениям:

R1OH + SO2 + R2N → [R2NH]SO3R1 I2 + H2O + [R2NH]SO3R1 + 2R2N → [R2NH]SO4R1 + 2[R2NH]I

где R1OH – спирт (метанол),
R1N – основание (пиридин или имидазол).

Используемые растворы и реактивы должны быть безводными. Их хранят и применяют в условиях, исключающих возможность воздействия на них атмосферной влаги.

Йодсернистый реактив. Представляет собой раствор, содержащий пиридин безводный, монометиловый эфир этиленгликоля, йод и серу диоксид. В йодсернистых реактивах часто пиридин заменяют на другие основания. Использование реактивов такого состава должно быть предварительно валидировано для подтверждения в каждом конкретном случае стехиометрии реакции и отсутствия несовместимости между испытуемым веществом и реактивом.

При определении воды в твёрдых веществах, нерастворимых в метаноле, тонко измельчённую навеску вещества взбалтывают с метанолом, после чего титруют реактивом К. Фишера. Некоторые вещества или смеси можно растворять в безводной уксусной кислоте, хлороформе, пиридине и других растворителях.

Для молекул с длинной цепью и могут использоваться пропанол и другие алканолы, имеющие большую растворяющую способность, или в смеси с метанолом при анализе высокомолекулярных соединений.

2-Метоксиэтанол (монометиловый эфир этиленгликоля) применяют в тех случаях, когда в присутствии метанола протекают побочные реакции (этерификация, образование кеталей и т. п.). Титрование в этом растворителе протекает медленнее по сравнению с метанолом. Хлороформ является хорошим растворителем для жиров и может использоваться в смеси с метанолом, содержание которого составляет не менее 25 % (обычно 50 %). Формамид улучшает растворимость полярных веществ и может добавляться в метанол для определения воды в протеинах. Не рекомендуется использование в качестве рабочей среды чистые апротонные растворители, которые нарушают стехиометрию реакции К. Фишера.

Масса навески, время взбалтывания навески с растворителем, а также наименование растворителя должны быть указаны в фармакопейной статье.

Оборудование

Прибор для титрования по методу К. Фишера представляет собой закрытую систему, состоящую из бюретки, снабжённой осушительной трубкой, заполненной осушающим агентом (например, молекулярными ситами), сосуда для подачи реактива и колбы для титрования, соединённых с бюреткой. Колба для титрования представляет собой сосуд вместимостью 60–100 мл с двумя платиновыми электродами, трубкой для подвода азота, осушительной трубкой, заполненной осушающим агентом, (например, молекулярными ситами), и пробкой, в которую вставляется кончик бюретки.

Испытуемое вещество вносят в сосуд через трубку, расположенную с противоположной стороны по отношению к осушительной трубке, и закрываемую притёртой пробкой. Перемешивание раствора в процессе титрования осуществляют при помощи магнитной мешалки или продуванием высушенного азота через раствор.

Конечную точку титрования определяют электрометрически (ОФС «Амперометрическое титрование»). Электрическая схема состоит из потенциометра с сопротивлением 2000 Ом, подключённого к источнику постоянного тока с напряжением 1,5 В и обеспечивающего необходимую разность потенциалов. Разность потенциалов отрегулирована таким образом, чтобы через платиновые электроды, соединённые последовательно с микроамперметром, проходил небольшой начальный ток. При прибавлении реактива стрелка микроамперметра отклоняется, но сразу же возвращается в исходное положение. В конце реакции, получаемое отклонение, должно оставаться неизменным не менее 30 с. В качестве альтернативы конечная точка может быть определена вольтаметрическим методом (ОФС «Вольтаметрическое титрование»).

Конечную точку титрования допускается определять визуально, по изменению окраски титруемой жидкости от жёлтой до красновато-коричневой при условии обеспечения необходимой точности. Параллельно необходимо проводить контрольный опыт.

Допускается использование автоматических титраторов в соответствии с инструкцией производителя.

Методика А. В сосуд для титрования помещают 5,0 мл метанола безводного и точную навеску испытуемого вещества, содержащую от 30 до 50 мг воды. Перемешивают 1 мин и титруют реактивом К. Фишера, прибавляя его при приближении к конечной точке по 0,1–0,05 мл. Параллельно проводят контрольный опыт (титруют 5,0 мл метанола безводного).

Методика Б. В сосуд для титрования помещают 20 мл метанола безводного или растворителя, указанного в фармакопейной статье, и титруют реактивом К. Фишера, определяя конечную точку титрования электрометрически. Затем в сосуд для титрования вносят точную навеску испытуемого вещества, указанную в фармакопейной статье. Смесь перемешивают в течение 1 мин и снова титруют реактивом К. Фишера, определяя конечную точку титрования электрометрически.

Методика В. В сосуд для титрования помещают 10 мл метанола безводного или растворителя, указанного в фармакопейной статье, и титруют йодсернистым реактивом, определяя конечную точку титрования электрометрически. Быстро вносят в сосуд для титрования указанное количество испытуемого вещества и точно отмеренный объём йодсернистого реактива, взятый с избытком приблизительно на 1 мл или объём, указанный в фармакопейной статье. Сосуд закрывают пробкой, выдерживают в защищённом от света месте в течение 1 мин или в течение времени, указанного в фармакопейной статье, периодически перемешивая содержимое сосуда. Избыток йодсернистого реактива титруют до первоначального значения силы тока, используя метанол безводный или растворитель, указанный в фармакопейной статье, к которому было прибавлено точно известное количество воды, эквивалентное около 2,5 мг/мл.

Если нет других указаний в фармакопейной статье, используют методику А.

###### Метод 2

При кулонометрическом титровании, необходимый для реакции К. Фишера йод образуется при анодном окислении йодид-иона:

Йод реагирует с диоксидом серы до тех пор, пока в среде (фоновом электролите) присутствует вода. Избыток йода указывает на достижение конечной точки титрования. Количество оттитрованной воды прямо пропорционально количеству электричества, прошедшему через ячейку. Конечную точку титрования определяют электрометрически.

1 моль йода соответствует 1 молю воды, а количество электричества 10,71 Кл – 1 мг воды.

Вследствие малого тока титрования кулонометрическое определение применяется для количественного определения микроколичеств воды: от 10 мкг до 10 мг.

Правильность и точность метода обусловлены способом приготовления испытуемого образца и устранением атмосферной влаги из системы.

Оборудование

Главным блоком прибора является кулонометрическая ячейка. Реакционная ячейка состоит из анодного отделения, в котором протекает реакция К. Фишера, и меньшего по объёму катодного отделения, в котором протекает катодная реакция восстановления. Каждое отделение содержит платиновый электрод. Анодное отделение заполняется анолитом, в качестве которого используется модифицированный реактив К. Фишера, содержащий йодид-анион вместо йода. Катодное отделение заполняется католитом, как правило, содержащим соли аммония в качестве активного компонента. Отделения разделены диафрагмой, предотвращающей смешение двух растворов. Поскольку диффузия активных компонентов не может быть полностью исключена диафрагмой, компоненты католита должны быть совместимы с анолитом. Могут использоваться и однокамерные ячейки без диафрагмы, где анодная и катодная реакции протекают в одном и том же объёме электролита, поэтому катодная реакция восстановления не должна давать продукты, способные окисляться на аноде, что может привести к завышенным результатам определения.

Реакционная ячейка должна поддерживаться в абсолютно сухом состоянии. Заливка реактива в анодное отделение производится через сухую воронку, после чего ячейка немедленно герметизируется, при этом может произойти обесцвечивание реактива. Влагу удаляют из системы предварительным электролизом. Катодное отделение также должно быть безводным. Небольшой избыток элементарного йода в католите не оказывает влияния на титрование.

Анализируемая жидкая проба вводится в ячейку с анолитом шприцем через силиконовую прокладку. Следует избегать попадания твёрдых проб в ячейку. Если необходимо провести испытание на твёрдых образцах, они вводятся через герметично закрываемый ввод; при этом должны быть предприняты меры по предотвращению поступления в ячейку атмосферной влаги (например, работать в перчаточном боксе в атмосфере сухого инертного газа). Твёрдые пробы могут вводиться в виде раствора после растворения их в подходящем растворителе, или путём высвобождения воды из пробы в трубчатой печи при нагревании и переноса в анолит потоком сухого инертного газа. Газы вводятся в анолит через трубку для ввода газа (барботер).

Объём пробы не должен превышать 10 мл. Обычно в ячейку дозируется 0,5–5,0 мл жидкой пробы. Газовые пробы вводятся в объёме от 100 мл до 10 л.

Методика

Кулонометрическое титрование выполняют до установления конечной точки титрования.

Отделение реакционной ячейки заполняют электролитом для микроопределения воды, согласно инструкциям изготовителя. Влагу удаляют из системы предварительным электролизом.

В реакционную ячейку помещают точное количество испытуемого вещества, указанное в фармакопейной статье, и перемешивают в течение 30 с или в течение времени, указанного в фармакопейной статье. Титруют до установления конечной точки титрования.

При использовании испарителя точную навеску испытуемого вещества, указанную в фармакопейной статье, помещают в трубку и нагревают. После выпаривания воды из образца в реакционной ячейке проводят титрование. Во избежание потерь испарившейся воды, уже собранной в растворе анолита при длительном нагревании, титрование могут проводить одновременно с нагреванием испытуемого образца.

Параллельно проводят контрольный опыт и рассчитывают содержание воды в испытуемом веществе в процентах.

Обработка результатов. Между двумя последовательными титрованиями вводят точно взвешенное количество воды – такое же, как в определяемом образце, и выполняют кулонометрическое титрование. Результат должен быть в пределах от 97,5 до 102,5 % для содержания 1000 мкг воды в образце и в пределах от 90,0 до 110,0 % для содержания 100 мкг воды в образце.

###### Метод 3

Оборудование. Определение проводят с помощью прибора (рис. 1), состоящего из стеклянной круглодонной колбы 1 вместимостью от 250 до 500 мл, приёмника 2, представляющего собой градуированную пробирку или бюретку вместимостью 6–10 мл с ценой деления 0,1 мл и обратного холодильника 3.

Рис. 1. Схема прибора для определения воды методом дистилляции: 1 – колба; 2 – приёмник; 3 – холодильник.

Методика. В колбу 1 помещают точное количество испытуемого вещества, указанное в фармакопейной статье (от 10 до 20 г), содержащего от 2 до 3 мл воды, прибавляют 100 мл толуола или ксилола и несколько кусочков пористого материала (например, пемзы). Колбу нагревают на плитке или песчаной бане до кипения. Кипячение ведут так, чтобы конденсирующийся растворитель не скапливался в холодильнике, а стекал навстречу поднимающимся парам жидкости со скоростью от 2 до 4 капель в секунду. Кипячение прекращают, когда объём воды в приёмнике перестанет увеличиваться и верхний слой растворителя в приёмнике станет прозрачным. Внутреннюю трубку холодильника промывают толуолом и продолжают нагревание в течение 5 мин, приёмник охлаждают до температуры 20±5 °С и стряхивают со стенок приёмника все капли воды. Вся отогнанная вода собирается в нижней части приёмника. После полного разделения слоёв определяют объём отогнанной воды.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0003 Анизидиновое число

Взамен ОФС.1.2.3.0003.15

Анизидиновым числом (IAH) называется число, определяющее содержание в испытуемом образце (жирное масло, твёрдые жиры, липиды) вторичных продуктов окисления (альдегидов, кетонов), равное увеличенной в 100 раз оптической плотности, измеренной в кювете с толщиной слоя 1 см раствора, содержащего 1 г испытуемого образца в 100 мл смеси растворителей после реакции с п-анизидином в условиях данной методики.

Все операции с растворами проводят быстро, избегая воздействия яркого света.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,5 г (точная навеска) испытуемого образца, если не указано иначе в фармакопейной статье, растворяют в триметилпентане, доводят объём раствора тем же растворителем до метки и перемешивают.

Испытуемый раствор Б. К 5,0 мл испытуемого раствора А прибавляют 1,0 мл п-анизидина раствора 0,25 % в уксусной кислоте ледяной и встряхивают.

Раствор сравнения. К 5,0 мл триметилпентана прибавляют 1,0 мл
п-анизидина раствора 0,25 % в уксусной кислоте ледяной и встряхивают.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора А в максимуме поглощения при длине волны 350 нм относительно триметилпентана. Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора Б в максимуме поглощения при длине волны 350 нм ровно через 10 мин после его приготовления относительно раствора сравнения.

Анизидиновое число (IAH) вычисляют по формуле:

где A1 – оптическая плотность испытуемого раствора Б;
A2 - оптическая плотность испытуемого раствора А;
a - навеска испытуемого вещества в испытуемом растворе А, г;
1,2 - коэффициент, учитывающий объём испытуемых растворов.

Примечание – Раствор п-анизидина используют свежеприготовленным.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0004 Кислотное число

Взамен ОФС.1.2.3.0004.15

Кислотным числом (IA) называют количество калия гидроксида, выраженное в миллиграммах, необходимое для нейтрализации свободных кислот, содержащихся в 1 г испытуемого образца. Данный показатель определяется при анализе жиров и жирных масел.

Кислотное число может быть определено одним из двух методов.

###### Метод 1

В колбу вместимостью 250 мл помещают точную навеску испытуемого образца, в зависимости от ожидаемого кислотного числа (табл. 1), и растворяют, если не указано иначе в фармакопейной статье, в 50 мл смеси, состоящей из равных объёмов спирта 96 % и петролейного эфира (3), предварительно нейтрализованной 0,1 М раствором натрия гидроксида или 0,1 М раствором калия гидроксида в присутствии 0,5 мл фенолфталеина раствора 1 %. При необходимости, колбу медленно нагревают на водяной бане с обратным холодильником, до температуры 90 °С до полного растворения испытуемого вещества и поддерживают эту температуру в процессе титрования. Полученный раствор титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида или 0,1 М раствором калия гидроксида до появления розового окрашивания, не исчезающего в течение 15 с.

Таблица 1. Навеска испытуемого образца в зависимости от ожидаемого кислотного числа
Ожидаемое кислотное число | Навеска испытуемого образца, г
--- | ---
Менее 1 | 20
1–4 | 10
4–10 | 4
10–25 | 1,5
25–50 | 1
Более 50 | 0,5

Кислотное число (IA) вычисляют по формуле:

где V – объём 0,1 М раствора натрия гидроксида или 0,1 М раствора калия гидроксида, израсходованный на титрование, мл;
а - навеска испытуемого вещества, г;
5,611 - количество калия гидроксида, соответствующее 1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида или 0,1 М раствора калия гидроксида.

При анализе окрашенных жиров и жирных масел конечную точку титрования устанавливают потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

###### Метод 2

Растворяют точную навеску испытуемого образца, в зависимости от ожидаемого кислотного числа (табл. 2), в 125 мл смеси равных объёмов 2-пропанола и толуола, предварительно нейтрализованной 0,1 М раствором натрия гидроксида или 0,1 М раствором калия гидроксида в присутствии 2 мл фенолфталеина раствора 1 % в 2-пропаноле до слабого, но устойчивого розового окрашивания. При необходимости колбу присоединяют к обратному холодильнику и медленно нагревают при частом встряхивании до полного растворения испытуемого вещества. Полученный раствор титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида или 0,1 М раствором калия гидроксида при интенсивном встряхивании до появления устойчивого розового окрашивания.

Таблица 2. Навеска испытуемого образца в зависимости от ожидаемого кислотного числа
Ожидаемое кислотное число | Навеска испытуемого образца, г
--- | ---
Менее 1 | 20
1–4 | 10
4–15 | 2,5
15–74,9 | 0,5
75,0 и более | 0,1

Кислотное число вычисляют по формуле, приведённой в методе 1.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0005 Йодное число

Взамен ОФС.1.2.3.0005.15

Йодным числом (II) называют количество йода, выраженное в граммах, необходимое для связывания 100 г испытуемого образца. Йодное число характеризует содержание в испытуемом образце непредельных соединений (например, непредельных жирных кислот в жирах или жирных маслах).

Йодное число может быть определено одним из трёх методов.

###### Метод 1

В коническую колбу с притёртой пробкой вместимостью 250 мл, предварительно высушенную или промытую уксусной кислотой ледяной, помещают точную навеску испытуемого образца в количестве, указанном в табл. 1, и растворяют в 15 мл хлороформа. Медленно прибавляют 25,0 мл йода бромида раствора и выдерживают закрытую колбу в тёмном месте в течение 30 мин, если не указано иначе в фармакопейной статье, часто встряхивая. Прибавляют последовательно 10 мл калия йодида раствора 10 %, 100 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата при постоянном энергичном встряхивании до светло-жёлтой окраски раствора. Прибавляют 5 мл крахмала раствора 1 % и продолжают титрование, прибавляя 0,1 М раствор натрия тиосульфата по каплям, до обесцвечивания раствора. Параллельно проводят контрольный опыт.

Таблица 1. Величина навески испытуемого образца в зависимости от ожидаемого йодного числа
Ожидаемое йодное число | Навеска испытуемого вещества, г
--- | ---
Менее 20 | 1,0
20–60 | 0,5–0,25
60–100 | 0,25–0,15
Более 100 | 0,15–0,10

Йодное число вычисляют по формуле, приведённой в методе 3.

###### Метод 2

Навеска испытуемого образца должна быть такая, чтобы избыток йода монохлорида раствора составлял 50–60 % от общего количества,
т.е. 100–150 % от связанного количества.

В колбу с притёртой стеклянной пробкой вместимостью 250 мл, предварительно высушенную или промытую уксусной кислотой ледяной, помещают точную навеску испытуемого образца в количестве, указанном в табл. 2, если не указано иначе в фармакопейной статье, и растворяют в 15 мл смеси равных объёмов циклогексана и уксусной кислоты ледяной. При необходимости перед растворением навеску испытуемого образца расплавляют (температура плавления выше 50 °С). К полученному раствору очень медленно прибавляют объём йода монохлорида раствора, указанный в табл. 2, и выдерживают закрытую колбу в тёмном месте в течение 30 мин, при частом перемешивании.

Прибавляют последовательно 10 мл калия йодида раствора 10 %, 100 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата при постоянном энергичном встряхивании до почти полного исчезновения жёлтой окраски раствора. Прибавляют 5 мл крахмала раствора 1 % и продолжают титрование, прибавляя по каплям 0,1 М раствор натрия тиосульфата, до обесцвечивания раствора. Параллельно проводят контрольный опыт.

Таблица 2. Величина навески испытуемого образца и объём йода монохлорида раствора в зависимости от ожидаемого йодного числа
Ожидаемое йодное число | Навеска испытуемого образца, г (соответствует избытку 150 % ICl) | Навеска испытуемого образца, г (соответствует избытку 100 % ICl) | Объём йода монохлорида раствора, мл
--- | --- | --- | ---
Менее 3 | 10 | 10 | 25
3 | 8,4613 | 10,5760 | 25
5 | 5,0770 | 6,3460 | 25
10 | 2,5384 | 3,1730 | 20
20 | 0,8461 | 1,5865 | 20
40 | 0,6346 | 0,7935 | 20
60 | 0,4321 | 0,5288 | 20
80 | 0,3173 | 0,3966 | 20
100 | 0,2538 | 0,3173 | 20
120 | 0,2115 | 0,2644 | 20
140 | 0,1813 | 0,2266 | 20
160 | 0,1587 | 0,1983 | 20
180 | 0,1410 | 0,1762 | 20
200 | 0,1269 | 0,1586 | 20

Йодное число вычисляют по формуле, приведённой в методе 3.

###### Метод 3

В колбу с притёртой пробкой вместимостью 250 мл помещают точную навеску испытуемого образца в количестве, указанном в табл. 3, и растворяют в 3 мл эфира или хлороформа, прибавляют 20,0 мл 0,1 М раствора йода монохлорида, закрывают колбу пробкой, смоченной калия йодида раствором 10 %, осторожно встряхивают и выдерживают в тёмном месте в течение 1 ч.

Прибавляют последовательно 10,0 мл калия йодида раствора 10 %, 50 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата при постоянном энергичном встряхивании до светло-жёлтой окраски раствора. Прибавляют 3 мл хлороформа, сильно встряхивают, затем прибавляют 1 мл крахмала раствора 1 % и продолжают титрование до обесцвечивания раствора. Параллельно проводят контрольный опыт.

При анализе твёрдых жиров навеску испытуемого образца растворяют в 6 мл эфира, прибавляют 20,0 мл 0,1 М раствора йода монохлорида и 25 мл воды. Дальнейшее определение проводят, как указано выше.

Таблица 3. Величина навески испытуемого образца в зависимости от ожидаемого йодного числа
Ожидаемое йодное число | Навеска испытуемого образца, г
--- | ---
Менее 30 | 1,1–0,7
31–50 | 0,7–0,5
51–100 | 0,5–0,25
101–150 | 0,25–0,15
Более 150 | Менее 0,15

Йодное число вычисляют по формуле:

где V1 – объём 0,1 М раствора натрия тиосульфата, израсходованный на титрование в основном опыте, мл;
V2 - объём 0,1 М раствора натрия тиосульфата, израсходованный в контрольном опыте, мл;
а - навеска испытуемого вещества, г;
0,01269 - количество йода, соответствующее 1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата, г.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0006 Гидроксильное число

Взамен ОФС.1.2.3.0006.15

Гидроксильным числом (IOH) называют количество калия гидроксида, выраженное в миллиграммах, эквивалентное суммарному количеству кислоты, присутствующей в растворе после ацилирования 1 г испытуемого образца. Данный показатель определяется при анализе жиров и жирных масел.

Гидроксильное число характеризует число гидроксильных групп в веществе.

Гидроксильное число может быть определено одним из трёх методов.

###### Метод 1

В мерную колбу вместимостью 150 мл, снабжённую обратным холодильником, помещают точную навеску испытуемого образца, указанную в табл. 1, если не указано иначе в фармакопейной статье, и прибавляют уксусного ангидрида раствор 25 % (о/о) в безводном пиридине (ацилирующий агент) в количестве, указанном в табл. 1. Нагревают колбу на кипящей водяной бане в течение 1 ч, поддерживая уровень воды в бане на 2,5 см выше уровня жидкости в колбе. Вынимают колбу из бани и оставляют охлаждаться. Прибавляют 5 мл воды через верхний конец холодильника. При появлении помутнения прибавляют пиридин до образования прозрачного раствора, отмечая прибавленный объём. Колбу встряхивают и снова помещают на водяную баню на 10 мин. Вынимают колбу из бани и оставляют охлаждаться. Промывают холодильник и стенки колбы 5 мл спирта 96 %, предварительно нейтрализованного по фенолфталеину. Содержимое колбы титруют 0,5 М раствором калия гидроксида спиртовым, используя 0,2 мл фенолфталеина раствора 1 % в качестве индикатора. Параллельно проводят контрольный опыт.

Таблица 1. Навеска испытуемого образца и объём ацилирующего агента в зависимости от ожидаемого гидроксильного числа
Ожидаемое гидроксильное число | Навеска испытуемого образца, г | Объём ацилирующего агента, мл
--- | --- | ---
10–100 | 2,0 | 5,0
100–150 | 1,5 | 5,0
150–200 | 1,0 | 5,0
200–250 | 0,75 | 5,0
250–300 | 0,60 или 1,20 | 5,0 или 10,0
300–350 | 1,0 | 10,0
350–700 | 0,75 | 15,0
700–950 | 0,5 | 15,0

Гидроксильное число (IOH) вычисляют по формуле:

(1)

где V1 – объём 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового, израсходованный на титрование в основном опыте, мл;
V2 - объём 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового, израсходованный в контрольном опыте, мл;
IA - кислотное число;
а - навеска испытуемого вещества, г;
28,05 - количество калия гидроксида, содержащееся в 1 мл 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового, мг.

###### Метод 2

В коническую колбу с притёртой пробкой вместимостью 5 мл помещают точную навеску испытуемого образца, указанную в фармакопейной статье, и прибавляют 2,0 мл пропионового ангидрида реактива. Колбу закрывают, встряхивают до полного растворения испытуемого образца и оставляют на 2 ч. Содержимое колбы переносят в коническую колбу вместимостью 500 мл, содержащую 25,0 мл анилина раствора 0,9 % в циклогексане и 30 мл уксусной кислоты ледяной. Содержимое колбы перемешивают круговым движением и выдерживают 5 мин. Прибавляют 0,05 мл кристаллического фиолетового раствора 0,5 % и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до появления изумрудно-зелёного окрашивания. Параллельно проводят контрольный опыт.

Гидроксильное число (IOH) вычисляют по формуле:

(2)

где V1 – объём 0,1 М раствора хлорной кислоты, израсходованный на титрование в основном опыте, мл;
V2 - объём 0,1 М раствора хлорной кислоты, израсходованный в контрольном опыте, мл;
a - навеска испытуемого вещества, г;
5,610 - количество калия гидроксида, соответствующее 1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты, мг.

Полученное значение гидроксильного числа пересчитывают с поправкой на содержание воды по формуле:

(3)

где W – содержание воды в испытуемом веществе, %.

###### Метод 3

В коническую колбу с притёртой пробкой вместимостью 250 мл помещают точную навеску испытуемого вещества, указанную в табл. 2, и прибавляют 5 мл смеси пиридина и уксусного ангидрида (3:1), вскрытых непосредственно перед использованием или свежеперегнанных. Нагревают колбу с обратным холодильником на кипящей водяной бане в течение 1 ч, прибавляют 10 мл воды через холодильник и нагревают ещё 10 мин. Охлаждают и прибавляют 25 мл бутанола, предварительно нейтрализованного по фенолфталеину 0,5 М раствором калия гидроксида спиртовым: сначала через холодильник прибавляют 15 мл бутанола, затем, отсоединив холодильник, промывают стенки колбы 10 мл бутанола. Прибавляют 1 мл фенолфталеина раствора 1 % и титруют 0,5 М раствором калия гидроксида спиртовым. Параллельно проводят контрольный опыт.

Определение свободных кислот. В коническую колбу вместимостью 125 мл помещают 10 г (точная навеска) испытуемого вещества, прибавляют 10 мл свежеперегнанного пиридина, предварительно нейтрализованного по фенолфталеину, прибавляют 1 мл фенолфталеина раствора 1 % и титруют 0,5 М раствором калия гидроксида спиртовым.

Гидроксильное число (I OH) вычисляют по формуле:

(4)

где a1 и a2 – навески вещества, взятые для ацилирования и для определения свободных кислот соответственно, г;
V - объём 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового, израсходованный на титрование в основном опыте после ацилирования, мл;
V1 - объём 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового, израсходованный на титрование в контрольном опыте при ацилировании, мл;
V2 - объём 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового, израсходованный при титровании свободных кислот, мл;
28,05 - количество калия гидроксида, содержащееся в 1 мл 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового, мг.

Таблица 2. Навеска испытуемого вещества в зависимости от ожидаемого гидроксильного числа
Ожидаемое гидроксильное число | Навеска испытуемого образца, г
--- | ---
Менее 20 | 10
20–50 | 5
50–100 | 3
100–150 | 2
150–200 | 1,5
200–250 | 1,25
250–300 | 1,0
300–350 | 0,75

При анализе окрашенных жирных масел и жиров конечную точку титрования устанавливают потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0007 Пероксидное число

Взамен ОФС.1.2.3.0007.15

Пероксидным (перекисным) числом (Ip) называют количество пероксидов, выраженное в миллиэквивалентах активного кислорода, содержащееся в 1000 г испытуемого образца.

Пероксидное число может быть определено одним из двух методов.

При отсутствии указаний в ФС используют метод 1. Замена метода 1 на метод 2 требует валидации.

Испытания проводят, защищая растворы от воздействия ультрафиолетового света.

###### Метод 1

В коническую колбу с притёртой пробкой вместимостью 250 мл помещают 5 г (точная навеска) испытуемого образца и прибавляют 30 мл смеси уксусной кислоты ледяной и хлороформа (3:2), встряхивают до растворения испытуемого образца, прибавляют 0,5 мл калия йодида насыщенного раствора и закрывают колбу пробкой. Встряхивают точно в течение 60±1 с, прибавляют 30 мл воды и титруют 0,01 М раствором натрия тиосульфата, прибавляя титрант медленно при постоянном энергичном встряхивании, почти до полного исчезновения жёлтого окрашивания раствора. Прибавляют 5 мл крахмала раствора 1 %, содержащего 0,01 % ртути (II) йодида, и продолжают титрование при постоянном встряхивании до полного обесцвечивания раствора. Параллельно проводят контрольный опыт. Объём титранта в контрольном опыте не должен превышать 0,1 мл. В случае превышения определение проводят со свежеприготовленным калия йодида насыщенным раствором.

Пероксидное число (Ip) вычисляют по формуле:

где V – объём 0,01 М раствора натрия тиосульфата, израсходованный на титрование в основном опыте, мл;
V0 - объём 0,01 М раствора натрия тиосульфата, израсходованный в контрольном опыте, мл;
а - навеска испытуемого вещества, г;
c - концентрация раствора натрия тиосульфата, моль/л.

###### Метод 2

В коническую колбу с притёртой пробкой вместимостью 250 мл помещают 50 мл смеси уксусной кислоты ледяной и триметилпентана (3:2) и прибавляют точную навеску испытуемого образца, в зависимости от ожидаемого пероксидного числа (табл. 1). Колбу встряхивают круговыми движениями до растворения испытуемого образца, прибавляют 0,5 мл калия йодида насыщенного раствора и выдерживают раствор в закрытой колбе точно в течение 60±1 с, постоянно встряхивая, затем прибавляют 30 мл воды и титруют 0,01 М раствором натрия тиосульфата, прибавляя титрант медленно при постоянном энергичном встряхивании, почти до полного исчезновения жёлтого окрашивания раствора. Прибавляют около 0,5 мл крахмала раствора 0,5 % и продолжают титрование при постоянном встряхивании до исчезновения синего окрашивания раствора.

Таблица 1. Навеска испытуемого образца в зависимости от ожидаемого пероксидного числа
Ожидаемое пероксидное число | Навеска испытуемого образца, г
--- | ---
Менее 12 | 5,00–2,00
12–20 | 2,0–1,20
20–30 | 1,20–0,80
30–50 | 0,800–0,500
50–90 | 0,500–0,300

В случае пероксидного числа 70 и выше наблюдается задержка обесцвечивания крахмала от 15 до 30 с, что обусловлено способностью триметилпентана всплывать на поверхность водной фазы. При значениях пероксидного числа выше 150 рекомендуется использовать 0,1 М раствор натрия тиосульфата.

При значениях пероксидного числа 70 и выше раствор выдерживают в течение 15–30 с после прибавления каждой порции титранта при перемешивании, или прибавляют небольшое количество (0,5–1,0 % (м/м) эмульгатора (например, полисорбата 60), с целью предотвращения расслоения фаз и уменьшения времени высвобождения йода.

Параллельно проводят контрольный опыт. Если количество титранта в контрольном опыте превышает 0,1 мл, определение проводят со свежеприготовленным калия йодида насыщенным раствором.

Пероксидное число вычисляют по формуле, приведённой в методе 1.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0008 Число омыления

Взамен ОФС.1.2.3.0008.15

Числом омыления (IS) называют количество калия гидроксида, выраженное в миллиграммах, необходимое для нейтрализации свободных кислот и омыления сложных эфиров, содержащихся в 1,0 г испытуемого образца.

В колбу из боросиликатного стекла с обратным холодильником вместимостью 250 мл помещают точную навеску испытуемого образца, в зависимости от ожидаемого числа омыления (табл. 1), если в фармакопейной статье не указано иное, и прибавляют 25,0 мл 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового и несколько стеклянных шариков. Нагревают на водяной бане в течение 30 мин или времени, указанного в фармакопейной статье, поддерживая лёгкое кипение, до получения прозрачного раствора. Прибавляют 1 мл фенолфталеина раствора 1 % и немедленно, пока раствор горячий, оттитровывают избыток калия гидроксида 0,5 М раствором хлористоводородной кислоты.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Таблица 1. Навеска испытуемого образца в зависимости от ожидаемого числа омыления
Ожидаемое число омыления | Навеска испытуемого образца, г
--- | ---
Менее 3 | 20
3–10 | 12–15
10–40 | 8–12
40–60 | 5–8
60–100 | 3–5
100–200 | 2,5–3
200–300 | 1–2
300–400 | 0,5–1

Число омыления (IS) вычисляют по формуле:

где V1 – объём 0,5 М раствора хлористоводородной кислоты, израсходованный на титрование в основном опыте, мл;
V2 - объём 0,5 М раствора хлористоводородной кислоты, израсходованный в контрольном опыте, мл;
а - навеска испытуемого вещества, г;
28,06 - количество калия гидроксида, соответствующее 1 мл 0,5 М раствора хлористоводородной кислоты, мг.

В случае трудно омыляемых веществ, прибавляют 5–10 мл ксилола и нагревают более продолжительное время (время нагревания указывают в фармакопейной статье).

При анализе окрашенных жирных масел и жиров конечную точку титрования устанавливают потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0009 Эфирное число

Взамен ОФС.1.2.3.0009.15

Эфирным числом (IE) называют количество калия гидроксида, выраженное в миллиграммах, необходимое для омыления сложных эфиров, содержащихся в 1 г испытуемого образца.

Эфирное число может быть определено одним из двух методов.

###### Метод 1

Эфирное число определяют по разности между числом омыления (IS) и кислотным числом (IA):

###### Метод 2

В коническую колбу вместимостью 250 мл помещают 1,5–2,0 г (точная навеска) испытуемого образца, прибавляют 20–30 мл спирта 96 % и встряхивают. Прибавляют 1 мл фенолфталеина раствора 1 % и титруют 0,5 М раствором калия гидроксида спиртовым до появления бледно-розового окрашивания, не исчезающего в течение 30 с.

Прибавляют 25,0 мл 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового и несколько стеклянных шариков. Присоединяют обратный холодильник и нагревают колбу на водяной бане при кипении раствора в течение 30 мин или времени, указанного в фармакопейной статье. Избыток калия гидроксида оттитровывают 0,5 М раствором хлористоводородной кислоты. Параллельно проводят контрольный опыт.

Эфирное число (IE) вычисляют по формуле:

где V1 – объём 0,5 М раствора хлористоводородной кислоты, израсходованный на титрование в основном опыте, мл;
V2 - объём 0,5 М раствора хлористоводородной кислоты, израсходованный в контрольном опыте, мл;
а - навеска испытуемого вещества, г;
28,06 - количество калия гидроксида, содержащееся в 1 мл 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового, мг.

При анализе окрашенных жирных масел и жиров конечную точку титрования устанавливают потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0010 Метод сжигания в колбе с кислородом

Взамен ОФС.1.2.3.0010.15

Метод сжигания в колбе с кислородом применяется в качестве способа пробоподготовки для последующего определения содержания брома, йода, фтора, хлора, серы, селена и фосфора в лекарственных средствах и упаковочных материалах для лекарственных средств.

Принцип метода состоит в разрушении органических веществ сжиганием в атмосфере кислорода, растворении образующихся продуктов сгорания в поглощающей жидкости с последующим определением элементов, находящихся в растворе в виде ионов.

###### Оборудование

При проведении работы необходимо надеть защитные очки, колбу поместить в предохранительный чехол, установить защитный экран. Колба для сжигания должна быть тщательно вымыта и свободна от следов органических веществ и растворителей.

Для определения используют коническую колбу из термостойкого стекла вместимостью 500–1000 мл со шлифом. В притёртую стеклянную пробку колбы впаяна нихромовая, платиновая или платино-иридиевая проволока диаметром 0,7–0,8 мм, заканчивающаяся изготовленной из того же материала корзиночкой или спиралью (держатель образца) на расстоянии 1,5–2,0 см от дна колбы (рис. 1).

Рисунок 1. Колба для сжигания в атмосфере кислорода

###### Методика

Помещают 0,05 г (точная навеска) тонкоизмельчённого образца испытуемого вещества или другое количество, указанное в фармакопейной статье, в центр фильтровальной бумаги, не содержащей галогенидов, размером около 30×40 мм, с выступающей узкой полоской шириной 10 мм и длиной 30 мм. Заворачивают в виде пакетика, оставляя узкую
полоску (рис. 2).

Рисунок 2. Фильтровальная бумага для приготовления пакетика

При исследовании жидкости навеску помещают в капилляр, заплавленный парафином, или в капсулу (полиэтиленовую, из нитроплёнки или метилцеллюлозы). Для жидкостей возможно применение двойного бумажного пакетика, а при исследовании жидких образцов объёмом не более 200 мкл можно использовать капсулы из поликарбоната.

При проверке мазеобразных веществ применяют капсулу (вместимостью не более 200 мкл) из нитроплёнки или пакетик из вощёной жиронепроницаемой бумаги. Капсулу или пакетик заворачивают в фильтровальную бумагу, как указано выше. Если при проведении определения требуется, чтобы фильтровальная бумага была пропитана лития карбонатом, следует увлажнить центр бумаги насыщенным раствором лития карбоната и высушить её перед применением при 100–105 ºС.

При исследовании твёрдых и мазеобразных веществ, сгорающих со вспышкой, к навеске прибавляют 3–5 мг парафина.

Подготовленную пробу в пакетике из фильтровальной бумаги помещают в держатель образца. В колбу для сжигания наливают воду или другую поглощающую жидкость, указанную в фармакопейной статье, увлажняют горло колбы водой и пропускают в течение 3–5 мин ток кислорода через трубку, конец которой находится выше уровня жидкости. Осторожно поджигают узкий конец свободной полоски фильтровальной бумаги и немедленно плотно закрывают колбу пробкой, смоченной водой. Во время сжигания следует придерживать пробку рукой.

По окончании сжигания содержимое колбы встряхивают и оставляют на 30–60 мин при периодическом перемешивании. Стенки колбы, держатель образца и пробку промывают водой, промывные воды присоединяют к основному раствору и проводят определение элемента методом, указанным в фармакопейной статье.

Параллельно проводят контрольный опыт.

###### Определение хлора и брома

Сжигают точную навеску вещества, указанную в фармакопейной статье, как описано выше, используя в качестве поглощающей жидкости 20 мл водорода пероксида раствора 6 %. Стенки колбы и держатель образца обмывают 40 мл воды, прибавляют 0,25 мл бромфенолового синего раствора спиртового 0,1 % и нейтрализуют по каплям натрия гидроксида раствором 0,1 М до перехода жёлтой окраски в синюю. Прибавляют 1 мл азотной кислоты раствора 0,3 %, 0,25 мл дифенилкарбазона раствора спиртового 1 % и титруют ртути (II) нитрата раствором 0,01 М до перехода жёлтой окраски в светло-фиолетовую.

1 мл ртути (II) нитрата раствора 0,01 М соответствует 0,709 мг хлора или 1,598 мг брома.

###### Определение йода

Сжигают точную навеску вещества, указанную в фармакопейной статье, как описано выше, поглощая продукты сжигания 10 мл натрия гидроксида раствора 0,2 М. Пробку, держатель образца и стенки колбы обмывают 25 мл калия ацетата раствора 10 % в уксусной кислоте ледяной, к которому предварительно прибавляют 0,75 мл брома, затем тщательно промывают 40 мл воды, прибавляют по каплям муравьиную кислоту безводную 85 % до обесцвечивания раствора, 20 мл серной кислоты раствора 0,025 М, 0,5 г калия йодида и выдерживают в тёмном месте в течение 5 мин. Выделившийся йод титруют натрия тиосульфата раствором 0,1 М (индикатор – 0,5 мл крахмала раствор 1 %).

1 мл натрия тиосульфата раствора 0,1 М соответствует 2,116 мг йода.

###### Определение фтора

Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение фтора».

###### Определение серы

Сжигают точную навеску вещества, указанную в фармакопейной статье, как описано выше, используя в качестве поглощающей жидкости 15 мл водорода пероксида раствора 6 %. Держатель образца и стенки колбы обмывают 20 мл воды и упаривают содержимое колбы до 4–5 мл. К охлаждённому раствору прибавляют 2 мл уксусной кислоты разведённой 30 %, 20 мл спирта 96 %, 0,1 мл водного метиленового синего раствора 0,02 % и нафтарзона раствора 0,2 %, и титруют бария нитрата раствором 0,01 М до перехода жёлто-зелёной окраски в розовую.

1 мл бария нитрата раствора 0,01 М соответствует 0,321 мг серы.

###### Определение фосфора

Сжигают точную навеску вещества, указанную в фармакопейной статье, как описано выше, используя в качестве поглощающей жидкости 1 мл серной кислоты раствора 0,05 М. Определение фосфора проводят в соответствии с ОФС «Спектрофотометрическое определение фосфора».

###### Определение селена

Определение селена проводят в соответствии с ОФС «Селен».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0013 Нитритометрия

Взамен ОФС.1.2.3.0013.15

Нитритометрия – метод титриметрического анализа, при котором в качестве титрованного раствора используется раствор натрия нитрита.

Применяется для количественного определения соединений, содержащих первичную или вторичную ароматическую аминогруппу, для определения гидразидов, а также ароматических нитросоединений после предварительного восстановления нитрогруппы до аминогруппы.

Растворяют, если не указано иначе, точную навеску образца лекарственного средства, указанную в фармакопейной статье, в смеси 10 мл воды и 10 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %. Прибавляют воду до общего объёма 80 мл, 1 г калия бромида и при постоянном перемешивании титруют 0,1 М раствором натрия нитрита. В начале титрования прибавляют 0,1 М раствор натрия нитрита со скоростью 2 мл/мин, а в конце (за 0,5 мл до эквивалентного количества) – 0,05 мл/мин.

Титрование проводят при температуре раствора 15−20 ºС, однако в некоторых случаях требуется охлаждение до 0−5 ºС.

При потенциометрическом титровании в качестве индикаторного электрода применяют платиновый электрод, в качестве электродов сравнения используют хлорсеребряный или насыщенный каломельный электрод.

При амперометрическом титровании на электроды накладывают разность потенциалов 0,3−0,4 В, если не указано иначе в фармакопейной статье.

Точку эквивалентности определяют электрометрическими методами (потенциометрическое титрование, титрование «до полного прекращения тока») или с помощью внутренних индикаторов и внешнего индикатора (йодкрахмальная бумага).

В качестве внутренних индикаторов используют тропеолин 00 раствор 0,1 % (4 капли раствора), тропеолин 00 в смеси с метиленовым синим (4 капли тропеолина 00 раствора 0,1 % и две капли раствора метиленового синего), нейтрального красного раствор (две капли в начале и две капли в конце титрования).

Титрование с тропеолином 00 проводят до перехода окраски от красной к жёлтой, со смесью тропеолина 00 с метиленовым синим – от красно-фиолетовой к голубой, с нейтральным красным – от красно-фиолетовой к синей. Выдержку в конце титрования с нейтральным красным увеличивают до 2 мин.

Титрование с йодкрахмальной бумагой ведут до тех пор, пока капля титруемого раствора, взятая через 1 мин после прибавления 0,1 М раствора натрия нитрита, не будет немедленно вызывать на бумаге синее окрашивание с более светлым пятном в центре. В некоторых случаях выдержка может быть увеличена, о чём должно быть указано в фармакопейной статье.

Параллельно проводят контрольный опыт.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0014 Кислотно-основное титрование в неводных средах

Взамен ОФС.1.2.3.0014.15

Кислотно-основное титрование в неводных растворителях – метод объёмного анализа, который можно рассматривать как разновидность классической титриметрии. Применение методов неводного титрования значительно расширяет возможности аналитического определения самых разнообразных веществ и их смесей.

Метод кислотно-основного титрования в неводных растворителях применяется для количественного определения веществ, титрование которых в воде затруднено или невозможно из-за их слабо выраженных в этой среде кислотно-основных свойств, малой растворимости, наличия в объектах анализа компонентов или примесей, полностью блокирующих возможность или нарушающих селективность титрования в водной среде.

В неводных средах кислотно-основные свойства различных веществ, в сравнении с наблюдаемыми в воде, могут сильно изменяться, причём эти изменения для различных классов веществ индивидуальны, поэтому путём адекватного выбора среды можно обеспечить не только саму возможность титрования, но и контролировать его селективность. Выбранная среда позволяет регулировать кислотно-основные свойства веществ в растворах и создает оптимальные условия для титрования.

###### Растворители

Большинство растворителей обладает кислыми или основными свойствами.

Кислотные (протонодонорные) растворители – соединения кислотного характера, являющиеся донорами протонов. Их используют для определения слабых оснований, нерастворимых в воде. К ним относят безводные кислоты: уксусная, пропионовая, муравьиная.

Основные (протофилъные) растворители – соединения основного характера, являющиеся акцепторами протонов. К этой группе растворителей принадлежат: бензол, пиридин, диметилформамид, формамид, этилендиамин.

Амфотерные (амфипротные) растворители обладают как кислотными, так и основными свойствами. К ним относятся спирты (метанол, этанол и др.), кетоны (метилэтилкетон, ацетон и др.), уксусный ангидрид.

По характеру влияния на силу кислот, оснований и солей растворители также делят на дифференцирующие и нивелирующие.

Дифференцирующие растворители не обладают выраженными кислотно-основными свойствами и увеличивают различия в силе электролитов. К этой группе растворителей принадлежат: метилэтилкетон, ацетон, метанол, нитрометан и др.

В нивелирующих растворителях электролиты хорошо и примерно одинаково диссоциируют, поэтому растворитель с сильными основными свойствами нивелирует силу кислот и дифференцирует силу оснований. Сильно кислотный растворитель, напротив, дифференцирует силу кислот и нивелирует силу оснований.

Выбор растворителя может осуществляться на основании величин констант титрования (Кт) или их показателей (рКт). Эти величины позволяют прогнозировать не только возможность, но и точность титрования. Чем меньше величина Кт или больше величина рКт, тем выше вероятность оптимизации условий титрования. Константа титрования определяется как частное от деления ионного произведения растворителя (Кi) на константу диссоциации растворенного вещества (КА – для кислот, КВ – для оснований).

При титровании кислот:

KT = Ki ∙ KA-1, т. е. pKT = pKi − pKA

При титровании оснований:

KT = KA = Ki ∙ KB-1, т. е. pKT = pKA = pKi − pKB

При дифференцированном титровании смесей двух кислот или двух оснований:

KT = KAII × KAI-1 или KT = KAI × KAII-1

(индексы I и II обозначают последовательность нейтрализации).

Значения величин ионных произведений для ряда растворителей и константы диссоциации некоторых кислот и оснований в воде и в различных растворителях приведены в Приложениях 1, 2 и 3.

Для соединений, принадлежащих к одному классу, часто имеет место линейная зависимость между значениями рКА в воде и неводном растворителе. Если эта зависимость изучена, её можно использовать для предварительной оценки условий титрования в данном растворителе.

Оптимальные условия титрования для слабых кислот достигаются в основных растворителях (пиридин, диметилформамид), а для слабых оснований – в кислых растворителях (уксусная кислота, пропионовая кислота и уксусный ангидрид).

Соли некоторых органических и минеральных кислот могут быть оттитрованы как основания в кислых растворителях, и, реже, как кислоты в основных растворителях. Как кислоты можно титровать галогенводородные кислоты, ангидриды кислот, карбоновые кислоты, аминокислоты, енолы (такие как барбитураты и ксантины), имиды, фенолы, пирролы, сульфонамиды и другие соединения, способные к количественному депротонированию в основных растворителях. Как основания можно титровать азотсодержащие гетероциклические соединения, амиды, оксазолины и четвертичные аммониевые основания, соли оснований и органических кислот, соли оснований и слабых неорганических кислот, а также некоторые соли аминов и другие соединения, способные к протонированию в кислых растворителях.

Для раздельного титрования смесей кислот или оснований используют дифференцирующие растворители, т.е. растворители с величиной рKi, обычно превышающей 15.

В случае, когда соединение не растворяется в чистом растворителе, либо продукты нейтрализации выпадают в виде осадков, для титрования применяют смеси неводных растворителей, приготовленных из двух или трёх компонентов, один из которых является апротонным (бензол, хлороформ и др.). Присутствие апротонного (инертного) растворителя уменьшает ионное произведение среды (Кi), что иногда способствует улучшению условий титрования. Растворители, обладающие дифференцирующим действием, смешивают с инертными растворителями чаще всего в соотношении от 1:1 до 1:20. В таких растворителях изменение окраски индикаторов происходит более чётко, а скачок потенциала часто более крутой, чем в кислотных или основных растворителях.

Смеси растворителей для определения кислот: ацетон—бутиловый спирт, бензол—метиловый спирт, бензол— изопропиловый спирт и др.

Смеси растворителей для определения оснований: уксусная кислота—ацетон, уксусная кислота—бензол, уксусная кислота—хлороформ, уксусная кислота—диоксан—уксусный ангидрид и др.

При выборе растворителя для проведения кислотно-основного титрования принимают во внимание следующие критерии:

- растворитель, используемый для определения веществ основного характера, должен обладать кислотными свойствами, а для определения веществ кислотного характера – основными;

- константа диссоциации растворителя должна быть невелика;

- диэлектрическая проницаемость растворителя должна быть высокой;

- растворитель должен растворять определяемое вещество в такой степени, чтобы можно было получить 0,01 М раствор;

- растворитель не должен вступать в побочные химические реакции с определяемым веществом;

- при титровании в данном растворителе должно быть возможно обнаружение конечной точки титрования;

- растворитель должен легко подвергаться очистке и др.

###### Титранты

Титрованные растворы для неводного титрования готовят с органическим растворителем.

Определение соединений основного характера проводят с использованием титрованных растворов хлорной кислоты в безводной уксусной кислоте, метаноле, нитрометане.

Определение соединений кислого характера проводят с использованием титрованных растворов оснований: натрия гидроксида, натрия метанолята, тетраэтиламмония гидроокисида в этаноле, метаноле, в смеси метанола и бензола и др.

В ряде случаев титрование возможно только в результате взаимодействия титруемого соединения со вспомогательным реактивом перед титрованием или в процессе титрования. При титровании солей галогеноводородных кислот, как оснований (титрант – 0,1 М раствор хлорной кислоты), в титруемый раствор прибавляют в избытке ртути (II) ацетат, что приводит к образованию недиссоциирующих комплексных галогенидов ртути и эквивалентного количества легко и количественно протонирующихся ацетат-ионов. В среде уксусного ангидрида титруют тем же титрантом соли хлористоводородной кислоты, как основания, без использования ртути (II) ацетата, поскольку в этой среде в отсутствие воды количественно протонируются непосредственно хлорид-ионы, что в обычных растворителях неосуществимо.

Возможно титрование как оснований и соединений, содержащих в молекуле азиридиновые или оксирановые циклы. Для его реализации необходимо присутствие в титруемом растворе избытка нуклеофилов – бромид- или йодид-анионов. Тогда при титровании в среде кислых растворителей или нитрометана (титрант – 0,1 М раствор хлорной кислоты) количественно и быстро происходит раскрытие азиридиновых или оксирановых циклов с присоединением протона и аниона-нуклеофила. Таким образом, соединения, содержащие эти циклы, титруются как основания, но процесс практически необратим, поскольку не приводит к образованию катионов определяемых соединений.

В случае титрования соединений кислого характера выбор титранта-основания также зависит от растворителя. Для получения воспроизводимых результатов следует учитывать, что сила титранта-основания должна быть сравнима с силой сопряженного основания растворителя. В идеальном случае следует использовать в качестве титранта соль сопряженного основания растворителя, поскольку оно является самым сильным основанием, которое может существовать в данном растворителе. Так, если для определения карбоновых кислот в качестве растворителей используются простые спирты (этанол, метанол), то в качестве титрантов применяют обычно этилат натрия и метилат натрия соответственно.

###### Индикация конечной точки титрования

Конечную точку титрования в неводных растворителях фиксируют визуальным методом с использованием кислотно-основных индикаторов или при помощи инструментальных методов.

Признаком достижения точки эквивалентности служит достижение раствором определенного значения рН, которое фиксируется по изменению окраски индикатора или скачку электродного потенциала.

Индикаторы. Основные параметры, характеризующие интервал перехода рН и окраски индикатора различны в разных растворителях и сильно отличаются от их значений в воде. Поэтому выбор индикаторов для определения веществ в неводных растворителях сложен и проводится чаще эмпирически.

При предварительном выборе условий кислотно-основного титрования конкретных веществ в неводных средах полезно руководствоваться табл 1.

Таблица 1. Растворители, индикаторы и титранты, рекомендуемые при кислотно-основном титровании в неводных средах
Растворители | Индикаторы | Титранты
--- | --- | ---
Кислые Уксусная, пропионовая, муравьиная кислоты, а также их смеси с уксусным ангидридом, бензолом, хлороформом и др. | Кристаллический фиолетовый, судан III, тропеолин 00, метиловый фиолетовый, нейтральный красный, малахитовый зеленый, диметиловый жёлтый, нафтолбензеин | Раствор хлорной кислоты в уксусной кислоте или нитрометане
Основные Диметилформамид, пиридин, этилендиамин, бутиламин, морфолин | Тимоловый синий, бромтимоловый синий, нафтолбензеин, нитроанилин, тимолфталеин | Растворы гидроксидов натрия и калия, метилата натрия, метилата лития, гидроксиды тетраэтил- и тетрабутиламмония в спирте метиловом или в его смеси с бензолом или толуолом
Дифференцирующие Ацетон, диоксан, нитро-метан, метилэтилкетон, метанол, 2-пропанол, трет-бутиловый спирт, диметилсульфоксид, хлороформ, бензол, толуол, ацетонитрил, метилизобутилкетон | Метиловый оранжевый, тимоловый синий, нейтральный красный, метиловый красный, бромтимоловый синий, нафтолбензеин | Растворы хлористоводородной кислоты в спирте метиловом или в гликолевых смесях; растворы хлорной кислоты в нитрометане, метаноле или в гликолевых смесях; растворы, применяемые при титровании в основных растворителях

Электороды. Конечную точку титрования наиболее точно определяют электро-метрическими методами анализа – потенциометрическим или кондукто-метрическим.

При потенциометрическом определении используют в качестве индикаторного стеклянный или любой другой электрод, обратимый по отношению к протону. В качестве электрода сравнения обычно применяют либо хлор-серебряный, либо каломельный электрод. При проведении потенциометрического титрования целесообразно использовать электролитический мост, заполненный насыщенным раствором калия хлорида или лития перхлората в метаноле. Это предотвращает попадание воды в титруемый раствор и возрастание электрического сопротивления моста в процессе титрования. Использование лития перхлората, как контактного электролита, необходимо, если титрование оснований проводят в протогенной среде в присутствии ртути (II) ацетата или уксусного ангидрида, когда попадание в титруемый раствор следов калия хлорида недопустимо.

При титровании в основных растворителях следует принимать меры для защиты титруемого раствора и особенно титранта от углекислого газа, содержащегося в воздухе, и влажности. Титрование в этилендиамине и пиридине лучше проводить в атмосфере инертного газа (азота или аргона).

Оптимальный объём титруемого раствора составляет от 30 до 50 мл, оптимальная величина расхода титранта в пределах от 5 до 9 мл.

При кондуктометрическом титровании точку эквивалентности устанавливают по резкому изменению электропроводности. Для регистрации аналитического сигнала (сопротивления) применяют два одинаковых платиновых электрода. При расчёте удельной электропроводности экспериментально находят константу электролитической ячейки. Скорость перемешивания растворов должна быть постоянной.

Изменение электропроводности изображают графически в виде кондуктометрических кривых. Вид кривой титрования зависит от природы взаимодействующих электролитов и подвижности ионов в растворе.

В ряде случаев, особенно при меняющемся в процессе титрования составе среды и при инструментальной индикации точки эквивалентности, проведение контрольного опыта обычным путём неосуществимо. В таком случае проводят титрование двух разных навесок определяемого вещества. Величина разности расходов титранта на эти навески не должна быть меньше 5 мл. Расчёт результата определения ведется по величине этой разности, отнесённой к разности навесок, что исключает ошибку, связанную с нецелевым расходом титранта, практически одинаковом при титровании каждой из навесок. Навески выбирают таким образом, чтобы объём титранта в каждом случае не превышал объём используемой бюретки.

##### Приложение 1. Величины pKi различных растворителей (pKi = −lgKi) при температуре от 20 до 25 °С

№ п/п | Растворитель | pKi
--- | --- | ---
1 | Серная кислота | 3,62
2 | Муравьиная кислота | 6,10
3 | Уксусная кислота | 14,4
4 | Уксусный ангидрид | 14,5
5 | Этилендиамин | 15,3
6 | Этиленгликоль | 15,6
7 | Формамид | 16,7
8 | Метанол | 16,7
9 | Пропиленгликоль | 16,8
10 | Диэтиленгликоль | 17,5
11 | Этанол | 19,1
12 | н-Бутанол | 20,1
13 | Метилцеллозольв | 20,7
14 | 2-Пропанол | 22,0
15 | Диметилацетамид | 23,9
16 | Нитрометан | 24,0
17 | N-Метилпирролидон | 24,2
18 | Пиридин | 24,2
19 | Диметилформамид | 25,3
20 | Метилбутилкетон | 25,3
21 | Метилэтилкетон | 25,7
22 | Ацетон | 25,9
23 | Ацетонитрил | 32,2
24 | Диметилсульфоксид | 33,3

##### Приложение 2. Величины рКА кислот в различных растворителях (pКА = −lgКА)

Кислота | Растворитель
--- | ---
Вода | Метанол | Спирт 95% | Бутанол | 2-Пропанол | Этиленгликоль | Пропиленгликоль | Метилцеллозольв | Ацетон | Метилизобутилкетон | Метилэтилкетон | Формамид | Диметилформамид | Диметилсульфоксид | Ацетонитрил | Нитрометан | N-метилпирродон | Пиридин | Уксусная кислота | Муравьиная кислота | Уксусный ангидрид
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22
Азотная | 0,2 | 3,17 | 3,75 |  |  |  |  |  |  |  | 4,66 |  |  |  |  | 8,80 |  | 4,30 | 5,10 |  | 8,20
Ацетилсалициловая | 3,50 |  |  |  |  |  |  |  |  |  | 16,30 |  | 11,30 |  |  |  |  |  |  |  |
Барбитуровая | 4,01 |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  | 6,67 |  |  |
Бензойная | 4,20 | 9,52 | 10,13 | 10,24 |  | 8,16 | 8,83 | 10,70 | 11,95 |  | 16,6 | 6,36 | 12,20 | 11,10 | 20,70 | 19,60 | 12,30 | 9,80 |  |  |
Винная | 3,03 | 7,40 |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  | 8,90 |  |  |  |  |  |  |  |
Дихлоруксусная | 1,31 | 6,30 | 7,14 | 7,30 | 7,80 | 4,50 |  |  | 10,20 |  | 10,26 |  |  |  | 15,80 | 14,10 | 8,30 |  |  |  |
Лимонная | 3,10 |  |  |  |  |  |  |  |  |  | 10,1 |  | 10,60 |  |  |  |  |  |  |  |
Монохлоруксусная | 2,86 | 7,80 | 8,51 | 8,50 | 9,23 | 6,05 |  | 9,10 | 11,20 |  | 15,4 | 4,50 | 10,10 | 8,90 | 18,80 | 17,0 | 10,90 |  |  |  |
Муравьиная | 3,75 |  | 9,15 |  |  |  |  | 9,70 |  |  | 16,70 | 5,74 | 11,55 |  |  |  | 12,0 | 8,84 |  |  |
Никотиновая | 4,73 |  |  |  |  |  |  |  | 16,60 |  | 15,0 |  | 10,80 | 9,60 |  |  |  |  |  |  |
n-Аминобензойная | 4,92 |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |
Пикриновая | 0,80 | 4,80 | 3,93 | 4,50 | 3,70 |  |  |  | 3,17 | 11,0 | 3,70 | 1,33 | 3,65 | 1,0 | 11,0 | 10,50 |  | 3,65 |  |  |
n-Нитробензойная | 3,40 | 8,40 | 8,87 | 9,10 | 9,60 |  |  |  | 10,59 |  |  | 5,88 | 10,60 | 9,0 | 18,70 | 17,60 | 10,50 | 7,94 |  |  |
n-Толуолсульфоновая |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  | 1,55 |  | 5,30 |  |  | 2,68 |  | 0,34 |
Салициловая | 2,89 | 7,90 | 8,60 | 7,73 |  |  |  | 8,90 | 9,53 |  | 13,0 | 4,73 | 8,30 | 6,80 | 16,70 |  |  |  |  |  |
Серная |  | 1,44 |  | 3,42 |  |  |  |  |  |  | 5,48 |  | 3,10 |  | 4,60 | 5,10 |  |  | 4,25 | 0,58 | 4,90
Сульфадимезин | 7,51 |  |  |  |  |  |  |  | 19,60 |  | 18,70 |  | 13,0 |  |  |  |  |  |  |  |
Сульфадиметоксин | 5,90 |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |
Трихлоруксусная | 0,70 | 4,90 | 5,70 | 6,30 |  |  |  | 5,90 | 8,20 |  | 8,86 | 1,46 | 10,60 |  |  |  |  |  |  |  |
Уксусная | 4,75 | 9,70 | 10,41 | 10,35 | 11,35 | 8,32 | 9,10 | 11,10 | 12,55 |  | 16,6 | 6,91 | 13,50 | 12,60 | 22,30 | 20,50 | 13,30 | 11,44 |  |  |
Фенилуксусная | 4,31 |  |  |  |  | 8,06 | 8,78 |  |  |  |  | 6,57 | 12,90 | 11,60 |  | 20,10 |  |  |  |  |
Фенобарбитал | 7,21 |  |  |  |  |  |  |  | 19,20 |  | 13,30 |  | 13,40 | 10,98 |  |  |  |  |  |  |
Хлористоводородная | 0,8 | 1,05 | 1,95 |  | 3,10 |  |  |  | 8,90 |  | 8,30 |  |  |  | 6,20 | 8,10 | 4,08 | 5,40 | 5,30 | 0,89 | 8,30
Хлорная |  |  |  |  |  |  |  |  | 2,90 |  | 2,20 |  |  |  | 1,90 | 2,23 |  | 3,23 | 2,70 | 0,28 | 0,90

##### Приложение 3. Величины рКА оснований в различных растворителях (pКА = pКi − pКВ = pКТ)

Основание | Растворитель
--- | ---
Вода | Метанол | Спирт 95% | Этиленгликоль | Пропиленгликоль | Метилцеллозольв | N-метилпирролидон | Муравьиная кислота | Уксусная кислота | Уксусный ангидрид | Ацетон | Метилэтилкетон | Метилизобутилкетон | Формамид | Диметилформамид | Диметилсульфоксид | Нитрометан | Ацетонитрил
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19
Аденин | 9.90 |  |  |  |  | 13.70 |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |
Аммиак | 9.30 |  |  |  |  | 11.70 |  |  | 10.10 |  |  |  |  |  | 9.45 | 10.50 | 15.70 | 16.46
Анилин | 4.58 | 6.10 | 5.70 | 6.12 | 6.12 |  |  | 5.49 | 8.60 |  | 5.92 |  | 9.63 | 4.10 | 4.36 | 3.60 | 9.07 | 10.56
Ацетамид | 0.48 |  |  |  |  |  |  |  | 6.75 | 8.60 |  |  |  |  | 9.50 |  |  |
Ацетанилид | 0.40 |  |  |  |  |  |  |  | 6.80 | 7.30 |  |  |  |  |  |  |  |
Бензиламин | 9.62 |  |  |  |  | 11.30 |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |
Гидразин | 8.11 |  |  |  |  | 11.10 |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |
Гуанозин | 12.40 |  |  |  |  | 15.0 |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |
Дибазол | 4.20 |  |  |  |  |  |  |  |  | 9.00 |  |  |  |  | 6.40 |  |  |
Димедрол | 8.20 |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  | 7.70 |  |  |
Диметиламин | 10.60 |  |  |  |  |  |  |  | 10.0 |  |  |  |  |  | 10.40 |  | 17.96 | 18.73
Диметиланилин | 5.10 | 4.50 | 4.40 |  |  |  |  |  | 9.93 |  | 4.91 | 6.20 |  |  |  | 2.51 | 11.04 |
Дифениламин | 0.90 | 3.18 |  |  |  |  |  |  | 7.45 |  | 3.87 |  |  |  |  |  | 5.24 |
Диэтиламин | 10.90 |  |  |  |  | 12.20 | 9.20 | 5.19 | 10.10 |  |  | 13.44 |  |  | 10.10 | 10.50 | 17.95 | 18.70
Диэтиланилин | 6.52 |  |  |  |  |  |  |  | 10.20 | 10.60 | 6.26 | 7.20 |  |  |  |  |  |
Кодеин | 8.00 | 8.60 | 11.40 | 9.38 |  |  |  | 5.11 |  | 10.80 | 9.62 | 11.18 |  |  | 8.30 |  |  |
Кофеин | 0.60 |  |  |  |  |  |  | 5.17 |  | 6.30 |  |  |  |  |  |  |  |
Мочевина | 0.20 |  |  |  |  |  |  | 4.67 | 7.65 | 9.36 |  |  |  |  |  |  |  |
α-Нафтиламин | 3.92 | 5.66 | 5.10 |  |  |  |  | 5.05 | 9.60 |  | 5.42 | 6.38 |  |  |  |  |  |
Новокаин | 8.80 |  |  |  |  |  |  |  |  | 11.30 |  |  |  |  | 8.60 |  |  |
Папаверин | 5.90 | 6.92 |  | 7.25 |  |  |  |  |  | 10.80 | 8.03 |  |  |  | 6.60 |  |  |
Пилокарпин | 6.80 |  |  |  |  |  |  |  |  | 10.90 |  |  |  |  |  |  |  |
Пиперидин | 11.20 | 11.0 | 12.51 | 12.52 | 11.71 |  | 10.40 |  | 10.1 |  | 12.24 | 13.48 |  | 11.08 | 10.40 |  | 18.22 | 18.92
Пиридин | 5.15 | 5.54 | 4.30 | 5.92 | 5.69 |  |  | 5.50 | 10.0 | 9.90 | 5.77 | 6.94 |  | 4.43 | 3.30 | 3.40 | 12.16 | 19.33
Промедол | 8.40 |  |  |  |  |  |  |  |  | 11.30 |  | 14.40 |  |  | 8.20 |  |  |
Теобромин | 0.10 |  |  |  |  |  |  | 5.26 |  | 6.10 |  |  |  |  |  |  |  |
Теофиллин | 2.60 |  |  |  |  |  |  |  |  | 6.60 |  |  |  |  |  |  |  |
Трибутиламин | 9.85 |  |  |  |  |  |  |  | 10.10 |  |  |  |  |  |  |  | 17.77 | 18.10
Триэтиламин | 10.70 |  |  | 11.15 | 10.87 |  | 8.70 |  | 10.20 | 11.50 | 11.62 | 12.40 |  | 9.99 | 9.25 | 9.0 | 18.35 | 18.46
Цитидин | 9.80 |  |  |  |  | 13.20 |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |  |
Эфедрин | 9.70 |  |  | 11.29 |  |  |  |  |  | 8.90 |  |  |  |  |  |  |  |

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0015 Комплексонометрическое титрование

Взамен ОФС.1.2.3.0015.15

Комплексонометрическое титрование – метод титриметрического анализа, основанный на образовании хелатов при взаимодействии катионов металлов с комплексонами.

Комплексоны – органические соединения, в молекулах которых содержится большое число оснόвных донорных центров и кислотных функциональных групп, расположенных так, что при их взаимодействии с катионами металлов образуются высокоустойчивые внутрикомплексные соединения, содержащие не менее двух циклов.

В настоящее время для комплексонометрического титрования наибольшее применение среди известных комплексонов получили этилендиаминтетрауксусная кислота и её динатриевая соль, относящиеся к аминополикарбоновым кислотам.

Динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты известна под названиями: натрия эдетат, трилон Б, комплексон III, хелатон III и др.

Натрия эдетат образует с катионами различных металлов в стехиометрическом отношении (1:1) устойчивые и хорошо растворимые в воде комплексонаты, что позволяет использовать его для количественного определения алюминия, висмута, кальция, магния, свинца, цинка и других ионов металлов в лекарственных средствах.

Индикаторы, применяемые для визуального определения конечной точки титрования, называются металлоиндикаторами. В химическом отношении они, как правило, являются органическими кислотами и обладают способностью изменять окраску при образовании комплексных соединений с катионами металлов. Взаимодействие металлоиндикаторов с катионами определяемых металлов должно быть обратимым и константа устойчивости металлоиндикаторного комплекса должна быть на 104 меньше константы устойчивости комплекса катиона металла с титрантом.

Распространёнными металлоиндикаторами являются эриохром чёрный Т, хальконкарбоновая кислота, хромовый тёмно-синий, ксиленоловый оранжевый, пирокатехиновый фиолетовый, дитизон, гексаметилентетрамин, аммоний пурпурнокислый.

Основные условия титрования:

- в точке эквивалентности определяемые катионы практически полностью связаны в комплекс (константа нестойкости комплексов должна быть очень малой величины);

- определяемые катионы должны образовывать с металлиндикатором комплексы, обладающие меньшей прочностью, чем их комплексы с ЭДТА и её динатриевой солью;

- комплексонометрическое следует проводить при определенном значении рН, так как в сильно кислых растворах (рН<3) образуются малоустойчивые кислые комплексы. При повышении рН устойчивость образовавшихся комплексов возрастает, однако в сильно щелочных средах (рН>10) происходит образование малоустойчивых оксокомплексов или гидрооксидов металлов. Для поддержания определенного значения рН титрование следует проводить в присутствии буферных растворов, имеющих определённое значение рН.

Способы комплексонометрического титрования:

1. Прямое титрование. К анализируемому раствору прибавляют аммиачный буферный раствор, металлоиндикатор и титруют стандартным раствором натрия эдетата (трилона Б). Способом прямого титрования определяют катионы Cu2+, Со2+, Pb2+, Ni2+, Zn2+, Fе3+, Ва2+, Сr3+,Ca2+, Mg2+ и др. В точке эквивалентности окраска раствора изменяется от окраски комплекса катиона с металлоиндикатором до окраски свободного металлоиндикатора.

2. Обратное титрование. К анализируемому раствору прибавляют аммиачный буферный раствор, затем точно отмеренный удвоенный минимальный объём (35–40 мл) стандартного раствора трилона Б, который вступает в реакцию с определяемыми ионами, а его избыток оттитровывают стандартным раствором магния сульфата или цинка сульфата в присутствии металлоиндикатора. Титрование проводится до перехода окраски свободного индикатора до окраски комплекса металлоиндикатора с катионом титранта.

Способ обратного титрования применяют:

- когда реакция комплексообразования протекает медленно;

- нет подходящего индикатора для фиксирования конечной точки титрования при прямом способе титрования;

- индикатор образует с определяемым ионом очень прочный комплекс, который не разрушается комплексоном;

- для определения катионов в нерастворимых в воде осадках.

Методики определения катионов

Алюминий. Определение проводят одним из приведённых ниже способов:

1. Растворяют точную навеску препарата (соответствующую 20–30 мг алюминия) в смеси 2 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М и 50 мл воды. Прибавляют 50,0 мл 0,05 М раствора натрия эдетата и нейтрализуют
   натрия гидроксида раствором 1 М по метиловому красному. Нагревают раствор до кипения и выдерживают на водяной бане в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 50 мг индикаторной смеси ксиленолового оранжевого, 5 г гексаметилентетрамина и титруют избыток натрия эдетата 0,1 М раствором цинка сульфата до красно-фиолетового окрашивания.

- 1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 1,349 мг алюминия.

2. К 20,0 мл раствора препарата, приготовленного, как описано в фармакопейной статье, прибавляют 25,0 мл 0,1 М раствора натрия эдетата и 10 мл смеси равных объёмов аммония ацетата раствора 15,5 % и уксусной кислоты разведённой 12 %. Кипятят в течение 2 мин, охлаждают до комнатной температуры, добавляют 50 мл этанола и 3 мл дитизона раствора 0,025 % в этаноле. Избыток натрия эдетата оттитровывают 0,1 М раствором цинка сульфата до перехода окраски от зеленовато-голубой до красно-фиолетовой.

- 1 мл 0,1 М раствора натрия эдетата соответствует 2,698 мг алюминия.

Висмут. Растворяют точную навеску препарата (соответствующую 0,1–0,2 г висмута), как указано в фармакопейной статье. Прибавляют 50 мл воды и доводят рН до 1,0–2,0, добавляя по каплям азотную кислоту разведённую 16 % или аммиака раствора 10 %. Прибавляют 50 мг ксиленолового оранжевого индикаторной смеси и медленно титруют 0,05 М раствором натрия эдетата до жёлтого окрашивания.

1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 10,45 мг висмута.

Кальций. Растворяют точную навеску препарата (соответствующую 40–50 мг кальция), как указано в фармакопейной статье, в воде или хлористоводородной кислоте разведённой 8,3 % и далее проводят определение по одному из приведённых способов:

1. Доводят объём раствора водой до 100 мл и титруют 0,05 М раствором натрия эдетата. В конце титрования прибавляют 4 мл натрия гидроксида раствора 30 % и 3 мл хальконкарбоновой кислоты–раствора индикатора; появляется розовое окрашивание. Продолжают титрование до перехода окраски в интенсивно синий цвет.

2. Доводят объём раствора водой до 50 мл, прибавляют 10 мл аммония хлорида буферного раствора рН 10,0, 0,1 г индикаторной смеси или 7 капель хромового тёмно-синего раствора и титруют 0,05 М раствором натрия эдетата до сине-фиолетового окрашивания.

- 1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 2,004 мг кальция.

Магний. Растворяют точную навеску препарата (соответствующую 20–30 мг магния), как указано в фармакопейной статье. Прибавляют 50 мл воды, 10 мл аммония хлорида буферного раствора рН 10,0, 0,1 г индикаторной смеси или 7 капель раствора индикатора эриохрома чёрного Т и титруют 0,05 М раствором натрия эдетата до синего окрашивания.

1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 1,215 мг магния.

Свинец. Растворяют точную навеску препарата (соответствующую 0,1–0,2 г свинца), как указано в фармакопейной статье. Прибавляют 50 мл воды, 50 мг ксиленолового оранжевого индикаторной смеси, 5 г гексаметилентетрамина и титруют 0,05 М раствором натрия эдетата до жёлтого окрашивания.

1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 10,36 мг свинца.

Цинк. Растворяют точную навеску препарата (соответствующую 60–80 мг цинка), как указано в фармакопейной статье. Прибавляют 50 мл воды, 50 мг ксиленолового оранжевого индикаторной смеси, 5 г гексаметилентетрамина и титруют 0,05 М раствором натрия эдетата до жёлтого окрашивания.

1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 3,269 мг цинка.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0016 Определение кислотонейтрализующей способности

Взамен ОФС.1.2.3.0016.15

Метод определения кислотонейтрализующей способности основан на свойстве препаратов-антацидов связывать хлористоводородную кислоту.

Испытание применяют для установления количественной оценки кислотонейтрализующей способности, выраженной количеством миллиграмм-эквивалентов хлористоводородной кислоты, связываемой 1 г или минимальной разовой дозой лекарственного препарата, методом титриметрии.

Испытуемую пробу готовят в зависимости от вида лекарственной формы, если не указано иначе в фармакопейной статье.

Твёрдые лекарственные формы. В стакан вместимостью 250 мл помещают точно взвешенное количество образца, эквивалентное минимальной разовой дозе препарата. При необходимости увлажняют, прибавляя не более 5 мл спирта 96 % (нейтрализованного до рН 3,5) и перемешивают, чтобы смочить образец полностью. Прибавляют 70 мл воды и перемешивают на магнитной мешалке в течение 1мин.

Примечание – В случае шипучих таблеток к навеске сначала прибавляют 10 мл воды и осторожно вращают стакан до прекращения реакции. Прибавляют еще 10 мл воды и осторожно перемешивают. Обмывают стенки стакана 50 мл воды и перемешивают на магнитной мешалке в течение 1 мин.

Суспензии и другие жидкости. Встряхивают флакон, пока содержимое не станет однородным, и определяют плотность. В стакан вместимостью 250 мл помещают точно взвешенное количество однородной смеси, эквивалентное минимальной разовой дозе, доводят водой до 70 мл и перемешивают на магнитной мешалке в течение 1 мин. К испытуемой пробе прибавляют 30,0 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты, перемешивают на магнитной мешалке в течение 15 мин и титруют избыток хлористоводородной кислоты в течение 5мин 0,5 М раствором натрия гидроксида до достижения устойчивого (в течение 10–15 с) значения рН 3,5.

Количество миллиграмм-эквивалентов (мг-экв) поглощённой кислоты вычисляют по формуле:

(1)

МHCl – молярность хлористоводородной кислоты;
МNaOH – молярность натрия гидроксида;
VNaOH – объем 0,5 М раствора натрия гидроксида, пошедшего на титрование испытуемой пробы.

Примечание – Если кислотонейтрализующая способность анализируемого образца больше 25 мг-экв, добавляют 60,0 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты и делают соответствующее изменение при вычислении.

Полученный результат (X) выражают в миллиграмм-эквивалентах (мг-экв) кислоты, поглощенной 1 г испытуемого образца (Х1) или минимальной разовой дозой (Х2):

Для твёрдых лекарственных форм:

(2)

а - навеска испытуемого образца, г;

(3)

G - средняя масса таблетки или содержимого капсулы,г.

Для суспензий и других жидкостей:

(4)

Vдозы - объём дозы, мл;
ρ - плотность испытуемой пробы, г/мл;
a - навеска препарата, г.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0019 Определение сахаров спектрофотометрическим методом

Взамен ОФС.1.2.3.0019.15

Методы определения сахаров спектрофотометрическим методом основаны на измерении оптической плотности окрашенных растворов, образуемых при взаимодействии сахаров с антроновым реактивом (метод 1), орциновым реактивом (метод 2) и пикриновой кислотой (метод 3).

###### Метод 1

Метод основан на реакции гидролиза сложных углеводов до моносахаров в сильнокислой среде с их последующей дегидратацией. Образующийся гидроксиметилфурфурол вступает в реакцию комплексообразования с антроном, в результате наблюдается появление синевато-зелёного окрашивания. Интенсивность окраски прямо пропорциональна содержанию моносахаров в испытуемом растворе в области концентраций 0,02 – 0,10 мг/мл.

Испытуемый раствор. Готовят, как указано в фармакопейной статье.

Раствор стандартного образца глюкозы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца глюкозы, растворяют в воде или как указано в фармакопейной статье, доводят этим же растворителем до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, доводят растворителем до метки и перемешивают. Полученный раствор содержит 0,02 мг/мл глюкозы.

Раствор сравнения. В пробирку помещают 3 мл воды, охлаждают на ледяной бане, прибавляют 6 мл антронового реактива 0,2 %.

В пробирку помещают 3,0 мл испытуемого раствора, охлаждают на ледяной бане и осторожно прибавляют 6,0 мл антронового реактива 0,2 %, перемешивают и немедленно нагревают на водяной бане в течение времени, указанного в фармакопейной статье. Охлаждают и измеряют оптическую плотность испытуемого раствора в максимуме поглощения при длине волны 625 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения. Параллельно измеряют оптическую плотность раствора фармакопейного стандартного образца глюкозы, приготовленного аналогично испытуемому раствору.

Построение калибровочного графика. Вместо использования одного стандартного раствора, если указано в фармакопейной статье, строят калибровочный график, используя разведённые растворы стандартного образца глюкозы с концентрацией от 0,01 до 0,05 мг/мл.

Содержание сахаров в 1 мл испытуемого раствора определяют по калибровочной кривой зависимости оптической плотности калибровочных растворов от содержания стандартного образца глюкозы в 1 мл растворителя.

При анализе декстранов учитывают, что 1 г глюкозы соответствует 0,94 г декстранов.

###### Метод 2

При нагревании пентоз (или их фосфорных производных) в присутствии кислот от них отщепляется вода и образуется фурфурол; в присутствии орцина и железа(III) хлорида при этом появляется зелёное окрашивание. Чувствительность метода определения значительно выше с рибозой, чем с дезоксирибозой и гексозами.

Железа(III) хлорида раствор 0,05 % в хлористоводородной кислоте концентрированной. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,05 г (точная навеска) FeCl3·6H2O, растворяют в хлористоводородной кислоте концентрированной и доводят объём раствора водой до метки. Срок годности раствора 1 месяц.

Орцина раствора 10 % в этаноле. В мерную колбу из тёмного стекла вместимостью 100 мл помещают 10 г (точная навеска) орцина, растворяют в этаноле и доводят объём раствора тем же растворителем. Раствор используют свежеприготовленным.

Испытуемый раствор. Готовят, как указано в фармакопейной статье.

Раствор стандартного образца рибозы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца рибозы, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Раствор сравнения. К 2,0 мл железа(III) хлорида раствора 0,05 % в хлористоводородной кислоте концентрированной прибавляют 2 мл воды, смесь встряхивают и прибавляют 0,2 мл орцина раствора 10 % в этаноле. Пробирку нагревают на водяной бане в течение 20 мин, с последующим охлаждением в ледяной воде.

В пробирку помещают 2,0 мл испытуемого раствора с содержанием рибозы 2,5 – 25,0 мг/мл, прибавляют 2,0 мл железа(III) хлорида раствор 0,05 % в хлористоводородной кислоте концентрированной, смесь встряхивают и прибавляют 0,2 мл орцина раствора 10 % в этаноле. Пробирку нагревают на водяной бане в течение 20 мин, с последующим охлаждением в ледяной воде, и измеряют оптическую плотность испытуемого раствора в максимуме поглощения при длине волны 670 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения. Параллельно измеряют оптическую плотность раствора фармакопейного стандартного образца рибозы, приготовленного аналогично испытуемому раствору.

Построение калибровочного графика. В 6 пробирок вносят 0,10, 0,20, 0,40, 0,60, 0,80 и 1,0 мл раствора фармакопейного стандартного образца рибозы, прибавляют воду до 2,0 мл и проводят те же операции, что и с испытуемым раствором.

Содержание сахаров (пентоз) в 1 мл испытуемого раствора находят по калибровочному графику зависимости оптической плотности калибровочных растворов от содержания рибозы в мг/мл.

###### Метод 3

Метод основан на цветной реакции моносахаров с пикриновой кислотой, протекающей с образованием пикраминовой кислоты в результате восстановления сахаром группы – NO2 до – NH2. Интенсивность образовавшейся окраски пропорциональна количеству определяемого сахара (0,1 – 0,8 мг/мл) в испытуемом растворе.

Испытуемый раствор. Готовят, как указано в фармакопейной статье.

Раствор стандартного образца глюкозы. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 0,05 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца глюкозы, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Срок годности раствора 10 сут при хранении в прохладном, защищённом от света месте.

Раствор сравнения. К 1,0 мл пикриновой кислоты раствора 1 % прибавляют 3,0 мл натрия карбоната раствора 20 % и количество воды, равного количеству испытуемого раствора. Колбу нагревают на водяной бане в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки.

В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают точное количество испытуемого раствора указанного в фармакопейной статье, 1,0 мл пикриновой кислоты раствора 1 %, и 3,0 мл натрия карбоната раствора 20 %. Колбу нагревают на водяной бане в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры, доводят объём раствора водой до метки и измеряют оптическую плотность испытуемого раствора в максимуме поглощения при длине волны (от 440 до 460 нм) в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения. Параллельно измеряют оптическую плотность раствора фармакопейного стандартного образца глюкозы, приготовленного аналогично испытуемому раствору.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0020 Спектрофотометрическое определение фосфора

Взамен ОФС.1.2.3.0020.15

Методы спектрофотометрического определения фосфора основаны на использовании окислительного разложения, в результате которого фосфор переводится в фосфат-ионы, образующие с молибденовой кислотой окрашенные соединения.

Выбор метода спектрофотометрического определения фосфора и способа минерализации связан с составом, свойствами лекарственного средства и количеством содержащегося в нём фосфора.

Минерализацию осуществляют методами:

- 1) сжигания в атмосфере кислорода (метод 1);

- 2) сжигания с окислительными смесями концентрированных кислот (метод 2);

- 3) сухой минерализацией – сплавлением с твёрдыми окислителями (метод 3).

В ряде случаев (при определении фосфора в фосфолипидах, нуклеиновых кислотах и других соединениях) до минерализации проводят выделение испытуемого вещества.

Определение фосфора нуклеиновых кислот по Спирину проводят спектрофотометрическим методом с определением оптической плотности при двух значениях длин волн – 270 нм и 290 нм в ультрафиолетовой области спектра.

Способы минерализации

###### Метод 1

Испытание проводят в соответствии с ОФС «Метод сжигания в колбе с кислородом».

###### Метод 2

Методика 1. Используется для лекарственных средств из животного и растительного сырья. В колбу Кьельдаля помещают точную навеску (или отмеренный объём) лекарственного средства, указанную в фармакопейной статье, содержащую 0,2–0,3 мг фосфора, прибавляют 3 мл серной кислоты концентрированной и 3 мл азотной кислоты концентрированной или 3 мл хлорной кислоты, перемешивают. Колбу закрывают стеклянной воронкой и осторожно нагревают, начиная с 50 °С, постепенно повышая температуру до 250±50 °С. Прибавляют по каплям 1 мл азотной кислоты концентрированной; повторяют добавление кислоты по 1 мл каждые 5 мин до получения раствора слабо-жёлтого цвета и прекращают нагревание. К охлаждённому раствору осторожно, небольшими порциями, прибавляют 20 мл воды и кипятят 30 мин. Одновременно в аналогичных условиях минерализуют контрольную пробу.

Методика 2. Используется преимущественно для витаминных лекарственных средств с минералами. В колбу Кьельдаля или высокую термостойкую пробирку помещают точную навеску лекарственного средства, эквивалентную содержанию фосфора 100 мг или указанному в фармакопейной статье, прибавляют 25 мл азотной кислоты концентрированной, осторожно нагревают в течение 30 мин на газовой горелке, электрическом колбонагревателе или плитке, прибавляют 15 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и продолжают нагревание до исчезновения бурых паров.

###### Метод 3

Метод используется для витаминных лекарственных средств с минералами.

Помещают точную навеску предварительно подготовленного, как описано в фармакопейной статье, лекарственного средства в платиновый или кварцевый тигель (при необходимости в образцах с маслом тигель выдерживают в сушильном шкафу при 110 °C в течение 10 мин или более для полной абсорбции масла магния оксидом), осторожно сжигают на открытом пламени газовой горелки или электроплитке в присутствии магния оксида (от 3,0 мг до 2,5 г; количество магния оксида должно быть указано в фармакопейной статье) до обугливания, и продолжают сжигание в муфельной печи при температуре 900±100 °С до тех пор, пока весь остаток не станет белого цвета (3±2 ч).

Спектрофотометрические методики определения фосфора

Образующиеся после минерализации фосфат-ионы взаимодействуют с молибденовой кислотой с образованием жёлтых гетерополикомплексов – фосфорномолибденовых кислот, переходящих под действием восстановителей (аскорбиновой кислоты, гидразина сульфата, эйконогена, метола или других) в фосфорномолибденовую синь, интенсивность окраски которой пропорциональна содержанию фосфора. Состав фосфорномолибденовой сини зависит от природы восстановителя, кислотности раствора, температуры и других условий. От природы восстановителя зависят скорость реакции, чувствительность метода и положение максимума поглощения.

В спектре поглощения фосфорномолибденовой сини для испытуемого лекарственного средства определяют положение максимума. При необходимости перед проведением цветной реакции испытуемый раствор нейтрализуют натрия гидроксида раствором 5 М (или другой концентрации, указанной в фармакопейной статье) в присутствии 1–2 капель фенолфталеина раствора 1 %, избыток щёлочи нейтрализуют серной кислоты раствором 0,05 М (или другой концентрации, указанной в фармакопейной статье).

Методика 1

Используется преимущественно для витаминных лекарственных средств с минералами, с аскорбиновой кислотой.

Ацетатный буферный раствор рН 4,0. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 10 мл уксусной кислоты раствора 1 М, 25 мл натрия ацетата раствора 0,1 М и доводят объём раствора водой до метки. Срок годности полученного раствора – 3 мес.

Методы минерализации и приготовления раствора должны быть указаны в фармакопейной статье. В одну из трёх мерных колб вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл раствора, приготовленного после минерализации, в другую – 2,0 мл фосфора стандартного раствора 20 мкг/мл и в третью – 2,0 мл воды (контрольный раствор). В каждую из трёх колб прибавляют по 10 мл ацетатного буферного раствора рН 4,0, 2,5 мл аммония молибдата раствора 1 % в серной кислоте и 2,5 мл свежеприготовленного аскорбиновой кислоты раствора 1 % и доводят объёмы растворов ацетатным буферным раствором рН 4,0 до метки. Точно через 10 мин после добавления аскорбиновой кислоты раствора 1 % измеряют оптическую плотность испытуемого и стандартного растворов в максимуме поглощения при длине волны 740 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно контрольного раствора.

Содержание фосфора в субстанции или препарате в процентах (Х) вычисляют по формуле:

(1)

где A1 – оптическая плотность испытуемого раствора; + A0 – оптическая плотность стандартного раствора;
V – объём воды, используемый для приготовления испытуемого раствора после минерализации, мл;
a – навеска субстанции или препарата, г; + 20 – концентрация фосфора в фосфора стандартном растворе 20 мкг/мл.

Методика 2

Используется преимущественно для лекарственных средств из животного и растительного сырья.

Восстанавливающий раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 4,0 г метола и 10,0 г натрия сульфита гептагидрата, растворяют в 150 мл воды, прибавляют 196 г натрия метабисульфита, растворённого в 600 мл воды, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют. Срок годности раствора – 30 сут.

Проба на содержание фосфора в используемых реактивах. При смешивании 5 мл восстанавливающего раствора, 10 мл аммония молибдата раствора 5 % в серной кислоте (2) и 20 мл натрия ацетата раствора насыщенного не должно появляться синего окрашивания.

Проводят минерализацию, как указано в методике 1 метода 2. Содержимое колбы количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объём раствора водой до метки, перемешивают и фильтруют через сухой обеззоленный бумажный фильтр, отбрасывая первые 15 мл фильтрата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 15,0 мл фильтрата, прибавляют 35 мл воды, 5,0 мл восстанавливающего раствора, 10 мл аммония молибдата раствора 5 % в серной кислоте (2) и выдерживают в течение 10 мин при комнатной температуре, периодически перемешивая. Соотношение фильтрата и воды (общий объём 50 мл) может быть изменено в зависимости от содержания фосфора в фильтрате.

Параллельно в аналогичных условиях готовят стандартный и контрольный растворы, помещая в мерную колбу вместимостью 100 мл 20,0 мл фосфора стандартного раствора 20 мкг/мл, 30 мл воды (стандартный раствор) или 50 мл воды (контрольный раствор) и те же количества реактивов, как для испытуемого раствора.

Точно через 10 мин в колбы с испытуемым, стандартным и контрольным растворами прибавляют по 20 мл натрия ацетата раствора насыщенного, доводят объём раствора в каждой колбе водой до метки, тщательно перемешивают и через 22,5±2,5 мин измеряют оптическую плотность испытуемого и стандартного растворов в максимуме поглощения при длине волны 725 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно контрольного раствора.

Содержание фосфора в субстанции или препарате в процентах (Х) вычисляют по формуле:

(2)

где A1 – оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 – оптическая плотность стандартного раствора;
a – навеска субстанции или препарата, г;
20 – концентрация фосфора в фосфора стандартном растворе 20 мкг/мл.

Методика 3

Используется преимущественно для витаминных лекарственных средств с минералами, с гидрохиноно.

Способ минерализации, навеска лекарственного средства или содержание фосфора в пробе должны быть указаны в фармакопейной статье. В мерную колбу вместимостью 500 мл с помощью воды количественно переносят полученный остаток после минерализации, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают. В одну из трёх мерных колб вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора, в другую – 5,0 мл фосфора стандартного раствора 20 мкг/мл и в третью – 5,0 мл воды (контрольный раствор). В каждую из трёх колб прибавляют по 1,0 мл аммония молибдата раствора 5 % в серной кислоте (3), 1,0 мл гидрохинона раствора 0,5 % и 1,0 мл натрия гидросульфита раствора 20 %, перемешивают и доводят объёмы растворов в каждой колбе водой до метки, перемешивают и выдерживают в течение 30 мин, измеряют оптическую плотность испытуемого и стандартного растворов в максимуме поглощения при длине волны 650 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно контрольного раствора.

Содержание фосфора в субстанции или препарате в процентах (Х) вычисляют по формуле:

(3)

где A1 - оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 - оптическая плотность стандартного раствора;
a – навеска субстанции или препарата, г;
20 - концентрация фосфора в фосфора стандартном растворе 20 мкг/мл.

Методика 4

Используется для определения примесей или количественного определения фосфора, с эйконогеном.

Раствор эйконогена. Готовят одним из двух способов.

- A. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,750 г натрия сульфита, 14,150 г натрия гидросульфита и 0,105 г эйконогена, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. Полученный раствор используют свежеприготовленным.

- Б. Готовят сухую смесь из 5,0 г натрия сульфита, 94,3 г натрия гидросульфита и 0,70 г эйконогена при тщательном перемешивании. В день определения в мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,5 г сухой смеси, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Полученный остаток после минерализации (методику выбирают в зависимости от природы вещества) растворяют в 10 мл воды и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, перемешивают, прибавляют 0,75 мл аммония молибдата раствора 8,3 % в серной кислоте, 1,0 мл раствора эйконогена и доводят объём раствора водой до метки.

Готовят стандартный раствор, помещая 1–3 мл фосфора стандартного раствора 5 мкг/мл в мерную колбу вместимостью 25 мл, добавляя те же реактивы, что и в испытуемый раствор.

Измеряют оптическую плотность испытуемого и стандартного растворов в максимуме поглощения при длине волны 620 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно контрольного раствора.

Содержание фосфора в субстанции или препарате в процентах (Х) вычисляют по формуле:

(4)

где A1 – оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 – оптическая плотность стандартного раствора;
a – навеска субстанции или препарата, г;
V0 – объём фосфора стандартного раствора, мл;
5 – концентрация фосфора в фосфора стандартном растворе 5 мкг/мл.

Для нормирования предельного содержания примесей возможно сравнение значений оптической плотности испытуемого и стандартного растворов. Оптическая плотность испытуемого раствора не должна превышать оптическую плотность стандартного раствора.

Методика 5

Используется преимущественно для витаминных лекарственных средств с минералами, с гидразина сульфатом.

Молибденовый реактив. Растворяют 6,86 г натрия молибдата в 200 мл воды (раствор А); растворяют 0,40 г гидразина сульфата в 100 мл воды (раствор Б). В мерную колбу вместимостью 1000 мл, содержащую 500 мл воды, осторожно прибавляют при охлаждении и перемешивании 100 мл серной кислоты концентрированной, туда же полностью переносят растворы А и Б и доводят объём раствора водой до метки. Реактив используют свежеприготовленным.

Остаток после минерализации (способ минерализации указывают в фармакопейной статье), содержащий от 0,25 до 1,50 мг фосфора, переносят в мерную колбу вместимостью 500 мл с помощью 45±5 мл воды, прибавляют 20 мл серной кислоты раствора 1 М и перемешивают. Если остаток не растворился, прибавляют ещё небольшое количество серной кислоты раствора 1 М и доводят объём раствора водой до метки.

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, прибавляют 20 мл молибденового реактива, 50 мл воды и выдерживают на кипящей водяной бане, в течение 30 мин. Охлаждают до комнатной температуры, доводят объём раствора водой до метки и измеряют оптическую плотность полученного раствора в максимуме поглощения при длине волны 830 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно контрольного раствора и определяют концентрацию фосфора в испытуемом растворе по калибровочному графику.

Построение калибровочного графика. В мерные колбы вместимостью 100 мл помещают 2,0; 5,0; 7,5; 10,0 и 15,0 мл фосфора стандартного раствора 10 мкг/мл, прибавляют по 20 мл молибденового реактива и далее поступают, как указано выше для испытуемого раствора.

Строят калибровочный график, откладывая по оси ординат оптическую плотность, а по оси абсцисс – концентрацию фосфора в мкг/мл.

Содержание фосфора в субстанции или препарате в процентах (Х) вычисляют по формуле:

(5)

где С – концентрация фосфора, определенная по калибровочному графику, мкг/мл;
a – навеска субстанции или препарата, г.

Определение фосфора нуклеиновых кислот по Спирину

Метод основан на измерении разности показателей поглощения в ультрафиолетовой области при двух значениях длин волн после обработки испытуемого лекарственного средства раствором хлорной кислоты при нагревании. В фармакопейных статьях в зависимости от соотношения содержания нуклеиновых кислот (дезоксирибонуклеиновой и рибонуклеиновой, а также их фрагментов) допускаются модификации методик гидролиза.

Методика

К 1,0 мл раствора образца, содержащего 15–35 мкг нуклеиновых кислот, помещенного в термостойкую центрифужную пробирку или колбу, прибавляют 5,0 мл хлорной кислоты раствора 0,5 М (другие условия указывают в фармакопейной статье) и закрывают стеклянным колпачком или присоединяют воздушный холодильник. Смесь выдерживают на кипящей водяной бане в течение 20 мин, охлаждают и при необходимости (при наличии осадка) центрифугируют при 2000 об/мин в течение 20 мин, измеряют оптическую плотность гидролизованного прозрачного раствора или надосадочной жидкости при длинах волн 270 нм и 290 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. При высоких значениях оптической плотности растворы разводят хлорной кислоты раствором 0,5 М (разведение должно быть указано в фармакопейной статье). В качестве контрольного раствора используют хлорной кислоты раствор 0,5 М.

Метод применим при выполнении условия: А270 и А290 не должны отличаться более чем на 15 %.

Содержание фосфора в субстанции или препарате в процентах (Х) вычисляют по формуле:

(6)

где A270 – оптическая плотность испытуемого раствора при 270 нм;
A290 – оптическая плотность испытуемого раствора при 290 нм;
a – навеска субстанции или препарата, г;
V – объём, в котором растворена субстанция или препарат, мл;
F – степень дополнительного разведения испытуемого раствора;
l – толщина оптического слоя, см;
0,19 – разность удельных показателей поглощения нуклеиновых кислот (ΔА1см) при длинах волн 270 и 290 нм при содержании фосфора 1 мкг/мл, мл/(мкг·см).

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0028 Количественное определение кислорода в лекарственных средствах на основе кислорода медицинского

Взамен ОФС.1.2.3.0028.20

Определение кислорода в газах медицинских проводят одним из методов: поглотительным (абсорбционным) методом (метод 1), газовой хроматографии (метод 2), парамагнитного анализа (метод 3), являющихся альтернативными. Поглотительный (абсорбционный) метод является арбитражным.

Требования настоящей общей фармакопейной статьи распространяются на количественное определение объёмной доли кислорода в лекарственных средствах на основе кислорода медицинского.

###### Метод 1

Поглотительный (абсорбционный) метод осуществляют с помощью измерительного аппарата для анализа кислорода типа АК-М1 (рис. 1).

Аммиачный раствор аммония хлорида. Растворяют 750 г аммония хлорида в 1000 мл воды и прибавляют 1000 мл раствора аммиака.

Заполняют цилиндрическую часть поглотительной пипетки (7) медными спиралями и закрывают пробкой. Заливают в пипетку и уравнительную склянку (9) аммиачный раствор аммония хлорида.

Кран (2) бюретки (1) смазывают тонким слоем технического вазелина или вакуумной смазки и соединяют отдельные части прибора резиновыми трубками (10,11). Проверяют прибор на герметичность по постоянству уровня жидкости в бюретке при закрытом кране и нижнем положении уравнительной склянки.

Перед проведением анализа заполняют аммиачным раствором цилиндрическую часть пипетки с капиллярной трубкой (6), капиллярную трубку (5), бюретку, проходы и капиллярные отростки крана (3,4).

Отбирают в бюретку прибора через отросток крана (3) пробу кислорода, несколько превышающую 100 см3.

Для приведения объёма кислорода в бюретке к атмосферному давлению устанавливают уровень аммиачного раствора аммония хлорида в уравнительной склянке против нулевого деления бюретки. Пережимают резиновую трубку (10) и быстрым поворотом крана выпускают из бюретки избыток кислорода в атмосферу. Соединяют поворотом крана бюретку с пипеткой и, поднимая уравнительную склянку, вытесняют весь кислород из бюретки в цилиндрическую часть пипетки. После заполнения раствором капиллярной трубки пипетки кран закрывают.

Для лучшего поглощения кислорода прибор осторожно встряхивают. Через 2–3 мин поглощение кислорода обычно заканчивается. Поворотом крана соединяют бюретку с пипеткой и, медленно опуская уравнительную склянку, переводят в бюретку непоглощённый остаток пробы. Как только аммиачный раствор начинает поступать в бюретку, кран закрывают. Кислород в бюретке приводят к атмосферному давлению, устанавливая на одной высоте уровни жидкости в бюретке и уравнительной склянке. Через 1–2 мин измеряют объём остаточных газов в бюретке, выжидая, пока жидкость стечёт со стенок бюретки.

Снимают показания на шкале бюретки. Деление, соответствующее уровню жидкости в бюретке, показывает объёмную долю кислорода в процентах в испытуемом кислороде.

Определение поглощения кислорода повторяют. За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, абсолютное расхождение между которыми не должно превышать 0,05 %.

Рисунок 1. Измерительный аппарат для анализа кислорода типа АК-М1. Размеры указаны в миллиметрах. 1 – бюретка; 2 – двухходовой кран» 3,4 – отростки крана; 5,6 – капиллярные стеклянные трубки; 7 – поглотительная пипетка с капиллярной трубкой; 8 – штатив; 9 – уравнительная склянка; 10,11 – резиновые трубки.

###### Метод 2

Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Газовая хроматография», с помощью газового хроматографа (рис. 2).

Рисунок 2. Схема устройства газового хроматографа для анализа газообразных проб: 1 – анализируемый газ; 2 – регулятор давления; 3 – расходомер; 4 - кран-дозатор; 5 – дозирующая петля; 6 – колонка с термостатом; 7 – детектор; 8 – газ-носитель с системой регулирования потока газа; 9 – фильтр-осушитель; 10 – делитель потока газа; 11 - система сбора данных.

Устройство ввода пробы. Ввод газовой пробы осуществляется с помощью дозирующего устройства газового хроматографа – крана-дозатора для газовых проб (4) с дозирующей петлёй фиксированного объёма (5), имеющего два положения «Отбор» – «Анализ».

Стандартный образец кислорода с азотом. Поверочная газовая смесь, содержащая около 99,5 % кислорода и 0,5 % азота.

Испытуемый образец. Образец лекарственного средства (без разведений).

Хроматографические условия

Колонка | металлическая или стеклянная 2 м × 1 мм, молекулярное сито; |  |
Детектор | по теплопроводности; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Скорость потока | 10 мл/мин; |  |
Объём дозирующей петли | 250 мкл; |  |
Температура | колонка | 50–70 ºС; |
| детектор | 50–70 ºС; |
Время хроматографирования | 5 мин. |  |

Допускается корректировка условий хроматографирования в соответствии с ОФС «Хроматография».

Порядок выхода пиков: кислород, азот.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного образца кислорода с азотом:

- разрешение (RS) между пиками кислорода и азота должно быть не менее 1,5;

- относительное стандартное отклонение площадей пиков кислорода и азота должно быть не более 10 % (3 повторных введения);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пиков кислорода и азота должно быть не более 2 % (3 повторных введения).

Содержание азота в лекарственном средстве в объёмных процентах (Х1) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика азота на хроматограмме испытуемого образца;
Sо – площадь пика азота на хроматограмме поверочной газовой смеси;
Xо – концентрация азота в поверочной газовой смеси, %.

Содержание кислорода в лекарственном средстве в объёмных процентах (X2) вычисляют по формуле:

где Xi – суммарное содержание азота и других примесей, ранее определенных другими методами, в лекарственном средстве, %.

Метод предназначен для количественного определения кислорода при объёмной доле кислорода в смеси от 90 до 100 %.

###### Метод 3

Определение проводится с использованием парамагнитного анализатора.

Принцип метода основан на высокой парамагнитной чувствительности молекулы кислорода. Кислород оказывает сильное влияние на магнитные поля, которые измеряются количеством электричества, зависящего от величины концентрации кислорода. Поскольку парамагнитный эффект кислорода имеет линейный характер, погрешность прибора не должна превышать 0,1 %.

Основные модификации парамагнитного метода определения кислорода:

1. Элемент, представляющий собой гантелевидное тело на крутящейся подвеске, помещённый в сильное магнитное поле. Молекулы кислорода втягиваются в магнитное поле на том участке, где напряжённость его максимальна, при этом гантелевидное тело отклоняется от своего исходного (нулевого) положения. Сила, необходимая для возвращения гантелевидного тела в его нулевое положение пропорциональна содержанию кислорода в смеси.

2. Парамагнитный эффект обратно пропорционален абсолютной температуре и основан на зависимости парамагнитного эффекта от температуры. При наличии в среде парамагнитного газа градиента температуры и градиента магнитного поля возникает термомагнитная конвекция кислорода. Скорость потока («магнитный ветер») является функцией содержания кислорода и может быть определена, например, на основе измерения теплопроводности.

3. Использование сильного поля, приложенного к трубке. Молекулы кислорода должны втягиваться в поле, создавая сопротивление потоку газа сравнения (обычно N2), проходящего через трубку. Снижение скорости потока газа-носителя в трубке является мерой определения содержания кислорода.

Калибровка прибора. Калибровку проводят в соответствии с инструкцией к прибору. Устанавливают нулевой уровень, пропуская через прибор азот особой чистоты, до получения постоянных показаний. Устанавливают шкалу до 100 %, пропуская через прибор стандартный образец (поверочную газовую смесь) кислорода при той же скорости потока, что и для стандартного образца азота, до получения постоянных показателей. Допускается применять стандартные образцы (поверочные газовые смеси) газов с известной концентрацией кислорода (например, поверочную газовую смесь кислорода 20,9 % или поверочную газовую смесь кислорода 95,0 %).

Измерение. Пропускают через прибор исследуемый газ при постоянной скорости потока до получения постоянных показателей. Регистрируют концентрацию кислорода в исследуемом газе.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0029 Титриметрия (титриметрические методы анализа)

Вводится впервые

Титриметрия, титриметрический анализ – метод количественного химического анализа, основанный на точном измерении объёма стандартного (титрованного) раствора, израсходованного на реакцию с определяемым веществом.

Стандартным или титрованным называется раствор реактива точно известной концентрации, предназначенный для титриметрического анализа.

Требования к титрованным растворам установлены ОФС «Титрованные растворы».

Титриметрию относят к объёмным методам количественного анализа, так как определяемое вещество находится в растворе, обозначаемом как испытуемый.

Титрование – процесс прибавления титрованного раствора к испытуемому раствору определяемого вещества до достижения точки эквивалентности.

Точкой эквивалентности или теоретической точкой конца титрования называется состояние системы, когда количество прибавляемого титрованного раствора эквивалентно количеству определяемого вещества.

Момент, при котором заканчивается титрование, называется конечной точкой титрования, которую определяют, используя соответствующие индикаторы или физические параметры инструментальных методов.

Когда точка эквивалентности полностью или почти полностью совпадает с конечной точкой титрования, по закону эквивалентов можно рассчитать количество определяемого вещества по количеству израсходованного на реакцию титрованного раствора.

В соответствии с законом эквивалентов вещества реагируют друг с другом в количествах, пропорциональных их эквивалентам. Для количественного определения вещества при титриметрии необходимо установить объем титрованного раствора, в котором содержится столько эквивалентов, сколько их содержится в пробе определяемого вещества.

По закону эквивалентов:

где Mt – молярная концентрация титрованного раствора;
Vt – эквивалентный объём титрованного раствора;
Mi – молярная концентрация определяемого вещества;
Vi – объем определяемого вещества.

Искомая концентрация определяемого вещества:

Очень часто конечная точка титрования не совпадает с точкой эквивалентности. Это может происходит из-за индикаторной ошибки, а также из-за того, что реакция является обратимой, из-за взаимодействия титрованного раствора с побочными продуктами реакции и т.д. В этих случаях при титриметрическом методе анализа необходимо проведение контрольного опыта, введение поправочного коэффициента и других мер, указанных в фармакопейной статье.

Для титриметрического метода анализа рекомендуется использовать реакции, удовлетворяющие следующим основным требованиям:

- точка эквивалентности в реакциях должна точно и быстро фиксироваться;

- реакция между веществами титрованного и испытуемого раствора должна протекать в строгом стехиометрическом соотношении, соответствующем её химическому уравнению;

- реакция должна быть практически необратимой;

- реакция должна протекать с достаточной скоростью.

###### Оборудование

При выполнении титриметрического анализа ручным способом используют бюретки, пипетки и другую посуду, требования к которой указаны в ОФС «Мерная посуда».

Объём бюретки для титрования выбирается таким образом, чтобы теоретический объём титрованного раствора составлял от 30 до 90 % объёма её номинальной вместимости. Если титрованного раствора требуется менее 5 мл, необходимо использовать соответствующую микробюретку.

Для точного измерения объёмов растворов, кроме традиционных стеклянных пипеток, можно использовать современные дозирующие устройства, например, пипетки-дозаторы и электронные пипетки.

Для проведения автоматизированного титриметрического анализа используют различные автоматические титраторы (автотитраторы), которые имеют электронную систему управления, позволяющие проводить любые виды титрования и автоматическую обработку полученных результатов.

Физико-химические и другие характеристики индикаторов, способы приготовления растворов индикаторов, используемых в титриметрических методах анализа, указаны в ОФС «Реактивы. Индикаторы».

В зависимости от используемого вида титриметрического анализа применяют различные инструментальные способы регистрации конечной точки титрования: потенциометрическое, фотометрическое, кондуктометрическое, амперометрическое, кулонометрическое, требования к проведению которых указаны в соответствующих общих фармакопейных статьях.

###### Классификация титриметрических методов анализа

Титриметрические методы анализа классифицируют:

1. В зависимости от способа титрования;

2. В зависимости от типа химической реакции, протекающей между веществами испытуемого и титрованного растворов.

1. В зависимости от способа титрования различают: прямое титрование, обратное титрование и косвенное (заместительное) титрование.

- Прямое титрование. При прямом титровании раствор, содержащий определяемое вещество, титруется стандартным (титрованным) раствором до достижения точки эквивалентности. Точка эквивалентности достигается напрямую, при этом необходимо соблюдать осторожность и титрованный раствор из бюретки под конец титрования прибавлять по каплям, чтобы последняя прибавленная капля не превысила объём, соответствующий конечной точке титрования. Количество определяемого вещества рассчитывают, исходя из объёма и молярности титрованного раствора и титра определяемого вещества, указанного в фармакопейной статье.

- Обратное титрование. При обратном титровании (титровании по остатку, титрование с двумя титрантами) используют испытуемый и два стандартных (титрованных) раствора, один из которых является вспомогательным, а второй (основной) применяют непосредственно для титрования. При проведении испытания к точно измеренному объёму испытуемого раствора с определяемым веществом прибавляют избыточный, но точно отмеренный объём первого титрованного раствора. В результате химической реакции определяемое вещество, присутствующее в испытуемом растворе, полностью расходуется, вступая во взаимодействие с первым титрованным раствором. Вторым (основным) титрованным раствором титруют избыток первого вспомогательного титрованного раствора, не вступившего в реакцию с определяемым веществом. Количество определяемого вещества рассчитывают исходя из разности объёмов титрованных растворов с поправкой на контрольный опыт с учётом молярности растворов и титра определяемого вещества по вспомогательному титрованному раствору, указанного в фармакопейной статье.

- Косвенное (заместительное) титрование. При косвенном или заместительном титровании (титровании по замещению, титрование заместителя) также используют испытуемый раствор и два титрованных раствора. При испытании к точно отмеренному объёму испытуемого раствора с определяемым веществом прибавляют избыток первого (вспомогательного) титрованного раствора. В результате протекающей реакции вещество испытуемого раствора полностью расходуется с образованием эквивалентного количества соответствующего продукта реакции, который титруют вторым (основным) титрованным раствором до наступления точки эквивалентности. Таким образом, определяемое вещество замещается на другое, которое впоследствии и подвергается анализу. Заместительное титрование применяют, если невозможно определить вещество в испытуемом растворе, например, отсутствует подходящий титрованный раствор или нельзя установить точку эквивалентности. Количество определяемого вещества рассчитывают также как при прямом титровании.

- Во многих случаях в титриметрии, независимо от способа титрования, требуется проведение контрольного (холостого) опыта. Это необходимо для устранения влияния примесей, используемых реактивов, неточностей, связанных с применением мерной посуды, условий определения, обусловленных побочными реакциями и другими причинами. В контрольном опыте участвуют все реактивы (титрованные растворы, индикаторы и т.п.), кроме анализируемого вещества, или реактивы и анализируемое вещество без характерного реактива на анализируемое вещество. Контрольный опыт проводят параллельно с испытуемым образцом и в аналогичных условиях. Количество титрованного раствора, израсходованное на контрольный опыт, вычитают из общего количества титрованного раствора, пошедшего на титрование испытуемого раствора.

2. В зависимости от типа химической реакции, протекающей между веществами испытуемого и титрованного растворов различают титрование: кислотно-основное, окислительно-восстановительное, комплексонометрическое и осадительное.

- Требования к отдельным видам титриметрического метода анализа изложены в общих фармакопейных статьях: ОФС «Кислотно-основное титрование в неводных средах», ОФС «Нитритометрия» и ОФС «Комплексонометрическое титрование».

- Кислотно-основное титрование основано на использовании реакций кислотно-основного взаимодействия (реакций нейтрализации). Применяют для количественного определения неорганических и органических веществ, обладающих кислотно-основными свойствами.

- В зависимости от используемых титрованных растворов различают разновидности кислотно-основного титрования:

  - алкалиметрия – титрованными растворами являются растворы сильных оснований, например, натрия гидроксида, калия гидроксида и др.;

  - ацидиметрия – титрованными растворами являются растворы сильных кислот, например, хлористоводородной кислоты, серной кислоты и др.

- В основе метода лежит реакция нейтрализации:

Н+ + ОН– → Н2О,

- которая идет с большой скоростью, строго стехиометрично, до конца и удовлетворяет основным требованиям, предъявляемым к реакциям для титриметрического метода анализа.

- Для фиксирования конечной точки титрования применяют кислотно-основные индикаторы (рН-индикаторы), представляющие собой органические соединения, способные изменять цвет в растворе в зависимости от рН раствора. Интервал перехода окраски индикатора должен быть вблизи точки эквивалентности. Наиболее часто для кислотно-основного титрования используют такие индикаторы, как: метиловый оранжевый, фенолфталеин, метиловый красный. Из инструментальных методов для фиксирования конечной точки титрования применяют потенциометрический (рН-метрия).

- При кислотно-основном титровании могут быть использованы способы прямого, обратного или заместительного титрования.

- В фармакопейном анализе используется кислотно-основное титрование, проводимое как в водной среде, так и в неводных средах.

- Окислительно-восстановительное титрование основано на использовании окислительно-восстановительных реакций. При проведении окислительно-восстановительного титрования происходит изменение окислительно-восстановительного потенциала реакции и наблюдается резкое изменение потенциала вблизи точки эквивалентности.

- Окислительно-восстановительное титрование применяют для количественного определения веществ, обладающих окислительными или восстановительными свойствами.

- В зависимости от свойств определяемого вещества и используемых титрованных растворов различают методы окислительного титрования и методы восстановительного титрования.

- В фармакопейном анализе наибольшее применение имеют методы окислительного титрования, такие как: перманганатометрия, йодометрия, хроматометрия, броматометрия, цериметрия и др.

- Из методов восстановительного титрования используют, например, феррометрию, в которой титрованным раствором является раствор соли железа(II).

- Для фиксирования точки эквивалентности при окислительно-восстановительном титровании используют окислительно-восстановительные индикаторы (редокс-индикаторы), которые при достижении определенного потенциала, зависящего от присутствия в растворе окислителей или восстановителей, изменяют цвет. Различают индикаторы одноцветные, у которых одна из форм цветная, другая бесцветная (например, дифениламин в окисленной форме фиолетового цвета, в восстановленной − бесцветный, метиленовый синий также бесцветен в восстановленной форме и имеет синий цвет в окисленном состоянии), и двухцветные, у которых обе формы окрашены (например, ферроин в окисленной форме синего цвета, в восстановленной − красного).

- Специфические индикаторы взаимодействуют только с определенными соединениями: крахмал является специфическим индикатором на йод, тиоцианаты − на железо(III). В некоторых случаях при окислительно-восстановительном титровании в роли индикатора могут быть титрованные растворы, изменяющие цвет в точке эквивалентности: растворы калия перманганата, йода, церия(IV) сульфата, калия дихромата.

- Из инструментальных методов для регистрации конечной точки титрования в окислительно-восстановительном титровании используют фотометрические, потенциометрические, амперометрические, кулонометрические и другие методы.

- Если окислительно-восстановительная реакция соответствует требованиям, предъявляемым к титриметрическим методам анализа и имеется возможность зафиксировать точку эквивалентности, то используют метод прямого титрования. Если же реакция идет не стехиометрично, медленно, то применяют методы обратного или заместительного титрования. Кроме того, может потребоваться изменение окислительного состояния определяемого вещества перед титрованием путем прибавления окислителя или восстановителя, избыток этого реагента должен быть удален, например, осаждением.

Перманганатометрия – метод окислительно-восстановительного титрования, в котором основным титрованным раствором является раствор калия перманганата. Фиксирование конечной точки титрования в бесцветных растворах может происходить без индикатора – по окрашиванию раствора в розовый цвет, в окрашенных растворах – с применением индикатора, например, ферроина. Прямое перманганатометрическое титрование восстановителей проводят в сильнокислой среде, которую создают прибавляя избыток серной кислоты.

MnO4– + 8H+ + 5e– → Mn2+ + 4H2O

Нельзя использовать для создания кислой среды хлористоводородную или азотную кислоты, так как в их присутствии возможно протекание побочных реакций.

В перманганатометрии можно применять способы обратного и заместительного титрования.

Йодометрия – метод окислительно-восстановительного титрования, в котором основными титрованными растворами являются растворы йода и растворы натрия тиосульфата. Фиксирование конечной точки титрования осуществляют с применением специфического индикатора − крахмала, который образует с йодом соединение, окрашенное в синий цвет. Безиндикаторное титрование йодом применяется редко, так как в малых концентрациях раствор йода имеет очень бледную окраску.

При проведении йодометрического титрования из-за особенностей физико-химических свойств йода (летучести) требуется выполнение некоторых специальных условий: титрование проводить при комнатной температуре, а если указано в фармакопейной статье, то и при более низкой температуре. При соответствующем указании в фармакопейной статье реакционную смесь при йодометрическом титровании необходимо выдерживать в темноте, закрывать реакционные колбы пробками и предпринимать другие меры по обеспечению условий проведения титрования. Йодометрическое титрование проводят в нейтральной или слабокислой среде. К титрованию выделившегося в ходе реакции йода приступают не сразу, а минут через 5 после начала реакции образования йода при прибавлении соответствующего реактива.

Йодометрическое титрование имеет широкое применение в фармакопейном анализе лекарственных средств, при этом могут быть использованы способы прямого, обратного и, не очень часто, заместительного титрования.

Прямое титрование стандартным раствором йода используют, например, для определения сильных восстановителей, прибавляя индикатор крахмал до начала титрования и титруют до появления окраски.

I2 +2e– → 2I–

При обратном йодометрическом титровании, используемым для веществ, которые труднее окисляются или подвергаются другим процессам под воздействием йода, избыток раствора йода после реакции с определяемым веществом титруют стандартным раствором натрия тиосульфата, используя в качестве индикатора крахмал, который рекомендуется прибавлять вблизи точки эквивалентности (в присутствии больших количеств йода крахмал может разрушаться, при этом результаты анализа могут быть завышены).

I2 + 2S2O32– → 2I– + S4O62–

Хроматометрия (дихроматометрия, бихроматометрия) – метод окислительно-восстановительного титрования, при котором в качестве основного титрованного раствора используют раствор калия дихромата, являющийся менее сильным окислителем по сравнению с раствором калия перманганата. Фиксирование конечной точки титрования осуществляют с применением внутренних редокс-индикаторов: дифениламина, дифениламино-сульфокислоты, N-фенилантраниловой кислоты, которые образуют окрашенные соединения с избытком титрованного раствора. Возможно использование внешних индикаторов, например, серебра нитрата, калия феррицианида, образующих окрашенные осадки с избытком титрованного раствора. Безиндикаторное титрование до появления в точке эквивалентности оранжевой окраски титрованного раствора хрома(VI) является наименее точным из-за недостаточной интенсивности окраски, а также присутствия ионов хрома(III), образующихся при восстановлении дихромат-иона и обладающих зеленой окраской, что затрудняет определение изменения цвета титруемого раствора в точке эквивалентности.

Хроматометрическое титрование проводят в кислой среде, создаваемой серной кислотой. Кислую среду можно создавать, прибавляя не только серную, но также фосфорную или хлористоводородную кислоту определенной концентрации.

Прямое хроматометрическое титрование используют для определения восстановителей, например, соединений, содержащих железо(II), сульфиты.

Cr2O72– +14H+ + 6e– → Cr3+ + 7H2O

При обратном хроматометрическом титровании, используемым для определения таких окислителей, как нитраты, хлораты, перманганаты, к раствору испытуемого вещества прибавляют избыток титрованного раствора железа (II) (например, титрованного раствора железа (II) сульфата), который окисляется до железа (III) при взаимодействии с раствором испытуемого вещества. Избыток титрованного раствора железа (II) титруют стандартным раствором калия дихромата в присутствии фосфорной кислоты. Обратное хроматометрическое титрование применяют также для определения восстановителей, которые медленно реагируют с титрованным раствором калия дихромата.

Броматометрия – метод окислительно-восстановительного титрования, при котором в качестве основного титрованного раствора используют раствор калия бромата, являющийся является сильным окислителем в кислой среде. Фиксирование конечной точки титрования осуществляют с помощью индикаторов, в кислой среде окрашивающих титруемый раствор в красный цвет, исчезновение окраски титруемого раствора свидетельствует об окончании титрования. В броматометрии используют такие индикаторы, как: метиловый оранжевый, метиловый красный, нейтральный красный.

При прямой броматометрии титрованным раствором калия бромата в кислой среде титруют испытуемый раствор, содержащий определяемое вещество с восстановительными свойствами. Титрованный раствор калия бромата бесцветен, также бесцветны образующиеся в процессе реакции бромид-ионы:

BrO3– + 6e + 6H+ → Br– + 3H2O

После достижения точки эквивалентности добавление избытка раствора калия бромата приводит к образованию брома:

BrO3– + 5Br– + 6H+ → 3Br2 + 3H2O

Образующийся бром окрашивает раствор в бледно-жёлтый цвет, но окраска раствора недостаточно интенсивна для визуальной фиксации конечной точки титрования. Поэтому броматометрическое титрование проводят в присутствии индикаторов, прибавляемых в начале титрования. Индикаторы интенсивно окрашивают титруемый раствор, а после достижения точки эквивалентности необратимо взаимодействуют с образовавшимся бромом, образующимся после точки эквивалентности согласно вышеприведенной реакции. Вследствие этого титруемый раствор обесцвечивается, что является окончанием титрования. Титрование ведут медленно во избежание локального образования брома в растворе до достижения точки эквивалентности.

При обратном броматометрическом титровании к раствору испытуемого вещества прибавляют избыток титрованного раствора калия бромата и непрореагировавшее количество титрованного раствора определяют йодометрическим методом. Определение проводят в кислой среде в присутствии достаточного количества калия бромата, необходимого для образования брома, который фактически взаимодействует с действующим веществом в качестве окислителя. Прибавлением калия йодида в реакционную смесь избыток брома переводят в йод, выделяющийся в количестве, эквивалентном избытку брома, затем йод титруют раствором натрия тиосульфата.

Различают также бромид-броматный метод титрования, при проведении которого для окисления действующих веществ бромом (для бромирования) используют стандартный титрованный раствор бромид-бромата, содержащий калия бромат и калия бромид (фактически, раствор брома) в кислой среде. В зависимости от свойств определяемого вещества применяют обратное или заместительное титрование, определяют необходимые условия проведения испытания.

При проведении броматометрического титрования необходимо соблюдать некоторые общие требования: титрование проводить в вытяжном шкафу с принудительной вентиляцией из-за особенностей физико-химических и токсических свойств продуктов реакции (брома), титрование проводить медленно в сильнокислой среде, для увеличения скорости реакции, в соответствии с указаниями в фармакопейной статье, растворы могут быть нагреты, для ускорения реакции могут быть использованы катализаторы, например, соли ртути (II), во многих случаях при броматометрии необходимо проводить контрольный опыт.

Цериметрия – метод окислительно-восстановительного титрования, при котором в качестве основного титрованного раствора используют раствор церия сульфата(IV), являющийся в кислой среде сильным окислителем, близким по эффективности к калия перманганату. Окислительно-восстановительный потенциал цериметрического титрования определяется не только свойствами определяемого вещества, но сильно зависит от природы и концентрации используемой кислоты, анионы которой образуют комплексные соединения с церием(IV), в форме которых церий(IV) присутствует в растворах. При прямом цериметрическом титровании веществ, обладающих восстановительными свойствами, растворы церия(IV) сульфата, имеющие в кислой среде жёлто-оранжевую окраску, изменяют её за счет образования бесцветных соединений церия(III).

Ce4+ + e → Ce3+

Вместе с тем, интенсивность окраски растворов церия(IV) невелика и обычно недостаточна для визуальной фиксации конечной точки титрования безиндикаторным методом. Поэтому цериметрическое титрование, как правило, осуществляют в присутствии редокс-индикаторов, таких как ферроин, орто-фенантролин, дифениламин, 2,2'-дипиридил и др. Конечную точку титрования в цериметрии также можно определить инструментальными методами, например, потенциометрическим, амперометрическим и др.

Способы обратного и заместительного титрования в цериметрии также используют. В случае обратного цериметрического титрования избыток титрованного раствора церия(IV) сульфата титруют вторым стандартным раствором, которым может быть, например, раствор железа(II) сульфата.

Цериметрическое титрование можно проводить в присутствии хлоридов, что неприемлемо в перманганатометрии. Вместе с тем, метод непригоден для титрования нейтральных и щелочных растворов.

Комплексонометрическое титрование – метод титриметрического анализа, основанный на образовании хелатов при взаимодействии катионов металлов с комплексонами (ОФС «Комплексонометрическое титрование»).

Титрование по методу осаждения или осадительное титрование основано на реакциях образования малорастворимых соединений, выделяющихся из раствора в виде осадка.

Для осадительного титрования пригодны реакции образования осадков, которые должны отвечать следующим требованиям:

- протекать количественно и быстро при обычных условиях,

- не сопровождаться образованием пересыщенных растворов;

- образующийся осадок должен иметь постоянный состав, не должен загрязняться в процессе осаждения, желательно быть практически нерастворимым;

- результаты титрования не должны в заметной степени искажаться явлениями адсорбции (соосаждения);

- должна существовать возможность фиксирования точки эквивалентности.

Наибольшее значение приобрели методы осаждения, связанные с образованием малорастворимых соединений серебра, бария, ртути и др., которые дают возможность количественно определять осаждаемые ими анионы (хлориды, бромиды, иодиды, цианиды, тиоцианаты, сульфаты, хроматы), а также катионы, образующие малорастворимые соединения с указанными выше анионами. Применяя специальные приемы титрования, осадительным методом можно проводить количественное определение не только отдельных катионов или анионитов, но и их смесей.

Практическое значение в фармакопейном анализе имеют аргентометрическое, меркурометрическое, бариметрическое титрование.

Аргентометрия − метод осадительного титрования (титрования по методу осаждения), в котором основным стандартным раствором является титрованный раствор серебра нитрата. Метод используют для определения галогенидов, тиоцианатов, цианидов, фосфатов и других ионов.

В зависимости от условий проведения различают несколько методов аргентометрии:

- 1) Метод Мора − аргенометрический метод анализа, используется для титрования хлоридов и бромидов титрованным раствором серебра нитрата в нейтральной среде в присутствии индикатора − раствора калия хромата. Йодиды не определяются методом Мора. При проведении прямого титрования испытуемого раствора титрованным раствором серебра нитрата в присутствии индикатора по достижении точки эквивалентности образуется осадок серебра хромата красно-бурого цвета:

2AgNO3 + K2CrO4 → Ag2CrO4 ↓+ 2KNO3

- 2)Метод Фольгарда − метод аргенометрического или тиоцианатометрического титрования, в котором в качестве стандартных растворов используют титрованные растворы серебра нитрата и аммония тиоцианата или калия тиоцианата. Индикатором в этом методе являются ионы железа(III) (раствор железоаммонийных квасцов), образующие с тиоцианат-ионами соединения, окрашенные в красный цвет. Условия титрования по методу Фольгарда: титрование проводят в кислой среде, титруемый раствор необходимо энергично перемешивать, в анализируемом растворе должны отсутствовать соли ртути(I) и ртути(II), окислители тиоцианатов, анионы, образующие прочные комплексы с индикатором.

- Прямое титрование стандартным раствором аммония тиоцианата используют для определения соединений, содержащих ионы серебра(I) , в присутствии индикатора, содержащего ионы железа(III). При титровании вначале образуется малорастворимое соединение ионов серебра(I) и раствора аммония тиоцианата, в конечной точке титрования избыточная капля титрованного раствора реагирует с индикатором, образуется комплекс, окрашивающий раствор в красный цвет:

Fe3+ + 3NCS– → [Fe(NCS)3]

- Обратное титрование по методу Фольгарда используют для определения галогенидов, йодидов и бромидов. К раствору испытуемого вещества-галогенида прибавляют точно отмеренный объем избытка титрованного раствора серебра нитрата, образуется осадок белого цвета. Непрореагировавший остаток (избыток) раствора серебра нитрата титруют стандартным раствором аммония тиоцианата в присутствии индикатора:

Ag++NCS– → AgNCS

- В конце титрования при добавлении избытка раствора аммония тиоцианата, испытуемый раствор окрашивается в красный цвет. При определении йодидов рекомендуется прибавлять индикатор в конце титрования. При определении хлоридов методом Фольгарда, для более четкого фиксирования конечной точки титрования, титрование необходимо проводить в присутствии органических растворителей.

- 3) Метод Фаянса − метод прямого аргенометрического определения галогенидов титрованным раствором серебра нитрата в слабокислой среде с применением адсорбционных индикаторов.

- Применение адсорбционных индикаторов основано на использовании коллоидных свойств галогенидов серебра, образующихся при аргентометрическом титровании галогенидов. В начале титрования галогениды серебра адсорбируют ионы галогена, находящиеся в избытке в растворе, приобретая при этом отрицательный заряд. В конце титрования, когда все галоген-ионы уже связаны, галогениды серебра теряют свой заряд и наблюдается процесс коагуляции. При прибавлении даже незначительного избытка раствора серебра нитрата галогениды серебра адсорбируют ионы серебра и заряжаются положительно. Заряженные частицы обладают высокой адсорбционной способностью и притягивают к себе окрашенный анион адсорбированного индикатора, образуя с ним малорастворимое соединение.

- Адсорбционные индикаторы представляют собой органические соединения, являющиеся слабыми кислотами. Анионы этих индикаторов, адсорбируясь на поверхности положительно заряженных коллоидных частиц, выпадающих при аргентометрии в виде осадков, вызывают изменение цвета поверхности этих осадков. Таким образом, адсорбционные индикаторы показывают изменение цвета не в растворе, а на поверхности коллоидного осадка, несущего положительный заряд. В качестве адсорбционных индикаторов применяют: бромфеноловый синий, бромкрезеловый синий – в уксуснокислой среде, эозинат натрия – в уксуснокислой среде, флуоресцеин – в нейтральной и слабо щелочной среде.

- Хлориды и бромиды можно титровать с бромфеноловым синим в уксусно-кислой среде от зелено-желтого до синего окрашивания, при титровании йодидов с этим индикатором в точке эквивалентности окрашивание будет зеленым. Йодиды с эозинатом натрия титруют до розового окрашивания осадка, галогениды с флуоресцеином − до розово-красного окрашивания осадка.

Меркуриметрия − титриметрический метод анализа, в частности осадительное титрование, в котором основным стандартным раствором является титрованный раствор ртути(II) нитрата. Метод основан на образовании устойчивых слабодиссоциированных (малорастворимых) комплексных соединений ртути(II) при взаимодействии титрованного раствора ртути(II) нитрата c галогенидами, тиоцианатами, цианидами в кислой среде, достигаемой прибавлением азотной кислоты. Меркуриметрию рассматривают как метод осадительного титрования, но так как в результате реакции образуются комплексные соединения, то и как разновидность комплексонометрического титрования. Фиксирование точки эквивалентности проводят индикаторным и безиндикаторным методом.

При прямом меркуриметрическом титровании раствор анализируемого вещества титруют стандартным раствором ртути(II) нитрата в азотнокислой среде. При взаимодействии с хлоридами, бромидами, цианидами и роданидами образуются слабо диссоциированные соединения, например:

Hg2+ + Cl– ↔ [Hg Cl]+ [Hg Cl]+ + Cl– ↔ HgCl2

После достижения точки эквивалентности, когда ионы испытуемого вещества полностью прореагируют с титрованным раствором, появляются избыточные ионы ртути(II), которые обнаруживают при помощи соответствующего индикатора, образующего с избытком ионов ртути(II), характерные соединения: дифенилкарбазон или дифенилкарбазид, окрашенные в сине-фиолетовый цвет; раствор нитропруссида натрия − образует осадок белого цвета.

В случае титрования йодидов точку эквивалентности (конечную точку титрования) устанавливают безиндикаторным способом − по образованию неисчезающей мути ртути(II) йодида от розового до красного цвета:

Hg2+ + 4I– ↔ [HgI4]2– Hg2+ + [HgI4]2 ↔ 2HgI2

При меркуриметрическом титровании необходимо обратить внимание на создание оптимального значения рН среды для определяемого вещества.

Сульфатометрия − титриметрический метод анализа, относящийся к осадительному титрованию, в котором основным стандартным раствором является титрованный раствор серной кислоты, предназначенный для определения бария(II) в соединениях бария. Метод прямой сульфатометрии основан на реакции осаждения бария(II) и образования малорастворимого осадка сульфата бария при взаимодействии с титрованным раствором серной кислоты.

Ва2+ + SO42– → BaSO4↓

Окончание титрования фиксируют индикаторным методом. Применяют металлохромные индикаторы из группы азокрасителей — нитхромазо (нитроортаниловый С), ортаниловый А. Эти индикаторы в растворе окрашены в розовый цвет, а их комплексы с катионом бария(II) − в фиолетовый. При титровании растворов, содержащих соединения бария(II) титрованным раствором серной кислоты первоначальная фиолетовая окраска раствора, обусловленная присутствием комплексов бария с индикатором, вблизи точки эквивалентности переходит в розовую, вследствие разрушения комплексов при их взаимодействии с титрантом − серной кислотой.

Бариметрия − титриметрический метод анализа, в котором основным стандартным раствором является титрованный раствор бария хлорида, предназначенный для определения серной кислоты, сульфатов. Испытуемый раствор, содержащий сульфаты, титруют стандартным раствором бария хлорида с использованием индикаторов, указанных в сульфатометрии, при этом изменение окраски раствора происходит из розовой в фиолетовую.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0030 Вольтаметрическое титрование

Вводится впервые

Вольтаметрическое титрование является методом количественного анализа, при котором конечная точка титрования определяется по изменению напряжения между погружёнными в анализируемый раствор электродами (один индикаторный и один электрод сравнения или два индикаторных электрода) в зависимости от количества прибавляемого титранта.

###### Оборудование

Прибор для вольтаметрического титрования состоит из электрохимической ячейки, представляющей собой источник регулируемого тока; микроамперметра и электродной пары, погружённой в анализируемый раствор. В качестве электродов обычно используют инертные электроды – платиновый, графитовый, а также сделанный из этих материалов вращающийся дисковый электрод.

###### Методика

Настраивают ток на индикаторном электроде, как указано в фармакопейной статье, строят график зависимости начального напряжения и значений, полученных при титровании в зависимости от количества прибавляемого титранта. Предполагаемой точке эквивалентности соответствует резкое изменение напряжения, наблюдаемое в ходе титрования. Титрование проводят при непрерывном перемешивании анализируемого раствора и продолжают после достижения предполагаемой точки эквивалентности не менее чем тремя равными количествами титранта. С двух сторон от точки эквивалентности на прямой должно находиться не менее трёх точек. Конечной точкой титрования является точка пересечения двух прямых.

При вольтаметрическом титровании с двумя индикаторными электродами регистрируют всю кривую титрования и используют для определения конечной точки титрования.

Конкретные параметры – тип индикаторного электрода, потенциал индикаторного электрода (или разность потенциалов двух индикаторных электродов), электрод сравнения, массу анализируемого вещества, тип и концентрацию титранта – указывают в фармакопейных статьях.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0031 Амперометрическое титрование

Взамен ОФС.1.2.1.19.0001.15

Амперометрическое титрование является методом количественного анализа, при котором конечная точка титрования определяется по изменению тока между погружёнными в анализируемый раствор электродами в зависимости от количества прибавляемого титранта. Один из электродов – индикаторный, второй – электрод сравнения, обладающий постоянным потенциалом. Напряжение, накладываемое на электроды, должно быть таким, чтобы потенциал индикаторного электрода обеспечивал предельный диффузионный ток, обусловленный разрядом электрохимически активных соединений, участвующих в титриметрической реакции.

Разновидностью метода является использование пары идентичных индикаторных электродов небольшой поверхности (обычно платиновые или золотые), находящихся под напряжением, достаточным для протекания катодного и анодного процессов при наличии в растворе окислительно-восстановительной пары. Этот вид титрования рекомендуется при йодометрическом и нитритометрическом определении, а также при определении воды по методу К. Фишера.

###### Оборудование

Прибор для амперометрического титрования состоит из электрохимической ячейки, представляющей собой источник постоянного тока с регулируемым напряжением; микроамперметра и электродной пары, погружённой в анализируемый раствор. В качестве индикаторного электрода обычно используют инертные электроды – платиновый, золотой, ртутный капельный, графитовый или стеклоуглеродный, а также сделанный из этих материалов вращающийся дисковый электрод. В качестве электрода сравнения обычно используют каломельный или хлорсеребряный электрод.

При титровании в средах с большим сопротивлением может использоваться трёхэлектродная схема. Напряжение накладывается на индикаторный и вспомогательный электроды, а требуемый потенциал индикаторного электрода устанавливается относительно электрода сравнения.

###### Методика

При амперометрическом титровании устанавливают потенциал индикаторного электрода, обеспечивающий протекание электрохимической реакции, и регистрируют величину тока в зависимости от количества прибавленного титранта. Предполагаемой точке эквивалентности соответствует резкое изменение роста или падения диффузионного тока. Титрование проводят при непрерывном перемешивании анализируемого раствора и продолжают после достижения предполагаемой точки эквивалентности не менее чем тремя равными количествами титранта. С двух сторон от точки эквивалентности на прямой должно находиться не менее трёх точек. Конечной точкой титрования является точка пересечения двух прямых.

При амперометрическом титровании с двумя индикаторными электродами регистрируют всю кривую титрования и используют для определения конечной точки титрования.

Конкретные параметры – тип индикаторного электрода, потенциал индикаторного электрода (или разность потенциалов двух индикаторных электродов), электрод сравнения, амперометрический индикатор и коррекцию сила тока с поправкой на разбавление раствора (в случае необходимости), массу анализируемого вещества, тип и концентрацию титранта – указывают в фармакопейных статьях.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0032 Потенциометрическое титрование

Взамен ОФС.1.2.1.19.0002.15

Потенциометрическое титрование является методом количественного анализа, при котором конечная точка титрования определяется по изменению потенциала индикаторного электрода в зависимости от количества прибавляемого титранта.

###### Оборудование

Потенциал индикаторного электрода обычно измеряют при нулевом или практически нулевом токе. Наиболее удобно использовать для этих целей высокоомный потенциометр (рН-метр).

В качестве индикаторного электрода при кислотно-основном титровании чаще всего используют стеклянный электрод, при окислительно-восстановительном титровании – платиновый электрод, в комплексонометрическом титровании – ионоселективный электрод, а в реакциях осаждения – серебряный или сульфидсеребряный электрод.

Второй электрод электродной пары, погруженной в анализируемый раствор, является электродом сравнения, обладающим постоянным потенциалом. Обычно в качестве электрода сравнения используют каломельный или хлорсеребряный электроды.

В случаях, когда ионы, диффундирующие из электрода сравнения, мешают титрованию или при титровании в неводных средах, электрод сравнения отделяют от анализируемого раствора электролитическим мостиком. Если титрование проводится при постоянном значении рН, в качестве электрода сравнения можно использовать стеклянный электрод.

Потенциометрическое титрование может быть автоматизировано с использованием автотитраторов, способных проводить математический анализ кривой титрования или останавливать прибавление титранта при достижении значения потенциала индикаторного электрода, отвечающего точке эквивалентности.

###### Методика

При потенциометрическом титровании регистрируют потенциал индикаторного электрода относительно электрода сравнения в зависимости от количества прибавленного титранта, а титрование продолжают после достижения предполагаемой точки эквивалентности. Конечной точке титрования отвечает максимальное значение изменения потенциала (∆Е) к приращению объёма прибавленного титранта (∆V). Конечную точку титрования находят графически методом касательных по кривой зависимости потенциала индикаторного электрода от количества прибавленного титранта или расчётным методом по максимальному значению ∆Е/∆V, или по точке разрыва (смене знака) второй производной ∆(∆Е/∆V).

При потенциометрическом титровании слабой кислоты или основания с использованием неводных растворителей, при необходимости, проводят контрольный опыт или предварительно нейтрализуют смесь растворителей. Если использование для этих целей потенциометрического детектирования нецелесообразно, смесь растворителей может быть предварительно нейтрализована путем титрования с использованием подходящего индикатора. Некоторые примеры приведены в таблице 1.

Таблица 1. Индикаторы, подходящие для нейтрализации смеси растворителей
Титрант | Индикатор
--- | ---
0,1 М или 0,05 М раствор хлорной кислоты | Кристаллического фиолетового раствор 0,5 % или 0,1 %
0,1 М раствор тетрабутиламмония гидроксида | Тимолового синего метанольный раствор 0,3 %
0,1 М раствор натрия гидроксида этанольный | Тимолфталеина раствор 0,1 %

Конкретные параметры – тип индикаторного электрода, электрод сравнения, тип и концентрацию титранта, навеску анализируемого вещества, растворитель или смесь растворителей и их точный объём – указывают в фармакопейных статьях.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0033 Определение метокси- и этоксигрупп

Вводится впервые

Метод определения метокси- и этоксигрупп основан на способности простых метиловых и этиловых эфиров гидролизоваться под действием йодистоводородной кислоты с образованием йодметана или йодэтана (1). Йодметан или йодэтан поглощаются раствором брома в уксусной кислоте в присутствии натрия ацетата раствора 25 %. Полученный йодметан или йодэтан, присоединяя бром, дают неустойчивый йоддибромид, распадающийся на бромйод и бромистый метан или бромистый этан (2). Бромйод в присутствии щелочей окисляется бромом до йодноватой кислоты (3). Избыток брома разлагают муравьиной кислотой до бромистоводородной кислоты (4), а йодноватую кислоту восстанавливают калия йодидом до йода (5), который титруют раствором натрия тиосульфата. Схема реакций для соединений, содержащих этоксигруппы, аналогична.

Испытание применяют для количественного определения метокси- и этоксигрупп в лекарственных средствах методом титриметрии.

###### Оборудование

Устройство для определения метоксигрупп (рис. 1) состоит из:

- круглодонной колбы (а), снабжённой капиллярным боковым рукавом для подвода углерода диоксида или азота;

- обратного холодильника (б);

- ловушки (в) для отделения йодметана от йодистого водорода, соединённой с круглодонной колбой через обратный холодильник;

- приёмника (г) для поглощения йодметана раствором брома в уксусной кислоте после прохождения через ловушку;

- дополнительного приёмника (д), необходимого на случай проскока йодистого метила, соединённого через отводную трубку с приёмником, и содержащего раствор брома в уксусной кислоте;

- прибора, регулирующего давление, через который проводят углерода диоксид или азот, подсоединённого к колбе через капилляр, содержащий маленький ватный тампон.

Примечание – Следует избегать использования органических растворителей для очистки аппаратуры, так как их следовые остатки могут влиять на определение.

Рисунок 1. Устройство для определения метоксигрупп: а – круглодонная колба; б – обратный холодильник; в – ловушка; г – приёмник; д – дополнительный приёмник.

###### Методика

Раствор брома в уксусной кислоте. Растворяют 100 г калия ацетата в 1000 мл смеси уксусный ангидрид—уксусная кислота ледяная 1:9. В день использования к 145 мл полученного раствора прибавляют 5 мл брома.

Взвешивают испытуемый образец в тарированной желатиновой капсуле и помещают в круглодонную колбу (а) вместе с несколькими кусочками необожжённого фарфора («кипятильниками»), прибавляют 6 мл йодистоводородной кислоты и подсоединяют колбу к обратному холодильнику (б), герметизируя все шлифованные соединения минимальным количеством силиконовой смазки. Ловушку (в) наполовину заполняют водой. В приёмник (г) помещают 7 мл раствора брома в уксусной кислоте, в дополнительный приёмник (д) – 3 мл раствора брома в уксусной кислоте. Пропускают через прибор углерода диоксид или азот
со скоростью 2 пузырька в секунду; помещают круглодонную колбу в масляную баню или нагревательный кожух, нагретый до 150 °С и продолжают реакцию в течение 40 мин для определения метоксигрупп или 80 мин для определения этоксигрупп. Сливают содержимое приёмника и дополнительного приёмника в коническую колбу вместимостью 500 мл, содержащую 10 мл натрия ацетата раствора 25 %. Промывают трубку водой, собирая промывочные растворы в коническую колбу, и доводят объём раствора водой до 125 мл. Прибавляют по каплям при интенсивном перемешивании муравьиную кислоту до исчезновения, вызываемого бромом красно-коричневого окрашивания, и 3 дополнительные капли муравьиной кислоты 85 % (всего обычно требуется от 12 до 15 капель). Выдерживают раствор в течение 3 мин, прибавляют 15 мл серной кислоты разведённой 9,8 % и 3 г калия йодида, незамедлительно титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата, используя в качестве индикатора 3 мл крахмала раствора 1 %.

Параллельно проводят контрольный опыт с использованием желатиновой капсулы без испытуемого образца.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0034Определение спирта этилового в лекарственных средствах

Взамен ОФС.1.2.1.0016.15

Спирт этиловый в лекарственных средствах, в зависимости от их состава и физико-химических свойств, может быть определен методом дистилляции (метод 1) с последующим определением плотности с помощью пикнометра, плотномера или ареометра, или методом газовой хроматографии (метод 2). Метод количественного определения спирта этилового должен быть указан в фармакопейной статье на лекарственное средство. Содержание спирта этилового может быть выражено в объёмных или массовых процентах.

Требования данной общей фармакопейной статьи распространяются на субстанции (настойки, экстракты жидкие и др.) и лекарственные препараты, представленные в жидких лекарственных формах (настойки, экстракты, растворы спиртовые и др.), содержащие в своем составе спирт этиловый.

###### Метод 1

Метод дистилляции заключается в отделении спирта этилового от растворенных в нём веществ.

Устройства для определения спирта этилового в лекарственных средствах представлены на рис. 1 и 2.

Определение плотности с помощью пикнометра или плотномера

В круглодонную колбу (1) (рис. 1) вместимостью 200 – 250 мл вносят точно отмеренное количество лекарственного средства. При содержании спирта в лекарственном средстве до 20 % для определения берут 75 мл лекарственного средства, при содержании от 20 до 50 % – 50 мл, при содержании от 50 % и выше – 25 мл; перед перегонкой лекарственное средство разбавляют водой до 75 мл.

Колбу присоединяют к горизонтально расположенному прямому холодильнику (3) с аллонжем (4), направляющим дистиллят в приёмник – мерную колбу вместимостью 50 мл (5), желательно помещённую в стакан с холодной водой.

Рисунок 1. Схема устройства для определения содержания спирта этилового: 1 – круглодонная колба; 2 – термометр; 3 – холодильник; 4 – аллонж; 5 – приёмник; 6 – электронагреватель.

Нагревают перегонную колбу на электронагревателе (6). Для равномерного кипения в колбу с испытуемым раствором помещают капилляры, пемзу или кусочки прокалённого фарфора. Температуру паров измеряют термометром (2), размещённым в приборе таким образом, чтобы ртутный шарик располагался на 0,5–1,0 см ниже отверстия отводной трубки. При соблюдении температурных пределов перегонки достигается равномерное кипение испытуемого раствора. Если испытуемый раствор при перегонке сильно пенится, то прибавляют 2 – 3 мл концентрированной фосфорной или серной кислоты, кальция хлорид, парафин, воск (2–3 г).

В мерную колбу вместимостью 50 мл собирают 48 мл дистиллята, охлаждают до температуры 20 ºС и доводят объём раствора водой до метки.

Плотность дистиллята определяют с помощью пикнометра или плотномера и по алкоголеметрическим таблицам находят содержание спирта этилового в объёмных процентах.

Содержание спирта этилового в лекарственном средстве в объёмных процентах (Х) вычисляют по формуле:

(1)

где 50 - объём дистиллята, мл;
a – содержание спирта этилового в дистилляте, % (о/о);
b – объём испытуемого лекарственного средства, взятый для перегонки, мл.

В тех случаях, когда при дистилляции удаляются летучие вещества, отличные от спирта этилового и воды, следует проводить предварительную обработку в соответствии с указаниями в фармакопейной статье.

При содержании в лекарственном средстве эфирных масел, хлороформа, этилового эфира, камфоры к нему добавляют в делительной воронке равные объёмы насыщенного раствора натрия хлорида и петролейного эфира. Смесь взбалтывают в течение 3 мин. После разделения слоёв спиртоводный слой сливают в другую делительную воронку и обрабатывают таким же образом половинным количеством петролейного эфира. Спиртоводный слой сливают в колбу для перегонки. Объединённые эфирные извлечения взбалтывают с половинным количеством насыщенного раствора натрия хлорида и присоединяют к жидкости, находящейся в колбе для перегонки.

Если лекарственное средство содержит менее 30 % спирта этилового, то высаливание проводят не раствором, а 10 г сухого натрия хлорида.

При содержании в лекарственном средстве летучих кислот их нейтрализуют раствором щёлочи, а при содержании летучих оснований – фосфорной или серной кислотами.

Лекарственные средства, содержащие свободный йод, перед дистилляцией обрабатывают до обесцвечивания цинковой пылью или рассчитанным количеством сухого натрия тиосульфата. Для связывания летучих сернистых соединений к лекарственному средству прибавляют несколько капель 10 % раствора натрия гидроксида.

Определение плотности с помощью ареометра

В круглодонную колбу (1) вместимостью 500 мл (рис. 2) помещают 50,0 мл лекарственного средства, отобранного при температуре 20 ± 0,1 °С, прибавляют 200 – 300 мл воды и несколько кусочков пемзы.

Рисунок 2. Схема устройства для определения содержания спирта этилового (размеры приведены в миллиметрах): 1 – круглодонная колба; 2 – дистилляционная головка с переходником; 3 – вертикальный холодильник; 4 – трубка холодильника; 5 – мерная колба.

Присоединяют дистилляционную головку с переходником (2) и холодильник (3), снабжённый в нижней части трубкой (4), через которую дистиллят подаётся в нижнюю часть мерной колбы (5) вместимостью 250 мл. Мерная колба погружается в смесь льда и воды. Отгоняют и собирают в мерную колбу вместимостью 250 мл не менее 180 мл дистиллята. Дистиллят охлаждают до 20±0,1 °С и доводят объём раствора водой с температурой 20±0,1 °С до метки.

Дистиллят переносят в цилиндр, диаметр которого должен превышать ширину корпуса ареометра не менее чем на 6 мм. В случае недостаточности объёма дистиллята, количество образца удваивают и доводят объём дистиллята водой с температурой 20±0,1 °С до 500,0 мл. Вносят поправку на разведение, умножая найденное по алкоголеметрическим таблицам значение содержания спирта этилового в процентах на 5. Содержание спирта этилового, рассчитанное по алкоголеметрическим таблицам, округляют до десятичного знака.

###### Метод 2

Методика 1

Внутренний стандарт. Пропанол.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают точно отмеренное количество испытуемого лекарственного средства, достаточное для получения раствора, содержащего 4–6 % (о/о) спирта этилового, прибавляют 5,0 мл внутреннего стандарта, перемешивают и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл спирта этилового (не менее 96 %) и 5,0 мл внутреннего стандарта, перемешивают и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 0,4 см, дивинилбензол / этилвинилбензол (площадь поверхности 500 – 600 м2/г), дивинилбензол / этилвинилбензол (площадь поверхности 500 – 600 м2/г); |  |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | азот для хроматографии или гелий для хроматографии; |  |
Скорость потока | 30 мл/мин; |  |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Температура колонки | 150 °С; |  |
Температура испарителя | 170 °С; |  |
Температура детектора | 170 °С. |  |

Хроматографируют по 1–2 мкл испытуемого раствора и раствора сравнения.

Содержание спирта этилового в лекарственном средстве в объёмных процентах (Х) рассчитывают по формуле:

(2)

где S - площадь пика спирта этилового на хроматограмме испытуемого раствора;
S' – площадь пика спирта этилового на хроматограмме раствора сравнения;
S0 – площадь пика внутреннего стандарта на хроматограмме испытуемого раствора;
S'0 – площадь пика внутреннего стандарта на хроматограмме раствора сравнения;
V – объём лекарственного средства, взятый для анализа, мл;
P – содержание спирта этилового в стандартном образце, %.

Проверка пригодности хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения разрешение (RS) между пиками спирта этилового и пропанола должно быть не менее 2,0;

Методика 2

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл пропанола и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают объём лекарственного средства, соответствующий 1 г этанола и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл этанола безводного и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл метанола для хроматографии и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения В. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора внутреннего стандарта, прибавляют 1,0 мл раствора сравнения А, 2,0 мл раствора сравнения Б и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | колонка кварцевая размером 30 м × 0,53 мм, покрытая пленкой поли [(цианопропил) (фенил)] [диметил]силоксана толщиной 3 мкм; |  |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:50; |  |
Скорость потока | 3 мл/мин. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура (°С)
--- | --- | ---
Колонка | 0–1,6 | 40
1,6–9,9 | 40 → 65
9,9–13,6 | 65 → 175
13,6–20 | 175
Блок ввода проб |  | 200
Детектор |  | 200

Хроматографируют по 1,0 мкл раствора сравнения В и испытуемого раствора.

Относительное время удерживания соединений. Этанол – 1 (около 5,3 мин); метанол – около 0,8; пропанол – около 1,6.

Проверка пригодности хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения В разрешение (RS) между пиками метанола и этанола должно быть не менее 5,0.

Содержание спирта этилового в лекарственном средстве в объёмных процентах (X) рассчитывают по формуле:

(3)

где S1 - площадь пика спирта этилового на хроматограмме испытуемого раствора;
S2 – площадь пика спирта этилового на хроматограмме раствора сравнения В;
S'1 – площадь пика внутреннего стандарта на хроматограмме испытуемого раствора;
S'2 – площадь пика внутреннего стандарта на хроматограмме раствора сравнения В;
V1 – объём лекарственного средства в испытуемом растворе, мл.

Методика 3

Данная методика подразумевает использование парофазного пробоотборника.

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл пропанола и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают объём лекарственного средства, соответствующий 0,4 г этанола и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, прибавляют 1,0 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объём раствора водой до метки. Во флакон для инъекций помещают 2,0 мл полученного раствора.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл этанола безводного и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл данного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,5 мл раствора сравнения А, прибавляют 1,0 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объём раствора водой до метки. Во флакон для инъекций помещают 2,0 мл полученного раствора.

Раствор сравнения В. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения А, прибавляют 1,0 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объём раствора водой до метки. Во флакон для инъекций помещают 2,0 мл полученного раствора.

Раствор сравнения Г. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,5 мл раствора сравнения А, прибавляют 1,0 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объём раствора водой до метки. Во флакон для инъекций помещают 2,0 мл полученного раствора.

Раствор сравнения Д. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл метанола для хроматографии и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения Е. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора внутреннего стандарта, прибавляют 2,0 мл раствора сравнения А, 2,0 мл раствора сравнения Д и доводят объём раствора водой до метки. Во флакон для инъекций помещают 2,0 мл данного раствора.

Немедленно закрывают флаконы для инъекций плотной резиновой мембранной пробкой, покрытой политетрафторэтиленом, закрепляют алюминиевой обжимной крышкой.

Хроматографируют на газовом хроматографе с пламенно-ионизационным детектором.

Хроматографические условия

Колонка | колонка кварцевая размером 30 м х 0,53 мм, покрытая пленкой поли[(цианопропил)(фенил)] [диметил]силоксана толщиной 3 мкм; |  |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:50; |  |
Скорость потока | 3 мл/мин. |  |
Условия для парофазного пробоотборника:
Температура уравновешивания | 85 °С; |  |
Время уравновешивания | 20 мин. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура (°С)
--- | --- | ---
Колонка | 0–1,6 | 40
1,6–9,9 | 40 → 65
9,9–13,6 | 65 → 175
13,6–20 | 175
Блок ввода проб |  | 200
Детектор |  | 200

Хроматографируют по 1,0 мл газовой фазы над испытуемым раствором, растворами сравнения Б, В, Г и Е.

Относительное время удерживания соединений Этанол – 1 (около 5,3 мин); метанол – около 0,8; 1-пропанол – около 1,6.

Проверка пригодности хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения Е разрешение (RS) между пиками метанола и этанола должно быть не менее 5,0.

Строят калибровочный график, откладывая по оси абсцисс концентрацию спирта этилового в растворах сравнения Б, В, Г и Е, а по оси ординат – средние значения отношений площадей пиков этанола и внутреннего стандарта на соответствующих хроматограммах.

Рассчитывают содержание спирта этилового в лекарственном средстве в объёмных процентах.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.2.3.0035 Определение уксусной кислоты в синтетических пептидах

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на определение уксусной кислоты в лекарственных средствах синтетических пептидов.

###### Область применения

Испытание проводят для установления количественного содержания уксусной кислоты в синтетических пептидах с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии.

###### Методика

Приготовление растворов

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,7 мл фосфорной кислоты концентрированной. Доводят объём раствора водой до метки и перемешивают. Значение рН полученного раствора доводят до 3,00 натрия гидроксида раствором концентрированным.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Растворитель. ПФБ—ПФА 5:95.

Испытуемый раствор. Готовят, как указано в фармакопейной статье.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мл растворителя, прибавляют 10 мг (точная навеска) стандартного образца уксусной кислоты ледяной, доводят объём раствора тем же растворителем до метки и перемешивают (0,1 мг/мл).

Проверка пригодности хроматографической системы. Хроматографическая система считается пригодной, если выполняются следующие условия:

- фактор асимметрии пика (AS) пика уксусной кислоты на хроматограмме стандартного раствора должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение (RSD) площади пика уксусной кислоты на хроматограмме стандартного раствора должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику уксусной кислоты на хроматограмме стандартного раствора, должна быть не менее 500 теоретических тарелок.

Условия хроматографирования

Колонка | 250 мм × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии (С18), 5 мкм |  |
Скорость потока, мл/мин | 1,2 |  |
Температура колонки, °С | 25 |  |
Детектор | спектрофотометрический |  |
Длина волны, нм | 210 |  |
Объём вводимой пробы, мкл | 10 |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФ А, об.% | ПФ Б, об.%
--- | --- | ---
0–5 | 95 | 5
5–10 | 95 → 50 | 5 → 50
10–20 | 50 | 50
20–22 | 50 → 95 | 50 → 5
22–30 | 95 | 5

Время удерживания уксусной кислоты около 3-4 мин. Базовая линия представляет собой крутой подъём в начале линейного градиента, который соответствует выходу пептидов из колонки.

Хроматографируют испытуемый и стандартный растворы.

Содержание уксусной кислоты в лекарственных средствах в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S – площадь пика уксусной кислоты на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика уксусной кислоты на хроматограмме стандартного раствора;
С – концентрация испытуемого раствора, мг/мл;
С0 – концентрация уксусной кислоты в стандартном растворе, мг/мл.

#### 1.2.4. Биологические испытания

### 1.3. Реактивы

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.3.0001 Реактивы. Индикаторы

Взамен ОФС.1.3.0001.15

ABTS (диаммония соль). См. Диаммония 2,2′-азинобис(3-этилбензотиазолин-6-сульфонат).

HEPES. [7365-45-9]. C8H18N2O4S. (М.м. 238,30).

2-[4-(2-Гидроксиэтил)пиперазин-1-ил]этансульфоновая кислота.

Белый или почти белый порошок.

Температура плавления. Около 236 °С (с разложением).

MTS. См. Тетразолия соль.

MTT. См. Тетразолия бромид.

Агар. Cмесь полисахаридов агарозы и агаропектина, получаемая путем экстракции из красных и бурых водорослей. Пористые пластины толщиной не более 20 мм или пленки толщиной не более 0,5 мм белого или светло-жёлтого цвета; допускается слегка сероватый оттенок.

Потеря в массе при высушивании не более 20%.

Содержание тяжелых металлов не более 40 ррm Рb.

Агароза для хроматографии. [9012-36-6].

Линейный полисахарид, получаемый из агара. 4% суспензия в воде набухших гранул диаметром от 60 до 140 мкм. Используют в гель-хроматографии для разделения белков с молекулярными массами от 6·104 до 20·106 и полисахаридов с молекулярными массами от 3·103 до 5·106.

Агароза поперечно-сшитая для хроматографии (1). [61970-08-9].

Получают из агарозы реакцией с 2,3-дибромпропанолом в сильно щелочной среде.

4% суспензия в воде набухших гранул диаметром от 60 до 140 мкм. Используют в гель-хроматографии для разделения белков с молекулярными массами от 6·104 до 20·106 и полисахаридов с молекулярными массами от 3·103 до 5·106.

Агароза поперечно-сшитая для хроматографии (2). [65099-79-8].

Получают из агарозы реакцией с 2,3-дибромпропанолом в сильно щелочной среде.

4% суспензия в воде набухших гранул диаметром от 60 до 140 мкм. Используют в гель-хроматографии для разделения белков с молекулярными массами от 7·104 до 40·106 и полисахаридов с молекулярными массами от 1·105 до 2·107.

Агароза для электрофореза. [9012-36-6].

Нейтральный линейный полисахарид, основной компонент которого получают из агара.

Порошок белого или почти белого цвета.

Практически нерастворима в холодной воде, очень мало растворима в горячей воде.

Агароза-ДЭАЭ для ионообменной хроматографии. [57407-08-6].

Поперечно-сшитая агароза с замещенными диэтиламиноэтильными группами в виде шарообразных гранул.

Агароза/поперечно-сшитый полиакриламид

Агароза в поперечно-сшитой полиакриламидной матрице. Используют для разделения глобулярных белков с молекулярными массами от 2·104 до 35·104.

Адамантан. [281-23-2]. С10Н16. (М.м. 136,23).

Адамантан.

Содержит не менее 99,0% С10Н16.

Температура плавления. От 209 до 212 °С (возгоняется).

Адамантанол. [768-95-6]. С10Н16O. (М.м. 152,23).

Адамантан-1-ол.

Содержит не менее 99,0% С10Н16O.

Температура плавления. От 245 до 247 °С (возгоняется).

Аденозин. [58-61-7]. С10Н13N5O4. (М.м. 267,24).

6-Амино-9-(β-D-рибофуранозил)-9Н-пурин.

Кристаллический порошок белого цвета.

Мало растворим в воде, практически нерастворим в ацетоне, спирте 96% и эфире; растворяется в разведённых растворах кислот.

Температура плавления. Около 234 °С.

Адипиновая кислота. [124-04-9]. С6Н10O4. (М.м. 146,14).

Гександиовая кислота.

Содержит не менее 99,0% С6Н10O4.

Кристаллы в виде призм.

Легко растворима в метаноле, растворима в ацетоне, практически нерастворима в петролейном эфире.

Температура плавления. Около 152 °С.

Азометин Н. [5941-07-1]. С17Н12NNaO8S2. (М.м. 445,4).

4-Гидрокси-5-{[(2-гидроксифенил)метилиден]амино}нафталин-2,7-дисульфонат натрия (1:1).

Бесцветный или белый кристаллический порошок.

Растворим в воде и спирте 96%.

Азометин Н раствор

0,45 г азометина Н и 1 г аскорбиновой кислоты растворяют в воде при слабом нагревании и доводят объём раствора тем же растворителем до 100 мл.

Азот. [7727-37-9]. N2. (М.м. 28,01). Азот.

Азот промытый и высушенный.

Азот особой чистоты. [7727-37-9].

Содержит не менее 99,999% (о/о) N2.

Углерода монооксид. Не более 5 ppm.

Кислород. Не более 5 ppm.

Азот для хроматографии. [7727-37-9]. Содержит не менее 99,95% (о/о) N2.

Азот, свободный от кислорода. [7727-37-9]. Азот очищают от кислорода пропусканием через раствор пирогаллола щелочной.

Азота закись. [10024-97-2]. N2О. (М.м. 44,01).

Оксид диазота.

Содержит не менее 99,99% (о/о) N2О.

Азота монооксид. Не более 1 ppm.

Углерода монооксид. Не более 1 ppm.

Азота монооксид. [10102-43-9]. NО. (М.м. 30,01).

Оксид азота(II).

Содержит не менее 98,0% (о/о) NО.

Азотная кислота

Содержит 31–34% (м/м) HNO3.

Смешивают 1 г азотной кислоты концентрированной и 1 г воды.

Плотность. 1,186–1,210.

Азотная кислота дымящая

Содержит 95–98% (м/м) HNO3.

Прозрачная жидкость, слегка желтоватого цвета, дымящая на воздухе.

. Около 1,5.

Азотная кислота концентрированная. [7697-37-2]. НNО3. (М.м. 63,01).

Азотная кислота.

Содержит не менее 63,0% (м/м) и не более 70,0% (м/м) НNО3.

Прозрачная, бесцветная или почти бесцветная жидкость, смешивается с водой.

. От 1,384 до 1,416.

Прозрачность. Азотная кислота должна быть прозрачной.

Цветность. Окраска азотной кислоты должна быть не интенсивнее эталона Y6.

Хлориды. Не более 0,00005% (0,5 ppm). К 5 г азотной кислоты концентрированной прибавляют 10 мл воды и 0,3 мл 1,7% раствора серебра нитрата, выдерживают в течение 2 мин в защищённом от света месте. Полученный раствор должен выдерживать испытание на хлориды. Эталон готовят с использованием смеси 13 мл воды, 0,5 мл азотной кислоты концентрированной, 0,5 мл эталонного раствора хлорида (5 ppm Cl) и 0,3 мл 1,7% раствора серебра нитрата.

Сульфаты. Не более 0,0002% (2 ppm). К 10 г азотной кислоты концентрированной прибавляют 0,2 г натрия карбоната и выпаривают досуха; остаток растворяют в 15 мл воды дистиллированной. Полученный раствор должен выдерживать испытание на сульфаты. Эталон готовят с использованием 2 мл эталонного раствора сульфата (10 ppm SO4) и 13 мл воды дистиллированной.

Мышьяк (метод А). Не более 0,000002% (0,02 ppm). К 50 г азотной кислоты концентрированной прибавляют 0,5 мл серной кислоты концентрированной и осторожно выпаривают до появления белых паров; к остатку прибавляют 1 мл 10% раствора гидроксиламина гидрохлорида и доводят водой до 2 мл. Полученный раствор должен выдерживать испытание на мышьяк. Эталон готовят с использованием 1,0 мл эталонного раствора мышьяка (1 ppm Аs).

Тяжёлые металлы. Не более 0,0002% (2 ppm). 10 мл раствора, приготовленного для испытания на железо, доводят водой до 20 мл. 12 мл полученного раствора должны выдерживать испытание на тяжелые металлы. Эталон готовят с использованием эталонного раствора свинца (2 ppm Рb).

Железо. Не более 0,0001% (1 ppm). Осадок, полученный при испытании на сульфатную золу, растворяют в 1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3% и доводят объём раствора водой до 50 мл. 5 мл полученного раствора доводят водой до объёма 10 мл. Полученный раствор должен выдерживать испытание на железо.

Сульфатная зола. Не более 0,001%. 100 г кислоты азотной концентрированной осторожно выпаривают досуха; остаток смачивают несколькими каплями серной кислоты концентрированной и нагревают до бледно-красного цвета.

Количественное определение. К 1,50 г кислоты азотной концентрированной прибавляют около 50 мл воды и титруют 1 М раствором натрия гидроксида, используя в качестве индикатора 0,1 мл 0,05% раствора метилового красного.

1 мл 1 М раствора натрия гидроксида соответствует 63,0 мг НNO3.

Хранят в защищённом от света месте.

Азотная кислота, свободная от свинца

Азотная кислота концентрированная должна выдерживать следующее дополнительное испытание.

К 100 г азотной кислоты концентрированной прибавляют 0,1 г натрия карбоната безводного и выпаривают досуха; остаток растворяют в воде при слабом нагревании и доводят объём раствора тем же растворителем до 50,0 мл. Содержание свинца определяют методом атомно-абсорбционной спектрометрии. Интенсивность поглощения измеряют при длине волны 283,3 нм или 217,0 нм, используя в качестве источника излучения лампу с полым свинцовым катодом и воздушно-ацетиленовое пламя. Не более 0,00001% (0,1 ррm Pb).

Азотная кислота, свободная от свинца и кадмия

Азотная кислота концентрированная должна выдерживать следующие дополнительные испытания.

Испытуемый раствор. К 100 г азотной кислоты концентрированной прибавляют 0,1 г натрия карбоната безводного, выпаривают досуха; остаток растворяют в воде при слабом нагревании и доводят объём раствора тем же растворителем до 50,0 мл.

Кадмий. Не более 0,00001% (0,1 ррm). Содержание кадмия определяют методом атомно-абсорбционной спектрометрии. Интенсивность поглощения измеряют при длине волны 228,8 нм, используя в качестве источника излучения лампу с полым кадмиевым катодом и воздушно-ацетиленовое или воздушно-пропановое пламя.

Свинец. Не более 0,00001% (0,1 ррm). Содержание свинца определяют методом атомно-абсорционной спектрометрии. Интенсивность поглощения измеряют при длине волны 283,3 нм или 217,0 нм, используя лампу с полым свинцовым катодом и воздушно-ацетиленовое пламя.

Азотная кислота, свободная от тяжёлых металлов

Азотная кислота концентрированная должна выдерживать следующие дополнительные требования.

Железо. Не более 0,02 ppm.

Кадмий. Не более 0,005 ppm.

Медь. Не более 0,001 ppm.

Мышьяк. Не более 0,005 ppm.

Никель. Не более 0,005 ppm.

Ртуть. Не более 0,002 ppm.

Свинец. Не более 0,001 ppm.

Цинк. Не более 0,01 ppm.

Азотная кислота разведённая 50%

Содержит около 500 г/л HNO3.

80 г азотной кислоты концентрированной доводят водой до 100 мл.

Азотная кислота разведённая 25%

Содержит около 250 г/л HNO3.

40 г азотной кислоты концентрированной доводят водой до 100 мл.

Азотная кислота разведённая 20%

Содержит около 200 г/л HNO3.

32 г азотной кислоты концентрированной доводят водой до 100 мл.

Азотная кислота разведённая 16%

Содержит азотной кислоты 15,5–17,0%.

Смешивают 1 г азотной кислоты и 1 г воды.

Плотность. 1,087–1,096.

Азотная кислота разведённая 12,5%

Содержит около 125 г/л HNO3.

20 г азотной кислоты концентрированной доводят водой до 100 мл.

Азотная кислота разведённая 6%

Содержит около 60 г/л HNO3.

9,0 г азотной кислоты концентрированной доводят водой до 100 мл.

Азотная кислота разведённая 4%

Содержит около 40 г/л HNO3.

24 г азотной кислоты разведённой 16% доводят водой до 100 мл.

Азотная кислота разведённая 2%

Содержит около 20 г/л HNO3.

12 г азотной кислоты разведённой 16% доводят водой до 100 мл.

Азотная кислота разведённая 1%

Содержит около 10 г/л HNO3.

6 г азотной кислоты разведённой 16% доводят водой до 100 мл.

Азотной кислоты ацетоновый раствор 3%

4,8 г азотной кислоты концентрированной доводят ацетоном до 100 мл.

Азотной кислоты 7,5 М раствор.

525 мл азотной кислоты концентрированной доводят водой до 1000,0 мл.

Азотной кислоты 5 М раствор

350 мл азотной кислоты концентрированной доводят водой до 1000,0 мл.

Азотной кислоты 2 М раствор

140 мл азотной кислоты концентрированной доводят водой до 1000,0 мл.

Азотной кислоты 0,5 М раствор

35 мл азотной кислоты концентрированной доводят водой до 1000,0 мл.

Азотной кислоты 0,3 М раствор

21 мл азотной кислоты концентрированной доводят водой до 1000,0 мл.

Азотной кислоты 0,2 М раствор

14 мл азотной кислоты концентрированной доводят водой до 1000,0 мл.

Азотной кислоты 0,1 М раствор.

7 мл азотной кислоты концентрированной доводят водой до 1000,0 мл.

Азотной кислоты 0,05 М раствор

1,0 мл азотной кислоты 5 М раствора доводят водой до 100,0 мл.

Азотной кислоты 0,01 М раствор

0,5 мл азотной кислоты 2 М раствора доводят водой до 100,0 мл.

Акридон. [578-95-0]. С13Н9NО. (М.м. 195,22).

Акридин-9(10H)-он.

Содержит не менее 99% С13Н9NО.

Нерастворим в бензоле, хлороформе, воде и спирте.

Температура плавления. Около 360 °С.

Акридонуксусная кислота. [38609-97-1]. C15H11NO3. (М.м. 253,25).

[9-Оксоакридин-10(9H)-ил]уксусная кислота.

Содержит не менее 99% C15H11NO3.

Практически не расстворим в воде, хлороформе, мало растворим в спирте 95%, легко растворим в диметилсульфоксиде и диметилформамиде.

Температура плавления. Около 290 °С (с разл.).

Акриламид. [79-06-1]. С3Н5NО. (М.м. 71,08).

Проп-2-енамид.

Бесцветные или белого цвета хлопья или кристаллический порошок белого или почти белого цвета.

Очень легко растворим в воде и метаноле, легко растворим в этаноле.

Температура плавления. Около 84 °С.

Акриламид—бисакриламида (29:1) 30% раствор

290 г акриламида и 10 г метиленбисакриламида растворяют в 1000,0 мл воды и фильтруют.

Акриламид—бисакриламид (32,3:1) 30% раствор

291 г акриламида и 9 г метиленбисакриламида растворяют в 1000,0 мл воды и фильтруют.

Акриламид—бисакриламида (36,5:1) 30% раствор

292 г акриламида и 8 г метиленбисакриламида растворяют в 1000,0 мл воды и фильтруют.

Акриловая кислота. [79-10-7]. С3Н4О2. (М.м. 72,06).

Проп-2-еновая кислота.

Содержит не менее 99% С3Н4О2. Стабилизирована 0,02% раствором монометилового эфира гидрохинона.

Бесцветная или слегка жёлтоватая едкая жидкость.

Смешивается с водой, спиртом 96% и эфиром.

Легко полимеризуется в присутствии кислорода.

. Около 1,05.

. Около 1,421.

Температура кипения. Около 141 °С.

Температура плавления. От 12 до 15 °С.

L-Аланин. [56-41-7]. С3Н7NO2. (М.м. 89,09).

(2S)-2-Аминопропановая кислота.

Содержит не менее 99,5% С3Н7NO2.

Кристаллический порошок белого цвета.

Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%, практически нерастворим в ацетоне и эфире.

. От +13,0 до 15,0 (5% раствор в хлористоводородной кислоте 5 М).

α-Аланин. См. L-Аланин.

β-Аланин. [107-95-9]. С3Н7NO2. (М.м. 89,09).

3-Аминопропановая кислота.

Содержит не менее 99% С3Н7NO2.

Кристаллический порошок белого цвета.

Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%, практически нерастворим в ацетоне и эфире.

Температура плавления. Около 200 °С с разложением.

β-Аланина раствор 0,1 М

8,9 г β-аланина растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Алеуритиновая кислота. [533-87-9]. С16Н32О5. (М.м. 304,42).

rac-(9R,10S)-9,10,16-Тригидроксигексадекановая кислота.

Порошок белого цвета, жирный на ощупь.

Растворима в метаноле.

Температура плавления. Около 101 °С.

Ализарин S. [130-22-3]. С14Н7NaО7S·Н2О. (М.м. 360,27).

1,2-Дигидрокси-9,10-диоксо-9,10-дигидроантрацен-3-сульфонат натрия, моногидрат.

Порошок оранжево-жёлтого цвета.

Легко растворим в воде и спирте 96%, практически нерастворим в бензоле, хлороформе и эфире.

Ализариновый красный С. См. Ализарин S.

Ализарина S раствор 0,1%. Раствор 1 г/л.

Испытание на чувствительность. Реактив изменяет окраску от жёлтой до оранжево-красной при установлении титра 0,05 М раствора бария перхлората.

Переход окраски от жёлтой до фиолетовой в интервале рН 3,7–5,2.

Ализаринкомплексон. [3952-78-1]. С19Н15NO8. (М.м. 385,32).

2,2'-{[(3,4-Дигидрокси-9,10-диоксо-9,10-дигидроантрацен-2-ил)метил]нитрило}диуксусная кислота.

Мелкокристаллический порошок от светлого коричневато-жёлтого до оранжево-коричневого цвета.

Практически нерастворима в воде, растворима в растворах гидроксидов щелочных металлов.

Температура плавления. Около 185 °С.

Потеря в массе при высушивании. Не более 10,0%. Определение проводят из 1,0 г.

Ализаринкомплексона раствор

0,193 г ализаринкомплексона растворяют в 6 мл свежеприготовленного 1 М раствора натрия гидроксида, прибавляют 750 мл воды, 25 мл сукцинатного буферного раствора рН 4,6 и по каплям 0,5 М раствор хлористоводородной кислоты до изменения окраски раствора от фиолетово-красной до жёлтой (рН от 4,5 до 5,0), затем прибавляют 100 мл ацетона и доводят объём раствора водой до 1000 мл.

Ализаринкомплексона реактив

Раствор I. 0,36 г церия(III) нитрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 50 мл.

Раствор II. 0,7 г ализаринкомплексона суспендируют в 50 мл воды, прибавляют до растворения около 0,25 мл раствора аммиака концентрированного, затем прибавляют 0,25 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Раствор III. 6,0 г натрия ацетата растворяют в 50 мл воды, прибавляют 11,5 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора водой до 100 мл.

К 33 мл ацетона прибавляют 6,8 мл раствора III, 1,0 мл раствора II, 1,0 мл раствора I и доводят объём полученного раствора водой до 50 мл.

Испытание на чувствительность. К 1,0 мл эталонного раствора фторида (10 ррm фторид-иона) прибавляют 19,0 мл воды и 5,0 мл реактива ализаринкомплексона. Через 20 мин должно появиться голубое окрашивание.

Срок годности – 5 сут.

Ализариновый жёлтый. [1718-34-9]. С13Н8N3NaO5. (М.м. 309,21).

2-Гидрокси-5-[(4-нитрофенил)диазенил]бензоат натрия.

Кристаллический порошок светло-коричневого, тёмно-коричневого или красно-коричневого цвета.

Мало растворим в воде и спирте 96%, легко растворим при нагревании.

Переход окраски раствора от светло-жёлтой к красно-оранжевой в интервале рН 10,0–12,0.

Раствор индикатора. 0,1% раствор. Растворение проводят при нагревании.

Альбумин бычий. [9048-46-8].

Бычий сывороточный альбумин, содержит не менее 96% белка в пересчёте на безводное вещество.

Порошок от белого до светло-коричнево-жёлтого цвета.

Содержание воды не более 3,0%.

Альбумин человеческий.

Альбумин человеческой сыворотки, содержащий не менее 96% альбумина.

Альбумин яичный. [9006-59-1].

Яичный альбумин, содержит не менее 97% белка в пересчёте на безводное вещество.

Порошок от белого до светло-жёлтого цвета.

Содержание воды не более 6,0%.

Альдегиддегидрогеназа

Фермент, получаемый из пекарских дрожжей (Saccharomyces cerevisiae), катализирующий окисление ацетальдегида до уксусной кислоты в присутствии никотинамид-аденин динуклеотида, солей калия и тиолов при рН 8,0.

Альдегиддегидрогеназы раствор

Количество альдегиддегидрогеназы, соответствующее 70 единицам активности, растворяют в воде и доводят объём раствора водо до 10 мл.

Срок годности – 8 ч при 4 °С.

Альфадекс. [10016-20-3]. C36H60O30. (М.м. 972,8).

Циклогексакис-(1→4)-(α-D-глюкопиранозил).

Содержит не менее 98% C36H60O30.

Растворим в воде.

Температура плавления. Около 278° (с разл.).

Альциановый синий 8GX. [33864-99-2]. C56H68Cll4CuN16S4. (М.м. 1298,86).

медь;[диметиламино-[[15,24,33-трис [[диметиламино (диметилазаниумилиден)метил]сульфанилметил]-2,11,20,29,37,39-гексаза-38,40-диазаниданонацикло [28.6.1.13,10.112,19.121,28.04,9.013,18.022,27.031,36]тетраконта-1(37),2,4(9),5,7,10,12(39),13(18),14,16,19,21,23,25,27,29,31(36),32,34-нонадекаен-6-ил]метилсульфанил]метилиден]-диметилазания тетрахлорид.

Алюминий. [7429-90-5]. Al. (А.м. 26,98).

Мягкий, ковкий металл белого с голубоватым оттенком цвета в виде брусков, листов, порошка, ленты или проволоки. На воздухе образуется окисная пленка, которая защищает металл от коррозии.

Аналитической чистоты.

Алюминия-калия сульфат. [7784-24-9]. AlK(SO4)2·12Н2О (М.м. 474,4).

Бис(сульфат) алюминия-калия, додекагидрат.

Содержит не менее 99,0% и не более 100,5% AlK(SO4)2 ·12 Н2О.

Гранулированный порошок или бесцветная кристаллическая масса.

Легко растворим в воде, очень легко растворим в кипящей воде, растворим в глицерине, практически нерастворим в этаноле.

Алюминия нитрат. [7784-27-2]. Аl(NO3)3·9H2O. (М.м. 375,13).

Нитрат алюминия, нонагидрат.

Кристаллы, расплывающиеся на воздухе.

Очень легко растворим в воде и спирте 96%, очень мало растворим в ацетоне.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Алюминия оксид безводный. [1344-28-1]. Al2O3. (М.м. 101,96).

Оксид алюминия.

Алюминия оксид, состоящий из γ-Al2O3, обезвоженный и активированный нагреванием. Размер частиц от 75 до 150 мкм.

Алюминия оксид основной

Порошок белого цвета.

Алюминия оксид безводный основной формы пригоден для колоночной хроматографии.

рН. От 9,0 до 10,0 (суспензия, полученная встряхиванием 1 г с 10 мл воды в течение 5 мин).

Алюминия оксид нейтральный

Гранулированный порошок белого цвета.

Обменная ёмкость. 1,00 г прокаина гидрохлорида растворяют в спирте (90%, о/о) и доводят объём раствора тем же растворителем до 100 мл. 20,0 мл полученного раствора и 5,0 г испытуемого реактива помещают в колбу вместимостью 100 мл с притертой стеклянной пробкой, выдерживают в течение 15 мин, периодически встряхивая, и фильтруют. К 10,0 мл фильтрата прибавляют 10 мл воды, 0,05 мл 0,05% раствора бромфенолового синего и титруют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до зеленого окрашивания. Цвет раствора должен измениться при прибавлении не более 1,4 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты.

Водорастворимые вещества. Не более 0,2%. Используют хроматографическую колонку с внутренним диаметром 1 см, длиной 40 см, нижний конец которой сужен до диаметра от 2 до 3 мм и снабжен пористым стеклянным фильтром (100) или хлопковым тампоном выше суженной части. Колонку заполняют 10,0 г испытуемого реактива и 25 мл воды, элюируют водой до получения 20 мл прозрачного элюата, который выпаривают и сушат при температуре 150 °С; масса остатка не должна превышать 20 мг.

Раствор S. Остаток, полученный в испытании «Водорастворимые вещества», растворяют при нагревании в воде, фильтруют и доводят объём фильтрата водой до 100 мл.

Хлориды. Не более 0,05%. 1 мл раствора S доводят водой до 15 мл. Полученный раствор должен выдерживать испытание на хлориды.

Сульфаты. Не более 0,1%. 1 мл раствора S доводят водой до 15 мл. Полученный раствор должен выдерживать испытание на сульфаты. Эталон готовят с использованием 10 мл эталонного раствора сульфата (10 ррm сульфат-иона).

Хроматографическая разделяющая способность. Хроматографическую колонку, описанную в испытании «Водорастворимые вещества», заполняют испытуемым реактивом до высоты 5 см. Через колонку пропускают 5 мл раствора азобензола и 5 мл метоксиазобензола, затем промывают 20 мл смеси растворителей бензол—петролейный эфир 1:4. В верхней части колонки образуется слой метоксиазобензола ярко-жёлтого цвета толщиной от 3 до 5 мм, а ниже его наблюдается слой азобензола бледно-жёлтого цвета толщиной 2 см.

Алюминия оксид нейтральный для хроматографии

Порошок белого цвета.

Алюминия оксид безводный, нейтральный, для колоночной хроматографии.

При необходимости указывается размер частиц, активность и другие параметры.

Алюминия хлорид. [7784-13-6]. АlCl3·6H2O. (М.м. 241,43).

Алюминия хлорид, гексагидрат. Содержит не менее 98,0% АlCl3·6H2O.

Кристаллический порошок от белого до слегка жёлтоватого цвета, гигроскопичен.

Легко растворим в воде и спирте 96%, растворим в эфире.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Алюминия хлорида раствор

65,0 г алюминия хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100 мл. Прибавляют 0,5 г угля активированного, перемешивают в течение 10 мин и фильтруют. К фильтрату при непрерывном перемешивании прибавляют достаточное количество 1% раствора натрия гидроксида (около 60 мл) до получения раствора с рН около 1,5.

Алюминия хлорида раствор 10%

10 г алюминия хлорида растворяют в 40 мл воды в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Алюминия хлорида раствор 10% в спирте 96%

10 г алюминия хлорида растворяют в 40 мл спирта 96% в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Алюминия хлорида раствор 5% в спирте 96%

5 г алюминия хлорида растворяют в 40 мл спирта 96% в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Алюминия хлорида раствор 5% в спирте 70%

5,0 г алюминия хлорида помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 50 мл спирта 70% и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Алюминия хлорида раствор 4% в спирте 96%

4,0 г алюминия хлорида помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 40 мл спирта 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Алюминия хлорида раствор 3% в спирте 96%

3 г алюминия хлорида растворяют в 40 мл спирта 96% в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Алюминия хлорида раствор 3% в спирте 70%

3 г алюминия хлорида растворяют в 40 мл спирта 70% в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Алюминия хлорида раствор 3% в спирте 60%

3 г алюминия хлорида растворяют в 40 мл спирта 60% в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Алюминия хлорида раствор 2% в спирте 96%

2 г алюминия хлорида растворяют в 40 мл спирта 96% в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Алюминия хлорида раствор 2% в спирте 70%

2,0 г алюминия хлорида помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 50 мл спирта 70% и доводят объём раствора тем же растворителем до метки

Алюминия хлорида раствор 2% в спирте 60%

2,0 г алюминия хлорида помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 50 мл спирта 60% и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Алюминия хлорида раствор 2% в спирте 50%

2,0 г алюминия хлорида помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 50 мл спирта 50% и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Алюминия хлорида раствор 1% в спирте 96%

1 г алюминия хлорида растворяют в 40 мл спирта 96% в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Алюминия хлорида реактив

2,0 г алюминия хлорида растворяют в 100 мл 5% (о/о) раствора уксусной кислоты ледяной в метаноле.

Алюминия хлорида спиртовой раствор (около 0,05 М)

12,5 г алюминия хлорида растворяют в 100 мл спирта 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Проверка титра не требуется.

Алюминон. [569-58-4]. C22H23N3O9. (М.м. 473,4).

3,3'-[(3-Карбоксилато-4-оксоциклогекса-2,5-диен-1-ил)метилен]бис(6-гидроксибензоат) триаммония.

Температура плавления. От 220 до 225 °С (с разл.).

Алюмокалиевые квасцы. См. Алюминия-калия сульфат.

Амидо-чёрный 10В. [1064-48-8]. С22Н14N6Na2O9S2. (М.м. 616,5).

4-Амино-5-гидрокси-3-[(4-нитрофенил)диазенил]-6-(фенилдиазенил)нафталин-2,7-дисульфонат динатрия.

Порошок от тёмно-коричневого до черного цвета.

Умеренно растворим в воде; растворим в спирте 96%.

Амидо-чёрного 10В раствор 0,5%

Раствор 5 г/л амидо-черного 10В в смеси растворителей 30% уксусной кислоты–метанола 10:90.

Амилацетат. [628-63-7]. С7Н14О2. (М.м. 130,18).

Пентилацетат.

Бесцветная прозрачная жидкость с фруктовым запахом.

Хорошо смешивается с этанолом и эфиром; смешивается с водой в соотношении 0,18:100.

. 0,879.

Температура кипения. Около 148 °С.

н-Амиловый спирт. См. Пентанол.

трет-Амиловый спирт. См. трет-Пентиловый спирт.

Аминоазобензол. [60-09-3]. С12Н11N3. (М.м. 197,24).

4-(Фенилдиазенил)анилин.

Игольчатые кристаллы коричневато-жёлтого с голубоватым оттенком цвета.

Мало растворим в воде, легко растворим в спирте 96% и эфире.

Температура плавления. Около 128 °С.

7-Аминоактиномицин D. [7240-37-1]. C62H87N13O16. (М.м. 1270,4).

2,7-Диамино-4,6-диметил-3-оксо-N1,N9-бис[2,5,9-триметил-1,4,7,11,14-пентаоксо-6,13-ди(пропан-2-ил)гексадекагидро-1H-пирроло[2,1-i][1,4,7,10,13]оксатетраазациклогексадецин-10-ил]-3H-феноксазин-1,9-дикарбоксамид.

От красного до тёмно-фиолетового цвета кристаллический порошок.

Умеренно растворим в диметилсульфоксиде, метаноле и этаноле, мало растворим в воде.

Температура плавления. От 235 до 255 °С.

Ядовит.

4-Аминоантипирин. [83-07-8]. С11Н13N3O. (М.м. 203,24).

4-Амино-1,5-диметил-2-фенил-1,2-дигидро-3H-пиразол-3-он.

Игольчатые кристаллы или порошок светло-жёлтого цвета.

Умеренно растворим в воде, легко растворим в спирте 96%, мало растворим в эфире.

Температура плавления. Около 108 °С.

4-Аминоантипирина раствор 0,1%

Раствор аминоантипирина 1 г/л в буферном растворе рН 9,0.

2-Аминобензойная кислота. [118-92-3]. С7Н7NO2. (М.м. 137,14).

2-Аминобензойная кислота.

Кристаллический порошок от белого до бледно-жёлтого цвета.

Умеренно растворима в холодной воде, легко растворима в горячей воде, спирте 96%, эфире и глицерине.

Растворы в спирте 96% или эфире и, в особенности в глицерине, обнаруживают фиолетовую флуоресценцию.

Температура плавления. Около 145 °С.

3-Аминобензойная кислота. [99-05-8]. С7Н7NO2. (М.м. 137,14).

3-Аминобензойная кислота.

Кристаллический порошок от белого до бледно-жёлтого цвета.

Температура плавления. От 178 до 180 °С.

4-Аминобензойная кислота. [150-13-0]. С7Н7NO2. (М.м. 137,14).

4-Аминобензойная кислота.

Кристаллический порошок белого цвета.

Мало растворима в воде, легко растворима в спирте 96%, практически нерастворима в петролейном эфире.

Температура плавления. Около 187 °С.

Хранят в защищённом от света месте.

4-Аминобензойной кислоты раствор

1 г 4-аминобензойной кислоты растворяют в смеси 18 мл уксусной кислоты безводной, 20 мл воды и 1 мл фосфорной кислоты концентрированной.

Непосредственно перед использованием полученный раствор смешивают с ацетоном в соотношении 2:3.

4-Аминобутановая кислота. См. γ-Аминомасляная кислота.

Аминобутанол. [96-20-8]. С4Н11NO. (М.м. 89,14).

(2RS)-2-Аминобутан-1-ол.

Маслянистая жидкость.

Смешивается с водой, растворим в спирте 96%.

. Около 0,94.

. Около 1,453.

Температура кипения. Около 180 °С.

(2R)-2-Аминобутан-1-ол. [5856-63-3].

(2S)-2-Аминобутан-1-ол. [5856-62-2].

6-Аминогексановая кислота. [60-32-2]. С6Н13NO2. (М.м. 131,17).

6-Аминогексановая кислота.

Бесцветные кристаллы.

Легко растворима в воде, умеренно растворима в метаноле, практически нерастворима в этаноле.

Температура плавления. Около 205 °С.

2-Аминогептан. [123-82-0].C7H17N. (М.м. 115,22.).

(2RS)-Гептан-2-амин.

Прозрачная бесцветная или слегка жёлтоватая жидкость.

. Около 0,766.

. Около 1,418.

Температура кипения. 142–144 °С.

Аминогидроксинафталинсульфоновая кислота. [116-63-2]. С10Н9NO4S. (М.м. 239,24).

4-Амино-3-гидроксинафталин-1-сульфоновая кислота.

Игольчатые кристаллы белого или серого цвета, под действием света приобретают розовый цвет, в особенности влажные.

Практически нерастворима в воде, спирте 96% и эфире, растворима в растворах гидроксидов щелочных металлов и горячих растворах натрия метабисульфита.

Хранят в защищённом от света месте.

Аминогидроксинафталинсульфоновой кислоты раствор

Смешивают 5,0 г натрия сульфита безводного, 94,3 г натрия гидросульфита и 0,7 г аминогидроксинафталинсульфоновой кислоты. 1,5 г полученной смеси растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 10,0 мл.

Срок годности – 1 сут.

Аминогиппуровая кислота. [61-78-9]. С9Н10N2O3. (М.м. 194,19).

(4-Аминобензамидо)уксусная кислота.

Порошок белого или почти белого цвета.

Умеренно растворима в воде, растворима в спирте 96%, очень мало растворима в эфире.

Температура плавления. Около 200 °С.

Аминогиппуровой кислоты реактив

3,0 г фталевой кислоты и 0,3 г аминогиппуровой кислоты растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 100 мл.

γ-Аминомасляная кислота. [56-12-2]. С4Н9NO2. (М.м. 103,12).

4-Аминобутановая кислота.

Пластинчатые кристаллы при выделении из эфира, игольчатые кристаллы при выделении из воды и спирта 96%.

Легко растворима в воде, практически нерастворима или мало растворима в других растворителях.

Температура плавления. Около 202 °С (снижается при быстром нагреве).

Аминометилализариндиуксусная кислота. См. Ализаринкомплексон.

Аминометилализариндиуксусной кислоты раствор. См. Ализаринкомплексона раствор.

Аминометилализариндиуксусной кислоты реактив. См. Ализаринкомплексона реактив.

4-Амино-3-гидроксинафталин-1-сульфоновая кислота. См. Аминогидроксинафталинсульфоновая кислота.

1-Аминоиндан. [34698-41-4]. C9H11N. (М.м. 133,19).

2,3-Дигидро-1H-инден-1-амин.

Содержит не менее 98% C9H11N.

Температура плавления. Около 15 °С.

Температура кипения. Около 95 °С/8 мм. рт. ст.

Около 1,038.

Около 1,561.

2-Амино-N-метил-N-циклогексилбензиламин. [57365-08-9]. C14H22N2. (М.м. 218,34).

2-{[Метил(циклогексил)амино]метил}анилин.

Содержит не менее 98% C14H22N2.

Температура плавления. От 44 до 47 °С.

8-Аминонафталин-2-сульфокислота. См. 1-Нафтиламин-7-сульфоновая кислота.

Аминонитробензофенон. [1775-95-7]. С13Н10N2O3. (М.м. 242,23).

2-Бензоил-5-нитроанилин.

Кристаллический порошок жёлтого цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим в тетрагидрофуране, мало растворим в метаноле.

Температура плавления. Около 160 °С.

. От 690 до 720. Определение проводят при длине волны 233 нм, используя раствор 0,01 г/л в метаноле.

Аминопиразолон. См. 4-Аминоантипирин.

2-Аминопиридин. См. Пирид-2-иламин.

4-Аминопиридин. [504-24-5]. С5Н6N2. (М.м. 94,11).

Пиридин-4-амин.

Порошок от белого до бледно-серого или светло-жёлтого цвета.

Очень легко растворим в этаноле; растворим в воде, бензоле и эфире.

Температура плавления. Около 157 °С.

Аминополиэфир. [23978-09-8]. С18Н36N2O6. (М.м. 376,49).

4,7,13,16,21,24-Гексаокса-1,10-диазабицикло[8.8.8]гексакозан.

Бесцветные кристаллы или белый кристаллический порошок.

Нерастворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Температура плавления. От 70 до 73 °С.

3-Аминопропанол. [156-87-6]. С3Н9NO. (М.м. 75,11).

3-Аминопропан-1-ол.

Прозрачная, бесцветная, вязкая жидкость.

. Около 0,99.

. Около 1,461.

Температура плавления. Около 11 °С.

3-Аминопропановая кислота. См. β-Аланин.

Аминоуксусная кислота. См. Глицин.

Аминоуксусная буферная смесь

Растворяют в воде 8,4 г натрия гидрокарбоната, 10,0 г калия гидрокарбоната, 7,5 г аминоуксусной кислоты, 4,0 мл раствора аммиака концентрированного и доводят объём раствора водой до 100,0 мл; рН около 8,3.

2-Аминофенол. [95-55-6]. С6Н7NO. (М.м. 109,13).

2-Аминофенол.

Белый или слегка окрашенный кристаллический порошок.

Умеренно растворим в воде, растворим в этаноле.

Температура плавления. От 170 до 175 °С.

Хранят в защищённом от света месте.

3-Аминофенол. [591-27-5]. С6Н7NO. (М.м. 109,13).

3-Аминофенол.

Белый или слегка окрашенный кристаллический порошок.

Умеренно растворим в воде, растворим в этаноле.

Температура плавления. От 120 до 124 °С с разложением.

Температура кипения. Около 164 °С при 11 мм. рт. ст.

Хранят в защищённом от света месте.

4-Аминофенол. [123-30-8]. С6Н7NO. (М.м. 109,13).

4-Аминофенол.

Белый или слегка окрашенный кристаллический порошок.

Умеренно растворим в воде, растворим в этаноле.

Температура плавления. Около 186 °С с разложением.

Хранят в защищённом от света месте.

4-Аминофолиевая кислота. [54-62-6]. C19H20N8O5. (М.м. 440,4).

(2S)-2-(4-{[(2,4-Диаминоптеридин-6-ил)метил]амино}бензамидо)пентандиовая кислота.

Жёлтый порошок.

Температура плавления. Около 230 °С.

Аминохлорбензофенон. [719-59-5]. С13Н10СlNO. (М.м. 231,68).

2-Бензоил-4-хлоранилин.

Кристаллический порошок жёлтого цвета.

Практически нерастворим в воде, легко растворим в ацетоне, растворим в спирте 96%.

Температура плавления. Около 97 °С.

Хранят в защищённом от света месте.

Аммиак. [7664-41-7]. NH3. (М.м. 17,03).

Аммиак.

Аммиак водный. См. Аммиака раствор концентрированный 25%.

Аммиака раствор

Содержит не менее 17% (170 г/л) и не более 19% (190 г/л) NH3.

68 г раствора аммиака концентрированного 25% доводят водой до 100,0 мл.

. От 0,931 до 0,934.

Аммиака раствор, используемый в испытании на предельное содержание железа, должен выдерживать следующее дополнительное требование: 5 мл раствора аммиака выпаривают при температуре 100 °С досуха. К сухому остатку прибавляют 10 мл воды, 2 мл 20% раствора лимонной кислоты, 0,1 мл тиогликолевой кислоты и раствора аммиака до щелочной реакции, доводят объём полученного раствора водой до 20,0 мл. Раствор не должен окрашиваться в розовый цвет.

Хранят при температуре не выше 20 °С, защищая от углерода диоксида.

Аммиака раствор концентрированный 32%

Содержит не менее 32% (м/м) NH3.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

. От 0,883 до 0,889.

Количественное определение. 50,0 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты помещают в колбу с притертой пробкой, точно взвешивают, прибавляют 2 мл раствора аммиака концентрированного и снова взвешивают. Титруют 1 М раствором натрия гидроксида, используя в качестве индикатора 0,5 мл смешанного раствора метилового красного.

1 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 17,03 мг NH3.

Хранят при температуре не выше 20 °С, защищая от углерода диоксида.

Аммиака раствор концентрированный 25%. [1336-21-6].

Содержит от 25 до 28% (м/м) NH3.

Бесцветная прозрачная жидкость с характерным острым (резким) запахом. . От 0,898 до 0,907.

Обращаться с осторожностью.

Аммиака раствор 17%. См. Аммиака раствор.

Аммиака раствор 10%

Содержит не менее 10% (100 г/л) и не более 11% (110 г/л) NH3.

40 г раствора аммиака концентрированного 25% доводят водой до 100,0 мл.

Аммиака раствор 10%, свободный от свинца

Испытание на свинец: К 20 мл раствора прибавляют 1,0 мл калия цианида раствора, свободного от свинца, доводят объём раствора водой до 50,0 мл и прибавляют 0,1 мл натрия сульфида раствора в глицерине. Окраска полученного раствора не должна превышать интенсивность окраски раствора сравнения, приготовленного без натрия сульфида.

Аммиака раствор 5%

500 мл 10% раствора аммиака доводят водой до 1000,0 мл.

Аммиака раствор 4%

40 мл аммиака раствора 10% доводят водой до 100,0 мл.

Аммиака раствор 2,3%

23 мл аммиака раствора 10% доводят водой до 100,0 мл.

Аммиака раствор 1,25% в метаноле

5,0 мл аммиака раствора концентрированного 25% помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора метанолом до метки.

Аммиака раствор 1%

4 г аммиака раствора концентрированного 25% доводят водой до 100,0 мл.

Аммиака раствор разведённый 3,4%. См. Аммиака раствор 2 М.

Аммиака раствор разведённый 0,18%

Содержит не менее 0,16% (1,6 г/л) и не более 0,18% (1,8 г/л) NH3.

0,7 г раствора аммиака концентрированного 25% доводят водой до 100,0 мл.

Аммиака раствор 13,5 М

920,0 мл аммиака водного доводят водой до 1000,0 мл.

Аммиака раствор 10 М

681,2 мл аммиака водного доводят водой до 1000,0 мл.

Аммиака раствор 6 М

408,7 мл аммиака водного доводят водой до 1000,0 мл.

Аммиака раствор 5 М

340,6 мл аммиака водного доводят водой до 1000,0 мл.

Аммиака раствор 2 М

Содержит не менее 3,3% (33 г/л) и не более 3,6% (36 г/л) NH3.

13 г раствора аммиака концентрированного 25% доводят водой до 100,0 мл.

Аммиака раствор 1 М

Содержит не менее 1,65% (16,5 г/л) и не более 1,8% (18 г/л) NH3.

6,5 г раствора аммиака концентрированного 25% доводят водой до 100,0 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Аммиака водно-спиртовой раствор

1,0 мл раствора аммиака концентрированного 25% смешивают с 9,0 мл спирта 96%.

Аммиачный буферный раствор

5,4 г аммония хлорида растворяют в 20,0 мл воды, прибавляют 35,0 мл аммиака раствора и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. pH полученного раствора от 9,5 до 10,0.

Аммоний азотнокислый. См. Аммония нитрат.

Аммоний пурпурнокислый. [3051-09-0]. С8Н8N6O6·Н2О. (М.м. 302,20).

2,6-Диоксо-5-{[2,4,6-триоксотетрагидропиримидин-5(2H)-илиден]амино}-1,2,3,6-тетрагидропиримидин-4-олат аммония, моногидрат.

Мелкокристаллический порошок пурпурно-красного или красно-коричневого цвета с характерным зеленоватым металлическим блеском.

Мало растворим в воде.

При рН > 11,0 раствор имеет фиолетовую окраску, а его комплекс с ионом кальция в тех же условиях оранжевого цвета.

Переход окраски при прямом титровании ионов кальция от оранжевой к фиолетовой.

Индикаторная смесь. 0,25 г индикатора и 25 г натрия хлорида растирают в ступке и перемешивают.

Аммония ацетат. [631-61-8]. С2Н7NО2. (М.м. 77,08).

Ацетат аммония.

Бесцветные кристаллы, очень легко расплывающиеся на воздухе.

Очень легко растворим в воде и спирте 96%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Аммония ацетата раствор 25%

25,0 г аммония ацетата растворяют в воде, прибавляют 3 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Аммония ацетата раствор 15,5%

15,5 г аммония ацетата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Раствор используют свежеприготовленным.

Аммония ацетата раствор 15%

15,0 г аммония ацетата растворяют в воде, прибавляют 0,3 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Аммония ацетата раствор 10%

10,0 г аммония ацетата растворяют в воде, прибавляют 0,3 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Аммония ацетата раствор 1,0%

10,0 г аммония ацетата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Аммония ацетата раствор 0,75%

7,5 г аммония ацетата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Аммония ацетата раствор 0,48%

3,2 мл 15% раствора аммония ацетата доводят водой до 100 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Аммония ацетата раствор 1,0 М

77,08 г аммония ацетата растворяют в воде и доводят объём раствора до 1000,0 мл тем же растворителем.

Аммония ацетата раствор 0,2 М

15,42 г аммония ацетата растворяют в воде и доводят объём раствора до 1000,0 мл тем же растворителем.

Аммония ацетата раствор 0,1 М

7,71 г аммония ацетата растворяют в воде и доводят объём раствора до 1000,0 мл тем же растворителем.

Аммония ацетата раствор 0,05 М

3,85 г аммония ацетата растворяют в воде и доводят объём раствора до 1000,0 мл тем же растворителем.

Аммония ацетата насыщенный раствор

Растворяют достаточное количество аммония ацетата в воде до получения раствора, содержащего не менее 61,5% аммония ацетата.

Аммония ацетата насыщенный раствор, нейтрализованный раствором натрия гидроксида

Аммония ацетата насыщенный раствор нейтрализуют сначала 30% раствором натрия гидроксида до розового окрашивания по фенолфталеину, затем избыток натрия гидроксида нейтрализуют насыщенным раствором аммония ацетата до слабо-розового окрашивания.

Аммония ванадат. [7803-55-6]. NH4VO3. (М.м. 116,98).

Триоксованадат(V) аммония.

Кристаллический порошок от белого до слегка жёлтоватого цвета.

Мало растворим в воде, растворим в 10% растворе аммиака.

Аммония ванадата раствор 1,2%.

1,2 г аммония ванадата растворяют в 95 мл воды и доводят объём раствора серной кислотой концентрированной до 100,0 мл.

Аммония ванадата раствор 0,25%.

2,5 г аммония ванадата растворяют в 500 мл кипящей воды, прибавляют 20 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Аммония ванадата раствор 0,5% в серной кислоте концентрированной.

0,05 г аммония ванадата растворяют в 10 мл серной кислоты концентрированной.

Аммония гидрокарбонат. [1066-33-7]. NH4HCO3. (М.м. 79,06).

Гидрокарбонат аммония.

Содержит не менее 99% NH4HCO3.

Бесцветные кристаллы или белый кристаллический порошок.

Легко растворим в холодной воде, реагирует с горячей водой, практически нерастворим в спирте 96% и ацетоне.

Аммония гидросульфат. [7803-63-6]. NH4HSO4. (М.м. 115,11).

Гидросульфат аммония.

Содержит не менее 98% NH4HSO4.

Бесцветные кристаллы или белый кристаллический порошок.

Аммония дигидрофосфат. [7722-76-1]. NH4H2PO4. (М.м. 115,03).

Дигидрофосфат аммония.

Кристаллический порошок белого цвета или бесцветные кристаллы.

Легко растворим в воде.

рН. Около 4,2 (2,3% раствор).

(1R)-(-)-Аммония 10-камфоросульфонат. [82509-30-6]. С10Н19NO4S. (М.м. 249,33).

[(1R,4S)-7,7-Диметил-2-оксобицикло[2.2.1]гепт-1-ил]метансульфонат аммония.

Содержит не менее 97,0% С10Н19NO4S.

Бесцветные кристаллы или белый кристаллический порошок.

Легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96%.

. –18±2 (5% раствор).

Аммония карбамат. [1111-78-0]. СН6N2O2. (М.м. 78,07).

Карбамат аммония.

Бесцветное кристаллическое вещество с запахом аммиака, гигроскопичен.

Очень хорошо растворяется в воде с образованием карбоната аммония.

На воздухе при атмосферном давлении диссоциирует с образованием аммиака и углекислого газа. При нагревании теряет воду с образованием мочевины.

Хранить при температуре 2–8 °С.

Аммония карбонат. [506-87-6]. (NH4)2СО3. (М.м. 96,09).

Карбонат аммония (1:2).

Бесцветные мелкие кристаллы в массе белого цвета.

Очень легко растворим в воде, реагирует в горячей воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Аммония карбоната раствор 15,8%.

Раствор аммония карбоната в воде 158 г/л.

Аммония карбоната раствор 10%.

10 г аммония карбоната растворяют в 30 мл воды, прибавляют 10 мл 10% раствора аммиака и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Аммония карбоната раствор 7% в аммиака растворе концентрированном 25%

7,0 г аммония карбоната растворяют в аммиака растворе концентрированном 25% и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Аммония молибдат. [12054-85-2]. (NH4)6Мо7О24·4Н2О. (М.м. 1235,9).

Гептамолибдат гексааммония, тетрагидрат.

Бесцветные кристаллы или кристаллы от слегка жёлтоватого до зеленоватого цвета.

Растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Аммония молибдата раствор 20% в серной кислоте

10,0 г аммония молибдата растворяют в серной кислоты растворе 50% и доводят объём раствора тем же растворителем до 50 мл.

Аммония молибдата раствор 10%

Раствор аммония молибдата в воде 100 г/л.

Аммония молибдата раствор 8,3% в серной кислоте

8,30 г аммония молибдата растворяют в 40 мл воды, прибавляют 33 мл серной кислоты раствора 40% и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Аммония молибдата раствор 5%

Раствор аммония молибдата в воде 50 г/л.

Аммония молибдата раствор 5% в серной кислоте

5,0 г аммония молибдата растворяют в 60 мл воды и прибавляют 40 мл серной кислоты разведённой 16%.

Аммония молибдата раствор 5% в серной кислоте (1)

5,0 г аммония молибдата растворяют в 50 мл воды и прибавляют 50 мл серной кислоты раствора 10 М.

Аммония молибдата раствор 5% в серной кислоте (2)

5,0 г аммония молибдата растворяют в 50 мл воды и прибавляют 50 мл серной кислоты раствора 3 М.

Аммония молибдата раствор 5% в серной кислоте (3)

5,0 г аммония молибдата растворяют в 50 мл воды и прибавляют 30 мл серной кислоты раствора 40%.

Аммония молибдата раствор 2,5%

2,5 г аммония молибдата растворяют при перемешивании в 70 мл кипящей воды и выдерживают на водяной бане 2 ч при температуре 37 °С. Раствор оставляют на сутки при температуре 18–22 °С, после чего количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора водой до метки. Раствор фильтруют и хранят в склянке из тёмного стекла с притёртой пробкой при температуре 4–8 °С в течение 1 мес.

Аммония молибдата раствор 2%

Раствор аммония молибдата в воде 20 г/л.

Аммония молибдата раствор 1% в серной кислоте

1,0 г аммония молибдата растворяют в 50 мл воды и прибавляют 50 мл серной кислоты разведённой 16% (м/м).

Аммония молибдата раствор (рН 7,0)

5,0 г аммония молибдата растворяют при нагревании в 30 мл воды, затем охлаждают и доводят рН до 7,0 3,4% раствором аммиака разведённым, объём полученного раствора доводят водой до 50,0 мл.

Аммония молибдата спиртовой сернокислый раствор

Раствор I. 5,0 г аммония молибдата растворяют при нагревании в 20 мл воды.

Раствор II. Смешивают 150 мл спирта 96% с 150 мл воды. При охлаждении прибавляют 100 мл серной кислоты концентрированной.

Непосредственно перед использованием к раствору I прибавляют раствор II в соотношении 20:80.

Аммония молибдата раствор в ацетоне

1,0 г аммония молибдата растворяют в воде, доводят объём раствора тем же растворителем до 40 мл, прибавляют 3 мл 25% хлористоводородной кислоты и доводят объём раствора ацетоном до 100,0 мл.

Хранят в защищённом от света месте.

Срок годности – 1 мес.

Аммония молибдата раствор в 15% серной кислоте

1,0 г аммония молибдата растворяют в 40,0 мл 15% (о/о) раствора серной кислоты концентрированной. Срок годности – 1 сут.

Аммония молибдата реактив

Последовательно смешивают по 1 объёму 2,5% раствора аммония молибдата, 10% раствора аскорбиновой кислоты и 29,45% раствора серной кислоты, затем прибавляют 2 объёма воды.

Хранят во флаконах оранжевого стекла. Срок годности – 1 сут.

Аммония молибдата раствор в серной кислоте концентрированной (реактив Фреде)

0,1 г аммония молибдата растворяют в 10 мл серной кислоты концентрированной.

Хранят в банках оранжевого стекла. Срок годности – 6 мес.

Аммония молибдата раствор в азотной кислоте

Растворяют 6,5 г мелкораздробленной молибденовой кислоты в смеси 14 мл воды и 14,5 мл аммиака раствора концентрированного. Раствор охлаждают и постепенно при перемешивании прибавляют к смеси 32 мл охлажденного раствора азотной кислоты концентрированной и 40 мл воды и выдерживают в течение 48 ч, затем раствор фильтруют через плотный фильтр. Если при хранении раствора выделится осадок, его отделяют декантацией.

Аммония нитрат. [6484-52-2]. NH4NO3. (М.м. 80,04).

Нитрат аммония.

Кристаллический порошок белого цвета или бесцветные кристаллы; гигроскопичен.

Очень легко растворим в воде, легко растворим в метаноле, растворим в спирте 96%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Аммония оксалат. [6009-70-7]. С2H8N2O4·Н2О. (М.м. 142,11).

Оксалат диаммония, моногидрат.

Бесцветные кристаллы. Растворим в воде.

Аммония оксалата раствор 4%.

Раствор аммония оксалата в воде 40 г/л.

Аммония оксалата раствор 0,2 М.

Раствор аммония оксалата в воде 28,4 г/л.

Аммония персульфат. [7727-54-0]. (NН4)2S2О8 (М.м. 228,20).

Пероксодисульфат диаммония.

Белый кристаллический порошок. Легко растворим в воде.

Аммония персульфата раствор 20%.

20 г аммония персульфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Используют свежеприготовленным.

Аммония персульфата раствор 10%.

10 г аммония персульфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Используют свежеприготовленным.

Аммония пирролидиндитиокарбамат. [5108-96-3]. С5Н12N2S2. (М.м. 164,29).

Пирролидин-1-карбодитиоат аммония.

Кристаллический порошок от белого до светло-жёлтого цвета.

Умеренно растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96%.

Хранят в упаковке, содержащей небольшое количество аммония карбоната в полотняном мешочке.

Аммония пирролидиндитиокарбамата раствор 1%

1,0 г аммония пирролидиндитиокарбамата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Аммония рейнекат. [13573-16-5]. NH4[Cr(NCS)4(NH3)2]·Н2О. (М.м. 354,44).

Диамминтетра(тиоцианато)хромат(III) аммония, моногидрат.

Порошок или кристаллы красного цвета.

Умеренно растворим в холодной воде, растворим в горячей воде и спирте 96%.

В водном растворе разлагается с выделением свободного цианистого водорода (осторожно!).

Аммония рейнекат безводный. [13573-16-5]. NH4[Cr(NCS)4(NH3)2]. (М.м. 336,43).

Диамминтетра(тиоцианато)хромат(III) аммония.

Порошок или кристаллы красного цвета.

Растворим в горячей воде.

В водном растворе разлагается с выделением свободного цианистого водорода (осторожно!).

Аммония рейнеката раствор 10%.

10 г аммония рейнеката безводного растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Используют свежеприготовленным.

Аммония рейнеката раствор 8%.

8 г аммония рейнеката безводного растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Используют свежеприготовленным.

Аммония рейнеката раствор 2,5%.

2,5 г аммония рейнеката безводного растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Используют свежеприготовленным.

Аммония рейнеката раствор 2,0%.

2 г аммония рейнеката безводного растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Используют свежеприготовленным.

Аммония рейнеката раствор 1%.

1 г аммония рейнеката безводного растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Используют свежеприготовленным.

Аммоний роданистый. См. Аммония тиоцианат.

Аммония роданид. См. Аммония тиоцианат.

Аммония сульфамат. [7773-06-0]. NH2SO3NH4. (М.м. 114,12).

Сульфамат аммония.

Кристаллический порошок белого цвета или бесцветные кристаллы; гигроскопичен.

Очень легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Температура плавления. Около 130 °С.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Аммония сульфамата раствор 5%.

5,0 г аммония сульфамата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Аммония сульфамата раствор 2%.

2,0 г аммония сульфамата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Аммония сульфамата раствор 0,5%.

0,5 г аммония сульфамата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Аммония сульфат. [77383-20-2]. (NH4)2SO4. (М.м. 132,14).

Сульфат диаммония.

Бесцветные кристаллы или гранулы белого цвета.

Очень легко растворим в воде, практически нерастворим в ацетоне и спирте 96%.

рН. От 4,5 до 6,0 (5% раствор).

Сульфатная зола. Не более 0,1%.

Аммония сульфата раствор 20%.

20 г аммония сульфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Аммония сульфата раствор 2%.

2,0 г аммония сульфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Аммония сульфида раствор.

120 мл аммиака раствора 10% насыщают сероводородом и прибавляют 80 мл аммиака раствора 10%.

Аммония тиоцианат. [1762-95-4]. NH4SСN. (М.м. 76,12).

Тиоцианат аммония.

Бесцветные кристаллы, расплывающиеся на воздухе.

Очень легко растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Аммония тиоцианата раствор 10%.

10,0 г аммония тиоцианата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Аммония тиоцианата раствор 7,6%.

7,6 г аммония тиоцианата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Аммония тиоцианата раствор 5%.

5 г аммония тиоцианата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Аммония тиоцианата раствор 1%.

1 г аммония тиоцианата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Аммония формиат. [540-69-2]. СН5NO2. (М.м. 63,06).

Формиат аммония.

Расплывающиеся кристаллы или гранулы.

Очень легко растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Температура плавления. От 119 до 121 °С.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Аммония формиата раствор 0,01 М

0,63 г аммония формиата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Аммония фосфат. [7783-28-0]. (NH4)2НРO4. (М.м. 132,06).

Гидрофосфат диаммония.

Кристаллы или гранулы белого цвета; гигроскопичен.

Очень легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

рН. Около 8,0 (20% раствор).

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Аммония фторид. [12125-01-8]. NH4F. (М.м. 37,04).

Фторид аммония.

Бесцветные гигроскопичные кристаллы.

Легко растворим в воде.

Температура плавления. Около 167 °С (с разложением).

Аммония хлорид. [12125-02-9]. NH4Cl. (М.м. 53,49).

Хлорид аммония.

Белый кристаллический порошок.

Легко растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Аммония хлорида раствор 10,7%.

Раствор аммония хлорида в воде 107 г/л.

10,7 г аммония хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Аммония хлорида раствор 10%.

10 г аммония хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Аммония хлорида раствор 2%.

2,0 г аммония хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Аммония хлорида раствор 20% в аммиака растворе концентрированном 25%

20,0 г аммония хлорида растворяют в аммиака растворе концентрированном 25% и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Аммония хлорида раствор 2% в спирте 70%.

2,0 г аммония хлорида помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 50 мл спирта 70% и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Аммония–церия(IV) нитрат. [16744-21-3]. (NH4)2Се(NO3)6. (М.м. 548,2).

Гексанитрат диаммония–церия.

Кристаллический порошок оранжево-жёлтого цвета или прозрачные кристаллы оранжевого цвета.

Растворим в воде.

Аммония–церия(IV) сульфат. [10378-47-9]. (NH4)4Се(SO4)4·2Н2О.

(М.м. 632,6). Тетрасульфат тетрааммония–церия, дигидрат.

Кристаллический порошок или кристаллы оранжево-жёлтого цвета.

Медленно растворим в воде.

Аммония цианида раствор

2 г калия цианида растворяют в 15 мл аммиака раствора концентрированного 25% и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Аммония цитрат. [3012-65-5]. С6Н14N2О7. (М.м. 226,18).

2-Гидроксипропан-1,2,3-трикарбоксилат диамония.

Кристаллический порошок белого цвета или бесцветные кристаллы.

Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

рН. Около 4,3 (2,26% раствор).

Аммония цитрата раствор 30%.

30 г аммония цитрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл. Прибавляют три капли фенолового красного спиртового раствора 0,1% и, по каплям, аммиака раствор концентрированный 25% до красноватого окрашивания полученного раствора.

При использовании раствора для определения свинца, встряхивают полученный раствор с порциями по 20 мл дитизона раствора 0,003% до сохранения последним оранжево-зелёного окрашивания.

Ангидрид уксусный. См. Уксусный ангидрид.

Ангидрида уксусного раствор 12% (о/о) в безводном пиридине.

12 мл уксусного ангидрида смешивают с 88 мл безводного пиридина.

Хранят в банках оранжевого стекла с притертыми пробками.

Ангидрид фталевый. См. Фталевый ангидрид.

Ангидрон. См. Магния перхлорат.

Андростанолон. [521-18-6]. C19H30O2. (М.м. 290,44).

17β-Гидрокси-5α-андростан-3-он.

Содержит не менее 99,0% C19H30O2.

Белый или почти белый порошок.

Температура плавления. Около 180 °С.

Андростендион. [63-05-8]. C19H26O2. (М.м. 286,41).

Андрост-4-ен-3,17-дион.

Температура плавления. От 170 до 174 °С.

Анетол. [4180-23-8]. С10Н12О. (М.м. 148,20).

1-Метокси-4-[(1E)-проп-1-ен-1-ил]бензол.

Кристаллическая масса белого цвета при температуре до 20–21 °С, при температуре выше 23 °С – жидкость.

Практически нерастворим в воде, легко растворим в этаноле, эфире, этилацетате и петролейном эфире.

. Около 1,56.

Температура кипения. Около 230 °С.

Хроматографическая чистота анетола, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 99,0%.

цис-Анетол. [25679-28-1]. С10Н12О. (М.м. 148,20).

1-Метокси-4-[(1Z)-проп-1-ен-1-ил]бензол.

Кристаллическая масса белого цвета при температуре до 20–21 °С, при температуре выше 23 °С–жидкость.

Практически нерастворим в воде, легко растворим в этаноле, растворим в эфире, этилацетате и петролейном эфире.

. Около 1,56.

Температура кипения. Около 230 °С.

Хроматографическая чистота цис-анетола, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 92,0%.

п-Анизидин. [104-94-9]. С7Н9NО. (М.м. 123,15).

4-Метоксианилин.

Содержит не менее 97,0% С7Н9NО.

Кристаллы белого цвета.

Умеренно растворим в воде, растворим в этаноле.

Вызывает раздражение кожи; сенсибилизатор.

Хранят в защищённом от света месте при температуре от 0 до 4 °С.

При хранении n-анизидин темнеет вследствие окисления. Окисленный n-анизидин может быть восстановлен и обесцвечен следующим образом:

20 г n-анизидина растворяют в 500 мл воды при температуре 75 °С, прибавляют 1 г натрия сульфита и 10 г угля активированного, перемешивают в течение 5 мин и фильтруют. Полученный фильтрат охлаждают и выдерживают при температуре около 0 °С в течение не менее 4 ч, затем фильтруют, полученные кристаллы промывают небольшим количеством воды, охлажденной до температуры 0 °С, и сушат в вакууме над фосфора(V) оксидом.

Анилин. [62-53-3]. С6Н7N. (М.м. 93,13).

Анилин.

Бесцветная или жёлтоватого цвета жидкость.

Растворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. Около 1,02.

Температура кипения. От 183 до 186 °С.

Хранят в защищённом от света месте.

Анилина гидрохлорид. [142-04-1]. C6H7N·HCl. (М.м. 129,59).

Анилина гидрохлорид.

Содержит не менее 99,0 C6H7N·HCl.

Бесцветные кристаллы.

Температура кипения. От 196 до 198 °С.

Анилина сульфат. [542-16-5]. (C6H7N)2·H2SO4. (М.м. 284,33).

Анилина сульфат (2:1).

Содержит не менее 98,0% (C6H7N)2·H2SO4.

Бесцветные кристаллы.

Растворим в воде, мало растворим в этаноле, нерастворим в эфире.

Анионообменная смола.

Смола в хлоридной форме, содержащая четвертичные аммониевые группы [СН2N+(СН3)3], присоединенные к полимерной решетке, состоящей из полистирола поперечно-сшитого 2% дивинилбензола. Выпускают в виде гранул, размер которых должен быть указан в фармакопейных статьях.

Смолу промывают на стеклянном фильтре (40) 1 М раствором натрия гидроксида до отрицательной реакции на хлориды в промывном растворе, затем промывают водой до получения нейтральной реакции в промывной воде. Суспендируют в свежеприготовленной воде, свободной от аммиака, и защищают от углерода диоксида.

Анионообменная смола для хроматографии.

Анионообменная микропористая смола большой обменной ёмкости, полностью модифицированная триметиламмониевыми группами. Диаметр частиц 8 мкм.

Анионообменная смола для хроматографии на основе поливинилового спирта.

Анионообменная смола на основе поливинилового спирта, модифицированная четвертичными аммониевыми группами [СН2N+(СН3)3].

Выпускают в виде гранул, размер которых должен быть указан в фармакопейных статьях.

Анионообменная смола полиметакрилатная для хроматографии.

Анионообменная микропористая смола на основе полиметилакрилата, большой обменной ёмкости, полностью модифицированная триметиламмониевыми группами. Диаметр частиц 8 мкм.

Анионообменная смола сильноосновная.

Гелеобразная смола в ОН-форме, содержащая четвертичные аммониевые группы [СН2N+(СН3)3, тип I], присоединенные к полимерной решетке, состоящей из полистирола поперечно-сшитого 8% дивинилбензола.

Прозрачные гранулы коричневого цвета.

Размер частиц: от 0,2 мм до 1,0 мм.

Содержание влаги. Около 50%.

Статическая обменная ёмкость (СОЕ). Не менее 1,2 мэкв/мл.

Анионообменная смола сильноосновная (1).

Смола в хлоридной форме, содержащая четвертичные аммониевые группы [СН2N+(СН3)3], присоединенные к полимерной решетке, состоящей из полистирола поперечно-сшитого 2% дивинилбензола. Выпускают в виде гранул, размер которых должен быть указан в фармакопейных статьях.

Анионообменная смола сильноосновная для хроматографии.

Смола с четвертичными аммониевыми группами, присоединенными к решетке латекса поперечно-сшитого дивинилбензолом.

Анионообменная смола сильноосновная для хроматографии (1)

Смола с четвертичными аммониевыми группами, присоединенными к решетке латекса поперечно-сшитого дивинилбензолом. Ядрами носителя являются частицы диаметром 9-13 мкм с порами размером менее 0,1 нм. Частицы образованы этилвинилбензолом, поперечно-сшитым 55% дивинилбензолом. Латексное покрытие состоит из микрочастиц диаметром 85 нм, модифицированных на 6% алифатическими четвертичными аммониевыми группами.

Анисовый альдегид. [123-11-5]. С8Н8О2. (М.м. 136,15).

4-Метоксибензальдегид.

Маслянистая жидкость.

Очень мало растворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

Температура кипения. Около 248 °С.

Хроматографическая чистота анисового альдегида, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 99,0%.

Анисового альдегида раствор уксуснокислый.

Последовательно смешивают 0,5 мл анисового альдегида, 50 мл уксусной кислоты ледяной и 1 мл серной кислоты концентрированной.

Анисового альдегида раствор уксуснокислый в метаноле.

Последовательно смешивают 0,5 мл анисового альдегида, 10 мл уксусной кислоты ледяной, 85 мл метанола и 5 мл серной кислоты концентрированной.

Анисового альдегида раствор уксуснокислый в этаноле.

Последовательно смешивают 0,5 мл анисового альдегида, 10 мл уксусной кислоты ледяной, 85 мл этанола и 5 мл серной кислоты концентрированной.

Анисового альдегида раствор спиртовой сернокислый.

10 мл анисового альдегида смешивают с 90 мл спирта 96%, прибавляют 10 мл серной кислоты концентрированной и перемешивают.

Анисового альдегида раствор спиртовой сернокислый (2).

0,5 мл анисового альдегида смешивают с 10 мл уксусной кислоты ледяной, 85 мл спирта 96%, прибавляют 5 мл серной кислоты концентрированной и перемешивают.

Анолит для изоэлектрофокусировки рН от 3 до 5

0,1 М раствор кислоты глутаминовой и 0,5 М раствор кислоты фосфорной.

К раствору 14,71 г глутаминовой кислоты в воде прибавляют 33 мл фосфорной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Антимонила калия тартрат. См. Калия антимонилтартрат

Антитромбин III.

Антитромбин III выделяют из человеческой плазмы хроматографией на гепарин-агарозе. Он должен иметь специфическую активность не менее 6 МЕ/мг.

Антитромбина III раствор (1).

Восстанавливают антитромбин III, как указано производителем реактива, и доводят трис—EDTA—BSA буферным раствором рН 8,4 (2) до получения раствора с концентрацией антитромбина III 0,125 МЕ/мл.

Антитромбина III раствор (2).

Восстанавливают антитромбин III, как указано производителем реактива, и доводят трис—EDTA—BSA буферным раствором рН 8,4 (2) до получения раствора с концентрацией антитромбина III 1,0 МЕ/мл.

Антитромбина III раствор (3).

Восстанавливают антитромбин III, как указано производителем реактива и доводят трис(гидроксиметил)аминометана—натрия хлорида буферным раствором рН 7,4 до получения раствора с концентрацией антитромбина III 1,0 МЕ/мл.

Антраниловая кислота. См. 2-Аминобензойная кислота.

Антрацен. [120-12-7]. С14Н10. (М.м. 178,22).

Антрацен.

Кристаллический порошок белого цвета.

Практически нерастворим в воде, мало растворим в хлороформе.

Температура плавления. Около 218 °С.

Антрон. [90-44-8]. С14Н10О. (М.м. 194,23).

Антрацен-9(10H)-он.

Кристаллический порошок светло-жёлтого цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим в спирте 96%, растворим в бензоле.

Температура плавления. Около 155 °С.

Антроновый реактив 0,2%.

0,1 г антрона растворяют в 15 мл серной кислоты концентрированной. Полученный раствор должен быть жёлтого цвета. Доводят объём раствора тем же растворителем до 50 мл.

Арабиноза. [87-72-9]. С5Н10О5. (М.м. 150,13).

L-Арабинопираноза.

Кристаллический порошок белого цвета.

Легко растворима в воде.

. От + 103° до + 105° (5% раствор в воде, содержащей около 0,05% NH3).

Арбутин. [497-76-7]. С12Н16О7. (М.м. 272,25).

4-Гидроксифенил-β-D-глюкопиранозид.

Мелкие, блестящие игольчатые кристаллы белого цвета.

Легко растворим в воде, очень легко растворим в горячей воде, растворим в спирте 96%, практически нерастворим в эфире.

. Около –64° (2% раствор).

Температура плавления. Около 200 °С.

L-Аргинин. [74-79-3]. C6H14N4O2. (М.м. 174,20).

(2S)-2-Амино-5-(карбамимидоиламино)пентановаая кислота.

Растворим в воде, малорастворим в этаноле.

. +27° (8% раствор в хлористоводородной кислоте 6 М).

Температура плавления. Около 225 °С (разл.).

Аргон. [7440-37-1]. Аr. (А.м. 39,95).

Аргон.

Содержит не менее 99,995% (о/о) Аr.

Арсеназо I. [520-10-5]. C16H10AsN2Na3O11S2 (М.м. 614,3).

3-[(2-Арсонофенил)диазенил]-4,5-дигидроксинафталин-2,7-дисульфонат тринатрия.

Порошок красно-коричневого цвета. Легко растворим в воде.

Арсеназо I раствор 0,01%.

10 мг арсеназо I растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Арсеназо III. [1668-00-4]. C22H18As2N4O14S2. (М.м. 776,4).

3,6-Бис[(2-арсонофенил)диазенил]-4,5-дигидроксинафталин-2,7-дисульфоновая кислота.

Порошок тёмно-красного цвета. Легко растворим в воде.

Арсеназо III раствор 0,15%

0,15 г арсеназо III растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Аскорбиновая кислота. [50-81-7]. С6Н8О6. (М.м. 176,12).

(5R)-5-[(1S)-1,2-Дигидроксиэтил]-3,4-дигидроксифуран-2(5H)-он.

Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы, изменяют окрашивание под воздействием света и влаги.

Легко растворима в воде, растворима в спирте 96%, практически нерастворима в эфире.

Аскорбиновой кислоты раствор 10,0%.

5,0 г аскорбиновой кислоты растворяют в 30 мл воды и доводят объём раствора водой до 50,0 мл.

Аскорбиновой кислоты раствор 2,0%.

1,0 г аскорбиновой кислоты растворяют в 10 мл воды и доводят объём раствора водой до 50,0 мл.

Аскорбиновой кислоты раствор 1,0%.

0,5 г аскорбиновой кислоты растворяют в 5 мл воды и доводят объём раствора водой до 50,0 мл.

Аскорбиновой кислоты раствор 0,1%.

50 мг аскорбиновой кислоты растворяют в 0,5 мл воды и доводят объём раствора диметилформамидом до 50,0 мл.

L-Аспартил-L-фенилаланин. [13433-09-5]. С13Н16N2О5. (М.м. 280,28).

L-Аспартил-L-фенилаланин.

Порошок белого цвета.

Температура плавления. Около 210 °С с разложением.

Ауринтрикарбоновая кислота. [4431-00-9]. C22H14O9. (М.м. 422,3).

3,3'-[(3-Карбокси-4-оксоциклогекса-2,5-диен-1-ил)метилен]бис(6-гидроксибензойная кислота).

Порошок от тёмно-красного до коричневого цвета.

Температура плавления. Около 300 °С.

Ауринтрикарбоновой кислоты триаммониевая соль. См. Алюминон.

Ацеталь. [105-57-7]. С6Н14О2. (М.м. 118,17).

1,1-Диэтоксиэтан.

Прозрачная, бесцветная, летучая жидкость.

Смешивается с водой и спиртом 96%.

. Около 0,824.

. Около 1,382.

Температура кипения. Около 103 °С.

Ацетальдегид. [75-07-0]. С2Н4O. (М.м. 44,05).

Ацетальдегид.

Прозрачная бесцветная, воспламеняющаяся жидкость. Смешивается с водой и спиртом 96%.

. Около 0,788.

. Около 1,332.

Температура кипения. Около 21 °С.

Ацетальдегид-аммоний тример тригидрат. [58052-80-5]. С6H15N3·3H2O. (M.м. 183,25).

2,4,6-Триметилгексагидро-1,3,5-триазина тригидрат.

Содержание. Не менее 95,0%.

Бесцветные или белые или бледно-жёлтые кристаллы или порошок.

Температура плавления. От 95 до 97 °С.

Количественное определение. Около 0,9 г (точная навеска) вещества растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 50,0 мл. Титруют 1 М раствором хлористоводородной кислоты, определяя точку эквивалентности потенциометрически. 1 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 61,08 мг С6H15N3·3H2O.

4-Ацетамидобензойная кислота. [556-08-1].C9H9NO3. (М.м. 179,17).

4-Ацетамидобензойная кислота.

Белый или почти белый порошок или кристаллы.

Температура плавления. Около 260 °С.

Ацетаминофен. См. Парацетамол.

Ацетилацетамид. [5977-14-0]. С4Н7NO2. (М.м. 101,10).

3-Оксобутанамид.

Легко растворим в этаноле и ацетоне.

Температура плавления. От 53 до 56 °С.

Ацетилацетон. [123-54-6]. С5Н8О2. (М.м. 100,12).

Пентан-2,4-дион.

Бесцветная или слегка жёлтоватого цвета, легко воспламеняющаяся жидкость.

Легко растворим в воде, смешивается с ацетоном, спиртом 96%, эфиром и уксусной кислотой ледяной.

. От 1,452 до 1,453.

Температура кипения. От 138 до 140 °С.

Ацетилацетона реактив.

К 100 мл 15% раствора аммония ацетата прибавляют 0,2 мл ацетилацетона.

Ацетилирующая смесь.

Смешивают 1 часть уксусного ангидрида и 3 части перегнанного пиридина (фракция с температурой кипения от 114 до 115 °С). Смесь должна быть бесцветной. Смесь применяют свежеприготовленной. Обращаться с осторожностью.

N-Ацетил-ε-капролактам. [1888-91-1]. С8Н13NO2. (М.м 155,19).

1-Ацетилазепан-2-он.

Бесцветная жидкость. Смешивается с этанолом.

. Около 1,100.

. Около 1,489.

Температура кипения. Около 135 °С.

N-Ацетилнейраминовая кислота. [131-48-6]. С11Н19NО9. (М.м. 309,27).

5-Ацетамидо-3,5-дидезокси-D-глицеро-α-D-галакто-нон-2-улопиранозовая кислота.

Игольчатые кристаллы белого цвета.

Растворима в воде и метаноле, мало растворима в спирте 96%, практически нерастворима в ацетоне и эфире.

. Около –36° (1% раствор).

Температура плавления. Около 186 °С с разложением.

Ацетилтирозина этиловый эфир. [36546-50-6]. С13Н17NО4·Н2О. (М.м. 269,29).

Этил[(2S)-2-ацетамидо-3-(4-гидроксифенил)пропаноат] моногидрат.

Кристаллический порошок белого цвета; пригоден для количественного определения химотрипсина.

. От + 21° до + 25° (1% раствор в спирте 96%).

. От 60 до 68. Определение проводят при длине волны 278 нм в спирте 96%.

Ацетилтирозина этилового эфира 0,2 М раствор.

0,54 г ацетилтирозина этилового эфира растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 10,0 мл.

N-Ацетилтриптофан. [1218-34-4]. С13Н14N2О3·Н2О. (М.м. 246,26).

(2S)-2-Ацетамидо-3-(1H-индол-3-ил)пропановая кислота.

Порошок белого или почти белого цвета или бесцветные кристаллы.

Мало растворим в воде, растворим в разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов.

Температура плавления. Около 205 °С.

Ацетилхлорид. [75-36-5]. С2Н3СlO. (М.м. 78,50).

Ацетилхлорид.

Прозрачная, бесцветная, воспламеняющаяся жидкость.

Разлагается в воде и спирте 96%, смешивается с эфиром и бензолом, растворим в ацетоне, хлороформе и толуоле.

Обращаться с осторожностью.

. Около 1,10.

Температурные пределы перегонки. От 49 до 53 °С; должно перегоняться не менее 95%.

Ацетилхолина хлорид. [60-31-1]. С7Н16СlNО2. (М.м. 181,66).

2-(Ацетилокси)-N,N,N-триметилэтан-1-аминий хлорид.

Кристаллический порошок.

Очень легко растворим в холодной воде и спирте 96%, практически нерастворим в эфире; разлагается в горячей воде и разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов.

Хранят при температуре -20 °С.

N-Ацетил-L-цистеин. [616-91-1]. С5Н9NО3S. (М.м. 163,19).

N-Ацетил-L-цистеин.

Белый или почти белый порошок.

Хранить при температуре от 2 до 8 °С.

Ацетилэвгенол. [93-28-7]. С12Н14О3. (М.м. 206,24).

[2-Метокси-4-(проп-2-ен-1-ил)фенил]ацетат.

Маслянистая жидкость жёлтого цвета.

Легко растворим в спирте 96% и эфире, практически нерастворим в воде.

. Около 1,521.

Температура кипения. От 281 до 282 °С.

Хроматографическая чистота ацетилэвгенола, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 98,0%.

Ацетон. [67-64-1]. С3Н6O. (М.м. 58,08).

Пропан-2-он.

Бесцветная, прозрачная, легко воспламеняющаяся жидкость с характерным запахом.

Температура кипения. 56,24 °С.

Растворим в хлороформе, смешивается с водой, спиртом 96% и эфиром.

При необходимости используют ацетон особой чистоты.

Обращаться с осторожностью.

Ацетона раствор 0,1% (о/о)

1,0 мл ацетона вносят в не менее чем 500 мл воды и доводят объём раствора водой до 1000 мл.

Ацетон безводный.

Ацетон сушат безводным натрия сульфатом в течение 12 ч.

Ацетонитрил. [75-05-8]. С2Н3N. (М.м. 41,05).

Ацетонитрил.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Смешивается с водой, ацетоном, эфиром и метанолом.

. Около 0,78.

. Около 1,344.

Раствор 100 г/л ацетонитрила имеет нейтральную реакцию по лакмусовой бумаге.

Температурные пределы перегонки. От 80 до 82 °С; должно перегоняться не менее 95%.

Ацетонитрил, используемый для спектрофотометрии, должен выдерживать следующее дополнительное испытание.

Минимальное пропускание. 98%. Определение проводят в области длин волн от 255 до 420 нм, используя в качестве раствора сравнения воду.

Ацетонитрил для хроматографии.

Ацетонитрил, используемый в хроматографии, должен выдерживать следующее дополнительное испытание.

Минимальная чистота: 99,8%.

Оптическая плотность: Не более 0,01. Определение проводят при длине волны 240 нм, используя в качестве раствора сравнения воду.

Ацетонитрил для хроматографии особо чистый.

Минимальная чистота: 99,9%.

Оптическая плотность: Не более 0,10. Определение проводят при длине волны 200 нм, используя в качестве раствора сравнения воду.

БАПНА. [911-77-3]. C19H22N6O4∙HCl. (М.м. 434,9).

Nα-Бензоил-N-(4-нитрофенил)-DL-аргининамида гидрохлорид.

Порошок от белого до светло-коричневого цвета.

Температура плавления. 257–276 °С.

Хранить при температуре –20 °С.

Баритовая вода. См. Бария гидроксида раствор 5%.

Барбитал. [57-44-3]. C8H12N2O3. (М.м. 184,19).

5,5-Диэтил-1,3-диазинан-2,4,6-трион.

5,5-Диэтилпиримидин-2,4,6(1H,3H,5H)-трион.

Содержит не менее 98,0% C8H12N2O3.

Белый или почти белый кристаллический порошок, легко растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Температура плавления. 188–192 °С.

Барбитал натрия. [144-02-5]. C8H11N2NaO3. (М.м. 206,17).

4,6-Диоксо-5,5-диэтил-1,4,5,6-тетрагидропиримидин-2-олат натрия.

Содержит не менее 98,0% C8H11N2NaO3.

Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы, мало растворим в спирте 96%.

Барбитуровая кислота. [67-52-7]. С4Н4N2О3. (М.м. 128,09).

1,3-Диазинан-2,4,6-трион.

Пиримидин-2,4,6(1Н,3Н,5Н)-трион.

Бария ацетат. [543-80-6]. C4H6BaO4. (М.м. 255,42).

Диацетат бария.

Белый или почти белый порошок.

Растворим в воде. Ядовит.

. Около 2,47.

Бария гидроксид. [12230-71-6]. Ва(ОН)2·8Н2О. (М.м. 315,47).

Гидроксид бария, октагидрат.

Белые или бесцветные кристаллы.

Растворим в воде. Ядовит.

Бария гидроксида раствор 10%.

К 10,0 г бария гидроксида прибавляют 80 мл предварительно нагретой до 50 °С воды и перемешивают в течение 30 мин. Доводят объём раствора водой до 100 мл. Полученный раствор выдерживают при комнатной температуре в течение 24 ч и фильтруют. Перед использованием раствор повторно фильтруют.

Бария гидроксида раствор 4,73%.

Раствор бария гидроксида в воде 47,3 г/л.

Бария гидроксида раствор 5%.

5 г бария гидроксида взбалтывают со 100 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды. Используют свежеприготовленным. Ядовит.

Бария карбонат. [513-77-9]. ВаСО3. (М.м. 197,34).

Карбонат бария.

Порошок белого цвета или рассыпчатая масса.

Практически нерастворим в воде, спирте 96%, растворим в растворе аммония хлорида.

Бария нитрат. [10022-31-8]. Ва(NO3)2 (М.м. 261,34).

Нитрат бария.

Бесцветные кристаллы. Растворим в холодной воде; легко растворим в горячей воде. Ядовит.

Бария нитрата раствор 5%.

5 г бария нитрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл. Раствор фильтруют. Ядовит.

Бария сульфат. [7727-43-7]. ВаSO4. (М.м. 233,39).

Сульфат бария.

Белый порошок.

Практически нерастворим в воде.

Бария хлорид. [10326-27-9]. ВаСl2·2Н2О. (М.м. 244,27).

Хлорид бария.

Бесцветные прозрачные кристаллы.

Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%. Ядовит.

Бария хлорида раствор 25%.

Раствор бария хлорида в воде 250 г/л. Ядовит.

Бария хлорида раствор 20%.

Раствор бария хлорида в воде 200 г/л. Ядовит.

Бария хлорида раствор 12%.

Раствор бария хлорида в воде 120 г/л. Ядовит.

Бария хлорида раствор 10%.

Раствор бария хлорида в воде 100 г/л. Ядовит.

Бария хлорида раствор 6,1%.

Раствор бария хлорида в воде 61 г/л. Ядовит.

Бария хлорида раствор 5%.

Раствор бария хлорида в воде 50 г/л. Ядовит.

Бария хлорида раствор 3,65%.

Раствор бария хлорида в воде 36,5 г/л. Ядовит.

Бензальацетон. [1896-62-4]. С10Н10О. (М.м. 146,19).

(3E)-4-Фенилбут-3-ен-2-он.

Содержит не менее 99% С10Н10О.

Температура плавления. Около 40 °С.

Температура кипения. То 260 до 262 °С.

Бензальдегид. [100-52-7]. С7Н6О. (М.м. 106,12).

Бесцветная или слегка жёлтоватого цвета жидкость, сильно преломляющая свет, с запахом горького миндаля.

Мало растворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. Около 1,05.

. Около 1,545.

Температурные пределы перегонки. От 177 до 180 °С; должно перегоняться не менее 95%.

На воздухе легко окисляется с образованием бензойной кислоты.

Хранят в защищённом от света месте.

Бензальдегида раствор насыщенный.

1 мл бензальдегида взбалтывают в склянке с 250 мл воды. Смесь оставляют до следующего дня, время от времени взбалтывая. Перед применением сливают прозрачную жидкость. Используют свежеприготовленным.

Бензгидрол. [91-01-0]. C13H12O. (М.м. 184,23).

Дифенилметанол.

Содержит не менее 99% C13H12O.

Температура плавления. От 65 до 67 °С.

Температура кипения. Около 297 °С.

Бензидин. [92-87-5]. C12H12N2 (М.м. 184,24).

[1,1'-Бифенил]-4,4'-диамин.

Белые или слегка жёлтоватые мелкоигольчатые кристаллы.

Практически нерастворим в воде, растворим в спирте 96% и эфире.

Обращаться с осторожностью.

Бензидина раствор 1%

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 г бензидина, растворяют в 20 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора водой до метки.

Бензил. [134-81-6]. C14H10О2 (М.м. 210,23).

1,2-Дифенилэтан-1,2-дион.

Кристаллический порошок жёлтоватого цвета.

Нерастворим в воде, растворим в спирте 96%, этилацетате и толуоле.

Температура плавления. 95 °С.

Бензилбензоат. [120-51-4]. С14Н12О2 (М.м. 212,24).

Бензилбензоат.

Бесцветные или почти бесцветные кристаллы, или бесцветная или почти бесцветная маслянистая жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается со спиртом 96%, эфиром, метиленхлоридом, с жирными и эфирными маслами.

Бензилкоричный эфир. [103-41-3]. C16H14О2 (М.м. 238,28).

Бензил(3-фенилпроп-2-еноат).

Бесцветные или жёлтоватого цвета кристаллы.

Практически нерастворим в воде, растворим в спирте 96% и эфире.

Температура плавления. Около 39 °С.

Бензиловая кислота. [76-93-7]. C14H12O3. (М.м. 228,24).

Гидрокси(дифенил)уксусная кислота.

Содержит не менее 99,0% C14H12O3.

Температура плавления. От 149 до 151 °С.

Бензиловый спирт. [100-51-6]. С7Н8О. (М.м. 108,14).

Фенилметанол.

Прозрачная, бесцветная, холодящая, маслянистая жидкость.

Растворим в воде; смешивается со спиртом 96%, эфиром, жирными и эфирными маслами.

2-Бензилпиридин. [101-82-6]. C12H11N. (М.м. 169,22).

2-Бензилпиридин.

Содержит не менее 98,0% C12H11N.

Жидкость жёлтого цвета.

Температура плавления. От 13 до 16 °С.

Бензин авиационный. См. ГОСТ 1012-72.

Бензогидразид. [613-94-5]. C7H8N2O. (М.м. 136,15).

Бензогидразид.

Бензоиларгинина этилового эфира гидрохлорид. [2645-08-1]. C15H23ClN4O3. (М.м. 342,82).

Этил[(2S)-5-карбамимидамидо-2-бензамидопентаноата гидрохлорид.

Кристаллический порошок белого цвета.

Очень легко растворим в воде и этаноле, практически нерастворим в эфире.

от –15° до –18° (1% раствор).

Температура плавления. Около 129 °С.

: от 310 до 340. Определение проводят при длине волны 227 нм, используя 0,001% раствор.

2-Бензоилбензойная кислота. [85-52-9]. C14H10O3. (М.м. 226,23).

2-Бензоилбензойная кислота.

Содержит не менее 99% C14H10O3.

Температура плавления. От 127 до 129 °С.

3-Бензоилбензойная кислота. [579-18-0]. C14H10O3. (М.м. 226,23).

3-Бензоилбензойная кислота.

Содержит не менее 99% C14H10O3.

Температура плавления. От 164 до 166 °С.

4-Бензоилбензофенон. [2128-93-0]. C19H14O. (M.м. 258,31).

4-Фенилбензофенон.

Почти белый кристаллический порошок.

Температура плавления. 99-103 °С.

N-Бензоил-L-пролил-L-фенилаланил-L-аргинин 4-нитроанилида ацетат.

C35H42N8O8. (М.м. 702,76).

Бензоилхлорид. [98-88-4]. C7H5СlO. (М.м. 140,57).

Бензоилхлорид.

Бесцветная, слезоточивая жидкость.

Растворим в эфире, разлагается в воде и спирте 96%.

Обращаться с осторожностью.

. Около 1,21.

Температура кипения. Около 197 °С.

Бензоин. [579-44-2]. C14H12О2. (М.м. 212,24).

(2RS)-2-Гидрокси-1,2-дифенилэтан-1-он.

Кристаллы слегка жёлтоватого цвета.

Очень мало растворим в воде, легко растворим в ацетоне, растворим в горячем спирте 96%, умеренно растворим в эфире.

Температура плавления. Около 137 °С.

Бензойная кислота. [65-85-0]. C7H6О2. (М.м. 122,12).

Бензойная кислота.

Бесцветные игольчатые кристаллы или белый мелкокристаллический порошок.

Мало растворима в воде, легко растворима в спирте 96%, растворима в хлороформе и бензоле.

Температура плавления. От 121 до 124 °С.

Бензокаин. [94-09-7]. C9H11NO2. (М.м. 165,19).

Этил(4-аминобензоат).

Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Легко растворим в спирте 96% и хлороформе, очень мало растворим в воде.

Бензол. [71-43-2]. C6H6. (М.м. 78,11).

Бензол.

Прозрачная, бесцветная, воспламеняющаяся жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

Температура кипения. Около 80 °С.

Ядовит.

Бензоламин. См. Анилин.

Бензофенон. [119-61-9]. C13H10О. (М.м. 182,22).

Дифенилметанон.

Кристаллы в виде призм.

Практически нерастворим в воде, легко растворим в спирте 96% и эфире, растворим в хлороформе.

Температура плавления. Около 48 °С.

1,4-Бензохинон. [106-51-4]. C6H4О2. (М.м. 108,09).

Циклогекса-2,5-диен-1,4-дион.

Жёлтоватые призмы или кристаллический порошок.

Очень мало растворим в воде, растворим в спирте 96% и эфире.

Бензетония хлорид. [121-54-0]. C27H42СlNО2. (М.м. 448,08).

N-Бензил-N,N-диметил-2-{2-[4-(2,4,4-триметилпентан-2-ил)фенокси]этокси}этан-1-аминий хлорид.

Белый или почти белый кристаллический порошок без запаха.

Очень легко растворим в спирте 96% и хлороформе, легко растворим в воде.

Температура плавления. От 158 до 164 °С.

Хранят в защищённом от света месте.

Бензетония хлорид моногидрат. [5929-09-9]. C27H42СlNО2·Н2О. (М.м. 466,10).

N-Бензил-N,N-диметил-2-{2-[4-(2,4,4-триметилпентан-2-ил)фенокси]этокси}этан-1-аминий хлорид моногидрат.

Мелкокристаллический порошок белого цвета или бесцветные кристаллы.

Растворим в воде и спирте 96%, мало растворим в эфире.

Температура плавления. Около 163 °С.

Хранят в защищённом от света месте.

Бергаптен. [484-20-8]. С12H8О4. (М.м. 216,19).

4-Метокси-7H-фуро[3,2-g][1]бензопиран-7-он.

Бесцветные кристаллы.

Практически нерастворим в воде, умеренно растворим в спирте 96% и мало растворим в уксусной кислоте ледяной.

Температура плавления. Около 188 °С.

Бертолетова соль. См. Калия хлорат.

Бетадекс. [7585-39-9]. C42H70O35. (М.м. 1135,0).

Циклогептакис-(1→4)-(α-D-глюкопиранозил).

Содержит не менее 97% C42H70O35.

Растворим в 1 М растворе аммиака, умеренно растворим в воде, практически нерастворим в этаноле.

. От +159° до +165° (1,5% в воде).

Температура плавления. От 290 до 300 °С(с разл.).

Бетулин. [473-98-3]. C30H50O2. (М.м. 442,7).

Луп-20(29)-ен-3β,28-диол.

Белый или почти белый кристаллический порошок.

Температура плавления. От 248 до 251 °С.

Бетулина раствор 0,2% в метиленхлориде

0,1 г бетулина помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора этим же растворителем до метки.

Биоханин А. [491-80-5]. C16H12O5. (М.м. 284,26).

5,7-Дигидрокси-3-(4-метоксифенил)-4Н-1-бензопиран-4-он.

Твёрдое вещество.

Умеренно растворим в диметилсульфоксиде, мало растворим в этаноле, очень мало растворим в воде.

2,2'-Бипиридин. [366-18-7]. C10H8N2. (М.м. 156,18).

2,2'-Бипиридин.

Содержит не менее 98% C10H8N2.

Растворим в органических растворителях, мало растворим в воде.

Температура плавления. От 70 до 73 °С.

2,2'-Бипиридина раствора в метаноле 1%.

1,0 г 2,2'-бипиридина помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки.

2,2'-Бипиридина раствор в этаноле 0,25%.

0,25 г 2,2'-бипиридина растворяют в 100 мл этанола.

Бисбензимид. [23491-44-3]. C25H24N6O. (М.м. 424,5). 4-[5-(4-Метилпиперазин-1-ил)[1H,1ʹH-2,5ʹ-бибензимидазол]-2ʹ-ил]фенол.

Бисбензимида тригидрохлорид. [23491-45-4]. C25H24N6O·3HCl. (М.м. 533,9). 4-[5-(4-Метилпиперазин-1-ил)[1H,1ʹH-2,5ʹ-бибензимидазол]-2ʹ-ил]фенола тригидрохлорид.

Бисбензимида тригидрохлорид пентагидрат. C25H24N6O·3HCl·5H2O. (М.м. 624,0). 4-[5-(4-Метилпиперазин-1-ил)[1H,1ʹH-2,5ʹ-бибензимидазол]-2ʹ-ил]фенола тригидрохлорид пентагидрат.

Бисбензимида исходный раствор 0,005%.

5 мг бисбензимида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Хранят в тёмном месте.

Бисбензимида рабочий раствор.

Непосредственно перед использованием 100 мкл исходного раствора бисбензимида доводят фосфатным забуференным физиологическим раствором рН 7,4 до 100,0 мл.

N,O-Бис(триметилсилил)ацетамид. [10416-59-8]. С8Н21NOSi2.

(М.м. 203,43). (Триметилсилил)[_N_-(триметилсилил)этанимидоат].

Бесцветная жидкость.

. Около 0,83.

N,O-Бис(триметилсилил)трифторацетамид. [25561-30-2]. С8H18F3NOSi2.

(М.м. 257,40).

(Триметилсилил)[_N_-(триметилсилил)-2,2,2-трифторэтанимидоат].

Бесцветная жидкость.

. Около 0,97.

. Около 1,38.

Температура кипения. Около 40 °С при 12 мм рт. ст.

Бис(этилендиамин)меди(II) гидроксида раствор 1 М. [14552-35-3]. C4H18CuN4O2. (М.м. 217,76).

Этан-1,2-диамин—меди(II) гидроксид 2:1.

Биурет. [108-19-0]. C2H5N3О2. (М.м. 103,08).

2-Имидодикарбодиамид.

Кристаллы белого цвета; гигроскопичны.

Растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96%, очень мало растворим в эфире.

Температура плавления. От 188 до 190 °С с разложением.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Биуретовый реактив.

1,5 г меди(II) сульфата и 6,0 г калия-натрия тартрата растворяют в 500 мл воды, прибавляют 300 мл 10% раствора натрия гидроксида, свободного от карбонатов, доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл и перемешивают.

Бифенил. [92-52-4]. C12H10. (М.м. 154,21).

1,1'-Бифенил.

Кристаллический порошок белого цвета.

Практически нерастворим в воде.

Температура плавления. От 68 до 70 °С.

Бифенил-4-ол. [92-69-3]. C12H10О. (М.м. 170,21).

[1,1'-Бифенил]-4-ол.

Кристаллический порошок белого цвета.

Практически нерастворим в воде.

Температура плавления. От 164 до 167 °С с разложением.

БКФ (ВRP) индикатора раствор

0,1 г бромтимолового синего, 20 мг метилового красного и 0,2 г фенолфталеина растворяют в спирте 96%, доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл и фильтруют.

Бора фторид. [7637-07-2]. ВF3. (М.м. 67,81).

Трифторид бора.

Бесцветный газ.

Бора фторид в метаноле 20%.

Раствор бора фторида в метаноле 200 г/л.

Бора фторид в метаноле 14%.

Раствор бора фторида в метаноле 140 г/л.

Бора хлорид. [10294-34-5]. ВСl3. (М.м. 117,18).

Трихлорид бора.

Бесцветный газ. Бурно реагирует с водой. Используют в виде растворов в подходящих растворителях (2-хлорэтанол, метиленхлорид, гексан, гептан, метанол).

Ядовит, вызывает коррозию.

Температура кипения. Около 12,6 °С.

. Около 1,420.

Бора хлорида раствор в метаноле 12%.

Раствор бора хлорида в метаноле 120 г/л.

Хранят в защищённом от света месте при температуре–20 °С, преимущественно в ампулах.

Борная кислота. [10043-35-3]. Н3ВО3. (М.м. 61,83).

Борная кислота.

Бесцветные, блестящие, слегка жирные на ощупь чешуйки или мелкий кристаллический порошок.

Легко растворима в горячей воде (100 °С), глицерине; растворима в спирте 96%, очень мало растворима в ацетоне.

Борной кислоты раствор 6%.

6 г борной кислоты растворяют в воде при нагревании, охлаждают и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Борной кислоты раствор 4%.

4 г борной кислоты растворяют в воде при нагревании, охлаждают и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Борной кислоты раствор 2%.

2 г борной кислоты растворяют в воде при нагревании, охлаждают и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Борной кислоты раствор 0,2% спиртовой.

0,5 г борной кислоты растворяют при нагревании в смеси 25 мл спирта 96% и 20 мл воды в мерной колбе вместимостью 250 мл, охлаждают и доводят объём раствора спиртом 96% до метки.

Борной кислоты 0,6 М раствор.

37,098 г борной кислоты растворяют при нагревании в 250–300 мл воды, доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Борной кислоты 0,2 М раствор.

12,366 г борной кислоты растворяют при нагревании в 100–150 мл воды, доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Борнеол. [507-70-0]. C10H18О. (М.м. 154,25).

(1R,2S,4R)-1,7,7-Триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ол.

Бесцветные кристаллы. Легко сублимируется.

Практически нерастворим в воде, легко растворим в спирте 96%, эфире и петролейном эфире.

Температура плавления. Около 208 °С.

Хроматография. Определение проводят методом тонкослойной хроматографии (ТСХ), используя в качестве тонкого слоя силикагель G. На линию старта хроматографической пластинки наносят 10 мкл 0,1% раствора в толуоле. Хроматографируют в хлороформе. Когда фронт растворителя пройдет 10 см от линии старта, пластинку вынимают из камеры, сушат на воздухе и опрыскивают раствором анисового альдегида, расходуя 10 мл на пластинку площадью 200 мм2, сушат при температуре от 100 до 105 °С в течение 10 мин. На хроматограмме должно обнаруживаться только одно основное пятно.

Борнилацетат. [5655-61-8]. C12H20О2. (М.м. 196,29).

{(1R,2S,4R)-1,7,7-Триметилбицикло[2.2.1]гепт-2-ил}ацетат.

Бесцветные кристаллы или бесцветная жидкость.

Очень мало растворим в воде, растворим в спирте 96% и эфире.

Температура плавления. Около 28 °С.

Хроматография. Определение проводят методом тонкослойной хроматографии, используя в качестве тонкого слоя силикагель G. На линию старта хроматографической пластинки наносят 10 мкл 0,2% раствора в толуоле. Хроматографируют в хлороформе. Когда фронт растворителя пройдет 10 см, пластику вынимают из камеры, сушат на воздухе и опрыскивают раствором анисового альдегида, расходуя 10 мл на пластинку площадью 200 мм2, сушат при температуре от 100 до 105 °С в течение 10 мин. На хроматограмме должно обнаруживаться только одно основное пятно.

Бредфорда реактив. См. Кислотного синего 90 раствор.

Бриллиантовый синий. См. Кислотный синий.

Бром. [7726-95-6]. Вr2. (М.м. 159,81).

Бром.

Красно-бурая легко летучая жидкость с удушливым запахом.

Мало растворим в воде, растворим в спирте 96% и эфире.

Обращаться с осторожностью.

Брома раствор.

30 г брома и 30 г калия бромида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

4-Броманилин. [106-40-1]. С6H6BrN. (М.м. 172,02).

Бледно-жёлтый порошок. Очень мало растворим в воде.

Температура плавления. От 60 до 64 °С.

Бромелаин. [37189-34-7].

Концентрат протеолитических ферментов, получаемых из Ananas comosus L. Merr.

Активность: 1 г бромелаина высвобождает из раствора желатина за 20 мин при 45 °С и pH 4,5 около 1,2 г азота аминогрупп.

Бромелаина раствор.

1,0 г бромелаина растворяют в смеси фосфатный буферный раствор pH 5,5—натрия хлорида раствор 0,9% и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Бромная вода.

3 мл брома встряхивают с 100 мл воды до насыщения.

Хранят над избытком брома в банке оранжевого стекла с притертой пробкой, в прохладном защищённом от света месте.

Брома раствор спиртовой.

В коническую колбу вместимостью 250 мл помещают 90 мл спирта 96%, при перемешивании и охлаждении колбы снаружи льдом осторожно постепенно прибавляют 10 мл отмеренного мерным цилиндром брома.

Хранят в банке оранжевого стекла, закрытой притертой пробкой, в тёмном, прохладном месте.

5-Бром-2′-деоксиуридин. [59-14-3]. C9H11ВrN2О5. (М.м. 307,10).

5-Бром-1-(2-дезокси-β-D-рибофуранозил)пиримидин-2,4(1Н,3Н)-дион.

Температура плавления. Около 194 °С.

Бромистоводородная кислота концентрированная. [10035-10-6]. HBr.

(М.м. 80,91).

Бесцветная жидкость с резким запахом, дымящая на воздухе.

Содержит не менее 47% и не более 49% НBr (м/м).

. От 1,174 до 1,189.

Бромистоводородной кислоты 30% раствор.

30% раствор бромистого водорода в уксусной кислоте ледяной.

Перед вскрытием содержимое осторожно дегазируют.

Бромистоводородная кислота разведённая.

5,0 мл бромистоводородной кислоты 30% раствора помещают во флаконы из тёмного стекла, укупоривают в атмосфере аргона полиэтиленовыми пробками и хранят в защищённом от света месте. Непосредственно перед использованием прибавляют 5,0 мл уксусной кислоты ледяной и перемешивают.

Хранят в тёмном месте.

Бромистоводородной кислоты 47% раствор. См. Бромистоводородная кислота концентрированная.

Бромистоводородная кислота разведённая 0,79%.

Раствор бромистого водорода в воде 7,9 г/л.

16,81 г бромистоводородной кислоты концентрированной растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Бромкрезоловый зеленый (синий). [76-60-8]. C21H14Вr4О5S. (М.м. 698,0).

3,3-Бис(3,5-дибром-4-гидрокси-2-метилфенил)-3H-2,1λ6-бензоксатиол-1,1-дион.

Порошок белого с коричневатым оттенком цвета.

Мало растворим в воде, растворим в спирте 96% и разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов.

Бромкрезолового зеленого (синего) раствор 0,4% в спирте 96%.

0,4 г бромкрезолового зеленого (синего) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 50 мл спирта 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хранят в прохладном, защищённом от света месте.

Срок годности 6 месяцев.

Бромкрезолового зеленого (синего) раствор 0,05%.

50 мг бромкрезолового зеленого растворяют в 0,72 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида и 20 мл спирта 96%, доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Испытание на чувствительность. К 100 мл воды, свободной от углерода диоксида, прибавляют 0,2 мл раствора бромкрезолового зеленого; появляется синее окрашивание, которое переходит в жёлтое при прибавлении не более 0,2 мл 0,02 М раствора хлористоводородной кислоты.

Переход окраски от жёлтой к синей в интервале рН 3,6–5,2.

Бромкрезолового зеленого (синего) раствор 0,04%.

0,1 г индикатора растворяют в 7,15 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора свежепрокипяченной и охлажденной водой до 250,0 мл.

Переход окраски раствора от жёлтой к синей в интервале рН 3,8–5,4.

Бромкрезолового зеленого (синего) раствор 0,1%.

0,1 г индикатора растворяют в 50 мл спирта 96% и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Переход окраски раствора от жёлтой к синей в интервале рН 3,8–5,4.

Бромкрезолового зеленого и метилового красного раствор.

0,15 г бромкрезолового зеленого и 0,1 г метилового красного растворяют в 180 мл этанола и доводят объём раствора водой до 200 мл.

Бромкрезоловый зеленый (синий) водорастворимый. С21Н17Вr4NO5S. (М.м. 715,0). 2-[(3,5-Дибром-4-гидрокси-2-метилфенил)(3,5-дибром-2-метил-4-оксоциклогекса-2,5-диен-1-илиден)метил]бензолсульфонат аммония.

Порошок черного цвета. Легко растворим в воде.

Переход окраски раствора от жёлтой к синей в интервале рН 3,8–5,4.

Раствор индикатора. 0,04% раствор.

Бромкрезоловый пурпурный. [115-40-2]. С21Н16Вr2O5S. (М.м. 540,2).

3,3-Бис(3-бром-4-гидрокси-5-метилфенил)-3H-2,1λ6-бензоксатиол-1,1-дион.

Порошок розоватого цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим в спирте 96% и разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов.

Бромкрезолового пурпурного раствор 0,1%.

0,1 г индикатора растворяют в 50 мл спирта 96% при нагревании и после охлаждения доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Переход окраски раствора от жёлтой к пурпурной в интервале рН 5,2–6,8.

Бромкрезолового пурпурного раствор 0,05%.

50 г бромкрезолового пурпурного растворяют в 0,92 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида и 20 мл спирта 96%, доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Испытание на чувствительность. К 100 мл воды, свободной от углерода диоксида, прибавляют 0,2 мл раствора бромкрезолового пурпурного и 0,05 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида; появляется синевато- фиолетовое окрашивание, которое переходит в жёлтое при прибавлении не более 0,2 мл 0,02 М раствора хлористоводородной кислоты.

Переход окраски от жёлтой до синевато-фиолетовой в интервале рН 5,2–6,8.

Бромкрезолового пурпурного раствор 0,04%.

0,1 г индикатора растворяют в 9,25 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора свежепрокипяченной и охлажденной водой до 250 мл.

Переход окраски раствора от жёлтой к пурпурной в интервале рН 5,2–6,8.

Бромкрезоловый пурпурный водорастворимый. С21Н19Вr2NO5S. (М.м. 557,3). 2-[(3-Бром-4-гидрокси-5-метилфенил)(3-бром-5-метил-4-оксоциклогекса-2,5-диен-1-илиден)метил]бензолсульфонат аммония.

Мелкокристаллический порошок тёмно-красного или тёмно-коричневого цвета.

Легко растворим в воде.

Переход окраски раствора от жёлтой к пурпурной в интервале рН 5,2–6,8.

Раствор индикатора. 0,04% раствор.

Бромтимоловый синий. [76-59-5]. С27Н28Вr2O5S. (М.м. 624,4).

3,3-Бис[3-бром-4-гидрокси-2-метил-5-(пропан-2-ил)фенил]-3H-2,1λ6-бензоксатиол-1,1-дион.

Порошок от красновато-розового до коричневатого цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим в спирте 96% и разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов.

Бромтимолового синего раствор 1% в диметилформамиде.

Раствор бромтимолового синего в диметилформамиде 10 г/л.

Бромтимолового синего раствор 0,15%.

0,15 г бромтимолового синего и 0,15 г натрия карбоната безводного растворяют в воде и доводят водой до объёма 100 мл.

Бромтимолового синего раствор 0,1% спиртовой.

0,1 г бромтимолового синего растворяют в 50 мл спирта 96% при нагревании и после охлаждения доводят водой до объёма 100 мл.

Переход окраски от жёлтой к синей в интервале рН 6,0–7,6.

Бромтимолового синего раствор 0,05%.

50 мг бромтимолового синего растворяют в смеси 4 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида и 20 мл спирта 96%, доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Испытание на чувствительность. К 100 мл воды, свободной от углерода диоксида, прибавляют 0,3 мл раствора бромтимолового синего; появляется жёлтое окрашивание, которое переходит в синее при прибавлении не более 0,1 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида.

Переход окраски от жёлтой к синей в интервале рН 5,8–7,4.

Бромтимолового синего раствор 0,04%.

0,1 г бромтимолового синего растворяют в 8 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 250,0 мл.

Переход окраски раствора от жёлтой к синей в интервале рН 6–7,6.

Бромтимолового синего раствор 0,04% спиртовой.

К 0,1 г бромтимолового синего прибавляют 3,2 мл 0,05 М раствора натрия гидроксида и 5 мл спирта 90%, нагревают до растворения, полученный раствор охлаждают и доводят спиртом 90% до объёма 250 мл.

Бромтимоловый синий водорастворимый. С27Н31Вr2NO5S. (М.м. 641,4).

2-{3-Бром-4-гидрокси-2-метил-5-(пропан-2-ил)фенил)[3-бром-2-метил-4-оксо-5-(пропан-2-ил)циклогекса-2,5-диен-1-илиден]метил}бензолсульфонат аммония.

Мелкокристаллический порошок от тёмно-коричневого до черного цвета. Растворим в воде.

Переход окраски раствора от жёлтой к синей в интервале рН 6–7,6.

Раствор индикатора. 0,04% раствор.

4-Бромфенацилбромид. [99-73-0]. C8H6Br2O. (М.м. 277,94).

1-(4-Бромфенил)этан-1-он.

Содержит не менее 98% C8H6Br2O.

Грязно-белые кристаллы или порошок. Сильный лакриматор.

Практически нерастворим в воде, в щелочных растворах гидролизуется.

. Около 1,848.

. Около 1,603.

Температура плавления. 100–108 °С.

Хранить при температуре 2–8 °С.

4-Бромфенол. [106-41-2]. С6Н4ВrOH. (М.м. 173,01).

1-Бром-4-гидроксибензол.

Бесцветный или бледно-оранжевый или бледно-розовый порошок.

Растворим в спирте.

Бромфеноловый красный. [2800-80-8]. С19Н12Вr2O5S. (М.м. 512,2).

3,3-Бис(3-бром-4-гидроксифенил)-3H-2,1λ6-бензоксатиол-1,1-дион.

Красновато-коричневые кристаллы.

Растворим в спирте, умеренно растворим в воде.

Переход окраски от жёлтой к красной в интервале рН 5,2–6,8.

Бромфеноловый синий. [115-39-9]. С19Н10Вr4O5S. (М.м. 670,0).

3,3-Бис(3,5-дибром-4-гидроксифенил)-3H-2,1λ6-бензоксатиол-1,1-дион.

Порошок светлого оранжево-жёлтого цвета.

Очень мало растворим в воде, мало растворим в спирте 96%, легко растворим в растворах гидроксидов щелочных металлов.

Бромфенолового синего раствор 0,2% спиртовой

0,2 г бромфенолового синего растворяют при нагревании в 3 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида и 10 мл спирта 96%, полученный раствор охлаждают и доводят спиртом 96% до 100,0 мл.

Бромфенолового синего раствор 0,1% водно-спиртовой

0,1 г бромфенолового синего растворяют при нагревании на водяной бане в 50 мл спирта 96%, полученный раствор охлаждают до комнатной температуры и доводят водой до 100,0 мл.

Бромфенолового синего раствор 0,04% спиртовой

20,0 мл бромфенолового синего раствора 0,2% спиртового доводят спиртом 96% до 100,0 мл.

Бромфенолового синего раствор 0,1%

0,1 г бромфенолового синего растворяют в смеси 1,5 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида и 20 мл спирта 96%, доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Испытание на чувствительность. К 20 мл воды, свободной от углерода диоксида, прибавляют 0,05 мл раствора бромфенолового синего и 0,05 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты; появляется жёлтое окрашивание, которое переходит в синевато-фиолетовое при прибавлении не более 0,1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида.

Переход окраски от жёлтой к синевато-фиолетовой в интервале рН 2,8–4,4.

Бромфенолового синего раствор 0,05%.

50 мг бромфенолового синего растворяют при осторожном нагревании в 4 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида и доводят водой до 100,0 мл.

Бромфеноловый синий водорастворимый. С19Н13Вr4NO5S (М.м. 687,0).

2-[(3,5-Дибром-4-гидроксифенил)(3,5-дибром-4-оксоциклогекса-2,5-диен-1-илиден)метил]бензолсульфонат аммония.

Мелкокристаллический порошок черного цвета.

Легко растворим в воде.

Переход окраски раствора от жёлтой к синей в интервале рН 3–4,6.

Раствор индикатора. 0,04% раствор.

Бруцин. [357-57-3]. С23Н26N2O4·2Н2О. (М.м. 430,5).

2,3-Диметоксистрихнидин-10-он дигидрат.

Бесцветные кристаллы.

Мало растворим в воде, легко растворим в спирте 96% и эфире.

Температура плавления. Около 178 °С.

Бумага для хроматографии.

Чистая целлюлозная бумага с гладкой поверхностью и толщиной от 0,18 до 1,3 мм.

Тип бумаги и толщину указывают в испытаниях, в которых она используется.

Бура. См. Натрия тетраборат.

Бутан-1,4-дисульфокислота. [27665-39-0]. C4H10O6S2. (М.м. 218,25).

Бутан-1,4-дисульфоновая кислота.

Бесцветная жидкость.

Содержит не менее 97% C4H10O6S2.

. Около 1,657.

Бутановая кислота. См. Масляная кислота.

Бутанол. [71-36-3]. С4Н10О. (М.м. 74,12).

Бутан-1-ол.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Растворим в воде, смешивается со спиртом 96%, эфиром.

. Около 0,81.

Температура кипения. От 116 до 119 °С.

2-Бутанол. [78-92-2]. С4Н10О. (М.м. 74,12).

Бутан-2-ол.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Легко растворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. Около 0,81.

Температурные пределы перегонки. От 99 до 100 °С; должно перегоняться не менее 95%.

трет-Бутанол. См. трет-Бутиловый спирт.

2-Бутанон. См. Метилэтилкетон.

Бутиламин. [109-73-9]. С4Н11N. (М.м. 73,14).

Бутан-1-амин.

Бесцветная жидкость. Смешивается с водой, спиртом 96% и эфиром.

. Около 1,401.

Температура кипения. Около 78 °С.

Перегоняют и используют в течение 1 мес.

трет-Бутиламин. [75-64-9]. С4Н11N. (М.м. 73,14).

2-Метилпропан-2-амин.

Жидкость.

Смешивается со спиртом 96%.

. Около 0,694.

. Около 1,378.

Температура кипения. Около 46 °С.

Бутилацетат. [123-86-4]. С6Н12О2. (М.м. 116,16).

Бутилацетат.

Прозрачная, бесцветная, воспламеняющаяся жидкость.

Мало растворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. Около 0,883.

. Около 1,395.

Температурные пределы перегонки. От 123 до 126 °С; должно перегоняться не менее 95%.

Бутанол. Не более 0,2%. Определение проводят методом газовой хроматографии.

Бутилформиат. Не более 0,1%. Определение проводят методом газовой хроматографии.

Бутилпропионат. Не более 0,1%. Определение проводят методом газовой хроматографии.

Вода. Не более 0,1%.

Количественное определение. Не менее 99,5% С6Н12О2. Определение проводят методом газовой хроматографии.

Бутилбороновая кислота. [4426-47-5]. С4Н11ВО2. (М.м. 101,94).

Бутилбороновая кислота.

Содержит не менее 98% С4Н11ВО2.

Температура плавления. От 90 до 92 °С.

Бутилгидрокcианизол. [25013-16-5] (смесь). C11H16O2. (М.м. 180,24).

2-трет-Бутил-4-метоксифенол [121-00-6], содержащий не более 10% 3-трет-бутил-4-метоксифенола [88-32-4]

Белый, желтоватый или слегка розоватый кристаллический порошок.

Очень легко растворим в метиленхлориде, легко растворим в спирте 96%, практически нерастворим в воде.

трет-Бутилгидроксипероксид. См. трет-Бутилгидропероксид.

Бутилгидрокситолуол. [128-37-0]. С15Н24О. (М.м. 220,35).

2,6-Ди(трет-бутил)-4-метилфенол.

Белый или жёлтовато-белый кристаллический порошок.

Практически нерастворим в воде, очень легко растворим в ацетоне и эфире, легко растворим в спирте 96% и растительных маслах.

1,3-Бутиленгликоль. [107-88-0]. C4H10O2. (М.м. 90,12).

(3RS)-Бутан-1,3-ол.

Бесцветная вязкая жидкость.

Растворим в воде, спиртах, ацетоне, умеренно растворим в эфире, хлорбензоле, четырёххлористом углероде, мало растворим в неполярных растворителях.

. Около 1,005.

. Около 1,441.

Температура кипения. 203–204 °С.

Температура плавления. –77 °С.

трет-Бутилгидропероксид. [75-91-2]. С4Н10О2. (М.м. 90,12).

2-Метилпропан-2-пероксол.

Воспламеняющаяся жидкость.

Растворим в органических растворителях.

. Около 0,898.

. Около 1,401.

Температура кипения. 35 °С.

трет-Бутилметиловый эфир. [1634-04-4]. С5Н12О. (М.м. 88,15).

2-Метил-2-метоксипропан.

Бесцветная, прозрачная, воспламеняющаяся жидкость.

Очень мало растворим в воде, смешивается с этанолом и эфиром.

. Около 1,376.

Минимальное пропускание. Не менее 50% при длине волны 240 нм; не менее 80% при длине волны 255 нм; не менее 98% при длине волны 280 нм.

Определение проводят, используя в качестве раствора сравнения воду.

Бутилпарагидроксибензоат. [94-26-8]. С11Н14О3. (М.м. 194,23).

Бутил(4-гидроксибензоат).

Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Очень мало растворим в воде, легко растворим в спирте 96%.

Температура плавления. От 68 до 71 °С.

трет-Бутиловый спирт. [75-65-0]. С4Н10О. (М.м. 74,12).

2-Метилпропан-2-ол.

Прозрачная, бесцветная жидкость или кристаллическая масса.

Растворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

Температура затвердевания. Около 25 °С.

Температурные пределы перегонки. От 81 до 83 °С; должно перегоняться не менее 95%.

Бутилхлорид. См. 1-Хлорбутан.

Бутиролактон. [96-48-0]. С4Н6О2. (М.м. 86,09).

Оксолан-2-он.

Маслянистая жидкость.

Смешивается с водой, растворим в метаноле, эфире, ацетоне, бензоле и четыреххлористом углероде.

. Около 1,435.

Температура кипения. Около 204 °С.

Буферные рабочие и образцовые растворы для электрофореза. См. Натрия лаурилсульфат.

Вазелин.

Полужидкая смесь углеводородов, полученная из нефти и обесцвеченная. Практически нерастворим в воде и спирте 96%, растворим в эфире и петролейном эфире; раствор иногда обнаруживает слабую опалесценцию.

Вазелиновое масло. См. Парафин жидкий.

Валереновая кислота. [3569-10-6]. C15H22O2. (М.м. 234,33).

(2E)-3-[(4S,7R,7aR)-3,7-Диметил-2,4,5,6,7,7a-гексагидро-1H-инден-4-ил]-2-метилпроп-2-еновая кислота.

Температура плавления от 134 до 138 °С.

Валериановая кислота. [109-52-4]. С5Н10О2. (М.м. 102,13).

Пентановая кислота.

Бесцветная жидкость.

Растворима в воде, легко растворима в спирте 96% и эфире.

. Около 0,94.

. Около 1,409.

Температура кипения. Около 186 °С.

L-Валин. [72-18-4]. C5H11NO2. (М.м. 117,15).

(2S)-2-Амино-3-метилбутановая кислота.

Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96%.

Ванадия(V) оксид. [1314-62-1]. V2О5. (М.м. 181,88). Оксид ванадия(V).

Содержит не менее 98,5% V2О5.

Порошок от жёлто-коричневого до оранжевато-коричневого цвета.

Мало растворим в воде, растворим в концентрированных неорганических кислотах и разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов с образованием солей.

Ванадия(V) оксида раствор 0,2%.

0,2 г ванадия(V) оксида растворяют в 4 мл серной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Ванилин. [121-33-5]. С8Н8О3. (М.м. 152,15).

4-Гидрокси-3-метоксибензальдегид.

Белые или слабо-жёлтоватые иглы с запахом ванили, темнеющие на воздухе. Очень мало растворим в воде, легко растворим в спирте 96%, эфире и хлороформе.

Температура плавления. От 81 до 83 °С.

Ванилина раствор 5% в спирте 96%.

5,0 г ванилина растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Ванилина раствор 3% в спирте 96%.

3,0 г ванилина растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Ванилина раствор 2% в хлористоводородной кислоте.

0,2 г ванилина растворяют в 10 мл хлористоводородной кислоты концентрированной. Используют свежеприготовленным.

Ванилина раствор 1% в серной кислоте.

0,1 г ванилина растворяют в 10 мл серной кислоты концентрированной. Используют свежеприготовленным.

Ванилина раствор 1% в спирте 96%.

1,0 г ванилина растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Ванилина раствор 1% в хлорной кислоте разведённой 10%.

0,1 г ванилина растворяют в 10 мл хлорной кислоты разведённой 10%.

Используют свежеприготовленным.

Ванилина раствор 0,0005%.

0,5 мг ванилина растворяют в 10,0 мл уксусной кислоты ледяной, прибавляют 85,0 мл спирта 96% и 5,0 мл серной кислоты концентрированной.

Срок годности – 30 суток при хранении в прохладном, защищённом от света месте.

Ванилина раствор в фосфорной кислоте.

1,0 г ванилина растворяют в 25 мл спирта 96%, прибавляют 25 мл воды и 35 мл фосфорной кислоты концентрированной.

Ванилина реактив.

К 100 мл 1% раствора ванилина в спирте 96% осторожно по каплям прибавляют 2 мл серной кислоты концентрированной.

Срок годности 2 сут.

Вератровая кислота. [93-07-2]. C9H10O4. (М.м. 150,17).

3,4-Диметоксибензойная кислота.

Содержит не менее 99% C9H10O4.

Мало растворима воде, растворима в спирте 96% и эфире.

Температура кипения. От 179 до 182 °С.

Винилацетат. [108-05-4]. C4H6O2. (М.м. 86,09).

Этенилацетат.

Бесцветная жидкость.

Умеренно растворим воде; смешивается с этанолом и эфиром.

. Около 0,930.

Температура кипения. Около 72 °С.

Винил-н-бутиловый эфир. [111-34-2]. C6H12O. 100,16.

1-(Этенилокси)бутан.

Хранить при температуре 2–8 °С.

. Около 0,778.

. Около 1,400.

Температура кипения 94 °С.

2-Винилпиридин. [100-69-6]. С7H7N. (М.м. 105,14).

2-Этенилпиридин.

Жидкость жёлтого цвета. Смешивается с водой.

. Около 0,97.

. Около 1,549.

Температура кипения 159 °С.

1-Винилпирролидин-2-он. [88-12-0]. C6H9NO. (М.м. 111,14).

1-Этенилпирролидин-2-он.

Содержит не менее 99,0% C6H9NO.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Вода. Не более 0,1% (полумикрометод).

Определение проводят из 2,5 г, используя в качестве растворителя смесь 50 мл метанола безводного и 10 мл бутиролактона.

Количественное определение. Проводят методом газовой хроматографии.

Хроматографирование проводят на газовом хроматографе с пламенно-ионизационным детектором в следующих условиях:

– колонка кварцевая капиллярная размером 30 м × 0,5 мм, покрытая слоем макрогола 20 000 толщиной 1,0 мкм;

– газ-носитель гелий для хроматографии;

– температура блока ввода пробы 190 °С;

– температуру колонки программируют следующим образом: выдерживают температуру 80 °С в течение 1 мин, затем повышают до 190 °С со скоростью 10 °С в мин и выдерживают температуру 190 °С в течение 15 мин.

Хроматографируют 0,3 мкл испытуемого вещества, регулируя скорость потока газа-носителя таким образом, чтобы время удерживания основного вещества, составляло около 17 мин. Содержание C6H9NO определяют методом внутренней нормализации.

Винилполимер октадецилсилильный для хроматографии.

Сферические частицы (5 мкм) сополимера винилового спирта, связанного октадецилсиланом.

Содержит 17% углерода.

Винилполимер октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии.

Сферические частицы (5 мкм) сополимера винилового спирта, связанного октадецилсиланом. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами эндкепирован для закрытия большинства оставшихся силанольных групп.

Содержит 17% углерода.

Винилхлорид. [75-01-4]. C2H3Cl. (М.м. 62,50).

Хлорэтен.

Бесцветный газ.

Мало растворим в органических растворителях.

Винная кислота. [87-69-4]. С4Н6О6. (М.м. 150,09).

(2R,3R)-Дигидроксибутандиовая кислота.

Бесцветные кристаллы.

Легко растворима в воде, спирте 96%, растворима в ацетоне, мало растворима в эфире.

Винной кислоты раствор 20%.

2 г винной кислоты растворяют в 10 мл воды. Используют свежеприготовленным.

Винной кислоты раствор 2%.

0,2 г винной кислоты растворяют в 10 мл воды. Используют свежеприготовленным.

Винной кислоты раствор 1%.

0,1 г винной кислоты растворяют в 10 мл воды. Используют свежеприготовленным.

Винной кислоты раствор 0,0015%.

15 мг винной кислоты растворяют в 100 мл воды. 10 мл полученного раствора доводят водой до 100 мл. Используют свежеприготовленным.

Висмута нитрат. [10035-06-0]. Вi(NO3)3·5Н2О. (М.м. 485,1).

Нитрат висмута(III), пентагидрат.

Прозрачные бесцветные кристаллы в массе белого цвета. Реагирует с водой. Легко растворим в азотной кислоте.

Висмута нитрат основной. [1304-85-4]. Bi4BiO(NO3)4(OH)9. (М.м. 1462). Тетранитрат-нонагидроксид тетрависмута-оксидовисмута(1+).

Содержит не менее 71,5% и не более 74,0% висмута; не менее 14,5% и не более 16,5% нитрата, в пересчете на азота(V) оксид (N2O5).

Порошок белого цвета.

Практически нерастворим в воде.

Висмута нитрата основного раствор.

5 г висмута нитрата основного растворяют в смеси 8,4 мл азотной кислоты концентрированной и 50 мл воды, доводят объём раствора водой до 250 мл и, если необходимо, фильтруют.

Кислотность. К 10 мл висмута нитрата основного раствора прибавляют 0,05 мл 0,1% спиртового раствора метилового оранжевого; окраска раствора должна измениться при прибавлении от 5,0 мл до 6,25 мл 1 М раствора натрия гидроксида.

Вода. [7732-18-5]. См. ФС Вода очищенная.

Вода деионизированная. См. Вода для хроматографии.

Вода дистиллированная. Вода очищенная, получаемая из воды питьевой методом дистилляции.

Вода для инъекций. См. ФС Вода для инъекций.

Вода для определения бактериальных эндотоксинов (вода для БЭТ)

Вода, которая не реагирует с ЛАЛ/ТАЛ-реактивом и не содержит бактериальные эндотоксины в определяемых количествах.

Вода для хроматографии.

Деионизированная вода, имеющая сопротивление не менее 0,18 Мом·м.

Вода очищенная. См. ФС Вода очищенная.

Вода, свободная от аммиака.

К 100 мл воды прибавляют 0,1 мл серной кислоты концентрированной, перегоняют, используя прибор для определения температурных пределов перегонки, отбрасывают первые 10 мл и собирают следующие 50 мл.

Вода, свободная от нитратов.

К 100 мл воды прибавляют несколько миллиграммов калия перманганата и бария гидроксида; перегоняют, используя прибор для определения температурных пределов перегонки, отбрасывают первые 10 мл и собирают следующие 50 мл.

Вода, свободная от углерода диоксида.

Воду кипятят в течение нескольких минут, охлаждают.

Хранят, защищая от атмосферного воздействия.

Вода, свободная от частиц.

Воду фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,22 мкм.

Вода хлорная.

Содержит хлор, хлорноватистую кислоту и хлористый водород.

Получают пропусканием газообразного хлора через воду до насыщения при комнатной температуре.

Хранят в прохладном, защищённом от света месте.

Водород для хроматографии. [1333-74-0]. Н2. (М.м. 2,016).

Содержит не менее 99,95% (о/о) Н2.

Водорода пероксид. [7722-84-1]. Н2О2. (М.м. 34,01).

Пероксид водорода.

Содержание Н2О2 в реактиве «х.ч.»–не менее 30 и не более 35%; «ч.д.а.»–не менее 29 и не более 32%; «ч.»–не менее 29%.

Бесцветная прозрачная жидкость без запаха или со слабым своеобразным запахом, слабокислой реакции, легко разлагающаяся с выделением кислорода.

Водорода пероксида раствор концентрированный. См. Водорода пероксид.

Водорода пероксида раствор разведённый.

10 г водорода пероксида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Восстанавливающая смесь.

Для получения однородной смеси последовательно смешивают предварительно измельченные реактивы: 20 мг калия бромида, 0,5 г гидразина сульфата и 5 г натрия хлорида.

Гадолиния ацетат тетрагидрат. [15280-53-2]. Gd(CH3CO2)3·4H2O. (М.м. 406,44).

Ацетат гадолиния(III) тетрагидрат.

Легко растворим в воде.

Гадолиния сульфат октагидрат. [13450-87-8]. Gd2(SO4)3·8H2O. (М.м. 746,8).

Сульфата гадолиния(III) октагидрат.

Содержит не менее 99,9% Gd2(SO4)3·8H2O.

Бесцветное кристаллическое вещество.

Растворимость в холодной воде около 3%, в горячей–около 2,5%.

Гадолиния хлорид безводный. [10138-52-0]. GdCl3. (М.м. 263,61).

Хлорид гадолиния(III).

Содержит не менее 99,99% GdCl3.

Бесцветное кристаллическое вещество.

Растворим в воде.

Галактоза. [59-23-4]. C6H12O6. (М.м. 180,16).

D-Галактопираноза.

Кристаллический порошок белого цвета. Легко растворима в воде.

. От + 79° до + 81° (10% раствор в воде, содержащей около 0,05% NH3).

Галловая кислота. [5995-86-8]. C7H6O5·H2O. (М.м. 188,13).

3,4,5-Тригидроксибензойная кислота, моногидрат.

Кристаллический порошок или длинные игольчатые кристаллы, бесцветные или слегка жёлтоватого цвета.

Растворима в воде, легко растворима в горячей воде, спирте 96% и глицерине, мало растворима в эфире.

Галловая кислота теряет кристаллизационную воду при температуре 120 °С и плавится при температуре около 260 °С с разложением.

Гамамелитаннин. [469-32-9]. C20H20O14. (М.м. 484,4).

(2R,3R,4R)-2-Формил-2,3,4-тригидроксипентан-1,5-диил бис (3,4,5-тригидроксибензоат).

2-C-[(Галлоилокси)метил]-d-рибоза 5-галлат.

ГАМК. См. γ-Аминомасляная кислота.

Гарпагозид. [19210-12-9]. C24H30O11. (М.м. 494,5).

[(1S,4aS,5R,7S,7aS)-4a,5-Дигидрокси-1-(β-D-глюкопиранозилокси)-7-метил-1,4a,5,6,7,7a-гексагидроциклопента[_c_]пиран-7-ил]-(2E)-3-фенилпроп-2-еноат.

Кристаллический порошок белого цвета, очень гигроскопичен.

Растворим в воде и спирте 96%.

Температура плавления. От 117 до 121 °С.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Гвайазулен. [489-84-9]. C15H18. (М.м. 198,30).

1,4-Диметил-7-(пропан-2-ил)азулен.

Кристаллы тёмно-синего цвета или жидкость синего цвета.

Очень мало растворим в воде, смешивается с жирными и эфирными маслами и вазелиновым маслом, умеренно растворим в спирте 96%, растворим в 50% растворе серной кислоты и 80% (м/м) фосфорной кислоте с образованием бесцветного раствора.

Температура плавления. Около 30 °С.

Хранят в защищённом от света и воздуха месте.

Гваяковая смола.

Смола, полученная из сердцевины дерева Guaiacum officinale L. и Guaiacum sanctum L.

Твердые, гладкие фрагменты красновато-коричневого или зеленовато-коричневого цвета, блестят на изломе. При нагревании размягчается.

Практически нерастворим в воде.

Гексадекан. [544-76-3]. C16H34. (М.м. 226,44).

Гексадекан.

Содержит не менее 99% C16H34.

. Около 0,773.

. Около 1,434.

Температура плавления. Около 18 °С.

Температура кипения. Около 287 °С.

Гексадиметрина бромид. [28728-55-4]. (C13H30Br2N2)n.

Поли(1,1,5,5-тетраметил-1,5-диазаундекан-1,5-диий-1,11-диил дибромид).

Аморфный порошок белого цвета, гигроскопичен.

Растворим в воде.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Гексакозан. [630-01-3]. C26H54. (М.м. 366,70).

Гексакозан.

Бесцветные или белого цвета хлопья.

Практически нерастворим в воде, растворим в этаноле и эфире.

Температура плавления. Около 57 °С.

Гексаметилдисилазан. [999-97-3]. C6H19NSi2. (М.м. 161,39).

Si,Si,Si-Триметил-N-(триметилсилил)силан-1-амин.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

. Около 0,78.

. Около 1,408.

Температура кипения. Около 125 °С.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Гексаметилдисилоксан. [107-46-0]. C6H18OSi2. (М.м. 162,38).

Гексаметилдисилоксан.

Прозрачная бесцветная жидкость.

Очень мало растворим в воде.

. Около 0,764.

Гексаметилентетрамин. [100-97-0]. C6H12N4. (М.м. 140,19).

1,3,5,7-Тетраазатрицикло[3.3.1.13,7]декан.

Бесцветный кристаллический порошок.

Очень легко растворим в воде.

Гексан. [110-54-3]. C6H14. (М.м. 86,18).

Гексан.

Бесцветная, воспламеняющаяся жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешиваетсяс этанолом и эфиром.

. От 0,659 до 0,663.

. От 1,375 до 1,376.

Температурные пределы перегонки. От 67 до 69 °С; должно перегоняться не менее 95%.

Гексан, используемый в спектрофотометрии, должен выдерживать следующее дополнительное испытание.

Минимальное пропускание. 97%. Определение проводят в области длин волн от 260 до 420 нм, используя в качестве раствора сравнения воду.

Гексанитродифениламин. C12H5N7O12. [131-73-7]. (М.м. 439,21).

2,4,6-Тринитро-N-(2,4,6-тринитрофенил)анилин.

Желтовато-золотой порошок или призматические кристаллы.

Растворим в азотной кислоте и тёплой ледяной уксусной кислоте, практически нерастворим в воде, спирте 96% и эфире.

Температура плавления. Около 244 °С.

Взрывоопасен.

Гексанитродифениламина раствор 0,02%.

20 мг гексанитродифениламина растворяют в натрия гидроксида растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до 100 мл.

Гексансульфоновая кислота. C6H14O3S. [13595-73-8]. (М.м. 166,24).

Гексан-1-сульфоновая кислота.

Температура плавления. Около 16 °С.

Гексафторизопропанол. C3H2F6O. [920-66-1]. (М.м. 168,04).

1,1,1,3,3,3-Гексафторопропан-2-ол.

Бесцветная прозрачная жидкость, смешивающаяся с водой и безводным спиртом.

. Около 1,596.

Температура кипения. Около 59 °С.

Гексахлорбензол. [118-74-1]. С6Cl6. (М.м. 284,78).

Гексахлорбензол.

Бесцветные кристаллы.

Практически нерастворим в воде, мало растворим в спирте и бензоле.

Температура кипения. Около 323–326 °С.

Температура плавления. Около 230 °С.

α-Гексахлорциклогексан. [319-84-6]. С6Н6Cl6. (М.м. 290,83).

rac-(1R,2R,3R,4R,5S,6S)-1,2,3,4,5,6-Гексахлорциклогексан.

Белый порошок.

Температура кипения. Около 288 °С.

Температура плавления. Около 158 °С.

β-Гексахлорциклогексан. [319-85-7]. С6Н6Cl6. (М.м. 290,83).

(1r,2r,3r,4r,5r,6r)-1,2,3,4,5,6-Гексахлорциклогексан.

Белый порошок.

Температура плавления. Более 300 °С.

γ-Гексахлорциклогексан. См. Линдан.

δ-Гексахлорциклогексан. [319-86-8]. С6Н6Cl6. (М.м. 290,83).

(1R,2R,3r,4S,5S,6s)-1,2,3,4,5,6-Гексахлорциклогексан.

Белый порошок.

Температура плавления. Около 140 °С.

Гексиламин. [111-26-2]. C6H15N. (М.м. 101,19).

Гексан-1-амин.

Бесцветная жидкость.

Мало растворим в воде, растворим в спирте 96% и эфире.

. Около 0,766.

. Около 1,418.

Температура кипения. От 127 до 131 °С.

Гелий для хроматографии. [7440-59-7]. Не. (А.м. 4,003).

Гелий.

Содержит не менее 99,995% (о/о) Не.

Гепариназа I. [9025-39-2]. Гепарин-лиаза (EC 4.2.2.7).

Фермент из Flavobacterium heparinum, катализирующий расщепление полисахаридов, содержащих (1→4)-связанные D-глюкуронатные или L-идуронатные остатки и (1→4)-α-связанные 2-сульфоамино-2-дезокси-6-сульфо-D-глюкозные остатки, с образованием олигосахаридов с терминальными 4-дезокси-α-D-глюк-4-енуронозильными группами на их невосстанавливающих концах.

Гепариназа II. [149371-12-0].

Фермент из Flavobacterium heparinum, катализирующий деполимеризацию сульфатированных полисахаридных цепей, содержащих 1→4 связи между гексозаминами и остатками уроновых кислот (как идуроновых, так и глюкуроновых). В результате реакции образуются олигосахаридные продукты (в основном дисахариды), содержащие ненасыщенные уроновые кислоты.

Гепариназа III. [37290-86-1]. Гепарин-сульфат-лиаза (EC 4.2.2.8).

Фермент из Flavobacterium heparinum, катализирующий деполимеризацию избирательно сульфатированных полисахаридных цепей, содержащих 1→4 связи между гексозаминами и остатками глюкуроновой кислоты, с образованием олигосахаридных продуктов (в основном дисахаридов), содержащих ненасыщенные уроновые кислоты.

Гептан. [142-82-5]. С7H16. (М.м. 100,20).

Гептан.

Бесцветная, воспламеняющаяся жидкость.

Растворим в хлороформе, практически нерастворим в воде, смешивается с этанолом и эфиром.

. От 0,683 до 0,686.

. От 1,387 до 1,388.

Температурные пределы перегонки. От 97 до 98 °С; должно перегоняться не менее 95%.

Гептафтормасляная кислота. [375-22-4]. С4HF7O2. (М.м. 214,04).

Перфтормасляная кислота.

Бесцветная прозрачная жидкость.

. Около 1,645.

. Около 1,300.

Температура кипения. 120 °С.

Гептахлорэпоксид. [1024-57-3]. С10H5Cl7O. (М.м. 389,32).

(1aS,2R,5R,6R,6aS)-2,3,4,5,6,7,7-Гептахлор-1b,2,5,5a,6,6a-гексагидро-1aH-2,5-метаноиндено[1,2-b]оксирен.

Температура кипения. 425,5 °С.

Температура плавления. 160–161,5 °С.

Гептилпарагидроксибензоат. [1085-12-7]. C14H20O3. (М.м. 236,31).

Гептил(4-гидроксибензоат).

Кристаллический порошок от слегка жёлтоватого до кремового цвета.

Температура плавления. От 45 до 50 °С.

Гераниола ацетат. [105-87-3]. C12H20O2. (М.м. 196,29).

[(3Е)-3,7-Диметилокта-2,6-диен-1-ил]ацетат.

Бесцветная или слабо-жёлтого цвета жидкость, со слабым запахом розы и лаванды.

Очень мало растворим в воде, легко растворим в этаноле; смешивается с эфиром.

. От 0,896 до 0,913.

. Около 1,463.

Температура кипения. Около 138 °С.

Хроматографическая чистота гераниола ацетата, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 99,0%.

Гиалуроновая кислота. [9004-61-9]. C28H44N2O23. (М.м. 776,65).

. Около 1,666.

Белый порошок.

Гидразин. [302-01-2]. NH2NH2. (М.м. 32,05).

Гидразин.

Слегка маслянистая бесцветная жидкость с сильным запахом аммиака.

Смешиваема с водой.

. Около 1,470.

Температура плавления. Около 1,5 °С.

Температура кипения. Около 113 °С.

Ядовитое и едкое вещество.

Гидразина дигидрохлорид. [5341-61-7]. NH2NH2·2НCl. (М.м. 104,97).

Дигидрохлорид гидразина.

Белый кристаллический порошок.

Очень легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%. Ядовит.

Гидразина сульфат. [10034-93-2]. NH2NH2·H2SO4. (М.м. 130,12).

Сульфат гидразина.

Бесцветные кристаллы.

Умеренно растворим в холодной воде, растворим в горячей воде (50 °С) и легко растворим в кипящей воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Гидриндантин дигидрат. [16289-95-5]. C18H10O6·2H2O. (М.м. 358,30).

2,2ʹ-Дигидрокси-1H,1ʹH-[2,2ʹ-биинден]-1,1ʹ,3,3ʹ(2H,2ʹH)-тетраон дигидрат

Кристаллический порошок.

Температура плавления. Около 250 °С.

3'-Гидроксиацетофенон. [121-71-1]. C8H8O2. (М.м. 152,15)

1-(3-Гидроксифенил)этанон.

Содержит не менее 98,0% C8H8O2.

Растворяется в спирте 96%, не растворяется в воде.

Температура плавления. От 93 до 97 °С.

4-Гидроксибензогидразид. [5351-23-5]. C7H8N2O2. (М.м. 152,15).

4-Гидроксибензогидразид.

4-Гидроксибензойная кислота. [99-96-7]. C7H6O3. (М.м. 138,12).

4-Гидроксибензойная кислота.

Кристаллический порошок.

Очень мало растворима в воде, очень легко растворима в спирте 96%, растворима в ацетоне и эфире.

Температура плавления. От 214 до 215 °С.

4-Гидроксиизофталевая кислота. [636-46-4]. C8H6O5. (М.м. 182,13).

4-Гидроксибензол-1,3-дикарбоновая кислота.

Игольчатые или в виде пластинок кристаллы.

Очень мало растворима в воде, легко растворима в спирте 96% и эфире.

Температура плавления. Около 314 °С с разложением.

Гидроксипропил-β-циклодекстрин. [128446-35-5] (ранее [94035-02-6]).

C42H70O35[(C3H6O)n]7, n=0, 1, 2…

Гидроксипропилбетадекс.

Белый или почти белый, аморфный или кристаллический порошок.

Легко растворим в воде и пропиленгликоле.

рН раствора. От 5,0 до 7,5 (2%).

Гидрокортизона 21-бутират. [6677-99-2]. C25H36O6. (М.м. 432,5).

(11β,17-Дигидрокси-3,20-диоксопрегн-4-ен-21-ил)бутаноат.

Содержит не менее 96% C25H36O6.

Температура плавления. От 191 до 193 °С.

4-Гидроксикумарин. [1076-38-6]. C9H6O3. (М.м. 162,14).

4-Гидрокси-2H-1-бензопиран-2-он.

Содержит не менее 98% C9H6O3.

Температура плавления. От 211 до 213 °С.

Гидроксиламина гидрохлорид. [5470-11-1]. NH2OH·HCl. (М.м. 69,49).

Гидрохлорид гидроксиламина.

Кристаллический порошок белого цвета.

Очень легко растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Гидроксиламина гидрохлорида раствор 25%

25 г гидроксиламина гидрохлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Гидроксиламина гидрохлорида раствор 20%

20 г гидроксиламина гидрохлорида растворяют в достаточном количестве воды для получения около 65 мл раствора. Раствор переносят в сепаратор, прибавляют 5 капель тимолового синего спиртового раствора 0,1% и аммиака раствора концентрированного 25% до жёлтого окрашивания. Прибавляют 10 мл натрия диэтилдитиокарбамата раствора 4%, перемешивают и выдерживают в течение 5 мин. Экстрагируют полученный раствор порциями по 15 мл хлороформа пока порция в 5 мл хлороформного экстракта не будет приобретать жёлтой окраски при встряхивании с меди(II) cульфата раствором 12,5%. Прибавляют хлористоводородной кислоты раствор 3 М до розового окрашивания и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Гидроксиламина гидрохлорида раствор 20% (1)

20 г гидроксиламина гидрохлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Гидроксиламина гидрохлорида раствор 0,2%

0,2 г гидроксиламина гидрохлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Гидроксиламина гидрохлорида раствор 2 М.

69,5 г гидроксиламина гидрохлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 500,0 мл. Раствор хранят при температуре 4–8 °С в течение 1 мес.

Гидроксиламина гидрохлорида раствор 1 М.

6,95 г гидроксиламина гидрохлорида растворяют в 50 мл воды и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Раствор хранят при температуре 4–8 °С в течение 1 мес.

Гидроксиламина гидрохлорида раствор спиртовой 0,5 М.

3,48 г гидроксиламина гидрохлорида растворяют в 95 мл спирта 60% (о/о), прибавляют 0,5 мл 0,2% раствора метилового оранжевого в спирте 60% (о/о) и достаточное количество 0,5 М раствора калия гидроксида в спирте 60% (о/о) до получения четкого жёлтого окрашивания, доводят спиртом 60% (о/о) до 100,0 мл.

Гидроксиламина гидрохлорида раствор 14%.

14,0 г гидроксиламина гидрохлорида растворяют в 60 мл воды и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Гидроксиламина гидрохлорида раствор 10%.

10,0 г гидроксиламина гидрохлорида растворяют в 60 мл воды и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Гидроксиламина щелочной раствор 7%.

Непосредственно перед использованием смешивают равные объёмы 14% раствора гидроксиламина гидрохлорида и 15% раствора натрия гидроксида.

Гидроксиламина щелочной раствор 5%.

10% раствор гидроксиламина гидрохлорида смешивают с 10% раствором натрия гидроксида в соотношении 1:2 (по объёму).

Гидроксиламина гидрохлорида раствор 1%.

1,0 г гидроксиламина гидрохлорида растворяют в 60 мл воды и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Гидроксиламина раствор щелочной в метаноле.

Раствор А. 12,5 г гидроксиламина гидрохлорида растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Раствор Б. 12,5 г натрия гидроксида растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Непосредственно перед использованием смешивают равные объёмы растворов А и Б.

Гидроксиламина гидрохлорида раствор спиртовой 5%.

2,5 г гидроксиламина гидрохлорида растворяют в 4,5 мл горячей воды, прибавляют 40 мл спирта 96%, 0,4 мл 0,2% спиртового раствора бромфенолового синего и достаточное количество 0,5 М спиртового раствора калия гидроксида до зеленовато-жёлтого окрашивания, доводят объём раствора спиртом 96% до 50,0 мл.

Гидроксиламина сульфат. [10039-54-0]. (NH2OH)2·H2SO4. (М.м. 164,14).

Сульфат гидроксиламина (1:2).

Бесцветные кристаллы.

Легко растворим в воде, растворим в эфире, нерастворим в спирте 96%.

Гидроксиметилфурфурол. [67-47-0]. C6H6O3. (М.м. 126,11).

5-(Гидроксиметил)фуран-2-карбальдегид.

Игольчатые кристаллы.

Легко растворим в воде, ацетоне и спирте 96%, растворим в эфире.

Температура плавления. Около 32 °С.

Гидроксинафтолового синего натриевая соль. [63451-35-4]. C20H11N2Na3O11S3.

(М.м. 620,5).

3-Гидрокси-4-[(2-гидрокси-4-сульфонатонафталин-1-ил)диазенил]нафталин-2,7-дисульфонат тринатрия.

12-Гидроксистеариновая кислота. [106-14-9]. C18H36O3. (М.м. 300,48).

12-Гидроксиоктадекановая кислота.

Порошок белого цвета.

Практически нерастворима в воде, растворима в этаноле, хлороформе и эфире.

Температура плавления. От 71 до 74 °С.

5-Гидроксиурацил. [496-76-4]. C4H4N2O3. (М.м. 128,09).

Пиримидин-2,4,5-триол.

Кристаллический порошок белого цвета.

Температура плавления. Около 310 °С с разложением.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Гидроксихинолин. [148-24-3]. C9H7NO. (М.м. 145,16).

Хинолин-8-ол.

Кристаллический порошок белого или жёлтоватого цвета.

Легко растворим в спирте 96%, растворим в ацетоне, хлороформе, бензоле, мало растворим в воде, эфире. Растворяется в растворах неорганических кислот и разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов.

Температура плавления. Около 75 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,05%.

Гидроксихинолина раствор 5%.

5 г гидроксихинолина растворяют в 100 мл 2 М раствора уксусной кислоты.

Гидроксихинолина раствор в ацетонитриле 3%.

3 г гидроксихинолина растворяют в 100 мл ацетонитрила.

Гидроксихинолина раствор в хлороформе 0,1%.

0,1 г гидроксихинолина растворяют в 100 мл хлороформа.

Гидрофильный полиоксиметакрилатный гель для хроматографии.

Гидрофильный полиоксиметакрилатный гель, состоящий из полностью пористых сферических частиц.

Гидрохинон. [123-31-9]. C6H6O2. (М.м. 110,11).

Бензол-1,4-диол.

Бесцветные или белого цвета, игольчатые, мелкие кристаллы, темнеющие под действием воздуха и света.

Растворим в воде, спирте 96% и эфире.

Температура плавления. Около 173 °С.

Хранят в защищённом от света и воздуха месте.

Гидрохинона раствор 0,5%.

0,5 г гидрохинона растворяют в воде, прибавляют 1 каплю серной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Гиперозид. [482-36-0]. C21H20O12. (М.м. 464,4).

(β-D-Галактопиранозилокси)-5,7-дигидрокси-3-2-(3,4-дигидроксифенил)-4H-1-бензопиран-4-он.

Игольчатые кристаллы светло-жёлтого цвета.

Растворим в метаноле.

.–8,3° (0,2% раствор в пиридине).

Температура плавления. Около 240 °С с разложением.

Гипоксантин. [68-94-0]. C5H4N4O. (М.м. 136,11).

1,7-Дигидро-6Н-пурин-6-он.

Кристаллический порошок белого цвета.

Очень мало растворим в воде, умеренно растворим в кипящей воде, растворим в разведённых растворах неорганических кислот и разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов.

Разлагается, не плавясь, при температуре около 150 °С.

Гипофосфита реактив. См. Натрия гипофосфита раствор.

Гипс. См. Кальция сульфат.

Гистамин. [51-45-6]. C5H9N3. (М.м. 111,15).

2-(4-Имидазолил)этанамин.

Бесцветные кристаллы.

Растворим в воде и спирте.

Температура кипения. 209,5 °С.

Температура плавления. 83,5 °С.

Гистамина дигидрохлорид. [56-92-8]. C5H9N3·2HCl. (М.м. 184,07).

2-(4-Имидазолил)этанамина дигидрохлорид.

Гистамина дигидрохлорида раствор 0,1%

10 мг гистамина дигидрохлорида растворяют в 10 мл воды для инъекций. Срок годности – 1 год при температуре от 2 до 8 °С.

Гистамина раствор

Натрия хлорида раствор 0,9%, содержащий 0,1 мкг/мл гистамина (в виде фосфата или дигидрохлорида).

Гистамина фосфат. [23297-93-0]. C5H9N3·2H3PO4. (М.м. 307,14).

2-(4-Имидазолил)этанамина дифосфат.

Гистидина гидрохлорид моногидрат. [123333-71-1]. C6H9N3O2·HCl·H2O. М.м. 209,63.

(2RS)-2-Амино-3-(имидазол-4-ил)пропановой кислоты гидрохлорид, моногидрат.

Бесцветные кристаллы или кристаллический порошок.

Растворим в воде.

Температура плавления. Около 250 °С с разложением.

Гликокол. См. Глицин.

Гликолевая кислота. [79-14-1]. C2H4O3. (М.м. 76,05).

Гидроксиуксусная кислота.

Бесцветные кристаллы.

Растворима в воде, ацетоне, спирте 96%, эфире и метаноле.

Температура плавления. Около 80 °С.

Глиоксальгидроксианил. [1149-16-2]. C14H12N2O2. (М.м. 240,26).

2,2'-[Этан-1,2-диилиденди(нитрило)]дифенол.

Кристаллы белого цвета.

Растворим в горячем спирте 96%.

Температура плавления. Около 200 °С.

Глиоксаля раствор 40%. [107-22-2].

Содержит около 40% (м/м) глиоксаля.

Количественное определение. Около 1,0 г раствора глиоксаля (точная навеска) помещают в колбу с притертой стеклянной пробкой, прибавляют 20 мл 7% раствора гидроксил-амина гидрохлорида и 50 мл воды, выдерживают в течение 30 мин и титруют 1 М раствором натрия гидроксида до перехода окраски от красной к зеленой, используя в качестве индикатора 1 мл смешанного раствора метилового красного. Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 1 М раствора натрия гидроксида соответствует 29,02 мг глиоксаля (C2H2O2).

Глицерин. [56-81-5]. C3H8O3. (М.м. 92,09).

Пропан-1,2,3-триол.

Содержит не менее 98,0% и не более 101,0% пропан-1,2,3-триола в расчете на безводную субстанцию.

Бесцветная прозрачная густая жидкость; гигроскопична.

Смешивается с водой, спиртом 96%, мало растворим в ацетоне, практически нерастворим в эфире.

Глицерин 85%.

Водный раствор, содержащий не менее 83,5% (м/о) и не более 88,5% (м/о) пропан-1,2,3-триола.

Сиропообразная жидкость, бесцветная или почти бесцветная, прозрачная, очень гигроскопичная.

Смешивается с водой и спиртом 96%, мало растворим в ацетоне, практически нерастворим в эфире, жирных и эфирных маслах.

Глицерина раствор 33%.

33 мл глицерина разбавляют водой до 100 мл и прибавляют крупинку камфоры или 1 каплю жидкого фенола.

DL-α-Глицерофосфат динатрия гидрат. [1555-56-2]. C3H7Na2O6P·xH2O. (М.м. 216,04 безводный).

[(2RS)-1,2-Дигидроксипропил]фосфат динатрия гидрат.

Белый или почти белый кристаллический порошок или кристаллы.

Содержит не менее 85% C3H7Na2O6P (не менее 98% в пересчёте на безводное вещество).

Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

L-α-Глицерофосфорилхолин. [28319-77-9]. C8H20NO6P. (М.м. 257,22).

(2R)-1,2-Дигидрокси-9,9-диметил-5-оксо-4,6-диокса-9-аза-5λ5-фосфадекан-9-ий-5-олат.

Содержит не менее 98% C8H20NO6P.

.–2,8° (2,6% раствор в воде, pH 5,8).

Температура плавления. Около 143 °С.

Хранить при температуре –20 °С.

Глицин. [56-40-6]. C2H5NO2. (М.м. 75,07).

Аминоуксусная кислота.

Белый кристаллический порошок.

Легко растворим в воде; нерастворим в эфире; очень мало растворим в спирте 96%.

Температура плавления. Около 234 °С с разложением.

Глицина ангидрид. [106-57-0]. C4H6N2O2. (М.м. 114,10).

Пиперазин-2,5-дион.

Глицирретиновая кислота. [471-53-4]. C30H46O4. (М.м. 470,7).

3β-Гидрокси-11-оксоолеан-12-ен-30-овая кислота.

Смесь α- и β-глицирретиновых кислот, в которой преобладает β-изомер.

Порошок от белого до жёлтовато-коричневатого цвета.

Практически нерастворима в воде, растворима в этаноле и уксусной кислоте ледяной.

. От + 145° до + 155° (1% раствор в этаноле).

Хроматография. Определение проводят методом тонкослойной хроматографии, используя в качестве тонкого слоя силикагель GF254, суспензию которого готовят, используя раствор 0,25% (о/о) фосфорной кислоты. На хроматографическую пластинку наносят 5 мкл 0,5% раствора глицирретиновой кислоты в смеси равных объёмов хлороформа и метанола. Хроматографируют в смеси растворителей метанол–хлороформ 5:95. Когда фронт растворителей пройдет 10 см, хроматограмму просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм. На хроматограмме должно обнаруживаться тёмное пятно (Rf около 0,3), соответствующее β-глицирретиновой кислоте, и меньшее пятно (Rf около 0,5), соответствующее α-глицирретиновой кислоте. Пластинку опрыскивают раствором анисового альдегида и нагревают при температуре от 100 до 105 °С в течение 10 мин. Оба пятна должны быть окрашены в синевато-фиолетовый цвет; между ними допускается наличие меньшего пятна синевато-фиолетового цвета.

L-γ-Глутамил-L-цистеин. [636-58-8]. C8H14N2O5S (М.м. 250,27).

Глутаминовая кислота. [56-86-0]. C5H9 NO4. (М.м. 147,13).

(2S)-2-Аминопентандиовая кислота.

Содержит от 98,5 до 100,5% C5H9 NO4 в пересчете на сухое вещество.

Белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Легко растворима в кипящей воде, мало растворима в холодной воде; практически нерастворима в спирте 96%, эфире и ацетоне.

Глутаровый альдегид. [111-30-8]. C5H8O2. (М.м. 100,12).

Пентандиаль.

Маслянистая жидкость. Растворим в воде.

. Около 1,434.

Температура кипения. Около 188 °С.

Глутатион окисленный. [27025-41-8]. C20H32N6O12S2. (М.м. 612,63).

Бис(L-γ-глутамил-L-цистеинилглицин) дисульфид.

Глюкоза безводная. [50-99-7]. C6H12O6. (М.м. 180,16).

D-глюкопираноза.

Белый кристаллический порошок сладкого вкуса.

Легко растворима в воде, умеренно растворима в спирте 96%.

Глюкоза. [14431-43-7]. C6H12O6·Н2О. (М.м. 198,17).

D-Глюкопираноза, моногидрат.

Белый кристаллический порошок со сладким вкусом.

Легко растворима в воде, умеренно растворима в спирте 96%.

Глюкозы раствор 10%

10,0 г глюкозы растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Глюкозы раствор 5%

5,0 г глюкозы растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Глюкозамина гидрохлорид. [66-84-2]. C6H13NO5·HCl. (М.м. 215,63).

2-Амино-2-дезокси-β-D-глюкопиранозы гидрохлорид.

Кристаллы.

Растворим в воде, практически нерастворим в эфире.

. + 100°, снижающееся до + 47,5° через 30 мин (10% раствор).

D-Глюкуроновая кислота. [6556-12-3]. C6H10O7. (М.м. 194,14).

D-Глюкопирануроновая кислота.

Содержит не менее 96,0% C6H10O7 в пересчете на сухое вещество, высушенное в вакууме.

Растворима в воде и спирте 96%.

Обнаруживает мутаротацию : +11,7° → +36,3°.

Количественное определение. 0,150 г D-глюкуроновой кислоты растворяют при перемешивании в метаноле безводном и титруют 0,1 М раствором тетрабутиламмония гидроксида потенциометрически, защищая раствор от воздействия углерода диоксида воздуха во время растворения и титрования.

1 мл 0,1 М раствора тетрабутиламмония гидроксида соответствует 19,41 мг C6H10O7.

Гольмия(III) оксид. [12055-62-8]. Ho2O3. (М.м. 377,86).

Оксид гольмия(III).

Порошок жёлтоватого цвета.

Практически нерастворим в воде.

Гольмия перхлората раствор 4%.

Раствор 40 г/л гольмия(III) оксида в 14,1% растворе хлорной кислоты.

Грисса реактив.

Раствор 1. 1,0 г сульфаниловой кислоты растворяют в 100 мл уксусной кислоты разведённой 30%.

Раствор 2. 0,1 г нафтиламина растворяют в 100 мл уксусной кислоты разведённой 30%.

Растворы 1 и 2 смешивают 1:1 непосредственно перед использованием.

Грисса-Илосвая реактив.

Раствор 1. 1,66 г сульфаниловой кислоты растворяют в 425 мл воды и прибавляют 75 мл уксусной кислоты. Срок годности – 2 мес.

Раствор 2. 0,3 г нафтиламина растворяют в 60 мл воды, кипятят 3 мин, прозрачный раствор сливают и смешивают с 450 мл 15% уксусной кислоты разведённой. Раствор готовят и хранят в тёмных склянках. Раствор годен до появления розовой окраски.

Растворы 1 и 2 смешивают 1:1 непосредственно перед использованием.

Гуанидина гидрохлорид. [50-01-1]. CH5N3·HCl. (М.м. 95,53).

Гидрохлорид гуанидина.

Кристаллический порошок.

Легко растворим в воде и спирте 96%.

Гуанин. [73-40-5]. C5H5N5O. (М.м. 151,13).

2-Амино-1,7-дигидро-6Н-пурин-6-он.

Аморфный порошок белого цвета.

Практически нерастворим в воде, мало растворим в спирте 96%, растворим в растворах аммиака и разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов.

Гуанозин. [118-00-3]. C10H13N5O5. (М.м. 283,24).

2-Амино-9-(β-D-рибофуранозил)-1,9-дигидро-6Н-пурин-6-он.

Содержит не менее 98% C10H13N5O5.

Температура плавления. Около 250° (с разл.).

Гуммиарабик.

Смола, полученная из ствола и ветвей Acacia senegal L. Willd (синоним Senegalia senegal (L.) Britton), других видов Acacia африканского происхождения и Acacia seyal Delile.

Твердые фрагменты жёлто-оранжевого или оранжево-коричневого цвета. Легко растворим в воде.

Гуммиарабика раствор 10%.

20,0 г гуммиарабика смешивают с 200 мл воды, перемешивают в течение 2 ч. Центрифугируют полученную смесь при 2000 об/мин в течение 30 мин, фильтруют через бумажный фильтр. Раствор хранят в пластиковых ёмкостях при температуре не выше 15 °С не более 3 суток.

Дантрон. [117-10-2]. C14H8O4. (М.м. 240,21).

1,8-Дигидроксиантрацен-9,10-дион.

Кристаллический порошок оранжевого цвета.

Мало растворим в воде, растворим в этаноле, хлороформе и эфире.

Температура плавления. Около 195 °С.

ДДД. Смесь о,п-ДДД и п,п-ДДД.

о,п-ДДД. [53-19-0]. (М.м. 320,04).

1-[2,2-Дихлор-1-(4-хлорфенил)этил]-2-хлорбензол.

п,п-ДДД. [72-54-8]. (М.м. 320,04).

1-[2,2-Дихлор-1-(4-хлорфенил)этил]-4-хлорбензол.

Температура кипения. 193 °С.

Температура плавления. 109 °С.

ДДТ. Смесь о,п-ДДТ и п,п-ДДТ.

о,п-ДДТ. [789-02-6]. (М.м. 354,49).

1-[2,2.2-Трихлор-1-(4-хлорфенил)этил]-2-хлорбензол.

п,п-ДДТ. [50-29-3]. (М.м. 354,49).

1-[2,2.2-Трихлор-1-(4-хлорфенил)этил]-4-хлорбензол.

Температура кипения. 260 °С.

Температура плавления. От 108 до 109 °С.

11-Дезоксикортизол. [152-58-9]. C21H30O4. (М.м. 346,46).

17,21-Дигидроксипрегн-4-ен-3,20-дион

Содержит не менее 98% C21H30O4.

Температура плавления. От 205 до 208 °С (с разл.).

4-Дезоксипиридоксина гидрохлорид. [148-51-6]. C8H11NO2·HCl. (М.м. 189,64).

5-(Гидроксиметил)-2,4-диметилпиридин-3-ола гидрохлорид.

Дейтерия оксид. [7789-20-0]. D2O. (М.м. 20,03).

Вода-d2.

Степень дейтерирования не менее 99,7%.

. Около 1,11.

. Около 1,328.

Температура кипения. Около 101 °С.

Дейтерированная уксусная кислота. [1186-52-3]. C2D4O2. (М.м. 64,08).

Уксусная кислота-d4.

Степень дейтерирования не менее 99,7%.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Легко смешивается с водой, спиртом 96% и эфиром.

. Около 1,12.

. Около 1,368.

Температура кипения. Около 115 °С.

Температура плавления. Около 16 °С.

Дейтерированный ацетон. [666-52-4]. C3D6O. (М.м. 64,12).

Ацетон-d6.

Степень дейтерирования не менее 99,5%.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Смешивается с водой, диметилформамидом, этанолом, эфиром и метанолом.

. Около 0,87.

. Около 1,357.

Температура кипения. Около 55 °С.

Вода и дейтерия оксид. Не более 0,1%.

Дейтерированный диметилсульфоксид. [2206-27-1]. C2D6OS. (М.м. 84,17).

Сульфинилдиметан-d6.

Степень дейтерирования не менее 99,8%.

Вязкая, практически бесцветная, сильно гигроскопичная жидкость.

Растворим в воде, ацетоне, этаноле и эфире.

. Около 1,18.

Температура плавления. Около 20 °С.

Вода и дейтерия оксид. Не более 0,1%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Дейтерированный метанол. [811-98-3]. CD4O. (М.м. 36,07).

Метанол-d4.

Степень дейтерирования не менее 99,8%.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Смешивается с водой, спиртом 96% и метиленхлоридом.

. Около 0,888.

. Около 1,326.

Температура кипения. 65,4 °С.

Дейтерированный хлороформ. [865-49-6]. CDCl3. (М.м. 120,38).

Трихлорметан-d.

Степень дейтерирования не менее 99,7%.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается с ацетоном, спиртом 96% и эфиром.

Может быть стабилизирован серебряной фольгой.

. Около 1,51.

. Около 1,445.

Температура кипения. Около 60 °С.

Вода и дейтерия оксид. Не более 0,05%.

Декан. [124-18-5]. C10H22. (М.м. 142,28).

Декан.

Бесцветная жидкость. Практически нерастворим в воде.

. Около 1,411.

Температура кипения. Около 174 °С.

Деканол. [112-30-1]. C10H22O. (М.м. 158,28).

Декан-1-ол.

Вязкая жидкость, затвердевающая при температуре 6 °С.

Практически нерастворим в воде, растворим в спирте 96% и эфире.

. Около 1,436.

Температура кипения. Около 230 °С.

Дексаметазон–альдегид. [6762-51-2]. C22H27FO4. (М.м. 374,45).

11β,20-Дигидрокси-16α-метил-3-оксо-9-фторпрегна-1,4,17(20)-триен-21-аль.

Содержит не менее 95% C22H27FO4.

Температура плавления. От 226 до 230 °С (с разл.).

Дексаметазон–кетон. [1880-61-1]. C20H25FO3. (М.м. 332,41).

11β-Гидрокси-16α-метил-9-фторандроста-1,4-диен-3,17-дион.

Содержит не менее 95% C20H25FO3.

Температура плавления. От 242 до 244 °С.

Дексаметазон-кислота. [37927-01-8]. C21H27FO5. (М.м. 378,43).

11β,17-Дигидрокси-16α-метил-3-оксо-9-фторандроста-1,4-диен-17β-карбоновая кислота.

Содержит не менее 95% C21H27FO5.

Температура плавления. От 277 до 280 °С.

Декстран 2000 синий. [9049-32-5].

Готовят из декстрана, имеющего среднюю молекулярную массу 2·106, введением полициклического хромофора, окрашивающего вещество в синий цвет. Степень замещения 0,017. Высушивают при замораживании.

Быстро и полностью растворяется в воде и водных солевых растворах.

0,1% раствор в фосфатном буферном растворе рН 7 имеет максимум поглощения при длине волне 280 нм.

Декстран поперечно-сшитый для хроматографии (1).

Гранулы шарообразной формы, пригодны для разделения пептидов и белков с молекулярными массами от 15·102 до 30·103. Сухие гранулы имеют диаметр от 20 до 80 мкм.

Декстран поперечно-сшитый для хроматографии (3).

Гранулы шарообразной формы пригодны для разделения пептидов и белков с молекулярными массами от 4·103 до 15·104. Сухие гранулы имеют диаметр от 40 до 120 мкм.

Декстроза. См. Глюкоза.

Дельтаметрин. [52918-63-5]. С22H19Br2NO3. (М.м. 505,2).

(S)-(3-Феноксифенил)(циано)метил[(1R,3R)-3-(2,2-дибромэтенил)-2,2-диметилциклопропанкарбоксилат].

Температура кипения. 300 °С.

Температура плавления. 98 °С.

Демеклоциклина гидрохлорид. [64-73-3]. C21H21ClN2O8·HCl. (М.м. 501,31).

(4S,4aS,5aS,6S,12aS)-3,6,10,12,12a-Пентагидрокси-4-(диметиламино)-1,11-диоксо-7-хлор-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамида гидрохлорид.

Жёлтый порошок.

Растворим или умеренно растворим в воде, мало растворим в спирте 96%, очень мало растворим в ацетоне.

2'-Деоксиуридин. [951-78-0]. C9H12N2O5. (М.м. 228,20).

1-(2-Дезокси-β-D-рибофуранозил)пиримидин-2,4(1H,3H)-дион.

Температура плавления. Около 165 °С.

Диазореактив.

5 мл раствора сульфаниловой кислоты (4,5 г сульфаниловой кислоты и 45 мл хлористоводородной кислоты концентрированной в 500 мл воды) вносят в колбу, поставленную на лед, прибавляют 2,5 мл 10% раствора натрия нитрита. Смесь оставляют на льду в течение 5 мин, затем прибавляют еще 10 мл 10% раствора натрия нитрита, взбалтывают, оставляют на льду в течение 5 мин и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Хранят на льду. Используют свежеприготовленным, сохраняя на льду.

Диазотированный сульфацил.

7 г сульфацил-натрия растворяют в 50 мл воды, прибавляют 9 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 100 мл. 1 мл полученного раствора помещают в колбу, поставленную на лед, прибавляют 50 мл воды, 0,2 мл 10% раствора натрия нитрита, перемешивают и доводят объём раствора водой до 100 мл. Используют свежеприготовленным.

3,3'-Диаминобензидина тетрагидрохлорид. [7411-49-6]. C12H14N4·4HCl·2H2O. (М.м. 396,14).

[1,1'-Бифенил]-3,3',4,4'-тетрамина тетрагидрохлорид дигидрат.

Порошок почти белого или слегка розового цвета.

Растворим в воде.

Температура плавления. Около 280 °С с разложением.

п-Диаминодифенилсульфон. [80-08-0]. C12H12N2O2S. (М.м. 248,30).

4-[(4-аминобензен)сульфонил]анилин.

Растворим в метаноле, этаноле, ацетоне, практически нерастворим в воде.

Температура плавления. 175,5 °С.

2,3-Диаминонафталин. [771-97-1]. C10H10N2. (М.м. 158,20).

Нафталин-2,3-диамин.

Содержит не менее 97% C10H10N2.

Коричнево-жёлтый кристаллический порошок.

Растворим в пиридине, диметилсульфоксиде, N,N-диметилформамиде, горячем метаноле, в разбавленной хлористоводородной кислоте. Мало растворим в спирте 96%.

Температура плавления. От 193 до 196 °С.

2,3-Диаминонафталина раствор 0,1%.

0,1 г 2,3-диаминонафталина растворяют в 100 мл хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М.

Диаммония 2,2′-азинобис(3-этилбензотиазолин-6-сульфонат). [30931-67-0]. C18H24N6O6S4. (М.м. 548,68).

2,2′-(Гидразин-1,2-диилиден)бис(3-этил-2,3-дигидро-1,3-бензотиазол-6-сульфонат) диаммония.

Хромогенный субстрат для иммуноферментного анализа.

Зелёный порошок или таблетки, легко растворим в воде.

рН: от 4,2 до 5,8 для 0,01% раствора.

Диатомит. [91053-39-3].

Мелкий гранулированный порошок белого или почти белого цвета, полученный из кремнистых оболочек окаменевших диатомовых водорослей или их осколков.

Практически нерастворим в воде, спирте 96% и эфире.

Идентифицируют с помощью микроскопа при увеличении 500×.

Диатомит для газовой хроматографии.

Мелкий гранулированный порошок белого или почти белого цвета, полученный из кремнистых оболочек окаменевших диатомовых водорослей или их осколков.

Практически нерастворим в воде, спирте 96% и эфире.

Идентифицируют с помощью микроскопа при увеличении 500×; очищают обработкой хлористоводородной кислотой концентрированной и промыванием водой.

Размер частиц. Не более 5% должно оставаться на сите № 180 и не более 10% должно проходить через сито № 125.

Диатомит для газовой хроматографии (1).

Мелкий гранулированный порошок белого или почти белого цвета, полученный из кремнистых оболочек окаменевших диатомовых водорослей или их осколков.

Практически нерастворим в воде, спирте 96% и эфире.

Идентифицируют с помощью микроскопа при увеличении 500×; очищают обработкой хлористоводородной кислотой концентрированной и промыванием водой.

Размер частиц. Не более 5% должно оставаться на сите № 250 и не более 10% должно проходить через сито № 180.

Диатомит для газовой хроматографии (2).

Мелкий гранулированный порошок белого или почти белого цвета с удельной площадью поверхности около 0,5 м2/г, полученный из кремнистых оболочек окаменевших диатомовых водорослей или их осколков.

Практически нерастворим в воде, спирте 96% и эфире.

Идентифицируют с помощью микроскопа при увеличении 500×; очищают обработкой хлористоводородной кислотой концентрированной и промыванием водой.

Размер частиц. Не более 5% должно оставаться на сите № 180. Не более 10% должно проходить через сито № 125.

Диатомит силанизированный для газовой хроматографии.

Диатомит для газовой хроматографии, силанизированный диметилдихлорсиланом или другими подходящими силанизирующими реагентами.

Диатомит силанизированный для газовой хроматографии (1).

Получают из измельченного красного огнеупорного кирпича и силанизируют диметилдихлорсиланом или другими подходящими силанизирующими реагентами. Очищают обработкой хлористоводородной кислотой концентрированной и промыванием водой.

Диацетил. [431-03-8]. С4Н6O2. (М.м. 86,09).

Бутан-2,3-дион.

Зеленовато-жёлтая жидкость с сильным запахом.

Легко растворима в воде.

Температура плавления. –2,4 °С.

Температура кипения. Около 88 °С.

Дибензил. [103-29-7]. С14Н14. (М.м. 182,26).

1,1'-Этан-1,2-диилдибензол.

Кристаллический порошок белого цвета.

Практически нерастворим в воде, очень легко растворим в метиленхлориде, легко растворим в ацетоне, растворим в спирте 96%.

Температура плавления. От 50 до 53 °С.

Дибутиламин. [111-92-2]. C8H19N. (М.м. 129,24).

N-Бутилбутан-1-амин.

Бесцветная жидкость.

. Около 1,417.

Температура кипения. 159,6 °С.

Дибутиловый эфир. [142-96-1]. С8Н18О. (М.м. 130,23).

1,1'-Оксидибутан.

Бесцветная, воспламеняющаяся жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается с этанолом и эфиром.

. Около 0,77.

. Около 1,399.

Не перегоняют, если дибутиловый эфир не выдерживает испытания на пероксиды.

Пероксиды. 8 мл раствора крахмала с калия йодидом помещают в цилиндр с притертой стеклянной пробкой, вместимостью 12 мл и диаметром около 1,5 см, полностью заполняют испытуемым эфиром, закрывают пробкой и перемешивают. Выдерживают в тёмном месте в течение 30 мин; не должно появляться окрашивание.

Название и концентрация любого добавленного стабилизатора должны быть указаны на этикетке.

Дибутилфталат. [84-74-2]. С16Н22О4. (М.м. 278,34).

Дибутил(бензол-1,2-дикарбоксилат).

Прозрачная, бесцветная или слабоокрашенная маслянистая жидкость.

Очень мало растворим в воде, смешивается с ацетоном, спиртом 96% и эфиром.

. От 1,043 до 1,048.

. От 1,490 до 1,495.

2,4-Дигидроксибензальдегид. [95-01-2]. C7H6O3. (М.м. 138,12).

2,4-Дигидроксибензальдегид.

Температура плавления. Около 135 °С.

2,5-Дигидроксибензойная кислота. [490-79-9]. C7H6O4. (М.м. 154,12).

2,5-Дигидроксибензойная кислота.

Светло-жёлтые кристаллы.

Температура плавления. Около 205 °С.

10,11-Дигидрокарбамазепин. [3564-73-6]. С15Н14N2O. (М.м. 238,28).

10,11-Дигидро-5Н-дибензо[_b_,f]азепин-5-карбоксамид.

Температура плавления. От 205 до 210 °С.

1,3-Дигидроксинафталин. [132-86-5]. С10Н8O2. (М.м. 160,17).

Нафталин-1,3-диол.

Кристаллический порошок коричневато-фиолетового цвета.

Легко растворим в воде и спирте 96%.

Температура плавления. Около 125 °С.

1,3-Дигидроксинафталина раствор 1,0%

1,0 г 1,3-дигидроксинафталина с содержанием основного вещества не менее 98% помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

1,3-Дигидроксинафталина раствор 0,2%

0,2 г 1,3-дигидроксинафталина с содержанием основного вещества не менее 98% помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

2,7-Дигидроксинафталин. [582-17-2]. С10Н8O2. (М.м. 160,17).

Нафталин-2,7-диол.

Игольчатые кристаллы.

Растворим в воде, спирте 96% и эфире.

Температура плавления. Около 190 °С.

2,7-Дигидроксинафталина раствор.

10 мг 2,7-дигидроксинафталина растворяют в 100 мл серной кислоты концентрированной и выдерживают до обесцвечивания.

Срок годности 2 сут.

Дигитонин. [11024-24-1]. С56Н92O29. (М.м. 1229).

3β-[β-D-Глюкопиранозил-(1→3)-β-D-галактопиранозил-(1→2)-[β-D-ксилопиранозил-(1→3)]-β-D-галактопиранозил-(1→4)-β-D-галактопиранозилокси]-(25R)-5α-спиростан-2α,15β-диол.

Кристаллы или кристаллический порошок белого цвета.

Практически нерастворим в воде, умеренно растворим в этаноле, мало растворим в спирте 96%, практически нерастворим в эфире.

Диглицин. [556-50-3]. C4H8N2O3. (М.м. 132,12).

Глицилглицин.

Дидодецил-3,3′-тиодипропионат. [123-28-4]. С30Н58О4S. (М.м. 514,8).

Дидодецил(3,3'-сульфандиилдипропаноат).

Кристаллический порошок белого цвета.

Практически нерастворим в воде, легко растворим в ацетоне и петролейном эфире, мало растворим в спирте 96%.

Температура плавления. Около 39 °С.

Диизобутилкетон. [108-83-8]. С9Н18О. (М.м. 141,24).

2,6-Диметилгептан-4-он.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Мало растворим в воде, смешивается с большинством органических растворителей.

. Около 1,414.

Температура кипения. Около 168 °С.

Диизопропиловый эфир. [108-20-3]. С6Н14О. (М.м. 102,17).

2,2'-Оксидипропан.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Очень мало растворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. От 0,723 до 0,728.

Температура кипения. От 67 до 69 °С.

Не перегоняют, если диизопропиловый эфир не выдерживает испытания на пероксиды.

Пероксиды. 8 мл раствора крахмала с калия йодидом помещают в цилиндр с притертой стеклянной пробкой вместимостью 12 мл и диаметром около 1,5 см, полностью заполняют испытуемым эфиром, закрывают пробкой и перемешивают. Выдерживают в тёмном месте в течение 30 мин. Не должно появляться окрашивание.

Название и концентрация любого добавленного стабилизатора должны быть указаны на этикетке.

Хранят в защищённом от света месте.

Диизопропилэтиламин. [7087-68-5]. C8H19N. (М.м. 129,24).

N-(Пропан-2-ил)-N-этилпропан-2-амин.

Содержит не менее 98% C8H19N.

Бесцветная или светло-жёлтая прозрачная жидкость с характерным запахом аминов.

. Около 0,472.

. Около 1,413.

Температура кипения. Около 127 °С.

N,N`-Диизопропилэтилендиамин. [4013-94-9]. C8H2ON2. (М.м. 144,26).

N,N′-Бис(1-метилэтил)-1,2-этандиамин.

Бесцветная или желтоватая, едкая, воспламеняющаяся, гигроскопичная жидкость.

. Около 0,798.

. Около 1,429.

Температура кипения. Около 170 °C.

1,5-Дийодпентан. [628-77-3]. C5H10I2. (М.м. 323,94).

1,5-Дийодпентан.

Прозрачная жидкость от светло-жёлтого до оранжевого цвета.

. Около 2,18.

. Около 1,60.

Температура плавления. Около 9 °С.

Дикалия гидрофосфат. [7758-11-4]. К2НРО4. (М.м. 174,18).

Гидрофосфат дикалия.

Кристаллический порошок белого цвета, гигроскопичен.

Очень легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Дикалия гидрофосфата раствор 3%

3,0 г дикалия гидрофосфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Дикалия гидрофосфата раствор 0,1%

1,0 г дикалия гидрофосфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Дикалия гидрофосфата раствор 0,02 М

3,48 г дикалия гидрофосфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Дикалия гидрофосфат тригидрат. [16788-57-1]. К2НРО4·3Н2О.

(М.м. 228,22).

Гидрофосфат дикалия, тригидрат.

Белый кристаллический порошок или кристаллы.

Дикарбоксидина гидрохлорид. [56455-90-4]. С20Н24N2O6·HCl. (М.м. 461,3).

4,4′-[4,4′-Диамино[1,1′-бифенил]-3,3′-диилбис(окси)]дибутановой кислоты дигидрохлорид.

Диметикон. [9006-65-9]. C2n+4H6n+12Sin+1On.

α-(Триметилсилил)-ω-метилполи[окси(диметилсиландиил)].

Представляет собой поли(диметилсилоксан), получаемый при гидролизе и поликонденсации дихлордиметилсилана и хлортриметилсилана; степень полимеризации (n = 20–400) обеспечивает кинематическую вязкость от 20 мм2·с−1 до 1300 мм2·с−1.

Прозрачная бесцветная жидкость с различной вязкостью.

Практически нерастворим в воде, очень мало растворим или практически нерастворим в этаноле; смешивается с этилацетатом, метилэтилкетоном, толуолом.

Диметиламин. [124-40-3]. С2H7N. (М.м. 45,08).

N-Метилметанамин.

Бесцветный огнеопасный газ.

Температура кипения. 7 °С.

Температура плавления. –92,2 °С.

Диметиламина раствор концентрированный.

Раствор диметиламина в воде 40% (м/о).

Прозрачная бесцветная жидкость с характерным запахом.

. Около 0,89.

. Около 1,37.

Температура кипения. Около 54 °С.

Температура плавления. Около –37 °С.

Диметиламинобензальдегид. [100-10-7]. С9Н11NO. (М.м. 149,19).

4-(Диметиламино)бензальдегид.

Кристаллы белого или жёлтовато-белого цвета.

Растворим в спирте 96 % и разведённых растворах неорганических кислот.

Температура плавления. Около 74 °С.

Диметиламинобензальдегида кислотно-спиртовой раствор 0,1%.

В 1,0 мл хлористоводородной кислоты концентрированной растворяют 0,1 г диметиламинобензальдегида и доводят объём раствора спиртом 96 % до 100,0 мл.

Диметиламинобензальдегида раствор 10% в концентрированной серной кислоте.

1,0 г диметиламинобензальдегида растворяют в 10 мл серной кислоты концентрированной.

Раствор используют свежеприготовленным.

Диметиламинобензальдегида раствор 10% кислотно-спиртовой.

1,0 г диметиламинобензальдегида растворяют в 3,5 мл хлорной кислоты и медленно прибавляют 6,5 мл 2-пропанола.

Раствор используют свежеприготовленным.

Диметиламинобензальдегида раствор 3% в спирте 80%.

0,3 г диметиламинобензальдегида растворяют при слабом нагревании в 5 мл спирта 80% и доводят объём раствора тем же растворителем до 10 мл. Раствор используют свежеприготовленным.

Диметиламинобензальдегида раствор 2%.

0,2 г диметиламинобензальдегида растворяют без нагревания в смеси 4,5 мл воды и 5,5 мл хлористоводородной кислоты концентрированной.

Готовят непосредственно перед использованием.

Диметиламинобензальдегида раствор 1% в метаноле.

0,1 г диметиламинобензальдегида растворяют в 10 мл метанола.

Раствор используют свежеприготовленным.

Диметиламинобензальдегида раствор 1% в спирте 96%.

0,1 г диметиламинобензальдегида растворяют в 10 мл спирта 96%.

Раствор используют свежеприготовленным.

Диметиламинобензальдегида раствор 1% в этаноле.

1,0 г диметиламинобензальдегида растворяют в 100 мл этанола

Раствор используют свежеприготовленным.

Диметиламинобензальдегида раствор 1% в 1 М растворе хлористоводородной кислоты.

0,1 г диметиламинобензальдегида растворяют в 10 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты.

Раствор используют свежеприготовленным.

Диметиламинобензальдегида раствор 1% в 3 М растворе хлористоводородной кислоты.

0,1 г диметиламинобензальдегида растворяют в 10 мл 3 М раствора хлористоводородной кислоты.

Раствор используют свежеприготовленным.

Диметиламинобензальдегида раствор в концентрированной серной кислоте.

1 г диметиламинобензальдегида смачивают 4 каплями воды и прибавляют 3 мл серной кислоты концентрированной.

Диметиламинобензальдегида раствор в серной кислоте концентрированной 1%.

0,1 г диметиламинобензальдегида растворяют в 10 мл серной кислоты концентрированной.

Раствор используют свежеприготовленным.

Диметиламинобензальдегида раствор (реактив Олпорта).

0,125 г диметиламинобензальдегида растворяют в охлажденной смеси 35 мл воды и 65 мл серной кислоты концентрированной, прибавляют 0,1 мл 5% раствора железа(III) хлорида.

Перед использованием выдерживают 24 ч в защищённом от света месте.

Хранят при комнатной температуре в течение 7 сут; в холодильнике − в течение нескольких месяцев.

Диметиламинобензальдегида раствор в смеси фосфорной и уксусной кислот.

0,25 г диметиламинобензальдегида растворяют в смеси 5 г 85% фосфорной кислоты, 45 г воды и 50 г уксусной кислоты безводной.

Готовят непосредственно перед использованием.

Диметиламинобензальдегида солянокислый раствор в уксусной кислоте (реактив Эрлиха).

К 10,0 г диметиламинобензальдегида прибавляют 12,5 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора до 100,0 мл уксусной кислотой ледяной. Срок хранения раствора 1 мес при температуре 2–8 °С.

Перед использованием раствор разбавляют в 10 раз уксусной кислотой ледяной.

Диметиламинобензальдегида спиртовой раствор.

0,2 г диметиламинобензальдегида растворяют в 20 мл спирта 96%, прибавляют 0,5 мл 25% хлористоводородной кислоты, полученный раствор встряхивают с углем активированным и фильтруют. Окраска раствора не должна быть интенсивнее окраски 0,00025 М раствора йода.

Готовят непосредственно перед использованием.

Диметиламинобензальдегида спиртовой раствор в хлористоводородной кислоте.

1,0 г диметиламинобензальдегида растворяют в 50 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и прибавляют 50 мл спирта 96%.

Хранят в защищённом от света месте. Срок годности 1 мес.

4-Диметиламинокоричный альдегид. [6203-18-5]. С11Н13NO. (М.м. 175,23).

3-[(4-Диметиламино)фенил]проп-2-еналь.

Кристаллы или порошок от оранжевого до оранжево-коричневого цвета. Чувствителен к свету.

Очень мало растворим в воде, мало растворим в этаноле и эфире.

Температура плавления. Около 138 °С.

4-Диметиламинокоричного альдегида раствор.

2 г 4-диметиламинокоричного альдегида растворяют в смеси 100 мл 25% хлористоводородной кислоты и 100 мл этанола. Хранят в прохладном месте.

Непосредственно перед использованием раствор разводят этанолом в 4 раза. Хранят в прохладном месте.

Диметиламинонафталинсульфонилхлорид. [605-65-2]. С12Н12СlNO2S. (М.м. 269,75).

5-(Диметиламино)нафталин-1-сульфонилхлорид.

Кристаллический порошок жёлтого цвета.

Мало растворим в воде, растворим в метаноле.

Температура плавления. Около 70 °С.

Хранят в прохладном месте.

Диметиламинопропилхлорида гидрохлорид. [5407-04-5]. C5H12ClN·HCl. (М.м. 158.07).

N,N-Диметил-3-хлорпропан-1-амина гидрохлорид.

Гигроскопичный порошок от белого до бледно-кремового цвета.

Хорошо растворим в воде.

Температура плавления. Около 140 °С.

3-Диметиламинофенол. [99-07-0]. C8H11NO. (М.м. 137,18).

3-(Диметиламино)фенол.

Серый порошок.

Мало растворим в воде.

Температура плавления. Около 80 °С.

Диметиламиноэтилбензилат. [968-46-7]. C18H21NO3. (М.м. 299,36).

[2-(Диметиламино)этил][гидрокси(дифенил)ацетат].

Содержит не менее 96% C18H21NO3.

. Около 1,149.

. Около 1,534.

Диметиланилин. [121-69-7]. С8Н11N. (М.м. 121,18).

N,N-Диметиланилин.

Прозрачная, маслянистая жидкость. Свежеперегнанный–почти бесцветный, при хранении темнеет до красновато-коричневого цвета.

Практически нерастворим в воде, легко растворим в спирте 96% и эфире.

. Около 1,558.

Температурные пределы перегонки. От 192 до 194 °С; должно перегоняться не менее 95%.

2,3-Диметиланилин. [87-59-2]. С8Н11N. (М.м. 121,18).

2,3-Диметиланилин.

Жидкость жёлтоватого цвета.

Умеренно растворим в воде, растворим в спирте 96%.

. От 0,993 до 0,995.

. Около 1,569.

Температура кипения. Около 224 °С.

2,6-Диметиланилин. [87-62-7]. С8Н11N. (М.м. 121,18).

2,6-Диметиланилин.

Бесцветная жидкость.

Умеренно растворим в воде, растворим в спирте 96%.

. Около 0,98.

Диметилацетамид. [127-19-5]. С4Н9NО. (М.м. 87,12).

N,N-Диметилацетамид.

Содержит не менее 99,5% С4Н9NО.

Бесцветная жидкость.

Смешивается с водой и большинством органических растворителей.

. Около 0,94.

. Около 1,437.

Температура кипения. Около 165 °С.

Диметилглиоксим. [95-45-4]. C4H8N2O2. (М.м. 116,12).

Бутан-2,3-диилиденбис(гидроксиламин).

Кристаллический порошок белого цвета или бесцветные кристаллы.

Практически нерастворим в холодной воде, очень мало растворим в кипящей воде, растворим в спирте 96% и эфире.

Температура плавления. Около 240 °С с разложением.

Сульфатная зола. Не более 0,05%.

Диметилглиоксима раствор.

1 г диметилглиоксима растворяют в 100 мл 5% раствора натрия гидроксида.

Диметилдециламин. [1120-24-7]. С12Н27N. (М.м. 185,35).

N,N-Диметилдекан-1-амин.

Содержит не менее 98,0% (м/м) С12Н27N.

Температура кипения. Около 234 °С.

Диметилкарбонат. [616-38-6]. С3Н6О3 (М.м. 90,08).

Диметилкарбонат.

Бесцветная жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается со спиртом 96%.

. Около 1,065.

. Около 1,368.

Температура кипения. Около 90 °С.

1,9-Диметилметиленовый синий цинка хлорид. [931418-92-7]. C36H44Cl4N6S2Zn. (М.м. 832,1).

7-(Диметиламино)-N,N,1,9-тетраметил-3H-фенотиазин-3-иминий хлорид—хлорид цинка (2:2:1).

Диметиловый жёлтый. [60-11-7]. С14Н15N3. (М.м. 225,29).

N,N-Диметил-4-(фенилдиазенил)анилин.

Мелкие кристаллы жёлтого цвета или хлопья жёлтого или оранжевого цвета. Практически нерастворим в воде, очень мало растворим в спирте 96%.

Хроматография. Определение проводят методом тонкослойной хроматографии, используя в качестве тонкого слоя силикагель G. На хроматографическую пластинку наносят 10 мкл 0,01% раствора диметилового жёлтого в метиленхлориде и хроматографируют в этом же растворителе, фронт растворителя должен пройти не менее 10 см; на хроматограмме должно обнаруживаться только одно основное пятно.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Диметилового жёлтого и орацетового синего раствор.

10 мг диметилового жёлтого и 10 мг орацетового синего В растворяют в 300 мл метиленхлорида.

Диметилового жёлтого раствор 0,1% в бензоле.

10 мг диметилового жёлтого растворяют в 10 мл бензола.

Переход окраски раствора от красной к жёлтой в интервале рН 3,0–4,0.

Диметилового жёлтого раствор 0,1% в спирте 96%.

10 мг диметилового жёлтого растворяют в 10 мл спирта 96%.

Переход окраски раствора от красной к жёлтой в интервале рН 3,0–4,0.

1,3-Диметил-2-имидазолидинон. [80-73-9]. С5Н10N2О. (М.м. 114,15).

1,3-Диметилимидазолидин-2-он.

. Около 1,4720.

Температура кипения. Около 224 °С.

N,N-Диметилоктиламин. [7378-99-6]. С10Н23N. (М.м. 157,30).

N,N-Диметилоктан-1-амин.

Бесцветная жидкость.

Очень мало растворим в воде, растворим в этаноле и эфире.

. Около 0,765.

. Около 1,424.

Температура кипения. Около 195 °С.

Диметилпиперазин. [106-58-1]. С6Н14N2. (М.м. 114,19).

1,4-Диметилпиперазин.

Бесцветная жидкость. Смешивается с водой и спиртом 96%.

. Около 0,85.

. Около 1,446.

Температура кипения. Около 131 °С.

Диметилстеарамид. [3886-90-6]. С20Н41NО. (М.м. 311,55).

N,N-Диметилоктадеканамид.

Твердая масса белого или почти белого цвета.

Растворим в большинстве органических растворителей, включая ацетон.

Температура плавления. Около 51 °С.

Диметилсульфоксид. [67-68-5]. С2Н6ОS. (М.м. 78,13).

(Метансульфинил)метан.

Прозрачная, бесцветная, маслянистая, гигроскопичная жидкость.

Смешивается с водой и спиртом 96%.

. Около 1,10.

Температура кипения. Около 189 °С.

Вода. Не более 10 г/л.

Диметилсульфоксид, используемый в спектрофотометрии, должен выдерживать требования для диметилсульфоксида, но с другим содержанием воды, приведенным ниже, и, кроме того, должен выдерживать следующие дополнительные испытания.

Минимальное пропускание. 10% при длине волны 262 нм; 35% при длине волны 270 нм; 70% при длине волны 290 нм; 98% при длине волны 340 нм и более.

Определение проводят, используя в качестве раствора сравнения воду.

Вода. Не более 0,2% (м/м).

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Диметилсульфон. [67-71-0]. С2Н6О2S. (М.м. 94,13).

(Метансульфонил)метан.

Кристаллический порошок белого цвета.

Легко растворим в воде, растворим в ацетоне и спирте 96%.

Температура плавления. От 108 до 110 °С.

Диметилтетрадециламин. [112-75-4]. С16Н35N. ((М.м. 241,46).

N,N-Диметилтетрадекан-1-амин.

Содержит не менее 98,0% (м/м) и не более 101,0% (м/м) С16Н35N.

Прозрачная или почти прозрачная, бесцветная или жёлтоватого цвета жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается с ацетоном, спиртом 96% и метанолом.

. Около 0,80.

Температура кипения. Около 260 °С.

Вода. Не более 0,3% (м/м).

Количественное определение. 0,200 г растворяют в 10 мл спирта 96% и титруют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до красного окрашивания, используя в качестве индикатора 0,1 мл 0,05% раствора метилового красного.

1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 24,15 мг С16Н35N.

N,N-Диметил-L-фенилаланин. [17469-89-5]. C11H15NO2. (М.м. 193,24).

(2S)-2-(Диметиламино)-3-фенилпропановая кислота.

Содержит не менее 99% C11H15NO2 .

Температура плавления. Около 226 °С.

Диметилфенилендиамина сульфат. [536-47-0]. С8Н12N2∙H2SО4. (М.м. 234,27).

N,N′-Диметилбензол-1,4-диамина сульфат (1:1).

Содержит не менее 98% С8Н12N2∙H2SО4.

Порошок белого или слегка жёлтоватого цвета. Растворим в воде.

Температура плавления. Около 200 °С, с разложением.

Хранят в защищённом от света месте.

2,6-Диметилфенол. [576-26-1]. С8Н10О. (М.м. 122,16). 2,6-Диметилфенол.

Бесцветные игольчатые кристаллы.

Мало растворим в воде, легко растворим в спирте 96% и эфире.

Температура кипения. Около 203 °С.

Температура плавления. От 46 до 48 °С.

3,4-Диметилфенол. [95-65-8]. С8Н10О. (М.м. 122,16).

3,4-Диметилфенол.

Кристаллы белого или почти белого цвета.

Мало растворим в воде, легко растворим в спирте 96%.

Температура кипения. Около 226 °С.

Температура плавления. От 25 до 27 °С.

Диметилформамид. [68-12-2]. С3Н7NО. (М.м. 73,09).

N,N-Диметилформамид.

Прозрачная, бесцветная, жидкость.

Смешивается с водой и спиртом 96%.

. От 0,949 до 0,952.

Температура кипения. Около 153 °С.

Вода. Не более 0,1%.

Диметилформамида диметилацеталь. [4637-24-5]. C5H13NO2. (М.м. 119,16).

N,N-Диметил-1,1-диметоксиметанамин.

. Около 0,896.

. Около 1,396.

Температура кипения. Около 103 °С.

Диметилформамида диэтилацеталь. [1188-33-6]. С7Н17NО2. (М.м. 147,22).

N,N-Диметил-1,1-диэтоксиметанамин.

. Около 1,40.

Температура кипения. От 128 до 130 °С.

Диметилфталат. [131-11-3]. C10H10O4. (М.м. 194,19).

Вязкая бесцветная жидкость.

. От 1,514 до 1,518.

1,1-Диметилэтиламин. См. трет-Бутиламин.

1,1-Диметилэтилметиловый эфир. См. трет-Бутилметиловый эфир.

Диметоксипропан. [77-76-9]. С5Н12О2. (М.м. 104,15). 2,2-Диметоксипропан.

Бесцветная жидкость. Разлагается под действием влажного воздуха или воды.

Растворим в этаноле и эфире.

. Около 0,847.

. Около 1,378.

Температура кипения. Около 83 °С.

Димидия бромид. [518-67-2]. С20Н18BrN3. (М.м. 380,28).

3,8-Диамино-5-метил-6-фенилфенантридин-5-ий бромид.

Кристаллы тёмно-красного цвета.

Мало растворим в воде при температуре 20 °С, умеренно растворим в воде при температуре 60 °С и спирте 96%, практически нерастворим в эфире.

Димидия бромида и сульфанового синего смешанный раствор.

Отдельно растворяют 0,5 г димидия бромида и 0,25 г сульфанового синего в 30 мл горячей смеси растворителей этанол–вода 1:9 и перемешивают. Оба раствора смешивают и доводят объём раствора той же смесью растворителей до 250 мл. 20 мл полученного раствора смешивают с 20 мл 14,0% (о/о) раствора серной кислоты, предварительно разведённой примерно 250 мл воды, доводят водой до 500,0 мл.

Хранят в защищённом от света месте.

Динатрия арсенат. [10048-95-0]. Na2HАsO4·7H2O. (М.м. 312,01).

Гидроарсенат(V) динатрия, гептагидрат.

Кристаллы, выветривающиеся на воздухе.

Легко растворим в воде, растворим в глицерине, мало растворим в спирте 96%. Водный раствор имеет щелочную реакцию по лакмусу.

. Около 1,87.

Температура плавления. Около 57 °С (при быстром нагревании).

Динатрия бицинхонинат. [979-88-4]. C20H10N2Na2O4. (М.м. 388,28).

[2,2′-Бихинолин]-4,4′-дикарбоксилат динатрия.

Динатрия бутандисульфонат. [36589-61-4]. C4H8Na2O6S2. (М.м. 262,21).

Бутан-1,4-дисульфонат динатрия.

Кристаллическое вещество белого цвета.

Растворяется в воде.

Динатрия гидрофосфат безводный. [7558-79-4]. Na2HРO4. (М.м. 141,96). Гидрофосфат динатрия.

Белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы, гигроскопичный.

Легко растворим в воде, очень легко растворим в горячей воде, очень мало растворим в спирте 96%.

Динатрия гидрофосфата безводного раствор 10%.

10,0 г динатрия гидрофосфата безводного растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Динатрия гидрофосфата безводного раствор 5%.

5,0 г динатрия гидрофосфата безводного растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Динатрия гидрофосфата безводного раствор 1%.

10,0 г динатрия гидрофосфата безводного растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Динатрия гидрофосфата раствор 0,2 М.

2,84 г динатрия гидрофосфата безводного растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Динатрия гидрофосфата раствор 0,1 М.

1,42 г динатрия гидрофосфата безводного растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Динатрия гидрофосфат дигидрат. [10028-24-7]. Na2HРO4·2Н2О. (М.м. 177,99).

Гидрофосфат динатрия, дигидрат.

Бесцветные кристаллы, выветриваются на воздухе.

Растворим в воде, очень легко растворим в горячей воде.

Динатрия гидрофосфат гептагидрат. [7782-85-6]. Na2HРO4·7Н2О. (М.м. 268,07).

Гидрофосфат динатрия, гептагидрат.

Динатрия гидрофосфата раствор 0,5 М.

89,0 г динатрия гидрофосфата дигидрата растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Динатрия гидрофосфата раствор 0,35 М.

12,53 г динатрия гидрофосфата додекагидрата (или 6,23 г динатрия гидрофосфата дигидрата) растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Динатрия гидрофосфата раствор 0,2 М.

35,598 г динатрия гидрофосфата дигидрата растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Динатрия гидрофосфата раствор 0,05 М.

8,9 г динатрия гидрофосфата дигидрата растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Динатрия гидрофосфат додекагидрат. [10039-32-4]. Na2HРO4·12Н2О.

(М.м. 358,14).

Гидрофосфат динатрия, додекагидрат.

Прозрачные бесцветные кристаллы. Выветриваются на воздухе.

Легко растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96%.

Динатрия гидрофосфата додекагидрата раствор 9%.

9 г динатрия гидрофосфата додекагидрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Динатрия гидрофосфата додекагидрата раствор 5%.

5 г динатрия гидрофосфата додекагидрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Динатрия гидроцитрат. [144-33-2]. С6Н6Na2O7·1,5Н2О. (М.м. 263,11).

2-Гидроксипропан-1,2,3-трикарбоксилат динатрия, сесквигидрат.

Порошок белого цвета.

Растворим менее чем в 2 частях воды, практически нерастворим в спирте 96%.

Динатрия сульфид нонагидрат. См. Натрия сульфид.

Динатрия тетраборат. См. Натрия тетраборат.

Динатрия тетрабората раствор. См. Натрия тетрабората раствор.

Динатрия эдетат дигидрат. [6381-92-6]. С10Н14N2Na2O8·2H2O. (М.м. 372,24).

2,2ʹ,2ʹʹ,2ʹʹʹ-(Этан-1,2-диилдинитрило)тетраацетат диводорода динатрия дигидрат.

Белый, кристаллический порошок.

Растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96%, практически нерастворим в эфире.

Динитробензоилхлорид. [99-33-2]. С7Н3ClN2O5. (М.м. 230,56).

3,5-Динитробензоилхлорид.

Кристаллический порошок светло-жёлтого цвета или жёлтоватые кристаллы в виде игл.

Растворим в эфире; в воде и спирте 96% разлагается.

Температура плавления. Около 68 °С.

Динитробензойная кислота. [99-34-3]. С7Н4N2O6. (М.м. 212,12).

3,5-Динитробензойная кислота.

Кристаллы почти бесцветные.

Мало растворима в воде, очень легко растворима в спирте 96%.

Температура плавления. Около 206 °С.

Динитробензойной кислоты раствор 2%.

Раствор 20 г/л в спирте 96%.

Динитробензол. [528-29-0]. С6Н4N2O4. (М.м. 168,11).

1,3-Динитробензол.

Кристаллический порошок или кристаллы жёлтоватого цвета.

Практически нерастворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Температура плавления. Около 90 °С.

Динитробензола раствор.

Раствор 10 г/л в спирте 96%.

Динитрофенилгидразин. [119-26-6]. С6Н6N4O4. (М.м. 198,14).

(2,4-Динитрофенил)гидразин.

Кристаллы красновато-оранжевого цвета.

Очень мало растворим в воде, мало растворим в спирте 96% и эфире; растворим в этилацетате.

Температура плавления. Около 203 °С с разложением.

Динитрофенилгидразина уксусно-хлористоводородный раствор.

0,2 г динитрофенилгидразина растворяют в 20 мл метанола, прибавляют 80 мл смеси равных объёмов уксусной кислоты разведённой 30% и хлористоводородной кислоты 25% и перемешивают.

Готовят непосредственно перед использованием.

Динитрофенилгидразина сернокислый раствор.

В холодной смеси 10 мл серной кислоты концентрированной и 10 мл воды растворяют 1,5 г динитрофенилгидразина и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Динитрофенилгидразина спиртовой раствор.

0,5 г динитрофенилгидразина смешивают с 6 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и перемешивают до исчезновения красно-оранжевого окрашивания осадка. Прибавляют 20 мл этанола, нагревают смесь до получения прозрачного раствора, охлаждают и доводят этанолом до 100,0 мл.

Полученный раствор хранят в холодном месте. Срок годности 3 мес.

Динитрофенилгидразина хлористоводородный раствор.

0,50 г динитрофенилгидразина растворяют при нагревании в хлористоводородной кислоте разведённой 7,3%, доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл, охлаждают и фильтруют.

Готовят непосредственно перед использованием.

Nα-(2,4-Динитро-5-фторфенил)-L-аланиламид. [95713-52-3]. C9H9FN4O5. (М.м. 272,19).

(2S)-2-(2,4-Динитро-5-фторфениланилино)пропанамид.

Содержит не менее 98% C9H9FN4O5.

Кристаллы или порошок от жёлтого до оранжевого цвета.

Температура плавления. От 226 до 229 °С.

Хранить при температуре от 2 до 8 °С.

2,4-Динитрохлорбензол. [97-00-7]. C6H3ClN2O4. (М.м. 202,55).

2,4-Динитро-1-хлорбензол.

Бледно-жёлтоватые кристаллы. При быстром нагревании до высокой температуры может взрываться.

Практически нерастворим в воде, растворим в этаноле и эфире.

Динонилфталат. [28553-12-0]. С26Н42O4. (М.м. 418,6).

Динонил(бензол-1,2-дикарбоксилат) – смесь C9 изомеров.

Бесцветная или светло-жёлтого цвета вязкая жидкость.

. От 0,97 до 0,98.

. От 1,482 до 1,489.

Вода. Не более 0,1%.

Диоксан. [123-91-1]. С4Н8O2. (М.м. 88,11).

1,4-Диоксан.

Прозрачная, бесцветная жидкость со слабым приятным запахом.

Смешивается с водой и большинством органических растворителей.

. Около 1,03.

Температура затвердевания. От 9 до 11 °С.

Вода. Не более 0,5%.

Не перегоняют, если диоксан не выдерживает испытания на пероксиды.

Пероксиды. 8 мл раствора крахмала с калия йодидом помещают в цилиндр с притертой стеклянной пробкой вместимостью 12 мл и диаметром около 1,5 см, заполняют полностью диоксаном и перемешивают. Выдерживают в тёмном месте в течение 30 мин. Не должно обнаруживаться окрашивание.

Диоксан, используемый для жидкостной сцинтилляции, должен быть соответствующей степени чистоты.

Диоксана исходный раствор 0,1%.

1,00 г диоксана растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,00 мл. 5,0 мл полученного раствора доводят водой до 50,0 мл (1,0 мг/мл).

Диоксана раствор 0,05%.

50,0 мл исходного раствора диоксана доводят водой до 100,0 мл (0,5 мг/мл диоксана).

Диоксана раствор 0,01%.

10,0 мл 0,05% раствора диоксана доводят водой до 50,0 мл (0,1 мг/мл диоксана).

Диоксана раствор 0,002%.

2,0 мл 0,05% раствора диоксана доводят водой до 50,0 мл (0,02 мг/мл диоксана).

Диоктадецилдисульфид. [2500-88-1]. С36Н74S2. (М.м. 571,1).

1,1'-Дисульфандиилдиоктадекан.

Порошок белого цвета. Практически нерастворим в воде.

Температура плавления. От 53 до 58 °С.

Ди(октадецил)-3,3′-тиодипропионат. [693-36-7]. С42Н82O4S. (М.м. 683,2).

Диоктадецил(3,3'-сульфандиилдипропаноат).

Кристаллический порошок белого цвета.

Практически нерастворим в воде, легко растворим в метиленхлориде, умеренно растворим в ацетоне, спирте 96% и петролейном эфире.

Температура плавления. От 58 до 67 °С.

2,2′-Ди(октадецилокси)-5,5′-спироби(1,3,2-диоксафосфаринан). [3806-34-6]. С41Н82O6Р2. (М.м. 733,0).

3,9-Бис(октадецилокси)-2,4,8,10-тетраокса-3,9-дифосфаспиро[5.5]ундекан.

Твердое воскообразное вещество белого цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим в растворах углеводородов.

Температура плавления. От 40 до 70 °С.

Дисульфин синий. См. Сульфановый синий.

Диталимфос. [5131-24-8]. C12H14NO4PS. (М.м. 299,28).

О,О-Диэтил-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-2Н-изоиндол-2-ил)фосфонотионат.

Очень мало растворим в воде, в этилацетате и в безводном спирте.

Дитизон. [60-10-6]. С13Н12N4S. (М.м. 256,33).

N',2-Дифенилдиазенкарботиогидразид.

Порошок синевато-черного или коричневато-черного, или черного цвета. Практически нерастворим в воде, растворим в спирте 96%.

Хранят в защищённом от света месте.

Дитизона раствор 0,12%.

60 мг дитизона растворяют в хлороформе и доводят объём раствора тем же растворителем до 50,0 мл.

Дитизона раствор 0,05%

Раствор дитизона 0,5 г/л в хлороформе.

Готовят непосредственно перед использованием.

Дитизона раствор 0,025% в ацетоне

25 мг дитизона растворяют в ацетоне и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Дитизона раствор 0,025% в этаноле

25 мг дитизона растворяют в этаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Дитизона раствор 0,003%

30 мг дитизона растворяют в хлороформе и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл. К 10,0 мл полученного раствора прибавляют 0,5 мл спирта 96% и доводят объём раствора хлороформом до 100,0 мл.

При использовании для определения свинца, 100 мл полученного раствора встряхивают с 50 мл азотной кислоты 0,1 М раствора, отбрасывая верхний слой.

Дитизона раствор 0,002% в метиленхлориде

0,2 г дитизона растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл. 1,0 мл полученного раствора доводят метиленхлоридом до 100,0 мл.

Дитизона раствор 0,0012% (0,00125%)

40,0 мг дитизона (или 41,7 мг для получения 0,00125% раствора) растворяют в хлороформе и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл. 30,0 мл полученного раствора доводят хлороформом до объёма 100,0 мл.

Установка титра. Количество ртути(II) хлорида, эквивалентное 0,1354 г HgCl2, растворяют в смеси равных объёмов серной кислоты разведённой 9,8% и воды и доводят объём раствора той же смесью растворителей до 100,0 мл. 2,0 мл полученного раствора доводят смесью равных объёмов серной кислоты разведённой 9,8% и воды до объёма 100,0 мл (раствор содержит 20 ррm Нg). 1,0 мл полученного раствора помещают в делительную воронку, прибавляют 50 мл серной кислоты разведённой 9,8%, 140 мл воды и 10 мл раствора 200 г/л гидроксиламина гидрохлорида. Титруют приготовленным раствором дитизона; после каждого прибавления титранта смесь встряхивают 20 раз, к концу титрования смесь оставляют для разделения слоев, затем отбрасывают хлороформный слой и продолжают титровать до синевато-зеленого окрашивания.

Количество ртути (Э) в миллиграммах, эквивалентное содержанию дитизона в 1 мл раствора, вычисляют по формуле: Э = 20/V, где V–объём раствора дитизона, израсходованный на титрование, в миллилитрах.

Дитизона раствор 0,001%.

10 мг дитизона растворяют в 1 л хлороформа. Раствор хранят в плотно закрытой упаковке при 4–8 °С.

5,5′-Дитиобис(2-нитробензойная кислота). [69-78-3]. С14Н8N2О8S2. (М.м. 396,35).

5,5'-Дисульфандиилбис(2-нитробензойная кислота).

Порошок жёлтого цвета.

Умеренно растворима в спирте 96%.

Температура плавления. Около 242 °С.

Дитиол. [496-74-2]. С7Н8S2. (М.м. 156,26).

4-Метилбензол-1,2-дитиол.

Кристаллы белого цвета, гигроскопичны.

Растворим в метаноле и растворах гидроксидов щелочных металлов.

Температура плавления. Около 30 °С.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Дитиола реактив.

1 г дитиола растворяют в 2 мл кислоты тиогликолевой и доводят объём раствора 2% раствором натрия гидроксида до 250,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Дитиотрейтол. [27565-41-9]. С4Н10О2S2. (М.м. 154,24).

rac-(2R,3R)-1,4-Дисульфанилбутан-2,3-диол.

Игольчатые слабо гигроскопичные кристаллы.

Легко растворим в воде, ацетоне и этаноле безводном.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Дифениламин. [122-39-4]. С12Н11N. (М.м. 169,22).

N-Фениланилин.

Кристаллы белого цвета.

Мало растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Температура плавления. Около 55 °С.

Хранят в защищённом от света месте.

Дифениламина раствор.

0,05 г дифениламина растворяют в смеси 10 мл серной кислоты концентрированной и 2 мл воды.

Дифениламина раствор 0,1%.

Раствор 1 г/л в серной кислоте концентрированной.

Хранят в защищённом от света месте.

Дифениламина раствор 1%.

Раствор 10 г/л в серной кислоте концентрированной. Раствор должен быть бесцветным.

Дифениламина уксуснокислый раствор.

1 г дифениламина растворяют в 100 мл уксусной кислоты ледяной и прибавляют 2,75 мл кислоты серной концентрированной.

Готовят непосредственно перед использованием.

Дифениламин-4-сульфокислоты натриевая соль. [6152-67-6]. С12Н10NNaO3S. (М.м. 271,27).

4-(Фениламино)-бензенсульфоновой кислоты натриевая соль.

Растворим в воде.

Дифениламин-4-сульфокислоты натриевой соли раствор 0,5%.

0,5 г Дифениламин-4-сульфокислоты натриевой соли растворяют в 100 мл воды.

Дифенилантрацен. [1499-10-1]. С26Н18. (М.м. 330,42).

9,10-Дифенилантрацен.

Кристаллический порошок от жёлтоватого до жёлтого цвета.

Практически нерастворим в воде, легко растворим в эфире.

Температура плавления. Около 248 °С.

Дифенилбензидин. [531-91-9]. С24Н20N2. (М.м. 336,43).

N,N′-Дифенил[1,1′-бифенил]-4,4′-диамин.

Кристаллический порошок белого или белого с сероватым оттенком цвета. Практически нерастворим в воде, мало растворим в ацетоне и спирте 96%.

Температура плавления. Около 248 °С.

Хранят в защищённом от света месте.

Дифенилборной кислоты аминоэтиловый эфир. [524-95-8]. С14Н16ВNО.

(М.м. 225,09).

(2-Аминоэтил)дифенилборинат.

Кристаллический порошок белого или слегка жёлтоватого цвета. Практически нерастворим в воде, растворим в спирте 96%.

Температура плавления. Около 193 °С.

Дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствор 1% в спирте 96%.

1,0 г дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира растворяют в 100 мл спирта 96%.

Срок годности 3 мес при хранении в прохладном, защищённом от света месте.

1,2-Дифенилгидразин. [122-66-7]. C12H12N2. (М.м. 184,24).

1,2-Дифенилгидразин.

Оранжевый порошок.

Температура плавления. Около 125 °С.

2,2-Дифенилглицин. [3060-50-2]. C14H13NO2. (М.м. 227,26).

Амино(дифенил)уксусная кислота.

Белое кристаллическое вещество.

Температура плавления. Около 245 °С (разл.).

N,N′-Дифенилгуанидин. [102-06-7]. С13Н13N3. (М.м. 211,26).

N,N'-Дифенилгуанидин.

Мелкокристаллический порошок белого или светло-жёлтого цвета.

Очень мало растворим в воде, легко растворим в спирте 96%, мало растворим в эфире, умеренно растворим в хлороформе.

Дифенилкарбазид. [140-22-7]. С13Н14N4О. (М.м. 242,28).

N',2-Дифенилгидразин-1-карбогидразид.

Кристаллический порошок белого цвета, постепенно розовеет на воздухе. Очень мало растворим в воде, растворим в ацетоне, спирте 96% и уксусной кислоте ледяной.

Температура плавления. Около 170 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,1%.

Хранят в защищённом от света месте, в сосудах оранжевого стекла.

Дифенилкарбазида раствор

0,2 г дифенилкарбазида растворяют в 10 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора этанолом безводным до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Дифенилкарбазон. [538-62-5]. С13Н12N4О. (М.м. 240,26).

N',2-Дифенилдиазенкарбогидразид.

Кристаллический порошок оранжево-жёлтого цвета.

Практически нерастворим в воде, очень легко растворим в спирте 96%, хлороформе и бензоле.

Температура плавления. Около 157 °С с разложением.

Раствор индикатора. См. Дифенилкарбазона раствор спиртовой 1%.

Дифенилкарбазона раствор спиртовой 1%.

1,0 г дифенилкарбазона растворяют при нагревании в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл. Хранят во флаконах оранжевого стекла. Срок годности – 15 сут.

Дифенилкарбазон-ртутный реактив.

Раствор I. 0,1 г дифенилкарбазона растворяют в этаноле безводном и доводят объём раствора тем же растворителем до 50,0 мл.

Раствор II. 1 г ртути(II) хлорида растворяют в этаноле безводном и доводят объём раствора тем же растворителем до 50,0 мл.

Смешивают равные объёмы растворов I и II.

Дифенилоксазол. [92-71-7]. С15Н11NО. (М.м. 221,25).

2,5-Дифенил-1,3-оксазол.

Порошок белого цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим в метаноле, умеренно растворим в диоксане и кислоте уксусной ледяной.

Температура плавления. Около 70 °С с разложением.

. Около 1260. Определение проводят при длине волны 305 нм, используя в качестве растворителя метанол.

Дифенилоксазол, используемый для жидкостной сцинтилляции, должен быть соответствующей степени чистоты.

Дифенилфениленоксида полимер.

Поли[окси(2,6-дифенил-1,4-фенилен)].

Пористые гранулы шарообразной формы белого или почти белого цвета. Размер гранул указывают в испытаниях, в которых они используются.

2,6-Дихлоранилин. [608-31-1]. С6Н5NСl2. (М.м. 162,02).

2,6-Дихлоранилин.

Содержит не менее 98% С6Н5NСl2.

Температура плавления. Около 37 °С.

2,4-Дихлорбензойная кислота. [50-84-0]. C7H4Cl2O2. (М.м. 191,01).

2,4-Дихлорбензойная кислота.

Бледно-бежевый порошок.

Температура плавления. Около 160 °С.

Дихлорбензол. [95-50-1]. С6Н4Сl2. (М.м. 147,00).

1,2-Дихлорбензол.

Бесцветная маслянистая жидкость.

Практически нерастворим в воде, растворим в этаноле безводном и эфире.

. Около 1,31.

Температура кипения. Около 180 °С.

Дихлорметан. См. Метиленхлорид.

Дихлородиаминоциклогексанплатина. [61848-66-6]. C6H14Cl2N2Pt. (М.м. 380,18).

(SP-4-2)-Дихлоро[(1R,2R)-циклогексан-1,2-диамин-κN,κN']платина(II).

Твёрдое вещество жёлтого цвета.

Мало растворим в диметилсульфоксиде.

Дихлорофос. [62-73-7]. С4Н7Сl2О4Р. (М.м. 220,98).

(2,2-Дихлорэтенил)диметилфосфат.

Жидкость от бесцветного до коричневато-жёлтого цвета.

Растворим в воде, смешивается с большинством органических растворителей.

. Около 1,452.

Дихлоруксусная кислота. [79-43-6]. С2Н2Сl2О2. (М.м. 128,94).

Дихлоруксусная кислота.

Бесцветная жидкость. Смешивается с водой, спиртом 96% и эфиром.

. Около 1,566.

. Около 1,466.

Температура кипения. Около 193 °С.

Дихлоруксусной кислоты раствор.

67 мл дихлоруксусной кислоты доводят водой до 300 мл и нейтрализуют раствором аммиака концентрированным по синей лакмусовой бумаге. Охлаждают, прибавляют 33 мл дихлоруксусной кислоты и доводят водой до 600 мл.

Дихлорфенолиндофенола натриевая соль. [620-45-1].

С12Н6Сl2NNaО2·2Н2О. (М.м. 326,11).

4-[(4-Оксо-3,5-дихлорциклогекса-2,5-диен-1-илиден)амино]фенолят натрия, дигидрат.

Порошок тёмно-зеленого цвета.

Легко растворима в воде и этаноле безводном.

Водный раствор имеет тёмно-синюю окраску, которая при подкислении раствора переходит в розовую.

Дихлорфенолиндофенола натриевой соли раствор 0,2% в этаноле

0,2 г дихлорфенолиндофенола натриевой соли растворяют в этаноле и доводят объём раствора этанолом до 100,0 мл.

Дихлорфенолиндофенола натриевой соли раствор 0,015%.

15 мг 2,6-дихлорфенолиндофенола натриевой соли помещают в стакан вместимостью 100 мл, прибавляют прокипяченную горячую водой небольшими порциями, фильтруя каждую порцию раствора через один и тот же фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл. После полного растворения фильтр промывают горячей водой, пока стекающая жидкость не обесцветится и после охлаждения доводят объём раствора водой до метки. Хранить в защищённом от света месте. Срок годности – 5 сут.

Дихлорфенолиндофенола натриевой соли стандартный раствор

50,0 мг дихлорфенолиндофенола натриевой соли растворяют в 100,0 мл воды и фильтруют.

Установка условного титра. 20,0 мг аскорбиновой кислоты растворяют в 10,0 мл свежеприготовленного 20% раствора (200 г/л) метафосфорной кислоты и доводят объём раствора водой до 250,0 мл. 5,0 мл полученного раствора быстро титруют приготовленным раствором дихлорфенолиндолфенола из микробюретки с ценой деления 0,01 мл до розового окрашивания, не исчезающего в течение 10 с, время титрования должно быть не более 2 мин. Раствор дихлорфенолиндолфенола разводят водой до получения раствора, 1 мл которого соответствует 0,1 мг аскорбиновой кислоты С6Н8О6.

Срок годности – 3 сут. Титр устанавливают непосредственно перед использованием.

Дихлорфенолиндофенола натриевой соли 0,001 М раствор

33 мг дихлорфенолиндофенола натриевой соли растворяют в 100,0 мл воды и фильтруют.

2,6-Дихлорфенолиндофенолята натрия раствор 0,001 М. См. Дихлорфенолиндофенола натриевой соли 0,001 М раствор.

Дихлорфлуоресцеин. [76-54-0]. С20Н10Сl2O5. (М.м. 401,2).

2-(6-Гидрокси-3-оксо-2,7-дихлор-3Н-ксантен-9-ил)бензойная кислота.

Порошок от жёлтовато-коричневого до жёлто-оранжевого цвета.

Мало растворим в воде, легко растворим в спирте 96% и разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов с образованием раствора с жёлтовато-зеленой флуоресценцией, практически нерастворим в эфире.

Дихлорфлуоресцеина раствор 0,2% в этаноле

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,2 г дихлорфлуоресцеина, растворяют в этаноле и доводят объём раствора этим же растворителем до метки.

2,6-Дихлорхинонхлоримид. [101-38-2]. С6Н2Сl3NO. (М.м. 210,44).

2,6-Дихлор-4-(хлоримино)циклогекса-2,5-диен-1-он.

Кристаллический порошок от светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим в спирте 96% и разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов.

Температура плавления. Около 66 °С.

2,6-Дихлорхинонхлоримида раствор 1%.

1,0 г 2,6-дихлорхинонхлоримида растворяют в 100 мл спирта 96%.

Хранят в прохладном, защищённом от света месте.

Срок годности 30 суток.

2,6-Дихлорхинонхлоримида раствор 0,4% в 2-пропаноле.

0,2 г 2,6-дихлорхинонхлоримида растворяют в 50 мл 2-пропанола.

Хранят при температуре от 2 до 8 ºС во флаконе оранжевого стекла.

При появлении розового окрашивания раствор к применению непригоден.

2,6-Дихлорхинонхлоримида раствор 0,1%.

0,1 г 2,6-дихлорхинонхлоримида растворяют в 100 мл спирта 96%.

Хранят в прохладном, защищённом от света месте.

Срок годности 7 суток.

2,6-Дихлорхинонхлоримида раствор 0,04%.

0,02 г перекристаллизованного из ацетона 2,6-дихлорхинонхлоримида растворяют в 50 мл свежеперегнанного бутилового или изопропилового спирта.

Хранят на холоду в банке оранжевого стекла.

При появлении розового окрашивания раствор к применению непригоден.

Дихлорэтан. [107-06-2]. C2Н4Сl2. (М.м. 98,96).

1,2-Дихлорэтан.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Растворим приблизительно в 120 частях воды и 2 частях спирта 96%, смешивается с эфиром.

. Около 1,25.

Температурные пределы перегонки. От 82 до 84 °С; должно перегоняться не менее 95%.

Дихлорэтан, насыщенный водой.

Смешивают дихлорэтан с водой в соотношении 1:2, энергично встряхивают в течение 15–20 мин и оставляют до разделения слоев. Отбирают дихлорэтановый слой.

Готовят непосредственно перед использованием.

Дициандиамид. См. Цианогуанидин.

Дициклогексил. [92-51-3]. C12H22. (М.м. 166,30).

1,1'-Би(циклогексан).

. Около 0,864.

Температура кипения. Около 227 °С.

Температура плавления. Около 4 °С.

Дициклогексиламин. [101-83-7]. С12Н23N. (М.м. 181,32).

N-Циклогексилциклогексан-1-амин.

Бесцветная жидкость.

Умеренно растворим в воде, смешивается с большинством органическимх растворителей.

. Около 1,484.

Температура кипения. Около 256 °С.

Температура затвердевания. 0–1 °С.

Дициклогексилмочевина. [2387-23-7]. С13Н24N2О. (М.м. 224,34).

N,N'-Дициклогексилмочевина.

Кристаллический порошок белого цвета.

Температура плавления. Около 232 °С.

Диэтаноламин. [111-42-2]. С4Н11NO2. (М.м. 105,14).

2,2'-Азандиилди(этан-1-ол).

Прозрачная, вязкая жидкость слегка жёлтоватого цвета или кристаллы, расплывающиеся на воздухе, плавятся при температуре около 28 °С. Смешивается с водой и спиртом 96%, легко растворим в ацетоне и эфире.

. Около 1,09.

рН. От 10,0 до 11,5 (5% раствор).

Диэтиламин. [109-89-7]. С4Н11N. (М.м. 73,14).

N-Этилэтанамин.

Прозрачная, бесцветная, воспламеняющаяся жидкость. Имеет сильнощелочную реакцию.

Смешивается с водой и спиртом 96%. Обращаться с осторожностью.

. Около 0,71.

Температура кипения. Около 55 °С.

Диэтиламиноэтилдекстран.

Анионообменная смола в форме гидрохлорида.

Порошок, образующий с водой гель.

Диэтиламиноэтоксиэтанол. [140-82-9]. C8H19NO2. (М.м. 161,24).

2-[2-(Диэтиламино)этокси]этан-1-ол.

Бесцветная или бледно-жёлтая маслянистая жидкость.

Хранить при температуре от 2 до 8 °С.

N,N-Диэтиланилин. [91-66-7]. С10Н15N. (М.м. 149,23).

N,N-Диэтиланилин.

Прозрачная, бесцветная или слегка жёлтоватая воспламеняющаяся жидкость, имеет сильную щелочную реакцию.

Практически нерастворим в воде, легко растворим в спирте 96% и эфире.

. Около 0,938.

Температура кипения. Около 217 °С.

Температура плавления. Около -38 °С.

Ди(2-этилгексил)фталат. [117-81-7]. С24Н38О4. (М.м. 390,56).

Ди(2-этилгексил)(бензол-1,2-дикарбоксилат).

Прозрачная, маслянистая жидкость.

Практически нерастворим в воде, растворим в органических растворителях.

. Около 0,98.

. Около 1,486.

Вязкость. Около 80 Па·с.

Диэтиленгликоль. [111-46-6]. С4Н10О3. (М.м. 106,12).

2,2′-Оксиди(этан-1-ол).

Содержит не менее 99,5% (м/м) С4Н10О3.

Прозрачная, бесцветная, гигроскопичная жидкость.

Смешивается с водой, ацетоном и спиртом 96%.

. Около 1,118.

. Около 1,447.

Температура кипения. От 244 до 246 °С.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Диэтиленгликоля метиловый эфир. [111-77-3]. С5Н12О3. (М.м. 120,15).

2-(2-Метоксиэтокси)этан-1-ол.

Прозрачная, бесцветная жидкость. Легко воспламенима, гигроскопична.

. Около 1,01.

. Около 1,426.

Диэтилфенилендиамина сульфат. [6283-63-2]. С10Н16N2∙H2SО4. (М.м. 262,32). N,N-Диэтилбензол-1,4-диамина сульфат (1:1).

Содержит не менее 98% С10Н16N2∙H2SО4.

Порошок белого или слегка жёлтоватого цвета. Растворим в воде.

Температура плавления. Около 185 °С, с разложением.

Хранят в защищённом от света месте.

Диэтилфенилендиамина сульфата раствор.

К 250 мл воды прибавляют 2 мл серной кислоты концентрированной и 25 мл 0,02 М раствора натрия эдетата. В полученном растворе растворяют 1,1 г диэтилфенилендиамина сульфата и доводят объём раствора водой до 1000 мл.

Используют только бесцветный раствор.

Хранят в прохладном, защищённом от света месте. Срок годности 1 мес.

N,N-Диэтилэтилендиамин. [100-36-7]. С6Н16N2. (М.м. 116,20).

N,N-Диэтилэтан-1,2-диамин.

Содержит не менее 98% С6Н16N2.

Слегка маслянистая жидкость, бесцветная или слегка жёлтоватого цвета, с сильным запахом аммиака. Оказывает раздражающее действие на кожу, глаза и слизистые оболочки.

. Около 0,827.

Температура кипения. От 145 до 147 °С.

Вода. Не более 1,0%. Определение проводят из 0,5 г.

Диэтокситетрагидрофуран. [3320-90-9]. С8Н16О3. (М.м. 160,21).

2,5-Диэтоксиоксолан.

Смесь цис- и транс- изомеров.

Прозрачная, бесцветная или слегка жёлтоватого цвета жидкость.

Практически нерастворим в воде, растворим в спирте 96%, эфире и большинстве других органических растворителей.

. Около 0,98.

. Около 1,418.

1-Додеканол. См. Лауриловый спирт.

Додецилтриметиламмония бромид. [1119-94-4]. CH3(CH2)11N(CH3)3Br. (М.м. 308,3).

Лаурилтриметиламмония бромид.

Докузат натрия. См. Натрия докузат.

D-ДОПА. [5796-17-8]. C9H11NO4. (М.м. 197,19).

(2R)-2-Амино-3-(3,4-дигидроксифенил)пропановая кислота.

Содержит не менее 95% C9H11NO4.

Растворим в 1 М хлористоводородной кислоте, практически нерастворим в спирте 96%.

. От +9,5 до +11,5 (1% раствор в 1 М хлористоводородной кислоте).

Температура плавления. Около 277 °С.

Дотриаконтан. [544-85-4]. С32Н66. (М.м. 450,9).

Дотриаконтан.

Пластинки белого цвета.

Практически нерастворим в воде, умеренно растворим в гексане, мало растворим в эфире.

Температура плавления. Около 69 °С.

Примеси. Не более 0,1%. Определение проводят методом газовой хроматографии.

Жжёная известь. См. Кальция оксид.

Желатин. [9000-70-8].

Очищенный протеин, получаемый при частичном кислотном (тип А) или щелочном (тип Б) гидролизе животного коллагена. Может представлять собой смесь двух типов.

От светло-жёлтого до слегка жёлтовато-коричневого цвета твердая масса в виде полупрозрачных пластин, стружек, гранул или порошка.

Практически нерастворим в обычных растворителях. В холодной воде набухает, при нагревании образует коллоидный раствор.

Желатин гидролизованный.

50 г желатина растворяют в 1000 мл воды. Обрабатывают насыщенным паром в автоклаве при температуре 121 °С в течение 90 мин и лиофилизируют.

Железа(III) аммония сульфат. [7783-83-7]. FeNH4(SO4)2·12Н2О. (М.м. 482,2).

Сульфат аммония железа(III), додекагидрат.

Бледно-лиловые кристаллы, выцветающие на воздухе.

Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Водный раствор имеет кислую реакцию и с растворами роданидов дает тёмно-красное окрашивание.

Железа(III) аммония сульфата насыщенный раствор

40 г железа(III) аммония сульфата растворяют в 100 мл воды, фильтруют и прибавляют азотную кислоту разведённую 16% до перехода коричневой окраски в желтовато-зелёную.

Хранят во флаконе из тёмного стекла в защищённом от света месте при комнатной температуре.

Железа(III) аммония сульфата раствор 30%.

30 г железа(III) аммония сульфата растворяют в воде, к раствору прибавляют азотную кислоту разведённую 16% до перехода коричневой окраски в жёлтовато-зелёную и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Перед использованием, если необходимо, фильтруют.

Железа(III) аммония сульфата раствор 15%.

15 г железа(III) аммония сульфата растворяют в воде, к раствору прибавляют азотную кислоту разведённую 16% до перехода коричневой окраски в жёлтовато-зелёную и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Перед использованием, если необходимо, фильтруют.

Железа(III) аммония сульфата раствор 15% сернокислый.

15 г железа(III) аммония сульфата растворяют в смеси серной кислоты концентрированной и воды 1:3 (о/о) и доводят объём раствора этим же растворителем до 100,0 мл.

Перед использованием, если необходимо, фильтруют.

Железа(III) аммония сульфата раствор 10%.

10,0 г железа(III) аммония сульфата растворяют в воде, к раствору прибавляют азотной кислоты разведённой 16% до перехода коричневой окраски в жёлтовато-зелёную и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Перед использованием, если необходимо, фильтруют.

Железа(III) аммония сульфата раствор 1,0%.

1,0 г железа(III) аммония сульфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Железа(III) аммония сульфата раствор 1,0% кислый.

1,0 г железа(III) аммония сульфата растворяют в воде, прибавляют 6 мл азотной кислоты разведённой 16% и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Железа(III) аммония сульфата раствор 0,20%.

0,2 г железа(III) аммония сульфата растворяют в воде, подкисляют 6 мл азотной кислоты разведённой 16% и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Железа(III) аммония сульфата раствор в азотной кислоте.

Встряхивают 30 г железа(III) аммония сульфата с 40 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Если раствор мутный, его центрифугируют или фильтруют.

Хранят в защищённом от света месте.

Железа(III) аммония сульфата раствор 20% в серной кислоте.

20 г железа(III) аммония сульфата растворяют в 75 мл воды, прибавляют 10 мл раствора 2,8% (о/о) серной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Железа(III) аммония сульфата раствор 1% в серной кислоты растворе 0,14% (о/о)

1,0 г железа(III) аммония сульфата растворяют в серной кислоты растворе 0,14% (о/о) и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Железа(III) нитрат. [7782-61-8]. Fe(NO3)3·9H2O. (М.м. 404,0).

Нитрат железа(III), нонагидрат.

Содержит не менее 99,0% (м/м) Fe(NO3)3·9H2O.

Кристаллы или кристаллическая масса светло-розового цвета.

Очень легко растворим в воде.

Свободная кислота. Не более 0,3% (в виде HNO3).

Железа(III) нитрата раствор 5%.

5 г железа(III) нитрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Железа(II) аммония сульфат. [7783-85-9]. Fe(NH4)2(SO4)2·6H2O.

(М.м. 392,14).

Дисульфат диаммония железа(II), гексагидрат.

Кристаллы бледного голубовато-зеленоватого цвета или гранулы.

Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Хранят в защищённом от света месте.

Железа(II) сульфат. [7782-63-0]. FeSO4·7Н2О. (М.м. 278,01).

Сульфат железа(II), гептагидрат.

Бледные зеленовато-голубые кристаллы.

Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Железа(II) сульфата раствор насыщенный

К 10 г железа(II) сульфата прибавляют около 20 мл воды, перемешивают до прекращения растворения и фильтруют.

Железа(II) сульфата раствор 5% сернокислый

5 г железа(II) сульфата растворяют в 90 мл воды, свободной от углерода диоксида, и прибавляют 10 мл серной кислоты концентрированной. Готовят непосредственно перед использованием.

Железа(II) сульфата раствор 1%

1,0 г железа(II) сульфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Готовят непосредственно перед использованием.

Железа(II) сульфата раствор 0,45% в хлористоводородной кислоте

0,45 г железа(II) сульфата растворяют в 50 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты и доводят объём раствора водой, свободной от углерода диоксида, до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Железа(II) сульфата раствор 0,01%

10 мг железа(II) сульфата растворяют в 100 мл воды, свободной от углерода диоксида. Готовят непосредственно перед использованием.

Железа(II) сульфата раствор в серной кислоте

3 г железа(II) сульфата растворяют в смеси 3 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды и 3 мл серной кислоты разведённой 9,8%.

Готовят непосредственно перед использованием.

Железа(III) сульфат. [15244-10-7]. Fe2(SO4)3·хH2O.

Сульфата железа(III) гидрат.

Порошок жёлтовато-белого цвета, сильно гигроскопичен, разлагается на воздухе.

Растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке, в защищённом от света месте.

Железа(III) сульфат пентагидрат. [142906-29-4]. Fe2(SO4)3·5H2O. (М.м. 490,0).

Сульфата железа(III) пентагидрат.

Порошок или клисталла жёлтовато-белого цвета.

Железа(III) сульфата раствор в серной кислоте 5%.

5,0 г железа(III) сульфата растворяют в достаточном количестве воды, прибавляют 20 мл серной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Железа(II) хлорид. [13478-10-9]. FeCI2·4H2O. (М.м. 198,81).

Хлорид железа(II), тетрагидрат.

Зеленовато-голубые моноклинные кристаллы.

Очень легко растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Гигроскопичен.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Температура плавления. 76,5 °С (с разложением).

Железа(III) хлорид. [10025-77-1]. FeCI3·6H2O. (М.м. 270,30).

Хлорид железа(III), гексагидрат.

Кристаллическая масса жёлто-оранжевого или коричневого цвета, расплывающаяся на воздухе.

Очень легко растворим в воде, растворим в спирте 96% и эфире.

Под действием света железа(III) хлорид и его растворы частично восстанавливаются.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Железа(III) хлорида раствор (плотность 1,07–1,08).

20,0 г железа(III) хлорида растворяют в 100 мл воды, доводят водой до величины плотности 1,07–1,08 и перемешивают.

Срок годности – не более 3 мес при хранении в плотно закрытой упаковке, в прохладном защищённом от света месте.

Железа(III) хлорида раствор 0,1 М

2,7 г железа(III) хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Железа(III) хлорида раствор 30%.

30,0 г железа(III) хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Срок годности – не более 3 мес при хранении в плотно закрытой упаковке, в прохладном защищённом от света месте.

Железа(III) хлорида раствор 10,5%.

10,5 г железа(III) хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Срок годности – не более 3 мес при хранении в плотно закрытой упаковке, в прохладном защищённом от света месте.

Железа(III) хлорида раствор 10%.

10,0 г железа(III) хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Срок годности – не более 3 мес при хранении в плотно закрытой упаковке, в прохладном защищённом от света месте.

Железа(III) хлорида раствор 9%.

9,0 г железа(III) хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Срок годности – не более 3 мес при хранении в плотно закрытой упаковке, в прохладном защищённом от света месте.

Железа(III) хлорида раствор 5%.

5,0 г железа(III) хлорида растворяют в воде и доводят водой до 100,0 мл.

Железа(III) хлорида раствор 3%.

3 г железа(III) хлорида растворяют в воде и доводят водой до 100,0 мл.

Железа(III) хлорида раствор 1,3%.

1,3 г железа(III) хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Железа(III) хлорида раствор 1%.

1,0 г железа(III) хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Железа(III) хлорида раствор 0,25%.

0,25 г железа(III) хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Железа(III) хлорида спиртовой раствор 5%.

5,0 г железа(III) хлорида растворяют в этаноле безводном и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Железа(III) хлорида спиртовой раствор 2%.

2,0 г железа(III) хлорида растворяют в этаноле безводном и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Железа(III) хлорида спиртовой раствор 1%.

1,0 г железа(III) хлорида растворяют в 100 мл спирта 96%.

Железа(III) хлорида раствор в этаноле 0,3%.

0,3 г железа(III) хлорида растворяют в 100 мл этанола.

Железа(III) хлорида раствор кислый 0,075%.

75 мг железа(III) хлорида растворяют в 50 мл уксусной кислоты ледяной.

К полученному раствору осторожно при охлаждении на льду прибавляют 50 мл серной кислоты концентрированной.

Раствор используют свежеприготовленным.

Железа(III) хлорида раствор в уксусной кислоте 0,05%.

Растворяют 5 мг железа(III) хлорида в 10,0 мл уксусной кислоты ледяной.

Срок годности – не более 7 сут при хранении в плотно закрытой упаковке.

Железа(III) хлорида раствор 0,001%.

1,0 мл железа(III) хлорида раствора 1% доводят водой до 1000 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Железа(III) хлорида и сульфаминовой кислоты реактив.

Раствор содержит 1% (10 г/л) железа(III) хлорида и 1,6% (16 г/л) сульфаминовой кислоты.

Железо-нитратный реактив.

1,5 г железа(II) сульфата и 1,0 г натрия метабисульфита растворяют в 200 мл воды (раствор А). В 10 мл раствора А растворяют 0,5 г натрия цитрата (раствор Б).

Раствор Б готовят непосредственно перед использованием.

Железа окисного хлорид. См. Железа(III) хлорид.

Железа салицилата раствор.

0,1 г железа(III) аммония сульфата растворяют в смеси 2 мл серной кислоты разведённой 9,8% и 48 мл воды, доводят объём раствора водой до 100,0 мл. К полученному раствору прибавляют 50 мл 1,15% (11,5 г/л) раствора натрия салицилата, 10 мл уксусной кислоты разведённой 12%, 80 мл 13,6% (1136 г/л) раствора натрия ацетата и доводят объём раствора водой до 500,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке, в защищённом от света месте.

Железо. [7439-89-6]. Fe. (А.м. 55,85). Железо.

Порошок серого цвета или проволока.

Растворимо в разведённых неорганических кислотах.

Железо(III) азотнокислое 9-водное. См. Железа(III) нитрат.

Железо треххлористое 6-водное. См. Железа(III) хлорид.

Жёлтая кровяная соль. См. Калия ферроцианид.

Желудочный искусственный сок.

2,0 г натрия хлорида и 3,2 г пепсина порошка растворяют в воде, прибавляют 80 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Изатин. [91-56-5]. С8H5NO2. (М.м. 147,13).

1H-Индол-2,3-дион.

Мелкие кристаллы жёлтовато-красного цвета.

Мало растворим в воде, растворим в горячей воде, спирте 96% и эфире, растворим в растворах гидроксидов щелочных металлов с образованием фиолетового окрашивания, переходящего при стоянии в жёлтое.

Температура плавления. Около 200 °С с частичной сублимацией.

Сульфатная зола. Не более 0,2%.

Изатина реактив.

6 мг железа(III) сульфата растворяют в 8 мл воды, прибавляют при перемешивании 50 мл серной кислоты концентрированной; к полученному раствору прибавляют 6 мг изатина и перемешивают до растворения.

Раствор должен быть светло-жёлтого цвета, но не должен иметь оранжевый или красный цвет.

Известковая вода. См. Кальция гидроксида раствор.

Известь жжёная. См. Кальция оксид.

Изоамилбензоат. [94-46-2]. C12H16O2. (М.м. 192,25).

Изопентилбензоат. 3-Метилбутилбензоат.

. Около 1,494.

Температура кипения. Около 261 °С.

Бесцветная или бледно-жёлтая жидкость.

Изоамиловый спирт. [123-51-3]. С5H12O. (М.м. 88,15).

3-Метилбутан-1-ол.

Бесцветная жидкость.

Мало растворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

Температура кипения. Около 130 °С.

Изобутиловый спирт. См. 2-Метилпропанол.

L-Изолейцин. [73-32-5]. C6H13NO2. (М.м. 131,17).

(2S,3S)-2-Амино-3-метилпентановая кислота.

Кристаллический порошок белого цвета. Растворим в воде, мало растворим в спирте.

. От + 38,6 до + 42,5° (4% раствор в 6 М хлористоводородной кислоте).

Температура плавления. Около 290 °С с разложением.

Изомальтол. [64519-82-0]. C12H24O11. (М.м. 344,31).

6-O-(α-D-Глюкопиранозил)-D-глюцит—1-O-(α-D-глюкопиранозил)-D-маннитол.

Белый или почти белый кристаллический порошок или гранулы.

Легко растворим в воде.

Изомальтит. [534-73-6]. C12H24O11. (М.м. 344,31).

6-O-(α-D-Глюкопиранозил)-D-глюцит.

Белый или почти белый порошок.

Легко растворим в воде.

Изоментол. [23283-97-8]. С10H20O. (М.м. 156,27).

(+)-Изоментол: (1S,2R,5R)-5-Метил-2-(пропан-2-ил)циклогексан-1-ол.

(±)-Изоментол: rac-(1R,2S,5S)-5-Метил-2-(пропан-2-ил)циклогексан-1-ол.

Бесцветные кристаллы.

Практически нерастворим в воде, очень легко растворим в спирте 96% и эфире.

. (+)-Изоментол: около + 24° (10% раствор в спирте 96%).

Температура кипения. (+)-Изоментол: около + 218 °С. (±)-Изоментол: около + 218 °С.

Температура плавления. (+)-Изоментол: около + 80 °С. (±)-Изоментол: около + 53 °С.

(+)-Изоментон. [1196-31-2]. С10H18O. (М.м. 154,25).

(2R,5R)-5-Метил-2-(пропан-2-ил)циклогексан-1-он.

Содержит различные количества ментона.

Бесцветная жидкость.

Очень мало растворим в воде, растворим в спирте 96% и эфире.

. Около 0,904.

. Около 1,453.

. Около + 93,2°.

Хроматографическая чистота изоментона, применяемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 80,0%.

Изооктан. См. Триметилпентан.

Изопентан. См. 2-Метилбутан.

Изопропиламин. [75-31-0]. С3H9N. (М.м. 59,11).

Пропан-2-амин.

Бесцветная, сильно летучая, воспламеняющаяся жидкость.

. Около 1,374.

Температура кипения. От 32 до 34 °С.

Изопропилйодид. См. 2-Йодпропан.

Изопропилметансульфонат. [926-06-7]. C4H10O3S. (М.м. 138,19).

(Пропан-2-ил)метансульфонат.

Содержит не менее 99,0% C4H10O3S.

Прозрачная бесцветная жидкость.

Плотность. Около 1,129 г/мл (20 °С).

. 1,418–1,421.

Температура кипения. Около 82 °С при 6 мм рт.ст.

Изопропилмиристат. [110-27-0]. С17Н34О2. (М.м. 270,45).

(Пропан-2-ил)тетрадеканоат.

Прозрачная, бесцветная, маслянистая жидкость.

Не смешивается с водой, смешивается со спиртом 96%, метиленхлоридом, жирными маслами и с вазелиновым маслом.

. Около 0,850.

. Около 1,435.

Изопропиловый спирт. См. 2-Пропанол.

4-Изопропилфенол. [99-89-8]. С9H12О. (М.м. 136,19).

4-(Пропан-2-ил)фенол.

Содержит не менее 98% С9H12О.

Температура кипения. Около 212 °С.

Температура плавления. От 59 до 61 °С.

Изопулегол. [89-79-2]. C10H18O. (М.м. 154,25).

(1R,2S,5R)-5-Метил-2-(проп-1-ен-2-ил)циклогексан-1-ол.

latexmath:[$d_{4}^{20}$]. Около 0,911.

. Около 1,472.

Температура кипения. Около 210 °С.

Изопулегол, используемый в газовой хроматографии, должен содержать не менее 99% основного вещества.

Имидазол. [288-32-4]. С3H4N2. (М.м. 68,08).

1H-Имидазол.

Кристаллический порошок белого цвета.

Растворим в воде и спирте 96%.

Температура плавления. Около 90 °С.

Иминодибензил. [494-19-9]. С14H13N. (М.м. 195,26).

10,11-Дигидро-5H-дибенз[_bf_]азепин.

Кристаллический порошок бледно-жёлтого цвета.

Практически нерастворим в воде, легко растворим в ацетоне.

Температура плавления. Около 106 °С.

Иминодиуксусная кислота. [142-73-4]. C4H7NO4. (М.м. 133,10).

2,2′-Азандиилдиуксусная кислота.

Индан-1-он. [83-33-0]. C9H8O. (М.м. 132,16).

2,3-Дигидро-1H-инден-1-он.

Содержит не менее 98% C9H8O.

Температура плавления. От 38 до 41 °С.

Температура кипения. Около 245 °С.

Около 1,103.

Индигокармин. [860-22-0]. С16H8N2Na2O8S2. (М.м. 466,4).

(2E)-3,3′-Диоксо-1,1′,3,3′-тетрагидро[2,2′-бииндолилиден]-5,5′-дисульфонат динатрия.

Обычно содержит натрия хлорид.

Порошок от синего до фиолетово-синего цвета или гранулы синего цвета с медным блеском.

Умеренно растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%. Осаждается из водного раствора натрия хлоридом.

Растворы индигокармина синего цвета, под влиянием восстановителей обесцвечиваются.

Переход окраски раствора от синей к жёлтой в интервале рН 11,6–14,0.

Индигокармина раствор 0,4%.

4 г индигокармина растворяют в горячей воде, прибавляя воду отдельными порциями до объёма 900 мл, затем прибавляют 2 мл серной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. 10,0 мл эталонного раствора нитрата (100 ррm нитрат-иона) смешивают с 10 мл воды, 0,05 мл 0,4% раствора индигокармина и тотчас прибавляют (за один раз, но осторожно) 30 мл серной кислоты концентрированной. Полученный раствор немедленно титруют приготовленным 0,4% раствором индигокармина до стабильной синей окраски.

Количество миллилитров раствора индигокармина, израсходованное на титрование, соответствует 1 мг нитрат-иона.

Индигокармина раствор 0,25%.

0,25 г индигокармина растворяют в горячей воде, прибавляя воду отдельными порциями до объёма 90 мл, затем прибавляют 0,2 мл серной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Индигокармина раствор 0,1%.

1,0 г индигокармина растворяют в 25 мл серной кислоты концентрированной, затем прибавляют ещё 25 мл серной кислоты концентрированной. Полученный раствор осторожно выливают в 500 мл воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Индигокармина раствор 0,02%.

0,2 г индигокармина растворяют в смеси 10 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и 990 мл 20% раствора серной кислоты, свободной от азота.

Раствор должен выдерживать следующее испытание.

10 мл полученного раствора прибавляют к раствору 1,0 мг калия нитрата в 10 мл воды, тотчас прибавляют 20 мл серной кислоты, свободной от азота, и нагревают до кипения. Синее окрашивание раствора должно исчезнуть в течение 1 мин.

Индолилуксусная кислота. [87-51-4]. C10H9NO2. (М.м. 175,18).

2-(1H-Индол-3-ил)уксусная кислота.

Чувствительные к воздуху и свету кристаллы от почти белого до коричневого цвета.

Температура плавления. 168–170 °С (с разложением).

Индофеноловый синий. [132-31-0]. С18H16N2O. (М.м. 276,33).

4-{[4-(Диметиламино)фенил]имино}нафталин-1(4H)-он.

Порошок фиолетово-черного цвета. Практически нерастворим в воде.

Хроматография. Определение проводят методом тонкослойной хроматографии, используя в качестве тонкого слоя силикагель G. На хроматографическую пластинку наносят 10 мкл 0,01% раствора в метиленхлориде и хроматографируют в этом же растворителе. Фронт растворителя должен пройти не менее 10 см. На хроматограмме должно обнаруживаться только одно основное пятно. Допускается пятно на старте.

Йод. I2. [7553-56-2]. I2. (М.м. 253,81).

Иод.

Сухие тяжелые фиолетово-черные с металлическим блеском кристаллические пластинки или кусочки, или мелкокристаллический порошок. Летуч при комнатной температуре.

Очень мало растворим в воде, растворим в этаноле, мало растворим в глицерине, очень легко растворим в концентрированных растворах йодидов.

Йода раствор 0,1 М.

25,4 г йода растворяют в 200 мл 20% раствора калия йодида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Хранят в защищённом от света месте.

Йода раствор 0,05 М.

12,7 г йода растворяют в 100 мл 40% раствора калия йодида, прибавляют 1 мл кислоты хлористоводородной разведённой 7,3% и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Хранят в защищённом от света месте.

Йода раствор 0,005 М.

К 10,0 мл 0,05 М раствора йода прибавляют 0,6 г калия йодида и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Йода раствор 0,001 М.

10,0 мл 0,1 М раствора йода помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, прибавляют 0,6 г калия йодида, перемешивают и доводят объём раствора водой до метки.

Готовят непосредственно перед использованием.

Йода раствор 0,0005 М.

К 10,0 мл 0,05 М раствора йода прибавляют 0,6 г калия йодида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Йода раствор 0,0001 М.

2,0 мл 0,005 М раствора йода доводят водой до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Йода раствор спиртовой 5%.

Раствор 50 г/л в спирте 96%.

Хранят в защищённом от света месте.

Йода раствор спиртовой 1%.

Раствор 10 г/л в спирте 96%.

Хранят в защищённом от света месте.

Йода бромид. [7789-33-5]. IBr. (М.м. 206,81).

Бромид иода(I).

Кристаллы от синевато-черного до коричневато-черного цвета.

Легко растворим в воде, спирте 96%, эфире и уксусной кислоте ледяной.

Температура кипения. Около 116 °С.

Температура плавления. Около 40 °С.

Хранят в прохладном, защищённом от света месте.

Йода бромида раствор.

20 г йода бромида растворяют в уксусной кислоте ледяной и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Хранят в защищённом от света месте.

Йода монохлорид. [7790-99-0]. ICl. (М.м. 162,36).

Хлорид иода(I).

Кристаллы черного цвета.

Растворимы в воде, уксусной кислоте и спирте 96%.

Температура кипения. Около 97,4 °С.

Хранят в прохладном, защищённом от света месте.

Йода монохлорида раствор.

Раствор йода монохлорида готовят одним из описанных ниже методов.

[arabic] . 1,4 г йода монохлорида растворяют в уксусной кислоте ледяной и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл. . 13,0 г мелкорастертого йода растворяют при встряхивании в смеси 300 мл углерода четыреххлористого и 700 мл уксусной кислоты ледяной. К 20 мл этого раствора прибавляют 15 мл 10% раствора калия йодида, 100 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата. Затем через раствор пропускают сухой газообразный хлор до тех пор, пока на титрование 20 мл полученного раствора будет расходоваться двойное количество, но не большее, тиосульфата натрия. . 8,0 г йода трихлорида растворяют в 200 мл уксусной кислоты ледяной, растворяют 9 г йода в 300 мл углерода четыреххлористого, смешивают оба раствора и прибавляют уксусную кислоту ледяную до 1000,0 мл.

Раствор йода монохлорида хранят в закрытом сосуде в прохладном месте.

Йода трихлорид. [865-44-1]. ICl3. (М.м. 233,27).

Хлорид иода(III).

Красновато-оранжевые кристаллы.

Приготовление йода трихлорида. Над йодом, охлаждённым смесью сухого льда с ацетоном до температуры −78 °С, пропускают газообразный хлор до появления жёлтых капелек избыточного хлора. Реакционную смесь выдерживают еще в течение нескольких часов в охлажденной бане, после чего перегоняют при комнатной температуре во второй сосуд.

Йода(V) оксид перекристаллизованный. [12029-98-0]. I2O5. (М.м. 333,81).

Оксид иода(V).

Содержит не менее 99,5% I2O5.

Кристаллический порошок белого цвета или гранулы от белого до серовато-белого цвета. Гигроскопичен.

Очень легко растворим в воде с образованием НIО3.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке, в защищённом от света месте.

3-Йодбензиламмония хлорид. [3718-88-5]. С7H8IN·HCl. (М.м. 269,51).

(3-Иодфенил)метанамина гидрохлорид.

Белые или почти белые кристаллы.

Температура плавления. От 188 до 190 °С.

2-Йодбензойная кислота. [88-67-5]. С7H5IO2. (М.м. 248,02).

2-Иодбензойная кислота.

Кристаллический порошок от белого до светло-жёлтого цвета.

Мало растворима в воде, растворима в спирте 96%.

Температура плавления. Около 160 °С.

2-Йодгиппуровая кислота. [147-58-0]. С9H8INO3. (М.м. 305,07).

(2-Иодбензамидо)уксусная кислота.

Кристаллический порошок белого или почти белого цвета.

Умеренно растворима в воде.

Температура плавления. Около 170 °С.

Йодистоводородная кислота. [10034-85-2]. НI. (М.м. 127,91).

Йодистоводородную кислоту перегоняют над красным фосфором, пропуская во время перегонки углерода диоксид или азот. Используют бесцветную или почти бесцветную, кипящую при постоянной температуре смесь (от 55 до 58% НI), перегоняющуюся при температуре от 126 до 127 °С.

Кислоту помещают в небольшие флаконы из стекла коричневого цвета, предварительно продутые углерода диоксидом или азотом, со стеклянными пробками, герметизируют парафином.

Хранят в защищённом от света месте.

Йодистый метил. См. Йодметан.

Йодкрахмальная бумага. См. Крахмала раствор с калия йодидом.

Йодметан. [74-88-4]. CH3I. (М.м. 141,94).

Иодметан.

Бесцветная или желтоватая жидкость.

. Около 2,28.

. Около 1,531.

Температура кипения. 41–43 °С.

Йодная кислота. [10450-60-9]. Н5IO6. (М.м. 227,94).

Ортопериодная кислота.

Бесцветные расплывающиеся кристаллы.

Легко растворима в воде, растворима в спирте 96%, эфире.

Температура плавления. Около 122 °С с разложением.

Йодной и уксусной кислоты раствор.

0,446 г натрия перйодата растворяют в 2,5 мл 25% (о/о) раствора серной кислоты концентрированной и доводят объём раствора уксусной кислотой ледяной до 100,0 мл.

Йодплатината реактив.

К 3 мл 10% раствора хлорплатиновой кислоты прибавляют 97 мл воды и 100 мл 6% раствора калия йодида.

Хранят в защищённом от света месте.

2-Йодпропан. [75-30-9]. C3H7I. (М.м. 169,99).

2-Иодпропан.

Бесцветная или жёлтоватая жидкость.

. Около 1,703.

. Около 1,498.

Температура кипения. 88–90 °С.

Йодсернистый реактив.

Устройство для приготовления реактива, состоящее из круглодонной колбы вместимостью 3000–4000 мл с 3 входными отверстиями для мешалки, термометра и трубки, заполненной осушителем, должно быть закрытым и сухим в процессе подготовки. В колбу помещают 700 мл пиридина безводного и 700 мл монометилового эфира этиленгликоля, прибавляют при постоянном перемешивании 220 г мелкоизмельченного йода, предварительно высушенного над фосфора(V) оксидом. Перемешивание продолжают до полного растворения йода (около 30 мин). Затем охлаждают колбу до температуры −10 °C и быстро прибавляют при постоянном перемешивании 190 г серы диоксида. Температура реакционной смеси не должна превышать 30 °С. По окончании прибавления смесь охлаждают.

Установка титра. Около 20 мл метанола безводного помещают в сосуд для титрования и титруют приготовленным йодсернистым реактивом (определение воды). Прибавляют точно взвешенное достаточное количество воды и повторяют определение воды. Вычисляют количество воды в миллиграммах, соответствующее 1 мл йодсернистого реактива.

1 мл йодсернистого реактива соответствует как минимум 3,5 мг воды.

Должны быть приняты меры предосторожности для предотвращения воздействия на растворы атмосферной влаги. Титр устанавливают непосредственно перед использованием.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Йодуксусная кислота. [64-69-7]. С2Н3IO2. (М.м. 185,95).

Иодуксусная кислота.

Бесцветные или белого цвета кристаллы. Растворима в воде и спирте 96%.

Температура плавления. От 82 до 83 °С.

5-Йодурацил. [696-07-1]. С4Н3IN2O2. (М.м. 237,98).

5-Иодпиримидин-2,4(1Н,3Н)-дион.

Температура плавления. Около 276 °С с разложением.

Йодэтан. [75-03-6]. С2Н5I. (М.м. 155,97).

Иодэтан.

Жидкость от бесцветного до слегка жёлтоватого цвета, под действием воздуха и света темнеет.

Смешивается со спиртом 96% и большинством органических растворителей.

. Около 1,95.

. Около 1,513.

Температура кипения. Около 72 °С.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Ионообменная смола сильнокислотная. См. Катионообменная смола сильная (протонированная форма).

Ионообменная смола сильнокислотная (кальциевая форма). См. Катионообменная смола сильная (кальциевая форма).

Кадмий. [7440-43-9]. Сd. (А.м. 112,41).

Кадмий.

Блестящий металл серебристо-белого цвета.

Практически нерастворим в воде, легко растворим в азотной кислоте и горячей хлористоводородной кислоте.

Кадмия диацетат. [543-90-8]. C4H6CdO4. (М.м. 230,50).

Бесцветные, прозрачные или полупрозрачные кристаллы.

Легко растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Кадмия диацетат дигидрат. [5743-04-4]. C4H6CdO4·2H2O. (М.м. 266,53).

Белый кристаллический порошок.

Кадмия хлорид. [7790-78-5]. СdCl2·2,5Н2О. (М.м. 228,35).

Хлорид кадмия, гидрат (1:2,5).

Бесцветные полупрозрачные кристаллы или кристаллический порошок, в массе белого цвета.

Очень легко растворим в воде, умеренно растворим в метаноле, слабо растворим в этаноле.

Казеин. [9000-71-9].

Смесь родственных фосфопротеинов, полученных из молока.

Аморфный порошок или гранулы белого цвета.

Очень мало растворим в воде и неполярных органических растворителях, растворим в кислоте хлористоводородной концентрированной с образованием бледно-фиолетового окрашивания.

Образует соли с кислотами и основаниями.

Изоэлектрическая точка казеина находится при значении рН около 4,7.

Щелочные растворы имеют левое вращение плоскости поляризации.

Калий виннокислый. См. Калия тартрат.

Калий двууглекислый. См. Калия гидрокарбонат.

Калий двухромовокислый. См. Калия дихромат.

Калия антимонилтартрат. [28300-74-5]. C8H4K2O12Sb2·3H2O. (М.м. 667,9).

Ди[тартрато(4-)O1,O2,O3,O4]бис[антимонат(III)] дикалия тригидрат.

Гранулированный порошок белого цвета или прозрачные бесцветные кристаллы.

Растворим в воде и глицерине, легко растворим в кипящей воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Водный раствор имеет слабокислую реакцию.

Калия ацетат. [127-08-2]. С2Н3КO2. (М.м. 98,14).

Ацетат калия.

Бесцветные кристаллы, расплывающиеся на воздухе.

Легко растворим в воде, растворим в спирте 96%, практически нерастворим в эфире.

Калия ацетата раствор 10%.

10 г калия ацетата растворяют при перемешивании в 90 мл воды и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Калия ацетата раствор 10% в уксусной кислоте ледяной.

Смешивают 10 г калия ацетата с 50 мл уксусной кислоты ледяной, осторожно перемешивают до полного растворения калия ацетата и доводят объём раствора уксусной кислотой ледяной до 100,0 мл.

Калий азотнокислый. См. Калия нитрат.

Калия бикарбонат. См. Калия гидрокарбонат.

Калия бикарбоната раствор насыщенный метанольный. См. Калия гидрокарбоната раствор насыщенный метанольный.

Калия бисульфат. См. Калия гидросульфат.

Калия бисульфата раствор 10%.

10 г калия гидросульфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Калия бихромат. См. Калия дихромат.

Калия бромат. [7758-01-2]. КВrO3. (М.м. 167,00).

Бромат калия.

Кристаллы или гранулированный порошок белого цвета.

Растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Калия бромата раствор 1%

1,0 г калия бромата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Калия бромид. [7758-02-3]. КВr (М.м. 119,00).

Бромид калия.

Бесцветные кристаллы или мелкокристаллический порошок.

Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Калия бромид, используемый в инфракрасной абсорбционной спектрофотометрии, должен выдерживать следующее дополнительное испытание.

ИК-спектр диска калия бромида толщиной 2 мм, предварительного высушенного при температуре 250 °С в течение 1 ч, должен иметь практически ровную базовую линию в интервале частот от 4000 до 620 см-1. Не должен иметь максимумов с поглощением более 0,02 над базовой линией за исключением максимумов для воды при частотах 3440 и 1630 см-1.

Калия бромида раствор 10%.

10 г калия бромида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Хранят в банках с притертыми пробками в защищённом от света месте.

Калия гексацианоферрат(III). См. Калия феррицианид.

Калия гидрокарбонат. [298-14-6]. KHCO3. (М.м. 100,11).

Гидрокарбонат калия.

Прозрачные, бесцветные кристаллы.

Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Калия гидрокарбоната раствор насыщенный метанольный.

0,1 г калия гидрокарбоната растворяют при нагревании в 0,4 мл воды, прибавляют 25 мл метанола и перемешивают круговыми движениями, продолжая нагревание до растворения.

Готовят непосредственно перед использованием.

Калия гидрокарбоната и калия карбоната раствор.

4,0 г калия гидрокарбоната растворяют в 15 мл воды (при нагревании), прибавляют 2,5 г кристаллического калия карбоната и доводят объём раствора водой до 20,0 мл.

Калия гидроксид. [1310-58-3]. KOH. (М.м. 56,11).

Гидроксид калия.

Белые куски, цилиндрические палочки или гранулы с кристаллической структурой на изломе. Гигроскопичен.

Очень легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96%, практически нерастворим в эфире.

Калия гидроксида раствор 2 М.

112,22 г калия гидроксида растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Калия гидроксида раствор 1 М.

56,11 г калия гидроксида растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Калия гидроксида раствор 0,8 М.

44,89 г калия гидроксида растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Калия гидроксида раствор 0,5 М.

28,06 г калия гидроксида растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Калия гидроксида раствор 50%.

50 г калия гидроксида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Хранят в стеклянных сосудах с каучуковыми пробками.

Срок годности – 1 неделя.

Калия гидроксида раствор 45%.

45 г калия гидроксида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Хранят в стеклянных сосудах с каучуковыми пробками.

Срок годности – 1 неделя.

Калия гидроксида раствор 30%.

30 г калия гидроксида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Хранят в стеклянных сосудах с каучуковыми пробками.

Срок годности – 1 неделя.

Калия гидроксида раствор 10%.

10 г калия гидроксида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Хранят в стеклянных сосудах с каучуковыми пробками.

Срок годности – 1 неделя.

Калия гидроксида раствор 5%.

5 г калия гидроксида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Хранят в стеклянных сосудах с каучуковыми пробками.

Срок годности – 1 неделя.

Калия гидроксида раствор 1%.

1,0 г калия гидроксида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Хранят в стеклянных сосудах с каучуковыми пробками.

Срок годности – 1 неделя.

Калия гидроксида раствор спиртовой 10%.

10 г калия гидроксида растворяют в 16 мл воды и доводят объём раствора спиртом 96%, свободным от альдегидов, до 100,0 мл. Декантируют прозрачный раствор. Раствор должен быть почти бесцветным.

Срок годности – не более 3 мес при хранении в прохладном, защищённом от света месте.

Калия гидроксида раствор спиртовой 5%.

5 г калия гидроксида растворяют в 8 мл воды и доводят объём раствора спиртом 96%, свободным от альдегидов, до 100,0 мл. Декантируют прозрачный раствор. Раствор должен быть почти бесцветным.

Срок годности – не более 3 мес при хранении в прохладном, защищённом от света месте.

Калия гидроксида раствор спиртовой 3%.

3 г калия гидроксида растворяют в 5 мл воды и доводят объём раствора спиртом 96%, свободным от альдегидов, до 100,0 мл. Декантируют прозрачный раствор. Раствор должен быть почти бесцветным.

Калия гидроксида раствор спиртовой 0,66%.

6,6 г калия гидроксида растворяют в 50 мл воды и доводят объём раствора спиртом 96% до 1000,0 мл.

Калия гидроксида раствор в метаноле 6%.

3,0 г калия гидроксида растворяют в 40 мл метанола и доводят объём раствора метанолом до 50,0 мл.

Калия гидроксида раствор в метаноле 3%.

1,5 г калия гидроксида растворяют в 20 мл метанола и доводят объём раствора метанолом до 50,0 мл.

Калия гидроксида раствор в метаноле 3 М.

16,8 г калия гидроксида растворяют в 30 мл воды и доводят объём раствора метанолом до 100,0 мл.

Калия гидроксида раствор спиртовой 2 М.

11,2 г калия гидроксида растворяют в 20 мл воды и доводят объём раствора спиртом 96% до 100,0 мл.

Калия гидроксида раствор спиртовой 0,5 М.

2,8 г калия гидроксида растворяют в 5 мл воды и доводят объём раствора спиртом 96% до 100,0 мл.

Калия гидроксида раствор спиртовой 0,2 М.

1,12 г калия гидроксида растворяют в 5 мл воды и доводят объём раствора спиртом 96% до 100,0 мл.

Калия гидроксида раствор спиртовой 0,1 М.

0,56 г калия гидроксида растворяют в 5 мл воды и доводят объём раствора спиртом 96% до 100,0 мл.

Калия гидроксида раствор 5% в спирте 50%.

5 г калия гидроксида растворяют в спирте 50% и доводят объём раствора спиртом 50% до 100,0 мл. Декантируют прозрачный раствор. Раствор должен быть почти бесцветным.

Срок годности – не более 3 мес при хранении в прохладном, защищённом от света месте.

Калия гидросульфат. [7646-93-7]. KHSO4. (М.м. 136,17).

Гидросульфат калия.

Прозрачные, бесцветные, гигроскопичные кристаллы.

Легко растворим в воде с образованием кислого раствора.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Калия гидротартрат. [868-14-4]. C4H5KO6. (М.м. 188,18).

(2R,3R)-2,3-Дигидроксибутан-1,4-диоат калия (1:1).

Кристаллический порошок белого цвета или бесцветные, слегка матовые кристаллы.

Мало растворим в воде, растворим в кипящей воде, очень мало растворим в спирте 96%.

Калия гидротартрата насыщенный раствор.

6,4 г калия гидротартрата растворяют в 1000 мл кипящей воды, после охлаждения фильтруют и доводят объём водой до 1000,0 мл.

рН полученного раствора должен быть 3,56 ± 0,02.

Калия гидрофталат. [877-24-7]. C8H5KO4. (М.м. 204,22).

Бензол-1,2-дикарбоксилат калия (1:1).

Кристаллы белого цвета. Растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Калия гидрофталата раствор 0,2 М.

Раствор калия гидрофталата содержит 40,84 г в пересчете на C8H5KO4 в 1000,0 мл воды.

Калия гидрофталата раствор 0,4%.

0,4 г калия гидрофталата растворяют в 50 мл воды и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Калия дигидрофосфат. [7778-77-0]. КН2РО4. (М.м. 136,09). Дигидрофосфат калия.

Бесцветные кристаллы. Легко растворим в воде, очень легко растворим в горячей воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Калия дигидрофосфата раствор 0,5 М

68,050 г калия дигидрофосфата растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Калия дигидрофосфата раствор 0,25 М

34,02 г калия дигидрофосфата растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора тем же растворителем до 1 л.

Калия дигидрофосфата раствор 0,2 М

27,22 г калия дигидрофосфата растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора тем же растворителем до 1 л.

Калия дигидрофосфата раствор 0,1 М

Калия дигидрофосфат дважды перекристаллизовывают из воды и высушивают при температуре 110 °С до постоянной массы. 1,36 г перекристаллизованного калия дигидрофосфата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Калия дигидрофосфата раствор 0,05 М

Калия дигидрофосфат дважды перекристаллизовывают из воды и высушивают при температуре 110 °С до постоянной массы. 0,68 г перекристаллизованного калия дигидрофосфата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Калия дигидрофосфата раствор 0,03 М

Калия дигидрофосфат дважды перекристаллизовывают из воды и высушивают при температуре 110 °С до постоянной массы. 4,08 г перекристаллизованного калия дигидрофосфата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000 мл.

Калия дигидрофосфата раствор 0,025 М

3,40 г калия дигидрофосфата растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора тем же растворителем до 1 л.

Калия дигидрофосфата раствор 0,02 М

2,72 г калия дигидрофосфата растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора тем же растворителем до 1 л.

Калия дигидрофосфата раствор 0,01 М

1,36 г калия дигидрофосфата растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора тем же растворителем до 1 л.

Калия дихромат. [7778-50-9]. K2Cr2O7. (М.м. 294,18). Дихромат дикалия.

Кристаллы оранжево-красного цвета.

Растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Калия дихромат, используемый для калибровки спектрофотометров, должен содержать не менее 99,9% K2Cr2O7 в пересчете на вещество высушенное при температуре 130 °С.

Количественное определение. Около 1,0 г калия дихромата (точная навеска) растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 250,0 мл. 50,0 мл полученного раствора помещают в колбу вместимостью 500 мл, прибавляют свежеприготовленный раствор, состоящий из 4,0 г калия йодида, 2,0 г натрия гидрокарбоната и 6,0 мл хлористоводородной кислоты концентрированной в 100 мл воды. Колбу закрывают пробкой, выдерживают в защищённом от света месте в течение 5 мин и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата, используя в качестве индикатора 1 мл раствора крахмала, свободного от йодидов.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 4,903 мг K2Cr2O7.

Калия дихромата раствор 10,6%. Раствор 106 г/л.

Калия дихромата раствор 5%. Раствор 50 г/л.

Калия дихромата раствор 0,5%. Раствор 5 г/л.

Калия дихромата раствор 0,02%. Раствор 0,2 г/л.

Калия дихромата раствор в серной кислоте.

1 г калия дихромата растворяют в 60 мл воды и осторожно прибавляют 7,5 мл серной кислоты концентрированной.

Калий железистосинеродистый. См. Калия ферроцианид.

Калий железосинеродистый. См. Калия феррицианид.

Калия йодат. [7758-05-6]. KIO3. (М.м. 214,00).

Иодат калия.

Кристаллический порошок белого цвета.

Растворим в воде, легко растворим в горячей воде; практически нерастворим в спирте 96%.

Калия йодата раствор 1%.

1,0 г калия йодата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

*Калия йодата раствор 0,1 М*.

В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,07 г калия йодата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

*Калия йодата раствор 0,05 М*.

10,70 г калия йодата растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Калия йодата раствор 0,005 М.

1,070 г калия йодата растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Калия йодид. [7681-11-0]. КI. (М.м. 166,00).

Иодид калия.

Белые кристаллы или белый порошок.

Очень легко растворим в воде, легко растворим в глицерине, растворим в спирте 96%.

20 г калия йодида растворяют в свежепрокипяченной и охлажденной воде и доводят объём раствора водой до 100 мл. Раствор должен быть бесцветным.

Хранят в банках оранжевого стекла с притёртыми пробками в защищённом от света месте.

Калия йодида раствор 50%.

50 г калия йодида растворяют в свежепрокипячённой и охлаждённой воде и доводят объём раствора водой до 100 мл. Раствор должен быть бесцветным.

Хранят в банках оранжевого стекла с притёртыми пробками в защищённом от света месте.

Калия йодида раствор 40%.

40 г калия йодида растворяют в свежепрокипячённой и охлаждённой воде и доводят объём раствора водой до 100 мл. Раствор должен быть бесцветным.

Хранят в банках оранжевого стекла с притёртыми пробками в защищённом от света месте.

Калия йодида раствор 20%.

20 г калия йодида растворяют в свежепрокипяченной и охлажденной воде и доводят объём раствора водой до 100 мл. Раствор должен быть бесцветным.

Хранят в банках оранжевого стекла с притёртыми пробками в защищённом от света месте.

Калия йодида раствор 16,6%. См. Калия йодида раствор 1 М.

Калия йодида раствор 10%.

10,0 г калия йодида растворяют в свежепрокипяченной и охлажденной воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Раствор должен быть бесцветным.

Хранят в банках оранжевого стекла с притертыми пробками в защищённом от света месте.

Калия йодида раствор 5%. 5,0 г калия йодида растворяют в свежепрокипяченной и охлажденной воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Раствор должен быть бесцветным.

Хранят в банках оранжевого стекла с притертыми пробками в защищённом от света месте.

Калия йодида раствор 1%. 10,0 мл калия йодида раствора 10% доводят водой до 100,0 мл. Используют свежеприготовленным.

Калия йодида раствор 1 М%.

16,6 г калия йодида растворяют в свежепрокипяченной и охлажденной воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Раствор должен быть бесцветным.

Хранят в банках оранжевого стекла с притертыми пробками в защищённом от света месте.

Калия йодида йодированный раствор.

2 г йода и 4 г калия йодида растворяют в 10 мл воды, после полного растворения доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Калия йодида насыщенный раствор.

Насыщенный раствор калия йодида в воде, свободной от углерода диоксида, должен содержать нерастворенные кристаллы.

0,5 мл насыщенного раствора калия йодида смешивают с 30 мл смеси хлороформ–12% уксусная кислота 2:3, прибавляют 0,1 мл 0,1% раствора крахмала; если появляется синее окрашивание, оно должно исчезнуть при прибавлении 0,05 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата.

Хранят в защищённом от света месте.

Калий йодистый. См. Калия йодид.

Калий йодновато-кислый. См. Калия йодат.

Калия йодовисмутата раствор.

К 0,85 г висмута нитрата основного прибавляют 40 мл воды, 10 мл уксусной кислоты ледяной и 20 мл 40% раствора калия йодида.

Калия йодовисмутата раствор (1).

100 г винной кислоты растворяют в 400 мл воды, прибавляют 8,5 г висмута нитрата основного, встряхивают в течение 1 ч, прибавляют 200 мл 40% раствора калия йодида и энергично встряхивают. Выдерживают в течение 24 ч и фильтруют.

Хранят в защищённом от света месте.

Калия йодовисмутата раствор (2).

[.underline]#Исходный раствор#. Суспендируют 1,7 г висмута нитрата основного и 20 г винной кислоты в 40 мл воды. К суспензии прибавляют 40 мл 40% раствора калия йодида, встряхивают в течение 1 ч и фильтруют.

Срок годности – несколько дней, при хранении во флаконах оранжевого стекла.

[.underline]#Раствор для опрыскивания#. Непосредственно перед использованием смешивают 5 мл исходного раствора с 15 мл воды.

Калия йодовисмутата раствор разведённый.

100 г винной кислоты растворяют в 500 мл воды и прибавляют 50 мл раствора калия йодовисмутата (1).

Хранят в защищённом от света месте.

Калия карбонат. [584-08-7]. K2CO3. (М.м. 138,21). Карбонат дикалия.

Гранулированный порошок белого цвета. Гигроскопичен.

Очень легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%, ацетоне.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Калия карбоната раствор 15%.

15,0 г калия карбоната растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл и фильтруют.

Калия-натрия тартрат. [6381-59-5]. C4H4KNaO6∙4H2O. (М.м. 282,22).

(2R,3R)-2,3-Дигидроксибутан-1,4-диоат калия-натрия, тетрагидрат.

Бесцветные призматические кристаллы.

Легко растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96%.

Калия нафтохинонсульфонат. [5908-27-0]. С10Н5О5КS. (М.м. 276,31).

1,2-Диоксо-1,2-дигидронафталин-4-сульфонат калия.

Порошок жёлто-оранжевого цвета.

Калий марганцовокислый. См. Калия перманганат.

Калий надсернокислый. См. Калия персульфат.

Калия нитрат. [7757-79-1]. KNO3. (М.м. 101,10).

Нитрат калия.

Бесцветные прозрачные кристаллы.

Очень легко растворим в горячей воде, легко растворим в воде; очень мало растворим в спирте 96%, эфире.

Калия нитрата насыщенный раствор в метаноле.

К 100 мл метанола прибавляют 1 г калия нитрата и встряхивают в течение 5 мин. Используют надосадочную жидкость. Срок годности – 6 мес.

Калия нитрата раствор 1%.

1,0 г калия нитрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Калия перйодат. [7790-21-8]. KIO4. (М.м. 230,00).

Периодат калия.

Кристаллический порошок белого цвета или бесцветные кристаллы.

Мало растворим в холодной воде, растворим в горячей воде; очень мало растворим в спирте 96%.

Калия ферриперйодата раствор.

1 г калия перйодата растворяют в 5 мл 12% свежеприготовленного раствора калия гидроксида, прибавляют 20 мл воды и 1,5 мл 10,5% раствора железа(III) хлорида, доводят 12% свежеприготовленным раствором калия гидроксида до объёма 50,0 мл.

Калий фталевокислый кислый. См. Калия гидрофталат.

Калия перманганат. [7722-64-7]. КMnO4. (М.м. 158,03). Перманганат калия.

Тёмно-фиолетовые, почти черные кристаллы с синевато-стальным блеском. Растворим в холодной воде, легко растворим в горячей воде, метаноле, спирте 96%, ацетоне.

Калия перманганата раствор насыщенный

9 г калия перманганата заливают 100 мл горячей воды, перемешивают и оставляют на 1 ч, после чего осторожно сливают в банку оранжевого стекла с притертой пробкой.

Хранят в прохладном, защищённом от света месте.

Калия перманганата раствор 5%

50 г калия перманганата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл. Раствор хранят при температуре 4–8 °С в течение 3 мес.

Калия перманганата раствор 3%

3 г калия перманганата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Калия перманганата раствор 2%

2 г калия перманганата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Калия перманганата раствор 1,5%

1,5 г калия перманганата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Калия перманганата раствор 0,5%

0,5 г калия перманганата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Хранят в стеклянных банках с притёртыми пробками в защищённом от света месте.

Калия перманганата раствор 0,5% в серной кислоты растворе 1,4% (о/о)

0,5 г калия перманганата растворяют в серной кислоты растворе 1,4% (о/о) и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Хранят в стеклянных банках с притёртыми пробками в защищённом от света месте.

Калия перманганата раствор 0,1%

0,1 г калия перманганата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Хранят в стеклянных банках с притертыми пробками в защищённом от света месте.

Калия перманганата раствор 0,02%

20 мг калия перманганата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Используют свежеприготовленным.

Калия перманганата раствор 3% в фосфорной кислоте

3 г калия перманганата растворяют в смеси 15 мл фосфорной кислоты концентрированной и 70 мл воды, доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Калия перманганата раствор 3% в фосфорной кислоте разведённой 10%

3 г калия перманганата растворяют при нагревании в 100 мл фосфорной кислоты разведённой 10%. Раствор хранят при температуре 4–8 °С в течение 3 мес.

Калия перманганата раствор 1% в 1 М серной кислоте

1,0 г калия перманганата растворяют в 25 мл воды, прибавляют 50,0 мл 2 М серной кислоты и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Калия перманганата раствор 0,5% в 1 М растворе гидроксида натрия

0,5 г калия перманганата растворяют в 25 мл 1 М раствора гидроксида натрия и доводят объём раствора до 100,0 мл тем же раствориателем.

Калия перманганата раствор 0,1 М

1,58 г калия перманганата растворяют в воде и доводят объём раствора до 100,0 мл тем же раствориателем.

Калия перманганата раствор 0,02 М

0,32 г калия перманганата растворяют в воде и доводят объём раствора до 100,0 мл тем же раствориателем.

Калия перманганата раствор 0,002 М

2,0 мл калия перманганата раствора 0,1 М доводят водой до объёма 100,0 мл.

Калия перренат. [10466-65-6]. KReO4. (М.м. 289,30).

Перренат калия.

Кристаллический порошок белого цвета.

Растворим в воде, мало растворим в спирте 96%, метаноле и пропиленгликоле.

Калия персульфат. [7727-21-1]. K2S2O8. (М.м. 270,32).

Пероксидисульфат дикалия.

Бесцветные кристаллы или кристаллический порошок белого цвета.

Растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%. Водные растворы разлагаются при комнатной температуре, быстрее–при нагревании.

Хранят в прохладном месте.

Калия пироантимонат. [12208-13-8]. KSb(OH)6. (М.м. 262,90).

Гексагидроксоантимонат(V) калия.

Кристаллы или кристаллический порошок белого цвета. Умеренно растворим в воде.

Калия пироантимоната раствор.

2,0 г калия пироантимоната растворяют в 95 мл горячей воды, быстро охлаждают, прибавляют раствор, содержащий 2,5 г калия гидроксида в 50 мл воды, и 1 мл 8,5% раствора натрия гидроксида разведённого. Выдерживают в течение 24 ч, фильтруют и доводят объём раствора водой до 150,0 мл.

Калия плюмбита раствор.

1,7 г свинца(II) ацетата, 3,4 г калия цитрата и 50 г калия гидроксида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Калий сернокислый кислый. См. Калия гидросульфат.

Калия бисульфат. См. Калия гидросульфат.

Калия сульфат. [7778-80-5]. K2SO4. (М.м. 174,26).

Сульфат дикалия.

Бесцветные кристаллы.

Растворим в холодной воде, легко растворим в горячей воде, практически нерастворим в спирте 96%, ацетоне.

Калия сульфата раствор 1%.

1,0 г калия сульфата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Калия тартрат. [6100-19-2]. C4H4K2O6·0,5H2O. (М.м. 235,27).

(2R,3R)-2,3-Дигидроксибутан-1,4-диоат дикалия, гемигидрат.

Гранулированный порошок или кристаллы белого цвета.

Очень легко растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96%.

Калия тетрайодомеркурата раствор.

1,35 г ртути(II) хлорида растворяют в 50 мл воды, прибавляют 5,0 г калия йодида и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Калия тетрайодомеркурата щелочной раствор.

11 г калия йодида и 15 г ртути(II) йодида растворяют в воде, доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл. Непосредственно перед использованием полученный раствор смешивают с раствором 250 г/л натрия гидроксида 1:1.

Калия тетраоксалат. [6100-20-5]. C2HKO4·C2H2O4·2H2O. (М.м. 254,19).

Гидрооксалат калия—щавелевая кислота—вода (1/1/2).

Кристаллический порошок белого цвета.

Умеренно растворим в воде, растворим в кипящей воде, мало растворим в спирте 96%.

Калия тиоцианат. [333-20-0]. KSCN. (М.м. 97,18).

Тиоцианат калия.

Бесцветные кристаллы, расплывающиеся на воздухе.

Очень легко растворим в воде и спирте 96%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Калия тиоцианата раствор 20%.

Раствор 20,0 г калия тиоцианата в 100,0 мл воды.

Калия тиоцианата раствор 9,7%.

Раствор 9,7 г калия тиоцианата в 100,0 мл воды.

Калий углекислый. См. Калия карбонат.

Калий уксуснокислый. См. Калия ацетат.

Калия феррицианид. [13746-66-2]. K3[Fe(CN)6]. (М.м. 329,26). Гексацианоферрат(III) трикалия.

Кристаллы красного цвета.

Легко растворим в воде, растворим в ацетоне, очень мало растворим в спирте 96%.

Калия феррицианида раствор 10%.

10 г калия феррицианида заливают небольшим количеством воды, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Калия феррицианида раствор 8%.

8 г калия феррицианида заливают небольшим количеством воды, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Калия феррицианида раствор 5%.

5 г калия феррицианида заливают небольшим количеством воды, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Калия феррицианида раствор 1%.

1 г калия феррицианида заливают небольшим количеством воды, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Калия ферроцианид. [14459-95-1]. K4[Fe(CN)6]·3H2O. (М.м. 422,39).

Гексацианоферрат(II) тетракалия, тригидрат.

Прозрачные кристаллы жёлтого цвета.

Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%, растворим в ацетоне.

Калия ферроцианида раствор 5,3%.

Раствор калия ферроцианида в воде 53 г/л.

Калия ферроцианида раствор 5%.

5 г калия ферроцианида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Калия ферроцианида раствор 2%.

2 г калия ферроцианида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Калия фосфат тригидрат. См. Трикалия фосфат тригидрат.

Калия фосфат двузамещенный. См. Дикалия гидрофосфат.

Калия фосфат однозамещенный. См. Калия дигидрофосфат.

Калий фталевокислый. См. Калия гидрофталат.

Калия хлорат. [3811-04-9]. KClO3. (М.м. 122,55).

Хлорат калия.

Порошок или гранулы, или кристаллы белого цвета.

Растворим в воде, легко растворим в кипящей воде, очень мало растворим в спирте 96%.

Калия хлората раствор 5%.

5 г калия хлората растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Калия хлорид. [7447-40-7]. КСl. (М.м. 74,55).

Хлорид калия.

Белый кристаллический порошок.

Легко растворим в воде, очень легко растворим в горячей воде, очень мало растворим в спирте 96%.

Калия хлорид, используемый для инфракрасной абсорбционной спектрофотометрии, должен выдерживать следующее дополнительное требование.

ИК-спектр диска калия хлорида толщиной 2 мм, предварительно высушенного при температуре 250 °С в течение 1 ч, должен иметь практически ровную базовую линию в интервале волновых чисел от 4000 до 620 см-1. Не должен иметь максимумов с поглощением более 0,02 над базовой линией, за исключением максимумов для воды при волновых числах 3440 и 1630 см-1.

Калия хлорида раствор 10%

10,0 г калия хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Калия хлорида раствор 4%

4,0 г калия хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Калия хлорида раствор 3 М

223,6 г калия хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл. Раствор хранят при комнатной температуре в течение 6 мес.

Калия хлорида раствор 2 М

149,1 г калия хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл. Раствор хранят при комнатной температуре в течение 6 мес.

Калия хлорида раствор 0,2М

Раствор калия хлорида содержит эквивалент 14,92 г KCl в 1000,0 мл.

10,0 мл калия хлорида раствора 2 М доводят водой до 100,0 мл.

Калия хлорида раствор 0,1 М

Раствор калия хлорида содержит эквивалент 7,46 г KCl в 1000,0 мл.

5,0 мл калия хлорида раствора 2 М доводят водой до 100,0 мл.

Калия хромат. [7789-00-6]. K2CrO4. (М.м. 194,19).

Хромат дикалия.

Кристаллы жёлтого цвета.

Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Калия хромата раствор 5%.

Раствор 50 г калия хромата в 1000,0 мл воды.

Калий хромовокислый. См. Калия хромат.

Калия цианид. [151-50-8]. KCN. (М.м. 65,12).

Цианид калия.

Кристаллический порошок или масса, или гранулы белого цвета. Яд.

Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Калия цианида раствор 10%

Раствор 1,0 г калия цианида в 10,0 мл воды.

Калия цианида раствор 10%, свободный от свинца

Растворяют 1,0 г калия цианида в 9,0 мл воды, прибавляют 0,2 мл водорода пероксида, разведённого 1:5. Выдерживают 24 ч, доводят водой до 10,0 мл и фильтруют.

Испытание на свинец: К 10 мл раствора прибавляют 10 мл воды, 10 мл сероводорода раствора и 5,0 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3%. Окраска должна отсутствовать.

Калия цитрат. [6100-05-6]. C6H5K3O7. (М.м. 324,41).

2-Гидроксипропан-1,2,3-карбоксилат трикалия, моногидрат.

Белый гранулированный порошок или прозрачные кристаллы; гигроскопичен.

Очень легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Кальцион. [3810-39-7]. С30Н14N4Na6O22S6. (М.м. 1112,8).

4-Гидрокси-3-[(8-гидрокси-3,6-дисульфонатонафталин-1-ил)диазенил]-5-[(1,8-дигидрокси-3,6-дисульфонатонафталин-2-ил)диазенил]нафталин-2,7-дисульфонат гексанатрия.

Черный с фиолетовым оттенком порошок.

Растворим в воде, практически нерастворим в ацетоне, бензоле, спирте 96%. В интервале рН 11,0–13,0 имеет синюю окраску, а его комплексы с ионом кальция в тех же условиях розового цвета.

Переход окраски раствора при прямом титровании от розовой к синей.

Раствор индикатора. 0,1% раствор.

Срок годности – 1 мес.

Кальция гидроксид. [1305-62-0]. Ca(OH)2. (М.м. 74,09).

Дигидроксид кальция.

Порошок белого цвета.

Практически нерастворим в воде и спирте 96%, растворим в растворах минеральных кислот и растворе аммония хлорида.

Кальция гидроксида раствор.

1 часть жженой извести гасят 5 частями воды; кашицеобразную массу переносят в бутыль, прибавляют 15 частей воды, сильно взбалтывают и выдерживают в течение 4–5 ч. Затем воду сливают и отбрасывают. Остаток обливают 50 частями холодной воды, взбалтывают, укупоривают бутыль и выдерживают в прохладном месте в течение нескольких дней, время от времени взбалтывая.

Для употребления известковую воду по мере надобности сливают с осадка и фильтруют, а к осадку вновь прибавляют воду до первоначального объёма; взбалтывают и оставляют в прохладном месте в тщательно укупоренной бутыли для получения новой порции известковой воды.

Кальция гидроокиси раствор. См. Кальция гидроксида раствор.

Кальция карбонат. [471-34-1]. СаСО3. (М.м. 100,09).

Карбонат кальция.

Белый порошок.

Практически нерастворим в воде; растворим в растворах аммония хлорида.

Кальция лактат пентагидрат. [5743-47-5]. C6H10CaO6·5H2O. (М.м. 308,29).

Бис(2-гидроксипропаноат) кальция пентагидрат или смесь (2R)-, (2S)- и (2RS)-2-гидроксипропаноатов кальция пентагидрат.

Белый или почти белый, кристаллический или гранулированный, слегка выветривающийся порошок.

Растворим в воде, легко растворим в кипящей воде, очень мало растворим в спирте 96%.

Кальция натрия–эдетат. См. Натрия кальция эдетат.

Кальция оксид. [1305-78-8]. CaO. (М.м. 56,08).

Оксид кальция.

Белые куски или порошок, слипающийся в комки. На воздухе поглощает воду и двуокись углерода.

Растворим в горячей воде в соотношении 0,66:100 при температуре 80 °С. Реагирует с кислотами.

Кальция сульфат дигидрат. [10101-41-4]. CaSO4·2H2O. (М.м. 172,17).

Сульфат кальция, дигидрат.

Белый мелкокристаллический порошок.

Очень мало растворим в воде, растворим в неорганических кислотах, натрия тиосульфате, солях аммония, глицерине.

Кальция сульфата раствор насыщенный.

0,4 г кальция сульфата взбалтывают с 100 мл воды и выдерживают в течение 24 ч, время от времени взбалтывая. Раствор перед употреблением осторожно декантируют.

Кальция сульфат. [10034-76-1]. CaSO4·0,5H2O. (М.м. 145,15).

Сульфат кальция, гемигидрат.

Белый порошок.

Растворим примерно в 1500 частях воды, практически нерастворим в спирте 96%.

При смешивании с водой, масса которой равна половине массы кальция сульфата, порошок быстро затвердевает, превращаясь в твердую пористую массу.

Кальция сульфата гемигидрата раствор.

5 г кальция сульфата гемигидрата взбалтывают с 100 мл воды в течение 1 ч и фильтруют.

Кальция фторид. [7789-75-5]. CaF2. (М.м. 78,07).

Фторид кальция.

Белый порошок.

Практически нерастворим в воде, мало растворим в кислотах.

Кальция хлорид безводный. [10043-52-4]. CaCl2. (М.м. 110,98).

Хлорид кальция.

Содержит не менее 98,0% CaCl2 в пересчёте на сухое вещество.

Гранулы белого цвета, расплывающиеся на воздухе.

Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96% и метаноле.

Потеря в массе при высушивании. Не более 5,0%. Определение проводят в сушильном шкафу при температуре 200 °С.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке, защищая от воздействия влаги.

Кальция хлорида дигидрат. [10035-04-8]. CaCl2·2H2O. (М.м. 147,01).

Хлорида кальция дигидрат.

Содержит не менее 99,0% CaCl2·2H2O.

Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96% и метаноле.

При нагревании выше 175°С теряет кристаллизационную воду.

Кальция хлорида раствор 50%.

66,2 г кальция хлорида дигидрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Кальция хлорида раствор 20%.

26,5 г кальция хлорида дигидрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Кальция хлорида раствор 7,35%.

9,74 г кальция хлорида дигидрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Кальция хлорида раствор 3 М.

44,10 г кальция хлорида дигидрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Кальция хлорида раствор 0,025 М.

3,68 г кальция хлорида дигидрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Кальция хлорида раствор 0,02 М.

2,94 г кальция хлорида дигидрата растворяют в 900 мл воды, устанавливают рН раствора в пределах от 6,0 до 6,2 и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Хранят при температуре от 2 до 8 °С.

Кальция хлорида раствор 0,01 М.

0,147 г кальция хлорида дигидрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Кальция хлорид тетрагидрат. [25094-02-4]. CaCl2·4H2O. (М.м. 183,05).

Хлорид кальция, тетрагидрат.

Содержит не более 0,05 ррm Fe.

Кальций хлористый. См. Кальция хлорид.

Камедь бобов рожкового дерева. [9000-40-2].

Измельчённый эндосперм семян Ceratonia siliqua L. Taub., сем. Fabaceae.

Белый или почти белый порошок, содержащий от 70% до 80% растворимой в воде смолы, состоящей в основном из галактоманнана.

Камфора. [76-22-2]. С10Н16О. (М.м. 152,23).

rac-(1R,4R)-1,7,7-Триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-он.

Белые кристаллические куски или бесцветный кристаллический порошок с сильным характерным запахом.

Очень мало растворима в воде (0,1:100), легко растворима в спирте 96% и эфире, растворима в ацетоне.

Хроматографическая чистота камфоры, используемой в газовой хроматографии, должна быть не менее 98,0%.

(1S)-(+)-10-Камфорсульфоновая кислота. [3144-16-9]. C10H16O4S. (М.м. 232,30).

(1S,4R)- 7,7-Диметил-2-оксобицикло[2.2.1]гепт-1-ил]метансульфоновая кислота.

Содержит не менее 99,0% C10H16O4S.

Призматические кристаллы.

Растворима в воде, гигроскопична.

. + 61±1°.

Температура плавления. Около 194 °C, с разложением.

Каолин легкий. [1332-58-7].

Очищенный природный алюмосиликат гидратированный. Содержит подходящий диспергатор.

Легкий порошок белого цвета, не содержащий твердых спекшихся частиц, маслянистый на ощупь.

Практически нерастворим в воде и минеральных кислотах.

Крупные частицы. Не более 0,5%. 5,0 г каолина помещают в цилиндр с притертой стеклянной пробкой длиной около 160 мм и диаметром 35 мм, прибавляют 60 мл 1% раствора натрия пирофосфата, энергично встряхивают и отстаивают в течение 5 мин. С помощью пипетки отбирают 50 мл жидкости на уровне около 5 см ниже поверхности и отбрасывают. К оставшейся жидкости прибавляют 50 мл воды, встряхивают, отстаивают в течение 5 мин и удаляют 50 мл, как описано выше. Эту операцию повторяют до тех пор, пока не будет удалено в общей сложности 400 мл. Переносят оставшуюся суспензию в чашку для выпаривания, выпаривают при температуре 100 °С досуха и сушат до постоянной массы при температуре от 100 до 105 °С. Масса остатка должна быть не более 25 мг.

Мелкие частицы. 5,0 г каолина диспергируют в 250 мл воды при энергичном встряхивании в течение 2 мин и тотчас выливают в стеклянный цилиндр диаметром 50 мм. С помощью пипетки отбирают 20 мл, помещают в фарфоровую чашку, выпаривают при температуе 100 °С досуха и сушат до постоянной массы при температуре от 100 до 105 °С. Остаток суспензии отстаивают при температуре 20 °С в течение 4 ч и с помощью пипетки удаляют 20 мл на уровне точно 5 см ниже поверхности, не взбалтывая осадок. Остаток помещают в фарфоровую чашку, выпаривают досуха и сушат до постоянной массы при температуре от 100 до 105 °С. Масса второго остатка должна быть не менее 70% от массы первого остатка.

Капсаицин. [404-86-4]. C18H27NO3. (М.м. 305,41).

(6Е)-N-[(4-Гидрокси-3-метоксифенил)метил]-8-метилнон-6-енамид.

Белый или практически белый, кристаллический порошок.

Практически нерастворим в воде, легко растворим в безводном спирте.

Температура кипения. 210–220 °С при 0,01 мм рт. ст.

Температура плавления. 62–65 °С.

Каприловый спирт. См. Деканол.

Карбазол. [86-74-8]. C12H9N. (М.м. 167,19).

9H-Карбазол.

Кристаллы. Практически нерастворим в воде, легко растворим в ацетоне, мало растворим в этаноле.

Температура плавления. Около 245 °С.

Карбазола раствор 0,5%.

0,5 г карбазола растворяют в спирте 96% в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объём раствора спиртом 96% до метки.

Карбомер. [9007-20-9].

Поперечно-сшитый полимер акриловой кислоты, после высушивания при температуре 80 °С в течение 1 ч содержит большое количество карбоксильных групп (-CОOH, от 56 до 68%).

Средняя молекулярная масса около 3·106.

рН. Около 3,0 (1% суспензия).

Карбофенотион. [786-19-6]. C11H16ClO2PS3. (М.м. 342,87).

О,О-Диэтил-S-{[(4-хлорфенил)сульфанил]метил}дитиофосфат.

Жидкость жёлтоватого цвета.

Практически нерастворим в воде, смешивается с органическими растворителями.

. Около 1,27.

Карвакрол. [499-75-2]. C10H14O. (М.м. 150,22).

2-Метил-5-(пропан-2-ил)фенол.

Жидкость коричневатого цвета.

Практически нерастворим в воде, очень легко растворим в спирте 96% и эфире.

. Около 0,975.

. Около 1,523.

Температура кипения. Около 237 °С.

Хроматографическая чистота карвакрола, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 95,0%.

Карвон. [2244-16-8]. C10H14O. (М.м. 150,22).

(5S)-2-Метил-5-(проп-1-ен-2-ил)циклогекс-2-ен-1-он.

Жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается со спиртом 96%.

. Около 0,965.

. Около 1,500.

. Около + 61°.

Температура кипения. Около 230 °С.

Хроматографическая чистота карвона, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 98,0%.

β-Кариофиллен. [87-44-5]. C15H24. (М.м. 204,35).

(1R,4E,9S)-4,11,11-Триметил-8-метилиденбицикло[7.2.0]ундец-4-ен.

Маслянистая жидкость, практически нерастворима в воде, смешивается со спиртом 96%.

β-Кариофиллен, используемый в газовой хроматографии, должен содержать не менее 90,0% основного вещества, определённого как описано в ФС «Гвоздичное масло» методом нормирования.

Карминовая кислота. [1260-17-9]. C22H20O13. (М.м. 492,4).

3,5,6,8-Тетрагидро-7-(β-D-глюкопиранозил)-1-метил-9,10-диоксо-9,10-дигидроантрацен-2-карбоновая кислота.

Содержит не менее 96% C22H20O13.

Тёмно-красный порошок, очень хорошо растворим в воде, растворим в диметилсульфоксиде, практически не растворим в спирте 96%.

. Около + 3,1 (1% раствор в воде).

Температура плавления. Около 136 °С.

Катехин. [154-23-4]. C15H14O6. (М.м. 290,27).

(2R,3S)-2-(3,4-Дигидроксифенил)-2Н-1-бензопиран-3,5,7-триол.

Бесцветные кристаллы или игольчатые образования.

Растворим в воде и спирте 96%, мало растворим в эфире, очень мало растворим в ацетоне.

Катионит слабый.

Смола полиметакриловая слабокислая, содержащая карбоксильные группы в протонированной форме.

Размер частиц. От 75 до 160 мкм.

Используемые пределы рН. От 5,0 до 14,0.

Максимальная температура использования. 120 °С.

Катионит слабоосновный. См. Катионит слабый.

Катионообменная смола

Смола в протонированной форме с группами сульфоновой кислоты, присоединенными к решетке полимера, состоящего из полистирола, поперечно-сшитого 8% дивинилбензола. Выпускают в виде гранул, размер которых указывают после названия реактива в испытаниях, в которых он используется.

Катионообменная смола (1)

Смола в протонированной форме с группами сульфоновой кислоты, присоединенными к решетке полимера, состоящего из полистирола, поперечно-сшитого 4% дивинилбензола. Выпускают в виде гранул, размер которых указывают после названия реактива в испытаниях, в которых он используется.

Катионообменная смола сильная (кальциевая форма)

Смола в кальциевой форме с группами сульфоновой кислоты, присоединенными к решетке полимера, состоящего из полистирола, поперечно-сшитого 8% дивинилбензола. Размер частиц указывают после названия реактива в фармакопейных статьях.

Катионообменная смола сильная (натриевая форма).

Смола в натриевой форме с группами сульфоновой кислоты, присоединенными к решетке полимера, состоящего из полистирола, поперечно-сшитого 8% дивинилбензола. Размер частиц указывают после названия реактива в фармакопейных статьях.

Катионообменная смола сильная (протонированная форма).

Смола в протонированной форме с группами сульфоновой кислоты, присоединенными к решетке, состоящей из полистирола, поперечно-сшитого 8% дивинилбензола. Выпускают в виде гранул шарообразной формы; если нет других указаний, размер частиц составляет от 0,3 мм до 1,2 мм.

Статическая обменная ёмкость (СОЕ). От 4,5 до 5,0 ммоль/г при содержании воды от 50 до 60%.

[.underline]#Приготовление колонки#. Если нет других указаний, используют трубку с вплавленным внутрь диском из пористого стекла, длиной 400 мм, внутренним диаметром 20 мм и высотой заполнения около 200 мм. Смолу предварительно смешивают с водой, полученную взвесь вводят в трубку, не допуская образования пузырьков воздуха между частицами. Во время работы жидкость не должна опускаться ниже поверхности смолы. Если смола в протонированной форме, промывают водой до тех пор, пока для нейтрализации 50 мл потребуется не более 0,05 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида, используя в качестве индикатора 0,1 мл 0,1% спиртового раствора метилового оранжевого. Если смола в натриевой форме или нуждается в регенерации, через колонку медленно пропускают около 100 мл смеси равных объёмов хлористоводородной кислоты 25% и воды, а затем промывают водой, как описано выше.

Катионообменная смола сильная (протонированная форма) (1).

Смола в протонированной форме с группами сульфоновой кислоты, присоединенными к решётке на 2% сульфонированного полимера, состоящего из полистирола, поперечно-сшитого дивинилбензолом. Размер частиц, составляющий от 45 до 250 мкм, указывают после названия реактива в фармакопейных статьях.

Катионообменная смола слабая (протонированная форма).

Смола в протонированной форме с карбоксильными группами, присоединенными к решетке, состоящей из этилвинилбензола, поперечно-сшитого 55% дивинилбензола. Размер частиц составляет от 6 до 9 мкм.

Статическая обменная ёмкость (СОЕ) — не менее 0,5 мэкв/колонку (250×4 мм).

Квасцы железоаммониевые. См. Железа(III) аммония сульфат.

Кверцетин-3-глюкозид. [482-35-9]. C21H20O12. (М.м. 464,38).

5,7-Дигидрокси-3-(β-D-глюкопиранозилокси)-2-(3,4-дигидроксифенил)-4H-1-бензопиран-4-он.

Кверцитрин. [522-12-3]*.* C21H20O11. (М.м. 448,38).

5,7-Дигидрокси-3-[(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)окси]-2-(3,4-дигидроксифенил)-4H-1-бензопиран-4-он.

Жёлтые кристаллы, практически нерастворимые в холодной воде, растворимые в спирте 96%.

Температура плавления. От 176 до 179 °С.

Хранить при температуре от 2 до 8 °С.

15-Кетопростагландин E1. [22973-19-9]. C20H32O5. (М.м. 352,47).

7-[(1R,2R,3R)-3-Гидрокси-5-оксо-2-[(1E)-3-оксоокт-1-ен-1-ил]циклопентил]гептановая кислота.

Содержит не менее 98% C20H32O5.

Хранить при темпратуре не выше –20 °С.

Кетостеариловый спирт. [67762-27-0].

Смесь твердых алифатических спиртов. В его составе должно быть не менее 40% стеарилового спирта (С18Н38О; М.м. 270,49); сумма стеарилового спирта и цетилового спирта (С16Н34О; М.м. 242,49) должна быть не менее 90,0%.

Белая или светло-жёлтая воскообразная масса, пластинки, хлопья или гранулы.

Практически нерастворим в воде, легко растворим в эфире, растворим в спирте 90% (о/о); в расплавленном состоянии смешивается с жирными маслами, вазелиновым маслом.

Кизельгур для хроматографии.

Легкий порошок белого или желтовато-белого цвета.

Практически нерастворим в воде, разведённых кислотах и органических растворителях.

Скорость фильтрации. Используют хроматографическую колонку размером 0,25 м × 10 мм с пластинкой из пористого стекла (100) и двумя отметками на высоте 0,10 м и 0,20 м над пластинкой. Колонку заполняют испытуемым веществом до первой отметки, а до второй отметки–водой. Когда первые капли начинают вытекать из колонки, снова заполняют до второй отметки водой и измеряют время вытекания из колонки первых 5 мл воды. Скорость потока должна быть не менее 1 мл/мин.

Цветность. Элюат, полученный при испытании на скорость фильтрации, должен быть бесцветным.

Кислотность или щелочность. К 1,00 г прибавляют 10 мл воды, энергично взбалтывают и выдерживают в течение 5 мин. Суспензию фильтруют через фильтр, предварительно промытый горячей водой до нейтральной реакции в промывной воде. К 2,0 мл фильтрата прибавляют 0,05 мл 0,05% раствора метилового красного; наблюдается жёлтое окрашивание. К 2,0 мл фильтрата прибавляют 0,05 мл 1% раствора фенолфталеина; допускается слабо-розовое окрашивание раствора.

Водорастворимые вещества. 10,0 г помещают в хроматографическую колонку размером 0,25 м × 10 мм, элюируют водой, собирая первые 20 мл элюата, выпаривают досуха, остаток сушат при температуре от 100 до 105 °С. Масса остатка должна быть не более 10 мг.

Железо. Не более 0,02% (200 ppm). К 0,50 г прибавляют 10 мл смеси равных объёмов 25% хлористоводородной кислоты и воды, энергично встряхивают, выдерживают в течение 5 мин и фильтруют.

1,0 мл фильтрата должен выдерживать испытание на железо.

Потеря в массе после прокаливания. Не более 0,5%. Во время прокаливания (600 °С) вещество не должно иметь коричневую или черную окраску.

Кизельгур G.

Состоит из кизельгура, обработанного хлористоводородной кислотой и кальцинированного прибавлением около 15% кальция сульфата полугидрата.

Мелкий порошок серовато-белого цвета; при растирании с водой серый цвет становится более выраженным. Средний размер частиц от 10 до 40 мкм.

Кальция сульфат. Определение проводят методом, указанным для силикагеля G.

рН. От 7,0 до 8,0. Измеряют рН суспензии, полученной встряхиванием 1 г в 10 мл воды, свободной от углерода диоксида, в течение 5 мин.

Хроматографическая разделяющая способность. Определение проводят методом тонкослойной хроматографии. Пластинки готовят, используя взвесь кизельгура G с 2,7 г/л раствором натрия ацетата. На линию старта хроматографической пластинки наносят 5 мкл раствора, содержащего по 0,1 г/л лактозы, сахарозы, глюкозы и фруктозы в пиридине. Хроматографируют в системе растворителей вода–2-пропанол–этилацетат 12:23:65. Время прохождения фронта растворителей на расстояние 14 см около 40 мин. Пластинку сушат на воздухе, опрыскивают раствором анисового альдегида, расходуя около 10 мл, и нагревают при температуре от 100 до 105 °С в течение 5 мин. На хроматограмме должны обнаруживаться 4 четких, хорошо разделенных, без «хвостов», пятна.

Кислород. [7782-44-7]. О2. (М.м. 32,00).

Кислород.

Содержит не менее 99,99% (о/о) О2.

Азот и аргон. Не более 100 ppm.

Углерода диоксид. Не более 10 ppm.

Углерода монооксид. Не более 5 ppm.

Кислотный синий 1. См. Сульфановый синий.

Кислотный синий 83. [6104-59-2]. C45H44N3NaO7S2. (М.м. 826,0).

3-[({4-[(4-{[(3-Сульфонатофенил)метил](этил)амино}фенил){4-[(4-этоксифенил)амино]фенил}метилен]циклогекса-2,5-диен-1-илиден}(этил)аммонио)метил]бензолсульфонат натрия.

Кумасси бриллиантовый синий R-250.

Порошок коричневого цвета.

Практически нерастворим в холодной воде, мало растворим в кипящей воде и этаноле, растворим в серной кислоте концентрированной, уксусной кислоте ледяной и разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов.

Кислотный синий 90. [6104-58-1]. C47H48N3NaO7S2. (М.м. 854,0).

3-({[3-Метил-4-({4-[(4-этоксифенил)амино]фенил}(2-метил-4-{[(3-сульфонатофенил)метил](этил)амино}]фенил)метилен)циклогекса-2,5-диен-1-илиден](этил)аммонио}метил)бензолcульфонат натрия.

Кумасси бриллиантовый синий G-250.

Порошок тёмно-коричневого цвета с фиолетовым блеском и с вкрапленными частицами, имеющими металлический блеск.

Растворим в воде и этаноле.

Потеря в массе при высушивании. Не более 5,0%. 0,500 г сушат в сушильном шкафу при температуре от 100 до 105 °С.

. Более 500, в пересчете на сухое вещество. Определение проводят при длине волны 577 нм, используя 0,001% раствор в буферном растворе рН 7,0.

Кислотного синего 90 раствор. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 50 мг кислотного синего 90, растворяют в 25 мл спирта 96%, прибавляют 50 мл фосфорной кислоты концентрированной, доводят объём раствора водой до метки и тщательно перемешивают. Фильтруют и хранят в банках тёмного стекла при комнатной температуре. Если при хранении выпадает осадок красителя, перед использованием реактив необходимо профильтровать.

Кислотный синий 92. [3861-73-2]. C26H16N3Na3O10S3. (М.м. 695,6).

5-Гидрокси-4-{[5-сульфонато-4-(фениламино)нафталин-1-ил]диазенил}нафталин-2,7-дисульфонат тринатрия.

Кристаллы тёмно-синего цвета.

Мало растворим в спирте 96%, растворим в воде, ацетоне и моноэтиловом эфире этиленгликоля.

Кислотного синего 92 раствор.

0,5 г кислотного синего 92 растворяют в смеси 10 мл уксусной кислоты ледяной, 45 мл спирта 96% и 45 мл воды.

Кислотный хром чёрный специальный. См. Эриохром чёрный Т.

Кислотный хромовый тёмно-синий. См. Хромовый тёмно-синий.

1,7-Клеве кислота. См. 1-Нафтиламин-7-сульфоновая кислота.

Кремнезём для газовой хроматографии, промытый кислотой.

Кремнезём для газовой хроматографии, подвергнутый термо-щелочной обработке смешением диатомита с Na2CO3 и прокаливанием выше 900 °С. Кремнезём промывается кислотой, а затем водой (но не основанием) до нейтральной реакции. Кремнезём может быть силанизирован обработкой реактивом как диметилдихлорсилан для маскирования поверхностных силанольных групп.

Кремнезём для газовой хроматографии, промытый кислотой и основанием.

Кремнезём для газовой хроматографии, подвергнутый термо-щелочной обработке смешением диатомита с Na2CO3 и прокаливанием выше 900 °С. Кремнезём промывается кислотой, а затем водой и основанием до нейтральной реакции. Кремнезём может быть силанизирован обработкой реактивом как диметилдихлорсилан для маскирования поверхностных силанольных групп.

Клобетазола пропионат. [25122-46-7]. C25H32ClFO5. (М.м. 467,0).

(11β-Гидрокси-16β-метил-3,20-диоксо-9-фтор-21-хлорпрегна-1,4-диен-17-ил)пропаноат.

Кристаллический порошок белого цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим в спирте 96% и ацетоне.

. Около + 104° (в диоксане).

Температура плавления. Около 196 °С.

Кобальта нитрат. [10026-22-9]. Co(NO3)2·6H2O. (М.м. 291,03).

Нитрат кобальта(II), гексагидрат.

Буро-красные кристаллы. Гигроскопичен. Очень легко растворим в воде.

Кобальта нитрата раствор 5%.

5 г кобальта нитрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Кобальта хлорид. [7791-13-1]. CoCl2·6H2O. (М.м. 237,93).

Хлорид кобальта(II), гексагидрат.

Кристаллический порошок красного цвета или кристаллы тёмно-красного цвета.

Очень легко растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Кобальта хлорида раствор 5%.

5 г кобальта хлорида растворяют в воде, прибавляют 0,2 мл хлористоводородной кислоты 25% и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Кобальта хлорида раствор 1%.

1,0 г кобальта хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Конго красный. [573-58-0]. C32H22N6Na2O6S2. (М.м. 696,7).

3,3'-[[1,1'-Бифенил]-4,4'-диилбис(диазендиил)]бис(4-аминонафталин-1-сульфонат) динатрия.

Порошок коричневато-красного цвета. Растворим в воде.

Конго красного бумага.

Полоски фильтровальной бумаги погружают на несколько минут в раствор конго красного. Высушивают.

Конго красного раствор.

0,1 г конго красного растворяют в смеси 20 мл спирта 96% и воды и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Испытание на чувствительность. К 100 мл воды, свободной от углерода диоксида, прибавляют 0,2 мл раствора конго красного и 0,3 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида; появляется синее окрашивание, которое переходит в розовое при прибавлении не более 0,3 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида.

Переход окраски от синей до розовой в интервале рН 3,0–5,0.

Коричный альдегид. [104-55-2]. C9H8O. (М.м. 132,16).

3-Фенилпроп-2-еналь.

Маслянистая жидкость от жёлтоватого до зеленовато-жёлтого цвета.

Мало растворим в воде, очень легко растворим в спирте 96% и эфире.

. От 1,048 до 1,051.

. Около 1,620.

Хранят в прохладном, защищённом от света месте.

Кортизон. [53-06-5]. C21H28O5. (М.м. 360,44).

17,21-Дигидроксипрегн-4-ен-3,11,20-трион.

Содержит не менее 98% C21H28O5.

Температура плавления. От 223 до 228 °С (с разл.).

Кофеин. См. ФС Кофеин.

Кофейная кислота. [331-39-5]. C9H8O4. (М.м. 180,16).

(2Е)-3-(3,4-Дигидроксифенил)проп-2-еновая кислота.

Кристаллы или пластинки белого или почти белого цвета.

Легко растворима в горячей воде и спирте 96%, умеренно растворима в холодной воде.

Температура плавления. Около 225 °С с разложением.

Свежеприготовленный раствор с рН 7,6 имеет 2 максимума поглощения при длинах волн 293 и 329 нм.

Красная кровяная соль. См. Калия феррицианид.

Крахмал растворимый. [9005-84-9]. (С6Н10О5)n.

Порошок белого или слегка кремоватого цвета.

Практически нерастворим в спирте 96%, растворим в кипящей воде с образованием прозрачного или слегка опалесцирующего раствора, не застывающего при охлаждении.

Крахмала раствор 1%

1 г крахмала растворимого смешивают с 5 мл воды до получения однородной кашицы и смесь медленно вливают при постоянном размешивании в 100 мл кипящей воды. Кипятят в течение 2 мин до получения слегка опалесцирующей жидкости. Срок годности – 3 сут.

Примечание. При приготовлении раствора индикатора из картофельного крахмала клейстер, полученный указанным выше образом, дополнительно нагревают в автоклаве при температуре 120 °С в течение 1 ч.

Крахмала раствор 1% в натрия хлорида растворе насыщенном

1 г крахмала растворимого смешивают с 5 мл натрия хлорида раствора насыщенного до получения однородной кашицы и смесь медленно вливают при постоянном размешивании в 100 мл кипящего натрия хлорида раствора насыщенного. Кипятят в течение 2 мин до получения слегка опалесцирующей жидкости. После охлаждения при необходимости фильтруют. Срок годности – 4 мес при хранении от 2 до 8 °С.

Крахмала раствор 1%, содержащий 0,01% ртути(II) йодида

1,0 г крахмала растворимого растирают в порошок с 5 мл воды, полученную смесь медленно при постоянном перемешивании вливают в 100 мл кипящей воды, содержащей 10 мг ртути(II) йодида.

При использовании реактива каждый раз проводят испытание на чувствительность.

Испытание на чувствительность. Смесь, состоящая из 1 мл раствора крахмала, 20 мл воды, около 50 мг калия йодида и 0,05 мл 0,005 М раствора йода, должна иметь синее окрашивание.

Крахмала раствор 1%, содержащий 0,1% салициловой кислоты

10 г крахмала растворимого смешивают с 50 мл холодной воды и полученную смесь вливают в 1000 мл кипящей воды, перемешивают до полного растворения, охлаждают и прибавляют 1 г салициловой кислоты. Срок годности раствора ‒ 1 месяц.

Крахмала раствор 0,5% содержащий 0,125% салициловой кислотой

1 г крахмала растворимого смешивают с небольшим количеством холодной воды. Полученную смесь прибавляют к 200 мл кипящей воды, прибавляют 250 мг салициловой кислоты, кипятят в течение 3 мин и немедленно охлаждают.

Срок годности от 2 до 3 недель при хранении раствора при температуре от 4 до 10 °С.

Свежий раствор крахмала готовят в том случае, когда в точке эквивалентности переход окраски от синей к бесцветной не резкий.

Испытание на чувствительность. К 2 мл 0,5% раствора крахмала прибавляют 20 мл воды, около 50 мг калия йодида и 0,05 мл 0,005 М раствора йода; полученный раствор должен иметь синее окрашивание.

Крахмала раствор 0,5%, содержащий 0,2% сульфаминовой кислоты

1 г крахмала растворимого смешивают с 10 мл воды до получения однородной кашицы и смесь медленно вливают при постоянном перемешивании в 200 мл кипящей воды. Прибавляют 400 мг сульфаминовой кислоты и продолжают кипячение еще в течение 2 мин. Используют свежеприготовленным.

Крахмала раствор 0,1%

0,1 г крахмала растворимого растирают в 5 мл воды и, продолжая перемешивать, прибавляют к 100 мл кипящей воды и кипятят ещё 2 мин, охлаждают.

Крахмала раствор с калия йодидом

0,75 г калия йодида растворяют в 100 мл воды, нагревают до кипения и прибавляют при перемешивании раствор 0,5 г крахмала растворимого в 35 мл воды. Кипятят в течение 2 мин и охлаждают.

Испытание на чувствительность. Смесь, состоящая из 15 мл раствора крахмала с калия йодидом, 0,05 мл уксусной кислоты ледяной и 0,3 мл 0,0005 М раствора йода, должна иметь синее окрашивание.

Йодкрахмальная бумага. Обеззоленные бумажные фильтры пропитывают раствором крахмала с калия йодидом и сушат в тёмном помещении на воздухе, не содержащем паров кислот. Бумагу разрезают на полоски длиной около 50 мм и шириной около 6 мм. Полоска йодкрахмальной бумаги не должна тотчас синеть при смачивании ее 1 каплей 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты.

Йодкрахмальную бумагу хранят в банках оранжевого стекла с притертой пробкой в защищённом от света месте.

о-Крезоксиуксусная кислота. [1878-49-5]. C9H10O3. (М.м. 166,17).

(2-Метилфенокси)уксусная кислота.

Кремовый кристаллический порошок.

Температура плавления. 155–157 °С.

Крезол. [95-48-7]. С7Н8О. (М.м. 108,14).

2-Метилфенол.

Кристаллы или переохлажденная жидкость, темнеющая на свету и воздухе. Смешивается с этанолом и эфиром, растворим примерно в 50 частях воды и растворах гидроксидов щелочных металлов.

. Около 1,05.

. От 1,540 до 1,550.

Температура кипения. Около 190 °С.

Температура затвердевания. Не ниже 30,5 °С.

Остаток после выпаривания. Не более 0,1% (м/м). Выпаривают при температуре 100 °С, сушат при температуре от 100 до 105 °С.

Хранят в защищённом от воздействия кислорода и влаги месте, перед использованием перегоняют.

м-Крезол. [108-39-4]. С7Н8О. (М.м. 108,14).

3-Метилфенол.

Бесцветная или жёлтоватая жидкость.

Умеренно растворим в воде, смешивается со спиртом 96% и дихлорметаном.

Около 1,03.

Температура кипения. Около 202 °С.

Температура плавления. 11–12 °С.

п-Крезол. [106-44-5]. С7Н8О. (М.м. 108,14).

4-Метилфенол.

Бесцветные или белые или практически белые кристаллы или кристаллическая масса.

. Около 1,02.

Температура кипения. 201,9 °С.

Температура плавления. 35,5 °С.

Крезоловый красный. [1733-12-6]. С21Н18О5S. (М.м. 382,43).

3,3-Бис(4-гидрокси-3-метилфенил)-3Н-2,1λ6-бензоксатиол-1,1-дион.

Кристаллический порошок красновато-коричневого цвета.

Мало растворим в воде, растворим в спирте 96% и разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов.

Крезолового красного раствор 0,1%.

0,1 г крезолового красного растворяют в смеси 2,65 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида и 20 мл спирта 96%, доводят объём раствора водой до 100 мл.

Испытание на чувствительность. К 100 мл воды, свободной от углерода диоксида, прибавляют 0,1 мл раствора крезолового красного и 0,15 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида; появляется пурпурно-красное окрашивание, которое должно перейти в жёлтое при прибавлении не более 0,15 мл 0,02 М раствора хлористоводородной кислоты.

Изменение окраски от жёлтой до красной в интервале рН 7,0–8,6.

Крезолового красного раствор 0,04%.

0,1 г крезолового красного растворяют в 13,1 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора свежепрокипяченной и охлажденной водой до 250,0 мл.

Переход окраски раствора от красной к жёлтой в интервале рН 0,2–1,8 и от жёлтой к пурпурно-красной в интервале рН 7,2–8,8.

Крезолового красного спиртовой раствор 0,1%.

0,1 г крезолового красного растворяют в 50 мл спирта 96% и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Крезоловый красный водорастворимый. [62625-29-0]. С21Н17NaO5S. (М.м. 404,4).

2-[(4-Гидрокси-3-метилфенил)(3-метил-4-оксоциклогекса-2,5-диен-1-ил)метил]бензолсульфонат натрия.

Натриевая соль о-крезолсульфофталеина. (Взамен аммониевой соли).

Порошок красно-коричневого цвета. Растворим в воде.

Переход окраски раствора от красной к жёлтой в интервале рН 0,2–1,8 и от жёлтой к красной в интервале рН 7,2–8,8.

Раствор индикатора. 0,04% раствор.

Крезоловый пурпурный. [2303-01-7]. С21Н18О5S. (М.м. 382,43).

3,3-Бис(4-гидрокси-2-метилфенил)-3Н-2,1λ6-бензоксатиол-1,1-дион.

Кристаллический порошок оливково-зеленого цвета.

Мало растворим в воде, растворим в спирте 96%, уксусной кислоте ледяной и метаноле.

Крезолового пурпурного раствор 0,1%.

0,1 г крезолового пурпурного растворяют в 13 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Переход окраски от красной до жёлтой в интервале рН 1,2–2,8 и от жёлтой до фиолетовой в интервале рН 7,4–9,0.

Крезолового пурпурного раствор 0,04%.

0,1 г крезолового пурпурного растворяют в 13,1 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора свежепрокипяченной и охлажденной водой до 250,0 мл.

Переход окраски от розово-красной к жёлтой в интервале рН 1,2–2,8 и от жёлтой к фиолетовой в интервале рН 7,4–9,0.

Крезолового пурпурного спиртовой раствор 0,1%.

0,1 г крезолового пурпурного растворяют в 50 мл спирта 96% и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Крезоловый пурпурный водорастворимый. [62625-31-4]. С21Н17NaO5S. (М.м. 404,4).

2-[(4-Гидрокси-2-метилфенил)(2-метил-4-оксоциклогекса-2,5-диен-1-ил)метил]бензолсульфонат натрия.

Мелкокристаллический порошок от оранжево-коричневого до черного цвета.

Переход окраски раствора от розово-красной к жёлтой в интервале рН 1,2–2,8 и от жёлтой к пурпурной в интервале рН 7,4–9,0.

Раствор индикатора. 0,04% раствор.

Кремневольфрамовая кислота. [11130-20-4]. Н4[SiW12O40]·xH2O. (М.м. 2878,2, для безводного).

Кристаллы белого или жёлтовато-белого цвета, расплывающиеся на воздухе. Очень легко растворима в воде и спирте 96%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Кремневольфрамовой кислоты раствор 1%.

1 г кремневольфрамовой кислоты растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Кремнийорганический полимер, аморфный, октадецилсилильный, эндкепированный.

Кремнийорганический аморфный полимер с октадецильными группами. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами эндкепирован для закрытия большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Кремнийорганический полимер, аморфный, октадецилсилильный с полярными мостиками, эндкепированный.

Кремнийорганический аморфный полимер с октадецильными группами, присоединёнными через полярные мостики. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами эндкепирован для закрытия большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Кремнийорганический полимер, аморфный, октилсилильный с полярными мостиками, эндкепированный.

Кремнийорганический аморфный полимер, с октильными группами, присоединёнными через полярные мостики. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами эндкепирован для закрытия большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Кремнийорганический полимер совместимый с водной подвижной фазой, октадецилсилильный, эндкепированный.

Кремнийорганический полимер, содержащий октадецилсилильные группы, нанесённый на сферические частицы непористого диоксида кремния. Совместим со 100% водной фазой. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами эндкепирован для закрытия большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Кристаллический фиолетовый. [548-62-9]. С25Н30СlN3. (М.м. 408,0).

4-{Бис[4-(диметиламино)фенил]метилен}-N,N-диметилциклогекса-2,5-диен-1-иминий хлорид.

Кристаллы или порошок тёмно-зеленого цвета.

Растворим в воде, спирте 96%.

Кристаллического фиолетового раствор 0,5%.

0,5 г кристаллического фиолетового растворяют в уксусной кислоте безводной и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Испытание на чувствительность. К 50 мл кислоты уксусной безводной прибавляют 0,1 мл раствора кристаллического фиолетового; появляется голубовато-фиолетовое окрашивание, которое переходит в голубовато-зеленое при прибавлении 0,1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты.

Кристаллического фиолетового раствор 0,1%.

0,1 г кристаллического фиолетового растворяют в уксусной кислоте безводной и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Переход окраски при неводном титровании от фиолетовой (щелочная) через сине-зеленую (нейтральная) к зеленовато-жёлтой (кислая).

Ксантгидрол. [90-46-0]. С13Н10О2. (М.м. 198,22).

9H-Ксантен-9-ол.

Содержит не менее 90,0% С13Н10О2.

Порошок от белого до светло-жёлтого цвета.

Очень мало растворим в воде, растворим в спирте 96%, эфире и уксусной кислоте ледяной.

Доступен также в виде раствора, содержащего от 90 до 110 г/л ксантгидрола в метаноле.

Температура плавления. Около 123 °С.

Хранят в защищённом от света месте. Если используют метанольный раствор, то хранят в небольших герметично закрытых ампулах и при необходимости перед использованием фильтруют.

Ксантгидрол особой чистоты.

Должен выдерживать требования для ксантгидрола и следующее дополнительное требование.

Содержит не менее 98,0% С13Н10О2.

Ксантгидрола раствор.

К 100 мл уксусной кислоты безводной прибавляют 0,1 мл 10% раствора ксантгидрола в метаноле, 1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и выдерживают в течение 24 ч.

Ксантгидроловый реактив. См. Ксантгидрола раствор.

Ксиленоловый оранжевый. [3618-43-7]. С31Н28N2Na4О13S. (М.м. 760,6).

2,2',2'',2'''-{(1,1-Диоксо-3Н-2,1λ6-бензоксатиол-3,3-диил)бис[(6-гидрокси-5-метил-3,1-фенилен)метиленнитрило]}тетраацетат тетранатрия.

Кристаллический порошок красновато-коричневатого цвета.

Растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96% и эфире.

В интервале рН 5,0–6,0 ксиленоловый оранжевый окрашен в лимонно-жёлтый цвет, а его комплекс с ионом висмута в тех же условиях красного цвета. В щелочных растворах индикатор имеет фиолетово-красную окраску. Переход окраски при прямом комплексонометрическом титровании от красной в лимонно-жёлтую.

Ксиленолового оранжевого индикаторная смесь.

Растирают в порошок 1 часть ксиленолового оранжевого с 99 частями калия нитрата или натрия хлорида.

Испытание на чувствительность. К 50 мл воды прибавляют 1 мл уксусной кислоты разведённой 12%, 50 мг индикаторной смеси ксиленолового оранжевого и 0,05 мл 3,3% раствора свинца(II) нитрата. Прибавляют гексаметилентетрамин до тех пор, пока окраска раствора не изменится от жёлтой до фиолетово-красной; после прибавления 0,1 мл 0,1 М раствора натрия эдетата окраска раствора должна измениться на жёлтую.

Ксиленолового оранжевого раствор 0,1%.

0,1 г ксиленолового оранжевого растворяют в 100 мл воды.

Переход окраски см. «Ксиленоловый оранжевый».

Срок годности – 14 сут.

Ксиленолового оранжевого раствор 0,05%.

50 мг ксиленолового оранжевого растворяют в 100 мл воды.

Переход окраски см. «Ксиленоловый оранжевый».

Срок годности – 14 сут.

2,3-Ксилидин. См. 2,3-Диметиланилин.

2,6-Ксилидин. См. 2,6-Диметиланилин.

Ксилитол. [87-99-0]. C5H12O5. (М.м. 152,15).

Белый или почти белый кристаллический порошок.

Температура плавления. От 92 до 96 °С.

Ксилоза. [58-86-6]. С5Н10О5. (М.м. 150,13). D-Ксилопиранза.

Кристаллический порошок белого цвета или бесцветные игольчатые кристаллы.

Очень легко растворима в воде, растворима в горячем спирте 96%.

. Около + 20° (10% раствор через 10 ч после его приготовления).

Ксилол. [1330-20-7]. С8Н10. (М.м. 106,17).

Диметилбензол.

Смесь о-, м- и п-изомеров.

Прозрачная, бесцветная, воспламеняющаяся жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. Около 0,867.

. Около 1,497.

Температура кипения. Около 138 °С.

о-Ксилол. [95-47-6]. С8Н10. (М.м. 106,17).

1,2-Диметилбензол.

Прозрачная, бесцветная, воспламеняющаяся жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. Около 0,881.

. Около 1,505.

Температура кипения. Около 144 °С.

Температура плавления. Около -25 °С.

м-Ксилол. [108-38-3]. С8Н10. (М.м. 106,17).

1,3-Диметилбензол.

Прозрачная, бесцветная, воспламеняющаяся жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. Около 0,884.

. Около 1,497.

Температура кипения. Около 139 °С.

Температура плавления. Около -47 °С.

Кумарин. [91-64-5]. C9H6O2. (М.м. 146,14). 2Н-Хромен-2-он

2Н-1-Бензопиран-2-он.

Бесцветный кристаллический порошок или ромбические или прямоугольные кристаллы.

Очень легко растворим в кипящей воде, растворим в спирте 96% и в растворах гидроксидов щелочных металлов.

Температура кипения. Около 302 °С.

Температура плавления. От 68 до 71 °С.

Кумасси бриллиантовый синий G-250. См. Кислотный синий 90.

Кумасси бриллиантовый синий R-250. См. Кислотный синий 83.

Кумасси красящий раствор.

1,25 г кислотного синего 83 растворяют в 1000,0 мл смеси уксусная кислота ледяная—метанол—вода 1:4:5 и фильтруют.

Кумасси синего раствор. См. Кислотного синего 90 раствор.

Куркумин. [458-37-7]. С21Н20О6. (М.м. 368,38).

(1E,6E)-1,7-Бис(4-гидрокси-3-метоксифенил)гепта-1,6-диен-3,5-дион.

Кристаллический порошок оранжево-коричневого цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим в уксусной кислоте ледяной, практически нерастворим в эфире.

Температура плавления. Около 183 °С.

Куркумовая бумага.

Бумага должна быть равномерно окрашена в ярко-жёлтый цвет.

Переход окраски бумаги от жёлтой к буро-красной в интервале рН 7,4–9,2 и от буро-красной к оранжево-жёлтой в интервале рН 10,2–11,8.

Срок годности 2 года.

Лавандулол. [498-16-8]. С10Н18О. (М.м. 154,25).

(2R)-5-Метил-2-(проп-1-ен-2-ил)гекс-4-ен-1-ол.

Маслянистая жидкость с характерным запахом.

. Около 0,875.

. Около 1,407.

. Около –10,2 ºС.

Хроматографическая чистота лавандолола, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 98,0%.

Лавандулола ацетат. [25905-14-0]. С12Н20О2. (М.м. 196,29).

[(2R)-5-Метил-2-(проп-1-ен-2-ил)гекс-4-ен-1-ил]ацетат.

Бесцветная жидкость с характерным запахом.

. Около 0,911.

. Около 1,454.

Хроматографическая чистота лавандолола ацетата, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 93,0%.

Лакмоид. [33869-21-5]. С24Н16N2O6. (М.м. 428,39).

7-Амино-2,8-бис(2,4-дигидроксифенил)-3H-феноксазин-3-он.

Порошок чёрно-фиолетового цвета.

Растворим в воде, спирте 96%, ацетоне, уксусной кислоте ледяной.

Переход окраски раствора от красной к синей в интервале рН 4,4–6,4.

Раствор индикатора. 0,2% раствор в спирте 96%. Растворение проводят при нагревании.

Лакмоидная бумага синяя.

Бумага должна быть равномерно окрашена в серо-голубой цвет.

Переход окраски бумаги от бледно-фиолетовой к сероголубой в интервале рН 4,0–6,4.

Срок годности 2 года.

Лакмус. [1393-92-6].

Пигмент сине-фиолетового цвета, полученный из различных видов Rocella, Lecanora или других лишайников.

Растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Переход окраски от красной до синей в интервале рН 5,0–8,0.

Лакмусовая бумага синяя.

10 частей грубо измельченного лакмуса кипятят с 100 частями спирта 96% в течение 1 ч. Спирт декантируют, к остатку прибавляют смесь из 45 частей спирта 96% и 55 частей воды. Через 2 дня прозрачную жидкость декантируют, пропитывают полоски фильтровальной бумаги и сушат.

Испытание на чувствительность. Полоску фильтровальной бумаги размером 10 × 60 мм погружают в смесь 10 мл 0,02 М раствора хлористоводородной кислоты и 90 мл воды. При встряхивании бумага должна приобрести красное окрашивание в течение 45 с.

Лакмусовая бумага красная.

К синему экстракту лакмуса прибавляют по каплям хлористоводородную кислоту разведённую 7,3% до перехода синей окраски в красную. Полоски фильтровальной бумаги пропитывают полученным раствором и сушат.

Испытание на чувствительность. Полоску фильтровальной бумаги размером 10 × 60 мм погружают в смесь 10 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида и 90 мл воды. При встряхивании бумага должна приобрести синее окрашивание в течение 45 с.

Лактобионовая кислота. [96-82-2]. С12Н22О12. (М.м. 358,30).

4-O-β-D-Галактопиранозил-D-глюконовая кислота.

Кристаллический порошок белого цвета.

Легко растворима в воде, практически нерастворима в спирте 96%.

Температура плавления. Около 115 °С.

Лантана(III) нитрат. [10277-43-7]. La(NO3)3·6H2O. (М.м. 433,0).

Нитрат лантана(III), гексагидрат.

Бесцветные кристаллы, расплывающиеся на воздухе.

Легко растворим в воде.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Лантана(III) нитрата раствор 5%.

5,0 г лантана(III) нитрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Лантана(III) нитрата раствор 0,0005 М.

0,2166 г лантана(III) нитрат помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, растворяют в 300 мл воды для хроматографии, прибавляют 1,0 мл азотной кислоты разведённой 4% и доводят объём раствора водой для хроматографии до метки.

Лантана(III) оксид. [1312-81-8]. La2O3. (М.м. 325,81).

Оксид лантана(III).

Аморфный порошок почти белого цвета. Поглощает углерода диоксид из воздуха.

Практически нерастворим в воде, растворим в разведённых минеральных кислотах.

Кальций. Не более 5 ррm.

Лантана(III) хлорида раствор.

К 58,65 г лантана(III) оксида медленно прибавляют 100 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, нагревают до кипения, охлаждают и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Лауриловая кислота. [143-07-7]. C12H24O2. (М.м. 200,32).

Додекановая кислота.

Белый или почти белый кристаллический порошок.

Практически нерастворим в воде, легко растворим в спирте 96%.

Температура плавления. Около 44 °С.

Лауриловый спирт. [112-53-8]. С12Н26О. (М.м. 186,33).

Додекан-1-ол.

. Около 0,820.

Температура кипения. От 24 до 27 °С.

Левоментол. [98167-53-4]. C10H20O. (М.м. 156,27).

(1R,2S,5R)-5-Метил-2-(пропан-2-ил)циклогексанол.

Бесцветные кристаллы или кристаллический порошок с сильным запахом мяты перечной.

Очень легко растворим в спирте 96%, эфире, уксусной кислоте, легко растворим в жидком парафине и жирных маслах, очень мало растворим в воде.

L-Лейцин. [61-90-5]. C6H13NO2. (М.м. 131,17).

(2S)-2-Амино-4-метилпентановая кислота.

Белый или почти белый кристаллический порошок или блестящие хлопья.

Умеренно растворим в воде, практически нерастворим в спирте.

Лецитин. [8002-43-5].

L-α-Фосфатидилхолин.

L-Лизин. [56-87-1]. C6H14N2O2. (М.м. 146,19).

(2S)-2,6-Диаминогексановая кислота.

Кристаллическое вещество.

Растворяется в воде.

. От +24 до +26° (2% в хлористоводородной кислоты растворе 6 М).

Температура плавления. Около 215 °С (с разл.).

Лимонен. [5989-27-5]. С10Н16. (М.м. 136,23).

(4R)-1-Метил-4-(пропен-2-ил)циклогекс-1-ен.

Бесцветная жидкость.

Практически нерастворим в воде, растворим в спирте 96%.

. Около 0,84.

. От 1,471 до 1,474.

. От + 96 до + 106°.

Температура кипения. От 175 до 177 °С.

Хроматографическая чистота лимонена, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 99,0%.

Лимонная кислота. [5949-29-1]. С6Н8О7·Н2О. (М.м. 210,14).

2-Гидроксипропан-1,2,3-трикарбоновая кислота, моногидрат.

Бесцветные прозрачные кристаллы или белый кристаллический порошок. Очень легко растворима в воде, легко растворима в спирте 96%, умеренно растворима в эфире.

При использовании в испытании на железо лимонная кислота должна выдерживать следующее дополнительное испытание.

0,5 г лимонной кислоты растворяют в 10 мл воды, прибавляют 0,1 мл тиогликолевой кислоты, перемешивают, прибавляют раствор аммиака концентрированный до щелочной реакции и доводят объём полученного раствора водой до 20 мл. Раствор не должен окрашиваться в розовый цвет.

Лимонная кислота безводная. [77-92-9]. С6Н8О7. (М.м. 192,12).

2-Гидроксипропан-1,2,3-трикарбоновая кислота.

Белый кристаллический порошок, бесцветные кристаллы или гранулы.

Очень легко растворима в воде, легко растворима в спирте 96%, умеренно растворима в эфире.

Температура плавления. Около 153 °С с разложением.

Лимонной кислоты раствор 1 М.

210,14 г лимонной кислоты (или 192,12 г лимонной кислоты безводной) растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Лимонной кислоты раствор 0,25 М.

52,5 г лимонной кислоты (или 48,0 г лимонной кислоты безводной) растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Лимонной кислоты раствор 0,1 М

21,01 г лимонной кислоты (или 19,21 г лимонной кислоты безводной) растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Лимонной кислоты раствор 0,05 М

10,51 г лимонной кислоты (или 9,61 г лимонной кислоты безводной) растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Лимонной кислоты раствор 10%

10,0 г лимонной кислоты безводной растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Лимонной кислоты раствор 2%

2,0 г лимонной кислоты безводной растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Линалила ацетат. [115-95-7]. С12Н20О2. (М.м. 196,28).

[(3RS)-3,7-Диметилокта-1,6-диен-3-ил]ацетат.

Бесцветная или слегка жёлтая жидкость с сильным запахом бергамота и лаванды.

. От 0,895 до 0,912.

. От 1,448 до 1,451.

Температура кипения. Около 215 °С.

Хроматографическая чистота линалила ацетата, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 95,0%.

Линалол. См. Линалоол.

Линалоол. [78-70-6]. С10Н18О. (М.м. 154,25).

(3RS)-3,7-Диметилокта-1,6-диен-3-ол.

Смесь 2 стереоизомеров (ликареола и кориандрола).

Жидкость. Практически нерастворим в воде, растворим в эфире.

. Около 0,860.

. Около 1,462.

Температура кипения. Около 200 °С.

Хроматографическая чистота линалола, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 96,0%.

Линдан. [58-89-9]. С6H6Cl6. (М.м. 290,83).

(1R,2S,3r,4R,5S,6r)-1,2,3,4,5,6-Гексахлорциклогексан.

Твердый белый порошок.

Мало растворим в воде, растворим в органических растворителях.

Температура кипения. 323 °С.

Температура плавления. 112,8 °С.

Литий. [7439-93-2]. Li. (А.м. 6,941). Литий.

Мягкий металл, на свежем срезе серебристо-серого цвета, при контакте с воздухом быстро становится тусклым. Бурно реагирует с водой с образованием водорода и раствора лития гидроксида.

Растворим в метаноле с образованием водорода и раствора лития метилата; практически нерастворим в эфире и петролейном эфире.

Хранят под петролейным эфиром или жидким парафином.

Лития гидроксид. [1310-66-3]. LiOH·H2O. (М.м. 41,96).

Гидроксид лития, моногидрат. Гранулированный порошок белого цвета. Является сильной щелочью, быстро поглощает воду и углерода диоксид.

Растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Лития карбонат. [554-13-2]. Li2СO3.(М.м. 73,89).

Карбонат лития.

Легкий порошок белого цвета.

Умеренно растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96%. Насыщенный раствор при температуре 20 °С содержит около 13 г/л Li2СO3.

Лития метаборат безводный. [13453-69-5]. LiВO2. (М.м. 49,75).

Метаборат лития.

Белые триклинные кристаллы.

Мало растворим в холодной воде, легко растворим в горячей воде.

Температура плавления. Около 840 °С.

Лития нитрат. [7790-69-4]. LiNO3. (М.м. 68,95).

Нитрат лития.

Бесцветные кристаллы.

Легко растворим в воде и спирте 96%.

Температура плавления. Около 261 °С.

Лития перхлорат. [7791-03-9]. LiClO4. (М.м. 106,39).

Белые кристаллы или кристаллический порошок.

Очень легко растворим в воде, спирте 96% и ацетоне.

Температура плавления. Около 236 °С.

Лития сульфат. [10102-25-7]. Li2SO4·Н2О. (М.м. 127,96).

Сульфат дилития, моногидрат.

Бесцветные кристаллы или белый кристаллический порошок.

Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Лития хлорид. [7447-41-8]. LiСl. (М.м. 42,39).

Хлорид лития.

Кристаллический порошок или гранулы, или кубические кристаллы; расплывается на воздухе.

Легко растворим в воде, растворим в ацетоне и спирте 96%. Водные растворы имеют нейтральную или слабощелочную реакцию.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Люголя раствор.

1 г йода и 2 г калия йодида растворяют в 17 мл воды и хорошо перемешивают.

Лютеолин. [491-70-3]. C15H10O6. (М.м. 286,24).

5,7-Дигидрокси-2-(3,4-дигидроксифенил)-4H-1-бензопиран-4-он.

Лютеолин-7-глюкозид. [5373-11-5]. C21H20O11. (М.м. 448,38).

5-Гидрокси-7-(β-D-глюкопиранозилокси)-2-(3,4-дигидроксифенил)-4H-1-бензопиран-4-он.

Жёлтый порошок.

Спектрометрия. Раствор в метаноле имеет максимумы поглощения при 255 нм, 267 нм и 350 нм.

Температура плавления. Около 247 °С.

Лютеция хлорид гексагидрат. [15230-79-2]. LuCl3·6H2O. (М.м. 389,42).

Хлорид лютеция(III) гексагидрат.

От белого до жёлтого цвета кристаллический порошок.

Легко растворим в воде.

Магнезиальная смесь.

5 г магния хлорида и 7 г аммония хлорида растворяют в воде, прибавляют 35 мл 10% раствора аммиака и воды до 100 мл. Отстаивают в течение 3–5 сут и фильтруют.

Магнезон ХС. С16Н10СlN2NaO5S·H2O. (М.м. 418,8).

2-Гидрокси-3-[(2-гидроксинафталин-1-ил)диазенил]-5-хлорбензолсульфонат натрия, моногидрат.

Порошок красно-коричневого цвета.

Мало растворим в воде, спирте 96% и ацетоне, практически нерастворим в хлороформе и эфире.

В интервале рН 9,8–11,2 имеет сине-фиолетовую окраску, а его комплекс с ионом магния в тех же условиях ярко-красного цвета.

Переход окраски при прямом титровании иона магния от ярко-красной к сине-фиолетовой.

Раствор индикатора. 0,01% раствор в ацетоне.

Срок годности – 2 мес.

Магний. [7439-95-4]. Мg. (А.м. 24,31).

Магний.

Лента или стружка, или проволока серебристо-белого цвета, или порошок серого цвета.

Реагирует с кислотами, растворим в солях аммония, практически нерастворим в разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов.

Магния ацетат. [16674-78-5]. С4Н6МgO4·4Н2О. (М.м. 214,45).

Ацетат магния, тетрагидрат.

Бесцветные кристаллы, расплывающиеся на воздухе. Легко растворим в воде и спирте 96%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Магния ацетата раствор спиртовой 0,5%.

0,5 г магния ацетата растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Срок годности – не более 2 мес при хранении в прохладном, защищённом от света месте.

Магния ацетата раствор метанольный 0,5%.

0,5 г магния ацетата растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Срок годности – не более 2 мес при хранении в прохладном, защищённом от света месте.

Магния нитрат. [13446-18-9]. Mg(NO3)2·6Н2О. (М.м. 256,41).

Нитрат магния, гексагидрат.

Бесцветные прозрачные кристаллы, расплывающиеся на воздухе.

Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Магния нитрата раствор.

17,3 г магния нитрата растворяют при осторожном нагревании в 5 мл воды, прибавляют 80 мл спирта 96%, охлаждают и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Магния оксид. [1309-48-4]. MgO. (М.м. 40,30).

Оксид магния.

Белый, мелкий лёгкий порошок без запаха.

Практически нерастворим в воде, с которой даёт щелочную реакцию на фенолфталеин, растворим в разведённых кислотах с легким шипением.

Магния оксид лёгкий

См. Магния оксид. Насыпная плотность: не более 0,15 г/см3.

Магния оксид тяжёлый

См. Магния оксид. Насыпная плотность: не менее 0,25 г/см3.

Магния сульфат безводный. [7487-88-9]. МgSO4. (М.м. 120,37).

Сульфат магния.

Белый мелкокристаллический порошок.

Очень легко растворим в воде, гигроскопичен.

Магния сульфат гептагидрат. [10034-99-8]. МgSO4·7H2O. (М.м. 246,47).

Сульфат магния, гептагидрат.

Бесцветные призматические кристаллы, выветривающиеся на воздухе.

Легко растворим в воде, очень легко растворим в горячей воде; практически нерастворим в спирте 96%.

Магния сульфата насыщенный раствор.

100 г магния сульфата безводного заливают 100 мл воды и выдерживают в течение 24 ч при частом взбалтывании. Раствор фильтруют.

Магния сульфата раствор 25%

25 г магния сульфата безводного растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Магния сульфата раствор 25% в серной кислоты растворе 1 М

25 г магния сульфата безводного растворяют в серной кислоте 1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Магния сульфата раствор 10%.

10 г магния сульфата безводного растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Магния сульфата аммиачный раствор.

10 г магния сульфата безводного и 20 г аммония хлорида растворяют в 85 мл воды, прибавляют 37 мл 5% раствора аммиака и перемешивают. Полученную смесь выдерживают 4±1 суток в плотно закрытой ёмкости, декантируют и фильтруют.

Магния хлорид. [7791-18-6]. МgCl2·6H2O. (М.м. 203,30).

Хлорид магния, гексагидрат.

Белые кристаллы, на воздухе расплываются.

Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96%.

Магния хлорида раствор 10%.

10 г магния хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Магния перхлорат. [10034-81-8]. Мg(ClO4)2. (М.м. 223,21).

Перхлорат магния.

Гранулы белого цвета. Препарат чрезвычайно притягивает влагу, при нагревании с органическими веществами может дать взрыв.

Легко растворим в воде, очень легко растворим в горячей воде, растворим в спирте 96%, метаноле, ацетоне.

Макрогол 200. [25322-68-3].

α-Гидро-ω-гидроксиполи(оксиэтан-1,2-диил).

Прозрачная, бесцветная или почти бесцветная, вязкая жидкость.

Легко растворим в воде, ацетоне, спирте 96% и метиленхлориде, практически нерастворим в эфире и жирных маслах.

. Около 1,127.

. Около 1,450.

Макрогол 200 очищенный.

500 мл макрогола 200 помещают в круглодонную колбу вместимостью 1000 мл, отгоняют летучие вещества при температуре 60 °С в течение 6 ч, используя ротационный испаритель и вакуум от 1,5 до 2,5 кПа.

Макрогол 300. [25322-68-3].

α-Гидро-ω-гидроксиполи(оксиэтан-1,2-диил).

Макрогол 400. [25322-68-3].

α-Гидро-ω-гидроксиполи(оксиэтан-1,2-диил).

Макрогола 400 раствор спиртовой 5%.

5 мл макрогола 400 смешивают со 100 мл спирта 96%. Срок годности – не более 6 мес при хранении в прохладном, защищённом от света месте.

Макрогол 1000. [25322-68-3].

α-Гидро-ω-гидроксиполи(оксиэтан-1,2-диил).

Макрогол 1500. [25322-68-3].

α-Гидро-ω-гидроксиполи(оксиэтан-1,2-диил).

Макрогол 6000. [25322-68-3].

α-Гидро-ω-гидроксиполи(оксиэтан-1,2-диил).

Белое или почти белое твёрдое вещество воскового или парафиноподобного вида, очень лекго растворимо в воде и в хлористом метилене, практически нерастворимо в спирте 96%, в жирных и минеральных маслах.

Макрогол 20 000.

α-Гидро-ω-гидроксиполи(оксиэтан-1,2-диил).

Макрогол 20 000 2-нитротерефталат.

Поли[(оксиэтан-1,2-диил)-со-(2-нитротерефталоил)]

Макрогол 20000, модифицированный обработкой 2-нитротерефталевой кислотой.

Твердая воскообразная масса белого или почти белого цвета.

Растворим в ацетоне.

Макрогол 20 000 терефталат.

Поли[(оксиэтан-1,2-диил)-со-(терефталоил)]

Макрогол 20 000, модифицированный обработкой терефталевой кислотой.

Макрогол, деактивированный по отношению к основаниям.

Привитый полиэтиленгликоль, деактивированный по отношению к основаниям.

Неподвижная фаза для газовой хроматографии.

Макрогол, деактивированный по отношению к полярным соединениям.

Привитый полиэтиленгликоль, деактивированный по отношению к полярным соединениям.

Неподвижная фаза для газовой хроматографии.

Макрогола лауриловый эфир. [9002-92-0]. С12Н26O(С2Н4O)n.

α-Додецил-ω-гидроксиполи(оксиэтан-1,2-диил).

Малатион. [121-75-5]. C10H19O6PS2. (М.м. 330,36).

Диэтил(2-{[бис(метокси)фосфоротионил]сульфанил}бутандиоат).

Температура кипения. Около 156 °С.

Малахитовый зеленый. [569-64-2]. С23Н25СlN2. (М.м. 364,91).

4-{[4-(Диметиламино)фенил](фенил)метилен}-N,N-диметилциклогекса-2,5-диен-1-иминий хлорид.

Кристаллы зеленого цвета с металлическим блеском.

Очень легко растворим в воде с образованием раствора синевато-зеленого цвета, растворим в спирте 96% и метаноле.

Раствор 0,01 г/л в спирте 96% имеет максимум поглощения при длине волны 617 нм.

Малахитового зеленого раствор 0,5%. Раствор 5 г/л в уксусной кислоте безводной.

Малахитового зеленого спиртовой раствор 0,1%.

0,1 г малахитового зеленого растворяют в 20 мл спирта 96% и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Малеиновая кислота. [110-16-7]. C4Н4О4. (М.м. 116,07).

(2Z)-Бут-2-ендиовая кислота.

Содержит не менее 99,0% С4Н4О4.

Белый кристаллический порошок.

Легко растворим в воде и спирте 96%, умеренно растворим в эфире.

Малеиновый ангидрид. [108-31-6]. С4Н2О3. (М.м. 98,06).

Фуран-2,5-дион.

Кристаллы белого цвета.

Растворим в воде с образованием малеиновой кислоты, очень легко растворим в ацетоне и этилацетате, легко растворим в толуоле, растворим в спирте 96% с образованием сложного эфира, очень мало растворим в петролейном эфире.

Температура плавления. Около 52 °С.

Любой остаток, не растворимый в толуоле, не должен превышать 5% (малеиновая кислота).

Малеинового ангидрида раствор 5%.

5 г малеинового ангидрида растворяют в толуоле и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Срок годности 1 мес. Раствор в случае помутнения фильтруют.

Мальтит. [585-88-6]. C12H24O11. (М.м. 344,31).

4-O-(α-D-Глюкопиранозил)-D-глюцит.

Содержит не менее 98% C12H24O11.

Белый или почти белый кристаллический порошок.

Очень легко растворим в воде, правктически нерастворим в этаноле.

Температура плавления. От 148 до 151 °С.

. От +105,5 до +108,5 (5% раствор в воде).

Маннит. См. Маннитол.

Маннитол. [69-65-8]. С6Н14О6. (М.м. 182,17).

D-Маннитол.

Белый или почти белый кристаллический порошок, легкие гранулы.

Легко растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96%.

Маннитола раствор 20%.

20,0 г маннитола растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Манноза. [3458-28-4]. С6Н12О6. (М.м. 180,16).

D-Маннопираноза.

Кристаллический или мелкокристаллический порошок белого цвета.

Очень легко растворима в воде, мало растворима в этаноле.

. От +13,7 до +14,7 (20% раствор в воде, содержащей около 0,05% NH3).

Температура плавления. Около 132 °С с разложением.

Марганца(IV) оксид. [1313-13-9]. MnO2 (М.м. 86,94).

Оксид марганца(IV).

Тёмно-коричневый порошок.

Нерастворим в воде, азотной кислоте и ацетоне. Реагирует в хлористоводородной кислоте.

Марганца(II) сульфат. [10034-96-5]. МnSO4·H2O. (М.м. 169,02).

Сульфат марганца(II), моногидрат.

Кристаллический порошок или кристаллы бледно-розового цвета.

Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Потеря в массе после прокаливания. От 10,0% до 12,0%. Определение проводят из 1,000 г при температуре 500 °С.

Масляная кислота. [107-92-6]. С4Н8О2. (М.м. 88,11).

Бутановая кислота.

Содержит не менее 99,0% С4Н8О2.

Маслянистая жидкость. Смешивается с водой, спиртом 96%.

. Около 0,96.

. Около 1,398.

Температура кипения. Около 163 °С.

Меглюмин. [6284-40-8]. C7H17NO5. (М.м. 195,21).

1-Дезокси-1-(метиламино)-D-глюцит.

Белый или почти белый кристаллический порошок.

Легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96%, практически нерастворим в метиленхлориде.

. От –15,7 до –17,3 (10% раствор в воде).

Температура плавления. 128–132 °С.

Меди(II) ацетат. [6046-93-1]. С4Н6CuO4·H2O. (М.м. 199,65).

Ацетат меди(II), моногидрат.

Кристаллы или порошок голубовато-зеленого цвета.

Легко растворим в кипящей воде, растворим в воде и спирте 96%, мало растворим в эфире и глицерине 85%.

Меди(II) ацетата раствор 5%.

5,0 г меди(II) ацетата растворяют в воде, подкисленной несколькими миллилитрами уксусной кислоты, и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Меди(II) нитрат. [10031-43-3]. Сu(NO3)2·3H2O. (М.м. 241,62).

Нитрат меди(II), тригидрат.

Кристаллы синего цвета.

Очень легко растворим в воде, спирте 96% и кислоте азотной разведённой. Водный раствор имеет сильно кислую реакцию.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Меди(II) нитрата раствор 5%.

5,0 г меди(II) нитрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Меди(II) сульфат безводный. [7758-98-7]. СuSO4. (М.м. 159,61).

Зеленовато-серый порошок. Гигроскопичен.

Легко растворим в воде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в спирте 96%.

Меди(II) сульфат. [7758-99-8]. СuSO4·5H2O. (М.м. 249,69).

Сульфат меди(II), пентагидрат.

Порошок или кристаллы синего цвета. Медленно выветривается на воздухе. Очень легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Меди(II) cульфата раствор 12,5%

12,5 г меди(II) сульфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Меди(II) сульфата раствор 10%

10,0 г меди(II) сульфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Меди(II) сульфата раствор 5%

5,0 г меди(II) сульфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Меди(II) cульфата раствор 1,25%

1,25 г меди(II) сульфата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Меди(II) cульфата раствор 0,5%

0,5 г меди(II) сульфата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Меди(II) cульфата раствор 0,4%

0,4 г меди(II) сульфата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Меди тетрааммиаката аммиачный раствор

34,5 г меди(II) сульфата растворяют в 100 мл воды, прибавляют при перемешивании по каплям раствор аммиака концентрированный до растворения образовавшегося осадка. Поддерживая температуру ниже 20 °С, при непрерывном встряхивании прибавляют по каплям 30 мл 20% раствора натрия гидроксида. Фильтруют через стеклянный фильтр (40), промывают водой до получения прозрачного фильтрата. Встряхивают с 200 мл раствора аммиака концентрированного и фильтруют через стеклянный фильтр, затем повторно фильтруют, чтобы уменьшить осадок до минимума.

Меди(I) хлорид. [7758-89-6]. CuCl (М.м. 99,00).

Хлорид меди(I).

Серовато-белый или серовато-зеленый порошок.

Практически нерастворим в воде, растворим в хлористоводородной кислоте концентрированной и растворе аммиака концентрированном.

Меди(I) хлорида раствор

К 1,25 г меди(I) хлорида прибавляют 1 г натрия метабисульфита и 100 мл 10% раствора аммония хлорида.

Меди(II) хлорид. [10125-13-0]. CuCl2·2H2O.(М.м. 170,48).

Хлорид меди(II), дигидрат.

Порошок или кристаллы зеленовато-голубого цвета, расплывающиеся на воздухе, выветриваются в сухом воздухе.

Легко растворим в воде, спирте 96% и метаноле, умеренно растворим в ацетоне, мало растворим в эфире.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Меди(II) хлорида раствор 3%

Растворяют 0,75 г меди(II) хлорида и 1,5 г аммония хлорида в небольшом количестве воды. К раствору прибавляют 1,5 мл 25% концентрированного раствора аммиака и доводят объём раствора водой до 25,0 мл.

Меди(II) хлорида раствор 0,05% в метаноле

Растворяют 50 мг меди(II) хлорида в метаноле и доводят объём раствора метанолом до 100 мл.

Меди эдетата раствор

К 2 мл 2% раствора меди(II) ацетата прибавляют 2 мл 0,1 М раствора натрия эдетата и доводят объём раствора водой до 50,0 мл.

Медно-тартратный реактив

Раствор I. 34,6 г меди(II) сульфата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 500,0 мл.

Раствор II. 173 г калия-натрия тартрата и 50 г натрия гидроксида растворяют в 400 мл воды. Нагревают до кипения, охлаждают, доводят объём полученного раствора водой, свободной от углерода диоксида, до 500,0 мл.

Непосредственно перед использованием смешивают равный объёмы растворов I и II.

5 мл реактива разводят 5 мл воды и нагревают до кипения. Раствор должен оставаться прозрачным и не выделять даже следов осадка.

Медно-цитратный раствор

25 г меди(II) сульфата, 50 г лимонной кислоты и 144 г натрия карбоната безводного растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Медь. [7440-50-8]. Cu. (А.м. 63,55).

Медь.

Фольга очищенная, стружка, проволока или металлический порошок электролитической чистоты.

Мезитилоксид. [141-79-7]. С6Н10О. (М.м. 98,14).

4-Метилпент-3-ен-2-он.

Бесцветная маслянистая жидкость.

Растворим в 30 частях воды, смешивается с большинством органических растворителей.

. Около 0,858.

Температура кипения. От 129 до 130 °С.

Меламин. [108-78-1]. С3Н6N6. (М.м. 126,14).

1,3,5-Триазин-2,4,6-триамин.

Аморфный порошок белого цвета.

Очень мало растворим в воде и спирте 96%.

Ментилацетат. [2623-23-6]. С12Н22О2. (М.м. 198,30).

[(1R,2S,5R)-5-Метил-2-(пропан-2-ил)циклогексил]ацетат.

Бесцветная жидкость.

Мало растворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. Около 0,92.

. Около 1,447.

Температура кипения. Около 225 °С.

Хроматографическая чистота ментилацетата, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 98,0%.

Ментол рацемический. [89-78-1].C10H20O. (М.м. 156,27).

rac-(1R,2S,5R)-5-Метил-2-(пропан-2-ил)циклогексанол.

Бесцветные кристаллы или белый кристаллический порошок или плавящаяся масса с сильным запахом мяты перечной.

Очень легко растворим в спирте 96%, эфире, уксусной кислоте, легко растворим в жидком парафине и жирных маслах, очень мало растворим в воде.

Ментон. [14073-97-3]. С10Н18О. (М.м. 154,25).

(2S,5R)-5-Метил-2-(пропан-2-ил)циклогексанон.

Содержит различные количества изоментона.

Бесцветная жидкость.

Очень мало растворим в воде, очень легко растворим в спирте 96% и эфире.

. Около 0,897.

. Около 1,450.

Хроматографическая чистота ментона, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 90,0%.

Ментофуран. [17957-94-7]. С10Н14О. (М.м. 150,22).

(6R)-3,6-Диметил-4,5,6,7-тетрагидробензофуран.

Жидкость слегка синеватого цвета.

Очень мало растворим в воде, растворим в спирте 96%.

. Около 0,965.

. Около 1,480.

. Около + 93°.

Температура кипения. Около 196 °С.

Хроматографическая чистота ментофурана, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 97,0%.

3-Меркаптопропионовая кислота. [107-96-0]. C3H6O2S. (М.м. 106,14).

3-Сульфанилпропановая кислота.

Прозрачная бесцветная маслянистая жидкость.

. Около 1,218.

Температура плавления. От 17 до 19 °С.

Температура кипения. Около 110 °С (15 мм. рт. ст.).

Меркаптопурин моногидрат. [6112-76-1]. C5H4N4S·H2O. (М.м. 170,19).

7H-Пурин-6-тиол моногидрат.

Содержит не менее 98,0% C5H4N4S·H2O.

Температура плавления. Выше 300 °С.

2-Меркаптоэтанол. [60-24-2]. С2Н6ОS. (М.м. 78,13).

2-Сульфанилэтан-1-ол.

Жидкость. Смешивается с водой.

. Около 1,116.

Температура кипения. Около 157 °С.

Месалазин. [89-57-6]. С7Н7NO3. (М.м. 153,14).

5-Амино-2-гидроксибензойная кислота.

Почти белый или светло-серый или светло-розовый порошок или кристаллы.

Очень мало растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Растворяется в разбавленных растворах щёлочей и в разбавленной хлористоводородной кислоте.

Метакриловая кислота. [79-41-4]. С4Н6О2. (М.м. 86,09).

2-Метилпроп-2-еновая кислота.

Бесцветная жидкость.

Растворима в воде, смешивается с этанолом и эфиром.

. Около 1,431.

Температура кипения. Около 160 °С.

Температура плавления. Около 16 °С.

Метаниловый жёлтый. [587-98-4]. С18Н14N3NaO3S. (М.м. 375,38).

3-{[4-(Фениламино)фенил]диазенил}бензолсульфонат натрия.

Порошок коричневато-жёлтого цвета.

Растворим в воде и спирте 96%, очень мало растворим в эфире.

Метанилового жёлтого раствор 0,1%.

Раствор 1 г метанилового жёлтого в 1000,0 мл метанола.

Испытание на чувствительность. К 50 мл уксусной кислоты безводной прибавляют 0,1 мл раствора метанилового жёлтого; появляется розовато-красное окрашивание, которое должно перейти в фиолетовое при прибавлении 0,05 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты.

Переход окраски от красной до оранжево-жёлтой в интервале рН 1,2–2,3.

Метанол. [67-56-1]. СН4О. (М.м. 32,04). Метанол.

Спирт метиловый абсолютированный.

Содержание метанола не менее 99,8%.

Прозрачная, бесцветная, воспламеняющаяся жидкость.

Смешивается с водой и спиртом 96%.

. От 0,791 до 0,793.

Температура кипения. От 64 до 65 °С.

Метанол особой чистоты.

Должен выдерживать требования для метанола и следующее дополнительное испытание.

Минимальное пропускание. 20% при длине волны 210 нм; 50% при длине волны 220 нм; 75% при длине волны 230 нм; 95% при длине волны 250 нм; 98% при длине волны 260 нм и более.

Определение проводят, используя в качестве раствора сравнения воду.

Метанол для жидкостной хроматографии.

Метанол, используемый в жидкостной хроматографии, должен выдерживать следующие дополнительные испытания.

Содержит не менее 99,8% СН4О.

Оптическая плотность. Не более 0,17. Измеряют при длине волны 225 нм, используя в качестве раствора сравнения воду.

Метанол подкисленный.

1,0 мл хлористоводородной кислоты 25% доводят метанолом до 100,0 мл.

Метанол безводный. [67-56-1]. Метанол абсолютированный. Спирт метиловый абсолютированный.

Содержание метанола не менее 99,8%.

1000 мл метанола обрабатывают 5 г магния. Если необходимо, инициируют реакцию, прибавляя 0,1 мл 5,4% раствора ртути(II) хлорида. После прекращения выделения газа жидкость перегоняют, отгон собирают в сухую ёмкость и защищают от влаги.

Вода. Не более 0,3 г/л.

Метанол, свободный от альдегидов.

25 г йода растворяют в 1 л метанола, полученный раствор прибавляют при постоянном перемешивании к 400 мл 1 М раствора натрия гидроксида, затем прибавляют 150 мл воды и выдерживают в течение 16 ч. Фильтруют и кипятят с обратным холодильником до исчезновения запаха йодоформа. Раствор подвергают фракционной перегонке.

Содержит не более 0,001% альдегидов и кетонов.

Метанол, очищенный от карбонилсодержащих примесей.

1 л метилового спирта нагревают в течение 3 ч с 10 г 2,4-динитрофенилгидразина и 2 мл хлористоводородной кислоты концентрированной с обратным холодильником при температуре 100 °С. Затем метиловый спирт 2 раза перегоняют, собирая фракции, кипящие при температуре 64,5 °С.

25 мл спирта помещают в колбу вместимостью 300 мл, прибавляют 75 мл раствора 2,4-динитрофенилгидразина, нагревают при температуре 100 °С с обратным холодильником в течение 24 ч, спирт отгоняют, доводят 2% раствором серной кислоты до 200,0 мл и выдерживают в течение 24 ч. Не должны образовываться кристаллы (альдегиды).

Метанол 90%.

Смешивают 90 мл метанола и 10 мл воды.

Метанол 80%.

Смешивают 80 мл метанола и 20 мл воды.

Метанол 70%.

Смешивают 70 мл метанола и 30 мл воды.

Метанол 60%.

Смешивают 60 мл метанола и 40 мл воды.

Метанол 50%.

Смешивают равные объёмы метанола и воды.

Метансульфоновая кислота. [75-75-2]. СН4О3S. (М.м. 96,11).

Метансульфоновая кислота.

Прозрачная, бесцветная жидкость, затвердевающая при температуре около 20 °С.

Смешивается с водой, мало растворима в толуоле, практически нерастворима в гексане.

. Около 1,48.

. Около 1,430.

Метафосфорная кислота. [37267-86-0]. (НРО3)n.

Метафосфорная кислота.

Стекловидные комочки или палочки, содержащие определенное количество натрия метафосфата. Гигроскопична.

Очень легко растворима в воде, растворима в спирте 96%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Метафосфорной кислоты раствор 3%.

3,0 г метафосфорной кислоты растворяют в воде для хроматографии и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Метафосфорной кислоты раствор 3% в уксусной кислоте.

3,0 г измельчённой метафосфорной кислоты растворяют в 40 мл уксусной кислоты ледяной при нагревании. Раствор охлаждают, переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Метил-4-аминобензоат. [619-45-4]. C8H9NO2. (М.м. 151,16).

Метил(4-аминобензоат).

Температура плавления. От 110 до 113 °С.

Метил-4-ацетилбензоат. [3609-53-8]. C10H10O3. (М.м. 178,18).

Метил(4-ацетилбензоат).

Температура плавления. Около 94 °С.

Метил-4-ацетилбензоата реактив

0,25 г метил-4-ацетилбензоата растворяют в смеси 5 мл серной кислоты концентрированной и 85 мл охлаждённого метанола.

3-(Метиламино)-1-фенилпропан-1-ол. [42142-52-9]. C10H15NO.

(М.м. 165,23).

Белый или почти белый порошок.

Температура плавления. От 59 до 64 °С.

4-Метиламинофенола сульфат. См. Метол.

Метилантранилат. [134-20-3]. С8Н9NО2. (М.м. 151,16).

Метил(2-аминобензоат).

Бесцветные кристаллы или жидкость от бесцветного до жёлтоватого цвета. Растворим в воде, легко растворим в спирте 96% и эфире.

Температура плавления. От 24 до 25 °С.

Температура кипения. 256 °С.

Хроматографическая чистота метилантранилата, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 95,0%.

Метиларахидат. [1120-28-1]. С21Н42О2. (М.м. 326,56).

Метилэйкозаноат.

Содержит не менее 98,0% С21Н42О2. Определение проводят методом газовой хроматографии.

Кристаллическая масса от белого до жёлтого цвета.

Растворим в спирте 96% и петролейном эфире.

Температура плавления. Около 46 °С.

Метилацетат. [79-20-9]. С3Н6О2. (М.м. 74,08).

Метилацетат.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Растворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. Около 0,933.

. Около 1,361.

Температура кипения. От 56 до 58 °С.

Метилбегенат. [929-77-1]. С23Н46О2. (М.м. 354,61).

Метилдокозаноат.

Кристаллы или кристаллический порошок.

Практически нерастворим в воде, растворим в этаноле и эфире.

Температура плавления. От 54 до 55 °С.

(R)-(+)-α-Метилбензилизоцианат. [33375-06-3]. C9H9NO. (М.м. 147,17).

[(1R)-1-Изоцианатоэтил]бензол.

Содержит не менее 99,0% C9H9NO.

Энантиомерная чистота не менее 99%.

Бесцветная жидкость.

. Около 1,045.

. Около 1,514.

Температура кипения. От 55 до 56 °С при 2,5 мм.рт.ст.

Хранить при температуре от 2 до 8 °С.

(S)-(–)-α-Метилбензилизоцианат. [14649-03-7]. C9H9NO. (М.м. 147,17).

[(1S)-1-Изоцианатоэтил]бензол.

Содержит не менее 99,0% C9H9NO.

Энантиомерная чистота не менее 99%.

Бесцветная жидкость.

. Около 1,045.

. Около 1,514.

Температура кипения. От 55 до 56 °С при 2,5 мм.рт.ст.

Хранить при температуре от 2 до 8 °С.

Метилбензоат. [93-58-3]. C8H8O2. (М.м. 136,15).

Метилбензоат.

Бесцветная жидкость.

.1,088

Температура кипения. Около 200 °С.

Метилбензолсульфонат. [80-18-2]. С7H8O3S. (М.м. 172,20).

Метил(бензолсульфонат).

Прозрачная бесцветная жидкость.

Температура кипения. Около 148 °С.

Метилбензотиазолонгидразона гидрохлорид. [38894-11-0].

С8Н9N3S·HCl·H2O. (М.м. 233,72).

2-Гидразинилиден-3-метил-2,3-дигидро-1,3-бензотиазола гидрохлорид, моногидрат.

Кристаллический порошок почти белого или жёлтоватого цвета.

Растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96%.

Температура плавления. Около 270 °С.

2-Метилбутан. [78-78-4]. С5Н12. (М.м. 72,15).

2-Метилбутан.

Содержит не менее 99,5% С5Н12.

Бесцветная, легко воспламеняющаяся жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается с этанолом и эфиром.

. Около 0,621.

. Около 1,354.

Температура кипения. Около 29 °С.

Вода. Не более 0,02%.

Остаток после выпаривания. Не более 0,0003%.

Минимальное пропускание. 50% при длине волны 210 нм; 85% при длине волны 220 нм; 98% при длине волны 240 нм и более.

Определение проводят, используя в качестве раствора сравнения воду.

2-Метилбут-2-ен. [513-35-9]. С5Н10. (М.м. 70,13).

2-Метилбут-2-ен.

Очень легко воспламеняющаяся жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

Температура кипения. От 37,5 до 38,5 °С.

Метилдеканоат. [110-42-9]. С11Н22О2. (М.м. 186,29).

Метилдеканоат.

Содержит не менее 99,0% С11Н22О2.

Прозрачная, бесцветная или жёлтого цвета жидкость.

Растворим в петролейном эфире, практически нерастворим в воде, легко растворим в этаноле и эфире.

. От 0,871 до 0,876.

. От 1,425 до 1,426.

Метилдокозаноат. См. Метилбегенат.

3-О-Метилдопамина гидрохлорид. [1477-68-5]. С9Н13NО2∙HCl. (М.м. 203,67).

4-(2-Аминоэтил)-2-метоксифенола гидрохлорид.

Температура плавления. От 213 до 215 °С.

4-О-Метилдопамина гидрохлорид. [645-33-0]. С9Н13NО2∙HCl. (М.м. 203,67).

5-(2-Аминоэтил)-2-метоксифенола гидрохлорид.

Температура плавления. От 207 до 208 °С.

Метиленбисакриламид. [110-26-9]. С7Н10N2O2. (М.м. 154,17).

N,N′-Метиленбис(проп-2-енамид).

Очень мелкий порошок белого или почти белого цвета.

Мало растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Температура плавления. 300 °С с разложением.

Метиленовый синий. [7220-79-3]. С16Н18СlN3S·3Н2О. (М.м. 373,90).

3,7-Бис(диметиламино)-5λ4-фенотиазин-5-ий хлорид, тригидрат.

Кристаллический порошок тёмно-зеленого или бронзового цвета.

Легко растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Метиленового синего раствор 1%

0,1 г метиленового синего растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 10,0 мл.

Метиленового синего раствор 0,25%

0,25 г метиленового синего растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Метиленового синего раствор 0,15%

0,15 г метиленового синего растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Метиленового синего раствор 0,1%

0,1 г метиленового синего растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Метиленового синего раствор 0,02%

20 мг метиленового синего растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Метиленового синего спиртовой раствор 0,1%

0,1 г метиленового синего растворяют в 100 мл спирта 96%.

Метиленового синего спиртовой раствор 0,05%

50 мг метиленового синего растворяют в 100 мл спирта 96%.

Метиленхлорид. [75-09-2]. СН2Сl2. (М.м. 84,93).

Дихлорметан.

Бесцветная жидкость.

Умеренно растворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

Температура кипения. От 39 до 42 °С.

Метиленхлорид, используемый в флуориметрии, должен выдерживать следующее дополнительное испытание.

Флуоресценция. При облучении светом с длиной волны 365 нм поглощение, измеренное при длине волны 460 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должно быть интенсивнее флуоресценции раствора, содержащего 0,002 ррm хинина в 0,5 М растворе серной кислоты, измеренного в тех же условиях.

Метиленхлорид подкисленный.

К 100 мл метиленхлорида прибавляют 10 мл кислоты хлористоводородной концентрированной, встряхивают. После разделения слоев используют нижний слой.

Метилизобутилкетон. [108-10-1]. С6Н12О. (М.м. 100,16).

4-Метилпентан-2-он.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Мало растворим в воде, смешивается с большинством органических растворителей.

. Около 0,80.

Температура кипения. Около 115 °С.

Температурные пределы перегонки. Перегоняют 100 мл. Интервал температуры перегонки не должен превышать 4,0 °С; должно перегоняться от 1 до 95 мл.

Остаток после выпаривания. Не более 0,01%. Выпаривают при температуре 100 °С, остаток сушат при температуре от 100 до 105 °С.

Метилизобутилкетон очищенный.

50 мл свежеперегнанного метилизобутилкетона встряхивают с 0,5 мл хлористоводородной кислоты 25% в течение 1 мин. После разделения слоев нижний слой отбрасывают.

Готовят непосредственно перед использованием.

Метилкаприлат. [111-11-5]. С9Н18О2. (М.м. 158,24).

Метилоктаноат.

Бесцветная или жёлтоватая жидкость.

Практически нерастворим в воде; легко растворим в этаноле и эфире.

. Около 0,876.

. Около 1,417.

Температура кипения. От 193 до 194 °С.

Метилкапринат. См. Метилдеканоат.

Метилкапроат. [106-70-7]. С7Н14О2. (М.м. 130,18).

Метилгексаноат.

Бесцветная или жёлтоватая жидкость.

Практически нерастворим в воде, легко растворим в этаноле и эфире.

.Около 0,885.

. Около 1,405.

Температура кипения. От 150 до 151 °С.

Метиллаурат. [111-82-0]. С13Н26О2. (М.м. 214,34).

Метилдодеканоат.

Содержит не менее 98,0% С13Н26О2. Определение проводят методом газовой хроматографии.

Бесцветная или жёлтого цвета жидкость.

Растворим в спирте 96% и петролейном эфире.

. Около 0,87.

. Около 1,431.

Температура плавления. Около 5 °С.

Метиллигноцерат. [2442-49-1]. С25Н50О2. (М.м. 382,66).

Метилтетракозаноат.

Жёлтоватые хлопья.

Практически нерастворим в воде, растворим в этаноле и эфире.

Температура плавления. Около 58 °С.

Метиллинолеат. [112-63-0]. С19Н34О2. (М.м. 294,47).

Метил[(9Z,12Z)-октадека-9,12-диеноат].

Жёлтоватая маслянистая жидкость.

Практически нерастворим в воде, растворим в этаноле, легко растворим в эфире.

. Около 0,888.

. Около 1,466.

Температура кипения. От 207 до 208 °С.

Метиллиноленат. [301-00-8]. С19Н32О2. (М.м. 292,46).

Метил[(9Z,12Z,15Z)-октадека-9,12,15-триеноат].

Жёлтоватая маслянистая жидкость.

Практически нерастворим в воде, растворим в этаноле и эфире.

. Около 0,901.

. Около 1,471.

Температура кипения. Около 207 °С.

Метилмаргарат. [1731-92-6]. С18Н36О2. (М.м. 284,48).

Метилгептадеканоат.

Бесцветные или почти бесцветные пластинки.

Практически нерастворим в воде, растворим в этаноле и эфире.

Температура плавления. От 32 до 34 °С.

Метилметакрилат. [80-62-6]. С5Н8О2. (М.м. 100,12).

Метил(2-метилпроп-2-еноат).

Бесцветная жидкость.

Очень мало растворим в воде, смешивается с этанолом и эфиром.

. Около 1,414.

Температура кипения. Около 100 °С.

Температура плавления. Около–48 °С.

Содержит подходящий стабилизирующий реагент.

Метилмиристат. [124-10-7]. С15Н30О2. (М.м. 242,40).

Метилтетрадеканоат.

Содержит не менее 98,0% С15Н30О2. Определение проводят методом газовой хроматографии.

Бесцветная или слабо-жёлтого цвета жидкость.

Растворим в спирте 96% и петролейном эфире, практически нерастворим в воде.

. Около 0,87.

. Около 1,437.

Температура плавления. Около 20 °С.

Температура кипения. Около 156 °С.

2-Метил-5-нитроимидазол. [88054-22-2]. С4Н5N3O2. (М.м. 127,10).

2-Метил-5-нитроимидазол.

Порошок от белого до светло-жёлтого цвета.

Температура плавления. От 252 до 254 °С.

Метиловый жёлтый. См. Диметиловый жёлтый.

Метиловый зеленый. [82-94-0]. С26Н33Сl2N3. (М.м. 458,5).

4-{[4-(Диметиламино)фенил][4-(диметилиминиумил)циклогекса-2,5-диен-1-илиден]метил}-N,N,N-триметиланилиния дихлорид.

Порошок зеленого цвета.

Растворим в воде, растворим в серной кислоте концентрированной с образованием жёлтого окрашивания, переходящего в зеленое при разведении водой.

Метилового зеленого-йодомеркуратная бумага.

Тонкие полоски подходящей фильтровальной бумаги погружают в 4% раствор метилового зеленого, сушат на воздухе, затем погружают их в течение 1 ч в раствор, содержащий 140 г/л калия йодида и 200 г/л ртути(II) йодида. Полоски промывают водой дистиллированной до тех пор, пока промывные воды не станут практически бесцветными, и сушат на воздухе.

Хранят в защищённом от света месте.

Срок годности 2 сут.

Метиловый красный. [493-52-7]. С15Н15N3О2. (М.м. 269,30).

2-{[4-(Диметиламино)фенил]диазенил}бензойная кислота.

Порошок тёмно-красного цвета или кристаллы фиолетового цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим в спирте 96 % при нагревании, растворим в разведённых растворах гидроксидов и углекислых солей щелочных металлов.

Метилового красного раствор 0,05%.

50 мг растворяют в смеси 1,86 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида и 50 мл спирта 96%, доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Испытание на чувствительность. К 100 мл воды, свободной от углерода диоксида, прибавляют 0,1 мл раствора метилового красного и 0,05 мл 0,02 М раствора хлористоводородной кислоты; появляется красное окрашивание, которое должно перейти в жёлтое при прибавлении не более 0,1 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида.

Переход окраски от красной до жёлтой в интервале рН 4,4–6,0.

Метилового красного раствор 0,04%.

0,1 г метилового красного растворяют в 18,6 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой, свободной от углерода диоксида, до 250,0 мл. Переход окраски от красной к жёлтой в интервале pH 4,2–6,2.

Метилового красного спиртовой раствор 0,2%.

0,2 г метилового красного растворяют в 100 мл спирта 60%. Срок годности – 6 месяцев.

Метилового красного спиртовой раствор 0,1%.

0,1 г метилового красного растворяют в 100,0 мл спирта 96%.

Переход окраски от красной к жёлтой в интервале рН 4,2–6,2.

Метилового красного смешанный раствор.

0,1 г метилового красного и 50 мг метиленового синего растворяют в 100,0 мл спирта 96%.

Переход окраски от красно-фиолетовой до зеленой в интервале рН 5,2–5,6.

Метиловый оранжевый. [547-58-0]. С14Н14N3NaО3S. (М.м. 327,33).

4-{[4-(Диметиламино)фенил]диазенил}бензолсульфонат натрия.

Кристаллический порошок оранжево-жёлтого цвета.

Мало растворим в воде, легко растворим в горячей воде, практически нерастворим в спирте 96%, других органических растворителях.

Метилового оранжевого смешанный раствор.

20 мг метилового оранжевого и 0,1 г бромкрезолового зеленого растворяют в 1 мл 0,2 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Переход окраски от оранжевой до жёлтовато-зеленой в интервале рН 3,0–4,4.

Метилового оранжевого раствор 0,1%.

0,1 г метилового оранжевого растворяют в горячей воде, охлаждают и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Испытание на чувствительность. К 100 мл воды, свободной от углерода диоксида, прибавляют 0,1 мл раствора метилового оранжевого; появляется жёлтое окрашивание, которое должно перейти в красное при прибавлении не более 0,1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты.

Переход окраски от красной до жёлтой в интервале рН 3,0–4,4.

Метилового оранжевого спиртовой раствор 0,1%.

0,1 г метилового оранжевого растворяют в 80 мл воды и доводят объём раствора спиртом 96% до 100,0 мл.

Испытание на чувствительность. К 100 мл воды, свободной от углерода диоксида, прибавляют 0,1 мл раствора метилового оранжевого; появляется жёлтое окрашивание, которое должно перейти в красное при прибавлении не более 0,1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты.

Переход окраски от красной до жёлтой в интервале рН 3,0–4,4.

Метилового оранжевого раствор в ацетоне.

0,025 г метилового оранжевого растворяют в 100 мл ацетона. Раствор встряхивают периодически в течение 1 ч, затем фильтруют.

Переход окраски от красной до жёлтой в интервале pH 3,0–4,4.

Метиловый фиолетовый. [8004-87-3]. С24Н28ClN3. (М.м. 393,95).

4-{[4-(Диметиламино)фенил][4-(метилимино)циклогекса-2,5-диен-1-илиден]метил}-N,N-диметиланилина гидрохлорид.

Кристаллический порошок с неоднородной (по размеру) формой частиц зеленого цвета с металлическим блеском.

Растворим в воде, растворах неорганических кислот и разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов.

Переход окраски раствора от жёлтой к зеленой в интервале рН 0,1–1,5 и от зеленой к фиолетовой в интервале рН 1,5–3,2.

Метилового фиолетового раствор 0,1%.

0,1 г метилового фиолетового растворяют в 100,0 мл воды.

Метилового фиолетового уксуснокислый раствор.

0,1 г метилового фиолетового растворяют в 100,0 мл уксусной кислоты ледяной.

Используют свежеприготовленным.

Метилолеат. [112-62-9]. С19Н36О2. (М.м. 296,49).

Метил[(9Z)-октадец-9-еноат].

Содержит не менее 98,0% С19Н36О2. Определение проводят методом газовой хроматографии.

Бесцветная или слабо-жёлтого цвета маслянистая жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается с этанолом и эфиром.

. Около 0,88.

. Около 1,452.

Температура кипения. Около 216 °С.

Метилпальмитат. [112-39-0]. С17Н34О2. (М.м. 270,45).

Метилгексадеканоат.

Содержит не менее 98,0% С17Н34О2. Определение проводят методом газовой хроматографии.

Кристаллическая масса белого или жёлтого цвета.

Растворим в спирте 96% и петролейном эфире, практически нерастворим в воде.

Температура плавления. Около 30 °С.

Метилпальмитолеат. [1120-25-8]. С17Н32О2. (М.м. 268,43).

Метил[(9Z)-9-гексадеценоат].

Жёлтоватая жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается с этанолом и эфиром.

. Около 0,876.

. Около 1,451.

Метилпарагидроксибензоат. [99-76-3]. С8Н8О3. (М.м. 152,15).

Метил(4-гидроксибензоат).

Белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Очень мало растворим в воде, легко растворим в спирте 96% и метаноле.

Температура плавления. От 125 до 128 °С.

3-Метилпентан-2-он. [565-61-7]. C6H12O. (М.м. 100,16).

Бесцветная, воспламеняющаяся жидкость.

. about 0.815.

. about 1.400.

Температура кипения. Около 118 °C

4-Метилпентан-2-ол. [108-11-2]. С6Н14О. (М.м. 102,17).

4-Метилпентан-2-ол.

Прозрачная, бесцветная, летучая жидкость.

Растворим в воде, смешивается с этанолом и эфиром.

. Около 0,802.

. Около 1,411.

Температура кипения. Около 132 °С.

Метилпеларгонат. [1731-84-6].C10H20O2. (М.м.172,26).

Метил нонаноат.

Содержит не менее 98,0% C10H20O2. Определение проводят методом газовой хроматографии.

Прозрачная бесцветная жидкость.

. Около 0,873.

. Около 1,422.

Температура кипения. От 91 до 92 °С

Метилпиперазин. [109-01-3]. С5Н12N2. (М.м. 100,16).

1-Метилпиперазин.

Бесцветная жидкость.

Смешивается с водой и спиртом 96%.

. Около 0,90.

. Около 1,466.

Температура кипения. Около 138 °С.

4-(4-Метилпиперидино)пиридин. [80965-30-6]. С11Н16N2. (М.м. 176,26).

4-(4-Метилпиперидин-1-ил)пиридин.

Прозрачная жидкость.

. Около 1,565.

N-Метилпирролидин. [120-94-5]. C5H11N. (М.м. 85,15).

1-Метилпирролидин.

Температура кипения. Около 80 °С.

N-Метилпирролидон. [872-50-4]. C5H9NO. (М.м. 99,13).

1-Метилпирролидин-2-он.

. Около 1,028.

Температура кипения. Около 202 °С.

Температура плавления. Около −24 °С.

2-Метилпропанол. [78-83-1]. С4Н10О. (М.м. 74,12).

2-Метилпропан-1-ол.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Растворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. Около 0,80.

. От 1,397 до 1,399.

Температура кипения. Около 107 °С.

Температурные пределы перегонки. От 107 до 109 °С; должно перегоняться не менее 96%.

2-Метил-2-пропанол. См. трет-Бутиловый спирт.

N-Метилривастигминхлорид. C15H25ClN2O2. (М.м. 300,82).

(1S)-N,N,N-Триметил-1-(3-{[метил(этил)карбамоил]окси}фенил)этанаминия хлорид.

Белое или почти белое вещество.

Мало растворим диметилсульфоксиде, метаноле. Гигроскопичен.

Температура плавления. От 189 до 192 °С.

Метилсалицилат. [119-36-8]. C8H8O3. (М.м. 152,15).

Метил[2-гидроксибензоат].

Бесцветная или слегка жёлтоватая жидкость.

Очень слабо растворим в воде, смешивается с этанолом 96%, с жирными и эфирными маслами.

. Около 1,18.

Температура кипения. Около 223 °С.

Температура плавления. Около -8 °С.

Метилстеарат. [112-61-8]. С19Н38О2. (М.м. 298,50).

Метилоктадеканоат.

Содержит не менее 98,0% С19Н38О2; определение проводят методом газовой хроматографии.

Кристаллическая масса белого или жёлтого цвета.

Растворим в спирте 96% и петролейном эфире.

Температура плавления. Около 38 °С.

Метилтиоаденозин. [2457-80-9]. C11H15N5O3S. (М.м. 297,33).

(2R,3R,4S,5S)-5-(6-Амино-9H-пурин-9-ил)-5-[(метилсульфанил)метил]оксолан-3,4-диол.

Мало растворим в метаноле, диметилсцльфоксиде.

Температура плавления. От 205 до 210 °С.

Метилтозилат. [80-48-8]. C8H10O3S. (М.м. 186,23).

Метил(4-метилбензолсульфонат).

Прозрачная, бесцветная или бледно-жёлтая маслинистая жидкость или низкоплавкое твёрдое вещество.

. Около 1,234.

. Около 1,517.

Температура плавления. От 25 до 28 °С.

Температура кипения. Около 145 °С при 5 мм. рт. ст.

Метилтридеканоат. [1731-88-0]. С14Н28О2. (М.м. 228,37).

Метилтридеканоат.

Бесцветная или слабо-жёлтого цвета жидкость.

Растворим в спирте 96% и петролейном эфире.

. Около 0,86.

. Около 1,441.

Температура плавления. Около 6 °С.

Метилтрикозаноат. [2433-97-8]. С24Н48О2. (М.м. 368,64).

Метилтрикозаноат.

Содержит не менее 99,0% С24Н48О2.

Кристаллы белого цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим в гексане.

Температура плавления. От 55 до 56 °С.

Метилфенилоксазолилбензол. [3073-87-8]. С26Н20N2О2. (М.м. 392,45).

2,2'-(1,4-Фенилен)бис(4-метил-5-фенил-1,3-оксазол).

Мелкий порошок зеленовато-жёлтого цвета с синей флуоресценцией или мелкие кристаллы.

Растворим в спирте 96%, умеренно растворим в ксилоле.

Температура плавления. Около 233 °С.

Метилфенилоксазолилбензол, используемый для жидкостной сцинтилляции, должен быть соответствующей степени чистоты.

Метилфталеин. См. Фталеиновый пурпурный.

Метилцеллозольв. См. Этиленгликоля монометиловый эфир.

Метилцеллюлоза 450. [9004-67-5].

Представляет собой частично О-метилированную целлюлозу.

Белый или жёлтовато-белый или серовато-жёлтый порошок или гранулы. Гигроскопична после высушивания.

Практически нерастворима в горячей воде, ацетоне, этаноле, эфире и толуоле, растворима в холодной воде, образуя коллоидные растворы.

Номинальная вязкость. 450 мПа·с.

Метилциннамат. [103-26-4]. С10Н10О2. (М.м. 162,19).

Метил(3-фенилпроп-2-еноат).

Бесцветные кристаллы.

Практически нерастворим в воде, легко растворим в спирте 96% и растворим в эфире.

. Около 1,56.

Температура кипения. Около 260 °С.

Температура плавления. От 34 до 36 °С.

N-Метилцитизин. [486-86-2]. C12H16N2O. (М.м. 204,27).

(1R,5S)-3-Метил-1,2,3,4,5,6-гексагидро-8H-1,5-метанопиридо[1,2-a][1,5]диазоцин-8-он.

Содержит не менее 98% C12H16N2O.

Вещество белого или почти белого цвета.

Температура плавления: 135–137 °С.

Метилэтилкетон. [78-93-3]. С4Н8О. (М.м. 72,11).

Бутан-2-он.

Прозрачная, бесцветная, воспламеняющаяся жидкость.

Очень легко растворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. Около 0,81.

Температура кипения. От 79 до 80 °С.

Метилэйкозаноат. См. Метиларахидат.

Метионин. [59-51-8]. C5H11NO2S. (М.м. 149,21).

(2RS)-2-Амино-4-(метилсульфанил)бутановая кислота.

Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворим в воде, очень мало растворим в спирте.

3-Метокси-L-тирозин. [200630-46-2]. C10H13NO4. (М.м. 229,23).

(2S)-2-Амино-3-(4-гидрокси-3-метоксифенил)пропановая кислота, моногидрат.

Почти белый или жёлтый порошок.

Хранить при температуре 2–8°С.

Метоксифенилуксусная кислота. [7021-09-2]. С9Н10О3. (М.м. 166,17).

(2RS)-2-Метокси-2-фенилуксусная кислота.

Кристаллический порошок белого цвета или кристаллы белого или почти белого цвета.

Умеренно растворима в воде, легко растворима в спирте 96% и эфире.

Температура плавления. Около 70 °С.

Хранят в прохладном месте.

Метоксифенилуксусной кислоты реактив.

2,7 г метоксифенилуксусной кислоты растворяют в 6 мл 10% раствора тетраметиламмония гидроксида и прибавляют 20 мл этанола.

Хранят в полиэтиленовой упаковке.

Метоксихлор. [72-43-5]. C16H15Cl3O2. (М.м. 345,65).

1,1'-(2,2,2-Трихлорэтан-1,1-диил)бис(4-метоксибензол).

Практически нерастворим в воде. Легко растворим в большинстве органических растворителей.

Температура кипения. Около 346 °С.

Температура плавления. От 78 до 86 °С.

Метол. [55-55-0]. С14Н18N2O2∙H2SO4. (М.м. 344,38).

4-(Метиламино)фенола сульфат (2:1).

Бесцветные кристаллы или белый кристаллический порошок.

Растворим в воде, мало растворим в этаноле, практически нерастворим в эфире.

Температура плавления. От 250 до 260 °С с разложением.

DL-Миндальная кислота. [90-64-2]. C8H8O3. (М.м. 152,15).

(RS)-Гидрокси(фенил)уксусная кислота.

Бесцветные кристаллы или белый кристаллический порошок.

Содержит не менее 98,5% C8H8O3.

Очень легко растворима в спирте 96%, легко растворима в воде.

Температура плавления. 119 °С.

Миозмин. [532-12-7]. С9Н10N2. (М.м. 146,19).

3-(3,4-Дигидро-2Н-пиррол-5-ил)пиридин.

Бесцветные кристаллы.

Практически нерастворим в воде, растворим в этаноле и эфире.

Температура плавления. Около 45 °С.

Миристиловый спирт. [112-72-1]. С14Н30О. (М.м. 214,39).

Тетрадекан-1-ол.

Листочки, кристаллизующиеся из этанола.

Очень мало растворим в этаноле, растворим в эфире.

. Около 0,823.

Температура плавления. От 38 до 40 °С.

Миристилтриметиламмония бромид. [1119-97-7]. С17Н38BrN. (М.м. 336,39). N,N,N-Триметилтетрадекан-1-аминий бромид.

Кристаллический порошок белого цвета.

Легко растворим воде и в спирте 96%.

Температура плавления. Около 245 °С.

Миристилтриметиламмония бромида раствор 1%.

1,0 г миристилтриметиламмония бромида растворяют в 100,0 мл воды.

Миристицин. [607-91-0]. С11Н12О3. (М.м. 192,21).

4-Метокси-6-(проп-2-ен-1-ил)-2H-1,3-бензодиоксол.

Бесцветная или с жёлтоватым оттенком маслянистая жидкость.

Практически нерастворим в воде, мало растворим в этаноле, растворим в эфире, смешивается с толуолом и ксилолом.

. Около 1,144.

. Около 1,540.

Температура кипения. От 276 до 277 °С.

Температура плавления. Около 173 °С.

Хранят в прохладном, защищённом от света месте.

β-Мирцен. [123-35-3]. С10Н16. (М.м. 136,23).

7-Метил-3-метиленокта-1,6-диен.

Маслянистая жёлтоватая жидкость с приятным запахом.

Практически нерастворим в воде, смешивается со спиртом 96%, растворим в эфире и уксусной кислоте ледяной, растворах гидроксидов щелочных металлов.

. Около 0,794.

. Около 1,470.

Хроматографическая чистота β-мирцена, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 90,0%.

Молекулярное сито. [70955-01-0].

Молекулярное сито состоит из натрия алюмосиликата. Имеет вид шариков диаметром 2 мм, размер пор 0,3–0,5 нм.

Молибденованадиевый реактив.

В стакане вместимостью 150 мл смешивают растертые в порошок 4,0 г аммония молибдата и 0,1 г аммония ванадата, прибавляют 70 мл воды и перемешивают стеклянной палочкой до растворения. Через несколько минут должен получиться прозрачный раствор, к которому прибавляют 20 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Молибденовая кислота. [7782-91-4]. Н2МоО4. (М.м. 161,95).

Молибденовая кислота.

Белый или белый с жёлтоватым оттенком порошок.

Мало растворима в воде, реагирует с разведёнными растворами гидроксидов щелочных металлов, растворима в горячей серной кислоте концентрированной.

Молочная кислота. [50-21-5]. С3Н6О3. (М.м. 90,08).

(2RS)-2-Гидроксипропановая кислота.

Бесцветная или слегка жёлтоватая, сиропообразная жидкость.

Смешивается с водой, спиртом 96% и эфиром.

. Около 1,205.

Молочной кислоты реактив.

Раствор I. К 60 мл молочной кислоты прибавляют 45 мл раствора молочной кислоты, насыщенного без нагревания суданом красным G и предварительно отфильтрованного. Молочная кислота насыщается медленно без нагревания, поэтому всегда необходим избыток красителя.

Раствор II. Готовят 10 мл насыщенного раствора анилина и фильтруют.

Раствор III. 75 мг калия йодида растворяют в воде и доводят тем же растворителем до 70 мл. К полученному раствору прибавляют 10 мл спирта 96% и 0,1 г йода, встряхивают.

Смешивают растворы I и II, прибавляют раствор III.

Морфолин. [110-91-8]. С4Н9NО. (М.м. 87,12).

Морфолин.

Бесцветная, гигроскопичная, воспламеняющаяся жидкость.

Растворим в воде и спирте 96%.

. Около 1,01.

Температурные пределы перегонки. От 126 до 130 °С; должно перегоняться не менее 95%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

2-(N-Морфолино)этансульфоновая кислота. [4432-31-9]. C6H13NO4S. (М.м. 195,24).

2-(Морфолин-4-ил)сульфоновая кислота. MES.

Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворим в воде.

Температура плавления. Около 300 °С.

4-Морфолинпропансульфокислота. [1132-61-2]. C7H15NO4S. (М.м. 209,26).

3-(Морфолин-4-ил)пропан-1-сульфоновая кислота.

Сордержит не менее 99,5% C7H15NO4S.

Хорошо растворима в воде.

Температура плавления. Около 280 °С.

4-Морфолинэтансульфокислота. [4432-31-9]. C6H13NO4S. (М.м. 195,24).

2-(Морфолин-4-ил)этан-1-сульфоновая кислота.

Сордержит не менее 99% C6H13NO4S.

Хорошо растворима в воде.

Температура плавления. Более 300 °С.

4-Морфолинэтансульфокислота моногидрат. [145224-94-8].

C6H13NO4S·H2O. (М.м. 213,25).

2-(Морфолин-4-ил)этансульфоновой кислоты моногидрат.

Содержит не менее 99% C6H13NO4S·H2O.

Легко растворим в воде.

Температура плавления. Более 300 °С.

Мочевина. [57-13-6]. СН4N2О. (М.м. 60,06).

Карбонодиамид.

Белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Очень легко растворима в воде, растворима в спирте 96%, практически нерастворима в метиленхлориде.

Муравьиная кислота безводная. [64-18-6]. СН2О2. (М.м. 46,03).

Муравьиная кислота.

Содержит не менее 98,0% (м/м) СН2О2.

Бесцветная прозрачная жидкость. Вызывает коррозию.

Смешивается с водой и спиртом 96%.

. Около 1,22.

Муравьиная кислота 85%.

Содержит не менее 85,0% (м/м) СН2О2.

Бесцветная прозрачная жидкость с резким запахом.

Смешивается с водой и спиртом 96%.

Муравьиной кислоты раствор 0,5%

В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 100 мл воды, прибавляют 1,0 мл муравьиной кислоты безводной и доводят объём раствора водой до метки.

Мурексид. См. Аммоний пурпурнокислый.

Мышьяка(III) оксид. [1327-53-3]. Аs2O3. (М.м. 197,84).

Оксид мышьяка(III).

Кристаллический порошок или белая масса.

Мало растворим в воде, растворим в кипящей воде. Реагирует с разведёнными растворами гидроксидов и карбонатов щелочных металлов.

Надуксусная кислота. См. Перуксусная кислота.

Натр едкий. См. Натрия гидроксид.

Натрий. [7440-23-5]. Na. (А.м. 22,99).

Натрий.

Металл, на свежем срезе имеет блестящую серебристо-серую поверхность. На воздухе быстро тускнеет и полностью окисляется до натрия оксида, который превращается в натрия карбонат. Бурно реагирует с водой с образованием водорода и натрия гидроксида.

Растворим в безводном метаноле с образованием водорода и натрия метилата, практически нерастворим в эфире и петролейном эфире.

Хранят в петролейном эфире или жидком парафине (например, керосин).

Натрия раствор 1,2% в метаноле

1,2 г натрия растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрий сернистокислый. См. Натрия сульфит.

Натрия азид. [26628-22-8]. NaN3. (М.м. 65,01).

Азид натрия.

Кристаллический порошок или кристаллы белого цвета.

Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%, практически нерастворим в эфире.

Натрий азотнокислый. См. Натрия нитрат.

Натрий азотистокислый. См. Натрия нитрит.

Натрия аммония фосфат тетрагидрат. [7783-13-3]. Na(NH4)HPO4·4Н2О. (М.м. 209,07).

Натрий-аммоний фосфат тетрагидрат.

Бесцветные кристаллы или белый кристаллический порошок.

Легко растворим в воде.

Температура плавления. Около 79 °С.

Натрия арсенит. [7784-46-5]. NaAsO2. (М.м. 129,91). Натрия метаарсенит.

Натрия арсенита раствор 5,0%.

5,0 г натрия арсенита растворяют в 30 мл натрия гидроксида раствора 1 М. Охлаждают до 0 °С и прибавляют при перемешивании 65 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3%.

Натрия арсенита раствор 0,5%.

0,50 г мышьяка(III) оксида растворяют в 5 мл раствора натрия гидроксида разведённого 8,5%, прибавляют 2,0 г натрия гидрокарбоната и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Натрия аскорбата раствор.

3,5 г аскорбиновой кислоты растворяют в 20 мл 1 М раствора натрия гидроксида.

Готовят непосредственно перед использованием.

Натрия ацетат. См. Натрия ацетат тригидрат.

Натрия ацетат безводный. [127-09-3]. С2Н3NaО2. (М.м. 82,03). Ацетат натрия.

Бесцветные кристаллы или гранулы.

Очень легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96%.

Потеря в массе при высушивании. Не более 2,0%. Определение проводят при температуре от 100 до 105 °С.

Натрия ацетат тригидрат. [6131-90-4]. С2Н3NaО2·3Н2О. (М.м. 136,08). Ацетат натрия, тригидрат.

Бесцветные прозрачные кристаллы, выветриваются в теплом воздухе.

Очень легко растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Натрия ацетата раствор насыщенный

42 г натрия ацетата тригидрата смешивают с 50 мл воды, выдерживают сутки и фильтруют.

Натрия ацетата раствор 25%

25,0 г натрия ацетата тригидрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия ацетата раствор 20%

20,0 г натрия ацетата тригидрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия ацетата раствор 13,6%. См. Натрия ацетата раствор 1 М.

Натрия ацетата раствор 10%

10 г натрия ацетата тригидрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия ацетата раствор 5 М

680,4 г натрия ацетата тригидрата растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл

Натрия ацетата раствор 2 М

272,16 г натрия ацетата тригидрата растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Натрия ацетата раствор 1 М

136,08 г натрия ацетата тригидрата растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Натрия ацетата раствор 0,1 М

1,36 г натрия ацетата тригидрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Раствор хранят при температуре 4–8 °С в течение 3 мес.

Натрия ацетата раствор 0,01 М

0,680 г натрия ацетата тригидрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 500,0 мл.

Раствор хранят при температуре 4–8 °С в течение 1 мес.

Натрия ацетата раствор 0,001 М

10,0 мл натрия ацетата раствора 0,01 М доводят водой до 100 мл.

Используют свежеприготовленным.

Натрия бензоат. [532-32-1]. С7Н5NaО2. (М.м. 144,10).

Бензоат натрия.

Белый кристаллический порошок.

Растворим в воде, растворим в спирте 96% при нагревании.

Натрия бикарбонат. См. Натрия гидрокарбонат.

Натрия бисульфит. См. Натрия гидросульфит.

Натрия бутансульфонат. [2386-54-1]. С4Н9NaО3S. (М.м. 160,17).

Бутан-1-сульфонат натрия.

Кристаллический порошок белого цвета.

Растворим в воде.

Температура плавления. Более 300 °С.

Натрия висмутат. [12232-99-4]. NaBiO3. (М.м. 279,97).

Метависмутат(V) натрия.

Содержит не менее 85,0% NaBiO3.

Порошок жёлтого или жёлтовато-коричневого цвета. Медленно разлагается под действием влаги или высокой температуры.

Практически нерастворим в холодной воде.

Натрия вольфрамат. [10213-10-2]. Na2WO4·2H2O. (М.м. 329,86).

Вольфрамат(VI) натрия, дигидрат.

Кристаллический порошок белого цвета или бесцветные кристаллы.

Легко растворим в воде с образованием прозрачного раствора, практически нерастворим в спирте 96%.

Натрия гексансульфонат. [2832-45-3]. С6Н13NaO3S. (М.м. 188,22).

Гексан-1-сульфонат натрия.

Порошок белого или почти белого цвета.

Легко растворим в воде.

Натрия гексансульфонат, моногидрат. [207300-91-2]. С6Н13NaO3S·H2O. (М.м. 206,24).

Гексан-1-сульфонат натрия, моногидрат.

Содержит не менее 99,0% С6Н13NaO3S·H2O.

Натрия гептансульфонат. [22767-50-6]. С7Н15NaO3S. (М.м. 202,25).

Гептан-1-сульфонат натрия.

Кристаллическая масса белого или почти белого цвета.

Легко растворим в воде, растворим в метаноле.

Натрия гептансульфонат, моногидрат. [207300-90-1]. С7Н15NaO3S·H2O. (М.м. 220,26).

Гептан-1-сульфонат натрия, моногидрат.

Содержит не менее 96% С7Н15NaO3S в пересчете на безводное вещество.

Кристаллический порошок белого цвета.

Растворим в воде, очень мало растворим в этаноле, практически нерастворим в эфире.

Вода. Не более 8%. Определение проводят из 0,3 г.

Натрия гиалуронат. [9067-32-7]. (C14H20NNaO11)n.

Гиалуронат натрия.

Белый или почти белый очень гигроскопичный порошок или волокнистый материал.

Растворим или умеренно растворим в воде, практически нерастворим в ацетоне и этаноле.

Хранят в защищённом от света и влажности месте.

Натрия гидрокарбонат. [144-55-8]. NaHCO3. (М.м. 84,01).

Гидрокарбонат натрия.

Белый кристаллический порошок.

Растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Натрия гидрокарбоната раствор 10%.

10,0 г натрия гидрокарбоната растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия гидрокарбоната раствор 8,4%.

8,4 г натрия гидрокарбоната растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия гидрокарбоната раствор 7,5%.

7,5 г натрия гидрокарбоната растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия гидрокарбоната раствор 5%.

5 г натрия гидрокарбоната растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Срок годности – не более 30 сут при хранении в прохладном, защищённом от света месте.

Натрия гидрокарбоната раствор 4,2%.

4,2 г натрия гидрокарбоната растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия гидрокарбоната раствор 2%.

2 г натрия гидрокарбоната растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия гидрокарбоната раствор 5% водно-спиртовой.

5,0 г натрия гидрокарбоната растворяют в смеси спирт 96%–вода 30:70 и доводят объём раствора этой же смесью до 100,0 мл.

Натрия гидрокарбоната раствор 0,6%.

0,6 г натрия гидрокарбоната растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия гидроксид. [1310-73-2]. NaOH. (М.м. 40,00).

Гидроксид натрия.

Белые куски или цилиндрические палочки, имеющие на изломе кристаллическую структуру; гигроскопичен. Обращаться с осторожностью.

Очень легко растворим в воде; легко растворим в спирте 96%, растворим в глицерине; очень мало растворим в ацетоне и эфире.

Натрия гидроксида раствор концентрированный

42 г натрия гидроксида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия гидроксида раствор насыщенный, свободный от карбонатов

50 г натрия гидроксида растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл, выдерживают до образования прозрачного супернатанта и декантируют, избегая внесения углерода диоксида.

Натрия гидроксида раствор 40%

40,0 г натрия гидроксида растворяют в воде и после охлаждения доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Раствору дают отстояться и прозрачную жидкость сливают с осадка.

Срок годности – 6 мес при хранении в стеклянном сосуде с резиновой пробкой.

Натрия гидроксида раствор 30%

30,0 г натрия гидроксида растворяют в воде и после охлаждения доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл. Раствору дают отстояться и прозрачную жидкость сливают с осадка.

Срок годности – 6 мес при хранении в стеклянном сосуде с резиновой пробкой.

Натрия гидроксида раствор 20%

20 г натрия гидроксида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл. Раствору дают отстояться и прозрачную жидкость сливают.

Хранят в стеклянных сосудах с резиновыми пробками.

> Натрия гидроксида раствор 17%

> 85,0 г натрия гидроксида помещают в мерную колбу вместимостью 500 мл, растворяют в воде, охлаждают, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Натрия гидроксида раствор 15%

15 г натрия гидроксида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл. Раствору дают отстояться и прозрачную жидкость сливают.

Хранят в стеклянных сосудах с резиновыми пробками.

Натрия гидроксида раствор 10%

10 г натрия гидроксида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл. Раствору дают отстояться и прозрачную жидкость сливают.

Хранят в стеклянных сосудах с резиновыми пробками.

Натрия гидроксида раствор 8,5%

8,5 г натрия гидроксида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия гидроксида раствор 5%

5 г натрия гидроксида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия гидроксида раствор 3%

3 г натрия гидроксида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия гидроксида раствор 2%

2,0 г натрия гидроксида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия гидроксида раствор 1%

1,0 г натрия гидроксида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия гидроксида раствор 0,1%

1,0 мл натрия гидроксида раствора 10% доводят водой до 100,0 мл.

Натрия гидроксида раствор 10 М

400,0 г натрия гидроксида растворяют в достаточном количестве воды, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Натрия гидроксида раствор 6 М

120,0 г натрия гидроксида растворяют в достаточном количестве воды, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до 500,0 мл.

Натрия гидроксида раствор 5 М

100,0 г натрия гидроксида растворяют в достаточном количестве воды, свободной от углерода диоксида, и доводят объем раствора тем же растворителем до 500,0 мл.

Натрия гидроксида раствор 4 М

80,0 г натрия гидроксида растворяют в достаточном количестве воды, свободной от углерода диоксида, и доводят объем раствора тем же растворителем до 500,0 мл.

Натрия гидроксида раствор 3,5 М

70,0 г натрия гидроксида растворяют в достаточном количестве воды, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до 500,0 мл.

Натрия гидроксида раствор 3 М

60,0 г натрия гидроксида растворяют в достаточном количестве воды, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до 500,0 мл.

Натрия гидроксида раствор 2 М

80,0 г натрия гидроксида растворяют в достаточном количестве воды, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Натрия гидроксида раствор 1,5 М

60,0 г натрия гидроксида растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Натрия гидроксида раствор 1 М

40 г натрия гидроксида растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Натрия гидроксида раствор 0,5 М

20 г натрия гидроксида растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Натрия гидроксида раствор 0,4 М

16,0 г натрия гидроксида растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Натрия гидроксида раствор 0,2 М

8,0 г натрия гидроксида растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Натрия гидроксида раствор 0,15 М

6,0 г натрия гидроксида растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Натрия гидроксида раствор 0,1 М

4,0 г натрия гидроксида растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Натрия гидроксида раствор 0,05 М

5,0 мл натрия гидроксида раствора 1 М доводят водой до 100,0 мл.

Используют свежеприготовленным.

Натрия гидроксида раствор 0,02 М

2,0 мл натрия гидроксида раствора 1 М доводят водой до 100,0 мл.

Используют свежеприготовленным.

Натрия гидроксида раствор 0,01 М

1,0 мл натрия гидроксида раствора 1 М доводят водой до 100,0 мл.

Используют свежеприготовленным.

Натрия гидроксида метанольный раствор

40 мг натрия гидроксида растворяют в 50 мл воды, полученный раствор охлаждают и прибавляют 50 мл метанола.

Используют свежеприготовленным.

Натрия гидроксида раствор в метаноле 20%

20 г натрия гидроксида растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Используют свежеприготовленным.

Натрия гидроксида раствор в метаноле 12%

12 г натрия гидроксида растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Используют свежеприготовленным.

Натрия гидроксида раствор в метаноле 2%

2,0 г натрия гидроксида растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия гидроксида раствор в метаноле 0,4%

0,4 г натрия гидроксида растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Используют свежеприготовленным.

Натрия гидроксида спиртовой раствор 10%

Раствор 100 г/л в спирте 96%.

Натрия гидроксида спиртовой раствор 2%

Раствор 20 г/л в спирте 96%.

Натрия гидроокись. См. Натрия гидроксид.

Натрия гидросульфат. [7681-38-1]. NaHSO4. (М.м. 120,06).

Гидросульфат натрия.

Легко растворим в воде, очень легко растворим в кипящей воде. В спирте 96% разлагается с образованием натрия сульфата и серной кислоты.

Температура плявления. Около 315 °С.

Натрия гидросульфит. [7631-90-5]. NaHSO3. (М.м. 104,06).

Гидросульфит натрия.

Кристаллический порошок белого цвета. На воздухе частично теряет серы диоксид и постепенно окисляется до сульфата.

Легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96%.

Натрия гидросульфита раствор 20%

20 г натрия гидросульфита растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Натрия гидросульфита раствор 8%

8,0 г натрия гидросульфита растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Натрия гидрофосфат. См. Динатрия гидрофосфат.

Натрия гипобромита раствор.

20 мл раствора натрия гидроксида концентрированного и 500 мл воды смешивают на ледяной бане, прибавляют 5 мл раствора брома и осторожно перемешивают до растворения.

Готовят непосредственно перед использованием.

Натрия гипофосфит. [10039-56-2]. NaH2PO2·H2O. (М.м. 105,99).

Фосфинат натрия, моногидрат.

Кристаллический порошок белого цвета или бесцветные кристаллы. Гигроскопичен.

Легко растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Натрия гипофосфита раствор (реактив Тиле).

20 г натрия гипофосфита растворяют в 40 мл воды. Раствор вливают в 180 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и выдерживают в течение 24 ч. По осаждении выделившихся кристаллов натрия хлорида жидкость сливают с осадка. Раствор должен быть бесцветным.

Хранят в стеклянном сосуде с притертой пробкой.

Натрия гипохлорита раствор концентрированный.

Содержит не менее 25 г/л и не более 30 г/л активного хлора.

В химический стакан вместимостью 400 мл помещают 100 г извести хлорной с содержанием активного хлора 35–36%, прибавляют 170 мл воды и перемешивают в течение 15 мин. Параллельно во второй химический стакан вместимостью 400 мл помещают 70 г натрия карбоната безводного, прибавляют 170 мл воды и перемешивают. К содержимому первого стакана при непрерывном перемешивании прибавляют содержимое второго стакана. Масса вначале густеет, а затем разжижается. Смесь выдерживают в течение 20 мин и фильтруют под вакуумом в колбу Бунзена. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4 мл полученного фильтрата и доводят объём раствора водой до метки.

Жидкость жёлтоватого цвета, имеет щелочную реакцию.

Хранят в защищённом от света месте.

Количественное определение. 10 мл раствора натрия гипохлорита концентрированного растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл (раствор А). В колбу для титрования последовательно помещают 50 мл воды, 1,0 г калия йодида, 12,5 мл уксусной кислоты разведённой 12%, 10 мл раствора А и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата, используя в качестве индикатора 1 мл раствора крахмала.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 3,546 мг активного хлора.

Натрия гипохлорита раствор разбавленный.

0,7 мл натрия гипохлорита раствора концентрированного разбавляют водой до объёма 50 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Натрия глюкуронат. [207300-70-7]. С6Н9NaО7·H2O. (М.м. 234,14).

D-глюкопирануронат натрия, моногидрат.

Умеренно растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

. Около +21,5° (2% раствор в воде).

Натрия дезоксихолат. [302-95-4]. C24H39NaO4. (М.м. 414,6).

3α,12α-Дигидрокси-5β-холан-24-оат натрия.

Кристаллический порошок от белого до кремового цвета.

Легко растворим в воде.

. Около +44° (2% раствор в воде).

Натрия декансульфонат. [13419-61-9]. С10Н21NaO3S. (М.м. 244,33).

Декан-1-сульфонат натрия.

Кристаллический порошок или хлопья белого или почти белого цвета.

Легко растворим в воде, растворим в метаноле.

Натрия дигидрофосфат безводный. [7558-80-7]. NaH2PO4. (М.м. 119,98).

Дигидрофосфат натрия.

Порошок белого цвета, гигроскопичен.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Натрия дигидрофосфат моногидрат. [10049-21-5]. NaH2PO4·Н2О. (М.м. 137,99).

Дигидрофосфат натрия, моногидрат.

Кристаллы или гранулы белого цвета, слегка расплывающиеся на воздухе. Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Натрия дигидрофосфат дигидрат. [13472-35-0]. NaН2PO4·2H2O. (М.м. 156,01).

Дигидрофосфат натрия, дигидрат.

Бесцветные или белые кристаллы.

Растворим в горячей воде, нерастворим в спирте 96%.

Натрия дигидрофосфата раствор 0,1 М.

13,80 г натрия дигидрофосфата моногидрата растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Натрия дигидрофосфата раствор 0,01 М.

10,0 мл натрия дигидрофосфата раствора 0,1 М доводят водой до 100,0 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Натрия дигидрофосфата раствор 0,05 М.

6,90 г натрия дигидрофосфата моногидрата растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Натрия дитионит. [7775-14-6]. Na2S2O4. (М.м. 174,11).

Бис(диоксидосульфат)(S–S) динатрия.

Кристаллический порошок белого или серовато-белого цвета; на воздухе окисляется.

Очень легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Натрия диэтилдитиокарбамат. [20624-25-3]. С5Н10NNaS2·3H2O. (М.м. 225,31).

N,N-Диэтилдитиокарбамат натрия тригидрат.

Бесцветные или белого цвета кристаллы.

Легко растворим в воде, растворим в спирте 96%. Водный раствор бесцветный.

Натрия диэтилдитиокарбамата раствор 4%.

4,0 г натрия диэтилдитиокарбамата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Натрия диэтилдитиокарбамата раствор 0,015%.

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 15 мг натрия диэтилдитиокарбамата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Натрия додецилсульфат. См. Натрия лаурилсульфат.

Натрия докузат. [577-11-7]. С20Н37NaO7S. (М.м. 444,6).

1,2-Бис[(2-этилгексил)оксикарбонил]этансульфонат натрия.

Белая или почти белая воскообразная масса или хлопья; гигроскопичен.

Умеренно растворим в воде, легко растворим в спирте 96% и метиленхлориде.

Натрия йодид. [7681-82-5]. NaI. (М.м. 149,89).

Иодид натрия.

Белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы; гигроскопичен.

Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96%.

Натрия кальция эдетат. [23411-34-9]. C10H12CaN2Na2O8·xH2O. (М.м. 374,27 – безводный).

2,2',2'',2'''-(Этан-1,2-диилдинитрило)тетраацетат кальция динатрия, гидрат.

Белый или пости белый гигроскопичный порошок.

Легко раствоим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Натрия карбонат безводный. [497-19-8]. Na2CO3. (М.м. 105,99).

Карбонат натрия.

Порошок белого цвета, гигроскопичен.

Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Потеря в массе при высушивании при температуре около 300 °С должна быть не более 1%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Натрия карбонат декагидрат. [6132-02-1]. Na2CO3·10H2O. (М.м. 286,14).

Карбонат натрия, декагидрат.

Белый кристаллический порошок или бесцветные прозрачные кристаллы. Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Натрия карбонат моногидрат. [5968-11-6]. Na2CO3· H2O. (М.м. 124,00).

Белый кристаллический порошок или бесцветные прозрачные кристаллы. Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Натрия карбоната раствор 20%

20,0 г натрия карбоната безводного растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Срок годности – 2 мес.

Натрия карбоната раствор 10,6%. См. Натрия карбоната раствор 1 М.

Натрия карбоната раствор 10%

10,0 г натрия карбоната безводного растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Срок годности – не более 30 сут при хранении в прохладном, защищённом от света месте.

Натрия карбоната раствор 5%.

5,0 г натрия карбоната безводного растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Срок годности – – не более 30 сут при хранении в прохладном, защищённом от света месте.

Натрия карбоната раствор 2%.

2,0 г натрия карбоната безводного растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Срок годности – – не более 14 сут при хранении в прохладном, защищённом от света месте.

Натрия карбоната раствор 1,85%.

1,85 г натрия карбоната безводного растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Срок годности – не более 14 сут при хранении в прохладном, защищённом от света месте.

Натрия карбоната раствор 0,5%.

0,5 г натрия карбоната безводного растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Срок годности – не более 7 сут при хранении в прохладном, защищённом от света месте.

Натрия карбоната раствор 2% в натрия гидроксиде.

Раствор 20 г/л натрия карбоната безводного в 0,1 М растворе натрия гидроксида.

Натрия карбоната раствор 1 М.

10,6 г натрия карбоната безводного растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Срок годности – 2 мес.

Натрия карбоната раствор 0,1 М.

10,6 г натрия карбоната безводного растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Срок годности – не более 7 сут при хранении в прохладном, защищённом от света месте.

Натрия карбоната раствор 0,05 М.

5,3 г натрия карбоната безводного растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Срок годности – не более 7 сут при хранении в прохладном, защищённом от света месте.

Натрия кобальтинитрит. [13600-98-1]. Na3[Co(NO2)6]. (М.м. 403,9).

Гексанитрокобальтат(III) натрия.

Порошок оранжево-жёлтого цвета.

Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Натрия кобальтинитрит полугидрат. Na3[Co(NO2)6]·0,5Н2О. (М.м. 412,9).

Гексанитрокобальтат(III) натрия, гемигидрат.

Оранжево-жёлтый порошок.

Растворим в воде и в кислотах.

Натрия кобальтинитрита раствор 20%.

20,0 г натрия кобальтинитрита при комнатной температуре растворяют в воде о доводят объём раствора тем же растворитем до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Натрия кобальтинитрита раствор 10%.

10,0 г натрия кобальтинитрита при комнатной температуре растворяют в воде о доводят объём раствора тем же растворитем до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Натрия лаурилсульфат. [151-21-3]. С12Н25NaO4S. (М.м. 288,38).

Додецил-1-сульфат натрия.

Белый или светло-жёлтый порошок или кристаллы.

Легко растворим в воде с образованием опалесцирующего раствора, умеренно растворим в спирте 96%.

Натрия лаурилсульфата раствор 2%.

2,0 г натрия лаурилсульфата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия лаурилсульфата раствор 0,1%.

0,1 г натрия лаурилсульфата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Буферный рабочий раствор для электрофореза в системе натрия лаурилсульфат-полиакриламидный гель (SDS-PAGE).

151,4 г трис(гидроксиметил)аминометана, 721,0 г глицина и 50,0 г натрия лаурилсульфата растворяют в воде и доводят тем же растворителем до 5000,0 мл. Непосредственно перед использованием разводят водой в 10 раз и перемешивают.

рН полученного раствора должен быть от 8,1 до 8,8.

Буферный образцовый раствор (концентрированный) для электрофореза в системе натрия лаурилсульфат–полиакриламидный гель (SDS-PAGE).

1,89 г трис(гидроксиметил)аминометана, 5,0 г натрия лаурилсульфата, 50 мг бромфенолового синего и 25,0 мл глицерина растворяют в 100 мл воды, доводят рН раствора до 6,8 хлористоводородной кислотой концентрированной и доводят водой до 125 мл.

Буферный образцовый раствор (концентрированный) для электрофореза в системе натрия лаурилсульфат–полиакриламидный гель (SDS-PAGE) для восстановительных условий.

3,78 г трис(гидроксиметил)аминометана, 10,0 г натрия лаурилсульфата, 100 мг бромфенолового синего и 50,0 мл глицерина растворяют в 200 мл воды. К полученному раствору прибавляют 25,0 мл 2-меркаптоэтанола, доводят рН раствора до 6,8 хлористоводородной кислотой концентрированной и доводят объём раствора водой до 250,0 мл.

Альтернативно, в качестве восстанавливающего вещества вместо 2-меркаптоэтанола может быть использован дитиотреитол. В этом случае буферный раствор готовят следующим образом: 3,78 г трис(гидроксиметил)-аминометана, 10,0 г натрия лаурилсульфата, 100 мг бромфенилового синего и 50,0 мл глицерина растворяют в 200 мл воды. Доводят рН раствора до 6,8 хлористоводородной кислотой концентрированной и доводят объём раствора водой до 250,0 мл. Непосредственно перед использованием прибавляют дитиотреитол до конечной концентрации 100 мМ.

Натрия метабисульфит. [7681-57-4]. Nа2S2O5. (М.м. 190,11).

Дисульфит динатрия.

Белый или почти белый кристаллический порошок.

Легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96%.

Натрия метабисульфита раствор 20%

20 г натрия метабисульфита растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Раствор хранят в таре из тёмного стекла с притертой пробкой при комнатной температуре в течение 6 мес.

Натрия метабисульфита раствор 0,5%

0,5 г натрия метабисульфита растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Натрия метабисульфита раствор 0,1%

0,1 г натрия метабисульфита растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Натрия метансульфонат. [2386-57-4]. СН3NaO3S. (М.м. 118,09).

Метансульфонат натрия.

Кристаллический порошок белого цвета, гигроскопичен.

Легко растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Натрия метаперйодат. См. Натрия перйодат.

Натрия метилат. [124-41-4]. CH3ONa. (М.м. 54,02).

Метоксид натрия.

Белый порошок. Легко воспламеняем. Чувствителен к влажности.

Активно реагирует с водой.

Хранят во влаго- и воздухонепроницаемой упаковке.

Натрия метоксид. См. Натрия метилат.

Натрия молибдат. [10102-40-6]. Na2MoO4·2H2O. (М.м. 241,95).

Молибдат(VI) натрия, дигидрат.

Кристаллический порошок белого цвета или бесцветные кристаллы.

Легко растворим в воде.

Натрия молибдата раствор 0,1% в серной кислоте концентрированной.

10 мг натрия молибдата растворяют в 10 мл серной кислоты концентрированной.

Натрия нафтохинонсульфонат. [521-24-4]. С10Н5NaO5S. (М.м. 260,20).

1,2-Диоксо-1,2-дигидронафталин-4-сульфонат натрия.

Кристаллический порошок от жёлтого до оранжево-жёлтого цвета.

Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Натрия нитрат. [7631-99-4]. NaNO3. (М.м. 84,99).

Нитрат натрия.

Порошок или гранулы белого цвета или бесцветные, прозрачные, кристаллы, расплывающиеся на воздухе.

Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Натрия нитрит. [7632-00-0]. NaNO2. (М.м. 69,00).

Нитрит натрия.

Гранулированный порошок белого цвета или кристаллический порошок слегка жёлтоватого цвета.

Легко растворим в воде.

*Натрия нитрита раствор 25%*.

25,0 г натрия нитрита растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Натрия нитрита раствор 10%.

10,0 г натрия нитрита растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Натрия нитрита раствор 5%.

5,0 г натрия нитрита растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Натрия нитрита раствор 4,5%.

4,5 г натрия нитрита растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Натрия нитрита раствор 3,5%.

3,5 г натрия нитрита растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Натрия нитрита раствор 2%.

2,0 г натрия нитрита растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Натрия нитрита раствор 1%.

1,0 г натрия нитрита растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Натрия нитрита раствор 0,5%.

0,5 г натрия нитрита растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Натрия нитрита раствор 0,3%.

0,3 г натрия нитрита растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Натрия нитрита раствор 0,2%.

0,2 г натрия нитрита растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Натрия нитрита раствор 0,1%.

0,1 г натрия нитрита растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Натрия нитрита раствор 1,25% в 0,5 М хлористофодородной кислоте.

1,25 г нитрита натрия растворяют в хлористоводородной кислоте растворе 0,5 М и доводят объём раствора до 100,0 мл тем же растворителем.

Готовят непосредственно перед использованием.

Натрия нитропруссид. [13755-38-9]. Na2[Fe(CN)5(NO)]·2H2O. (М.м. 297,95).

Пентацианонитрозилферрат(III) натрия, дигидрат.

Порошок или кристаллы красновато-коричневого цвета.

Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Натрия нитропруссида раствор 10% в серной кислоте разведённой 9,8%.

1 г натрия нитропруссида помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл. растворяют в серной кислоте разведённой 9,8% и доводят объём тем же растворителем до метки.

Натрия нитропруссида раствор 10%.

10,0 г натрия нитропруссида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Натрия нитропруссида раствор 5%.

5,0 г натрия нитропруссида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Натрия нитропруссида раствор 4%.

4,0 г натрия нитропруссида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Натрия нитропруссида раствор 3%.

3,0 г натрия нитропруссида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Натрия нитропруссида раствор 2,5%.

2,5 г натрия нитропруссида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Натрия нитропруссида раствор 1%.

1,0 г натрия нитропруссида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Натрия нитропруссида раствор 0,5%.

0,5 г натрия нитропруссида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Натрия нитропруссида окисленный раствор.

10 г натрия нитропруссида растворяют в 100 мл воды, прибавляют 5 мл 3% раствора калия перманганата и 2 мл 10% раствора натрия гидроксида. Полученную смесь фильтруют и выдерживают в течение 24 ч.

Срок годности 2 мес.

Натрия оксалат. [62-76-0]. С2Na2О4. (М.м. 134,00).

Оксалат динатрия.

Кристаллический порошок белого цвета.

Растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96% и эфире.

Натрия октансульфонат. [5324-84-5]. С8Н17NaO3S. (М.м. 216,27).

Октан-1-сульфонат натрия.

Содержит не менее 98% С8Н17NaO3S.

Кристаллический порошок или хлопья белого или почти белого цвета.

Легко растворим в воде, растворим в метаноле.

Натрия октансульфонат моногидрат. [207596-29-0]. С8Н17NaO3S·H2O. (М.м. 234,29).

Октан-1-сульфонат натрия моногидрат.

Белый или почти белый порошок.

Натрия октилсульфат. [142-31-4]. С8Н17NaO4S. (М.м. 232,27).

Октилсульфат натрия.

Кристаллический порошок или хлопья белого или почти белого цвета.

Легко растворим в воде, растворим в метаноле.

Натрия пентансульфонат. [22767-49-3]. С5Н11NaO3S. (М.м. 174,19).

Пентан-1-сульфонат натрия.

Твердое кристаллическое вещество белого или почти белого цвета.

Растворим в воде и спирте 96%.

Натрия пентансульфоната моногидрат. [207605-40-1].C5H11NaO3S·H2O. (М.м. 192,21).

Пентан-1-сульфонат натрия моногидрат.

Белое или почти белое кристаллическое вещество, растворимо в воде.

Натрия перйодат. [7790-28-5]. NaIO4. (М.м. 213,89).

Периодат натрия.

Содержит не менее 99,0% NaIO4.

Кристаллический порошок или кристаллы белого цвета.

Растворим в воде и растворах неорганических кислот.

Натрия перйодата раствор.

1,07 г натрия перйодата растворяют в воде, прибавляют 5 мл серной кислоты разведённой 9,8% и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Натрия перйодата раствор 2%.

0,2 г натрия перйодата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 10,0 мл.

Натрия перйодата раствор 0,2%.

0,2 г натрия перйодата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Натрия перхлорат. [7791-07-3]. NaClO4·H2O. (М.м. 140,46).

Перхлорат натрия, моногидрат.

Содержит не менее 99,0% NaClO4·H2O.

Кристаллы белого цвета, расплывающиеся на воздухе.

Очень легко растворим в воде.

Хранят в плотно закрытой упаковке.

Натрия пикрата раствор.

1,8 г пикриновой кислоты растворяют в 180 мл воды и прибавляют 20 мл 10% раствора натрия гидроксида. Используют свежеприготовленным.

Натрия пикрата нейтральный раствор.

1,0 г пикриновой кислоты растворяют в 25 мл воды, 4,36 мл 1 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. 5 мл полученного раствора титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида или 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты (индикатор – фенолфталеин).

В случае получения щелочного или кислого раствора натрия пикрата к нему прибавляют по расчету 0,1 М раствор натрия гидроксида или 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты.

Натрия пикрата щелочной раствор.

Смешивают 20 мл раствора натрия пикрата и 10 мл раствора 50 г/л натрия гидроксида, доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Срок годности 2 сут.

Натрий пиросернистокислый. См. Натрия метабисульфит.

Натрия пиросульфат. См. Натрия метабисульфит.

Натрия пирофосфат. [13472-36-1]. Na4P2O7·10H2O. (М.м. 446,1).

Дифосфат тетранатрия, декагидрат.

Бесцветные, слегка выветривающиеся кристаллы.

Легко растворим в воде, очень легко растворим в спирте 96%.

Натрия пропансульфонат моногидрат. [304672-01-3]. C3H7SO3Na·H2O. (М.м. 164,16).

Натрия пропан-1-сульфонат моногидрат.

Температура плавления. Около 250 °С.

Натрия родизонат. [523-21-7]. С6Na2O6. (М.м. 214,04).

3,4,5,6-Тетраоксоциклогекс-1-ен-1,2-диолат динатрия.

Кристаллы фиолетового цвета.

Растворим в воде с образованием оранжево-жёлтого раствора. Растворы нестабильны, их готовят в день использования.

Натрия салицилат. [54-21-7]. С7Н5NaО3. (М.м. 160,10).

Белый кристаллический порошок или белые чешуйки.

Легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96%, практически нерастворим в эфире.

Натрия салицилата раствор 1,15%

1,15 г натрия салицилата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия салицилата раствор 0,2% в спирте 96%

0,2 г натрия салицилата растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия салицилата раствор 0,04% в спирте 96%

40 мг натрия салицилата растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия сульфат безводный. [7757-82-6]. Na2SO4. (М.м. 142,04)

Сульфат динатрия.

Белый или почти белый порошок, гигроскопичен.

Легко растворим в воде.

Натрия сульфат декагидрат. [7727-73-3]. Na2SO4·10H2O. (М.м. 322,20).

Сульфат динатрия, декагидрат.

Бесцветные прозрачные, выветривающиеся на воздухе кристаллы или белый кристаллический порошок.

Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Натрия сульфата насыщенный раствор.

60 г натрия сульфата заливают 100 мл воды и выдерживают при частом взбалтывании в течение 24 ч.

Натрия сульфата раствор 20%.

20 г натрия сульфата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия сульфат безводный. [7757-82-6]. Na2SO4. (М.м. 142,04). Сульфат натрия.

Белый порошок. Гигроскопичен. Очень легко растворим в воде.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5%. Определение проводят при температуре 130 °С.

Натрия сульфид. [1313-84-4]. Na2S·9H2O. (М.м. 240,18).

Сульфид натрия, нонагидрат.

Бесцветные, быстро жёлтеющие кристаллы, расплывающиеся на воздухе. Очень легко растворим в воде.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Натрия сульфида раствор в глицерине

12 г натрия сульфида растворяют при нагревании в 45 мл смеси растворителей вода—глицерин (85%) 10:29, затем охлаждают и доводят объём раствора той же смесью растворителей до 100,0 мл.

Раствор должен быть бесцветным.

Натрия сульфида водно-глицериновый раствор

5 г натрия сульфида растворяют в 10 мл воды и прибавляют 30 мл глицерина.

Хранят в закрытой упаковке, защищая от света.

Натрия сульфида раствор 2%

2 г натрия сульфида растворяют в воде, прибавляют 2–3 капли глицерина и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Натрия сульфит. См. Натрия сульфит гептагидрат.

Натрия сульфит безводный. [7757-83-7]. Na2SO3. (М.м. 126,04).

Сульфит натрия.

Белый или почти белый порошок.

Легко растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96%.

Натрия сульфит гептагидрат. [10102-15-5]. Na2SO3·7H2O. (М.м. 252,15).

Сульфит натрия, гептагидрат.

Бесцветные кристаллы. На воздухе легко теряет воду и окисляется.

Легко растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96%.

Натрия сульфита раствор 30%

30 г натрия сульфита безводного растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия сульфита раствор 10%

10 г натрия сульфита безводного растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия сульфита раствор 4%

4,0 г натрия сульфита безводного растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия сульфита раствор 1%

1,0 г натрия сульфита безводного растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия тартрат. [6106-24-7]. С4Н4Na2O6·2H2O. (М.м. 230,08).

(2R,3R)-2,3-Дигидроксибутан-1,4-диоат динатрия, дигидрат.

Кристаллы или гранулы белого цвета.

Очень легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Натрия тартрата раствор 2,98%.

2,98 г натрия тартрата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Натрия тетраборат. [1303-96-4]. Na2B4O7·10H2O. (М.м. 381,37).

Тетраборат натрия, декагидрат.

Бесцветные прозрачные, легко выветривающиеся кристаллы или белый кристаллический порошок.

Умеренно растворим в холодной воде, легко растворим в горячей воде, растворим в глицерине, практически нерастворим в спирте 96%.

Натрия тетрабората раствор

9,55 г динатрия тетрабората растворяют в серной кислоте концентрированной при нагревании и доводят объём раствора той же кислотой до 1000,0 мл.

Натрия тетрабората насыщенный раствор

5,0 г мелко растертого натрия тетрабората заливают 100 мл воды и оставляют при частом взбалтывании в течение 24 ч. Раствор фильтруют.

Натрия тетрабората раствор 0,05 М

Натрия тетраборат дважды перекристаллизовывают из воды, растворяя его при температуре не выше 60 °С, и сушат между листами фильтровальной бумаги, меняя последнюю до тех пор, пока отдельные кристаллы не перестанут прилипать к стеклянной палочке.

19,07 г перекристаллизованного натрия тетрабората растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Натрия тетрабората раствор 0,005 М

1,91 г перекристаллизованного натрия тетрабората растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Натрия тетрагидроборат. [16940-66-2]. NaBH4. (М.м. 37,83).

Натрия бор(о)гидрид.

Бесцветные, гигроскопичные кристаллы.

Легко растворим в воде, растворим в этаноле.

Разлагается при повышении температуры или в присутствии кислот или ряда солей металлов на бор и водород.

Натрия тетрагидробората восстанавливающий раствор

В мерную колбу вместимостью 500 мл, содержащую около 100 мл воды, помещают 5,0 г натрия гидроксида в виде пеллет и 2,5 г натрия тетрагидробората. Перемешивают до полного растворения и доводят объём раствора водой до метки. Готовят непосредственно перед использованием.

Натрия тетрагидробората раствор 1%

0,5 г натрия тетрагидробората растворяют в аммиака растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до 50,0 мл.

Натрия тетрадейтеродиметилсилапентаноат. [24493-21-8]. С6Н9D4NaO2Si. (М.м. 172,27).

3-(Триметилсилил)пропаноат-2,2,3,3-d4 натрия.

Степень дейтерирования не менее 99%.

Кристаллический порошок белого цвета.

Легко растворим в воде, этаноле и метаноле.

Температура плавления. Около 300 °С.

Вода и дейтерия оксид. Не более 0,5%.

Натрия тетрафенилборат. [143-66-8]. C24H20BNa. (М.м. 342,20). Тетрафенилборанид натрия.

Объёмный порошок белого или слегка жёлтоватого цвета.

Легко растворим в воде и ацетоне.

Натрия тетрафенилбората раствор 1%. Раствор 10 г/л.

Если необходимо, перед использованием фильтруют.

Срок годности 7 сут.

Натрия тиогликолят. [367-51-1]. С2Н3NaО2S. (М.м. 114,10).

Сульфанилацетат натрия.

Гранулированный порошок или кристаллы белого цвета. Гигроскопичен.

Легко растворим в воде и метаноле, растворим в спирте 96%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Натрия тиосульфат безводный. [7772-98-7]. Na2S2O3. (М.м. 158,11).

Тиосульфат динатрия, безводный.

Натрия тиосульфат. [10102-17-7]. Na2S2O3·5Н2О. (М.м. 248,18).

Тиосульфат динатрия, пентагидрат.

Бесцветные прозрачные кристаллы.

Очень легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Натрия тиосульфата раствор 1 М.

248,2 г натрия тиосульфата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Раствор хранят в таре из тёмного стекла с притертой пробкой при комнатной температуре в течение 3 мес.

Натрия тиосульфата раствор 0,1 М.

24,82 г натрия тиосульфата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Раствор хранят в таре из тёмного стекла с притертой пробкой при комнатной температуре в течение 3 мес.

Натрия тиосульфата раствор 0,05 М.

50,0 мл натрия тиосульфата раствора 0,1 М помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Натрия тиосульфата раствор 0,01 М.

10,0 мл натрия тиосульфата раствора 0,1 М помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор используют свежеприготовленным.

Натрия тиосульфата раствор 0,005 М.

25,0 мл натрия тиосульфата раствора 0,1 М помещают в мерную колбу вместимостью 500 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор используют свежеприготовленным.

Натрия флуоресцеинат. [518-47-8]. С20Н10Na2О5. (М.м. 376,27).

2-(6-Оксидо-3-оксо-3Н-ксантен-9-ил)бензоат динатрия.

Порошок оранжево-красного цвета.

Легко растворим в воде. Водные растворы имеют интенсивную жёлтовато-зеленую флуоресценцию.

Натрия формиат. [141-53-7]. СНNaО2. (М.м. 68,01).

Формиат натрия.

Кристаллический порошок или расплывающиеся гранулы белого цвета.

Растворим в воде и глицерине, мало растворим в спирте 96%.

Температура плавления. Около 253 °С.

Натрия фосфат двузамещенный безводный. См. Динатрия гидрофосфат безводный.

Натрия фосфата раствор 5%. См. Динатрия гидрофосфата безводного раствор 5%.

Натрия фосфат двузамещенный 12-водный. См. Динатрия гидрофосфат додекагидрат.

Натрия фосфат додекагидрат. [10101-89-0]. Na3PO4·12H2O. (М.м. 380,12).

Фосфат натрия, додекагидрат.

Бесцветные или белого цвета кристаллы.

Легко растворим в воде.

Натрия фосфата раствор 0,25 М.

95,025 г натрия фосфата додекагидрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Натрия фосфата раствор 0,2 М.

76,02 г натрия фосфата додекагидрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Натрия фосфат однозамещенный. См. Натрия дигидрофосфат дигидрат.

Натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный. См. Динатрия гидрофосфат додекагидрат.

Натрий фосфорнокислый двузамещенный безводный. См. Динатрия гидрофосфат безводный.

Натрия фосфорномолибдат. [1313-30-0] Na3[P(Мо3O10)4]∙xH2O. (М.м. 1891,2 для безводного).

Натрий фосфорномолибденовокислый.

Жёлтый мелкокристаллический порошок.

Растворим в растворах неорганических кислот.

Натрия фосфорномолибдата раствор 10%.

10 г натрия фосфорномолибдата растворяют в 75,6 мл хлористоводородной кислоты концентрированной.

Натрия фторид. [7681-49-4]. NaF. (М.м. 41,99).

Фторид натрия.

Белый порошок или бесцветные кристаллы.

Растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Натрия хлорид. [7647-14-5]. NaCl. (М.м. 58,44).

Хлорид натрия.

Белые кубические кристаллы или белый кристаллический порошок.

Очень легко растворим в воде; практически нерастворим в спирте 96%.

Натрия хлорида раствор 20%

20,0 г натрия хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия хлорида раствор 15%

15,0 г натрия хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия хлорида раствор 10%

10,0 г натрия хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия хлорида раствор 5%

5,0 г натрия хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия хлорида раствор 4%

4,0 г натрия хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия хлорида раствор 2,2%

2,2 г натрия хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия хлорида раствор 1%

1,0 г натрия хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия хлорида раствор 0,9%

0,9 г натрия хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия хлорида раствор 0,9% для инъекций

0,9 г натрия хлорида растворяют в воде для инъекций и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия хлорида раствор 0,1%

0,1 г натрия хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия хлорида раствор 0,2 М

11,7 г натрия хлорида помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Натрия хлорида раствор 1 М

5,84 г натрия хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия хлорида раствор 0,1 М

5,84 г натрия хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Натрия хлорида раствор 2 мМ

117 мг натрия хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Натрия хлорида насыщенный раствор

1 часть натрия хлорида смешивают с 2 частями воды, периодически встряхивают и отстаивают. Перед использованием раствор декантируют и, если необходимо, фильтруют.

Натрия цитрат. [6132-04-3]. С6Н5Na3O7·2H2O. (М.м. 294,10).

Тринатриевая соль 2-гидроксипропан-1,2,3-карбоновой кислоты, дигидрат.

Белый кристаллический порошок.

Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Натрия цитрата раствор 1 М

29,41 г натрия цитрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия цитрата раствор 0,1 М

29,41 г натрия цитрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Натрия цитрата раствор 10%

10,0 г натрия цитрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия цитрата раствор 3,8%

3,8 г натрия цитрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия цитрата раствор 0,5%

0,5 г натрия цитрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия цитрата раствор 0,2%

0,2 г натрия цитрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрий щавелевокислый. См. Натрия оксалат.

Натрия эдетат. См. Динатрия эдетат дигидрат.

Натрия эдетата раствор 0,8%

0,89 г динатрия эдетата дигидрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Натрия эдетата раствор 1 М

37,2 г динатрия эдетата дигидрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия эдетата раствор 0,2 М

7,44 г динатрия эдетата дигидрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия эдетата раствор 0,1 М

3,72 г динатрия эдетата дигидрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия эдетата раствор 0,05 М

1,86 г динатрия эдетата дигидрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Натрия эдетата раствор 0,01 М

3,72 г динатрия эдетата дигидрата растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Натронная известь. [8006-28-8]. CaO·NaOH. (М.м. 96,07).

Оксид кальция—гидроксид натрия (1/1)

Нафталин. [91-20-3]. С10Н8. (М.м. 128,17).

Нафталин.

Кристаллы белого цвета.

Практически нерастворим в воде, легко растворим в эфире, растворим в спирте 96%.

Температура плавления. Около 80 °С.

Нафталин, используемый для жидкостной сцинтилляции, должен быть соответствующей степени чистоты.

Нафтарзон. [3688-92-4]. С16Н11АsN2Na2O10S2. (М.м. 576,3).

4-[(2-Арсонофенил)диазенил]-3-гидроксинафталин-2,7-дисульфонат динатрия.

Порошок красного цвета. Растворим в воде.

*Нафтарзона раствор 0,2%.

*0,2 г нафтарзона растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Хранят в защищённом от света месте. Срок хранения – 7 сут.

Нафтарзона раствор 0,058%.

58 мг нафтарзона растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Испытание на чувствительность. К 50 мл спирта 96% прибавляют 20 мл воды, 1 мл 0,05 М раствора серной кислоты, 1 мл раствора нафтарзона и титруют 0,025 М раствором бария перхлората до перехода окраски раствора от оранжево-жёлтой к оранжево-розовой.

Хранят в защищённом от света месте. Срок хранения – 7 сут.

Нафтиламин. [134-32-7]. С10Н9N. (М.м. 143,19).

Нафталин-1-амин.

Кристаллический порошок белого цвета, под действием света и воздуха розовеет.

Мало растворим в воде, легко растворим в спирте 96% и эфире.

Температура плавления. Около 51 °С.

Хранят в защищённом от света месте.

При работе соблюдать меры предосторожности – может содержать примесь β-нафтиламина.

β-Нафтиламин. [91-59-8]. С10Н9N. (М.м. 143,19).

Нафталин-2-амин.

Листовидные кристаллы или кристаллический порошок.

Растворим в спирте 96%, эфире и бензоле.

Температура плавления. Около 110 °С.

Канцерогенен.

Нафтиламина гидрохлорид. [552-46-5]. С10Н9N·HCl. (М.м. 179,65).

Нафталин-1-амина гидрохлорид.

Содержит не менее 98% С10Н9N·HCl.

Растворим в воде, спирте 96%.

Температура плавления. От 272 до 275 °С.

При работе соблюдать меры предосторожности – может содержать примесь β-нафтиламина.

1-Нафтиламин-7-сульфоновая кислота. [119-28-8]. C10H9NO3S. (М.м. 223,25).

8-Аминонафталин-7-сульфоновая кислота.

Содержит не менее 95% C12H10O2.

1-Нафтилуксусная кислота. [86-87-3]. C12H10O2. (М.м. 186,21).

(Нафталин-1-ил)уксусная кислота.

Содержит не менее 95% C12H10O2.

Порошок белого или жёлтоватого цвета.

Мало растворима в воде, растворима в разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов.

Температура плавления. Около 135 °С.

Нафтилэтилендиамина дигидрохлорид. [1465-25-4]. С12Н14N2·2НСl. (М.м. 259,17).

N-(Нафталин-1-ил)этан-1,2-диамина дигидрохлорид.

Может содержать кристаллизационный метанол.

Порошок белого или жёлтовато-белого цвета.

Растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Нафтилэтилендиамина дигидрохлорида раствор 0,1%.

0,1 г нафтилэтилендиамина дигидрохлорида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Используют свежеприготовленным.

Раствор нафтилэтилендиамина дигидрохлорида 0,5% в 1 М хлористоводородной кислоте.

0,5 г нафтилэтилендиамина дигидрохлорида растворяют в хлористоводородной кислоте растворе 1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Используют свежеприготовленным.

1-Нафтойная кислота. [86-55-5]. C11H8O2. (М.м. 172,18).

Нафталин-1-карбоновая кислота.

Содержит не менее 98% C11H8O2.

Лекго растворима в горячем спирте 96% и эфире, мало растворима в воде.

Температура плавления. 160–162 °С.

α-Нафтол. [90-15-3]. С10Н8О. (М.м. 144,17). Нафталин-1-ол.

Кристаллический порошок белого цвета или бесцветные или белого цвета кристаллы, темнеющие под действием света.

Мало растворим в воде, легко растворим в спирте 96% и эфире.

Температура плавления. Около 95 °С.

Хранят в защищённом от света месте.

α-Нафтола спиртовой раствор 20%.

20,0 г α-нафтола растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

α-Нафтола спиртовой раствор 10%.

1,0 г α-нафтола растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 10,0 мл.

α-Нафтола раствор 0,1%.

0,10 г α-нафтола растворяют в 3 мл 15% раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

α-Нафтола спиртовой раствор 0,05%.

0,05 г α-нафтола растворяют в спирте 40% и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

β-Нафтол. [135-19-3]. С10Н8О. (М.м. 144,17).

Нафталин-2-ол.

Пластинки или кристаллы белого или слабо-розового цвета.

Очень мало растворим в воде, очень легко растворим спирте 96%.

Температура плавления. Около 122 °С.

Хранят в защищённом от света месте.

β-Нафтола щелочной раствор 5%.

5,0 г свежеперекристаллизованного β-нафтола растворяют в 40 мл натрия гидроксида раствора 10% и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

β-Нафтола щелочной раствор 2%.

2,0 г β-нафтола растворяют в 40 мл натрия гидроксида раствора 10% и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

β-Нафтола раствор 0,003% в серной кислоте.

3,0 мг β-нафтола растворяют в 50 мл серной кислоты концентрированной и доводят объём раствора той же кислотой до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Нафтол жёлтый S. [846-70-8]. C10H4N2Na2O8S. (М.м. 358,19).

8-Гидрокси-5,7-динитронафталин-2-сульфонат динатрия.

Жёлтый или оранжево-жёлтый порошок.

Легко растворим в воде.

Нафтолбензеин. [145-50-6]. С27Н18О2. (М.м. 374,43).

4-[(4-Гидроксинафталин-1-ил)(фенил)метилен]нафталин-1(4H)-он.

Порошок коричневато-красного цвета или блестящие кристаллы коричневато-черного цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим в спирте 96% и уксусной кислоте ледяной.

*Нафтолбензеина раствор 0,2%.

*0,2 г нафтолбензеина растворяют в 100,0 мл уксусной кислоты безводной.

Испытание на чувствительность. К 50 мл уксусной кислоты ледяной прибавляют 0,25 мл раствора нафтолбензеина; появляется коричневато-жёлтое окрашивание, которое должно перейти в зеленое при прибавлении не более 0,05 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты.

Нафтолбензеина раствор 0,1%.

0,1 г нафтолбензеина растворяют в 100,0 мл уксусной кислоты безводной.

Испытание на чувствительность. К 50 мл уксусной кислоты ледяной прибавляют 0,25 мл раствора нафтолбензеина; появляется коричневато-жёлтое окрашивание, которое должно перейти в зеленое при прибавлении не более 0,05 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты.

α-Нафтолфталеин. [596-01-0]. С28Н18О4. (М.м. 418,4).

3,3-Бис(4-гидроксинафталин-1-ил)-2-бензофуран-1(3H)-он.

Мелкокристаллический порошок от зеленовато-серого до коричневого цвета. Практически нерастворим в воде, легко растворим в спирте, эфире и уксусной кислоте ледяной, мало растворим в бензоле.

Переход окраски раствора от жёлтовато-розовой к зеленовато-синей в интервале рН 7,4–8,6.

α-Нафтолфталеина раствор 0,1%.

0,1 г α-нафтолфталеина растворяют в 50 мл спирта 96% и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

1,2-Нафтохинон-4-сульфокислоты калиевая соль. См. Калия нафтохинонсульфонат.

Нейтральный красный. [553-24-2]. С15Н17ClN4. (М.м. 288,78).

8-Амино-N,N,7-триметилфеназин-2(10H)-иминий хлорид.

Кристаллы или порошок черного или черно-зеленого цвета.

Легко растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Переход окраски раствора от красной к жёлтой в интервале рН 6,8–8,0.

Нейтрального красного раствор 0,5%

0,5 г нейтрального красного растворяют в 100 мл воды.

Нейтрального красного раствор 0,1%

0,1 г нейтрального красного растворяют в 100 мл воды.

Нейтрального красного уксуснокислый раствор.

0,1 г нейтрального красного растворяют в 100 мл уксусной кислоты ледяной.

Нерилацетат. [141-12-8]. С12Н20О2. (М.м. 196,29).

[(2Z)-3,7-Диметилокта-2,6-диен-1-ил]ацетат.

Бесцветная, маслянистая жидкость.

Смешивается с этанолом и эфиром.

. Около 0,907.

. Около 1,460.

Хроматографическая чистота нерилацетата, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 93,0%.

транс-Неролидол. [40716-66-3]. С15Н26О. (М.м. 222,37).

(6E)-3,7,11-Триметилдодека-1,6,10-триен-3-ол.

Жидкость слабо-жёлтого цвета с легким запахом лилии или ландыша.

Практически нерастворим в воде и глицерине, смешивается со спиртом 96%.

. Около 0,876.

. Около 1,479.

Хроматографическая чистота транс-неролидола, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 90,0%.

Никель-алюминиевый сплав.

Содержит от 48 до 52% алюминия (Аl, А.м. 26,98) и от 48 до 52% никеля (Ni, А.м. 58,69).

Перед использованием измельчают до тонкого порошка (сито № 180).

Практически нерастворим в воде, растворим в растворах неорганических кислот.

Никель-алюминиевый сплав, свободный от галогенов.

Содержит от 48 до 52% алюминия (Аl, А.м. 26,98) и от 48 до 52% никеля (Ni, А.м. 58,69).

Мелкий порошок серого цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим в растворах неорганических кислот.

Содержит не более 0,001% хлоридов. 0,400 г сплава растворяют в 40 мл смеси 67 объёмов серной кислоты R и 33 объёмов разбавленной азотной кислот R. Раствор упаривают почти досуха, остаток растворяют в воде и разбавляют до 20,0 мл тем же растворителем (испытуемый раствор). Испытуемый раствор делят на 2 равные части, к первой прибавляют 1,0 мл нитрата серебра раствора 1 М, оставляют на 15 мин, фильтруют и прибавляют 0,2 мл раствора 16,5 мг прокалённого при температуре 500–600 °С до постоянной массы натрия хлорида в 1000,0 мл воды. К второй половине испытуемого раствора прибавляют 1,0 мл нитрата серебра раствора 1 М. Опалесценция второй части испытуемого раствора не должна превышать опалесценцию первой части.

Никеля сульфат. [10101-98-1]. NiSO4·7H2O. (М.м. 280,86).

Сульфат никеля(II), гептагидрат.

Кристаллический порошок или кристаллы зеленого цвета.

Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Никеля хлорид. [7718-54-9]. NiСl2. (М.м. 129,60).

Хлорид никеля(II).

Кристаллический порошок жёлтого цвета.

Очень легко растворим в воде, растворим в спирте 96%. Сублимируется в отсутствие воздуха и легко абсорбирует аммиак. Водный раствор имеет кислую реакцию.

Никотиновая кислота. [59-67-6]. C6H5NO2. (М.м. 123,11).

Пиридин-3-карбоновая кислота.

Белый или почти белый кристаллический порошок.

Умеренно растворим в воде, растворим в кипящей воде и кипящем спирте 96%.

Никотинамидадениндинуклеотид. [53-84-9]. С21Н27N7O14Р2. (М.м. 663,4).

({[(2R,3S,4R,5R)-5-(6-Амино-9H-пурин-9-ил)-3,4-дигидроксиоксолан-2-ил]метокси}(гидрокси)фосфорил){[(2R,3S,4R,5R)-5-(3-карбамоил-1-ий-1-ил)-3,4-дигидроксиоксолан-2-ил]метил}фосфат.

Порошок белого цвета, сильно гигроскопичен. Легко растворим в воде.

Никотинамидадениндинуклеотида раствор 0,4%.

40 мг никотинамидадениндинуклеотида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 10,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Нильский синий А. [3625-57-8]. (С20Н19N3O)2·H2SO4. (М.м. 732,8).

5-Имино-N,N-диэтил-5H-бензо[_a_]феноксазин-9-амина сульфат (2:1).

Кристаллический порошок зеленого цвета с бронзовым блеском.

Умеренно растворим в спирте 96%, уксусной кислоте ледяной и пиридине.

Раствор 0,005 г/л в спирте (50%, о/о) имеет максимум поглощения при длине волны 640 нм.

Нильского синего А раствор 1%.

Раствор 1,0 г нильского синего А в 100,0 мл уксусной кислоты безводной.

Испытание на чувствительность. К 50 мл уксусной кислоты безводной прибавляют 0,25 мл раствора нильского синего А; появляется голубое окрашивание, которое переходит в сине-зеленое при прибавлении не более 0,1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты.

Переход окраски от синей до красной в интервале рН 9,0–13,0.

Нингидрин. [485-47-2]. С9Н4О3∙Н2О. (М.м. 178,14).

2,2-Дигидрокси-1H-инден-1,3(2H)-дион, моногидрат.

Кристаллический порошок белого или слегка жёлтого цвета. Ядовит.

Растворим в воде и спирте 96%, мало растворим в эфире.

Хранят в защищённом от света месте.

Нингидрина раствор 5% в спирте

0,5 г нингидрина растворяют при встряхивании в 10 мл спирта 96%.

Нингидрина раствор 3%

3,0 г нингидрина растворяют в 100 мл раствора 45,5 г/л натрия метабисульфита.

Нингидрина раствор 3% в спирте

1,5 г нингидрина растворяют в 50 мл спирта 96%.

Нингидрина раствор 2%

1,0 г нингидрина растворяют в 50 мл воды.

Нингидрина раствор 1,7% в ацетоне

0,17 г нингидрина растворяют в 10 мл ацетона. Срок годности – 30 сут. Хранить в плотно закрытой ёмкости при температуре от 0 до 4 °С.

Нингидрина раствор 1,7% уксусно-спиртовой

1,0 г нингидрина растворяют в 50 мл спирта 96% и прибавляют 10 мл уксусной кислоты ледяной.

Нингидрина раствор 2% в спирте

1,0 г нингидрина растворяют в 50 мл спирта 96%.

Нингидрина раствор 1% в спирте

0,5 г нингидрина растворяют в 50 мл спирта 96%.

Нингидрина раствор 1% в ацетоне

0,5 г нингидрина растворяют в 50 мл ацетона.

Нингидрина раствор 0,5% в ацетоне

0,25 г нингидрина растворяют в 50 мл ацетона.

Нингидрина раствор 0,4% в ацетоне

0,2 г нингидрина растворяют в 50 мл ацетона.

Нингидрина раствор 0,5% в метаноле

0,25 г нингидрина растворяют в 50 мл метанола.

Нингидрина раствор 0,4%

4,0 г нингидрина растворяют в 100 мл смеси растворителей уксусная кислота безводная—бутанол 5:95.

Нингидрина раствор 0,25%

0,25 г нингидрина растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Нингидрина раствор 0,25% в спирте 96%

0,25 г нингидрина растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Нингидрина раствор 0,2%

0,2 г нингидрина растворяют в 100,0 мл смеси растворителей уксусная кислота разведённая 12%—бутанол 5:95.

Нингидрина раствор 0,2% в спирте 96%

0,2 г нингидрина растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Нингидрина раствор 0,1%

0,1 г нингидрина растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Используют свежеприготовленным.

Нингидрина раствор 0,1% в пропаноле

0,1 г нингидрина растворяют в пропаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Нингидрина и олова(II) хлорида реактив (1)

0,2 г нингидрина растворяют в 4 мл горячей воды, прибавляют 5 мл 0,16% раствора олова(II) хлорида, выдерживают в течение 30 мин, фильтруют и хранят при температуре от 2 до 8 °С.

Непосредственно перед использованием к 2,5 мл полученного раствора прибавляют 5 мл воды и 45 мл 2-пропанола.

Нингидрина и олова(II) хлорида реактив (2)

4,0 г нингидрина растворяют в 100 мл моноэтилового эфира этиленгликоля. Осторожно встряхивают с 1 г смолы катионообменной (от 300 до 840 мкм) и фильтруют (раствор А). 0,16 г олова(II) хлорида растворяют в 100 мл буферного раствора рН 5,5 (раствор Б).

Непосредственно перед использованием смешивают равные объёмы растворов А и Б.

Нитрилотриуксусная кислота. [139-13-9]. C6H9NO6. (М.м. 191,14).

2,2'2''-Нитрилотриуксусная кислота.

Белый или почти белый кристаллическия порошок.

Практически нерастворим в воде и большинстве органических растворителей.

Температура плавления. Около 245 °С (разл.).

Нитроанилин. [100-01-6]. С6Н6N2O2 (М.м. 138,12).

4-Нитроанилин.

Кристаллический порошок ярко-жёлтого цвета.

Очень мало растворим в воде, умеренно растворим в кипящей воде, растворим в спирте 96% и эфире. Образует водорастворимые соли с сильными неорганическими кислотами.

Температура плавления. Около 147 °С.

п-Нитроанилина раствор.

0,015 г нитроанилина растворяют в 20 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты и доводят спиртом 96% до 100,0 мл. Реактив применяют не ранее, чем через 24 ч после приготовления.

Нитробензальдегид. [552-89-6]. С7Н5NO3. (М.м. 151,12).

2-Нитробензальдегид.

Игольчатые кристаллы жёлтого цвета.

Мало растворим в воде, легко растворим в спирте 96%, растворим в эфире, сублимируется паром.

Температура плавления. Около 42 °С.

Нитробензальдегидная бумага.

0,2 г нитробензальдегида растворяют в 10 мл 20% раствора натрия гидроксида. Срок годности – 1 ч.

В полученный раствор погружают нижнюю половину полоски из медленно фильтрующей бумаги длиной 10 см и шириной 0,8–1,0 см. Избыток реактива удаляют, промокая полоску между 2 листами фильтровальной бумаги.

Используют в течение нескольких минут после приготовления.

Нитробензальдегида раствор.

0,12 г порошка нитробензальдегида прибавляют к 10 мл раствора натрия гидроксида разведённого 8,5%, встряхивают в течение 10 мин и фильтруют.

Готовят непосредственно перед использованием.

Нитробензилхлорид. [100-14-1]. С7Н6СlNO2. (М.м. 171,58).

1-Нитро-4-(хлорметил)бензол.

Кристаллы светло-жёлтого цвета.

Практически нерастворим в воде, очень легко растворим в спирте 96% и эфире.

Сильный лакриматор, при работе принимать меры предосторожности.

Нитробензоилхлорид. [122-04-3]. С7Н4СlNO3. (М.м. 185,56).

4-Нитробензоилхлорид.

Кристаллы или кристаллическая масса жёлтого цвета, расплывающаяся на воздухе.

Растворим в растворе натрия гидроксида с образованием жёлтовато- оранжевого окрашивания.

Температура плавления. Около 72 °С.

4-Нитробензойная кислота. [62-23-7]. C7H5NO4. (M.м. 167,12).

Жёлтые кристаллы.

Температура плавления. Около 240 °С.

4-(4-Нитробензил)пиридин. [1083-48-3]. С12Н10N2O2. (М.м. 214,22).

4-[(4-Нитрофенил)метил]пиридин.

Порошок жёлтого цвета.

Температура плавления. Около 70 °С.

Нитробензол. [98-95-3]. С6Н5NO2. (М.м. 123,11).

Нитробензол.

Бесцветная или слегка жёлтоватого цвета жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

Температура кипения. Около 211 °С.

Динитробензол. К 0,1 мл нитробензола прибавляют 5 мл ацетона, 5 мл воды и 5 мл 20% раствора натрия гидроксида и встряхивают; после разделения слоев верхний слой должен быть почти бесцветным.

Нитрозодипропиламин. [621-64-7]. С6Н14N2O. (М.м. 130,19).

N-Нитрозо-N-пропилпропан-1-амин.

Жидкость.

Растворим в этаноле, эфире и концентрированных неорганических кислотах.

. Около 0,915.

Температура кипения. Около 78 °С.

Пригодна для определения хемилюминесценции.

Нитрозодипропиламина раствор.

Вводят 78,62 г этанола, прокалывая инъекционной иглой пробку сосуда, содержащего нитрозодипропиламин, разводят этанолом в соотношении 1:100 и помещают по 0,5 мл в плотно закрываемые флаконы.

Хранят в защищённом от света месте при температуре 5 °С.

Нитрозо-Р-соль. [525-05-3]. С10Н5NNa2O8S2. (М.м. 377,26).

3-Гидрокси-4-нитрозонафталин-2,7-дисульфонат динатрия.

Жёлтые или жёлтые с зеленоватым оттенком кристаллы.

Нитрозо-Р-соли раствор 0,5%.

Раствор 0,1 г нитрозо-Р-соли в 50,0 мл воды.

Нитрометан. [75-52-5]. СН3NO2. (М.м. 61,04).

Нитрометан.

Прозрачная, бесцветная, маслянистая жидкость.

Мало растворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. От 1,132 до 1,134.

. От 1,381 до 1,383.

Температурные пределы перегонки. От 100 до 103 °С; должно перегоняться не менее 95%.

Нитромолибденованадиевый реактив.

Раствор I. 10,0 г аммония молибдата растворяют в воде, прибавляют 1 мл 18% раствора аммиака и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Раствор II. 2,5 г аммония ванадата растворяют в горячей воде, прибавляют 14 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 500,0 мл.

К 96 мл азотной кислоты концентрированной прибавляют 100 мл раствора I и 100 мл раствора II и доводят объём раствора водой до 500,0 мл.

Нитротетразолиевый синий. [298-83-9]. С40Н30Сl2N10O6. (М.м. 817,6).

3,3′-(3,3′-Диметокси[1,1'-бифенил]-4,4′-диил)бис[2-(4-нитрофенил)-5-фенил-2Н-тетразол-3-ий] дихлорид.

Растворим в метаноле с образованием прозрачного раствора жёлтого цвета.

Температура плавления. Около 189 °С с разложением.

4-Нитрофенол. [100-02-7]. C6H5NO3. (М.м. 139,11).

4-Нитрофенол.

Бесцветный или слабо-жёлтый порошок, умеренно растворим в воде и метане.

Температура плавления. Около 114 °С.

Нитрофурантоин. [67-20-9]. С8Н6N4О5. (М.м. 238,16).

1-{[(5-Нитрофуран-2-ил)метилен]амино}имидазолидин-2,4-дион.

Жёлтый кристаллический порошок или жёлтые кристаллы, без запаха или почти без запаха.

Очень мало растворим в воде и спирте 96%, растворим в диметилформамиде.

(5-Нитро-2-фурил)метилена диацетат. [92-55-7]. С9Н9NO7. (М.м. 243,17).

[(5-Нитрофуран-2-ил)метилен]диацетат.

Кристаллы жёлтого цвета.

Температура плавления. Около 90 °С.

Нитрохромовый реактив.

0,7 г калия дихромата растворяют в азотной кислоте концентрированной и доводят объём раствора той же кислотой до 100,0 мл.

Нитроэтан. [79-24-3]. С2Н5NO2. (М.м. 75,07).

Нитроэтан.

Прозрачная, бесцветная, маслянистая жидкость.

Растворим в воде, хлороформе; смешивается с этанолом и эфиром.

Температура кипения. Около 114 °С.

Нитхромазо. [94732-99-7]. C22H12N6Na2O18S4. (М.м. 822,6). 4,5-Дигидрокси-3,6-бис[(E)-2-(4-нитро-2-сульфофенил)диазен-1-ил]нафталин-2,7-дисульфонат динатрия.

Нордазепам. [1088-11-5]. С15Н11СlN2O. (М.м. 270,71).

5-Фенил-7-хлор-1,3-дигидро-2Н-1,4-бензодиазепин-2-он.

Кристаллический порошок белого или светло-жёлтого цвета.

Практически нерастворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Температура плавления. Около 216 °С.

Нониламин. [112-20-9]. C9H21N. (М.м. 143,27).

Нонан-1-амин.

Содержит не менее 98% C9H21N.

. Около 0,788.

. Около 1,433.

Температура кипения. Около 201 °С.

DL-Норлейцин. [616-06-8]. С6Н13NO2. (М.м. 131,17).

(2RS)-2-Аминогексановая кислота.

Блестящие кристаллы.

Умеренно растворим в воде, растворим в кислотах.

Норпсевдоэфедрина гидрохлорид. [2153-98-2]. С9Н13NO∙HСl. (М.м. 187,61).

rac-(1R,2R)-2-Амино-1-фенилпропан-1-ола гидрохлорид.

Кристаллический порошок.

Растворим в воде.

Температура плавления. От 180 до 181 °С.

Обесцвечивающий раствор.

Смесь растворителей: уксусная кислота ледяная–метанол–вода 1:4:5.

2,2`-Оксибис(N,N-диметиламин). [3033-62-3]. C8H20N2O. (М.м. 160,26).

Бис(2-диметиламиноэтил)овый эфир.

Бесцветная едкая жидкость.

. Около 0,85.

. Около 1,430.

Окситетрациклина гидрохлорид. [2058-46-0]. C22H24N2O9·HCl. (М.м. 496,89).

(4S,4aR,5S,5aR,6S,12aS)-3,5,6,10,12,12a-Гексагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамида гидрохлорид.

Жёлтый кристаллический порошок, гигроскопичен.

Легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96%.

Октан. [111-65-9].C8H18. (М.м. 114,23).

Октан.

Бесцветная прозрачная жидкость с характерным запахом.

. Около 0,703.

. Около 1,397.

Температура кипения. 125,7 °С.

Октанол. [111-87-5]. С8Н18O. (М.м. 130,23).

Октан-1-ол.

Бесцветная жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. Около 0,828.

Температура кипения. Около 195 °С.

3-Октанон. [106-68-3]. С8Н16О. (М.м. 128,21).

Октан-3-он.

Бесцветная жидкость с характерным запахом.

Практически нерастворим в воде, смешивается с этанолом и эфиром.

. Около 0,822.

. Около 1,415.

Температура кипения. Около 167 °С.

Хроматографическая чистота 3-октанона, применяемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 98,0%.

Октиламин. [111-86-4]. С8Н19N. (М.м. 129,24).

Октан-1-амин.

Бесцветная жидкость с характерным запахом.

Смешивается с этанолом, бензолом и этилацетатом. ограниченно смешивается с водой.

. Около 0,782.

Температура кипения. От 175 до 179 °С.

N-Октилпиридин-4-амин. [64690-19-3]. C13H22N2. (М.м. 206,33).

N-Октилпиридин-4-амин.

Порошок от светло-коричневого до тёмно-коричневого цвета.

Температура плавления. От 64 до 67 °С.

Хранить при температуре от 2 до 8 °С.

Октоксинол. [9002-93-1]. C14H22O(C2H4O)n.

α-[4-(2,4,4-Триметилпентан-2-ил)фенил]-ω-гидроксиполи(оксиэтан-1,2-диил).

Октоксинол 1. [2315-67-5]. C16H26O2. (М.м. 250,38).

2-[4-(2,4,4-Триметилпентан-2-ил)фенокси]этан-1-ол.

Октоксинол 9. C32H58O10. (М.м. 602,80).

26-[4-(2,4,4-Триметилпентан-2-ил)фенокси]-3,6,9,12,15,18,21,24-октаоксагексакозан-1-ол.

Октоксинол 10. [9041-29-6]. C34H62O11. (М.м. 646,85).

29-[4-(2,4,4-Триметилпентан-2-ил)фенокси]-3,6,9,12,15,18,21,24,27- нонаоксанонакозан-1-ол.

Олеамид. [301-02-0]. С18Н35NО. (М.м. 281,48).

(9Z)-Октадец-9-енамид.

Порошок или гранулы от белого до жёлтоватого цвета.

Практически нерастворим в воде, очень легко растворим в метиленхлориде, растворим в этаноле.

Температура плавления. Около 80 °С.

Олова(II) хлорид. [10025-69-1]. SnCl2·2H2O. (М.м. 225,65).

Хлорид олова(II), дигидрат.

Содержит не менее 97,0% SnCl2·2H2O.

Бесцветные кристаллы.

Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96%, уксусной кислоте ледяной, хлористоводородной кислоте разведённой и концентрированной.

Олова(II) хлорида раствор (1)

20,0 г олова металлического нагревают с 85 мл хлористоводородной кислоты концентрированной до прекращения выделения водорода, охлаждают.

Хранят раствор над избытком олова, защищая от воздуха.

Олова(II) хлорида раствор (2)

Непосредственно перед использованием раствор олова(II) хлорида (1) разводят хлористоводородной кислотой разведённой 7,3% 1:10.

Олова(II) хлорида раствор 10%

1,0 г олова(II) хлорида растворяют в 5 мл воды, в случае появления опалесценции прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 10,0 мл.

Олова(II) хлорида раствор 8%

К 8,0 г олова(II) хлорида прибавляют 100 мл раствора 20% (о/о) хлористоводородной кислоты, встряхивают до растворения, если необходимо, нагревают при температуре 50 °С и пропускают азот в течение 15 мин.

Готовят непосредственно перед использованием.

Олово. [7440-31-5]. Sn. (А.м. 118,71).

Олово.

Гранулы серебристо-белого цвета.

Растворимо в хлористоводородной кислоте концентрированной с выделением водорода.

Мышьяк. Не более 0,001% (10 ррm).

Оранжевый III. См. Метиловый оранжевый.

Оранжевый IV. См. Тропеолин 00.

Орацетовый синий 2R. [4395-65-7]. С20Н14N2О2. (М.м. 314,34).

1-Амино-4-анилиноантрацен-9,10-дион.

Температура плавления. Около 194 °С.

Орацетовый синий В. [12769-16-3]. С21Н16N2О2. (М.м. 328,37).

4-Анилино-1-(метиламино)антрацен-9,10-дион.

Порошок сине-фиолетового цвета.

Практически нерастворим в воде, легко растворим в ацетоне и уксусной кислоте безводной.

Орацетового синего В раствор 0,5%.

1 г орацетового синего В растворяют в 200 мл уксусной кислоты ледяной. При титровании в неводной среде изменяет окраску от голубого цвета (основание) через пурпурный (нейтральная среда) до розового цвета (кислая среда).

Ортофосфорная кислота. См. Фосфорная кислота.

Ортофосфорная кислота концентрированная. См. Фосфорная кислота концентрированная.

Орцин. [6153-39-5]. С7Н8О2·Н2О. (М.м. 142,15).

5-Метилбензол-1,3-диол, моногидрат.

Бесцветный кристаллический порошок, чувствителен к свету.

Растворим в воде, легко растворим в этаноле и эфире.

Температура кипения. Около 290 °С.

Температура плавления. От 58 до 61 °С.

Осмия(VIII) оксид. [20816-12-0]. ОsO4. (М.м. 254,23).

Оксид осмия(VIII).

Игольчатые кристаллы светло-жёлтого цвета или кристаллическая масса жёлтого цвета. Гигроскопичен, чувствителен к свету.

Растворим в воде, спирте 96% и эфире.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Осмия(VIII) оксида раствор 0,25%.

Раствор 0,25 г осмия(III) оксида в 100,0 мл серной кислоты раствора 0,05 М.

Палладий. [7440-05-3]. Рd. (А.м. 106,42).

Палладий.

Металл серовато-белого цвета.

Растворим в хлористоводородной кислоте 25%.

Палладия хлорид. [7647-10-1]. РdCl2. (М.м. 177,33).

Хлорид палладия(II).

Кристаллы красного цвета.

Растворим в воде, ацетоне; растворим в хлористоводородной кислоте концентрированной.

Палладия хлорида раствор.

1,0 г палладия хлорида растворяют в 10 мл теплой хлористоводородной кислоты концентрированной, полученный раствор доводят смесью равных объёмов хлористоводородной кислоты разведённой 7,3% и воды до объёма 250,0 мл.

Непосредственно перед использованием раствор разбавляют 2 объёмами воды.

Пальмитиновая кислота. [57-10-3]. С16Н32О2. (М.м. 256,42).

Гексадекановая кислота.

Кристаллические чешуйки белого цвета.

Практически нерастворима в воде, легко растворима в горячем спирте 96% и эфире.

Температура плавления. Около 63 °С.

Панкреатин. См. ФС Панкреатин.

Папаверина гидрохлорид. [61-25-6]. C20H21NO4·HCl. (М.м. 375,85).

1-[(3,4-Диметоксифенил)метил]-6,7-диметоксиизохинолина гидрохлорид.

Белый или почти белый кристаллический порошок или белые или почти белые кристаллы.

Умеренно растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Температура плавления. От 224 до 225 °С с разложением.

Папаин. [9001-73-4].

Протеолитический фермент, получаемый из млечного сока зелёных плодов и листьев Carica papaya L.

Парарозанилина гидрохлорид. [569-61-9]. С19Н17N3·HCl. (М.м. 323,82).

4-[Бис(4-аминофенил)метилен]циклогекса-2,5-диен-1-иминия хлорид.

Кристаллический порошок синевато-красного цвета.

Мало растворим в воде, растворим в этаноле, практически нерастворим в эфире.

Растворы в воде и этаноле имеют интенсивную красную окраску, растворы в разведённых серной и хлористоводородной кислотах имеют жёлтую окраску.

Температура плавления. Около 270 °С с разложением.

Парарозанилина обесцвеченный раствор

0,1 г парарозанилина гидрохлорида помещают в колбу с притертой стеклянной пробкой, прибавляют 60 мл воды и раствора 1,0 г натрия сульфита безводного или раствора 2,0 г натрия сульфита, или раствора 0,75 г натрия метабисульфита в 10 мл воды, затем медленно при перемешивании прибавляют 6 мл кислоты хлористоводородной разведённой 7,3%, закрывают колбу пробкой и продолжают перемешивание до растворения; объём полученного раствора доводят водой до 100,0 мл.

Раствор используют через 12 ч после приготовления.

Хранят в защищённом от света месте.

Парарозанилина раствор 0,2% в хлористоводородной кислоты растворе 1 М

0,2 г парарозанилина гидрохлорида растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 1 М и доводят объём тем же растворителем до 100,0 мл.

Срок годности раствора – 6 мес.

Парафин жидкий.

Бесцветная прозрачная маслянистая жидкость, без флуоресценции при дневном освещении.

Практически нерастворимо в воде, умеренно растворимо в спирте 96%, смешивается с углеводородами.

Парацетамол. [103-90-2]. C8H9NO2. (М.м. 151,16).

N-(4-Гидроксифенил)ацетамид.

Белый или почти белый кристаллический порошок, легко растворим в спирте 96%, растворим в ацетоне, умеренно растворим в воде.

Температура плавления. От 168 до 172 °С.

Парацетамол, свободный от 4-аминофенола

Парацетамол перекристаллизовывают из воды и сушат в вакууме при температуре 70 °С; процедуру повторяют до тех пор, пока парацетамол не будет выдерживать следующее испытание.

5 г высушенного парацетамола растворяют в смеси равных объёмов метанола и воды и доводят объём раствора той же смесью растворителей до 100,0 мл. Прибавляют 1 мл свежеприготовленного раствора, содержащего 10 г/л натрия нитропруссида и 10 г/л натрия карбоната безводного, перемешивают и выдерживают в течение 30 мин в защищённом от света месте. Не должно появляться синее или зеленое окрашивание.

Пеларгоновая кислота. [112-05-0]. С9Н18O2. (М.м. 158,24).

Нонановая кислота.

Содержит не менее 97,0% С9Н18O2.

Температура плавления. Около 9 °С.

Температура кипения. Около 270 °С.

. Около 0,906.

. Около 1,432.

Пентан. [109-66-0]. С5Н12. (М.м. 72,15).

Пентан.

Прозрачная, бесцветная, воспламеняющаяся жидкость.

Очень мало растворим в воде, смешивается с ацетоном, этанолом и эфиром.

. Около 0,63.

. Около 1,359.

Температура кипения. Около 36 °С.

Пентан, используемый в спектрофотометрии, должен выдерживать следующее дополнительное испытание.

Минимальное пропускание. 20% при длине волны 200 нм; 50% при длине волны 210 нм; 85% при длине волны 220 нм; 93% при длине волны 230 нм; 98% при длине волны 240 нм.

Определение проводят, используя в качестве раствора сравнения воду.

1,2-Пентандиол. [5343-92-0].С5Н12О2. (М.м. 104,15).

Пентан-1,2-диол.

Бесцветная жидкость.

. Около 0,971.

. Около 1,439.

Температура кипения. Около 206 °С.

Пентанол. [71-41-0]. С5Н12О. (М.м. 88,15).

Пентан-1-ол.

Бесцветная жидкость.

Умеренно растворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. Около 1,410.

Температура кипения. Около 137 °С.

Пентафторпропановая кислота. [422-64-0]. C3HF5O2. (М.м. 164,03).

Пентафторпропановая кислота.

Прозрачная бесцветная жидкость.

. Около 1,561.

. Около 1,284.

Температура кипения. Около 97 °С.

Пентафторпропионовый ангидрид. [356-42-3]. C6F10O3. (М.м. 310,05).

Пентафторпропановый ангидрид.

. Около 1,571.

. Около 1,29.

Температура кипения. 70,5 °С.

Пентетовая кислота. [67-43-6]. C14H23N3O10. (М.м. 393,35).

N,N-Бис{2-[бис(карбоксиметил)амино]этил}глицин.

Белый кристаллический порошок.

Очень мало растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96% и хлороформе.

Температура плавления. Около 220 °С.

трет-Пентиловый спирт. [75-85-4]. С5Н12О. (М.м. 88,15).

2-Метилбутан-2-ол.

Летучая воспламеняющаяся жидкость.

Легко растворим в воде, смешивается со спиртом 96%, эфиром и глицерином.

. Около 0,81.

Температурные пределы перегонки. От 100 до 104 °С; должно перегоняться не менее 95%.

Хранят в защищённом от света месте.

Перметрин. [52645-53-1]. C21H20Cl2O3. (М.м. 391,29).

[(3-Феноксифенил)метил][2,2-диметил-3-(2,2-дихлорэтен-1-ил)циклопропанкарбоксилат].

Температура плавления. От 34 до 35 °С.

Пергидроль. См. Водорода пероксид.

Перуксусная кислота. [79-21-0]. C2H4O3. (М.м. 76,05).

Этанпероксовая кислота.

Бесцветная жидкость с сильным резким и едким запахом.

. Около 1,104.

Песок.

Крупинки кремния диоксида белого или слегка сероватого цвета с размером частиц от 150 до 300 мкм.

Петролейный эфир. [8032-32-4].

Прозрачная, бесцветная, воспламеняющаяся жидкость, не флуоресцирует. Практически нерастворим в воде, смешивается со спиртом 96%.

. От 0,661 до 0,664.

Температурные пределы перегонки. От 50 до 70 °С.

Петролейный эфир (1).

Должен выдерживать требования для петролейного эфира (1) со следующими изменениями:

. От 0,630 до 0,656.

Температурные пределы перегонки. От 40 до 60 °С.

Не должен мутнеть при температуре 0 °С.

Петролейный эфир (2).

Должен выдерживать требования для петролейного эфира со следующими изменениями:

. От 0,620 до 0,630.

Температурные пределы перегонки. От 30 до 40 °С.

Не должен мутнеть при температуре 0 °С.

Петролейный эфир (3).

Должен выдерживать требования для петролейного эфира со следующими изменениями:

. Около 0,720.

Температурные пределы перегонки. От 100 до 120 °С.

Вода: не более 0,03%.

Петролейный эфир (4).

Должен выдерживать требования для петролейного эфира со следующими изменениями:

. Около 0,70.

Температурные пределы перегонки. От 80 до 100 °С.

Пикрилсульфокислота. [2508-19-2]. C6H3N3O9S. (М.м. 293,17).

2,4,6-Тринитробензолсульфоновая кислота.

Растворима в воде.

Пикрилсульфокислоты раствор 5%.

Раствор пикрилсульфокислоты в воде 50 г/л.

Хранить при температуре 2–8 °С.

Пикриновая кислота. [88-89-1]. С6Н3N3О7. (М.м. 229,10).

2,4,6-Тринитрофенол.

Призмы или пластинки жёлтого цвета. Ядовита.

Растворима в воде и спирте 96%.

Хранят, увлажняя водой.

Пикриновой кислоты раствор 1%.

1,0 г пикриновой кислоты растворяют в 100,0 мл воды.

Хранят в стеклянных сосудах с притертыми пробками в защищённом от света месте.

Срок годности 2 мес.

Пикриновой кислоты насыщенный раствор.

12,3 г пикриновой кислоты заливают 1 л воды и оставляют при частом взбалтывании на 24 ч.

Хранят в стеклянных сосудах с притертыми пробками в защищённом от света месте.

Пикриновой кислоты раствор.

К 100 мл насыщенного раствора пикриновой кислоты прибавляют 0,25 мл 20% раствора натрия гидроксида.

Пикриновой кислоты насыщенный раствор в абсолютированном спирте.

6,25 г пикриновой кислоты заливают 100 мл абсолютированного спирта и оставляют при частом взбалтывании на 24 ч.

Хранят в стеклянных сосудах с притертыми пробками в защищённом от света месте, вдали от огня.

α-Пинен. [7785-70-8]. С10Н16. (М.м. 136,23).

(1R,5R)-2,6,6-Триметилбицикло[3.1.1]гепт-2-ен.

Жидкость не смешиваемая с водой.

. Около 0,859.

. Около 1,466.

Температура кипения. От 154 до 156 °С.

Хроматографическая чистота α-пинена, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 99,0%.

β-Пинен. [127-91-3]. С10Н16. (М.м. 136,23).

rac-(1R,5R)-6,6-Диметил-2-метилиденбицикло[3.1.1]гептан.

Бесцветная, маслянистая жидкость с запахом скипидара.

Практически нерастворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. Около 0,867.

. Около 1,474.

Температура кипения. От 155 до 156 °С.

Хроматографическая чистота β-пинена, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 99,0%.

Пиперазина гексагидрат. [142-63-2]. C4H10N2·6H2O. (М.м. 194,23).

Белый кристаллический порошок.

Легко растворим в воде, растворим в этаноле, мало растворим в диэтиловом эфире.

Температура плавления. Около 44 °С.

Пиперазинопиримидин. [20980-22-7]. C8H12N4. (М.м. 164,21).

2-(Пиперазин-1-ил)пиримидин.

Содержит не менее 98% ]. C8H12N4.

От белого до бледно-жёлтого легкоплавкое вещество.

Температура кипения. Около 120 °С/2 мм.рт.ст.

Пиперидин. [110-89-4]. С5Н11N. (М.м. 85,15).

Пиперидин.

Бесцветная или слегка жёлтоватого цвета жидкость, имеет щелочную реакцию.

Смешивается с водой, спиртом 96%, эфиром и петролейным эфиром.

Температура кипения. Около 106 °С.

Пиперидина гидрохлорид. [6091-44-7]. С5Н11N·HCl. (М.м. 121,61).

Пиперидина гидрохлорид.

Белый кристаллический порошок, гигроскопичен.

Содержит не менее 99% С5Н11N·HCl.

Растворим в воде.

Температура плавления. От 245 до 249 °С.

Пиперитон. [89-81-6]. C10H16O. (М.м. 152,23).

3-Метил-6-(пропан-2-ил)циклогекс-2-ен-1-он.

Пирид-2-иламин. [504-29-0]. С5Н6N2. (М.м. 94,12).

Пиридин-2-амин.

Крупные кристаллы.

Растворим в воде, спирте 96% и эфире.

Температура кипения. Около 210 °С.

Температура плавления. Около 58 °С.

Пиридилазонафтол. [85-85-8]. С15Н11N3O. (М.м. 249,27).

1-(Пиридин-2-илдиазенил)нафталин-2-ол.

Порошок кирпично-красного цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим в спирте, метаноле и горячих разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов.

Температура плавления. Около 138 °С.

Пиридилазонафтола раствор 0,1%.

0,1 г пиридилазонафтола растворяют в 100 мл этанола.

Испытание на чувствительность. К 50 мл воды прибавляют 10 мл ацетатного буферного раствора рН 4,4, 0,10 мл 0,02 М раствора натрия эдетата и 0,25 мл раствора пиридилазонафтола; после прибавления 0,15 мл 0,5% раствора меди(II) сульфата окраска должна измениться от светло-жёлтой к фиолетовой.

Пиридилазорезорцина натриевая соль моногидрат. [16593-81-0]. C11H8N3NaO2·H2O. (М.м. 255,21).

4-(2-Пиридилазо)резорцинола натриевая соль моногидрат.

Оранжевый кристаллический порошок.

Индикатор.

Пиридилазорезорцина раствор 0,1%.

0,1 г пиридилазорезорцина натриевой соли моногидрата растворяют в 100 мл спирта 96%.

Пиридин. [110-86-1]. С5Н5N. (М.м. 79,10).

Пиридин.

Прозрачная, бесцветная, гигроскопичная жидкость. Обладает характерным неприятным запахом. Ядовит.

Смешивается с водой и спиртом 96%.

Температура кипения. Около 115 °С.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Пиридин безводный.

Пиридин сушат над натрия карбонатом безводным, фильтруют и перегоняют.

Вода. Не более 0,01% (м/м).

Пиримифос-этил. [23505-41-1]. C13H24N3O3PS. (М.м. 333,39).

O-[2-(Диэтиламино)-6-метилпиримидин-4-ил]-O,O-диэтилтиофосфат.

Температура плавления. От 15 до 18 °С.

Пировиноградная кислота. [127-17-3]. С3Н4О3. (М.м. 88,06).

2-Оксопропановая кислота.

Жидкость жёлтоватого цвета. Смешивается с водой, этанолом и эфиром.

. Около 1,267.

. Около 1,413.

Температура кипения. Около 165 °С.

Пирогаллол. [87-66-1]. С6Н6О3. (М.м. 126,11).

Бензол-1,2,3-триол.

Кристаллы белого цвета, под действием воздуха и света темнеют.

Очень легко растворим в воде, спирте 96% и эфире, мало растворим в углерода дисульфиде.

Под действием воздуха водные растворы, а еще быстрее щелочные растворы, приобретают коричневую окраску вследствие абсорбции кислорода.

Температура плавления. Около 131 °С.

Хранят в защищённом от света месте.

Пирогаллола раствор.

0,5 г пирогаллола растворяют в 100 мл воды и разливают в поглотительные сосуды по 10 мл. Непосредственно перед использованием в раствор прибавляют 3 капли 30% раствора калия гидроксида. Раствор используют свежеприготовленным.

Пирогаллола щелочной раствор.

0,5 г пирогаллола растворяют в 2 мл воды, свободной от углерода диоксида. 12 г калия гидроксида растворяют в 8 мл воды, свободной от углерода диоксида.

Непосредственно перед использованием смешивают оба раствора.

Пирокатехин. [120-80-9]. С6Н6О2. (М.м. 110,11).

Бензол-1,2-диол.

Бесцветные или слабо-жёлтого цвета кристаллы.

Растворим в воде, ацетоне, спирте 96% и эфире.

Температура плавления. Около 102 °С.

Хранят в защищённом от света месте.

Пирокатехиновый фиолетовый. [115-41-3]. С19Н14О7S. (М.м. 386,39).

3,3-Бис(3,4-дигидроксифенил)-3Н-2,1λ6-бензоксатиол-1,1-дион.

Порошок красно-коричневого или зелено-коричневого цвета.

Легко растворим в воде и спирте 96%, растворим в уксусной кислоте ледяной, практически нерастворим в эфире, ацетоне, бензоле.

В интервале рН 2,0–3,0 индикатор имеет жёлтую окраску, его комплексы с ионом висмута в тех же условиях синего цвета.

Переход окраски при прямом титровании иона висмута от синей к жёлтой.

В щелочной среде индикатор имеет красно-фиолетовую окраску, его комплексы с ионами магния и цинка в тех же условиях зеленовато-синего цвета.

Переход окраски при прямом титровании ионов магния и цинка от зеленовато-синей к красно-фиолетовой.

Пирокатехинового фиолетового индикаторная смесь.

0,25 г пирокатехинового фиолетового и 25 г натрия хлорида растирают в ступке и перемешивают.

Пирокатехинового фиолетового раствор.

0,1 г пирокатехинового фиолетового растворяют в 100 мл воды.

Пирролидин. [123-75-1]. С4H9N. (М.м. 71,12).

Пирролидин.

Содержание. Не менее 99%.

Температура кипения. От 87 до 88 °С.

2-Пирролидон. [616-45-5]. C4H7NO. (М.м. 85,10).

Пирролидин-2-он.

Бесцветная жидкость при температуре выше 25 °С.

Смешивается с водой, с безводным спиртом и этилацетатом.

. Около 1,116.

Температура кипения. 245 °С.

Температура плавления. От 23 до 25 °С.

Плазма крови человека нормальная

Растворяют количество лиофильно высушенной плазмы крови человека с параметрами гемостаза в пределах нормы, соответствующей 1 мл плазмы крови человека, в 1 мл воды. Раствор используют свежеприготовленным.

Плазма с пониженным содержанием тромбоцитов

С помощью пластикового шприца вместимостью 50 мл, содержащего 5 мл стерильного натрия цитрата раствора 3,8%, отбирают 45 мл человеческой крови. Немедленно центрифугируют при 1 500 g и температуре 4 °C в течение 30 мин. С помощью пластикового шприца отбирают верхние две трети надосадочной плазмы и немедленно центрифугируют её при 3 500 g и температуре 4 °C в течение 30 мин. Отделяют верхние две трети жидкости и быстро замораживают её в подходящих аликвотах в пластиковых пробирках при температуре не выше −40 °C. Используют пластиковое или обработанное силиконом оборудование.

Плазма с пониженным содержанием фактора IX

Готовят из крови человека, содержащей менее 1% от нормального количества фактора IX. Собранную кровь разбавляют натрия цитрата раствором 3,8% 9:1.

Хранят в пластиковых пробирках при температуре −30 °C или ниже.

Плюмбон. [1772-02-7]. С18Н12АsN6Na3O8S. (М.м. 616,3).

4-({4-[3-(2-Арсоно-4-нитрофенил)триаз-1-ен-1-ил]фенил}диазенил)бензолсульфонат тринатрия.

Кирпично-красный порошок.

Растворим в воде, легко растворим в растворе тетрабората натрия, мало растворим в спирте 96%, практически нерастворим в ацетоне, хлороформе, бензоле.

В боратном буферном растворе (рН около 9,2) индикатор имеет жёлтую окраску; его комплексы с ионом свинца в тех же условиях розового цвета.

Плюмбона раствор.

0,05% раствор плюмбона в 2% растворе динатрия тетрабората. (Na2B4O7·10Н2О).

Повидон. [9003-39-8]. (С6Н9NО)n.

Поли[1-(2-оксопирролидин-1-ил)этилен].

Белый или жёлтовато-белый порошок или хлопья; гигроскопичен.

Легко растворим в воде, спирте 96% и метаноле, умеренно растворим в ацетоне, практически нерастворим в эфире.

Полиамид 6. [25038-54-4]. (C6H11NO)n.

Поликапролактам.

Стерильную нить из полиамида 6 получают путём протягивания через подходящую матрицу синтетического пластикового материала, образованного путём полимеризации ε-капролактама. Состоит из гладких цилиндрических мононитей, плетёных или слегка скрученных нитей в оболочке из того же материала. Подлежит гранулированию.

Температура плавления. Около 220 °С.

Полиамида 6 порошок. В химический стакан вместимостью 3 л помещают 200 г гранул полиамида 6, прибавляют 1,1 л уксусной кислоты безводной, нагревают до полного растворения гранул и охлаждают. Фильтруют выпавший осадок с помощью вакуума и промывают водой до нейтральной реакции по универсальному индикатору. В мерную колбу вместимостью 2000 мл помещают отфильтрованный и промытый порошок полиамида, прибавляют 1,1 л спирта 70%, колбу присоединяют к обратному холодильнику и кипятят на водяной бане в течение 1 ч. Промытый сорбент фильтруют с помощью вакуума и промывают 1 л ацетона. Полученный порошок сушат на воздухе в течение 30 мин, затем просеивают через сито с отверстиями размером 1 мм, рассыпают на пергаментную бумагу и сушат на воздухе в течение 10 ч.

Поливиниловый спирт. [9002-89-5]. (М.м. от 20000 до 150000).

Поли(1-гидроксиэтилен).

Жёлтовато-белый порошок или полупрозрачные гранулы.

Растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96%, практически нерастворим в ацетоне.

Вязкость. От 3 до 70 мПа·с.

Эфирное число. Не более 280.

Поли(диметил)(дифенил)силоксан.

Содержит 95% метильных групп и 5% фенильных групп.

Неподвижная фаза для газовой хроматографии.

Поли(диметил)(дифенил)силоксан, деактивированный по отношению к основаниям.

Содержит 95% метильных групп и 5% фенильных групп.

Деактивированная по отношению к основаниям неподвижная фаза для газовой хроматографии, для анализа аминов.

Поли(диметил)(дифенил)(дивинил)силоксан.

Содержит 94% метильных групп, 5% фенильных групп и 1% винильных групп.

Неподвижная фаза для газовой хроматографии.

Поли(диметилсилоксан). [9016-00-6]. (C2H6OSi)n.

Поли[окси(диметилсилан)].

Повторяющаяся структурная единица гомополимера.

Полиметакрилатный гидроксилированный гель для хроматографии.

Гель на основе сополимеров гидроксилированных эфиров метакриловой кислоты.

Используется в качестве неподвижной фазы в эксклюзионной и ион-обменной хроматографии.

Поли[метил(трифторпропил)силоксан]. [63148-56-1].

Неподвижная фаза для газовой хроматографии.

Полиметилфенилсилоксан. [63148-58-3].

Поли[окси(метилфенилсиландиил)].

Кремнийорганический полимер (содержащий метильные и фенильные группы), имеющий вид полужидкой бесцветного масла. Средняя молекулярная масса 4000.

Очень вязкая жидкость (вязкость около 1300 мПа.с).

Неподвижная фаза для газовой хроматографии.

. Около 1,09.

. Около 1,540.

Поли[метил(95)фенил(5)]силоксан. См. Поли(диметил)(дифенил)силоксан.

Поли[метил(94)фенил(5)винил(1)]силоксан. См. Поли(диметил)(дифе-нил)(дивинил)силоксан.

Полиоксиэтилированное касторовое масло.

Жидкость светло-жёлтого цвета, становится прозрачной при температуре около 26 °С.

Полисорбат 20. [9005-64-5].

Сополимер смеси эфиров лауриловой кислоты, сорбитола и его ангидридов с этиленоксидом с примерным соотношением 20 моль этиленоксида на каждый моль сорбитола и ангидридов сорбитола.

Маслянистая, жёлтоватая или коричневато-жёлтая прозрачная или слегка опалесцирующая жидкость.

Cмешивается с водой, этанолом, этилацетатом и метанолом, практически нерастворима в жирных маслах.

Плотность. Около 1,10.

Полисорбат 80. [9005-65-6].

Сополимер смеси эфиров различных жирных кислот, в основном олеиновой кислоты, сорбитола и его ангидридов с этиленоксидом с примерным соотношением 20 моль этиленоксида на каждый моль сорбитола и ангидридов сорбитола.

Маслянистая желтоватая или коричневато-жёлтая прозрачная жидкость. Смешивается с водой, этанолом, этилацетатом и метанолом, практически нерастворим в жирных маслах.

Плотность. Около 1,08.

Вязкость. Около 400 мПа·с при температуре 25 °С.

Полисорбата 80 раствор 0,5%.

0,5 г полисорбата 80 растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Полистирол 900–1000. [9003-53-6].

Поли(1-фенилэтилен).

Стандарт, используемый для калибровки в газовой хроматографии.

Мw. Около 950.

Мw/Мn. 1,10.

Поли(фенил)(5)[диметил](95)силоксан. См. Поли(диметил)(дифенил)силоксан.

Поли(фенил)(35)[диметил](65)силоксан.

Полисилоксан, замещенный на 35% фенильными и на 65% диметильными группами.

Неподвижная фаза для газовой хроматографии.

Поли(фенил)(50)[диметил](50)силоксан.

Полисилоксан, замещенный на 50% фенильными и на 50% диметильными группами.

Неподвижная фаза для газовой хроматографии.

Поли(цианопропил)силоксан.

Полисилоксан, замещенный на 100% цианопропильными группами.

Поли(цианопропил)(3)(фенил)(3)(метил)(94)силоксан.

Полисилоксан, замещенный на 3% цианопропильными группами, на 3% фенильными группами и на 94% диметильными группами.

Неподвижная фаза для газовой хроматографии.

Поли(цианопропил)(7)(фенил)(7)(метил)(86)силоксан.

Полисилоксан, замещенный на 7% цианопропильными группами, на 7% фенильными группами и на 86% диметильными группами.

Неподвижная фаза для газовой хроматографии.

Поли(цианопропилфенил)(6)(метил)(94)силоксан.

Полисилоксан, замещенный на 6% цианопропилфенильными группами и на 94% диметильными группами.

Неподвижная фаза для газовой хроматографии.

Поли(цианопропил)(50)(метил)(50)силоксан.

Полисилоксан, замещенный на 50% цианопропильными группами и на 50% диметильными группами.

Неподвижная фаза для газовой хроматографии.

Поли(цианопропил)(фенилметил)силоксан.

Содержит 90% цианопропильных групп и 10% фенилметильных групп.

Неподвижная фаза для газовой хроматографии.

Поли[(цианопропил)метилфенилметилсилоксан]. См. Поли[(цианопро-пил)(метил)][(фенил)(метил)]силоксан.

Поли[(цианопропил)(метил)][(фенил)(метил)]силоксан.

Содержит 25% цианопропильных групп, 25% фенильных групп и 50% метильных групп (средняя молекулярная масса – 8000).

Очень вязкая жидкость (вязкость около 9000 мПа . с).

. Около 1,10.

. Около 1,502.

Полиэтиленгликоль. См. Макрогол.

Полиэтиленгликольадипинат. [24938-37-2]. (С8Н12О4)n.

Поли(оксиэтан-1,2-диилоксигексан-1,6-диоил).

Воскообразная масса белого цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим в хлороформе.

Температура плавления. Около 43 °С.

Полиэтиленгликольсукцинат. [25569-53-3]. (С6Н8О4)n.

Поли(оксиэтан-1,2-диилоксибутан-1,4-диоил).

Кристаллический порошок белого цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим в хлороформе.

Температура плавления. Около 102 °С.

Полиэтиленгликоля [10] монолауриловый эфир. [9002-92-0].

α-Гидро-ω-(додецилокси)поли(оксиэтилен).

Средняя степень полимеризации – 10.

Полиэтиленгликоля [23] монолауриловый эфир. [9002-92-0].

α-Гидро-ω-(додецилокси)поли(оксиэтилен).

Средняя степень полимеризации – 23.

Полиэфирный гидроксилированный гель для хроматографии.

Гель с небольшим размером частиц, имеющий гидрофильную поверхность. Имеет предел эксклюзии по декстрану с молекулярной массой от 2·105 до 2,5·106.

Полоксамер 188. [9003-11-6].

Синтетический блок-сополимер этиленоксида (оксирана) и пропиленоксида (2-метилоксирана) со структурой:

,

где а – 75-85, b – 25-30.

Содержание оксиэтиленовых звеньев – от 79,9% до 83,7%.

Средняя молекулярная масса – от 7680 до 9510.

Белый или почти белый воскообразный порошок, микрочастицы или хлопья.

Растворим в воде и спирте 96%.

Температура плавления. Около 50 °С.

D-Пролил-L-фенилаланил-L-аргинин 4-нитроанилида дигидрохлорид. C26H36Cl2N8O5. (М.м. 611,52).

L-Пролин. C5H9NO2. [147-85-3]. (М.м. 115,13).

Белый или почти белый кристаллический порошок.

Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96%.

Пропанол. [71-23-8]. С3Н8О. (М.м. 60,10).

Пропан-1-ол.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Смешивается с водой и спиртом 96%.

. Около от 0,802 до 0,806.

Температура кипения. Около 97,2 °С.

Температурные пределы перегонки. От 96 до 99 °С; должно перегоняться не менее 95%.

2-Пропанол. [67-63-0]. С3Н8О. (М.м. 60,10).

Пропан-2-ол.

Прозрачная, бесцветная, воспламеняющаяся жидкость.

Смешивается с водой и спиртом 96%.

. Около 0,785.

Температура кипения. От 81 до 83 °С.

2-Пропанол особой чистоты.

Должен выдерживать требования для изопропанола и следующие дополнительные требования:

. Около 1,378.

Вода. Не более 0,05%. Определение проводят из 10 г.

Минимальное пропускание. 25% при длине волны 210 нм; 55% при длине волны 220 нм; 75% при длине волны 230 нм; 95% при длине волны 250 нм; 98% при длине волны 260 нм.

Определение проводят, используя в качестве раствора сравнения воду.

Пропаноламин. [156-87-6]. С3Н9NО. (М.м. 75,11).

3-Аминопропан-1-ол.

Прозрачная, бесцветная, вязкая жидкость.

. Около 0,99.

. Около 1,461.

Температура плавления. Около 11 °С.

Пропидия йодид. [25535-16-4]. C27H34I2N4. (М.м. 668,39).

3,8-Диамино-5-{3-[метилди(этил)азаниумил]пропил}-6-фенилфенантридин-5-ий дииодид.

Тёмно-красное вещество.

Пропиламина гидрохлорид.

Пропан-1-амина гидрохлорид. [556-53-6]. C3H9N·HCl. (М.м. 95,57).

Белый или почти белый кристаллический порошок.

Температура плавления. Около 161 °С.

Пропилацетат. [109-60-4]. С5Н10О2. (М.м. 102,14).

Пропилацетат.

Прозрачная бесцветная жидкость.

. Около 0,888.

Температура кипения. Около 102 °С.

Температура плавления. Около–95 °С.

Пропиленгликоль. [57-55-6]. С3Н8О2. (М.м. 76,09).

(2RS)-Пропан-1,2-диол.

Прозрачная бесцветная вязкая жидкость.

Смешивается с водой и спиртом 96%.

Температура кипения. От 184 до 189 °С.

. От 1,035 до 1,040.

. От 1,431 до 1,433.

Пропиленгликолькарбонат. [108-32-7]. C4H6O3. (М.м. 103,09).

(4RS)-4-Метил-1,3-диоксолан-2-он.

Бесцветная жидкость без запаха.

Температура плавления: –49°С

Температура кипения: 242°С.

. Около 1,204.

. Около 1,421.

Пропиленоксид. [75-56-9]. С3Н6О. (М.м. 58,08).

(2RS)-2-Метилоксиран.

Бесцветная жидкость.

Температура кипения. 34,3 °С

Смешивается со спиртом 96%, эфиром.

Пропилпарагидроксибензоат. [94-13-3]. С10Н12О3. (М.м. 180,20).

Пропил(4-гидроксибензоат).

Белый кристаллический порошок.

Очень мало растворим в воде, легко растворим в спирте 96% и метаноле.

Температура плавления. От 96 до 99 °С.

Пропионовая кислота. [79-09-4]. С3Н6О2. (М.м. 74,08).

Пропановая кислота.

Маслянистая жидкость.

Растворима в спирте 96% и эфире, смешивается с водой.

. Около 0,993.

. Около 1,387.

Температура кипения. Около 141 °С.

Температура плавления. Около 21 °С.

Пропионовый альдегид. [123-38-6]. С3Н6О. (М.м. 58,08).

Пропаналь.

Жидкость. Легко растворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. Около 0,81.

. Около 1,365.

Температура кипения. Около 49 °С.

Температура плавления. Около–81 °С.

Пропионовый ангидрид. [123-62-6]. С6Н10О3. (М.м. 130,14).

Пропановый ангидрид.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Разлагается в воде и спирте 96%, смешивается с эфиром.

. Около 1,01.

Температура кипения. Около 167 °С.

Пропионового ангидрида реактив.

1,0 г толуолсульфоновой кислоты растворяют в 30 мл уксусной кислоты ледяной и прибавляют 5 мл пропионового ангидрида.

Используют через 15 мин после приготовления.

Срок годности 1 сут.

Протамина сульфат. См. ФС Протамина сульфат.

Протионамид. [14222-60-7]. C9H12N2S. (М.м. 180,27).

2-Пропилпиридин-4-карботиоамид.

Содержит не менее 99,0% C9H12N2S.

Жёлтый кристаллический порошок.

Умерено растворим в хлороформе и спирте 96%, практически нерастворим в воде.

Температура плавления. От 140 до 143 °C.

Протравной черный 11. См. Эриохром чёрный Т.

Прочный синий В, соль. [14263-94-6]. С14Н12Сl2N4O2∙ZnCl2. (М.м. 475,5).

3,3′-Диметокси[1,1'-бифенил]-4,4′-бис(диазония) дихлорид—хлорид цинка (1:1).

Порошок тёмно-зеленого цвета.

Растворим в воде.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке при температуре от 2 до 8 °С.

Прочного синего В раствор 0,5%.

50 мг прочного синего В соли растворяют в 2,5 мл воды и доводят объём до 10,0 мл спиртом 96%.

Прочный красный В, соль. [49735-71-9]. С17Н13N3O9S2. (М.м. 467,4).

2-Метокси-4-нитробензолдиазония нафталин-1,5-дисульфонат (1:1).

Порошок оранжево-жёлтого цвета.

Растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке, в защищённом от света месте при температуре от 2 до 8 °С.

Пулегон. [89-82-7]. С10Н16O. (М.м. 152,23).

(5R)-5-Метил-2-(пропан-2-илиден)циклогексан-1-он.

Бесцветная, маслянистая жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. Около 0,936.

. От 1,485 до 1,489.

. От + 19,5 до + 22,5°.

Температура кипения. От 222 до 224 °С.

Хроматографическая чистота пулегонанетола, применяемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 98,0%.

Рамноза. [6155-35-7]. С6Н12О5·Н2О. (М.м. 182,17).

6-Дезокси-L-маннопираноза моногидрат.

Кристаллический порошок белого цвета.

Легко растворима в воде.

. От + 7,8 до + 8,3° (5% раствор в воде, содержащей около 0,05% NН3).

Рапонтицин. [155-58-8]. С21Н24О9. (М.м. 420,4).

[3-Гидрокси-5-[2-(3-гидрокси-4-метоксифенил)этен-1-ил]фенил]-β-D-глюкопиранозид.

Кристаллический порошок жёлтовато-серого цвета.

Растворим в спирте 96% и метаноле.

Раствор для определения пригодности ТСХ пластинок.

Смешивают по 1,0 мл 0,05% раствора судана красного G в толуоле, свежеприготовленного 0,05% раствора метилового оранжевого в этаноле, 0,05% раствора бромкрезолового зеленого в ацетоне, 0,025% раствора метилового красного в ацетоне и доводят объём полученного раствора ацетоном до 10,0 мл.

Раствор крахмала–индикатор. См. Крахмал растворимый.

Раствор формальдегида. См. Формалин технический.

Растворимый красный 1. См. Судан красный G.

Реактив ван-Урка.

К 35 мл воды приливают при помешивании 65 мл серной кислоты концентрированной и в еще горячий раствор вносят 0,03 мл 10% раствора железа(III) хлорида. После охлаждения раствора до температуры 50 °С прибавляют 0,2 г диметиламинобензальдегида.

Реактив используют не ранее, чем через 24 ч после приготовления.

Срок годности – 7 сут.

Реактив Драгендорфа

Раствор I. К 0,85 г висмута нитрата основного прибавляют 40 мл воды, 10 мл уксусной кислоты ледяной и взбалтывают в течение 15 мин.

Раствор II. 8 г калия йодида растворяют в 20 мл воды.

Смешивают равные объёмы растворов I и II. К 10 мл полученной смеси прибавляют 100 мл воды и 20 мл уксусной кислоты ледяной.

Реактив Драгендорфа модифицированный

Раствор I. К 0,85 г висмута нитрата основного прибавляют 40 мл воды, 10 мл уксусной кислоты ледяной и взбалтывают в течение 15 мин.

Раствор II. 8 г калия йодида растворяют в 20 мл воды.

Растворы I и II смешивают (основной раствор).

Непосредственно перед применением 5 мл основного раствора смешивают с 5 мл 1% водного раствора аскорбиновой кислоты и 5 мл спирта 96%.

Реактив Драгендорфа модифицированный по Бергоффу-Дельвиче

Раствор I. 8,0 г висмута нитрата основного растворяют в 25 мл азотной кислоты разведённой 25%.

Раствор II. 20 г калия йодида растворяют в смеси 1 мл хлористоводородной кислоты раствора 6 М и 50 мл воды.

К раствору I медленно при перемешивании приливают раствор II. Прибавляют воду до появления оранжево-красной окраски раствора. Объём раствора должен составлять 95 мл. При необходимости отфильтровывают на стеклянном фильтре ПОР 40 и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Реактив Драгендорфа разведённый

100 г винной кислоты растворяют в 400 мл воды и прибавляют 8,5 г висмута нитрата основного. Встряхивают в течение 1 ч, прибавляют 200 мл калия йодида раствора 40%, снова встряхивают, оставляют стоять в течение 24 ч и фильтруют.

50 мл фильтрата приливают к раствору 100 г винной кислоты в 500 мл воды.

Все растворы защищают от света.

Реактив Майера.

1,358 г ртути дихлорида растворяют в 60 мл воды, прибавляют раствор 5 г калия йодида в 10 мл воды и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Реактив Марки. См. Формальдегида раствор в серной кислоте.

Реактив Марфея. См. Nα-(2,4-Динитро-5-фторфенил)-L-аланиламид.

Реактив Миллона.

Готовят по одному из методов.

1. 10 г ртути(I) нитрата растворяют в 8,5 мл азотной кислоты концентрированной и разбавляют двойным объёмом воды; прозрачный раствор сливают.

2. 10 г металлической ртути растворяют в 15 мл азотной кислоты концентрированной и прибавляют 30 мл воды; прозрачный раствор сливают.

Реактив Несслера. См. Калия тетрайодомеркурата щелочной раствор.

Реактив Оллпорта. См. Диметиламинобензальдегида раствор.

Реактив Тиле. См. Натрия гипофосфита раствор.

Реактив Фелинга. См. Медно-тартратный реактив.

Реактив Фишера.

Раствор I. В сосуд, содержащий 110 г пиридина (содержание воды не более 0,1%) и охлаждаемый льдом, пропускают обезвоженный сернистый газ до привеса 27 г.

Срок годности – 1 – 6 мес.

Раствор II. В сосуд из оранжевого стекла с притертой пробкой помещают 600 мл метанола (содержание воды не более 0,1%) и 75 г йода, закрывают пробкой, перемешивают и оставляют стоять до полного растворения йода.

Срок годности – 2–6 мес.

Растворы I и II непосредственно перед использованием смешивают в соотношении 1:2,17. Титр полученного реактива около 0,004 г/мл.

Разбавленный реактив Фишера с титром около 0,001 г/мл готовят, смешивая полученный раствор с метанолом в соотношении 1:1, и применяют только при электрометрическом определении конечной точки титрования.

Установка титра. Около 0,04 г (точная навеска) воды вносят в сухую колбу, содержащую 5 мл метанола, и титруют реактивом Фишера, прибавляя в конце титрования по 0,10–0,05 мл.

Параллельно титруют 5 мл метанола.

Титр реактива Фишера (W), в граммах на миллилитр, вычисляют по формуле:

где a – навеска воды, г;
V1 – объём реактива Фишера, израсходованный на титрование навески воды в метаноле, мл;
V2 – объём реактива Фишера, израсходованный на титрование в контрольном опыте, мл.

Примечание.

1. Реактив Фишера описанного состава неприменим для анализа соединений, реагирующих с одним или несколькими компонентами реактива (например, аскорбиновая кислота, меркаптаны, сульфиды, гидрокарбонаты и карбонаты щелочных металлов, оксиды и гидроксиды металлов, альдегиды, кетоны и др.).

2. Для определения воды в карбонильных соединениях и сильных кислотах при электрометрическом определении конечной точки титрования можно использовать реактив Фишера видоизмененного состава, содержащий вместо метанола N,N-диметилформамид.

3. Допускается использование коммерческих растворов I и II.

Реактив Фолина. См. Реактив Фолина-Дениса.

Реактив Фолина-Дениса

В круглодонную колбу помещают 70 мл воды, 10,0 г натрия вольфрамата, 2,0 г фосфорномолибденовой кислоты, 5 мл 85% фосфорной кислоты и кипятят с обратным холодильником в течение 2 ч. Смесь охлаждают, доводят водой объём раствора до 100 мл и хорошо перемешивают.

Хранят в сосудах оранжевого стекла с притертыми пробками не более 5 суток.

Реактив Фолина-Чокальтеу

100 г натрия вольфрамата и 25 г натрия молибдата растворяют в 700 мл воды, прибавляют 100 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и 50 мл фосфорной кислоты концентрированной. Смесь нагревают в стеклянной колбе с обратным холодильником в течение 10 ч, прибавляют 150 г лития сульфата, 50 мл воды и 5 капель брома. Кипятят до удаления избытка брома (в течение 15 мин), охлаждают, доводят объём раствора водой до 1000,0 мл и фильтруют.

Реактив должен иметь жёлтую окраску. Реактив не пригоден для использования, если приобретает зеленый оттенок, но может быть регенерирован путем кипячения с несколькими каплями брома. Избыток брома обязательно удаляют кипячением.

Хранят при температуре от 2 до 8 °С.

Реактив Фолина-Чокальтеу разведённый

Смешивают реактив Фолина-Чокальтеу с водой в соотношении 1:2.

Реактив Фреде. См. Аммония молибдата раствор в серной кислоте концентрированной.

Реактив Швейцера

10 г меди(II) сульфата растворяют в 100 мл воды, прибавляют 10% раствор натрия гидроксида в достаточном для осаждения гидрата окиси меди количестве, собирают последний на фильтре и промывают водой до исчезновения реакции на сульфаты. Влажный осадок растворяют в минимальном количестве 10% раствора аммиака, необходимом для полного растворения осадка.

Хранят в стеклянных сосудах с притёртыми пробками.

Реактив Шталя. Смешивают 5 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, 50 мл спирта 96% и 1 г диметиламинобензальдегида; после полного растворения доводят объём раствора спиртом 96% до 100 мл.

Реактив Эллмана. См. 5,5′-Дитиобис-2-нитробензойная кислота.

Реактив Эрлиха. См. Диметиламинобензальдегида солянокислый раствор в уксусной кислоте (реактив Эрлиха).

Резазурин. [550-82-3]. C12H7NO4. (М.м. 229,19).

7-Гидрокси-3Н-феноксазин-3-он 10-оксид.

Тёмно-красные кристаллы с зеленоватым отблеском.

Резорцин. [108-46-3]. С6Н6О2. (М.м. 110,11).

Бензол-1,3-диол.

Белый или белый с жёлтоватым оттенком кристаллический порошок. Под действием света и воздуха краснеет.

Очень легко растворим в воде и спирте 96%, легко растворим в эфире.

Температура плавления. От 109 до 112 °С.

Температура кипения. Около 281 °С.

Резорцина раствор

К 50 г резорцина прибавляют 50 мл воды и оставляют при частом взбалтывании на 24 ч. Раствор фильтруют.

Хранят в хорошо укупоренных сосудах оранжевого стекла, в защищённом от света месте.

Резорцина раствор 2%

2,0 г резорцина растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл. Используют свежеприготовленным.

Резорцина раствор 1%

1,0 г резорцина растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл. Используют свежеприготовленным.

Резорцина раствор в бензоле

К 1,5 г резорцина прибавляют 1 л бензола и оставляют при частом взбалтывании на 24 ч. Прозрачный раствор сливают.

Хранят в стеклянных сосудах с притертыми пробками, в защищённом от света месте.

Резорцина раствор спиртовой 0,1%

0,1 г резорцина растворяют в 70 мл спирта 96% в мерной колбе вместимостью 100 мл, доводят объём спиртом 96% до метки и перемешивают. Срок годности – не более 10 сут при хранении в прохладном и защищённом от света месте.

Резорцина реактив

К 80 мл хлористоводородной кислоты концентрированной прибавляют 10 мл раствора резорцина, 0,25 мл 2,5% раствора меди(II) сульфата и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Используют через 4 ч после приготовления.

Хранят при температуре от 2 до 8 °С. Срок годности 7 сут.

Резорциновый синий. См. Лакмоид.

Рейнекат аммония. См. Аммония рейнекат.

Рибоза. [50-69-1]. С5Н10О5. (М.м. 150,13).

D-Рибофураноза.

Белый кристаллический порошок.

Растворима в воде, мало растворима в спирте 96%.

Температура плавления. От 88 до 92 °С.

Рицинолеиновая кислота. [141-22-0]. С18Н34О3. (М.м. 298,46).

(9Z,12R)-12-Гидроксиоктадец-9-еновая кислота.

Содержит смесь жирных кислот, полученных гидролизом масла касторового. Вязкая жидкость от жёлтого до жёлтовато-коричневого цвета.

Практически нерастворима в воде, очень легко растворима в этаноле, растворима в эфире.

. Около 0,942.

. Около 1,472.

Температура плавления. Около 285 °С с разложением.

Родамин В. [81-88-9]. С28Н31СlN2O3. (М.м. 479,0).

6-(Диэтиламино)-9-(2-карбоксифенил)-N,N-диэтил-3H-ксантен-3-иминий хлорид.

Кристаллы зеленого цвета или порошок красновато-фиолетового цвета. Очень легко растворим в воде и спирте 96%.

Родамина В раствор 0,1%.

10 мг родамина В растворяют в 10 мл воды.

Родамина В раствор 0,01%.

10 мг родамина В растворяют в 100 мл воды.

Розмариновая кислота. [20283-92-5]. C18H16O8. (М.м. 360,31).

(2R)-3-(3,4-Дигидроксифенил)-2-{[(2E)-3-(3,4-дигидроксифенил)проп-2-еноил]окси}пропановая кислота.

Кристаллическое вещество.

Температура плавления. От 170 до 174 °C

Ртути дихлорид. См. Ртути(II) хлорид.

Ртути(I) нитрат. [7782-86-7]. Hg2(NO3)2·2H2O. (М.м. 561,2).

Нитрат ртути(I), дигидрат.

Бесцветные кристаллы, выветриваются на воздухе. Ядовит.

Реагирует с водой при растворении. Растворим в азотной кислоте, растворах аммиака и ацетоне.

Ртути(II) ацетат. [1600-27-7]. С4Н6НgO2. (М.м. 318,68).

Ацетат ртути(II).

Кристаллы белого цвета. Ядовит.

Очень легко растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Ртути(II) ацетата раствор 0,1 М.

3,19 г ртути(II) ацетата растворяют в уксусной кислоте безводной, доводят объём раствора той же кислотой до 100 мл. Если необходимо, полученный раствор нейтрализуют 0,1 М раствором хлорной кислоты, используя в качестве индикатора 0,05 мл 0,1% раствора кристаллического фиолетового.

Ртути(II) ацетата раствор 5%.

5,0 г ртути(II) ацетата растворяют в теплой уксусной кислоте ледяной. После охлаждения доводят объём раствора уксусной кислотой ледяной до 100,0 мл.

Хранят в ёмкостях из оранжевого стекла в защищённом от света месте.

Ртути(II) ацетата раствор 3%.

3,0 г ртути(II) ацетата растворяют в теплой уксусной кислоте ледяной. После охлаждения доводят объём раствора уксусной кислотой ледяной до 100,0 мл.

Хранят в ёмкостях из оранжевого стекла в защищённом от света месте.

Ртути(II) бромид. [7789-47-1]. НgBr2. (М.м. 360,40).

Бромид ртути(II).

Кристаллы или кристаллический порошок белого или светло-жёлтого цвета. Мало растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Ртути(II) бромида 5% раствор в спирте 96%.

5,0 г ртути(II) бромида растворяют при перемешивании в 70 мл спирта 96% и доводят объём раствора спиртом 96% до 100 мл.

Ртутно-бромидная бумага.

В прямоугольную чашку помещают 5% раствор ртути(II) бромида в спирте 96%, погружают в раствор кусочки белой фильтровальной бумаги плотностью 80 г/м2 (время фильтрования 100 мл воды при температуре 20 °С через фильтр с поверхностью 10 см2 и давлении 6.7 кПа: от 40 с до 60 с), размером 1.5×20 см, сложенные вдвое. Бумагу подвешивают на неметаллическую нить, позволяя стечь избытку жидкости, сушат в защищённом от света месте. Отрезают по 1 см с каждого конца каждой полоски и нарезают остальную часть бумаги на квадратики со стороной 1,5 см или диски диаметром 1,5 см.

Хранят в плотно закрытой ёмкости, обернутой черной бумагой.

Ртути(II) йодид. [7774-29-0]. НgI2. (М.м. 454,4).

Иодид ртути(II).

Плотный кристаллический порошок ярко-красного цвета.

Мало растворим в воде, умеренно растворим в ацетоне, спирте 96% и эфире, растворим в избытке 10% раствора калия йодида.

Хранят в защищённом от света месте.

Ртути(II) нитрат. [7783-34-8]. Нg(NO3)2·H2O (М.м. 342,62).

Нитрат ртути(II), моногидрат.

Бесцветные или слегка окрашенные кристаллы. Гигроскопичен.

Растворим в воде в присутствии небольшого количества азотной кислоты.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке, в защищённом от света месте.

Ртути(II) нитрата раствор в азотной кислоте.

3 мл ртути осторожно растворяют в 27 мл азотной кислоты дымящей; полученный раствор разводят равным объёмом воды.

Хранят в защищённом от света месте. Срок годности 2 мес.

Ртути(II) оксид. [21908-53-2]. НgO. (М.м. 216,59).

Оксид ртути(II).

Порошок от жёлтого до оранжево-жёлтого цвета.

Практически нерастворим в воде и спирте 96%.

Хранят в защищённом от света месте.

Ртути(II) сульфата раствор.

1 г ртути(II) оксида растворяют в смеси 20 мл воды и 4 мл серной кислоты концентрированной.

Ртути(II) тиоцианат. [592-85-8]. Нg(SCN)2. (М.м. 316,75).

Тиоцианат ртути(II).

Кристаллический порошок белого цвета.

Очень мало растворим в воде, мало растворим в спирте 96% и эфире, растворим в растворах натрия хлорида.

Ртути(II) тиоцианата раствор.

0,3 г ртути(II) тиоцианата растворяют в этаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Срок годности 7 сут.

Ртути(II) хлорид. [7487-94-7]. НgCl2. (М.м. 271,50).

Хлорид ртути(II).

Тяжелый белый порошок или белые кристаллы. Ядовит.

Растворим в воде, эфире и глицерине, легко растворим в спирте 96%.

Ртути(II) хлорида раствор 5,4%. См. Ртути(II) хлорида раствор 0,2 М.

Ртути(II) хлорида раствор 0,2 М.

5,4 г ртути(II) хлорида растворяют в 100,0 мл воды.

Ртуть. [7439-97-6]. Нg. (А.м. 200,59).

Ртуть.

Жидкость серебристо-белого цвета, рассыпающаяся на сферические капли, которые не оставляют металического следа при трении о бумагу.

. Около 13,5.

Температура кипения. Около 357 °С.

Рутений красный. [11103-72-3]. [(NH3)5RuORu(NH3)4ORu(NH3)5]Cl6·4H2O. (М.м. 858,4).

Тетрадекаамминдиоксидотрирутения(6+) гексахлорид тетрагидрат.

Порошок коричневато-красного цвета.

Растворим в воде.

Рутения красного раствор 0,08%.

0,8 г рутения красного в 1000,0 мл раствора свинца(II) ацетата 9,5%.

Рутин. См. Рутозид тригидрат.

Рутозид тригидрат. [250249-75-3]. C27H30O16·3H2O. (М.м. 664,6).

5,7-Дигидрокси-3-{[6-O-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)-β-D-глюкопиранозил]окси}-2-(3,4-дигидроксифенил)-4H-1-бензопиран-4-он тригидрат.

Кристаллический порошок жёлтого цвета, темнеет на свету.

Очень мало растворим в воде, растворим примерно в 400 частях кипящей воды. Мало растворим в спирте 96%. Растворим в растворах гидроксидов щелочных металлов и аммиака.

Температура плавления. Около 210 °С с разложением.

Сабинен. [3387-41-5]. С10Н16. (М.м. 136,23).

4-Метилиден-1-(пропан-2-ил)бицикло[3.1.0]гексан.

Бесцветная маслянистая жидкость.

. Около 0,843.

. Около 1,468.

Температура кипения. От 163 до 165 °С.

Хроматографическая чистота сабинена, применяемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 99,0%.

Салициловая кислота. [69-72-7]. С7Н6О3. (М.м. 138,12).

2-Гидроксибензойная кислота.

Белые, мелкие игольчатые кристаллы или легкий кристаллический порошок. Мало растворима в воде, легко растворима в спирте 96% и эфире, умеренно растворима в метиленхлориде.

Салициловый альдегид. [90-02-8]. С7Н6О2. (М.м. 122,12).

2-Гидроксибензальдегид.

. Около 1,167.

. Около 1,574.

Температура кипения. Около 196 °С.

Температура плавления. Около –7 °С.

Салицилового альдегида азин. [959-36-4]. С14Н12N2О2. (М.м. 240,26).

2,2'-[Гидразин-1,2-диилиденбис(метанилилиден)]дифенол.

0,30 г гидразина сульфата растворяют в 5 мл воды, прибавляют 1 мл уксусной кислоты ледяной и 2 мл свежеприготовленного 20% (о/о) раствора салицилового альдегида в 2-пропаноле. Перемешивают, выдерживают до образования жёлтого осадка, затем встряхивают с двумя порциями по 15 мл метиленхлорида.

Объединенные органические извлечения, высушенные над натрия сульфатом безводным, декантируют или фильтруют и выпаривают досуха. Осадок перекристаллизовывают при охлаждении из смеси растворителей метанол–толуол 40:60. Кристаллы сушат в вакууме.

Температура плавления. Около 213 °С.

Сангвинарина хлорид. [5578-73-4]. C20H14ClNO4. (М.м. 367,78).

Псевдохелеретрин хлорид.

13-Метил [1,3]бензодиоксоло [5,6-c][1,3]диоксоло [4,5-i]фенантридин-13-иум хлорид.

Оранжевый кристаллический порошок.

Растворим в метаноле.

Температура плавления. Около 283 °С.

Хранят в защищённом от света и влажности месте.

Сантонин. [481-06-1]. С15Н18О3. (М.м. 246,30).

(3S,3aS,5aS,9bS)-3,5a,9-Триметил-3a,5,5a,9b-тетрагидронафто[1,2-b]фуран-2,8(3H,4H)-дион.

Бесцветные блестящие кристаллы, жёлтеющие под действием света.

Очень мало растворим в воде, легко растворим в горячем спирте 96%, умеренно растворим в этаноле.

Температура плавления. От 172 до 176 °С.

. Около –173 °С (этанол).

Сапарал.

Смесь аммонийных солей тритерпеновых гликозидов-аралозидов А, В и С.

Аморфный порошок кремового или серовато-кремового цвета. Гигроскопичен.

Легко растворим в воде, мало и медленно растворим в спирте 96%; практически нерастворим в хлороформе.

Сапарала раствор 0,6%. 0,06 г сапарала растворяют в 10 мл метанола.

Сафранин. [477-73-6]. С20Н19СlN4. (М.м. 350,84).

3,7-Диамино-2,8-диметил-5-фенилфеназин-5-ий хлорид.

Тёмно-красный порошок.

Умеренно растворим в спирте 70%, образуя прозрачный раствор красного цвета с жёлтовато-красной флуоресценцией.

Сафранина раствор.

0,1 г сафранина растворяют в 10 мл спирта 50%.

Сахарин. [81-07-2]. C7H5NO3S. (М.м. 183,18).

λ6-1,2-Бензотиазол-1,1,3-трион.

Содержит не менее 98% C7H5NO3S.

Кристаллы или еристаллический порошок от белого до бледно-кремового цвета.

Растворяется в воде, спирте 96%, ацетоне.

Температура плавления. От 223 до 232 °С.

Сахароза. [57-50-1]. С12Н22О11. (М.м. 342,30).

β-D-Фруктофуранозил-α-D-глюкопиранозид.

Белый кристаллический порошок или блестящие, сухие, бесцветные или белые кристаллы.

Очень легко растворима в воде, умеренно растворима в спирте 96%, практически нерастворима в этаноле безводном.

Если сахарозу используют для поверки поляриметра, ее хранят в сухом виде в запаянной ампуле.

Сахарозы раствор 1%.

1,0 г сахарозы помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Свинца(II) ацетат. [6080-56-4]. С4Н6О4Pb·3H2O. (М.м. 379,33).

Ацетат свинца(II), тригидрат.

Бесцветные кристаллы, выветривающиеся на воздухе.

Легко растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Свинца(II) ацетата основного раствор.

Содержит не менее 16,7% (м/м) и не более 17,4% (м/м). Рb (А.м. 207,19) в виде соединения, соответствующего примерно формуле С8Н14О10Рb3.

40,0 г свинца(II) ацетата растворяют в 90 мл воды, свободной от углерода диоксида. Доводят рН раствора до 7,5 раствором натрия гидроксида концентрированным, центрифугируют и используют прозрачный, бесцветный раствор над осадком.

Хранят в хорошо закрытой емкости, раствор должен быть прозрачным.

Свинца(II) ацетата раствор 10%.

10,0 г свинца(II) ацетата растворяют в воде, прибавляют уксусную кислоту 98% до получения прозрачного раствора и разводят водой до 100,0 мл.

Свинца(II) ацетата раствор 10% спиртовой.

10,0 г свинца(II) ацетата растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Свинца(II) ацетата раствор 9,5%.

95 г свинца(II) ацетата растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и разводят водой до 1000,0 мл.

Свинцово-ацетатная бумага.

Фильтровальную бумагу, плотность которой 80 г/м2, погружают в смесь уксусная кислота разведённая 12%–раствор свинца(II) ацетата 9,5% 1:10, затем ее вынимают, сушат и нарезают на полоски размером 15 × 40 мм.

Свинцово-ацетатная вата.

Гигроскопичную вату погружают в смесь растворителей уксусная кислота разведённая 12%–9,5% раствор свинца(II) ацетата 1:10. Не отжимая ваты, удаляют избыток жидкости, затем помещают ее на несколько слоев фильтровальной бумаги и сушат на воздухе.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Свинца(II) нитрат. [10099-74-8]. Рb(NO3)2. (М.м. 331,21).

Нитрат свинца(II).

Кристаллический порошок белого цвета или бесцветные кристаллы.

Легко растворим в воде.

Свинца(II) нитрата раствор 10%.

10 г свинца(II) нитрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Свинца(II) нитрата раствор 3,3%. См. Свинца(II) нитрата раствор 0,1 М.

Свинца(II) нитрата раствор 0,1 М.

33,1 г свинца(II) нитрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Свинца(II) оксид. [1317-36-8]. РbO. (М.м. 223,20).

Оксид свинца(II).

Мелкокристаллический или аморфный порошок от жёлто-зеленого с серебристым оттенком до красновато-бурого цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим в азотной кислоте концентрированной и концентрированных растворах гидроксидов щелочных металлов.

Свинца(IV) оксид. [1309-60-0]. РbO2. (М.м. 239,20).

Оксид свинца(IV).

Порошок тёмно-коричневого цвета, выделяющий кислород при нагревании. Практически нерастворим в воде, растворим в хлористоводородной кислоте концентрированной с выделением хлора, растворим в азотной кислоте разведённой 12,5% в присутствии пероксида водорода, щавелевой кислоты или других восстанавливающих реагентов, растворим в горячих концентрированных растворах гидроксидов щелочных металлов.

Свинцовый уксус. См. Свинца(II) ацетата основного раствор.

Себациновая кислота. [124-04-9]. С10Н18O4. (М.м. 202,25).

Декандиовая кислота.

Содержит не менее 99,0% С10Н18O4.

Легко растворима в спирте 96%.

Температура плавления. От 133 до 137 °С.

Сегнетова соль. См. Калия-натрия тартрат.

Селен. [7782-49-2]. Se. (А.м. 78,96).

Селен.

Порошок или гранулы от коричневато-красного до черного цвета.

Практически нерастворим в воде и спирте 96%, растворим в азотной кислоте концентрированной при нагревании.

Температура плавления. Около 220 °С.

Селена(IV) оксид. [7446-08-4]. SeO2. (М.м. 110,96).

Оксид селена(IV).

Белый кристаллический порошок.

Легко растворим в воде, растворим в спирте 96%, ацетоне, уксусной кислоте.

Селенистая кислота. [7783-00-8]. Н2SeO3. (М.м. 128,97).

Селенистая кислота.

Кристаллы, расплывающиеся на воздухе. Легко растворима в воде.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Сеньетова соль. См. Калия-натрия тартрат.

Сера. [7704-34-9]. S. (А.м. 32,07).

Сера.

Мелкий аморфный бледно-жёлтый порошок, без запаха.

Серебра диэтилдитиокарбамат. [1470-61-7]. С5Н10АgNS2. (М.м. 256,14).

N,N-Диэтилдитиокарбамат серебра.

Порошок от бледно-жёлтого до серовато-жёлтого цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим в пиридине.

Готовят следующим образом: 1,7 г серебра нитрата растворяют в 100 мл воды. Отдельно растворяют 2,3 г натрия диэтилдитиокарбамата в 100 мл воды. Оба раствора охлаждают до температуры 10 °С, смешивают и при перемешивании собирают осадок жёлтого цвета на стеклянном фильтре, промывают 200 мл холодной воды и сушат в вакууме в течение 2–3 ч.

Серебра диэтилдитиокарбамат не должен изменять окраску или иметь сильный запах.

Серебра нитрат. [7761-88-8]. АgNO3. (М.м. 169,87).

Нитрат серебра.

Бесцветные прозрачные кристаллы в виде пластинок или белых цилиндрических палочек. Под действием света препарат темнеет.

Очень легко растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Готовят непосредственно перед использованием.

Серебра нитрата раствор 10%.

10,0 г серебра нитрата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. Срок годности – 6 мес при хранении в сосуде светозащитного стекла с притёртой пробкой в защищённом от света месте.

Серебра нитрата раствор 5%.

5,0 г серебра нитрата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объем раствора водой до метки. Срок годности – 6 мес в сосуде светозащитного стекла с притертой пробкой в защищённом от света месте.

Серебра нитрата раствор 4,25%.

4,25 г серебра нитрата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. Срок годности – 6 мес в сосуде светозащитного стекла с притёртой пробкой в защищённом от света месте.

Серебра нитрата раствор 2%.

2,0 г серебра нитрата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. Срок годности – 6 мес при хранении в сосуде светозащитного стекла с притёртой пробкой в защищённом от света месте.

Серебра нитрата раствор 1,7%. См. Серебра нитрата раствор 0,1 М.

Серебра нитрата раствор 0,1 М

1,7 г серебра нитрата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. Срок годности – 6 мес при хранении в сосуде светозащитного стекла с притёртой пробкой в защищённом от света месте.

Серебра нитрата аммиачный раствор 5%

5,0 г серебра нитрата растворяют в 100 мл воды. К раствору приливают по каплям, при постоянном перемешивании, 10% раствор аммиака разведеный до тех пор, пока осадок не будет почти (но не полностью) растворен; фильтруют.

Хранят в хорошо укупоренных сосудах оранжевого стекла в защищённом от света месте.

Серебра нитрата аммиачный раствор 2,5%

2,5 г серебра нитрата растворяют в 80 мл воды, по каплям прибавляют 10% раствор аммиака разведённый до растворения осадка и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Хранят в хорошо укупоренных сосудах оранжевого стекла в защищённом от света месте.

Серебра нитрата спиртовой раствор 2%.

2,0 г серебра нитрата растворяют в 80 мл спирта 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Хранят в хорошо укупоренных сосудах оранжевого стекла в защищённом от света месте.

Серебра нитрата раствор в пиридине 8,5%.

Раствор 85 г/л в пиридине.

8,5 г серебра нитрата растворяют в 80 мл пиридина и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Хранят в сосудах оранжевого стекла с притертыми пробками в защищённом от света месте.

Серебра нитрата реактив.

К смеси 3 мл раствора аммиака концентрированного 32% и 40 мл 1 М раствора натрия гидроксида прибавляют по каплям при перемешивании 8 мл 2% раствора серебра нитрата и доводят объём раствора водой до 200,0 мл.

Серебра оксид. [20667-12-3]. Ag2O. (М.м. 231,74).

Оксид серебра(I).

Порошок коричневато-черного цвета.

Практически нерастворим в воде и спирте 96%, легко растворим в разведённой азотной кислоте и растворах аммиака.

Хранят в защищённом от света месте.

Серебряно-марганцевая бумага.

Полоски медленно фильтрующей бумаги погружают в раствор, содержащий 8,5 г/л марганца(II) сульфата и 8,5 г/л серебра нитрата. Выдерживают в течение нескольких минут, сушат над фосфора(V) оксидом, защищая от воздействия паров кислот и щелочей.

Серная кислота концентрированная. [7664-93-9]. Н2SO4. (М.м. 98,08).

Серная кислота.

Содержит 95,0–97,0% Н2SO4 (м/м).

Бесцветная едкая маслянистой консистенции, очень гигроскопичная жидкость.

. От 1,830 до 1,837.

Смешивается с водой и спиртом 96% с интенсивным выделением тепла. При смешивании с другими жидкостями следует осторожно прибавлять серную кислоту концентрированную к другим жидкостям.

Серной кислоты раствор 50%

К 50 мл воды осторожно, при помешивании, прибавляют 30 мл серной кислоты концентрированной. Раствор после охлаждения разбавляют водой до плотности 1,398–1,388.

Серной кислоты раствор 48%

К 60 мл воды осторожно, при перемешивании, прибавляют 27,3 мл серной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Серной кислоты раствор 40%

К 60 мл воды осторожно, при перемешивании, прибавляют 23,0 мл серной кислоты концентрированной.

Серной кислоты раствор 25%

К 100 мл воды осторожно, при перемешивании, прибавляют 17,0 мл серной кислоты концентрированной.

Серной кислоты раствор 20% (м/о)

К 100 мл воды осторожно, при перемешивании, прибавляют 12,5 мл серной кислоты концентрированной.

Серная кислота разведённая 16% (м/м)

1 массовую часть серной кислоты концентрированной осторожно приливают к 5 массовым частям воды.

Содержит не менее 15,5 и не более 16,5% Н2SO4.

Серная кислота разведённая 13% (м/о)

К 80 мл воды осторожно, при перемешивании, прибавляют 7,4 мл серной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Серная кислота разведённая 9,8%. См. Серной кислоты раствор 1 М.

Серной кислоты раствор 5%

К 100 мл воды осторожно, при помешивании, прибавляют 3,0 мл серной кислоты концентрированной.

Серной кислоты раствор 2,8% (о/о)

К 80 мл воды осторожно, при помешивании, прибавляют 2,8 мл серной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Серной кислоты раствор 1,4% (о/о)

К 80 мл воды осторожно, при помешивании, прибавляют 1,4 мл серной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Серной кислоты раствор 1% (о/о)

К 80 мл воды осторожно, при помешивании, прибавляют 1,0 мл серной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Серной кислоты раствор 0,14% (о/о)

К 80 мл воды осторожно, при помешивании, прибавляют 1,4 мл серной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Серной кислоты раствор 13 М

26 н. раствор серной кислоты.

К 166 мл воды осторожно при постоянном перемешивании прибавляют 427 мл серной кислоты концентрированной.

Серной кислоты раствор 10 М

20 н. раствор серной кислоты.

558,0 мл серной кислоты концентрированной осторожно прибавляют к 400 мл воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Серной кислоты раствор 9 М

18 н. раствор серной кислоты.

505,0 мл серной кислоты концентрированной осторожно прибавляют к 400 мл воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Серной кислоты раствор 5 М

10 н. раствор серной кислоты.

279,0 мл серной кислоты концентрированной осторожно прибавляют к 400 мл воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Серной кислоты раствор 3 М

6 н. раствор серной кислоты.

168,0 мл серной кислоты концентрированной осторожно прибавляют к 400 мл воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Серной кислоты раствор 2 М

4 н. раствор серной кислоты.

112,0 мл серной кислоты концентрированной осторожно прибавляют к 400 мл воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Серной кислоты раствор 1,5 М

3 н. раствор серной кислоты.

84,0 мл серной кислоты концентрированной осторожно прибавляют к 600 мл воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Серной кислоты раствор 1 М

2 н. раствор серной кислоты.

56,0 мл серной кислоты концентрированной осторожно прибавляют к 800 мл воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Количественное определение. В колбу с притертой стеклянной пробкой помещают 30 мл воды, прибавляют 10,0 мл серной кислоты разведённой и титруют 1 М раствором натрия гидроксида, используя в качестве индикатора 0,1 мл 0,05% раствора метилового красного.

1 мл 1 М раствора натрия гидроксида соответствует 49,04 мг Н2SO4.

Серной кислоты раствор 0,5 М

1 н. раствор серной кислоты.

28,00 мл серной кислоты концентрированной осторожно прибавляют к 100 мл воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Серной кислоты раствор 0,25 М

0,5 н. раствор серной кислоты.

14,00 мл серной кислоты концентрированной осторожно прибавляют к 100 мл воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Серной кислоты раствор 0,05 М

0,1 н. раствор серной кислоты.

5,0 мл серной кислоты раствора 1 М помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Используют свежеприготовленным.

Серной кислоты раствор 0,025 М

0,05 н. раствор серной кислоты.

2,5 мл серной кислоты раствора 1 М помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Используют свежеприготовленным.

Серной кислоты раствор 0,02 М

0,04 н. раствор серной кислоты.

2,0 мл серной кислоты раствора 1 М помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Используют свежеприготовленным.

Серной кислоты раствор 0,015 М

0,03 н. раствор серной кислоты.

3,0 мл серной кислоты раствора 0,5 М помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Используют свежеприготовленным.

Серной кислоты раствор 0,01 М

0,02 н. раствор серной кислоты.

2,0 мл серной кислоты раствора 0,5 М помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Используют свежеприготовленным.

Серной кислоты раствор 5 мМ

0,01 н. раствор серной кислоты.

1,0 мл раствора серной кислоты 0,5 М помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Используют свежеприготовленным.

Серной кислоты раствор 3,8 мМ

0,0076 н. раствор серной кислоты.

7,6 мл раствора серной кислоты 0,5 М помещают в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Используют свежеприготовленным.

Серная кислота, свободная от азота.

Должна выдерживать требования для серной кислоты концентрированной и следующее дополнительное испытание.

Нитраты. К 5 мл воды осторожно прибавляют 45 мл серной кислоты концентрированной, охлаждают до температуры 40 °С и прибавляют 8 мг дифенилбензидина; полученный раствор должен быть бесцветным или слегка бледно-голубого цвета.

Серной кислоты раствор в уксусном ангидриде 2%.

Раствор 20 г/л.

Серной кислоты раствор спиртовой 36,6%.

Осторожно при постоянном охлаждении и перемешивании 20 мл серной кислоты концентрированной прибавляют к 60 мл спирта 96%, охлаждают и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Серной кислоты раствор спиртовой 10%.

Осторожно при постоянном охлаждении и перемешивании 5,5 мл серной кислоты концентрированной прибавляют к 60 мл спирта 96%, охлаждают и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Серной кислоты раствор спиртовой 5%.

Осторожно при постоянном охлаждении и перемешивании 2,8 мл серной кислоты концентрированной прибавляют к 60 мл спирта 96%, охлаждают и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Серной кислоты раствор спиртовой 2,5 М.

Осторожно при постоянном охлаждении и перемешивании 14 мл серной кислоты концентрированной прибавляют к 60 мл спирта 96%, охлаждают и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Серной кислоты раствор спиртовой 0,25 М.

10 мл 2,5 М спиртового раствора серной кислоты доводят спиртом 96% до объёма 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Сернистой кислоты раствор.

Сернистая кислота весьма неустойчива при хранении и известна только в водных растворах. Готовят ее непосредственно перед употреблением по следующей методике.

Сернистый газ, получаемый при действии прибавляемой по капле серной кислоты концентрированной на сульфит или натрия бисульфит, по газоотводной трубке пропускают через 50–100 мл холодной воды до насыщения. Насыщенный раствор сернистой кислоты при температуре 20 °С содержит около 6% SO2 и имеет плотность около 1,0328. Такой раствор разводят водой в 10 раз и применяют для обесцвечивания йода.

Сероводород. [7783-06-4]. Н2S. (М.м. 34,08).

Сульфид водорода.

Газ; мало растворим в воде.

Сероводород очищенный

Содержит не менее 99,7% (о/о) Н2S.

Сероводорода раствор

Свежеприготовленный раствор сероводорода в воде.

Насыщенный раствор содержит при 20 °С от 0,4% до 0,5% H2S.

Сероуглерод. [75-15-0]. СS2. (М.м. 76,14).

Дисульфид углерода.

Бесцветная или жёлтоватого цвета воспламеняющаяся жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается с этанолом и эфиром.

. Около 1,26.

Температура кипения. От 46 до 47 °С.

Серы диоксид. [7446-09-5]. SO2. (М.м. 64,06).

Оксид серы(IV).

Бесцветный газ. При сжатии превращается в бесцветную жидкость.

Растворим в спирте 96%, серной кислоте концентрированной, уксусной кислоте.

Серы диоксид очищенный.

Содержит не менее 99,9% (о/о) SO2.

Силикагель π-акцептор/π-донор для хиральной хроматографии.

Очень тонко измельчённый силикагель со сферическими частицами, поверхность которых химически модифицирована 1-(3,5-динитробензамидо)-1,2,3,4-тетрагидрофенантреном, проявляющим как π-электроноакцепторные, так и π-электронодонорые свойства. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется. Дополнительно указывают конфигурацию колонки (S,S) или (R,R).

Силикагель алкиламидный для хроматографии.

Силикагель с размером частиц от 3 до 10 мкм, с поверхностью, химически модифицированной алкиламидными группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель алкиламидный эндкепированный, для хроматографии.

Силикагель с размером частиц от 3 до 10 мкм, с поверхностью, химически модифицированной алкиламидными группами и эндкепированный. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель алкилированный для хроматографии, для использования с подвижными фазами с высоким содержанием воды.

Силикагель очень тонко измельчённый, с поверхностью, химически модифицированной алкильными группами, пригодный для использования с подвижными фазами с высоким содержанием воды. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Силикагель амидогексадецилсилильный для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с поверхностью, химически модифицированной амидогексадецилсилильными группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель амидогексадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с поверхностью, химически модифицированной амидогексадецилсилильными группами. Для сведения к минимуму какого-либо взаимодействия с основными соединениями, тщательно эндкепируют для устранения большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель аминопропилметилсилильный для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной аминопропилметилсилиль-ными группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель аминопропилсилильный для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной аминопропилсилильными группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель аминопропилсилильный, эндкепированный, для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной аминопропилсилильными группами. Для сведения к минимуму какого-либо взаимодействия с основными соединениями, тщательно эндкепируют для устранения большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель безводный.

Аморфная кремневая кислота, частично обезвоженная и полимеризованная, поглощающая при температуре 20 °С около 30% воды относительно своей массы. Содержит в качестве индикатора кобальта хлорид.

Практически нерастворим в воде, частично растворим в растворах натрия гидроксида.

Силикагель бутилсилильный для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной бутилсилильными группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Кремния диоксид сфероидальный. 30 нм.

Объём пор. 0,6 см3/г.

Удельная площадь поверхности. 80 м2/г.

Силикагель бутилсилильный эндкепированный, для хроматографии.

Очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 мкм до 10 мкм, химически модифицированный бутилсилильными группами. Для сведения к минимуму какого-либо взаимодействия с основными соединениями, тщательно эндкепируют для устранения большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывается после названия реагента в тестах, где он используется.

Мелкий, белый или почти белый однородный порошок, практически нерастворимый в воде и в этаноле (96 процентов).

Силикагель гексилсилильный для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 мкм до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной гексилсилильными группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель гексилсилильный эндкепированный, для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 мкм до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной гексилсилильными группами. Для сведения к минимуму какого-либо взаимодействия с основными соединениями, тщательно эндкепируют для устранения большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель гидрофильный для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм, поверхность которого модифицирована с целью придания гидрофильных свойств. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Силикагель гидрофильный для хроматографии (1).

Силикагель сферический, очень тонко измельчённый, с размером частиц от 3 до 10 мкм, поверхность которого модифицирована с целью придания гидрофильных свойств. Имеет необходимую ёмкость для разделения белковых соединений с молекулярными массами от 4000 до 400000 Да, обладающий высокой рН стабильностью. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Силикагель диизобутилоктадецилсилильный для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с поверхностью, химически модифицированной диизобутилоктадецилсилильными группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель диметилоктадецилсилильный для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной диметилоктадецилсилиль-ными группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Размер частиц иррегулярный. Удельная площадь поверхности 300 м2/г.

Силикагель диольный для хроматографии (1). См. Силикагель, модифицированный дигидроксипропильными группами для хроматографии.

Силикагель для хиральной хроматографии, модифицированный L-пеницилламином.

Очень тонко измельчённый силикагель для хроматографии с поверхностью, модифицированной L-пеницилламином.

Силикагель для хиральной хроматографии, модифицированный производным мочевины.

Очень тонко измельчённый силикагель с размером частиц 5 мкм и поверхностью, модифицированной следующим производным мочевины:

Силикагель для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 мкм до 10 мкм. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Практически нерастворим в воде и спирте 96%.

Силикагель для хроматографии, сильный анионит.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной группами четвертичного аммония. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

рН. Используемые пределы от 2 до 8.

Силикагель для хроматографии, сильный анионит (1).

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 11 до 30 мкм и поверхностью, химически модифицированной группами четвертичного аммония. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель для хроматографии, сильный анионит (2).

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 31 до 50 мкм и поверхностью, химически модифицированной группами четвертичного аммония. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель для хроматографии, сильный катионит.

Силикагель, очень тонко измельчённый, с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, химически связанной с сильно кислыми катионобменными группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Практически нерастворим в воде и спирте 96%.

Силикагель для эксклюзионной хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц 10 мкм и очень гидрофильной поверхностью; средний диаметр пор около 30 нм; совместим с водными растворами с рН от 2 до 8 и органическими растворителями.

Пригоден для разделения протеинов с молекулярными массами от 1·103 до 3·105.

Силикагель для эксклюзионной хроматографии (1).

Силикагель или смешанный носитель со сферическими гидрофильными частицами размером от 1,5 до 10 мкм. Пригоден для разделения протеинов с молекулярными массами от 5·103 до 7∙106.

Силикагель додецилсилильный для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с поверхностью, химически модифицированной додецилсилильными группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель додецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с поверхностью, химически модифицированной додецилсилильными группами. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами эндкепирован для закрытия большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель, модифицированный альбумином для хиральной хроматографии.

Силикагель тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, модифицированной бычьим альбумином.

Силикагель, модифицированный амилазой для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной амилазой. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель, модифицированный амино- и цианогруппами для хроматографии.

Силикагель пористый с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной амино- и цианогруппами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель модифицированный ванкомицином для хиральной хроматографии.

Силикагель тонко измельченный с поверхностью, модифицированной ванкомицином. Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель, модифицированный дигидроксипропильными группами для хроматографии.

Силикагель тонко измельчённый с размером частиц от 1,5 до 10 мкм химически связанный с дигидроксипропильными группами.

Размер пор указывают после названия силикагеля.

Силикагель, модифицированный овомукоидом для хиральной хроматографии.

Силикагель тонко измельчённый с размером частиц 5 мкм, пористостью 120 Å и поверхностью, модифицированной овомукоидом.

Силикагель, модифицированный оптически активным краун-эфиром для хиральной хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый, с поверхностью химически модифицированной оптически активным 3,3'-дифенил-2,2'-эпи(1,4,7,10,13,16-гексаоксагексадекан-1,16-диил)-1,1'-бинафталином. Обычно используют сильнокислые подвижные фазы с pH 1–2. Размер частиц и знак оптического вращения указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется. При использовании сорбентов с противоположным оптическим вращением порядок выхода компонентов разделяемой смеси обычно меняется на обратный.

Силикагель, модифицированный трис(3,5-диметилфенилкарбамоил)амилозой для хиральной хроматографии.

Силикагель с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, модифицированной трис(3,5-диметилфенилкарбамоил)амилозой.

Силикагель, модифицированный трис(3,5-диметилфенилкарбамоил)целлюлозой для хиральной хроматографии.

Силикагель с размером частиц от 3 до 20 мкм и поверхностью, модифицированной трис(3,5-диметифенилкарбамоил)целлюлозой.

Силикагель, модифицированный трис(3,5-дихлорфенилкарбамоил)целлюлозой для хиральной хроматографии.

Силикагель с размером частиц от 3 до 20 мкм и поверхностью, модифицированной трис(3,5-дихлорфенилкарбамоил)целлюлозой.

Силикагель, модифицированный трис(4-метилбензоил)целлюлозой для хиральной хроматографии.

Силикагель с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, модифицированной трис(4-метилбензоил)целлюлозой.

Силикагель, модифицированный трис(фенилкарбамоил)целлюлозой для хиральной хроматографии.

Силикагель с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, модифицированной трис(4-метилбензоил)целлюлозой.

Силикагель, модифицированный трис(5-хлор-2-метилфенилкарбамоил)амилозой для хиральной хроматографии.

Силикагель с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью,
модифицированной трис(5-хлор-2-метилфенилкарбамоил)амилозой.

Силикагель, модифицированный α1-кислотным гликопротеином для хиральной хроматографии.

Силикагель тонко измельчённый с размером частиц 5 мкм и поверхностью, модифицированной α1-кислотным гликопротеином.

Силикагель мультиалкильный для хроматографии С8/С18.

Пористые силикагельные частицы, химически модифицированные октильными и октадецильными группами. Диаметр частиц 5 мкм.

Силикагель нитрильный для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с поверхностью, химически модифицированной цианопропилсилильными группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель нитрильный для хроматографии (1).

Силикагель очень тонко измельчённый, состоящий из пористых сферических частиц, с химически связанными нитрильными группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель нитрильный для хроматографии (2) (сверхчистый).

Силикагель сверхчистый с поверхностью, химически модифицированной цианопропилсилильными группами. Содержит менее 20 ррm металлов. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель октадеканоиламинопропилсилильный для хроматографии.

Силикагель тонкоизмельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной аминопропилсилильными группами, которые ацилированы октадеканоилгруппами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель октадецилсилильный для колоночной хроматографии.

Силикагель обращённо-фазовый, тонко измельчённый, с поверхностью химически модифицированной октадецилсилильными группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель октадецилсилильный для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной октадецилсилильными группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель октадецилсилильный для хроматографии (1) (сверхчистый).

Силикагель сверхчистый, очень тонко измельчённый с размером пор около 10 нм и поверхностью, химически модифицированной октадецилсилильными группами (содержание углерода 19%).

Содержание металлов должно быть менее 20 ррm.

Силикагель октадецилсилильный для хроматографии (2) (сверхчистый).

Силикагель сверхчистый, очень тонко измельчённый с размером пор 15 нм и поверхностью, химически модифицированной октадецилсилильными группами (содержание углерода 20%), предназначенный для анализа полициклических ароматических углеводородов. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель октадецилсилильный монолитный для хроматографии.

Монолитные стержни высокопористые (более 80%) из силикагеля с бимодальной структурой пор; модифицированы на поверхности октадецилсилильными группами.

Силикагель октадецилсилильный монолитный, эндкепированный, для хроматографии.

Монолитные стержни высокопористые (более 80%) из силикагеля с бимодальной структурой пор; модифицированы на поверхности октадецилсилильными группами. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами эндкепирован для закрытия большинства оставшихся силанольных групп.

Силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм; перед введением октадецилсилильных групп его предварительно обрабатывают путем тщательного промывания и гидролиза большинства поверхностных силоксановых мостиков для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм и размером пор около 10 нм, содержит около 16% углерода. Перед введением октадецилсилильных групп его предварительно обрабатывают путем тщательного промывания и гидролиза большинства поверхностных силоксановых мостиков. Для дальнейшего сведения к минимуму какого-либо взаимодействия с основными соединениями тщательно эндкепируют для устранения большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии (1).

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм. Перед введением октадецилсилильных групп его предварительно обрабатывают путем тщательного промывания и гидролиза большинства поверхностных силоксановых мостиков. Для дальнейшего сведения к минимуму какого-либо взаимодействия с основными соединениями тщательно эндкепируют для устранения большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель октадецилсилильный, с полярными группами, эндкепированный, для хроматографии.

Силикагель, очень тонко измельчённый, с размером частиц от 3 мкм до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной октадецилсилильными группами, имеющими полярные функции в алифатической цепи. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами эндкепирован для закрытия большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель октадецилсилильный, с полярными группами и этиленовыми мостиками, гибридный, эндкепированный.

Синтетические сферические гибридные частицы, состоящие из неорганических (силикагель) и органических (органосилоксаны) компонентов, связанные через этиленовые мостики с полярными частицами и химически модифицированные октадецилсилильными группами. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами эндкепирован для закрытия большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Силикагель октадецилсилильный, с полярными группами, капсулированный, для хроматографии.

Силикагель, очень тонко измельчённый, с размером частиц от 3 мкм до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной октадецилсилильными группами, имеющими полярные функции в алифатической цепи. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами капсулирован для закрытия большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Силикагель октадецилсилильный, с пористой поверхностью на непористой основе, для хроматографии.

Силикагель тонко измельчённый с непористым ядром носителя. Поверхность с контролируемой пористостью химически модифицирована октадецилсилильными группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Силикагель октадецилсилильный, с пористой поверхностью на непористой основе, эндкепированный, для хроматографии.

Силикагель тонко измельчённый с непористым ядром носителя. Поверхность с контролируемой пористостью химически модифицирована октадецилсилильными группами. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами эндкепирован для закрытия большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель октадецилсилильный, совместимый с водной подвижной фазой, для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной октадецилсилильными группами, совместимый со 100%-ной водной фазой. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель октадецилсилильный, совместимый с водной подвижной фазой, эндкепированный, для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной октадецилсилильными группами, совместимый со 100%-ной водной фазой. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами эндкепирован для закрытия большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель октадецилсилильный, экстра плотно связанный, эндкепированный, для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 1,8 до 7 мкм и поверхностью, химически модифицированной октадецилсилильными группами. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами эндкепирован для закрытия большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной октадецилсилильными группами. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами эндкепирован для закрытия большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии (1) (сверхчистый).

Силикагель очень тонко измельчённый с размером пор около 10 нм и поверхностью, химически модифицированной октадецилсилильными группами (содержание углерода 20%). Для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами эндкепирован для закрытия большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Содержание металлов должно быть менее 20 ррm.

Силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, с пористой поверхностью на непористой основе.

Силикагель тонко измельчённый с размером частиц от 30 до 50 мкм. Поверхность с контролируемой пористостью химически модифицирована октадецилсилильными группами. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами эндкепирован для закрытия большинства оставшихся силанольных групп. Ядро носителя непористое. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Силикагель октилсилильный для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной октилсилильными группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель октилсилильный для хроматографии (1).

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной октилсилильными и метильными группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель октилсилильный для хроматографии (2).

Силикагель очень тонко измельчённый с размером пор 10 и поверхностью, химически модифицированной октилсилильными группами (содержит 19% углерода).

Силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм; перед введением октилсилильных групп его предварительно обрабатывают путем тщательного промывания и гидролиза большинства поверхностных силоксановых мостиков для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм. Перед введением октилсилильных групп его предварительно обрабатывают путем тщательного промывания и гидролиза большинства поверхностных силоксановых мостиков. Для дальнейшего сведения к минимуму какого-либо взаимодействия с основными соединениями тщательно эндкепируют для устранения большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель октилсилильный, с полярными группами, эндкепированный, для хроматографии.

Силикагель, очень тонко измельчённый, с размером частиц от 3 мкм до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной октилсилильными группами, имеющими полярные функции в алифатической цепи. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами эндкепирован для закрытия большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель октилсилильный, с пористой поверхностью на непористой основе, эндкепированный, для хроматографии

Силикагель тонко измельчённый с непористым ядром носителя. Поверхность с контролируемой пористостью химически модифицирована октилсилильными группами. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами эндкепирован для закрытия большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется. Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель октилсилильный, экстра плотно связанный, эндкепированный, для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый и поверхностью, химически модифицированной очень плотно расположенными октилсилильными группами. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами эндкепирован для закрытия большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель октилсилильный, эндкепированный, для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной октилсилильными группами. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными соединениями тщательно эндкепируют для устранения большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель пентафторфенилпропильный для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 1,5 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной пентафторфенилпропильными группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель пентафторфенилпропильный, эндкепированный, для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 1,5 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной пентафторфенилпропильными группами. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными соединениями тщательно эндкепируют для устранения большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель полиаминный для хроматографии

Силикагель пористый, сферический, очень тонко измельчённый, с поверхностью, химически модифицированной полимерным слоем, содержащим вторичные и третичные аминогруппы. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель пористый для хроматографии, модифицированный диметилсиланом.

Силикагель пористый с размером частиц от 5 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной диметилсиланом. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Силикагель пористый для обращённо-фазовой хроматографии, модифицированный алкильными цепями

Силикагель пористый с размером частиц от 1,5 до 10 мкм, модифицированный алкильными цепями и предназначенный для удерживания гидрофильных соединений при использовании подвижных фаз с большим содержанием воды, включая 100% водную фазу. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется. Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель пропилсилильный для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной пропилсилильными группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Силикагель пропоксибензольный, эндкепированный, для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с поверхностью, химически модифицированной пропоксибензольными группами.

Силикагель, стабилизированный цирконием.

Сферический силикагель, стабилизированный цирконием, покрытый гидрофильным (диольным) мономолекулярным слоем, имеющий эффективный диаметр пор 150 ангстрем.

Силикагель триметилсилильный для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной триметилсилильными группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель триценилсилильный для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый, состоящий из полностью пористых сферических частиц размером от 3 до 15 мкм и поверхностью, химически модифицированной триценилсилильными (С30) группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель фенилгексилсилильный для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной фенилгексильными группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель фенилгексилсилильный с этиленовыми мостиками, гибридный, с заряженной поверхностью, эндкепированный, для хроматографии.

Синтетические сферические с этиленовыми мостиками гибридные частицы, состоящие из неорганических (силикагель) и органических (органосилоксаны) компонентов, химически модифицированные на поверхности связыванием фенилгексилсилильных групп. Для сведения к минимуму любого взаимодействия с основными соединениями они тщательно эндкепированы, чтобы покрыть большинство оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Силикагель фенилгексилсилильный, эндкепированный, для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной фенилгексильными группами. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными соединениями тщательно эндкепируют для устранения большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель фенилсилильный для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 1,5 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной фенильными группами.

Силикагель фенилсилильный для хроматографии (1).

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц 1,5 мкм и поверхностью, химически модифицированной фенильными группами.

Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Практически нерастворим в воде, спирте 96% и метиленхлориде.

Кремния диоксид сфероидальный. 8 нм.

Удельная площадь поверхности. 180 м2/г.

Содержание углерода. 5,5%.

Силикагель фенилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 1,5 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной фенильными группами. Перед введением фенилсилильных групп его предварительно обрабатывают путем тщательного промывания и гидролиза большинства поверхностных силоксановых мостиков для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель фенилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии. Силикагель очень тонко измельченный с поверхностью, химически модифицированной фенильными группами. Перед введением фенилсилильных групп его предварительно обрабатывают путем тщательного промывания и гидролиза большинства поверхностных силоксановых мостиков для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами. После модификации тщательно эндкепируют для устранения большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель фенилсилильный, с полярными группами и этиленовыми мостиками, гибридный, эндкепированный для хроматографии.

Синтетические сферические гибридные частицы, состоящие из неорганических (силикагель) и органических (органосилоксаны) компонентов, содержащих этиленовые мостики и полярные частицы, химически модифицированных октадецилсилильными группами. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными компонентами эндкепирован для закрытия большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Силикагель фенилсилильный с этиленовыми мостиками, гибридный, эндкепированный, для хроматографии.

Синтетические сферические с этиленовыми мостиками гибридные частицы, состоящие из неорганических (силикагель) и органических (органосилоксаны) компонентов, химически модифицированные на поверхности связыванием фенилсилильных групп. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными соединениями они тщательно эндкепированы, чтобы покрыть большинство оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Силикагель фенилсилильный, эндкепированный, для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с поверхностью, химически модифицированной фенильными группами. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными соединениями тщательно эндкепируют для устранения большинства оставшихся силанольных групп.

Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель феноксиалкилсилильный, эндкепированный, для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с поверхностью, химически модифицированной феноксиалкильными группами, с полярным эндкепированием. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель цианосилильный для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с поверхностью, химически модифицированной цианосилильными группами. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель цианосилильный эндкепрованный для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 3 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной цианосилильными группами. Для сведения к минимуму взаимодействия с основными соединениями тщательно эндкепируют для устранения большинства оставшихся силанольных групп. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель β-циклодекстриновый для хроматографии.

Силикагель очень тонко измельчённый с размером частиц от 5 до 10 мкм и поверхностью, химически модифицированной β-циклодекстрином. Размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Гомогенный порошок белого цвета.

Силикагель G.

Состоит из около 87% кремния диоксида и около 13% кальция сульфата гемигидрата.

Гомогенный порошок белого цвета с размером частиц около 15 мкм.

Кальция сульфат. 0,25 г помещают в колбу с притертой стеклянной пробкой, прибавляют 3 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3% и 100 мл воды, энергично взбалтывают в течение 30 мин, фильтруют через стеклянный фильтр и промывают остаток. Фильтрат и промывные воды объединяют и проводят определение содержания кальция методом комплексонометрии.

1 мл 0,1 М раствора натрия эдетата соответствует 14,51 мг СаSO4·0,5Н2О.

рН. Около 7,0 (суспензия, полученная взбалтыванием 1 г с 10 мл воды, свободной от углерода диоксида, в течение 5 мин).

Силикагель GF254.

Содержит около 13% кальция сульфата полугидрата и около 1,5% флуоресцентного индикатора, имеющего оптимальную интенсивность поглощения при длине волны 254 нм.

Гомогенный порошок белого цвета с размером частиц около 15 мкм.

Кальция сульфат. Определение проводят методом, указанным для силикагеля G.

рН. Должен выдерживать требования для силикагеля G.

Флуоресценция. Определение проводят методом тонкослойной хроматографии, используя в качестве тонкого слоя силикагель GF254. На хроматографическую пластинку наносят в 10 точек последовательно возрастающие объёмы от 1 до 10 мкл 0,1% раствора бензойной кислоты в смеси растворителей муравьиная кислота безводная–2-пропанол 10:90. Хроматографируют в той же смеси растворителей. Когда фронт растворителей пройдет около 10 см, пластинку вынимают, сушат и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм. На верхней трети хроматограммы на флуоресцирующем фоне должны обнаруживаться темные пятна бензойной кислоты, начиная от 2 мкг и более.

Силикагель H.

Гомогенный порошок белого цвета с размером частиц около 15 мкм.

рН. Должен выдерживать требования для силикагеля G.

Силикагель Н силанизированный.

Гомогенный порошок белого цвета; после встряхивания с водой всплывает на поверхность вследствие гидрофобных свойств.

Хроматографическая разделяющая способность. Должен выдерживать испытание для силикагеля НF254 силанизированного.

Силикагель НF254.

Содержит около 1,5% флуоресцентного индикатора, имеющего оптимальную интенсивность поглощения при длине волны 254 нм.

Гомогенный порошок белого цвета с размером частиц около 15 мкм.

рН. Должен выдерживать требование для силикагеля G.

Флуоресценция. Должен выдерживать требование для силикагеля GF254.

Силикагель НF254 силанизированный.

Содержит около 1,5% флуоресцентного индикатора, имеющего оптимальную интенсивность поглощения при длине волны 254 нм.

Гомогенный порошок белого цвета; после встряхивания с водой всплывает на поверхность вследствие гидрофобных свойств.

Хроматографическая разделяющая способность. В коническую колбу вместимостью 250 мл помещают по 0,1 г метиллаурата, метилмиристата, метилпальмитата и метилстеарата, прибавляют 40 мл 3% спиртового раствора калия гидроксида и нагревают с обратным холодильником при температуре 100 °С в течение 1 ч. Охлаждают, переносят раствор в делительную воронку с помощью 100 мл воды, подкисляют до рН от 2 до 3 хлористоводородной кислотой разведённой 7,3% и встряхивают с 3 порциями хлороформа по 10 мл каждая. Объединенные хлороформные извлечения сушат над натрия сульфатом безводным, фильтруют и выпаривают досуха на водяной бане. Остаток растворяют в 50 мл хлороформа. Проводят определение методом тонкослойной хроматографии, используя в качестве тонкого слоя силикагель НF254 силанизированный. На хроматографическую пластинку наносят в 3 точки по 10 мкл хлороформного раствора и хроматографируют в системе растворителей уксусная кислота ледяная–вода–диоксан 10:25:65. Когда фронт растворителей пройдет 14 см, пластинку вынимают, сушат при температуре 120 °С в течение 30 мин, охлаждают, опрыскивают раствором 35 г/л фосфорномолибденовой кислоты в 2-пропаноле и нагревают при температуре 150 °С до появления пятен. Пластинку обрабатывают парами аммиака до получения белого фона. На хроматограммах должны обнаруживаться 4 четко разделенных хорошо выраженных пятна.

Сильная катионообменная смола.

Сорбент, представляющий собой сополимер стирола с дивинилбензолом в водородной форме. Диаметр частиц – от 5 до 12 мкм. Поверхность субстрата модифицирована сульфогруппами.

Симендан. [131741-08-7]. C14H12N6O. (М.м. 280,28).

N-{4-[(4RS)-4-Метил-6-оксо-1,4,5,6-тетрагидропиридазин-3-ил]фенил}карбоногидразоноилдицианид.

Порошок или кристаллы жёлтого цвета.

Малорастворим в метаноле и диметилсульфоксиде.

Температура плавления. Более 185 °С (разл.).

Синенсетин. [2306-27-6]. С20Н20О7. (М.м. 372,37).

2-(3,4-Диметоксифенил)-5,6,7-триметокси-4H-1-бензопиран-4-он.

Белый кристаллический порошок.

Практически нерастворим в воде, растворим в спирте 96%.

Температура плавления. Около 177 °С.

Поглощение. Раствор в метаноле имеет 3 максимума поглощения при 243, 268 и 330 нм.

Количественное содержание. Не менее 95,0%.

Синий VS. См. Сульфановый синий.

Сквалан. [111-01-3]. С30Н62. (М.м. 422,8).

2,6,10,15,19,23-Гексаметилтетракозан.

Бесцветная маслянистая жидкость.

Легко растворим в эфире и жирных маслах, мало растворим в ацетоне, спирте 96%, уксусной кислоте ледяной и метаноле.

. От 0,811 до 0,813.

. От 1,451 до 1,453.

Скипидар очищенный.

Прозрачная бесцветная подвижная жидкость с характерным запахом.

Скополетин. [92-61-5]. C10H8O4. (М.м. 192,17).

7-Гидрокси-6-метокси-2H-1-бензопиран-2-он.

7-Гидрокси-6-метоксикумарин.

Бледно бежевые, тонкие кристаллы.

Температура плавления. От 202 до 208 °С.

Слабая катионообменная смола.

Сорбент, представляющий собой сополимер 55%-ной сшивки этилвинилбензола с дивинилбензолом. Диаметр частиц от 3 до 15 мкм. Поверхность субстрата модифицирована карбоксильными и/или фосфатными группами. Обменная ёмкость сорбента – не менее 500 мкЭкв на колонку.

Слабая катионообменная смола (1).

Сорбент на основе силикагеля с поверхностью, модифицированной полимеризованными бутадиеном и малеиновой кислотой. Диаметр частиц 5 мкм. Обменная ёмкость сорбента – не менее 29 мкЭкв на колонку.

Слабая катионообменная смола (2).

Сорбент, представляющий собой сополимер 55%-ной сшивки этилвинилбензола с дивинилбензолом. Диаметр частиц от 6 до 9 мкм. Поверхность субстрата модифицирована карбоксильными группами. Обменная ёмкость сорбента – не менее 500 мкЭкв на колонку.

Слабая катионообменная смола (3).

Сорбент, представляющий собой сополимер 55%-ной сшивки этилвинилбензола с дивинилбензолом. Диаметр частиц 5 мкм. Поверхность субстрата модифицирована карбоксильными группами. Обменная ёмкость сорбента – не менее 8400 мкЭкв на колонку.

Смешанный индикатор.

Смешивают метиловый красный и метиленовый синий в соотношении 2:1.

Смешанного индикатора раствор.

100 мл 0,1% спиртового раствора метилового красного смешивают с 50 мл 0,1% спиртового раствора метиленового синего (голубого).

Переход окраски раствора от фиолетово-красной к зеленой при рН 5,4.

Смесь для спекания.

25 г мелко растертого безводного химически чистого натрия карбоната тщательно смешивают в ступке с 45 г безводного химически чистого калия карбоната и с 25 г мелко растёртого химически чистого калия нитрата.

Хранят в банке с притертой пробкой.

Смола для обращённо-фазовой ионной хроматографии.

Нейтральная, макропористая смола с высокой удельной поверхностью неполярного характера, состоящая из полимерной решётки полистирола поперечно-сшитого дивинилбензолом.

Смола слабокатионитная. См. Анионобменная смола.

Смола ионообменная сильнокислотная. См. Катионообменная смола сильная (протонированная форма).

Соль Рейнеке. См. Аммония рейнекат.

Сополимер дивинилбензол-винилпирролидона.

Твёрдые, пористые гранулы из поперечно-сшитого полимера. Существуют различные марки с разными размерами гранул. Размер гранул указывают после названия реактива в испытаниях, в которых он используется.

Сополимер стирол-дивинилбензола.

Твёрдые, пористые гранулы из поперечно-сшитого полимера. Существуют различные марки с разными размерами гранул. Размер гранул указывают после названия реактива в испытаниях, в которых он используется.

Сополимер этилвинилбензол-дивинилбензола.

Твёрдые, пористые гранулы шарообразной формы из поперечно-сшитого полимера. Существуют различные марки с разными размерами гранул. Размер гранул указывают в испытаниях, в которых он используется.

Сорбент комбинированный для ВЭЖХ.

Сорбент для ВЭЖХ, состоящий как из обращённо-фазовых (алкильная цепь длиннее С8), так и из слабых катионообменных (карбоксильных) функциональных групп, химически связанных с пористыми или непористыми частицами диаметром 1,0-50 мкм.

Сорбит. См. Сорбитол.

Сорбитол. [50-70-4]. С6Н14О6. (М.м. 182,17). D-Глюцит.

Белый или почти белый кристаллический порошок. Обладает полиморфизмом.

Очень легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Спирт 95%. [64-17-5]. С2Н6О. (М.м. 46,07).

Этанол.

Содержит 94,9–96,0% (о/о) или 92,3–93,8% (м/м) С2Н6О при температуре 20 °С.

Бесцветная, прозрачная, летучая, воспламеняющаяся жидкость; гигроскопична.

Смешивается с водой и метиленхлоридом. Горит бездымным голубоватым пламенем.

Температура кипения. Около 78 °С.

Должен соответствовать ФС Спирт этиловый 95%, 96%.

Спирт 96%. [64-17-5]. С2Н6О. (М.м. 46,07).

Этанол.

Содержит 95,1–96,9% (о/о) или 92,6–95,2% (м/м) С2Н6О при температуре 20 °С.

Бесцветная, прозрачная, летучая, воспламеняющаяся жидкость; гигроскопична.

Смешивается с водой и метиленхлоридом. Горит бездымным голубоватым пламенем.

Температура кипения. Около 78 °С.

Должен соответствовать ФС Спирт этиловый 95%, 96%.

Спирт 96%, свободный от альдегидов.

1200 мл спирта 96% смешивают с 5 мл 40% раствора серебра нитрата и 10 мл охлажденного 50% раствора калия гидроксида, встряхивают, отстаивают в течение нескольких дней и фильтруют.

Фильтрат перегоняют непосредственно перед использованием.

Спирт 96% очищенный.

К 1 л 95% спирта прибавляют 4 г цинковой пыли и 4 мл серной кислоты концентрированной. Смесь оставляют на 24 ч, периодически перемешивая. Затем спирт перегоняют. К 1 л перегнанного спирта прибавляют 4 г цинковой пыли и 4 г калия гидроксида, перемешивают и снова перегоняют.

Спирт 96%, содержащий 1% хлористоводородной кислоты концентрированной.

К 80 мл спирта 96% осторожно прибавляют по каплям 5,6 г хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора спиртом 96% до 100,0 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Спирт 90%.

К 94 мл спирта 96% прибавляют 7 мл воды дистиллированной и перемешивают.

Спирт 90%, содержащий 1% хлористоводородной кислоты концентрированной.

К 80 мл спирта 90% осторожно прибавляют по каплям 5,6 г хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора спиртом 90% до 100,0 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Спирт 80%.

К 83,5 мл спирта 96% прибавляют 18,5 мл воды дистиллированной и перемешивают.

Спирт 70%.

К 73 мл спирта 96% прибавляют 30 мл воды дистиллированной и перемешивают.

Спирт 60%.

К 62,5 мл спирта 96% 40,5 мл воды дистиллированной и перемешивают.

Спирт 60%, содержащий 5% хлористоводородной кислоты.

К 126 мл спирта 96% прибавляют 28 г хлористоводородной кислоты концентрированной, доводят объём раствора водой до 200 мл.

Спирт 60%, содержащий 1% хлористоводородной кислоты.

К 126 мл спирта 96% прибавляют 5,6 г хлористоводородной кислоты концентрированной, доводят объём раствора водой до 200 мл.

Спирт 50%.

К 52,1 мл спирта 96% прибавляют 51,1 мл воды дистиллированной и перемешивают.

Спирт 40%.

К 41,7 мл спирта 96% прибавляют 61,3 мл воды дистиллированной и перемешивают.

Спирт 30%.

К 31,3 мл спирта 96% прибавляют 71,1 мл воды дистиллированной и перемешивают.

Спирт н-амиловый. См. Пентанол.

Спирт н-бутиловый. См. Бутанол.

Спирт изоамиловый. См. Изоамиловый спирт.

Спирт изопропиловый. См. 2-Пропанол.

Спирт метиловый. См. Метанол.

Спирт поливиниловый. См. Поливиниловый спирт.

Спирт пропиловый. См. Пропанол.

Спирт этиловый абсолютированный. См. Этанол.

Спирт этиловый абсолютированный для спектрофотометрии.

Абсолютированный спирт, не содержащий бензола, перегоняют над твердым натрия кидроксидом или калия гидроксидом (10 г щелочи на 1 л спирта). Начальную и конечную порции отгона отбрасывают. Перегнанный спирт абсолютированный при измерении относительно воды в кювете с толщиной слоя 1 см должен иметь величину оптической плотности, не превышающей 0,01 в области от 320 до 350 нм и 0,05 в области от 280 до 300 нм.

Сплав Деварда.

Сплав Cu—Al—Zn 50:45:5 (масс).

Белый хрупкий металл в виде палочек или серого порошка.

Стеарилфумарат натрия. [4070-80-8]. C22H39NaO4. (М.м. 390,53).

(2Z)-4-Оксо-4-(окстадецилокси)бут-2-еновая кислота.

Порошок белого цвета.

Стеариновая кислота. [57-11-4]. С18Н36О2. (М.м. 284,48).

Октадекановая кислота.

Порошок или хлопья белого цвета, маслянистые на ощупь.

Практически нерастворима в воде, растворима в горячем спирте 96% и эфире.

Температура плавления. Около 70 °С.

Стекловолокно.

Тонкие стеклянные нити.

Стронция карбонат. [1633-05-2]. SrCO3. (М.м. 147,63).

Карбонат стронция.

Кристаллический порошок белого цвета.

Содержит не менее 99,5% SrCO3.

Судан красный G. [1229-55-6]. С17Н14N2O2. (М.м. 278,31).

1-[(2-Метоксифенил)диазенил]нафталин-2-ол.

Порошок красновато-коричневого цвета.

Практически нерастворим в воде.

Хроматография. Определение проводят методом тонкослойной хроматографии, используя в качестве тонкого слоя силикагель G. На хроматографическую пластинку наносят 10 мкл 0,01% раствора в метиленхлориде и хроматографируют в том же растворителе. Длина пробега фронта растворителя около 10 см от линии старта. На полученной хроматограмме должно обнаруживаться только одно основное пятно.

Судана красного G раствор 0,025% спиртовой

5 мг судана красного G растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 20,0 мл.

Судан I. [842-07-9]. С16Н12N2O. (М.м. 248,28).

1-(Фенилдиазенил)нафталин-2-ол.

Порошок оранжево-красного цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим в метиленхлориде.

Температура плавления. Около 131 °С.

Судан III. [85-86-9]. С22Н16N4O. (М.м. 352,39).

1-{[4-(Фенилдиазенил)фенил]диазенил}нафталин-2-ол.

Коричневый порошок с зеленым металлическим блеском.

Мало растворим в спирте 96%, растворим в бензоле и хлороформе.

Судана III раствор 0,3%.

0,3 г судана III растворяют в спирте 70%, нагревая до закипания. Кипятят в течение 3–5 мин, затем охлаждают и фильтруют. Доводят объём раствора спиртом 70% до 100 мл.

Судана III раствор 0,1% уксуснокислый.

0,1 г судана III помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 20 мл уксусной кислоты ледяной, встряхивают до полного растворения навески и доводят объём раствора уксусной кислотой ледяной до метки.

Судан IV. [85-83-6]. C24Н20N4O. (М.м. 380,44).

1-({2-Метил-4-[(2-метилфенил)диазенил]фенил}диазенил)нафталин-2-ол.

Порошок от коричневого до красновато-коричневого цвета.

Мало растворим в этаноле 96%, растворим в хлороформе.

Судана IV раствор 0,5%.

0,5 г реактива растворяют в хлороформе и доводят объём раствора хлороформом до 100 мл.

Сулема. См. Ртути(II) хлорид.

Сульфаминовая кислота. [5329-14-6]. NН2SO3Н. (М.м. 97,09).

Сульфаминовая кислота.

Кристаллический порошок или кристаллы белого цвета.

Легко растворима в воде, умеренно растворима в ацетоне, спирте 96% и метаноле, практически нерастворима в эфире.

Температура плавления. Около 205 °С с разложением.

Сульфаминовой кислоты раствор 10%

10,0 г сульфаминовой кислоты растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Сульфаминовой кислоты раствор 5%

5,0 г сульфаминовой кислоты растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Сульфаминовой кислоты раствор 4%

4,0 г сульфаминовой кислоты растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Сульфаминовой кислоты раствор 3%

3,0 г сульфаминовой кислоты растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Сульфаминовой кислоты раствор 0,6%

0,6 г сульфаминовой кислоты растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Сульфаминовой кислоты раствор 0,024%

4,0 мл сульфаминовой кислоты раствора 0,6% доводят водой до 100,0 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

3-Сульфамоил-4-хлорбензойная кислота. [1205-30-7]. C7H6ClNO4S. (М.м. 235,64).

3-Сульфамоил-4-хлорбензойная кислота.

Содержит не менее 98,0% C7H6ClNO4S.

Температура плавления. От 256 до 258 °С.

Сульфаниламид. [63-74-1]. С6Н8N2O2S. (М.м. 172,20).

4-Аминобензолсульфонамид.

Порошок белого цвета.

Мало растворим в воде, легко растворим в кипящей воде, ацетоне, растворим разведённых неорганических кислотах и растворах гидроксидов щелочных металлов, умеренно растворим в спирте 96%, эфире и петролейном эфире.

Температура плавления. Около 165 °С.

Сульфаниловая кислота. [121-57-3]. С6Н7NО3S. (М.м. 173,19).

4-Аминобензол-1-сульфоновая кислота.

Белый или белый с сероватым оттенком кристаллический порошок.

Умеренно растворима в воде, практически нерастворима в 96% спирте.

Сульфаниловой кислоты раствор диазотированный.

В мерный стакан вместимостью 100 мл помещают 0,9 г сульфаниловой кислоты, растворяют при нагревании в 9 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки. Охлаждают 10 мл полученного раствора в ледяной воде и прибавляют 10 мл ледяного натрия нитрита раствора 4,5%. Выдерживают 15 мин при температуре 0 °С (можно хранить при этой температуре до трёх дней) и непосредственно перед использованием прибавляют 20 мл натрия карбоната раствора 10%.

Сульфаниловой кислоты щелочной раствор 0,5 М.

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 8,66 г сульфаниловой ктслоты, 30 мл воды, 11 мл натрия гидроксида раствора 10%, перемешивают до растворения и доводят объём раствора водой до метки.

Срок годности – 30 сут.

Сульфановый синий. [129-17-9]. С27Н31N2NaO6S2. (М.м. 566,7).

4-{[4-(Диэтиламино)фенил][4-(диэтилазанийилиден)циклогекса-2,5-диен-1-илиден]метил}бензол-1,3-дисульфонат натрия (1:1).

Порошок фиолетового цвета.

Растворим в воде. Разведённые растворы имеют синюю окраску, которая переходит в жёлтую при прибавлении кислоты хлористоводородной концентрированной.

Сульфарсазен. См. Плюмбон.

Сульфатиазол. [72-14-0]. С9Н9N2O2S2. (М.м. 255,32).

4-Амино-N-(1,3-тиазол-2-ил)бензолсульфонамид.

Порошок или кристаллы белого или жёлтовато-белого цвета.

Очень мало растворим в воде, растворим в ацетоне, мало растворим в спирте 96%. Растворяется в разведённых неорганических кислотах, растворах гидроксидов и карбонатов щелочных металлов.

Температура плавления. Около 200 °С.

Сульфомолибденовый реактив 0,5%.

Около 50 мг аммония молибдата растворяют в 10 мл кислоты серной концентрированной.

Сульфомолибденовый реактив 2,5%.

2,5 г аммония молибдата растворяют при нагревании в 20 мл воды. 28 мл кислоты серной концентрированной доводят водой до объёма 50 мл, затем охлаждают. Оба раствора смешивают и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Хранят в полиэтиленовой упаковке.

Сульфосалициловая кислота. [5965-83-3]. С7Н6O6S·2Н2О. (М.м. 254,21).

2-Гидрокси-5-сульфобензойная кислота, дигидрат.

Кристаллический порошок или кристаллы белого цвета.

Очень легко растворима в воде и спирте 96%, растворима в эфире.

Температура плавления. Около 109 °С.

Сульфосалициловой кислоты раствор 20%.

20 г сульфосалициловой кислоты растворяют в воде, доводят объём раствора водой до 100 мл.

Сульфосалициловой кислоты раствор 10%.

10 г сульфосалициловой кислоты растворяют в воде, доводят объём раствора водой до 100 мл.

Сурьмы(III) хлорид. [10025-91-9]. SbCl3. (М.м. 228,12).

Хлорид сурьмы(III).

Бесцветные кристаллы или прозрачная кристаллическая масса. Гигроскопичен.

Легко растворим в этаноле безводном; гидролизуется в воде.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке, защищают от влаги.

Сурьмы(III) хлорида раствор 30%.

30 г сурьмы(III) хлорида быстро промывают 2 порциями по 15 мл хлороформа, свободного от этанола, отбрасывают промывные растворы и промытые кристаллы тотчас растворяют при слабом нагревании в 100 мл хлороформа, свободного от этанола.

Хранят раствор над натрия сульфатом безводным.

Сурьмы(III) хлорида раствор в этиленхлориде (около 20%).

Раствор I. 110 г сурьмы(III) хлорида растворяют в 400 мл этиленхлорида, прибавляют 2,0 г алюминия оксида безводного, перемешивают и фильтруют через стеклянный фильтр (40). Доводят объём фильтрата этиленхлоридом до 500 мл и перемешивают. Оптическая плотность полученного раствора, измеренная при длине волны 500 нм в кювете с толщиной слоя 2 см, не должна превышать 0,07.

Раствор II. В вытяжном шкафу смешивают 100 мл свежеперегнанного ацетилхлорида и 400 мл этиленхлорида.

Хранят в прохладном месте.

Смешивают 90 мл раствора I и 10 мл раствора II.

Хранят во флаконах оранжевого стекла с притертой пробкой.

Срок годности 7 сут. Реактив не годен при появлении окрашивания.

Сурьмы(III) хлорида раствор в хлороформе (≈22%).

Хлороформ промывают 2–3 раза равными объёмами воды и сушат над прокаленным калия карбонатом; высушенный хлороформ сливают и перегоняют, отбрасывая первые 10 мл дистиллята. Во время высушивания и перегонки хлороформ следует защищать от воздействия света. Сурьмы трихлорид промывают перегнанным высушенным хлороформом до тех пор, пока промывной хлороформ не будет бесцветным.

Очищенный хлороформ насыщают при температуре 20 °С промытым сурьмы трихлоридом.

Смешивают 1 мл раствора сурьмы трихлорида с 2 г сеньетовой соли и титруют 0,1 М раствором йода до жёлтого окрашивания.

1 мл 0,1 М раствора йода соответствует 0,01141 г SbCl3, которого в растворе должно быть не менее 21,0% и не более 23,0%.

Тагатоза. [87-81-0]. С6Н12О6. (М.м. 180,16).

D-ликсо-Гекс-2-улоза.

Порошок белого цвета. Растворима в воде.

. –2,3° (2,19% раствор в воде).

Температура плавления. От 134 до 135 °С.

Таллия сульфат. [7446-18-6]. Тl2SO4. (М.м. 504,8).

Сульфат таллия(I).

Ромбовидные призмы белого цвета.

Мало растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Таниновая кислота. [1401-55-4]. C76H52O46. (М.м. 1701,2).

{3,4-Дигидрокси-5-[(3,4,5-тригидроксибензоил)окси]бензоил}-2,3,4,6-тетра-O-{3,4-дигидрокси-5-[(3,4,5-тригидроксибензоил)окси]бензоил}-β-D-глюкопиранозид.

Блестящие чешуйки или аморфный порошок от жёлтоватого до светло-коричневого цвета.

Очень легко растворима в воде, легко растворима в спирте 96%, растворима в ацетоне, практически нерастворима в эфире.

Хранят в защищённом от света месте.

Таниновой кислоты раствор 10%

1 г таниновой кислоты растворяют в 1 мл спирта 96% и доводят объём раствора водой до 10 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Таниновой кислоты раствор 5%

0,5 г таниновой кислоты растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 10 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Твин-20. См. Полисорбат 20.

Твин-80. См. Полисорбат 80.

Терефталевый альдегид. [623-27-8]. C8H6O2. (М.м. 134,13).

Бензол-1,4-дикарбальдегид.

Белое или почти белое кристалличнское или хлопьевидное вещество.

Содержит не менее 98% C8H6O2.

Температура плавления. От 112 до 117 °С.

Температура кипения. От 245 до 248 °С.

γ-Терпинен. [99-85-4]. С10Н16. (М.м. 136,23).

4-Метил-1-(пропан-2-ил)циклогекса-1,4-диен.

Маслянистая жидкость.

. Около 0,850.

. От 1,474 до 1,475.

Температура кипения. От 183 до 186 °С.

Хроматографическая чистота γ-терпинена, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 93,0%.

Терпинен-4-ол. [562-74-3]. С10Н18О. (М.м. 154,25).

(1RS)-4-Метил-1-(пропан-2-ил)циклогекс-3-ен-1-ол.

Бесцветная маслянистая жидкость.

. Около 0,934.

. Около 1,477.

Температура кипения. От 209 до 212 °С.

Хроматографическая чистота терпинен-4-ола, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 98,0%.

α-Терпинеол. [98-55-5]. С10Н18О. (М.м. 154,24).

2-[(1RS)-4-Метилциклогекс-3-ен-1-ил]пропан-2-ол.

Бесцветные кристаллы.

Практически нерастворим в воде, растворим в спирте 96% и эфире.

. Около 0,935.

. Около 1,483.

. Около 92,5°.

Температура плавления. Около 35 °С.

Может содержать от 1 до 3% β-терпинеола.

Хроматографическая чистота α-терпинеола, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 97,0%.

Тест-полоска для определения pH

Бумажная тест-полоска или пластиковая тест-полоска, содержащая один или несколько бумажных сегментов, пропитанных кислотно-основными индикаторами, позволяющая визуально определять pH в заданном диапазоне путём сравнения её окраски с соответствующей цветовой шкалой.

Тетра-O-ацетил-β-D-глюкопираноза. [13100-46-4]. C14H20O10. (М.м. 348,30).

1,2,3,4-Тетра-O-ацетил-β-D-глюкопираноза.

Белый или почти белый порошок, растворим в воде при лёгком нагревании.

. Около +11 (6 г/л, раствор в хлороформе).

Температура плавления. От 126 до 128 °С.

Тетрабутиламмония бромид. [1643-19-2]. С16Н36BrN. (М.м. 322,37).

N,N,N-Трибутилбутан-1-аминий бромид.

Кристаллы белого или почти белого цвета.

Температура плавления. От 102 до 104 °С.

Тетрабутиламмония гидроксид. См. Тетрабутиламмония гидроксид 30-водный.

Тетрабутиламмония гидроксид 30-водный. [147741-30-8]. С16Н37NО·30Н2О. (М.м. 799,9).

N,N,N-Трибутилбутан-1-аминий гидроксид триаконтагидрат.

Содержит не менее 98,0% С16Н37NО·30Н2О.

Кристаллы белого или почти белого цвета.

Растворим в воде.

Тетрабутиламмония гидроксида раствор 40%. [2052-49-5].

Раствор, содержащий 400 г/л С16Н37NО (М.м. 259,47), приготовленный разведением реактива соответствующей степени чистоты.

Тетрабутиламмония гидроксида раствор 10,4%. [2052-49-5].

Раствор, содержащий 104 г/л С16Н37NО (М.м. 259,47), приготовленный разведением реактива соответствующей степени чистоты.

Тетрабутиламмония гидроксида раствор 8,8% в метаноле

27 г тетрабутиламмония гидроксида 30-водного растворяют в метаноле и доводят объём тем же растворителем до 100 мл.

Тетрабутиламмония гидроксида раствор 1 М в метаноле.

Раствор, содержащий 259,47 г/л С16Н37NО (М.м. 259,47) в метаноле.

Тетрабутиламмония гидросульфат. [32503-27-8]. С16Н37NО4S. (М.м. 339,53).

N,N,N-Трибутилбутан-1-аминий гидросульфат.

Кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Легко растворим в воде и метаноле.

Температура плавления. От 169 до 173 °С.

Оптическая плотность. Не более 0,05; измеряют оптическую плотность 5% раствора в области длин волн от 240 до 300 нм.

Тетрабутиламмония гидросульфата раствор 1%

10,0 г тетрабутиламмония гидросульфата помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, прибавляют 800 мл воды, перемешивают до полного растворения, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют.

Используют свежеприготовленным.

Тетрабутиламмония гидросульфата раствор 0,08 М

27,2 г тетрабутиламмония гидросульфата помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, прибавляют 800 мл воды, перемешивают до полного растворения, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют.

Используют свежеприготовленным.

Тетрабутиламмония дигидрофосфат. [5574-97-0]. С16Н38NO4P. (М.м. 339,45).

N,N,N-Трибутилбутан-1-аминий дигидрофосфат.

Порошок белого цвета, гигроскопичен.

рН. Около 7,5 (17% раствор).

Оптическая плотность. Около 0,10; измеряют оптическую плотность 17% раствора при длине волны 210 нм.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Тетрабутиламмония йодид. [311-28-4]. С16Н36IN. (М.м. 369,37).

N,N,N-Трибутилбутан-1-аминий иодид.

Содержит не менее 98,0% С16Н36IN.

Кристаллический порошок или кристаллы белого цвета или слегка окрашены.

Растворим в спирте 96%.

Тетрабутиламмония перхлорат. [1923-70-2]. C16H36ClNO4. (М.м. 341,91).

N,N,N-Трибутилбутан-1-аминий перхлорат.

Содержит не менее 98,0% C16H36ClNO4.

Тетрабутиламмония хлорид. [1112-67-0]. С16Н36ClN. (М.м. 277,92).

N,N,N-Трибутилбутан-1-аминий хлорид.

Температура плавления. От 83 до 85 °С.

. От 1,421 до 1,423.

Хранят под азотом.

Тетрагексиламмония гидросульфат. [32503-34-7]. С24Н53NО4S.(М.м. 451,7).

N,N,N-Тригексилгексан-1-аминий гидросульфат.

Белые кристаллы.

Температура плавления. От 100 до 102 °С.

Тетрагептиламмония бромид. [4368-51-8]. С28Н60BrN. (М.м. 490,7).

N,N,N-Тригептилгептан-1-аминий бромид.

Кристаллический порошок или кристаллы белого цвета или слегка окрашены.

Температура плавления. От 89 до 91 °С.

Тетрагидрофуран. [109-99-9]. С4Н8О. (М.м. 72,11).

Оксолан.

Прозрачная, бесцветная, воспламеняющаяся жидкость.

Смешивается с водой, спиртом 96% и эфиром.

Температура кипения. 66 °С.

. Около 0,89.

. Около 1,407.

Не перегоняют, если тетрагидрофуран не выдерживает испытание на пероксиды.

Пероксиды. 8 мл раствора крахмала с калия йодидом помещают в цилиндр с притертой пробкой емкостью 12 мл и диаметром около 1,5 см, заполняют полностью тетрагидрофураном, затем перемешивают и выдерживают в тёмном месте в течение 30 мин. Не должно наблюдаться окрашивание.

Тетрагидрофуран, используемый в спектрофотометрии, должен выдерживать следующее дополнительное испытание.

Минимальное пропускание. 20% при длине волны 255 нм; 80% при длине волны 270 нм; 98% при длине волны 310 нм.

Определение проводят, используя в качестве раствора сравнения воду.

Тетрагидрофуран, очищенный от пероксидных соединений.

1,0 л тетрагидрофурана встряхивают в течение 10 мин со 100 г олова(II) хлорида, выдерживают в течение 1 сут, раствор декантируют с осадка и сушат в течение 1 сут калия гидроксидом. При необходимости сушку повторяют до тех пор, пока калия гидроксид не перестанет расплываться. При положительном результате проверки на отсутствие перекисей, высушенный тетрагидрофуран перегоняют, оставляя в колбе для перегонки не менее 150 мл исходного тетрагидрофурана. Используют фракцию с температурой перегонки 65,5–66,0 °С. Срок годности–1 мес в защищённом от света месте.

Тетрадекан. [629-59-4]. С14Н30. (М.м. 198,39).

Тетрадекан.

Содержит не менее 99,5% С14Н30.

Бесцветная жидкость.

Практически нерастворим в воде, легко растворим в этаноле и эфире.

. Около 0,76.

. Около 1,429.

Температура кипения. Около 252 °С.

Температура плавления. Около–5 °С.

Тетрадеканол. См. Миристиловый спирт.

Тетрадециламмония бромид. [14937-42-9]. С40Н84BrN. (М.м. 659,0).

N,N,N-Тридецилдекан-1-аминий бромид.

Кристаллический порошок или кристаллы белого цвета или слегка окрашены.

Температура плавления. От 88 до 89 °С.

Тетрадецилтриметиламмония бромид. [8044-71-1]. С17Н38BrN. (М.м. 336,39).

N,N,N-Триметилтетрадекан-1-аминий бромид.

Кристаллический порошок белого цвета.

Растворим воде, легко растворим в спирте 96%.

Температура плавления. Около 240 °С.

Тетразолиевый синий. [1871-22-3]. С40Н32Cl2N8O2. (М.м. 727,6).

3,3′-(3,3′-Диметокси[1,1'-бифенил]-4,4′-диил)бис(3,5-дифенил-3Н-1,2λ5,3,4-тетразол-2-ий) дихлорид.

Кристаллы жёлтого цвета.

Мало растворим в воде, легко растворим в спирте 96% и метаноле, практически нерастворим в ацетоне и эфире.

Температура плавления. Около 245 °С с разложением.

Тетразолиевого синего раствор 0,35%.

0,175 г тетразолиевого синего растворяют в 50 мл спирта 96%.

Тетразолиевого синего раствор 0,2%.

0,1 г тетразолиевого синего растворяют в 50 мл спирта 96%.

Тетразолия бромид. [298-93-1]. C18H16BrN5S. (М.м. 414,32).

3-(4,5-Диметил-1,3-тиазол-2-ил)-2,5-дифенил-2H-тетразол-3-ий бромид.

Умеренно растворим в спирте 96%, умеренно или мало растворим в воде.

Температура плавления. Около 195 °С (с разложением).

Тетразолия соль. [138169-43-4]. C20H17N5O6S2. (М.м. 487,51).

4-{3-(4,5-Диметил-1,3-тиазол-2-ил)-5-[3-(карбоксиметокси)фенил]-2H-тетразол-3-ий-2-ил}бензол-1-сульфонат.

Тетраметиламмония гидроксид. [10424-65-4]. С4Н13NO·5Н2О. (М.м. 181,23).

N,N,N-Триметилметанаминий гидроксид, пентагидрат.

Квалификация: для ВЭЖХ.

Тетраметиламмония гидроксида раствор 25%.

Содержит не менее 25,0% (м/м) С4Н13NO. (М.м. 91,15).

Прозрачная, бесцветная или слегка окрашенная жидкость.

Смешивается с водой и спиртом 96%.

Тетраметиламмония гидроксида раствор 10%.

Содержит не менее 10,0% (м/м) С4Н13NO. (М.м. 91,15).

Прозрачная, бесцветная или слегка окрашенная жидкость.

Смешивается с водой и спиртом 96%.

Тетраметиламмония гидроксида раствор 2%.

Содержит не менее 2,0% (м/м) С4Н13NO. (М.м. 91,15).

Прозрачная, бесцветная или слегка окрашенная жидкость.

Смешивается с водой и спиртом 96%.

Тетраметиламмония гидроксида раствор разведённый.

10 мл 10% раствора тетраметиламмония гидроксида доводят спиртом 96%, свободным от альдегидов, до объёма 100 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Тетраметиламмония гидросульфат. [80526-82-5]. С4Н13NO4S.(М.м. 171,22).

N,N,N-Триметилметанаминий гидросульфат.

Гигроскопичный порошок.

Температура плавления. Около 295 °С.

Тетраметиламмония хлорид. [75-57-0]. С4Н12СlN. (М.м. 109,60).

N,N,N-Триметилметанаминий хлорид.

Бесцветные кристаллы. Растворим в воде и спирте 96%.

Температура плавления. Около 300 °С с разложением.

Тетраметиламмония хлорида раствор.

10,96 г тетраметиламмония хлорида растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 1 л и доводят объём раствора водой до метки. Требуемое значение рН 7,0 устанавливают прибавлением к раствору по каплям 0,1 М раствора натрия гидроксида потенциометрически.

Тетраметилбензидин. [54827-17-7]. C16H20N2. (М.м. 240,34).

3,3',5,5'-Тетраметил[1,1'-бифенил]-4,4'-диамин.

Содержит не менее 98% C16H20N2.

Хорошо растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

Температура плавления. От 168 до 171 °С.

Тетраметилбензидина спиртовый раствор 0,1%.

0,1 г тетраметилбензидина растворяют в спирте 96% и доводят объём до 100,0 мл тем же растворителем.

1,1,3,3-Тетраметилбутиламин. [107-45-9]. C8H19N. (М.м. 129,24).

2-Амино-2,4,4-триметилпентан.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

. Около 0,805.

. Около 1,424.

Температура плавления. Около 140 °C.

Тетраметилдиаминодифенилметан. [101-61-1]. С17Н22N2. (М.м. 254,37).

4,4′-Метиленбис(N,N-диметиланилин).

Кристаллы от белого до голубовато-белого цвета или листочки.

Практически нерастворим в воде, мало растворим в спирте 96%, растворим в неорганических кислотах, легко растворим в эфире.

Температура плавления. Около 90 °С.

Тетраметилдиаминодифенилметана реактив.

Раствор А. 2,5 г тетраметилдиаминодифенилметана растворяют в 10 мл уксусной кислоты ледяной и прибавляют 50 мл воды.

Раствор Б. 5,0 г калия йодида растворяют в 100 мл воды.

Раствор В. 0,30 г нингидрина растворяют в 10 мл уксусной кислоты ледяной и прибавляют 90 мл воды.

Растворы А и Б смешивают, к полученному раствору прибавляют 1,5 мл раствора В.

Тетраметилсилан. [75-76-3]. С4Н12Si. (М.м. 88,22).

Тетраметилсилан.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Очень мало растворим в воде, растворим в ацетоне и спирте 96%.

. Около 0,64.

. Около 1,358.

Температура кипения. Около 26 °С.

Тетраметилсилан, используемый в спектроскопии ядерного магнитного резонанса (ЯМР), должен выдерживать следующее дополнительное испытание.

В спектре ЯМР 13С примерно 10% (о/о) раствора тетраметилсилана в дейтерированном хлороформе интенсивность любого постороннего сигнала, за исключением тех, которые соответствуют вращению боковых связей и хлороформу, не должна превышать интенсивности боковых линий 13С, расположенных на расстоянии 59,1 Гц по обе стороны основного сигнала тетраметилсилана.

Тетраметилэтилендиамин. [110-18-9]. С6Н16N2. (М.м. 116,20).

N,N,N',N'-Тетраметилэтан-1,2-диамин.

Бесцветная жидкость.

Смешивается с водой, спиртом 96% и эфиром.

. Около 0,78.

. Около 1,418.

Температура кипения. Около 121 °С.

Тетранатрия эдетат гидрат. [194491-31-1]. C10H12N2Na4O8·xH2O. (М.м. 380,14, безводный).

2,2',2'',2'''-(Этан-1,2-диилдинитрило)тетраацетат тетранатрия, гидрат.

Белый, кристаллический порошок.

Растворим в воде.

Тетрапропиламмония хлорид. [5810-42-4]. C12H28ClN. (М.м. 221,81).

N,N,N-Трипропилпропан-1-аминий хлорид.

Белый или почти белый кристаллический порошок, умеренно растворим в воде.

Температура плавления. От 240 до 242 °С.

Тетрахлорвинфос. [22248-79-9]. C10H9Cl4O4P. (М.м. 365,96).

(Диметил)[(Z)-1-(2,4,5-трихлорфенил)-2-хлорэтен-1-ил]фосфат.

Температура плавления. Около 95 °С.

Тетрахлорметан. См. Углерода тетрахлорид.

Тетрахлорэтан. [79-34-5]. С2Н2Сl4. (М.м. 167,85).

1,1,2,2-Тетрахлорэтан.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Мало растворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. Около 1,59.

. Около 1,495.

Температурные пределы перегонки. От 145 до 147 °С; должно перегоняться не менее 95%.

Тетраэтиламмония бромид. [71-91-0]. С8Н20BrN. (М.м. 210,16).

Тетраэтиламмония бромид.

Кристаллы.

Очень легко растворим в воде и метаноле, легко растворим в диметилсульфоксиде, растворим в ацетонитриле и диметилформамиде, мало растворим в ацетоне.

Температура плавления. Около 284 °С.

Тетраэтиламмония бромида раствор 10%.

10,0 г предварительно высушенного при 102,5±2,5 °С тетраэтиламмония бромида растворяют в 50 мл уксусной кислоты безводной, прибавляют 5,0 мл уксусного ангидрида и доводят объём раствора уксусной кислотой безводной до 100,0 мл.

Тетраэтиламмония гидроксида раствор 20%. [77-98-5]. С8Н21NO. (М.м. 147,26).

Раствор 200 г/л; бесцветная жидкость, является сильной щелочью.

. Около 1,01.

. Около 1,372.

Квалификация–для ВЭЖХ.

Тетраэтиламмония гидросульфат. [16873-13-5]. С8Н21NO4S. (М.м. 227,32).

N,N,N-Триэтилэтанаминий гидросульфат.

Гигроскопичный порошок.

Температура плавления. Около 245 °С.

Тетраэтиламмония йодид. [68-05-3]. (С8Н20IN. (М.м. 257,16).

N,N,N-Триэтилэтанаминий иодид.

Белые кристаллы.

Температура плавления. Около 320 °С с разложением.

Тетраэтиленпентамин. [112-57-2]. С8Н23N5. (М.м. 189,30).

3,6,9-Триазаундекан-1,11-диамин.

Бесцветная жидкость. Растворим в ацетоне.

. Около 1,506.

Хранят в сухом и прохладном месте.

Тиазоловый жёлтый. См. Титановый жёлтый.

Тиамазол. [60-56-0]. С4Н6N2S. (М.м. 114,17).

1-Метил-1,3-дигидро-2H-имидазол-2-тион.

Кристаллический порошок белого или почти белого цвета.

Легко растворим в воде, растворим в спирте 96% и метиленхлориде, умеренно растворим в эфире.

Температура плавления. Около 145 °С.

2-(2-Тиенил)уксусная кислота. [1918-77-0]. С6Н6О2S. (М.м. 142,18).

(Тиофен-2-ил)уксусная кислота.

Порошок коричневого цвета.

Температура плавления. Около 65 °С.

Тимидин. [50-89-5]. C10H14N2O5. (М.м. 242,23).

1-(β-D-2-Дезоксирибоферанозил)-5-метилпиримидин-2,4(1H,3H)-дион.

Содержит не менее 99% C10H14N2O5.

. От +18 до +20 (1% раствор в воде).

Температура плавления. От 186 до 188 °С.

Тимин. [65-71-4]. С5Н6N2О2. (М.м. 126,11).

5-Метилпиримидин-2,4(1Н,3Н)-дион.

Короткие игольчатые кристаллы или пластинки.

Мало растворим в холодной воде, растворим в горячей воде, растворим в разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов.

Тимол. [89-83-8]. С10Н14О. (М.м. 150,22).

5-Метил-2-(пропан-2-ил)фенол.

Бесцветные кристаллы или кристаллический порошок с характерным запахом.

Очень мало растворим в воде, очень легко растворим в спирте 96% и эфире, легко растворим в эфирных и жирных маслах, умеренно растворим в глицерине, растворим в разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов.

Хроматографическая чистота тимола, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 95,0%.

Тимола раствор спиртовой 20%

20 г тимола растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора этим же растворителем до 100 мл.

Тимола раствор 0,5%

0,5 г тимола растворяют в смеси 5 мл серной кислоты концентрированной и 95 мл спирта 96% и доводят объём раствора этим же растворителем до 100 мл.

Тимоловый синий. [76-61-9]. С27Н30О5S. (М.м. 466,6).

3,3-Бис[4-гидрокси-2-метил5-(пропан-2-ил)фенил]-3H-2,1λ6-бензоксатиол-1,1-дион.

Кристаллический порошок от коричневато-зеленого до зеленовато-синего цвета.

Мало растворим в воде, растворим в спирте 96% и разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов.

Тимолового синего раствор 0,1%.

0,1 г тимолового синего растворяют в смеси 2,15 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида и 20 мл спирта 96%, доводят объём раствора водой до 100 мл.

Испытание на чувствительность. К 100 мл воды, свободной от углерода диоксида, прибавляют 0,1 мл раствора тимолового синего и 0,2 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида; появляется синее окрашивание, которое переходит в жёлтое при прибавлении не более 0,1 мл 0,02 М раствора хлористоводородной кислоты.

Переход окраски от красной до жёлтой в интервале рН 1,2–2,8 и от оливково-зеленой до синей в интервале рН 8,0–9,6.

Тимолового синего раствор 0,04%.

0,1 г тимолового синего растворяют в 10,75 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой, свободной от углерода диоксида, до 250 мл.

Изменение окраски см. выше.

Тимолового синего метанольный раствор 0,3%.

0,03 г тимолового синего растворяют в 10 мл метанола.

Тимолового синего метанольный раствор 0,2%.

0,02 г тимолового синего растворяют в 10 мл метанола.

Тимолового синего раствор 1%.

1% раствор в диметилформамиде.

Тимолового синего спиртовой раствор 0,2%.

0,2 г тимолового синего растворяют в 50 мл спирта 96% при нагревании и после охлаждения доводят объём раствора водой до 100 мл. Изменение окраски см. выше.

Тимолового синего спиртовой раствор 0,1%.

0,1 г тимолового синего растворяют в 50 мл спирта 96% при нагревании и после охлаждения доводят объём раствора водой до 100 мл. Изменение окраски см. выше.

Тимоловый синий водорастворимый. [62625-21-2]. С27Н29NaO5S.

(М.м. 488,6).

2-{[4-Гидрокси-2-метил-5-(пропан-2-ил)фенил][2-метил-4-оксо-5-(пропан-2-ил)циклогекса-2,5-диен-1-илиден]метил}бензолсульфонат натрия.

Мелкокристаллический порошок коричневого цвета. Растворим в воде.

Переход окраски раствора от красной к жёлтой в интервале рН 1,2–2,8 и от жёлтой к синей в интервале рН 8,0–9,2.

Тимолового синего водорастворимого раствор.

Раствор 40 мг тимолового синего водорастворимого в 100 мл воды.

Переход окраски от красной к жёлтой в интервале рН 1,2–2,8 и от жёлтой к синей в интервале рН 8,0–9,6.

Тимолфталеин. [125-20-2]. С28Н30О4. (М.м. 430,5).

3,3-Бис[4-гидрокси-2-метил-5-(пропан-2-ил)фенил]-2-бензофуран-1(3H)-он.

Порошок от белого до жёлтовато-белого цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим в спирте 96% и разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов.

Тимолфталеина раствор 0,1%.

Раствор 0,1 г тимолфталеина в 100 мл спирта 96%.

Испытание на чувствительность. К 100 мл воды, свободной от углерода диоксида, прибавляют 0,2 мл раствора тимолфталеина, раствор бесцветный; при прибавлении не более 0,05 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида должно появиться синее окрашивание раствора.

Переход окраски от бесцветной до синей в интервале рН 9,3–10,5.

Тиоацетамид. [62-55-5]. С2Н5NS. (М.м. 75,13).

Этантиоамид.

Кристаллический порошок или бесцветные кристаллы. Ядовит.

Легко растворим в воде и спирте 96%.

Температура плавления. Около 113 °С.

Тиоацетамида раствор 4%.

4,0 г тиоацетамида растворяют в воде и доводят объём раствора до 100,0 мл.

Тиоацетамида реактив.

К 0,2 мл 4% раствора тиоацетамида прибавляют 1 мл смеси 5 мл воды, 15 мл натрия гидроксида раствора 1 М и 20 мл глицерина 85%, нагревают при температуре 100 °С в течение 20 с.

Готовят непосредственно перед использованием.

Тиобарбитуровая кислота. [504-17-6]. С4Н4N2О2S. (М.м. 144,15).

2-Сульфанилиден-1,3-диазинан-4,6-дион.

2-Тиоксодигидропиримидин-4,6(1H,5H)-дион.

Тиогликолевая кислота. [68-11-1]. С2Н4О2S. (М.м. 92,12).

Сульфанилуксусная кислота.

Бесцветная жидкость.

Смешивается с водой, растворима в спирте 96%.

Тиодиэтиленгликоль. [111-48-8]. C4H10O2S. (М.м. 122,19).

2,2'-Сульфандиилди(этан-1-ол).

Бесцветная или жёлтая вязкая жидкость.

Содержит не менее 99% C4H10O2S.

. Около 1,18.

Температура кипения. Около 165 °С (20 мм. рт. ст.).

Температура плавления. Около -16 °С.

Тиомерсал. [54-64-8]. С9Н9HgNaО2S. (М.м. 404,8).

2-[(Этилмеркурио)сульфанил]бензоат натрия.

Легкий кристаллический порошок жёлтовато-белого цвета.

Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96%, практически нерастворим в эфире.

Тиомерсала раствор 0,1%

0,1 г тиомерсала растворяют в натрия хлорида растворе 0,9% для инъекций и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл. Хранят не более 3 месяцев во флаконе из тёмного стекла при температуре 2–8 °С.

Тиомерсала раствор 0,01%

10,0 мл тиомерсала раствора 0,1% доводят натрия хлорида раствором 0,9% для инъекций до 100,0 мл. Используют свежеприготовленным.

Тиомочевина. [62-56-6]. CН4N2S. (М.м. 76,12).

Тиомочевина.

Кристаллический порошок или кристаллы белого цвета.

Растворима в воде и спирте 96%.

Температура плавления. Около 178 °С.

Тиосемикарбазид. [79-19-6]. CH5N3S. (М.м. 91,14).

Гидразин-1-карботиоамид.

Содержит не менее 99% CH5N3S.

Температура плавления. От 180 до 183 °С.

Тирамин. [51-67-2]. С8Н11NО. (М.м. 137,18).

4-(2-Аминоэтил)фенол.

Кристаллы.

Мало растворим в воде, растворим в горячем этаноле.

Температура плавления. От 164 до 165 °С.

Тирозин. [60-18-4]. С9Н11NО3. (М.м. 181,19).

(2S)-2-Амино-3-(4-гидроксифенил)пропановая кислота.

Кристаллический порошок или кристаллы белого цвета, или бесцветные кристаллы.

Мало растворим в воде, практически нерастворим в ацетоне, этаноле и эфире, растворим в кислоте хлористоводородной разведённой и разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов.

Тирон. [149-45-1]. C6H4Na2O8S2·H2O. (М.м. 332,22).

4,5-Дигидроксибензол-1,3-дисульфонат динатрия.

Очень легко растворим в воде.

Температура плавления. Около 300 °С.

Тирона раствор 2%.

1,0 г тирона растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 50 мл.

Титан. [7440-32-6]. Тi. (А.м. 47,87). Титан.

Содержит не менее 99% Тi.

Металлический порошок или тонкая проволока, диаметром не более 0,5 мм, или губка.

Температура плавления. Около 1668 °С.

. Около 4,507.

Титана диоксид. [13463-67-7]. TiO2. (М.м. 79,87).

Оксид титана(IV).

Белый или почти белый порошок.

Практически нерастворим в воде, нерастворим в разведённых минеральных кислотах, но медленно растворяется в горячей серной кислоте концентрированной.

Титана диоксида раствор.

0,1 г титана диоксида нагревают с 100 мл серной кислоты концентрированной на сетке при периодическом перемешивании до полного растворения. Хранят в стеклянном сосуде с притертой пробкой.

Титана(III) хлорид. [7705-07-9]. ТiCl3. (М.м. 154,23).

Хлорид титана(III).

Кристаллы красновато-фиолетового цвета, расплывающиеся на воздухе.

Растворим в воде и спирте 96%, практически нерастворим в эфире.

Температура плавления. Около 440 °С.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Титана(III) хлорида раствор 15%.

Раствор 150 г/л титана(III) хлорида в растворе 100 г/л хлористоводородной кислоты.

. Около 1,19.

Титана(III) хлорид—серной кислоты реактив.

20 мл 15% раствора титана(III) хлорида осторожно смешивают с 13 мл серной кислоты концентрированной, прибавляют достаточное количество раствора водорода пероксида концентрированного до получения жёлтого окрашивания, нагревают до начала выделения белых паров и охлаждают. Разводят водой, повторяют выпаривание и прибавление воды до получения бесцветного раствора, доводят объём раствора водой до 100 мл.

Титана(IV) хлорид. [7550-45-0]. TiCl4. (М.м. 189,68).

Титана(IV) хлорид.

Содержит не менее 99% TiCl4.

Бесцветная подвижная прозрачная жидкость, дымящая на воздухе. Гигроскопичен, реагирует с водой.

Температура плавления. Около –25 °С.

Температура кипения. Около 135 °С.

. Около 1,726.

. Около 1,61.

Титановый жёлтый. [1829-00-1]. С28Н19N5Nа2О6S4. (М.м. 695,7).

2,2′-[(Триаз-1-ен-1,3-диил)бис-4,1-фенилен]бис(6-метил-1,3-бензотиазол-7-сульфонат)] динатрия.

Порошок жёлтовато-коричневого цвета.

Легко растворим в воде и спирте 96%.

Титанового жёлтого бумага.

Полоски фильтровальной бумаги погружают в раствор титанового жёлтого, выдерживают несколько минут и сушат при комнатной температуре.

Титанового жёлтого раствор 0,05%.

Раствор 0,5 г титанового жёлтого в 100,0 мл воды.

Испытание на чувствительность. К 10 мл воды прибавляют 0,1 мл раствора титанового жёлтого, 0,2 мл эталонного раствора магния (10 ррm Mg) и 1,0 мл 1 М раствора натрия гидроксида. Полученный раствор сравнивают с эталонным раствором, приготовленным таким же образом, за исключением магния; должно наблюдаться отчетливое розовое окрашивание.

Тозиларгинина метилового эфира гидрохлорид. [1784-03-8]. С14Н22N4О4S·HСl. (М.м. 378,87).

Метил[(2S)-5-Карбамимидамидо-2-(4-метилбензолсульфонамидо)пентаноата] гидрохлорид.

. От–12° до–16° (4% раствор).

Температура плавления. Около 145 °С.

Тозиларгинина метилового эфира гидрохлорида раствор.

К 98,5 мг тозиларгинина метилового эфира гидрохлорида прибавляют 5 мл буферного раствора трис(гидроксиметил)аминометана с рН 8,1, встряхивают до растворения, прибавляют 2,5 мл смешанного раствора метилового красного и доводят объём раствора водой до 25 мл.

Тозил-лизил-хлорметана гидрохлорид. [4238-41-9]. С14Н21СlN2О3S·HСl. (М.м. 369,31).

N-[(3S)-7-Амино-2-оксо-1-хлоргептан-3-ил]-4-метилбензолсульфонамида гидрохлорид.

. От –7 до –9° (2% раствор).

Температура плавления. Около 155 °С с разложением.

. От 310 до 340. Определение проводят при длине волны 230 нм, используя в качестве раствора сравнения воду.

Тозил-лизил-хлорметана гидрохлорида раствор 0,2%.

20 мг тозил-лизил-хлорметана гидрохлорида растворяют в 1 мл воды.

Тозил-фенилаланил-хлорметан. [402-71-1]. С17Н18СlNО3S. (М.м. 351,85).

4-Метил-N-[(2S)-3-оксо-4-хлор-1-фенилбутан-2-ил]бензолсульфонамид.

. От–85° до–89° (1% раствор в спирте 96%).

Температура плавления. Около 105 °С.

. От 290 до 320. Определение проводят при длине волны 228,5 нм в спирте 96%.

о-Толидин. [119-93-7]. С14Н16N2. (М.м. 212,29).

3,3'-Диметил[1,1'-бифенил]-4,4'-диамин.

Содержит не менее 97,0% С14Н16N2 .

Кристаллический порошок светло-коричневого цвета.

Температура плавления. Около 130 °С.

Ядовит.

о-Толидина раствор.

0,16 г о-толидина растворяют в 30,0 мл уксусной кислоты ледяной, прибавляют 1,0 г калия йодида и доводят объём раствора водой до 500,0 мл.

о-Толуидин. [95-53-4]. С7Н9N. (М.м. 107,15).

2-Метиланилин.

Жидкость светло-жёлтого цвета, под действием воздуха и света становится красновато-коричневой.

Мало растворим в воде, растворим в спирте 96% и в растворах неорганических кислот.

. Около 1,01.

. Около 1,569.

Температура кипения. Около 200 °С.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке, в защищённом от света месте.

n-Толуидин. [106-49-0]. С7Н9N. (М.м. 107,15).

4-Метиланилин.

Блестящие пластинки или хлопья.

Мало растворим в воде, легко растворим в ацетоне и спирте 96%, растворим в эфире.

Температура плавления. Около 44 °С.

о-Толуидина гидрохлорид. [636-21-5]. С7Н9N·HCl. (М.м. 143,61).

2-Метиланилина гидрохлорид.

Содержит не менее 98,0% С7Н10СlN.

Кристаллический порошок.

Температура плавления. От 215 до 217 °С.

Толуидиновый синий. [92-31-9]. С15Н16СlN3S. (М.м. 305,83).

3-Амино-7-(диметиламино)-2-метил-5λ4-фенотиазин-5-ий хлорид.

Порошок тёмно-зеленого цвета.

Растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Толуиленовый красный. См. Нейтральный красный.

Толуол. [108-88-3]. С7Н8. (М.м. 92,14). Толуол.

Прозрачная, бесцветная, воспламеняющаяся жидкость.

Очень мало растворим в воде, смешивается со спиртом 96%.

. От 0,865 до 0,870.

Температура кипения. Около 110 °С.

Толуол, свободный от серы.

Должен выдерживать требования для толуола и следующее дополнительное испытание.

Серосодержащие соединения. К 10 мл толуола прибавляют 1 мл этанола, 3 мл раствора калия плюмбита и кипятят с обратным холодильником в течение 15 мин. Через 5 мин водный слой не должен потемнеть.

Вещества, родственные тиофену. 2 мл толуола встряхивают с 5 мл реактива изатина в течение 5 мин и оставляют на 15 мин; в нижнем слое не должно наблюдаться синее окрашивание.

Толуолсульфонамид. [70-55-3]. С7Н9NО2S. (М.м. 171,22).

4-Метилбензол-1-сульфонамид. 4-Метилбензолсульфонамид.

Кристаллический порошок белого цвета.

Мало растворим в воде и эфире, растворим в спирте 96% и растворах гидроксидов щелочных металлов.

Температура плавления. Около 136 °С.

о-Толуолсульфонамид. [88-19-7]. С7Н9NО2S. (М.м. 171,22).

2-Метилбензол-1-сульфонамид. 2-Метилбензолсульфонамид.

Кристаллический порошок белого цвета.

Мало растворим в воде и эфире, растворим в спирте 96% и растворах гидроксидов щелочных металлов.

Температура плавления. Около 156 °С.

п-Толуолсульфонамид. См. Толуолсульфонамид.

Толуолсульфоновая кислота. [6192-52-5]. С7Н8О3S·Н2О. (М.м. 190,22).

4-Метилбензолсульфоновая кислота, моногидрат.

Содержит не менее 87,0% С7Н8О3S.

Кристаллический порошок или кристаллы белого цвета.

Легко растворима в воде, растворима в спирте 96% и эфире.

п-Толуолсульфохлорид. [98-59-9]. C7H7ClO2S. (М.м. 190,65).

4-Метилбензолсульфонилхлорид.

Белый или серый порошок.

Нерастворим в воде.

Температура плавления. От 65 до 69 °С.

Торин. См. Нафтарзон.

Тория(IV) нитрат. [13823-29-5]. Th(NO3)4∙xH2O. (М.м. 480,1 для безводного).

Нитрат тория(IV), гидрат.

Белые кристаллы, слегка расплывающиеся на воздухе.

Легко растворим в воде и спирте 96%.

Тория(IV) нитрат тетрагидрат. [13470-07-0]. Th(NO3)4∙4H2O. (М.м. 552,12).

Нитрат тория(IV), тетрагидрат.

Белые кристаллы, слегка расплывающиеся на воздухе.

Легко растворим в воде и спирте 96%.

Трагакант. [9000-65-1].

Затвердевшая на воздухе смола Astragalus gummifer Labill. и некоторых других видов Astragalus из западной Азии.

Триамцинолон. [124-94-7]. С21Н27FО6. (М.м. 394,43).

11β,16α,17α,21-Тетрагидрокси-9α-фторпрегна-1,4-диен-3,20-дион.

Белый или почти белый кристаллический порошок.

Практически нерастворим в воде и метиленхлориде, мало растворим в метаноле.

Температура плавления. От 262 до 263 °С.

Триацетин. [102-76-1]. С9Н14О6. (М.м. 218,20).

(Пропан-1,2,3-триил)триацетат.

Почти прозрачная, бесцветная или жёлтоватого цвета жидкость.

Растворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. Около 1,16.

. Около 1,43.

Температура кипения. Около 260 °С.

Триглицин. [556-33-2]. C6H11N3O4. (М.м. 189,17).

Глицилглицилглицин.

Трикалия фосфат тригидрат. [22763-03-7]. K3PO4·3H2O. (М.м. 266,31).

Трикалия фосфат тригидрат.

Белый или почти белый кристаллический порошок, легко растворим в воде.

Трикозан. [638-67-5]. С23Н48. (М.м. 324,63).

Трикозан.

Кристаллы белого цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим в эфире и гексане.

. Около 1,447.

Температура плавления. Около 48 °С.

Трилон Б. См. Натрия эдетат.

Триметилпентан. [540-84-1]. С8Н18. (М.м. 114,23).

2,2,4-Триметилпентан.

Бесцветная, воспламеняющаяся жидкость.

Практически нерастворим в воде, растворим в этаноле.

. От 0,691 до 0,696.

. От 1,391 до 1,393.

Температурные пределы перегонки. От 98 до 100 °С; должно перегоняться не менее 95%.

Триметилпентан, используемый в спектрофотометрии, должен выдерживать следующие дополнительные испытания.

Минимальное пропускание. 98% в области длин волн от 250 до 420 нм; в качестве раствора сравнения используют воду.

Оптическая плотность. Не более 0,07 в области длин волн от 220 до 360 нм; в качестве раствора сравнения используют воду.

N-Триметилсилилимидазол. [18156-74-6]. С6Н12N2Si. (М.м. 140,26).

1-(Триметилсилил)-1H-имидазол.

Бесцветная, гигроскопичная жидкость.

. Около 0,96.

. Около 1,48.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Триметилсульфония гидроксид. [17287-03-5]. C3H10OS. (М.м. 94,18).

Триметилсульфония гидроксид.

Триметилсульфония гидроксида раствор 0,2 М.

1,88 г триметилсульфония гидроксида растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до 100,0 мл.

Трипановый синий. [72-57-1]. C34H24N6Na4O14S4. (М.м. 960,81).

3,3′-[(3,3′-Диметил[1,1′-бифенил]-4,4′-диил)бис(диазен-2,1-диил)]бис(5-амино-4-гидроксинафталин-2,7-дисульфонат) тетранатрия.

От голубовато-серого до тёмно-синего цвета кристаллы, отчасти с бронзовым отблеском. Водные растворы тёмно-синего цвета с фиолетовым оттенком.

Температура плавления. Около 300 °С.

Умеренно или мало растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96%, практически нерастворим в хлороформе и эфире.

Трипанового синего раствор 0,5%

0,5 г трипанового синего растворяют в предварительно стерилизованном фосфатном забуференном физиологическом растворе pH 7,4 и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Хранить в защищённом от света месте.

Трипанового синего раствор 0,4%

0,4 г трипанового синего растворяют в предварительно стерилизованном фосфатном забуференном физиологическом растворе pH 7,4 и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Хранить в защищённом от света месте.

Триптофан. [73-22-3]. С11Н12N2О2. (М.м. 204,23).

L-Триптофан

(2S)-2-Амино-3-(1H-индол-3-ил)пропановая кислота.

Кристаллический порошок от белого до жёлтовато-белого цвета или бесцветные кристаллы.

Мало растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96%, практически нерастворим в эфире.

. Около –30° (1% раствор в воде).

1,3,5-Трис[3,5-ди(1,1-диметилэтил)-4-гидроксибензил]-1,3.5-триазин-2,4,6(1Н,3Н,5Н)-трион. [27676-62-6]. С48Н69N3О6. (М.м. 784,1).

1,3,5-Трис{[3,5-ди(трет-бутил)-4-гидроксифенил]метил}-1,3,5-триазаин-2,4,6(1Н,3Н,5Н)-трион.

Кристаллический порошок белого цвета.

Температура плавления. От 218 до 222 °С.

Трис[2,4-ди(1,1-диметилэтил)фенил]фосфит. [31570-04-4]. С42Н63О3Р.

(М.м. 646,9).

Трис[3,5-ди(трет-бутил)фенил]фосфит.

Порошок белого цвета.

Температура плавления. От 182 до 186 °С.

Трис(гидроксиметил)аминометан. [77-86-1]. C4H11NO3. (М.м. 121,14).

2-Амино-2-(гидроксиметил)пропан-1,3-диол.

Белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Очень легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96%.

Температура плавления. От 168 до 174 °С.

Трис(гидроксиметил)аминометана раствор.

Раствор трис(гидроксиметил)аминометана содержит эквивалент 24,22 г С4Н11NО3 в 1000,0 мл.

Трис(гидроксиметил)аминометан гидрохлорид. [1185-53-1]. C4H12ClNO3. (М.м. 157,60).

2-Амино-2-(гидроксиметил)пропан-1,3-диол гидрохлорид.

Белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Очень легко растворим в воде.

Температура плавления. От 150 до 152 °С.

Трисцианоэтоксипропан. [2465-93-2]. С12Н17N3О3. (М.м. 251,28).

3,3',3''-[Пропан-1,2,3-триилтрис(окси)]трипропаннитрил.

Вязкая жидкость коричнево-жёлтого цвета.

Растворим в метаноле.

Используют в качестве неподвижной фазы в газовой хроматографии.

. Около 1,11.

Вязкость. Около 172 мПа·с.

Тритон X-100. См. Октоксинол.

Трифенилен. [217-59-4]. C18H12. (М.м. 228,29).

Трифенилен.

Содержит не менее 98,0% С18Н12.

Растворим в этаноле, бензоле, ацетоне, уксусной кислоте и хлороформе.

Температура плавления. От 194 до 199 °С.

Трифенилметанол. [76-84-6]. C19H16O. (М.м. 260,33).

Трифенилметанол.

Бесцветные кристаллы.

Практически нерастворим в воде, легко растворим в спирте 96%.

Трифенилсурьма. [603-36-1]. C18H15Sb. (М.м. 353,07).

Трифенилсурьма.

Бесцветные кристаллы.

Практически нерастворима в воде.

Температура плавления. От 48 до 50 °С.

Трифенилтетразолия хлорид. [298-96-4]. С19Н15ClN4. (М.м. 334,80).

2,3,5-Трифенил-3Н-1,2λ5,3,4-тетразол-2-ий хлорид.

Содержит не менее 98,0% С19Н15ClN4.

Порошок светло-жёлтого или серовато-жёлтого цвета.

Растворим в воде, ацетоне и спирте 96%, практически нерастворим в эфире.

Температура плавления. Около 240 °С с разложением.

Хранят в защищённом от света месте.

Трифенилтетразолия хлорида раствор 0,5%.

Раствор 0,5 г трифенилтетразолия хлорида в 100,0 мл спирта 96%, свободного от альдегидов.

Хранят в защищённом от света месте.

Трифенилфосфат. [115-86-6]. C18H15PO4. (М.м. 326,28).

Трифенилфосфат.

Бесцветные кристаллы или белый кристаллический порошок без запаха.

Растворим в органических растворителях, практически нерастворим в воде.

Температура плавления. 49–51 °С.

4-(Трифторметил)фенол. [402-45-9]. C7H5F3O. (М.м. 162,11).

4-(Трифторметил)фенол.

Содержит не менее 97% C7H5F3O.

Температура плавления. Около 46 °С.

Хранить при температуре 2–8 °С.

3-(Трифторметил)-4-хлоранилин. [320-51-4]. C7H5ClF3N. (М.м. 195.57).

3-(Трифторметил)-4-хлоранилин.

Содержит не менее 99% C7H5ClF3N.

Температура плавления. От 35 до 37 °С.

Трифторуксусная кислота. [76-05-1]. C2HF3O2. (М.м. 114,02).

Трифторуксусная кислота.

Содержит не менее 99% С2НF3O2.

Жидкость.

Смешивается с водой, ацетоном, спиртом 96% и эфиром.

. Около 1,53.

Температура кипения. Около 72 °С.

Используют квалификацию, пригодную для секвенирования протеинов.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Трифторуксусной кислоты раствор 50% (о/о)

5 мл трифторуксусной кислоты смешивают с 5 мл воды.

Трифторуксусной кислоты раствор 10%

10 г трифторуксусной кислоты растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Трифторуксусной кислоты раствор 1%

1,0 г трифторуксусной кислоты растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Трифторуксусной кислоты раствор 0,1%

1,0 г трифторуксусной кислоты растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Трифторуксусной кислоты раствор 0,05%

0,5 г трифторуксусной кислоты растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Трифторуксусной кислоты раствор 0,02%

2,0 мл трифторуксусной кислоты раствора 1% разбавляют водой до 100,0 мл.

Трифторуксусной кислоты раствор 0,01%

1,0 мл трифторуксусной кислоты раствора 1% разбавляют водой до 100,0 мл.

Трифторуксусной кислоты раствор 2 М

5,7 г трифторуксусной кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Трифторуксусный ангидрид. [407-25-0]. С4F6O3. (М.м. 210,03).

Трифторуксусный ангидрид.

Бесцветная жидкость.

. Около 1,51.

Температура кипения. 39,1 °С.

Трихлортрифторэтан. [76-13-1]. С2Сl3F3. (М.м. 187,38).

1,1,2-Трифтор-1,2,2-трихлорэтан.

Бесцветная, летучая жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается с ацетоном и эфиром.

. Около 1,58.

Температурные пределы перегонки. От 47 до 48 °С; должно перегоняться не менее 98%.

Трихлоруксусная кислота. [76-03-9]. C2HCl3O2. (М.м. 163,39).

Трихлоруксусная кислота.

Бесцветные кристаллы или кристаллическая масса.

Очень легко расплывается на воздухе, очень легко растворима в воде и спирте 96%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Трихлоруксусной кислоты раствор 80%.

В 100 мл воды растворяют 150 г трихлоруксусной кислоты.

Определение концентрации раствора. 2,0 мл полученного раствора разводят водой до 25 мл и титруют натрия гидроксида раствором 1 М (индикатор – фенолфталеина раствор 0,1%) до слабо-розового окрашивания. Концентрацию трихлоруксусной кислоты (Х) в процентах вычисляют по формуле:

[latexmath]

\[Х = \frac{V_{1} \bullet 0,1634}{2} \bullet 100\ ,\]

где: V1 – количество натрия гидроксида раствора 1 М, пошедшее на титрование, мл; 0,1634 – количество трихлоруксусной кислоты, соответствующее 1 мл натрия гидроксида раствора 1 М, г.

Трихлоруксусной кислоты раствор 20%.

20,0 г трихлоруксусной кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Трихлоруксусной кислоты раствор 15%.

15,0 г трихлоруксусной кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Трихлоруксусной кислоты раствор 10%.

10,0 г трихлоруксусной кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Трихлоруксусной кислоты раствор 5%.

50,0 г трихлоруксусной кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Трихлоруксусной кислоты раствор 4%.

40,0 г трихлоруксусной кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Трихлоруксусной кислоты спиртовый раствор 25%.

Растворяют 25 г трихлоруксусной кислоты в 100 мл спирта 96%.

Раствор готовят перед использованием.

Трихлоруксусной кислоты раствор в ацетоне 3%.

3,0 г трихлоруксусной кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в ацетоне и доводят объём раствора до метки тем же растворителем.

1,1,1-Трихлорэтан. [71-55-6]. С2Н3Сl3. (М.м. 133,40).

1,1,1-Трихлорэтан.

Не воспламеняющаяся жидкость.

Практически нерастворим в воде, растворим в ацетоне, эфире и метаноле.

. Около 1,34.

. Около 1,438.

Температура кипения. Около 74 °С.

2,2,2-Трихлорэтанол. [115-20-8]. С2Н3Сl3O. (М.м. 149,40).

2,2,2-Трихлорэтан-1-ол.

. Около 1,56.

. Около 1,49.

Температура кипения. Около 152 °С.

Температура плавления. Около 17 °С.

Трихлорэтилен. [79-01-6]. С2НСl3. (М.м. 131,39).

1,1,2-Трихлорэтен.

Бесцветная жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается о спиртом 96% и эфиром.

. Около 1,46.

. Около 1,477.

Триэтаноламин. [102-71-6]. С6Н15NO3. (М.м. 149,19).

2,2ʹ,2ʹʹ-Нитрилотри(этан-1-ол).

Бесцветная, вязкая, очень гигроскопичная жидкость, под действием воздуха и света приобретает коричневую окраску.

Смешивается с водой, ацетоном, спиртом 96%, глицерином 85% и метанолом.

. Около 1,13.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке, в защищённом от света месте.

Триэтаноламина раствор 26%

26,0 г триэтаноламина помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объём раствора до метки тем же растворителем.

Триэтиламин. [121-44-8]. С6Н15N. (М.м. 101,19).

N,N-Диэтилэтанамин.

Бесцветная жидкость.

Мало растворим в воде при температуре ниже 18,7 °С, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. Около 0,727.

. Около 1,401.

Температура кипения. Около 90 °С.

Триэтиламина раствор 10% в метаноле.

13,8 мл триэтиламина растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до 100,0 мл.

Триэтиламина гидрохлорид. [554-68-7]. С6Н15N·HCl. (М.м. 137,65).

N,N-Диэтилэтанамина гидрохлорид.

Белый или почти белый порошок.

Температура плавления. От 256 до 259 °С (с разложением).

Триэтилендиамин. [280-57-9]. С6Н12N2. (М.м. 112,17).

1,4-Диазабицикло[2.2.2]октан.

Кристаллы, очень гигроскопичны. Легко сублимируется при комнатной температуре.

Легко растворяется в воде, ацетоне и этаноле.

Температура кипения. Около 174 °С.

Температура плавления. Около 158 °С.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Тромбин бычий. [9002-04-4].

Фермент, который преобразует фибриноген в фибрин. Получают из плазмы крупного рогатого скота путём осаждения с соответствующими солями и органическими растворителями в контролируемых условиях (рН, ионная сила и температура).

Желтовато-белый порошок. Хранят при температуре ниже 0 °С.

Активность – не менее 40 единиц NIH на мг. Одна единица NIH соответствует количеству тромбина, вызывающего при растворении в 0,1 мл в течение 20±5 с коагуляцию 0,2 мл разведённой 1:1 плазмы. 1 NIH тромбина соответствует 1,2±0,1 МЕ тромбина.

Тромбин человеческий. [9002-04-4].

Фермент, который преобразует фибриноген человека в фибрин. Получают из плазмы человека путем осаждения с соответствующими солями и органическими растворителями в контролируемых условиях (рН, ионная сила и температура).

Желтовато-белый порошок, легко растворимый в 0,9% растворе натрия хлорида, образуя опалесцирующий, бледно-жёлтый раствор. Хранят в герметичной стерильной упаковке под азотом, в защищённом от света месте, при температуре не более 25 °С.

Тромбина человеческого раствор (1).

Восстанавливают человеческий тромбин, как указано производителем реактива, и разводят трис – EDTA – BSA буферным раствором рН 8,4 (2) до получения раствора с концентрацией 5 МЕ/мл.

Тромбина человеческого раствор (2).

Восстанавливают человеческий тромбин, как указано производителем реактива, и доводят трис(гидроксиметил)аминометана—натрия хлорида—BSA буферным раствором рН 7,4 (1) до получения раствора с концентрацией 5 МЕ/мл.

Трометамол. См. Трис(гидроксиметил)аминометан.

Тропеолин 00. [554-73-4]. С18Н14N3NaO3S. (М.м. 375,38).

4-[(4-Анилинофенил)диазенил]бензолсульфонат натрия.

Оранжево-жёлтый порошок или золотисто-жёлтые игольчатые кристаллы. Растворим в горячей воде и спирте 96%.

Переход окраски раствора от красной к жёлтой в интервале рН 1,4–3,2.

Тропеолин 00 раствор 0,1%.

0,1 г тропеолина 00 смешивают с 100 мл воды. Растворение проводят при нагревании до температуры 100 °С.

Тропеолин 00 раствор 0,2%.

0,2 г тропеолина 00 смешивают с 100 мл метанола, периодически встряхивают в течение 1 ч и фильтруют.

Тропеолин 000-1. [523-44-4]. C16H11N2NaO4S. (М.м. 350,32).

4-[(4-Гидроксинафталин-1-ил)диазенил]бензолсульфонат натрия.

Порошок тёмно-красного или красновато-коричневого цвета.

Тропеолин 000-2. [633-96-5]. C16H11N2NaO4S. (М.м. 350,32).

4-[(2-Гидроксинафталин-1-ил)диазенил]бензолсульфонат натрия.

Тропеолин 000-2 раствор 0,1%.

0,1 г тропеолина 000-2 растворяют в 80 мл воды и доводят объём раствора до 100 мл спиртом 96%.

Раствор пригоден для использования в течение 3 месяцев.

Троповая кислота. [552-63-6]. C9H10O3. (М.м. 166,17).

(2RS)-3-Гидрокси-2-фенилпропановая кислота.

ТСХ пластинка со слоем алюминия оксида.

Подложка из стекла, металла или пластика, покрытая слоем алюминия оксида с размером частиц от 5 до 40 мкм, содержащим около 10% кальция сульфата гемигидрата в качестве связующего вещества. Если необходимо, размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подложка из стекла, металла или пластика, покрытая слоем силикагеля с подходящей толщиной и размером частиц (обычно от 2 до 10 мкм для пластин с мелким размером частиц для ВЭТСХ и от 5 до 40 мкм для обычных ТСХ пластин). Если необходимо, размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Сорбент может содержать связующее органическое вещество.

Хроматографическая разделяющая способность. На пластинку наносят необходимый объём раствора для определения пригодности ТСХ пластинок (10 мкл для обычной пластинки и от 1 до 2 мкл для пластинки с мелким размером частиц). Хроматографируют в системе растворителей метанол–толуол 20:80. Когда фронт растворителей пройдет две трети длины пластинки, она считается пригодной, если на ней видны 4 четко разделенных пятна:

– пятно бромкрезолового зеленого с Rf не более 0,15;

– пятно метилового оранжевого с Rf в пределах от 0,1 до 0,25;

– пятно метилового красного с Rf в пределах от 0,35 до 0,55;

– пятно судана красного G с Rf в пределах от 0,75 до 0,98.

ТСХ пластинка со слоем силикагеля 60.

Подложка из стекла, металла или пластика, покрытая слоем силикагеля с подходящей толщиной и размером частиц (обычно от 5 до 17 мкм), размером пор 60 Å для ВЭТСХ.

ТСХ пластинка со слоем силикагеля, импрегнированная 10% раствором натрия хлорида.

ТСХ пластинку со слоем силикагеля помещают в камеру с 10% раствором натрия хлорида и хроматографируют восходящим методом. Когда фронт подвижной фазы дойдёт до конца пластинки, её вынимают из камеры и подсушивают на воздухе в течение 1 ч, сушат в сушильном шкафу при температуре 120 °С в течение 10 мин и охлаждают на воздухе.

ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Должна выдерживать требования для ТСХ пластинки со слоем силикагеля со следующими изменениями.

Содержит флуоресцентный индикатор с максимумом поглощения при длине волны 254 нм.

Гашение флуоресценции. На пластинку наносят в 5 точек последовательно возрастающие объёмы от 1 до 10 мкл для обычной ТСХ пластинки и от 0,2 до 2 мкл для ВЭТСХ пластинки 0,1% раствора бензойной кислоты в смеси растворителей этанол–циклогексан 15:85. Хроматографируют в той же смеси растворителей. Когда фронт растворителя пройдет половину длины пластинки, ее вынимают из камеры и сушат до испарения растворителей. Пластинку просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм. На обычных ТСХ пластинках бензойная кислота должна обнаруживаться в виде темных пятен на флуоресцирующем фоне примерно на середине хроматограммы для нанесенных количеств 2 мкг и более. На ВЭТСХ пластинках бензойная кислота должна обнаруживаться в виде темных пятен на флуоресцирующем фоне примерно на середине хроматограммы для нанесенных количеств 0,2 мкг и более.

ТСХ пластинка со слоем силикагеля G.

Должна выдерживать требования для ТСХ пластинки со слоем силикагеля со следующим изменением.

Содержит кальция сульфат полугидрат (гипс) в качестве связующего вещества.

ТСХ пластинка со слоем силикагеля GF254.

Должна выдерживать требования для ТСХ пластинки со слоем силикагеля со следующим изменением.

Содержит кальция сульфат полугидрат (гипс) в качестве связующего вещества и флуоресцентный индикатор с максимумом поглощения при длине волны 254 нм.

Гашение флуоресценции. Должна выдерживать требования для ТСХ пластинки со слоем силикагеля F254.

ТСХ пластинка со слоем силикагеля октадецилсилильного F254.

Подложка из стекла, металла или пластика, покрытая слоем силикагеля химически модифицированного октадецилсилильными группами с подходящей толщиной и размером частиц (обычно от 2 до 10 мкм для пластин ВЭТСХ и от 5 до 40 мкм для обычных ТСХ пластин). Если необходимо, размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Сорбент может содержать связующее органическое вещество.

Содержит флуоресцентный индикатор с максимумом поглощения при длине волны 254 нм.

Гашение флуоресценции. Должна выдерживать требования для ТСХ пластинки со слоем силикагеля F254.

ТСХ пластинка со слоем силикагеля H.

Подложка из стекла, металла или пластика, покрытая слоем силикагеля H с подходящей толщиной и размером частиц 15 мкм.

ТСХ пластинка со слоем силикагеля октилсилильного.

Подложка из стекла, металла или пластика, покрытая слоем силикагеля химически модифицированного октилсилильными группами с подходящей толщиной и размером частиц (обычно от 2 до 10 мкм для пластин ВЭТСХ и от 5 до 40 мкм для обычных ТСХ пластин). Если необходимо, размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Сорбент может содержать связующее органическое вещество.

ТСХ пластинка со слоем силикагеля силанизированного.

Подложка из стекла, металла или пластика, покрытая слоем силикагеля силанизированного с подходящей толщиной и размером частиц (обычно от 2 до 10 мкм для пластин ВЭТСХ и от 5 до 40 мкм для обычных ТСХ пластин). Если необходимо, размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, где он используется.

Сорбент может содержать связующее органическое вещество.

Хроматографическая разделяющая способность. По 0,1 г метиллаурата, метилмеристата, метилпальмитата и метилстеарата помещают в коническую колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 40 мл 3% спиртового раствора калия гидроксида и нагревают с обратным холодильником при температуре 100 °С в течение 1 ч. Охлаждают, раствор помещают в делительную воронку с помощью 100 мл воды, подкисляют хлористоводородной кислотой разведённой 7,3% до рН 2–3 и встряхивают с 3 порциями, по 10 мл каждая, метиленхлорида. Объединенные метиленхлоридные извлечения сушат над натрия сульфатом безводным, фильтруют и выпаривают на водяной бане досуха. Сухой остаток растворяют в 50 мл метиленхлорида (испытуемый раствор). Определение проводят методом ТСХ, используя ТСХ пластинку со слоем силикагеля силанизированного. На пластинку наносят в 3 точки необходимый объём испытуемого раствора (около 10 мкл для обычной ТСХ пластинки и от 1 до 2 мкл для ВЭТСХ пластинки с мелким размером частиц). Хроматографируют в системе растворителей уксусная кислота ледяная–вода–диоксан 10:25:65. Когда фронт растворителей пройдет две трети длины пластинки, ее вынимают из камеры и сушат при температуре 120 °С в течение 30 мин. Пластинку охлаждают, опрыскивают 3,5% раствором фосфорномолибденовой кислоты в 2-пропаноле и нагревают при температуре 150 °С до появления пятен. Затем пластинку обрабатывают парами аммиака до получения фона белого цвета. Пластинка считается пригодной, если на ней видны 4 четко разделенных пятна.

ТСХ пластинка со слоем силикагеля силанизированного F254.

Должна выдерживать требования для ТСХ пластинки со слоем силикагеля силанизированного со следующим изменением.

Содержит флуоресцентный индикатор с максимумом поглощения при длине волны 254 нм.

ТСХ пластинка со слоем силикагеля этилсилильного F254.

Подложка из стекла, металла или пластика, покрытая слоем силикагеля химически модифицированного этилсилильными группами с подходящей толщиной и размером частиц (обычно от 2 до 10 мкм для пластин ВЭТСХ и от 5 до 40 мкм для обычных ТСХ пластин). Если необходимо, размер частиц указывают после названия сорбента в испытаниях, в которых он используется.

Сорбент может содержать связующее органическое вещество.

Содержит флуоресцентный индикатор с максимумом поглощения при длине волны 254 нм.

Гашение флуоресценции. Должна выдерживать требования для ТСХ пластинки со слоем силикагеля F254.

ТСХ пластинка со слоем целлюлозы.

Подложка из стекла, металла или пластика, покрытая слоем целлюлозы для хроматографии (1) с толщиной 0,1 мм.

ТСХ пластинка со слоем целлюлозы F254.

Подложка из стекла, металла или пластика, покрытая слоем целлюлозы для хроматографии F254 с толщиной 0,1 мм.

ТСХ пластинка со слоем целлюлозы для ВЭТСХ.

Подложка из стекла, металла или пластика, покрытая слоем целлюлозы для хроматографии (2) с толщиной 0,1 мм.

Туйон. [546-80-5]. С10Н16О. (М.м. 152,23).

(1S,4R,5R)-4-Метил-1-(пропан-2-ил)бицикло[3.1.0]гексан-3-он.

Бесцветная или почти бесцветная жидкость.

Практически нерастворим в воде, растворим в спирте 96% и других органических растворителях.

. Около 0,914.

. Около 1,450.

Температура кипения. Около 200 °С.

Углеводороды с низким давлением паров (тип L).

Маслянистая масса.

Растворимы в бензоле и толуоле.

Углерод графитированный для хроматографии. [7440-44-0].

Углеродные цепочки с длиной цепи более С9; размер частиц от 400 до 850 мкм.

Плотность. 0,72.

Удельная площадь поверхности. 10 м2/г.

Не применяют при температуре выше 400 °С.

Углерод графитированный для хроматографии (1). [7440-44-0].

Пористые сферические частицы углерода, размер частиц 5–7 мкм.

Удельный объём пор: 0,7 см3/г.

Углерод четырёххлористый. [56-23-5]. ССl4. (М.м. 153,82). Тетрахлорметан.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается со спиртом 96%.

. От 1,595 до 1,598.

Температура кипения. От 76 до 77 °С.

Углерода диоксид. [124-38-9]. СО2. (М.м. 44,01).

Оксид углерода(IV).

Бесцветный газ. При давлении 101 кПа 1 объём газа растворяется в 1 объёме воды.

Углерода диоксид (1).

Содержит не менее 99,995% (о/о) СО2.

Углерода монооксид. Менее 5 ррm.

Кислород. Менее 25 ррm.

Углерода дисульфид. См. Сероуглерод.

Углерода монооксид. [630-08-0]. СО. (М.м. 28,01).

Оксид углерода(II).

Содержит не менее 99,97% (о/о) СО.

Углерода тетрахлорид. См. Углерод четырёххлористый.

Углеродное молекулярное сито.

Пористые, сферические, гидрофобные частицы углерода, используемые в качестве носителя для газовой хроматографии. Размер частиц – 178-251 мкм, размер пор – 0,10-0,12 нм.

Уголь активированный. [7440-44-0]

Черный порошок без запаха.

Практически нерастворим в воде и органических растворителях.

Уголь животного или растительного происхождения, специально обработанный и обладающий в связи с этим большой поверхностной активностью, способный адсорбировать газы, токсины, тяжелые металлы и др.

Хранят в плотно закрытых упаковках, отдельно от веществ, выделяющих в атмосферу газы или пары.

Уксусная кислота. [64-19-7]. С2H4O2. (М.м. 60,05).

Уксусная кислота.

Содержание C2H4O2 не менее 98%.

Бесцветная прозрачная жидкость с резким специфическим запахом.

Уксусная кислота безводная.

Содержит не менее 99,6% (м/м) С2Н4О2.

Бесцветная жидкость или белые блестящие папоротникообразные кристаллы. Легко смешивается или легко растворяется в воде, спирте 96%, эфире, глицерине 85% и большинстве жирных и эфирных масел.

. От 1,052 до 1,053.

Температура кипения. От 117 до 119 °С.

Температура замерзания. Не ниже 15,8 °С.

Вода. Не более 0,4%. Если содержание воды превышает 0,4%, прибавляют рассчитанное количество уксусного ангидрида.

Хранят в защищённом от света месте.

Уксусная кислота ледяная.

Содержит не менее 99,0% (м/м) С2Н4О2.

. От 1,049 до 1,051.

Температура кипения. От 117 до 119 °С.

Уксусная кислота разведённая 42%

Содержит не менее 400 г/л и не более 440 г/л С2Н4О2.

42 г уксусной кислоты ледяной доводят водой до 100,0 мл.

Уксусная кислота разведённая 37%

Содержит не менее 350 г/л и не более 390 г/л С2Н4О2.

37 г уксусной кислоты ледяной доводят водой до 100,0 мл.

Уксусная кислота разведённая 30%

Содержит не менее 290 г/л и не более 310 г/л С2Н4О2.

30 г уксусной кислоты ледяной доводят водой до 100,0 мл.

Уксусная кислота разведённая 30% в спирте 60%

Содержит не менее 290 г/л и не более 310 г/л С2Н4О2.

30 г уксусной кислоты ледяной доводят спиртом 60% до 100,0 мл.

Уксусная кислота разведённая 20%

Содержит не менее 190 г/л и не более 210 г/л С2Н4О2.

20 г уксусной кислоты ледяной доводят водой до 100,0 мл.

Уксусная кислота разведённая 15%

Содержит не менее 145 г/л и не более 155 г/л С2Н4О2.

15,3 г уксусной кислоты ледяной доводят водой до 100,0 мл.

Уксусная кислота разведённая 12%

Содержит не менее 115 г/л и не более 125 г/л С2Н4О2.

12,24 г уксусной кислоты ледяной доводят водой до 100,0 мл.

Уксусная кислота разведённая 50%

Содержит не менее 475 г/л и не более 525 г/л С2Н4О2.

51,0 г уксусной кислоты ледяной доводят водой до 100,0 мл.

Уксусная кислота разведённая 10%

Содержит не менее 95 г/л и не более 105 г/л С2Н4О2.

10,2 г уксусной кислоты ледяной доводят водой до 100,0 мл.

Уксусной кислоты раствор 10% в метаноле

10,4 г уксусной кислоты ледяной осторожно смешивают с 89,6 г метанола.

Раствор используют свежеприготовленным.

Уксусной кислоты раствор 5%

5,1 г уксусной кислоты ледяной доводят водой до 100,0 мл.

Уксусной кислоты раствор 5% (о/о) в метаноле

5,0 мл уксусной кислоты ледяной доводят метанолом до 100,0 мл.

Уксусной кислоты раствор 3%

3,1 г уксусной кислоты ледяной доводят водой до 100,0 мл.

Уксусной кислоты раствор 2,4% (о/о)

2,4 мл уксусной кислоты ледяной доводят водой до 100,0 мл.

Уксусной кислоты раствор 2%

2,0 г уксусной кислоты ледяной доводят водой до 100,0 мл.

Уксусной кислоты раствор 1%

1,0 г уксусной кислоты ледяной доводят водой до 100,0 мл.

Уксусной кислоты раствор 0,75%

0,75 г уксусной кислоты ледяной доводят водой до 100,0 мл.

Уксусной кислоты раствор 0,5%

0,5 г уксусной кислоты ледяной доводят водой до 100,0 мл.

Уксусной кислоты раствор 0,4%

0,4 г уксусной кислоты ледяной доводят водой до 100,0 мл.

Уксусной кислоты раствор 0,1%

0,1 г уксусной кислоты ледяной доводят водой до 100,0 мл.

Уксусной кислоты раствор 6 М

343 мл уксусной кислоты ледяной осторожно смешивают с водой и доводят водой до 1000,0 мл.

Уксусной кислоты раствор 5 М

286 мл уксусной кислоты ледяной осторожно смешивают с водой и доводят водой до 1000,0 мл.

Уксусной кислоты раствор 2 М

114 мл уксусной кислоты ледяной доводят водой до 1000,0 мл.

Уксусной кислоты раствор 1 М

57 мл уксусной кислоты ледяной доводят водой до 1000,0 мл.

Уксусной кислоты раствор 0,1 М

5,7 мл уксусной кислоты ледяной доводят водой до 1000,0 мл.

Уксусный ангидрид. [108-24-7]. С4H6O3. (М.м. 102,09).

Уксусный ангидрид.

Бесцветная прозрачная жидкость с резким запахом. При растворении реактива в воде образуется уксусная кислота, причем реакция сначала идет медленно, а затем ускоряется и проходит бурно (возможны выбросы).

Обращаться с осторожностью.

Температура кипения. От 136 до 142 °С.

Уксусного ангидрида раствор 25% (о/о) в безводном пиридине

25,0 мл уксусного ангидрида растворяют в безводном пиридине, объём раствора доводят тем же растворителем до 100,0 мл.

Хранят, защищая от света и воздуха.

Уксусного ангидрида раствор 12% (о/о) в безводном пиридине.

12 мл уксусного ангидрида смешивают с 88 мл безводного пиридина.

Хранят в банках оранжевого стекла с притертыми пробками.

Уксусного ангидрида раствор в серной кислоте.

Осторожно смешивают 5 мл уксусного ангидрида и 5 мл серной кислоты концентрированной. Полученную смесь прибавляют при охлаждении по каплям к 50 мл этанола безводного.

Готовят непосредственно перед использованием.

Ундекандиовая кислота. [1852-04-6]. С11H20O4. (М.м. 216,27).

Ундекандиовая кислота.

Содержит не менее 97%. С11H20O4.

Температура плавления. От 108 до 110 °С.

Универсальный индикатор.

Состав: 0,006 г бромкрезолового пурпурового, 0,01 г бромкрезолового зеленого, 0,02 г метилового оранжевого, 0,04 г тропеолина 00, 0,04 г фенолфталеина, 0,05 г тимолового синего, 0,1 г бромтимолового синего.

Растворим в спирте 96%.

Предназначен для колориметрического определения концентрации водородных ионов.

Индикатор изменяет окраску в интервале рН 1,0–10,0

рН | Окраска | рН | Окраска
--- | --- | --- | ---
1,0 | красно-фиолетовая | 6,0 | зеленовато-жёлтая
2,0 | розово-оранжевая | 7,0 | жёлто-зеленая
3,0 | оранжевая | 8,0 | зеленая
4,0 | жёлто-оранжевая | 9,0 | сине-зеленая
5,0 | жёлтая | 10,0 | серовато-синяя

Универсального индикатора раствор.

Содержимое пробирки (единичная упаковка) растворяют в 100 мл спирта 80% при нагревании на горячей (до температуры 50 °С) водяной бане.

Уридин. [58-96-8]. С9Н12N2О6. (М.м. 244,20).

1-(β-D-Рибофуранозил)пиримидин-2,4(1H,3H)-дион.

Кристаллический порошок белого или почти белого цвета.

Растворим в воде.

Температура плавления. Около 165 °С.

Уротропин. См. Гексаметилентетрамин.

Фактора Ха раствор

Восстанавливают бычий фактор Ха, как указано производителем реактива и разводят трис(гидроксиметил)аминометана—натрия хлорида буферным раствором рН 7,4. Оптическая плотность полученного раствора, измеренная при длине волны 405 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно трис(гидроксиметил)аминометана—натрия хлорида буферного растворам рН 7,4, не должна превышать 0,20.

Фактора Ха раствор (1)

Восстанавливают бычий фактор Ха, как указано производителем реактива и доводят трис—EDTA—BSA буферным раствором рН 8,4 (2) до получения раствора с оптической плотностью 0,65-1,25 при 405 нм.

Фактора Ха раствор (2)

Восстанавливают бычий фактор Ха, как указано производителем реактива и доводят трис(гидроксиметил)аминометана—натрия хлорида—BSA буферным раствором рН 7,4 (1) до получения раствора с оптической плотностью 0,8 при 405 нм после 4 мин инкубации с хромогенным субстратом или раствора, который дает увеличение значений оптической плотности при 405 нм не более чем 0,20 абсорбционных единиц в мин.

транс,транс-Фарнезол. [106-28-5]. C15H26O. (М.м. 222,37).

(2E,6E)-3,7,11-Триметилдодека-2,6,10-триен-1-ол.

Феназон. [60-80-0]. C11H12N2O. (М.м. 188,23).

1,5-Диметил-2-фенил-1,2-дигидро-3H-пиразол-3-он.

Бесцветные кристаллы или белый кристаллический порошок.

Очень легко растворим в воде.

Температура плавления. От 109 до 111°С.

Фенантрен. [85-01-8]. С14Н10. (М.м. 178,23).

Фенантрен.

Кристаллы белого цвета.

Практически нерастворим в воде, легко растворим в эфире, умеренно растворим в спирте 96%.

Температура плавления. Около 100 °С.

Фенантролина гидрохлорид. [3829-86-5]. С12Н8N2·HCl·Н2О. (М.м. 234,68).

1,10-Фенантролина гидрохлорид, моногидрат.

Порошок белого или почти белого цвета.

Легко растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Температура плавления. Около 215 °С с разложением.

Фенантролина сульфат. [4199-91-1]. С12Н8N2·Н2SО4. (М.м. 278,28).

1,10-Фенантролина сульфат (1:1).

Порошок белого цвета с жёлтоватым оттенком.

Растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

В качестве окислительно-восстановительного индикатора используется комплекс о-фенантролина сульфата с железом(II)–Ферроин.

о-Фенантролина сульфата раствор.

0,7 г железа(II) сульфата растворяют в 100 мл воды, прибавляют 2,2 г о-фенантролина сульфата и перемешивают до растворения.

Фенилгидразина гидрохлорид. [59-88-1]. С6H8N2·HCl. (М.м. 144,60).

Фенилгидразина гидрохлорид.

Кристаллический порошок белого или почти белого цвета, под действием воздуха приобретает коричневую окраску.

Растворим в воде и спирте 96%.

Температура плавления. Около 245 °С с разложением.

Хранят в защищённом от света месте.

Фенилгидразина гидрохлорида раствор 1%.

0,5 г фенилгидразина гидрохлорида помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 25 мл воды, перемешивают до полного растворения и доводят объём раствора водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Фенилгидразина гидрохлорида раствор 0,4%.

0,2 г фенилгидразина гидрохлорида помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 25 мл воды, перемешивают до полного растворения и доводят объём раствора водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Фенилгидразина гидрохлорида раствор 0,36%.

0,9 г фенилгидразина гидрохлорида растворяют в 50 мл воды, обесцвечивают углем активированным и фильтруют. К фильтрату прибавляют 30 мл хлористоводородной кислоты 25% и доводят объём раствора водой до 250,0 мл. Раствор используют свежеприготовленным.

Фенилгидразина раствор в серной кислоте 0,1%.

0,1 г фенилгидразина гидрохлорида растворяют в 100 мл охлажденной смеси из равных объёмов серной кислоты концентрированной и воды. Используют свежеприготовленным.

Фенилгидразина раствор в серной кислоте 0,065%.

65 мг фенилгидразина гидрохлорида, предварительно перекристаллизованного из спирта (85%, о/о), растворяют в смеси растворителей вода–серная кислота концентрированная 80:170 и доводят объём раствора той же смесью растворителей до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

α-Фенилглицин. [2835-06-5]. С8Н9NO2. (М.м. 151,16).

(2RS)-2-Амино-2-фенилуксусная кислота.

Содержит не менее 95% С8Н9NO2.

Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворим в воде и этаноле, мало растворим в эфире.

D-α-Фенилглицин. [875-74-1]. С8Н9NO2. (М.м. 151,16).

(2R)-2-Амино-2-фенилуксусная кислота.

Содержит не менее 99% С8Н9NO2.

Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворим в воде и этаноле, мало растворим в эфире.

Температура плавления. Около 300 °С (с разложением).

n-Фенилендиамина дигидрохлорид. [615-28-1]. С6Н8N2·2HCl. (М.м. 181,06).

Бензол-1,4-диамина дигидрохлорид.

Кристаллический порошок или кристаллы белого цвета или слегка окрашенные. На воздухе краснеет.

Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96% и эфире.

Фенилизотиоцианат. [103-72-0]. С7Н5NS. (М.м. 135,19).

Изотиоцианатобензол.

Бесцветная жидкость. Практически нерастворим в воде, растворим в спирте 96%.

. Около 1,13.

. Около 1,65.

Температура кипения. Около 221 °С.

Температура плавления. Около –21 °С.

2-Фенилмасляная кислота. [90-27-7]. C10H12O2. (М.м. 164,20).

(2RS)-2-Фенилбутановая кислота.

Содержит не менее 98% C10H12O2.

Кристаллический порошок белого или почти белого цвета.

Температура плавления. Около 40 °С.

Температура кипения. От 270 до 272 °С.

2-Фенилэтанол. [60-12-8]. C8H10O. (М.м. 122,16).

2-Фенилэтанол.

Содержит не менее 98% C8H10O.

Бесцветная жидкость.

. Около 1,021.

. Около 1,53.

Температура кипения. Около 219 °С.

Температура плавления. Около –27 °С.

Феноксазин. [135-67-1]. С12Н9NO. (М.м. 183,21).

10Н-Феноксазин.

Серо-зелёный порошок.

Температура плавления. Около 156 °С.

Феноксибензамина гидрохлорид. [63-92-3]. С18Н22СlNO·HCl. (М.м. 340,29).

(2RS)-N-Бензил-1-фенокси- N-(2-хлорэтил)пропан-2-амина гидрохлорид.

Содержит от 97,0% до 103,0% С18Н23Сl2NO в пересчете на сухое вещество.

Кристаллический порошок белого или почти белого цвета.

Умеренно растворим в воде, легко растворим в спирте 96%.

Температура плавления. Около 138 °С.

Феноксиуксусная кислота. [122-59-8]. С8Н8O3. (М.м. 152,15).

Феноксиуксусная кислота.

Кристаллы почти белого цвета.

Умеренно растворима в воде, легко растворима в спирте 96%, эфире и кислоте уксусной ледяной.

Температура плавления. Около 98 °С.

Феноксиэтанол. [122-99-6]. С8Н10O2. (М.м. 138,16).

2-Феноксиэтан-1-ол.

Прозрачная, бесцветная маслянистая жидкость.

Мало растворим в воде, легко растворим в спирте 96% и эфире.

. Около 1,11.

. От 1,537.

Температура затвердевания. Не ниже 12 °С.

Фенол. [108-95-2]. C6H6O. (М.м. 94,11).

Фенол.

Бесцветные или слегка розовые, или слегка жёлтоватые кристаллы, или кристаллическая масса, поглощающая влагу.

Растворим в воде, очень легко растворим в спирте 96%, глицерине и метиленхлориде. При попадании на кожу вызывает раздражение.

Фенола раствор 10% спиртовой.

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 г фенола, растворяют в спирте 95% и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Фенола раствор 5%.

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 г фенола, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Фенолдисульфоновая кислота. [96-77-5]. C6H6O7S2. (М.м. 254,24).

4-Гидрокси-1,3-бензолдисульфоновая кислота.

. Около 1,606.

. Около 1,655.

Температура кипения. Около 367 °С.

Феноловый красный. [143-74-8]. С19Н14О5S. (М.м. 354,38).

3,3-Бис(4-гидроксифенил)-3Н-2,1λ6-бензоксатиол-1,1-дион.

Мелкодисперсный порошок тёмно-красного цвета.

Умеренно растворим в воде, растворим в спирте 96 % и ацетоне, легко растворим в разведённых растворах гидроксидов и углекислых солей щелочных металлов, практически нерастворим в хлороформе и эфире.

Переход окраски раствора от жёлтой к красной в интервале рН 6,8–8,4.

Фенолового красного раствор 0,1%

0,1 г фенолового красного растворяют в смеси 2,82 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида и 20 мл спирта 96%, доводят объём раствора водой до 100 мл.

Испытание на чувствительность. К 100 мл воды, свободной от углерода диоксида, прибавляют 0,1 мл раствора фенолового красного; появляется жёлтое окрашивание, которое должно перейти в красно-фиолетовое при прибавлении не более 0,1 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида.

Переход окраски от жёлтой до красновато-фиолетовой в интервале рН 6,8–8,4.

Фенолового красного раствор 0,06%

0,06 г фенолового красного растворяют в 8,5 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора свежепрокипяченной и охлажденной водой до 100,0 мл.

Фенолового красного раствор 0,04%

0,04 г фенолового красного растворяют в 5,7 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора свежепрокипяченной и охлажденной водой до 100,0 мл.

Фенолового красного раствор (2)

Раствор I. 33 мг фенолового красного растворяют в 1,5 мл 8,5% раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Раствор II. 25 мг аммония сульфата растворяют в 235 мл воды, прибавляют 105 мл 8,5% раствора натрия гидроксида и 135 мл уксусной кислоты разведённой 12%.

Раствор II смешивают с 25 мл раствора I. Если необходимо, доводят рН раствора до 4,7 с помощью 8,5% раствора натрия гидроксида.

Фенолового красного раствор (3)

Раствор I. 33 мг фенолового красного растворяют в 1,5 мл 8,5% раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 50 мл.

Раствор II. 50 мг аммония сульфата растворяют в 235 мл воды, прибавляют 105 мл 8,5% раствора натрия гидроксида и 135 мл уксусной кислоты разведённой 12%.

Раствор II смешивают с 25 мл раствора I. Если необходимо, доводят рН раствора до 4,7 с помощью 8,5% раствора натрия гидроксида.

Фенолового красного спиртовой раствор 0,1%

0,1 г фенолового красного растворяют в 50 мл спирта 96% при нагревании на горячей водяной бане и после охлаждения доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Феноловый красный водорастворимый. [34487-61-1]. С19Н13NаO5S. (М.м. 376,36).

2-[(4-Гидроксифенил)(4-оксоциклогекса-2,5-диен-1-илиден)метил] бензолсульфонат натрия.

Натриевая соль фенолсульфофталеина. (Взамен аммониевой соли).

Порошок красно-коричневого цвета.

Растворим в воде.

Переход окраски раствора от жёлтой к красной в интервале рН 6,8–8,4.

Фенолового красного водорастворимого раствор.

Раствор 40 мг фенолового красного водорастворимого в 400 мл воды.

Фенолфталеин. [77-09-8]. С20Н14O4. (М.м. 318,32).

3,3-Бис(4-гидроксифенил)-2-бензофуран-1(3H)-он.

Порошок от белого до жёлтовато-белого цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим в спирте 96%.

Фенолфталеина раствор 1%.

1,0 г фенолфталеина растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора до 100,0 мл тем же растворителем.

Фенолфталеина раствор 0,1%.

0,1 г фенолфталеина растворяют в 80 мл спирта 96% и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Испытание на чувствительность. К 100 мл воды, свободной от углерода диоксида, прибавляют 0,1 мл раствора фенолфталеина; при прибавлении не более 0,2 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида окраска раствора должна измениться от бесцветной до розовой.

Переход окраски от бесцветной до ярко-розовой в интервале рН 8,2–10,0.

Фенхлорфос. [299-84-3]. C8H8Cl3O3PS. (М.м. 321,55).

O,O-Диметил-O-(2,4,5-трихлорфенил)тиофосфат.

Температура плавления. Около 35 °С.

Фенхон. [7787-20-4]. С10Н16O. (М.м. 152,23).

(1R,4S)-1,3,3-Триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-он.

Маслянистая жидкость.

Смешивается со спиртом 96% и эфиром, практически нерастворим в воде.

Температура кипения. Около 193 °С.

. Около 1,46.

Хроматографическая чистота фенхона, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 98,0%.

Ферроин. [14634-91-4]. C36H24FeN6O4S. (M.м. 692,5).

Сульфат трис(1,10-фенантролин)железа(II).

0,70 г железа(II) сульфата и 1,76 г фенантролина гидрохлорида растворяют в 70 мл воды и доводят объём раствора тем же растворителем до 100 мл. Испытание на чувствительность. К 50 мл серной кислоты разведённой 9,8% прибавляют 0,15 мл раствора осмия(VIII) оксида и 0,1 мл ферроина. После прибавления 0,1 мл 0,1 М раствора аммония церия нитрата окраска раствора должна измениться от красной до голубой.

Ферроцифен. [14768-11-7]. С26Н16FеN6. (М.м. 468,3).

Бисцианобис(1,10-фенантролин)железо(II).

Кристаллический порошок фиолетово-бронзового цвета.

Практически нерастворим в воде и спирте 96%.

Хранят в сухом защищённом от света месте.

Фибриноген бычий. [9001-32-5].

Белок, преобразующийся в фибрин под действием тромбина бычьего. Получают из плазмы крупного рогатого скота.

Содержит не менее 75% свёртываемого белка.

Флороглюцин. [108-73-6]. С6Н6O3. (М.м. 126,11).

Бензол-1,3,5-триол.

Белый или почти белый порошок.

Легко растворим в спирте 96%, умеренно растворим в воде.

Температура плавления. Около 217 °С.

Флороглюцина дигидрат. [6099-90-7]. С6Н6O3·2Н2O. (М.м. 162,14).

Бензол-1,3,5-триол, дигидрат.

Кристаллы белого или жёлтоватого цвета.

Мало растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Температура плавления. Около 223 °С (метод мгновенного плавления).

Флороглюцина раствор спиртовой 10%.

1,0 г флороглюцина растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 10,0 мл.

Флороглюцина раствор 1%.

К 1 мл флороглюцина раствора спиртового 10% прибавляют 9 мл хлористоводородной кислоты 25%.

Хранят в защищённом от света месте.

Флороглюцина раствор.

0,1 г флороглюцина растворяют в смеси из 8 мл спирта 96% и 8 мл хлористоводородной кислоты 25%. При смачивании этим раствором сосновая лучинка должна окрашиваться в красный цвет. Готовят непосредственно перед использованием.

Флороглюцина раствор в эфире 0,1%.

0,1 г флорглюцина растворяют в эфире и разводят эфиром до 100,0 мл.

Готовят непосредственно перед использованием.

Флороглюцина раствор в серной кислоте.

1,5 г флорглюцина растворяют при осторожном нагревании в смеси из 75 г воды и 50 г серной кислоты концентрированной.

Флуорантен. [206-44-0]. С16Н10. (М.м. 202,24).

Флуорантен.

Кристаллы от жёлтого до жёлтовато-коричневого цвета.

Практически нерастворим в воде, очень мало растворим в эфире, растворим в хлороформе и бензоле.

Температура кипения. Около 384 °С.

Температура плавления. От 105 до 110 °С.

9-Флуоренилметилхлорформиат. [28920-43-6]. C15H11ClO2. (М.м. 258,70).

[(9H-Флуорен-9-ил)метил]карбонохлоридат.

Гигроскопичен, водой гидролизуется.

Содержит не менее 97% C15H11ClO2.

Температура плавления. От 60 до 64 °С.

Хранить при температуре 2–8 °С в инертной атмосфере.

Флуорескамин. [38183-12-9]. С17Н10О4. (М.м. 278,26).

4ʹ-фенил-3H,3ʹH-спиро[2-бензофуран-1,2ʹ-фуран]-3,3ʹ-дион.

Температура плавления. От 154 до 155 °С.

Флуорескамина раствор 0,01% в ацетоне.

20 мг флуорескамина растворяют в 20 мл ацетона.

5,0 мл полученного раствора доводят ацетоном до 50 мл.

Флуоресцеин. [2321-07-5]. С20Н12О5. (М.м. 332,31).

3',6'-Дигидрокси-3H-спиро[2-бензофуран-1,9'-ксантен]-3-он.

Порошок оранжево-красного цвета.

Практически нерастворим в воде и эфире, растворим в теплом спирте 96% и растворах гидроксидов щелочных металлов.

В растворе флуоресцеин обнаруживает зеленую флуоресценцию.

Температура плавления. Около 315 °С.

Флуоресцеина раствор 0,025% спиртовой

5 мг флуоресцеина растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 20,0 мл.

Флуфенаминовая кислота. [530-78-9]. С14Н10F3NО2. (М.м. 281,23).

2-[3-(Трифторметил)анилино]бензойная кислота.

Кристаллический порошок или игольчатые кристаллы бледно-жёлтого цвета. Практически нерастворима в воде, легко растворима в спирте 96%.

Температура плавления. От 132 до 135 °С.

Формалин. См. Формальдегида раствор 35%.

Формалин технический.

Содержит 36,5–37,5% формальдегида.

Бесцветная прозрачная жидкость, при хранении допускается образование помутнения или белого осадка.

Смешивается с водой и спиртом 96%.

Формальдегид. [50-00-0]. CH2O. (М.м. 30,03).

Формальдегид.

Формальдегида раствор 35%.

Бесцветная прозрачная жидкость, при хранении допускается образовние помутнения или белого осадка.

Смешивается с водой и спиртом 96%.

Формальдегида раствор в серной кислоте.

2 мл 35% раствора формальдегида смешивают с 100 мл серной кислоты концентрированной.

Формамид. [75-12-7]. CH3NO. (М.м. 45,04).

Формамид.

Прозрачная, бесцветная, маслянистая, гигроскопичная жидкость.

Смешивается с водой и спиртом 96%. Гидролизуется в воде.

Температура кипения. Около 103 °С. Определение проводят при давлении 2 кПа.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Формамид обработанный.

1,0 г кислоты сульфаминовой диспергируют в 20,0 мл формамида, содержащего 5% (о/о) воды.

N-Формилцитизин. [53007-06-0]. C12H14N2O2. (М.м. 218,25).

(1R,5S)-8-Оксо-1,5,6,8-тетрагидро-2H-1,5-метанопиридо[1,2-a][1,5]диазоцин-3(4H)-карбальдегид.

Вещество белого или почти белого цвета.

Температура плавления: 165–167 °С.

Фосфолипиды

Определенное количество мозга бычьего, хорошо отделенного от кровеносных сосудов, промывают и разжижают в подходящем устройстве. От 1000 до 1300 г разжиженного вещества взвешивают, измеряют объём (V, мл), затем экстрагируют 3 порциями по 4V мл ацетона, и фильтруют при пониженном давлении; полученный остаток сушат при температуре 37 °С в течение 18 ч; затем остаток экстрагируют смесью растворителей петролейный эфир (3)–петролейный эфир (2) 2:3, двумя порциями по 2 мл, фильтруя каждый экстракт через фильтровальную бумагу, предварительно увлажненную той же смесью растворителей. Объединенные извлечения выпаривают досуха при температуре 45 °С и давлении не более 670 Па. Остаток растворяют в 0,2V мл эфира и выдерживают при температуре 4 °С до образования осадка. Прозрачную надосадочную жидкость центрифугируют, выпаривают при пониженном давлении до объёма 100 мл на килограмм разжиженного вещества и взвешивают. Выдерживают при температуре 4 °С до образования осадка (от 12 до 24 ч) и центрифугируют. К прозрачной надосадочной жидкости прибавляют ацетон в количестве, в 5 раз превышающем ее объём, центрифугируют и отбрасывают надосадочную жидкость. Осадок сушат.

Хранят в эксикаторе под вакуумом, в защищённом от света месте.

Фосфор красный. [7723-14-0]. P. (А.м. 30,97). Фосфор.

Содержит не менее 97% P.

Порошок тёмно-красного цвета.

Медленно окисляется кислородом воздуха, хранить в герметичной таре.

Фосфора(V) оксид. [1314-56-3]. Р2О5. (М.м. 141,94). Оксид фосфора(V).

Аморфный порошок белого цвета, расплывающийся на воздухе. С водой образует гидраты с выделением тепла.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Фосфористая кислота. [13598-36-2]. H3PO3. (М.м. 82,00).

Фосфористая кислота.

Содержит не менее 99% H3PO3.

. Около 1,651.

Белая или почти белая, очень гигроскопичная кристаллическая масса или нестабильные орторомбические кристаллы; медленно окисляется кислородом воздуха до фосфорной кислоты.

Растворима в воде, спирте 96% и в смеси 3 объёмов эфира и 1 объёма спирта 96%.

Фосфорная кислота. [7664-38-2]. H3PO4. (М.м. 98,00).

Фосфорная кислота.

Бесцветная, прозрачная жидкость.

Содержит не менее 24,8% и не более 25,2% H3PO4.

. От 1,147 до 1,150.

Фосфорная кислота безводная

25,0 г фосфора(V) оксида растворяют в 33,0 г фосфорной кислоты концентрированной.

Фосфорная кислота концентрированная

Содержит не менее 85% (м/м) H3PO4.

. Около 1,685.

Бесцветная, прозрачная жидкость или бесцветные кристаллы, расплывающиеся на воздухе.

Очень легко растворима в воде, растворима в спирте 96%.

Фосфорная кислота разведённая 55%

38,4 мл фосфорной кислоты концентрированной прибавляют к 50 мл воды. Содержание H3PO4 от 53% до 57%.

. От 1,35 до 1,40.

Фосфорная кислота разведённая 42,5%

29,7 мл фосфорной кислоты концентрированной прибавляют к 50 мл воды и доводят объём раствора водой до 100 мл. Содержание H3PO4 от 41,0% до 44,0%.

Фосфорная кислота разведённая 25%

17,5 мл фосфорной кислоты концентрированной прибавляют к 60 мл воды и доводят объём раствора водой до 100 мл. Содержание H3PO4 от 24,0% до 26,0%.

Фосфорная кислота разведённая 20%

14,0 мл фосфорной кислоты концентрированной прибавляют к 60 мл воды и доводят объём раствора водой до 100 мл. Содержание H3PO4 от 19,0% до 21,0%.

Фосфорная кислота разведённая 10%

7,0 мл фосфорной кислоты концентрированной прибавляют к 80 мл воды и доводят объём раствора водой до 100 мл. Содержание H3PO4 от 9,5% до 10,5%.

Фосфорная кислота разведённая 7%

4,9 мл фосфорной кислоты концентрированной прибавляют к 80 мл воды и доводят объём раствора водой до 100 мл. Содержание H3PO4 от 9,5% до 10,5%.

Фосфорная кислота разведённая 5%

3,5 мл фосфорной кислоты концентрированной прибавляют к 80 мл воды и доводят объём раствора водой до 100 мл. Содержание H3PO4 от 4,75% до 5,25%.

Фосфорная кислота разведённая 3,5%

2,4 мл фосфорной кислоты концентрированной прибавляют к 80 мл воды и доводят объём раствора водой до 100 мл. Содержание H3PO4 от 3,40% до 3,60%.

Фосфорная кислота разведённая 2,0%

1,4 мл фосфорной кислоты концентрированной прибавляют к 80 мл воды и доводят объём раствора водой до 100 мл. Содержание H3PO4 от 1,90% до 2,10%.

Фосфорная кислота разведённая 1,0%

0,7 мл фосфорной кислоты концентрированной прибавляют к 80 мл воды и доводят объём раствора водой до 100 мл. Содержание H3PO4 от 0,94% до 1,06%.

Фосфорная кислота разведённая 0,5%

3,5 мл фосфорной кислоты концентрированной прибавляют к 0,5 л воды и доводят объём раствора водой до 1,0 л. Содержание H3PO4 от 0,47% до 0,53%.

Фосфорная кислота разведённая 0,43%

3,0 мл фосфорной кислоты концентрированной прибавляют к 0,5 л воды и доводят объём раствора водой до 1,0 л. Содержание H3PO4 от 0,40% до 0,46%.

Фосфорная кислота разведённая 0,3%

2,1 мл фосфорной кислоты концентрированной прибавляют к 0,5 л воды и доводят объём раствора водой до 1,0 л. Содержание H3PO4 от 0,27% до 0,33%.

Фосфорная кислота разведённая 0,25%

1,75 мл фосфорной кислоты концентрированной прибавляют к 0,5 л воды и доводят объём раствора водой до 1,0 л. Содержание H3PO4 от 0,22% до 0,28%.

Фосфорная кислота разведённая 0,1%

10,0 мл фосфорной кислоты разведённой 1,0% доводят водой до 100 мл. Раствор используют свежеприготовленным.

Фосфорная кислота разведённая 0,085%

8,5 мл фосфорной кислоты разведённой 1,0% доводят водой до 100 мл. Раствор используют свежеприготовленным.

Фосфорной кислоты раствор 5 М

576,5 г (342,0 мл) фосфорной кислоты концентрированной осторожно прибавляют к 0,8 л воды и доводят объём раствора водой до 1,0 л.

Фосфорной кислоты раствор 3 М

345,9 г (205,2 мл) фосфорной кислоты концентрированной осторожно прибавляют к 0,8 л воды и доводят объём раствора водой до 1,0 л.

Фосфорной кислоты раствор 2 М

230,6 г (136,8 мл) фосфорной кислоты концентрированной осторожно прибавляют к 0,8 л воды и доводят объём раствора водой до 1,0 л.

Фосфорной кислоты раствор 1 М

115,3 г (68,4 мл) фосфорной кислоты концентрированной осторожно прибавляют к 0,8 л воды и доводят объём раствора водой до 1,0 л.

Фосфорной кислоты раствор 0,66 М

76,1 г (45,2 мл) фосфорной кислоты концентрированной осторожно прибавляют к 0,8 л воды и доводят объём раствора водой до 1,0 л.

Фосфорной кислоты раствор 0,5 М

57,6 г (34,2 мл) фосфорной кислоты концентрированной осторожно прибавляют к 0,8 л воды и доводят объём раствора водой до 1,0 л.

Фосфорной кислоты раствор 0,05 М

25,0 мл 2 М раствора фосфорной кислоты доводят водой до 1,0 л.

Фосфорной кислоты раствор 0,02 М

20,0 мл 1 М раствора фосфорной кислоты доводят водой до 1,0 л.

Фосфорновольфрамовая кислота. [12501-23-4]. 12WО3∙Н3РО4∙xН2О. (М.м. 2880,1 для безводной).

Оксид вольфрама(VI)—фосфорная кислота (12/1), гидрат.

Белые кристаллы или белые с сероватым или жёлтовато-зеленым оттенком кристаллы или кристаллический порошок.

Очень легко растворима в воде, растворима в спирте 96%.

Фосфорновольфрамовой кислоты раствор 0,025 М

К 10 г натрия вольфрамата прибавляют 8 мл фосфорной кислоты концентрированной и 75 мл воды, нагревают с обратным холодильником в течение 3 ч, охлаждают и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Фосфорновольфрамовой кислоты раствор 0,025 М (1)

К 7,2 г фосфорновольфрамовой кислоты безводной прибавляют 90 мл воды, нагревают с обратным холодильником в течение 3 ч, охлаждают и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Фосфорновольфрамовой кислоты раствор 3%

0,3 г фосфорновольфрамовой кислоты растворяют в 0,8 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8% и доводят водой до 10,0 мл. В случае получения мутного раствора его фильтруют через двойной фильтр.

Фосфорновольфрамовой кислоты спиртовой раствор 25%.

25 г фосфорновольфрамовой кислоты растворяют в 100 мл спирта 96% при легком нагревании на водяной бане.

Срок годности 1 мес при хранении в прохладном, защищённом от света месте.

Фосфорновольфрамовой кислоты 20%

20 г фосфорновольфрамовой кислоты растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100 мл.

Фосфорновольфрамовой кислоты спиртовой раствор 20%

20 г фосфорновольфрамовой кислоты растворяют в 100 мл спирта 96% при легком нагревании на водяной бане.

Срок годности 1 мес при хранении в прохладном, защищённом от света месте.

Фосфорномолибденовая кислота. [51429-74-4]. 12МоО3·Н3РО4·хН2О. (М.м. 1825,3 для безводной).

Оксид молибдена(VI)—фосфорная кислота (12/1), гидрат

Мелкие кристаллы оранжево-жёлтого цвета.

Легко растворима в воде, растворима в спирте 96% и эфире.

Фосфорномолибденовой кислоты раствор 4%.

4 г фосфорномолибденовой кислоты растворяют в воде, доводят объём раствора тем же растворителем до 40 мл. Осторожно при охлаждении прибавляют 60 мл серной кислоты концентрированной.

Готовят непосредственно перед использованием.

Фосфорномолибденовой кислоты спиртовой раствор 20%.

20 г фосфорномолибденовой кислоты растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 100 мл.

Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Фосфорномолибденовой кислоты спиртовой раствор 10%.

10 г фосфорномолибденовой кислоты растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 100 мл.

Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Фосфорномолибденовой кислоты спиртовой раствор 5%.

5 г фосфорномолибденовой кислоты растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 100 мл.

Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Фосфорномолибденовой кислоты спиртовой раствор 4%.

4 г фосфорномолибденовой кислоты растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 100 мл.

Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Фосфорномолибденовой кислоты спиртовой раствор 2,5%.

2,5 г фосфорномолибденовой кислоты растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора тем же растворителем до 100 мл.

Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Фосфорномолибденовой кислоты уксуснокислый раствор 5%.

5 г фосфорномолибденовой кислоты растворяют в смеси серная кислота концентрированная—уксусная кислота ледяная 1:20 и доводят объём раствора тем же растворителем до 100 мл.

Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Фосфорномолибденово-вольфрамовый реактив. См. Реактив Фолина-Чокальтеу.

Фосфорномолибденово-вольфрамовый реактив разведённый. См. Реактив Фолина-Чокальтеу разведённый.

Фталазин. [253-52-1]. С8Н6N2. (М.м. 130,15).

Фталазин.

Кристаллы бледно-жёлтого цвета.

Легко растворим в воде, растворим в этаноле, этилацетате и метаноле, умеренно растворим в эфире.

Температура плавления. От 89 до 92 °С.

Фталевая кислота. [88-99-3]. С8Н6О4. (М.м. 166,13).

Бензол-1,2-дикарбоновая кислота.

Растворима в горячей воде и спирте 96%.

Фталевый альдегид. [643-79-8]. С8Н6О2. (М.м. 134,13).

Бензол-1,2-дикарбальдегид.

Кристаллический порошок жёлтого цвета.

Мало растворим в воде, умеренно растворим в горячей воде, растворим в спирте 96% и эфире.

Температура плавления. Около 55 °С.

Хранят в защищённом от света месте, без доступа воздуха.

Фталевого альдегида реактив.

2,47 г борной кислоты растворяют в 75 мл воды, доводят рН до 10,4 45% раствором калия гидроксида и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

1,0 г фталевого альдегида растворяют в 5 мл метанола, прибавляют 95 мл приготовленного раствора борной кислоты и 2 мл тиогликолевой кислоты и доводят рН до 10,4 45% раствором калия гидроксида.

Хранят в защищённом от света месте.

Срок годности 3 сут.

Фталевый ангидрид. [85-44-9]. С8Н4О3. (М.м. 148,12).

2-Бензофуран-1,3-дион.

Содержит не менее 99,0% С8Н4О3.

Хлопья белого цвета.

Очень мало растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Температура плавления. От 130 до 132 °С.

Количественное определение. 2,000 г растворяют в 100 мл воды, кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин, охлаждают и титруют 1 М раствором натрия гидроксида, используя в качестве индикатора раствор фенолфталеина.

1 мл 1 М раствора натрия гидроксида соответствует 74,05 мг С8Н4О3.

Фталевого ангидрида раствор.

42 г фталевого ангидрида растворяют в 300 мл пиридина безводного и выдерживают в течение 16 ч.

Хранят в защищённом от света месте.

Срок годности 7 сут.

Фталеиновый пурпурный. [2411-89-4]. С32Н32N2O12·xH2O. (М.м. 636,6, для безводного).

2,2',2'',2'''-{(3-Оксо-1,3-дигидро-2-бензофуран-1,1-диил)бис[(6-гидрокси-5-метил-3,1-фенилен)метиленнитрило]}тетрауксусная кислота.

Порошок от жёлтовато-белого до коричневатого цвета.

Практически нерастворим в воде, растворим спирте 96%.

Реактив поступает в продажу в виде натриевой соли: порошок от жёлтовато-белого до коричневатого цвета; растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Испытание на чувствительность. 10 мг фталеинового пурпурного растворяют в 1 мл раствора аммиака концентрированного и доводят объём раствора водой до 100 мл. К 5,0 мл полученного раствора прибавляют 95,0 мл воды, 4,0 мл раствора аммиака концентрированного 25%, 50,0 мл спирта 96% и 0,1 мл 0,1 М раствора бария хлорида; появляется сине-фиолетовое окрашивание, которое должно обесцветиться после прибавления 0,15 мл 0,1 М раствора натрия эдетата.

Фталеинового пурпурного раствор 0,5%.

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 г фталеинового пурпурного, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

2-Фтор-2-деокси-D-глюкоза. См. 2-Фтор-2-дезокси-D-глюкоза.

2-Фтор-2-дезокси-D-глюкоза. [86783-82-6]. С6Н11FO5. (М.м. 182,15).

2-Дезокси-2-фтор-D-глюкоза.

Кристаллический порошок.

Температура плавления. От 174 до 176 °С.

1-Фтор-2-нитро-4-(трифторметил)бензол. [367-86-2]. С7Н3F4NO2.

(М.м. 209,10). 2-Нитро-4-(трифторметил)-1-фторбензол.

Жёлтовая кристаллическая масса.

Практически нерастворим в воде, растворим в этаноле и эфире.

Температура плавления. Около 197 °С.

2-Фтор-2-дезокси-D-манноза. [38440-79-8]. С6Н11FO5. (М.м. 182,15).

2-Дезокси-2-фтор-D-манноза.

4-Фтор-3-хлоранилин. [367-21-5]. C6H5ClFN. (М.м. 164,16).

4-Фтор-3-хлоранилин.

Содержит не менее 98% C6H5ClFN.

Температура плавления. От 42 до 47 °С.

Температура кипения. От 227 до 230 °С.

4-Фторанилин. [371-40-4]. C6H6FN. (М.м. 111,12).

4-Фторанилин.

Бледно-жёлтая маслянистая жидкость.

Растворима в этаноле и эфире, мало растворима в хлороформе.

Фтординитробензол. [70-34-8]. С6Н3FN2O4. (М.м. 186,10).

2,4-Динитро-1-фторбензол.

Кристаллы или жидкость бледно-жёлтого цвета.

Растворим в эфире и пропиленгликоле.

Температура плавления. Около 29 °С.

Фтористоводородная кислота. [7664-39-3]. НF. (М.м. 20,01).

Фтористоводородная кислота.

Содержит не менее 40,0% (м/м) НF.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Остаток после прокаливания. Не более 0,05% (м/м); кислоту фтористоводородную выпаривают в платиновом тигле, остаток осторожно прокаливают до постоянной массы.

Хранят в полиэтиленовой упаковке.

Фукоза. [6696-41-9]. С6Н12O5. (М.м. 164,16).

6-Дезокси-L-галактопираноза.

Порошок белого цвета.

Растворима в воде и спирте 96%.

. Около –76° (9% раствор, через 24 ч после приготовления).

Температура плавления. Около 140 °С.

Фуксин основной. [632-99-5]. C20H19N3·HCl. (М.м. 337,85).

4-[(4-Аминофенил)(4-иминоциклогекса-2,5-диен-1-илиден)метил]-2-метиланилина гидрохлорид и [569-61-9]. C19H17N3·HCl. (М.м. 323,82). 4,4'-[(4-Иминоциклогекса-2,5-диен-1-илиден)метилен]дианилина гидрохлорид

Кристаллы с зеленовато-бронзовым блеском.

Растворим в воде и спирте 96%.

При необходимости очищают следующим образом: 1 г фуксина основного растворяют в 250 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3%, выдерживают в течение 2 ч при комнатной температуре, фильтруют, полученный фильтрат нейтрализуют раствором натрия гидроксида разведённым 8,5% и прибавляют его избыток от 1 до 2 мл. Фильтруют через стеклянный фильтр (40), осадок промывают водой, растворяют в 70 мл метанола, предварительно нагретого до кипения, и прибавляют 300 мл воды при температуре 80 °С. Охлаждают и фильтруют; кристаллы сушат в вакууме.

Хранят в защищённом от света месте.

Фуксина обесцвеченный раствор 0,1%.

0,1 г фуксина основного растворяют в 60 мл воды, прибавляют раствор, содержащий 1 г натрия сульфита безводного или 2 г натрия сульфита гептагидрата в 10 мл воды. Медленно при постоянном перемешивании прибавляют 2 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, доводят объём раствора водой до 100 мл.

Выдерживают в защищённом от света месте в течение не менее 12 ч, обесцвечивают углем активированным и фильтруют. Если раствор мутнеет, его фильтруют перед использованием. Если при выдерживании раствора появляется фиолетовое окрашивание, его снова обесцвечивают углем активированным.

Испытание на чувствительность. К 1,0 мл полученного раствора прибавляют 1,0 мл воды и 0,1 мл спирта 96%, свободного от альдегидов. Прибавляют 0,2 мл раствора, содержащего 0,01% формальдегида. В течение 5 мин должно появиться светло-розовое окрашивание раствора.

Хранят в защищённом от света месте.

Фуксина обесцвеченный раствор 1%

К 1,0 г фуксина основного прибавляют 100 мл воды, нагревают до температуры 50 °С и охлаждают, периодически перемешивая. Выдерживают в течение 48 ч, перемешивают и фильтруют. К 4 мл фильтрата прибавляют 6 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, перемешивают и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Раствор используют через 1 ч после приготовления.

Фуксинсернистой кислоты раствор.

1,0 г фуксина основного растворяют при нагревании в 600 мл воды, фильтруют и охлаждают в бане со льдом. К охлажденному фильтрату медленно прибавляют 100 мл 10% раствора натрия сульфита, колбу закрывают пробкой и встряхивают. Затем раствор охлаждают в бане со льдом и постепенно при встряхивании прибавляют небольшими порциями хлористовородную кислоту 25% до исчезновения розовой окраски (примерно 10–13 мл). Объём раствора доводят водой до метки и тщательно перемешивают.

Слегка окрашенный раствор помещают в защищенное от света место. Применяться должен не ранее, чем на другой день после приготовления, когда раствор станет совершенно бесцветным.

Хранят в защищённом от света месте.

Примечание. Если после прибавления хлористоводородной кислоты раствор остается окрашенным, его встряхивают с 0,2–0,3 г активированного угля и тотчас фильтруют.

Фумаровая кислота. [110-17-8]. С4Н4О4. (М.м. 116,07).

(2E)-Бут-2-ендиовая кислота.

Содержит не менее 99,0% С4Н4О4.

Белые или почти белые кристаллы, растворима в спирте 96%, мало растворима в воде и ацетоне.

Температура плавления. Около 300 °C.

Фурфурол. [98-01-1]. С5Н4О2. (М.м. 96,08). Фуран-2-карбальдегид.

Прозрачная, маслянистая жидкость, бесцветная или коричневато-жёлтого цвета.

Смешивается с 11 частями воды, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. От 1,155 до 1,161.

Температурные пределы перегонки. От 159 до 163 °С; должно перегоняться не менее 95%.

Хранят в тёмном месте.

Хальконкарбоновая кислота. [3737-95-9]. C21H14N2O7S·3H2O. (М.м. 492,5).

3-Гидрокси-4-[(2-гидрокси-4-сульфонафталин-1-ил)диазенил]нафталин-2-карбоновая кислота.

Порошок коричневато-черного цвета.

Мало растворима в воде, очень мало растворима в ацетоне и спирте 96%, умеренно растворима в разведённых растворах натрия гидроксида, растворима в спирте 50% и ацетоне 50%.

При рН больше 12,0 имеет голубую окраску, а его компоненты с ионом кальция в тех же условиях–красновато-сиреневую.

Переход окраски при прямом титровании от красновато-сиреневой к голубой.

Хальконкарбоновой кислоты индикаторная смесь.

Смешивают 1 часть хальконкарбоновой кислоты с 99 частями натрия хлорида.

Испытание на чувствительность. 50 мг индикаторной смеси хальконкарбоновой кислоты растворяют в смеси 2 мл 20% раствора натрия гидроксида и 100 мл воды; появляется голубое окрашивание, которое переходит в фиолетовое при прибавлении 1 мл 1% раствора магния сульфата и 0,1 мл 0,15% раствора 1,5 г/л кальция хлорида; при прибавлении 0,15 мл 0,01 М раствора натрия эдетата вновь появляется голубое окрашивание.

Хальконкарбоновой кислоты–раствор индикатора.

0,025 г индикатора растворяют в 100 мл спирта 50% или ацетона.

Срок годности – индикатора 2 мес.

Хелеритрина хлорид. [3895-92-9]. C21H18ClNO4. (М.м. 383,82).

1,2-Диметокси-12-метил[1,3]бензодиоксоло[5,6-c]фенантридин-12-иум хлорид.

Оранжево-жёлтый кристаллический порошок, растворим в метаноле.

Температура плавления. 199–206 °C (около 200 °C).

Хранят в защищённом от света и влажности месте.

α-Химотрипсин. [9004-07-3]. (М.м. около 25 000).

Протеолитический фермент (гидролаза, КФ 3.4.21.1), получаемый активацией химотрипсиногена, экстрагируемого из поджелудочной железы крупного рогатого скота (Bos taurus L).

Активность – не менее 5 микрокаталь на мг.

α-Химотрипсин для пептидного картирования.

α-Химотрипсин высокой степени очистки, лишённый активности трипсина.

Хинальдиновый красный. [117-92-0]. С21Н23IN2. (М.м. 430,3).

2-{2-[4-(Диметиламино)фенил]этенил}-1-этилхинолин-1-ий иодид.

Порошок тёмного синевато-черного цвета.

Умеренно растворим в воде, легко растворим в спирте 96%.

Хинальдинового красного раствор.

0,1 г хинальдинового красного растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Переход окраски от бесцветной до красной в интервале рН 1,4–3,2.

Хингидрон. [106-34-3]. С12Н10О4. (М.м. 218,21).

Циклогекса-2,5-диен-1,4-дион—бензол-1,4-диол (1/1).

Блестящие кристаллы или кристаллический порошок тёмно-зеленого цвета. Мало растворим в воде, умеренно растворим в горячей воде, растворим в спирте 96%, растворе аммиака концентрированного и эфире.

Температура плавления. Около 170 °С.

Хинидин. [56-54-2]. С20Н24N2О2. (М.м. 324,42).

(S)-(6-Метоксихинолин-4-ил)[(2R,4S,5R)-5-этенил-1-азабицикло[2.2.2]октан-2-ил]метанол.

Кристаллический порошок белого цвета.

Очень мало растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96%, мало растворим в эфире и метаноле.

. Около +260° (1% раствор в этаноле).

Температура плавления. Около 172 °С.

Хранят в защищённом от света месте.

Хинидина сульфат дигидрат. [6591-63-5]. (С20Н24N2О2)2·H2SO4·2H2O. (М.м. 782,9).

(S)-(6-Метоксихинолин-4-ил)[(2R,4S,5R)-5-этенил-1-азабицикло[2.2.2]октан-2-ил]метанола сульфата (2:1) дигидрат.

Белый или почти белый кристаллический порошок или блестящие бесцветные игольчатые кристаллы.

Мало растворим в воде, растворим в кипящей воде и спирте 96%, практически нерастворим в ацетоне.

. От +275 до 290 (2% раствор в хлористоводородной кислоте 0,1 М).

Температура плавления. Около 212 °С (разл.).

Хинин. [130-95-0]. С20Н24N2О2. (М.м. 324,42).

(R)-(6-Метоксихинолин-4-ил)[(2S,4S,5R)-5-этенил-1-азабицикло[2.2.2]октан-2-ил]метанол.

Микрокристаллический порошок белого цвета.

Очень мало растворим в воде, мало растворим в кипящей воде, очень легко растворим в этаноле, растворим в эфире.

. Около –67° (1% раствор в этаноле).

Температура плавления. Около 175 °С.

Хранят в защищённом от света месте.

Хинина гидрохлорид дигидрат. [6119-47-7]. С20Н24N2О2·HCl·2H2O. (М.м. 396,91).

(R)-(6-Метоксихинолин-4-ил)[(2S,4S,5R)-5-этенил-1-азабицикло[2.2.2]октан-2-ил]метанола гидрохлорид (1:1) дигидрат.

Кристаллический порошок белого или почти белого цвета или бесцветные игольчатые кристаллы, часто в комках.

Легко растворим в спирте 96%, растворим в воде.

. От –245 до –258 (2% раствор в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М).

Хранят в защищённом от света месте.

Хинина гидрохлорида раствор 2%

2 г хинина гидрохлорида дигидрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл. Раствор используют свежеприготовленным.

Хинина сульфат дигидрат. [6119-70-6, 207671-44-1]. (С20Н24N2О2)2·H2SO4·2H2O. (М.м. 782,9).

(R)-(6-Метоксихинолин-4-ил)[(2S,4S,5R)-5-этенил-1-азабицикло[2.2.2]октан-2-ил]метанола сульфат (2:1) дигидрат.

Кристаллический порошок белого или почти белого цвета или бесцветные игольчатые кристаллы.

Мало растворим в воде, умеренно растворим в кипящей воде и спирте 96%.

. От –237 до –245 (2% раствор в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М).

Хранят в защищённом от света месте.

Хинолин. [91-22-5]. C9H7N. (М.м.129,16).

Хинолин.

Прозрачная, слегка желтоватая, гигроскопичная жидкость.

Мало растворима в холодной воде, смешивается с ацетоном, этанолом и эфиром.

Хлоралгидрат. [302-17-0]. С2H3Сl3O2. (М.м. 165,40).

2,2,2-Трихлорэтан-1,1-диол.

Бесцветные прозрачные кристаллы или мелкокристаллический порошок. Гигроскопичен при повышенной влажности.

Очень легко растворим в спирте 96% и эфире, растворим в хлороформе.

Хлоралгидрата раствор концентрированный.

Раствор 80 г хлоралгидрата в 20 мл воды.

Хлоралгидрата раствор водно-глицериновый.

20 г хлоралгидрата растворяют при нагревании в 5 мл воды и прибавляют 5 мл глицерина.

Хлорамин. [127-52-6]. С6Н5СlNNaO2S∙xН2О. (М.м. 213,62 для безводного).

N-(Фенилсульфонил)-N-хлоразанид натрия, гидрат.

Белые или слегка жёлтоватые кристаллы или кристаллический порошок со слабым запахом хлора.

Хлорамин Б. См. Хлорамин.

Хлорамина раствор 5%.

5 г хлорамина растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл. Раствор используют свежеприготовленным.

Хлорамина раствор 3%.

3 г хлорамина растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Хлорамина раствор 2%.

2 г хлорамина растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Хлорамина раствор 0,1%.

0,1 г хлорамина растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Раствор используют свежеприготовленным.

Хлорамина раствор 0,02%.

Раствор 0,2 г/л хлорамина.

Раствор используют свежеприготовленным.

Хлорамина раствор 0,01%.

Раствор 0,1 г/л хлорамина.

Раствор используют свежеприготовленным.

Хлорамин Т. [7080-50-4]. С7Н7СlNNaO2S∙3Н2О. (М.м. 281,69).

N-(Толуилсульфонил)-N-хлоразанид натрия, тригидрат.

Белый или слегка желтоватый кристаллический порошок.

Легко растворим в воде, растворим в спирте 96%.

Хлоранил. [118-75-2]. C6Cl4О2. (М.м. 245,88).

2,3,5,6-Тетрахлорциклогекса-2,5-диен-1,4-дион.

Жёлтый кристаллический порошок.

Легко растворим в ацетоне и эфире, растворим в диметилформамиде, умеренно растворим в бензоле, мало растворим в спирте 96%, очень мало растворим в воде.

Температура плавления. Около 290 °С.

Хлоранилин. [106-47-8]. С6Н6СlN. (М.м. 127,57).

4-Хлоранилин.

Растворим в горячей воде, легко растворим в спирте 96% и эфире.

Температура плавления. Около 71 °С.

Хлорацетанилид. [539-03-7]. С8Н8СlNО. (М.м. 169,61).

N-(4-Хлорфенил)ацетамид.

Кристаллический порошок.

Практически нерастворим в воде, растворим в спирте 96%.

Температура плавления. Около 178 °С.

4-Хлорбензойная кислота. [74-11-3]. C7H5ClO2. (М.м. 156,56).

4-Хлорбензойная кислота.

Белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Легко растворим в спирте 96%, растворим в ацетоне, умеренно растворим в этилацетате, практически нерастворим в воде.

Температура плавления. Около 240 °С.

4-Хлорбензолсульфонамид. [98-64-6]. С6Н6СlNО2S. (М.м. 191,64).

4-Хлорбензолсульфонамид.

Порошок белого цвета. Растворим в спирте 96% и эфире.

Температура плавления. Около 145 °С.

1-Хлорбутан. [109-69-3]. C4H9Cl. (М.м. 92,57).

1-Хлорбутан.

Прозрачная, бесцветная, летучая, легко воспламеняющаяся жидкость.

Практически нерастворима в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

Хлорбутанол. [57-15-8]. C4H7Cl3O·0,5H2O. (М.м. 186,46).

2-Метил-1,1,1-трихлорпропан-2-ол гемигидрат.

Белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы, быстро сублимирующиеся.

Умеренно растворим в воде, очень легко растворим в спирте 96% и эфире, растворим в глицерине 85%.

Температура плавления. Около 78 °С.

2-Хлор-2-дезокси-D-глюкоза. [14685-79-1]. С6Н11ClO5. (М.м. 198,60).

2-Дезокси-2-хлор-D-глюкоза.

Белый или почти белый кристаллический порошок. Гигроскопичен.

Хорошо растворим в воде и диметилсульфоксиде, практически не растворим в спирте 96%.

Хлористоводородная кислота концентрированная. [7647-01-0]. НСl. (М.м. 36,46).

Бесцветная жидкость с резким запахом, дымящая на воздухе.

Содержит не менее 35% и не более 38% НСl (м/м).

. От 1,174 до 1,189.

Хлористоводородная кислота 30%

Смешивают хлористоводородную кислоту концентрированную с водой в соотношении 5:1.

Хлористоводородная кислота 25%

70 г хлористоводородной кислоты концентрированной приливают к 25 мл воды и доводят тем же растворителем до 100,0 мл.

Хлористоводородная кислота 20%

56 г хлористоводородной кислоты концентрированной приливают к 30 мл воды и доводят тем же растворителем до 100,0 мл.

Хлористоводородная кислота 15%

42 г хлористоводородной кислоты концентрированной приливают к 40 мл воды и доводят тем же растворителем до 100,0 мл.

Хлористоводородная кислота разведённая 10%

28 г хлористоводородной кислоты концентрированной приливают к 65 мл воды и доводят тем же растворителем до 100,0 мл.

Хлористоводородная кислота разведённая 8,3%

1 объём хлористоводородной кислоты 25% приливают к 2 объёмам воды.

Хлористоводородная кислота разведённая 7,3%

Содержит 73 г/л НСl.

20 г хлористоводородной кислоты концентрированной приливают к 75 мл воды и доводят тем же растворителем до 100,0 мл.

Хлористоводородная кислота разведённая 3,65%

Содержит 36,5 г/л НСl.

10 г хлористоводородной кислоты концентрированной приливают к 75 мл воды и доводят тем же растворителем до 100,0 мл.

Хлористоводородная кислота разведённая 7,3% в метаноле

Содержит 73 г/л НСl.

20 г хлористоводородной кислоты концентрированной приливают к 75 мл метанола и доводят тем же растворителем до 100,0 мл.

Хлористоводородная кислота разведённая 5%

Содержит 50 г/л НСl.

13,7 г хлористоводородной кислоты концентрированной приливают к 75 мл воды и доводят тем же растворителем до 100,0 мл.

Хлористоводородная кислота 2%

5,6 г хлористоводородной кислоты концентрированной приливают к 90 мл воды и доводят тем же растворителем до 100,0 мл.

Хлористоводородная кислота 1,5% в спирте 96%

4,3 г хлористоводородной кислоты концентрированной приливают к 90 мл спирта 96% и доводят тем же растворителем до 100,0 мл.

Хлористоводородная кислота 1%

10 мл хлористоводородной кислоты разведённой 10% доводят водой до 100,0 мл.

Хлористоводородная кислота 0,75%

7,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 10% доводят водой до 100,0 мл.

Хлористоводородная кислота 0,5%

5,0 мл хлористоводородной кислоты разведённой 10% доводят водой до 100,0 мл.

Хлористоводородная кислота 0,37%

1,03 г хлористоводородной кислоты концентрированной доводят водой до 100,0 мл.

Хлористоводородная кислота разведённая 0,11%

30 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты доводят водой до 1000,0 мл; рН раствора 1,6±0,1.

Хлористоводородная кислота разведённая 0,037%

Содержит 0,37 г/л НСl.

1,0 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3% доводят водой до 200,0 мл.

Хлористоводородной кислоты раствор 7 М

700 г хлористоводородной кислоты концентрированной приливают к 250 мл воды и доводят тем же растворителем до 1000,0 мл.

Хлористоводородной кислоты раствор 6 М

600 г хлористоводородной кислоты концентрированной приливают к 350 мл воды и доводят тем же растворителем до 1000,0 мл.

Хлористоводородной кислоты раствор 5 М

500 г хлористоводородной кислоты концентрированной приливают к 400 мл воды и доводят тем же растворителем до 1000,0 мл.

Хлористоводородной кислоты раствор 4,8 М

480 г хлористоводородной кислоты концентрированной приливают к 450 мл воды и доводят тем же растворителем до 1000,0 мл.

Хлористоводородной кислоты раствор 4 М

400 г хлористоводородной кислоты концентрированной приливают к 500 мл воды и доводят тем же растворителем до 1000,0 мл.

Хлористоводородной кислоты раствор 3 М

300 г хлористоводородной кислоты концентрированной приливают к 650 мл воды и доводят тем же растворителем до 1000,0 мл.

Хлористоводородной кислоты раствор 2,7 М

270 г хлористоводородной кислоты концентрированной приливают к 700 мл воды и доводят тем же растворителем до 1000,0 мл.

Хлористоводородной кислоты раствор 2 М

200 г хлористоводородной кислоты концентрированной приливают к 750 мл воды и доводят тем же растворителем до 1000,0 мл.

Хлористоводородной кислоты раствор 1 М

100 г хлористоводородной кислоты концентрированной приливают к 850 мл воды и доводят тем же растворителем до 1000,0 мл.

Хлористоводородной кислоты раствор 0,5 М

50 г хлористоводородной кислоты концентрированной приливают к 900 мл воды и доводят тем же растворителем до 1000,0 мл.

Хлористоводородной кислоты раствор 0,3 М

30,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М доводят водой до 100,0 мл.

Используют свежеприготовленным.

Хлористоводородной кислоты раствор 0,2 М

20,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М доводят водой до 100,0 мл.

Используют свежеприготовленным.

Хлористоводородной кислоты раствор 0,12 М

12,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М доводят водой до 100,0 мл.

Используют свежеприготовленным.

Хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М

10,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М доводят водой до 100,0 мл.

Используют свежеприготовленным.

Хлористоводородной кислоты раствор 0,06 М

12,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,5 М доводят водой до 100,0 мл.

Используют свежеприготовленным.

Хлористоводородной кислоты раствор 0,05 М

10,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,5 М доводят водой до 100,0 мл.

Используют свежеприготовленным.

Хлористоводородной кислоты раствор 0,025 М

5,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,5 М доводят водой до 100,0 мл.

Используют свежеприготовленным.

Хлористоводородной кислоты раствор 0,02 М

2,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М доводят водой до 100,0 мл.

Используют свежеприготовленным.

Хлористоводородной кислоты раствор 0,01 М

1,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М доводят водой до 100,0 мл.

Используют свежеприготовленным.

Хлористоводородной кислоты раствор 0,001 М

1,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М доводят водой до 1000,0 мл.

Используют свежеприготовленным.

Хлористоводородной кислоты раствор 7% в метаноле

19,6 г хлористоводородной кислоты концентрированной приливают к 70 мл метанола и доводят тем же растворителем до 100,0 мл.

Хлористоводородной кислоты раствор 1% в спирте 96%

2,8 г хлористоводородной кислоты концентрированной приливают к 90 мл спирта 96% и доводят тем же растворителем до 100,0 мл.

Хлористоводородной кислоты раствор 0,01 М в спирте 96%

5,0 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты доводят спиртом 96% до 500,0 мл.

Хлористоводородная кислота бромированная

К 100 мл хлористоводородной кислоты концентрированной прибавляют 1 мл раствора брома.

Хлористоводородная кислота, свободная от свинца

Должна выдерживать требования для хлористоводородной кислоты концентрированной и следующее дополнительное испытание.

Свинец. Не более 20 ррm.

Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии.

Испытуемый раствор. 200 г хлористоводородной кислоты концентрированной помещают в кварцевый тигель, испаряют почти досуха, к полученному остатку прибавляют 5 мл азотной кислоты, приготовленной дистилляцией азотной кислоты концентрированной при температуре ниже температуры кипения, и выпаривают досуха. Остаток растворяют в 5 мл азотной кислоты, приготовленной дистилляцией азотной кислоты концентрированной при температуре ниже температуры кипения.

Растворы сравнения. Готовят растворы сравнения, используя эталонный раствор свинца (0,1 ррm Рb), разведённый азотной кислотой, приготовленной дистилляцией азотной кислоты концентрированной при температуре ниже температуры кипения.

Измеряют интенсивность эмиссии при длине волны 220,35 нм.

Хлористый метилен. См. Метиленхлорид.

Хлорметилизопропилкарбонат. [35180-01-9]. C5H9ClO3. (М.м. 152,58).

(Пропан-2-ил)(хлорметил)карбонат.

Содержит не менее 98% C5H9ClO3.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

. Около 1,15.

Температура кипения. 147,5 °С.

Хлорная кислота. [7601-90-3]. НСlO4. (М.м. 100,46).

Хлорная кислота.

Содержит около 70% НСlO4 (м/м).

Прозрачная, бесцветная или со слабым жёлтоватым оттенком жидкость.

Легко смешивается с водой.

. Около 1,664.

Хлорная кислота разведённая

8,5 мл хлорной кислоты помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Хлорной кислоты раствор 50%

К 20 мл воды прибавляют 50 мл хлорной кислоты и перемешивают.

Хлорной кислоты раствор 25%

К 45 мл воды прибавляют 25 мл хлорной кислоты и перемешивают.

Хлорной кислоты раствор 4 М

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 345 мл хлорной кислоты и доводят объём раствора водой очищенной до метки.

Хлорной кислоты раствор 0,5 М.

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 43 мл хлорной кислоты и доводят объём раствора водой очищенной до метки.

Хлорной кислоты раствор 0,1 М.

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20,0 мл хлорной кислоты раствора 0,5 М и доводят объём раствора водой очищенной до метки.

Хлорной кислоты раствор 0,15 М.

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,3 мл хлорной кислоты и доводят объём раствора водой очищенной до метки.

Хлорной кислоты раствор 0,015 М.

В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл хлорной кислоты раствора 0,15 М и доводят объём раствора водой очищенной до метки.

2-Хлор-4-нитроанилин. [121-87-9]. C6H5ClN2O2. (М.м. 172,57).

4-Нитро-2-хлоранилин.

Кристаллический порошок жёлтого цвета. Легко растворим в метаноле.

Температура плавления. Около 107 °С.

Хранят в защищённом от света месте.

4-Хлор-7-нитробензофуразан. [10199-89-0]. C6H2ClN3O3. (М.м. 199,55).

Порошок от бледно-жёлтого до тёмно-жёлтого цвета.

Хлорогеновая кислота. [327-97-9]. С16Н18О9. (М.м. 354,31).

(1S,3R,4R,5R)-1,4,5-Тригидрокси-3-{[3-(3,4-дигидроксифенил)проп-2-еноил]окси}циклогексанкарбоновая кислота.

Кристаллический порошок белого цвета.

Растворима в воде, ацетоне и этаноле.

Температура плавления. Около 208 °С.

. Около –35,2°.

Хлороформ. [67-66-3]. СНСl3. (М.м. 119,38).

Трихлорметан.

Прозрачная, бесцветная тяжелая подвижная жидкость с характерным запахом.

Мало растворим в воде, смешивается со спиртом 96%.

. От 1,475 до 1,481.

Температура кипения. Около 60 °С.

Хлороформ содержит от 0,4% (м/м) до 1,0% (м/м) этанола.

Хлороформ безводный.

К 1 л хлороформа прибавляют 100 г кальция хлорида безводного, энергично взбалтывают и оставляют на 24 ч. Прозрачную жидкость сливают в сухую склянку с притертой пробкой.

Хлороформ подкисленный.

К 100 мл хлороформа прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, встряхивают и отстаивают до разделения на 2 слоя.

Хлороформ, свободный от этанола.

[upperroman] . Промывают 200 мл хлороформа, встряхивая с 4 порциями воды по 100 мл каждая. Сушат над 20 г натрия сульфата безводного в течение 24 ч и фильтруют. Фильтрат перегоняют над 10 г натрия сульфата безводного, отбрасывая первые 20 мл отгона. . В течение 3 мин взбалтывают 20 мл хлороформа с 20 мл воды, хлороформный слой отделяют и промывают 2 порциями воды по 20 мл каждая. Фильтруют через сухой фильтр, смешивают с 5 г безводного натрия сульфата, оставляют на 2 ч и фильтруют.

Готовят непосредственно перед использованием.

Хлороформ, стабилизированный амиленом.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Мало растворим в воде, смешивается со спиртом 96%.

Вода. Не более 0,05%.

Остаток после выпаривания. Не более 0,001%.

Минимальное пропускание. Не менее 50% при длине волны 255 нм; не менее 80% при длине волны 260 нм; не менее 98% при длине волны 300 нм.

Определение проводят, используя в качестве раствора сравнения воду.

Количественное определение. Не менее 99,8% СНСl3. Определение проводят методом газовой хроматографии.

5-Хлорпиридин-2-амин. [1072-98-6]. C5H5ClN2. (М.м. 128,56).

5-Хлорпиридин-2-амин.

Содержит не менее 97,5% C5H5ClN2.

От белого до бледно-коричневого кристаллический порошок.

Температура плавления. От 135 до 138 °С.

Хлорпирифос. [2921-88-2]. C9H11Cl3NO3PS. (М.м. 350,59).

O-(3,5,6-Трихлорпиридин-2-ил)-O,O-диэтилтиофосфат.

Температура кипения. Около 200 °С.

Температура плавления. От 42 до 44 °С.

Хлорплатиновая кислота. [18497-13-7]. Н2[PtСl6]·6H2O. (М.м. 517,9).

Гексахлорплатиновая(IV) кислота, гексагидрат.

Содержит не менее 37,0% (м/м) Pt. (А.м. 195,1).

Кристаллы или кристаллическая масса коричневато-красного цвета.

Очень легко растворима в воде, растворима в спирте 96%.

Количественное определение. 0,200 г хлорплатиновой кислоты прокаливают при температуре 900 °С до постоянной массы и взвешивают остаток (платина).

Хранят в защищённом от света месте.

3-Хлорпропан-1,2-диол. [96-24-2]. С3Н7СlO2. (М.м. 110,54).

3-Хлорпропан-1,2-диол.

Бесцветная жидкость.

Растворим в воде, спирте 96% и эфире.

. Около 1,322.

. Около 1,480.

Температура кипения. Около 213 °С.

5-Хлорсалициловая кислота. [321-14-2]. С7Н5СlO3. (М.м. 172,57).

2-Гидрокси-5-хлорбензойная кислота.

Кристаллический порошок белого или почти белого цвета.

Растворима в метаноле.

Температура плавления. Около 173 °С.

Хлортриметилсилан. [75-77-4]. С3Н9СlSi. (М.м. 108,64).

Триметилхлорсилан.

Прозрачная, бесцветная жидкость, дымящая на воздухе.

. Около 0,86.

. Около 1,388.

Температура кипения. Около 57 °С.

Хлоруксусная кислота. [79-11-8]. С2Н3СlО2. (М.м. 94,50).

Хлоруксусная кислота.

Бесцветные или белого цвета кристаллы, расплывающиеся на воздухе.

Очень легко растворима в воде, растворима в спирте 96% и эфире.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

2-[(4-Хлорфенил)ацетил]бензойная кислота

[53242-76-5]. C15H11ClO3. (М.м. 274,70).

Хлорфенол. [106-48-9]. С6Н5СlО. (М.м. 128,56).

4-Хлорфенол.

Бесцветные или почти бесцветные кристаллы.

Мало растворим в воде, очень легко растворим в спирте 96%, эфире и растворах гидроксидов щелочных металлов.

Температура плавления. Около 42 °С.

2-Хлорэтанол. [107-07-3]. С2Н5СlО. (М.м. 80,51).

2-Хлорэтан-1-ол.

Бесцветная жидкость.

Растворим в спирте 96%.

. Около 1,197.

. Около 1,442.

Температура кипения. Около 130 °С.

Температура плавления. Около–89 °С.

2-Хлорэтанола раствор.

125 мг 2-хлорэтанола растворяют в 2-пропаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до 50 мл. 5 мл полученного раствора доводят 2-пропанолом до 50,0 мл.

2-Хлорэтиламина гидрохлорид. [870-24-6]. C2H6ClN·HCl. (М.м. 115,99).

2-Хлорэтан-1-амина гидрохлорид.

Кристаллический порошок белого цвета.

Содержит не менее 98% C2H6ClN·HCl.

Температура плавления. От 143 до 148 °С.

(2-Хлорэтил)диэтиламина гидрохлорид. [869-24-9]. С6Н14СlN·HCl. (М.м. 172,10).

2-Хлор-N,N-диэтилэтан-1-амина гидрохлорид.

Кристаллический порошок белого цвета.

Очень легко растворим в воде и метаноле, легко растворим в метиленхлориде, практически нерастворим в гексане.

Температура плавления. Около 211 °С.

Холина альфосцерат. См. L-α-Глицерофосфорилхолин.

Холина глицерофосфат. См. L-α-Глицерофосфорилхолин.

Холина хлорид. [67-48-1]. С5Н14СlNО. (М.м. 139,62).

2-Гидрокси-N,N,N-триметилэтанаминий хлорид.

Бесцветные кристаллы, расплывающиеся на воздухе.

Очень легко растворим в воде и спирте 96%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Хрома(III) трихлорид гексагидрат. [10060-12-5]. CrCl3·6H2O. (М.м. 266,45).

Хлорид хрома(III), гексагидрат.

Кристаллический порошок тёмно-зеленого цвета, гигроскопичен.

Легко растворим в воде и спирте 96%.

Хранят в сухом месте, защищая от действия окислителей.

Хрома(VI) оксид. [1333-82-0]. CrO3. (М.м. 99,99).

Оксид хрома(VI).

Игольчатые кристаллы или гранулы тёмного коричневато-красного цвета, расплывающиеся на воздухе.

Очень легко растворим в воде.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Хрома(VI) оксида насыщенный раствор.

В 50 мл воды растворяют хрома(VI) оксид до появления твёрдого осадка. Срок годности – 1 месяц.

Хромазурол S. [1667-99-8]. C23H13Cl2Na3O9S. (М.м. 605,3).

2-Гидрокси-5-[(2,6-дихлор-3-сульфонатофенил)(3-карбоксилато-5-метил-4-оксоциклогекса-2,5-диен-1-илиден)метил]-3-метилбензоат тринатрия.

Порошок коричневато-черного цвета.

Растворим в воде, мало растворим в спирте 96%.

Хромазурол S раствор 1%

1 г хромазурола S растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Хрома–калия сульфат. [7788-99-0]. CrK(SO4)2·12H2O. (М.м. 499,4).

Дисульфат калия–хрома(III), додекагидрат.

Крупные кристаллы от фиолетово-красного до черного цвета.

Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Хромовая кислота. [7738-94-5]. H2CrO4. (М.м. 118,01). Хромовая кислота.

40 г хромового ангидрида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Хромовая смесь.

Насыщенный раствор хрома(VI) оксида в серной кислоте концентрированной.

Хромовый тёмно-синий. [1058-92-0]. С16Н9СlN2Na2O9S2. (М.м. 518,8).

4,5-Дигидрокси-3-[(2-гидрокси-5-хлорфенил)диазенил]нафталин-2,7-дисульфонат динатрия.

Порошок тёмно-коричневого или черного цвета.

Легко растворим в воде.

0,05% раствор вишнево-красного цвета. В интервале рН 9,5–10,0 имеет сине-фиолетовую окраску, его комплексы с ионами кальция, магния и цинка в тех же условиях красного цвета.

Переход окраски при прямом титровании от красной к сине-фиолетовой.

Индикаторная смесь.

0,25 г хромового тёмно-синего и 25 г натрия хлорида растирают в ступке и перемешивают.

Хромового тёмно-синего раствор.

0,5 г хромового тёмно-синего растворяют в 10 мл аммиачного буферного раствора и доводят объём раствора спиртом 96% до 100,0 мл.

Срок годности – 1 мес.

Хромотроп II B. [548-80-1]. С16Н9N3Na2O10S2. (М.м. 513,4).

4,5-Дигидрокси-3-[(4-нитрофенил)диазенил]нафталин-2,7-дисульфонат динатрия.

Порошок красновато-коричневого цвета.

Растворим в воде с образованием жёлтовато-красного раствора, практически нерастворим в спирте 96%.

Хромотроп II B раствор 0,005%.

Раствор 50 мг хромотропа II B в 1 л серной кислоты концентрированной.

Хромотроповая кислота. [148-25-4]. С10Н8O8S2. (М.м. 320,30).

4,5-Дигидроксинафталин-2,7-дисульфоновая кислота.

Игольчатые кристаллы белого цвета.

Растворима в воде, очень мало растворима в спирте 96% и эфире.

Температура плавления. Около 300 °С.

Хромотроповой кислоты раствор 0,5%.

0,50 г хромотроповой кислоты растворяют примерно в 80 мл воды и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Срок годности – 24 ч.

Хромотроповой кислоты натриевая соль. [5808-22-0]. С10Н6Na2O8S2·2H2O.

(М.м. 400,3).

4,5-Дигидроксинафталин-2,7-дисульфонат динатрия, дигидрат.

Порошок жёлтовато-белого цвета.

Растворима в воде, практически нерастворима в спирте 96%.

Хромотроповой кислоты натриевая соль безводная. [129-96-4]. С10Н6Na2O8S2. (М.м. 364,26).

4,5-Дигидроксинафталин-2,7-дисульфонат динатрия.

Порошок серовато-белого цвета.

Хромотроповой кислоты натриевой соли раствор 2,0%

2,0 г хромотроповой кислоты натриевой соли растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Хромотроповой кислоты натриевой соли раствор 1,0% сернокислый

1,0 г хромотроповой кислоты натриевой соли растворяют в серной кислоте концентрированной и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Хромотроповой кислоты натриевой соли раствор 0,1%

0,1 г хромотроповой кислоты натриевой соли растворяют в серной кислоте концентрированной и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Цезия хлорид. [7647-17-8]. СsCl. (М.м. 168,36).

Хлорид цезия.

Порошок белого цвета.

Очень легко растворим в воде, легко растворим в метаноле, практически нерастворим в ацетоне.

Цезия хлорида раствор 0,15 М

25,34 г цезия хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000 мл.

Целлюлоза для хроматографии (1). [9004-34-6].

Гомогенный порошок белого цвета со средним размером частиц менее 30 мкм.

Приготовление хроматографической пластинки. 15% суспензию целлюлозы в воде гомогенизируют в электрическом миксере в течение 60 с и наносят на тщательно очищенные пластины слоем толщиной 0,1 мм с помощью устройства для нанесения покрытий. Сушат на воздухе.

Целлюлоза для хроматографии (2).

Микрокристаллическая целлюлоза. Гомогенный порошок белого цвета со средним размером частиц менее 30 мкм.

Приготовление хроматографической пластинки.

25% суспензию целлюлозы в воде гомогенизируют в электрическом миксере в течение 60 с и наносят на тщательно очищенные пластины слоем толщиной 0,1 мм с помощью устройства для нанесения покрытий. Сушат на воздухе.

Целлюлоза для хроматографии F254.

Микрокристаллическая целлюлоза F254. Гомогенный порошок белого цвета со средним размером частиц менее 30 мкм, содержащий флуоресцентный индикатор с оптимальной интенсивностью поглощения при длине волны 254 нм.

Приготовление хроматографической пластинки.

25% суспензию целлюлозы в воде гомогенизируют в электрическом миксере в течение 60 с и наносят на тщательно очищенные пластины слоем толщиной 0,1 мм с помощью устройства для нанесения покрытий. Сушат на воздухе.

Целлюлоза-ДЭАЭ для тонкослойной хроматографии.

Поперечно-сшитая целлюлоза с замещёнными диэтиламиноэтильными группами в виде шарообразных гранул.

Приготовление хроматографической пластинки. 15–25% суспензию целлюлозы-ДЭАЭ в воде гомогенизируют в электрическом миксере в течение 60 с и наносят на тщательно очищенные пластины слоем толщиной 0,1 мм с помощью устройства для нанесения покрытий. Сушат на воздухе.

Церия(III) нитрат. [10294-41-4]. Се(NО3)3·6Н2О. (М.м. 434,2).

Нитрат церия(III), гексагидрат.

Кристаллический порошок от бесцветного до слабо-жёлтого цвета.

Легко растворим в воде и спирте 96%.

Церия–аммония сульфат. См. Аммония–церия(IV) сульфат.

Церия(IV) сульфат. [10294-42-5]. Се(SО4)2·4Н2О. (М.м. 404,3).

Сульфат церия(IV), тетрагидрат.

Кристаллический порошок или кристаллы жёлтого или оранжево-жёлтого цвета.

Очень мало растворим в воде, медленно растворим в разведённых растворах неорганических кислот.

Церия(IV) сульфата раствор 0,1 М.

4,04 г церия(IV) сульфата растворяют в 80 мл воды и доводят объём раствора свежепрокипяченной и охлажденной водой до 100,0 мл.

Церия(IV) сульфата кислый раствор 0,01 М.

0,404 г церия(IV) сульфата растворяют в 50 мл серной кислоты разведённой 16% и доводят объём раствора свежепрокипяченной и охлажденной водой до 100,0 мл.

Цетилпиридиния хлорид моногидрат. [6004-24-6]. C21H38ClN·H2O. (М.м. 358,00).

1-Гексадецилпиридиния хлорид моногидрат.

Белый или почти белый порошок.

Легко растворим в воде и спирте 96%.

Температура плавления. От 80 °С до 83 °С.

Цетилпиридиния хлорида раствор 5%

5,0 г цетилпиридиния хлорида моногидрата растворяют примерно в 80 мл воды и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Цетилтриметиламмония бромид. [57-09-0]. С19Н42BrN. (М.м. 364,45).

N,N,N-Триметилгексадекан-1-аминий бромид.

Кристаллический порошок белого цвета.

Растворим воде, легко растворим в спирте 96%.

Температура плавления. Около 240 °С.

Цетилтриметиламмония гидроксид. [505-86-2]. C19H43NO. (М.м. 301,55).

N,N,N-Триметилгексадекан-1-аминий гидроксид.

Прозрачная, бесцветная или бледно-жёлтая жидкость.

. Около 1,372.

Цетилтриметиламмония гидроксида раствор 10%.

10,0 г цетилтриметиламмония гидроксида растворяют примерно в 80 мл воды и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Цефалина дигидрохлорид. [5853-29-2]. C28Н38N2O4·2HCl. (М.м. 539,53).

(1R)-1-{[(2S,3R,11bS)-9,10-Диметокси-3-этил-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метил}-7-метокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ола дигидрохлорид.

Кристаллический порошок от белого до жёлтоватого цвета. Легко растворим в воде, растворим в ацетоне и спирте 96%.

. Около + 25° (2% раствор).

Цианобромида раствор.

К бромной воде прибавляют по каплям при охлаждении 0,1 М раствор аммония тиоцианата до исчезновения жёлтой окраски.

Готовят непосредственно перед использованием.

Цианогуанидин. [461-58-5]. С2Н4N4. (М.м. 84,08).

N-Цианогуанидин.

Кристаллический порошок белого цвета.

Умеренно растворим в воде и спирте 96%, практически нерастворим в эфире и метиленхлориде.

Температура плавления. Около 210 °С.

Цианоуксуcная кислота. [372-09-8]. С3Н3NO2. (М.м. 85,06).

Цианоуксуcная кислота.

Гигроскопичные кристаллы белого или жёлтовато-белого цвета.

Растворима в воде.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Циклобутан-1,1-дикарбновая кислота. [5445-51-2]. C6H8O4. (М.м. 144,13).

Циклобутан-1,1-дикарбновая кислота.

Содержит не менее 99% C6H8O4.

Хорошо растворима в воде.

Температура плавления. Около 158 °С.

Циклогексан. [110-82-7]. С6Н12. (М.м. 84,16).

Циклогексан.

Прозрачная, бесцветная, воспламеняющаяся жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается с органическими растворителями.

. Около 0,78.

Температура кипения. Около 80,5 °С.

Циклогексан, используемый в спектрофотометрии, должен выдерживать следующее дополнительное испытание.

Минимальное пропускание. 45% при длине волны 220 нм; 70% при длине волны 235 нм; 90% при длине волны 240 нм; 98% при длине волны 250 нм.

Определение проводят, используя в качестве раствора сравнения воду.

Циклогексан особой чистоты.

Должен выдерживать требования для циклогексана и следующее дополнительное испытание.

Интенсивность поглощения, измеренная при длине волны 460 нм (при облучении пучком света с длиной волны 365 нм), не должна быть интенсивнее поглощения раствора 0,002 ррm хинина в 0,05 М растворе серной кислоты.

Циклогексанол. [108-93-0]. С6Н12O. (М.м. 100,16).

Бесцветные кристаллы.

Температура плавления. Около 25 °С.

Растворим в воде, ацетоне, хлороформе, этаноле, эфире.

Циклогексиламин. [108-91-8]. С6Н13N. (М.м. 99,17).

Циклогексанамин.

Бесцветная жидкость.

Растворим в воде, смешивается с наиболее распространенными растворителями.

. Около 1,460.

Температура кипения. От 134 до 135 °С.

Циклогексилендинитрилтетрауксусная кислота. [125572-95-4]. С14Н22N2О8·Н2О. (М.м. 364,35).

2,2',2'',2'''-[_rac_-(1R,2R)-Циклогексан-1,2-диилди(нитрило)]тетрауксусная кислота, моногидрат.

Кристаллический порошок белого цвета.

Температура плавления. Около 204 °С.

Циклогексилметанол. [100-49-2]. C7H14O. (М.м. 114,19).

Циклогексилметанол.

Бесцветная жидкость со слабым запахом камфоры, растворим в этаноле.

. Около 1,464

Температура кипения. Около 185 °С.

3-Циклогексилпропионовая кислота. [701-97-3]. С9Н16О2. (М.м. 156,22).

3-Циклогексилпропановая кислота.

Бесцветная жидкость.

. Около 0,998.

. Около 1,4648.

Температура кипения. Около 130 °С.

Циммермана–Рейнгардта раствор.

70 г марганца(II) сульфата растворяют в 400–500 мл воды, прибавляют 125–130 мл серной кислоты, 125–160 мл фосфорной кислоты концентрированной и разбавляют водой до 1 л.

Срок годности – 3 года.

Цинеол. [470-82-6]. С10Н18О. (М.м. 154,25).

1-Метил-4-(пропан-2-ил)-7-оксабицикло[2.2.1]гептан.

Бесцветная жидкость.

Практически нерастворим в воде, смешивается с этанолом и эфиром.

. От 0,922 до 0,927.

. От 1,456 до 1,459.

Температура затвердевания. От 0 до 1 °С.

Температурные пределы перегонки. От 174 до 177 °С.

Цинк. [7440-66-6]. Zn. (А.м. 65,38).

Цинк.

Содержит не менее 99,5% Zn.

Цилиндры или гранулы, или шарики серебристо-белого цвета, или стружка с синим блеском.

Цинк активированный.

Цинк в виде цилиндров или шариков помещают в коническую колбу, прибавляют достаточное количество раствора хлорплатиновой кислоты (50 ррm), чтобы полностью покрыть металл, через 10 мин металл промывают водой, удаляют воду и немедленно сушат.

Цинка ацетат. [5970-45-6]. С4Н6О4Zn∙2H2O. (М.м. 219,51).

Ацетат цинка, дигидрат.

Блестящие кристаллы белого цвета, слегка выветривающиеся на воздухе. Легко растворим в воде, растворим в спирте 96%.

При температуре 100 °С теряет кристаллизационную воду.

. Около 1,735.

Температура плавления. Около 237 °С.

Цинка ацетата раствор.

54,9 г цинка ацетата растворяют при перемешивании в смеси 600 мл воды и 150 мл уксусной кислоты ледяной. При перемешивании прибавляют 150 мл раствора аммиака концентрированного 32%, охлаждают до комнатной температуры и доводят рН до 6,4 25% раствором аммиака, доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Цинка оксид. [1314-13-2]. ZnO. (М.м. 81,38).

Оксид цинка.

Белый или белый с жёлтоватым оттенком аморфный порошок. Поглощает диоксид углерода из воздуха.

Практически нерастворим в воде, спирте 96 %; реагирует с неорганическими кислотами, разведёнными растворами гидроксидов щелочных металлов.

Цинка порошок

Содержит не менее 90,0% Zn. (А.м. 65,38).

Очень мелкий порошок серого цвета.

Растворим в хлористоводородной кислоте разведённой 7,3%.

Цинка сульфат. [7446-20-0]. ZnSO4·7H2O. (М.м. 287,55).

Сульфат цинка, гептагидрат.

Бесцветные прозрачные кристаллы или мелкокристаллический порошок. На воздухе выветривается.

Очень легко растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96%.

Цинка сульфата раствор 1%.

1,0 г цинка сульфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Цинка сульфата раствор 0,45%.

0,45 г цинка сульфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Цинка хлорид. [7646-85-7]. ZnCl2. (М.м. 136,29).

Хлорид цинка.

Белый кристаллический порошок или белые брусочки.

Очень легко растворим в воде, растворим в спирте 96% и глицерине.

Цинка хлорида раствор в муравьиной кислоте.

20 г цинка хлорида растворяют в 80 г 85% раствора муравьиной кислоты безводной.

Цинка хлорида раствор йодированный.

20 г цинка хлорида и 6,5 г калия йодида растворяют в 10,5 мл воды, прибавляют 0,5 г йода и встряхивают в течение 15 мин. Если необходимо, фильтруют.

Хранят в защищённом от света месте.

Цинковая пыль. См. Цинка порошок.

Цинхонидин. [485-71-2]. С19Н22N2O. (М.м. 294,39).

(R)-(Хинолин-4-ил)[(1S,2S,4S,5R)-5-этенил-1-азабицикло[2.2.2]октан-2-ил]метанол.

Кристаллический порошок белого цвета.

Очень мало растворим в воде и петролейном эфире, умеренно растворим в спирте 96%, мало растворим в эфире.

. От –105° до –110° (5% раствор в спирте 96%).

Температура плавления. Около 208 °С с разложением.

Хранят в защищённом от света месте.

Цинхонин. [118-10-5]. С19Н22N2O. (М.м. 294,39).

(S)-(Хинолин-4-ил)[(1S,2S,4S,5R)-5-этенил-1-азабицикло[2.2.2]октан-2-ил]метанол.

Кристаллический порошок белого цвета.

Мало растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96% и метаноле, мало растворим в эфире.

. От +225° до +230° (5% раствор в спирте 96%).

Температура плавления. Около 263 °С.

Хранят в защищённом от света месте.

Цирконила нитрат. [14985-18-3]. ZrO(NO3)2∙2H2O. (М.м. 231,23 безводный).

Динитрат оксидоциркония(IV), гидрат.

Кристаллический порошок или кристаллы белого цвета. Гигроскопичен.

Растворим в воде. Водный раствор прозрачный или слегка опалесцирующий.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Цирконила нитрата раствор 0,1%.

Раствор 1 г/л в смеси растворителей вода–хлористоводородная кислота концентрированная 40:60.

Цирконила хлорид. [15461-27-5]. ZrOCl2∙xH2O. (М.м. 178,13 безводный).

Дихлорид оксидоциркония(IV), гидрат.

Кристаллический порошок или кристаллы белого или почти белого цвета. Легко растворим в воде и спирте 96%.

Цирконила хлорид октагидрат. [13520-92-8]. ZrСl2O∙8H2O. (М.м. 322,25).

Дихлорид оксидоциркония(IV), октагидрат.

Содержит не менее 96,0% ZrСl2O∙8H2O.

Кристаллический порошок или кристаллы белого или почти белого цвета. Легко растворим в воде и спирте 96%.

L-Цистеин. [52-90-4]. C3H7NO2S. (М.м. 121,16).

(2R)-2-Амино-3-сульфанилпропановая кислота.

Белый кристаллический порошок.

Легко растворим в воде, спирте 96% и кислоте уксусной, практически нерастворим в ацетоне.

. Около 6,5° (10% раствор в 1 М растворе хлористоводородной кислоты).

L-Цистеина гидрохлорид моногидрат. [7048-04-6]. C3H7NO2S·HCl·H2O. (М.м. 175,63).

(2R)-2-Амино-3-сульфанилпропановой кислоты гидрохлорид моногидрат.

Содержит не менее 98% C3H7NO2S·HCl·H2O.

Белый кристаллический порошок.

Легко растворим в воде.

. Около 6,5° (10% раствор в 1 М растворе хлористоводородной кислоты).

L-Цистин. [56-89-3]. C6H12N2O4S2. (М.м. 240,30).

(2R,2'R)-3,3'-Дисульфандиилбис(2-аминопропановая кислота).

Кристаллический порошок белого цвета. Разлагается при температуре 250 °С.

Практически нерастворим в воде и спирте 96%, растворяется в разведённых растворах гидроксидов щелочных металлов.

. От –218° до –224° (1 М раствор хлористоводородной кислоты).

Цитраль. [5392-40-5]. С10Н16О. (М.м. 152,23).

(2ZE)-3,7-Диметилокта-2,6-диеналь.

Жидкость светло-жёлтого цвета.

Практически нерастворима в воде, смешивается со спиртом 96%, эфиром и глицерином.

Цитроптен. [487-06-9]. С11Н10О4. (М.м. 206,19).

5,7-Диметокси-2H-1-бензопиран-2-он.

Игольчатые кристаллы.

Практически нерастворим в воде, эфире и петролейном эфире, легко растворим в ацетоне и спирте 96%.

Температура плавления. Около 145 °С.

Черной туши раствор.

Жидкую черную тушь разводят водой в соотношении 1:10.

Щавелевая кислота. См. Щавелевая кислота дигидрат.

Щавелевая кислота безводная. [144-62-7]. C2H2O4. (М.м. 90,03).

Щавелевая кислота.

Содержит не менее 98% C2H2O4.

Кристаллы белого цвета.

Легко растворима в воде.

Температура плавления. Около 185 °С (разл.).

Щавелевая кислота дигидрат. [6153-56-6]. C2H2O4·2Н2О. (М.м. 126,07).

Щавелевая кислота, дигидрат.

Содержит не менее 98% C2H2O4·2Н2О.

Кристаллы белого цвета.

Растворима в воде, легко растворима в спирте 96%.

Температура плавления. От 104 до 106 °С.

Щавелевой кислоты раствор 5%

5 г щавелевой кислоты дигидрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Щавелевой кислоты раствор 2% в этаноле

2 г щавелевой кислоты дигидрата растворяют в этаноле и доводят объём раствора этанолом до 100 мл.

Щавелевой кислоты раствор 0,5 М

6,3 г щавелевой кислоты дигидрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Щавелевой кислоты раствор 0,1 М

1,26 г щавелевой кислоты дигидрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100 мл.

Щавелевой кислоты раствор в серной кислоте

5 г щавелевой кислоты дигидрата растворяют в охлажденной смеси 75 мл воды и 50 мл серной кислоты концентрированной.

Щёлочно-аммиачный раствор. 50,0 г натрия гидроксида растворяют при перемешивании в 870 мл воды. После охлаждения к раствору прибавляют 80 мл аммиака водного и доводят объём раствора водой до метки.

Срок годности – 1 сут.

Эвгенол. [97-53-0]. С10Н12О2. (М.м. 164,20).

2-Метокси-4-(проп-2-ен-1-ил)фенол.

Бесцветная или бледно-жёлтого цвета маслянистая жидкость; под действием воздуха и света темнеет и становится более вязкой.

Практически нерастворим в воде, смешивается со спиртом 96%, эфиром и жирными и эфирными маслами.

. Около 1,07.

Температура кипения. Около 250 °С.

Хроматографическая чистота эвгенола, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 98,0%.

Хранят в защищённом от света месте.

ЭДТА. См. (Этилендинитрил)тетрауксусная кислота.

Эйконоген. [5639-34-9]. С10Н9NO4S. (М.м. 239,25).

61-Амино-5-гидроксинафталин-2-сульфоновая кислота.

Бесцветные кристаллы. Растворим в воде.

Эмодин. [518-82-1]. С15Н10О5. (М.м. 270,24).

1,3,8-Тригидрокси-6-метилантрацен-9,10-дион.

Игольчатые кристаллы оранжево-красного цвета.

Практически нерастворим в воде, мало растворим в эфире, растворим в спирте 96% и растворах гидроксидов щелочных металлов.

Эндопротеиназа Glu-C из S. aureus V8, тип XVII-B. [66676-43-5]. EC 3.4.21.19.

Микробный внеклеточный протеолитический фермент. Лиофилизированный порошок, содержащий от 500 до 1000 единиц на миллиграмм сухого вещества.

Эозин натрий водорастворимый. См. Эозин Н.

Эозин Н. [17372-87-1]. C20H6Br4Na2O5. (М.м. 691,9).

2-(2,4,5,7-Тетрабром-6-оксидо-3-оксо-3H-ксантен-9-ил)бензоат динатрия.

Порошок красного или коричневого цвета.

Легко растворим в воде.

Растворы индикатора. 0,1% раствор, 0,5% раствор.

Эриохром чёрный Т. [1787-61-7]. С20Н12N3NaO7S. (М.м. 461,4).

3-Гидрокси-4-[(1-гидроксинафталин-2-ил)диазенил]-7-нитронафталин-1-сульфонат натрия.

Порошок коричневато-черного цвета.

Растворим в спирте 96%, мало растворим в воде. Ядовит.

В интервале рН 9,5–10,0 имеет синюю окраску, а его комплексы с ионами кальция, магния и цинка в тех же условиях красно-фиолетового цвета.

Переход окраски при прямом титровании от красно-фиолетовой к синей.

Эриохрома чёрного Т индикаторная смесь.

0,25 г эриохрома чёрного Т и 25 г натрия хлорида растирают в ступке и перемешивают.

Испытание на чувствительность. 50 мг эриохрома чёрного Т индикаторной смеси растворяют в 100 мл воды; появляется коричневато-фиолетовое окрашивание, которое должно перейти в синее при прибавлении 0,3 мл аммиака раствора 10%. При последующем прибавлении 0,1 мл магния сульфата раствора 1% окраска должна измениться на фиолетовую.

Раствор индикатора. Эриохрома чёрного Т индикаторной смеси раствор 0,2% в спирте 95%.

20 мг эриохрома чёрного Т индикаторной смеси растворяют в 10 мл спирта 95%.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке, в защищённом от света месте.

Эриохрома чёрного Т раствор в метаноле.

0,2 г эриохрома чёрного Т растворяют в 100 мл метанола.

Эритритол. [149-32-6]. С4Н10О4. (М.м. 122,12).

(2R,3S)-Бутан-1,2,3,4-тетраол.

Бесцветные кристаллы в виде тетрагональных призм.

Очень легко растворим в воде, растворим в пиридине, мало растворим в спирте 96%.

Температура плавления. Около 121,5 °С.

Эрукамид. [112-84-5]. С22Н43NO. (М.м. 337,58).

(13Z)-Докоз-13-енамид.

Порошок или гранулы жёлтоватого или белого цвета.

Практически нерастворим в воде, очень легко растворим в метиленхлориде, растворим в этаноле.

Температура плавления. Около 70 °С.

Эскулин. [531-75-9]. С15Н16O9∙xН2О. (М.м. 340,28 для безводного).

7-Гидрокси-6-(β-D-глюкопиранозилокси)-2H-1-бензопиран-2-он, гидрат.

Порошок белого или почти белого цвета или бесцветные кристаллы.

Умеренно растворим в воде и спирте 96%, легко растворим в горячей воде и горячем спирте 96%.

Эстрагол. [140-67-0]. С10Н12О. (М.м. 148,20).

1-Метокси-4-(проп-2-ен-1-ил)бензол.

Маслянистая жидкость.

Смешивается со спиртом 96%.

. Около 1,52.

Температура кипения. Около 216 °С.

Хроматографическая чистота эстрагола, используемого в газовой хроматографии, должна быть не менее 98,0%.

17α-Эстрадиол. [57-91-0]. С18Н24О2. (М.м. 272,38).

Эстра-1,3,5(10)-триен-3,17α-диол.

Кристаллический порошок белого или почти белого цвета или бесцветные кристаллы.

Практически нерастворим в воде, растворим в бензоле, умеренно растворим в спирте 96%, мало растворим в эфире.

Температура плавления. От 178 до 179 °С.

Эсцин. [6805-41-0].

Смесь родственных сапонинов, полученных из семян Aesculus hippocastanum L.

Очень мелкий аморфный порошок почти белого или слегка красноватого или жёлтоватого цвета.

Этанол. [64-17-5]. С2Н6О. (М.м. 46,07).

Этанол.

Спирт этиловый абсолютированный.

Бесцветная, прозрачная, летучая, воспламеняющаяся жидкость. Гигроскопичен.

Смешивается с водой и метиленхлоридом.

Горит голубоватым бесцветным пламенем.

Содержание этилового спирта не менее 99,8% по объёму.

Хранят в стеклянных банках с притертыми пробками.

Этанол 95%. См. Спирт 95%.

Этанол 96%. См. Спирт 96%.

Этанол безводный. См. Этанол.

Этаноламин. [141-43-5]. С2Н7NO. (М.м. 61,08).

2-Аминоэтан-1-ол.

Прозрачная, бесцветная, вязкая, гигроскопичная жидкость.

Смешивается с водой и метанолом, умеренно растворим в эфире.

. Около 1,04.

. Около 1,454.

Температура плавления. Около 11 °С.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке.

Этил 5-бромвалерат. [14660-52-7]. С7Н13BrO2. (М.м. 209,08).

Этил 5-бромвалерат.

Бесцветная или светло-жёлтая жидкость.

. От 1,457 до 1,460.

Этилакрилат. [140-88-5]. С5Н8O2. (М.м. 100,12).

Этил(проп-2-еноат).

Бесцветная жидкость.

Очень мало растворим в воде, смешивается с этанолом и эфиром.

. Около 0,924.

. Около 1,406.

Температура плавления. Около –71 °С.

Температура кипения. Около 99 °С.

Этиламин. [75-04-7]. C2H7N. (М.м. 45,08).

Этанамин.

Температура плавления. Около –81 °С.

Температура кипения. Около 16 °С.

Этиламин водный.

Раствор этанамина в воде, содержит от 66 до 72% этанамина.

Прозрачная жидкость с характерным запахом.

. Около 0,81.

Этиламина гидрохлорид. [557-66-4]. C2H7N·HCl. (М.м. 81,54).

Этанамина гидрохлорид.

Белые гигроскопичные кристаллы или порошок.

Содержит не менее 98,0% C2H7N·HCl.

Температура плавления. От 107 до 108 °С.

Этилацетат. [141-78-6]. С4Н8O2. (М.м. 88,11).

Этилацетат.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Растворим в воде, смешивается со спиртом 96%.

. От 0,901 до 0,904.

Температура кипения. От 76 до 78 °С.

Этилацетат обработанный.

200 г сульфаминовой кислоты диспергируют в этилацетате и доводят тем же растворителем до 1000,0 мл. Полученную суспензию перемешивают в течение 3 сут. и фильтруют через бумажный фильтр.

Срок годности 1 мес.

Этилбензоат. [93-89-0]. C9H10O2. (М.м. 150,17).

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Практически нерастворима в воде, смешивается со спиртом 96% и петролейным эфиром.

. Около 1,050.

. Около 1,506.

Температура кипения. От 211 °C до 213 °C.

Этилбензол. [100-41-4]. С8Н10. (М.м. 106,17).

Этилбензол.

Содержит не менее 99,5% (м/м) С8Н10.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Практически нерастворим в воде, растворим в ацетоне и спирте 96%.

. Около 0,87.

. Около 1,496.

Температура кипения. Около 135 °С.

Этилбензолсульфонат. [515-46-8]. C8H10O3S. (М.м. 186,23).

Этил(бензолсульфонат).

Содержит не менее 97,0% C8H10O3S.

Бесцветная или бледно-жёлтая жидкость, мало растворима в воде, смешиваема со спиртом 96%.

Плотность. Около 1,22 г/мл (25 °С).

Этилванилин. [121-32-4]. C9H10O3. (М.м. 166,17).

4-Гидрокси-3-этоксибензальдегид.

Содержит не менее 98% C9H10O3.

Растворим в этаноле, эфире, бензоле, мало растворим в воде.

Температура плавления. От 74 до 77 °С.

2-Этилгексан-1,3-диол. [94-96-2]. С8Н18О2. (М.м. 146,23).

2-Этилгексан-1,3-диол.

Слегка маслянистая бесцветная жидкость.

Растворим в этаноле, 2-пропаноле, пропиленгликоле и масле касторовом.

. Около 0,942.

. Около 1,451.

Температура кипения. Около 244 °С.

2-Этилгексановая кислота. [149-57-5]. С8Н16О2. (М.м. 144,21).

2-Этилгексановая кислота.

Бесцветная жидкость.

Практически нерастворима в воде, легко растворима в этаноле и эфире.

. Около 0,91.

. Около 1,425.

Температура кипения. Около 168 °С.

Этиленбис[3,3-ди(3-(1,1-диметилэтил)-4-гидроксифенил)бутират]. [32509-66-3]. С50Н66О8. (М.м. 795,1).

(Этан-1,2-диил)бис[3,3-бис(3-трет-бутил-4-гидроксифенил)бутаноат].

Кристаллический порошок.

Практически нерастворим в воде и петролейном эфире, очень легко растворим в ацетоне, эфире и метаноле.

Температура плавления. Около 165 °С.

Этиленгликоль. [107-21-1]. С2Н6О2. (М.м. 62,07).

Этан-1,2-диол.

Бесцветная, слегка вязкая гигроскопичная жидкость.

Смешивается с водой и спиртом 96%, мало растворим в эфире.

. От 1,113 до 1,115.

. Около 1,432.

Температура плавления. Около –12 °С.

Температура кипения. Около 198 °С.

Кислотность. К 10 мл прибавляют 20 мл воды и 1 мл 0,1% раствора фенолфталеина; окраска раствора должна измениться до розовой при прибавлении не более 0,15 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида.

Вода. Не более 0,2%.

Этиленгликоля монометиловый эфир. [109-86-4]. С3Н8О2. (М.м. 76,09).

2-Метоксиэтан-1-ол.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Смешивается с водой, ацетоном, спиртом 96% и эфиром.

. Около 0,97.

. Около 1,403.

Температура кипения. Около 125 °С.

Этиленгликоля моноэтиловый эфир. [110-80-5]. С4Н10О2. (М.м. 90,12).

2-Этоксиэтан-1-ол.

Прозрачная, бесцветная жидкость.

Смешивается с водой, ацетоном, спиртом 96% и эфиром.

. Около 0,93.

. Около 1,406.

Температура кипения. Около 135 °С.

Этилендиамин. [107-15-3]. С2Н8N2. (М.м. 60,10).

Этан-1,2-диамин.

Прозрачная, бесцветная жидкость с аммиачным запахом; имеет сильнощелочную реакцию.

Смешивается с водой и спиртом 96%, мало растворим в эфире.

Температура кипения. Около 116 °С.

(Этилендинитрил)тетрауксусная кислота. [60-00-4]. С10Н16N2О8. (М.м. 292,24).

2,2',2'',2'''-[Этан-1,2-диилди(нитрило)]тетрауксусная кислота.

Кристаллический порошок белого цвета.

Очень мало растворима в воде.

Температура плавления. Около 250 °С с разложением.

Этиленоксид. [75-21-8]. С2Н4О. (М.м. 44,05).

Оксиран.

Бесцветный, воспламеняющийся газ.

Очень легко растворим в воде и этаноле.

Температура ожижения. Около 12 °С.

Этиленоксида исходный раствор.

Все операции, производимые в ходе приготовления растворов, выполняют в вытяжном шкафу. Защищают руки и лицо, надевая полиэтиленовые защитные перчатки и подходящую маску для лица.

Растворы хранят в воздухонепроницаемой упаковке, в холодильнике при температуре от 4 до 8 °С. Все испытания проводят 3 раза.

В сухую чистую тест-пробирку, охлажденную в смеси из 1 части натрия хлорида и 3 частей измельченного льда, медленно вводят ток газообразного этиленоксида, позволяя конденсироваться на внутренней стенке тест-пробирки. С помощью стеклянного шприца, предварительно охлажденного до температуры 10 °С, помещают около 300 мкл (что соответствует приблизительно 0,25 г этиленоксида) жидкого этиленоксида в 50 мл макрогола 200 (особой чистоты). Определяют абсорбированное количество этиленоксида взвешиванием до и после абсорбции (Мсо). Разводят этим же макроголом 200 до 100,0 мл. Перед использованием тщательно перемешивают.

Количественное определение. К 10 мл суспензии 500 г/л магния хлорида в этаноле прибавляют 20,0 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты в спирте. Колбу закрывают пробкой, взбалтывают до получения насыщенного раствора и для достижения равновесия выдерживают в течение ночи. 5,00 г исходного раствора 2,5 г/л этиленоксида помещают в колбу, взвешивают, выдерживают в течение 30 мин и титруют потенциометрически 0,1 М спиртовым раствором калия гидроксида.

Проводят контрольный опыт, используя вместо исходного раствора этиленоксида такое же количество макрогола 200 (особой чистоты).

Содержание этиленоксида (Х) в миллиграммах в 1 г вычисляют по формуле:

где V0 – объём 0,1 М спиртового раствора калия гидроксида, израсходованный на титрование контрольного раствора;
V1 объём 0,1 М спиртового раствора калия гидроксида, израсходованный на титрование испытуемого раствора;
f – поправочный коэффициент к молярности 0,1 М спиртового раствора калия гидроксида;
m – масса испытуемого образца, г.

Этиленоксида раствор 0,001%

1,0 г холодного исходного раствора этиленоксида (соответствует 2,5 мг этиленоксида) помещают в холодную ёмкость, содержащую 40,0 г холодного макрогола 200 очищенного. Перемешивают, определяют точную массу и разбавляют до расчётной массы для получения раствора, содержащего 50 мкг этиленоксида на 1 грамм раствора. 10,0 г полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, содержащую около 30 мл воды, перемешивают и доводят объём раствора водой до 50,0 мл (10 мкг/мл этиленоксида). Используют свежеприготовленным.

Этиленоксида раствор 0,0002%

10,0 мл этиленоксида раствора 0,001% помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объём раствора водой до метки (2 мкг/мл этиленоксида). Используют свежеприготовленным.

Этиленхлоргидрин. См. 2-Хлорэтанол.

1,1′-Этилиденбис(триптофан). [132685-02-0]. C24Н26N4О4. (М.м. 434,5).

(2S,2'S)-3,3'-[Этан-1,1-диилбис(1H-индол-1,3-диил)]бис(2-аминопропановая кислота).

Содержит не менее 98,0% C24Н26N4О4.

Кристаллический порошок белого или почти белого цвета.

Мало растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96%, практически нерастворим в эфире.

Температура плавления. Около 223 °С с разложением.

N-Этилмалеимид. [128-53-0]. C6Н7NО2. (М.м. 125,13).

1-Этил-1Н-пиррол-2,5-дион.

Бесцветные кристаллы.

Умеренно растворим в воде, легко растворим в спирте 96%.

Температура плавления. От 41 до 45 °С.

Хранят при температуре от 2 до 8 °С.

Этилметилкетон. См. Метилэтилкетон.

2-Этил-2-метилянтарная кислота. [631-31-2]. С7Н12О4. (М.м. 160,17).

(2RS)-2-Метил-2-этилбутандиовая кислота.

Температура плавления. От 104 до 107 °С.

Этилпарагидроксибензоат. [120-47-8]. С9Н10О3. (М.м. 166,17).

Этил(4-гидроксибензоат).

Белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Очень мало растворим в воде, легко растворим в спирте 96%.

Температура плавления. От 115 до 118 °С.

2-Этилпиридин. [100-71-0]. C7H9N. (М.м. 107,15).

Бесцветная или коричневатая жидкость.

. Около 0,939.

. Около 1,496.

Температура кипения. Около 149 °С.

Этилформиат. [109-94-4]. С3Н6О2. (М.м. 74,08).

Этилформиат.

Прозрачная, бесцветная воспламеняющаяся жидкость.

Легко растворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

. Около 0,919.

. Около 1,36.

Температура кипения. Около 54 °С.

Этилцианоацетат. [105-56-6]. С5Н7NO2. (М.м. 113,11).

Этил(цианоацетат).

Бесцветная или светло-жёлтого цвета жидкость.

Мало растворим в воде, смешивается со спиртом 96% и эфиром.

Температура кипения. От 205 до 209 °С с разложением.

Этинилфенилацетамид. [70933-58-3]. C10H9NO. (М.м. 159,18).

N-(3-Этинилфенил)ацетамид.

Содержит не менее 98,0% C10H9NO.

Хранить при температуре 2–8 °С.

5-Этокси-2-меркаптобензимидазол. [55489-15-1]. C9H10N2OS. (М.м. 194.25).

5-Этокси-2-меркаптобензимидазол.

Содержит не менее 97% C9H10N2OS.

Порошок светло-жёлтого цвета.

Температура плавления. Около 256 °C.

Этоксихризоидина гидрохлорид. [2313-87-3]. С14Н16N4O·HСl. (М.м. 292,76).

4-[(4-Этоксифенил)диазенил]бензол-1,3-диамина гидрохлорид.

Порошок красноватого цвета.

Растворим в спирте 96%.

Этоксихризоидина раствор 0,1%.

Раствор 1 г этоксихризоидина гидрохлорид растворяют в спирте 96% и доводят объём раствора до 100,0 мл тем же раствортелем.

Испытание на чувствительность. К смеси 5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3% и 0,05 мл раствора этоксихризоидина прибавляют 0,05 мл 0,0167 М раствора бромид-бромата. Окраска раствора должна измениться от красной до светло-жёлтой в течение 2 мин.

Эфир. [60-29-7]. С4Н10О. (М.м. 74,12).

1,1'-Оксидиэтан.

Прозрачная, бесцветная, летучая, очень подвижная, легко воспламеняющаяся жидкость; гигроскопична.

Пары эфира с воздухом, кислородом и азота закисью образуют в определенных концентрациях взврывчатую смесь.

. От 0,713 до 0,715.

Температура кипения. От 34 до 35 °С.

Не перегоняют, если эфир не выдерживает испытания на пероксиды.

Пероксиды. 8 мл раствора крахмала с калия йодидом помещают в цилиндр с притертой стеклянной пробкой вместимостью 12 мл и диаметром около 1,5 см. Объём цилиндра заполняют полностью испытуемым эфиром, перемешивают и выдерживают в тёмном месте в течение 30 мин; не должно появиться окрашивание.

Название и концентрация любого добавленного стабилизатора должны быть указаны на этикетке.

Хранят в воздухонепроницаемой упаковке, защищённом от света месте, при температуре не выше 15 °С.

Эфир диэтиловый. См. Эфир.

Эфир сухой.

Эфир промывают при встряхивании водой, затем насыщенным раствором кальция хлорида, выдерживают над безводным кальция хлоридом в течение не менее 24 ч, время от времени перемешивая, и фильтруют.

Янтарная кислота. [110-15-6]. С4Н6O4. (М.м. 118,09).

Бутандиовая кислота.

Кристаллический порошок белого цвета или бесцветные кристаллы.

Растворима в воде и спирте 96%.

Температура плавления. От 184 до 187 °С.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.3.0002 Титрованные растворы

Взамен ОФС.1.3.0002.15

Титрованными растворами называются растворы точно известной концентрации, предназначенные для целей титриметрического анализа.

Концентрация титрованного раствора (титранта) обычно выражается его молярной концентрацией, титром или титром по определяемому веществу.

Молярная концентрация (молярность) – это выраженное в молях количество растворенного вещества, содержащееся в 1 л раствора. Молярность вычисляется как отношение количества растворенного вещества к объёму раствора:

(1)

где СМ – молярная концентрация, моль/л;
М – количество растворенного вещества, моль;
V – общий объём раствора, л.

Раствор, содержащий x моль вещества в 1 л раствора, обозначают x М раствором.

Титр – это выраженная в миллиграммах масса растворенного
вещества, содержащаяся в 1 мл раствора (размерность – мг/мл).

Титр титранта по определяемому веществу – это выраженная в миллиграммах масса определяемого вещества, эквивалентная 1 мл данного титранта. Титр титранта по определяемому веществу вычисляют, исходя из молярной концентрации или титра титранта с учетом стехиометрических коэффициентов уравнения химической реакции, протекающей при титровании, и молярных масс реагирующих веществ (размерность – мг/мл).

Для приготовления титрованных растворов применяют химически чистые вещества или промышленного производства стандарт-титры для титриметрии. Допускается приготовление титрованного раствора несколько большей концентрации, чем требуется по расчету, который при необходимости можно довести до нужной концентрации путем разбавления.

Для приготовления титрованных растворов используют мерную посуду исключительно класса А.

Приготовленные титрованные растворы стандартизуют двумя способами: по стандартному титрованному раствору или по точной навеске соответствующего стандартного образца. Перед стандартизацией титрованный раствор необходимо тщательно перемешать. Концентрацию титрованных растворов определяют путем достаточного количества титрований (не менее трех).

При ручном титровании используют бюретки с ценой деления в пределах 0,01–0,05 мл.

Если титрованный раствор используют в количественном анализе, в котором конечную точку титрования определяют электрометрическим методом (например, методом амперометрии или потенциометрии), раствор стандартизуют тем же методом. Состав среды, в которой стандартизуют титрованный раствор, должен быть таким же, как и тот, в котором он будет использован.

Для определения точной концентрация приготовленного титрованного раствора вычисляют поправочный коэффициент (К), представляющий собой отношение фактически полученной концентрации титрованного раствора к теоретически заданной. Поправочный коэффициент вычисляют с точностью до четвертого знака после запятой.

Вычисление поправочного коэффициента производят одним из указанных ниже способов.

Способ 1 – по навеске соответствующего стандартного образца:

(2)

где a – навеска вещества, по которому устанавливают титр, мг;
T – количество вещества, по которому устанавливается титр, соответствующее 1 мл + раствора заданной молярной концентрации (титр титранта по определяемому веществу), мг/мл;
V – объём приготовленного раствора, израсходованный на титрование, мл.

Способ 2 – по титрованному раствору известной концентрации:

(3)

где V0 – объём титрованного раствора, по которому устанавливается титр, мл;
V – объём приготовленного титрованного раствора, израсходованный на титрование, мл;
K0 – поправочный коэффициент титрованного раствора, по которому устанавливается титр.

Коэффициент К должен находиться в пределах от 0,98 до 1,02. Если коэффициент К отличается от указанных пределов (более чем на ± 2 %), то раствор следует разбавить или укрепить на основании следующего расчета.

В случае разбавления раствора из величины К вычитают единицу и полученную разность умножают на 1000. Результат умножения соответствует количеству воды в миллилитрах, которое следует прибавить к каждому литру разбавляемого раствора. В случае укрепления из единицы вычитают коэффициент К и разность умножают на количество граммов исходного вещества, взятое для приготовления 1 л раствора. Полученное количество прибавляют на каждый литр раствора. После этого раствор тщательно перемешивают.

Относительное стандартное отклонение при определении коэффициента К не должно превышать 0,2 %.

Титрованные растворы меньшей молярной концентрации можно приготовить посредством точного разведения более концентрированных титрованных растворов водой, свободной от углерода диоксида. Поправочные коэффициенты полученных разбавленных растворов такие
же, как у исходных растворов. Исключение составляют титрованные растворы для окислительно-восстановительного титрования, которые
после разбавления нуждаются в повторной установке титра. Методика установки титра должна быть приведена в фармакопейной статье.

Растворы с молярной концентрацией ниже 0,1 М готовят непосредственно перед использованием.

Так как при хранении концентрация титрованного раствора может изменяться, необходимо перепроверять поправочные коэффициенты титрованных растворов в соответствии с установленными для них сроками хранения.

Титрованные растворы, в которых при хранении появились хлопья или осадок, применять нельзя.

Титрованные растворы хранят при комнатной температуре, защищая их, при необходимости, от воздействия углерода диоксида, влаги воздуха и прямых солнечных лучей.

Рекомендуется готовить, стандартизовать и использовать титрованные растворы при одной и той же температуре.

Исходные стандартные вещества для титрованных растворов

Исходные стандартные вещества для установки концентрации титрованных растворов обозначают буквами РО (реактив основной) и готовят следующим образом.

Калия бромат РО. КBrO3. (М.м. 167,00).

Калия бромат перекристаллизовывают из кипящей воды. Кристаллы собирают и сушат до постоянной массы при температуре 180 °С.

Калия гидрофталат РО. С8Н5КО4. (М.м. 204,22).

Калия гидрофталат перекристаллизовывают из кипящей воды. Кристаллы собирают при температуре выше 35 °С и сушат до постоянной массы при температуре 120 °С.

Калия дихромат РО. K2Cr2O7. (М.м. 294,19).

Калия дихромат перекристаллизовывают из горячей воды. Кристаллы сушат до постоянной массы при температуре от 130 до 150 °С и растирают.

Кислота бензойная РО. С7Н6О2. (М.м. 122,12).

Кислоту бензойную сублимируют.

Мышьяка оксид РО. Аs2О3. (М.м. 197,84).

Мышьяка оксид сублимируют.

Хранят над силикагелем безводным.

Натрия карбонат безводный РО. Na2CO3. (М.м. 106,01).

Насыщенный раствор натрия карбоната фильтруют при комнатной температуре. Через фильтрат медленно пропускают поток углерода диоксида при постоянном охлаждении и перемешивании. Через 2 ч осадок собирают на стеклянном фильтре, промывают фильтр ледяной водой, насыщенной углерода диоксидом. Сушат при температуре от 100 до 105 °С и прокаливают до постоянной массы при температуре от 270 до 300 °С, периодически перемешивая.

Натрия хлорид РО. NaCl. (М.м. 58,44).

К 1 объёму насыщенного раствора натрия хлорида прибавляют 2 объёма хлористоводородной кислоты концентрированной. Полученные кристаллы собирают и промывают хлористоводородной кислотой 25 %, которую удаляют нагреванием на кипящей водяной бане. Прокаливают до постоянной массы при температуре 300 °С.

Сульфаниловая кислота РО. С6Н7NO3S. (М.м. 173,19).

Сульфаниловую кислоту перекристаллизовывают из кипящей воды, фильтруют и сушат до постоянной массы при температуре от 100 до 105 °С.

Цинк РО. Zn. (А.м. 65,37).

Используют цинк с содержанием не менее 99,9 % Zn.

Титрованные растворы

1 М раствор азотной кислоты

96,9 мл азотной кислоты концентрированной доводят водой до 1000,0 мл.

Установка титра. 1,000 г натрия карбоната безводного РО растворяют в 50 мл воды, прибавляют 0,1 мл 0,1 % раствора метилового оранжевого и титруют приготовленным раствором азотной кислоты до красновато-жёлтого окрашивания; кипятят в течение 2 мин, раствор снова приобретает желтую окраску, охлаждают и продолжают титрование до красновато-жёлтого окрашивания.

1 мл 1 М раствора азотной кислоты соответствует 53,00 мг Na2CO3.

0,1 М раствор аммония тиоцианата. 0,1 М раствор аммония роданида.

7,612 г аммония тиоцианата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 20,0 мл 0,1 М раствора серебра нитрата прибавляют 25 мл воды, 2 мл азотной кислоты раствора 2 М, 2 мл железа аммония сульфата раствора 10 % и титруют приготовленным раствором аммония тиоцианата до появления красновато-жёлтого окрашивания.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 7,612 мг NH4SCN.

0,05 М раствор аммония тиоцианата. 0,05 М раствор аммония роданида.

100 мл 0,1 М раствора аммония тиоцианата помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл и доводят объём полученного раствора до метки. Принимают титр исходного раствора.

0,01 М раствор аммония тиоцианата. 0,01 М раствор аммония роданида.

100,0 мл 0,1 М раствора аммония тиоцианата доводят водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 20,0 мл 0,01 М раствора серебра нитрата прибавляют 25 мл воды, 2 мл азотной кислоты раствора 2 М, 2 мл раствора железа аммония сульфата раствора 10 % и далее поступают, как указано при установке титра 0,1 М раствора аммония тиоцианата.

1 мл 0,01 М раствора серебра нитрата соответствует 0,7612 мг NH4SCN.

0,1 М раствор аммония церия нитрата

Раствор, содержащий 56 мл серной кислоты концентрированной и 54,82 г аммония церия нитрата, взбалтывают в течение 2 мин, прибавляют последовательно 5 порций воды, по 100 мл каждая, перемешивая после каждого прибавления. Доводят объём раствора водой до 1000,0 мл. Титр полученного раствора устанавливают через 10 сут.

Установка титра. К 25,0 мл полученного раствора прибавляют 2 г калия йодида и 150 мл воды. Немедленно титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата, используя в качестве индикатора 1 мл 0,1 % раствора крахмала.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 54,82 мг (NH4)2Cе(NО3)6.

Хранят в защищённом от света месте.

0,01 М раствор аммония церия нитрата

К 100,0 мл 0,1 М раствора аммония церия нитрата прибавляют при охлаждении 30 мл серной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

0,1 М раствор аммония церия сульфата

65,0 г аммония церия сульфата растворяют в смеси 500 мл воды и 30 мл серной кислоты концентрированной, охлаждают и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 25,0 мл полученного раствора прибавляют 2 г калия йодида и 150 мл воды. Немедленно титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата, используя в качестве индикатора 1 мл 0,1 % раствора крахмала.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 63,26 мг 2(NH4)2SO4 · Cе(SО4)2 · 2H2O.

0,01 М раствор аммония церия сульфата

К 100,0 мл 0,1 М раствора аммония церия сульфата прибавляют при охлаждении 30 мл серной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

0,01 М раствор бария нитрата

2,613 г бария нитрата растворяют в воде, доводят объём раствора водой до 1000 мл и фильтруют.

Установка титра. К 10 мл 0,01 М раствора серной кислоты прибавляют 40 мл воды, по 2 капли метиленового синего раствора 0,02 % и нафтарзона раствора 0,2 % и медленно титруют 0,01 М раствором бария нитрата до перехода жёлтой окраски в розовую.

1 мл 0,01 М раствора серной кислоты соответствует 2,613 мг бария нитрата.

0,05 М раствор бария перхлората

15,8 г бария гидроксида растворяют в смеси 75 мл воды и 7,5 мл хлорной кислоты, доводят рН раствора до 3,0 хлорной кислотой и фильтруют, если необходимо. Прибавляют 150 мл спирта 96 %, доводят объём раствора водой до 250 мл, затем доводят объём раствора буферным раствором рН 3,7 до 1000,0 мл.

Установка титра. К 5,0 мл 0,05 М раствора серной кислоты прибавляют 5 мл воды, 50 мл буферного раствора рН 3,7 и 0,5 мл 0,1 % раствора ализарина S; титруют приготовленным раствором бария перхлората до появления оранжево-красного окрашивания. Определение титра проводят непосредственно перед использованием.

1 мл 0,05 М раствора серной кислоты соответствует 16,81 мг Ba(ClO4)2.

0,025 М раствор бария перхлората

500,0 мл 0,05 М раствора бария перхлората доводят ацетатным буферным раствором рН 3,7 до 1000,0 мл.

0,1 М раствор бария хлорида

24,4 г бария хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 10,0 мл приготовленного раствора бария хлорида прибавляют 60 мл воды, 3 мл аммиака раствора концентрированного 25 %, от 0,5 до 1,0 мг фталеинового пурпурного и титруют 0,1 М раствором натрия эдетата. Когда окраска раствора начнет ослабевать, прибавляют 50 мл спирта 96 % и продолжают титрование до исчезновения синевато-фиолетового окрашивания.

1 мл 0,1 М раствора натрия эдетата соответствует 24,43 мг BaCl2 · 2H2O.

0,025 М раствор бария хлорида

25,0 мл 0,1 М раствора бария хлорида доводят водой до 100,0 мл.

0,02 М раствор бензэтония хлорида

8,960 г бензэтония хлорида, предварительно высушенного до постоянной массы при температуре от 100 до 105 °C, растворяют в 50 мл спирта 96 % и 900 мл воды, не допуская обильного вспенивания, и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. Около 0,1 г (точная навеска) стандартного образца натрия лаурилсульфата растворяют в 10 мл воды, прибавляют 40 мл смеси
2-пропанол—вода 10:30, 10 мл димидия бромида и сульфанового синего смешанного раствора, 1 мл октанола, 10 мл хлороформа и титруют 0,02 М раствором бензэтония хлорида. Титрант сначала добавляют по 1 мл, смешивая слои до исчезновения пены. Вблизи точки эквивалентности титрант добавляют по 0,05 мл до перехода розовой окраски хлороформного (нижнего) слоя в синюю.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,02 М раствор бензэтония хлорида соответствует 5,768 мг натрия лаурилсульфата C12H25NaO4S.

0,004 М раствор бензэтония хлорида

1,792 г бензэтония хлорида, предварительно высушенного до постоянной массы при температуре от 100 до 105 °С, растворяют в воде
и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. Вычисляют молярность раствора, исходя из содержания С27Н42СlNO2 в высушенном бензэтония хлориде, определенного следующим образом. 0,350 г высушенного вещества растворяют в 30 мл уксусной кислоты безводной, прибавляют 6 мл 3,19 % раствора ртути(II) ацетата и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты, используя в качестве индикатора 0,05 мл 0,5 % раствора кристаллического фиолетового. Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 44,81 мг С27Н42СlNO2.

0,0167 М раствор бромид-бромата. 0,05 М раствор брома.

2,7835 г калия бромата РО и 13 г калия бромида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

0,01 М раствор висмута нитрата

4,85 г висмута нитрата растворяют в 60 мл азотной кислоты разведённой 12,5 % и разбавляют водой до объёма 1000,0 мл.

Установка титра. К 25,0 мл полученного раствора прибавляют 50 мл воды и титруют 0,01 М раствором натрия эдетата, используя в качестве индикатора 0,05 мл ксиленолового оранжевого раствора.

1 мл 0,1 М раствора натрия эдетата соответствует 48,51 мг Вi(NO3)3·5Н2О.

0,001 М раствор гадолиния сульфата

0,7468 г гадолиния сульфата октагидрата растворяют при перемешивании в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. В коническую колбу вместимостью 100 мл помещают 0,25 мл 0,01 М раствора натрия эдетата, прибавляют 15 мл воды, 10 мл индикаторного раствора и титруют приготовленным 0,001 М раствором гадолиния сульфата до изменения окраски от жёлтой до фиолетово-розовой. Параллельно проводят контрольный опыт с 15 мл воды.

Поправочный коэффициент к молярности раствора гадолиния сульфата (К) вычисляют по формуле:

где:
V1 - объём 0,01 М раствора натрия эдетата, мл;
c1 − концентрация раствора натрия эдетата, моль/л;
V2 − объём приготовленного раствора гадолиния сульфата, израсходованный на титрование раствора натрия эдетата, мл;
V0 − объём приготовленного раствора гадолиния сульфата, израсходованный на титрование в контрольном опыте, мл;
c2 − концентрация раствора гадолиния сульфата, моль/л.

Индикаторный раствор. 30 мл ацетатного буферного раствора рН 5,0 (1) и 3 мл ксиленолового оранжевого раствора 0,05 % помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл и доводят объём раствора водой до метки.

0,003 М раствор гадолиния хлорида

0,791 г гадолиния хлорида безводного растворяют при перемешивании в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

0,1 М раствор железа(III) аммония сульфата

50,0 г железа(III) аммония сульфата растворяют в смеси 300 мл воды и 6 мл серной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 25,0 мл приготовленного раствора железа(III) аммония сульфата прибавляют 3 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, 2 г калия йодида и через 10 мин титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата, используя в качестве индикатора 1 мл 0,1 % раствора крахмала.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 48,22 мг FeNH4(SO4)2·12H2O.

0,01 М раствор железа(III) аммония сульфата

10,0 мл 0,1 М раствор железа(III) аммония сульфата разбавляют водой до объёма 100,0 мл.

0,1 М раствор железа(II) сульфата

27,80 г железа(II) сульфата растворяют в 500 мл серной кислоты разведенной 9,8 % и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 25,0 мл приготовленного раствора железа(II) сульфата прибавляют 3 мл фосфорной кислоты концентрированной и тотчас титруют 0,02 М раствором калия перманганата. Определение титра проводят непосредственно перед использованием.

1 мл 0,02 М раствора калия перманганата соответствует 27,80 мг FeSO4 · 7H2O.

0,5 М раствор йода

127,0 г йода и 200 г калия йодида растворяют в воде и доводят
объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 2,0 мл полученного раствора прибавляют 1 мл уксусной кислоты раствора 2 М и 50 мл воды. Титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата, используя в качестве индикатора 1 мл 0,1 % раствора крахмала.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 12,69 мг I2.

Хранят в защищённом от света месте.

0,1 М раствор йода

Около 25,5 г йода и 40 г калия йодида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 10,0 мл полученного раствора прибавляют 1 мл уксусной кислоты раствора 2 М и 40 мл воды. Далее поступают, как указано при установке титра 0,5 М раствора йода.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 12,69 мг I2.

Хранят в защищённом от света месте.

0,05 М раствор йода

20 г калия йодида растворяют в минимальном количестве воды, прибавляют 12,7 г йода, растворяют при перемешивании и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 20,0 мл полученного раствора прибавляют 1 мл уксусной кислоты раствора 2 М и 30 мл воды. Далее поступают, как указано при установке титра 0,5 М раствора йода.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 12,69 мг I2.

Хранят в защищённом от света месте.

0,025 М раствор йода

10 г калия йодида растворяют в минимальном количестве воды, прибавляют 6,35 г йода, растворяют при перемешивании и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 20,0 мл полученного раствора прибавляют 1 мл уксусной кислоты раствора 2 М и 30 мл воды. Далее поступают, как указано при установке титра 0,5 М раствора йода.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 12,69 мг I2.

Хранят в защищённом от света месте.

0,01 М раствор йода

0,3 г калия йодида растворяют в 20,0 мл 0,05 М раствора йода и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Установка титра. К 25,0 мл полученного раствора прибавляют 1 мл уксусной кислоты раствора 2 М и 25 мл воды и титруют 0,01 М раствором натрия тиосульфата, используя в качестве индикатора 1 мл 0,1 % раствора крахмала.

1 мл 0,01 М раствора натрия тиосульфата соответствует 1,269 мг I2.

0,005 М раствор йода

0,15 г калия йодида растворяют в 10,0 мл 0,05 М раствора йода и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Установка титра. К 25,0 мл полученного раствора прибавляют 1 мл уксусной кислоты раствора 2 М и 25 мл воды и титруют 0,01 М раствором натрия тиосульфата, используя в качестве индикатора 1 мл 0,1 % раствора крахмала.

1 мл 0,01 М раствора натрия тиосульфата соответствует 1,269 мг I2.

0,1 М раствор йода монохлорида (для определения йодного числа)

11,06 г калия йодида и 7,10 г калия йодата помещают в склянку с притертой пробкой, прибавляют 50 мл воды и 50 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, закрывают пробкой и встряхивают до полного растворения образующегося при реакции йода. Раствор переносят в делительную воронку и взбалтывают с 10 мл хлороформа. Если хлороформный слой окрашивается в фиолетовый цвет, то прибавляют при сильном взбалтывании по каплям 1 % раствор калия йодата до обесцвечивания хлороформного слоя. Если же хлороформный слой остается бесцветным, то прибавляют по каплям 1 % раствор калия йодида до появления бледно-розовой окраски. После отстаивания водный слой сливают в мерную колбу и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл. Приготовленный раствор должен иметь лимонно-желтый цвет.

Установка титра. 25,0 мл приготовленного раствора йода монохлорида помещают в колбу с притертой пробкой, прибавляют 1 г калия йодида и выдерживают в защищённом от света месте в течение 15 мин. Выделившийся йод титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата, используя в качестве индикатора 0,5 – 1 мл 1 % раствора крахмала.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 12,69 мг I2.

Титр раствора устанавливают каждый раз перед применением.

Хранят в сосудах тёмного стекла с притертыми пробками в защищённом от света месте.

0,033 М раствор калия бромата

5,5110 г калия бромата РО растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 10,0 мл полученного раствора прибавляют 50 мл воды, 10 мл 16,6 % раствора калия йодида и 5 мл хлористоводородной кислоты 25 %. Титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата, используя в качестве индикатора 1 мл 0,1 % раствора крахмала. Индикатор прибавляют в конце титрования.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 2,783 мг KBrO3.

0,02 М раствор калия бромата

3,340 г калия бромата РО растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 15,0 мл полученного раствора прибавляют 45 мл воды. Далее поступают, как указано при установке титра 0,033 М раствора калия бромата.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 2,783 мг KBrO3.

0,0167 М раствор калия бромата

2,7889 г калия бромата PO растворяют в воде и доводят объём
раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 20,0 мл полученного раствора прибавляют
40 мл воды. Далее поступают, как указано при установке титра 0,033 М раствора калия бромата.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 2,78 мг KBrO3.

0,0083 М раствор калия бромата

250,0 мл 0,033 М раствора калия бромата доводят водой до
1000,0 мл.

Установка титра. К 40,0 мл полученного раствора прибавляют
20 мл воды. Далее поступают, как указано при установке титра 0,033 М раствора калия бромата.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 2,783 мг KBrO3.

1 М раствор калия гидроксида

60 г калия гидроксида растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора водой, свободной от углерода диоксида, до 1000,0 мл.

Установка титра. 20,0 мл приготовленного раствора калия гидроксида титруют 1 М раствором хлористоводородной кислоты, используя в качестве индикатора 0,5 мл 0,1 % раствора фенолфталеина.

1 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 56,11 мг KOH.

0,1 М раствор калия гидроксида

6 г калия гидроксида растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Установка титра. 20,0 мл приготовленного раствора калия гидроксида титруют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты, используя в качестве индикатора 0,5 мл 0,1 % раствора фенолфталеина.

1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 5,611 мг KOH.

0,5 М раствор калия гидроксида в спирте 60 % (о/о)

3 г калия гидроксида растворяют в спирте 60 % (о/о), свободном от альдегидов, и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Установка титра. 20,0 мл приготовленного раствора калия гидроксида в спирте 60 % (о/о) титруют 0,5 М раствором хлористоводородной кислоты, используя в качестве индикатора 0,5 мл 0,1 % раствора фенолфталеина.

1 мл 0,5 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 28,06 мг KOH.

0,5 М раствор калия гидроксида спиртовой. 0,5 М раствор калия гидроксида спиртовой.

3 г калия гидроксида растворяют в 5 мл воды и доводят объём раствора спиртом 96 %, свободным от альдегидов, до 100,0 мл.

Установка титра. 20,0 мл приготовленного раствора калия гидроксида спиртового титруют 0,5 М раствором хлористоводородной кислоты, используя в качестве индикатора 0,5 мл 0,1 % раствора фенолфталеина.

1 мл 0,5 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 28,06 мг KOH.

0,2 М раствор калия гидроксида спиртовой. 0,2 М раствор кали едкого спиртовой.

40,0 мл 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового доводят спиртом 96 %, свободным от альдегидов, до 100,0 мл.

Установка титра. 10,0 мл полученного раствора титруют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты, используя в качестве индикатора 0,5 мл 0,1 % раствора фенолфталеина.

1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 5,611 мг KOH.

0,1 М раствор калия гидроксида спиртовой. 0,1 М раствор кали едкого спиртовой.

20,0 мл 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового доводят спиртом 96 %, свободным от альдегидов, до 100,0 мл.

Установка титра. 20,0 мл полученного раствора титруют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты, используя в качестве индикатора 0,5 мл 0,1 % раствора фенолфталеина.

1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 5,611 мг KOH.

0,05 М раствор калия гидроксида спиртовой. 0,05 М раствор кали едкого спиртовой.

10,0 мл 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового доводят спиртом 96 %, свободным от альдегидов, до 100,0 мл.

Установка титра. 40,0 мл полученного раствора титруют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты, используя в качестве индикатора 0,5 мл 0,1 % раствора фенолфталеина.

1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 5,611 мг KOH.

0,01 М раствор калия гидроксида спиртовой

2,0 мл 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового доводят спиртом 96 %, свободным от альдегидов, до 100,0 мл.

0,1 М раствор калия гидрофталата

20,42 г калия гидрофталата PO растворяют в 800 мл уксусной кислоты безводной, полученный раствор нагревают на водяной бане до растворения, защищая от действия влаги. Охлаждают до температуры 20 °С и доводят объём раствора уксусной кислотой безводной до 1000,0 мл.

0,0167 М раствор калия дихромата

4,90 г калия дихромата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 20,0 мл приготовленного раствора калия дихромата прибавляют 1 г калия йодида, 7 мл хлористоводородной кислоты разведенной 7,3 %, 250 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата до перехода окраски от синей к светло-зеленой, используя в качестве индикатора 3 мл 0,1 % раствора крахмала.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 4,903 мг K2Cr2O7.

0,00167 М раствор калия дихромата

10,0 мл 0,0167 М раствора калия дихромата разбавляют водой до объёма 100,0 мл.

0,05 М раствор калия йодата

10,7 г калия йодата растворяют в воде и доводят объём раствора
водой до 1000,0 мл.

Установка титра. 25,0 мл приготовленного раствора калия йодата доводят водой до 100,0 мл. К 20,0 мл полученного раствора прибавляют 2 г калия йодида, 10 мл серной кислоты разведенной 9,8 %, и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата, используя в качестве индикатора 1 мл 0,1 % раствора крахмала. Индикатор прибавляют в конце титрования.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 3,567 мг KIO3.

0,001 М раствор калия йодата

10,0 мл 0,05 М раствора калия йодата доводят водой до 500,0 мл.

0,0167 М раствор калия йодата

3,567 г калия йодата растворяют в воде и доводят объём раствора
водой до 1000,0 мл.

Установка титра. 20,0 мл приготовленного раствора калия йодата помещают в колбу с притертой пробкой, прибавляют 100 мл воды, 25 мл серной кислоты разведенной 9,8 %, 2 г калия йодида и выдерживают в защищённом от света месте в течение 10 мин. Выделившийся йод титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата, используя в качестве индикатора 1 мл 0,1 % раствора крахмала. Индикатор прибавляют в конце титрования.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 3,567 мг KIO3.

Хранят в сосудах темного стекла с притертыми пробками в защищённом от света месте.

0,001 М раствор калия йодида

10,0 мл раствора калия йодида 166 г/л доводят водой до 100,0 мл. 5,0 мл полученного раствора доводят водой до 500,0 мл.

0,02 М раствор калия перманганата

3,2 г калия перманганата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл; полученный раствор нагревают на водяной бане в течение 1 ч, охлаждают и фильтруют через стеклянный фильтр.

Установка титра. К 20,0 мл приготовленного раствора калия перманганата прибавляют 2 г калия йодида, 10 мл серной кислоты разведенной 9,8 % и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата, используя в качестве индикатора 1 мл 0,1 % раствора крахмала. Индикатор прибавляют в конце титрования.

1 мл 0,1 М раствора тиосульфата натрия соответствует 3,161 мг KMnO4.

Титр устанавливают непосредственно перед использованием.

Хранят в защищённом от света месте.

0,002 М раствор калия перманганата

10,0 мл 0,02 М раствора калия перманганата доводят водой до 100,0 мл.

Установка титра. Как описано при установке титра 0,02 М раствора калия перманганата.

Хранят в защищённом от света месте.

0,1 М раствор лития метилата

0,694 г лития небольшими порциями растворяют в 150 мл метанола безводного и доводят объём раствора толуолом до 1000,0 мл.

Установка титра. К 10,0 мл диметилформамида прибавляют 0,05 мл 0,3 % раствора тимолового синего в метаноле и титруют приготовленным раствором лития метилата до получения синего окрашивания раствора. Немедленно прибавляют 0,200 г бензойной кислоты РО, перемешивают до растворения и титруют приготовленным раствором лития метилата до повторного получения синего окрашивания раствора. Во время титрования раствор защищают от атмосферного углерода диоксида. Титр раствора лития метилата устанавливают по объёму титранта, израсходованного в повторном титровании.

1 мл 0,1 М раствора лития метилата соответствует 12,21 мг С7Н6О2.

Титр устанавливают непосредственно перед использованием.

0,05 М раствор магния сульфата

12,5 г магния сульфата растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. 40,0 мл полученного раствора доводят водой до 300 мл. Прибавляют 10 мл аммонийного буфера pH 10,0 и 50 мг тритурации эриохрома черного. Нагревают до температуры 40 °С и титруют при этой температуре 0,1 М раствором натрия эдетата до перехода окраски от фиолетовой к синей.

1 мл 0,1 М раствора натрия эдетата соответствует 24,65 мг MgSO4∙7H2O.

0,1 М раствор магния хлорида

20,33 г магния хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. 25,0 мл полученного раствора доводят водой до 300 мл. Прибавляют 10 мл аммонийного буфера pH 10,0 и 50 мг тритурации эриохрома черного. Нагревают до температуры 40 °С и титруют при этой температуре 0,1 М раствором натрия эдетата до перехода окраски от фиолетовой к синей.

1 мл 0,1 М раствора натрия эдетата соответствует 20,33 мг MgCl2 ∙ 6H2O.

0,025 М раствор магния хлорида

25,0 мл 0,1 М раствора магния хлорида доводят водой до 100,0 мл.

0,02 М раствор меди сульфата

5,0 г меди сульфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 20,0 мл полученного раствора меди сульфата прибавляют 2 г натрия ацетата, 0,1 мл 0,1 % раствора пиридилазонафтола и титруют 0,02 М раствором натрия эдетата до перехода окраски от фиолетово-синей до ярко-зеленой; вблизи точки эквивалентности титруют медленно.

1 мл 0,02 М раствора натрия эдетата соответствует 4,994 мг СuSO4 ⋅ 5H2O.

0,1 М раствор натрия арсенита

4,946 г мышьяка оксида РО растворяют в смеси 20 мл 10 М раствора натрия гидроксида и 20 мл воды, доводят объём раствора водой до 400,0 мл и нейтрализуют хлористоводородной кислотой разведенной 7,3 % по лакмусовой бумаге. Растворяют в полученном растворе 2,0 г натрия гидрокарбоната и доводят объём раствора водой до 500,0 мл.

0,025 М раствор натрия арсенита

25 мл 0,1 М раствор натрия арсенита доводят водой до 100 мл.

1 М раствор натрия гидроксида

42 г натрия гидроксида растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Проверка на содержание карбонатов. 45,0 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты титруют приготовленным раствором натрия гидроксида (индикатор – фенолфталеин). К оттитрованному раствору прибавляют по каплям 1 М раствор хлористоводородной кислоты до исчезновения розового окрашивания и упаривают при кипячении до ~ 20 мл. В процессе кипячения при возникновении розового окрашивания прибавляют 1 М раствор хлористоводородной кислоты до обесцвечивания. Раствор охлаждают и, при наличии розовой окраски, прибавляют 1 М раствор хлористоводородной кислоты до обесцвечивания. Суммарное количество прибавленного 1 М раствора хлористоводородной кислоты не должно превышать 0,1 мл.

Установка титра (1). 20,0 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты титруют полученным раствором натрия гидроксида, используя в качестве индикатора 0,5–1,0 мл 1 % раствора фенолфталеина.

1 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 40,00 мг NaOH.

Установка титра (2). Около 5,00 г (точная навеска) калия гидрофталата PO, предварительного тонко измельченного и высушенного при температуре 120 °С в течение 2 ч, растворяют в 75 мл воды и титруют приготовленным раствором натрия гидроксида (индикатор – фенолфталеин).

1 мл 1 М раствора натрия гидроксида соответствует 204,22 мг C8H5KO4.

Титр устанавливают непосредственно перед использованием.

Хранить в плотно закрытых емкостях из темного стекла.

0,5 М раствор натрия гидроксида

21 г натрия гидроксида растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора той же водой до 1000,0 мл.

Проверка на содержание карбонатов. Проводят, как описано при приготовлении 1 М раствора натрия гидроксида. Для определения берут 45,0 мл 0,5 М раствора хлористоводородной кислоты.

Установка титра (1). 10,0 мл 0,5 М раствора хлористоводородной кислоты титруют, как указано при определении титра 1 М раствора натрия гидроксида.

1 мл 0,5 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 20,00 мг NaOH.

Установка титра (2). Около 2,50 г (точная навеска) калия гидрофталата PO, предварительно тонко измельченного и высушенного при температуре 120 °С в течение 2 ч, растворяют в 50 мл воды. Далее поступают, как указано при установке титра 1 М раствора натрия гидроксида.

1 мл 0,5 М раствора натрия гидроксида соответствует 102,11 мг C8H5KO4.

Хранить в плотно закрытых емкостях из темного стекла.

0,1 М раствор натрия гидроксида

100,0 мл 1 М раствора натрия гидроксида доводят водой, свободной от углерода диоксида, до 1000,0 мл.

Проверка на содержание карбонатов. Проводят, как описано при приготовлении 1 М раствора натрия гидроксида. Для определения берут 45 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты.

Установка титра (1). 10,0 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты титруют, как указано при определении титра 1 М раствора натрия гидроксида.

1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 4,00 мг NaOH.

Установка титра (2). Около 0,50 г (точная навеска) калия гидрофталата PO, предварительно тонко измельченного и высушенного при температуре 120 °С в течение 2 ч, растворяют в 30 мл воды. Далее поступают, как указано при установке титра 1 М раствора натрия
гидроксида.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 20,42 мг C8H5KO4.

Установка титра (3), для использования в количественном анализе галидов органических оснований. Около 0,10 г (точная навеска) бензойной кислоты PO растворяют в смеси 5 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты и 50 мл спирта 96 %. Титруют приготовленным раствором натрия гидроксида потенциометрически. Учитывают объём титранта между двумя точками перегиба на кривой титрования.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 12,21 мг C7H6O2.

Хранить в плотно закрытых ёмкостях из темного стекла.

0,05 М раствор натрия гидроксида

50,0 мл 1 М раствора натрия гидроксида доводят водой, свободной от углерода диоксида, до 1000,0 мл.

Проверка на содержание карбонатов. Проводят, как описано при приготовлении 1 М раствора натрия гидроксида. Для определения берут 45 мл 0,05 М раствора хлористоводородной кислоты.

Установка титра (1). 10,0 мл 0,05 М раствора хлористоводородной кислоты титруют, как указано при определении титра 1 М раствора натрия гидроксида.

Установка титра (2). Около 0,25 г (точная навеска) калия гидрофталата PO, предварительно тонко измельченного и высушенного при температуре 120 °С в течение 2 ч, растворяют в 30 мл воды. Далее поступают, как указано при установке титра 1 М раствора натрия гидроксида.

1 мл 0,05 М раствора натрия гидроксида соответствует 10,21 мг C8H5KO4.

Хранить в плотно закрытых емкостях из тёмного стекла.

0,02 М раствор натрия гидроксида

20,0 мл 1 М раствора натрия гидроксида доводят водой, свободной от углерода диоксида, до 1000,0 мл.

Проверка на содержание карбонатов. Проводят, как описано при приготовлении 1 М раствора натрия гидроксида. Для определения берут 45 мл 0,02 М раствора хлористоводородной кислоты.

Установка титра. Около 0,10 г (точная навеска) калия гидрофталата PO, предварительно тонко измельченного и высушенного при температуре 120 °С в течение 2 ч, растворяют в 30 мл воды. Далее поступают, как указано при установке титра 1 М раствора натрия гидроксида.

1 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида соответствует 4,084 мг C8H5KO4.

Хранить в плотно закрытых емкостях из темного стекла.

0,01 М раствор натрия гидроксида

10,0 мл 1 М раствора натрия гидроксида доводят водой, свободной от углерода диоксида, до 1000,0 мл.

Проверка на содержание карбонатов. Проводят, как описано при приготовлении 1 М раствора натрия гидроксида. Для определения берут 45 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты.

Установка титра. Около 0,05 г (точная навеска) калия гидрофталата PO, предварительно тонко измельченного и высушенного при температуре 120 °С в течение 2 ч, растворяют в 30 мл воды. Далее поступают, как указано при установке титра 1 М раствора натрия гидроксида.

1 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида соответствует 2,042 мг C6H5KO4.

Хранить в плотно закрытых емкостях из темного стекла.

0,1 М раствор натрия гидроксида этанольный

К 250 мл этанола безводного (спирт абсолютированный) прибавляют 3,3 г 10 М раствора натрия гидроксида.

Установка титра. 0,200 г (точная навеска) бензойной кислоты PO растворяют в 2 мл воды и 10 мл спирта 96 % и титруют приготовленным раствором натрия гидроксида этанольным, используя в качестве индикатора 0,2 мл 0,1 % раствора тимолфталеина.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида этанольного соответствует 12,21 мг C7H6O2.

Титр устанавливают непосредственно перед использованием.

Хранить в плотно закрытых емкостях из темного стекла.

0,1 М раствор натрия гидроксида в смеси метанола и бензола

4,2 г натрия гидроксида растворяют в 100 мл метанола в мерной колбе вместимостью 1000,0 мл. Объём раствора доводят бензолом и метанолом до метки, прибавляя их попеременно при помешивании. Соотношение метанола и бензола при приготовлении раствора должно быть примерно 1:4.

Примечание – В случае получения непрозрачного раствора его выдерживают в течение 12 ч, после чего прозрачную жидкость быстро сливают с осадка.

Установка титра. Около 0,100 г (точная навеска) бензойной кислоты PO растворяют в 20 мл диметилформамида, нейтрализованного непосредственно перед титрованием по 1 % раствору тимолового синего в диметилформамиде, и титруют приготовленным раствором натрия гидроксида в присутствии того же индикатора до перехода окраски от жёлтой к синей.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 12,21 мг C7H6O2.

Титр устанавливают непосредственно перед использованием.

Примечание – Установку титра следует проводить в тщательно закрытых сосудах. Титрование рекомендуется проводить в атмосфере инертного газа.

Хранить в плотно закрытых емкостях из темного стекла.

0,001 М раствор натрия додецилсульфата

0,2884 г натрия додецилсульфата, в пересчете на сухое вещество (105 ºС в течение 2 ч), растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 50,0 мл полученного раствора прибавляют 15 мл хлороформа, 10 мл 1 М раствора серной кислоты и 1 мл раствора, содержащего по 0,003 % диметилового жёлтого и орацетового синего В в хлороформе. Титруют 0,004 М раствором бензэтония хлорида при энергичном встряхивании и разделении слоев после каждого добавления титранта до тех пор, пока хлороформный слой не приобретет постоянный (неисчезающий) зелёный цвет.

1 мл 0,004 М раствора бензэтония хлорида соответствует 1,154 мг C12H25NaO4S.

0,01 М раствор натрия додецилсульфата

2,884 г натрия додецилсульфата, в пересчёте на сухое вещество (105 ºС в течение 2 ч), растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 50,0 мл полученного раствора прибавляют 15 мл хлороформа, 10 мл 1 М раствора серной кислоты и 1 мл раствора, содержащего по 0,003 % диметилового жёлтого и орацетового синего В в хлороформе. Титруют 0,04 М раствором бензэтония хлорида при энергичном встряхивании и разделении слоев после каждого добавления титранта до тех пор, пока хлороформный слой не приобретет постоянный (неисчезающий) зелёный цвет.

1 мл 0,04 М раствора бензэтония хлорида соответствует 11,54 мг C12H25NaO4S.

0,1 М раствор натрия метилата

175 мл метанола безводного охлаждают в ледяной воде и прибавляют небольшими порциями около 2,5 г свеженарезанного натрия; когда металл растворится, доводят объём раствора толуолом до 1000,0 мл.

Установка титра. К 10 мл диметилформамида прибавляют 0,05 мл 0,3 % раствора тимолового синего в метаноле и титруют приготовленным раствором натрия метилата до синего окрашивания. Тотчас прибавляют около 0,200 г (точная навеска) бензойной кислоты РО, перемешивают до растворения и титруют приготовленным раствором натрия метилата до повторного получения синего окрашивания. Во время титрования раствор защищают от атмосферного углерода диоксида. Титр раствора натрия метилата устанавливают по объёму титранта, израсходованного в повторном титровании.

1 мл 0,1 М раствора натрия метилата соответствует 12,21 мг С7Н6О2.

Титр устанавливают непосредственно перед использованием.

0,1 М раствор натрия нитрита

7,5 г натрия нитрита растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. 0,300 г (точная навеска) сульфаниловой кислоты РО растворяют в 50 мл 2 М раствора хлористоводородной кислоты, прибавляют 3 г калия бромида и охлаждают в бане со льдом. Полученный раствор титруют приготовленным раствором натрия нитрита, устанавливая конечную точку титрования электрометрически, используя в качестве индикаторного платиновый электрод, а в качестве электрода сравнения – хлорсеребряный или насыщенный каломельный, или с помощью внутренних индикаторов и внешнего индикатора (йодкрахмальная бумага). Титрование с тропеолином 00 проводят до перехода окраски от красной к жёлтой, со смесью тропеолина 00 с метиленовым синим – от красно-фиолетовой к голубой, с нейтральным красным – от красно-фиолетовой к синей. Выдержку в конце титрования с нейтральным красным увеличивают до 2 мин.

Титрование с йодкрахмальной бумагой ведут до тех пор, пока капля титруемого раствора, взятая через 1 мин после прибавления раствора
натрия нитрита, не будет немедленно вызывать синее окрашивание на бумаге. Параллельно проводят контрольный опыт. В некоторых случаях выдержка может быть увеличена, о чем должно быть указано в фармакопейной статье.

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 17,32 мг С6Н7 NО3S.

0,1 М раствор натрия перйодата

21,4 г натрия перйодата растворяют в 500 мл воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 20,0 мл приготовленного раствора прибавляют 5 мл хлорной кислоты, закрывают колбу пробкой и перемешивают. Доводят рН раствора до 6,4 насыщенным раствором натрия гидрокарбоната. Прибавляют 10 мл 16,6 % раствора калия йодида, закрывают пробкой, перемешивают, выдерживают в течение 2 мин и титруют 0,025 М раствором натрия арсенита до слабо-жёлтого окрашивания, затем прибавляют 2 мл раствора крахмала и титруют до обесцвечивания раствора.

1 мл 0,025 М раствора натрия арсенита соответствует 5,348 мг NaIO4.

0,1 М раствор натрия тиосульфата

25 г натрия тиосульфата и 0,2 г натрия карбоната растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора той же водой до 1000,0 мл.

Установка титра

Способ 1. К 20,0 мл 0,0167 М раствора калия бромата прибавляют 40 мл воды, 10 мл 16,6 % раствора калия йодида, 5 мл хлористоводородной кислоты 25 % и титруют приготовленным раствором натрия тиосульфата, используя в качестве индикатора 1 мл 0,1 % раствора крахмала. Индикатор прибавляют в конце титрования.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 2,784 мг КВrO3.

Способ 2. Около 0,15 г (точная навеска) калия дихромата РО растворяют в 50 мл воды в колбе с притертой пробкой, прибавляют 2 г калия йодида, 5 мл хлористоводородной кислоты 25 %, закрывают пробкой, смоченной 10 % раствором калия йодида, и выдерживают в защищённом от света месте в течение 10 мин. Прибавляют 100 мл воды, промывая пробку водой, и титруют приготовленным раствором натрия тиосульфата до зеленовато-жёлтого окрашивания. Затем прибавляют 2 мл раствора крахмала и продолжают титровать до перехода синей окраски в светло-зеленую.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 4,903 мг K2Cr2O7.

Хранят в сосудах темного стекла с притертыми пробками в защищённом от света и углекислоты месте.

0,02 М раствор натрия тиосульфата

20 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объём раствора водой, свободной от углерода диоксида, до метки и перемешивают. Раствор используют свежеприготовленным.

Установка титра проводится так же, как описано при установке титра 0,005 М раствора натрия тиосульфата.

1 мл 0,02 М раствора натрия тиосульфата соответствует 0,5568 мг KBrO3 (способ 1) или 0,9806 мг K2Cr2O7 (способ 2).

0,01 М раствор натрия тиосульфата

10 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объём раствора водой, свободной от углерода диоксида, до метки и перемешивают. Раствор используют свежеприготовленным.

Установка титра проводится так же, как описано при установке титра 0,005 М раствора натрия тиосульфата.

1 мл 0,01 М раствора натрия тиосульфата соответствует 0,2784 мг KBrO3 (способ 1) или 0,4903 мг K2Cr2O7 (способ 2).

0,005 М раствор натрия тиосульфата

25,0 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата доводят водой, свободной от углерода диоксида, до 500,0 мл.

Используют свежеприготовленный раствор.

Установка титра

Способ 1. К 5,0 мл 0,0083 М раствора калия бромата прибавляют 35 мл воды, 10 мл 16,6 % раствора калия йодида, 5 мл хлористоводородной кислоты 25 % и титруют приготовленным раствором натрия тиосульфата, используя в качестве индикатора 1 мл 0,1 % раствора крахмала. Индикатор прибавляют в конце титрования.

1 мл 0,005 М раствора натрия тиосульфата соответствует 0,139 мг КBrО3.

Способ 2. Около 0,15 г (точная навеска) калия дихромата РО растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 250 мл, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают. 25 мл полученного раствора
калия дихромата помещают в колбу с притертой пробкой, прибавляют
0,2 г калия йодида, 3 мл хлористоводородной кислоты 25 %, закрывают пробкой, смоченной 10 % раствором калия йодида, и выдерживают в защищённом от света месте в течение 10 мин. Прибавляют 50 мл воды, промывая пробку водой, и титруют как описано при установке титра 0,1 М раствора натрия тиосульфата по способу 2.

1 мл 0,005 М раствора натрия тиосульфата соответствует 0,2452 мг K2Cr2O7.

0,002 М раствор натрия тиосульфата

20,0 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата доводят водой, свободной от углерода диоксида, до 1000,0 мл.

Используют свежеприготовленный раствор.

Установка титра

Способ 1. К 5,0 мл 0,0083 М раствора калия бромата прибавляют 35 мл воды, 10 мл 16,6 % раствора калия йодида, 5 мл хлористоводородной кислоты 25 % и титруют приготовленным раствором натрия тиосульфата, используя в качестве индикатора 1 мл 0,1 % раствора крахмала. Индикатор прибавляют в конце титрования.

1 мл 0,002 М раствора натрия тиосульфата соответствует 0,0556 мг КBrО3.

Способ 2. Около 0,15 г (точная навеска) калия дихромата РО растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 250 мл, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают. 25 мл полученного раствора калия дихромата помещают в колбу с притертой пробкой, прибавляют 0,2 г калия йодида, 3 мл хлористоводородной кислоты 25 %, закрывают пробкой, смоченной 10 % раствором калия йодида, и выдерживают в защищённом от света месте в течение 10 мин. Прибавляют 50 мл воды, промывая пробку водой, и титруют как описано при установке титра 0,1 М раствора натрия тиосульфата по способу 2.

1 мл 0,002 М раствора натрия тиосульфата соответствует 0,09808 мг K2Cr2O7.

0,1 М раствор натрия эдетата. 0,1 М раствор трилона Б.

37,2 г динатрия эдетата дигидрата растворяют в 500 мл воды, прибавляют 100 мл 1 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. 0,120 г цинка РО растворяют в 4 мл хлористоводородной кислоты 25 % и прибавляют 0,1 мл бромной воды; избыток брома удаляют кипячением, прибавляют 2 М раствор натрия гидроксида до слабокислой или нейтральной реакции, доводят водой до 200 мл, прибавляют 50 мг индикаторной смеси ксиленолового оранжевого и достаточное количество гексаметилентетрамина до фиолетово-розового окрашивания, прибавляют еще 2 г гексаметилентетрамина и титруют приготовленным раствором натрия эдетата до изменения окраски от фиолетово-розовой к жёлтой.

1 мл 0,1 М раствора натрия эдетата соответствует 6,54 мг Zn.

0,05 М раствор натрия эдетата. 0,05 М раствор трилона Б.

18,6 г динатрия эдетата дигидрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. 0,060 г цинка РО растворяют в 4 мл хлористоводородной кислоты 25 % и прибавляют 0,1 мл бромной воды. Далее поступают, как указано при установке титра 0,1 М раствора натрия эдетата.

1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 3,269 мг Zn.

0,025 М раствор натрия эдетата. 0,05 М раствор трилона Б.

9,3 г динатрия эдетата дигидрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. 0,060 г цинка РО растворяют в 4 мл хлористоводородной кислоты 25 % и прибавляют 0,1 мл бромной воды. Далее поступают, как указано при установке титра 0,1 М раствора натрия эдетата.

1 мл 0,025 М раствора натрия эдетата соответствует 1,6345 мг Zn.

0,02 М раствор натрия эдетата

7,44 г динатрия эдетата дигидрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. 0,030 г цинка РО растворяют в 4 мл хлористоводородной кислоты 25 % и прибавляют 0,1 мл бромной воды. Далее поступают, как указано при установке титра 0,1 М раствора натрия эдетата.

1 мл 0,02 М раствора натрия эдетата соответствует 1,308 мг Zn.

0,01 М раствор натрия эдетата

3,72 г динатрия эдетата дигидрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. 0,015 г цинка РО растворяют в 4 мл хлористоводородной кислоты 25 % и прибавляют 0,1 мл бромной воды. Далее поступают, как указано при установке титра 0,1 М раствора натрия эдетата.

1 мл 0,01 М раствора натрия эдетата соответствует 0,654 мг Zn.

0,002 М раствор натрия эдетата

10,0 мл 0,02 М раствора натрия эдетата доводят водой до 100,0 мл.

0,05 М раствор ртути(II) нитрата. 0,05 М раствор ртути(II) нитрата.

17,2 г ртути(II) нитрата растворяют в 50 мл 1 М раствора азотной кислоты и доводят водой до 1000,0 мл.

Установка титра. Около 0,150 г (точная навеска) натрия хлорида РО растворяют в 50 мл воды и титруют приготовленным раствором ртути(II) нитрата, используя в качестве индикатора 0,5 мл 1 % спиртового раствора дифенилкарбазона.

1 мл 0,05 М раствора ртути(II) нитрата соответствует 5,844 мг NaCl.

0,01 М раствор ртути(II) нитрата

100,0 мл 0,05 М раствор ртути(II) нитрата доводят водой до 500,0 мл.

0,1 М раствор серебра нитрата

17,0 г серебра нитрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра

Способ 1. Около 0,150 г (точная навеска) натрия хлорида РО растворяют в 50 мл воды и титруют приготовленным раствором серебра нитрата до появления красноватого осадка, используя в качестве индикатора 5 % раствор калия хромата. Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 5,844 мг NaCl.

Способ 2. Около 0,100 г (точная навеска) натрия хлорида РО растворяют в 30 мл воды и титруют приготовленным раствором нитрата серебра потенциометрически. Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора нитрата серебра соответствует 5,844 мг NaCl.

Хранят в защищённом от света месте.

0,05 М раствор серебра нитрата

250,0 мл 0,1 М раствора серебра нитрата доводят водой до 500,0 мл.

0,02 М раствор серебра нитрата

100,0 мл 0,1 М раствора серебра нитрата доводят водой до 500,0 мл.

0,01 М раствор серебра нитрата

50,0 мл 0,1 М раствора серебра нитрата доводят водой до 500,0 мл.

0,005 М раствор серебра нитрата

25,0 мл 0,1 М раствора серебра нитрата доводят водой до 500,0 мл.

0,001 М раствор серебра нитрата

5,0 мл 0,1 М раствора серебра нитрата доводят водой до 500,0 мл.

0,02 М раствор серебра нитрата в 2-пропаноле

3,4 г серебра нитрата растворяют в 2-пропаноле и доводят объём раствора 2-пропанолом до 1000,0 мл.

Установка титра. Около 0,10 г (точная навеска) высушенного в течение 2 ч при 130 °С калия бромида помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В коническую колбу помещают 10,0 мл полученного раствора, прибавляют 25 мл спирта 96 % и титруют потенциометрически приготовленным раствором серебра нитрата. Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,02 М раствора серебра нитрата соответствует 2,380 мг KBr.

Хранят в защищённом от света месте.

0,5 М раствор серной кислоты

30 мл серной кислоты концентрированной осторожно вливают в воду и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. 1,000 г (точная навеска) натрия карбоната безводного РО растворяют в 50 мл воды, прибавляют 0,1 мл 0,1 % раствора метилового оранжевого (раствор окрашивается в желтый цвет). Титруют приготовленным раствором серной кислоты до красновато-жёлтого окрашивания. Кипятят в течение около 2 мин (раствор снова приобретает жёлтое окрашивание), охлаждают и титруют вновь до повторного появления красновато-жёлтого окрашивания.

1 мл 0,5 М раствора серной кислоты соответствует 53,00 мг Na2CO3.

0,05 М раствор серной кислоты

100,0 мл 0,5 М раствора серной кислоты доводят водой до 1000,0 мл.

0,01 М раствор серной кислоты

20,0 мл 0,5 М раствора серной кислоты доводят водой до 1000,0 мл.

0,005 М раствор серной кислоты

10,0 мл 0,5 М раствора серной кислоты доводят водой до 1000,0 мл.

0,1 М раствор свинца(II) нитрата.

33 г свинца(II) нитрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 20,0 мл приготовленного раствора свинца(II) нитрата прибавляют 300 мл воды, 50 мг тритурации ксиленолового оранжевого и достаточное количество гексаметилентетрамина до появления фиолетово-розового окрашивания. Титруют 0,1 М раствором натрия эдетата до появления жёлтого окрашивания.

1 мл 0,1 М раствора натрия эдетата соответствует 33,12 мг Рb(NO3)2.

0,05 М раствор свинца(II) нитрата

16,5 г свинца(II) нитрата растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 50,0 мл приготовленного раствора прибавляют 300 мл воды. Далее поступают, как указано в установке титра 0,1 М раствора свинца нитрата.

0,1 М раствор тетрабутиламмония гидроксида

40 г тетрабутиламмония йодида растворяют в 90 мл метанола безводного, прибавляют 20 г тонко измельченного серебра оксида и энергично встряхивают в течение 1 ч. Центрифугируют несколько миллилитров смеси и проводят испытание жидкости над осадком на йодиды. При получении положительной реакции дополнительно прибавляют 2 г серебра оксида и встряхивают в течение последующих 30 мин; эту процедуру повторяют до тех пор, пока жидкость не будет свободна от йодидов. Смесь фильтруют через стеклянный фильтр, промывают реакционный сосуд и фильтр 3 порциями, по 50 мл каждая, толуола. К полученному фильтрату прибавляют промывной толуол и доводят объём раствора толуолом до 1000,0 мл. Через раствор пропускают сухой азот, свободный от углерода диоксида, в течение 5 мин.

Установка титра. К 10 мл диметилформамида прибавляют 0,05 мл 0,3 % раствора тимолового синего в метаноле и титруют приготовленным раствором тетрабутиламмония гидроксида до чистого синего окрашивания. Тотчас прибавляют 0,200 г (точная навеска) бензойной кислоты РО, перемешивают до растворения и продолжают титрование до синего окрашивания. Титр раствора тетрабутиламмония гидроксида устанавливают по объёму титранта, израсходованного в повторном титровании.

1 мл 0,1 М раствора тетрабутиламмония гидроксида соответствует 12,21 мг C7H6O2.

Титр устанавливают непосредственно перед использованием.

0,1 М раствор тетрабутиламмония гидроксида в 2-пропаноле

Раствор готовят, как указано для 0,1 М раствора тетрабутиламмония гидроксида, используя в качестве растворителя 2-пропанол вместо толуола.

Установка титра. Титр устанавливают, как указано для 0,1 М раствора тетрабутиламмония гидроксида.

0,01 М раствор тетрабутиламмония йодида

4 г тетрабутиламмония йодида растворяют в достаточном количестве воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 25,0 мл приготовленного раствора прибавляют 50 мл 0,01 М раствора серебра нитрата, 0,5 мл 2 М раствора азотной кислоты и титруют избыток серебра нитрата 0,01 М раствором аммония тиоцианата, используя в качестве индикатора 0,5 мл 0,2 % раствора железа(III) аммония сульфата.

1 мл 0,01 М раствора серебра нитрата соответствует 3,694 мг C16H36IN.

0,1 М раствор тетраэтиламмония гидроксида

30 г тетраэтиламмония йодида растворяют в 200 мл метанола и встряхивают в течение 1 ч с 25 г тонко измельченного серебра оксида в стеклянном сосуде с притёртой пробкой. По окончании встряхивания центрифугируют несколько миллилитров смеси и раствор испытывают на присутствие йодидов. При положительной реакции к основному раствору прибавляют еще 5 г серебра оксида и снова встряхивают в течение 30 мин; эту процедуру повторяют до тех пор, пока жидкость не будет свободна от йодидов; смесь фильтруют через стеклянный фильтр. Реакционную колбу ополаскивают 3 порциями, по 50 мл каждая, сухого бензола, бензольный раствор фильтруют через тот же фильтр и прибавляют к фильтрату. Фильтрат доводят бензолом до 1000,0 мл. Через полученный раствор пропускают сухой азот, свободный от углерода диоксида, в течение 5 мин.

Установка титра. К смеси 5 мл метанола и 20 мл ацетона прибавляют 0,05 мл 0,3 % раствора тимолового синего в метаноле и титруют приготовленным раствором тетраэтиламмония гидроксида до чистого синего окрашивания. Сразу же прибавляют около 0,200 г (точная навеска) бензойной кислоты РО, перемешивают до растворения и продолжают титрование до синего окрашивания. Титр устанавливают по объёму титранта, израсходованного при повторном титровании.

1 мл 0,1 М раствора тетраэтиламмония гидроксида соответствует 12,21 мг С7Н6О2.

0,05 М раствор титана(III) хлорида

51,4 мл титана(III) хлорида раствора 15 % помещают в мерную колбу вместимостью 1 л, прибавляют 50 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Установка титра. Проводят непосредственно перед использованием. 20,0 мл 0,1 М раствора железа(III) аммония сульфата помещают в герметичную колбу для титрования и пропускают через раствор углерода диоксид до полного удаления воздуха. Прибавляют около 35 мл 0,05 М раствора титана(III) хлорида, 5 мл 8 % раствора аммония тиоцианата и продолжают титрование раствором титана(III) хлорида до обесцвечивания раствора.

1 мл 0,1 М раствора железа(III) аммония сульфата соответствует 15,43 мг титана(III) хлорида TiCl3.

0,005 М раствор тория(IV) нитрата

2,761 г тория(IV) нитрата тетрагидрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. Около 0,1 г (точная навеска) натрия фторида, предварительно высушенного при 150 °С до постоянной массы, вносят в мерную колбу вместимостью 250 мл, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. К 20,0 мл полученного раствора прибавляют 0,6 мл ализарина S раствора 0,1 %, 5,0 мл буферного раствора рН 3,0 и титруют 0,005 М раствором тория(IV) нитрата до перехода жёлтой окраски в розово-жёлтую.

1 мл 0,005 М раствора тория(IV) нитрата соответствует 0,8398 мг натрия фторида.

0,1 М раствор уксусной кислоты

6,0 г уксусной кислоты ледяной доводят водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 25,0 мл приготовленного раствора уксусной кислоты прибавляют 0,5 мл 0,1 % раствора фенолфталеина и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 6,01 мг С2Н4О2.

2 М раствор хлористоводородной кислоты

170,0 мл хлористоводородной кислоты концентрированной доводят водой до объёма 1000,0 мл.

Установка титра. Около 2,000 г (точная навеска) натрия карбоната безводного РО растворяют в 50 мл воды, прибавляют 0,1 мл 0,1 % раствора метилового оранжевого (раствор окрашивается в желтый цвет) и титруют приготовленным раствором хлористоводородной кислоты до красновато-жёлтого окрашивания. Кипятят в течение 2 мин (раствор снова приобретает жёлтое окрашивание), охлаждают и продолжают титрование до красновато-жёлтого окрашивания.

1 мл 2 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 106,00 мг Na2CO3.

1 М раствор хлористоводородной кислоты

85,0 мл хлористоводородной кислоты концентрированной доводят водой до объёма 1000,0 мл.

Установка титра. Около 1,000 г (точная навеска) натрия карбоната безводного РО растворяют в 50 мл воды, прибавляют 0,1 мл 0,1 % раствора метилового оранжевого (раствор окрашивается в желтый цвет) и титруют приготовленным раствором хлористоводородной кислоты до красновато-жёлтого окрашивания. Кипятят в течение 2 мин (раствор снова приобретает жёлтое окрашивание), охлаждают и продолжают титрование до красновато-жёлтого окрашивания.

1 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 53,00 мг Na2CO3.

0,5 М раствор хлористоводородной кислоты

42,5 мл концентрированной хлористоводородной кислоты доводят водой до 1000,0 мл.

Установка титра. Около 0,600 г (точная навеска) натрия карбоната безводного РО растворяют в 100 мл воды. Далее поступают, как при установке титра 1 М раствора хлористоводородной кислоты.

1 мл 0,5 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 26,50 мг Na2CO3.

0,1 М раствор хлористоводородной кислоты

100,0 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты доводят водой до 1000,0 мл.

1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 5,30 мг Na2CO3.

0,05 М раствор хлористоводородной кислоты

10,0 мл 0,5 М раствора хлористоводородной кислоты доводят водой до 100,0 мл.

1 мл 0,05 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 2,65 мг Na2CO3.

0,02 М раствор хлористоводородной кислоты

20,0 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты доводят водой
до 1000,0 мл.

1 мл 0,02 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 1,06 мг Na2CO3.

0,01 М раствор хлористоводородной кислоты

10,0 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты доводят водой до 1000,0 мл.

1 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 0,53 мг Na2CO3.

0,5 М раствор хлористоводородной кислоты спиртовой

45,0 мл хлористоводородной кислоты концентрированной смешивают с 1000,0 мл этанола.

0,1 М раствор хлористоводородной кислоты спиртовой

8,5 мл хлористоводородной кислоты концентрированной доводят спиртом 96 %, свободным от альдегидов, до 1000,0 мл.

0,1 М раствор хлорной кислоты

К 900 мл уксусной кислоты ледяной прибавляют 8,5 мл хлорной кислоты, перемешивают, прибавляют 30 мл уксусного ангидрида и доводят объём раствора уксусной кислотой ледяной до 1000,0 мл, перемешивают и выдерживают в течение 24 ч. Содержание воды определяют методом К. Фишера без добавления метанола и, если необходимо, прибавляют воду или уксусный ангидрид до содержания воды от 0,1 до 0,2 %. Выдерживают в течение 24 ч.

Установка титра. Около 0,350 г (точная навеска) калия гидрофталата РО растворяют в 50 мл уксусной кислоты безводной, если необходимо, осторожно нагревая, охлаждают и титруют приготовленным раствором хлорной кислоты, используя в качестве индикатора 0,05 мл 0,5 % раствора кристаллического фиолетового, до перехода фиолетовой окраски раствора в голубовато-зеленую.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 20,42 мг C8H5KO4.

Примечание – Если температура, при которой проводится количественное определение, отличается от температуры, при которой был установлен титр 0,1 М раствора хлорной кислоты, то вводят температурную поправку. Объём (Vc), необходимый для количественного определения, вычисляют по формуле:

где t1 – температура, при которой устанавливают титр;
t2 – температура, при которой проводят количественное определение;
V – объём, израсходованный на титрование фактически, мл.

0,05 М раствор хлорной кислоты

50,0 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты доводят уксусной кислотой безводной до 100,0 мл.

0,1 М раствор хлорной кислоты в метаноле

К 8,5 мл хлорной кислоты прибавляют 500 мл метанола, очищенного от карбонилсодержащих соединений, и доводят объём раствора тем же метиловым спиртом до 1000,0 мл.

Установка титра. Около 0,1 г (точная навеска) натрия салицилата, предварительно дважды перекристаллизованного из спирта 96 % и высушенного до постоянной массы, растворяют в 10 мл метанола, прибавляют равный объём ацетона, 2 капли 0,3 % раствора тимолового синего в метаноле и титруют приготовленным раствором хлорной кислоты до перехода окраски от жёлтой к розовой.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 16,01 мг С7Н5NaO3.

0,1 М раствор хлорной кислоты в нитрометане

К 8,5 мл раствора хлорной кислоты прибавляют 500 мл нитрометана и доводят объём раствора нитрометаном до 1000,0 мл.

Установка титра. Как описано при установке титра 0,1 М раствора хлорной кислоты.

0,1 М раствор церия(IV) сульфата

40,4 г церия(IV) сульфата растворяют в смеси 500 мл воды и 50 мл серной кислоты концентрированной; охлаждают и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 25,0 мл приготовленного раствора церия(IV) сульфата прибавляют 2,0 г калия йодида, 150 мл воды и тотчас титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата, используя в качестве индикатора 1 мл 0,1 % раствора крахмала.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 40,43 мг Се(SO4)2 ⋅ 4H2O.

0,01 М раствор церия(IV) сульфата

10,0 мл 0,1 М раствора церия(IV) сульфата доводят водой до 100,0 мл.

0,1 М раствор цинка сульфата

29 г цинка сульфата растворяют в воде и доводят объём раствора
водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 20,0 мл приготовленного раствора цинка сульфата прибавляют 5 мл уксусной кислоты раствора 2 М, доводят водой до 200 мл. Далее поступают, как при установке титра 0,05 М раствора цинка хлорида.

1 мл 0,1 М раствора натрия эдетата соответствует 28,75 мг ZnSO4·7H2O.

0,05 М раствор цинка сульфата

14,5 г цинка сульфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 40,0 мл приготовленного раствора цинка сульфата прибавляют 5 мл уксусной кислоты раствора 2 М, разбавляют водой до 200 мл, прибавляют 50 мг тритурации ксиленолового оранжевого и достаточное количество гексаметилентетрамина до появления фиолетово-розового окрашивания, прибавляют еще 2 г гексаметилентетрамина и титруют 0,1 М раствором натрия эдетата до перехода окрашивания от фиолетово-розового до жёлтого.

1 мл 0,1 М раствора натрия эдетата соответствует 28,75 мг ZnSO4·7H2O.

0,02 М раствор цинка сульфата

5,8 г цинка сульфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 100,0 мл приготовленного раствора цинка сульфата прибавляют 5 мл уксусной кислоты раствора 2 М, разбавляют водой до 200 мл. Далее поступают, как при установке титра 0,05 М раствора цинка сульфата.

1 мл 0,1 М раствора натрия эдетата соответствует 28,75 мг ZnSO4·7H2O.

0,01 М раствор цинка сульфата

2,9 г цинка сульфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 200,0 мл приготовленного раствора цинка сульфата прибавляют 5 мл уксусной кислоты раствора 2 М. Далее поступают, как при установке титра 0,05 М раствора цинка сульфата.

1 мл 0,1 М раствора натрия эдетата соответствует 28,75 мг ZnSO4·7H2O.

0,05 М раствор цинка хлорида

6,82 г цинка хлорида растворяют в воде. Если необходимо, по каплям прибавляют хлористоводородную кислоту разведенную 7,3 % до исчезновения опалесценции и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра. К 20,0 мл приготовленного раствора цинка хлорида прибавляют 5 мл уксусной кислоты раствора 2 М, доводят водой до 200 мл, прибавляют 50 мг тритурации ксиленолового оранжевого и достаточное количество гексаметилентетрамина до появления фиолетово-розового окрашивания, прибавляют еще 2 г гексаметилентетрамина и титруют 0,1 М раствором натрия эдетата до перехода окрашивания от фиолетово-розового до жёлтого.

1 мл 0,1 М раствора натрия эдетата соответствует 13,63 мг ZnCl2.

0,05 М раствор щавелевой кислоты

6,3 г щавелевой кислоты дигидрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Установка титра

Способ 1. К 20,0 мл приготовленного раствора щавелевой кислоты титруют 0,1 М натрия гидроксида используя в качестве индикатора 0,5–1,0 мл 1 % раствора фенолфталеина.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 4,502 мг щавелевой кислоты безводной C2H2O4.

Способ 2. К 20,0 мл приготовленного раствора щавелевой кислоты прибавляют 15 мл серной кислоты раствора 1 М, нагревают до 70–80 °С и титруют 0,02 М раствором калия перманганата до появления слабо-розового окрашивания. Вначале титрования реакция протекает медленно, затем ускоряется.

1 мл 0,02 М раствора калия перманганата соответствует 4,502 мг щавелевой кислоты безводной C2H2O4.

Хранят в защищённом от света месте.

0,005 М раствор щавелевой кислоты

10,0 мл 0,05 М раствора щавелевой кислоты доводят водой до 100,0 мл.

Установка титра. Как описано при установке титра 0,02 М раствора калия перманганата.

Раствор используют свежеприготовленным.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.3.0003 Буферные растворы

Взамен ОФС.1.3.0003.15

Буферные растворы – растворы с определённой концентрацией водородных ионов, содержащие сопряженную кислотно-основную пару, обеспечивающую устойчивость величины их водородного показателя (рН) при незначительном изменении концентрации, либо при прибавлении небольшого количества кислоты или основания.

Забуференные растворы ‒ это системы, в которых конкретный ион находится в равновесии с веществами, способными связывать или высвобождать этот ион. Забуференные растворы способны сохранять активность определенного иона при прибавлении веществ, которые, как ожидается, могут изменять активность этого иона.

В фармакопейном анализе применяют кислотные буферные системы (раствор слабой кислоты и ее соли) и основные буферные системы (раствор слабого основания и его соли). рН таких смесей мало меняется при разведении в довольно широких пределах (1:100), а также при прибавлении небольших количеств сильных кислот или оснований.

Буферный раствор характеризуется значением создаваемого рН и буферной ёмкостью. Буферная ёмкость системы определяется количеством моль кислоты или основания (в грамм-эквивалентах на 1 л), прибавление которых изменяет рН 1 л (дм3) буферного раствора на 1 единицу рН. Ёмкость буферного раствора регулируется концентрацией буферных веществ.

Буферные растворы используются для установления и поддержания активности иона в узком диапазоне рН.

Буферные растворы используются в основном:

- а) для калибровки рН-метров;

- б) в аналитических методиках;

- в) для достижения изотоничности при приготовлении жидких лекарственных форм;

- г) для поддержания стабильности дозированных лекарственных форм.

Компоненты буферной системы для целей химического анализа должны сочетаться с определяемым веществом и используемыми реактивами. Буферные и забуференные растворы готовят на воде. Также можно использовать воду дистиллированную и воду для хроматографии. Буферные и забуференные растворы после приготовления следует тщательно перемешать.

Если в методике приготовления буферного раствора предусмотрено доведение pH, его готовят вначале в градуированном химическом стакане, а после доведения pH количественно переносят в мерную колбу и доводят объём раствора водой до метки. При отсутствии стадии доведения рН, буферный раствор сразу готовят в мерной колбе.

Ацетоновый забуференный раствор

8,15 г натрия ацетата и 42,0 г натрия хлорида растворяют в воде, прибавляют 68,0 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты, 150 мл ацетона и доводят объём раствора водой до 500,0 мл.

Буферный раствор рН 2,0

6,57 г калия хлорида растворяют в воде, прибавляют 119,0 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Фосфатный буферный раствор рН 2,0

8,95 г динатрия гидрофосфата дигидрата и 3,40 г калия дигидрофосфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл. Доводят рН до 2,0 потенциометрически с помощью фосфорной кислоты концентрированной.

Сульфатный буферный раствор рН 2,0

132,1 г аммония сульфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 500,0 мл (раствор I).

Осторожно при постоянном охлаждении и перемешивании прибавляют 14 мл серной кислоты концентрированной к 400,0 мл воды; охлаждают и доводят объём раствора водой до 500,0 мл (раствор II).

Смешивают равные объёмы растворов I и II; если необходимо, доводят рН до 2,0 потенциометрически раствором I или II.

Буферный раствор рН 2,2

6,7 мл фосфорной кислоты концентрированной смешивают с 250 мл воды, прибавляют 50 мл натрия гидроксида раствора 1 М, доводят рН до 2,2 потенциометрически с помощью натрия гидроксида раствора 1 М и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Буферный раствор рН 2,5

100,0 г калия дигидрофосфата растворяют в 800 мл воды, доводят рН до 2,5 потенциометрически с помощью хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Буферный раствор рН 2,5 (1)

4,9 г фосфорной кислоты разведенной 10 % смешивают с 250 мл воды, доводят рН до 2,5 потенциометрически с помощью раствора натрия гидроксида разведенного 8,5 % и доводят объём раствора водой до 500,0 мл.

0,1 М фосфатный буферный раствор рН 2,5

13,8 г натрия дигидрофосфата моногидрата растворяют в воде. Доводят рН до 2,5 потенциометрически с помощью фосфорной кислоты разведённой 10 % и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Буферный раствор рН 3,0

21,0 г лимонной кислоты растворяют в 200,0 мл 1 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

40,3 мл полученного раствора доводят 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до 100,0 мл.

1,0 М цитратный буферный раствор рН 3,0

19,2 г безводной лимонной кислоты растворяют в 80,0 мл воды. Доводят рН до 3,0 потенциометрически с помощью 1 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

0,25 М цитратный буферный раствор рН 3,0

4,8 г безводной лимонной кислоты растворяют в 80,0 мл воды. Доводят рН до 3,0 потенциометрически с помощью 1 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

0,2 М фосфатный буферный раствор рН 3,0

24,0 г натрия дигидрофосфата безводного растворяют в воде. Доводят рН до 3,0 потенциометрически с помощью фосфорной кислоты разведённой 10 % и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

0,1 М фосфатный буферный раствор рН 3,0

12,0 г натрия дигидрофосфата безводного растворяют в воде. Доводят рН до 3,0 потенциометрически с помощью фосфорной кислоты разведенной 10 % и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Фосфатный буферный раствор рН 3,0

0,7 мл фосфорной кислоты концентрированной смешивают с 100 мл воды и доводят объём раствора водой до 900,0 мл. Доводят рН до 3,0 с помощью раствора натрия гидроксида концентрированного и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Фосфатный буферный раствор рН 3,0 (1)

3,40 г калия дигидрофосфата растворяют в 900 мл воды. Доводят рН до 3,0 потенциометрически с помощью фосфорной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Фосфатный буферный раствор рН 3,0 (2)

5,40 г калия дигидрофосфата растворяют в 900 мл воды. Доводят рН до 3,0 потенциометрически с помощью фосфорной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Фосфатный буферный раствор рН 3,2

900,0 мл 4 г/л раствора натрия дигидрофосфата смешивают с 100 мл 2,5 г/л раствора фосфорной кислоты концентрированной. Если необходимо, доводят рН до 3,2 потенциометрически раствором натрия дигидрофосфата или фосфорной кислоты концентрированной.

Фосфатный буферный раствор рН 3,2 (1)

Доводят рН до 3,2 потенциометрически для 35,8 г/л раствора динатрия гидрофосфата додекагидрата c помощью фосфорной кислоты разведённой 10 %.

100,0 мл полученного раствор доводят водой до объёма 2000,0 мл.

*Фосфатный буферный раствор рН 3,25 *

1,36 г калия дигидрофосфата растворяют в воде, доводят рН до 3,25±0,05 потенциометрически с помощью фосфорной кислоты разведённой 10 %. Доводят объём раствора водой до 1000,0 мл и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Фосфатный буферный раствор рН 3,3

К 0,05 М раствору калия дигидрофосфата приливают 0,05 М раствор фосфорной кислоты до рН 3,3.

Буферный раствор рН 3,5

25,0 г аммония ацетата растворяют в 25,0 мл воды, прибавляют 38,0 мл хлористоводородной кислоты 25 %. Если необходимо, доводят рН до 3,5 потенциометрически с помощью хлористоводородной кислоты разведенной 7,3 % или 10 % раствора аммиака и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Фосфатный буферный раствор рН 3,5

68,0 г калия дигидрофосфата растворяют в воде, доводят рН до 3,5 потенциометрически с помощью фосфорной кислоты концентрированной. Доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Фосфатный буферный раствор рН 3,5 (1)

3,4 г калия дигидрофосфата растворяют в воде, доводят рН до 3,5 потенциометрически с помощью фосфорной кислоты концентрированной. Доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Буферный раствор рН 3,6

250,0 мл 0,2 М раствора калия гидрофталата смешивают с 11,94 мл 0,2 М раствора хлористоводородной кислоты и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Буферный раствор рН 3,7

15,0 мл уксусной кислоты разведенной 30 % смешивают с 60,0 мл спирта 96 % и 20,0 мл воды. Доводят рН до 3,7 потенциометрически с помощью раствора аммиака и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

0,25 М цитратный буферный раствор рН 4,0

4,8 г безводной лимонной кислоты растворяют в 80,0 мл воды. Доводят рН до 4,0 потенциометрически с помощью 1 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

0,025 М Фосфатный буферный раствор рН 4,0

3,4 г калия дигидрофосфата растворяют в 800 мл воды. Доводят рН до 4,0 потенциометрически с помощью фосфорной кислоты разведённой 10 % и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Забуференный раствор меди сульфата рН 4,0

0,25 г меди(II) сульфата и 4,5 г аммония ацетата растворяют в уксусной кислоте разведенной 12 % и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Ацетатный буферный раствор рН 4,3

136,0 г натрия ацетата растворяют в 600 мл воды и прибавляют уксусную кислоту до рН 4,3. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объём раствора водой до метки.

Ацетатный буферный раствор рН 4,4

136,0 г натрия ацетата и 77,0 г аммония ацетата растворяют в 600 мл воды, прибавляют 200 мл уксусной кислоты ледяной и доводят значение рН уксусной кислотой ледяной до 4,4. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объём раствора водой до метки.

Фталатный буферный раствор рН 4,4

2,042 г калия гидрофталата растворяют в 50,0 мл воды, прибавляют
7,5 мл 0,2 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 200,0 мл.

0,05 М фосфатный буферный раствор рН 4,5

6,80 г калия дигидрофосфата растворяют в 1000,0 мл воды.

Ацетатный буферный раствор рН 4,5

77,1 г аммония ацетата растворяют в воде, прибавляют 70,0 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Натрия ацетатный буферный раствор рН 4,5

63,0 г натрия ацетата безводного растворяют в воде, прибавляют 90,0 мл уксусной кислоты разведенной 30 %. Доводят рН до 4,5 потенциометрически уксусной кислотой разведенной 30 % и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Ацетатный буферный раствор рН 4,6

5,4 г натрия ацетата растворяют в 50,0 мл воды, прибавляют 2,4 г уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора водой до 100,0 мл; если необходимо, доводят рН до 4,6 потенциометрически уксусной кислотой ледяной.

Сукцинатный буферный раствор рН 4,6

11,8 г янтарной кислоты растворяют в смеси 600,0 мл воды и 82,0 мл 1 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Ацетатный буферный раствор рН 4,7

136,1 г натрия ацетата растворяют в 500,0 мл воды. 250,0 мл полученного раствора смешивают с 250,0 мл уксусной кислоты разведенной 12 %. Встряхивают дважды со свежеприготовленным отфильтрованным 0,1 г/л раствором дитизона в хлороформе. Встряхивают с углерода тетрахлоридом до обесцвечивания экстракта. Водный слой фильтруют для удаления следов углерода тетрахлорида.

Ацетатный буферный раствор рН 5,0

К 120,0 мл 6,0 г/л раствора уксусной кислоты ледяной прибавляют 100,0 мл 0,1 М раствора калия гидроксида и 250,0 мл воды, перемешивают. Доводят рН до 5,0 потенциометрически с помощью 6 г/л раствора уксусной кислоты ледяной или 0,1 М раствора калия гидроксида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Ацетатный буферный раствор рН 5,0 (1)

50 г аммония ацетата растворяют в 800 мл воды, прибавляют 10 мл уксусной кислоты ледяной, перемешивают. Доводят рН до 5,0 потенциометрически с помощью уксусной кислоты ледяной или 0,1 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

1,0 М бария ацетата буферный раствор рН 5,0

63,86 г бария ацетата помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл, растворяют в 200 мл воды, доводят рН раствора до 5,0±0,1 с помощью уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора водой до метки.

0,1 М бария ацетата буферный раствор рН 5,0

25,54 г бария ацетата растворяют в 900 мл воды, доводят рН раствора до 5,0±0,1 с помощью уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора водой до 1000 мл.

Цитратный буферный раствор рН 5,0

20,1 г лимонной кислоты и 8,0 г натрия гидроксида растворяют в 800 мл воды. Доводят рН до 5,0 потенциометрически с помощью хлористоводородной кислоты разведенной 7,3 % и доводят объём раствора водой до 1000 мл.

Фосфатный буферный раствор рН 5,0

2,72 г калия дигидрофосфата растворяют в 800,0 мл воды. Доводят рН до 5,0 потенциометрически с помощью 1 М раствора калия гидроксида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Фосфатный буферный раствор рН 5,0 (1)

250 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М доводят натрия гидроксида раствором 10 % до рН 5,0 и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Буферный раствор рН 5,2

1,02 г калия гидрофталата растворяют в 30,0 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Буферный раствор рН 5,25 для корректировки общей ионной силы

58,5 г натрия хлорида, 61,5 г натрия ацетата, 5,0 г циклогексилен-динитрилотетрауксусной кислоты и 57,0 мл уксусной кислоты ледяной растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 500,0 мл. Доводят рН до 5,25±0,25 натрия гидроксида раствором 335 г/л и доводят объём раствора водой до 1000 мл.

0,067 М фосфатный буферный раствор рН 5,4

Смешивают необходимые объёмы 23,99 г/л раствора динатрия гидрофосфата додекагидрата и 9,12 г/л раствора натрия дигидрофосфата моногидрата, чтобы получить рН 5,4. Доводят рН до 5,4 потенциометрически.

Буферный раствор рН 5,5

54,4 г натрия ацетата растворяют в 50,0 мл воды, если необходимо, нагревают до температуры 35 °С. После охлаждения полученного раствора к нему медленно прибавляют 10,0 мл уксусной кислоты безводной, перемешивают и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Ацетатный буферный раствор рН 5,5

2,05 г натрия ацетата безводного растворяют в 800 мл воды, доводят рН раствора ледяной уксусной кислотой до 5,5 и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Ацетатно-эдетатный буферный раствор рН 5,5

250,0 г аммония ацетата и 15,0 г динатрия эдетата дигидрата растворяют в 400,0 мл воды и прибавляют 125,0 мл уксусной кислоты ледяной.

Фосфатный буферный раствор рН 5,5

Раствор I. 13,61 г калия дигидрофосфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Раствор II. 35,81 г динатрия гидрофосфата додекагидрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Смешивают 96,4 мл раствора I и 3,6 мл раствора II.

Фосфатно-цитратный буферный раствор рН 5,5

56,85 мл 28,4 г/л раствора динатрия гидрофосфата безводного смешивают с 43,15 мл 21,0 г/л раствора лимонной кислоты.

Фосфатный буферный раствор рН 5,8

1,19 г динатрия гидрофосфата дигидрата и 8,25 г калия дигидрофосфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Ацетатный буферный раствор рН 6,0

100,0 г аммония ацетата растворяют в 300,0 мл воды, прибавляют 4,1 мл уксусной кислоты ледяной. Если необходимо, доводят рН до 6,0 с помощью раствора аммиака или уксусной кислоты разведенной 30 % и доводят объём раствора водой до 500,0 мл.

Диэтиламмония фосфата буферный раствор рН 6,0

68,0 мл фосфорной кислоты концентрированной осторожно доводят водой до 500,0 мл. 25,0 мл полученного раствора смешивают с 450,0 мл воды и 6,0 мл диэтиламина. Если необходимо, доводят рН до (6 ± 0,05) потенциометрически с помощью диэтиламина или кислоты фосфорной концентрированной и доводят объём раствора водой до 500,0 мл.

1 М морфолиноэтансульфонатный буферный раствор pH 6,0

В химический стакан вместимостью 250 мл помещают 48,8 г 2-(N-морфолино)этансульфоновой кислоты, растворяют в 200 мл воды и прибавляют 25 мл натрия гидроксида раствора 2 М. Доводят рН до 6,0 потенциометрически с помощью натрия гидроксида раствора 2 М. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 250 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Фосфатный буферный раствор рН 6,0

63,2 мл 71,5 г/л раствора динатрия гидрофосфата додекагидрата смешивают с 36,8 мл 21 г/л раствора лимонной кислоты.

Фосфатный буферный раствор рН 6,0 (1)

6,8 г натрия дигидрофосфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл. Доводят рН до 6,0 потенциометрически с помощью натрия гидроксида раствора концентрированного.

Фосфатный буферный раствор рН 6,0 (2)

250,0 мл 0,2 М раствора калия дигидрофосфата смешивают с 28,5 мл 0,2 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Фосфатный буферный раствор рН 6,4

2,5 г динатрия гидрофосфата додекагидрата, 2,5 г натрия дигидрофосфата дигидрата и 8,2 г натрия хлорида растворяют в 950,0 мл воды. Если необходимо, доводят рН до 6,4 потенциометрически с помощью 1 М раствора натрия гидроксида или 1 М раствора хлористоводородной кислоты и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Фосфатный буферный раствор рН 6,4 (1)

1,78 г динатрия гидрофосфата дигидрата, 1,36 г калия дигидрофосфата и 7,02 г натрия хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

0,5 М фталатный буферный раствор рН 6,4

100,0 г калия гидрофталата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл. Доводят рН до 6,4 потенциометрически с помощью раствора натрия гидроксида концентрированного.

Буферный раствор рН 6,5

60,5 г динатрия гидрофосфата додекагидрата и 46,0 г калия дигидрофосфата растворяют в воде, прибавляют 100,0 мл 0,02 М раствора натрия эдетата, 20 мг ртути(II) хлорида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Фосфатный буферный раствор рН 6,5

2,75 г натрия дигидрофосфата и 4,5 г натрия хлорида растворяют в 500 мл воды. Доводят рН до 6,5 потенциометрически с помощью фосфатного буферного раствора рН 8,5.

0,1 М фосфатный буферный раствор рН 6,5

13,80 г натрия дигидрофосфата моногидрата растворяют в 900,0 мл воды. Доводят рН до 6,5 потенциометрически с помощью раствора натрия гидроксида концентрированного и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Имидазольный буферный раствор рН 6,5

6,81 г имидазола, 1,23 г магния сульфата и 0,73 г кальция сульфата растворяют в 752 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты. Если необходимо, доводят рН до 6,5 потенциометрически 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Фосфатный буферный раствор рН 6,6

250,0 мл 0,2 М раствора калия дигидрофосфата смешивают с 89,0 мл 0,2 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

0,1 М фосфатный буферный раствор рН 6,7

Растворяют 15,6 г натрия дигидрофосфата дигидрата в воде и доводят объём раствора водой до 1 л.

Растворяют 17,8 г динатрия гидрофосфата дигидрата в воде и доводят объём раствора водой до 1 л.

Смешивают оба раствора, проверяют значение рН и при необходимости доводят его до 6,7.

Фосфатный забуференный физиологический раствор рН 6,8

1,0 г калия дигидрофосфата, 2,0 г дикалия гидрофосфата и 8,5 г натрия хлорида растворяют в 900 мл воды. Если необходимо, доводят рН до 6,8 потенциометрически 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты или 0,1 М раствором натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Фосфатный буферный раствор рН 6,8

77,3 мл 71,5 г/л раствора динатрия гидрофосфата додекагидрата смешивают с 22,7 мл 21 г/л раствора лимонной кислоты.

Фосфатный буферный раствор рН 6,8 (1)

51,0 мл 27,2 г/л раствора калия дигидрофосфата смешивают с 49,0 мл 71,6 г/л раствора динатрия гидрофосфата додекагидрата. Если необходимо, доводят рН до 6,8 потенциометрически исходным раствором калия дигидрофосфата или динатрия гидрофосфата.

Хранят при температуре от 2 до 8 °С.

Фосфатный буферный раствор рН 6,8 (2)

Хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М и натрия фосфата раствор 0,2 М смешивают в соотношении 3:1 и доводят рН полученного раствора до 6,80±0,05 с помощью хлористоводородной кислоты раствора 2 М или натрия гидроксида раствора 2 М.

Фосфатный буферный раствор рН 6,8 (3)

28,65 г динатрия гидрофосфата додекагидрата и 10,89 г калия дигидрофосфата растворяют в 800 мл воды, доводят рН полученного раствора до 6,8±0,05 с помощью 2 М раствора фосфорной кислоты или 2 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора до 1 л.

Фосфатный буферный раствор рН 6,8 (4).

50,0 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М смешивают с 23,65 мл натрия гидроксида раствора 0,2 М, при необходимости доводят рН полученного раствора до 6,8±0,05 с помощью 2 М раствора фосфорной кислоты или 2 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой свободной от диоксида углерода до 200,0 мл.

1 М трис-гидрохлорида буферный раствор рН 6,8

60,6 г трис(гидроксиметил)аминометана растворяют в 400 мл воды, доводят рН до 6,8 потенциометрически с помощью хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 500,0 мл.

Ацетатно-альбуминовый буферный раствор pH 7,0

32 мг кальция ацетата и 10 мг альбумина бычьего растворяют в 60 мл воды. Прибавляют 580 мкл уксусной кислоты ледяной и доводят рН до 7,0 потенциометрически с помощью натрия гидроксида раствора 2 М. Доводят объём раствора до 100 мл и фильтруют.

Малеатный буферный раствор рН 7,0

10,0 г натрия хлорида, 6,06 г трис(гидроксиметил)аминометана и 4,90 г малеинового ангидрида растворяют в 900,0 мл воды. Доводят рН до 7,0 потенциометрически с помощью 170 г/л раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Хранят при температуре от 2 до 8 °С. Срок годности – 3 сут.

Фосфатно-альбуминовый буферный раствор pH 7,0

68 мг калия дигидрофосфата и 10 мг альбумина бычьего растворяют в 30 мл воды. При необходимости доводят рН до 7,0 потенциометрически с помощью калия гидроксида раствора 10 %. Доводят объём раствора до 50 мл и фильтруют.

Фосфатный буферный раствор рН 7,0

82,4 мл динатрия гидрофосфата додекагидрата раствора 71,5 г/л смешивают с 17,6 мл лимонной кислоты раствора 21 г/л.

Фосфатный буферный раствор рН 7,0 (1)

250,0 мл 0,2 М раствора калия дигидрофосфата смешивают с 148,2 мл 8 г/л раствора натрия гидроксида. Если необходимо, доводят рН до 7,0 потенциометрически исходным раствором калия дигидрофосфата или натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Фосфатный буферный раствор рН 7,0 (2)

50,0 мл 136 г/л раствора калия дигидрофосфата смешивают с 29,5 мл 1 М раствора натрия гидроксида, доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Доводят рН до 7,0 потенциометрически исходным раствором калия дигидрофосфата или натрия гидроксида.

Фосфатный буферный раствор рН 7,0 (3)

5,0 г калия дигидрофосфата и 11,0 г дикалия гидрофосфата растворяют
в 900,0 мл воды. Доводят рН до 7,0 потенциометрически с помощью фосфорной кислоты разведенной 10 % или 8,5 % раствора натрия гидроксида разведенного и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Фосфатный буферный раствор рН 7,0 (4)

28,4 г динатрия гидрофосфата безводного и 18,2 г калия дигидрофосфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 500,0 мл.

Фосфатный буферный раствор рН 7,0 (5)

28,4 г динатрия гидрофосфата безводного растворяют в 800,0 мл воды. Доводят рН до 7,0 потенциометрически с помощью 30 % раствора фосфорной кислоты и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

0,1 М фосфатный буферный раствор рН 7,0

1,361 г калия дигидрофосфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Доводят рН до 7,0 потенциометрически с помощью 35 г/л раствора динатрия гидрофосфата додекагидрата.

0,067 М фосфатный буферный раствор рН 7,0

Раствор I. 0,908 г калия дигидрофосфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Раствор II. 2,38 г динатрия гидрофосфата додекагидрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

38,9 мл раствора I смешивают с 61,1 мл раствора II; если необходимо, доводят рН до 7,0 потенциометрически раствором I или II.

0,063 М фосфатный буферный раствор рН 7,0

5,18 г динатрия гидрофосфата безводного и 3,65 г натрия дигидрофосфата моногидрата растворяют в 950,0 мл воды. Доводят рН до 7,0 потенциометрически с помощью фосфорной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

0,03 М фосфатный буферный раствор рН 7,0

5,2 г дикалия гидрофосфата растворяют в 900,0 мл воды. Доводят рН до 7,0 с помощью фосфорной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

0,025 М фосфатный буферный раствор рН 7,0

1 объём 0,063 М фосфатного буферного раствора рН 7,0 смешивают с 1,5 объёмами воды.

Тетрабутиламмония буферный раствор рН 7,0

6,16 г аммония ацетата растворяют в смеси 15,0 мл 400 г/л раствора тетрабутиламмония гидроксида и 185,0 мл воды. Если необходимо, доводят рН до 7,0 потенциометрически с помощью азотной кислоты концентрированной.

Буферный раствор рН 7,2

250,0 мл 0,2 М раствора калия дигидрофосфата смешивают с 175,0 мл 0,2 М раствора натрия гидроксида. Доводят рН до 7,2 потенциометрически 0,2 М раствором калия дигидрофосфата или 0,2 М раствором натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Фосфатный буферный раствор рН 7,2

87,0 мл динатрия гидрофосфата додекагидрата раствора 71,2 г/л смешивают с 13,0 мл лимонной кислоты раствора 21 г/л.

Забуференный солевой раствор рН 7,2

8,0 г натрия хлорида, 0,2 г калия хлорида, 0,1 г кальция хлорида безводного, 0,1 г магния хлорида, 3,18 г динатрия гидрофосфата додекагидрата и 0,2 г калия дигидрофосфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Фосфатно-альбуминовый забуференный физиологический раствор рН 7,2

10,75 г динатрия гидрофосфата додекагидрата, 7,6 г натрия хлорида и 10,0 г альбумина бычьего растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл. Непосредственно перед использованием доводят рН до 7,2 потенциометрически с помощью 8,5 % раствора натрия гидроксида разведенного или фосфорной кислоты разведенной 10 %.

Фосфатно-альбуминовый забуференный физиологический раствор рН 7,2 (1)

10,75 г динатрия гидрофосфата додекагидрата, 7,6 г натрия хлорида, 1,0 г альбумина бычьего растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл. Непосредственно перед использованием доводят рН до 7,2 потенциометрически с помощью 8,5 % раствора натрия гидроксида разведенного или фосфорной кислоты разведенной 10 %.

Имидазольный буферный раствор рН 7,3

3,4 г имидазола и 5,8 г натрия хлорида растворяют в воде, прибавляют 18,6 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл; если необходимо, доводят рН до 7,3 потенциометрически 1 М раствором хлористоводородной кислоты.

Буферный раствор рН 7,4

0,6 г калия дигидрофосфата, 6,4 г динатрия гидрофосфата додекагидрата и 5,85 г натрия хлорида растворяют в воде, если необходимо, доводят рН до 7,4 потенциометрически 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты или 0,1 М раствором натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Барбиталовый буферный раствор рН 7,4

50,0 мл раствора, содержащего 19,44 г/л натрия ацетата и 29,46 г/л барбитал-натрия, смешивают с 50,5 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты, прибавляют 20,0 мл 85 г/л раствора натрия хлорида и доводят объём раствора водой до 250,0 мл.

Фосфатный буферный раствор рН 7,4

393,4 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида смешивают с 250,0 мл 0,2 М раствора калия дигидрофосфата.

Трис(гидроксиметил)аминометана—натрия хлорида буферный раствор рН 7,4

6,08 г трис(гидроксиметил)аминометана и 8,77 г натрия хлорида растворяют в 500 мл воды, прибавляют 10,0 г альбумина бычьего. Доводят рН до 7,4 потенциометрически с помощью хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Трис – натрия ацетата буферный раствор рН 7,4

6,3 г трис(гидроксиметил)аминометана и 4,9 г натрия ацетата безводного растворяют в 900,0 мл воды. Доводят рН до 7,4 с помощью серной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Трис – натрия ацетата – натрия хлорида буферный раствор рН 7,4

30,0 г трис(гидроксиметил)аминометана, 14,5 г натрия ацетата безводного, 14,6 г натрия хлорида растворяют в 900,0 мл воды и прибавляют 0,50 г альбумина бычьего. Доводят рН до 7,4 потенциометрически с помощью серной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Фосфатный забуференный физиологический раствор рН 7,4

2,38 г динатрия гидрофосфата додекагидрата, 0,19 г калия дигидрофосфата и 8,0 г натрия хлорида растворяют в воде, если необходимо, доводят рН до 7,4 потенциометрически 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты или 0,1 М раствором натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Боратный буферный раствор рН 7,5

2,5 г натрия хлорида, 2,85 г натрия тетрабората и 10,5 г борной кислоты растворяют в воде, если необходимо, доводят рН до 7,5 потенциометрически 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты или 0,1 М раствором натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Хранят при температуре от 2 до 8 °С.

Буферный (HEPES) раствор рН 7,5

2,38 г 2-[4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-ил]этансульфоновой кислоты растворяют в 90 мл воды. Доводят рН до 7,5 потенциометрически с помощью 20 % раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

0,2 М фосфатный буферный раствор рН 7,5

27,22 г калия дигидрофосфата растворяют в 930,0 мл воды. Доводят рН до 7,5 потенциометрически с помощью 300 г/л раствора калия гидроксида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

0,33 М фосфатный буферный раствор рН 7,5

Раствор I. 119,31 г динатрия гидрофосфата додекагидрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Раствор II. 45,36 г калия дигидрофосфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

85,0 мл раствора I смешивают с 15,0 мл раствора II; если необходимо, доводят рН до 7,5 потенциометрически раствором I или раствором II.

Трис(гидроксиметил)аминометана буферный раствор рН 7,5

7,27 г трис(гидроксиметил)аминометана и 5,27 г натрия хлорида растворяют в воде. Если необходимо, доводят рН до 7,5 потенциометрически исходным раствором трис(гидроксиметил)аминометана или 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты и доводят объём раствора водой до
1000,0 мл.

0,05 М трис – гидрохлорида буферный раствор рН 7,5

6,057 г трис(гидроксиметил)аминометана растворяют в 900 мл воды. Доводят рН до 7,5 потенциометрически с помощью хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

0,1 М трис – гидрохлорида буферный раствор рН 7,8

12,11 г трис(гидроксиметил)аминометана и 2,77 г безводного кальция хлорида растворяют в 900 мл воды. Доводят рН до 7,8 потенциометрически с помощью хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Натрия цитрата буферный раствор рН 7,8 (0,034 М натрия цитрата и 0,1 М натрия хлорида раствор)

10,0 г натрия цитрата и 5,90 г натрия хлорида растворяют в 900,0 мл воды. Доводят рН до 7,8 потенциометрически с помощью хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Буферный раствор рН 8,0

50,0 мл 0,2 М раствора калия дигидрофосфата смешивают с 46,8 мл 0,2 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 200,0 мл.

Буферный раствор рН 8,0 (1)

20,0 г дикалия гидрофосфата растворяют в 900,0 мл воды. Доводят рН до 8,0 потенциометрически с помощью фосфорной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

0,0015 М боратный буферный раствор рН 8,0

0,572 г натрия тетрабората и 2,94 г кальция хлорида растворяют в 800,0 мл воды. Доводят рН до 8,0 с помощью 1 М раствора хлористоводородной кислоты и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

0,02 М фосфатный буферный раствор рН 8,0

50,0 мл 0,2 М раствора калия дигидрофосфата смешивают с 46,8 мл 0,2 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 500,0 мл.

0,1 М фосфатный буферный раствор рН 8,0

0,523 г калия дигидрофосфата и 16,73 г дикалия гидрофосфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

1 М трис-гидрохлоридный буферный раствор рН 8,0

60,6 г трис(гидроксиметил)аминометана и 0,74 г кальция хлорида растворяют в 400 мл воды, доводят рН до 8,0 потенциометрически с помощью хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 500,0 мл.

1 М фосфатный буферный раствор рН 8,0

136,1 г калия дигидрофосфата растворяют в воде. Доводят рН до 8,0 потенциометрически с помощью 1 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Трис-ацетатный буферный раствор рН 8,0

6,3 г трис(гидроксиметил)аминометана и 4,9 г натрия ацетата безводного растворяют в 900,0 мл воды. Доводят рН до 8,0 потенциометрически с помощью серной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Трис(гидроксиметил)аминометана буферный раствор рН 8,1

0,294 г кальция хлорида растворяют в 40,0 мл раствора трис(гидрокси-метил)аминометана 24,22 г/л. Доводят рН до 8,1 потенциометрически с помощью 1 М раствора хлористоводородной кислоты и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Трис—глицина буферный раствор рН 8,3

6,0 г трис(гидроксиметил)аминометана и 28,8 г глицина растворяют в 500,0 мл воды и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл. Непосредственно перед использованием 1 объём приготовленного раствора доводят водой до 10 объёмов.

Трис—EDTA—BSA буферный раствор рН 8,4 (1)

6,1 г трис(гидроксиметил)аминометана, 2,8 г динатрия эдетата дигидрата, 10,2 г натрия хлорида и 10,0 г альбумина бычьего растворяют в 800 мл воды. Доводят рН до 8,4 потенциометрически с помощью 1 М раствора хлористоводородной кислоты и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Трис—EDTA—BSA буферный раствор рН 8,4 (2)

6,1 г трис(гидроксиметил)аминометана, 2,8 г динатрия эдетата дигидрата, 10,2 г натрия хлорида и 1,0 г макрогола 6000 или 2,0 г альбумина бычьего или 2,0 г альбумина человеческого растворяют в 800 мл воды. Доводят рН до 8,4 потенциометрически с помощью 1 М раствора хлористоводородной кислоты и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Трис(гидроксиметил)аминометан—EDTA буферный раствор рН 8,4

5,12 г натрия хлорида, 3,03 г трис(гидроксиметил)аминометана и 1,40 г динатрия эдетата дигидрата растворяют в 250,0 мл воды. Доводят рН до 8,4 потенциометрически с помощью хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 500,0 мл.

Фосфатный буферный раствор рН 8,5

3,5 г дикалия гидрофосфата и 4,5 г натрия хлорида растворяют в 500,0 мл воды. Доводят рН до 8,5 потенциометрически с помощью смеси равных объёмов фосфорной кислоты разведенной 10 % и воды.

Трис-ацетатный буферный раствор рН 8,5

0,294 г кальция хлорида и 12,11 г трис(гидроксиметил)аминометана растворяют в воде. Доводят рН до 8,5 потенциометрически с помощью уксусной кислоты разведенной 30 % и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Барбиталовый буферный раствор pH 8,6

1,38 г барбитала, 8,76 г барбитала натрия и 0,38 г кальция лактата пентагидрата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Трис-боратный буферный раствор с трилоном Б рН 8,6–8,8

60,5 г трис(гидроксиметил)аминометана, 6,0 г трилона Б, 19,0 г борной кислоты последовательно растворяют в воде в мерном цилиндре вместимостью 1000,0 мл, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают. При необходимости раствор фильтруют через бумажный фильтр. Раствор хранят при температуре 2 – 8 °С не более 3 мес.

1,5 М трис-гидрохлоридный буферный раствор рН 8,8

90,8 г трис(гидроксиметил)аминометана растворяют в 400 мл воды. Доводят рН до 8,8 потенциометрически с помощью хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 500,0 мл.

Буферный (фосфатный) раствор рН 9,0

1,74 г калия дигидрофосфата растворяют в 80 мл воды. Доводят рН до 9,0 потенциометрически с помощью 1 М раствора калия гидроксида и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Буферный раствор рН 9,0

Раствор I. 6,18 г борной кислоты растворяют в 0,1 М растворе калия хлорида и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000,0 мл.

Раствор II. 0,1 М раствор натрия гидроксида.

1000,0 мл раствора I смешивают с 420,0 мл раствора II.

Буферный раствор рН 9,0 (1)

6,20 г борной кислоты растворяют в 500,0 мл воды. Доводят рН до 9,0 потенциометрически с помощью 1 М раствора натрия гидроксида (около 41,5 мл) и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Аммония хлорида буферный раствор рН 9,5

33,5 г аммония хлорида растворяют в 150,0 мл воды, прибавляют 42,0 мл аммиака водного и доводят объём раствора водой до 250,0 мл. Хранят в полиэтиленовой упаковке.

Аммония хлорида буферный раствор рН 10,0

5,4 г аммония хлорида растворяют в 20,0 мл воды, прибавляют 35,0 мл аммиака раствора и доводят объём раствора водой до 100,0 мл.

Боратный буферный раствор pH 10,0

12,4 г борной кислоты помещают в химический стакан вместимостью 500 мл, суспендируют в 300 мл воды, прибавляют 100 мл калия гидроксида раствора 1 М и перемешивают до растворения борной кислоты. Доводят рН до 10,0 потенциометрически с помощью калия гидроксида раствора 1 М (обычно требуется около 60 мл). Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 500 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Диэтаноламина буферный раствор рН 10,0

96,4 г диэтаноламина растворяют в воде, доводят объём раствора водой до 400,0 мл, прибавляют 0,5 мл 186 г/л раствора магния хлорида. Доводят рН до 10,0 потенциометрически с помощью 1 М раствора хлористоводородной кислоты и доводят объём раствора водой до 500,0 мл.

0,1 М аммония карбоната буферный раствор рН 10,3

7,91 г аммония карбоната растворяют в 800,0 мл воды. Доводят рН до 10,3 потенциометрически с помощью раствора натрия гидроксида разведенного 8,5 % и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Аммония хлорида буферный раствор рН 10,4

70,0 г аммония хлорида растворяют в 200,0 мл воды, прибавляют 330,0 мл аммиака водного и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл. Если необходимо, доводят рН до 10,4 потенциометрически с помощью аммиака раствора 17 %.

Боратный буферный раствор рН 10,4

24,64 г борной кислоты растворяют в 900,0 мл воды. Доводят рН до 10,4 потенциометрически с помощью 400 г/л раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Буферный раствор рН 10,9

6,75 г аммония хлорида растворяют в аммиака растворе 17 % и доводят объём раствора тем же растворителем до 100,0 мл.

Буферный раствор pH 11,0

6,21 г борной кислоты, 4,00 г натрия гидроксида и 3,70 г калия хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Буферный раствор для регулирования ионной силы

58,5 г натрия хлорида, 57,0 мл уксусной кислоты ледяной, 61,5 г натрия ацетата и 5,0 г циклогексилендинитрилтетрауксусной кислоты растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 500,0 мл. Доводят рН до 5,0 – 5,5 с помощью 335 г/л раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Буферный раствор для регулирования ионной силы (1)

Раствор (а). 210,0 г лимонной кислоты растворяют в 400,0 мл воды. Доводят рН до 7,0 потенциометрически с помощью аммиака водного и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Раствор (б). 132 г аммония фосфата растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Раствор (в). К суспензии 292,0 г (этилендинитрил)тетрауксусной кислоты в 500,0 мл воды прибавляют 200,0 мл аммиака водного. Доводят рН до 6,0 – 7,0 потенциометрически с помощью аммиака водного и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Смешивают равные объёмы растворов (a), (б), (в) и доводят рН до 7,5 с помощью аммиака водного.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.3.0004 Стандартные растворы

Вводится впервые

Азота стандартный раствор 100 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 0,2358 г аммония сульфата (NH4)2SO4, доведённого до постоянной массы в эксикаторе над кальция хлоридом безводным, растворяют в воде и доводят объём водой до метки. Хранят в колбе с притёртой пробкой при температуре от 2 до 8 °С не более 1 года.

Азота стандартный раствор 50 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50,0 мл азота стандартного раствора 100 мкг/мл и доводят объём раствора водой до метки. Хранят в колбе с притёртой пробкой при температуре от 2 до 8 °С не более 3 мес.

Азота стандартный раствор 20 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20,0 мл азота стандартного раствора 100 мкг/мл и доводят объём водой до метки. Хранят в колбе с притёртой пробкой при температуре от 2 до 8 °С не более 3 мес.

Альбумина бычьего стандартный раствор 10 мг/мл

В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,25 г альбумина бычьего, растворяют в натрия хлорида растворе 0,9 % и доводят объём тем же растворителем до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Алюминия стандартный раствор 1 мг/мл

Метод 1. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 8,947 г алюминия хлорида АlCl3·6H2O, растворяют в воде и доводят объём водой до метки.

Стандартизация алюминия хлорида. Около 0,25 г (точная навеска) алюминия хлорида растворяют в 25 мл воды и проводят комплексонометрическое титрование алюминия. 1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 12,07 мг AlCl3∙6H2O.

Метод 2. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,39 г алюминия нитрата Аl(NO3)3·9H2O, растворяют в воде и доводят объём водой до метки.

Стандартизация алюминия нитрата. Около 0,35 г (точная навеска) алюминия нитрата растворяют в 20 мл воды и проводят комплексонометрическое титрование алюминия. 1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 18,76 мг Al(NO3)3∙9H2O.

Метод 3. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,758 г алюминия-калия сульфата додекагидрата AlK(SO4)2 12H2O, растворяют в воде, прибавляют 10 мл серной кислоты раствора 1 М и доводят объём водой до метки.

Алюминия стандартный раствор 200 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,352 г алюминия-калия сульфата AlK(SO4)2·12Н2О, растворяют в воде, прибавляют 10 мл серной кислоты раствора 1 М и доводят объём водой до метки.

Стандартизация алюминия-калия сульфата. Около 0,45 г (точная навеска) алюминия-калия сульфата растворяют в 20 мл воды и проводят комплексонометрическое титрование алюминия. 1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 23,72 мг AlK(SO4)2∙12H2O.

Алюминия стандартный раствор 100 мкг/мл

Непосредственно перед использованием алюминия стандартный раствор 1 мг/мл разводят водой в 10 раз.

Алюминия стандартный раствор 10 мкг/мл

Непосредственно перед использованием алюминия стандартный раствор 1 мг/мл разводят водой в 100 раз.

Алюминия стандартный раствор 2,5 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 2,5 мл алюминия стандартного раствора 200 мкг/мл и доводят объём водой до метки.

Алюминия стандартный раствор 2 мкг/мл

Непосредственно перед использованием алюминия стандартный раствор 200 мкг/мл разводят водой в 100 раз.

Алюминия стандартный раствор 1 мкг/мл

Непосредственно перед использованием алюминия стандартный раствор 100 мкг/мл разводят водой в 100 раз.

Аммония стандартный раствор 200 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,593 г аммония хлорида NH4Cl, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Аммония стандартный раствор 100 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,297 г аммония хлорида NH4Cl, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Аммония стандартный раствор 10 мкг/мл

Непосредственно перед использованием аммония стандартный раствор 200 мкг/мл разводят водой в 20 раз.

Аммония стандартный раствор 2 мкг/мл

Непосредственно перед использованием аммония стандартный раствор 200 мкг/мл разводят водой в 100 раз.

Аммония стандартный раствор 1 мкг/мл

Непосредственно перед использованием аммония стандартный раствор 100 мкг/мл разводят водой в 100 раз.

Ацетальдегида стандартный раствор 100 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 г ацетальдегида С2Н4O, растворяют в 2-пропаноле и доводят объём тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём 2-пропанолом до метки. Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Бария стандартный раствор 1 мг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,178 г бария хлорида BaCl2·2H2O, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Бария стандартный раствор 50 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл бария стандартного раствора 1 мг/мл и доводят объём раствора водой до метки.

Ванадия стандартный раствор 1 мг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,230 г аммония ванадата NH4VO3, растворяют в воде и доводят объём водой до метки.

Водорода пероксида стандартный раствор 10 мкг/мл

Непосредственно перед использованием в мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,3 мл водорода пероксида раствора разведённого и доводят объём водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Водорода пероксида стандартный раствор 2 мкг/мл

Непосредственно перед использованием в мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20,0 мл водорода пероксида стандартного раствора 10 мкг/мл и доводят объём водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Железа стандартный раствор 250 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл, содержащую 50 мл хлористоводородной кислоты 5 %, помещают 4,840 г железа(III) хлорида FeCI3·6H2O, растворяют и доводят объём тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Железа стандартный раствор 200 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 0,8634 г или рассчитанное по формуле количество железа(III) аммония сульфата FeNH4(SO4)2·12Н2О, соответствующее 0,1000 г железо(III)-иона, растворяют при нагревании в 25 мл серной кислоты раствора 1 М и доводят объём водой до метки.

где Q – содержание железо(III)-иона в 1 г железа(III) аммония сульфата, г.

Определение содержания железо(III)-иона в железа(III) аммония сульфате. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают около 2,5 г (точная навеска) железа(III) аммония сульфата FeNH4(SO4)2·12Н2О, растворяют в воде и доводят объём водой до метки. В коническую колбу с притёртой пробкой помещают 20,0 мл полученного раствора, прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты 25 % и 2 г калия йодида. Смесь взбалтывают и выдерживают в тёмном месте в течение 30 мин, прибавляют 50 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата (индикатор – крахмала раствор 1 %). Содержание железо(III)-иона в граммах (Q) в 1 г железа(III) аммония сульфата вычисляют по формуле:

где a1 – навеска железа(III) аммония сульфата, г;
V1 – объём 0,1 М раствора натрия тиосульфата, пошедший на титрование, мл;
5,585 – количество железо(III)-иона, соответствующее 1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата, мг.

Железа стандартный раствор 30 мкг/мл

Непосредственно перед использованием 15,0 мл железа стандартного раствора 200 мкг/мл помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём водой до метки.

Железа стандартный раствор 20 мкг/мл

Непосредственно перед использованием железа стандартный раствор 200 мкг/мл разводят водой в 10 раз.

Железа стандартный раствор 10 мкг/мл

Непосредственно перед использованием 5,0 мл железа стандартного раствора 200 мкг/мл помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём водой до метки.

Железа стандартный раствор 8 мкг/мл

Непосредственно перед использованием 4,0 мл железа стандартного раствора 200 мкг/мл помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём водой до метки.

Железа стандартный раствор 3 мкг/мл

Непосредственно перед использованием 15,0 мл железа стандартного раствора 20 мкг/мл помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём водой до метки.

Железа стандартный раствор 1 мкг/мл

Непосредственно перед использованием 5,0 мл железа стандартного раствора 20 мкг/мл помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём водой до метки.

Кадмия стандартный раствор 1 мг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,10 г кадмия Cd, растворяют в минимальном количестве смеси равных объёмов воды и хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора хлористоводородной кислотой 1 % (о/о) до метки.

Кадмия стандартный раствор 10 мкг/мл

Непосредственно перед использованием кадмия стандартный раствор 1 мг/мл разводят хлористоводородной кислотой 1 % (о/о) в 100 раз.

Кадмия стандартный раствор 1 мкг/мл

Непосредственно перед использованием кадмия стандартный раствор 10 мкг/мл разводят хлористоводородной кислотой 1 % (о/о) в 10 раз.

Калия стандартный раствор 2 мг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,446 г калия сульфата K2SO4, высушенного до постоянной массы при температуре 102,5±2,5 °С, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Калия стандартный раствор 1 мг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,223 г калия сульфата K2SO4, высушенного до постоянной массы при температуре 102,5±2,5 °С, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Калия стандартный раствор 600 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,144 г калия хлорида, высушенного до постоянной массы при температуре 102,5±2,5 °С, растворяют в воде и доводят объём тем же растворителем до метки.

Калия стандартный раствор 100 мкг/мл

Непосредственно перед использованием калия стандартный раствор 1 мг/мл разводят водой в 10 раз.

Калия стандартный раствор 20 мкг/мл

Непосредственно перед использованием калия стандартный раствор 2 мг/мл разводят водой в 100 раз.

Калия стандартный раствор 2 мкг/мл

Непосредственно перед использованием калия стандартный раствор 20 мкг/мл разводят водой в 10 раз.

Кальция стандартный раствор 3 мг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,749 г кальция карбоната СаСО3, высушенного при температуре 102,5±2,5 °С до постоянной массы, прибавляют 10 мл воды, взбалтывают, прибавляют постепенно хлористоводородную кислоту разведённую 8,3 % до растворения; после удаления пузырьков углерода диоксида доводят объём водой до метки.

Кальция стандартный раствор 1 мг/мл

Метод 1. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,769 г кальция хлорида безводного CaCl2, растворяют в хлористоводородной кислоте разведённой 7,3 % и доводят объём тем же растворителем до метки.

Метод 2. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 0,624 г кальция карбоната СаСО3, высушенного при температуре 102,5±2,5 °С до постоянной массы, прибавляют 3 мл уксусной кислоты разведённой 30 %, доводят объём раствора водой до метки и дегазируют.

Метод 3. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,50 г кальция карбоната СаСО3, высушенного при температуре 102,5±2,5 °С до постоянной массы, прибавляют 12 мл уксусной кислоты разведённой 30 %, дегазируют и доводят объём раствора водой до метки.

Кальция стандартный раствор 400 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,001 г кальция карбоната СаСО3, высушенного при температуре 102,5±2,5 °С до постоянной массы, растворяют в 25 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М и доводят объём раствора водой до метки.

Кальция стандартный раствор 100 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл кальция стандартного раствора 1 мг/мл и доводят объём водой до метки. Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Кальция стандартный раствор спиртовой 100 мкг/мл

Непосредственно перед использованием кальция стандартный раствор спиртовой 1 мг/мл разводят спиртом 96 % в 10 раз.

Кальция стандартный раствор 30 мкг/мл

Непосредственно перед использованием кальция стандартный раствор 3 мг/мл разводят водой в 100 раз.

Кальция стандартный раствор 10 мкг/мл

Непосредственно перед использованием кальция стандартный раствор 1 мг/мл разводят водой в 100 раз.

Лютеция стандартный раствор 20 мкг/мл

Непосредственно перед использованием в мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,445 г лютеция хлорида гексагидрата, растворяют в смеси равных объёмов воды и азотной кислоты, свободной от тяжёлых металлов, и доводят объём той же смесью растворителей до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём водой до метки.

Магния стандартный раствор 1 мг/мл

Метод 1. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,010 г магния сульфата гептагидрата МgSO4·7H2O, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Метод 2. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 8,365 г магния хлорида МgCl2·6H2O, растворяют в хлористоводородной кислоте разведённой 7,3 % и доводят объём тем же растворителем до метки.

Магния стандартный раствор 100 мкг/мл

Непосредственно перед использованием магния стандартный раствор 1 мг/мл разводят водой в 10 раз.

Магния стандартный раствор 10 мкг/мл

Непосредственно перед использованием магния стандартный раствор 1 мг/мл разводят водой в 100 раз.

Меди стандартный раствор 1 мг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,393 г меди(II) сульфата СuSO4·5H2O, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Меди стандартный раствор 10 мкг/мл

Непосредственно перед использованием меди стандартный раствор 1 мг/мл разводят водой в 100 раз.

Мышьяка стандартный раствор 1 мг/мл

В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 0,330 г мышьяка(III) оксида Аs2O3, растворяют в 5 мл натрия гидроксида раствора 8,5 % и доводят объём раствора водой до метки.

Мышьяка стандартный раствор 100 мкг/мл

Непосредственно перед использованием мышьяка стандартный раствор 1 мг/мл разводят водой в 10 раз.

Мышьяка стандартный раствор 10 мкг/мл

Непосредственно перед использованием мышьяка стандартный раствор 1 мг/мл разводят водой в 100 раз.

Мышьяка стандартный раствор 1 мкг/мл

Непосредственно перед использованием мышьяка стандартный раствор 100 мкг/мл разводят водой в 100 раз.

Натрия стандартный раствор 1 мг/мл

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,305 г натрия карбоната безводного, растворяют в смеси 25 мл воды и 25 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Натрия стандартный раствор 500 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,271 г натрия хлорида NaCl, высушенного до постоянной массы при температуре 102,5±2,5 °С, растворяют в воде и доводят объём тем же растворителем до метки.

Натрия стандартный раствор 200 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,509 г натрия хлорида NaCl, высушенного до постоянной массы при температуре 102,5±2,5 °С, растворяют в воде и доводят объём тем же растворителем до метки.

Никеля стандартный раствор 1 мг/мл

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 4,78 г никеля сульфата NiSO4·7H2O, растворяют в воде и доводят объём тем же растворителем до метки.

Никеля стандартный раствор 10 мкг/мл

Непосредственно перед использованием никеля стандартный раствор 1 мг/мл разводят водой в 100 раз.

Никеля стандартный раствор 1 мкг/мл

Непосредственно перед использованием никеля стандартный раствор 10 мкг/мл разводят водой в 10 раз.

Нитрата стандартный раствор 2 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 0,815 г калия нитрата, растворяют в воде и доводят объём водой до метки. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём водой, свободной от нитратов, до метки.

Олова стандартный раствор 5 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 0,50 г олова, растворяют в смеси 5 мл воды и 25 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём водой до метки.

Ртути стандартный раствор 1 мг/мл

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,354 г ртути(II) хлорида НgCl2, растворяют в 50 мл азотной кислоты разведённой 12,5 % и доводят объём водой до метки. Хранят в защищённом от света месте.

Стандартизация раствора. В коническую колбу помещают 10,0 мл полученного раствора, прибавляют 0,5 мл железа(III) аммония сульфата раствора 10 % и медленно титруют 0,01 М раствором аммония тиоцианата до оранжевого окрашивания раствора.

Содержание ртути в полученном растворе в мг/мл (Х) вычисляют по формуле:

где V1 – объём 0,01 М раствора аммония тиоцианата, пошедший на титрование, мл;
1,003 – количество ртути, соответствующее 1 мл 0,01 М раствора аммония тиоцианата, мг.

Ртути стандартный раствор 100 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,108 г ртути(II) оксида НgO, растворяют в 10 мл воды с добавлением 1 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём водой до метки. Хранят в защищённом от света месте.

Ртути стандартный раствор 10 мкг/мл

Непосредственно перед использованием ртути стандартный раствор 1 мг/мл разводят водой в 100 раз.

Ртути стандартный раствор 1 мкг/мл

Непосредственно перед использованием ртути стандартный раствор 100 мкг/мл разводят водой в 100 раз.

Свинца стандартный раствор 1 мг/мл

В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 0,400 г свинца нитрата Рb(NO3)2, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Свинца стандартный раствор 100 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 79,9 мг свинца нитрата Рb(NO3)2, растворяют в 5 мл азотной кислоты и доводят объём водой до метки.

Свинца стандартный раствор 10 мкг/мл

Непосредственно перед использованием свинца стандартный раствор 100 мкг/мл разводят водой в 10 раз.

Свинца стандартный раствор 5 мкг/мл

Непосредственно перед использованием 5,0 мл свинца стандартного раствора 100 мкг/мл помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём водой до метки.

Свинца стандартный раствор 3 мкг/мл

Непосредственно перед использованием 3,0 мл свинца стандартного раствора 100 мкг/мл помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём водой до метки.

Свинца стандартный раствор 1 мкг/мл

Непосредственно перед использованием свинца стандартный раствор 100 мкг/мл разводят водой в 100 раз.

Селена стандартный раствор 1 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 40 мг селена металлического, прибавляют 100 мл смеси азотная кислота концентрированная—вода 1:2 и перемешивают периодически до полного растворения, нагревая при необходимости на водяной бане. Доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Серебра стандартный раствор 1 мг/мл

В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 0,790 г серебра нитрата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Серебра стандартный раствор 100 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл серебра стандартного раствора 1 мг/мл и доводят объём раствора водой до метки.

Серебра стандартный раствор 5 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл серебра стандартного раствора 1 мг/мл и доводят объём раствора водой до метки.

Стронция стандартный раствор 10 мг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,685 г стронция карбоната, осторожно прибавляют хлористоводородную кислоту концентрированную до полного растворения твёрдого вещества и прекращения выделения пузырьков газа, доводят объём раствора водой до метки.

Сульфата стандартный раствор 1 мг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1814 г калия сульфата K2SO4, высушенного при температуре 102,5±2,5 °С до постоянной массы, растворяют в воде и доводят объём водой до метки.

Сульфата стандартный раствор спиртовой 1 мг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1814 г калия сульфата K2SO4, высушенного при температуре 102,5±2,5 °С до постоянной массы, растворяют в спирте 30 % и доводят объём тем же растворителем до метки.

Сульфата стандартный раствор 10 мкг/мл

Непосредственно перед использованием сульфата стандартный раствор 1 мг/мл разводят водой в 100 раз.

Сульфата стандартный раствор спиртовой 10 мкг/мл

Непосредственно перед использованием сульфата стандартный раствор спиртовой 1 мг/мл разводят спиртом 30 % в 100 раз.

Сульфита стандартный раствор 80 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,150 г натрия сульфита безводного, растворяют в воде и доводят объём водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят объём водой до метки.

Титана стандартный раствор 100 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 100,0 мг титана Ti, прибавляют 50 мл воды, 100 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, растворяют, при необходимости нагревая, охлаждают до комнатной температуры и доводят водой до 1000 мл.

Феноксиэтанола стандартный раствор 5 мкл/мл

В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,250 мл феноксиэтанола С8Н10O2 и доводят объём водой до метки. Раствор хранят при температуре от 2 до 8 °С не более 6 мес.

Феноксиэтанола стандартный раствор 5 мг/мл

В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,226 мл феноксиэтанола С8Н10O2 и доводят объём водой до метки. Раствор хранят при температуре от 2 до 8 °С не более 6 мес.

Феноксиэтанола стандартный раствор 100 мкг/мл

Непосредственно перед использованием в мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл феноксиэтанола стандартного раствора 5 мг/мл и доводят объём раствора водой до метки.

Фенола стандартный раствор 10 мг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,00 г фенола C6H6O, растворяют в воде и доводят объём водой до метки. Раствор хранят в защищённом от света месте при температуре от 2 до 8 °С не более 1 года.

Фенола стандартный раствор 100 мкг/мл

Непосредственно перед использованием в мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл фенола стандартного раствора 10 мг/мл и доводят объём водой до метки.

Формальдегида стандартный раствор 4 мг/мл

Рассчитанное по формуле количество формалина технического (Х) в миллилитрах, соответствующее 0,400 г формальдегида, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора водой до метки.

где Q – содержание формальдегида в 1 мл формалина технического, г.

Определение содержания формальдегида в формалине техническом. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл формалина технического, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В коническую колбу с притёртой пробкой помещают 5,0 мл полученного раствора, прибавляют 20 мл 0,05 М раствора йода и 10 мл 1 М раствора натрия гидроксида. Смесь взбалтывают и выдерживают в тёмном месте в течение 10 мин, прибавляют 11 мл 0,5 М раствора серной кислоты и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата до светло-жёлтого окрашивания, прибавляют 0,5 мл крахмала раствора 1 % и продолжают титрование до обесцвечивания раствора. Параллельно проводят контрольный опыт с 5,0 мл воды. Содержание формальдегида в граммах (Q) в 1 мл формалина технического вычисляют по формуле:

где V0 – объём 0,1 М раствора натрия тиосульфата, пошедший на титрование в контрольном опыте, мл;
V1 – объём 0,1 М раствора натрия тиосульфата, пошедший на титрование в основном опыте, мл;
1,501 – количество формальдегида, соответствующее 1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата, мг.

Полученный раствор хранят при температуре от 2 до 8 °С не более 1 мес.

Формальдегида стандартный раствор 20 мкг/мл

Непосредственно перед использованием 1,0 мл формальдегида стандартного раствора 4 мг/мл помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Фосфата стандартный раствор 500 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,716 г калия дигидрофосфата КН2РО4, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Фосфата стандартный раствор 5 мкг/мл

Непосредственно перед использованием фосфата стандартный раствор 500 мкг/мл разводят водой в 100 раз.

Фосфора стандартный раствор 100 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,4395 г калия дигидрофосфата КН2РО4, высушенного до постоянной массы при температуре 102,5±2,5 °С, прибавляют 800 мл воды, 20 мл 0,05 М раствора серной кислоты и доводят объём водой до метки.

Фосфора стандартный раствор 80 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,3515 г калия дигидрофосфата КН2РО4, высушенного до постоянной массы при температуре 102,5±2,5 °С, прибавляют 800 мл воды, 20 мл 0,05 М раствора серной кислоты и доводят объём водой до метки.

Фосфора стандартный раствор 20 мкг/мл

Непосредственно перед использованием 20,0 мл фосфора стандартного раствора 100 мкг/мл помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Фосфора стандартный раствор 10 мкг/мл

Непосредственно перед использованием фосфора стандартный раствор 100 мкг/мл разводят водой в 10 раз.

Фосфора стандартный раствор 5 мкг/мл

Непосредственно перед использованием 5,0 мл фосфора стандартного раствора 100 мкг/мл помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Фторида стандартный раствор 200 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,442 г натрия фторида, доведённого до постоянной массы путём высушивания в течение 12 ч при 300 °С, растворяют в воде, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают. Хранят в полиэтиленовых ёмкостях.

Фторида стандартный раствор 10 мкг/мл

Непосредственно перед использованием 5,0 мл фторида стандартного раствора 200 мкг/мл помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Хинина сульфата стандартный раствор 1 мг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г хинина сульфата дигидрата, растворяют в серной кислоты растворе 0,5 М и доводят объём тем же растворителем до метки.

Хинина сульфата стандартный раствор 10 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл хинина сульфата стандартного раствора 1 мг/мл и доводят объём раствора водой до метки.

Хинина сульфата стандартный раствор 0,1 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл хинина сульфата стандартного раствора 10 мкг/мл и доводят объём раствора серной кислоты раствором 0,005 М до метки.

Хлорида стандартный раствор 400 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,659 г натрия хлорида NaCl, доведённого до постоянной массы путём прокаливания при 550±50 °С, растворяют в воде и доводят объём водой до метки.

Хлорида стандартный раствор 2 мкг/мл

Непосредственно перед использованием 5,0 мл хлорида стандартного раствора 400 мкг/мл помещают в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Хрома стандартный раствор 1 мг/мл

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,83 г калия дихромата K2Cr2O7, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хрома стандартный раствор 100 мкг/мл

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,283 г калия дихромата K2Cr2O7, растворяют в азотной кислоты 0,5 М растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Цинка стандартный раствор 5 мг/мл

Метод 1. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 2,5 г гранулированного цинка, растворяют в 20 мл хлористоводородной кислоты раствора 5 М и доводят объём раствора водой до метки.

Метод 2. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 3,15 г цинка оксида ZnO, растворяют в 15 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Цинка стандартный раствор 1 мг/мл

Метод 1. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 0,625 г цинка оксида ZnO, предварительно прокалённого до постоянной массы, растворяют в 10 мл азотной кислоты и доводят объём водой до метки.

Метод 2. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,440 г цинка сульфата ZnSO4·7H2O, растворяют в азотной кислоты 0,5 М растворе и доводят объём тем же растворителем до метки.

Цинка стандартный раствор 100 мкг/мл

Непосредственно перед использованием цинка стандартный раствор 1 мг/мл разводят водой в 10 раз.

Цинка стандартный раствор 10 мкг/мл

Непосредственно перед использованием цинка стандартный раствор 1 мг/мл разводят водой в 100 раз.

Цинка стандартный раствор 5 мкг/мл

Непосредственно перед использованием 1,0 мл цинка стандартного раствора 1 мг/мл помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Циркония стандартный раствор 1 мг/мл

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,293 г цирконила нитрата ZrO(NO3)2·2H2O, растворяют в смеси хлористоводородной кислоты концентрированной и воды 2:8 (о/о) и доводят объём этой же смесью растворителей до метки.

### 1.4. Лекарственные формы и методы их анализа

#### 1.4.1. Лекарственные формы

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0001 Лекарственные формы

Взамен ОФС.1.4.1.0001.15

Настоящая общая фармакопейная статья устанавливает общие требования к производству, изготовлению, показателям и методам оценки качества лекарственных форм лекарственных препаратов для медицинского применения.

Требования к производству, изготовлению, показателям и методам оценки лекарственных форм для гомеопатических лекарственных препаратов устанавливает общая фармакопейная статья «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов».

###### Термины и определения

Лекарственные средства − вещества или их комбинации, вступающие в контакт с организмом человека или животного, проникающие в органы, ткани организма человека или животного, применяемые для профилактики, диагностики (за исключением веществ или их комбинаций, не контактирующих с организмом человека или животного), лечения заболевания, реабилитации, для сохранения, предотвращения или прерывания беременности и полученные из крови, плазмы крови, из органов, тканей организма человека или животного, растений, минералов методами синтеза или с применением биологических технологий. К лекарственным средствам относятся фармацевтические субстанции и лекарственные препараты.

Лекарственная форма – состояние лекарственного препарата, соответствующее способам его введения и применения и обеспечивающее достижение необходимого лечебного эффекта.

Лекарственные препараты − лекарственные средства в виде лекарственных форм, применяемые для профилактики, диагностики, лечения заболевания, реабилитации, для сохранения, предотвращения или прерывания беременности.

Фармацевтическая субстанция − лекарственное средство в виде одного или нескольких обладающих фармакологической активностью действующих веществ вне зависимости от природы происхождения, которое предназначено для производства, изготовления лекарственных препаратов и определяет их эффективность.

Вспомогательные вещества − вещества неорганического или органического происхождения, используемые в процессе производства, изготовления лекарственных препаратов для придания им необходимых физико-химических свойств.

Основа − вспомогательное вещество или смесь вспомогательных веществ, являющихся носителем действующего вещества/веществ, обеспечивающих требуемый объём/массу и необходимые физические характеристики лекарственного препарата в конкретной лекарственной форме.

Дисперсная система − система, состоящая из двух или более фаз, одна из которых представляет непрерывную фазу (дисперсионную среду), в объёме которой распределена другая (твёрдая, жидкая или газообразная дисперсная) фаза. Дисперсная фаза также может быть представлена ионами или молекулами различных соединений.

Производство лекарственных средств − деятельность по производству лекарственных средств организациями-производителями лекарственных средств на одной стадии, нескольких или всех стадиях технологического процесса, а также по хранению и реализации произведённых лекарственных средств.

Изготовление лекарственных препаратов – деятельность, осуществляемая аптечными организациями, имеющими лицензию на фармацевтическую деятельность по изготовлению лекарственных препаратов для медицинского применения по рецептам врачей и требованиям медицинских организаций.

Стабильность − способность лекарственного средства сохранять химические, физические, микробиологические, биофармацевтические и фармакологические свойства в определённых границах на протяжении срока годности.

Способ/путь введения и применения − способ или путь доставки лекарственного средства в организм человека или животного.

Дозировка лекарственного препарата − количественно выраженное содержание действующих веществ в единице дозирования, объёма или массы в соответствии с лекарственной формой, а для некоторых видов лекарственных форм − количество высвобождаемого из лекарственной формы действующего вещества за единицу времени.

Наименование лекарственной формы − слово или словосочетание, выражающее единичное понятие о лекарственной форме и отличие её от других лекарственных форм. Совокупность (перечень) наименований лекарственных форм образует их номенклатуру.

###### Классификация

Основным элементом наименования лекарственной формы является общий термин, обозначающий самостоятельную, относительно однородную группу лекарственных форм. Наименование основного элемента лекарственной формы лекарственного препарата для медицинского применения соответствует определению, указанному в общей фармакопейной статье (ОФС) (например, в ОФС «Таблетки», ОФС «Суспензии», ОФС «Настойки», ОФС «Пластыри трансдермальные» и т.д.).

Дополнительным элементом наименования лекарственной формы является слово или словосочетание, которое отражает классификационные признаки. Лекарственные формы могут быть иерархически классифицированы по следующим основным признакам, указанным в таблице.

Таблица. Классификация лекарственных форм по основным классификационным признакам

К твёрдым лекарственным формам относят таблетки, капсулы, порошки, гранулы, драже, лиофилизаты, имплантаты, суппозитории, плёнки, пастилки, карандаши, тампоны лекарственные, леденцы лекарственные, сборы, экстракты сухие и др.

К жидким лекарственным формам относят растворы, капли, сиропы, суспензии, эмульсии, шампуни лекарственные, экстракты жидкие, настойки, эликсиры, соки, настои, отвары и др.

К мягким лекарственным формам относят мази, кремы, гели, линименты, пасты, экстракты густые и др.

К газообразным лекарственным формам относят газы медицинские, аэрозоли и др.

По типу дисперсной системы лекарственные формы могут быть гомогенными, гетерогенными и комбинированными.

Гомогенная дисперсная система − тип дисперсной системы, в которой отсутствует поверхность раздела фаз между дисперсной фазой и дисперсионной средой (истинные растворы, растворы высокомолекулярных соединений, мази-сплавы и др.).

Гетерогенная дисперсная система − тип дисперсной системы, в которой имеется поверхность раздела фаз между дисперсной фазой и дисперсионной средой (суспензии, эмульсии и др.).

Комбинированная дисперсная система − тип дисперсной системы, состоящей как из гомогенных, так и гетерогенных дисперсных систем.

Лекарственные формы по способу/пути введения и применения классифицируют на такие основные группы как: для приёма внутрь, для наружного применения, для местного применения, для парентерального применения, для ингаляционного применения, кроме того, могут быть выделены лекарственные формы для трансдермального применения. Каждая из указанных групп, при необходимости, может иметь подгруппы.

Лекарственные формы могут быть предназначены для оказания местного и/или системного действия на организм человека.

Возможные способы/пути введения и применения конкретной лекарственной формы, как правило, указаны в общей фармакопейной статье на данную лекарственную форму.

Если в наименовании таких лекарственных форм как таблетки, капсулы, гранулы, драже, сиропы, настойки, не указан способ применения, то следует считать, что лекарственная форма предназначена «для приёма внутрь».

Под наружным применением понимают нанесение лекарственного препарата на неповреждённую и/или повреждённую кожу, в том числе на раневые и/или ожоговые поверхности, и/или волосы, и/или ногти.

Под местным применением понимают нанесение лекарственного препарата на слизистые оболочки, в том числе, глазное (офтальмологическое), назальное, ректальное, вагинальное применение, нанесение на дёсны, на слизистую оболочку полости рта и др., а также введение в наружный слуховой проход.

Термин «для местного применения» используют, если лекарственная форма предназначена для трёх и более способов/путей введения и применения, относящихся к местному применению; если менее, чем для трёх − указывают конкретный способ/путь введения и применения.

Если лекарственная форма для местного применения в полости рта предназначена для трёх и более способов применения (например, для нанесения на слизистую оболочку полости рта, для нанесения на зубы, для нанесения на дёсны и др.), используют термин «стоматологический»; если способов применения один или два, то указывают конкретный способ применения.

Под парентеральным применением понимают введение лекарственного препарата в такой лекарственной форме в организм человека с нарушением целостности кожных покровов и/или слизистых оболочек, в том числе путём инъекций, инфузий или имплантации.

Термин «для инъекций» используют, если лекарственный препарат в такой лекарственной форме предназначен для трёх и более инъекционных путей введения (например, для внутривенного, внутримышечного, подкожного введения и др.).

Термин «для инфузий» используют, если лекарственный препарат в такой лекарственной форме предназначен, как правило, для медленного, часто капельного введения в больших объёмах с помощью инфузионных систем. Данный термин без уточнения пути введения означает «инфузию для внутривенного введения».

По типу высвобождения действующего вещества/веществ лекарственные формы могут иметь стандартное (обычное) и модифицированное (нестандартное) высвобождение.

Лекарственная форма со стандартным высвобождением/лекарственная форма с немедленным высвобождением/лекарственная форма с обычным высвобождением – лекарственная форма с высвобождением действующего вещества/веществ, которое не было преднамеренно модифицировано с помощью специального состава и/или специальной технологии производства.

Лекарственная форма с модифицированным высвобождением – лекарственная форма, у которой скорость и/или место высвобождения действующего вещества/веществ отличается от лекарственной формы со стандартным высвобождением при том же пути введения. Данная модификация высвобождения достигается за счёт разработки специального состава и/или специальной технологии производства. К лекарственным формам с модифицированным (нестандартным) высвобождением относят лекарственные формы с пролонгированным, отсроченным (отложенным), пульсирующим и ускоренным высвобождением.

Лекарственная форма с пролонгированным высвобождением/ лекарственная форма с замедленным (замедленным непрерывным) высвобождением – лекарственная форма с модифицированным высвобождением, характеризующаяся более медленным высвобождением действующего вещества/веществ по сравнению с лекарственной формой со стандартным высвобождением при том же пути введения.

Лекарственная форма с отсроченным высвобождением/лекарственная форма с отложенным высвобождением – лекарственная форма с модифицированным высвобождением, предназначенная, как правило, для приёма внутрь, у которой высвобождение действующего вещества/веществ наступает в указанное время или в указанном месте желудочно-кишечного тракта.

Лекарственная форма с пульсирующим высвобождением/лекарственная форма с прерывистым высвобождением – лекарственная форма с модифицированным высвобождением, характеризующаяся последовательным, прерывистым высвобождением действующего вещества/веществ.

Кроме основных классификационных признаков, лекарственные формы могут иметь дополнительные классификационные признаки.

По готовности к применению выделяют группу лекарственных форм, требующих перед применением дополнительного преобразования путём растворения или диспергирования в соответствующем растворителе, с целью приготовления восстановленных или разведённых лекарственных форм, предназначенных для непосредственного применения/введения.

Лекарственные формы могут быть дозированными или недозированными. Дозированными называют лекарственные формы, содержащие одну дозу или часть дозы действующего вещества/веществ в каждой единице лекарственной формы.

Лекарственные формы могут быть выпущены в однодозовой упаковке, содержащей одну дозу или часть дозы действующего вещества/веществ, или в многодозовой упаковке, содержащей несколько доз действующего вещества/веществ.

Лекарственный препарат в различных лекарственных формах может включать одно, два и более действующих веществ (фармацевтических субстанций) и может не содержать вспомогательных веществ или, как правило, содержать одно или более вспомогательных веществ или основу, представляющую собой носитель для действующего вещества/веществ (например, в мягких лекарственных формах), состоящую из одного или более вспомогательных веществ.

Различают лекарственные формы лекарственных препаратов, содержащих действующие вещества растительного происхождения: настойки, экстракты, эликсиры, настои, отвары, соки, сборы, гранулы резано-прессованные, которые в ряде случаев могут быть позиционированы и использованы как фармацевтические субстанции растительного происхождения (например, экстракты в капсулах, таблетках; настойки в каплях и т.д.).

При составлении наименования лекарственной формы конкретного лекарственного препарата для медицинского применения используют комбинирование основного и дополнительного элемента. Дополнительным элементом наименования лекарственной формы является слово или словосочетание, которое отражает такие классификационные признаки лекарственной формы, как: способ/путь введения и применения, тип модифицированного высвобождения, в установленных случаях − признак готовности к применению, технологические признаки (например, «таблетки, покрытые оболочкой», «порошок шипучий» и др.), признак разделения на дозы, признак возрастной группы (например, «для детей»), природу растворителя в растворах (например, «спиртовой», «масляный»), характер вкуса и/или аромата (например, «со вкусом лимона», «с ароматом ментола»), отсутствие сахара (например, «без сахара») и др.

Отнесение лекарственной формы к той или иной группе с аналогичными классификационными признаками определяет подходы к оценке её качества. В зависимости от назначения, способа/пути введения и применения, а также режима дозирования, технологических и других классификационных признаков лекарственной формы, в перечень испытаний для оценки её качества включают определение таких показателей, которые, как правило, отражают особенности данной лекарственной формы.

Лекарственные формы также могут быть объединены в группы по способу/пути введения и применения лекарственного препарата, при этом одна и та же лекарственная форма может быть представлена одновременно в различных группах, например, таблетки могут быть для приёма внутрь, для парентерального применения, для вагинального применения и т.д. В ряде случаев, лекарственные формы, объединённые в одну группу по способу/пути введения и применения, могут иметь общий дополнительный показатель их качества, который отражает специфику применения лекарственных препаратов в виде лекарственной формы той или иной группы.

###### Особенности технологии

Производство лекарственных препаратов в различных лекарственных формах должно осуществляться производителями лекарственных средств, имеющими лицензию на производство лекарственных средств, в соответствии с Правилами надлежащей производственной практики (GMP), утвержденными уполномоченным федеральным органом исполнительной власти. Правила GMP распространяются на все виды лекарственных средств и устанавливают общие требования к организации их производства и контроля качества, а также дополнительные требования к организации производства отдельных видов лекарственных препаратов в различных лекарственных формах.

Изготовление лекарственных препаратов в различных лекарственных формах должно осуществляться аптечными организациями, имеющими лицензию на фармацевтическую деятельность, в соответствии с Правилами изготовления и отпуска лекарственных препаратов для медицинского применения, утверждёнными уполномоченным федеральным органом исполнительной власти.

Вспомогательные вещества, вводимые в состав лекарственных препаратов для обеспечения соответствующих свойств лекарственной формы, должны быть разрешены для медицинского применения.

При разработке составов лекарственных препаратов с антимикробными консервантами в любых лекарственных формах, необходимость использования и эффективность консервантов должны быть подтверждены. Методика определения и критерии эффективности консервантов, входящих в состав лекарственного препарата, должны соответствовать требованиям ОФС «Определение эффективности антимикробных консервантов».

При производстве лекарственных препаратов в лекарственных формах, представляющих собой гетерогенные и комбинированные дисперсные системы (суспензии, эмульсии и др.), содержащие диспергированные частицы, должны быть приняты меры, обеспечивающие необходимый и контролируемый размер частиц с учётом предполагаемого способа/пути введения и применения лекарственного препарата.

При получении нестерильных лекарственных препаратов в виде любых лекарственных форм, должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту и соответствие требованиям ОФС «Микробиологическая чистота».

При получении стерильных лекарственных препаратов в виде любых лекарственных форм должны быть приняты меры, обеспечивающие их стерильность и соответствие требованиям ОФС «Стерильность». При получении стерильных лекарственных препаратов в виде различных лекарственных форм используют методы стерилизации в соответствии с ОФС «Стерилизация».

Как правило, лекарственные препараты применяют в виде лекарственных форм, в которых они выпущены; для некоторых лекарственных препаратов перед применением необходимо выполнить дополнительные действия (лекарственные формы диспергируемые, диспергиремые во рту, жевательные, шипучие и др.).

Кроме того, лекарственные препараты в виде лекарственных форм, рекомендованных к применению, могут быть получены дополнительным преобразованием исходной лекарственной формы непосредственно перед применением:

- в виде восстановленных лекарственных форм путём растворения или диспергирования твёрдых или мягких лекарственных форм (таблетки, порошки, гранулы, лиофилизаты, гели, пасты и др.) в соответствующих растворителях;

- в виде разбавленных лекарственных форм, полученных путём разведения жидких лекарственных форм (концентратов, растворов и др.) соответствующим растворителем до требуемой концентрации.

###### Испытания

Для оценки качества лекарственных препаратов в различных лекарственных формах применяют, как правило, испытания по показателям качества, характеризующим конкретную лекарственную форму по основным и, при необходимости, дополнительным, классификационным признакам, указанным в настоящей общей фармакопейной статье, а также по показателям качества, характеризующим действующее вещество/вещества и, при необходимости, вспомогательное вещество/вещества, входящее в состав данного лекарственного препарата в соответствии с требованиями ОФС «Лекарственные препараты».

Следующие испытания предназначены для оценки качества лекарственной формы лекарственного препарата.

Описание. Лекарственную форму характеризуют, отмечая внешний вид (агрегатное состояние, форму, размеры, прозрачность или мутность и др.), органолептические (цвет, запах) и другие свойства лекарственного препарата в лекарственной форме в соответствии с требованиями общей фармакопейной статьи на эту лекарственную форму и указаниями в конкретной фармакопейной статье; описание вкуса не приводят.

Определение размера некоторых твёрдых лекарственных форм (гранулы, имплантаты, плёнки и др.) проводят как самостоятельное испытание по соответствующему показателю, например, «Размер гранул».

Прозрачность. Испытание проводят для жидких лекарственных форм, представленных стерильными растворами, растворами для приёма внутрь, растворами для местного применения в соответствии с ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей», для остальных жидких лекарственных форм − при соответствующем указании в фармакопейной статье.

Цветность. Испытание проводят для жидких лекарственных форм, представленных стерильными растворами, растворами для приёма внутрь, растворами для местного применения в соответствии с ОФС «Степень окраски жидкостей», для остальных растворов – при соответствующем указании в фармакопейной статье.

рН. Испытание проводят для жидких лекарственных форм (растворов, суспензий, эмульсий, концентратов, эликсиров, сиропов, соков, пен, шампуней лекарственных и др.), для некоторых мягких лекарственных форм, а также извлечений, как правило, водных, из таких лекарственных форм, как плёнки биодеградируемые, тампоны лекарственные, губки лекарственные и др. Определение рН проводят потенциометрическим методом в соответствии с ОФС «Ионометрия». Значения рН указывают в фармакопейной статье.

Однородность массы. Испытание проводят для дозированных лекарственных форм и лекарственных форм в однодозовой индивидуальной упаковке в соответствии с ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм», если в фармакопейной статье нет других указаний.

Для дозированных аэрозолей, дозированных спреев, дозированных лекарственных форм для ингаляций, представляющих собой растворы, определяют показатель «Однородность массы доставляемых (высвобождаемых) доз» в соответствии с требованиями общих фармакопейных статей на указанные лекарственные формы.

Капли, предназначенные для приёма внутрь, должны соответствовать требованиям ОФС «Капли» по показателю «Доза и однородность дозы».

Испытание по показателю «Однородность массы» не применяют в случае, если предусмотрено испытание по показателю «Однородность дозирования» для всех действующих веществ.

Средняя масса. Определение проводят в ходе выполнения испытания по показателю «Однородность массы» для дозированных лекарственных форм и лекарственных форм в однодозовой индивидуальной упаковке, или как самостоятельное испытание (например, ОФС «Плитки»), если указано в фармакопейной статье. Показатели «Средняя масса» и «Отклонения от средней массы» определяют в соответствии с методикой и нормативными требованиями, приведёнными в ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм», если в фармакопейной статье нет других указаний. Данные, полученные при определении показателя «Средняя масса» могут быть необходимы для расчётов, например, при количественном определении компонентов лекарственного препарата и др.

Однородность дозирования. Испытание проводят для дозированных лекарственных форм и лекарственных форм в однодозовой индивидуальной упаковке, в соответствии с ОФС «Однородность дозирования», если в фармакопейной статье нет других указаний.

Для дозированных аэрозолей, дозированных спреев, дозированных лекарственных форм для ингаляций, представляющих собой эмульсии или суспензии определяют показатель «Однородность доставляемых (высвобождаемых) доз (Однородность дозирования)» в соответствии с требованиями общих фармакопейных статей на указанные лекарственные формы.

Однородность массы (объёма) доз. Испытание проводят для недозированных лекарственных форм (жидкие лекарственные формы, гранулы, порошки и др.), выпускаемых в многодозовой упаковке в комплекте с прилагаемым средством дозирования – мерным устройством для отбора по массе или по объёму дозы, необходимой для применения (стаканчик мерный, ложка мерная, дозатор шприцевой и др.). Определение проводят в соответствии с ОФС «Однородность массы (объёма) доз, отобранных из многодозовой упаковки».

Распадаемость. Испытание проводят, как правило, для твёрдых дозированных лекарственных форм. Для таблеток и капсул, а также, если в фармакопейной статье нет других указаний, для гранул, драже, пастилок, пилюль, испытание проводят в соответствии с ОФС «Распадаемость твёрдых лекарственных форм». Для суппозиториев, вагинальных таблеток, ректальных и вагинальных капсул испытание проводят в соответствии с ОФС «Распадаемость суппозиториев, вагинальных таблеток, ректальных и вагинальных капсул». Для плёнок из биодеградируемых материалов испытание проводят в соответствии с методикой определения и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье на конкретный лекарственный препарат в этой лекарственной форме.

Если в фармакопейной статье предусмотрено испытание по показателю «Растворение», то допускается не проводить испытание по показателю «Распадаемость».

Растворение. Испытание проводят, как правило, для твёрдых лекарственных форм. Для таблеток, капсул, гранул, суппозиториев на гидрофильной основе, а также, если в фармакопейной статье нет других указаний, для плёнок, испытание проводят в соответствии с ОФС «Растворение для твёрдых дозированных лекарственных форм». Для суппозиториев на липофильной основе испытание проводят в соответствии с ОФС «Растворение для суппозиториев на липофильной основе»; для пластырей трансдермальных – в соответствии с ОФС «Растворение для пластырей трансдермальных»; для резинок жевательных лекарственных – в соответствии с ОФС «Растворение для резинок жевательных лекарственных»; для систем терапевтических – в соответствии с методикой определения и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье на конкретный лекарственный препарат в этой лекарственной форме.

Время растворения или диспергирования. Испытание проводят, если в фармакопейной статье нет других указаний, для твёрдых лекарственных форм (гранул, лиофилизатов, порошков), предназначенных для получения восстановленных жидких лекарственных форм путём их растворения или диспергирования в соответствующем растворителе, а также для порошков шипучих, в соответствии с ОФС «Время растворения или диспергирования».

Размер частиц. Испытание проводят для лекарственных форм, содержащих частицы действующих и вспомогательных веществ, размер которых может оказать неблагоприятное воздействие на безопасность и эффективность лекарственного препарата.

Для аэрозолей, предназначенных для ингаляций, определяют респирабельную фракцию (частиц с аэродинамическим диаметром менее 5 мкм) в соответствии с ОФС «Аэродинамическое распределение мелкодисперсных частиц». Для порошков, сухих экстрактов испытание проводят, как правило, в соответствии с ОФС «Ситовой анализ». Для суспензий, эмульсий, а также лекарственных форм суспензионного и комбинированного типа (неингаляционные аэрозоли, спреи, мягкие лекарственные формы, суппозитории, пены лекарственные, карандаши лекарственные) испытание проводят, как правило, методом оптической микроскопии в соответствии с ОФС «Оптическая микроскопия» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье. Определение размера частиц в мягких лекарственных формах и суспензиях, включая мягкие лекарственные формы и суспензии для офтальмологического применения, а также в эмульсиях, проводят в соответствии с ОФС «Определение показателя «Размер частиц» в суспензиях, эмульсиях, мягких лекарственных формах». Для эмульсий типа «масло в воде», предназначенных для парентерального применения, испытание проводят в соответствии с ОФС «Размер частиц (капель) и их распределение по размерам в эмульсиях для парентерального применения».

В установленных случаях определение размера частиц в различных лекарственных формах проводят методом лазерной дифракции в соответствии с ОФС «Определение распределения частиц по размеру методом лазерной дифракции света».

Потеря в массе при высушивании или Вода. Испытание проводят, как правило, для твёрдых, иногда мягких, лекарственных форм (порошки, гранулы, таблетки-лиофилизат, лиофилизаты, имплантаты, плёнки, драже, плитки, пастилки, резинки жевательные лекарственные, экстракты сухие, экстракты густые и др.), в тех случаях, когда содержание воды может влиять на физико-химические свойства лекарственной формы, биодоступность действующего вещества/веществ, на стабильность лекарственного препарата в такой лекарственной форме и т.д. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение воды» или ОФС «Потеря в массе при высушивании» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Показатели «Потеря в массе при высушивании» и «Вода» могут быть альтернативными, кроме случаев, когда определение потери в массе при высушивании необходимо для контроля содержания остаточных органических растворителей в лекарственном препарате.

Сухой остаток. Испытание проводят для жидких лекарственных форм лекарственных препаратов, содержащих действующие вещества растительного происхождения (настойки, экстракты жидкие, соки) в соответствии с требованиями, указанными в общей фармакопейной статье на лекарственную форму или в фармакопейной статье на конкретный лекарственный препарат в такой лекарственной форме.

Плотность. Испытание проводят для жидких лекарственных форм, представляющих собой спиртовые растворы с содержанием спирта этилового в концентрации выше 40 %, для других неводных растворов, настоек, экстрактов масляных, эликсиров, сиропов, соков, концентратов, шампуней лекарственных и др. в соответствии с ОФС «Плотность» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Вязкость. Испытание проводят для жидких лекарственных форм, представляющих собой растворы высокомолекулярных соединений, суспензии, эмульсии, шампуни лекарственные и др., в соответствии с ОФС «Вязкость» и требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Механические включения. Испытание на видимые механические включения проводят для лекарственных форм для парентерального применения, лекарственных для офтальмологического применения, растворов для орошения в соответствии с ОФС «Видимые механические включения в лекарственных препаратах для парентерального применения и глазных лекарственных формах». Испытания на невидимые механические включения проводят для лекарственных форм для парентерального применения в соответствии с ОФС «Невидимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения».

Испытание по показателю «Механические включения» проводят для аэрозолей для ингаляций дозированных и порошков для ингаляций дозированных в соответствии с ОФС «Лекарственные формы для ингаляций», методикой и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Осмоляльность. Испытание проводят для лекарственных форм для инфузий, лекарственных форм для офтальмологического применения в соответствии с ОФС «Осмолярность», в случае, если теоретическое значение осмолярности лекарственных форм не может быть рассчитано.

Выход содержимого упаковки. Испытание проводят для недозированных аэрозолей, недозированных спреев, недозированных пен в соответствии с ОФС «Выход содержимого упаковки».

Извлекаемый объём. Испытание проводят для жидких лекарственных форм для приёма внутрь в соответствии с ОФС «Извлекаемый объём».

Испытание не применяют для жидких лекарственных форм для приёма внутрь в однодозовых индивидуальных упаковках, если предусмотрено испытание по показателю «Однородность дозирования».

Извлекаемый объём лекарственных форм для парентерального применения. Испытание проводят для жидких лекарственных форм для парентерального применения в соответствии с ОФС «Извлекаемый объём лекарственных форм для парентерального применения».

Масса (объём) содержимого упаковки. Испытание проводят для недозированных лекарственных форм, за исключением жидких лекарственных форм для парентерального применения и жидких лекарственных форм для приёма внутрь, в соответствии с ОФС «Масса (объём) содержимого упаковки», если в фармакопейной статье нет других указаний.

Кроме того, для оценки качества конкретного наименования лекарственной формы могут быть необходимы дополнительные испытания, указанные в соответствующих общих фармакопейных статьях на лекарственные формы, например:

- проходимость через иглу – для суспензий для парентерального применения;

- седиментационная устойчивость – для суспензий и шампуней лекарственных суспензионного и комбинированного типа;

- относительная плотность пены – для пен лекарственных;

- время пенообразования – для пен лекарственных;

- металлические частицы – для мазей глазных, упаковка которых представляет собой металлические тубы и др.

Для ряда лекарственных форм в общих фармакопейных статьях указаны испытания, которые проводят на стадии контроля технологического процесса производства лекарственных препаратов в данной лекарственной форме, например:

- давление в упаковке – для аэрозолей и пен лекарственных, в которых пропеллентами являются сжатые газы; испытание проводят в соответствии с ОФС «Давление в упаковке»;

- прочность на раздавливание – для таблеток и леденцов, полученных методом прессования; испытание проводят в соответствии с ОФС «Прочность таблеток на раздавливание»;

- истираемость – для таблеток и леденцов, полученных методом прессования; испытание проводят в соответствии с ОФС «Истираемость таблеток»;

- пенообразующая способность – для шампуней лекарственных; испытание проводят в соответствии с ОФС «Шампуни лекарственные»;

- содержание метанола и 2-пропанола – для настоек, экстрактов, эликсиров; испытание проводят в соответствии с ОФС «Метанол и 2-пропанол»;

- испытание клапанного устройства проводят – для аэрозолей и пен лекарственных, если применимо, испытание проводят в соответствии с методикой, указанной в фармакопейной статье и т.п.

Дополнительные испытания лекарственных форм проводят также в том случае, когда продукты вымывания из системы упаковки и укупорки лекарственной формы могут оказать влияние на безопасность и эффективность лекарственного препарата; например, на стадии контроля технологического процесса производства для растворов для инфузий в упаковке из поливинилхлорида проводят испытание на гемолитически действующие вещества и т.п.

###### Упаковка

Упаковка лекарственной формы лекарственного препарата должна соответствовать общим требованиям ОФС «Упаковка лекарственных средств» и дополнительным требованиям по упаковке, указанным в общей фармакопейной статье на конкретную лекарственную форму.

Если дополнительные требования к упаковке отсутствуют, в общих фармакопейных статьях на лекарственные формы раздел «Упаковка» не приводится. В этом случае, упаковка любой лекарственной формы должна соответствовать требованиям ОФС «Упаковка лекарственных средств», а упаковка лекарственных форм «Гранулы резано-прессованные» и «Сборы» должна соответствовать требованиям ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

###### Маркировка

Маркировка лекарственной формы лекарственного препарата должна соответствовать общим требованиям ОФС «Маркировка лекарственных средств» и дополнительным требованиям по маркировке, указанным в общей фармакопейной статье на конкретную лекарственную форму.

Если дополнительные требования к маркировке отсутствуют, в общих фармакопейных статьях на лекарственные формы раздел «Маркировка» не приводится. В этом случае, маркировка любой лекарственной формы должна соответствовать требованиям ОФС «Маркировка лекарственных средств», а маркировка лекарственных форм «Гранулы резано-прессованные» и «Сборы» должна соответствовать требованиям ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Для лекарственных препаратов в виде дозированных лекарственных форм приводят названия действующих веществ и их количества в одной дозе препарата, если нет других указаний в фармакопейной статье.

Для лекарственных препаратов в виде недозированных лекарственных форм приводят названия действующих веществ и их количества в определенном объёме (массе) лекарственного препарата.

Для лекарственных препаратов в виде лекарственных форм для парентерального применения, для офтальмологического применения, для ингаляций, для наружного и/или местного применения указывают наименования действующих веществ, их количества и перечень наименований всех вспомогательных веществ, в случае лекарственных форм для инфузий приводят также количество вспомогательных веществ.

Маркировка лекарственных препаратов в лекарственных формах, предназначенных для приготовления пациентом или медицинским персоналом восстановленных или разбавленных лекарственных форм, должна содержать информацию о способе получения, условиях хранения и сроках годности восстановленной или разбавленной лекарственной формы.

На упаковках шипучих, диспергируемых и т.п. лекарственных форм (гранул, порошков, таблеток и др.) лекарственных препаратов должна быть предупредительная надпись о необходимости предварительного их растворения/диспергирования перед применением.

Для лекарственных препаратов в виде недозированных лекарственных форм в многодозовой упаковке необходимо указывать условия хранения и срок годности после первого вскрытия упаковки.

###### Хранение

Хранение лекарственной формы лекарственного препарата должно соответствовать общим требованиям ОФС «Хранение лекарственных средств» и дополнительным требованиям по хранению, указанным в общей фармакопейной статье на конкретную лекарственную форму.

Если дополнительные требования к хранению отсутствуют, в общих фармакопейных статьях на лекарственные формы раздел «Хранение» не приводится. В этом случае, хранение любой лекарственной формы должно соответствовать требованиям ОФС «Хранение лекарственных средств», а хранение лекарственных форм «Гранулы резано-прессованные» и «Сборы» должно соответствовать требованиям ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0003 Лекарственные формы для офтальмологического применения

Взамен ОФС.1.4.1.0003.15

Лекарственные формы для офтальмологического применения – стерильные жидкие, мягкие или твёрдые лекарственные формы, содержащие одно или более действующих веществ, предназначенные для местного применения на глазном яблоке и/или конъюнктиве, для инъекционного или для имплантационного введения в ткани глаза.

###### Классификация

Различают следующие лекарственные формы для офтальмологического применения в зависимости от их агрегатного состояния:

- жидкие лекарственные формы: капли глазные; растворы для промывания глаз; инъекционные растворы для офтальмологического применения;

- мягкие лекарственные формы: мази глазные, гели глазные, кремы глазные;

- твёрдые лекарственные формы: плёнки глазные; имплантаты интравитреальные; таблетки, порошки или лиофилизаты для приготовления капель глазных; порошки или лиофилизаты для приготовления инъекционных растворов для офтальмологического применения.

Лекарственные формы для офтальмологического применения различают по способу/пути введения и применения:

- к лекарственным формам для местного применения относят капли глазные, растворы для промывания глаз, мази глазные, гели глазные, кремы глазные, плёнки глазные, таблетки для приготовления капель глазных, порошки для приготовления капель глазных, лиофилизаты для приготовления капель глазных;

- к лекарственным формам для парентерального применения относят инъекционные растворы для офтальмологического применения (для внутриглазного/парабульбарного/субконъюнктивального введения), порошки для приготовления растворов для субконъюнктивального/внутриглазного/ парабульбарного введения, лиофилизаты для приготовления растворов для субконъюнктивального/внутриглазного/парабульбарного введения;

- к лекарственным формам для имплантационного введения относят имплантаты интравитреальные.

Капли глазные – стерильные капли, предназначенные для инстилляции в глаз. Капли глазные могут представлять собой истинные растворы, растворы высокомолекулярных соединений, суспензии, эмульсии.

Капли глазные с пролонгированным высвобождением — стерильные капли глазные, характеризующиеся высвобождением действующего вещества в течение продолжительного периода времени.

Растворы для промывания глаз – стерильные водные растворы, предназначенные для промывания и смачивания глаз, а также для пропитывания материалов, накладываемых на глазное яблоко.

Мазь глазная – стерильная мазь, предназначенная, как правило, для нанесения на слизистую оболочку глаза (конъюнктиву).

Гель глазной – стерильный гель, предназначенный для нанесения на слизистую оболочку глаза (конъюнктиву).

Крем глазной — стерильный крем, предназначенный, как правило, для нанесения на слизистую оболочку глаза (конъюнктиву).

Плёнки глазные – стерильные плёнки, предназначенные для помещения в конъюнктивальный мешок глаза.

Таблетки, порошки, лиофилилизаты для приготовления капель глазных, – стерильные таблетки, стерильные порошки, стерильные лиофилизаты, предназначенные для приготовления капель глазных в виде восстановленных лекарственных форм путём растворения или диспергирования в соответствующем растворителе.

- Раствор для внутриглазного введения – стерильный раствор, предназначенный для введения в глазное яблоко.

- Раствор для парабульбарного введения – стерильный раствор, предназначенный для введения в клетчатку, окружающую глазное яблоко;

- Раствор для субконъюнктивального введения — стерильный водный раствор, предназначенный для введения под конъюнктиву.

Порошки, лиофилизаты для приготовления растворов для субконъюнктивального/внутриглазного/парабульбарного введения — стерильные порошки, стерильные лиофилизаты, предназначенные для приготовления инъекционных растворов для офтальмологического применения в виде восстановленных лекарственных форм путём растворения их в соответствующем растворителе.

Имплантат интравитреальный — имплантат, предназначенный для введения в заднюю камеру глаза.

Лекарственные формы для офтальмологического применения могут быть дозированными и недозированными.

###### Особенности технологии

Все лекарственные формы для офтальмологического применения должны быть стерильными.

В зависимости от физико-химических характеристик фармацевтической субстанции (субстанций) и других свойств компонентов лекарственного препарата, стерильные лекарственные формы для офтальмологического применения могут быть получены с использованием финишной стерилизации или без неё (в асептических условиях с соблюдением необходимых мероприятий для обеспечения стерильности).

Методы и условия стерилизации лекарственных форм для офтальмологического применения должны соответствовать требованиям ОФС «Стерилизация».

В зависимости от типа лекарственной формы, природы фармацевтической субстанции (субстанций) лекарственные препараты для офтальмологического применения могут содержать вспомогательные вещества различных функциональных классов: антиоксиданты, комплексообразователи, антимикробные консерванты, регулирующие рН среды и другие вещества, обеспечивающие, как правило, стабильность лекарственной формы.

Лекарственные формы для офтальмологического применения в многодозовых упаковках, предназначенные для местного применения, должны содержать подходящий антимикробный консервант в необходимой концентрации, за исключением тех случаев, когда само действующее вещество обладает достаточным антимикробным действием.

Лекарственные формы для офтальмологического применения в однодозовых упаковках, в виде капель глазных или растворов для промывания глаз, не должны содержать антимикробных консервантов (например, капли глазные, предназначенные для применения во время хирургического вмешательства).

Инъекционные лекарственные формы для офтальмологического применения и имплантаты интравитреальные должны выпускаться в однодозовых упаковках и не должны содержать консервантов.

Осмоляльность лекарственных форм для офтальмологического применения должна находиться в пределах осмоляльности 0,6-2,0 % раствора натрия хлорида. Допускается получение и применение гипер- и гипоосмотических капель глазных, но, как правило, состав капель глазных с концентрацией действующих веществ ниже концентрации эквивалентной 0,6 % раствора натрия хлорида, подлежит коррекции посредством добавления соответствующих вспомогательных веществ.

Оптимальное значение рН лекарственных форм для офтальмологического применения должно соответствовать рН слёзной жидкости – 7,4. Значение рН может отличаться от оптимального, но должно находиться в пределах от 3,5 до 8,5.

Увеличение продолжительности действия капель глазных может быть достигнуто повышением их вязкости. Для этого используют вспомогательные вещества-пролонгаторы. Для капель глазных оптимальной является вязкость 5-15 мм2/с. Показатель вязкости капель глазных может отличаться от оптимальных значений, но, как правило, не должен превышать 150 мм2/с.

Основа для получения мягких лекарственных форм для офтальмологического применения должна быть нейтральной, не раздражать конъюнктиву, должна равномерно распределяться на слизистой оболочке глаза и не содержать каких-либо посторонних примесей.

При производстве лекарственных форм для офтальмологического применения, содержащих диспергированные частицы и представляющих собой гетерогенные, комбинированные дисперсные системы, должна быть предусмотрена технология, обеспечивающая получение и контроль частиц необходимого размера.

При получении лекарственных препаратов, выпускаемых в виде лекарственных форм для офтальмологического применения, должны быть приняты меры, обеспечивающие их стерильность.

Капли глазные могут быть выпущены готовыми к применению или быть приготовленными непосредственно перед применением в виде восстановленных лекарственных форм, из стерильных таблеток, стерильных порошков или стерильных лиофилизатов, предназначенных для приготовления капель глазных, путём растворения или диспергирования их в соответствующем стерильном растворителе.

Лекарственные формы для офтальмологического применения в виде инъекционных лекарственных форм, могут быть выпущены готовыми к применению или быть приготовленными непосредственно перед применением в виде восстановленных лекарственных форм из стерильных порошков или стерильных лиофилизатов, предназначенных для приготовления стерильных инъекционных растворов для субконъюнктивального/внутриглазного/парабульбарного введения, путём растворения их в соответствующем растворителе.

Упаковка лекарственных форм для офтальмологического применения может быть однодозовой и многодозовой.

###### Испытания

Лекарственные формы для офтальмологического применения должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для соответствующей лекарственной формы.

Лекарственные формы для офтальмологического применения, представляющие собой капли, растворы, суспензии, эмульсии, мази, кремы, гели, плёнки, имплантаты должны отвечать требованиям соответствующих ОФС: «Капли», ОФС «Растворы», ОФС «Суспензии», ОФС «Эмульсии», ОФС «Мягкие лекарственные формы», ОФС «Плёнки», ОФС «Имплантаты» и нормативным требованиям, указанным в фармакопейных статьях.

Лекарственные формы для офтальмологического применения в виде инъекционных лекарственных форм должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для парентерального применения».

Лекарственные формы, представляющие собой порошки, таблетки, лиофилизаты, предназначенные для приготовления восстановленных лекарственных форм для офтальмологического применения (капель глазных, растворов для инъекций), должны отвечать требованиям соответствующих ОФС: «Порошки» (исключая показатель «Размер частиц»), «Таблетки» (исключая показатели «Распадаемость», «Растворение»), «Лиофилизаты».

Восстановленные лекарственные формы для офтальмологического применения в виде капель глазных и растворов для инъекций, полученные с использованием таблеток, порошков или лиофилизатов, предназначенных для их приготовления путём растворения или диспергирования, должны соответствовать требованиям, предъявляемым к соответствующим лекарственным формам.

Описание. Лекарственные формы для офтальмологического применения характеризуют, отмечая внешний вид (агрегатное состояние, форму, размеры и др.), основные физические, органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Стерильность. Испытание проводят для всех лекарственных форм для офтальмологического применения в соответствии с ОФС «Стерильность».

Однородность дозирования. Испытание проводят для дозированных лекарственных форм для офтальмологического применения и лекарственных форм для офтальмологического применения в однодозовой индивидуальной упаковке в соответствии с ОФС «Однородность дозирования».

Испытание не применяют для лекарственных форм для офтальмологического применения, представляющих собой суспензии, эмульсии, гели в однодозовых индивидуальных упаковках.

рН. Испытание проводят для всех лекарственных форм для офтальмологического применения в соответствии с ОФС «Ионометрия» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье. Испытание не проводят при наличии соответствующего обоснования.

Осмоляльность. Для капель глазных, представляющих собой водные растворы, определяют значение осмолярности и/или осмоляльности в соответствии с ОФС «Осмолярность» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Механические включения видимые. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Видимые механические включения в лекарственных препаратах для парентерального применения и глазных лекарственных формах».

Испытание не применяют для лекарственных форм для офтальмологического применения в виде мягких лекарственных форм, а также капель глазных суспензионного и эмульсионного типа.

Размер частиц. Испытание проводят для лекарственных форм для офтальмологического применения в виде мягких лекарственных форм, суспензий или эмульсий для офтальмологического применения в соответствии с ОФС «Определение показателя «Размер частиц» в суспензиях, эмульсиях, мягких лекарственных формах».

Металлические частицы. Испытание проводят для мазей глазных, упаковка которых представляет собой металлические тубы, в соответствии с ОФС «Металлические частицы в мазях глазных».

Вязкость. Испытание проводят для гелей глазных, представляющих собой растворы карбомера, в соответствии с ОФС «Вязкость» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

###### Упаковка

В соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств».

Лекарственные формы для офтальмологического применения выпускают в стерильных однодозовых и многодозовых упаковках с контролем первого вскрытия.

Каждую плёнку глазную, каждый имплантат интравитреальный перед помещением в блистеры, пеналы и т.д. упаковывают индивидуально.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0004 Гранулы

Взамен ОФС.1.4.1.0004.18

Настоящая общая фармакопейная статья не распространяется на гранулы резано-прессованные. Гранулы резано-прессованные должны соответствовать требованиям ОФС «Гранулы резано-прессованные».

Гранулы – твёрдая лекарственная форма в виде агрегатов частиц порошка любой формы.

Гранулы могут содержать одно или несколько действующих веществ с добавлением или без добавления вспомогательных веществ.

В зависимости от способа/пути введения и применения различают гранулы для приёма внутрь, гранулы для рассасывания, гранулы шипучие, гранулы для приготовления лекарственных форм для приёма внутрь.

В зависимости от наличия оболочки различают гранулы без оболочки и гранулы, покрытые оболочкой.

Для гранул без оболочки, предназначенных для приёма внутрь, используют термин «гранулы».

Гранулы для рассасывания – гранулы, помещаемые в полость рта, растворяющиеся или распадающиеся при рассасывании.

Гранулы, покрытые оболочкой – гранулы, покрытые одним или несколькими слоями различных вспомогательных веществ, предназначенные для приёма внутрь.

По типу высвобождения различают гранулы с обычным высвобождением и гранулы с модифицированным высвобождением.

Гранулы с модифицированным высвобождением – гранулы, полученные по специальной технологии, в состав оболочки и (или) содержимого которых входят специальные вспомогательные вещества для изменения скорости, и (или) времени, и (или) места высвобождения действующего вещества, предназначенные для приёма внутрь.

Использование термина «модифицированное высвобождение» в наименовании лекарственной формы возможно лишь в тех случаях, когда неприменимы термины «кишечнорастворимые с пролонгированным высвобождением», «с пролонгированным высвобождением» или «кишечнорастворимые».

Среди гранул с модифицированным высвобождением различают гранулы с пролонгированным и отсроченным (отложенным) высвобождением.

Гранулы кишечнорастворимые – гранулы для приёма внутрь с отсроченным высвобождением, покрытые специальной оболочкой или содержащие специальные вещества, или полученные с использованием специальной технологии, которые обеспечивают устойчивость в желудочном соке (гастрорезистентность) и обычное высвобождение действующих веществ в кишечном соке.

Гранулы с пролонгированным высвобождением – гранулы для приёма внутрь, покрытые специальной оболочкой, или содержащие специальные вспомогательные вещества, или полученные по специальной технологии, для замедленного непрерывного высвобождения действующих веществ.

Гранулы кишечнорастворимые с пролонгированным высвобождением – гранулы кишечнорастворимые, покрытые специальной оболочкой или содержащие специальные вспомогательные вещества, или полученные по специальной технологии, для замедленного непрерывного высвобождения действующих веществ.

Гранулы могут быть использованы для приготовления восстановленных лекарственных форм (в виде капель, растворов, суспензий, сиропов) путём растворения или диспергирования гранул в соответствующем растворителе. Для обозначения таких гранул используют термин «Гранулы для приготовления…» с указанием наименования получаемой лекарственной формы и способа/пути её введения или применения, например, «Гранулы для приготовления суспензии для приёма внутрь».

Гранулы шипучие – гранулы, в состав которых введены органические кислоты и карбонаты или гидрокарбонаты, реагирующие в присутствии воды с выделением углерода диоксида; предназначены для растворения или диспергирования в воде перед приёмом внутрь.

Разновидностью гранул являются пеллеты, которые представляют собой твёрдые частицы сферической формы без оболочки или покрытые оболочкой, обладающие свойством сыпучести, содержащие одно или несколько действующих веществ различной консистенции с добавлением вспомогательных веществ.

Гранулы могут быть дозированными и недозированными.

Гранулы могут быть выпущены в однодозовых или многодозовых упаковках.

Гранулы, включая пеллеты, могут быть использованы в качестве фармацевтических субстанций при производстве других лекарственных форм (например, капсул, таблеток, суспензий и др.).

###### Особенности технологии

Производство гранул осуществляют методами сухого или влажного гранулирования, структурной грануляции и др.

Гранулы, покрытые оболочкой, получают последовательным нанесением слоёв плёнкообразующего покрытия на частицы носителя, содержащего действующее вещество (вещества), любым подходящим способом.

При производстве гранул и при покрытии их оболочками применяют различные вспомогательные вещества: связующие, разбавители, способствующие скольжению и др. В состав гранул шипучих входят органические кислоты и карбонаты/гидрокарбонаты и могут быть введены корригенты вкуса, стабилизаторы, антимикробные консерванты, красители.

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственной формы «Гранулы» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту.

###### Испытания

Гранулы должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Восстановленные лекарственные формы, полученные с использованием гранул, предназначенных для их приготовления путём растворения или диспергирования, должны соответствовать требованиям ОФС, регламентирующих качество полученных лекарственных форм.

Описание. Гранулы характеризуют, отмечая внешний вид (форму, наличие оболочки, поверхность и др.), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Если нет других указаний в фармакопейной статье, гранулы должны быть однородными по окраске.

Размер гранул. Размер гранул должен быть в пределах от 0,2 мм до 3 мм. Количество более мелких и более крупных гранул не должно превышать в сумме 5 %. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Ситовой анализ» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Размер гранул, представляющих собой пеллеты, может быть в пределах от 0,5 мм до 5 мм. Если указано в фармакопейной статье, определение размера и распределения по размерам пеллет проводят в соответствии с ОФС «Ситовой анализ».

Распадаемость. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Распадаемость твёрдых лекарственных форм» с использованием навески лекарственного препарата 0,5 г, если не указано иное, и сетки с отверстиями размером 0,42 мм (40 меш). При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, в качестве жидкой среды используют воду.

Если нет других указаний в фармакопейной статье, гранулы должны распадаться в течение 15 мин, гранулы, покрытые оболочкой, должны распадаться в течение 30 мин.

Гранулы кишечнорастворимые. Если не указано иначе в фармакопейной статье, испытание проводят со следующими изменениями в два этапа. В качестве жидкой среды на первом этапе используют хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М. Время устойчивости гранул в кислой среде может зависеть от их состава, но не должно быть менее 1 ч и более 3 ч. Гранулы не должны распадаться и обнаруживать признаки растрескивания и размягчения. На втором этапе кислоту заменяют фосфатным буферным раствором с рН 6,8. Если нет других указаний в фармакопейной статье, то в буферном растворе гранулы должны распадаться в течение 1 ч.

Гранулы шипучие. Испытание проводят по следующей методике. В стакан, содержащий 200 мл воды при температуре от 15 оС до 25°оС, помещают одну дозу гранул – наблюдается интенсивное выделение пузырьков газа. Гранулы считаются распавшимися, если после прекращения выделения газа они или растворились, или диспергировались в воде. Испытание повторяют еще на 5 дозах. Гранулы выдерживают испытание, если каждая из 6 доз растворяется в течение не более 5 мин.

Растворение. Испытание проводят для дозированных гранул за исключением гранул шипучих; гранул, предназначенных для приготовления растворов для приёма внутрь; гранул, время распадаемости которых не превышает 5 мин. Определение проводят в соответствии с ОФС «Растворение для твёрдых дозированных лекарственных форм». Если в фармакопейной статье предусмотрено испытание по показателю «Растворение», то допускается не проводить испытание по показателю «Распадаемость».

Потеря в массе при высушивании. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Потеря в массе при высушивании» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Однородность массы. Испытание проводят для дозированных гранул и для гранул, выпускаемых в однодозовой индивидуальной упаковке, в соответствии с ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм». Испытание не применяют в случае, если проводят испытание по показателю «Однородность дозирования».

Однородность дозирования. Испытание проводят для дозированных гранул и для гранул, выпускаемых в однодозовой индивидуальной упаковке, в соответствии с ОФС «Однородность дозирования».

Однородность массы доз. Испытание проводят для недозированных гранул, выпускаемых в многодозовой упаковке, снабжённой устройством для дозирования, в соответствии с ОФС «Однородность массы (объёма) доз, отобранных из многодозовой упаковки».

Время растворения или диспергирования. Испытание проводят для гранул, предназначенных для получения восстановленных жидких лекарственных форм путём растворения или диспергирования гранул, в соответствии с ОФС «Время растворения или диспергирования» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Масса содержимого упаковки. Испытание проводят для недозированных гранул в многодозовой упаковке в соответствии с ОФС «Масса (объём) содержимого упаковки».

Микробиологическая чистота. Испытания проводят для всех гранул в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0005 Капсулы

Взамен ОФС.1.4.1.0005.18

Капсулы – твёрдая дозированная лекарственная форма, содержащая одно или несколько действующих веществ с добавлением или без добавления вспомогательных веществ, заключённых в твёрдую или мягкую оболочку различного размера и вместимости.

В зависимости от типа оболочки различают капсулы твёрдые и мягкие.

Твёрдые капсулы – капсулы с твёрдой оболочкой цилиндрической формы с полусферическими концами, состоящие из двух частей – корпуса и крышечки, которые входят одна в другую, не образуя зазоров. Корпус и крышечка могут иметь специальные канавки и выступы для обеспечения «замка».

В зависимости от вместимости оболочки твёрдые капсулы могут быть 8 размеров (табл. 1).

Таблица 1. Размеры твёрдых капсул в зависимости от их вместимости
Размер | 000 | 00 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5
Вместимость, мл | 1,37 | 0,95 | 0,68 | 0,50 | 0,37 | 0,30 | 0,21 | 0,13

Допускается использовать капсулы размера 0е1 (вместимость 0,78 мл), представляющие собой удлинённые капсулы размера 0. Допускается также использовать капсулы других размеров, приведённых в фармакопейных статьях.

Примечание: «еl» – сокращение от англ. «elongated» – удлинённый.

Мягкие капсулы – цельные капсулы различной формы: сферической, цилиндрической, яйцевидной (ректальные или вагинальные), продолговатой или цилиндрической с полусферическими концами, со швом или без шва. Мягкие капсулы имеют более толстую оболочку, чем твёрдые. Капсулы могут быть различных размеров, вместимостью до 1,5 мл.

По способу/пути введения и применения капсулы делят на капсулы для приёма внутрь, капсулы подъязычные, капсулы для рассасывания, капсулы жевательные, капсулы вагинальные, капсулы внутриматочные, капсулы ректальные, капсулы с порошком для ингаляций.

Термин «капсулы» применяют для капсул, предназначенных для приёма внутрь.

Капсулы подъязычные – капсулы, предназначенные для помещения под язык с целью оказания системного действия.

Капсулы для рассасывания – капсулы, помещаемые в полость рта для последующего рассасывания, обычно с целью оказания местного действия.

Капсулы жевательные – мягкие капсулы, предназначенные для разжёвывания с целью высвобождения содержимого в полость рта и оказания местного или системного действия после всасывания действующего вещества через слизистую оболочку полости рта или в желудочно-кишечном тракте после проглатывания.

Капсулы вагинальные – капсулы, предназначенные для введения во влагалище с целью оказания местного действия.

Капсулы внутриматочные – мягкие капсулы, предназначенные для введения в полость матки, высвобождающие содержимое в течение продолжительного периода времени.

Капсулы ректальные – мягкие капсулы вытянутой формы с жидким или мягким содержимым, предназначенные для введения в прямую кишку с целью оказания местного или системного действия.

Капсулы с порошком для ингаляций – капсулы, содержащие порошок, предназначенный для ингаляционного введения с помощью соответствующего ингалятора в дыхательную систему, с целью оказания местного или системного действия в нижних дыхательных путях и лёгких.

По типу высвобождения действующего вещества различают капсулы с обычным и модифицированным высвобождением.

Капсулы с модифицированным высвобождением – капсулы для приёма внутрь, полученные по специальной технологии, или в состав оболочки и/или содержимого которых входят специальные вспомогательные вещества, для изменения скорости, и/или времени, и/или места высвобождения действующего вещества.

Капсулы кишечнорастворимые – капсулы для приёма внутрь с отсроченным высвобождением, полученные путём заполнения гастрорезистентными гранулами или частицами или путём использования специальной технологии, которые обеспечивают устойчивость в желудочном соке (гастрорезистентность) и обычное высвобождение действующих веществ в кишечном соке.

Капсулы с пролонгированным высвобождением – капсулы для приёма внутрь, содержащие специальные вспомогательные вещества или полученные по специальной технологии, для замедленного непрерывного высвобождения действующего вещества (действующих веществ).

Капсулы кишечнорастворимые с пролонгированным высвобождением – капсулы кишечнорастворимые, содержащие специальные вспомогательные вещества или полученные по специальной технологии, для замедленного непрерывного высвобождения действующих веществ.

Использование термина «модифицированное высвобождение» для обозначения капсул возможно лишь в тех случаях, когда неприменимы термины «кишечнорастворимые с пролонгированным высвобождением», «с пролонгированным высвобождением» или «кишечнорастворимые».

Капсулы могут быть выпущены в однодозовой или многодозовой упаковке.

###### Особенности технологии

Твёрдые капсулы получают внесением содержимого капсулы (преимущественно в твёрдой форме, например, порошок или гранулы) в корпус капсулы.

Мягкие капсулы формуют, наполняют и запаивают в ходе одной технологической операции. Содержимое мягких капсул может быть жидким или мягким. Твёрдые вещества обычно растворяют или диспергируют в подходящем растворителе, разрешённом к медицинскому применению.

Для получения капсульной оболочки используют желатин, другие полимерные структурообразователи и вспомогательные вещества: непрозрачные наполнители, поверхностно-активные вещества, консерванты, красители, корригенты вкуса, ароматизаторы и другие вещества.

Содержимое капсул может быть твёрдым, жидким или мягким, состоящим из одной или нескольких фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ, таких как растворители, разбавители, смазывающие, разрыхляющие и другие вещества, или без вспомогательных веществ. Содержимое капсул не должно разрушать оболочку. Оболочка должна разрушаться в месте действия с высвобождением действующего вещества (веществ).

При получении лекарственных препаратов в лекарственной форме «Капсулы» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту.

###### Испытания

Капсулы должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Капсулы с порошком для ингаляций должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для ингаляций».

Описание. Капсулы характеризуют, отмечая внешний вид (форму, размеры и др.), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Оболочка капсулы должна иметь гладкую поверхность и не должна содержать воздушных пузырьков или механических повреждений. На поверхность капсул может быть нанесена маркировка.

Приводят описание содержимого капсул.

Распадаемость. Капсулы (твёрдые и мягкие). Испытание проводят в соответствии с ОФС «Распадаемость твёрдых лекарственных форм». При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, капсулы должны распадаться в воде в течение 30 мин. В качестве жидкой среды допускается использовать хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М или желудочный искусственный сок. Если капсулы всплывают на поверхность жидкой среды, следует использовать диски.

Капсулы кишечнорастворимые. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Распадаемость твёрдых лекарственных форм» в два этапа со следующими изменениями методики. В качестве жидкой среды на первом этапе испытания применяют хлористоводородной кислоты раствор 01 М и не используют диски. Капсулы должны оставаться неповреждёнными в кислой среде в течение времени, указанного в фармакопейной статье, обычно оно составляет от 2 ч до 3 ч, но не менее 1 ч. Повреждением капсулы считается любое нарушение целостности оболочки капсулы, позволяющее содержимому капсулы выйти в окружающую среду. На втором этапе кислоту заменяют фосфатным буферным раствором с рН 6,8. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, в буферном растворе капсулы должны распадаться в течение 1 ч, используя диски. Может быть использован буферный раствор рН 6,8 с добавлением порошка панкреатина (например, 0,35 г панкреатина на 100 мл буферного раствора).

Если капсулы не выдержали испытание вследствие прилипания к дискам, результаты считают недействительными. Испытание повторяют на следующих 6 капсулах, без дисков.

Капсулы ректальные, капсулы вагинальные. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Распадаемость суппозиториев, вагинальных таблеток, ректальных и вагинальных капсул». При отсутствии другого обоснования, капсулы вагинальные, не предназначенные для пролонгированного местного действия, и капсулы ректальные, не предназначенные для модифицированного или пролонгированного местного действия, должны распадаться в течение 30 мин.

Растворение. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Растворение для твёрдых дозированных лекарственных форм» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Если в фармакопейной статье предусмотрено испытание по показателю «Растворение», то испытание по показателю «Распадаемость» допускается не проводить.

Однородность массы. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм».

Испытание не применяют в случае, если предусмотрено испытание по показателю «Однородность дозирования» для всех действующих веществ.

Однородность дозирования. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Однородность дозирования».

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для всех капсул в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0006 Лекарственные формы для ингаляций

Взамен ОФС.1.4.1.0006.15

Лекарственные формы для ингаляций – жидкие, мягкие или твёрдые лекарственные формы, предназначенные для введения действующего вещества (веществ) в дыхательную систему в виде паров или дисперсий твёрдых или жидких частиц в газовой среде с целью оказания местного или системного действия.

Лекарственные формы для ингаляций содержат одно или более действующих веществ, растворённых или диспергированных в соответствующем носителе.

Для введения лекарственных форм для ингаляций в дыхательную систему в большинстве случаев используют специальные устройства – небулайзеры, ингаляторы (находящиеся под давлением, не находящиеся под давлением или предназначенные для порошков) и др.

###### Термины и определения

Высвобождение – приведение в действие специального устройства распыления/доставки лекарственного средства.

Доза (терапевтическая доза) – количество действующего вещества, которое должно быть принято за один раз, указанное в инструкции по медицинскому применению. Для получения одной терапевтической дозы лекарственной формы для ингаляций может потребоваться несколько высвобождений.

Доставляемая (высвобождаемая) доза – количество действующего вещества, которое фактически получает пациент (не учитывается количество действующего вещества, осевшее на составных частях ингалятора).

Респирабельная фракция – количество действующего вещества, предположительно проникающее в дыхательную систему во время ингаляции (частицы с диаметром приблизительно от 1 до 5 мкм).

Небулайзер – устройство для медицинского применения, обеспечивающее преобразование жидкой лекарственной формы для ингаляций в дисперсию в газовой среде (аэрозоль) при помощи, как правило, электрической энергии. Небулайзеры должны обеспечивать образование дисперсных частиц подходящего размера для доставки действующего вещества в дыхательные пути и лёгкие. Небулайзеры могут быть компрессорными, ультразвуковыми, либо иного типа.

###### Классификация

Выделяют несколько групп лекарственных форм для ингаляций:

- лекарственные формы для ингаляций для введения в виде пара;

- тампоны лекарственные для ингаляций;

- лекарственные формы для ингаляций для распыления с помощью небулайзера;

- аэрозоли для ингаляций дозированные (лекарственные формы для ингаляций, находящиеся под давлением);

- лекарственные формы для ингаляций, не находящиеся под давлением;

- порошки для ингаляций, в т.ч. капсулы с порошком для ингаляций.

Лекарственные формы для ингаляций для введения в виде пара – лекарственные формы, образующие пары при добавлении в горячую воду или, образующие пары при помощи соответствующего устройства, например, парового ингалятора, не находящегося под давлением, предназначенные для вдыхания с целью оказания местного или системного действия. К лекарственным формам для ингаляций для введения в виде пара, относят:

- жидкие лекарственные формы: растворы для ингаляций, капли для ингаляций, эмульсии для ингаляций, суспензии для ингаляций, настойки для ингаляций;

- мягкие лекарственные формы: мази для ингаляций;

- твёрдые лекарственные формы: таблетки для ингаляций, предназначенные для растворения или диспергирования в жидкой среде перед применением.

Тампоны лекарственные для ингаляций – тампоны лекарственные, как правило, помещаемые в соответствующие аппликаторы цилиндрической формы с закруглёнными концом и отверстием, предназначенные для ингаляций через носовые ходы.

Лекарственные формы для ингаляций для распыления с помощью небулайзера – лекарственные формы, предназначенные для преобразования в аэрозоль для ингаляций с помощью соответствующего устройства, как правило, небулайзера. К лекарственным формам для ингаляций для распыления относят:

- жидкие лекарственные формы: растворы для ингаляций, суспензии для ингаляций, эмульсии для ингаляций, концентраты для приготовления жидкой лекарственной формы для ингаляций;

- твёрдые лекарственные формы: таблетки или порошки для приготовления жидких лекарственных форм для ингаляций.

К лекарственным формам для ингаляций, находящиеся под давлением, относят Аэрозоли для ингаляций дозированные – аэрозоли, предназначенные для ингаляционного введения в дыхательную систему с целью оказания местного или системного действия в нижних дыхательных путях и лёгких и выпускаемых в упаковке с дозирующим устройством.

Аэрозоли для ингаляций дозированные могут представлять собой растворы, суспензии или эмульсии; выпускаемые в упаковке с дозирующей клапанно-распылительной системой.

Лекарственные формы для ингаляций, не находящимися под давлением – неаэрозольные лекарственные формы для ингаляций, представляющие собой растворы, суспензии или эмульсии, доставляющие дозу лекарственного препарата за одно или более высвобождений с помощью портативного устройства для доставки, ультразвуковых колебаний или иных методов.

К лекарственной форме «порошки для ингаляций» относят дозированные порошки, предназначенные для введения в дыхательную систему с помощью соответствующего устройства – порошкового ингалятора, снабжённого дозирующим устройством. В зависимости от вида и устройства порошкового ингалятора различают следующие разновидности «порошков для ингаляций» дозированных:

- порошок для ингаляций, предварительно дозированный (порошок для ингаляций, предварительно дозированный; порошковый ингалятор, предварительно дозированный) – порошок для ингаляций, помещённый в порошковый ингалятор, содержащий заранее отмеренное количество действующего вещества (лекарственного препарата) в виде порошка для ингаляций, как правило, заключённого в упаковку в форме капсулы, блистера или иную форму;

- порошок с дозирующим устройством (порошок для ингаляций дозированный с дозирующим устройством; порошковый ингалятор с дозирующим устройством) – это порошок для ингаляций, помещённый в порошковый ингалятор с дозирующим устройством, содержащий резервуар с порошком для ингаляций, дозируемым на отдельные высвобождения (дозы) с помощью устройства для доставки (распыления).

Примечание. Порошки для ингаляций, заключённые в капсулы, называемые «Капсулы с порошком для ингаляций», предназначенные для порошкового ингалятора, представляют собой лекарственную форму «Порошок для ингаляций» и не относятся к лекарственной форме «Капсулы».

Порошки для ингаляций могут быть однодозовыми и многодозовыми.

Лекарственные формы для ингаляций могут быть дозированными и недозированными.

###### Особенности технологии

Вспомогательные вещества, входящие в состав лекарственных форм для ингаляций, в используемых концентрациях не должны отрицательно влиять на основное терапевтическое действие лекарственного препарата, не должны быть токсичными и не должны неблагоприятно воздействовать на функции слизистой оболочки дыхательных путей и её реснитчатого эпителия.

В зависимости от типа лекарственной формы и природы фармацевтической субстанции (субстанций) лекарственные формы для ингаляций могут содержать пропелленты (тетрафторэтан и др.), растворители (вода, спирт этиловый и др.), антимикробные консерванты (метилпарагидроксибензоат и др.), поверхностно-активные (полисорбат-20 и др.), стабилизирующие (натрия эдетат и др.), солюбилизирующие вещества и т.д.

Лекарственные формы для ингаляций для распыления с помощью небулайзера, лекарственные формы для ингаляций, не находящиеся под давлением, в многодозовых упаковках могут содержать антимикробные консерванты, за исключением лекарственных форм лекарственных препаратов, которые сами обладают антимикробными свойствами.

Порошки для ингаляций содержат одно или несколько тонкодисперсных фармацевтических субстанций вместе с инертными вспомогательными веществами – «носителями» (обычно лактоза) или без них. При производстве порошков для ингаляций фармацевтические субстанции микронизируют в специальных устройствах.

При производстве лекарственных форм для ингаляций, содержащих диспергированные частицы и представляющих собой гетерогенные, комбинированные дисперсные системы, должна быть предусмотрена технология, обеспечивающая получение и контроль частиц необходимого размера и однородность доставляемой дозы.

Состав лекарственных форм для ингаляций и процесс их производства должны обеспечивать однородность дозирования и формирование аэрозоля с размером частиц действующего вещества, предназначенных для введения в соответствующий отдел дыхательной системы.

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственных форм для ингаляций должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту; в установленных случаях, при поучении стерильных лекарственных форм, должны быть приняты меры, обеспечивающие их стерильность. При получении стерильных лекарственных форм для ингаляций используют методы стерилизации в соответствии с ОФС «Стерилизация».

Лекарственные формы для ингаляций для введения в виде пара и лекарственные формы для ингаляций для распыления могут быть выпущены готовыми к применению или быть приготовленными непосредственно перед применением в виде восстановленных лекарственных форм из порошков, таблеток, мазей, предназначенных для приготовления жидких лекарственных форм для ингаляций путём растворения или диспергирования в соответствующих растворителях; а также приготовленными непосредственно перед применением в виде разбавленных лекарственных форм из концентратов, предназначенных для получения жидких лекарственных форм для ингаляций после разведения в соответствующем растворителе до требуемой концентрации.

Лекарственные препараты в виде лекарственных форм для ингаляций могут быть выпущены в однодозовых и многодозовых упаковках.

###### Испытания

Лекарственные формы для ингаляций должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для соответствующей лекарственной формы.

Лекарственные формы для ингаляций, представляющие собой растворы, капли, суспензии, эмульсии, настойки, таблетки, мази, порошки, аэрозоли, тампоны лекарственные должны отвечать требованиям соответствующих ОФС: «Растворы», «Капли», «Суспензии», «Эмульсии», «Настойки», «Таблетки», «Мягкие лекарственные формы», «Порошки», «Аэрозоли», «Тампоны лекарственные» и нормативным требованиям, указанным в фармакопейных статьях.

Лекарственные формы, представляющие собой порошки, таблетки, мази, концентраты, предназначенные для приготовления лекарственных форм для ингаляций, должны отвечать требованиям соответствующих ОФС: «Порошки», «Таблетки», «Мягкие лекарственные формы», «Концентраты».

Восстановленные и разбавленные жидкие лекарственные формы для ингаляций для распыления небулайзером, полученные с использованием порошков, таблеток или концентратов, предназначенных для их приготовления путём растворения/диспергирования или разбавления, должны соответствовать требованиям, предъявляемым к жидким лекарственным формам для ингаляций для распыления небулайзером.

Описание. Лекарственные формы для ингаляций характеризуют, отмечая внешний вид (агрегатное состояние, форму, размеры и др.), основные физические, органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

рН. Испытание проводят для лекарственных форм для ингаляций для введения в виде пара, а также для жидких лекарственных форм для ингаляций, предназначенных для распыления с помощью небулайзера. Определение проводят потенциометрическим методом в соответствии с ОФС «Ионометрия». При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, значение рН жидких лекарственных форм или твёрдых и мягких лекарственных форм после их растворения/диспергирования или разбавления в соответствующем растворителе должно быть от 3,0 до 10,0.

Однородность дозирования. Испытание проводят для лекарственных форм для ингаляций, предназначенных для распыления небулайзером, представляющих собой жидкие лекарственные формы, выпускаемые в однодозовой упаковке, в соответствии с ОФС «Однородность дозирования».

При соответствующем обосновании, проводят испытание по показателю «Однородность массы» в соответствии с методикой. Взвешивают по отдельности содержимое 20 упаковок, извлекая содержимое как можно полнее, определяют среднюю массу. Масса каждой индивидуальной упаковки может отклоняться от средней массы 20 упаковок не более чем на ±10 %, при этом масса не более 2 индивидуальных упаковок может отклоняться более ±10 %, но не должна превышать ±20 % от средней массы.

Механические включения. Испытание проводят для аэрозолей для ингаляций дозированных и порошков для ингаляций дозированных в соответствии с методикой и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье. Отсутствие показателя должно быть обосновано.

Респирабельная фракция (Аэродинамическое распределение мелкодисперсных частиц)». Испытание проводят для аэрозолей для ингаляций дозированных; дозированных лекарственных форм для ингаляций, не находящихся под давлением; порошков для ингаляций; капсул с порошком для ингаляций в соответствии с ОФС «Аэродинамическое распределение мелкодисперсных частиц» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Испытание для лекарственных форм для ингаляций для распыления с помощью небулайзера, представляющих собой суспензии, проводят в соответствии с ОФС «Аэродинамическое распределение мелкодисперсных частиц» или в соответствии с ОФС «Испытания лекарственных форм для ингаляций, предназначенных для распыления с помощью небулайзера» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Однородность доставляемых (высвобождаемых) доз. (Однородность дозирования). Испытание проводят для дозированных лекарственных форм: для аэрозолей для ингаляций дозированных; для дозированных лекарственных форм для ингаляций, не находящихся под давлением; для порошков для ингаляций, для капсул с порошком для ингаляций.

Контроль показателя для лекарственных препаратов в упаковках с дозирующим устройством должен проводиться как на дозах, высвобождаемых из одной упаковки, так и для доз, высвобождаемых из разных упаковок. Испытание на дозах из одной упаковки неприменимо для лекарственных форм в однодозовых упаковках, а также для лекарственных форм в многодозовых упаковках, в которых количество доз менее 10. Для этих препаратов выполняют только испытание на дозах, высвобождаемых из разных упаковок. Испытания на дозах из одной упаковки и на дозах из разных упаковок должны проводиться отдельно друг от друга, их результаты должны оцениваться независимо друг от друга.

Процедура отбора доз должна включать в себя отбор доз в начале, в середине и в конце использования ингалятора, включая первую и последнюю номинальные дозы.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, испытание на одной упаковке на стадии 1 проводят на 10 дозах, отбираемых по следующей схеме: три дозы отбирают в начале, четыре – в середине и три – в конце использования упаковки. На стадии 2 испытание проводят на двух дополнительных упаковках, из которых отбирают по 10 доз по указанной выше схеме.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, испытание на разных упаковках на стадии 1 проводят на 10 дозах, отобранных из 10 упаковок лекарственного препарата для ингаляций следующим образом: из трёх упаковок по одной дозе высвобождают в начале, из четырёх упаковок – в середине, из трёх упаковок – в конце использования лекарственного препарата. На стадии 2 испытание проводят на 20 дополнительных упаковках, из которых отбирают по одной дозе по схеме, аналогичной указанной выше.

Методика определения однородности доставляемых (высвобождаемых) доз (однородность дозирования) для одной упаковки аэрозолей для ингаляций. Высвобождение дозы проводят в соответствии со способом, описанным в инструкции по медицинскому применению или в фармакопейной статье; как правило, ингалятор используют при нижнем положении клапана. Для ингаляторов, применяемых при верхнем положении клапана, используют методики, обеспечивающие полноту сбора доставляемых (высвобождаемых) доз.

Для сбора дозы используют следующий прибор и методику.

Прибор (рис. 1) состоит из держателя фильтра (А), цилиндра для сбора образцов (Б), который герметично закрепляется с держателем фильтра и адаптером мундштука (В), соединяющим цилиндр для сбора образцов и выходное отверстие ингалятора. Используют адаптер мундштука, позволяющий лицевой стороне мундштука ингалятора находиться на одном уровне с лицевой стороной трубки для сбора образцов или на 2,5 мм её нарезной части, в зависимости от ингалятора. Держатель фильтра сконструирован для использования фильтров диаметром 25 мм. Вакуумный ниппель присоединён к насосу и регулятору воздушного потока. Воздушный поток регулируют таким образом, чтобы воздух проходил через всю конструкцию, включая фильтр и ингалятор, со скоростью 28,3 л/мин(±5 %). Воздух должен непрерывно пропускаться через цилиндр для сбора доз во избежание потери действующего вещества в окружающую среду. Фильтр и другие составляющие части конструкции должны быть совместимы с действующим веществом, другими компонентами лекарственного препарата и растворителями, которые используются для извлечения действующего вещества из фильтра. В собранном виде все соединения прибора должны быть герметичны.

Испытание проводят, по отдельности определяя количество действующего вещества в 10 дозах. При отсутствии иных указаний в инструкции по медицинскому применению перед использованием упаковку встряхивают в течение 5 с и отбрасывают одну дозу. При включенном насосе вставляют ингалятор в прибор и выпускают одну дозу, через 5 с насос отключают. Производят смывы с фильтра и внутренней поверхности собирательного цилиндра, используя определенные порции растворителя в соответствии с методикой, приведённой в фармакопейной статье. Процедуру повторяют для последующих доз согласно схеме отбора доз.

Необходимое количество доз отбрасывают до тех пор, пока не останется (n/2)+1 доза, где n – заявленное количество доз. Собирают 4 дозы согласно описанной выше методике.

Снова отбрасывают необходимое количество доз до тех пор, пока не останется 3 дозы. Собирают 3 последние дозы согласно описанной выше методике и определяют содержание действующего вещества в соответствии с методикой, приведённой в фармакопейной статье.

Для лекарственных препаратов для ингаляций, содержащих более одного действующего вещества, испытание по показателю «Однородность доставляемых (высвобождаемых) доз. (Однородность дозирования)» проводят для каждого действующего вещества.

В случае если содержимое упаковки представляет собой раствор, допускается производить оценку однородности доставляемых (высвобождаемых) доз путём определения средней массы одной дозы и расчёта отклонений от средней массы.

Стадия 1. Лекарственный препарат выдерживает испытание, если 9 из 10 результатов находятся в пределах от 75 % до 125 % от среднего значения, а все результаты находятся в пределах от 65 % до 135 % от среднего значения.

Стадия 2. Если 2 или 3 результата, полученных на стадии 1,выходят за пределы от 75 % до 125 % от среднего значения, испытание повторяют на дополнительных ингаляторах. Не более 3 из 30 значений могут выходить за пределы от 75 % до 125 % от среднего значения, и все значения должны быть в пределах от 65 % до 135 % от среднего значения.

Среднее значение доставляемых (высвобождаемых) доз должно находиться в пределах от 85 % до 115 % от заявленного значения.

Методика определения однородности доставляемых (высвобождаемых) доз для порошков для ингаляций. Высвобождение дозы проводят в соответствии со способом, описанным в инструкции по медицинскому применению. Прибор для сбора дозы аналогичен прибору, представленному на рис. 1, однако имеет больший диаметр, а также отвод Р1 с клапаном. Для испытания собирают прибор для определения однородности дозирования в порошковых ингаляторах, представленный на рис. 2 и описанный в таблице. Размеры фильтров и трубок должны быть приемлемы для используемой скорости потока.

Определяют скорость потока и длительность отбора образца с помощью цилиндра для сбора образца по следующей методике.

Ингалятор готовят согласно инструкции по медицинскому применению и герметично соединяют его с цилиндром для сбора образца при помощи адаптера. Соединяют одно отверстие манометра с отводом (Р1), второе отверстие манометра оставляют открытым. Открывают клапан отвода Р1. Включают насос, открывают двухсторонний клапан (Д). С помощью регулирующего клапана (З) устанавливают давление величиной 4,0 кПа. Закрывают клапан отвода Р1. Отсоединяют ингалятор от адаптера и, не изменяя положение регулирующего клапана (З), присоединяют измеритель скорости потока к входному отверстию системы.

Для измерения скорости выходящего потока используют либо измеритель скорости потока, откалиброванный на измерение объёма потока, выходящего из измерительного прибора, либо рассчитывают скорость выходящего из него потока (Qвых), используя уравнение идеального газа. Для измерителя, откалиброванного на измерение входящего потока (Qвх), применяют следующее уравнение:

где P0 – атмосферное давление, мм рт.ст;
∆P – перепад давления в измерительном приборе, мм рт.ст.

Рис. 1. Прибор для сбора доз в дозированных лекарственных формах для ингаляций, находящихся под давлением. Размеры приведены в мм
Рис. 2. Прибор для определения однородности доставляемых (высвобождаемых) доз в порошковых ингаляторах

Таблица. Описание элементов прибора, предназначенного для определения однородности доставляемых (высвобождаемых) дозирования в порошковых ингаляторах
Код | Элемент прибора | Описание
--- | --- | ---
А | Цилиндр для сбора образца | Количественный отбор действующего вещества. Аналогичен цилиндру на рис. 1 с размерами 34,85 мм (внутренний диаметр) х 12 см (длина)
Б | Фильтр | 47 мм фильтр, например, стеклянный волокнистый фильтр
В | Соединитель | Внутренний диаметр ≥ 8 мм, например, короткая металлическая муфта с отводом к Р3 меньшего диаметра
Г | Вакуумная трубка | Трубка ≥ 8 мм (внутренний диаметр), достаточной длины для внутреннего объёма (25±5) мл, например, силиконовая
Д | Двухсторонний клапан | Двухсторонний, двухпортовый электромагнитный клапан, имеющий минимальное сопротивление воздушному потоку, с внутренним диаметром ≥ 8 мм и временем открытия ≤ 100 мс
Е | Вакуумный насос | Насос должен обеспечивать достаточную скорость воздушного потока через собранную систему. Насос соединяют с двухсторонним клапаном с помощью вакуумной трубки (внутренний диаметр ≥ 10 мм)
Ж | Таймер | Таймер, способный управлять двухсторонним клапаном в течение необходимого времени
P1 | Отвод к манометру, оснащенный клапаном | 2,2 мм (внутренний диаметр), 3,1 мм (наружный диаметр), находится на одном уровне с внутренней стороной трубки для сбора образца, отцентрированный на расстоянии 59 мм от входного отверстия, с гладкой поверхностью. Регулятор давления Р1 никогда не должен открываться в атмосферу. Давление относительно атмосферного измеряется Р1
P2 P3 | Измерители давления | Измерители абсолютного давления
З | Регулирующий клапан | Клапан, регулирующий воздушный поток с максимальным значением Cv ≥ 1

В случае если скорость потока превышает 100 л/мин, с помощью регулирующего клапана (З) устанавливают данный показатель в пределах (110±5) л/мин. Отмечают скорость потока, выходящего из измерителя, и определяют время, в течение которого 4 л воздуха проходят через ингалятор.

Проверку наличия требуемого потока воздуха в регуляторе потока проводят следующим образом: при присоединённом адаптере измеряют абсолютное давление с обеих сторон регулирующего клапана, рис. 2 (точки замера Р2 и Р3). Соотношение Р3/Р2 должно составлять ≤ 0,5, в противном случае производят увеличение мощности насоса и повторяют измерения.

В случае ингаляторов, предназначенных для использования капсул с порошком для ингаляций, подготавливают ингалятор в соответствии с инструкцией по медицинскому применению, герметично подсоединяют к прибору. Пропускают 4 л воздуха через прибор. Отсоединяют ингалятор. Производят смывы с фильтра и внутренней поверхности собирательного цилиндра, используя определённые порции растворителя в соответствии с методикой, приведённой в фармакопейной статье. Количественно собирают доставленные (высвободившиеся) дозы лекарственной формы, производя смывы с фильтра и внутренней поверхности собирательного цилиндра определенными порциями растворителя. Определяют содержание действующего вещества в соответствии с методикой, приведённой в фармакопейной статье. Повторяют процедуру для последующих 9 доз.

Ингаляторы, имеющие резервуар для порошка, подготавливают в соответствии с инструкцией по медицинскому применению, герметично подсоединяют к прибору. Пропускают 4 л воздуха через прибор. Отсоединяют ингалятор. Количественно собирают доставленные (высвободившиеся) дозы лекарственной формы, производя смывы с фильтра и внутренней поверхности собирательного цилиндра определенными порциями растворителя. Определяют содержание действующего вещества в соответствии с методикой, приведённой в фармакопейной статье. Повторяют процедуру для последующих 2-х доз.

Необходимое количество доз отбрасывают до тех пор, пока не останется (n/2)+1 доза, где n – заявленное количество доз. Собирают 4 дозы согласно описанной выше методике.

Снова отбрасывают необходимое количество доз до тех пор, пока не останется 3 дозы. Собирают 3 последние дозы согласно описанной выше методике и определяют содержание действующего вещества в соответствии с методикой, приведённой в фармакопейной статье.

Для порошков для ингаляций, содержащих более одного действующего вещества, испытание по показателю «Однородность доставляемых (высвобождаемых) доз. (Однородность дозирования)» проводят для каждого действующего вещества.

Стадия 1. Лекарственный препарат выдерживает испытание, если 9 из 10 результатов находятся в пределах от 75 % до 125 % от среднего значения, а все результаты находятся в пределах от 65 % до 135 % от среднего значения.

Стадия 2. Если 2 или 3 результата, полученных на стадии 1, выходят за пределы от 75 % до 125 % от среднего значения, испытание повторяют на дополнительных ингаляторах. Не более 3 из 30 значений могут выходить за пределы от 75 % до 125 % от среднего значения, и все значения должны быть в пределах от 65 % до 135 % от среднего значения.

Среднее значение доставляемых (высвобождаемых) доз должно находиться в пределах от 85 %до 115 % от заявленного значения.

Количество высвобождений из упаковки (количество доз в упаковке). Испытание проводят для дозированных лекарственных форм для ингаляций в многодозовой упаковке, снабжённой дозирующим устройством. Допускается проводить испытание одновременно с определением показателя «Однородность доставляемых (высвобождаемых) доз. (Однородность дозирования)». Количество высвобождений из упаковки (количество доз в упаковке) должно быть не менее указанного на этикетке. Технические дозы, необходимые для заполнения клапанно-распылительной системы, в расчёт не принимают.

*Микробиологическая чистота*. Испытания проводят для всех лекарственных форм для ингаляций, кроме стерильных, в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Стерильность. Испытания проводят для всех стерильных лекарственных форм для ингаляций в соответствии с ОФС «Стерильность».

Масса (объём) содержимого упаковки. Испытание проводят для недозированных лекарственных форм для ингаляций в соответствии с ОФС «Масса (объём) содержимого упаковки».

###### Упаковка

В соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств».

Многодозовые упаковки лекарственных форм для ингаляций, находящихся и не находящихся под давлением, лекарственных форм для ингаляций, предназначенных для распыления, должны быть снабжены дозирующим устройством.

Упаковка лекарственных форм для ингаляций может представлять собой ингаляторы, обеспечивающие дозирование и введение действующего вещества в лёгкие.

Аэрозоли для ингаляций дозированные могут быть помещены в дозирующие аэрозольные ингаляторы, которые могут быть различной конструкции (со спейсером, активированные вдохом и др.).

Упаковка порошков для ингаляций представляет собой индивидуальные ингаляторы, которые могут быть многодозовыми: резервуарные, блистерные или капсульными, как правило, однодозовыми.

###### Маркировка

В соответствии с ОФС «Маркировка лекарственных средств».

Для дозированных лекарственных форм для ингаляций указывают количество доз в упаковке. В случаях, если для получения минимальной терапевтической дозы требуется более одного высвобождения, указывают необходимое число высвобождений.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0007 Лекарственные формы для парентерального применения

Взамен ОФС.1.4.1.0007.15

Лекарственные формы для парентерального применения – стерильные жидкие, мягкие или твёрдые лекарственные формы, содержащие одно или более действующих веществ, предназначенные для введения в организм человека с нарушением целостности кожных покровов или слизистых оболочек путём инъекций, инфузий или имплантации.

Требования настоящей общей фармакопейной статьи не распространяются на лекарственные препараты для парентерального применения, полученные из крови человека, иммунобиологические и радиофармацевтические.

###### Классификация

Различают следующие лекарственные формы для парентерального применения в зависимости от их агрегатного состояния:

- жидкие лекарственные формы: растворы для инъекций, суспензии для инъекций, эмульсии для инъекций; растворы для инфузий, эмульсии для инфузий; концентраты для приготовления лекарственных форм для инъекций или для инфузий; суспензии для имплантации;

- мягкие лекарственные формы: гели для инъекций, гели для подкожного введения;

- твёрдые лекарственные формы: порошки для приготовления лекарственных форм для инъекций или инфузий; лиофилизаты для приготовления лекарственных форм для инъекций или инфузий; имплантаты, включая имплантаты интравитреальные, таблетки для имплантации.

Лекарственные формы для парентерального применения офтальмологического применения могут быть предназначены для инъекций, для инфузий и для имплантации.

Растворы для инъекций – стерильные растворы, предназначенные для инъекционного введения в определенные ткани или органы или в сосудистое русло.

Суспензии для инъекций – стерильные суспензии, предназначенные для инъекционного введения в определенные ткани или органы.

Суспензии для инъекций с пролонгированным высвобождением – суспензии для инъекций, содержащие специальные вспомогательные вещества или полученные по специальной технологии, для замедленного непрерывного высвобождения действующих веществ.

Эмульсии для инъекций – стерильные эмульсии типа «масло в воде», предназначенные для инъекционного введения в определенные ткани или органы или в сосудистое русло.

Лекарственные формы для инъекционного введения в определенные ткани, могут быть предназначены для подкожного введения, для внутрикожного введения, для внутримышечного введения, для накожного скарификационного нанесения, для околосуставного введения, для проведения прик-теста и др.

Лекарственные формы для инъекционного введения в определенные органы, могут быть предназначены для внутриполостного введения, для внутрибрюшинного введения, для внутрипузырного введения, для внутрисуставного введения, для внутрисердечного введения, для интратекального введения, для экстраамниального введения и др.

Лекарственные формы для инъекционного введения в сосудистое русло (для внутрисосудистого введения) могут быть предназначены для внутривенного введения, для внутриартериального введения, для внутрикоронарного введения, для интралимфатического введения и др.

Растворы для инфузий – стерильные растворы, предназначенные для парентерального применения, путем, как правило, медленного, часто капельного введения в циркулирующий кровоток с помощью инфузионных систем в значительном объеме.

Эмульсии для инфузий – стерильные эмульсии типа «масло в воде», предназначенные для парентерального применения, путем, как правило, медленного, часто капельного введения в циркулирующий кровоток с помощью инфузионных систем в значительном объеме.

Суспензии для имплантации – стерильные суспензии, предназначенные для имплантации с целью оказания системного действия в течение продолжительного периода времени.

К мягким лекарственным формам для парентерального применения относят гели для инъекций, гели для подкожного введения.

Гели для инъекций – стерильные гидрофильные гели, предназначенные для инъекционного введения в определенные ткани и органы.

Гели для подкожного введения – стерильные гидрофильные гели, предназначенные для введения непосредственно под кожу.

К твердым лекарственным формам для парентерального применения относят имплантаты, таблетки для имплантации.

Имплантаты – стерильная твердая лекарственная форма, за исключением таблеток для имплантации, имеющая подходящие для введения в ткани тела размеры и форму, предназначенная для имплантации и высвобождающая действующее вещество в течение длительного периода времени. Как правило, вводится подкожно, в иных случаях указывается путь введения.

Имплантат интравитреальный — имплантат, предназначенный для введения в заднюю камеру глаза.

Таблетки для имплантации – стерильные таблетки, получаемые путем прессования, предназначенные для имплантации, обычно подкожной, с целью оказания местного или системного действия в течение продолжительного периода времени.

Порошки для приготовления инъекционных или инфузионных лекарственных форм или лиофилизаты для приготовления инъекционных или инфузионных лекарственных форм – стерильные порошки или стерильные лиофилизаты, предназначенные для приготовления лекарственных форм для инъекций или для инфузий в виде восстановленных лекарственных форм путем растворения или диспергирования их в соответствующем стерильном растворителе.

Концентраты для приготовления инъекционных или инфузионных лекарственных форм – стерильные концентраты, предназначенные для приготовления лекарственных форм для инъекций или для инфузий после разведения в соответствующем растворителе до требуемой концентрации.

Лекарственные формы для парентерального применения могут быть дозированными и недозированными.

###### Особенности технологии

Все лекарственные формы для парентерального применения должны быть стерильными.

В зависимости от физико-химических характеристик фармацевтической субстанции (субстанций) и других свойств компонентов лекарственного препарата, стерильные лекарственные формы для парентерального применения могут быть получены с использованием финишной стерилизации или без неё (в асептических условиях с соблюдением необходимых мероприятий для обеспечения стерильности).

Методы и условия стерилизации лекарственных форм для парентерального применения должны соответствовать требованиям ОФС «Стерилизация».

В качестве растворителя для получения жидких лекарственных форм для парентерального применения используют воду для инъекций, которая должна соответствовать требованиям ФС «Вода для инъекций».

В качестве водных растворителей, кроме воды для инъекций, могут быть использованы изотонический раствор натрия хлорида, раствор Рингера, раствор декстрозы 5 % и др..

Для получения неводных растворов лекарственных препаратов для парентерального применения используют масла жирные растительные или органические растворители.

При использовании жирных растительных масел особое внимание следует обращать на внешний вид растворителя: масло должно быть прозрачным при температуре 10 °С, без запаха или почти без запаха, а также на соответствие таких показателей качества, как кислотное число, число омыления, йодное число требованиям фармакопейной статьи, установленных для конкретного масла,

В составе комплексных растворителей могут быть применены спирт этиловый, глицерин, пропиленгликоль, макрогол 400, бензилбензоат, бензиловый спирт и другие.

Для получения лекарственных форм для парентерального применения могут быть использованы вспомогательные вещества различных функциональных классов, например, обеспечивающие изотоничность лекарственного препарата относительно крови, регулирующие рН, улучшающие растворимость действующих веществ, антимикробные консерванты, антиоксиданты, стабилизаторы, эмульгаторы и другие вещества при надлежащем обосновании.

При этом содержание некоторых вспомогательных веществ в лекарственных препаратах для парентерального применения должно быть обосновано. Вспомогательные вещества, содержащие ртуть и катионные поверхностно-активные соединения, вещества, подобные хлорбутанолу, крезолу и фенолу, представляющие собой серы диоксид или калия или натрия сульфит, бисульфит и метабисульфит, должны использоваться в количествах, не превышающих концентраций, регламентированных соответствующими нормативными актами.

В лекарственные формы для инъекций в многодозовой упаковке антимикробные консерванты добавляют в необходимой концентрации независимо от способа стерилизации, за исключением тех случаев, когда фармацевтическая субстанция обладает достаточной антимикробной активностью.

Лекарственные формы для инъекций с объемом введения в одноразовой дозе более 15 мл, при отсутствии соответствующего обоснования, а также лекарственные формы для внутриполостных, внутрисердечных, внутриглазных инъекций или инъекций, имеющих доступ к спинномозговой жидкости и предназначенных для новорожденных, не должны содержать антимикробных консервантов.

Лекарственные формы для инфузий не должны содержать антимикробных консервантов и, как правило, должны быть изотоничны по отношению к крови человека.

Основа гелей для парентерального применения должна обладать вязкостью, обеспечивающей модифицированное высвобождение действующего вещества в месте введения.

При производстве лекарственных форм для парентерального применения, содержащих диспергированные частицы и представляющих собой гетерогенные, комбинированные дисперсные системы, должна быть предусмотрена технология, обеспечивающая получение и контроль частиц необходимого размера. Эмульсии для инъекций и инфузий не должны обнаруживать признаков расслоения. В суспензиях для инъекций может наблюдаться осадок, который при взбалтывании должен быстро диспергироваться с образованием достаточно стабильной суспензии, чтобы обеспечить необходимую дозу введения.

При получении лекарственных препаратов, выпускаемых в виде лекарственных форм для парентерального применения, должны быть приняты меры, обеспечивающие их стерильность.

Лекарственные формы для парентерального применения могут быть выпущены готовыми к применению или быть приготовленными непосредственно перед применением в виде восстановленных лекарственных форм из стерильных порошков или стерильных лиофилизатов, предназначенных для приготовления стерильных растворов для инъекций или инфузий путём растворения их в соответствующем растворителе; или приготовленными из стерильных порошков или стерильных лиофилизатов, предназначенных для приготовления стерильных растворов для инъекций путём диспергирования их в соответствующем растворителе.

Лекарственные формы для парентерального применения в виде разбавленных лекарственных форм могут быть приготовлены из концентратов, предназначенных для получения лекарственные форм для инъекций или инфузий после разведения в соответствующем растворителе до требуемой концентрации.

Растворители, используемые для разведения перед применением лекарственных форм для парентерального применения в виде жидких лекарственных форм, должны выдерживать дополнительные испытания в соответствии с ОФС «Бактериальные эндотоксины» или ОФС «Пирогенность».

Дополнительные испытания лекарственных форм для парентерального применения предусматривают в том случае, если продукты вымывания из системы упаковки и укупорки лекарственного препарата для парентерального применения могут оказать влияние на его безопасность и эффективность. При фармацевтической разработке лекарственного препарата, при изучении его стабильности, на стадии контроля технологического процесса производства для растворов для инфузий в полимерной упаковке из поливинилхлорида проводят испытание на гемолитически действующие вещества и т.п.

Упаковка лекарственных форм для парентерального применения может быть однодозовой и многодозовой.

###### Испытания

Все лекарственные формы для парентерального применения должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для соответствующей лекарственной формы.

Лекарственные формы для офтальмологического применения, представляющие собой растворы, суспензии, эмульсии, гели, имплантаты должны отвечать требованиям соответствующих ОФС: ОФС «Растворы», ОФС «Суспензии», ОФС «Эмульсии», ОФС «Мягкие лекарственные формы», ОФС «Имплантаты» и нормативным требованиям, указанным в фармакопейных статьях.

Лекарственные формы, представляющие собой порошки, лиофилизаты, концентраты, предназначенные для приготовления восстановленных или разбавленных лекарственных форм для парентерального применения, должны отвечать требованиям соответствующих ОФС: ОФС «Порошки» (исключая показатель «Размер частиц»), ОФС «Лиофилизаты», ОФС «Концентраты».

Восстановленные и разбавленные лекарственные формы для парентерального применения в виде растворов для инъекций и растворов для инфузий, полученные с использованием порошков, лиофилизатов или концентратов, предназначенных для их приготовления путём растворения/разведения или диспергирования, должны соответствовать требованиям, предъявляемым к соответствующим лекарственным формам.

Описание. Лекарственные формы для парентерального применения характеризуют, отмечая внешний вид (агрегатное состояние, форму, размеры и др.) и основные физические, органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Стерильность. Испытание проводят для всех лекарственных форм для парентерального применения в соответствии с ОФС «Стерильность».

Бактериальные эндотоксины или Пирогенность. Испытание проводят для всех лекарственных форм для парентерального применения в соответствии с ОФС «Бактериальные эндотоксины» или ОФС «Пирогенность».

Аномальная токсичность. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Аномальная токсичность» для лекарственных препаратов для парентерального применения, полученных из сырья природного происхождения; для лекарственных препаратов для инъекций и инфузий в упаковках из полимерных материалов и в других случаях, если имеются соответствующие указания фармакопейной статьи. Испытание не проводят при наличии соответствующего обоснования.

Гистамин и/или Депрессорные вещества. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Испытание на гистамин» и/или ОФС «Испытание на депрессорные вещества» для лекарственных форм для парентерального применения, предназначенных для внутрисосудистого введения и полученных из фармацевтических субстанций микробиологического или животного происхождения, которые могут обладать депрессорным действием.

рН. Испытание проводят для лекарственных форм для парентерального применения, представляющих собой жидкие лекарственные формы непосредственно или после восстановления или разведения, гели в соответствии с ОФС «Ионометрия» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Видимые механические включения. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Видимые механические включения в лекарственных препаратах для парентерального применения и глазных лекарственных формах».

Невидимые механические включения. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Невидимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения».

Однородность дозирования. Испытание проводят для дозированных лекарственных форм и лекарственных форм в однодозовых индивидуальных упаковках в соответствии с ОФС «Однородность дозирования».

Осмоляльность.Для лекарственных форм для парентерального применения, представляющих собой инфузии, определяют значение осмолярности и/или осмоляльности в соответствии с ОФС «Осмолярность» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Размер частиц. Испытание проводят, если указано в фармакопейной статье, для эмульсий для парентерального применения типа «масло в воде», в соответствии с ОФС «Размер частиц (капель) и их распределение по размерам в эмульсиях для парентерального применения» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Седиментационная устойчивость. Испытание проводят для лекарственных форм для парентерального применения, представляющих собой суспензии в соответствии с ОФС «Седиментационная устойчивость», если нет других указаний в фармакопейной статье.

Плотность. Испытание проводят для лекарственных форм для парентерального применения, представляющих собой масляные растворы и эмульсии, в соответствии с ОФС «Плотность» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Вязкость. Испытание проводят для лекарственных форм для парентерального применения, представляющих собой вязкие растворы, гели, эмульсии и растворы, содержащие высокомолекулярные вещества, в соответствии с ОФС «Вязкость» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Извлекаемый объем. Испытание проводят для лекарственных форм для парентерального применения в соответствии ОФС «Извлекаемый объём лекарственных форм для парентерального применения».

Высвобождение действующих веществ. При указании в фармакопейной статье проводят определение степени высвобождения действующего вещества в среду растворения через установленные интервалы времени для лекарственных форм для парентерального применения, представляющих собой имплантаты, таблетки, суспензии и эмульсии пролонгированного высвобождения, в соответствии с методикой и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Таблетки для имплантации должны соответствовать ОФС «Таблетки» (исключая показатель «Распадаемость») и нормативным требованиям, указанным в фармакопейной статье. Отсутствие показателя «Растворение» при испытании Таблеток для имплантации должно быть обосновано.

###### Упаковка

В соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств».

Лекарственные формы для парентерального применения выпускают в стерильных однодозовых (ампулы, картриджи, предварительно наполненные шприцы, индивидуальная упаковка имплантатов и др.) или в многодозовых (бутылки, флаконы и др.) упаковках, герметично укупоренных, с контролем первого вскрытия.

Лекарственные формы для парентерального применения, предназначенные для внутриполостных, внутрисердечных, внутриглазных инъекций или инъекций, имеющих доступ к спинномозговой жидкости, должны выпускаться только в однодозовых упаковках.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0008 Мягкие лекарственные формы

Взамен ОФС.1.4.1.0008.18

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на мягкие лекарственные формы, представляющие собой гели, кремы, линименты, мази, пасты.

Гели – мягкая лекарственная форма в виде коллоидной дисперсии, полученная путём гелеобразования с использованием специальных вспомогательных веществ.

Кремы – мягкая лекарственная форма в виде многофазной системы, состоящей из липофильной типа «вода/масло» и гидрофильной типа «масло/вода» фаз или множественной эмульсии.

Линименты – мягкая лекарственная форма для местного применения, обладающая свойством текучести при температуре тела.

Мази – мягкая лекарственная форма, состоящая из однофазной основы, в которой растворены или диспергированы твёрдые или жидкие фармацевтические субстанции.

Пасты – мягкая лекарственная форма, содержащая значительное количество (более 25 %) тонкоизмельчённых твёрдых веществ.

В зависимости от способа/пути введения и применения мягкие лекарственные формы могут быть для наружного применения, для местного применения, вагинальные, ректальные, назальные, ушные, для применения в полости рта, для парентерального применения, для офтальмологического применения, для ингаляций и др.

К вагинальным мягким лекарственным формам относят гели, кремы, линименты и мази вагинальные, предназначенные для введения во влагалище с целью оказания местного действия.

К ректальным мягким лекарственным формам относят гели, кремы и мази ректальные, предназначенные для введения в прямую кишку с целью оказания местного действия.

К назальным мягким лекарственным формам относят гели, кремы и мази назальные, предназначенные для введения в полость носа или нанесения на слизистую оболочку полости носа.

К ушным мягким лекарственным формам относят гели, кремы и мази ушные, предназначенные для введения в наружный слуховой проход, при необходимости – с помощью пропитанного ими тампона.

К мягким лекарственным формам для применения в полости рта относят:

- гели гидрофильные, кремы, мази и пасты для нанесения на слизистую оболочку полости рта с целью оказания местного действия;

- гели и линименты периодонтальные, предназначенные для введения в карман между зубом и десной;

- гели и пасты для нанесения на дёсны с целью оказания местного действия;

- гели зубные, представляющие собой гели гидрофильные, предназначенные для нанесения на зубы и/или дёсны путём втирания;

- гели и пасты лекарственные стоматологические – гели и пасты, предназначенные для трёх и более путей введения: периодонтального, нанесения на зубы, нанесения на дёсны, нанесения на слизистую оболочку полости рта и др.

Гели (как правило, гидрофильные) и пасты могут быть предназначены для приёма внутрь, а также могут быть использованы для приготовления суспензий для приёма внутрь (восстановленных лекарственных форм) путём диспергирования гелей или паст в соответствующем растворителе. Для обозначения таких гелей или паст используют термин «Гель для приготовления суспензии для приёма внутрь» или «Паста для приготовления суспензии для приёма внутрь.

Различают также мягкие лекарственные формы для введения в полости тела с помощью соответствующих аппликаторов:

- гели эндоцервикальные или линименты эндоцервикальные, предназначенные для введения в канал шейки матки:

- гели уретральные, предназначенные для введения в мочеиспускательный канал.

Гели интестинальные – гели, предназначенные для введения в кишечник (двенадцатиперстную кишку, тонкую кишку, подвздошную кишку, толстую кишку) с помощью соответствующего устройства.

Гели трансдермальные – гели, предназначенные для нанесения на кожу с целью оказания системного действия за счёт проникновения действующих веществ в кровоток через кожный барьер.

К мягким лекарственным формам для ингаляций относят мази для ингаляций, представляющие собой мази, образующие пары при добавлении в горячую воду или при помощи соответствующего устройства (например, ингалятора), предназначенные для вдыхания с целью оказания местного действия.

К мягким лекарственным формам для офтальмологического применения относят мази глазные, кремы глазные и гели глазные, которые представляют собой стерильные лекарственные формы, предназначенные, как правило, для нанесения на слизистую оболочку глаза (конъюнктиву).

К мягким лекарственным формам для парентерального применения относят гели для инъекций и гели для подкожного введения, представляющие собой стерильные гидрофильные гели, предназначенные для инъекционного введения в определённые ткани и органы или для введения непосредственно под кожу.

По типу дисперсных систем мягкие лекарственные формы могут быть гомогенными (сплавы, растворы), гетерогенными (суспензионные, эмульсионные) и комбинированными.

В зависимости от основы выделяют мягкие лекарственные формы на:

- гидрофобной основе;

- гидрофильной основе;

- дифильной основе;

- эмульсионной основе;

- многофазной основе.

К мягким лекарственным формам также могут быть отнесены бальзамы, имеющие мягкую или более текучую консистенцию и представляющие собой, как правило, гомогенные смеси фармацевтических субстанций растительного происхождения жидкой, реже твёрдой консистенции (смол, эфирных масел, растительных жирных масел и др.) с добавлением или без добавления других фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ.

###### Особенности технологии

Технология получения мягких лекарственных форм должна обеспечивать максимальное диспергирование и равномерное распределение фармацевтической субстанции (субстанций) в основе, а также необходимую консистенцию. Состав лекарственного препарата, выпускаемого в виде мягкой лекарственной формы, должен обеспечивать стабильность его физического состояния при хранении и применении.

Основу для мягких лекарственных форм следует выбирать с учётом назначения лекарственного препарата, эффективности, безопасности и биодоступности действующих веществ, совместимости компонентов лекарственного препарата, реологических свойств, стабильности в течение срока годности.

Основы, используемые при получении мягких лекарственных форм могут быть однофазными и многофазными; основы подразделяют на:

- гидрофобные (липофильные): жировые (природные жиры, масла растительные, жиры гидрогенизированные и их сплавы с маслами растительными и веществами жироподобными и др.), углеводородные (вазелин, масло вазелиновое, петролат, парафин, церезин и другие сплавы углеводородов), силиконовые (эсилон-аэросильная основа и др.) и пр.;

- гидрофильные (липофобные): гели высокомолекулярных углеводов (эфиры целлюлозы, крахмала, агара) и белков (желатина, коллагена и др.), гели неорганических веществ (бентонита), гели синтетических высокомолекулярных соединений (полиэтиленоксида, поливинилпирролидона, полиакриламида) и др.;

- дифильные: абсорбционные основы – безводные сплавы гидрофобных основ, эмульсионные основы типа «вода/масло», реже − основы типа «масло/вода» и др.

В качестве вспомогательных веществ для мягких лекарственных форм используют эмульгаторы типа «масло/вода» и «вода/масло», гелеобразователи, антимикробные консерванты, антиоксиданты, солюбилизаторы, вещества, повышающие температуру плавления и вязкость, гидрофобные растворители, воду и гидрофильные растворители, отдушки и дезодорирующие средства, регуляторы рН, красители, ароматизаторы и др.

Мази на гидрофобной основе получают, как правило, с использованием углеводородных основ, также могут быть использованы другие гидрофобные вспомогательные вещества (растительные масла, жиры животного происхождения и их производные, воски, синтетические глицериды, силиконовые основы и др.). В состав мазей на гидрофобной основе может быть введено только незначительное количество воды или водных растворов.

Мази на эмульсионной основе – в зависимости от типа эмульгатора могут быть получены мази на основе эмульсии типа «вода/масло» при использовании таких эмульгаторов, как спирты шерстяного воска, сложные эфиры, моноглицериды, жирные спирты; или эмульсии типа «масло/вода» при использовании таких эмульгаторов, как жирные спирты, полисорбаты, цетостеариловый эфир макрогола, сложные эфиры жирных кислот с макроголами. Такие мази могут адсорбировать большое количество воды.

Мази на гидрофильной основе обычно состоят из смесей жидких и твёрдых полиэтиленгликолей, в состав основ таких мазей могут быть введены липофильные вещества и эмульгаторы типа «масло/вода»; такие мази смешиваются с водой.

Кремы на гидрофобной эмульсионной основе получают на основе эмульсии типа «вода/масло» или «масло/вода/масло», стабилизированной подходящими эмульгаторами.

Кремы на гидрофильной эмульсионной основе получают на основе эмульсии типа «масло/вода» или «вода/масло/вода», стабилизированной подходящими эмульгаторами. К ним также относят коллоидные дисперсные системы, которые состоят из диспергированных в воде или в смешанных водно-гликолевых растворителях высших жирных спиртов или кислот, которые стабилизированы гидрофильными поверхностно-активными веществами.

Гели на липофильной основе (Олеогели) – гели, полученные с применением основ, состоящих из гидрофобного растворителя и липофильного гелеобразователя.

Гели на гидрофильной основе (Гидрогели) – гели, полученные с применением основ, состоящих из воды, гидрофильного смешанного или неводного растворителя и гидрофильного гелеобразователя.

Особенности технологии изготовления лекарственных препаратов в виде мягких лекарственных форм в аптечных организациях, приведены в ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде мягких лекарственных форм».

При получении лекарственных препаратов в виде мягких лекарственных форм, представляющих собой гетерогенные и комбинированные дисперсные системы, содержащие диспергированные частицы, должна быть предусмотрена технология, обеспечивающая получение и контроль частиц необходимого размера в зависимости от предполагаемого использования.

При получении лекарственных препаратов в виде мягких лекарственных форм должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту; в установленных случаях, при получении стерильных мягких лекарственных форм, должны быть приняты меры, обеспечивающие их стерильность. При получении стерильных мягких лекарственных форм используют методы стерилизации в соответствии с ОФС «Стерилизация».

Мягкие лекарственные формы выпускают готовыми к применению, но гели и пасты могут быть получены непосредственно перед применением в виде восстановленных лекарственных форм из порошков, предназначенных для их приготовления путём диспергирования в соответствующих растворителях.

Мягкие лекарственные формы могут быть выпущены в однодозовых и многодозовых упаковках.

###### Испытания

Мягкие лекарственные формы должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для конкретной мягкой лекарственной формы.

Восстановленные лекарственные формы в виде суспензий для приёма внутрь, полученные с использованием гелей или паст, предназначенных для их приготовления путём диспергирования, должны соответствовать требованиям ОФС «Суспензии»; в фармакопейной статье указывают «Время диспергирования» и, при необходимости, «Описание» полученной лекарственной формы.

Мягкие лекарственные формы в виде гелей для инъекций, гелей для подкожного введения, должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для парентерального применения».

Мягкие лекарственные формы в виде мазей, кремов и гелей, предназначенных для офтальмологического применения, должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для офтальмологического применения».

Мягкие лекарственные формы в виде мазей для ингаляций, предназначенных для введения в организм в виде пара, должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для ингаляций».

Лекарственные формы, представляющие собой порошки, предназначенные для приготовления мягких лекарственных форм в виде гелей или паст, должны соответствовать требованиям ОФС «Порошки».

Описание. Мягкие лекарственные формы характеризируют, отмечая внешний вид (консистенция, однородность и др.), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Мягкие лекарственные формы должны быть однородными, не иметь прогорклого запаха, а также признаков физической нестабильности (агрегации частиц, фазового расслоения, коагуляции, коалесценции).

Бальзамы, как правило, характеризуют, отмечая специфический запах, характерную окраску, консистенцию, однородность.

Однородность дозирования. Испытание проводят для мягких лекарственных форм в однодозовых индивидуальных упаковках в соответствии с ОФС «Однородность дозирования» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Размер частиц. Испытание проводят для мягких лекарственных форм гетерогенного и комбинированного типа, содержащих компоненты в виде твёрдой дисперсной фазы, в соответствии с ОФС «Определение показателя «Размер частиц» в суспензиях, эмульсиях, мягких лекарственных формах.

Металлические частицы. Испытание проводят для мазей глазных, упаковка которых представляет собой металлические тубы, в соответствии с ОФС «Металлические частицы в мазях глазных».

Герметичность упаковки. Испытание проводят для мягких лекарственных форм в соответствии с ОФС «Определение герметичности упаковки» (раздел «Определение герметичности туб с мягкими лекарственными формами»).

рН. Испытание проводят в соответствии с методикой определения и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье. Определяют значение рН мягкой лекарственной формы или рН водной вытяжки из мягкой лекарственной формы. Отсутствие данного показателя должно быть обосновано.

Кислотное число и пероксидное число. Испытание проводят для мягких лекарственных форм, в состав которых входят вещества, способные к гидролизу и окислению, если указано в фармакопейной статье. Определение проводят в соответствии с ОФС «Кислотное число» и ОФС «Пероксидное число». Нормативные требования и методики определения приводят в фармакопейной статье.

Масса содержимого упаковки. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Масса (объём) содержимого упаковки».

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для всех мягких лекарственных форм, за исключением стерильных, в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Стерильность. Испытание проводят для мягких лекарственных форм, к которым предъявляется требование стерильности, в соответствии с ОФС «Стерильность».

###### Упаковка

В соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств».

Упаковка назальных, ушных, ректальных, вагинальных и других мягких лекарственных форм должна иметь дополнительное устройство или аппликатор для введения лекарственного препарата.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0009 Пластыри

Взамен ОФС.1.4.1.0009.18

Требования настоящей общей фармакопейной статьи не распространяются на пластыри трансдермальные. Пластыри трансдермальные должны соответствовать требованиям ОФС «Пластыри трансдермальные».

Пластыри – лекарственная форма, состоящая из нанесённой на подложку основы, содержащей одно или несколько действующих веществ, обладающая способностью прилипать к коже или слизистым оболочкам, предназначенная для наружного или местного применения.

В редких случаях, пластыри представляют собой лекарственную форму, состоящую только из пластырной массы (основы с действующим веществом/веществами) без подложки.

Для пластырей, предназначенных для наклеивания на повреждённую или неповреждённую поверхность кожи с целью оказания местного действия, используют термин «пластырь».

Пластырь для слизистой оболочки полости рта – пластырь, предназначенный для наклеивания на слизистую оболочку полости рта с целью оказания системного действия в течение определённого периода времени, по истечению которого он удаляется.

Пластыри в виде липкой ленты или в виде иной формы, не содержащие действующего вещества (веществ), используемые с целью фиксации повязок, компрессов, тампонов и других целей, не являются лекарственными средствами, и на них не распространяются требования настоящей общей фармакопейной статьи.

Основа пластырей представляет собой пластичную однородную адгезивную (липкую) массу (пластырную массу), в которой равномерно распределено действующее вещество (вещества), или прокладку с действующим веществом (веществами), закреплённую на подложке с липким слоем.

В зависимости от состава основы различают пластыри: смоляно-восковые, каучуковые, акриловые и др.

В зависимости от материала и вида подложки различают пластыри на тканевой, нетканой или полимерной основе, а также пластыри перфорированные или без перфорации.

Пластыри с липкой стороны должны быть покрыты защитной плёнкой.

###### Особенности технологии

Технология производства пластырей и перечень используемых вспомогательных веществ зависят от вида пластырей.

Основу смоляно-восковых пластырей составляют сплавы смол и воска, в состав которых могут входить также жиры и углеводороды.

Пластырная основа каучуковых (резиновых) пластырей представляют собой смесь каучука со смолами, фармацевтическими субстанциями и вспомогательными веществами. Данный вид пластырей длительное время сохраняет свою клейкость.

В состав пластырной массы также могут быть внесены наполнители, антиоксиданты, антимикробные консерванты, красители, ароматизаторы и другие вспомогательные вещества.

Пластырная масса должна представлять собой однородную смесь, плотную при комнатной температуре и размягчающуюся, липкую при температуре тела.

Подложка, полученная из синтетических или природных материалов, и адгезивный (липкий) слой основы должны быть гипоаллергенны и не должны оказывать на кожу и слизистые раздражающего действия.

Защитная плёнка должна препятствовать контакту липкого слоя пластырей с окружающей средой и удаляться перед применением.

Пластыри должны легко удаляться с кожи, не оставляя следов, не нанося повреждений и не отделяя пластырную массу от подложки.

Пластыри могут быть дозированными и недозированными.

Пластыри могут быть выпущены в однодозовой и многодозовой упаковке.

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственной формы «Пластыри» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту; в установленных случаях, при получении стерильных пластырей, должны быть приняты меры, обеспечивающие их стерильность. При получении стерильных пластырей используют методы стерилизации в соответствии с ОФС «Стерилизация».

###### Испытания

Пластыри должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Описание. Пластыри характеризуют, отмечая внешний вид (форму, размеры, наличие перфорации, однородность пластырной массы, материал подложки и защитной плёнки и др.), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи. а Пластыри могут иметь прямоугольную, круглую, фигурную и др. форму.

Однородность дозирования. Испытание проводят для пластырей, предназначенных для оказания системного действия, в соответствии с ОФС «Однородность дозирования» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Количество пластырной массы. Испытание проводят, если указано в фармакопейной статье. Определение проводят гравиметрическим методом в соответствии с нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье; результат выражают в г/м2 или г/г.

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для всех пластырей, за исключением стерильных, в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Стерильность. Испытание проводят для пластырей, к которым предъявляется требование стерильности в соответствии, в соответствии с ОФС «Стерильность».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0010 Порошки

Взамен ОФС.1.4.1.0010.15

Порошки – твёрдая лекарственная форма, состоящая из отдельных сухих частиц различной степени дисперсности, обладающая свойством сыпучести.

Порошки могут содержать одно или несколько действующих веществ с добавлением или без добавления вспомогательных веществ. Различают порошки простые (однокомпонентные), содержащие только одно действующее вещество, и сложные (многокомпонентные), содержащие два и более действующих веществ.

В зависимости от способа/пути введения и применения различают порошки для наружного применения, порошки для местного применения, порошки для приёма внутрь, порошки назальные, порошки периодонтальные, порошки ушные, порошки для ингаляций.

Порошки назальные – порошки, предназначенные для назального применения путём вдувания в полость носа.

Порошки периодонтальные – порошки, предназначенные для нанесения в карман между зубом и десной.

Порошки ушные – порошки, предназначенные для введения в наружный слуховой проход.

Порошки для ингаляций дозированные – порошки, предназначенные для ингаляционного введения с помощью соответствующего ингалятора в дыхательную систему, с целью оказания местного или системного действия в нижних дыхательных путях и лёгких.

Порошки могут использоваться для получения других лекарственных форм:

- порошок для приготовления раствора и порошок для приготовления сиропа − порошок, предназначенный для получения раствора или получения сиропа путём его растворения в соответствующем растворителе;

- порошок для приготовления суспензии − порошок, предназначенный для получения суспензии путём его диспергирования в соответствующем растворителе;

- порошок для приготовления концентрата, порошок для приготовления капель и порошок для приготовления спрея − порошок, предназначенный для получения концентрата, или капель, или спрея путём его растворения или диспергирования в соответствующем растворителе;

- порошок для приготовления геля и порошок для приготовления пасты − порошок, предназначенный для получения геля или пасты.

По способу/пути введения или применения лекарственные формы, полученные из порошков, предназначенных для их приготовления, могут быть использованы для парентерального применения, для приёма внутрь, для наружного применения, для местного применения. Для обозначения таких порошков используют термин «Порошок для приготовления…» с указанием наименования получаемой лекарственной формы и способа/пути её введения или применения, например: «Порошок для приготовления суспензии для приёма внутрь», «Порошок для приготовления концентрата для приготовления раствора для инфузий» и др.

Порошки шипучие – порошки, в состав которых введены органические кислоты и карбонаты или гидрокарбонаты, реагирующие в присутствии воды с выделением углерода диоксида; предназначены для растворения или диспергирования в воде перед приёмом внутрь.

Порошки могут быть дозированными и недозированными.

Порошки могут быть выпущены в однодозовых или многодозовых упаковках.

###### Особенности технологии

В качестве вспомогательных веществ, входящих в состав порошков, используют индифферентные наполнители, солюбилизаторы, корригенты вкуса, ароматизаторы, красители, антимикробные консерванты.

Порошки могут содержать вспомогательные вещества, обеспечивающие растворение или диспергирование в соответствующем растворителе, предотвращающие слёживаемость, снижающие гигроскопичность, регулирующие или стабилизирующие pH или стабилизирующие фармацевтическую субстанцию и др.

В зависимости от способа/пути введения и применения лекарственного препарата в лекарственной форме «Порошок» или лекарственной формы, для приготовления которой предназначен порошок, предъявляют различные требования в отношении дисперсности (измельчённости) порошков. Дисперсность порошков характеризуют размером отверстия сита, через которое проходит порошок. Размер частиц порошка выражают в микрометрах.

Порошки для ингаляций могут содержать одну или несколько тонкодисперсных фармацевтических субстанций вместе с инертными вспомогательными веществами – «носителями» (обычно лактоза) или без них. При получении порошков для наружного, местного применения и/или для приготовления суспензий для наружного, местного применения необходимо обеспечивать соответствующий размер частиц с указанием его в фармакопейной статье.

При получении многокомпонентных порошков каждое вещество измельчают отдельно и просеивают через соответствующее сито в соответствии с ОФС «Ситовой анализ». Фармацевтические субстанции при производстве порошков для ингаляций микронизируют, то есть измельчают в специальных микронизирующих устройствах.

Особенности технологии при изготовлении лекарственных препаратов в виде порошков в аптечных организациях, приведены в ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм». При изготовлении порошков, если количество фармацевтической субстанции (действующего вещества) на всю массу изготавливаемого порошка составляет менее 0,05 г, то для изготовления порошка используют тритурацию фармацевтической субстанции – её смесь с лактозой моногидрата или другими вспомогательными веществами в соотношении 1:10 или 1:100.

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственной формы «Порошки» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту; в установленных случаях, например, при получении порошков, предназначенных для приготовления лекарственных форм для парентерального применения, порошков для получения растворов или суспензий, предназначенных для использования на открытых ранах или на повреждённой коже, и др., должны быть приняты меры, обеспечивающие их стерильность. При получении стерильных порошков используют методы стерилизации в соответствии с ОФС «Стерилизация».

Порошки для приготовления раствора для приёма внутрь могут представлять собой смесь порошка и гранул.

Порошки могут быть использованы в качестве фармацевтических субстанций при производстве других лекарственных форм (например, гранул, капсул, таблеток, суспензий и др.). Порошки для приготовления раствора для приема внутрь могут представлять собой смесь порошка и гранул.

###### Испытания

Порошки должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Восстановленные лекарственные формы, полученные с использованием порошков, предназначенных для их приготовления путём растворения или диспергирования, должны соответствовать требованиям ОФС, регламентирующих качество полученных лекарственных форм.

Порошки для приготовления растворов или суспензии для парентерального применения должны быть стерильными и должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для парентерального применения».

Порошки для приготовления капель глазных должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для офтальмологического применения».

Порошки для ингаляций должны выдерживать требования ОФС «Лекарственные формы для ингаляций».

Описание. Порошки характеризуют, отмечая внешний вид, органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Порошки должны быть однородными: не должно обнаруживаться отдельных частиц, блесток, вкраплений при рассмотрении их невооружённым глазом.

Размер частиц. Порошки должны иметь размер частиц не более 160 мкм, если не указано иначе в фармакопейной статье. При необходимости, размер частиц определяют в соответствии с ОФС «Ситовой анализ» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Потеря в массе при высушивании или Вода. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Потеря в массе при высушивании» или ОФС «Определение воды» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Однородность массы. Испытание проводят для дозированных порошков и для порошков, выпускаемых в однодозовой индивидуальной упаковке, в соответствии с ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм». Испытание не применяют в случае, если проводят испытание по показателю «Однородность дозирования».

Однородность дозирования. Испытание проводят для дозированных порошков и для порошков, выпускаемых в однодозовой индивидуальной упаковке, в соответствии с ОФС «Однородность дозирования».

При соответствующем обосновании для однокомпонентных дозированных порошков, однокомпонентных порошков в однодозовой индивидуальной упаковке, не предназначенных для приготовления лекарственных форм для парентерального применения, применяют испытание по показателю «Однородность массы».

Однородность массы доз. Испытание проводят для недозированных порошков, выпускаемых в многодозовой упаковке, снабжённой устройством для дозирования, в соответствии с ОФС «Однородность массы (объёма) доз, отобранных из многодозовой упаковки».

Время растворения или диспергирования. Испытание проводят для порошков, предназначенных для получения восстановленных жидких лекарственных форм путём растворения или диспергирования порошков, в соответствии с ОФС «Время растворения или диспергирования» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Масса содержимого упаковки. Испытание проводят для недозированных порошков в многодозовой упаковке в соответствии с требованиями ОФС «Масса (объём) содержимого упаковки».

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для всех порошков, за исключением стерильных, в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Стерильность. Испытание проводят для порошков, к которым предъявляется требование стерильности в соответствии с ОФС «Стерильность».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0011 Растворы

Взамен ОФС.1.4.1.0011.18

Растворы – жидкая лекарственная форма, получаемая путём растворения твёрдых, жидких или газообразных веществ в соответствующем растворителе или смеси взаимосмешивающихся растворителей с образованием гомогенных дисперсных систем.

Растворы могут содержать одно или более действующих и вспомогательных веществ.

В зависимости от способа/пути введения и применения различают растворы для приёма внутрь, для наружного применения, для местного применения, вагинальные, внутриматочные, ректальные, для применения в полости рта, для применения в полости носа, для промывания слухового прохода, для гастроэнтерального введения, для эндотрахеального введения, трансдермальные, для орошения, для парентерального применения, для офтальмологического применения, для ингаляций, для диализа, для гемофильтрации, для гемодиафильтрации, для перитонеального диализа и др.

Растворы для гастроэнтерального введения – растворы, предназначенные для введения в желудок или двенадцатиперстную кишку с помощью соответствующего устройства.

Растворы для эндотрахеального введения – стерильные растворы, предназначенные для введения в трахею и/или бронхиолы путём инстилляции.

К растворам для применения в полости рта относят растворы: для полоскания, для промывания полости рта, для слизистой оболочки полости рта, для нанесения на дёсны, зубные.

Растворы для полоскания – растворы, предназначенные для полоскания полости рта и (или) глотки.

К растворам для применения в полости носа относят растворы для промывания полости носа и растворы для эндосинусиального введения.

Растворы для эндосинусиального введения – стерильные растворы, предназначенные для введения в синусы (пазухи) полости носа с целью оказания местного действия.

Растворы ректальные – растворы, предназначенные для введения в прямую кишку с помощью соответствующих устройств (например, спринцовки, клизмы) с целью оказания местного или системного действия.

Растворы вагинальные – растворы, предназначенные для введения во влагалище с целью оказания местного действия.

Растворы внутриматочные – растворы, предназначенные для введения в полость матки.

Растворы для внутриполостного введения – стерильные растворы, предназначенные для введения в полости тела, например, в мочевой пузырь (для внутрипузырного введения), в суставную полость (для внутрисуставного введения), в амниотическую полость (для интраамниального введения), в субарахноидальное пространство через твёрдую мозговую оболочку (для интратекального введения) и т.д.

Растворы для орошения – стерильные водные растворы большого объёма, предназначенные для орошения полостей тела (Растворы для орошения желудка, Растворы для орошения мочевого пузыря), а также для орошения ран и поверхностей, например, во время хирургических операций.

Растворы трансдермальные – растворы, предназначенные для контролируемой доставки действующего вещества в системный кровоток путём пассивной диффузии через неповрежденную кожу.

Растворы для парентерального применения представляют собой стерильные растворы, предназначенные для введения в организм человека путём инъекций или инфузий с нарушением целостности кожных покровов или слизистых оболочек, минуя желудочно-кишечный тракт. Классификация растворов для парентерального применения приведена в ОФС «Лекарственные формы для парентерального применения».

К растворам для офтальмологического применения относят растворы для инъекционного введения в ткани глаза и растворы для промывания; они описаны в ОФС «Лекарственные формы для офтальмологического применения».

Растворы для ингаляций представляют собой растворы, предназначенные для преобразования в аэрозоль для ингаляций с помощью соответствующего устройства (например, небулайзера), либо растворы, образующие пары при добавлении в горячую воду или при помощи соответствующего устройства (например, ингалятора и др.), предназначенные для вдыхания с целью оказания местного или системного действия. Термин «растворы для ингаляций» используют в тех случаях, когда для лекарственных форм не применим термин «капли для ингаляций».

Различают также растворы, предназначенные для проведения детоксикации крови и органов человека, коррекции водно-электролитного баланса с использованием методов диализа и/или фильтрации.

Растворы для гемодиализа, для гемофильтрации, для гемодиафильтрации – стерильные водные растворы, предназначенные соответственно для гемодиализа или для гемофильтрации или для гемодиафильтрации, содержащие электролиты с концентрацией, близкой к электролитному составу плазмы.

Растворы для перитонеального диализа – стерильные водные растворы, предназначенные для перитонеального диализа.

В зависимости от природы растворителя (растворителей) различают растворы водные и неводные. В свою очередь, неводные растворы могут представлять собой растворы спиртовые, масляные, глицериновые и т.д.

В зависимости от природы фармацевтической субстанции (субстанций) различают растворы истинные, растворы высокомолекулярных соединений, коллоидные растворы и др.

Такие лекарственные формы как «Капли», «Концентраты», «Сиропы», «Спреи» и др. могут представлять собой раствор.

Для обозначения некоторых лекарственных форм, представляющих собой растворы, также применяют и другие термины (определения).

Микстуры – для обозначения растворов, а также других жидких лекарственных форм преимущественно аптечного изготовления, предназначенных для приёма внутрь и дозируемых ложками.

Воды ароматные – для обозначения лекарственных форм, как правило, аптечного изготовления, представляющих собой водные или водно-спиртовые растворы, насыщенные компонентами эфирных масел.

Жидкости – для обозначения растворов, представляющих собой жидкую фармацевтическую субстанцию как таковую или смесь жидких фармацевтических субстанций, без растворителя. Термин «жидкости» не должен применяться для обозначения растительных, в том числе жирных, или эфирных, или минеральных масел, а также животных жиров.

Лаки для ногтей лекарственные – для обозначения жидких лекарственных форм, представляющих собой неводные растворы фармацевтических субстанций, предназначенных для нанесения на ногтевую пластинку с целью получения лакового покрытия после испарения летучих растворителей.

Клей жидкий (клей кожный, пластырь жидкий) – для обозначения жидких лекарственных форм, представляющих собой неводные растворы, предназначенных для наружного применения с целью получения плёнкообразующего покрытия, обладающего способностью прилипать к коже после испарения летучих растворителей.

###### Особенности технологии

Растворы получают растворением фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ в соответствующем растворителе или смеси растворителей.

Растворители (смеси растворителей) выбирают, исходя из свойств и природы действующего вещества (веществ), для обеспечения отсутствия возможного химического и физико-химического взаимодействия между растворителем и действующим веществом (веществами). Растворитель (смесь растворителей) не должен оказывать влияния на фармакологическую активность действующего вещества (веществ).

В качестве основного растворителя для получения водных растворов используют воду очищенную, соответствующую требованиям ФС «Вода очищенная» или воду для инъекций, соответствующую требованиям ФС «Вода для инъекций».

Растворы для орошения содержат действующие вещества являющиеся, как правило, электролитами или осмотическими активными веществами, растворёнными в воде для инъекций, соответствующей требованиям ФС «Вода для инъекций». В ряде случаев раствор для орошения может состоять только из воды для инъекций.

Основными растворителями в неводных растворах являются спирт этиловый различных концентраций, масла жирные растительные, масло вазелиновое, глицерин и др.

Для получения спиртовых растворов в качестве основного растворителя используют спирт 96 %, соответствующий требованиям ФС «Спирт этиловый 95 %, 96 %», который при необходимости разводят водой очищенной до требуемой концентрации.

В качестве вспомогательных веществ при производстве и изготовлении растворов могут быть использованы подходящие антимикробные консерванты, антиоксиданты, стабилизаторы, солюбилизаторы, сорастворители, корригенты и другие вспомогательные вещества.

Вспомогательные вещества не должны отрицательно влиять на заявленное терапевтическое действие лекарственного препарата в лекарственной форме «Раствор», не должны вызывать местное раздражение в применяемых концентрациях.

При получении растворов используют, как правило, массо-объёмный способ приготовления. Растворы также могут быть получены по массе или по объёму в зависимости от природы фармацевтических субстанций и растворителей (вязкие, летучие растворители и др.).

Содержание действующих веществ в растворе выражают в процентной или массовой концентрации.

При получении растворов воду и водные растворы, близкие по плотности к воде (как правило, имеющие плотность от 0,95 г/см3 до 1,05 г/см3), отмеривают; твёрдые вещества (фармацевтические субстанции и вспомогательные вещества), а также растворители и растворы, плотность которых больше или меньше 1±0,05 г/см3 − отвешивают.

При получении растворов высокомолекулярных соединений учитывают природу фармацевтической субстанции (субстанций). Растворы неограниченно набухающих высокомолекулярных соединений (пепсин, трипсин и др.) получают по общим правилам приготовления растворов. Растворение ограниченно набухающих высокомолекулярных соединений (желатин, крахмал, метилцеллюлоза и др.) протекает, как правило, в определённых условиях, способствующих предварительному их набуханию и последующему растворению. На стадии набухания эти условия предусматривают определённый объём растворителя, температурный режим, время набухания и соблюдение условий, обеспечивающих переход набухших высокомолекулярных соединений в раствор (нагревание или охлаждение).

Для получения растворов коллоидных соединений (протаргол, колларгол) используют дополнительные технологические операции, обеспечивающие гидратацию коллоидных частиц.

При получении масляных и глицериновых растворов для увеличения скорости растворения фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ используют нагревание. Получение спиртовых растворов не подразумевает нагревание.

Воды ароматные могут быть получены различными способами: перегонкой эфирномасличного лекарственного растительного сырья с водяным паром, растворением эфирного масла в воде или разведением концентратов. Для повышения устойчивости вод ароматных в их состав может быть добавлен спирт этиловый.

Особенности технологии изготовления лекарственных препаратов в виде растворов в аптечных организациях, приведены в ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм».

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственной формы «Растворы» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту; в установленных случаях, например, при получении растворов для орошения и других стерильных растворов, должны быть приняты меры, обеспечивающие их стерильность. При получении стерильных растворов используют методы стерилизации в соответствии с ОФС «Стерилизация».

Растворы могут быть выпущены готовыми к применению или быть приготовленными непосредственно перед применением в виде восстановленных лекарственных форм из порошков, гранул, таблеток или лиофилизатов, предназначенных для приготовления растворов путём растворения в соответствующих растворителях.

Растворы в виде разбавленных лекарственных форм могут быть приготовлены из концентратов, предназначенных для получения растворов после разведения в соответствующем растворителе до требуемой концентрации.

Растворы могут быть выпущены в однодозовых и многодозовых упаковках.

###### Испытания

Растворы должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Растворы для парентерального применения должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для парентерального применения».

Растворы для офтальмологического применения должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для офтальмологического применения».

Растворы для ингаляций должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для ингаляций».

Растворы для гемодиализа, гемофильтрации, гемодиафильтрации и перитонеального диализа должны соответствовать требованиям ОФС «Растворы для диализа, гемодиализа, гемофильтрации и гемодиафильтрации».

Лекарственные формы, представляющие собой порошки, таблетки, гранулы, лиофилизаты, концентраты, предназначенные для приготовления растворов, должны отвечать требованиям соответствующих ОФС: ОФС «Порошки», ОФС «Таблетки», ОФС «Гранулы», ОФС «Лиофилизаты», ОФС «Концентраты».

Описание. Растворы характеризуют, отмечая внешний вид (прозрачность, вязкость и др.), органолептические свойства (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Прозрачность. Испытание проводят для стерильных растворов, растворов для приёма внутрь, растворов для местного применения в соответствии с ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей», для остальных растворов − при соответствующем указании в фармакопейной статье.

Цветность. Испытание проводят для стерильных растворов, растворов для приёма внутрь, растворов для местного применения в соответствии с ОФС «Степень окраски жидкостей», для остальных растворов – при соответствующем указании в фармакопейной статье.

рН или «Кислотность или щёлочность». Испытание проводят для водных, водно-спиртовых и спиртовых растворов, если указано в фармакопейной статье.

Определение рН проводят потенциометрическим методом в соответствии с ОФС «Ионометрия». Значение рН раствора указывают в фармакопейной статье.

При установлении пределов кислотности или щёлочности растворов с помощью индикаторов используют растворы кислот или щелочей с концентрацией от 0,01 М до 0,1 М.

Плотность. Испытание проводят для спиртовых растворов, содержащих спирт этиловый в концентрации выше 40 %, и для других неводных растворов в соответствии с ОФС «Плотность» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Спирт этиловый. Испытание проводят для спиртовых растворов, содержащих спирт этиловый в концентрации ниже 40 % в соответствии с ОФС «Определение спирта этилового в лекарственных средствах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Вязкость. Испытание проводят для растворов высокомолекулярных соединений в соответствии с ОФС «Вязкость» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Кислотное и пероксидное число. Испытание проводят для растворов масляных в соответствии с ОФС «Кислотное число» и ОФС «Пероксидное число» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Видимые механические включения. Испытание проводят для растворов для орошения в соответствии с ОФС «Видимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения и глазных лекарственных формах».

Однородность дозирования. Испытание проводят для растворов в однодозовых индивидуальных упаковках, кроме растворов для наружного применения, в соответствии с ОФС «Однородность дозирования».

Однородность массы (объёма) доз. Испытание проводят для растворов, выпускаемых в многодозовой упаковке, снабжённой устройством для дозирования, в соответствии с ОФС «Однородность массы (объёма) доз, отобранных из многодозовой упаковки».

Извлекаемый объём. Испытание проводят для растворов, предназначенных для приёма внутрь, в соответствии с ОФС «Извлекаемый объём». Испытание не применяют для растворов в однодозовых индивидуальных упаковках, предназначенных для приёма внутрь, если проводят испытание по показателю «Однородность дозирования».

Масса (объём) содержимого упаковки. Испытание проводят для всех растворов, за исключением растворов для приёма внутрь, в соответствии с ОФС «Масса (объём) содержимого упаковки».

Бактериальные эндотоксины или Пирогенность. Испытание проводят для растворов для орошения в соответствии с ОФС «Бактериальные эндотоксины» или ОФС «Пирогенность» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для всех растворов, за исключением стерильных, в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Стерильность. Испытание проводят для растворов, к которым предъявляется требование стерильности, в соответствии с ОФС «Стерильность».

###### Упаковка

В соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств».

Многодозовая упаковка растворов для приёма внутрь должна быть снабжена средством дозирования, представляющим собой мерную ложку, мерный стаканчик, мерный колпачок, шприцевой дозатор и др., для отмеривания предписанной дозы лекарственного препарата.

Упаковка растворов для вагинального, ректального, внутриматочного введения, а также, при необходимости, упаковка растворов для применения в полости рта, для применения в полости носа, для орошения и т.д., должна быть приспособлена для соответствующего введения или снабжена подходящей насадкой, аппликатором.

###### Маркировка

В соответствии с ОФС «Маркировка лекарственных средств».

Стерильные растворы должны иметь надпись «Стерильно». В случаях получения лекарственного препарата в асептических условиях без последующей стерилизации конечного продукта должна быть надпись «Приготовлено асептически».

Маркировка растворов для орошения должны содержать дополнительные надписи:

- лекарственный препарат не должен использоваться для инъекций;

- лекарственный препарат должен быть использован однократно, любой неиспользованный остаток должен быть уничтожен.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0012 Сиропы

Взамен ОФС.1.4.1.0012.15

Сиропы − жидкая лекарственная форма в виде водного раствора вязкой консистенции со сладким вкусом, содержащая сахарозу в концентрации не менее 45 % или её заменители, предназначенная для приёма внутрь.

Сиропы, как правило, являются гомогенными дисперсными системами, но также могут представлять собой гетерогенные (чаще всего суспензии) или комбинированные дисперсные системы.

###### Особенности технологии

Для получения сиропов растворяют в воде сиропообразующее вещество (вещества) при нагревании до температуры кипения. В качестве сиропообразующих веществ используют сахарозу или её заменители, например, многоатомный циклический спирт сорбитол, смесь декстрозы с фруктозой и сахарозой и другие. Обычно концентрация сахарозы или другого сиропообразующего вещества в готовом сиропе составляет не менее 45% по массе.

Добавление фармацевтических субстанций, настоек, экстрактов, соков и т.д., а также вспомогательных веществ, производят после охлаждения сиропа до температуры 55±5 °С.

В качестве вспомогательных веществ при получении сиропов могут быть использованы антимикробные консерванты, для предотвращения кристаллизации сиропообразующего компонента и корректировки других показателей в сиропы могут быть введены различные полиспирты, поверхностно-активные вещества и другие вещества.

При получении сиропов введение фармацевтических субстанций, вспомогательных и других веществ осуществляют путём их растворения, смешивания, суспендирования, эмульгирования в растворе сиропообразующего вещества. Готовый сироп фильтруют.

Сиропы могут быть выпущены готовыми к применению или быть приготовленными непосредственно перед применением в виде восстановленных лекарственных форм из гранул или порошков, предназначенных для приготовления сиропов путём растворения в соответствующем растворителе.

При получении лекарственных препаратов в лекарственной форме «Сиропы» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту.

Сиропы могут быть выпущены в однодозовых или многодозовых упаковках.

###### Испытания

Сиропы должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Лекарственные формы, представляющие собой порошки или гранулы, предназначенные для приготовления сиропов, должны отвечать требованиям соответствующих ОФС: «Порошки», «Гранулы».

Описание. Сиропы, как правило, должны быть прозрачными, допускается наличие опалесценции, не допускается наличие признаков кристаллизации сиропообразующего компонента.

Сиропы характеризуют, отмечая внешний вид (консистенция, прозрачность или опалесценция и др.), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Плотность. Испытание проводят одним из методов в соответствии с ОФС «Плотность» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Вязкость. Испытание проводят, если указано в фармакопейной статье, в соответствии с ОФС «Вязкость». Нормативные требования указывают в фармакопейной статье.

pH. Испытание проводят, если указано в фармакопейной статье, потенциометрическим методом в соответствии с ОФС «Ионометрия». Значение pH указывают в фармакопейной статье.

Однородность дозирования. Испытание проводят для сиропов в однодозовых индивидуальных упаковках в соответствии с ОФС «Однородность дозирования».

Однородность массы (объёма) доз. Испытание проводят для сиропов, выпускаемых в многодозовой упаковке, снабжённой устройством для дозирования, в соответствии с ОФС «Однородность массы (объёма) доз, отобранных из многодозовой упаковки».

Извлекаемый объём. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Извлекаемый объём».

Испытание не применяют для сиропов в однодозовых индивидуальных упаковках в случае, если проводят испытание по показателю «Однородность дозирования».

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для всех сиропов в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

###### Упаковка

В соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств».

Многодозовая упаковка сиропов должна быть снабжена средством дозирования, представляющим собой мерную ложку, мерный стаканчик, мерный колпачок, шприцевой дозатор и др., для отмеривания предписанной дозы лекарственного препарата.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0013 Суппозитории

Взамен ОФС.1.4.1.0013.15

Суппозитории – твёрдая дозированная лекарственная форма, предназначенная для введения в полость тела и расплавляющаяся (растворяющаяся, распадающаяся) при температуре тела.

Палочки – твёрдая дозированная лекарственная форма конической или цилиндрической формы, предназначенная для введения в естественные или патологические полости организма, способная расплавляться или растворяться при температуре тела.

Суппозитории и палочки могут содержать одно или более фармацевтических субстанций, растворенных или диспергированных в подходящей основе.

В зависимости от свойств фармацевтической субстанции, (растворимая или нерастворимая в основе) суппозитории и палочки могут быть гомогенными, гетерогенными или комбинированными.

В зависимости от пути введения различают суппозитории ректальные и вагинальные. Масса и размеры суппозиториев должны соответствовать пути их введения.

Суппозитории ректальные – суппозитории, предназначенные для введения в прямую кишку с целью оказания местного или системного действия. Суппозитории ректальные обычно имеют коническую или торпедообразную форму. Масса одного суппозитория ректального должна находиться в пределах от 1 до 4 г. Если масса не указана, то изготавливают суппозитории ректальные массой 3 г. Масса суппозитория ректального для детей должна быть от 0,5 до 1,5 г. Максимальный диаметр суппозитория ректального не должен превышать 1,5 см.

Суппозитории вагинальные – суппозитории, предназначенные для введения во влагалище с целью оказания местного действия. Суппозитории вагинальные в основном имеют шарообразную, яйцевидную форму или вид плоского тела с закругленным концом (форму пессария). Масса одного суппозитория вагинального должна находиться в пределах от 1,5 до 6 г. Если масса не указана, то суппозитории вагинальные изготавливают массой 4 г.

Палочки, как правило, имеют форму цилиндра с заостренным концом, диаметром не более 0,2–0,5 см. Масса палочки должна быть от 0,5 до 1 г.

В зависимости от пути введения различают палочки дентальные, назальные, периодонтальные, уретральные, ушные и другие (для свищей).

Палочки дентальные – палочки, предназначенные для помещения в зубной канал с целью оказания местного действия.

Палочки назальные – палочки, предназначенные для помещения в полость носа с целью оказания местного действия.

Палочки периодонтальные – палочки, предназначенные для помещения в карман между зубом и десной.

Палочки уретральные – стерильные палочки, предназначенные для введения в мочеиспускательный канал.

Палочки ушные – палочки, предназначенные для введения в наружный слуховой проход.

###### Особенности технологии

В промышленных условиях суппозитории и палочки получают методом выливания расплавленной массы в формы или методом прессования.

В аптечных организациях суппозитории и палочки изготавливают методом ручного формования или выливания. Особенности технологии изготовления лекарственных препаратов в виде суппозиториев и палочек в аптечных организациях, приведены в ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм».

Основы, используемые при производстве суппозиториев и палочек, подразделяют на липофильные, гидрофильные и дифильные.

В качестве липофильных основ применяют масло какао, сплавы масла какао с парафином и гидрогенизированными жирами, растительные и животные гидрогенизированные жиры, твёрдый жир, ланоль, сплавы гидрогенизированных жиров с воском, твёрдым парафином и др.

В качестве гидрофильных основ используют желатино-глицериновые гели, сплавы полиэтиленоксидов различных молекулярных масс и другие основы.

Дифильные основы представляют собой искусственные композиции, обладающие липофильными и гидрофильными свойствами и содержащие в своем составе поверхностно-активные вещества. К дифильным основам относят также сложные эфиры высших жирных кислот типа витепсол, лазупол, суппорин М.

Производство суппозиториев и палочек методом выливания расплавленной массы в формы проводится по следующей схеме: приготовление основы, подготовка фармацевтических субстанций, введение в основу фармацевтических субстанций, гомогенизация, формование и упаковка. Фармацевтические субстанции, при необходимости измельченные и просеянные, вводят непосредственно в основу в виде водного раствора или раствора в другом подходящем гидрофильном растворителе (для гидрофильных веществ), в виде раствора в жирах или липофильных растворителях (для липофильных веществ) или суспензий растёртых порошков в основах (нерастворимые в воде и жирах).

Термолабильные вещества вводят в основу перед гомогенизацией и формованием при минимально возможной температуре основы, необходимой для сохранения качества веществ и структурных свойств основы.

Метод прессования для производства суппозиториев и палочек используется реже. Его преимуществами являются возможность избежать деструкции термолабильных фармацевтических субстанций, отсутствие седиментации фармацевтической субстанции и предотвращение ее несовместимости с расплавленной суппозиторной основой.

В состав суппозиториев и палочек могут входить различные вспомогательные вещества эмульгаторы, антимикробные консерванты, антиоксиданты, стабилизаторы и др.

При получении суппозиториев и палочек должны быть приняты меры, обеспечивающие необходимую микробиологическую чистоту; в установленных случаях, например, при получении палочек, вводимых в уретру, а также других стерильных палочек, должны быть приняты меры, обеспечивающие их стерильность. Для получения стерильных палочек используют методы стерилизации в соответствии с ОФС «Стерилизация».

Суппозитории и палочки могут быть выпущены в однодозовой и многодозовой упаковке.

###### Испытания

Суппозитории и палочки должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Описание. Суппозитории и палочки характеризуют, отмечая внешний вид (форму, размеры и др.), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Суппозитории или палочки должны иметь одинаковую форму, однородную суппозиторную массу, обладать твёрдостью, обеспечивающей удобство применения.

Однородность суппозиторной массы определяют визуально: на срезе суппозитория или палочки не должно быть вкраплений. На продольном срезе суппозиториев допускается наличие воздушного стержня или воронкообразного углубления. В отдельных случаях допускается наличие вкраплений на срезе, что должно быть указано в фармакопейной статье.

Размер частиц. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Оптическая микроскопия» для суппозиториев и палочек, в основу которых фармацевтические субстанции введены в виде суспензии.

Методику определения, включая пробоподготовку и нормативные требования к размеру частиц, указывают в фармакопейной статье. Размер частиц не должен превышать 100 мкм, если другое не указано в фармакопейной статье.

Растворение. Испытание проводят, если указано в фармакопейной статье:

- для суппозиториев и палочек на гидрофильной основе – в соответствии с ОФС «Растворение для твёрдых дозированных лекарственных форм»;

- для суппозиториев и палочек на липофильной основе – в соответствии с ОФС «Растворение для суппозиториев на липофильной основе».

Условия проведения испытания и нормативные требования указывают в фармакопейной статье.

Распадаемость. Испытание проводят, если указано в фармакопейной статье, в соответствии с ОФС «Распадаемость суппозиториев, вагинальных таблеток, ректальных и вагинальных капсул». При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, суппозитории и палочки на липофильной основе должны распадаться в течение не более чем через 30 мин; суппозитории и палочки на гидрофильной основе – не более чем через 60 мин.

Испытание не применяют, если предусмотрено испытание по показателю «Растворение».

Испытание не применяют, если для суппозиториев и палочек на липофильной основе предусмотрены испытания по показателям «Температура плавления» или «Время полной деформации».

Температура плавления. Время полной деформации. Для суппозиториев и палочек на липофильной основе проводят испытание по показателям «Температура плавления» или «Время полной деформации».

Испытание по показателю «Температура плавления» проводят в соответствии с ОФС «Температура плавления», метод 2. Температура плавления не должна превышать 37 °С, если нет других указаний в фармакопейной статье.

Испытание по показателю «Время полной деформации» проводят в соответствии с ОФС «Определение времени полной деформации суппозиториев на липофильной основе». Время полной деформации не должно превышать 15 мин, если нет других указаний в фармакопейной статье».

Однородность массы. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм». Испытание не применяют, если предусмотрено испытание по показателю «Однородность дозирования» для всех действующих веществ.

Однородность дозирования. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Однородность дозирования».

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для всех суппозиториев и палочек, за исключением стерильных, в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота.

Стерильность. Испытание проводят для палочек, к которым предъявляется требование стерильности, в соответствии с ОФС «Стерильность».

###### Упаковка

В соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств».

Упаковка вагинальных, ректальных суппозиториев и палочек может иметь дополнительное устройство для введения лекарственного препарата или может быть укомплектована соответствующим аппликатором.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0014 Суспензии

Взамен ОФС.1.4.1.0014.15

Суспензии – жидкая лекарственная форма, представляющая собой гетерогенную дисперсную систему, содержащую одно или несколько твёрдых фармацевтических субстанций, распределённых в жидкой дисперсионной среде.

Суспензия, содержащая диспергированные частицы размером менее 1 мкм, представляет собой микрогетерогенную дисперсную систему.

В зависимости от способа/пути введения и применения различают суспензии для приёма внутрь, для наружного применения, для местного применения, вагинальные, ректальные, зубные, для слизистой оболочки полости рта, для ингаляций, для имплантации, для гастроэнтерального введения, для эндосинусиального введения, для эндотрахеального введения, для парентерального применения, для применения в форме глазных капель.

Суспензии для эндосинусиального введения – стерильные суспензии, предназначенные для введения в синусы (пазухи) полости носа.

Суспензии для эндотрахеального введения – стерильные суспензии, предназначенные для введения в трахею и/или бронхиолы путём инстилляции.

Суспензии для имплантации – стерильные суспензии, предназначенные для имплантации с целью оказания системного действия в течение продолжительного периода времени.

###### Особенности технологии

Суспензии могут быть получены диспергированием твёрдой дисперсной фазы, содержащей нерастворимую, предварительно измельчённую фармацевтическую субстанцию (субстанции) с жидкой дисперсионной средой или другими методами.

Дисперсионной средой может быть вода, глицерин, растительные жирные масла и др. В качестве вспомогательных веществ в суспензиях могут быть использованы буферные растворы, стабилизаторы (вещества, повышающие вязкость дисперсионной среды, поверхностно-активные вещества и др.), ароматизаторы, корригенты вкуса, антимикробные консерванты, антиоксиданты, красители и другие вещества.

Суспензии могут быть выпущены готовыми к применению или быть приготовленными непосредственно перед применением в виде восстановленных лекарственных форм из порошков, гранул, таблеток или лиофилизатов, предназначенных для приготовления суспензий путём диспергирования в соответствующем растворителе.

Суспензии для приёма внутрь также могут быть получены перед применением из гелей или паст, предназначенных для приготовления суспензий для приёма внутрь путём диспергирования мягких лекарственных форм (гелей, паст) в соответствующих растворителях.

Кроме того, суспензии в виде разбавленных лекарственных форм могут быть приготовлены из концентратов, предназначенных для получения суспензий после разведения в соответствующем растворителе до требуемой концентрации.

Особенности технологии изготовления лекарственных препаратов в виде суспензий в аптечных организациях, приведены в ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм».

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственных форм «Суспензии» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту; в установленных случаях, например, при производстве суспензий в виде капель глазных или других стерильных суспензий, должны быть приняты меры, обеспечивающие их стерильность. При получении стерильных суспензий применяют методы стерилизации в соответствии с ОФС «Стерилизация».

Упаковка суспензий может быть однодозовой и многодозовой.

###### Испытания

Суспензии должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Суспензии для парентерального применения должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для парентерального применения».

Суспензии, предназначенные для применения в форме капель глазных должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для офтальмологического применения».

Суспензии для ингаляций должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для ингаляций».

Лекарственные формы, представляющие собой порошки, таблетки, гранулы, лиофилизаты, концентраты, гели, пасты, предназначенные для приготовления суспензий, должны отвечать требованиям соответствующих ОФС: ОФС «Порошки», ОФС «Таблетки», ОФС «Гранулы», ОФС «Лиофилизаты», ОФС «Концентраты», ОФС «Мягкие лекарственные формы».

Описание. Суспензии характеризуют, отмечая внешний вид, органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи. После встряхивания суспензия должна представлять собой жидкость с однородно распределёнными в ней частицами.

рН. Испытание проводят, если указано в фармакопейной статье. Определение проводят потенциометрическим методом в соответствии с ОФС «Ионометрия». Значение рН указывают в фармакопейной статье.

Размер частиц. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение показателя «Размер частиц» в суспензиях, эмульсиях, мягких лекарственных формах».

Проходимость через иглу. Испытание проводят для суспензий, предназначенных для парентерального применения, в соответствии с методикой, указанной в фармакопейной статье. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, суспензия должна свободно проходить в шприц через иглу 0,8 мм× 40 мм.

При соответствующем обосновании испытания по показателям «Размер частиц» и «Проходимость через иглу» могут быть взаимозаменяемыми.

Седиментационная устойчивость. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Седиментационная устойчивость» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Испытание не применяют для восстановленных суспензий для приёма внутрь в однодозовых индивидуальных упаковках.

Вязкость. Испытание проводят, если указано в фармакопейной статье, в соответствии с ОФС «Вязкость» методом ротационной вискозиметрии. Испытание должно быть предусмотрено для суспензий, в состав которых входят вещества, увеличивающие вязкость.

Однородность дозирования. Испытание проводят для суспензий в однодозовых индивидуальных упаковках, за исключением суспензий для наружного применения и суспензий для местного применения, в соответствии с ОФС «Однородность дозирования».

Однородность массы (объёма) доз. Испытание проводят для суспензий, выпускаемых в многодозовой упаковке, снабжённой устройством для дозирования, в соответствии с ОФС «Однородность массы (объёма) доз, отобранных из многодозовой упаковки».

Извлекаемый объём. Испытание проводят для суспензий для приёма внутрь в соответствии с ОФС «Извлекаемый объём».

Испытание не применяют для суспензий в однодозовых упаковках, если проводят испытание по показателю «Однородность дозирования».

Масса (объём) содержимого упаковки. Испытание проводят для всех суспензий, за исключением суспензий для приёма внутрь, в соответствии с ОФС «Масса (объём) содержимого упаковки».

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для всех суспензий, за исключением стерильных, в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Стерильность. Испытание проводят для суспензий, к которым предъявляется требование стерильности в соответствии с ОФС «Стерильность».

###### Упаковка

В соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств».

Многодозовая упаковка суспензий для приёма внутрь должна быть снабжена средством дозирования, представляющим собой мерную ложку, мерный стаканчик, мерный колпачок, шприцевой дозатор и др., для отмеривания предписанной дозы лекарственного препарата.

Упаковка суспензий для вагинального, ректального введения, а также, при необходимости, упаковка суспензий для применения в полости рта, должна быть приспособлена для соответствующего введения или снабжена подходящей насадкой, аппликатором.

###### Маркировка

В соответствии с ОФС «Маркировка лекарственных средств».

Должна быть предусмотрена предупредительная надпись «Перед употреблением взбалтывать».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0015 Таблетки

Взамен ОФС.1.4.1.0015.15

Таблетки – твёрдая дозированная лекарственная форма, получаемая путем прессования порошков или гранул или другим подходящим способом, содержащая одно или несколько действующих веществ, с добавлением или без добавления вспомогательных веществ.

Классификационное деление таблеток на группы, как правило, определяют: способ получения, способ/путь введения и применения, тип высвобождения действующего вещества (веществ), признак готовности к применению, технологические признаки.

По технологическим признакам различают таблетки без оболочки и таблетки, покрытые оболочкой.

Для таблеток без оболочки, предназначенных для приёма внутрь, используют термин «таблетки».

Таблетки без оболочки (таблетки) – однослойные таблетки, полученные однократным прессованием частиц, или многослойные таблетки, состоящие из концентрических или параллельных слоёв, полученные последовательным прессованием частиц различного состава, с использованием вспомогательных веществ, специально не предназначенных для высвобождения действующего вещества (веществ) в желудочно-кишечном тракте.

Таблетки, покрытые оболочкой – таблетки для приёма внутрь, покрытые одним или несколькими слоями, состоящими из смеси различных вспомогательных веществ и в ряде случаев действующих веществ.

Таблетки, покрытые плёночной оболочкой – таблетки для приёма внутрь, покрытые оболочкой, представляющей собой очень тонкое полимерное покрытие, как правило, не превышающее 5-10 % от массы таблетки.

По типу (скорость, характер, время, место) высвобождения различают таблетки с обычным (стандартным/немедленным) и модифицированным (нестандартным) высвобождением.

Таблетки с обычным высвобождением – таблетки, с высвобождением действующего вещества (веществ), которое не было преднамеренно модифицировано с помощью специального состава и (или) специальной технологии производства.

Таблетки с модифицированным высвобождением – таблетки для приёма внутрь, полученные по специальной технологии, или в состав оболочки и (или) содержимого которых входят специальные вспомогательные вещества для изменения скорости, и (или) времени, и (или) места высвобождения действующего вещества (веществ).

Модифицированное высвобождение может быть пролонгированным (замедленным, замедленным непрерывным), пульсирующим (прерывистым), ускоренным и отсроченным (отложенным).

Таблетки кишечнорастворимые – таблетки для приёма внутрь, с отсроченным высвобождением, покрытые специальной оболочкой, или содержащие специальные, или полученные с использованием специальной технологии, которые обеспечивают устойчивость в желудочном соке (гастрорезистентность) и обычное высвобождение действующего вещества (веществ) в кишечном соке. В случае если таблетки покрыты оболочкой, используют термин «таблетки кишечнорастворимые, покрытые оболочкой». В случае если таблетки покрыты плёночной оболочкой, используют термин «таблетки кишечнорастворимые, покрытые плёночной оболочкой».

Таблетки с пролонгированным высвобождением – таблетки для приёма внутрь, покрытые специальной оболочкой, или содержащие специальные вспомогательные вещества, или полученные по специальной технологии, для замедленного непрерывного высвобождения действующего вещества (веществ). В случае если таблетки покрыты оболочкой, используют термин «таблетки с пролонгированным высвобождением, покрытые оболочкой». В случае если таблетки покрыты плёночной оболочкой, используют термин «таблетки с пролонгированным высвобождением, покрытые плёночной оболочкой».

Таблетки кишечнорастворимые с пролонгированным высвобождением – таблетки кишечнорастворимые, покрытые специальной оболочкой, или содержащие специальные вспомогательные вещества, или полученные по специальной технологии, для замедленного непрерывного высвобождения действующего вещества (веществ). В случае если таблетки покрыты оболочкой, используют термин «таблетки кишечнорастворимые с пролонгированным высвобождением, покрытые оболочкой». В случае если таблетки покрыты плёночной оболочкой, используют термин «таблетки кишечнорастворимые с пролонгированным высвобождением, покрытые плёночной оболочкой».

Таблетки с пульсирующим (прерывистым) высвобождением – таблетки с последовательным периодическим (прерывистым) высвобождением действующего вещества (веществ).

Таблетки с ускоренным высвобождением – таблетки, содержащие специальные вспомогательные вещества и (или) полученные по особой технологии, что позволяет обеспечивать увеличение скорости высвобождения действующего вещества (веществ).

В зависимости от способа/пути введения и применения различают: таблетки для применения в полости рта, таблетки вагинальные, таблетки вагинальные шипучие, таблетки внутриматочные, таблетки для имплантации, таблетки для ингаляций.

Таблетки для применения в полости рта – обычно таблетки без оболочки, полученные по специальной технологии с целью высвобождения действующего вещества (веществ) в полости рта и обеспечения местного или системного действия.

К таблеткам для применения в полости рта относят: таблетки для рассасывания, жевательные, защёчные, защёчные мукоадгезивные, подъязычные, диспергируемые в полости рта, а также таблетки-лиофилизат.

Таблетки для рассасывания – таблетки, помещаемые в полость рта для последующего рассасывания, обычно для получения местного действия.

Таблетки жевательные – таблетки без оболочки, требующие разжевывания перед проглатыванием.

Таблетки защёчные (трансбуккальные) – таблетки, помещаемые в щёчный карман с целью получения системного действия.

Таблетки защёчные мукоадгезивные – таблетки, помещаемые на слизистую оболочку щёк, обычно содержащие гидрофильные полимеры, прилипающие к слизистой оболочке, с целью оказания системного действия в течение продолжительного периода времени.

Таблетки подъязычные (сублингвальные) – таблетки, помещаемые под язык с целью получения системного действия.

Таблетки, диспергируемые в полости рта – таблетки, которые помещают в полость рта, где они быстро диспергируются до проглатывания.

Таблетки-лиофилизат – твёрдая лекарственная форма, получаемая путем лиофилизации в виде пористой массы, имеющей форму таблетки и предназначенная для помещения в полость рта, где происходит быстрое высвобождение действующего вещества (веществ) при контакте со слюной перед проглатыванием.

Таблетки вагинальные – таблетки без оболочки или покрытые плёночной оболочкой, предназначенные для вагинального применения, обычно для оказания местного действия.

Таблетки вагинальные шипучие – таблетки, предназначенные для введения во влагалище, в состав которых введены органические кислоты и гидрокарбонаты, реагирующие в его среде с выделением углерода диоксида.

Таблетки внутриматочные – таблетки, предназначенные для введения в полость матки, высвобождающие действующее вещество (вещества) в течение длительного периода времени.

Таблетки для имплантации – стерильные таблетки, получаемые путём прессования, предназначенные для имплантации обычно подкожной, с целью оказания местного или системного действия в течение продолжительного периода времени.

Таблетки для ингаляций – таблетки, образующие пары при добавлении в горячую воду или при помощи соответствующего устройства (например, ингалятора и др.), предназначенные для вдыхания с целью оказания местного действия.

По признаку готовности к применению различают таблетки, которые применяют в том виде, в котором они выпущены, и таблетки, которые требуют выполнения дополнительных действий перед их применением (растворимые, диспергируемые, шипучие).

Таблетки растворимые – таблетки без оболочки или покрытые плёночной оболочкой, которые растворяют в подходящем растворителе (преимущественно в воде) перед применением; полученный раствор может быть слабо опалесцирующим.

Таблетки диспергируемые – таблетки без оболочки или покрытые плёночной оболочкой, диспергируемые в соответствующем растворителе (преимущественно в воде) перед применением с образованием суспензии.

Таблетки шипучие – таблетки без оболочки, содержащие вещества кислого и основного характера (гидрокарбонаты), которые быстро реагируют в воде с выделением углерода диоксида; они предназначены для растворения или диспергирования в воде непосредственно перед применением.

Кроме того, таблетки могут быть использованы для приготовления восстановленных лекарственных форм (капель, растворов, суспензий, паст) путём растворения или диспергирования их в соответствующем растворителе. По способу/пути введения или применения лекарственные формы, полученные из таблеток, предназначенных для их приготовления, могут быть использованы для парентерального применения, для приёма внутрь, для наружного применения, для местного применения. Для обозначения таких таблеток используют термин «Таблетки для приготовления…» с указанием наименования получаемой лекарственной формы и способа/пути её введения или применения. Для таблеток, предназначенных для приготовления раствора для приёма внутрь, используется термин «Таблетки растворимые». Для таблеток, предназначенных для приготовления суспензии для приёма внутрь, используется термин «Таблетки диспергируемые».

###### Особенности технологии

Наиболее распространённым методом производства таблеток является метод прессования (прямое прессование или с применением влажного или сухого гранулирования), реже используется формование и лиофилизация.

Формованные таблетки производят под низким давлением из увлажнённой порошковой массы путем её втирания в специальные формы или формовки расплавленной массы.

Таблетки-лиофилизат производят путем лиофилизации жидкостей или гелей, содержащих действующее вещество (вещества).

В зависимости от технологии производства, способа/пути введения и применения таблеток, физико-химических свойств фармацевтической субстанции (субстанций), дозировки, типа высвобождения действующего вещества (веществ) таблеток, применяют вспомогательные вещества различных функциональных классов (ОФС «Вспомогательные вещества»).

Разбавители (наполнители) используют для обеспечения необходимой массы таблетки, если в состав входит малое количество фармацевтической субстанции (субстанций). К этому классу вспомогательных веществ относятся: декстроза, лактоза моногидрат, сахароза, крахмал, производные целлюлозы, маннитол, сорбитол, кальция карбонат, магния карбонат, кальция глицерофосфат и др.

Разрыхлители (дезинтегранты) включают в состав таблеток с целью обеспечения их распадаемости. К ним относят набухающие разрыхлители: крахмал (в том числе химически модифицированный), производные целлюлозы, кросповидон, мальтоза, алгиновая кислота и её натриевая и калиевая соли, газообразующие разрыхлители: твёрдые органические кислоты в сочетании с карбонатами или гидрокарбонатами и разрыхлители, улучшающие смачиваемость и водопроницаемость – поверхностно активные вещества (эмульгатор полисорбат-80, кремния диоксид коллоидный и др.).

Связующие (связывающие) вещества вводят для обеспечения прочности гранул и таблеток. С этой целью используют растворы крахмала, желатина, сахарозы, алгиновой кислоты и её натриевой соли; природные камеди, производные целлюлозы, макрогол, повидон и др.

Вспомогательные вещества, способствующие скольжению (антифрикционные вещества) препятствуют прилипанию к пресс-инструменту, оказывают смазывающее действие, улучшают текучесть таблетируемых смесей. Скользящие вещества: крахмал, тальк, каолин, обезжиренный молочный порошок, кремния диоксид коллоидный, макрогол, полисорбат-80. Смазывающие вещества: жирные кислоты и их соли (стеариновая кислота и её кальциевая и магниевая соли), углеводороды (вазелиновое масло), полисорбат-80, натрия лаурилсульфат. Такие вещества замедляют скорость распадаемости таблетки и растворения действующего вещества (веществ), поэтому не рекомендуется превышать содержание полисорбата-80, стеариновой кислоты, кальция и магния стеарата более чем на 1 %, талька – на 3 % , кремния диоксид коллоидного – на 10 % от массы таблетки.

В состав жевательных таблеток в качестве вспомогательных веществ обычно входят маннитол, сорбитол, сахароза и др.

В состав шипучих таблеток входят органические кислоты и карбонаты или гидрокарбонаты.

В зависимости от состава и способа нанесения оболочки таблеток различают дражированное, плёночное и прессованное покрытие.

Оболочка может быть защитной или обеспечивать разрушение таблетки в определенном отделе желудочно-кишечного тракта, или регулировать время высвобождения действующего вещества (веществ).

Таблетки кишечнорастворимые получают путем покрытия таблеток кишечнорастворимой оболочкой или прессованием гранул или частиц, предварительно покрытых устойчивой к желудочному соку оболочкой. Пролонгация высвобождения может быть достигнута при использовании:

- специального покрытия таблеток;

- технологии создания многослойных таблеток;

- технологии создания таблеток с нерастворимым каркасом;

- иных способов иммобилизации действующих веществ на инертном носителе.

Для нанесения оболочек могут быть использованы вспомогательные вещества следующих функциональных классов: адгезивные вещества, обеспечивающие прилипание материалов покрытия оболочки к ядру таблетки (сироп сахарный, магния оксид и др.); вещества, создающие каркасы (сахароза, тальк, магния карбонат, этилцеллюлоза и др.); пластификаторы, придающие покрытиям свойства пластичности (растительные масла, метилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза натрия, полисорбат-80 и др.); вещества, придающие покрытиям свойства влагостойкости (кремния диоксид коллоидный, шеллак, полиакриловые смолы и др.); красители.

При нанесении оболочек методом наращивания используют гуммиарабик, желатин, сироп сахарный, магния карбонат, крахмал, метилцеллюлозу, пшеничную муку, кальция стеарат, кальция карбонат, натрия алгинат, тальк, магния оксид и др.

В состав плёночных оболочек входят такие вещества, как гидроксипропилметилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, ацетилфталилцеллюлоза, метилцеллюлоза, этилцеллюлоза, натрий карбоксиметилцеллюлоза, сополимеры метакриловой кислоты и ее эфиров, повидон, желатин и др.

Для получения прессованных покрытий используют сахарозу, лактозу, крахмал, пшеничную муку, стеариновую кислоту и др.

Вещества, используемые для покрытия таблеток, обычно наносят в виде растворов или суспензий в условиях, позволяющих растворителю испариться. В качестве растворителей используют воду очищенную, этанол, ацетон, хлороформ, аммиака раствор, кислоту хлористоводородную и др.

Корригенты вкуса, ароматизаторы и красители используют для улучшения внешнего вида таблеток и придания им необходимого вкуса и запаха, маркировки дозы, а также идентификации лекарственного препарата.

Технология производства таблеток должна обеспечивать необходимую устойчивость таблеток к истиранию и механическую прочность.

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственных форм «Таблетки» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту; в установленных случаях, при получении стерильных таблеток, должны быть приняты меры, обеспечивающие их в стерильность. При производстве стерильных таблеток используют методы стерилизации в соответствии с ОФС «Стерилизация».

Таблетки могут быть выпущены в однодозовой и многодозовой упаковке.

Деление таблеток. На таблетки может наноситься риска (риски), позволяющая делить их на части для облегчения приема лекарственного препарата или соответствия дозировке.

Для обеспечения точности получения пациентом назначенной дозы при разработке лекарственного препарата в лекарственной форме «Таблетки» должна оцениваться эффективность риски (рисок) по однородности массы разделенных частей. Каждая доза должна проверяться с использованием следующего испытания, если нет других указаний в фармакопейной статье.

Разламывают вручную 30 произвольно отобранных таблеток и далее для испытания используют только одну часть (соответствующую дозировке), полученную от каждой таблетки. Взвешивают по отдельности каждую из 30 частей и рассчитывают среднюю массу.

Таблетки выдерживают испытание, если за пределы 100±15 % от средней массы выходит не более 1 из 30 испытуемых частей таблеток.

Таблетки не выдерживают испытания, если масса более чем одной части таблеток выходит за указанные пределы или если масса одной части из 30 испытуемых частей таблеток выходит за пределы 100±25 % от средней массы.

###### Испытания

Таблетки должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Восстановленные лекарственные формы, полученные с использованием таблеток, предназначенных для их приготовления путём растворения или диспергирования, должны соответствовать требованиям ОФС, регламентирующим качество полученных лекарственных форм.

Таблетки, предназначенные для приготовления лекарственных форм для парентерального применения, должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для парентерального применения».

Таблетки, предназначенные для приготовления капель глазных, должны соответствовать ОФС «Лекарственные формы для офтальмологического применения».

Таблетки для ингаляций должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для ингаляций».

Таблетки-лиофилизат должны соответствовать требованиям ОФС «Лиофилизаты».

Описание. Таблетки характеризуют, отмечая внешний вид (форму, поверхность, обозначения на поверхности и др.), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Таблетки обычно представляют собой прямые круглые цилиндры с плоской или двояковыпуклой верхней и нижней поверхностью, цельными или скошенными краями (фаской). Таблетки могут иметь и иную форму, например, овальную, многоугольную и др.

На разломе таблеток без оболочек при рассматривании под лупой видна та или иная относительно однородная структура (однослойные таблетки) или послойная структура (многослойные таблетки), но не признаки оболочки. На разломе таблеток, покрытых оболочкой, при рассматривании под лупой видно ядро, окруженное одним или несколькими сплошными слоями различной структур.

Оценку внешнего вида таблеток осуществляют при осмотре невооруженным глазом 20 таблеток. Поверхность таблетки должна быть гладкой, однородной, если нет других указаний в фармакопейной статье. На поверхности таблетки могут быть нанесены штрихи, риски для деления, надписи и другие обозначения. Для таблеток диаметром 9 мм и более рекомендуется наличие риски.

Распадаемость. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Распадаемость твёрдых лекарственных форм». При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, в качестве жидкой среды используют воду. Если нет других указаний в фармакопейной статье, то:

- таблетки без оболочки должны распадаться в течение 15 мин;

- таблетки, покрытые оболочкой, должны распадаться в течение 60 мин;

- таблетки, покрытые плёночной оболочкой, должны распадаться в течение 30 мин.

Таблетки кишечнорастворимые, покрытые оболочкой. Если нет других указаний в фармакопейной статье, испытание проводят в соответствии с ОФС «Распадаемость твердых лекарственных форм», со следующими изменениями методики. Испытание проводят в два этапа. В качестве жидкой среды на первом этапе используют хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М. Время устойчивости таблеток в кислой среде, может зависеть от их состава, но не должно быть менее 1 ч и более 3 ч. Таблетки не должны распадаться и обнаруживать признаки растрескивания и размягчения. На втором этапе кислоту заменяют фосфатным буферным раствором с рН 6,8. Если нет других указаний в фармакопейной статье, то в буферном растворе таблетки должны распадаться в течение 1 ч. Может быть использован буферный раствор с рН 6,8 с добавлением порошка панкреатина (например, 0,35 г порошка панкреатина на 100 мл буферного раствора). Использование дисков, если применимо, указывают в фармакопейной статье.

Таблетки диспергируемые и таблетки растворимые. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Распадаемость твёрдых лекарственных форм». В качестве жидкой среды используют воду с температурой 20 ± 5 °C. Таблетки должны распадаться в течение 3 мин.

Таблетки, диспергируемые в полости рта. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Распадаемость твёрдых лекарственных форм», В качестве жидкой среды используют воду». Таблетки должны распадаться в течение 3 мин.

Таблетки для применения в полости рта (таблетки подъязычные, защечные, для рассасывания). Испытание проводят в соответствии с ОФС «Распадаемость твёрдых лекарственных форм» и нормативными требованиями (время распадаемости), указанными в фармакопейной статье. В ряде случаев дополнительно нормируют время, в течение которого таблетка не должна распадаться. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, в качестве жидкой среды используют воду.

Таблетки-лиофилизат. Испытание проводят по следующей методике, если нет других указаний в фармакопейной статье. В стакан, содержащий 200 мл воды при температуре 20±5 °С, помещают одну таблетку. Испытание повторяют на 5 других таблетках. Таблетки выдерживают испытание, если каждая из 6 таблеток распалась или растворилась в течение не более 3 мин.

Таблетки шипучие. Испытание проводят по следующей методике. В стакан, содержащий 200 мл воды при температуре 20±5 °С, помещают одну таблетку – наблюдается интенсивное выделение пузырьков газа. Таблетка считается распавшейся или растворившейся, если после прекращения выделения пузырьков газа вокруг нее или её фрагментов, отсутствуют агломераты частиц. Испытание повторяют на 5 других таблетках. Таблетки выдерживают испытание, если каждая из 6 таблеток распалась или растворилась в течение не более 5 мин

Таблетки вагинальные. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Распадаемость суппозиториев, вагинальных таблеток, ректальных и вагинальных капсул», за исключением таблеток пролонгированного действия. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, время распадаемости таблеток не должно превышать 30 мин.

Растворение. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Растворение для твёрдых дозированных лекарственных форм» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Если нет других указаний в фармакопейной статье, то:

- для таблеток, таблеток, покрытых оболочкой, (1 группа) проводят испытание, подтверждающее соответствующее высвобождение действующего вещества (веществ);

- для таблеток кишечнорастворимых, таблеток кишечнорастворимых, покрытых оболочкой, (2 группа) проводят испытание, подтверждающее отсроченное высвобождение необходимого количества действующего вещества (веществ);

- для таблеток с пролонгированным высвобождением, таблеток с пролонгированным высвобождением, покрытых оболочкой, (3 группа) проводят испытание, подтверждающее замедленное высвобождение действующего вещества (веществ).

Если в фармакопейной статье предусмотрено испытание по показателю «Растворение», то допускается не проводить испытание по показателю «Распадаемость.

Дисперсность. Испытание проводят для таблеток диспергируемых по следующей методике. В колбу, содержащую 100 мл воды, помещают 2 таблетки, перемешивают до полного диспергирования. Должна образоваться однородная суспензия, проходящая через сито с номинальным размером отверстий 710 мкм (ОФС «Ситовой анализ»).

Потеря в массе при высушивании или Вода. Испытание проводят в тех случаях, когда содержание воды может влиять на свойства действующего вещества (веществ), стабильность лекарственного препарата в лекарственной форме «Таблетки» и т.д. Испытание обязательно для таблеток, полученных способом лиофилизации. Определение проводят в соответствии с ОФС «Потеря в массе при высушивании» или ОФС «Определение воды» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Однородность массы. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм». Испытание не применяют в случае, если предусмотрено испытание по показателю «Однородность дозирования» для всех действующих веществ.

Однородность дозирования. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Однородность дозирования», если нет других указаний в фармакопейной статье.

Прочность на раздавливание. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Прочность таблеток на раздавливание» на стадии технологического процесса производства таблеток.

Истираемость. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Истираемость таблеток» на стадии технологического процесса производства таблеток.

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для всех таблеток за исключением стерильных, в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Стерильность. Испытание проводят для таблеток, к которым предъявляется требование стерильности, в соответствии с ОФС «Стерильность».

###### Маркировка

В соответствии с ОФС «Маркировка лекарственных средств».

На упаковке растворимых, шипучих и диспергируемых таблеток должна быть предупредительная надпись о необходимости предварительного растворения/диспергирования таблеток перед применением.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0016 Пластыри трансдермальные

Взамен ОФС.1.4.1.0016.15

Пластыри трансдермальные – лекарственная форма для наружного применения, представляющая собой пластырь, состоящий из нанесённых на подложку матрицы или резервуара, предназначенный для контролируемой доставки действующего вещества (веществ) в системный кровоток путём пассивной диффузии через неповреждённую кожу.

Пластыри трансдермальные могут содержать одно или несколько действующих веществ.

Пластырь трансдермальный представляет собой многослойный пластырь. Внешний покровный слой (подложка) является непроницаемым для действующего вещества и служит для придания жёсткости всему пластырю, а также для защиты от внешнего воздействия. Со стороны поверхности высвобождения действующего вещества, предназначенной для аппликации на кожу, имеется защитное антиадгезионное покрытие, удаляемое непосредственно перед применением пластыря трансдермального.

Различают два основных вида пластырей трансдермальных: резервуарные и матричные (рис. 1). В резервуарных пластырях трансдермальных (рис. 1, А) действующее вещество/вещества находится в запаянном резервуаре в виде раствора, геля, суспензии или эмульсии. Внешний покровный слой резервуара представляет собой непроницаемую для содержимого резервуара полимерную плёнку, а внутренний, обращённый к коже слой, – полимерную мембрану, регулирующую скорость выхода действующего вещества/веществ из резервуара на кожу через слой адгезива. Адгезив обеспечивает прочное крепление пластыря на коже.

Матричные пластыри трансдермальные устроены более просто (рис. 1, Б). Внешний покровный слой представляет собой непроницаемую для действующего вещества гибкую полимерную плёнку, к которой прикреплена полимерная адгезионная матрица, содержащая действующие и вспомогательные вещества.

Рис. 1. Схемы пластырей трансдермальных: резервуарный (А) и матричный (Б).

Площадь внешнего покровного слоя может быть равна площади высвобождения (подачи) действующего вещества/веществ (т.е. резервуара или полимерной адгезионной матрицы) или быть несколько больше, для нанесения по краям пластыря адгезива. Защитное покрытие также может быть несколько больше, чем сам пластырь трансдермальный, что облегчает процесс его удаления.

###### Особенности технологии

В качестве вспомогательных веществ, входящих в состав пластырей трансдермальных, могут быть использованы пластификаторы, стабилизаторы, солюбилизаторы, модификаторы скорости высвобождения действующего вещества, усилители проницаемости кожи для действующего вещества, адгезивы, полимеры, сополимеры, растворители, эмульгаторы и другие вспомогательные вещества.

Вспомогательные вещества не должны обладать местно-раздражающим, аллергизирующим и токсическим действием.

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственной формы «Пластыри трансдермальные» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту.

Испытания

Пластыри трансдермальные должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Описание. Пластырь трансдермальный характеризуют, отмечая внешний вид (форму, размеры, описание матрицы и/или адгезива и др.), органолептические (цвет внешнего покровного слоя и др.) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Растворение. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Растворение для пластырей трансдермальных» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье. Определяют скорость высвобождения действующего вещества из пластыря трансдермального или скорость его подачи через полимерную мембрану в выбранную среду растворения.

Однородность дозирования. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Однородность дозирования» при отсутствии других указаний в фармакопейной статье.

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для всех пластырей трансдермальных в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

###### Упаковка

В соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств».

Каждый пластырь трансдермальный помещают в индивидуальную первичную упаковку.

###### Маркировка

В соответствии с ОФС «Маркировка лекарственных средств».

На первичной упаковке указывают название и содержание действующего вещества в пластыре трансдермальном, количество подаваемого действующего вещества в единицу времени.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0017 Эмульсии

Взамен ОФС.1.4.1.0017.15

Эмульсии – жидкая лекарственная форма, представляющая собой гетерогенную двухфазную дисперсную систему с жидкой дисперсной фазой и жидкой дисперсионной средой.

Эмульсия, содержащая диспергированные частицы размером менее 1 мкм, представляет собой микрогетерогенную дисперсную систему.

Различают два основных типа эмульсий: «масло в воде» и «вода в масле».

В зависимости от способа/пути введения и применения различают эмульсии для приёма внутрь, для местного применения, для наружного применения, вагинальные, внутриматочные, ректальные, зубные, для гастроэнтерального введения, для промывания слухового прохода, для ингаляций, для парентерального применения (для инъекций, для инфузий), для применения в форме капель глазных.

###### Особенности технологии

Эмульсии получают диспергированием эмульгатора с эмульгируемой жидкостью и дисперсионной средой.

При получении эмульсий в качестве масляной фазы используют масла растительного и животного происхождения, минеральные, эфирные масла и другие несмешивающиеся с водой жидкости.

Эмульгаторы вводят в состав эмульсий для обеспечения устойчивости.

Тип образующейся эмульсии определяется свойствами эмульгатора (его гидрофильно-липофильным балансом). Эмульгаторы по типу образуемых эмульсий разделяют на гидрофильные, образующие эмульсии типа «масло в воде» и липофильные, образующие эмульсии типа «вода в масле».

Выбор эмульгатора и его количество зависит от природы и свойств эмульгатора и масла.

Фармацевтические субстанции вводят в состав эмульсий, учитывая их физико-химические свойства: липофильные вещества растворяют в маслах, водорастворимые – в воде, нерастворимые вещества диспергируют и вводят в основу эмульсии.

При необходимости в состав эмульсии вводят антимикробные консерванты.

Эмульсии могут быть выпущены готовыми к применению или быть приготовленными непосредственно перед применением в виде восстановленной лекарственной формы из лиофилизатов, предназначенных для получения эмульсии путём диспергирования в соответствующем растворителе.

Эмульсии также могут быть получены в виде разбавленной лекарственной формы из концентратов, предназначенных для получения эмульсии после их разведения в соответствующем растворителе до требуемой концентрации.

Особенности технологии изготовления лекарственных препаратов в виде эмульсий в аптечных организациях, приведены в ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм».

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственной формы «Эмульсии» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту; в установленных случаях, при получении стерильных эмульсий, должны быть приняты меры, обеспечивающие их стерильность. При получении стерильных растворов используют методы стерилизации в соответствии с ОФС «Стерилизация».

Эмульсии могут быть дозированными и недозированными.

Эмульсии могут быть выпущены в однодозовой и многодозовой упаковке.

###### Испытания

Эмульсии должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Эмульсии для парентерального применения должны соответствовать ОФС «Лекарственные формы для парентерального применения».

Эмульсии, предназначенные для применения в форме капель глазных должны соответствовать ОФС «Лекарственные формы для офтальмологического применения».

Эмульсии для ингаляций должны соответствовать ОФС «Лекарственные формы для ингаляций».

Лекарственные формы, представляющие собой лиофилизаты и концентраты, предназначенные для приготовления эмульсий, должны отвечать требованиям соответствующих ОФС: «Лиофилизаты», «Концентраты».

Описание. Эмульсии характеризуют, отмечая внешний вид, органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи. Эмульсия должна представлять собой однородную жидкость, в которой может наблюдаться расслоение, исчезающее после взбалтывания.

pH. Испытание проводят потенциометрическим методом в соответствии с ОФС «Ионометрия». Значение рН указывают в фармакопейной статье.

Размер частиц (капель). При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение показателя «Размер частиц» в суспензиях, эмульсиях, мягких лекарственных формах».

Плотность. Испытание проводят, если указано в фармакопейной статье, одним из методов в соответствии с ОФС «Плотность» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Вязкость. Испытание проводят, если указано в фармакопейной статье, в соответствии с ОФС «Вязкость» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Однородность дозирования. Испытание проводят для дозированных эмульсий и эмульсий в однодозовых индивидуальных упаковках, за исключением эмульсий длч наружного и местного применения, в соответствии с ОФС «Однородность дозирования».

Однородность массы (объёма) доз. Испытание проводят для эмульсий, выпускаемых в многодозовой упаковке, снабжённой устройством для дозирования, в соответствии с ОФС «Однородность массы (объёма) доз, отобранных из многодозовой упаковки».

Извлекаемый объём. Испытание проводят для эмульсий для приёма внутрь в соответствии с ОФС «Извлекаемый объём».

Испытание не применяют для дозированных эмульсий и эмульсий в однодозовых индивидуальных упаковках, если проводят испытание по показателю «Однородность дозирования».

Масса (объём) содержимого упаковки. Испытание проводят для всех эмульсий, за исключением эмульсий для приёма внутрь, в соответствии с требованиями ОФС «Масса (объём) содержимого упаковки».

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для всех эмульсий, за исключением стерильных, в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Стерильность. Испытания проводят для эмульсий, к которым предъявляется требование стерильности, в соответствии с ОФС «Стерильность».

###### Упаковка

В соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств».

Многодозовая упаковка эмульсий для приёма внутрь должна быть снабжена средством дозирования, представляющим собой мерную ложку, мерный стаканчик, мерный колпачок, шприцевой дозатор и др., для отмеривания предписанной дозы лекарственного препарата.

Упаковка эмульсий для вагинального, ректального, внутриматочного введения, а также, при необходимости, упаковка эмульсий для промывания слухового прохода и др., должна быть приспособлена для сооветствующего введения или снабжена подходящей насадкой, аппликатором.

###### Маркировка

В соответствии с ОФС «Маркировка лекарственных средств».

На упаковке должна быть предупредительная надпись «Перед употреблением взбалтывать».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0018 Настои и отвары

Взамен ОФС.1.4.1.0018

Настои отвары – жидкие лекарственные формы, представляющие собой водные извлечения из лекарственного растительного сырья.

Водные извлечения могут быть однокомпонентные – полученные из одного вида лекарственного растительного сырья, и многокомпонентные – полученные из двух и более видов лекарственного растительного сырья.

По пути введения и способу применения настои и отвары используются для приёма внутрь, для наружного применения, для местного применения, для ингаляций.

###### Особенности технологии

Водные извлечения (настои, отвары) изготавливают экстракцией лекарственного растительного сырья водой, а также растворением сухих или жидких экстрактов в рассчитанном объёме воды.

При изготовлении водных извлечений обеспечивают оптимальные условия экстракции, с учётом стандартности лекарственного растительного сырья, его измельчённости и морфологической группы, соотношения массы сырья и объёма экстрагента, физико-химических свойств действующих лекарственных средств и сопутствующих веществ.

Лекарственное растительное сырьё, используемое для получения настоев и отваров, должно соответствовать требованиям соответствующих фармакопейных статей.

Для приготовления водных извлечений используют лекарственное растительное сырьё: цельное, измельчённое, порошок.

В случае использования цельного лекарственного растительного сырья отдельных морфологических групп для изготовления водных извлечений, его предварительно измельчают. Травы измельчают, как правило, до частиц размером не более 7 мм; листья и цветки – до частиц размером, как правило, не более 5 мм (кожистые листья, например, брусники обыкновенной, толокнянки обыкновенной – до частиц размером не более 3 мм); кору, корни, корневища – до частиц размером, как правило, не более 3 мм; плоды и семена используют преимущественно цельные, при необходимости измельчают до частиц размером не более 0,5 мм. Измельчённость лекарственного растительного сырья должна быть указана в фармакопейной статье.

Оценку измельчённости (размера частиц) подготовленного лекарственного растительного сырья проводят ситовым анализом (ОФС «Ситовой анализ»).

При отсутствии других указаний, из лекарственного растительного сырья, представляющего собой цветки, листья, травы или побеги, изготавливают настой; из лекарственного растительного сырья, представляющего собой кору, плоды, семена, почки, подземные органы – отвар.

При получении водного извлечения лекарственное растительное сырьё заливают водой комнатной температуры, настаивают в инфундирном аппарате на водяной бане при частом помешивании: настои в течение 15 мин, отвары – в течение 30 мин, при отсутствии других указаний, затем охлаждают при комнатной температуре: настои – в течение 45 мин, отвары – в течение 10 мин при отсутствии других указаний. После охлаждения водное извлечение процеживают, остаток лекарственного растительного сырья отжимают, объём полученного извлечения доводят водой до предписанного объёма.

Объём воды, необходимый для приготовления требуемого количества водного извлечения, определяют суммированием требуемого объёма извлечения и дополнительного количества воды, взятого с учётом коэффициента водопоглощения (ОФС «Определение коэффициента водопоглощения и расходного коэффициента лекарственного растительного сырья»), для компенсации адсорбции жидкости сырьём. Дополнительное количество воды рассчитывают путём умножения прописанной массы лекарственного растительного сырья на коэффициент водопоглощения.

При изготовлении водных извлечений объёмом 1000–3000 мл время настаивания на водяной бане увеличивается на 10 мин и составляет 25 мин для настоев и 40 мин – для отваров.

Из лекарственного растительного сырья, содержащего эфирное масло, независимо от морфологической группы сырья, получают настой (время настаивания 15 мин, время охлаждения при комнатной температуре – 45 мин), при этом сосуд для настаивания должен быть плотно закрыт во избежание потерь летучих компонентов эфирных масел.

Рекомендуется готовить настой из лекарственного растительного сырья, содержащего не только летучие, но и термолабильные биологически активные вещества, например, сердечные гликозиды.

Из лекарственного растительного сырья, содержащего дубильные вещества (дуба кора, змеевика корневища, лапчатки прямостоячей корневища, кровохлёбки лекарственной корневища и корни и др.), а также толокнянки обыкновенной листьев, брусники обыкновенной листьев получают отвары, которые после снятия сосуда для настаивания с водяной бани, не допуская охлаждения при комнатной температуре, немедленно процеживают, чтобы избежать осаждения дубильных веществ и фенологликозидов.

Из сенны листьев получают отвар, который процеживают после полного охлаждения водного извлечения при комнатной температуре для осаждения смол.

Как правило, соотношение лекарственного растительного сырья и полученного водного извлечения должно составлять 1:10, т.е. из 10 массовых частей лекарственного растительного сырья получают 100 объёмных частей водного извлечения.

Настой алтея корней готовят без нагревания в соотношении 1:20: корни алтея заливают водой комнатной температуры и настаивают в течение 30 мин при комнатной температуре при частом помешивании, полученный настой процеживают, сырьё не отжимают.

Для получения требуемого объёма водного извлечения из лекарственного растительного сырья, содержащего полисахариды (слизи), в частности – алтея корней, следует использовать расходный коэффициент, который показывает, во сколько раз следует увеличить массу сырья и объём воды (экстрагента), чтобы получить соответствующий объём настоя или отвара.

Значения расходного коэффициента приведены в ОФС «Определение коэффициента водопоглощения и расходного коэффициента лекарственного растительного сырья».

Водные извлечения из горицвета весеннего травы, ландыша травы, багульника болотного побегов, валерианы лекарственной корневищ с корнями готовят в соотношении 1:30.

В ряде случаев следует брать (например, для термопсиса ланцетного травы) 1 массовую часть лекарственного растительного сырья для получения 400 объёмных частей водного извлечения (1:400).

При получении водных извлечений из лекарственного растительного сырья, содержащего сильнодействующие или ядовитые биологически активные вещества (сердечные гликозиды, алкалоиды), применяют лекарственное растительное сырьё с определённой биологической активностью (ЛЕД) или с определённым процентным содержанием компонентов с известной терапевтической активностью. Лекарственное растительное сырьё с большей биологической активностью или большим содержанием компонентов с известной терапевтической (фармакологической) активностью берут в меньшем количестве, чем прописано, рассчитывая его по формуле:

где m - количество лекарственного растительного сырья, необходимое для изготовления водного извлечения, г;
A – прописанное количество лекарственного растительного сырья, г;
Б – фактическое количество единиц действия в лекарственном растительном сырье или содержание компонентов с известной терапевтической (фармакологической) активностью в 1 г сырья, %;
B – стандартное содержание в единицах действия в лекарственном растительном сырье или содержание компонента с известной терапевтической (фармакологической) активностью в 1 г сырья, %.

При изготовлении водных извлечений из лекарственного растительного сырья, содержащего алкалоиды, прибавляют лимонную, винную или хлористоводородную кислоту, при этом кислоты берут по массе столько, сколько содержится алкалоидов во взятом количестве лекарственного растительного сырья.

Водные извлечения также могут быть получены путём растворения в воде сухих (1:1, м/м) или жидких (1:1 или 1:2, м/о) экстрактов-концентратов, взятых в соответствующих количествах по отношению к прописанному количеству лекарственного растительного сырья, то есть 1:1 или 1:2.

Сухие экстракты-концентраты вводятся в состав жидких лекарственных форм по правилам растворения порошкообразных лекарственных средств, а жидкие – по правилам добавления спиртосодержащих лекарственных средств (ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм»).

При изготовлении водных извлечений не допускается замена лекарственного растительного сырья настойками, эфирными маслами и экстрактами, не предназначенными для изготовления водных извлечений.

Многокомпонентные водные извлечения из двух и более видов лекарственного растительного сырья, требующие одинакового режима экстракции, обусловленного физико-химическими свойствами действующих и сопутствующих веществ, изготавливают в одном инфундирном аппарате независимо от морфологической группы лекарственного растительного сырья и с учётом коэффициентов водопоглощения (ОФС «Определение коэффициента водопоглощения и расходного коэффициента лекарственного растительного сырья»).

Многокомпонентные водные извлечения из лекарственного растительного сырья, требующего различных условий экстракции, изготавливаются раздельно с использованием для экстракции максимально возможного объёма воды, но не менее чем 10-кратного по отношению к массе лекарственного растительного сырья.

В водные извлечения могут быть добавлены фармацевтические субстанции, лекарственные препараты и вспомогательные вещества. Твёрдые вещества растворяют в готовых настоях и отварах при перемешивании, фильтруют во флакон для отпуска через тот же фильтр, который использовался для фильтрования водного извлечения, при необходимости доводят объём водного извлечения водой до предписанного. Жидкости в виде лекарственных форм (сиропы, настойки, экстракты жидкие и др.) прибавляют к готовому настою или отвару.

При изготовлении водных извлечений из лекарственного растительного сырья не допускается использование концентрированных растворов лекарственных средств.

При необходимости к настоям и отварам могут быть добавлены консерванты, например, сорбиновая кислота.

Требования к контролю качества, упаковке и маркировке устанавливает общая фармакопейная статья «Лекарственные препараты аптечного изготовления».

###### Хранение

При температуре от 2 °С до 8 °С, в защищённом от света месте.

###### Срок годности

Срок годности водных извлечений – не более 2 сут при отсутствии других указаний, например, срок годности настоев алтея корней и других водных извлечений, содержащих полисахариды (слизи), – не более 1 сут, водных извлечений из чаги – не более 4 сут.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0019 Настойки

Взамен ОФС.1.4.1.0019.15

Настойки − жидкая лекарственная форма, представляющая собой обычно окрашенные спиртовые или водно-спиртовые извлечения, полученные из лекарственного растительного сырья (высушенного или свежесобранного), а также из сырья животного происхождения без удаления экстрагента.

Настойки подразделяют на простые, полученные на основе одного вида лекарственного растительного сырья, и сложные (комплексные) – на основе смеси нескольких видов лекарственного растительного сырья.

В зависимости от способа/пути введения и применения различают настойки для приёма внутрь, для наружного применения, для местного применения, для ингаляций.

Для настоек, предназначенных для приёма внутрь (как правило, после разведения), используют термин «настойка».

Настойка для ингаляций – настойка, образующая пары при добавлении в горячую воду или при помощи соответствующего устройства (например, ингалятора и др.), предназначенные для вдыхания с целью оказания местного действия.

Настойка для местного применения – настойка, предназначенная для местного применения (в том числе после разведения).

Настойка для наружного применения – настойка, предназначенная для наружного применения (в том числе после разведения).

Настойки могут использоваться как лекарственные растительные препараты, а также в качестве растительных фармацевтических субстанций входить в состав других лекарственных препаратов, представляющих собой различные лекарственные формы, например, жидкие лекарственные формы, включая капли для приёма внутрь, эликсиры и др.

###### Особенности технологии

Настойки получают методом мацерации, перколяции или другим валидированным методом, используя в качестве экстрагента спирт этиловый этанол в необходимой концентрации.

Лекарственное растительное сырьё, используемое для получения настоек, должно отвечать требованиям соответствующих фармакопейных статей.

Из одной массовой части лекарственного растительного сырья получают 5 объёмных частей настойки. Из одной массовой части лекарственного растительного сырья, содержащего алкалоиды и сердечные гликозиды, – 10 объёмных частей настойки, если нет других указаний в фармакопейной статье.

После завершения процесса экстракции настойки отстаивают при температуре не выше 10°С в течение не менее 2 сут до получения прозрачной жидкости и фильтруют. В процессе хранения некоторых настоек, главным образом комплексных, допускается образование незначительного осадка балластных веществ, при условии отсутствия в нём компонентов, по которым осуществляется стандартизация.

При технологическом процессе производства настоек проводят испытание на содержание метанола и 2-пропанола в соответствии с ОФС «Метанол и 2-пропанол». При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, содержание метанола должно быть не более 0,05 %, содержание 2-пропанола − не более 0,05 %.

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственной формы «Настойки» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту.

###### Испытания

Настойки должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Описание. Настойки характеризуют, отмечая внешний вид (прозрачность, опалесценцию и др.), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Настойки, как правило, представляют собой прозрачную окрашенную жидкость. Допускается наличие опалесценции, взвеси, в ряде случаев, особенно в процессе хранения, возможно образование незначительного осадка, если это не влияет на эффективность и безопасность лекарственного средства.

Плотность. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Плотность» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Спирт этиловый. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение спирта этилового в лекарственных средствах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Сухой остаток. Испытание проводят по следующей методике. В предварительно высушенные при температуре 100–105 °С до постоянной массы фарфоровую чашку диаметром 5 см или бюкс, взвешенные с точностью до 0,0001 г, помещают 5,0 мл настойки, выпаривают на водяной бане досуха, сушат в сушильном шкафу в течение 2 ч при температуре 100–105 °С, охлаждают в эксикаторе (над безводным силикагелем, кальция хлоридом безводным или другим подходящим осушителем) в течение 30 мин и взвешивают. Результат выражают в массо-объёмных процентах. Содержание сухого остатка должно соответствовать требованиям, указанным в фармакопейной статье.

Тяжёлые металлы. Испытание проводят по следующей методике. В фарфоровую чашку помещают 10 мл настойки и выпаривают досуха на водяной бане, прибавляют 1 мл серной кислоты концентрированной, осторожно сжигают и прокаливают при температуре 600 °С. К полученному остатку прибавляют при нагревании 5 мл аммония ацетата насыщенного раствора, фильтруют через беззольный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл, промывают фильтр 5 мл воды и доводят объём фильтрата водой до метки.

12 мл полученного раствора должны выдерживать испытания на тяжёлые металлы в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы», метод 4.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, содержание тяжёлых металлов должно быть не более 0,001 %.

Извлекаемый объём. Испытание проводят для настоек, предназначенных для приёма внутрь, в соответствии с ОФС «Извлекаемый объём».

Масса (объём) содержимого упаковки. Испытание проводят для всех настоек, за исключением настоек для приёма внутрь, в соответствии с ОФС «Масса (объём) содержимого упаковки».

Микробиологическая чистота. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

###### Маркировка

В соответствии с ОФС «Маркировка лекарственных средств».

Для настоек, в которых возможно образование опалесценции или незначительного осадка (при хранении), должна быть предусмотрена предупредительная надпись «Перед употреблением взбалтывать».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0020 Сборы

Взамен ОФС.1.4.1.0020.15

Сборы – лекарственная форма, представляющая собой смесь двух и более видов лекарственного растительного сырья различных способов переработки (измельчённое, порошок), реже цельное, предназначенную для применения после получения водных извлечений (настоев, отваров).

Сборы могут выпускаться в однодозовых или многодозовых упаковках.

###### Особенности технологии

Лекарственное растительное сырьё (компоненты сбора), используемое для получения сборов, должно соответствовать требованиям применимых общих фармакопейных статей, соответствующих фармакопейных статей.

В начале производства сбора каждый вид лекарственного растительного сырья, требующего измельчения и предназначенного для включения в состав сборов, по отдельности измельчают и просеивают. При отсутствии других указаний в фармакопейных статьях на лекарственное растительное сырьё, входящее в состав сборов, его измельчённость должна соответствовать требованиям ОФС «Настои и отвары», указанным для различных морфологических групп сырья.

При необходимости после измельчения лекарственного растительного сырья, мелкие частицы в виде пыли отсеивают.

Масса сбора после высушивания должна равняться суммарной массе лекарственного растительного сырья, входящих в сбор.

###### Идентификация

Отбор проб для проведения анализа сборов проводят в соответствии с требованиями ОФС «Отбор проб лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Внешние признаки

Сборы измельчённые. Из средней пробы измельчённого сбора берут аналитическую пробу массой 10,0 г, помещают на гладкую, белую поверхность, проводят визуальный осмотр при дневном свете, фиксируя соответствие цвета, запаха сбора требованиям фармакопейной статьи. Далее в пробе определяют компоненты сбора по внешнему виду, рассматривая их невооружённым глазом, а также с помощью лупы (10×) и т.п. Необходимо подтвердить морфологические признаки отдельных видов лекарственного растительного сырья, входящих в сбор, в соответствии с ОФС на отдельные морфологические группы лекарственного растительного сырья.

Сборы-порошки. Из средней пробы сбора-порошка берут аналитическую пробу массой 10,0 г, помещают на гладкую, белую поверхность, проводят визуальный осмотр при дневном свете, фиксируя соответствие цвета, запаха сбора требованиям фармакопейных статей.

Микроскопические признаки. Сборы подвергают микроскопическому анализу в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Сборы измельчённые. Из аналитической пробы отбирают 25-30 однородных по внешнему виду компонентов/частиц каждого компонента сбора и из нескольких компонентов/кусочков готовят препараты, которые затем рассматривают под микроскопом для определения компонентов сбора.

При исследовании по основным признакам должны быть диагностированы все компоненты сбора, микрофотографии (или рисунков) основных анатомо-диагностических признаков компонентов должны быть приведены в фармакопейной статье.

Сборы-порошки. Часть аналитической пробы помещают на чистую гладкую поверхность и по внешним признакам выделяют составные компоненты сбора, рассматривая их невооружённым глазом и с помощью лупы (10×) и т.п. Для каждого компонента выбирают достаточное количество (но не менее 5) однородных по внешнему виду частиц и из нескольких отобранных частиц готовят микропрепараты по методике приготовления микропрепаратов из измельчённого лекарственного растительного сырья. Отмечают наличие анатомо-диагностических признаков, характерных для отдельных компонентов сбора.

Описание основных диагностических признаков должно сопровождаться иллюстративным материалом (микрофотографиями и др.). и быть приведено в фармакопейной статье.

Основные группы биологически активных веществ

Из средней пробы берут аналитическую пробу массой 10,0 г для проведения качественных реакций, испытаний с помощью хроматографических и спектральных исследований.

1. Качественные микрохимические и гистохимические реакции. Проводят в микропрепаратах компонентов сбора в соответствии с требованиями ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

2. Качественные реакции. Качественные реакции проводят непосредственно на компонентах сбора и/или с извлечением из сбора с указанием названия группы/групп биологически активных веществ или обнаруживаемых индивидуальных соединений по методикам, приведённым в фармакопейных статьях на лекарственное растительное сырьё. Используемые реакции должны быть специфичными для биологически активных веществ компонентов сбора.

3. Хроматография. Анализ осуществляется с помощью различных хроматографических методик (ТСХ, ВЭЖХ и др.), позволяющих идентифицировать компоненты сбора, с использованием соответствующих фармакопейных стандартных образцов, маркёров (активных или аналитических). Для испытаний используют водное или водно-спиртовое извлечение из сбора, а также извлечения, полученные с помощью других подходящих растворителей, если это указано в фармакопейной статье.

4. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Для испытаний используют извлечения из сбора, если предусмотрено фармакопейной статьей. Допускается ссылка на раздел «Количественное определение». Приводится описание условий регистрации спектра с указанием длин волн, при которых должны наблюдаться максимум(ы), иногда минимум(ы), поглощения.

###### Испытания

Влажность. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Зола общая. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Зола общая» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Измельчённость. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Допустимые примеси. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Радионуклиды. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Тяжёлые металлы и мышьяк. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Определяют содержания биологически активных веществ, обуславливающих терапевтическое (фармакологическое) действие сбора, методом, указанным в фармакопейной статье.

###### Хранение

В соответствии требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0021 Экстракты

Взамен ОФС.1.4.1.0021.15]

Экстракты − лекарственная форма, представляющая собой концентрированное извлечение из лекарственного растительного сырья, реже из сырья животного происхождения.

По консистенции различают:

- экстракты сухие (Extracta sicca) − порошкообразные массы, обладающие свойством сыпучести, с потерей в массе при высушивании не более 5 %, если иное не указано в фармакопейной статье;

- экстракты густые (Extracta spissa) – вязкие массы с потерей в массе при высушивании не более 25 %, если иное не указано в фармакопейной статье;

- экстракты жидкие (Extracta fluida) – густые, подвижные, иногда маслянистые жидкости.

Экстракты-концентраты – экстракты различной консистенции, стандартизованные по отношению к лекарственному растительному сырью в определенных соотношениях, например 1:1 или 1:2. Экстракты-концентраты, как правило, используют для получения настоев и отваров, заменяя в указанных соотношениях лекарственное растительное сырье.

По используемому экстрагенту различают:

- экстракты водные, полученные с использованием в качестве экстрагента воды;

- экстракты спиртовые, полученные с использованием в качестве экстрагента спирта этилового различных концентраций;

- экстракты масляные, полученные с использованием в качестве экстрагента масла растительного;

- экстракты, полученные с использованием органических экстрагентов (например, углерода четыреххлористого, дихлорэтана и др.);

- экстракты, полученные последовательным экстрагированием лекарственного растительного сырья экстрагентами, в том числе различной полярности.

Экстракты подразделяют на простые, полученные на основе одного вида лекарственного растительного сырья, и сложные (комплексные) – на основе смеси нескольких видов лекарственного растительного сырья.

В зависимости от способа/пути введения и применения различают:

- экстракт для приема внутрь – экстракт, предназначенный для приема внутрь (в том числе после разведения);

- экстракт для наружного применения – экстракт, предназначенный для наружного применения (в том числе после разведения);

- экстракт для местного применения – экстракт, предназначенный для местного применения (в том числе после разведения).

Экстракты могут использоваться как лекарственные растительные препараты, а также в качестве фармацевтических субстанций входить в состав других лекарственных препаратов, представляющих собой различные лекарственные формы, например: таблетки, капсулы, эликсиры, суппозитории, капли для приёма внутрь и др.

Можно выделить следующие типы экстрактов:

- экстракты стандартизированные – экстракты, доведенные до заданного содержания компонентов с известной терапевтической активностью в допустимых пределах, что достигается добавлением к экстракту вспомогательных веществ или смешиванием серий экстракта;

- экстракты квантифицированные (приведенные) – экстракты, доведенные до определенного диапазона содержания компонентов (активных маркеров), достигается смешиванием серий экстракта;

- экстракты остальные – экстракты, для которых ни компоненты с известной терапевтической активностью, ни активные маркеры не установлены.

###### Особенности технологии

Экстракты могут быть получены методами перколяции, реперколяции, мацерации, циркуляционной экстракции и другими подходящими валидированными методами.

Лекарственное растительное сырье, используемое для получения экстрактов, должно отвечать требованиям соответствующих фармакопейных статей и общих фармакопейных статей.

Вспомогательные вещества, используемые в качестве экстрагентов, должны быть разрешены к медицинскому применению.

В качестве одного из критериев оценки эффективности процесса экстракции может быть использован показатель «Экстрактивные вещества», определение которого в лекарственном растительном сырье проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Экстракты жидкие после завершения процесса экстрагирования следует обязательно выдерживать при температуре не выше 10 °С в течение не менее 2 сут для осаждения балластных веществ, отделяемых фильтрованием, и получения прозрачной жидкости. В процессе хранения экстрактов жидких допускается образование незначительного осадка балластных веществ при условии отсутствия в нем биологически активных веществ.

При получении экстрактов сухих и густых их освобождают от балластных веществ добавлением к полученной вытяжке спирта этилового, адсорбентов, кипячением вытяжки и другими способами с последующим фильтрованием.

В случае экстрактов густых очищенные извлечения сгущают выпариванием под вакуумом до требуемой консистенции.

Экстракты сухие получают высушиванием экстрактов густых или непосредственно из очищенной вытяжки с использованием методов, обеспечивающих максимальное сохранение действующих веществ: распыление, лиофилизация, сублимация и др.

При производстве экстрактов-концентратов предварительно полученные экстракты различной консистенции стандартизуют до требуемого содержания компонента или группы компонентов, как правило, путем разбавления вспомогательными веществами, например, декстрином и др.

Гигроскопичность экстрактов сухих уменьшают добавлением лактозы, аэросила и других вспомогательных веществ.

При получении лекарственных препаратов с использованием экстрактов густых разрешено применение растворов экстрактов густых (Extracta solutа) в соотношении 1:2 к исходному экстракту. В качестве растворителя используют смесь, состоящую из 6 частей воды, 3 частей глицерина и 1 части спирта этилового. Растворы экстрактов густых применяют в двойном количестве, срок их хранения не должен превышать 15 сут.

При технологическом процессе производства экстрактов проводят испытание на содержание метанола и 2-пропанола в соответствии с ОФС «Метанол и 2-пропанол». При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, содержание метанола должно быть не более 0,05 %, содержание 2-пропанола − не более 0,05 %.

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственной формы «Экстракты» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту.

###### Испытания

Экстракты должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Описание. Экстракты характеризуют, отмечая внешний вид (консистенцию, наличие опалесценции экстрактов жидких и др.), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Экстракты жидкие, как правило, представляют собой прозрачную окрашенную жидкость; допускается наличие опалесценции, взвеси, в ряде случаев, особенно в процессе хранения, возможно образование незначительного осадка, если это не влияет на эффективность и безопасность лекарственного средства.

Потеря в массе при высушивании или Вода. Испытание проводят для экстрактов густых и экстрактов сухих в соответствии с ОФС «Потеря в массе при высушивании» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Если для экстрактов сухих не применима методика ОФС «Потеря в массе при высушивании», то проводят испытание в соответствии с ОФС «Определение воды» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Спирт этиловый. Испытание проводят для спиртсодержащих экстрактов в соответствии с ОФС «Определение спирта этилового в жидких фармацевтических препаратах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Тяжёлые металлы. Испытание проводят по следующей методике. В фарфоровую чашку помещают 1 мл экстракта жидкого, или 1 г экстракта густого, или 1 г экстракта сухого, прибавляют 1 мл серной кислоты концентрированной, осторожно сжигают и прокаливают при температуре 600 °С. К полученному остатку прибавляют при нагревании 5 мл аммония ацетата насыщенного раствора, фильтруют через беззольный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл, промывают фильтр 5 мл воды и доводят объём фильтрата водой до метки.

12 мл полученного раствора должны выдерживать испытания на тяжёлые металлы в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы», метод 4.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, содержание тяжёлых металлов должно быть не более 0,01 %.

Сухой остаток. Испытание проводят для экстрактов жидких по следующей методике. В предварительно высушенный при температуре 100–105 °С до постоянной массы бюкс помещают 5,0 мл экстракта жидкого, выпаривают на водяной бане досуха, сушат в сушильном шкафу в течение 3 ч при температуре 100–105 °С, охлаждают в эксикаторе (над безводным силикагелем, кальция хлоридом безводным или другим подходящим осушителем) в течение 30 мин и взвешивают. Результат выражают в массо-объёмных процентах. Содержание сухого остатка должно соответствовать требованиям, указанным в фармакопейной статье.

Кислотное число, пероксидное число, йодное число, число омыления. Испытание проводят для масляных экстрактов, если указано в фармакопейной статье, в соответствии с требованиями следующих ОФС: ОФС «Кислотное число», ОФС «Пероксидное число», ОФС «Йодное число»; ОФС «Число омыления» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Остаточные органические растворители. Испытание проводят для экстрактов, при производстве которых используют органические растворители, если указано в фармакопейной статье, в соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Извлекаемый объем. Испытание проводят для экстрактов жидких, предназначенных для приёма внутрь, в соответствии с ОФС «Извлекаемый объем».

Масса (объем) содержимого упаковки. Испытание проводят для всех экстрактов, за исключением экстрактов жидких для прима внутрь, в соответствии с ОФС «Масса (объем) содержимого упаковки».

Микробиологическая чистота. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

###### Маркировка

В соответствии с требованиями ОФС «Маркировка лекарственных средств».

Для экстрактов жидких, в которых возможно образование осадка (при хранении), должна быть предусмотрена предупредительная надпись «Перед употреблением взбалтывать».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0022 Гранулы резано-прессованные

Взамен ОФС.1.4.1.0022.15

Гранулы резано-прессованные – лекарственная форма, представляющая собой гранулы цилиндрической, округлой или иной формы, полученные путём прессования лекарственного растительного сырья и предназначенные для получения водных извлечений.

###### Особенности технологии

Для производства гранул резано-прессованных могут использоваться только те виды лекарственного растительного сырья, в которых в процессе гранулирования не снижается количественное содержание биологически активных веществ.

Лекарственное растительное сырьё, используемое для производства гранул резано-прессованных, должно соответствовать требованиям фармакопейной статьи на данный вид лекарственного растительного сырья.

Для производства гранул резано-прессованных используется измельченное лекарственное растительное сырьё (измельченность устанавливается для каждого вида лекарственного растительного сырья индивидуально), которое подвергается увлажнению насыщенным паром при постоянном перемешивании (для равномерного распределения влаги). Далее увлажненное сырье поступает в прессовочную машину, откуда после продавливания увлажненной массы через сито выходит в виде прессованных цилиндров, которые затем поступают в сушилку, охлаждаются за счёт обдува воздухом, и далее подаются на вальцовую машину, где измельчаются до гранул.

Гранулы резано-прессованные выпускают в однодозовой упаковке.

###### Испытания

Гранулы резано-прессованные должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной для данной лекарственной формы.

Описание. Гранулы резано-прессованные характеризуют, отмечая внешний вид (форму, размер и др.), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Микроскопические признаки. Микропрепараты готовят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственных средств природного происхождения».

Измельченность. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах». Гранул резано-прессованных, не проходящих сквозь сито, размер отверстий которого указывают в фармакопейной статье, должно быть не более 5 %. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, частиц гранул резано-прессованных, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, должно быть не более 5 %.

Распадаемость. Испытание проводят по следующей методике. В коническую колбу вместимостью 100 мл помещают 10–12 гранул резано-прессованных, прибавляют 50 мл воды, нагретой до кипения и кипятят при периодическом взбалтывании содержимого колбы. Гранулы резано-прессованные считаются распавшимися, если они полностью распались или превратились в рыхлую массу, которая разрушается при легком прикосновении стеклянной палочки. Наличие такой массы должно быть оговорено в фармакопейной статье. Время распадаемости отсчитывают с момента прибавления кипящей воды. За результат принимают среднее значение трёх определений. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, гранулы резано-прессованные должны распадаться в течение не более 5 мин.

Влажность. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение влажности лекарственных средств природного происхождения» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Зола общая. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Зола общая» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Минеральная примесь. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельченности и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Тяжёлые металлы и мышьяк. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Масса содержимого упаковки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Отбор проб лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Микробиологическая чистота. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

###### Упаковка

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Для упаковки гранул резано-прессованных используют, как правило, фильтр-пакеты бумажные.

###### Маркировка

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Маркировка вторичной упаковки лекарственного растительного препарата в виде гранул резано-прессованных должна включать указание «Продукция прошла радиационный контроль».

###### Хранение

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0023 Газы медицинские

Взамен ОФС.1.4.1.0023.18

Газы медицинские – лекарственная форма, представляющая собой любое вещество или смесь веществ, газообразных при нормальном атмосферном давлении и комнатной температуре, предназначенная для медицинского применения.

В зависимости от созданных температурных условий и давления различают газы медицинские криогенные, сжатые и сжиженные.

Газ медицинский криогенный – газ медицинский, сжижающийся при давлении 101,3 кПа и температуре ниже минус 150 °С.

Газ медицинский сжатый – газ медицинский, сохраняющий газообразное состояние при наполнении под давлением при температуре минус 50 °С.

Газ медицинский сжиженный – газ медицинский, находящийся в двухфазном состоянии (газ над жидкостью) при наполнении под давлением при температуре минус 50 °С.

Лекарственные препараты в виде лекарственной формы «Газы медицинские» могут быть предназначены для оказания местного и/или системного действия на организм человека, по пути/способу применения и введения могут быть для наружного применения, для местного применения, для ингаляций.

Газы медицинские рассматривают также как лекарственные средства, при этом газы медицинские сжиженные представляют собой фармацевтические субстанции, которые используют для получения лекарственных препаратов в виде газов медицинских сжатых, выпускаемых в виде лекарственных форм «Газы медицинские».

###### Особенности технологии

Газы медицинские, рассматриваемые как фармацевтические субстанции или вспомогательные вещества, могут быть получены путём химического синтеза или из природных источников с последующей их очисткой (при необходимости) в промышленных условиях или в условиях медицинских организаций.

Производство газов медицинских должно быть организовано в промышленных условиях в соответствии с правилами надлежащей производственной практики, требованиями действующих в Российской Федерации нормативных правовых актов к данному виду опасного производства. Процесс производства газов медицинских должен быть валидирован.

Исходные материалы, вспомогательные вещества, используемые в процессе производства газов медицинских, включая воздух, природные газы и воду, а также упаковка (баллоны, цистерны, резервуары и другие криогенные ёмкости) должны соответствовать установленным требованиям к их качеству, включая требования к микробиологической чистоте.

Вода, используемая для испытания баллонов гидростатическим давлением, должна быть, как минимум, питьевого качества. Необходимо проводить микробиологический контроль воды, используемой для охлаждения при сжатии воздуха, если она имеет контакт с газом медицинским.

Газы медицинские, полученные промышленным способом, могут применяться непосредственно в том виде, в котором они выпущены, а также могут быть использованы для последующего изготовления газовых смесей в условиях медицинской организации или могут быть расфасованы (например, в кислородные подушки) в условиях аптечной или медицинской организации.

###### Испытания

Газы медицинские должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, предусмотренные для данной лекарственной формы, а также испытания, характерные для газов медицинских, рассматриваемых как лекарственное средство, включая идентификацию, испытания на чистоту, количественное определение, указанные в соответствующей фармакопейной статье.

Отбор проб газов медицинских для испытаний проводят в соответствии с ОФС «Отбор проб» и методикой отбора проб, указанной в фармакопейной статье.

Описание. Газы медицинские характеризуют, отмечая физико-химические (агрегатное состояние, отношение к воспламенению и горению), органолептические свойства (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи. При необходимости, в фармакопейной статье приводят методику определения указанных свойств газа медицинского.

Давление газа в упаковке. Испытание проводят, если не указано иначе в фармакопейной статье, для газов медицинских сжатых в баллонах, при технологическом процессе производства. Методику определения и нормативные требования указывают в фармакопейной статье.

Герметичность упаковки. Испытание проводят, если не указано иначе в фармакопейной статье, для газов медицинских сжатых в баллонах, при технологическом процессе производства. Методику определения и нормативные требования указывают в фармакопейной статье.

Объём содержимого упаковки. Испытание проводят для газов медицинских сжатых в баллонах в соответствии с нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье. Определение проводят расчётным методом на основании измерения давления газа медицинского в упаковке с учётом температуры.

###### Упаковка

В соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств».

Баллоны для газов медицинских должны быть опломбированы для контроля первого вскрытия; для защиты от загрязнения на баллоны рекомендуется устанавливать защитные колпачки.

###### Маркировка

В соответствии с ОФС «Маркировка лекарственных средств».

Баллоны для газов медицинских должны быть окрашены в соответствующий цвет и иметь надпись установленного цвета.

###### Хранение и перевозка

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственных средств», ОФС «Перевозка лекарственных средств» и другими требованиями, установленными в Российской Федерации для данного вида продукции.

Баллоны, наполненные газом медицинским и газовыми смесями, хранят в специальных складских помещениях или на открытых площадках под навесом, защищённых от воздействия экстремальных температур, атмосферных осадков и прямых солнечных лучей, вдали от источников отопления и открытого огня.

Зоны хранения должны быть чистыми, сухими, хорошо проветриваемыми, в них не должны храниться горючие материалы.

Во время перевозки газовые баллоны должны быть защищены от неблагоприятных погодных условий. Для газовых смесей, в которых при замораживании происходит разделение фаз, должны соблюдаться особые условия хранения и перевозки.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0024 Губки лекарственные

Взамен ОФС.1.4.1.0024.18

Губки лекарственные − стерильная лекарственная форма, представляющая собой пористый абсорбирующий материал, пропитанный фармацевтической субстанцией (субстанциями) или являющийся ею, с добавлением или без добавления вспомогательных веществ, предназначенная для наружного или местного применения.

###### Особенности технологии

Производство губок лекарственных включает, как правило, процесс приготовления раствора соединения, образующего основу губки лекарственной, и введения в него действующего вещества (веществ) и вспомогательных веществ с последующей сублимационной сушкой полученной композиции и приданием ей необходимой формы и размеров.

В качестве основы для производства губок лекарственных обычно используют природные соединения (желатин, коллаген, соли альгиновой кислоты и др.), представляющие собой, после специальной обработки, пористый абсорбирующий материал.

Как правило, в лекарственной форме «Губки лекарственные» выпускают гемостатические, антисептические, дерматопротекторные, стимулирующие репарацию тканей и др. лекарственные препараты.

Губки лекарственные могут быть выпущены в однодозовых и многодозовых упаковках.

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственной формы «Губки лекарственные» должны быть приняты меры, обеспечивающие их стерильность. При производстве стерильных губок лекарственных используют методы стерилизации в соответствии с ОФС «Стерилизация».

###### Испытания

Губки лекарственные должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Описание. Губки лекарственные, как правило, представляют собой пластины или листы определённой формы и размера. Губки лекарственные характеризуют, отмечая структуру материала, её форму, цвет (например, листы белого цвета пористой структуры или сухая пористая масса жёлтого цвета в форме пластин), запах (при наличии), характер поверхности губки лекарственной (например, рельефная, гладкая и др.) в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

рН водного извлечения. Испытание проводят потенциометрическим методом в соответствии с ОФС «Ионометрия». При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, значение рН водного извлечения губки лекарственной должно быть в диапазоне от 4,5 до 7,5.

Потеря в массе при высушивании или Вода. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Потеря в массе при высушивании» или ОФС «Определение воды» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Показатели «Потеря в массе при высушивании» и «Вода» могут быть альтернативными, кроме случая, когда определение показателя «Потеря в массе при высушивании» необходимо для контроля содержания остаточных органических растворителей.

Однородность массы. Испытание проводят для губок лекарственных в однодозовой упаковке в соответствии с ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Абсорбирующая способность. Испытание проводят для губок лекарственных в лекарственных препаратах, предназначенных для поглощения экссудатов и других выделений из раневых поверхностей. Методику испытания и нормативные требования приводят в фармакопейной статье.

Гемостатическая активность. Испытание проводят для губок лекарственных в лекарственных препаратах гемостатического действия. Методику испытания и нормативные требования приводят в фармакопейной статье.

Стерильность. Испытания проводят для всех губок лекарственных в соответствии с ОФС «Стерильность»; губки лекарственные должны быть стерильны.

###### Упаковка

В соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств».

Каждую губку лекарственную упаковывают герметично в индивидуальную первичную упаковку, обеспечивающую её стерильность в течение всего срока годности.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0025 Драже

Взамен ОФС.1.4.1.0025.18

Драже − твёрдая дозированная лекарственная форма для приёма внутрь, получаемая путём послойного нанесения действующих веществ в смеси со вспомогательными веществами на гранулы, полученные из индифферентных вспомогательных веществ.

Масса драже, как правило, колеблется в пределах от 0,1 до 0,5 г, в отдельных случаях – до 1,0 г.

###### Особенности технологии

Производство драже осуществляется в дражировочных котлах с использованием технологии многократного послойного нанесения фармацевтической субстанции (субстанций) в смеси со вспомогательными веществами на ядро, представляющее собой гранулу, полученную из подходящих индифферентных вспомогательных веществ.

В качестве вспомогательных веществ при производстве драже используют наполнители (разбавители), разрыхляющие, связывающие, скользящие вещества, корригенты вкуса и запаха, красители, лаки и др.

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственной формы «Драже» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту.

###### Испытания

Драже должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Описание. Драже характеризуют, отмечая внешний вид (форму, характер поверхности и др.), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Драже должны иметь правильную шарообразную форму. В отдельных случаях наружный слой драже может быть окрашенным. Если нет других указаний в фармакопейной статье, поверхность драже должна быть ровной и гладкой, однородной по окраске.

Распадаемость. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Распадаемость твёрдых лекарственных форм». При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, в качестве жидкой среды используют воду. Драже должны распадаться в течение 30 мин, если в фармакопейной статье не указано иное.

Растворение. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Растворение для твёрдых дозированных лекарственных форм» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Если в фармакопейной статье предусмотрено испытание по показателю «Растворение», то испытание по показателю «Распадаемость» допускается не проводить.

Потеря в массе при высушивании или Вода. Испытание проводят в соответствии с требованиями фармакопейной статьи в тех случаях, когда содержание воды может влиять на свойства действующего вещества, на стабильность лекарственного препарата в лекарственной форме «Драже».

Испытание проводят в соответствии с ОФС «Потеря в массе при высушивании» или ОФС «Определение воды» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Однородность массы. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, драже выдерживают испытание, если не более двух индивидуальных масс отклоняются от средней массы более чем на ±15 %, но при этом ни одна индивидуальная масса не должна отклоняться от средней массы более чем на ±30 % или на величину в два раза превышающую установленную норму.

Испытание не применяют, если предусмотрено испытание по показателю «Однородность дозирования» для всех действующих веществ.

Однородность дозирования. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Однородность дозирования» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, испытание проводят также как для лекарственной формы «Таблетки», нормативные требования приводят в фармакопейной статье.

Микробиологическая чистота. Испытания проводят для всех драже в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0026 Имплантаты

Взамен ОФС.1.4.1.0026.18

Имплантаты − стерильная твёрдая лекарственная форма, имеющая подходящие для введения в ткани тела размеры и форму, предназначенная для имплантации и высвобождающая действующее вещество (вещества) в течение длительного периода времени. Как правило, вводится подкожно, в иных случаях указывается путь введения.

Требования настоящей общей фармакопейной статьи не распространяются на таблетки для имплантации. Таблетки для имплантации должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для парентерального применения».

По пути введения, кроме имплантатов для подкожного введения, различают также имплантаты глазные, имплантаты для внутримышечного введения, а также имплантаты для введения в различные органы.

Для имплантатов, предназначенных для подкожного введения, используют термин «имплантат».

Имплантат глазной – твёрдая дозированная лекарственная форма, предназначенная для введения во внутренние структуры глаза на длительный период времени для оказания определённого фармакологического действия. Разновидностью имплантата глазного является имплантат интравитреальный.

Имплантат интравитреальный − имплантат глазной, предназначенный для введения в заднюю камеру глаза.

По типу высвобождения имплантаты относят к лекарственным формам с модифицированным, как правило, пролонгированным высвобождением.

Имплантаты могут быть покрыты оболочкой.

Имплантаты могут быть произведены на основе биодеградируемых/растворимых материалов (биодеградируемые имплантаты) и на основе небиодеградируемых материалов (небиодеградируемые имплантаты).

###### Особенности технологии

Имплантаты представляют собой полимерную основу (матрикс) с равномерно распределённым в ней действующим веществом (веществами), которое способно в течение определённого времени высвобождаться из основы в месте имплантации.

Биодеградируемые имплантаты, как правило, производят из синтетических алифатических полиэфиров (полигликолевой кислоты, полимолочной кислоты, сополимеров гликолевой и молочной кислот); поликапролактона, полипропилена фумарата и др. Наиболее часто в качестве биодеградируемого полимера для производства имплантатов используют сополимер молочной и гликолевой кислот (полилактид-когликолид).

Биодеградируемыми называются имплантаты, разрушающиеся в результате естественных (микробиологических, биохимических) процессов, протекающих в организме. Высвобождение действующего вещества из биодеградируемого имплантата возможно в течение 6 мес. и более. На скорость высвобождения влияют размер частиц и растворимость фармацевтической субстанции (субстанций), площадь поверхности имплантата, скорость образования эрозии полимера и др. Биодеградируемые имплантаты не требуют удаления из места имплантации при завершении лечения.

В состав небиодеградируемых имплантатов могут входить поливиниловый спирт, этилвинилацетат, полибутилметилакрилат, полиэтилентерефталат, силикон и др.

Небиодеградируемые имплантаты должны быть удалены после завершения периода высвобождения действующего вещества для предотвращения их фиброзирования и инкапсулирования в местах имплантации, например, в полости глаза.

Полимерные имплантаты цилиндрической формы, как правило, получают методом экструзии расплава смеси фармацевтической субстанции и полимера. Имплантаты также могут быть произведены путём прямого прессования фармацевтической субстанции (субстанций) с полимерным носителем.

Имплантаты могут быть покрыты оболочкой, обеспечивающей необходимую скорость высвобождения действующего вещества из полимерной основы.

При получении лекарственных препаратов в лекарственной форме «Имплантаты» должны быть приняты меры, обеспечивающие их стерильность. Как правило, стерильность имплантатов обеспечивают финишной стерилизацией или организацией асептических условий производства в соответствии с ОФС «Стерилизация».

###### Испытания

Имплантаты должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы», а также выдерживать испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Описание. Имплантаты характеризуют, отмечая внешний вид (форму и др.), органолептические (цвет и др.) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи. Для имплантатов, покрытых оболочкой, если указано в фармакопейной статье, приводят толщину оболочки на поперечном разрезе имплантата.

Размеры имплантата. Определяют геометрические размеры (например, диаметр, длину и др.) имплантата в миллиметрах путём измерения микрометром. В фармакопейной статье приводят количество имплантатов для испытания и допустимые отклонения размеров имплантата.

Вода или Потеря в массе при высушивании. Испытание проводят в соответствии с требованиями фармакопейной статьи в тех случаях, когда содержание воды может влиять на физико-химические свойства имплантата, биодоступность действующего вещества (веществ), на стабильность лекарственного препарата в лекарственной форме «Имплантаты» и т.д. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение воды» или ОФС «Потеря в массе при высушивании» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Показатели «Потеря в массе при высушивании» и «Вода» являются альтернативными, кроме случаев, когда определение показателя качества «Потеря в массе при высушивании» предусмотрено для одновременного контроля содержания остаточных органических растворителей.

Однородность массы. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье. Испытание не применяют в случае, если предусмотрено испытание по показателю «Однородность дозирования» для всех действующих веществ.

Однородность дозирования. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Однородность дозирования» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Видимые механические включения. Испытание проводят для биодеградируемых имплантатов в зависимости от места их имплантации (например, для глазных имплантатов), в соответствии с ОФС «Видимые механические включения в лекарственных препаратах для парентерального применения и глазных лекарственных формах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Бактериальные эндотоксины или Пирогенность. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Бактериальные эндотоксины» или ОФС «Пирогенность» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Стерильность. Испытание проводят для всех имплантатов в соответствии с ОФС «Стерильность»; имплантаты должны быть стерильны.

###### Упаковка

В соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств».

Имплантаты упаковывают в индивидуальные стерильные упаковки.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0027 Капли

Взамен ОФС.1.4.1.0027.18

Капли − жидкая лекарственная форма, представляющая собой раствор, эмульсию или суспензию одной или нескольких фармацевтических субстанций в соответствующем растворителе и дозируемая каплями с помощью соответствующего приспособления (капельница, пипетка и др.).

В зависимости от способа/пути введения и применения различают капли для приёма внутрь, для местного применения, для применения в полости рта, глазные, назальные, ушные, для ингаляций.

Капли для приёма внутрь − капли, предназначенные для приёма внутрь, как правило, после разведения.

Капли для местного применения – капли, предназначенные для местного применения.

Капли назальные − капли, предназначенные для инстилляции в полость носа с целью оказания местного или системного действия.

Капли ушные − капли, предназначенные для инстилляции в наружный слуховой проход.

Капли назальные и ушные − капли, предназначенные для инстилляции в полость носа и/или в наружный слуховой проход.

Капли глазные − стерильные капли, предназначенные для инстилляции в глаз.

Капли глазные с пролонгированным высвобождением − стерильные капли глазные, характеризующиеся высвобождением действующего вещества в течение продолжительного периода времени.

В ряде случаев капли назальные и капли ушные могут быть одновременно предназначены и для офтальмологического применения: капли глазные и назальные, капли глазные и ушные, капли глазные, назальные и ушные.

К каплям для применения в полости рта относят капли для нанесения на слизистую оболочку полости рта, капли зубные, капли подъязычные.

Капли для нанесения на слизистую оболочку полости рта − капли, предназначенные для нанесения на слизистую оболочку полости рта путём инстилляции в полость рта или на определённую часть полости рта, за исключением подъязычного пространства.

Капли зубные − капли, предназначенные для нанесения на зубы или десны с целью оказания местного действия.

Капли подъязычные − капли, предназначенные для инстилляции под язык с целью оказания системного действия.

Капли для ингаляций − капли, образующие пары при добавлении в горячую воду или при помощи соответствующего устройства (например, ингалятора), предназначенные для вдыхания с целью оказания местного или системного действия.

По типу дисперсной системы капли могут быть гомогенными (капли-растворы), гетерогенными (капли-суспензии, капли-эмульсии) и комбинированными.

Капли, представляющие собой растворы, могут быть водными и неводными (спиртовыми, масляными и др.).

###### Особенности технологии

В зависимости от типа дисперсной системы капли могут быть получены растворением или диспергированием фармацевтической субстанции (субстанций) в соответствующем растворителе (растворителях) или дисперсионной среде.

В качестве растворителя или дисперсионной среды используют воду очищенную или воду для инъекций, спирт этиловый различной концентрации (30 %, 40 %, 70 %, 95 %, 96 % и др.), масла (минеральные, жирные растительные, эфирные) и др. В качестве растворителей также могут быть использованы настойки, экстракты жидкие.

В качестве вспомогательных веществ при получении капель также могут быть использованы антимикробные консерванты, буферные растворы, сорастворители, стабилизаторы, антиоксиданты, ароматизаторы, пролонгаторы, корригенты вкуса и другие вспомогательные вещества.

При разработке состава капель необходимо учитывать физико-химические свойства фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ, их совместимость, особенности пути введения капель и др. Например, вещества, входящие в состав капель ушных не должны оказывать повреждающего давления на барабанную перепонку; капли назальные, представляющие собой водные растворы, как правило, должны быть изотоничны и т.д. Капли, представляющие собой суспензии или эмульсии, для обеспечения корректной их дозировки должны быть достаточно стабильными, легко диспергироваться при встряхивании.

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственной формы «Капли» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту, в установленных случаях, при получении стерильных капель (капли глазные и ушные, капли глазные и назальные, капли глазные, назальные и ушные и др.) должны быть приняты меры, обеспечивающие их стерильность. При получении стерильных капель используют методы стерилизации в соответствии с ОФС «Стерилизация».

Капли могут быть выпущены готовыми к применению или быть приготовленными непосредственно перед применением в виде восстановленных лекарственных форм из гранул, порошков, таблеток или лиофилизатов, предназначенных для получения капель путём их растворения или диспергирования в соответствующем растворителе.

Капли могут выпускаться в однодозовых или многодозовых упаковках.

###### Испытания

Капли должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Капли глазные и капли глазные с пролонгированным высвобождением, а также капли ушные и капли назальные, предназначенные, в том числе, и для офтальмологического применения, должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для офтальмологического применения».

Капли для ингаляций должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для ингаляций».

Капли, представляющие собой водные и неводные растворы, должны соответствовать требованиям ОФС «Растворы».

Капли, представляющие собой суспензии, должны соответствовать требованиям ОФС «Суспензии».

Капли, представляющие собой эмульсии, должны соответствовать требованиям ОФС «Эмульсии».

Лекарственные формы, представляющие собой порошки, таблетки, гранулы и лиофилизаты для приготовления капель должны соответствовать следующим ОФС: ОФС «Порошки», ОФС «Таблетки», ОФС «Гранулы» и ОФС «Лиофилизаты».

Описание. Капли могут представлять собой прозрачный раствор или жидкость, однородную после взбалтывания. Капли характеризуют, отмечая внешний вид (прозрачность или мутность и др.), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Прозрачность. Испытание проводят для капель стерильных, капель для приёма внутрь, капель для местного применения, представляющих собой растворы, в соответствии с ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей», для капель остальных − при соответствующем указании в фармакопейной статье.

Цветность. Испытание проводят для капель стерильных, капель для приёма внутрь, капель для местного применения, представляющих собой растворы, в соответствии с ОФС «Степень окраски жидкостей», для капель остальных − при соответствующем указании в фармакопейной статье.

Доза и однородность дозы. Испытание проводят для капель, предназначенных для приёма внутрь. Количество капель, соответствующее одной дозе, с помощью мерного или дозирующего устройства помещают в мерный цилиндр. Скорость капания не должна превышать 2 кап/с. Жидкость взвешивают, прибавляют еще одну дозу и вновь взвешивают; повторное прибавление с последующим взвешиванием проводят до тех пор, пока не будет взвешено 10 доз. Определяют среднюю массу дозы.

Масса ни одной дозы не должна отклоняться более чем на 10 % от средней массы. Суммарная масса 10 доз не должна отличаться более чем на 15 % от номинальной массы 10 доз.

При необходимости, измеряют общий объём 10 доз. Объём не должен отличаться более чем на 15 % от номинального объёма 10 доз.

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для всех капель, за исключением стерильных, в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Стерильность. Испытание проводят для капель, к которым предъявляется требование стерильности, в соответствии с ОФС «Стерильность».

Извлекаемый объём. Испытание проводят для капель, предназначенных для приёма внутрь, в соответствии с ОФС «Извлекаемый объём».

Масса (объём) содержимого упаковки. Испытание проводят для всех капель, за исключением капель для приёма внутрь, в соответствии с ОФС «Масса (объём) содержимого упаковки».

###### Упаковка

В соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств».

Упаковка капель может представлять собой флакон-капельницу или может быть снабжена специальным приспособлением − средством дозирования каплями в виде вставки-капельницы, крышки-капельницы, насадки-дозатора, пипетки и др.

Стерильные капли выпускают в стерильных однодозовых упаковках с контролем первого вскрытия.

###### Маркировка

В соответствии с ОФС «Маркировка лекарственных средств».

Маркировка капель для приёма внутрь должна содержать информацию о количестве капель в 1 мл или 1 г лекарственного препарата.

Для капель, представляющих собой эмульсии или суспензии, должна быть предусмотрена предупредительная надпись «Перед употреблением взбалтывать».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0028 Карандаши лекарственные

Взамен ОФС.1.4.1.0028.18

Карандаши лекарственные − твёрдая лекарственная форма в виде карандаша цилиндрической или конической формы с закруглённым концом, предназначенная для наружного применения с целью оказания местного действия и состоящая только из действующих веществ (одного или нескольких), либо представленная подходящей основой, в которой равномерно распределены действующие вещества.

Масса карандашей лекарственных, как правило, находится в пределах от 0,5 до 10,0 г.

###### Особенности технологии

Карандаши лекарственные могут быть получены методами выливания, прессования и погружения.

Фармацевтические субстанции, в зависимости от их свойств, могут быть введены в основу в виде раствора, эмульсии или суспензии.

Выливание может быть использовано для производства карандашей лекарственных, содержащих различные основы.

Метод прессования может быть использован только для производства карандашей лекарственных из масс, обладающих достаточной пластичностью.

Метод погружения заключается в погружении в расплавленную основу фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ с использованием для этих целей специальных форм.

Основа карандашей лекарственных должна обеспечить определённую форму лекарственного препарата и достаточную твёрдость (прочность) для сопротивления нажиму при использовании, но также должна обеспечить оптимальное высвобождение действующего вещества/веществ, лёгкость нанесения (намазывания) карандаша лекарственного на кожу. Поверхность карандашей лекарственных при использовании, то есть нанесении на кожу, должна постепенно стираться без повреждений и травмирования кожи.

В качестве вспомогательных веществ при производстве карандашей лекарственных используют формообразующие вещества, пластифицирующие добавки, вещества, улучшающие биодоступность действующих веществ в лекарственной форме и другие вспомогательные вещества.

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственной формы «Карандаши лекарственные» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту.

###### Испытания

Карандаши лекарственные должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Описание. Карандаши лекарственные характеризуют, отмечая внешний вид (форму, геометрические размеры в миллиметрах), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Карандаши лекарственные могут иметь вид цилиндрических палочек или сферических конусов, округло заострённых с одного конца.

Поверхность карандашей лекарственных должна быть ровной, гладкой, однородной, если иное не указано в фармакопейной статье.

Размер частиц. Испытание проводят для карандашей лекарственных, содержащих компоненты в виде твёрдой дисперсной фазы (гетерогенной системы). Определение проводят методом оптической микроскопии в соответствии с ОФС «Оптическая микроскопия». При отсутствии других указаний в фармакопейной статье размер частиц должен быть не более 100 мкм.

Средняя масса и отклонение от средней массы. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, определение средней массы и отклонений от средней массы проводят в соответствии с ОФС «Масса (объём) содержимого упаковки» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для всех карандашей лекарственных в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0029 Концентраты

Взамен ОФС.1.4.1.0029.18

Требования настоящей общей фармакопейной статьи не распространяются на экстракты-концентраты.

Экстракты-концентраты должны соответствовать требованиям ОФС «Экстракты».

Концентраты – жидкая лекарственная форма, предназначенная для применения после разведения в соответствующем растворителе до требуемой концентрации.

Концентраты могут содержать одно или несколько действующих веществ с добавлением или без добавления вспомогательных веществ.

Концентраты используют для получения других лекарственных форм. В зависимости от получаемой лекарственной формы различают:

- концентрат для приготовления раствора − концентрат, предназначенный для получения раствора;

- концентрат для приготовления суспензии – концентрат, предназначенный для получения суспензии, в том числе микрогетерогенной;

- концентрат для приготовления эмульсии – концентрат, предназначенный для получения эмульсии, в том числе микрогетерогенной.

По способу/пути введения и применения лекарственные формы, полученные из концентратов, предназначенных для их приготовления, используют для приёма внутрь, для наружного применения, для местного применения, для парентерального применения. Для описания полученной лекарственной формы (разбавленной лекарственной формы) используют термин «Концентрат для приготовления…» с указанием наименования получаемой лекарственной формы и способа/пути её введения и применения, например, «концентрат для приготовления раствора для инфузий», «концентрат для приготовления эмульсии для наружного применения» и др.

Концентраты могут быть выпущены как в виде дозированной, так и в виде недозированной лекарственной формы.

###### Особенности технологии

Концентраты получают растворением фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ в соответствующем растворителе или смеси растворителей.

В качестве основных растворителей при получении концентратов для приготовления водных растворов используют воду очищенную или воду для инъекций. В качестве растворителей при получении концентратов для приготовления неводных растворов используют спирт этиловый, масла жирные и др.

При последующем получении лекарственных форм из концентратов, предназначенных для их приготовления, концентрат, как правило, разводят до требуемой концентрации тем растворителем, который был использован при получении концентрата.

Фармацевтические субстанции, используемые при получении концентратов, могут представлять собой гигроскопичные, выветривающиеся или содержащие значительное количество кристаллизационной воды вещества.

При получении концентратов необходимо избегать концентраций растворённого вещества (веществ) близких к насыщенным, так как в условиях понижения температуры возможна их кристаллизация.

В качестве вспомогательных веществ при получении концентратов используют стабилизаторы, солюбилизаторы, антиоксиданты, пластификаторы и другие вещества.

Концентрированные растворы, предназначенные для аптечного изготовления лекарственных препаратов, изготавливают массо-объёмным способом в асептических условиях с использованием свежеполученной воды очищенной.

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственной формы «Концентраты» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту; в установленных случаях, например, при производстве концентратов для приготовления растворов для инфузий и др., должны быть приняты меры, обеспечивающие их стерильность. При получении стерильных концентратов используют методы стерилизации в соответствии с ОФС «Стерилизация».

###### Испытания

Концентраты должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Разбавленные лекарственные формы, полученные с использованием концентратов, предназначенных для их приготовления, должны соответствовать требованиям ОФС, регламентирующих качество полученных разбавленных лекарственных форм.

Концентраты, предназначенные для приготовления лекарственных форм для парентерального применения, должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для парентерального применения».

Концентраты, предназначенные для приготовления лекарственных форм для ингаляций, должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для ингаляций».

Описание. Концентраты характеризуют, отмечая внешний вид (прозрачность и др.), органолептические (цветность, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Прозрачность. Испытание проводят для концентратов, предназначенных для приготовления лекарственных форм для парентерального применения, для приёма внутрь, для местного применения, в соответствии с ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей», для остальных концентратов – при соответствующем указании в фармакопейной статье.

Цветность. Испытание проводят для концентратов, предназначенных для приготовления лекарственных форм парентерального применения, для приёма внутрь, для местного применения, в соответствии с ОФС «Степень окраски жидкостей», для остальных концентратов – при соответствующем указании в фармакопейной статье.

рН раствора. Испытание проводят для концентратов, предназначенных для приготовления водных растворов, для концентратов для приготовления эмульсий, в соответствии с ОФС «Ионометрия», для остальных концентратов — при соответствующем указании в фармакопейной статье. Значение рН концентрата указывают в фармакопейной статье.

Плотность. Испытание проводят для концентратов, предназначенных для приготовления неводных растворов, содержащих спирт этиловый в концентрации выше 40 %, для концентратов для приготовления эмульсий, для остальных концентратов — при соответствующем указании в фармакопейной статье. Определение проводят в соответствии с ОФС «Плотность» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Спирт этиловый. Испытание проводят для концентратов, предназначенных для приготовления неводных растворов, содержащих спирт этиловый в концентрации ниже 40 %, в соответствии с ОФС «Определение спирта этилового в лекарственных средствах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Вода. Испытание проводят для концентратов, предназначенных для приготовления неводных растворов, в соответствии с ОФС «Определение воды», метод 1 и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Извлекаемый объём. Испытание проводят для концентратов для приготовления лекарственных форм для парентерального применения в соответствии с ОФС «Извлекаемый объём лекарственных форм для парентерального применения».

Испытание проводят для концентратов для приготовления лекарственных форм для приёма внутрь в соответствии с ОФС «Извлекаемый объём».

Объём содержимого упаковки. Испытание проводят для всех концентратов, за исключением концентратов для приготовления лекарственных форм для парентерального применения и для концентратов для приготовления лекарственных форм для приёма внутрь, в соответствии с ОФС «Масса (объём) содержимого упаковки».

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для всех концентратов, за исключением стерильных, в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Стерильность. Испытание проводят для концентратов, предназначенных для приготовления лекарственных форм для парентерального применения и других концентратов, к которым предъявляется требование стерильности, в соответствии с ОФС «Стерильность».

###### Маркировка

В соответствии с ОФС «Маркировка лекарственных средств».

Информация о способе получения, условиях хранения и сроках годности разбавленной лекарственной формы, приготовленной из концентрата, должна быть указана в маркировке или инструкции по применению лекарственного препарата.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0030 Леденцы лекарственные

Взамен ОФС.1.4.1.0030.18

Леденцы лекарственные − твёрдая дозированная лекарственная форма, получаемая способом выливания или прессования, содержащая одно или несколько действующих веществ, равномерно распределённых в соответствующей основе, и предназначенная для рассасывания с целью оказания местного действия в полости рта и глотке.

###### Особенности технологии

Леденцы лекарственные получают методом выливания или прессования. В качестве основы для производства леденцов лекарственных, как правило, используют смесь сахарозы и жидкой декстрозы (смесь декстрозы, олигосахаридов и полисахаридов) в соотношении около 60:40. Приготовление смеси проводят при определённой температуре (от 90 до 140 °С). Полученная смесь должна иметь пластичную консистенцию и содержать около 1 % влаги. Затем в основу вводят действующее вещество (вещества) и различные вспомогательные вещества (красители, ароматизаторы, корригенты вкуса, антимикробные консерванты и др.). После перемешивания полученную карамельную массу охлаждают и путём выливания получают леденцы лекарственные необходимой формы и размера.

При производстве леденцов лекарственных методом прессования должны быть приняты меры, обеспечивающие механическую прочность леденцов лекарственных, что подтверждается испытаниями, указанными в ОФС «Истираемость таблеток» и ОФС «Прочность таблеток на раздавливание».

При получении лекарственных препаратов в лекарственной форме «Леденцы лекарственные» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту.

###### Испытания

Леденцы лекарственные должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Описание. Леденцы лекарственные характеризуют, отмечая внешний вид (форму, размеры, однородность поверхности), органолептические (цвет, запах) и другие показатели в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Леденцы лекарственные, как правило, имеют округлую форму, гладкую и однородную поверхность. Диаметр леденцов лекарственных округлой формы составляет, как правило, от 15 до 20 мм. Поверхность леденцов лекарственных должна быть гладкой, однородной, если не обосновано иное. Допускается неравномерность окрашивания, наличие пузырьков воздуха в карамельной массе и незначительная неровность краёв леденцов лекарственных.

Однородность массы. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Испытание не применяют в случае, если предусмотрено испытание по показателю «Однородность дозирования» для всех действующих веществ.

Однородность дозирования. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Однородность дозирования» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, испытание проводят также как для лекарственной формы «Таблетки», нормативные требования приводят в фармакопейной статье.

Микробиологическая чистота. Испытания проводят для всех леденцов лекарственных в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0031 Лиофилизаты

Взамен ОФС.1.4.1.0031.18

Лиофилизаты − твёрдая лекарственная форма в виде порошка или пористой массы, полученная путём лиофилизации лекарственных средств жидкой или мягкой консистенции.

Лиофилизаты могут содержать одно или несколько действующих веществ с добавлением или без добавления вспомогательных веществ.

Лиофилизаты могут использоваться для получения других лекарственных форм:

- лиофилизат для приготовления раствора и лиофилизат для приготовления спрея − лиофилизат, предназначенный для получения раствора или спрея путём его растворения в соответствующем растворителе;

- лиофилизат для приготовления суспензии и лиофилизат для приготовления эмульсии − лиофилизат, предназначенный для получения суспензии или эмульсии путём его диспергирования в соответствующем растворителе;

- лиофилизат для приготовления капель и лиофилизат для приготовления концентрата − лиофилизат, предназначенный для получения капель или концентрата путём его растворения или диспергирования в соответствующем растворителе.

По способу/пути введения или применения лекарственные формы, полученные из лиофилизатов, предназначенных для их приготовления, наиболее часто используют для парентерального применения, но могут быть также использованы для приёма внутрь, для наружного применения, для местного применения. Для обозначения таких лиофилизатов используют термин «Лиофилизат для приготовления…» с указанием наименования получаемой лекарственной формы и способа/пути её введения или применения, например, «Лиофилизат для приготовления раствора для инфузий», «Лиофилизат для приготовления суспензии для внутримышечного введения»; «Лиофилизат для приготовления капель глазных» и др.

Лиофилизаты, как правило, являются дозированной лекарственной формой.

Лиофилизаты могут быть использованы в качестве фармацевтических субстанций при производстве лекарственных препаратов в других лекарственных формах.

###### Особенности технологии

Метод лиофилизации (лиофильной сушки), используемый для производства лиофилизатов, представляет собой процесс удаления растворителя из замороженного материала путём возгонки (сублимации) кристаллов растворителя в условиях вакуума, т.е. превращения его в пар, минуя жидкую фазу.

Процесс лиофилизации состоит из трёх основных стадий: замораживания, сублимации кристаллов растворителя (первичной сушки) и удаления остатков растворителя (вторичной сушки).

Температурный режим замораживания определяется эвтектической зоной для лиофилизируемого лекарственного средства и для лиофилизации выбирают эвтектическую температуру замораживания, при которой достигается максимальная концентрация действующего вещества.

При замораживании растворов, содержащих воду с растворёнными в ней веществами, сначала замерзает чистая вода, а вещества концентрируются в незамерзающей части до тех пор, пока раствор не достигнет эвтектической концентрации, при которой образуется физически однородная (гомогенная) смесь двух или более твёрдых кристаллических веществ.

Скорость замораживания может быть различной. Быстрое замораживание применяют при производстве лекарственных средств, для которых важно сохранение клеточной структуры, например, плазмы крови, микроорганизмов и др. Для быстрого замораживания используют сжиженные газы или охлаждающие смеси. Большинство других лекарственных средств подвергают медленному замораживанию в морозильных камерах или в воздушной среде в камерах сублимационных установок.

Удаление остатков растворителя осуществляется главным образом за счёт сублимации, проводимой под вакуумом или значительно реже − в инертном газе, при этом происходит удаление остатков растворителя из замороженного объекта без образования жидкой фазы.

При производстве лиофилизатов используют различные вспомогательные вещества: растворители, солюбилизаторы, наполнители, антимикробные консерванты, регуляторы рН, стабилизаторы, криопротекторы и др. Вспомогательные вещества должны обеспечить сохранение надлежащего терапевтического эффекта и фармакокинетических параметров лекарственного препарата.

Наиболее часто лиофилизацию проводят из водного раствора. Также могут быть использованы неводные растворители, их применение позволяет увеличить скорость сублимации (первичной сушки), уменьшить время растворения или диспергирования лиофилизата при получении конечной лекарственной формы и улучшить её стабильность.

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственной формы «Лиофилизаты» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту; в установленных случаях, при получении стерильных лекарственных форм, должны быть приняты меры, обеспечивающие их стерильность. При получении стерильных лиофилизатов используют методы стерилизации в соответствии с ОФС «Стерилизация».

Должны быть приняты меры, обеспечивающие однородность дозирования или однородность массы при внутрипроизводственном контроле за количеством раствора перед лиофилизацией.

###### Испытания

Лиофилизаты должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Восстановленные лекарственные формы, полученные с использованием лиофилизатов, предназначенных для их приготовления путём растворения или диспергирования, должны соответствовать требованиям ОФС, регламентирующих качество полученных лекарственных форм.

Лиофилизаты, предназначенные для приготовления лекарственных форм для парентерального применения, должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для парентерального применения».

Лиофилизаты, предназначенные для приготовления капель глазных, должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для офтальмологического применения».

Лиофилизаты, предназначенные для приготовления лекарственных форм для ингаляций, должны выдерживать требования ОФС «Лекарственные формы для ингаляций».

Описание. Лиофилизаты характеризуют, отмечая внешний вид (сухая пористая масса, в виде таблетки, цельная или раскрошенная масса и др.), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Вода или Потеря в массе при высушивании. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение воды» или ОФС «Потеря в массе при высушивании» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Показатели «Потеря в массе при высушивании» и «Вода» не являются альтернативными, когда определение показателя «Потеря в массе при высушивании» необходимо для контроля содержания остаточных органических растворителей.

Однородность массы. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм». Испытание не применяют в случае, если предусмотрено испытание по показателю «Однородность дозирования» для всех действующих веществ.

Однородность дозирования. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Однородность дозирования».

Время растворения или диспергирования. Испытание проводят для лиофилизатов, предназначенных для получения восстановленных жидких лекарственных форм путём растворения или диспергирования лиофилизатов, в соответствии с ОФС «Время растворения или диспергирования» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для лиофилизатов, за исключением стерильных лиофилизатов , в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Стерильность. Испытание проводят для лиофилизатов, к которым предъявляется требование стерильности, в соответствии с ОФС «Стерильность».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0033 Пены лекарственные

Взамен ОФС.1.4.1.0033.18

Пены лекарственные − лекарственная форма, представляющая собой раствор, эмульсию или суспензию действующих и вспомогательных веществ (в том числе поверхностно-активных), которые находятся под давлением пропеллента в герметичной упаковке, снабжённой клапанно-распылительной системой, обеспечивающей высвобождение содержимого в виде дисперсии газа в жидких, реже твёрдых фазах.

Пены лекарственные представляют собой трёхфазную дисперсную систему, содержащую действующие вещества с добавлением поверхностно-активных вспомогательных веществ, растворителей и других веществ, находящихся под давлением газа-пропеллента.

В зависимости от природы дисперсионной среды различают водные и неводные пены лекарственные (водно-спиртовые, масляные и др.).

В зависимости от свойств фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ, входящих в состав лекарственного препарата, пены лекарственные могут быть быстроразрушающимися и стабилизированными.

В зависимости от способа/пути введения и применения выделяют, как правило, пены лекарственные для наружного применения и пены лекарственные для местного применения.

Пена лекарственная для наружного применения − пена, предназначенная для наружного применения; после оседания на месте применения может образовывать защитную плёнку.

К пенам лекарственным для местного применения относятся: пена лекарственная вагинальная, пена лекарственная внутриматочная и пена лекарственная ректальная.

Пены лекарственные могут быть дозированными и недозированными.

###### Особенности технологии

Вспомогательные вещества, входящие в состав пен лекарственных, должны обеспечивать оптимальные технологические характеристики лекарственной формы, быть совместимы с другими компонентами лекарственной формы и материалом упаковки.

Пены лекарственные могут быть получены с использованием водных и неводных растворителей. В качестве водных растворителей используют воду очищенную или воду для инъекций; неводных растворителей – спирты, минеральные и жирные масла и др.

В состав пен лекарственных обязательно вводят раствор поверхностно-активного вещества (веществ) и газ-пропеллент, а также стабилизаторы, антимикробные консерванты и другие вспомогательные вещества.

Поверхностно-активные вещества (например, полисорбаты) используют для обеспечения распределения газа в дисперсионной среде и стабилизации пены. Стабильная пена образуется, если пропеллент, как правило, вводят в состав дисперсной фазы (эмульсия типа «масло в воде»).

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственной формы «Пены лекарственные» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту; в установленных случаях, при получении стерильных пен лекарственных, должны быть приняты меры, обеспечивающие их стерильность. При получении стерильных пен лекарственных используют методы стерилизации в соответствии с ОФС «Стерилизация».

###### Испытания

Пены лекарственные должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Описание. Пены лекарственные характеризуют, отмечая внешний вид (консистенцию и др.), органолептические (цвета, запаха) и другие свойства высвободившегося содержимого упаковки в соответствии с требованиями фармакопейной статьи. При описании консистенции пен лекарственных могут быть применимы следующие термины: кремообразная, мелкоячеистая, пузырящаяся и др.

рН. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Ионометрия». Определяют рН полученного водного раствора после оседания пены или после растворения лекарственного препарата в воде. Условия проведения испытания и значение рН указывают в фармакопейной статье.

Давление в упаковке. Испытание проводят на стадии фармацевтической разработки и технологического процесса производства для пен лекарственных, в которых пропеллентами являются сжатые газы, в соответствии с ОФС «Давление в упаковке» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Герметичность упаковки (скорость утечки). Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение герметичности упаковки».

Испытание клапанного устройства. Испытание проводят, если применимо, на стадии технологического процесса производства.

Выход содержимого упаковки. Испытание проводят для недозированных пен лекарственных в соответствии с ОФС «Выход содержимого упаковки».

Однородность массы доз. Испытание проводят для дозированных пен лекарственных, представляющих собой растворы.

Контроль показателя должен проводиться как для доз, высвобождаемых из одной упаковки, так и для доз, полученных из разных упаковок. Процедура отбора доз должна включать в себя отбор доз в начале, в середине и в конце использования лекарственного препарата в виде пены лекарственной.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, отбор доз для испытания из 10 упаковок пен лекарственных проводят следующим образом: из трёх упаковок необходимое количество доз высвобождают в начале, из четырех упаковок – в середине, из трёх упаковок – в конце использования лекарственного препарата.

Высвобождают одну дозу и отбрасывают её. Спустя не менее 5 с встряхивают упаковку в течение 5 с, снова высвобождают и отбрасывают одну дозу. Повторяют указанную процедуру ещё 3 раза, если в фармакопейной статье не указано иначе. Взвешивают упаковку. Встряхивают упаковку в течение 5 с, высвобождают и отбрасывают одну дозу, снова взвешивают упаковку. По разности вычисляют массу высвободившейся дозы.

Испытание повторяют ещё для 9 доз, указанных в фармакопейной статье. Рассчитывают среднюю массу дозы (mср) и отклонения индивидуальных значений от средней массы дозы.

Лекарственный препарат считают выдержавшим испытание, если не более 1 из 10 индивидуальных значений масс отклоняется от средней массы на величину, превышающую 25 %, при этом не более чем на 35 %. Если 2 или 3 результата выпадают из пределов 75–125 %, испытание повторяют с 20 другими дозами. Не более 3 из 30 значений могут выходить за пределы 75 – 125 %, и все значения должны быть в пределах от 65 до 135 %.

Количество доз в упаковке. Испытание проводят для дозированных пен лекарственных в многодозовой упаковке одним из указанных методов.

Метод 1. Выпускают содержимое одной упаковки, высвобождая дозы с интервалом не менее 5 с. Регистрируют количество высвобождённых доз.

Допускается проводить испытание одновременно с определением показателя «Однородность массы доз» или показателя «Однородность дозирования».

Метод 2. Упаковку взвешивают вместе с распылителем с точностью до 0,01 г (m1). Нажимая на распылитель, из упаковки выпускают всё содержимое и снова взвешивают упаковку вместе с распылителем с точностью до 0,01 г (m2).

Среднее количество доз (nср) в одной упаковке вычисляют по формуле (1):

(1)

где mср - cредняя масса одной дозы, рассчитанная при определении показателя «Однородность массы доз», г.

Количество доз, полученное в результате испытания, должно быть не менее указанного на этикетке.

Однородность дозирования. Испытание проводят для дозированных пен лекарственных, представляющих собой эмульсии или суспензии.

Контроль показателя должен проводиться как для доз, высвобождаемых из одной упаковки, так и для доз, полученных из разных упаковок. Процедура отбора доз должна включать в себя отбор доз в начале, в середине и в конце использования лекарственного препарата.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, отбор доз для испытания из 10 упаковок пен лекарственных проводят следующим образом: из трёх упаковок необходимое количество доз высвобождают в начале, из четырёх упаковок – в середине, из трёх упаковок – в конце использования лекарственного препарата в виде пены лекарственной.

Испытание проводят с использованием аппарата или установки, способных к количественному удерживанию дозы, выпущенной из распылительного устройства. Встряхивают упаковку в течение 5 с, высвобождают и отбрасывают одну дозу. Спустя не менее 5 с снова встряхивают упаковку в течение 5 с, высвобождают и отбрасывают одну дозу. Повторяют указанную процедуру ещё 3 раза, если иначе не указано в фармакопейной статье. Через 5 с выпускают одну дозу в приёмник аппарата. Содержимое приёмника собирают путём последовательных промываний и определяют содержание действующего вещества в объединённых промывных водах.

Испытание повторяют ещё для 9 доз, указанных в фармакопейной статье. Рассчитывают среднее значение содержания действующего вещества в одной дозе лекарственного препарата и отклонения индивидуальных значений отклонений от среднего значения

Лекарственный препарат выдерживает испытание, если 9 из 10 результатов находятся в пределах от 75 до 125 % от среднего значения, а все результаты находятся в пределах от 65 до 135 %. Если 2 или 3 результата выпадают из пределов 75–125 %, испытание повторяют с 20 другими дозами. Не более 3 из 30 значений могут выходить за пределы 75–125 %, и все значения должны быть в пределах от 65 до 135 %.

Для пен лекарственных, содержащих несколько действующих веществ, испытание на однородность дозирования должно быть выполнено для каждого вещества.

Относительная плотность пены. Аэрозольный баллон выдерживают при температуре 25 °С в течение не менее 24 ч. Следят за тем, чтобы аэрозольный баллон не нагревался: устанавливают на насадку аэрозольного баллона жёсткую трубку длиной от 70 до 100 мм с внутренним диаметром отверстия около 1 мм. Аэрозольный баллон встряхивают для получения содержимого в виде однородной фазы, выпускают и отбрасывают от 5 до 10 мл пены. Взвешивают плоскодонную чашу вместимостью около 60 мл и высотой около 35 мм. Помещают конец жёсткой трубки, прикреплённой к насадке аэрозольного баллона, в угол чаши и нажимают насадку. Круговыми движениями равномерно заполняют чашу. После того, как пена полностью расширится, сглаживают её уровень, удалив излишки пены предметным стеклом. Взвешивают. Определяют массу такого же объёма воды, наполнив ту же чашу.

Относительную плотность пены (ρ) вычисляют по формуле (2):

(2)

где m - масса испытуемого образца пены лекарственной, г;
е – масса такого же объёма воды, г.

Проводят три определения и рассчитывают среднее значение. Ни одно из полученных значений не должно отклоняться от среднего значения более чем на 20 %.

Время пенообразования. Испытание проводят для пен лекарственных по методике, приведённой ниже. Прибор для определения времени пенообразования представлен на рис. 1. Прибор состоит из бюретки (1) вместимостью 50 мл, с внутренним диаметром 15 мм и ценой деления 0,1 мл, снабжённой запорным краном (2) с одним отверстием диаметром 4 мм. Отметка, соответствующая 30 мл, должна находиться на расстоянии не менее 210 мм от оси запорного крана. Нижняя часть бюретки соединена при помощи полимерной трубки (3) длиной не более 50 мм и с внутренним диаметром 4 мм с аэрозольным баллоном (4), оборудованным подходящей для данного соединения насадкой нажимного типа. Аэрозольный баллон выдерживают при температуре 25 °С в течение не менее 24 ч. Следят за тем, чтобы аэрозольный баллон не нагревался, встряхивают для получения содержимого в виде однородной фазы, выпускают и отбрасывают от 5 до 10 мл пены. Соединяют насадку аэрозольного баллона (5) и носик бюретки. Открывают запорный кран, нажимают на насадку и выпускают одну дозу пены объёмом около 30 мл, закрывают запорный кран и одновременно включают секундомер. Наблюдают за объёмом пены в бюретке, каждые 10 с отмечают увеличение пены до тех пор, пока не будет достигнут максимальный объём. Проводят три определения.

Время достижения максимального объёма в каждом определении не должно превышать 5 мин.

Рисунок 1. Прибор для определения времени пенообразования: 1 – бюретка; 2 – запорный кран; 3 – полимерная трубка; 4 – аэрозольный баллон под давлением; 5 – насадка аэрозольного баллона.

Размер частиц. Испытание проводят для пен лекарственных, представляющих собой жидкость суспензионного или комбинированного типа. Методика определения и требования к размеру частиц дисперсной фазы должны быть указаны в фармакопейной статье.

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для пен лекарственных, за исключением стерильных пен лекарственных, в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Стерильность. Испытание проводят для пен лекарственных, к которым предъявляется требование стерильности, в соответствии с ОФС «Стерильность».

###### Маркировка

В соответствии с ОФС «Маркировка лекарственных средств».

Для пен лекарственных должны быть предусмотрены предупредительные надписи: «Хранить вдали от отопительной системы и прямых солнечных лучей», «Не вскрывать», «Предохранять от падений и ударов» и, при необходимости, другие надписи.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0032 Пастилки лекарственные

Взамен ОФС.1.4.1.0032.18

Пастилки лекарственные − твёрдая дозированная лекарственная форма, представляющая собой упруго-пластичную основу с равномерно распределённым в ней действующим веществом (веществами), предназначенная для рассасывания с целью оказания местного действия в полости рта и глотке.

Пастилки лекарственные могут быть покрыты оболочкой.

###### Особенности технологии

Пастилки лекарственные производят путём формовки (отливки) пластичной массы, содержащей, как правило, ароматизированную и подслащённую основу с введённой в неё фармацевтической субстанцией (сбстанциями). В качестве основы для пастилок лекарственных используют природные высокомолекулярные соединения, или синтетические полимеры, или смолы с добавлением корригентов вкуса и запаха, пищевых красителей и других вспомогательных веществ, обеспечивающих особенность способа применения пастилок лекарственных − постепенно растворяться при рассасывании в полости рта. Вкус пастилок лекарственных обеспечивается за счёт подсластителей, сахарозаменителей и других веществ этого класса. В качестве вспомогательных веществ при производстве пастилок лекарственных используют также антимикробные консерванты (например, сорбиновую кислоту и др.), пластификаторы и др.

При производстве лекарственных препаратов в лекарственной форме «Пастилки лекарственные» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту.

###### Испытания

Пастилки лекарственные должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Описание. Пастилки лекарственные характеризуют, отмечая внешний вид (форму, поверхность и др.), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями, указанными в фармакопейной статье. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, поверхность пастилки лекарственной должна быть гладкой, однородной.

Распадаемость. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Распадаемость твёрдых лекарственных форм». При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, в качестве жидкой среды используют воду. Пастилки лекарственные должны распадаться в течение 30 мин, если в фармакопейной статье не указано иное.

Потеря в массе при высушивании или Вода. Испытание проводят в соответствии с требованиями фармакопейной статьи в тех случаях, когда содержание воды может влиять на физико-химические свойства основы (сохранение упруго-пластичных свойств), свойства действующего вещества (веществ), стабильность лекарственного препарата в лекарственной форме «Пастилки лекарственные» и т.д.

Испытание проводят в соответствии с ОФС «Потеря в массе при высушивании» или ОФС «Определение воды» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Однородность массы. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Испытание не применяют в случае, если предусмотрено испытание по показателю «Однородность дозирования» для всех действующих веществ.

Однородность дозирования. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Однородность дозирования» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, испытание проводят также как для лекарственной формы «Таблетки», нормативные требования приводят в фармакопейной статье.

Микробиологическая чистота. Испытания проводят для всех пастилок лекарственных в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0034 Пилюли

Взамен ОФС.1.4.1.0034.18

Пилюли – твёрдая дозированная лекарственная форма для приёма внутрь в виде шариков, как правило, массой от 0,1 до 0,5 г, диаметром не более 8 мм, полученных из однородной пластичной массы. Пилюли массой более 0,5 г называются болюсами.

Пилюли могут быть покрыты оболочкой.

###### Особенности технологии

Основные стадии процесса получения пилюль: подготовка и смешивание фармацевтической субстанции (субстанций) и вспомогательных веществ, получение пилюльной массы, формирование пилюль.

Пилюльная масса представляет собой однородную пластичную массу, состоящую из смеси фармацевтической субстанции (субстанций) и вспомогательных веществ. Образование упруго-пластичной пилюльной массы, необходимой для придания пилюлям надлежащей сферической формы, массы и объёма, должны обеспечивать вспомогательные вещества.

При производстве пилюль применяют различные классы вспомогательных веществ: растворители, уплотнители, пластификаторы, связующие и др. В качестве вспомогательных веществ используют воду очищенную, глицерин, сахар, крахмал, сироп сахарный, порошок солодки корней, мёд натуральный, экстракты густые (солодки корней, валерианы лекарственной корневища с корнями, одуванчика лекарственного корни) и др.

Фармацевтические субстанции вводят в пилюльную массу в зависимости от их растворимости: растворимые вещества растворяют в одном из вспомогательных веществ, разрешённом для приёма внутрь (например, вода очищенная), нерастворимые вещества тщательно растирают в мельчайший порошок с соответствующим вспомогательным веществом.

Пилюли промышленного производства могут быть покрыты оболочками из сахара или кишечнорастворимой оболочкой.

Особенности технологии изготовления лекарственных препаратов в виде пилюль в аптечных организациях, приведены в ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм». Из фармацевтических субстанций, обладающих окислительными свойствами (серебра нитрат, калия перманганат) получают пилюльную массу с добавлением вспомогательных веществ неорганической природы (глина белая, бентонит и др.). Пилюли аптечного изготовления, как правило, обсыпают порошком ликоподия, различными видами крахмала или другим вспомогательным веществом, предназначенным для этих целей, в случае пилюль с окислителями – их обсыпают глиной белой.

###### Испытания

Пилюли должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Описание. Пилюли характеризуют, отмечая внешний вид (форма, размеры, характер поверхности и др.), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Пилюли должны иметь правильную шарообразную форму, не изменяющуюся при хранении. Поверхность пилюль должна быть сухой и гладкой, в разрезе пилюли должны быть однородны. Однородность пилюль определяют визуально по отсутствию вкраплений, включений на срезе пилюли.

Распадаемость. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Распадаемость твёрдых лекарственных форм». При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, пилюли должны распадаться в течение 1 ч.

Потеря в массе при высушивании. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Потеря в массе при высушивании» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, потеря в массе при высушивании должна быть не более 10 %.

Однородность массы. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье. Испытание не применяют в случае, если предусмотрено испытание по показателю «Однородность дозирования» для всех действующих веществ.

Однородность дозирования. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Однородность дозирования» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, испытание проводят также как для лекарственной формы «Таблетки», нормативные требования приводят в фармакопейной статье.

Зола общая. Испытание проводят для пилюль, в состав которых входят экстракты густые и/или сухие в соответствии с требованиями ОФС «Зола общая» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Тяжёлые металлы. Испытание проводят для пилюль, в состав которых входят экстракты густые и/или сухие, в соответствии с методикой и нормативными требованиями, указанными в ОФС «Экстракты» (испытание «Тяжелые металлы»).

Микробиологическая чистота. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0035 Плёнки

Взамен ОФС.1.4.1.0035.18

Плёнки − твёрдая дозированная лекарственная форма, представляющая собой одно- или многослойные тонкие пластинки подходящего для применения размера, содержащие одно или несколько действующих веществ и вспомогательные, в том числе плёнкообразующие, вещества.

В зависимости от способа/пути введения и применения различают плёнки глазные и плёнки для применения в полости рта.

Плёнки глазные – стерильные плёнки, предназначенные для помещения в конъюнктивальный мешок глаза.

К плёнкам для применения в полости рта относят плёнки для наклеивания на десну, защёчные, диспергируемые в полости рта, периодонтальные, подъязычные.

Плёнки для наклеивания на десну – плёнки, предназначенные для наклеивания на десну с целью оказания местного действия.

Плёнки защёчные – плёнки, предназначенные для помещения в щёчный карман с целью оказания системного действия.

Плёнки, диспергируемые в полости рта – плёнки, предназначенные для помещения в полость рта, где они быстро диспергируются перед проглатыванием.

Плёнки периодонтальные – плёнки, предназначенные для помещения в карман между зубом и десной.

Плёнки подъязычные – плёнки, предназначенные для помещения под язык с целью оказания системного действия.

По типу высвобождения плёнки относят к лекарственным формам с модифицированным, как правило, пролонгированным высвобождением.

Плёнки могут быть произведены на основе биодеградируемых/растворимых материалов (биодеградируемые плёнки) и на основе небиодеградируемых материалов (небиодеградируемые плёнки).

###### Особенности технологии

Тонкие пластинки плёнок получают, как правило, методом выливания или экструзии.

В качестве плёнкообразующей основы (матрицы) при производстве плёнок из биодеградируемых материалов используют полимерные материалы синтетического и природного происхождения, не взаимодействующие химически и биологически с фармацевтической субстанцией (субстанциями) и обладающие склонностью к набуханию и постепенному высвобождению действующего вещества (веществ). Плёнки могут быть получены на основе пищевых полимеров, водорастворимых полимеров, сополимеров и др.

Биодеградируемые плёнки не требуют удаления из места применения при завершении лечения.

Вспомогательные вещества, используемые при получении плёнок, должны обеспечить контролируемое высвобождение действующего вещества (веществ) из полимерной основы в заданном интервале времени и другие необходимые технологические характеристики лекарственной формы.

В качестве вспомогательных веществ при производстве плёнок используют также пластификаторы, антимикробные консерванты, стабилизаторы, адгезивные (клеящие) вещества и др. При производстве плёнок, предназначенных для применения в полости рта, в качестве вспомогательных веществ используют также корригенты вкуса, ароматизаторы.

Фармацевтическая субстанция (субстанции) в основу плёнки может быть введена в виде раствора, эмульсии или суспензии.

Отдельные слои многослойных плёнок могут содержать различные концентрации и модификации действующего вещества (веществ). При получении многослойных плёнок из растворов на подложку (форму) наносят несколько слоёв с последовательным высушиванием каждого слоя.

Технология производства плёнок должна обеспечивать сохранение их целостности в процессе производства, упаковки, хранения и применения.

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственной формы «Плёнки» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту; в установленных случаях, например, при получении плёнок глазных и др., должны быть приняты меры, обеспечивающие их стерильность. Для получения стерильных плёнок могут быть использованы радиационные методы стерилизации в соответствии с ОФС «Стерилизация».

###### Испытания

Плёнки должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Плёнки глазные должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для офтальмологического применения».

Описание Плёнки характеризуют, отмечая внешний вид (форму и др.), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Размеры плёнки. Определяют геометрические размеры (длину, ширину, толщину) плёнки в миллиметрах путём измерения микрометром. Количество плёнок для испытания и допустимые отклонения размеров плёнки приводят в фармакопейной статье.

pH раствора. Испытание проводят для плёнок из биодеградируемых материалов в соответствии с ОФС «Ионометрия». Методику пробоподготовки для испытания, значение рН раствора и другие нормативные требования приводят в фармакопейной статье.

Распадаемость. Испытание проводят для плёнок из биодеградируемых материалов в соответствии с методикой определения и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье. Плёнки должны распадаться в течение времени, указанного в фармакопейной статье.

Растворение. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Растворение для твёрдых дозированных лекарственных форм» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Если в фармакопейной статье предусмотрено испытание по показателю «Растворение», то испытание по показателю «Распадаемость» допускается не проводить.

Потеря в массе при высушивании или Вода. Испытание проводят в соответствии с требованиями фармакопейной статьи в тех случаях, когда содержание воды может влиять на биодоступность действующего вещества (веществ), на стабильность лекарственного препарата в лекарственной форме «Плёнки» и т.д. Определение проводят в соответствии с ОФС «Потеря в массе при высушивании» или ОФС «Определение воды» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Однородность массы. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Испытание не применяют в случае, если предусмотрено испытание по показателю «Однородность дозирования» для всех действующих веществ.

Однородность дозирования. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Однородность дозирования» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, испытание проводят также как для лекарственной формы «Таблетки», нормативные требования приводят в фармакопейной статье.

Время растворения. Испытание проводят для плёнок глазных из биорастворимых полимеров в соответствии с требованиями фармакопейной статьи, в которой должны быть указаны: среда растворения, условия проведения испытания, количество образцов, время растворения и др. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, плёнки глазные должны раствориться в растворе натрия хлорида 0,9 % в течение 2–3 ч.

Испытание раствора, полученного при растворении плёнок глазных из биорастворимых полимеров: испытания раствора проводят по показателям: «Прозрачность раствора», «Цветность раствора», «рН раствора», «Видимые механические включения» в соответствии с ОФС: ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей», ОФС «Степень окраски жидкостей», ОФС «Ионометрия», ОФС «Видимые механические включения в лекарственных препаратах для парентерального применения и глазных лекарственных формах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейных статьях.

Микробиологическая чистота. Испытания проводят для всех плёнок, за исключением стерильных, в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Стерильность. Испытание проводят для плёнок, к которым предъявляется требование стерильности, в соответствии с ОФС «Стерильность».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0036 Плитки

Взамен ОФС.1.4.1.0036.18

Плитки − твёрдая лекарственная форма, представляющая собой пластичную массу с равномерно распределённым в ней действующим веществом (веществами), имеющая форму плитки определённого размера и предназначенная для приёма внутрь целиком или частями.

Плитка может быть целой или поделённой на равные части (доли) с помощью нанесённых на её поверхность рисок.

###### Особенности технологии

Лекарственные препараты в виде лекарственной формы «Плитки» производят методом формования из пластичной массы, представляющей собой основу, в которую предварительно вводят фармацевтическую субстанцию (субстанции) и вспомогательные вещества.

Для производства пластичной основы плиток используют сахарный сироп, крахмальную патоку, молоко сгущённое с сахаром, альбумин пищевой и другие подходящие для этих целей вспомогательные вещества. Как правило, сначала получают молочно-сахарный сироп, затем в него вводят фармацевтическую субстанцию (субстанции), вспомогательные вещества и из полученной массы формируют плитки.

При производстве лекарственных препаратов в лекарственной форме «Плитки» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту.

###### Испытания

Плитки должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Описание. Плитки характеризуют, отмечая внешний вид (форму размеры и др.), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями, указанными в фармакопейной статье. Если необходимо, приводят описание плитки на поперечном разрезе или изломе. Если плитка поделена на доли, указывают их количество.

Потеря в массе при высушивании. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Потеря в массе при высушивании». При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, потеря в массе при высушивании должна составлять не более 8,0 %.

Средняя масса и отклонения от средней массы. Испытание проводят на 10 плитках. Каждую плитку взвешивают с точностью до 0,1 г и рассчитывают среднюю массу и отклонения от средней массы каждой плитки. Нормативные требования приводят в фармакопейной статье.

Микробиологическая чистота. Испытания проводят для всех плиток в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0037 Резинки жевательные лекарственные

Взамен ОФС.1.4.1.0037.18

Резинки жевательные лекарственные − твёрдая дозированная лекарственная форма «резиноподобной» консистенции, предназначенная для жевания в течение определённого периода времени без последующего проглатывания с целью оказания местного действия в полости рта и глотке или системного действия.

Резинки жевательные лекарственные могут содержать одно или несколько действующих веществ.

Резинки жевательные лекарственные могут быть покрыты оболочкой.

###### Особенности технологии

Резинки жевательные лекарственные могут быть получены методом прессования порошка жевательной основы или методом плавления жевательной основы жевательных резинок с последующим внесением в основу фармацевтической субстанции (субстанций) и вспомогательных веществ и приданием полученной смеси необходимой формы. В установленных случаях резинки жевательные лекарственные покрывают оболочкой, например, для защиты от света и влаги.

Жевательная основа резинок жевательных лекарственных состоит преимущественно из синтетических полимеров с добавлением воска, смол и кальция карбоната. В качестве вспомогательных веществ в жевательную основу добавляют пластификаторы, корригенты вкуса, подсластители, ароматизаторы, антимикробные консерванты, красители и др.

При получении лекарственных препаратов в лекарственной форме «Резинки жевательные лекарственные» должны быть приняты меры, обеспечивающие их необходимую микробиологическую чистоту.

###### Испытания

Резинки жевательные лекарственные должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Описание. Резинки жевательные лекарственные характеризуют, отмечая внешний вид (форму, размеры в миллиметрах и др.), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи. В случае покрытия резинок жевательных лекарственных оболочкой, указывают её наличие и характер.

Растворение. Испытание проводят на стадии фармацевтической разработки и технологического процесса производства резинок жевательных лекарственных в соответствии с ОФС «Растворение для резинок жевательных лекарственных».

Потеря в массе при высушивании или Вода. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Потеря в массе при высушивании» или ОФС «Определение воды» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, потеря в массе при высушивании или содержание воды должно составлять не более 7,0 %.

Однородность массы. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье. Испытание не применяют в случае, если предусмотрено испытание по показателю «Однородность дозирования» для всех действующих веществ.

Однородность дозирования. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Однородность дозирования» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, испытание проводят также как для лекарственной формы «Таблетки», нормативные требования приводят в фармакопейной статье.

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для всех резинок жевательных лекарственных в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

###### Упаковка

В соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств».

###### Маркировка

В соответствии с ОФС «Маркировка лекарственных средств».

###### Хранение

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственных средств».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0038 Системы терапевтические

Взамен ОФС.1.4.1.0038.18

Системы терапевтические – лекарственная форма, представляющая собой систему доставки и специфического высвобождения действующего вещества (веществ) в течение определённого, как правило, продолжительного периода времени. Высвобождение действующего вещества (веществ) из системы терапевтической осуществляется запрограммированным образом.

Термин «система терапевтическая» для обозначения лекарственной формы рекомендуется использовать только в том случае, если для обозначения лекарственной формы с действием, аналогичным системам терапевтическим, не применимы другие, более подходящие термины, например, плёнки, имплантаты, пластыри трансдермальные и др.

Для правильного использования лекарственной формы в названии системы терапевтической обязательно должен быть указан способ/путь введения и применения.

Система вагинальная терапевтическая – система, предназначенная для введения и высвобождения действующего вещества во влагалище.

Система внутриматочная терапевтическая – система, предназначенная для введения и высвобождения действующего вещества в полости матки.

Различают системы терапевтические, оказывающие общее (системное) действие на организм человека, и системы терапевтические с направленной доставкой действующего вещества (веществ) к заданному органу (ткани) – мишени.

Система терапевтическая может иметь устройство доставки. Если в маркировке системы терапевтической не указано иное, то устройство доставки должно быть удалено после использования.

Обозначение дозировки действующего вещества (веществ) в системе терапевтической может быть указано как количество действующего вещества (веществ), высвобождаемого из лекарственной формы за определённый период времени, например, 20 мкг/24 часа, или как концентрация в названии лекарственного препарата, например, в процентах.

###### Особенности технологии

Основными компонентами систем терапевтических являются резервуар для лекарственного препарата и мембрана (мембраны), обеспечивающая, в том числе, запрограммированную (контролируемую) скорость высвобождения действующего вещества (веществ) в течение определённого времени. Устройства доставки лекарственной формы к месту применения могут иметь различную форму, определяющую внешний вид системы.

При производстве систем терапевтических в качестве вспомогательных веществ используют биосовместимые полимерные материалы, в которые вводят фармацевтическую субстанцию (субстанции). Введение в лекарственную форму фармацевтической субстанции на полимерном носителе при применении лекарственного препарата должно обеспечить пролонгирование его действия, контролируемое высвобождение действующего вещества из полимерной основы в заданном интервале времени и другие необходимые биофармацевтические параметры. Фармацевтические субстанции, вспомогательные вещества, устройство доставки, материал упаковки должны быть совместимы между собой и с другими компонентами (при наличии) лекарственного препарата.

В качестве полимерного материала-носителя используют, например, полидиметилсилоксановый эластомер и др. Вспомогательные вещества могут также включать различные клеи, усилители проницаемости мембраны, контролирующие или не контролирующие скорость высвобождения действующего вещества, солюбилизаторы, пластификаторы, смягчители и др.

При получении лекарственных препаратов в лекарственных формах «Системы терапевтические» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту; в установленных случаях должны быть приняты меры, обеспечивающие их стерильность. При получении стерильных систем терапевтических используют методы стерилизации в соответствии с ОФС «Стерилизация».

###### Испытания

Системы терапевтические должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Описание. Системы терапевтические характеризуют, отмечая внешний вид системы терапевтической, включая описание устройства доставки, в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Растворение. Испытание проводят в соответствии с методикой и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье. Определяют количество действующего вещества, которое должно высвободиться из системы терапевтической в среду растворения за определённый промежуток времени.

Однородность дозирования. Испытание проводят, если указано в фармакопейной статье, в соответствии с ОФС «Однородность дозирования». Методику и нормативные требования приводят в фармакопейной статье.

Прочность. Испытание проводят, если указано в фармакопейной статье. Методику и нормативные требования приводят в фармакопейной статье.

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для всех систем терапевтических, за исключением стерильных, в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Стерильность. Испытания проводят для стерильных систем терапевтических в соответствии с ОФС «Стерильность».

###### Упаковка

В соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств».

Каждую систему терапевтическую упаковывают герметично в индивидуальную первичную упаковку, обеспечивающую в установленных случаях её стерильность.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0039 Соки

Взамен ОФС.1.4.1.0039.18

Соки − жидкая лекарственная форма, представляющая собой выжатый сок, полученный из свежего лекарственного растительного сырья с добавлением фармацевтических субстанций и (или) вспомогательных веществ.

Соки подразделяют на простые, полученные из одного вида лекарственного растительного сырья, и сложные (комплексные), полученные из смеси двух и более видов лекарственного растительного сырья.

В зависимости от способа/пути введения и применения различают соки для приёма внутрь, для наружного применения, для местного применения.

Кроме того, соки могут быть использованы в качестве фармацевтических субстанций в составе других лекарственных препаратов, представляющих собой, например, жидкие лекарственные формы, включая капли для приёма внутрь, а также мази, таблетки и др.

###### Особенности технологии

Для получения соков используют свежее лекарственное растительное сырьё, как правило, с высоким содержанием воды. Качество используемого свежего лекарственного растительного сырья должно отвечать требованиям соответствующей фармакопейной статьи.

Соки получают методом прессования предварительно измельчённого свежего лекарственного растительного сырья. Для повышения выхода сока применяют повторное измельчение и прессование сырья, предварительную мацерацию измельченного лекарственного растительного сырья соответствующими экстрагентами перед прессованием, а также другие подходящие методы.

Полученную жидкость – выжатый сок, обрабатывают с использованием методов, обеспечивающих удаление балластных веществ: с добавлением спирта этилового, нагреванием при определённой температуре или другими методами.

После обработки сок подвергают очистке, выдерживая при определённой температуре в течение установленного времени для осаждения оставшихся балластных веществ, которые затем отделяют фильтрованием или центрифугированием.

В качестве вспомогательных веществ могут быть использованы антимикробные консерванты, стабилизаторы, антиоксиданты и другие вещества.

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственной формы «Соки», должны быть приняты меры, обеспечивающие необходимую микробиологическую чистоту; в установленных случаях, например, при получении стерильных соков, предназначенных для нанесения на раны, должны быть приняты меры, обеспечивающие стерильность. При получении стерильных соков применяют методы стерилизации в соответствии с ОФС «Стерилизация».

Соки могут быть выпущены в однодозовой и многодозовой упаковке.

###### Испытания

Соки должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Описание. Соки характеризуют, отмечая внешний вид (прозрачность, опалесценцию, осадок, др.), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Соки, как правило, представляют собой прозрачную жидкость или жидкость с опалесценцией или взвесью. В ряде случаев, особенно в процессе хранения, возможно образование незначительного осадка.

Плотность. Испытание проводят, если указано в фармакопейной статье, в соответствии с требованиями ОФС «Плотность» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Спирт этиловый. Испытание проводят для соков, при производстве которых используют спирт этиловый, в соответствии с ОФС «Определение спирта этилового в лекарственных средствах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Сухой остаток. Испытание проводят по следующей методике. В предварительно высушенный при температуре 100–105 °С до постоянной массы бюкс помещают 5,0 мл сока, выпаривают на водяной бане досуха, сушат в сушильном шкафу в течение 3 ч при температуре 100–105 °С, охлаждают в эксикаторе (над безводным силикагелем, кальция хлоридом безводным или другим подходящим осушителем) в течение 30 мин и взвешивают. Результат выражают в массо-объёмных процентах. Содержание сухого остатка должно соответствовать требованиям, указанным в фармакопейной статье.

pH. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Ионометрия» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Тяжёлые металлы. Испытание проводят по следующей методике. В фарфоровую чашку помещают 1,0 мл сока, прибавляют 1 мл серной кислоты концентрированной, осторожно сжигают и прокаливают при температуре 600 °С. К полученному остатку прибавляют при нагревании 5 мл аммония ацетата насыщенного раствора, фильтруют через беззольный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл, промывают фильтр 5 мл воды и доводят объём фильтрата водой до метки.

12 мл полученного раствора должны выдерживать испытания на тяжёлые металлы в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы», метод 4.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, содержание тяжёлых металлов должно быть не более 0,01 %.

Извлекаемый объём. Испытание проводят для соков, предназначенных для приёма внутрь, в соответствии с ОФС «Извлекаемый объём».

Масса (объём) содержимого упаковки. Испытание проводят для всех соков, за исключением соков для приёма внутрь, в соответствии с ОФС «Масса (объем) содержимого упаковки».

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для всех соков, за исключением стерильных, в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Стерильность. Испытание проводят для соков, к которым предъявляется требование стерильности, в соответствии с ОФС «Стерильность».

###### Маркировка

В соответствии с требованиями ОФС «Маркировка лекарственных средств».

Для соков, в которых возможно образование опалесценции или незначительного осадка (при хранении), должна быть предусмотрена предупредительная надпись «Перед употреблением взбалтывать».

Для стерильных лекарственных форм приводят указание о стерильности лекарственного препарата.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0040 Тампоны лекарственные

Взамен ОФС.1.4.1.0040.18

Тампоны лекарственные − лекарственная форма, предназначенная для введения в естественные отверстия тела на ограниченный период времени, состоящая из мягкого волокнистого материала, пропитанного фармацевтической субстанцией (субстанциями) с добавлением или без добавления вспомогательных веществ.

В зависимости от способа/пути введения и применения различают следующие виды тампонов лекарственных:

- тампоны лекарственные вагинальные − тампоны лекарственные, предназначенные для введения во влагалище;

- тампоны лекарственные ректальные − тампоны лекарственные, предназначенные для введения в прямую кишку;

- тампоны лекарственные ушные − тампоны лекарственные, предназначенные для введения в наружный слуховой проход;

- тампоны лекарственные для ингаляций − тампоны лекарственные, как правило, помещаемые в соответствующие аппликаторы цилиндрической формы с закруглённым концом и отверстием, предназначенные для ингаляций через носовые ходы.

Тампоны лекарственные вагинальные и тампоны лекарственные ушные предназначены для оказания местного действия, тампоны лекарственные ректальные и тампоны лекарственные для ингаляций – для оказания системного действия.

###### Особенности технологии

Тампоны лекарственные производят из тканных и нетканных природных и синтетических гипоаллергенных материалов (например, производных целлюлозы, коллагена, силикона и др.), которым придают необходимую форму и размер и пропитывают композицией фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ.

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственной формы «Тампоны лекарственные» должны быть приняты меры по обеспечению их необходимой микробиологической чистоты.

Тампоны лекарственные могут быть выпущены в однодозовой и многодозовой упаковке.

###### Испытания

Тампоны лекарственные, помещённые в аппликатор, должны быть извлечены из аппликатора перед проведением испытаний.

Тампоны лекарственные должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Описание. Тампоны лекарственные характеризуют, отмечая внешний вид (форму, геометрические размеры в миллиметрах), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

рН водного извлечения. Испытание проводят потенциометрически в соответствии с ОФС «Ионометрия». Значение рН должно находиться в диапазоне значений, приемлемых для обозначенного способа/пути введения и применения лекарственного препарата в лекарственной форме «Тампоны лекарственные». Методику пробоподготовки образца лекарственного препарата для проведения испытания и нормативные требования приводят в фармакопейной статье.

Испытание не применяют для тампонов лекарственных для ингаляций.

Однородность массы. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье. Испытание не применяют, если предусмотрено испытание по показателю «Однородность дозирования» для всех действующих веществ.

Однородность дозирования. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Однородность дозирования» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Микробиологическая чистота. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

###### Упаковка

В соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств».

Как правило, каждый тампон лекарственный упаковывают в индивидуальную первичную упаковку из полимерных материалов.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0041 Шампуни лекарственные

Взамен ОФС.1.4.1.0041.18

Шампуни лекарственные − жидкая или мягкая, легко вспениваемая лекарственная форма, содержащая действующие и вспомогательные вещества, в том числе, поверхностно-активные вещества, предназначенная для наружного применения путем нанесения на волосы и кожу головы и последующего смывания водой.

Шампуни лекарственные по типу дисперсной системы могут быть гомогенными (растворы), гетерогенными (суспензии, эмульсии) и комбинированными.

###### Особенности технологии

Шампуни лекарственные получают, как правило, растворением фармацевтической субстанции (субстанций) в воде очищенной с добавлением поверхностно-активных и других вспомогательных веществ: загустителей, стабилизаторов, антимикробных консервантов, регуляторов рН, ароматизаторов, красителей, кондиционирующих веществ и др.

При производстве шампуней лекарственных в качестве сорастворителя воды очищенной и (или) солюбилизатора может быть также использован спирт этиловый; в качестве поверхностно-активных веществ наиболее часто применяют натрия лаурилсульфат, натрия лауретсульфат и их смеси с моноэтаноламидом и диэтаноламидом и др., в качестве загустителей − производные полиэтиленгликоля (макрогола), пропиленгликоль и др.

Если фармацевтическая субстанция (субстанции) не растворяется в воде очищенной, то её вводят в шампуни лекарственные в виде суспензии или эмульсии.

При производстве шампуней лекарственных суспензионного и комбинированного типа, должны быть приняты меры, обеспечивающие необходимый размер частиц дисперсной фазы.

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственных форм «Шампуни лекарственные» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту.

Шампуни лекарственные могут быть выпущены в однодозовых и многодозовых упаковках.

###### Испытания

Шампуни лекарственные должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Описание. Шампуни характеризуют, отмечая внешний вид (агрегатное состояние, консистенцию), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

рН. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Ионометрия». При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, значение рН должно находиться в диапазоне от 5,0 до 8,0.

Вязкость. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Вязкость» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Плотность. Испытание проводят одним из методов в соответствии с в ОФС «Плотность» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Испытание не является обязательным, если предусмотрено проведение испытания по показателю «Вязкость».

Пенообразующая способность. Испытание допускается проводить на стадии технологического процесса производства шампуней лекарственных в соответствии с указанным методом определения. Нормативные требования по пенообразующей способности и устойчивости пены приводят в фармакопейной статье.

Рисунок 1. Устройство и размеры составных частей прибора Росс-Майлса. Размеры указаны в миллиметрах. 1 - термостат, 2 - насос, 3 - водяная рубашка, 4 - мерный цилиндр, 5 - стеклянная пипетка, 6 - штатив. | Рисунок 2. Стеклянная пипетка. Размеры указаны в миллиметрах.

Определение проводят на приборе Росс-Майлса (рис. 1) или аналогичном приборе. Прибор Росс-Майлса закреплён на штативе (6), состоит из мерного цилиндра с ценой деления 2 мм (4), помещенного в водяную рубашку (3), снабженную двумя выводами для соединения с термостатом (1) и пипетки, соединённой с калиброванной трубкой. Цилиндр сверху закрыт пробкой, которая имеет два отверстия: одно для ввода наконечника стеклянной пипетки (5), второе – для отвода воздуха. Стеклянная пипетка (рис. 2) соединена с калиброванной трубкой из стекла или нержавеющей стали.

Измерение проводят при температуре 37±2 °С водного раствора, содержащего 0,5 % шампуня лекарственного.

Для проведения испытания отбирают не менее 3 образцов шампуня лекарственного, содержимое которых соединяют вместе, тщательно перемешивают и сокращают до средней пробы массой не менее 500 г.

Испытуемый раствор. В химический стакан помещают 5,00 г средней пробы образца шампуня лекарственного, растворяют в 50-60 мл воды c заданной жесткостью и перемешивают до полного растворения; в случае шампуней суспензионного и комбинированного типа − до полного ресуспендирования. Полученный раствор помещают в мерную колбу вместимостью 1000 мл, доводят объем раствора до метки водой с заданной жесткостью и перемешивают, избегая пенообразования.

Испытуемый раствор готовят не позднее, чем за 30 мин, и не ранее, чем за 2 ч до испытания. Приготовление испытуемого раствора проводят при температуре испытания с допустимым отклонением ±2 °С.

Приготовление воды с заданной жесткостью. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 8,5 мл кальция хлорида тетрагидрата раствора 4 % в воде очищенной, прибавляют 450 мл воды очищенной, перемешивают, прибавляют 1,5 мл магния сульфата гептагидрата раствора 4,4 % в воде очищенной, доводят объём раствора тем же растворителем до метки и перемешивают.

Проведение испытания. Подготавливают для испытания прибор Росс-Майлса или аналогичный, доводя до температуры 37±2 °С жидкость в рубашке с помощью термостата. Одновременно 300 мл испытуемого раствора доводят до температуры 37±2 °С. Из этого количества отбирают 50 мл испытуемого раствора, наливают в мерный цилиндр с внутренним диаметром 50 мм по стенке так, чтобы не образовалась пена. Через 10 мин с помощью резиновой груши вводят в пипетку 200 мл испытуемого раствора таким образом, чтобы не образовалась пена. Пипетку с раствором закрепляют в штативе так, чтобы её выходное отверстие находилось на расстоянии 900 мм от уровня жидкости в цилиндре и обеспечивало попадание струи в центр жидкости. Открывают кран пипетки. По истечении раствора из пипетки включают секундомер и через 30 с измеряют высоту образовавшегося столба пены в миллиметрах (Н0изм); через 5 мин снова измеряют высоту образовавшегося столба пены в миллиметрах (Н5изм).

Если уровень столба пены имеет неровную поверхность, то за высоту столба пены принимают среднее арифметическое замеров максимальной и минимальной высоты пены.

Перед каждым новым определением мерный цилиндр промывают водой очищенной.

Разница между внутренним диаметром мерного цилиндра отдельных приборов оказывает влияние на высоту образовавшегося столба пены, поэтому для каждого прибора необходимо установить поправочный коэффициент, при помощи которого пересчитывают все полученные при измерениях значения на значения, отвечающие высоте столба пены, точно измеренной прибором с внутренним диаметром цилиндра 50 мм. Поправочный коэффициент (K) вычисляют по формуле (1):

(1)

где D – фактический внутренний диаметр цилиндра испытуемого прибора, мм;
2500 – внутренний диаметр цилиндра стандартного прибора в квадрате (502),мм2.

Пенообразующую способность (H0) в миллиметрах вычисляют по формуле (2):

(2)

где H0изм – начальная высота столба пены, измеренная данным прибором, мм;
К – поправочный коэффициент.

Пенообразующую способность (H5) в миллиметрах вычисляют по формуле (3):

(3)

где H5изм – высота столба пены по истечении 5 мин, измеренная данным прибором, мм;
К – поправочный коэффициент.

Устойчивость пены (У) вычисляют по формуле (4):

(4)

где H0 – скорректированная высота столба пены (начальная),мм;
H5 – скорректированная высота столба пены по истечении 5 мин, мм.

Пенообразующую способность определяют по высоте столба пены в миллиметрах, измеренной через 30 с, а устойчивость пены определяют по высоте столба пены, измеренной через 5 мин.

За окончательный результат испытаний принимают среднее арифметическое результатов трех определений, допустимые расхождения между которыми не должны превышать 10 мм.

Седиментационная устойчивость. Испытание проводят для шампуней лекарственных суспензионного и комбинированного типа в соответствии с ОФС «Седиментационная устойчивость». При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, время ресуспендирования должно составлять не более 30 с.

Масса (объем) содержимого упаковки. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Масса (объем) содержимого упаковки».

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для всех шампуней лекарственных в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

###### Маркировка

В соответствии с ОФС «Маркировка лекарственных средств».

Для шампуней суспензионного или комбинированного типа должна быть предусмотрена предупредительная надпись «Перед употреблением взбалтывать».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0042 Эликсиры

Взамен ОФС.1.4.1.0042.15

Эликсиры – жидкая лекарственная форма, предназначенная для приёма внутрь, представляющая собой спирто-водные извлечения из одного или нескольких видов лекарственного растительного сырья и (или) смесь настоек и (или) экстрактов, с добавлением вспомогательных веществ (в том числе корригентов вкуса, запаха и цвета, антимикробных консервантов), а также с добавлением или без добавления других фармацевтических субстанций.

###### Особенности технологии

Эликсиры могут быть получены двумя способами. Один из них представляет собой экстракцию одного или нескольких видов лекарственного растительного сырья спиртом этиловым определённой концентрации. Другой способ состоит в смешивании предварительно полученных спирто-водных извлечений из лекарственного растительного сырья, как правило, представляющих собой настойки и (или) экстракты. Оба способа получения эликсиров предполагают добавление вспомогательных веществ и, при необходимости, фармацевтических субстанций, к полученному спирто-водному извлечению.

Обязательными компонентами эликсиров являются такие вспомогательные вещества, как корригенты вкуса, ароматизаторы и антимикробные консерванты. В качестве корригентов вкуса и ароматизаторов в эликсиры могут быть добавлены сахара и (или) сахарный колер и (или) мёд, сок; в качестве антимикробных консервантов используют метилпарагидроксибензоат, пропилпарагидроксибензоат, а также другие корригенты вкуса, ароматизаторы, антимикробные консерванты и необходимые вспомогательные вещества.

При технологическом процессе производства эликсиров проводят испытание на содержание метанола и 2-пропанола в соответствии с ОФС «Метанол и 2-пропанол». При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, содержание метанола должно быть не более 0,05 %, содержание 2-пропанола − не более 0,05 %.

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственной формы «Эликсиры» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту.

###### Испытания

Эликсиры должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Описание. Эликсиры характеризуют, отмечая внешний вид (прозрачность, опалесценцию, осадок и др.), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Эликсиры, как правило, представляют собой жидкость, имеющую характерный цвет и запах. Допускается наличие опалесценции; в ряде случаев, особенно в процессе хранения, возможно образование незначительного осадка.

Плотность. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Плотность» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Спирт этиловый. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение спирта этилового в лекарственных средствах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

pH. Испытание проводят, если указано в фармакопейной статье, в соответствии с ОФС «Ионометрия». Значение рН приводят в фармакопейной статье.

Тяжёлые металлы. Испытание проводят для эликсиров, в состав которых входят спирто-водные извлечения, полученные экстракцией одного или нескольких видов лекарственного растительного сырья спиртом этиловым. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, испытание проводят по следующей методике.

В фарфоровую чашку помещают 10 мл эликсира и выпаривают досуха на водяной бане, прибавляют 1 мл серной кислоты концентрированной, осторожно сжигают и прокаливают при температуре 600 °С. К полученному остатку прибавляют при нагревании 5 мл аммония ацетата насыщенного раствора, фильтруют через беззольный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл, промывают фильтр 5 мл воды и доводят объём фильтрата водой до метки.

12 мл полученного раствора должны выдерживать испытания на тяжёлые металлы в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы», метод 4.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, содержание тяжёлых металлов должно быть не более 0,001 %.

Извлекаемый объём. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Извлекаемый объём».

Однородность массы (объёма) доз. Испытание проводят для эликсиров, выпускаемых в многодозовой упаковке, снабжённой устройством для дозирования, в соответствии с ОФС «Однородность массы (объёма) доз, отобранных из многодозовой упаковки».

Микробиологическая чистота. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

###### Упаковка

В соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств».

Многодозовая упаковка эликсиров может должна быть снабжена средством дозирования, представляющим собой мерную ложку, мерный стаканчик, мерный колпачок, шприцевой дозатор и др., для отмеривания предписанной дозы лекарственного препарата.

###### Маркировка

В соответствии с ОФС «Маркировка лекарственных средств».

Для эликсиров, в которых возможно образование опалесценции или незначительного осадка, должна быть предусмотрена предупредительная надпись «Перед употреблением взбалтывать».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0043 Выбор лекарственных форм для детей

Вводится впервые

В настоящей общей фармакопейной статье приведена информация о лекарственных формах, в виде которых могут быть произведены или изготовлены лекарственные препараты, предназначенные для применения в педиатрической практике.

Информация может быть использована при фармацевтической разработке лекарственных препаратов для детей, при необходимости применения в педиатрической практике лекарственных препаратов, предназначенных для взрослых и др.

Общая характеристика и требования к лекарственным формам, в виде которых выпускаются лекарственные препараты, приведены в ОФС «Лекарственные формы».

###### Общие положения

Лекарственные препараты, предназначенные для применения в педиатрической практике, представляют собой лекарственные препараты, имеющие дозировку действующего вещества (веществ), соответствующую определённой возрастной группе или группам детей, выпускаемые в лекарственных формах, обеспечивающих эффективность, безопасность, удобство применения лекарственного препарата для детей.

Лекарственная форма для детей – состояние лекарственного препарата, предназначенного для применения в педиатрической практике, соответствующее способам/путям его введения и применения, обеспечивающее достижение необходимого лечебного эффекта по отношению ко всем возрастных группам детей или к определённой возрастной группе детей.

Лекарственные препараты для детей могут быть:

- произведены организациями-производителями лекарственных средств и зарегистрированы в установленном порядке;

- изготовлены аптечными организациями, имеющими лицензию на фармацевтическую деятельность, по рецептам на лекарственные препараты и требованиям медицинских организаций.

Требования к лекарственным препаратам аптечного изготовления для детей приведены в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления для детей». В этой общей фармакопейной статье указаны правила изготовления, внутриаптечного контроля, отпуска лекарственных препаратов в виде растворов, порошков, мазей и других лекарственных форм, предназначенных для применения в педиатрической практике, с учётом особых требований, предъявляемых к возрастной группе пациентов – для новорождённых детей и детей до 1 года.

Зарегистрированные лекарственные препараты промышленного производства с маркировкой «для детей» или указанием возраста ребёнка, выпускают в виде изученных лекарственных форм, позволяющих безопасно и точно применять/вводить лекарственный препарат, что повышает степень соблюдения режима лечения, минимально воздействуют на физиологические процессы приёма лекарственного препарата ребёнком, а также снижает риск ошибок дозирования.

Особенности физиологических, метаболических и психологических процессов, характеризующие развитие детей от рождения до достижения взрослого возраста, свидетельствуют о том, что детей нельзя рассматривать в качестве маленьких взрослых, а также в качестве однородной группы. Анатомические и физиологические различия, наблюдаемые у детей и взрослых, могут значительно изменять фармакокинетический профиль как лекарственных препаратов, так и вспомогательных веществ, что во многом предопределяет выбор лекарственной формы в педиатрической практике.

Дети различных возрастных групп отличаются в отношении пригодности различных лекарственных форм и их предпочтения. Возраст ребёнка, его индивидуальное состояние здоровья, поведение, наличие или отсутствие инвалидности, наследственность и культурная среда, в которой находится ребёнок в настоящее время, рассматривают в качестве наиболее вероятных факторов, определяющих приемлемость лекарственной формы лекарственного препарата для ребёнка и её предпочтение.

Приемлемая лекарственная форма лекарственного препарата для детей должна обеспечить способность и готовность пациента к его применению, облегчить введение повторных доз препарата, а лицам, обеспечивающим уход за пациентом, – способность к оказанию помощи при приёме/введении лекарственного препарата.

Для определения подходов к выбору лекарственной формы для той или иной возрастной группы детей учитывают, как правило, следующие возрастные группы, основанные на периодах развития детей:

- новорождённые дети (от 0 до 28 дней);

- дети грудного возраста (от 28 дней до 1 года);

- дети младшего возраста (1–3 года),

- дети дошкольного возраста (3–6(7) лет),

- дети младшего школьного возраста (6(7)–11(12) лет);

- подростки (12–16 (17–18) лет).

Вместе с тем, многие лекарственные препараты, рекомендуемые для лечения пациентов детской возрастной группы, не доступны в виде лекарственных форм, подходящих для детей, что приводит к тому, что в педиатрической практике часто применяют лекарственные препараты в лекарственных формах, предназначенных для взрослых, путём дополнительных преобразований имеющейся лекарственной формы в состояние, удобное для приёма детьми.

Совокупность операций перед применением/введением лекарственного препарата пациенту, проводимых с целью его доставки пациенту на основе альтернативной стратегии (например, путём улучшения доступности лекарственного препарата для детей или коррекции дозы и др.), называют модификацией лекарственной формы.

###### Особенности технологии

При производстве и изготовлении лекарственных препаратов в виде лекарственных форм для детей необходимо учитывать совокупность элементов лекарственного препарата, которые позволяют использовать его для целевой возрастной группы/групп детей. К таким элементам относят возраст ребёнка, состав действующих и вспомогательных веществ, вид лекарственной формы и её основные классификационные признаки (способ/путь введения и применения, агрегатное состояние, тип высвобождения и др.), частоту дозирования, систему упаковки/укупорки, включая элементы дозирования, инструкцию по медицинскому применению лекарственного препарата. При производстве и изготовлении лекарственных препаратов для детей необходима корректировка доз, а также корректировка массы или объёма лекарственной формы в зависимости от возраста и веса ребёнка.

Вспомогательные вещества

Вспомогательные вещества, вводимые в состав лекарственных препаратов для обеспечения соответствующих свойств лекарственной формы, должны быть разрешены для медицинского применения. Номенклатура и объёмы вспомогательных веществ, используемых при производстве лекарственных препаратов для детей, должны быть минимальными для создания лекарственных форм с надлежащими характеристиками эффективности, стабильности, микробиологической чистоты, однородности дозирования и вкусовыми качествами, которые в целом должны гарантировать качество лекарственного препарата в выбранной лекарственной форме.

Функциональная характеристика вспомогательных веществ, предназначенных для получения лекарственных препаратов, приведена в ОФС «Вспомогательные вещества». Необходимо учитывать, что одни и те же вспомогательные вещества, не вызывающие побочных эффектов при наличии их в лекарственных препаратах, принимаемых взрослыми, могут привести к нежелательным реакциям у детей различных возрастных групп при содержании их в лекарственных препаратах для детей.

Токсичность вспомогательных веществ для новорождённых и грудных детей можно объяснить особенностями физиологии и метаболизма в этой возрастной группе. Поэтому в лекарственных формах, предназначенных для новорождённых и детей до 1 года, следует избегать использования антимикробных консервантов, химических стабилизаторов, спирта этилового.

Перечень вспомогательных веществ, приведённых в настоящей общей фармакопейной статье, не является исчерпывающим, но даёт представление о проблемах, которые с наибольшей вероятностью относятся к детям различных возрастных групп.

Антимикробные консерванты. Добавление антимикробных консервантов может быть востребовано при производстве лекарственных препаратов для детей в виде многодозовых жидких лекарственных форм для приёма внутрь, некоторых мягких лекарственных форм, растворов для парентерального применения. Необходимость использования антимикробных консервантов и их эффективность при разработке лекарственных препаратов в различных лекарственных формах для детей должны быть подтверждены в соответствии с ОФС «Определение эффективности антимикробных консервантов» для детей целевой (возрастной) группы. Концентрация антимикробных консервантов должна быть минимальной для обеспечения удовлетворительного антимикробного действия лекарственной формы для детей.

Бензиловый спирт часто используют в качестве антимикробного консерванта для лекарственных препаратов для инъекций. При разработке лекарственных препаратов для парентерального применения, предназначенных для применения у детей в возрасте до 3 лет, необходимость введения бензилового спирта необходимо тщательно оценивать и, по возможности, избегать его использования.

Бензойная кислота, натрия бензоат и калия бензоат при введении в лекарственные формы для парентерального применения могут увеличить риск развития желтухи новорождённых.

Растворители. Предпочтительным растворителем для жидких лекарственных форм для детей является вода. Для повышения растворимости некоторых веществ могут быть использованы сорастворители или неионогенные поверхностно-активные вещества. Риски, связанные с применением вспомогательных веществ, повышающих растворимость, выше в случае добавления их в лекарственные формы для парентерального применения по отношению к лекарственным формам для приёма внутрь.

Спирт этиловый, используемый в качестве растворителя, особенно в больших количествах, не должен попадать в организм детей через лекарственные формы без чёткого подтверждения его пользы для получения лекарственной формы. В различных возрастных группах детей возможно возникновение серьёзных острых и хронических проблем, связанных с применением лекарственных препаратов, содержащих спирт этиловый, таких как, острая интоксикация при случайной передозировке и хроническая токсичность, связанная с повседневным использованием препаратов при хронических заболеваниях. Спирт этиловый может стать причиной потенциально опасного фармакокинетического межлекарственного взаимодействия. Дети, особенно в возрасте до 6 лет, более подвержены воздействию спирта этилового. Негативные воздействия спирта этилового на центральную нервную систему у детей наблюдается уже при концентрации вещества в крови на уровне 10 мг/100 мл. Длительное воздействие спирта этилового (более 1 недели), связанное с применением лекарственных препаратов даже в малых дозах, как правило, противопоказано для детей младше 6 лет, и должно ограничиваться 2-мя неделями для детей старше 6 лет в случае отсутствия подтверждения положительного соотношения риска и пользы.

Лекарственные препараты, в состав которых входит пропиленгликоль в качестве растворителя, не следует применять/вводить пациентам в возрасте до 4 лет. Основным токсическим действием лекарственных препаратов, содержащих пропиленгликоль, является угнетение центральной нервной системы.

Наполнители. Используемая в качестве наполнителя лактоза может спровоцировать острую длительную диарею, обезвоживание, метаболический ацидоз у детей грудного и младшего возраста с непереносимостью лактозы.

Красители. Большинство красителей, используемых в производстве лекарственных препаратов для приёма внутрь, относятся к одной из следующих групп: азокрасители (тартразин, жёлтый закат, новый кокцин), хинолиновые красители (хинолин жёлтый), трифенилметановые красители (краситель синий для химической и пищевой промышленности), ксантеновые красители (эритрозин). Имеется значительное количество сообщений о нежелательных эффектах у детей различных возрастных групп, вызываемых перечисленными группами красителей.

В лекарственных препаратах для детей следует избегать использование любых красителей, особенно в лекарственных препаратах, предназначенных для детей грудного и младшего возраста. Запрещено применение в составе лекарственных препаратов для детей, в виде лекарственных форм для приёма внутрь, таких красителей, как тартразин (Е102), жёлтый закат (Е110), азорубин или кармуазин (Е122), эритрозин (Е127), которые могут вызвать аллергические и другие побочные реакции.

В отдельных случаях, например, для исключения случайных ошибок дозирования, когда лекарственный препарат производится в нескольких дозированных лекарственных формах и необходимость окрашивания лекарственного препарата обоснована, могут быть использованы красители, в отношении которых подтверждена их безопасность, приемлемость для целевой возрастной группы и другие необходимые требования.

Корригенты вкуса и ароматизаторы. У детей хорошо развита чувствительность к вкусам, запахам и химическим раздражителям. Они способны определять сладость и солёность практически сразу после попадания лекарственного препарата в полость рта, а также способны чувствовать сладкий привкус жидкостей для приёма внутрь и степень сладости. Дети больше взрослых отдают предпочтение более сладким привкусам. В связи с этим неприятный привкус веществ в жидких лекарственных формах для приёма внутрь, например, горечь или металлический привкус, зачастую маскируют с помощью корригентов вкуса и ароматизаторов.

Выбор корригентов вкуса зависит от вида лекарственной формы, свойств лекарственного препарата и физико-химических свойств корригента. Задачей маскировки вкуса не всегда является придание лекарственному препарату приятного вкуса; вкус, придаваемый лекарственному препарату для детей, должен быть приемлемым с учётом вкусовых предпочтений, культуры применения лекарств для детей. В качестве корригентов вкуса применяют подсластители, фруктовые сиропы (вишневый, малиновый и др.) и другие вспомогательные вещества.

Ароматизаторы могут быть представлены эфирными маслами (мятное, анисовое, гвоздичное) и др.

Подсластители. Наиболее часто используемым подсластителем является сахароза. Следует избегать применения сахарозы в лекарственных препаратах для пациентов педиатрического профиля, страдающих от наследственной непереносимости фруктозы. При лечении детей, страдающих диабетом, необходимо избегать применения лекарственных препаратов с высоким содержанием сахарозы. При длительном лечении следует предусмотреть замену лекарственных препаратов с высоким содержанием сахарозы на лекарственные препараты, не содержащие сахарозу, которая вызывает снижение pH зубного налёта, растворение зубной эмали, и приводит к развитию кариеса.

Фруктоза вызывает повышение концентрации глюкозы в крови, и поэтому её применение так же следует избегать у пациентов, страдающих диабетом. Также фруктоза противопоказана пациентам с гипогликемией или наследственной непереносимостью фруктозы. Кроме того, фруктоза может оказывать слабительное действие при высоких дозах лекарственного препарата в лекарственных формах для приёма внутрь.

Сорбитол и ксилит не всасываются из кишечника, поэтому считаются безопасными подсластителями для пациентов с диабетом. Вместе с тем, сорбитол и ксилит могут вызвать осмотическую диарею. Поскольку сорбитол метаболизируется до фруктозы, он противопоказан пациентам педиатрического профиля с наследственной непереносимостью фруктозы и гипогликемией, в тяжелых он может вызвать повреждение печени и кому, приводящую к смерти пациентов. Особенно следует избегать использования сорбитола в лекарственных формах для внутривенного введения.

Аспартам – дипептид аспарагиновой кислоты и метиловый эфир фенилаланина – в 150–200 раз слаще, чем сахароза. Фенилаланиновый компонент, содержащийся в аспартаме, противопоказан пациентам с фенилкетонурией.

Особенности технологии лекарственного препарата, предназначенного для педиатрического применения, зависят также от выбора оптимальной лекарственной формы лекарственного препарата, наиболее подходящей для пациентов определённой возрастной группы педиатрического профиля. Важным аспектом выбора лекарственной формы для детей является установление оптимального способа/пути введения и применения.

Способ/путь введения и применения

Для приёма внутрь. Данный способ применения лекарственных препаратов в виде жидких и твёрдых лекарственных форм для приёма внутрь является доступным для пациентов педиатрического профиля с широким возрастным диапазоном.

Жидкие лекарственные формы (растворы, сиропы, суспензии, эмульсии) более удобны для детей младших возрастных групп, которые не могут глотать капсулы или таблетки. Рекомендуемый объём дозы жидкой лекарственной формы должен составлять не более 5 мл для детей до 5 лет и не более 10 мл для детей 5 лет и старше. Растворы для приёма внутрь могут быть выпущены в виде капель для приёма внутрь, концентратов с рекомендациями по их последующему разбавлению в напитке, соке и других приемлемых разбавителях.

Суспензии могут рассматриваться в случае веществ с неудовлетворительными вкусовыми характеристиками, так как минимизация количества вещества в растворе помогает улучшить вкусовые качества лекарственного препарата; может обеспечить более высокое содержание действующего вещества в дозе, чем растворы, что способствует уменьшению объёма дозы. В маркировку, инструкцию по медицинскому применению лекарственного препарата в виде суспензии должна быть включена подробная информация о необходимости обязательного перемешивания лекарственного препарата перед применением для обеспечения правильного дозирования.

Твёрдые лекарственные формы для приёма внутрь в виде шипучих таблеток, гранул или порошков после их полного растворения/диспергирования могут быть альтернативными жидким лекарственным формам для приёма внутрь, которые не обладают достаточной стабильностью в водной среде.

Для веществ, которые не являются стабильными или вкус которых не может быть замаскирован в жидких лекарственных формах, предпочтительными являются твёрдые лекарственные формы в виде порошка, гранул, которые могут представлять собой отдельные «частицы» (пеллеты, мини-таблетки, микросферы и др.), выпускаемых в однодозовой упаковке (например, саше) или многодозовой упаковке в комплекте с дозирующим мерным устройством. Лекарственные препараты в виде таких лекарственных форм можно вводить непосредственно в ротовую полость пациента педиатрического профиля или путём смешивания предписанной дозы с небольшим количеством мягкой пищи или с напитком перед введением. Лекарственные препараты также могут быть выпущены в виде капсул, содержимое которых можно добавлять в пищу.

Лекарственные формы для рассасывания или жевания в полости рта с последующим проглатыванием содержимого без воды, в виде таблеток для рассасывания/диспергирования в полости рта, иных форм для рассасывания в полости рта (лиофилизатов, плёнок) или в виде резинок жевательных лекарственных, рекомендуются для детей старше 6 лет. Лекарственные препараты в виде лекарственной формы «таблетки жевательные» считаются приемлемыми для детей от 2 лет и старше.

Лекарственные препараты в виде таблеток и капсул могут обеспечить преимущества большей стабильности, точности дозирования и компактности по сравнению с жидкими лекарственными формами. Основным ограничением для применения их в педиатрии связано с тем, что твёрдые лекарственные формы могут представлять значительные проблемы для детей младшего возраста и подростков, испытывающих трудности с глотанием. Возраст, в котором дети могут глотать целые таблетки или капсулы, в значительной степени зависит от самого ребёнка, а также от обучения и поддержки, которую дети получают от медицинских работников и от лиц, осуществляющих за ними уход.

Таблетки для детей должны иметь несколько дозировок. Рекомендуется для детей выпускать таблетки и капсулы как можно меньшего размера. Производство таблеток небольшого размера, содержащих часть требуемой дозы, можно рассматривать как способ улучшения приемлемости лекарственной формы и/или увеличения диапазона дозирования таблеток. Рекомендуется, чтобы таблетки были обтекаемой формы, небольшого размера (диаметр 3–4 мм), чтобы доза действующего вещества/веществ для детей целевой возрастной группы достигалась за счёт приёма одной или нескольких таких таблеток, называемых «мини»- или «микро»-таблетками. Приём нескольких мини-таблеток может быть предпочтительнее приёма одной, более крупной лекарственной формы, кроме того, таблетки меньшего размера позволяют осуществлять гибкое дозирование. Следует также предусмотреть нанесение разделительных рисок на таблетку, чтобы обеспечить точное деление её на половинки или четвертинки.

Твёрдые лекарственные формы для приёма внутрь представляют возможность для выбора лекарственных форм с модифицированным высвобождением.

Для применения в полости рта. Лекарственные формы для детей, предназначенные для применения в полости рта, имеют некоторые преимущества перед лекарственными формами для приёма внутрь. Вкус является одним из ключевых факторов, влияющих на время контакта лекарственного препарата со слизистой оболочкой пациента, что важно для препаратов, предназначенных специально для детей. Основные ограничения, связанные с данным способом введения – это отсутствие совместных усилий детей, их проблемы координации, риск удушья и аспирации. Кроме того, лекарственные формы для применения в полости рта могут быть проглочены или выплюнуты до того, как произойдет достаточное всасывание действующего вещества.

Таблетки защёчные, плёнки защёчные предназначены для медленного рассасывания и обеспечения пролонгированного высвобождения действующего вещества; таблетки подъязычные и другие твёрдые лекарственные формы, предназначенные для нанесения/помещения под язык (капсулы, плёнки) растворяются быстро и обеспечивают быстрый фармакодинамический эффект. Ограниченное число детей младшего возраста способно применять лекарственные препараты в виде указанных лекарственных форм из-за малых объёмов щечного кармана и подъязычной зоны, а также из-за их вкусовых качеств и возникающего местного раздражения при приёме. Для детей младшего возраста такие лекарственные формы не подходят.

Пастилки лекарственные и леденцы лекарственные представляют собой твёрдые лекарственные формы, предназначенные для рассасывания с целью оказания, как правило, местного действия в полости рта и глотке. Данная лекарственная форма может быть приемлемой только для детей старшего возраста.

Мукоадгезивные лекарственные формы удерживаются в полости рта за счет адгезии к поверхности слизистой оболочки и могут модифицировать системное всасывание действующего вещества в месте применения. Они могут быть в виде таблеток защёчных мукоадгезивных, а также в виде иных твёрдых или мягких мукоадгезивных лекарственных форм. Такие лекарственные формы могут быть пригодны даже для детей младшего возраста, но необходима более подробная оценка их приемлемости.

Для каждого конкретного случая использования лекарственной формы в полости рта ребёнка необходимо оценивать применимость жидких лекарственных форм, предназначенных для закапывания, опрыскивания или распыления в полости рта или нанесения на определённую часть полости рта (например, капель, спреев и др.).

Для назального применения. Лекарственные препараты для введения, распыления, вдувания в полость носа представлены жидкими, мягкими и твёрдыми лекарственными формами и предназначены для оказания местного или системного действия. Как правило, они выпускаются в многодозовых упаковках, снабжённых распылительными, дозирующими или специальными системами доставки лекарственного препарата в носовую полость.

Капли назальные с анатомической точки зрения могут быть предпочтительны для детей грудного возраста, поскольку их носовая полость настолько мала, что одной или двух капель достаточно, чтобы покрыть всю слизистую оболочку. Не рекомендуется выпускать лекарственные препараты, содержащие сильнодействующие вещества, в виде капель назальных из-за ненадёжности дозирования.

Спреи назальные и аэрозоли назальные могут быть в виде недозированных и дозированных лекарственных форм. Применение недозированных назальных спреев и аэрозолей для детей ограничено из-за значительной вариабельности дозы. Дозированные аэрозоли назальные имеют высокую степень воспроизводимости дозирования и распределения капель по размерам, но аэрозоли оказывают сильное воздействие на слизистую оболочку носа, которое приводит к местному раздражению (охлаждению) и дополнительно ограничивает область депонирования лекарственного препарата. Существует большое разнообразие систем дозирования лекарственных препаратов в виде назальных спреев и аэрозолей, позволяющих выбрать необходимый вариант для определённой возрастной группы детей. Приемлемость указанных лекарственных форм для детей младшего возраста требует более подробной оценки.

Для введения лекарственных препаратов, находящихся предпочтительно в твёрдом и сухом состоянии (например, пептидов и вакцин) выбирают лекарственную форму «порошки назальные дозированные». Системы дозирования и доставки лекарственного препарата в этой лекарственной форме могут быть пассивными и активными. Активные системы оснащены механизмом, который позволяет создавать давление и выталкивать (вдувать) порошок в ноздрю; такие лекарственные формы особенно подходят для детей.

Для ректального применения. Ректальный путь введения может быть использован для лекарственных препаратов, оказывающих местное или системное действие. Суппозитории – лекарственная форма для ректального применения, наиболее распространённая при лечении детей. Другие лекарственные формы для ректального применения могут включать кремы, мази, гели, пены, капсулы мягкие желатиновые, а также растворы или суспензии в клизмах малого (менее 20 мл) или большого (более 67,5 мл) объёма.

Лекарственные препараты в виде суппозиториев ректальных могут быть выпущены для разных возрастных групп детей в различных дозировках. Суппозитории ректальные для детей должны иметь размер (длину, диаметр) и массу, которые соответствуют возрасту пациента: масса суппозитория ректального для детей грудного возраста, как правило, должна быть около 1 г.

Объём клизмы должен соответствовать предполагаемому действию лекарственного препарата (местному или системному) и возрасту ребёнка. Объём детских клизм, предназначенных для оказания системного действия, должен быть максимально малым, но в то же время, позволяющим обеспечить надлежащую доставку действующего вещества, хорошее всасывание и отсутствие раздражения. В зависимости от возраста и доставляемой дозы приемлемым может считаться объём 1–5 мл. Устройство доставки дозы должно обеспечивать простоту доставки; наконечник для клизмы (ректальная трубка) не должен травмировать пациента и должен иметь длину, соответствующую возрасту ребёнка. Использование калиброванных устройств (предварительно заполненные шприцы с ректальным наконечником) облегчает индивидуальное дозирование в сравнении с устройствами для единовременной доставки всей дозы препарата, и может сократить необходимость в лекарственных формах разной дозировки.

Вспомогательные вещества, используемые в ректальных лекарственных препаратах, не должны раздражать слизистую оболочку прямой кишки детей.

Для наружного применения. Данный способ применения лекарственных препаратов для оказания местного действия обеспечивают жидкие (растворы, суспензии, шампуни, спреи и др.), мягкие (мази, кремы и др.), твёрдые (порошки) лекарственные формы, пластыри лекарственные. Для многих действующих веществ (фармацевтических субстанций) в лекарственных формах для наружного применения, потенциальным риском является непредусмотренное системное всасывание их через кожу. Важные морфологические различия существуют между нормальной (зрелой) кожей и кожей новорождённого (особенно недоношенного) ребёнка, которые обуславливают различия в проникновении действующего вещества в глубокие слои кожи. После созревания кожа грудного ребёнка имеет меньшую изменчивость по сравнению с кожей взрослого человека: толщина рогового слоя (эпидермиса) остаётся практически одинаковой, но у новорождённых и детей грудного возраста кровоснабжение и гидратация кожи лучше, чем у взрослых.

У пациентов педиатрического профиля в возрасте до 2 лет (новорождённые, дети грудного и ясельного возраста) область применения лекарственных форм для наружного применения должна быть ограничена.

Необходимо учитывать риск использования вспомогательных веществ в лекарственных препаратах для наружного применения, вызывающих сенсибилизацию кожи, окклюзию и др. Следует избегать использования этанола в лекарственных формах для младших возрастных групп, так как вещество может вызывать дегидратацию кожи и болевые ощущения.

Для трансдермального применения. Пластыри трансдермальные обеспечивают непрерывное безболезненное активное проникновение действующего вещества в течение нескольких часов или даже дней (инфузия без иглы) в сочетании с высокой степенью соблюдения предписанного режима лечения. Они обладают оптимальными свойствами для пациентов детского возраста. Из-за стандартизированного, воспроизводимого свойства доставки пластырь трансдермальный должен быть предпочтительной лекарственной формой по отношению, например, к мазям, гелям, кремам для трансдермального применения, когда требуется системное усвоение действующего вещества через кожу.

Для новорождённых, детей грудного и более старшего возраста необходимо учитывать различия в свойствах кожи при выборе лекарственной формы в виде пластыря трансдермального. Большинство пластырей трансдермальных матричного типа могут быть разделены на несколько частей, чтобы адаптировать дозу действующих веществ для детей определённой возрастной группы, но предпочтительным является, использование лекарственных форм, специально предназначенных для применения в педиатрической практике. По меньшей мере, необходимо предусмотреть нанесение линий разреза на пластыре, чтобы обеспечить надлежащую дозировку. Пластыри трансдермальные мембранного типа нельзя разрезать на несколько частей, так как разрушение мембраны приводит к неконтролируемой доставке действующего вещества и провоцирует «демпинг дозы» с возможными летальными последствиями.

Для парентерального применения. Для пациентов педиатрического профиля способ внутривенного введения лекарственной формы предпочтителен. Применение лекарственных препаратов для подкожного и внутримышечного введения ограничено в связи с малой мышечной массой у новорождённых детей, особенно у недоношенных; прочие пути введения, например, внутрикостный, используют только в случае необходимости неотложной помощи.

Объём лекарственной формы для внутривенного введения и инфузий должен быть тщательно определён в зависимости от возраста и массы тела пациента. Если для пациентов педиатрического профиля используют традиционную лекарственную форму, то может понадобиться дополнительное разведение, при этом в инструкции по медицинскому применению лекарственного препарата должны быть указаны объём, наименование разбавителя и другая необходимая информация по его разбавлению. Информация по разбавлению лекарственных препаратов для внутривенного введения и инфузий, если необходимо, также должна учитывать возможность воздействия на водный и натриевый баланс организма ребёнка. Лекарственные препараты, представленные в инфузионной лекарственной форме, должны иметь нейтральное значение pH и быть изоосмотическими, если не предназначены для совместного использования с другими растворами. При этом в инструкции по медицинскому применению должна содержаться информация о необходимости разбавления или совместного введения (вливания).

Лекарственные формы для внутривенного введения и инфузий, предназначенные для лечения детей, должны быть оценены в отношении осмоляльности, значения pH и химической раздражительности фармацевтической субстанции и вспомогательных веществ. Изоосмотическая концентрация лекарственных форм для внутривенного введения и инфузий является предпочтительной и должна достигаться путём добавления в лекарственный препарат подходящих веществ для регулирования осмолярности (натрия хлорид, декстроза и др.) или соответствующего разбавления перед введением согласно инструкции по медицинскому применению. Гипоосмолярные растворы могут способствовать увеличению осмотической нагрузки на организм и вызывать серьёзные системные побочные эффекты у пациентов педиатрического профиля – болевые ощущения, тромбофлебит, кровоизлияние и др.

Для новорождённых пациентов, как правило, для внутривенного введения используют водные растворы. Суточная доза жидкости для пациентов педиатрического профиля, получающих внутривенную терапию, зависит от возраста и массы тела. Например, новорождённый ребёнок с массой тела 1 кг может получать только 150 мл жидкости в день, включая всю потребность в питании и лечении. Целевые объёмы и содержание электролитов важны для всех пациентов детского возраста, но для новорождённых данные параметры являются критическими.

В педиатрической практике также используют восстановленные лекарственные формы для парентерального применения, полученные из лекарственных препаратов, выпускаемых в виде лекарственных форм «Лиофилизаты», «Порошки», предназначенных для получения лекарственных форм для парентерального применения путём растворения/диспергирования в соответствующем растворителе. Большинство доз для новорождённых, грудных детей и детей младшего возраста потребует отбора дозы, которая меньше, чем общий объём полученной восстановленной жидкой лекарственной формы. Рекомендуемый объём растворителя для растворения/диспергирования исходной лекарственной формы должен учитывать вытесняемый объём жидкости и быть оптимальным для создания концентрации препарата, упрощающей расчёт пропорций.

Для ингаляционного применения. Ингаляционное применение является предпочтительным способом введения лекарственных препаратов для пациентов с астмой, а также может быть использовано для лечения других заболеваний детей. Лекарственные формы для ингаляций могут быть представлены аэрозолями для ингаляций, порошками для ингаляций, лекарственными формами для ингаляций для распыления с помощью небулайзера и др. Упаковка лекарственных форм для ингаляций может представлять собой ингаляторы различных модификаций, которые обеспечивают дозирование и введение действующего вещества в лёгкие.

Использование лекарственных препаратов для лечения астмы у детей должно соответствовать показаниям, приведённым в инструкциях по медицинскому применению лекарственного препарата и клиническим показаниям.

Ингаляторы отмеренных доз с распылением сжатым воздухом эффективны, но требуют значительной координации запуска устройства и ингаляционного действия, то есть нажатия и дыхания, что препятствует их применению у детей младшего возраста. Но дети могут быть обучены использованию ингаляторов отмеренных доз с распылением сжатым воздухом, активируемых дыханием, которые автоматически запускаются, чтобы высвободить дозированный препарат в начале ингаляции.

Ингаляторы сухого порошка могут быть эффективными системами доставки для детей старшего возраста для достижения необходимого объёма вдоха. Объём вдоха, необходимый для вдыхания порошка, варьируется в зависимости от устройства. Современные ингаляторы сухого порошка обеспечивают дисперсионную энергию и способствуют деагрегации порошка, при наличии соответствующих доказательств они могут быть подходящими для детей младшего возраста.

Использование воздушно-компрессорных и других небулайзеров для ингаляционного применения помогает осуществить более эффективную доставку лекарств в лёгкие за счёт новых функций, включая компьютерный контроль. Разработаны новые устройства для распыления лекарственных средств, которые так же удобны, как и ингаляторы отмеренных доз с распылением сжатым воздухом, относительно размера и продолжительности вдыханий. В таких устройствах вся доза мгновенно распыляется и может вдыхаться сразу. Данный тип небулайзеров классифицируют, как ингаляторы отмеренных доз жидких препаратов.

Необходимая дозировка действующего вещества/веществ лекарственного препарата, предназначенного для педиатрического применения, зависит от возраста, уровня развития ребёнка и других аспектов. При производстве лекарственных препаратов для детей необходимо корректировать дозу действующего вещества/веществ, учитывая область применения лекарственной формы – для одной возрастной группы или для нескольких возрастных групп детей.

С учётом установленной дозы, свойств компонентов состава лекарственного препарата и, при необходимости, других аспектов, должна быть выбрана частота дозирования лекарственной формы. Предпочтительной является частота дозирования – не более 2 раз в день.

Частоту дозирования можно значительно сократить использованием лекарственных форм с модифицированным высвобождением, в частности, пролонгированным, замедленным. Лекарственные препараты для детей с модифицированным высвобождением представлены лекарственными формами для трансдермального применения (пластыри), для парентерального применения, для приёма внутрь.

В случае лекарственных форм для приёма внутрь с модифицированным высвобождением необходимо учитывать различное время прохождения лекарственной формы через желудочно-кишечный тракт у детей разного возраста, их различные физиологические особенности, например, значение рН в желудке ребёнка и др.

Лекарственные препараты с модифицированным (пролонгированным) высвобождением должны охватывать дозировки для широкого диапазона возрастов. Для твёрдых лекарственных форм это может быть достигнуто с использованием лекарственных форм, состоящих из множества частиц, например, гранул с пролонгированным высвобождением с конкретной дозой на каждую гранулу. Небольшие частицы детям легче проглатывать, чем цельные лекарственные формы, что позволяет корректировать дозу и, следовательно, можно использовать для детей лекарственный препарат, применяемый для взрослых. В жидких лекарственных формах с пролонгированным высвобождением фармацевтическая субстанция, как правило, заключена внутрь маленьких частиц, например, пеллет, частиц смолы, или прикреплена к ним. Суспензии для приёма внутрь могут содержать частицы с пролонгированным высвобождением; размер частиц должен быть ограничен, а пациентам надо запрещать разжевывать их. Лекарственные формы, состоящие из множества частиц соответствующего размера с модифицированным высвобождением, могут также вводиться ребёнку через зонды.

Вспомогательные вещества, используемые для получения частиц лекарственной формы с модифицированным высвобождением (например, полимеры, пластификаторы и др.), должны быть оценены с учётом рисков.

Из-за различных принципов и вспомогательных веществ, используемых для достижения модифицированного высвобождения, для исключения неправильного применения лекарственного препарата, в инструкции по медицинскому применению следует указать, можно ли лекарственный препарат в виде лекарственной формы с модифицированным высвобождением растворять/диспергировать в жидкости или измельчать перед применением. Следует также указывать, можно ли принимать лекарственный препарат с модифицированным высвобождением вместе с жидкой или мягкой пищей, а также указать подходящие типы обычных жидкостей и продуктов питания.

При производстве, изготовлении, упаковке, хранении и транспортировании лекарственных форм нестерильных лекарственных препаратов для детей должны быть использованы материалы и методы, предотвращающие загрязнение и рост микроорганизмов и обеспечивающие соответствие их требованиям ОФС «Микробиологическая чистота».

Лекарственные формы стерильных лекарственных препаратов для детей производят и изготавливают с применением материалов и методов, предотвращающих загрязнение и обеспечивающих их стерильность в соответствии с требованиями ОФС «Стерильность». Для их получения используют методы и условия стерилизации, указанные в ОФС «Стерилизация».

###### Модификация лекарственных форм

Ряд лекарственных препаратов разрешён к применению только у взрослых и не содержит одобренных показаний в общей характеристике лекарственного препарата для его использования у детей. В тех случаях, когда лекарственный препарат, разрешённый к применению у взрослых, также может быть использован для детей, необходимо выполнить модификацию его лекарственной формы, для обеспечения возможности применения лекарственного препарата в педиатрической практике. В медицинской практике подобная модификация лекарственной формы выполняется достаточно часто. Однако при этом отсутствует информация о влиянии модификации лекарственной формы на биодоступность лекарственного препарата.

При необходимости применения модификации лекарственной формы в педиатрической практике следует учитывать ряд факторов:

- в целях индивидуального дозирования лекарственного препарата ребёнку, в домашних условиях следует прибегать только к простейшим манипуляциям (например, деление таблеток с рисками или разрезание на части не имеющих рисок таблеток, измельчение таблеток или открытие капсул и т.п.). При указании возможности такой модификации лекарственных форм следует также учитывать вопросы сохранения здоровья и безопасность лица, осуществляющего уход за ребёнком;

- наиболее частой ситуацией является модификация лекарственных форм, которая выполняется в рамках подбора режима лечения для ребёнка в условиях стационара или в амбулаторных условиях. При этом сложные манипуляции с модификацией лекарственных форм, связанные, например, с изменением дозировки (концентрации) лекарственного препарата, должны выполняться только медицинскими работниками в стационаре и фармацевтическими работниками в аптеке;

- модификацию лекарственной формы следует рассматривать, как резервный вариант организации лечения, который применяют в случаях, если фармацевтическая субстанция, необходимая для лечения и соответствующая требованиям для организации лечения, не доступна;

- поскольку лекарственный препарат для взрослых, как правило, уже содержит вспомогательные вещества, модификация лекарственных форм не должна значительно увеличивать количество вспомогательных веществ в составе препарата;

- наличие дополнительной информации о физических, химических, микробиологических характеристиках лекарственного препарата позволит фармацевтическим работникам надлежащим образом осуществить модификацию лекарственных форм и снизить связанные с этим риски для пациента и лица, выполняющего такую модификацию.

Модификацию лекарственных форм следует проводить в соответствии с требованиями, предъявляемыми к аптечному изготовлению лекарственных препаратов, указанными в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления для детей», ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм», ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм», ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде мягких лекарственных форм», ОФС «Стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления» и другими действующими нормативными документами. Приведенный в настоящей общей фармакопейной статье перечень способов модификации лекарственных форм не является исчерпывающим и служит главным образом для выявления потенциальных рисков, связанных с модификацией лекарственных форм конкретных лекарственных препаратов, а также для выбора информации, которая будет полезной для информирования персонала, выполняющего такую модификацию.

Деление таблеток на части. Данная модификация лекарственной формы является простой операцией в случае, если таблетки являются делимыми и имеют риску (риски) для облегчения такой манипуляции. Действующее вещество будет при этом равномерно распределено по всем частям таблетки. Однако вероятность ошибки дозирования более высока при использовании:

- таблеток небольшого размера;

- таблеток с низкой дозировкой фармацевтической субстанции, например, в которых доза действующего вещества может быть менее 1 мг;

- неделимых таблеток с риской;

- таблеток без риски.

Для данного вида модификации лекарственной формы могут использоваться специальные устройства для удерживания и деления таблеток.

Некоторые виды таблеток не подлежат модификации, например, таблетки кишечнорастворимые, таблетки многослойные, многие лекарственные формы с модифицированным высвобождением и др.

Производитель может предусмотреть внесение указаний по делению таблеток на более мелкие части, в общую характеристику лекарственного препарата и инструкцию по медицинскому применению лекарственного препарата.

Измельчение таблеток. Данный вид модификации лекарственной формы представляет собой измельчение цельной таблетки до мелкодисперсного порошка, в котором предполагается равномерное распределение действующего вещества, что позволяет принять пациенту отмеренную меньшую дозу действующего вещества, или допускает смешивание лекарственной формы с пищей или напитком для облегчения приёма внутрь. Для подобной модификации лекарственной формы могут быть использованы ступка и пестик. Разделение полученной массы порошка на отдельные дозы, содержащие необходимое для применения количество действующего вещества, может быть выполнено путём развешивания с помощью весов, в домашних условиях при отсутствии весов – визуально, но в этом случае имеется высокий риск ошибки дозирования.

При выполнении указанного вида модификации таблеток в условиях аптечного изготовления операциями, которые могут способствовать улучшению однородности доз полученного порошка, являются:

- предварительное измельчение таблеток. Следует учитывать, что изменения в размере частиц могут повлиять на биодоступность лекарственного препарата. Повышение температуры в процессе измельчения может увеличить вероятность химического распада действующего вещества или модификаций его кристаллической решетки, особенно в случае стероидов;

- дополнительное смешивание полученного порошка таблеток с разбавителем, как правило, лактоза моногидратом, и последующая расфасовка в капсулы вручную или с использованием средства дозирования (например, ложки-дозатора и др.). Капсулы могут быть простыми, вощёными, парафинированными, пергаментными в зависимости от физико-химических свойств веществ, входящих в состав порошка; также в качестве упаковки могут быть использованы твёрдые желатиновые капсулы.

Использование лактозы в качестве наполнителя не всегда допустимо, поэтому необходимо учитывать физико-химические свойства веществ, входящих в состав лекарственного препарата в исходной лекарственной форме.

Измельчение или модификация таблеток с замедленным высвобождением может привести к утрате ожидаемого полезного фармакологического действия.

Производитель может внести в общую характеристику лекарственного препарата соответствующие указания по вопросам пригодности таблеток для операции измельчения и введения в полученный порошок индифферентных разбавителей, чтобы позволить введение пациенту меньших доз действующего вещества. Любая информация о стабильности и совместимости измельчённой таблетки с обычными продуктами питания и напитками (например, йогуртом, молоком, водой, фруктовыми соками) и любые известные сведения об изменении биодоступности действующего вещества, также могут быть представлены в общей характеристике лекарственного препарата.

Вскрытие капсул. Данная модификация имеет преимущество по сравнению с измельчением таблеток, так как капсулы изначально содержат смесь фармацевтической субстанции и вспомогательных веществ в виде порошка, гранул, пеллет и др. Деление содержимого капсул на отдельные дозы, как и деление измельчённых таблеток, может быть выполнено путём визуального контроля в домашних условиях с риском ошибки дозирования, или развешиванием содержимого капсул на весах на дозы, предназначенные для пациента педиатрического профиля. Извлечённый из капсул порошок (гранулы, пеллеты и др.) может быть диспергирован в напитке (пище) для облегчения приёма внутрь. Лекарственные препараты с замедленным высвобождением, состоящие из частиц со специальным покрытием, упакованных в капсулы, обычно могут быть вскрыты и диспергированы в пище или напитке. Содержимое капсул также может быть расфасовано в бумажные или твёрдые желатиновые капсулы.

Производитель может внести в общую характеристику лекарственного препарата любую дополнительную информацию о стабильности и совместимости извлеченного из капсул порошка с обычными продуктами питания и напитками и любые известные сведения об изменении биодоступности действующего вещества.

Диспергирование таблеток или капсул и извлечение долей. Дальнейшая модификация лекарственной формы порошка (гранул, пеллет и др.), полученного из таблеток или изъятого из капсул, может представлять собой:

- диспергирование порошка в подходящей жидкости с образованием суспензии;

- снижение концентрации или уменьшение части дозы действующего вещества исключительно объёмными методами.

Риск ошибки дозировки, возникающей в результате оседания или осаждения полученной дисперсии, может быть уменьшен за счёт использования суспензии, имеющей высокую вязкость.

При данном виде модификации лекарственных форм потенциальные риски связаны с ошибками дозирования по объёму полученных вязких жидкостей, а также потери (уменьшении) предполагаемой дозы действующего вещества из-за его гидролиза в водной среде. Если же происходит не диспергирование, а растворение порошка в подходящей жидкости, то в таких случаях ошибка дозирования уменьшается, но сохраняется риск потери части дозы, связанный с процессами гидролиза.

Производитель может предусмотреть в информации о лекарственном препарате соответствующих указаний по пригодности полученных порошков лекарственного препарата для изготовления из них суспензий и водных растворов. Любая информация о возможности уменьшения части дозы действующего вещества путём его перевода в суспензию с дозированием по объёму также может быть представлена в общей характеристике лекарственного препарата.

Разрезание или закрывание части пластырей трансдермальны. Доза лекарственного препарата, доставляемая через кожу, пропорциональна площади поверхности пластыря трансдермального, находящегося в контакте с ней, поэтому теоретически возможно получить половину дозы, уменьшив вдвое площадь пластыря, при прочих равных условиях его применения. Модификация пластыря путём разрезания его ножницами пропорционально уменьшенной площади лекарственной формы сопряжена с определённым риском развития нежелательного действия.

Одной из главных проблем, связанных с модификацией пластырей трансдермальных являются различия в структуре кожи, формирующейся у новорождённых. Несмотря на утверждения производителей о том, что трансдермальные лекарственные препараты содержат специальную мембрану, контролирующую высвобождение, основным фактором, контролирующим скорость высвобождения, остается сама кожа и её роговой слой. В этой связи кинетика всасывания, установленная для пластырей трансдермальных для взрослых, не будет применима к группе детей младшего возраста.

При модификации пластыря трансдермального особую сложность представляет определение необходимой для аппликации площади пластыря. Это связано с тем, что площадь пластырной основы может быть меньше видимой глазу внешней площади пластыря, а асимметричная резка пластыря может привести к ошибкам дозирования. Пластырная основа герметично запаяна внутри лекарственной формы, предназначенной для взрослых. Резка пластыря приводит к нарушению целостности его кромки, воздействию атмосферного воздуха на пластырную основу с последующей её механической эрозией и окислительным распадом.

Производитель может внести в характеристику лекарственного препарата любую дополнительную информацию о влиянии процедуры резки пластыря трансдермального или закрытия (заклеивания) части пластыря на характеристики высвобождения действующего вещества.

Разрезание суппозиториев. Модификация суппозиториев ректальных допустима только в случае равномерного распределения действующего вещества/веществ в суппозиторной основе. Но даже и в этом случае точная корректировка дозы затруднена, так как только небольшая часть суппозиториев производится в форме, облегчающей деление пополам на основе простого визуального осмотра. Резка суппозитория вдоль плоскости его симметрии (то есть по вертикали, а не по горизонтали) является очевидным способом модификации лекарственной формы и несёт меньший риск ошибки дозирования, но полученная при этом внешняя форма суппозитория может стать неоптимальной для его ректального введения. Горизонтальное срезание асимметричной части (пулевидной части или закруглённого усечённого конуса) связано с наибольшим риском ошибки дозирования.

Производитель может внести в общую характеристику лекарственного препарата любую дополнительная информацию об однородности распределения действующего вещества в суппозитории и связанных с этим особенностей дозирования.

Изменение способа введения лекарственных форм для инъекций. Использование для приёма внутрь лекарственных форм, предназначенных для инъекций, является относительно дорогостоящим способом лечения. Но в целом, именно эта модификация связана с наименьшей вероятностью ошибок дозирования, поскольку многие лекарственные формы для инъекций представляют собой разбавленные, невязкие водные растворы. Уменьшения дозы в этом случае можно добиться используя шприц небольшого объёма в сочетании с дополнительным разбавлением лекарственной формы. Порошки, предназначенные для получения лекарственных форм для инъекций, могут быть растворены в подходящем растворителе обычным способом перед дополнительным разбавлением для снижения дозы до необходимой для приёма детьми. Неприятный вкус лекарственной формы для инъекций может стать проблемой для приёма внутрь такой лекарственной формы, и этот фактор должен быть принят во внимание. Следует учитывать также и другие значимые риски при использовании данного способа модификации лекарственных препаратов.

Многодозовые лекарственные препараты для инъекций могут содержать в своем составе антимикробные консерванты (например, бензиловый спирт), пропиленгликоль или другие опасные вещества, иметь такие значения pH или осмолярности, которые способны нанести потенциальный вред новорождённым или детям других возрастных групп. Поскольку стабильность растворов для инъекций может быть нарушена при разбавлении, то при отсутствии надежной информации от производителя данного лекарственного препарата, следует исходить из предположения о том, что профиль стабильности исходного лекарственного препарата при его разбавлении воспроизводиться не будет.

Допускается модификация лекарственных форм для инъекций в лекарственные формы для ингаляций для распыления с использованием небулайзеров. Данный вид модификации лекарственной формы для детей возможен только при условии, если известен точный качественный и количественный состав исходной лекарственной формы для инъекций для взрослых. Это связано с тем, что ряд лекарственных препаратов для инъекций, содержит в качестве стабилизаторов антиоксиданты на основе сульфитов, которые могут спровоцировать спазм бронхов и негативно повлиять на безопасность применения модифицированного препарата.

Следует внести в общую характеристику лекарственного препарата любую дополнительную информацию, которая позволит определить пригодность раствора для инъекций для введения другими способами.

###### Испытания

Для оценки качества лекарственных препаратов промышленного производства для детей в различных лекарственных формах применяют, как правило, испытания по показателям качества, указанным в ОФС «Лекарственные формы» и испытаниям, характеризующим конкретную лекарственную форму по основным и, при необходимости, дополнительным, классификационным признакам, указанным в ОФС на конкретные лекарственные формы (ОФС «Таблетки», ОФС «Капсулы», ОФС «Порошки», ОФС «Гранулы», ОФС «Суспензии», ОФС «Капли», ОФС «Спреи»¸ ОФС «Растворы», ОФС «Пластыри трансдермальные» и др.) или на группу лекарственных форм (ОФС «Лекарственные формы для парентерального применения», ОФС «Лекарственные формы для ингаляций», ОФС «Мягкие лекарственные формы» и др.), а также по показателям качества, характеризующим действующее вещество/вещества и, при необходимости, вспомогательное вещество/вещества, входящее в состав данного лекарственного препарата в соответствии с ОФС «Лекарственные препараты».

Испытания лекарственных препаратов для детей аптечного изготовления проводят на основании требований соответствующих действующих нормативных документов, утверждённых уполномоченным федеральным органом исполнительной власти, как правило, при осуществлении внутриаптечного контроля их качества, а также на основании требований к контролю качества лекарственных форм, указанных в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления для детей», ОФС «Стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления», ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм», ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм» ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде мягких лекарственных форм».

###### Упаковка

Выбор системы упаковки/укупорки для лекарственных препаратов для детей осуществляют на основании общих требований к упаковке и критериев выбора упаковки для лекарственных препаратов в конкретной лекарственной форме в соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств» и ОФС «Лекарственные формы».

Для лекарственных препаратов для детей рекомендуется использовать упаковку с защитой от вскрытия детьми, которая представляет собой упаковку, труднодоступную для вскрытия маленькими детьми, но возможную к использованию взрослыми.

Упаковка стерильных лекарственных препаратов, применяемых в педиатрической практике, должна обеспечивать стерильность.

Лекарственные препараты для детей, по возможности, должны выпускаться в виде готовой к применению лекарственной формы, без потребности в дополнительных этапах приготовления лекарственного препарата.

В педиатрической практике предпочтительно использование лекарственных препаратов в виде дозированных лекарственных форм и лекарственных форм в однодозовой упаковке.

Многодозовая упаковка лекарственных препаратов для детей в виде жидких лекарственных форм, гранул, порошков и др., должна быть выпущена в комплекте с прилагаемым средством дозирования – мерным устройством для отбора по массе или по объёму дозы, необходимой для применения ребёнком.

Устройства для отбора и доставки в организм дозы действующих веществ лекарственных препаратов для детей, должны обеспечивать точное измерение дозы и её простое контролируемое введение.

Не рекомендуется в качестве устройств для отбора и доставки доз лекарственных препаратов для детей использовать ложки (столовые, десертные, чайные).

В качестве мерных устройств для лекарственных препаратов для детей могут быть использованы такие средства дозирования, как мерные ложки/ложечки, мерные колпачки/стаканчики общим объёмом 10 мл, имеющие калибровочные линии для отмеривания меньшего объёма (5 и 2,5 мл) или без них. Точность измерения мерными ложками/ложечками, мерными колпачками/стаканчиками необходимой дозы лекарственных препаратов в виде жидких лекарственных форм, будет зависеть от вязкости, поверхностного натяжения и других свойств жидкости, а также интерпретации делений и менисков пользователем.

Средства дозирования в виде мерных ложек с глубокой градуированной чашечкой или в виде небольшого мерного цилиндра с ручкой, имеют преимущество по сравнению с обычными мерными ложками, поскольку при их использовании ниже вероятность пролить лекарственный препарат.

Дозирующие устройства в виде градуированных пипеток и дозирующих шприцев для лекарственных форм для приёма внутрь, особенно удобны для грудных детей и детей младшего возраста, которые не могут использовать ни ложки, ни чашки. Также такие устройства позволяют точно отмерить дозу и контролировать введение лекарственного препарата непосредственного в щёчный карман пациента при применении во всех возрастных группах. Эти средства дозирования рекомендуются для лекарственных препаратов, для которых точное дозирование является обязательным. Дозирующие шприцы для лекарственных форм для приёма внутрь не должны иметь иглу или подключаться к внутривенным устройствам. Устройства, предназначенные для введения лекарственного препарата непосредственно в полость рта, не должны быть изготовлены из материала, который может сломаться или травмировать полость рта.

Доставка лекарственных препаратов в жидкой лекарственной форме в виде капель, может быть удобной, особенно для грудных детей и детей младшего возраста. На точность дозирования каплями также влияет вязкость, плотность лекарственной формы и правильность отмеривания капель пользователем.

Выбор устройства должен осуществляться с учётом объёма дозы лекарственного препарата, типа и вкуса лекарственного препарата, простоты его введения. Особое значение имеет возможность точно измерять небольшие объёмы лекарственных форм для инъекций, предназначенных для новорождённых детей. Концентрации действующих веществ должны быть такими, чтобы требуемые объёмы дозы можно было измерить стандартными шприцами без дальнейшего разбавления. Если необходимо разбавление предварительно отмеренного объёма лекарственного препарата для инъекций до его введения, следует помнить, что в поршне шприца может содержаться значительное избыточное количество действующего вещества.

Градуировка средств дозирования должна быть чёткой, нестираемой, во избежание возможной ошибки градуировку следует указывать в миллилитрах или долях миллилитра. Если градуировка указана в других единицах, например, в миллиграммах, то такое средство дозирования должно быть использовано только с этим лекарственным препаратом. Необходимо установить совместимость всех компонентов средства дозирования и градуировки с лекарственным препаратом, а также их устойчивость к обычным процедурам мойки.

Должно быть гарантировано соответствие рекомендованной к приёму дозы лекарственного препарата той дозе, которая будет отмерена с помощью дозирующего устройства упаковки и доставлена пациенту. Оценку однородности массы или однородности объёма доз, отобранных с помощью мерного устройства (стаканчик мерный, ложка мерная, дозатор шприцевой и др.), входящего в комплект с лекарственной формой для детей проводят в соответствии с ОФС «Однородность массы (объёма) доз, отобранных из многодозовой упаковки».

###### Маркировка*

В соответствии с ОФС «Маркировка лекарственных средств» и ОФС «Лекарственные формы».

Лекарственные препараты для детей должны иметь специальные внешние обозначения, отличающие их от аналогичных лекарственных препаратов для взрослых.

К наименованию лекарственного препарата, предназначенного для применения исключительно у детей, добавляется определение «для детей» (сироп для детей, таблетки диспергируемые для детей и др.) или указывается возрастная группа/группы детей (суппозитории ректальные для детей от 3 месяцев до 3 лет).

Сведения о дозировке должны быть представлены в чёткой форме, например, в виде миллиграммов на единицу массы тела, должны присутствовать специальные инструкции по измерению и введению точной дозы.

При использовании лекарственных препаратов в виде исходных лекарственных форм «Порошки» и «Лиофилизаты», предназначенных для приготовления восстановленных лекарственных форм для парентерального применения, должны быть чёткие инструкции по получению лекарственных форм, предназначенных для непосредственного применения.

###### Хранение

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственных средств».

###### Срок годности

В соответствии с ОФС «Стабильность и сроки годности лекарственных средств».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0044 Растворы для диализа, гемодиализа, гемофильтрации и гемодиафильтрации

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на лекарственные препараты, предназначенные для проведения интра- и экстракорпоральной искусственной детоксикации крови и органов человека, коррекции водно-электролитного баланса с использованием методов диализа и/или фильтрации, выпускаемых в виде следующих лекарственных форм:

- растворы для перитонеального диализа;

- растворы для гемодиализа;

- растворы для гемофильтрации;

- растворы для гемодиафильтрации.

Растворы для перитонеального диализа, растворы для гемодиализа, растворы для гемофильтрации, рстворы для гемодиафильтрации представляют собой стерильные водные растворы, содержащие электролиты с концентрацией, близкой к электролитному составу плазмы крови человека; в качестве вещества, обладающего осмотической активностью, содержат, как правило, декстрозу.

Перитонеальный диализ ‒ метод интракорпоральный детоксикации крови и коррекции водно-электролитного баланса, в основе которого лежит использование брюшины пациента как естественной полупроницаемой мембраны, через которую посредством диффузии и осмоса возможен обмен растворённых веществ и воды между кровью и раствором для перитонеального диализа. Метод характеризуется более или менее постоянным присутствием раствора для перитонеального диализа (около 2 л) в брюшной полости, который периодически (3–5 раз в день) замещается новыми свежими порциями. Растворы для перитонеального диализа могут быть изотоническими и гипертоническими. Растворы, предназначенные для перитонеального (внутрибрюшинного) введения нельзя применять внутривенно.

Гемодиализ ‒ метод экстракорпоральной детоксикации крови и органов человека, в основе которого лежит обмен растворённых веществ и воды посредством диффузии и осмоса через искусственную избирательно проницаемую мембрану специального оборудования, которая с одной стороны омывается током крови, с другой стороны ‒ раствором для гемодиализа, который течёт в противоположном току крови направлении. В зависимости от размера пор и других характеристик мембраны из крови удаляются вещества с различной молекулярной массой; при гемодиализе не всегда эффективно удаление веществ с большой молекулярной массой. Лекарственные препараты в виде растворов для гемодиализа предназначены для введения в диализный отсек специального оборудования для проведения гемодиализа.

Гемофильтрация ‒ метод экстракорпоральной детоксикации крови и органов человека, в основе которого лежит осуществляемая с помощью специального оборудования перфузия крови через гемофильтр посредством ультрафильтрации и синхронной внутривенной инфузии в экстракорпоральный контур кровотока замещающего раствора ‒ раствора для гемофильтрации. Через полупроницаемую мембрану гемофильтра за счёт градиента давления из кровотока происходит перенос воды и растворённых в ней веществ, в том числе веществ с большой молекулярной массой с образованием ультрафильтрата. Оборудование для проведения гемофильтрации обеспечивает перфузию крови, удаление ультрафильтрата и введение раствора для гемофильтрации. Растворы для гемофильтрации предназначены для внутривенного введения пациенту, кровоток которого установленным способом соединён с оборудованием для проведения гемофильтрации.

Гемодиафильтрация ‒ метод экстракорпоральной детоксикации крови и органов человека, в основе которого лежит осуществляемое с помощью специального оборудования объединение процессов гемодиализа и гемофильтрации. Растворы для гемодиафильтрации могут быть предназначены для внутривенного введения пациенту, кровоток которого установленным способом соединён с оборудованием для проведения гемодиафильтрации или могут быть использованы в качестве диализирующих растворов (аналогично растворам для гемодиализа) и введены в экстракорпоральный контур кровотока с помощью специального оборудования.

###### Особенности технологии

Лекарственные препараты, выпускаемые в виде лекарственных форм «раствор для перитонеального диализа», «раствор для гемодиализа», «раствор для гемофильтрации», «раствор для гемодиафильтрации», представляют собой водные стерильные апирогенные растворы, которые получают растворением фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ (если применимо) в воде для инъекций.

Ионный состав растворов приближен к электролитному составу плазмы крови человека: растворы для гемодиализа, гемофильтрации и гемодиафильтрации содержат ионы натрия, калия, кальция, магния и хлоридов; в состав растворов для перитонеального диализа входят все перечисленные ионы, за исключением ионов калия. В качестве вещества, определяющего осмотическую активность лекарственного препарата, в состав всех растворов, как правило, включают декстрозу в различных концентрациях; иногда вместо декстрозы могут быть добавлены другие вещества, например, аминокислоты. Концентрированные растворы для гемодиафильтрации могут содержать цитраты, используемые как антикоагулянты.

В растворы для перитонеального диализа, гемодиализа, гемофильтрации и гемодиафильтрациине добавляют антиоксиданты.

Для коррекции рН растворов, если необходимо, в качестве вспомогательных веществ применяют кислоту хлористоводородную и натрия гидроксид, иногда используют натрия гидрокарбонат и/или натрия лактат.

Если в состав растворов входит натрия гидрокарбонат, то для предупреждения его взаимодействия и возможного образования осадка с ионами кальция и магния, лекарственный препарат должен состоять из двух отдельных растворов: один из которых представляет собой раствор электролитов с декстрозой, другой ‒ раствор натрия гидрокарбоната или раствор, содержащий натрия гидрокарбонат, натрия хлорид и натрия лактат. Два раствора одного лекарственного препарата содержатся в отдельных камерах одной упаковки (двухкамерного пакета). В соответствии с инструкцией по медицинскому применению лекарственного препарата смешивание растворов из двух камер и получение конечного раствора должно осуществляться непосредственно перед использованием.

Технологию получения конечного раствора путём смешивания непосредственно перед использованием двух растворов, находящихся в двух камерах упаковки, применяют также для некоторых лекарственных препаратов без натрия гидрокарбоната в составе, например, для смешивания перед использованием кислого раствора декстрозы с электролитами и щелочного раствора натрия лактата.

Из-за больших объёмов растворов, применяемых для гемодиализа, гемофильтрации и гемодиафильтрации, для их получения могут быть использованы соответствующие концентрированные растворы, которые перед применением разбавляют до указанного объёма для получения необходимой концентрации электролитов и декстрозы. Разбавление концентрированных растворов производится, как правило, на специальном оборудовании с использованием автоматического дозирующего устройства, в случае растворов для гемофильтрации и гемодиафильтрации ‒ устройства, оснащенного ультрафильтрами. Разбавленные растворы для гемодиализа, для гемофильтрации и для гемодиафильтрации должны быть использованы сразу после их получения из соответствующих концентрированных.

При получении лекарственных препаратов в виде растворов для перитонеального диализа, растворов для гемодиализа, растворов для гемофильтрации, растворов для гемодиафильтрации должны быть приняты меры, обеспечивающие их стерильность. При получении стерильных растворов используют методы стерилизации в соответствии с ОФС «Стерилизация».

###### Испытания

Лекарственные препараты, выпускаемые в виде лекарственных форм «раствор для перитонеального диализа», «раствор для гемодиализа», «раствор для гемофильтрации» и «раствор для гемодиафильтрации» должны соответствовать ОФС «Лекарственные препараты» и ОФС «Лекарственные формы», а также выдерживать следующие испытания, характерные для данных лекарственных препаратов в виде указанных лекарственных форм.

Подготовка образцов. Если лекарственный препарат представлен двумя растворами для смешивания и получения конечного раствора, то для проведения испытаний отбирают, как правило, три вида образцов: из первой камеры первичной упаковки (образец А), из второй камеры первичной упаковки (образец Б) и образец конечного раствора лекарственного препарата, полученного после смешивания растворов из обеих камер упаковки в соответствии с инструкцией по применению (образец А+Б). Регламентируемые показатели качества для каждого из образцов для испытаний (А, Б и А+Б) указывают в фармакопейной статье на лекарственный препарат. Испытание образцов А и Б необходимо проводить сразу же после их отбора из первичной упаковки; испытание образца А+Б проводят сразу после его приготовления.

Отбор образцов концентрированных растворов для гемодиализа, для гемофильтрации или для гемодиафильтрации и разбавленных растворов, полученных разведением исходных концентрированных растворов в соответствии с инструкцией по их применению, проводят в соответствии с указаниями в фармакопейной статье на лекарственный препарат.

Описание. Лекарственные препараты в виде растворов для перитонеального диализа, для гемодиализа, для гемофильтрации, для гемодиафильтрации характеризуют, отмечая внешний вид (прозрачность, опалесценцию), органолептические (цвет, запах) и другие свойства в соответствии с требованиями фармакопейной статьи на лекарственный препарат.

Подлинность. Подлинность действующих веществ, входящих в состав лекарственного препарата, подтверждают с использованием наиболее специфичных методов анализа, позволяющих идентифицировать лекарственный препарат.

Качественные реакции. При совместном присутствии в лекарственном препарате всех ионов и декстрозы, определение ионов натрия, калия, кальция, хлоридов, лактатов, гидрокарбонатов проводят в соответствии с ОФС «Общие реакции на подлинность»; а для определения декстрозы, ионов магния, цитратов используют следующие качественные реакции:

Декстроза. К 5 мл препарата прибавляют 2 мл натрия гидроксида раствора 8,5 % и 0,05 мл меди (II) сульфата раствора 12,5 %. Образуется раствор голубого цвета. При нагревании полученного раствора до кипения должен появиться красный осадок.

Магний. К 0,1 мл титанового жёлтого раствора 0,05 % прибавляют 10 мл воды, 2 мл препарата и 1 мл натрия гидроксида раствора 1 М, должно появляться отчётливое розовое окрашивание.

Цитраты. К 5 мл препарата прибавляют 0,5 мл серной кислоты концентрированной, 1 мл калия перманганата раствора 3 % и нагревают до обесцвечивания раствора. Затем прибавляют 0,5 мл натрия нитропруссида раствора 10 % в серной кислоты растворе 1 М и 4 г сульфаминовой кислоты. Прибавляют по каплям аммиака раствор концентрированный 25 % до растворения сульфаминовой кислоты. При добавлении избытка аммиака раствора концентрированного 25 % должно появиться фиолетовое окрашивание раствора, переходящее в фиолетово-синее.

Физико-химические методы. Идентификацию ионов натрия, калия, кальция и магния, хлоридов, лактатов, гидрокарбонатов и декстрозы, а также одновременное определение лактатов и гидрокарбонатов при их совместном присутствии в растворах лекарственных препаратов, можно проводить, если применимо, на основании физико-химических и химических методов испытаний совместно с испытанием по показателю «Количественное определение» для каждого указанного компонента.

Прозрачность. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей». Лекарственные препараты в виде растворов для перитонеального диализа, для гемодиализа, для гемофильтрации, для гемодиафильтрации должны быть прозрачными.

Цветность. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Степень окраски жидкостей». Лекарственные препараты в виде растворов для перитонеального диализа, для гемодиализа, для гемофильтрации, для гемодиафильтрации, не содержащие декстрозу, должны быть бесцветными. Окраска растворов лекарственных препаратов, содержащих декстрозу, должна выдерживать сравнение с эталоном цветности, указанном в фармакопейной статье на лекарственный препарат.

рН. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Ионометрия». Значения рН указывают в фармакопейной статье на лекарственный препарат.

Осмолярность. Для лекарственных препаратов в виде растворов для перитонеального диализа, для гемодиализа, для гемофильтрации и для гемодиафильтрации рассчитывают значение теоретической осмолярности. Если теоретическая осмолярность не может быть рассчитана, необходимо определить значение осмоляльности в соответствии с ОФС «Осмолярность».

Механические включения. Видимые частицы. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Видимые механические включения в лекарственных препаратах для парентерального применения и глазных лекарственных формах».

Невидимые частицы. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Невидимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения».

Алюминий. Не более 10 мкг/л, если не указано иначе в фармакопейной статье.

Испытание проводят одним из альтернативных методов.

1. Атомно-абсорбционная спектрометрия (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 1 или метод 2).

- Для проведения испытания используют посуду из полимерных материалов, предварительно выдержанную в течение 24 ч в 0,1 % растворе азотной кислоты.

- Для приготовления растворов используют воду дистиллированную, не контактировавшую со стеклом; для приготовления контрольного опыта – воду, свободную от алюминия, полученную методом обратного осмоса с последующей многократной дистилляцией.

- Раствор-модификатор. В соответствии с указаниями фармакопейной статьи готовят, как правило, водный раствор с добавлением, например, азотной кислоты или азотной кислоты и магния нитрата.

- Раствор-модификатор добавляют в одинаковых пропорциях в испытуемый раствор, стандартные растворы и контрольный раствор.

- Испытуемый раствор. В соответствии с указаниями фармакопейной статьи используют лекарственный препарат без разбавления или разбавляют водой до необходимой для испытания концентрации.

- Контрольный раствор. Готовят в соответствии с указаниями фармакопейной статьи. Контрольный раствор представляет собой, как правило, водный раствор с добавлением раствора-модификатора.

- Калибровочные растворы. Для приготовления калибровочных растворов алюминий-иона используют стандартный раствор алюминий-иона, указанный в фармакопейной статье, например, алюминия стандартный раствор 1 мкг/мл (ОФС «Стандартные растворы»). Готовят не менее трёх калибровочных растворов в диапазоне, охватывающем предполагаемое содержание алюминия в испытуемом растворе, например, калибровочные растворы, содержащие 5, 10 и 15 мкг/л алюминия, если лекарственный препарат должен содержать не более 10 мкг/л алюминия.

- Для метода 1 калибровочные растворы готовят разбавлением стандартного раствора 1 мкг/мл алюминий водой до необходимого объёма, с добавлением раствора-модификатора.

- Для метода 2 в калибровочные растворы, кроме стандартного раствора 1 мкг/мл алюминий-иона и раствора-модификатора, добавляют указанный в фармакопейной статье одинаковый объём исходного раствора, затем доводят объём калибровочных растворов водой до необходимого значения.

- Условия испытания

Источник излучения | лампа для определения алюминия с полым катодом;
Длина волны | 309,3 нм;
Атомизация | графитовая печь;
Газ | аргон.

- Измеряют поглощение испытуемого, контрольного и калибровочных растворов. Для каждого раствора проводят не менее 3 измерений. Из значений поглощения испытуемого и стандартных растворов вычитают значение поглощения контрольного раствора. Строят калибровочную кривую зависимости средних результатов измерений, полученных для калибровочных растворов от их концентрации. Содержание алюминия в испытуемом растворе в мкг/л определяют по калибровочному графику.

2. Флуориметрия. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Алюминий» (метод 1) и требованиями, указанными в фармакопейной статье.

3. Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой» и требованиями, указанными в фармакопейной статье.

5-гидроксиметилфурфурол. Испытание проводят для лекарственных препаратов, содержащих декстрозу, в соответствии с ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях», одним из двух альтернативных методов.

1. Спектрофотометрия в ультрафиолетовой области.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают точно измеренный объём раствора препарата, эквивалентный содержанию 1,0 г декстрозы безводной, растворяют в воде для инъекций и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора при длине волны 284 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения воду для инъекций.

- При отсутствии в фармакопейной статье других указаний, оптическая плотность испытуемого раствора не должна превышать 0,25.

2. Спектрофотометрия в видимой области. Не более 0,04 % (не более 0,08 % для растворов, содержащих гидрокарбонаты).

- Раствор n-толуидина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 г п-толуидина, растворяют в смеси уксусная кислота безводная—2-пропанол 1:9 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор барбитуровой кислоты. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 г барбитуровой кислоты, растворяют в 70 мл слегка нагретой на водяной бане воды, охлаждают и доводят водой до метки.

- Раствор 5-гидроксиметилфурфурола 1 мг/мл. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г 5-гидроксиметилфурфурола, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

- Испытуемый раствор. К точно измеренному объёму препарата, соответствующему около 25 мг декстрозы безводной, прибавляют 5,0 мл раствора n-толуидина и 1,0 мл раствора барбитуровой кислоты, перемешивают и выдерживают 2,5±0,5 мин.

- Стандартный раствор 5-гидроксиметилфурфурола. Готовят из раствора 5-гидроксиметилфурфурола 1 мг/мл подходящим разведением водой так, чтобы 10 мкг 5-гидроксиметилфурфурола (или 20 мкг 5-гидроксиметилфурфурола для растворов, содержащих гидрокарбонаты) содержалось в таком же объёме, как ожидается в испытуемом препарате. К полученному раствору прибавляют 5,0 мл раствора n-толуидина и 1,0 мл раствора барбитуровой кислоты, перемешивают и выдерживают 2,5±0,5 мин.

- Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора и стандартного раствора 5-гидроксиметилфурфурола при длине волны 550 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения воду для инъекций. Оптическая плотность испытуемого раствора не должна превышать оптическую плотность стандартного раствора.

Извлекаемый объём. Не менее номинального объёма. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Извлекаемый объём лекарственных форм для парентерального применения», используя одну из двух альтернативных методик.

1. Объём раствора препарата измеряют откалиброванным цилиндром в соответствии с методикой, указанной в ОФС «Извлекаемый объём лекарственных форм для парентерального применения».

2. Объём раствора препарата рассчитывают, как отношение массы раствора лекарственного препарата к его плотности.

Взвешивают препарат в первичной упаковке (системе, контейнере) с содержимым. Содержимое первичной упаковки удаляют через соединительную трубку или инъекционный порт и взвешивают упаковку без содержимого. Вычисляют массу содержимого упаковки, как разницу массы заполненной и опустошенной упаковки. Определяют плотность раствора препарата пикнометром в соответствии с ОФС «Плотность».

Рассчитывают извлекаемый объём содержимого упаковки путём деления массы содержимого упаковки на его плотность.

Бактериальные эндотоксины. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Бактериальные эндотоксины».

Не более 0,05 ЕЭ на 1 мл лекарственных препаратов, представляющих собой раствор для перитонеального диализа, раствор для гемофильтрации или раствор для гемодиафильтрации.

Не более 0,25 ЕЭ на 1 мл лекарственного препарата, представляющего собой раствор для гемодиализа.

Аномальная токсичность. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Аномальная токсичность». Лекарственные препараты должны быть нетоксичными. Тест-доза – 0,5 мл препарата на мышь, внутривенно. Скорость введения 0,1 мл/с. Срок наблюдения – 48 ч.

Стерильность. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Стерильность». Лекарственные препараты должны быть стерильными.

Количественное определение. В зависимости от состава лекарственного препарата, если другое не указано в фармакопейной статье, содержание калия, натрия, кальция, магния, хлоридов, лактатов, гидрокарбонатов, декстрозы моногидрата в пересчёте на безводное вещество должно составлять не менее 95,0 % и не более 105,0 % от заявленного количества.

Если для определяемого иона/ вещества указано более одного метода испытаний, то они являются альтернативными, испытание проводят в соответствии с одним из них.

Калий. Испытание проводят одним из альтернативных методов.

1. Атомно-абсорбционная спектрометрия (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 1).

- Испытуемый раствор. Используют неразбавленный раствор препарата или раствор препарата разбавляют водой для получения испытуемого раствора с концентрацией калия, соответствующей рабочему диапазону применяемого прибора. К 100 мл испытуемого раствора прибавляют 10 мл натрия хлорида раствора 2,2 %.

- Калибровочные растворы. Используя калия стандартный раствор 100 мкг/мл, готовят не менее трёх калибровочных растворов калия так, чтобы диапазон концентраций этих растворов включал ожидаемое значение концентрации калия в испытуемом растворе. К 100 мл каждого калибровочного раствора прибавляют 10 мл натрия хлорида раствора 2,2 %.

- Условия испытания

Источник излучения | лампа для определения калия с полым катодом;
Длина волны | 766,5 нм;
Атомизация | воздушно-пропановое или воздушно-ацетиленовое пламя.

- Измеряют поглощение испытуемого, контрольного и калибровочных растворов. Для каждого раствора проводят не менее 3 измерений. Из значений поглощения испытуемого и стандартных растворов вычитают значение поглощения контрольного раствора. Строят калибровочную кривую зависимости средних результатов измерений, полученных для калибровочных растворов от их концентрации. Содержание калия в испытуемом растворе определяют по калибровочному графику.

2. Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой»).

Натрий. Испытание проводят одним из альтернативных методов.

1. Атомно-эмиссионная спектрометрия (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия», метод 1).

- Испытуемый раствор. Используют неразбавленный раствор препарата или раствор препарата разбавляют водой для получения испытуемого раствора с концентрацией натрия, соответствующей рабочему диапазону применяемого прибора.

- Калибровочные растворы. Используя натрия стандартный раствор 200 мкг/мл, готовят не менее трёх калибровочных растворов натрия так, чтобы диапазон концентраций этих растворов включал ожидаемое значение концентрации натрия в испытуемом растворе.

- Условия испытания

Источник излучения | лампа для определения натрия с полым катодом;
Длина волны | 589,0 или 589,6 нм;
Атомизация | воздушно-пропановое или воздушно-ацетиленовое пламя.

- Измеряют величину эмиссии испытуемого, контрольного и калибровочных растворов. Для каждого раствора проводят не менее 3 измерений. Из значений эмиссии испытуемого и стандартных растворов вычитают значение эмиссии контрольного раствора. Строят калибровочную кривую зависимости средних результатов измерений, полученных для калибровочных растворов от их концентрации. Содержание натрия в испытуемом растворе определяют по калибровочному графику.

2. Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой»).

Кальций. Испытание проводят одним из альтернативных методов.

1. Атомно-абсорбционная спектрометрия (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 1).

- Испытуемый раствор. Используют неразбавленный раствор препарата или раствор препарата разбавляют водой для получения испытуемого раствора с концентрацией кальция, соответствующей рабочему диапазону применяемого прибора.

- Калибровочные растворы. Используя кальция стандартный раствор 400 мкг/мл, готовят не менее трёх калибровочных растворов кальция так, чтобы диапазон концентраций этих растворов включал ожидаемое значение концентрации кальция в испытуемом растворе.

- Условия испытания

Источник излучения | лампа для определения кальция с полым катодом;
Длина волны | 422,7 нм;
Атомизация | воздушно-пропановое или воздушно-ацетиленовое пламя.

- Измеряют поглощение испытуемого, контрольного и калибровочных растворов. Для каждого раствора проводят не менее 3 измерений. Из значений поглощения испытуемого и стандартных растворов вычитают значение поглощения контрольного раствора. Строят калибровочную кривую зависимости средних результатов измерений, полученных для калибровочных растворов от их концентрации. Содержание кальция в испытуемом растворе определяют по калибровочному графику.

2. Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой»).

Магний. Испытание проводят одним из альтернативных методов.

1. Атомно-абсорбционная спектрометрия (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 1).

- Испытуемый раствор. Используют неразбавленный раствор препарата или раствор препарата разбавляют водой для получения испытуемого раствора с концентрацией магния, соответствующей рабочему диапазону применяемого прибора.

- Калибровочные растворы. Используя магния стандартный раствор 100 мкг/мл, готовят не менее трёх калибровочных растворов магния так, чтобы диапазон концентраций этих растворов включал ожидаемое значение концентрации магния в испытуемом растворе.

- Условия испытания

Источник излучения | лампа для определения магния с полым катодом;
Длина волны | 285,2 нм;
Атомизация | воздушно-пропановое или воздушно-ацетиленовое пламя.

- Измеряют поглощение испытуемого, контрольного и калибровочных растворов. Для каждого раствора проводят не менее 3 измерений. Из значений поглощения испытуемого и стандартных растворов вычитают значение поглощения контрольного раствора. Строят калибровочную кривую зависимости средних результатов измерений, полученных для калибровочных растворов от их концентрации. Содержание магния в испытуемом растворе определяют по калибровочному графику.

2. Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно связанной плазмой»).

Хлориды. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В ячейку для титрования или коническую колбу помещают точно отмеренный объём раствора препарата, соответствующий около 0,7 ммоль хлоридов, при необходимости разводят водой, и титруют 0,1 М раствором серебра нитрата потенциометрически, применяя в качестве электрода сравнения комбинированный хлорсеребряный электрод (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

Учитывают объём титранта между двумя точками перегиба на кривой титрования.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 3,545 мг хлорид-иона.

Гидрокарбонат. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Объём испытуемого раствора препарата, соответствующий около 0,1 г натрия гидрокарбоната, титруют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты, определяя конечную точку потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

1 мл 0,1 М хлористоводородной кислоты соответствует 8,401 мг гидрокарбоната.

Лактат. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В ячейку для титрования или коническую колбу помещают точно отмеренный объём раствора препарата, соответствующий около 0,7 ммоль лактата, прибавляют 10,0 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты, 50 мл ацетонитрила и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают объём титранта между двумя точками перегиба на кривой титрования.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 8,907 мг лактата.

Гидрокарбонат и лактат (при совместном присутствии в растворах для перитонеального диализа, растворах для гемофильтрации и растворах для гемодиафильтрации). Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза: серная кислота 0,005 М, предварительно дегазированная гелием для хроматографии.

Испытуемый раствор. Готовят как указано в фармакопейной статье.

Стандартные растворы. Растворяют в 100 мл воды для хроматографии такие точно взвешенные количества фармакопейного стандартного образца натрия лактата и фармакопейного стандартного образца натрия гидрокарбоната, чтобы получить концентрации, соответствующие 90 %, 100 % и 110 % заявленного содержания.

Хроматографические условия

Колонка | 300 × 7,8 мм, катионообменная смола, 9 мкм;
Температура колонки | 60 °С;
Скорость потока | 0,6 мл/мин;
Детектор | дифференциальный рефрактометр;
Объём пробы | 20 мкл.

Порядок выхода пиков: лактат, гидрокарбонат.

Определяют содержание лактатов и гидрокарбонатов в испытуемом растворе путём интерполяции площади пика лактата и высоты пика гидрокарбоната по линейной регрессионной кривой, полученной с помощью стандартных растворов.

Декстроза. Определение проводят одним из альтернативных методов.

1. Титриметрический метод (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

- Испытуемый раствор. Точно отмеренный объём раствора препарата, соответствующий около 5,0 г декстрозы безводной, помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл и доводят объём водой до метки.

- В коническую колбу с притёртой пробкой вместимостью 225±25 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора, прибавляют 5 мл воды, 25 мл 0,05 М раствора йода и 5 мл 1 М раствора натрия гидроксида. Колбу закрывают пробкой и выдерживают в тёмном месте при 20 °С в течение 20 мин. Прибавляют 5 мл серной кислоты разведенной 16 % и титруют избыток йода 0,1 М раствором натрия тиосульфата до появления жёлтого окрашивания, прибавляют 0,5 мл крахмала раствора 1 % и продолжают титровать 0,1 М раствором натрия тиосульфата до обесцвечивания раствора.

- Параллельно проводят контрольный опыт.

- 1 мл 0,1 М раствора йода соответствует 9,008 мг декстрозы безводной.

2. Поляриметрия (ОФС «Оптическое вращение»).

- Испытуемый раствор. Точно отмеренный объём раствора препарата, соответствующий около 30 г декстрозы безводной, помещают в мерную колбу вместимостью 500 мл и доводят объём раствора водой до метки.

- В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,2 мл 6 М раствора аммиака, доводят объём содержимого испытуемым раствором до метки и выдерживают 30 мин.

- Измеряют угол вращения испытуемого раствора.

- Содержание декстрозы С6Н12О6 в препарате в процентах от заявленного количества (Х) вычисляют по формуле:

- где α – измеренный угол вращения, °;
  52,7 – удельное оптическое вращение декстрозы, (°) ∙ мл ∙ дм-1 ∙ г-1;
  l – толщина слоя, дм;
  V1 – объём препарата, взятый для приготовления испытуемого раствора, мл;
  L – заявленное количество декстрозы в препарате, г/100 мл.

3. Высокоэффективная жидкостная хроматография с использованием рефрактометрического детектора (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

- Подвижная фаза (ПФ). Вода.

- Испытуемый раствор. Используют раствор препарата без разведения или раствор препарата разводят водой до концентрации декстрозы около 15 мг/мл.

- Раствор стандартного образца декстрозы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают около 0,165 г фармакопейного стандартного образца декстрозы моногидрата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

- Хроматографические условия

Колонка | 300 × 7,8 мм, катионообменная смола сильная (кальциевая форма), 9 мкм; |  |
Температура колонки | 85 °С; |  |
Скорость потока | 0,5 мл/мин; |  |
Детектор | рефрактометрический; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 15 мин. |  |

Хроматографируют стандартный и испытуемый растворы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- относительное стандартное отклонение площади пика декстрозы должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки, рассчитанная по пику декстрозы, должна составлять не менее 1000 теоретических тарелок;

- фактор асимметрии пика (AS) декстрозы должен быть не более 2,0.

Содержание декстрозы в препарате в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика декстрозы на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика декстрозы на хроматограмме стандартного раствора;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца декстрозы моногидрата, взятая для приготовления стандартного раствора, мг;
F – фактор разведения препарата;
P – содержание декстрозы в фармакопейном стандартном образце декстрозы моногидрата, %;
L – заявленное содержание декстрозы в препарате, мг/мл.

Цитрат-ионы. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Испытуемый раствор. В коническую колбу помещают 10 мл раствора препарата и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до появления розовой окраски (индикатор – 0,2 мл фенолфталеина раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1,0 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 8,603 мг натрия цитрата в пересчёте на безводное вещество.

###### Упаковка

В соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств».

Упаковка лекарственных препаратов в виде растворов для перитонеального диализа, растворов для гемодиализа, растворов для гемофильтрации, растворов для гемодиафильтрации представляет собой, как правило, гибкую систему упаковки, состоящую из однокамерного или двухкамерного пакета из полимерного материала общим объёмом до 6000 мл, снабженную необходимыми соединительными элементами для подключения лекарственного препарата к соответствующему интра- или экстракорпоральному контуру диализа или фильтрации. Система упаковки лекарственных препаратов для перитонеального диализа также может включать пустой дренажный пакет. Каждую систему упаковки, состоящую из пакета с соединительными элементами, помещают в герметично запаянный пакет (мешок) из полимерной плёнки (защитную оболочку).

Упаковка лекарственных препаратов в виде концентрированных растворов для гемодиализа, для гемофильтрации или для гемодиафильтрации, предназначенных для разбавления перед использованием, может представлять собой жёсткие или полужёсткие бутыли и другие ёмкости из полимерных материалов.

Упаковка и соединительные элементы упаковки из полимерных материалов должны соответствовать требованиям, предъявляемым к упаковке из полимерных материалов, предназначенной для лекарственных средств для парентерального применения.

###### Маркировка

В соответствии с ОФС «Маркировка лекарственных средств».

На первичной упаковке лекарственных препаратов в виде растворов для перитонеального диализа, растворов для гемодиализа, растворов для гемофильтрации, растворов для гемодиафильтрации дополнительно указывают:

- содержание действующих веществ (состав) в пересчёте на 1 л раствора лекарственного препарата, в г/л;

- ионный состав раствора лекарственного препарата, в ммоль/л;

- диапазон значений рН раствора;

- теоретическую осмолярность в мОсмоль/л;

- «Для однократного применения»;

- «Перед использованием убедиться, что упаковка не повреждена и раствор прозрачный, чистый»;

- «Все неиспользованные количества раствора должны быть уничтожены».

При необходимости также указывают:

- «Стерильно»;

- «Не содержит бактериальные эндотоксины».

Указывают способ/путь введения и применения лекарственных препаратов:

- «Для интраперитонеального введения», «Не использовать для внутривенного введения» ‒ растворы для перитонеального диализа;

- «Для введения в экстракорпоральный контур», «Не использовать для внутривенного введения» ‒ растворы для гемодиализа;

- «Только для внутривенного введения» ‒ растворы для гемофильтрации и растворы для гемодиафильтрации.

Для растворов лекарственных препаратов, получаемых путём смешивания двух растворов, находящихся в двух отдельных камерах упаковки, содержание действующих веществ в пересчёте на 1 л раствора (г/л) и ионный состав раствора (ммоль/л) указывают для раствора, готового к использованию, то есть раствора, полученного после смешивания. Дополнительно на первичной упаковке указывают:

- «Не использовать растворы из двух камер без тщательного смешивания»;

- «Готовый к применению раствор должен быть использован в течение 24 ч после смешивания» или могут быть указаны индивидуальные для лекарственного препарата сроки использования.

Для лекарственных препаратов в виде концентрированных растворов для гемодиализа, для гемофильтрации или для гемодиафильтрации указывают содержание действующих веществ (состав) в пересчёте на 1 л (г/л) и ионный состав (ммоль/л) концентрированного раствора лекарственного препарата. Дополнительно должно быть указано:

- концентрированный раствор должен быть разбавлен непосредственно перед использованием;

- коэффициент разбавления раствора для использования,

- объём, взятый для использования, должен быть точно измерен;

- ионный состав разбавленного раствора, готового к использованию (ммоль/л),

- разбавление, которое должно быть сделано;

- расчетная осмолярность в мОсмоль/л,

- любая неиспользованная часть концентрированного раствора должна быть отброшена.

###### Хранение

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственных средств».

В упаковке, обеспечивающей стабильность в течение указанного срока годности лекарственного препарата при температуре не ниже 4 °C, если не указано иначе в фармакопейной статье.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0045 Аэрозоли

Взамен ОФС.1.4.1.0002.15

Аэрозоли – лекарственная форма, представляющая собой раствор, эмульсию или суспензию действующих веществ, находящуюся под давлением пропеллента в герметичной упаковке (аэрозольный баллон), снабжённой клапанно-распылительной системой, обеспечивающей высвобождение содержимого в виде дисперсии твёрдых или жидких частиц в газе, размер которых соответствует пути введения.

Аэрозоли представляют собой двухфазные (газ и жидкость) или трёхфазные (газ, жидкость и твёрдое вещество или жидкость) системы. Двухфазные аэрозоли состоят из раствора фармацевтической субстанции в сжиженном пропелленте с добавлением растворителей, обеспечивающих растворимость фармацевтических субстанций. Трёхфазные аэрозоли состоят из суспензии или эмульсии фармацевтических субстанций и пропеллента.

В зависимости от способа/пути введения и применения различают аэрозоли для наружного применения, для местного применения, для ингаляций, трансдермальные. К аэрозолям для местного применения относят аэрозоли назальные, ушные, для нанесения на слизистую оболочку полости рта, подъязычные.

Аэрозоли могут быть дозированными и недозированными.

###### Особенности технологии

Вспомогательные вещества, входящие в состав аэрозолей, должны обеспечивать оптимальные технологические характеристики лекарственной формы, быть совместимы с другими компонентами лекарственной формы и материалом упаковки. Вспомогательные вещества в составе аэрозолей для ингаляций не должны неблагоприятно влиять на функцию слизистой оболочки респираторного тракта.

В качестве вспомогательных веществ, применяемых при производстве аэрозолей, используют растворители, поверхностно-активные вещества, плёнкообразователи, корригенты вкуса и запаха, антимикробные консерванты, антиоксиданты; а также пропелленты, например, сжиженные газы, галогенированные углеводороды или смеси пропеллентов.

Аэрозоли помещают в упаковку, которая может быть изготовлена из металла, стекла, полимерных материалов или комбинаций указанных материалов, которые не должны взаимодействовать с содержимым упаковки. Стеклянные ёмкости аэрозолей должны быть защищены покрытием из полимерного материала. Упаковка аэрозолей должна быть прочной и устойчивой по отношению к внутреннему давлению.

Упаковка недозированных аэрозолей должна быть снабжена средством доставки лекарственного препарата – распылительным или клапанно-распылительным устройством непрерывного действия; упаковка дозированных аэрозолей – дозирующим распылительным или дозирующим клапанно-распылительным устройством. Распылительное устройство должно регулировать высвобождение содержимого упаковки во время использования: скорость и полноту высвобождения, размер частиц дисперсии, однородность дозирования. Клапанно-распылительное устройство аэрозолей должно обеспечивать герметичность упаковки в нерабочем состоянии. Материалы, используемые в производстве распылительных и дозирующих устройств (полимеры, эластомеры, металл), должны быть инертны по отношению к содержимому упаковки.

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственной формы «Аэрозоли» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту; в установленных случаях, при получении стерильных аэрозолей, должны быть приняты меры, обеспечивающие их стерильность.

###### Испытания

Аэрозоли должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Аэрозоли, предназначенные для ингаляций, должны выдерживать требования ОФС «Лекарственные формы для ингаляций».

Описание. Из упаковки аэрозоли высвобождаются в виде дисперсии твёрдых или жидких частиц в газе, образующих жидкость, которая может представлять собой раствор, суспензию, эмульсию. Аэрозоли характеризуют, отмечая внешний вид, органолептические (цвет, запах) и другие свойства жидкости в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Для аэрозолей, представляющих собой эмульсии и суспензии, может наблюдаться расслаивание, но они должны легко реэмульгироваться и ресуспендироваться при встряхивании для обеспечения равномерного распределения компонентов дисперсной фазы в дисперсионной среде.

Давление в упаковке. Испытание проводят на стадии фармацевтической разработки и технологического процесса производства для аэрозолей, в которых пропеллентами являются сжатые газы, в соответствии с ОФС «Давление в упаковке».

Герметичность упаковки (скорость утечки). Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение герметичности упаковки».

Испытание клапанного устройства. Испытание проводят, если применимо, на стадии технологического процесса производства.

Выход содержимого упаковки. Испытание проводят для недозированных аэрозолей в соответствии с ОФС «Выход содержимого упаковки».

Однородность массы доставляемых (высвобождаемых) доз. Испытание проводят для дозированных аэрозолей, представляющих собой растворы.

Испытание аэрозолей для ингаляций проводят в соответствии с ОФС «Лекарственные формы для ингаляций» (испытание «Однородность доставляемых (высвобождаемых) доз»).

Контроль показателя должен проводиться как для доз, высвобождаемых из одной упаковки, так и для доз, полученных из разных упаковок. Процедура отбора доз должна включать в себя отбор доз в начале, в середине и в конце использования лекарственного препарата в виде аэрозоля.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, отбор доз для испытания из 10 упаковок аэрозолей проводят следующим образом: из трёх упаковок необходимое количество доз высвобождают в начале, из четырёх упаковок – в середине, из трёх упаковок – в конце использования лекарственного препарата.

Методика определения однородности массы доставляемых (высвобождаемых) доз для одной упаковки. Высвобождают одну дозу и отбрасывают ее. Спустя не менее 5 с встряхивают упаковку в течение 5 с, снова высвобождают и отбрасывают одну дозу. Повторяют указанную процедуру еще 3 раза, если в фармакопейной статье не указано иначе. Взвешивают упаковку. Встряхивают упаковку в течение 5 с, высвобождают и отбрасывают одну дозу, снова взвешивают упаковку. По разности вычисляют массу высвободившейся дозы.

Испытание повторяют еще для 9 доз, указанных в фармакопейной статье. Рассчитывают среднюю массу дозы (mср) и отклонения индивидуальных значений масс от средней массы дозы.

Лекарственный препарат считают выдержавшим испытание, если не более 1 из 10 индивидуальных значений масс отклоняется от средней массы на величину, превышающую 25 %, при этом не более чем на 35 %. Если 2 или 3 результата выпадают из пределов 75–125 %, испытание повторяют с 20 другими дозами. Не более 3 из 30 значений могут выходить за пределы 75–125 %, и все значения должны быть в пределах от 65 % до 135 %.

Определение средней массы одной дозы

Способ 1. Среднюю массу дозы (mср) рассчитывают, используя данные, полученные в ходе проведения испытания на «Однородность массы доставляемых (высвобождаемых) доз».

Способ 2. Если указано в фармакопейной статье, среднюю массу одной дозы определяют по отдельной методике.

С помощью распылителя производят пять нажатий и высвобождают первые пять доз аэрозоля, упаковку с распылителем взвешивают с точностью до 0,01 г (m1). Затем производят точное количество нажатий (n), указанное в фармакопейной статье (от 10 до 20) с интервалом не менее 5 с и взвешивают упаковку с распылителем с точностью до 0,01 г (m2).

Среднюю массу одной дозы в граммах (mср) вычисляют по формуле:

Испытания проводят при температуре 20±2 ºС.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, средняя масса одной дозы должна быть в пределах от 85 % до 115 % от заявленной массы дозы, указанной на этикетке.

Однородность доставляемых (высвобождаемых) доз. (Однородность дозирования). Испытание проводят для дозированных аэрозолей, представляющих собой эмульсии или суспензии.

Испытание аэрозолей для ингаляций проводят в соответствии с ОФС «Лекарственные формы для ингаляций» (испытание «Однородность доставляемых (высвобождаемых) доз»).

Контроль показателя должен проводиться как для доз, высвобождаемых из одной упаковки, так и для доз, полученных из разных упаковок. Процедура отбора доз должна включать в себя отбор доз в начале, в середине и в конце использования препарата в виде аэрозоля.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, отбор доз для испытания из 10 упаковок аэрозолей проводят следующим образом: из трёх упаковок необходимое количество доз высвобождают в начале, из четырёх упаковок – в середине, из трёх упаковок – в конце использования лекарственного препарата.

Методика определения однородности доставляемых (высвобождаемых) доз (однородности дозирования) для одной упаковки. Испытание проводят с использованием аппарата или установки, способных к количественному удерживанию дозы, выпущенной из распылительного устройства. Встряхивают упаковку в течение 5 с, высвобождают и отбрасывают одну дозу. Спустя не менее 5 с снова встряхивают упаковку в течение 5 с, высвобождают и отбрасывают одну дозу. Повторяют указанную процедуру еще три раза, если иначе не указано в фармакопейной статье. Через 5 с выпускают одну дозу в приёмник аппарата. Содержимое приёмника собирают путём последовательных промываний и определяют содержание действующего вещества в объединённых промывных водах.

Испытание повторяют еще для 9 доз, указанных в фармакопейной статье. Рассчитывают среднюю доставляемую дозу (среднее значение содержания действующего вещества в одной доставляемой дозе лекарственного препарата) и отклонения индивидуальных значений от средней доставляемой дозы. Допустимые отклонения средней доставляемой (высвобождаемой) дозы должны быть от 85 % до 115 % от заявленного значения, указанного на этикетке.

Лекарственный препарат выдерживает испытание, если 9 из 10 результатов находятся в пределах от 75 % до 125 % от среднего значения, а все результаты находятся в пределах от 65 % до 135 %. Если 2 или 3 результата выпадают из пределов 75–125 %, испытание повторяют с 20 другими дозами. Не более 3 из 30 значений могут выходить за пределы 75–125 %, и все значения должны быть в пределах от 65 % до 135 %.

Для аэрозолей, содержащих несколько действующих веществ, испытание на однородность доставляемых (высвобождаемых) доз должно быть выполнено для каждого вещества.

Количество высвобождений из упаковки (количество доз в упаковке). Испытание проводят для дозированных аэрозолей в многодозовой упаковке одним из указанных методов.

Метод 1. Выпускают содержимое одной упаковки, высвобождая дозы с интервалом не менее 5 с. Регистрируют количество высвобождённых доз.

Допускается проводить испытание одновременно с определением показателя «Однородность массы доставляемых (высвобождаемых) доз» или показателя «Однородность доставляемых (высвобождаемых) доз (Однородность дозирования)».

Метод 2. Упаковку взвешивают вместе с распылителем с точностью до 0,01 г (m3). Нажимая на распылитель, из упаковки выпускают всё содержимое и снова взвешивают упаковку вместе с распылителем с точностью до 0,01 г (m4).

Среднее количество доз (nср) в одной упаковке вычисляют по формуле:

где nср – среднее количество доз в одной упаковке;
m3 – первоначальная масса упаковки с распылителем, г;
m4 – масса упаковки с распылителем после полного извлечения её содержимого, г;
mср – cредняя масса одной дозы, рассчитанная при определении показателя «Однородность массы доставляемых (высвобождаемых) доз», г.

Количество доз, полученное в результате испытания, должно быть не менее, указанного на этикетке.

Размер частиц. Испытание проводят для аэрозолей, представляющих собой суспензию действующих веществ, не предназначенных для ингаляций. Методика определения и требования к размеру частиц должны быть указаны в фармакопейной статье.

Респирабельная фракция. (Аэродинамическое распределение мелкодисперсных частиц). Испытание проводят для аэрозолей, предназначенных для ингаляций, в соответствии с ОФС «Аэродинамическое распределение мелкодисперсных частиц» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

pH. Испытание проводят, если указано в фармакопейной статье, потенциометрическим методом в соответствии с ОФС «Ионометрия». Значение рН указывают в фармакопейной статье.

Вода. Испытание проводят, если указано в фармакопейной статье в тех случаях, когда содержание воды может оказать влияние на характеристики (биодоступность действующего вещества/веществ, на стабильность и т.д.) лекарственного препарата в лекарственной форме «Аэрозоли».

Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение воды» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для всех аэрозолей, за исключением стерильных, в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Стерильность. Испытание проводят для аэрозолей, к которым предъявляется требование стерильности, в соответствии с ОФС «Стерильность».

###### Маркировка

В соответствии с ОФС «Маркировка лекарственных средств».

Для аэрозолей должны быть предусмотрены предупредительные надписи: «Хранить вдали от источника огня, отопительной системы и прямых солнечных лучей», «Не вскрывать», «Предохранять от падений и ударов» и, при необходимости, другие надписи.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.1.0046Спреи

Взамен ОФС.1.4.1.0002.15

Спреи – лекарственная форма, представляющая собой раствор, эмульсию или суспензию, высвобождение действующих веществ которых, происходит за счёт давления воздуха, создаваемого с помощью механического распылителя насосного типа или при сжатии полимерной упаковки, обеспечивающей высвобождение содержимого в виде дисперсии твёрдых или жидких частиц в воздухе, размер которых соответствует пути введения.

По сравнению с аэрозолями спреи не содержат пропеллента и являются более грубодисперсной системой.

Спреи представляют собой однофазные (жидкость) или двухфазные (жидкость и твёрдое вещество или жидкость) системы.

В зависимости от способа/пути введения и применения различают спреи для наружного применения, для местного применения и трансдермальные. Спреи для местного применения могут быть для применения в полости рта, назальные, ушные. К спреям для применения в полости рта относят спреи для нанесения на слизистую оболочку полости рта, подъязычные.

Спреи могут быть дозированными и недозированными.

Спрей трансдермальный – спрей, предназначенный для контролируемой доставки действующего вещества в системный кровоток путём пассивной диффузии через неповрежденную кожу.

Спрей подъязычный дозированный – спрей, предназначенный для нанесения под язык с целью оказания системного действия, выпускаемый в упаковке с дозирующим устройством.

###### Особенности технологии

Вспомогательные вещества, входящие в состав спреев, должны обеспечивать оптимальные технологические характеристики лекарственной формы, быть совместимы с другими компонентами лекарственной формы и материалом упаковки.

В качестве вспомогательных веществ, применяемых при производстве спреев, используют растворители, поверхностно-активные вещества, плёнкообразователи, корригенты вкуса и запаха, антимикробные консерванты, антиоксиданты.

Спреи могут быть получены путём растворения/диспергирования в соответствующем растворителе лиофилизатов или порошков, предназначенных для получения спреев.

Спреи могут быть выпущены в однодозовой и многодозовой упаковке.

Упаковка недозированных спреев должна быть снабжена средством доставки лекарственного препарата – распылительным устройством непрерывного действия; упаковка дозированных спреев – дозирующим распылительным устройством. Распылительное устройство должно регулировать высвобождение содержимого упаковки во время использования: скорость и полноту высвобождения, размер частиц дисперсии, однородность дозирования. Материалы, используемые в производстве упаковки спреев, а также распылительных и дозирующих устройств, должны быть инертны по отношению к содержимому упаковки.

При получении лекарственных препаратов в виде лекарственных форм «Спреи» должны быть приняты меры, обеспечивающие их микробиологическую чистоту; в установленных случаях, при получении стерильных спреев, должны быть приняты меры, обеспечивающие их стерильность.

###### Испытания

Спреи должны соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и выдерживать следующие испытания, характерные для данной лекарственной формы.

Лекарственные формы, представляющие собой порошки и лиофилизаты, предназначенные для получения лекарственных препаратов в виде лекарственной формы «Спрей», должны выдерживать требования ОФС «Порошки» и ОФС «Лиофилизаты» соответственно.

Описание. При высвобождении из упаковки спреи образуют жидкость, представляющую собой раствор, суспензию или эмульсию. Спреи характеризуют, отмечая внешний вид, органолептические (цвет, запах) и другие свойства жидкости в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Для спреев, представляющих собой эмульсии и суспензии, может наблюдаться расслаивание, но они должны легко реэмульгироваться и ресуспендироваться при встряхивании для обеспечения равномерного распределения компонентов дисперсной фазы в дисперсионной среде.

Выход содержимого упаковки. Испытание проводят для недозированных спреев в соответствии с ОФС «Выход содержимого упаковки».

Однородность массы доставляемых (высвобождаемых) доз. Испытание проводят для дозированных спреев, представляющих собой растворы.

Контроль показателя должен проводиться не только для доз, высвобождаемых из одной упаковки, но и для доз, полученных из разных упаковок. Процедура отбора доз должна включать в себя отбор доз в начале, в середине и в конце использования препарата.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, отбор доз для испытания из 10 упаковок спреев проводят следующим образом: из трёх упаковок необходимое количество доз высвобождают в начале, из четырёх упаковок – в середине, из трёх упаковок – в конце использования лекарственного препарата.

Методика определения однородности массы доставляемых (высвобождаемых) доз для одной упаковки. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, перед использованием упаковку встряхивают в течение 5 с, высвобождают одну дозу и отбрасывают её. Спустя не менее 5 с встряхивают упаковку в течение 5 с, снова высвобождают и отбрасывают одну дозу. Повторяют указанную процедуру еще три раза, если иначе не указано в фармакопейной статье. Взвешивают упаковку. Встряхивают упаковку в течение 5 с, высвобождают и отбрасывают одну дозу, снова взвешивают упаковку. По разности вычисляют массу высвободившейся дозы.

Испытание повторяют еще для 9 доз, указанных в фармакопейной статье. Используя данные, полученные при определении однородности массы доставляемых (высвобождаемых) доз, рассчитывают среднюю массу дозы (mср) и отклонения индивидуальных значений от средней массы дозы.

Лекарственный препарат считают выдержавшим испытание, если не более 1 из 10 индивидуальных масс отклоняется от средней массы на величину, превышающую 25 %, при этом не более чем на 35 %. Если 2 или 3 результата выпадают из пределов 75–125 %, испытание повторяют с 20 другими дозами. Не более 3 из 30 значений могут выходить за пределы 75 – 125 %, и все значения должны быть в пределах от 65 % до 135 %.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, средняя масса одной дозы должна быть в пределах от 85 % до 115 % от заявленной массы дозы, указанной на этикетке.

Однородность доставляемых (высвобождаемых) доз. (Однородность дозирования). Испытание проводят для дозированных спреев, представляющих собой эмульсии или суспензии.

Контроль данного показателя должен проводиться не только для доз, высвобождаемых из одной упаковки, но и для доз, полученных из разных упаковок. Процедура отбора доз должна включать в себя отбор доз в начале, в середине и в конце использования препарата.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, отбор доз для испытания из 10 упаковок спреев проводят следующим образом: из трёх упаковок необходимое количество доз высвобождают в начале, из четырёх упаковок – в середине, из трёх упаковок – в конце использования лекарственного препарата.

Методика определения однородности доставляемых (высвобождаемых) доз (Однородности дозирования) для одной упаковки. Испытание проводят с использованием аппарата или установки, способных к количественному удерживанию дозы, выпущенной из распылительного устройства. Встряхивают упаковку в течение 5 с, высвобождают и отбрасывают одну дозу. Спустя не менее 5 с снова встряхивают упаковку в течение 5 с, высвобождают и отбрасывают одну дозу. Повторяют указанную процедуру еще 3 раза, если иначе не указано в фармакопейной статье. Через 5 с выпускают одну дозу в приёмник аппарата. Содержимое приёмника собирают путём последовательных промываний и определяют содержание действующего вещества в объединённых промывных водах.

Испытание повторяют ещё для 9 доз, указанных в фармакопейной статье. Рассчитывают среднюю доставляемую дозу (среднее значение содержания действующего вещества в одной доставляемой дозе лекарственного препарата) и отклонения индивидуальных значений от средней доставляемой дозы. Допустимые отклонения должны быть от 85 % до 115% от значения, указанного на этикетке.

Лекарственный препарат выдерживает испытание, если 9 из 10 результатов находятся в пределах от 75 % до 125 % от среднего значения, а все результаты находятся в пределах от 65 % до 135 %. Если 2 или 3 результата выпадают из пределов 75−125 %, испытание повторяют с 20 другими дозами. Не более 3 из 30 значений могут выходить за пределы 75−125 %, и все значения должны быть в пределах от 65 % до 135 %.

Для спреев, содержащих несколько действующих веществ, испытание на однородность доставляемых (высвобождаемых) доз. (Однородность дозирования) должно быть выполнено для каждого вещества.

Однородность дозирования. Испытание проводят для спреев в однодозовой упаковке в соответствии с ОФС «Однородность дозирования» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Количество высвобождений из упаковки (количество доз в упаковке). Испытание проводят для дозированных спреев в многодозовой упаковке одним из указанных методов.

Метод 1. Выпускают содержимое одной упаковки, высвобождая дозы с интервалом не менее 5 с. Регистрируют количество высвобожденных доз.

Допускается проводить испытание одновременно с определением показателя «Однородность массы доставляемых (высвобождаемых) доз» или показателя «Однородность доставляемых (высвобождаемых) доз (Однородность дозирования)».

Метод 2. Упаковку взвешивают вместе с распылителем или насадкой с точностью до 0,01 г (m1). Нажимая на распылитель или насадку, из упаковки выпускают всё содержимое и снова взвешивают упаковку вместе с распылителем или насадкой с точностью до 0,01 г (m2).

Среднее количество доз (nср) в одной упаковке вычисляют по формуле:

где nср – среднее количество доз в одной упаковке;
m1 – первоначальная масса упаковки с распылителем, г;
m2 – масса упаковки с распылителем после полного извлечения её содержимого, г;
mср – cредняя масса одной дозы, рассчитанная при определении показателя «Однородность массы доставляемых (высвобождаемых) доз», г.

Количество доз, полученное в результате испытания, должно быть не менее, указанного на этикетке.

Размер частиц. Испытание проводят для спреев, представляющих собой суспензию действующих веществ. Методика определения и требования к размеру частиц должны быть указаны в фармакопейной статье.

pH. Испытание проводят, если указано в фармакопейной статье, потенциометрическим методом в соответствии с ОФС «Ионометрия». Значение рН указывают в фармакопейной статье.

Микробиологическая чистота. Испытание проводят для всех спреев, за исключением стерильных, в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Стерильность. Испытание проводят для спреев, к которым предъявляется требование стерильности, в соответствии с ОФС «Стерильность».

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0001 Аэродинамическое распределение мелкодисперсных частиц

Взамен ОФС.1.4.2.0001.15

Настоящая общая фармакопейная статья описывает приборы и методы, используемые для определения аэродинамического распределения мелкодисперсных твёрдых и жидких частиц (аэрозолей), формируемых при активации препаратов для ингаляций.

Аэродинамическую характеристику распределения мелкодисперсных частиц проводят путём оценки респирабельной фракции (количества частиц с аэродинамическим диаметром менее 5 мкм).

Если респирабельной фракции недостаточно для полной характеристики распределения частиц по размеру, вместо неё проводят оценку масс-медианного аэродинамического диаметра и геометрического стандартного отклонения.

Допускается определение аэродинамического распределения мелкодисперсных частиц с использованием других валидированных методов и соответствующего квалифицированного испытательного оборудования.

При каждом испытании на аэродинамическое распределение мелкодисперсных частиц следует проводить дополнительную проверку баланса масс. Для этого по указанной в фармакопейной статье методике анализа проводят определение содержания анализируемых компонентов лекарственного препарата на всех частях импактора или импинджера, конечном фильтре (если применимо), адаптере, а также ингаляторе. Сумма полученных результатов не должна отличаться от заявленного содержания более чем на 25 %.

Альтернативно можно оценивать баланс масс относительно среднего значения, полученного в испытании на однородность доставляемой дозы. В этом случае в сумму полученных результатов не включают отложения на ингаляторе и адаптере. Баланс масс является критерием валидности полученного результата.

В случае недостижения указанных требований, полученный результат не учитывают, а испытание повторяют.

###### Стеклянный импинджер

Прибор изображен на рис. 1, спецификация компонентов прибора приведена в табл. 1.

Методика для жидких лекарственных форм для распыления

В верхнюю и нижнюю камеры помещают, соответственно, 7 мл и 30 мл растворителя, указанного в фармакопейной статье.

Соединяют все части прибора, при этом прибор должен располагаться строго вертикально. Патрубок в нижней камере должен лишь касаться дна нижней камеры. Присоединяют насос к боковому адаптеру и пропускают через аппарат поток воздуха. Скорость потока воздуха на входе в горловину устанавливают 60±5 л/мин.

Вводят жидкое лекарственное средство для распыления в резервуар небулайзера. Надевают мундштук и соединяют с помощью адаптера со стеклянным импинджером.

Включают поток посредством электромагнитного клапана насоса, а через 10 с – небулайзер. Через 60 с, если нет других указаний в фармакопейной статье, отключают небулайзер, и через 5 с после этого выключают поток (насос).

Разбирают прибор и промывают внутреннюю поверхность верхней камеры растворителем, указанным в фармакопейной статье. Промывную жидкость собирают в мерную колбу.

Затем промывают внутреннюю поверхность нижней камеры. Промывную жидкость собирают в другую мерную колбу.

Промывают фильтр насоса и его соединение с нижней камерой, полученную промывную жидкость объединяют с промывной жидкостью, полученной при мытье нижней камеры.

Определяют количественное содержание действующего вещества в каждой из 2 колб по методике, приведённой в фармакопейной статье.

Интерпретация результатов. Результаты выражают для каждой части прибора (верхней и нижней камеры) в процентах по отношению к заявленному содержанию действующего вещества.

Рисунок 1. Устройство и размеры составных частей (компонентов) стеклянного импинджера. Размеры указаны в мм.

Примечания

1. Некоторые растворители образуют легковоспламеняющиеся паровоздушные смеси, которые могут воспламеняться при прохождении через вакуумный насос, поэтому необходимо соблюдать все соответствующие меры предосторожности.

2. При проведении испытания необходимо придерживаться оптимальных условий окружающей среды (температура, относительная влажность), если нет других указаний в фармакопейной статье.

Таблица 1. Спецификация компонентов стеклянного импинджера
Код | Компонент | Описание | Размеры[6]
--- | --- | --- | ---
А | Адаптер для мундштука | Резиновый адаптер для мундштука |
Б | Горловина | Модифицированная круглодонная колба: | 50 мл
входное отверстие шлифованного стекла | 29/32
выходное отверстие шлифованного стекла | 24/29
В | Переходник из горловины отверстия в верхнюю камеру | Модифицированный стеклянный адаптер: |
входное отверстие шлифованного стекла | 24/29
выходное отверстие шлифованного стекла | 24/29
Нижняя секция в виде стеклянной трубки диаметром | 14
Тонкостенная стеклянная трубка с внешним диаметром | 17
Г | Верхняя камера | Модифицированная круглодонная колба: | 100 мл
входное отверстие шлифованного стекла | 24/29
выходное отверстие шлифованного стекла | 24/29
Д | Соединительная трубка | Стеклянная трубка со стенками средней толщины: |
конусообразное отверстие | 14/23
Изогнутая секция и верхняя вертикальная секция с внешним диаметром | 13
Нижняя вертикальная секция с внешним диаметром | 8
Е | Боковой резьбовой адаптер (к насосу) | Пластиковый наконечник винта | 28/13
Силиконовая прокладка | 28/11
Шайба из ПЭТФ | 28/11
Стеклянная резьба адаптера размером | 28
Выходное отверстие адаптера минимальным диаметром | 5
Ж | Патрубок | Модифицированный полипропиленовый держатель фильтра, соединённый с нижней вертикальной секцией соединительной трубки с помощью соединителя из ПЭТФ | см. рис. 1
Диск с четырьмя форсунками, расположенными на окружности диаметром 5,3 мм вокруг центральной форсунки: | 10
диаметр | 2
выступ | 2
З | Нижняя камера | Коническая колба | 250 мл
входное отверстие шлифованного стекла | 24/29

Методика для аэрозолей (дозированных ингаляционных лекарственных форм, находящихся под давлением)

Адаптер для мундштука подсоединяют к горловине таким образом, чтобы мундштук, при его подсоединении к адаптеру на глубину около 10 мм, располагался выше горизонтальной оси горловины, а открытый конец мундштука, который соединён с испытуемым ингалятором, располагался выше остальных частей стеклянного импинджера.

В верхнюю и нижнюю камеры помещают, соответственно, 7 мл и 30 мл растворителя, указанного в фармакопейной статье.

Соединяют все части прибора, при этом прибор должен располагаться строго вертикально. Патрубок в нижней камере должен лишь касаться дна нижней камеры. Присоединяют насос к боковому адаптеру и пропускают через аппарат поток воздуха. Скорость потока воздуха на входе в горловину устанавливают 60±5 л/мин.

Встряхивают испытуемый ингалятор в течение 5 с и, нажимая на дозирующий клапан, выпускают содержимое в воздух. Процедуру повторяют три раза, встряхивая каждый раз перед высвобождением в течение 5 с. Встряхивают в течение 5 с, соединяют мундштук и ингалятор с адаптером и сразу нажимают на дозирующий клапан, высвобождая дозу лекарственного средства. Отсоединяют ингалятор с мундштуком от адаптера, встряхивают в течение 5 с, вновь соединяют мундштук и ингалятор с адаптером и нажимают на дозирующий клапан. Повторяют описанную выше процедуру еще восемь раз. После десятого нажатия ожидают 5 с и отключают поток (насос).

Разбирают прибор, промывают внутреннюю поверхность соединительной трубки (Д), патрубка (Ж) и бокового резьбового адаптера (Е) растворителем, указанным в фармакопейной статье. Промывную жидкость собирают в нижней камере.

Определяют количественное содержание действующего вещества в полученном растворе по методике, приведённой в фармакопейной статье.

Интерпретация результатов. Результаты выражают в процентах по отношению к заявленному содержанию действующего вещества.

Методика для порошков для ингаляций

В верхнюю и нижнюю камеры помещают, соответственно, 7 мл и 30 мл растворителя, указанного в фармакопейной статье.

Соединяют все части прибора, при этом прибор должен располагаться строго вертикально. Патрубок в нижней камере должен лишь касаться дна нижней камеры. Присоединяют насос к боковому адаптеру и пропускают через аппарат воздух. Скорость потока воздуха на входе в горловину устанавливают 60±5 л/мин.

Ингалятор готовят к использованию, как указано в инструкции по медицинскому применению, и подсоединяют через адаптер к импинджеру. Включают поток (насос) на 5 с, высвобождают дозу. Выключают поток (насос) и отсоединяют ингалятор. Повторяют описанную процедуру девять раз.

Разбирают прибор, промывают внутреннюю поверхность соединительной трубки (Д), патрубка (Ж) и бокового резьбового адаптера (Е) растворителем, указанным в фармакопейной статье. Промывную жидкость собирают в нижней камере.

Определяют количественное содержание действующего вещества в полученном растворе по методике, приведённой в фармакопейной статье.

Интерпретация результатов. Результаты выражают в процентах по отношению к заявленному содержанию действующего вещества.

###### Каскадный импактор Андерсена

Каскадный импактор Андерсена состоит из 8 ступеней с отверстиями и улавливающими пластинами, располагающимися под ступенью, и фильтра. Изготовлен из материала, инертного для компонентов лекарственной формы, например: алюминий, нержавеющая сталь, титан. Ступени соединены между собой и герметизированы уплотнительными кольцами. Размеры и количества отверстий на ступенях приведены в табл. 2. В конфигурации, используемой для анализа аэрозолей рис. 2, входной конус (1) соединён с прямоугольным входным портом (2).

В конфигурации, используемой для анализа порошков для ингаляций, как правило, применяют пресепаратор рис. 3, который располагают между верхней ступенью импактора и входным портом для сбора нереспирабельной фракции порошка.

Для обеспечения герметичности соединения мундштука ингалятора и входного порта используют специальный резиновый адаптер, который должен соответствовать по форме и размерам мундштуку испытуемого ингалятора.

Таблица 2. Размеры и количества отверстий в каскадном импакторе Андерсена
Ступень | Количество отверстий | Диаметр отверстий, мм
--- | --- | ---
0 | 96 | 2,550±0,025
1 | 96 | 1,890±0,025
2 | 400 | 0,9140±0,0127
3 | 400 | 0,7110±0,0127
4 | 400 | 0,5330±0,0127
5 | 400 | 0,3430±0,0127
6 | 400 | 0,2540±0,0127
7 | 201 | 0,2540±0,0127

Рисунок 2. Каскадный импактор Андерсена в конфигурации для анализа аэрозолей: 1 – входной конус; 2 – входной порт.
Рисунок 3. Пресепаратор для каскадного импактора Андерсена. Размеры указаны в мм. За исключением обозначенных мест (не отламывать края), все кромки и шероховатости должны быть удалены.

Поверхность должна быть гладкой. Внутренний канал должен быть отшлифован до чистоты около 0,4 мкм. Размеры уплотнителя: внутренний диаметр 29 мм, внешний диаметр 32 мм, ширина 1,8 мм.

Методика для аэрозолей (дозированных ингаляционных лекарственных форм, находящихся под давлением)

Помещают соответствующий фильтр на нижнюю ступень, собирают импактор, проверяют систему на герметичность, следуя инструкциям производителя. Адаптер закрепляют на входном порте таким образом, чтобы конец мундштука испытуемого ингалятора находился на одном уровне с горизонтальной осью входного порта, а сам ингалятор был ориентирован в рабочую позицию согласно инструкции по применению (как правило, вертикально). Насос соединяют с выходным отверстием прибора и устанавливают скорость потока воздуха на входе 28,3±1,5 л/мин.

Если нет других указаний в инструкции по применению, встряхивают ингалятор в течение 5 с и высвобождают одну дозу в воздух. Включают поток (насос), вставляют мундштук в адаптер и производят выпуск дозы в импактор. Отсоединяют ингалятор от адаптера, встряхивают и вновь производят выпуск дозы в импактор, повторяют процедуру. Количество высвобождений должно быть минимальным, как правило, не более десяти. Через 5 с после последнего высвобождения отключают поток (насос). Разбирают прибор, отсоединяют входной порт, адаптер и мундштук, промывают их растворителем, указанным в фармакопейной статье. Аккуратно извлекают фильтр и улавливающие пластины, промывают их определёнными порциями растворителя, указанными в фармакопейной статье.

Определяют количество действующего вещества в каждой собранной порции по методике, приведённой в фармакопейной статье.

Интерпретация результатов. Для определения величины респирабельной фракции, рассчитывают процентное отношение количества действующего вещества, определённого на ступенях, указанных в фармакопейной статье, к заявленному содержанию действующего вещества.

Методика для порошков для ингаляций

При определении респирабельной фракции в порошках для ингаляций используют модификации каскадного импактора Андерсена на 60 л/мин и 90 л/мин с пресепаратором. Выбор конкретной модификации зависит от того, при какой скорости потока удается достичь критического потока (соотношение Р3/Р2 ≤ 0,5, рис. 4, табл. 3).

Помещают соответствующий фильтр на нижнюю ступень, собирают импактор и проверяют систему на герметичность, следуя инструкциям производителя. Использование пресепаратора оговаривается в фармакопейной статье. Если валидация показала, что отложения на некоторых ступенях незначительны, допустимо не определять содержание для этих ступеней.

Для обеспечения эффективного поглощения частиц возможно покрытие поверхности каждой пластины и пресепаратора глицерином, силиконовым маслом или аналогичной нелетучей, относительно инертной жидкостью с высокой вязкостью.

Соединяют импактор с системой регулирования потока, как указано на рис. 4 и описано в табл. 3.

Если нет других указаний, пропускают через прибор с подсоединённым ингалятором 4 л воздуха со скоростью потока, на которой откалибрована используемая модификация каскадного импактора Андерсена.

Схема системы представлена на рис. 4, описание в табл. 3.

Рисунок 4. Система регулирования воздушного потока

Таблица 3. Описание системы регулирования воздушного потока
Код | Устройство | Описание
--- | --- | ---
А | Соединитель | Внутренний диаметр≥8 мм, например, короткая металлическая муфта с отводом к Р3 меньшего диаметра
Б | Вакуумная трубка | Трубка≥8±0,5 мм (внутренний диаметр), достаточной длины для внутреннего объёма 25±5 мл, например, силиконовая
В | Двухсторонний клапан | Двухсторонний, двухпортовый электромагнитный клапан, имеющий минимальное сопротивление воздушному потоку, с внутренним диаметром≥8 мм, и временем реакции≤100 мс
Г | Вакуумный насос | Насос должен обеспечивать достаточную скорость воздушного потока через собранную систему. Насос соединяют с двухсторонним клапаном с помощью вакуумной трубки (внутренний диаметр≥10 мм)
Д | Таймер | Таймер, способный регулировать двухсторонний клапан в течение необходимого времени
P2 P3 | Измерители давления | Измерители абсолютного давления
Е | Регулирующий клапан | Клапан, регулирующий воздушный поток с максимальным значением Cv≥1

Готовят порошковый ингалятор, как указано в фармакопейной статье или в инструкции по медицинскому применению. При включенном потоке (насосе) и закрытом двустороннем клапане вставляют мундштук ингалятора в адаптер. Высвобождают порошок в прибор, открыв клапан на необходимое время, Т±5 %. Повторяют процедуру, количество высвобождений должно быть минимальным, как правило, не более десяти. Через 5 с после последнего высвобождения отключают поток (насос).

Разбирают прибор, отсоединяют пресепаратор, адаптер и мундштук, промывают их растворителем, указанным в фармакопейной статье. Аккуратно извлекают фильтр и улавливающие пластины, промывают их порциями растворителя, указанными в фармакопейной статье.

Определяют количество действующего вещества в каждой собранной порции по методике, приведённой в фармакопейной статье.

Интерпретация результатов. Для определения величины респирабельной фракции, рассчитывают процентное отношение количества действующего вещества, определённого на ступенях, указанных в фармакопейной статье, к заявленному содержанию действующего вещества.

###### Многоуровневый жидкостной импинджер

Многоуровневый жидкостной импинджер состоит из 5 ступеней: 1 (пресепаратор), 2, 3 и 4 (основные ступени) и 5 (ступень фильтра) (рис. 5, 6, 7, табл. 4, 5). Ступени, на которых производится сбор лекарственного средства, должны поддерживаться во влажном состоянии, в отличие от каскадного импактора Андерсена.

Первая ступень состоит из верхней горизонтальной металлической перегородки (Б), через которую проходит входное отверстие трубки (А) с улавливающей пластиной (Г); стеклянного цилиндра (Д) с отверстием для отбора проб (Е), образующего вертикальную стенку ступени; нижней горизонтальной металлической перегородки (Ж), через которую трубка (З) соединяется со следующей ступенью. Трубка (Х) ступени 4 заканчивается насадкой с набором форсунок.

Улавливающая пластинка (Г) крепится к металлической рамке (К), которая подсоединена двумя проволоками (Л) к втулке (М), соединенной с трубкой. Горизонтальная поверхность улавливающей пластинки перпендикулярна оси распылителя и расположена по центру. Верхняя поверхность уплотняющей пластинки немного приподнята над краем металлической рамы.

Выемка по периметру горизонтальной стенки предназначена для стеклянного цилиндра. Стеклянные цилиндры напротив горизонтальных стенок закрыты сальником (Н) и скреплены между собой шестью болтами (О).

Отверстия для отбора проб закрыты пробками. Дно нижней стенки ступени 4 имеет концентрический выступ с резиновым уплотнительным кольцом (Р), которое обеспечивает герметичное примыкание краёв фильтра к держателю фильтра.

Держатель фильтра (Т) выполнен в виде резервуара с концентрическим углублением, в котором плотно установлена перфорированная опора для фильтра (У). Держатель фильтра имеет размер, предусматривающий использование фильтров диаметром 76 мм. Конструкция, включающая все ступени, зафиксирована на держателе фильтра двумя зажимами (Ф).

Входной порт (рис. 8) под прямым углом соединён с входным отверстием трубки первой ступени импинджера.

Резиновое уплотнительное кольцо распылителя обеспечивает герметичность соединения с входным портом.

Для обеспечения герметичности соединения мундштука ингалятора и входного порта используют специальный резиновый адаптер, который должен соответствовать по форме и размерам мундштуку испытуемого ингалятора.

Таблица 4. Спецификация компонентов многоуровневого жидкостного импинджера
Код | Компонент | Описание | Размеры[6]
--- | --- | --- | ---
А, З | Трубка | Металлическая трубка, проходящая через разделительную перегородку с прокладкой (С), с полированной внутренней поверхностью | см. рис. 6
Б, Ж | Разделительная перегородка | Круглая металлическая пластина диаметром | 120
толщина | см. рис. 6
В | Прокладка | Например, из ПЭТФ | должна подходить к трубке
Г | Улавливающая пластина | Пористый круглый диск из тугоплавкого стекла | -
диаметр | см. рис. 6
Д | Стеклянный цилиндр | Стеклянная трубка с ровными полированными поверхностями | -
высота вместе с прокладками | 46
внешний диаметр | 100
толщина стенок | 3,5
диаметр отверстия для отбора пробы (F) | 18
крышка отверстия для отбора пробы | 24/25 (ISO)[7] 7. по ISO 2768-mk
К | Металлическая рамка | L-образная круговая рамка с щелью | -
внутренний диаметр | должен подходить к улавливающей пластине
высота | 4
толщина горизонтальной секции | 0,5
толщина вертикальной секции | 2
Л | Проволока | Стальная, соединяющая металлическую рамку и втулку (два для каждой рамки) | -
диаметр | 1
М | Втулка | Металлическая втулка, закреплённая на трубке резьбовым соединением | -
внутренний диаметр | должен подходить к трубке
высота | 6
толщина | 5
Н | Сальник | Прокладка, например, силиконовая | должна подходить к стеклянному цилиндру
О | Болт | Металлический болт с гайкой (6 пар) длиной | 205
диаметр | 4
P | Уплотнительное кольцо | Каучуковое уплотнительное кольцо, диаметр х толщина | 66,34×2,62
С(S) | Уплотнительное кольцо | Каучуковое уплотнительное кольцо, диаметр х толщина | 29,1×1,6
Т | Держатель фильтра | Металлический кожух со штативом и выходным отверстием | рис. 7
У | Опора для фильтра | Перфорированная листовая сталь, диаметр | 65
размер отверстий | 3
расстояние между отверстиями (по центру) | 4
Ф | Зажимы | Замки с пружинным механизмом | -
Х | Трубка с набором форсунок | Трубка (Н) с насадкой и набором форсунок | рис. 6
Ц | Выходное отверстие | Выходное отверстие с патрубком для присоединения к насосу | Внутренний диаметр ≥10

Рис. 5. Устройство многоуровневого жидкостного импинджера. Описание приведено в тексте.
Рис. 6. Детальная схема трубок и улавливающих пластин. На вставках представлена насадка с набором форсунок.

Таблица 5. Размеры[1] трубок и улавливающих пластин
Тип | Код[8] | Ступень 1 | Ступень 2 | Ступень 3 | Ступень 4 | Фильтр (ступень 5)
--- | --- | --- | --- | --- | --- | ---
Расстояние | 1 | 9,5 (–0,0; +0,5) | 5,5 (–0,0; +0,5) | 4,0 (–0,0; +0,5) | 6,0 (–0,0; +0,5) | -
Расстояние | 2 | 26 | 31 | 33 | 30,5 | 0
Расстояние | 3 | 8 | 5 | 5 | 5 | 5
Расстояние | 4 | 3 | 3 | 3 | 3 | -
Расстояние | 5 | 0 | 3 | 3 | 3 | 3
Расстояние | 6[9] | 20 | 25 | 25 | 25 | 25
Расстояние | 7 | - | - | - | 8,5 | -
Диаметр | c | 25 | 14 | 8,0 (±0,1) | 21 | 14
Диаметр | d | 50 | 30 | 20 | 30 | -
Диаметр | e | 27,9 | 16,5 | 10,5 | 23,9 | -
Диаметр | f | 31,75 (–0,0; +0,5) | 22 | 14 | 31 | 22
Диаметр | g | 25,4 | 21 | 13 | 30 | 21
Диаметр | h | - | - | - | 2,70 (±0,5) | -
Диаметр | j | - | - | - | 6,3 | -
Диаметр | k | - | - | - | 12,6 | -
Радиус[10] | r | 16 | 22 | 27 | 28,5 | 0
Радиус | s | 46 | 46 | 46 | 46 | -
Радиус | t | - | 50 | 50 | 50 | 50
Угол | w | 10° | 53° | 53° | 53° | 53°
Угол | u | - | - | - | 45° | -
Угол | v | - | - | - | 60° | -

Рис. 7. Детальная схема держателя фильтра. Спецификации компонентов приведены в табл. 4. Размеры указаны в мм.
Рис. 8. Детальная схема входного порта. Размеры указаны в мм.

Методика для аэрозолей (дозированных ингаляционных лекарственных форм, находящихся под давлением)

По 20 мл растворителя, указанного в фармакопейной статье, помещают в ступени 1–4, закрывают пробками. Наклоняют аппарат, чтобы смочить пробки для нейтрализации электростатического заряда. Устанавливают фильтр в держатель на ступени 5, собирают прибор.

Адаптер закрепляют на входном порте таким образом, чтобы конец мундштука испытуемого ингалятора находился на одном уровне с горизонтальной осью входного порта, а сам ингалятор был ориентирован в рабочую позицию согласно инструкции по медицинскому применению (как правило, вертикально).

К выходному отверстию присоединяют вакуумный насос и устанавливают скорость потока воздуха через прибор 30±1,5 л/мин на входе.

Если нет других указаний в инструкции по применению, встряхивают ингалятор в течение 5 с и высвобождают одну дозу в воздух. Включают поток (насос), вставляют мундштук в адаптер и производят выпуск одной дозы в импинджер. Отсоединяют ингалятор от адаптера, повторяют процедуру. Количество высвобождений должно быть минимальное, как правило, не более десяти. Через 5 с после последнего высвобождения отключают поток (насос).

Отсоединяют ступень 5 прибора, аккуратно извлекают фильтр и промывают порциями растворителя, указанными в фармакопейной статье. Отсоединяют входной порт и адаптер от прибора, также промывают растворителем. При необходимости ополаскивают внутреннюю поверхность трубки ступени 1 растворителем, позволяя растворителю стечь. Омывают внутренние стенки, осторожно поворачивая прибор. Следят, чтобы жидкость не проникала из одной ступени в другую.

Определяют количество действующего вещества в каждой собранной порции по методике, приведённой в фармакопейной статье.

Интерпретация результатов. Величину респирабельной фракции (количество частиц с аэродинамическим диаметром менее 5 мкм) определяют указанным в фармакопейной статье методом, проводя пересчёт номинального отсекаемого диаметра частиц для каждой из ступеней на фактический отсекаемый диаметр каждой из ступеней при скорости потока, использованной в испытании.

Методика для порошков для ингаляций

Помещают фильтр на нижнюю ступень, собирают импинджер. Подсоединяют прибор к системе регулирования потока (рис. 4 и табл. 3). Если нет других указаний, пропускают через прибор с подсоединённым ингалятором 4 л воздуха со скоростью потока Qисх, использовавшейся при определении однородности дозирования.

По 20 мл растворителя, указанного в фармакопейной статье, помещают в ступени 1–4, закрывают пробками. Наклоняют аппарат, чтобы смочить пробки для нейтрализации электростатического заряда. Закрепляют адаптер на входном порте.

Готовят порошковый ингалятор в соответствии с инструкцией по применению. При включенном потоке (насосе) и закрытом двустороннем клапане вставляют мундштук ингалятора в адаптер. Высвобождают порошок в прибор, открыв клапан на время, Т±5 %, необходимое для пропускания 4 л воздуха при заданной скорости потока. Повторяют процедуру. Количество высвобождений должно быть минимальным, как правило, не более десяти. Через 5 с после последнего высвобождения отключают поток (насос).

Отсоединяют ступень 5 прибора, аккуратно извлекают фильтр и промывают порциями растворителя, указанными в фармакопейной статье. Отсоединяют входной порт и адаптер от прибора, и также промывают растворителем. При необходимости ополаскивают внутреннюю поверхность трубки ступени 1 растворителем, позволяя растворителю стечь. Омывают внутренние стенки, осторожно поворачивая прибор. Следят, чтобы жидкость не проникала из одной ступени в другую.

Определяют количество действующего вещества в каждой собранной порции по методике, приведённой в фармакопейной статье.

Интерпретация результатов. Величину респирабельной фракции (количество частиц с аэродинамическим диаметром менее 5 мкм) определяют указанным в фармакопейной статье методом, проводя пересчёт номинального отсекаемого диаметра частиц для каждой из ступеней на фактический отсекаемый диаметр каждой из ступеней при скорости потока, использованной в испытании.

Каскадный импактор нового поколения

Устройство каскадного импактора нового поколения показано на рис. 9, 10, 11, 12, 13. Входной порт, используемый для соединения с ингалятором, показан на рис. 8. Прибор представляет собой семиступенчатый каскадный импактор с терминальным микродиафрагменным сборником (МДС). Прибор предназначен для работы со скоростями потока воздуха от 30 до 100 л/мин. Изготовлен из материала, инертного для компонентов лекарственной формы, например: алюминий, нержавеющая сталь, титан.

Примечание – Для проведения испытания лекарственных форм для ингаляций, предназначенных для распыления с помощь небулайзера возможна работа оборудования со скоростью 15 л/мин.

Импактор имеет съёмные улавливающие чашки, расположенные в одной плоскости, и состоит из трёх основных частей: нижнего корпуса, в котором установлены улавливающие чашки, герметизирующего корпуса, в котором установлены форсунки, и крышки с межступенчатыми каналами (рис. 9, 10, 11, 12). Все ступени, кроме первой, имеют набор форсунок (рис. 12). Поток воздуха через импактор носит пилообразный характер. Спецификация ступеней представлена в табл. 6.

Таблица 6. Спецификация ступеней импактора нового поколения
Описание | Размер, мм
--- | ---
Пресепаратор (размер "а" на рис. 14) | 12,80±0,05
Ступень 1 (рис. 13). Диаметр форсунки | 14,30±0,05
Ступень 2 (рис. 13). Диаметр форсунки | 4,88±0,04
Ступень 3 (рис. 13). Диаметр форсунки | 2,185±0,02
Ступень 4 (рис. 13). Диаметр форсунки | 1,207±0,01
Ступень 5 (рис. 13). Диаметр форсунки | 0,608±0,01
Ступень 6 (рис. 13). Диаметр форсунки | 0,323±0,01
Ступень 7 (рис. 13). Диаметр форсунки | 0,206±0,01
МДС (рис. 13) | около 0,070
Глубина чашки (размер "б" на рис. 12) | 14,625±0,10
Шероховатость поверхности чашек для сбора | 0,5–2 мкм
Ступень 1. Расстояние от форсунки до герметизирующего корпуса (размер в на рис. 11) | 0±1,18
Ступень 2. Расстояние от форсунки до герметизирующего корпуса (размер в на рис. 11) | 5,236±0,736
Ступень 3. Расстояние от форсунки до герметизирующего корпуса (размер в на рис. 11) | 8,445±0,410
Ступень 4. Расстояние от форсунки до герметизирующего корпуса (размер в на рис. 11) | 11,379±0,237
Ступень 5. Расстояние от форсунки до герметизирующего корпуса (размер в на рис. 11) | 13,176±0,341
Ступень 6. Расстояние от форсунки до герметизирующего корпуса (размер в на рис. 11) | 13,999±0,071
Ступень 7. Расстояние от форсунки до герметизирующего корпуса (размер в на рис. 11) | 14,000±0,071
МДС. Расстояние от форсунки до герметизирующего корпуса (размер в на рис. 11) | 14,429–14,571

При выполнении исследований герметизирующий корпус и крышка скреплены друг с другом в один блок. Доступ к улавливающим чашкам возможен только после завершения испытания ингалятора, когда этот блок открыт. Чашки закрепляются в общем поддоне таким образом, чтобы их можно было извлечь из импактора только при поднятии блока.

Входной порт с внутренними размерами, указанными на рис. 8, присоединён к входной трубке импактора. При испытании порошков для ингаляций для предотвращения перегрузки первой ступени может быть использован пресепаратор, который устанавливается между входным портом и импактором. Использование пресепаратора оговаривается в фармакопейной статье. Переходник должен обеспечивать плотное соединение мундштука и открытого конца входного порта.

Рисунок 9. Общий вид каскадного импактора нового поколения

Терминальный микродиафрагменный сборник (МДС) при испытании многих лекарственных форм позволяет исключить использование конечного фильтра, что должно быть определено при валидации метода, используемого в фармакопейной статье. МДС состоит из уплотнительной пластины с форсунками и чашки для сбора. В случае испытания лекарственных форм со значительной долей частиц, которую невозможно уловить в МДС, может быть предусмотрено использование дополнительного держателя фильтра конечной очистки (предпочтительно стекловолоконного), который используется либо вместо МДС, либо после МДС.

Рисунок 10. Общий вид каскадного импактора нового поколения с компонентами
Рисунок 11. Схема межступенчатых каналов каскадного импактора нового поколения
Рисунок 12. Конфигурация форсунок импактора нового поколения
Рисунок 13. Пресепаратор для импактора нового поколения

Методика для аэрозолей (дозированных ингаляционных лекарственных форм, находящихся под давлением)

Собирают прибор без пресепаратора. Помещают улавливающие чашки в соответствующие гнёзда поддона.

Для обеспечения эффективного поглощения частиц возможно покрытие поверхности для сбора глицерином, силиконовым маслом или другой нелетучей, относительно инертной жидкостью с высокой вязкостью.

Вставляют поддон в нижний корпус. Закрывают крышку импактора с присоединённым к корпусу уплотнением, зажимом обеспечивают герметичность соединения. Присоединяют входной порт к входному отверстию импактора. Переходник должен обеспечивать плотное соединение мундштука и открытого конца входного порта. Соединяют импактор с системой регулирования потока, как указано на рис. 4 и описано в табл. 3.

Включают вакуумный насос для прокачивания воздуха через каскадный импактор и устанавливают скорость потока через систему с помощью измерителя скорости потока воздуха, присоединённого к открытому концу входного порта. Если в фармакопейной статье нет других указаний, то прибор используют при скорости потока воздуха 30 л/мин±5 %. Настраивают клапан регулировки скорости потока воздуха для достижения устойчивого потока воздуха через систему с требуемой скоростью с отклонением не более ±5 %.

Если нет других указаний в инструкции по применению, встряхивают ингалятор в течение 5 с и высвобождают одну дозу в воздух. Включают поток (насос), вставляют мундштук в адаптер и высвобождают одну дозу в импактор. Отсоединяют ингалятор от адаптера, встряхивают и вновь высвобождают дозу в импактор. Повторяют процедуру, количество высвобождений должно быть минимальным, как правило, не более десяти. Через 5 с после последнего высвобождения отключают поток (насос).

Разбирают прибор, отсоединяют входной порт, адаптер и мундштук, аккуратно извлекают улавливающие чашки и промывают их определенными порциями растворителя, указанными в фармакопейной статье.

Определяют количество действующего вещества в каждой собранной порции по методике, приведённой в фармакопейной статье.

Интерпретация результатов. Величину респирабельной фракции (количество частиц с аэродинамическим диаметром менее 5 мкм) определяют указанным в фармакопейной статье методом, проводя пересчёт номинального отсекаемого диаметра частиц для каждой из ступеней на фактический отсекаемый диаметр каждой из ступеней при скорости потока, использованной в испытании.

Методика для порошков для ингаляций

Собирают прибор, помещают улавливающие чашки в соответствующие гнёзда поддона.

Для обеспечения эффективного поглощения частиц возможно покрытие поверхности для сбора глицерином, силиконовым маслом или другой нелетучей, относительно инертной жидкостью с высокой вязкостью. Вставляют поддон в нижний корпус. Закрывают крышку импактора с присоединённым герметизирующим корпусом, зажимом обеспечивают герметичность соединения. Пресепаратор (в случае его использования) присоединяют следующим образом: вставляют среднюю часть пресепаратора в основание пресепаратора; полученный блок устанавливают во входное отверстие импактора; помещают 15 мл используемого растворителя в центральную чашку; устанавливают сверху корпус пресепаратора; закрывают два фиксатора.

Присоединяют входной порт к входному отверстию импактора или пресепаратора. Присоединяют соответствующий адаптер для мундштука к входному порту таким образом, чтобы вставленный в него мундштук ингалятора находился на горизонтальной оси входного порта. Передняя поверхность мундштука ингалятора должна плотно и герметично прилегать к передней части входного порта.

Проверяют, чтобы положение ингалятора, присоединённого к переходнику мундштука, соответствовало положению, описанному в инструкции по применению.

Соединяют импактор с системой регулирования потока, как указано на рис. 4 и описано в табл. 3.

Если нет других указаний, пропускают через прибор с подсоединённым ингалятором 4 л воздуха со скоростью потока Qисх, использовавшейся при определении однородности дозирования.

Подсоединяют измеритель скорости потока к входному отверстию системы. Для измерения скорости исходящего потока используют либо измеритель скорости потока, откалиброванный для потока, исходящего из измерительного прибора, либо, в случае использования прибора, откалиброванного на измерение входящего потока Qвх, рассчитывают скорость исходящего потока Qисх по закону идеального газа:

где P0 – атмосферное давление;
ΔР – перепад давления в измерительном приборе.

Устанавливают регулирующий клапан таким образом, чтобы достичь постоянной скорости потока через систему, Qисх±5 %. Определяют время, в течение которого 4 л воздуха проходят через ингалятор. При присоединённом ингаляторе измеряют абсолютное давление с обеих сторон регулирующего клапана (точки замера Р2 и Р3, рис. 4). Соотношение Р3/Р2 должно составлять ≤0,5, в противном случае, производят увеличение мощности насоса и повторяют измерения.

Готовят порошковый ингалятор, как указано в фармакопейной статье или в инструкции по медицинскому применению. При включенном потоке (насосе) и закрытом двустороннем клапане вставляют мундштук ингалятора в адаптер. Высвобождают порошок импактор, открыв клапан на необходимое время, Т±5 %. Повторяют процедуру, количество высвобождений должно быть минимальным, как правило, не более десяти. Через 5 с после последнего высвобождения отключают поток (насос).

Разбирают прибор, отсоединяют пресепаратор, адаптер и мундштук,

аккуратно извлекают улавливающие чашки и промывают их порциями растворителя, указанными в фармакопейной статье.

Определяют количество действующего вещества в каждой собранной порции по методике, приведённой в фармакопейной статье.

Интерпретация результатов. Величину респирабельной фракции (количество частиц с аэродинамическим диаметром менее 5 мкм) определяют указанным в фармакопейной статье методом, проводя пересчёт номинального отсекаемого диаметра частиц для каждой из ступеней на фактический отсекаемый диаметр каждой из ступеней при скорости потока, использованной в испытании.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0002 Извлекаемый объём

Взамен ОФС.1.4.2.0002.18

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на определение показателя «Извлекаемый объём» в жидких лекарственных формах для приёма внутрь.

###### Область применения

Данные испытания применимы к лекарственным препаратам независимо от того, поставляются они в виде жидких лекарственных форм или их получают растворением твёрдых веществ в определенном объёме указанного растворителя.

Испытания не проводят для лекарственных форм в однодозовых упаковках, если в фармакопейную статью включено испытание на однородность дозирования (ОФС «Однородность дозирования»).

###### Лекарственные формы, объём упаковки которых не превышает 250 мл

Отбирают 30 упаковок и выполняют испытание, как описано ниже для конкретной лекарственной формы.

Растворы, суспензии, эмульсии и другие жидкие лекарственные формы для приёма внутрь. Встряхивают содержимое каждой из 10 упаковок и проводят испытания в соответствии с методикой.

Порошки для приготовления растворов и суспензий для приёма внутрь. К содержимому каждой из 10 упаковок добавляют отмеренный объём растворителя, указанный на этикетке, в соответствии с инструкцией по применению. Встряхивают содержимое каждой упаковки и проводят испытание в соответствии с методикой.

###### Методика

Осторожно, чтобы избежать образования воздушных пузырьков, выливают содержимое каждой упаковки в отдельные сухие мерные, калиброванные цилиндры, вместимость которых не более чем в 2,5 раза больше измеряемого объёма. Если не указано иначе в фармакопейной статье, содержимому каждой упаковки дают стекать под углом 30 ° к поверхности в течение не более 30 мин для недозированных препаратов и 5 с – для однодозовых. После исчезновения воздушных пузырьков измеряют объём жидкости в каждом цилиндре.

В жидких лекарственных формах при встряхивании и выливании образуются пузырьки воздуха, мешающие точному определению извлекаемого объёма. Для однодозовых препаратов малого объёма извлекаемый объём может быть определён следующим образом: содержимое упаковки выливают в сухой предварительно взвешенный бюкс, давая вытекать содержимому в течение не более 5 с; определяют массу содержимого; после определения плотности рассчитывают извлекаемый объём.

Методика определения плотности. В сухую мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50,0 мл воды и тарируют. В мерную колбу помещают 25,0 г (точная навеска) препарата. Из бюретки доводят объём раствора водой до метки и записывают израсходованное количество в мл.

Плотность препарата ρ (г/мл) вычисляют по формуле:

где a – навеска препарата, г;
V – объём воды из бюретки, мл.

###### Анализ результатов

Лекарственный препарат считается прошедшим испытание, если соблюдены следующие критерии.

Для недозированных препаратов. Среднее значение объёма содержимого 10 упаковок должно быть не менее 100 %, и ни одна из упаковок не должна иметь объём менее 95 % от номинального объёма.

Если среднее значение объёма содержимого 10 упаковок менее 100 % от указанного на этикетке, но ни одна из упаковок не имеет объём менее 95 % или среднее значение объёма содержимого 10 упаковок составляет 100 % и объём не более чем одной упаковки менее 95 %, но не менее 90 % от номинального объёма, то выполняют испытание на 20 дополнительных упаковках.

Среднее значение объёма содержимого 30 упаковок должно составлять не менее 100 % от номинального объёма, и объём не более чем одной из 30 упаковок может быть менее 95 %, но не менее 90 % от указанного на этикетке.

Для однодозовых упаковок. Если не применимы требования ОФС «Однородность дозирования», то среднее значение объёма содержимого 10 упаковок должно быть не менее 100 % и объём каждой из 10 упаковок должен находиться в интервале от 95 до 110 % от номинального объёма.

Если среднее значение объёма содержимого 10 упаковок менее 100 % от номинального, но объём для всех упаковок не выходит за
пределы 95–110 % или, если среднее значение объёма содержимого 10 упаковок не менее 100 % и объём не более чем одной упаковки находится вне интервала 95–110 % и не выходит за пределы 90–115 %, то испытание выполняют на 20 дополнительных упаковках.

Среднее значение объёма содержимого 30 упаковок, полученного из 30 упаковок, должно составлять не менее 100 % от номинального объёма, объём не более одной из 30 упаковок может выходить за пределы 95–110 %, но должен находиться в пределах 90–115 % от номинального объёма.

###### Лекарственные формы, объём упаковок которых превышает 250 мл

Определение проводят из одной упаковки в соответствии с приведённой выше методикой. Объём жидкости, полученной из одной упаковки, должен составлять не менее 100 % от номинального объёма.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0003 Извлекаемый объём лекарственных форм для парентерального применения

Взамен ОФС.1.4.2.0003.15

Лекарственные формы для парентерального применения могут быть в однодозовых упаковках (ампулы, картриджи, предварительно наполненные шприцы и др.) или многодозовых упаковках, содержащих несколько доз препарата. Объём лекарственного препарата в упаковке должен быть достаточным, чтобы обеспечить введение номинального объёма, указанного на этикетке.

Соответствие лекарственных форм для парентерального применения требованиям по извлекаемому объёму достигается заполнением упаковок с небольшим избытком от номинального объёма (табл. 1).

Таблица 1. Объём заполнения инъекционных растворов в однодозовых упаковках
Номинальный объём, мл | Объём заполнения, мл
--- | ---
Невязкие растворы | Вязкие растворы
0,5 | 0,6 | 0,62
1,0 | 1,10 | 1,15
2,0 | 2,15 | 2,25
5,0 | 5,30 | 5,50
10,0 | 10,50 | 10,70
20,0 | 20,60 | 20,90
30,0 | 30,80 | 31,20
50,0 | 51,00 | 51,50
Более 50 | На 2 % более номинального | На 3 % более номинального

Суспензии и эмульсии перед извлечением из упаковки и перед определением плотности встряхивают. Масляные и вязкие лекарственные препараты при необходимости можно подогревать в соответствии с указаниями на этикетке. Их следует тщательно встряхивать перед извлечением содержимого. Перед измерением объёма содержимое охлаждают до 20–25 °С.

###### Однодозовые упаковки

Отбирают 1 упаковку, если номинальный объём составляет 10 мл и более, отбирают 3 упаковки, если номинальный объём составляет от 3 мл до 10 мл, отбирают 5 упаковок, если номинальный объём составляет 3 мл и менее. Извлекают всё содержимое каждой отобранной упаковки, используя сухой шприц, вместимость которого не более чем в 3 раза превышает измеряемый объём, снабженный иглой №21 (G 21) длиной не менее 2,5 см. Из шприца и иглы удаляют пузырьки воздуха и помещают содержимое, не выдавливая содержимое из иглы, в сухой мерный цилиндр, калиброванный на заполнение. Вместимость мерного цилиндра должна быть такой, чтобы измеряемый объём занимал не менее 40 % от номинального объёма цилиндра. Альтернативно объём содержимого в миллилитрах может быть рассчитан как отношение массы содержимого в граммах к плотности.

Для упаковок с номинальным объёмом 2 мл и менее содержимое нескольких упаковок может быть объединено, чтобы получить объём, подходящий для измерения, при условии, что для каждой упаковки используется отдельный сухой шприц.

Содержимое упаковок с номинальным объёмом 10 мл или более может быть определено непосредственным выливанием в мерный цилиндр или сухой предварительно взвешенный бюкс.

Объём содержимого упаковки должен быть не менее номинального, если упаковки исследуются индивидуально. Для упаковок с номинальным объёмом 2 мл и менее измеренный объём должен быть не менее суммы номинальных объёмов исследованных упаковок.

###### Многодозовые упаковки

Для многодозовых лекарственных форм для парентерального применения в упаковках, на которых указано количество доз определённого объёма, выбирают одну упаковку и поступают, как указано для однодозовых лекарственных форм, используя то же количество отдельных шприцев, что и количество указанных доз.

Измеренный объём должен быть таким, чтобы объём, извлекаемый из каждого шприца, обеспечивал дозу не менее заявленной.

###### Картриджи и предварительно наполненные шприцы

Отбирают 1 упаковку, если номинальный объём составляет 10 мл и более, отбирают 3 упаковки, если номинальный объём составляет от 3 мл до 10 мл, отбирают 5 упаковок, если номинальный объём составляет 3 мл и менее. При необходимости снабжают упаковку аксессуарами, необходимыми для использования (игла, поршень, шприц) и извлекают всё содержимое каждой отобранной упаковки, не выдавливая содержимое из иглы, в сухой предварительно взвешенный бюкс, медленно и постоянно нажимая на поршень. Взвешивают бюкс и рассчитывают объём в миллилитрах как отношение массы содержимого бюкса в граммах к плотности лекарственного препарата.

Объём, полученный для каждой исследованной упаковки, должен быть не менее номинального.

###### Растворы для инфузий

Отбирают одну упаковку. Переносят содержимое в сухой мерный цилиндр, калиброванный на заполнение, вместимость которого должна быть такой, чтобы лекарственный препарат занимал не менее 40 % от номинального объёма цилиндра. Измеряют объём.

Объём должен быть не менее номинального.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0006 Невидимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения

Взамен ОФС.1.4.2.0006.15

Испытание на наличие невидимых механических включений предназначено для твёрдых и жидких лекарственных форм для парентерального применения.

Механические включения в лекарственных формах для парентерального применения – это посторонние подвижные нерастворимые частицы, за исключением пузырьков газа, случайно присутствующие в растворах препаратов.

Для определения частиц, невидимых невооружённым глазом (размером менее 100 мкм), используют три метода.

Метод 1 − счётно-фотометрический метод.

Метод 2 − метод электрочувствительных зон (метод Култера).

Метод 3 – метод микроскопии.

###### Область применения

При испытании лекарственных форм для парентерального применения на присутствие частиц, которые не видны невооружённым глазом, предпочтительнее применять методы 1 или 2. Однако в некоторых случаях для получения обоснованного заключения необходимо использовать и метод 3.

Метод 1 не пригоден для исследования мутных лекарственных препаратов (например, эмульсий, коллоидных и липосомальных препаратов) или лекарственных препаратов, образующих воздушные или газовые пузыри при прохождении через измерительную ячейку. В таком случае испытание проводят по методу 3. При исследовании мутных лекарственных препаратов (например, эмульсий) возможно применение метода 2 после проведения количественного разбавления препарата соответствующим растворителем, что должно быть указано в частной фармакопейной статье.

Если вязкость испытуемого препарата достаточно высока, это служит препятствием для его испытания любым из методов. Для понижения вязкости проводят количественное разбавление соответствующим растворителем, свободным от механических частиц, что должно быть указано в фармакопейной статье.

Результат, полученный для отдельной единицы или группы единиц препарата, не может быть достоверно экстраполирован на другие единицы, которые не прошли испытания. Поэтому для получения правильных выводов об уровне загрязнения механическими включениями большой партии препарата необходимо соблюдать правила отбора проб в соответствии с ОФС «Отбор проб».

###### Условия проведения испытания

Испытание следует проводить в условиях, ограничивающих загрязнение механическими включениями − предпочтительно в шкафу с ламинарным потоком. Стеклянную посуду и оборудование для фильтрования, за исключением мембранных фильтров, осторожно промывают тёплым раствором детергента и ополаскивают большим объёмом воды для удаления следов поверхностно-активного вещества. Непосредственно перед использованием повторяют промывание снаружи и внутри водой, свободной от частиц.

Следует избегать попадания воздушных пузырей в исследуемый препарат, особенно в тех случаях, когда пробы препарата отбирают в ёмкость, в которой проводится испытание.

Испытание растворов для парентерального применения в упаковках объёмом 25 мл и более проводят на единичных упаковках. Для упаковок, содержащих менее 25 мл, содержимое 10 или большего числа упаковок объединяют в чистой ёмкости для получения объёма не менее 25 мл. Испытуемый раствор может быть приготовлен также путём смешивания содержимого соответствующего числа упаковок с последующим разбавлением до 25 мл водой, свободной от частиц, или свободным от частиц растворителем, если невозможно использовать воду, свободную от частиц, что должно быть указано в фармакопейной статье.

Порошки для приготовления растворов для парентерального применения растворяют в воде, свободной от частиц, или в соответствующем растворителе, свободном от частиц, если невозможно использовать воду, что должно быть указано в фармакопейной статье.

Число испытуемых образцов должно быть достаточным для получения статистически значимого результата. Испытания образцов объёмом 25 мл и более можно проводить на серии менее 10 шт. в соответствии с правилами отбора проб согласно ОФС «Отбор проб».

###### Метод 1. Счётно-фотометрический метод

Оборудование. Испытание проводят на приборах, основанных на принципе светоблокировки и позволяющих определять размер частиц и число частиц соответствующего размера. Прибор калибруют с помощью дисперсии сферических частиц (стандартный образец), имеющих известный размер от 10 до 25 мкм. Стандартный образец диспергируют в воде, свободной от частиц. Следует соблюдать осторожность, чтобы избежать агрегации частиц в процессе диспергирования.

Проверка пригодности условий проведения испытания. Предварительно проводят проверку пригодности условий (окружающей среды, подготовленной стеклянной посуды и используемой воды) для проведения испытания. Для этого определяют наличие механических включений в 5 пробах воды, свободной от частиц, по 5 мл каждая, по описанной ниже методике. Если в 25 мл для объединённых 5 проб число частиц размером 10 мкм и более превысит 25, то условия не пригодны для проведения испытания.

Подготовительные этапы проведения испытания необходимо повторять, пока окружающая среда, стеклянная посуда и вода не станут пригодными для проведения испытания.

Методика. Перемешивают содержимое образца, медленно переворачивая его 20 раз. При необходимости осторожно удаляют этикетки и элементы укупорки. Очищают наружные поверхности вскрываемой упаковки струёй воды, свободной от частиц, и удаляют пробку, избегая какого-либо загрязнения содержимого. Готовят испытуемый раствор в соответствии с указаниями, приведёнными выше, в зависимости от объёма содержимого упаковки. Для удаления пузырьков воздуха приготовленный раствор оставляют стоять в течение 2 мин или обрабатывают ультразвуком.

В объединённой пробе объёмом не менее 25 мл определяют число частиц размером, равным или превышающим 10 и 25 мкм. Проводят 4 измерения, каждая объёмом не менее 5 мл. При этом не принимают в расчёт результаты определения для первой пробы и рассчитывают среднее число частиц в испытуемом образце.

Анализ результатов. Препараты с номинальным объёмом 100 мл и менее отвечают требованиям, если в одной упаковке среднее число частиц размером 10 мкм и более не превышает 6000, а среднее число частиц размером 25 мкм и более не превышает 600.

Препараты с номинальным объёмом более 100 мл отвечают требованиям, если в 1 мл среднее число частиц размером 10 мкм и более не превышает 25, а среднее число частиц размером 25 мкм и более не превышает 3.

Если среднее число частиц превышает указанные значения, то проводят испытание препарата методом микроскопии.

###### Метод 2. Метод электрочувствительных зон (метод Култера)

Оборудование. Определение проводят с использованием счётчика Култера, в котором трубка с апертурой (калиброванным отверстием диаметром 100 или 200 мкм) в стенке и двумя электродами погружена в стакан, содержащий частицы, взвешенные в электролите низкой концентрации. Метод основан на регистрации электрических импульсов, возникающих при прохождении частицы через апертуру. Величина импульса пропорциональна размеру частицы.

На результаты, полученные на приборе, не влияют цвет частиц, показатель преломления частицы или жидкости, а также форма частиц.

Прибор калибруют с помощью дисперсии латексных частиц (стандартный образец), имеющих известный размер от 10 до 25 мкм. Стандартный образец диспергируют в натрия хлорида растворе 0,9 %, свободном от частиц.

Натрия хлорида раствор 0,9 %, свободный от частиц. Натрия хлорида раствор 0,9 %, предварительно профильтрованный через мембранный фильтр с размером проб 0,22 мкм.

Проверка пригодности условий проведения испытания. Предварительно проводят проверку пригодности условий (окружающей среды, подготовленной стеклянной посуды и используемого натрия хлорида раствора 0,9 % для проведения испытания. Для этого определяют наличие механических включений в 3 пробах раствора натрия хлорида 0,9 % по 20 мл каждая, из которых анализируют троекратно по 1 мл. Если в 60 мл для объединенных 3 проб число частиц размером 10 мкм превысит 60, то условия не пригодны для проведения испытания.

Подготовительные этапы проведения испытания необходимо повторять, пока окружающая среда, стеклянная посуда и натрия хлорида раствор 0,9 % не станут пригодны для проведения испытания.

Методика. Перемешивают содержимое образца, медленно переворачивая его не менее 20 раз. Очищают наружные поверхности вскрываемой упаковки струёй воды, свободной от частиц, вскрывают его, избегая какого-либо загрязнения содержимого. Готовят испытуемый раствор в соответствии с указаниями, приведёнными в разделе «Условия проведения испытания».

В качестве растворителя, как правило, используют натрия хлорида раствор 0,9 %, свободный от частиц.

Для удаления пузырьков воздуха приготовленный раствор оставляют стоять в течение 2 мин или обрабатывают ультразвуком.

В объединённой пробе объёмом не менее 20 мл определяют число частиц размером, равным или превышающим 10 и 25 мкм.

Принимают в расчёт результаты 3 измерений по 1 мл и рассчитывают среднее число частиц в испытуемом образце.

Анализ результатов. Препараты с номинальным объёмом 100 мл и менее отвечают требованиям, если в одной упаковке среднее число частиц размером 10 мкм и более не превышает 6000, а среднее число частиц размером 25 мкм и более не превышает 600.

Препараты с номинальным объёмом более 100 мл отвечают требованиям, если в 1 мл среднее число частиц размером 10 мкм и более не превышает 25, а среднее число частиц размером 25 мкм и более не превышает 3.

Если среднее число частиц превышает указанные значения, то проводят испытание препарата методом микроскопии.

###### Метод 3. Метод микроскопии

Оборудование. Используют бинокулярный микроскоп и фильтровальная установка.

Микроскоп оборудован окуляр-микрометром и двумя осветителями. Микроскоп настроен на 100-кратное увеличение.

Поле зрения окуляр-микрометра представляет собой окружность, разделённую по диаметру, и состоит из большого круга, разделённого перекрестиями на квадранты, прозрачные и чёрные стандартные окружности диаметром 10 и 25 мкм при 100-кратном увеличении, и линейной шкалы с ценой деления 10 мкм. Шкала калибруется по аттестованному объект-микрометру. Относительная ошибка линейной шкалы допускается в пределах ±2 %.

Один из осветителей − яркий эпископический осветитель, встроенный в микроскоп, другой – внешний, фокусируемый осветитель, позволяющий обеспечить отражённое боковое освещение под углом 10–20°.

Фильтровальная установка предназначена для удерживания механических включений и состоит из держателя фильтра, изготовленного из стекла или другого подходящего материала, источника вакуума и мембранного фильтра с размером пор 1,0 мкм или менее, подходящего цвета.

Проверка пригодности условий проведения испытания. Предварительно проводят проверку пригодности условий (окружающей среды, подготовленной стеклянной посуды, фильтровального оборудования и используемой воды) для проведения испытания. Для этого определяют наличие механических включений в 50 мл воды, свободной от частиц, по описанной ниже методике. Если в 50 мл воды число частиц размером 10 мкм и более превышает 20 или число частиц размером 25 мкм и более превышает 5, то условия не пригодны для проведения испытания.

Подготовительные этапы проведения испытания необходимо повторять, пока окружающая среда, стеклянная посуда, фильтровальное оборудование и вода не станут пригодными для проведения испытания.

Методика. Перемешивают содержимое образца, медленно переворачивая его 20 раз. При необходимости осторожно удаляют этикетки и элементы укупорки. Очищают наружные поверхности вскрываемой упаковки струёй воды, свободной от частиц, и удаляют пробку, избегая какого-либо загрязнения содержимого. Готовят испытуемый раствор в соответствии с указаниями, приведенными выше, в зависимости от объёма содержимого упаковки.

Внутреннюю сторону держателя фильтра с укреплённым мембранным фильтром смачивают несколькими миллилитрами воды, свободной от частиц. Переносят в воронку для фильтрования весь объём раствора или объём одной упаковки и подключают вакуум. При необходимости раствор прибавляют порциями до тех пор, пока не будет отфильтрован весь объём. После последнего прибавления раствора промывают внутренние стенки держателя фильтра водой, свободной от частиц. Вакуум оставляют включенным до тех пор, пока поверхность фильтра не освободится от жидкости. Помещают фильтр на предметное стекло в чашку Петри и сушат на воздухе со слегка приоткрытой крышкой. По окончании сушки предметное стекло с фильтром помещают на столик микроскопа и просматривают всю поверхность фильтра в отражённом свете. Определяют число частиц размером 10 мкм и более, и число частиц размером 25 мкм и более. Допускается просмотр части фильтра с последующей экстраполяцией полученного результата на всю площадь фильтра. Рассчитывают среднее число частиц в испытуемом препарате.

При подсчёте частиц микроскопическим методом не следует определять размеры или число аморфных или других образований неопределённой морфологии типа пятен или плёнок. В этом случае следует использовать метод 1 или 2.

Анализ результатов. Препараты с номинальным объёмом 100 мл и менее отвечают требованиям, если в одной упаковке среднее число частиц размером 10 мкм и более не превышает 3000, а среднее число частиц размером 25 мкм и более не превышает 300.

Препараты с номинальным объёмом более 100 мл отвечают требованиям, если в 1 мл среднее число частиц размером 10 мкм и более не превышает 12, а среднее число частиц размером 25 мкм и более не превышает 2.

Метод микроскопии является арбитражным.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0007 Масса (объём) содержимого упаковки

Взамен ОФС.1.4.2.0007.15

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на определение показателя «Масса (объём) содержимого упаковки» в недозированных лекарственных формах: мазях, жидких лекарственных формах для наружного и местного применения, порошках, аэрозолях, спреях и других лекарственных формах, за исключением жидких лекарственных форм для приёма внутрь и лекарственных форм для парентерального применения.

###### Методика для лекарственных форм, кроме аэрозолей и спреев

Для упаковок, маркированных по массе. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, отбирают 10 заполненных упаковок и удаляют этикетки. Тщательно промывают и высушивают внешнюю поверхность каждой упаковки и взвешивают упаковки по отдельности. Количественно удаляют содержимое из каждой упаковки и промывают все части упаковки растворителем, указанным в фармакопейной статье. Высушивают и снова взвешивают каждую упаковку вместе с соответствующими элементами упаковки. По разности масс вычисляют массу содержимого упаковки.

Для упаковок, маркированных по объёму. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, отбирают 10 заполненных упаковок. Чтобы свести к минимуму влияние пузырьков воздуха для лекарственных препаратов, маркированных по объёму, определение объёма содержимого каждой упаковки выполняется по массе, из которой рассчитывается объём с использованием плотности препарата.

Методика определения плотности

В сухую мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50,0 мл воды и тарируют. В мерную колбу помещают около 25,0 г (точная навеска) препарата. Из бюретки доводят объём раствора водой до метки и записывают израсходованное количество в мл.

Плотность препарата ρ (г/мл) вычисляют по формуле:

где a – навеска препарата, г;
V – объём воды из бюретки, мл.

В качестве альтернативного метода выливают содержимое каждой из 10 упаковок в 10 сухих мерных цилиндров, вместимость которых не более чем в 2,5 раза больше измеряемого объёма, давая полностью стечь жидкости. Определяют объём содержимого каждой упаковки.

###### Анализ результатов

Среднее значение массы (объёма) содержимого 10 упаковок не должно быть менее указанного на этикетке, масса (объём) содержимого каждой отдельной упаковки должна быть не менее 90 % от указанной на этикетке для содержимого 60 г или 60 мл и менее, или не менее 95 % от указанной на этикетке для содержимого более 60 г или 60 мл.

Если это требование не выполняется для 2 и более упаковок, то испытание считается непройденным. Если это требование не выполняется для одной упаковки, то определяют массу (объем) содержимого 20 дополнительных упаковок.

Среднее значение массы (объёма) содержимого 30 упаковок должно быть не менее указанного на этикетке, и масса (объём) содержимого не более чем одной из 30 упаковок может быть менее 90 % (но не менее 85 %) от указанного на этикетке для содержимого 60 г или 60 мл и менее, или менее 95 % (но не менее 90 %) от указанного на этикетке для содержимого более 60 г или 60 мл.

###### Методика для аэрозолей и спреев

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, отбирают 10 заполненных упаковок и удаляют этикетки. Тщательно промывают и высушивают внешнюю поверхность каждой упаковки и взвешивают упаковки по отдельности. Удаляют содержимое из каждой упаковки, используя безопасную технологию (например, охлаждают для снижения внутреннего давления, удаляют клапан и выливают). Остатки содержимого удаляют и ополаскивают элементы упаковки растворителем, указанным в фармакопейной статье. Резервуар, клапан и другие элементы нагревают при 100 °С в течение 5 мин, если не указан иной способ сушки. Охлаждают и снова взвешивают каждую упаковку со всеми элементами упаковки. По разности масс определяют массу содержимого упаковки.

###### Анализ результатов

Требование выполняется, если масса содержимого каждой из 10 упаковок не менее, указанной на этикетке.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0008 Однородность дозирования

Взамен ОФС.1.4.2.0008.18

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения однородности дозирования и применима к дозированным лекарственным формам (таблеткам, капсулам, суппозиториям и др.) и лекарственным формам в однодозовых индивидуальных упаковках (гранулам, порошкам и др.), содержащим как одно, так и несколько действующих веществ.

Дозированными единицами называют дозированные лекарственные формы, содержащие одну или часть дозы действующего вещества в каждой дозированной единице.

Целью испытания на однородность дозирования является контроль равномерности распределения действующего вещества (веществ) по отдельно взятым единицам дозированной лекарственной формы. Результаты испытания позволяют количественно оценить показатели, характеризующие разброс в содержании одного или нескольких действующих веществ по отдельно взятым единицам испытуемого дозированного лекарственного препарата.

Если не указано иначе в фармакопейной статье данное испытание не проводят для растворов, суспензий, эмульсий и гелей в однодозовых индивидуальных упаковках, предназначенных для местного и наружного применения.

Данному испытанию, как правило, не подвергают лекарственные препараты, содержащие витамины, микроэлементы, активные компоненты растительного или животного происхождения, и другие лекарственные препараты при наличии соответствующего обоснования.

Испытание на однородность дозирования лекарственных форм может быть выполнено двумя способами:

- количественным определением содержания действующего вещества по отдельности в каждой отобранной для испытания единице дозированной лекарственной формы (способ 1, прямого определения);

- точным определением массы нетто каждой отобранной для испытания единицы дозированной лекарственной формы (способ 2, расчётно-массовый).

Способ 1 применим для оценки однородности дозирования любых дозированных лекарственных форм и лекарственных форм в однодозовых индивидуальных упаковках.

Способ 2 применим для оценки однородности дозирования следующих лекарственных форм:

- растворы в однодозовых упаковках и мягких капсулах;

- твёрдые лекарственные формы (включая порошки, гранулы и другие твёрдые стерильные лекарственные формы) в однодозовых упаковках и не содержащие других действующих и вспомогательных веществ;

- твёрдые лекарственные формы (включая твёрдые стерильные лекарственные формы) в однодозовых упаковках с добавлением или без добавления действующих или вспомогательных веществ, полученные из истинных растворов путём лиофилизации в конечной упаковке, на этикетке которых указан данный способ получения препарата;

- твёрдые капсулы, таблетки без оболочки или таблетки, покрытые плёночной оболочкой с содержанием действующего вещества 25 мг и более и 25 % и более от массы дозированной единицы или от массы содержимого твёрдой капсулы; при этом, если содержание других действующих веществ в лекарственной форме меньше указанных значений, то их однородность дозирования определяют по способу 1.

Условиями, определяющими возможность применения способа 2, являются также равномерное распределение действующего вещества по массе испытуемого препарата и предусмотренное в фармакопейной статье использование навесок усрёдненной пробы при количественном определении действующего вещества.

Случаи возможного применения способов 1 и 2 но отношению к различным лекарственным формам приведены в табл. 1.

Таблица 1. Применение способов 1 и 2 для оценки однородности дозирования лекарственных форм
Наименование лекарственной формы | Доза и массовая доля действующего вещества
--- | ---
≥25 мг и ≥25 % | <25 мг или <25 %
Способ*
Таблетки | без оболочки | 1.2 | 1
покрытые плёночной оболочкой | 1.2 | 1
покрытые оболочкой методом дражирования (наращивания) или прессования | 1
Капсулы | твёрдые | 1.2 | 1
мягкие, содержащие суспензию, гель или эмульсию | 1
мягкие, содержащие раствор | 1.2
Гранулы и порошки в однодозовой упаковке | однокомпонентные без вспомогательных веществ | 1.2
содержащие два и более действующих веществ и/или вспомогательные вещества | 1
Лиофилизаты в однодозовой упаковке | - | 1.2
Растворы в однодозовой упаковке | - | 1.2
Суспензии, эмульсии, гели в однодозовой упаковке, предназначенные для парентерального применения и приёма внутрь | - | 1
Суппозитории | - | 1
Пластыри трансдермальные | - | 1
Другие лекарственные формы | - | 1

Примечания:

1. Способ 1 – прямое определение содержания действующего вещества.

2. Cпособ 2 – расчётное определение содержания действующего вещества по массе единиц дозированной лекарственной формы.

###### Определение однородности дозирования

От испытуемой серии препарата отбирают случайным образом пробу в количестве 30 дозированных единиц, из них в произвольном порядке отбирают 10 дозированных единиц для проведения первого этапа испытания.

В каждой из дозированных единиц определяют содержание действующего вещества по способу 1 или способу 2. Оставшиеся 20 дозированных единиц лекарственной формы сохраняют для проведения второго этапа испытания.

###### Способ прямого определения

Проводят определение, как указано для данной дозированной формы. Там, где используют разные методики для количественного определения лекарственного препарата и испытания однородности дозирования, для результатов последнего испытания может понадобиться применение корректирующего коэффициента.

В каждой из 10 отобранных дозированных единиц испытуемого препарата (п = 10) определяют количественное содержание действующего вещества (веществ) по методике, приведённой в фармакопейной статье. При испытании для жидких или мягких лекарственных форм определение выполняют при тщательном перемешивании содержимого упаковки.

Каждый из полученных результатов выражают в процентах (xi) от номинального содержания действующего вещества в одной дозированной единице лекарственной формы (i – номер единицы препарата по порядку проведения анализа).

###### Расчётно-массовый способ

Количественное определение действующих(-ого) веществ(-а) проводят на репрезентативном образце серии лекарственного препарата с использованием методики, приведённой, как правило, в разделе «Количественное определение» фармакопейной статьи. Допускают, что концентрация (отношение массы действующего вещества к массе дозированной единицы) однородна для всех дозированных единиц лекарственной формы.

Для каждой из 10 отобранных дозированных единиц испытуемого препарата (n =10) определяют массу (wi) непосредственно или по разности масс заполненной и незаполненной упаковки (массу нетто) с точностью взвешивания ±0,0002 г. В фармакопейной статье предусматривают меры, обеспечивающие полноту удаления препарата из упаковок, не приводящие к изменению их масс.

Испытание выполняют в соответствии со следующими указаниями для каждого типа дозированной лекарственной формы.

Таблетки без оболочки или покрытые плёночной оболочкой. Взвешивают точно каждую из 10 отобранных таблеток. Рассчитывают содержание действующего вещества в каждой таблетке на основании массы отдельных таблеток и результата количественного определения действующего вещества.

Твёрдые капсулы. Взвешивают точно каждую из 10 отобранных капсул. Извлекают содержимое каждой капсулы подходящим способом, затем точно взвешивают пустую оболочку. Массу содержимого капсулы вычисляют по разности массы капсулы и массы оболочки. Рассчитывают содержание действующего вещества в каждой капсуле на основании масс содержимого капсул и результата количественного определения.

Мягкие капсулы. Взвешивают точно каждую из 10 отобранных капсул. Извлекают содержимое капсулы, разрезая ее чистым и сухим инструментом (ножницы или скальпель), промывают оболочку подходящим растворителем. Для удаления растворителя с поверхности оболочки оставляют при комнатной температуре в течение 30 мин, избегая поглощения или потери влаги. Затем взвешивают оболочку и вычисляют массу содержимого капсулы. Рассчитывают содержание действующего вещества в каждой капсуле на основании масс содержимого капсул и результата количественного определения.

Другие твёрдые дозированные лекарственные формы. Определение проводят в соответствии с указаниями для твёрдых капсул.

Жидкие или мягкие дозированные лекарственные формы. Взвешивают точно количество жидкости или мягкого содержимого, извлечённое из 10 отобранных отдельных упаковок. При необходимости рассчитывают эквивалентный объём, предварительно определив плотность. Рассчитывают содержание действующего вещества в каждой упаковке на основании масс содержимого упаковок и результата количественного определения.

С использованием полученных результатов в каждой из 10 дозированных единиц вычисляют содержание действующего вещества в процентах (xi) от заявляемого содержания:

где i – номер единицы препарата по порядку взвешивания;
wi – масса нетто единицы испытуемого препарата;
– средняя масса нетто единиц испытуемого препарата;
А – содержание действующего вещества в дозируемой единице испытуемого препарата, полученное, как указано в разделе «Количественное определение» и выраженное в процентах от заявляемого содержания.

Величину А рассчитывают по формуле:

где B – содержание действующего вещества в дозируемой единице испытуемого препарата (таблетке, капсуле, флаконе и др.), полученное как указано, в разделе «Количественное определение»;
L – заявляемое содержание действующего вещества в дозируемой единице испытуемого препарата.

###### Расчёт приемлемого значения

Для полученной любым из описанных способов совокупности значений xi рассчитывают величины среднего арифметического () и стандартного отклонения (s) и относительного стандартного отклонения (RSD).

Соответственно найденной величине выбирают стандартное значение (M) и рассчитывают приемлемое значение (AV) для первых 10 отобранных единиц n=10 (1 этап) и далее, при необходимости, для 30 отобранных дозированных единиц n=30 (2 этап) по формуле:

Обозначения величин приведены в табл. 2. Используя принятое значение M, рассчитывают приемлемое значение, как это указано в табл. 2.

Таблица 2. Порядок обработки экспериментальных данных
Обозначение | Определение | Пояснения (условия) | Формула или значение
--- | --- | --- | ---
n | Число единиц препарата, участвующих в испытании (объём выборки) | первый этап | 10
второй этап | 30
i | Номер единицы препарата по порядку анализа или взвешивания | - | от 1 до n
xi | Содержание действующего вещества в единице испытуемого препарата, % | результаты рассчитывают в % от номинального содержания действующего вещества | определяют экспериментально (по способу 1 или 2), как указано в фармакопейной статье
| Среднее арифметическое значений xi, % | вычисляют при n = 10 или n = 30 |
k | Константа приемлемости для f степеней свободы (f = n – 1) при доверительной вероятности P, равной 95 % | при n = 10 | 2,4
при n = 30 | 2,0
s | Стандартное отклонение | вычисляется соответственно объёму выборки при n = 10 или 30 |
RSD | Относительное стандартное отклонение | вычисляется как стандартное отклонение выборки выраженное в % от среднего |
М (случай 1) применяется, если T ≤ 101,5 | Стандартное значение | при 98,5 % ≤ ≤ 101,5 % |
при < 98,5 % | 98,5 %
при > 101,5 % | 101,5 %
M (случай 2) применяется, если T > 101,5 | Стандартное значение | при 98,5 % ≤ ≤ Т |
при < 98,5 % | 98,5 %
при > Т | Т %
АV | Приемлемое значение, % | вычисляется соответственно значению M |
L1 | Максимально допустимое значение АV, % | - | 15,0
L2 | Максимально допустимый предел отклонений каждой дозированной единицы от рассчитанного значения М, % | нижняя граница определения 0,75М, верхняя граница определения 1,25 М (при значении L2 = 25,0) | 25,0
Т | Целевое значение содержания действующего вещества в испытуемом образце в момент производства, выраженное в процентах от номинального содержания. T = 100%, если нет других указаний. T > 100% если предусмотрено превышение в содержании действующего вещества, в т.ч. подтвержденное данными по стабильности | - | -

###### Интерпретация результатов

Требования к однородности считаются выполненными, если приемлемое значение для первых 10 дозированных единиц (n=10) меньше или равно L1, при отсутствии других указаний в фармакопейной статье. Если приемлемое значение для 10 единиц больше L1, испытание продолжают на оставшихся 20 ранее отобранных дозированных единицах испытуемого препарата и вновь рассчитывают приемлемое значение.

Требования считают выполненными, если конечное приемлемое значение для 30 дозированных единиц меньше или равно L1 и ни одно полученное значение содержания действующего вещества в каждой дозированной единице не меньше (1 - L2 × 0,01) × M или не больше (1 + L2 × 0,01) × M, при расчёте приемлемого значения способом 1 или 2.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье L1 равно 15,0; а L2 равно 25,0.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0009 Однородность массы дозированных лекарственных форм

Взамен ОФС.1.4.2.0009.15

Данное испытание относится к дозированным лекарственным формам (таблеткам, капсулам, суппозиториям и др.) и однодозовым лекарственным формам в индивидуальных упаковках (гранулам, порошкам, лиофилизатам и др.). Испытание не применяют в случае, если проводят испытание по показателю «Однородность дозирования» в соответствии с требованиями ОФС «Однородность дозирования».

Испытание проводят на 20 единицах дозированной лекарственной формы или содержимом 20 индивидуальных упаковок однодозовых лекарственных форм, отобранных случайным образом.

###### Методика

Определяют среднюю массу взвешиванием 20 единиц дозированной лекарственной формы или содержимого 20 индивидуальных упаковок однодозовых лекарственных форм: взвешивают каждую единицу в отдельности c точностью до 0,001 г, если не указано иначе в фармакопейной статье, и рассчитывают среднюю массу.

Для капсул и твёрдых лекарственных форм в однодозовых упаковках массу содержимого определяют, как описано ниже.

Капсулы. Взвешивают невскрытую капсулу. Вскрывают капсулу и удаляют как можно полнее её содержимое. Оболочку мягких капсул промывают растворителем, указанным в фармакопейной статье, и оставляют на воздухе до удаления запаха растворителя. Взвешивают оболочку. Массу содержимого каждой капсулы рассчитывают как разность между взвешиваниями. Повторяют определение на 19 оставшихся капсулах.

Твёрдые лекарственные формы (порошки, гранулы, лиофилизаты) в однодозовых упаковках. При необходимости удаляют бумажную этикетку с поверхности индивидуальной упаковки. Промывают и высушивают внешнюю поверхность упаковки. Вскрывают упаковку и тотчас взвешивают. Осторожным постукиванием освобождают упаковку от содержимого как можно полнее, при необходимости ополаскивают её водой, затем спиртом 96 % и сушат при температуре от 100 до 105 °С в течение 1 ч или, если материал упаковки не позволяет использовать нагревание при этой температуре, сушат при более низкой температуре до постоянной массы. Охлаждают в эксикаторе и взвешивают. По разности взвешиваний рассчитывают массу содержимого упаковки. Повторяют определение на 19 оставшихся индивидуальных упаковках.

###### Требование

Лекарственную форму считают выдержавшей испытание, если не более двух индивидуальных масс отклоняются от средней массы на величину, превышающую допустимое отклонение, указанное в таблице. При этом ни одна индивидуальная масса не должна отклоняться от средней массы на величину, в 2 раза превышающую значение, указанное в табл. 1.

Таблица 1. Допустимые отклонения от средней массы дозированных лекарственных форм
Дозированная лекарственная форма | Средняя масса | Допустимое отклонение, %
--- | --- | ---
Таблетки без оболочки и таблетки, покрытые плёночной оболочкой | 80 мг и менее | 10
Более 80 мг, но менее 250 мг | 7,5
250 мг и более | 5
Таблетки c оболочкой, полученной методом дражирования | Для всех масс | 15
Капсулы и гранулы без покрытия, порошки для приёма внутрь и наружного применения | Менее 300 мг | 10
300 мг и более | 7,5
Твёрдые лекарственные формы для приготовления лекарственных форм для парентерального применения | Более 40 мг | 10
40 мг и менее* | –
Суппозитории | Для всех масс | 5
Порошки для приготовления капель глазных и примочек (дозированные) | Менее 300 мг | 10
300 мг и более | 7,5
* Если средняя масса равна 40 мг и менее, то лекарственная форма подлежит испытанию на однородность дозирования в соответствии с ОФС «Однородность дозирования» и не подлежит испытанию на однородность массы.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0010 Определение времени полной деформации суппозиториев на липофильной основе

Взамен ОФС.1.4.2.0010.15

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения времени, необходимого для полной деформации суппозиториев, изготовленных на липофильной основе, при заданных условиях, под действием приложенной массы.

###### Метод 1

Прибор (рис. 1) состоит из плоскодонной стеклянной трубки (1) с внутренним диаметром 15,5 мм и длиной около 140 мм и стержня (2) диаметром 5,0 мм, расширяющегося книзу до диаметра 12 мм, со свободно скользящим поддерживающим устройством (3), имеющим отверстие диаметром 5,2 мм. К нижней, плоской стороне стержня крепится металлическая игла (4) диаметром 1 мм и длиной 2 мм. На верхней части стержня имеется скользящее маркировочное кольцо (5).

Стержень состоит из 2 соединённых частей: нижней, изготовленной из пластмассы, и верхней, изготовленной из пластмассы или металла с диском определённой массы. Масса всего стержня – 30±0,4 г.

Устанавливают нулевое положение маркировочного кольца, для чего вводят стержень в стеклянную трубку до достижения дна и фиксируют это положение поддерживающим устройством. При этом маркировочное кольцо передвигается на уровень верхнего края поддерживающего устройства стержня (нулевое положение).

В стеклянную трубку помещают 10 мл воды и погружают её вертикально в водяную баню с температурой 36,5±0,5 °С на глубину не менее 7 см ниже поверхности воды, но так, чтобы она не касалась дна водяной бани. В трубку заострённым концом вниз помещают суппозиторий, затем вводят стержень до тех пор, пока металлическая игла не коснется основания суппозитория, с этого момента включают секундомер. Регистрируют время, необходимое для достижения иглой стержня дна стеклянной трубки, соответствующего нулевому положению маркировочного кольца.

Полученное время принимают за время полной деформации суппозитория на липофильной основе.

Рисунок 1. Схема прибора для определения времени полной деформации суппозиториев: 1 – стеклянная трубка; 2 – стержень; 3 – поддерживающее устройство стержня; 4 – металлическая игла; 5 – маркировочное кольцо в нулевом положении.

###### Метод 2

Прибор (рис. 2) состоит из водяной бани (А) с крышкой, в которую вставлены термометр (Б) и стеклянная трубка (В) с капиллярным переходом, закрытая пробкой с короткого конца, и вставки (Г).

В качестве вставки могут быть использованы:

- стеклянный стержень (Г1) в форме трубки, запаянной с обоих концов, имеющий свинцовый ободок на нижнем конце. Масса стержня – 30±0,4 г;

- проникающая вставка (Г2), состоящая из стержня массой 7,5±0,1 г в штоке, который имеет расширение книзу для крепления суппозитория; обе части изготовлены из нержавеющей стали.

Устанавливают и поддерживают температуру водяной бани 36,5±0,5 ºС. В трубку (В) помещают 5 мл воды, нагретой до 36,5±0,5 °С, суппозиторий заострённым концом вниз и вводят вставку (Г1 или Г2).

При помощи секундомера регистрируют время, необходимое для достижения нижним краем вставки суженной части стеклянной трубки.

Полученное время принимают за время полной деформации суппозитория на липофильной основе.

Приборы для определения времени полной деформации суппозиториев должны соответствовать геометрическим и техническим параметрам, предусмотренным настоящей общей фармакопейной статьёй.

Рисунок 2. Схема прибора для определения времени полной деформации суппозиториев: А – водяная баня; Б – термометр; В – стеклянная трубка; Г1 – стеклянный стержень; Г2 – проникающая вставка.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0012 Распадаемость суппозиториев, вагинальных таблеток, ректальных и вагинальных капсул

Взамен ОФС.1.4.2.0012.15

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения распадаемости суппозиториев, вагинальных таблеток, ректальных и вагинальных капсул в жидкой среде за определённый промежуток времени в условиях, указанных в фармакопейной статье.

###### Метод 1. Испытание для суппозиториев

Прибор для испытания состоит из прозрачного стеклянного или пластмассового полого цилиндра с соответствующей толщиной стенок, внутри которого с помощью трёх держателей закреплено металлическое устройство, состоящее из 2 перфорированных дисков из нержавеющего металла, закреплённых на расстоянии около 30 мм друг от друга. Диаметр дисков близок к размеру внутреннего диаметра цилиндра, и в каждом диске имеется 39 отверстий диаметром 4 мм (рис. 1).

Испытания проводят на трёх приборах с отдельным испытуемым образцом. Каждый прибор помещают в сосуд с термостатирующим устройством, вместимостью не менее 4 л, заполненный жидкой средой. В качестве жидкой среды используют воду, нагретую до температуры 36,5±0,5 °С, если нет других указаний в фармакопейной статье.

Сосуд снабжён медленно движущейся мешалкой и устройством, которое поддерживает прибор в вертикальном положении ниже поверхности жидкой среды не менее чем на 90 мм и даёт возможность переворачивать его на 180°, не вынимая из среды. Три прибора могут быть также помещены вместе в один сосуд вместимостью не менее 12 л.

Рисунок 1. Схема прибора для определения распадаемости суппозиториев, вагинальных таблеток, ректальных и вагинальных капсул. Размеры указаны в миллиметрах.

Испытание проводят на трёх суппозиториях. Каждый образец помещают на нижний диск устройства, устанавливают устройство в цилиндр прибора и закрепляют его. Прибор помещают в сосуд с жидкой средой и начинают испытание. Приборы переворачивают каждые 10 мин.

По истечении времени, указанного в фармакопейной статье, исследуют состояние анализируемых образцов.

Препарат выдерживает испытание, если все образцы распались.

Испытуемые образцы считаются распавшимися, если:

- а) образцы полностью растворились;

- б) наблюдается разделение компонентов суппозитория: расплавленные липофильные вещества распределились на поверхности жидкой среды, нерастворимые компоненты осели на дно, а растворимые – растворились; в зависимости от состава и способа получения компоненты могут распределяться по одному или нескольким из указанных путей;

- в) размягчение испытуемого образца сопровождается заметным изменением формы, без полного разделения компонентов; размягчением считается также отсутствие у суппозитория твёрдого ядра, оказывающего сопротивление при надавливании стеклянной палочкой.

###### Метод 2. Испытание для вагинальных таблеток, ректальных и вагинальных капсул

Испытание проводят с использованием прибора, описанного
в методе 1. Прибор, устанавливают на держателях, помещают в лабораторный стакан подходящего диаметра, заполненный жидкой средой, при этом поверхность жидкой среды должна находиться немного ниже верхнего перфорированного диска (рис. 2). Затем с помощью пипетки прибавляют указанную жидкую среду до тех пор, пока перфорации диска не покроется тонким слоем жидкой среды.

Испытание проводят на трёх вагинальных таблетках, ректальных или вагинальных капсулах. Каждый испытуемый образец помещают отдельно на верхний диск устройства, накрывают стеклянной пластинкой, для сохранения соответствующих условий влажности.

По истечении времени, указанного в фармакопейной статье, исследуют состояние анализируемых образцов.

Препарат выдерживает испытание, если все испытуемые образцы распались.

Испытуемые образцы считаются распавшимися, если:

- а) образцы полностью растворились;

- б) на перфорированном диске не осталось осадка или оставшийся осадок состоит только из мягкой или пенообразной массы, не имеющей твёрдого ядра, оказывающего сопротивление при надавливании стеклянной палочкой (вагинальные таблетки);

- в) наблюдается разрыв желатиновой оболочки ректальной или вагинальной капсулы, позволяющий освободиться её содержимому.

Рисунок 2. Схема прибора для определения распадаемости вагинальных таблеток, ректальных и вагинальных капсул: А – стеклянная пластинка; Б – вагинальная таблетка; В – поверхность воды; Г – вода; Д – стакан.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0013 Распадаемость твёрдых лекарственных форм

Взамен ОФС.1.4.2.0013.15

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения способности твёрдых дозированных лекарственных форм в виде таблеток (кроме вагинальных таблеток), капсул (кроме ректальных и вагинальных капсул), гранул, драже, пастилок, пилюль и плёнок распадаться в жидкой среде за определённый промежуток времени в условиях, указанных в фармакопейной статье.

###### Метод 1. Испытания для лекарственных форм размером не более 18 мм

Оборудование. Прибор (рис. 1) для определения распадаемости состоит из сборной корзинки, стеклянного сосуда для жидкости вместимостью 1 л, термостатического устройства, поддерживающего температуру жидкости в пределах 37±2 °С, и электромеханического устройства, сообщающего корзинке возвратно-поступательное движение на расстоянии не менее 50 мм и не более 60 мм в вертикальной плоскости при частоте 28–32 цикла в 1 мин.

Основную часть прибора составляет сборная корзинка с 6 цилиндрическими стеклянными трубками длиной 77,5±2,5 мм с внутренним диаметром 21,85±1,15 мм и толщиной стенки 1,9±0,9 мм. Трубки поддерживаются в вертикальном положении сверху и снизу двумя накладными пластмассовыми пластинами диаметром 90±2 мм, толщиной 6,75±1,75 мм с 6 отверстиями, каждое диаметром 24±2 мм. Отверстия равноудалены от центра пластины и находятся на равном расстоянии друг от друга. К нижней поверхности нижней пластины прикреплена сетка с отверстиями размером 2,0±0,2 мм из нержавеющей стальной проволоки диаметром 0,615±0,045 мм. Пластины удерживаются жёстко относительно друг друга вертикальными металлическими стержнями по окружности. Ещё один металлический стержень прикреплён к центру верхней пластины, что позволяет прикрепить корзинку к механическому устройству, которое может поднимать и опускать её. Время, требующееся для движения вверх, равно времени движения вниз; изменение направления движения происходит плавно.

Корзинка движется вертикально вдоль оси. Не должно быть заметного смещения оси в горизонтальной плоскости

Рисунок 1. Устройство и размеры составных частей прибора для определения распадаемости по методу 1: а – корзинка; б – сетчатое дно-подставка корзинки; в – диск. Размеры указаны в миллиметрах.

В конструкции прибора предусмотрено использование дисков. При этом каждая стеклянная трубка снабжается диском цилиндрической формы диаметром 20,7±0,15 мм и высотой 9,5±0,15 мм (рис. 1, в), изготовленным из прозрачной пластмассы с плотностью от 1,18 до 1,20 г/см3. В диске просверлены 5 параллельных отверстий диаметром 2,0±0,1 мм; одно из них расположено в центре диска, остальные 4 – равномерно по кругу радиусом 6,0±0,2 мм от центра диска. На боковой поверхности диска вырезаны 4 выемки трапециевидной симметричной формы, практически перпендикулярные верхней и нижней поверхностям диска. Параллельные стороны выемки совпадают с краями диска и параллельны воображаемой линии, соединяющей два соседних отверстия, расположенных по кругу. Длина параллельной стороны трапеции на нижней поверхности диска составляет 1,6±0,1 мм, выемка имеет форму квадрата. Длина параллельной стороны трапеции на верхней поверхности диска составляет 9,4±0,2 мм и её середина находится на расстоянии 2,6±0,1 мм от окружности диска. Все поверхности диска гладкие.

Применение дисков указывается в фармакопейной статье.

Корзинку помещают в стакан, высота которого составляет 149±11 мм, внутренний диаметр – 106±9 мм. Объём жидкости должен быть таким, чтобы при подъёме корзинки в крайнее верхнее положение сетка находилась ниже поверхности жидкости не менее чем на 15 мм, а при опускании корзинки в крайнее нижнее положение – на 25 мм выше дна сосуда, и верхние открытые концы стеклянных трубок – над поверхностью жидкости.

Конструкция корзинки может изменяться при условии соблюдения указанных выше требований для стеклянных трубок и проволочной сетки.

Методика. Для проведения испытания отбирают 18 образцов твёрдых лекарственных форм, если нет других указаний в фармакопейной статье. В каждую из 6 трубок помещают по одному образцу и, если предписано, диск. Опускают корзинку в сосуд с жидкостью, указанной в фармакопейной статье и включают прибор. По истечении установленного времени корзинку вынимают и исследуют состояние лекарственных форм. Все образцы должны полностью распасться. Если 1 или 2 образца не распались, повторяют испытание на оставшихся 12 образцах. Не менее 16 из 18 образцов должны полностью распасться.

Интерпретация результатов. Образец считается полностью распавшимся, когда кроме нерастворимых фрагментов лекарственной формы, в т.ч. оболочки, находящихся на сетке или прилипших к нижней поверхности диска (если использовались диски) нет никакого остатка или остаток представляет собой мягкую массу, разрушающуюся при лёгком прикосновении стеклянной палочкой. Наличие такого остатка должно быть указано в фармакопейной статье.

###### Метод 2. Испытания для лекарственных форм размером более 18 мм

Оборудование. Прибор (рис. 2) для определения распадаемости состоит из жёсткой корзинки, стеклянного сосуда для жидкости вместимостью 1 л, термостатического устройства, поддерживающего температуру жидкости в пределах 37±2 °C, и электромеханического устройства, сообщающего корзинке возвратно-поступательное движение на расстоянии не менее 53 мм и не более 57 мм в вертикальной плоскости при частоте 29–32 цикла в 1 мин.

Основную часть прибора составляет корзинка с 3 цилиндрическими стеклянными трубками длиной 77,5±2,5 мм с внутренним диаметром 33,0±0,5 мм и толщиной стенки 2,5±0,5 мм. Трубки поддерживаются в вертикальном положении сверху и снизу двумя накладными пластмассовыми пластинами диаметром 97 мм, толщиной 9 мм с 3 отверстиями. Отверстия равноудалены от центра пластины и находятся на равном расстоянии друг от друга. К нижней поверхности нижней пластины прикреплена сетка с отверстиями размером 2,0±0,2 мм из нержавеющей стальной проволоки диаметром 0,63±0,3 мм. Пластины удерживаются жёстко относительно друг друга на расстоянии 77,5 мм вертикальными металлическими стержнями по окружности. Еще один металлический стержень прикреплён к центру верхней пластины, что позволяет прикрепить корзинку к механическому устройству, которое может поднимать и опускать её. Время, требующееся для движения вверх, равно времени движения вниз; изменение направления движения происходит плавно.

Корзинка движется вертикально вдоль оси. Не должно быть заметного смещения оси в горизонтальной плоскости.

В конструкции прибора предусмотрено использование дисков. Каждая стеклянная трубка снабжается диском цилиндрической формы диаметром 31,4±0,13 мм и высотой 15,3±0,15 мм, изготовленным из прозрачной пластмассы с плотностью от 1,18 до 1,20 г/см3. В диске просверлены 7 отверстий диаметром 3,15±0,1 мм; одно из них расположено в центре диска, остальные 6 – равномерно по кругу радиусом 4,2 мм от центра диска.

Применение дисков указывается в фармакопейной статье.

Корзинку помещают в стакан. Объём жидкости должен быть таким, чтобы при подъёме корзинки в крайнее верхнее положение сетка находилась ниже поверхности жидкости не менее чем на 15 мм, а при опускании корзинки в крайнее нижнее положение – на 25 мм выше дна сосуда, и верхние открытые концы стеклянных трубок – над поверхностью жидкости.

Конструкция корзинки может изменяться при условии соблюдения указанных выше требований для стеклянных трубок и проволочной сетки.

Методика. Для проведения испытания отбирают 6 образцов твёрдых лекарственных форм и проводят его либо с одновременным использованием двух корзинок, либо повторяя испытание. В каждую трубку помещают по одному образцу и, если предписано, диск. Опускают корзинку в сосуд с жидкостью, указанной в фармакопейной статье и включают прибор. По истечении установленного времени корзинку вынимают и исследуют состояние лекарственных форм. Все образцы должны полностью распасться.

Интерпретация результатов. Образец считается полностью распавшимся, когда кроме нерастворимых фрагментов лекарственной формы, в т.ч. оболочки, находящихся на сетке или прилипших к нижней поверхности диска (если использовались диски) нет никакого остатка или остаток представляет собой мягкую массу, разрушающуюся при лёгком прикосновении стеклянной палочкой. Наличие такого остатка должно быть указано в фармакопейной статье.

Рисунок 2. Устройство и размеры составных частей прибора для определения распадаемости по методу 2: а – корзинка; б – сетчатое дно-подставка корзинки; в – диск. Размеры указаны в миллиметрах.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0014 Растворение для твёрдых дозированных лекарственных форм

Взамен ОФС.1.4.2.0014.15

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения количества действующего вещества, которое высвобождается в среду растворения из лекарственного препарата в твёрдой дозированной лекарственной форме за определённый промежуток времени в условиях, указанных ниже или предусмотренных фармакопейной статьей.

Испытание применяют при контроле качества лекарственных препаратов в твёрдой дозированной форме с целью подтверждения постоянства состава, стабильности технологического процесса, обеспечения однородности внутри серий и разработки единых стандартов качества.

В фармакопейной статье при описании данного испытания на конкретный лекарственный препарат указывают:

- тип аппарата;

- среду растворения – состав и объём;

- скорость вращения мешалки для аппаратов I и II или возвратно-поступательных движений цилиндров для аппарата III или скорость потока среды растворения для аппарата IV;

- температуру среды растворения;

- время отбора проб;

- методику количественного определения действующего вещества или действующих веществ, высвободившихся в среду растворения;

- количество действующего вещества, которое должно высвободиться в среду растворения за нормируемое время, выраженное в процентах от заявленного содержания;

В настоящей ОФС в зависимости от скорости высвобождения действующих веществ лекарственные препараты подразделяются на следующие группы:

- 1 группа: Лекарственные препараты с обычным высвобождением: таблетки; таблетки, покрытые оболочкой; гранулы (время растворения которых превышает 5 мин); гранулы, покрытые оболочкой; капсулы, драже и другие твёрдые дозированные лекарственные формы;

- 2 группа: Лекарственные препараты с отсроченным высвобождением: таблетки, покрытые кишечнорастворимой оболочкой; кишечнорастворимые капсулы, гранулы и другие кишечнорастворимые твёрдые дозированные лекарственные формы;

- 3 группа: Лекарственные препараты с пролонгированным высвобождением: таблетки, капсулы и гранулы с пролонгированным высвобождением и другие твёрдые дозированные лекарственные формы с пролонгированным высвобождением.

Испытание «Растворение» для многокомпонентных твёрдых дозированных лекарственных форм допускается проводить по наименее растворимому (в водных средах с рН, находящемся в физиологическом диапазоне), действующему веществу.

В данном разделе под единицей лекарственной формы понимают одну таблетку или одну капсулу или указанное количество гранул.

###### Оборудование

Выбор аппарата для испытания и соответствующей среды растворения зависит от физико-химических свойств лекарственного препарата и вида лекарственной формы.

Все части аппарата, которые могут контактировать с лекарственным средством и средой растворения, должны быть химически инертными и не влиять на результаты анализа. Металлические части аппарата должны быть изготовлены из нержавеющей стали или покрыты соответствующим материалом, чтобы гарантировать отсутствие их взаимодействия со средой растворения или действующим веществом.

Не должно быть частей аппарата или условий его сборки, которые могли бы вызвать вибрацию, движение или перемещение во время работы, кроме равномерного вращения перемешивающего устройства или плавного возвратно-поступательного движения цилиндров.

Аппараты для растворения должны соответствовать геометрическим и техническим параметрам, предусмотренным настоящей общей фармакопейной статьей.

Аппарат I. Вращающаяся корзинка

Аппарат I (рис. 1) состоит из:

- сосуда для растворения (В) с полусферическим дном, изготовленного из боросиликатного стекла или другого подходящего прозрачного инертного материала. Номинальная вместимость сосуда для растворения составляет 1000 мл; высота – 185±25 мм; внутренний диаметр – 102±4 мм;

- двигателя с регулятором скорости, поддерживающим скорость вращения корзинки в пределах – 4 % от скорости вращения корзинки, указанной в фармакопейной статье

- перемешивающего элемента, который состоит из вертикального вала (А), к нижней части которого прикреплена цилиндрическая корзинка (Б). Ось вращения вала не должна отклоняться от вертикальной оси сосуда более чем на 2 мм. Вращение вала должно быть плавным, без существенных колебаний.

Корзинка состоит из двух частей: верхняя часть, имеющая отверстие диаметром 2,0±0,5 мм, должна быть приварена к валу и снабжена 3 упругими зажимами или другим подходящим приспособлением, позволяющим удалять нижнюю часть корзинки для введения испытуемого лекарственного средства. Съёмная часть корзинки сделана из сваренной прямым швом металлической проволочной сетки, в которой проволока диаметром 0,21–0,31 мм образует отверстия размером 0,36–0,44 мм. Сетка имеет форму цилиндра и сверху и снизу ограничена металлической оправой.

При использовании агрессивных кислых растворов может использоваться корзинка, покрытая слоем золота толщиной 2,5 мкм.

Расстояние между дном сосуда для растворения и корзинкой должно составлять от 23 до 27 мм.

Для предотвращения испарения среды растворения сосуды для растворения закрывают крышками с центральным отверстием для прохождения оси корзинки, а также с отверстиями для термометра и отбора проб.

Для поддержания температуры среды растворения 37±0,5 °С аппарат должен быть оснащён водяной баней или термостатируемым устройством.

Аппарат II. Лопастная мешалка

Аппарат II состоит из тех же частей, что и аппарат I.

Отличие аппарата II заключается в использовании в качестве перемешивающего элемента лопастной мешалки (рис. 2) вместо вращающейся корзинки.

Металлическая лопасть и металлический вал представляют собой единый элемент и могут быть покрыты подходящим инертным материалом. Нижний край лопасти мешалки должен находиться на расстоянии от 23 до 27 мм от дна сосуда для растворения. Центральная вертикальная линия лопасти должна проходить через ось вала так, чтобы нижняя часть лопасти находилась на уровне нижней части вала. Допускается использование детали, состоящей из двух разъёмных частей, сохраняющихся прочно закрепленными в процессе испытания.

Рисунок 1. Устройство и размеры составных частей аппарата «Вращающаяся корзинка». Размеры указаны в мм.
Рисунок 2. Устройство и размеры составных частей аппарата «Лопастная мешалка». Размеры указаны в мм.

Аппарат III. Поршневой цилиндр

Аппарат III (рис. 3) состоит из:

- набора цилиндрических плоскодонных стеклянных сосудов;

- набора стеклянных поршневых цилиндров, совершающих возвратно-поступательные движения;

- экранов-сит верхней и нижней части цилиндров, выполненных из несорбирующих инертных материалов;

- фиттингов, изготовленных из нержавеющей стали или другого подходящего инертного материала;

- двигателя и системы привода, приводящих в вертикальное возвратно-поступательное движение цилиндры внутри сосудов и, при необходимости, перемещающих их горизонтально в разных рядах сосудов.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье элементы прибора должны соответствовать размерам, приведённым на рис. 3.

Для предотвращения испарения среды растворения сосуды закрывают крышками.

Для поддержания температуры 37±0,5 °С аппарат должен быть оснащён водяной баней или термостатируемым устройством.

Рисунок 3. Устройство и размеры составных частей аппарата «Поршневой цилиндр». Размеры указаны в мм.

Аппарат IV. Проточная ячейка

Аппарат IV (рис. 4) состоит из:

- резервуара для среды растворения;

- насоса с диапазоном изменения подачи потока от 240 мл/ч до 960 мл/ч, с синусоидальным профилем скорости 120±10 импульсов/мин, перекачивающим среду растворения через проточную ячейку со стандартными скоростями 4 мл/мин, 8 мл/мин и 16 мл/мин. Допускается применение насоса без пульсаций;

- проточной ячейки (рис. 5, 6), установленной вертикально, из прозрачного инертного материала с системой фильтров, предотвращающих попадание нерастворившихся частиц. Нижний конус обычно заполнен маленькими стеклянными шариками, возможна установка держателя таблеток. Стандартные диаметры ячейки составляют 12 мм и 22,6 мм.

Размер ячейки, характеристики фильтрующей системы, параметры скорости потока и пульсации должны быть указаны в фармакопейной статье.

Для поддержания температуры среды растворения 37±0,5 °С аппарат должен быть оснащён водяной баней или термостатируемым устройством.

Рисунок 4. Принципиальная схема прибора «Проточная ячейка»
Рисунок 5. Устройство и размеры составных частей аппарата «Проточная ячейка» 12,0 мм. Размеры указаны в мм. А – проточная ячейка; Б – держатель таблеток для проточной ячейки размером 12,0 мм.
Рисунок 6. Устройство и размеры составных частей аппарата «Проточная ячейка» 22,6 мм. Размеры указаны в мм. А – проточная ячейка; Б – держатель таблеток для проточной ячейки размером 22,6 мм.

Пригодность оборудования

Надлежащая работа оборудования может быть проверена путём квалификации оборудования.

При проверке пригодности оборудования для испытаний на растворение необходимо учитывать важнейший квалификационный аспект – конструктивные особенности аппаратов и имеющиеся допуски.

Критические параметры испытаний, такие как температура и объём среды растворения, скорость вращения, скорость погружения или скорость потока жидкости, отбор проб, в течение периода использования должны контролироваться периодически.

Необходимо тщательно наблюдать и контролировать процесс проведения испытания, что особенно важно для объяснения ситуаций, выходящих за рамки спецификаций.

Целесообразно применение аппаратов, позволяющих вести наблюдение за испытуемым лекарственным средством и всеми компонентами системы, совершающими вращательные, возвратно-поступательные и иные установленные движения.

При валидации автоматизированных систем оборудования по отбору проб, подготовке среды растворения, проведению испытания и др. необходимо принимать во внимание их правильность и прецизионность, а также предотвращение загрязнений при различных разбавлениях, перемещениях, очистке и отборе проб, приготовлении среды растворения.

###### Среда растворения

В качестве среды растворения могут применяться: вода очищенная, хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М, буферные растворы с рН 6,8–7,8, а также другие растворы, указанные в фармакопейной статье или в настоящей общей фармакопейной статье.

Вода в качестве среды растворения может быть рекомендована только в том случае, если доказано, что изменение рН не оказывает влияние на характеристики растворения лекарственного препарата.

Состав среды выбирают на основании физико-химических свойств действующего(ых) и вспомогательного(ых) вещества(в) в пределах диапазона условий, в которых лекарственный препарат предположительно будет находиться после его применения. Это относится, в частности, к рН и ионной силе среды растворения.

Если лекарственные препараты в твёрдой дозированной лекарственной форме, в состав которых входит желатин, не отвечают требованиям испытания по показателю «Растворение», когда в качестве среды растворения используется вода или среды с рН менее 6,8, то – при наличии указаний в фармакопейной статье – испытание проводится повторно в той же среде с добавлением очищенного пепсина (активностью не более 750000 Ед на 1000 мл), или, если в качестве среды используются вода и среды с рН более 6,8, испытание повторяется в той же среде с добавлением панкреатина (активностью не более 1750 Ед протеазной активности на 1000 мл). Условия проведения повторного испытания должны быть приведены в фармакопейной статье.

Обычно используют среды растворения со значениями рН от 1 до 8.

При соответствующем обосновании может потребоваться среда растворения с более высоким значением рН.

Использование водных растворов с добавлением ферментов, поверхностно-активных веществ (например, натрия додецилсульфата, твин-80) или органических растворителей должно быть обосновано на стадии разработки испытания. Использование органических растворителей не рекомендуется. Для плохо растворимых веществ рекомендуется использовать среду растворения, содержащую поверхностно-активные вещества.

Применение прибора с вращающейся корзинкой или с лопастной мешалкой, а также прибора с поршневым цилиндром, как правило, основано на принципе проведения испытания в условиях ненасыщения, то есть в таких условиях, когда вещество, уже находящееся в растворе, не оказывает существенного влияния на скорость растворения вещества, ещё оставшегося в лекарственном препарате. Эти условия обычно подразумевают использование количества среды растворения, как минимум, в 3–10 раз больше необходимого для получения насыщенного раствора.

Объём среды растворения для аппаратов «Вращающаяся корзинка» и «Лопастная мешалка», «Поршневой цилиндр», если нет других указаний в фармакопейной статье или нормативной документации, обычно составляет 900 мл, но не должен быть менее 500 мл.

В случаях, когда соблюдение условий достаточного разбавления требует использования большого объёма среды растворения или при необходимости непрерывной смены рН среды растворения предпочтительнее использовать прибор «Проточная ячейка».

Температура среды растворения должна контролироваться на протяжении всего исследования и составлять 37±0,5 °С. Перед использованием среда растворения должна быть деаэрирована. Для этого среду растворения нагревают до температуры около 41 °С, осторожно перемешивая, сразу же фильтруют под вакуумом через фильтр с размером пор не более 0,45 мкм, энергично перемешивая. После фильтрования продолжают воздействие вакуумом в течение 5 мин.

Для деаэрирования может использоваться любой другой валидированный метод удаления газов.

Необходимость деаэрирования среды растворения подтверждается экспериментально. Если деаэрирование не влияет на процесс высвобождения действующего вещества в среду растворения, то это должно быть оговорено в фармакопейной статье.

Рекомендуемые среды растворения приведены далее в приложении 1.

###### Отбор проб

Отбор проб осуществляется из зоны сосуда для растворения, находящейся на ½ расстояния между поверхностью среды растворения и верхней частью съёмного элемента корзинки или лопасти мешалки и на расстоянии не менее 1 см от стенок сосуда для растворения.

Время отбора проб должно быть указано в фармакопейной статье и должно соблюдаться с точностью ±2 %.

Для препаратов 1 группы, если нет других указаний в фармакопейной статье, время отбора проб – через 45 мин после начала испытания.

Для препаратов 2 группы указывают 2 отдельных нормируемых временных интервала – для кислотной стадии и буферной стадии.

Для препаратов 3 группы указывают не менее 3 временных интервалов.

После каждого отбора пробы объём среды растворения должен быть возмещён тем же растворителем в объёме, равном объёму отобранной аликвоты. Если предварительными исследованиями показано, что пополнение среды растворения не является обязательным, убыль среды растворения учитывают при расчёте количества лекарственного средства, высвободившегося в среду растворения.

Аликвота раствора, отобранная из среды растворения, фильтруется сразу через инертный фильтр, который не должен абсорбировать действующее вещество из раствора и содержать вещества, способные экстрагироваться средой растворения. Размер пор фильтра должен составлять не более 0,45 мкм, если нет других указаний в фармакопейной статье.

Центрифугирование аликвоты допускается только при обосновании невозможности применения фильтрации пробы и валидации методики пробоподготовки.

Методика количественного определения действующего вещества в растворе должна быть описана в фармакопейной статье и валидирована в соответствии с установленными требованиями.

Если оболочка капсулы влияет на результаты анализа, то определяют фактор коррекции (поправку), для чего проводят испытание «Растворение» на капсулах, используемых при производстве данной лекарственной формы, не содержащих действующего вещества. Фактор коррекции учитывается при расчёте содержания действующего вещества, высвободившегося в среду растворения. Фактор коррекции не должен превышать 25 % от заявленного содержания действующего вещества.

###### Методика

Для лекарственных препаратов 1 группы с обычным высвобождением. В сосуд аппарата для растворения помещают указанный в фармакопейной статье объём среды растворения, предварительно доведённой до температуры 37±0,5 °С и деаэрированной.

При использовании аппарата I «Вращающаяся корзинка», если нет других указаний в фармакопейной статье, помещают по одной единице лекарственной формы в каждую из 6 сухих корзинок аппарата. Опускают корзинки в среду растворения и включают двигатель, вращающий перемешивающее устройство.

При использовании аппарата II «Лопастная мешалка», если нет других указаний в фармакопейной статье, по одной единице лекарственной формы помещают непосредственно в каждый из 6 сосудов со средой растворения до начала вращения мешалки.

Для предотвращения всплывания испытуемых образцов на поверхность среды растворения используют приспособление в виде проволочного зажима, грузила из инертного материала или стеклянной спирали, удерживающее образец на дне сосуда. Тип, параметры и размеры грузил должны быть указаны в фармакопейной статье. Допускается использование других альтернативных, валидированных приспособлений. Необходимо соблюдать осторожность для того, чтобы избежать оседания пузырьков воздуха на поверхности испытуемого образца. Скорость вращения приборов с лопастной мешалкой или с вращающейся корзинкой обычно выбирают в диапазоне от 50 об/мин до 100 об/мин, но она не должна превышать 150 об/мин.

При использовании аппарата III (поршневой цилиндр), если нет других указаний в фармакопейной статье, по одной единице лекарственной формы помещают в каждый поршневой цилиндр, совершающий возвратно-поступательные движения, избегая образования пузырьков воздуха на её поверхности. Прибор приводят в действие в соответствии с указаниями, во время возвратно-поступательного движения вверх-вниз цилиндр проходит общее расстояние 9,9–10,1 см. Используют аппарат с возможностью выбора скорости возвратно-поступательного движения цилиндров и поддержания её значения в пределах ±5 %. В течение указанного интервала времени или в каждом из указанных промежутков времени поднимают цилиндры и отбирают порцию пробы из центра между поверхностью среды растворения и дном каждого сосуда.

При использовании аппарата «Проточная ячейка» помещают 1 шарик диаметром 5,0±0,5 мм и затем стеклянные шарики подходящего размера, обычно 1,0±0,1 мм (входят в комплект аппарата), на дно конической части проточной ячейки для предотвращения прохождения жидкости в трубку. Одну единицу лекарственной формы, если нет других указаний в фармакопейной статье, помещают в держатель или непосредственно на поверхность слоя стеклянных шариков. Закрывают аппарат фильтрующей системой.

Используют аппарат с возможностью выбора скорости потока среды растворения в диапазоне от 4 мл/мин до 50 мл/мин, обеспечивающий постоянство потока с точностью ±5 % от номинальной скорости потока.

Испытуемые пробы фильтруют сразу после их отбора при отсутствии других указаний. Используют инертный фильтр, не абсорбирующий активное вещество и не содержащий экстрагирующихся веществ, способных повлиять на результаты анализа. Анализ пробы проводят, используя подходящую методику количественного определения, указанную в фармакопейной статье. При необходимости повторяют испытание на дополнительном количестве единиц лекарственной формы.

Для лекарственных препаратов 2 группы с отсроченным высвобождением при использовании аппаратов I, II, IV может применяться одна из 2 альтернативных методик проведения испытания "Растворение". Ссылка на используемую методику должна быть указана в фармакопейной статье.

Методика 1

Испытание проводят в 2 стадии.

1-я стадия (кислотная). По 750 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М, если нет других указаний в фармакопейной статье, помещают в каждый из 6 сосудов для растворения, предварительно доведённой до температуры 37±0,5 °С и деаэрированной. Помещают по одной единице лекарственной формы, если нет других указаний в фармакопейной статье, в каждый из 6 сосудов для растворения, закрывают сосуд, включают двигатель перемешивающего устройства. Через 2 ч, если нет других указаний в фармакопейной статье, отбирают аликвоту и сразу продолжают процесс растворения, как описано ниже.

Отобранную аликвотную часть раствора анализируют по методике, описанной в фармакопейной статье. Результаты испытаний на 1-й стадии считаются удовлетворительными, если количество действующего вещества, перешедшего в среду растворения, соответствует критериям раздела «Интерпретация результатов» (табл. 2).

2-я стадия (буферная). В каждый из 6 сосудов для растворения прибавляют по 250 мл натрия фосфата раствора 0,2 М (Na3PO4·12H2O), температура которого составляет 37±0,5 °С (перемешивающее устройство аппарата продолжает работать). Доводят рН среды растворения до 6,80±0,05 с помощью хлористоводородной кислоты раствора 2 М или натрия гидроксида раствора 2 М.

Продолжают процесс растворения в течение 45 мин, если нет других указаний в фармакопейной статье. После отбора пробы раствора проводят определение содержания действующего вещества в растворе по методике, описанной в фармакопейной статье. Результаты испытаний на 2-й стадии считаются удовлетворительными, если количество действующего вещества, перешедшего в среду растворения, соответствует критериям раздела «Интерпретация результатов» (табл. 2).

Примечание – Процедура добавления натрия фосфата раствора 0,2 М и доведения рН среды растворения до заданного значения должна проводиться в течение не более 5 мин.

Методика 2

Испытание проводят в 2 стадии.

1-я стадия (кислотная). По 1000 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М, если нет других указаний в фармакопейной статье, помещают в каждый из 6 сосудов для растворения, предварительно довёденной до температуры 37±0,5 °С и деаэрированной. Помещают по одной единице лекарственной формы, если нет других указаний в фармакопейной статье, в каждый из 6 сосудов для растворения, закрывают сосуд, включают двигатель перемешивающего устройства. Через 2 ч, если нет других указаний в фармакопейной статье отбирают аликвоту и сразу продолжают процесс растворения как описано ниже.

Отобранную аликвотную часть раствора анализируют по методике, описанной в фармакопейной статье.

Результаты испытаний на 1-й стадии считаются удовлетворительными, если количество действующего вещества, перешедшего в среду растворения, соответствует критериям раздела «Интерпретация результатов» (табл. 2).

2-я стадия (буферная). Из каждого сосуда для растворения удаляют хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М и помещают по 1000 мл фосфатного буферного раствора рН 6,8 с температурой 37±0,5 °С. Допустимо переносить испытуемые единицы лекарственной формы из сосудов для растворения, содержащих хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М, в сосуды для растворения, содержащие по 1000 мл фосфатного буферного раствора рН 6,8 с температурой 37±0,5 °С.

Процесс растворения продолжают в течение 45 мин, если нет других указаний в фармакопейной статье. Затем отбирают аликвоту и сразу анализируют по методике, описанной в фармакопейной статье. Результаты испытания на 2-й стадии считаются удовлетворительными, если количество действующего вещества, высвободившегося в среду растворения, соответствует критериям раздела «Интерпретация результатов» (табл. 2).

Примечание – Приготовление фосфатного буферного раствора рН 6,8. Хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М и натрия фосфата раствор 0,2 М (Na3PO4·12H2O) смешивают в соотношении 3:1 и при необходимости доводят рН полученного раствора до 6,80±0,05 с помощью хлористоводородной кислоты раствора 2 М или натрия гидроксида раствора 2 М.

При использовании аппарата III (поршневой цилиндр) применяют методику 2, используя один ряд сосудов для кислотной стадии, следующий ряд сосудов – для буферной стадии, при указанном объёме среды растворения (обычно 300 мл).

Для лекарственных препаратов 3 группы с пролонгированным высвобождением аппарат, методика испытания и методика определения содержания действующего вещества в растворе должны быть описаны в фармакопейной статье, в соответствии с требованиями настоящей общей фармакопейной статьи, указанными выше для лекарственных форм с обычным высвобождением.

###### Интерпретация результатов

Лекарственные препараты 1 группы с обычным высвобождением

Если не указано иначе в фармакопейной статье, количество действующего вещества, высвободившегося в среду растворения из каждой единицы лекарственной формы в течение 45 мин должно составлять не менее 80 % от заявленного содержания (Q+5 %).

Q – количество действующего вещества, высвобождающегося за определённый промежуток времени из единицы лекарственной формы в среду растворения, выраженное в процентах от заявленного содержания.

Если не указано иначе в фармакопейной статье, значение Q считают равным 75 %.

Испытание проводят на 6 единицах лекарственной формы. Результаты испытания считаются удовлетворительными, если количество действующего вещества, высвободившегося в среду растворения, соответствует критериям, приведённым в табл. 1, стадия S1.

Если при этом хотя бы один результат не соответствует установленным критериям, то испытание «Растворение» повторяют еще на 6 единицах лекарственной формы и проводят интерпретацию результатов согласно стадии S2 табл. 1.

Если при повторном испытании результаты не соответствуют установленным критериям, испытание повторяют на 12 дополнительных единицах лекарственной формы и проводят интерпретацию результатов согласно стадии S3 табл. 1.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, серия бракуется, если ни на одной из стадий исследования результаты испытания не удовлетворяют установленным критериям.

Таблица 1. Интерпретация результатов испытания «Растворение» + для лекарственных препаратов 1 группы
Стадия | Количество испытуемых единиц | Критерии приемлемости
--- | --- | ---
S1 | 6 | Для каждой испытуемой единицы: в среду растворения должно высвободиться не менее Q +5 % от заявленного содержания действующего вещества.
S2 | 6 | Среднее количество высвободившегося в среду растворения действующего вещества из 12 испытуемых единиц лекарственной формы (S1+S2) должно быть не менее Q и не должно быть ни одной единицы, где в среду растворения перешло бы менее Q–15 % от заявленного содержания действующего вещества.
S3 | 12 | Среднее количество высвободившегося в среду растворения действующего вещества из 24 испытуемых единиц лекарственной формы (S1+S2+S3) должно быть не менее Q; только для 2 единиц может быть менее Q–15 %, и ни для одной единицы не должно быть менее Q–25 % от заявленного содержания действующего вещества.

Лекарственные препараты 2 группы с отсроченным высвобождением.

Испытание проводят на 6 единицах лекарственной формы для каждой стадии (кислотной и буферной).

Результаты испытания на каждой стадии считаются удовлетворительными, если количество действующего вещества, высвободившегося в среду растворения из каждой единицы лекарственной формы, соответствует критериям, приведённым в табл. 2, для кислотной стадии А1 и для буферной стадии B1.

Если не указано иначе в фармакопейной статье, значение Q считают равным 75 %.

Если при этом хотя бы один результат не соответствует установленным критериям, то испытание «Растворение» повторяют еще на 6 единицах лекарственной формы и проводят интерпретацию результатов согласно табл. 2, кислотная стадия А2 и буферная стадия B2.

Если при повторном испытании результаты не соответствуют установленным критериям, испытание повторяют на 12 дополнительных единицах лекарственной формы и проводят интерпретацию результатов согласно табл. 2, кислотная стадия А3 и буферная стадия B3.

Количество Q представляет собой указанное общее количество действующего вещества, растворившегося как на кислотной, так и на буферной стадии, выраженное в процентах (%) от заявленного содержания.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье серия бракуется, если ни на одной из стадий исследования результаты испытания не удовлетворяют установленным критериям.

Таблица 2. Интерпретация результатов испытания «Растворение» + для лекарственных препаратов 2 группы.
Стадия | Количество испытуемых единиц | Критерии приемлемости
--- | --- | ---
1-я стадия (кислотная)
А1 | 6 | Для каждой испытуемой единицы: в среду растворения должно высвободиться не более 10 % от заявленного содержания действующего вещества.
А2 | 6 | Среднее количество высвободившегося в среду растворения действующего вещества из 12 испытуемых единиц (А1+А2) не должно быть более 10 % от заявленного содержания действующего вещества и не должно быть ни одной единицы, количество высвободившегося действующего вещества из которой превышает 25 % от заявленного содержания.
А3 | 12 | Среднее количество высвободившегося в среду растворения действующего вещества из 24 испытуемых единиц (А1+А2+А3) не должно быть более 10 % от заявленного содержания действующего вещества и не должно быть ни одной единицы, количество высвободившегося действующего вещества из которой превышает 25 % от заявленного содержания.
2-я стадия (буферная)
B1 | 6 | Для каждой испытуемой единицы: в среду растворения должно высвободиться не менее Q+5 % от заявленного содержания действующего вещества.
B2 | 6 | Среднее количество высвободившегося в среду растворения действующего вещества из 12 испытуемых единиц (B1+B2) должно быть не менее Q и не должно быть ни одной единицы, где в среду растворения высвободилось бы менее Q–15 % от заявленного содержания действующего вещества.
B3 | 12 | Среднее количество высвободившегося в среду растворения действующего вещества из 24 испытуемых единиц (B1+B2+B3) должно быть не менее Q; только для 2 единиц может быть менее Q–15 %, и ни для одной единицы не должно быть менее Q–25 % от заявленного содержания действующего вещества.

Лекарственные препараты 3 группы с пролонгированным высвобождением.

Испытание проводят на 6 единицах лекарственной формы. Результаты испытания считаются удовлетворительными, если количество действующего вещества, высвободившегося в среду растворения из каждой единицы лекарственной формы, соответствует критериям, приведённым в табл. 3, стадия L1.

Если при этом хотя бы один результат не соответствует установленным критериям, то испытание «Растворение» повторяют еще на 6 единицах лекарственной формы и проводят интерпретацию результатов согласно табл. 3, стадия L2.

Если при повторном испытании результаты не соответствуют установленным критериям, испытание повторяют на 12 дополнительных единицах лекарственной формы и проводят интерпретацию результатов согласно табл. 3, стадия L3.

Если ни на одной из стадий исследования результаты испытания не удовлетворяют установленным критериям, серия бракуется.

Таблица 3. Интерпретация результатов испытания «Растворение» + для лекарственных препаратов 3 группы
Стадия | Количество испытуемых единиц | Критерии приемлемости
--- | --- | ---
L1 | 6 | Не должно быть ни одной испытуемой единицы, для которой количество высвободившегося в среду растворения действующего вещества находится за пределами установленных диапазонов и менее значения, установленного для конечного времени испытания.
L2 | 6 | Среднее количество высвободившегося в среду растворения действующего вещества из 12 испытуемых единиц (L1+L2) должно лежать в пределах установленных диапазонов и должно быть не менее значения, установленного для конечного времени испытания. Ни одно индивидуальное значение не должно больше чем на 10 % от заявленного содержания выходить за пределы установленных диапазонов и быть более чем на 10 % от заявленного содержания ниже значения, установленного для конечного времени испытания.
L3 | 12 | Среднее количество высвободившегося в среду растворения действующего вещества из 24 испытуемых единиц (L1+L2+L3) должно лежать в пределах установленных диапазонов и должно быть не менее значения, установленного для конечного времени испытания. Не более чем для 2 из 24 единиц количество высвободившегося вещества может более чем на 10 % от заявленного содержания выходить за пределы установленных диапазонов и быть более чем на 10 % от заявленного содержания ниже значения, установленного для конечного времени испытания. Ни для одной единицы количество высвободившегося вещества не должно более чем на 20 % от заявленного содержания выходить за пределы установленных диапазонов и быть более чем на 20 % от заявленного содержания ниже значения, установленного для конечного времени испытания.

##### Приложение 1. Рекомендуемые среды растворения

При проведении испытания на растворение твёрдых дозированных лекарственных форм для приёма внутрь могут быть использована среды растворения, примеры которых приведены в табл. 4.

Таблица 4. Примеры возможных сред растворения
pH | Среда растворения
--- | ---
pH 1,0 | HCl
pH 1,2 | NaCl, HCl
pH 1,5 | NaCl, HCl
pH 4,5 | Фосфатный или ацетатный буферный раствор
pH 5,5 и pH 5,8 | Фосфатный или ацетатный буферный раствор
pH 6,8 | Фосфатный буферный раствор
pH 7,2 и pH 7,5 | Фосфатный буферный раствор

Состав и приготовление сред растворения, приведённых в табл. 4, указаны ниже.

Среды растворения с хлористоводородной кислотой

- хлористоводородной кислоты раствор 0,2 М;

- натрия хлорида раствор 0,2 М: 11,69 г натрия хлорида растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 1000 мл.

Для приготовления сред растворения с хлористоводородной кислотой со значениями рН указанными в табл. 5, смешивают 250 мл натрия хлорида раствора 0,2 М с объёмом хлористоводородной кислоты раствора 0,2 М, указанным в табл. 5 и доводят объём полученного раствора водой до 1000 мл.

Среды растворения с хлористоводородной кислотой также могут быть приготовлены с использованием калия хлорида вместо натрия хлорида.

Таблица 5. Среды растворения с хлористоводородной кислотой
pH | HCl, мл
--- | ---
1,2 | 425,0
1,3 | 336,0
1,4 | 266,0
1,5 | 207,0
1,6 | 162,0
1,7 | 130,0
1,8 | 102,0
1,9 | 81,0
2,0 | 65,0
2,1 | 51,0
2,2 | 39,0

Ацетатные буферные растворы

Уксусной кислоты раствор 2 М: 120,0 г ледяной уксусной кислоты доводят водой до 1000,0 мл.

- Ацетатный буферный раствор рН 4,5: 2,99 г натрия ацетата растворяют в воде, прибавляют 14,0 мл 2 М раствора уксусной кислоты и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

- Ацетатный буферный раствор рН 5,5: 5,98 г натрия ацетата растворяют в воде, прибавляют 3,0 мл 2 М раствора уксусной кислоты и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

- Ацетатный буферный раствор рН 5,8: 6,23 г натрия ацетата растворяют в воде, прибавляют 2,1 мл 2 М раствора уксусной кислоты и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Фосфатные буферные растворы

Для приготовления буферных растворов со значениями рН, указанными в табл. 6, смешивают 250 мл 0,2 М раствора калия дигидрофосфата и указанный в табл. 6 объём 0,2 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до 1000,0 мл.

Таблица 6. Фосфатные буферные растворы
pH | 5,8 | 6,0 | 6,2 | 6,4 | 6,6 | 6,8
--- | --- | --- | --- | --- | --- | ---
NaOH, мл | 18,0 | 28,0 | 40,5 | 58,0 | 82,0 | 112,0
pH | 7,0 | 7,2 | 7,4 | 7,6 | 7,8 | 8,0
NaOH, мл | 145,5 | 173,5 | 195,5 | 212,0 | 222,5 | 230,5

Иные фосфатные буферные растворы

- Фосфатный буферный раствор рН 4,5. В мерной колбе вместимостью 1000 мл помещают 13,61 г калия дигидрофосфата, растворяют в 750 мл воды. При необходимости корректируют значение рН 0,1 М раствором натрия гидроксида или 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты и доводят объём раствора водой до метки.

- Фосфатный буферный раствор рН 5,5.

- Фосфатный буферный раствор рН 6,8.

- Буферный раствор рН 7,2.

- 0,33 М фосфатный буферный раствор рН 7,5.

Искусственный кишечный сок рН 6,8

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 77,0 мл натрия гидроксида раствора 0,2 М, 250,0 мл раствора, содержащего 6,8 г калия дигидрофосфата и 500 мл воды, прибавляют 10,0 г порошка панкреатина, перемешивают, при необходимости корректируют значение рН и доводят объём раствора водой до метки.

Искусственный желудочный сок

В мерной колбе вместимостью 1000 мл растворяют в 100 мл воды 2,0 г натрия хлорида и 3,2 г порошка пепсина, прибавляют 80 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты и доводят объём раствора водой до метки. При необходимости порошок пепсина может быть исключён.

###### Повышение рН

При проведении испытания, требующего повышения рН, может быть использована одна из следующих последовательностей, указанная в табл. 7.

Таблица 7. Повышение рН
Время, ч | 0-1 | 1-2 | 2-3 | 3-4 | 4-5 | 5-6 | 6-7 | 7
--- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | ---
pH | 1,0 |
pH | 1,2 | 6,8
pH | 1,2 | 2,5 | 4,5 | 7,0 | 7,5
pH | 1,5 | 4,5 | 7,2

Для достижения указанных изменений рН, можно:

- заменять один буферный раствор другим (полная замена);

- каждый раз удалять только половину среды растворения (неполная или половинная замена) и заменять её буферным раствором с более высоким значением рН: рН исходного буферного раствора 1,2, а второго (заменяющего) ‒ 7,5;

- к исходному буферному раствору рН 1,5 прибавлять смесь, состоящую из трис(гидроксиметил)аминометана и натрия ацетат безводного, вначале для получения значения рН 4,5, а затем вторую порцию смеси для получения значения рН 7,2, как указано ниже:

- хлористоводородная кислота рН 1,5: 2 г натрия хлорида растворяют в воде, прибавляют 31,6 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты и доводят объём раствора водой до 1000 мл;

- буферный раствор рН 4,5: смешивают 2,28 г трис(гидроксиметил)аминометана и 1,77 г натрия ацетата безводного; полученную смесь растворяют в описанном выше растворе хлористоводородной кислоты рН 1,5;

- буферный раствор рН 7,2: смешивают 2,28 г трис(гидроксиметил)аминометана с 1,77 г натрия ацетата безводного; полученную смесь растворяют в описанном выше растворе хлористоводородной кислоты рН 4,5.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0015 Растворение для суппозиториев на липофильной основе

Взамен ОФС.1.4.2.0015.15

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения количества действующего вещества, которое высвобождается в среду растворения из суппозиториев на липофильной основе за определённый промежуток времени в условиях, указанных ниже или предусмотренных фармакопейной статьёй.

Испытание применяют при фармацевтической разработке лекарственных средств, контроле качества суппозиториев на липофильной основе с целью подтверждения постоянства состава и стабильности технологического процесса.

В фармакопейной статье при описании данного испытания на конкретное лекарственное средство указывают:

- среду растворения – состав и объём;

- скорость потока среды растворения;

- температуру среды растворения;

- время отбора проб;

- объём пробы;

- методику количественного определения действующего вещества (веществ), высвободившегося в среду растворения;

- количество действующего вещества (веществ), которое должно высвободиться в среду растворения за нормируемое время, выраженное в процентах от заявленного содержания.

###### Оборудование

Используется прибор «Проточная ячейка» (рис. 1), который состоит из:

- резервуара для среды растворения, помещённого на водяную баню;

- водяной бани, поддерживающей температуру среды растворения в диапазоне значений 37,0±0,5 °С;

- насоса, перекачивающего среду растворения через проточную ячейку;

- термостатируемой проточной ячейки с системой фильтров;

- устройства для отбора проб.

Рисунок 1. Принципиальная схема прибора «Проточная ячейка».

Проточная ячейка состоит из 3 прозрачных частей, вставляемых одна в другую (рис. 2):

1. Нижняя часть состоит из 2 смежных камер (А и Б), соединённых переливным отверстием (1).

- Среда растворения попадает в камеру А с восходящим потоком, затем переходит в камеру Б, где поток является нисходящим, и проходит через маленькое выходное отверстие (2), ведущее наверх к фильтрующему устройству. Перед выходным отверстием может быть установлено сито с остриём (3), улавливающее крупные частицы.

2. Средняя часть ячейки имеет полость для сбора липофильных наполнителей (4), которые плавают на поверхности среды растворения. Металлическая сетка (5) служит грубым фильтром.

3. Фильтрующая часть снабжена фильтром (6) из бумаги, стекловолокна или целлюлозы.

Существует открытая и закрытая конфигурация (открытый и закрытый цикл) работы проточной ячейки. При постоянном обновлении среды растворения и ее удалении после экстрагирования действующих веществ конфигурация называется открытой, в случае рециркуляции фиксированного объёма среды растворения внутри сосуда – конфигурация закрытая.

Рисунок 2. Схема проточной ячейки. Размеры указаны в мм. А – камера с восходящим потоком; Б – камера с нисходящим потоком; 1 – переливное отверстие; 2 – выходное отверстие; 3 – сито с остриём; 4 – полость для сбора липофильных наполнителей; 5 – металлическая сетка; 6 – фильтр; 7 – капилляр.

Среда растворения. Если среда растворения содержит буферный раствор, то доводят значение рН до заданного (допустимое отклонение значения рН±0,05). Перед использованием среда растворения должна быть деаэрирована.

###### Методика

Одну единицу лекарственной формы помещают в камеру А. Закрывают ячейку подготовленной фильтрующей частью. Среду растворения нагревают до подходящей температуры. Используя насос, через нижнюю часть ячейки вводят подогретую среду растворения для создания потока в открытом или закрытом цикле с установленным отклонением скорости потока ±5 %. Когда среда растворения достигнет уровня переливного отверстия, воздух начнёт выходить через капилляр (7), соединённый с фильтрующим устройством, и камера Б заполнится средой растворения. Действующее вещество распределяется в среде растворения в зависимости от его физико-химических свойств.

###### Отбор проб

Отбор проб производят на выходе из ячейки при использовании как открытого, так и закрытого цикла.

Отобранную пробу фильтруют с помощью инертного фильтра с соответствующим размером пор, не вызывающим адсорбции действующего вещества из раствора и не содержащим веществ, экстрагируемых средой растворения, которые могли бы влиять на результаты анализа, описанного в фармакопейной статье метода.

###### Анализ результатов

Количество действующего вещества, перешедшего в раствор за указанное время, выражают в процентах от заявленного содержания.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье через 45 минут в среду растворения должно высвободиться не менее 75 % (Q) действующего вещества.

Испытание проводят на 6 единицах лекарственной формы. Результаты испытания считаются удовлетворительными, если количество действующего вещества, высвободившегося в среду растворения из каждой единицы лекарственной формы, соответствует критериям, приведённым в табл. 1, стадия S1.

Если при этом хотя бы один результат не соответствует норме, указанной в фармакопейной статье, то испытание «Растворение» повторяют еще на 6 единицах лекарственной формы и проводят интерпретацию результатов согласно табл. 1, стадия S2.

Если при повторном испытании результаты не соответствуют установленным критериям, испытание повторяют на 12 дополнительных единицах лекарственной формы и проводят интерпретацию результатов согласно табл. 1, стадия S3.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье серия бракуется, если ни на одной из стадий исследования результаты испытания не удовлетворяют установленным критериям.

Таблица 1. Интерпретация результатов испытания «Растворение» для суппозиториев на липофильной основе
Стадия | Число испытуемых единиц | Критерии приемлемости
--- | --- | ---
S1 | 6 | Для каждой испытуемой единицы: в среду растворения должно высвободиться не менее Q + 5 % от заявленного содержания действующего вещества
S2 | 6 | Среднее количество высвободившегося в среду растворения действующего вещества из 12 испытуемых единиц лекарственной формы (S1 + S2) должно быть не менее Q, и не должно быть ни одной единицы, где в среду растворения перешло бы менее Q – 15 % от заявленного содержания действующего вещества
S3 | 12 | Среднее количество высвободившегося в среду растворения действующего вещества из 24 испытуемых единиц лекарственной формы (S1 + S2 + S3) должно быть не менее Q; только для 2 единиц может быть менее Q – 15 %, и ни для одной единицы не должно быть менее Q – 25 % от заявленного содержания действующего вещества

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0016 Сыпучесть порошков

Взамен ОФС.1.4.2.0016.15

В настоящей общей фармакопейной статье приведены методы оценки сыпучести порошков, наиболее часто применяемые в фармацевтической практике.

Под сыпучестью (текучестью) понимают способность частиц твёрдых порошкообразных веществ, материалов сыпаться (течь) под воздействием собственной силы тяжести. Для целей настоящей общей фармакопейной статьи под порошкообразными веществами, материалами (далее ‒ порошками), подразумеваются фармацевтические субстанции, вспомогательные вещества, их смеси, промежуточные продукты и другие материалы в виде твёрдых сыпучих веществ (порошков, гранул, сфероидов и т.п.), которые могут быть использованы при производстве лекарственных средств.

###### Область применения

Широкое использование порошков в фармацевтической промышленности для создания самых различных лекарственных форм лекарственных препаратов требует всесторонней оценки их технологических свойств, включая оценку характеристик сыпучести порошков. Работа по установлению связи между различными критериями сыпучести порошков и технологическим процессом производства лекарственных средств способствовала появлению большого количества методов испытаний для определения многогранных технологических характеристик порошков, например, сыпучести (текучести), плотности, прессуемости, пористости, смачиваемости и т.п.

Наиболее часто встречающиеся методы оценки сыпучести порошков и рекомендации, касающиеся их унификации, стандартизации, приведённые в настоящей общей фармакопейной статье, могут быть полезными при фармацевтической разработке, технологическом процессе производства лекарственных средств.

###### Основные положения

Сыпучесть порошков является комплексной технологической характеристикой способности материала образовывать дискретно-непрерывный устойчивый поток, определяемый дисперсностью и формой частиц, остаточной влажностью, гранулометрическим составом порошкообразной системы.

Любой метод оценки сыпучести порошков должен быть применимым на практике, воспроизводимым, чувствительным, обеспечивающим получение значащих информативных результатов. Вместе с тем, ни один из простых методов определения сыпучести порошков не способен адекватно и полностью охарактеризовать весь спектр характеристик сыпучести порошков, имеющих определённое значение в фармацевтической практике. Поэтому подходящей стратегией для оценки сыпучести порошков может быть использование нескольких стандартизированных методов испытаний для определения различных характеристик, критериев сыпучести порошков, имеющих значение для решения конкретной задачи.

Наиболее часто для оценки различных характеристик сыпучести порошков применяют следующие методы испытаний:

- определение скорости сыпучести через отверстие;

- определение угла естественного откоса;

- определение коэффициента прессуемости (коэффициента Карра) или коэффициент Хауснера;

- метод сдвиговых ячеек.

Все указанные методы испытаний помимо основных методик определения указанных характеристик, имеют многочисленные их разновидности и варианты, которые применяют в зависимости от конкретных задач. Кроме того, для выполнения одного и того же испытания может быть использовано оборудование, имеющее различные параметры. Учитывая большое количество разновидностей методик указанных методов испытаний, необходимо обращать внимание на стандартизацию методик испытаний.

###### Метод 1. Определение скорости сыпучести через отверстие

Скорость сыпучести порошка зависит от многих факторов, некоторые из которых связаны со свойствами его частиц, а некоторые зависят от применяемого испытания. Определение скорости сыпучести порошка через отверстие является одним из лучших способов оценки его сыпучести. При выполнении данного метода очень важно контролировать обеспечение непрерывного потока порошка, так как пульсирующие потоки могут появляться даже у свободно сыпучих порошков. Изменения скорости потока также могут происходить по мере освобождения ёмкости, из которой сыплется порошок. Были выведены эмпирические уравнения, устанавливающие взаимосвязь скорости потока порошка с диаметром отверстия, размером и плотностью частиц порошка, но использовать полученные данные для определения скорости сыпучести порошка через отверстие можно только при испытании свободно сыпучих порошков.

Скорость сыпучести порошков через отверстие представляет собой отношение массы, вытекающей из ёмкостей различного вида (цилиндра, воронки, загрузочной воронки), ко времени. Измерение скорости сыпучести порошков можно осуществлять непрерывно или в дискретных приращениях.

Основные методики определения скорости сыпучести порошков через отверстие могут быть классифицированы по трём основным экспериментальным переменным:

- тип ёмкости для порошка: обычно используют ёмкости в виде цилиндров, воронок и загрузочных воронок из технологического оборудования;

- размер и форма используемого отверстия: диаметр и форма отверстия являются критическими факторами при определении скорости сыпучести порошка;

- методика измерения скорости сыпучести порошка: измерение скорости потока можно проводить непрерывно с использованием электронных весов, оснащённых каким-либо записывающим устройством, или измерение осуществлять в дискретных величинах, например, время, измеренное с точностью до десятой доли секунды, необходимое для прохождения через отверстие 100 г порошка, или количество порошка, измеренного с точностью до десятой доли грамма, проходящего через отверстие в течение 10 с.

В соответствии с выбранной методикой можно определять массовую или объёмную скорость сыпучести порошков.

Более простой методикой является определение массовой скорости сыпучести порошков, но при испытании материалов с высокой плотностью и летучих материалов возможно искажение результатов; в этом случае предпочтительнее использовать определение объёмной скорости сыпучести. Иногда для облегчения высыпания порошка из ёмкости применяют виброустройство, но это усложняет интерпретацию получаемых результатов. Для более точного моделирования условий роторного пресса, применяемого в технологическом процессе производства, предложено использовать устройство, имеющее подвижное отверстие, позволяющее определить минимальный диаметр отверстия для прохождения потока порошка.

Скорость сыпучести порошка через отверстие не является характерным свойством порошка, так как она в значительной мере зависит от используемой методики.

На результаты испытаний, получаемые при использовании методик по определению скорости сыпучести через отверстие, влияют такие известные важные параметры, как:

- диаметр и форма отверстия;

- тип материала, из которого сделана ёмкость (металл, стекло, полимерный материал);

- диаметр и высота слоя порошка.

Определение скорости сыпучести порошка через отверстие используют для порошков, которые имеют некоторую способность к сыпучести; для когезивных порошков такая методика не применима. Если высота слоя порошка значительно выше, чем диаметр отверстия, то скорость сыпучести фактически не зависит от высоты слоя порошка. Целесообразно использовать в качестве ёмкости цилиндр, чтобы стенки ёмкости не оказывали влияние на поток порошка. Таким образом, скорость потока будет определяться подвижностью, т.е. течением порошка по порошку, а не движением порошка по стенке ёмкости. В большинстве случаев скорость сыпучести порошка увеличивается, если высота столба порошка меньше, чем его двойной диаметр. Отверстие должно быть круглым, цилиндр не должен вибрировать.

Основные требования к размерам цилиндра:

- диаметр отверстия должен быть более чем в 6 раз больше диаметра частиц;

- диаметр цилиндра должен быть более чем в 2 раза больше диаметра отверстия.

Для обеспечения максимальной подвижности и оптимальной структуры потока («порошок по порошку») в плоском дне цилиндра делают отверстие с изменяемым диаметром. Непрерывное измерение скорости сыпучести с использованием электронных весов позволяет более эффективно, по сравнению с дискретным, обнаруживать кратковременные изменения скорости сыпучести порошка.

Необходимо учитывать, что полученные результаты измерения скорости сыпучести через отверстие зависят от вариантов используемого метода, поэтому не применимо сравнение результатов, полученных этим методом, с результатами, указанными в общепринятой шкале сыпучести (табл. 3).

Для репрезентативной оценки сыпучести порошков в производственных условиях в качестве ёмкости для порошка может быть использована загрузочная воронка. При этом не рекомендуется использовать воронки с выходным стволом, так как скорость потока будет зависеть не только от размера и высоты выходного ствола, но и от силы трения между порошком и стволом воронки. Можно использовать воронку в виде усечённого конуса, но в этом случае необходимо учитывать влияние на скорость потока коэффициента трения между стенками и порошком, поэтому важное значение имеет подбор необходимого материала для воронки.

Определение сыпучести с использованием стандартной воронки

Для определения способности испытуемого материала, состоящего из твёрдых частиц, сыпаться в вертикальном направлении через выходное отверстие воронки при заданных условиях, проводят испытание с использованием стандартных воронок. В зависимости от сыпучести испытуемого образца могут быть использованы воронки различных конструкций:

- без выходного ствола, типа «бункер» (рис. 1), с различными размерами внутреннего угла и диаметрами выходных отверстий, указанными в табл. 1;

- с выходным стволом (рис. 2).

При отсутствии выходного ствола, воронку используют с насадкой. Воронку поддерживают в вертикальном положении при помощи специального устройства. Вся конструкция должна быть защищена от вибраций.

Рисунок 1. Воронка без выходного ствола (бункер) со сменной насадкой. Насадку изготавливают из нержавеющей кислотоупорной стали (V4A, CrNi). Размеры указаны в миллиметрах.

Таблица 1. Типовые размеры диаметров выходных отверстий сменных насадок
Насадка | Диаметр (d) выходного отверстия, мм
--- | ---
1 | 10±0,01
2 | 15±0,01
3 | 25±0,01

Рисунок 2. Воронка с выходным стволом. Размеры указаны в миллиметрах.

Методика. В сухую воронку с закрытым выходным отверстием помещают без уплотнения навеску испытуемого образца, взвешенную с точностью ±0,5 %. Количество испытуемого образца зависит от его насыпного (кажущегося) объёма (ОФС «Насыпная плотность и плотность после уплотнения») и от используемого оборудования, но должно занимать не менее 80–90 % от объёма воронки. Открывают выходное отверстие воронки и определяют время, за которое через отверстие воронки пройдёт весь образец. Проводят не менее трёх измерений.

Если при использовании воронки, представленной на рис. 1, время высыпания 100 г испытуемого образца через насадку 1 менее 25 с, то рекомендуется использовать воронку, представленную на рис. 2. Если при использовании воронки, представленной на рис. 1, испытуемый образец неравномерно высыпается из воронки с насадкой 1, то скорость сыпучести определяют последовательно, используя воронку с насадкой 2 или с насадкой 3.

Анализ результатов. Скорость сыпучести выражают в секундах, измеренных с точностью до десятой доли секунды, отнесённых к 100 г испытуемого образца, с указанием типа использованного оборудования, номера насадки.

Результаты зависят от условий хранения испытуемого образца.

Результаты определения скорости сыпучести могут быть представлены следующим образом:

- как вычисленное среднее значение, при условии, что ни один из результатов не отклоняется от среднего значения более чем на 10 %;

- в виде диапазона значений, если отдельные результаты отклоняются от среднего значения более чем на 10 %;

- в виде графика зависимости массы испытуемого образца от времени истечения;

- указывают бесконечное время в случае неполного истечения испытуемого образца через воронку.

###### Метод 2. Определение угла естественного откоса

Угол естественного откоса – это постоянная величина трёхмерного угла (относительно горизонтальной поверхности), сформированного при высыпании порошка горкой в виде конуса на горизонтальную поверхность, полученного в определённых условиях испытания.

Угол естественного откоса используют для описания свойств сыпучести твёрдых веществ, он является характеристикой сыпучести, учитывающей трение частиц между собой, а также сопротивление между частицами при их движении. Результат определения угла естественного откоса во многом зависит от используемого метода. Трудности в проведении испытания возникают из-за расслаивания (сегрегации), уплотнения или разрыхления (аэрации) порошка при формировании конуса. Несмотря на трудности, методики определения этой характеристики сыпучести находят применение в фармацевтической промышленности при решении производственных проблем.

Большинство применяемых методик определения статистического угла естественного откоса можно классифицировать по двум основным экспериментальным переменным:

- высота цилиндра, через который проходит порошок: может быть фиксированной относительно основания или высота может изменяться по мере формирования горки;

- основание, на котором формируется горка: может иметь фиксированный диаметр, или диаметр основания конуса горки из порошка может изменяться по мере формирования горки.

При проведении испытаний с использованием основных методик могут быть определены:

- стекающий угол естественного откоса ‒ определяется после «стекания» из ёмкости дополнительного количества порошка, выходящего за пределы основания конуса горки фиксированного диаметра. Образование конуса порошка с основой фиксированного диаметра позволяет определить стекающий угол естественного откоса;

- динамический угол естественного откоса ‒ определяется путём заполнения цилиндра (с прозрачной плоской крышкой на одном конце) и вращения его с заданной скоростью. Динамический угол естественного откоса ‒ это угол (относительно горизонтальной поверхности), сформированный сыпучим порошком. Внутренний угол кинетического трения определяется плоскостью, разделяющей частицы, которые скатываются вниз с верхнего слоя порошка, и частицы, которые вращаются вместе с цилиндром (с шероховатой поверхностью).

Общая шкала сыпучести и угла естественного откоса. Несмотря на то, что существуют некоторые различия в качественной оценке сыпучести порошков, основанной на определении угла естественного откоса, всё же, в большинстве случаев, она согласуется с классификацией Карра, приведённой в табл. 2.

Таблица 2. Характер сыпучести и соответствующий угол естественного откоса
Характер сыпучести | Угол естественного откоса, градус
--- | ---
Отличная | 25–30
Хорошая | 31–35
Приемлемая (дополнительных действий не требуется) | 36–40
Удовлетворительная (может застревать) | 41–45
Слабая (необходимо дополнительное встряхивание или вибрация) | 46–55
Плохая | 56–65
Очень плохая | более 66

В технологическом процессе производства чаще используют порошки, имеющие угол естественного откоса в диапазоне от 40 градусов до 50 градусов, гораздо реже ‒ более 50 градусов.

Угол естественного откоса не является характерным свойством порошка, так как он изменяется в зависимости от методики, используемой для формирования конуса порошка. Необходимо обратить внимание на обязательное соблюдение следующих условий, которые могут повлиять на результаты определения:

- вершина формирующегося конуса порошка может деформироваться под воздействием падающих сверху частиц порошка, поэтому при построении порошкового конуса необходимо соблюдать осторожность, аккуратность, при этом условия эксперимента должны обеспечивать формирование симметричного конуса порошка;

- материал основания, на котором строится конус из порошка, влияет на угол естественного откоса. Рекомендуется, чтобы конус из порошка формировался на «общем основании», т.е. образование конуса на слое порошка. Это достигается путём использования основания с опредёленным диаметром, внешние края которого имеют бортик для сохранения слоя порошка, на котором формируется конус.

Методика. Определение угла естественного откоса проводят по одной из методик определения скорости сыпучести с использованием того же оборудования, в тех же условиях. Испытуемый образец вытекает из отверстия воронки или цилиндра на неподвижное основание с бортиком, удерживающим на основании слой порошка, и формирует угол естественного откоса. Основание не должно подвергаться вибрации. Высоту расположения отверстия воронки или цилиндра подбирают таким образом, чтобы испытуемый образец образовывал симметричный конус. Необходимо принять меры по предупреждению вибрации при движении воронки или цилиндра. Для уменьшения воздействия падающего порошка на формирующуюся вершину конуса, край воронки или цилиндра должен находиться на расстоянии 2–4 см от вершины горки порошка. Если симметричный конус испытуемого образца не удаётся получить или воспроизвести, то этот метод не может быть использован.

Измеряют высоту полученного конуса порошка (h) и диаметр основания (d) и рассчитывают угол естественного откоса (α) по формуле:

(1)

где h – высота полученного конуса порошка;
d – диаметр основания полученного конуса порошка;
α – угол естественного откоса.

Анализ результатов. Угол естественного откоса выражают в угловых градусах, как вычисленное среднее значение, с указанием типа использованного оборудования, номера насадки (при использовании), условий эксперимента (диаметр основания конуса, если он фиксированный, материала основания на которой формировался конус).

###### Метод 3. Определение коэффициента прессуемости и коэфициента Хауснера

Одним из простых, быстрых и популярных методов прогнозирования характеристик сыпучести порошков является определение коэффициента прессуемости (называемого также коэффициентом Карра) и связанного с ним коэффициента Хауснера.

Коэффициент прессуемости представляет собой косвенный показатель насыпной плотности, размера и формы, площади поверхности, когезионной способности и содержания влаги в испытуемом веществе.

Существует несколько основных методик определения коэффициента прессуемости и коэффициента Хауснера, в которых основное испытание заключается в измерении насыпного (кажущегося) объёма порошка (Vo) и объёма порошка после его уплотнения (Vf). Коэффициент прессуемости и коэффициент Хауснера рассчитывают по следующим формулам:

(2) (3)

где Vo – насыпной объём порошка, мл;
Vf – объём порошка после уплотнения, мл.

В качестве альтернативы рассматриваемые коэффициенты могут быть рассчитаны с использованием измеренных значений насыпной плотности (ρbulk) и плотности после уплотнения (ρtapped) следующим образом:

(4) (5)

где ρbulk – насыпная плотность, г/мл;
ρtapped – плотность после уплотнения, г/мл.

В некоторых методиках иногда определяют степень уплотнения как отдельный или как дополнительный параметр изменения объёма при уплотнении.

Для коэффициента прессуемости и коэффициента Хауснера используется общепринятая шкала сыпучести, приведенная в табл. 3.

Таблица 3. Шкала сыпучести
Коэффициент прессуемости, % | Характеристика сыпучести | Коэффициент Хауснера
--- | --- | ---
1–10 | отличная | 1,00–1,11
11–15 | хорошая | 1,12–1,18
16–20 | приемлемая | 1,19–1,25
21–25 | удовлетворительная | 1,26–1,34
26–31 | слабая | 1,35–1,45
32–37 | плохая | 1,46–1,59
более 38 | очень плохая | более 1,60

Коэффициент прессуемости и коэффициент Хауснера не являются характерными свойствами порошка, так как их значение зависит от используемой методики. На определение насыпного (кажущегося) объёма порошка (Vo), объёма порошка после уплотнения (Vf), насыпной плотности (ρbulk) и плотности после уплотнения (ρtapped) влияют следующие условия:

- диаметр используемого цилиндра;

- количество встряхиваний (соскоков), необходимых для достижения насыпной плотности после уплотнения;

- масса образца, используемого в испытании;

- вращение образца во время его уплотнения.

Методика. Используют мерный цилиндр вместимостью 250 мл и массу испытуемого образца в количестве 100 г и проводят испытание в соответствии с ОФС «Насыпная плотность и плотность после уплотнения». Могут быть использованы меньшие количества и объёмы, но вместе с результатами полученных испытаний должны быть указаны все условия проведения испытаний и изменения в методике. Рекомендуется проводить в среднем три определения.

###### Метод 4. Метод сдвиговых ячеек

Чтобы изучение сыпучести порошков и проектирование загрузочных воронок поставить на фундаментальную основу, для разных видов порошков были разработаны специальные приборы, имеющие сдвиговые ячейки различных типов и соответствующие им методики проведения испытаний, позволяющие дать более полную и точную характеристику сыпучести порошков. Используя метод сдвиговых ячеек можно получить множество различных параметров, описывающих сыпучесть порошков, которые находят применение для оценки и определения оптимальных параметров загрузочных воронок, бункеров, смесителей и других ёмкостей для технологического процесса производства.

Методики испытаний, оценка полученных данных, характеристики параметров сыпучести порошков, определяемых с использованием метода сдвиговых ячеек, более подробно изложены в ОФС «Определение характеристик сыпучести порошков методом сдвиговых ячеек».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0017 Растворение для пластырей трансдермальных

Взамен ОФС.1.4.2.0017.15

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения количества действующего вещества, которое высвобождается в среду растворения из пластыря трансдермального за определённый промежуток времени в условиях, указанных ниже или предусмотренных фармакопейной статьёй.

Растворение лекарственного вещества может происходить как в результате непосредственного его высвобождения из пластыря трансдермального в среду растворения (скорость высвобождения), так и в результате подачи лекарственного вещества в среду растворения через полимерную мембрану (скорость подачи). Растворение (скорость высвобождения или скорость подачи) выражают количеством действующего вещества, высвободившегося в единицу времени с единицы площади пластыря трансдермального.

Испытание применяют при фармацевтической разработке лекарственных средств, контроле качества пластырей трансдермальных с целью подтверждения постоянства состава, стабильности технологического процесса и обеспечения однородности внутри серий.

В фармакопейной статье при описании данного испытания на конкретный пластырь трансдермальный указывают:

- тип прибора;

- среду растворения – состав и объём;

- скорость вращения мешалки;

- температуру среды растворения;

- время отбора проб;

- методику количественного определения действующего вещества или веществ, высвободившихся в среду растворения;

- описание держателя для пластыря трансдермального;

- способ закрепления пластыря трансдермального;

- площадь контакта пластыря трансдермального со средой растворения для определения скорости высвобождения действующего вещества или площадь контакта пластыря трансдермального с полимерной мембраной со средой растворения для определения скорости подачи действующего вещества;

- для прибора 1 – применяемую полимерную мембрану (при определении скорости подачи лекарственного вещества из пластыря трансдермального);

###### Оборудование

Используют аппарат II «Лопастная мешалка», описанный в ОФС «Растворение для твёрдых дозированных лекарственных форм», который путём внесения дополнительных элементов может быть модифицирован в три самостоятельных прибора:

- прибор 1 – содержит держатель (экстракционную ячейку) для пластыря трансдермального;

- прибор 2 – оснащён диском из нержавеющей стали для закрепления на его поверхности пластыря трансдермального;

- прибор 3 – содержит цилиндр из нержавеющей стали взамен лопастной мешалки.

Прибор выбирают в зависимости от состава, размеров и формы пластыря.

Прибор 1. На дно сосуда для растворения помещён держатель для пластыря трансдермального (рис. 1), выполненный из химически инертного материала. Держатель состоит из опорной части (основания), предназначенной для закрепления пластыря, и покровной части (крышечки) с центральным отверстием необходимого диаметра, подбираемого в соответствии с размером пластыря трансдермального. В конструкции держателя может применяться также полимерная мембрана, помещаемая между основанием и крышечкой. При определении скорости подачи лекарственного вещества в среду растворения из пластыря трансдермального через полимерную мембрану конструкция держателя не должна допускать контакт пластыря трансдермального со средой растворения.

Рисунок 1. Схема прибора 1. Размеры указаны в мм.

Полимерная мембрана применяется, когда непосредственный контакт поверхности пластыря трансдермального, высвобождающей действующее вещество, со средой растворения недопустим. Скорость диффузии лекарственного вещества в мембране должна быть постоянной во время проведения испытания и не должна оказывать влияния на кинетику процесса. Толщина мембраны должна обеспечивать ее механическую прочность и неизменность свойств во время проведения испытания.

Площадь высвобождающей поверхности держателя (площадь контакта пластыря трансдермального со средой растворения) должна быть от 5,0 до 25,0 см2.

Основание. Центральная часть основания образует полость, предназначенную для укрепления пластыря. Полость имеет глубину 2,6 мм и диаметр, соответствующий размеру испытуемого пластыря. Допускается использование следующих диаметров: 27 мм, 38 мм, 45 мм, 52 мм, соответствующих объёмам 1,48 мл, 2,94 мл, 4,13 мл, 5,52 мл (рис. 2).

Крышечка. Крышечка имеет отверстие в центре с диаметром, подобранным согласно размеру испытуемого пластыря. Пластырь, таким образом, может располагаться точно в центре, а поверхность его высвобождения ограничиваться. Допускается использование следующих диаметров: 20 мм, 32 мм, 40 мм, 50 мм, соответствующих площадям 3,14 см2, 8,03 см2, 12,56 см2, 19,63 см2. Крышечку удерживают с помощью гаек, накрученных на болты, вставленные в основание. Крышечку и основание герметизируют резиновым кольцом, которое надевается на сосуд (рис. 2).

Держатель с закреплённым в нём пластырем трансдермальным (или пластырем трансдермальным с мембраной) помещают на дно сосуда высвобождающей поверхностью вверх параллельно нижнему краю лопасти мешалки. Объём среды растворения между держателем и дном сосуда должен быть минимальным, расстояние между поверхностью держателя и нижним краем лопасти мешалки должно составлять 25±2 мм и не меняться в течение испытания.

Рисунок 2. Схема держателя (экстракционной ячейки). Размеры указаны в мм.

Прибор 2. В данном приборе используется сборный диск из нержавеющей стали в виде сетки с размером отверстий 125 мкм (рис. 3).

Рисунок 3. Схема сборного диска прибора 2. Размеры указаны в мм.

Прибор 3. Мешалку и вал заменяют на вращающийся цилиндр из нержавеющей стали (рис. 4, 5). Расстояние между внутренней поверхностью дна сосуда и цилиндром должно быть 25±2 мм и не меняться в течение испытания.

Рисунок 4. Схема прибора 3. Размеры указаны в см.
Рисунок 5. Схема вращающегося цилиндра. Размеры указаны в см.

Среда растворения. В качестве среды растворения могут применяться вода, буферные растворы со значениями рН в интервале 5,5–7,5 (допустимое отклонение рН±0,05), натрия хлорида раствор 0,9 %, органические растворители (спирт 96 %, изопропанол) и другие среды, указанные в фармакопейной статье. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, объём среды растворения обычно составляет 500 мл, а температура среды растворения в сосуде составляет 32,0±0,5 ºС.

Растворённые газы, находящиеся в среде растворения, должны быть удалены до проведения испытания валидированным методом дегазации растворов.

Для предотвращения испарения среды растворения сосуды для растворения должны закрываться соответствующими крышками.

Скорость вращения мешалки. Скорость вращения мешалки составляет 100 об/мин при отсутствии других указаний в фармакопейной статье. Допустимое отклонение скорости вращения ±4 % от скорости, указанной в фармакопейной статье.

###### Методика

Испытание проводят не менее чем на 6 пластырях трансдермальных (или 5 в случае теста растворения с применением полимерной мембраны).

Объём среды растворения, указанный в фармакопейной статье, помещают в сосуд и доводят температуру до 32,0±0,5 °С.

При использовании прибора 1, если не указано иначе в фармакопейной статье, на основание держателя помещают пластырь трансдермальный, при необходимости пластырь трансдермальный накрывают мембраной, затем помещают сверху крышку держателя, фиксируют её и опускают держатель на дно сосуда поверхностью высвобождения вверх.

При необходимости используют гидрофобное вещество (например, вазелин) для смазывания плоских поверхностей для более плотного соединения и удерживания пластыря.

При использовании прибора 2 пластырь трансдермальный помещают на сборный диск так, чтобы поверхность высвобождения пластыря была максимально плоской и ровной. Пластырь трансдермальный может крепиться к диску с помощью клея или двусторонней клейкой ленты. Пластырь трансдермальный не должен выходить за пределы диска. Диск с прикреплённым к нему пластырем трансдермальным помещают на дно сосуда поверхностью высвобождения вверх.

При использовании прибора 3 с пластыря трансдермального удаляют защитную ленту и помещают его липкой стороной на чистую поверхность инертной пористой мембраны, в случае использования мембраны. Размер мембраны со всех сторон должен быть не менее чем на 1 см больше пластыря.

Можно использовать два способа крепления пластыря трансдермального к цилиндру:

- пластырь трансдермальный с прикреплённой к нему мембраной помещают мембраной вниз на чистую поверхность и наносят подходящий клей на свободные края мембраны, а также при необходимости − на внешний покровный слой пластыря;

- используют двустороннюю клейкую ленту, которую крепят к внешней стенке цилиндра.

Аккуратно надавливая, тщательно прикрепляют пластырь трансдермальный внешней покровной стороной к цилиндру так, чтобы продольная ось пластыря находилась вокруг окружности цилиндра.

Для прибора 1, в случае использования мембраны, следует предварительно проверить влияние мембраны на результаты анализов. Для приборов 2 и 3 следует проверить влияние клея или клейкой ленты на результаты испытаний и исключить возможность адсорбции на них действующих веществ.

Включают перемешивающее устройство. С этого момента через каждый час или иной интервал времени, указанный в фармакопейной статье, отбирают пробы раствора.

Примечание – При необходимости допускается использование мембраны, изготовленной из различных материалов таких как, инертная пористая целлюлоза или силиконы, и не оказывающей воздействия на кинетику высвобождения действующего вещества (веществ) из пластыря. Кроме того, мембрана не должна содержать материалов, оказывающих влияние на ее функциональную способность. Мембрана может быть подвергнута специальной обработке перед проведением испытания, например, путём выдерживания ее в условиях испытания в течение 24 ч. Мембрану наносят на высвобождающую поверхность пластыря, избегая при этом образования пузырьков воздуха.

###### Отбор проб

Отбор проб осуществляют из средней по высоте части среды растворения на расстоянии не ближе 10 мм от внутренней стенки сосуда.

Каждую пробу анализируют на количественное содержание действующего вещества. Уменьшение объёма среды растворения компенсируют либо возвращением пробы раствора в сосуд, либо добавлением среды растворения или учитывают при расчётах.

Время отбора проб должно быть указано в фармакопейной статье и должно соблюдаться с точностью ±2 %.

###### Интерпретация результатов

Если не указано иначе в фармакопейной статье руководствуются данными табл. 1.

Результаты испытания считаются удовлетворительными, если скорость высвобождения (скорость подачи) соответствует критериям, приведённым в табл. 1., стадия А.

Если при этом хотя бы один результат не соответствует норме, указанной в фармакопейной статье, то испытание повторяют ещё на 6 (5) образцах пластыря трансдермального, при этом интерпретацию результатов проводят согласно табл. 1., стадия Б.

Если при повторном испытании результаты не соответствуют установленным критериям, испытание повторяют на 12 (10) дополнительных образцах пластыря трансдермального, интерпретацию результатов проводят согласно табл. 1., стадия В. Если требование по стадии В не выполняется, то анализируемая серия бракуется.

Количество действующего вещества, высвободившегося в среду растворения в течение наибольшего из указанных в фармакопейной статье периодов времени, должно составлять не менее 75 % от заявленного содержания действующего вещества в пластыре трансдермальном.

Таблица 1. Интерпретация результатов теста растворения для пластырей трансдермальных
Стадия | Количество испытуемых образцов | Критерии приемлемости
--- | --- | ---
А | 6 (5) | Ни одно из индивидуальных значений скорости высвобождения (или подачи) действующего вещества из пластыря трансдермального не лежит вне нормируемых в фармакопейной статье пределов значений скорости.
Б | 6 (5) | Среднее значение индивидуальных значений скорости высвобождения (или подачи) действующего вещества из пластыря трансдермального в 12 (10) сосудах (А+Б) лежит в нормируемых в фармакопейной статье пределах значений скорости. Ни одно из индивидуальных значений скорости высвобождения (или подачи) действующего вещества из пластыря трансдермального не отклоняется более чем на 10 % от среднего значения установленного предела от нормируемых в фармакопейной статье пределов значений скорости.
В | 12 (10) | Среднее значение индивидуальных значений скорости высвобождения (или подачи) лекарственного вещества из пластыря трансдермального в 24 (20) сосудах (А+Б+В) лежит в нормируемых в фармакопейной статье пределах значений скорости. Не более чем 2 из 24 (20) результатов находятся вне нормируемых пределов значений, причем отклонение не превышает 10 % от среднего значения установленного предела, ни один из результатов не отклоняется от среднего нормируемого в фармакопейной статье предела значений скорости более чем на 20 %.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0018 Растворение для резинок жевательных лекарственных

Взамен ОФС.1.4.2.0018.18

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения количества действующего вещества (веществ), которое высвобождается в среду растворения из резинки жевательной лекарственной за определённый промежуток времени в условиях, указанных ниже или предусмотренных фармакопейной статьей.

Определение проводят путём механического разминания кусочка жевательной резинки, помещённого в небольшую камеру, имитирующую процесс жевания.

Испытание применяют при фармацевтической разработке лекарственных средств, контроле качества резинок жевательных лекарственных с целью подтверждения постоянства состава, стабильности технологического процесса и обеспечения однородности внутри серий.

В фармакопейной статье на конкретную жевательную резинку лекарственную указывается:

- используемый прибор (тип А или тип Б);

- состав, объём и температура среды растворения;

- количество циклов «жевания» в минуту;

- время и метод отбора проб;

- методика количественного определения; количественное определение действующего вещества (веществ) проводят в остатке жевательной резинки или в среде растворения.

###### Оборудование

Прибор А

Прибор А для имитации жевания (рис. 1) состоит из следующих частей:

- камера, имитирующая процесс жевания;

- вертикальный поршень;

- два горизонтальных поршня с уплотнительными О-образными кольцами и прокладками.

Камера, имитирующая процесс жевания состоит из четырех отдельных частей:

- центральная камера;

- воронка (рис. 2);

- два направляющих элемента с втулками (рис. 3).

Воронку и направляющие элементы монтируют в центральную камеру. Уплотнительные О-образные кольца вставляют в выточку поршня, вокруг которой помещена прокладка, обеспечивающая герметичность камеры.

Рисунок 1. Устройство и размеры составных частей прибора А для имитации жевания. Камера, имитирующая процесс жевания и поршни. Размеры указаны в мм. А – горизонтальный поршень; В – направляющая; С – камера, имитирующая процесс жевания; D – воронка; Е – вертикальный поршень.

Рисунок 2. Схема воронки прибора А. Размеры указаны в мм. | Рисунок 3. Схема направляющей прибора А. Размеры указаны в мм.

Горизонтальные поршни размещают в камере, имитирующей процесс жевания через направляющие.

Жевательную резинку подвергают воздействию при помощи горизонтальных поршней; вертикальный поршень обеспечивает правильное местоположение жевательной резинки в процессе имитации жевания.

Для обеспечения постоянства рабочего цикла контролируют скорость прибора. Один цикл жевания определяют следующим образом: горизонтальные поршни начинают своё движение из крайних внешних положений, движутся к самому дальнему внутреннему положению и обратно в крайнее внешнее положение. В течение одного цикла вертикальный поршень движется из самого нижнего положения к самому верхнему и обратно в самое нижнее положение.

Величина хода каждого горизонтального поршня составляет 25,0 мм. Максимальное расстояние между двумя горизонтальными поршнями составляет 50,0 мм. Минимальное расстояние между двумя горизонтальными поршнями составляет от 0,1 мм до 1,0 мм. Величина хода вертикально поршня составляет 22,0 мм.

Движение горизонтальных поршней контролируется таким образом, чтобы оба поршня находились в самом дальнем внутреннем положении одновременно. Движение вертикального поршня должно согласовываться с движением горизонтальных поршней.

При необходимости прибор может быть сконструирован таким образом, чтобы к концу цикла горизонтальные поршни вращались вокруг собственных осей в противоположном направлении друг к другу для достижения максимального эффекта жевания.

Все части прибора, которые могут находиться в контакте с препаратом или средой растворения, должны быть химически инертными и не должны адсорбировать, реагировать или иным образом взаимодействовать с образцом.

Прибор Б

Прибор Б для имитации жевания (рис. 4) состоит из:

- ячейки для испытания (рис. 5 или 6);

- вертикального штока с верхней жевательной поверхностью (рис. 7);

- камеры-основания с нижней жевательной поверхностью (рис. 8);

- устройства для выполнения жевательных движений;

- устройства, вращающего вертикальный шток.

Обычно резинку вставляют между двумя вращающимися пластиковыми сетками для предотвращения её распадания.

Допускается использование сеток, изготовленных из нейлона (PA6), с размером ячеек 1,4 мм и диаметром нитей 0,405 мм.

Жевательную резинку подвергают воздействию при помощи нижней и верхней жевательных поверхностей. Скорость прибора контролируют для обеспечения постоянства рабочего цикла. Расстояние между нижней и верхней жевательными поверхностями может устанавливаться до 5 мм. Угол вращения вращательного устройства составляет около 20°.

Ячейки для испытаний могут также оснащаться одной или двумя стеклянными трубками для отбора проб, имеющими двойные термостатируемые стенки. Трубки позволяют также обеспечить сток жидкости наружу, который может потребоваться для умеренно растворимых веществ.

Рисунок 4. Схема прибора Б. А – вращающееся устройство для внутренней поверхности имитации жевания; В – корпус; С – ячейка для испытаний; D – шток; Е – верхняя поверхность имитации жевания; F – нижняя поверхность имитации жевания; G – камера-основание; H – устройство для имитации жевания движения с движением вверх-вниз.

Все части прибора, которые могут находиться в контакте с препаратом или средой растворения, должны быть химически инертными и не должны адсорбировать, реагировать или взаимодействовать с образцом.

Рисунок 5. Схема ячейки для испытаний прибора Б. Размеры указаны в мм.
Рисунок 6. Схема ячейки для испытаний (прямой) прибора Б. Размеры указаны в мм.
Рисунок 7. Схема штока прибора Б. Размеры указаны в мм.
Рисунок 8. Схема камеры-основания прибора Б. Размеры указаны в мм.
Рисунок 9. Схема верхней поверхности имитации жевания прибора Б. Размеры указаны в мм
Рисунок 10. Схема нижней поверхности имитации жевания прибора Б. Размеры указаны в мм.

###### Методика

В камеру, имитирующую процесс жевания помещают указанный объём среды растворения, как правило, 20 мл фосфатного буферного раствора с рН 6,0. Поддерживают температуру среды растворения при 37±0,5 °C, используя электрическое устройство с внешним контролем (прибор А) или термостат (прибор Б). Задают скорость движения поршней при указанном числе циклов жевания в минуту (обычно 60). Точно взвешивают часть жевательной резинки или резинку целиком, помещают её в камеру, имитирующую процесс жевания и приводят прибор в действие.

###### Отбор проб и анализ результатов

Останавливают прибор в указанное время. Удаляют остатки резинки и отбирают пробу среды растворения. Определяют содержание действующего вещества (веществ) по соответствующей методике. После каждого отбора проб допускается восполнение среды растворения; при расчётах необходимо учитывать изменение объёма среды растворения или разбавление пробы. В качестве альтернативы возможно определение содержания действующего вещества (веществ) оставшегося в жевательной резинке. Испытание последовательно проводят на шести жевательных резинках.

Количество действующего вещества (веществ), растворённого за определённое время, выражается в процентах от заявленного содержания, указанного в фармакопейной статье.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0019 Время растворения или диспергирования

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения времени растворения или диспергирования лекарственных препаратов, выпускаемых в виде исходных лекарственных форм, требующих перед применением дополнительного преобразования путём растворения или диспергирования в соответствующем растворителе, с целью получения лекарственного препарата в жидкой лекарственной форме, предназначенной для применения.

###### Область применения

Данное испытание относится к гранулам, лиофилизатам, порошкам (далее – твёрдым лекарственным формам), предназначенным для получения жидких лекарственных форм, а также к порошкам шипучим.

###### Определение

Время растворения или диспергирования – время, в течение которого исходная лекарственная форма полностью растворена или диспергирована в соответствующем растворителе; в случае порошков шипучих – прекратилось выделение пузырьков углерода диоксида.

###### Методика определения для твёрдых лекарственных форм, предназначенных для получения жидких лекарственных форм

Процесс растворения или диспергирования твёрдых лекарственных форм должен проходить в условиях, обеспечивающих полное смачивание всех компонентов лекарственного препарата в твёрдой лекарственной форме и переход твёрдых компонентов в раствор в течение достаточного времени при опредёленной интенсивности взбалтывания. При необходимости должны быть указаны особые требования к растворению или диспергированию лекарственного препарата (например, температурный режим и др.).

Определение проводят визуально на 6 образцах, отсчёт времени осуществляют с помощью секундомера.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, твёрдая лекарственная форма выдерживает испытание по показателю «Время растворения» или «Время диспергирования», если каждый из 6 образцов растворяется или диспергируется в течение не более 5 мин.

Различают два способа подготовки образцов для определения показателя «Время растворения» или «Время диспергирования».

В случае если объём растворителя не превышает номинальный объём упаковки, как правило – флакон, определение проводят следующим образом. Во флакон с лекарственным препаратом, представляющим собой твёрдую лекарственную форму, вводят количество растворителя, необходимое для получения максимальной терапевтической концентрации, указанной в инструкции по медицинскому применению препарата, если иное не указано в фармакопейной статье. Аккуратно перемешивают либо встряхивают до полного растворения или диспергирования твёрдой лекарственной формы. В установленных случаях растворитель вводят, прокалывая резиновую пробку, которой укупорен флакон с лекарственным препаратом, с помощью шприца, предварительно заполненного соответствующим растворителем.

Время растворения или диспергирования лекарственного препарата измеряют с момента внесения растворителя в упаковку с лекарственным препаратом.

Если объём растворителя превышает номинальный объём упаковки или упаковка не предназначена для внесения в неё растворителя, определение проводят следующим образом. Одну дозу лекарственного препарата в твёрдой лекарственной форме помещают в стакан, содержащий отмеренное количество растворителя, необходимое для получения максимальной терапевтической концентрации, указанной в инструкции по медицинскому применению препарата, если иное не указано в фармакопейной статье. Аккуратно перемешивают либо встряхивают до полного растворения или диспергирования твёрдой лекарственной формы.

Время растворения или диспергирования измеряют с момента внесения лекарственной формы в растворитель.

###### Методика определения для порошков шипучих

Определение проводят визуально на 6 образцах, отсчёт времени осуществляют с помощью секундомера.

Если нет других указаний в фармакопейной статье, порошок шипучий выдерживает испытание по показателю «Время растворения» или «Время диспергирования», если каждая из 6 исследуемых доз лекарственного препарата растворяется или диспергируется в течение не более 5 мин.

Одну дозу лекарственного препарата в виде порошка шипучего помещают в стакан, содержащий 200 мл воды, при температуре от 15° С до 25 °С, при этом начинают выделяться пузырьки газа.

Лекарственная форма считается растворившейся, если после прекращения выделения пузырьков газа она полностью растворилась или диспергировалась.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0020 Выход содержимого упаковки

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения процента выхода содержимого упаковки при применении лекарственных препаратов в виде недозированных лекарственных форм, представляющих собой аэрозоли, пены лекарственные или спреи.

###### Методика

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье испытание проводят не менее чем на трёх образцах лекарственного препарата в анализируемой лекарственной форме, отобранных в соответствии с требованиями ОФС «Отбор проб».

Определяют массу каждой из трёх упаковок, взвешенных вместе с распылителем или насадкой с точностью до 0,01 г (m1).

Нажатием на распылитель или насадку из упаковки удаляют всё содержимое и снова взвешивают пустую упаковку вместе с распылителем или насадкой с точностью до 0,01 г (m2).

Выход содержимого упаковки в процентах (X) вычисляют по формуле:

где m1 – масса упаковки с распылителем или насадкой, г;
m2 – масса пустой упаковки с распылителем или насадкой, г;
m3 – масса содержимого лекарственного препарата, указанная на этикетке, г (или полученная путём умножения номинального объёма на плотность лекарственного препарата).

Критерии приемлемости. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье лекарственную форму считают выдержавшей испытание, если выход содержимого (Х) каждой из трёх упаковок составляет не менее 90 % от массы содержимого лекарственного препарата, указанной на этикетке.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0021 Давление в упаковке

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения давления внутри упаковки лекарственных форм, находящихся под давлением в герметичной упаковке, представляющих собой аэрозоли и пены лекарственные, в которых пропеллентами являются сжатые газы.

###### Методика

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье испытание проводят не менее чем на трёх образцах лекарственного препарата в исследуемой лекарственной форме, отобранных в соответствии с ОФС «Отбор проб». Упаковка аэрозолей или пен лекарственных, находящихся под давлением, представляет собой, как правило, аэрозольные баллоны.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье отобранные для испытания аэрозольные баллоны выдерживают при температуре (20±5)° С в течение 1 ч. Затем аэрозольные баллоны встряхивают и устанавливают в вертикальное положение. С помощью специального адаптера (переходника) к отверстию клапана аэрозольного баллона присоединяют манометр, откалиброванный на измерение давления в нормируемом интервале значений, имеющий допустимую основную погрешность измерения не более ±2,5 % диапазона показаний. Измеряют давление внутри каждого аэрозольного баллона.

Критерии приемлемости. Давление внутри каждой упаковки должно соответствовать нормативным требованиям, указанным в фармакопейной статье. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье, давление в каждой из испытуемых упаковок не должно превышать 0,8 МПа.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0022 Испытания лекарственных форм для ингаляций, предназначенных для распыления с помощью небулайзера

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на жидкие лекарственные формы для ингаляций, предназначенные для распыления, путём преобразования в аэрозоль (дисперсию твёрдых или жидких частиц) с помощью небулайзера.

Лекарственные формы для ингаляций, предназначенные для распыления с помощью небулайзера, должны соответствовать требованиям характерным для данной лекарственной формы, в соответствии с ОФС «Лекарственные формы» и ОФС «Лекарственные формы для ингаляций».

В настоящей общей фармакопейной статье приведены испытания, позволяющие определить дополнительные показатели качества лекарственных форм для ингаляций, предназначенных для распыления с помощью небулайзера, которые стандартизируют подход к оценке дозы действующего вещества, доставляемой в дыхательные пути и лёгкие пациента, независимо от вида используемого небулайзера.

Небулайзер (от латинского nebula — туман, облако) представляет собой прибор, обеспечивающий преобразование жидкой лекарственной формы для распыления в дисперсию в газовой среде (аэрозоль) и доставляющий действующие веществ в дыхательные пути и лёгкие в виде дисперсии твёрдых или жидких частиц.

В зависимости от способа распыления различают небулайзеры ультразвукового, мембранного и компрессорного типа.

В ультразвуковых небулайзерах распыление происходит за счёт высокочастотной вибрации жидкой лекарственной формы под действием источника ультразвуковых колебаний (пьезоэлемента).

Мембранные или mesh-небулайзеры также работают с применением ультразвука, однако его действие направлено не напрямую на лекарственную форму, а на сетчатую мембрану, которая приходит в движение, в результате чего происходит распыление.

Компрессорные (струйные) небулайзеры состоят из электромеханического компрессора и небулайзерной камеры, в которой происходит образование аэрозоля посредством распыления жидкой лекарственной формы мощной струей воздуха, создаваемой компрессором.

Компрессорные небулайзеры различаются способом активации.

Конвекционный небулайзер производит аэрозоль с постоянной скоростью, но лекарственная форма поступает в дыхательные пути только во время вдоха пациента, а во время выдоха выходит во внешнюю среду, т.е. происходит потеря лекарственной формы.

Небулайзеры, активируемые вдохом, образуют аэрозоль также постоянно на протяжении всего процесса дыхания, но во время вдоха высвобождение аэрозоля усиливается, количество вдыхаемой лекарственной формы увеличивается, соответственно, снижается её потеря.

Небулайзеры, синхронизированные с дыханием (дозиметрические) производят аэрозоль только во время фазы вдоха.

Небулайзеры должны обеспечивать образование дисперсных частиц подходящего размера для доставки действующего вещества в дыхательные пути и лёгкие.

Скорость доставки, размер дисперсных частиц, общее количество действующего вещества, доставляемого различными типами небулайзеров, различны.

###### Скорость доставки и общее количество доставленного действующего вещества

Испытания проводят, используя стандартизированные условия объёмной скорости потока используемого небулайзера. Если для распыления должны быть использованы небулайзеры, синхронизированные с дыханием или небулайзеры, активируемые вдохом, то при проведении испытания их следует заменить имитатором дыхания из-за зависимости скорости потока воздуха при вдохе от особенностей устройства небулайзеров такого типа.

Имитация характера дыхания используемого имитатора дыхания может соответствовать стандартному характеру дыхания взрослых пациентов или характеру дыхания, свойственному детям – новорождённым, младенцам или детям других возрастных групп. Имитацию характера дыхания используют вместо потоков воздуха с постоянными скоростями, чтобы измерение массы действующего вещества, которое будет доставлено в лёгкие пациента, было более адекватным.

Прибор. Имитатор дыхания. Для проведения испытания используют доступный имитатор дыхания, способный генерировать характер дыхания с параметрами, указанными в табл. 1.

Таблица 1. Параметры характера дыхания имитатора дыхания для пациентов разных возрастов.
Параметры характера дыхания, единицы измерения | Возраст пациента
--- | ---
Взрослые | Новорождённые | Младенцы | Дети
Общий объём, мл | 500 | 25 | 50 | 155
Частота дыхания, циклов в мин. | 15 | 40 | 30 | 25
Форма волны | синусоида | синусоида | синусоида | синусоида
Соотношение времени вдоха и выдоха | 1:1 | 1:3 | 1:3 | 1:2

Имитатор дыхания, имеющий характер дыхания с параметрами, указанными для взрослых, применяют только в том случае, если испытуемый небулайзер специально не предназначен для распыления лекарственных препаратов, используемых в педиатрической практике, в противном случае выбирают имитаторы дыхания с параметрами, указанными в табл. 1 для новорождённых, младенцев или детей.

Система фильтров. Используют любой, надлежащим образом валидированный фильтр низкого сопротивления, способный собирать частицы аэрозоля для количественной оценки и позволяющий извлекать действующее вещество подходящим растворителем. «Мертвый» объём корпуса фильтра не должен превышать 10 % объема потока стандартного вдоха/выдоха, используемого для имитации дыхания.

Методика. Фильтр в держателе (А) соединяют с имитатором дыхания (B), как показано на рис. 1. Заполняют небулайзер (C) таким объёмом лекарственного препарата в лекарственной форме для ингаляций, предназначенной для распыления с помощью небулайзера, как указано в инструкции по применению в соответствии с возрастом пациента.

Присоединяют к дыхательному фильтру мундштук небулайзера, если необходимо, то с помощью адаптера. Убеждаются в герметичности мест соединения. Проверяют, чтобы положение небулайзера соответствовало положению, описанному в инструкции по применению.

При необходимости можно наклонить имитатор дыхания и держатель фильтра. Настраивают имитатор на воспроизведение дыхания определенного характера.

Рисунок 1. Экспериментальная установка для испытания с использованием имитатора дыхания: А — дыхательный фильтр и держатель фильтра, B — имитатор дыхания, C — небулайзер.

Активируют имитатор дыхания, и в момент начала цикла вдыхания включают небулайзер. Оставляют небулайзер работать в течение заданного первого промежутка времени T0.

Этот промежуток времени должен быть таким, чтобы количество лекарственного препарата, осевшего на фильтре, было достаточно для проведения количественного определения действующего вещества.

Выбранное время обычно составляет 60±1 с, это время позволяет напрямую определить скорость доставки действующего вещества.

Если количество действующего вещества, необходимое для его количественного определения, за 60±1 с не успевает осесть на фильтре, то время для сбора частиц аэрозоля можно увеличить. При этом, если фильтр успевает промокнуть (пропитаться), время необходимо отрегулировать (сократить).

По завершении первого промежутка времени T0 небулайзер останавливают. Помещают в установку свежий фильтр и держатель. Продолжают испытание до тех пор, пока небулайзер не закончит распыление.

Во избежание пропитывания фильтра, по мере необходимости прерывают распыление и меняют фильтры.

Используя методику, приведённую в фармакопейной статье, определяют количество (массу) действующего вещества, осевшего на фильтрах и держателях за каждый из промежутков времени.

Интерпретация результатов. Скорость доставки действующего вещества рассчитывают путём деления количества (массы) действующего вещества с первого фильтра, на время T0 (заданный первый промежуток времени), в течение которого был произведен сбор этого действующего вещества на первом фильтре.

Общее количество доставленного действующего вещества рассчитывают путём сложения количества (массы) действующего вещества, определённого на всех фильтрах и держателях.

###### Аэродинамическое распределение частиц аэрозолей, формируемых при распылении лекарственных форм для ингаляций с помощью небулайзера

Лекарственные формы для ингаляций, предназначенные для распыления с помощью небулайзера, должны быть охарактеризованы по размеру частиц при скоростях потока ниже диапазона, который обычно используют для порошковых и дозирующих ингаляторов.

Как правило, рекомендуют скорость потока 15 л/мин, так как это значение является приближенным к средней скорости потока воздуха при вдохе здорового взрослого человека, общий объем потока стандартного вдоха/выдоха которого, составляет 500 мл.

Несмотря на то, что можно быстро измерить распределение частиц аэрозоля, распыленного небулайзером, по размеру, используя приборы для малоугловой лазерной фотометрии светорассеяния (лазерных дифракционных анализаторов), с помощью таких методик нельзя детектировать действующее вещество; определяют скорее распределение по размеру капель аэрозоля, но не содержимое этих капель. Это может не иметь значения для однородных растворов, но может приводить к значимым ошибкам, если лекарственный препарат для распыления находится в виде лекарственной формы суспензии или если капли достаточно быстро испаряются, например, при использовании некоторых типов небулайзеров.

Однозначно охарактеризовать аэрозоль с точки зрения массы действующего вещества как функции от аэродинамического диаметра позволяют каскадные импакторы.

Допустимо использование метода лазерной дифракции, при условии его валидации в сравнении с методом определения на основе каскадного импактора.

Для определения рекомендуется использовать каскадный импактор нового поколения, охарактеризованный в ОФС «Аэродинамическое распределение мелкодисперсных частиц», который предварительно должен быть откалиброван при скорости потока 15 л/мин.

Определение баланса масс (материального баланса), таким же способом, как для порошковых и дозирующих ингаляторов, затруднительно: поскольку доза выделяется из небулайзера непрерывно, в связи с чем, в эту статью данный способ не включен. Однако, проверка баланса масс, как показателя валидности результата, в рамках разработки и валидации метода, должна проводиться обязательно.

Контроль испарения капель, созданных небулайзером, может иметь решающее значение для предотвращения систематической ошибки в процессе оценки размера капель. Испарение можно свести к минимуму путём охлаждения импактора до температуры около 5 °C. Обычно импактор охлаждают путём помещения в холодильник примерно на 90 мин.

Как правило, после каждого использования необходимо полностью очищать аппарат, в том числе промежутки между ступенями, в виду повышенного риска коррозии, вызываемой конденсацией/накоплением содержащих соль капель внутри металлических частей вследствие охлаждения импактора. Рекомендуется высушивать все поверхности аппарата после каждого испытания, например, сжатым воздухом. Сушить сжатым воздухом микродиафрагменный сборник (МДС) не рекомендуется.

Прибор. Подробно прибор и индукционный порт описаны в ОФС «Аэродинамическое распределение мелкодисперсных частиц», где также указаны важнейшие размеры и описан процесс квалификации импактора (измерение диаметра отверстий и других размеров импактора).

Чтобы обеспечить полноту сбора действующего вещества из аэрозоля, распылённого небулайзером со скоростью потока 15 л/мин, обязательно использовать в дополнение к МДС дублирующий фильтр. Этот фильтр помещают за МДС, если это вариант с внутренним расположением фильтра, или в держателе, помещённом снаружи импактора. Фильтр используется для поглощения всех мелких капель, которые проходят за последнюю фракционирующую ступень импактора.

Пресепаратор в испытаниях распылённых небулайзером аэрозолей не используют.

Валидация метода. Перегрузка ступени импактора. В ходе разработки и валидации метода важно подтвердить, что объём жидкости, отобранной из небулайзера как образец, не перегружает импактор.

При визуальном осмотре собирающих поверхностей на ступенях (каскадах), где скапливается наибольшее количество капель аэрозоля, в случае перегрузки могут обнаруживаться следы стекающих капель. Это явление обычно связывают с увеличением массы действующего вещества, осевшего на последней ступени и дублирующем фильтре.

Наиболее эффективный способ избежать перегрузку системы в данном случае — это сократить время отбора проб, уравновешивая перегрузку путём повышения чувствительности аналитического метода.

Вторичный унос. Отскакивание и вторичный унос капель, сформированных небулайзером, менее вероятны, чем твёрдых частиц из ингаляторов, поэтому, как правило, никакого покрытия не требуется.

Методика. Предварительно охлаждают собранный импактор и индукционный порт в холодильнике (при температуре около 5 °C) в течение не менее 90 мин, определение начинают в течение 5 мин после того, как вынут импактор из холодильника. Могут быть также использованы и другие методы сохранения низкой температуры импактора (например, охлаждающая камера).

Небулайзер снабжают приводным газом (обычно это воздух или кислород) или используют компрессор с давлением и скоростью потока, заданными производителем небулайзера.

Принимают меры предосторожности, чтобы под воздействием давления линия подачи газа не отсоединялась от небулайзера.

Заполняют распылитель объёмом лекарственного препарата, указанным в инструкции по применению.

Вынимают импактор из холодильника. Присоединяют индукционный порт к импактору и подключают импактор/внешний фильтр к источнику вакуума, который способен всасывать воздух через систему со скоростью 15 л/мин, как показано на рис. 2. Активируют поток через импактор.

Рисунок 2. Схема прибора для измерения распределения по размеру частиц лекарственных форм для инъекций, предназначенных для распыления с помощью небулайзера: А — небулайзер, B — индукционный порт, C — импактор, D — клапан контроля потока, E — источник вакуума.

Подключают расходомер, откалиброванный для объёмного потока, выходящего из прибора, к индукционному порту. Настраивают клапан управления потоком, расположенный между импактором и источником вакуума, для достижения стабильного потока через систему со скоростью 15 ±5 % л/мин. Отключают расходомер.

Проверяют, чтобы положение небулайзера соответствовало, положению, описанному в инструкции по применению, затем присоединяют мундштук небулайзера к индукционному порту, при необходимости через адаптер для мундштука, убеждаются в герметичности мест соединения.

Включают поток/компрессор для небулайзера.

Отбирают пробу в течение заранее определенного времени T0.

После того, как T0 установлено, его необходимо обязательно зафиксировать, для дальнейшего использования при анализе конкретного лекарственного препарата и возможности сравнения данных о массовой доле.

В конце периода отбора проб отключают поток/компрессор приводного газа для небулайзера, вынимают небулайзер из индукционного порта и отключают поток от источника вакуума к импактору.

Разбирают импактор и используя методику, приведённую в фармакопейной статье, определяют массу действующего вещества, осевшего в течение определенного времени Т0 в индукционном порте, на каждой ступени (каскаде) и на дублирующем/внешнем фильтре.

Суммируют массу действующего вещества, осевшего в МДС, с массой, осевшей на дублирующем/внешнем фильтре, и для последующих расчётов принимают за один результат.

Интерпретация результатов

Вычисляют массовую долю (Fm,comp) действующего вещества, осевшего на каждой из составных частей импактора, по формуле:

где mcomp – масса действующего вещества, относящаяся к рассматриваемой части импактора;
М – общая масса действующего вещества, осевшая в системе (импакторе).

Результаты вычисления Fm,comp представляют в виде диаграммы распределения массовой доли действующего вещества по ступеням (каскадам) импактора, пример можно увидеть на рис. 3.

При расчётах значения величины Fm,comp для смежных ступеней (каскадов) импактора допустимо сложить и представить их как одно значение, однако при этом необходимо обосновать выбор объединяемых ступеней (каскадов).

Рисунок 3. Пример диаграммы распределения массовой доли действующего вещества по ступеням (каскадам) импактора

Рассчитывают накопленную массовую долю действующего вещества, осевшего на каждой из составных частей импактора (ступеней/каскадов), начиная с конечного места сбора (МДС или дублирующий/внешний фильтр) и далее по порядку расположения компонентов импактора, с помощью табл. 2.

Строят график зависимости величины накопленной массовой доли действующего вещества от величины диаметра отсечения в логарифмической шкале, с помощью которого можно при необходимости определить масс-медианный аэродинамический диаметр (MMAD) и геометрическое стандартное отклонение (GSD), с поправкой на материальный баланс.

Фракцию частиц (массу действующего вещества), меньше заданного размера, или попадающую в диапазон между верхним и нижним размерными пределами, определяют с помощью метода интерполяции.

Таблица 2. Расчёты, применяемые для использования каскадного импактора нового поколения при скорости потока 15 л/мин
Диаметр отсечения (μм) | Масса действующего вещества | Совокупная масса действующего вещества | Накопленная массовая доля действующего вещества, в %
--- | --- | --- | ---
0,98 | масса от МДС и/или фильтра m8 | c7 = m8 | F7 = (c7/c) × 100
1,36 | масса с 7 ступени, m7 | c6 = c7 + m7 | F6 = (c6/c) × 100
2,08 | масса с 6 ступени, m6 | c5 = c6 + m6 | F5 = (c5/c) × 100
3,3 | масса с 5 ступени, m5 | c4 = c5 + m5 | F4 = (c4/c) × 100
5,39 | масса с 4 ступени, m4 | c3 = c4 + m4 | F3 = (c3/c) × 100
8,61 | масса с 3 ступени, m3 | c2 = c3 + m3 | F2 = (c2/c) × 100
14,1 | масса с 2 ступени, m2 | c1 = c2 + m2 | F1 = (c1/c) × 100
| масса с 1 ступени, m1 | c = c1 + m1 | 100

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0023 Металлические частицы в мазях глазных

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на метод определения металлических частиц в мазях глазных.

###### Область применения

Данное испытание проводят для мазей глазных, упаковка которых представляет собой металлические тубы.

###### Оборудование

Испытание проводят методом оптической микроскопии в соответствии с требованиями ОФС «Оптическая микроскопия», исследуя объект визуально или с помощью компьютерного обеспечения.

###### Методика

Определение проводят на 10 тубах. Содержимое каждой из 10 туб (мазь максимально выдавливают из туб) помещают в отдельные чистые, без царапин чашки Петри диаметром 60 мм с плоским дном. Чашки Петри закрывают и нагревают при температуре около 85 °С до полного расплавления основы. Охлаждают мазь до комнатной температуры и затвердевания, избегая перемешивания и встряхивания.

Удаляют крышки и переворачивают каждую чашку Петри на подставку микроскопа с увеличением не менее 30× и диском окуляра микрометра, который откалиброван на используемое увеличение. В дополнение к вертикальному освещению используют источник направленного регулируемого света мощностью не менее 150 Вт, освещающий образец мази с двух противоположных сторон сверху под углом около 45°. Исследуют всю поверхность дна чашки Петри на наличие металлических частиц. Их обнаруживают по металлическому блеску, изменяя интенсивность света от дополнительного источника. Подсчитывают число металлических частиц, размер которых по любой оси измерения составляет от 50 мкм до 90 мкм.

Мазь глазная соответствует требованиям, если общее число металлических частиц, размер которых составляет от 50 до 90 мкм во всех 10 тубах не превышает 50, и если не более чем в 1 тубе содержится 9 или более частиц указанной величины. Если данное требование не выполняется, исследование повторяют на 20 дополнительных тубах.

###### Анализ данных

Мазь глазная соответствует требованиям, если общее число металлических частиц, размер которых составляет от 50 до 90 мкм во всех 30 тубах не превышает 150 частиц, и если не более чем в 3 тубах содержится 9 или более частиц указанной величины (в каждой из туб).

Не допускается наличие частиц с максимальным размером более 90 мкм.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0024 Насыпная плотность и плотность после уплотнения

Вводится впервые

В настоящей общей фармакопейной статье приведены методы определения насыпной плотности, плотности после уплотнения и показателя прессуемости твёрдых сыпучих веществ.

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на фармацевтические субстанции, вспомогательные вещества, их смеси, промежуточные продукты, лекарственные препараты в виде лекарственных форм «Порошки», «Гранулы», а также на другие материалы в виде твёрдых сыпучих веществ, которые могут быть применены при производстве лекарственных средств и материалов, используемых в фармацевтической практике.

###### Область применения

Насыпная плотность, плотность после уплотнения, прессуемость являются технологическими характеристиками твёрдых сыпучих веществ. Показатель насыпной плотности нелинейно связан с сыпучестью и также является одним из достоверных способов оценки сыпучести твёрдых сыпучих веществ (ОФС «Сыпучесть порошков»).

Твёрдые сыпучие вещества используют в технологическом процессе производства абсолютного большинства лекарственных форм лекарственных препаратов (таблетки, капсулы, аэрозоли, суспензии, суппозитории, мягкие лекарственные формы и др.). Перед использованием таких веществ проводят оценку их технологических характеристик, от которых может зависеть качество готового лекарственного препарата, точность дозирования действующих веществ, биодоступность, и в конечном итоге ‒ эффективность и безопасность лекарственного препарата. Определение насыпной плотности до и после уплотнения и, если необходимо, оценку прессуемости используемых твёрдых сыпучих веществ, проводят в зависимости от конкретных технологических задач, например, при производстве таблеток методом прессования, при наполнении твёрдых капсул содержимым в виде твёрдого сыпучего вещества и т.п.

Методы измерения насыпной плотности до и после уплотнения, а также оценка способности используемых твёрдых сыпучих веществ к уплотнению, сжатию, приведённые в настоящей общей фармакопейной статье, могут быть использованы при фармацевтической разработке, технологическом процессе производства лекарственных средств, для решения научно-исследовательских задач.

###### Определение насыпной плотности

Насыпная плотность испытуемого образца ‒ это отношение массы неуплотнённого образца к его объёму, с учётом объёма промежутков (пустот) между частицами вещества. Поэтому насыпная плотность зависит как от плотности частиц испытуемого вещества, так и от пространственного расположения частиц в слое вещества.

Единица измерения насыпной плотности ‒ г/мл, так как измерения проводят с использованием цилиндров, градуированных в мл. Международные единицы измерения ‒ кг/м3 или г/см3 (1 г/мл = 1000 кг/м3).

Объёмные свойства испытуемого вещества зависят от подготовки, обработки и хранения испытуемого образца этого вещества, т.е. от того, как с ним обращались. Частицы вещества могут иметь различное пространственное расположение в слое вещества, поэтому насыпная плотность будет иметь диапазон значений, кроме того, малейшее нарушение слоя вещества, например, уплотнение, может привести к изменению насыпной плотности и получению нового результата. В связи с этим, насыпную плотность вещества часто очень трудно измерить с надлежащей воспроизводимостью результатов измерения, поэтому при предоставлении результатов измерения вместе со значением насыпной плотности необходимо обязательно указывать, каким образом было проведено определение.

Методы определения насыпной плотности вещества основаны на:

- измерении объёма образца вещества известной массы в градуированном цилиндре (метод 1);

- измерении массы образца вещества, помещённого в чашку с известным объёмом, с использованием прибора волюметра (метод 2);

- измерении массы образца вещества известного объёма с использованием цилиндрического сосуда (метод 3).

Методы 1 и 3 являются предпочтительными.

###### Метод 1. Измерение в градуированном цилиндре

Методика

При необходимости, образец вещества в количестве, достаточном для проведения испытания, пропускают через сито с размером отверстий не менее 1,0 мм для разрушения агломератов, которые могли образоваться при хранении; эту процедуру следует проводить осторожно, чтобы избежать изменения свойств вещества. В сухой градуированный цилиндр объёмом 250 мл, ценой делений до 2 мл, осторожно вносят, не уплотняя, приблизительно 100 г (m) испытуемого образца, взвешенного с точностью 0,1 %; при необходимости образец осторожно разравнивают, избегая уплотнения. По ближайшему делению градуированного цилиндра определяют наблюдаемый (кажущийся) объём неуплотнённого испытуемого образца (V0). Насыпную плотность (ρbulk) рассчитывают в граммах на миллилитр (г/мл) по формуле:

(1)

где ρbulk – насыпная плотность, г/мл;
m – масса испытуемого образца, г;
V0 – наблюдаемый объём неуплотнённого испытуемого образца, мл.

При определении насыпной плотности желательно проводить повторные измерения. Если не указано другое, вычисляют среднее значение трёх определений, используя три испытуемых образца.

В случае, если плотность испытуемого вещества слишком низкая или слишком высокая, и наблюдаемый объём неуплотнённого образца массой 100 г составляет более 250 мл или менее 150 мл, необходимо выбрать такое количество вещества, чтобы наблюдаемый объём его неуплотнённого образца составлял от 150 мл до 250 мл (не менее 60 % от общего объёма цилиндра); массу испытуемого образца указывают в результатах испытания.

Для образцов, имеющих наблюдаемый объём неуплотнённого испытуемого образца от 50 мл до 100 мл, для измерения можно использовать цилиндр объёмом 100 мл с ценой деления не менее 1 мл; объём цилиндра указывают в результатах испытаний.

###### Метод 2. Измерение в волюметре

Оборудование. Прибор, представленный на рис. 1, состоит из верхней воронки, снабжённой ситом с размером отверстий 1,0 мм, загрузочной воронки, установленной над камерой, содержащей 4 стеклянных экрана, по которым испытуемый образец скользит и, отскакивая, направляется по ходу движения. В нижней части камеры находится воронка, которая собирает испытуемый образец и направляет его в чашку, установленную непосредственно под ней. Чашка может быть цилиндрической ‒ объёмом 25,00±0,05 мл и внутренним диаметром 30,00±2,00 мм или кубической ‒ объёмом 16,39±0,20 мл и внутренними размерами 25,400±0,076 мм.

Рисунок 1. Волюметр: A ‒ сито с размером отверстий 1,0 мм, Б ‒ верхняя воронка, В ‒ загрузочная воронка, Г‒ камера, Д ‒ одна из четырёх стеклянных перегородок, Е ‒ чашка для приема испытуемого образца, Ж ‒ подставка.

Методика. Пропускают избыток испытуемого образца (объёмом не менее 25 см3, если прибор с кубической чашкой, и не менее 35 см3 образца, если прибор с цилиндрической чашкой) через волюметр (рис. 1) до тех пор, пока чашка для приёма испытуемого образца не переполнится. Излишки образца осторожно убирают с верхней части чашки плавным движением острого края шпателя, располагая шпатель перпендикулярно к верхней поверхности чашки во избежание уплотнения образца или избыточного удаления образца из чашки. С внешних стенок чашки удаляют остатки испытуемого образца и определяют массу (m) образца с точностью до 0,1 %.

Насыпную плотность (ρbulk) рассчитывают в граммах на миллилитр (г/мл) по формуле:

(2)

где ρbulk – насыпная плотность, г/мл;
m – масса испытуемого образца, г;
V0 – объём чашки, мл.

Вычисляют среднее значение трёх определений, используя три разных испытуемых образца.

###### Метод 3. Измерение в цилиндрическом сосуде

Оборудование. Прибор состоит из цилиндрического сосуда с крышкой объёмом 100 мл, изготовленного из нержавеющей стали, с размерами, указанными на рис. 2.

Рисунок 2. Цилиндрический сосуд (слева) и крышка (справа). Размеры указаны в миллиметрах.

Методика

Если необходимо, для разрушения агломератов, которые могли образоваться при хранении, достаточное для испытания количество испытуемого образца пропускают через сито с отверстиями диаметром 1,0 мм; полученным образцом заполняют цилиндрический сосуд прибора до его переполнения, не уплотняя. Осторожно удаляют излишки образца с верхней части сосуда шпателем, как описано в методе 2 «Измерение в волюметре». Определяют массу (m) испытуемого образца с точностью до 0,1 %, вычитая массу пустого цилиндрического сосуда, которую определили предварительно. Насыпную плотность (ρbulk) рассчитывают в граммах на миллилитр (г/мл) по формуле:

(3)

где ρbulk – насыпная плотность, г/мл;
m – масса испытуемого образца, г;
V0 – объём цилиндрического сосуда, мл.

Вычисляют среднее значение трёх определений, используя три разных испытуемых образца.

###### Определение плотности после уплотнения

Плотность после уплотнения ‒ это увеличенная насыпная плотность испытуемого образца, полученная после его уплотнения в результате механического воздействия (встряхивания, постукивания), приложенного к градуированному цилиндру или сосуду, в котором находится испытуемый образец.

Испытуемый образец помещают в градуированный цилиндр или сосуд и после измерения первоначального объёма или массы образца содержимое градуированного цилиндра или сосуда механически уплотняют до получения постоянного объёма или массы образца. Уплотнение образца в результате механического воздействия (встряхивания, постукивания) происходит при механическом поднятии градуированного цилиндра или сосуда на определенную высоту и последующем его падении (соскока) под действием силы тяжести собственной массы. Испытание проводят одним из трёх указанных методов. Предпочтительно использовать устройства, которые при уплотнении испытуемого образца вращают градуированный цилиндр или сосуд для минимизации любого возможного разделения массы образца во время уплотнения.

Метод 1

Оборудование. Прибор, используемый для уплотнения испытуемых образцов при определении насыпной плотности до и после уплотнения, представлен на рис. 3.; он состоит из следующих частей:

- градуированный цилиндр вместимостью 250 мл, ценой делений 2 мл, массой 220±44 г;

- уплотняющее устройство, способное обеспечивать 250±15 падений (соскоков) в минуту с высоты 3±0,2 мм или 300±15 падений (соскоков) в минуту с высоты 14±2 мм. Масса подставки для градуированного цилиндра вместе с держателем 450±10 г.

Рисунок 3. Уплотняющее устройство для испытуемых образцов. Размеры указаны в миллиметрах.

Методика

Определяют наблюдаемый объём неуплотнённого испытуемого образца (V0), как указано в разделе «Насыпная плотность. Метод 1. Измерение в градуированном цилиндре». Градуированный цилиндр с образцом закрепляют в держателе прибора, указанного на рис. 3. С одним и тем же испытуемым образцом выполняют 10, 500 и 1250 падений (соскоков) и отмечают соответствующие объёмы V10, V500 и V1250. Если разница между V500 и V1250 составляет не более 2 мл, то V1250 ‒ это значение насыпного объёма после уплотнения. Если разница между V500 и V1250 превышает 2 мл, то испытание продолжают, выполняя дополнительные падения (соскоки), например, 1250, до достижения разницы между двумя последовательными измерениями объёма не более 2 мл. Для некоторых твёрдых сыпучих веществ при валидации может быть установлено меньшее количество падений (соскоков).

Плотность после уплотнения (ρtapped) рассчитывают в граммах на миллилитр (г/мл) по формуле:

(4)

где ρtapped – плотность после уплотнения, г/мл;
m – масса испытуемого образца, г;
Vf – конечный насыпной объём испытуемого образца после уплотнения, мл.

Для определения плотности после уплотнения желательно провести повторные измерения. Вместе с результатами испытаний указывают высоту падения (соскока), с которой проводилось испытание.

При отсутствии возможности использовать испытуемый образец массой 100 г, используют уменьшенное количество образца и подходящий градуированный цилиндр объёмом 100 мл с ценой деления до 1 мл, массой 130±16 г, установленный на держателе массой 240±12 г. В этом случае анализ данных проводят следующим образом: если разница между V500 и V1250 не более 1 мл, то V1250 ‒ это насыпной объём после уплотнения. Если разница между V500 и V1250 более 1 мл, то испытание продолжают, выполняя дополнительные падения (соскоки), например, 1250, до достижения разницы между двумя последовательными измерениями объёма не более 1 мл. Измененные условия испытаний указывают в результатах испытаний.

###### Метод 2

Методика. Испытание проводят так же, как в методе 1 определения плотности после уплотнения, за исключением того, что уплотняющее устройство должно обеспечивать фиксированное падение (соскок) с высоты 3±0,2 мм при частоте падения (соскоков) 250 раз в минуту.

###### Метод 3

Методика. Испытание проводят так же, как описано в разделе «Насыпная плотность. Метод 3. Измерение в цилиндрическом сосуде», используя цилиндрический сосуд с крышкой, представленный на рис. 2. Цилиндрический сосуд с крышкой встряхивают с частотой 50-60 раз в минуту с помощью подходящего прибора для определения плотности после уплотнения. Выполняют 200 встряхиваний, снимают крышку и осторожно удаляют избыток испытуемого образца порошка с верхней части цилиндрического сосуда, как описано в разделе «Насыпная плотность. Метод 3. Измерение в цилиндрическом сосуде». Испытание повторяют с 400 встряхиваниями. Если разница между двумя измерениями массы, полученными после 200 и 400 встряхиваний, превышает 2 %, то испытание повторяют с использованием 200 дополнительных встряхиваний до тех пор, пока разница между последовательными измерениями не составит менее 2 %.

Плотность после уплотнения (ρtapped) рассчитывают в граммах на миллилитр (г/мл) по формуле:

(5)

где ρtapped – плотность после уплотнения, г/мл; mf – масса испытуемого образца в цилиндрическом сосуде, г; 100 – объём цилиндрического сосуда, мл.

Вычисляют среднее значение трёх определений, используя три разных испытуемых образца. В результатах испытаний указывают также условия проведения испытания, включая высоту при встряхивании цилиндрического сосуда.

###### Определение показателей прессуемости

Взаимодействия между частицами твёрдого сыпучего вещества влияют как на значение его насыпной плотности, так и на свойства сыпучести (текучести) вещества. Сравнение насыпной плотности до и после уплотнения позволяет оценить характер взаимодействий между различными частицами в слое испытуемого образца конкретного вещества. Такие сравнения могут указывать на способность вещества к сыпучести или способность вещества к уплотнению, оценить которые можно, используя такие показатели сыпучести как, например, коэффициент прессуемости (коэффициент Карра) и коэффициент Хауснера (Hausner).

Коэффициент прессуемости и коэффициент Хауснера показывают способность испытуемого вещества к уплотнению (сжатию) методами, указанными в настоящей общей фармакопейной статье, т.е. позволяют оценить относительную значимость взаимодействий между частицами вещества. Для свободно сыпучих веществ такие взаимодействия менее значимы и значения их насыпной плотности до и после уплотнения будут близки. Для слабо сыпучих веществ (связанных, когезивных и т.п.), часто наблюдаются значительные взаимодействия между частицами, поэтому разница значений насыпной плотности до уплотнения и плотности после уплотнения может быть высокой. Данные различия отражаются коэффициентом прессуемости и коэффициентом Хауснера.

Коэффициенты прессуемости и Хауснера рассчитывают по формулам:

(6) (7)

где Vo – начальный (наблюдаемый) до уплотнения насыпной объём испытуемого образца, мл;
Vf – конечный, после уплотнения, насыпной объём испытуемого образца, мл.

В зависимости от испытуемого вещества коэффициент прессуемости можно определять с использованием V10 вместо V0. При использовании значения V10 (измеренного, как указано в методе 1 раздела «Определение плотности после уплотнения») об этом должно быть указано в результатах испытаний.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0025 Определение герметичности упаковки

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья устанавливает общие требования к определению герметичности упаковки, предназначенной для фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов для медицинского применения. Общие требования к упаковке лекарственных средств, в том числе к видам герметичной упаковки, приведены в ОФС «Упаковка лекарственных средств».

###### Область применения

Испытания предназначены для определения герметичности первичной упаковки, содержащей лекарственные средства: при фармацевтической разработке лекарственных средств, при контроле качества лекарственного препарата, в рамках технологического процесса производств (после заполнения и укупоривания/запайки), при исследовании стабильности лекарственного препарата.

Под герметичностью упаковки, предназначенной для лекарственных средств, понимают её способность совместно с укупорочными средствами и другими элементами системы упаковки препятствовать проникновению в содержимое упаковки и выходу из упаковки газов, паров и/или жидкостей, при обычных условиях хранения, транспортирования и реализации.

Испытание на герметичность – контрольное испытание, которое проводится для определения способности упаковки обеспечивать герметичность при определённых условиях испытаний. Испытание на герметичность упаковки позволяет определить наличие разрыва, неплотного прилегания элементов упаковки.

Утечка – это непреднамеренное проникновение или выход вещества (твёрдого, жидкого или газообразного) через отверстие в упаковке или через зазор между элементами (компонентами) упаковки.

Проницаемость упаковки – это прохождение газа, жидкости через непористую стенку упаковки в упаковку или из упаковки.

Выбор метода испытания герметичности упаковки лекарственных средств, а также применяемые критерии приемлемости при оценке герметичности, зависят от типа, вида и других характеристик первичной упаковки, от формы лекарственного препарата, для которого предназначена упаковка, и других факторов.

Допускается определение герметичности с использованием других валидированных методов и соответствующего квалифицированного аналитического оборудования, позволяющего оценить герметичность упаковки, в том числе в автоматическом режиме.

###### Определение герметичности упаковки методом внутреннего давления (вакуумирования)

Метод применяют для определения герметичности упаковки лекарственных препаратов, как правило, представляющих собой жидкие лекарственные формы в запаянных ампулах, в герметично закрытых флаконах, бутылках, банках, в процессе производства лекарственных средств, после заполнения, укупоривания или запаивания упаковки.

Метод основан на создании избыточного давления внутри испытуемого образца герметично закрытой или герметично запаянной упаковки и последующем определении герметичности упаковки визуальным контролем или с помощью соответствующего оборудования.

Определение герметичности ампул (определение качества запайки ампул). Запаянные ампулы лекарственного препарата, заполненные до номинальной вместимости, размещают в кассетах капиллярами вниз, кассеты помещают в вакуумную камеру, эксикатор или соответствующую ёмкость используемого оборудования на фильтровальную бумагу. В вакуумной камере создают необходимое разрежение, откачивая воздух, при этом внутри ампул создается избыточное давление. Если происходит частичное или полное истечение жидкости из ампул (следы воды на фильтровальной бумаге), упаковка ампул считается негерметичной.

Определение герметичности флаконов, бутылок, банок. Испытуемые образцы, представляющие собой герметично укупоренные упаковки с лекарственными препаратами в виде жидких лекарственных форм, помещают в вакуумную камеру, эксикатор или соответствующую ёмкость используемого оборудования горлышком вниз. С помощью вакуумного насоса достигают заданного разрежения в вакуумной камере, после чего останавливают вакуумный насос и устанавливают в ёмкости давление, равное атмосферному. Испытуемые образцы достают из вакуумной камеры и оценивают визуально и/или с помощью впитывающей салфетки. При обнаружении в месте укупорки протечки, выявляемой по наличию капель и/или следов лекарственного средства на салфетке, такие образцы упаковки, представляющие собой флаконы, бутылки или банки, считаются негерметичными.

###### Определение герметичности упаковки с помощью индикаторного (красящего) раствора

В данном методе герметичность упаковки определяют по отсутствию красителя внутри упаковки, подвергшейся действию избыточного, по сравнению с атмосферным, давления или действию вакуума.

Определение герметичности ампул и флаконов, герметизированных после заполнения их при атмосферном давлении. Лекарственные препараты в ампулах и/или флаконах помещают в кассеты, которые погружают в эксикатор или соответствующую ёмкость используемого оборудования, заполненную водой, подкрашенной любым водорастворимым красителем (например, заполненную метиленового синего раствором 0,0005 %). Кассеты погружают таким образом, чтобы ампулы и/или флаконы полностью находились в воде. Ёмкость герметично закрывают и создают в ней избыточное, по сравнению с атмосферным, давление 100±20 кПа, которое выдерживают в течение 20–25 мин, после чего устанавливают в ёмкости давление, равное атмосферному. После снятия давления кассету с ампулами и/или флаконами вынимают и просматривают на наличие красителя, прошедшего через дефекты упаковки внутрь ампул и/или флаконов. Ампулы и/или флаконы, содержащие краситель, считаются негерметичными.

Определение герметичности упаковок безъячейковых (стрипов), упаковок ячейковых (блистеров), пакетов, пакетиков (саше) и других аналогичных образцов первичной упаковки

Образцы лекарственных препаратов в герметично укупоренных упаковках, представляющих собой упаковки безъячейковые (стрипы), упаковки ячейковые (блистеры), пакеты или пакетики (саше) погружают в эксикатор или соответствующую ёмкость используемого оборудования, заполненную водой, подкрашенной любым водорастворимым красителем, (например, заполненную раствором метиленового синего). Упаковки должны быть полностью погружены в воду, при необходимости их накрывают сверху удерживающей пластиной с отверстиями. В испытательной ёмкости (эксикаторе) создают давление 40–60 кПа, после чего останавливают вакуумный насос и устанавливают давление, равное атмосферному. Выдерживают при атмосферном давлении в течение 30 мин.

Образцы достают из ёмкости (эксикатора), обмывают водой (при необходимости вскрывают) и оценивают визуально. При обнаружении красителя внутри образца, упаковка считается негерметичной.

###### Определение герметичности упаковки методом свечения

Метод основан на способности газовой среды упаковки лекарственных средств светиться под действием высокочастотного электрического тока при большом напряжении. В зависимости от величины давления газовой среды упаковки (уровня вакуума) цвет свечения будет различным.

Применяют для лекарственных препаратов в ампулах и флаконах, герметизированных при пониженном давлении («под вакуумом»). Определение герметичности упаковки в этом случае заключается в проверке её способности сохранять уровень вакуума, необходимый для обеспечения надлежащего качества содержащегося лекарственного препарата.

Для проведения испытаний используют соответствующее оборудование, обеспечивающее определение уровня вакуума в необходимом диапазоне, например аппарат типа Дарсонваль.

Испытуемые ампулы или флаконы при комнатной температуре устанавливают в штативе, к ним на расстоянии 1 см подводят электрод, не прикасаясь высокочастотным электродом к месту запайки ампул. Экспозиция искрового заряда у каждой ампулы или флакона не должна быть более 1 с во избежание пробоя стенки ампул или флаконов. Свечение внутри ампулы или флакона и характерное потрескивание при подведении к ним электрода указывает на наличие в упаковках вакуума. В зависимости от величины остаточного давления внутри ампулы или флакона (уровня вакуума) цвет свечения будет различным.

Контроль точности определения следует проводить по свечению образцов ампул и флаконов, герметизированных в строго контролируемых условиях при точно известных значениях давления.

Например, при определении герметичности ампул и флаконов, содержащих иммунобиологические лекарственные препараты, методом свечения, если нет других указаний, величину давления определяют по цвету свечения в соответствии с данными таблицы. Упаковка считается негерметичной, если остаточное давление внутри ампулы или флакона будет более 1,0 кПа.

Таблица 1. Зависимость цвета свечения от величины давления внутри ампулы или флакона для иммунобиологических лекарственных средств
Величина давления, кПа | Цвет свечения
--- | ---
от 0,010 до 0,1 | бледно-голубое
от 0,1 до 1,0 | розово-голубое
от 1,0 до 5,0 | фиолетовое
от 5,0 до 100,0 | нет свечения

###### Определение герметичности туб с мягкими лекарственными формами

Испытание проводят для упаковки, представляющей собой тубы, содержащие мягкие лекарственные формы.

Отбирают 10 туб и тщательно вытирают наружные поверхности туб фильтровальной бумагой. Тубы помещают в горизонтальном положении на лист фильтровальной бумаги и выдерживают в термостате при температуре 60±3°С в течение 8 ч.

На фильтровальной бумаге и ни на одной из 10 туб не должно быть подтеков содержимого.

Если наблюдаются подтеки хотя бы на одной из 10 первоначально отобранных туб, то дополнительно проводят испытание еще с 20 тубами. Результаты испытания считаются удовлетворительными, если не наблюдается подтеков ни на одной из 20 дополнительно отобранных туб.

###### Определение герметичности аэрозольных упаковок

Испытание проводят для упаковок, представляющих собой аэрозольные баллоны, укупоренные с помощью клапанно-распылительной системы (аэрозольные упаковки), содержащие лекарственные формы (например, аэрозоли, пены), находящиеся в этих упаковках под давлением пропеллента.

Визуальный метод определения герметичности. При отсутствии других указаний в фармакопейной статье испытание проводят не менее чем на 3 образцах упаковки. Аэрозольный баллон без колпачка и распылителя или насадки полностью погружают в водяную баню при температуре 45±5 °С не менее чем на 15 мин и не более чем на 30 мин для стеклянного аэрозольного баллона и не менее чем на 10 мин и не более чем на 20 мин для металлического аэрозольного баллона. Толщина слоя воды над штоком клапана должна быть не менее 1 см. Упаковка считается герметичной, если не наблюдается выделение пузырьков газа.

Скорость утечки

Отбирают 12 ранее не использовавшихся аэрозольных баллонов, удаляют с них все этикетки. Каждый аэрозольный баллон без колпачка и распылителя или насадки взвешивают с точностью до 0,001 г (m0), записывают дату и время с точностью до получаса, и оставляют в вертикальном положении при температуре 25±2° С в течение не менее 3 сут. Затем каждый аэрозольный баллон повторно взвешивают с точностью до 0,001 г (m1), записывая дату и время с точностью до получаса. Отмечают время (Т) в часах, в течение которого аэрозольные баллоны подвергались испытанию.

Освобождают каждый аэрозольный баллон от содержимого в соответствии со способом, указанным в фармакопейной статье. Взвешивают каждый пустой аэрозольный баллон с точностью до 0,001 г (m2) и рассчитывают массу содержимого каждого аэрозольного баллона (m3) по формуле:

(1)

Среднюю массу содержимого испытуемых аэрозольных баллонов с точностью до 0,001 г (m3i) рассчитывают по формуле:

(2)

где m0i – сумма масс аэрозольных баллонов до испытания, с содержимым, в г;
m2i – сумма масс аэрозольных баллонов, подвергшихся испытанию, без содержимого, в г;
n – количество аэрозольных баллонов, подвергшихся испытанию.

Cкорость утечки в год (Vm) в миллиграммах содержимого каждого аэрозольного баллона, подвергшегося испытанию, рассчитывают по формуле:

(3)

где m0 – масса аэрозольного баллона с содержимым, в г;
m1 – масса аэрозольного баллона по окончании испытания, в г;
Т – время, в ч;
1000 – пересчет г в мг.

Среднюю скорость утечки в год (Vmi) в миллиграммах содержимого аэрозольных баллонов, подвергшихся испытанию, рассчитывают по формуле:

(4)

где m0i – сумма масс аэрозольных баллонов до испытания с содержимым, в г;
m1i – сумма масс аэрозольных баллонов, подвергшихся испытанию, по окончании испытания, в г;
n – количество аэрозольных баллонов, подвергшихся испытанию;
Т – время, в ч;
1000 – пересчет г в мг.

Скорость утечки в год в процентах (V%) содержимого каждого аэрозольного баллона, подвергшегося испытанию, рассчитывают по формуле:

(5)

где Vm – cкорость утечки в год содержимого испытуемого аэрозольного баллона, в мг;
m3 – масса содержимого испытуемого аэрозольного баллона, в г;
1000 – пересчет г в мг.

Среднюю скорость утечки в год в процентах (Vi%) содержимого аэрозольных баллонов, подвергшихся испытанию, рассчитывают по формуле:

(6)

где Vmi – средняя cкорость утечки в год содержимого испытуемых аэрозольных баллонов, в мг;
m3i – средняя масса содержимого испытуемых аэрозольных баллонов, в г;
1000 – пересчет г в мг.

Если масса содержимого аэрозольного баллона составляет 15 г и более, при отсутствии других указаний в фармакопейной статье, средняя скорость утечки в год для 12 аэрозольных баллонов не должна превышать 3,5 % от средней массы содержимого аэрозольного баллона и ни для одного из них не должна превышать 5,0 %.

Если, хотя бы для одного аэрозольного баллона, скорость утечки в год превышает 5,0 %, но ни для одного из аэрозольных баллонов не превышает 7,0 %, испытание на скорость утечки проводят еще на 24 аэрозольных баллонах. Не более 2 аэрозольных баллонов из 36 могут иметь скорость утечки в год больше 5,0 % и ни для одного из них скорость утечки в год не должна превышать 7,0 %.

Если масса содержимого аэрозольного баллона составляет менее 15 г, то средняя скорость утечки в год для 12 аэрозольных баллонов не должна превышать 525 мг и ни для одного из них не должна превышать 750 мг. Если хотя бы для одного аэрозольного баллона скорость утечки в год превышает 750 мг, но не более 1,1 г, то испытание на скорость утечки проводят еще на 24 аэрозольных баллонах. Не более 2 аэрозольных баллонов из 36 могут иметь скорость утечки в год более 750 мг и ни для одного аэрозольного баллона из 36 скорость утечки в год не должна превышать 1,1 г.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0026 Определение консистенции методом пенетрометрии

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на определение консистенции лекарственных средств и вспомогательных веществ методом пенетрометрии.

Консистенция определяется состоянием, при котором пасто-, кремообразные, полутвёрдые или вязкие образцы сопротивляются деформации при приложении силы.

###### Область применения

Испытание предназначено для оценки структурно-механических свойств (вязкость, пластичность и др.) лекарственных средств и вспомогательных веществ методом пенетрометрии с целью выбора основы для мягких лекарственных форм: мазей, кремов, паст и др., так как от их консистенции зависит лёгкость нанесения и равномерность распределения на коже или слизистых данных лекарственных препаратов.

###### Принцип метода

Метод основан на определении глубины погружения проникающего объекта в толщину испытуемого образца, имеющего вязкую, мазеобразную консистенцию. Измерение проводят в валидированных условиях в течение установленного времени 5,0±0,1 с, при температуре 25±0,5 ºС. Для поддержания заданного температурного режима могут быть использованы водяная или воздушная баня, также допускается проводить испытание в помещении с постоянной температурой.

###### Оборудование

Для проведения определения используется прибор – пенетрометр (рис. 1), который состоит из штатива и проникающего объекта.

В качестве проникающего объекта, как правило, используется конус, изготовленный из коррозионно-стойкой латуни или стали со съёмным наконечником из твёрдой стали.

Штатив пенетрометра включает:

- шкалу (с ценой деления 0,1 мм) для определения глубины погружения проникающего объекта в испытуемый образец (А);

- вертикальный стержень, поддерживающий и направляющий проникающий объект (Б);

- устройство для автоматического ввода и извлечения проникающего объекта в образец в течение времени (В);

- устройство, обеспечивающее вертикальное положение проникающего объекта и контролирующее горизонтальное положение основания (Г);

- горизонтальное основание (Ж);

- контроль горизонтального положения основания (З).

На рис. 1 указан также:

- проникающий объект пенетрометра (Д);

- ёмкость с образцом (Е).

Рисунок 1. Пенетрометр

Проникающий объект пенетрометра должен иметь гладкую поверхность, определённые размер и массу (рис. 2 и рис. 3).

Рисунок 2. Конус (m = 102,5 г), ёмкость (d = 102 мм или 75 мм, h ≥ 62 мм) и стержень (l = 162 мм, m = 47,5 г). Размеры указаны в миллиметрах.
Рисунок 3. Микроконус (m = 7,0 г), ёмкость и стержень (l = 116 мм, m = 16,8 г). Размеры указаны в миллиметрах.

###### Пробоподготовка

В зависимости от физико-химических свойств лекарственных средств и вспомогательных веществ, подлежащих испытанию, пробоподготовку образцов проводят одним из следующих методов.

Способ 1. Испытуемым образцом аккуратно наполняют доверху три ёмкости, исключая попадание пузырьков воздуха (для удаления возможного присутствия пузырьков воздуха ёмкости с образцом встряхивают). При необходимости поверхность испытуемых образцов выравнивают и выдерживают при температуре 25±0,5 ºС в течение 24 ч, если не указано иное. Для выравнивания поверхности испытуемых образцов используют шпатель с подходящей шириной жёсткого лезвия из коррозионностойкого материала.

Способ 2. Три испытуемых образца выдерживают при температуре 25±0,5 ºС в течение 24 ч, если не указано иное. В течение 5 мин подходящим способом измельчают испытуемые образцы и аккуратно наполняют три ёмкости доверху, исключая попадание пузырьков воздуха (для удаления возможного присутствия пузырьков воздуха ёмкости с образцом встряхивают), выравнивая, при необходимости, поверхность образцов. Структура измельчённого испытуемого образца должна быть однородной.

Способ 3. Расплавляют три испытуемых образца и аккуратно наполняют три ёмкости доверху, исключая попадание пузырьков воздуха (для удаления возможного присутствия пузырьков воздуха ёмкости с образцом встряхивают). Испытуемые образцы выдерживают при температуре 25±0,5 ºС в течение 24 ч, если не указано иное.

###### Определение глубины погружения

На горизонтальное основание пенетрометра помещают ёмкость с испытуемым образцом. Проверяют, чтобы поверхность испытуемого образца была перпендикулярна вертикальной оси проникающего объекта. Проникающий объект выдерживают не менее 1 ч при температуре 25±0,5 ºС и устанавливают в таком положении, чтобы вершина его конуса слегка касалась поверхности испытуемого образца (при определении конус не должен касаться стенок емкости с образцом). Высвобождают проникающий объект и выдерживают в таком состоянии в течение стандартизованного времени 5,0±0,1 с. Затем проникающий объект фиксируют и определяют глубину проникновения по шкале пенетрометра. Испытание повторяют с двумя оставшимися ёмкостями с испытуемыми образцами. Перед проведением каждого испытания конус и ось пенетрометра тщательно очищают, не вращая конус.

###### Анализ данных

Глубина погружения – число пенетрации, выраженное в единицах, соответствующих десятым долям миллиметра, т.е. число пенетрации составляет 100, если объект пенетрометра погрузился на 10 мм.

За результат испытания принимают среднее арифметическое значение трёх определений из трёх выборочных единиц – при пенетрации более 200 единиц, из одной выборочной единицы – при пенетрации 200 или менее единиц с точностью до единицы, соответствующей 0,1 мм (1 дмм) по шкале пенетрометра.

Если при испытании один из индивидуальных результатов отличается от среднего значения более чем на 3 %, то испытание повторяют и вычисляют среднее значение и относительное стандартное отклонение результатов шести испытаний.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0027 Определение показателя «Размер частиц» в суспензиях, эмульсиях, мягких лекарственных формах

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения показателя «Размер частиц» в лекарственных средствах, представляющих собой суспензии, эмульсии, мягкие лекарственные формы гетерогенного и комбинированного типа, содержащие компоненты в виде твёрдой дисперсной фазы.

Испытания проводят методом оптической микроскопии в соответствии с ОФС «Оптическая микроскопия», методом лазерной дифракции в соответствии с ОФС «Определение распределения частиц по размеру методом лазерной дифракции света» или другими валидированными методами с использованием соответствующего квалифицированного испытательного оборудования.

###### Определение размера частиц в суспензиях и мягких лекарственных формах для офтальмологического применения

Размер частиц определяют методом оптической микроскопии по следующей методике.

Пробу лекарственного средства, содержащую не менее 10 мкг твёрдого действующего вещества, вносят в счётную камеру (для суспензий) или осторожно наносят на предметное стекло и просматривают под микроскопом всю площадь образца. Вначале образец просматривают при малом увеличении (например, 50×), отмечая частицы размером более 25 мкм. Затем проводят измерение этих частиц при большем увеличении (например, от 200× до 500×). Количество частиц рассчитывают в пересчёте на пробу лекарственного средства, содержащую 10 мкг твёрдого действующего вещества, если нет других указаний в фармакопейной статье.

В испытуемом образце не должно обнаруживаться более 20 частиц размером более 25 мкм, из них − не более 2 частиц могут иметь размер более 50 мкм. Не допускается наличие частиц размером более 90 мкм.

###### Определение размера частиц в суспензиях

Определение размера частиц в пробе лекарственной формы, представляющей собой суспензию, проводят по вышеописанной методике, применяемой для суспензий, предназначенных для офтальмологического применения. В испытуемом образце не должно обнаруживаться частиц размером более 100 мкм, если нет других указаний в фармакопейной статье.

###### Определение размера частиц (капель) в эмульсиях

Определение размера частиц (капель) в пробе лекарственной формы, представляющей собой эмульсию, проводят, если указано в фармакопейной статье.

Нормативные требования к размеру частиц (капель) должны быть указаны в фармакопейной статье.

Определение размера частиц (капель) и их распределение по размерам в стерильных эмульсиях типа «масло в воде», предназначенных для парентерального применения (для инъекций, для инфузий) проводят в соответствии с ОФС «Размер частиц (капель) и их распределение по размерам в эмульсиях для парентерального применения».

###### Определение размера частиц в мягких лекарственных формах

Размер частиц определяют методом оптической микроскопии по следующей методике.

Используют микроскоп, снабжённый окулярным микрометром для определения размера объектов при увеличении окуляра 15× и объектива 8×, если нет других указаний в фармакопейной статье Цену деления окулярного микрометра выверяют по объект-микрометру для проходящего света.

Используют предметные стёкла, обработанные с одной стороны следующим образом: посередине стекла абразивным материалом наносят квадрат с диагоналями (размер сторон около 15 мм), линии маркируют.

Отбирают среднюю пробу лекарственного средства, представляющего собой мягкую лекарственную форму, массой не менее 5 г, в соответствии с ОФС «Отбор проб». Если концентрация действующих веществ (вещества) в лекарственном средстве превышает 10 %, то прибавляют соответствующую основу до содержания действующих веществ (вещества) около 10 % и перемешивают. При отборе проб следует избегать измельчения частиц.

Из средней пробы лекарственного средства, представляющего собой мягкую лекарственную форму, берут навеску 0,05 г и помещают на необработанную сторону предметного стекла. Предметное стекло нагревают на водяной бане до расплавления основы, прибавляют каплю судана III раствора 0,1 % уксуснокислый для липофильных и эмульсионных основ типа вода/масло или метиленового синего раствора 0,1 % для гидрофильных и эмульсионных основ типа масло/вода и перемешивают. Пробу накрывают покровным стеклом (24×24 мм), фиксируют его путём слабого надавливания и просматривают в 4 полях зрения сегментов, образованных диагоналями квадрата. Для испытания одной лекарственной формы проводят 5 определений средней пробы.

Размер частиц в лекарственных средствах, представляющих собой мягкие лекарственные формы, не должен превышать 100 мкм, если нет других указаний в фармакопейной статье.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0028 Размер частиц (капель) и их распределение по размерам в эмульсиях для парентерального применения

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения размера частиц (капель) и их распределения по размерам в эмульсиях для парентерального применения. Данное испытание относится к эмульсиям для парентерального применения типа «масло в воде», предназначенным для инъекционного или инфузионного введения.

При получении эмульсий типа «масло в воде» для парентерального применения (называемых жировыми или липидными эмульсиями), в качестве действующих и вспомогательных веществ используют масла жирные природного происхождения (соевое, пальмовое, оливковое, рыбий жир и др.), которые диспергируют с помощью эмульгатора в воде для инъекций. Образовавшаяся эмульсия представляет собой гетерогенную дисперсную систему с жидкой дисперсной фазой в виде частиц масла шаровидной формы (капель масла, капель жира, жировых шариков) различного размера (диаметра) и жидкой дисперсионной, не прозрачной средой.

Размер частиц (капель масла) в эмульсиях, предназначенных для внутрисосудистого введения, имеет решающее значение, так как из-за механической фильтрации в лёгких могут задерживаться частицы, имеющие размер более 5 мкм. Если количество частиц большого размера по отношению к общему содержанию частиц в эмульсии велико, то это также влияет на безопасность использования лекарственной формы.

Поэтому для эмульсий для парентерального применения должны быть учтены такие показатели, как «Размер частиц (капель)», «Распределение частиц (капель) по размерам» и определены критерии их приемлемости. При испытании, определяют средний размер (диаметр) частиц (капель) эмульсии и диапазон частиц (капель) других размеров, выраженный в виде стандартных отклонений, обращая особое внимание при этом на наличие и допустимое содержание частиц (капель) большого размера, известное как «хвост» частиц большого размера (диаметра).

Нормативные требования к размеру частиц (капель) и их распределению по размерам, а также методы определения этих показателей, должны быть указаны в фармакопейной статье на лекарственный препарат, выпускаемый в виде эмульсии, предназначенной для внутрисосудистого введения (для инфузий, для инъекций, для внутривенного введения и др.).

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье размер (диаметр) частиц (капель) масла, полученных при диспергировании в эмульсиях должен быть не более 5 мкм.

Для анализа распределения частиц (капель) по размеру (от 0,2 мкм и более) в эмульсиях используют, как правило, методы, основанные на принципах светорассеяния: метод динамического рассеяния света, метод лазерной дифракции света. Определение размера и количества частиц (капель) в эмульсиях проводят методами, основанными на принципах светоблокировки и электрочувствительных зон, например, счётно-фотометрическим, методом Култера.

Методики, используемые для определения размера частиц (капель) и их распределения в эмульсиях для парентерального применения указанными методами, должны быть валидированы. Испытания по определению размера и количества частиц (капель) и анализ распределения частиц (капель) в эмульсиях для парентерального применения проводят одним из указанных методов.

###### Метод динамического рассеяния света

Область применения. Метод эффективен для определения наличия частиц (капель) в эмульсии в диапазоне их номинальных размеров от 0,001 до 1,0 мкм, особенно эффективен для определения частиц (капель) размером менее 0,5 мкм; метод дает относительную информацию о распределении частиц (капель) по размерам, но не подсчитывает их.

Принцип

Метод динамического рассеяния света или метод фотонной корреляционной спектроскопии основан на анализе быстро меняющихся временных флуктуаций (колебаний) интенсивности рассеянного света, которые происходят из-за случайного броуновского движения или диффузии любых частиц, включая капли масла, находящиеся в жидкости во взвешенном состоянии. Быстро меняющуюся интенсивность рассеянного света, создаваемую взвешенными, рассеивающимися частицами (каплями), измеряют под заданным углом, обычно под углом 90°, с помощью подходящего детектора, например, фотоумножительной трубки. Полученные данные о рассеянной интенсивности используют для вычисления автокорреляционной функции интенсивности, которая представляет собой простую экспоненциальную функцию затухания во времени для частиц (капель) одного размера. При суммировании экспоненциальных функций затухания во времени представителей каждого из установленных размеров частиц (капель) и применении необходимых формул и расчётов, можно получить данные о распределении частиц (капель), малого размера (диаметра).

Функция автокорреляции, генерируемая данными об интенсивности рассеяния, полученными из испытуемой эмульсии, может быть «инвертирована» (трансформирована) с помощью соответствующего алгоритма деконволюции (обратного интегрального преобразования) чтобы получить приблизительное распределение коэффициентов диффузии по отношению к интенсивности.

Исходя из последнего распределение частиц (капель) малого диаметра вычисляют с использованием уравнения Стокса-Эйнштейна и правил классического (Ми) рассеяния света.

Оборудование. Определение методом динамического рассеяния света или методом фотонно-корреляционной спектроскопии проводят с помощью анализаторов, спектрометров и других подходящих приборов, имеющих возможность автоматического разбавления образца или же разбавление проводят вручную, выполнение испытаний контролируется валидированным программным обеспечением, угол рассеяния обычно устанавливают на уровне 90 °. Надлежащие результаты измерения (средний размер (диаметр) частиц и стандартное отклонение от среднего размера) могут быть получены при использовании приборов, условий и наличия других необходимых данных, соответствующих заданным параметрам определения.

Вода. Воду, используемую в качестве растворителя, фильтруют через фильтр с размером пор 0,2 мкм. Для удаления пузырьков воздуха воду обрабатывают ультразвуком в течение 30 с. Допускается использовать стерильную воду для инъекций, хранящуюся в упаковке из стекла.

Подготовка стандартных образцов

К заранее установленному объёму воды добавляют соответствующее количество концентрированной дисперсии, содержащей стандартный образец. В качестве стандартного образца используют сертифицированный стандартный материал, представляющий собой дисперсию сферических частиц (например, полистирольных латексных или других подходящих наночастиц), имеющих известный размер. Аккуратно перемешивают жидкость до получения однородной слегка мутной дисперсии (исходный стандартный образец).

Если используемый прибор оснащён автоматической системой введения, то после ввода в прибор через шприц исходного стандартного образца, дальнейшее разбавление образца для проведения испытания и оптимизации концентрации частиц, происходит автоматически, гарантируя, что она не настолько высока, чтобы вызвать погрешности измерения из-за многократного рассеяния или взаимодействия между каплями. В случае отсутствия автоматической системы введения, исходный стандартный образец разбавляют водой, как правило, не менее чем в 10 раз по сравнению с первым разбавлением, а затем помещают в «измерительную» кювету.

Оптимальная схема разбавления, обеспечивающая надлежащую интенсивность рассеяния для анализа в случае ручного разбавления и использования кюветы, определяется техническими характеристиками прибора. Таким образом, для используемого прибора устанавливают концентрацию частиц в конечном стандартном образце.

Определение следует выполнять отдельно для трёх различных стандартных образцов с размерами частиц 100, 250 и 400 мкм (трёхкратно для каждого размера).

Полученные результаты среднего размера (диаметра) частиц и стандартного отклонения от среднего размера стандартных образцов, определенные по интенсивности, должны совпадать с ожидаемыми значениями в пределах допустимых отклонений.

Пробоподготовка.

К заранее установленному объёму воды добавляют соответствующий объём образца испытуемой эмульсии. Аккуратно перемешивают жидкости до получения однородной слегка мутной дисперсии, представляющей собой исходный испытуемый образец.

Пробоподготовку проводят аналогично методике подготовки стандартных образцов.

Для используемого прибора, основанного на принципе светорассеяния, должна быть установлена концентрация конечного испытуемого образца эмульсии. Результаты должны быть установлены на основании трёх измерений, или, в зависимости от ситуации, на основе валидационных данных метода.

Пригодность системы. Используя стандартный образец, указанный в подразделе «Подготовка стандартных образцов», определяют значение среднего размера (диаметра) частиц и соответствующее стандартное отклонение. Система пригодна для использования после того, как температура образца достигла равновесия, результаты стабилизировались, получены данные трёх определений среднего размера (диаметра) частиц. Коэффициент вариации не должен превышать 15 % среднего размера частиц (капель) от соответствующего сертифицированного стандартного образца. Более высокое значение коэффициента вариации указывает на то, что используемые стандартные дисперсии сферических частиц не подходят в качестве стандартного образца, так как они либо изначально не обладают однородностью, либо стали агломерированными в неприемлемой степени. В этом случае необходимо выбрать и протестировать другую стандартную дисперсию сферических частиц.

Примечание – Рекомендуемый коэффициент вариации в 15 % увеличен по сравнению с методом классического рассеяния света из-за различий в способе определения среднего размера частиц (капель).

Методика определения и анализ данных. В прибор для измерения методом светового рассеяния или методом фотонно-корреляционной спектрометрии, оснащённый автоматической системой разбавления, используя одноразовый шприц, вносят испытуемый или стандартный образец. Если автоматическая система разбавления не используется, переносят соответствующим образом разбавленный испытуемый или стандартный образец в кювету, кювету помещают в держатель образца с регулируемой температурой прибора. Позволяют образцу уравновеситься до заданной контролируемой температуры, близкой к температуре окружающей среды, устанавливают угол рассеивания прибора на 90° и выполняют измерения. До тех пор, пока параметр распределения (χ2) остается приемлемо низким согласно спецификациям прибора, результаты определения являются приемлемыми (нормальными). Чрезмерные значения параметра распределения (χ2) свидетельствуют о том, что распределение частиц (капель) не является нормальным, что может указывать на нестабильность эмульсии. Определяемый размер частиц (капель) эмульсий должен быть менее 0,5 мкм, независимо от концентрации дисперсной (масляной, липидной, жировой) фазы.

###### Метод лазерной дифракции света

Метод лазерной дифракции света, использующий классическое рассеяние света, основанное на теории Ми, анализирует пространственное (угловое) изменение интенсивности света, путём измерения последнего в зависимости от угла рассеяния, как правило, в большом диапазоне обнаруженных углов. Временные флуктуации (колебания) интенсивности рассеяния, обусловленные броуновским движением, усредняются во времени для каждого углового измерения. Это угловое изменение происходит вследствие взаимной интерференции отдельных рассеянных волн, поступающих на детектор с разными фазами из разных точек в пределах каждой из частиц (капель) эмульсии, суммированных по всем различным частицам. Степень углового изменения значительна всякий раз, когда размер частицы (капли) не мал по сравнению с длиной волны лазерного излучения (обычно 633-635 нм). Частицы заданного размера и показателя преломления дают уникальную кривую зависимости интенсивности рассеяния от угла наклона. Распределение размеров частиц (капель) приводит к конечной угловой зависимости, которая представляет собой суммирование всех индивидуальных кривых интенсивности и угла наклона. Измеренная угловая зависимость интенсивности рассеяния, полученная из испытуемого образца эмульсии, может быть инвертирована (трансформирована) с помощью соответствующего алгоритма деконволюции (обратного интегрального преобразования) в сочетании с теорией рассеяния Ми для получения приблизительного распределения частиц (капель) по размерам. Область применения, оборудование, пробоподготовка, методика определения и другие данные, касающиеся метода классического рассеяния света, представлены в ОФС «Определение распределения частиц по размерам методом лазерной дифракции света».

###### Метод светоблокировки

Область применения. Метод эффективен для определения частиц (капель) эмульсии размером от 1,3 до 400 мкм, при испытании эмульсий обеспечивает подсчет частиц размером до 5 мкм и частиц (капель) большого диаметра (более 5 мкм).

Принцип

Метод светоблокировки (светового затемнения, световой экстинкции) основан на оптическом определении размера отдельных частиц (капель). При применении метода прохождение частицы (капли) через тонкую оптическую «чувствительную» зону приводит к эффективной блокировке части падающего светового пучка, вызывая мгновенное снижение интенсивности света, достигающее отдалённого детектора экстинкции уменьшением обнаруженной интенсивности света.

Величина этого уменьшения сигнала связана с площадью поперечного сечения частицы (капли), предположительно меньшей, чем толщина «чувствительной» зоны (зоны зондирования), т.е. для сферических частиц (капель) связана с квадратом их диаметра. Чем больше диаметр сферической частицы (капли), тем больше высота (напряжение) импульса сигнала, вызванного кратковременным уменьшением обнаруженной интенсивности света.

При оптимизации прибора для оптического измерения отдельных частиц методом светоблокировки, для определенного образца эмульсии необходимо протестировать серию разведений для достижения согласованности между образцами.

Цель состоит в том, чтобы определить стандартный диапазон разведений, которые дают последовательные данные и наиболее применимы к тестируемому составу лекарственного препарата. Необходимо, чтобы при сравнении различных эмульсий каждый раз измерялось одно и то же приблизительное количество капель, и как только стандартный диапазон разведений будет достигнут, его можно использовать для определения.

До тех пор, пока концентрация частиц (капель) находится ниже «предела измерения» датчика (определённого проточной ячейкой и оптической конструкцией и проверенного экспериментально), только одна частица (капля) в большинстве случаев пройдёт через «чувствительную» зону (зону зондирования) в определённый момент времени, что позволит определить размер и подсчитать менее чем 1 % частиц (капель). Для используемого в испытании датчика должен быть известен как «предел измерения» (концентрация), так и оптимальный расход.

Целесообразно выполнять измерения большого диаметра частиц (капель) при уменьшенной концентрации эмульсии таким образом, чтобы измеряемая концентрация частиц (капель) от порога обнаружения (например, более 1,8 мкм) до соответствующего верхнего размера (например, 50 мкм) составляла приблизительно одну треть от номинального «предела измерения» для используемого датчика. Полученные значения высоты одиночных импульсов преобразуются в диаметры капель с применением стандартной калибровочной кривой, построенной предварительно с использованием стандартного образца, в качестве которого применяют сертифицированный стандартный материал, представляющий собой дисперсию сферических моноразмерных частиц.

Оборудование

Для измерения используют подходящее для метода, светоблокировки оборудование с возможностью автоматического разбавления образца или без него, оснащённое подходящим программным обеспечением.

Надлежащие результаты измерения (количество частиц, распределение частиц по размерам) могут быть получены при использовании приборов, условий и наличия других необходимых данных, соответствующих заданным параметрам определения.

Вода. Воду, используемую в качестве растворителя, фильтруют через фильтр с размером пор 0,2 мкм. Для удаления пузырьков воздуха воду обрабатывают ультразвуком в течение 30 с. Допускается использовать стерильную воду для инъекций, хранящуюся в упаковке из стекла.

Подготовка стандартных образцов

К заранее установленному объёму воды добавляют соответствующее количество концентрированной дисперсии, содержащей стандартный образец. В качестве стандартного образца используют сертифицированный стандартный материал, представляющий собой дисперсию сферических частиц. Аккуратно перемешивают жидкость до получения однородной слегка мутной дисперсии (исходный стандартный образец). Если используемый прибор оснащён автоматической системой введения и разбавления, то после ввода в прибор через шприц или тефлоновую пробоотборную линию исходного стандартного образца, дальнейшее разбавление образца для проведения испытания и оптимизации концентрации частиц, происходит автоматически.

В случае отсутствия автоматической системы разбавления, исходный стандартный образец разбавляют водой, как правило, не менее чем в 10 раз по сравнению с первым разбавлением, а затем помещают в ёмкость из нейтрального стекла типа I, перед тем как пропустить его через датчик.

Поверка прибора и калибровка должны быть проведены с использованием двух различных стандартных образцов дисперсий с размером частиц приблизительно 5 и 10 мкм и на основании трёх измерений для каждого размера частиц. После калибровки прибора устанавливают порог обнаружения частиц на уровне 1,8 мкм, верхний предел на уровне 50 мкм.

Пробоподготовка

К заранее установленному объёму воды добавляют соответствующий объём образца испытуемой эмульсии для проведения не менее трёх измерений. Аккуратно перемешивают жидкости до получения однородной слегка мутной дисперсии, представляющей собой исходный испытуемый образец.

Пробоподготовку проводят аналогично методике подготовки стандартных образцов.

Пригодность системы. Используя стандартный образец, указанный в подразделе «Подготовка стандартных образцов», определяют среднее значение размера (диаметра) частиц и количество частиц в миллилитре каждого из стандартных образцов, содержащих частицы размером 5 и 10 мкм. Система пригодна для использования после того, как полученные данные трёх измерений размера (диаметра) частиц будут находиться в пределах 10 % от целевого значения, как с точки зрения повторяемости, так и с точки зрения близости к значению соответствующего сертифицированного стандартного образца.

Методика определения и анализ данных

В прибор для измерения методом светоблокировки, оснащённый автоматической системой разбавления, используя одноразовый шприц или тефлоновую пробоотборную линию, вносят испытуемый или стандартный образец. Если автоматическая система разбавления не используется, переносят соответствующим образом разбавленный испытуемый или стандартный образец в свободную от частиц ёмкость из нейтрального стекла типа I, содержащую соответствующий объём воды.

Образец тщательно перемешивают с водой до получения однородной дисперсии.

Устанавливают на приборе диапазон измерения частиц от 1,8 мкм до 50 мкм и варьируют концентрацию и/или время сбора данных таким образом, чтобы разница между двумя измерениями количества частиц превышающих 5 мкм была как минимум двукратной.

Количество частиц размером более 5 мкм в исходной эмульсии должно быть достаточным, для достоверного определения «хвоста» частиц большого диаметра.

Средний диаметр капель жировых эмульсий для парентерального применения должен быть менее 500 мкм независимо от концентрации дисперсной липидной фазы.

Необходимые данные проведённого испытания, как правило, определяют с помощью программного обеспечения прибора.

Примечание – При проведении испытания не допускается использование материала на основе поливинилхлорида с диэтилгексилфталатом, так как такой материал инициирует распад липидных эмульсий для парентерального применения.

###### Метод электрочувствительных зон (метод Култера)

Область применения. Метод предназначен для измерения размера и количества частиц в диапазоне от 0,2 мкм до 1600 мкм. Может использоваться для определения количества частиц (жировых капель) размером от 0,5 мкм до 5 мкм и более.

Принцип. Метод Култера основан на регистрации электрических импульсов, возникающих при прохождении через апертуру находящихся в электролите частиц. Во время испытания измеряется сопротивление между электродами. В апертуре создается так называемая «чувствительная зона» и частицы, находящиеся в электролите во взвешенном состоянии, могут быть подсчитаны при прохождении через неё. При этом эквивалентный объём электролита удаляется из «чувствительной зоны», что вызывает короткое изменение сопротивления в апертуре. Это изменение можно измерить как импульс тока или напряжения. Высота этого импульса пропорциональна объёму частицы. Используя автоматическую систему для анализа числа и уровня импульсов, можно подсчитать число частиц и измерить объём каждой частицы, проходящей через «чувствительную зону».

Оборудование

Метод Култера используется в приборах – анализаторах, которые представляют собой одну установку, содержащую апертурную трубку, систему анализа жидкостей (включающую насос и измерительный прибор) и электронику для управления апертурным током. Анализатор осуществляет управление током таким образом, что его значение остается постоянным. Регуляторы скорости потока и фокусировки апертуры находятся на передней панели анализатора. Все остальные регулирующие устройства управляются с помощью соответствующего программного обеспечения, которое обеспечивает получение распределения по размерам с высоким разрешением частиц. Каждая апертурная трубка покрывает диапазон размера частиц от 2 до 60 % диаметра апертуры (апертура – отверстие определенного диаметра от 20 до 2000 мкм). Используются апертуры диаметром 20, 50 мкм в зависимости от предполагаемого размера жировых капель. Верхний предел измерений диктуется вязкостью раствора и плотностью частиц, а нижний предел – размером апертуры, электрической проводимостью анализируемого образца и условиями окружающей среды. Заданные сила тока и усиление используются во время анализа и определяют величину электрического импульса (сила тока) и коэффициент его усиления, создаваемые в анализаторе автоматически при прохождении частиц через апертуру (так например, для апертуры 20 мкм рекомендуется установить усиление 4 и силу тока 600 µА).

Результаты, полученные на приборе, представляются в виде числа частиц, а также в виде распределения частиц по объёму или площади поверхности, на них не влияют цвет частиц, показатель преломления частиц или жидкости, а также форма частиц.

Все данные сохраняются в памяти прибора в виде значений зарегистрированных импульсов, причём значение каждого импульса преобразовано прибором в значение размера частиц, выраженное в мкм.

Автоматически создается файл с полной информацией о параметрах проведения анализа и полученных результатах.

Растворитель. Для электропроводности и в качестве растворителя используют натрия хлорида раствор 4 %. Перед использованием (за 2–3 ч) раствор фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,22 мкм. Для промывки системы после работы используют спирт 70 % и оставляют её заполненной этим раствором.

Пригодность системы

Перед началом работы, при каждой смене растворителя и замене апертуры прибор калибруют в соответствии с инструкцией по эксплуатации, используя для этого калибровочную суспензию латексных стандартных образцов (в зависимости от определяемого размера).

При выполнении калибровки анализируют известный размер латексных стандартных образцов. Калибровать апертуру следует стандартными частицами, размер которых составляет от 10 до 20 % размера апертуры. Разброс измерений стандартных образцов определяет константу калибровки Kd, необходимую анализатору для того, чтобы измерять действительные размеры частиц. После калибровки, необходимо тщательно отмыть апертуру и внешний электрод.

Пробоподготовка. К определенному объёму растворителя добавляют объём образца испытуемой эмульсии. Делают дальнейшие разведения до необходимой концентрации для прохождения испытуемого образца через апертуру.

Методика определения и анализ данных

Проверяют, что в систему введено значение Kd, полученное при калибровке. Согласно инструкции по эксплуатации опорожняют систему, продувая ее воздухом, заполняют растворителем. Кювету с образцом помещают в держатель для проб. Проверяют проходимость апертуры, анализируют пробу и снимают показания прибора. Количество испытаний и объём анализируемой пробы зависит от определяемого размера и требований. Измерения и расчёт проводят с учетом объёма анализируемой пробы, а также по времени анализа без учёта объёма образца.

С помощью программного обеспечения прибора рассчитывают долю частиц необходимого размера.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0029 Седиментационная устойчивость

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения способности суспензий после взбалтывания сохранять равномерное распределение частиц по всему объёму лекарственной формы неизменным, в течение времени, необходимого для введения, приёма или нанесения лекарственной формы.

Седиментационная устойчивость – устойчивость дисперсной системы против оседания частиц под действием силы тяжести.

Ресуспендируемость – способность частиц дисперсной фазы равномерно распределяться по всему объёму суспензии при взбалтывании.

###### Методика

Определение проводят визуальным осмотром при достаточной освещённости.

Для суспензий, предназначенных для парентерального применения и для приёма внутрь время, необходимое для ресуспендирования, должно быть не более 1 мин, если нет других указаний в фармакопейной статье.

Для шампуней лекарственных суспензионного и комбинированного типа, для суспензий, предназначенных для применения в форме капель глазных, время, необходимое для ресуспендирования, должно быть не более 30 с, если нет других указаний в фармакопейной статье.

Испытуемый образец тщательно взбалтывают в течение установленного времени, необходимого для ресуспендирования, и переносят в полном объёме содержимое, если нет иных указаний в фармакопейной статье, из флакона (или другой упаковки, указанной в фармакопейной статье) в мерный цилиндр или стеклянную пробирку, фиксируют время.

Осматривают опорожнённый флакон (упаковку), для осмотра полимерного флакона его разрезают на части: на дне и стенках флакона (упаковки) не должно наблюдаться агрегатов и агломератов частиц дисперсной фазы.

###### Критерии приемлемости

В цилиндре или стеклянной пробирке не должно наблюдаться признаков расслоения, седиментации и образования агрегатов и агломератов в течение времени, необходимого для осуществления приёма, введения или нанесения лекарственной формы.

При отсутствии других указаний в фармакопейной статье для суспензий, предназначенных для парентерального применения, для приёма внутрь, для применения в форме капель глазных, а также для шампуней лекарственных суспензионного и комбинированного типа, время седиментационной устойчивости должно быть не менее 2–3 мин.

Примечание – Допускается просветление жидкости у верхнего мениска, вызванное капиллярными явлениями и смачиванием внутренней поверхности.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0030 Однородность массы (объёма) доз, отобранных из многодозовой упаковки

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на лекарственные формы (жидкие лекарственные формы, гранулы, порошки и др.), выпускаемые в многодозовой упаковке в комплекте с прилагаемым средством дозирования – мерным устройством для отбора по массе или по объёму дозы, необходимой для применения.

Данное испытание предназначено для оценки однородности массы или однородности объёма доз, отобранных с помощью мерного устройства (стаканчик мерный, ложка мерная, дозатор шприцевой и др.), входящего в комплект с лекарственной формой.

Испытание проводят на 20 индивидуальных дозах лекарственной формы, отобранных случайным образом из одной или нескольких многодозовых упаковок с помощью прилагаемого к упаковке мерного устройства.

Если отбираемая доза лекарственной формы в инструкции по применению или в маркировке лекарственного препарата указана, как масса, то определяют массу каждой из 20 отобранных доз лекарственной формы, взвешивая их с точностью до 0,01 г, если другое не указано в фармакопейной статье. Затем рассчитывают среднюю массу и отклонение от средней массы в процентах для каждой из 20 индивидуальных доз.

Если отбираемая доза лекарственной формы в инструкции по применению или в маркировке лекарственного препарата указана, как объём, то определяют объём каждой из 20 отобранных доз лекарственной формы, измеряя их объём с точностью до 0,1 мл, если другое не указано в фармакопейной статье. Затем рассчитывают средний объём и отклонение от среднего объёма в процентах для каждой из 20 индивидуальных доз.

Объёмы отбираемых доз также можно определить путём измерения их масс и последующего расчёта их объёмов, используя значения плотности испытуемой лекарственной формы.

Критерии приемлемости

Лекарственную форму считают выдержавшей испытание, если масса или объём не более двух индивидуальных доз отклоняется от средней массы или среднего объёма более чем на 10 %, но при этом масса или объём ни одной индивидуальной дозы не должны отклоняться от средней массы или среднего объёма более чем на 20 %.

Если в фармакопейной статье указаны нормативные требования к массе или объёму доз, отбираемых с помощью мерного устройства, находящегося в комплекте с лекарственной формой, то после взвешивания массы или измерения объёма 20 индивидуальных доз, рассчитанная средняя масса или средний объём не должны отклоняться от номинальной массы или номинального объёма отбираемой дозы более, чем на значение, указанное в фармакопейной статье.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0031 Определение распределения частиц по размеру методом лазерной дифракции света

Взамен ОФС.1.2.1.0008.15

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на метод дифракции лазерного излучения, используемый для определения распределения частиц по размеру, основан на анализе профиля рассеяния света, возникающего при освещении частицы коллимированным лазерным лучом. Метод позволяет измерять частицы в диапазоне от 0,1 мкм до 3,0 мм.

###### Область применения

Метод предназначен для определения размера частиц и распределения частиц по размеру в лекарственных препаратах, представляющих собой такие лекарственные формы, как порошки, суспензии, эмульсии, дисперсий и др. Метод позволяет также определять, а затем и нормировать размер частиц фармацевтических субстанций и их распределение.

###### Оборудование

Оборудование размещают таким образом, чтобы защитить его от воздействия электрических помех, механических вибраций, температурных колебаний, влажности и прямого яркого света.

Схема прибора для лазерной дифракции представлена на рис. 1.

Взаимодействие луча падающего света и частиц дисперсной фазы приводит к образованию профиля рассеяния света с разными значениями интенсивности света при различных углах. Общее распределение угловой интенсивности, состоящее из прямого и рассеянного света, фокусируется линзой на многоэлементном детекторе. Линза создает профиль рассеяния света, который не зависит от расположения частиц в световом луче.

Рисунок 1. Схема прибора для определения размера частиц методом лазерной дифракции: 1 – источник лазерного излучения; 2 – модуль обработки лазерного излучения; 3 – частицы; 4 – рассеянный свет; не собранный линзой (6); 5 – рабочее расстояние линзы (6); 6 – линза Фурье; 7 – прямой луч; 8 – фокусное расстояние линзы (6); 9 – рассеянный луч; 10 – детектор затемнения; 11 – многоэлементный детектор.

Работа прибора базируется на основных принципах рассеяния лазерного излучения при условии идеализированных свойств частиц, поэтому калибровка прибора перед измерением не требуется. Проверку правильности работы прибора можно осуществить путём измерения сертифицированного стандартного материала, состоящего из частиц известного распределения по размеру.

Работу прибора необходимо подтверждать через регулярные интервалы времени или с надлежащей частотой. Поверку системы производят с использованием контрольного материала, известного распределения по размеру. Средние значения трёх измерений должны отличаться от установленного значения не более чем на 10 % для x50 и не более чем на 15 % для x10 и x90. Для x <10 мкм эти величины необходимо удвоить.

###### Пробоподготовка

Методика пробоподготовки должна обеспечивать получение репрезентативного образца требуемого объёма для измерения размера частиц.

Спреи, аэрозоли и пузырьки газа в жидкости измеряются непосредственно, поскольку пробоподготовка или разведение могут изменить распределение частиц по размеру.

Сыпучие порошки также можно преобразовать в аэрозоли при помощи диспергаторов, использующих энергию сжатого газа или перепады давления. Полученный аэрозоль проходит через зону измерения, после чего попадает во впускное отверстие вакуумного блока, где частицы аэрозоля собираются.

В качестве дисперсионной среды могут быть использованы вода и различные органические растворители (этанол, метанол; изопропанол; гексан, ацетон, толуол и другие), что должно быть указано фармакопейной статье.

Определение диапазона концентраций. Для получения приемлемого соотношения «сигнал – шум» в детекторе, концентрация частиц в дисперсии должна превышать минимальный уровень. Также она должна быть меньше максимального уровня концентрации во избежание многократного рассеяния.

На диапазон концентраций влияют: ширина лазерного луча, расстояние, проходимое лучом лазера в зоне измерения, оптические свойства частиц и чувствительность элементов детектора. Измерения необходимо проводить при различных концентрациях частиц для определения оптимального диапазона концентраций для каждого характерного образца материала.

Принцип метода. Образец, диспергированный в жидкости или газе с необходимой концентрацией, подвергается воздействию лазерного облучения. Свет, рассеянный от частиц на различных углах, измеряется многоэлементным детектором. Числовые значения, представляющие профиль рассеяния света, регистрируются для последующего анализа. В дальнейшем эти значения математически преобразуются с помощью оптической модели в доли от общего объёма отдельных размерных классов, формируя, таким образом, объёмное распределение частиц по размеру.

Метод не может отличить рассеяние от отдельных частиц и рассеяние от кластеров частиц, т. е. агломератов или агрегатов. В случае если образцы содержат агломераты или агрегаты частиц, и если необходимо определить распределение отдельных частиц по размеру, то перед измерением кластеры диспергируют на отдельные частицы. Для несферических частиц получают соответствующее распределение эквивалентных сфер по размеру, поскольку метод предполагает использование сферических частиц в своей оптической модели. Полученное распределение частиц по размеру может отличаться от распределений, основанных на других физических принципах (например, седиментации или ситовом определении).

###### Методика

Измерение размеров частиц осуществляют на малоугловых измерителях дисперсности в соответствии с руководством по эксплуатации прибора и инструкцией пользователя.

После соответствующей регулировки оптической части прибора проводят фоновое измерение среды, в которой отсутствуют дисперсные частицы. Уровень сигнала фона должен быть ниже соответствующего порогового значения. После фонового измерения проводят измерение пробы. Обычно при измерении проводится большое число регистраций сигнала на элементах детектора и определяется среднее значение для каждого элемента. Положение и размер элементов детектора, фокусное расстояние линзы определяют диапазон углов рассеяния для каждого элемента.

Большинство приборов также измеряют интенсивность центрального луча. Различие интенсивностей центрального луча в дисперсной системе и фонового измерения является параметром затемнения и свидетельствует об интенсивности рассеянного света и концентрации частиц.

Специфические условия проведения анализа по измерению размера частиц и их распределению в конкретных лекарственных средствах указывают в фармакопейных статьях или требованиях, установленных производителем (разработчиком).

Выбор оптической модели. Выбор подходящей оптической модели зависит от размера абсорбции, показателя преломления, шероховатости, ориентации кристалла и т.д., испытуемого образца. В большинстве случаев применяют аппроксимацию Фраунгофера или теорию Ми. При размере частиц менее 25 мкм различия между оптическими моделями становятся более существенными. В этом диапазоне более точные результаты позволяет получать теория Ми. При использовании теории Ми в прибор необходимо ввести значения показателя преломления частиц и среды или их отношение.

Время измерения. Время измерения, время и частота сбора данных детектором определяют экспериментально таким образом, чтобы достичь желаемой точности. Как правило, за время измерения происходит большое количество сканирований за короткий промежуток времени.

Повторные измерения. Число повторных измерений зависит от конкретного материала. Обычно измеряют не менее трёх репрезентативных образцов одной серии.

Результаты измерений. Результаты обычно представляют в виде интегральной кривой распределения частиц по размеру (рис. 2). Величины xm отражают размер частиц, где m – доля частиц с размером x и менее. Для оценки распределения по размеру обычно используют значения x10, x50 и x90.

Рисунок 2. Интегральное объёмное распределение частиц по размеру: x – размер частиц, определяемый как диаметр объёма эквивалентной сферы; Q3(x) – объёмная доля частиц с размером x и менее; x10, x50, x90 – размер частиц, соответствующий объёмной доле 10 %, 50 % и 90 % соответственно.

Повторяемость. Предпочтительно использование сертифицированных или стандартных материалов, состоящих из сферических частиц известного распределения по размеру, с размерными группами, отличающимися по размеру более чем в 10 раз. Работоспособность прибора считается соответствующей требованиям, если среднее значение x50 по крайней мере трёх независимых измерений сертифицированного или стандартного материала отличается не более чем на 3 % от установлённого диапазона значений. Средние значения x10 и x90 не должны превышать установленный диапазон значений более чем на 5 %. Относительное стандартное отклонение должно быть менее 3 % для x50 и менее 5 % для x10 и x90. Для x<10 мкм эти величины необходимо удвоить.

Промежуточная внутрилабораторная прецизионность. Промежуточная внутрилабораторная прецизионность метода, главным образом, зависит от характеристик материала (измельчённый/неизмельчённый, твёрдый/ломкий), а также от типа лекарственной формы. Обычно измеряют не менее трёх репрезентативных образцов одной серии. Относительное стандартное отклонение должно быть менее 10 % для x50. Для значений x10 и x90 относительное стандартное отклонение должно быть менее 15 %. Для x<10 мкм эти величины необходимо удвоить.

Меры предосторожности. При проведении измерений жидких дисперсий необходимо избегать появления пузырьков воздуха, испарения жидкости или других неоднородностей дисперсии. При работе с сухими дисперсиями необходимо избегать неравномерного потока частиц от диспергатора или турбулентного воздушного течения. Такие эффекты могут привести к получению недостоверных результатов по распределению частиц по размеру.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.4.2.0032 Ситовой анализ

Взамен ОФС.1.1.0015.15

Ситовой анализ – это определение фракционного состава или распределения по размерам частиц порошков и гранул путём просеивания через сита. Ситовой анализ осуществляют просеиванием проб материала через набор стандартных сит, размер отверстий которых последовательно уменьшается сверху вниз, в результате чего материал разделяется на фракции.

Определение фракционного состава порошков и гранул используется в технологии лекарственных средств на различных стадиях производства.

Механическое просеивание является наиболее подходящим в том случае, когда большинство частиц имеет размер более 75 мкм. Лёгкий вес более мелких частиц обуславливает недостаточную силу для преодоления поверхностных сил когезии и адгезии во время просеивания, что вызывает слипание частиц между собой и с ситом, приводящее к задержке на сите частиц, которые должны были бы пройти сквозь сито. Для таких веществ более подходящим может быть воздушно-струйное или ультразвуковое просеивание. Просеивание может быть использовано для некоторых порошков или гранул с медианным размером частиц менее 75 мкм в том случае, если метод может быть валидирован.

Использование ситового анализа имеет ряд ограничений:

- для проведения анализа требуется, как правило, достаточно большое количество порошка (обычно – не менее 25 г);

- метод неприменим к несыпучим или забивающим отверстия сита порошкообразным материалам (маслянистым, липким, склонным к комкованию и др.);

- если исследуемые образцы гигроскопичны или, напротив, легко теряют влагу, при проведении анализа следует контролировать влажность и температуру окружающей среды.

Ситовой анализ может использоваться для определения степени измельчения порошков (ОФС «Измельчённость порошков»), которую выражают посредством описательных терминов, учитывая номера сит, соответствующих требованиям ОФС «Оборудование: фильтры и сита».

Классификация порошков по степени измельчения

Крупный порошок. Не менее 95 % массы порошка проходит через сито номер 1400 и не более 40 % массы порошка проходит через сито номер 355.

Среднемелкий порошок. Не менее 95 % массы порошка проходит через сито номер 355 и не более 40 % массы порошка проходит через сито номер 180.

Мелкий порошок. Не менее 95 % массы порошка проходит через сито номер 180 и не более 40 % массы порошка проходит через сито номер 125.

Очень мелкий порошок. Не менее 95 % массы порошка проходит через сито номер 125 и не более 40 % массы порошка проходит через сито номер 90.

Когда такие термины не могут быть использованы, измельчённость порошка выражают в процентах массы порошка (м/м), проходящего через сито определённого размера.

Если указан один номер сита и нет других указаний в фармакопейной статье, не менее 97 % массы порошка должно проходить через указанное сито.

Для определения степени измельчения порошков методом просеивания собирают сита, порошок просеивают и каждую фракцию взвешивают.

Степень измельчения порошка, соответствующую номинальному размеру отверстий сита, указывают в фармакопейной статье в скобках после наименования вещества.

Измельчённость порошка лекарственного растительного сырья (препарата) определяют в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Если нет особых указаний в фармакопейной статье, то определение гранулометрического состава проводят методом механического встряхивания (методом сухого просеивания). В случае, если трудно определить конечную точку процесса просеивания (т. е. вещество не легко проходит сквозь сита) или когда в конце необходимо использовать сито с более мелкими отверстиями (менее 75 мкм), должно быть предусмотрено использование альтернативного метода.

Просеивание должно проводиться в условиях, исключающих увеличение или уменьшение влаги в испытуемом образце. Для предотвращения поглощения или потери влаги испытуемым образцом необходимо постоянно контролировать относительную влажность окружающей среды, в которой проводят просеивание. При отсутствии признаков несоответствия условий просеивание обычно проводят в условиях относительной влажности окружающей среды. Любые специальные условия, которые применимы для определённого вещества, должны быть указаны в фармакопейной статье.

Принципы аналитического просеивания. Аналитические сита изготавливают из тканной проволочной сетки, плетение которой обеспечивает квадратную форму отверстий и которая запаяна в основание открытого цилиндрического контейнера. Сита устанавливают одно на другое по увеличению размера отверстий, и помещают испытуемый порошок на верхнее сито. Набор сит, установленных друг на друга, встряхивают в течение определённого периода времени, затем с необходимой точностью определяют массу порошка, оставшегося на каждом сите. В результате получают процентное содержание фракций порошка в соответствии с диапазоном размера отверстий используемых сит.

Такой способ просеивания в основном используется для оценки гранулометрического состава однокомпонентных фармацевтических порошков, не менее 80 % частиц которых имеют размер более 75 мкм. Параметр размера, используемый при определении гранулометрического состава методом аналитического просеивания, представляет собой длину стороны минимального квадратного отверстия, через которое может пройти частица.

###### Аналитические сита

Аналитические сита, используемые для фармакопейного анализа должны соответствовать текущему изданию ISO 3310-1 «Cита лабораторные. Технические требования и испытания. Часть 1. Сита из проволочной ткани» (см. табл. 1). Если нет указаний в фармакопейной статье, необходимо использовать ISO сита с основными размерами отверстий, указанными в табл. 1, в которой представлены рекомендованные размеры сит в определённых регионах. Допускается использовать наборы сит с другими размерами отверстий по ГОСТ.

Таблица 1. Классификация типовых размеров сит
Номинальный размер отверстия по ISO 3310-1 | США сито № | Рекомендованные USP сита (мкм) | Европейское сито № | Японское сито №
--- | --- | --- | --- | ---
Основной размер | Дополнительный размер
R 20/3 | R 20 | R 40/3
11,20 мм | 11,20 мм | 11,20 мм |  |  | 11200 |
| 10,00 мм |  |  |  |  |
|  | 9,50 мм |  |  |  |
| 9,00 мм |  |  |  |  |
8,00 мм | 8,00 мм | 8,00 мм |  |  |  |
| 7,10 мм |  |  |  |  |
|  | 6,70 мм |  |  |  |
| 6,30 мм |  |  |  |  |
5,60 мм | 5,60 мм | 5,60 мм |  |  | 5600 | 3,5
| 5,00 мм |  |  |  |  |
|  | 4,75 мм |  |  |  | 4
| 4,50 мм |  |  |  |  |
4,00 мм | 4,00 мм | 4,00 мм | 5 | 4000 | 4000 | 4,7
| 3,55 мм |  |  |  |  |
|  | 3,35 мм | 6 |  |  | 5,5
| 3,15 мм |  |  |  |  |
2,80 мм | 2,80 мм | 2,80 мм | 7 | 2800 | 2800 | 6,5
| 2,50 мм |  |  |  |  |
|  | 2,36 мм | 8 |  |  | 7,5
| 2,24 мм |  |  |  |  |
2,00 мм | 2,00 мм | 2,00 мм | 10 | 2000 | 2000 | 8,6
| 1,80 мм |  |  |  |  |
|  | 1,70 мм | 12 |  |  | 10
| 1,60 мм |  |  |  |  |
1,40 мм | 1,40 мм | 1,40 мм | 14 | 1400 | 1400 | 12
| 1,25 мм |  |  |  |  |
|  | 1,18 мм | 16 |  |  | 14
| 1,12 мм |  |  |  |  |
1,00 мм | 1,00 мм | 1,00 мм | 18 | 1000 | 1000 | 16
| 900 мкм |  |  |  |  |
|  | 850 мкм | 20 |  |  | 18
| 800 мкм |  |  |  |  |
710 мкм | 710 мкм | 710 мкм | 25 | 710 | 710 | 22
| 630 мкм |  |  |  |  |
|  | 600 мкм | 30 |  |  | 26
| 560 мкм |  |  |  |  |
500 мкм | 500 мкм | 500 мкм | 35 | 500 | 500 | 30
| 450 мкм |  |  |  |  |
|  | 425 мкм | 40 |  |  | 36
| 400 мкм |  |  |  |  |
355 мкм | 355 мкм | 355 мкм | 45 | 355 | 355 | 42
| 315 мкм |  |  |  |  |
|  | 300 мкм | 50 |  |  | 50
| 280 мкм |  |  |  |  |
250 мкм | 250 мкм | 250 мкм | 60 | 250 | 250 | 60
| 224 мкм |  |  |  |  |
|  | 212 мкм | 70 |  |  | 70
| 200 мкм |  |  |  |  |
180 мкм | 180 мкм | 180 мкм | 80 | 180 | 180 | 83
| 160 мкм |  |  |  |  |
|  | 150 мкм | 100 |  |  | 100
| 140 мкм |  |  |  |  |
125 мкм | 125 мкм | 125 мкм | 120 | 125 | 125 | 119
| 112 мкм |  |  |  |  |
|  | 106 мкм | 140 |  |  | 140
| 100 мкм |  |  |  |  |
90 мкм | 90 мкм | 90 мкм | 170 | 90 | 90 | 166
| 80 мкм |  |  |  |  |
|  | 75 мкм | 200 |  |  | 200
| 71 мкм |  |  |  |  |
63 мкм | 63 мкм | 63 мкм | 230 | 63 | 63 | 235
| 56 мкм |  |  |  |  |
|  | 53 мкм | 270 |  |  | 282
| 50 мкм |  |  |  |  |
45 мкм | 45 мкм | 45 мкм | 325 | 45 | 45 | 330
| 40 мкм |  |  |  |  |
|  | 38 мкм |  |  | 38 | 391

Выбранные сита должны включать весь диапазон размеров частиц, присутствующий в испытуемом образце. Рекомендуется использовать набор сит, имеющих прогрессию площадей отверстий. Набор сит должен быть собран так, чтобы сито с самым крупным размером отверстий было верхним, а с самым мелким размером отверстий нижним. Размер отверстий аналитических сит выражается в микрометрах или миллиметрах.

Для изготовления аналитических сит используют проволоку из нержавеющей стали, или (менее предпочтительно) из латуни или другого подходящего химически неактивного металла.

Калибровка и повторная калибровка аналитических сит производится в соответствии с текущим изданием ISO 3310-1. Перед использованием сита тщательно проверяются на значительные искривления и изломы, в особенности соединения ситового каркаса. Сита могут быть откалиброваны оптически для определения среднего размера отверстия и различий в размерах отверстий. В качестве альтернативного метода для оценки эффективности просеивания аналитических сит в диапазоне размеров 212–850 мкм могут быть использованы доступные стандартные стеклянные сферы (шарики, гранулы). Если нет указаний в фармакопейной статье, определение проводят при контролируемой комнатной температуре и относительной влажности окружающей среды.

Очистка аналитических сит. Для очистки аналитических сит используют струю воздуха или жидкости только низкого давления. Если некоторые отверстия остались забиты частицами испытуемого вещества, то можно осторожно очистить их мягкой щёткой.

Испытуемый образец. Если в фармакопейной статье не указана масса навески для конкретного вещества, то для испытания на аналитических ситах диаметром 200 мм берут навеску 25–100 г испытуемого образца, в зависимости от его насыпной плотности. Для сит диаметром 76 мм количество испытуемого образца составляет около 1/7 от того количества, которое может быть размещено на аналитическом сите диаметром 200 мм. Массу навески для конкретного образца определяют просеиванием точных навесок разной массы, например, 25 г, 50 г и 100 г в течение определённого периода времени, используя механический встряхиватель.

Примечание – Если результаты испытания сходны для навесок образца 25 г и 50 г, но для навески 100 г получен более низкий процент просеивания через самое мелкое сито, то навеска 100 г слишком велика для данного образца.

Если в наличии только 10–25 г испытуемого образца, то могут быть использованы аналитические сита с теми же характеристиками отверстий, но меньшего диаметра, однако конечная точка просеивания должна быть переопределена. Допускается определение с навеской меньшей массы (т. е. менее 5 г). Для образцов с низкой насыпной плотностью, а также для образцов, состоящих большей частью из частиц высокой изодиаметрической формы, массы навески менее 5 г для сит диметром 200 мм могут быть необходимы для предотвращения чрезмерного прилипания образца к ситу. При проведении валидации определённого метода аналитического просеивания необходимо учитывать возможность закупоривания отверстий сита частицами испытуемого образца.

Если испытуемый образец имеет склонность к поглощению или потере значительных количеств воды при изменении влажности, то испытание нужно проводить в условиях соответствующего контроля окружающей среды. Если известно, что испытуемый образец может быть источником электростатического заряда, то необходимо тщательное наблюдение за тем, чтобы это не повлияло на результат анализа. Для минимизации этого эффекта к испытуемому образцу может быть добавлен антистатический реагент, такой как кремния диоксид коллоидный и/или алюминия оксид в количестве 0,5 % (м/м). Если вышеуказанные эффекты не могут быть устранены, то необходимо выбрать альтернативную методику определения размера частиц.

Способы встряхивания. Для проведения ситового анализа могут быть использованы различные виды коммерчески доступных сит и приспособлений для встряхивания порошков. Однако различные способы встряхивания могут давать разные результаты ситового анализа и установления конечных точек, так как на каждую частицу действуют силы различного типа и величины. Используют методы, включающие механическое или электромагнитное встряхивание, которые могут вызвать вертикальное колебание или горизонтальное круговое движение частиц, постукивание или комбинацию постукивания и горизонтального кругового движения частиц. Может использоваться метод встряхивания с применением воздушной струи. Так как изменение условий встряхивания может привести к отличающимся и некорректным результатам при ситовом анализе и установлении конечных точек просеивания, в результатах должен быть указан используемый метод встряхивания, а также параметры встряхивания (в случае их возможного варьирования).

Определение конечной точки просеивания. Ситовой анализ считается завершённым, когда масса остатка на любом аналитическом сите не отличается более чем на 5 % или на 0,1 г (10 % при просеивании на сите диаметром 76 мм) от массы остатка на этом сите при предыдущем взвешивании. Если масса остатка на сите составляет менее чем 5 % от общей массы навески, то конечная точка увеличивается таким образом, чтобы разность масс на одном и том же сите при двух повторных взвешиваниях составляла не более 20 %.

Если масса остатка на одном сите составляет более 50 % от общей массы навески, при отсутствии указаний в фармакопейной статье, испытание необходимо повторить, но с добавлением к набору сит дополнительного сита, промежуточного по размеру отверстий между ситом с избыточной массой и следующим (с большим размером отверстий) ситом ISO серии из оригинального набора.

###### Методы просеивания

Механическое встряхивание (метод сухого просеивания). Взвешивают каждое аналитическое сито с точностью до 0,1 г. Помещают предварительно взвешенный с необходимой точностью испытуемый образец на верхнее сито (с наибольшим размером отверстий), накрывают крышкой. Встряхивают набор сит в течение 5 мин, затем аккуратно, без потери образца, вынимают каждое сито из набора. Взвешивают каждое сито и определяют массу остатка на сите после просеивания. Аналогичным образом определяют массу остатка на собирательном/собирающем поддоне. Ещё раз собирают набор сит и встряхивают в течение 5 мин. Снимают каждое сито и взвешивают, как описано ранее. Повторяют процедуру до достижения конечной точки просеивания (см. «Определение конечной точки просеивания» в разделе «Аналитические сита»). По завершении анализа сравнивают массы фракций испытуемого образца. Суммарная потеря массы не должна превышать 5 % от массы навески испытуемого образца.

Повторяют просеивание с новым образцом, проводя однократное просеивание в течение времени, равного суммарному времени просеивания при предыдущем определении. Подтверждают, что это время просеивания соответствует требованиям по определению конечной точки просеивания. После валидации конечной точки просеивания для определённого вещества в последующих испытаниях может быть использовано однократное просеивание в течение фиксированного времени, обеспечивающего равномерное распределение частиц в зависимости от их размера.

При наличии признаков задержки на каком-либо из сит агрегатов частиц в большей степени, чем отдельных частиц, получение хорошей воспроизводимости результатов при использовании метода механического сухого просеивания маловероятно. Анализ должен проводиться с использованием другого метода определения размера частиц.

Методы с использованием воздуха (воздушно-струйное просеивание и ультразвуковое просеивание). Для просеивания могут быть использованы различные типы оборудования с применением потока воздуха. Воздушно-струйное просеивание представляет собой систему с использованием однократного просеивания. При определении используется методика, аналогичная указанной в методе сухого просеивания, но вместо обычного механизма встряхивания используется стандартизованная воздушная струя. Метод отличается проведением последовательных анализов на индивидуальных ситах, начиная с сита с наименьшим размером отверстий, для распределения частиц по размерам. Воздушно-струйное просеивание, как правило, включает в себя использование сит с меньшим размером отверстий, чем в ситах, используемых при обычном сухом просеивании. Этот метод наиболее применим, если необходимо выделить только фракции частиц наибольшего или наименьшего размера.

В методе ультразвукового просеивания также используется набор сит. Испытуемый образец вносится в вертикальную воздушную колебательную колонку, которая поднимает образец, затем в течение определённого количества импульсов в минуту возвращает его через ситовые отверстия. При использовании ультразвукового просеивания масса навески образца может быть уменьшена до 5 г.

Методы воздушно-струйного и ультразвукового просеивания используются для порошков или гранул в тех случаях, когда механическое просеивание не может дать достоверного результата.

Эти методы в наибольшей степени зависят от специфического распределения частиц порошка в воздушном потоке, поэтому основные трудности методов могут возникнуть при использовании сит с малым размером отверстий (т. е. менее 75 мкм), если частицы имеют тенденцию к слипанию, а также, если образец может быть источником электростатического заряда. В вышеуказанных случаях особенно важно определение конечной точки просеивания, а также подтверждение того, что наиболее крупные частицы являются отдельными частицами, а не агрегатами.

###### Интерпретация результатов

В дополнение к массам остатков на отдельных ситах и поддоне необработанные данные должны включать массу навески испытуемого образца, общее время просеивания, точную методику просеивания и заданные значения всех изменяемых параметров.

Для удобства можно перевести полученные данные в суммарное (кумулятивное) распределение масс, а при необходимости выразить распределение функцией прохождения суммарной массы частиц меньше установленного предела. Диапазон используемых сит должен включать сито, через которое проходит весь испытуемый образец. Если есть признаки того, что остаток образца, задержавшийся на сите, представляет собой агрегаты частиц, образовавшиеся в процессе просеивания, то испытание считается недействительным.

### 1.5. Лекарственное растительное сырьё, лекарственные средства растительного происхождения и методы их анализа

#### 1.5.1. Морфологические группы лекарственного растительного сырья

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.1.0002 Травы (Herbae)

Взамен ОФС.1.5.1.0002.15

Травами в фармацевтической практике называют лекарственное растительное сырьё, представляющее собой высушенные или свежие надземные части травянистых растений. Траву собирают во время цветения, иногда во время бутонизации или плодоношения. Сырьё состоит из стеблей с листьями, цветками, отчасти с бутонами и незрелыми плодами. У одних растений собирают только верхушки, у других − всю надземную часть, у третьих − надземную часть вместе с корнями.

###### Подлинность

Внешние признаки

Цельное и измельчённое сырьё. Подготовка объекта к анализу: при необходимости сухую траву размачивают, погружая её на несколько минут в горячую воду или помещая во влажную камеру. Если трава измельчённая, то для размачивания выбирают куски стебля, листья, цветки, плоды. Свежую траву исследуют без предварительной обработки.

Подготовленную к анализу траву раскладывают на стеклянной пластинке или другой гладкой поверхности, тщательно расправляя стебель, листья, цветки, плоды. Рассматривают при дневном свете невооружённым глазом, с помощью лупы (10×) и т.п.

При определении внешних признаков травы обращают внимание на строение стеблей, листьев (ОФС «Листья»), цветков (ОФС «Цветки»), при необходимости плодов (ОФС «Плоды»).

В строении стебля диагностическое значение имеют:

1. Характер ветвления (простой или ветвистый).

2. Форму поперечного сечения (цилиндрическая, ребристая, четырёхгранная и т.д.).

3. Характер поверхности (гладкая, ребристая, бороздчатая и др.).

4. Опушение (обилие и расположение волосков).

5. Листорасположение (очередное, супротивное, мутовчатое).

6. Размеры (длина стебля и диаметр у основания) определяют с помощью измерительной линейки или миллиметровой бумаги.

Для измельчённой травы определяют:

1. Цвет.

2. Запах определяют при растирании.

Порошок. Помещают на гладкую, белую поверхность и при дневном свете рассматривают невооружённым глазом, с помощью лупы (10×) и т.п. Отмечают цвет смеси частиц (общей массы и отдельных вкраплений), форму частиц, происхождение частиц и их характер (если определяется). При рассмотрении под лупой обращают внимание на опушённость кусочков, характер поверхности (гладкая, шероховатая, покрытая желёзками и др.). Определяют запах (аналогично цельной и измельчённой траве). Определяют размер частиц порошка аналогично измельчённой траве.

Микроскопические признаки

Цельное и измельчённое сырьё. Готовят микропрепараты в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения» из цельных листьев или кусочков пластинки листа с краем и жилкой, кусочков листа от основания и верхушки, кусочков черешка (если лист имеет черешок), чашечки или её кусочков, венчика, кусочков цветоножки (при необходимости), кусочков стеблей (при необходимости); кусочков плодов (если есть и при необходимости, рассматривая их с поверхности).

Обращают внимание на следующие анатомо-диагностические признаки:

1. Анатомо-диагностические признаки листьев (ОФС «Листья»). Для цельной травы обычно бывает достаточно определить анатомо-диагностические признаки листьев. Для измельчённой травы проводят анализ анатомо-диагностических признаков всех морфологических частей травы.

2. Анатомо-диагностические признаки цветков (ОФС «Цветки»).

3. Редко определяют анатомо-диагностические признаки плодов (ОФС «Плоды»).

4. Анатомо-диагностические признаки стебля.

В анатомо-диагностических целях в стебле необходимо рассматривать:

1. Характер кутикулы_ (ровная, морщинистая, в том числе продольно-морщинистая, поперечно-морщинистая, лучисто-морщинистая; штриховатая, гребневидная и др.), степень выраженности изменения ровности кутикулы.

2. Форму клеток эпидермиса (изодиаметрическая − округлая, квадратная, многоугольная; полигональная − прямоугольная, овальная, ромбовидная, веретеновидная, комбинированная и др.).

3. Извилистость стенок клеток эпидермиса (прямые, извилистые, волнистые, зигзагообразные, зубчатые и др.), степень извилистости.

4. Утолщённость стенок клеток эпидермиса (наличие четковидной утолщённости).

5. Наличие устьиц и их форма (круглая, овальная), размеры.

6. Тип устьичного аппарата (ОФС «Листья»).

7. Погружённость устьиц в эпидермис (выступающие над эпидермисом, погружённые в эпидермис).

8. Наличие, характеристика и размеры волосков (простые и головчатые, одно- и многоклеточные, одно-, дву- и многорядные, пучковые, разветвлённые и неразветвлённые), особенности их мест присоединения (наличие розетки), утолщённость стенок (толстые, тонкие стенки), характер кутикулы (ровная, бородавчатая, штриховатая).

9. Наличие и структура желёзок, их размеры.

10. Наличие секреторных каналов, млечников, вместилищ.

11. Наличие кристаллов, их структура (одиночные кристаллы кальция оксалата различной формы, друзы, рафиды, стиллоиды, цистолиты, кристаллический песок и др.), локализация (в паренхиме под эпидермисом, в паренхиме в виде кристаллоносной обкладки вокруг проводящих пучков и групп волокон, редко в клетках эпидермиса), размеры.

12. Наличие включений: слизи, инулина, каротиноидов и др. (в паренхиме под эпидермисом, редко в клетках эпидермиса).

13. Наличие аэренхимы.

Описание основных диагностических признаков должно сопровождаться иллюстративным материалом (микрофотографиями и др.) и быть приведено в фармакопейной статье.

Рассмотрение поперечных срезов стеблей возможно в исключительных случаях (при возникновении спорных вопросов или других причин).

Примечание – Чаще встречаются стебли с клетками эпидермиса прямоугольной формы, с ровными стенками, и более редко, чем на листе, встречающимися устьицами. Остальные анатомо-диагностические признаки чаще всего совпадают с таковыми листа, но могут иметь иные размеры и частоту встречаемости.

Порошок. Готовят микропрепараты порошка травы в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения». В микропрепаратах порошка рассматривают фрагменты листьев (ОФС «Листья»), цветков (ОФС «Цветки») и плодов (ОФС «Плоды»), стеблей.

Среди фрагментов стебля будут иметь значение фрагменты эпидермиса, фрагменты более глубинных структур с млечниками, вместилищами, кристаллами и другими характерными анатомо-диагностическими признаками.

В порошке с размером частиц более 0,5 мм в рассматриваемых фрагментах можно различить практически все признаки, характерные для цельного и измельчённого сырья. Некоторые элементы эпидермиса могут встречаться в виде обломков волосков, желёзок; из-за разрушения клеток могут встречаться отдельные кристаллы, друзы и т.д.

В порошке лекарственного растительного сырья с размером частиц менее 0,5 мм анатомо-диагностические признаки, характерные для сырья, представлены отдельными волосками, желёзками, кристаллами, другими структурами и частями структур клеток клеток и т.п.

Описание основных анатомо-диагностических признаков должно сопровождаться иллюстративным материалом (микрофотографиями и др.) и быть приведено в фармакопейной статье.

Люминесцентная микроскопия. Рассматривают сухой порошок травы, реже поперечный срез листа, приготовленный из цельного или измельчённого сырья после предварительного размягчения во влажной камере. Наблюдают собственную (первичную) флуоресценцию сырья в ультрафиолетовом свете. Наиболее яркое свечение имеют кутикула, клеточные оболочки механических тканей, элементов ксилемы, волосков, содержимое отдельных клеток или тканей мезофилла, эпидермиса, в зависимости от их химического состава. Листья некоторых растений характеризуются ярким и специфическим свечением содержимого желёзок, секреторных каналов и вместилищ в зависимости от химического состава содержимого. Яркая флуоресценция характерна для фрагментов проводящих пучков стебля (сосуды ксилемы и механические волокна); хорошо видна пыльца; фрагменты эндодермы семени обычно имеют яркое голубое свечение (жирное масло).

Основные группы биологически активных веществ

1. Качественные микрохимические и гистохимические реакции. Проводят в микропрепаратах листьев (на поперечных срезах, срезах с поверхности, в порошке), чаще всего с целью обнаружения толстой кутикулы, эфирного масла (может быть представлено в виде капель или заключено во вместилища и/или канальцы), а также слизей, в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

2. Качественные реакции. Проводят с извлечением из травы по методикам, указанным в фармакопейной статье.

3. Хроматография. Проводят анализ извлечений из травы с помощью различных хроматографических методик с использованием соответствующих фармакопейных стандартных образцов, маркёров (активных или аналитических). Для испытаний используют водное или водно-спиртовое извлечение из травы, а также извлечения, полученные с помощью других подходящих растворителей, если это указано в фармакопейной статье. Чаще всего в извлечениях из травы определяют компоненты эфирных масел, флавоноиды и др.

4. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Анализ проводят в извлечении из травы при наличии соответствующих требований в фармакопейной статье. Допускается ссылка на раздел «Количественное определение». Приводится описание условий регистрации спектра с указанием длин волн, при которых должны наблюдаться максимум(ы) и минимум(ы) поглощения.

###### Испытания

Влажность. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Зола общая. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Зола общая» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Измельчённость. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Допустимые примеси. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Тяжёлые металлы и мышьяк. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. В разделе приводят валидированную(ые) методику(и) определения индивидуального вещества или суммы биологически активных веществ в пересчёте на индивидуальное вещество с использованием соответствующих фармакопейных стандартных образцов, маркёров (активных или аналитических). В качестве приемлемого метода могут быть использованы химические методы (титриметрия), физико-химические методы (различные виды хроматографии, спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях и др.).

Если компоненты с установленной терапевтической активностью (активные маркёры) известны, то именно их содержание в траве подлежит определению (если возможно).

Косвенным методом количественного определения является определение экстрактивных веществ, извлекаемых определённым для конкретного вида сырья экстрагентом, в соответствии с ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

###### Хранение

В соответствии c ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Примечание – Требования ОФС «Травы» распространяются на морфологическую группу побеги.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.1.0003 Листья (Folia)

Взамен ОФС.1.5.1.0003.15

Листьями в фармацевтической практике называют лекарственное растительное сырьё, представляющее собой высушенные или свежие листья или отдельные листочки сложного листа. Листья собирают обычно вполне развитые, с черешком или без черешка.

###### Идентификация

Внешние признаки

Цельное и измельчённое сырьё. Подготовка сырья к анализу:

- мелкие и кожистые листья исследуют сухими;

- крупные, тонкие листья (как правило, смятые) размягчают во влажной камере или путём погружения на несколько минут в горячую воду;

- свежие листья исследуют без предварительной подготовки.

Подготовленные к анализу листья раскладывают на стеклянной пластинке и рассматривают при дневном свете невооружённым глазом, с помощью лупы (10×) и т.п.

Диагностическое значение имеют:

1. Строение (простое, сложное − непарноперистосложное, парноперистосложное, дваждыпарноперистосложное, дваждынепарно-перистосложное, пальчатосложное, тройчатосложное и др.) и размеры листовой пластинки.

2. Форма листовой пластинки (округлая, эллиптическая, широкоэллиптическая, узкоэллиптическая, продолговатая, яйцевидная, широкояйцевидная, узкояйцевидная, обратнояйцевидная, округлообратно-яйцевидная, широко-обратнояйцевидная, ланцетная, сердцевидная, стреловидная, копьевидная, серповидная, игольчатая и др.).

3. Глубина рассечения листовой пластинки (пальчатолопастные, перистолопастные, тройчатолопастные, пальчатораздельные, перисто-раздельные, тройчатораздельные, пальчаторассеченные, перисто-рассеченные, тройчаторассеченные).

4. Характер основания (округлое, широкоокруглое, узкоокруглое, клиновидное, узкоклиновидное, ширококлиновидное, усечённое, выемчатое, сердцевидное и др.) и верхушки (острая, округлая, туповатая, выемчатая, оттянутая и др.) листовой пластинки.

5. Характер края листа (цельный, пильчатый, двоякопильчатый, зубчатый, городчатый, выемчатый).

6. Наличие черешка, его размеры.

7. Характер поверхности черешка (гладкая, ребристая, бороздчатая и др.).

8. Наличие влагалища, прилистников (свободные, сросшиеся), характеристика, размеры.

9. Опушение листа и черешка (обилие и расположение волосков).

10. Жилкование листа (у однодольных − параллельное, дуговидное; у двудольных − перистое, пальчатое; у папоротников и примитивных семенных растений (например, растения сем. гинкговые (Ginkgoaceae) − дихотомическое).

11. Наличие эфирномасличных желёзок и других образований на поверхности листа или наличие вместилищ в мезофилле.

12. Размеры определяют с помощью измерительной линейки или миллиметровой бумаги. Измеряют длину и ширину пластинки листа, длину и диаметр черешка.

Для измельчённых листьев определяют:

1. Цвет определяют с обеих сторон листа.

2. Запах определяют при растирании.

Порошок. Помещают на гладкую, белую поверхность и при дневном свете рассматривают невооружённым глазом, с помощью лупы (10×) и т.п. Отмечают цвет смеси частиц (общей массы и отдельных вкраплений), форму частиц, происхождение частиц и их характер (если определяется). При рассмотрении под лупой обращают внимание на опушённость фрагментов, характер поверхности (гладкая, шероховатая, покрытая желёзками и др.). Определяют запах (аналогично цельным и измельчённым листьям). Определяют размер частиц порошка аналогично измельчённым листьям.

Микроскопические признаки

Цельное и измельчённое сырьё. Готовят микропрепараты в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения» из цельных листьев или кусочков пластинки листа с краем и жилкой, кусочков листа от основания и верхушки, кусочков черешка (если лист имеет черешок), рассматривая их с поверхности. При анализе толстых и кожистых листьев (например, эвкалипт прутовидный, толокнянка обыкновенная, брусника обыкновенная) готовят поперечные срезы и «давленые» микропрепараты. При необходимости также готовят поперечные срезы черешков.

Обращают внимание на следующие анатомо-диагностические признаки:

1. Характер кутикулы верхнего и нижнего эпидермиса (ровная; морщинистая, в том числе продольно-морщинистая, поперечно-морщинистая, лучисто-морщинистая; штриховатая; гребневидная и др.).

2. Форма клеток верхнего и нижнего эпидермиса (изодиаметрическая − округлая, квадратная, многоугольная; полигональная − прямоугольная, овальная, ромбовидная, веретеновидная, комбинированная и др.); извилистость стенок клеток верхнего и нижнего эпидермиса (прямые, извилистые, волнистые, зигзагообразные, зубчатые и др.), степень извилистости; утолщённость стенок клеток верхнего и нижнего эпидермиса (равномерная, чётковидная).

3. Наличие устьиц, их форма (круглая, овальная), размеры, частота встречаемости на верхнем и нижнем эпидермисе.

4. Тип устьичного аппарата:

   - аномоцитный тип (беспорядочно-клеточный) – аномоцитный (или ранункулоидный) — устьица окружены неопределённым числом клеток, не отличающихся по форме и размерам от остальных клеток эпидермиса;

   - диацитный тип (двуклеточный) – устьица окружены двумя околоустьичными клетками, смежные стенки которых перпендикулярны устьичной щели;

   - парацитный тип (параллельноклеточный) – с каждой стороны устьица, вдоль его продольной оси расположены по одной или более околоустьичных клеток;

   - анизоцитный тип (неравноклеточный) – устьица окружены тремя околоустьичными клетками, из которых одна значительно меньше двух других;

   - тетрацитный тип – устьице окружено 4 симметрично расположенными околоустьичными клетками: две клетки параллельны устьичной щели, а две другие примыкают к полюсам замыкающих клеток;

   - гексацитный тип − устьице окружено 6 околоустьичными клетками: две пары расположены симметрично вдоль замыкающих клеток, а две клетки занимают полярные положения;

   - энциклоцитный тип – побочные клетки образуют узкое кольцо вокруг замыкающих клеток;

   - актиноцитный тип – характеризуется несколькими побочными клетками, радиально расходящимися от замыкающих клеток.

5. Наличие водяных устьиц (отличаются крупным размером и расположены обычно на верхушке листа или зубчика, над гидатодой).

6. Погружённость устьиц в эпидермис (выступающие над эпидермисом, погружённые в эпидермис).

7. Наличие и строение волосков на верхнем и нижнем эпидермисе (простые и головчатые, одно- и многоклеточные, одно-, дву- и многорядные, пучковые, разветвлённые и неразветвлённые), их размеры, особенности мест их присоединения (наличие розетки), утолщённость стенок (толстые, тонкие стенки), характер кутикулы (ровная, бородавчатая, штриховатая).

8. Наличие желёзок на верхнем и нижнем эпидермисе, их строение, размеры.

9. Наличие секреторных каналов, млечников, вместилищ (в паренхиме под эпидермисом).

10. Наличие и строение кристаллических включений (одиночные кристаллы различной формы, друзы, рафиды, стилоиды, цистолиты, кристаллический песок и др.), их локализация (в паренхиме под эпидермисом, в паренхиме в виде кристаллоносной обкладки вокруг проводящих пучков и групп волокон, редко в клетках эпидермиса), размеры.

11. Наличие включений запасных питательных веществ: слизи, инулина и др. (в паренхиме под эпидермисом, реже в клетках эпидермиса).

12. Структура мезофилла (форма клеток, однородность, расположение, наличие аэренхимы).

13. Строение листа (дорсовентральный, изолатеральный).

14. Строение проводящей системы листа (форма главной жилки; количество, форма, расположение проводящих пучков в жилке; структура проводящих пучков − расположение флоэмы и ксилемы, наличие механических тканей).

15. Наличие механической ткани (колленхима, склеренхимные волокна, каменистые клетки, лубяные волокна и др.).

16. Строение черешка: на поперечном срезе черешка листа указывают его форму в средней, базальной и апикальной части (округлая, треугольная, желобчатая, серповидная, слегка крыловидная, широко-крылатая), число и расположение проводящих пучков, наличие механической ткани (колленхимы, склеренхимы).

Описание основных анатомо-диагностических признаков должно сопровождаться иллюстративным материалом (микрофотографиями и др.) и быть приведено в фармакопейной статье.

Порошок. Готовят микропрепараты порошка в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения». В микропрепаратах порошка рассматривают фрагменты листьев с главной и второстепенными жилками, фрагменты листьев с краем листовой пластинки, фрагменты верхушки листа, фрагменты в поперечном сечении, фрагменты черешка. В изучаемых частицах порошка отмечают все проявляющиеся анатомо-диагностические признаки, перечисленные для цельных и измельчённых листьев. Обращают внимание на то, что ряд элементов (волоски, желёзки, кристаллы, друзы и пр.) может быть отделён от частиц листа; в порошке наблюдается много фрагментов тканей и отдельных элементов: волоски и их фрагменты, желёзки, отдельные кристаллы кальция оксалата и фрагменты кристаллоносной обкладки, механические клетки − волокна, склереиды, фрагменты секреторных каналов, вместилищ, млечников и др.

В порошке с размером частиц свыше 0,5 мм в рассматриваемых фрагментах можно различить практически все признаки, характерные для цельного и измельчённого сырья. Некоторые элементы эпидермиса могут быть в виде обломков волосков, желёзок и др.; из-за разрушения клеток могут встречаться отдельные кристаллы, друзы и др.

Ещё более затруднено выделение анатомо-диагностических признаков в порошке лекарственного растительного сырья с размером частиц менее 0,5 мм. Здесь также могут быть фрагменты различных участков эпидермиса листа, однако по возможности больше внимания следует уделить единичным элементам: отдельным волоскам, желёзкам, кристаллам, особенностям клеток и пр.

В порошке лекарственного растительного сырья с размером частиц менее 0,5 мм обращают внимание на особенности строения клеток и наличие единичных элементов эпидермиса и мезофилла листа – отдельных волосков, желёзок, их фрагментов, кристаллов и др.

Описание основных анатомо-диагностических признаков должно сопровождаться иллюстративным материалом (микрофотографиями и др.) и быть приведено в фармакопейной статье.

Люминесцентная микроскопия. Рассматривают сухой порошок, реже поперечный срез листа, приготовленный из цельного или измельчённого сырья после предварительного размягчения во влажной камере. Наблюдается собственная (первичная) флуоресценция сырья в ультрафиолетовом свете. Наиболее яркое свечение имеют кутикула, клеточные оболочки механических тканей, элементов ксилемы, волосков, содержимое отдельных клеток или тканей мезофилла, эпидермиса листа в зависимости от их химического состава. Листья некоторых растений характеризуются ярким и специфическим свечением содержимого желёзок, секреторных каналов и вместилищ в зависимости от химического состава содержимого.

Основные группы биологически активных веществ

1. Качественные микрохимические и гистохимические реакции. Проводят в микропрепаратах листьев (на поперечных срезах, препаратах с поверхности, в порошке), чаще всего с целью обнаружения толстой кутикулы, эфирного масла (может быть представлено в виде капель или заключено во вместилища и/или канальцы), а также слизей в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

2. Качественные реакции. Проводят с извлечением из листьев по методикам, приведённым в фармакопейной статье.

3. Хроматография. Проводят анализ извлечений из листьев с помощью различных хроматографических методик с использованием соответствующих фармакопейных стандартных образцов, маркёров (активных или аналитических). Для испытаний используют водное или водно-спиртовое извлечение из листьев, а также извлечения, полученные с помощью других подходящих растворителей, если это указано в фармакопейной статье. Чаще всего в извлечениях из листьев определяют компоненты эфирных масел, флавоноиды и др.

4. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Анализ проводят в извлечении из листьев при наличии соответствующих указаний в фармакопейной статье. Допускается ссылка на раздел «Количественное определение». Приводится описание условий регистрации спектра с указанием длин волн, при которых должны наблюдаться максимум(ы), иногда минимум(ы), поглощения.

###### Испытания

Влажность. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Зола общая. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Зола общая» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Измельчённость. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Допустимые примеси. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Тяжёлые металлы и мышьяк. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. В разделе приводят валидированную(ые) методику(и) определения индивидуального вещества или суммы биологически активных веществ в пересчёте на индивидуальное вещество с использованием соответствующих фармакопейных стандартных образцов, маркёров (активных или аналитических). В качестве приемлемого метода могут быть использованы химические методы (титриметрия), физико-химические методы (различные виды хроматографии, спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях и др.).

Если компоненты с установленной терапевтической активностью (активные маркёры) известны, то именно их содержание в листьях подлежит определению (если возможно).

Косвенным методом количественного определения является определение экстрактивных веществ, извлекаемых определённым для конкретного вида сырья экстрагентом, в соответствии с ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

###### Хранение

В соответствии c ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.1.0004 Цветки (Flores)

Взамен ОФС.1.5.1.0004.15

Цветками в фармацевтической практике называют лекарственное растительное сырьё, представляющее собой высушенные отдельные цветки (с цветоножками или без них) или соцветия, а также их части или свежие цветки. Цветки собирают обычно в начале цветения, некоторые − в фазу бутонизации (Alabastra).

###### Идентификация

Внешние признаки

Цельное и измельчённое сырьё. Цветки помещают на гладкую, белую поверхность и при дневном свете определяют тип соцветия (корзинка, щиток, зонтик, кисть, метёлка и др.). Отмечают целостность соцветий, присутствие отдельных бутонов и цветков (для корзинок отмечают особенности краевых и трубчатых цветков), присутствие плодов (зрелых, незрелых). Если сырьё представлено одиночными цветками, а не соцветиями, анализ внешних признаков начинают с характеристики цветка.

После размачивания цветков в течение 1 мин в горячей воде их помещают на стеклянную пластинку/предметное стекло и под лупой разделяют препаровальными иглами на отдельные части, рассматривают невооружённым глазом, с помощью лупы (10×) и т.п. строение цветка (или соцветия).

Диагностическое значение имеют:

1. Строение околоцветника: простой (чашечковидный, венчиковидный) или двойной.

2. Строение чашечки и венчика (правильные − актиноморфные, или неправильные − зигоморфные).

3. Число и форма чашелистиков (или зубчиков чашечки).

4. Число и форма лепестков (или зубчиков венчика).

5. Число и строение тычинок.

6. Число пестиков.

7. Особенности строения завязи и цветоложа.

8. Опушённость всех частей соцветия (цветка) и цветоножки.

9. Характер поверхности цветоножки (гладкая, ребристая, бороздчатая и др.).

10. Размеры_ (диаметр цветка (соцветия), длина цветоножки) определяют с помощью измерительной линейки или миллиметровой бумаги на размоченном материале.

Для измельчённого сырья определяют:

1. Цвет.

2. Запах определяют при растирании.

Порошок. Помещают на гладкую, белую поверхность и при дневном свете рассматривают невооружённым глазом, с помощью лупы (10×) и т.п. Отмечают цвет смеси частиц (общей массы и отдельных вкраплений), форму частиц, происхождение частиц и их характер (если определяется). При рассмотрении под лупой обращают внимание на опушённость кусочков, характер поверхности (гладкая, шероховатая, покрытая желёзками и др.). Определяют запах (аналогично цельным и измельчённым цветкам). Определяют размер частиц порошка аналогично измельчённому сырью.

Микроскопические признаки

Цельное и измельчённое сырьё. Готовят микропрепараты в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения» из отдельных частей соцветия (цветки, листочки обёртки корзинки) или частей цветка (лепестки, чашелистики), рассматривая их с поверхности. При необходимости готовят и изучают микропрепараты цветоножек по методике приготовления и анализа микропрепаратов стеблей (ОФС «Трава»).

Обращают внимание на следующие анатомо-диагностические признаки (лепестков, чашелистиков, листочков обёртки, эпидермиса цветоножек):

1. Характер кутикулы верхнего и нижнего эпидермиса.

2. Форма клеток верхнего и нижнего эпидермиса.

3. Извилистость стенок клеток верхнего и нижнего эпидермиса.

4. Утолщённость стенок клеток верхнего и нижнего эпидермиса.

5. Наличие устьиц, их форма, размеры на верхнем и нижнем эпидермисе.

6. Тип устьичного аппарата; количество околоустьичных клеток.

7. Погружённость устьиц в эпидермис.

8. Наличие и характеристика волосков на верхнем и нижнем эпидермисе, их размеры, особенности мест их присоединения.

9. Наличие и структура желёзок на верхнем и нижнем эпидермисе, их размеры.

10. Наличие секреторных каналов, млечников, вместилищ (в паренхиме под эпидермисом).

11. Наличие и структура кристаллов кальция оксалата (в паренхиме под эпидермисом, редко в клетках эпидермиса), их размеры.

12. Наличие включений − слизь, инулин, каротиноиды и др. (в паренхиме под эпидермисом, редко в клетках эпидермиса).

Мезофилл анализируемых элементов цветка обычно однороден, проводящая система чаще представлена спиральными трахеидами, механическая ткань отсутствует (диагностическое значение может иметь строение механических элементов листочков обёртки).

Помимо перечисленного, изучают пыльцу по следующим признакам:

1. Форма пыльцы: округлая, овальная, округло-угловатая (округло-трёхгранная, округло-четырёхгранная, округло-пятигранная, округло-шестигранная, округло-многогранная, сочетание округло-угловатой формы), комбинация нескольких типов.

2. Характер поверхности пыльцы (гладкая, шиповатая, шероховатая).

3. Характер апертур (утончённых мест) экзины (бороздные пыльцевые зёрна: трёхбороздные, четырёхбороздные, пятибороздные, шестибороздные; поровые пыльцевые зерна: трёхпоровые, четырёхпоровые).

4. Размеры пыльцы.

Описание основных анатомо-диагностических признаков должно сопровождаться иллюстративным материалом (микрофотографиями и др.) и быть приведено в фармакопейной статье.

Порошок. Готовят микропрепараты порошка цветков в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

В микропрепаратах порошка по возможности рассматривают цельные или почти цельные лепестки, чашелистики, листочки обёртки корзинки, а также их фрагменты. Отмечают все проявляющиеся анатомо-диагностические признаки, перечисленные для цельных и измельчённых цветков. Обращают внимание на то, что ряд признаков (волоски, желёзки, кристаллы, друзы и пр.) могут быть отделены от частиц цветка. Особое внимание обращают на структуру пыльцы.

В порошке с размером частиц более 0,5 мм в рассматриваемых фрагментах можно различить практически все анатомо-диагностические признаки, характерные для цельного и измельчённого сырья. Некоторые элементы эпидермиса могут встречаться в виде обломков волосков, желёзок, из-за разрушения клеток могут встречаться отдельные кристаллы, друзы и др.

В порошке лекарственного растительного сырья с размером частиц менее 0,5 мм анатомо-диагностические признаки, характерные для сырья, представлены отдельными волосками, желёзками, кристаллами, пыльцевыми зёрнами, особенностями строения клеток и др.

Описание основных анатомо-диагностических признаков должно сопровождаться иллюстративным материалом (микрофотографиями и др.) и быть приведено в фармакопейной статье.

Люминесцентная микроскопия. Рассматривают сухой порошок или отдельные части соцветия, цветка; наблюдают собственную (первичную) флуоресценцию сырья в ультрафиолетовом свете. Наиболее характерное свечение имеют кутикула, различные трихомы (волоски, желёзки), механические элементы, пыльцевые зёрна, включения клеток, в зависимости от их химического состава.

Основные группы биологически активных веществ

1. Качественные микрохимические и гистохимические реакции. Проводят в микропрепаратах цветков чаще всего с целью обнаружения эфирного масла (может быть представлено в виде капель или заключено во вместилища и/или канальцы), а также слизи. Методики проведения испытаний описаны в ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

2. Качественные реакции. Проводят с извлечением из цветков по методикам, указанным в фармакопейной статье.

3. Хроматография. Проводят анализ извлечений с помощью различных хроматографических методик с использованием соответствующих фармакопейных стандартных образцов, маркёров (активных или аналитических). Для испытаний используют водное или водно-спиртовое извлечение из цветков, а также извлечения, полученные с помощью других подходящих растворителей, если это указано в фармакопейной статье. Чаще всего в извлечениях из цветков определяют компоненты эфирных масел, флавоноиды и др.

4. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Анализ проводят с извлечением из цветков при наличии соответствующих требований в фармакопейной статье. Допускается ссылка на раздел «Количественное определение». Приводится описание условий регистрации спектра с указанием длин волн, при которых должны наблюдаться максимум(ы), иногда минимум(ы) поглощения.

###### Испытания

Влажность. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Зола общая. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Зола общая» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Измельчённость. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Допустимые примеси. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Тяжёлые металлы и мышьяк. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. В разделе приводят валидированную(ые) методику(и) определения индивидуального вещества или суммы биологически активных веществ в пересчёте на индивидуальное вещество с использованием соответствующих фармакопейных стандартных образцов, маркёров (активных или аналитических). В качестве приемлемого метода могут быть использованы химические методы (титриметрия), физико-химические методы (различные виды хроматографии, спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях и др.).

Если компоненты с установленной терапевтической активностью (активные маркёры) известны, то именно их содержание в цветках подлежит определению (если возможно).

Косвенным методом количественного определения является определение экстрактивных веществ, извлекаемых определённым для конкретного вида сырья экстрагентом, в соответствии с ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

###### Хранение

В соответствии c ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.1.0005 Кора (Cortex)

Взамен ОФС.1.5.1.0005.15

Корой в фармацевтической практике называют наружную часть стволов, ветвей и корней деревьев и кустарников, расположенную к периферии от камбия. Кору, как правило, заготавливают весной в период сокодвижения и высушивают.

###### Идентификация

Внешние признаки

Цельное и измельчённое сырьё. Сухую кору помещают на гладкую, белую поверхность и при дневном свете рассматривают невооружённым глазом, с помощью лупы (10×) и т.п.

Диагностическое значение имеют:

1. Форма кусков коры (трубчатая, желобоватая, плоская и др.).

2. Особенности наружной и внутренней поверхности. Наружная поверхность коры с бурой или серой пробкой, блестящая или матовая, гладкая или морщинистая (слегка морщинистая), с продольными или поперечными морщинками, иногда с трещинками. Кора ветвей и стволов имеет округлые или продолговатые, поперечно или продольно вытянутые чечевички, иногда на ней могут быть листовые лишайники (кустистые лишайники при заготовке должны удаляться). Внутренняя поверхность коры обычно более светлая, гладкая или ребристая с многочисленными или редкими продольными тонкими выдающимися рёбрышками.

3. Характер излома. Поперечный излом может быть неровный: занозистый, волокнистый или зернистый.

4. Размеры коры (длина, толщина) определяют с помощью измерительной линейки или миллиметровой бумаги.

Для измельчённого сырья определяют:

1. Цвет определяют с наружной и внутренней поверхности коры.

2. Запах определяют при соскобе внутренней поверхности на свежем изломе сухой коры и при увлажнении.

Порошок. Помещают на гладкую, белую поверхность и при дневном свете рассматривают невооружённым глазом с помощью лупы (10×) и т.п. Отмечают цвет смеси частиц (общей массы и отдельных вкраплений), форму частиц, происхождение частиц и их характер (если определяется). При рассмотрении под лупой и т.п. обращают внимание на характер поверхности (гладкая, шероховатая, покрытая морщинками, трещинками, чечевичками и др.). Определяют запах (аналогично цельной и измельчённой коре). Определяют размер частиц порошка аналогично измельчённому сырью.

Микроскопические признаки

Цельное и измельчённое сырьё. Готовят поперечные и продольные срезы коры, «давленые» микропрепараты в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Обращают внимание на следующие анатомо-диагностические признаки:

1. Форма клеток пробки, её толщина, окраска (обычно клетки имеют прямоугольную сплющенную форму с прямыми стенками, расположены ровными рядами, возможны и другие варианты).

2. Соотношение толщины первичной и вторичной коры.

3. Ширина сердцевинных лучей.

4. Наличие секреторных каналов, млечников, вместилищ.

5. Наличие включений: клетки с эфирным маслом, клетки с флобафенами и др.

6. Наличие и структура кристаллов, их размеры. Одиночные кристаллы кальция оксалата часто встречаются в отдельных клетках паренхимы или в клетках паренхимы, окружающих лубяные волокна, образуя кристаллоносную обкладку.

7. Характер проводящей системы.

8. Наличие механической ткани (важный анатомо-диагностический признак). Отмечают наличие колленхимы; расположение, строение лубяных волокон и каменистых клеток (других элементов механической ткани); механические элементы могут располагаться одиночно и группами, рассеянно и поясами. Стенки лубяных волокон и каменистых клеток обычно сильно утолщены и лигнифицированы.

Все указанные признаки обнаруживаются в цельной и измельчённой коре (в поперечных, продольных срезах и давленых препаратах). В измельчённой коре указанные признаки чаще видны в продольном сечении. Наибольшее диагностическое значение имеют строение и расположение механических элементов, различные включения (особенно кристаллы), млечники, секреторные каналы, вместилища. В микроскопии измельчённой коры отмечают также особенности фрагментов пробки.

Мелкие крахмальные зёрна, встречающиеся в коре, диагностического значения не имеют.

Порошок. Готовят микропрепараты порошка в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

В микропрепаратах порошка в изучаемых частицах выделяют все анатомо-диагностические признаки, перечисленные для цельной и измельчённой коры. Важнейшими диагностическими признаками в порошке коры являются: механические элементы (лубяные волокна, каменистые клетки), их расположение (одиночно или группами), включения кальция оксалата (одиночные кристаллы, друзы), млечники, вместилища, секреторные каналы. В микроскопии порошка отмечают также особенности фрагментов пробки, клетки которой обычно многоугольной формы (вид с поверхности). В клетках паренхимы могут быть крахмальные зёрна, кристаллы кальция оксалата, иногда эфирное масло.

Описание основных анатомо-диагностических признаков должно сопровождаться иллюстративным материалом (микрофотографиями и др.) и быть приведено в фармакопейной статье.

Люминесцентная микроскопия. Рассматривают поперечные срезы коры или порошок (соскоб) в ультрафиолетовом свете. Ярким свечением обладают одревесневшие элементы (лубяные волокна, каменистые клетки); флуоресценция клеток паренхимы зависит от химического состава коры.

###### Основные группы биологически активных веществ

1. Качественные микрохимические и гистохимические реакции. Проводят на поперечных срезах коры или с порошком коры. При этом чаще всего проводят реакции на наличие действующих веществ, в некоторых случаях на сопутствующие вещества, в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

2. Качественные реакции. Проводят на сухом сырье, с соскобом, порошком или с извлечением из коры по методикам, указанным в фармакопейной статье.

3. Хроматография. Проводят анализ извлечений из коры с помощью различных хроматографических методик с использованием соответствующих фармакопейных стандартных образцов, маркёров (активных или аналитических). Для испытаний используют водное или водно-спиртовое извлечение из коры, а также извлечения, полученные с помощью других подходящих растворителей, если это указано в фармакопейной статье.

4. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Анализ проводят с извлечением из коры при наличии соответствующих требований в фармакопейной статье. Допускается ссылка на раздел «Количественное определение». Приводится описание условий снятия спектра с указанием длин волн, при которых должны наблюдаться максимум(ы), иногда минимум(ы), поглощения.

###### Испытания

Влажность. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Зола общая. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Зола общая» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте» и требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Измельчённость. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» и требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Допустимые примеси. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» и требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Тяжёлые металлы и мышьяк. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. В разделе приводят валидированную(ые) методику(и) определения индивидуального вещества или суммы биологически активных веществ в пересчёте на индивидуальное вещество с использованием соответствующих фармакопейных стандартных образцов, маркёров (активных или аналитических). В качестве приемлемого метода могут быть использованы химические методы (титриметрия), физико-химические методы (различные виды хроматографии, спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях и др.).

Если компоненты с установленной терапевтической активностью (активные маркёры) известны, то именно их содержание в коре подлежит определению (если возможно).

Косвенным методом количественного определения является определение экстрактивных веществ, извлекаемых определённым для конкретного вида сырья экстрагентом, в соответствии с ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

###### Хранение

В соответствии c ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.1.0006 Корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы (Radices, rhizomata, bulbi, tubera, bulbotubera)

Взамен ОФС.1.5.1.0006.15

В фармацевтической практике сырьё представлено корнями − radices, корневищами − rhizomata, корневищами и корнями – rhizomata et radices, корневищами с корнями − rhizomata cum radicibus, луковицами − bulbi, клубнями − tubera и клубнелуковицами − bulbotubera.

Используют высушенные, реже свежие подземные органы многолетних растений, собранные чаще осенью или ранней весной, очищенные или отмытые от земли, освобождённые от отмерших частей, остатков стеблей и листьев. Крупные подземные органы перед сушкой разрезают на части (продольно или поперёк).

###### Идентификация

Внешние признаки

Цельное и измельчённое сырьё. Сухие подземные органы помещают на гладкую, белую поверхность и при дневном свете рассматривают невооружённым глазом, с помощью лупы (10×) и т.п. Для измельчённых подземных органов рассматривают и характеризуют кусочки сырья.

Диагностическое значение имеют:

1. Форма кусков корней, корневищ, луковиц, клубней, клубнелуковиц. Корни цилиндрические, реже конические, простые или разветвлённые. Корневища простые или разветвлённые, многоглавые, цилиндрические или овальные, чётковидные, внутри сплошные или полые, прямые, изогнутые или перекрученные и т. д. Луковицы и клубнелуковицы шаровидные, яйцевидные, продолговатые, сплющенные и т. п. Клубни шаровидные, овальные, иногда сплющенные, веретеновидные и т.п.

2. Особенности наружной поверхности. Поверхность неочищенных подземных органов может быть ровной или (чаще) морщинистой. Для корней обычно характерна продольно-морщинистая поверхность, для корневищ − продольная и поперечная морщинистость часто с характерными по форме и окраске следами удалённых корней, отмерших листьев и стеблей. Клубни чаще всего имеют морщинистую поверхность. Луковицы имеют обычно несколько наружных сухих чешуй, под которыми располагаются более или менее утолщённые сочные чешуи, сидящие на укороченном стебле (донце). Клубнелуковицы имеют только наружные сухие чешуи.

3. Характер излома. Излом может быть ровный, зернистый, пористый, занозистый или волокнистый.

4. Расположение проводящих элементов рассматривают невооружённым глазом, под лупой и т.п. на изломе или поперечном разрезе крупных корней, корневищ и клубней. Корни могут иметь первичное и вторичное строение. При первичном строении в центре виден центральный осевой цилиндр, при вторичном строении в центре находится древесина. Корневища могут иметь пучковое или беспучковое строение. У корневищ однодольных растений проводящие пучки разбросаны без особого порядка в коре и в центральном цилиндре. У двудольных растений в центре широкая сердцевина, при пучковом строении проводящие пучки расположены в виде кольца ближе к сердцевине. Корневища беспучкового строения отличаются от корней наличием в центре сердцевины (у некоторых видов она разрушена − корневище полое). Клубни чаще всего имеют пучковое строение.

5. Размеры (длина, диаметр, толщина) определяют с помощью измерительной линейки или миллиметровой бумаги. Диаметр и толщину измеряют в наиболее широком месте.

Для измельчённого сырья определяют:

1. Цвет с поверхности и на свежем изломе.

2. Запах при разламывании или растирании кусочка анализируемого подземного органа.

Порошок. Порошок помещают на гладкую, белую поверхность и при дневном свете рассматривают невооружённым глазом, с помощью лупы (10×) и т.п. Отмечают цвет смеси частиц (общей массы и отдельных вкраплений), форму частиц, происхождение частиц и их характер (если определяется). При рассмотрении под лупой обращают внимание на характер поверхности частиц покровной ткани (гладкая, шероховатая, покрытая морщинками, трещинками и др.), а также наличие сухих и сочных чешуй (если имеются). Определяют запах (аналогично цельным и измельчённым подземным органам). Определяют размер частиц порошка аналогично измельчённому сырью.

Микроскопические признаки

Цельное и измельчённое сырьё. Готовят поперечные и продольные срезы, «давленые» микропрепараты в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения». При необходимости готовят препараты в соответствующих реактивах для выявления различных структур или веществ.

Обращают внимание на следующие анатомо-диагностические признаки:

Для корней определяют первичное или вторичное строение.

- А. Для первичного строения корня обычно характеризуют:

  1. Покровную ткань − эпиблему или ризодерму (стенки клеток обычно тонкие, иногда утолщены с внешней стороны, могут подвергаться одревеснению или опробковению).

  2. Широкую первичную кору.

  3. Эндодерму (у однодольных эндодерма имеет подковообразное утолщение стенок клеток – представлена одним рядом клеток с утолщёнными внутренними и радиальными стенками).

  4. Эндодерму (у однодольных эндодерма имеет подковообразное утолщение стенок клеток – представлена одним рядом клеток с утолщёнными внутренними и радиальными стенками).

  5. Проводящую систему − закрытый сосудисто-волокнистый радиальный пучок в центре корня.

- Б. Для вторичного строения корня обычно характеризуют:

  1. Покровную ткань – перидерму (состоит из более или менее толстого слоя пробки, феллогена и феллодермы).

  2. Кору – состоит из клеток паренхимы, проводящих элементов луба (флоэмы), нередко присутствуют механические элементы: лубяные волокна, каменистые клетки.

  3. Камбий.

  4. Древесину (беспучковое строение) – лучистое (часто) и нелучистое строение.

Для корневищ определяют строение, характерное для однодольных (пучковое) или двудольных растений (пучковое или беспучковое).

- А. Для пучкового строения корневищ однодольных растений обычно характеризуют:

  1. Покровную ткань – эпидермис (стенки клеток могут подвергаться одревеснению или опробковению, часто эпидермис разрушен, при этом наружные слои паренхимы коры опробковевшие).

  2. Кору, эндодерму (с подковообразным утолщением стенок клеток).

  3. Закрытые сосудисто-волокнистые пучки (расположены беспорядочно в коре и центральном цилиндре (камбий отсутствует), коллатеральные, концентрические).

- Б. Для пучкового строения корневищ двудольных растений обычно характеризуют:

  1. Покровную ткань – перидерма;

  2. Открытые коллатеральные и биколлатеральные сосудисто-волокнистые пучки (расположены по кругу (имеется камбий)).

  3. Центральную часть (широкая сердцевина, состоящая из паренхимных клеток).

- В. Для беспучкового строения корневищ двудольных растений обычно характеризуют:

  1. Покровную ткань – перидерму (состоит из более или менее толстого слоя пробки, феллогена и феллодермы).

  2. Кору – состоит из паренхимных клеток.

  3. Камбий.

  4. Центральную часть (сердцевина, состоящая из паренхимных клеток, у некоторых видов она частично разрушена).

Для клубней и клубнелуковиц характерными анатомо-диагностическими признаками являются:

1. Паренхима (преобладающая ткань) с запасным питательным веществом, в которой расположены проводящие пучки.

2. Форма клеток пробки, её толщина, окраска (обычно клетки имеют прямоугольную сплющенную форму с прямыми стенками, расположены ровными рядами, возможны и другие варианты), при первичном строении корня отмечают особенности строения эпидермы или ризодермы (наличие корневых волосков).

3. Наличие эндодермы. Эндодерма – самый внутренний слой коры, представленный основной тканью, образующей влагалище вокруг участка, занятого проводящими тканями, и характеризующейся присутствием пояска Каспари на антиклинальных стенках клеток; позже клетки могут иметь вторичные оболочки (подковообразное утолщение).

4. Выраженность камбия (может отсутствовать, быть плохо выраженным, выраженным участками и хорошо выраженным (указывают толщину)).

5. Лучистость строения древесины (указывают ширину сердцевинных лучей) или отсутствие сердцевинных лучей.

6. Характер проводящей системы (структура и тип проводящих пучков или беспучковое строение; тип утолщённости стенок сосудов и трахеид).

Анатомо-диагностические признаки, которые могут встречаться во всех подземных органах:

1. Секреторные каналы, млечники, вместилища.

2. Кристаллы, друзы (отмечают их структуру и размеры). Одиночные кристаллы часто встречаются в отдельных клетках паренхимы или в клетках паренхимы, окружающих лубяные волокна, образуя кристаллоносную обкладку.

3. Включения (клетки с эфирным маслом, клетки со слизью, клетки с жирным маслом и др.).

4. Запасные питательные вещества: инулин, крахмал (указывают размер, форму, структуру крахмальных зёрен).

5. Волоски и сосочковидные выросты, (отмечают их размеры (обычно встречаются на поверхности корней первичного строения и корневищ).

6. Аэренхима.

7. Механическая ткань (расположение, строение, лубяных и древесинных волокон, каменистых клеток (размеры) и других элементов механической ткани).

Все указанные признаки могут быть обнаружены в цельных корнях, корневищах, луковицах, клубнях, клубнелуковицах (в поперечных, продольных срезах и «давленых» препаратах). В измельчённых подземных органах наибольшее значение имеют механические и проводящие элементы (их структура, расположение) в рассматриваемых фрагментах тканей; различные включения (в том числе кристаллы кальция оксалата) и запасные питательные вещества (крахмал, инулин); млечники, эфиромасличные вместилища, секреторные каналы (их фрагменты). В микроскопии измельчённых подземных органов отмечают также особенности фрагментов пробки (эпидермы, ризодермы).

Описание основных анатомо-диагностических признаков должно сопровождаться иллюстративным материалом (микрофотографиями и др.) и быть приведено в фармакопейной статье.

Порошок. Готовят микропрепараты порошка в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

В микропрепаратах порошка отмечают наличие анатомо-диагностических признаков, перечисленных для цельных и измельчённых корней, корневищ, луковиц, клубней, клубнелуковиц (в поперечных, продольных срезах и «давленых» препаратах). В порошке наибольшее значение имеют фрагменты покровных, механических и проводящих тканей (их структура, расположение); различные включения (в том числе кристаллы) и запасные питательные вещества (крахмал, инулин); фрагменты млечников, эфиромасличных вместилищ, секреторных каналов. Отмечают также особенности фрагментов пробки (эпиблемы, ризодермы).

Описание основных анатомо-диагностических признаков должно сопровождаться иллюстративным материалом (микрофотографиями и др.) и быть приведено в фармакопейной статье.

Люминесцентная микроскопия. Рассматривают поперечный срез (или распил), сухой порошок или соскоб подземных органов и отмечают собственную (первичную) флуоресценцию в ультрафиолетовом свете сырья. Наиболее яркое свечение имеют одревесневшие элементы (сосуды, трахеиды, лубяные и древесные волокна; каменистые клетки), содержимое секреторных образований (вместилищ, каналов, млечников). Флуоресценция клеток паренхимы зависит от химического состава.

Основные группы биологически активных веществ

1. Качественные микрохимические и гистохимические реакции. Проводят на поперечных срезах или с порошком подземных органов чаще всего на наличие действующих веществ, запасных питательных веществ в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

2. Качественные реакции. Проводят на сухом сырье, с порошком или соскобом, но чаще с извлечением из подземных органов, в соответствии с методиками, указанными в фармакопейной статье.

3. Хроматография. Проводят анализ извлечений из подземных органов с помощью различных хроматографических методик с использованием соответствующих фармакопейных стандартных образцов, маркёров (активных или аналитических). Для испытаний используют водное или водно-спиртовое извлечение из подземных органов, а также извлечения, полученные с помощью других подходящих растворителей, если это указано в фармакопейной статье. Чаще всего в извлечениях из подземных органов определяют антраценпроизводные, флавоноиды, дубильные вещества и др.

4. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Анализ проводят с извлечением из подземных органов при наличии соответствующих указаний в фармакопейной статье. Допускается ссылка на раздел «Количественное определение». Приводится описание условий регистрации спектра с указанием длин волн, при которых должны наблюдаться максимум(ы), иногда минимум(ы), поглощения.

###### Испытания

Влажность. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Зола общая. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Зола общая» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Измельчённость. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Допустимые примеси. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Тяжёлые металлы и мышьяк. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. В разделе приводят валидированную(ые) методику(и) определения индивидуального вещества или суммы биологически активных веществ в пересчете на индивидуальное вещество с использованием соответствующих фармакопейных стандартных образцов, маркёров (активных или аналитических). В качестве приемлемого метода могут быть использованы химические методы (титриметрия), физико-химические методы (различные виды хроматографии, спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях и др.).

Если компоненты с установленной терапевтической активностью (активные маркёры) известны, то именно их содержание в сырье подлежит определению (если возможно).

Определение дубильных веществ проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания дубильных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Косвенным методом количественного определения является определение экстрактивных веществ, извлекаемых определённым для конкретного вида сырья экстрагентом, в соответствии с ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

###### Хранение

В соответствии c ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.1.0007 Плоды (Fructus)

Взамен ОФС.1.5.1.0007.15

Плодами в фармацевтической практике называют плоды различных морфологических типов, отдельные плодики, соплодия и их части. Плоды собирают зрелыми (иногда в фазу технической зрелости) и высушивают. Некоторые сочные плоды перерабатывают свежими.

###### Идентификация

Внешние признаки

Цельное и измельчённое сырьё. Сухие плоды помещают на гладкую, белую поверхность и при дневном свете рассматривают невооружённым глазом, с помощью лупы (10×) и т.п. Сочные плоды, изменившие во время сушки форму, рассматривают сначала в сухом виде, а затем после размачивания в горячей воде или кипячения в течение 5−10 мин.

Плод состоит из сухого (сухие плоды) или сочного (сочные плоды) околоплодника (перикарпия) и заключённых в него семян. Сухие плоды часто имеют внутри полости − гнёзда, число гнёзд может быть различно. Иногда плод (шиповник) образован разросшимся гипантием, охватывающим прикрепляющиеся к нему изнутри плодики. Плодики − морфологические отдельности, формирующие апокарпный плод.

Диагностическое значение имеют (для измельчённого сырья рассматривают кусочки плодов и характеризуют их) следующие признаки:

1. Тип плода (морфологический): монокарпии, формируются из монокарпного гинецея − однолистовка, боб, сочная однокостянка, сухая однокостянка; апокарпии, формируются из апокарпного гинецея − сухая многолистовка, сочная многолистовка, земляничина или фрага, сочная многокостянка, многоорешек, цинародий; ценокарпии, формируются из ценокарпного гинецея − ягода, коробочки разного типа, стручок и стручочек, гесперидий или померанец, тыквина, яблоко, ценобий, вислоплодник, ценокарпная многокостянка или пиренарий, калачик (карцерула); псевдомонокарпии, формируются из псевдомонокарпного гинецея − орех, жёлудь, семянка, зерновка, псевдомонокарпная костянка.

2. Тип околоплодника – сухой (сухие плоды) или сочный (сочные плоды).

3. Наличие плодоножки, её длина, цвет и характер поверхности.

4. Форма и особенности строения околоплодника для сочных плодов определяют после размягчения (яйцевидная, шаровидная, продолговатая, сплюснутая, со слабо выступающими продольными рёбрами, с остатками чашечки и др.).

5. Характер поверхности околоплодника (шероховатая, морщинистая, гладкая, блестящая и др.).

6. Число гнёзд в плоде (если они имеются).

7. Наличие эфирномасличных каналов или вместилищ.

8. Размеры (длина, толщина, поперечник плода) определяют с помощью измерительной линейки или миллиметровой бумаги.

Для измельчённых плодов определяют:

1. Количество семян, их форма, размеры, характер поверхности и т.д. определяют для сочных плодов после их размягчения и отделения семян от мякоти (ОФС «Семена»).

2. Наличие плодоножки, её длина, цвет и характер поверхности (гладкая, ребристая, бороздчатая и др.).

3. Цвет околоплодника.

4. Запах определяют при разламывании или растирании.

Порошок. Рассматривают невооружённым глазом, с помощью лупы (10×) и т.п. Отмечают цвет смеси частиц (общей массы и отдельных вкраплений), форму частиц, происхождение частиц и их характер (если определяется), наличие цельных или почти цельных семян. При рассмотрении под лупой обращают внимание на опушённость фрагментов, характер поверхности (гладкая, шероховатая, покрытая желёзками, чечевичками и др.). Определяют запах (аналогично цельным и измельчённым плодам). Определяют размер частиц порошка аналогично измельчённым плодам.

Микроскопические признаки

Цельные плоды. Микропрепараты готовят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения». С диагностической целью рассматривают препараты околоплодника (эпидермис, мезокарпий, эндокарпий), гипантия (если имеется) и семян. Готовят поперечные срезы и срезы с поверхности. При необходимости готовят «давленые» микропрепараты.

Диагностическое значение имеет строение околоплодника. В околоплоднике различают три слоя: наружный − экзокарпий, средний − мезокарпий, внутренний − эндокарпий. Эндокарпий у некоторых плодов срастается с семенной кожурой, иногда эндокарпий представлен механической тканью в виде клеток с чётковидными утолщениями.

Выделяют следующие анатомо-диагностические признаки:

1. Характеристика эпидермиса: характер кутикулы (отложения на ней воска), форма клеток эпидермиса (гипантия, плода, семени); извилистость стенок клеток эпидермиса; характер утолщения стенок клеток эпидермиса.

2. Характеристика устьиц: наличие устьиц в эпидермисе и их форма, размеры; тип устьичного аппарата, количество околоустьичных клеток; погружённость устьиц в эпидермис; наличие чечевичек в эпидермисе.

3. Наличие и характер трихом (волосков), их размеры, особенности мест прикрепления.

4. Секреторные каналы, млечники, вместилища.

5. Наличие и характер клеток-идиобластов (клетки, содержащие слизи, каротиноиды, кристаллы кальция оксалата и др.), их размеры.

6. Характер паренхимы мезокарпия (форма и размер клеток, однородность, плотность расположения).

7. Наличие аэренхимы.

8. Характер проводящей системы (расположение и строение проводящих пучков).

9. Запасные питательные вещества, их размеры.

10. Наличие механической ткани (каменистые клетки, склеренхимные волокна).

11. Анатомо-диагностические признаки семян (ОФС «Семена»).

Измельчённое сырье. Готовят «давленые» микропрепараты. При необходимости и возможности готовят поперечные срезы крупных кусочков плодов и срезы с поверхности. Выделяют анатомо-диагностические признаки, перечисленные для цельных плодов, обнаруживаемые на фрагментах эпидермиса, эндокарпия, мезокарпия и семян (ОФС «Семена»). Фрагменты эпидермиса чаще проявляют признаки цельного сырья. Во фрагментах мезокарпия и эндокарпия наблюдают форму клеток паренхимы, наличие клеток-идиобластов, различных эндогенных секреторных структур (или их фрагментов), наличие кристаллов кальция оксалата, запасных веществ, механических и проводящих элементов и их фрагментов.

Описание основных анатомо-диагностических признаков должно сопровождаться иллюстративным материалом (микрофотографиями и др.) и быть приведено в фармакопейной статье.

Порошок. В порошке плодов имеют диагностическое значение фрагменты эпидермиса, эндокарпия, мезокарпия и семян (ОФС «Семена»). Фрагменты эпидермиса чаще проявляют признаки цельного сырья (форма клеток, характер кутикулы, наличие устьиц и др.). Волоски могут быть частично или полностью обломаны и встречаться отдельно от фрагментов эпидермиса. Во фрагментах мезокарпия и эндокарпия наблюдают форму клеток паренхимы, наличие идиобластов, различных эндогенных секреторных структур (или их фрагментов), наличие кристаллов, запасных веществ, механических и проводящих элементов и их фрагментов. Разные виды кристаллов, включая друзы, а также каменистые клетки и другие анатомо-диагностические признаки могут встречаться отдельно от частиц порошка.

Описание основных диагностических признаков должно сопровождаться иллюстративным материалом (микрофотографиями и др.) и быть приведено в фармакопейной статье.

Люминесцентная микроскопия. Рассматривают поперечный срез после увлажнения плода во влажной камере, реже − сухой порошок. Отмечают первичную (собственную) флуоресценцию сырья в ультрафиолетовом свете. Наблюдают структуру околоплодника, где особенно ярко выделяются механические элементы, секреторные каналы и их содержимое, проводящие пучки. Ярко флуоресцирует эндосперм семени и ткани зародыша. Флуоресценция обусловлена химическим составом тканей и для каждого вида специфична.

Основные группы биологически активных веществ

1. Качественные микрохимические и гистохимические реакции. Проводят в микропрепаратах плодов на наличие жирного и эфирного масел, крахмала, на одревесневшие элементы и др. в соответствии с требованиями ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

2. Качественные реакции. Проводят с извлечением из плодов по методикам, указанным в фармакопейной статье.

3. Хроматография. Проводят анализ извлечений с помощью различных хроматографических методик с использованием соответствующих фармакопейных стандартных образцов, маркёров (активных или аналитических). Для испытаний используют водное или водно-спиртовое извлечение из плодов, а также извлечения, полученные с помощью других подходящих растворителей, если это указано в фармакопейной статье. Чаще всего в извлечениях из плодов определяют компоненты эфирных масел, витамины, фенольные соединения и др.

4. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Анализ проводят с извлечением из плодов при наличии соответствующих требований в фармакопейной статье. Допускается ссылка на раздел «Количественное определение». Приводят описание условий регистрации спектра с указанием длин волн, при которых должны наблюдаться максимум(ы) , иногда минимум(ы) поглощения.

###### Испытания

Влажность. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Зола общая. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Зола общая» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Измельчённость. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Допустимые примеси. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Тяжёлые металлы и мышьяк. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах». Испытание не проводится при наличии протоколов анализа на лекарственное растительное сырьё/фармацевтическую субстанцию растительного происхождения тех партий/серий, из которых произведён лекарственный растительный препарат.

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» на стадии производственного процесса.

Микробиологическая чистота. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. В разделе приводят валидированную(ые) методику(и) определения индивидуального вещества или суммы биологически активных веществ в пересчёте на индивидуальное вещество с использованием соответствующих фармакопейных стандартных образцов, маркёров (активных или аналитических). В качестве приемлемого метода могут быть использованы химические методы (титриметрия), физико-химические методы (различные виды хроматографии, спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях и др.).

Если компоненты с установленной терапевтической активностью (активные маркёры) известны, то именно их содержание в плодах подлежит определению (если возможно).

Косвенным методом количественного определения является определение экстрактивных веществ, извлекаемых определённым для конкретного вида сырья экстрагентом, в соответствии с ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

###### Хранение

В соответствии c требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.1.0008 Семена (Semina)

Взамен ОФС.1.5.1.0008.15

Семенами в фармацевтической практике называют цельные семена разного типа, части семенного ядра и отдельные семядоли. Семена собирают, как правило, зрелыми, освобождают от околоплодника, а при необходимости от семенной кожуры, и высушивают.

###### Идентификация

Внешние признаки

Цельное и измельчённое сырьё. Сухие или реже размягчённые во влажной камере семена, помещают на гладкую, белую поверхность и при дневном свете рассматривают невооружённым глазом, с помощью лупы (10×) и т.п. Снаружи семена покрыты семенной кожурой (спермодермой). Под семенной кожурой располагается семенное ядро, состоящее из эндосперма или перисперма (питательных тканей), которые могут отсутствовать, и зародыша.

Диагностическое значение имеют (для измельчённого сырья рассматривают отдельные фрагменты семян и характеризуют их) следующие признаки:

1. Форма семени (сплюснутая, яйцевидная, эллиптическая, заострённая, шаровидная и др.).

2. Размеры семени (длина, толщина или ширина) определяют с помощью измерительной линейки или миллиметровой бумаги, шарообразных семян − просеиванием сквозь сито с круглыми отверстиями.

Для измельчённого сырья определяют:

1. Особенности поверхности (гладкая, шероховатая, блестящая, матовая, голая или опушённая, ребристая или ямчатая и др.).

2. Особенности семенной кожуры (деревянистая, плотная, твёрдая, хрупкая, однослойная, состоящая из двух слов, многослойная и др.).

3. Наличие и форма рубчика или семяшва и т.д. При необходимости отмечают размеры и окраску рубчика.

4. Наличие эндосперма или перисперма.

5. Характеристика зародыша (форма – прямой, дугообразный, кольцевидный, спиральный, подковообразный и др., размеры, его расположение и др.).

6. Цвет.

7. Запах определяют при разламывании или растирании.

Порошок. Помещают на гладкую, белую поверхность и при дневном свете рассматривают невооружённым глазом, с помощью лупы (10×) и т.п. Отмечают цвет смеси частиц (общей массы и отдельных вкраплений), форму частиц, происхождение частиц и их характер (если определяется), наличие цельных или почти цельных семян. При рассмотрении под лупой обращают внимание на опушённость фрагментов семян, характер их поверхности (гладкая, ямчатая, шероховатая, покрытая желёзками и др.). Определяют запах аналогично цельным и измельчённым семенам. Определяют размер частиц порошка аналогично измельчённому сырью.

Микроскопические признаки

Цельное сырьё. Микропрепараты готовят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения». Для определения подлинности готовят поперечные срезы и срезы с поверхности. При необходимости готовят продольные срезы и «давленые» микропрепараты.

В диагностике семян важное значение имеет строение семенной кожуры, которая может состоять из нескольких слоёв характерного строения, включая эпидермис семени (наружный слой кожуры). Для некоторых семян характерно наличие слизи в эпидермальных клетках кожуры, для других − пигментного слоя. Учитывают величину и форму запасающей питательной ткани − эндосперма или перисперма, форму и строение зародыша (все вместе перечисленные выше структуры составляют семенное ядро).

Диагностическое значение имеют следующие признаки:

1. Характер кутикулы (отложения воска на ней).

2. Форма клеток эпидермиса, извилистость и утолщённость их стенок.

3. Наличие устьиц, их форма, размеры.

4. Наличие и характеристика волосков, особенности прикрепления к эпидермису, строение и размеры.

5. Структура семенной кожуры:

   - однослойная;

   - двухслойная;

   - многослойная − включает одновременно или в разных сочетаниях и в разной последовательности различные слои: механический (твёрдый) (состоит из одного или нескольких рядов толстостенных склеренхимных плотно сомкнутых изодиаметрических клеток или палисадных (типа волокон), вытянутых параллельно или перпендикулярно поверхности семени), пигментный (клетки этого слоя содержат пигмент или стенки клеток пропитываются пигментом), разбухающий или слизистый (состоит из одного или нескольких рядов паренхимных клеток, которые благодаря особенностям своего химического состава могут впитывать большое количество воды и сильно разбухать), паренхимный (состоит из живых паренхимных тонкостенных клеток, которые могут содержать запасные питательные вещества, при созревании запасные питательные вещества истощаются, клетки спадаются, формируя бесструктурный слой, состоящий из деформированных сжатых элементов, утративший свой клеточный характер) и др.

6. Секреторные каналы, млечники, вместилища.

7. Запасные питательные вещества (крахмал, жирное масло, белки и др.), кристаллические включения (их строение и размеры).

8. Характер проводящей системы.

9. Наличие механической ткани (каменистые клетки, волокна и т.д.).

10. Наличие аэренхимы.

11. Характеристика зародыша − семядолей, корешка, стебелька, почечки зародыша; по форме: прямой, дугообразный, кольцевидный, спиральный, подковообразный, наподобие плоской пружины и др.

12. Характер и структура эндосперма или перисперма. Эндосперм обычно состоит из плотно сложенных клеток без межклетников с оболочкой разной толщины, более-менее изодиаметрических многоугольной формы, содержащих запасные питательные вещества, кристаллы кальция оксалата, эфирное масло. Структура перисперма и эндосперма часто бывает похожа. Существуют семена, не содержащие эндосперм (перисперм), накапливающие запасные питательные вещества в семядолях зародыша.

Измельчённое сырье. Готовят «давленые» микропрепараты в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения». При необходимости и возможности готовят поперечные срезы крупных кусочков семян и срезы с поверхности. Выделяют анатомо-диагностические признаки, перечисленные для цельных семян, обнаруживаемые на фрагментах эпидермиса, кожуры и др. Фрагменты эпидермиса чаще проявляют признаки цельного сырья. Диагностическое значение имеет строение отдельных слоёв семенной кожуры, особенно механического и пигментного. Рассматривая фрагменты кожуры семян отмечают их принадлежность к соответствующему слою. Нередко встречается сочетание двух-трёх слоёв семенной кожуры, что также является характерным признаком. Наблюдают наличие различных эндогенных секреторных структур (или их фрагментов), наличие кристаллов, запасных питательных веществ, каменистых клеток, механических и проводящих элементов и их фрагментов, содержимое клеток эндосперма и зародыша (жирное масло, слизь, кристаллы и др.).

Описание основных диагностических признаков должно сопровождаться иллюстративным материалом (микрофотографиями и др.) и быть приведено в фармакопейной статье.

Порошок. В порошке семян диагностическое значение имеют: фрагменты семенной кожуры, в которых можно установить последовательность расположения составляющих её слоев и их структуру, характер эпидермиса, наличие кристаллов, механических и проводящих элементов, эндогенных секреторных структур; а также фрагменты эндосперма с жирным маслом, кристаллами, слизью, алейроновыми зёрнами, крахмалом и отдельные зёрна крахмала, кристаллы, каменистые клетки, склеренхимные волокна, капли масла.

Описание основных анатомо-диагностических признаков должно сопровождаться иллюстративным материалом (микрофотографиями и др.) и быть приведено в фармакопейной статье.

Люминесцентная микроскопия. Рассматривают поперечный срез после размягчения семени во влажной камере. Наблюдают первичную (собственную) флуоресценцию сырья в ультрафиолетовом свете. Чётко выделяются отдельные слои семенной кожуры, ярко флуоресцируют одревесневшие ткани; флуоресценция эндосперма и зародыша зависит от химического состава содержимого клеток; жирное масло обусловливает яркую голубую флуоресценцию эндосперма и зародыша.

Основные группы биологически активных веществ

1. Качественные микрохимические и гистохимические реакции. Проводят в микропрепаратах семян на наличие жирного и эфирного масел, слизи, крахмала, одревесневших элементов и др. в соответствии с требованиями ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

2. Качественные реакции. Проводят с извлечением из семян по методикам, указанным в фармакопейной статье.

3. Хроматография. Проводят анализ извлечений с помощью различных хроматографических методик с использованием соответствующих фармакопейных стандартных образцов, маркёров (активных или аналитических). Для испытаний используют водное или водно-спиртовое извлечение из семян, а также извлечения, полученные с помощью других подходящих растворителей, если это указано в фармакопейной статье. Чаще всего в извлечениях из семян определяют компоненты эфирных масел, витамины и др.

4. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Анализ проводят с извлечением из семян при наличии соответствующих требований в фармакопейной статье. Допускается ссылка на раздел «Количественное определение». Приводится описание условий регистрации спектра с указанием длин волн, при которых должны наблюдаться максимум(ы), иногда минимум(ы) поглощения.

###### Испытания

Влажность. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Зола общая. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Зола общая» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Измельчённость. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Допустимые примеси. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» и нормативными требованиями, указанными в ФС.

Тяжёлые металлы и мышьяк. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. В разделе приводят валидированную(ые) методику(и) определения индивидуального вещества или суммы биологически активных веществ в пересчёте на индивидуальное вещество с использованием соответствующих фармакопейных стандартных образцов, маркёров (активных или аналитических) и т.п. В качестве приемлемого метода могут быть использованы химические методы (титриметрия), физико-химические методы (различные виды хроматографии, спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях и др.).

Если компоненты с установленной терапевтической активностью (активные маркёры) известны, то именно их содержание в семенах подлежит определению (если возможно).

Косвенным методом количественного определения является определение экстрактивных веществ, извлекаемых определённым для конкретного вида сырья экстрагентом, в соответствии с ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

###### Хранение

В соответствии c требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.1.0009 Почки (Gemmae)

Взамен ОФС.1.5.1.0009.15

Почками в фармацевтической практике называют лекарственное растительное сырьё, представляющее собой цельные, собранные в соответствующий период вегетации и высушенные боковые (пазушные) и верхушечные (терминальные) почки.

###### Идентификация

Внешние признаки

Цельное сырьё. Почки помещают на гладкую, белую поверхность и при дневном свете рассматривают невооружённым глазом, с помощью лупы (10×) и т.п.

Диагностическое значение имеют:

1. Тип почки (вегетативная, генеративная или вегетативно-генеративная).

2. Форма почки или её очертания (округлая, овальная, конусовидная, яйцевидная, клиновидная, шиловидная и др.).

3. Степень сомкнутости кроющих чешуй (плотно сомкнутые, рыхлые).

4. Характеристика почечных чешуй (форма, особенности строения).

5. Форма поперечного сечения почки (округлая, сплюснутая, гранистая и др.).

6. Наличие, степень и характер опушения почки (опушенная, голая).

7. Характер поверхности почки – гладкая, матовая, блестящая.

8. Смолистость почки (смолистая, несмолистая).

9. Тип почкосложения в медиальной части почки (створчатое, полуобъемлющее, объемлющее, черепитчатое).

10. Тип листосложения в медиальной части почки (сложенное, складчатое, скомканное, трубчатое, завёрнутое, отвёрнутое, улиткообразное, закрученное).

11. Особенности расположения почки на побеге (одиночные, мутовками).

12. Размер (длина, ширина) определяют с помощью линейки или миллиметровой бумаги. Длину и ширину почки измеряют в самой широкой её части.

13. Цвет.

14. Запах определяют при растирании или разламывании почки.

Микроскопические признаки

Цельное сырьё. Микропрепараты готовят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения» из цельных почек, рассматривая их с поверхности, на поперечных и продольных срезах. Поперечные срезы следует делать в средней, т.е. медиальной части почки, определяя место среза по длине почки. При необходимости выполняют поперечный срез в базальной части почки и/или продольно-радиальный срез.

Обращают внимание на следующие анатомо-диагностические признаки:

1. Эпидермис примордиев и кроющих чешуй (форма клеток, кутинизация и др.).

2. Характер опушения: наличие и особенности трихом, топография локализации трихом (по жилкам, по краю, по всей поверхности).

3. Мезофилл примордиев и кроющих чешуй (структура мезофилла, пигментация, наличие включений и др.).

4. Особенности проводящих тканей примордиев и кроющих чешуй: наличие проводящих пучков, их тип, степень армированности пучков.

5. Особенности выделительной системы примордиев и кроющих чешуй: наличие вместилищ, клеток идиобластов с включениями (друзы, монокристаллы и др.).

6. Смолистость почек (наличие смолистых веществ).

7. Типы устьичных аппаратов, их встречаемость на листовых поверхностях (примордии, чешуи) (ОФС «Листья»).

8. Погруженность устьиц в эпидермис (выступающие над поверхностью, погруженные в эпидермис).

Описание основных анатомо-диагностических признаков должно сопровождаться иллюстративным материалом (микрофотографиями и др.) .) и быть приведено в фармакопейной статье.

Основные группы биологически активных веществ

1. Качественные микрохимические и гистохимические реакции. Проводят в микропрепаратах почек (на поперечных и продольных срезах, на препаратах с поверхности кроющих чешуй) с целью обнаружения кутикулы, эфирного масла, слизей, смолистых веществ, лигнифицированных оболочек клеток в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

2. Качественные реакции. Проводят с извлечением из почек по методикам, указанным в фармакопейной статье.

3. Хроматография. Проводят анализ извлечений из почек с помощью различных хроматографических методик с использованием соответствующих фармакопейных стандартных образцов, маркёров (активных или аналитических). Для испытаний используют водное или водно-спиртовое извлечение из почек, а также извлечения, полученные с помощью других подходящих растворителей, если это указано в фармакопейной статье. Чаще всего в извлечениях из почек определяют: простые фенолы, флавоноиды, компоненты эфирного масла, сапонины и др.

4. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Анализ проводят с извлечением из почек при наличии соответствующих требований в фармакопейной статье. Допускается ссылка на раздел «Количественное определение». Приводится описание условий регистрации спектра с указанием длин волн, при которых должны наблюдаться максимум(ы), иногда минимум(ы) поглощения.

###### Испытания

Влажность. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Зола общая. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Зола общая» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Измельчённость. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Допустимые примеси. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» и нормативными требованиями, указанными в фармакопейной статье.

Тяжёлые металлы и мышьяк. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» на стадии производственного процесса.

Микробиологическая чистота. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. В разделе приводят валидированную(ые) методику(и) определения индивидуального вещества или суммы биологически активных веществ в пересчёте на индивидуальное вещество с использованием соответствующих фармакопейных стандартных образцов, маркёров (активных или аналитических) и т.п. В качестве приемлемого метода могут быть использованы химические методы (титриметрия), физико-химические методы (различные виды хроматографии, спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях и др.).

Если компоненты с установленной терапевтической активностью или активные маркёры известны, то именно их содержание в почках подлежит определению (если возможно).

Косвенным методом количественного определения является определение экстрактивных веществ, извлекаемых определенным для сырья экстрагентом, в соответствии с ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

###### Хранение

В соответствии c ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

#### 1.5.2. Масла для производства и изготовления лекарственных препаратов

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.2.0001 Эфирные масла

Взамен ОФС.1.5.2.0001.15

Эфирные масла – продукты растительного происхождения, являющиеся многокомпонентными смесями летучих душистых веществ и относящиеся к различным классам органических соединений.

В составе эфирных масел преобладающими компонентами в большинстве случаев являются терпены и их производные, которые представлены монотерпеноидами и сесквитерпеноидами, относящимися к различным классам органических соединений (насыщенные и полиненасыщенные, ациклические, моноциклические, бициклические и трициклические, а также кислородсодержащие). Встречаются также ароматические и алифатические соединения нетерпенового строения (спирты, фенолы, кислоты, альдегиды, сложные эфиры, сульфиды и др.).

Эфирные масла получают из высушенного или свежесобранного лекарственного растительного сырья дистилляцией (перегонкой) с водой или водяным паром, прессованием, экстракцией органическими растворителями или другими способами выделения.

Название исходного лекарственного растительного сырья, способы его обработки (высушенное, свежесобранное, цельное, измельчённое) и наименование производящего растения на русском и латинском языках (семейство, род, вид), должны указываться в фармакопейных статьях.

###### Свойства

Описание. Бесцветные или окрашенные прозрачные подвижные жидкости, чаще желтоватого цвета, с характерным запахом. Как правило, эфирные масла легче воды.

Под влиянием воздуха и света многие эфирные масла, постепенно окисляясь, изменяют запах и цвет (темнеют). Некоторые эфирные масла при хранении загустевают.

Определение органолептических характеристик испытуемого образца проводят в сравнении со стандартным образцом.

Цвет и прозрачность определяют, поместив 10 мл масла в цилиндр из прозрачного бесцветного стекла диаметром 2–3 см, наблюдая перпендикулярно оси цилиндра в проходящем рассеянном дневном свете. Цветность может быть регламентирована в сравнении со стандартной шкалой цветности, в соответствии с ОФС «Степень окраски жидкостей», если есть указание в фармакопейной статье.

Запах определяют, нанося около 0,1 мл эфирного масла на полоску фильтровальной бумаги длиной 12 см и шириной 5 см так, чтобы масло не смачивало края бумаги, и оценивают запах через каждые 15 мин. В течение 1 ч запах испытуемого образца должен быть одинаков с запахом стандартного образца, нанесённого аналогичным образом на фильтровальную бумагу.

Растворимость. Эфирные масла мало растворимы, очень мало растворимы или практически нерастворимы в воде; легко растворимы или растворимы в спирте различной концентрации, эфире и других органических растворителях.

Для определения растворимости эфирного масла в спирте этиловом 1 мл эфирного масла помещают в пробирку или цилиндр вместимостью 25−30 мл с притёртой пробкой. Термостатируют образец при 20±2 °С и все дальнейшие определения проводят при температуре окружающей среды. В бюретку вместимостью 25 мл помещают спирт этиловый, процентная концентрация которого должна быть указана в фармакопейной статье на конкретное эфирное масло. До момента полного растворения масла спирт прибавляют порциями по 0,1 мл при частом интенсивном перемешивании. Измеряют объём спирта, израсходованного для получения прозрачного раствора. Продолжают прибавлять спирт порциями по 0,5 мл при интенсивном перемешивании до тех пор, пока общий объём добавленного спирта не будет равным 20 мл. Если раствор становится мутным или опалесцирующим прежде, чем были добавлены 20 мл спирта, то регистрируют объём спирта в точке, в которой мутность или опалесценция появляется, а также тот объём, при котором мутность или опалесценция исчезает.

Если прозрачный раствор не образуется после добавления 20 мл спирта указанной концентрации, то испытание повторяют с использованием спирта более высокой концентрации.

В тех случаях, когда указано, что эфирное масло должно быть «растворимо в n объёмах спирта указанной концентрации», то это означает, что прозрачный в n объёмах спирта раствор остается прозрачным по сравнению с неразбавленным эфирным маслом после дальнейшего добавления спирта той же концентрации до общего объёма 20 мл.

В тех случаях, когда указано, что эфирное масло должно быть «растворимо в n объёмах спирта, указанной концентрации с образованием мутного раствора при разбавлении», то это означает, что прозрачный в n объёмах спирта раствор становится мутным в n1 объёмах спирта (когда n1 менее 20) и остается таким после дальнейшего постепенного добавления спирта той же концентрации, до общего объёма 20 мл.

В тех случаях, когда указано, что эфирное масло должно быть «растворимо в n объёмах спирта указанной концентрации с образованием мутного раствора между n1 и n2 объёмами», то это означает, что прозрачный в n объёмах спирта раствор становится мутным в n1 объёмах (когда n1 менее 20) и остается таким после дальнейшего постепенного добавления спирта той же концентрации до общего объёма спирта, равного n2 (когда n2 менее 20) и становится прозрачным.

Если указано, что эфирное масло должно быть «растворимо с опалесценцией», то это означает, что спиртовой раствор эфирного масла имеет опалесценцию, сравнимую с опалесценцией свежеприготовленного стандартного раствора мутности, полученного в тех же условиях следующим образом: смешивают 0,5 мл серебра нитрата раствора 1,7 % и 0,05 мл азотной кислоты концентрированной, прибавляют 50 мл натрия хлорида раствора 0,0012 %, перемешивают и выдерживают в течение 5 мин в защищённом от света месте.

###### Идентификация

Определение подлинности проводят методом газовой хроматографии в соответствии с ОФС «Газовая хроматография». Условия проведения анализа должны быть описаны в фармакопейной статье. Для установления подлинности эфирных масел используют либо относительное время удерживания отдельных, прежде всего преобладающих и специфичных компонентов, либо проводят сравнение хроматограммы испытуемого масла с хроматограммой стандартного образца масла, приведённой в фармакопейной статье.

С учётом лабильности многих соединений, являющихся компонентами эфирных масел, целесообразно использовать стеклянные колонки, предварительно проверенные на инертность. Проверку инертности колонок следует проводить следующим образом: на колонке при 130 °С хроматографируют стандартный образец линолилацетата. На хроматограмме должны отсутствовать дополнительные пики, свидетельствующие о разложении данного вещества.

Определение подлинности можно осуществлять также методом тонкослойной хроматографии или другими методами, приведёнными в фармакопейной статье.

###### Испытания

Температура затвердевания. Определение проводят в соответствии с ОФС «Температура затвердевания», при этом высота слоя эфирного масла в капилляре должна быть не менее 5 см, или в условиях указанных в фармакопейной статье. Значение температуры затвердевания должно соответствовать пределам, указанным в фармакопейной статье на конкретное эфирное масло.

Плотность. Определение проводят в соответствии с ОФС «Плотность». Значение плотности должно соответствовать пределам, указанным в фармакопейной статье на конкретное эфирное масло.

Удельное вращение. Определение проводят в соответствии с ОФС «Оптическое вращение». Значение величины оптического вращения должно соответствовать пределам, указанным в фармакопейной статье на конкретное эфирное масло.

Показатель преломления. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)». Значение показателя преломления должно соответствовать пределам, указанным в фармакопейной статье на конкретное эфирное масло.

###### Спирт этиловый

Качественная реакция 1. Наносят 0,1 мл эфирного масла на воду, помещённую на часовое стекло, и смотрят на чёрном фоне; не должно наблюдаться заметного помутнения вокруг капель масла.

Качественная реакция 2. В пробирку помещают 1 мл эфирного масла, закрывают рыхлым кусочком ваты, в середину которого помещён кристаллик фуксина основного, и подогревают до кипения на водяной бане; не должно наблюдаться фиолетово-розового окрашивания ваты.

Кислотное число (Ia). Определение проводят в соответствии с ОФС «Кислотное число». Для определения используют 1,5−2 г эфирного масла (точная навеска) и 5 мл спирта, предварительно нейтрализованного по фенолфталеину). Значение кислотного числа должно соответствовать пределам, указанным в фармакопейной статье на конкретное эфирное масло.

Пероксидное число (Ip). Определение проводят в соответствии с ОФС «Пероксидное число». Значение пероксидного числа должно соответствовать пределам, указанным в фармакопейной статье на конкретное эфирное масло.

###### Жирные и минеральные масла, в том числе осмолившиеся вещества

Качественная реакция 1. В пробирку вместимостью 20 мл помещают

1 мл эфирного масла, 10 мл спирта 96 % и взбалтывают; не должно наблюдаться помутнения и образования маслянистых капель.

Качественная реакция 2. Помещают 0,05 мл эфирного масла на фильтровальную бумагу; пятно масла должно испариться с бумаги полностью в течение 24 ч без оставления следа.

Остаток после выпаривания эфирного масла. Помещают 5 г (точная навеска) эфирного масла в предварительно взвешенную выпарительную чашку диаметром 7−9 см. Если остаток после выпаривания эфирного масла более 8 %, то в фармакопейной статье может быть указана меньшая навеска испытуемого образца. Чашку нагревают на водяной бане при выключенной вентиляции в течение времени, указанного в фармакопейной статье. Охлаждают в эксикаторе над кальция хлоридом безводным и взвешивают. Во время всего испытания следят за тем, чтобы уровень воды в бане находился на 15–20 мм ниже дна выпарительной чашки.

Содержание остатка после выпаривания эфирного масла (Х) в процентах вычисляют по формуле:

где m1 – масса чашки с остатком после выпаривания, г;
m0 – масса пустой чашки, г;
а – навеска испытуемого образца, г.

Вода. Смешивают 0,5 мл эфирного масла с 10 мл петролейного эфира (4); не должно наблюдаться помутнения.

Для эфирного масла, получаемого экстракцией сырья органическими растворителями, в фармакопейные статьи должны быть введены методики контроля органических растворителей и установлены нормы их остаточного содержания. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Объём содержимого упаковки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Масса (объём) содержимого упаковки».

Микробиологическая чистота. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

###### Количественное определение

В фармакопейную статью должен быть включён метод газовой хроматографии или иной, для количественного определения преобладающих или специфичных компонентов эфирного масла, и установлены нормы их содержания.

Процентные соотношения основных компонентов устанавливают методом нормализации.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.2.0002 Масла жирные растительные

Взамен ОФС.1.5.2.0002.15

Масла жирные растительные – это природные смеси, состоящие из триглицеридов (сложных эфиров глицерина с различными высшими жирными кислотами).

При комнатной температуре масла жирные растительные имеют жидкую (персиковое, миндальное, подсолнечное масло) или твёрдую (плотную) консистенцию (масло какао).

В состав жидких растительных масел могут входить ненасыщенные жирные кислоты, содержащие 1, 2, 3, 4 и более двойных связей. Чем больше непредельных кислот входит в состав триглицеридов масла жирного растительного, тем выше его склонность к высыханию. В зависимости от состава триглицеридов и химической структуры высших жирных кислот масла жирные растительные подразделяются на:

- невысыхающие, в триглицеридах которых преобладает олеиновая кислота (оливковое, персиковое, миндальное масло);

- полувысыхающие, в триглицеридах которых преобладает линолевая кислота (подсолнечное масло);

- высыхающие, в триглицеридах которых преобладает линоленовая кислота (льняное масло).

В состав триглицеридов твёрдых жирных растительных масел входят насыщенные кислоты (лауриновая, миристиновая, пальмитиновая, стеариновая, арахиновая и др.).

Масла жирные растительные, не обладающие выраженной фармакологической активностью, используют в качестве вспомогательных веществ (персиковое, миндальное, подсолнечное, оливковое).

В состав масел жирных растительных могут входить различные биологически активные вещества в виде жирных кислот семейств омега-3 или омега-6; каротиноиды, токоферолы, стерины, лигнаны или другие соединения, которые обуславливают соответствующее фармакологическое действие масла жирного (слабительное, гепатопротекторное, антисклеротическое, ранозаживляющее и т.д.).

###### Особенности технологии

Масла жирные растительного происхождения получают из плодов и семян растений методом холодного или горячего прессования. Отжатое (сырое) масло, при необходимости, очищают (рафинируют). Очистка проводится с целью удаления посторонних примесей и может включать такие стадии, как фильтрация, гидратация, щелочная очистка, дезодорация и другие.

При необходимости, в масла жирные растительные может быть добавлен подходящий антиоксидант.

В производстве лекарственных форм для парентерального применения должны использоваться только невысыхающие масла жирные растительные, получаемые методом холодного прессования и подвергнутые дополнительной очистке.

В фармакопейной статье на масло жирное растительное определённого наименования должен быть указан источник получения − наименование исходного лекарственного растительного сырья на русском и латинском языках с указанием рода, вида и семейства, способа получения, очистки или модификации жирного масла, названия введённых экзогенных антиоксидантов.

###### Свойства

Описание. Прозрачные, бесцветные или окрашенные маслянистые, подвижные, малоподвижные жидкости или твёрдые вещества, без запаха или с характерным запахом.

Твёрдые масла имеют белый или желтовато-белый цвет, жидкие масла окрашены в жёлтый, зелёный, оранжевый и другие цвета.

Масла растительные жирные, предназначенные для парентерального применения, если нет других указаний в фармакопейной статье, должны быть прозрачными при температуре до 10 ºС, без запаха или почти без запаха.

Растворимость. Практически не растворимы в воде, мало растворимы в спирте, легко – в хлороформе, петролейном эфире, гексане, хлористом метилене, четыреххлористом углероде, в уксусной кислоте ледяной. Исключение составляет клещевины обыкновенной семян масло жирное, легко растворимое в спирте, трудно – в петролейном эфире.

###### Идентификация

Для установления подлинности масел жирных растительных используют качественные реакции, физические, химические и физико-химические методы: хроматографию в тонком слое сорбента, высокоэффективную тонкослойную хроматографию, газовую хроматографию, спектрофотометрию в ультрафиолетовой и видимой областях, спектрометрию в инфракрасной области и др.

При наличии в маслах жирных растительных экзогенных антиоксидантов установление их подлинности проводят в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

###### Испытания

Температура плавления. Определение проводят в соответствии с ОФС «Температура плавления».

Температура затвердевания. Определение проводят в соответствии с ОФС «Температура затвердевания».

Плотность. Определение проводят в соответствии с ОФС «Плотность».

Показатель преломления. Определение проводят в соответствии с ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)».

pH. От 5,8 до 7,0. Определение проводят в соответствии с ОФС «Ионометрия». Навеску испытуемого образца массой от 2,0 до 5,0 г (масса навески должна быть указана в фармакопейной статье) встряхивают в течение 10 мин с 25 мл воды.

Анизидиновое число (IАН). Определение проводят в соответствии с ОФС «Анизидиновое число».

Йодное число (Ii). От 79 до 141. Определение проводят в соответствии с ОФС «Йодное число», если нет других указаний в фармакопейной статье.

Кислотное число (Ia). Не более 5,0 (не более 0,56). Определение проводят в соответствии с ОФС «Кислотное число».

Пероксидное число (Ip). Не более 10,0. Определение проводят в соответствии с ОФС «Пероксидное число».

Примечание – Определение данного показателя проводят в первую очередь после отбора пробы из серии испытуемого образца.

Число омыления (Is). От 185 до 200. Определение проводят в соответствии с ОФС «Число омыления». Для определения используют 2,0 г (точная навеска) испытуемого образца, если нет других указаний в фармакопейной статье.

Индекс окислённости. Значение величины индекса окислённости испытуемого образца не должно превышать величины, указанной в фармакопейной статье.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,04 г (точная навеска) испытуемого образца, прибавляют 15 мл гексана, перемешивают и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 232 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения. В качестве раствора сравнения используют гексан.

Индекс окислённости испытуемого образца (ИО) рассчитывают по формуле:

где А232 – оптическая плотность испытуемого раствора при длине волны 232 нм;
l – толщина слоя кюветы, см;
а – навеска испытуемого образца, г.

Неомыляемые вещества. Определяют количество веществ, содержащихся в испытуемом образце, не подвергшихся щелочному гидролизу и перешедших в липофильный растворитель из спирто-щелочной смеси.

В мерную колбу со шлифом вместимостью 250 мл помещают 3,0 г (точная навеска) испытуемого образца, прибавляют 20 мл калия гидроксида раствора спиртового 2 М и нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 1 ч. В колбу прибавляют 80 мл воды и нагревают на водяной бане в течение 30 мин. Полученная смесь должна быть прозрачной (при необходимости процесс гидролиза продолжают до получения прозрачного раствора). Смесь охлаждают до комнатной температуры и переносят в делительную воронку вместимостью 250 мл. Колбу ополаскивают 60 мл воды, которую добавляют в ту же делительную воронку. В воронку прибавляют 50 мл эфира и осторожно, не допуская образования эмульсии, взбалтывают. После разделения слоёв верхний эфирный слой переносят в делительную воронку вместимостью 200 мл и повторяют экстракцию ещё два раза порциями эфира по 25 мл. При образовании стойкой эмульсии в воронку следует добавить 0,25 мл спирта 96 %. Объединённые эфирные извлечения в делительной воронке промывают несколькими порциями воды по 40 мл до исчезновения щелочной реакции в последней порции водного слоя (индикатор – фенолфталеин). Водные извлечения отбрасывают. Эфирный экстракт фильтруют через бумажный фильтр, содержащий 8 г натрия сульфата безводного, в высушенную до постоянной массы круглодонную колбу вместимостью 250 мл со шлифом. После окончания фильтрования фильтр с натрия сульфатом промывают тремя порциями эфира по 10 мл, собирая фильтрат в ту же колбу. Эфир отгоняют на роторном испарителе при температуре водяной бани не выше 40 °С досуха. Колбу с сухим остатком сушат при комнатной температуре до удаления запаха эфира, а затем сушат по постоянной массы при температуре 100−105 ºС.

Содержание неомыляемых веществ в масле жирном растительном в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где m1 – масса пустой колбы, г;
m2 – масса колбы с остатком после высушивания, г;
а – навеска испытуемого образца, г.

Посторонние жирные масла. Определение проводят в соответствии с

ОФС «Определение посторонних масел в маслах жирных растительных методом тонкослойной хроматографии».

Определение состава жирных кислот в маслах жирных растительных и жирах. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение состава жирных кислот в маслах жирных растительных и жирах».

Летучие вещества. Не более 0,15 %. Определение проводят методом высушивания 5 г (точная навеска) жирного масла при 100 − 105 °С до постоянной массы.

Остаточные органические растворители. Определение проводят в соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Парафин, воск, смоляные и минеральные масла. В плоскодонную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 г испытуемого образца, прибавляют 10 мл калия гидроксида спиртового раствора 0,5 М и нагревают с обратным холодильником на водяной бане при периодическом перемешивании в течение 15 мин. Охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 25 мл воды и перемешивают. Полученный раствор должен быть прозрачным.

Альдегиды. В пробирку вместимостью 10 мл помещают 1,0 г (точная навеска) испытуемого образца, прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и осторожно взбалтывают в течение 1 мин. К полученной смеси прибавляют 1 мл свежеприготовленного флороглюцина раствора в эфире 0,1 % и осторожно встряхивают; не должно наблюдаться розового или красного окрашивания.

Белки. В пробирку вместимостью 10 мл помещают 1,0 г испытуемого образца, прибавляют 2 мл бензина авиационного и перемешивают. Раствор должен быть прозрачным; не должно наблюдаться образования осадка.

Вода. Не более 0,3 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 3,0 г (точная навеска).

Мыла. Не более 0,01 %.

В коническую плоскодонную колбу вместимостью 250 мл помещают 50 мл воды, прибавляют 0,5 мл фенолфталеина раствора 1 % и кипятят на плитке в течение 1 мин, при этом жидкость должна быть бесцветной. К горячему раствору прибавляют 5,0 г испытуемого образца, взбалтывают и кипятят в течение 5 мин. Колбу с эмульсией охлаждают до комнатной температуры, ставят на лист белой бумаги и прибавляют ещё 0,5 мл фенолфталеина раствора 1 %; водный слой должен быть бесцветным.

Не более 0,001 %.

В фарфоровом тигле сжигают и прокаливают 5,0 г (точная навеска) жирного масла. Остаток не должен превышать 0,01 %. К остатку в тигле прибавляют 1 мл свежекипяченой воды, растворяют при нагревании на водяной бане и добавляют 0,1 мл фенолфталеина раствора 1 %; раствор не должен быть окрашен, или появившееся слабо-розовое окрашивание должно быстро исчезнуть.

Фосфорсодержащие вещества. Не более 0,5 % в пересчёте на стеароолеолецитин или не более 0,044 % в пересчёте на фосфора (V) оксид. Определяют в соответствии с указаниями фармакопейной статьи.

Цианиды, синильная кислота. Определение остаточных количеств цианидов и синильной кислоты в маслах жирных растительных, получаемых из семян растений сем. розоцветные - Rosaceae.

В коническую колбу вместимостью 50 мл вносят 5 мл испытуемого образца и прибавляют 5 мл серной кислоты разведённой 16 %. Колбу неплотно закрывают корковой пробкой со щелью в нижней части пробки по диаметру. В щель вставляют полоску фильтровальной бумаги шириной 1 см и такой длины, чтобы нижний край полоски находился на 1 − 1,5 см над уровнем содержимого колбы. Колбу закрывают пробкой со вставленной полоской и нагревают на водяной бане в течение 15 мин. Затем колбу снимают, кончик полоски, смоченный натрия гидроксида раствором 10 %, отрезают и помещают на дно фарфоровой чашки. На кусочек бумаги в чашке наносят 0,05 мл железа(II) сульфата раствора насыщенного, чашку нагревают на водяной бане в течение 1 мин. Затем на тот же кусочек наносят 0,05 мл железа(III) хлорида раствора 5 % и 0,05 мл хлористоводородной кислоты концентрированной. На дне чашки не должно наблюдаться голубого или синего окрашивания.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3 А или 3 Б.

Микробиологическая чистота. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Стерильность. Испытание проводят в соответствии с указаниями ОФС «Стерильность».

Масса (объём) содержимого упаковки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Масса (объём) содержимого упаковки» для лекарственных форм не предназначенных для приёма внутрь и для парентерального применения.

Извлекаемый объём. Определение проводят в соответствии с ОФС «Извлекаемый объём» для лекарственных форм для приёма внутрь или ОФС «Извлекаемый объём лекарственных форм для парентерального применения».

###### Количественное определение

Если масла жирные растительные используются как фармацевтические субстанции растительного происхождения, определение подлинности и количественное определение проводят по биологически активным веществам масла, обуславливающим его фармакологическую активность.

Количественное определение биологически активных веществ в маслах жирных растительных проводят с использованием методов газовой хроматографии, высокоэффективной жидкостной хроматографии и других методов, указанных в фармакопейных статьях.

Количественное определение экзогенных антиоксидантов. Если для стабилизации жирного масла был использован дополнительно введённый экзогенный антиоксидант, то определение его содержания проводят в соответствии с методикой и нормами, указанными в фармакопейной статье.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.2.0003 Жиры и жироподобные вещества

Вводится впервые

Требования настоящей общей фармакопейной статьи распространяется на жиры и жироподобные вещества, используемые в качестве фармацевтических субстанций и вспомогательных веществ, составляющих жировые основы для лекарственных препаратов.

###### Термины и определения

Основа лекарственного препарата представляет собой вспомогательное вещество или смесь вспомогательных веществ, являющееся носителем действующего вещества, обеспечивающее требуемый объём (массу) и необходимые характеристики лекарственного препарата в определённой лекарственной форме (ОФС «Лекарственные препараты»).

Жиры (липиды) – группа органических веществ, по химической структуре являющиеся сложными эфирами глицерина и жирных кислот, обладающие гидрофобностью и способностью растворяться в малополярных органических растворителях.

Жироподобные вещества (липоиды) – группа гидрофобных природных веществ, класса липидов, включающая все категории, кроме собственно жиров, и характеризующаяся разнообразием химического состава и строения входящих в неё соединений. К жироподобным веществам относятся: воски, смолы, фосфолипиды, стерины, цереброзиды, гликолипиды и др.

Жировые основы представлены натуральными и полусинтетическими жирами. Основной частью жиров животного и растительного происхождения являются сложные эфиры трёхатомного спирта – глицерина и жирных кислот, называемые триглицеридами.

Триглицериды, жидкие при комнатной температуре, называются маслами, а пластичные или полутвёрдые – жирами. Глицериды, содержащие одну ненасыщенную кислоту в структуре, называют мононенасыщенными, а с несколькими ненасыщенными кислотами – полиненасыщенными. По способности к гидролизу жиры разделяют на омыляемые и неомыляемые.

В качестве полусинтетических основ используют гидрогенизированные жиры, получаемые насыщением водородом жирных масел растительных. Современные липофильные основы представляют собой смешанные составы сложных эфиров жирных кислот – моно-, ди- и триглицеридов («Твёрдый жир»), которые получают этерификацией жирных кислот с глицерином или переэтерификацией натуральных жиров. В состав основ данного вида вводят различные вспомогательные вещества – эмульгаторы, воски специального назначения и др., обеспечивающие простоту введения в лекарственную форму фармацевтических субстанций различной природы.

###### Свойства

Описание. Прозрачные, бесцветные, более или менее окрашенные твёрдые вещества без запаха или со специфическим запахом.

Растворимость. Практически не растворимы в воде, мало растворимы в спирте, легко в хлороформе, петролейном эфире, гексане, хлористом метилене, четырёххлористом углероде.

###### Идентификация

Для установления подлинности жиров и жироподобных веществ используют качественные реакции, а также современные физические, химические и физико-химические методы: хроматографию в тонком слое сорбента, высокоэффективную тонкослойную хротматографию, газовую хроматографию, спектрофотометрию в ультрафиолетовой и видимой областях, спектрометрию в инфракрасной области и др.

При наличии в жирах и жироподобных веществах экзогенных антиоксидантов установление их подлинности проводят в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

###### Испытания

Температура плавления. Определение проводят в соответствии с ОФС «Температура плавления».

Температура затвердевания. Определение проводят в соответствии с ОФС «Температура затвердевания».

Плотность. Определение проводят в соответствии с ОФС «Плотность».

###### Показатель преломления

Определение проводят в соответствии с ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)».

Для натуральных жиров при проведении идентификации состава жирных кислот методом газовой хроматографии, показатель преломления не определяют.

###### Твёрдость жира

Определение проводят в соответствии с ОФС «Термический анализ» и методом ЯМР (ОФС «Спектроскопия ядерного магнитного резонанса»).

Содержание твёрдого жира методом ЯМР определяют как отношение числа положительно заряженных ядер водорода (далее – протонов) в твёрдой фазе образца к общему числу протонов в твёрдой и жидкой фазах образца при определённой температуре, выраженное в процентах.

###### Определение твердых жиров методом ЯМР

Для определения содержания твёрдого жира применяют прямой метод – измерение сигналов протонов как твёрдой, так и жидкой фаз, и косвенный метод – измерение сигнала протонов в жидкой фазе и дальнейший расчёт содержания твёрдого жира путём сравнения с образцом, содержащим только жидкий жир.

Оборудование. ЯМР-анализатор низкого разрешения с рабочей частотой от 20 до 40 МГц.

Пробу выдерживают до стабильного состояния при заданной температуре, затем нагревают до температуры измерения и стабилизируют при этой температуре.

После достижения электромагнитного равновесия в статическом магнитном поле спектрометра и воздействия 90-го радиочастотного импульса сигнала затухания намагниченности от протонов твёрдой и жидкой фаз регистрируют через 11 мкс и 70 мкс (или при интервалах, рекомендованных изготовителем спектрометра) и вычисляют содержание твёрдого жира:

где f – фактор коррекции
S1, S2 – уровни сигнала магнитной индукции, измеренные при 11 и 70 мкс
NT – твёрдость жира

Анизидиновое число (IАН). Определение проводят в соответствии с ОФС «Анизидиновое число» в дополнение к пероксидному числу, так как при определении пероксидного числа отсутствует корреляция со степенью разрушения основы, определяемой органолептически.

Гидроксильное число (IОН). Определение проводят в соответствии с ОФС «Гидроксильное число».

Йодное число (Ii). Определение проводят в соответствии с ОФС «Йодное число».

Кислотное число (Ia). Определение проводят в соответствии с ОФС «Кислотное число».

Общее число окисления. Общее число окисления вычисляют по формуле:

где: Ip – перекисное число
IAH – анизидиновое число

Пероксидное число (Ip). Определение проводят в соответствии с ОФС «Пероксидное число».

Число омыления (Is)

Определение проводят в соответствии с ОФС «Число омыления».

Если в целях консервации испытуемое вещество было насыщено углерода диоксидом, перед взвешиванием его выдерживают в выпарительной чашке в вакуум-эксикаторе в течение 24 часов.

Число омыления связано со средней молекулярной массой (M) чистых жирных кислот и их сложных глицериновых эфиров следующим соотношением:

где: М – средняя молекулярная масса;
n = 1 – для жирных кислот и моноглицеридов;
n = 2 – для диглицеридов
n = 3 – для триглицеридов.

Величина числа омыления определяется длиной цепочек, содержащихся в глицеридах жирных кислот, соотношением концентраций жирных кислот и используется для быстрой идентификации жиров. В табл. 1 представлены значения числа омыления нескольких важных природных масел и жиров.

Таблица 1. Значения числа омыления некоторых масел и жиров
Наименование жира | Значение числа омыления
--- | ---
Твёрдый жир | 230–245
Кокосовое масло | 250–265
Какао масло | 190–200
Пальмовое масло | 190–200
Подсолнечное масло | 195–205
Пальмоядровое масло | 240–260

Эфирное число (IE). Определение проводят в соответствии с ОФС «Эфирное число».

Неомыляемые вещества. Определение проводят в соответствии с ОФС «Масла жирные растительные».

Жирнокислотный состав. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение состава жирных кислот в маслах жирных растительных и жирах».

Посторонние жирные кислоты. Определение проводят методом, указанным в фармакопейной статье.

Стерины. Определение проводят в соответствии с ОФС «Стерины в маслах жирных растительных и жирах».

###### Вода и осадок

В две грушевидные центрифужные пробирки ёмкостью 125 мл с чёткой градуировкой (табл. 2) вносят 50,0 мл бензола и 50,0 мл испытуемого образца, при необходимости нагретого для растворения выделившегося стеарина и тщательно перемешанного при 25 °С. Пробирки плотно закрывают пробками, интенсивно встряхивают, нагревают на водяной бане при 50 °С в течение 10 мин, центрифугируют со скоростью 1500 об/мин в течение 10 мин и регистрируют общий объём воды с осадком на дне каждой пробирки. Повторно центрифугируют с интервалами 10 мин до тех пор, пока общий объём воды с осадком не будет постоянным для трёх последовательных измерений. Суммарный объём воды с осадком в двух пробирках соответствует процентному содержанию (по объёму) воды и осадка в масле.

Таблица 2. Требования к градуировке центрифужных пробирок
Объём, мл | Цена деления, мл
--- | ---
0–3 | 0,1
3–5 | 0,5
5–10 | 1,0
10–25 | 5,0
25–50 | 25,0
50–100 | 50,0

* Испытание проводят, если есть указания в фармакопейной статье.

#### 1.5.3. Методы анализа лекарственного растительного сырья, лекарственных средств растительного происхождения

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.3.0001 Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах

Взамен ОФС.1.5.3.0001.15]

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах.

Контролю на радиационную безопасность подлежит лекарственное растительное сырье, заготавливаемое на территории Российской Федерации и ввозимое на территорию Российской Федерации, и лекарственные растительные препараты.

Лекарственные растительные препараты получают из лекарственного растительного сырья, которое соответствует по содержанию радионуклидов требованиям настоящей общей фармакопейной статьи.

Результаты, полученные при определении радионуклидов в лекарственном растительном сырье, распространяются на лекарственный препарат, произведенный из данной партии лекарственного растительного сырья.

###### Термины и определения

Счетный образец (аналитическая проба) - определенное количество пробы, выделенной методом квартования из объединенной пробы, для измерения её радиационных параметров.

Радиоактивность - свойство некоторых радионуклидов подвергаться радиоактивному распаду.

Активность радионуклида − число ядерных превращений (N), происходящих в данном количестве вещества, в промежуток времени (t), отнесенное к этому промежутку времени:

Единица активности в СИ − Беккерель (Бк) − одно ядерное превращение в секунду.

Зиверт (Зв) – единица эквивалентной дозы, соответствующей определенному виду излучения (α, β, γ), т.е. количество излучения, которое проникло внутрь с учетом тканевого сопротивления. 1 Зв : 1000=1 мЗв (миллизиверт).

Удельная активность радионуклида (а) – активность вещества (А), отнесенная к массе (m) испытуемой пробы: (Бк/кг).

Концентрирование удельной активности − процедура приготовления счетного образца путем высушивания, обугливания, озоления или химического концентрирования.

Средства измерения включают в себя необходимые для определения удельной активности радионуклидов цезия-137 и стронция-90:

- радиометрическую установку с приспособлениями для экспонирования счетных образцов;

- методики выполнения измерений на данной радиометрической установке;

- методики приготовления счетных образцов вместе с необходимыми устройствами, приспособлениями и инструментами.

Радиационный контроль − применение средств измерений для определения соответствия испытуемых образцов требованиям норм радиационной безопасности.

###### Общие положения

Проводится радиационный контроль лекарственного растительного сырья (ЛРС) и лекарственных растительных препаратов (ЛРП), в том числе и сборов из ЛРС.

Примечание – Испытание по данному показателю для лекарственных растительных препаратов не проводится при наличии протоколов анализа на лекарственное растительное сырье/фармацевтическую субстанцию растительного происхождения тех партий/серий, из которых произведен лекарственный растительный препарат.

При проведении радиационного контроля ЛРС и ЛРП выполняются следующие основные процедуры:

- отбор проб из партии ЛРС/серии ЛРП;

- приготовление счетных образцов с концентрированием удельной активности в случае необходимости;

- измерение активности стронция-90 и цезия-137 в счетных образцах;

- расчет результатов измерений и погрешности исследований;

- определение соответствия ЛРС/ЛРП критериям радиационной безопасности.

Отбор проб для радиационного контроля проводят в соответствии с требованиями ОФС «Отбор проб лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Подготовку счетных образцов ЛРС/ЛРП для определения удельной активности стронция-90 и цезия-137 проводят на основании настоящей общей фармакопейной статьи.

Метрологические характеристики средств измерений должны подтверждаться поверкой органами Государственной метрологической службы в установленные сроки с выдачей свидетельства о поверке.

Персонал, осуществляющий радиационный контроль ЛРС/ЛРП, должен пройти соответствующее обучение для работы на радиометрических установках, освоить методики приготовления счетных образцов и методики выполнения измерений.

Результатом измерения активности радионуклидов в счетном образце является интервал значений активности от (А - ∆А) до (А + ∆А) , в котором с вероятностью Р= 0,95 находится значение измеряемой величины А (Бк):

где А – значение измеренной активности радионуклида на данной радиометрической установке, Бк;
∆А – значение погрешности при измерении А на данной радиометрической установке, Бк.

Пример. При измерении активности радионуклида получены следующие значения: А=75 Бк; ∆А=20 Бк.

75 − 20 < 75 ≤ 75 + 20 → 55 < 75 ≤ 95

С вероятностью Р=0,95 значение измеряемой величины А (Бк) находится в интервале от 55 до 95 Бк.

Если часть интервала от (А - ∆А) до А или {(А - ∆А) − А} находится в области отрицательных значений, то следует считать, что с вероятностью Р = 0,95 значение величины А находится в интервале:

от 0 до (А + ∆А) или {0 − (А + ∆А)}.

Пример. При измерении активности радионуклида получены следующие значения: А=15 Бк; ∆А=20 Бк.

15−20< 15 ≤ 15 + 20 (1) → 0 < 15 ≤35.

С вероятностью Р = 0,95 значение измеряемой величины А (Бк) находится в интервале от 0 до 35 Бк.

Если значение измеренной активности А<0, то следует считать, что значение величины А находится в интервале от 0 до ∆А или (0−∆А).

Пример. При измерении активности радионуклида получены следующие значения: А = − 5 Бк; ∆А= 20 Бк, т.к. А<0−5<0→ 0−20.

С вероятностью Р=0,95 значение измеряемой величины А (Бк) находится в интервале от 0 до 20 Бк.

Результатом определения удельной активности радионуклидов (а) в ЛРС/ЛРП является интервал, характеризуемый соотношением:

где а – значение удельной активности радионуклида в исследуемом ЛРС/ЛРП, Бк/кг;
∆а – значение погрешности, Бк/кг.

###### Порядок отбора проб ЛРС/ЛРП

Порядок отбора проб ЛРС/ЛРП включает выделение однородной по радиационному составу пробы для приготовления счетных образцов. Отбор проб проводят в соответствии с требованиями ОФС «Отбор проб лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Отбор пробы для радиационного контроля от партии ЛРС и от серии ЛРП имеют разные схемы отбора проб и разный объем выборки.

Отбор проб от партии ЛРС представлен на рис. 1., отбор проб от серии ЛРП − на рис. 2.

Радиационный контроль ЛРС и ЛРП имеют право проводить уполномоченные организации.

###### Определение удельной активности цезия-137 и стронция-90 в ЛРС/ЛРП

Для измерения удельной активности цезия-137 и стронция-90 в ЛРС/ЛРП и определения соответствия ЛРС/ЛРП критериям радиационной безопасности пpи оптимальных затратах времени и средств предложены три варианта подготовки счетных образцов. В табл. 1 приведены массы ЛРС в зависимости от используемого варианта измерений. В случае отсутствия указаний в табл. 1, следует руководствоваться данными, приведенными в табл. 2. В табл. 2 приведены массы ЛРС/ЛРП в зависимости от морфологической группы и используемого варианта измерений.

Рисунок 1. Схема порядка отбора проб от партии ЛРС для радиационного контроля и определения содержания радионуклидов
Рисунок 2. Схема порядка отбора проб от серии ЛРП для определения содержания радионуклидов

Таблица 1. Масса ЛРС/ЛРП в зависимости от используемого варианта измерений
№ | Наименование ЛРС/ЛРП | Масса ЛРС/ЛРП (не менее), г
--- | --- | ---
Определение Cs-137 | Определение Sr-90
Вариант измерений | Вариант измерений
1-й | 2-й | 3-й | 1-й | 2-й | 3-й
1 | Алтея корни | 40 | 280 | 400 | 10 | 30 | 90
2 | Аниса обыкновенного плоды | 40 | 400 | 600 | 10 | 30 | 90
3 | Аира обыкновенного корневища | 45 | 300 | 600 | 8 | 30 | 90
4 | Березы почки | 50 | 450 | 600 | 8 | 30 | 90
5 | Бессмертника песчаного цветки | 15 | 150 | 250 | 4 | 30 | 90
6 | Боярышника плоды | 50 | 350 | 600 | 15 | 40 | 90
7 | Брусники обыкновенной листья | 30 | 170 | 350 | 8 | 40 | 90
8 | Багульника болотного побеги | 30 | 225 | 350 | 5 | 40 | 90
9 | Валерианы лекарственной корневища с корнями | 40 | 300 | 450 | 9 | 30 | 90
10 | Горца птичьего (спорыша) трава | 25 | 220 | 350 | 5 | 30 | 90
11 | Девясила высокого корневища и корни | 50 | 350 | 650 | 10 | 30 | 90
12 | Донника трава | 25 | 150 | 300 | 6 | 30 | 90
13 | Дуба кора | 50 | 300 | 500 | 8 | 30 | 90
14 | Душицы обыкновенной трава | 25 | 200 | 300 | 6 | 30 | 90
15 | Зверобоя трава | 30 | 170 | 350 | 8 | 30 | 90
16 | Календулы лекарственной цветки | 16 | 180 | 270 | 6 | 30 | 90
17 | Крушины ольховидной кора | 25 | 300 | 400 | 8 | 30 | 90
18 | Кукурузы столбики с рыльцами | 26 | 150 | 250 | 8 | 30 | 90
19 | Липы цветки | 30 | 200 | 450 | 8 | 30 | 90
20 | Лопуха корни | 40 | 350 | 500 | 8 | 30 | 90
21 | Льна посевного семена | 60 | 600 | 800 | 10 | 30 | 90
22 | Мать-и-мачехи обыкновенной листья | 30 | 200 | 350 | 7 | 30 | 90
23 | Мелиссы лекарственной трава | 25 | 180 | 250 | 6 | 30 | 90
24 | Можжевельника обыкновенного плоды | 50 | 400 | 600 | 12 | 30 | 90
25 | Ламинарии слоевища | 40 | 600 | 800 | 15 | 30 | 90
26 | Мяты перечной листья | 25 | 180 | 250 | 8 | 30 | 90
27 | Ортосифона тычиночного листья (почечный чай) | 30 | 260 | 400 | 8 | 30 | 90
28 | Пижмы обыкновенной цветки | 25 | 220 | 350 | 5 | 30 | 90
29 | Подорожника большого листья | 35 | 280 | 400 | 6 | 30 | 90
30 | Пустырника трава | 20 | 180 | 300 | 5 | 30 | 90
31 | Расторопши пятнистой плоды | 50 | 500 | 800 | 12 | 30 | 90
32 | Родиолы розовой корневища и корни | 30 | 200 | 400 | 5 | 30 | 90
33 | Рябины обыкновенной плоды | 60 | 370 | 600 | 12 | 30 | 90
34 | Сенны листья | 40 | 180 | 250 | 8 | 30 | 90
35 | Солодки корни | 30 | 270 | 400 | 10 | 30 | 90
36 | Сосны обыкновенной почки | 25 | 150 | 300 | 5 | 30 | 90
37 | Тмина обыкновенного плоды | 45 | 300 | 500 | 10 | 30 | 90
38 | Толокнянки обыкновенной листья | 35 | 200 | 450 | 8 | 30 | 90
39 | Тысячелистника обыкновенного трава | 15 | 200 | 300 | 4 | 30 | 90
40 | Укропа пахучего плоды | 40 | 330 | 500 | 9 | 30 | 90
41 | Фасоли обыкновенной плодов створки | 20 | 180 | 280 | 6 | 30 | 90
42 | Фенхеля обыкновенного плоды | 40 | 380 | 500 | 9 | 30 | 90
43 | Фиалки трава | 25 | 200 | 300. | 6 | 30 | 90
44 | Хвоща полевого трава | 25 | 130 | 280 | 8 | 30 | 90
45 | Хмеля обыкновенного соплодия | 20 | 190 | 300 | 4 | 30 | 90
46 | Чабреца трава | 30 | 170 | 300 | 6 | 30 | 90
47 | Чага | 25 | 350 | 400 | 6 | 30 | 90
48 | Черники обыкновенной побеги | 25 | 150 | 28 | 4 | 30 | 90
49 | Череды трехраздельной трава | 25 | 200 | 300 | 8 | 30 | 90
50 | Чистотела большого трава | 30 | 150 | 300 | 6 | 30 | 90
51 | Шалфея лекарственного листья | 35 | 250 | 350 | 7 | 30 | 90
52 | Шиповника плоды | 50 | 400 | 600 | 13 | 30 | 90
53 | Эвкалипта прутовидного листья | 30 | 240 | 400 | 9 | 30 | 90
54 | Элеутерококка колючего корневища и корни | 40 | 400 | 600 | 9 | 30 | 90
55 | Эрвы шерстистой трава | 25 | 200 | 350 | 5 | 30 | 90

Таблица 2. Масса ЛРС/ЛРП в зависимости от морфологической группы и используемого варианта измерений
№ | Наименование ЛРС/ЛРП | Масса ЛРС/ЛРП (не менее), г
--- | --- | ---
Определение Cs-137 | Определение Sr-90
Вариант измерений | Вариант измерений
1-й | 2-й | 3-й | 1-й | 2-й | 3-й
1 | Побеги | 30 | 200 | 340 | 6 | 30 | 90
2 | Почки | 40 | 300 | 450 | 7 | 30 | 90
3 | Цветки | 25 | 200 | 300 | 6 | 30 | 90
4 | Плоды | 50 | 400 | 600 | 10 | 30 | 90
5 | Листья | 30 | 200 | 320 | 8 | 30 | 90
6 | Трава | 30 | 200 | 300 | 6 | 30 | 90
7 | Кора | 35 | 250 | 400 | 7 | 30 | 90
8 | Семена | 60 | 600 | 800 | 10 | 30 | 90
9 | Корни | 40 | 330 | 500 | 10 | 30 | 90
10 | Корневища | 40 | 360 | 600 | 8 | 30 | 90
11 | Корневища с корнями | 40 | 300 | 450 | 9 | 30 | 90
Примечания – Приведенные массы являются усредненными.

###### Определение цезия-137 при времени экспонирования счетного образца 1800 с (30 мин)

1-й вариант измерений предполагает использование аттестованной геометрии − чашки Петри, измельчение указанной массы до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм (содержимое фильтр-пакетов может использоваться без дополнительного измельчения).

2-й вариант измерений предполагает использование аттестованной геометрии − сосуда Маринелли объемом 1 л, ЛРС/ЛРП категории «измельченное» (как правило, проходящее сквозь сито отверстиями размером 7 мм); допускается без измельчения анализировать цельное сырьё/препарат, например: боярышника плоды, шиповника плоды, льна семена и т.д., при достаточной насыпной массе.

3-й вариант измерений предполагает использование аттестованной геометрии − сосуда Маринелли объемом 1 л, измельчение указанной массы ЛРС/ЛРП до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

###### Определение стронция-90 при времени экспонирования счетного образца 1800 с (30 мин)

1-й вариант измерений предполагает использование аттестованной геометрии − кюветы, измельчение указанной массы до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм.

2-й вариант измерений предполагает использование аттестованной геометрии − кюветы, измельчение с последующим озолением указанной массы.

3-й вариант измерений предполагает использование аттестованной геометрии − кюветы, измельчение с последующим радиохимическим концентрированием.

###### Приготовление счетных образцов и измерение активности цезия-137 и стронция-90 в пробах ЛРС/ЛРП

Подготовка проб к измерениям

Подготовка проб к измерениям заключается в отборе пробы, предварительном измельчении ЛРС/ЛРП с целью приготовления однородного счетного образца в соответствии с выбранным вариантом измерения, выборе измерительной кюветы, определении объема ее заполнения, определении схемы анализа.

Пробу ЛРС/ЛРП предварительно измельчают с помощью ножа, секатора, мясорубки, терки, а затем в специальных лабораторных измельчителях, дробилках и мельницах и др.

В зависимости от выбранного варианта измерения радиологическому испытанию подвергают ЛРС/ЛРП, измельченное до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, 2 мм и 1 мм.

Навеску для радиологического испытания определяют для каждого вида ЛРС/ЛРП с учетом выбора аттестованной геометрии, которая не может быть меньше указанной в табл. 1.

Приготовление счетного образца для измерения цезия-137 и стронция-90 зависит от измельченности поступившего на анализ сырья/препарата, используемого метода измерения и чувствительности используемой радиометрической установки. Выбор аттестованных геометрий (гамма-спектрометр, сосуд Маринелли 1 л, чашка Петри; бета-спектрометр − измерительная кювета) зависит от результатов, полученных в процессе анализа (см. варианты измерений).

###### Приготовление счетного образца для определения удельной активности цезия-137

Пробу измельчают и просеивают сквозь сито с отверстиями размером 2 мм для аттестованной геометрии − чашки Петри (1 вариант измерений), 7 мм (2 вариант измерений) или 2 мм (3 вариант измерений) для сосуда Маринелли. Измельченное ЛРС/ЛРП помещают в сосуд Маринелли или в чашку Петри, масса сырья/препарата не может быть меньше указанной в табл. 1, и измеряют активность цезия-137. Для определения массы измеряемого счетного образца сосуд взвешивают до и после его заполнения.

При получении отрицательного результата в чашке Петри (т.е. сырьё/препарат относится ко второй или третьей группе радиационной безопасности) увеличивают массу счетного образца (2 вариант измерений) и повторно проводят измерение активности цезия-137 в сосуде Маринелли. При получении результатов, соответствующих третьей группе по критериям радиационной безопасности, продолжают исследование по 3 варианту измерений. Схема проведения радиационного контроля приведена на рис. 3.

###### Приготовление счетного образца для определения удельной активности стронция-90

Данная методика определения удельной активности стронция-90 рассчитана на равномерное распределение радионуклида по объему пробы, поэтому проба должна быть тщательно измельчена и перемешана.

Отобранную пробу измельчают и просеивают сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. Измельченное и просеянное ЛРС/ЛРП помещают в измерительную кювету; масса счетного образца должна быть не меньше, указанной в табл. 1. Для определения массы измеряемого образца измерительную кювету взвешивают до и после заполнения. Измельченное и просеянное ЛРС/ЛРП помещают в измерительную кювету, тщательно перемешивают шпателем и уплотняют в ней специальным приспособлением; высота слоя счетного образца не должна превышать глубины кюветы. Определение активности счетного образца проводят на бета-спектрометре в соответствии с инструкцией к данному спектрометрическому комплексу. Как правило, при анализе ЛРС/ЛРП требуется 2 вариант измерений.

С целью уменьшения погрешности измерения (Δа) допускаются методы термического и радиохимического концентрирования. Первоначально проводят термическое концентрирование, основанное на озолении массы счетного образца согласно данным табл. 1.

Если по результатам 2 варианта измерений а − Δа < Н, то необходимо использовать 3 вариант измерений, поставив в известность об этом организацию, представившую образец на исследование. Если на основании повторного исследования вновь нельзя сделать однозначного вывода, то для дальнейшего концентрирования используют радиохимические методики.

При необходимости увеличения чувствительности применяемых методов измерения возможно использование утвержденных в установленном порядке методов термохимического концентрирования или частичного, или полного радиохимического выделения определяемого радионуклида. Допускается также использование методов концентрирования и радиохимического выделения, не указанных в приложениях, при условии их аттестации в Российской Федерации.

###### Термическое концентрирование

Термическое концентрирование основано на озолении порошка счетного образца ЛРС/ЛРП. Основным требованием является наличие достаточного объема пробы для получения от 3 до 7 г золы. Необходимо учитывать, что при озолении происходит концентрирование в среднем в 10 раз. Таким образом, навеска для озоления может составлять от 30 г (2 вариант измерений) до 90 г в случае необходимости увеличения массы счетного образца в 3 варианте измерений.

Измельченное и просеянное ЛРС/ЛРП переносят в предварительно взвешенные тигли. Для определения массы образца заполненные тигли вновь взвешивают и помещают в муфельную печь для озоления при температуре 600-800 °С. После окончания концентрирования золу переносят в измерительную кювету, выравнивают и уплотняют в ней с помощью специального приспособления. Проводят определение массы зольного остатка (с точностью до 0,01 г) по разнице между массой чистой и заполненной кюветы. Масса золы в кювете должна составлять от 3 до 7 г в случае проведения дополнительных измерений, необходимость которых указана в разделе «Измерение активности радионуклидов».

К термическому концентрированию относится также сушка при поступлении на испытание свежесобранного сырья.

Методика радиохимического концентрирования проб для бета-спектрометрического определения стронция-90 в ЛРС/ЛРП

Раствор носителя иттрия. В 100 мл воды растворяют 21,6 г (точная навеска) иттрия нитрата гексагидрата. Раствор фильтруют от возможных примесей через беззольный фильтр и отбирают параллельно три пробы по 1 мл и разбавляют каждую пробу водой до 5 мл. Отобранные пробы нагревают до температуры 80-90 °С и к каждой прибавляют 5 мл насыщенного раствора щавелевой кислоты. Осадок выдерживают в растворе в течение 2-3 ч и фильтруют через пористый фильтр № 4, промывают 2 раза водой, спиртом 96 % и эфиром диэтиловым (по 2-3 мл). Осадок высушивают до постоянной массы при температуре 45-50 °С. Весовая форма для пересчета − иттрия оксалат наногидрат Y2(C2O4)3 · 9Н2О. Коэффициент пересчета на металл − 0,295.

Раствор носителя стронция. В 100 мл воды растворяют 12,1 г (точная навеска) стронция нитрата. Раствор фильтруют, отбирают три пробы по 1 мл и разбавляют каждую пробу водой до 5 мл. Пробы нагревают до температуры 80-90 °С и прибавляют при перемешивании 2 мл насыщенного раствора аммония карбоната. Осадок выдерживают в течение 1 ч и фильтруют через пористый фильтр № 4. Промывают 2 раза водой, спиртом 96 % и эфиром диэтиловым (по 2-3 мл), высушивают до постоянной массы при температуре 110-120 °С. Весовая форма для пересчета − стронция карбонат SrCO3. Коэффициент пересчета на металл − 0,594.

Перед проведением анализа осадок носителей смывают с фильтров минимальным количеством хлористоводородной кислоты раствора 6 М и собирают в отдельный стакан (т.е. по 50 мг стронция и иттрия в пересчете на металл).

К навеске озоленного ЛРС/ЛРП прибавляют раствор, содержащий носители, нагревают на песчаной бане и постепенно прибавляют смесь хлористоводородной кислоты концентрированной и азотной кислоты концентрированной (3:1) до растворения основной массы озоленного сырья/препарата (приблизительно 200 мл).

Осадок декантируют и промывают смесью хлористоводородной кислоты концентрированной и азотной кислоты концентрированной (3:1). Промывной раствор прибавляют к фильтрату. Осадок промывают водой и высушивают в сушильном шкафу при температуре 80-90 °С, охлаждают и проводят регистрацию активности осадка на бета-спектрометре (как правило, активность подобных осадков находится на уровне фона).

Фильтрат осторожно нейтрализуют натрия гидроксида раствором 20 % при постоянном перемешивании до рН 3-4, используя универсальную индикаторную бумагу. Затем к раствору приливают при перемешивании аммиака раствор концентрированный 25 % до рН 8 и 5 мл насыщенного раствора аммония карбоната.

Выпавший осадок выдерживают в течение 30 мин в равновесии с раствором и фильтруют на воронке Бунзена, размером меньше размера счетной кюветы, через двойной беззольный фильтр. Осадок промывают водой 2-3 раза порциями по 3-5 мл, спиртом 96 % и подсушивают (промыванием эфиром диэтиловым). Фильтр с осадком снимают с воронки и помещают в счетную кювету. Сушат при температуре 40-45 °С и измеряют активность образца на бета-спектрометре без учета удельной активности калия.

Примечания

1. При проведении концентрирования необходимо добавлять по 1 порции каждого раствора носителя на 2-3 г золы ЛРС/ЛРП.

2. Методика гарантирует выделение более 90 % равновесных стронция-90 и иттрия-90.

###### Измерение активности радионуклидов

Измерение удельной активности цезия-137. Для измерения удельной активности цезия-137 используют гамма-спектрометры со сцинтилляционными и полупроводниковыми детекторами, находящиеся в свинцовой защите, толщина которой должна быть не менее 50 мм. Минимальная измеряемая активность гамма-спектрометров должна составлять 3-10 Бк.

Установленная настоящей общей фармакопейной статьей масса анализируемой пробы в зависимости от выбранного варианта измерения обеспечивает приемлемую погрешность получаемого результата при измерении в стандартной геометрии − чашка Петри или сосуд Маринелли 1 л.

Первоначально измерение активности проводят в аттестованной геометрии − чашке Петри; если по 1 варианту измерений чувствительности гамма-спектрометра не хватает для получения достоверного результата, увеличивают массу счетного образца и в качестве измерительного сосуда используют сосуд Маринелли (2 или 3 вариант измерений).

Измерение активности проводят в соответствии с инструкцией к используемому гамма-спектрометру и настоящей общей фармакопейной статьей.

Последовательность проведения радиационного контроля приведена на рис. 3.

Примечание – Допускается использование компьютеризованных гамма-, бета-спектрометрических комплексов с программным обеспечением.

Измерение удельной активности стронция-90. Для измерения удельной активности стронция-90 используют бета-спектрометры с детектором, находящиеся в свинцовой защите. Минимальная измеряемая активность бета-спектрометров должна составлять 0,1-1,0 Бк.

Приготовленный счетный образец в соответствии с вариантом измерения помещают в свинцовую защиту под детектор и проводят определение активности радионуклида.

Первоначально проводят измерение исходного (неозоленного) ЛРС/ЛРП в виде порошка с величиной частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм (1 вариант измерений). В случаях, когда чувствительности бета-спектрометра не хватает для измерения активности радионуклида, сначала проводят термическое концентрирование (озоление) − 2 вариант измерений; если при этом не происходит уменьшение погрешности измерения, то увеличивают навеску для последующего озоления. Если полученный результат попадает в третью группу согласно критериям радиационной безопасности, то радиационный контроль продолжают, проводят радиохимическое концентрирование.

Последовательность проведения радиационного контроля приведена на рис. 4.

###### Измерение проб нулевой активности

Как правило, активность большинства испытуемых образцов ЛРС/ЛРП не превышает 1 % от нормы. Такие счетные образцы называются образцами с «нулевой» активностью. При радиационном контроле основной задачей становится проверка соответствия счетного образца следующему уравнению:

где H – допустимый уровень удельной активности радионуклида в испытуемом веществе;
mпр – масса счетного образца для определения удельной активности Sr-90 или Cs-137, кг;
t0 = 3600 с – время измерения, соответствующее определению минимальной измеряемой активности А0;
tизм время измерения данного счетного образца, которое не должно превышать 3600 с, с;
A0 Sr-90 минимальная измеряемая активность Sr-90 по алгоритму «с учетом 40К», в данном случае A0 Sr-90 = 0,6 Бк, при использовании алгоритма без учета 40 К A0 Sr-90 = 1,0 Бк;
A0 Cs-137 минимальная измеряемая активность Cs-137; для сосуда Маринелли 1 л эта величина равна 3,4 Бк, при использовании чашки Петри – 1,7 Бк.

Рисунок 3. Схема проведения радиационного контроля на содержание цезия-137.

В схеме под утвердительным ответом «Да» подразумевается соответствие полученного результата норме удельной активности цезия-137 в ЛРС/ЛРП. Ответ «Нет» − если ЛРС/ЛРП относится ко второй или третьей группе (по критериям радиационной безопасности).

Рисунок 4. Схема проведения радиационного контроля на содержание стронция-90.

В схеме под утвердительным ответом «Да» подразумевается соответствие полученного результата норме удельной активности стронция-90 в ЛРС/ЛРП. Ответ «Нет» − если ЛРС/ЛРП относится ко второй или третьей группе (по критериям радиационной безопасности).

###### Измерение активных проб

Если по итогам проведенного радиационного контроля сырьё/препарат по критериям радиационной безопасности относится к третьей группе, то окончательный вывод можно сделать только при соблюдении условии точности ΔВ<0,3.

При измерении «активных проб» используют следующее уравнение:

Исходя из него, можно вычислить массу счетного образца по следующему выражению:

###### Определение соответствия ЛРС/ЛРП требованиям радиационной безопасности

Для определения соответствия ЛРС/ЛРП критериям радиационной безопасности используют показатель соответствия В и погрешность его определения ΔВ, значения которых рассчитывают по результатам измерений удельной активности стронция-90 и цезия-137 в пробе:

где а - измеренное значение удельной активности радионуклида в пробе;
Н – допустимый уровень удельной активности радионуклида в испытуемом веществе;
Δа - абсолютная доверительная (Р =0,95) погрешность измерения удельной активности.

ЛРС/ЛРП считается соответствующим критерию радиационной безопасности (первая группа), если:

ЛРС/ЛРП должно признаваться несоответствующим критерию радиационной безопасности (вторая группа), если:

Переход на 2 и 3 вариант измерений проводится с одновременным извещением об этом организации, представившей образец на исследование.

Если величина (В+ΔВ)>1, а (В−ΔВ) ≤ 1 (третья группа), то прежде чем принять решение по растительному сырью/препарату следует иметь в виду, что при проведении более точных измерений существует вероятность уменьшения ΔВ и перенос отнесения ЛРС/ЛРП из третьей группы в первую. В подобной ситуации рекомендуется:

- при измерении удельной активности цезия-137 увеличить массу счетного образца, используя для измерения вместо чашки Петри сосуд Маринелли 1 л;

- при измерении удельной активности стронция-90 первоначально озолить сырьё/препарат и провести повторное измерение, если при этом растительное сырьё/препарат остается в третьeй группе, необходимо увеличить навеску растительного сырья/препарата для озоления с 30 до 70 г или использовать метод радиохимического концентрирования, или увеличить время экспозиции до 3600 с.

Результаты измерений удельной активности радионуклидов в пробе должны удовлетворять условию точности: ΔВ < 0,3.

ЛРС/ЛРП, качество которого не соответствует установленным нормам, изымается из обращения.

Для определения соответствия ЛРС/ЛРП критериям радиационной безопасности используют нормы, приведенные в табл. 3.

Таблица 3. Пределы допустимого содержания радионуклидов в ЛРС/ЛРП
Радионуклиды | Допустимая удельная активность радионуклида, Бк/кг, не более
--- | ---
Cs-137 | 400
Sr-90 | 200

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.3.0002 Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов

Взамен ОФС.1.5.3.0002.15

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения наличия вредителей запасов.

Испытание проводят в обязательном порядке при приёмке лекарственного растительного сырья/препаратов, а также ежегодно при хранении.

Лекарственное растительное сырьё/препараты проверяют на наличие живых и мёртвых вредителей (рисунок 1) и их личинок путём осмотра невооружённым глазом и/или с помощью лупы (5-10×) при внешнем осмотре партии/серии лекарственного растительного сырья/препарата в специально выделенной пробе, а также при определении измельчённости и содержания примесей. Кроме того, обращают внимание на наличие поражения лекарственного растительного сырья/препаратов грызунами, включая упаковочные материалы. При осмотре лекарственного растительного сырья/препаратов обращают внимание на наличие частей сырья/препарата, повреждённых вредителями запасов, тщательно осматривают швы, складки упаковочного материала, щели в ящиках.

Рисунок 1. Вредители запасов

При обнаружении в лекарственном растительном сырье/препарате вредителей запасов определяют степень его заражённости, используя специально выделенную пробу (ОФС «Отбор проб лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов»).

Анализ должен быть проведён не позднее 2 сут с момента поступления пробы на анализ. В холодный период года (среднесуточная температура воздуха ниже 10 °С) проба сырья перед анализом должна быть выдержана при комнатной температуре не менее 1,5-2 ч.

Методика

Аналитическую пробу лекарственного растительного сырья/препарата взвешивают с точностью ± 5 г, затем просеивают сквозь сито с размером отверстий 0,5 мм. В лекарственном растительном сырье/препарате, прошедшем сквозь сито, проверяют наличие клещей; в лекарственном растительном сырье/препарате, оставшемся на сите, – наличие моли, точильщика и их личинок и наличие других живых и мёртвых вредителей. Количество клещей и других вредителей подсчитывают, используя лупу; моли, точильщика, их личинок и других вредителей – невооружённым глазом или с помощью лупы.

Интерпретация результатов.

Количество вредителей на 1 кг лекарственного растительного сырья (Х) вычисляют по формуле:

где N – число обнаруженных вредителей в пробе (в сырье, прошедшем сквозь сито, и/или в сырье, оставшемся на сите);
m – масса аналитической пробы, взятая для проведения анализа, г.

Вычисление проводят до первого десятичного знака с последующим округлением до целого числа.

Степень заражённости лекарственного растительного сырья в зависимости от количества обнаруженных вредителей в 1 кг лекарственного растительного сырья определяют в соответствии с данными, приведёнными в таблице 1.

Таблица 1. Степень заражённости лекарственного растительного сырья вредителями запасов
Степень заражённости | Виды вредителей запасов, количество шт. в 1 кг лекарственного растительного сырья
--- | ---
клещи (клещ мучной (Tyroglyphus farina L.), клещ волосатый (Glyciphagus destructor Schrank.), клещ хищный (Cheyletus eruditus Schrank.), сухофруктовый клещ (Carpoglyphus lactis L.) и др.) | амбарная моль (Tinea granella L.), хлебный точильщик (Sidotrepa panicea L.), их личинки и др.
I | Не более 20 | Не более 5
II | Более 20; свободно передвигаются по поверхности сырья и не образуют сплошных масс | 6-10
III | Образуют сплошные войлочные массы, движение их затруднено | Более 10

В случае обнаружения в лекарственном растительном сырье живых вредителей запасов его подвергают дезинсекции. Перед использованием в производстве лекарственных средств лекарственное растительное сырьё, прошедшее дезинсекцию, просеивают сквозь сито с размером отверстий 0,5 мм (при заражённости клещами или мелкими вредителями-насекомыми) или с размером отверстий 3 мм (при заражённости другими вредителями).

После обработки сырьё используют в зависимости от степени заражённости. При I степени заражённости сырьё может быть допущено к медицинскому применению, при II степени и в исключительных случаях при III степени заражённости сырьё может быть использовано для переработки с целью получения индивидуальных веществ.

При обнаружении вредителей запасов в серии лекарственного растительного препарата её бракуют.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.3.0003 Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения

Взамен ОФС.1.5.3.0003.15

Настоящая общая фармакопейная статья устанавливает единые требования к проведению микроскопического и микрохимического анализа лекарственных средств растительного происхождения, в том числе лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов, а также лекарственных средств животного происхождения.

###### Термины и определения

Анатомо-диагностические признаки − совокупность признаков анатомического строения исследуемого образца, отличающих его от других видов при идентификации.

Микроскопическое исследование – исследование, при котором в общей картине анатомического строения исследуемого образца идентифицируются под микроскопом характерные анатомо-диагностические признаки; при этом руководствуются разделом «Микроскопия» соответствующей фармакопейной статьи.

Микрохимическое исследование - исследование, при котором проводят микрохимические реакции одновременно с микроскопическим анализом исследуемого образца, наблюдая их результаты под микроскопом. Обычно микрохимическое исследование включает микрохимические реакции для обнаружения действующих и сопутствующих веществ: алкалоидов, дубильных веществ, слизи, инулина, крахмала и др.

Гистохимическое исследование - исследование, при котором проводят гистохимические реакции одновременно с микроскопическим анализом исследуемого образца. Обычно гистохимическое исследование включает гистохимические реакции, позволяющие провести окрашивание анатомических структур и тканей: эфиромасличных желёзок, вместилищ, одревесневших оболочек сосудов, механических волокон, кутинизированных оболочек (кутикулу, покрывающую эпидермис), опробковевших оболочек покровной ткани (пробку) и др.

Микропрепарат – препарат исследуемого объекта, подготовленный на предметном стекле, с целью его дальнейшего изучения под микроскопом.

Поперечный срез – срез морфологического органа исследуемого образца, выполненный перпендикулярно вертикальной оси этого морфологического органа. Обычно на поперечном срезе рассматривают диаметр сосудов, механических волокон, млечников, вытянутых вместилищ, структуру сосудисто-волокнистых пучков подземных органов, стеблей, черешков и т.д. в поперечном сечении.

Продольный срез – срез морфологического органа исследуемого образца, выполненный параллельно вертикальной оси этого морфологического органа. Обычно на продольном срезе изучают длину сосудов, механических волокон и других вытянутых структур; характер утолщённости (перфорации) стенок этих структур; строение сосудисто-волокнистых пучков подземных органов, стеблей, черешков и т.д. в продольном сечении.

«Давленый» микропрепарат – микропрепарат, полученный из морфологического органа исследуемого образца путем раздавливания его на предметном стекле обратным концом препаровальной иглы или скальпелем с целью получения более тонкого слоя исследуемого объекта и возможности детального рассмотрения его структур. Обычно «давленые» микропрепараты готовят из плодов, подземных органов, коры, крупного порошка различных морфологических органов и др.

###### Общие положения

Особенности приготовления микропрепаратов из лекарственного растительного сырья, лекарственных средств природного происхождения зависят от морфологической группы исследуемого объекта, а также от состояния исследуемого образца − цельный, измельчённый или порошок.

Способы просветления

1. Несколько кусочков исследуемого образца помещают в колбу или пробирку, прибавляют натрия гидроксида раствор 5 %, разведённый водой (1:1), и кипятят в течение 2−5 мин в зависимости от толщины и плотности объекта, не допуская сильного размягчения. Более жёсткие исследуемые образцы (толокнянки обыкновенной листья, брусники обыкновенной листья, эвкалипта прутовидного листья) кипятят до 5 мин, более хрупкие исследуемые образцы (крапивы двудомной листья, чистотела большого листья) кипятят до 2 мин. Затем содержимое переливают в стеклянный стакан, жидкость сливают через 2−4 слоя марли, которой закрывают стакан, и сырьё тщательно промывают водой, каждый раз сливая воду через ту же марлю. Содержимое стакана переносят в небольшом количестве воды в чашку Петри. Частички исследуемого образца, оставшиеся на марле, смывают в ту же чашку Петри. Из воды кусочки вынимают скальпелем или лопаточкой и помещают на предметное стекло в 0,05 мл хлоралгидрата раствора водно-глицеринового или глицерина раствора 33 %.

2. Кусочки исследуемого образца кипятят в хлоралгидрата растворе водно-глицериновом, разведённом водой (1:1), в течение 5−10 мин (до просветления). Просветлённый кусочек исследуемого образца помещают на предметное стекло в 0,05 мл хлоралгидрата раствора водно-глицеринового или глицерина раствора 33 %.

Способы размягчения

1. Исследуемый образец кипятят в хлоралгидрата растворе водно-глицериновом в течение 10 мин.

2. При отсутствии хлоралгидрата раствора водно-глицеринового выбранный исследуемый образец и кусочки образца помещают в воду на 1−2 ч, после размачивания переносят в смесь глицерин – вода – этанол (1:1:1), где выдерживают 1−2 сут до полного пропитывания тканей жидкостью. В этой жидкости материал можно хранить продолжительное время, для чего при приготовлении смеси к ней добавляют кристаллик фенола.

Способы приготовления микропрепаратов порошков

1. Порошок исследуемого образца на кончике препаровальной иглы, смоченном в хлоралгидрата растворе водно-глицериновом, помещают в 0,10-0,15 мл хлоралгидрата раствора водно-глицеринового на предметном стекле, тщательно перемешивают, накрывают покровным стеклом и нагревают до удаления пузырьков воздуха. Затем стекло слегка придавливают ручкой препаровальной иглы, выступившую по краям жидкость удаляют полоской фильтровальной бумаги. Порошки кожистых листьев просветляют кипячением в натрия гидроксида растворе 5 %.

2. Порошок исследуемого образца на кончике препаровальной иглы, смоченном в натрия гидроксида растворе 5 %, помещают в 0,10-0,15 мл натрия гидроксида раствора 5 % на предметном стекле, тщательно перемешивают, накрывают покровным стеклом и нагревают до удаления пузырьков воздуха. После охлаждения удаляют фильтровальной бумагой натрия гидроксида раствор с одной стороны покровного стекла, добавляя с противоположной стороны пипеткой глицерина раствор 33 %.

3. Способ приготовления микропрепаратов порошков, содержащихся в лекарственных препаратах в твёрдых лекарственных формах должен быть описан в фармакопейной статье.

###### Микроскопическое исследование

Листья

Цельное сырьё. Для анализа цельных листьев берут цельные листья или кусочки пластинки листа с краем и жилкой, кусочки листа от основания и верхушки, кусочки черешка (если лист имеет черешок).

Кусочки сырья, просветлённые одним из двух способов и помещённые на предметное стекло, разделяют скальпелем или препаровальными иглами на две части, одну из них осторожно переворачивают. Кожистые и толстые листья раздавливают скальпелем или обратным концом препаровальной иглы. Кусочек черешка помещают на предметное стекло. Тонкие черешки раздавливают скальпелем или обратным концом препаровальной иглы для высвобождения эпидермиса. С толстых черешков снимают эпидермис с помощью препаровальных игл или бритвы, убирая грубые внутренние части черешка, мешающие получению хорошего микропрепарата эпидермиса. Объект накрывают покровным стеклом, при необходимости слегка сверху придавливают чистым обратным концом препаровальной иглы и слегка подогревают до удаления пузырьков воздуха, после охлаждения рассматривают лист с обеих сторон и эпидермис черешка под микроскопом сначала при малом, затем при большом увеличении. При разных увеличениях, пользуясь макро- и микровинтом, исследуют верхний и нижний эпидермис, а также глубинные структуры листа, расположенные под эпидермисом (паренхима, включения, сосуды и т.д.).

При анализе толстых и кожистых листьев (эвкалипт прутовидный, толокнянка обыкновенная, брусника обыкновенная) готовят поперечные срезы. При необходимости также готовят поперечные срезы черешков. Для чего используют два способа размачивания.

Из размоченных объектов делают срезы, зажимая кусочки листа (черешка) в бутылочную пробку (коровую) или сердцевину бузины. При использовании бутылочной пробки её предварительно кипятят в воде 15 мин. Кусочек бузины или бутылочной пробки разрезают пополам и между двумя половинками зажимают кусочек листа. Для изготовления поперечных срезов поверхность кусочка следует подготовить так, чтобы она была строго перпендикулярна к оси черешка или жилке листа. Для поперченного среза из листа вырезают небольшой участок, так чтобы попала средняя или боковая жилка, срез ведут перпендикулярно к жилке. Готовые срезы помещают в чашку Петри с водой, откуда срезы вынимают, просматривают под микроскопом, отбирая удачные.

При использовании первого способа размачивания срезы для их изучения помещают на предметное стекло в хлоралгидрата раствор водно-глицериновый. При способе размачивания 2 срезы требуют дополнительного просветления. Для чего их помещают в натрия гидроксида раствор 5 % на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и осторожно нагревают над пламенем горелки до полного просветления. После охлаждения микропрепарата с левой стороны покровного стекла помещают небольшой кусочек фильтровальной бумаги, а с правой начинают понемногу вводить пипеткой глицерина раствор 33 % до получения микропрепарата с бесцветной включающей жидкостью. Полученный микропрепарат изучают под микроскопом.

Измельчённое сырьё. Для анализа берут кусочки пластинки листа с краем и жилкой, кусочки листа от основания и верхушки, кусочки черешка (если лист имеет черешок). Далее с выбранными кусочками поступают так же, как в случае с цельными листьями.

Порошок. Для изучения порошка можно использовать 1 или 2 способ получения микропрепаратов.

Цветки

Цельное сырьё. Для анализа берут чашечку, венчик, тычинки, пестик, цветоножку, также, если есть, листочки обёртки корзинки, прицветные листы и другие элементы цветка и соцветий, если таковые имеются. Просветляют одним из двух способов. Для исследования пыльцы раздавливают пыльники тычинок обратным концом препаровальной иглы. Следует учесть, что тонкие лепестки кипятят в натрия гидроксида растворе 5 % не более 1 мин. Анализ цветоножки проводят аналогично анализу черешка листа. При необходимости делают поперечные срезы цветоножки.

Измельчённое сырьё. Для анализа берут кусочки чашечки, венчика, цветоножки, а также тычинки, пестик и другие элементы цветка и соцветий, если таковые имеются. Если сырьё имеет небольшие размеры, то берут цельные чашечку и венчик. Далее с выбранными кусочками поступают так же, как в случае с цельными цветками.

Порошок. Для изучения порошка можно использовать 1 или 2 способ приготовления микропрепаратов.

Травы

Цельные травы. Для анализа берут цельные листья или кусочки пластинки листа с краем и жилкой, кусочки листа от основания и верхушки, кусочки черешка (если лист имеет черешок); чашечку, венчик, тычинки, пестик и цветоножку, при необходимости другие элементы цветка и соцветий, если таковые имеются; кусочки стеблей, если есть, и при необходимости плоды. Используют один из двух способов просветления.

Для исследования стеблей их обрезки кипятят в натрия гидроксида растворе 5 % в течение 3−5 мин в зависимости от анатомической структуры объектов. Эпидермис снимают скальпелем или препаровальными иглами; из остальных тканей готовят микропрепарат, раздавливая объект скальпелем на предметном стекле в хлоралгидрата растворе водно-глицериновом или глицерина растворе 33 %. При необходимости готовят поперечные срезы, для чего используют методику приготовления поперечных срезов черешка листа, учитывая, что при помещении кусочков стеблей между двумя половинками пробки необходимо сделать бритвой соответствующие углубления для предотвращения сдавливания тканей исследуемого объекта.

Измельчённое сырьё. Выбирают кусочки листьев, цветков, стеблей, плодов или при их небольших размерах цельные перечисленные объекты. Далее с ними поступают так же, как в случае с цельной травой.

Порошок. Для изучения порошка можно использовать 1 или 2 способ приготовления микропрепаратов.

Плоды и семена

Цельное сырьё. Готовят микропрепараты кожуры семени и околоплодника с поверхности или поперечные срезы.

Для приготовления микропрепаратов кожуры и околоплодника с поверхности 2−3 семян или плода кипятят в пробирке в натрия гидроксида растворе 5 % в течение 2−3 мин и тщательно промывают водой. Объект помещают на предметное стекло, препаровальными иглами отделяют кожуру семени или ткани околоплодника и рассматривают их в хлоралгидрата растворе водно-глицериновом или глицерина растворе 33 %.

Ткани мезокарпия и эндокарпия рассматривают в «давленых» микропрепаратах и на срезах. «Давленые» микропрепараты получают при использовании обратного конца препаровальной иглы или скальпеля путём надавливания на объект в заключающей среде на предметном стекле.

Для приготовления срезов сухие плоды и семена предварительно размягчают, поместив их на 1 сут во влажную камеру (влажной камерой служит эксикатор с водой, в которую добавлено несколько капель хлороформа) или водяным паром в течение 15−30 мин или более, в зависимости от твёрдости объекта.

Можно также использовать способ размачивания 2 перед получением поперечных срезов, помещая при этом анализируемые объекты в воду на 1 сут, далее в смесь глицерин – вода –этанол (1:1:1) на 3 сут.

Мелкие плоды и семена запаивают в парафиновый блок размером 0,5×0,5×1,5 см. Кончиком нагретой препаровальной иглы расплавляют парафин и в образовавшуюся ямку быстро погружают объект. Поверхность объекта должна быть сухой. Срезы объекта делают вместе с парафином; срезы выбирают из парафина препаровальной иглой, смоченной жидкостью, и готовят микропрепараты в хлоралгидрата растворе водно-глицериновом или глицерина растворе 33 %.

Для изготовления срезов из мелких плодов и семян можно также использовать пробку бузины или бутылочную пробку. При использовании бутылочной пробки её предварительно кипятят в воде 15 мин. В используемых половинках пробки делать углубления, соответствующие размерам плодов и семян. Готовые срезы помещают в чашку Петри с водой, откуда срезы вынимают, просматривают под микроскопом, отбирая удачные.

Измельчённое сырьё. Выбирают крупные кусочки плодов и семян. Получают микропрепараты аналогично микропрепаратам цельного сырья. Более удобно проводить анализ в «давленых» микропрепаратах, для чего просветлённые объекты раздавливают обратным концом препаровальной иглы или скальпелем на предметном стекле в заключающей жидкости.

Из более крупных кусочков при необходимости готовят поперечные срезы, заливая анализируемые объекты в парафиновый блок или используя пробку бузины или бутылочную пробку.

Порошок. Для изучения порошка можно использовать 1 или 2 способ приготовления микропрепаратов.

При исследовании строения клеток кожуры и околоплодника в порошке из плодов и семян, содержащих крахмал или незначительное количество жирного масла, микропрепарат готовят в хлоралгидрата растворе водно-глицериновом при легком подогреве. При необходимости порошок обезжиривают и просветляют.

Для обезжиривания порошок сырья помещают в пробирку с притёртой пробкой и заливают 2−3 раза смесью спирта с эфиром (1:3) и после настаивания каждый раз в течение 20 мин растворитель сливают. Вместо смеси спирта с эфиром для обезжиривания можно использовать ксилол или эфир.

Для просветления 0,5−1 г порошка насыпают в фарфоровую чашку, прибавляют 5−10 мл азотной кислоты разведённой 16 % и кипятят в течение 1 мин, затем жидкость процеживают через ткань и порошок промывают горячей водой. Остаток на ткани собирают лопаточкой обратно в фарфоровую чашку, обливают 5 − 10 мл натрия гидроксида раствора 5 %, кипятят в течение 1 мин, снова процеживают через ту же ткань и промывают горячей водой. После этого порошок рассматривают в глицерина растворе 33 % под микроскопом.

Кора

Цельное сырьё. Готовят поперечные или продольные срезы коры. Кусочки коры размером (2−3) см × (0,5−1) см кипятят в колбе или пробирке с водой в течение 5 мин. Размягчённые куски выравнивают скальпелем так, чтобы они имели строго поперечное или продольное сечение. Делают срезы и готовят микропрепараты в хлоралгидрата растворе водно-глицериновом или глицерина растворе 33 %.

Измельчённое сырьё. Соскоб коры или мелкие кусочки кипятят в течение 3 − 5 мин в натрия гидроксида растворе 5 %, промывают водой и готовят микропрепараты, раздавливая объект скальпелем в хлоралгидрата растворе водно-глицериновом или глицерина растворе 33 %.

Порошок. Для изучения порошка можно использовать 1 или 2 способ приготовления микропрепаратов.

Почки

Цельное сырьё. Готовят микропрепараты с поверхности из цельных почек, а также поперечных и продольных срезов.

Микропрепараты готовят из цельных почек, рассматривая их с поверхности на поперечных и продольных срезах. Поперечные срезы следует делать в средней, т.е. медиальной части почки, определяя место среза по длине почки. При необходимости выполняют поперечный срез в базальной части почки и/или радиальное продольное сечение.

Корни, корневища, клубни, луковицы, клубнелуковицы

Цельное сырьё. Готовят поперечные и продольные срезы. Небольшие куски подземных органов помещают в холодную воду и выдерживают около 1 сут, затем помещают в смесь этилового спирта 95 % и глицерина (1:1) на 3 сут. Размоченные объекты выравнивают скальпелем так, чтобы они имели строго поперечное или продольное сечение. Делают срезы и готовят микропрепараты в хлоралгидрата растворе водно-глицериновом или глицерина растворе 33 % и рассматривают анатомо-диагностические признаки сначала при малом, затем при большом увеличении.

Измельчённое сырьё. Кусочки подземных органов кипятят в течение 3−5 мин в натрия гидроксида растворе 5 %, тщательно промывают водой и готовят микропрепараты, раздавливая кусочки в глицерина растворе 33 % или хлоралгидрата растворе водно-глицериновом.

Порошок. Для изучения порошка можно использовать 1 или 2 способ приготовления микропрепаратов.

Микрохимическое и гистохимическое исследование

Лигнин, крахмал, секреторное наполнение, пробка. Небольшое количество исследуемого образца распределяют в 0,10−0,15 мл молочной кислоты реактива на предметном стекле и накрывают покровным стеклом. Микропрепарат очень осторожно нагревают до кипения, поддерживая слабое кипение в течение короткого времени и обеспечивая при этом достаточное количество хлоралгидрата раствора водно-глицеринового или раствора глицерина 33 %. При необходимости, включающую жидкость восполняют с помощью клиновидной стеклянной пипетки. Охлаждают и рассматривают под микроскопом. Лигнифицированные элементы окрашиваются в ярко жёлтый цвет; элементы, содержащие целлюлозу, остаются бесцветными. Крахмальные зёрна окрашиваются в светло- или тёмно-фиолетовый цвет; некоторые секреторные накопления (например, эфирные масла, смолы, маслянистые смолы) окрашиваются в оранжевый цвет, а пробка - в красный цвет.

Крахмал

1. Цельный или измельчённый исследуемый образец, размягчённый способом 2, или полученные срезы, или порошок образца на кончике препаровальной иглы, смоченном водой или глицерина раствором 33 %, помещают в 0,10-0,15 мл воды или глицерина раствора 33 % на предметном стекле и рассматривают крахмальные зёрна. Из цельного, измельчённого и дроблёного сырья делают «давленые» микропрепараты. При изучении крахмальных зёрен определяют их форму, строение, размеры измеряют окулярным микрометром.

2. Цельный или измельчённый исследуемый образец, размягчённый способом 2, или полученные срезы, или порошок образца на кончике препаровальной иглы, смоченном раствором Люголя, помещают в 0,10-0,15 мл раствора Люголя на предметном стекле, накрывают покровным стеклом и наблюдают крахмальные зёрна. Из цельного и измельчённого исследуемого образца готовят «давленый» микропрепарат, в котором рассматривают крахмал. Крахмальные зерна приобретают синее или сине-фиолетовое окрашивание. Необходимо учитывать, что окраска исчезает при нагревании. Приготовленный микропрепарат следует анализировать сразу после его приготовления, так как окраска сохраняется недолго.

3. Для обнаружения крахмала делают соскоб сухой коры, подземного органа и рассматривают его в растворе Люголя. Крахмальные зёрна окрашиваются в синий или сине-фиолетовый цвет.

Жирное и эфирное масло

1. Эфирные масла наблюдаются без применения красителей в виде капель светло-жёлтого, тёмно-жёлтого, зеленовато-жёлтого, коричневато-красного цвета.

2. Цельный или измельчённый исследуемый образец, размягчённый способом 2, или полученные срезы, или порошок образца на кончике препаровальной иглы, смоченном судана III раствором водно-глицериновым, помещают в 0,10-0,15 мл судана III раствора водно-глицеринового на предметном стекле, накрывают покровным стеклом и нагревают. Из цельного и измельчённого исследуемого образца готовят «давленый» микропрепарат в используемом реактиве. Капли жирного или эфирного масла окрашиваются в оранжево-розовый или оранжево-жёлтый цвет.

3. Небольшое количество исследуемого образца погружают в метиленового синего спиртовой раствор 0,02 % на 3-5 мин. На предметное стекло помещают в 0,10−0,15 мл глицерина раствора 33 %, исследуемый образец, выдержанный в метиленового синего спиртовом растворе 0,02 %, накрывают покровным стеклом и рассматривают под микроскопом. Эфирное масло окрашивается в синий цвет в отличие от жирного масла.

Слизь

1. Порошок исследуемого образца на кончике препаровальной иглы, смоченном раствором чёрной туши, помещают в 0,10-0,15 мл раствора чёрной туши на предметном стекле, тщательно перемешивают, накрывают покровным стеклом и тотчас рассматривают под микроскопом (малое увеличение); слизь заметна в виде бесцветных масс на чёрном фоне.

2. Порошок исследуемого образца на кончике препаровальной иглы, смоченном рутения красного раствором 0,08 %, помещают в 0,10-0,15 мл рутения красного раствора 0,08 % на предметном стекле, тщательно перемешивают, накрывают покровным стеклом. По истечении около 1 мин наносят 0,05 мл воды, позволяя проникнуть ей между предметным и покровным стеклом. Рассматривают под микроскопом. Слизь окрашивается в фиолетово-красный цвет.

Дубильные вещества

На внутреннюю поверхность сухого исследуемого образца наносят 0,05 мл железа(III) аммония сульфата раствора 1 % (раствора квасцов железоаммониевых) или железа(III) хлорида раствора 3 %; появляется чёрно-синее или чёрно-зеленое окрашивание.

Производные антрацена

1. На внутреннюю поверхность сухого исследуемого образца наносят 0,05-0,10 мл натрия гидроксида раствора 10 %; появляется красное или тёмно-красное окрашивание.

2. На предметное стекло ставят трубку диаметром 1,5 см и высотой 2 см. Внутрь стеклянной трубки помещают небольшое количество порошка (или соскоба) исследуемого образца, сверху накрывают другим предметным стеклом, ставят на асбестовую сетку, закреплённую в штативе, и подогревают. Пламя горелки следует держать от предметного стекла на расстоянии 5-7 см. На поверхность стекла, которое служит для улавливания сублимата, помещают кусочки фильтровальной бумаги и смачивают время от времени холодной водой. Через некоторое время на нижней стороне стекла появляется налёт. Под микроскопом в сублимате видны тонкие жёлтые иголочки, которые в ультрафиолетовом свете (люминесцентный микроскоп) имеют яркое жёлтое или оранжево-красное свечение. В натрия гидроксида растворе 10 % сублимат растворяется с красным окрашиванием.

Инулин

Около 0,1 г измельчённого в порошок исследуемого образца помещают на предметное стекло, прибавляют 0,05−0,10 мл β-нафтола (резорцина или тимола) в спиртовом растворе 20 % и 0,05 мл серной кислоты концентрированной и рассматривают под микроскопом. Инулин окрашивается в красновато-фиолетовый цвет, при использовании резорцина или тимола − в оранжево-красный. О наличии инулина судят только при отсутствии крахмала.

Одревесневшие (лигнифицированные) элементы

Полученные срезы исследуемого образца или его порошок на кончике препаровальной иглы, смоченном флороглюцина раствором спиртовым 10 %, помещают в 0,10-0,15 мл флороглюцина раствора спиртового 10 % на предметном стекле, перемешивают и выдерживают до полного испарения раствора. Прибавляют 0,05 мл серной кислоты раствора 25 %, накрывают микропрепарат покровным стеклом и сразу рассматривают под микроскопом. Красное окрашивание указывает на наличие лигнина (одревесневших механических элементов).

###### Люминесцентная микроскопия

Метод люминесцентной микроскопии применяют (где это целесообразно) для идентификации лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов. Преимуществом метода является возможность его применения для изучения сухого исследуемого образца, из которого готовят толстые срезы или микропрепараты порошка и наблюдают первичную (собственную) люминесценцию. Люминесцентную микроскопию выполняют с помощью люминесцентных микроскопов или обычных биологических микроскопов, снабжённых специальными люминесцентными осветителями.

Приготовление микропрепаратов. Для приготовления микропрепаратов используют высушенный исследуемый образец или его порошок. Предварительное размачивание исследуемого образца исключается, так как это приводит к вымыванию веществ из клеток; допускается лишь непродолжительное размягчение во влажной камере.

Листья. Готовят обычно микропрепараты из порошка листьев, которые рассматривают без включающей жидкости. Наиболее яркая люминесценция характерна для лигнифицированных элементов (сосуды жилки, механические волокна), а также кутикулы и кутинизированных оболочек различных эпидермальных образований (волоски, желёзки и др.). В эпидермальных клетках часто содержатся флавоноиды, обусловливающие коричневую, жёлтую или зеленовато-жёлтую люминесценцию. Клетки мезофилла в зависимости от их химического состава содержат различные включения - жёлтые, голубые, зеленовато-жёлтые, коричневые. Хлорофилл и кристаллы кальция оксалата в высушенном исследуемом образце не люминесцируют. При необходимости приготовления среза лист предварительно размягчают во влажной камере и с помощью бритвы делают толстый срез (2-3 мм). Более тонкие срезы помещают в хлоралгидрата раствор водно-глицериновый или раствор глицерина 33 % и накрывают покровным стеклом.

В качестве включающей жидкости используют воду, глицерина раствор 33 %, поливинилового спирта раствор 5 %, нефлуоресцирующее вазелиновое масло. Включающая жидкость не должна растворять содержащиеся в микропрепарате люминесцирующие вещества.

Травы. При анализе трав готовят микропрепараты листьев. При необходимости приготовления микропрепарата стебля его размягчают во влажной камере и готовят срезы. Толстые срезы (2-3 мм) закрепляют на предметном стекле и рассматривают без включающей жидкости; тонкие срезы помещают в подходящую жидкость и накрывают покровным стеклом. Наиболее яркую люминесценцию имеют лигнифицированные элементы проводящих пучков (сосуды и механические волокна), склеренхимные клетки, встречающиеся в коре и сердцевине стебля. В клетках эпидермиса и коры часто встречаются флавоноиды; у некоторых видов сырья в клетках обкладки вокруг проводящих пучков содержатся алкалоиды, обладающие в зависимости от состава разнообразным свечением: синим, голубым, зелёным, зеленовато-жёлтым, золотисто-жёлтым, оранжево-красным.

Цветки. Чаще готовят микропрепараты из порошка цветков или отдельных частей цветка (соцветия), которые рассматривают обычно без включающей жидкости. В цветках часто содержатся флавоноиды, каротиноиды и другие вещества, обладающие флюоресценцией. Отчетливо видны пыльцевые зёрна, имеющие жёлтое, зеленовато-жёлтое или голубоватое свечение.

Плоды. Готовят обычно поперечные срезы плода после предварительного размягчения во влажной камере и рассматривают во включающей жидкости или без неё в зависимости от толщины среза. Для плодов характерна люминесценция тканей околоплодника (экзокарпия, механических клеток мезокарпия, проводящих пучков). Отчетливо видны секреторные каналы: ярко светится их содержимое; клетки выстилающего слоя обычно имеют желтовато-коричневую люминесценцию. В содержимом каналов нередко видны ярко люминесцирующие кристаллические включения, чаще всего жёлтого или жёлто-зеленого цвета.

Семена. Готовят обычно поперечные срезы семени после предварительного размягчения во влажной камере и рассматривают их во включающей жидкости или без неё в зависимости от толщины среза. Обращают внимание на характер люминесценции семенной кожуры, в которой отчётливо выделяются склеренхимные слои. Клетки эпидермиса, содержащие слизь, обычно имеют сине-голубое свечение. Эндосперм и ткани зародыша, богатые жирным маслом, характеризуются голубой люминесценцией.

Кора. Кору предварительно размягчают во влажной камере, готовят толстые поперечные срезы (до 3-5 мм), которые закрепляют на предметном стекле и рассматривают без включающей жидкости; тонкие срезы заключают в жидкость. Для некоторых видов сырья характерна люминесценция пробкового слоя коры: оболочки клеток пробки имеют интенсивно синее свечение, их содержимое - тёмно-красное (антоцианы). Яркое и разнообразное свечение имеют механические элементы (лубяные волокна и каменистые клетки): голубое, зеленовато-голубое, желтовато-зелёное. Люминесценция паренхимы коры зависит от химического состава. Антраценпроизводные обусловливают ярко-оранжевое или красновато-оранжевое свечение. Дубильные вещества обладают свойством "тушить" люминесценцию, поэтому ткани, содержащие дубильные вещества, тёмно-коричневого, почти чёрного, цвета.

Микропрепарат, приготовленный из порошка коры или соскоба, рассматривают без включающей жидкости. В нем наиболее ярко видны механические элементы.

Корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы. Готовят поперечные срезы, распилы, микропрепараты порошка или соскоба. Срезы готовят из материала, предварительно размягчённого во влажной камере, распилы (из толстых корней и корневищ) из сухого материала с помощью тонкой пилы или фрезы. С помощью бритвы с поверхности распила снимают тонкий слой для удаления слоя клеток, покрытых пылью. Толстые срезы и распилы (до 3 – 5 мм) закрепляют на предметном стекле и рассматривают без включающей жидкости. Слой пробки у подземных органов обычно тусклый, почти чёрный. Ярко люминесцируют древесина (у корней и корневищ) и проводящие пучки, а также склеренхимные элементы. Их свечение весьма разнообразно: от буровато-зелёного, жёлто-зелёного до светло-голубого и интенсивно-синего в зависимости от вида сырья. Еще более разнообразна люминесценция паренхимных тканей и различных секреторных образований (вместилища, каналы, ходы, млечники, различные идиобласты), что определяется их химическим составом. В секреторных образованиях встречаются кристаллические включения кумаринов, алкалоидов, флавоноидов, обладающих яркой люминесценцией.

В микропрепаратах порошка видны отдельные сосуды, группы механических волокон, каменистые клетки, отдельные секреторные образования и их обрывки, ярко люминесцирующие клетки паренхимы, содержащие те или иные вещества.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.3.0004 Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах

Взамен ОФС.1.5.3.0004.15

Настоящая общая фармакопейная статья устанавливает единые требования к определению подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах, в виде лекарственных форм гранулы резано-прессованные.

Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей проводят в одной из 3 аналитических проб, полученной из средней пробы методом квартования в соответствии с требованиями ОФС «Отбор проб лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

###### Термины и определения

Подлинность лекарственного растительного сырья/препарата – это соответствие лекарственного растительного сырья/препарата тому наименованию, под которым оно поступило на анализ.

Измельчённость лекарственного растительного сырья/препарата – показатель качества лекарственного растительного сырья/препарата (цельного, измельчённого, порошка), который характеризует количество лекарственного растительного сырья/препарата, имеющего больший или меньший размер частиц в сравнении с установленным фармакопейной статьей для соответствующего вида лекарственного растительного сырья/препарата, и выражается в процентах.

Содержание примесей – показатель качества лекарственного растительного сырья/препарата (цельного, измельчённого, порошка), характеризующий содержание в лекарственном растительном сырье/препарате допустимых примесей, попавших в лекарственное растительное сырьё в процессе его заготовки, и выражающийся в процентах.

###### Определение подлинности

Подлинность лекарственного растительного сырья/препарата устанавливают по внешним признакам, анатомо-диагностическим признакам при микроскопическом исследовании, качественным реакциям, хроматографическим и спектральным характеристикам и иными методами в соответствии с требованиями фармакопейной статьи на лекарственное растительное сырьё/препарат.

Методы определения подлинности лекарственного растительного сырья/препарата различных морфологических групп приведены в соответствующих ОФС («Листья», «Травы», «Кора», «Корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы», «Цветки», «Плоды», «Семена», «Почки»).

###### Определение измельчённости

Измельчённость лекарственного растительного сырья/препарата определяют методом ситового анализа.

Для цельного лекарственного растительного сырья/препарата, как правило, приводят нормируемое значение частиц меньшего размера, определяемое с помощью сита. Размер отверстий сита и допустимая норма содержания частиц меньшего размера указаны в фармакопейной статье на лекарственное растительное сырьё/препарат.

В зависимости от морфологических особенностей, структуры и размеров цельного лекарственного растительного сырья/препарата для его просеивания используют сита с размером отверстий 3, 2, 1 и 0,5 мм.

Для измельчённого лекарственного растительного сырья/препарата и порошка в фармакопейной статье приводятся допустимые значения содержания частиц большего и меньшего размера, определяемые с помощью двух сит, размер отверстий которых указан в фармакопейной статье на анализируемое лекарственное растительное сырьё/препарат.

В зависимости от морфологической группы измельчённое лекарственное растительное сырьё/препарат, как правило, имеет размер частиц не более 7, 5 или 3 мм. Для просеивания измельчённого лекарственного растительного сырья/препарата, как правило, используют верхние сита с размером отверстий 7, 5 или 3 мм и нижнее сито с размером отверстий 0,5 мм (0,25 мм). В ряде случаев, когда высушенное лекарственное растительное сырьё/препарат имеет хрупкую структуру, размер отверстий нижнего сита составляет 0,18 мм (ромашки аптечной цветки, мяты перечной листья, донника трава и др.).

Лекарственное растительное сырьё/препарат, измельчённые, как правило, до частиц размером не более 2 мм называют порошком. Для просеивания порошка, как правило, используют верхнее сито с размером отверстий 2 мм и нижнее сито с размером отверстий 0,18 мм.

Для цельного лекарственного растительного сырья/препарата количество частиц, проходящих сквозь сито с указанным размером отверстий, не должно превышать 5 %, если иное не указано в фармакопейной статье.

Для измельчённого лекарственного растительного сырья/препарата и порошка количество частиц, не проходящих сквозь верхнее сито с указанным размером отверстий, не должно превышать 5 %; количество частиц, проходящих сквозь нижнее сито с указанным размером отверстий, не должно превышать 5 %, если иное не указано в фармакопейной статье.

Методика определения измельчённости. Часть аналитической пробы лекарственного растительного сырья/препарата помещают на сито, указанное в соответствующей фармакопейной статье на лекарственное растительное сырьё/препарат, и осторожно, плавными вращательными движениями просеивают, не допуская дополнительного измельчения. Просеивание измельчённых частей считается законченным, если количество лекарственного растительного сырья/препарата, прошедшего сквозь сито при дополнительном просеве в течение 1 мин, составляет менее 1 % сырья/препарата, оставшегося на сите.

Для цельного сырья частицы, прошедшие сквозь сито, взвешивают и вычисляют их процентное содержание к массе аналитической навески.

Для просеивания измельчённого лекарственного растительного сырья/препарата и порошка берут два сита. Часть аналитической пробы сырья/препарата помещают на верхнее сито и просеивают. Затем отдельно взвешивают лекарственное растительное сырьё/препарат, оставшееся на верхнем сите и прошедшее сквозь нижнее сито, и вычисляют процентное содержание частиц, не прошедших сквозь верхнее сито, и содержание частиц, прошедших сквозь нижнее сито, к массе аналитической навески. Взвешивание проводят с точностью ± 0,1 г при массе аналитической навески свыше 100 г и ± 0,05 г при массе аналитической навески 100 г и менее.

Допустимая норма содержания измельчённых частиц для каждого вида лекарственного растительного сырья/препарата должна быть указана в фармакопейной статье.

###### Определение содержания примесей

Обычно к допустимым примесям лекарственного растительного сырья/препаратов относят:

- части сырья, изменившие окраску, присущую данному виду лекарственного растительного сырья/препарата (побуревшие, почерневшие, выцветшие и т. д.);

- другие части растения, не соответствующие установленному описанию сырья;

- органическую примесь (части других неядовитых растений);

- минеральную примесь (земля, песок, камешки).

К недопустимым примесям относят:

- стекло;

- помет грызунов и птиц;

- части ядовитых растений;

- части растений, утратившие свою окраску (с указанием в фармакопейной статье их недопустимой окраски).

Часть аналитической пробы цельного и измельчённого лекарственного растительного сырья/препарата, оставшуюся после определения подлинности и измельчённости, взвешивают с точностью ± 0,01 г, затем помещают на чистую гладкую поверхность и лопаточкой или пинцетом выделяют примеси, указанные в фармакопейной статье на лекарственное растительное сырьё/препарат.

Для порошка, как правило, определяют только минеральную примесь, так как определение других допустимых примесей затруднено.

Одновременно обращают внимание на наличие вредителей запасов в соответствии с требованиями ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Каждый вид примеси взвешивают отдельно с точностью ± 0,1 г при массе аналитической навески более 100 г и точностью ± 0,05 г при массе аналитической навески 100 г и менее.

Содержание каждого вида примеси в процентах (X) вычисляют по формуле:

где m1 – масса примеси, г;
m2 – навеска лекарственного растительного сырья/препарата, г.

Для допустимых примесей устанавливаются следующие нормы: органическая примесь должна составлять не более 1 %; минеральная примесь – не более 1 %; части сырья/препарата, утратившие окраску, присущую данному виду сырья/препарата, − не более 3 %; другие части растения, не соответствующие установленному описанию сырья/препарата, − не более 2 %, если иное не указано в фармакопейной статье.

Для определения содержания минеральной примеси, имеющей размеры менее 2 мм, анализируемую пробу цельного и измельчённого лекарственного растительного сырья/препарата просеивают сквозь сито с размером отверстий 2 мм.

Частицы, прошедшие сквозь сито, помещают в стеклянный стакан вместимостью 1000 мл и далее используют метод определения содержания минеральной примеси в порошке.

Массу минеральной примеси, полученную в отсеве, присоединяют к массе минеральной примеси, отобранной механическим способом с помощью пинцета, и рассчитывают её суммарное содержание по формуле (1).

Методика определения содержания минеральной примеси в порошке. Часть аналитической пробы взвешивают с точностью ± 0,01 г, затем помещают в стеклянный стакан вместимостью 1000 мл, прибавляют 200 мл воды. Чтобы устранить комочки из слипшихся частиц, содержимое размешивают до полного смачивания лекарственного растительного сырья/препарата, равномерно распределяя в объёме раствора. Выдерживают 3–5 мин. После оседания минеральной примеси воду со взвешенными частицами быстро (не давая разбухнуть частицам сырья) сливают с осадка. Осадок в стакане несколько раз промывают водой до полного удаления взвешенных частиц лекарственного растительного сырья/препарата.

По окончании промывания в стакане должен остаться осадок минеральной примеси с минимальным количеством воды. Стакан с осадком помещают в сушильный шкаф и сушат при температуре 100-105 оС до приобретения осадком сыпучести. Высушенный осадок (минеральную примесь) охлаждают и взвешивают с точностью ± 0,01 г. Содержание минеральной примеси вычисляют по формуле (1).

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.3.0005 Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте

Взамен ОФС.1.5.3.0005.15

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения золы, нерастворимой в хлористоводородной кислоте, представляющей собой остаток после обработки хлористоводородной кислотой золы общей, и состоящей преимущественно из кремнезёма.

В тигель, содержащий остаток после определения золы общей, прибавляют 25 мл хлористоводородной кислоты разведённой 10 %, тигель накрывают часовым стеклом и осторожно кипятят в течение 10 мин. После охлаждения к содержимому тигля прибавляют 5 мл горячей воды, обмывая часовое стекло. Жидкость фильтруют через беззольный фильтр, перенося на него остаток с помощью горячей воды. Фильтр с осадком промывают горячей водой до нейтральной реакции промывных вод по универсальной индикаторной бумаге, переносят его в тот же тигель, сушат и прокаливают при красном калении (550–650 °С), охлаждают в эксикаторе и взвешивают. Прокаливание проводят до постоянной массы остатка.

Содержание золы, нерастворимой в хлористоводородной кислоте разведённой 10 %, в сырье/препарате в процентах (X) вычисляют по формуле:

где m1 – масса золы, г;
m2 – масса сырья/препарата, г.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.3.0006 Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах

Взамен ОФС.1.5.3.0006.15

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах, которые в последующем используются для получения экстракционных лекарственных форм (экстракты, настойки, настои, отвары и т.д.), а также в случае отсутствия в соответствующей фармакопейной статье метода количественного определения биологически активных веществ.

Показатель «экстрактивные вещества» характеризует содержание в лекарственном растительном сырье/препарате всей суммы биологически активных и балластных веществ, извлекаемых экстрагентом. Тип экстрагента приводится в фармакопейной статье на лекарственное растительное сырьё/препарат в зависимости от его последующего назначения.

Определение содержания экстрактивных веществ проводят гравиметрическим методом с использованием одной из описанных ниже методик.

Методика 1 используется для определения содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье/препаратах, которые в последующем подвергаются процессу однократной экстракции.

Методика 2 используется для определения содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье/препаратах, которые в последующем подвергаются многократной обработке одним и тем же экстрагентом.

Методика 3 используется для определения содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье/препаратах, которые в последующем подвергаются последовательной обработке различными экстрагентами.

При отсутствии соответствующих указаний в фармакопейной статье используют методику 1.

###### Методика 1

В коническую колбу вместимостью 200−250 мл помещают 1,0 г (точная навеска) измельчённого лекарственного растительного сырья/препарата, просеянного сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, прибавляют 50 мл экстрагента, указанного в соответствующей фармакопейной статье на лекарственное растительное сырьё/препарат, колбу закрывают пробкой, взвешивают с точностью ±0,01 г и оставляют на 1 ч. Колбу соединяют с обратным холодильником, нагревают, поддерживая слабое кипение в течение 2 ч. После охлаждения колбу с содержимым вновь закрывают той же пробкой и взвешивают. Потерю в массе восполняют экстрагентом. Содержимое колбы тщательно взбалтывают и фильтруют через сухой беззольный фильтр в сухую колбу вместимостью 150−200 мл.

В фарфоровую чашку предварительно высушенную при температуре от 100 до 105 °С до постоянной массы и взвешенную с точностью до 0,0001 г переносят пипеткой 25,0 мл полученного фильтрата. Содержимое чашки выпаривают на водяной бане или в вакуум-сушильном шкафу досуха. Чашку с сухим остатком сушат при температуре от 100 до 105 °С до постоянной массы, охлаждают в течение 30 мин в эксикаторе, на дне которого находится кальция хлорид безводный и взвешивают с точностью до 0,0001 г.

Обработка результатов

Содержание экстрактивных веществ в абсолютно сухом лекарственном растительном сырье/препарате в процентах (X) вычисляют по формуле:

(1)

где m1 – масса чашки с сухим остатком, г;
m0 – масса чашки, г;
a – навеска лекарственного растительного сырья/препарата, г;
W – влажность лекарственного растительного сырья/препарата, %.

Примечание – Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье/препарате, содержащем водорастворимые полисахариды, проводят методом настаивания в соответствии с ОФС «Настои и отвары».

###### Методика 2

В коническую колбу вместимостью 200−250 мл помещают 1,0 г (точная навеска) измельчённого лекарственного растительного сырья/препарата, просеянного сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, прибавляют 50 мл экстрагента, указанного в соответствующей фармакопейной статье на лекарственное растительное сырьё/препарат, колбу закрывают пробкой, взвешивают с точностью ±0,01 г и оставляют на 1 ч. Колбу соединяют с обратным холодильником, нагревают на водяной бане, поддерживая слабое кипение в течение 2 ч. После охлаждения колбу с содержимым вновь закрывают той же пробкой, взвешивают. Потерю в массе восполняют экстрагентом. Содержимое колбы тщательно взбалтывают и фильтруют через сухой беззольный фильтр в сухую колбу вместимостью 150−200 мл. Фильтр с навеской снова помещают в исходную колбу и повторяют эту процедуру в соответствии с количеством экстракций сырья, необходимым при получении извлечения (двух-, трёх- и более кратном), каждый раз прибавляя фильтрат в ту же колбу.

В фарфоровую чашку, предварительно высушенную при температуре от 100 до 105 °С до постоянной массы и взвешенную с точностью ±0,01 г, пипеткой переносят 25,0 мл объединённого фильтрата. Содержимое чашки выпаривают на водяной бане или в вакуум-сушильном шкафу досуха. Чашку с сухим остатком сушат при температуре от 100 до 105 °С до постоянной массы, охлаждают в течение 30 мин в эксикаторе, на дне которого находится кальция хлорид безводный и взвешивают с точностью до 0,0001 г.

Обработка результатов

Содержание экстрактивных веществ в абсолютно сухом лекарственном растительном сырье/препарате в процентах (Х) вычисляют по формуле:

(2)

где m1 – масса чашки с сухим остатком, г;
m0 – масса чашки, г;
a – навеска лекарственного растительного сырья/препарата, г;
W – влажность лекарственного растительного сырья/препарата, %;
n – число экстракций.

###### Методика 3

В коническую колбу вместимостью 200−250 мл, помещают 1,0 г (точная навеска) измельчённого лекарственного растительного сырья/препарата, просеянного сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, прибавляют 50 мл экстрагента, указанного в соответствующей фармакопейной статье на лекарственное растительное сырьё/препарат, взвешивают и оставляют на 1 ч. Колбу соединяют с обратным холодильником и нагревают, поддерживая слабое кипение в течение 2 ч. После охлаждения колбу с содержимым вновь закрывают той же пробкой и взвешивают. Потерю в массе восполняют экстрагентом. Содержимое колбы взбалтывают и фильтруют через фильтр беззольный в сухую колбу вместимостью 150−200 мл. Фильтр с навеской возвращают в исходную коническую колбу.

Аналитическую процедуру повторяют с использованием других экстрагентов, указанных в фармакопейной статье, фильтруя каждый раз в новые колбы.

Из каждой полученной фракции отбирают пипеткой по 25,0 мл фильтрата, переносят в отдельные фарфоровые чашки, предварительно высушенные при температуре от 100 до 105 °С до постоянной массы и взвешенные по отдельности с точностью ±0,01 г. Содержимое чашек выпаривают на водяной бане или в вакуум-сушильном шкафу досуха. Чашки с сухими остатками выдерживают при температуре от 100 до 105 °С до постоянной массы, охлаждают в течение 30 мин в эксикаторе, на дне которого находится кальция хлорид безводный, взвешивают по отдельности с точностью до 0,0001 г.

Обработка результатов

Содержание экстрактивных веществ в каждой фракции в абсолютно сухом лекарственном растительном сырье/препарате в процентах (Х) вычисляют по формуле:

(3)

где m1 – масса чашки с сухим остатком, г;
m0 – масса чашки, г;
a – навеска лекарственного растительного сырья/препарата, г;
W влажность лекарственного растительного сырья/препарата, %.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.3.0007 Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения

Взамен ОФС.1.5.3.0007.15

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения влажности лекарственного растительного сырья, лекарственных средств растительного и животного происхождения (бадяга).

Метод основан на измерении потери в массе при высушивании за счёт удаления влаги и летучих веществ, которую определяют в лекарственном растительном сырье (свежем и высушенном), лекарственных растительных препаратах, лекарственном средстве животного происхождения (бадяга) при высушивании до постоянной массы или другим методом, описанным в фармакопейной статье.

Пробоподготовка

Аналитическую пробу испытуемого образца при необходимости измельчают любым подходящим способом до размера частиц не более 10 мм, что определяется особенностями лекарственного средства природного происхождения.

Методика

Аналитическую пробу испытуемого образца перемешивают и берут две навески по 3–5 г, взвешенные с точностью ±0,01 г. Каждую навеску испытуемого образца помещают в предварительно высушенный до постоянной массы и взвешенный бюкс с крышкой и ставят в сушильный шкаф, нагретый до температуры 100–105oС для высушенного сырья и до температуры 130–135oС для свежего сырья. При этой же температуре осуществляют высушивание взятых навесок.

Высушивание испытуемого образца проводят в открытых бюксах вместе со снятыми крышками. При взвешивании бюксы должны быть закрыты. Первое взвешивание охлаждённых в эксикаторе в течение 30 мин анализируемых образцов, представленных листьями, травами, цветками и порошком из лекарственного растительного сырья/препаратов, проводят через 2 ч; анализируемых образцов, представленных корнями, корневищами, корой, плодами, семенами и другими морфологическими группами лекарственного растительного сырья/препаратов – через 3 ч. Для свежего лекарственного растительного сырья, представленного листьями, травами, цветками и плодами, первое взвешивание охлаждённых в эксикаторе анализируемых образцов проводят через 1 ч, анализируемых образцов, представленных другими более плотными по морфологической структуре видами сырья – через 2 ч.

Высушивание испытуемого образца проводят до постоянной массы. Постоянная масса считается достигнутой, если разница между двумя последовательными взвешиваниями после 30 мин дополнительного высушивания и 30 мин охлаждения в эксикаторе не превышает ±0,01 г. В этом случае имеется в виду влажность воздушно-сухого испытуемого образца.

При определении абсолютной влажности, значение которой используется в формулах расчёта количества действующих веществ в высушенном испытуемом образце, определение проводят в навесках 1–2 г (точная навеска), взятых из аналитической пробы, предназначенной для количественного определения действующих веществ и золы, вышеописанным методом, но при разнице между взвешиваниями, не превышающей ±0,0005 г.

Обработка результатов

Влажность испытуемого образца в процентах (W) вычисляют по формуле:

где m - масса до высушивания, г;
m1 – масса после высушивания, г.

За окончательный результат определения принимают среднее арифметическое трёх параллельных определений, вычисленных до десятых долей процента. Допустимое расхождение между результатами двух параллельных определений не должно превышать 0,5 %.

Для высушенного испытуемого образца устанавливают верхний предел содержания влаги: не более…%. Для свежего лекарственного растительного сырья, как правило, нормируется нижний и верхний предел содержания влаги: не менее…% и не более…%.

Для определения влажности лекарственного растительного сырья/препаратов возможно использование влагомеров термографических инфракрасных, при этом в фармакопейной статье должны быть указаны навеска, измельчённость лекарственного растительного сырья/препарата, а также режим сушки и норма влажности. Методика должна быть валидирована.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.3.0008 Определение содержания дубильных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных средствах растительного происхождения

Взамен ОФС.1.5.3.0008.18

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения содержания дубильных веществ в лекарственном растительном сырье, фармацевтических субстанциях растительного происхождения и лекарственных препаратах растительного происхождения, в т. ч. лекарственных растительных препаратах.

Определение содержания дубильных веществ проводят титриметрическим (метод 1. Определение суммы дубильных веществ в пересчёте на танин) и спектрофотометрическими методами (метод 2. Определение суммы дубильных веществ в пересчёте на пирогаллол и метод 3. Определение суммы дубильных веществ в пересчёте на пирогаллол или (+)-катехин).

###### Метод 1

В коническую колбу вместимостью 500 мл, помещают 2,0 г (точная навеска) испытуемого образца, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с размером отверстий 2 мм, добавляют 250 мл нагретой до кипения воды и кипятят с обратным холодильником на электрической плитке с закрытой спиралью в течение 30 мин при периодическом перемешивании. Полученное извлечение охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через вату в мерную колбу вместимостью 250 мл так, чтобы частицы испытуемого образца не попали в колбу, доводят объём раствора водой до метки.

В коническую колбу вместимостью 1000 мл помещают 25,0 мл полученного водного извлечения или точный объём экстракта жидкого или настойки, указанный в фармакопейной статье, прибавляют 500 мл воды, 25 мл индигокармина раствора 0,1% и титруют при постоянном перемешивании калия перманганата раствором 0,02 М до золотисто-жёлтого окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт: в коническую колбу вместимостью 1000 мл помещают 525 мл воды, 25 мл раствора индигосульфокислоты и титруют при постоянном перемешивании калия перманганата раствором 0,02 М до золотисто-жёлтого окрашивания.

1 мл калия перманганата раствора 0,02 М соответствует 0,004157 г дубильных веществ в пересчёте на танин.

Обработка результатов

Содержание суммы дубильных веществ в пересчёте на танин в абсолютно сухом испытуемом образце в процентах (Х) вычисляют по формуле:

(1)

где V – объём калия перманганата раствора 0,02 М, израсходованного на титрование водного извлечения, мл;
V1 – объём калия перманганата раствора 0,02 М, израсходованного на титрование в контрольном опыте, мл;
a – навеска испытуемого образца, г;
W – влажность испытуемого образца, %;
0,004157 – количество дубильных веществ, соответствующее 1 мл калия перманганата раствора 0,02 М (в пересчёте на танин), г;
250 – общий объём водного извлечения, мл;
25 объём водного извлечения, взятого для титрования, мл.

###### Метод 2

Пробоподготовка

1. Для лекарственного растительного сырья и лекарственного растительного препарата. Точную навеску испытуемого образца, указанную в фармакопейной статье, измельчённую до величины частиц, проходящих сквозь сито с размером отверстий 1 мм, помещают в круглодонную колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 150 мл воды и нагревают на водяной бане в течение 30 мин, затем охлаждают под проточной водой до комнатной температуры и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 250 мл. Круглодонную колбу ополаскивают водой, промывные воды переносят в мерную колбу с экстрактом, доводят объём водой до метки. После осаждения твёрдых частиц полученный раствор фильтруют через фильтр беззольный диаметром около 125 мм, отбрасывая первые 50 мл фильтрата.

- Определение проводят в защищённом от света месте.

2. Для экстракта жидкого или настойки. Точный объём экстракта жидкого или настойки, указанный в фармакопейной статье, помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают. Полученный раствор фильтруют через фильтр беззольный диаметром около 125 мм, отбрасывая первые 50 мл фильтрата.

Методика

Определение суммы дубильных веществ. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл фильтрата и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, прибавляют 1 мл фосфорномолибденово-вольфрамового реактива и 10 мл воды, доводят объём раствора натрия карбоната раствором 10,6 % до метки (испытуемый раствор). Через 30 мин измеряют оптическую плотность испытуемого раствора (А1) на спектрофотометре при длине волны 760 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения воду.

Определение суммы дубильных веществ, не адсорбируемых кожным порошком. К 10,0 мл фильтрата прибавляют 0,1 г стандартного образца кожного порошка, перемешивают полученную смесь в течение 1 ч и фильтруют через фильтр беззольный. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл полученного фильтрата и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, прибавляют 1 мл фосфорномолибденово-вольфрамового реактива, 10 мл воды и доводят объём раствора натрия карбоната раствором 10,6 % до метки (испытуемый раствор). Через 30 мин измеряют оптическую плотность испытуемого раствора (А2) на спектрофотометре при длине волны 760 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения воду.

Параллельно измеряют оптическую плотность стандартного раствора.

Раствор стандартного образца пирогаллола. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,05 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца пирогаллола, растворяют в 50 мл воды и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл раствора стандартного образца пирогаллола, прибавляют 1 мл фосфорномолибденово-вольфрамового реактива, 10 мл воды и доводят объём раствора натрия карбоната раствором 10,6 % до метки (стандартный раствор). Через 30 мин измеряют оптическую плотность стандартного раствора (А3) на спектрофотометре при длине волны 760 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения воду.

Обработка результатов

Содержание суммы дубильных веществ в пересчёте на пирогаллол в абсолютно сухом испытуемом образце в процентах (Х) вычисляют по формуле:

(2)

где А1 – оптическая плотность испытуемого раствора при определении суммы дубильных веществ;
А2 – оптическая плотность испытуемого раствора при определении суммы дубильных веществ, не адсорбируемых кожным порошком, в пересчёте на пирогаллол;
А3 – оптическая плотность стандартного раствора;
a1 навеска испытуемого образца, г;
a2 навеска фармакопейного стандартного образца пирогаллола, г;
P содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце пирогаллола, %;
W влажность испытуемого образца, %.

###### Метод 3

В коническую колбу вместимостью 500 мл помещают 2,0 г (точная навеска), если иное не указано в фармакопейной статье, измельченного испытуемого образца, просеянного сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, заливают 250 мл воды и кипятят с обратным холодильником на электрической плитке с закрытой спиралью в течение 30 мин при периодическом перемешивании. Полученное извлечение охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через вату в мерную колбу вместимостью 250 мл так, чтобы частицы испытуемого образца не попали в колбу и доводят объём раствора водой до метки. Полученный раствор фильтруют через фильтр беззольный диаметром около 125 мм, отбрасывая первые 50 мл фильтрата.

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл фильтрата и доводят объём раствора водой до метки. Измеряют оптическую плотность раствора А (А1) на спектрофотометре при длине волны 266 нм (для гидролизуемых дубильных веществ) или 278 нм (для конденсированных дубильных веществ), если иное не указано в фармакопейной статье, в кювете с толщиной слоя 1,0 мм относительно раствора сравнения. В качестве раствора сравнения используют воду.

Раствор Б. К 5,0 мл фильтрата прибавляют 0,05 г кожного порошка, перемешивают полученную смесь в течение 30 мин и фильтруют через бумажный фильтр диаметром около 125 мм. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного фильтрата и доводят объём раствора водой до метки. Измеряют оптическую плотность раствора Б (А2) на спектрофотометре при длине волны 266 нм (для гидролизуемых дубильных веществ) или 278 нм (для конденсированных дубильных веществ), если иное не указано в фармакопейной статье, в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения. В качестве раствора сравнения используют воду.

Раствор стандартного образца. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца пирогаллола (для гидролизуемых дубильных веществ) или ((+)-катехина (для конденсированных дубильных веществ), если иное не указано в фармакопейной статье, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным. Измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца (А3) на спектрофотометре при длине волны 266 нм (для гидролизуемых дубильных веществ) или 278 нм (для конденсированных дубильных веществ), если иное не указано в фармакопейной статье, в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения. В качестве раствора сравнения используют воду.

Обработка результатов

Содержание суммы дубильных веществ в пересчете на пирогаллол или (+)-катехин в абсолютно сухом испытуемом образце в процентах (Х) вычисляют по формуле:

(3)

где А1 – оптическая плотность раствора А;
А2 – оптическая плотность раствора Б;
А3 – оптическая плотность раствора стандартного образца пирогаллола или (+)-катехина;
a1 – навеска испытуемого образца, г;
a2 – навеска фармакопейного стандартного образца пирогаллола или (+)-катехина, г;
P – содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце пирогаллола или (+)-катехина, %;
W – влажность испытуемого образца, %.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.3.0009 Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах

Взамен ОФС.1.5.3.0009.15

Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка проводят с использованием следующих методов: атомно-абсорбционной спектрометрии (метод 1), атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (метод 2), масс-спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (метод 3).

Процедура определения содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах состоит из следующих основных этапов:

1. Отбор пробы для определения остаточных пестицидов, тяжёлых металлов и мышьяка. Отбор пробы проводится в соответствии с требованиями ОФС «Отбор проб лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов» в условиях, исключающих дополнительное загрязнение сырья.

2. Подготовка пробы.

3. Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в испытуемых пробах.

4. Определение соответствия лекарственного растительного сырья/препарата допустимым нормам.

Результаты, полученные при определении содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье, распространяются на лекарственный растительный препарат, произведенный из данной партии лекарственного растительного сырья.

Лекарственные растительные препараты подвергаются выборочному контролю на содержание тяжёлых металлов и мышьяка не реже одного раза в год (одна серия каждого наименования).

Методики определения тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье/препаратах должны быть валидированы. Выбор методики измерения аналитического сигнала (по градуировочной кривой или методом «стандартных добавок») для конкретных объектов исследования определяется в ходе валидации методики.

Приготовление растворов осуществляют в мерной посуде класса А или 1 класса точности, а их хранение − в пластиковой посуде (PMP, PFA, PP).

Используемая вода должна быть деионизованной (деионизированной) на ионнообменных смолах и соответствовать требованиям, предъявляемым к воде очищенной.

Предельно допустимое содержание тяжёлых металлов и мышьяка не должно превышать значений, приведенных в табл. 1, если иное не указано в фармакопейной статье (например, для ламинарии слоевищ предельно допустимое содержание мышьяка составляет 90 мг/кг).

Таблица 1. Предельно допустимое содержание тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах
Элемент | Предельно допустимое содержание, мг/кг
--- | ---
Свинец Кадмий Ртуть Мышьяк | 6,0 1,0 0,1 0,5

Примечание – В соответствии с требованиями безопасности, принятыми в Российской Федерации.

###### Метод 1

Оборудование. Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах проводят на атомно-абсорбционном спектрометре с различными атомизаторами пробы (пламенный, электротермический), а также методом «холодного пара» и генерации гидридов.

Подготовка лабораторной посуды включает следующие последовательные этапы: обычная мойка посуды с раствором моющего средства, тщательное ополаскивание проточной водой питьевой, затем замачивание в натрия гидроксида растворе 1 % и водорода пероксиде, ополаскивание проточной водой питьевой с последующим замачиванием в течение 1 ч в хлористоводородной кислоты растворе 10 %, либо обработка посуды азотной кислоты раствором 1 %, ополаскивание водой для хроматографии 3-4 раза, сушка.

Приготовление стандартных растворов тяжёлых металлов и мышьяка осуществляют в лабораторных условиях или используют готовые растворы стандартных образцов.

Пробоподготовка включает в себя предварительное измельчение пробы для определения остаточных пестицидов, тяжёлых металлов и мышьяка с целью приготовления однородного образца и последующего взятия не менее двух параллельных навесок, деструкцию органической матрицы для переведения ионов металлов и мышьяка в раствор.

При отборе проб следует избегать контакта лекарственного растительного сырья/препарата с предметами, содержащими определяемые металлы. Загрязнение лабораторной посуды железом, хромом и никелем может происходить при контакте с нержавеющей сталью, свинцом − с резиной, кадмием − с некоторыми видами пластмасс. Эти загрязнения контрольным опытом не учитываются и могут давать заметное завышение результатов.

Пробу лекарственного растительного сырья предварительно измельчают с помощью ножа или ножниц, затем в специальных лабораторных дробилках или мельницах-измельчителях и просеивают сквозь сито с размером отверстий 1 мм. Лекарственные растительные препараты, расфасованные в пачки, дополнительно измельчают и просеивают сквозь сито с размером отверстий 1 мм.

Лекарственные растительные препараты, расфасованные в фильтр-пакеты, дополнительно измельчают и просеивают сквозь сито с размером отверстий 1 мм.

Для дальнейшей подготовки к анализу рекомендуется использовать два метода подготовки пробы:

- сухая (термическая) минерализация;

- мокрая (кислотная)минерализация.

Пробоподготовка лекарственного растительного сырья/препарата к анализу заключается в деструкции органической основы пробы методами «сухой» или «мокрой» минерализации с последующим растворением остатка в водных растворах кислот или кислотной экстракции (неполной минерализации). При недостаточной чувствительности проводят концентрирование токсичных элементов с последующим атомно-абсорбционным определением их в органических растворах.

Метод «сухой» минерализации основан на полном разложении органических веществ путем сжигания анализируемой пробы в муфельной печи при контролируемом температурном режиме.

Метод «мокрой» минерализации основан на полном разложении органических веществ пробы при нагревании в смеси концентрированных кислот. Проведение «мокрой» минерализации возможно в открытых системах (колбах Кьельдаля, стеклянных стаканах), либо в закрытых системах (например, автоклав, микроволновая система для пробоподготовки).

Метод пробоподготовки лекарственного растительного сырья/препарата к анализу выбирают в соответствии с аппаратурным оснащением аналитической лаборатории.

Проведение пробоподготовки с использованием различных систем минерализации проб рекомендуется проводить с валидацией по образцам с известным содержанием элементов.

Метод 1а («сухая» минерализация, свинец, кадмий)

Помещают 2,5 г (точная навеска) испытуемого образца в фарфоровый, стеклоуглеродный, кварцевый или другой тигель и устанавливают в холодную муфельную печь. Озоление испытуемых образцов проводят постепенно, поднимая температуру печи на 50 °С каждые 30 мин (во избежание воспламенения) до 480 °С, выдерживают в печи до полного озоления образца. После охлаждения пробу переносят во фторопластовый стакан, прибавляют 5 мл азотной кислоты концентрированной, свободной от свинца и кадмия, и оставляют на ночь. Затем нагревают пробу на электрической плитке и выпаривают до сухого остатка, после чего добавляют 1 мл фтористоводородной кислоты концентрированной и при сильном нагреве выпаривают досуха. Остаток охлаждают и обрабатывают 10 мл хлористоводородной кислоты разведенной (1:1) и упаривают до «влажных солей». Остаток доводят хлористоводородной кислоты раствором 2,5 % до объёма 10 мл.

Метод 1б («сухая» минерализация, свинец, кадмий)

Помещают 0,5-1,0 г (точная навеска) испытуемого образца в тигель (из стеклоуглерода марки С-200, разрешается использование кварцевых и платиновых тиглей, фарфоровых с неповрежденной внутренней поверхностью), смачивают 0,5-1,5 мл серной кислоты концентрированной и осторожно нагревают на пламени газовой горелки, электрической плитке и т.п. до полного обугливания. Тигель охлаждают до комнатной температуры и прибавляют 1 мл азотной кислоты концентрированной и 0,25 мл серной кислоты концентрированной. Осторожно нагревают на электрической плитке до исчезновения бурых паров, избегая разбрызгивания и усиливают нагрев до исчезновения плотных белых паров. Тигель помещают в муфельную печь и прокаливают при температуре около 500 °С до получения зольного остатка. Охлаждают до комнатной температуры и прибавляют 4 мл хлористоводородной кислоты раствора 6 М, закрывают крышкой и нагревают на водяной бане 15 мин. Крышку снимают и упаривают содержимое тигля до «влажных солей», прибавляют 0,05 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и 5 мл горячей воды и нагревают в течение 2 мин. Полученный остаток количественно (трехкратно) переносят небольшими порциями при помощи воды для хроматографии в мерную колбу вместимостью 25 или 50 мл, фильтруя через беззольный фильтр, промытый хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М, и доводят объём раствора водой для хроматографии до метки.

Метод 2a («мокрая» минерализация, свинец, кадмий)

Помещают 1,0 г (точная навеска) испытуемого образца в колбу Кьельдаля вместимостью 100 мл, прибавляют 7 мл азотной кислоты концентрированной, перемешивают до полного смачивания пробы. К содержимому прибавляют 4 мл хлорной кислоты концентрированной и перемешивают. Колбу закрепляют под углом 45° на песчаной бане, осторожно нагревают до появления бурых паров азота оксида и нагрев отключают. После полного прекращения выделения бурых паров температуру повышают до появления плотных белых паров и получения кислотного остатка 1-2 мл. Колбу снимают с песчаной бани, охлаждают и количественно при помощи воды для хроматографии переносят ее содержимое в мерную колбу вместимостью 50 или 100 мл, фильтруя содержимое через беззольный фильтр, промытый хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М, доводят объём раствора водой до метки.

Метод 2б («мокрая» минерализация, ртуть)

Помещают 0,5 г (точная навеска) испытуемого образца в стеклянный стакан вместимостью 50 мл, смачивают водой, приливают 6 мл серной кислоты концентрированной и 3 мл азотной кислоты концентрированной. Перемешивают, стакан накрывают крышкой из стеклоуглерода и оставляют в водяной бане на 1 сут при температуре около 10-20 °C. Нагреваютна водяной бане при температуре 50-60 °С в течение 2 ч, охлаждают до комнатной температуры, снимают крышки из стеклоуглерода и прибавляют 5 мл аммония персульфата раствора 5 %. Смесь перемешивают и оставляют в стакане на ночь при комнатной температуре. На следующий день содержимое стакана переносят в мерную колбу вместимостью 200 или 250 мл и проводят дальнейшее определение.

Метод 2в («мокрая» минерализация, ртуть)

Помещают 1 г (точная навеска) испытуемого образца во фторопластовый стакан металлического тубуса, смачивают 6 мл смеси серной кислоты концентрированной и азотной кислоты концентрированной 1:5. Стакан, закрытый фторопластовой крышкой, помещают в металлический тубус. Металлический тубус закрывают, помещают в сушильный шкаф, нагревают до 100 °С и выдерживают при этой температуре в течение 4 ч, далее после охлаждения переносят содержимое фторопластового стакана в мерную колбу вместимостью 200 или 250 мл, и проводят определение.

Метод 2г («мокрая» минерализация, свинец, кадмий, мышьяк)

Помещают 1,0 г (точная навеска) испытуемого образца помещают во фторопластовый стакан для автоклава, смачивают 10 мл смеси хлористоводородной кислоты концентрированной и азотной кислоты концентрированной в соотношении 1:1. Стакан, закрытый фторопластовой крышкой, помещают в автоклав, нагревают до 200 °С и выдерживают при этой температуре 2 ч. Вынимают, охлаждают, вскрывают и количественно переносят содержимое фторопластового стакана в мерную колбу вместимостью 50 мл, фильтруя содержимое через беззольный фильтр, промытый хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М, доводят объём раствора водой до метки.

Метод 2д («мокрая» минерализация, свинец, кадмий, ртуть, мышьяк)

Мокрую минерализацию проводят в системе микроволнового разложения. Разложение в микроволновой системе возможно в многообразном аппаратурном исполнении при использовании различных кислот и реагентов. При использовании таких систем нужно придерживаться рекомендаций фирмы-изготовителя. Необходимо валидировать методику разложения лекарственного растительного сырья/препаратов.

Пример методики пробоподготовки

Помещают 0,5 г (точная навеска) испытуемого образца в сосуд для микроволнового разложения, приливают 3 мл воды и 5 мл азотной кислоты концентрированной, осторожно перемешивают до полного смачивания и выдерживают в течение 5–10 мин. Сосуд герметично закрывают, помещают в защитный кожух и затем в ротор микроволновой системы. Далее проводят обработку по программе, приведенной в табл. 2.

Таблица 2. Программа обработки образцов лекарственного растительного сырья/препарата в системе микроволнового разложения
Этап | Время, мин | Температура, °С | Мощность излучения, Вт
--- | --- | --- | ---
1 | 5 | 80 | до 350
2 | 3,5 | 160 | до 800
3 | 4,5 | 190 | до 1000
4 | 12 | 190 | до 800

В конце цикла сосуды охлаждают на воздухе, открывают и полученный прозрачный или с небольшим осадком раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, фильтруя через беззольный фильтр, промытый хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М, и доводят объём раствора водой до метки.

Проведение измерений. Определения проводят различными вариантами метода атомно-абсорбционной спектрометрии, с разными способами атомизации пробы. Чувствительность измерения в атомно-абсорбционном анализе для пламенного метода составляет 0,01-10 мкг/мл, для непламенных − 0,0001-0,1 мкг/мл. Ртуть определяют методом атомно-абсорбционной спектрометрии с применением техники «холодных паров».

Анализ проб на содержание свинца и кадмия осуществляют: пламенной атомизацией (табл. 3); свинца, кадмия и мышьяка с использованием электротермического атомизатора (табл. 4); ртути – на ртутном анализаторе или с использованием ртутно-гидридной приставки к атомно-абсорбционному спектрометру (пламенный или электротермический вариант); мышьяка − с использованием ртутно-гидридной приставки к атомно-абсорбционному спектрометру в соответствии с условиями анализа элементов (табл. 3).

Таблица 3. Ориентировочные параметры определения тяжёлых металлов и мышьяка методом атомно-абсорбционной спектрометрии (пламенная атомизация)
Элемент | Длина волны, нм | Ширина щели, нм | Тип пламени | Чувствительность, мкг/мл
--- | --- | --- | --- | ---
Кадмий | 228,8 | 0,3 | В - А | 0,025
Свинец | 283,3 | 0,4 | В - А | 0,50
Ртуть | 253,7 | 0,7 | «холодный пар» | 0,002
Мышьяк | 193,7 | 0,5 |  | 0,002

Примечание – тип пламени: В – воздух, А – ацетилен в соответствии с требованиями инструкции по эксплуатации прибора.

Обработку полученного аналитического сигнала для ртути и мышьяка осуществляют по высоте пика.

Стадия высушивания зависит от кислотного, органического, минерального состава пробы и конструктивных особенностей прибора.

Обработку полученного аналитического сигнала для кадмия, свинца и мышьяка осуществляют по площади пика.

Параметры определения тяжёлых металлов и мышьяка со стадиями высушивания, озоления (пиролиза), атомизации и отжига (очистки) исследуемых проб отрабатываются для конкретных приборов в соответствии с инструкцией по эксплуатации прибора.

Таблица 4. Ориентировочные параметры определения тяжёлых металлов и мышьяка методом атомно-абсорбционной спектрометрии (электротермическая атомизация)
Элемент | Длина волны, нм | Ширина щели, нм | Стадия озоления (пиролиза) | Стадия атомизации
--- | --- | --- | --- | ---
Т,°С | tсек, с | Т,°С | tсек, с | tинт, с
Кадмий | 228,8 | 0,20-0,5 | 300-600 | 8-25 | 1300-1700 | 3-5 | 3-5
Свинец | 283,3 | 0,20-0,5 | 500-800 | 8-25 | 1600-2000 | 3-5 | 3-5
Ртуть* | 253,7 | 0,20-0,5 | - | - | 900-1100 | 3-6 | 3-6
Мышьяк** | 193,7 | 0,20-0,5 | 800-1400 | 8-15 | 2200-2600 | 3-5 | 3-5

Примечание – Т,°С − температура озоления, атомизации; tсек, с − время озоления, атомизации; tинт, с − время интегрирования;

* при использовании ртутно-гидридной приставки;

** при использовании корректора Зеемана.

Для уменьшения влияния минерального состава лекарственного растительного сырья/препарата на исследуемые элементы используют:

1. Кювету с пластиной (платформой).

2. Модификаторы матрицы.

3. Разбавление анализируемого раствора.

Подготовку атомно-абсорбционного спектрометра к работе осуществляют в соответствии с инструкцией по эксплуатации прибора с учетом особенности измерения низких концентраций элементов.

Результатом измерений является величина атомного поглощения элемента, полученная в абсорбционном режиме с доверительной вероятностью Р=0,95.

Обработку результатов измерений и определение соответствия тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье/препарате допустимым нормам проводят с использованием компьютерных программ. При ручной обработке данных строят график зависимости абсорбции от концентрации. Допускается применять линейную, кусочно-линейную или сглаженную нелинейную аппроксимацию градуировочной функции с коэффициентом корреляции не менее 0,990. В расчетах используют среднее арифметическое значение 3 параллельных измерений одной пробы.

Результаты определения содержания тяжёлых металлов и мышьяка в испытуемом образце (С) следует считать как среднее арифметическое 3 параллельных определений с точностью до 0,001 мкг.

Содержание тяжелого металла и мышьяка в испытуемом образце в мкг/г (Х) вычисляют по формуле:

(1)

где СХ - концентрация металла в испытуемом растворе, мкг/мл;
V - разведение, мл;
СК – концентрация металла в контрольном опыте, мкг/мл;
VК – объём контрольной пробы, мл;
а – навеска испытуемого образца, г.

###### Альтернативные способы пробоподготовки и проведения результатов измерений

При проведении определения содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье/препаратах методами атомно-абсорбционной спектрометрии; атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно связанной плазмой; масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой могут быть использованы способы пробоподготовки и проведения результатов измерений, приведенные ниже.

Метод 1 (сухая минерализация)

Метод соответствует методу 1б («сухая» минерализация, свинец, кадмий), приведенному в подразделе «Подготовка проб к анализу» для атомно-абсорбционной спектрометрии.

Метод 2 (мокрая минерализация)

Метод соответствует методу 2д («мокрая» минерализация, свинец, кадмий, ртуть, мышьяк), приведенному в подразделе «Подготовка проб к анализу» для атомно-абсорбционной спектрометрии.

Проведение измерений. Определение содержания кадмия, ртути, мышьяка, свинца проводят методом калибровочной кривой. Для этого из стандартных образцов элементов с концентрацией 0,1-1 г/дм3 готовят серию градуировочных растворов, содержащих заявленные элементы в таких концентрациях, чтобы ожидаемое значение концентраций элементов в испытуемом растворе находилось внутри диапазона концентраций градуировочных растворов.

Приготовление градуировочных растворов. Для приготовления градуировочных растворов используют готовые растворы стандартных образцов (ГСО) состава ионов металлов отечественного или зарубежного производства (CRM) c концентрацией элементов 0,1-1 г/дм3 в азотной или хлористоводородной кислоте с массовой долей кислоты не менее 1 %.

Измерения для каждого градуировочного раствора выполняют не менее 5 раз. С помощью программы обработки данных, полученные результаты для каждого градуировочного раствора усредняют, и строят линейную градуировочную характеристику (калибровочную кривую) зависимости выходного сигнала от концентрации определяемых элементов в градуировочном растворе (мг/дм3).

Градуировочная характеристика должна быть линейной во всем диапазоне измеряемых концентраций с коэффициентом корреляции не менее 0,990, который определяется автоматически, без вмешательства оператора.

По значению выходного сигнала испытуемого раствора с использованием градуировочной характеристики и программы обработки данных находят концентрацию определяемых элементов в анализируемом растворе (мг/дм3).

За результат измерений принимают среднее арифметическое 3 параллельных определений одной пробы.

###### Примеры количественного определения тяжёлых металлов и мышьяка

###### Метод 1

Определение проводят методом атомно-абсорбционная спектрометрии.

Испытуемый раствор 1. Аналитическую пробу испытуемого образца измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. Помещают 0,5 г (точная навеска) измельченного испытуемого образца в коническую колбу с притертой пробкой − сосуд для микроволнового разложения, добавляют 4 мл воды и 6 мл азотной кислоты концентрированной, осторожно перемешивают до полного смачивания и выдерживают в течение 10-15 мин. Сосуд герметично закрывают, помещают в защитный кожух и затем в ротор микроволновой системы и проводят минерализацию по программе, приведенной в табл. 5.

Таблица 5. Программа минерализации испытуемых образцов
Этап | Время, мин | Температура, °С | Мощность излучения, Вт
--- | --- | --- | ---
1 | 9 | 20-80 | до 550
2 | 7 | 80-160 | до 1500
3 | 10 | 160-200 | до 1800
4 | 14 | 200 | до 1500

В конце цикла сосуд охлаждают на воздухе, осторожно открывают и полученный прозрачный или с небольшим осадком раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл, фильтруя через фильтр беззольный, промытый хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М и доводят объём раствора водой до метки.

Одновременно готовят контрольный раствор 1, проводя те же стадии обработки с добавлением тех же количеств реагентов, но без испытуемого образца.

Испытуемый раствор 2. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора 1, доводят объём раствора водой до метки и тщательно перемешивают. Одновременно готовят контрольный раствор 2, проводя те же стадии обработки с добавлением тех же количеств реагентов, но без испытуемого раствора 1.

Определение мышьяка и ртути проводят, используя испытуемый раствор 1 и контрольный раствор 1, определение свинца и кадмия – используя испытуемый раствор 2 и контрольный раствор 2.

1. Приготовление калибровочных растворов ионов свинца

- Исходный раствор ионов свинца 1,0 мкг/мл. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 мл ГСО 7778-2000 состава раствора ионов свинца, прибавляют 1,0 мл азотной кислоты концентрированной, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают (раствор А). Раствор А хранят в плотно закрытой пластиковой посуде при температуре 4-8^ ^°С не более 1 мес.

- Калибровочные растворы ионов свинца с концентрациями 0,01 мкг/мл; 0,02 мкг/мл; 0,04 мкг/мл. В мерные колбы вместимостью 100 мл помещают 1,0; 2,0; 4,0 мл раствора А, прибавляют 1 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки. Получают калибровочные растворы с концентрацией ионов свинца 0,01 мкг/мл; 0,02 мкг/мл; 0,04 мкг/мл соответственно. Растворы готовят перед началом измерений и используют в течение 1 сут.

- Возможно приготовление калибровочных растворов с использованием автосемплера оборудования.

2. Приготовление калибровочных растворов ионов кадмия

- Исходный раствор ионов кадмия 1,0 мкг/мл. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 мл ГСО 7773-2000 состава раствора ионов кадмия, прибавляют 1,0 мл азотной кислоты концентрированной, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают (раствор А). Раствор А хранят в плотно закрытой пластиковой посуде при температуре 4-8 °С не более 1 мес.

- Калибровочные растворы ионов кадмия с концентрациями 0,001 мкг/мл; 0,002 мкг/мл; 0,003 мкг/мл. В мерные колбы вместимостью 100 мл помещают 0,1; 0,2; 0,3 мл раствора А, прибавляют 1,0 мл азотной кислоты концентрированной, доводят объём раствора водой до метки. Получают калибровочные растворы с концентрацией ионов кадмия 0,001 мкг/мл; 0,002 мкг/мл; 0,003 мкг/мл соответственно. Растворы готовят перед началом измерений и используют в течение 1 сут.

- Возможно приготовление калибровочных растворов с использованием автосемплера оборудования.

3. Приготовление калибровочных растворов ионов мышьяка

- Исходный раствор ионов мышьяка 1,0 мкг/мл. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл ГСО 7344-96 состава раствора ионов мышьяка (III), прибавляют 1,0 мл азотной кислоты концентрированной, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают (раствор А). Раствор А хранят в плотно закрытой пластиковой посуде при температуре 4-8°С не более 1 мес.

- Калибровочные растворы ионов мышьяка с концентрациями 0,004 мкг/мл; 0,006 мкг/мл; 0,008 мкг/мл. В мерные колбы вместимостью 100 мл помещают 0,4; 0,6; 0,8 мл раствора А, прибавляют 1,0 мл азотной кислоты концентрированной, доводят объём раствора водой до метки. Получают калибровочные растворы с концентрацией ионов мышьяка 0,004 мкг/мл; 0,006 мкг/мл; 0,008 мкг/мл соответственно. Растворы готовят перед началом измерений и используют в течение 1 сут.

- Возможно приготовление калибровочных растворов с использованием автосемплера оборудования.

4. Калибровочные растворы ионов ртути (для проведения анализа по определению ртути на атомно-абсорбционном спектрометре с гидридной приставкой)

- Исходный раствор ионов ртути 0,1 мкг/мл. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 мл ГСО 7343-96 состава раствора ионов ртути (II), прибавляют 4,0 мл азотной кислоты концентрированной, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают (раствор А). Раствор А хранят в плотно закрытой пластиковой посуде при температуре 4-8 °С не более 1 мес.

- В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл раствора А, прибавляют 4,0 мл азотной кислоты концентрированной, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают (раствор Б). Раствор Б хранят в плотно закрытой пластиковой посуде при температуре 4-8 °С не более 1 мес.

- Калибровочные растворы ионов ртути с концентрациями 0,0005; 0,001; 0,0015 мкг/мл. В мерные колбы вместимостью 10 0мл помещают 0,5; 1,0; 1,5 мл раствора Б, прибавляют 1,0 мл азотной кислоты концентрированной, доводят объём раствора водой до метки. Растворы готовят перед началом измерений и используют в течение 1 сут.

5. Приготовление раствора матричного модификатора с массовой концентрацией палладия 0,5 г/л (для определения свинца, кадмия). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 мл палладиевого матричного модификатора с концентрацией 10 г/л, доводят объём раствора до метки водой и перемешивают. Раствор хранят при температуре не выше 25 °С не более 5 сут.

6. Приготовление раствора матричного модификатора с массовой концентрацией палладия 1,0 г/л (для определения мышьяка). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл палладиевого матричного модификатора с концентрацией 10 г/л, доводят объём раствора до метки водой и перемешивают. Раствор хранят при температуре не выше 25 °С не более 5 сут.

7. Раствор восстановителя для ртути (для проведения анализа по определению ртути на атомно-абсорбционном спектрометре с гидридной приставкой или гидридном анализаторе). Навеску 10,0 г олова(II) хлорида дигидрата помещают в мерную колбу вместимостью 500 мл, добавляют 25 мл хлористоводородной кислоты концентрированной. Нагревают при помешивании на электрической плитке до полного растворения. Снимают с плитки, охлаждают до комнатной температуры и осторожно добавляют объём раствора водой до метки.

8. Калибровочные растворы ионов ртути (для проведения анализа по определению ртути на анализаторе ртути)

- Стандартный раствор ионов ртути 10,0 мкг/мл (раствор А). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 мл ГСО 7343-96 состава раствора ионов ртути (II), прибавляют 0,4 мл азотной кислоты концентрированной, доводят объём раствора водой до метки. Раствор А хранят в плотно закрытой пластиковой посуде при температуре 4-8oС не более 2 мес.

- Стандартный раствор ионов ртути 1,0 мкг/мл (раствор Б). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл раствора А, прибавляют 2,0 мл азотной кислоты концентрированной, доводят объём раствора водой до метки. Раствор Б хранят в плотно закрытой пластиковой посуде при температуре 4-8 °С не более 1 мес.

- Стандартный раствор ионов ртути 0,1 мкг/мл (раствор В). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл раствора Б, прибавляют 2,0 мл азотной кислоты концентрированной, доводят объём раствора водой до метки. Раствор В хранят в плотно закрытой пластиковой посуде при температуре 4-8 °С не более 10 сут.

- Стандартный раствор ионов ртути 0,01 мкг/мл (раствор Г). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл раствора В, прибавляют 2,0 мл азотной кислоты концентрированной, доводят объём раствора водой до метки. Раствор В хранят в плотно закрытой пластиковой посуде при температуре 4-8 °С не более 5 сут.

- Построение калибровочной зависимости. Калибровочную зависимость строят, используя кварцевые кюветы (табл. 6).

Таблица 6. Аликвоты соответствующих исходных стандартных растворов ионов ртути
Исходный стандартный раствор ионов ртути | Аликвота исходного стандартного раствора, мкл | Количество ртути в дозируемом объёме, нг | Концентрация из расчета на навеску 0,1 г, мг/кг | Аналитическая ячейка поглощения
--- | --- | --- | --- | ---
Раствор Г | 25 | 0,25 | 0,0025 | Нижний диапазон
50 | 0,50 | 0,005
100 | 1,00 | 0,01
Раствор В | 15 | 1,50 | 0,015
20 | 2,00 | 0,02
40 | 4,00 | 0,04
25 | 2,5 | 0,025 | Контрольный раствор (нижний диапазон)
Раствор Б | 20 | 20,0 | 0,20 | Верхний диапазон
50 | 50,0 | 0,50
Раствор А | 10 | 100,0 | 1,00
20 | 200,0 | 2,00

Проведение измерений. Определение содержания свинца, кадмия, мышьяка проводят на атомно-абсорбционном спектрометре с электротермическим атомизатором (табл. 7 – 10).

Определение содержания ртути проводят на атомно-абсорбционном спектрометре с гидридной приставкой (с поглотительной ячейкой для определения ртути) и лампой с полым катодом ртути, на гидридном анализаторе или на пиролитическом анализаторе ртути (допускается для определения содержания ртути в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах использовать пиролитические анализаторы ртути (прямое определение ртути в пробах без предварительной подготовки), либо анализаторы с пиролитической приставкой).

Таблица 7. Условия проведения анализа на атомно-абсорбционном спектрометре
№ | Параметр | Значение для свинца | Значение для кадмия | Значение для ртути | Значение для мышьяка
--- | --- | --- | --- | --- | ---
1 | Длина волны, нм | 283,3 | 228,8 | 253,7 | 193,7
2 | Ширина щели, нм | 0,5 | 0,5 | 0,5R | 0,5R
3 | Тип интегрирования | по площади пика | по площади пика | интегральный | по площади пика
4 | Ток лампы, мА | 10,0 | 4,0 | 3,0 | 11,0
5 | Система коррекции фона (на эффекте Зеемана) | вкл. | вкл. | - | вкл.
6 | Тип калибровочной зависимости | линейная | линейная | линейная | линейная
7 | Объём пробы испытуемого раствора, мкл | 20 | 10 | - | 30 (за 2 раза)
8 | Объём дозирования модификатора, мкл | 10 | 10 | - | 10 (за 2 раза)
9 | Тип графитовой печи | c пиропокрытием | c пиропокрытием | - | c пиропокрытием и платформой
10 | Режим дозирования в предварительно подогретую кювету | вкл. (70 °С) | вкл. (70 °С) | - | вкл. (85 °С)

Таблица 8. Температурная программа нагрева графитовой печи для определения свинца
Стадия | Температура, °С | Время, сек | Расход аргона, дм3/мин | Запись сигнала
--- | --- | --- | --- | ---
1 | 85 | 20,0 | 0,3 | Выкл.
2 | 95 | 15,0 | 0,3 | Выкл.
3 | 120 | 15,0 | 0,3 | Выкл.
4 | 1100 | 10,0 | 0,3 | Выкл.
5 | 1100 | 8,0 | 0,3 | Выкл.
6 | 1100 | 2,1 | 0,0 | Выкл.
7 | 2400 | 1,0 | 0,0 | Вкл.
8 | 2400 | 2,0 | 0,0 | Вкл.
9 | 2400 | 2,0 | 0,3 | Выкл.

Таблица 9. Температурная программа нагрева графитовой печи для определения кадмия
Стадия | Температура, °С | Время, сек | Расход аргона, дм3/мин | Запись сигнала
--- | --- | --- | --- | ---
1 | 85 | 10,0 | 0,3 | Выкл.
2 | 95 | 5,0 | 0,3 | Выкл.
3 | 120 | 20,0 | 0,3 | Выкл.
4 | 500 | 10,0 | 0,3 | Выкл.
5 | 500 | 8,0 | 0,3 | Выкл.
6 | 500 | 2,0 | 0,0 | Выкл.
7 | 2000 | 0,8 | 0,0 | Вкл.
8 | 2000 | 2,0 | 0,0 | Вкл.
9 | 2000 | 2,0 | 0,3 | Выкл.

Таблица 10. Температурная программа нагрева графитовой печи для определения мышьяка
Стадия | Температура, °С | Время, сек | Расход аргона, дм3/мин | Запись сигнала
--- | --- | --- | --- | ---
1 | 110 | 10,0 | 0,3 | Выкл.
2 | 140 | 12,0 | 0,3 | Выкл.
3 | 160 | 5,0 | 0,3 | Выкл.
4 | 1400 | 10,0 | 0,3 | Выкл.
5 | 1400 | 10,0 | 0,3 | Выкл.
6 | 1400 | 2,0 | 0,0 | Выкл.
7 | 2700 | 0,7 | 0,0 | Вкл.
8 | 2700 | 2,0 | 0,0 | Вкл.
9 | 2700 | 2,0 | 0,3 | Выкл.

Обработка результатов измерений на атомно-абсорбционном спектрометре. Обработку результатов проводят с использованием компьютерной программы. При ручной обработке данных строят график зависимости абсорбции от концентрации. Измерение содержания определяемых элементов проводят методом калибровочной кривой. Используется линейная аппроксимация градуировочной функции с коэффициентом корреляции не менее 0,98.

Результаты определения содержания элементов в пробе (С) следует считать, как среднее арифметическое 3 параллельных измерений одной пробы.

Содержание элемента в испытуемом образце в мг/кг с помощью программного обеспечения прибора (Х) вычисляют по формуле:

(2)

где: C – содержание элемента в испытуемом образце, мкг/кг;
1000 – коэффициент пересчета мкг в мг.

Содержание элемента в испытуемом образце в мг/кг (Х) вычисляют по формуле (1).

Ориентировочные условия проведения анализа для определения ртути на пиролитическом анализаторе ртути. Аналитическую пробу испытуемого образца измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. Помещают 0,1 г (точная навеска) измельченного испытуемого образца в кювету из никелевого сплава и отправляют на анализ по усредненной температурно-операционной программе для определения ртути (табл. 11).

Таблица 11. Усредненная температурно-операционная программа для определения ртути в кюветах из никелевого сплава
Стадия | Время, сек | Температура, оС | Продув | Нагрев амальгаматора | Запись сигнала
--- | --- | --- | --- | --- | ---
1 | 10 | 200 | - | - | -
2 | 60 | 200 | - | - | -
3 | 90 | 750 | - | - | -
4 | 90 | 750 | - | - | -
5 | 60 | - | + | - | -
6 | 12 | - | - | + | -
7 | 30 | - | - | - | +

Обработка результатов измерений на пиролитическом анализаторе ртути. Обработку результатов измерений проводят с использованием компьютерной программы. Используется линейная аппроксимация градуировочной зависимости с коэффициентом корреляции не менее 0,98.

Результаты определения содержания ртути в пробе (С) следует считать, как среднее арифметическое 3 параллельных измерений одной пробы.

Содержание элемента в испытуемом образце в мг/кг с помощью программного обеспечения прибора.

Содержание ртути в испытуемом образце в мг/кг (Х) вычисляют по формуле:

(3)

где: C – количество ртути в навеске испытуемого образца, нг;
а – навеска испытуемого образца, г;
1000 – коэффициент пересчета г в кг;
1000000 – коэффициент пересчета нг в мг.

###### Метод 2

Определение проводят методом атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 3 мл азотной кислоты концентрированной, доводят объём раствора водой деионизованной до метки.

Испытуемый раствор 1 (определение содержания мышьяка, кадмия и свинца). Аналитическую пробу испытуемого образца измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. Помещают 1,0 г (точная навеска) измельченного испытуемого образца, высушенного до постоянной массы при 105 °С в течение 2 ч, в сосуд для микроволнового разложения, добавляют 10 мл азотной кислоты концентрированной, осторожно перемешивают до полного смачивания и помещают в микроволновую печь. В случае необходимости к испытуемому образцу добавляют 1-2 мл водорода пероксида с соответствующим уменьшением объёма азотной кислоты (суммарный объём раствора должен составлять 10 мл). Проводят разложение при 165-175 °С (в зависимости от конфигурации микроволновой системы) в течение 30 мин и проводят минерализацию по программе, приведенной в таблице 12.

Таблица 12 – Программа минерализации испытуемых образцов

Этап | Время, мин | Температура, °С | Мощность излучения, Вт
--- | --- | --- | ---
1 | 3 | 20-80 | до 550
2 | 5 | 80 | до 550
3 | 10-15 | 80-175* | до 1500
4 | 30 | 175* | до 1800

* допускается снижение температуры до 165 °С в зависимости от конфигурации микроволновой системы.

Полученные после микроволнового разложения растворы охлаждают до комнатной температуры, фильтруют через фильтр беззольный в мерные колбы объёмом 25 мл, доводят объём раствора водой деионизованной до метки.

Испытуемый раствор 2 (определение содержания ртути). В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора 1, доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочные растворы ионов свинца, кадмия и мышьяка

Исходный раствор ионов свинца, кадмия и мышьяка (свинца – 5,0 мг/л, кадмия – 1,0 мг/л, мышьяка – 0,5 мг/л). В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 1,25 мл стандартного раствора ионов свинца 1000 мг/л, 0,25 мл стандартного раствора ионов кадмия 1000 мг/л и 1,25 мл стандартного раствора ионов мышьяка 100 мг/л, прибавляют 1,0 мл азотной кислоты концентрированной, доводят объём раствора водой деионизованной до метки.

Калибровочный раствор 1 (ионов свинца – 0,10 мкг/мл, ионов кадмия – 0,02 мкг/мл, ионов мышьяка – 0,01 мкг/мл). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл исходного раствора ионов свинца, кадмия и мышьяка, доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочный раствор 2 (ионов свинца – 0,20 мкг/мл, ионов кадмия – 0,04 мкг/мл, ионов мышьяка – 0,02 мкг/мл). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл исходного раствора ионов свинца, кадмия и мышьяка, доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочный раствор 3 (ионов свинца – 0,30 мкг/мл, ионов кадмия – 0,06 мкг/мл, ионов мышьяка – 0,03 мкг/мл). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 3,0 мл исходного раствора ионов свинца, кадмия и мышьяка, доводят растворителем объём раствора и перемешивают.

Контрольный раствор. В качестве контрольного раствора используют растворитель.

Проведение измерений. Определение содержания свинца, кадмия, мышьяка проводят на атомно-эмиссионном спектрометре с индуктивно-связанной плазмой.

Определение содержания определяемых элементов проводят методом калибровочной кривой или методом добавок. Характеристические длины волн эмиссии (λ) по выбранным элементам представлены в табл. 13. В случае мышьяка и кадмия за результат можно принимать среднее значение концентраций, полученных по результатам определения на двух длинах волн.

Таблица 13. Характеристические длины волн
Длина волны | Свинец, нм | Кадмий, нм | Мышьяк, нм
--- | --- | --- | ---
Основные | 220,351 нм | 228,802 нм | 197,197
Вспомогательные | 283,306 168,215 | 214,438 226,502 | 189,042 193,696

Параметры проведения испытания на атомно-эмиссионном спектрометре с индуктивно-связанной приведены в табл. 14.

Таблица 14. Условия проведения анализа на атомно-эмиссионном спектрометре
№ | Параметр | Значение
--- | --- | ---
1 | Мощность плазмы | 1500 Вт
2 | Расход плазмообразующего газа | 15 л/мин
3 | Расход распылительного газа | 0,6 л/мин
4 | Расход вспомогательного газа | 0,2 л/мин
5 | Скорость потока образца | 1,5 л/мин
6 | Количество повторных анализов | 5
7 | Направление регистрации сигналов | Аксиальное
8 | Время интегрирования | Авто

Определение содержание ртути проводят с помощью гидридного анализатора или гидридной приставки к атомному абсорберу по методике, описанной в разделе «Атомно-абсорбционная спектрометрия».

Обработка результатов измерений на атомно-эмиссионном спектрометре. Результаты определения содержания элементов в испытуемом растворе следует считать, как среднее арифметическое 3 параллельных измерений одной пробы.

Содержание элемента в испытуемом образце в мг/кг (Х) вычисляют по формуле (1).

###### Метод 3

Определение проводят методом масс-спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой

Испытуемый раствор для определения содержания свинца, кадмия, ртути и мышьяка в лекарственном растительном сырье/препаратах готовится по методике приготовления испытуемого раствора 1, описанной в разделе «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой».

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 32 мл азотной кислоты концентрированной, доводят объём раствора водой деионизованной до метки.

Калибровочные растворы ионов свинца, кадмия, ртути и мышьяка

Исходный раствор ионов ртути 10,0 мг/л. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл стандартного раствора ионов ртути 1000 мг/л, доводят объём раствора растворителем до метки.

Исходный раствор ионов свинца, кадмия, ртути и мышьяка (свинца – 5,0 мкг/мл, кадмия – 1,0 мкг/мл, ртути – 0,1 мкг/мл, мышьяка – 0,5 мкг/мл). В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 1,25 мл стандартного раствора ионов свинца 1000 мг/л, 0,25 мл стандартного раствора ионов кадмия 1000 мг/л, 2,5 мл исходного раствора ртути 10,0 мг/л и 1,25 мл стандартного раствора ионов мышьяка 100 мг/л, доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочный раствор1 (ионов свинца – 0,10 мкг/мл, ионов кадмия – 0,02 мкг/мл, ионов ртути – 0,002 мкг/мл, ионов мышьяка – 0,01 мкг/мл). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл исходного раствора ионов свинца, кадмия, ртути и мышьяка, доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочный раствор 2 (ионов свинца – 0,20 мкг/мл, ионов кадмия – 0,04 мкг/мл, ионов ртути – 0,004 мкг/мл, ионов мышьяка – 0,02 мкг/мл). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл исходного раствора ионов свинца, кадмия, ртути и мышьяка, доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочный раствор 3 (ионов свинца – 0,30 мкг/мл, ионов кадмия – 0,06 мкг/мл, ионов ртути – 0,006 мкг/мл, ионов мышьяка – 0,03 мкг/мл). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 3,0 мл исходного раствора ионов свинца, кадмия, ртути и мышьяка, доводят объём раствора растворителем до метки.

Контрольный раствор. В качестве контрольного раствора используют растворитель.

Проведение измерений. Определение содержания свинца, кадмия, ртути и мышьяка проводят на масс-спектрометре с индуктивно-связанной плазмой.

Определение содержания определяемых элементов проводят методом калибровочной кривой или методом добавок. Для анализа используют изотопы, приведенные в табл. 15.

Таблица 15. Изотопы используемые для на масс-спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой
№ | Изотоп | Мышьяк | Кадмий | Ртуть | Свинец
--- | --- | --- | --- | --- | ---
1 | Основные | 75 | 111 | 202 | 208
2 | Вспомогательные | - | 114, 106, 108 | - | 206, 207

Параметры проведения испытания на масс-спектрометре с индуктивно-связанной плазмой приведены в табл. 16.

Таблица 16. Условия проведения анализа на масс-спектрометре
№ | Параметр | Значение
--- | --- | ---
1 | Мощность плазмы | 1500 Вт
2 | Расход плазмообразующего газа | 15 л/мин
3 | Расход распылительного газа | 1,0 л/мин
4 | Скорость потока образца | 0,10 об/мин
5 | Количество повторных анализов | 5
6 | Время интегрирования | 0,1 с

Обработка результатов измерений на масс-спектрометре. Результаты определения содержания элементов в испытуемом растворе следует считать, как среднее арифметическое 3 параллельных измерений одной пробы.

Содержание элемента в испытуемом образце в мг/кг (Х) вычисляют по формуле (1).

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.3.0010 Определение содержания эфирного масла в лекарственном растительном сырье и лекарственных средствах растительного происхождения

Взамен ОФС.1.5.3.0010.15

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения содержания эфирного масла. Испытание позволяет выделить и количественно определить содержание эфирного масла в лекарственном растительном сырье и лекарственных средствах растительного происхождения, в том числе, и лекарственных растительных препаратах.

Определение содержания эфирного масла проводят путём его перегонки с водяным паром из лекарственного растительного сырья или лекарственного средства растительного происхождения с последующим измерением объёма. Содержание масла выражают в массо-объёмных процентах в пересчёте на абсолютно сухое лекарственное растительное сырьё/лекарственный растительный препарат или в объёмных процентах для жидких лекарственных средств.

Методика, навеска сырья или навеска/объём лекарственного средства растительного применения, степень измельчения лекарственного растительного сырья или лекарственного растительного препарата, объём воды – 300 мл, если не указано иное, и время перегонки должны быть указаны в соответствующей фармакопейной статье.

###### Методика 1

Для определения эфирного масла используют прибор, приведённый на рис. 1. Навеску измельчённого сырья/препарата помещают в широкогорлую круглодонную колбу (А) вместимостью 1000 мл, прибавляют воду и закрывают резиновой пробкой (Б) с обратным холодильником (В). В пробке снизу укрепляют металлические крючки, на которые с помощью тонкой проволоки подвешивают градуированный приёмник (Г), предварительно заполненный водой, таким образом, чтобы конец холодильника находился над воронкообразным расширением приёмника, не касаясь его. Приёмник должен свободно помещаться в горле колбы, не касаясь стенок, и отстоять от уровня воды не менее чем на 50 мм. Цена деления градуированной части приёмника 0,025 мл. Колбу с содержимым нагревают и кипятят в течение времени, указанного в фармакопейной статье.

Рисунок 1. Прибор для определения содержания эфирного масла по методике 1 (метод Гинзберга): А – широкогорлая колба; Б – резиновая пробка; В – обратный шариковый холодильник; Г – градуированный приёмник.

За 5 мин до окончания отгонки прекращают подачу воды в холодильник с целью прогревания его для того, чтобы оставшиеся на его внутренних стенках капли эфирного масла стекли в приёмник.

Объём масла в градуированной части приёмника измеряют после окончания дистилляции и охлаждения прибора до комнатной температуры. После каждого определения холодильник промывают горячей водой. После 6-8 определений прибор необходимо промыть последовательно ацетоном или этанолом и водой.

Обработка результатов. Содержание эфирного масла в пересчёте на абсолютно сухое сырьё/препарат в процентах (Х1) вычисляют по формуле:

(1)

где V – объём эфирного масла, мл;
a – навеска лекарственного растительного сырья/препарата, г;
W – влажность лекарственного растительного сырья/препарата, %.

###### Методика 2

Для определения эфирного масла используют прибор, приведённый на рис. 2. Прибор состоит из круглодонной колбы (А) вместимостью 1000 мл, паропроводной изогнутой трубки (Б), холодильника (В), градуированной трубки (Г), оканчивающейся внизу спускным краном (Д) и сливной трубкой (Е). Верхняя часть приёмника имеет расширение (Ж) с боковой трубкой (З), которая служит для внесения растворителя эфирного масла в дистиллят и сообщения внутренней части прибора с атмосферой. Колбу и паропроводную трубку соединяют через шлиф. Градуированная трубка имеет цену деления 0,02 мл. Для заполнения прибора водой используют резиновую трубку (И) длиной 450 мм с внутренним диаметром 4,5–5 мм и воронку (К) диаметром 30–40 мм.

Перед каждым определением через прибор пропускают пар в течение 15–20 мин.

Навеску измельчённого сырья/препарата помещают в колбу и прибавляют воду. Колбу присоединяют к паропроводной трубке, заполняют водой градуированную и сливную трубки через кран при помощи резиновой трубки, оканчивающейся воронкой. Колбу нагревают и кипятят с интенсивностью, при которой скорость стекания дистиллята составляет 60-65 кап/мин.

Через 5 мин после окончания дистилляции открывают кран, постепенно спуская дистиллят таким образом, чтобы эфирное масло заняло градуированную часть трубки приёмника, и через 5 мин измеряют объём масла.

После 6-8 определений прибор необходимо промыть последовательно ацетоном или этанолом и водой.

Содержание эфирного масла в пересчёте на абсолютно сухое сырьё/препарат в процентах (Х2) вычисляют по формуле (1), приведённой в методике 1.

Рисунок 2. Прибор для определения содержания эфирного масла по методикам 2 и 3 (метод Клевенджера): А – круглодонная колба; Б – паропроводная изогнутая трубка; В – холодильник; Г – градуированная трубка-приемник; Д – спускной кран; Е – сливная трубка; Ж – расширение приемника; З – боковая трубка приемника; И – резиновый шланг; К – воронка.

###### Методика 3

Для определения эфирного масла используют прибор, приведённый на рис. 2. Навеску измельчённого сырья/препарата или точный объём жидкого лекарственного средства растительного происхождения помещают в колбу, прибавляют воду. Колбу присоединяют к паропроводной трубке, заполняют водой градуированную и сливную трубки через кран при помощи резиновой трубки, оканчивающейся воронкой. Через боковую трубку при помощи пипетки вливают в приёмник точный объём декалина (около 0,5 мл), опуская для этого уровень жидкости в градуированную часть трубки. Далее поступают в соответствии с указаниями, приведёнными в методике 2.

Обработка результатов. Содержание эфирного масла в пересчёте на абсолютно сухое сырьё/препарат в процентах (X3) вычисляют по формуле:

(2)

где V – объём раствора эфирного масла в декалине, мл;
V1 – объём декалина, мл;
a – навеска лекарственного растительного сырья/препарата, г;
W влажность лекарственного растительного сырья/препарата, %.

Содержание эфирного масла в лекарственных средствах в процентах (X4) вычисляют по формуле:

(3)

где V – объём раствора эфирного масла в декалине, мл;
V1 – объём декалина, мл;
V2 – объём лекарственного средства, мл.

###### Методика 4

Для определения эфирного масла используют прибор с конденсирующей системой, приведённый на рис. 3. Используют тщательно очищенный прибор, состоящий из следующих частей:

Рисунок 3. Конденсирующая система для прибора для определения эфирных масел по методике 4

1. Подходящей круглодонной колбы с коротким шлифованным горлом с внутренним диаметром в широкой части около 29 мм;

2. Конденсирующей системы (рис. 3), плотно присоединённой к колбе; различные части системы соединены путём сплавления в единое целое, с использованием стекла с низким коэффициентом расширения:

   - пробки Л1, имеющей отверстие для выравнивания давления системы с атмосферным давлением, трубки Л, имеющей отверстие диаметром около 1 мм, совпадающее с отверстием пробки, широкий конец трубки Л, шлифованный с внутренним диаметром 10 мм;

   - грушеобразного расширения К, вместимостью 3 мл;

   - градуированной трубки КМ с ценой деления 0,01 мл;

   - шарообразного расширения М, вместимостью около 2 мл;

   - трехходового крана Н;

   - места соединения Б, расположенного на 20 мм выше самого верхнего деления градуированной трубки;

3. Подходящего нагревательного устройства с точной регулировкой температуры;

4. Вертикального штатива с горизонтальным кольцом, покрытым изоляционным материалом.

Объём воды, указанный в фармакопейной статье, вместе с несколькими кусочками пористого фарфора помещают в колбу, которую присоединяют к конденсирующей системе. Через воронкообразное расширение О приливают воду до достижения уровня Б. Пробку Л1 вынимают и добавляют, указанное в фармакопейной статье количество ксилола с помощью пипетки, опустив её кончик на дно трубки Л. Трубку Л закрывают пробкой Л1, убедившись, что отверстия совмещены. Жидкость нагревают в колбе до кипения и устанавливают скорость дистилляции 2–3 мл/мин, при отсутствии других указаний в фармакопейной статье.

Для определения скорости дистилляции в процессе испытания уровень воды понижают с помощью трехходового крана до понижения мениска до нижней отметки (а) (рис. 4). Закрывают кран и засекают время, необходимое для достижения жидкостью уровня верхней отметки (б). Открывают кран и продолжают дистилляцию, регулируя скорость дистилляции изменением температуры нагревания. Через 30 мин прекращают нагревание и по истечении не менее 10 мин определяют объём ксилола в градуированной трубке.

Рисунок 4. Грушеобразное расширение К градуированной трубки КМ

Навеску измельчённого сырья/препарата помещают в колбу и продолжают дистилляцию, как описано выше, с указанной скоростью перегонки (дистилляции). Прекращают нагревание и через 10 мин определяют объём раствора эфирного масла в ксилоле, собравшегося в градуированной трубке.

Обработка результатов. Содержание эфирного масла в пересчёте на абсолютно сухое сырьё/препарат в процентах (X5) вычисляют по формуле:

(4)

где V – объём раствора эфирного масла в ксилоле, мл;
V1 – объём ксилола, мл;
a – навеска лекарственного растительного сырья/препарата, г;
W влажность лекарственного растительного сырья/препарата, %.

При использовании эфирного масла для других аналитических целей смесь ксилола и эфирного масла, не содержащая воды, может быть извлечена следующим образом: вынимают пробку Л1 и вносят 0,1 мл натрия флуоресцеината раствора 0,1 % и 0,5 мл воды. С помощью трехходового крана H смесь ксилола и эфирного масла сливают в шарообразное расширение М и оставляют на 5 мин, затем медленно сливают её до уровня крана Н. Кран открывают против часовой стрелки таким образом, чтобы вода вытекала из соединительной трубки БН. Трубку промывают ацетоном и небольшим количеством толуола, вводимыми через воронкообразное расширение О. Поворачивают кран против часовой стрелки и сливают смесь ксилола и эфирного масла в подходящий сосуд.

После 6–8 определений прибор необходимо промыть последовательно ацетоном или этанолом и водой.

###### Методика 5

Для определения эфирного масла используют прибор, приведённый на рис. 5. Перед каждым определением через прибор пропускают пар в течение 15–20 мин.

Навеску измельчённого сырья/препарата помещают в круглодонную колбу (А) вместимостью 1000 мл и прибавляют воду. Колбу соединяют с паропроводной трубкой, заполняют водой градуированную трубку и сливную трубку, оканчивающуюся воронкой до тех пор, пока в нижней воронкообразной части отстойника не наберётся слой воды высотой 8-12 мм. Во время дистилляции данный уровень воды должен оставаться без изменения. Колбу нагревают и кипятят в течение времени, указанного в фармакопейной статье. Во время дистилляции температура в отстойнике не должна превышать 25 °C. Через 5 мин после окончания дистилляции открывают кран, постепенно спуская дистиллят таким образом, чтобы эфирное масло заполнило градуированную часть трубки. Через 5 мин измеряют объём эфирного масла.

После 6–8 определений прибор необходимо промыть последовательно ацетоном или этанолом и водой.

Содержание эфирного масла в пересчёте на абсолютно сухое сырьё/препарат в процентах (X6) вычисляют по формуле (1) приведённой в методике 1.

Рисунок 5. Прибор для определения содержания эфирного масла по методике 5: А – круглодонная колба; Б – паропроводная трубка; В – холодильник; Г – отстойник; Д – термометр до 100 °C, ртутный шарик которого находится на уровне отверстия холодильника; Е – градуированная трубка; Ж – спусковой кран; З – сливная трубка; И – резиновый шланг; К – воронка.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.3.0011 Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах

Взамен ОФС.1.5.3.0011.15

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения содержания пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах, получаемых от культивируемых лекарственных растений.

Результаты, полученные при определении содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье, распространяются на лекарственный препарат, произведенный из данной партии лекарственного растительного сырья.

###### Термины и определения

Пестициды − химические или биологические препараты, используемые для борьбы с вредителями и болезнями растений, сорными растениями, вредителями хранящейся сельскохозяйственной продукции, бытовыми вредителями и внешними паразитами животных, а также для регулирования роста растений, предуборочного удаления листьев (дефолианты), предуборочного подсушивания растений (десиканты).

Остаточные пестициды − вещества, включающие в себя остаточное количество пестицидов и любые производные пестицидов (продукты конверсий, реакций, метаболиты, примеси).

Проба для определения остаточных пестицидов и тяжелых металлов – определенное количество пробы, выделенной методом квартования из объединенной пробы.

Единицы измерения − мг/кг – количество мг пестицида в 1 кг лекарственного растительного сырья или лекарственного растительного препарата.

Средства измерений включают необходимые для определения содержания пестицидов приборы и методики выполнения измерений, имеющие нормированные метрологические характеристики.

Контроль на содержание остаточных количеств пестицидов − определение соответствия исследуемых объектов требованиям нормативной документации.

###### Общие положения

Для обеспечения достоверности полученных результатов анализируемое на содержание остаточных пестицидов лекарственное растительное сырьё/препараты, как правило, должно иметь влажность не более 15 %.

В лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах определяют содержание остаточных пестицидов, в том числе хлорсодержащих: гексахлорциклогексана (ГХЦГ) и его изомеров (α-, β-, γ-ГХЦГ), дихлордифенилтрихлорметилметана (ДДТ) и его метаболитов (ДДД − дихлордифенилдихлорметилметана, ДДЕ − дихлордифенил-хлорэтилена), гексахлорбензол (ГХБ), алдрина, гептахлора и других.

Основные этапы определения содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырьё и лекарственных растительных препаратах:

- отбор пробы для определения остаточных пестицидов, тяжелых металлов и мышьяка (ОФС «Отбор проб лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов»);

- подготовка пробы к определению: для повышения эффективности экстракции рекомендуется измельчать испытуемый образец до величины частиц, проходящих сквозь сито с размером отверстий 1 мм и менее. Измельчение должно выполняться таким образом, чтобы избежать интенсивного нагрева испытуемых образцов, поскольку нагрев может привести к потере некоторых пестицидов. Аналитическую пробу испытуемого образца возможно увеличить для обеспечения однородности измельчения. Для уменьшения ошибки анализа, связанной с пробоподготовкой, испытуемые образцы должны быть гомогенизированы.

Измельчение пробы должно гарантировать, что проба достаточно однородна, чтобы обеспечить приемлемую вариабельность выборки. Если это невозможно, следует рассмотреть возможность использования большего количества образца, чтобы иметь возможность получить лучшую оценку истинного значения содержания пестицидов. После гомогенизации или измельчения образцы могут разделиться на различные фракции. Такое фракционирование может происходить из-за различий в размере, форме и плотности. Поскольку пестициды могут быть неоднородно распределены между различными фракциями, важно убедиться, что фракции в аналитической пробе находятся в том же соотношении, что и в исходном лабораторном образце.

- определение содержания остаточных пестицидов в испытуемых образцах;

- обработка результатов измерений;

- определение соответствия сырья допустимым нормам.

Все реактивы и растворители не должны содержать примесей, в т.ч. пестицидов, которые могут влиять на результаты анализа.

Используемые аналитические методы должны удовлетворять требованиям ОФС «Валидация аналитических методик» и следующим критериям:

- выбранный метод является подходящим для комбинации остаточный пестицид/лекарственное растительное сырьё;

- при интерпретации результатов необходимо учитывать влияние некоторых компонентов естественного происхождения (например, влияние дисульфида у растений семейства капустных (Brassicaeae), бромида из бурых морских водорослей и т.п.);

- концентрации испытуемого раствора и раствора сравнения, а также настройки аппаратуры должны быть такими, чтобы аналитический сигнал, используемый для количественного анализа пестицидов, находился в пределах линейного диапазона используемого детектора;

- каждый пестицид извлекается в диапазоне 70-110 %;

- повторяемость и воспроизводимость метода: относительное стандартное отклонение (%) не должно превышать значений, указанных в табл. 1.

Таблица 1. Аналитические характеристические параметры в различных диапазонах концентрации вещества
Диапазон концентрации вещества, мг/кг | Повторяемость (относительное стандартное отклонение, %) | Воспроизводимость (относительное стандартное отклонение, %)
--- | --- | ---
0,001-0,01 | 30 | 60
>0,01-0,1 | 20 | 40
>0,1-1 | 15 | 30
>1 | 10 | 20

Для определения содержания пестицидов в пробе используется газовая (ГХ/МС) или жидкостная (ВЭЖХ/МС) хроматография с масс-спектрометрическим детектором. При отсутствии масс-спектрометрического детектора можно использовать другие селективные детекторы. Определение проводится в соответствии с требованиями ОФС «Хроматография», «Газовая хроматография», «Высокоэффективная жидкостная хроматография» и «Масс-спектрометрия».

###### Порядок отбора проб

Отбор проб от партии сырья/серии препарата проводят в соответствии с требованиями ОФС «Отбор проб лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов» и настоящей статьи.

Отбор проб для проведения испытаний осуществляют в соответствии с действующими санитарно-гигиеническими правилами и условиями, исключающими дополнительное загрязнение сырья.

###### Определение соответствия остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырьё и лекарственных растительных препаратах допустимым нормам

Пределы допустимого содержания остаточных хлорсодержащих пестицидов в лекарственном растительном сырьё и лекарственных растительных препаратах не должны превышать значения, указанные в табл. 2.

Таблица 2. Пределы допустимого содержания остаточных пестицидов (хлорсодержащих) в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах
Вещество | Пределы допустимого содержания, мг/кг
--- | ---
Гексахлорциклогексан и его изомеры (в сумме) | 0,1
ДДТ и его метаболиты (в сумме) | 0,1
Алдрин | Не допускается
Гептахлор | Не допускается

Если нет других указаний в фармакопейной статье, количество других остаточных пестицидов не должно превышать значений предельно допустимого содержания, указанных в табл. 3.

Таблица 3. Пределы допустимого содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах
N п/п | Вещество | Пределы допустимого содержания, мг/кг
--- | --- | ---
1 | Азинфос-метил | 1,0
2 | Азинфос-этил | 0,1
3 | Алахлор | 0,02
4 | Ацефат | 0.1
5 | Бромид, неорганический (в пересчете на бромид ион) | 50
6 | Бромофос-метил | 0.05
7 | Бромофос-этил | 0,05
8 | Бромпропилат | 3,0
9 | Винклозолин | 0,4
10 | Гексахлорбензол | 0,1
11 | Дельтаметрин | 0,5
12 | Диазинон | 0,5
13 | Дихлофлуанид | 0,1
14 | Дихлорфос | 1,0
15 | Дикофол | 0,5
16 | Диметоат и ометоат (в сумме) | 0,1
17 | Дитиокарбаматы (в пересчете на CS2) | 2,0
18 | Квиналфос | 0,05
19 | Квинтоцен (в сумме с пентахлоранилином и метилпентахлорфенилсульфидом) | 1,0
20 | Малатион (в сумме с малаоксоном) | 1,0
21 | Мекарбам | 0,05
22 | Метакрифос | 0,05
23 | Метамидофос | 0,05
24 | Метидатион | 0,2
25 | Метоксихлор | 0,05
26 | Мирекс | 0,01
27 | Монокротофос | 0,1
28 | Паратион-метил и параоксон-метил (в сумме) | 0,2
29 | Паратион-этил и параоксон-этил (в сумме) | 0,5
30 | Пендиметалин | 0,1
31 | Пентахлоранизол | 0,01
32 | Перметрин и изомеры (в сумме) | 1,0
33 | Пиперонилбутоксид | 3.0
34 | Пиретрум (цинерин I, цинерин II, джасмолин I, джасмолин II, пиретрин I и пиретрин II в сумме) | 3,0
35 | Пиримифос-метил и с N-дезэтил-пиримифос-метил (в сумме) | 4,0
36 | Пиримифос-этил | 0,05
37 | Протиофос | 0,05
38 | Профенофос | 0,1
39 | Процимидон | 0,1
40 | С-421 | 0,02
41 | Текназен | 0,05
42 | Тетрадифон | 0,3
43 | Фенвалерат | 1,5
44 | Фенитротион | 0,5
45 | Фенпропатрин | 0,03
46 | Фенсульфотион (в сумме) | 0,05
47 | Фентион (в сумме) | 0,05
48 | Фенхлорофос (сумма фенхлорофоса и фенхлорофосоксона) | 0,1
49 | τ-Флувалинат | 0,05
50 | Флуцитринат | 0,05
51 | Фонофос | 0,05
52 | Фозалон | 0,1
53 | Фосмет | 0,05
54 | Хлордан (сумма цис-, транс- и оксихлордана) | 0,05
55 | Хлорпирифос-метил | 0,1
56 | Хлорпирифос-этил | 0,2
57 | Хлортал-диметил | 0,01
58 | Хлорфенвинфос | 0,5
59 | λ-Цигалотрин | 1,0
60 | Циперметрин и изомеры (в сумме) | 1,0
61 | Цифлутрин (в сумме) | 0,1
62 | Эндосульфан (изомеры и эндосульфана сульфат в сумме) | 3,0
63 | Эндрин | 0,05
64 | Этион | 2,0
65 | Этримфос | 0,05

Значение пределов допустимого содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырьё и лекарственных растительных препаратах (ПДСОПЛРС), не включенных в табл. 3, рассчитывают по формуле (1) c учетом значения уровня допустимого суточного потребления вещества* и величины дозы суточного потребления лекарственного растительного сырья:

(1)

где ДСП – допустимое суточное потребление вещества, в мг на кг массы тела;
М – масса тела, кг (60 кг);
МСД – суточная доза лекарственного растительного сырья, кг;
100 – фактор потребления**.

Значение предельно допустимого содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном препарате (ПДСОПЛРП) рассчитывают по формуле (2 или 4):

где ДСП – допустимое суточное потребление вещества, в мг на кг массы тела;
М – масса тела, кг (60 кг);
МСДП – суточная доза лекарственного растительного препарата, кг;
100 – фактор потребления.

Примечания:

1. Рекомендовано ФАО/ВОЗ (ООН).

2. Относится к требованию ВОЗ о том, что количество остаточных пестицидов, потребляемых из ЛРС, не должно превышать 1 % от общего количества потребляемых пестицидов.

###### Определение остаточных пестицидов (хлорсодержащих)

Во избежание влияния матрицы испытуемого раствора используется метод стандартных добавок или метод внутренних стандартов.

Метод стандартных добавок

Стандартный раствор А. (Раствор стандартных образцов основных пестицидов, 1 мкг/мл). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) каждого стандартного образца (4,4'-ДДТ; 4,4'-ДДД; 4,4'-ДДЭ; α-ГХЦГ; β-ГХЦГ; γ-ГХЦГ; гептахлор; алдрина), растворяют в 10-15 мл ацетонитрила и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят ацетонитрилом до метки.

Пробоподготовка

Методика 1

Стандартный раствор Б: Аналитическую пробу испытуемого образца измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. В тефлоновую пробирку для центрифугирования вместимостью 50 мл помещают 10,0 г (точная навеска) измельченного испытуемого образца, прибавляют 0,5 мл стандартного раствора А, 30,0 мл ацетонитрила*, встряхивают в течение 1 мин (при необходимости допускается использование промежуточной стадии пробоподготовки: прибавляют 4 г безводного магния сульфата, 1 г натрия хлорида, тщательно встряхивают в течение 1 мин).

Извлечение центрифугируют в течение 3 мин при 5000 об/мин. После центрифугирования из верхнего слоя пробирки переносят аликвоту объемом 6 мл в тефлоновую пробирку для центрифугирования вместимостью 15 мл, (при необходимости допускается использование промежуточной стадии пробоподготовки: прибавляют 150 мг сорбента, представляющего собой смесь первичных и вторичных аминов и 950 мг магния сульфата безводного) и центрифугируют в течение 3 мин при 5000 об/мин. Полученную надосадочную жидкость фильтруют через фильтр с размером пор 0,45 мкм. В хроматографическую виалу, содержащую 15 мкл муравьиной кислоты раствора 5 % в ацетонитриле (для стабилизации экстракта) переносят 1,5 мл полученного фильтрата.

Примечание – При необходимости допускается изменение объема ацетонитрила, с учетом коэффициента водопоглощения и особенностей испытуемого образца, с обязательным пропорциональным изменением объема стандартного раствора А.

Методика 2

Стандартный раствор В: Аналитическую пробу испытуемого образца измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. В коническую колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 г (точная навеска) измельченного испытуемого образца, прибавляют 0,5 мл стандартного раствора А и 30,0 мл воды, с учетом коэффициента водопоглощения и особенностей испытуемого образца. К полученному раствору прибавляют 20 мл гексана и встряхивают в течение 5 мин. Полученное извлечение отфильтровывают в круглодонную колбу объемом 100 мл. Проводят экстракцию дважды, объединенные извлечения упаривают на роторном вакуумном испарителе досуха. Сухой остаток растворяют в 25,0 мл ацетонитрила (или другом подходящем растворителе).

Испытуемый раствор: Проводят пробоподготовку аналогично приготовлению стандартного раствора В, прибавляя вместо 0,5 мл стандартного раствора А 0,5 мл ацетонитрила.

Могут быть использованы другие методики пробоподготовки при условии их валидации.

Хроматомасс-спектрометрический анализ полученных растворов проводят на газовом хроматографе с масс-селективным детектором.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная колонка 30 м × 0,25 мм, покрытая слоем (5%-фенил)-метилполисилоксана, 0,5 мкм;
Газ-носитель | гелий для хроматографии;
Скорость потока, | 1 мл/мин;
Объем пробы | 1 мкл;
Сканирование | режим селективного детектирования энергия ионизации – 70 эВ; скорость сканирования - 1 скан/с при диапазоне сканирования 40-600 а.е.м.; задержка на выход растворителя 3 мин.

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °C
--- | --- | ---
Колонка | 0–4 | 70
5–28 | 70 → 300
29–33 | 300
Испаритель |  | 280
Интерфейс |  | 280

Хроматомасс-спектрометрический анализ проводят в режиме селективного детектирования индивидуальных ионов с идентификацией пестицидов по характеристическим ионам и времени удерживания с использованием стандартных растворов (табл. 4).

Таблица 4. Хроматографические и масс-спектрометрические данные анализа стандартных растворов хлорорганических пестицидов (ХОП) и полихлорбифенилов (ПХБ)
Наименование ХОП или ПХБ | Время удерживания, мин | Характеристические ионы, m/z | Относительное время удерживания
--- | --- | --- | ---
α-ГХЦГ β-ГХЦГ γ-ГХЦГ | Около 18,43 Около 19,09 Около 19,15 | 219, 183, 217, 181 | 0,848 0,874 0,881
ДДТ ДДД | Около 24,77 Около 24,07 | 235, 237, 165 | 1,152 1,118
ДДЕ | Около 23,25 | 318, 246, 248 | 1,080
Альдрин | Около 21,38 | 263, 298, 66 | 0,988
Гептахлор | Около 20,65 | 272, 274, 339, 237 | 0,954
4,4΄-Дибром-дифенил | Около 21,66 | 312, 310, 314, 152 | 1,000
Гексахлорбензол | Около 18,62 | 214, 249, 284 | 0,859

Пригодность хроматографической системы

- время удерживания определяемых компонентов в испытуемом растворе, не должны отличаться от времени удерживания компонентов в стандартном растворе Б или В, более чем на 0,5 мин;

- относительные интенсивности пиков характеристических ионов на реконструированной хроматограмме не должны отличаться более чем на 20 % от относительной интенсивности этих пиков в масс-спектр стандартного раствора Б или В, полученного в данной хроматомасс-спектрометрической системе;

- синхронность максимумов пиков характеристических ионов;

- соотношение сигнал/шум, должно быть не менее 3:1.

Условия проведения измерений могут быть иными при использовании других детекторов, при этом методика должна быть валидирована.

Обработка результатов измерений

Содержание хлорорганических пестицидов в мг/кг (Х) вычисляют по формуле:

(4)

где Сo – концентрация соответствующего пестицида в стандартном растворе Б или В, мкг/мл;
S – площадь пика пестицида на хроматограмме испытуемого раствора;
So – площадь пика пестицида на хроматограмме стандартного раствора Б или В;
С – концентрация испытуемого раствора, г/мл.

Расчет содержания пестицидов в группе (группа ДДТ, группа ГХЦГ) проводится путем суммирования установленного содержания пестицидов в каждой группе.

###### Метод внутреннего стандарта

При выборе внутреннего стандарта необходимо руководствоваться следующим:

- степень экстракции внутреннего стандарта должна отражать степень экстракции всех определяемых компонентов;

- матрица испытуемого раствора не должны мешать идентификации и оценке внутреннего стандарта;

- в случае если матрица испытуемого раствора мешает проводить испытания, при приготовлении стандартного раствора используют матрицу испытуемого раствора;

- внутренний стандарт должен быть стабильным и обладать устойчивыми хроматографическими характеристиками пика.

Пример: 4,4'-дибромдифенил, гексахлорбензол и др.

Раствор внутреннего стандарта (1 мкг/мл). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) внутреннего стандарта, растворяют в 10-15 мл ацетонитрила и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят ацетонитрилом до метки.

Стандартный раствор А (Раствор стандартных образцов основных пестицидов, 1 мкг/мл). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) каждого стандартного образца (4,4'-ДДТ; 4,4'-ДДД; 4,4'-ДДЭ; α-ГХЦГ; β-ГХЦГ; γ-ГХЦГ; гептахлор; алдрина), растворяют в 10-15 мл ацетонитрила и доводят тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят ацетонитрилом до метки.

Без использования матрицы испытуемого раствора

Пробоподготовка

Методика 1

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,5 мл стандартного раствора А и 0,5 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объем раствора ацетонитрилом до метки.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу испытуемого образца измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. В тефлоновую пробирку для центрифугирования вместимостью 50 мл помещают 10,0 г (точная навеска) измельченного испытуемого образца, прибавляют 0,5 мл раствора внутреннего стандарта и 24,5 мл ацетонитрила, встряхивают в течение 1 мин (при необходимости допускается использование промежуточной стадии пробоподготовки: прибавляют 4 г безводного магния сульфата, 1 г натрия хлорида, тщательно встряхивают в течение 1 мин).

Извлечение центрифугируют в течение 3 мин при 5000 об/мин. После центрифугирования из верхнего слоя пробирки переносят аликвоту объемом 6 мл в тефлоновую пробирку для центрифугирования вместимостью 15 мл (при необходимости допускается использование промежуточной стадии пробоподготовки: прибавляют 150 мг сорбента, представляющего собой смесь первичных и вторичных аминов, и 950 мг магния сульфата безводного) и центрифугируют в течение 3 мин при 5000 об/мин. Полученную надосадочную жидкость фильтруют через фильтр с размером пор 0,45 мкм. В хроматографическую виалу, содержащую 15 мкл муравьиной кислоты раствора 5 % в ацетонитриле, переносят 1,5 мл полученного фильтрата.

Примечание – При необходимости допускается изменение объема ацетонитрила, с учетом коэффициента водопоглощения и особенностей испытуемого образца, с обязательным пропорциональным изменением объема внутреннего стандарта.

Методика 2

Стандартный раствор В. В коническую колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл стандартного раствора А и 0,5 мл раствора внутреннего стандарта, прибавляют 30,0 мл воды. К полученному раствору прибавляют 20 мл гексана и встряхивают в течение 5 мин. Полученное извлечение отфильтровывают в круглодонную колбу вместимостью 100 мл, экстракцию проводят дважды. Объединенные извлечения упаривают на роторном вакуумном испарителе досуха. Сухой остаток растворяют в 25 мл ацетонитрила (или другом подходящем растворителе).

Испытуемый раствор: Аналитическую пробу испытуемого образца измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. В коническую колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 г (точная навеска) измельченного испытуемого образца, прибавляют 0,5 мл раствора внутреннего стандарта и 30,0 мл воды, с учетом коэффициента водопоглощения и особенностей испытуемого образца. К полученному раствору прибавляют 20 мл гексана и встряхивают в течение 5 мин. Полученное извлечение фильтруют в круглодонную колбу вместимостью 100 мл, экстракцию проводят дважды. Объединенные извлечения упаривают на роторном вакуумном испарителе досуха. Сухой остаток растворяют в 25 мл ацетонитрила (или другом подходящем растворителе).

Измерение проводят аналогично методике, указанной в разделе «Метод стандартных добавок».

Пригодность хроматографической системы

- время удерживания определяемых компонентов в испытуемом растворе, не должны отличаться от времени удерживания компонентов в стандартном растворе Б или В, более чем на 0,5 мин;

- относительные интенсивности пиков характеристических ионов на реконструированной хроматограмме не должны отличаться более чем на 20 % от относительной интенсивности этих пиков в масс-спектре стандартного раствора Б или В, полученных в данной хроматомасс-спектрометрической системе;

- синхронность максимумов пиков характеристических ионов;

- соотношение сигнал/шум, должно быть не менее 3:1.

- для количественной оценки используют пробы, извлечение из которых внутреннего стандарта составило 70-110 %.

Условия проведения измерений могут быть иными при использовании других детекторов, при этом методика должна быть валидирована.

Обработка результатов измерений

Содержание хлорорганических пестицидов в мг/кг (Х) вычисляют по формуле:

(5)

где Сo – концентрация соответствующего пестицида в стандартном растворе Б или В, мкг/мл;
Сi – концентрация испытуемого раствора, г/мл;
Si – площадь пика пестицида на хроматограмме испытуемого раствора;
So – площадь пика пестицида на хроматограмме стандартного раствора Б или В.

Расчет содержания пестицидов в группе (группа ДДТ, группа ГХЦГ) проводится путем суммирования установленного содержания пестицидов в каждой группе.

С использованием матрицы испытуемого раствора

Пробоподготовка

Методика 1

Стандартный раствор Б: Аналитическую пробу испытуемого образца измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. В тефлоновую пробирку для центрифугирования вместимостью 50 мл помещают 10,0 г (точная навеска) измельченного испытуемого образца, прибавляют 0,5 мл раствора внутреннего стандарта, 0,5 мл стандартного раствора А, 24,0 мл ацетонитрила*, встряхивают в течение 1 мин (при необходимости допускается использование промежуточной стадии пробоподготовки: прибавляют 4 г безводного магния сульфата, 1 г натрия хлорида, тщательно встряхивают в течение 1 мин).

Извлечение центрифугируют в течение 3 мин при 5000 об/мин. После центрифугирования из верхнего слоя пробирки переносят аликвоту объемом 6 мл в тефлоновую пробирку для центрифугирования вместимостью 15 мл (при необходимости допускается использование промежуточной стадии пробоподготовки: прибавляют 150 мг сорбента, представляющего собой смесь первичных и вторичных аминов и 950 мг магния сульфата безводного) и центрифугируют в течение 3 мин при 5000 об/мин. Полученную надосадочную жидкость фильтруют через фильтр с размером пор 0,45 мкм. В хроматографическую виалу, содержащую 15 мкл муравьиной кислоты раствора 5 % в ацетонитриле, переносят 1,5 мл полученного фильтрата.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу испытуемого образца измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. В тефлоновую пробирку для центрифугирования вместимостью 50 мл помещают 10,0 г (точная навеска) измельченного испытуемого образца, прибавляют 0,5 мл раствора внутреннего стандарта, 24,5 мл ацетонитрила, встряхивают в течение 1 мин (при необходимости допускается использование промежуточной стадии пробоподготовки: прибавляют 4 г безводного магния сульфата, 1 г натрия хлорида, тщательно встряхивают в течение 1 мин). Извлечение центрифугируют в течение 3 мин при 5000 об/мин. После центрифугирования из верхнего слоя пробирки переносят аликвоту объемом 6 мл в тефлоновую пробирку для центрифугирования вместимостью 15 м (при необходимости допускается использование промежуточной стадии пробоподготовки: прибавляют 150 мг сорбента, представляющего собой смесь первичных и вторичных аминов, и 950 мг магния сульфата безводного) и центрифугируют в течение 3 мин при 5000 об/мин. Полученную надосадочную жидкость фильтруют через фильтр с размером пор 0,45 мкм. В хроматографическую виалу, содержащую 15 мкл муравьиной кислоты раствора 5 % в ацетонитриле, переносят 1,5 мл полученного фильтрата.

Примечание – При необходимости допускается изменение объема ацетонитрила, с учетом коэффициента водопоглощения и особенностей испытуемого образца, с обязательным пропорциональным изменением объема внутреннего стандарта.

Методика 2

Стандартный раствор Б. Аналитическую пробу испытуемого образца измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. В коническую колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 г (точная навеска) измельченного испытуемого образца, прибавляют 0,5 мл раствора внутреннего стандарта, 0,5 мл стандартного раствора А и 30,0 мл воды, с учетом коэффициента водопоглощения и особенностей испытуемого образца. К полученному раствору прибавляют 20,0 мл ацетонитрила и встряхивают в течение 5 мин. Полученное извлечение отфильтровывают в круглодонную колбу объемом 100 мл, экстракцию проводят дважды. Объединенные извлечения упаривают на роторном вакуумном испарителе досуха. К сухому остатку прибавляют 25 мл гексана.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу испытуемого образца измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. В коническую колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 г (точная навеска) измельченного испытуемого образца, прибавляют 0,5 мл раствора внутреннего стандарта и 30,0 мл воды, с учетом коэффициента водопоглощения и особенностей испытуемого образца (при необходимости добавляют органические растворители для улучшения экстракции). К полученному раствору прибавляют 20,0 мл ацетонитрила и встряхивают в течение 5 мин. Полученное извлечение отфильтровывают в круглодонную колбу вместимостью 100 мл, экстракцию проводят дважды. Объединенные извлечения упаривают на роторном вакуумном испарителе досуха. К сухому остатку прибавляют 25 мл гексана.

Измерение проводят аналогично методике, указанной в разделе «Метод стандартных добавок».

Пригодность хроматографической системы

- время удерживания определяемых компонентов в испытуемом растворе, не должны отличаться от времени удерживания компонентов в стандартном растворе Б или В, более чем на 0,5 мин;

- относительные интенсивности пиков характеристических ионов на реконструированной хроматограмме не должны отличаться более чем на 20 % от относительной интенсивности этих пиков в масс-спектре стандартного раствора Б или В, полученных в данной хроматомасс-спектрометрической системе;

- синхронность максимумов пиков характеристических ионов;

- соотношение сигнал/шум, должно быть не менее 3:1;

- для количественной оценки используют пробы, извлечение из которых внутреннего стандарта составило 70-110 %.

Условия проведения измерений могут быть иными при использовании других детекторов, при этом методика должна быть валидирована.

Обработка результатов измерений

Содержание хлорорганических пестицидов в мг/кг (Х) вычисляют по формуле:

(6)

где Сo – концентрация соответствующего пестицида в стандартном растворе, мкг/мл;
Сi – концентрация испытуемого раствора, г/мл;
Si – площадь пика пестицида на хроматограмме испытуемого раствора;
So – площадь пика пестицида на хроматограмме стандартного раствора;
Sovs – площадь пика внутреннего стандарта на хроматограмме стандартного раствора;
Svsi – площадь пика внутреннего стандарта на хроматограмме испытуемого раствора.

Расчет содержания пестицидов в группе (группа ДДТ, группа ГХЦГ) проводится путем суммирования установленного содержания пестицидов в каждой группе.

Способы оценки, пробоподготовки могут комбинироваться между собой в зависимости от особенностей испытуемого образца, методики должны быть валидированы.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.3.0012 Определение коэффициента водопоглощения и расходного коэффициента лекарственного растительного сырья

Взамен ОФС.1.5.3.0012.15

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для учёта вклада коэффициента водопоглощения при получении требуемых количеств водных извлечений из лекарственного растительного сырья, содержащего полисахариды (например: мать-и-мачехи обыкновенной листья и др.) и расходного коэффициента – при получении требуемых количеств водных извлечений из лекарственного растительного сырья, содержащего слизь (например: алтея корни).

###### Коэффициент водопоглощения

Коэффициент водопоглощения – показатель, определяемый количест-вом воды в миллилитрах, удерживаемой 1,0 г лекарственного растительного сырья после его отжатия в перфорированном стакане инфундирного аппара-та. Коэффициент водопоглощения используется для расчётов при получении водных извлечений из лекарственного растительного сырья.

Для определения коэффициента водопоглощения точную навеску цельного или измельчённого лекарственного растительного сырья массой 10,0 г заливают водой, количество указанное в фармакопейной статье, и готовят водное извлечение в соответствии с ОФС «Настои и отвары». Полученное водное извлечение процеживают, оставшееся в перфорированном стакане инфундирного аппарата сырьё отжимают и измеряют объём извлечения.

Коэффициент водопоглощения (Квп) рассчитывают по следующей формуле:

где V1 – объём воды, добавленный к сырью, мл;
V2 – полученный объём водного извлечения после отжатия сырья, мл;
а – масса лекарственного растительного сырья, г.

Коэффициент водопоглощения рассчитывают как среднее арифметическое результатов трёх параллельных определений.

В табл. 1 приведены значения коэффициентов водопоглощения для отдельных видов лекарственного растительного сырья.

Таблица 1. Коэффициенты водопоглощения отдельных видов лекарственного растительного сырья
Вид сырья | Коэффициент, мл/г | Вид сырья | Коэффициент, мл/г
--- | --- | --- | ---
Аира обыкновенного корневища | 2,4 | Липы цветки | 3,4
Брусники обыкновенной листья | 1,5 | Мать–и–мачехи обыкновенной листья | 3,0
Валерианы лекарственной корневища с корнями | 2,9 | Мяты перечной листья | 2,4
Горицвета весеннего трава | 2,8 | Подорожника большого листья | 2,5
Дуба кора | 2,0 | Полыни горькой трава | 2,1
Душицы обыкновенной трава | 2,0 | Пустырника трава | 2,0
Змеевика корневища | 2,0 | Ромашки аптечной цветки | 3,4
Зверобоя трава | 1,6 | Сенны листья | 1,8
Калины обыкновенной кора | 2,0 | Солодки корни | 1,7
Крапивы двудомной листья | 1,8 | Сушеницы топяной трава | 2,2
Кровохлебки лекарственной корневища и корни | 1,7 | Толокнянки обыкновенной листья | 1,4
Крушины ольховидной кора | 1,6 | Шалфея лекарственного листья | 3,3
Лапчатки прямостоячей корневища | 1,4 | Шиповника плоды | 1,1

При отсутствии коэффициента водопоглощения для лекарственного растительного сырья отдельных морфологических групп используют сле-дующие условные значения:

- для корней и корневищ – 1,5 мл/г;

- для коры, почек, травы и цветков – 2,0 мл/г;

- для семян – 3,0 мл/г.

Объём воды (Vквп), необходимый для получения водного извлечения с учётом коэффициента водопоглощения (Квп), рассчитывают по следующей формуле:

где V – требуемый объём водного извлечения, мл;
m – масса лекарственного растительного сырья, необходимая для приготовления водного извлечения, г;
Квп – коэффициент водопоглощения лекарственного растительного сырья.

Расходный коэффициент

Расходный коэффициент (Кр) показывает во сколько раз следует увеличить массу сырья и объём воды для получения требуемого объёма (мл) водного извлечения из лекарственного растительного сырья, содержащего слизь, например алтея корни (табл. 2).

Таблица 2. Расходные коэффициенты для получения водного извлечения алтея корней при различных соотношениях сырья и экстрагент
Соотношение сырьё-экстагент | Расходный коэффициент алтея корней, Kр
--- | ---
1 : 100 | 1,05
1 : 50 | 1,10
1 : 30 | 1,15
1 : 25 | 1,20
1 : 20 | 1,30

Для водного извлечения из алтея корней с концентрацией более 5 % (1:20) расходный коэффициент (Кр) рассчитывают по формуле:

где m – масса алтея корня, необходимая для получения 100 мл водного извлечения необходимой концентрации, г;
4,6 – постоянная величина, показывающая, что 1,0 г алтея корня удерживает 4,6 мл водного извлечения.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.3.0013 Определение содержания сока в свежем лекарственном растительном сырье

Взамен ОФС.1.5.3.0013.18

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения содержания сока в свежем лекарственном растительном сырье (свежие растения либо их части) гравиметрическим методом.

Содержание сока определяют в лекарственном растительном сырье, используемом для производства/изготовления лекарственных средств, получаемых на основе соков, а также гомеопатических лекарственных средств. Под соком понимают жидкость, полученную из свежего лекарственного растительного сырья путём его механической обработки методом прямого отжима или отжима с предварительной мацерацией.

Определение содержания сока проводят гравиметрическим методом, одной из описанных ниже методик.

Методика 1 используется для определения содержания выжатого сока в лекарственном растительном сырье, которое в последующем подвергается процессу прессования.

Методика 2 используется для определения содержания выжатого сока в лекарственном растительном сырье, которое в последующем подвергается предварительной мацерации и прессованию.

Методика 3 используется для определения содержания сока, в лекарственном растительном сырье, с влажностью более 60 %, которое предназначено для производства/изготовления гомеопатических лекарственных средств.

Методика 4 используется для определения содержания сока, в лекарственном растительном сырье с влажностью менее 60 %, которое предназначено для производства/изготовления гомеопатических лекарственных средств.

Для свежего лекарственного растительного сырья, как правило, нормируется нижний и верхний предел содержания сока: не менее … % и не более … %, если иное не указано в фармакопейной статье.

Пробоподготовка

Для получения сока из свежего лекарственного растительного сырья пробу, предварительно измельчают до размера частиц не более 10 мм (для методик 1 и 2) или до кашицеобразного состояния (для методик 3 и 4), используя для этого соответствующее оборудование и приспособления (ножницы, мельницы различных типов, ступки и др.), что определяется морфологической группой лекарственного растительного сырья.

Измельчённую аналитическую пробу свежего лекарственного растительного сырья тщательно перемешивают и берут две навески, взвешенные с точностью ± 0,01 г.

Для определения содержания сока в свежем лекарственном растительном сырье (по методике 3 и 4), предварительно устанавливают влажность сырья, в соответствии с ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Методика определения сухого остатка в соке

В точно взвешенную фарфоровую чашку или бюкс, предварительно высушенную при температуре 100 − 105 оС до постоянной массы, помещают 5,0 г (точная навеска) сока. Выпаривают на водяной бане досуха, сушат в сушильном шкафу в течение 2 ч при температуре (102,5 ± 2,5) оС, охлаждают в эксикаторе (над силикагелем безводным, кальция хлоридом безводным или другим подходящим осушителем) в течение 30 мин и взвешивают.

Обработка результатов

Содержание сухого остатка в соке в процентах (X) вычисляют по формуле:

(1)

где m1 – масса сухого остатка, г;
m2 – масса сока, г.

Методика 1

Во взвешенную колбу вместимостью 50 мл отжимают 50,0 г (точная навеска) измельчённого лекарственного растительного сырья, используя для этого соответствующее оборудование (соковыжималки различных типов, прессы и т.д.) и взвешивают.

Обработка результатов

Содержание выжатого сока в лекарственном растительном сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

(2)

где m1 – масса колбы с выжатым соком, г;
m0 – масса пустой колбы г;
a – навеска лекарственного растительного сырья, г.

Методика 2

В колбу вместимостью 250 мл помещают 50,0 г (точная навеска) измельчённого лекарственного растительного сырья, прибавляют равное (по массе) количество воды (или другого растворителя), перемешивают и настаивают в течение 24 ч, после чего извлечение фильтруют под вакуумом через воронку Бюхнера в предварительно взвешенную колбу Бунзена вместимостью 100 мл.

Обработка результатов

Содержание выжатого сока в лекарственном растительном сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

(3)

где m2 – масса колбы с выжатым соком, г;
m1 – масса прибавленной воды, г;
m0 – масса пустой колбы г;
a – навеска лекарственного растительного сырья, г.

Методика 3

Отжимают под прессом 20 г (точная навеска) измельчённого сырья и полученный сок фильтруют через фильтр беззольный до получения прозрачного фильтрата. В двух пробах фильтрата по 5 г + 0,01 г определяют содержание сухого остатка.

Обработка результатов

Содержание сока в сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

(4)

где W – влажность сырья, %;
В – содержание сухого остатка в соке, %;

Методика 4

К 25 г ± 0,01 г измельченного лекарственного растительного сырья прибавляют равное (по массе) количество воды, перемешивают и настаивают в течение 24 ч, после чего извлечение фильтруют до получения прозрачного фильтрата. Затем в двух пробах по 5 г ± 0,01 г полученного фильтрата определяют содержание сухого остатка.

Обработка результатов

Содержание сока в сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

(5)

где W – влажность сырья, %;
В – содержание сухого остатка в соке, %;

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.3.0014 Определение содержания жирных масел в лекарственном растительном сырье и лекарственных средствах растительного происхождения

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения содержания жирных масел (липидов). Испытание позволяет выделить и количественно определить содержание жирных масел (липидов) в лекарственном растительном сырье и лекарственных средствах растительного происхождения, в том числе, и лекарственных растительных препаратах.

Определение содержания жирного масла (липидов) проводят путём его экстракции с помощью неполярного(ых) органического(их) растворителя(ей), с последующим гравиметрическим определением. Навеска сырья или препарата, его измельчённость, экстрагент (петролейный эфир, хлороформ, эфир диэтиловый или другой неполярный органический растворитель или их смесь) и его объём или его отношение к объёму экстрактора в аппарате Сокслета (как правило, равный 2 объёмам экстрактора), время перегонки, температура водяной бани и сушильного шкафа должны быть указаны в соответствующей фармакопейной статье на лекарственное растительное сырьё/препарат.

###### Методика 1

Патрон (пакет) из фильтровальной бумаги, предварительно обезжиренной, с точной навеской испытуемого образца переносят в экстрактор аппарата Сокслета (рис. 1). Аппарат Сокслета, предварительно высушенный в сушильном шкафу до постоянной массы, присоединяют к круглодонной колбе со шлифом (объёмом равным 2 объёмам экстрактора) и помещают на водяную баню. Экстрагируют до полного обесцвечивания извлечения в экстракторе. По окончании процесса экстракции растворитель отгоняют на роторном испарителе при температуре кипения экстрагента и высушивают полученный комплекс липофильных веществ при температуре 100–105 °С до постоянной массы. Колбу с сухим остатком после охлаждения взвешивают.

Рисунок 1. Прибор (аппарат) Сокслета: 1 – холодильник, 2 – экстрактор, 3 – патрон с испытуемым образцом, 4 – растворитель.

Обработка результатов. Содержание жирного масла (липидов) в абсолютно сухом испытуемом образце в процентах (Х1) вычисляют по формуле:

(1)

где: a1 – масса колбы с сухим остатком, г;
a2 – масса колбы, г;
a – навеска испытуемого образца, г;
W – влажность испытуемого образца, %.

###### Методика 2

Патрон (пакет) из фильтровальной бумаги, предварительно обезжиренной, высушенный в сушильном шкафу при температуре 80 °С до постоянной массы, с точной навеской испытуемого образца переносят в аппарат Сокслета. Аппарат Сокслета присоединяют к круглодонной колбе со шлифом, экстрагируют на водяной бане до полного обесцвечивания извлечения в экстракторе. Патрон (пакет) вынимают и оставляют в вытяжном шкафу до полного удаления экстрагента, сушат в сушильном шкафу до постоянной массы, охлаждают и взвешивают.

В случае, если установить полноту экстракции по обесцвечиванию извлечения не представляется возможным (например, если липофильная фракция имеет слабую окраску), окончание экстракции возможно определить иным способом. Для этого на часовое стекло или шлиф колбы помещают каплю стекающего из экстрактора аппарата Сокслета экстрагента. Если после испарения экстрагента на часовом стекле или шлифе колбы не останется жирного масла, то экстракция считается проведённой полностью.

Обработка результатов. Содержание жирного масла (липидов) в абсолютно сухом испытуемом образце в процентах (Х2) вычисляют по формуле:

(2)

где: a1 – навеска испытуемого образца с патроном до экстракции, г;
a2 – навеска испытуемого образца с патроном после экстракции, г;
a – навеска испытуемого образца, г;
W – влажность испытуемого образца, %.

###### Методика 3

Точную навеску испытуемого образца помещают в коническую колбу с притёртой пробкой вместимостью 100 мл, добавляют 15 мл воды и 10 мл хлористоводородной кислоты 25 %, перемешивают и добавляют эфир или другой подходящий экстрагент. Содержимое колбы перемешивают в течение 15 мин, и переносят содержимое колбы в делительную воронку. После полного разделения фаз органический слой переносят в плоскодонную колбу вместимостью 100 мл. Процедуру экстракции повторяют дважды, прибавляя к водному слою 2 раза эфир или другой подходящий экстрагент порциями по 20 мл. Полученные органические слои объединяют в плоскодонной колбе и высушивают в течение 2–3 ч над натрия сульфатом безводным, фильтруют через беззольный фильтр. Безводный органический раствор помещают в предварительно взвешенную с точностью до 0,001 г круглодонную колбу вместимостью 100 мл и отгоняют растворитель на роторном испарителе при температуре не выше 40 оС. Полученный остаток высушивают при температуре 100-105 оС до постоянной массы. Колбу с сухим остатком взвешивают с точностью до 0,001 г.

Обработка результатов. Содержание жирного масла (липидов) в препарате в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х3) вычисляют по формуле:

(3)

где: a1 – масса колбы с сухим остатком, г;
a2 – масса пустой колбы, г;
a – навеска испытуемого образца, г;
W – потеря в массе при высушивании, %.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.3.0015 Показатель набухания

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья предназначена для определения показателя набухания в лекарственном растительном сырье или лекарственных растительных препаратах.

Показатель набухания – это объём в миллилитрах, занимаемый 1,0 г лекарственного растительного сырья или лекарственного растительного препарата, включая прилипшую слизь, после набухания в водном растворе в течение 4 ч.

В калиброванный мерный цилиндр с притёртой пробкой вместимостью 25 мл и высотой 125±5 мм, с ценой деления 0,5 мл или в любую другую мерную посуду, указанную в фармакопейной статье, помещают 1,0 г (если иное не указано в фармакопейной статье) цельного или измельчённого испытуемого образца, проходящего сквозь сито, размер отверстий которого должен быть указан в фармакопейной статье.

Содержимое смачивают 1 мл спирта 96 %, если иное не указано в фармакопейной статье, прибавляют 25 мл воды и плотно закрывают цилиндр. Интенсивно встряхивают каждые 10 мин в течение 1 ч. Оставляют на 30 мин, затем перемешивают путём вращения цилиндра вокруг вертикальной оси и для осаждения частиц оставляют ещё на 2,5 ч, сливают максимально возможное количество жидкости (если применимо).

После чего измеряют объём, занимаемый испытуемым образцом вместе с прилипшей слизью. Проводят три параллельных определения. Показатель набухания рассчитывают как среднее значение трёх определений.

Величину показателя набухания в лекарственном растительном сырье, или лекарственном растительном препарате указывают в фармакопейной статье.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.3.0016 Определение воды в эфирных маслах

Вводится впервые

Определение воды в эфирных маслах используется для качественного анализа и количественного определения воды в эфирных маслах.

###### Качественный анализ

Для качественного анализа воды в эфирных маслах могут быть применены следующие качественные реакции:

1. С углерода дисульфидом.

- Смешивают 0,5 мл (10 капель) эфирного масла с 1 мл углерода дисульфида. Не должно наблюдаться помутнения.

2. С безводным петролейным эфиром

- Смешивают 0,5 мл эфирного масла с 10 мл петролейного эфира (4). Не должно наблюдаться помутнения.

Метод качественного анализа воды в эфирных маслах должен быть указан в фармакопейной статье на лекарственное средство.

###### Количественное определение

Для количественного определения воды в эфирных маслах могут быть применены следующие методы:

1. Метод К. Фишера (полумикрометод) в соответствии с ОФС «Определение воды».

2. Микрометод определения воды (кулонометрический) в соответствии с ОФС «Определение воды».

3. Определение воды методом дистилляции в соответствии с ОФС «Определение воды».

Метод количественного определения воды в эфирных маслах должен быть указан в фармакопейной статье на лекарственное средство.

При проведении испытания выбранным количественным методом определения воды в эфирных маслах должны соблюдаться условия:

- навеску эфирного масла в соответствии с ОФС «Эфирные масла» приводят в фармакопейной статье;

- наименование и количество органических растворителей, наименование, концентрацию и количество реактивов в соответствии с ОФС «Реактивы. Индикаторы» приводят в фармакопейной статье;

- выбор аппаратуры, технические и температурные условия проведения метода приводят в фармакопейной статье;

- обработку результатов, формулы для расчётов приводят в фармакопейной статье.

Нормы содержания воды в эфирном масле должны быть указаны в фармакопейных статьях.

Выбор аналитического метода качественного анализа и количественного определения воды должен быть обоснован, а используемая методика валидирована в соответствии с ОФС «Валидация аналитических методик».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.3.0017 Определение состава жирных кислот в маслах жирных растительных и жирах

Вводится впервые

Метод определения состава жирных кислот в маслах жирных растительных и жирах проводят методом газовой хроматографии (ОФС «Газовая хроматография»).

###### Методика 1

Методика неприменима для масел, содержащих глицериды жирных

кислот с эпокси-, гидроэпокси-, гидроперокси-, циклопропиловыми или циклопропениловыми группами, а также для масел, в составе которых большая часть жирных кислот имеет длину цепи менее восьми атомов углерода, или для масел с кислотным числом более 2,0.

Метиловые эфиры жирных кислот могут быть получены следующими способами, если в фармакопейной статье не приведены иные условия:

1. В колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 – 0,15 мл тщательно перемешенного испытуемого образца, добавляют 1 мл метанола и 0,05 – 0,1 мл ацетилхлорида. Смесь аккуратно перемешивают и нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 1 ч. Избыток метанола отгоняют. К остатку прибавляют 0,2 мл гексана (гептана или другого растворителя с соответствующей полярностью) и перемешивают.

2. В колбу вместимостью 50 мл, снабжённую пришлифованным обратным холодильником, помещают 0,1 г тщательно перемешенного испытуемого образца, приливают 10 мл метанола. К полученной смеси прибавляют 0,28 г калия гидроксида и нагревают с обратным холодильником на песчаной бане при температуре 105-110 ºС в течение 1 часа. Смесь охлаждают до комнатной температуры, приливают по каплям 0,5 мл диметилсульфата, нагревают с обратным холодильником на песчаной бане при температуре 105-110 ºС в течение 30 мин и приливают ещё 0,2 мл диметилсульфата. Из полученного раствора отгоняют метанол до объёма 2,5 мл. Смесь охлаждают до комнатной температуры, приливают 20 мл воды, переносят в делительную воронку, добавляют 20 мл гексана (гептана или другого растворителя с соответствующей полярностью) и интенсивно встряхивают. Верхний слой отделяют и фильтруют через беззольный фильтр, содержащий 1 г натрия сульфата безводного.

Раствор сравнения А. Готовят 0,5 г смеси веществ, применяемых для калибровки (калибровочной смеси), состава приведённого в таблицах 1, 2 или 3, в соответствии с указаниями в фармакопейной статье. Если в фармакопейной статье не указан определённый раствор, готовят смесь состава, приведённого в таблице 1. Смесь растворяют в гексане (гептане или другом растворителе с соответствующей полярностью) и доводят объём раствора тем же растворителем до 50 мл.

Раствор сравнения Б. Доводят 1,0 мл раствора сравнения A гептаном до 10 мл.

Раствор сравнения В. Готовят 0,5 г смеси метиловых эфиров жирных кислот, которые по составу соответствуют смеси жирных кислот, указанных в фармакопейной статье на испытуемое вещество. Смесь растворяют в гексане (гептане или другом растворителе с соответствующей полярностью) и доводят объём раствора тем же растворителем до 50 мл. Допускается также использование готовых смесей метиловых эфиров жирных кислот.

Условия хроматографирования

Колонка | Кварцевая капиллярная длиной 10-30, диаметром от 0,2 до 0,8 мм, с неподвижной фазой полиэтиленгликоль 20 М (макрогол 20000), толщиной от 0,1 до 0,5 мкм или другая неподвижная фаза |
Детектор | пламенно-ионизационный |
Газ-носитель | Гелий, водород или азот для хроматографии |
Деление потока | 1:100 или менее в зависимости от внутреннего диаметра применяемой колонки (например, в случае использования колонки с внутренним диаметром 0,32 мм деление потока должно составлять 1:50) |
Скорость потока, мл/мин | 1,3 (для колонки с внутренним диаметром 0,32 мм) |
Объём пробы, мкл | 1 |
Температура | Колонка | 160-200 °С
Инжектор | 250 °С
Детектор | 250 °С

Если требуется линейный градиент температуры, температуру колонки увеличивают, например, со скоростью 3 ºС/мин от 170 до 230 ºС.

Пригодности хроматографической системы. Хроматографическая система считается пригодной, если при использовании смеси веществ, используемых для калибровки, приведенных в таблице 1 или таблице 2, выполняются следующие условия:

- разрешение (RS) между пиками метилолеата и метилстеарата на хроматограмме раствора сравнения А должно быть не менее 1,8;

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика метилмиристата на хроматограмме раствора сравнения Б должно быть не менее 5;

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику метилстеарата на хроматограмме раствора сравнения А должна быть не менее 30000 теоретических тарелок.

Таблица 1. Смесь веществ, применяемых для калибровки (для газовой хроматографии с капиллярной колонкой и системой с делением потока)
Смесь веществ | Состав (в процентах м/м)
--- | ---
Метиллаурат | 5
Метилмиристат | 5
Метилпальмитат | 10
Метилстеарат | 20
Метиларахидат | 40
Метилолеат | 20

Таблица 2. Смесь веществ, применяемых для калибровки (для газовой хроматографии с капиллярной колонкой и системой с делением потока)
Смесь веществ | Состав (в процентах м/м)
--- | ---
Метимиристат | 5
Метилпальмитат | 10
Метилстеарат | 15
Метиларахидат | 20
Метилолеат | 20
Метилэйкозеноат | 10
Метилбехенат | 10
Метиллигноцерат | 10

Примечание − при выполнении качественного анализа с использованием калибровочных кривых в калибровочную смесь рекомендуется добавлять компонент испытуемого раствора с максимальным числом атомов углерода в цепи.

Хроматографическая система считается пригодной, если при использовании смеси веществ, применяемых для калибровки, приведённых в таблице 3 выполняются следующие условия:

- разрешение (RS) между пиками метилкаприлата и метилдеканоата на хроматограмме раствора сравнения А должно быть не менее 4,0;

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика метилкапроата на хроматограмме раствора сравнения Б должно быть не менее 5;

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику метилдеканоата на хроматограмме раствора сравнения А должна быть не менее 15000 теоретических тарелок.

Таблица 3. Смесь веществ, применяемых для калибровки (для газовой хроматографии с капиллярной колонкой и системой с делением потока)
Смесь веществ | Состав (в процентах м/м)
--- | ---
Метилкапроат | 10
Метилкаприлат | 10
Метилдеканоат | 20
Метиллаурат | 20
Метилмиристат | 40

Примечание − при выполнении качественного анализа с использованием калибровочных кривых в калибровочную смесь рекомендуется добавлять компонент испытуемого раствора с максимальным числом атомов углерода в цепи.

Следует избегать условий хроматографирования, которые могут дать неразделённые пики (наличие компонентов с небольшим различием между временами удерживания, например, линоленовая и арахидоновая кислоты).

Качественный анализ. Идентифицируют пики на хроматограмме раствора сравнения В (изотермические условия хроматографирования или линейный градиент температуры).

При использовании изотермических условий хроматографирования пики могут быть также идентифицированы построением калибровочных кривых с использованием хроматограммы раствора сравнения А и данных таблиц 1, 2 или 3.

На хроматограмме раствора сравнения А измеряют приведённое время удерживания (tʹR) каждого пика.

tʹR – разница между временем удерживания пика растворителя и временем удерживания несорбирующегося (в условиях определения) вещества.

Строят график линейной зависимости:

Lg (tʹR) = f (эквивалент числа атомов углерода в цепи).

Логарифмы tʹR ненасыщенных жирных кислот расположены на этой линии в точках, соответствующих не целым значениям «эквивалента числа атомов углерода в цепи». Эквивалент числа атомов углерода в цепи представляет собой длину теоретической цепи насыщенной жирной кислоты, которая должна была иметь такое же tʹR , как идентифицируемая жирная кислота. Например, у линолевой кислоты такое же tʹR , как у теоретической насыщенной жирной кислоты, имеющей 18,8 атомов углерода.

Идентификацию пиков на хроматограмме испытуемого раствора проводят по прямой линии и уменьшающимся временам удерживания.

Эквиваленты числа атомов углерода в цепи представлены в таблице 4.

Таблица 4. Эквиваленты числа атомов углерода в цепи (значения рассчитаны с использованием калибровочных кривых и приведены в качестве примера для колонки с макроголом 20 000)
Жирная кислота | Эквивалент числа атомов углерода в цепи
--- | ---
Капроновая кислота | 6,0
Каприловая кислота | 8,0
Каприновая кислота | 10,0
Лауриновая кислота | 12,0
Миристиновая кислота | 14,0
Пальмитиновая кислота | 16,0
Пальмитолеиновая кислота | 16,3
Маргариновая кислота | 17,0
Стеариновая кислота | 18,0
Олеиновая кислота | 18,3
Линолевая кислота | 18,8
Гамма-линоленовая кислота | 19,0
Альфа-линоленовая кислота | 19,2
Арахиновая кислота | 20,0
11-Эйкозеиновая кислота (гондоиновая кислота) | 20,2
Арахидоновая кислота | 21,2
Бегеновая кислота | 22,0
Эруковая кислота | 22,2
12-Оксостеариновая кислота | 22,7
Рицинолевая кислота | 23,9
12-Гидроксистеариновая кислота | 23,9
Лигноцериновая кислота | 24,0
Нервоновая кислота | 24,2

Количественный анализ. Используют метод внутренней нормализации. Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 % от суммы площадей всех пиков.

В определённых случаях, например, при наличии жирных кислот с 12 или менее атомами углерода, в фармакопейной статье должен быть указан поправочный коэффициент для преобразования площадей пиков в проценты (м/м).

Содержание олеиновой кислоты представляет собой сумму олеиновой кислоты (18:1 n-9) и цис-вакциновой кислоты (18:1 n-7).

###### Методика 2

Методика неприменима для масел, содержащих глицериды жирных кислот с эпокси-, гидроэпокси-, гидроперокси-, циклопропиловыми и циклопропениловыми группами или для масел с кислотным числом более 2,0.

Испытуемый раствор. В центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой помещают 0,1 г (точная навеска) испытуемого образца, растворяют в смеси 1 мл гептана (гексана или другом растворителе с соответствующей полярностью) с 1 мл диметилкарбоната, энергично перемешивают и нагревают до температуры 50±5 ºС. Прибавляют к ещё тёплому раствору 1 мл натрия раствора 1,2 % в метаноле и энергично перемешивают в течение 5 мин, прибавляют 3 мл воды и энергично перемешивают в течение 30 с. Смесь центрифугируют 15 мин со скоростью 1500 об/мин. Надосадочную жидкость используют в качестве испытуемого раствора.

Растворы сравнения и анализ данных. Если в фармакопейной статье нет других указаний, поступают, как указано в методике 1.

Условия хроматографирования

Колонка | Кварцевая капиллярная 30 м × 0,25 мм, макрогол 20000, 025 мкм |  |
Детектор | пламенно-ионизационный |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии |  |
Деление потока | 1:100 |  |
Скорость потока, мл/мин | 0,9 |  |
Объём пробы, мкл | 1 |  |
Температура | Колонка | 0–15 мин | 100
15–36 мин | 100 → 225 °С
36–61 мин | 225 °С
Инжектор |  | 250 °С
Детектор |  | 250 °С

###### Методика 3

Методика неприменима для масел, содержащих глицериды жирных кислот с эпокси-, гидроэпокси-, гидроперокси-, альдегидными, кетоновыми, циклопропиловыми и циклопропениловыми группами и сопряженными полиненасыщенными и ацетиленовыми соединениями из-за частичного или полного разрушения этих групп.

Испытуемый раствор. В коническую колбу вместимостью 25 мл помещают 0,1 г испытуемого образца, растворяют в 2 мл натрия гидроксида раствора в метаноле 2 % и кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин. Прибавляют через холодильник 2,0 мл бора фторида в метаноле 14 % и кипятят в течение 30 мин, прибавляют через холодильник 4,0 мл гептана и кипятят в течение 5 мин. Смесь охлаждают, прибавляют 10,0 мл натрия хлорида насыщенного раствора, встряхивают в течение 15 с и прибавляют такое количество натрия хлорида насыщенного раствора, чтобы верхний слой поднялся к горлу колбы. Отбирают 2,0 мл верхнего слоя, помещают в делительную воронку, промывают тремя порциями воды, по 2 мл каждая, и сушат полученный экстракт над натрия сульфатом безводным.

Растворы сравнения, хроматографическая методика и анализ данных. Если в фармакопейной статье нет других указаний, поступают, как указано в методике 1.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.3.0018 Стерины в маслах жирных растительных и жирах

Вводится впервые

Метод определения стеринов в маслах жирных растительных и жирах основаны на использовании газовой хроматографии (ОФС «Газовая хроматография»), после получения неомыляемых веществ.

###### Методика 1

Получают неомыляемые вещества масла жирного растительного или твёрдого жира и отделяют стериновую фракцию методом тонкослойной хроматографии (ОФС «Тонкослойная хроматография»), используя пластинки, покрытые слоем силикагеля толщиной от 0,2 мм до 0,5 мм.

Испытуемый раствор А. В колбу вместимостью 150 мл, помещают раствор 0,2 % бетулина в метиленхлориде в таком объёме, чтобы количество бетулина соответствовало 10 % содержания стеринов в испытуемом образце, (например, оливы европейской плодов свежих масла жирного прибавляют 500 мкл, в случае других масел жирных растительных 1500 мкл раствора бетулина). Выпаривают в токе азота до сухого остатка.

Если в фармакопейной статье определяется только содержание индивидуальных стеринов в процентах к стериновой фракции, раствор бетулина можно не прибавлять.

В колбу помещают 5 г (точная навеска) испытуемого образца, прибавляют 50 мл калия гидроксида раствора спиртового 2 М и кипятят с обратным холодильником на водяной бане в течение 1 ч, при частом перемешивании. Охлаждают до температуры ниже 25 °С и количественно переносят в делительную воронку с помощью 100 мл воды. В делительную воронку прибавляют 100 мл эфира и осторожно встряхивают. Эфирные извлечения сливают и операцию повторяют ещё 2 раза порциями по 100 мл. Объединённые эфирные извлечения переносят в делительную воронку, прибавляют 40 мл воды, осторожно встряхивают в течение 3-5 минут, оставляют до полного расслоения и отбрасывают водный слой. Эфирный слой встряхивают с несколькими порциями воды, по 40 мл каждая, до тех пор, пока водный слой не перестанет давать щелочную реакцию по фенолфталеину. Эфирный слой количественно переносят в доведённую до постоянной массы колбу.

Эфир отгоняют досуха, к сухому остатку прибавляют 6 мл ацетона. В токе азота аккуратно удаляют ацетон. Остаток в колбе сушат до постоянной массы при температуре 100 – 105 °С, охлаждают в эксикаторе и взвешивают. Сухой остаток растворяют в минимальном объёме метиленхлорида. Упаривают содержимое в токе азота до объёма 1 мл. В зависимости от неомыляемого содержимого испытуемого образца, обеспечивают конечную концентрацию раствора 2,5–5 %.

Испытуемый раствор Б. В колбу вместимостью 150 мл помещают 5 г (точная навеска) рапса семян масла жирного и далее поступают так, как указано в методике приготовления испытуемого раствора А, начиная со слов «…прибавляют 50 мл калия гидроксида раствора спиртового 2 М….».

Испытуемый раствор В. В колбу вместимостью 150 мл помещают 5 г (точная навеска) подсолнечника однолетнего семян масла жирного и далее поступают так, как указано в методике приготовления испытуемого раствора А, начиная со слов «…прибавляют 50 мл калия гидроксида раствора спиртового 2 М….».

Раствор сравнения. Растворяют 25 мг холестерина и 10 мг бетулина в 1,0 мл метиленхлорида.

На пластинки (для каждого испытуемого раствора используют отдельную пластинку): в виде полосы длиной 10 мм – наносят 10 мкл раствора сравнения, в виде полосы длиной 150 мм – 0,5 мл испытуемого раствора А, Б или В, соответственно. Пластинки с нанесёнными пробами сушат при комнатной температуре, помещают в камеру со смесью растворителей гексан – эфир (65:35) и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт около 80 - 90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат в токе азота, обрабатывают дихлорфлуоресцеина раствором 0,2 % в этаноле и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения должны обнаруживаться две зоны адсорбции: зона адсорбции холестерина и под ней зона адсорбции бетулина.

Результат. На хроматограммах испытуемых растворов А, Б, В должны обнаруживаться зоны адсорбции с близкими значениями Rf зон адсорбции соответствующим стеринам.

С хроматограммы каждого испытуемого раствора снимают силикагель зоны адсорбции стеринов, а также дополнительно зоны на 2 – 3 мм выше и ниже видимых зон адсорбции на хроматограмме раствора сравнения и помещают раздельно в три колбы вместимостью 50 мл каждая.

В каждую колбу прибавляют по 15 мл метиленхлорида и нагревают с обратным холодильником в течение 15 мин, постоянно перемешивая. Растворы фильтруют через стеклянный фильтр или соответствующую фильтровальную бумагу и промывают фильтры тремя порциями метиленхлорида по 15 мл каждая. Каждый из трёх объединённых фильтратов со смывами помещают в колбу, упаривают в токе азота до объёма 5 - 10 мл. Растворы переносят в небольшие пробирки и выпаривают в токе азота досуха.

Испытуемый раствор. К сухому остатку, полученному из испытуемого образца методом тонкослойной хроматографии, прибавляют свежеприготовленную смесь из 0,04 мл хлортриметилсилана, 0,1 мл гексаметилдисилазана и 0,5 мл пиридина безводного. Смесь отстаивают в течение 5 мин и используют жидкую фазу.

Раствор сравнения А. К 9 частям стеринов, выделенных из рапса семян масла жирного методом тонкослойной хроматографии, прибавляют 1 часть холестерина. К полученной смеси прибавляют свежеприготовленную смесь из 0,04 мл хлортриметилсилана, 0,1 мл гексаметилдисалазана и 0,5 мл пиридина безводного, отстаивают в течение 5 мин и используют надосадочную жидкость.

Раствор сравнения Б. К стеринам, выделенным из подсолнечника однолетнего семян масла жирного методом тонкослойной хроматографии, прибавляют свежеприготовленную смесь из 0,04 мл хлортриметилсилана, 0,1 мл гексаметилдисалазана и 0,5 мл пиридина безводного. Смесь отстаивают в течение 5 мин и используют надосадочную жидкость.

Все растворы используются свежеприготовленные.

Условия хроматографирования

Колонка | Кварцевая капиллярная 20-30 м × 0,25 - 0,32 мм, поли[метил(95)фенил(5)]силоксан или поли(цианопропил)(7)(фенил)(7)метил(8)силоксан, 0,25 мкм |
Детектор | пламенно-ионизационный |
Газ-носитель | Гелий, водород для хроматографии |
Деление потока | 1:50 или 1:100 |
Скорость потока, см/с | 30-50 см/с (водород) или 20 – 35 см/с (гелий) |
Объём пробы, мкл | 1 |
Температура | Колонка | 260 °С
Инжектор | 280 °С
Детектор | 290 °С

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей холестерина, брассикастерина, кампестерина и β-ситостерина используют хроматограмму раствора сравнения А. Для идентификации пиков примесей кампестерина, стигмастерина, β-ситостерина и ∆7-сигмастенола (∆7-стигмастерина) используют хроматограмму раствора сравнения Б.

Относительные времена удерживания стеринов (по отношению к β-ситостерину) приведены в табл. 1.

Таблица 1. Относительные времена удерживания стеринов (по отношению к β-ситостерину) для двух различных колонок
Смесь веществ | Поли(цианопропил)(7) (фенил)(7)(метил)(86) силоксан | Поли [метил(95)-фенил(5)] силоксан
--- | --- | ---
Холестерин | 0,64 | 0,63
Брассикастерин | 0,70 | 0,71
24-метиленхолестерин | 0,79 | 0,80
Кампестерин | 0,82 | 0,81
Кампестанол | 0,83 | 0,82
Стигмастерин | 0,87 | 0,87
∆7-Кампестерин | 0,93 | 0,92
∆5,23-Стигмастадиенол | 0,95 | 0,95
Клеростерин | 0,96 | 0,96
β-Ситостерин | 1 | 1
Ситостанол | 1,01 | 1,02
∆5-Авенастерин | 1,03 | 1,03
∆5,24-Стигмастадиенол | 1,09 | 1,08
∆7-Стигмастенол (∆7-стигмастерин) | 1,13 | 1,12
∆7-Авенастерин | 1,18 | 1,16
*Бетулин | 1,4 | 1,4

* Пик внутреннего стандарта (бетулин) должен быть чётко отделён от пиков определяемых стеринов; площадь пика внутреннего стандарта при расчётах не учитывают.

Содержание каждого стерина в стериновой фракции испытуемого образца в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика, соответствующего определяемому стерину;
ΣS – сумма площадей всех пиков, соответствующих компонентам, указанным в таблице 1; не учитывают пик бетулина.

Содержание каждого стерина в мг на 100 г испытуемого образца (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика, соответствующего определяемому стерину;
S0 – площадь пика внутреннего стандарта бетулина;
a0 – навеска внутреннего стандарта бетулина, мг;
a – навеска испытуемого образца, мг.

###### Методика 2

Неомыляемые вещества получают в соответствии с ОФС «Масла жирные растительные». Одновременно, в таких же условиях, получают и неомыляемые вещества из подсолнечника однолетнего семян масла жирного и отделяют стериновую фракцию методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Испытуемый раствор. В пробирку вместимостью 15 мл с помощью трех порций (каждое по 4 мл) растворителя, использованного при получении неомыляемых веществ (обычно: эфир или петролейный эфир) переносят неомыляемые вещества. Выпаривают в токе азота досуха. Сухой остаток растворяют в достаточном объёме подвижной фазы для получения раствора с концентрацией около 4 %. Для улучшения растворимости добавляют несколько капель 2-пропанола и фильтруют через мембранный фильтр (размер пор 0,45 мкм).

Раствор сравнения. Готовят, как описано для испытуемого раствора с использованием неомыляемых веществ, полученных из подсолнечника однолетнего семян масла жирного.

Условия хроматографирования

Предколонка | 5 мм × 4,6 мм, силикагель для хроматографии, 5 мкм, размер пор 6 нм
Колонка | 250 мм × 4,6 мм, силикагель для хроматографии, 5 мкм, размер пор 6 нм
Подвижная фаза | гексан - 2-пропанол (1:99)
Скорость потока, мл/мин | 1
Температура колонки, °С | 25
Детектор | спектрофотометрический
Длина волны, нм | 210
Объем пробы, мкл | 50

Идентификация стеринов. Стериновая фракция элюируется в конце хроматограммы. Устанавливают расположение собираемой фракции по хроматограмме раствора сравнения, на которой наблюдается два основных пика, элюирующихся между 23-й и 32-й минутами. Собирают фракцию на выходе из детектора в пробирку вместимостью 15 мл с завинчивающейся крышкой и выпаривают растворитель в потоке азота.

Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. Остаток стериновой фракции, полученный методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, как описано выше для испытуемого раствора, растворяют в 0,2 мл пиридина безводного и 0,2 мл смеси N,О‑бис(Триметилсилил) трифторацетамид – хлортриметилсилан (99:1). Плотно закрывают пробирку и нагревают при 80 °С в течение 20 мин, выдерживают до охлаждения и используют жидкую фазу.

Раствор сравнения. Остаток стериновой фракции, полученный методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, как описано выше для раствора сравнения, растворяют в 0,2 мл пиридина безводного и 0,2 мл смеси N,О‑бис(Триметилсилил) трифторацетамид - хлортриметилсилан (99:1). Плотно закрывают пробирку и нагревают при 80 °С в течение 20 мин, выдерживают до охлаждения и используют надосадочную жидкость.

Условия хроматографирования

Колонка | Кварцевая капиллярная 30 м × 0,25 мм, поли[метил(95)фенил(5)]силоксан, 0,25 мкм |  |
Детектор | пламенно-ионизационный |  |
Газ-носитель | Гелий для хроматографии |  |
Деление потока | 1:25 |  |
Скорость потока, мл/мин | 2,6 |  |
Объём пробы, мкл | 1-3 |  |
Температура | Колонка | Время (мин) | Температура ºС
0–38 | 260
38–44 | 260 → 290
44–49 | 290
Инжектор |  | 290 °С
Детектор |  | 290 °С

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей кампестерина, стигмастерина, β-ситостерина и ∆7-сигмастенола используют хроматограмму раствора сравнения. Идентифицируют пики стеринов на хроматограмме испытуемого раствора с использованием хроматограммы раствора сравнения и относительных времён удерживания компонентов по отношению к β‑ситостерину (основной пик), приведённых в таблице 1.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения разрешение (RS) между пиками кампестерина и стигмастерина должно быть не менее 4,0.

Содержание каждого определяемого стерина в стериновой фракции испытуемого образца в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика, соответствующего определяемому стерину;
ΣS – сумма площадей всех пиков (за исключением бетулина), соответствующих компонентам, указанным в таблице 1.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.5.3.0019 Щелочные примеси в маслах жирных растительных и жирах

Вводится впервые

Метод определения щелочных примесей в маслах жирных растительных и жирах основан на использовании следующей методики, если в фармакопейной статье не приведены другие, валидированные в соответствии с ОФС «Валидация аналитических методик».

В пробирку помещают 10 мл свежеперегнанного ацетона, 0,3 мл воды и прибавляют 0,05 мл бромфенолового синего раствора 0,04 % спиртового.

При необходимости раствор нейтрализуют хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М или натрия гидроксида раствором 0,01 М. Прибавляют 10 г испытуемого масла жирного растительного или расплавленного твердого жира, встряхивают и оставляют до разделения слоев.

Для изменения окраски верхнего слоя на желтую должно быть израсходовано не более 0,1 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М.

### 1.6. Гомеопатические лекарственные средства

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.6.0001 Лекарственные средства гомеопатические

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на гомеопатические лекарственные средства для медицинского применения.

К гомеопатическим лекарственным средствам относятся гомеопатические фармацевтические субстанции и гомеопатические лекарственные препараты.

##### Термины и определения

Гомеопатическая фармацевтическая субстанция − одно или несколько обладающих фармакологической активностью действующих веществ вне зависимости от природы происхождения, предназначенные для производства/изготовления гомеопатических лекарственных препаратов.

Гомеопатический лекарственный препарат – лекарственный препарат, произведённый или изготовленный из фармацевтической субстанции (субстанций) в соответствии с требованиями общих фармакопейных статей к гомеопатическим лекарственным препаратам.

В качестве гомеопатических фармацевтических субстанций могут использоваться фармацевтические субстанции биологического, растительного, минерального, химического и синтетического происхождения, а также настойки гомеопатические матричные, настои и отвары гомеопатические, которые вводят в состав гомеопатических лекарственных препаратов в виде потенцированных жидких разведений и тритураций.

Потенцирование (динамизация) представляет собой ступенчатое разбавление гомеопатической фармацевтической субстанции, сопровождающееся интенсивным встряхиванием при жидкофазной технологии или длительным растиранием при твёрдофазной технологии, или комбинацией этих двух процессов.

##### Особенности технологии

При введении в состав гомеопатических лекарственных препаратов гомеопатических фармацевтическиз субстанций в виде соответствующих гомеопатических потенций (жидких разведений или тритураций), являющихся активными компонентами, название этим компонентам обычно дают по латинскому названию гомеопатической фармацевтической субстанции с указанием шкалы и степени разведения (потенцирования).

Для получения гомеопатических фармацевтических субстанций (настоек гомеопатических матричных, настоев и отваров гомеопатических), гомеопатических разведений (растворов, жидких разведений, тритураций), препаратов в гомеопатических лекарственных формах используются определённые вспомогательные вещества (ОФС «Вспомогательные вещества для гомеопатических лекарственных средств»).

Гомеопатические лекарственные препараты могут содержать один или несколько активных компонентов. Изменение шкалы разведения (степени разведения) активных компонентов, а также содержания спирта или концентрации спирта, используемого для получения препарата, означает изменение состава препарата, что влияет на фармакологическое действие и эффективность лекарственного препарата.

##### Испытания

Показатели качества гомеопатического лекарственного препарата обусловлены с одной стороны входящими в его состав гомеопатическими фармацевтическими субстанциями, с другой стороны – лекарственной формой, в виде которой он применяется. Показатели качества препарата, характеризующие входящие в их состав субстанции, регламентируются соответствующими ФС на эти субстанции.

Показатели качества лекарственной формы, регламентирующие требования к ней, приведены в соответствующей ОФС. В случае использования для получения гомеопатических лекарственных препаратов лекарственных форм, общепринятых в медицинской практике, требования к ним представлены в ОФС на лекарственные формы и фармацевтико-технологические методы испытаний, предназначенные для лекарственных препаратов для медицинского применения.

При использовании лекарственных форм, применяемых лишь для гомеопатических лекарственных препаратов (настойки гомеопатические матричные, тритурации, разведения, оподельдоки и др.) следует руководствоваться требованиями соответствующих ОФС: «Настойки гомеопатические матричные», «Настои и отвары гомеопатические», «Гранулы гомеопатические», «Мази гомеопатические».

Испытания на подлинность и количественное определение разведений гомеопатических проводят по методикам, принятым для гомеопатических фармацевтических субстанций.

В случае если степень потенцирования активного компонента (активных компонентов) в препарате не позволяет установить их подлинность и определить содержание в полученном лекарственном препарате, технология получения и количество взятых компонентов контролируется визуально (под наблюдением) и документируется на стадии технологического процесса. Установление подлинности и количественное определение этих лекарственных препаратов проводится по вспомогательным веществам (спирту этиловому, лактозе и т.д.).

##### Упаковка

Упаковка должна обеспечивать стабильность лекарственного препарата в течение установленного срока годности (ОФС «Упаковка лекарственных средств»).

##### Маркировка

Требования, предъявляемые к маркировке, приведены в ОФС «Маркировка лекарственных средств».

##### Хранение

В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств» и ОФС на соответствующие гомеопатические лекарственные формы.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.6.0002 Вспомогательные вещества для гомеопатических лекарственных средств

Вводится впервые

Вспомогательные вещества для гомеопатических лекарственных средств – вещества растительного, животного, минерального, химического происхождения, используемые в процессе производства/изготовления гомеопатических лекарственных средств (субстанций и препаратов) для придания им необходимых физико-химических свойств.

Вспомогательные вещества для гомеопатических лекарственных средств по назначению можно разделить на 2 группы:

- используемые для получения гомеопатических фармацевтических субстанций, включая настойки гомеопатические матричные, а также активных компонентов – гомеопатических разведений и тритураций;

- используемые для получения гомеопатических лекарственных препаратов.

##### Общие положения

Гомеопатические фармацевтические субстанции, как правило, используются в виде потенцированных (динамизированных) разведений или тритураций, представляющих собой лекарственные формы, качество которых регламентируется соответствующими ОФС: «Растворы и жидкие разведения гомеопатические», «Тритурации гомеопатические». Специфической лекарственной формой гомеопатических фармацевтических субстанций являются настойки гомеопатические матричные (ОФС «Настойки гомеопатические матричные»).

При получении гомеопатических фармацевтических субстанций, представляющих собой потенцированные (динамизированные) разведения и тритурации, используют, как правило, воду очищенную, воду для инъекций, натрия хлорида раствор 0,9 %, спирт этиловый для получения жидких разведений, а в случае тритураций – лактозу.

Перечень вспомогательных веществ, используемых для получения гомеопатических лекарственных средств, гомеопатических фармацевтических субстанций и гомеопатических разведений, в том числе формообразующих, приведён, как правило, в соответствующих ОФС на лекарственные формы: «Настойки гомеопатические матричные», «Растворы и жидкие разведения гомеопатические», «Тритурации гомеопатические» и др. Например, основным растворителем (экстрагентом, носителем) при производстве/изготовлении водно-спиртовых настоек гомеопатических матричных, растворов и разведений является спирт этиловый в концентрации (м/м): 94 %, 86 %, 73 %, 62 %, 43 %, 30 %, 15 %.

Глицерол используется в качестве экстрагента при получении настоек гомеопатических матричных из сырья животного происхождения. Он может использоваться как самостоятельно, так и с добавлением натрия хлорида растворов различной концентрации (8 %, 4 %, 1,5 %, 0,9 %).

Для получения таких гомеопатических фармацевтических субстанций как настойки гомеопатические матричные, наряду со спиртом этиловым используются специфические вспомогательные вещества: мёд, молочная сыворотка и др.

Лактоза в качестве вспомогательного вещества широко используется: для получения тритураций гомеопатических, настоек гомеопатических матричных ферментированных, смесей гомеопатических и таблеток.

В составе гомеопатических лекарственных средств не должны применяться стабилизаторы, антиоксиданты, консерванты, красители, корригенты. В отдельных случаях, например для препаратов в лекарственной форме «Спреи гомеопатические», допустимо использование в качестве консерванта бензалкония хлорида, что регламентируется соответствующей ОФС на лекарственную форму «Спреи гомеопатические».

При получении лекарственной формы, совпадающей с аллопатической лекарственной формой (таблетки, капли глазные, растворы для инъекций, суппозитории и др.), для производства / изготовления используют вспомогательные вещества, применяемые в технологии лекарственных препаратов (ОФС «Вспомогательные вещества»).

Вспомогательные вещества, присутствующие только в гомеопатических лекарственных препаратах, описаны в ОФС на соответствующую гомеопатическую лекарственную форму (гранулы, оподельдоки и др.).

##### Испытания

Качество вспомогательных веществ, используемых в получении гомеопатических лекарственных средств, регламентируется соответствующими документами.

Дополнительные требования к качеству вспомогательных веществ устанавливают в случае использования их для получения лекарственных препаратов для парентерального, офтальмологического применения, а также лекарственных препаратов, к которым предъявляются требования по показателям «Стерильность» и др.

##### Хранение

Хранение вспомогательных веществ, используемых в получении гомеопатических лекарственных средств, осуществляется в соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств».

#### 1.6.1. Лекарственное сырьё для гомеопатических лекарственных препаратов

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.6.1.0001 Лекарственное растительное сырьё для гомеопатических лекарственных средств

Взамен ОФС.1.6.1.0001.18

Лекарственное растительное сырьё для гомеопатических лекарственных средств − свежие или высушенные растения, либо их части, используемые для производства (изготовления) гомеопатических лекарственных средств.

Лекарственное растительное сырьё для гомеопатических лекарственных средств включает цельные растения, надземные, подземные органы растений или их отдельные части, водоросли, грибы, включая спорынью, лишайники, а также определённые выделения (экссудаты) растений, которые не подвергались предварительной специальной обработке.

Требования, предъявляемые к качеству высушенного лекарственного растительного сырья, изложены в ОФС «Лекарственное растительное сырьё. Фармацевтические субстанции растительного происхождения ».

###### Особенности технологии

Лекарственное растительное сырьё для гомеопатических лекарственных средств получают от культивируемых или дикорастущих растений, заготавливая его с соблюдением фазы вегетации, сроков и правил его заготовки.

Соответствующие условия культивирования, заготовки, переработки и хранения являются основой для гарантии качества лекарственного растительного сырья, используемого для производства (изготовления) гомеопатических лекарственных средств.

Заготовку лекарственного растительного сырья, предназначенного для получения гомеопатических лекарственных средств, осуществляют в специально отведённых экологически чистых местах в сухую ясную погоду таким образом, чтобы оно, по возможности, было минимально подвержено загрязнению. При этом лекарственное растительное сырьё не должно иметь внешних признаков перенесённых болезней, увядших или отмерших частей растений, значительных повреждений, плесени, насекомых и других загрязнений животного происхождения, присутствие которых недопустимо. Очистка лекарственного растительного сырья, в случае необходимости, должна проводиться с использованием возможно меньшего количества воды. Для дальнейшей переработки остаток воды, по возможности, максимально удаляется.

Химическая деконтаминация лекарственного растительного сырья, используемого в гомеопатической практике, например, с применением этиленоксида, недопустима.

Свежее лекарственное растительное сырьё подлежит немедленной переработке. Если немедленная переработка невозможна, лекарственное растительное сырьё, предназначенное для транспортирования и хранения, охлаждают, подвергают глубокой заморозке или хранят в спирте 96 % или спирте соответствующей концентрации, при условии, что весь материал, включая средства консервации, используется во время переработки. Сырьё, подвергнутое глубокой заморозке, должно быть помещено в замороженном состоянии в спирт предписанной концентрации. При дальнейшей переработке сырья, помещённого в спирт, количество этого спирта учитывается при расчёте количества спирта, необходимого для получения настойки гомеопатической матричной, в соответствии с требованиями ОФС «Настойки гомеопатические матричные».

###### Испытания

Подлинность. Подлинность лекарственного растительного сырья для гомеопатических средств устанавливается по органолептическим (цвет, запах), макроскопическим и микроскопическим признакам, а также испытанием на присутствие основных групп биологически активных веществ в соответствии с требованиями ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах», ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения», ОФС на морфологические группы лекарственного растительного сырья (травы, листья, цветки, кора, плоды, семена и др.).

Влажность. Определение влажности проводят в соответствии с ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Зола общая. Определение золы общей проводят в соответствии с ОФС «Зола общая».

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Определение проводят в соответствии с ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте».

Определение содержания сока в свежем лекарственном растительном сырье. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания сока в свежем лекарственном растительном сырье».

Допустимые примеси. Если свежее лекарственное растительное сырьё используется для получения гомеопатических лекарственных средств, содержание примесей (сырьё, изменившее окраску; другие части растения; недозрелые плоды и др.) должно быть настолько низким, насколько возможно. Испытание на содержание допустимых примесей должно выполняться, если не указано иначе в фармакопейной статье. Максимальное содержание допустимых примесей указывается в фармакопейной статье. Содержание допустимых примесей должно быть не более 2 %, если в фармакопейной статье не указано иначе.

Если для гомеопатических средств используется высушенное лекарственное растительное сырьё, качество его должно соответствовать требованиям фармакопейной статьи на лекарственное растительное сырьё данного наименования.

Органическая и минеральная примесь. Испытания проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные пестициды. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Тяжёлые металлы. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Содержание биологически активных веществ, обуславливающих фармакологическое действие лекарственного растительного сырья, используемого в гомеопатической практике, определяют методом, указанным в фармакопейной статье.

###### Упаковка

Согласно требованиям ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов». Вид упаковки и массу сырья, упакованного в тару, устанавливают для конкретных видов лекарственного растительного сырья и указывают в соответствующей фармакопейной статье.

###### Маркировка

Требования, предъявляемые к маркировке, приведены в ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов». Для свежего растительного сырья дополнительно указывают дату и часы сбора, предупредительные надписи «Свежее сырьё», «Ядовито» (для ядовитых растений).

###### Хранение

Свежее лекарственное растительное сырьё должно быть переработано немедленно. Если немедленная переработка невозможна, сырьё хранят до переработки от 2 до 24 ч при соблюдении соответствующего температурного режима и консервации, указанных в фармакопейной статье.

Высушенное лекарственное растительное сырьё хранят в соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.6.1.0002 Сырьё животного происхождения для гомеопатических лекарственных средств

Взамен ОФС.1.6.1.0002.18

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на сырьё животного происхождения для гомеопатических лекарственных средств, которое представляет собой целых животных (чаще всего насекомых), отдельные части животных, включая железы и выделения из них, а также биологические жидкости и выделения животных, используемые для производства (изготовления) гомеопатических лекарственных средств.

Сырьё животного происхождения, используемое для получения гомеопатических лекарственных средств, может быть свежим и высушенным.

###### Классификация

Сырьё животного происхождения в зависимости от вида животных подразделяют на следующие группы:

1. - из ядовитых животных;

   - из неядовитых животных;

2. - 1)

     - позвоночные (Vertebrata):

     - млекопитающие (Mammalia);

     - пресмыкающиеся (Reptilia);

     - рыбы (Pisces);

     - птицы (Aves);

     - земноводные (Batrachia) и др.;

   - 2)

     - беспозвоночные (Invertebrata) (ядовитые и неядовитые):

     - моллюски (Mollusca), в том числе их экзоскелетов (раковин);

     - губки (Porifera);

     - черви (Vermes);

     - насекомые (Insecta);

     - пауки (Arachnida) и др.

3. - выделения живых животных в определённый период их развития;

   - секреты некоторых органов;

   - вытяжки из органов здоровых молодых животных;

   - вытяжки из патологически изменённых тканей животных.

###### Особенности технологии

Сырьё животного происхождения должно быть получено от здоровых животных, содержащихся в надлежащих гигиенических условиях, кроме случаев использования сырья из вытяжки из патологически изменённых тканей животных. Заготовка сырья, в зависимости от особенностей каждого вида, проводится в соответствии со строгой процедурой с указанием времени, места забора, при необходимости – условий умерщвления животного или получения от него продуктов жизнедеятельности, выделений, секретов и т.д.

При переработке живых животных необходимо учитывать нормы закона о защите животных, а именно порядок усыпления животных. Непосредственно перед переработкой низшие животные должны быть помещены в равное количество спирта этилового 94 % (м/м) или умерщвлены в открытом сосуде посредством введения двуокиси углерода, высшие животные должны быть оглушены эфиром или хлороформом.

Все эти особенности должны быть описаны в соответствующей фармакопейной статье.

К сырью животного происхождения должны предъявляться требования, сводящие к минимуму риск инфицирования гомеопатических лекарственных средств.

При этом методы производства должны включать стадию или стадии, которые удаляют либо инактивируют факторы инфицирования.

В некоторых случаях животные или их ткани, используемые для получения сырья, должны выдерживать требования компетентного уполномоченного органа и (или) нормативно-правовых актов, регламентирующих требования, предъявляемые к здоровью животных, используемых в практической деятельности человека.

Переработка органов и тканей теплокровных животных производится непосредственно после убоя или умерщвления. В некоторых случаях допускается сбор свежего материала с последующим его замораживанием.

При необходимости производство должно включать стадию фиксации инфекционных материалов перед экстракцией, которую следует максимально точно описать в соответствии с технологическим регламентом, включая полную информацию об исходном сырье, способах его хранения и правилах безопасности при работе с ним.

Экстракты из органов, тканей и клеток получают путём разведения одного или нескольких компонентов в смеси твёрдых, жидких или растворённых веществ. Селективные растворители отделяются путём кристаллизации, дистилляции или другими методами.

###### Испытания

Требования к сырью животного происхождения для гомеопатических лекарственных средств должны содержать во вводной части подробную информацию об источнике сырья, способе его получения, включая:

- род и подвид животного;

- идентификацию источника животного материала (домашнее или дикое животное), используемый орган или его часть;

- время забора или умерщвления животного;

- возможное наличие потенциально токсических веществ;

- данные об отсутствии риска передачи губчатой энцефалопатии (BSE);

- указание метода получения сырья.

Сырьё животного происхождения, предназначенное для получения гомеопатических лекарственных средств, должно соответствовать требованиям фармакопейной статьи, которая должна содержать следующие показатели качества: «Описание», «Подлинность», «Чистота» (определение токсических и других примесей, если применимо), «Влажность», «Количественное определение» (если применимо) и др.

Подлинность и содержание активных веществ, обуславливающих фармакологическое действие сырья животного происхождения для гомеопатических лекарственных средств, определяют методом, указанным в фармакопейной статье, по валидированным методикам (если применимо).

В случае использования сырья животного происхождения в аллопатической практике, качество сырья животного происхождения для гомеопатических препаратов также должно соответствовать требованиям к качеству утверждённой фармакопейной статьи на соответствующие аллопатические субстанции.

###### Упаковка

Согласно требованиям ОФС «Упаковка лекарственных средств». Упаковка должна обеспечивать стабильность сырья животного происхождения в течение установленного срока годности.

Вид упаковки и массу сырья, упакованного в тару, устанавливают для конкретных видов сырья животного происхождения и указывают в соответствующей фармакопейной статье.

###### Маркировка

Требования, предъявляемые к маркировке, изложены в ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов».

Для свежего сырья дополнительно указывают дату и часы сбора, предупредительные надписи: «Свежее сырьё», «Ядовито» (для ядовитого сырья).

###### Хранение

Свежее сырьё животного происхождения должно быть переработано немедленно. Если немедленная переработка невозможна, сырьё хранят до переработки от 2 до 24 ч, при соблюдении соответствующего температурного режима и (или) консервации, указанных в соответствующей фармакопейной статье.

Высушенное сырьё хранят в соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.6.1.0003 Сырьё минерального и химического происхождения для гомеопатических лекарственных средств

Взамен ОФС.1.6.1.0003.18

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на сырьё минерального и химического происхождения для гомеопатических лекарственных средств, которое представляет собой природные минералы, металлы и их соли, неметаллы и их соединения, горные породы, ископаемое топливо (нефть, бурый и каменный уголь и др.), золу растений или животных и (или) их частей, в том числе продукты их совместного обжига (прокаливания) с другими неорганическими соединениями, а также продукты химических реакций (химического синтеза), используемые для производства (изготовления) гомеопатических лекарственных средств.

###### Классификация

Сырьё минерального и химического происхождения в зависимости от происхождения подразделяется на группы:

- природные минералы (Аметист, Апатит, Малахит, Графит и др.);

- продукты химической реакции (Фтористый кальций, Аурум йодатум, Ртуть растворимая по Ганеману и др.);

- продукты химического синтеза (Ацетилсалициловая кислота и др.);

- зола растений и животных (Уголь древесный, Растительный уголь, Зола костная), а также наружные защитные скелетные образования некоторых беспозвоночных животных (Кораллиум рубрум, Калькарея карбоника и др.);

- продукты совместного обжига (прокаливания) золы растений и животных с неорганическими соединениями (Гепар сульфур и др.);

- металлы и их соли (химически чистые металлы и металлы, полученные путём возгонки, например, Олово металлическое и др.);

- неметаллы и их соединения (Фосфор, Сера и др.);

- горные породы (Гранит, Мрамор и др.);

- ископаемое топливо и продукты его переработки (Петролеум, Петролеум крудум и др.);

- продукты растительного происхождения (Дёготь и др.).

###### Особенности технологии

Сырьё минерального и химического происхождения, предназначенное для получения гомеопатических лекарственных средств, может различаться по растворимости в различных растворителях и прежде всего, в воде.

Минералы и соединения, нерастворимые в воде, используемые как лекарственное сырьё для гомеопатических препаратов, предварительно измельчают до размера частиц, указанного в фармакопейной статье. Определение размера частиц проводят в соответствии с требованиями ОФС «Ситовой анализ». После чего их используют для получения тритураций в соответствии с требованиями ОФС «Тритурации гомеопатические».

Металлы, используемые в гомеопатии, могут быть получены путём возгонки руды или путём осаждения из соответствующих солей. При необходимости их предварительно измельчают до размера частиц, указанного в фармакопейной статье. Они могут подвергаться дополнительно дистилляции (возгонке) с получением металлического зеркала. Для этого чистый металл помещается в соответствующий аппарат и нагревается под вакуумом до испарения. Параметры температуры и вакуума подбираются в соответствии с используемым металлом. Газообразный металл конденсируется на поверхности охлаждённой части дистилляционного аппарата и образует при этом металлическое зеркало. После охлаждения металлическое зеркало механически снимается с поверхности. Полученный порошок используется для получения тритураций в соответствии с требованиями ОФС «Тритурации гомеопатические», используемых для получения лекарственных препаратов для наружного применения.

Неметаллы и их соединения (в том числе фосфор, сера, селен, углерод и др.) обрабатываются по методу, приведённому в фармакопейной статье.

Некоторые растения или животные, а также их части (в том числе наружные защитные скелетные образования ряда беспозвоночных животных) для получения из них гомеопатических фармацевтических субстанций могут подвергаться минерализации под воздействием температур. Различают 3 вида воздействия температур:

1. от 170 до 250 °С – степень обжаривания (tosta);

2. от 200 до 600 °С – степень обугливания (carbo);

3. выше 500 °С – степень озоления (cinis).

Выбор температурного режима зависит от исходного сырья и необходимой степени минерализации.

Кроме минерализации, это сырьё под воздействием очень высоких температур (порядка 1100–1500 °С) также может подвергаться прокаливанию. Полученную субстанцию применяют в соответствии с фармакопейной статьёй.

В случае если минеральные соединения извлекаются из сырья животного или растительного происхождения, метод их получения должен быть приведён в фармакопейной статье.

Растворимые субстанции минерального происхождения используются в соответствии с ОФС «Растворы и жидкие разведения гомеопатические», а также фармакопейными статьями. Отдельные способы получения гомеопатических субстанций из сырья минерального и химического происхождения отмечают в фармакопейной статье.

###### Испытания

Требования к сырью и субстанции минерального и химического происхождения должны содержать следующие показатели качества: источник получения (природное или синтетическое), описание, химическая формула (если применимо), молекулярная масса (если применимо), подлинность, испытание на чистоту или допустимые примеси (если применимо), количественное определение (если применимо), метод получения гомеопатической субстанции, хранение.

В случае использования сырья минерального и химического происхождения в аллопатической практике, качество сырья минерального и химического происхождения для гомеопатических препаратов также должно соответствовать требованиям к качеству утверждённых фармакопейных статей на соответствующие аллопатические субстанции.

Для минералов в разделе «Описание» информация по «Степени твёрдости по Моосу» имеет информативный характер.

###### Упаковка

Согласно требованиям ОФС «Упаковка лекарственных средств». Упаковка должна обеспечивать стабильность сырья минерального и химического происхождения в течение установленного срока годности.

Вид упаковки указывают в соответствующей фармакопейной статье.

###### Маркировка

Требования, предъявляемые к маркировке, изложены в ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов».

На этикетке указывают наименование минерального сырья на латинском языке (название минерала, металла или химического соединения).

Для металлов, полученных путём возгонки, дополнительно указывают «praeparatum» или сокращенно «praep.».

Для сырья, полученного путём воздействия температур, указывают на латинском языке полученный продукт (Carbo или Cinis), дополнительно указывают название растения или животного (из которого данный продукт получен) на латинском языке (например, Carbo Betulae, Carbo Ossium и т.д.).

Если сырьё подвергалось обжариванию, дополнительно указывают «tosta» или «tostum».

###### Хранение

При температуре от 15 до 25 °С. Особые условия хранения указывают в фармакопейной статье.

В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств».

#### 1.6.2. Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.6.2.0001 Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов

Взамен ОФС.1.6.2.0001.18

Настоящая общая фармакопейная статья устанавливает общие требования к гомеопатическим лекарственным формам, которые используют в производстве (изготовлении) гомеопатических лекарственных препаратов.

###### Термины и определения

Гомеопатическое лекарственное средство – гомеопатические вещества, их комбинации, применяемые для профилактики, лечения заболевания, реабилитации после болезни. К гомеопатическим лекарственным средствам относятся гомеопатические фармацевтические субстанции и гомеопатические лекарственные препараты.

Гомеопатическая лекарственная форма – состояние гомеопатического лекарственного препарата, соответствующее способам его применения (введения) и обеспечивающее достижение необходимого лечебного эффекта.

Гомеопатическая фармацевтическая субстанция – лекарственное средство в виде одного или нескольких обладающих фармакологической активностью действующих веществ растительного, животного, минерального, химического, биотехнологического происхождения, предназначенное для производства/изготовления гомеопатических лекарственных препаратов.

По природе растворителя существуют извлечения*: водно-спиртовые (настойки гомеопатические матричные), водные (настои и отвары), масляные. (*Извлечения из сырья растительного, минерального, животного происхождения).

Активный компонент – действующее вещество, обеспечивающее фармакологическую активность гомеопатического лекарственного препарата.

Гомеопатический лекарственный препарат – гомеопатическое лекарственное средство, произведённое/изготовленное в одной из принятых в гомеопатии лекарственных форм. Входит в группу лекарственных препаратов традиционной медицины и может содержать одну или несколько гомеопатических фармацевтических субстанций.

Потенцирование (динамизация) – это ступенчатое разбавление гомеопатической фармацевтической субстанции, сопровождающееся интенсивным встряхиванием при жидкофазной технологии или длительным растиранием при твёрдофазной технологии, или комбинацией этих двух процессов.

###### Классификация лекарственных форм

Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов в большинстве своём по номенклатуре соответствуют лекарственным формам, используемым в общей практике: растворы, таблетки, мази, суппозитории, пластыри, капли, настойки и др. (ОФС «Лекарственные формы»).

Ряд гомеопатических лекарственных форм имеет особенности и по своей технологии получения являются специфичными и применяемыми только в гомеопатии. К таким лекарственным формам следует отнести: гранулы гомеопатические, оподельдоки гомеопатические, разведения гомеопатические, смеси гомеопатические и др.

Некоторые лекарственные формы предназначены для приготовления гомеопатических лекарственных препаратов, например, настойки гомеопатические матричные, тритурации, разведения гомеопатические и др. К настойкам гомеопатическим матричным наряду со спиртовыми настойками относятся настойки гомеопатические матричные на глицерине и настойки гомеопатические матричные ферментированные.

Технология получения и требования к оценке качества гомеопатических лекарственных форм приведены в соответствующих ОФС: «Гранулы гомеопатические», «Мази гомеопатические», «Растворы и жидкие разведения гомеопатические», «Тритурации гомеопатические», «Смеси гомеопатические», «Настойки гомеопатические матричные», «Капли гомеопатические», «Капли глазные гомеопатические», «Пластыри гомеопатические», «Растворы для инъекций гомеопатические», «Сиропы гомеопатические», «Суппозитории гомеопатические», «Таблетки гомеопатические», «Настои и отвары гомеопатические».

###### Особенности технологии

Разведения и тритурации получают из гомеопатической фармацевтической субстанции при помощи процесса потенцирования в соответствии с гомеопатической производственной практикой.

Различают способы потенцирования жидких фармацевтических субстанций по Ганеману, Корсакову и LM-метод (ОФС «Растворы и жидкие разведения гомеопатические»).

Обычно используют следующие степени потенцирования:

- 1 часть активного компонента плюс 9 частей растворителя; обозначают как «D» (десятичное разведение);

- 1 часть активного компонента плюс 99 частей растворителя; обозначают как «С» (сотенное разведение).

Число степеней потенций определяет меру разведения, например, «D3» обозначает третью десятичную потенцию, а «С3» − третью сотенную потенцию.

«LM-» (или «Q-») потенцию готовят в соответствии со специфическими процедурами (пятидесятитысячное разведение 1/50 000 с самой высокой степенью потенцирования LM30).

Различают следующие степени разведения (потенции):

- D со степенью разведения 1:10 на шаг потенцирования (десятичное разведение);

- С со степенью разведения 1:100 на шаг потенцирования (сотенное разведение);

- М со степенью разведения 1:1000 на шаг потенцирования (тысячное разведение);

- LМ со степенью разведения 1:50 000 на шаг потенцирования (пятидесятитысячное разведение).

Обычно используют следующие разведения:

- D2, D3, D6 (С3), D12 (С6);

- С12, С13, С30, С50, С100, С200, С500, С1000, С10000;

- М1, М5, М10, СМ1;

- LМ1, LМ2, LМ5 и до LМ30.

Разведения разделяют на:

- низкие (от настойки до шестого сотенного разведения);

- средние (от шестого до двенадцатого сотенного разведения);

- высокие (выше двенадцатого сотенного разведения);

- сверхвысокие (от сотенного до тысячного разведения и выше).

Особенности потенцирования растворов и получения жидких разведений гомеопатических приведены в ОФС «Растворы и жидкие разведения гомеопатические».

Аналогичным образом потенцируют твёрдые фармацевтические субстанции с подходящим вспомогательным веществом − путём получения соответствующей тритурации. Тритурации производят (изготавливают) в соответствии с требованиями ОФС «Тритурации гомеопатические».

Как правило, при получении гомеопатических лекарственных препаратов в различных лекарственных формах в их состав не включают стабилизаторы, консерванты и антиоксиданты.

Гомеопатические лекарственные препараты, содержащие в составе ядовитые и сильнодействующие компоненты, отпускают, только начиная с разведения D4 и выше. В случае нетоксичных субстанций растительного или животного происхождения допускается использование настоек гомеопатических матричных в качестве активных компонентов.

###### Испытания

Для оценки качества лекарственных форм, которые характерны для гомеопатических лекарственных препаратов, используют методы и методики, приведённые в соответствующих ОФС на гомеопатические лекарственные формы и методы их анализа, а также руководствуются требованиями настоящей ОФС и ОФС «Лекарственные формы».

К показателям, которые являются обязательными для оценки качества гомеопатического лекарственного препарата в любой лекарственной форме, относятся: «Описание», «Микробиологическая чистота» (для нестерильных лекарственных форм), «Стерильность» (для стерильных лекарственных форм), «Масса (объём) содержимого упаковки», «Извлекаемый объём» (для жидких лекарственных форм для приёма внутрь (ОФС «Извлекаемый объём») и лекарственных форм для парентерального применения (ОФС «Извлекаемый объём лекарственных форм для парентерального применения»).

Оценку качества гомеопатического лекарственного препарата, связанную с активным компонентом (активными компонентами), проводят по общепринятым показателям: «Подлинность» и «Количественное определение».

В случае если степень разведения активного компонента не позволяет определить подлинность или количественное содержание, качество препарата оценивают по вспомогательным веществам.

Количественную оценку активного компонента (активных компонентов), как правило, проводят для лекарственных препаратов, которые содержат активный компонент/активные компоненты в разведении до D4.

Подлинность, как правило, определяют в том случае, если разведение активного компонента/активных компонентов не превышает D7.

###### Упаковка

Упаковка должна обеспечивать стабильность лекарственного препарата в течение установленного срока годности (ОФС «Упаковка лекарственных средств»).

###### Маркировка

Требования, предъявляемые к маркировке, приведены в ОФС «Маркировка лекарственных средств». Помимо общих требований дополнительно указывают состав лекарственного препарата, в котором наименование активного компонента (активных компонентов) приводят на латинском языке с указанием шкалы и степени разведений. Названия вспомогательных веществ указывают на русском языке.

###### Хранение

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственных средств».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.6.2.0002 Гранулы гомеопатические

Взамен ОФС.1.6.2.0002.18

Гранулы гомеопатические – твёрдая лекарственная форма в виде сфер одинакового диаметра, содержащая один активный компонент или несколько активных компонентов.

В зависимости от способа применения различают гранулы гомеопатические для приёма внутрь, гранулы для рассасывания.

###### Особенности технологии

Гранулы гомеопатические производят/изготавливают путём насыщения (пропитывания) или нанесения жидкого разведения гомеопатического одного или нескольких активных компонентов на вспомогательный компонент – гранулы сахарные, получаемые из сахарозы, лактозы или других подходящих вспомогательных веществ. Исходные гранулы сахарные должны иметь достаточную механическую прочность для того, чтобы быть устойчивыми к растрескиванию или разрушению при их обработке.

Для обеспечения равномерного распределения жидких разведений гомеопатических гранулы сахарные должны быть одинакового размера. Гранулы сахарные различают по номерам от 1 до 14 в зависимости от их размера (диаметра) или другим параметрам, указанным в фармакопейной статье. Гранулы сахарные классифицируют по их количеству в 1 г. Количество гранул сахарных подсчитывают в двух параллельных пробах в навеске, взвешенной с точностью до 0,01 г (табл. 1).

Таблица 1. Характеристика вспомогательного компонента – гранул сахарных*
№ гранул | Количество гранул в 1 г | Навеска гранул для подсчёта их количества, г | Средний диаметр гранул, мм
1 | 1532–1693 | 0,02 | 0,85
2 | 470–530 | 0,1 | 1,4
3 | 220–280 | 0,2 | 1,7
4 | 110–130 | 0,4 | 2,2
5 | 70–90 | 0,6 | 2,5
6 | 40–50 | 1 | 3,0
7 | 30–40 | 1 | 3,3
8 | 28–32 | 1,6 | 3,4
9 | 22–28 | 2 | 3,7
10 | 16–20 | 2,5 | 4,1
11 | 10 | 5 | 5,0
12 | 5 | 10 | 6,3
13 | 3 | 15 | 7,4
14 | 2 | 25 | 8,5

* Плотность от 1,52 до 1,59 г/см3.

Гранулы гомеопатические получают, как правило, тремя способами.

Способ 1. Насыщение (пропитывание) гранул сахарных жидким разведением гомеопатическим или смесью гомеопатических разведений.

Способ основан на абсорбции активного компонента гранулами сахарными. Гранулы сахарные насыщают соответствующими жидкими разведениями гомеопатическими, приготовленными на спирте 62 % (м/м) или 70 % (о/о). При этом содержание спирта в разведении гомеопатическом должно быть не менее 60 % (м/м), что соответствует 68 % (о/о).

Если концентрация спирта ниже требуемой, производство/изготовление десятичного или сотенного разведения, предназначенного для насыщения гранул сахарных, осуществляют с использованием спирта 62 % (м/м) или 70 % (о/о).

Для равномерного распределения разведения гранул сахарных предварительно смачивают спиртом 62 % (м/м) или 70 % (о/о), который прибавляют из расчёта 1 г на 100 г.

Насыщение гранул сахарных жидкими разведениями гомеопатическими производят методом перемешивания в механических смесителях или вручную (для массы до 1 кг) в стеклянных плотно закрывающихся сосудах. Рабочий объём смесителя должен быть в 1,5–2 раза больше загружаемой массы гранул сахарных. Процесс перемешивания в механических смесителях производят в течение 3–4 мин, при ручном способе – в течение 10 мин.

Влажные гранулы высушивают на воздухе при комнатной температуре до постоянной массы (в соответствии с технологическим регламентом).

Гранулы, полученные данным способом, нельзя насыщать разведениями гомеопатическими ниже С3 (третьего сотенного разведения), полученными из летучих и пахучих веществ, а также из всех кислот.

Способ 2. Наслаивание на гранулы сахарные разведения гомеопатического (разведений гомеопатических) в сахарном сиропе.

Этот способ используют для нанесения разведений гомеопатических: водных (А), тритураций (Б), смесей (В) с низкими десятичными разведениями и в случаях, когда способ 1 с применением спирта нежелателен.

А. Наслаивание разведений гомеопатических водных

Для получения 100 г гранул гомеопатических 1 г разведения гомеопатического водного встряхивают с 9 г сахарного сиропа и полученные 10 г смеси равномерно наслаивают на (100 – Х) г гранул сахарных, где Х – количество сахара в сахарном сиропе, в граммах.

Б. Наслаивание тритураций

Для получения 100 г гранул гомеопатических 10 г тритурации встряхивают с 20 г сахарного сиропа, полученную смесь равномерно наслаивают на (100 – Х – Y) г гранул сахарных, где Х – количество сахара в сахарном сиропе, в граммах; Y – количество вспомогательного вещества, содержащееся в тритурации, в граммах.

В. Наслаивание смесей

Смеси готовят в соответствии с ОФС «Смеси гомеопатические» путём совместного встряхивания разведений гомеопатических водных и (или) тритураций в сахарном сиропе.

Для получения 100 г гранул гомеопатических 1 г смеси встряхивают с 9 г сахарного сиропа и 10 г этого разведения равномерно наслаивают на (100 – Х – У) г гранул сахарных, где Х – количество сахара в сахарном сиропе, в граммах; У – количество вспомогательного вещества, содержащееся в тритурации, в граммах.

Наслаивание разведений гомеопатических активных компонентов в сахарном сиропе на гранулы сахарные производят в дражировочных котлах с регулируемым подогревом. Гранулы сахарные помещают в дражировочный котёл, предварительно подогретый до температуры 37–42 °С, и медленно вращают до тех пор, пока вся масса гранул не нагреется до той же температуры. Разведения гомеопатические активных компонентов в сахарном сиропе вливают в дражировочный котёл постепенно, небольшими равными порциями, через равные промежутки времени. По окончании наслаивания нагрев дражировочного котла прекращают, а вращение его продолжают для высушивания гранул до постоянной массы (в соответствии с технологическим регламентом).

Способ 3. Гранулы гомеопатические получают путём распыления насыщенного раствора лактозы на кристаллы лактозы до формирования гранул шаровидной формы требуемого диаметра в постоянном токе тёплого воздуха, с последующим распылением 20 % раствора лактозы с добавлением разведений гомеопатических, приготовленных по десятичной (1: 10), сотенной (1:100) или другой шкале разведений. Температура, скорость поступления воздуха, время распыления растворов до получения гранул определённого размера должны быть указаны в технологическом регламенте.

При этом количество активных компонентов, нанесённых на гранулы сахарные любым из этих способов, не должно существенно изменять их средний диаметр и другие физико-химические показатели, так как для характеристики гранул гомеопатических используют показатели исходных гранул сахарных.

###### Испытания

Качество гранул гомеопатических оценивают в соответствии с требованиями ОФС «Гранулы». К общим испытаниям, предусмотренным в ОФС «Гранулы», для гранул гомеопатических дополнительно определяют следующие показатели:

Распадаемость. В коническую колбу вместимостью 100 мл помещают 10 гранул, прибавляют 50 мл воды, имеющей температуру 37±2 °С. Колбу медленно покачивают 1–2 раза в секунду. Проводят не менее 3 определений. Гранулы должны полностью распадаться в течение не более 5 мин, если нет других указаний в фармакопейной статье.

Количество гранул в 1 г. В навеске (величина навески для каждого размера гранул приведена в табл. 1), взвешенной с точностью до 0,01 г, подсчитывают количество гранул. Определение проводят в двух параллельных пробах.

Потеря в массе при высушивании. Не более 2 %, если нет других указаний в фармакопейной статье (ОФС «Потеря в массе при высушивании»).

Однородность массы. Испытание проводят для гранул в однодозовых упаковках в соответствии с ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм».

Установление подлинности активных компонентов (если применимо), вспомогательных веществ (сахаров) проводят в соответствии с требованиями фармакопейной статьи с помощью качественных реакций или методом ТСХ по методике, указанной в фармакопейной статье.

###### Упаковка

Упаковка должна обеспечивать стабильность лекарственного препарата в течение установленного срока годности (ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов»).

###### Маркировка

Требования, предъявляемые к маркировке, изложены в ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов».

###### Хранение

В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств».

При температуре от 15 до 25 °С, если не указано иначе в фармакопейной статье.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.6.2.0004 Капли глазные гомеопатические

Взамен ОФС.1.6.2.0004.18

Капли глазные гомеопатические – капли глазные, содержащие один или несколько активных компонентов в соответствующих гомеопатических разведениях.

###### Особенности технологии

Капли глазные гомеопатические производят (изготавливают) по массе в асептических условиях. В качестве растворителей применяют воду очищенную свежеприготовленную, изотонический раствор натрия хлорида или буферные растворы, указанные в фармакопейной статье.

Общие требования к условиям производства (изготовления) капель глазных гомеопатических должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для офтальмологического применения».

При производстве (изготовлении) капель глазных гомеопатических используют активные компоненты, предварительно потенцируя их, и вспомогательные вещества (к числу которых относятся вещества, используемые в качестве изотонирующих агентов и растворителей).

Для изотонирования капель глазных гомеопатических применяют, чаще всего, натрия хлорид, натрия нитрат, натрия сульфат. Кроме изотонирующих, могут быть использованы вещества, поддерживающие оптимальное значение рН, указанные в фармакопейной статье. В многодозовые глазные капли добавляют консерванты.

Стерилизацию капель глазных гомеопатических проводят в соответствии с требованиями ОФС «Стерилизация».

Капли глазные гомеопатические могут содержать один или более активных компонентов в виде соответствующих гомеопатических разведений, приготовление и контроль качества которых регламентированы ОФС «Растворы и жидкие разведения гомеопатические».

При потенцировании разведений активных компонентов, содержащих спирт этиловый (далее спирт) и предназначенных для изготовления глазных капель, концентрация остаточного спирта в глазных каплях не должна превышать допустимую норму.

Перед добавлением разведений активных компонентов или их смесей в капли глазные гомеопатические два последних десятичных разведения или последнее сотенное разведение потенцируют с применением воды очищенной свежеприготовленной или натрия хлорида раствора 0,9 %, или изотонического раствора, состоящего из: 0,2 частей натрия гидрокарбоната; 8,8 частей натрия хлорида и 91 части воды очищенной свежеприготовленной.

Вместо воды может быть использован другой растворитель (кроме спирта), указанный в фармакопейной статье.

Вспомогательные вещества добавляют в капли глазные гомеопатические после окончательного потенцирования активных компонентов (компонента).

###### Испытания

Качество капель глазных гомеопатических оценивают в соответствии с требованиями ОФС «Лекарственные формы для офтальмологического применения». Дополнительно определяют:

- объём содержимого упаковки – в соответствии с требованиями ОФС «Масса (объём) содержимого упаковки»;

- остаточное содержание спирта определяют в соответствии с ОФС «Определение спирта этилового в лекарственных средствах». Норма – не более 0,5 % (не более 5 мг в 1,0 г).

Содержание действующих веществ, а также другие показатели определяют в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

В случае если степень потенцирования активного компонента (активных компонентов) не позволяет установить их подлинность или определить содержание, качество препарата оценивают по вспомогательным веществам.

###### Упаковка

Упаковка должна обеспечивать стерильность и стабильность капель глазных гомеопатических при транспортировании и хранении в течение установленного срока годности (ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов»).

Капли глазные гомеопатические могут быть упакованы как в однодозовую, так и в многодозовую упаковку с контролем первого вскрытия, при этом последняя должна быть оснащена дозирующим устройством.

###### Маркировка

Требования, предъявляемые к маркировке, изложены в ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов».

###### Хранение

В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств».

При температуре от 8 до 15 °С, если не указано иначе в фармакопейной статье.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.6.2.0005 Капли гомеопатические

Взамен ОФС.1.6.2.0005.18

Капли гомеопатические – капли, содержащие один или несколько активных компонентов. Требования настоящей общей фармакопейной статьи не распространяются на капли глазные гомеопатические. Капли глазные гомеопатические должны соответствовать требованиям ОФС «Капли глазные гомеопатические».

В зависимости от пути введения и способа применения различают капли для приёма внутрь, капли назальные.

Капли гомеопатические для приёма внутрь − капли, предназначенные для приёма внутрь.

Капли назальные гомеопатические − капли, предназначенные для инстилляции в полость носа с целью оказания местного или системного действия.

###### Особенности технологии

Капли гомеопатические производят/изготавливают по массе. При производстве/изготовлении капель гомеопатических используют один или несколько активных компонентов. В качестве активных компонентов могут быть использованы: настойки гомеопатические матричные и (или) их разведения, растворы и жидкие разведения гомеопатические, смеси гомеопатические и др. Производство/изготовление гомеопатических разведений, а также их смесей регламентированы ОФС «Настойки гомеопатические матричные», «Растворы и жидкие разведения гомеопатические», «Смеси гомеопатические» и др.

Последнее десятичное или сотенное разведение активного компонента потенцируется с применением растворителя, предусмотренного в составе капель гомеопатических.

В качестве растворителей применяют воду, глицерин, спирт, жирные и минеральные масла (или другой растворитель, указанный в фармакопейной статье).

При потенцировании разведений активных компонентов, содержащих спирт и предназначенных для изготовления капель назальных гомеопатических, концентрация остаточного спирта в назальных каплях не должна превышать допустимую норму. Для одного или двух последних десятичных разведений используют воду или другой растворитель (кроме спирта этилового), указанный в фармакопейной статье.

При получении капель назальных недопустимо применять вспомогательные вещества (ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов»), за исключением консервантов, загустителей, изотонирующих веществ и веществ, используемых для регулирования и стабилизации pH. В качестве изотонирующего вещества обычно используют натрия хлорид.

###### Испытания

Качество капель гомеопатических оценивают в соответствии с требованиями ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов» и ОФС «Капли».

Остаточное содержание спирта этилового определяют в соответствии с ОФС «Определение спирта этилового в лекарственных средствах».

Подлинность активного компонента в растворах первого, второго или третьего десятичного разведения определяют в соответствии с требованиями фармакопейной статьи. Содержание активных компонентов определяют согласно требованиям фармакопейной статьи.

В том случае, если степень потенцирования активного компонента (активных компонентов) не позволяет установить их подлинность или определить содержание, качество препарата оценивают по вспомогательным веществам.

###### Упаковка

Упаковка должна обеспечивать стабильность лекарственного препарата в течение установленного срока годности (ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов»).

###### Маркировка

Требования, предъявляемые к маркировке, изложены в ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов».

При маркировке капель назальных должны быть указаны любые изотонирующие вещества, используемые помимо натрия хлорида.

###### Хранение

В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств».

При температуре не выше 25 °С. Особые условия хранения указывают в фармакопейной статье.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.6.2.0006 Мази гомеопатические

Взамен ОФС.1.6.2.0006.18

Мази гомеопатические – мази, состоящие из основы и равномерно распределённых в ней одного или нескольких активных компонентов в гомеопатических разведениях.

По консистенции и составу основы мази гомеопатические подразделяются на собственно мазь гомеопатическую и оподельдок гомеопатический.

Собственно мазь гомеопатическая (мазь гомеопатическая) − мягкая лекарственная форма, состоящая из основы и равномерно распределённых в ней одного или нескольких активных компонентов в гомеопатических разведениях.

Оподельдок гомеопатический – мыльный линимент, состоящий из основы и смеси активных компонентов в гомеопатических разведениях.

###### Особенности технологии

При производстве (изготовлении) мазей гомеопатических используют обычно основы природного происхождения:

- гидрофобные – жировые и углеводородные (ланолин, масла растительные, воск пчелиный, спермацет, вазелин, масло вазелиновое, парафин);

- гидрофильные – гели высокомолекулярных углеводов и белков (трагакант, агар, желатин, крахмал, мёд, глицерин) или другие, указанные в фармакопейной статье.

В мази гомеопатические активные компоненты вводят в виде настоек гомеопатических матричных и/или их разведений, тритураций гомеопатических, растворов и жидких разведений гомеопатических, субстанций синтетического, минерального и природного происхождения. Качество используемых в составе мазей активных компонентов регламентировано требованиями ОФС «Настойки гомеопатические матричные», «Растворы и жидкие разведения гомеопатические», «Смеси гомеопатические» и др.

Настойки гомеопатические матричные, входящие в состав мазей гомеопатических в концентрации более 5 %, перед смешиванием с основой либо выпаривают (под вакуумом) до половины взятого количества, либо для их инкорпорирования в вазелин к нему добавляют 5–10 % ланолина безводного.

Содержание активных компонентов в мазях гомеопатических должно быть указано в виде разведений, как принято в гомеопатии.

При производстве (изготовлении) оподельдоков гомеопатических жидких основу обычно получают смешиванием спирта мыльного, воды очищенной и спирта 96 % в соотношении по массе 2:1:1. Активные компоненты в оподельдоки вводят в основу, обычно соблюдая соотношение 1:10.

В качестве активных компонентов в оподельдоках используют: настойки гомеопатические матричные (чаще всего в концентрации 3 %, 5 % или 10 %); смеси настоек гомеопатических матричных; смеси разведений настоек гомеопатических матричных и др.

Летучие и пахучие ингредиенты добавляют в последнюю очередь.

Получение мазей гомеопатических, содержащих порошки металлов, проводят путём смешивания 1 части порошка металла с 9 частями мазевой основы. При этом размер 80 % частиц металла должен быть не более 10 мкм, частицы размером 50 мкм и более должны отсутствовать.

В мази гомеопатические, как правило, не вводят стабилизаторы, антиоксиданты и консерванты. Добавление консервантов допускается только в тех случаях, когда в качестве основы используют гели, содержащие воду, или эмульсии типа масло/вода.

###### Испытания

Качество мазей гомеопатических оценивают в соответствии с ОФС «Мази».

В оподельдоках гомеопатических помимо общих испытаний (ОФС «Мази»), дополнительно определяют:

- плотность (ОФС «Плотность»);

- сухой остаток.

Испытание по показателю «Сухой остаток» проводят по следующей методике. Помещают 2 г (точная навеска) оподельдока жидкого гомеопатического в предварительно высушенный при температуре 100–105 °С до постоянной массы точно взвешенный бюкс и выпаривают при нагревании на водяной бане досуха. Бюкс с сухим остатком сушат при температуре 100–105 °С до постоянной массы. Постоянная масса считается достигнутой, когда разница в массе между двумя последними взвешиваниями не будет превышать 0,0005 г.

Подлинность и содержание активных веществ, а также другие показатели определяют согласно требованиям фармакопейной статьи.

В случае если степень потенцирования активного компонента (активных компонентов) не позволяет установить их подлинность или определить содержание, качество препарата оценивают по вспомогательным веществам.

###### Упаковка

Упаковка должна обеспечивать стабильность лекарственного препарата в течение установленного срока годности (ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов»).

Упаковка мазей гомеопатических может быть однодозовой и многодозовой.

Для упаковки мазей гомеопатических, как правило, используют металлические тубы с внутренним лаковым покрытием или тубы из полимерных материалов с защитной мембраной и латексным кольцом, а также банки, для оподельдоков гомеопатических – флаконы. Упаковка стерильных мазей и оподельдоков гомеопатических должна быть герметичной и иметь устройство для контроля первого вскрытия, например, защитную мембрану.

###### Маркировка

Требования, предъявляемые к маркировке, изложены в ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов».

###### Хранение

При температуре от 8 до 15 °С, если нет других указаний в фармакопейной статье. Для стерильных мазей и оподельдоков дополнительно указывают срок хранения после первого вскрытия.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.6.2.0007 Настои и отвары гомеопатические

Взамен ОФС.1.6.2.0007.18

Настои и отвары гомеопатические – жидкие лекарственные формы, представляющие собой водные извлечения из лекарственного растительного сырья, используемые для получения гомеопатических лекарственных форм.

Настои и отвары гомеопатические используются в качестве гомеопатических субстанций для производства (изготовления) гомеопатических лекарственных препаратов (растворы для инъекций гомеопатические, капли глазные гомеопатические и др.).

###### Особенности технологии

Для получения гомеопатических водных извлечений используют свежее и высушенное лекарственное растительное сырьё, разрешённое к применению в гомеопатии и отвечающее требованиям ОФС «Лекарственное растительное сырьё для гомеопатических лекарственных средств» и соответствующих фармакопейных статей.

Перед получением водных извлечений высушенное лекарственное растительное сырьё предварительно измельчают в соответствии с требованиями ОФС «Настои и отвары», если не указано иное в фармакопейной статье; свежее лекарственное растительное сырьё измельчают до получения кашицы, если нет других указаний в фармакопейной статье.

###### Метод 1

Отвары гомеопатические из высушенного лекарственного растительного сырья

Отвары из высушенного лекарственного растительного сырья (D1) производят (изготавливают) из 1 части высушенного растительного сырья и 10 частей воды.

Измельчённую 1 часть лекарственного растительного сырья заливают 10 частями воды, предварительно нагретой до кипения, и настаивают в колбе с обратным холодильником на водяной бане в течение 30 мин. По истечении указанного времени отвар сразу фильтруют (мягко отжимая растительное сырьё) через стерильную ткань. Если полученный отвар не соответствует предписанному объёму (10 частей), сырьё вновь заливают достаточным количеством кипящей воды и осторожно фильтруют до получения объёма отвара, равного 10 частям.

Полученный отвар соответствует первому десятичному разведению (D1).

Второе десятичное разведение (D2) производят (изготавливают) из 1 части отвара (D1) и 9 частей воды для инъекций. Последующие разведения получают аналогично из одной части предыдущего разведения и 9 частей воды для инъекций.

Для получения крахмалсодержащих отваров гомеопатических 1 часть лекарственного растительного сырья заливают 100 частями воды при тех же условиях, как указано выше. В этом случае отвар гомеопатический соответствует второму десятичному разведению (D2).

Отвары обычно обрабатываются немедленно и используются для производства (изготовления) растворов для инъекций гомеопатических, капель глазных гомеопатических и смесей гомеопатических.

###### Метод 2

Отвары гомеопатические из свежего лекарственного растительного сырья

Для получения отвара гомеопатического из свежего лекарственного растительного сырья вначале проводят определение влажности лекарственного растительного сырья в соответствии с ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Количество воды (Х, кг), необходимое для получения водных извлечений, вычисляют по формуле:

где m - масса лекарственного растительного сырья, кг;
W - влажность лекарственного растительного сырья, %.

Рассчитанным количеством воды, нагретым до температуры выше 90 оС, заливают измельчённое лекарственное растительное сырьё и настаивают при этой температуре в колбе с обратным холодильником на водяной бане в течение 30 мин, периодически помешивая. Затем фильтруют, используя стерильную ткань.

Первое десятичное разведение (D1) производят (изготавливают) из 3 частей отвара и 7 частей воды для инъекций.

Второе десятичное разведение (D2) производят (изготавливают) из 1 части отвара (D1) и 9 частей воды для инъекций.

Последующие разведения получают из одной части предыдущего разведения и 9 частей воды для инъекций.

Отвары гомеопатические обычно обрабатываются немедленно и используются только для изготовления растворов для инъекций гомеопатических и капель глазных гомеопатических.

###### Метод 3

Настои гомеопатические из высушенного лекарственного растительного сырья

Настои гомеопатические из высушенного лекарственного растительного сырья (D1) производят (изготавливают) из 1 части высушенного растительного сырья и 10 частей воды.

Помещают 1 часть измельчённого лекарственного растительного сырья в ступку, прибавляют 3–5 частей воды и растирают несколько раз, оставляют на 15 мин, затем прибавляют оставшуюся часть воды, нагретую до кипения.

Смесь помещают на водяную баню и выдерживают при температуре выше 90 оС в течение 5 мин, периодически помешивая, накрывают крышкой и оставляют до полного остывания. Настой фильтруют (мягко отжимая растительное сырьё) через стерильную ткань. Если полученный настой не соответствует предписанному объёму (10 частей), сырьё вновь заливают достаточным количеством холодной воды и осторожно сцеживают до получения объёма настоя, равного 10 частям.

Полученный настой соответствует первому десятичному разведению (D1).

Второе десятичное разведение (D2) производят (изготавливают) из 1 части настоя (D1) и 9 частей воды для инъекций. Последующие разведения получают из одной части предыдущего разведения и 9 частей воды для инъекций.

Настои обычно обрабатываются немедленно и используются для изготовления растворов для инъекций гомеопатических, капель глазных гомеопатических и смесей гомеопатических.

###### Метод 4

Настои гомеопатические из свежего лекарственного растительного сырья

Для получения настоя гомеопатического из свежего лекарственного растительного сырья вначале проводят определение влажности лекарственного растительного сырья в соответствии с ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Количество воды (Х, кг), необходимое для получения водных извлечений, вычисляют по формуле:

где m - масса лекарственного растительного сырья, кг;
W - влажность лекарственного растительного сырья, %.

Измельчённое лекарственное растительное сырьё помещают в колбу с притёртой пробкой, прибавляют рассчитанное количество воды, подогретой до 37 оС, закрывают притёртой пробкой и выдерживают при той же температуре в течение 1 ч при периодическом помешивании. По истечении указанного времени настой сцеживают и фильтруют, используя стерильную ткань.

Первое десятичное разведение (D1) настоя из свежего лекарственного растительного сырья получают из 4 частей настоя и 6 частей воды для инъекций.

Второе десятичное разведение (D2) производят (изготавливают) из 1 части настоя (D1) и 9 частей воды для инъекций. Последующие разведения получают из одной части предыдущего разведения и 9 частей воды для инъекций.

Настои, полученные по методу 4, обычно обрабатываются немедленно и используются исключительно для изготовления растворов для инъекций гомеопатических.

###### Метод 5

Настои из свежего лекарственного растительного сырья, полученные без нагревания

Для получения настоя из свежего лекарственного растительного сырья без нагревания вначале проводят определение влажности лекарственного растительного сырья в соответствии с ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Количество воды (Х, кг), необходимое для получения водных извлечений, вычисляют по формуле:

где m - масса лекарственного растительного сырья, кг;
W - влажность лекарственного растительного сырья, %.

К измельчённому лекарственному растительному сырью прибавляют рассчитанное количество воды, перемешивают. Настаивают не более 2 ч, затем сцеживают и фильтруют полученный настой, используя стерильную ткань.

Первое десятичное разведение (D1) производят (изготавливают) из 3 частей настоя и 7 частей воды для инъекций.

Второе десятичное разведение (D2) производят (изготавливают) из 1 части настоя (D1) и 9 частей воды для инъекций. Последующие разведения получают из одной части предыдущего разведения и 9 частей воды для инъекций.

Настои, полученные по методу 5, обычно обрабатываются немедленно и используются для изготовления растворов для инъекций гомеопатических и капель глазных гомеопатических.

###### Испытания

Качество настоев и отваров гомеопатических оценивают в соответствии с требованиями ОФС «Настои и отвары».

Дополнительно настои и отвары гомеопатические, предназначенные для хранения, должны оцениваться по показателю «Стерильность» (ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов»).

###### Упаковка

Упаковка должна обеспечивать стабильность водного извлечения в течение установленного срока годности (ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов»).

###### Маркировка

Требования, предъявляемые к маркировке, изложены в ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов». Отвары и их разведения, полученные по методу 1 и 2, обозначают «Decoctum», настои и их разведения, полученные по методу 3, обозначают «Infusum», настои и их разведения, полученные по методу 4, обозначают «Digestio», настои и их разведения, полученные по методу 5, обозначают «Aquos». На этикетках также указывают наименование лекарственного растительного сырья, степень разведения настоя или отвара, дату производства (изготовления) и предупредительные надписи «Перед употреблением взбалтывать», «Хранить при температуре не выше 8 °C».

Хранение

Настои и отвары гомеопатические, а также их разведения, как правило, используют свежеприготовленные.

При необходимости настои и отвары гомеопатические хранят при температуре от 2 до 8 оС, в защищённом от света месте, от 2–3 ч до 2 сут, если нет других указаний в фармакопейной статье.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.6.2.0008 Настойки гомеопатические матричные

Взамен ОФС.1.6.2.0008.18

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на настойки гомеопатические матричные, в том числе настойки матричные ферментированные, термообработанные и на глицерине.

Настойки гомеопатические матричные представляют собой жидкие извлечения из свежего или высушенного сырья растительного и/или животного происхождения, смеси сока растений с этанолом, используемые для производства/изготовления гомеопатических лекарственных препаратов.

###### Классификация

В зависимости от используемого вида экстрагента, сырья и технологии различают четыре вида настоек гомеопатических матричных:

- настойки гомеопатические матричные – спиртовые и водно-спиртовые (настойки гомеопатические матричные);

- настойки гомеопатические матричные ферментированные;

- настойки гомеопатические матричные на глицерине;

- настойки гомеопатические матричные термообработанные.

###### Особенности технологии

В качестве сырья для получения настоек гомеопатических матричных используют лекарственное растительное сырьё (свежее или высушенное) или сырьё животного происхождения.

В случае если в фармакопейной статье для получения настойки гомеопатической матричной разрешено использование нескольких видов растений одного ботанического рода, используют один из видов или смесь разрешённых видов.

Размер частиц измельчённого лекарственного растительного сырья или сырья животного происхождения и способ получения настойки указывают в фармакопейной статье. Если не указано иначе, свежее лекарственное растительное сырьё измельчают до образования кашицы, а высушенное – до частиц, размер которых указан в табл. 1 (для настоек гомеопатических матричных, получаемых способами 1–4, 11).

Таблица 1. Размер частиц высушенного лекарственного растительного сырья в зависимости от используемой морфологической группы или содержащейся в нём группы БАВ
Вид используемого высушенного лекарственного растительного сырья | Размер частиц, мм
--- | ---
Листья, травы, цветки | 4
Кора, побеги, подземные органы (корни, корневища, клубни, клубнелуковицы, луковицы и др.) | 3
Плоды и семена | 2
Растительное сырьё, содержащее алкалоиды | 1

Высушенное лекарственное растительное сырьё, предназначенное для получения настоек гомеопатических матричных ферментированных, если не указано иначе в фармакопейной статье, должно быть измельчено до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером не более 0,5 мм (ОФС «Ситовой анализ»).

Лекарственное растительное сырьё должно соответствовать требованиям ОФС «Лекарственное растительное сырьё для гомеопатических лекарственных средств».

В качестве сырья для получения настоек гомеопатических матричных на глицерине используют животных, их части или их выделения. При этом переработка частей высших животных (теплокровных) осуществляется непосредственно после убоя, низших животных умерщвляют непосредственно перед переработкой в токе углерода диоксида. Сырьё животного происхождения должно соответствовать требованиям ОФС «Сырьё животного происхождения для гомеопатических лекарственных средств».

При получении настоек гомеопатических матричных ферментированных требуется соблюдение строго определённых условий: температурного режима, рН среды, продолжительности настаивания и режима перемешивания. Температурный режим (нагревание и охлаждение) поддерживают с помощью термостатов. Процесс экстракции интенсифицируют тщательным перемешиванием мацератов дважды в сутки.

Настойки гомеопатические матричные получают перколяцией или мацерацией спиртом этиловым указанной концентрации, мацерацией водой очищенной свежеприготовленной в присутствии мёда или смеси мёда с лактозой или свежеприготовленной молочной сывороткой, мацерацией глицерином в присутствии (или без) натрия хлорида в соответствии с приведёнными ниже способами с указанием технологии получения последующих разведений (потенций).

Примечание – Молочную сыворотку готовят из свежего натурального сырого коровьего молока высшего сорта. Изготовление и методы испытания молочной сыворотки приведены в Приложении А.

Для настаивания (мацерации) с применением спирта этилового используют плотно закрывающиеся стеклянные ёмкости, а в случае настоек гомеопатических матричных ферментированных – плотно закрывающиеся грубокерамические ёмкости.

Для выбора способа получения настойки гомеопатической матричной необходимо определить тип сырья, влажность и содержание сока в сырье.

Определение влажности (потери в массе при высушивании) свежего лекарственного растительного сырья для получения настоек способами 2, 3 и 11а–г проводят в соответствии с ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Способы определения содержания сока в свежем лекарственном растительном сырье приведены в ОФС «Определение содержания сока в свежем лекарственном растительном сырье».

Каждому способу получения настоек гомеопатических матричных соответствует определённый способ получения разведений (потенций).

Разведения (потенции) настоек гомеопатических матричных готовят по массе (м/м) в соотношении 1:10 (десятичная шкала) или 1:100 (сотенная шкала) при взбалтывании (потенцировании) с использованием в качестве разбавителя этанола определённой концентрации, если не указано иначе в фармакопейной статье.

Примечание – Под «частями» в способах получения следует понимать массовые части.

###### Способы получения настоек гомеопатических матричных из свежего и высушенного лекарственного растительного сырья, грибов и сырья животного происхождения

Способ 1. Предусматривает получение настойки гомеопатической матричной из свежего лекарственного растительного сырья, содержащего не менее 70 % сока и не содержащего эфирных масел, смол и слизи.

Настойки гомеопатические матричные, полученные способом 1, представляют собой спиртовые извлечения из сока растений, полученные с использованием спирта этилового 86 % (м/м).

Мелко измельчённое лекарственное растительное сырьё отжимают под прессом. Полученный сок взвешивают и немедленно смешивают с равным количеством спирта этилового 86 % (м/м), взбалтывают и оставляют для настаивания в течение не менее 5 сут при температуре не выше 20 °С. После этого извлечение фильтруют.

В фильтрате определяют сухой остаток или проводят количественное определение активных компонентов.

Если содержание сухого остатка или активных компонентов превышает регламентируемую фармакопейной статьёй норму, то количество спирта этилового 43 % (м/м) в килограммах (Е1), необходимое для разбавления, вычисляют по формуле (1):

(1)

где m - масса фильтрата, кг;
Bx - содержание сухого остатка или содержание активных компонентов в фильтрате, %;
B0 - содержание сухого остатка или содержание активных компонентов, регламентируемое фармакопейной статьёй, %.

Фильтрат смешивают с рассчитанным количеством спирта этилового 43 % (м/м), отстаивают в течение не менее 5 сут при температуре не выше 20 °С и при необходимости фильтруют.

Содержание спирта этилового в настойке гомеопатической матричной составляет около 43 % (м/м).

Первое десятичное разведение (D1) готовят из 2 частей настойки гомеопатической матричной и 8 частей спирта этилового 43 % (м/м).

Второе десятичное разведение (D2) готовят из 1 части первого десятичного разведения (D1) и 9 частей спирта этилового 43 % (м/м).

Последующие разведения готовят аналогично.

Первое сотенное разведение (С1) готовят из 2 частей настойки гомеопатической матричной и 98 частей спирта этилового 43 % (м/м).

Второе сотенное разведение (С2) готовят из 1 части первого сотенного разведения (С1) и 99 частей спирта этилового 43 % (м/м).

Последующие разведения готовят аналогично.

Способ 2. Предусматривает получение настойки гомеопатической матричной из свежего лекарственного растительного сырья, содержащего менее 70 % сока, с влажностью более 60 %, не содержащего эфирных масел, смол и слизи.

Настойки гомеопатические матричные получают методом мацерации. Лекарственное растительное сырьё взвешивают, тщательно измельчают, отбирают пробу для определения влажности. Оставшееся измельчённое лекарственное растительное сырьё ещё раз взвешивают и немедленно заливают не менее чем половинным от массы взятого лекарственного растительного сырья количеством спирта этилового 86 % (м/м), перемешивают и оставляют в плотно закрытом сосуде при температуре не выше 20 °С.

Необходимое количество спирта этилового 86 % (м/м) в килограммах (Е2) рассчитывают по формуле (2):

(2)

где m - масса лекарственного растительного сырья, кг;
W - влажность лекарственного растительного сырья, %.

От рассчитанного количества спирта этилового 86 % (Е2) вычитают количество ранее прибавленного спирта и остаток спирта смешивают с полученной массой. Массу оставляют не менее чем на 10 сут при температуре не выше 20 °С при периодическом встряхивании. Затем массу отжимают и фильтруют.

Если содержание сухого остатка или активных компонентов превышает регламентируемую фармакопейной статьёй норму, проводят разбавление настойки способом, указанным в способе 1.

Содержание спирта этилового в настойке составляет около 43 % (м/м).

Жидкие разведения готовят, как описано в способе 1.

Способ 2а. Предусматривает получение настойки гомеопатической матричной по способу 2 с использованием в качестве экстрагента спирта этилового 62 % (м/м).

Если содержание сухого остатка или активных компонентов превышает регламентируемую фармакопейной статьёй норму, проводят разбавление настойки способом, указанным в способе 1, используя спирт этиловый 30 % (м/м).

Содержание спирта этилового в настойке составляет около 30 % (м/м).

Первое десятичное разведение (D1) готовят из 2 частей настойки гомеопатической матричной и 8 частей спирта этилового 30 % (м/м).

Второе десятичное разведение (D2) готовят из 1 части первого десятичного разведения (D1) и 9 частей спирта этилового 15 % (м/м).

Последующие разведения готовят аналогично.

Первое сотенное разведение (С1) готовят из 2 частей настойки гомеопатической матричной и 98 частей спирта этилового 30 % (м/м).

Второе сотенное разведение (С2) готовят из 1 части первого сотенного разведения (С1) и 99 частей спирта этилового 15 % (м/м).

Последующие разведения готовят аналогично.

Способ 3. Предусматривает получение настойки гомеопатической матричной из свежего лекарственного растительного сырья с влажностью менее 60 % или содержащего эфирные масла, смолы и слизи, а также из свежих грибов.

Настойки гомеопатические матричные получают методом мацерации. Лекарственное растительное сырьё или грибы свежие взвешивают, определяют влажность, затем тщательно измельчают и полученную массу немедленно заливают не менее чем половинным от массы сырья количеством спирта этилового 86 % (м/м), перемешивают и оставляют в плотно закрытом сосуде при температуре не выше 20 °С.

Необходимое количество спирта этилового 86 % в килограммах (Е3) рассчитывают по формуле (3):

(3)

где m - масса сырья, кг;
W - влажность сырья, %.

От рассчитанного количества спирта этилового 86 % (Е3) вычитают количество ранее прибавленного спирта и остаток спирта смешивают с полученной массой. Массу оставляют не менее чем на 10 сут при температуре не выше 20 °С при периодическом встряхивании, затем отжимают и фильтруют.

Если содержание сухого остатка или активных компонентов превышает регламентируемую фармакопейной статьёй норму, проводят разбавление настойки способом, указанным в способе 1, используя спирт этиловый 62 % (м/м).

Содержание спирта этилового в настойке составляет около 60 % (м/м).

Первое десятичное разведение (D1) готовят из 3 частей настойки гомеопатической матричной и 7 частей спирта этилового 62 % (м/м).

Второе десятичное разведение (D2) готовят из 1 части первого десятичного разведения (D1) и 9 частей спирта этилового 62 % (м/м).

Последующие разведения готовят аналогично, используя для получения третьего десятичного разведения спирт этиловый 62 % (м/м), а с четвёртого десятичного разведения – спирт этиловый 43 % (м/м).

Первое сотенное разведение (С1) готовят из 3 частей настойки гомеопатической матричной и 97 частей спирта этилового 62 % (м/м).

Второе сотенное разведение (С2) готовят из 1 части первого сотенного разведения (С1) и 99 частей спирта этилового 43 % (м/м).

Последующие разведения готовят аналогично.

Способ За. Настойки гомеопатические матричные получают по способу 3, используя в качестве экстрагента спирт этиловый 73 % (м/м).

Если содержание сухого остатка или активных компонентов превышает регламентируемую фармакопейной статьёй норму, проводят разбавление настойки способом, указанным в способе 1, используя спирт этиловый 43 % (м/м).

Содержание спирта этилового в настойке составляет около 43 % (м/м).

Первое десятичное разведение (D1) готовят из 3 частей настойки гомеопатической матричной и 7 частей спирта этилового 43 % (м/м).

Второе десятичное разведение (D2) готовят из 1 части первого десятичного разведения (D1) и 9 частей спирта этилового 30 % (м/м).

Третье десятичное разведение (D3) готовят из 1 части второго десятичного разведения (D2) и 9 частей спирта этилового 15 % (м/м).

Последующие разведения готовят аналогично.

Первое сотенное разведение (С1) готовят из 3 частей настойки гомеопатической матричной и 97 частей спирта этилового 43 % (м/м).

Второе сотенное разведение (С2) готовят из 1 части первого сотенного разведения (С1) и 99 частей спирта этилового 30 % (м/м).

Третье сотенное разведение (С3) готовят из 1 части второго сотенного разведения (С2) и 99 частей спирта этилового 15 % (м/м).

Последующие разведения готовят аналогично.

Способ 3б. Настойки гомеопатические матричные получают по способу 3, используя в качестве экстрагента спирт этиловый 43 % (м/м).

Если содержание сухого остатка или активных компонентов превышает регламентируемую фармакопейной статьёй норму, проводят разбавление настойки способом, указанным в способе 1, используя спирт этиловый 30 % (м/м).

Содержание спирта этилового в настойке составляет около 30 % (м/м).

Первое десятичное разведение (D1) готовят из 3 частей настойки гомеопатической матричной и 7 частей спирта этилового 30 % (м/м).

Второе десятичное разведение (D2) готовят из 1 части первого десятичного разведения (D1) и 9 частей спирта этилового 15 % (м/м).

Последующие разведения готовят аналогично.

Первое сотенное разведение (С1) готовят из 3 частей настойки гомеопатической матричной и 97 частей спирта этилового 30 % (м/м).

Второе сотенное разведение (С2) готовят из 1 части первого сотенного разведения (С1) и 99 частей спирта этилового 15 % (м/м).

Последующие разведения готовят аналогично.

Способ 4. Настойки гомеопатические матричные получают из высушенного лекарственного растительного сырья и грибов, свежего сырья животного происхождения методом мацерации.

Настойки гомеопатические матричные получают мацерацией из 1 части лекарственного растительного сырья или грибов, или сырья животного происхождения и 10 частей спирта в концентрации, указанной в фармакопейной статье.

Количество спирта этилового, израсходованное на предварительную обработку свежего сырья животного происхождения (умерщвление насекомых, измельчение и т.д.), вычитают из общего количества спирта, необходимого для получения настойки.

Сырьё, измельчённое до необходимой величины, смешивают со спиртом этиловым в предписанной концентрации и оставляют в закрытом сосуде при ежедневном взбалтывании при температуре не выше 20 °С в течение не менее 8 сут, если не указано иначе в фармакопейной статье. После этого извлечение сливают, сырьё отжимают (лекарственное растительное сырьё и грибы − под прессом), отжатую жидкость объединяют с извлечением и фильтруют.

Если содержание сухого остатка или активных компонентов превышает регламентируемую фармакопейной статьёй норму, проводят разбавление настойки способом, указанным в способе 1, используя спирт этиловый в предписанной концентрации или концентрации, используемой для получения настойки.

Настойка гомеопатическая матричная соответствует первому десятичному разведению D1.

Второе десятичное разведение (D2) готовят из 1 части настойки гомеопатической матричной (D1) и 9 частей спирта этилового в концентрации, используемой для получения настойки.

Третье десятичное разведение (D3) готовят из 1 части второго десятичного разведения (D2) и 9 частей спирта этилового в концентрации, используемой для получения настойки.

Начиная с четвёртого десятичного разведения (D4) используют спирт этиловый 43 % (м/м), если не указано иначе в фармакопейной статье, и готовят аналогично предыдущим десятичным разведениям.

Первое сотенное разведение (С1) готовят из 10 частей настойки гомеопатической матричной (D1) и 90 частей спирта этилового в концентрации, используемой для получения настойки.

Второе сотенное разведение (С2) готовят из 1 части первого сотенного разведения (С1) и 99 частей спирта этилового 43 % (м/м), если не указано иначе в фармакопейной статье.

Последующие разведения готовят аналогично.

Способ 4а. Настойки гомеопатические матричные получают из высушенного лекарственного растительного сырья или сырья животного происхождения методом перколяции.

Одну часть высушенного измельчённого лекарственного растительного сырья или сырья животного происхождения заливают 5 частями спирта этилового в концентрации, указанной в фармакопейной статье, и настаивают в течение 2 сут при частом взбалтывании. Подготовленное сырьё достаточно плотно укладывают в перколятор. Затем, при открытом спускном кране, добавляют такое количество спирта этилового той же концентрации, чтобы слой его над поверхностью сырья составлял 1–3 см (вытекающую из крана жидкость наливают обратно в перколятор). После этого перколят с определённой скоростью выпускают из крана, непрерывно доливая в перколятор такое количество спирта этилового, чтобы на 1 часть сырья приходилось 10 частей спирта этилового, и над сырьём был его постоянный слой. Процесс перколяции продолжают до получения 10 частей извлечения, которое отстаивают в течение 8 сут, фильтруют, взвешивают фильтрат и определяют в нём содержание сухого остатка или активных компонентов.

Примечание – Следует соблюдать следующую скорость вытекания извлечения из перколятора при загрузке сырья:

- до 1 кг: 10–15 капель/мин;

- до 2 кг: 20–25 капель/мин;

- до 3 кг: 30–35 капель/мин;

- до 10 кг: 40–70 капель/мин.

Если содержание сухого остатка или активных компонентов превышает регламентируемую фармакопейной статьёй норму, проводят разбавление настойки способом, указанным в способе 1, используя спирт этиловый в предписанной концентрации или концентрации, используемой для получения настойки.

Настойка гомеопатическая матричная соответствует первому десятичному разведению D1.

Жидкие разведения готовят, как описано в способе 4.

Способы получения настоек гомеопатических матричных ферментированных

Способы 5.1–5.5. Настойки гомеопатические матричные ферментированные получают из свежего лекарственного растительного сырья.

Смешивают 100 частей измельчённого свежего лекарственного растительного сырья с определёнными количествами воды очищенной, мёда и лактозы моногидрата. Количества (в частях) мёда, лактозы моногидрата и воды очищенной, необходимые для получения настоек гомеопатических матричных ферментированных способами 5.1–5.5, приведены в табл. 2.

Таблица 2. Соотношение частей основных компонентов, используемых для получения настойки гомеопатической матричной ферментированной, в зависимости от используемого способа (из расчёта на 100 частей измельчённого свежего лекарственного растительного сырья)
№ способа | Мёд | Лактоза моногидрат | Вода очищенная
--- | --- | --- | ---
5.1 | 0,75 | 0,75 | 50
5.2 | 0,75 | 0,75 | 75
5.3 | 0,75 | 0,75 | 125
5.4 | 0,75 | 0,75 | 200
5.5 | 0,75 | 0,75 | 275

Измеряют величину рН смеси и оставляют для настаивания при температуре 37,0±0,5 °С в течение 3,5 сут. Ежедневно утром и вечером определяют величину рН мацерата и охлаждают его в смеси воды со льдом (температура не выше 4 °С), каждый раз в течение 2 ч. Непосредственно до и после охлаждения мацерат перемешивают. Всё остальное время его выдерживают в плотно закрытых сосудах при температуре 37,0±0,5 °С. Как только величина рН начинает снижаться, нагревание прекращается, мацерат оставляют при комнатной температуре, продолжая ежедневно, утром и вечером по 2 ч охлаждать его в смеси воды со льдом, определять величину рН, тщательно перемешивать до и после охлаждения. По истечении 3,5 сут, во время очередного охлаждения, растительное сырьё отжимают, используя стерильную ткань (суровое полотно и др.). Отжатое лекарственное растительное сырьё высушивают на воздухе. Далее его тщательно перемешивают, 3–5 г помещают в фарфоровый тигель и сжигают при температуре тёмно-красного каления (около 700 °С) до получения золы. В течение последующих 3,5 сут жидкое извлечение выдерживают при комнатной температуре, продолжая ежедневно утром и вечером определять величину рН, по 2 ч охлаждать в смеси воды со льдом, тщательно перемешивать до и после охлаждения. По истечении 3,5 сут извлечение фильтруют через стерильную ткань, определяют величину рН и объём фильтрата (фильтрат, как правило, мутный). Полученный фильтрат смешивают с золой (из расчёта 50 мг золы на 100 мл), смесь помещают в прохладное защищённое от света место и настаивают в течение не менее 6 мес; образующийся при настаивании осадок не используют.

Способы 6.1–6.3. Настойки гомеопатические матричные ферментированные получают из свежего или высушенного лекарственного растительного сырья.

Делят 100 частей измельчённого свежего (способы 6.1 и 6.3) или высушенного (способ 6.2) лекарственного растительного сырья и определённые количества воды очищенной, мёда и, если указано, лактозы моногидрата на 7 порций.

Количества (в частях) мёда, лактозы моногидрата и воды очищенной, необходимые для получения настоек гомеопатических матричных ферментированных способами 6.1–6.3, приведены в табл. 3.

Таблица 3. Соотношение частей основных компонентов, используемых для получения настойки гомеопатической матричной ферментированной, в зависимости от используемого способа (из расчёта на 100 частей измельчённого лекарственного растительного сырья)
№ способа | Вода очищенная | Мёд | Лактоза моногидрат
--- | --- | --- | ---
6.1 | 500 | 0,75 | Не прибавляют
6.2 | 500 | 0,75 | Не прибавляют
6.3 | 200 | 1,5 | 1,5

Первое приготовление готовят утром из одной порции измельчённого лекарственного растительного сырья, воды очищенной, мёда и лактозы моногидрата (способ 6.3) и настаивают при температуре 37,0±0,5 °С. Вечером смесь охлаждают в воде со льдом в течение 2 ч при тщательном перемешивании до и после охлаждения. После этого смесь вновь помещают для настаивания при температуре 37,0±0,5 °С. Через 24 ч первую порцию лекарственного растительного сырья отделяют, отжимают, используя стерильную ткань.

Полученное извлечение смешивают со вторыми порциями лекарственного растительного сырья, воды очищенной, мёда, лактозы моногидрата. Смесь настаивают при температуре 37,0±0,5 °С. Вечером смесь охлаждают в воде со льдом в течение 2 ч при перемешивании непосредственно до и после охлаждения. Через 24 ч (утром) растительное сырьё отжимают через стерильную ткань.

Далее аналогичным образом обрабатывают оставшиеся 5 порций лекарственного растительного сырья, воды очищенной, мёда, лактозы моногидрата в течение последующих 5 сут.

Извлечение, полученное после обработки седьмой порции лекарственного растительного сырья, оставляют для отстаивания (в течение не менее 2–3 ч), после чего фильтруют через стерильную ткань. Определяют объём полученного фильтрата (фильтрат, как правило, мутный).

Отжатое лекарственное растительное сырьё высушивают на воздухе. Далее его тщательно перемешивают, 3–5 частей сырья помещают в фарфоровый тигель и сжигают при температуре тёмно-красного каления (около 700 °С) до получения золы. Затем полученный фильтрат смешивают с золой (из расчёта 50 мг золы на 100 г фильтрата), смесь помещают в прохладное защищённое от света место и настаивают в течение не менее 6 месяцев; образующийся при настаивании осадок не используют.

Способы 7.1–7.5. Настойки гомеопатические матричные ферментированные получают из свежего растительного сырья.

Смешивают 100 частей измельчённого свежего лекарственного растительного сырья с определёнными количествами воды очищенной и молочной сыворотки. Необходимые для получения настойки гомеопатической матричной ферментированной количества молочной сыворотки и воды очищенной указаны в табл. 4. Измеряют величину рН смеси и далее поступают, как указано в способах 5.1–5.5.

Таблица 4. Количество (в частях) молочной сыворотки и воды очищенной, необходимое для получения настоек гомеопатических матричных ферментированных способами 7.1–7.5
№ способа | Молочная сыворотка | Вода очищенная
--- | --- | ---
7.1 | 50 | Не прибавляют
7.2 | 50 | 25
7.3 | 50 | 75
7.4 | 15 | 110
7.5 | 50 | 225

Способ 8. Настойки гомеопатические матричные ферментированные получают из высушенного лекарственного растительного сырья.

Делят 100 частей измельчённого высушенного лекарственного растительного сырья, 300 частей воды очищенной и 200 частей молочной сыворотки на семь порций и далее изготавливают настойку в соответствии с требованиями, определёнными способами 6.1–6.3.

Разведения (потенции) из настоек гомеопатических матричных ферментированных готовят по массе на воде очищенной свежеприготовленной при встряхивании (потенцировании).

Первое десятичное (D1) или первое сотенное разведение (C1) готовят из 1 части настойки гомеопатической матричной ферментированной и 9 или 99 частей воды очищенной.

Второе десятичное (D2) или второе сотенное (C2) разведение готовят из 1 части первого десятичного (D1) или первого сотенного (C1) разведения и 9 или 99 частей воды очищенной.

Последующие разведения готовят из 1 части предыдущего десятичного или сотенного разведения и 9 или 99 частей воды очищенной.

###### Способы получения настоек гомеопатических матричных на глицерине

Способ 9a. Настойки гомеопатические матричные на глицерине получают из сырья животного происхождения – убитых животных или свежезабитых теплокровных животных или их частей и глицерина.

Для получения первого десятичного (D1) разведения или первого сотенного (С1) разведения 1 часть мелкоизмельчённого исходного сырья смешивают с 9 частями (для D1) или 99 частями (для С1, соответствующему D2) глицерина 85 % и встряхивают. Перед измельчением допускается в обоснованных случаях прибавление 1 части глицерина 85 % к 1 части исходного сырья. В случае необходимости осадок отфильтровывают.

Настойка гомеопатическая матричная на глицерине соответствует первому десятичному разведению (D1).

Второе десятичное разведение (D2) готовят из 1 части настойки гомеопатической матричной (D1) и 9 частей глицерина 85 % или спирта этилового 15 % (м/м).

Третье десятичное разведение (D3) готовят из 1 части второго десятичного (D2) или первого сотенного разведения (С1, соответствует D2) и 9 частей спирта этилового 15 % (м/м).

Последующие разведения готовят аналогично.

Второе сотенное (С2) разведение готовят из 1 части первого сотенного разведения (С1, соответствует D2) и 99 частей спирта этилового 15 % (м/м).

Последующие разведения готовят аналогично.

Если второе десятичное разведение (D2) готовят со спиртом этиловым 15 % (м/м), это должно быть указано в маркировке.

Способ 9б. Настойки гомеопатические матричные на глицерине получают из сырья животного происхождения – убитых животных или свежезабитых теплокровных животных или их частей и глицерина.

Для получения настойки гомеопатической матричной 1 часть мелкоизмельчённого исходного сырья животного происхождения смешивают с 2,1 частями глицерина 85 % и встряхивают. В случае необходимости смесь фильтруют.

Первое десятичное разведение (D1) готовят из 3 частей настойки гомеопатической матричной и 7 частей воды очищенной.

Второе десятичное разведение (D2) готовят из 1 части первого десятичного разведения и 9 частей воды очищенной.

Последующие разведения готовят аналогично.

В случае приготовления инъекционных растворов используют воду для инъекций вместо воды очищенной.

Водные разведения, приготовленные по способу 9б, должны иметь в маркировке указание «стерильное».

Настойки гомеопатические матричные на глицерине, полученные по способу 9б, используют для приготовления: жидких разведений для инъекций, капель глазных, смесей гомеопатических.

Способ 10а. Настойки гомеопатические матричные на глицерине получают из сырья животного происхождения – животных, частей животных или их выделений и глицерина, содержащего натрия хлорид.

Смешивают 1 часть мелкоизмельчённого сырья животного происхождения с 5 частями натрия хлорида раствора 1,5 % в воде и прибавляют 95 частей глицерина. Смесь перемешивают и оставляют для настаивания в защищённом от света месте при температуре не выше 20 °С в течение не менее 7 и не более 21 сут при периодическом перемешивании. Затем жидкость декантируют и при необходимости фильтруют через марлю.

Фильтрат является настойкой гомеопатической матричной. Настойка гомеопатическая матричная соответствует второму десятичному разведению (D2) или первому сотенному разведению (С1).

При стоянии возможно образование осадка, который перед дальнейшей переработкой необходимо суспендировать.

В качестве растворителя для приготовления разведений используют раствор, состоящий из 0,2 частей натрия гидрокарбоната и 8,8 частей натрия хлорида в 991 части воды. В случае приготовления инъекционных растворов используют воду для инъекций вместо воды очищенной.

Третье десятичное разведение (D3) готовят из 1 части настойки гомеопатической матричной (D2) и 9 частей растворителя. Последующие разведения готовят аналогично.

Разведения, используемые для получения инъекционных растворов, готовят следующим образом: четвёртое десятичное разведение (D4) готовят из 1 части третьего десятичного (D3) разведения, 5,6 частей растворителя и 3,4 частей воды для инъекций.

Последующие разведения готовят, используя вышеуказанный растворитель.

Второе сотенное разведение (С2) готовят из 1 части настойки гомеопатической матричной (С1) и 99 частей растворителя.

Последующие десятичные и сотенные разведения готовят аналогично, используя тот же растворитель.

Способ 10б. Настойки гомеопатические матричные на глицерине получают из сырья животного происхождения – животных, частей животных или их выделений и глицерина, содержащего натрия хлорид.

Смешивают 1 часть мелкоизмельчённого сырья животного происхождения с 5 частями натрия хлорида раствора 4 % в воде и прибавляют 95 частей глицерина. Далее поступают, как указано в способе 10а.

Настойка гомеопатическая матричная соответствует второму десятичному разведению (D2) или первому сотенному разведению (С1).

В качестве растворителя для приготовления разведений используют раствор, состоящий из 0,2 частей натрия гидрокарбоната и 8,8 частей натрия хлорида в 991 части воды очищенной. В случае приготовлении инъекционных растворов используют раствор аналогичного состава, приготовленный на воде для инъекций.

Разведения готовят, как указано в способе 10а, используя вышеуказанный растворитель.

Способ 10в. Настойки гомеопатические матричные на глицерине получают из сырья животного происхождения – из животных, частей животных или их выделений и глицерина, содержащего натрия хлорид.

Смешивают 1 часть мелкоизмельчённого сырья животного происхождения с 5 частями натрия хлорида раствора 8 % в воде и прибавляют 95 частей глицерина. Далее поступают, как указано в способе 10а.

Настойка гомеопатическая матричная соответствует второму десятичному разведению (D2) или первому сотенному разведению (С1).

В качестве растворителя для приготовления разведений используют раствор, состоящий из 0,2 частей натрия гидрокарбоната и 8,8 частей натрия хлорида в 991 части воды очищенной. В случае приготовления инъекционных растворов используют воду для инъекций вместо воды очищенной.

Разведения готовят, как указано в способе 10а, используя вышеуказанный растворитель.

Способ 10г. Настойки гомеопатические матричные на глицерине получают из сырья животного происхождения – составных частей крови лошади.

Отбор крови для получения составных частей производится ветеринарным врачом от живых лошадей. У животного отбирают 200 мл крови и каждый мл крови смешивают с 15 ME гепарина натрия и 0,625 мл натрия хлорида раствора 0,9 %. Из полученной смеси отделяют различные компоненты крови с помощью центрифуги для фракционирования и каждую индивидуальную фракцию ресуспендируют с 1,1 мл натрия хлорида раствора 0,9 % в воде, получают клеточную суспензию.

Кровь животного, полученная при убое скота, не должна использоваться.

Для получения настойки гомеопатической матричной 1 часть полученной клеточной суспензии смешивают с 5 частями натрия хлорида раствора 0,15 % в воде и прибавляют 95 частей глицерина. Смесь оставляют в защищённом от света месте при температуре не выше 20 °С в течение не менее 7 и не более 21 сут. Затем жидкость декантируют и при необходимости фильтруют через марлю. Фильтрат является настойкой гомеопатической матричной.

Настойка гомеопатическая матричная на глицерине соответствует второму десятичному разведению (D2) или первому сотенному разведению (С1).

При хранении возможно образование осадка, который перед дальнейшей переработкой необходимо суспендировать.

В качестве растворителя для приготовления разведений используют раствор, состоящий из 0,2 частей натрия гидрокарбоната и 8,8 частей натрия хлорида в 991 части воды очищенной. В случае приготовления инъекционных растворов используют воду для инъекций вместо воды очищенной.

Третье десятичное разведение (D3) готовят из 1 части настойки гомеопатической матричной (D2) и 9 частей растворителя. Последующие разведения готовят аналогично.

Второе сотенное (С2) разведение готовят из 1 части настойки гомеопатической матричной (С1) и 99 частей растворителя. Последующие разведения готовят аналогично.

Настойки гомеопатические матричные и их разведения, полученные по способам 9а, 10а, 10б, 10в, 10г используют для приготовления: тритураций гомеопатических, жидких разведений для инъекций гомеопатических, мазей гомеопатических, суппозиториев гомеопатических, капель глазных гомеопатических, гранул гомеопатических, а также смесей гомеопатических.

###### Способы получения настоек гомеопатических матричных термообработанных

Способ 11. Предусматривает получение настойки гомеопатической матричной из свежего лекарственного растительного сырья, содержащего менее 70 % сока, с влажностью более 60 %, не содержащего эфирных масел, смол и слизи.

Настойки гомеопатические матричные получают методом мацерации. Лекарственное растительное сырьё взвешивают, тщательно измельчают, отбирают пробу для определения влажности. Оставшееся измельчённое лекарственное растительное сырьё ещё раз взвешивают и немедленно заливают не менее чем половинным от массы взятого лекарственного растительного сырья количеством спирта этилового 86 % (м/м), перемешивают.

Необходимое количество спирта этилового 86 % (м/м) в килограммах (Е4) рассчитывают по формуле (4):

(4)

где m - масса лекарственного растительного сырья, кг;
W - влажность лекарственного растительного сырья, %.

От рассчитанного количества спирта 86 % (Е4) вычитают количество ранее прибавленного спирта и остаток спирта смешивают с полученной массой. Затем нагревают до кипения с обратным холодильником, выдерживая при температуре кипения в течение 30 мин, если не указано иное. После охлаждения оставляют в плотно закрытом сосуде на 12–36 ч, затем отжимают и фильтруют.

Если содержание сухого остатка или активных компонентов превышает регламентируемую фармакопейной статьёй норму, проводят разбавление настойки способом, указанным в способе 1.

Первое десятичное разведение (D1) готовят из 2 частей настойки гомеопатической матричной и 8 частей спирта 43 % (м/м).

Второе десятичное разведение (D2) готовят из 1 части первого десятичного разведения (D1) и 9 частей спирта 30 % (м/м).

Третье десятичное разведение (D3) готовят из 1 части второго десятичного разведения (D2) и 9 частей спирта 15 % (м/м).

Последующие разведения готовят аналогично.

Способ 11а. Предусматривает получение настойки гомеопатической матричной по способу 11 с использованием в качестве экстрагента спирта 62 % (м/м).

Если содержание сухого остатка или активных компонентов превышает регламентируемую фармакопейной статьёй норму, проводят разбавление настойки способом, указанным в способе 1, используя спирт 30 % (м/м).

Первое десятичное разведение (D1) готовят из 2 частей настойки гомеопатической матричной и 8 частей спирта 30 % (м/м).

Второе десятичное разведение (D2) готовят из 1 части первого десятичного разведения (D1) и 9 частей спирта 15 % (м/м).

Последующие разведения готовят аналогично.

Способ 11б. Предусматривает получение настойки гомеопатической матричной из свежего лекарственного растительного сырья с влажностью менее 60 % или содержащего эфирные масла, смолы и слизи.

Настойки гомеопатические матричные получают методом мацерации. Лекарственное растительное сырьё взвешивают, определяют влажность, затем тщательно измельчают и полученную массу немедленно заливают не менее чем половинным от массы лекарственного растительного сырья количеством спирта 86 % (м/м), перемешивают.

Необходимое количество спирта 86 % в килограммах (Е5) рассчитывают по формуле (5):

(5)

где m - масса лекарственного растительного сырья, кг;
W - влажность лекарственного растительного сырья, %.

От рассчитанного количества спирта 86 % (Е5) вычитают количество ранее прибавленного спирта и остаток спирта смешивают с полученной массой. Затем нагревают до кипения с обратным холодильником, выдерживая при температуре кипения в течение 30 мин, если не указано иное. После охлаждения оставляют в плотно закрытом сосуде на 12–36 ч, затем отжимают и фильтруют.

Если содержание сухого остатка или активных компонентов превышает регламентируемую фармакопейной статьёй норму, проводят разбавление настойки способом, указанным в способе 1, используя спирт 62 % (м/м).

Первое десятичное разведение (D1) готовят из 3 частей настойки гомеопатической матричной и 7 частей спирта 62 % (м/м).

Второе десятичное разведение (D2) готовят из 1 части первого десятичного разведения (D1) и 9 частей спирта 43 % (м/м).

Третье десятичное разведение (D3) готовят из 1 части второго десятичного разведения (D2) и 9 частей спирта 30 % (м/м).

Четвёртое десятичное разведение (D4) готовят из 1 части третьего десятичного разведения (D3) и 9 частей спирта 15 % (м/м).

Последующие разведения готовят аналогично.

Способ 11в. Настойки гомеопатические матричные получают по способу 11б, используя в качестве экстрагента спирт 73 % (м/м).

Если содержание сухого остатка или активных компонентов превышает регламентируемую фармакопейной статьёй норму, проводят разбавление настойки способом, указанным в способе 1, используя спирт 43 % (м/м).

Первое десятичное разведение (D1) готовят из 3 частей настойки гомеопатической матричной и 7 частей спирта 43 % (м/м).

Второе десятичное разведение (D2) готовят из 1 части первого десятичного разведения (D1) и 9 частей спирта 30 % (м/м).

Третье десятичное разведение (D3) готовят из 1 части второго десятичного разведения (D2) и 9 частей спирта 15 % (м/м).

Последующие разведения готовят аналогично.

Способ 11г. Настойки гомеопатические матричные получают по способу 11б, используя в качестве экстрагента спирт 43 % (м/м).

Если содержание сухого остатка или активных компонентов превышает регламентируемую фармакопейной статьёй норму, проводят разбавление настойки способом, указанным в способе 1, используя спирт 30 % (м/м).

Первое десятичное разведение (D1) готовят из 3 частей настойки гомеопатической матричной и 7 частей спирта 30 % (м/м).

Второе десятичное разведение (D2) готовят из 1 части первого десятичного разведения (D1) и 9 частей спирта 15 % (м/м).

Последующие разведения готовят аналогично.

Способ 11д. Настойки гомеопатические матричные получают из высушенного лекарственного растительного сырья.

Настойки гомеопатические матричные получают мацерацией из 1 части лекарственного растительного сырья и 10 частей спирта в концентрации, указанной в фармакопейной статье.

Сырьё, измельчённое до необходимой величины, смешивают со спиртом этиловым в предписанной концентрации. Затем нагревают до кипения с обратным холодильником, выдерживая при температуре кипения в течение 30 мин, если не указано иное. После охлаждения оставляют в плотно закрытом сосуде на 12–36 ч, затем отжимают и фильтруют.

Если содержание сухого остатка или активных компонентов превышает регламентируемую фармакопейной статьёй норму, проводят разбавление настойки способом, указанным в способе 1, используя спирт в предписанной концентрации или концентрации, используемой для получения настойки.

Настойка гомеопатическая матричная соответствует первому десятичному разведению D1.

Второе десятичное разведение (D2) готовят из 1 части настойки матричной гомеопатической (D1) и 9 частей спирта в концентрации, используемой для получения настойки.

Последующие десятичные разведения готовят аналогично; в этом процессе концентрация спирта уменьшается с каждым шагом разбавления в последовательности 94 – 86 – 73 – 62 – 43 – 30 – 15 % (м/м) до тех пор, пока не будет достигнута концентрация спирта 15 % (м/м).

###### Испытания

Требования, предъявляемые к качеству настоек гомеопатических матричных, приведены в ОФС «Настойки».

Настойки гомеопатические матричные и настойки гомеопатические матричные термообработанные оценивают по показателям: «Описание», «Плотность», «Метанол и 2-пропанол», «Подлинность», «Сухой остаток», «Тяжёлые металлы», «Микробиологическая чистота» и другим показателям в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

Для настоек гомеопатических матричных ферментированных не проводят определение по показателю «Метанол и 2-пропанол», дополнительно проводят определение рН в соответствии с ОФС «Ионометрия».

Количественное определение активных компонентов проводят в соответствии с требованиями фармакопейных статей.

Настойки гомеопатические матричные, полученные из лекарственного растительного сырья, содержащего ядовитые и сильнодействующие компоненты, должны быть подвергнуты испытанию четвёртого десятичного разведения (D4) «Испытание четвёртого десятичного разведения» в соответствии с требованиями фармакопейных статей.

В случае если жидкие разведения настоек гомеопатических матричных на глицерине предназначены для производства стерильных лекарственных форм, они должны выдерживать испытание на стерильность в соответствии с требованиями ОФС «Стерильность».

###### Упаковка

Упаковка должна обеспечивать стабильность настойки матричной гомеопатической в течение установленного срока годности (ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов»).

###### Маркировка

Требования, предъявляемые к маркировке, приведены в ОФС «Маркировка лекарственных средств».

Помимо общих требований, предусмотренных ОФС, дополнительно указывают: наименование настойки гомеопатической матричной на латинском и русском языках, надпись «настойка гомеопатическая матричная», количество настойки в миллилитрах, номер серии, условия хранения. Если настойка из высушенного сырья, в наименовании указывается способ получения соответствующим символом.

Для настоек гомеопатических матричных ферментированных и их разведений (потенций) дополнительно указывают «ферментированные», используя аббревиатуру «ferm», и номер способа получения; для настоек гомеопатических матричных, полученных по способам 4а, 9а, 10б, 10в, 10г, дополнительно указывают шкалу и степень разведения; для настоек гомеопатических матричных, полученных способом мацерации глицерином, и их разведений (потенций) дополнительно указывают аббревиатуру «Gl» и номер способа получения; для настоек гомеопатических матричных термообработанных дополнительно указывают «ethanol. Decoctum».

###### Хранение

В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств».

При температуре от 15 до 25 °С. Для настоек гомеопатических матричных, получаемых из сырья растительного или животного происхождения, содержащего сильнодействующие или ядовитые вещества, дополнительно указывают «Хранить с осторожностью» или «Хранить с особой осторожностью».

Настойки гомеопатические матричные ферментированные хранят, не отделяя от осадка, в течение не менее 6 месяцев; осадок не используют.

##### Приложение А. Молочная сыворотка

Изготовление. Для изготовления молочной сыворотки используют свежее натуральное сырое коровье молоко высшего сорта (плотность не менее 1027 кг/м3), полученное от здоровых животных и по качеству удовлетворяющее требованиям действующей нормативной документации.

Молоко указанного качества нагревают до кипения и кипятят в течение 5 мин. После охлаждения молоко заквашивают молочнокислыми микроорганизмами лактобактерии плантарум – Lactobacillus plantarum (Orla-Jensen 1919), семейства Lactobacilaceae, и выдерживают в защищённом от света месте при температуре около 25°С в течение 3 сут. Сыворотку отделяют фильтрованием через стерильную ткань (два слоя марли и др.) (закваска).

В грубокерамический сосуд помещают 1 л свежего натурального сырого коровьего молока высшего сорта, прибавляют 10 мл полученной закваски и оставляют для сквашивания в защищённом от света месте при температуре около 25°С в течение 3 сут. Образовавшийся самопрессованный прочный сгусток (не должен содержать пузырьков газа) отделяют, сыворотку фильтруют через стерильную ткань (два слоя марли и др.). Первые 100 мл фильтрата отбрасывают.

###### Испытания

Описание. Свежеприготовленная молочная сыворотка не должна иметь запаха дрожжей или масляной кислоты.

рН. От 4,0 до 4,5 (ОФС «Ионометрия»).

Определение степени окраски. Окраска свежеприготовленной молочной сыворотки должна находиться в пределах окраски эталонов от GY2 до GY5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 1).

Определение степени мутности. Опалесценция 10 мл свежеприготовленной сыворотки не должна быть интенсивнее, чем раствор сравнения из 1,5 мл натрия хлорида раствора 2 мМ, 5 мл азотной кислоты концентрированной, 2,5 мл воды и 1 мл серебра нитрата раствора 1,7 %.

Испытание проводят в одинаковых пробирках с притёртой пробкой из прозрачного бесцветного и нейтрального стекла с плоским дном, имеющим внутренний диаметр от 15 мм до 25 мм. Через 5 мин после приготовления раствора сравнения растворы просматривают перпендикулярно вертикальной оси пробирок на чёрном фоне при рассеянном дневном свете (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

###### Хранение

Молочную сыворотку используют свежеприготовленной.

При необходимости использования сыворотки для изготовления нескольких последующих серий ферментированных настоек, её хранят в защищённом от света месте, при температуре не выше 4 °С, в течение не более 48 ч.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.6.2.0009 Пластыри гомеопатические

Взамен ОФС.1.6.2.0009.18

Пластыри гомеопатические – лекарственная форма, состоящая из клеевой основы или пластырной массы, нанесённой однородным слоем на подложку из природного материала, содержащая один или несколько активных компонентов в соответствующих гомеопатических разведениях, предназначенная для наружного или местного применения и обладающая способностью прилипать к коже или слизистым оболочкам.

###### Особенности технологии

В состав пластырной массы в качестве основы в зависимости от назначения могут входить разрешённые к применению в медицинской практике натуральные жиры, воск, смолы, природные масла, каучук, церезин, вазелин и др. Введение синтетических антиоксидантов и консервантов не практикуется.

Для производства гомеопатических пластырей компоненты, входящие в пластырную массу, предварительно растворяют или расплавляют. При этом расплавляют вначале более тугоплавкие, а затем легкоплавкие вещества и их смешивают. Растворённую или расплавленную пластырную массу процеживают. В охлаждённую (полуостывшую) пластырную массу (температура 25 °С) или клеевую основу вводят настойки гомеопатические матричные, тритурации гомеопатические и/или их гомеопатические разведения. Летучие и пахучие компоненты добавляют в последнюю очередь.

Клеевой слой должен быть защищён слоем, который удаляется перед нанесением пластыря. Защитный слой не должен отделять активный компонент от поддерживающего слоя. Материал подложки не должен раздражать кожу или вызывать аллергическую реакцию.

###### Испытания

Качество пластырей гомеопатических оценивают в соответствии с требованиями ОФС «Пластыри медицинские».

В случае если степень потенцирования активного компонента/активных компонентов не позволяет установить их подлинность или определить содержание, качество препарата оценивают по вспомогательным веществам.

###### Упаковка

Упаковка должна обеспечивать стабильность лекарственного препарата в течение установленного срока годности (ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов»).

###### Маркировка

Требования, предъявляемые к маркировке, изложены в ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов».

###### Хранение

В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств».

При температуре не выше 25 °С, если нет других указаний в фармакопейной статье.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.6.2.0010 Растворы и жидкие разведения гомеопатические

Взамен ОФС.1.6.2.0010.18

Растворы гомеопатические – растворы одного или нескольких активных компонентов в соответствующих гомеопатических разведениях.

Жидкие разведения гомеопатические – разведения активных компонентов с учётом правил гомеопатических разведений в соответствующих растворителях.

Растворы и жидкие разведения гомеопатические используются:

- в качестве гомеопатических фармацевтических субстанций для производства/изготовления гомеопатических лекарственных препаратов;

- в качестве лекарственных препаратов для внутреннего, наружного и местного применения.

###### Особенности технологии

Растворы и жидкие разведения гомеопатические готовят по массе.

В качестве растворителей используют: воду очищенную, воду для инъекций, натрия хлорида раствор 0,9 %, глицерин, спирт этиловый или другой растворитель, указанный в фармакопейной статье.

При производстве/изготовлении водно-спиртовых растворов и разведений в качестве растворителя используют спирт этиловый в концентрациях, указанных в табл. 1.

Таблица 1. Соотношение концентрации спирта этилового по массе и по объёму
концентрация (м/м) | 94 % | 86 % | 73 % | 62 % | 43 % | 30 % | 15 %
концентрация (о/о) около: | 96 % | 90 % | 80 % | 70 % | 50 % | 36 % | 18,5 %

Количество воды (по массе) и спирта 96,0–96,9 % (по объёму), которые необходимо смешать для получения 1 кг спирта указанных концентраций, приведено в Приложении А. Концентрацию разведённого спирта определяют по плотности. Отклонения, допустимые в концентрации спирта при его разведении, приведены в Приложении Б.

Под «частями» в методах получения следует понимать массовые части.

Для получения разведений используют методы Ганемана, Корсакова и LM-метод.

Обозначение разведений:

- по Ганеману десятичные разведения (1:10) обозначают буквой «D», сотенные разведения (1:100) – буквой «С», с указанием числа ступеней разведения (потенцирования) арабскими цифрами;

- по Корсакову разведения обозначают буквой «К», с указанием числа ступеней разведения (потенцирования) арабскими цифрами;

- LM – разведения (1:50 000) обозначают буквами «LM», с указанием числа ступеней разведения (потенцирования) римскими цифрами.

Шкалы разведений:

Наименование шкалы | Степень разведения
--- | ---
Десятичная | 1:10
Сотенная | 1:100
Пятидесятитысячная | 1:50 000

Растворы гомеопатические

Для приготовления растворов первого десятичного (D1) или первого сотенного (С1) разведения 1 часть субстанции растворяют в 9 частях или 99 частях растворителя и встряхивают (потенцируют), если не указано иное в фармакопейной статье. Особенности производства/изготовления указывают в фармакопейной статье.

При приготовлении растворы не должны нагреваться, если нет особых указаний в фармакопейной статье.

Если при получении раствора требуется использовать спирт 15 % (м/м), то первое десятичное разведение (D1) может быть получено следующим образом: 1 часть субстанции растворяют в 7,58 частях воды и прибавляют 1,42 части спирта 94 % (м/м). Для получения первого сотенного разведения (С1) 1 часть субстанции растворяют в 83,4 частях воды и прибавляют 15,6 частей спирта 94 % (м/м).

Жидкие разведения гомеопатические

Жидкие разведения гомеопатические получают путём ступенчатого разбавления, сопровождающегося встряхиванием растворов гомеопатических, тритураций гомеопатических, настоек матричных гомеопатических, настоев и отваров гомеопатических, смесей гомеопатических.

Методы получения разведений настоек гомеопатических матричных приведены в ОФС «Настойки гомеопатические матричные»; методы получения разведений смесей гомеопатических приведены в ОФС «Смеси гомеопатические»; методы получения разведений настоев и отваров гомеопатических приведены в ОФС «Настои и отвары гомеопатические».

Разведения готовят в помещении, защищённом от прямого солнечного света. Используют плотно закупоривающиеся стеклянные сосуды, объём которых на 1/2–1/3 больше объёма разводимого активного компонента. В процессе изготовления каждое жидкое разведение потенцируют путём встряхивания (не менее 10 раз).

По методу Ганемана при производстве/изготовлении каждого десятичного и сотенного разведения используют отдельный сосуд.

Второе десятичное разведение (D2) готовят из 1 части раствора (D1) и 9 частей спирта 43 % (м/м), если не указан иной растворитель в фармакопейной статье. Последующие разведения готовят аналогично.

Второе сотенное разведение (С2) готовят из 1 части раствора (C1) и 99 частей спирта 43 % (м/м), если не указан иной растворитель в фармакопейной статье. Последующие разведения готовят аналогично.

В случае использования в качестве растворителя воды или воды для инъекций, в маркировке должно быть указано «водное». Водные разведения должны перерабатываться немедленно после их приготовления, так как используются исключительно для получения готовых лекарственных форм: растворов для инъекций гомеопатических, мазей гомеопатических, суппозиториев гомеопатических, капель глазных гомеопатических и др. Водные разведения, предназначенные для получения мазей гомеопатических и суппозиториев гомеопатических, допускается готовить на воде очищенной.

По методу Корсакова сотенные разведения готовят в одном и том же сосуде.

Первое сотенное разведение готовят в соответствии с методом, используемым при получении настойки гомеопатической матричной или субстанции.

В первый сосуд помещают отмеренное количество настойки или субстанции, прибавляют необходимое количество соответствующего растворителя (разбавителя) и встряхивают, в результате чего получают 1-е сотенное разведение. Полученное разведение переносят во второй сосуд с обозначением К1 путём переворачивания вверх дном или отсасывания. При процессе опорожнения сосуда должно удаляться 99 % раствора, при этом в сосуде остаётся 1 %.

В первый сосуд, содержащий 1 часть 1-го сотенного разведения, прибавляют 99 частей разбавителя, встряхивают, в результате чего получают второе сотенное разведение по Корсакову К2. Полученное разведение переносят в третий сосуд с обозначением К2.

Аналогично получают все последующие разведения, вливая каждый раз 99 частей разбавителя в один и тот же первый сосуд до достижения требуемого разведения.

В случае нерастворимой субстанции первые три потенцированные тритурации производят/изготавливают с лактозой моногидратом по методу, приведённому в ОФС «Тритурации гомеопатические». Последующие разведения готовят, используя жидкий разбавитель, по методу, приведённому выше.

Гомеопатический раствор, предназначенный для внутреннего применения, в случае отсутствия в его составе спирта, может содержать другие компоненты, разрешённые к применению в гомеопатической практике.

LM–разведения (50-тысячные потенции) готовят из тритураций субстанций в третьем сотенном разведении (С3) путём последовательного потенцирования в соотношении 1:50 000 и обозначают буквами «LM» (L – 50; M – 1000). В процессе изготовления каждое разведение потенцируют путём встряхивания 100 раз.

Для LM–разведений существует шкала от LM I до LM XXX, т.е. имеется 30 ступеней разведения (потенцирования). В отличие от десятичных и сотенных, ступень разведения для шкалы LM-разведений обозначают римскими цифрами.

Для получения разведения LM I: 0,06 г тритурации третьего сотенного разведения (С3) растворяют в 20 мл спирта 15 % (м/м) (соответствует 500 каплям) и встряхивают. Одну каплю полученного раствора переносят в плотно закрывающийся сосуд вместимостью 5–10 мл, прибавляют 2,5 мл спирта 86 % (м/м) (соответствует 100 каплям) и энергично встряхивают 100 раз. Полученным разведением равномерно увлажняют 100 г гранул сахарных № 2 (470–530 гранул в 1 г) (ОФС «Гранулы гомеопатические»), после пропитывания в плотно закрывающемся сосуде гранулы высушивают на воздухе при комнатной температуре до постоянной массы. Полученные гранулы соответствуют разведению LM I.

Для получения разведения LM II: одну гранулу в разведении LM I переносят в плотно закрывающийся сосуд вместимостью 5–10 мл, растворяют в одной капле воды очищенной, прибавляют 2,5 мл спирта 86 % (м/м) (соответствует 100 каплям) и энергично встряхивают 100 раз. Полученное разведение наносят на следующие 100 г гранул сахарных № 2, как указано выше.

Аналогично получают последующие LM–разведения.

Для получения жидких LM–разведений из LM–разведений гранул: одну гранулу соответствующего LM–разведения растворяют в 10 мл спирта 15 % (м/м). Получают раствор, LM–разведение которого соответствует LM–разведению гранулы, взятой для растворения.

Жидкие разведения гомеопатические (по Ганеману) из тритураций

Для изготовления разведений из тритураций используют два способа.

Способ 1. Для получения четвёртого сотенного жидкого разведения (С4) 1 часть тритурации субстанции третьего сотенного разведения (С3) растворяют в 79 частях воды, прибавляют 20 частей спирта 86 % (м/м) и встряхивают. Пятое сотенное (С5) и все последующие сотенные разведения готовят из 1 части предыдущего сотенного разведения и 99 частей спирта 43 % (м/м) при встряхивании.

Способ 2. Для получения шестого десятичного жидкого разведения (D6) 1 часть тритурации субстанции четвёртого десятичного разведения (D4) растворяют в 9 частях воды и встряхивают. Затем 1 часть полученного разведения встряхивают с 9 частями спирта 30 % (м/м).

Аналогично получают седьмое десятичное жидкое разведение (D7) из тритурации пятого десятичного разведения (D5), а восьмое десятичное жидкое разведение (D8) из тритурации шестого десятичного разведения (D6).

От девятого (D9) и выше десятичные разведения готовят из предыдущих десятичных разведений со спиртом 43 % (м/м) в соотношении 1:10.

Для получения шестого сотенного жидкого разведения (С6) 1 часть тритурации четвёртого сотенного разведения (С4) растворяют в 99 частях воды и встряхивают. Затем 1 часть полученного разведения встряхивают с 99 частями спирта 30 % (м/м).

Аналогично получают седьмое сотенное разведение (С7) из тритурации пятого сотенного разведения (С5), а восьмое сотенное разведение (С8) из тритурации шестого сотенного разведения (С6).

От девятого (С9) и выше сотенные жидкие разведения готовят из предыдущего сотенного жидкого разведения с использованием спирта 43 % (м/м) в соотношении 1:100.

Жидкие разведения из тритураций D6, D7, С6 и С7, полученные по описанному методу, не должны использоваться для получения последующих разведений.

###### Испытания

Качество растворов и жидких разведений гомеопатических оценивают в соответствии с требованиями ОФС «Растворы».

По показателям «Подлинность», «Количественное определение» оценивают растворы и жидкие разведения гомеопатические, которые содержат первое, второе или третье десятичное разведение активного компонента (активных компонентов) в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

В том случае, если степень разведения активного компонента (активных компонентов) не позволяет установить их подлинность или определить содержание, качество препарата оценивают по вспомогательным веществам.

Допустимые отклонения в содержании лекарственных веществ не должны превышать ±5 % для первого и второго десятичных разведений и ±10 % для третьего десятичного разведения, если нет других указаний в фармакопейной статье.

Растворы и жидкие разведения гомеопатические при использовании в качестве лекарственных препаратов оценивают в соответствии с требованиями ОФС на соответствующую лекарственную форму.

Четвёртые десятичные разведения (D4), содержащие ядовитые и сильнодействующие вещества, должны выдерживать испытание на четвертичное десятичное разведение в соответствии с фармакопейной статьёй («Испытание на D4»).

###### Упаковка

Упаковка должна обеспечивать стабильность растворов и жидких разведений гомеопатических в течение установленного срока годности (ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов»).

###### Маркировка

Требования, предъявляемые к маркировке, изложены в ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов».

###### Хранение

В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств».

При температуре от 15 до 25 °С, если не указано иначе в фармакопейной статье.

Растворы и разведения, содержащие ядовитые или сильнодействующие вещества до третьего десятичного разведения, следует хранить в соответствии с действующими требованиями. Особые условия хранения указывают в фармакопейной статье.

##### Приложение А. Количества по массе (в граммах) воды и спирта концентрации 96,0–96,9 % (о/о), которые необходимо смешать для получения 1000 г спирта концентрации 15 %, 30 %, 43 %, 62 %, 73 %, 86 % (м/м)

Концентрация взятого спирта, % (о/о) | 15 | 30 | 43 | 62 | 73 | 86
--- | --- | --- | --- | --- | --- | ---
спирт | вода | спирт | вода | спирт | вода | спирт | вода | спирт | вода | спирт | вода
96,0 | 160 | 840 | 320 | 680 | 458 | 542 | 661 | 339 | 778 | 222 | 917 | 83
96,1 | 160 | 840 | 319 | 681 | 458 | 542 | 660 | 340 | 777 | 223 | 915 | 85
96,2 | 159 | 841 | 319 | 681 | 457 | 543 | 659 | 341 | 775 | 225 | 914 | 86
96,3 | 159 | 841 | 318 | 682 | 456 | 544 | 658 | 342 | 774 | 226 | 912 | 88
96,4 | 159 | 841 | 318 | 682 | 455 | 545 | 657 | 343 | 773 | 227 | 911 | 89
96,5 | 159 | 841 | 317 | 683 | 455 | 545 | 656 | 344 | 772 | 228 | 909 | 91
96,6 | 158 | 842 | 317 | 683 | 454 | 546 | 655 | 345 | 771 | 229 | 908 | 92
96,7 | 158 | 842 | 316 | 684 | 453 | 547 | 654 | 346 | 770 | 230 | 907 | 93
96,8 | 158 | 842 | 316 | 684 | 453 | 547 | 653 | 347 | 768 | 232 | 905 | 95
96,9 | 158 | 842 | 315 | 685 | 452 | 548 | 652 | 348 | 767 | 233 | 904 | 96

##### Приложение Б. Отклонения, допустимые в концентрации спирта этилового при разведении

Определяемая концентрация (%) спирта этилового | Допустимые отклонения в концентрации (%) спирта этилового
--- | ---
м/м | о/о | м/м | о/о
94 | 96,11 | - | -
86 | 90,26 | 85,15-86,31 | 89,6-90,5
73 | 79,58 | 72,90-73,83 | 79,5-80,3
62 | 69,63 | 61,85-62,81 | 69,5-70,4
43 | 50,60 | 41,58-43,46 | 49,1-51,1
30 | 36,25 | 29,34-30,56 | 35,5-36,9
15 | 18,53 | 14,48-15,30 | 17,9-18,9

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.6.2.0011 Растворы для инъекций гомеопатические

Взамен ОФС.1.6.2.0011.18

Растворы для инъекций гомеопатические – стерильные жидкости, полученные путём потенцирования одного или нескольких активных компонентов в соответствующем растворителе, предназначенные для инъекционного введения.

###### Особенности технологии

Растворы для инъекций гомеопатические могут содержать один или несколько активных компонентов. Получение гомеопатических разведений, а также их смесей регламентировано требованиями ОФС «Растворы и жидкие разведения гомеопатические», ОФС «Смеси гомеопатические», ОФС «Настойки гомеопатические матричные», ОФС «Настои и отвары гомеопатические».

Растворы для инъекций гомеопатические должны соответствовать требованиям ОФС «Стерильность», ОФС «Видимые механические включения в лекарственных препаратах для парентерального применения и глазных лекарственных формах» и ОФС «Невидимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения».

Растворители. В качестве растворителя используют, как правило, воду для инъекций.

При получении растворов инъекционных гомеопатических из разведений, содержащих спирт этиловый (далее спирт), на двух последних этапах (при потенцировании по десятичной шкале) или на последнем этапе (при потенцировании по сотенной шкале) используют растворители, не содержащие спирт. Потенцирование или смешивание на этой стадии проводят с водой для инъекций или изотонирующим раствором, приготовленным на воде для инъекций.

Вспомогательные вещества. Для изотонирования, как правило, применяют натрия хлорид. Использование других вспомогательных веществ (консерванты, стабилизаторы и др.) не допускается (ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов»).

###### Испытания

Растворы инъекционные гомеопатические должны соответствовать требованиям ОФС «Лекарственные формы для парентерального применения» и ОФС «Растворы и жидкие разведения гомеопатические».

При получении растворов инъекционных гомеопатических из разведений, содержащих спирт, их контролируют по показателю «Спирт этиловый»: остаточное содержание спирта определяют в соответствии с ОФС «Определение спирта этилового в лекарственных средствах». Концентрация остаточного спирта не должна превышать допустимую норму – не более 0,5 % (не более 0,005 г в 1,0 г).

Подлинность и содержание активных компонентов, а также другие показатели определяют в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

В случае если степень потенцирования активного компонента (активных компонентов) не позволяет установить их подлинность или определить содержание, качество препарата оценивают по вспомогательным веществам.

###### Упаковка

Упаковка должна обеспечивать стабильность растворов для инъекций гомеопатических в течение установленного срока годности (ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов»).

###### Маркировка

Требования, предъявляемые к маркировке, изложены в ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов».

###### Хранение

В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств». При температуре от 15 до 25 °С, если не указано иначе в фармакопейной статье.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.6.2.0012 Сиропы гомеопатические

Взамен ОФС.1.6.2.0012.18

Сиропы гомеопатические – сиропы, содержащие один или несколько активных компонентов в соответствующих гомеопатических разведениях.

###### Особенности технологии

Сиропы гомеопатические готовят путём растворения сиропообразующего компонента в кипящей воде. Полученный сироп фильтруют в горячем виде в стерильную ёмкость. Концентрация сахара в сиропе должна быть не более 72 % (м/м).

В остывший сироп (при температуре согласно технологическому регламенту) вводят настойки гомеопатические матричные или их разведения гомеопатические, тритурации и (или) их разведения гомеопатические.

Качество используемых в составе сиропов активных компонентов регламентировано требованиями ОФС «Настойки гомеопатические матричные», ОФС «Растворы и жидкие разведения гомеопатические», ОФС «Смеси гомеопатические» и др.

Содержание активных компонентов в сиропах гомеопатических должно быть указано в виде разведений, как принято в гомеопатии.

Концентрация сахара в лекарственном препарате должна быть не менее 64 % (м/м).

В качестве консерванта для производства/изготовления сиропа гомеопатического может быть использован спирт этиловый, применение других консервантов недопустимо.

###### Испытания

Сиропы гомеопатические должны соответствовать требованиям ОФС «Сиропы».

В случае если степень потенцирования активного компонента (активных компонентов) не позволяет установить их подлинность или определить содержание, качество препарата оценивают по вспомогательным веществам.

###### Упаковка

Упаковка должна обеспечивать стабильность лекарственного препарата в течение установленного срока годности в соответствии с ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов».

###### Маркировка

Требования, предъявляемые к маркировке, изложены в ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов».

###### Хранение

В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств».

При температуре от 8 до 15 °С, если не указано иначе в фармакопейной статье.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.6.2.0013 Смеси гомеопатические

Взамен ОФС.1.6.2.0013.18

Смеси гомеопатические – однотипные смеси тритураций гомеопатических, настоек гомеопатических матричных, растворов гомеопатических или их разведений с различными вспомогательными веществами, предназначенные для получения лекарственных препаратов.

###### Особенности технологии

Получение разведений (потенций) настоек гомеопатических матричных, растворов и тритураций гомеопатических регламентировано требованиями ОФС «Настойки гомеопатические матричные», ОФС «Растворы и жидкие разведения гомеопатические», ОФС «Тритурации гомеопатические».

Степень разведения активных компонентов в смесях получают путём их последовательного ступенчатого разбавления (потенцирования) с применением предписанного вспомогательного вещества (растворитель, носитель), которое может быть добавлено в соотношении 1:10, 1:100 или в ином соотношении. Степень разведения активных компонентов в смесях соответствует числу ступеней их разведения при производстве смесей.

Смеси получают двумя способами.

Способ 1. Каждый активный компонент, входящий в состав смеси, предварительно потенцируют до необходимой степени разведения и затем предписанное количество (по массе) каждого полученного разведения смешивают до достижения однородности.

Способ 2. Смешивают предписанное количество (по массе) каждого активного компонента, взятого в разведении на ряд ступеней ниже конечного, и совместно потенцируют до необходимой степени их разведения в смеси.

При совместном потенцировании активных компонентов требуется соблюдать три основных правила.

Правило 1. Совместно потенцируют смеси, содержащие только жидкие гомеопатические разведения, при получении которых в качестве растворителя (или экстрагента) используется этанол различной концентрации и соблюдается соотношение 1:10 или 1:100. В состав таких смесей могут входить настойки гомеопатические матричные, жидкие разведения тритураций гомеопатических, растворы гомеопатические и/или их разведения.

На каждой ступени потенцирования 1 часть смеси взбалтывают с 9 или 99 частями этанола предписанной концентрации.

Если смеси предназначены для введения в состав лекарственных форм для парентерального применения или глазных капель, два последних десятичных разведения или последнее сотенное разведение потенцируют с использованием воды для инъекций или натрия хлорида раствора 0,9 % для инъекций. При получении таких смесей следует руководствоваться требованиями ОФС «Растворы для инъекций гомеопатические» и ОФС «Капли глазные гомеопатические».

Правило 2. Совместно потенцируют тритурации и жидкие гомеопатические разведения, полученные с использованием воды, водно-солевых или водно-глицериновых растворов в качестве растворителя (или экстрагента). В состав таких смесей могут входить водные растворы; водные разведения тритураций; настойки гомеопатические матричные, полученные из свежего или высушенного лекарственного растительного сырья способом мацерации и ферментации в смеси воды с молочной сывороткой, мёдом или лактозой; настойки гомеопатические матричные, полученные мацерацией сырья животного происхождения в смеси глицерина с раствором натрия хлорида.

На каждой ступени потенцирования 1 часть смеси взбалтывают с 9 или 99 частями предписанного растворителя.

Если смеси предназначены для введения в состав лекарственных форм для парентерального применения или капель глазных, то два последних десятичных разведения или последнее сотенное разведение потенцируют с использованием воды для инъекций; натрия хлорида раствора 0,9 %; изотонического раствора, содержащего смесь натрия гидрокарбонат–натрия хлорид–вода для инъекций 0,2:8,8:91, или другого растворителя, указанного в фармакопейной статье. При производстве таких смесей следует руководствоваться требованиями ОФС «Растворы для инъекций гомеопатические» и ОФС «Капли глазные гомеопатические».

При получении смесей для нанесения на исходные гранулы сахарные по способу 2, согласно ОФС «Гранулы гомеопатические», на последней ступени потенцирования применяют сироп сахарный 64 %.

Во всех других случаях для потенцирования смесей по правилу 2 используют воду для инъекций.

Правило 3. Совместно потенцируют смеси, содержащие только тритурации, изготовленные из порошков, настоек гомеопатических матричных, растворов и/или их разведений.

На каждой ступени потенцирования смешивают и растирают 1 часть смеси с 9 или 99 частями лактозы в соответствии с требованиями ОФС «Тритурации гомеопатические».

###### Испытания

Качество смесей гомеопатических регламентируется требованиями ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов».

При проведении испытания смесей гомеопатических для получения лекарственных препаратов по показателю «Описание» контролируют характеристику агрегатного состояния, цвет, запах и др. При необходимости характеризуют физические свойства: размер частиц, гигроскопичность и др. Также проводят испытание по показателю «Микробиологическая чистота» (ОФС «Микробиологическая чистота»).

В смесях, приготовленных с использованием спирта, определяют плотность; в смесях, содержащих только тритурации, определяют однородность смешивания. Оценку качества по другим показателям проводят в соответствии с требованиями фармакопейной статьи.

В случае если степень потенцирования активного компонента (активных компонентов) не позволяет установить его подлинность или определить содержание, качество препарата оценивают по вспомогательным веществам.

###### Упаковка

Упаковка должна обеспечивать стабильность смесей гомеопатических в течение установленного срока годности в соответствии с ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов».

###### Маркировка

Требования, предъявляемые к маркировке, изложены в ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов».

###### Хранение

Хранение смесей осуществляется в зависимости от их агрегатного состояния и принадлежности к той или иной лекарственной форме. В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.6.2.0014 Спреи гомеопатические

Взамен ОФС.1.6.2.0014.18

Спреи гомеопатические – лекарственная форма, представляющая собой один или несколько активных компонентов в виде жидких гомеопатических разведений, высвобождение которых происходит за счёт давления воздуха, создаваемого с помощью механического распылителя насосного типа или при сжатии полимерной упаковки, обеспечивающей высвобождение содержимого в виде дисперсии жидких частиц в воздухе, размер которых соответствует пути введения.

В зависимости от пути введения и способа применения различают спреи гомеопатические для применения в полости рта и назальные.

Спрей назальный гомеопатический – спрей, предназначенный для введения в полость носа с целью оказания местного действия.

Спрей подъязычный гомеопатический – спрей, предназначенный для нанесения под язык с целью оказания системного действия, выпускаемый в упаковке с дозирующим устройством.

###### Особенности технологии

Спреи гомеопатические готовят по массе, они могут содержать один или несколько активных компонентов. В гомеопатических разведениях в качестве активных компонентов могут быть использованы: настойки гомеопатические матричные, растворы и жидкие разведения гомеопатические. Качество используемых в составе спреев гомеопатических активных компонентов регламентировано требованиями ОФС «Настойки гомеопатические матричные», ОФС «Растворы и жидкие разведения гомеопатические», ОФС «Смеси гомеопатические» и др. В качестве растворителей для спреев чаще всего используется вода очищенная или вода для инъекций, а в качестве изотонирующего агента – натрия хлорид. Для создания нужной среды используются, как правило, натрия дигидрофосфат и натрия гидрофосфат. В качестве консерванта – бензалкония хлорид.

Для спреев подъязычных допускается использование в качестве растворителя и консерванта спирта этилового в концентрации, указанной в фармакопейной статье.

###### Испытания

Качество спреев гомеопатических, в том числе и входящих в их состав вспомогательных веществ, оценивают в соответствии с требованиями ОФС «Спреи».

Дополнительно спреи гомеопатические должны оцениваться по следующим показателям:

Описание. Включает описание цвета, запаха, прозрачности, наличие или отсутствие опалесценции.

Подлинность. Определяют подлинность активного компонента (если применимо) или вспомогательного вещества.

Спирт этиловый. Испытание проводят в том случае, если в качестве растворителя используется спирт этиловый (ОФС «Определение спирта этилового в лекарственных средствах»), если не указано иное в фармакопейной статье. Значение содержания спирта этилового должно быть указано в процентах и соответствовать пределам, установленным в фармакопейной статье.

Количественное определение. Количественное определение приводят в фармакопейной статье с указанием нормируемых значений по содержанию действующих веществ.

В случае если степень потенцирования активного компонента (активных компонентов) не позволяет установить их подлинность или определить содержание, качество препарата оценивают по вспомогательным веществам.

В случае введения консерванта проводят качественную оценку и определение количественного содержания антимикробного консерванта (ОФС «Определение эффективности антимикробных консервантов» (категория 2)).

Микробиологическая чистота. Для спреев гомеопатических микробиологическая чистота должна соответствовать требованиям ОФС «Микробиологическая чистота».

###### Упаковка

Упаковка спреев и все элементы упаковки, включая распылительные, дозирующие устройства, насадки, предохранительные колпачки и т.п., должны соответствовать требованиям ОФС «Упаковка лекарственных средств».

###### Маркировка

Требования, предъявляемые к маркировке, изложены в ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов».

###### Хранение

В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств», ОФС «Спреи», если нет других указаний в фармакопейной статье.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.6.2.0015 Суппозитории гомеопатические

Взамен ОФС.1.6.2.0015.18

Суппозитории гомеопатические – суппозитории, состоящие из суппозиторной основы и равномерно распределённых в ней одного или нескольких активных компонентов.

В качестве активных компонентов могут быть использованы: настойки гомеопатические матричные (ОФС «Настойки гомеопатические матричные»), разведения гомеопатические (ОФС «Растворы и жидкие разведения гомеопатические»), смеси гомеопатические (ОФС «Смеси гомеопатические»), тритурации гомеопатические (ОФС «Тритурации гомеопатические»), производство/изготовление которых должно быть регламентировано.

В зависимости от пути введения различают суппозитории гомеопатические ректальные и суппозитории гомеопатические вагинальные.

Суппозитории гомеопатические ректальные – суппозитории гомеопатические, предназначенные для введения в прямую кишку с целью оказания местного или системного действия. Суппозитории гомеопатические ректальные обычно имеют коническую или торпедообразную форму.

Суппозитории гомеопатические вагинальные – суппозитории гомеопатические, предназначенные для введения во влагалище с целью оказания местного действия. Суппозитории гомеопатические вагинальные в основном имеют шарообразную, яйцевидную форму или вид плоского тела с закруглённым концом (форму пессария).

###### Особенности технологии

При производстве/изготовлении суппозиториев гомеопатических в качестве основ обычно используют масло какао и гидрогенизированные жиры, другие основы должны быть указаны в фармакопейной статье. Суппозитории для детей готовят, как правило, на основе масла какао или твёрдого жира типа А.

Суппозитории гомеопатические формируют способом выкатывания, прессования или выливания расплавленной массы в литьевые суппозиторные формы.

При формировании суппозиториев гомеопатических способом выкатывания в качестве связующего вещества применяют ланолин безводный.

Активные компоненты вводят в основу, соблюдая соотношение 1:10 (десятичная) или 1:100 (сотенная шкала). При введении активные компоненты смешивают с основой непосредственно после растворения или растирания с небольшим количеством расплавленной основы, воды, спирто-водно-глицериновой смеси, масла вазелинового или другого подходящего растворителя.

Масса одного суппозитория для детей должна быть около 1,0 г, для взрослых – около 2,0 г. Допустимое отклонение в массе одного суппозитория от средней массы не должно превышать ±5 % (ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм»).

Активные компоненты в жидкой форме, не содержащие летучих активных компонентов, перед смешиванием с основой могут быть сконцентрированы путём упаривания на роторном вакуумном испарителе.

Термолабильные активные компоненты добавляют к основе непосредственно перед формированием суппозиториев.

Не допускается добавление поверхностно-активных веществ, консервантов и красителей.

###### Испытания

Качество суппозиториев гомеопатических оценивают в соответствии с требованиями ОФС «Суппозитории».

В случае если степень разведения активного компонента (активных компонентов) не позволяет установить их подлинность или определить содержание, качество препарата оценивают по вспомогательным веществам.

###### Упаковка

Упаковка должна обеспечивать стабильность лекарственного препарата в течение установленного срока годности в соответствии с ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов».

Упаковка суппозиториев гомеопатических может быть однодозовой и многодозовой.

###### Маркировка

Требования, предъявляемые к маркировке, изложены в ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов».

###### Хранение

В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств».

При температуре от 8 до 15 °С, если не указано иначе в фармакопейной статье.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.6.2.0016 Таблетки гомеопатические

Взамен ОФС.1.6.2.0016.18

Таблетки гомеопатические − твёрдая дозированная лекарственная форма, получаемая путём прессования, состоящая из одного или нескольких активных компонентов и вспомогательных веществ.

В зависимости от способа применения различают:

- таблетки гомеопатические − таблетки гомеопатические, предназначенные для приёма внутрь;

- таблетки, диспергируемые в полости рта, гомеопатические – таблетки гомеопатические, которые помещают в полость рта, где они диспергируются до проглатывания.

###### Особенности технологии

Таблетки гомеопатические могут быть получены прессованием одного или более активных компонентов со вспомогательными веществами (способ 1) или насыщением таблеток, полученных путём предварительного прессования, разведениями одного или нескольких активных компонентов (способ 2).

Способ 1. Таблетки гомеопатические получают прессованием тритураций гомеопатических, отвечающих требованиям ОФС «Тритурации гомеопатические», со вспомогательными веществами по технологиям, общепринятым при производстве таблеток. Если в процессе производства необходимо гранулирование, то в качестве гранулирующей жидкости используют воду, а также спирт предписанной концентрации.

В качестве вспомогательных веществ используют лактозу, сахарозу или другие вспомогательные вещества (ОФС «Таблетки»).

Масса гомеопатических тритураций в одной таблетке, как правило, должна составлять 0,1 г или 0,25 г, если нет других указаний в фармакопейной статье. Вспомогательные вещества добавляют к этой массе.

Способ 2. Таблетки гомеопатические получают насыщением таблеток, полученных путём предварительного прессования лактозы, сахарозы или других подходящих вспомогательных веществ, в соответствии с технологией способа 1, гомеопатическими разведениями одного или нескольких активных компонентов.

###### Испытания

Качество таблеток гомеопатических оценивают в соответствии с требованиями ОФС «Таблетки».

В случае если степень потенцирования активного компонента (активных компонентов) не позволяет установить их подлинность или определить содержание, качество препарата оценивают по вспомогательным веществам.

###### Упаковка

Упаковка должна обеспечивать стабильность лекарственного препарата в течение установленного срока годности (ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов»).

###### Маркировка

Требования, предъявляемые к маркировке, изложены в ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов».

###### Хранение

В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств», если не указано иначе в фармакопейной статье.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.6.2.0017 Тритурации гомеопатические

Взамен ОФС.1.6.2.0017.18

Тритурации гомеопатические – твёрдая лекарственная форма в виде порошка, состоящая из одного или нескольких активных компонентов с лактозой в качестве вспомогательного вещества (если не указано иное).

###### Область применения

Тритурации гомеопатические применяют:

- в качестве гомеопатических субстанций для производства (изготовления) гомеопатических лекарственных препаратов;

- в качестве лекарственных препаратов для приёма внутрь.

###### Особенности технологии

Тритурации массой до 1 кг производят вручную с использованием фарфоровой ступки. Особые условия производства (изготовления) тритураций должны быть указаны в фармакопейной статье.

Тритурации массой более 1 кг производят механическим способом. В случае использования специального оборудования оно должно обеспечивать получение тритураций, качество которых соответствует требованиям, приведённым в разделе «Испытания».

В качестве вспомогательного вещества используют лактозы моногидрат, если в фармакопейной статье не указано иное.

Тритурации производят (изготавливают) по массе. При отсутствии специальных указаний в фармакопейной статье применяют два способа получения:

- способ 1 предназначен для получения тритураций из твёрдых субстанций;

- способ 2 предназначен для получения тритураций из настоек гомеопатических матричных, растворов и жидких разведений гомеопатических, смесей гомеопатических.

Способ 1. Получение тритураций из твёрдых субстанций

Исходные твёрдые гомеопатические субстанции предварительно измельчают до размера частиц, указанного в фармакопейной статье. Определение размера частиц проводят в соответствии с требованиями ОФС «Ситовой анализ».

Продолжительность и интенсивность растирания должны быть такими, чтобы конечный размер частиц исходного вещества в первом десятичном (D1) или первом сотенном (С1) разведении не превышал 100 мкм.

Для получения тритураций вручную до четвёртого десятичного (D4) или четвёртого сотенного (С4) разведения включительно поступают следующим образом. Необходимое количество лактозы моногидрата делят на 3 равные части. Первую часть помещают в ступку и растирают, чтобы закрыть поры ступки. Затем прибавляют всё количество гомеопатической субстанции, растирают с усилием в течение 6 мин, после чего порошок сгребают неметаллическим шпателем и соскабливают со стенок ступки в течение 4 мин, эту операцию повторяют ещё раз. Затем добавляют последовательно вторую и третью части лактозы моногидрата, повторяя с каждой частью описанные выше операции. Минимальное время, требуемое для всего процесса производства (изготовления) тритурации, составляет 1 ч.

Аналогично поступают при получении последующих разведений.

При механическом способе производства (изготовления) тритураций из порошков до четвёртого десятичного (D4) или четвёртого сотенного (С4) разведения включительно активные компоненты и вспомогательные вещества добавляют и растирают, соблюдая последовательность операций, аналогичную указанной при изготовлении в ступке, и весь процесс получения тритурации составляет не менее 1 ч.

Для получения разведений выше пятого десятичного (D5) или выше пятого сотенного (С5), в отличие от описанного метода, поступают следующим образом. Разведения получают из 1 г тритурации предыдущего десятичного или сотенного разведения и 9 г или 99 г лактозы моногидрата, предварительно разделённого на 3 равные части. К первой части лактозы моногидрата постепенно, небольшими порциями прибавляют всё количество тритурации предыдущего разведения и тщательно растирают до получения однородного порошка. Затем прибавляют последовательно вторую и третью части лактозы моногидрата и тщательно растирают до однородности.

После длительного хранения тритурации вновь растирают.

Интенсивность и продолжительность растирания должны быть такими, чтобы размер полученных частиц твёрдой субстанции соответствовал требованию по показателю «Размер частиц».

Способ 2. Получение тритураций из настоек гомеопатических матричных, растворов и жидких разведений гомеопатических, смесей гомеопатических

При производстве (изготовлении) тритураций из настоек гомеопатических матричных, растворов и жидких разведений гомеопатических и смесей гомеопатических поступают следующим образом. Ко всему необходимому количеству лактозы моногидрата постепенно, небольшими порциями прибавляют всё количество настойки гомеопатической матричной, раствора или жидкого разведения гомеопатического или смеси гомеопатической предыдущего разведения и тщательно смешивают до получения однородной массы. Гомогенную влажную смесь осторожно высушивают, при необходимости измельчают и ещё раз смешивают.

Используют такое количество лактозы моногидрата, чтобы после завершения процесса изготовления была достигнута предписанная масса тритурации.

Настойки гомеопатические матричные, растворы и жидкие разведения гомеопатические и смеси гомеопатические, используемые для получения тритураций, должны потенцироваться в соотношениях, соответствующих их способам получения. При этом всегда используют столько лактозы моногидрата, чтобы общая масса тритурации после высушивания составляла для десятичного разведения 10 частей и для сотенного разведения 100 частей. Последующие разведения тритураций получают из 1 части тритурации предыдущего разведения и 9 частей (для десятичной шкалы) или 99 частей (для сотенной шкалы) лактозы моногидрата, тщательно смешивая до однородности.

###### Испытания

Тритурации гомеопатические контролируют по показателям качества: «Описание» (внешний вид, цвет, запах), «Однородность смешивания», «Размер частиц», «Микробиологическая чистота».

В тритурациях первого, второго или третьего десятичного разведения подлинность и количественное содержание активного компонента определяют согласно требованиям фармакопейной статьи.

Допустимые отклонения в содержании активного компонента не должны превышать:

- ±5 % для первого и второго десятичных разведений;

- ±10 % для третьего десятичного разведения, если нет других указаний в фармакопейной статье.

Содержание активных компонентов в тритурациях с ядовитыми или сильнодействующими веществами в четвёртом десятичном (D4) разведении определяют согласно фармакопейной статье.

Однородность смешивания. Определяют в тритурациях, содержащих металлы, уголь, графит, красящие активные компоненты. Три пробы по 1 г тритурации, взвешенные с точностью до ±0,01 г, рассыпают тонким слоем (не более 0,5 мм) на листе белой бумаги и рассматривают на расстоянии 20–25 см под лупой (увеличение от 7× до 9×), если нет других указаний в фармакопейной статье.

Активный компонент должен быть равномерно распределён в тритурации и не должен обнаруживаться в виде отдельных частиц.

Размер частиц. Испытание проводят для тритураций, полученных по способу 1, содержащих активные компоненты в первом десятичном (D1) или первом сотенном (С1) разведении, с помощью микроскопа или другим валидированным методом в соответствии с требованием фармакопейной статьи.

Среднюю пробу тритурации массой 10 мг помещают на часовое стекло диаметром 60–70 мм, прибавляют 0,5 мл масла вазелинового и тщательно перемешивают стеклянной палочкой до получения однородной суспензии. Каплю суспензии, не давая осесть частицам, наносят на предметное стекло и прикрывают покровным стеклом. Размер частиц определяют при помощи окуляр-микрометра (увеличение 400×, 600×). Просматривают 10 полей зрения.

Размер частиц твёрдой субстанции должен быть не более 100 мкм.

В случае если степень разведения активного компонента (активных компонентов) не позволяет установить их подлинность или определить содержание, качество препарата оценивают по вспомогательным веществам.

###### Упаковка

Упаковка должна обеспечивать стабильность лекарственного препарата в течение установленного срока годности (ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов»).

###### Маркировка

Требования, предъявляемые к маркировке, изложены в ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов».

###### Хранение

В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств». При температуре от 15 до 25 °С, если не указано иначе в фармакопейной статье.

### 1.7. Биологические лекарственные средства

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.7.0001 Биологические лекарственные препараты, полученные на основе градуальной технологии

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья устанавливает требования к группе биологических лекарственных препаратов для медицинского применения, полученных на основе градуальной технологии.

##### Термины и определения

Градуальный – характеризующийся постепенным ослаблением (уменьшением) какого-либо свойства, характеристики.

Градуальная технология – поэтапная обработка фармацевтической субстанции биологического происхождения, на каждом этапе которой её разведение сопровождается контролируемым воздействием с использованием автоматизированной микрофлюидной системы.

Микрофлюидная система – технологическая система, обеспечивающая получение разведений фармацевтической субстанции (т.е. действующего вещества) в микрофлюидном устройстве (микрореакторе), управляемом с помощью программного обеспечения.

Биологические лекарственные препараты, полученные на основе градуальной технологии – лекарственные препараты, специфическая активность которых обусловлена действующим веществом, получаемым из фармацевтической субстанции биологического происхождения (антитела к конкретным антигенам), подвергнутой градуальной технологии.

Биологические лекарственные препараты, полученные на основе градуальной технологии, могут содержать одно или два и более действующих веществ.

Биологические лекарственные препараты, полученные на основе градуальной технологии с использованием материалов животного происхождения, в случае приемлемости, должны выдерживать требования ОФС «Вирусная безопасность».

Биологические лекарственные препараты, полученные на основе градуальной технологии, производят, как правило, в лекарственных формах: таблетки, капли и растворы для приёма внутрь.

В состав биологических лекарственных препаратов, полученных на основе градуальной технологии, входят вспомогательные вещества различного функционального назначения (разбавители, разрыхлители, вещества, способствующие скольжению, консерванты и др.). В случае, если в состав препарата входят консерванты, определение их содержания должно быть предусмотрено с использованием подходящего метода.

##### Особенности технологии

Производство биологических лекарственных препаратов, полученных на основе градуальной технологии, должно осуществляться в условиях соблюдения правил надлежащей производственной практики.

С использованием градуальной технологии из фармацевтической субстанции биологического происхождения получают действующее вещество, которое при введении в состав лекарственного препарата в конкретной лекарственной форме и определяет его специфическую активность.

В качестве вспомогательного вещества (или смеси вспомогательных веществ) используют, как правило, воду или водно-спиртовые смеси, а также сахара (лактоза, мальтоза и др.).

##### Испытания

Испытания, применяемые для оценки качества биологических лекарственных препаратов, полученных на основе градуальной технологии, проводят по показателям качества, характеризующим действующие и вспомогательные вещества, входящие в их состав, и по показателям качества, характерной для конкретной лекарственной формы.

Биологические лекарственные препараты, полученные на основе градуальной технологии, должны отвечать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы» и ОФС на конкретные лекарственные формы, в виде которой они производятся: капли, растворы, таблетки.

Описание. Содержание раздела должно соответствовать общей фармакопейной статье на конкретную лекарственную форму: капли, растворы, таблетки.

Подлинность. Подлинность биологических лекарственных препаратов, полученных на основе градуальной технологии, устанавливают по наличию специфических физико-химических свойств раствора действующего вещества/веществ, обнаруживаемых непосредственно по их способности оказывать влияние на специально разработанные модельные (физико-химические) системы. Для регистрации изменений свойств раствора модельных систем используют кинетический или термографический методы анализа. Специфичность наблюдаемого, как в кинетическом, так и в термографическом методе анализа эффекта подтверждается использованием контролей, содержащих те же вспомогательные вещества, что и биологический лекарственный препарат, но без действующего вещества.

Кинетический метод является методом, применяемым для установления подлинности действующего вещества в биологических лекарственных препаратах в лекарственной форме таблетки для рассасывания. Метод основан на использовании в качестве модельного вещества легкоокисляемой аскорбиновой кислоты, на скорость окисления которой влияют физико-химические свойства раствора испытуемого препарата. Изменение скорости окисления аскорбиновой кислоты за установленный интервал времени определяется стандартной методикой с использованием радикала 2,2 '-азино-бис (3-этилбензотиазолин-6-сульфоновой кислоты (АБТС-радикала) путём оценки спектральных характеристик раствора при длине волны 730 нм. Для определения содержания аскорбиновой кислоты в начальный и конечный момент времени используют калибровочный график зависимости оптической плотности от концентрации градуировочных растворов аскорбиновой кислоты. Скорость реакции разложения аскорбиновой кислоты в испытуемом растворе должна быть меньше скорости реакции разложения аскорбиновой кислоты в контрольном растворе (статистическая значимость отличий соответствует р≤0,1).

Термографический метод. Если вспомогательные вещества, входящие в состав лекарственной формы, оказывают влияние на процесс окисления аскорбиновой кислоты и тем самым не позволяют провести установление подлинности кинетическим методом, используют термографический метод (термография высокого разрешения). Термографический метод позволяет напрямую определять изменения свойств растворителя (воды) при добавлении биологических лекарственных препаратов, полученных на основе градуальной технологии, (в лекарственных формах капли и растворы для приема внутрь) по сравнению со свойствами растворителя (воды) при добавлении контроля. Для этого проводится оценка изменения структуры воды в присутствии биологического лекарственного препарата, полученного на основе градуальной технологии, по изменению адсорбции на поверхности изучаемых растворов в сравнении с раствором контрольного образца. Подготовленные растворы испытуемого и контрольного образцов помещают в чашку Петри и с помощью тепловизора измеряют среднюю площадь приповерхностной пленки на поверхности раствора в заданном температурном интервале. Разностный коэффициент образования приповерхностной пленки в растворе испытуемого образца относительно контрольного образца должен быть не менее 5 % (статистическая значимость отличий соответствует р≤0,1).

Подлинность отдельных вспомогательных веществ, входящих в состав биологических лекарственных препаратов, устанавливают с использованием либо физико-химических методов анализа, например: метод спектрофотометрии в ультрафиолетовой области по совпадению максимума поглощения при длине волны (264±2) нм УФ-спектров испытуемого раствора и стандартного раствора калия сорбата; либо с помощью качественных реакций:

- с медно-тартратным реактивом по образованию осадка оранжево-красного цвета (лактозы моногидрат);

- с пирокатехина раствором 10% в присутствии серной кислоты концентрированной по образованию окрашивания розового или бордово-красного цвета (мальтитол).

Распадаемость. Испытание проводят для биологических лекарственных препаратов, полученных на основе градуальной технологии, в лекарственной форме таблетки для рассасывания в соответствии с ОФС «Распадаемость твёрдых лекарственных форм». Время распадаемости не должно превышать 15 мин.

Прозрачность. Испытания проводят для биологических лекарственных препаратов, полученных на основе градуальной технологии, в лекарственных формах: капли для приема внутрь и растворы для приёма внутрь в соответствии с ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей». Опалесценция (мутность) раствора испытуемого лекарственного препарата не должна превышать мутность эталона сравнения I.

Цветность. Испытания проводят для биологических лекарственных препаратов, полученных на основе градуальной технологии, в лекарственных формах: капли для приема внутрь и растворы для приема внутрь в соответствии с ОФС «Степень окраски жидкостей». Степень окраски раствора испытуемого препарата не должна превышать степень окраски эталона В9.

pH. Испытание проводят для биологических лекарственных препаратов, полученных на основе градуальной технологии, в лекарственных формах капли для приёма внутрь, растворы для приема внутрь в соответствии с ОФС «Ионометрия». Значение pH должно быть от 4,5 до 7,0.

Однородность массы. Испытание проводят для биологических лекарственных препаратов, полученных на основе градуальной технологии, в лекарственной форме таблетки для рассасывания в соответствии с ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм». Препарат считается выдержавшим испытание, если масса не более 2 индивидуальных масс отклоняется от средней массы более чем на 5 %; ни одна из индивидуальных масс не должна отклоняться от средней более чем на 10 %.

Извлекаемый объём. Испытанию подлежат биологические лекарственные препараты, полученные на основе градуальной технологии, в лекарственной форме капли для приёма внутрь и растворы для приёма внутрь в соответствии с ОФС «Извлекаемый объём».

Среднее значение объема содержимого 10 упаковок должно быть не менее 100 %, и ни одна из упаковок не должна иметь объем менее 95 % от номинального объёма.

Если среднее значение объёма содержимого 10 упаковок менее 100 % от указанного на этикетке, но ни одна из упаковок не имеет объём менее 95 % или среднее значение объёма содержимого 10 упаковок составляет 100 % и объём не более чем одной упаковки менее 95 %, но не менее 90 % от номинального объёма, то выполняют испытание на 20 дополнительных упаковках.

Среднее значение объёма содержимого 30 упаковок должно составлять не менее 100 % от номинального объёма, и объём не более чем одной из 30 упаковок может быть менее 95 %, но не менее 90 % от указанного на этикетке.

Доза и однородность дозирования. Испытание проводят для биологических лекарственных препаратов, полученных на основе градуальной технологии, в лекарственной форме капли для приёма внутрь в соответствии с ОФС «Капли». Препарат считается выдержавшим испытание, если масса ни одной дозы не должна отклоняться более чем на 10 % от средней массы. Суммарная масса 10 доз не должна отличаться более чем на 15 % от номинальной массы 10 доз.

Микробиологическая чистота. Биологические лекарственные препараты, полученные на основе градуальной технологии, в лекарственных формах: капли для приёма внутрь, растворы для приёма внутрь, таблетки для рассасывания должны выдерживать требования ОФС «Микробиологическая чистота».

Специфическая активность. Действующие вещества биологических лекарственных препаратов, полученных на основе градуальной технологии, обладают общим свойством – способностью оказывать непосредственное модифицирующее влияние на молекулу-мишень, изменять её пространственную структуру и, вследствие этого, её свойства и характер взаимодействия с комплементарными молекулами. В связи с этим для оценки специфической активности биологических лекарственных препаратов, полученных по градуальной технологии, используют метод, основанный на взаимодействии молекулы-мишени с комплементарными молекулами, (например, антиген-антительные взаимодействия или взаимодействия рецептор-мишень) – метод иммуноферментного анализа (ИФА) в соответствии с ОФС «Метод иммуноферментного анализа».

Метод основан на оценке влияния действующего вещества биологического лекарственного препарата, полученного на основе градуальной технологии, на реакцию специфического взаимодействия соответствующего антитела со своим антигеном и последующим определением полученного окрашенного комплекса с помощью метода спектрофотометрии в видимой области. В ходе контроля качества величину этого влияния (активность) промышленных серий сравнивают с активностью стандартного образца – аттестованной соответствующим образом серией биологического лекарственного препарата, полученного на основе градуальной технологии. Для этого в лунки планшета, покрытого сорбированным антигеном, добавляют раствор испытуемого лекарственного препарата и раствор стандартного образца и инкубируют в подобранных условиях. Затем образцы удаляют из лунок и проводят стандартный непрямой метод ИФА, в котором в лунки добавляют антитела к соответствующему белку, далее вторичные видоспецифические антитела с ферментной меткой, субстрат-проявитель для фермента и стоп-раствор, позволяющие на основе регистрируемых автоматическим планшетным спектрофотометром значений оптической плотности и соответствующего программного обеспечения рассчитывать количество антител, связавшихся с антигеном. Испытуемый биологический лекарственный препарат, полученный на основе градуальной технологии, считается активным, если статистически значимые отличия между оптическими плотностями испытуемого и стандартного образцов не превышают 5 % не менее чем по двум точкам сравнения (статистическая значимость отличий соответствует р≤0,1).

Активность стандартного образца биологического лекарственного препарата оценивается методом ИФА относительно контрольных образцов. В качестве контрольных образцов используют:

- плацебо, приготовленное по аналогичной технологии производства биологического лекарственного препарата из раствора, но без действующего вещества, и

- неспецифический контрольный образец, приготовленный по аналогичной технологии производства биологического лекарственного препарата, но содержащим в качестве исходной фармацевтической субстанции антитела к другим белкам.

Статистически значимые отличия оптической плотности в лунках со стандартным образцом биологического лекарственного препарата от оптической плотности в лунках с контрольными образцами не менее чем на 5 % не менее чем по двум точкам сравнения (статистическая значимость отличий соответствует р≤0,1), свидетельствуют о том, что стандартный образец биологического лекарственного препарата изменяет количество образующихся в ИФА комплексов антиген-антитело, характеризующих его специфическую модифицирующую активность.

Cпецифическая модифицирующая активность измеряется в единицах модифицирующего действия (ЕМД). Расчёт производят на основании подхода, использующегося для оценки коэффициента активности растворов, где отношение активности частицы (концентрация, которую имел бы компонент условного идеального раствора, обладающего теми же термодинамическими свойствами, что и данный реальный раствор) к её равновесной концентрации называется коэффициентом активности. На основании производственных регламентов рассчитывают количество действующего вещества в лекарственной форме. Затем готовят раствор лекарственного препарата в испытуемой лекарственной форме и рассчитывают условную концентрацию действующего вещества в полученном растворе. Величину модифицирующего действия для одной таблетки или 1 мл биологического лекарственного препарата, полученного на основе градуальной технологии, в лекарственной форме раствор/капли для приёма внутрь рассчитывают как активность, делённую на условную концентрацию действующего вещества в растворе.

Испытанию подвергают биологические лекарственные препараты, полученные на основе градуальной технологии, в различных лекарственных формах.

Хранение. В соответствии с ОФС «Хранение лекарственных средств».

#### 1.7.1. Иммунобиологические лекарственные препараты и методы их анализа

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.7.1.0007 ЛЕКАРСТВЕННЫЕ СРЕДСТВА, ПОЛУЧАЕМЫЕ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ТЕХНОЛОГИИ РЕКОМБИНАНТНОЙ ДНК

Взамен ОФС.1.7.1.0007.15

Общая фармакопейная статья содержит общие требования к производству и контролю лекарственных средств, представляющих собой белки, пептиды и их производные, получаемые с использованием технологии рекомбинантной ДНК (рДНК).

Общие требования данной общей фармакопейной статьи применимы к антигенам вакцин, полученным по технологии рДНК.

Некоторые аспекты данной общей фармакопейной статьи могут быть применимы к продуктам, производимым при помощи трансгенных животных и растений.

Данная общая фармакопейная статья не распространяется на модифицированные (рекомбинантные) организмы, предназначенные для использования напрямую в организме человека и животных, например, в качестве живых рекомбинантных векторов или живых вакцин, а также на препараты для генной терапии.

Перечень требований, приведённый в настоящей общей фармакопейной статье, не является окончательным. Дополнительные требования могут быть установлены для каждого конкретного лекарственного средства или могут быть представлены в фармакопейной статье.

###### ТЕРМИНЫ И ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Белки и пептиды (далее – продукты), получаемые с использованием технологии рДНК, производят с использованием клеток, геномы которых были подвергнуты генетической модификации, при которой нуклеотидную последовательность, кодирующую целевой продукт, как правило, вводят с помощью плазмиды или вирусного вектора в подходящие компетентные микроорганизмы (бактерии или дрожжи) или в клеточную линию млекопитающих (включая человека), насекомых или растений. Клетка-хозяин с встроенным фрагментом ДНК обеспечивает экспрессию целевого продукта в виде белка или пептида, извлекаемого в ходе этапов выделения и очистки. Продукты, полученные с использованием технологии рДНК, могут подвергаться преднамеренным посттрансляционным модификациям, например, таким, как пегилирование, конъюгация, фрагментация.

Клетка-хозяин – клетка бактерий или эукариотических клеточных линий, используемых для встраивания вектора экспрессии. Стабильную конструкцию из компетентных клеток и вектора экспрессии, используемую в производственном процессе, называют штаммом-продуцентом (системой вектор экспрессии/клетка-хозяина).

Экспрессирующая конструкция (вектор экспрессии) − вектор, который содержит кодирующую последовательность рекомбинантного белка и элементы, необходимые для его экспрессии.

Главный банк клеток (ГБК) – гомогенная суспензия клеток-хозяина, трансформированных вектором экспрессии. Суспензию разливают в равных объёмах в контейнеры, замораживают и хранят в условиях, обеспечивающих их стабильность. ГБК получают в установленных условиях из отобранного клеточного клона, содержащего экспрессирующую конструкцию. В некоторых случаях может потребоваться создание отдельных ГБК для вектора экспрессии и для клетки-хозяина.

Рабочий банк клеток (РБК) – гомогенная суспензия клеток, полученных на определённом уровне пассажа культивированием клеток из одного или более контейнеров ГБК, разлитая в равных объёмах в контейнеры с целью хранения в условиях, обеспечивающих их стабильность. РБК используют для производства каждой серии готового продукта. Образцы рабочего банка клеток необходимо хранить, как минимум, до истечения срока годности последней выпущенной партии препарата.

Готовый нерасфасованный продукт – фармацевтическая субстанция, полученная методом рекомбинантной ДНК, используемая для приготовления готового лекарственного препарата и предназначенная для хранения. Формирование серии готового нерасфасованного продукта должно быть установлено и документировано производителем.

Значимые генотипические и фенотипические маркёры – маркёры, позволяющие идентифицировать штамм-продуцент/клеточную линию и наличие экспрессирующей конструкции.

Инсерции и делеции – нарушения структуры нуклеотидной последовательности (мутации), при которых происходит добавление определенного количества нуклеотидов (инсерция) или выпадение одного или нескольких нуклеотидов с последующим укорочением (делеция) заданной последовательности.

Сайт интеграции – участок генома клетки-хозяина, в который включаются одна или более копий экспрессирующей конструкции.

Фланкирующие регуляторные участки – некодирующие нуклеотидные последовательности, примыкающие к 5´ и 3´- концам кодирующей последовательности. Эти участки включают, например, промотор, энхансер и последовательности для сплайсинга, и не включают точки начала репликации гена, устойчивые к антибиотикам.

###### ПРОИЗВОДСТВО

ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

Производство основано на валидированной системе посевных материалов с использованием подходящей системы вектор/клетка-хозяин. В системе посевного материала обычно используют главный банк клеток (ГБК) и/или рабочий банк клеток (РБК).

Описание клетки-хозяина, вектора экспрессии, системы вектор экспрессии/клетка-хозяин, ГБК и РБК, включая их происхождение, создание, поддержание и культивирование, должно быть детально задокументировано.

При использовании в производственном процессе материалов животного или человеческого происхождения применяют требования ОФС «Вирусная безопасность» и ОФС «Уменьшение риска передачи возбудителей губчатой энцефалопатии животных при применении лекарственных средств».

Валидация производственного процесса должна охватывать:

- стадии производственного процесса, включая этапы культивирования клеток и ферментацию, очистку и любую последующую преднамеренную модификацию целевого продукта, если это применимо;

- удаление или инактивацию контаминантов;

- удаление родственных и производственных примесей (например, нежелательных молекулярных вариантов продукта, остаточных белков клетки-хозяина и ДНК штамма-продуцента, антибиотиков, компонентов среды культивирования), а также материалов, используемых в ходе очистки целевого продукта;

- удаление пирогенных веществ, если это применимо.

Вектор экспрессии, клетка-хозяин, штамм-продуцент

Исходные материалы, используемые в производстве продукта рДНК, включая вектор экспрессии, клетки-хозяина и пул трансформированных или трансфицированных клеток, из которых будет получен исходный клон, должны быть подробно охарактеризованы и документально оформлены.

Должна быть представлена информация о происхождении, источнике и истории клеток-хозяина, а также задокументированы подробное описание и характеристики вектора и экспрессирующей конструкции:

- источник и характеристика гена, кодирующего целевой продукт, а также других функционально значимых участков экспрессирующей конструкции (нуклеотидная последовательность целевого гена и его фланкирующие участки, карта рестрикции и др.).

Для характеристики штамма-продуцента используют:

- фенотипические и генотипические характеристики клетки-хозяина, указание используемой среды культивирования;

- характеристики экспрессирующей конструкции в клетке-хозяина (интеграцию – механизмы и сайты интеграции), количество копий, анализ нуклеотидных последовательностей клонированного гена и фланкирующих областей вектора экспрессии, происхождение компонентных составных частей, информацию о входящих в её состав генах (помимо целевого), схему сборки экспрессирующей конструкции и др.);

- документы (информацию) об исходном сырье, методах введения (трансформации или трансфекции) в клетке-хозяина вектора экспрессии и стратегии получения штамма-продуцента из клона, используемого для создания системы банка клеток (отбор, клонирование, способы индуцирования экспрессии гена, её контроль в процессе производства и др.).

Система банков клеток

Для обеспечения качества и безопасности лекарственного препарата требуется стандартизированный подход при создании штамма-продуцента.

Если предполагается использование штамма-продуцента в течение многочисленных циклов производства, рекомендуется создание двухуровневой системы банков клеток, состоящей из главного банка клеток (ГБК) и рабочего банка клеток (РБК).

Индивидуальные контейнеры, содержащие клетки одного банка клеток, хранят в валидированных идентичных условиях и после извлечения из хранилища обратно в хранилище не возвращают.

Установление характеристик и испытание банков клеток представляет собой критически важную часть контроля лекарственных средств, получаемых с использованием технологии рДНК. Испытания банков клеток проводят для подтверждения подлинности, чистоты и пригодности клеточной линии для предполагаемого использования в производстве.

Стратегия проведения испытаний банков клеток может варьироваться в зависимости от природы и биологических свойств клеток (например, потребности в питательных веществах для роста), истории культивирования клеточной линии (например, в части условий и особенностей использования сырья рекомбинантного или животного происхождения, в том числе, полученного из тканей, органов или жидкостей человека, и/или применения антибиотиков).

Банки клеток (ГБК и РБК) должны быть охарактеризованы и испытаны на разных стадиях, включая клетки на стадии до и после достижения уровня удвоения популяции или числа генераций, используемых при производстве (клетки предельного для производства клеточного возраста in vitro).

Сведения о банках клеток должны включать следующую информацию:

- назначение, история создания клеточной линии и получения банков клеток, включая методы, реагенты, питательные среды, использованные в процессе культивирования;

- условия хранения, включая среду для криоконсервирования, стабильность банков при хранении;

- подтверждение подлинности и чистоты клеток, в том числе, идентификацию штамма-продуцента (с помощью биохимических, генетических или протеомных методов и др.),

- подтверждение фенотипической и генотипической характеристики штамма-продуцента;

- жизнеспособность клеток;

- данные об экспрессирующей конструкции (для их получения используют методы, применяемые в молекулярной биологии, например, метод картирования с помощью рестрикционных эндонуклеаз и др.):

  - последовательность нуклеотидов в экспрессирующей конструкции;

  - процент клеток, сохраняющих экспрессирующую конструкцию;

  - количество копий экспрессирующей конструкции;

  - наличие инсерций или делеций, количество сайтов интеграции;

  - способы индукции и контроля уровня экспрессии;

- данные о генетической стабильности клеток – необходимо подтвердить, что нуклеотидные последовательности кодирующего фрагмента, фланкирующих контрольных участков и промоторов идентичны последовательностям, установленным для экспрессирующей конструкции, и соответствуют планируемой аминокислотной последовательности продукта (с учётом предела обнаружения используемого метода). Генетическая стабильность подтверждается на стадии посевного материала и на конечной стадии роста клеточной популяции;

- данные, подтверждающие отсутствие в банке клеток онкогенных и посторонних агентов: вирусов, бактерий (в том числе, микоплазм), грибов (в соответствии с требованиями ОФС «Требования к клеточным культурам – субстратам производства биологических лекарственных препаратов»);

- данные, подтверждающие отсутствие у клеточных линий онкогенности, если не обосновано иное (в соответствии с требованиями ОФС «Требования к клеточным культурам – субстратам производства биологических лекарственных препаратов»).

При выявлении каких-либо изменений в последовательности нуклеотидов необходимо детально охарактеризовать и представить обоснование приемлемости подобных изменений с представлением данных о стабильности вектора экспрессии и его способности к постоянной экспрессии целевого продукта.

Для банков прокариотических и дрожжевых клеток характеристика также должна включать микробиологическую чистоту и, при необходимости, испытание на присутствие бактериофагов. Также могут потребоваться дополнительные специфичные испытания; целесообразность их проведения должна быть рассмотрена в каждом конкретном случае.

Для банков клеток животных обязательно определение морфологии. Банки клеток животных должны быть проверены на наличие контаминации, так как клеточные субстраты животных благоприятны для размножения посторонних агентов, таких как микоплазмы и вирусы. Кроме того, клеточные линии животных могут содержать эндогенные контаминанты, такие, как эндогенные ретровирусы. Стратегия испытаний в отношении контаминации должна быть разработана на основе принципов управления рисками для качества с учётом природы и истории клеточной линии.

Питательные среды и другое исходное сырьё

Надлежащий контроль качества обеспечивают для питательных сред и всего исходного сырья (реактивы, сыворотки, добавки и др.), используемых при производстве рекомбинантных продуктов, с учётом их влияния на качество, безопасность и эффективность целевого продукта. В частности, должно быть известно происхождение исходного сырья и задокументирована его прослеживаемость.

Культивирование клеток и этап сбора продукта

Банк клеток (например, один или более контейнеров РБК или ГБК) используют для начала процесса культивирования. Определяют параметры производственного процесса и порядок внутрипроизводственного контроля (например, для этапа удвоения популяции клеток, достижения определённойконцентрации клеток, объёмов, рН, времени культивирования, температуры, микробиологических испытаний) с целью обеспечения надлежащей производительности и последовательности этапов процесса культивирования.

Критерии сбора продукта и завершения культивирования определяет производитель с учётом предельного возраста клеток in vitro (например, определённого количества пассажей или времени удвоений популяции при однократном или многократном сборе продукта), при котором клеточный субстрат показал стабильность и способность производить целевой или промежуточный продукт.

Каждый сбор продукта проверяют на отсутствие контаминации. Отсутствие контаминации при производстве подтверждают, в первую очередь, путём испытания на микробиологическую чистоту. В случае использования клеток животных отсутствие контаминации дополнительно проверяют с помощью соответствующих методов при культивировании клеток in vitro или молекулярно-биологических методов.

Необходим сбор данных о молекулярной целостности экспрессируемого гена и о значимых фенотипических и генотипических маркерах штамма-продуцента. Каждый сбор проверяется на содержание целевого продукта, микробиологическую чистоту, наличие эндотоксинов и микоплазмы. Рутинный контроль на посторонние вирусы выполняется на определённом этапе в зависимости от производственной схемы и природы используемых материалов. Критерии приемлемости определяются установленной процедурой мониторинга.

Сборы продукта могут быть объединены перед началом процедуры очистки.

Очистка

Должно быть подтверждено, что процедуры выделения и очистки позволяют получить планируемые промежуточные продукты надлежащей чистоты. Для этого должен быть проведен анализ процедур, предпринятых как для контроля родственных примесей и родственных соединений, так и для удаления или инактивации производственных примесей и контаминантов.

Испытания для определения содержания белков клеток-хозяина, ДНК штамма-продуцента, а также иных посторонних примесей, связанных с процессом производства, проводят на достаточном количестве партий (не менее 5) продукта или серий субстанции (конечного балка). Содержание остаточной ДНК штамма-продуцента, белков клеток-хозяина и других примесей не должно превышать установленных значений.

Для обеспечения постоянства и надлежащего качества процесса очистки устанавливают внутрипроизводственный контроль для соответствующих параметров и периодичности этапов (например, для выхода, объёма, pH, времени обработки, температуры, профиля элюирования и отбора фракций, микробиологических испытаний). Для подтверждения получения целевого продукта с заданными характеристиками и чистотой так же проводится контроль гетерогенных белков и веществ, используемых при очистке, контролируется содержание целевого продукта, родственных соединений.

Если применимо, определяют и подтверждают условия и срок хранения промежуточных продуктов или возможность проведения повторной обработки.

СТАНДАРТНЫЕ ОБРАЗЦЫ

В качестве стандартного образца для идентификации, количественного определения и других испытаний может быть использована серия лекарственного средства с доказанной стабильностью и репрезентативностью по отношению к сериям, прошедшим клинические исследования, или репрезентативная серия фармацевтической субстанции. Стандартный образец характеризуют надлежащим образом в соответствии с фармакопейными требованиями.

ХАРАКТЕРИСТИКА ПРОДУКТА

В процессе фармацевтической разработки необходимо получить подробную характеристику продукта, включая определение его структуры, физико-химических, биологических, иммунохимических свойств и чистоты.

Характеристика необходима для определения показателей качества, важных для безопасности и эффективности лекарственного препарата. Полученная информация обеспечивает основу для обоснования перечня показателей качества, включаемых в спецификации на выпуск, оценки стабильности и проведения любых испытаний, которые могут потребоваться для подтверждения приемлемости изменений процесса производства.

Структура

Необходимо максимально полно охарактеризовать первичную структуру целевого продукта и структуры более высокого порядка, любые посттрансляционные модификации, например, гликозилирование, а также преднамеренные модификации целевого продукта.

Аминокислотную последовательность устанавливают на основании последовательности ДНК вектора экспрессии и подтверждают испытанием полученного продукта. Аминокислотную последовательность и дисульфидные связи продукта определяют с помощью комбинации таких методов, как пептидное картирование (ОФС «Пептидное картирование») и масс-спектрометрия (ОФС «Масс-спектрометрия») и др.

Испытания пегилированных белков должны включать в себя определение участка модификации и степени занятости сайта, но не ограничиваться этим.

Характеристика гликозилирования должна включать определение общего состава моносахаридов (нейтральные сахара, аминосахара и сиаловые кислоты), сайтов связывания, типа гликозилирования (например, N- или O-гликозилирование), степени занятости сайта и олигосахаридных структур гликановых цепей (удлинения, протяжённости, разветвлённости, типа соединения).

Особое внимание необходимо уделить гликановым структурам, нехарактерным для природных белков человека, в связи с их возможной иммуногенностью, а также гликанам, оказывающим влияние на активность продукта.

Определение конформации белка проводят с использованием комбинации подходящих физико-химических методов, например, спектроскопия кругового дихроизма, инфракрасная спектроскопия с Фурье-преобразованием, флуоресценция, дифференциальная сканирующая калориметрия, спектрометрия протонного ядерного магнитного резонанса и/или масс-спектрометрия водородно-дейтериевого обмена и др.

Необходимо изучение состава форм белка с различным зарядом (заряженных изоформ). Влияние изоформенного состава на безопасность и эффективность целевого продукта должно быть подтверждено в надлежащих испытаниях.

Биологические испытания, связанные с определением функциональной активности, также могут служить дополнительным подтверждением конформации белка.

Активность

Активность (уникальную способность продукта вызывать определённый фармакологический эффект) оценивают биологическими и биохимическими (включая иммунохимические методы) методами, в зависимости от природы и свойств продукта.

Механизм действия продукта должен быть изучен и охарактеризован, при возможности, в соответствующих испытаниях активности.

Иммунохимические свойства

Должны быть представлены данные по сравнению аффинности к их мишеням для целевого продукта, родственных соединений и родственных примесей.

Если иммунохимические свойства имеют отношение к механизму действия, в частности, для антител, то их необходимо тщательно охарактеризовать (например, определение Fc-эффекторной функции).

Родственные примеси и родственные соединения

Продукты, получаемые с помощью технологии рДНК, обычно имеют несколько источников гетерогенности (например, N-концевой или
C-концевой процессинг, N-концевое пироглутамирование, дезамидирование, окисление, изомеризация, фрагментация, нарушения положения дисульфидных связей, N- и О-гликозилирование, гликирование, агрегация), что приводит к сложному профилю продукта, состоящему из нескольких сходных молекулярных соединений или молекулярных вариантов.

Если безопасность и эффективность таких молекулярных вариантов сопоставимы с продуктом и не имеют негативного влияния на безопасность и эффективность лекарственного препарата, то их относят к родственным соединениям и не рассматривают в качестве примесей.

Другие молекулярные варианты, которые не обладают сопоставимыми с целевым продуктом активностью, безопасностью и эффективностью, рассматривают как родственные примеси.

Методы, используемые для оценки родственных соединений и родственных примесей, должны быть способны выявлять структурные варианты с различными физико-химическими свойствами, например, зарядом, размером и гидрофобностью. Общепринятым подходом является применение комбинации ортогональных методов, например, хроматографических, электрофоретических и спектроскопических.

Определение особенностей молекулярных вариантов продукта по заряду, например, после различного сиалилирования или дезамидирования, N- или C-концевого процессинга, выполняют соответствующими методами (капиллярного электрофореза, изоэлектрического фокусирования, ионообменной хроматографии и др.), которые можно использовать совместно с другими методами, например, такими как масс-спектрометрия.

Высокомолекулярные формы продукта, такие как димеры и олигомеры более высокого порядка, могут быть разделены и количественно определены с помощью методов разделения по размеру (например, эксклюзионной хроматографии, проточного фракционирования в поперечных полях, аналитического ультрацентрифугирования) в сочетании с подходящими методами детектирования (например, ультрафиолетовой спектрофотометрии, флуориметрии, светорассеяния).

Производственные примеси и контаминанты

Примеси, связанные с производственным процессом (производственные примеси), могут включать белки клетки-хозяина, ДНК штамма-продуцента и компоненты питательной среды (например, индукторы, антибиотики, сыворотки). Производственные примеси должны быть оценены качественно и количественно.

Остаточные белки клеток-хозяина определяют с помощью подходящего чувствительного и надёжного испытания, способного обнаруживать широкий спектр белковых примесей.

Остаточную ДНК штамма-продуцента определяют с помощью специфичных количественных методов с достаточной чувствительностью в соответствии с рекомендациями ОФС «Определение и характеристика остаточной ДНК клетки-хозяина».

Примеси, образующиеся в ходе производственного процесса, могут включать ферменты, реактивы (например, гуанидин), красители, окислители и восстановители, антибиотики, соли (например, тяжёлых металлов), растворители, лиганды (например, протеин А) и другие вещества.

Контаминанты (загрязняющие вещества) включают в себя все случайно попавшие в продукт вещества, не предназначенные для использования в производственном процессе (например, микроорганизмы, ферменты, бактериальные эндотоксины).

Примеси, связанные с производственным процессом, и контаминанты контролируют с помощью надлежащих стратегий, основанных на принципах управления рисками.

Содержание белка

Количественное определение белка проводят с помощью соответствующих физико-химических или иммунохимических методов. Содержание общего белка (выраженное в единицах массы) может определяться с помощью методов, представленных в ОФС «Определение белка».

При необходимости могут применяться другие методы с использованием подходящего стандартного образца (например, хроматография). Для модифицированных белков количественное определение относится только к белковой части молекулы.

СТРАТЕГИЯ КОНТРОЛЯ

На основе знаний о рекомбинантном продукте и производственном процессе устанавливают запланированный комплекс мероприятий контроля, обеспечивающих эффективность производства и качество конечной продукции (т.е. стратегию контроля). Стратегия контроля должна включать в себя контроль параметров процесса, контроль в процессе производства, контроль исходного сырья, промежуточных продуктов, фармацевтической субстанции и лекарственного препарата, а также используемые методы и частоту контроля.

Стратегия контроля должна гарантировать, что характеристики качества, имеющие отношение к безопасности и эффективности, находятся в пределах допустимого диапазона изменчивости каждого параметра процесса, исходя из степени его влияния на ожидаемое качество лекарственного препарата.

Выбор испытаний и этапов, на которых их проводят, должен быть основан на знании производственного процесса и всесторонней характеристике фармацевтической субстанции и лекарственного препарата. Часть испытаний отбирают для включения в спецификации. Спецификации на фармацевтическую субстанцию и лекарственный препарат, полученные с использованием технологии рДНК, являются одной из частей общей стратегии контроля.

ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ СУБСТАНЦИЯ

Если фармацевтическая субстанция содержит конъюгированный или химически модифицированный белок (например, пегилированный белок), соответствующие испытания должны быть проведены как для модифицированного, так и для немодифицированного продукта. Проводят испытания для молекулярных вариантов, родственных продукту (например, соотношение модифицированного и немодифицированного белка) и для производственных примесей, полученных в результате модификации (например, побочные продукты модификации, реагенты) и устанавливают критерии их приемлемости.

ГОТОВЫЙ НЕРАСФАСОВАННЫЙ ПРОДУКТ

Для получения готового нерасфасованного продукта могут быть объединены одна или несколько серий фармацевтической субстанции. В процессе его получения могут быть добавлены подходящие стабилизаторы или другие вспомогательные вещества.

Готовый нерасфасованный продукт должен храниться с соблюдением валидированных условий, обеспечивающих микробиологическую чистоту/стерильность и стабильность.

Готовый нерасфасованный продукт должен отвечать установленным требованиям, которые формируются на основании его характеристик и результатов валидации технологического процесса и стабильности.

Формирование партии (серии) должно быть установлено и документировано.

ЛЕКАРСТВЕННЫЙ ПРЕПАРАТ

Для получения лекарственного препарата может быть использована одна или объединены несколько серий фармацевтической субстанции. В процессе его получения допустимо добавление соответствующих стабилизаторов и других вспомогательных веществ.

Лекарственный препарат должен отвечать требованиям общих фармакопейный статей для соответствующих лекарственных форм, соответствующих фармакопейных статей, а также следующим положениям.

Идентификация

Методы подтверждения подлинности должны быть специфичными и основанными на уникальных особенностях молекулярной структуры, биологических свойствах или других свойствах молекулы, таких как, размер, первичная структура, изоэлектрический профиль, хроматографические свойства и функциональная конформация, используя, где применимо, стандартный образец. Методы, используемые при определении активности или чистоты, также можно использовать для их идентификации.

Испытания

Используют комплекс надлежащих методов, позволяющих определить производственные примеси, родственные примеси и родственные соединения (например, возникающие в результате укорачивания, фрагментации, агрегации, окисления, дезамидирования продукта и др.), и устанавливают критерии их приемлемости. Выбор комплекса методов должен быть обоснован.

Испытания для модифицированных белков. Проводят в зависимости от типа модификации белка в конкретном лекарственном препарате. Пределы содержания должны быть установлены.

Количественное определение

Содержание. Содержание фармацевтической субстанции должно соответствовать пределам, утверждённым для конкретного лекарственного препарата. Обычно оно основано на определении содержания белка и выражается в единицах массы. Могут быть использованы методы, представленные в ОФС «Определение белка». При необходимости, могут применяться другие методы с использованием подходящего стандартного образца, например, жидкостная хроматография. Для модифицированных белков количественное определение относится только к белковой части молекулы.

Активность. Активность устанавливают подходящим специфичным методом в испытаниях с использованием стандартного образца и количественно оценивают по сравнению с активностью стандартного образца. Для вычисления и обработки результатов испытаний используют подходящие статистические методы.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.7.1.0014 МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА ДЛЯ МЕДИЦИНСКОГО ПРИМЕНЕНИЯ

Взамен ОФС.1.7.1.0014.18

Общая фармакопейная статья распространяется на лекарственные средства на основе моноклональных антител, в том числе конъюгированных, которые применяют для лечебных, профилактических целей, и для диагностики in vivo. Требования и положения данной общей фармакопейной статьи не применяют к моноклональным антителам, используемым в качестве реактивов при производстве лекарственных препаратов, а также к получаемым из асцитической жидкости моноклональным антителам, требования к которым устанавливаются уполномоченным органом.

###### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Моноклональные антитела для медицинского применения представляют собой иммуноглобулины или фрагменты иммуноглобулинов, например, F(ab')2, с установленной специфичностью, продуцируемые одним клоном клеток. Они могут быть конъюгированы с другими веществами, включая изотопы, предназначенные для радиоактивных меток. В испытаниях при подходящих условиях практически не содержат посторонних частиц.

Моноклональные антитела могут быть получены из иммортализованных В-лимфоцитов, клонированных и воспроизведённых в виде непрерывных линий клеток, или из линий клеток, созданных c использованием технологии рекомбинантной ДНК (рДНК).

В настоящее время с использованием технологии рДНК получают следующие типы моноклональных антител:

- химерные моноклональные антитела, в которых вариабельные домены тяжёлых и лёгких цепей антител человека замещаются на соответствующие домены антител другого видового происхождения, обладающие необходимой антигенной специфичностью;

- гуманизированные моноклональные антитела, в которых три короткие гипервариабельные последовательности (участки, определяющие комплементарность) вариабельных доменов каждой цепи антитела другого видового происхождения встраиваются в структуру вариабельных доменов антитела человека; для улучшения связывания антигенов могут быть произведены и другие изменения последовательности;

- рекомбинантные моноклональные антитела человека, в которых вариабельные домены тяжёлых и лёгких цепей антитела человека комбинируются с постоянными (константными) доменами антитела человека.

Моноклональные антитела, полученные из линий клеток, модифицированных по технологии рДНК, также должны соответствовать требованиям и положениям ОФС «Лекарственные средства, получаемые с использованием технологии рекомбинантной ДНК».

###### ПРОИЗВОДСТВО

ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

Производство основано на системе посевных материалов с использованием главного банка клеток и, при необходимости, рабочего банка клеток, полученных из клонированных клеток. Технологию производства валидируют при фармацевтической разработке с целью предупреждения передачи инфекционных возбудителей с лекарственным препаратом. Все биологические материалы и клетки, используемые в производстве, должны быть охарактеризованы и соответствовать требованиям общей фармакопейной статьи ОФС «Минимизация риска контаминации лекарственных препаратов возбудителями губчатой энцефалопатии животных». При использовании в производстве моноклональных антител для медицинского применения материалов животного или человеческого происхождения также применяют требования ОФС «Вирусная безопасность». При использовании иммунизирующего антигена определяют его характеристики и документируют метод иммунизации.

Валидация процесса. При разработке лекарственного средства процесс производства валидируют по следующим аспектам:

- постоянство процесса производства, включая этапы культивирования клеток и ферментацию, очистку и, если применимо, метод фрагментации;

- удаление или инактивация инфекционных агентов;

- надлежащее удаление родственных и производственных примесей (например, остаточные белки и ДНК клетки-хозяина, протеин А, антибиотики, компоненты культуральной среды);

- специфичность и биологическая активность моноклонального антитела;

- отсутствие пирогенных веществ неэндотоксиновой природы, если применимо;

- возможность повторного использования компонентов системы очистки (например, материал колонки); предельное содержание или критерии приемлемости устанавливают на основании результатов валидации;

- используемые методы конъюгирования, если применимо.

Определение характеристик продукта (моноклонального антитела). Продукт исследуют для получения объективной информации о его структурной целостности, изотипе, аминокислотной последовательности, вторичной структуре, углеводной части молекул, дисульфидных связях, конформации, специфичности, аффинности, биологической активности и гетерогенности (характеристика изоформ).

Используют ряд подходящих аналитических методов, включая химические, физические, иммунохимические, биологические (например, пептидное картирование, секвенирование N- и C-концевых аминокислот, масс-спектрометрия, хроматографические, электрофоретические, спектроскопические методы). Для получения информации о перекрёстной реактивности с тканями человека проводят дополнительные испытания.

Для продуктов, модифицированных путём фрагментации или конъюгации, также характеризуют влияние используемых методов на моноклональное антитело.

Промежуточные продукты. При хранении промежуточных продуктов, для каждого из них устанавливают срок годности или период хранения, обоснованные данными стабильности.

Количественное определение биологическими методами. Испытания выбирают, исходя из предполагаемого механизма действия моноклонального антитела.

Стандартные образцы. Для идентификации, количественного определения и других испытаний утверждают стандартный образец, полученный из серии препарата с доказанной стабильностью и эффективностью в клинических исследованиях или репрезентативной ей. Исследования стандартного образца проводят в соответствии с требованиями раздела «Определение характеристик продукта (моноклонального антитела)», при этом перекрёстную реактивность нет необходимости определять для каждой серии стандартного образца.

Определение серии. На протяжении всего производственного процесса должно быть определено, что принимается за серию лекарственного средства.

ИСТОЧНИКИ КЛЕТОК

К источникам клеток относят участников слияния, лимфоциты, миеломные клетки, фидерные клетки и клетки-хозяина для экспрессии рекомбинантных моноклональных антител.

Происхождение и характеристики родительских клеток должны быть задокументированы, включая информацию о состоянии здоровья доноров и об используемых участниках слияния (например, линия миеломных клеток, линия лимфобластоидных В-клеток человека).

По возможности исходные клетки подвергают соответствующему скринингу на наличие посторонних и эндогенных контаминирующих агентов. Выбор вирусов для испытаний зависит от вида и происхождения тканей.

КЛЕТОЧНАЯ ЛИНИЯ, ПРОДУЦИРУЮЩАЯ МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА

Пригодность клеточной линии, продуцирующей моноклональные антитела, подтверждают:

- документально по истории клеточной линии, включая описание слияния клеток, иммортализацию или трансфекцию и процедуру клонирования;

- характеристикой клеточной линии (например, фенотип, анализ изоферментов, иммунохимические и цитогенетические маркеры);

- характеристикой соответствующих особенностей антител;

- постоянством критических показателей качества антитела до или после удвоения уровня популяции или количества генераций, используемых в рутинном производстве;

- для продуктов, полученных с использованием технологии рДНК, постоянством кодирующей экспрессионной конструкции в клетках, культивируемых до предельного для производства клеточного возраста in vitro (или более) или других целей, путём проведения либо испытания на нуклеиновые кислоты, либо количественного определения моноклонального антитела.

БАНКИ КЛЕТОК

Главный банк клеток представляет собой гомогенную суспензию клеточной линии, продуцирующей моноклональные антитела, помещённую в равных объёмах в индивидуальные контейнеры для хранения в рамках одной операции.

Рабочий банк клеток представляет собой гомогенную суспензию клеточной линии, полученной из главного банка клеток при установленном уровне пассажей и помещённых в равных объёмах в индивидуальные контейнеры для хранения в рамках одной операции.

Послепроизводственные клетки представляют собой клетки, культивированные вплоть до (или более) уровня удвоения популяции клеток или количества генераций, используемых в рутинном производстве.

Для контроля главного банка клеток проводят испытания на жизнеспособность, подлинность, отсутствие бактериальной, грибковой и микоплазменной контаминации, определение характеристик продуцируемых моноклональных антител. Контаминацию посторонними вирусами определяют с помощью ряда подходящих испытаний in vivo и in vitro, а контаминацию ретровирусами и другими эндогенными вирусами – с использованием ряда подходящих испытаний in vitro.

Для контроля рабочего банка клеток проводят испытания на жизнеспособность, подлинность, отсутствие бактериальной, грибковой и микоплазменной контаминации. Контаминацию посторонними вирусами определяют с помощью ряда подходящих испытаний in vivo и in vitro. Для первого рабочего банка клеток данные испытания выполняют на послепроизводственных клетках, полученных из этого рабочего банка клеток. Для последующих рабочих банков клеток могут быть проведены единичные испытания in vivo и in vitro, либо непосредственно на клетках рабочего банка, либо на послепроизводственных клетках.

Если при подготовке главного и рабочего банков клеток использовали потенциально контаминированный биологический материал, проводят испытания на наличие отдельных вирусов с учётом происхождения данного материала. Допускается не проводить испытание, если инактивацию материала выполняют с использованием валидированных методик.

Для контроля послепроизводственных клеток проводят испытания на отсутствие бактериальной, грибковой и микоплазменной контаминации. Контаминацию посторонними вирусами определяют с помощью ряда подходящих испытаний in vivo и in vitro, а контаминацию ретровирусами и другими эндогенными вирусами – с использованием ряда подходящих испытаний in vitro.

###### КУЛЬТИВИРОВАНИЕ И СБОР БИОМАССЫ

ПРОИЗВОДСТВО С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ОГРАНИЧЕННОГО КОЛИЧЕСТВА ПАССАЖЕЙ (ОДНОКРАТНЫЙ СБОР)

Клетки культивируют до установленного максимального количества пассажей, или до удвоения популяции, или до заданного времени сбора биомассы (в соответствии со стабильностью клеточной линии). Сбор биомассы осуществляют в рамках одной операции.

ПРОИЗВОДСТВО С НЕПРЕРЫВНЫМ КУЛЬТИВИРОВАНИЕМ (МНОГОКРАТНЫЙ СБОР)

Клетки культивируют непрерывно в течение установленного периода времени (в соответствии со стабильностью системы и постоянством производства). Мониторинг необходимо проводить на протяжении всего периода культивирования. Требуемая частота и тип мониторинга будут зависеть от природы производственной системы.

Для контроля каждого сбора проводят испытания на содержание антител, бионагрузку, присутствие эндотоксинов и микоплазм. Общие или специфические испытания на посторонние вирусы проводят на соответствующей технологической стадии в зависимости от характера производственного процесса и используемых материалов. При производстве с использованием ограниченного количества пассажей (однократный сбор) посторонние вирусы определяют не менее чем в трёх сборах с помощью ряда подходящих испытаний in vitro.

Критерии пригодности сбора биомассы для дальнейшей обработки должны быть чётко определены и связаны с применяемым графиком мониторинга. При обнаружении любых посторонних вирусов процесс тщательно исследуют для установления причины контаминации, и дальнейшую обработку собранной биомассы не проводят. Сбор биомассы, в котором обнаружены эндогенные вирусы, не используют для очистки, если не определён план соответствующих мероприятий по предотвращению передачи инфекционных агентов.

###### ОЧИСТКА

Сборы биомассы или промежуточные пулы могут быть объединены перед дальнейшей обработкой. Процесс очистки включает этапы удаления и (или) инактивации безоболочечных и оболочечных вирусов. Для очистки используют валидированный процесс с подтверждённой эффективностью по удалению и (или) инактивации инфекционных агентов, родственных и производственных примесей. Чётко разработанные этапы процесса обеспечивают получение очищенных моноклональных антител (активной фармацевтической субстанции) с постоянным качеством и биологической активностью.

###### ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ СУБСТАНЦИЯ

Программа испытаний фармацевтической субстанции зависит от результатов валидации производственного процесса, подтверждения его постоянства и предполагаемого уровня родственных и производственных примесей. Испытания фармацевтической субстанции включают описание внешнего вида, идентичность, бионагрузку и бактериальные эндотоксины, родственные соединения, родственные и производственные примеси (включая белки клетки-хозяина и ДНК клетки-хозяина), а также структурную целостность, содержание белка и биологическую активность с помощью подходящих аналитических методов, сравнивая со стандартным образцом, где это необходимо. Если фармацевтическая субстанция содержит конъюгированные или модифицированные антитела, должны быть выполнены соответствующие испытания до и после конъюгации или модификации.

Если предполагается хранение промежуточных продуктов, проводят оценку их стабильности и влияния на качество или срок годности лекарственного препарата.

###### ГОТОВЫЙ НЕРАСФАСОВАННЫЙ ПРОДУКТ

Для получения готового нерасфасованного продукта может быть использована одна или объединены несколько серий фармацевтической субстанции. В процессе получения готового нерасфасованного продукта допустимо добавление соответствующих стабилизаторов и других вспомогательных веществ.

Готовый нерасфасованный продукт должен храниться в условиях, валидированных в отношении бионагрузки и стабильности.

###### ЛЕКАРСТВЕННЫЙ ПРЕПАРАТ

Готовый нерасфасованный продукт стерилизуют методом мембранной фильтрации и расфасовывают в асептических условиях в стерильные первичные упаковки, затем могут быть подвергнуты лиофилизации.

В рамках внутрипроизводственного контроля каждую упаковку (флакон, шприц или ампула) после заполнения осматривают, удаляя из серии («отбраковывая») те из них, которые содержат видимые частицы.

При разработке лекарственного препарата должно быть доказано, что в процессе его производства и хранения не происходит образования видимых белковых частиц или их количество снижено до обоснованного и разрешённого уровня.

ОПИСАНИЕ

Лекарственные препараты в жидкой лекарственной форме представляют собой прозрачную или опалесцирующую, бесцветную или слабоокрашенную жидкость.

Лекарственные препараты в виде лиофилизата представляют собой белый или слабоокрашенный порошок, или твёрдую рыхлую массу. После растворения лиофилизаты имеют те же характеристики, что и лекарственные препараты в жидкой лекарственной форме.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Подлинность устанавливают с помощью подходящих валидированных методов, используя, где применимо, стандартный образец. Количественное определение также позволяет подтвердить подлинность.

ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»). Жидкие или восстановленные лиофилизированные препараты должны соответствовать установленным для конкретного лекарственного препарата нормам.

Цветность (ОФС «Степень окраски жидкостей»). Жидкие или восстановленные лиофилизированные препараты должны соответствовать установленным для конкретного лекарственного препарата нормам.

Видимые механические включения (ОФС «Видимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения и глазных лекарственных формах»). Если иное не обосновано, лекарственный препарат должен выдерживать испытание.

Требования не распространяются на лекарственные препараты, на маркировке которых указано, что они должны использоваться с конечным фильтром, при условии, что фильтр обеспечивает получение раствора, выдерживающего данное испытание.

Время растворения (ОФС «Время растворения или диспергирования»). Лекарственные препараты в виде лиофилизатов должны полностью растворяться в указанном объёме растворителя в течение установленного времени.

рН (ОФС «Ионометрия»). Лекарственный препарат должен соответствовать установленным требованиям.

Осмоляльность (ОФС «Осмолярность»). Не менее 240 мОсмоль/кг, если иное не обосновано и не разрешено.

Извлекаемый объём (ОФС «Испытание на извлекаемый объём лекарственных препаратов для парентерального применения»). Лекарственный препарат должен выдерживать испытание.

Общий белок (ОФС «Определение белка»). Лекарственный препарат должен соответствовать установленным требованиям.

Молекулярно-массовое распределение. Определяют молекулярно-массовое распределение подходящим методом, например, методом гель-хроматографии (ОФС «Эксклюзионная хроматография»). Лекарственный препарат должен соответствовать установленным требованиям.

Молекулярная идентичность и структурная целостность. В зависимости от природы моноклонального антитела, его микрогетерогенности и изоформ для подтверждения молекулярной идентичности и структурной целостности может быть использован ряд различных испытаний. Такие испытания могут включать пептидное картирование, изоэлектрическое фокусирование, ионообменную хроматографию, хроматографию гидрофобных взаимодействий, олигосахаридное картирование, определение содержания моносахаридов, масс-спектрометрию.

Чистота. Испытания по определению родственных и производственных примесей проводят подходящими валидированными методиками. Если испытания по определению производственных примесей были проведены на фармацевтической субстанции или готовом нерасфасованном продукте с удовлетворительным результатом, эти испытания могут не проводиться на лекарственном препарате.

Стабилизатор. Где применимо, лекарственные препараты должны соответствовать установленным требованиям.

Вода (ОФС «Определение воды»). Лиофилизированные лекарственные препараты должны соответствовать установленным требованиям.

Стерильность (ОФС «Стерильность»). Лекарственные препараты должны выдерживать испытания на стерильность.

Бактериальные эндотоксины (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Лекарственные препараты должны соответствовать установленным требованиям.

Испытания, применяемые к модифицированным антителам. Выполняют соответствующие испытания в зависимости от типа модификации.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Испытания проводят подходящим биологическим методом в сравнении со стандартным образцом. Разработку методики испытания и расчёт результатов выполняют в соответствии с общепринятыми принципами (например, ОФС «Статистическая обработка результатов определения специфической фармакологической активности лекарственных средств биологическими методами»).

ХРАНЕНИЕ

В соответствии с указаниями на упаковке.

Срок годности рассчитывают с даты стерилизующей фильтрации, даты розлива (для жидких препаратов) или даты лиофилизации (где применимо).

###### МАРКИРОВКА

Указывают:

- количество единиц на миллилитр, где применимо;

- содержание белка в первичной упаковке;

- содержание (активность) моноклональных антител в первичной упаковке;

- для жидких лекарственных препаратов объём препарата в первичной упаковке;

- для лиофилизированных препаратов:

- название и объём растворителя;

- период времени, в течение которого лекарственный препарат (моноклональное антитело) должен быть использован после восстановления;

- разбавление лекарственного препарата перед применением, если применимо;

- использование конечного фильтра для раствора, если применимо.

________________________________________________________________________________________________________________

##### 1.7.1.1. Иммунобиологические лекарственные препараты

##### 1.7.1.2. Методы анализа иммунобиологических лекарственных препаратов

#### 1.7.2. Лекарственные препараты из крови и плазмы крови человека и методы их анализа

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

##### ОФС.1.7.2.0001 СТАДА ПТИЦ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА И КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА ВАКЦИН, НЕ СОДЕРЖАЩИЕ ОПРЕДЕЛЕННЫХ ПАТОГЕНОВ

Общая фармакопейная статья описывает требования к стадам птиц (кур, перепелов) для производства и контроля качества вакцин.

Птенцов, эмбрионы или культуры клеток, используемые при производстве или контроле качества вакцин, получают из яиц птиц, «не содержащих определённых патогенов» (SPF – specified pathogens free, далее – категория СПФ). Для подтверждения соответствия стада птиц категории СПФ используют систему контроля. Перечень определённых патогенов, подлежащих контролю, составлен с учётом современных знаний и, при необходимости, может обновляться.

Стадо птиц категории СПФ содержат в одинаковых условиях с минимальным риском контаминации. Технический персонал не должен иметь контактов со стадами птиц без категории. После присвоения стаду птиц категории СПФ к нему не добавляют птиц, не имеющих соответствующей категории.

Стада птиц категории СПФ нельзя размещать вблизи стад птиц без категории СПФ. Исключение составляют стада в процессе присвоения категории или содержащиеся в помещениях и условиях, соответствующих категории СПФ. Стадо содержат в изоляторе или в помещениях с фильтруемым воздухом и поддержанием разницы давления. В помещения не допускают лиц без соответствующего разрешения. Принимают необходимые меры для предотвращения проникновения грызунов, диких птиц, насекомых.

Персонал, имеющий разрешение на вход в помещение, не должен иметь контактов с другими птицами или носителями инфекции, потенциально способными инфицировать стадо. Перед входом в помещения персоналу рекомендуют принять душ и переодеться.

При возможности предметы, которые вносят в помещение, стерилизуют. В частности, рекомендуют обрабатывать корм соответствующим образом для предотвращения контаминации нежелательными микроорганизмами. Используемая вода должна соответствовать требованиям к воде питьевой. У птиц из стада категории СПФ не применяют лекарственные препараты, которые могут препятствовать выявлению заболевания. Птиц из стада категории СПФ не иммунизируют.

Сведения о здоровье стада постоянно регистрируют, любые отклонения от нормы расследуют. Основные параметры наблюдения включают: заболеваемость, смертность, общее физическое состояние, потребление корма, ежедневную яйценоскость, выводимость птенцов и качество яиц. Записи сохраняют в течение 5 лет. О любых отклонениях или при обнаружении какой-либо инфекции сообщают потребителям яиц в возможно короткие сроки.

Испытания, представленные в данной общей фармакопейной статье, должны обладать соответствующей специфичностью и чувствительностью к определённым серотипам вирусов. Испытуемые образцы отбирают случайным образом.

###### СОЗДАНИЕ СТАДА КАТЕГОРИИ СПФ

Стада категории СПФ создают из птиц, проверка которых подтверждает отсутствие вертикально передающихся инфекций, возбудители которых приведены в табл. 1.

Таблица 1. Перечень патогенов, подлежащих контролю
Возбудитель | Методы испытания* | Вертикальный путь передачи | Распространение
--- | --- | --- | ---
Аденовирусы птиц, группа 1 (Avian adenoviruses, group 1) | РДП, ИФА | да | медленное
Вирус энцефаломиелита птиц (Avian encephalomyelitis virus) | РДП, ИФА | да | быстрое
Вирус инфекционного бронхита птиц (Avian infectious bronchitis virus) | РТГА, ИФА | нет | быстрое
Вирус инфекционного ларинготрахеита птиц (Avian infectious laryngotracheitis virus) | Реакция нейтрализации вируса, ИФА | нет | медленное
Вирус лейкоза птиц (Avian leucosis viruses) | ИФА для вируса, реакция нейтрализации вируса, ИФА для антител | да | медленное
Вирус нефрита птиц (Avian nephritis virus) | ИО | нет | медленное
Ортореовирусы птиц (Avian orthoreoviruses) | ИО, ИФА | да | медленное
Вирус ретикулоэндотелиоза птиц (Avian reticuloendotheliosis virus) | РДП, ИФА | да | медленное
Ротавирус птиц (Avian rotavirus) | РДП, ИФА (группа А) | нет | быстрое
Вирус анемии цыплят (Chicken anaemia virus) | ИО, ИФА, реакция нейтрализации вируса | да | медленное
Вирус синдрома снижения яйценоскости (Egg drop syndrome virus) | РТГА, ИФА | да | медленное
Вирус оспы домашней птицы (Fowl-pox virus) | РДП, ИО, ИФА | нет | медленное
Вирус инфекционного бурсита птиц (Infectious bursal disease virus) | Серовар 1: РДП, ИФА, реакция нейтрализации вируса Серовар 2: реакция нейтрализации вируса | нет | быстрое
Вирус гриппа А (Influenza A virus) | РДП, ИФА, РТГА | нет | быстрое
Вирус болезни Марека (Marek’s disease virus) | РДП | нет | быстрое
Вирус болезни Ньюкасла (Newcastle disease virus) | РТГА, ИФА | нет | быстрое
Вирус ринотрахеита индеек (птиц) (Turkey rhinotracheitis virus) | ИФА | нет | медленное
Микоплазмы птиц (Mycoplasma gallisepticum, Mycoplasma synoviae и др.) | РА и РТГА для подтверждения положительного результата, ИФА, РТГА, ПЦР/ПЦР в реальном времени | да | медленное, быстрое
Salmonella Pullorum | РА | да | медленное

* Допустимо использование других методов испытаний при условии, что они не менее чувствительны и специфичны, чем представленные в данной общей фармакопейной статье

РА – реакция агглютинации

РДП – реакция диффузной преципитации в геле; данный метод применим для еженедельных исследований

ИФА – иммуноферментный анализ

РТГА – реакция торможения гемагглютинации

ИО – иммуноокрашивание

ПЦР – полимеразная цепная реакция

Испытания проводят на двух поколениях птиц, предшествующих формированию стада категории СПФ. Процедуры присвоения и поддержания категории СПФ у стад птиц приведены в таблице 2.

Таблица 2. Описание процедуры присвоения и поддержания категории СПФ у стад птиц
Поколение птиц | Описание процедуры
--- | ---
Новые птицы | Подтверждают отсутствие возбудителей, передающихся вертикальным путём
Проверяют всех птиц в возрасте до 20 нед. жизни на отсутствие вируса лейкоза птиц и антител к нему
Проводят испытания на наличие Salmonella spp. и общее клиническое обследование у всех птиц с 8-нед. возраста
Проводят рутинные испытания на наличие определённых возбудителей у всех птиц с 20-нед. возраста
Второе поколение | Проводят испытания на отсутствие вируса лейкоза птиц и антител к нему у всех птиц в возрасте до 20 нед. жизни
Проводят испытания на наличие Salmonella spp. и общее клиническое обследование у всех птиц с 8-нед. возраста
Проводят рутинные испытания на наличие определённых возбудителей у всех птиц с 20-нед возраста
Третье поколение | Проверяют на отсутствие вируса лейкоза птиц и антител к нему у всех птиц в возрасте до 20 нед. жизни
Проводят испытания на наличие Salmonella spp. и общее клиническое обследование у всех птиц с 8-нед. возраста
Если результаты всех испытаний соответствуют требованиям, то стаду присваивают категорию СПФ
Третье поколение | Проводят рутинные испытания на наличие определённых возбудителей у всех птиц с 20-нед. возраста
Проводят испытания после яйцекладки на наличие возбудителей, передающихся вертикальным путём
Последующие поколения | Проводят испытания на отсутствие вируса лейкоза птиц и антител к определённым инфекционным возбудителям у 5 % птиц в возрасте от 12 до 20 нед., дважды
Проводят испытания на наличие Salmonella spp. и общее клиническое обследование у всех птиц с 8-нед. возраста
Проводят рутинные испытания на наличие определённых инфекционных возбудителей у всех птиц с 20-нед. возраста
Проводят испытания после яйцекладки на наличие возбудителей, передающихся вертикальным путём

Для формирования нового стада категории СПФ проводят ряд испытаний на трёх поколениях птиц.

Все птицы в первом поколении до достижения возраста 20 недель должны быть проверены один раз на наличие группового антигена лейкоза птиц и на отсутствие антител к вирусу лейкоза птиц подтипов A, B и J с помощью иммуноферментного анализа или реакции нейтрализации вируса. Всех птиц также проверяют на отсутствие антител к инфекционным возбудителям, передающимся вертикальным путём, и на отсутствие Salmonella spp., начиная с 8-недельного возраста. С этого периода проводят регулярные клинические наблюдения, чтобы подтвердить отсутствие симптомов инфекционных заболеваний. Методы анализа, используемые для оценки формируемого стада, указаны в табл. 1, дополнительные рекомендации приведены в разделе по рутинным испытаниям стада категории СПФ.

Начиная с 20-недельного возраста, стада проверяют в соответствии с разделом «Рутинные испытания стада категории СПФ». Все процедуры присвоения и поддержания категории применяют к последующим двум поколениям, за исключением испытания каждой птицы на наличие возбудителей, передающихся вертикальным путём.

Стада категории СПФ формируют из третьего поколения птиц при условии, что результаты испытаний во всех трёх поколениях стада показали отсутствие возбудителей инфекционных заболеваний.

Допускают доукомплектование стада молодняком от стад птиц категории СПФ, полученным из другого стада этой же категории, содержащимся в отдельных помещениях на одной птицеферме. Начиная с 8-недельного возраста, стада подвергают испытаниям в соответствии с процедурами присвоения и поддержания категории.

###### ИСХОДНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ К ИСПЫТАНИЯМ ПОСЛЕДУЮЩИХ ПОКОЛЕНИЙ, ПОЛУЧЕННЫХ ИЗ СТАД КАТЕГОРИИ СПФ

Новое поколение для присвоения категории СПФ предварительно проверяют на отсутствие определённых патогенов при условии, что стадо доукомплектовано исключительно птицами из этой же категории. Проводят дополнительные испытания – дважды с интервалом не менее 4 недель у 5 % птиц из стада (не менее 10 и не более 200 птиц); птиц отбирают в возрасте от 12 недель до 16 недель и от 16 недель до 20 недель.

Подходящие образцы для проведения испытания на наличие вируса лейкоза птиц отбирают и исследуют индивидуально. Используемые методики контроля выполняют в соответствии с указаниями раздела «Рутинные испытания стада категории СПФ». По результатам испытаний, подтверждающих отсутствие каких-либо инфекций, новому поколению присваивают категорию СПФ.

###### РУТИННЫЕ ИСПЫТАНИЯ СТАДА КАТЕГОРИИ СПФ

ОБЩИЙ ОСМОТР, АУТОПСИЯ И ГИСТОПАТОЛОГИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

Клинические обследования проводят не реже одного раза в неделю в течение всего периода существования стада для подтверждения отсутствия вируса оспы домашней птицы и признаков какой-либо инфекции. В случае смертности, превышающей 0,2 % от поголовья стада в течение недели, проводят аутопсию по возможности всех погибших птиц. При необходимости, для установления диагноза проводят гистологические, микробиологические и вирусологические исследования. Также проводят специальное исследование на наличие признаков туберкулеза. Гистологические образцы из мест поражения специфически окрашивают для определения микобактерии Mycobacterium avium. Содержимое слепой кишки всех погибших птиц, по возможности, подвергают микробиологическому исследованию на наличие Salmonella spp. При необходимости могут быть объединены образцы содержимого слепой кишки от 5 птиц.

ИСПЫТАНИЕ НА НАЛИЧИЕ МИКРООРГАНИЗМОВ SALMONELLA SPP.

Испытание на наличие Salmonella spp. проводят с использованием культурального метода на смывах из прямой кишки, или испражнениях птиц, или мазках, полученных с помощью ректального тампона. При анализе испражнений или смывов каждые 4 недели исследуют 60 образцов в течение всей жизни стада. Для проведения испытаний можно объединить до 10 образцов. При анализе мазков отбирают не менее двух образцов, испытания проводят каждые 4 недели в течение всей жизни стада. Для обнаружения Salmonella spp. образцы предварительно обогащают, затем культивируют на питательных средах, селективных для Salmonella spp.

ИСПЫТАНИЯ НА НАЛИЧИЕ АНТИГЕНА ВИРУСА ЛЕЙКОЗА ПТИЦ

До начала яйцекладки проводят исследования ректальных смывов или образцов крови (высеивают светлый слой кровяного сгустка) на наличие специфических групповых антигенов вируса лейкоза птиц. Каждые 4 недели отбирают из стада 5 % птиц (не менее 10 и не более 200 птиц). Во время яйцекладки для образцов белка отбирают 5 % яиц (не менее 10 и не более 200 яиц), и проводят испытания каждые 4 недели. Испытания на наличие групповых специфических антигенов вируса лейкоза птиц проводят методом иммуноферментного анализа, используя методики, обеспечивающие обнаружение антигенов подгрупп А, В и J.

ИСПЫТАНИЯ НА НАЛИЧИЕ АНТИТЕЛ К ДРУГИМ ИНФЕКЦИОННЫМ ВОЗБУДИТЕЛЯМ

Испытания на наличие антител ко всем инфекционным возбудителям, перечисленным в табл. 1., проводят в течение всего периода яйцекладки стада. Каждые 4 недели отбирают образцы у 5 % птиц стада (не менее 10 и не более 200 птиц). Каждую неделю отбирают образцы у 1,25 % птиц стада, так как некоторые испытания на наличие отдельных возбудителей должны проводиться еженедельно. В табл. 1 приведена классификация определённых возбудителей с быстрым или медленным распространением. На наличие медленно распространяющихся инфекций образец проверяют индивидуально. Для проверки наличия быстро распространяющихся инфекций не менее 20 % образцов, собранных в течение каждого четырехнедельного периода, исследуют индивидуально. При использовании реакции нейтрализации или твёрдофазного иммуноферментного анализа все образцы могут быть исследованы индивидуально или объединением по 5 образцов, отобранных одновременно. Методы испытаний, пригодные для обнаружения определённых возбудителей, приведены в табл. 1.

###### ИСПЫТАНИЯ, ПРОВОДИМЫЕ В КОНЦЕ ПЕРИОДА ЯЙЦЕКЛАДКИ

После последнего сбора яиц проводят заключительные испытания для подтверждения отсутствия возбудителей, передающихся вертикальным путём (табл. 1). Для проведения испытаний после последнего сбора яиц не менее 5 % птиц из стада (не менее 10 и не более 200 птиц) оставляют на срок не менее 4 недель.

Образцы крови отбирают у каждой птицы стада в течение четырех недель, при этом не менее, чем у 1,25 % птиц (25 % образцов) отбирают не ранее чем через 4 недели после заключительного сбора яиц. Образцы сыворотки проверяют на наличие возбудителей, передающихся вертикальным путём (табл. 1). Если отбор образцов осуществляют еженедельно, то исследованию в данный период подвергают не менее 1,25 % птиц (25 % образцов). В качестве альтернативы в течение четырех недель после заключительного сбора яиц кровь и/или другие подходящие для испытаний материалы отбирают не менее чем у 5 % птиц из стада и проверяют на наличие возбудителей, передающихся вертикальным путём, с помощью валидированных методик на основе метода амплификации нуклеиновых кислот.

###### ДЕЙСТВИЯ, КОТОРЫЕ ДОЛЖНЫ БЫТЬ ПРЕДПРИНЯТЫ В СЛУЧАЕ ОБНАРУЖЕНИЯ ОПРЕДЕЛЁННОГО ВОЗБУДИТЕЛЯ

Если обнаружено заражение стада возбудителем, относящимся согласно табл. 1, к медленно распространяющимся, все материалы, полученные из стада в течение 4 недель, предшествующих дате отбора образца с наличием возбудителя, считаются неудовлетворительными. Аналогично, если обнаружено заражение стада возбудителем, относящимся согласно табл. 1, к быстро распространяющимся, все материалы, полученные из стада в течение двух недель, предшествующих дате отбора образца с наличием возбудителя, считаются неудовлетворительными. Любое лекарственное средство, произведённое с использованием таких материалов, и для которого обязательно использование птиц категории СПФ, считают непригодным и бракуют; все испытания по контролю качества, проведённые с использованием таких материалов, являются недействительными.

Производители обязаны уведомить потребителей всех яиц об обнаружении заражения в возможно короткие сроки после вспышки эпидемии.

Любое стадо, у которого подтверждено инфицирование любым определённым возбудителем, не может в последующем получить категорию СПФ. Любое потомство, полученное от данного стада в течение или после 4-недельного периода, предшествующего отбору последней отрицательной пробы, не может быть отнесено к категории СПФ.

________________________________________________________________________________________________________________

##### 1.7.2.1. Лекарственные препараты из крови и плазмы крови человека

##### 1.7.2.2. Методы анализа лекарственных препаратов из крови и плазмы крови человека и животных

#### 1.7.3. Биотехнологические лекарственные препараты и методы их анализа

##### 1.7.3.1. Биотехнологические лекарственные препараты

##### 1.7.3.2. Методы анализа биотехнологических лекарственных препаратов

#### 1.7.4. Генотерапевтические лекарственные препараты и методы их анализа

### 1.8. Лекарственные препараты аптечного изготовления

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.8.0001 Лекарственные препараты аптечного изготовления

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья устанавливает общие требования к лекарственным препаратам аптечного изготовления.

К лекарственным препаратам аптечного изготовления относят лекарственные препараты, изготовленные ex tempore (по мере надобности) аптечными организациями, имеющими лицензию на фармацевтическую деятельность с правом изготовления лекарственных препаратов по рецептам на лекарственные препараты (далее – рецепт) и требованиям медицинских организаций (далее – требование).

Лекарственные препараты аптечного изготовления не подлежат государственной регистрации.

Как правило, выделяют следующие основные категории лекарственных препаратов, которые могут быть изготовлены аптечными организациями:

- лекарственные препараты, изготовленные по рецептам или требованиям для одного (конкретного) пациента или группы пациентов, отпускаемые после изготовления;

- лекарственные препараты в виде внутриаптечной заготовки, изготовленные заранее по часто встречающимся прописям, хранящиеся до получения рецептов или требований на отпуск и предназначенные для отпуска без каких-либо дополнительных технологических операций.

Общие требования к лекарственным препаратам для медицинского применения, обращение которых допускается в Российской Федерации, указаны в ОФС «Лекарственные препараты».

В зависимости от требований к уровню их микробиологической чистоты, лекарственные препараты аптечного изготовления подразделяют на стерильные и нестерильные, понимая под стерильностью отсутствие всех видов и форм жизнеспособных микроорганизмов.

Стерильные лекарственные препараты – лекарственные препараты, изготовленные с применением материалов и методов, предотвращающих загрязнение и обеспечивающих их стерильность в соответствии с требованиями ОФС «Стерильность». Общие требования к стерильным лекарственным препаратам аптечного изготовления приведены в ОФС «Стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления».

В нестерильных лекарственных препаратах аптечного изготовления допускается содержание ограниченного количества определённых микроорганизмов, которое зависит от вида лекарственной формы нестерильного лекарственного препарата, способа его применения и других факторов. Нормативные требования к допустимому количественному и качественному составу микроорганизмов в нестерильных лекарственных препаратах регламентируются ОФС «Микробиологическая чистота».

На нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления распространяются также требования, приведённые в ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм», ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде мягких лекарственных форм», ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм».

Отдельные требования установлены для лекарственных препаратов аптечного изготовления гомеопатических (ОФС «Гомеопатические лекарственные препараты аптечного изготовления»), радиофармацевтических (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты экстемпорального изготовления»), а также для лекарственных препаратов аптечного изготовления, предназначенных для применения в педиатрической практике (ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления для детей»).

Лекарственные препараты аптечного изготовления могут быть получены в виде различных лекарственных форм. Общие требования к лекарственным формам, в виде которых выпускаются лекарственные препараты, в том числе, лекарственные препараты аптечного изготовления, указаны в ОФС «Лекарственные формы» и в ОФС на конкретные лекарственные формы (например, ОФС «Настои и отвары» и др.). Информация о подходах к предпочтительном выбору лекарственных форм лекарственных препаратов, предназначенных для педиатрического применения, в том числе, при аптечном изготовлении лекарственных препаратов, приведена в ОФС «Выбор лекарственных форм для детей».

##### Особенности технологии

Изготовление лекарственных препаратов аптечными организациями осуществляется по рецептам и требованиям в соответствии с правилами изготовления и отпуска лекарственных препаратов для медицинского применения, утверждёнными уполномоченным федеральным органом исполнительной власти (правила изготовления и отпуска), в условиях, отвечающих санитарно-эпидемиологическим требованиям.

Надлежащее качество лекарственных препаратов аптечного изготовления обеспечивается комплексом мероприятий по выполнению требований, рекомендаций и т.д., установленных правилами изготовления и отпуска и другими действующими нормативными документами, составляющими систему качества изготовления лекарственных препаратов каждой аптечной организации, в том числе, требованиями, рекомендациями по отношению к персоналу, помещениям и оборудованию, документации, технологическому процессу, контролю качества, упаковке, маркировке, сроку годности.

Персонал. Изготовление лекарственных препаратов в аптечных организациях должны осуществлять лица, имеющие фармацевтическое или иное специальное образование, соответствующее установленным квалификационным требованиям.

Работники/специалисты (далее – специалисты), занимающиеся изготовлением лекарственных препаратов несут ответственность за качество изготовленных препаратов в соответствии с действующим законодательством. Индивидуальная ответственность специалистов должна быть чётко прописана в должностных инструкциях. Все сотрудники аптечной организации должны быть ознакомлены с принципами и документами системы качества, должны проходить начальную и текущую подготовку, включая необходимое обучение по санитарно-гигиеническому режиму.

Помещение и оборудование. Аптечные организации должны иметь выделенные помещения и/или зоны, в которых организуются рабочие места для изготовления лекарственных препаратов. Для изготовления лекарственных препаратов в виде разных лекарственных форм оборудуют, как правило, отдельное рабочее место. При невозможности выделения рабочих мест для конкретных лекарственных форм, необходимо принять меры, чтобы минимизировать риск загрязнения, в том числе перекрёстного, изготавливаемого лекарственного препарата.

Изготовление стерильных лекарственных препаратов в аптечных организациях осуществляется в асептических условиях, создаваемых комплексом необходимых помещений, с оборудованием одного или нескольких рабочих мест по изготовлению.

Помещения, зоны, рабочие места должны быть оснащены необходимым технологическим оборудованием, количество, типы и размеры которого зависят от номенклатуры и объёма изготавливаемых лекарственных препаратов. Оборудование должно быть размещено таким образом, чтобы была обеспечена возможность его эффективной эксплуатации и обслуживания. Используемые при изготовлении лекарственных препаратов приборы, аппараты, средства измерений, мерная посуда должны быть в исправном состоянии, они должны подвергаться необходимым испытаниям (калибровке, поверке, аттестации или др.) в установленном порядке. К весам и мерной посуде для аптечного изготовления лекарственных препаратов, могут быть применимы общие требования, указанные в ОФС «Весы и взвешивание», ОФС «Мерная лабораторная посуда».

Необходимо предусмотреть помещение или зону для получения воды очищенной и, если необходимо, для получения воды для инъекций, используемых для изготовления лекарственных препаратов.

Документация. Все действия, осуществляемые в процессе изготовления, контроля качества и отпуска изготовленных лекарственных препаратов, в аптечных организациях должны быть задокументированы надлежащим образом.

Должны быть разработаны и утверждены документы (стандартные операционные процедуры), регламентирующие последовательность действий специалиста при изготовлении, упаковке лекарственных препаратов, очистке и дезинфекции используемого оборудования, подготовке и стерилизации посуды, ведении записей и осуществлении других мероприятий, необходимых для обеспечения системы качества изготавливаемых лекарственных препаратов.

Также должны быть разработаны документы, содержащие требования и методы определения качества изготовленного лекарственного препарата, утверждённые руководителем аптечной организации (далее – документы в области контроля качества). Качество изготовленного лекарственного препарата должно определяться его соответствием требованиям фармакопейной статьи и соответствующих общих фармакопейных статей, либо в случае их отсутствия – документа в области контроля качества.

Производственные записи в виде соответствующих журналов, в которых должны быть зафиксированы все результаты производственной деятельности и контроля качества изготовленных лекарственных препаратов в виде различных лекарственных форм, лекарственных препаратов в виде внутриаптечной заготовки и фасовки, а также концентрированных растворов, полуфабрикатов, тритураций, разведений спирта этилового, воды очищенной, воды для инъекций, могут быть выполнены на бумажном носителе или в виде электронного документа.

Совокупность документов, в которых указываются факты, имеющие отношение к качеству изготавливаемого лекарственного препарата (стандартные операционные процедуры, инструкции, журналы и др.) должны обеспечивать прослеживаемость процесса изготовления лекарственного препарата.

Фармацевтические субстанции, лекарственные препараты, вспомогательные вещества. При изготовлении лекарственных препаратов аптечными организациями используются фармацевтические субстанции и/или лекарственные препараты, включённые в Государственный реестр лекарственных средств для медицинского применения или единый реестр зарегистрированных лекарственных средств Евразийского экономического союза.

Не допускается изготовление аптечными организациями, имеющими лицензию на фармацевтическую деятельность, лекарственных препаратов, зарегистрированных в Российской Федерации (далее – готовые лекарственные препараты).

Используемые фармацевтические субстанции и готовые лекарственные препараты должны отвечать требованиям фармакопейных статей и соответствующих общих фармакопейных статей, например, ОФС «Фармацевтические субстанции», ОФС «Лекарственное растительное сырье. Фармацевтические субстанции растительного происхождения», ОФС «Эфирные масла», ОФС «Масла жирные растительные», ФС «Натрия хлорид», ФС «Декстрозы моногидрат», ФС «Мяты перечной листьев настойка», ФС «Пустырника травы настойка», ФС «Аммиака раствор 10 %+ Аниса обыкновенного плодов масло эфирное, раствор для приёма внутрь» и др.

При аптечном изготовлении лекарственных препаратов применяют вспомогательные вещества, соответствующие общей фармакопейной статье (ОФС «Вспомогательные вещества») и отвечающие требованиям (при наличии) фармакопейных статей на конкретные вспомогательные вещества, например, ФС «Вода очищенная», ФС «Вода для инъекций», ФС «Спирт этиловый 40 %, 70 %, 90 %», ФС «Вазелин», ФС «Какао настоящего семян масло жирное», ФС «Миндаля семян масло жирное» и др.

При изготовлении лекарственных препаратов по рецептам и требованиям также могут быть использованы заранее изготовленные в аптечной организации концентрированные растворы, полуфабрикаты, тритурации, воды ароматные, разведения спирта этилового и др.

Концентрированные растворы – заранее изготовленные растворы фармацевтических субстанций более высокой концентрации, чем та концентрация, в которой эти вещества выписываются в рецептах и требованиях, предназначенные для аптечного изготовления жидких лекарственных форм после разбавления в соответствующем растворителе до требуемой концентрации.

Полуфабрикаты – специальный вид недозированной заготовки, являющийся составной частью сложной лекарственной формы, представляющий собой смесь двух или более фармацевтических субстанций с добавлением или без вспомогательных веществ, изготовленных в таких соотношениях, в которых чаще всего эти вещества выписываются в рецептах и требованиях. Полуфабрикаты предназначены для аптечного изготовления лекарственных препаратов в различных лекарственных формах после смешивания с другими фармацевтическими субстанциями, лекарственными препаратами и вспомогательными веществами, указанными в рецепте или требовании.

Надлежащее качество фармацевтических субстанций, готовых лекарственных препаратов, вспомогательных веществ, воды очищенной, воды для инъекций, концентрированных растворов, полуфабрикатов, тритураций и других веществ, используемых для аптечного изготовления лекарственных препаратов, должно быть подтверждено результатами внутриаптечного контроля и зарегистрировано в соответствующих журналах.

Должно быть обеспечено надлежащее хранение поступающих в аптечную организацию фармацевтических субстанций, вспомогательных веществ, готовых лекарственных препаратов, используемых для изготовления лекарственных препаратов. При переносе указанных веществ в аптечную упаковку (штангласы), на аптечной упаковке должны быть указаны данные, перечень которых определён соответствующим документом в области контроля качества. В ряде случаев при оформлении аптечной упаковки с некоторыми веществами, должна быть предусмотрена дополнительная информация, например:

- с веществами, предназначенными для изготовления лекарственных препаратов, требующих асептических условий изготовления, указывают «для стерильных лекарственных препаратов»;

- с гигроскопичными веществами указывают содержание влаги (воды) в процентах;

- со стандартными фармакопейными растворами (пероксида водорода раствор, формальдегида раствор, аммиака раствор, хлористоводородной кислоты раствор, уксусной кислоты раствор) указывают фактическое содержание действующего вещества;

- с субстанциями, лекарственным растительным сырьём, содержащим сердечные гликозиды, указывают количество единиц действия в 1 г или в 1 мл;

- с лекарственным растительным сырьём, содержащим алкалоиды, указывают фактическое содержание активного вещества в сырье, в процентах.

Если необходимо, растворы, настойки и другие жидкости, используемые для изготовления лекарственных препаратов и отмериваемые каплями, обеспечивают стандартными каплемерами или откалиброванными эмпирическими каплемерами (например, пипетками) в соответствии с ОФС «Каплемеры»; на этикетке указывают количество капель жидкости в 1 г или в 1 мл.

Особенности технологического процесса изготовления. Если для состава и лекарственной формы лекарственного препарата, указанного в рецепте или требовании, известна технология изготовления, разработаны методики его химического контроля, установлены условия и срок годности (хранения), то изготовление такого лекарственного препарата проводят в соответствии с установленными правилами. Такие данные могут содержаться в фармакопейных статьях или общих фармакопейных статьях.

Если информации о совместимости веществ, указанных в рецепте или требовании, о способе применения, о методах/методиках контроля качества и других аспектах, зависящих от состава и/или лекарственной формы лекарственного препарата, недостаточно, то необходим тщательный анализ правильности выписывания рецепта или требования, проверки совместимости веществ, соответствия прописанных доз возрасту пациента, наличия указаний о способах применения, условий и сроков хранения, факторов, которые могут оказать влияние на стабильность лекарственного препарата в прописанной лекарственной форме, а также разработки технологии изготовления и внутриаптечного контроля качества данного лекарственного препарата аптечного изготовления. В случае отсутствия необходимых данных в фармакопейных статьях или общих фармакопейных статьях, необходимо руководствоваться документом в области контроля качества.

Факторы, влияющие на стабильность лекарственных препаратов аптечного изготовления, которые следует учитывать для предупреждения их терапевтической неэффективности, появления нежелательных реакций и т.п., можно проанализировать, используя информацию, указанную в ОФС «Аспекты стабильности лекарственных средств».

Из-за различных, часто индивидуальных, подходов к технологии изготовления аптечных лекарственных препаратов, необходимо особое внимание обращать на:

- расчёты и правильное определение массы (объёма) исходных фармацевтических субстанций, воды очищенной, основ для мягких лекарственных форм или суппозиториев, а также других веществ, используемых при изготовлении лекарственного препарата;

- определение общего объёма (массы) лекарственного препарата аптечного изготовления согласно прописи, указанной в рецепте или требовании.

На одном рабочем месте допускается одновременное изготовление только одного лекарственного препарата. Взвешивание или отмеривание компонентов лекарственного препарата осуществляют последовательно, в соответствии с порядком введения их в лекарственную форму. Запрещается заранее отвешивать или отмеривать сразу все компоненты лекарственного препарата.

Изготовление лекарственных препаратов с пахучими, летучими и красящими веществами осуществляют на отдельном рабочем месте, используя при этом отдельную мерную посуду, ступку и другое необходимое оборудование, предусмотренное технологическим процессом.

Особенности технологического процесса изготовления стерильных, нестерильных, гомеопатических, радиофармацевтических лекарственных препаратов, а также лекарственных препаратов для детей, приведены в соответствующих общих фармакопейных статьях, названия которых указаны во вводной части настоящей общей фармакопейной статьи.

Изготовление лекарственных препаратов из зарегистрированных лекарственных препаратов, включённых в Государственный реестр лекарственных средств для медицинского применения или единый реестр зарегистрированных лекарственных средств Евразийского экономического союза, допускается в том случае, если это предусмотрено в рецепте или требовании. Не допускается изготовление растворов для инъекций и растворов для инфузий из готовых лекарственных препаратов.

Наиболее часто предусматривается изготовление лекарственных препаратов в виде порошков из готовых лекарственных препаратов, представляющих собой таблетки или капсулы и содержащих необходимое действующее вещество. Особенности изготовления порошков из готовых лекарственных препаратов указаны в ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм», а также в ОФС «Лекарственные формы для детей» (раздел «Модификация лекарственных форм»).

Получение воды очищенной и воды для инъекций в условиях аптечной организации. В помещениях, предназначенных для получения воды очищенной и воды для инъекций, запрещено выполнять какие-либо иные работы, не связанные с получением воды надлежащего качества.

Получение воды очищенной и воды для инъекций производят с использованием оборудования, разрешённого для этой цели. Работы на нём осуществляют в соответствии с руководством по эксплуатации.

Полученную воду очищенную и воду для инъекций собирают в чистые простерилизованные или обработанные паром сборники, стеклянные баллоны, имеющие маркировку: «Вода очищенная», «Вода для инъекций» и дополнительные данные о дате получения воды, номера анализа и подписи ответственного лица. В случае одновременного использования двух и более сборников для воды, они должны быть пронумерованы.

Для соединения сборников с оборудованием для получения воды используют индифферентный к воде материал, разрешенный к применению, выдерживающий обработку паром.

Подачу воды на рабочие места осуществляют по трубопроводам или в баллонах. Трубопроводы должны быть изготовлены из материалов, разрешённых к применению и не влияющих на свойства воды. Обработку, дезинфекцию трубопровода производят перед сборкой, в процессе эксплуатации не реже 1 раза в 14 дней, а также при неудовлетворительных результатах микробиологических анализов.

Для обеззараживания трубопроводов из термостойких материалов через них пропускают острый пар из парогенератора или автоклава в течение 30 мин. Отсчёт времени обработки ведут с момента выхода пара с концевого участка трубопровода. Трубопроводы из полимерных материалов и стекла можно обеззараживать с использованием раствора пероксида водорода 6 %; обработку проводят в течение 6 ч с последующим тщательным промыванием водой очищенной и проведением контроля промывных вод на отсутствие восстанавливающих веществ.

Стеклянные трубки и ёмкости, используемые при получении воды, для очистки от пирогенных веществ обрабатывают подкислённым раствором калия перманганата в течение 25–30 мин, затем тщательно промывают свежеперегнанной водой для инъекций.

##### Испытания (контроль качества)

Все лекарственные препараты, изготовленные в аптечных организациях по рецептам или требованиям, лекарственные препараты в виде внутриаптечной заготовки и фасовки, а также концентрированные растворы, полуфабрикаты, тритурации, воды ароматные, разведения спирта этилового, воду очищенную, воду для инъекций подвергают внутриаптечному контролю качества.

Контроль качества лекарственных препаратов аптечного изготовления осуществляют на основании требований действующих нормативных документов, утверждённых уполномоченным федеральным органом исполнительной власти, в соответствии с методами контроля качества, установленными, если применимо, соответствующими общими фармакопейными статьями, фармакопейными статьями или, при их отсутствии – документами в области контроля качества, а также настоящей ОФС. Результаты контроля качества лекарственных препаратов аптечного изготовления должны быть зарегистрированы в соответствующих журналах, документах.

Особенности испытаний (контроля качества), изготовленных в аптечной организации гомеопатических и радиоактивных лекарственных препаратов, приведены в соответствующих общих фармакопейных статьях, названия которых указаны во вводной части настоящей общей фармакопейной статьи.

Приёмочный контроль. Все поступающие в аптечную организацию фармацевтические субстанции, готовые лекарственные препараты, вспомогательные и другие вещества (независимо от источника их поступления) подвергаются приёмочному контролю.

Приёмочный контроль организуют для предупреждения поступления в аптечную организацию недоброкачественных фармацевтических субстанций, готовых лекарственных препаратов, вспомогательных и других веществ, используемых при изготовлении лекарственных препаратов, а также некачественных упаковочных материалов.

Приёмочный контроль заключается в проверке всех поступающих лекарственных средств, вспомогательных и других веществ на соответствие требованиям по показателям: «Описание», «Упаковка», «Маркировка», а также в проверке правильности оформления сопроводительных документов.

При контроле показателя «Описание» проверяют внешний вид, агрегатное состояние, однородность, органолептические (цвет, запах) и другие свойства контролируемых веществ. По показателю «Упаковка» проверяют целостность упаковки и её соответствие физико-химическим свойствам лекарственных средств, вспомогательных веществ, упаковочным материалам. По показателю «Маркировка» проверяют соответствие маркировки требованиям ОФС «Маркировка лекарственных средств».

При проведении контроля качества лекарственных препаратов аптечного изготовления применяют следующие виды внутриаптечного контроля качества: письменный, опросный, органолептический, физический, химический, контроль при отпуске, из которых обязательными видами для лекарственных препаратов аптечного изготовления являются письменный, органолептический и контроль при отпуске.

Письменный контроль. При изготовлении лекарственных препаратов по рецептам и требованиям, а также в виде внутриаптечной заготовки, заполняют паспорт письменного контроля, в котором указывают:

- дату изготовления лекарственного препарата;

- номер рецепта или требования;

- наименование медицинской организации, название отделения (при наличии); номер серии, количество в серии – для лекарственных препаратов в виде внутриаптечной заготовки;

- наименования взятых лекарственных средств, вспомогательных веществ и их количества, число доз, подписи лиц, изготовившего, расфасовавшего и проверившего лекарственную форму.

Паспорт письменного контроля заполняют сразу после изготовления лекарственного препарата с перечислением фармацевтических субстанций, готовых лекарственных препаратов, вспомогательных веществ в соответствии с последовательностью технологических операций; при использовании готового лекарственного препарата для изготовления – указывают его серию. Паспорт письменного контроля хранят в течение двух месяцев со дня изготовления лекарственного препарата.

При изготовлении порошков, пилюль и суппозиториев определяют путём взвешивания фактическое значение общей массы, рассчитывают массу отдельных доз, исходя из указанного количества доз.

В паспорте письменного контроля и на оборотной стороне рецепта указывают общую суппозиторную или пилюльную массу, количество изотонирующего вещества, добавленного при изготовлении капель глазных, растворов для инъекций и инфузий.

В случае использования концентрированных растворов в паспорте письменного контроля указывают их наименование, концентрацию и взятый объём.

Все расчёты для изготовления лекарственного препарата производят до его изготовления и записывают на оборотной стороне паспорта письменного контроля. Использованные при расчётах коэффициенты водопоглощения для лекарственного растительного сырья, коэффициенты увеличения объёма растворов при растворении фармацевтических субстанций, заместительные коэффициенты при изготовлении суппозиториев и т.д., указывают в паспорте.

Если в состав лекарственного препарата входят наркотические средства, психотропные, ядовитые и сильнодействующие вещества, а также другие лекарственные средства, подлежащие предметно-количественному учёту, их количество указывают на оборотной стороне рецепта.

В случае если лекарственный препарат изготавливает и отпускает один и тот же специалист, то паспорт письменного контроля он заполняет последовательно в процессе изготовления лекарственного препарата.

Изготовленные лекарственные препараты, рецепты и требования, заполненные паспорта письменного контроля передают на проверку специалисту, выполняющему контрольные функции при изготовлении и отпуске лекарственных препаратов, который проверяет соответствие записей в паспорте письменного контроля назначениям в рецепте или требовании, правильности произведённых расчётов. Если изготовленный лекарственный препарат был подвергнут химическому контролю, то в паспорте письменного контроля проставляют номер химического анализа и подпись специалиста, выполнившего химический контроль.

Опросный контроль является выборочным контролем и проводится после изготовления одним специалистом не более 5 лекарственных препаратов.

При проведении опросного контроля специалист, выполняющий контрольные функции, называет первое лекарственное средство, входящее в состав изготовленного лекарственного препарата, а в случае лекарственных препаратов сложного состава называет также его количество, после чего специалист, изготовивший лекарственный препарат, называет все другие компоненты, которые были им использованы для изготовления, и их количества. Если были использованы концентрированные растворы, полуфабрикаты, специалист называет их наименование/состав и концентрацию.

Органолептический контроль является обязательным видом контроля качества, который заключается в проверке изготовленного лекарственного препарата по внешнему виду, цвету, запаху, однородности смешивания, проверке на отсутствие механических включений в жидких лекарственных формах. На вкус проверяют выборочно лекарственные препараты для приёма внутрь, предназначенные для детей.

Однородность порошков, пилюль, суппозиториев, мягких лекарственных форм проверяют выборочно у каждого специалиста, изготавливающего лекарственные препараты, в течение рабочего дня с учётом видов лекарственных форм изготовленных лекарственных препаратов.

Однородность порошковой смеси проверяют следующим образом: порошковую смесь собирают в центр ступки и, надавливая пестиком, рассматривают невооруженным глазом на расстоянии 25 см, при этом не должно обнаруживаться отдельных частиц, блёсток и вкраплений.

Суппозитории аптечного изготовления должны иметь одинаковую форму. Однородность суппозиторной массы определяют на продольном срезе суппозитория по отсутствию вкраплений. На срезе допускается только наличие воздушного стержня или воронкообразного углубления.

Пилюли должны быть одинаковых размеров, иметь правильную шарообразную форму, поверхность пилюль должна быть сухой и гладкой. В разрезе пилюли должны быть однородными.

При проверке однородности мягких лекарственных форм определяют отсутствие расслаивания, в суспензионных и комбинированных мазях – определяют размер частиц.

Для определения размера частиц четыре образца мази по 0,02–0,03 г помещают на два предметных стекла по два образца, накрывают вторым предметным стеклом, плотно прижимая его до образования пятен диаметром около 2 см. При рассмотрении пятен невооруженным глазом на расстоянии 25–30 см в трёх из четырёх исследуемых образцах не должно обнаруживаться видимых частиц. При обнаружении видимых частиц проводят повторное испытание на восьми пробах – наличие видимых частиц допускается не более чем в двух пятнах.

Механическими включениями в жидких лекарственных формах лекарственных препаратов являются посторонние подвижные нерастворимые вещества, кроме пузырьков газа, случайно присутствующих в растворах лекарственных препаратов.

Контроль на отсутствие механических включений является обязательным для всех стерильных растворов и проводится в процессе их изготовления до и после стерилизации Одновременно с проверкой отсутствия механических включений (органолептический контроль) для стерильных растворов проверяют объём растворов в ёмкостях и качество их укупорки (физический контроль).

Различают первичный и вторичный контроль на механические включения. Первичному и вторичному контролю стерильных растворов на отсутствие механических включений подлежат 100% ёмкостей с растворами.

Первичный контроль осуществляют до стерилизации и проводят после фильтрования и фасовки (если применимо) изготовленного стерильного раствора. При обнаружении механических включений раствор повторно фильтруют и вновь проверяют на отсутствие механических включений. Если при первичном контроле механические включения отсутствуют, то ёмкость с раствором укупоривают, маркируют и стерилизуют. Вторичный контроль проводят после стерилизации растворов; при обнаружении механических включений растворы считаются забракованными (неудовлетворительного качества). Растворы, изготовленные асептически, проверяют на отсутствие механических включений один раз после фасовки или стерилизующего фильтрования.

Контроль растворов на отсутствие механических включений осуществляет специалист с соблюдением условий и техники контроля. Для просмотра ёмкостей оборудуется рабочее место, защищённое от попадания прямых солнечных лучей. Допускается применение чёрно-белого экрана и специальных устройств. Одновременно просматривают от одной до пяти ёмкостей с раствором, в зависимости от их объёма.

Оборудование, условия испытания, техника контроля и другие особенности проверки стерильных растворов аптечного изготовления на механические примеси указаны в ОФС «Видимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения и глазных лекарственных формах».

Отсутствие механических включений в нестерильных растворах и эмульсиях аптечного изготовления и, если применимо, других жидких лекарственных формах, проверяют путём легкого встряхивания и переворачивания флакона вверх дном с последующим наблюдением за раствором в прямом и отражённом свете. Если в лекарственной форме содержатся взвешенные частицы, то они при этом опускаются вниз и попадают в поле зрения.

Физический контроль заключается в проверке общей массы или объёма лекарственного препарата, а также количества и массы отдельных доз (не менее трёх доз) дозированных лекарственных форм лекарственных препаратов.

Для проведения физического контроля лекарственных препаратов аптечного изготовления следует использовать средства измерений (массы, объёма) такого же типа, с такими же метрологическими характеристиками, которые были использованы при их изготовлении.

Физический контроль качества является выборочным для лекарственных препаратов, изготовленных по рецептам и требованиям: такие лекарственные препараты подвергают физическому контролю в течение рабочего дня с учётом всех видов изготовленных лекарственных форм, но не менее 3 % от количества лекарственных форм, изготовленных в течение рабочего дня. Обязательный физический контроль осуществляют в отношении лекарственных препаратов, предназначенных для новорождённых детей и детей в возрасте до 1 года; содержащих наркотические средства, психотропные, ядовитые и сильнодействующие вещества; требующих стерилизации; лекарственных препаратов в виде суппозиториев.

Для лекарственных препаратов в виде внутриаптечной заготовки и фасовки физический контроль является обязательным: контролю подлежит не менее трёх упаковок (единиц) от каждой серии лекарственных препаратов в виде внутриаптечной заготовки или в виде фасовки.

Качество лекарственного препарата считается удовлетворительным по физическому контролю, если полученные результаты проверки общего объёма, общей массы, массы отдельных доз и количества доз не превышают допустимые отклонения.

Допустимые отклонения в общем объёме или общей массе лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм, включая лекарственные препараты в виде внутриаптечной заготовки, указаны в табл. 1 и 2. Допустимые отклонения в общей массе лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде мягких лекарственных форм указаны в табл. 3.

Допустимые отклонения, указанные в табл. 1 и 2 действительны, как при изготовлении жидких лекарственных форм с использованием концентрированных растворов, так и при изготовлении жидких лекарственных форм с использованием фармацевтических субстанций, лекарственных препаратов.

Таблица 1. Допустимые отклонения в общем объёме жидких лекарственных форм при изготовлении массо-объёмным методом
Прописанный объём, мл | Отклонения, %
--- | ---
До 10 | ±10
Свыше 10 до 20 | ±8
Свыше 20 до 50 | ±4
Свыше 50 до 150 | ±3
Свыше 150 до 200 | ±2
Свыше 200 | ±1

Таблица 2. Допустимые отклонения в общей массе жидких лекарственных форм при изготовлении методом по массе
Прописанная масса, г | Отклонения, %
--- | ---
До 10 | ±10
Свыше 10 до 20 | ±8
Свыше 20 до 50 | ±5
Свыше 50 до 150 | ±3
Свыше 150 до 200 | ±2
Свыше 200 | ±1

Таблица 3. Допустимые отклонения в общей массе мягких лекарственных форм
Прописанная масса, г | Отклонения, %
--- | ---
До 5 | ±15
Свыше 5 до 10 | ±10
Свыше 10 до 20 | ±8
Свыше 20 до 30 | ±7
Свыше 30 до 50 | ±5
Свыше 50 до 100 | ±3
Свыше 100 | ±2

Отклонения, допустимые в массе отдельных доз (в том числе при фасовке) порошков (в том числе порошковыми дозаторами) приведены в табл. 4. Отклонения, допустимые в массе отдельных доз порошков (в том числе при фасовке), определяются на прописанную дозу одного порошка.

Таблица 4. Допустимые отклонения в массе отдельных доз (в том числе при фасовке) порошков
Прописанная масса, г | Отклонения, %
--- | ---
До 0,1 | ±15
Свыше 0,1 до 0,3 | ± 10
Свыше 0,3 до 1 | ± 5
Свыше 1 до 10 | ± 3
Свыше 10 до 100 | ± 3
Свыше 100 до 250 | ± 2
Свыше 250 | ± 0,3

Допустимые отклонения в массе отдельных доз суппозиториев и пилюль составляют:

- для суппозиториев – ±5 %;

- для пилюль массой до 0,3 г – ±10 %;

- для пилюль массой свыше 0,3 г – ±5 %.

Количество доз дозированных лекарственных форм лекарственных препаратов аптечного изготовления, выявленное при физическом контроле, должно соответствовать их количеству, указанному в рецепте, требовании; допустимые отклонения на количество доз не устанавливают.

В рамках физического контроля проверяют также качество укупорки изготовленного лекарственного препарата. Проверку качества («герметичности») укупорки жидких лекарственных форм аптечного изготовления осуществляют переворачиванием вверх дном укупоренного флакона, бутылки, т.е. системы упаковки/укупорки, подготовленной к отпуску – не должно наблюдаться вытекания жидкости.

Химический контроль заключается в оценке качества изготовления лекарственных препаратов по показателям:

- качественный анализ: определение подлинности;

- количественный анализ: количественное определение.

Для проведения химического контроля организуют рабочее место, оснащённое специальным оборудованием, приборами, реактивами, обеспеченное документами и необходимыми справочными материалами в области контроля качества лекарственных средств. Химический контроль проводят в соответствии с методиками, указанными в общих фармакопейных статьях, фармакопейных статьях, документах в области контроля качества.

Допустимо проведение химического контроля лекарственных препаратов аптечного изготовления методами экспресс-анализа, которые, как правило, являются неразрушающими методами контроля и характеризуются быстротой проведения, простотой используемых методик, а также требуют минимального количества испытуемого образца и реактивов.

Обязательному качественному анализу при аптечном изготовлении лекарственных препаратов, подвергаются:

- вода очищенная и вода для инъекций ежедневно из каждого сборника/баллона, а при подаче воды по трубопроводу – на каждом рабочем месте на допустимое содержание примесей хлоридов, сульфатов, солей кальция и магния, также проводится контроль значения рН;

- вода для инъекций, предназначенная для изготовления стерильных растворов, ежедневно из каждого сборника/баллона, а при подаче воды по трубопроводу – на каждом рабочем месте на допустимое содержание примесей хлоридов, сульфатов, солей кальция и магния, восстанавливающих веществ, солей аммония и углерода диоксида; также проводится контроль значения рН;

- все фармацевтические субстанции, готовые лекарственные препараты (если применимо), вспомогательные вещества, концентрированные растворы, полуфабрикаты, поступающие из помещений хранения в помещения для изготовления лекарственных препаратов;

- лекарственные средства, поступившие в аптечную организацию в случае возникновения сомнения в их качестве;

- концентрированные растворы, полуфабрикаты, жидкие лекарственные средства (в отдельных ёмкостях, в бюреточной установке, в штангласах с пипетками), используемые для изготовления лекарственных препаратов и находящиеся в помещении изготовления лекарственных препаратов, при их заполнении;

- каждая серия расфасованных лекарственных средств.

Выборочному качественному анализу подвергаются лекарственные препараты, изготовленные специалистом в течение рабочего дня по рецептам и требованиям, но не менее 10 % от общего количества изготовленных каждым специалистом лекарственных препаратов, с учётом различных видов лекарственных форм.

Качественный экспресс-анализ, как правило, выполняют с использованием цветных или осадочных химических реакций, указанных в ОФС «Общие реакции на подлинность», применяя для идентификации компонентов лекарственного препарата наиболее специфические и чувствительные реакции.

Анализ воды очищенной и воды для инъекций на допустимое содержание установленных для химического контроля примесей и контроль значений рН, проводят в соответствии с ФС «Вода очищенная» и ФС «Вода для инъекций». Ежеквартально вода очищенная и вода для инъекций должна подвергаться испытанию на соответствие требованиям ФС «Вода очищенная» или ФС «Вода для инъекций» по всем показателям качества, указанным в фармакопейных статьях.

Определение значения рН проводят потенциометрическим методом в соответствии с требованиями ОФС «Ионометрия» или с использованием индикаторной бумаги. Допустимые погрешности при измерении величины рН в ходе проведения химического контроля лекарственных препаратов аптечного изготовления приведены в табл. 5.

Таблица 5. Допустимые погрешности при измерении величины pH
Метод измерения | Максимальная погрешность в единицах pH при измерении
--- | ---
с интервалом pH 1–2 | с интервалом рН 0,3–0,7
Потенциометрический | 0,6 | 0,05
Индикаторной бумагой | 1 | 0,3

Обязательному полному химическому контролю, т.е. качественному и количественному анализу при аптечном изготовлении подвергают:

- все растворы для инъекций и инфузий до стерилизации, при этом проверяют значение рН, подлинность и количественное содержание действующего вещества (веществ), количественное содержание изотонирующих и стабилизирующих веществ;

- все растворы для инъекций и инфузий после стерилизации, при этом проводят оценку внешнего вида (органолептический контроль), проверяют значение рН, подлинность и количественное содержание действующего вещества (веществ); количественное содержание изотонируюших и стабилизирующих веществ после стерилизации проверяют лишь в случаях, предусмотренных документом в области контроля качества;

- стерильные растворы для наружного и местного применения, представляющие собой растворы для промывания глаз (офтальмологические растворы для орошений), растворы для лечения ожоговых поверхностей и открытых ран, растворы для интравагинального введения, растворы для орошения мочевого пузыря и желудка и иные стерильные растворы;

- капли глазные и мягкие лекарственные формы глазные, содержащие наркотические средства, психотропные, сильнодействующие и ядовитые вещества. При анализе капель глазных содержание в них изотонирующих и стабилизирующих веществ определяют до стерилизации;

- все лекарственные препараты в любых лекарственных формах, предназначенные для новорождённых детей и детей до 1 года;

- растворы атропина сульфата для приёма внутрь, растворы кислоты хлористоводородной для приёма внутрь, растворы серебра нитрата;

- все концентрированные растворы, полуфабрикаты, тритурации;

- каждая серия лекарственных препаратов, изготовленных в виде внутриаптечной заготовки;

- стабилизаторы, применяемые при изготовлении растворов для инъекций и растворов инфузий;

- буферные растворы, применяемые при изготовлении капель глазных;

- спирт этиловый при разведения его в аптечной организации, а также в случае возникновения сомнений в качестве спирта этилового при его поступлении в аптечную организацию.

Лекарственные препараты, изготовленные по рецептам и требованиям, подлежат полному химическому контролю в количестве не менее трёх лекарственных препаратов, при работе в одну смену, с учётом различных видов лекарственных форм. Полному химическому контролю в первую очередь подвергают лекарственные препараты, предназначенные для детей; для офтальмологического применения; содержащие наркотические средства, психотропные, сильнодействующие и ядовитые вещества; растворы для лечебных клизм.

Количественный анализ лекарственных препаратов аптечного изготовления, как правило, проводят с использованием титриметрических методов анализа в соответствии с ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)», ОФС «Комплексонометрическое титрование», ОФС «Нитритометрия» и др. Для количественного определения могут быть использованы физические, физико-химические методы анализа, например, рефрактометрический метод (ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)», спектрофотометрический (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях») и другие, исходя из номенклатуры лекарственных препаратов и технического обеспечения аптечной организации.

Качество лекарственного препарата считается удовлетворительным по химическому контролю (количественному содержанию), если полученные результаты анализов не превышают допустимые отклонения.

Допустимые отклонения (в процентах) количественного содержания фармацевтических субстанций в концентрированных растворах, используемых для аптечного изготовления жидких лекарственных форм, приведены в табл. 6.

Таблица 6. Допустимые отклонения в концентрации концентрированных растворов
Содержание лекарственного средства (%) | Отклонения (от обозначенного %)
--- | ---
До 20 % | Не более ±2 %
Свыше 20 % | Не более ±1 %

Допустимые отклонения при количественном определении действующих веществ в ходе проведения полного химического контроля лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде жидких, твёрдых и мягких лекарственных форм, приведены ниже.

Отклонения, допустимые в массе навески отдельных лекарственных средств в лекарственных препаратах аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм, включая лекарственные препараты в виде внутриаптечной заготовки, при изготовлении способом по массе или массо-объёмным способом (табл. 7 и 8) с использованием, как концентрированных растворов, так и фармацевтических субстанций, определяются не на концентрацию в процентах, а на массу навески каждого лекарственного средства, входящего в эти лекарственные формы.

Например, при изготовлении капель назальных по прописи: «2 % раствора протаргола - 10 мл» масса навески должна составлять 0,2 г, для которой допускается отклонение ±10 %. При контроле качества достаточно установить, что было взято не менее 0,18 г и не более 0,22 г протаргола.

Таблица 7. Допустимые отклонения в массе навески отдельных лекарственных средств в жидких лекарственных формах при изготовлении массо-объёмным методом
Прописанная масса, г | Отклонения, %
--- | ---
До 0,02 | ±20
Свыше 0,02 до 0,1 | ±15
Свыше 0,1 до 0,2 | ±10
Свыше 0,2 до 0,5 | ±8
Свыше 0,5 до 0,8 | ±7
Свыше 0,8 до 1 | ±6
Свыше 1 до 2 | ±5
Свыше 2 до 5 | ±4
Свыше 5 | ±3

Таблица 8. Допустимые отклонения в массе навески отдельных лекарственных средств в жидких лекарственных формах при изготовлении методом по массе
Прописанная масса, г | Отклонения, %
--- | ---
До 0,1 | ±20
Свыше 0,1 до 0,2 | ±15
Свыше 0,2 до 0,3 | ±12
Свыше 0,3 до 0,5 | ±10
Свыше 0,5 до 0,8 | ±8
Свыше 0,8 до 1 | ±7
Свыше 1 до 2 | ±6
Свыше 2 до 10 | ±5
Свыше 10 | ±3

Отклонения, допустимые в массе навески отдельных лекарственных средств в лекарственных препаратах аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм (порошках, пилюлях, суппозиториях), при изготовлении методом выкатывания или выливания (табл. 9), определяются на дозу каждого лекарственного средства (фармацевтической субстанции), входящего в эти лекарственные формы.

Среднюю массу определяют взвешиванием с точностью до 0,01 г не менее 10 единиц (доз) твёрдых лекарственных форм. При изготовлении менее 10 доз, взвешивают все дозы. Отклонения в массе твёрдых лекарственных форм от средней массы определяют взвешиванием каждой единицы (дозы) с минимальной выборкой 5 штук. Допустимые отклонения от средней массы не должны превышать ±5 %.

Таблица 9. Допустимые отклонения в массе навески отдельных лекарственных средств в твёрдых лекарственных формах (в том числе при изготовлении методом выкатывания или выливания)
Прописанная масса, г | Отклонения, %
--- | ---
До 0,02 | ±20
Свыше 0,02 до 0,05 | ±15
Свыше 0,05 до 0,2 | ±10
Свыше 0,2 до 0,3 | ±8
Свыше 0,3 до 0,5 | ±6
Свыше 0,5 до 1 | ±5
Свыше 1 до 2 | ±4
Свыше 2 до 5 | ±3
Свыше 5 до 10 | ±2
Свыше 10 | ±1

Отклонения, допустимые в массе навески отдельных лекарственных средств в лекарственных препаратах аптечного изготовления в виде мягких или жидких лекарственных форм при изготовлении методом по массе (табл. 10) с использованием как концентрированных растворов, так и фармацевтических субстанций, определяются не на концентрацию в процентах, а на массу навески каждого лекарственного средства (фармацевтической субстанции), входящего в эти лекарственные формы.

Таблица 10. Допустимые отклонения в массе навески отдельных лекарственных средств в жидких лекарственных формах при изготовлении методом по массе и в мягких лекарственных формах
Прописанная масса, г | Отклонения, %
--- | ---
До 0,1 | ±20
Свыше 0,1 до 0,2 | ±15
Свыше 0,2 до 0,3 | ±12
Свыше 0,3 до 0,5 | ±10
Свыше 0,5 до 0,8 | ±8
Свыше 0,8 до 1 | ±7
Свыше 1 до 2 | ±6
Свыше 2 до 10 | ±5
Свыше 10 | ±3

Дополнительные испытания для растворов для инъекций и инфузий, а также других стерильных растворов аптечного изготовления, касающиеся микробиологического контроля и испытаний на пирогенность или бактериальные эндотоксины, приведены в ОФС «Стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления».

Контроль при отпуске лекарственных препаратов аптечного изготовления является обязательным для всех лекарственных препаратов аптечного изготовления. В рамках контроля при отпуске проверяется соответствие:

- упаковки лекарственного препарата физико-химическим свойствам, входящих в него лекарственных средств;

- указанных в рецепте или требовании доз наркотических средств, психотропных, сильнодействующих веществ возрасту пациента;

- реквизитов рецепта, требования сведениям, указанным на упаковке изготовленного лекарственного препарата;

- маркировки лекарственного препарата установленным требованиям.

Специалист, ответственный за контроль при отпуске, после установления соответствия изготовленного лекарственного препарата всем обязательным требованиям, ставит подпись на оборотной стороне рецепта или требования.

Оценка качества изготовленных лекарственных препаратов. Для оценки качества лекарственных препаратов аптечного изготовления, подвергнувшихся внутриаптечному контролю, используют термины «Удовлетворяет» или «Не удовлетворяет».

Неудовлетворительное качество изготовленных лекарственных препаратов устанавливают в случаях:

- несоответствия описания (внешний вид, цвет, запах);

- несоответствия по показателям «Прозрачность» и (или) «Цветность» (для растворов);

- наличия видимых механических включений;

- несоответствия по значению рН;

- несоответствия степени измельчённости порошков;

- неоднородности смешивания лекарственных препаратов в виде порошков, мягких лекарственных форм, суппозиториев, тритураций;

- несоответствия размера частиц в гетерогенных и комбинированных мягких лекарственных формах;

- отклонения от массы или объёма лекарственного препарата, обозначенного в рецепте или требовании, включая:

- отклонения в общей массе или общем объёме;

- отклонения в массе или объёме отдельных доз или их количестве;

- отклонения по массе или концентрации действующих веществ, входящих в состав лекарственного препарата, выявленных при химическом контроле;

- несоответствия прописи рецепта или требования, включая:

- замену одного действующего вещества другим, отсутствие указанного вещества или наличие неуказанного вещества в рецепте или требовании;

- замену действующих веществ на аналогичные по фармакологическому действию без обозначения произведённой замены соответствующим образом;

- несоответствия по стерильности;

- нарушения герметичности укупорки;

- нарушения маркировки и оформления лекарственного препарата, предназначенного к отпуску.

##### Упаковка

Выбор упаковки и укупорочных средств лекарственных препаратов аптечного изготовления осуществляют в зависимости от физико-химических свойств лекарственного препарата, лекарственной формы, способа/пути введения и применения и других критериев в соответствии с требованиями ОФС «Упаковка лекарственных средств».

В общих фармакопейных статьях на соответствующие виды лекарственных форм лекарственных препаратов аптечного изготовления приведена возможная система упаковки/укупорки лекарственных препаратов аптечного изготовления.

##### Маркировка

Маркировка лекарственных препаратов, изготовленных аптечными организациями, имеющими лицензию на фармацевтическую деятельность, и оформление таких препаратов, должны соответствовать правилам изготовления и отпуска.

Особенности маркировки гомеопатических и радиофармацевтических лекарственных препаратов приведены в соответствующих общих фармакопейных статьях, названия которых указаны во вводной части настоящей общей фармакопейной статьи.

Лекарственные препараты, изготовленные и расфасованные в аптечной организации, оформляются соответствующими этикетками, которые в зависимости от способа применения лекарственного препарата подразделяют на этикетки:

- с надписью «Внутреннее» для лекарственных препаратов для приёма внутрь;

- с надписью «Наружное» для лекарственных препаратов наружного применения;

- с надписью «Для местного применения» для лекарственных препаратов местного применения;

- с надписью «Для инъекций», «Для инфузий» на лекарственные препараты для парентерального применения;

- с надписью «Глазные капли», «Глазная мазь», «Растворы для промывания глаз»/«Растворы для орошения глаз» на лекарственные препараты для офтальмологического применения;

На этикетках для оформления изготовленных лекарственных препаратов печатаются предупредительные надписи, соответствующие лекарственной форме, а также температурным и иным режимам хранения лекарственных средств, которые указаны в ОФС «Хранение лекарственных средств»:

- для микстур – «Хранить в прохладном и защищённом от света месте», «Перед употреблением взбалтывать»;

- для мягких лекарственных форм, мазей глазных, капель глазных, – «Хранить в прохладном и защищённом от света месте»;

- для капель для приёма внутрь – «Хранить в защищённом от света месте";

- для инъекций и инфузий и других стерильных лекарственных форм – «Стерильно».

На всех этикетках должна быть предупредительная надпись «Хранить в недоступном для детей месте».

Для лекарственных препаратов, требующих особых условий хранения, обращения и применения, на этикетках печатаются или наклеиваются предупредительные надписи.

Размеры этикеток определяются в соответствии с размерами упаковки, в которой отпускаются изготовленные лекарственные препараты; все предусмотренные правилами надписи должны быть нанесены на основную этикетку.

Текст этикеток печатается типографским способом или с использованием печатающих устройств на русском языке. Состав лекарственного препарата пишется от руки или наносится штампом. Наименования лекарственных препаратов, часто встречающихся в рецептуре, или изготовляемых в виде внутриаптечной заготовки, допускается напечатать типографским способом или с использованием печатающих устройств.

##### Хранение

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственных средств», в упаковке, обеспечивающей стабильность в течение установленного срока годности лекарственного препарата аптечного изготовления, с соблюдением условий, указанных в маркировке лекарственного препарата.

##### Срок годности

Срок годности отдельных наименований лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде различных лекарственных форм должен соответствовать установленному сроку годности, указанному в правилах изготовления и отпуска.

Установленные правилами изготовления и отпуска сроки годности стерильных, нестерильных, гомеопатических, радиофармацевтических лекарственных препаратов, а также лекарственных препаратов для детей, приведены в соответствующих общих фармакопейных статьях, названия которых указаны во вводной части настоящей общей фармакопейной статьи.

Аптечная организация вправе устанавливать иные сроки годности, изготавливаемых лекарственных препаратов, если они предусмотрены общими фармакопейными статьями.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.8.0002Лекарственные препараты аптечного изготовления для детей

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на лекарственные препараты аптечного изготовления, предназначенные для применения в педиатрической практике.

Общие положения и основные требования к лекарственным препаратам аптечного изготовления установлены в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления».

К лекарственным препаратам для детей (лекарственным препаратам, предназначенным для применения в педиатрической практике), относят лекарственные препараты, произведённые/изготовленные в дозировках, соответствующих возрасту детей, в виде лекарственных форм, обеспечивающих необходимый терапевтический эффект и удобство применения для детей. Выбор предпочтительных лекарственных форм для лекарственных препаратов, предназначенных для педиатрического применения, указан в ОФС «Выбор лекарственных форм для детей».

К лекарственным препаратам, применяемым в педиатрической практике, относят лекарственные препараты, предназначенные для детей, как правило, до 18 лет. Из группы лекарственных препаратов для детей выделяют лекарственные препараты, предназначенные для лечения новорождённых детей и детей до 1 года, к которым предъявляются специфические требования в связи с особенностями физического развития и состояния пациентов этих возрастных групп.

Лекарственные препараты для детей могут быть изготовлены в виде различных лекарственных форм: порошки, растворы, суспензии, эмульсии, капли, мази, суппозитории, растворы для инъекций и инфузий, капли глазные, мази глазные и др.

##### Особенности технологии

В зависимости от требований к уровню их микробиологической чистоты, лекарственные препараты аптечного изготовления для детей могут быть стерильными или нестерильными.

Требование стерильности предъявляется к лекарственным препаратам для детей, изготовленным в виде следующих лекарственных форм:

- лекарственные формы для новорождённых детей и детей до 1 года (порошки, растворы, суспензии, мази, капли глазные, растворы для инъекций, растворы для инфузий и др.);

- лекарственные формы для парентерального применения (растворы для инъекций, растворы для инфузий и др.);

- лекарственные формы для офтальмологического применения (капли глазные, растворы для промывания/орошения глаз, мази глазные и др.);

- лекарственные формы, предназначенные для нанесения на раневые и ожоговые поверхности (растворы, порошки и др.), растворы для орошения (желудка, мочевого пузыря и др.);

- лекарственные формы лекарственных препаратов, содержащих антибиотики (порошки, растворы, капли, мази, капли глазные, мази глазные и др.).

В зависимости от природы компонентов, входящих в состав лекарственного препарата, технологического процесса изготовления, стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления для детей подразделяют на:

- лекарственные препараты, которые подлежат финишной (окончательной) стерилизации в конечной упаковке в соответствии с требованиями и методами, указанными в ОФС «Стерилизация»;

- лекарственные препараты, которые не могут быть подвергнуты финишной стерилизации в конечной упаковке и должны быть изготовлены в асептических условиях с соблюдением всех необходимых мероприятий для обеспечения стерильности лекарственного препарата (использование стерильных растворителей, основ и др.) без последующей термической стерилизации.

Стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления для детей, предназначенные для парентерального применения, для офтальмологического применения, для нанесения на раневые и ожоговые поверхности, для орошения, а также лекарственные препараты, содержащие антибиотики, должны быть изготовлены в асептических условиях и соответствовать требованиям, указанным в ОФС «Стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления».

Технология изготовления лекарственных препаратов для детей в виде различных лекарственных форм, не требующих асептических условий изготовления, в зависимости от агрегатного состояния лекарственной формы, должна соответствовать ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм» или ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм» или ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде мягких лекарственных форм». При изготовлении нестерильных лекарственных препаратов для детей должны быть использованы материалы и методы, предотвращающие загрязнение и рост микроорганизмов и обеспечивающие соответствие их требованиям ОФС «Микробиологическая чистота».

Лекарственные препараты аптечного изготовления в виде лекарственных форм, предназначенных для лечения новорождённых детей и детей до 1 года, должны быть изготовлены в асептических условиях и соответствовать требованиям, указанным в ОФС «Стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления».

Для отдельных наименований стерильных лекарственных препаратов для лечения новорождённых детей и детей до 1 года разработана технология изготовления, условия и режимы стерилизации, сроки годности в указанных условиях хранения.

Капли глазные. Капли глазные, предназначенные для лечения новорождённых детей и детей до 1 года готовят в асептических условиях в соответствии с ОФС «Стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления».

Капли глазные, представляющие собой раствор серебра коллоидного (колларгола) 2 % или 3 %, предназначенные для лечения новорождённых детей и детей до 1 года, готовят в асептических условиях по правилам изготовления растворов защищённых коллоидов (ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм») – фармацевтическую субстанцию предварительно измельчают в стерильной ступке, затем смешивают со стерильной водой очищенной и фильтруют через бумажный обеззоленный фильтр в стерильный флакон для отпуска. Капли глазные аптечного изготовления состава «Раствор серебра коллоидного (колларгола) 2 % или 3 %» хранят в защищённом от света месте в течение 30 суток.

Порошки. Дозированные порошки для приёма внутрь готовят в асептических условиях с использованием фармацевтических субстанций, готовых лекарственных препаратов и вспомогательных веществ надлежащего качества. Если количество фармацевтической субстанции (действующего вещества) на всю массу изготавливаемого порошка составляет менее 0,05 г, то для изготовления порошка используют тритурацию фармацевтической субстанции (лекарственного препарата) – её смесь с лактозой моногидратом (молочным сахаром) или другими вспомогательными веществами в соотношении 1:10 или 1:100.

Особенности технологии изготовления порошков с использованием готовых лекарственных препаратов в виде твёрдых лекарственных форм (таблетки, капсулы) указаны в ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм», а также в ОФС «Лекарственные формы для детей» (раздел «Модификация лекарственных форм»).

Недозированные порошки предназначены для наружного применения в виде присыпок. При их изготовлении должна быть обеспечена необходимая степень измельчения всех ингредиентов и однородность их смешивания, если порошок сложный. Термостойкие вещества (трибромфенолята висмута и висмута оксида комплекс (ксероформ), цинка оксид, тальк и др.) подвергают стерилизации, термолабильные вещества (крахмал и др.) добавляют в асептических условиях. Присыпки с термостойкими веществами помещают в ёмкость для отпуска и в открытом виде стерилизуют горячим воздухом (воздушная стерилизация) в соответствии с режимами стерилизации с последующей укупоркой ёмкостей стерильными пробками в асептических условиях.

В табл. 1 приведены условия изготовления и режимы стерилизации некоторых порошков, предназначенных для лечения новорождённых детей и детей до 1 года.

Таблица 1. Режимы стерилизации лекарственных форм аптечного изготовления в виде порошков, предназначенных для лечения новорождённых и детей до 1 года
№ п/п | Наименование (состав) | Режим стерилизации (температура, время) | Продолжительность хранения (сутки) | Примечание
--- | --- | --- | --- | ---
1. | Бендозола (Дибазола) 0,001 г, Сахара (глюкозы) 0,2 г | Готовят в асептических условиях | 90 | Хранение в защищённом от света месте
2. | Дифенгидрамина (Димедрола) 0,002 г, Сахара (глюкозы) 0,2 г | Готовят в асептических условиях | 90 | Хранение в защищённом от света месте
3. | Фенобарбитала 0,002 г или 0,005 г, Сахара (глюкозы) 0,2 г | Готовят в асептических условиях | 90 | Хранение в защищённом от света месте
4. | Аминофиллина (Эуфиллина) 0,003 г, Сахара 0,2 г | Готовят в асептических условиях | 20 | Хранение в защищённом от света месте
5. | Присыпка ксероформа (трибромфенолята висмута и висмута оксида комплекс) 10 г (до 25 г) | 180 °C– 30 мин Флаконы с присыпкой в открытом виде стерилизуют в биксах в воздушных стерилизаторах с последующей укупоркой флаконов стерильными пробками в асептических условиях | 15 | Хранение в защищённом от света месте

Растворы. Растворы для приёма внутрь и для наружного применения готовят массо-объёмным методом (ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм»), на воде очищенной, отвечающей требованиям ФС «Вода очищенная»; в некоторых случаях, например, для растворов аскорбиновой кислоты, вода очищенная должна быть свежепрокипячённой. Растворы для приёма внутрь, как правило, не должны содержать стабилизаторов, антимикробных консервантов и других вспомогательных веществ.

Растворы, содержащие термостойкие вещества, подвергают стерилизации насыщенным паром под давлением (автоклавирование) в соответствии с режимом стерилизации. Растворы для приёма внутрь, содержащие термолабильные вещества (аскорбиновая кислота и др.) стерилизуют текучим паром.

В табл. 2 приведены условия изготовления и режимы стерилизации некоторых растворов для приёма внутрь, предназначенных для лечения новорождённых детей и детей до 1 года.

Таблица 2. Режимы стерилизации лекарственных форм аптечного изготовления в виде растворов для приёма внутрь, предназначенных для лечения новорождённых детей и детей до 1 года
№ п/п | Наименование (состав) | Режим стерилизации (температура, время) | Продолжительность хранения (сутки) | Примечание
--- | --- | --- | --- | ---
1. | Вода очищенная | 120 °C– 8 мин | 30 |
2. | Раствор декстрозы (глюкозы) 5 %, 10 %, 25 % | 120 °C– 8 мин | 30 | Готовят без стабилизатора.
3. | Раствор декстрозы (глюкозы) 5%– 100 мл, Кислоты аскорбиновой 1 г | 100 °C– 30 мин | 5 | Хранение в защищённом от света месте. Готовят на воде очищенной свежепрокипячённой. При фасовке флаконы заполняют доверху.
4. | Раствор декстрозы (глюкозы) 10 % или 20 %– 100 мл, Кислоты глютаминовой 1 г | 120 °C– 8 мин | 30 | Хранение в защищённом от света месте.
5. | Раствор бендазола (дибазола) 0,01 % | 120 °C– 8 мин | 30 |
6. | Раствор (дифенгидрамина) димедрола 0,02 % | 120 °C– 8 мин | 30 | Хранение в защищённом от света месте. Раствор используют только в фасовке по 10 мл. В условиях родильного дома следует воздерживаться от применения растворов димедрола, учитывая его выраженное седативное действие, угнетающее влияние на ЦНС и возможность развития интоксикации
7. | Раствор калия йодида 0,5 % | 120 °C– 8 мин | 30 | Хранение в защищенном от света месте. Фасовка раствора не должна превышать 20 мл.
8. | Раствор кальция глюконата 1 %, 3 %, 5 % | 120 °C– 8 мин | 7 | Растворяют в горячей воде.
9. | Раствор кальция хлорида 3 % | 120 °C– 8 мин | 30 | Для приготовления раствора целесообразно использовать 10 - 50% концентрат
10. | Раствор аскорбиновой кислоты 1 % | 100 °C– 30 мин | 5 | Хранение в защищённом от света месте. Готовят на воде очищенной свежепрокипячённой. При фасовке флаконы заполняют доверху
11. | Раствор глютаминовой кислоты 1 % | 120 °C– 8 мин | 30 | Хранение в защищённом от света месте
12. | Раствор никотиновой кислоты 0,05 % | 120 °C– 8 мин | 30 | Хранение в защищённом от света месте
13. | Раствор кофеина-бензоата натрия 1 % | 120 °C– 8 мин | 30 |
14. | Раствор: Кофеина-бензоата натрия 0,25 г или 0,5 г, Натрия бромида 0,5 г или 1 г, Воды очищенной до 100 мл | 120 °C– 8 мин | 30 | Хранение в защищённом от света месте
15. | Раствор магния сульфата 5 %, 10 %, 25 % | 120 °C– 8 мин | 30 |
16. | Раствор натрия бромида 1 % | 120 °C– 8 мин | 30 | Хранение в защищённом от света месте
17. | Раствор натрия хлорида 0,9 % | 120 °C– 8 мин | 30 |
18. | Раствор пиридоксина гидрохлорида 0,2 % | 120 °C– 8 мин | 30 | Хранение в защищённом от света месте
19. | Раствор аминофиллина (эуфиллина) 0,05 %, 0,5 % | 120 °C– 8 мин | 15 | Хранение в защищённом от света месте

Растворы для наружного применения, в т. ч. содержащие термолабильные вещества (калия перманганат, серебро коллоидное (колларгол), серебра протеинат (протаргол), водорода пероксид и др., готовят в асептических условиях на стерильной воде очищенной и разливают в стерильные флаконы.

В табл. 3 приведены условия изготовления и режимы стерилизации некоторых растворов для наружного применения, предназначенных для лечения новорождённых детей и детей до 1 года.

Таблица 3. Режимы стерилизации лекарственных форм аптечного изготовления в виде растворов для наружного применения, предназначенных для лечения новорождённых детей и детей до 1 года
№ п/п | Наименование (состав) | Режим стерилизации (температура, время) | Продолжительность хранения (сутки) | Примечание
--- | --- | --- | --- | ---
1. | Раствор калия перманганата 5 % | Готовят в асептических условиях | 2 | Хранение в защищённом от света месте. Раствор готовят на воде очищенной стерильной, разливают в стерильные флаконы
2. | Раствор серебра коллоидного (колларгола) 2 % | Готовят в асептических условиях | 30 | Хранение в защищённом от света месте Раствор готовят на воде очищенной стерильной, разливают в стерильные флаконы
3. | Раствор серебра протеината (протаргола) 2 % | Готовят в асептических условиях | 30 | Хранение в защищённом от света месте Раствор готовят на воде очищенной стерильной, разливают в стерильные флаконы
4. | Раствор натрия тетрабората 10 % в глицерине | 120 °C– 8 мин | 30 |
5. | Раствор водорода пероксида (перекиси водорода) 3 % | Готовят в асептических условиях | 15 | Хранение в защищённом от света месте Раствор готовят на воде очищенной стерильной, разливают в стерильные флаконы, укупоривают полиэтиленовыми пробками и завинчиваемыми крышками
6. | Нитрофурала (Фурацилина) 0,02 г, Раствор натрия хлорида 0,9 % или 10 % до 100 мл | 120 °C– 8 мин | 30 |

Масла. Для наружного применения с целью обработки кожных покровов используют масла растительные жирные (персиковое, оливковое и др.) и масла минеральные (вазелиновое). Масла стерилизуют в бутылках стеклянных для крови, трансфузионных и инфузионных препаратов ёмкостью 50 мл, укупоренных резиновыми пробками, обкатанных алюминиевыми колпачками; стерилизуют при 180 °С в течение 30 мин горячим воздухом (воздушная стерилизация).

В табл. 4 приведены условия изготовления и режимы стерилизации масел, предназначенных для наружного применения у новорождённых детей и детей до 1 года.

Таблица 4. Режимы стерилизации лекарственных препаратов аптечного изготовления, представляющих собой масла для наружного применения, предназначенных для лечения новорождённых детей и детей до 1 года
№ п/п | Наименование (состав) | Режим стерилизации (температура, время) | Продолжительность хранения (сутки) | Примечание
--- | --- | --- | --- | ---
1. | Масло персиковое | 180 °C – 30 мин | 30 | Хранение в прохладном, защищённом от света месте
2. | Масло оливковое | 180 °C– 30 мин | 30 | Хранение в прохладном, защищённом от света месте
3. | Масло подсолнечное | 180 °C– 30 мин | 30 | Хранение в прохладном, защищённом от света месте
4. | Масло вазелиновое | 180 °C– 30 мин | 30 | Хранение в прохладном, защищённом от света месте

Мази. Мази для наружного применения готовят в асептических условиях по общим правилам изготовления мазей (ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде мягких лекарственных форм»), с использованием, по возможности, стерильных ингредиентов, входящих в состав мазей.

Суппозитории. Суппозитории ректальные готовят в асептических условиях по общим правилам (ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм»), используя в качестве суппозиторной основы преимущественно масло какао. Форма и размер суппозитория должны быть указаны в рецепте, как правило, суппозитории для детей имеют массу 0,5–1,5 г.

##### Испытания (контроль качества)

Испытания лекарственных препаратов аптечного изготовления для детей в виде различных лекарственных форм проводят на основании требований действующих нормативных документов, утвержденных уполномоченным федеральным органом исполнительной власти, в соответствии с требованиями и положениями по внутриаптечному контролю лекарственных препаратов аптечного изготовления, указанными в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления» и дополнительными требованиями, указанными в настоящей общей фармакопейной статье.

При проведении органолептического контроля дополнительно к установленным требованиям по проверке лекарственных препаратов по внешнему виду, запаху, однородности смешивания, отсутствию механических включений, лекарственные препараты, предназначенные для детей для приёма внутрь, проверяют выборочно на вкус в случаях.

Физический контроль лекарственных препаратов аптечного изготовления обязательно осуществляется в отношении лекарственных препаратов, предназначенных для новорождённых детей и детей до 1 года.

Обязательному полному химическому контролю по показателям «Подлинность» и «Количественное определение» подвергают лекарственные препараты в любых лекарственных формах для лечения новорождённых детей и детей до 1 года. В случае отсутствия методов контроля качества для полного химического контроля, изготовление лекарственных форм, предназначенных для лечения новорождённых детей и детей до 1 года, необходимо осуществлять под наблюдением специалиста аптечной организации, выполняющего контрольные функции при изготовлении и отпуске лекарственных препаратов.

Для лекарственных препаратов, изготовленных по рецептам или требованиям и предназначенных для детей других возрастных групп, полный химический контроль по показателям «Подлинность» и «Количественное определение» проводят выборочно в количестве не менее трех лекарственных препаратов при работе в одну смену с учётом различных видов лекарственных форм.

##### Упаковка

Выбор системы упаковки/укупорки для лекарственных препаратов аптечного изготовления для детей осуществляют на основании общих требований к упаковке и критериев выбора упаковки для лекарственных препаратов в конкретной лекарственной форме в соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств», а также специфических требований, касающихся лекарственных препаратов аптечного изготовления. Упаковка стерильных лекарственных препаратов должна обеспечивать стерильность.

Система упаковки/укупорки стерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления для детей должна соответствовать ОФС «Стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления». Система упаковки/укупорки нестерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления для детей, в зависимости от агрегатного состояния лекарственной формы, должна соответствовать ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм» или ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм» или ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде мягких лекарственных форм».

При аптечном изготовлении лекарственных препаратов для новорождённых детей по требованиям, если не указано иное:

- объём растворов для приёма внутрь должен составлять 10–20 мл для одноразового использования. Допускается изготовление растворов для приёма внутрь в объёмах, рассчитанных на несколько новорожденных детей, но не более 200 мл, при условии их одномоментного использования;

- объём (масса) растворов для наружного применения – от 20,0 до 100,0 мл (г).

##### Маркировка

Маркировка лекарственных препаратов аптечного изготовления для детей должна соответствовать правилам изготовления и отпуска и ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления».

Все предусмотренные надписи должны быть нанесены на основную этикетку, имеющую соответствующее оформление в зависимости от способа применения лекарственного препарата в педиатрической практике с учётом возраста ребёнка.

Маркировка лекарственных препаратов аптечного изготовления для детей в виде внутриаптечной заготовки может быть напечатана типографским способом, написана от руки, нанесена штампом или с использованием печатающих устройств.

Кроме обязательных предупредительных надписей маркировка лекарственных препаратов аптечного изготовления для детей должна содержать дополнительные предупредительные надписи. На упаковке стерильного лекарственного препарата аптечного изготовления для детей должна быть надпись «Стерильно» или «Приготовлено асептически». Предупредительные надписи на упаковках лекарственных препаратов для детей должны содержать текст: «Детское», «Для новорождённых», а также дополнительные предупредительные надписи в зависимости от вида лекарственной формы.

##### Хранение

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственных средств», в упаковке, обеспечивающей стабильность в течение установленного срока годности лекарственного препарата аптечного изготовления для детей, с соблюдением условий, указанных в маркировке лекарственного препарата.

##### Срок годности

Срок годности отдельных наименований лекарственных препаратов аптечного изготовления для детей должен соответствовать установленному сроку годности, указанному в правилах изготовления и отпуска и в настоящей общей фармакопейной статье.

При отсутствии указаний о сроках годности лекарственных препаратов аптечного изготовления для детей, рекомендуется использовать данные, указанные в ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм» или ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм» или ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде мягких лекарственных форм» и/или ОФС «Стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления».

Аптечная организация вправе устанавливать иные сроки годности, изготавливаемых лекарственных препаратов, если они предусмотрены общими фармакопейными статьями.

После вскрытия флаконы с растворами для новорождённых детей должны быть использованы в течение 2 суток, при условии хранения их при температуре не выше 8 °С; в медицинских организациях вскрытые флаконы с растворами для новорождённых детей хранению не подлежат.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.8.0003 Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм.

Общие положения и основные требования к лекарственным препаратам аптечного изготовления установлены в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления».

К жидким лекарственным формам, в виде которых наиболее часто изготавливают нестерильные лекарственные препараты в аптечных организациях, относят такие лекарственные формы, как растворы, капли, суспензии, эмульсии, настои, отвары, слизи.

##### Особенности технологии

Жидкие лекарственные формы представляют собой дисперсную систему, состоящую из дисперсной фазы, которая распределена в жидкой дисперсионной среде. Дисперсная фаза в жидких лекарственных формах лекарственных препаратов аптечного изготовления может быть представлена фармацевтическими субстанциями, лекарственными препаратами или вспомогательными веществами в различном агрегатном состоянии (далее – веществами), дисперсионная среда – жидким вспомогательным веществом (растворителем, сорастворителями, экстрагентом и др.).

Тип дисперсной системы жидкой лекарственной формы (гомогенный, гетерогенный или комбинированный), физико-химические свойства веществ, входящих в состав лекарственного препарата и некоторые другие факторы определяют основные особенности технологии изготовления нестерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм.

Нестерильные лекарственные препараты в виде жидких лекарственных форм в аптечных организациях могут быть изготовлены следующими методами: массо-объёмным, по массе и по объёму.

Массо-объёмным методом (м/об) изготавливают водные и водно-спиртовые растворы твёрдых веществ.

Методом по массе (м/м) изготавливают растворы твёрдых и жидких веществ в вязких и летучих растворителях, дозируемых по массе, а также суспензии и эмульсии независимо от их концентрации.

К жидкостям, дозируемым по массе в лекарственных препаратах аптечного изготовления, относят:

- жидкости вязкие (глицерол, жирные и минеральные масла, полиэтиленгликоли (полиэтиленоксиды), силиконовые жидкости и др.;

- жидкости летучие (диметилсульфоксид, эфир медицинский, хлороформ, метилсалицилат, масла эфирные, терпентинное масло эфирное очищенное (скипидар) и др.);

- жидкости с плотностью, значительно отличающейся от плотности воды очищенной (бензилбензоат, левоментола раствор в ментил изовалерате, поливинокс, ихтаммол, дёготь берёзовый, нитроглицерин, пероксид водорода, молочная кислота, эфирные масла, терпентинное масло эфирное очищенное, метилсалицилат, нитроглицерин и др.).

Методом по объёму (об/об) изготавливают растворы спирта этилового различной концентрации, растворы кислоты хлористоводородной, растворы жидких стандартных фармакопейных растворов (кроме пергидроля).

К жидкостям, дозируемым по объёму в лекарственных препаратах аптечного изготовления, относят:

- воду очищенную и воду для инъекций;

- водные растворы веществ (в том числе, сироп сахарный, сироп алтейный и др.);

- лекарственные средства на основе лекарственного растительного сырья (настойки, экстракты жидкие, адонизид и др.).

Обозначение концентрации фармацевтических субстанций, лекарственных препаратов и вспомогательных веществ в прописях рецептов и требований на лекарственные препараты в виде жидких лекарственных форм может быть различным:

- в процентах;

- раздельное перечисление компонентов (веществ и растворителя);

- с указанием растворителя до заданного объёма или массы;

- с указанием соотношения массы или объёма растворяемого вещества (веществ) и объёма или массы раствора.

Если в рецепте или требовании не указан растворитель, то изготавливают водный раствор, используя воду очищенную.

Под названием «спирт» в рецепте или требовании понимают спирт этиловый. При отсутствии указания о концентрации спирта этилового, используют спирт этиловый 90 %. При необходимости использования других концентраций, спирт этиловый более высокой концентрации разводят водой очищенной до требуемой концентрации, используя соответствующие алкоголеметрические таблицы Государственной фармакопеи Российской Федерации.

Под названием «эфир» в рецепте или требовании понимают эфир диэтиловый; под названием «глицерин» понимают глицерол (глицерин) 85 % (плотность 1,223–1,233 г/см3).

Раствор – жидкая лекарственная форма, получаемая путём растворения твёрдых, жидких или газообразных веществ в соответствующем растворителе или смеси взаимосмешивающихся растворителей. Общие требования к лекарственной форме «Растворы» указаны в ОФС «Растворы».

Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде растворов по составу могут быть простыми, состоящими из одной растворенной фармацевтической субстанции или сложными, состоящими из двух и более растворённых фармацевтических субстанций, лекарственных препаратов и вспомогательных веществ. По природе растворителя (растворителей) различают водные и неводные растворы аптечного изготовления: спиртовые, масляные, глицериновые и другие. По типу дисперсной системы нестерильные растворы аптечного изготовления могут быть истинными (растворы низкомолекулярных и высокомолекулярных веществ) и коллоидными.

По способу применения нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде растворов могут быть в виде растворов для приёма внутрь, растворов для наружного применения и растворов для местного применения.

Для обозначения некоторых лекарственных форм аптечного изготовления, представляющих собой растворы, применяют специальные термины, например, жидкие лекарственные формы для приёма внутрь называют микстурами; водные или водно-спиртовые растворы эфирных масел – ароматными водами; растворы, представляющие собой жидкое вещество или смесь жидких веществ без растворителя, называют жидкостями. Лекарственные препараты в виде таких лекарственных форм, как «Капли», «Сиропы» также могут представлять собой растворы.

Общая технологическая схема получения нестерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде растворов предусматривает выполнение ряда технологических операций, включающих отмеривание или взвешивание растворителя, взвешивание твёрдого или отмеривание жидкого вещества (веществ), последовательное растворение твёрдых веществ в растворителе или последовательное смешивание жидких веществ с растворителем. Если необходимо, полученный раствор процеживают или фильтруют.

Перед изготовлением растворов, также как и других жидких лекарственных форм аптечного изготовления, необходимо рассчитать объём (массу) исходных компонентов: фармацевтических субстанций, лекарственных препаратов, растворителя и, если применимо, других вспомогательных веществ, а также определить общий объём (массу) жидкой лекарственной формы.

Общий объём растворов при их изготовлении массо-объёмным методом, также как и других жидких лекарственных форм аптечного изготовления, определяется суммой объёмов жидких веществ, входящих в состав лекарственной формы. Если в рецепте или требовании жидкие вещества прописаны по массе, то объём таких жидких веществ можно установить по значению их плотности, приведённой в табл. 1.

Таблица 1. Значения плотности жидких лекарственных средств и вспомогательных веществ
№ п/п | Название лекарственного средства, вспомогательного вещества | Плотность, г/см3 (г/мл)
--- | --- | ---
1. | Аммиака раствор (9,5–10,5 %) | 0,960
2. | Бензилбензоат | 1,118–1,122
3. | Валерианы лекарственной корневища с корнями настойка (Валерианы настойка) | 0,920
4. | Раствор левоментола в ментилизовалерате (Валидол) | 0,896–0,909
5. | Поливинокс (Винилин, бальзам Шостаковского) | 0,910–0,923
6. | Глицерол (Глицерин) | Не менее 1,244
7. | Берёзы коры дёготь (Дёготь березовый) | 0,925–0,950
8. | Диметилсульфоксид (Димексид) | 1,095–1,103
9. | Зверобоя травы настойка (Зверобоя настойка) | 0,970
10. | Ландыша травы настойка (Ландыша настойка) | 0,910
11. | Парафин жидкий (Масло вазелиновое) | 0,850–0,890
12. | Клещевины обыкновенной семян масло жирное (Масло касторовое) | 0,948–0,968
13. | Миндаля семян масло жирное (Масло миндальное) | 0,913–0,918
14. | Мяты перечной листьев масло эфирное (Масло мяты перечной) | 0,896–0,916
15. | Персика семян масло жирное (Масло персиковое) | 0,914–0,920
16. | Подсолнечника семян масло жирное (Масло подсолнечное) | 0,920–0,930
17. | Терпентинное масло эфирное очищенное (Масло терпентинное очищенное, скипидар) | 0,855–0,863
18. | Эвкалипта листьев масло эфирное (Масло эвкалиптовое) | 0,905–0,930
19. | Метилсалицилат | 1,180–1,186
20. | Мяты перечной листьев настойка (Мяты перечной настойка) | 0,858
21. | Аммиака раствор 10 %+Аниса обыкновенного плодов масло эфирное, раствор для приёма внутрь спиртовой (Нашатырно-анисовые капли) | 0,875
22. | Раствор водорода пероксида (Пергидроль (27,5–30,0 %)) | 1,096–1,105
23. | Полиэтиленгликоль-400 (полиэтиленоксид-400) | 1,125
24. | Полыни горькой травы настойка (Полыни настойка) | 0,910
25. | Пустырника травы настойка (Пустырника настойка) | 0,910
26. | Печени рыб масло жирное (Рыбий жир) | 0,917–0,927
27. | Сироп сахарный | 1,301–1,319
28. | Алтея корней сироп (Сироп алтейный) | 1,310–1,330
29. | Камфорный спирт 10 % (Спирт камфорный 10 %) | 0,886–0,895
30. | Спирт этиловый 40 % | 0,949–0,947
31. | Спирт этиловый 70 % | 0,886–0,883
32. | Спирт этиловый 90 % | 0,830–0,826
33. | Спирт этиловый 95 % | 0,808–0,812
34. | Уксусная кислота разведённая (29,5–30,5 %) | 1,038–1,039
35. | Уксусная кислота (98 %) | 1,0498
36. | Формальдегида раствор (Формалин (36,5–37,5 %)) | 1,078–1,093
37. | Хлористоводородная кислота разведенная (8,2–8,4%) | 1,038–1,039
38. | Хлористоводородная кислота (24,8–25,2%) | 1,122–1,124
39. | Хлороформ | 1,474–1,483
40. | Эвкалипта листьев настойка (Эвкалипта настойка) | 0,906–0,930
41. | Эфир диэтиловый (Эфир медицинский) | 0,714–0,717

При определении общего объёма раствора не учитывают изменение общего объёма при растворении твёрдых веществ, если эти изменения не превышают допустимые отклонения в общем объёме жидких лекарственных форм при изготовлении массо-объёмным методом, приведённые в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления».

Если же изменение объёма раствора при растворении твёрдых веществ будет превышать допустимые отклонения, то лекарственную форму рекомендуется изготавливать в мерной посуде, откалиброванной в соответствии с установленными правилами, или для расчёта использовать коэффициенты увеличения объёма лекарственных средств, указанные в табл. 2. Коэффициент увеличения объёма лекарственного средства показывает увеличение объёма раствора в миллилитрах при растворении 1 г фармацевтической субстанции или вспомогательного вещества при температуре 20 °C.

Таблица 2. Коэффициенты увеличения объёма лекарственных средств и вспомогательных веществ
№ п/п | Наименование лекарственного средства | Водные растворы, мл/г | Спиртовые растворы
--- | --- | --- | ---
мл/г | Концентрация спирта, %
1. | Ацетилсалициловая кислота |  | 0,72 | 90
2. | Метамизол натрия (Анальгин) | 0,68 | 0,67 | 30
3. | Бензокаин (Анестезин) |  | 0,85 | 70, 90, 96
4. | Бензилпенициллин натрия (Бензилпенициллина натриевая соль) | 0,68 |  |
5. | Борная кислота | 0,68 | 0,65 | 70, 90, 96
6. | Бромкамфора |  | 0,80 | 70
7. | Метенамин (Гексаметилентетрамин) | 0,78 | 0,79 | 70, 90
8. | Декстроза безводная (Глюкоза безводная) | 0,64 |  |
9. | Декстроза моногидрат (Глюкоза, влажность 10 %) | 0,69 |  |
10. | Глутаминовая кислота (Глютаминовая кислота) | 0,62 |  |
11. | Бендазол (Дибазол) | 0,82 | 0,86 | 30
12. | Тетракаин (Дикаин) | 0,86 |  |
13. | Дифенгидрамин (Димедрол) | 0,86 | 0,87 | 70, 90, 96
14. | Желатин | 0,75 |  |
15. | Изониазид | 0,72 |  |
16. | Йод (в растворе калия йодида) | 0,23 |  |
17. | Калия бромид | 0,27 | 0,36 | 70
18. | Калия йодид | 0,25 |  |
19. | Калия перманганат | 0,36 |  |
20. | Калия хлорид | 0,37 |  |
21. | Кальция глюконат | 0,50 |  |
22. | Кальция хлорид | 0,58 |  |
23. | Камфора рацемическая (Камфора) |  | 1,03 | 70, 90, 96
24. | Серебра протеинат (Колларгол) | 0,61 |  |
25. | Крахмал | 0,68 |  |
26. | Кофеин-бензоат натрия | 0,65 |  |
27. | Хлорамфеникол (Левомицетин) |  | 0,66 | 70, 90, 96
28. | Магния сульфат | 0,50 |  |
29. | Левоментол (Ментол) |  | 1,10 | 70, 90, 96
30. | Метилцеллюлоза | 0,61 |  |
31. | Натрия ацетат | 0,71 |  |
32. | Натрия бензоат | 0,60 |  |
33. | Натрия бромид | 0,26 | 0,30 | 70
34. | Натрия гидрокарбонат | 0,30 |  |
35. | Натрия нуклеинат | 0,55 |  |
36. | Натрия аминосалицилат дигидрат (Натрия пара-аминосалицилат) | 0,64 |  |
37. | Натрия салицилат | 0,59 |  |
38. | Натрия тетраборат | 0,47 |  |
39. | Натрия тиосульфат | 0,51 |  |
40. | Натрия хлорид | 0,33 |  |
41. | Натрия цитрат дигидрат (Натрия цитрат двузамещённый) | 0,48 |  |
42. | Прокаина гидрохлорид (Новокаин) | 0,81 | 0,81 | 70, 90, 96
43. | Прокаинамида (Новокаинамид) | 0,83 |  |
44. | Папаверина гидрохлорид | 0,77 | 0,81 | 30
45. | Пепсин | 0,61 |  |
46. | Пилокарпина гидрохлорид | 0,77 |  |
47. | Пиридоксина гидрохлорид | 0,71 |  |
48. | Поливинилпирролидон | 0,81 |  |
49. | Салициловая кислота |  | 0,77 | 70, 90, 96
50. | Сахароза | 0,63 |  |
51. | Адифенин (Спазмолитин) | 0,86 |  |
52. | Стрептомицина сульфат | 0,58 |  |
53. | Сульфацетамид (Сульфацил-натрий) | 0,62 | 0,65 | 70
54. | Терпингидрат |  | 0,77 | 96
55. | Тримекаина гидрохлорид (Тримекаин) | 0,89 |  |
56. | Тимол |  | 1,01 | 70, 90, 96
57. | Цинка сульфат | 0,41 |  |
58. | Аминофиллин (Эуфиллин) | 0,70 | 0,71 | 12
59. | Эфедрина гидрохлорид | 0,84 |  |

Если в рецепте или требовании указан общий объём раствора (или другой жидкой лекарственной формы), то объём растворителя (дисперсионной среды) рассчитывают путём вычитания из указанного общего объёма лекарственной формы объёмов всех жидких ингредиентов, а также учитывают изменение в общем объёме, применяя коэффициент увеличения объёма, если изменение объёма превышает допустимые нормы при растворении твёрдых веществ.

В первую очередь при изготовлении растворов массо-объёмным методом с водной дисперсионной средой отмеривают рассчитанный объём воды (воды очищенной или воды ароматной), в котором последовательно растворяют твёрдые вещества с учётом растворимости и возможного их взаимодействия.

Первыми в отмеренном объёме водной дисперсионной среды растворяют наркотические, психотропные, сильнодействующие лекарственные средства; далее – остальные лекарственные средства с учётом их растворимости.

Для повышения и ускорения растворения твёрдых веществ применяют их предварительное измельчение и перемешивание, нагревание раствора в процессе изготовления применяют с учётом физико-химических свойств веществ. Если твёрдое вещество мало растворимо или практически нерастворимо, может быть применено получение растворимых производных (комплексообразование, образование растворимых солей) и солюбилизация.

После растворения твёрдых веществ, полученный раствор процеживают или фильтруют через соответствующий материал, подобранный с учётом свойств растворителя и твёрдого вещества.

Твёрдые фармацевтические субстанции могут быть введены в состав раствора в виде заранее изготовленных концентрированных растворов, прибавляемых после растворения твёрдых веществ и фильтрования раствора. Если дисперсионной средой раствора является вода ароматная, то концентрированные растворы при изготовлении растворов и других жидких лекарственных форм не применяют.

Если в состав растворов входят другие жидкие вещества, то их прибавляют к полученному водному раствору в последнюю очередь в следующей последовательности:

- водные нелетучие и непахучие жидкости;

- иные нелетучие жидкости, смешивающиеся с водой;

- водные летучие жидкости;

- жидкости, содержащие спирт этиловый, в порядке возрастания его концентрации (табл. 3);

- другие неводные летучие и пахучие жидкости.

Таблица 3. Содержание спирта этилового в некоторых жидких лекарственных средствах
№ п/п | Наименование жидкого лекарственного средства | Содержание спирта этилового,% (об/об)
--- | --- | ---
1 | Аммиака+Аниса обыкновенного семян масло+Солодки корней экстракт, раствор для приёма внутрь (Грудной эликсир) | Не менее 14
2 | Тимьяна травы экстракт жидкий | Не менее 20
3 | Экстракты жидкие стандартизованные (концентраты) | 20–30
4 | Тысячелистника обыкновенного травы экстракт жидкий | 33–40
5 | Элеутерококка колючего корневищ экстракт жидкий | 33–40
6 | Красавки листьев настойка | 35–40
7 | Зверобоя травы настойка | 36–40
8 | Йода раствор спиртовой 5 % | Не менее 46
9 | Крапивы листьев экстракт жидкий | 41–50
10 | Боярышника плодов экстракт жидкий | 55–70
11 | Аралии манчьжурской корней настойка | 61–70
12 | Перца водяного травы экстракт жидкий | 64–70
13 | Ландыша травы настойка | 64–70
14 | Полыни горькой травы настойка | 64–70
15 | Пустырника травы настойка | 64–70
16 | Эвкалипта листьев настойка | 64–70
17 | Боярышника плодов настойка | 65–70
18 | Валерианы лекарственной корневища с корнями настойка | 65–70
19 | Женьшеня настоящего корней настойка | 65–70
20 | Календулы лекарственной цветков настойка | 65–70
21 | Заманихи корневища с корнями настойка | 66–70
22 | Аммиака раствор 10 %+Аниса обыкновенного плодов масло эфирное, раствор для приёма внутрь спиртовой (Нашатырно-анисовые капли) | 75–80
23 | Мяты перечной листьев настойка | 84–90
24 | Перца стручкового плодов настойка | 86–90
25 | Лимонника плодов настойка | 85–95
26 | Лимонника семян настойка | 85–95
27 | Цитраля раствор спиртовой 1 % | 96

Общая масса растворов, также как и других жидких лекарственных форм, при изготовлении методом по массе, определяется суммой масс всех веществ, входящих в состав лекарственной формы. Если в рецепте или требовании жидкие вещества прописаны по объёму, то массу таких жидких веществ можно установить по значению их плотности (табл. 1).

При изготовлении растворов по массе с использованием дисперсионной среды в виде вязких и летучих растворителей, вначале непосредственно в сухой флакон для отпуска отвешивают указанные в рецепте или требовании вещества, а затем отвешивают или отмеривают растворитель и перемешивают до растворения и получения раствора. При использовании вязких растворителей (глицерин, масла) применяют нагревание, учитывая физико-химические свойства веществ. Растворы, содержащие летучие вещества, нагревают при температуре не более
40–45 °С, но не нагревают жидкости, содержащие эфир и его смеси со спиртом этиловым.

Растворы, изготовленные на основе вязких и летучих растворителей, при необходимости процеживают через сухой фильтрующий материал, который подбирают с учётом вязкости и летучести растворителя, соблюдая меры предосторожности для снижения потерь, связанных с испарением.

Особенности изготовления спиртовых растворов. Спиртовые растворы изготавливают массо-объёмным методом. Количество спирта этилового, указанное в рецепте или требовании, соответствует объёмным единицам измерения.

При аптечном изготовлении неводных спиртовых растворов и других лекарственных форм спирт этиловый дозируют по объёму, не уменьшая указанный в рецепте или требовании его объём на величину возможного увеличения при растворении веществ, указанных в рецепте или требовании.

Если в рецепте или требовании количество спирта этилового не указано, а указан общий объём спиртового раствора, то необходимый для изготовления объём спирта этилового определяют путём вычитания объёмов всех жидких веществ из общего указанного в рецепте или требовании объёма лекарственной формы, а для твёрдых веществ – учитывают изменение в объёме лекарственной формы при их растворении в том случае, если изменение объёма превышает допустимые отклонения, приведённые в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления»).

Стандартные спиртовые растворы должны соответствовать составу, указанному в табл. 4. Если в рецепте или требовании выписан стандартный спиртовой раствор без указания концентрации спирта этилового, но в соответствии с табл. 4, имеющий несколько концентраций, то изготавливают и отпускают спиртовой раствор наименьшей концентрации.

Таблица 4. Стандартные спиртовые растворы
№ п/п | Наименование стандартного спиртового раствора | Состав стандартного спиртового раствора
--- | --- | ---
1. | Йода 5 % | Йода 50 г, Калия йодида 20 г, Воды очищенной, Спирта этилового 95 % поровну до 1000 мл
2. | Борной кислоты 3 % | Борной кислоты 30 г, Спирта этилового 70 % до 1000 мл
3. | Салициловой кислоты 1 % и 2 % | Салициловой кислоты 10 г или 20 г, Спирта этилового 70 % до 1000 мл
4. | Хлорамфеникола (Левомицетина) 0,25 %; 1 %; 3 %; 5 % a Хлорамфеникола (Левомицетина) 0,25 г; 1 г; 3 г или 5 г, Спирта этилового 70 % до 100 мл | 5.

При растворении веществ в спирте этиловом с концентрацией до 70 % (об/об) раствор нагревают только в случае необходимости с соблюдением мер предосторожности. При использовании спирта этилового с концентрацией выше 70 % (об/об) нагревание растворов не допускается.

Учёт израсходованного спирта этилового в аптечной организации осуществляют по массе в пересчёте объёма на концентрацию в соответствии с табл. 5 (для спирта этилового 95 %) и табл. 6 (для спирта этилового 96 %).

Таблица 5. Соответствие объёмов (мл) спирта этилового различной концентрации массе (г) 95 % спирта при температуре 20 °C
Концентрация спирта этилового, % | Объём (мл) спирто-водного раствора и соответствие его массе (г) спирта этилового
--- | ---
5 | 10 | 15 | 20 | 25 | 30 | 40 | 50 | 100
95 | 4,06 | 8,11 | 12,17 | 16,23 | 20,29 | 24,34 | 32,46 | 40,57 | 81,14
90 | 3,84 | 7,69 | 11,53 | 15,37 | 19,22 | 23,06 | 30,75 | 30,44 | 76,07
80 | 3,42 | 6,83 | 10,25 | 13,66 | 17,08 | 20,50 | 27,33 | 34,16 | 68,32
70 | 2,99 | 5,98 | 8,97 | 11,95 | 14,94 | 17,93 | 23,91 | 29,89 | 59,77
60 | 2,56 | 5,13 | 7,69 | 10,26 | 12,82 | 15,38 | 20,51 | 25,64 | 51,28
50 | 2,14 | 4,27 | 6,41 | 8,54 | 10,68 | 12,81 | 17,08 | 21,35 | 42,70
40 | 1,71 | 3,41 | 5,12 | 6,83 | 8,53 | 10,24 | 13,65 | 17,07 | 34,13
30 | 1,28 | 2,56 | 3,84 | 5,12 | 6,40 | 7,68 | 10,24 | 12,30 | 25,60
20 | 0,85 | 1,70 | 2,56 | 3,41 | 4,26 | 5,11 | 6,82 | 8,52 | 17,04

Таблица 6. Соответствие объёмов (мл) спирта этилового различной концентрации массе (г) 96 % спирта при температуре 20 °C
Концентрация спирта этилового, % | Объём (мл) °спирто-водного раствора и соответствие его массе (г) спирта этилового
--- | ---
5 | 10 | 15 | 20 | 25 | 30 | 40 | 50 | 100
96 | 4,04 | 8,08 | 12,11 | 16,15 | 20,19 | 24,23 | 32,30 | 40,38 | 80,75
90 | 3,79 | 7,57 | 11,36 | 15,14 | 18,93 | 22,71 | 30,28 | 37,86 | 75,71
80 | 3,37 | 6,73 | 10,09 | 13,46 | 16,82 | 20,19 | 26,92 | 33,65 | 67,29
70 | 2,95 | 5,89 | 8,83 | 11,78 | 14,72 | 17,67 | 23,56 | 29,45 | 58,89
60 | 2,52 | 5,05 | 7,57 | 10,09 | 12,62 | 15,14 | 20,18 | 25,23 | 50,46
50 | 2,10 | 4,20 | 6,31 | 8,41 | 10,51 | 12,61 | 16,82 | 21,02 | 42,04
40 | 1,68 | 3,37 | 5,05 | 6,73 | 8,42 | 10,10 | 13,46 | 16,83 | 33,66
30 | 1,26 | 2,52 | 3,78 | 5,04 | 6,30 | 7,56 | 10,08 | 12,61 | 25,21
20 | 0,84 | 1,68 | 2,53 | 3,37 | 4,21 | 5,03 | 6,74 | 8,42 | 16,84

Особенности изготовления растворов высокомолекулярных веществ. Растворы высокомолекулярных веществ изготавливают массо-объёмным методом (например, растворы пепсина, желатина) или по массе (например, растворы крахмала, эфиров целлюлозы).

Для растворения ограниченно набухающих высокомолекулярных веществ используют технологические приёмы набухания и нагревания (например, растворы желатина, крахмала) или охлаждения (например, раствор метилцеллюлозы).

Разведение стандартных фармакопейных растворов. Для аптечного изготовления нестерильных лекарственных препаратов в виде растворов могут быть использованы стандартные фармакопейные растворы, представляющие собой водные растворы промышленного производства, содержащие строго определённые, более высокие, чем выписываемые в рецепте или требовании, концентрации действующих веществ. Изготовление растворов сводится к разведению стандартных фармакопейных растворов водой, но расчёты по разведению конкретных наименований стандартных фармакопейных растворов имеют особенности.

Растворы хлористоводородной кислоты любой концентрации изготавливают в аптечных организациях из хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, принимая её за единицу (100 %). Указанный стандартный фармакопейный раствор используют также для получения 10 % (1:10) раствора (табл. 9), позиционируемого как концентрированный раствор (концентрация водорода хлорида при этом будет равна 0,83 %).

Если в прописи рецепта или требовании концентрация раствора не указана, то отпускают хлористоводородную кислоту разведённую 8,3 %. Хлористоводородная кислота концентрированная 25 % отпускается только в тех случаях, когда имеется соответствующее указание в рецепте или требовании. Без дополнительного указания хлористоводородная кислота концентрированная 25 % используется при изготовлении раствора №2 по прописи Демьяновича.

Растворы аммиака и растворы уксусной кислоты изготавливают, исходя из фактического содержания веществ в стандартных фармакопейных растворах аммиака и уксусной кислоты. Если в прописи рецепта или требовании концентрация раствора не указана, то отпускают 30 % раствор уксусной кислоты и 10 % раствор аммиака.

При выполнении расчётов для разведения стандартных фармакопейных растворов водорода пероксида и формальдегида до требуемой концентрации учитывают, под каким наименованием (химическим или условным) раствор выписан в рецепте или требовании. При разведении стандартных фармакопейных растворов, выписанных под химическим наименованием (раствор формальдегида или раствор водорода пероксида), расчёт исходного лекарственного средства проводится с учетом фактического содержания вещества в растворе. При выписывании фармакопейного раствора под условным названием (раствор формалина или раствор пергидроля) концентрация исходного препарата принимается за единицу (100 %). Если в прописи рецепта или требовании не указана требуемая концентрация раствора, то отпускают 3 % раствор водорода пероксида и 35 % раствор формальдегида.

Водорода пероксид (пергидроль) относится к жидкостям, которые при изготовлении лекарственных препаратов дозируют по массе; для необходимых пересчётов содержания водорода пероксида используют данные, указанные в табл. 7.

Таблица 7. Соотношения плотности и концентрации водорода пероксида в растворе
Плотность водорода пероксида, г/см3 | Концентрация водорода пероксида, %
--- | ---
по массе | массо-объёмная
1,096 | 27,5 | 29,18
1,098 | 28 | 30,72
1,101 | 29 | 31,94
1,105 | 30 | 33,15
1,109 | 31 | 34,36
1,112 | 32 | 35,59
1,116 | 33 | 36,82
1,119 | 34 | 38,05
1,123 | 35 | 39,29
1,126 | 36 | 40,55
1,130 | 37 | 41,81
1,134 | 38 | 43,07
1,137 | 39 | 44,34
1,141 | 40 | 45,62

Растворы защищённых коллоидов. Растворы защищённых коллоидов серебра протеинат (протаргола), серебра коллоидного (колларгола), ихтаммола (ихтиола) изготавливают массо-объёмным методом.

Растворы протаргола изготавливают путём рассыпания его на поверхность воды очищенной и оставляют до полного растворения.

Растворы колларгола изготавливают с предварительным его измельчением и смешиванием с водой очищенной.

Коллоидные растворы фильтруют через обеззоленные бумажные или стеклянные фильтры.

Суспензия – жидкая лекарственная форма, представляющая собой гетерогенную дисперсную систему, содержащую одно или несколько твёрдых действующих веществ, распределённых в жидкой дисперсионной среде. Общие требования к лекарственной форме «Суспензии» указаны в ОФС «Суспензии».

Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде суспензий по способу применения могут быть в виде суспензии для приёма внутрь, суспензии для наружного применения и суспензии для местного применения.

Независимо от концентрации действующих веществ суспензии изготавливают по массе.

Основной технологической задачей при аптечном изготовлении суспензий является максимальное диспергирование твёрдых нерастворимых частиц дисперсной фазы лекарственной формы. В аптечных организациях суспензии изготавливают в ступке или с использованием смесителей различной конструкции. При изготовлении суспензий в смесителях все ингредиенты помещают в смеситель и перемешивают до получения однородной массы. Время смешивания зависит от физико-химических свойств ингредиентов и конструкции смесителя.

При изготовлении суспензий в ступке для достижения требуемой степени измельчения твёрдых нерастворимых ингредиентов рекомендуется растирать их в ступке по правилам изготовления порошков с последующим диспергированием полученной порошковой смеси до тонкой однородной массы оптимальным количеством жидкости (дисперсионной среды), равной 1/2 массы измельчаемых веществ, затем массу из ступки необходимо перенести во флакон для отпуска порциями дисперсионной среды. Суспензии не подлежат фильтрации. Указанного приёма изготовления бывает достаточно для образования устойчивой суспензии, если дисперсная фаза представлена гидрофильными веществами.

Для получения устойчивых суспензий, содержащих гидрофобные вещества, необходимо также повышение вязкости дисперсионной среды, которое достигается введением в состав препарата вязких жидкостей (например, сиропа сахарного, глицерола и др.), стабилизаторов или применения других технологических приёмов, используемых для конкретных наименований суспензий. Выбор стабилизатора и его количество обусловлены свойствами стабилизируемого вещества, степенью его гидрофобности или гидрофильности.

При аптечном изготовлении нестерильных лекарственных препаратов в виде суспензий и эмульсий из гидрофобных веществ рекомендуется использовать стабилизаторы, указанные в табл. 8, учитывая физико-химические свойств компонентов лекарственного препарата, стабилизаторов, способа применения лекарственного препарата.

Таблица 8. Стабилизаторы гетерогенных систем для суспензий и эмульсий
№ п/п | Наименование стабилизатора | Стабилизируемые компоненты, количество в г
--- | --- | ---
масляная фаза 10 г | гидрофобное твёрдое вещество 1 г
с резко выраженными свойствами | с не резко выраженными свойствами
1. | Желатоза | 5,0 | 1,0 | 0,5
2. | Крахмал | 5,0 (используется в виде 10 % раствора) | 1,0 (используется в виде 5 % раствора) | 0,5 (используется в виде 5 % раствора)
3. | Лецитин (фосфатидилхолин) | от 0,75 до 2,0 | - | -
4. | Метилцеллюлоза (МЦ) | 1,0 (используется в виде 5 % раствора) | 1,0 (используется в виде 5 % раствора) | 0,5
5. | Моноглицериды дистиллированные (МГД) | 2,0 | - | -
6. | Пектин | 5,0 | - | -
7. | Сухое молоко | 10,0 | - | -
8. | Твин-80 | 2,0 | 0,2 | 0,1
9. | Эмульгатор Т-2 | 1,5–2,0 |  |

Эмульсия – жидкая лекарственная форма, представляющая собой гетерогенную двухфазную дисперсную систему с жидкой дисперсной фазой и жидкой дисперсионной средой. Общие требования к лекарственной форме «Эмульсии» указаны в ОФС «Эмульсии».

По способу применения нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде эмульсий могут быть в виде эмульсии для приёма внутрь, эмульсии для наружного применения, эмульсии для местного применения.

Лекарственные формы в виде эмульсии независимо от концентрации действующих веществ изготавливают по массе. Различают два основных типа эмульсий: «масло в воде» и «вода в масле». В случае аптечного изготовления нестерильных лекарственных препаратов в виде эмульсии типа «масло в воде»:

- если в составе лекарственного препарата отсутствует обозначение масла, то используют масло персиковое, масло оливковое или масло подсолнечное;

- если в составе лекарственного препарата нет указаний о содержании масла, то для приготовления 100,0 г эмульсии берут 10,0 г масла.

Основной технологической задачей при аптечном изготовлении эмульсий является обеспечение их физической стабильности. Для стабилизации эмульсий используют эмульгаторы, некоторые из которых приведены в табл. 8. Выбор эмульгатора и определение необходимого его количества для изготовления конкретного лекарственного препарата в виде эмульсии, зависит от технологических и физико-химических свойств эмульгатора и масла, концентрации эмульсии и способа её применения.

Технология аптечного изготовления эмульсии типа «масло в воде» включает расчёт количества её компонентов, применяемых для последующего получения в ступке «первичной эмульсии», которая затем должна быть разбавлена дисперсионной средой. Способ введения в эмульсии лекарственных средств и, если применимо, вспомогательных веществ, обусловлен их физико-химическими свойствами: липофильные вещества растворяют в маслах, водорастворимые – в воде, предназначенной для разбавления эмульсии, нерастворимые вещества диспергируют с готовой эмульсией.

Капли – жидкая лекарственная форма, представляющая собой раствор, эмульсию или суспензию одного или нескольких действующих веществ в соответствующем растворителе и дозируемая каплями с помощью соответствующего приспособления (капельница, пипетка и др.). Общие требования к лекарственной форме «Капли» указаны в ОФС «Капли».

По типу дисперсной системы капли аптечного изготовления могут быть гомогенными, гетерогенными. Нестерильные аптечные лекарственные препараты в виде капель могут быть предназначены для приёма внутрь, для местного применения (зубные, назальные, ушные, для слизистой рта и др.).

Технология изготовления нестерильных гетерогенных капель аптечного изготовления, представляющих собой суспензии или эмульсии, соответствует условиям, задачам, указанным для аптечного изготовления нестерильных лекарственных препаратов в лекарственных формах «Суспензии» или «Эмульсии».

Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде капель гомогенных представлены растворами, которые могут быть водными и неводными. Для сохранения объёма и концентрации капель фармацевтические субстанции и, если применимо, вспомогательные вещества, указанные в рецепте или требовании, растворяют примерно в половинном объёме растворителя; полученный раствор фильтруют через смоченный растворителем фильтр, промывают фильтр оставшимся объёмом растворителя.

При изготовлении капель на неводных растворителях (спирт этиловый, глицерин, масла и иные растворители) учитывается растворимость лекарственных средств и состав растворителя, а также количество капель в 1 г и 1 мл, масса 1 капли жидких лекарственных средств при температуре 20 °C по стандартному каплемеру с отклонениями ±5 % в соответствии с данными таблицы, приведенной в ОФС «Каплемеры».

Настои, отвары – жидкие лекарственные формы, представляющие собой водные извлечения из лекарственного растительного сырья. Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде лекарственных форм «Настои» или «Отвары» должны соответствовать ОФС «Настои и отвары».

Для быстрого и качественного изготовления и отпуска нестерильных лекарственных препаратов в виде жидких лекарственных форм по рецептам и требованиям используют заранее изготовленные концентрированные растворы, полуфабрикаты и лекарственные препараты в виде внутриаптечной заготовки и фасовки.

Концентрированные растворы рекомендуется изготавливать из гигроскопичных веществ, способных к выветриванию на воздухе, содержащих значительное количество кристаллизационной воды. При изготовлении концентрированных растворов декстрозы моногидрата, необходимо проводить перерасчёт её количества с учётом содержания кристаллизационной воды. При изготовлении концентрированных растворов следует избегать концентраций, близких к насыщенным, так как при понижении температуры возможна кристаллизация растворённого вещества.

Номенклатура концентрированных растворов определяется спецификой рецептуры и объёмом работы аптеки. В табл. 9 приведены наименования концентрированных растворов с указанием концентраций и сроков годности в условиях указанной температуры хранения.

Таблица 9. Концентрированные растворы, рекомендуемые для отмеривания из бюреточной установки
№ п/п | Наименование концентрированного раствора | Концентрация, % | Срок годности, сутки
--- | --- | --- | ---
не выше 25 °C | 3–5 °C
1. | Аскорбиновая кислота | 5 | 5 |
2. | Метенамин (Гексаметилентетрамин) | 10, 20, 40 | 20 |
3. | Декстроза безводная (Глюкоза безводная) | 10, 20, 40, 50 | 4 | 10
4. | Калия бромид | 20 | 20 |
5. | Калия йодид | 20 | 15 |
6. | Кальция хлорид | 10, 20 | 10 |
7. | Кальция хлорид | 50 | 30 |
8. | Кофеин-бензоат натрия | 5 | 7 | 15
9. | Кофеин-бензоат натрия | 20 | 20 |
10. | Магния сульфат | 10, 25, 50 | 15 |
11. | Натрия бензоат | 10 | 20 |
12. | Натрия бромид | 20 | 20 |
13. | Натрия гидрокарбонат | 5 | 4 | 10
14. | Натрия салицилат | 40 | 20 |
15. | Хлористоводородная кислота | 1:10 | 30 |

Концентрированные растворы изготавливают массо-объёмным способом в мерной посуде в асептических условиях с использованием свежеприготовленной воды очищенной. Если изготовление проводят не в мерной посуде, то объём воды очищенной рассчитывают с использованием значения плотности концентрированного раствора или коэффициента увеличения объёма веществ. В табл. 10 указаны масса фармацевтической субстанции и объём воды, необходимые для изготовления 1 л концентрированного раствора массо-объёмным методом.

Таблица 10. Данные для изготовления 1 литра концентрированного раствора некоторых фармацевтических субстанций
№ п/п | Наименование фармацевтической субстанции | Концентрация раствора, % | Плотность, г/мл или г/см3 | Количества
--- | --- | --- | --- | ---
фармацевтической субстанции, г | воды, мл
1. | Аскорбиновая кислота | 5 | 1,018 | 50,0 | 968
2. | Борная кислота | 3 | 1,010 | 30,0 | 978
3. | Борная кислота | 4 | 1,010 | 40,0 | 970
4. | Метенамин (Гексаметилентетрамин) | 10 | 1,021 | 100,0 | 921
5. | Метенамин (Гексаметилентетрамин) | 20 | 1,042 | 200,0 | 842
6. | Метенамин (Гексаметилентетрамин) | 40 | 1,088 | 400,0 | 688
7. | Декстроза безводная (Глюкоза безводная) | 10 | 1,034 | 100,0 | 934
8. | Декстроза безводная (Глюкоза безводная) | 20 | 1,068 | 200,0 | 868
9. | Декстроза безводная (Глюкоза безводная) | 40 | 1,150 | 400,0 | 749
10. | Декстроза безводная (Глюкоза безводная) | 50 | 1,186 | 500,0 | 685
11. | Калия бромид | 20 | 1,144 | 200,0 | 944
12. | Калия йодид | 20 | 1,148 | 200,0 | 848
13. | Кальция хлорид | 5 | 1,020 | 50,0 | 970
14. | Кальция хлорид | 10 | 1,041 | 100,0 | 941
15. | Кальция хлорид | 20 | 1,078 | 200,0 | 878
16. | Кальция хлорид | 50 | 1,207 | 500,0 | 707
17. | Кофеин-бензоат натрия | 10 | 1,034 | 100,0 | 934
18. | Кофеин-бензоат натрия | 20 | 1,073 | 200,0 | 873
19. | Магния сульфат | 10 | 1,048 | 100,0 | 948
20. | Магния сульфат | 20 | 1,093 | 200,0 | 893
21. | Магния сульфат | 25 | 1,116 | 250,0 | 866
22. | Магния сульфат | 50 | 1,221 | 500,0 | 721
23. | Натрия бензоат | 10 | 1,038 | 100,0 | 938
24. | Натрия бромид | 20 | 1,149 | 200,0 | 949
25. | Натрия гидрокарбонат | 5 | 1,033 | 50,0 | 988
26. | Натрия салицилат | 10 | 1,030 | 100,0 | 940
27. | Натрия салицилат | 20 | 1,830 | 200,0 | 883
28. | Натрия салицилат | 40 | 1,160 | 400,0 | 760

Изготовленные концентрированные растворы фильтруют, подвергают полному химическому контролю и проверяют на отсутствие механических включений. Допустимые отклонения (в процентах) в концентрированных растворах, изготовленных массо-объёмным методом, приведены в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления».

В случае превышения нормы допустимого отклонения производят исправление концентрации раствора. Концентрированные растворы после их разведения или укрепления подвергают полному химическому контролю повторно.

Емкости с концентрированными растворами оформляют этикетками с указанием наименования и концентрации раствора, даты изготовления, срока годности и анализа и подписи лица, проверившего раствор.

Изменение цвета, помутнение, появление хлопьев, налётов ранее установленного срока годности являются признаками непригодности растворов.

Полуфабрикаты для изготовления нестерильных жидких лекарственных форм изготавливают в асептических условиях с использованием воды очищенной. К полуфабрикатам, представляющим собой жидкость, относят изготовленные заранее растворы, содержащие одну или несколько фармацевтических субстанций, например ароматные воды. Состав вод ароматных аптечного изготовления и особенности технологии их изготовления приведены в табл. 11.

Таблица 11. Требования к изготовлению ароматных вод
№ п/п | Состав ароматной воды | Особенности изготовления ароматной воды
--- | --- | ---
1. | Вода укропная 0,005 % (хранение не более 30 суток): Фенхеля обыкновенного плодов масло эфирное (Масло фенхелевое) 0,05 г Вода очищенная до 1 л | В асептических условиях указанное количество соответствующего масла в течение 1 мин энергично смешивают с водой до растворения
2. | Вода мятная 0,044% (хранение не более 15 суток): Мяты перечной листьев масло эфирное (масло мяты перечной) 0,44 г Вода очищенная до 1 л

Номенклатура лекарственных препаратов в виде внутриаптечной заготовки жидких лекарственных форм зависит от специфики аптечной организации.

##### Испытания (контроль качества)

Испытания нестерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм проводят на основании требований действующих нормативных документов, утверждённых уполномоченным федеральным органом исполнительной власти, в соответствии с требованиями и положениями по внутриаптечному контролю лекарственных препаратов аптечного изготовления, указанными в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления».

##### Упаковка

Выбор системы упаковки/укупорки для нестерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм осуществляют на основании общих требований к упаковке и критериев выбора упаковки для лекарственных препаратов в конкретной лекарственной форме в соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств», а также следующих специфических требований, касающихся лекарственных препаратов аптечного изготовления.

Первичная упаковка нестерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм, как правило, является многодозовой, представляющей собой флаконы из бесцветного или светозащитного стекла (если в составе лекарственного препарата присутствуют светочувствительные вещества), укупоренные укупорочными средствами (крышками, пробками и др.). Используются флаконы различного объёма в зависимости от выписанного объёма (массы) лекарственного препарата в жидкой лекарственной форме.

Для аптечных лекарственных препаратов в виде капель предпочтительна упаковка во флаконы-капельницы, в виде
суспензий – предпочтительно упаковывать во флаконы из бесцветного стекла, при отсутствии в составе светочувствительных веществ. Лекарственные препараты в виде эмульсий для наружного применения желательно упаковывать во флаконы или банки с широким горлом.

##### Маркировка

Маркировка лекарственных препаратов аптечного изготовления, включая нестерильные лекарственные препараты в виде жидких лекарственных форм, осуществляется в соответствии с правилами изготовления и отпуска и ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления».

Кроме обязательных предупредительных надписей маркировка лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм должна содержать дополнительные предупредительные надписи:

- «Хранить в прохладном и защищённом от света месте» – микстуры и другие жидкие лекарственные формы, содержащие термолабильные и светочувствительные вещества;

- «Перед употреблением взбалтывать» – микстуры, суспензии, эмульсии, капли гетерогенные.

##### Хранение

В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств», в упаковке, обеспечивающей стабильность в течение установленного срока годности нестерильного лекарственного препарата аптечного изготовления в виде жидкой лекарственной формы, с соблюдением условий, указанных в маркировке лекарственного препарата.

##### Срок годности

Срок годности отдельных наименований нестерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм должен соответствовать установленному сроку годности, указанному в правилах изготовления и отпуска. Если для указанных лекарственных препаратов аптечного изготовления срок годности не установлен, то руководствуются следующими данными.

Срок годности нестерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления составляет:

- для жидких лекарственных форм, за исключением капель, эмульсий и суспензий – не более 14 суток

- для настоев, отваров, слизей – не более 2 суток;

- для эмульсий, суспензий, изготовленных с использованием стабилизаторов, – не более 7 суток;

- для эмульсий, суспензий, изготовленных без стабилизаторов, – не более 2 суток;

- для остальных лекарственных форм – не более 10 суток.

Аптечная организация вправе устанавливать иные сроки годности, изготавливаемых лекарственных препаратов, если они предусмотрены общими фармакопейными статьями.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.8.0004 Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде мягких лекарственных форм

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде мягких лекарственных форм.

Общие положения и основные требования к лекарственным препаратам аптечного изготовления установлены в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления».

К мягким лекарственным формам, в виде которых могут быть изготовлены нестерильные лекарственные препараты в аптечных организациях, относят такие лекарственные формы, как мази, линименты, пасты, гели и кремы.

##### Особенности технологии

В зависимости от консистентных свойств мягкие лекарственные формы лекарственных препаратов подразделяют на мази, гели, кремы, пасты и линименты. Общие требования к перечисленным лекарственным формам указаны в ОФС «Мягкие лекарственные формы».

Мазь – мягкая лекарственная форма, состоящая из однофазной основы, в которой растворены или диспергированы твёрдые или жидкие действующие вещества.

Линимент – мягкая лекарственная форма для местного применения, обладающая свойством текучести при температуре тела.

Паста – мягкая лекарственная форма, содержащая значительное количество (более 25 %) тонкоизмельчённых твёрдых веществ.

Крем – мягкая лекарственная форма в виде многофазной системы, состоящая из липофильного типа «вода/масло» и гидрофильной типа «масло/вода» фаз или множественной эмульсии.

Гель – мягкая лекарственная форма в виде коллоидной дисперсии, полученная путем гелеобразования с использованием специальных веществ.

Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде мягких лекарственных форм изготавливают по массе. Массу мягкой лекарственной формы определяют, как сумму количеств ингредиентов, указанных в рецепте или требовании.

По типу дисперсных систем нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде мягких лекарственных формы могут быть гомогенными (сплавы, растворы), гетерогенными (суспензии, эмульсии) и комбинированными.

Для изготовления нестерильных лекарственных препаратов в виде мягких лекарственных форм используют вспомогательные вещества: основы, консерванты, антиоксиданты, активаторы всасывания. Основа мягкой лекарственной формы должна обеспечивать проявление специфической активности лекарственного препарата в этой лекарственной форме, не нарушать функции кожи, слизистых, не вызывать аллергических реакций и иных побочных действий.

При аптечном изготовлении мягких лекарственных форм могут быть использованы следующие основы:

- гидрофобные – жировые, липофильные (природные жиры, растительные масла, гидрогенизаты растительных масел, гидрогенизированные жиры и их сплавы с растительными маслами), углеводородные (вазелин, вазелиновое масло, сплавы углеводородов), силиконовые (эсилон-аэросильная основа);

- гидрофильные – гели высокомолекулярных углеводов и белков (гели метилцеллюлозы и натрия карбоксиметилцеллюлозы, комбинации полиэтиленоксидов и другие полимеры, эфиры целлюлозы, крахмал, желатин);

- гидрофильно-липофильные, дифильные – безводные сплавы липофильных основ с эмульгаторами (сплав вазелина с ланолином безводным или с другими эмульгаторами), эмульсионные основы (смесь вазелина с ланолином водным, консистентная эмульсия вода/вазелин и др.).

Нестерильные лекарственные препараты в виде мягких лекарственных форм, вводимые в полости тела, наносимые на обширные раны и ожоговые поверхности, изготавливают в асептических условиях.

Основные технологические задачи при аптечном изготовлении мягких лекарственных форм включают обеспечение максимальной степени измельчения (диспергирования) веществ в ступке, равномерного распределения всех веществ (фармацевтических субстанций, лекарственных препаратов и вспомогательных веществ) в основе, получение однородной стабильной лекарственной формы.

Нестерильные лекарственные препараты в виде мягких лекарственных форм изготавливают в ступках или смесителях; гомогенные линименты могут быть изготовлены в упаковке (флаконе, банке) для отпуска.

При аптечном изготовлении мазей:

- если в составе лекарственного препарата отсутствует указание о концентрации действующего вещества, как правило, готовят мазь 10 % концентрации. Если мазь содержит действующие вещества, превышение дозировки которых может вызвать токсическое действие, то указание их концентрации обязательно;

- если в рецепте или требовании отсутствует наименование основы, то основа должна быть выбрана специалистом самостоятельно с учётом физико-химической совместимости компонентов мази.

При введении в основу мягкой лекарственной формы фармацевтических субстанций, лекарственных препаратов (при наличии) и вспомогательных веществ (при наличии) необходимо учитывать их растворимость в основе и воде, выписанные их количества, которые определяют особенности технологии мягкой лекарственной формы в зависимости от получаемой дисперсной системы.

Гомогенные мягкие лекарственные формы – мягкие лекарственные формы нестерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления, в которых вещества в основе распределены по типу сплавов (мягкие лекарственные формы-сплавы) или растворов (мягкие лекарственные формы-растворы).

Мягкие лекарственные формы-сплавы на липофильных основах получают сплавлением ингредиентов с учётом их температуры плавления.

Мягкие лекарственные формы-растворы на липофильных (гидрофобных) основах получают растворением жирорастворимых веществ в расплавленной основе или в гидрофобных компонентах сложных основ.

Мягкие лекарственные формы-растворы на гидрофильных (липофобных, водорастворимых) основах получают при растворении водорастворимых веществ в воде, являющейся составной частью лекарственной формы, или других жидкостях с учётом растворимости, затем смешивают с основой или растворяют в ней. При изготовлении лекарственной формы на безводной основе, вещества растворяют в минимальном количестве воды с учётом допустимых отклонений в общей массе лекарственной формы и предела водопоглощающей способности основы, затем смешивают с основой.

При аптечном изготовлении гомогенных линиментов – вещества растворяют в той жидкости, в которой они лучше растворимы, затем смешивают с остальными веществами.

Суспензионные мягкие лекарственные формы. При аптечном изготовлении нестерильных суспензионных мягких лекарственных форм вещества, нерастворимые ни в основе, ни в воде, вначале измельчают, затем диспергируют с оптимальным количеством жидкости. При содержании нерастворимых веществ (твёрдой фазы) в составе мягкой лекарственной формы менее 5 %, вещества измельчают с дополнительно вводимой жидкостью, родственной основе (для углеводородных основ – это вазелиновое масло, для жировых – масло жирное, для гидрофильных – вода, глицерол 85 %, спирт этиловый 90 %), в количестве, примерно равном половине массы измельчаемых веществ.

При содержании в составе мягкой лекарственной формы твёрдой фазы от 5 % до 25 % вещества измельчают с частью расплавленной основы, равной половине от массы твёрдых веществ, остальное количество основы используют в нерасплавленном виде.

При изготовлении гетерогенных (суспензионных) линиментов нерастворимые вещества измельчают с одним из входящих в состав линимента наименее вязким и нелетучим веществом (растворителем). Для повышения седиментационной устойчивости суспензионных линиментов возможно использование загустителей, например, кремния диоксид коллоидный (аэросил).

При содержании нерастворимых веществ 25 % и более в аптечной организации готовят мягкую лекарственную форму «пасту» – вещества измельчают вначале с половинным количеством расплавленной основы, а затем по частям вводят оставшуюся расплавленную основу.

Эмульсионные мягкие лекарственные формы. Нестерильные лекарственные препараты в виде эмульсионных мягких лекарственных форм на липофильных и дифильных основах содержат водные или спиртовые растворы лекарственных средств. Эмульсионные мягкие лекарственные формы аптечного изготовления на гидрофильных основах содержат гидрофобные жидкости.

При аптечном изготовлении в эмульсионные мягкие лекарственные формы (как правило, мази) в виде водных растворов вводят серебра протеинат (протаргол), серебро коллоидное (колларгол), танин, сухие экстракты и другие водорастворимые лекарственные средства, которые предварительно растворяют в воде с учётом их растворимости и допустимых отклонений в общей массе мазей (табл. 2). Полученные растворы эмульгируют и смешивают с оставшимся количеством основы. Жидкие лекарственные средства, входящие в состав рецепта или требования, эмульгируют основой. Если в рецепте или требовании на нестерильный лекарственный препарат в виде мягкой лекарственной формы указан резорцин или цинка сульфат, то их вводят в мягкие лекарственные формы (кроме офтальмологических) по типу суспензий.

Комбинированные мягкие лекарственные формы – это многофазные системы, представляющие собой сочетание различных типов дисперсных систем (растворов, суспензий, эмульсий). При изготовлении комбинированных мягких лекарственных форм вещества вводят в основу лекарственной формы с учётом их физико-химических свойств. Технологические приёмы, используемые при изготовлении комбинированных мягких лекарственных форм, должны предупреждать нежелательные взаимодействия лекарственных средств и вспомогательных веществ друг с другом или расслоение мягкой лекарственной формы в процессе изготовления и хранения, обеспечивать получение однородной массы.

Летучие жидкости при изготовлении мягких лекарственных форм различных типов дисперсных систем добавляют в последнюю очередь.

Для быстрого и качественного изготовления и отпуска нестерильных лекарственных препаратов в виде мягких лекарственных форм по рецептам и требованиям используют заранее изготовленные лекарственные препараты в виде внутриаптечной заготовки и фасовки, а также полуфабрикаты.

К полуфабрикатам в виде мягких лекарственных форм, относят изготовленные заранее смеси, содержащие основу и одну или несколько фармацевтических субстанций.

В табл. 1 приведены составы лекарственных препаратов в виде мазей с установленными сроками годности в указанных условиях хранения, рекомендуемые к аптечному изготовлению в виде внутриаптечной заготовки.

Таблица 1. Мази
№ п/п | Наименование (состав) | Продолжительность хранения при температуре 3–5 °C, сутки | Примечание
--- | --- | --- | ---
1. | Мазь димедроловая 5 % Состав № 1: Дифенгидрамина гидрохлорида (Димедрола) 5 г, Вазелина 86,5 г, Ланолина безводного 9,5 г | 30 | Хранение в защищённом от света месте. Данный состав рекомендуется использовать, если врач при выписывании мази не указал основу. Обладает поверхностным действием
2. | Мазь димедроловая 5 % Состав № 2: Дифенгидрамина гидрохлорида (Димедрола) 5 г, Подсолнечника семян масла жирного (Масла подсолнечного), Воды очищенной, Ланолина безводного по 31,6 г | 30 | Хранение в защищённом от света месте. Обладает проникающим, резорбтивным действием
3. | Мазь теофиллиновая 10% Состав: Теофиллина 10 г, Эмульгатора Т-2 9 г, Вазелина 54 г, Воды очищенной 27 г, Диметилсульфоксида (Димексида) 10 г | 1 год | Хранение в защищённом от света месте.
4. | Мазь фурациллиновая 0,2% Состав: Нитрофурала (фурациллина) 0,2 г, Парафина жидкого (Масла вазелинового) 0,6 г, Вазелина 99,2 г | 30 | Хранение в защищённом от света месте.

##### Испытания (контроль качества)

Испытания нестерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде мягких лекарственных форм проводят на основании требований действующих нормативных документов, утверждённых уполномоченным федеральным органом исполнительной власти, в соответствии с требованиями и положениями по внутриаптечному контролю лекарственных препаратов аптечного изготовления, указанными в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления».

##### Упаковка

Выбор системы упаковки/укупорки для нестерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде мягких лекарственных форм осуществляют на основании общих требований к упаковке и критериев выбора упаковки для лекарственных препаратов в конкретной лекарственной форме в соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств», а также следующих специфических требований, касающихся лекарственных препаратов аптечного изготовления.

Первичная упаковка нестерильных лекарственных препаратов в виде мягких лекарственных форм может представлять собой стеклянные банки, укупоренные навинчивающимися пластмассовыми или натягиваемыми крышками, с подложенным под крышку герметизирующим приспособлением (пергаментная или парафинированная бумага или картонные прокладки с двусторонним покрытием из полиэтилена), тубы алюминиевые или из полимерных или комбинированных материалов и др.

##### Маркировка

Маркировка лекарственных препаратов аптечного изготовления, включая нестерильные лекарственные препараты в виде мягких лекарственных форм, осуществляется в соответствии с правилами изготовления и отпуска и ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления».

Кроме обязательных надписей маркировка лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде мягких лекарственных форм должна содержать дополнительные предупредительные надписи в соответствии с видом лекарственной формы и физико-химическими свойствами веществ, входящих в состав лекарственного препарата:

- «Хранить в прохладном и защищённом от света месте» – все мягкие лекарственные формы.

- «Перед употреблением взбалтывать» – линименты.

##### Хранение

В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств», в упаковке, обеспечивающей стабильность в течение установленного срока годности нестерильного лекарственного препарата аптечного изготовления в виде мягкой лекарственной формы, с соблюдением условий, указанных в маркировке лекарственного препарата.

##### Срок годности

Срок годности отдельных наименований нестерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде мягких лекарственных форм должен соответствовать установленному сроку годности, указанному в правилах изготовления и отпуска.

Если для указанных лекарственных препаратов аптечного изготовления срок годности не установлен, то руководствуются следующими данными.

Срок годности нестерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде мягких лекарственных форм составляет:

- для нестерильных мягких лекарственных форм (мазей, линиментов) – 14 суток;

- для остальных лекарственных форм – не более 10 суток.

Аптечная организация вправе устанавливать иные сроки годности, изготавливаемых лекарственных препаратов, если они предусмотрены общими фармакопейными статьями.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.8.0005 Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм.

Общие положения и основные требования к лекарственным препаратам аптечного изготовления установлены в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления».

К твёрдым лекарственным формам, в виде которых наиболее часто изготавливают нестерильные лекарственные препараты в аптечных организациях, относят такие лекарственные формы, как порошки, суппозитории, пилюли.

##### Особенности технологии

Порошок – твёрдая лекарственная форма, состоящая из отдельных сухих частиц различной степени дисперсности, обладающая свойством сыпучести. Общие требования к лекарственной форме «Порошки» указаны в ОФС «Порошки».

Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде порошков представляют собой механические смеси измельчённых веществ – фармацевтических субстанций, лекарственных препаратов, вспомогательных веществ. По составу порошки аптечного изготовления могут быть простыми, состоящими из одной фармацевтической субстанции, или сложными, состоящими из двух и более фармацевтических субстанций, лекарственных препаратов, вспомогательных веществ. Порошки могут быть дозированными (разделёнными на отдельные дозы) и недозированными (неразделёнными на отдельные дозы). По способу применения нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде порошков могут быть предназначены для приёма внутрь, для наружного применения, для местного применения.

Перед изготовлением порошков необходимо рассчитать количества исходных компонентов – фармацевтических субстанций, и, если применимо, лекарственных препаратов, вспомогательных веществ (далее – веществ или ингредиентов). При распределительном способе прописывания порошков необходимо однократные дозы веществ, указанные в рецепте или требовании, умножить на число доз. При разделительном способе прописывания порошков необходимо отвешивать вещества в том количестве, которое указано в рецепте или требовании.

Основные технологические задачи при аптечном изготовлении порошков включают обеспечение: необходимой степени измельчения ингредиентов, для сложных порошков – однородности при смешивании; для дозированных порошков – точности дозирования.

В аптеках порошки могут быть изготовлены с использованием специального технологического оборудования (измельчители, смесители и др.) или в ступках. Для взвешивания ингредиентов порошка и разделения порошковой смеси на дозы по массе, указанные в рецепте или требовании, используют подходящие ручные или электронные весы, для разделения порошковой смеси на дозы по объёму также могут быть использованы дозаторы.

Если количество фармацевтической субстанции (действующего вещества) на всю массу изготавливаемого порошка составляет менее 0,05 г, то для изготовления порошка, как правило, используют тритурацию фармацевтической субстанции (лекарственного препарата) – её смесь с лактозой моногидратом или другими вспомогательными веществами в соотношении 1:10 или 1:100.

Для изготовления порошков в ступке для прописанного в рецепте или требовании состава лекарственного препарата рекомендуется выбрать ступку оптимальной загрузки, при этом общая масса порошка не должна превышать максимальную загрузку ступки с учётом параметров ступки, определённых в табл 1. В зависимости от размера ступки подбирают пестик.

Таблица 1. Параметры аптечных ступок
№ п/п | Диаметр по верхнему ободу, мм | Рабочая поверхность, см2 | Коэффициент ступки | Рабочий объём, см3 | Время измельчения, сек | Загрузка, г
--- | --- | --- | --- | --- | --- | ---
максимальная, г | оптимальная, г
1.* | 50 | 45 | 1 | 20 | 60 | 1 | 0,5
2. | 75 | 90 | 2 | 80 | 90 | 4 | 1,5
3. | 86 | 90 | 3 | 80 | 90 | 4 | 1,5
4. | 110 | 135 | 3 | 160 | 120 | 8 | 3
5. | 140 | 225 | 5 | 320 | 150 | 16 | 6
6. | 184 | 450 | 10 | 960 | 210 | 48 | 18
7. | 243 | 765 | 17 | 2240 | 300 | 112 | 42
* Примечание – Далее «ступка №1».

Вещество, измельчаемое в ступке первым, теряется в её порах и порах пестика. Количество теряемого вещества зависит от структуры самого вещества. Измельчение и смешивание порошков осуществляют путём последовательного добавления ингредиентов от меньших количеств к большим количествам в предварительно затёртой ступке индифферентным в фармакологическом отношении вспомогательным веществом или лекарственным средством с соблюдением потерь в соответствии с табл. 2. Остальные ингредиенты при изготовлении порошков добавляют в порядке увеличения их массы при соблюдении соотношения 1:20.

Таблица 2. Нормы потерь лекарственных средств при растирании в ступке №1*
№ п/п | Наименование фармацевтической субстанции | Величина потери, мг
--- | --- | ---
1. | Бензокаин (Анестезин) | 24
2. | Аскорбиновая кислота | 12
3. | Ацетилсалициловая кислота | 33
4. | Бромкамфора | 15
5. | Висмута субнитрат (Висмута нитрат основной) | 42
6. | Метенамин (Гексаметилентетрамин) | 26
7. | Бендазола гидрохлорид (Дибазол) | 18
8. | Калия бромид | 15
9. | Калия йодид | 21
10. | Кальция глицерофосфат | 25
11. | Камфора рацемическая (Камфора) | 24
12. | Кофеин | 15
13. | Трибромфенолята висмута и висмута оксида комплекс (Ксероформ) | 57
14. | Хлорамфеникол (Левомицетин) | 29
15. | Магния карбонат гидрат (Магния карбонат основной) | 19
16. | Магния сульфат | 17
17. | Рацементол (Ментол) | 10
18. | Натрия бензоат | 20
19. | Натрия гидрокарбонат | 11
20. | Натрия салицилат | 23
21. | Никотиновая кислота | 15
22. | Резорцинол (Резорцин) | 27
23. | Салициловая кислота | 55
24. | Сера (Сера осажденная) | 24
25. | Сульфаниламид (Стрептоцид) | 23
26. | Сульфадимидин (Сульфадимезин) | 18
27. | Теофиллин | 16
28. | Терпингидрат | 15
29. | Фенилсалицилат | 24
30. | Цинка оксид | 36
* Примечание – Для ступок других размеров, указанных в пунктах 2 – 7 табл. № 1 величину потери, взятую для ступки №1, умножают на коэффициент рабочей поверхности. Максимальная загрузка каждого номера ступки не должна превышать 1/20 части её объёма. При измельчении в ступке сразу нескольких ингредиентов они измельчаются независимо друг от друга, поэтому в ступке более рационально измельчать смесь ингредиентов, чем каждое из них по отдельности.

Требование к необходимой степени измельчения порошков зависит от его способа применения. Если нет других указаний, порошки должны быть измельчены до мелкого порошка и быть однородными при рассмотрении невооружённым глазом. Порошки, предназначенные для присыпок, измельчают до очень мелкого порошка.

Порядок смешивания ингредиентов порошка зависит не только от их количеств, но и от их физико-химических свойств.

Вещества, обладающие красящими свойствами, прибавляют в ступку на последнем этапе смешивания порошков или между слоями некрасящих ингредиентов и тщательно смешивают до однородной по цвету массы.

Легкораспыляющиеся/легковесные вещества добавляют в ступку в последнюю очередь. При выборе номера ступки для порошков, в состав которых входят такие вещества, необходимо учитывать, что масса легковесного вещества теоретически удваивается.

Трудноизмельчаемые лекарственные средства (тимол, йод, камфора, левоментол, борная кислота и др.) измельчают при необходимости с использованием жидкого лекарственного средства (например, спирт этиловый 95 % из расчета 10 капель на 1 г измельчаемого вещества).

Жидкие лекарственные средства, пахучие вещества, входящие в состав порошка, прибавляют к измельчённой смеси порошка в последнюю очередь с сохранением при этом основного свойства порошка – сыпучести.

Изготовление нестерильных порошков из готовых лекарственных препаратов осуществляют по указанному врачом составу изготавливаемого лекарственного препарата и вспомогательному веществу (при необходимости) в рецепте или требовании.

Допускается изготовление порошков из готовых лекарственных препаратов в виде твёрдых лекарственных форм (таблеток, капсул), обеспечивающих немедленное высвобождение лекарственных средств. Не допускается изготовление порошков из готовых лекарственных препаратов в виде лекарственных форм (таблеток, капсул) пролонгированного действия и покрытых кишечнорастворимой оболочкой.

При изготовлении порошков из таблеток их измельчают. Если в состав таблетки входят наркотические средства, психотропные, сильнодействующие и ядовитые вещества, то предварительно измельчают индифферентное вспомогательное вещество.

При изготовлении порошков из капсул их содержимое вводят в порошки по правилам изготовления лекарственных препаратов в форме порошков с учётом физико-химических свойств ингредиентов.

Масса одного порошка, изготовленного из готовых лекарственных препаратов в виде твёрдых лекарственных форм (таблеток, капсул), должна быть не менее 0,1 г. При отсутствии в рецепте или требовании указания о вспомогательном веществе, при изготовлении порошка из других лекарственных форм (таблеток, капсул) используют индифферентное вспомогательное вещество, в т.ч. входящее в состав данных лекарственных форм (таблеток, капсул).

Рекомендации по изготовлению порошков из готовых лекарственных препаратов в виде твёрдых лекарственных форм приведены в ОФС «Выбор лекарственных форм для детей» (раздел «Модификация лекарственных форм»).

Суппозитории – твёрдая дозированная лекарственная форма, предназначенная для введения в полость тела и расплавляющаяся (растворяющаяся, распадающаяся) при температуре тела.

Лекарственные препараты аптечного изготовления в виде лекарственной формы «Суппозитории» могут представлять собой суппозитории ректальные, суппозитории вагинальные и палочки.

Палочки – твёрдая дозированная лекарственная форма конической или цилиндрической формы, предназначенная для введения в естественные или патологические полости организма. Общие требования к лекарственной форме «Суппозитории» указаны в ОФС «Суппозитории».

При аптечном изготовлении суппозиториев используют суппозиторные основы: гидрофобные (масло какао и др.), гидрофильные (желатино-глицериновые, мыльно-глицериновые) и другие. Если в рецепте или требовании не указана суппозиторная основа, то используют масло какао.

Масса одного ректального суппозитория должна находиться в пределах от 1 г до 4 г, масса одного вагинального суппозитория – в пределах от 1,5 г до 6 г, масса одной палочки – от 0,5 г до 1 г. Если в рецепте или требовании не указано другое, то ректальные суппозитории изготавливают массой 3 г, вагинальные суппозитории – массой не менее 4 г.

Для аптечного изготовления суппозиториев также могут быть использованы вспомогательные вещества: консерванты, антиоксиданты, активаторы всасывания и др.

Лекарственные препараты аптечного изготовления в виде лекарственной формы «Суппозитории» изготавливают по массе методами выкатывания, прессования и выливания. Используемая технология изготовления должна обеспечить получение суппозиториев, имеющих однородную массу с равномерно распределённым по отдельным суппозиториям количеством действующих веществ и необходимую консистенцию (твёрдость) для удобства применения.

Введение в суппозитории лекарственных средств и вспомогательных веществ (при наличии) зависит от их физико-химических свойств, прежде всего от растворимости в суппозиторной основе или воде, а также от их прописанного количества.

При методе выливания вещества, растворимые в жирах, растворяют в расплавленной липофильной суппозиторной основе. При методе выкатывания вещества, растворимые в жирах, тщательно диспергируют, растирая с частью измельчённой основы или оптимальным количеством вспомогательной жидкости, родственной основе. При образовании эвтектической смеси добавляют вспомогательные вещества – уплотнители.

Водорастворимые вещества растворяют в минимальном количестве растворителя с учётом их растворимости, способности суппозиторной основы инкорпорировать растворитель и допустимых норм отклонения в массе отдельных суппозиториев от выписанной массы, приведённых в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления».

Нерастворимые в суппозиторной основе вещества и вещества, нерастворимые или очень трудно растворимые в воде, тщательно измельчают и вводят в основу в нерастворённом виде в виде мельчайших порошков, по правилам изготовления аптечных суспензий (ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм»).

При изготовлении суппозиториев методом ручного формования (выкатывания) масло какао предварительно измельчают в стружку и его рассчитанное количество добавляют частями к лекарственным средствам и вспомогательным веществам (при наличии), измельчённым и смешанным в ступке. Полученную массу уминают в ступке для улучшения пластичности до получения однородной суппозиторной массы. Используя соответствующее оборудование для выкатывания суппозиториев, из полученной суппозиторной массы формируют брусок или цилиндрический стержень определённой длины, осуществляют разделение бруска (стержня) на дозы, затем из каждой дозы выкатывают суппозиторий соответствующей формы.

При изготовлении суппозиториев методом выливания расплавленную суппозиторную массу помещают (выливают) в специальные формы соответствующего оборудования. Формы для изготовления суппозиториев перед выливанием предварительно охлаждают и смазывают жидкостью, не родственной суппозиторной основе.

При расчёте количества суппозиторной основы при изготовлении суппозиториев методом выливания учитывают объём гнезда используемой формы, физико-химические свойства суппозиторной основы и количественное содержание лекарственных средств.

При содержании лекарственных средств 5 % и более учитывают коэффициент замещения или обратный коэффициент замещения (I/Еж) в соответствии с табл. 3. Коэффициент замещения (Еж) показывает количество лекарственного средства, которое занимает такой же объём, как и 1,0 г жировой основы. Обратный коэффициент замещения (I/Еж) показывает количество жировой основы, которое занимает такой же объём, как и 1,0 г лекарственного средства.

Таблица 3. Коэффициенты замещения (EЖ) и обратные коэффициенты замещения (I/EЖ) некоторых лекарственных средств
№ п/п | Наименование фармацевтической субстанции | Коэффициент замещения (Eж) | Обратный коэффициент замещения (I/Eж)
--- | --- | --- | ---
1. | Ампициллин | 1,72 | 0,59
2. | Метамизол натрия (Анальгин) | 1,27 | 0,79
3. | Бензокаин (Анестезин) | 1,33 | 0,75
4. | Апилак | 1,48 | 0,68
5. | Аскорбиновая кислота | 1,73 | 0,58
6. | Бензилпенициллин натрия (Бензилпенициллина натриевая соль) | 1,75 | 0,57
7. | Борная кислота | 1,60 | 0,625
8. | Висмута субнитрат (Висмута нитрат основной) | 4,80 | 0,21
9. | Декстроза (Глюкоза) | 1,23 | 0,81
10. | Висмута субгаллат (Дерматол) | 2,60 | 0,38
11. | Ихтаммол (Ихтиол) | 1,10 | 0,91
12. | Кальция глюконат | 2,01 | 0,50
13. | Камфора рацемическая (Камфора) | 0,98 | 1,02
14. | Трибромфенолята висмута и висмута оксида комплекс (Ксероформ) | 4,80 | 0,63
15. | Хлорамфеникол (Левомицетин) | 1,59 | 0,63
16. | Клещевины обыкновенной семян масло жирное (Масло касторовое) | 1,00 | 1,00
17. | Натрия бромид | 2,22 | 0,45
18. | Натрия гидрокарбонат | 2,12 | 0,47
19. | Натрия салицилат | 1,98 | 0,52
20. | Прокаина гидрохлорид (Новокаин) | 1,40 | 0,71
21. | Папаверина гидрохлорид | 1,59 | 0,63
22. | Парафин твёрдый (Парафин) | 1,00 | 1,00
23. | Серебра протеинат 8 % (Протаргол) | 1,40 | 0,71
24. | Резорцинол (Резорцин) | 1,41 | 0,71
25. | Сера (Сера осажденная) | 1,41 | 0,71
26. | Стрептомицина сульфат (Стрептомицин) | 0,26 | 0,80
27. | Теофиллин | 1,23 | 0,81
28. | Фенилсалицилат | 1,40 | 0,72
29. | Фенобарбитал | 1,40 | 0,71
30. | Фуразолидон | 1,81 | 0,55
31. | Цинка оксид | 4,00 | 0,25
32. | Цинка сульфат | 2,00 | 0,50
33. | Аминофиллин (Эуфиллин) | 1,25 | 0,80

Пилюли – твёрдая дозированная лекарственная форма для приёма внутрь в виде шариков, как правило, массой от 0,1 г до 0,5 г, диаметром не более 8 мм, полученных из однородной пластичной массы. Пилюли массой более 0,5 г называются болюсами. Общие требования к лекарственной форме «Пилюли» указаны в ОФС «Пилюли».

Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде лекарственной формы «Пилюли» изготавливают с использованием специального оборудования методом ручного формования.

Особенность технологии аптечного изготовления пилюль заключается, как правило, в самостоятельном выборе специалистом вспомогательных формообразующих веществ для получения пилюльной массы, которая должна быть однородной, пластичной, состоящей из смеси лекарственных средств и вспомогательных веществ, легко отстающей от стенок ступки и пестика. Введение лекарственных средств в состав пилюльной массы необходимо осуществлять с учётом их физико-химических свойств и растворимости. Полученную пилюльную массу дозируют с использованием соответствующего оборудования, формируют пилюли и обсыпают вспомогательным веществом, предназначенным для этой цели.

Для быстрого и качественного изготовления и отпуска нестерильных лекарственных препаратов в виде твёрдых лекарственных форм по рецептам и требованиям используют заранее изготовленные лекарственные препараты в виде внутриаптечной заготовки и фасовки, а также полуфабрикаты, включая тритурации.

Тритурации изготавливают в количестве, достаточном для обеспечения примерно месячной потребности. Для уменьшения расслаивания тритурации при хранении, рекомендуется вновь её перемешивать в отдельной ступке через каждые 15 дней.

Номенклатура лекарственных препаратов в виде внутриаптечной заготовки твёрдых лекарственных форм зависит от специфики аптечной организации.

##### Испытания (контроль качества)

Испытания нестерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм проводят на основании требований действующих нормативных документов, утверждённых уполномоченным федеральным органом исполнительной власти, в соответствии с требованиями и положениями по внутриаптечному контролю лекарственных препаратов аптечного изготовления, указанными в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления».

##### Упаковка

Выбор системы упаковки/укупорки для нестерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм осуществляют на основании общих требований к упаковке и критериев выбора упаковки для лекарственных препаратов в конкретной лекарственной форме в соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств», а также следующих специфических требований, касающихся лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм.

Порошки. Первичной упаковкой нестерильных лекарственных препаратов в виде дозированных порошков могут быть бумажные капсулы (простые, вощёные, парафинированные или пергаментные), а также твёрдые желатиновые капсулы и др. Выбор капсул необходимого качества для порошков зависит от физико-химических свойств веществ, входящих в состав порошка. Капсулы с порошком помещают в картонную коробку или бумажный пакет – вторичную, потребительскую упаковку или в другие виды упаковки. Недозированные порошки отпускают пациенту, как правило, в бумажных двойных пакетах, или в картонных коробках, или в банках стеклянных или из полимерного материала.

Суппозитории. Лекарственные препараты аптечного изготовления в виде суппозиториев ректальных или вагинальных, изготовленных на гидрофобных основах, упаковывают, как правило, в тонкую пергаментную бумагу; для первичной упаковки суппозиториев на гидрофильных основах используют гофрированный колпачок или фольгу. Затем суппозитории, как правило, помещают в потребительскую упаковку (коробку). Лекарственные препараты аптечного изготовления в виде палочек, как правило, укладывают в картонные коробки – в складки бумаги, сверху прикрывают бумажной капсулой.

Пилюли. Лекарственные препараты аптечного изготовления в виде пилюль упаковывают в стеклянные, полимерные банки или картонные коробки.

##### Маркировка

Маркировка лекарственных препаратов аптечного изготовления, включая нестерильные лекарственные препараты в виде твёрдых лекарственных форм, осуществляется в соответствии с правилами изготовления и отпуска и ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления».

Кроме обязательных надписей маркировка лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм должна содержать дополнительные предупредительные надписи:

- «Хранить в сухом месте» – порошки, пилюли;

- «Хранить в защищённом от света месте» – лекарственные формы, содержащие светочувствительные вещества».

##### Хранение

В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств», в упаковке, обеспечивающей стабильность в течение установленного срока годности нестерильного лекарственного препарата аптечного изготовления в виде твёрдой лекарственной формы, с соблюдением условий, указанных в маркировке лекарственного препарата.

##### Срок годности

Срок годности отдельных наименований нестерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм должен соответствовать установленному сроку годности, указанному в правилах изготовления и отпуска.

Если для указанных лекарственных препаратов аптечного изготовления срок годности не установлен, то руководствуются следующими данными.

Срок годности нестерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм составляет:

- для нестерильных твёрдых лекарственных форм – 14 суток;

- для нестерильных твёрдых лекарственных форм в твёрдых желатиновых капсулах – 45 суток;

- для остальных лекарственных форм – не более 10 суток.

Аптечная организация вправе устанавливать иные сроки годности, изготавливаемых лекарственных препаратов, если они предусмотрены общими фармакопейными статьями.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.8.0006 Стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления.

Общие положения и основные требования к лекарственным препаратам аптечного изготовления установлены в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления».

Стерильные лекарственные препараты могут быть изготовлены в виде следующих лекарственных форм:

- лекарственные формы для парентерального применения (растворы для инъекций, растворы для инфузий и др.);

- лекарственные формы для офтальмологического применения (капли глазные, растворы для промывания глаз (растворы для орошения глаз), мази глазные и др.);

- лекарственные формы для новорождённых детей и детей до 1 года (порошки, растворы, суспензии, мази, капли глазные, растворы для инъекций, растворы для инфузий и др.);

- лекарственные формы, предназначенные для нанесения на раневые и ожоговые поверхности (растворы, порошки и др.), растворы для орошения (мочевого пузыря, желудка, и др.);

- лекарственные формы лекарственных препаратов, содержащих антибиотики (порошки, растворы, капли, мази, капли глазные, мази глазные и др.).

Стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления, изготовленные заранее, представлены стерильными лекарственными препаратами в виде внутриаптечной заготовки.

Кроме того, при изготовлении стерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления могут быть использованы стерильные концентрированные растворы, предназначенные для изготовления лекарственных препаратов для офтальмологического применения, для новорождённых детей и детей до 1 года.

##### Особенности технологии

Кроме общих требований к изготовлению лекарственных препаратов, указанных в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления», к технологическому процессу изготовления стерильных лекарственных препаратов предъявляются особые требования, направленные на сведение к минимуму риска их загрязнения микроорганизмами, механическими частицами, пирогенами.

Все стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления должны быть получены в условиях асептического изготовления с соблюдением требований к помещениям, оборудованию, персоналу, материалам (фармацевтическим субстанциям, вспомогательным веществам, вспомогательным материалам и др.), методам стерилизации, системе упаковки/укупорки и другим требованиям, установленным действующим законодательством.

В зависимости от физико-химических и других свойств компонентов, входящих в состав лекарственного препарата, стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления подразделяют на:

- лекарственные препараты, которые подлежат финишной (окончательной) стерилизации в конечной упаковке;

- лекарственные препараты, которые не могут быть подвергнуты финишной стерилизации в конечной упаковке, они изготавливаются в асептических условиях с соблюдением всех необходимых мероприятий для обеспечения стерильности.

В аптеке производственной с правом изготовления асептических лекарственных препаратов должен быть организован комплекс помещений для изготовления стерильных лекарственных препаратов; оборудовано одно или несколько рабочих мест по их изготовлению.

Запрещается одновременное изготовление на одном рабочем месте нескольких стерильных лекарственных препаратов, содержащих фармацевтические субстанции различных наименований или одного наименования, но в различных концентрациях.

Из-за различных, часто индивидуальных, подходов к технологии изготовления аптечных лекарственных препаратов, следует особое внимание обращать на расчёты необходимых количеств исходных веществ, воды для инъекций или воды очищенной и других веществ, используемых в технологическом процессе аптечного изготовления стерильных лекарственных препаратов.

При изготовлении водных растворов для инъекций, растворов для инфузий, жидких лекарственных форм для офтальмологического применения, содержащих в составе декстрозы моногидрат, пересчёт её количества проводят с учётом содержания кристаллизационной воды.

Обязательным технологическим этапом аптечного изготовления стерильных лекарственных препаратов является стерилизация. Общие требования к стерилизации указаны в ОФС «Стерилизация». В условиях аптечного изготовления лекарственных препаратов используются, как правило, следующие методы термической стерилизации:

- стерилизация насыщенным паром под давлением (автоклавирование) – для лекарственных препаратов в виде водных растворов, масел растительных, жиров, изделий из стекла, фарфора, металла, перевязочных и вспомогательных материалов (вата, марля, фильтровальная бумага, пергамент, спецодежда и др.), резиновых изделий;

- стерилизация горячим воздухом (воздушная стерилизация) – для стерилизации термостойких порошкообразных веществ (натрия хлорид, цинка оксид, тальк, каолин и др.), масел минеральных и растительных, жиров, ланолина, вазелина и др., а также изделий из стекла, металла, силиконовых эластомеров, фарфора и др.

Выбор метода стерилизации зависит от чувствительности стерилизуемого объекта к действию стерилизующего агента, эффективности воздействия стерилизующего агента на микроорганизмы. Применяемый метод стерилизации должен обеспечить сохранение эффективности и безопасности лекарственного препарата аптечного изготовления. Контроль параметров и эффективности методов стерилизации осуществляют с помощью контрольно-измерительных приборов, химических и биологических тестов.

Изготовленные лекарственные препараты подвергают стерилизации в окончательной упаковке. В случаях, когда термическая стерилизация изготовленных лекарственных препаратов в окончательной упаковке невозможна, используют метод стерилизующей фильтрации или изготовление лекарственных препаратов осуществляют в асептических условиях с соблюдением установленных требований.

Растворы для инъекций и растворы для инфузий, содержащие вещества, требующие защиты от воздействия повышенной температуры, рекомендуется стерилизовать фильтрованием в ламинарном потоке воздуха с помощью мембранных фильтров с номинальным размером пор не более 0,22 мкм и глубинных фильтров с эквивалентными свойствами по удержанию микроорганизмов. Необходимо использовать фильтры с минимальным отделением волокон.

Система упаковки/укупорки во всех возможных случаях стерилизации должна обеспечивать стерильность лекарственного препарата аптечного изготовления в течение всего срока годности.

Особенности технологии изготовления стерильных лекарственных препаратов в условиях аптечной организации в зависимости от вида, способа/пути введения и применения, от фармакологического действия лекарственных препаратов, представлены ниже.

Стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде лекарственных форм для парентерального применения. Общие требования к лекарственным формам для парентерального применения приведены в ОФС «Лекарственные формы для парентерального применения».

Номенклатура лекарственных препаратов аптечного изготовления для парентерального применения, как правило, представлена растворами для инъекций, растворами для инфузий.

Изготовленные растворы для инъекций, растворы для инфузий должны быть стерильными, стабильными, должны выдерживать испытание на пирогенность или бактериальные эндотоксины. В изготовленных растворах для инъекций и растворах инфузий видимые механические включения должны отсутствовать. Дополнительными требованиями к изготовленным растворам для инфузий являются их изотоничность, изогидричность, изоионичность, изовязкость.

Растворы для инъекций, растворы для инфузий изготавливают в асептических условиях массо-объёмным методом на воде для инъекций, соответствующей требованиям ФС «Вода для инъекций».

Фармацевтические субстанции, применяемые для изготовления лекарственных форм для парентерального применения, должны отвечать требованиям соответствующих фармакопейных статей. Некоторые фармацевтические субстанции одного наименования имеют различное предназначение: могут быть для производства/изготовления лекарственных препаратов для парентерального применения или для производства/изготовления нестерильных лекарственных препаратов.

В этом случае для изготовления растворов для инъекций, растворов для инфузий, растворов для орошения (мочевого пузыря, желудка) следует использовать фармацевтические субстанции надлежащего качества, т.е. имеющие указание: «Для производства лекарственных препаратов для парентерального применения».

В качестве вспомогательных веществ для аптечного изготовления стерильных лекарственных препаратов для парентерального применения могут быть использованы стабилизаторы, антиоксиданты и другие вспомогательные вещества (ОФС «Вспомогательные вещества»).

Не допускается изготовление растворов для инъекций и растворов для инфузий из готовых лекарственных препаратов.

Лекарственные препараты для парентерального применения изготавливают с соблюдением особенностей лекарственной формы, учитывая физико-химические свойства компонентов (действующих и вспомогательных веществ) лекарственного препарата.

Изготовление лекарственных препаратов для парентерального применения запрещается, если отсутствуют данные о химической совместимости входящих в их состав компонентов, о технологии изготовления, включая условия, режим стерилизации, а также, если отсутствуют методики определения их полного химического контроля.

Изготовленные растворы для парентерального применения должны быть профильтрованы с использованием разрешённых фильтровальных материалов и установок с одновременным розливом их в подготовленные стерильные флаконы, которые укупоривают стерильными пробками. Не допускается превышение 3-х часов от начала изготовления растворов для инъекций и растворов для инфузий до их стерилизации. Не допускается стерилизация растворов более 1 л и повторная стерилизация изготовленных растворов для инъекций и растворов для инфузий.

В табл. 1 приведены наименования и составы растворов для инъекций и растворов для инфузий аптечного изготовления, стерилизация которых должна проводиться в соответствии с указанными требованиями к режимам стерилизации. Время стерилизации, указанное в табл. 1, соответствует времени стерилизации растворов объёмом до 100 мл.

Таблица 1. Режимы стерилизации растворов для инъекций и инфузий аптечного изготовления
№ п/п | Наименование лекарственного препарата | Состав | Режим стерилизации (температура, время) | Продолжительность хранения (сутки) | Примечание
--- | --- | --- | --- | --- | ---
1. | Раствор атропина сульфата 0,05 %, 0,1 %, 1 %, 2,5 %, 5 % | Атропина сульфата 0,5 г, 1 г, 10 г, 25 г, 50 г, Раствора кислоты хлористоводородной 0,1 М 10 мл, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин. | 30 | Хранение в защищённом от света месте
2. | Вода для инъекций |  | 120 °C– 8 мин. | 30 |
3. | Раствор глицерола (глицерина) 10 % | Глицерола (глицерина) (в пересчете на безводный) 100 г, Натрия хлорида 9 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин. | 30 |
4. | Раствор декстрозы (глюкозы) 25% | Декстрозы (глюкозы) (в пересчете на безводную250 г, Раствора кислоты хлористоводородной 0,1 М до pH 3,0–4,1, Натрия хлорида 0,26 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин. | 30 |
5. | Раствор декстрозы (глюкозы) 5 % с калия хлоридом 0,5 % или 1 % | Декстрозы (глюкозы) (в пересчете на безводную) 50 г, Калия хлорида 5 г или 10 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин. | 60 |
6. | Раствор декстрозы (глюкозы) 10 % солевой | Декстрозы (глюкозы) (в пересчете на безводную) 100 г, Калия хлорида 2 г, Кальция хлорида (в пересчете на безводный) 0,4 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин. | 90 |
7. | Раствор бендазола (дибазола) 0,5 %, 1 %, 2 % | Бендазола (дибазола) 5 г, 10 г, 20 г, Раствора кислоты хлористоводородной 0,1 М 10 мл, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин. | 60 (0,5 % и 1 % р-р) 30 (2 % р-р) |
8. | Раствор тетракаина (дикаина) 0,1 %, 0,25 %, 0,3 % | Тетракаина (дикаина) 1 г, 2,5 г, 3 г, Раствора кислоты хлористоводородной 0,1 М 10 мл, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин. | 30 |
9. | Раствор тетракаина (дикаина) 1 %, 2 % | Тетракаина (дикаина) 10 г, 20 г, Натрия тиосульфата 0,5 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 90 |
10. | Раствор дифенгидрамина (димедрола) 1 %, 2 % | Дифенгидрамина (димедрола) 10 г, 20 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 | Хранение в защищённом от света месте
11. | Жидкость Петрова кровозаменяющая | Натрия хлорида 15 г, Калия хлорида 0,2 г, Кальция хлорида 1 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 |
12. | Раствор калия хлорида 0,5 %, 1 %, 3 %, 5 %, 7,5 %, 10 % | Калия хлорида 5 г, 10 г, 30 г, 50 г, 75 г, 100 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 |
13. | Раствор калия хлорида 0,25 %, 0,5 %, 1 % с декстрозой (глюкозой) или натрия хлоридом | Калия хлорида 2,5 г, 5 г, 10 г, Декстрозы (глюкозы) (в пересчете на безводную) 50 г или натрия хлорида 9 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 |
14. | Раствор кальция глюконата 10 % | Кальция глюконата 100 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 7 |
15. | Раствор кальция хлорида 0,25 %, 0,5 %, 1 %, 5 %, 10 % | Кальция хлорида 2,5 г, 5 г, 10 г, 50 г, 100 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 |
16. | Раствор кардиоплегический № 1
16.1. | № 1а | Натрия хлорида 4,5 г, Калия хлорида 2,22 г, Магния хлорида (в пересчете на безводный) 0,4 г, Декстрозы (глюкозы) (в пересчете на безводную) 1 г, Маннитола (маннита) 18 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 6 мес. |
16.2. | № 1б | Декстрозы (глюкозы) (в пересчете на безводную) 50 г, Магния сульфата 15 г, Калия хлорида 45 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 2 сут. |
17. | Раствор кардиоплегический № 2
17.1. | № 2а | Калия хлорида 5,6 г Натрия хлорида 5,0 г Декстрозы (глюкозы) (в пересчете на безводную) 6,45 г Маннитола (маннита) 23,65 г Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 60 |
17.2. | № 2б | Декстрозы (глюкозы) (в пересчете на безводную) 50 г, Магния сульфата 15 г, Калия хлорида 15 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 2 сут. |
Раствор кардиоплегический № 3
18. | N 3 | Натрия хлорида 4,5 г, Калия хлорида 1,125 г, Магния хлорида (в пересчете на безводный) 3,232 г, Кальция глюконата 0,3 г, Декстрозы (глюкозы) (в пересчете на безводную) 1 г, Маннитола (маннита) 19 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 12 мес. |
19. | Раствор «Квартасоль» | Натрия гидрокарбоната 1 г, Натрия ацетата 2,6 г, Натрия хлорида 4,75 г, Калия хлорида 1,5 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 90 |
20. | Раствор глютаминовой кислоты 1 % | Кислоты глютаминовой 10 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 | Хранение в защищённом от света месте
21. | Раствор кофеина (кофеина-бензоата натрия) 10 %, 20 % | Кофеина (кофеина-бензоата натрия) 100 г, 200 г, Раствора натрия гидроксида 0,1 М, 4 мл, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 |
22. | Раствор магния сульфата 2 % | Магния сульфата 20 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 2 сут. |
23. | Раствор натрия бензоата 15 % | Натрия бензоата 150 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C–8 мин | 30 |
24. | Раствор натрия бромида 5 %, 10 %, 20 % | Натрия бромида 50 г, 100 г, 200 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 | Хранение в защищённом от света месте
25. | Раствор натрия гидрокарбоната 3 %, 4 %, 5 %, 7 % | Натрия гидрокарбоната 30 г, 40 г, 50 г, 70 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 |
26. | Раствор натрия гидрокарбоната 3 %, 4 %, 5 %, 7 %, 8,4 % стабилизированный | Натрия гидрокарбоната 30 г, 40 г, 50 г, 70 г, 84 г Натрия эдетата 0,1 г (для 3–5 % р-ра) и 0,2 г (для 7–8,4 % р-ра) Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 |
27. | Раствор натрия хлорида 0,45 %, 0,9 %, 5,85 %, 10 % | Натрия хлорида 4,5 г, 9 г, 58,5 г, 100 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 90 |
28. | Раствор натрия хлорида 3 % | Натрия хлорида 30 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 2 сут. |
29. | Раствор натрия цитрата 4 %, 5 % | Натрия цитрата (в пересчете на сухое вещество) 40 г, 50 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 |
30. | Раствор натрия парааминосалицилата 3 % | Натрия парааминосалицилата 30 г Натрия сульфита безводного 5 г Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 7 | Хранение в защищённом от света месте
31. | Раствор натрия салицилата 3 %, 10 % | Натрия салицилата 30 г, 100 г Натрия метабисульфита 1 г Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 | Хранение в защищённом от света месте
32. | Раствор никотинамида 1 %, 2 %, 2,5 %, 5 % | Никотинамида 10 г, 20 г, 25 г, 50 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 | Хранение в защищённом от света месте
33. | Раствор прокаина (новокаина) 0,25 %, 0,5 %, 1 %, 2 % | Прокаина (новокаина) 2,5 г, 5 г, 10 г, 20 г, Раствора кислоты хлористоводородной 0,1 М до pH 3,8–4,5, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 | Хранение в защищённом от света месте
34. | Раствор прокаина (новокаина) 2 %, 5 %, 10 % | Прокаина (новокаина) 20 г, 50 г, 100 г, Раствора кислоты хлористоводородной 0,1 М 4 мл, 6 мл, 8 мл, Натрия тиосульфата 0,5 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 90 | Хранение в защищённом от света месте
35. | Раствор прокаина (новокаина) 5 % для спинномозговой анестезии | Прокаина (новокаина) 50 г Воды для инъекций до 1 л | Раствор не стерилизуют. Прокаина (новокаин) в порошке стерилизуют горячим воздухом при 120 °C в течение 2 часов. Готовят на стерильной воде с последующей микрофильтрацией раствора | 1 | Хранение в защищённом от света месте
36. | Раствор папаверина (папаверина гидрохлорида) 2 % | Папаверин (папаверина гидрохлорида) 20 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 | Хранение в защищённом от света месте
37. | Раствор Рингера - ацетата | Натрия хлорида 5,26 г, Натрия ацетата (в пересчете на безводный) 4,1 г, Кальция хлорида (в пересчете на безводный) 0,28 г, Магния хлорида (в пересчете на безводный) 0,14 г, Калия хлорида 0,37 г, Кислоты хлористоводородной разведенной (8 %) 0,2 мл, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 |
38. | Раствор Рингера - Локка | Натрия хлорида 9 г, Калия хлорида 0,2 г, Кальция хлорида 0,2 г, Натрия гидрокарбоната 0,2 г, Декстрозы (глюкозы) (в пересчете на безводную) 1 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 (срок хранения каждого из растворов) | Получают путём смешивания равных объёмов двух отдельно приготовленных и простерилизованных растворов (натрия гидрокарбоната и декстрозы (глюкозы) с солями)
39. | Раствор метамизол натрия+Питофенон+Фенпивериния бромида (спазмолитина) 0,5 %, 1 % | Метамизол натрия+Питофенон+Фенпивериния бромида (спазмолитина) 5 г, 10 г, Раствор кислоты хлористоводородной 0,1 М 20 мл, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 | Хранение в защищённом от света месте
40. | Раствор месульфамида (стрептоцида) растворимого 5 %, 10 % | Месульфамида (стрептоцида растворимого (в пересчёте на сухое вещество) 50 г, 100 г, Натрия тиосульфата 1 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 | Хранение в защищённом от света месте
41. | Раствор тримекаина 0,25 %, 0,5 %, 1 %, 2 %, 5 % | Тримекаина (в пересчете на безводный) 2,5 г, 5 г, 10 г, 20 г, 50 г, Натрия хлорида 9 г, 7 г, 5 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 | Хранение в защищённом от света месте 5 % раствор не изотонируют
42. | Раствор фуразидина (фурагина) растворимого 0,1 % с натрия хлоридом 0,9 % | Фуразидина (фурагина) растворимого 10 % с натрия хлоридом 90 % – 10, Воды для инъекций до 1 л | 100 °C– 30 мин | 7 | Хранение в защищённом от света месте
43. | Раствор эфедрина (эфедрина гидрохлорида) 2 %, 3 %, 5 % | Эфедрина (эфедрина гидрохлорида) 20 г, 30 г, 50 г, Воды для инъекций до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 | Хранение в защищённом от света месте

Стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде лекарственных форм для офтальмологического применения. Общие требования к лекарственным формам для офтальмологического применения указаны в ОФС «Лекарственные формы для офтальмологического применения».

К стерильным лекарственным препаратам в виде лекарственных форм для офтальмологического применения относят: капли глазные, растворы для промывания/орошения глаз, мази глазные, а также лекарственные препараты для офтальмологического применения в виде внутриаптечной заготовки, концентрированные растворы и полуфабрикаты для изготовления капель глазных.

Для изготовления стерильных лекарственных препаратов в виде лекарственных форм для офтальмологического применения применяют лекарственные средства и вспомогательные вещества (растворители, мазевые основы, стабилизаторы, буферные растворы, изотонирующие вещества, консерванты, пролонгаторы).

При изготовлении лекарственных препаратов для офтальмологического применения допускается использование стерильных готовых лекарственных препаратов в жидких и твёрдых лекарственных формах (порошки, лиофилизаты, предназначенные для приготовления растворов для инъекций и растворов для инфузий).

Капли глазные и растворы для промывания/орошения глаз в виде водных растворов должны быть стерильными и изотоничными, если нет других указаний в фармакопейных статьях, иметь оптимальное значение pH, соответствующее значению pH слезной жидкости – 7,4 (допустимые значения pH от 3,5 до 8,5), должны быть стабильны при хранении и соответствовать требованиям фармакопейной статьи, общей фармакопейной статьи или документов в области контроля качества на видимые механические включения.

Капли глазные и растворы для промывания/орошения глаз изготавливают в асептических условиях массо-объёмным методом на воде очищенной, соответствующей требованиям ФС «Вода очищенная».

Лекарственные препараты для офтальмологического применения, представляющие собой растворы лекарственных средств, требующих защиты от воздействия повышенной температуры, готовят в асептических условиях на стерильной воде очищенной без последующей стерилизации или с использованием стерилизации фильтрованием.

Обеспечение изотоничности гипотоничных лекарственных препаратов для офтальмологического применения, представляющие собой растворы, может осуществляться добавлением в состав лекарственных препаратов натрия хлорида, натрия сульфата, натрия нитрата или других веществ с учётом их совместимости с остальными компонентами лекарственного препарата. Изотоничной считается концентрация веществ в растворе, равная концентрации 0,7–1,1 % натрия хлорида. Расчёт необходимого количества натрия хлорида для обеспечения изотоничности раствора проводят с использованием изотонических коэффициентов по натрия хлориду, указанных в табл. 2.

Таблица 2. Значения изотонических коэффициентов фармацевтических субстанций по натрия хлориду
№ п/п | Наименование вещества | Количество натрия хлорида (г) эквивалентное 1 г вещества
--- | --- | ---
1 | Аминокапроновая кислота | 0,27
2 | Аскорбиновая кислота | 0,18
3 | Атропин сульфат | 0,10
4 | Борная кислота | 0,53
5 | Декстроза безводная (Глюкоза безводная) | 0,18
6 | Динатрия фосфат дигидрат (натрия гидрофосфат дигидрат)) | 1,0
7 | Дифенгирамина гидрохлорид (Димедрол) | 0,20
8 | Калия йодид | 0,35
9 | Калия хлорид | 0,76
10 | Кальция глюконат | 0,16
11 | Кальция хлорид гексагидрат | 0,36
12 | Кодеина фосфат | 0,12
13 | Кофеина (Кофеин-бензоат натрия) | 0,23
14 | Магния сульфат гептагидрат | 0,14
15 | Меди сульфат пентагидрат | 0,13
16 | Натрия аминосалицилат дигидрат (натрия пара-аминосалицилат) | 0,27
17 | Натрия ацетат тригидрат | 0,46
18 | Натрия бензоат | 0,40
19 | Натрия бромид | 0,62
20 | Натрия гидрокарбонат | 0,65
21 | Натрия йодид | 0,38
22 | Натрия метабисуфит | 0,65
23 | Натрия салицилат | 0,35
24 | Натрия сульфат декагидрат | 0,23
25 | Натрия тетраборат | 0,34
26 | Натрия тиосульфат | 0,30
27 | Натрия хлорид | 1,0
28 | Натрия цитрат | 0,30
29 | Никотинамид | 0,20
30 | Никотиновая кислота | 0,25
31 | Папаверин (Папаверина гидрохлорид) | 0,10
32 | Пилокарпина гидрохлорид | 0,22
33 | Платифиллина гидротартрат | 0,13
34 | Прозерин | 0,19
35 | Прокаина гидрохлорид (Новокаин) | 0,18
36 | Прокаинамида гидрохлорид (Новокаинамид) | 0,22
37 | Аминофиллин (Эуфиллин) | 0,17
38 | Тетракаина гидрохлорид (Дикаин) | 0,18
39 | Тиамина гидрохлорид | 0,21
40 | Фенилэфрина гидрохлорид (Мезатон) | 0,28
41 | Цинка сульфата гептагидрат | 0,12
42 | Эфедрин (эфедрина гидрохлорид) | 0,28

Для создания необходимого значения рН лекарственных препаратов для офтальмологического применения аптечного изготовления могут быть использованы буферные растворы, состав которых должен быть указан в рецепте или требовании, если применимо.

Для обеспечения стабильности лекарственных препаратов для офтальмологического применения аптечного изготовления в процессе хранения, в его состав могут быть введены стабилизаторы, антиоксиданты, антимикробные консерванты и другие вспомогательные вещества с учетом физико-химических свойств компонентов лекарственного препарата.

При изготовлении водных капель глазных в небольших количествах (10–15 мл), используют следующую технологию: растворитель делят на две части, в одной из которых растворяют все вещества, полученный раствор фильтруют через предварительно промытый растворителем фильтр, затем через этот же фильтр профильтровывают вторую часть растворителя, смывая при этом адсорбированные на фильтре вещества.

В табл. 3 приведены наименования и составы капель глазных аптечного изготовления, стерилизация которых должна проводиться в соответствии с указанными требованиями к режимам стерилизации.

Таблица 3. Режимы стерилизации капель глазных аптечного изготовления
№ п/п | Наименование (состав) | Режим стерилизации (температура, время) | Продолжительность хранения при температуре: | Примечание
--- | --- | --- | --- | ---
Не выше 25 °C | 3–5 °C
1. | Раствор атропина сульфата 0,25 %, 0,5 %, 1 % Состав: Атропина сульфата 0,025 г, 0,05 г, 0,1 г, Натрия хлорида 0,088 г, 0,085 г, 0,08 г, Воды очищенной до 10 мл | 100 °C– 30 мин |  | 30 | Хранение в защищённом от света месте
2. | Раствор тетракаина (дикаина) 0,25 %, 0,5 %, 1 % Состав: Тетракаина (дикаина) 0,025 г, 0,05 г, 0,1 г, Натрия хлорида 0,085 г, 0, 081 г, 0,072 г, Воды очищенной до 10 мл | 100 °C– 30 мин |  | 30 |
3. | Раствор тетракаина (дикаина) 0,5 %, 1 %, 2 %, 3 % Состав: Тетракаина (дикаина) 0,05 г, 0,1 г, 0,2 г, 0,3 г, Натрия хлорида 0, 081 г, 0,072 г, 0,053 г, 0,035 г, Натрия тиосульфата 0,005 г, Воды очищенной до 10 мл | 120 °C– 8 мин | 90 | 90 (0,5 % раствор) 30 (1 % раствор) | 0,5 % раствор готовят без стабилизатора. Нельзя хранить в холодильнике 2 % и 3 % растворы.
4. | Тетракаина (дикаина) 0,05 г, Цинка сульфата 0,05 г, Раствора борной кислоты 2 %– 10 мл | 120 °C– 8 мин | 30 | 30 |
5. | Тетракаина (дикаина) 0,05 г, Цинка сульфата 0,05 г, Резорцинола (резорцина) 0,05 г, Раствора кислоты борной 2 % – 10 мл | 120 °C– 8 мин | 30 | 30 | После стерилизации и охлаждения раствора, содержащего дикаин, кислоту борную, цинка сульфат, добавляется резорцинол (резорцин) в асептических условиях
6. | Раствор дифенгидрамина (димедрола) 0,25 %, 0,5 %, Состав: Дифенгидрамина (димедрола) 0,025 г, 0,05 г, Натрия хлорида 0,085 г, 0,08 г, Воды очищенной до 10 мл | 120 °C– 8 мин | 90 | 90 | Хранение в защищённом от света месте
7. | Дифенгидрамина (димедрола) 0,02 г, Раствор борной кислоты 2 %– 10 мл | 120 °C– 8 мин |  | 30 | Хранение в защищённом от света месте
8. | Раствор калия йодида 3 %, Состав: Калия йодида 0,3 г, Воды очищенной до 10 мл | 120 °C– 8 мин | 30 | 30 | Хранение в защищённом от света месте
9. | Калия йодида 0,05 г, Кальция хлорида (в пересчете на безводный) 0,05 г, Натрия хлорида 0,055 г, Воды очищенной до 10 мл | 120 °C– 8 мин | 90 | 90 | Хранение в защищённом от света месте
10. | Раствор кальция хлорида 3 %, Состав: Кальция хлорида (в пересчете на безводный) 0,3 г, Воды очищенной до 10 мл | 120 °C– 8 мин | 30 |  |
11. | Раствор кислоты аскорбиновой 0,2 %, Состав: Аскорбиновой кислоты 0,02 г, Натрия хлорида 0,086 г, Воды очищенной свежепрокипячёной до 10 мл | 100 °C– 30 мин | 2 | 7 | Хранение в защищённом от света месте
12. | Раствор клонидина (клофелина) 0,125 %, 0,25 %, 0,5 % Состав: Клонидина (клофелина) 0,0125 г, 0,025 г, 0,05 г, Натрия хлорида 0,09 г, Воды очищенной до 10 мл | 120 °C– 8 мин | 90 | 90 | Хранение в защищённом от света месте
13. | Раствор серебра коллоидного (колларгола) 2 %, 3 % Состав: Серебра коллоидного (колларгола) 0,2 г, 0,3 г, Воды очищенной до 10 мл | Готовят в асептических условиях | 30 | 30 | Хранение в защищённом от света месте. Раствор можно фильтровать через обеззоленный фильтр.
14. | Хлорамфеникола (левомицетина) 0,01 г, Раствора борной кислоты 2 %– 10 мл | 100 °C– 30 мин | 7 | 30 | Хранение в защищённом от света месте
15. | Хлорамфеникола (левомицетина) 0,02 г, Цинка сульфата 0,03 г, Резорцинола (Резорцина) 0,05 г, Раствора борной кислоты 2 %– 10 мл | 100 °C– 30 мин |  | 15 | Хранение в защищённом от света месте. После стерилизации и охлаждения раствора, содержащего хлорамфеникол (левомицетин), кислоту борную, цинка сульфат, добавляется резорцинол (резорцин) в асептических условиях
16. | Натрия гидрокарбоната 0,0 г, Натрия тетрабората 0,05 г, Натрия хлорида 0,04 г, Воды очищенной до 10 мл | 120 °C– 8 мин | 30 | 30 |
17. | Прокаина (новокаина) 0,05 г, Цинка сульфата 0,02 г, Резорцинола (резорцина )0,1 г, Раствора борной кислоты 1 % – 10 мл | 100 °C– 30 мин | 10 | 30 | Хранение в защищённом от света месте. После стерилизации и охлаждения раствора, содержащего прокаин (новокаин), кислоту борную, цинка сульфат, добавляется резорцинол (резорцин) в асептических условиях
18. | Раствор пилокарпина (пилокарпина гидрохлорида) 1 %, 2 %, 4 %, 6 % Состав: Пилокарпина (пилокарпина гидрохлорида) 0,1 г, 0,2 г, 0,4 г, 0,6 г, Натрия хлорида 0,068 г, 0,046 г, Воды очищенной до 10 мл | 120 °C– 8 мин | 30 | 30 | Хранение в защищённом от света месте.
19. | Пилокарпина (пилокарпина гидрохлорида) 0,1 г, Раствора кислоты борной 2 % – 10 мл | 120 °C– 8 мин |  | 30 | Хранение в защищённом от света месте.
20. | Раствор рибофлавина 0,02 % Состав: Рибофлавина 0,002 г, Натрия хлорида 0,09 г, Воды очищенной до 10 мл | 120 °C– 8 мин | 90 | 30 | Хранение в защищённом от света месте.
21. | Рибофлавина 0,001 г, Аскорбиновой кислоты 0,03 г, Борной кислоты 0,2 г, Воды очищенной свежепрокипячённой до 10 мл | 100 °C– 30 мин | 2 | 7 | Хранение в защищённом от света месте.
22. | Рибофлавина 0,002 г, Аскорбиновой кислоты 0,02 г, Декстрозы (глюкозы) (в пересчете на безводную) 0,2 г, Натрия хлорида 0,05 г, Воды очищенной свежепрокипячённой до 10 мл | 100 °C– 30 мин | 2 | 7 | Хранение в защищённом от света месте.
23. | Раствор нитрофурала (фурацилина) 0,02 % Состав: Нитрофурала (фурацилина) 0,002 г, Натрия хлорида 0,085 г, Воды очищенной до 10 мл | 120 °C– 8 мин | 30 | 30 | Хранение в защищённом от света месте.
24. | Цинка сульфата 0,03 г, Прокаина (новокаина) 0,1 г, Раствора борной кислоты 2 % – 10 мл | 100 °C– 30 мин |  | 30 | Хранение в защищённом от света месте.
25. | Цинка сульфата 0,025 г, Дифенгидрамина (димедрола) 0,03 г, Раствора борной кислоты 2 % – 10 мл | 100 °C– 30 мин |  | 30 | Хранение в защищённом от света месте.
26. | Раствор эфедрина (эфедрина гидрохлорида) 3 % Состав: Эфедрина (эфедрина гидрохлорида) 0,3 г, Воды очищенной до 10 мл | 120 °C– 8 мин | 30 | 30 | Хранение в защищённом от света месте.

В табл. 4 приведены наименования и составы растворов для промывания/орошения глаз, применяемых при микрохирургических операциях глаз, стерилизация которых должна проводиться в соответствии с указанными требованиями к режимам стерилизации.

Таблица 4. Режимы стерилизации растворов аптечного изготовления для промывания/орошения глаз
№ п/п | Наименование (состав) | Режим стерилизации (температура, время) | Продолжительность хранения при температуре не выше 25 °C
--- | --- | --- | ---
1. | Солевой офтальмологический раствор Состав: Натрия хлорида 5,3 г, Калия хлорида 0,75 г, Кальция хлорида (в пересчёте на безводный) 0,48 г, Натрия ацетата (в пересчёте на безводный) 3,9 г, Декстрозы (глюкозы) (в пересчёте на безводную) 0,8 г, Кислоты хлористоводородный разведённой (8 %) 0,05 мл, Воды очищенной до 10 мл | 120 °C– 8 мин | 30
2. | Солевой офтальмологический раствор (с магния хлоридом) Состав: Натрия хлорида 5,3 г, Калия хлорида 0,75 г, Кальция хлорида (в пересчёте на безводный) 0,48 г, Натрия ацетата (в пересчёте на безводный) 3,9 г, Декстрозы (глюкозы) (в пересчёте на безводную) 0,8 г, Магния хлорида (в пересчёте на безводный) 0,3 г, Кислоты хлористоводородный разведённой (8 %) 0,05 мл, Воды очищенной до 10 мл | 120 °C– 8 мин | 30

В аптечных условиях капли глазные могут быть изготовлены с использованием заранее изготовленных стерильных концентрированных растворов для изготовления капель глазных, наименования и составы которых, а также режимы стерилизации и сроки годности приведены в табл. 5.

Таблица 5. Режимы стерилизации концентрированных растворов для изготовления капель глазных
№ п/п | Наименование (состав) | Режим стерилизации (температура, время) | Продолжительность хранения при температуре: | Примечание
--- | --- | --- | --- | ---
Не выше 25 °C | 3–5 °C
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6
1. | Раствор калия йодида 20 % | 120 °C– 8 мин | 30 |  | Хранение в защищённом от света месте.
2. | Раствор аскорбиновой кислоты 2 %, 5 %, 10 % | 100 °C– 30 мин | 5 | 30 | Хранение в защищённом от света месте. Раствор изготавливается на воде очищенной свежепрокипяченной. При фасовке раствора флаконы заполняются доверху.
3. | Раствор борной кислоты 4 % | 120 °C– 8 мин | 30 |  |
4. | Раствор натрия тиосульфата 1 % | 100 °C– 30 мин | 30 |  |
5. | Раствор рибофлавина 0,02 % | 120 °C– 8 мин | 90 | 30 | Хранение в защищённом от света месте.
6. | Рибофлавина 0,02 г, Аскорбиновой кислоты 2 г или 10 г, Воды очищенной свежепрокипячённой до 100 мл | 100 °C– 30 мин | 5 | 30 | Хранение в защищённом от света месте. При фасовке раствора флаконы заполняются доверху.
7. | Рибофлавина 0,02 г, Борной кислоты 4 г, Воды очищенной до 10 мл | 100 °C– 30 мин | 30 |  | Хранение в защищённом от света месте.
8. | Рибофлавина 0,02 г, Никотиновой кислоты 0,1 г, Воды очищенной до 10 мл | 100 °C– 30 мин | 30 |  | Хранение в защищённом от света месте.
9. | Раствор цинка сульфата 1 % или 2 % | 120 °C– 8 мин | 30 |  |

Мази глазные аптечного изготовления не должны содержать твёрдых частиц, способных травмировать конъюнктиву глаза, должны легко распределяться по влажной слизистой оболочке.

Лекарственные препараты для офтальмологического применения в виде мазей глазных изготавливают методом по массе на стерильной основе для мазей глазных с использованием стерильных, если применимо, фармацевтических субстанций, лекарственных препаратов и вспомогательных веществ. Основа для мазей глазных должна быть нейтральной, равномерно распределяющейся по слизистой оболочке глаза, не содержащей посторонних примесей.

При отсутствии в рецепте или требовании указаний о составе основы для мазей глазных, применяют основу, представляющую собой сплав вазелина, не содержащего восстанавливающих веществ, и ланолина безводного в соотношении 9:1. Основу для мазей глазных получают путём сплавления ланолина безводного и вазелина сорта «для мазей глазных», в фарфоровой чашке при нагревании на водяной бане. Расплавленную основу фильтруют через несколько слоёв марли, расфасовывают в сухие стерильные стеклянные банки, обвязывают пергаментной бумагой и стерилизуют в воздушном стерилизаторе при температуре 180 °С в течение 30–40 мин или при температуре 200 °С в течение 15–20 мин в зависимости от объёма (массы) основы. Хранят стерильную основу для мазей глазных при температуре 3–5° С в течение 30 сут в защищённом от света месте.

При изготовлении мазей глазных фармацевтические субстанции, вспомогательные вещества вводят в основу для мазей глазных по общим правилам изготовления лекарственных препаратов в виде мягких лекарственных форм (ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде мягких лекарственных форм») в зависимости от их физико-химических свойств. Гомогенные мази глазные изготавливают растворением (расплавлением) компонентов в основе для мазей глазных. Мази глазные эмульсионные на абсорбционной мазевой основе изготавливают растворением водорастворимых компонентов в минимальном количестве стерильной воды очищенной и последующим смешиванием с основой для мазей. Указанная технология изготовления, т.е., предварительное растворение в стерильной воде очищенной перед смешиванием с основой мазевой, применяется для мазей глазных, содержащих цинка сульфат, резорцинол (резорцин), серебра протеинат (протаргол) и др.

При изготовлении мазей глазных суспензионного типа особое внимание необходимо обращать на обеспечение необходимой степени дисперсности компонентов. Нерастворимые и труднорастворимые вещества должны быть введены в основу для мазей в виде мельчайших порошков после тщательного диспергирования их с небольшим количеством стерильной вспомогательной жидкости или части расплавленной основы для мазей.

Стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде лекарственных форм лекарственных препаратов, содержащих антибиотики. В аптечных организациях лекарственные препараты, содержащие антибиотики, могут быть изготовлены в виде таких лекарственных форм, как растворы, порошки, суспензии, мази, суппозитории и др., общие требования к которым указаны в ОФС «Лекарственные формы» и ОФС на конкретную лекарственную форму: ОФС «Растворы», ОФС «Порошки», ОФС «Суспензии», ОФС «Мягкие лекарственные формы», ОФС «Суппозитории» и др.

Лекарственные препараты, в состав которых входят антибиотики, независимо от вида лекарственной формы, должны быть изготовлены в асептических условиях с использованием стерильных, если применимо, фармацевтических субстанций, вспомогательных веществ, растворителей, основ и др. в соответствии с общими правилами изготовления и особенностями технологии лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде жидких, твёрдых или мягких лекарственных форм (ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм», ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм», ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде мягких лекарственных форм»).

При изготовлении стерильных лекарственных препаратов, в состав которых входят антибиотики, прописанные в единицах действия, определение массы навески порошка антибиотика производят с учётом зависимости между массой и активностью антибиотика в соответствии с данными табл. 6.

Таблица 6. Соответствие 1 миллиона единиц действия антибиотика его массе
№ п/п | Наименование антибиотика | Масса, граммы
--- | --- | ---
1 | Амоксициллин | 1,0
2 | Ампициллин | 1,0
3 | Ампициллин натрия | 1,0
4 | Ампициллина тригидрат | 1,0
5 | Амфотерицин В | 1,38
6 | Бензилпенициллин калия | 0,625
7 | Бензилпенициллин натрия | 0,65
8 | Бензилпенициллина новокаиновая соль | 1,0
9 | Гентамицина сульфат | 1,7
10 | Грамицидин | 1,1
11 | Доксициклина хиклат | 1,15
12 | Канамицина сульфат | 1,0
13 | Карбенициллина динатрия | 1,3
14 | Клиндамицина гидрохлорид | 1,1
15 | Клиндамицина фумарат | 1,1
16 | Леворин | 0,02
17 | Леворин натрия | 0,02
18 | Линкомицина гидрохлорид | 1,1
19 | Мономицин | 1,0
20 | Неомицина сульфат | 1,56
21 | Нистатин | 0,25
22 | Оксациллин натрия | 1,1
23 | Окситетрациклина дигидрат | 1,0
24 | Олеандомицина фосфат | 1,3
25 | Олететрин | 1,0
26 | Полимиксина В сульфат | 0,1
27 | Полимиксина М сульфат | 0,125
28 | Ристомицина сульфат | 1,25
29 | Стрептомицина сульфат | 1,0
30 | Тетрациклин | 1,0
31 | Тетрациклина гидрохлорид | 1,0
32 | Феноксиметилпенициллин | 0,6
33 | Цефазолин | 1,0
34 | Цефазолин натрия | 1,0
35 | Цефалексин | 1,0
36 | Цефокситин | 1,0
37 | Цефотаксим | 1,0
38 | Цефопераон | 1,0
39 | Цефтазидим | 1,0
40 | Цефтриаксон | 1,2
41 | Цефуроксим | 1,0
42 | Эритромицин | 1,11
43 | Эритромицина фосфат | 1,0

Стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде лекарственных форм, предназначенных для нанесения на раневые и ожоговые поверхности, растворов для орошения (мочевого пузыря, желудка и др.). В аптечных организациях лекарственные препараты, предназначенные для нанесения на раневые и ожоговые поверхности, могут быть изготовлены в виде таких стерильных лекарственных форм, как растворы, порошки, мази и др., общие требования к которым указаны в ОФС «Лекарственные формы» и ОФС на конкретную лекарственную форму: ОФС «Растворы», ОФС «Порошки», ОФС «Мягкие лекарственные формы» и др.

Лекарственные препараты аптечного изготовления в виде лекарственных форм, предназначенных для нанесения на раневые и ожоговые поверхности изготавливают в соответствии с общими правилами изготовления и особенностями технологии лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде жидких, твёрдых или мягких лекарственных форм (ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм», ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм», ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде мягких лекарственных форм») в асептических условиях и подвергают стерилизации, если применимо.

Растворы для орошения (мочевого пузыря, желудка и др.) представляют собой водные растворы различного объёма, которые должны быть стерильными, стабильными, свободными от видимых механических включений, выдерживать испытание на бактериальные эндотоксины, если применимо. Растворы для орошения изготавливают массо-объёмным методом на воде для инъекций, соответствующей требованиям ФС «Вода для инъекций». В ряде случаев раствор для орошения может состоять только из воды для инъекций.

Дополнительно в табл. 7 приведены режимы стерилизации и сроки годности некоторых растворов аптечного изготовления, которые должны быть изготовлены стерильными, если в рецепте или требовании имеется соответствующее указание. Время стерилизации, указанное в табл. 7, соответствует времени стерилизации раствора объёмом до 100 мл.

В табл. 7 указаны данные о стерильных растворах аптечного изготовления, не включённых в табл. 1.

В случае необходимости, при полном совпадении составов лекарственных препаратов аптечного изготовления, возможно применение данных о режиме стерилизации и сроках годности стерильных растворов аптечного изготовления, указанных в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления для детей».

Таблица 7. Режимы стерилизации других* стерильных растворов аптечного изготовления
№ п/п | Наименование лекарственного препарата | Состав | Режим стерилизации (температура, время) | Продолжительность хранения (сутки) | Примечание
--- | --- | --- | --- | --- | ---
1. | Раствор декстрозы (глюкозы) 50 % (для интраамнеального введения и др.) | Декстрозы (глюкозы) (в пересчете на безводную) 500 г, Воды очищенной до 1 л | 120 °C– 8 мин | 90 |
2. | Раствор борной кислоты 2 % | Кислоты борной 20 г, Воды очищенной до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 |
3. | Раствор метилурацила 0,7 % | Метилурацила 7 г, Воды очищенной до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 | Хранение в защищённом от света месте
4. | Раствор натрия тетрабората 20 % в глицероле (глицерине) | Натрия тетрабората 20 г, Глицерола (Глицерина) 80 г | 120 °C– 8 мин | 30 |
5. | Раствор натрия хлорида 20 % (для интраамнеального введения) | Натрия хлорида 200 г, Воды очищенной до 1 л | 120 °C– 8 мин | 90 |
6. | Раствор нитрофурала (фурацилина) 0,01 %, 0,02 % | Нитрофурала (фурацилина) 0,1 г, 0,2 г, Натрия хлорида 9 г, Воды очищенной до 1 л | 120 °C– 8 мин | 30 | Хранение в защищенном от света месте
7. | Раствор хлоргексидина (хлоргексидина биглюконата) 0,02 %, 0,05 % | Раствора хлоргексидина (хлоргексидина биглюконата) 20 % 1 мл, 2,5 мл, Воды очищенной до 1 л | 120 °C– 8 мин | 90 |
* Примечание – Других растворов, не вошедших в табл. 1.

Стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде лекарственных форм для новорождённых детей и детей до 1 года

Особенности технологии изготовления лекарственных препаратов в виде различных лекарственных форм, предназначенных для новорождённых детей и детей до 1 года, указаны в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления для детей».

##### Испытания (контроль качества)

Испытания стерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления проводят на основании требований действующих нормативных документов, утверждённых уполномоченным федеральным органом исполнительной власти, в соответствии с требованиями и положениями по внутриаптечному контролю лекарственных препаратов аптечного изготовления, указанными в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления» и дополнительными требованиями, указанными в настоящей общей фармакопейной статье.

Микробиологический контроль растворов для инъекций и растворов для инфузий, за исключением растворов индивидуального изготовления, на стерильность и испытание на пирогенность или бактериальные эндотоксины проводится в соответствии с требованиями соответствующих фармакопейных статей и общих фармакопейных статей или документов в области контроля качества.

##### Упаковка

Выбор системы упаковки/укупорки для стерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления осуществляют на основании общих требований к упаковке для лекарственных препаратов в конкретной лекарственной форме в соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств» и специфических требований, касающихся стерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления.

Упаковка стерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления должна обеспечивать стерильность.

Растворы для инъекций, растворы для инфузий, растворы для орошения, растворы для промывания/орошения глаз и другие стерильные растворы для местного или наружного применения. Первичной упаковкой стерильных растворов аптечного изготовления, как правило, являются стерильные флаконы, бутылки стеклянные для крови, трансфузионных и инфузионных препаратов, укупоренные резиновыми пробками, обкатанные алюминиевыми колпачками, или двумя колпачками, или с алюминиевой прокладкой и двумя алюминиевыми колпачками. Резиновые пробки должны быть достаточно эластичными, прочными, чтобы в случае прокалывания их иглой сохранялась целостность и обеспечивалась герметичность упаковки после извлечения иглы из укупорочного средства (в случае многодозовой упаковки).

Для стерильных растворов небольшого объёма в качестве первичной упаковки могут быть использованы флаконы из трубки стеклянной (из дрота), укупоренные резиновыми пробками, обжатые колпачками.

Система укупоривания первичной упаковки стерильных лекарственных форм резиновыми пробками считается целостной только после того, как на укупоренной пробкой упаковке (флаконе, бутылке) будет обжат (закатан) колпачок. Колпачки алюминиевые являются, как правило, контролем первого вскрытия упаковки со стерильной лекарственной формой.

Первичная упаковка капель глазных аптечного изготовления представляет собой стерильные флаконы из трубки стеклянной (из дрота), объёмом, как правило, не более 10 мл, укупоренные стерильными резиновыми пробками и обжатые алюминиевыми колпачками.

Первичной упаковкой мазей глазных, основы для мазей глазных и других стерильных мазей аптечного изготовления, как правило, являются стерильные банки соответствующего объёма, горловина которых обвязана стерильной пергаментной бумагой и закрыта навинчивающимися крышками из полимерных материалов.

Первичная упаковка стерильных недозированных порошков представляет собой, как правило, стерильные банки, горловина которых обвязана стерильной пергаментной бумагой и закрыта навинчивающимися крышками из полимерных материалов. Первичной упаковкой стерильных лекарственных препаратов в виде дозированных порошков могут быть бумажные капсулы или твёрдые желатиновые, выбранные в зависимости от физико-химических свойств действующих и вспомогательных веществ лекарственного препарата.

##### Маркировка

Маркировка стерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления должна соответствовать правилам изготовления и отпуска и ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления».

Все предусмотренные надписи должны быть нанесены на основную этикетку стерильного лекарственного препарата аптечного изготовления, имеющую соответствующее оформление в зависимости от способа/пути введения и применения стерильного лекарственного препарата.

На упаковке каждого стерильного лекарственного препарата аптечного изготовления должна быть надпись «Стерильно» или «Приготовлено асептически». На этикетках стерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления, предназначенных для инъекций или инфузий, обязательно должен быть указан состав и способ/путь введения и применения: «Внутривенно», «Внутривенно (капельно)», «Внутримышечно» и др.

Кроме обязательных предупредительных надписей маркировка стерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления должна содержать дополнительные предупредительные надписи, в соответствии с видом лекарственной формы и физико-химическими свойствами веществ, входящих в состав лекарственного препарата.

##### Хранение

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственных средств», в упаковке, обеспечивающей стабильность в течение установленного срока годности стерильного лекарственного препарата аптечного изготовления, с соблюдением условий, указанных в маркировке лекарственного препарата.

##### Срок годности

Срок годности отдельных наименований стерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления должен соответствовать установленному сроку годности, указанному в правилах изготовления и отпуска и в настоящей общей фармакопейной статье.

Если для некоторых стерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления срок годности не установлен, то руководствуются следующими данными. Срок годности стерильных лекарственных препаратов аптечного изготовления составляет:

- для растворов для инъекций и растворов для инфузий – не более 2 суток;

- для капель глазных – не более 2 суток;

- для порошков, изготовленных в асептических условиях из стерильных ингредиентов в твёрдых желатиновых капсулах – 90 суток;

- для водных растворов, содержащих бензилпенициллин – 1 сутки;

- для остальных лекарственных форм – не более 10 суток.

Аптечная организация вправе устанавливать иные сроки годности, изготавливаемых лекарственных препаратов, если они предусмотрены общими фармакопейными статьями.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.8.0007 Гомеопатические лекарственные препараты аптечного изготовления

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на гомеопатические лекарственные препараты аптечного изготовления.

Общие положения и основные требования к лекарственным препаратам аптечного изготовления установлены в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления».

Гомеопатические лекарственные средства аптечного изготовления представлены гомеопатическими лекарственными формами: настойки матричные гомеопатические (ОФС «Настойки гомеопатические матричные»), гранулы гомеопатические (ОФС «Гранулы гомеопатические»), капли гомеопатические (ОФС «Капли гомеопатические»), капли глазные гомеопатические (ОФС Капли глазные гомеопатические»), тритурации гомеопатические (ОФС Тритурации гомеопатические»), растворы и жидкие разведения гомеопатические (ОФС Растворы и жидкие разведения гомеопатические»), мази гомеопатические и оподельдоки гомеопатические (ОФС Мази гомеопатические»), суппозитории гомеопатические (ОФС Суппозитории гомеопатические»), сиропы гомеопатические (ОФС Сиропы гомеопатические»), растворы для инъекций гомеопатические (ОФС Растворы для инъекций гомеопатические»), настои и отвары гомеопатические (ОФС «Настои и отвары гомеопатические») масла гомеопатические и др.

При изготовлении гомеопатических лекарственных препаратов, могут быть использованы фармацевтические субстанции, включённые в государственный реестр лекарственных средств для медицинского применения, единый реестр зарегистрированных лекарственных средств Евразийского экономического союза и отвечающие требованиям соответствующих фармакопейных статей, в случае их отсутствия в указанных реестрах, руководствуются требованиями ОФС «Вспомогательные вещества для гомеопатических лекарственных средств», ОФС «Настойки гомеопатические матричные», ОФС «Растворы и жидкие разведения гомеопатические», ОФС «Смеси гомеопатические», ОФС «Тритурации гомеопатические» в установленном порядке.

Качество гомеопатических фармацевтических субстанций, а также гомеопатических лекарственных препаратов, изготовленных заранее (внутриаптечная заготовка), вспомогательных веществ, используемых при изготовлении гомеопатического лекарственного препарата в аптечной организации, должно отвечать требованиям ОФС «Фармацевтические субстанции», ОФС «Вспомогательные вещества для гомеопатических лекарственных средств», ОФС «Настойки гомеопатические матричные», ОФС «Растворы и жидкие разведения гомеопатические», ОФС «Смеси гомеопатические», ОФС «Тритурации гомеопатические», ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов», ОФС на конкретные лекарственные формы, а также требованиям фармакопейных статей на фармацевтическую субстанцию конкретного наименования.

##### Особенности технологии

Общие требования к изготовлению гомеопатических лекарственных форм приведены в ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов», а особенности технологии – в ОФС на конкретную лекарственную форму.

1. Настойки гомеопатические матричные. Настойки гомеопатические матричные представляют собой жидкие извлечения из свежесобранного или высушенного сырья растительного и/или животного происхождения, смеси сока растений с этанолом, они используются в качестве гомеопатических фармацевтических субстанций.

- Свежесобранное лекарственное растительное сырьё предварительно измельчают до образования кашицы, высушенное – до получения частиц, имеющих размер в зависимости от морфологической группы или содержащихся групп биологически активных веществ (БАВ) (табл. 1).

Таблица 1. Размер частиц высушенного сырья растительного происхождения для получения настоек гомеопатических матричных
Морфологическая группа используемого высушенного лекарственного растительного сырья или название группы БАВ | Размер частиц, мм
--- | ---
Листья, травы, цветки | 4
Коры, побеги, подземные органы (корни, корневища, клубни, клубнелуковицы, луковицы и др.) | 3
Плоды и семена | 2
Растительное сырьё, содержащее алкалоиды | 1

- Высушенное сырьё растительного происхождения, предназначенное для изготовления настоек гомеопатических матричных ферментированных, измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером не более 0,5 мм. При изготовлении настоек гомеопатических матричных ферментированных должны соблюдаться температурный режим, рН среды, продолжительность настаивания и режим перемешивания. Температурный режим (нагревание) поддерживается с помощью термостатов. Процесс экстракции интенсифицируется тщательным перемешиванием мацератов дважды в день.

- Настойки гомеопатические матричные (в том числе, настойки гомеопатические матричные ферментированные, настойки гомеопатические матричные на глицерине) изготавливают в аптечных организациях:

  - перколяцией или мацерацией спиртом этиловым соответствующей концентрации;

  - мацерацией свежеприготовленной водой очищенной с добавлением меда или смеси меда с лактозой или свежеприготовленной молочной сывороткой;

  - мацерацией глицерином в присутствии или без натрия хлорида способами, описанными в ОФС «Настойки гомеопатические матричные».

2. Растворы и жидкие разведения гомеопатические. Растворы и жидкие разведения гомеопатические изготавливают по массе и используют в качестве гомеопатических фармацевтических субстанций для изготовления гомеопатических лекарственных препаратов или в качестве гомеопатических лекарственных препаратов для внутреннего, наружного и местного применения.

Изготовление аптечной организацией гомеопатических лекарственных препаратов в лекарственной форме растворы и жидкие разведения гомеопатические осуществляется в соответствии с ОФС «Растворы и жидкие разведения гомеопатические».

Жидкие разведения гомеопатические получают путём ступенчатого разбавления, сопровождающегося встряхиванием растворов гомеопатических, тритураций гомеопатических, настоек гомеопатических матричных, настоев и отваров гомеопатических, смесей гомеопатических.

В качестве растворителей применяют воду очищенную, воду для инъекций, натрия хлорида раствор изотонический, глицерин, спирт этиловый или другой растворитель, указанный в фармакопейной статье.

Жидкие разведения гомеопатические изготавливаются в помещении, защищённом от прямого солнечного света, с использованием плотно закупоривающихся стеклянных сосудов, объём которых на 1/2–1/3 больше объёма разводимого активного компонента. В процессе изготовления каждое разведение потенцируется путём встряхивания.

При изготовлении водно-спиртовых растворов и разведений в качестве растворителя используют спирт этиловый в концентрациях, указанных в табл. 2.

Таблица 2. Соотношение концентрации спирта этилового по массе и по объёму
Концентрация (м/м) | 94 % | 86 % | 73 % | 62 % | 43 % | 30 % | 15 %
Концентрация (о/о) около | 96 % | 90 % | 80 % | 70 % | 50 % | 36 % | 18,5 %

Количества воды очищенной (по массе) и спирта этилового 96,0–96,9 % (по объёму), которые необходимо смешать для получения 1000 г спирта указанных концентраций, приведены в ОФС «Растворы и жидкие разведения гомеопатические» и табл. 3.

Таблица 3. Количества по массе (в граммах) воды и спирта концентрации 96,0–96,9 % (о/о), которые необходимо смешать для получения 1000 г спирта концентрации 15 %, 30 %, 43 %, 62 %, 73 %, 86 % (м/м)
Концентрация взятого спирта, % (о/о) | 15 | 30 | 43 | 62 | 73 | 86
--- | --- | --- | --- | --- | --- | ---
спирт | вода | спирт | вода | спирт | вода | спирт | вода | спирт | вода | спирт | вода
96,0 | 160 | 840 | 320 | 680 | 458 | 542 | 661 | 339 | 778 | 222 | 917 | 83
96,1 | 160 | 840 | 319 | 681 | 458 | 542 | 660 | 340 | 777 | 223 | 915 | 85
96,2 | 159 | 841 | 319 | 681 | 457 | 543 | 659 | 341 | 775 | 225 | 914 | 86
96,3 | 159 | 841 | 318 | 682 | 456 | 544 | 658 | 342 | 774 | 226 | 912 | 88
96,4 | 159 | 841 | 318 | 682 | 455 | 545 | 657 | 343 | 773 | 227 | 911 | 89
96,5 | 159 | 841 | 317 | 683 | 455 | 545 | 656 | 344 | 772 | 228 | 909 | 91
96,6 | 158 | 842 | 317 | 683 | 454 | 546 | 655 | 345 | 771 | 229 | 908 | 92
96,7 | 158 | 842 | 316 | 684 | 453 | 547 | 654 | 346 | 770 | 230 | 907 | 93
96,8 | 158 | 842 | 316 | 684 | 453 | 547 | 653 | 347 | 768 | 232 | 905 | 95
96,9 | 158 | 842 | 315 | 685 | 452 | 548 | 652 | 348 | 767 | 233 | 904 | 96

3. Смеси гомеопатические. Смеси гомеопатические представляют собой смеси тритураций гомеопатических, настоек гомеопатических матричных, растворов и жидких разведений гомеопатических с различными вспомогательными веществами, предназначенные для изготовления гомеопатических лекарственных препаратов.

- Степень разведения активных компонентов в гомеопатических смесях получается путём их последовательного ступенчатого разбавления (потенцирования) с применением вспомогательного вещества (например, растворитель, носитель), которое добавляется в соотношении 1:10, 1:100 или в ином соотношении, указанном в рецепте или требовании. Изготовление аптечной организацией смесей гомеопатических, осуществляется в соответствии с ОФС «Смеси гомеопатические».

4. Тритурации гомеопатические. Тритурации гомеопатические представляют собой твёрдую лекарственную форму в виде порошка, состоящего из одного или нескольких измельчённых активных компонентов и/или их разведений со вспомогательным веществом. В качестве вспомогательного вещества используют лактозы моногидрат, если в рецепте не указано иное.

- Тритурации изготавливают по массе одним из двух способов, приведенных в ОФС «Тритурации гомеопатические».

5. Гранулы гомеопатические. Гранулы гомеопатические – твёрдая лекарственная форма в виде сфер одинакового диаметра, содержащая активный компонент или активные компоненты, для приёма сублингвально или перорально.

- Гранулы гомеопатические изготавливают:

  - насыщением или нанесением жидкого гомеопатического разведения одного или нескольких активных компонентов на вспомогательный компонент – гранул сахарных (полученных из сахарозы, лактозы или других подходящих сахаров);

  - наслаиванием на гранулы сахарные жидкого гомеопатического разведения технологическим способом, приведённым в ОФС «Гранулы гомеопатические».

- Исходные гранулы сахарные должны обладать достаточной механической прочностью для обеспечения устойчивости к растрескиванию или разрушению при их обработке, быть одинакового размера для обеспечения равномерного распределения жидких гомеопатических разведений. Размеры гранул различают по номерам от 1 до 14 в зависимости от их диаметра.

- Гранулы сахарные классифицируют по их количеству в 1 г. Для определения количества гранул в 1 г используют величины навесок согласно ОФС «Гранулы гомеопатические» и табл. 4.

Таблица 4. Характеристика гранул сахарных
№ гранул | Количество гранул в 1 г | Навеска гранул для подсчёта их количества, г | Средний диаметр гранул, мм
--- | --- | --- | ---
1 | 1532–1693 | 0,02 | 0,85
2 | 470–530 | 0,1 | 1,4
3 | 220–280 | 0,2 | 1,7
4 | 110–130 | 0,4 | 2,2
5 | 70–90 | 0,6 | 2,5
6 | 40–50 | 1 | 3,0
7 | 30–40 | 1 | 3,3
8 | 28–32 | 1,6 | 3,4
9 | 22–28 | 2 | 3,7
10 | 16–20 | 2,5 | 4,1
11 | 10 | 5 | 5,0
12 | 5 | 10 | 6,3
13 | 3 | 15 | 7,4
14 | 2 | 25 | 8,5

Допустимые отклонения в массе отдельных доз (в том числе при фасовке) гранул гомеопатических указаны в табл. 5.

Таблица 5. Допустимые отклонения в массе отдельных доз (в том числе, при фасовке) гранул гомеопатических
Прописанная масса, г | Отклонения, %
--- | ---
от 1 до 10 | ±4
от 10 до 100 | ±3

6. Капли гомеопатические. Капли гомеопатические представляют собой жидкую лекарственную форму и в зависимости от пути введения и способа применения могут быть представлены в виде капель для приёма внутрь и капель назальных.

- Капли гомеопатические могут содержать один или несколько активных компонентов в соответствующих гомеопатических разведениях.

- В качестве активных компонентов могут быть использованы: настойки гомеопатические матричные или их разведения, растворы и жидкие разведения гомеопатические, смеси гомеопатические и др. В качестве растворителей при изготовлении капель гомеопатических используют воду очищенную, глицерин, спирт, жирные и минеральные масла или иные растворители.

- Капли гомеопатические изготавливают по массе с учётом особенностей согласно ОФС «Капли гомеопатические».

7. Капли глазные гомеопатические. Капли глазные гомеопатические – капли глазные, содержащие один или несколько активных компонентов в соответствующих гомеопатических разведениях.

- Лекарственные препараты в виде капель глазных гомеопатических изготавливают по массе в асептических условиях согласно ОФС «Капли глазные гомеопатические».

- Перед добавлением активных компонентов в виде разведений гомеопатических или их смесей в капли глазные гомеопатические, два последних десятичных разведения или последнее сотенное разведение потенцируют с применением воды свежеприготовленной или натрия хлорида раствора 0,9 % или изотонического раствора, состоящего из 0,2 частей натрия гидрокарбоната, 8,8 частей натрия хлорида и 91,0 части свежеприготовленной воды очищенной.

- При потенцировании разведений активных компонентов, содержащих спирт этиловый и предназначенных для изготовления капель глазных, концентрация остаточного спирта в глазных каплях не должна превышать допустимую норму (не более 0,005 г в 1,0 г).

- В качестве растворителей применяют воду очищенную свежеприготовленную, натрия хлорида раствор изотонический или буферные растворы. Вспомогательные вещества добавляются в глазные гомеопатические капли после окончательного потенцирования активных компонентов.

8. Растворы для инъекций гомеопатические. Растворы для инъекций гомеопатические представляют собой стерильные водные или неводные растворы, содержащие один или несколько активных компонентов в соответствующих гомеопатических разведениях.

- При изготовлении растворов для инъекций гомеопатических из водно-спиртовых разведений содержание спирта этилового в готовом растворе не должно превышать 0,5 % или должно быть минимальным. Для этого на двух последних этапах (при потенцировании по десятичной шкале) или на последнем этапе (при потенцировании по сотенной шкале) используется изотонический раствор, приготовленный на воде для инъекций.

- Для изготовления растворов для инъекций гомеопатических в качестве растворителя используется вода для инъекций. Для изотонирования применяется натрия хлорид. Использование других вспомогательных веществ, за исключением веществ для изотонирования и поддержания постоянства величины pH, не допускается.

- Лекарственные препараты в лекарственной форме растворы для инъекций гомеопатические в аптечных организациях изготавливают в соответствии с ОФС «Растворы для инъекций гомеопатические».

9. Мази гомеопатические. Мази гомеопатические – мягкая лекарственная форма, состоящая из основы и равномерно распределённых в ней одного или несколько активных компонентов в гомеопатических разведениях.

- По консистенции и составу основы мази гомеопатические подразделяют на:

  - собственно мази гомеопатические;

  - оподельдоки гомеопатические.

- Оподельдоки гомеопатические (мыльный линимент) – жидкая лекарственная форма, состоящая из смеси активных компонентов гомеопатических разведений и основы.

- Лекарственные препараты в лекарственной форме мази гомеопатические изготавливают в аптечных организациях в соответствии с ОФС «Мази гомеопатические».

- В качестве активных компонентов в мазях гомеопатических могу быть использованы настойки гомеопатические матричные или их разведения, тритурации гомеопатические, растворы и жидкие разведения гомеопатические, субстанции синтетического, минерального и природного или иного происхождения; в качестве основ – гидрофобные (ланолин, масла растительные, воск пчелиный, спермацет, вазелин, масло вазелиновое, парафин), гидрофильные (трагакант, агар, желатин, крахмал, мёд, глицерин) или иные.

- В качестве активных компонентов в оподельдоках гомеопатических используют настойки гомеопатические матричные или их разведения гомеопатические в концентрации 3 %, 5 %, 10 % или иных концентрациях, смеси настоек гомеопатических матричных или смеси их разведений, или разведения гомеопатические, или другие лекарственные средства; в качестве основы – смесь спирта мыльного, воды и спирта 95 % в соотношении 2:1:1 (по массе) или в иных соотношениях.

- Лекарственные препараты в виде мазей гомеопатических или оподельдоков гомеопатических изготавливают согласно ОФС «Мази гомеопатические».

- Допустимые отклонения в общей массе гомеопатических мазей в тубах приведены в табл. 6.

Таблица 6. Допустимые отклонения в массе мазей гомеопатических
Прописанная масса, г | Отклонения, %
--- | ---
от 50 до 100 | ±4

10. Масла гомеопатические. Масло гомеопатическое представляет собой жидкую лекарственную форму в виде экстракта или раствора для наружного применения, состоящую из гомеопатических лекарственных средств и масла растительного или минерального.

- Масло гомеопатическое изготавливают:

  - мацерацией высушенного сырья растительного или животного происхождения маслом растительным или минеральным;

  - смешиванием масел эфирных и растительных или минеральных;

  - иным способом, обеспечивающим получение стабильной лекарственной формы.

- Масло гомеопатическое может содержать один или более активных компонентов.

- Масло гомеопатическое изготавливают по массе в соотношении 1:10 или 1:20, или в иных соотношениях.

- В качестве масел используют оливковое, арахисовое, подсолнечное, косточковые и другие масла растительные или минеральные, разрешённые для медицинского применения.

- Лекарственные препараты на основе масел могут быть монокомпонентными или комплексными. Комплексные лекарственные препараты на основе масел изготавливают смешиванием монокомпонентных масел, потенцированной основы и других возможных ингредиентов с маслами или без них.

- Масла гомеопатические изготавливают следующими способами.

- Способ 1. Масло гомеопатическое изготавливают из 1 весовой части высушенного сырья растительного или животного происхождения и 10 или 20 весовых частей масла. Весовую часть измельчённого сырья помещают в закрывающийся сосуд и смачивают 0,25 весовой части спирта этилового 95 %. Смесь оставляют на 12 ч, а затем смешивают с 10 или 20 весовыми частями масла и выдерживают при температуре 60–70 °C в течение 4 часов. После этого полученную смесь отжимают и фильтруют. Получается 10 % или 5 % гомеопатический препарат на основе масла.

- Способ 1а. Одну часть измельчённого сырья помещают в закрывающийся сосуд, в который прибавляют 10 или 20 частей масла (для сырья, содержащего сильнодействующие вещества), нагревают до 37 °C и выдерживают при этой температуре в течение 7 суток, перемешивая утром и вечером в течение 5 мин. Затем смесь отжимают и фильтруют.

- Способ 2. Масло гомеопатическое изготавливают путём смешивания 1 весовой части масла эфирного с 9 или 19 (или иными) весовыми частями масла, используемого в качестве основы. Получают 10 %, 5 % или иной концентрации гомеопатические препараты на основе масел.

- Способ 3. Для получения масляного разведения D3 сначала 1 часть жидкого гомеопатического разведения D1 встряхивают с 9 частями спирта этилового абсолютированного. Из 1 части этого разведения аналогично готовится жидкое гомеопатическое разведение D3. Одну часть жидкого гомеопатического разведения D3 смешивают с 99 частями масла, используемого в качестве основы. Эта смесь является масляным разведением D3.

- Масляное разведение D4 готовится аналогичным способом из жидкого гомеопатического разведения D2, аналогично готовятся и масляные разведения D5 и выше.

- Способ 3а. Одну часть тритурации гомеопатической смешивают с 99 частями масла, используемого в качестве основы, до гомогенного состояния, при этом масло вводится последовательно частями. Время перемешивания с основой составляет 20 мин.

- Способ 4. Масло гомеопатическое изготавливают путём смешивания 1 части гомеопатического разведения или смеси гомеопатических разведений с 9 частями минерального масла или в других соотношениях. Введение водных и спиртовых составляющих производят постадийно или с использованием эмульгаторов (ланолина, его производных или масла какао).

- Способ 5. Изготовление масел гомеопатических комбинированных, в состав которых входят гомеопатические разведения или смеси гомеопатических разведений, экстракты масляные, эфирные и синтетические масла, осуществляют с учётом физико-химических свойств всех компонентов. Технологические приёмы, используемые при изготовлении комбинированных масел, должны предупреждать нежелательные взаимодействия лекарственных средств друг с другом, также необходимо предусматривать введение компонентов в основу в определённой последовательности в зависимости от состава масла. Пахучие и летучие компоненты добавляют в последнюю очередь.

11. Суппозитории гомеопатические. Суппозитории гомеопатические – суппозитории, содержащие один или несколько активных компонентов в соответствующих гомеопатических разведениях, равномерно распределённых в суппозиторной основе.

- В качестве активных компонентов при изготовлении суппозиториев гомеопатических могут быть использованы настойки гомеопатические матричные, растворы и жидкие разведения гомеопатические, смеси гомеопатические, тритурации гомеопатические; в качестве основы – масло какао, ланолин и гидрогенизированные жиры.

- Лекарственные препараты в лекарственной форме суппозитории гомеопатические в аптечных организациях изготавливают методами выкатывания, прессования или выливания в соответствии с ОФС «Суппозитории гомеопатические».

12. Сиропы гомеопатические. Сироп гомеопатический – жидкая лекарственная форма, содержащая один или несколько активных компонентов в соответствующих гомеопатических разведениях. Лекарственные препараты в лекарственной форме сиропы гомеопатические изготавливают в аптечных организациях в соответствии с ОФС «Сиропы гомеопатические».

- Концентрация сахара в лекарственном препарате должна быть не менее 64 %. В качестве консерванта для изготовления гомеопатического сиропа используют спирт этиловый, применение других консервантов недопустимо.

##### Испытания (контроль качества)

Оценка качества гомеопатических лекарственных препаратов, изготавливаемых в условиях аптечной организации, осуществляется в виде:

- письменного контроля;

- опросного контроля;

- органолептического контроля;

- физического контроля;

- химического контроля;

- контроля при отпуске лекарственных препаратов.

В соответствии с правилами изготовления и отпуска гомеопатических лекарственных препаратов, утверждёнными уполномоченным федеральным органом исполнительной власти.

Все поступающие лекарственные средства (независимо от источника их поступления) подвергаются приёмочному контролю.

Приёмочный контроль организуется с целью предупреждения поступления в аптечную организацию недоброкачественных лекарственных средств, используемых для изготовления гомеопатических лекарственных препаратов, а также некачественных упаковочных материалов.

Приёмочный контроль заключается в проверке поступающих лекарственных средств на соответствие требованиям по показателям: «Описание», «Упаковка», «Маркировка», а также в проверке правильности оформления сопроводительных документов, включая документы, подтверждающие качество лекарственных средств.

На этапе приёмочного контроля обязательно должно оцениваться качество поступившего вспомогательного вещества – гранул сахарных, посредством физического и органолептического контроля.

Письменный контроль осуществляется заполнением паспорта письменного контроля гомеопатического лекарственного препарата, изготовленного по рецепту или требованию, или в виде внутриаптечной заготовки, сразу после изготовления гомеопатического лекарственного препарата по памяти в соответствии с последовательностью технологических операций. Все расчёты приводят на обратной стороне паспорта письменного контроля до изготовления гомеопатического лекарственного препарата. Проверяют соответствие записей в паспорте письменного контроля прописи в рецепте (требовании), правильности произведённых расчетов. Проводится обязательно для всех гомеопатических лекарственных препаратов, изготовленных в аптечной организации.

Опросный контроль проводится выборочно, после приготовления фармацевтом не более пяти гомеопатических лекарственных форм. При этом называется первая входящая фармацевтическая субстанция, а в лекарственных препаратах сложного состава указывается также её количество, после чего называются все взятые действующие и вспомогательные вещества, и их количества.

Органолептический контроль заключается в проверке изготовленного гомеопатического лекарственного препарата по показателям:

- описание (внешний вид, цвет, запах);

- однородность смешивания для смесей гомеопатических, тритураций гомеопатических, мазей гомеопатических;

- видимые механические включения (в каплях глазных гомеопатических, растворах для инъекций гомеопатических).

Физический контроль заключается в проверке общей массы или объёма гомеопатического лекарственного препарата, однородности массы для суппозиториев гомеопатических, количества гранул гомеопатических в 1 грамме и распадаемости для гранул гомеопатических.

Испытание однородности массы суппозиториев гомеопатических выполняют в соответствии с ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм».

Испытание по показателю «Количество гранул в 1 г» для лекарственных препаратов в лекарственной форме «гранулы гомеопатические», выполняют по методике, приведённой в ОФС «Гранулы гомеопатические».

Обязательный контроль количества гранул гомеопатических в 1 г должен выполняться для вспомогательного вещества – гранул сахарных; испытание проводят по той же методике ОФС «Гранулы гомеопатические».

Определение распадаемости гранул гомеопатических осуществляют в соответствии с требованиями ОФС «Гранулы гомеопатические».

Физическому контролю обязательно подвергают растворы для инъекций гомеопатические, настойки гомеопатические матричные.

Проверяется также качество упаковки изготовленного гомеопатического лекарственного препарата.

Химический контроль заключается в оценке качества изготовленных гомеопатических лекарственных препаратов по показателям:

- подлинность (качественный анализ);

- количественное определение;

Качественному анализу в обязательном порядке подвергаются:

- настойки гомеопатические матричные;

- тритурации гомеопатические первого десятичного разведения;

- растворы и жидкие разведения гомеопатические первого десятичного разведения;

- гомеопатические лекарственные препараты в виде внутриаптечной заготовки.

Химический контроль (качественный и количественный анализ) настоек гомеопатических матричных выполняют в соответствии с требованиями фармакопейных статей на настойку гомеопатическую матричную конкретного наименования. Настойки гомеопатические матричные, полученные из лекарственного растительного сырья, содержащего ядовитые и сильнодействующие вещества, должны быть подвергнуты испытанию на четвёртое десятичное разведение (D4): «Испытание четвёртого десятичного разведения» согласно соответствующим фармакопейным статьям. Аналогичному испытанию должны подвергаться тритурации гомеопатические, содержащие ядовитые или сильнодействующие вещества.

В соответствии с ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов» установление подлинности по активному компоненту и количественное определение гомеопатического лекарственного препарата проводят в случае, если разведение активного компонента позволяет выполнить указанные испытания. В случае если разведение активного компонента не позволяет выполнить указанные испытания, качество гомеопатического лекарственного препарата оценивают по вспомогательным веществам.

Качественному и количественному анализу (полный химический анализ) подвергаются в обязательном порядке растворы для инъекций гомеопатические.

Гомеопатические лекарственные препараты в виде внутриаптечной заготовки изготавливают под наблюдением провизора-аналитика или провизора-технолога. В тритурациях гомеопатических и гранулах гомеопатических качество лекарственного препарата дополнительно оценивают по вспомогательным веществам.

Контроль при отпуске проводится для всех гомеопатических лекарственных препаратов, изготовленных аптечной организацией, в рамках которого проверяется соответствие:

- упаковки гомеопатического лекарственного препарата с физико-химическими свойствами входящих в него лекарственных средств;

- реквизитов рецепта или требования сведениям, указанным на упаковке изготовленного гомеопатического лекарственного препарата;

- маркировки гомеопатического лекарственного средства требованиям ОФС «Маркировка лекарственных средств», ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов».

##### Упаковка

Выбор упаковки для гомеопатических лекарственных препаратов проводится в соответствии с ОФС «Упаковка лекарственных средств».

##### Маркировка

В соответствии с ОФС «Лекарственные формы гомеопатических лекарственных препаратов».

Гомеопатические лекарственные препараты, изготовленные и расфасованные в аптечной организации, оформляются соответствующими этикетками, которые в зависимости от способа применения лекарственного препарата подразделяют на этикетки:

- с надписью «Гомеопатический» или «Гомеопатическое лекарственное средство» для гомеопатических лекарственных препаратов;

- для мазей гомеопатических – «Хранить в прохладном и защищённом от света месте»;

- для капель гомеопатических – «Хранить в защищённом от света месте»;

- для гранул гомеопатических – «Хранить в сухом, защищённом от света месте».

##### Хранение

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственных средств», в упаковке, обеспечивающей стабильность гомеопатического лекарственного препарата в указанных условиях хранения (табл. 7).

Таблица 7. Условия хранения гомеопатических лекарственных препаратов в различных лекарственных формах
№ п/п | Наименование лекарственной формы | Условия хранения
--- | --- | ---
1 | 2 | 3
1. | Настойки гомеопатические матричные (спиртовые) | Хранение при температуре не выше 25 °C в защищённом от света месте, в плотно закрытой ёмкости
2. | Настойки гомеопатические матричные ферментированные | Хранение при температуре 12–15 °C в защищённом от света месте, в плотно закрытой ёмкости
3. | Разведения гомеопатические водно-спиртовые | Хранение при температуре не выше 25 °C в защищённом от света месте, в плотно закрытой ёмкости
4. | Разведения гомеопатические водные | Хранение при температуре не выше 25 °C в защищённом от света месте
5. | Жидкости для наружного применения | Хранение при температуре не выше 25 °C в защищённом от света месте
6. | Капли гомеопатические назальные (водные) | Хранение при температуре не выше 25 °C в защищённом от света месте
7. | Капли гомеопатические для приёма внутрь спиртовые | Хранение при температуре не выше 25 °C в защищённом от света месте
8. | Капли глазные гомеопатические | Хранение при температуре не выше 25 °C в защищённом от света месте
9. | Тритурации гомеопатические | Хранение в сухом, прохладном, защищённом от света месте
10. | Мази гомеопатические, в состав основы которых входят вазелин, вазелиновое масло и активный компонент/активные компоненты неорганического происхождения | Хранение при температуре 12–15 °C в защищённом от света месте
11. | Мази гомеопатические, в состав основы которых входят ланолин безводный, вазелин, потенцированный активный компонент/активные компоненты и другие активные компоненты | Хранение при температуре от 5 до 15 °C в защищённом от света месте
12. | Мази гомеопатические, в состав основы которых входят ланолин безводный, вазелин, масло растительного или минерального происхождения, потенцированный активный компонент/активные компоненты и другие вещества, разрешённые для медицинского применения, до 20 % | Хранение при температуре 12–15 °C в защищённом от света месте
13. | Мази гомеопатические, в состав основы которых гелеобразующие компоненты | Хранение при температуре 12–15 °C в защищённом от света месте
14. | Мази гомеопатические, в состав основы которых входят гелеобразующие компоненты синтетического происхождения | Хранение в холодильнике, в защищённом от света месте
15. | Масла монокомпонентные из высушенного сырья растительного или животного происхождения до 20 % | Хранение при температуре не выше 25 °C в защищённом от света месте, в плотно закрытой ёмкости
16. | Масла монокомпонентные из свежесобранного сырья растительного происхождения | Хранение при температуре не выше 25 °C в защищённом от света месте, в плотно закрытой ёмкости
17. | Масла гомеопатические, в состав которых входит потенцированный активный компонент/активные компоненты, масло минерального происхождения и другие вещества | Хранение при температуре не выше 25 °C в защищённом от света месте
18. | Суппозитории гомеопатические | Хранение при температуре 12–15 °C в защищённом от света месте
19. | Суппозитории ректальные гомеопатические на основе масла какао и ланолина | Хранение при температуре от 5 до 15 °C в сухом, защищённом от света месте
20. | Оподельдоки гомеопатические | Хранение при температуре 12–15 °C в защищённом от света месте или при температуре не выше 25 °C в сухом, защищённом от света месте
21. | Гранулы гомеопатические | Хранение в сухом, прохладном, защищённом от света месте, или в сухом, защищённом от света месте, при температуре не выше 25 °C.
22. | Сиропы гомеопатические | Хранение при температуре 12–15 °C в защищенном от света месте

##### Срок годности

Сроки годности гомеопатических лекарственных препаратов в различных лекарственных формах, изготовленные аптечными организациями (табл. 8).

Таблица 8. Сроки годности гомеопатических лекарственных препаратов
№ п/п | Наименование лекарственной формы | Срок годности в месяцах
--- | --- | ---
1 | 2 | 3
1. | Настойки гомеопатические матричные (спиртовые) | 60
2. | Настойки гомеопатические матричные ферментированные | 60
3. | Разведения гомеопатические (водно-спиртовые) | 60
4. | Разведения гомеопатические (водные) | 36 (после стерилизации)
5. | Жидкости для наружного применения | 36
6. | Капли гомеопатические назальные (водные) | 12 (7 суток после вскрытия упаковки)
7. | Капли гомеопатические для приёма внутрь (спиртовые) | 60
8. | Капли глазные гомеопатические | 12 (после стерилизации); (7 суток после вскрытия упаковки)
9. | Тритурации гомеопатические | 36
10. | Мази гомеопатические, в состав основы которых входят вазелин, вазелиновое масло и активный компонент/активные компоненты неорганического происхождения | 6
11. | Мази гомеопатические, в состав основы которых входят потенцированный активный компонент/активные компоненты, ланолин безводный, вазелин и другие активные компоненты | 60
12. | Мази гомеопатические, в состав основы которых входят потенцированный активный компонент/активные компоненты, ланолин безводный, вазелин, масло растительного или минерального происхождения и другие вещества, разрешённые для медицинского применения, до 20 % | 6
13. | Мази гомеопатические, в состав основы которых входят гелеобразующие компоненты | 6
14. | Мази гомеопатические, в состав основы которых входят гелеобразующие компоненты синтетического происхождения | 60
15. | Масла монокомпонентные из высушенного сырья растительного или животного происхождения до 20 % | 12
16. | Масла монокомпонентные из сырья растительного свежесобранного | 12
17. | Масла гомеопатические, в состав которых входит потенцированный активный компонент/активные компоненты, масло минерального происхождения и другие вещества | 60
18. | Суппозитории гомеопатические | 6
19. | Суппозитории ректальные гомеопатические на основе масла какао и ланолина | 36
20. | Оподельдоки гомеопатические | 60
21. | Гранулы гомеопатические | 60
22. | Сиропы гомеопатические | 12

_____________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.8.0008 СТАБИЛЬНОСТЬ И СРОКИ ГОДНОСТИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ АПТЕЧНОГО ИЗГОТОВЛЕНИЯ

Настоящая общая фармакопейная статья устанавливает требования к исследованию стабильности и установлению сроков годности лекарственных препаратов аптечного изготовления.

##### ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Следующие определения и понятия используются для целей настоящей общей фармакопейной статьи.

Другие определения и термины, используемые в настоящей общей фармакопейной статье, указаны в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления», ОФС «Стабильность и сроки годности лекарственных средств», ОФС «Лекарственные формы», ОФС «Упаковка лекарственных средств», ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

Выбор крайних вариантов (значений) (брэкетинг) – составление сокращённого плана исследования стабильности лекарственных препаратов аптечного изготовления таким образом, чтобы исследованию подвергались образцы только с крайними (предельными) значениями определённых факторов в ряду во всех временных точках контроля, используемых при проведении исследований по полному плану. План предполагает, что стабильность образцов с любыми промежуточными значениями факторов в ряду приравнивается к стабильности образцов с крайними значениями.

Данные, дополнительно подтверждающие стабильность лекарственного препарата аптечного изготовления – данные, которые не являются основными данными о стабильности, полученными в ходе формализованных (стандартно выполняемых в соответствии с предъявляемыми к этим исследованиям требованиями) исследований. Такие данные дополнительно обосновывают аналитические методики, предложенный срок годности, а также условия хранения.

Дата изготовления лекарственного препарата аптечного изготовления – дата выполнения первой операции, связанной со смешиванием фармацевтической субстанции с другими компонентами лекарственного препарата. Для лекарственных препаратов, состоящих из одной фармацевтической субстанции в первичной упаковке, датой изготовления считается начальная дата фасовки (дата наполнения первичной упаковки).

Долгосрочные исследования лекарственного препарата аптечного изготовления – исследования стабильности физических, химических, биологических, биофармацевтических и микробиологических характеристик лекарственного препарата в целях подтверждения предполагаемого срока годности и/или заявленных условий хранения.

Допустимые отклонения в условиях хранения – приемлемые колебания температуры и относительной влажности в технических средствах для хранения при исследованиях стабильности лекарственных препаратов аптечного изготовления.

Значимое изменение лекарственного препарата аптечного изготовления – одно из следующих изменений:

- 5 % изменение содержания;

- превышение критерия приемлемости продукта деградации;

- несоответствие критериям приемлемости по внешнему виду, физическим свойствам и функциональным характеристикам, например, по цвету, разделению фаз, способности к ресуспендированию, по комкованию (слёживаемости). Допускаются некоторые изменения физических свойств в условиях ускоренных исследований, например, размягчение суппозиториев, плавление мягких лекарственных форм;

- несоответствие критерию приемлемости по значению «рН» при наличии данного показателя в программе исследования стабильности лекарственного препарата.

Климатические зоны – зоны, деление на которые основано на превалирующих ежегодных климатических условиях.

Критическое изменение лекарственного препарата аптечного изготовления - изменение, влияющее на эффективность, безопасность и (или) качество лекарственного препарата.

Матричный метод – разработка сокращённого плана исследования стабильности лекарственных препаратов аптечного изготовления таким образом, чтобы только выбранная часть из общего количества образцов анализировалась в определённый момент времени с учётом всех комбинаций факторов. На последующих этапах контроля следует использовать другой комплект образцов из общего количества с учётом всех комбинаций факторов. Метод предполагает, что стабильность исследованных образцов отождествляется со стабильностью всех образцов в данный момент времени. Должны быть выявлены (учтены) различия в образцах для одного и того же лекарственного препарата, в том числе различия, охватывающие образцы, изготовленные в различных условиях разными специалистами в разные дни, с использованием разных серий фармацевтической субстанции, имеющие разную дозировку, разный размер одинакового типа упаковки и укупорочных средств и, возможно, в некоторых случаях разную систему упаковки/укупорки.

Многодозовая упаковка - первичная упаковка лекарственного препарата аптечного изготовления, которая позволяет последовательно отбирать дозы лекарственного препарата из общего количества доз, содержащихся в этой упаковке, не изменяя при этом безопасность, концентрацию, качество и микробиологическую чистоту оставшейся части лекарственного препарата.

Срок годности лекарственного препарата аптечного изготовления – период времени, в течение которого лекарственный препарат должен полностью соответствовать требованиям фармакопейной статьи или общей фармакопейной статьи (при наличии) при надлежащем хранении в условиях, указанных в фармакопейной статье или общей фармакопейной статье (при наличии), либо в случае их отсутствия – требованиям и условиям хранения документа в области контроля качества, утверждённого руководителем аптечной организации.

Стабильность – способность лекарственного средства сохранять химические, физические, микробиологические, биофармацевтические и фармакологические свойства в определённых границах в течение установленного срока годности.

Стрессовые исследования лекарственного препарата аптечного изготовления – исследования, проводимые для оценки влияния более неблагоприятных условий, чем условия ускоренных исследований хранения, и включающие в себя исследования на фотостабильность и исследования параметров, специфических для определённых лекарственных форм.

Ускоренные исследования лекарственного препарата аптечного изготовления – исследования, спланированные с целью ускорения химической деградации или физического изменения лекарственного препарата посредством создания неблагоприятных условий хранения и являющиеся частью программы исследования стабильности лекарственного препарата. Такие данные дополнительно к результатам долгосрочных исследований стабильности используются для оценки более отдалённых химических эффектов в условиях неускоренных исследований, а также для оценки влияния кратковременных отклонений от условий хранения, указанных в маркировке. Результаты ускоренных исследований не всегда позволяют прогнозировать физические изменения.

Условия хранения - оптимальные параметры окружающей среды (температура, влажность окружающего воздуха, световой режим и др.) и правила обращения (меры предохранения от порчи и др.), необходимые для обеспечения сохранения качества лекарственного препарата аптечного изготовления.

##### ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

Целью исследования стабильности лекарственных препаратов аптечного изготовления является:

- получение данных об изменении качества лекарственного препарата с течением времени под влиянием различных факторов окружающей среды, таких, как температура, влажность, свет, кислород и др., биологической контаминации;

- получение данных о влиянии на качество лекарственного препарата системы упаковки и её элементов, включая укупорочные средства и упаковочные материалы;

- исследование влияния на качество лекарственного препарата результатов взаимодействия фармацевтической субстанции со вспомогательными веществами или результатов взаимодействия двух или более фармацевтических субстанций в лекарственном препарате с фиксированными комбинациями доз и т.д.;

- получение сведений об эффективности антимикробных консервантов, антиоксидантов в лекарственных препаратах и др.

Данные, полученные в ходе исследования стабильности, необходимы:

- для установления срока годности лекарственных препаратов аптечного изготовления;

- для установления рекомендуемых требований к надлежащим условиям хранения лекарственного препарата аптечного изготовления и последующего выбора необходимых указаний по его маркировке;

- для выбора надлежащих упаковочных материалов, системы упаковки/укупорки, включающей укупорочные средства и другие элементы упаковки для конкретного лекарственного препарата;

- для обоснования использования, если применимо, необходимой концентрации антимикробных консервантов в лекарственных препаратах аптечного изготовления.

Исследование стабильности должно осуществляться по задокументированной программе исследования стабильности конкретного лекарственного препарата аптечного изготовления, разработка которой должна основываться на знании свойств и стабильности исходных компонентов лекарственного препарата (фармацевтической субстанции и/или готового лекарственного препарата, вспомогательного вещества) и лекарственной формы.

При разработке программы исследования стабильности необходимо также принимать во внимание все характеристики исследуемого лекарственного препарата: совместимость компонентов и возможность их деградации в изготовленном лекарственном препарате; особенности технологии изготовления (асептические условия, метод стерилизации); вероятность роста микроорганизмов в лекарственном препарате; используемую систему упаковки/укупорки; ожидаемые условия хранения; предполагаемую длительность применения пациентом исследуемого лекарственного препарата. Разработчик программы исследования стабильности должен использовать имеющиеся научные сведения, литературные данные о свойствах исследуемого лекарственного препарата, а также опираться на собственные знания и опыт по изготовлению лекарственных препаратов. Дополнительная информация о влиянии на стабильность лекарственных препаратов процессов химической деградации фармацевтических субстанций, особенностей лекарственных форм, факторов окружающей среды приведена в ОФС «Аспекты стабильности лекарственных средств».

Программа исследования стабильности лекарственного препарата аптечного изготовления включает в себя виды планируемых исследований (долгосрочные, ускоренные, стрессовые) и, как правило, выбор образцов, описание системы упаковки/укупорки, исследуемые характеристики, методики исследований, частоту исследований; требования к условиям исследования (условия хранения).

##### ИССЛЕДОВАНИЕ СТАБИЛЬНОСТИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ АПТЕЧНОГО ИЗГОТОВЛЕНИЯ

Исследование стабильности лекарственных препаратов аптечного изготовления осуществляют на основании данных, полученных в реальном времени в условиях долгосрочных исследований. Если применимо и необходимо для исследуемого лекарственного препарата, проводят ускоренные и/или стрессовые исследования. Ускоренные исследования являются дополнительными к долгосрочным, позволяющие получить данные о влиянии кратковременных отклонений температуры и относительной влажности от предполагаемых условий хранения лекарственного препарата. Стрессовые исследования, включая исследования на фотостабильность, проводят для оценки наиболее вредного влияния факторов внешней среды (высокие и низкие температуры, влага, кислород и другие компоненты воздуха, свет и т.п.) и зависимости от времени и условий их воздействия.

Общие рекомендации по исследованию стабильности лекарственных средств изложены в ОФС «Стабильность и сроки годности лекарственных средств», по исследованию на фотостабильность – в ОФС «Определение фотостабильности лекарственных средств».

Выбор образцов. Данные о стабильности лекарственного препарата аптечного изготовления должны быть получены от образцов лекарственного препарата, изготовленных в различных условиях, например, в разные дни, разными специалистами, с использованием разных серий фармацевтической субстанции (если применимо) и т.п. При этом образцы исследуемого лекарственного препарата должны быть одного и того же состава, в той же лекарственной форме, изготовлены по одной и той же технологии и упакованы в той же системе упаковки/укупорки, которая планируется для реализации.

При выборе количества исследуемых образцов лекарственного препарата аптечного изготовления необходимо учитывать свойства лекарственной формы и стабильность фармацевтической субстанции, используемой для изготовления. Для стандартных в отношении показателей стабильности лекарственных форм (например, твёрдых лекарственных форм с немедленным высвобождением, растворов), фармацевтические субстанции которых являются стабильными, при исследовании стабильности допускается использовать данные, по меньшей мере, двух различных образцов, а для лекарственных форм, критических в отношении показателей стабильности или нестабильности фармацевтической субстанции, необходимо использовать данные исследования стабильности трёх образцов лекарственного препарата, изготовленных в различных условиях.

Система упаковки/укупорки. При исследовании стабильности упаковка, укупорочные средства и другие элементы упаковки образцов лекарственного препарата аптечного изготовления должны быть идентичны системе упаковки/укупорки, которая будет применяться для лекарственных препаратов аптечного изготовления, предназначенных для реализации.

При исследовании стабильности лекарственные препараты аптечного изготовления должны быть в потребительской упаковке. Любые испытания лекарственного препарата без первичной упаковки или в упаковке из иных упаковочных материалов, могут составлять полезную часть стрессовых испытаний лекарственной формы или, соответственно, рассматриваться как дополнительная подтверждающая информация.

Если существует вероятность того, что при взаимодействии с содержимым лекарственного препарата на стабильность лекарственного препарата аптечного изготовления может оказать влияние система упаковки/укупорки (например, при контакте укупорочного средства (пробки), с жидкой лекарственной формой), то при изучении стабильности необходимо наряду с исследованием образцов в прямом (вертикальном) положении, исследовать образцы лекарственного препарата в перевёрнутом или горизонтальном положениях, т.е. такие образцы, которые контактируют с укупорочным средством (например, пробкой) для определения влияния материала укупорочного средства (пробки) на качество лекарственного препарата. Должны быть зафиксированы все сочетания различных систем упаковки/укупорки исследуемого лекарственного препарата при изучении стабильности и в программу исследования стабильности лекарственного препарата дополнительно введён показатель «положение» (обычное и перевёрнутое).

Исследуемые характеристики (параметры). Исследование стабильности включает в себя исследование таких свойств лекарственного препарата аптечного изготовления, которые подвержены изменениям в процессе хранения и которые могут оказать влияние на качество, безопасность и/или эффективность лекарственного препарата. В зависимости от конкретной ситуации объём исследований стабильности должен охватывать, если применимо, физические, химические, биологические и микробиологические показатели, а также учитывать содержание антимикробных консервантов и антиоксидантов.

При исследовании стабильности для каждого лекарственного препарата аптечного изготовления должен быть определён перечень исследуемых параметров, методы их определения и критерии приемлемости, которые должны соответствовать требованиям фармакопейной статьи и общих фармакопейных статей, либо в случае их отсутствия – требованиям документа в области контроля качества, утвержденного руководителем аптечной организации. Исследуемые параметры лекарственного препарата аптечного изготовления должны быть включены в программу исследования его стабильности, при этом не все из них необходимо проверять в каждой точке контроля.

Все лекарственные препараты аптечного изготовления в любых лекарственных формах должны оцениваться по внешнему виду (показатель «Описание»), по содержанию действующих веществ (показатель «Количественное определение») и, если применимо, по содержанию продуктов деградации и содержанию антимикробных консервантов и антиоксидантов.

Должна контролироваться микробиологическая чистота нестерильных лекарственных препаратов, при этом исследования по показателю «Микробиологическая чистота» необходимо проводить, по меньшей мере, в начале и конце исследования стабильности (в конце срока годности) лекарственного препарата.

Должно проводиться исследование стерильных лекарственных препаратов на соответствие требований по показателю «Стерильность», исследование допускается проводить в начальной и конечной точке исследования стабильности (в конце срока годности).

Лекарственные препараты для парентерального применения, как правило, исследуют также по показателям: видимые механические включения, рН, извлекаемый объём; при проведении исследований по показателям «Пирогенность» или «Бактериальные эндотоксины» допускается ограничиться исследованием стабильности на момент выпуска.

Следующие рекомендуемые исследования лекарственных препаратов могут быть включены в программу исследования стабильности в зависимости от вида лекарственной формы и её классификационных признаков: в лекарственных препаратах в виде растворов могут быть исследованы прозрачность, цветность, отсутствие осадка, рН; в суспензиях – способность к ресуспендированию; в эмульсиях – разделение фаз; в мягких лекарственных формах – однородность; в порошках – способность к комкованию и т.д.; исследование на запах должно проводиться только в случае необходимости и с соблюдением требований безопасности.

Для контроля исследуемых параметров необходимо использовать валидированные аналитические методики (ОФС «Валидация аналитических методик»), позволяющие охарактеризовать стабильность лекарственного препарата аптечного изготовления. Необходимость проведения повторных испытаний по исследованию стабильности и их объём будет зависеть от результатов валидации.

При исследовании стабильности могут быть применены методы и методики испытаний, регламентированные фармакопейной статьёй или общей фармакопейной статьёй, либо в случае их отсутствия – документом в области контроля качества на конкретный лекарственный препарат аптечного изготовления, если методики позволяют выявить различия между показателями качества исследуемого лекарственного средства и продуктами его деградации.

Для каждого конкретного испытания лекарственного препарата аптечного изготовления должны быть определены критерии приемлемости, представляющие собой числовые пределы, интервалы или другие данные.

Допускаются приемлемые и обоснованные отклонения одних и тех же показателей качества для одного и того же лекарственного препарата аптечного изготовления в начале и в конце исследования, основанные на оценке стабильности и на наблюдаемых изменениях при хранении.

Любые различия между содержанием антимикробных консервантов в начале и в конце исследования стабильности лекарственного препарата аптечного изготовления, должны быть подтверждены обоснованной корреляцией количественного содержания и достаточной эффективности этих консервантов для окончательного их содержания в составе лекарственного препарата, предназначенного для хранения и реализации в течение предполагаемого срока годности.

При исследовании стабильности лекарственного препарата аптечного изготовления одновременно с контролем качества исследуемых параметров оценивают физическую, химическую и др. совместимость действующего(-их) и вспомогательного(-ых) веществ.

Частота исследований. Периодичность исследований стабильности должна быть достаточной для установления профиля стабильности лекарственного препарата аптечного изготовления. Количество точек контроля результатов исследований зависит от запланированного метода исследования и предполагаемого срока годности лекарственного препарата аптечного изготовления.

Предполагаемая частота в условиях долгосрочного исследования лекарственного препарата аптечного изготовления составляет не менее трёх временных точек контроля, включая начальную и конечную. Если на основании имеющегося опыта предполагают, что результаты ускоренных испытаний могут вплотную приблизиться к критериям «значимого изменения», то необходимо расширить исследования, увеличив количество образцов в конечной точке контроля, либо включив четвёртую точку контроля в программу исследования стабильности.

При соответствующем обосновании для лекарственных препаратов аптечного изготовления могут быть применены сокращённые планы исследования стабильности, в которых частота исследований может быть уменьшена или когда исследования комбинаций определённых факторов допускается проводить не в полном объёме. Любой план сокращённых исследований должен позволять адекватно прогнозировать срок годности лекарственного препарата аптечного изготовления. Необходимо учесть потенциальный риск плана сокращённых исследований и установить меньший срок годности, чем он мог бы быть установлен при проведении полных исследований, вследствие меньшего количества собранных данных. К планам сокращённых исследований стабильности лекарственных препаратов относят метод крайних вариантов (брэкетинг) и матричный метод, требования к которым изложены в ОФС «Стабильность и сроки годности лекарственных средств».

Условия хранения при исследовании стабильности. Лекарственный препарат аптечного изготовления необходимо исследовать в условиях (с допустимыми отклонениями), позволяющими изучить его термическую стабильность и, если необходимо, чувствительность к действию влаги, света или возможности потери растворителя. Выбранные условия исследований должны соответствовать условиям и продолжительности хранения, перевозки (если необходимо), и последующего применения, с учётом климатических условий местности, на территории которой предназначена реализация исследуемого лекарственного препарата.

Для обеспечения надлежащей температуры и, при необходимости, относительной влажности, используют термостаты, термошкафы, климатические камеры или другие технические средства, позволяющие автоматически поддерживать заданную температуру с точностью ±2 °C и заданную относительную влажность с точностью ±5 %. Указанные колебания температуры и относительной влажности технических средств для хранения лекарственных препаратов аптечного изготовления при проведении исследований стабильности считают допустимыми. Используемые технические средства должны в течение установленного периода исследований контролировать условия хранения в рамках диапазонов, применяемых для исследования стабильности лекарственных препаратов. Условия хранения (например, фактическая температура и влажность, если осуществляется их контроль) должны отслеживаться и регистрироваться. Кратковременные изменения условий хранения из-за открывания двери технического средства для хранения считаются неизбежными. В случае отклонения от условий хранения из-за неисправности технического средства последствия должны быть установлены и занесены в отчёт. Последствия отклонений, которые превышают допустимые отклонения в течение более чем 24 ч, должны быть проанализированы. Для обеспечения надлежащих условий при исследовании фотостабильности лекарственных препаратов аптечного изготовления используют соответствующие источники света (ОФС «Определение фотостабильности лекарственных средств»). Используемые технические средства должны быть аттестованы, поверены и обслуживаться в соответствии с установленными требованиями.

При выборе условий хранения при исследовании стабильности лекарственного препарата аптечного изготовления необходимо учитывать влияние климатических условий местности, на территории которой предполагается реализация лекарственного препарата. Информация о средней годовой кинетической температуре и средней годовой относительной влажности в различных климатических зонах определяет выбор условий проведения долгосрочных испытаний при исследовании стабильности лекарственных препаратов аптечного изготовления. Средняя кинетическая температура включает ежегодные изменения, то есть, самые низкие и самые высокие температуры в климатической зоне в течение зимы и лета, она может быть рассчитана на основании климатических данных. В таблице 1 приведены условия проведения долгосрочных исследований стабильности лекарственных препаратов в зависимости от климатических зон. Для Российской Федерации применимы условия, указанные для климатических зон I и II.

Таблица 1. Рекомендуемые условия проведения долгосрочных исследований стабильности в зависимости от климатических зон
Климатическая зона | Описание | Критерии (средняя годовая температура, измеренная на открытом воздухе /среднее парциальное давление водяного пара) | Условия проведения долгосрочных испытаний
--- | --- | --- | ---
I | Умеренный климат | Менее или равно15 °С / менее или равно 11 гПа | 21 °С / 45 %
II | Субтропический или средиземноморский климат | От более 15 °С до 22 °С / от более 11 гПа до 18 гПа | 25 °С / 60 %
III | Жаркий и сухой климат | Более 22 °С / менее или равно 15 гПа | 30 °С / 35 %
IV А | Жаркий и влажный климат | Более 22 °С / более 15 гПа до 27 гПа | 30 °С / 65 %
IV В | Жаркий и очень влажный климат | Более 22 °С / более 27 гПа | 30 °С / 75 %

Условия хранения лекарственного препарата аптечного изготовления при долгосрочных исследованиях стабильности выбирают в зависимости от климатической зоны, в которой предполагается его реализация, в соответствии с данными таблицы 1 с учётом предполагаемых условий температуры и относительной влажности при его хранении, перевозке и реализации. Различают 3 группы лекарственных препаратов аптечного изготовления:

- требующих условий хранения в морозильной камере при температуре минус 20 °С;

- требующих условий хранения в холодильнике при температуре (5±3)°С;

- не требующие хранения ни в холодильнике, ни в морозильной камере.

Если предполагается, что лекарственный препарат аптечного изготовления не требует хранения ни в холодильнике, ни в морозильной камере, то в отношении такого лекарственного препарата применяют условия исследования «общие правила», указанные в таблице 2. Условия исследования определяются климатической зоной, выбираются разработчиком. Исследования в неблагоприятных условиях могут быть альтернативными условиям исследований при температуре (25±2)°С и относительной влажности (60±5)% или температуре (30±2)°С и относительной влажности (65±5)%.

Таблица 2. Условия исследований «Общие правила»
Исследование | Условия исследования (температура и относительная влажность)
--- | ---
Долгосрочное | (25±2)°С и (60±5)% или (30±2)°С и (65±5)% или (30±2)°С и (75±5)%

Долгосрочное исследование стабильности лекарственных препаратов аптечного изготовления, подлежащих хранению в холодильнике, проводят при температуре (5±3)°С. Выбор условий для ускоренных исследований таких лекарственных препаратов основан на оценке рисков. Исследования при неблагоприятных условиях могут быть альтернативой исследованию при температуре (25±2)°С и относительной влажности (60±5)% или температуре (30±2)°С и относительной влажности (65±5)%.

Долгосрочное исследование стабильности лекарственных препаратов аптечного изготовления, подлежащих хранению в морозильной камере, проводят при температуре минус (20±5)°С.

Долгосрочные исследования стабильности конкретного лекарственного препарата аптечного изготовления необходимо проводить в реальном времени, в рекомендованной потребительской упаковке, при постоянных верхних (наиболее высоких) показателях температуры и относительной влажности установленного режима хранения при исследовании, в течение всего предполагаемого срока годности.

Анализ данных. Анализируют данные о значениях показателей качества, полученные в ходе исследования стабильности лекарственного препарата аптечного изготовления.

Если данные свидетельствуют об отсутствии значимых изменений показателя качества во времени или изменения невелики по отношению к критерию приемлемости, а также если отсутствует вариабельность или она статистически незначительна, то лекарственный препарат аптечного изготовления по данному показателю качества в течение предполагаемого срока годности укладывается в установленные критерии приемлемости.

Если данные свидетельствуют о значимых изменениях показателя качества во времени и (или) внутрифакторной либо межфакторной вариабельности, то лекарственный препарат аптечного изготовления по данному показателю соответствует установленному критерию приемлемости только до определённого периода времени (срока), более короткого, чем предполагаемый срок годности.

Критическое изменение показателей качества лекарственного препарата аптечного изготовления в ходе исследования стабильности свидетельствует об их несоответствии установленным критериям приемлемости.

##### ОЦЕНКА ДАННЫХ ПО СТАБИЛЬНОСТИ ДЛЯ УСТАНОВЛЕНИЯ СРОКА ГОДНОСТИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ АПТЕЧНОГО ИЗГОТОВЛЕНИЯ

Полученные данные исследований стабильности используют для установления срока годности лекарственного препарата аптечного изготовления и предлагаемых условий его хранения, декларируемых в маркировке. Долгосрочные исследования стабильности должны охватывать весь предполагаемый период срока годности лекарственного препарата аптечного изготовления.

Для оценки данных о стабильности конкретного лекарственного препарата аптечного изготовления должен быть использован системный подход, охватывающий, в зависимости от ситуации, результаты исследований физических, химических, биологических и микробиологических свойств, включая, если применимо, специфические характеристики для определённых лекарственных форм.

Результаты долгосрочных исследований стабильности, основываясь на анализе не менее трёх образцов лекарственного препарата, изготовленных в различных условиях, например, в разные дни, разными специалистами аптечной организации, с использованием разных серий фармацевтической субстанции и др., позволяют установить срок годности лекарственного препарата аптечного изготовления и рекомендации по декларированию условий хранения в маркировке лекарственного препарата, которые будут применимы для всех будущих образцов данного лекарственного препарата, которые будут изготовлены и упакованы в тех же условиях, что исследуемые образцы.

Степень вариабельности отдельных исследуемых образцов лекарственного препарата аптечного изготовления должна обеспечивать уверенность в том, что изготовленные впоследствии образцы лекарственного препарата в течение установленного срока годности будут соответствовать требованиям фармакопейной статьи или общей фармакопейной статьи, либо в случае их отсутствия – документу в области контроля качества, утверждённому руководителем аптечной организации.

Предполагаемый срок годности для лекарственных препаратов аптечного изготовления рекомендуется устанавливать, учитывая данные о действующих сроках годности на лекарственные препараты аптечного изготовления, указанные в правилах изготовления и отпуска лекарственных препаратов для медицинского применения аптечными организациями, имеющими лицензию на фармацевтическую деятельность, утверждённых уполномоченным федеральным органом исполнительной власти, а также в общих фармакопейных статьях на различные группы лекарственных препаратов аптечного изготовления (ОФС «Стерильные лекарственные препараты аптечного изготовления», ОФС «Нестерильные лекарственные препараты аптечного изготовления в виде жидких лекарственных форм», ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления для детей» и др.)_. По результатам долгосрочного исследования стабильности не рекомендуется устанавливать срок годности лекарственного препарата аптечного изготовления более 90 суток.

Несмотря на ожидаемые вариабельности отдельных исследуемых образцов, важно, чтобы лекарственный препарат должен быть изготовлен таким образом, чтобы количество действующего вещества при его выпуске составляло 100 % от заявленного.

Приемлемый подход к оценке данных при установлении срока годности, т.е. к анализу данных относительно количественного признака лекарственного препарата аптечного изготовления, который предположительно изменяется во времени, заключается в определении самого раннего момента времени, при котором 95 % односторонний доверительный предел для усреднённой кривой пересекает критерий приемлемости. Если по результатам анализа от образца к образцу обнаруживается низкая вариабельность, то предпочтительно объединить указанные данные в единую оценку (с целью получения одного значения), используя методы статистического анализа. Если объединение данных количественного признака нескольких образцов неприемлемо, то срок годности определяется на основании минимального времени, в течение которого образец удовлетворяет критериям приемлемости.

Вместе с тем, каждая оценка должна включать в себя не только количественное определение, но и содержание продуктов деградации и прочие показатели качества лекарственного препарата аптечного изготовления.

Подходы к оценке данных о стабильности одно- и многофакторных исследований лекарственных препаратов аптечного изготовления, а также исследований с полным и сокращённым планом, одинаковы. Для выявления критичных показателей качества, которые с большой долей вероятности будут влиять на качество и функциональные характеристики лекарственного препарата, необходимо оценить результаты долгосрочных исследований стабильности и в соответствующих случаях дополнительные данные, при этом каждый показатель качества необходимо оценивать отдельно, а затем для определения срока годности провести обобщённую оценку результатов. Предполагаемый срок годности не должен превышать результат отдельного показателя качества.

Если данные испытаний стабильности свидетельствуют о настолько незначительном разложении и настолько низкой вариабельности, что уже при их рассмотрении, очевидно, что предполагаемый срок годности будет установлен, то, как правило, нет необходимости в проведении статистического анализа; достаточно обосновать отсутствие такого анализа.

На основании полученных результатов по оценке данных по стабильности, т.е. экспериментально подтверждённой в реальном времени стабильности лекарственного препарата аптечного изготовления, устанавливается срок его годности с указанием вида системы упаковки/укупорки, требуемых условий хранения и маркировки.

Срок годности лекарственного препарата аптечного изготовления, как правило, указывают в сутках, но он также может быть указан в часах, в этом случае в маркировке должно быть указано время изготовления лекарственного препарата.

Срок годности, указанный в маркировке лекарственного препарата аптечного изготовления, соответствует сроку (дате) его использования.

Для лекарственных препаратов аптечного изготовления в многодозовых упаковках срок годности соответствует сроку годности до вскрытия упаковки.

Срок годности изготовленного радиофармацевтического лекарственного препарата устанавливается на основании следующих факторов:

- стабильности состава радиофармацевтических лекарственных препаратов;

- уменьшения активности радионуклида с течением времени по закону радиоактивного распада;

- возрастания относительного содержания долгоживущих радионуклидных примесей, имеющих периоды полураспада большие, чем основной радионуклид.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.8.0009 ЭКСПРЕСС-АНАЛИЗ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ АПТЕЧНОГО ИЗГОТОВЛЕНИЯ

Настоящая общая фармакопейная статья устанавливает требования к выполнению испытаний (контролю качества) методом экспресс-анализа, осуществляемых аптечными организациями в отношении лекарственных препаратов аптечного изготовления.

##### ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

Качество лекарственного препарата аптечного изготовления определяется его соответствием требованиям фармакопейной статьи и общих фармакопейных статей, либо в случае их отсутствия – документам в области контроля качества, утверждённым руководителем аптечной организации. Виды испытаний для оценки качества лекарственных препаратов аптечного изготовления и требования к ним указаны в Правилах изготовления и отпуска лекарственных препаратов для медицинского применения аптечными организациями, имеющими лицензию на фармацевтическую деятельность, утверждёнными уполномоченным федеральным органом исполнительной власти, и в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления».

Для оценки качества изготовляемых и изготовленных лекарственных препаратов в аптечных организациях важная роль принадлежит химическому контролю, который заключается в проведении испытаний по показателям:

- качественный анализ: определение подлинности;

- количественный анализ: количественное определение.

Изготовление и отпуск лекарственных препаратов аптечными организациями ограничены сжатыми сроками, поэтому, учитывая номенклатуру изготовляемых лекарственных препаратов и техническое обеспечение аптечной организации, допустимо проведение химического контроля лекарственных препаратов аптечного изготовления методами экспресс-анализа. Различают методы качественного экспресс-анализа лекарственных препаратов аптечного изготовления и методы количественного экспресс-анализа.

Основные требования, предъявляемые к методам экспресс-анализа для лекарственных препаратов аптечного изготовления:

- быстрота (минимальное время) проведения анализа;

- использование простых, доступных для условий аптечных организаций методик химического и физико-химического анализа, не требующих длительной пробоподготовки (например, омыления, экстрагирования, фильтрования, нагревания и т.п.), сложного аналитического оборудования, позволяющих проводить определение лекарственных препаратов с точностью не ниже допустимых отклонений;

- расходование минимальных количеств анализируемого лекарственного препарата и реактивов при достаточной точности и чувствительности используемой методики;

- возможность проведения анализа без изъятия изготовленного лекарственного препарата;

- применение несложных расчётов в методах количественного экспресс-анализа.

В случае многокомпонентного лекарственного препарата предпочтительнее использовать методики химического и/или физико-химического экспресс-анализа без разделения компонентов.

Экспресс-анализ лекарственных препаратов аптечного изготовления относят к полумикроанализу (полумикрометоду), занимающему промежуточное положение между макро- и микроанализом. Полумикроанализ характеризуется тем, что необходимое для исследования количество вещества примерно в 10–20 раз меньше, чем при проведении макроанализа и составляет, как правило, около 50 мг твёрдого вещества или 1 мл жидкости (раствора). В методе полумикроанализа сохраняется та же система обнаружения и количественного определения элементов, ионов, функциональных групп, соединений, что и в макроанализе, но все реакции выполняют с малыми количествами вещества, пользуясь специальной техникой и аппаратурой (пробирки на 1–2 мл, фарфоровые чашки или планшеты, микробюретки и пипетки для титрования и т.п.).

Для проведения экспресс-анализа лекарственных препаратов аптечного изготовления применяют методы, реактивы, титрованные растворы, указанные в соответствующих общих фармакопейных статьях (ОФС) Государственной фармакопеи Российской Федерации.

##### МЕТОДЫ КАЧЕСТВЕННОГО ЭКСПРЕСС-АНАЛИЗА ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ АПТЕЧНОГО ИЗГОТОВЛЕНИЯ

Для качественного экспресс-анализа лекарственных препаратов аптечного изготовления используют фармакопейные методики определения подлинности (идентификации), указанные в ОФС «Общие реакции на подлинность», адаптированные к условиям экспресс-анализа в аптечных организациях.

Основные отличия методик качественного экспресс-анализа от фармакопейных методик идентификации (подлинности) лекарственных средств заключаются в том, что при выполнении качественного экспресс-анализа лекарственных препаратов аптечного изготовления применяют наиболее специфические и чувствительные качественные химические реакции определения элементов, ионов, функциональных групп лекарственных препаратов с использованием для анализа меньшего количества лекарственного препарата (от 0,001 г до 0,02 г в виде порошка или 1–5 капель в виде жидкости) и реактива (если применимо), чем указано в ОФС «Общие реакции на подлинность». Вместе с тем, количество образца лекарственного препарата аптечного изготовления для анализа должно быть взято с учётом предела обнаружения определяемого компонента, т.е. минимальной концентрации компонента, ниже которой химическая реакция не будет давать положительного результата.

Типы химических реакций, применяемых для качественного экспресс-анализа, зависят от физико-химических свойств определяемого компонента. Используемые для экспресс-анализа качественные реакции осаждения, комплексообразования, окислительно-восстановительные и др. должны иметь легко наблюдаемый результат взаимодействия, например, появление или изменение окраски, образование или растворение осадка, выделение газа, окрашивание пламени, появление флюоресценции и т.п. Рекомендуемые качественные реакции для определения подлинности (идентификации) фармацевтических субстанций, используемых в аптечных организациях для изготовления лекарственных препаратов, указаны в фармакопейных статьях на фармацевтические субстанции, как правило, в подразделе «вторая идентификация».

Качественный экспресс-анализ однокомпонентного лекарственного препарата аптечного изготовления сводится к проведению рекомендуемых реакций подлинности (идентификации) на данный компонент. При этом, в некоторых случаях достаточно выполнение только одной специфической реакции для подтверждения подлинности компонента.

При выполнении качественного экспресс-анализа многокомпонентных лекарственных препаратов аптечного изготовления необходимо учитывать влияние возможного взаимодействия компонентов лекарственного препарата при их совместном присутствии. Для многокомпонентных лекарственных препаратов рекомендуется использовать такую методику качественного экспресс-анализа, которая позволяла бы идентифицировать каждый компонент индивидуально в присутствии других, без их разделения, а в некоторых случаях использовать возможность определения подлинности двух и более компонентов лекарственного препарата одним реактивом или одной реакцией. Например, использовать последовательное определение подлинности компонентов в одной навеске, учитывая различную по времени скорость реакции взаимодействия двух и более компонентов с одним и тем же реактивом, или учитывая появление различных результатов взаимодействия отдельных компонентов. При отсутствии возможности проведения качественного экспресс-анализа многокомпонентного лекарственного препарата аптечного изготовления без разделения компонентов, прибегают к разделению компонентов с помощью воды, органических растворителей, растворов кислот, щелочей.

В качественном экспресс-анализе многокомпонентных лекарственных препаратов аптечного изготовления для разделения компонентов и последующей их идентификации можно использовать доступные виды хроматографии, например, бумажную (ОФС «Хроматография на бумаге»), тонкослойную (ОФС «Тонкослойная хроматография»), применяя подходящую неподвижную твёрдую фазу (специальную бумагу в бумажной хроматографии, специальные пластинки с нанесённым слоем сорбента в тонкослойной хроматографии), на которую наносят раствор (водный или неводный) анализируемого лекарственного препарата и раствор стандартного образца определяемого компонента. После хроматографирования в предварительно подобранных системах растворителей обнаружение зон адсорбции на хроматограмме осуществляют в ультрафиолетовом (УФ) свете или после обработки обнаруживающими реактивами на основе цветных реакций.

Для выполнения качественного экспресс-анализа лекарственных препаратов аптечного изготовления в условиях аптечной организации используют микро-пробирки, фарфоровые чашки, часовые стекла и др. В случае использования хроматографических методов для качественного экспресс-анализа лекарственных препаратов аптечного изготовления необходимо иметь соответствующее оборудование, материалы (бумагу, пластины), в случае исследования флуоресценции – наличие ультрахемископа с УФ – лампами и др. Для выполнения качественного экспресс-анализа лекарственных препаратов используют реактивы, соответствующие требованиям ОФС «Реактивы. Индикаторы».

##### МЕТОДЫ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ЭКСПРЕСС-АНАЛИЗА ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ АПТЕЧНОГО ИЗГОТОВЛЕНИЯ

Для количественного экспресс-анализа лекарственных препаратов аптечного изготовления используют фармакопейные титриметрические и физико-химические методы количественного определения, адаптированные к условиям экспресс-анализа в аптечных организациях.

Титриметрические методы. Наиболее быстрыми, простыми и точными методами экспресс-анализа лекарственных препаратов являются титриметрические методы. Общие требования к фармакопейным титриметрическим методам, применяемым для количественного экспресс-анализа лекарственных препаратов аптечного изготовления, должны соответствовать ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)».

От фармакопейных титриметрические методы количественного экспресс-анализа отличаются тем, что на количественное определение используют меньшее количество анализируемого лекарственного препарата (от 0,05 г до 0,1 г в виде порошка или от 1 мл до 2 мл в виде раствора), расходуют меньший объём титрованного раствора, применяют титрованные растворы, имеющие молярную концентрацию, как правило, ниже 0,1 М. Для количественного экспресс-анализа рекомендуется использовать такое количество (навеску) анализируемого лекарственного препарата, на титрование которого расходовалось бы не более 3 мл, но не менее 1 мл титрованного раствора, если иное не будет предусмотрено в фармакопейной статье на конкретный лекарственный препарат.

Химические реакции между определяемым компонентом лекарственного препарата и титрованным раствором, применяемые в титриметрическом методе количественного экспресс-анализа, должны удовлетворять следующим основным требованиям:

- реакция должна протекать количественно, т.е. в строгом стехиометрическом соотношении, соответствующем её химическому уравнению;

- реакция должна протекать с достаточной (большой) скоростью;

- должен существовать точный и быстрый способ определения точки эквивалентности (точки конца титрования);

- реакция должна быть практически необратимой.

Если реакция не удовлетворяет хотя бы одному из этих требований, она не может быть использована для титриметрического количественного экспресс-анализа.

Для количественного экспресс-анализа лекарственных препаратов аптечного изготовления в зависимости от типа протекающей химической реакции используют различные титриметрические методы анализа, требования к которым указаны в ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»: кислотно-основное титрование (алкалиметрия, ацидиметрия); окислительно-восстановительное титрование (перманганатометрия, йодометрия, йодатометрия. йодхлорметрия, броматометрия, хроматометрия, цериметрия и др.), осадительное титрование (аргентометрия, меркуриметрия). Требования к другим титриметрическим методам, которые находят применение для количественного экспресс-анализа лекарственных препаратов аптечного изготовления, изложены в ОФС «Комплексонометрическое титрование», ОФС «Нитритометрия», ОФС «Кислотно-основное титрование в неводных средах».

Общие требования, к титрованным растворам, применяемым в титриметрических методах количественного экспресс-анализа лекарственных препаратов аптечного изготовления, установлены ОФС «Титрованные растворы». Концентрация титрованного раствора выражается его молярной концентрацией, титром или титром по определяемому веществу. Размерность титра и титра титранта по определяемому веществу при титриметрическом методе экспресс-анализа лекарственных препаратов аптечного изготовления принято выражать в «г/мл» для упрощения расчётов количественного определения компонентов, для упрощения расчётов допустимых отклонений в массе отдельных компонентов при количественном определении в ходе проведении полного химического контроля лекарственных препаратах, изготовленных в виде различных лекарственных форм (ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления»).

Предпочтительнее в титриметрических методах экспресс-анализа лекарственных препаратов аптечного изготовления применять титрованные растворы 0,1 М концентрации, но учитывая чувствительность химической реакции, малое содержание определяемого компонента в навеске лекарственного препарата, молекулярную массу определяемого компонента и другие аспекты, для экспресс-анализа могут быть использованы титрованные растворы более низкой молярной концентрации (0,05 М; 0,02 М; 0,01 М и др.). Титрованные растворы с молярной концентрацией ниже 0,1 М могут быть приготовлены непосредственно перед использованием путём точного разведения 0,1 М титрованных растворов водой очищенной, свободной от углерода диоксида.

Для количественного экспресс-анализа лекарственных препаратов аптечного изготовления применяют титрованные растворы молярной концентрации, имеющие, желательно, поправочный коэффициент (K), равный 1 для упрощения расчётов содержания компонентов; если же поправочный коэффициент отличается от 1, то его необходимо учитывать при расчётах.

Как правило, при количественном экспресс-анализе лекарственных препаратов аптечного изготовления на титрование рекомендуется расходовать не менее 1 мл титрованного раствора, если иное не будет предусмотрено в фармакопейной статье на конкретный лекарственный препарат. Если же общее количество лекарственного препарата позволяет использовать большую по массе (объёму) навеску, то желательно, чтобы на титрование расходовалось 3–5 мл титрованного раствора, а в случае количественного экспресс-анализа концентрированных растворов, полуфабрикатов и т.п. – 5–10 мл титрованного раствора. Если же, согласно предварительному расчёту, на титрование навески (например, концентрированного раствора высокой концентрации) будет расходоваться более 10 мл титрованного раствора, то необходимо выполнить разведение навески лекарственного препарата водой (как правило) до нужного объёма в мерной колбе.

Для количественного определения компонентов (солей слабых кислот или слабых оснований) в многокомпонентных лекарственных препаратах аптечного изготовления возможно использование ступенчатого титрования, с применением, если необходимо, неводных растворителей для извлечения продуктов титрования и необходимых индикаторов.

Таким образом, перед проведением количественного экспресс-анализа лекарственного препарата аптечного изготовления необходимо предварительно рассчитать массу (объём) навески лекарственного препарата для титрования, чтобы количество израсходованного на титрование титрованного раствора соответствовало объёмам титриметрического экспресс-анализа лекарственных препаратов.

Конечную точку титрования в титриметрических методах количественного экспресс-анализа определяют чаще всего визуально по изменению окраски, выпадению осадка, используя индикаторы, соответствующие данному титриметрическому методу. Физико-химические и другие характеристики индикаторов, способы приготовления растворов индикаторов, используемых в титриметрических методах анализа, указаны в ОФС «Реактивы. Индикаторы».

Для определения конечной точки титрования можно также использовать физико-химические методы, фиксирующие изменение измеряемого параметра − величины рН, потенциала, силы тока и т.д. В зависимости от способов регистрации конечной точки титрования различают титрование: потенциометрическое, кондуктометрическое, амперометрическое, кулонометрическое и др., требования к проведению которых указаны в соответствующих общих фармакопейных статьях.

Для титрования в количественном экспресс-анализе лекарственных препаратов аптечного изготовления рекомендуется использовать пипетки, микробюретки с ценой деления 0,01–0,02 см3 (мл) различной вместимости (ОФС «Мерная посуда»); целесообразно иметь набор пипеток или микробюреток по числу титрованных растворов.

Расчёт количества определяемого компонента зависит от способа титрования. Для количественного экспресс-анализа лекарственных препаратов аптечного изготовления может быть использовано прямое, обратное, реже – заместительное титрование (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Для количественного определения компонента в массо-объёмных или массовых процентах (Х) в лекарственном препарате аптечного изготовления при прямом титровании используют формулу (1):

где: V – объём титрованного раствора, израсходованного на титрование, мл;
K – поправочный коэффициент титрованного раствора;
T – титр по определяемому компоненту (т.е. количество определяемого компонента в г, соответствующее 1 мл титрованного раствора), г/мл;
a – навеска или объём лекарственного препарата аптечного изготовления, взятые для титрования, г или мл.

В случае разведения навески лекарственного препарата аптечного изготовления, взятой для титрования, для количественного определения компонента в процентах (Х) в лекарственном препарате аптечного изготовления при прямом титровании используют формулу (2):

где: V – объём титрованного раствора, израсходованного на титрование, мл;
K – поправочный коэффициент титрованного раствора;
T – титр по определяемому компоненту (т.е. количество определяемого компонента в г, соответствующее 1 мл титрованного раствора), г/мл;
a – навеска или объём лекарственного препарата аптечного изготовления, взятые для титрования, г или мл;
V1 – объём разведённого лекарственного препарата аптечного изготовления (объём мерной колбы), мл;
V2 – объём разведённого лекарственного препарата аптечного изготовления, взятый для титрования, мл.

Для количественного определения массы компонента в граммах (X1) в лекарственном препарате аптечного изготовления при прямом титровании используют формулу (3):

где: V – объём титрованного раствора, израсходованного на титрование, мл;
K – поправочный коэффициент титрованного раствора;
T – титр по определяемому компоненту (т.е. количество определяемого компонента в г, соответствующее 1 мл титрованного раствора), г/мл;
G – общая масса или общий объём лекарственного препарата аптечного изготовления, г или мл;
a – навеска или объём лекарственного препарата аптечного изготовления, взятые для титрования, г или мл.

Для количественного определения компонента в массо-объёмных или массовых процентах (Х) в лекарственном препарате аптечного изготовления при обратном титровании используют формулу (4):

где: V – объём основного титрованного раствора, израсходованного на титрование, мл;
V0 – точный объём вспомогательного титрованного раствора, добавленного в избытке, мл;
K – поправочный коэффициент основного титрованного раствора;
K0 – поправочный коэффициент вспомогательного титрованного раствора;
T – титр по определяемому компоненту (т.е. количество определяемого компонента в г, соответствующее 1 мл вспомогательного титрованного раствора), г/мл;
a – навеска или объём лекарственного препарата аптечного изготовления, взятые для титрования, г или мл.

Другие расчёты количественного определения компонента в лекарственном препарате аптечного изготовления при обратном титровании проводят аналогично расчётам для прямого титрования.

Методики количественного экспресс-анализа лекарственных препаратов аптечного изготовления могут включать выполнение контрольного опыта для устранения возможного влияния на результаты анализа реактивов и других факторов. Под контрольным опытом подразумевают определение, проводимое с теми же количествами реактивов, обработанных тем же способом и в тех же условиях, что и раствор или смесь, содержащие определяемое вещество, но без самого вещества.

Расчёт среднего титра. В некоторых случаях, когда определяются близкие по химическим свойствам компоненты (например, при суммарном определении галогенидов), и затруднено их разделение или методы анализа сложны и требуют большой затраты времени, то, в качестве исключения, при количественном экспресс-анализе для расчёта используют средний ориентировочный титр. Следует иметь в виду, что этим способом определяется лишь сумма компонентов, но не их соотношение. Но все же такой подход даёт возможность быстро и просто, с практической точностью определить правильность изготовления лекарственного препарата, не прибегая к сложным методам разделения компонентов, входящих в состав лекарственного препарата аптечного изготовления.

Средний ориентировочный титр (Тср) – это количество смеси определяемых компонентов в граммах, соответствующее 1 мл титрованного раствора, величина которого зависит от титров определяемых компонентов и соотношения этих компонентов в лекарственном препарате. Средний ориентировочный титр вычисляется следующим образом: сумму масс каждого из определяемых компонентов лекарственного препарата делят на сумму теоретических объёмов титрованного раствора, который израсходуется на каждый компонент отдельно. Теоретический объём титрованного раствора рассчитывается как масса компонента, делённая на титр.

Для вычисления среднего ориентировочного титра в г/мл (Тср) для двух определяемых компонентов используют формулу (5):

где: T1 – титр по одному из определяемых компонентов, г/мл;
T2 – титр по другому определяемому компоненту, г/мл;
C1 – масса одного из определяемых компонентов, г;
C2 – масса другого определяемого компонента, г.

Средний ориентировочный титр не следует использовать, если определяемые компоненты лекарственного препарата аптечного изготовления имеют очень большие различия в массе.

Расчёт условного титра. Некоторые компоненты лекарственных препаратов аптечного изготовления представляют собой комплекс веществ или сложный состав, состоящий из двух или более веществ (например, аминофиллин, кофеин-бензоат натрия, серебро коллоидное и др.). Количественное определение такого компонента в лекарственном препарате можно рассчитать по одному из веществ, входящих в комплекс, с использованием условного титра. При количественном экспресс-анализе более доступным методом анализируют одно из веществ сложного состава компонента, а затем, с использованием условного титра, рассчитывают содержание всего компонента в лекарственном препарате аптечного изготовления.

Условный титр (Тусл) — титр соответствия компонента лекарственного препарата аптечного изготовления, количественное содержание одной из частей компонента которого условно принимается за 100 %. Для вычисления условного титра по компоненту лекарственного препарата аптечного изготовления в г/мл (Тусл) используют формулу (6):

где: T1 – титр по определяемой части (по определяемому веществу) компонента, г/мл;
Р – содержание определяемой части (определяемого вещества) в компоненте, %.

Допустимые отклонения. Полученные результаты количественного экспресс-анализа отдельных компонентов (в граммах или процентах) лекарственных препаратов аптечного изготовления не должны превышать допустимые отклонения, указанные в соответствующих таблицах раздела «Испытания (контроль качества)» ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления».

Физико-химические методы. Для количественного экспресс-анализа лекарственных препаратов аптечного изготовления также используются физико-химические методы, позволяющие определять малое содержание компонентов без разделения, автоматизировать и ускорить выполнение анализа, унифицировать методики экспресс-анализа и т.п.

Рефрактометрия. Наиболее широкое применение для количественного экспресс-анализа лекарственных препаратов аптечного изготовления находит фармакопейный рефрактометрический метод (ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)»).

В количественном экспресс-анализе лекарственных препаратов аптечного изготовления рефрактометрический метод используют для определения содержания компонентов в одно- и многокомпонентных лекарственных препаратах, изготовленных в виде растворов или в виде растворимых в воде твёрдых лекарственных форм, а также для определения содержания (концентрации) спирта этилового в водно-спиртовых растворах. При содержании компонента в лекарственном препарате менее 3–4 % использовать для его определения рефрактометрический метод не рекомендуется.

Рефрактометрический количественный экспресс-анализ сводится к установлению показателя преломления путём снятия показаний рефрактометра и последующему расчёту содержания определяемого компонента в лекарственном препарате аптечного изготовления. Определение проводят при температуре 20 °С и длине волны линии D спектра натрия 589,3 нм. Допускается проводить определение при температуре, отличающейся от 20 °С на 5–7 °С, но в этом случае при расчётах необходимо вводить поправку на температуру для показателя преломления. Показатель преломления воды при 20 °С равен 1,3330.

При количественном рефрактометрическом определении компонента в однокомпонентных лекарственных препаратах, представляющих собой водные растворы, сначала устанавливают показатель преломления растворителя, затем показатель преломления лекарственного препарата. Перед исследованием анализируемый лекарственный препарат, растворитель и рефрактометр выдерживают рядом в течение около 30 мин для уравнивания температуры объектов.

Для количественного рефрактометрического определения компонента в процентах (Cx) в однокомпонентном лекарственном препарате аптечного изготовления, представляющем собой водный раствор, используют формулу (7):

где: n – показатель преломления раствора;
n0 – показатель преломления растворителя;
F – фактор показателя преломления.

Фактор показателя преломления (F) – фактор, равный величине прироста показателя преломления при увеличении концентрации анализируемого раствора на 1 %. Значение факторов показателей преломления устанавливают экспериментально для каждого конкретного вещества и каждого процента его концентрации. Для некоторых веществ (калия йодид, магния сульфат, декстроза безводная и др.) величина фактора преломления постоянная, не зависящая от концентрации раствора, но для большинства веществ факторы показателей преломления в растворах разных концентраций отличаются друг от друга и приводятся в рефрактометрических таблицах.

Значения показателей преломления и факторов для различных концентраций фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов приведены в справочной литературе в соответствующих рефрактометрических таблицах. Определение концентрации компонента лекарственного препарата аптечного изготовления по рефрактометрическим таблицам заключается в следующем: установив по рефрактометру показатель преломления анализируемого раствора лекарственного препарата, в таблице находят соответствующее ему значение концентрации определяемого компонента в процентах. Если установленный по рефрактометру показатель преломления в таблице не приведён, то концентрацию компонента определяют интерполированием. Использование таблиц значительно упрощает расчёты количественного определения компонентов лекарственных препаратов аптечного изготовления.

В аптечной практике рефрактометрическое определение одного компонента в процентах наиболее часто используется для его количественного определения в концентрированных растворах.

Для количественного рефрактометрического определения компонента в граммах (X1) в однокомпонентном лекарственном препарате аптечного изготовления, который представляет собой водный раствор, используют формулу (8):

где: n – показатель преломления лекарственного препарата в виде раствора;
n0 – показатель преломления растворителя;
F – фактор показателя преломления;
G – общий объём лекарственного препарата, мл.

При количественном экспресс-анализе двух- и трёхкомпонентных лекарственных препаратов в виде растворов применяют совместное использование методов рефрактометрии и титриметрии. При этом методом рефрактометрии рекомендуется устанавливать содержание того компонента, определение которого химическими титриметрическими методами затруднительно: определяют показатель преломления анализируемого многокомпонентного лекарственного препарата и показатель преломления растворителя; содержание остальных компонентов устанавливают титриметрическими методами.

Для количественного рефрактометрического определения компонента в процентах (Cx) в трёхкомпонентном лекарственном препарате аптечного изготовления, который представляет собой водный раствор, используют формулу (9):

где: n – показатель преломления раствора лекарственного препарата в виде раствора;
n0 – показатель преломления растворителя;
Fx – фактор показателя преломления компонента, определяемого рефрактометрическим методом;
C1, C2 – концентрации компонентов, установленные химическим титриметрическим методом (методами), %;
F1, F2 – факторы показателей преломления компонентов, концентрации которых установлены химическим титриметрическим методом (методами).

Если неизвестен фактор компонента, концентрация которого установлена химическим титриметрическим методом, то есть F1 или F2, то применяют контрольные растворы, содержащие этот компонент в той же концентрации, что в анализируемом лекарственном препарате аптечного изготовления.

Рефрактометрический количественный экспресс-анализ лекарственных препаратов аптечного изготовления в виде твёрдых лекарственных форм (порошков) проводят путём измерения показателя преломления раствора, полученного при растворении навески лекарственного препарата в определенном объёме растворителя.

Для количественного рефрактометрического определения компонента в граммах (X1) в лекарственном препарате аптечного изготовления, который представляет собой порошок, используют формулу (10):

где: n – показатель преломления раствора, полученного при растворении навески лекарственного препарата;
n0 – показатель преломления растворителя, используемого для растворения навески лекарственного препарата;
F – фактор показателя преломления раствора определяемого компонента;
a – навеска лекарственного препарата (порошка), взятая для анализа, г;
V – объём растворителя, в котором растворили навеску лекарственного препарата (порошка), мл;
G – общая масса лекарственного препарата (порошка), г.

Рефрактометрический метод количественного экспресс-анализа применим для определения содержания спирта этилового в спирто-водных растворах. Линейная зависимость показателя преломления спирта этилового от его концентрации наблюдается при повышении концентрации спирта этилового до 50–55 % (об/об). Менее заметно увеличивается значение показателя преломления спирта этилового для концентраций 55–75 % (об/об), остается практически постоянным значение показателя преломления для концентраций 75–90 % (об/об), а для концентраций 90–95 % (об/об) значение показателя преломления уменьшается. Поэтому непосредственное рефрактометрическое количественное определение спирта этилового в спирто-водных растворах (полуфабрикатах, лекарственных препаратах аптечного изготовления и др.) проводят при его концентрации до 50–55 % (об/об). Для определения спирта этилового в более концентрированных спирто-водных растворах необходимо предварительное их разбавление водой очищенной с последующим учётом разбавления при расчёте концентрации.

При рефрактометрическом определении содержания спирта этилового в спирто-водной среде, во избежание существенной ошибки, связанной с летучестью спирта этилового, на призму рефрактометра наносят 5–6 капель определяемого спирто-водного раствора, быстро закрывают призму и устанавливают показатель преломления в течение не более 1 мин. Затем по таблице «Показатели преломления спирто-водных растворов препаратов, концентрация которых выражена в процентах (об/об)» находят концентрацию спирто-водного раствора, соответствующую установленной величине показателя преломления; если необходимо – определяют соответствующую поправку на температуру и учитывают её при окончательном определении концентрации спирта этилового в процентах (об/об) в спирто-водном растворе. Значения показателей преломления спирто-водных растворов для их различных концентраций приведены в справочной литературе в соответствующих таблицах.

Спектрофотометрия, фотоколориметрия. Для количественного определения отдельных компонентов в лекарственных препаратах аптечного изготовления может быть использован фармакопейный метод спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»), а также, если необходимо, метод фотоколориметрии. В зависимости от способности определяемых компонентов к поглощению света при определённых длинах волн в ультрафиолетовой и видимой областях спектра, метод позволяет провести количественное определение компонентов без их предварительного разделения. Для количественного определения в спектрофотометрическом методе используют сравнение поглощения раствора определяемого компонента с поглощением раствора стандартного образца, но в аптечной практике наиболее применимо использование известных значений удельного показателя поглощения определяемого компонента при расчётах его количественного определения.

Определение рН. Оценка качества растворов для инъекций, растворов для инфузий в аптечной организации осуществляется также по соответствию требованиям показателя рН.

Определение значения рН лекарственных препаратов аптечного изготовления проводят потенциометрическим методом в соответствии с требованиями ОФС «Ионометрия», метод 3. Приблизительное значение рН раствора можно оценить с использованием индикаторной бумаги (ОФС «Зависимость между реакцией раствора, приблизительным значением рН и цветом индикаторов»). Допустимые погрешности при измерении величины рН в ходе проведения химического контроля лекарственных препаратов аптечного изготовления приведены в ОФС «Лекарственные препараты аптечного изготовления».

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.11.0001 Радиофармацевтические лекарственные препараты

Взамен ОФС.1.11.0001.15

Радиофармацевтический лекарственный препарат (РФЛП) – лекарственный препарат, содержащий в готовом для применения состоянии один или несколько радионуклидов (радиоактивных изотопов) в качестве действующего вещества или в составе действующего вещества.

##### Общая характеристика

РФЛП применяются для радионуклидной диагностики и лечения различных заболеваний с использованием методов ядерной медицины.

Область применения РФЛП определяют ядерно-физические характеристики радионуклида в составе препарата.

РФЛП по медицинскому применению делятся на диагностические и терапевтические.

РФЛП диагностического назначения содержат гамма- или позитрон-излучающий радионуклид, являющийся информационным носителем, излучение которого, проникающее за пределы организма, регистрируется внешними детекторами. Это свойство применяется в процедурах радионуклидной диагностики, планарной или однофотонной эмиссионной компьютерной томографии (ОФЭКТ), позитронной эмиссионной томографии (ПЭТ) и некоторых других исследований.

В большинстве случаев химические соединения, входящие в состав диагностических РФЛП, используются в количествах, не вызывающих фармакологического действия.

В РФЛП терапевтического назначения радионуклид (бета-, альфа-излучатель, радионуклид, распад которого сопровождается электронным захватом или внутренней конверсией электронов) является основным лечебным началом, позволяющим локализовать лечебную дозу излучения непосредственно в клетки-мишени и, соответственно, обеспечить минимальное облучение здоровых органов и тканей.

Как правило, РФЛП применяются однократно или в некоторых случаях несколько раз и содержат только малые количества действующих веществ с присоединенным к ним радионуклидом, который позволяет провести сцинтиграфическую визуализацию, измерение биораспределения или терапевтическое воздействие.

Радиоактивность РФЛП снижается со временем, что обусловлено радиоактивным распадом.

Объём производства РФЛП крайне мал по сравнению с другими лекарственными средствами. Достаточно часто количество упаковок в серии составляет 3-5 единиц. Сроки годности РФЛП, в зависимости от периода полураспада соответствующих радионуклидов, составляют от нескольких минут до нескольких суток. Поэтому в контроле качества должны преимущественно использоваться экспресс-методы, а также методы, обеспечивающие возможность надёжного определения показателей качества при минимальных объёмах проб.

##### Термины и определения

Активность радиоактивного вещества - число ядерных превращений (N), происходящих в данном количестве вещества в короткий промежуток времени (t), отнесённое к этому промежутку времени. Синоним: скорость распада.

Активность молярная − для определённого изотопа: активность соединения (A), отнесённая к его количеству в молях (n).

Активность объёмная − отношение активности (A) радионуклида в препарате (образце) к объёму (V) препарата (образца).

Активность удельная − для определённого изотопа или смеси изотопов: активность вещества (A), отнесённая к его массе (m).

Генератор радионуклидный – любая система, содержащая фиксированный первичный (материнский) радионуклид, из которого образуются вторичные (дочерние) радионуклиды, извлечение которых осуществляется путем элюирования или другим способом и которые используются в радиофармацевтическом лекарственном препарате.

Изотопы − нуклиды, имеющие одинаковый порядковый номер, но различную атомную массу.

Изотопный индикатор – индикатор, который отличается только изотопным составом от интересующего вещества.

Ионизирующее излучение (ИИ) – излучение, взаимодействие которого со средой приводит к образованию в среде ионов разного знака (непосредственно ионизирующее излучение: ИИ, состоящее из заряженных частиц, кинетической энергии которых достаточно для ионизации атомов среды при атомных столкновениях; косвенно ионизирующее излучение: ИИ, которое при взаимодействии со средой может создать непосредственно ионизирующее излучение. Может состоять из фотонов, нейтронов, нейтральных мезонов и др. Энергия ионизирующего излучения измеряется в электронвольтах (эВ) и связана с единицей измерения энергии в системе СИ (Дж) следующим соотношением: 1 эВ ≈ 1,6 × 10-19 Дж.

Мишень для получения радионуклидов в циклотроне – конструкция, в которую помещается мишенный (стартовый) материал для последующего облучения потоком ускоренных заряженных частиц.

Мишенный (стартовый) материал – это химически стабильное вещество, предназначенное для облучения потоком ускоренных заряженных частиц высокой энергии. Мишенный (стартовый) материал может иметь газообразное, твердое, жидкое агрегатное состояние. В результате бомбардировки ядер стартового материала гамма-квантами, заряженными или нейтральными частицами могут происходить ядерные реакции. Суть ядерной реакции – получение одного химического элемента или изотопа из другого.

Набор для приготовления радиофармацевтического лекарственного препарата (набор для РФЛП) – любой препарат, который должен быть восстановлен или смешан с радионуклидами для получения готового к применению радиофармацевтического лекарственного препарата, как правило, перед его использованием.

Носитель, изотопный – стабильные изотоп/изотопы данного элемента или их соединения, химические свойства которых тождественны свойствам радиоактивного.

Нуклид − разновидность атома, характеризующаяся количеством протонов и нейтронов в его ядре (и, следовательно, его атомным номером Z и атомной массой А), а также его энергетическим состоянием.

Период полураспада (радионуклида) − для отдельно взятого процесса радиоактивного распада: время, за которое исходное число ядер радионуклида уменьшается вдвое. Обычно, обозначается: T1/2.

Постоянная радиоактивного распада − для радионуклида: вероятность распада его ядра в единицу времени, определяется выражением:

где Nt — общее число ядер данного радионуклида в момент времени t.

λ связана с периодом полураспада соотношением:

Активность радионуклида убывает со временем по экспоненциальному закону:

где где А0 и Аt - активности в начальный (0) и текущий (t) моменты времени, соответственно.

Препарат радионуклида без добавления носителя − препарат, свободный от стабильных изотопов элемента, к которому принадлежит данный радионуклид. Однако препараты, называемые препаратами радионуклида без носителя, иногда содержат незначительные количества стабильных изотопов того же элемента или его химического аналога. Источником их могут быть побочные ядерные реакции, примеси химических элементов, содержащиеся в реактивах, применяемых при химических операциях и т. д.

Радиоактивный препарат с носителем – радиоактивный препарат, в котором имеются как радиоактивные, так и стабильные изотопы данного элемента или химического аналога.

Радиоактивность − свойство некоторых нуклидов подвергаться радиоактивному распаду.

Радиоизотоп − радиоактивный изотоп определённого элемента.

Радионуклид − нуклид, который радиоактивен. Нуклиды, обладающие нестабильной комбинацией протонов и нейтронов, самопроизвольно с постоянной вероятностью превращаются в стабильные нуклиды или в нуклиды с другой нестабильной комбинацией протонов и нейтронов. О таких нуклидах говорят, что они радиоактивные, и они называются радионуклидами. Исходный радионуклид называют материнским, а образующийся – дочерним.

Радионуклидная чистота препарата − отношение активности основного радионуклида к общей активности препарата, выраженное в процентах, не является постоянной характеристикой данного препарата, а изменяется с течением времени.

Радионуклидные примеси − примеси других радиоактивных нуклидов (как того же, так и других элементов). Количество радионуклидных примесей выражают процентным отношением активности примесей к активности основного нуклида на определённую дату и, при необходимости, время. Дочерние радионуклиды, образующиеся в результате радиоактивного распада материнского (основного) радионуклида, не считаются радионуклидными примесями: например, Xe-131м не рассматривается как радионуклидная примесь к I-131.

Радионуклидный предшественник – радиоактивное вещество, предназначенное для введения радионуклида в другое вещество с целью получения РФЛП.

Радиохимическая чистота − отношение активности радионуклида, который присутствует в препарате в заявленной химической форме основного вещества, к общей активности радионуклида в этом препарате, выраженное в процентах.

Радиохимические примеси − химические соединения, отличные от основного вещества, составляющего препарат, но содержащие тот же радионуклид. Величину радиохимических примесей, т. е. активность содержащегося в них радионуклида, выражают в процентах к общей активности радионуклида в препарате.

Срок годности радиофармацевтического лекарственного препарата − время, в течение которого радиофармацевтический лекарственный препарат удовлетворяет требованиям установленным производителем.

Ультракороткоживущий радионуклид − радионуклид с периодом полураспада до 2 часов.

Химические примеси − примеси посторонних химических соединений и элементов, источниками которых являются исходные вещества и реактивы, а также побочные продукты неполно или параллельно протекающих реакций.

Химические предшественники для РФЛП (ХП для РФЛП) − вещества синтетического или природного происхождения, которые после мечения радионуклидом представляют собой молекулы, которые самостоятельно или в результате последующих химических превращений, обеспечивают доставку радионуклида к целевым клеткам-мишеням.

Ядерные изомеры − нуклиды, имеющие одинаковый массовый номер и атомный номер, но отличающиеся энергетическим состоянием их ядер.

##### Единицы активности и энергии

Радиоактивный распад или переход может включать испускание заряженных частиц, захват электронов (ЭЗ) или изомерный переход (ИП). Заряженные частицы, испускаемые ядром, – это альфа-частицы (ядро атома гелия с атомной массой 4) или бета-частицы (отрицательно заряженные, обычно называемые электронами или положительно заряженные, обычно называемые позитронами). Испускание заряженных частиц ядром может сопровождаться испусканием гамма-квантов. Гамма-кванты также испускаются при изомерном переходе. Такое испускание гамма-квантов может частично сопровождаться выходом электронов, называемых электронами внутренней конверсии. Процесс электронного захвата, приводит к вторичному испусканию рентгеновских лучей (благодаря перегруппировке электронов в атоме). Эта вторичная эмиссия сама по себе может частично замещаться выходом электронов, известных как электроны Оже. Радионуклиды с дефицитом нейтронов могут испускать позитроны. Такие радионуклиды называются позитрон-излучателями. При взаимодействии с электронами позитроны аннигилируют, испуская два гамма-кванта с энергией 511 кэВ каждый, обычно разлетающихся под углом 180° друг к другу. Такой процесс называется аннигилляционным излучением.

Как правило, для обозначения активности радионуклида используются общепринятые единицы измерения в соответствии с ОФС «Единицы международной системы (СИ), используемые в фармакопее».

Базовой единицей измерения является: 1 Беккерель [Бк] = 1 распад/с (СИ). Доза РФЛП, назначаемая пациенту, измеряется в единицах радиоактивности (мегабеккерель, МБк) и рассчитывается на определенное время введения в соответствии с периодом полураспада радионуклида и физиологическими характеристиками пациента В случаях, важных с точки зрения потенциальной токсичности или эффекта насыщения целевого рецептора, долю содержания нерадиоактивных молекул определяемого вещества в РФЛП выражают удельной активностью в беккерель на грамм (Бк/г), или молярной активностью в беккерель на моль (Бк/моль), или количеством нерадиоактивного соединения в максимальной рекомендуемой дозе (максимальном рекомендуемом объеме) в миллилитрах (мг/V).

Для энергии отдельных частиц и фотонов применяют внесистемную единицу электрон-вольт и десятичные кратные ей единицы: 1 эВ = 1,60219 × 10-19 Дж (приближенно) ≈ 0,16 аДж. Соответственно 1 кэВ ≈ 1,6 × 10-16 Дж = 0,16 фДж; 1 МэВ ≈ 1,6 × 10-13 Дж = 0,16 пДж.

##### Основные ядерно-физические характеристики нуклидов

К основным ядерно-физическим характеристикам радионуклидов, используемых в составе РФЛП, относятся период полураспада, вид, энергетическая характеристика и интенсивность всех компонентов ионизирующего излучения, возникающего как при распаде радионуклида, так и при энергетической разрядке ядра-продукта. Кроме того, для ядерной медицины важны и характеристики рентгеновского излучения атома, образующегося в результате распада радионуклида [Приложение 1].

Основные ядерно-физические характеристики для радионуклидов, входящих в состав РФЛП, а также используемых в составе стандартных радиоактивных растворов и источников, применяемых для испытаний РФЛП, возможных примесей, представлены в Приложении 1 к настоящей статье.

##### Особенности технологии

Основные источники производства радионуклидов для ядерной медицины следующие: ядерные реакторы, ускорители заряженных частиц (циклотроны), генераторы радионуклидные (как вторичный источник).

Генератор радионуклидный, набор для приготовления РФЛП и радиофармацевтический предшественник являются предшественниками (например, промежуточными продуктами, источниками или компонентами) для получения готового РФЛП, который можно непосредственно вводить пациенту.

Все технологические операции должны выполняться в специальных помещениях и на специальном оборудовании, предназначенном для производства/изготовления радиофармацевтических препаратов. Различные рабочие зоны должны быть ясно определены и разделены, особенно в отношении однонаправленного движения материалов, предшественников и готовых продуктов, чтобы избежать смешивания и использования не по назначению. Одновременное производство и/или изготовление различных РФЛП в одной рабочей зоне не допускается, что вызвано необходимостью снижения до минимума риска перекрестного загрязнения радиоактивными веществами или смешивания исходных материалов.

Приготовление дозированной формы конечного РФЛП в практической ядерной медицине обычно включает конкретную (лимитированную) активность на согласованную с потребителем дату (и, при необходимости, время) поставки готового к использованию РФЛП, генераторов радионуклидных, наборов для приготовления РФЛП и радионуклидных предшественников.

##### Генератор радионуклидный

В генераторе радионуклидном содержится фиксированный первичный (материнский) радионуклид, из которого образуются вторичные (дочерние) радионуклиды. Их можно использовать на значительных расстояниях от производства генераторов.

Известно более 100 генераторных пар радионуклидов, однако в медицине применяются не более 10. В современной радионуклидной диагностике около 80% процедур выполняют с препаратами, получаемыми на основе генератора технеция-99м. Препараты получают, как правило, в медицинских организациях с использованием наборов для приготовления РФЛП, и элюата из генератора. Элюат из генератора является исходным раствором радионуклида, то есть активной фармацевтической субстанцией и одновременно растворителем для лиофилизата.

Иногда вместо лиофилизата для приготовления РФЛП может быть использован раствор или набор реагентов, включающий несколько флаконов, содержащих лиофилизаты и/или растворы.

##### Материалы мишеней

Мишенный (стартовый) материал может иметь газообразное, твердое, жидкое агрегатное состояние. Изотопный состав и чистота материала мишени определяют относительное содержание нужного радионуклида и радионуклидных примесей. Использование изотопнообогащенных материалов мишеней, в которых содержание требуемого нуклида искусственно увеличено, может увеличить выход реакции и чистоту нужного радионуклида. Химическая форма, чистота, физическое состояние и химические побочные продукты, так же, как условия облучения, прямое физическое и химическое окружение, определяют химическое состояние и химическую чистоту получаемого радионуклида.

При производстве радионуклидов, особенно короткоживущих, не всегда возможно определить все эти критерии качества перед дальнейшим получением радионуклида и соответствующих РФЛП. Поэтому каждая партия материала мишени должна быть протестирована в пробных производственных циклах перед их использованием в рутинном производстве радионуклида и приготовлении РФЛП. Это необходимо проводить для подтверждения того, что в результате процесса производства в описанных условиях будет получен радионуклид в необходимых количествах и нужного качества.

Для облучения потоком частиц материал мишени находится в контейнере (ампуле) и/или мишенном устройстве. Необходимо убедиться в том, что в процессе облучения (температура, давление, время) не происходит взаимодействия между контейнером и его содержимым. При облучении заряженными частицами держатель материала мишени обычно сделан из подходящего металла с входом-выходом, окружающей охлаждающей системой и, как правило, с окном из тонкой металлической фольги. Вид и толщина окна мишени могут влиять на выход ядерной реакции, а также на радионуклидную чистоту.

##### Вспомогательные вещества

Вспомогательные вещества используются в производстве РФЛП для придания им необходимых физико-химических свойств. РФЛП обычно содержат те же категории вспомогательных веществ, что и обычные лекарственные препараты: стабилизаторы, наполнители, антиоксиданты, регуляторы рН, консерванты и др. Но РФЛП отличаются тем, что их получение подразумевает проведение одной или нескольких химических реакций. В связи с этим выделяют следующие группы вспомогательных веществ: восстановители, акцепторы свободных радикалов, лиганды для переноса и стабилизаторы коллоидных систем.

##### Химические предшественники для РФЛП (ХП для РФЛП)

Химические предшественники для РФЛП (ХП для РФЛП) обеспечивают доставку радионуклида к целевым клеткам-мишеням.

Существует два типа химических предшественников:

- радионуклидный предшественник, который по определению является радиоактивным (для радиоактивных меток);

- химический предшественник, который является нерадиоактивным.

ХП для РФЛП используют совместно со вспомогательными веществами или самостоятельно.

Обычно ХП для РФЛП не производятся в больших количествах. Некоторые, синтезируют непосредственно в радиофармацевтических лабораториях, другие поставляются специальными производителями или лабораториями.

Контроль качества ХП для РФЛП проводят в соответствии с требованиям фармакопейной статьи на соответствующий ХП для РФЛП, либо, в случае ее отсутствия с ОФС «Химические предшественники для радиофармацевтических лекарственных препаратов». Тесты на идентификацию, химическую чистоту и анализы должны проводиться по валидированным, фармакопейным аналитическим методикам, с использованием квалифицированного оборудования. Рекомендуется предварительное тестирование ХП для РФЛП в пробном производственном цикле перед их использованием для производства РФЛП и подтверждение, что в указанных условиях производства использование данного предшественника приводит к получению РФЛП в требуемых количествах и с заданным качеством.

##### Перечень показателей качества, которым должны соответствовать радиофармацевтические лекарственные препараты промышленного производства и/или изготавливаемые в медицинских учреждениях

1. Препараты промышленного производства:

   - состав;

   - описание;

   - идентификация;

   - водородный показатель (рН);

   - радионуклидная чистота и/или радионуклидные примеси;

   - радиохимическая чистота и/или радиохимические примеси;

   - химические примеси;

   - биологическое распределение в тканях организма (при необходимости);

   - показатели качества, характеризующие моноклональные антитела (в случае их наличия);

   - бактериальные эндотоксины или пирогенность;

   - активность или объемная (удельная, молярная) активность;

   - стерильность;

   - количественное определение (при необходимости);

   - хранение;

   - упаковка;.

   - маркировка;

   - перевозка (при необходимости);

   - срок годности.

2. Показатели качества для радиофармацевтических лекарственных препаратов, изготовленных с использованием радионуклидных генераторов или растворов радионуклидов и наборов реагентов в медицинских учреждениях:

   - состав;

   - описание;

   - водородный показатель (pH);

   - радиохимическая чистота и/или радиохимические примеси;

   - активность или объемная (удельная, молярная) активность;

   - хранение;

   - упаковка;

   - маркировка;

   - срок годности.

3. Показатели качества для радиофармацевтических лекарственных препаратов, изготовленных в ПЭТ-центрах на базе циклотронов, расположенных непосредственно в медицинских учреждениях:

   - состав;

   - описание;

   - идентификация;

   - осмолярность (при необходимости);

   - водородный показатель (pH);

   - механические включения (при необходимости)

   - радионуклидная чистота и/или радионуклидные примеси;

   - радиохимическая чистота и/или радиохимические примеси;

   - химические примеси;

   - показатели качества, характеризующие моноклональные антитела (в случае их наличия);

   - остаточные органические растворители;

   - бактериальные эндотоксины или пирогенность;

   - активность или объемная (удельная, молярная) активность;

   - стерильность;

   - стереоизомерная чистота (при необходимости);

   - количественное определение (при необходимости);

   - хранение;

   - упаковка;

   - маркировка;

   - перевозка (при необходимости);

   - срок годности.

При определении показателей качества РФЛП руководствуются требованиями общих фармакопейных статей, регламентирующих методы и методики фармакопейного анализа.

##### Меры предосторожности

Ионизирующее излучение является опасным для здоровья человека, поэтому необходимо соблюдать рекомендации по мерам предосторожности, защите от излучений и пределам уровней воздействия рентгеновского излучения, установленные национальным законодательством, регламентирующим так же правила работы с радиоактивными веществами, включая их хранение и транспортировку.

При работе с радиоактивными препаратами необходима соответствующая защита от излучения этих препаратов. Защита имеет своей целью предохранение людей от вредного воздействия радиации, а также снижение фоновых показаний измерительных приборов, регистрирующих ионизирующее излучение.

Предпочтительно должны быть выбраны методы экспресс-анализа с использованием дистанционно управляемого оборудования.

Проникающая способность каждого вида излучения зависит от природы излучения и его энергии.

Защита от внешнего альфа- и бета-излучения радиоактивных препаратов осуществляется сравнительно просто вследствие малой проникающей способности этих излучений. Альфа- и бета- излучения характеризуются определенными величинами пробега альфа- и бета-частиц, т.е. расстоянием, на которое они могут проникать в вещество. Альфа-частицы поглощаются резиновыми перчатками, одеждой, стенками стеклянной ампулы и т.п. Пробег бета-частиц в воздухе в зависимости от их энергии составляет величину от сантиметров до нескольких метров. Для защиты от бета-излучения применяют материалы с малым атомным номером, например, специальные экраны из плексигласа, контейнеры из алюминия и пластмасс и т.п. Однако при работе с высокоактивными препаратами следует принимать меры для защиты от тормозного излучения ‒ вторичного излучения, возникающего при прохождении бета-частиц через вещество. По своей природе тормозное излучение является фотонным ионизирующим излучением. Поэтому при работе с высокоактивными препаратами, содержащими бета-излучающие радионуклиды, применяют комбинированную защиту, в которой внутренний слой (со стороны источника) делается из вещества с малым атомным номером для поглощения бета-излучения, а внешний ‒ из вещества с бόльшим атомным номером для ослабления тормозного излучения.

Гамма-излучение в отличие от альфа- и бета-излучения не характеризуется определенным пробегом в веществе ‒ оно поглощается по мере прохождения через вещество по экспоненциальному закону. Наиболее эффективно поглощают гамма-излучение вещества с большим атомным номером, например свинец, вольфрам, уран. Гамма-излучение определенной энергии можно характеризовать толщиной слоя половинного ослабления (полутолщина ослабления) в веществе. Это та толщина защитного материала, которая ослабляет первоначальную интенсивность излучения в 2 раза. Например, через защитный материал, толщина которого равна 7 слоям половинного ослабления (полутолщинам), проходит менее 1% излучения незащищённого источника.

Защита от гамма-излучения радиоактивных препаратов достигается не только применением поглощающих экранов, но также и путём увеличения расстояния от препарата (интенсивность излучения обратно пропорциональна квадрату расстояния от препарата).

##### Испытания

###### Описание

Поскольку РФЛП радиоактивны, испытание по показателю «Описание» заключается в визуальной проверке внешнего вида РФЛП и основных физических свойств в соответствии с указаниями установленных производителем с учетом требований по радиационной безопасности.

###### Идентификация

Каждый радионуклид и ядерный изомер характеризуются периодом полураспада и специфическими, присущими только ему спектрами (энергий) ионизирующих излучений. К ним относятся спектры альфа-, бета-, гамма-излучения, конверсионных и Оже-электронов, тормозного излучения, характеристического рентгеновского излучения.

Форму и количественные характеристики каждого спектра, а также значение периода полураспада используют для проверки подлинности радионуклида.

Индивидуальными характеристиками радионуклидов могут служить также аппаратурные спектры, снимаемые в строго воспроизводимых условиях; их используют для определения подлинности радионуклидов в РФЛП.

Идентификацию радионуклида в препарате считают подтверждённой, если аппаратурный спектр ионизирующего излучения, снятый с источником, приготовленным из данного РФЛП, идентичен спектру, полученному с образцовым источником или источником, приготовленным из образцового раствора с тем же радионуклидом, и снятому в тех же условиях. Естественно, предполагается, что спектр должен быть скорректирован на вклад от радионуклидных примесей, если они имеются в РФЛП.

Идентификацию радионуклидов проводят по:

- спектру (гамма-, бета- и рентгеновское излучение);

- слою половинного ослабления (бета-излучение);

- периоду полураспада (любое излучение).

Для РФЛП с коротким сроком годности относительно времени, необходимого для предварительных испытаний до выпуска, точное определение периода полураспада в течение времени, соответствующего утроенному значению предполагаемого периода полураспада, нецелесообразно для целей идентификации радионуклидов. Достаточным представляется определение приблизительного значения периода полураспада.

##### Спектрометрия

Радионуклиды можно идентифицировать по их эмиссионному спектру. Каждый тип излучения требует специального оборудования для получения соответствующего спектра излучения.

Жидкостные сцинтилляционные счётчики используют для получения спектра α- и β-излучателей (см. Измерение активности).

Германиевый полупроводниковый детектор (HPGe) предпочтительно использовать для гамма- и рентгеновской спектрометрии.

Сцинтилляционный детектор – NaI-Tl . В качестве чувствительной части в котором выступает иодид натрия, лигированный таллием NaI(Tl).

Гамма-спектрометр используют для идентификации радионуклидов по энергии и интенсивности гамма-квантов или рентгеновских лучей.

Гамма-детектор калибруют, используя стандартные источники, так как эффективность детектирования зависит от энергии гамма-квантов и рентгеновских лучей, а также от формы источника и расстояния между детектором и источником. Эффективность детектора может быть измерена с использованием калиброванного источника измеряемого радионуклида или, (для обычной работы) по графику эффективность – энергия гамма-квантов и рентгеновских лучей, построенному с использованием нескольких калибровочных источников различных радионуклидов.

Гамма и рентгеновский спектр радионуклида, который испускает гамма-кванты и/или рентгеновское излучение, уникален для этого нуклида и характеризуется энергиями и количеством фотонов с определённой энергией, испускаемой при переходе с одного энергетического уровня на другой. Это свойство используют при идентификации радионуклидов, присутствующих в источнике, и в определении их количества, что обеспечивает оценку наличия радионуклидной примеси путём детектирования других пиков, отличающихся от ожидаемых.

##### Слой половинного ослабления

Для идентификации чистых бета-излучателей рекомендуется определять граничные энергии бета-спектров или зависящие от них параметры. Например, идентификацию проводят с помощью кривых поглощения бета-излучения в алюминии по величине слоя половинного ослабления следующим образом: используя установку с торцевым счётчиком в строго определённых экспериментальных условиях, находят зависимость скорости счёта от толщины слоя d алюминиевого поглотителя, помещаемого между источником и окном счётчика, в непосредственной близости к счётчику. Толщину слоя поглотителя принято выражать массой, приходящейся на единицу поверхности поглощающего слоя, в мг/см2. Кривая поглощения, представляющая собой зависимость логарифма скорости счёта logan от толщины d поглотителя, имеет прямолинейный участок. По нему с помощью формулы определяют величину слоя половинного ослабления d1/2 в мг/см2:

где В - коэффициент при d в формуле logan = C-Bd, определяющей прямолинейный участок.

Для определения подлинного значения d1/2 для данного радионуклида аналогичные измерения проводят с источником тех же размеров, формы и толщины и примерно той же активности, приготовленным из образцового раствора с этим радионуклидом.

##### Период полураспада

Для определения периода полураспада измеряют величину активности (или любой пропорциональной ей величины, например, скорости счёта, площади участка спектра и т.д.) в зависимости от времени. Детектор выбирают в зависимости от вида излучения, испускаемого анализируемым нуклидом. Измерения проводят при строго фиксированном расположении источника относительно детектора излучения, при условии регулярного контроля стабильности показаний применяемой аппаратуры с помощью источника с долгоживущим радионуклидом. Длительность и число измерений определяют для каждого конкретного случая.

Радиоактивность образца должна быть достаточно высокой, чтобы можно было проводить измерения в течение периода, соответствующего 3 расчетным периодам полураспада, но для каждого измерения она должна находиться в пределах диапазона линейности оборудования. При необходимости применяется поправка на потери времени простоя.

Кривая экспоненциального распада (кривая распада) описывается уравнением:

где At - радиоактивность в момент t,
A0 - радиоактивность в момент t = 0,
λ – константа распада радионуклида ,
е - основание натурального логарифма.

Период полураспада (Т1/2) связан с константой распада (λ) уравнением:

где ln2 ~ 0,693,
λ – константа распада радионуклида ;

Для РФЛП с коротким сроком годности относительно времени, необходимого для предварительных испытаний до выпуска, точное определение периода полураспада в течение времени, соответствующего утроенному значению предполагаемого периода полураспада, нецелесообразно для целей идентификации радионуклидов. Достаточным представляется определение приблизительного периода полураспада. С этой целью проводят не менее 3 измерений в течение периода, достаточного для достоверного определения разницы показаний. Период полураспада измеряется после соответствующего разбавления, чтобы избежать потерь времени простоя, с использованием ионизационной камеры, счетчика Гейгера-Мюллера, сцинтилляционного счетчика или полупроводникового детектора.

##### Идентификация и количественное определение действующих и/или вспомогательных веществ

Для идентификации и количественного определения действующих и вспомогательных веществ, входящих в состав РФЛП, можно использовать любые пригодные методы физико-химического анализа. Однако, принимая во внимание требования радиационной безопасности, а также небольшое количество фасовок РФЛП в серии, следует учитывать необходимость минимизации проб испытуемого препарата, как по объёму, так и по массе. Кроме того, предпочтительно должны быть выбраны методы экспресс-анализа с использованием дистанционно управляемого оборудования. Для выполнения анализов препарата при отсутствии отечественных реактивов и материалов допускается использование импортных реактивов и материалов соответствующей квалификации.

В исключительных случаях из-за невозможности количественного определения какого-либо вещества в составе РФЛП современными методами с учетом выше изложенных требований определение не проводят.

##### Осмолярность

Определение показателя «Осмолярность» следует проводить в соответствии с ОФС «Осмолярность» с учетом требований по радиационной безопасности.

##### Водородный показатель (pH)

Определение рН следует проводить в соответствии с ОФС «Ионометрия». Допускается использование индикаторных рН – полосок при обосновании возможности использования (валидации аналитической методики) при достаточных для оценки показателей качества препарата критериях точности и воспроизводимости результатов. Применение индикаторных полосок должно быть отражено в нормативной документации на РФЛП с валидированными критериями приемлемости.

##### Радионуклидная чистота и/или радионуклидные примеси

В большинстве случаев для определения радионуклидной чистоты и/или радионуклидных примесей РФЛП предварительно идентифицируют каждый присутствующий радионуклид и измеряют его активность. Для определения радионуклидной чистоты часто используют гамма-спектрометрию. Однако, это не совсем надёжный метод, так как обычно нелегко детектировать альфа- и бета-излучатели, и при использовании детекторов NaI-Tl на пики, характерные для примесей, испускающих гамма-кванты, часто накладывается спектр основного радионуклида. Диапазон гамма-спектрометрии может быть расширен двумя способами: во-первых, путем наблюдения за изменениями в спектре препарата со временем (это особенно полезно при обнаружении долгоживущих примесей в препарате короткоживущего радионуклида);во-вторых, с помощью химического разделения, при котором основные радионуклиды могут быть удалены, а остаток проверяется на наличие примесей.

Требуемая радионуклидная чистота регламентируется в фармакопейной статье, также могут быть установлены пределы для специфических примесей радионуклидов (например, кобальт-60 в кобальте-57). Хотя эти требования необходимы, они сами по себе недостаточны для подтверждения того, что радионуклидная чистота достаточна для использования этого РФЛП для пациентов. Производитель должен исследовать продукт детально на присутствие долгоживущих примесей через определенное количество периодов полураспада. Особенно это касается анализа РФЛП, содержащих радионуклид с периодом полураспада менее 2-х часов. Если необходимо идентифицировать и/или дифференцировать два или более позитрон-излучающих радионуклида, таких как, например, примеси фтора-18 в препаратах азота-13, дополнительно к гамма-спектрометрии проводят определение периода полураспада. Из-за различия периодов полураспада радионуклидов, присутствующих в РФЛП, радионуклидная чистота меняется во времени.

Радионуклидные примеси с большим периодом полураспада, чем у радионуклида в испытуемом РФЛП, могут быть определены по истечении соответствующего периода радиоактивного распада. В этом случае указывают время хранения образца до начала измерения оставшихся долгоживущих примесей и возможность выпуска РФЛП к применению до завершения испытания.

Активность обнаруженной примеси приводят в процентах по отношению к активности основного радионуклида в препарате на определённую дату.

Радионуклидные примеси, активность которых составляет не более 0,01% от активности основного радионуклида в течение всего срока годности, в фармакопейной статье не приводят, кроме особых случаев. Указание о пределе суммарной примеси в фармакопейной статье обязательно. В тех случаях, когда примесь не обнаружена, должен быть указан нижний предел обнаружения применённым методом анализа.

Контроль препарата на содержание радионуклидных примесей не выполняют, если:

1. В документе на радиоактивное исходное сырьё, применяемое для получения препарата, указано содержание радионуклидных примесей;

2. Радионуклид имеет период полураспада менее 2ух часов, то определение его радионуклидной чистоты затруднено, и его испытание проводится на стадии производства.

##### Радиохимическая чистота и/или радиохимические примеси

Определение радиохимической чистоты требует разделения различных химических соединений, содержащих радионуклид, и расчёта процента активности, связанной с основной химической формой. Радиохимические примеси могут образовываться в результате:

- производства радионуклида;

- последующих химических операций;

- неполного препаративного разделения;

- химических изменений в результате хранения.

Требование к радиохимической чистоте должно выполняться в течение всего периода хранения. Для определения радиохимической чистоты, в принципе, могут быть использованы различные методы физико-химического анализа: бумажная хроматография (ОФС «Хроматография на бумаге»), тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»), газовая хроматография (ОФС «Газовая хроматография»), высокоэффективная жидкостная хроматография (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»), электрофорез (ОФС «Электрофорез»).

Наиболее часто используются методы тонкослойной и бумажной хроматографии. В бумажной и тонкослойной хроматографии пробу, объём которой указан в фармакопейной статье, наносят на стартовую линию, как описывается в общих методах хроматографии. Важно предотвратить нанесение такого количества активности, которое обусловит потери при измерении за счёт совпадений, возникающих при измерении активности. Используют такое количество препарата, чтобы можно было получить статистически достоверные результаты измерения для тех примесей, активность которых составит не менее 0,5% от нанесённого количества. Одновременно активность анализируемой пробы должна быть такой, чтобы поправка на просчёты, обусловленная мёртвым временем регистрирующей установки, не превышала 1–2%. При измерении, в случае необходимости, в пробу может быть добавлен носитель. При этом массы разделяемых веществ не должны превышать допустимые для указанных методов.

После разделения хроматограмму высушивают, и положение зон радиоактивности определяют авторадиографией или путём измерения активности по длине хроматограммы с помощью соответствующих коллимированных счётчиков, или путём разрезания полоски и измерения активности каждого участка полоски (соотношения измеренной активности определяют соотношения концентраций радиоактивных химических форм). Положение пятен и участков можно химически идентифицировать путём сравнения с соответствующими растворами такого же химического вещества (нерадиоактивного), используя соответствующий метод детектирования. Активность может быть измерена путём интегрирования с использованием сканеров или цифровых счетчиков.

В показателе радиохимической чистоты приводятся нормативы содержания специфических примесей, включая изомеры.

Высокоэффективная жидкостная хроматография (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») ВЭЖХ-система, оснащенная масс-детектором и детектором радиоактивного излучения, позволяет одновременно определять радиохимическую и химическую чистоту, время удерживания с последующей идентификацией РФЛП. Элюирование может осуществляться градиентным или изократическим способом с использованием водных и/или органических буферных растворов.

В показателе радиохимической чистоты приводятся нормативы содержания специфических примесей, включая изомеры.

##### Химические примеси

Определение примесей и установление их допустимых пределов проводят в соответствии с требованиями фармакопейных статей, предназначенных для проведения испытаний на чистоту и допустимые пределы примесей. Допустимое содержание примесей в растворах РФЛП строго нормировано, так как уровень концентрации радионуклида в препарате без добавления носителя составляет около 10-7–10-8 моль/л, и примеси могут конкурентно связываться с химическими веществами, входящими в состав препарата, что приводит к изменению его радиохимической чистоты и, соответственно, фармакокинетики. Поэтому для определения химических примесей следует использовать высокочувствительные методы физико-химического анализа, такие как: атомно-эмиссионная спектрометрия (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия»), атомно-абсорбционная пламенная спектрометрия (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»), метод атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия») или метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Обязательно следует проводить определение примесей свинца, железа, мышьяка и металлов, присутствующих в конструкционных материалах мишеней и/или радионуклидных генераторах, а также в исходных реагентах (нерадиоактивном сырье) в процессе разработки и валидации производственного процесса и осуществлять дополнительный контроль в случае изменения конструкционных материалов мишени циклотрона, генераторного устройства и замены реагентов. Особое внимание необходимо уделять фармакологически активным примесям или примесям, даже в очень малых количествах влияющим на фармакодинамику (например, лиганды рецепторов). В случае необходимости следует определять стереоизомерную чистоту. По возможности, следует указывать подробную характеристику примесей. Общие пределы содержания могут быть установлены для неидентифицированных примесей. Пределы должны быть тщательно подобраны с учетом количества и токсичности, на основании токсичности исходных материалов, предшественников, возможных продуктов распада и конечного продукта.

##### Биологическое распределение

При необходимости для некоторых РФЛП могут быть предписаны биологические испытания. Распределение активности, наблюдаемое в указанных органах, тканях и других частях тела у соответствующих видов животных (обычно крысы или мыши), должно реально отражать ожидаемое распределение у человека и таким образом подтвердить функциональную пригодность препарата. Виды испытаний и требования к биологическому распределению РФЛП приводят в соответствующих фармакопейных статьях. Биологическое распределение, соответствующее требованиям, обеспечит накопление радиоактивных соединений в интересующем биологическом органе человека и пределы его накопления по отношению к окружающим органам и системам.

##### Остаточные органические растворители

Содержание остаточных растворителей нормируют в соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители». Для РФЛП с коротким сроком годности по сравнению с временем, необходимым для испытаний до выпуска их в обращение, вводят указание: «Допускается выпуск лекарственного препарата к применению до завершения испытания».

##### Бактериальные эндотоксины или пирогенность

Испытание на «Бактериальные эндотоксины» является более предпочтительным для РФЛП из-за большей чувствительности и скорости проведения. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Бактериальные эндотоксины» с соблюдением необходимых предосторожностей в целях ограничения облучения персонала, проводящего тест.

В разделе «Бактериальные эндотоксины или пирогенность» указывают предельное содержание бактериальных эндотоксинов в расчете на максимальную дозу препарата в миллилитрах с учётом способа его введения. Для препаратов, приготовляемых из лиофилизатов и растворов (элюатов), расчёт значений предельного содержания бактериальных эндотоксинов каждого из компонентов (лиофилизатов или растворов) проводят с учётом величины предельного содержания бактериальных эндотоксинов в готовой лекарственной форме: для препаратов, вводимых внутривенно, предельное содержание бактериальных эндотоксинов рассчитывают по формуле 175 МЕ/V, где V − максимальная доза препарата в мл в конце срока годности (наибольшая по объему доза препарата с наименьшей объёмной активностью в миллилитрах при средней массе человека 70 кг). Данные пределы должны составлять 2,5МЕ эндотоксина на килограмм массы тела. Расчёты необходимо проводить с использованием данных об изменении величины объёмной активности препарата в процессе хранения РФЛП, указанных в соответствующих фармакопейных статьях, и данных инструкции по медицинскому применению о максимальной дозе, вводимой пациенту.

Если точное определение максимально вводимого объёма не представляется возможным (так как для РФЛП показателем дозы является вводимая активность), целесообразно за V принимать максимальный объём, используемый для введения пациенту РФЛП, равный 10 мл. Полученное значение выражают в ЕЭ на мг сухого вещества, мл раствора или на флакон.

Если РФЛП имеет короткий срок годности по сравнению с продолжительностью испытания, что допускает их выпуск к применению до завершения испытания. В таком случае в фармакопейной статье приводят соответствующие указания.

Для РФЛП, пирогенность которых может быть обусловлена не только бактериальными эндотоксинами, но и природой испытуемого материала, проводят испытание на пирогенность. В разделе «Бактериальные эндотоксины или пирогенность» указывают, что препарат должен быть апирогенным. Количество вводимого препарата приводят в миллилитрах на 1 кг массы животного.

Если природа РФЛП обуславливает ингибирование или активирование процесса гелеобразования (при определении бактериальных эндотоксинов) и невозможно ликвидировать мешающий фактор (факторы), проводят испытание на пирогенность в соответствии с ОФС «Пирогенность». Испытание РФЛП, поставляемых в клинические учреждения в готовой для использования форме, на бактериальные эндотоксины или пирогенность предусматривает проверку каждой десятой партии препаратов.

##### Активность или объёмная (удельная, молярная) активность

Активность радионуклида в препарате также как и объёмную (удельную, молярную) активность указывают на определённую дату, а для препаратов, содержащих радионуклид с периодом полураспада менее 10 сут, также и на определённое время. Для препаратов, содержащих радионуклид с периодом полураспада менее 1 сут, активность указывают с учётом минут.

Абсолютное измерение активности определённого образца может быть выполнено, если известна схема распада радионуклида, но на практике требуется вносить много корректировок для получения точных результатов. Поэтому обычно проводят измерения с помощью первичного стандартного источника. Первичные стандартные источники не могут быть использованы для короткоживущих радионуклидов, например позитрон-излучателей. Измерительная аппаратура калибруется по доступным стандартам для каждого конкретного радионуклида. Стандарты, которые используют в лабораториях, тестируются компетентными органами.

Для измерения активности бета- и бета/гамма-излучателей используют ионизационные камеры и счётчики Гейгера-Мюллера. Измерение уровня излучения происходит путём измерения уровня ионизации газа в рабочем объёме камеры, который находится между двумя электродами. Между электродами создаётся разность потенциалов. При наличии свободных зарядов в газе между электродами возникает ток пропорциональный скорости возникновения зарядов и, соответственно, мощности дозы облучения.

Для измерения активности гамма-излучателей. используют полупроводниковые счетчики. Принцип их работы основан на том, что при прохождении через счетчик ионизующей частицы, заряды образованные в веществе счетчика, собираются на электродах. Так же используют сцинтилляционные счётчики или ионизационные камеры.

Для измерения активности альфа-излучателей требуются используют жидкостные сцинтилляционные счётчики и полупроводниковые детекторы на кремниевых диодах.

Для корректного сравнения радиоактивных источников важно, чтобы исследуемые препараты и стандарты были измерены в одних и тех же условиях.

Активность бета-излучателей с низкой энергией может быть измерена с помощью жидкостного сцинтилляционного счётчика. Принцип работы жидкостного сцинтилляционного счетчика основан на взаимодействии бета-излучающего радионуклида и сцинтиллятора, компонента сцинтилляционной смеси. Сцинтиллятор преобразует ионизирующее излучение от радионуклида в фотоны (сцинтилляция). Интенсивность света, вырабатываемого во время сцинтилляции, пропорциональна начальной энергии бета-частицы. Образец в растворе, содержащем одно или несколько (обычно два) органических флуоресцентных вещества (первичный и вторичный сцинтилляторы), превращающих часть энергии распада в фотоны света, которые детектируются фотоумножителем и конвертируются в электрические импульсы. При использовании жидкостных сцинтилляционных счётчиков сравнительные измерения корректируют с учетом эффектов светопоглощения. Прямые измерения выполняют, если это возможно, в одинаковых условиях (например, объём и вид растворов) для определяемого и стандартного источника. Все измерения активности должны быть скорректированы путём вычитания фоновой активности окружающей среды и ложных сигналов, испускаемых самим оборудованием. При измерении большой активности на некотором оборудовании необходимо провести коррекцию на потери от совпадений, возникающие из-за ограниченного времени разрешения детектора и связанного с ним электронного оборудования. Для регистрирующей системы с фиксированным мёртвым временем τ, которое наступает после каждого счёта, уравнение коррекции:

где N1 – истинная скорость счёта в секунду;
N - полученная скорость счёта в секунду;
τ - мёртвое время, в секундах.

На некоторых приборах эта корректировка выполняется автоматически. Корректировка из-за потерь от совпадений должна быть выполнена перед корректировкой на фоновое излучение.

Если время индивидуального измерения (tm) не пренебрежимо мало по сравнению с периодом полураспада (T½), то должен быть принят во внимание распад в течение времени измерения. После проведения корректировки показаний прибора (скорость счёта, ионизационный ток и т.д.) на фон и, если необходимо, на потери из-за электронных эффектов, проводят коррекцию на распад за время измерения по уравнению:

где Rкорр – показания прибора, скорректированные на начало индивидуального измерения;
R – показание прибора перед корректировкой на распад, но уже после коррекции на фон и т.д.;
λ – постоянная распада радионуклида;
е – основание натурального логарифма;
tm – продолжительность измерения.

Результаты определения активности показывают различия, которые, главным образом, связаны с редким видом ядерного превращения.

Для того чтобы компенсировать различия в количестве переходов в единицу времени, должно быть зарегистрировано достаточное количество импульсов. Так, например, необходимо, по крайней мере, 10000 импульсов для получения относительного стандартного отклонения не более 1% (доверительный интервал: 1 сигма, стандартное отклонение − корень квадратный из числа импульсов).

Все результаты измерения активности приводят с указанием даты и, если необходимо, времени измерения. Это указание должно быть сделано с учётом часового пояса (GMT, CET) (Среднее время по меридиану Гринвича, Центральное Европейское время). Активность на другое время рассчитывают по экспоненциальному уравнению или определяют по таблицам.

Удельную активность обычно рассчитывают, исходя из объёмной активности и концентрации изучаемого химического соединения после подтверждения, что активность относится только к радионуклиду (радионуклидная чистота) и интересующим химическим формам (радиохимическая чистота). Удельная активность изменяется во времени. Поэтому величину удельной активности приводят с указанием даты и, если необходимо, времени. Удельную активность необходимо измерять в препаратах с добавленным носителем. Для некоторых РФЛП без добавления носителя (например, лиганды рецепторов), важно указывать молярную удельную активность.

##### Стерильность

РФЛП для парентерального введения должны быть приготовлены с соблюдением мер предосторожности, чтобы исключить микробное загрязнение и обеспечить стерильность. Испытание на стерильность выполняют в соответствии с ОФС «Стерильность». Однако, из-за короткого периода полураспада радионуклидов, входящих в состав большинства РФЛП, результат анализа на стерильность получают, как правило, после использования конкретной партии. В таких случаях в фармакопейных статьях приводят указание о том, что результат контроля стерильности может быть получен после использования препарата.

Часто по нормативам радиационной безопасности (высокий уровень радиоактивности) для испытания на стерильность невозможно использовать РФЛП в количествах, указанных в ОФС «Стерильность». Кроме того, когда объём партии РФЛП ограничен одним или несколькими образцами (например, терапевтические или ультра-короткоживущие препараты), то тест на стерильность оказывается невыполнимым. Если период полураспада очень короткий (например, ≤ 20 мин), введение препарата пациенту проводят в потоке с применением метода мембранной фильтрации и валидацией системы производства.

Как правило, для РФЛП контроль соблюдения условий стерилизации должен гарантировать стерильность препарата, а испытание на стерильность предусматривает проверку каждой десятой партии препаратов, стерилизуемых автоклавированием (при условии валидации процесса стерилизации), и каждой партии препаратов стерилизуемых в воздушном стерилизаторе.

Для препаратов, стерилизованных фильтрованием и/или изготовленных в асептических условиях, следует проводить испытания стерильности каждой десятой партии при условии валидации асептических зон и контроля целостности стерилизующего фильтра при производстве каждой партии. При проведении испытаний на «стерильность», образцы должны храниться в надлежащих условиях, обеспечивающих достоверность полученных результатов.

##### Стереоизомерная чистота

При необходимости должна быть указана стереоизомерная чистота.

##### Хранение

Условия хранения должны обеспечивать снижение мощности дозы излучения до допустимого уровня.

В фармакопейной статье указывают конкретные условия хранения препарата, обусловленные его специфическими свойствами и обеспечивающие сохранность его качества (температурный режим и т.д.).

РФЛП должны быть тщательно закрыты и храниться в зоне, предназначенной для данных целей.

Во время хранения материал первичной упаковки может менять окраску в результате облучения. Изменение окраски не означает ухудшение качества препарата.

##### Упаковка

Упаковка РФЛП должна производиться в соответствии с действующим законодательством РФ в этой области в отношении радиоактивных препаратов медицинского назначения. При этом необходимо учитывать, что исчерпывающая информация о препарате должна содержаться в паспорте и инструкции по медицинскому применению РФЛП.

##### Маркировка

Маркировка первичной упаковки РФЛП (как правило, флакон для лекарственных средств) должна содержать минимум информации в целях обеспечения минимальной лучевой нагрузки на глаза медперсонала.

На этикетке первичной упаковки (флакона) со знаком радиационной опасности указывают: название препарата, лекарственную форму, активность (для капсул или драже активность каждой единицы) на установленную дату (и время), номер серии, срок годности. Маркировка может быть адаптирована (сокращена) в случае РФЛП на основе короткоживущих радионуклидов, тогда как отсутствующая информация (активность и объем раствора) в этом случае должна быть нанесена на этикетку вторичной упаковки соответственно.

На этикетке вторичной упаковки (комплект упаковочный транспортный) со знаком радиационной опасности указывают: наименование производителя; его товарный знак (при его наличии); название препарата; МНН на русском языке (если оно имеется); лекарственную форму, состав; «стерильно» (только для инъекционных лекарственных форм); информацию о том, что препарат предназначен для диагностики или для терапевтического применения; пути введения; общая активность на указанную дату и, при необходимости, время; для растворов предоставляются данные по объемной активности, для растворов указывается общий объем; любые специальные требования к хранению в отношении температуры и освещенности; для капсул (драже) дополнительно указывают активность каждой единицы и количество капсул (драже) в упаковке, номер серии, дату изготовления, срок годности.

##### Перевозка

Перемещение РФЛП внутри помещений, а также на территории радиационного объекта должно выполнятся в соответствии с действующими правилами радиационной безопасности при перевозке радиоактивных веществ в контейнерах и упаковках с учетом физического состояния источников излучения, их активности, вида излучения, габаритов и массы упаковки, с соблюдением условий радиационной безопасности. Транспортные средства, специально предназначенные для перевозки радионуклидных источников за пределами радиационного объекта, должны соответствовать действующим требованиям утвержденных правовых документов по радиационной безопасности персонала и населения при перевозке радиоактивных материалов (веществ).

##### Срок годности

Срок годности РФЛП определяется совокупностью следующих факторов:

- стабильностью химического и радиохимического состава РФЛП;

- уменьшением активности радионуклида с течением времени по закону радиоактивного распада;

- возрастанием относительного содержания радионуклидных примесей, имеющих периоды полураспада большие, чем основной радионуклид.

Срок годности каждого РФЛП приводят в соответствующей фармакопейной статье и устанавливают в соответствии с ОФС «Стабильность и сроки годности лекарственных средств». Периодичность контроля РФЛП в зависимости от их срока годности представлена в табл. 1.

Таблица 1. Периодичность контроля РФЛП при установлении их срока годности
№ п/п | Срок годности | Периодичность проверки качества
--- | --- | ---
1 | До 40 мин включительно | На время изготовления
2 | Свыше 40 мин до 5 сут включительно | На время изготовления и конец срока годности
3 | Свыше 5 сут до 10 сут включительно | На дату изготовления и конец срока годности
4 | Свыше 10 сут | На дату изготовления, в середине и в конце срока годности

Для препаратов со сроками годности, указанными в п.п. 3 и 4, приводят еще один раз данные анализа за их пределами. Временной интервал со времени окончания срока годности до даты данного анализа составляет 10-50 % срока годности.

РФЛП, полученные из наборов обычно предназначены для использования в течение 12 часов.

РФЛП для инъекций, срок годности которых превышает один день и которые содержат антимикробный консервант могут поставляться в многодозовой упаковке После асептического изъятия первой дозы контейнер следует хранить при температуре от 2° до 8°C и содержимое должно быть использовано в течение 7 дней.

##### Приложение 1. Таблица основных физических характеристик радионуклидов

Обозначения:

eA = электроны Оже
ce = электроны конверсии
β− = электроны
β+ = позитроны
γ = гамма-излучение
X = рентгеновское излучение

Таблица основных физических характеристик радионуклидов
Радионуклид | Период полураспада | Электронная эмиссия | Фотонная эмиссия
--- | --- | --- | ---
Тип | Энергия (MэВ) | Вероятность (на 100 распадов) | Тип | Энергия (MэВ) | Вероятность (на 100 распадов)
(I) Средняя энергия β-спектра (II) Максимальная вероятность, соответствующая полной аннигиляции в источнике на 100 распадов.
Тритий (3H) | 12.33 (6) лет | β− | 0.006 (I) (макс: 0.019) | 100 |  |  |
Углерод-11 (11C) | 20.385 (20) мин | β+ | 0.386 (I) (макс: 0.960) | 99.8 | γ | 0.511 | 199.5 (II)
Азот-13 (13N) | 9.965 (4) мин | β+ | 0.492 (I) (макс: 1.198) | 99.8 | γ | 0.511 | 199.6 (II)
Кислород-15 (15O) | 122.24 (16) с | β+ | 0.735 (I) (макс: 1.732) | 99.9 | γ | 0.511 | 199.8 (II)
Фтор-18 (18F) | 109.77 (5)мин | β+ | 0.250 (I) (макс: 0.633) | 96.7 | γ | 0.511 | 193.5 (II)
Фосфор-32 (32P) | 14.26 (4) сут | β− | 0.695 (I) (макс: 1.71) | 100 |  |  |
Фосфор-33 (33P) | 25.34 (12) сут | β− | 0.076 (I) (макс: 0.249) | 100 |  |  |
Сера-35 (35S) | 87.51 (12) сут | β− | 0.049 (I) (макс: 0.167) | 100 |  |  |
Хром-51 (51Cr) | 27.7025 (24) сут | eA | 0.004 | 67 | X | 0.005 | 22.3
|  |  |  | γ | 0.320 | 9.9
Кобальт-56 (56Co) | 77.27 (3) сут | eA | 0.006 | 47 | X | 0.006-0.007 | 25
β+ | 0.179 (I) | 0.9 | γ | 0.511 | 38.0 (II)
|  | 0.631 (I) | 18.1 |  | 0.847 | 100.0
|  |  |  |  | 1.038 | 14.1
|  |  |  |  | 1.175 | 2.2
|  |  |  |  | 1.238 | 66.1
|  |  |  |  | 1.360 | 4.3
|  |  |  |  | 1.771 | 15.5
|  |  |  |  | 2.015 | 3.0
|  |  |  |  | 2.035 | 7.8
|  |  |  |  | 2.598 | 17.0
|  |  |  |  | 3.202 | 3.1
|  |  |  |  | 3.253 | 7.6
Кобальт-57 (57Co) | 271.79 (9) сут | eA+ce | 0.006-0.007 | 177.4 | X | 0.006-0.007 | 57
ce | 0.014 | 7.4 | γ | 0.014 | 9.2
| 0.115 | 1.8 |  | 0.122 | 85.6
| 0.129 | 1.3 |  | 0.136 | 10.7
|  |  |  | 0.692 | 0.15
Кобальт-58 (58Co) | 70.86 (7) сут | eA | 0.006 | 49.4 | X | 0.006-0.007 | 26.3
β+ | 0.201 (I) | 14.9 | γ | 0.511 | 29.9 (II)
|  |  |  | 0.811 | 99.4
|  |  |  | 0.864 | 0.7
|  |  |  | 1.675 | 0.5
Кобальт-60 (60Co) | 5.2714 (5) лет | β− | 0.096 (I) (макс: 0.318) | 99.9 | γ | 1.173 | 100.0
|  |  |  |  | 1.333 | 100.0
Медь-62 (62Cu) | 9.67 мин | β+ | 1.316 (макс: 2.926) | 97.2 | Х | 0.007 | 0.709
| eA | 0.007 | 1.138 |  |  |
|  |  |  | γ | 0.511 | 194.86
|  |  |  |  | 0.875 | 0.15
|  |  |  |  | 1.173 | 0.342
Медь-64 (64Cu) | 12.7 час | β+ | 0.278 (макс: 0.653) | 17.4 | Х | 0.007 | 14.12
| β− | 0.190 (макс: 0.579) | 39.0 |  | 0.008 | 1.91
| eA | 0.007 | 22.66 |  |  |
|  |  |  | γ | 0.511 | 34.79
|  |  |  |  | 1.345 | 0.473
Галлий-66 (66Ga) | 9.49 (7) час | eA | 0.008 | 21 | X | 0.009-0.010 | 19.1
| β+ | 0.157 (I) | 1 | γ | 0.511 | 112 (II)
|  | 0.331 (I) | 0.7 |  | 0.834 | 5.9
|  | 0.397 (I) | 3.8 |  | 1.039 | 37
|  | 0.782 (I) | 0.3 |  | 1.333 | 1.2
|  | 1.90 (I) | 50 |  | 1.919 | 2.1
|  |  |  |  | 2.190 | 5.6
|  |  |  |  | 2.423 | 1.9
|  |  |  |  | 2.752 | 23.4
|  |  |  |  | 3.229 | 1.5
|  |  |  |  | 3.381 | 1.5
|  |  |  |  | 3.792 | 1.1
|  |  |  |  | 4.086 | 1.3
|  |  |  |  | 4.295 | 4.1
|  |  |  |  | 4.807 | 1.8
Галлий-67 (67Ga) | 3.2612 (6) сут | eA | 0.008 | 62 | X | 0.008-0.010 | 57
| ce | 0.082-0.084 | 30.4 | γ | 0.091-0.093 | 42.4
|  | 0.090-0.092 | 3.6 |  | 0.185 | 21.2
|  | 0.175 | 0.3 |  | 0.209 | 2.4
|  |  |  |  | 0.300 | 16.8
|  |  |  |  | 0.394 | 4.7
|  |  |  |  | 0.888 | 0.15
Германий-68 (68Ge) в равновесии с галлием-68 (68Ga) | 270.82 (27) сут | eA | 0.008 | 42.4 | X | 0.009-0.010 | 44.1
(68Ga: 67.629 (24) мин) | β+ | 0.353 (I) | 1.2 | γ | 0.511 | 178.3
| 0.836 (I) | 88.0 |  | 1.077 | 3.0
Галлий-68 (68Ga) | 67.629 (24) мин | eA | 0.008 | 5.1 | X | 0.009-0.010 | 4.7
| β+ | 0.353 (I) | 1.2 | γ | 0.511 | 178.3
|  | 0.836 (I) | 88.0 |  | 1.077 | 3.0
Криптон-81m (81mKr) | 13.10 (3) с | ce | 0.176 | 26.4 | X | 0.012-0.014 | 17.0
|  | 0.189 | 4.6 |  |  |
|  |  |  | γ | 0.190 | 67.6
Рубидий-81 (81Rb) в равновесии с Криптоном-81m (81mKr) | 4.576 (5) час | eA | 0.011 | 31.3 | X | 0.013-0.014 | 57.2
| ce | 0.176 | 25.0 | γ | 0.190 | 64
|  | 0.188 | 4.3 |  | 0.446 | 23.2
|  |  |  |  | 0.457 | 3.0
(81mKr: 13.10 (3) с) | β+ | 0.253 (I) | 1.8 |  | 0.510 | 5.3
| 0.447 (I) | 25.0 |  | 0.511 | 54.2
|  |  |  | 0.538 | 2.2
Рубидий-82 (82Rb) | 1.3 мин | β+ | 1.523 | 83.3 | γ | 0.511 | 191
Стронций-82 (82Sr) | 25 сут | e | 0.00017 | 202 | Х | 0.002-0.013 | 60
Стронций-85 (85Sr) | 64.84 сут | e | 0.017 | 204 | Х | 0.013 | 50
| ce | 0.51 | 0.066 | X | 0.013-0.015 | 55
|  |  |  | γ | 0.514 | 99,3
Стронций-89 (89Sr) в равновесии с Иттрием-89m (89mY) | 50.53 (7) сут | β− | 0.583 (I) (макс: 1.492) | 99.99 | γ | 0.909 | 0.01
(89mY: 16.06 (4) с) |  |  |  |  |  |
Стронций-90 (90Sr) в равновесии с Иттрием-90 (90Y) | 28.74 (4) лет | β− | 0.196 (I) (макс: 0.546) | 100 |  |  |
(90Y: 64.10 (8) час) |  |  |  |  |  |
Иттрий-90 (90Y) | 64.10 (8) час | β− | 0.934 (I) (макс: 2.280) | 100 |  |  |
Молибден-99 (99Mo) в равновесии с Технецием-99m (99mTc) | 65.94 (1) час | β− | 0.133 (I) | 16.4 | X | 0.018-0.021 | 3.6
|  | 0.290 (I) | 1.1 |  |  |
|  | 0.443 (I) | 82.4 | γ | 0.041 | 1.1
|  |  |  |  | 0.141 | 4.5
|  |  |  |  | 0.181 | 6
|  |  |  |  | 0.366 | 1.2
(99mTc: 6.01 (1) час) |  |  |  |  | 0.740 | 12.1
|  |  |  |  | 0.778 | 4.3
Технеций-99m (99mTc) | 6.01 (1) час | ce | 0.002 | 74 | X | 0.018-0.021 | 7.3
| eA | 0.015 | 2.1 | γ | 0.141 | 89.1
| ce | 0.120 | 9.4 |  |  |
|  | 0.137-0.140 | 1.3 |  |  |
Технеций-99 (99Tc) | 2.11 × 105 лет | β− | 0.085 (I) (макс: 0.294) | 100 |  |  |
Рутений-103 (103Ru) в равновесии с Родием-103m (103mRh) | 39.26 (2) сут | eA+ce | 0.017 | 12 | X | 0.020-0.023 | 9.0
| ce | 0.030-0.039 | 88.3 | γ | 0.497 | 91
(103mRh: 56.114 (20) мин) |  |  |  |  | 0.610 | 5.8
β− | 0.031 (I) | 6.6 |  |  |
| 0.064 (I) | 92.2 |  |  |
Индий-110 (110In) | 4.9 (1) час | eA | 0.019 | 13.4 | X | 0.023-0.026 | 70.5
|  |  |  | γ | 0.642 | 25.9
|  |  |  |  | 0.658 | 98.3
|  |  |  |  | 0.885 | 92.9
|  |  |  |  | 0.938 | 68.4
|  |  |  |  | 0.997 | 10.5
Индий-110m (110mIn) | 69.1 (5) мин | eA | 0.019 | 5.3 | X | 0.023-0.026 | 27.8
| β+ | 1.015 (I) | 61 | γ | 0.511 | 123.4 (II)
|  |  |  |  | 0.658 | 97.8
|  |  |  |  | 2.129 | 2.1
Индий-111 (111In) | 2.8047 (5) сут | eA | 0.019 | 15.6 | X | 0.003 | 6.9
|  |  |  |  | 0.023-0.026 | 82.3
| ce | 0.145 | 7.8 |  |  |
|  | 0.167-0.171 | 1.3 | γ | 0.171 | 90.2
|  | 0.219 | 4.9 |  | 0.245 | 94.0
|  | 0.241-0.245 | 1.0 |  |  |
Индий-114m (114mIn) в равновесии с Индием-114 (114In) | 49.51 (1) сут | ce | 0.162 | 40 | X | 0.023-0.027 | 36.3
|  | 0.186-0.190 | 40 |  |  |
|  |  |  | γ | 0.190 | 15.6
| β− | 0.777 (I) (макс: 1.985) | 95 |  | 0.558 | 3.2
(114In: 71.9 (1) с) |  |  |  |  | 0.725 | 3.2
Теллур-121m (121mTe) в равновесии с Теллуром-121 (121Te) | 154.0 (7) сут | eA | 0.003 | 88.0 | X | 0.026-0.031 | 50.5
|  | 0.022-0.023 | 7.4 |  |  |
|  |  |  | γ | 0.212 | 81.4
| ce | 0.050 | 33.2 |  | 1.102 | 2.5
(121Te: 19.16 (5) сут) |  | 0.077 | 40.0 |  |  |
|  | 0.180 | 6.1 |  |  |
Теллур-121 (121Te) | 19.16 (5) сут | eA | 0.022 | 11.6 | X | 0.026-0.030 | 75.6
|  |  |  | γ | 0.470 | 1.4
|  |  |  |  | 0.508 | 17.7
|  |  |  |  | 0.573 | 80.3
Йод-123 (123I) | 13.27 (8) час | eA | 0.023 | 12.3 | X | 0.004 | 9.3
|  |  |  |  | 0.027-0.031 | 86.6
| ce | 0.127 | 13.6 |  |  |
|  | 0.154 | 1.8 | γ | 0.159 | 83.3
|  | 0.158 | 0.4 |  | 0.346 | 0.1
|  |  |  |  | 0.440 | 0.4
|  |  |  |  | 0.505 | 0.3
|  |  |  |  | 0.529 | 1.4
|  |  |  |  | 0.538 | 0.4
Йод-124 (124I) | 4.176 дня | β+ | 0.687 (макс: 1.534) | 11.79 | X | 0.004 | 6.3
|  | 0.975 (макс: 2.138) | 10.89 |  | 0.027 | 47.5
| eA | 0.003 | 63.0 |  | 0.031 | 10.73
|  | 0.023 | 8.30 |  |  |
|  |  |  | γ | 0.511 | 45.96
|  |  |  |  | 0.603 | 62.9
|  |  |  |  | 0.723 | 10.35
|  |  |  |  | 1.509 | 3.13
|  |  |  |  | 1.691 | 10.88
Йод-125 (125I) | 59.402 (14) сут | eA+ce | 0.004 | 80 | X | 0.004 | 15.5
|  | 0.023-0.035 | 33 |  | 0.027 | 114
|  |  |  |  | 0.031 | 26
|  |  |  | γ | 0.035 | 6.7
Йод-126 (126I) | 13.11 (5) сут | eA | 0.023 | 6 | X | 0.027-0.031 | 42.2
| ce | 0.354 | 0.5 | γ | 0.388 | 34
|  | 0.634 | 0.1 |  | 0.491 | 2.9
|  |  |  |  | 0.511 | 2.3 (II)
| β− | 0.109 (I) | 3.6 |  | 0.666 | 33
|  | 0.290 (I) | 32.1 |  | 0.754 | 4.2
|  | 0.459 (I) | 8.0 |  | 0.880 | 0.8
|  |  |  |  | 1.420 | 0.3
| β+ | 0.530 (I) | 1 |  |  |
Йод-131 (131I) | 8.02070 (11) сут | ce | 0.46 | 3.5 | X | 0.029-0.030 | 3.9
| 0.330 | 1.6 |  |  |
|  |  |  | γ | 0.080 | 2.6
| β− | 0.069 (I) | 2.1 |  | 0.284 | 6.1
|  | 0.097 (I) | 7.3 |  | 0.365 | 81.7
|  | 0.192 (I) | 89.9 |  | 0.637 | 7.2
|  |  |  |  | 0.723 | 1.8
Ксенон-131m (131mXe) | 11.84 (7) сут | eA | 0.025 | 6.8 | X | 0.004 | 8.3
|  |  |  |  | 0.030 | 44.0
| ce | 0.129 | 61 |  | 0.034 | 10.2
|  | 0.159 | 28.5 |  |  |
|  | 0.163 | 8.3 | γ | 0.164 | 2.0
Йод-133 (133I) (распадается до Ксенона-133) | 20.8 (1) час | β− | 0.140 (I) | 3.8 | γ | 0.530 | 87
|  | 0.162 (I) | 3.2 |  | 0.875 | 4.5
|  | 0.299 (I) | 4.2 |  | 1.298 | 2.4
|  | 0.441 (I) | 83 |  |  |
Ксенон-133 (133Xe) | 5.243 (1) сут | eA | 0.026 | 5.8 | X | 0.004 | 6.3
|  |  |  |  | 0.031 | 40.3
| ce | 0.045 | 55.1 |  | 0.035 | 9.4
|  | 0.075-0.080 | 9.9 |  |  |
|  |  |  | γ | 0.080 | 38.3
| β− | 0.101 (I) | 99.0 |  |  |
Ксенон-133m (133mXe) (распадается до Ксенона-133) | 2.19 (1) сут | eA | 0.025 | 7 | X | 0.004 | 7.8
|  |  |  |  | 0.030 | 45.9
| ce | 0.199 | 64.0 |  | 0.034 | 10.6
|  | 0.228 | 20.7 |  |  |
|  | 0.232 | 4.6 | γ | 0.233 | 10.0
Йод-135 (135I) (распадается до Ксенона-135) | 6.57 (2) час | β− | 0.140 (I) | 7.4 | γ | 0.527 | 13.8
|  | 0.237 (I) | 8 |  | 0.547 | 7.2
|  | 0.307 (I) | 8.8 |  | 0.837 | 6.7
|  | 0.352 (I) | 21.9 |  | 1.039 | 8.0
|  | 0.399 (I) | 8 |  | 1.132 | 22.7
|  | 0.444 (I) | 7.5 |  | 1.260 | 28.9
|  | 0.529 (I) | 23.8 |  | 1.458 | 8.7
|  |  |  |  | 1.678 | 9.6
|  |  |  |  | 1.791 | 7.8
Ксенон-135 (135Xe) | 9.14 (2) час | ce | 0.214 | 5.5 | X | 0.031-0.035 | 5.0
| β− | 0.171 | 3.1 | γ | 0.250 | 90.2
|  | 0.308 | 96.0 |  | 0.608 | 2.9
Цезий-137 (137Cs) в равновесии с Барием-137m (137mBa) | 30.04 (3) лет | eA | 0.026 | 0.8 | X | 0.005 | 1
|  |  |  | 0.032-0.036 | 7
ce | 0.624 | 8.0 |  |  |
(137mBa: 2.552 (1) мин) |  | 0.656 | 1.4 | γ | 0.662 | 85.1
β− | 0.174 (I) | 94.4 |  |  |
| 0.416 (I) | 5.6 |  |  |
Самарий-153 (153Sm) | 46.3 часа | β− | 0.200 (макс: 0.635) | 32.2 | X | 0.006 | 12.0
|  | 0.226 (макс: 0.705) | 49.6 |  | 0.041 | 17.5
|  | 0.265 (макс: 0.808) | 17.5 |  | 0.042 | 31.7
| ce | 0.021 | 21.7 |  | 0.047 | 12.4
|  | 0.055 | 43.2 |  |  |
|  | 0.095 | 6.44 | γ | 0.070 | 4.85
|  |  |  |  | 0.103 | 29.8
Гольмий-166 (166Ho) | 26.8 час | β− | 0.651 (макс: 1.773) | 48.7 | X | 0.007 | 8.3
|  | 0.694 (макс: 1.854) | 50.0 |  | 0.048 | 3.1
| eA | 0.006 | 27.8 |  | 0.049 | 5.5
| ce | 0.023 | 11.5 |  |  |
|  | 0.071 | 26.5 | γ | 0.081 | 6.71
|  | 0.078 | 6.44 |  |  |
Лютеций-177 (177Lu) | 6.65 дня | β− | 0.048 (макс: 0.177) | 11.61 | γ | 0.208 | 10.36
|  | 0.110 (макс: 0.385) | 9.1 |  |  |
|  | 0.149 (макс: 0.498) | 79.4 |  |  |
| eA | 0.044 | 0.27 |  |  |
| ce | 0.112 | 0.48 |  |  |
|  | 0.143 | 0.57 |  |  |
Рений-188 (188Re) | 17.0 час | β− | 0.528 (макс: 1.487) | 1.748 | X | 0.009 | 3.2
|  | 0.729 (макс: 1.965) | 26.3 |  | 0.063 | 2.44
|  | 0.795 (макс: 2.120) | 70.0 |  |  |
| eA | 0.007 | 6.8 | γ | 0.155 | 15.61
| ce | 0.081 | 5.04 |  |  |
|  | 0.142 | 5.85 |  |  |
Золото-198 (198Au) | 2.696 сут | β - | 0.315 (I) | 98.7 | γ | 0.412 | 95.5
Таллий-199 (199Т1) | 7.42 час | се | 0.144 | 1.23 | X | 0.069-0.080 | 94.5
|  | 0.193 | 1.19 |  |  |
| β+ | 0.227 | 0.1 |  |  |
|  |  |  | γ | 0.158 | 4.9
|  |  |  |  | 0.208 | 12.8
|  |  |  |  | 0.247 | 9.2
|  |  |  |  | 0.334 | 1.6
|  |  |  |  | 0.455 | 12.3
Таллий-200 (200Tl) | 26.1 (1) час | ce | 0.285 | 3.4 | X | 0.010 | 32.0
|  | 0.353 | 1.4 |  | 0.069-0.071 | 63.3
|  |  |  |  | 0.08 | 17.5
| β+ | 0.495 (I) | 0.3 |  |  |
|  |  |  | γ | 0.368 | 87.2
|  |  |  |  | 0.579 | 13.8
|  |  |  |  | 0.828 | 10.8
|  |  |  |  | 1.206 | 29.9
|  |  |  |  | 1.226 | 3.4
|  |  |  |  | 1.274 | 3.3
|  |  |  |  | 1.363 | 3.4
|  |  |  |  | 1.515 | 4.0
Свинец-201 (201Pb) (распадается до Таллия-201) | 9.33 (3) час | eA | 0.055 | 3 | X | 0.070-0.073 | 69
|  |  |  |  | 0.083 | 19
| ce | 0.246 | 8.5 |  |  |
|  | 0.276 | 2 | γ | 0.331 | 79
|  | 0.316 | 2.3 |  | 0.361 | 9.9
|  |  |  |  | 0.406 | 2.0
|  |  |  |  | 0.585 | 3.6
|  |  |  |  | 0.692 | 4.3
|  |  |  |  | 0.767 | 3.2
|  |  |  |  | 0.826 | 2.4
|  |  |  |  | 0.908 | 5.7
|  |  |  |  | 0.946 | 7.9
|  |  |  |  | 1.099 | 1.8
|  |  |  |  | 1.277 | 1.6
Таллий-201 (201Tl) | 72.912 (17) час | ce | 0.016-0.017 | 17.7 | X | 0.010 | 46.0
|  | 0.027-0.029 | 4.1 |  | 0.069-0.071 | 73.7
|  | 0.052 | 7.2 |  | 0.080 | 20.4
|  | 0.084 | 15.4 |  |  |
|  | 0.153 | 2.6 | γ | 0.135 | 2.6
|  |  |  |  | 0,167 | 10.0
Таллий-202 (202Tl) | 12.23 (2) сут | eA | 0.054 | 2.8 | X | 0.010 | 31.0
|  |  |  |  | 0.069-0.071 | 61.6
| ce | 0.357 | 2.4 |  | 0.080 | 17.1
|  |  |  | γ | 0.440 | 91.4
Свинец-203 (203Pb) | 51.873 (9) час | eA | 0.055 | 3.0 | X | 0.010 | 37.0
|  |  |  |  | 0.071-0.073 | 69.6
| ce | 0.194 | 13.3 |  | 0.083 | 19.4
|  |  |  | γ | 0.279 | 80.8
|  |  |  |  | 0.401 | 3.4
Астат-211 (211At) | 7.21 час | α | 5.870 | 41.8 | X | 0.011 | 19.7
|  |  |  |  | 0.077 | 12.68
| eA | 0.008 | 26.1 |  | 0.079 | 21.24
|  | 0.06 | 1.34 |  | 0.090 | 9.53
|  |  |  | γ | 0.687 | 0.261
Висмут-213 (213Bi) | 45.6 мин | α | 5.869 | 1.94 | X | 0.011 | 1.75
| β− | 0.320 (макс: 0.982) | 31.0 |  | 0.077 | 1.18
|  | 0.492 (макс: 1.422) | 65.9 |  | 0.079 | 1.98
| eA | 0.008 | 2.31 |  |  |
| ce | 0.347 | 3.97 | γ | 0.440 | 26.1
Радий-223 (223Ra) | 11.43 дня | α | 5.434 | 2.22 | X | 0.012 | 25
|  | 5.540 | 9.0 |  | 0.081 | 15.3
|  | 5.607 | 25.2 |  | 0.084 | 25.4
|  | 5.716 | 51.6 |  | 0.095 | 11.5
|  | 5.747 | 9.0 |  |  |
| eA | 0.009 | 28 | γ | 0.154 | 5.7
| ce | 0.024 | 7.5 |  | 0.269 | 13.9
|  | 0.046 | 12.7 |  |  |
|  | 0.056 | 18.5 |  |  |
|  | 0.171 | 9.3 |  |  |
Иттербий-175 (175Yb) | 4.185(1) дня | eA | 0.00602 | 6.34 | Х | 0.0530-0.541 | 5.9
| ce | 0.05049 | 7.42 |  |  |
|  | 0.1029 | 1.76 | γ | 0.1138 | 3.87
| β− | 0.0190 | 20.4 |  | 0.2825 | 6.13
|  | 0.1024 | 6.7 |  | 0.3963 | 13.2
|  | 0.1399 | 72.9 |  |  |

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.11.0002 Радиофармацевтические лекарственные препараты для позитронно-эмиссионной томографии

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья устанавливает единые требования к показателям и методам оценки качества радиофармацевтических лекарственных препаратов (РФЛП) для позитронно-эмиссионной томографии (ПЭТ) при экстемпоральном изготовлении, в условиях производственной аптеки с правом изготовления радиофармацевтических лекарственных препаратов, располагающейся непосредственно в медицинской организации, с учетом особенностей, установленных законодательством Российской Федерации в области обеспечения радиационной безопасности. Также для произведенных РФЛП для ПЭТ при помощи стандартизованного процесса производства, имеющих государственную регистрацию на территории Российской Федерации.

Для РФЛП для ПЭТ на основе радионуклидов с периодом полураспада в несколько секунд или минут, испытания контроля качества проводятся когда готовится серия репрезентативная в отношении дальнейших серий, изготавливаемых в рамках определенного рабочего цикла. Испытания проводятся для серии, предназначенной для контроля качества, до выпуска последующих серий, предусмотренных для медицинского применения, т.е. проводятся испытание один раз в день только для первой серии РФЛП для ПЭТ. Для последующих серий контролируются только параметры процесса и показатели качества, отраженные для этих целей в нормативной документации для каждой серии РФЛП, контролируются в рамках производственного контроля.

В рамках настоящей общей фармакопейной статьи, к РФЛП для ПЭТ также относятся РФЛП, применяемые в любых гибридных методах исследований, основанных на совмещении технологий ПЭТ и других видов диагностических исследований в единой системе оборудования или технологической цепочки. К таким гибридным технологиям относятся позитронно-эмиссионная томография, совмещенная с компьютерной томографией или с магнитно-резонансной томографией.

##### Общая характеристика

=Радиофармацевтические лекарственные препараты (РФЛП) для позитронно-эмиссионной томографии (ПЭТ) содержат радионуклиды, которые претерпевают ядерное превращение или радиоактивный распад преимущественно путем эмиссии позитрона. Позитроны аннигилируют при столкновении с электронами, в результате чего образуются два фотона, которые испускаются в почти противоположных направлениях по отношению друг к другу. Каждый фотон обладает энергией 511 кэВ, что означает, что он находится в диапазоне гамма-лучей электромагнитного спектра. Данные радионуклиды используют в целом ряде визуализирующих ПЭТ-исследований в исследовательских, экспериментальных и клинических целях. Радионуклиды для ПЭТ-исследований, как правило, имеют короткий физический период полураспада. К радионуклидам, наиболее широко используемым в ПЭТ относятся такие атомы, как 18F, 11C, 13N , 15O, 62Cu, 64Cu, 68Ga, 82Rb и др.

Большинство радионуклидов для ПЭТ производят на месте использования с помощью ускорителя заряженных частиц (например, циклотрона) или генератора радионуклидов. Циклотрон ускоряет заряженные частицы (протоны, дейтоны и др.) до энергий, достаточных для их взаимодействия с ядрами мишени и протекания ядерных реакций, приводящих к образованию элементов с другим зарядом (Z) и/или массой (A).

В случае ПЭТ, короткое время жизни радионуклидов, в составе РФЛП, накладывает специфические ограничения при их получении и проведении испытаний с ними. Все требования и определения, описанные в данной общей фармакопейной статье (Радиофармацевтические лекарственные препараты для позитронно-эмиссионной томографии) не должны противоречить общей фармакопейной статье ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты». Когда этих различий невозможно избежать, нужно руководствоваться требованиями настоящей статьи.

##### Термины и определения

Аннигиляция – взаимодействие между частицей и её античастицей, при котором обе исчезают.

Бета-распад (β-распад) – ядерный распад, при котором испускается бета-частица (электрон (минус) или позитрон (плюс).

Многодозовая упаковка – первичная упаковка лекарственного препарата, которая позволяет последовательно отбирать дозы лекарственного препарата из общего количества доз, содержащихся в этой упаковке, не изменяя при этом безопасность, концентрацию, качество и микробиологическую чистоту оставшейся части лекарственного препарата;

Позитронно-эмиссионная томография, ПЭТ (двухфотонная эмиссионная томография) – диагностический метод исследования внутренних органов человека, основанный на регистрации пары гамма-квантов, возникающих при аннигиляции позитрона (бета распад (плюс)), входящего в состав радиофармацевтического лекарственного препарата.

Радиофармацевтический лекарственный препарат – лекарственный препарат, содержащий в готовом для применения состоянии один или несколько радионуклидов (радиоактивных изотопов) в качестве действующего вещества или в составе действующего вещества.

Серия – определенное количество РФЛП для ПЭТ с однородными свойствами и качеством (в установленных пределах), которое производится за один производственный цикл.

##### Меры предосторожности

Ионизирующее излучение (ИИ) является опасным для здоровья человека, поэтому необходимо соблюдать рекомендации по мерам предосторожности и пределам уровней воздействия ИИ, установленным национальным законодательством. Действия, связанные с мерами предосторожности, при производстве РФЛП, описаны в ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

##### Отбор образцов для контроля качества

Вся серия РФЛП для ПЭТ может содержаться в одном флаконе. Относительно малый объем серий РФЛП для ПЭТ накладывает определенные ограничения на количество материалов доступных для проведения испытаний контроля качества, при этом образцы для испытаний контроля качества отбираются не из всех флаконов. При отборе образцов для контроля качества РФЛП для ПЭТ должен отбираться достаточный объем препарата для проведения всех необходимых испытаний.

##### Испытания

Испытания проводят в соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты», используя физико-химические (инструментальные методы: спектрофотометрические, масс-спектрометрические, хроматографические и др.) в том числе: ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях», ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография», ОФС «Газовая хроматография», ОФС «Тонкослойная хроматография», и др.; допускается применение других фармакопейных методов анализа. Любые используемые методы (методики) контроля качества РФЛП для ПЭТ подлежат валидации.

##### Описание

В соответствии с требованиями ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

##### Идентификация

Идентификацию выполняют в соответствии с требованиями ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

Определение подлинности по радионуклиду обычно проводят путём сравнения спектра энергии исследуемого образца спектром для стандартного источника радионуклида или с табличными значениями. Коммерческие стандартные образцы должны поставляться с документацией поставщика для обеспечения их надлежащего описания. Описание характеристик и квалификация стандартных образцов должны соответствовать этапу разработки РФЛП для ПЭТ.

Идентификацию радионуклидов проводят:

- по спектру (гамма-, бета- и рентгеновское излучение);

- по слою половинного ослабления (бета-излучение);

- по периоду полураспада (любое излучение), для РФЛП с коротким сроком годности относительно времени, необходимого для предварительных испытаний до выпуска, точное определение периода полураспада в течение времени, соответствующего утроенному значению предполагаемого периода полураспада, нецелесообразно для целей идентификации радионуклидов. В этом случает допускается представление валидационного исследования для обоснования диапазона значений периода полураспада.

##### Осмолярность

Определение показателя «Осмолярность» следует проводить в соответствии с ОФС «Осмолярность» с учётом требований по радиационной безопасности. Для определения осмоляльности могут быть использованы следующие методы: криоскопический, мембранная и паровая осмометрия. В отдельных случаях возможно приведение данных теоретических значений осмолярности после количественного определения вспомогательных веществ.

##### Водородный показатель (pH)

Испытание выполняют в соответствии с ОФС «Ионометрия».

Допускается применение индикаторных тест – полосок с шагом шкалы 0,1–0,25 рН.

##### Радионуклидная чистота и/или радионуклидные примеси

Испытание на радионуклидную чистоту выполняют в соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

Для всех РФЛП для ПЭТ проводят измерение радионуклидной чистоты распавшихся образцов, чтобы оценить присутствие долгоживущих радионуклидов, которые получают в мишенном устройстве ускорительного комплекса. Определение проводится при смене мишени, после длительной остановки циклотрона, при поступлении новой партии мишенного материала.

##### Радиохимическая чистота и/или радиохимические примеси

Испытание на радиохимическую чистоту и радиохимические примеси выполняют в соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты». Испытания в данном разделе должны подтвердить присутствие рассматриваемого радионуклида в предполагаемой химической форме. Определение проводится методами: ВЭЖХ, Высокоэффективная жидкостная хроматография (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») с детекторами по радиоактивности, ТСХ, Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография») с детекторами по радиоактивности в каждой серии лекарственного препарата. В случае, если РФЛП содержит аминокислоту или другое соединение, имеющее энантиомеры, определяется энантиомерная чистота (хиральная ВЭЖХ).

##### Химические примеси

Испытание на содержание химических примесей, остаточных количеств реактивов и/или предшественников, а также побочных продуктов выполняют в соответствии с требованиями ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты». В фармакопейной статье должно быть указано какие химические примеси определяют в каждой серии.

##### Остаточные органические растворители

Содержание остаточных растворителей нормируют в соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители». Газовая хроматография (ОФС «Газовая хроматография») как правило, используется для количественного определения остаточных растворителей. Для РФЛП с коротким сроком годности по сравнению с временем, необходимым для проведения испытаний до выпуска их в обращение, вводят указание «Допускается выпуск лекарственного препарата к применению до завершения испытания». Основными типами детекторов являются пламенно-ионизационный и детектор по теплопроводности. Кроме того, для ГХ-анализа могут использоваться детекторы радиоактивного излучения.

##### Бактериальные эндотоксины или пирогенность

Испытание выполняют в соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

##### Активность или объемная (удельная, молярная) активность

Испытание на активность или объемную активность выполняют в соответствии с требованиями ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

##### Стерильность

Испытания на стерильность должны выполняться для оценки качества РФЛП для ПЭТ, предназначенных для парентерального применения. Испытание выполняют в соответствии с ОФС «Стерильность».

##### Хранение

Хранение должно осуществляться в соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

##### Упаковка

В соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

##### Маркировка

В соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты» и ОФС «Маркировка лекарственных средств».

При необходимости дополнительную информацию указывают в фармакопейной статье.

В связи с аспектами, связанными с возможным облучением, общей практикой является подготовка большей части маркировки заблаговременно. Например, ещё до фильтрации радиоактивного продукта на пустой флакон может быть предварительно нанесена этикетка, содержащая часть информации (например, наименование продукта, номер серии, дата), а после завершения испытаний, на наружный защитный контейнер может быть добавлена дополнительная этикетка с требуемой информацией (например, активностью препарата).

##### Перевозка

Перевозка РФЛП выполняется в соответствии с действующими правилами безопасности при транспортировании радиоактивных веществ и ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

##### Срок годности

В соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

##### Результаты, не соответствующие спецификации

Если результаты испытания в рамках контроля качества не соответствуют спецификациям, необходимо провести расследование с целью определения источника несоответствия: аналитической ошибки (ложноположительный результат) или ненадлежащего качества препарата. В связи с коротким периодом полураспада радионуклидов в РФЛП для ПЭТ может оказаться невозможным проведение расследований традиционным для испытательных лабораторий образом.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.11.0003 Обнаружение и измерение радиоактивности

Вводится впервые

Радиоактивность – свойство некоторых нуклидов подвергаться радиоактивному распаду. Радионуклиды можно идентифицировать по их эмиссионному спектру. Каждый тип излучения требует специального оборудования для получения соответствующего спектра излучения.

##### Область применения

В частных фармакопейных статьях на радиофармацевтические лекарственные средства обнаружение и измерение радиоактивности проводят с различными целями: подтверждение характеристик, идентификация/установление подлинности по радионуклиду, определение радиоактивности вещества/ активности или объёмной активности (количественное определение), определение радионуклидной и радиохимической чистоты и др.

##### Основы метода

В соответствии с радионуклидным составом радиоактивные источники могут испускать различные типы излучений с определёнными значениями энергий и относительных интенсивностей, такие как: альфа-частицы, бета-частицы (отрицательно заряженные, обычно называемые электронами или положительно заряженные, обычно называемые позитронами), гамма- и рентгеновское излучение. Подобные излучения могут быть обнаружены без дальнейшего определения их характеристик в ионизационной камере в результате проявления ионизирующих свойств. Детальный спектральный анализ с использованием спектрометра применяют для идентификации радионуклидов, присутствующих в образце. Методы, используемые для обнаружения и измерения радиоактивности, зависят от природы и энергии испускаемого излучения. Измерение радиоактивности осуществляется путём подсчёта числа обнаруженных явлений распада (эмиссий) и может быть осуществлено автономно (например, с использованием ионизационной камеры или спектрометра) или в комбинации с другими методами, например методом разделения (радиохроматография) для расчёта относительных вкладов различных радиоактивных химических форм, присутствующих в смеси.

##### Детекторы ионизирующих излучений

Детекторами ионизирующих излучений называют устройства, предназначенные для обнаружения излучений и частиц, определения состава излучения и измерения его энергетического спектра. Для обнаружения и измерения радиоактивности используют: газоразрядные, твёрдотельные (полимерные флуоресцентные и кристаллические сцинтилляторы) и сцинтилляционные детекторы.

Газоразрядные детекторы (ионизационная камера). В основе работы газоразрядных детекторов, которые также называют ионизационными, лежит измерение силы ионного тока, пропорционального количеству образовавшихся ионов, возникающих при ионизации газа под действием на него излучения от радиоактивного источника. Для этого к электродам, находящимся в ионизационной камере заполненной газом, прикладывают постоянное электрическое поле. После чего измеряют результирующий ионный ток, возникающий между электродами при ионизации газа под действием излучения от радиоактивного источника, и соотносят его с радиоактивностью в ионизационной камере. Прикладываемое напряжение, энергия, интенсивность излучения, природа и давление газа оказывают влияние на ионизационный ток. Ионизационная камера измеряет только результирующий ток, возникающий в итоге ионизации внутри камеры, и не может различать излучения различных радионуклидов. Прибор в большинстве случаев может измерять радиоактивность от нескольких десятков кБк до сотен ГБк.

Прибор. Ионизационная камера (включая калибраторы дозы) состоит из плотно закрытой камеры с колодцем и встроенным компьютерным оборудованием для преобразования сигнала детектора в единицы радиоактивности. Ионизационная камера должна быть экранирована для минимизации фоновых сигналов до приемлемого уровня.

Калибровка. Ионизационную камеру калибруют с учётом формы, размеров, материала первичной упаковки, объёма и состава раствора, положения внутри камеры измеряемого радионуклида. Значения пределов неопределенности при калибровке можно найти в государственных (национальных) или международных нормативных документах.

Калибровка осуществляется не менее одного раза в год, используя радионуклидные источники, соответствующие государственным (национальным) или международным стандартам, в первичной упаковке (флакон, шприц), подходящей по геометрии. Устанавливают и применяют дополнительные поправочные коэффициенты для учёта различия в конфигурациях образцов измеряемых радионуклидов. Выполняют контроль линейности сигнала прибора в пределах всего диапазона значений энергии и активности, для измерения которых применяется данное оборудование.

Для подтверждения калиброванного состояния ионизационной камеры для каждой установки параметра и перед каждым применением (как минимум один раз в день применения) проводят проверку стабильности ионизационной камеры с использованием стандартных радионуклидных источников с длительным периодом полураспада.

Для получения наиболее правильных результатов измерения активности образца и калибровочного источника должны быть проведены в абсолютно идентичной геометрии. При необходимости доводят объём радиофармацевтического лекарственного средства, радиоактивность которого необходимо измерить, до объёма калибровочного источника.

В день применения ионизационной камеры для подтверждения калибровки должна выполняться проверка на соответствие источнику сравнения, например, цезию-137. Для точного измерения радиоактивности отдельного радионуклида в измерение должны быть внесены поправки на вклады в ионизационный ток примесей радионуклидов, присутствующих в лекарственном препарате. Измеряемые уровни активности зависят от насыщения, диапазона усилителя и конструкции камеры.

Установки прибора (фактор калибровки) могут быть отрегулированы для создания прямой зависимости между ионизацией в результате излучения конкретного радионуклида и значением радиоактивности, полученным для каждой геометрии измерения.

Для точного измерения радиоактивности отдельного радионуклида в измерение должны быть внесены поправки на вклады в ионизационный ток примесей радионуклидов, присутствующих в лекарственном препарате. Измеряемые уровни активности зависят от насыщения, диапазона усилителя и конструкции камеры.

Метод. Образец размещают внутри колодца ионизационной камеры в заданном положении, используя держатель. После помещения образца в ионизационную камеру и достижения стабильного сигнала регистрируют значение активности.

Твёрдотельные детекторы

Полимерные и кристаллические сцинтилляционные детекторы. В связи с их высокой чувствительностью применяют при счёте низких уровней радиоактивности.

Полупроводниковый детектор. Используется для гамма- и рентгеновской спектрометрии, а так же при необходимости более точного измерения в случае измерения радиоактивности смесей радионуклидов или если предполагаемые примесные радионуклиды имеют близкие значения энергии излучения. Представляет собой ионизационную камеру, чувствительный объём которой является твёрдым телом – полупроводниковым кристаллом. Наиболее распространены детекторы из кристаллов кремния и германия. Малый размер по сравнению с газовыми камерами и сцинтилляторами является основным преимуществом данного вида детекторов.

Сцинтилляционный детектор. Сцинтилляционный метод регистрации излучений основан на регистрации вспышек света, возникающих при попадании на вещество (сцинтиллятор) ионизирующих излучений. Может применяться для измерения радиоактивности в динамическом режиме, например, в случае, когда элюат из жидкостного хроматографа направляется над детектором или через него. Основные свойства сцинтилляторов определяются механизмом возбуждения и высвечивания. В качестве сцинтилляторов используются различные вещества: органические (кристаллы, пластики или жидкости), газы и неорганические кристаллы (CsI, ZnS, NaI и стекла). При взаимодействии со сцинтиллятором ионизирующие излучения вызывают его видимую люминесценцию. С помощью фотоэлектронного умножителя световые сигналы пропорционально преобразуются в электрические и обрабатываются с помощью электроизмерительной техники.

Прибор. Сцинтилляционные детекторы состоят из сцинтиллятора и чувствительного фотоэлектрического устройства (фотоэлектронного умножителя). В детекторах небольших размеров сцинтилляторы наносятся непосредственно на катод фотоэлектронного умножителя. В ряде случаев между сцинтиллятором и фотокатодом помещают световод. Система может иметь регулируемое энергетическое окно для выбора, при необходимости, требуемого для счёта диапазона в спектре энергий. Измерительные приборы имеют различные параметры разрешения по энергии и эффективности обнаружения, зависящие от типа детектора, его объёмных и геометрических характеристик. Чем меньше эффективность, тем больше необходимое время счёта.

Калибровка. Калибровка детектора должна осуществляться измерением его эффективности с использованием радионуклидного источника, соответствующего государственным (национальным) или международным стандартам. При калибровке, исходя из эффективности, используют такие источники, как цезий-137, кобальт-60, барий-133 и другие, в соответствии с необходимым диапазоном значений энергии.

Метод. Необходимо удостовериться, что радиоактивность образца находится в диапазоне линейности оборудования. Измерение начинают после того, как все защитные экраны находятся на месте или крышка колодца возвращена в исходное положение и время счёта выбрано таким образом, чтобы получить число импульсов, достаточное для проведения необходимой статистической обработки. Измеряемые образцы должны быть помещены перед детектором или внутрь колодца детектора. Камеры измерения могут быть закрыты устройством для экранирования детектора, а введение образцов по отдельности может осуществляться с использованием крышки или других систем, позволяющих размещать образцы в определённом положении для обеспечения правильной геометрии измерения.

Жидкостной сцинтилляционный детектор. Жидкостные сцинтилляционные детекторы позволяют регистрировать все виды радиоактивного излучения.

Калибровка. Для учёта потери эффективности счёта в связи с поглощением жидкостной сцинтилляционный счётчик может использовать внешний источник, обычно барий-133 или европий-152, который подносится близко к флакону с образцом для высвобождения электронов Комптона. Форму результирующего спектра анализируют автоматически для вычисления параметра, характеризующего поглощение. Затем этот параметр может иметь отношение к источникам измерения эффективности счёта с известной активностью при определённом содержании поглотителя. Полученная кривая поглощения позволяет определить активность неизвестного образца при известных значениях скорости счёта и параметра поглощения.

Метод. Образец растворяется или суспендируется в жидкой сцинтилляционной смеси в прозрачных или полупрозрачных (стеклянных или полимерных) ёмкостях и далее ведётся подсчёт электрических импульсов, образованных с помощью фотоумножителя из излучаемого света. Жидкую сцинтилляционную смесь выбирают таким образом, чтобы минимизировать ошибки счёта вследствие поглощения, хемилюминесценции, фосфоресценции и т.д.

##### Спектрометрия

Радионуклиды могут быть идентифицированы по их спектру излучений. Получение спектра каждого типа излучений (например, альфа-частицы, бета-частицы и электроны, гамма- и рентгеновское излучения) требует определенного оборудования.

Гамма-спектрометрия. В гамма-спектрометрии с использованием сцинтилляционного детектора поглощение гамма- и рентгеновского излучения приводит к образованию света, который преобразуется с помощью фотоумножителя в электрический импульс.

В гамма-спектрометрии с использованием полупроводникового детектора поглощение гамма- и рентгеновского излучения приводит к незамедлительному образованию электрического импульса.

В обоих случаях амплитуда импульса пропорциональна энергии поглощенного излучения. Наиболее распространёнными детекторами для гамма- и рентгеновской спектрометрии являются сцинтилляционные счётчики на основе активированного таллием натрия йодида (NaI(Tl)) и полупроводниковые детекторы на основе высокочистого германия (HPGe).

Спектр гамма-излучения может быть образован при получении и анализе достаточного числа импульсов.

Прибор. Гамма-спектрометр обычно содержит экранированную измерительную камеру, в которую помещают образец, детектор, электрическую цепь и многоканальный анализатор.

Экранирование камеры должно уменьшать фоновый сигнал до уровня, позволяющего осуществлять регистрацию правильного спектра гамма-излучения. Измерительная камера имеет подвижную крышку или выдвижной ящик, позволяющие разместить образец. Может применяться держатель образца для обеспечения воспроизводимости геометрии между измерениями.

Продолжительность измерения зависит от радиоактивности конкретного радионуклида, и для достижения необходимой статистики счёта может потребоваться длительный период получения результата. Должны быть тщательно рассмотрены потери на мёртвое время для данного типа детектора.

Чувствительность детектора на основе NaI(Tl) выше, чем у германиевого детектора аналогичного размера. Обычно пики на спектре значений энергии идентифицируют с неопределенностью в зависимости от значений ширины пика на половине его высоты. Разрешение по энергии сцинтилляционного твёрдотельного детектора намного хуже, чем для полупроводникового детектора и, следовательно, пики, полученные при использовании полупроводникового детектора, намного уже, чем в случае применения сцинтилляционного детектора. Различные характеристики детекторов на основе NaI(Tl) и HPGe могут ограничивать их применение в некоторых спектрометрических анализах. Для идентификации радионуклида (ов) в РФЛП и определения радионуклидной чистоты оценка риска процесса производства радионуклида должна включать в себя оценку возможного присутствия других радионуклидов со значениями энергии фотонов в диапазоне (±10 %), характерными также и для радионуклида(ов), присутствующего(их) в радиофармацевтическом лекарственном средстве.

В случае присутствия радионуклидных примесей, которые испускают гамма- или рентгеновское излучения с энергией в диапазоне значений, также характерном и для фотонов, испускаемых радионуклидом лекарственного препарата, для идентификации пика достаточной является измеренная энергия пика, находящаяся в пределах максимального интервала значений ±2 кэВ или ±2 % (тот пик, который больше) по отношению к номинальной энергии пика. В случае если не предполагается присутствие таких примесей, для идентификации пика приемлемым является максимальный интервал ±10 кэВ или ±6 % (тот пик, который больше) по отношению к номинальной энергии пика.

Пробоподготовка. Необходимо обеспечить, чтобы скорость счёта образца находилась в пределах диапазона линейности оборудования. Для жидких образцов этого можно достичь с помощью соответствующего разбавления; для твёрдых образцов – изменением расстояния между источником и детектором или применением растворителя.

Необходимо обеспечить, чтобы контейнер, применяемый для количественных измерений, был идентичен по форме, размерам, объёму и материалу контейнеру с калибровочным стандартом.

Необходимо обеспечить идентичность радионуклидного состава образца (по энергиям) в контейнере и его положения в измерительной камере контейнеру с калибровочным стандартом для количественного определения.

При измерении образец должен преимущественно находиться в первичной упаковке и занимать определённое положение по отношению к детектору. В этом случае геометрия образец/детектор определяется положением образца относительно детектора и характеристиками контейнера и образца, например, формой, объёмом и плотностью.

Калибровка. Калибруют спектрометр по эффективности и энергии. Калибровка по энергии осуществляется с использованием пиков известных источников, соответствующих государственным (национальным) или международным стандартам, например, кобальта-57, цезия-137, кобальта-60 и других, имеющих необходимый диапазон энергий. Параллельно может быть проведена калибровка по эффективности с целью получения не только спектра значений энергии, но в дальнейшем также и значений активности образца и радионуклидных примесей. Калибровка по эффективности может выполняться с применением стандартного радионуклидного источника с соответствующим диапазоном спектра энергий. Для получения кривой эффективности измерение сигнала детектора как функции энергии, должно проводиться в определённой геометрии образец/детектор. В связи с этим возможно проводить измерение с помощью стандартного эталонного источника. Стандартные эталонные источники могут быть неподходящими для радионуклидов с коротким периодом полураспада, например, некоторых излучателей позитронов.

Метод. Испытуемый лекарственный препарат в первичной упаковке вносят в камеру измерительного оборудования и снимают спектр. Образец размещают близко к детектору или внутри детектора с колодцем. Все результаты в пределах диапазона заданных значений энергии собирают и выводят на дисплей измерителя скорости в виде числа импульсов в секунду или накапливают в течение заданного периода времени. В случае достаточного различия значений энергии фотонов, испускаемых радионуклидом(ами), может использоваться детектор на основе натрия йодида при установлении его высокой чувствительности. Однако при необходимости установления различия излучений со сходными значениями энергии следует применять детектор на основе HPGe или другой полупроводниковый детектор.

Идентификация / установление подлинности по радионуклиду. Калибруют спектрометр по энергии. Установление соответствия энергии пиков, обнаруженных для образца, значениям энергии, указанным в частной фармакопейной статье, подтверждает подлинность радионуклида в испытании.

Радионуклидная чистота. Определяют предел количественного определения (ПКО) и разрешение измерительного оборудования. Полученные значения должны соответствовать предельным содержаниям определяемых радионуклидов. Снимают спектр радиофармацевтического лекарственного средства.

Идентифицируют радионуклиды, присутствующие в испытуемом радиофармацевтическом лекарственном средстве, и определяют их радиоактивность (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»). В связи с тем, что содержание радионуклидных примесей, выраженное в процентах от общей активности, может возрастать или уменьшаться со временем, измеренная активность каждой примеси должна пересчитываться на активность на начало и конец срока годности лекарственного препарата. Активности всех радионуклидных примесей необходимо суммировать (принимая во внимание предел количественного определения) для получения общей активности радиофармацевтического лекарственного средства.

Бета-спектрометрия. Бета-спектрометр аналогичен гамма-спектрометру, но в нём часто используется жидкостной сцинтиллятор для преобразования энергии бета-частиц в свет, который можно обнаружить и затем проанализировать.

Калибровка. Общепринятым методом калибровки по энергии является применение непоглощающего образца сравнения для определения максимального значения энергии бета-частиц, испускаемых определяемым радионуклидом.

Метод. Бета-спектрометрия заключается преимущественно в растворении или суспендировании образца в жидкой сцинтилляционной смеси в прозрачных или полупрозрачных (стеклянных или полимерных) ёмкостях и последующем счёте электрических импульсов, образованных с помощью фотоумножителя из излучаемого света. Амплитуда импульса зависит от энергии поглощённого излучения. Спектр бета-частиц может быть получен при образовании достаточного числа импульсов. Жидкую сцинтилляционную смесь выбирают таким образом, чтобы минимизировать ошибки счёта вследствие поглощения, хемилюминесценции, фосфоресценции и т.д. Счёт совпадений при использовании двух или более фотоумножителей также используют для минимизации числа импульсов, к которым приводят фоновое излучение, электронные эффекты и т.д. Для выявления различия между эмиссиями альфа- и бета- частиц обычно дифференцируют импульсы по форме. Идентификация радионуклида. Установление соответствия на спектре энергии средних и/или максимальных значений энергии, полученных для образца, значениям энергии, указанным в частной фармакопейной статье, подтверждает подлинность радионуклида в испытании.

Альфа-спектрометрия. Для идентификации и количественного определения альфа-излучателей чаще всего применяют спектрометрию с использованием жидкостного сцинтилляционного детектора. Так же для идентификации и определения радионуклидной чистоты альфа-излучателей может применяться спектрометрия с использованием полупроводникового детектора на кремниевых диодах. При использовании такого детектора поглощение альфа-частиц приводит к незамедлительному образованию электрического импульса. Движение электронно-дырочных пар, образованных при воздействии излучения, индуцирует электрический заряд, который усиливают и измеряют.

Пробоподготовка. Подготовка образца является исключительно важной. После химического отделения определяемого радионуклида образец наносится как электролитическое покрытие на диск из нержавеющей стали в виде очень тонкого слоя вещества для минимизации собственной абсорбции. Результативность всей процедуры может определяться экспериментально с добавлением известного количества индикатора, который должен учитывать эффективность разделения, эффективность нанесения электролитического покрытия и эффективность счёта.

Для обоих типов детекторов амплитуда импульса зависит от энергии поглощенного излучения. Спектр альфа-частиц может быть получен при образовании достаточного количества импульсов.

Калибровка. Альфа-спектрометр должен быть откалиброван по энергии и эффективности. Калибровка осуществляется с использованием пиков известных источников, имеющих необходимый диапазон значений энергии, таких как америций-241 и плутоний-242. Не все альфа-частицы, испускаемые источником, будут образовывать импульс в системе. Вероятность того, что испускаемые альфа-частицы будут взаимодействовать с материалом детектора и образовывать импульс, характеризует эффективность детектора, зависящую от геометрии.

Идентификация/установление подлинности по радионуклиду. Установление соответствия энергии пиков, обнаруженных для образца, значениям энергии, указанным в частной фармакопейной статье, подтверждает подлинность радионуклида в испытании.

Обнаружение и измерение радиоактивности в сочетании с физико-химическими методами разделения.

Радиофармацевтическое лекарственное средство может содержать радионуклид в различных химических формах, отличных от необходимой. Поэтому следует разделить различные вещества, содержащие радионуклид, и определить их относительную радиоактивность. Для этого приборы для обнаружения и измерения радиоактивности используют в сочетании с физико-химическими методами разделения. В принципе может быть использован любой метод разделения.

Частные фармакопейные статьи на радиофармацевтические лекарственные средства могут включать совместное применение метода измерения радиоактивности и методов хроматографии на бумаге (ОФС «Хроматография на бумаге»), тонкослойной хроматографии (ОФС «Тонкослойная хроматография»), газовой хроматографии (ОФС «Газовая хроматография»), высокоэффективной жидкостной хроматографии (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»), эксклюзионной хроматографии (ОФС «Эксклюзионная хроматография») или электрофореза (ОФС «Электрофорез») и др. Во всех случаях активность каждого анализируемого образца измеряют после разделения, проведённого указанным методом. Измерение активности может выполняться с применением детекторов, смонтированных последовательно с другими детекторами в аналитических измерительных приборах, например, жидкостных хроматографах с осуществлением поточного («in-line») обнаружения радиоактивности испытуемых образцов, или выполняться автономно («off-line»), то есть после завершения аналитического разделения путём измерения активности фракций элюата, полученных после разделения с помощью жидкостной хроматографии или в виде распределения по активности на полосках (пластинах) в бумажной или тонкослойной хроматографии.

Непрерывное («in-line») обнаружение и измерение радиоактивности в сочетании с жидкостной хроматографией. Высокоэффективная жидкостная хроматография (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») может применяться для отделения основного радиоактивного вещества радиофармацевтического лекарственного средства от радиохимических примесей или продуктов деградации.

Прибор. Непрерывное («in-line») обнаружение обычно проводят с помощью проточного сцинтилляционного детектора, соединённого с измерителем скорости и регистрирующим устройством. Часть трубки, через которую движется элюат, содержащий радиоактивные компоненты, помещается перед детектором или внутри него. Эффективность счёта можно повысить, используя более длинную часть трубки (например, осуществляя многократные повороты перед детектором или внутри него); однако это будет уменьшать способность системы к разделению двух близко расположенных элюируемых пиков радиоактивности. Одновременное использование детектора радиоактивного излучения и других детекторов (ультрафиолетового, рефрактометрического, кондуктометрического и т.д.), соединённых последовательно, может применяться для идентификации вещества, например, по времени удерживания известного стандарта, для определения количества вещества с использованием подходящего стандартного образца и для измерения радиоактивности данного вещества. При последовательном соединении разных детекторов необходимо откорректировать экспериментально полученные значения времени удерживания с учётом задержки во времени между детекторами. Сцинтилляционный материал детектора выбирают, исходя из типа обнаруживаемого излучения, например, полимерный сцинтиллятор – для бета-частиц или сцинтилляционные кристаллы – для гамма- и рентгеновского излучений. Для обнаружения в потоке радионуклидов, испускающих бета-частицы, может также использоваться добавление жидкой сцинтилляционной смеси перед достижением элюатом детектора.

Предварительную калибровку прибора и измерения проводят в соответствии с инструкцией к прибору.

Метод. Образец разбавляют при необходимости и затем вносят в колонку в указанном объёме и при указанных условиях. В данном случае важно подтвердить предел обнаружения (ПО), предел количественного определения (ПКО), а также линейность детектора в пределах всего диапазона измеряемых значений активности. Сигнал детекторов регистрируют как функцию времени.

Идентификация пиков по радиометрическому сигналу (радиохроматограмма) осуществляют на основании времени удерживания анализируемых образцов. Для этой цели может быть использован профиль, полученный с помощью других детекторов.

Количественное определение различных компонентов профилей хроматограммы и радиохроматограммы проводят, исходя из площадей пиков. Площади пиков обычно получают непосредственным интегрированием сигнала детектора с использованием коммерчески доступного программного обеспечения.

Автономное («off-line») обнаружение и измерение радиоактивности. Высокоэффективная жидкостная хроматография (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). При условии воспроизводимой последовательности времён удерживания различных радиохимических веществ применяется альтернативный метод количественного определения радиоактивности, заключающийся в сборе элюата в жидкостной хроматографии в виде выходящих во времени порций (фракций) для автономного (off-line) определения радиоактивности. Радиоактивность фракций, соответствующих пикам, может быть выражена в виде относительной части в процентах от общей радиоактивности всех фракций с учётом предела количественного определения.

Прибор. Обычно содержит детектор радиоактивности, например, позиционно-чувствительный пропорциональный счётчик или коллимированный сцинтилляционный детектор, размещённый на фиксированном расстоянии от платформы, на которой располагается сканируемая хроматографическая пластина (полоска). Радиоактивность образца, наносимого на хроматографическую полоску, должна быть такой, чтобы значение скорости счёта находилось в диапазоне линейности измерительного оборудования, поэтому при необходимости образец может быть разбавлен. Сканируемая область размещается в соответствующем положении таким образом, чтобы необходимая полоса находилась на одной линии с траекторией сканирования детектора. Необходимо откорректировать время сканирования для обеспечения достаточного времени счёта в течение единичного анализа.

Детектор или платформа могут перемещаться в плоскости вдоль оси x или оси y таким образом, чтобы вся поверхность полностью была просканирована в течение одного анализа.

Детектор соединяется с соответствующим счётным устройством, чтобы можно было провести количественное измерение детектируемой радиоактивности и соотнести пространственно скорость счёта со сканируемой поверхностью.

Протокол с результатами измерения радиоактивности по отношению к пройденному детектором расстоянию выводится автоматически, а профиль содержит пики с площадью, пропорциональной числу импульсов на единицу расстояния.

Предварительную калибровку и измерения проводят в соответствии с инструкцией к прибору.

Метод. Образец вносят в колонку в указанном объёме и при указанных условиях. Фракции собирают на конечной стадии хроматографирования.

Измеряют объём между детектором, используемым для идентификации времени удерживания пиков, и местом сбора фракций, а фактор удерживания рассчитывают на основании скорости потока элюата и используют для оценки времени элюирования для каждого пика в месте сбора. Фракции собирают с учётом фиксированного интервала времени или в момент выхода, определённый исходя из времени удерживания таким образом, чтобы любой из рассматриваемых пиков относился к одной или более фракциям.

Радиоактивность каждой фракции измеряют с использованием калиброванного средства измерения, например, калибратора доз или сцинтилляционного детектора, с учётом предела количественного определения и линейности.

Профиль элюирования получают в результате графической обработки данных таблицы, в которой количество импульсов, соответствующее одной фракции, вносится напротив времени элюирования или объёма. Для определения радиохимической чистоты значения активности фракций, относящихся к одному и тому же пику, суммируют и рассчитывают относительное процентное содержание.

Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»). и хроматография на бумаге (ОФС «Хроматография на бумаге»). При условии проведения валидации методик тонкослойной хроматографии или бумажной хроматографии для разделения компонентов радиоактивного препарата число и относительная интенсивность разделённых пятен могут обнаруживаться и измеряться с использованием детектора радиоактивности.

Расположение пятен (пиков) дает возможность провести химическую идентификацию при сравнении с растворами этих же химических веществ (нерадиоактивных), используя соответствующий метод детектирования.

Счётчик радиоактивности. В случае если необходимо идентифицировать не более трёх полностью разделённых радиохимических компонентов, пластина (полоска) может быть разрезана на равные участки, каждый из которых имеет размер, не превышающий половину длины пластины (полоски) в соответствии с различием факторов разделения (Rf) двух наиболее близко расположенных пятен. Каждый отдельный участок нумеруют от начального края и подвергают счёту по отдельности. С другой стороны, для хорошо характеризуемых систем полоска может быть разрезана на две или более неравные части, размеры которых перед счётом, при необходимости, могут быть откорректированы. Для измерений могут быть использованы ионизационная камера или сцинтилляционный счётчик при условии их применения в пределах диапазона линейности измерительного оборудования и свыше его ПКО. Предварительную калибровку и измерения проводят в соответствии с инструкцией к прибору.

Авторадиография. Авторадиография также может быть использована для получения изображения распределения радиоактивности на хроматографической полоске. В этом случае необходимо показать, что сигнал системы, применяемой для получения изображения, например, люминофорной системы формирования изображения или фотоплёнки, является линейным по отношению к радиоактивности, представленной на хроматограмме. В ином случае систему необходимо калибровать повторно или параллельно подвергнуть действию серии радиоактивных источников сравнения, полученной разбавлением калибровочного стандартного раствора в диапазоне предполагаемых значений радиоактивности компонентов, которые могут присутствовать на подложке.

Калибровка. Подтверждение пределов обнаружения и количественного определения, а также линейности детектора во всем диапазоне измеряемых значений активности и для всех положений на подложке хроматографической системы имеет важное значение. С этой целью применяют образцы со значениями активности от 0,1 % до 100 % от предполагаемого диапазона. Образцы готовят разбавлением и применяют их равные объёмы, высушивая при необходимости. После получения профиля радиоактивности с использованием стандартного измерительного оборудования, площади пиков интегрируют для сравнения с рассчитанным количеством радиоактивности каждого пятна. Контролируют, чтобы чувствительность детектора на всей поверхности измерений была одинакова, так как она может отличаться в зависимости от положения детектора.

На разрешение пиков влияют размер пятна, общая радиоактивность радионуклида и технические возможности детектора. Это может быть проверено при нанесении пятен объёмом 5 мкл, разделённых расстоянием, возрастающим от 4 мм до 20 мм, и с шагом 2 мм. Приблизительное разрешение системы обнаружения может определяться, исходя из профиля радиоактивности, как расстояние между двумя пятнами, где базовая линия является чётко выделенной. Предварительную калибровку и измерения проводят в соответствии с инструкцией к прибору.

Метод. Помещают необходимое количество образца на стартовую линию хроматографической полоски, высушивая, при необходимости, во избежание расплывания пятна. Хроматографирование осуществляют согласно указанному методу. Допускается использование носителя, если указано в частной фармакопейной статье.

В бумажной и тонкослойной хроматографии предпочтительно не разбавлять испытуемый лекарственный препарат, но важно избегать нанесения вещества с таким количеством радиоактивности, которое в процессе её измерения обусловливает потери при счёте в связи с совпадениями (потери на мёртвое время).

После разделения полоску высушивают и определяют расположение радиоактивных участков путём измерения радиоактивности на протяжении всей хроматограммы, используя соответствующий коллимированный счётчик, с помощью авторадиографии или разрезанием полосок на части и измерением радиоактивности каждой части.

Суммарная радиоактивность может быть определена путём интегрирования с использованием автоматизированного измерительного прибора или счётчика с цифровой индикацией.

Из отношения площадей пиков получают отношение значений радиоактивности в процентах для соответствующих радиоактивных веществ.

Если полоски разрезаются на части, из отношения измеренных значений радиоактивности определяют отношение значений радиоактивности в процентах для соответствующих радиоактивных веществ.

##### Факторы, влияющие на точность измерений

Геометрия образца в процессе измерения радиоактивности и время измерения оказывают сильное влияние на результат. В общем случае геометрия измерения должна соответствовать геометрии при калибровке, а время измерения должно быть достаточно длительным для получения статистически достоверных данных.

Потери на мёртвое время. В связи с ограниченным временем разрешения (мёртвое время) детектора и соединённого с ним электронного оборудования может быть необходимым внесение поправок на потери при совпадениях. Время разрешения счётчика представляет собой минимальный временной интервал, необходимый счётчику для разрешения двух отдельно регистрируемых импульсов. Эпизодические явления излучения в более короткие интервалы времени могут не обнаруживаться или обнаруживаться как отдельное явление с суммарной энергией. Эти потери иногда называются «потерями на мёртвое время». Для подсчитывающей системы с фиксированным мёртвым временем истинную скорость счёта, c-1, рассчитывают по следующей формуле:

(1)

где N1 – наблюдаемая скорость счёта в секунду;
τ – мёртвое время в секундах.

Некоторые приборы вносят данную поправку автоматически. Внесение поправок на потери, вызванные совпадениями, должно быть сделано перед поправками на фоновое излучение.

Поправки на распад, происходящий в процессе измерения. Если период времени для отдельного измерения (tm) не настолько мал, что им можно пренебречь по сравнению с периодом полураспада радионуклида T1/2, необходимо учитывать распад, происходящий в процессе измерения. Например, 5 % суммарных потерь при счёте вследствие распада в течение периода измерения составляет 15 % от периода полураспада радионуклида.

Показание прибора (скорость счёта, ионизационный ток и т.д.), откорректированное с учётом фоновых сигналов и при необходимости потерь, вызванных электронными эффектами, на начало отдельного измерения рассчитывают по следующей формуле:

(2)

где R – показание прибора перед внесением поправки на распад, но после поправки на фоновый сигнал и т.д.;
e – основание натурального логарифма;
λ – константа распада радионуклида (ln 2/T1/2);
tm – продолжительность измерения.

##### Статистика измерения радиоактивности

Различия в результатах определений радиоактивности происходят, главным образом, из хаотичной природы ядерных превращений. С помощью счёта при любом ограниченном периоде времени можно только оценить истинную скорость ядерных превращений. Для компенсации различий в числе превращений за период времени должно регистрироваться достаточное количество импульсов. В случае измерения радиоактивности стандартное отклонение зарегистрированных импульсов равно корню квадратному из числа этих импульсов. Таким образом, для получения относительного стандартного отклонения, не превышающего 1 %, необходимо не менее 10 000 импульсов.

##### Линейность

Линейность измерительного прибора представляет собой диапазон значений радиоактивности конкретного радионуклида, в пределах которого его эффективность остается постоянной.

Линейный диапазон значений совокупного измерения радиоактивности может быть определён при повторном счёте для радиоактивного образца в условиях фиксированной геометрии, так как радионуклид образца распадается, начиная с уровня значений активности, превышающего линейный диапазон. После внесения поправок на фоновый сигнал строят график зависимости натурального логарифма значений скорости счёта от времени, прошедшего после первого измерения (Рис. 1).

Рисунок 1. График зависимости измеренной и экстраполированной скорости счёта (натуральный логарифм числа импульсов в секунду (ln cps)) при использовании источника, содержащего технеций-99м, от времени, начиная с уровня значений радиоактивности, превышающих линейный диапазон измерительного оборудования.

Линейный регрессионный анализ центральной линейной части совокупности данных приводит к наклону кривой, который равен постоянной распада λ , имеющей характерное значение для каждого радионуклида:

(3)

где c – натуральный логарифм скорости счёта при t = 0 измерительного прибора, имеющего идеальную линейность.

Итоговое уравнение регрессии используют для расчёта теоретической скорости счёта при каждом значении времени, при котором были зарегистрированы текущие показания прибора. Линейный диапазон измерительного оборудования является превышенным в случае, если отклонение измеренной скорости счёта от теоретической неприемлемо высокое.

С другой стороны, может быть произведён ряд разбавлений раствора радиоактивного вещества с известной радиоактивностью. Затем отмеряют равные объёмы каждого разбавленного раствора и подвергают счёту с использованием стандартизованных геометрии и комплектации счетчика. Отношение скорости счёта для каждого образца (после поправки на фоновые сигналы и распад) к рассчитанной радиоактивности соответствующего образца в Бк представляет собой эффективность счёта. Диапазон, в пределах которого это отношение имеет постоянное значение, является диапазоном измерительного оборудования, подходящим для данного радионуклида.

##### Предел обнаружения и предел количественного определения для оборудования и методик

Предел обнаружения и предел количественного определения для оборудования и методик, используемых при измерении радиоактивности, должны устанавливаться перед их повседневным использованием.

Предел обнаружения. Предел обнаружения (ПО) отдельной методики представляет собой наименьшее содержание радиоактивности в образце, которое может быть обнаружено, но не обязательно определено количественно в виде точного значения. На практике для этого необходимо определить фоновый сигнал и его стандартное отклонение. ПО обычно принимается равным трехкратному стандартному отклонению фонового сигнала.

Предел количественного определения. Предел количественного определения (ПКО) отдельной методики представляет собой наименьшее содержание радиоактивности в образце, которое может быть определено количественно с соответствующей прецизионностью и правильностью. ПКО применяется, в частности, для определения примесей и/или продуктов деградации. На практике ПКО обычно принимается равным 10-кратному стандартному отклонению фонового сигнала.

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.11.0004 Радиофармацевтические лекарственные препараты экстемпорального изготовления

Вводится впервые

Настоящая общая фармакопейная статья устанавливает требования к экстемпоральному изготовлению радиофармацевтических лекарственных препаратов (РФЛП).

РФЛП изготавливаются по требованиям медицинских организаций, производственными аптеками – структурными подразделениями медицинских организаций с правом изготовления РФЛП.

РФЛП изготавливаются в виде доз для одного или нескольких пациентов, в зависимости от клинических потребностей пациентов.

Изготовление РФЛП осуществляется в соответствии с порядком утверждённым уполномоченным федеральным органом исполнительной власти, с учётом особенностей, установленных законодательством Российской Федерации в области обеспечения радиационной безопасности.

РФЛП содержат в готовой для использования форме один радионуклид или несколько радионуклидов (радиоактивных изотопов) в качестве действующего вещества или в составе действующего вещества, диагностического или терапевтического назначения, в том числе для позитронно-эмиссионной томографии (ПЭТ) и однофотонной эмиссионной компьютерной томографии (ОФЭКТ), полученных с использованием радионуклидных генераторов, циклотронов, наборов реагентов, растворов радионуклидов, радиоактивных (радионуклидных) предшественников РФЛП.

При изготовлении РФЛП используются лекарственные препараты и/или фармацевтические субстанции, включённые соответственно в Государственный реестр лекарственных средств для медицинского применения, Единый реестр зарегистрированных лекарственных средств Евразийского экономического союза в установленном порядке, а также вспомогательные вещества в соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты». Допускается изготовление РФЛП из химических предшественников (ХП для РФЛП) и радионуклидных предшественников, в соответствии с требованиями соответствующих фармакопейных статей и общих фармакопейных статей.

В случае отсутствия информации о совместимости веществ, указанных в требовании на изготавливаемые РФЛП, о способе их применения, о методах/методиках контроля качества и других аспектах, зависящих от состава и/или лекарственной формы РФЛП, или её недостаточно, необходим тщательный анализ правильности выписывания требования, совместимости веществ, соответствия прописанных доз возрасту пациента, указаний о способах применения, условий и сроков хранения, факторов, которые могут оказать влияние на стабильность РФЛП.

Все этапы изготовления РФЛП разрабатываются с учётом требований радиационной безопасности для задействованного персонала и окружающей среды, в соответствии с требованиями нормативно-правового регулирования в установленной сфере деятельности, а также в сфере технологического и атомного надзора.

Изготовление РФЛП, как правило, включает в себя подготовку исходных материалов, получение радионуклидов для радиоактивного мечения, введение радиоактивной метки, химическую модификацию и/или очистку, получение/выделение РФЛП, дозирование и стерилизацию (если применимо), контроль качества (аналитический контроль), упаковку и маркировку.

Отбор доз осуществляемый медицинскими работниками перед применением РФЛП (например, из многодозового флакона) не является фармацевтической деятельностью в области изготовления и отпуска лекарственных препаратов.

##### Система обеспечения качества

Система обеспечения качества изготавливаемых РФЛП должна включать требования: к квалифицированному персоналу, прошедшему специальную подготовку; к помещениям и оборудованию; к процедурам для всех этапов изготовления и контроля качества; к технической документации и документации системы качества; к качеству исходных материалов; к аналитическим методам контроля качества; к упаковке и маркировке; к условиям хранения и отпуска; к мониторингу параметров окружающей среды.

Производственная аптека с правом изготовления РФЛП разрабатывает и утверждает требования к системе документации по изготовлению РФЛП, документацию по изготовлению, контролю и обеспечению качества РФЛП в которой с учётом требований соответствующих фармакопейных статей и общих фармакопейных статей, либо в случае их отсутствия – документов в области контроля качеств, последовательно (поэтапно) описываются требования: к исходным и упаковочным материалам, материалам для маркировки, технологии изготовления, промежуточным материалам, изготовленным РФЛП; устанавливаются предельные значения изменений характеристик, срок годности, требования к упаковке и маркировке, а также требования к проведению операций, связанных с очисткой, дезактивацией, дезинфекцией (стерилизацией) оборудования.

##### Персонал

Производственная аптека с правом изготовления РФЛП должна иметь достаточное количество работников/специалистов (далее – специалистов), имеющих фармацевтическое или иное специальное образование, соответствующее установленным квалификационным требованиям и опыт работы, а также достаточные ресурсы, включая оборудование и помещения, обеспечивающие выполнение сотрудниками своих обязанностей. В частности, сотрудники должны иметь специальную подготовку по радиационной безопасности.

Процессы изготовления, контроля и подтверждения их соответствия действующим требованиям должны, по возможности, проводиться разными специалистами производственной аптеки, при соблюдении всех письменных процедур, согласно которым выполняются эти действия.

Специалисты производственной аптеки, осуществляющие изготовление РФЛП, должны иметь на своих рабочих местах документацию по выполняемым процедурам изготовления РФЛП и проходить соответствующее обучение (инструктаж) в случае внесения изменений в указанную документацию.

В рамках своих полномочий, сотрудники производственной аптеки несут предусмотренную законодательством РФ ответственность за соответствие качества изготовленного РФЛП установленным требованиям.

##### Помещения и оборудование

Все стадии изготовления РФЛП (технологические операции) должны осуществляться в специальных контролируемых зонах (помещениях) отвечающих требованиям санитарно-эпидемиологических правил и гигиенических нормативов в области обеспечения радиационной безопасности и на специальном оборудовании, которое предназначено исключительно для изготовления РФЛП.

Помещения, оборудование и процессы организуют таким образом, чтобы свести к минимуму риск перекрёстной контаминации и перепутывания материалов.

Рабочее место должно быть оснащено необходимым оборудованием, количество, типы и размеры которого зависят от номенклатуры и объёма изготавливаемых РФЛП.

Не допускается, чтобы поверхности оборудования, используемых материалов рабочих зон, соприкасающиеся с изготавливаемым РФЛП или веществами, входящими в его состав, вступали с ними в химическую реакцию, выделяли или абсорбировали вещества, чтобы не изменить качество РФЛП.

Размещение оборудования в помещении должно обеспечивать возможность эффективного обслуживания и тщательной очистки, в том числе и при радиоактивном загрязнении.

Используемые при изготовлении и контроле качества РФЛП средства измерений, мерная посуда (ёмкости), приборы, аппараты должны быть в исправном состоянии, они должны регулярно подвергаться необходимым испытаниям (калибровке, поверке, аттестации и др.) в установленном порядке.

Не допускается одновременное изготовление РФЛП, содержащих различные радионуклиды, в одной рабочей зоне (ламинарной зоне или защитном шкафу) с целью исключения перекрёстного загрязнения радиоактивными веществами, перепутывания материалов с различными радионуклидами или перекрёстной контаминации.

Необходимо проводить мониторинг рабочих мест и производственной среды в отношении уровня концентрации частиц, микроорганизмов и радиации. Измерение радиоактивности проводят в соответствии с ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности».

Исследуются все отклонения, такие как: изменения диапазона линейности, калибровки прибора по энергии и эффективности, а также неожиданные изменения фоновых показаний.

##### Процесс изготовления

Подготовка исходных материалов

Исходные материалы, используемые в изготовлении РФЛП, должны отвечать требованиям соответствующих фармакопейных статей и общих фармакопейных статей, таких как ОФС «Фармацевтические субстанции», ОФС «Химические предшественники для радиофармацевтических лекарственных препаратов» и др.

Документация на исходные материалы, не входящие в состав изготовленного РФЛП (например, реагенты, удаляемые при очистке, катализаторы, растворители, картриджи и др.) предоставляемая производителем, проверяется, и при необходимости, дополняется специальными испытаниями в целях подтверждения их качества. Если испытания невозможно провести с технической точки зрения, их можно не проводить при условии выполнения соответствующей оценки рисков.

Некоторые радионуклиды невозможно систематически оценивать путём их выделения и проведения их испытаний перед использованием в процессе радиосинтеза.

Пригодность для предполагаемого применения подтверждается каждый раз при использовании новой серии материала мишени или модификации процесса получения радионуклидов.

Вскрытые или частично использованные контейнеры с исходными материалами, предназначенные для последующего использования, должным образом маркируются и хранятся в условиях ограниченного доступа. Срок годности для вскрытых, невскрытых контейнеров и растворов исходных материалов определяется с обязательным учётом микробиологического фона в конкретных условиях работы. Рекомендуется использовать исходные материалы в одноразовой упаковке. Срок годности наборов исходных материалов определяется с учётом деградации компонентов, микробной контаминации и стабильности материалов упаковки, принимая во внимание проницаемость пластиковых и эластомерных элементов упаковки. Срок годности указывается и подтверждается исследованиями стабильности, отражающими способ использования.

Мониторинг окружающей среды и персонала в ходе изготовления РФЛП имеет важное значение для определения качества изготовленного РФЛП, независимо от происхождения исходного материала, используемого при изготовлении. Должны быть разработаны и утверждены требования к периодичности мониторинга. Отклонения от рекомендуемой периодичности должны основываться на результатах оценки рисков и сопровождаться соответствующим обоснованием.

Когда необходимо изготовить стерильный РФЛП, а завершающая стерилизующая фильтрация невозможна, все исходные материалы должны быть стерильными. Части технологического оборудования, которые вступают в непосредственный контакт с РФЛП в процессе изготовления, должны быть стерильными и одноразовыми или же могут использоваться повторно при условии проведения валидированной процедуры очистки и стерилизации.

Химические предшественники

Химические предшественники для РФЛП (ХП для РФЛП) – вещества синтетического или природного происхождения, которые после мечения радионуклидом представляют собой молекулы, которые самостоятельно или в результате последующих химических превращений, обеспечивают доставку радионуклида к целевым клеткам-мишеням.

Контроль качества ХП для РФЛП проводят в соответствии с требованиями фармакопейной статьи на соответствующий ХП для РФЛП, либо, в случае её отсутствия, в соответствии с ОФС «Химические предшественники для радиофармацевтических лекарственных препаратов» и/или ОФС «Фармацевтические субстанции». Допускается объединение или комбинирование ХП для РФЛП с другими веществами в виде наборов для радиоактивного мечения и/или использование в качестве исходных материалов в кассетах или наборах для изготовления РФЛП.

Получение (наработка) радионуклидов

При получении (наработке) радионуклидов документируются следующие основные параметры: мишенный (стартовый) материал; ядерная реакция; конструктивные особенности мишенного устройства; техническое обслуживание мишенного устройства и транспортных коммуникаций; данные об облучении, такие как энергия и интенсивность пучка; типичные радинуклидные загрязнения для выбранного профиля реакции; процесс выделения/очистки радионуклида; оценивается эффективность получения радионуклидов с точки зрения качества и количества получаемых радионуклидов. Радионуклидные предшественники и молекулы-носители с радиоактивной меткой должны соответствовать требованиям ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты» и фармакопейным статьям на РФЛП.

Введение радиоактивной метки (радиоактивное мечение)

Радиоактивное мечение представляет собой процесс включения радионуклида в молекулу-носитель. Радиоактивное мечение должно проходить в контролируемых условиях. Оцениваются и документируются параметры качества, безопасности и эффективности РФЛП, связанные с химическим и физическим составом набора, компонентами или исходными материалами. Тщательно исследуются показатели стабильности и риск микробной контаминации.

При разработке процесса учитываются источник и качество исходных материалов (например, наличие примесей металлов и др.), количественный и качественный состав (например, концентрация, pH, стерильность, осмолярность (если применимо), вязкость, растворимость, стабильность и др.) и рабочие условия (например, использование инертного газа, температура, давление и др.).

Особое внимание уделяется возможным побочным продуктам синтеза. Автоматизация и/или использование кассет могут применяться для повышения надёжности процессов синтеза, снижения риска микробной контаминации и повышения радиационной безопасности.

Каждый новый впервые вводимый в производственной аптеке процесс радиоактивного мечения проходит валидационные испытания с помощью соответствующих средств контроля во время изготовления и контроля качества готового РФЛП.

РФЛП не требующие процесса выделения и очистки

Данный процесс характеризуется, как правило, одностадийным смешением раствора радионуклида с веществами, содержащимися в наборе для изготовления РФЛП. Следует избегать открытых методов радиохимического синтеза из-за повышенного риска микробной контаминации. Оценка риска должна быть сосредоточена на химическом, радиохимическом и микробиологическом качестве всех исходных материалов, включая радионуклид. В случае многоступенчатого изготовления, также должны учитываться условия взаимодействия и реакционная способность различных исходных материалов и, в особенности, ёмкости (контейнера), в котором реализуется процесс изготовления.

РФЛП требующие процесса выделения и очистки

Данный процесс характеризуется однократным добавлением раствора радионуклида к смеси исходных материалов или многократным добавлением различных исходных материалов и последующим этапом очистки. Эффективная очистка действующего вещества РФЛП, полученного из реакционной смеси, необходима для обеспечения низкого уровня радионуклидных, химических и/или радиохимических примесей. Оценка риска (дополнительно к аспектам перечисленным в разделе «РФЛП не требующие процесса выделения и очистки») должна включать условия очистки, особенно эффективности выделения и влияния хроматографических сред на последующую микробиологическую чистоту РФЛП (в отношении содержания бактериальных эндотоксинов).

Автоматизированные модули синтеза и/или дозирования

При изготовлении РФЛП могут использоваться автоматизированные модули синтеза (АМС) – многофункциональное оборудование, объединяющее все или отдельные этапы процесса на единой технологической платформе, управляемой дистанционно в автоматизированном режиме, т.е. позволяющие выполнять все необходимые операции (радиоактивного мечения, очистки, приготовления готового состава, дозирования и/или стерилизации и т.д.) без или с минимальным участием человека. АМС обычно состоит из комбинации элементов для выполнения и управления процессом. Таких как источник питания, привод, насосы, нагреватели и датчики, которые используются в сочетании с взаимосвязанной системой контейнеров, реакторов, трубок, шприцев, твёрдофазных картриджей и/или систем препаративной жидкостной хроматографии. Один и тот же модуль может применяться для изготовления разных РФЛП.

В процессе синтеза АМС регулирует некоторые параметры процесса. Ёмкости для реактивов, транспортные линии и система очистки, используемые в АМС, могут быть одноразовыми или использоваться в нескольких производственных циклах. Ёмкости для реактивов и системы очистки (например, колонка системы препаративной жидкостной хроматографии) считаются частью АМС. Электронные компоненты АМС выбираются с расчётом работы в определённом уровне радиационного воздействия, соответствующим предполагаемым условиям работы.

При использовании АМС принимаются соответствующие меры для предотвращения перекрёстной контаминации.

Компоненты АМС, контактирующие с исходными материалами, растворителями и/или РФЛП, должны быть химически инертны. Особое внимание уделяется компонентам, которые могут разлагаться под воздействием радиации и которые вступают в контакт с исходными материалами, растворителями и/или РФЛП, поскольку со временем они могут выделять примеси.

АМС квалифицируется поставщиком и/или пользователем. После этой квалификации валидируется процесс синтеза или/и дозирования. Процесс синтеза на АМС обычно контролируется программным обеспечением и проходит валидацию. Квалифицированный персонал, управляющий АМС, должен иметь перечень (документацию по выполняемым процедурам изготовления) последовательных этапов процесса и историю внесённых в них изменений, иметь необходимую информацию о химических веществах и реакциях, протекающих в системе для оценки потенциальных отклонений, которые могут возникнуть при изготовлении РФЛП, а также должен быть достаточно проинформирован о возможных сбоях в работе системы.

Доступ к программному обеспечению должен быть контролируемым и любые изменения в нём также должны контролироваться и документироваться.

Вносимые вручную изменения или регулировка параметров (например, ручное управление клапанами) документируются и расследуются как отклонение от утверждённых норм, если они выходят за пределы валидированных диапазонов.

Версия программного обеспечения, используемого при синтезе, записывается как один из параметров серии.

Все материалы системы АМС, вступающие в контакт с реагентами или препаратом, должны демонстрировать достаточную стабильность при хранении и использовании. Совместимость материалов (например, пластиков) с химическим процессом оценивается и документируется.

АМС могут также контролировать получение и дозирование РФЛП, обычно с использованием устройств измерения объёма или веса и детекторов радиоактивности, чтобы измерять и дозировать правильное количество РФЛП. Для дозирования могут использоваться одноразовые системы трубок. Измерительная система должна быть откалибрована.

Для поддержания низкого содержания бактериальных эндотоксинов и достижения высокого гарантированного уровня стерильности РФЛП используемые материалы и реактивы должны иметь соответствующую низкую исходную бионагрузку.

В конце процесса синтеза необходимо удостовериться в пригодности производственного процесса и подтвердить качество изготовленного РФЛП при помощи соответствующих аналитических испытаний.

В случае низкого выхода реакции или неисправности АМС количество получаемого РФЛП может быть ниже, и/или могут появиться дополнительные примеси.

Изготовление РФЛП в асептических условиях

Изготовление РФЛП, не подлежащих стерилизации, проводится в асептических условиях, в соответствии с требованиями, установленными в действующих нормативно-правовых актах, утверждённых уполномоченными органами исполнительной власти Российской Федерации и регулирующими органами Евразийского экономического союза.

Процедуры очистки

Очистка определяет качество изготовленного РФЛП.

Необходима тщательная оценка эффективности процесса выделения/очистки с учётом конечной радиохимической, радионуклидной и химической чистоты.

Особое внимание уделяется остаточным растворителям (ОФС «Остаточные органические растворители»).

Все процедуры очистки должны быть валидированы. Существует риск микробной контаминации при использовании хроматографических сред, особенно в случае многоразовых колонок для жидкостной хроматографии. Оценка риска должна быть сосредоточена на процедурах очистки и условиях хранения хроматографических сред. Микробиологическая нагрузка и содержание бактериальных эндотоксинов должны поддерживаться на уровне ниже допустимых пределов, что позволяет проводить стерилизацию РФЛП для парентерального введения.

Получение/выделение РФЛП

После очистки действующее вещество (молекулу с радиоактивной меткой) доводят до РФЛП, пригодного для непосредственного введения пациенту, с помощью процессов растворения, разведения, диспергирования и др.), а также стадий дозирования и стерилизации (если необходимо).

В случае если в один и тот же период времени необходимо изготовить разные виды РФЛП из наборов, во избежание перекрёстной контаминации используют отдельные упаковки (флаконы) с разбавителем. Большинство РФЛП предназначены для парентерального введения, их параметры качества должны соответствовать ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты» и ОФС «Лекарственные формы для парентерального применения».

Дозирование

Дозирование – это процесс отбора аликвоты раствора действующего вещества РФЛП для получения РФЛП подлежащего отпуску перед медицинским применением. Чтобы максимально снизить бионагрузку, компоненты, используемые в процессе дозирования, должны быть стерильными. Если стерильные компоненты недоступны, то они стерилизуются в соответствии с валидированным процессом. Если компоненты используются повторно, должна применяться валидированная процедура очистки, гарантирующая отсутствие перекрёстной контаминации.

Стерилизация

Изготовленные РФЛП для парентерального введения должны быть стерильными, стабильными, выдерживать испытание на бактериальные эндотоксины или пирогенность (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»). Процессы изготовления РФЛП, не подлежащих стерилизации, должны проходить в асептических условиях.

Запрещается изготавливать инъекционные растворы РФЛП при отсутствии данных о совместимости входящих в него химических соединений, технологии и режиме стерилизации, а также при отсутствии методов контроля качества, установленных фармакопейными статьями, общими фармакопейными статьями, либо в случае их отсутствия – документами в области контроля качества.

В большинстве случаев возможно проведение только стерилизующей фильтрации, а иногда стерилизация невозможна. Эти процедуры изготовления следует проводить в асептических условиях.

На регулярной основе должен проводиться мониторинг критических зон и окружающей среды на наличие взвешенных частиц и микробной контаминации.

Для РФЛП, наполняемых в асептических условиях, должен осуществляться контроль целостности мембранных фильтров, с учётом необходимости обеспечения радиационной безопасности и сохранения стерильности фильтров.

Процедура проверки целостности фильтра, например, путём определения точки пузырька, должна быть валидирована для каждого типа препарата.

Изготавливаемые РФЛП, содержащие радионуклид с периодом полураспада менее 10 мин, освобождаются от проверки целостности фильтра перед отпуском препарата.

Если введение препарата пациенту осуществляется непосредственно через оборудование, используемый фильтр должен быть пригоден для непосредственного введения препарата пациенту. Совместимость мембраны и корпуса фильтра с раствором препарата проверяется экспериментально с использованием спецификаций поставщика.

##### Контроль качества

Используемое аналитическое оборудование должно пройти квалификацию, а методики валидацию. Валидация, и/или верификация должны быть задокументированы и утверждены.

По возможности контроль качества должен проводиться сотрудником, назначенным ответственным за отпуск изготовленного РФЛП, отвечающим требованиям, предусмотренным действующим законодательством и не являющимся изготовителем РФЛП.

Каждый РФЛП изготовленный по требованию медицинской организации должен проверяться и соответствовать показателям качества, указанным в фармакопейных статьях, общих фармакопейных статьях, либо в случае их отсутствия – документов в области контроля качества.

Для каждого испытания или параметра указывается, необходимо ли получить результат до отпуска готового РФЛП.

Если испытание проводится после отпуска изготовленного РФЛП, это должно быть обосновано, включая установление максимального периода задержки перед проведением испытаний.

##### Упаковка

Упаковка изготовленных РФЛП осуществляется в зависимости от лекарственной формы и способа применения лекарственного препарата.

Материал первичной упаковки должен быть совместим с изготовленным РФЛП (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

##### Маркировка

Если РФЛП изготавливается и используется в одном и том же месте, маркировка первичной упаковки должна содержать идентифицирующую информацию и обеспечивать прослеживаемость. Она также должна соответствовать требованиям ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

##### Отпуск

Решение об отпуске изготовленного РФЛП зависит от соответствия результатов испытаний установленным показателям качества и данным процесса изготовления.

Из-за короткого срока годности изготовленного РФЛП не все параметры качества могут быть известны на момент отпуска.

Допускается отпуск изготовленных РФЛП до завершения полного цикла испытаний контроля качества. В этом случае должен быть чётко и подробно определён порядок отпуска, включая ответственность сотрудников аптечной организации и непрерывную оценку эффективности изготовленного РФЛП.

Перечень испытаний, которые необходимо провести перед отпуском изготовленного РФЛП, устанавливается в соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

Отпуск изготовленного РФЛП осуществляется в соответствии с письменной процедурой, в которой указываются все необходимые данные об изготовлении, контроле качества, оценка отклонений и т.д. Такая процедура должна основываться на оценке рисков. Ретроспективная оценка результатов испытаний допустима в тех случаях, когда их технически невозможно получить до введения изготовленного РФЛП пациенту, и должна основываться на оценке рисков.

Окончательная оценка и отпуск изготовленных РФЛП ответственным лицом подтверждаются в письменной форме в журнале (утверждённой внутренней документации).

В должностных инструкциях должны описываться действия ответственного лица в случае получения неудовлетворительных результатов испытаний после отпуска изготовленного РФЛП (отзыв или предоставление информации пользователям препарата – в зависимости от времени обнаружения).

##### Хранение

Изготовленные РФЛП должны храниться в закрытой зоне, предназначенной для данных целей, с установлением ограничений и порядка доступа сотрудников производственной аптеки. В данной закрытой зоне должны быть обеспечены условия хранения с учётом специфических свойств изготовленного РФЛП и необходимости сохранения его качества, предусмотренные требованиями соответствующих фармакопейных статей и общих фармакопейных статей.

##### Архивные образцы

Архивные образцы хранятся (если применимо) в течение 1 месяца с момента завершения всех испытаний или 3 месяцев после истечения срока годности изготовленного РФЛП, в зависимости от того, какой период дольше.

В случае дозирования в одну упаковку (флакон) архивные образцы могут быть недоступны, в этом случае вопрос тщательно рассматривается при любой оценке риска.

Там, где это технически возможно, такой же подход применяется к химическим предшественникам и исходным материалам.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ОФС.1.11.0005 Химические предшественники для радиофармацевтических лекарственных препаратов

Вводится впервые

Химические предшественники для РФЛП (ХП для РФЛП) − вещества синтетического или природного происхождения, которые после мечения радионуклидом представляют собой молекулы, которые самостоятельно или в результате последующих химических превращений, обеспечивают доставку радионуклида к целевым клеткам-мишеням.

##### Общая характеристика

ХП используют совместно со вспомогательными веществами или самостоятельно.

Оценке рисков подлежит:

- качество химического предшественника и доступная информация для оценки качества;

- последующие этапы превращения химического предшественника после введения в его состав радиоактивной метки;

- влияние количества ХП, содержащегося в одной дозе РФЛП, и частоты введения РФЛП на пациента.

Если ХП входит в состав специализированных наборов для синтеза РФЛП (кассет), его контроль качества не проводится, при условии, что требования к транспортированию и хранению не были нарушены.

Если ХП производят или выделяют из биологического материала, то они должны дополнительно соответствовать требованиям ОФС «Биологические лекарственные препараты».

Если ХП представляют собой иммуноглобулины или фрагменты иммуноглобулинов, характеризующиеся строгой антигенной специфичностью и продуцируемые одним клоном клеток, то они должны дополнительно соответствовать требованиям ОФС «Моноклональные антитела для медицинского применения».

Если ХП производят из материалов человеческого или животного происхождения, то они должны дополнительно соответствовать требованиям ОФС «Вирусная безопасность» и ОФС «Вирусная безопасность лекарственных препаратов из плазмы крови человека».

Если ХП получают из тканей и органов животных, восприимчивых к трансмиссивным губчатым энцефалопатиям, за исключением экспериментального заражения, они должны соответствовать требованиям ОФС «Уменьшение риска передачи возбудителей губчатой энцефалопатии животных при применении лекарственных средств».

##### Особенности технологии

Требования к производству ХП, должны соответствовать требованиям, предъявляемым к производству фармацевтических субстанций.

ХП получают с использованием аттестованного оборудования и валидированного процесса производства, обеспечивающего постоянство регламентированного качества процедурами, прописанными в общей фармакопейной статье или фармакопейной статье.

##### Испытания

Контроль ХП проводят в соответствии с требованиями фармакопейной статьи (ФС) на соответствующий ХП, либо (в случае её отсутствия) в соответствии с требованиям настоящей ОФС. Идентификация, испытание на, химическую чистоту и анализы должны проводиться по валидированным, фармакопейным аналитическим методикам, с использованием квалифицированного оборудования.

Описание. ХП характеризуют, отмечая внешний вид и основные физические и другие свойства в соответствии с указаниями установленными производителем.

Идентификация. Для установления подлинности ХП используют физико-химические или химические методы, например: спектроскопия ядерного магнитного резонанса (ОФС «Спектроскопия ядерного магнитного резонанса»), инфракрасная спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»), масс-спектрометрия (ОФС «Масс-спектрометрия») и хроматографические методы (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография», ОФС «Тонкослойная хроматография» и ОФС«Газовая хроматография»), капиллярный электрофорез (ОФС «Капиллярный электрофорез), качественные реакции.

Родственные примеси. Пределы контроля, идентификации и квалификации родственных примесей в органических ХП, неорганических примесей в неорганических ХП или родственных примесей в ХП биологического происхождения приведены в таблицах 1 и 2 и применяются, если иное не предусмотрено в ФС.

Таблица 1. Пределы контроля и идентификации примесей в органических и неорганических ХП*
Контролируемый предел | 0,2 %
Предел идентификации | 2,0 %
Сумма неспецифицируемых примесей | не более 3,0 %
* – указаны пределы в% по массе

Таблица 2. Пределы контроля, идентификации и квалификации родственных примесей в ХП биологического происхождения*
Контролируемый предел | 0,1 %
Предел идентификации | 0,5 %
Предел квалификации | 1,0 %
* – указаны пределы в% по массе

Для веществ, оказывающих токсический или нежелательный фармакологический эффект, может приводиться индивидуальный предел содержания примеси.

Остаточные органические растворители. Содержание остаточных растворителей нормируют в соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители». Растворители 1 класса не должны использоваться на заключительном этапе процесса производства химических предшественников. Если использование растворителя 1 класса на более ранней стадии производственного процесса неизбежно, применяются требования, указанные в ОФС «Остаточные органические растворители» Растворители 2 класса нормируются согласно ОФС «Остаточные органические растворители». Исходя из допустимой ежедневной экспозиции, содержание растворителей 3 класса не должно превышать 0,5 %.

Если для растворителя 3 класса предусмотрено нормативное требование, превышающее 0,5 %, необходимо проводить количественное определение растворителя.

##### Катализаторы и реагенты, содержащие металлы

Определение примесей каждого из следующих металлов: Pt, Pd, Ir, Rh, Ru, Os, Mo, Ni, Cr, V, Pb, Hg, Cd и Tl и др., проводят любым подходящим методом, если при производстве ХП используют специфические катализаторы или реагенты, содержащие металлы. Содержание не должно превышать суммарно 0,01 % по массе, если не указано иное («ОФС «Элементные примеси»).

Микробиологическая чистота. Определение микробиологической чистоты ХП, за исключением стерильных, проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота» по следующим показателям:

- общее число аэробных микроорганизмов: критерий приемлемости 103 КОЕ на грамм для нерасфасованной массы продукции или максимум 102 КОЕ на флакон (первичную упаковку) для химических предшественников в однодозовых или многодозовых упаковках;

- общее число грибов: критерий приемлемости 102 КОЕ на грамм для нерасфасованной массы продукции или максимум 101 КОЕ на флакон (первичную упаковку) для ХП в однодозовых или многодозовых упаковках.

Для ХП, размер партии которых чрезвычайно мал (менее 1000 мл или 1000 г) допускается отбор проб на микробиологические испытания в размере - не менее 1% от объёма партии.

Для ХП, расфасованных в однодозовые или многодозовые упаковки, размер партии которых не превышает 200 единиц – допускается отбор на микробиологические испытания 2 единицы из партии, при размере партии менее 100 единиц – 1 единицу из партии соответственно.

Стерильность. Подтверждение стерильности ХП, проводят в соответствии с ОФС «Стерильность» методом прямого посева или методом мембранной фильтрации. Применяется в случае отсутствия финишной стерилизации РФЛП.

Бактериальные эндотоксины. Количественное определение бактериальных эндотоксинов ХП проводят в соответствии с ОФС «Бактериальные эндотоксины». Если не обосновано и не разрешено иное, содержание бактериальных эндотоксинов не должно превышать 100 ЕЭ на грамм для сыпучего материала или 10 ЕЭ на флакон для ХП в однодозовых и многодозовых упаковках.

##### Количественное определение

Для количественного ХП используют подходящие физико-химические и химические методы анализа, которые следует применять в сочетании с современными физико-химическими методами анализа.

##### Упаковка

Упаковка должна обеспечивать качество ХП в течение установленного срока годности. Допускается добавление материалов, способствующих увеличению срока хранения ХП, а также смягчающих температурный режим хранения.

##### Маркировка

Приводят торговое наименование ХП, информацию о его назначении, наименование производителя, количество, условия хранения, меры предосторожности (при необходимости), дату изготовления, номер серии, срок годности и условия хранения.

##### Хранение

Содержание раздела приводят в соответствии с ОФС «Хранение лекарственных средств».

##### Срок годности

Срок годности ХП приводят в соответствующей нормативной документации и устанавливают в соответствии с ОФС «Стабильность и сроки годности лекарственных средств».

## 2. Фармацевтические субстанции

### 2.1. Фармацевтические субстанции синтетического происхождения

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0050 α-Токоферола ацетат (α-Tocopherylis acetas)

Взамен ФС.2.1.0050.18

| C31H52O3 [7695-91-2] | М.м. 472,74 |

##### Определение

все-rac-[2,5,7,8-Тетраметил-2-(4,8,12-триметилтридецил)-3,4-дигидро-2H-1-бензопиран-6-ил]ацетат.

Cодержит не менее 96,5 % и не более 102,0 % α-токоферола ацетата C31H52O3 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Бесцветная или слегка зеленовато-жёлтая прозрачная маслянистая жидкость вязкой консистенции с характерным запахом.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 %, ацетоне и растительных маслах, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в виде жидкой плёнки, в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца α-токоферола ацетата.

2. ГХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика
   α-токоферола ацетата на хроматограмме раствора стандартного образца
   α-токоферола ацетата (раздел «Родственные примеси»).

##### Испытания

Угол вращения. От –0,01° до +0,01° (10 % раствор субстанции в этаноле при длине кюветы 10 см, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл спирта 96 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должна выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

Кислотное число. Не более 1,0. (ОФС «Кислотное число»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в циклогексане и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции и 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца α-токоферола [10191-41-0], растворяют в циклогексане и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора циклогексаном до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём циклогексаном до метки.

Раствор для идентификации. Растворяют 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца все-rac-α-токоферола ацетата для идентификации пиков, содержащего примеси A и B, в 1 мл циклогексана.

Примечание

Примесь A:
все-rac-транс-[2,3,4,6,7-пентаметил-2-(4,8,12-триметилтридецил)-2,3-дигидробензофуран-5-ил]ацетат.

Примесь B:
все-rac-цис-[2,3,4,6,7-пентаметил-2-(4,8,12-триметилтридецил)-2,3-дигидробензофуран-5-ил]ацетат
[1560716-40-6].

Примесь C:
все-rac-2,5,7,8-тетраметил-2-(4,8,12-триметилтридецил)-3,4-дигидро-2H-1-бензопиран-6-ол (все-rac-α-токоферол)
[10191-41-0].

Примесь D:
{4-метокси-2,3,6-триметил-5-[(все-RS,E)-3,7,11,15-тетраметилгексадек-2-енил]фенил}ацетат
[37570-32-4].

Примесь E:
(все-RS,все-E)-2,6,10,14,19,23,27,31-октаметилдотриаконта-12,14,18-триен.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная размером 30 м × 0,25 мм, покрытая слоем полиметилсилоксана толщиной 0,25 мкм; |  |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Линейная скорость | 1 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1 мкл; |  |
Температура | Колонка | 280 оС; |
| Инжектор | 290оС; |
|  | Детектор | 290оС;
| Деление потока | 1:100; |
| Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания основного пика. |

Хроматографируют стандартный раствор, раствор для идентификации, раствор сравнения, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. α-Токоферола ацетат − 1 (около 15 мин); сквалан − около 0,4; примесь A − около 0,7; примесь B − около 0,8; примесь C − около 0,9; примесь D и E − около 1,05 (выходят сразу после пика α-токоферола ацетата).

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примеси А и В используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для идентификации.

Пригодность хроматографической системы.

На хроматограмме стандартного раствора разрешение (RS) между пиками примеси С и α-токоферола ацетата должно быть не менее 3,5:

- площадь пика примеси C не должна превышать 0,2 % от площади пика α-токоферола ацетата.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A и C не должна более чем в 5 раз превышать площадь пика α-токоферола ацетата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси B не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика α-токоферола ацетата на хроматограмме стандартного раствора (не более 1,5 %);

- сумма площадей пиков примесей D и E не должна превышать площадь пика α-токоферола ацетата на хроматограмме стандартного раствора (не более 1,0 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна более чем в 2,5 раза превышать площадь пика α-токоферола ацетата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,25 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 2,5 раза превышать площадь пика α-токоферола ацетата на хроматограмме стандартного раствора (не более 2,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,1 %).

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ГХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворе внутреннего стандарта и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца сквалана, растворяют в циклогексане и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца
α-токоферола ацетата, растворяют в растворе внутреннего стандарта и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют стандартный и испытуемый растворы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора фактор асимметрии пика (As) α-токоферол ацетата должен быть не менее 0,6 и не более 2,0.

Содержание α-токоферола ацетата C31H52O3 в процентах (X) вычисляют по формуле:

где B1 - отношение площади пика α-токоферола ацетата к площади пика сквалана на хроматограмме испытуемого раствора;
B0 - отношение площади пика α-токоферола ацетата к площади пика сквалана на хроматограмме стандартного раствора;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца, мг;
W - содержание остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание α-токоферола ацетата в фармакопейном стандартном образце α-токоферола ацетата,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0340 Абакавира сульфат (Abacaviri sulfas)

Абакавир

Вводится впервые

##### Определение

[(1S,4R)-4-[2-Амино-6-(циклопропиламино)-9H-пурин-9-ил]циклопент-2-ен-1-ил]метанола сульфат (2:1).

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % абакавира сульфата (C14H18N6O)2·H2SO4 в пересчёте на безводное и свободное от органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 % и метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца абакавира сульфата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика абакавира на хроматограмме раствора стандартного образца абакавира сульфата (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

###### Родственные примеси

Энантиомерная чистота. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Гептан—2-пропанол—диэтиламин 850:150:1.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Гептан—2-пропанол 500:500.

Растворитель. Трифторуксусная кислота—метанол 0,5:100.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг субстанции, растворяют в 30 мл растворителя, обрабатывая при необходимости ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 30 мл 2-пропанола и доводят объём раствора гептаном до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4 мг фармакопейного стандартного образца смеси стереоизомеров абакавира (содержит примесь 2 и 5), растворяют в 3 мл растворителя, обрабатывая при необходимости ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 3 мл 2-пропанола и доводят объём раствора гептаном до метки.

Примечание

Примесь 2 (транс-абакавир):
[(1R,4R)-4-[2-амино-6-(циклопропиламино)-9H-пурин-9-ил]циклопент-2-ен-1-ил]метанол
[783292-37-5].

Примесь 5 (энантиомер абакавира):
[(1R,4S)-4-[2-амино-6-(циклопропиламино)-9H-пурин-9-ил]циклопент-2-ен-1-ил]метанол
[136470-79-6].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель модифицированный трис(3,5-диметилфенилкарбамоил)амилозой для хиральной хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 286 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,% | Скорость потока, мл/мин
--- | --- | --- | ---
0–25 | 100 | 0 | 1,0
25–27 | 100 → 0 | 0 → 100 | 1,0
27–37 | 0 | 100 | 0,8
37–39 | 0 → 100 | 100 → 0 | 0,8
39–55 | 100 | 0 | 1,0

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Абакавир – 1 (около 17 мин); примесь 2 – около 0,8; примесь 5 – около 0,9.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси 2 и примеси 5 должно быть не менее 1,0;

- разрешение (RS) между пиками примеси 5 и абакавира должно быть не менее 1,5.

Содержание примеси 5 в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»).

Допустимое содержание примесей:

- примесь 5 – не более 0,3 %.

Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Вода—трифторуксусная кислота 999,5:0,5.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Вода—метанол 150:850.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в воде, обрабатывая при необходимости ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца смеси родственных примесей абакавира (содержит примеси 1–4), растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь 1 (десциклопропил абакавир):
[(1S,4R)-4-[2,6-диамино-9H-пурин-9-ил]циклопент-2-ен-1-ил]метанол
[124752-25-6].

Примесь 2 (транс-абакавир):
[(1R,4R)-4-[2-амино-6-(циклопропиламино)-9H-пурин-9-ил]циклопент-2-ен-1-ил]метанол
[783292-37-5].

Примесь 3 (О-пиримидиновое производное абакавира):
9-[(1S,4R)-4-{[(2,5-диамино-6-хлорпиримидин-4-ил)окси]метил}циклопент-2-ен-1-ил]-N6-циклопропил-9H-пурин-1,6-диамин
[1443421-69-9].

Примесь 4 (t-бутиловое производное абакавира):
9-[(1S,4R)-4-(трет-бутоксиметил)циклопент-2-ен-1-ил]-N6-циклопропил-9H-пурин-1,6-диамин
[1443421-68-8].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,9 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–20 | 95 → 70 | 5 → 30
20–35 | 70 → 10 | 30 → 90
35,1–50 | 95 | 5

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Абакавир – 1 (около 17 мин); примесь 1 – около 0,65; примесь 2 – около 1,04; примесь 3 – около 1,33; примесь 4 – около 1,7.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками абакавира и примеси 2 должно быть не менее 1,5.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»).

Допустимое содержание примесей:

- примесь 1 – не более 0,2 %;

- примесь 2 – не более 0,2 %;

- примесь 3 – не более 0,2 %;

- примесь 4 – не более 0,2 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 % для каждой примеси;

- сумма примесей – не более 0,8 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 %.

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2). Определение проводят в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде, обрабатывая при необходимости ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца абакавира сульфата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца абакавира сульфата, растворяют в воде, обрабатывая при необходимости ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца абакавира сульфата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца абакавира сульфата:

- фактор асимметрии пика (AS) абакавира должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика абакавира должно быть не более 1,5 % (6 введений).

Содержание абакавира сульфата (C14H18N6O)2·H2SO4 в субстанции в процентах в пересчёте на безводное и свободное от органических растворителей вещество (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика абакавира на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика абакавира на хроматограмме раствора стандартного образца абакавира сульфата;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца абакавира сульфата, мг;
P – содержание абакавира сульфата в фармакопейном стандартном образце абакавира сульфата,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0333 Абиратерона ацетат (Abirateroni acetas)

Абиратерон

Вводится впервые

##### Определение

[17-(Пиридин-3-ил)андроста-5,16-диен-3β-ил]ацетат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % абиратерона ацетата C26H33NO2 в пересчёте на безводное и свободное от органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок. Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде, растворим в спирте 96 %, умеренно растворим в ацетонитриле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца абиратерона ацетата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика абиратерона ацетата на хроматограмме раствора стандартного образца абиратерона ацетата (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

В ходе испытания растворы защищают от света.

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,77 г аммония ацетата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Подвижная фаза В (ПФВ). Спирт 96 %.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 31 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 6 мг фармакопейного стандартного образца абиратерона ацетата для проверки пригодности системы (содержит примеси 1–10), растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,0 мм, силикагель октадецилсилильный, с полярными группами, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |  |
Температура колонки | 15 °С; |  |
Скорость потока | 0,45 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,% | ПФВ,%
--- | --- | --- | ---
0–40 | 50 → 15 | 20 → 55 | 30
40–47 | 15 → 0 | 55 → 20 | 30 → 80
47–58 | 0 | 20 | 80
58–60 | 0 → 50 | 20 | 80 → 30
60–70 | 50 | 20 | 30

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Относительное время удерживания соединений (RRT) приведено в таблице 1.

Для идентификации пиков примесей 1-10 используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика абиратерона ацетата должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси 8 и примеси 9 должно быть не менее 1,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей, площади пиков примеси 2 и примеси 3 умножают на 3,85.

Таблица 1. Характеристика родственных примесей абиратерона ацетата
Номер примеси | Химическое название по ИЮПАК | Сокращённое название | Индекс | RRT
--- | --- | --- | --- | ---
1 | [7-оксо-17-(пиридин-3-ил)андроста-5,16-диен-3β-ил]ацетат | 7-Кетоабиратерона ацетат | [2410075-48-6] | Около 0,42
2 | [17-(пиридин-3-ил)-16α,17α-эпоксиандрост-5-ен-3β-ил]ацетат | α-Эпоксиабиратерона ацетат | [2484719-11-9] | Около 0,62
3 | [17-(пиридин-3-ил)-16β,17β-эпоксиандрост-5-ен-3β-ил]ацетат | β-Эпоксиабиратерона ацетат | [2484719-26-6] | Около 0,66
4 | 17-(пиридин-3-ил)андроста-5,16-диен-3β-ол | Абиратерон | [154229-19-3] | Около 0,69
5 | 1-[17-(пиридин-3-ил)андроста-3,5,16-триен-3β-ил]этан-1-он | 3-Деокси-3-ацетилабиратерон-3-ен | – | Около 0,85
| – | Абиратерона ацетат | – | 1 (около 34,5 мин)
6 | 3-(3β-этоксиандроста-5,16-диен-17-ил)пиридин | Абиратерона этиловый эфир | [2484719-14-2] | Около 1,18
7 | 3-[3β-(пропан-2-илокси)андроста-5,16-диен-17-ил]пиридин | Абиратерона изопропиловый эфир | [2484719-15-3] | Около 1,26
8 | 3-[андроста-3,5,16-триен-17-ил]пиридин | Ангидроабиратерон | [154229-20-6] | Около 1,29
9 | (3-(3β-хлорандроста-5,16-диен-17-ил)пиридин) | 3-Деокси-3-хлорабиратерон | – | Около 1,31
10 | 3-[3β-(4-хлорбутил)андроста-5,16-диен-17-ил]пиридин | O-Хлорбутил-абиратерон | – | Около 1,33

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»).

Допустимое содержание примесей:

- примеси 2 и 3 – не более 0,25 % каждая;

- примеси 4, 6 и 7 – не более 0,20 % каждая;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,80 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее площади пика абиратерона ацетата на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,25 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца абиратерона ацетата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 31 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца абиратерона ацетата, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца абиратерона ацетата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца абиратерона ацетата:

- фактор асимметрии пика (AS) абиратерона ацетата должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика абиратерона ацетата должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание абиратерона ацетата C26H33NO2 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика абиратерона ацетата на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика абиратерона ацетата на хроматограмме раствора стандартного образца абиратерона ацетата;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца абиратерона ацетата, мг;
P – содержание абиратерона ацетата в фармакопейном стандартном образце абиратерона ацетата,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0334 Адеметионина бутандисульфонат (Ademetionini butandisulfonas)

Адеметионин

Вводится впервые

##### Определение

(2S)-2-Амино-4-({[(2S,3S,4R,5R)-5-(6-амино-9H-пурин-9-ил)-3,4-дигидроксиоксолан-2-ил]метил}(метил)сульфанийил)бутаноат—бутан-1,4-дисульфоновая кислота (1:1,65).

Содержит не менее 95,0 % и не более 105,0 % адеметионина бутандисульфоната C15H22N6O5S·1,65C4H10O6S2 в пересчёте на безводное вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок с характерным запахом.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в формамиде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната.

2. ВЭЖХ. Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика адеметионина на хроматограмме раствора стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната (раздел «Количественное определение»).

3. Ионообменная хроматография (ОФС «Ионообменная хроматография»). Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика 1,4-бутандисульфоновой кислоты на хроматограмме раствора стандартного образца динатрия бутандисульфоната.

Все растворы хранят при температуре 5 ºС и используются свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 191 мг натрия карбоната безводного, 143 мг натрия гидрокарбоната, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца динатрия бутандисульфоната. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают около 20 мг фармакопейного стандартного образца динатрия бутандисульфоната, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 37 мг натрия сульфата безводного, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,25 мл полученного раствора и доводят объём раствора стандартным раствором до метки.

Хроматографические условия

Предколонка | 10 × 4,6 мм, анионообменная смола для хроматографии на основе поливинилового спирта, 9 мкм; |  |
Колонка | 250 × 4,0 мм, анионообменная смола для хроматографии на основе поливинилового спирта; 9 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | кондуктометрический; |  |
Объём пробы | 25 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика основного вещества. |  |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца динатрия бутандисульфоната и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. 1,4-бутансульфонат –1 (около 13 мин).

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение ® между пиками 1,4-бутансульфоната и сульфат-иона должно быть не менее 1,5;

- фактор асимметрии пика (AS) 1,4-бутансульфоната должен быть не менее 0,8 и не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика 1,4-бутандисульфоновой кислоты должно быть не более 3,0 % (6 введений).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 1,52 г субстанции в 10 мл L-лизина растворе 6,8 % должен выдерживать сравнение с эталоном II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

L-Лизина раствор 6,8 %. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 3,4 г L-лизина, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y4 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН. От 1,0 до 3,0 (0,4% раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

S,S-Изомер адеметионина. Не менее 55 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы хранят в защищённом от света месте и используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 189,2 г аммония формиата в 700 мл воды, доводят значение рН раствора муравьиной кислотой безводной до 5,0. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Скорость потока | 0,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 260 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика S,S-изомера адеметионина. |  |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. S,S-изомер адеметионина – 1 (около 19 мин); R,S-изомер адеметионина – около 1,15.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками S,S- и R,S-изомеров адеметионина должно быть не менее 2,0;

- фактор асимметрии пика (AS) S,S-изомера адеметионина должен быть не более 2,0;

- фактор асимметрии пика (AS) R,S-изомера адеметионина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика S,S-изомера адеметионина должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание S,S-изомера адеметионина в препарате в процентах (Хi) вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы хранят в защищённом от света месте при температуре
2–8 °С и используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 12,612 г аммония формиата и 1,0 г натрия октансульфоната в 700 мл воды, доводят значение рН раствора муравьиной кислотой безводной до 2,8. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—метанол—буферный раствор 5:250:750.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца аденина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца аденина, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца S-аденозил-L-гомоцистеина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца S-аденозил-L-гомоцистеина, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор метилтиоаденозина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) метилтиоаденозина, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната, 1,0 мл раствора стандартного образца аденина, 1,0 мл раствора стандартного образца S-аденозил-L-гомоцистеина, 4,0 мл раствора метилтиоаденозина и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 260 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 5-кратное от времени удерживания основного вещества. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартный и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Адеметионин – 1; аденин – около 0,67; S-аденозил-L-гомоцистеин – около 0,74; метилтиоаденозин – около 2,0; S-аденозилметионинамин – около 3,0.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика адеметионина должно быть не менее 10.

На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками аденина и S-аденозил-L-гомоцистеина должно быть не менее 1,5;

- фактор асимметрии пика (AS) адеметионина 1,4-бутандисульфоната должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика адеметионина 1,4-бутандисульфоната должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Содержание метилтиоаденозина в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное вещество, вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика метилтиоаденозина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика метилтиоаденозина на хроматограмме стандартного раствора;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца метилтиоаденозина, мг;
P - содержание метилтиоаденозина в фармакопейном стандартном образце метилтиоаденозина,%;
W - содержание воды в субстанции,%;

Содержание аденина и S-аденозил-L-гомоцистеина в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное вещество, вычисляют по формуле:

где S1 – площадь каждого из пиков аденина и S-аденозил-L-гомоцистеина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь каждого из пиков аденина и S-аденозил-L-гомоцистеина на хроматограмме стандартного раствора;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца аденина и S-аденозил-L-гомоцистеина, соответственно, мг;
P - содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце соответствующей примеси,%;
W - содержание воды в субстанции,%.

Содержание S-аденозилметионинамина и любой другой примеси в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное вещество, вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика S-аденозилметионинамина или любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика адеметионина на хроматограмме стандартного раствора;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната, мг;
P - содержание адеметионина 1,4-бутандисульфоната в фармакопейном стандартном образце адеметионина 1,4-бутандисульфоната,%;
W - содержание воды в субстанции,%.

Допустимое содержание примесей:

- S-аденозил-L-гомоцистеин – не более 0,5 %;

- метилтиоаденозин – не более 2,0 %;

- S-аденозилметионинамин – не более 1,75 %;

- аденин – не более 0,5 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 5,0 %.

Вода. Не более 5,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 50 мг (точная навеска) субстанции и, в качестве растворителя, смесь формамид—метанол 1:1.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 2) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,35 ЕЭ на 1 мг адеметионина 1,4-бутандисульфоната (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими уточнениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната:

- фактор асимметрии пика (AS) адеметионина 1,4-бутандисульфоната должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика адеметионина 1,4-бутандисульфоната должно быть не более 1,0 % (6 введений).

Содержание адеметионина бутандисульфоната C15H22N6O5S·1,65C4H10O6S2 в субстанции в пересчёте на безводное вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика адеметионина 1,4-бутандисульфоната на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика адеметионина 1,4-бутандисульфоната на хроматограмме раствора стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца адеметионина 1,4-бутандисульфоната, мг;
P - содержание адеметионина 1,4-бутандисульфоната в фармакопейном стандартном образце адеметионина 1,4-бутандисульфоната,%;
W - содержание воды в субстанции,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, при температуре 2–8 °С.

* Приводится для информации.

** Проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0335 Азаметония бромид (Azamethonii bromidum)

Взамен ФС 42-2769-91

##### Определение

2,2'-(Метилазандиил)бис(N,N-диметил-N-этилэтанаминия) дибромид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % азаметония бромида C13H33Br2N3 в пересчёте на безводное, свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый со слегка желтоватым оттенком кристаллический порошок со слабым запахом.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим или растворим в воде, легко растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в вазелиновом масле, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца азаметония бромида. Для определения испытуемую субстанцию 10 мг растирают с 2 каплями вазелинового масла.

2. Качественная реакция. К 0,1 г субстанции прибавляют 1 мл серной кислоты концентрированной; должны выделяться красновато-оранжевые пары брома.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 4 мл воды, прибавляют 2 мл пикриновой кислоты насыщенный раствор; должен образоваться жёлтый осадок.

##### Испытания

Температура плавления. От 210 до 215 °C (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1). Субстанцию предварительно высушивают при 110°С в течение 2 ч. Затем, не вынимая из шкафа, растирают её, набивают капилляр и тотчас запаивают.

** Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

** Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН. От 5,0 до 7,5 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем целлюлозы для ВЭТСХ.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—ацетонитрил—бутанол—метанол—вода 4:20:22:25:30.

Испытуемый раствор. Растворяют 0,25 г субстанции в 5 мл этанола. Раствор используют свежеприготовленным.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора этанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 0,25 г субстанции в 4 мл этанола и прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствор 0,2 М. Перед использованием раствор выдерживают в течение 1 ч. Раствор используют свежеприготовленным.

Реактив для детектирования. В коническую колбу помещают 20 мл воды, 5 мл хлористоводородной кислоты раствор 6 М, 2 мл реактива Драгендорфа модифицированного по Бергоффу-Дельвиче и 6 мл натрия гидроксида раствор 6 М. При неполном растворении висмута гидроокиси при встряхивании прибавляют несколько капель хлористоводородной кислоты раствора 6 М. Хранят при температуре 2–8 °С не более 10 суток.

На линию старта пластинки наносят 10 мкл испытуемого раствора (500 мкг), 2,5 мкл раствора сравнения (2,5 мкг), 1 мкл раствора сравнения (1 мкг) и 10 мкл раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения, содержащего 1 мкг субстанции, должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции действующего вещества.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 разделённые зоны адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зоны адсорбции любой примеси сравнивают с зонами адсорбции на хроматограммах раствора сравнения, содержащего 1 мкг (0,2 %) и 2,5 мкг (0,5 %) азаметония бромида.

На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения, содержащего 2,5 мкг азаметония бромида (не более 0,5 %).

Суммарное содержание примесей, оцененное по совокупности величины и интенсивности окраски их зон адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора в сравнении с зонами адсорбции на хроматограмме раствора сравнения, содержащего 1 мкг и 2,5 мкг азаметония бромида, не должно превышать 0,5 %.

Свободный бром. Растворяют 0,5 г субстанции в 5 мл воды, прибавляют 0,1 г калия йодида и 1 мл крахмала раствор 1 %, не должно появляться синее окрашивание.

Сульфаты. Не более 0,05 %. (ОФС «Сульфаты», метод 1). В 10 мл воды растворяют 0,2 г субстанции.

Вода. Не более 3,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют около 0,4 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 1,9 ЕЭ на 1 мг субстанции азаметония бромида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Взвешивают в закрытом бюксе 0,25 г (точная навеска) субстанции, помещают в коническую колбу 200 мл, растворяют в 50 мл воды, прибавляют 10 мл азотной кислоты разведённой 16 % и 25,0 мл 0,1 М раствора серебра нитрата, энергично перемешивают. Полученный раствор титруют 0,1 М раствором аммония тиоцианата до перехода окраски в коричневато-оранжевую (индикатор – 2 мл железа(III) аммония сульфата раствор 10 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 19,56 мг азаметония бромида C13H33Br2N3.

##### Хранение

В герметично закрытой упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0336 Азелаиновая кислота (Acidum azelaicum)

Вводится впервые

##### Определение

Нонандиовая кислота.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % азелаиновой кислоты C9H16O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый мелкокристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим или растворим в метаноле и спирте 96 %, растворим в ацетоне, очень мало растворим или практически нерастворим в воде.

Примечание – При проведении испытания субстанцию предварительно не растирают.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца азелаиновой кислоты.

##### Испытания

Температура плавления. От 106 до 109 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1). Субстанцию используют после потери в массе при высушивании.

Прозрачность раствора. Раствор субстанции 1 % в метаноле должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 2,3 г аммония дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,0. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 55:945.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Ацетонитрил—буферный раствор 1:1.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе, при необходимости обрабатывая ультразвуком в течение не более 1 мин, и доводят объём раствора растворителем до метки. Полученный раствор фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают по 25 мг себациновой кислоты, ундекандиовой кислоты, адипиновой кислоты и пеларгоновой кислоты, растворяют в 10 мл растворителя, прибавляют 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. Полученный раствор фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФА до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 3,5 мкм; |  |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 209 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 100 | 0
5–35 | 100 → 53 | 0 → 47
35–45 | 53 | 47
45–46 | 53 → 100 | 47 → 0
46–55 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Азелаиновая кислота – 1 (около 19 мин); адипиновая кислота – около 0,3; себациновая кислота – около 1,2; ундекандиовая кислота – около 1,4; пеларгоновая кислота – около 1,9.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками себациновой кислоты и ундекандиовой кислоты должно быть не менее 12.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика азелаиновой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,25 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать четырёхкратную площадь пика азелаиновой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика азелаиновой кислоты на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают (в вакууме) 1 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы при температуре 60 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 100 мл смеси спирт 96 %—вода 1:1 и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до перехода окраски в розовый (индикатор – 0,2 мл фенолфталеина раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 9,411 мг азелаиновой кислоты C9H16O4.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0049 Азитромицин дигидрат (Azithromycinum dihydricum)

Азитромицин

Взамен ФС.2.1.0049.18

##### Определение

(2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-3,4,10-Тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он дигидрат.

Cодержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % азитромицина С38H72N2O12 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

1 мкг азитромицина С38H72N2O12 соответствует специфической активности, равной 1 единице действия (ЕД).

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде и спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектроскопия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения соответствует спектру фармакопейного стандартного образца азитромицина.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец азитромицина по отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают досуха, высушивают в вакууме при температуре 80 °С в течение 30 мин и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика азитромицина на хроматограмме раствора стандартного образца азитромицина (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –45 до –49 в пересчёте на безводное, не содержащее органических растворителей вещество (2 % раствор субстанции в этаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 50 мл этанола должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

рН раствора. От 9,0 до 11,0 (0,1 г субстанции растворяют в 25 мл метанола и доводят объём водой до 50 мл, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие азитромицин и его примеси, используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 1,73 г аммония дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят рН раствора до 10,00 аммиака раствором концентрированным 25 %. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 1,80 г динатрия гидрофосфата безводного в 800 мл воды и доводят рН раствора до 8,90 фосфорной кислотой разведённой 10 % или натрия гидроксида раствором 10 %. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол—ацетонитрил 250:750.

Растворитель. Ацетонитрил—буферный раствор—метанол 30:35:35.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца азитромицина. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 16 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца азитромицина, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют содержимое флакона с фармакопейным стандартным образцом азитромицина для проверки пригодности хроматографической системы (содержит примеси F, H и J) в 1 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 5 мин и охлаждают до комнатной температуры.

Раствор для идентификации пиков примесей. Растворяют содержимое флакона с фармакопейным стандартным образцом азитромицина для идентификации примесей (содержит примеси A, B, C, E, F, G, I, J, L, M, N, O и Р) в 1 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 5 мин и охлаждают до комнатной температуры.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца азитромицина и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, кремнийорганический полимер, аморфный, октадецилсилильный, эндкепированный, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 60 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–25 | 50 → 45 | 50 → 55
25–30 | 45 → 40 | 55 → 60
30–80 | 40 → 25 | 60 → 75
80–81 | 25 → 50 | 75 → 50
81–93 | 50 | 50

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для идентификации пиков примесей, раствор стандартного образца азитромицина и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Относительное время удерживания (RRT) приведено в табл. 1.

Таблица 1. Относительное время удерживания соединений (RRT)
Сокращённое название | Химическое название по ИЮПАК | CAS | RRT
--- | --- | --- | ---
Примесь А | (2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-3,4,10-Тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,8,10,12,14-гексаметил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он | 76801-85-9 | Около 0,83
Примесь В | (2R,3R,4S,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-4,10-Дигидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он | 307974-61-4 | Около 1,31
Примесь С | (2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-3,4,10-Тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он | 620169-47-3 | Около 0,73
Примесь D | (2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-3,4,10-Тригидрокси-14-гидроксиметил-13-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12-гексаметил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он | 612069-26-8 | Около 0,54
Примесь E | (2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-11-[(3-Амино-3,4,6-тридезокси-β-D-ксило-гексопиранозил)окси]-3,4,10-тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он | 612069-27-9 | Около 0,43
Примесь F | (2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-3,4,10-Тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(N-метилформамидо)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он | 612069-28-0 | Около 0,51
Примесь G | (2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-3,4,10-Тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(4,N-диметилбензол-1-сульфонамидо)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он | 612069-31-5 | Около 1,36
Примесь H | (2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-11-{[3-(4-Ацетамидо-N-метилбензол-1-сульфонамидо)-3,4,6-тридезокси-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-3,4,10-тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он | 612069-30-4 | Около 0,79
Примесь I | (2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-3,4,10-Тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(метиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он | 172617-84-4 | Около 0,61
Примесь J | (2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-3,4,10,13-Тетрагидрокси-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он | 117693-41-1 | Около 0,54
Примесь L | (2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-3,4,10-Тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметилоксо-λ5-азанил)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он | 90503-06-3 | Около 0,29
Примесь M | (2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-3,4,10-Тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-11-[(3,4,6-тридезокси-3-формамидо-β-D-ксило-гексопиранозил)окси]-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он | 765927-71-7 | Около 0,37
Примесь N | (2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-3,4,10-Тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-11-[(3,4,6-тридезокси-3-оксо-β-D-ксило-гексопиранозил)окси]-2-этил-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он | 612069-25-7 | Около 0,76
Азитромицин |  |  | 1,00
Примесь O | (2R,3S,4R,5R,8R,10R,11R,12S,13S,14R)-3,4,10-Тригидрокси-13-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,6,8,10,12,14-гептаметил-2-пропил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-1-окса-6-азациклопентадекан-15-он | 763924-54-5 | Около 1,23
Примесь P | Неизвестная структура |  | Около 0,92

Хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу азитромицина для проверки пригодности хроматографической системы, и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы используют для идентификации пиков примесей F, H и J. Хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу азитромицина для идентификации примесей, и хроматограмму раствора для идентификации пиков примесей используют для идентификации пиков примесей A, B, C, E, F, G, I, J, L, M, N, O и Р.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика азитромицина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси J и примеси F должно быть не менее 3,0;

На хроматограмме раствора стандартного образца азитромицина:

- фактор асимметрии пика (AS) азитромицина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика азитромицина должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь F – 0,3; примесь G – 0,2; примесь Н – 0,1; примесь L – 2,3; примесь М – 0,6; примесь N – 0,7.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика азитромицина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме раствора стандартного образца азитромицина;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца азитромицина, мг;
P – содержание азитромицина в фармакопейном стандартном образце азитромицина,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь В – не более 2,0 %;

- сумма примесей D, J и Q – не более 0,5 %;

- примесь G – не более 0,2 %;

- примеси А, С, Е, F, H, I, L, М, N, О, Р – не более 0,5 % каждая;

- любая другая примесь – не более 0,2 %;

- сумма примесей – не более 3,0 %.

Не учитывают пики, относительное время удерживания которых менее относительного времени удерживания примеси L и более относительного времени удерживания примеси В, а также пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. От 4,0 % до 6,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,0025 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 2) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор рН 8,0. Растворяют 6,7 г дикалия гидрофосфата в 900 мл воды и доводят рН раствора до 8,00 фосфорной кислотой концентрированной. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Буферный раствор рН 11,0. Растворяют 6,7 г дикалия гидрофосфата в 900 мл воды и доводят рН раствора до 11,00 калия гидроксида раствором 10 %. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Буферный раствор рН 11,0—ацетонитрил 400:600.

Растворитель. Буферный раствор рН 8,0—ацетонитрил 40:60.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 2 мл ацетонитрила и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца азитромицина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца азитромицина, растворяют в 2 мл ацетонитрила и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, винилполимер октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика азитромицина. |  |

Хроматографируют раствор стандартного образца азитромицина и испытуемый раствор.

Время удерживания пика азитромицина – около 10 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца азитромицина:

- фактор асимметрии пика (AS) азитромицина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика азитромицина должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание азитромицина С38H72N2O12 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика азитромицина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика азитромицина на хроматограмме раствора стандартного образца азитромицина;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца азитромицина, мг;
P - содержание азитромицина в фармакопейном стандартном образце азитромицина,%;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0670 Албендазол (Albendazolum)

Взамен ВФС 42-3085-98

##### Определение

Метил{[5-(пропилсульфанил)-1H-бензимидазол-2-ил]карбамат}.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % албендазола C12H15N3O2S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в муравьиной кислоте безводной, очень мало растворим в метиленхлориде, практически нерастворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца албендазола.

Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец албендазола по отдельности растворяют в минимальных объёмах метиленхлорида, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Растворяют 0,1 г субстанции в смеси муравьиной кислоты безводной и метиленхлорида 1:9 и доводят объём раствора той же смесью до 10 мл. Полученный раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдержать сравнение с эталоном BY6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Растворы готовят непосредственно перед использованием.

Раствор аммония дигидрофосфата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,67 г аммония дигидрофосфата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Аммония дигидрофосфата
раствор—метанол 300:700.

Растворитель. Серная кислота концентрированная—метанол 1:99.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл растворителя и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартных образцов примесей A и D. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл растворителя и доводят объём раствора ПФ до метки. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца албендазола, содержащего примеси A и D, в 1,0 мл полученного раствора.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца албендазола для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси В, C, E, F и H, растворяют в 1 мл растворителя и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А:
5-(пропилсульфанил)-1H-бензимидазол-2-амин
[80983-36-4].

Примесь В:
метил{[5-(пропилсульфинил)-1H-бензимидазол-2-ил]карбамат}
[54029-12-8].

примесь С:
метил{[5-(пропилсульфонил)-1H-бензимидазол-2-ил]карбамат}
[75184-71-3].

Примесь D:
5-(пропилсульфонил)-1H-бензимидазол-2-амин,
[80983-34-2].

Примесь E:
метил[(1H-бензимидазол-2-ил)карбамат]
[10605-21-7].

Примесь F:
метил{[5-(метилсульфанил)-1H-бензимидазол-2-ил]карбамат},
[80983-45-5].

примесь H:
метил({5-[(2-метил-4-оксопентан-2-ил)сульфанил]-1H-бензимидазол-2-ил}карбамат)
[2469260-71-5].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 оС; |  |
Скорость потока | 0,7 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания албендазола. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартных образцов примесей A и D, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Албендазол – 1 (около 11 мин); примесь D – около 0,35; примеси B и C – около 0,40; примесь E – около 0,45; примесь A – около 0,48; примесь F – около 0,57; примесь H – около 0,66.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А и D используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора стандартных образцов примесей A и D. Для идентификации пиков примесей B, C, Е, F и H используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примесей B+C и примесью E должно быть не менее 1,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь A – 1,7; примеси B и C – 1,4; примесь D – 1,9; примесь E – 1,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси H не должна более чем в 6 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6 %);

- площадь пика примеси F не должна более чем в 5 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси A не должна более чем в 4 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,4 %);

- сумма площадей пиков примесей B и C не должна более чем в 4 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,4 %);

- площадь пика примеси E не должна более чем в 3 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика примеси D не должна более чем в 2 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика албендазола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать тринадцатикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Кислотно-основное титрование в неводных средах»).

Чтобы избежать местных перегревов во время титрования необходимо тщательно перемешивать раствор и завершить титрование сразу после достижения конечной точки.

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 3 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 40 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 26,53 мг албендазола C12H15N3O2S.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0357 Алендронат натрия тригидрат (Natrii alendronas trihydricus)

Алендроновая кислота

Вводится впервые

##### Определение

(4-Амино-1-гидроксибутан-1,1-диил)бис(фосфонат) триводорода натрия тригидрат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % алендроната натрия C4H12NNaO7P2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в воде, практически нерастворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца алендроната натрия тригидрата.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 50 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном В7 или ВY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 4,0 до 5,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

1. Примеси А и D

Раствор 9-флуоренилметилхлорформиата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,2 г 9-флуоренилметилхлорформиата, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки. Раствор используют сразу после приготовления.

Буферный раствор. Растворяют 5,88 г натрия цитрата, 2,84 г динатрия гидрофосфата безводного в 1900 мл воды и доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной или натрия гидроксида раствором 1 М до 8,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 2000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 29,4 г натрия цитрата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 150:850.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор—ацетонитрил 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Дериватизация. В полипропиленовую центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, 5,0 мл натрия тетрабората раствора 0,05 М, 5,0 мл ацетонитрила и 5,0 мл раствора 9-флуоренилметилхлорформиата, встряхивают в течение 45 с, выдерживают в тёмном месте при комнатной температуре в течение 30 мин. К полученному раствору прибавляют 20 мл метиленхлорида, встряхивают в течение 1 мин и центрифугируют при 4000 об/мин в течение 10 мин. Используют прозрачный верхний слой.

Стандартный раствор примеси А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 15,0 мг 4-аминобутановой кислоты (примесь А), растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В полипропиленовую центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и проводят дериватизацию аналогично испытуемому раствору.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 3,0 мг фармакопейного стандартного образца алендроната натрия для проверки пригодности хроматографической системы (содержит примесь D), растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В полипропиленовую центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора проводят дериватизацию аналогично испытуемому раствору.

Контрольный раствор. В полипропиленовую центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл растворителя и проводят дериватизацию аналогично испытуемому раствору.

Примечание

Примесь А: 4-Аминобутановая кислота [56-12-2].

Примесь D: структура неизвестна.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,1 мм, сополимер стирол-дивинилбензола, 10 мкм; |  |
Температура колонки | 45 °C; |  |
Скорость потока | 1,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 266 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–3 | 100 | 0
3–18 | 100 → 50 | 0 → 50
18–28 | 50 → 0 | 50 → 100

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, стандартный раствор примеси А, испытуемый раствор и контрольный раствор.

Относительное время удерживания соединений. Алендронат – 1 (около 7 мин); примесь D – около 1,4; примесь А – около 1,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют хроматограмму стандартного раствора; для идентификации пика примеси D используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу алендроната натрия для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками алендроната и примеси D должно быть не менее 5,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси А умножают на 0,4.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- примесь А – не более 0,15 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

2. Примеси B и C

Подвижная фаза (ПФ). В химическом стакане смешивают 0,2 мл муравьиной кислоты безводной и 1000 мл воды, доводят значение рН натрия гидроксида раствором 2 М до 3,5.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор примеси B. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,0 г фосфорной кислоты концентрированной (примесь B) и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор примеси C. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 г фосфористой кислоты (примесь C) и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл раствора А, 2,0 мл раствора примеси C и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь В: фосфаты;

Примесь С: фосфиты.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, анионообменная смола для хроматографии, 7 мкм; |  |
Температура колонки | 35 °C; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | дифференциальный рефрактометрический; |  |
Объём пробы | 100 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика алендроната. |  |

Хроматографируют раствор примеси B, раствор примеси C, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Алендронат – 1 (около 16 мин); примесь В – около 1,3; примесь С – 1,6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей B и С не должна превышать площадь пика алендроната на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Потеря в массе при высушивании. От 16,1 до 17,1 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают до постоянной массы 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 140–145 °С.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3Б).

Испытуемый раствор. В колбу Кьельдаля вместимостью 100 мл (в случае интенсивного пенообразования используют колбу вместимостью 300 мл) помещают 1,0 г субстанции, фиксируют колбу под углом 45°, прибавляют 5 мл смеси серная кислота концентрированная—азотная кислота концентрированная 8:10 до полного увлажнения порошка. Содержимое колбы осторожно нагревают до начала реакции, оставляют колбу. После замедления реакции прибавляют 5 мл той же смеси, нагревая после каждого прибавления. Повторяют процедуру до тех пор, пока общий объём прибавленной смеси не достигнет 18 мл, после чего усиливают нагревание и осторожно кипятят до потемнения раствора. Полученный раствор охлаждают. К охлаждённому раствору прибавляют 2 мл азотной кислоты концентрированной и снова нагревают до потемнения раствора. Процедуру повторяют до тех пор, пока раствор не перестанет темнеть. Усиливают нагревание до получения плотных белых паров. Полученный раствор охлаждают. К охлаждённому раствору прибавляют 5 мл воды, осторожно нагревают до появления плотных белых паров и продолжают нагревать до тех пор, пока объём раствора не уменьшится до 2–3 мл. Полученный раствор охлаждают. К охлаждённому раствору прибавляют 5 мл воды. Если раствор имеет жёлтую окраску, то к нему осторожно прибавляют 1 мл водорода пероксида и нагревают до появления паров белого цвета и уменьшения объёма до 2–3 мл. В случае жёлтого окрашивания раствора, прибавляют 5 мл воды и 1 мл водорода пероксида до обесцвечивания раствора. Полученный раствор охлаждают и доводят водой до 10 мл.

Определение тяжёлых металлов проводят, сравнивая с эталоном, состоящим из 2 мл эталонного раствора 2,6 мл воды и такого же количества реактивов, какое добавлено к испытуемому раствору.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») в условиях испытания «Родственные примеси. Примеси B и C» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца алендроната натрия тригидрата. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца алендроната натрия тригидрата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца алендроната натрия тригидрата и испытуемый раствор.

Содержание алендроната натрия C4H12NNaO7P2 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика алендроната на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика алендроната на хроматограмме раствора стандартного образца алендроната натрия тригидрата;
a1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца алендроната натрия тригидрата, мг;
P – содержание алендроната натрия в фармакопейном стандартном образце алендроната натрия тригидрата,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Перед проведением испытания должна быть проверена разделительная способность хроматографической системы.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0341 Алимемазина тартрат

Алимемазин
Alimemazini tartras

Вводится впервые

##### Определение

(2RS)-N,N,2-Триметил-3-(10H-фенотиазин-10-ил)пропан-1-амина (2R,3R)-2,3-дигидроксибутандиоат (2:1).

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % алимемазина тартрата (C18H22N2S)2·C4H6O6 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый со слегка желтоватым оттенком мелкокристаллический порошок.

* Чувствителен к свету и воздействию воздуха.

Растворимость. Легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в толуоле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца алимемазина тартрата.

2. Качественная реакция. Растворяют 25 мг субстанции в 1 мл метанола. Полученный раствор должен давать характерную реакцию Б на тартраты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 159 до 163 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Опалесценция раствора 1,0 г субстанции в 10 мл воды не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 5,0 до 6,5 (2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3). Раствор используют свежеприготовленным и защищают от света.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 3,854 г аммония ацетата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—метанол—раствор А 100:400:500.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 20:80.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 35 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помешают 3,5 мг фармакопейного стандартного образца алимемазина для проверки пригодности хроматографической системы (содержит примеси A, B и C), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А:
10-[(2RS)-3-(диметиламино)-N,N,2-триметилпропил]-10H-5λ4-фенотиазин-5-он
[10071-07-5].

Примесь В:
(2RS)-N,2-диметил-3-(10H-фенотиазин-10-ил)пропан-1-амин
[22732-04-3].

Примесь С:
10H-фенотиазин
[92-84-2].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |  |
Температура колонки | 40 °C; |  |
Скорость потока | 1,3 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 253 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика алимемазина. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Алимемазин – 1 (около 27 мин); примесь А – около 0,1; примесь В – около 0,5; примесь С – около 1,4.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В и С используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу алимемазина для проверки пригодности системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика алимемазина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками алимемазина и примеси С должно быть не менее 5,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь А – 4,4; примесь С – 0,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси В не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика алимемазина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика каждой из примесей А и С не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика алимемазина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика алимемазина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика алимемазина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика алимемазина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в течение 3 ч при температуре 105 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 3,5 ЕЭ на 1 мг алимемазина тартрата (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 37,35 мг алимемазина тартрата (C18H22N2S)2·C4H6O6.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке. В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытания проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0342 Аллопуринол (Allopurinolum)

Взамен ФС 42-2408-99

##### Определение

1,5-Дигидро-4H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-он.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % аллопуринола C5H4N4O в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый мелкокристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в натрия гидроксида растворе 10 %, умеренно растворим в диметилсульфоксиде, очень мало растворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца аллопуринола.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 1 мл натрия гидроксида растворе 0,1 М и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимум при 250 нм и минимум при 231 нм. Отношение оптических плотностей А231/А250 должно быть 0,47±0,05.

3. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 5 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М, прибавляют 1 мл реактива Несслера, нагревают до кипения и оставляют на 30 мин; должен образоваться осадок жёлтого цвета.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном 1 (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора» должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном В7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы хранят при температуре 8 °С не более 48 ч.

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,25 г калия дигидрофосфата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Растворитель. ПФА—ПФБ 900:100.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М, обрабатывают ультразвуком в течение 1 мин, прибавляют 80 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца аллопуринола. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) стандартного образца аллопуринола, растворяют в 2 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М, обрабатывают ультразвуком в течение 1 мин, прибавляют 80 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси A. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) стандартного образца примеси A, растворяют в 2 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М, обрабатывают ультразвуком в течение 1 мин, прибавляют 80 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси B. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) стандартного образца примеси B, растворяют в 2 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М, обрабатывают ультразвуком в течение 1 мин, прибавляют 80 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси C. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) стандартного образца примеси C, растворяют в 2 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М, обрабатывают ультразвуком в течение 1 мин, прибавляют 80 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси D. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) стандартного образца примеси D, растворяют в 2 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М, обрабатывают ультразвуком в течение 1 мин, прибавляют 80 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси E. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) стандартного образца примеси E, растворяют в 2 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М, обрабатывают ультразвуком в течение 1 мин, прибавляют 80 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают по 1,0 мл раствора стандартного образца аллопуринола, раствора стандартного образца примеси A, раствора стандартного образца примеси B, раствора стандартного образца примеси C, раствора стандартного образца примеси D и раствора стандартного образца примеси E и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А: 5-амино-1H-пиразол-4-карбоксамид [5334-31-6].

Примесь В: 5-формамидо-1H-пиразол-4-карбоксамид [22407-20-1].

Примесь С: 5-(4H-1,2,4-триазол-4-ил)-1H-пиразол-4-карбоксамид [1346604-13-4].

Примесь D: этил(5-амино-1H-пиразол-4-карбоксилат) [6994-25-8].

Примесь Е: этил(5-формамидо-1H-пиразол-4-карбоксилат) [31055-19-3].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Температура образца | 8 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 40 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА, % | ПФБ, %
--- | --- | ---
0–30 | 90 → 70 | 10 → 30
30–35 | 70 | 30
35–36 | 70 → 90 | 30 → 10
36–46 | 90 | 10

Хроматографируют стандартный и испытуемый растворы.

Относительное время удерживания соединений. Аллопуринол – 1 (около 10 мин); примесь A – около 0,62; примесь C – около 0,79; примесь B – около 0,81; примесь D – около 4,4; примесь E – около 4,8.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примеси А, В, С, D и Е используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками примеси C и примеси B должно быть не менее 0,8;

- фактор асимметрии пика (AS) аллопуринола должен быть не более 1,5.

Содержание каждой из примесей A, B, C, D и E в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей A, B, C, D и E на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика каждой из примесей A, B, C, D и E на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца каждой из примесей A, B, C, D и E, мг;
P – содержание примеси A, B, C, D и E в фармакопейном стандартном образце примеси A, B, C, D и E, соответственно,%.

Содержание любой другой примеси в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика аллопуринола на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца аллопуринола, мг;
P – содержание аллопуринола в фармакопейном стандартном образце аллопуринола,%.

Допустимое содержание примесей:

- примеси А, В, С, D, Е − не более 0,2 % каждая;

- примесь с относительным временем удерживания около 6,5 – не более 0,2 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Гидразин. Не более 0,00025 %. Гидразин, присутствующий в субстанции, реагирует с бензальдегидом, образуя бензальдегид азин. Определение полученного продукта реакции проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Допускается использование и других реактивов для проведения реакции, например диметиламинобензальдегида или других реагентов, позволяющих повысить чувствительность методики. При этом применяемая методика должна быть валидирована.

Подвижная фаза (ПФ). 2-Пропанол—гексан 50:950.

Растворитель. Натрия гидроксида раствор 8,5 %—метанол 1:1.

Раствор бензальдегида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 г бензальдегида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Испытуемый раствор. Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 5 мл растворителя, прибавляют 4 мл раствора бензальдегида, перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 2,5 ч. Прибавляют 5,0 мл гексана и встряхивают в течение 1 мин. Оставляют до разделения слоёв, используют верхний (гексановый) слой.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) гидразина сульфата, растворяют в растворителе, обрабатывают ультразвуком, и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. К 5,0 мл полученного раствора прибавляют 4 мл раствора бензальдегида, перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 2,5 ч. Прибавляют 5,0 мл гексана, встряхивают в течение 1 мин и оставляют до разделения слоёв. Используют органический (верхний) слой.

Контрольный раствор. К 5,0 мл растворителя прибавляют 4 мл раствора бензальдегида, перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 2,5 ч. Прибавляют 5,0 мл гексана и встряхивают в течение 1 мин. Оставляют до разделения слоёв, используют верхний (гексановый) слой.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель цианосилильный для хроматографии, 5 мкм, с размером пор 10 нм; |  |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Температура образца | 8 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 310 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Хроматографируют контрольный раствор, стандартный и испытуемый растворы.

Относительное время удерживания соединений. Бензальдегид – 1 (около 2,8 мин); бензальдегид азин – около 0,8.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками бензальдегид азина и бензальдегида должно быть не менее 2,0;

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика бензальдегид азина должно быть не менее 20.

Содержание гидразина в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика бензальдегид азина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика бензальдегид азина на хроматограмме стандартного раствора;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска гидразина сульфата, мг;
P - содержание основного вещества в гидразина сульфате,%;
32,05 – молекулярная масса гидразина;
130,12 – молекулярная масса гидразина сульфата.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», или (методом 6).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в 25 мл диметилсульфоксида, предварительно нейтрализованного по тимоловому синему 0,1 М раствором натрия гидроксида в смеси метанола и бензола, и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида в смеси метанола и бензола. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида в смеси метанола и бензола соответствует 13,61 мг аллопуринола C5H4N4O.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0343 Алпразолам (Alprazolamum)

Взамен ВФС 42-2877-97

##### Определение

1-Метил-6-фенил-8-хлор-4H-[1,2,4]триазоло[4,3-a][1,4]бензодиазепин.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % алпразолама C17H13ClN4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в хлороформе, умеренно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

* Растворяется в разбавленной азотной кислоте.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца алпразолама.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах этилацетата, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл переносят 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимум при 223 нм и плечо в интервале от 240 до 250 нм.

##### Испытания

Температура плавления. От 225 до 230 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). В делительную воронку помещают смесь растворителей метанол—аммиака раствор концентрированный 25 %—этилацетат 20:30:80, встряхивают в течение 5 мин и оставляют до полного разделения слоёв. В качестве ПФ используют верхний слой.

ПФ допустимо использовать только однократно.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в хлороформе и доводят объём тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца алпразолама. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца алпразолама, растворяют в хлороформе и доводят объём тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения 1. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца алпразолама и доводят объём раствора хлороформом до метки.

Раствор сравнения 2. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл раствора стандартного образца алпразолама и доводят объём раствора хлороформом до метки.

Раствор сравнения 3. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 3,0 мл раствора стандартного образца алпразолама и доводят раствор хлороформом до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг фармакопейного стандартного образца диазепама, растворяют в 25 мл хлороформа при встряхивании и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Смешивают 2,0 мл полученного раствора и 2,0 мл раствора стандартного образца алпразолама. Раствор используют свежеприготовленным.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (100 мкг), раствора сравнения 1 (0,1 мкг), раствора сравнения 2 (0,2 мкг), раствора сравнения 3 (0,3 мкг) и раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в предварительно насыщенную в течение не менее 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения 1 должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 разделённые зоны адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по совокупности величины и степени подавления флуоресценции не должна превышать зону адсорбции алпразолама на хроматограмме раствора сравнения 3 (не более 0,3%).

Суммарное содержание примесей, оцененное по совокупности величины и степени подавления флуоресценции их зон адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора в сравнении с зонами адсорбции на хроматограммах раствора сравнения 1, раствора сравнения 2 и раствора сравнения 3, содержащих 0,1 мкг, 0,2 мкг и 0,3 мкг алпразолама, не должно превышать 1,0 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,14 г (точная навеска) субстанции в смеси из 20 мл уксусного ангидрида и 30 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») по второму перегибу на кривой титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 15,44 мг алпразолама C17H13ClN4.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0344 Альфакальцидол (Alfacalcidolum)

Взамен ФС 42-3450-97

##### Определение

(5Z,7E)-9,10-Секохолеста-5,7,10(19)-триен-1α,3β-диол.

Содержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % альфакальцидола C27H44O2 в пересчёте на сухое вещество.

В растворе в зависимости от температуры и времени проявляет обратимую изомеризацию до пре-альфакальцидола. Активность обусловлена обоими соединениями.

##### Свойства

Описание. Белые или почти белые кристаллы или белый кристаллический порошок.

* Чувствителен к воздействию воздуха, тепла и света.

Растворимость. Практически нерастворим в воде, легко растворим в спирте 96 %, растворим в жирных маслах.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца альфакальцидола.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика альфакальцидола на хроматограмме раствора стандартного образца альфакальцидола (раздел «Количественное определение»).

3. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения испытуемого раствора в области от 220 до 330 нм должен иметь максимум при 265 нм и минимум при 228 нм.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в спирте 95 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 95 % до метки.

##### Испытания

Температура плавления. От 137 до 144 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1, без предварительного подсушивания).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от света и воздуха и используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—вода—ацетонитрил 150:170:680.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 25 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца альфакальцидола. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца альфакальцидола, растворяют в 25 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца альфакальцидола для проверки пригодности хроматографической системы (содержит примеси A и D), растворяют в 10 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для идентификации примеси В. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца альфакальцидола для идентификации примеси В, растворяют в 10 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца альфакальцидола и доводят объём раствора смесью ацетонитрил—вода 1:1 до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора той же смесью до метки.

Примечание

Примесь A: (5E,7E)-9,10-секохолеста-5,7,10(19)-триен-1α,3β-диол [65445-14-9].

Примесь B: (5Z,7E)-9,10-секохолеста-5,7,10(19)-триен-1β,3β-диол [63181-13-5].

Примесь D: неизвестная структура.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 2,1 мм, силикагель октадецилсилильный с полярными группами и этиленовыми мостиками, гибридный, эндкепированный, 1,7 мкм; |  |
Температура колонки | 32 °C; |  |
Скорость потока | 0,3 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 264 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика альфакальцидола. |  |

Относительное время удерживания соединений. Альфакальцидол – 1 (около 15 мин); пре-альфакальцидол – около 0,91; примесь A – около 0,94; примесь D – около 0,96; примесь B – около 1,1.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси используют относительное время удерживания соединений, хроматограмма, прилагаемая к стандартному образцу альфакальцидола для проверки пригодности хроматографической системы, и хроматограмма раствора для проверки пригодности хроматографической системы используются для идентификации пиков примесей A и D, а также пре-альфакальцидола; хроматограмма, прилагаемая к стандартному образцу альфакальцидола для идентификации примеси B, и хроматограмма раствора для идентификации примеси B используются для идентификации пика примеси B.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика альфакальцидола должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси D и альфакальцидола должно быть не менее 1,5;

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками пре-альфакальцидола и примеси A должно быть не менее 2,0;

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси A и примеси D должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей: Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- примеси A, B и D – не более 0,5 % каждая;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают пик пре-альфакальцидола и пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,3 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 0,1 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 50 °C и остаточном давлении не более 0,67 кПа (5 мм рт. ст.).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца альфакальцидола и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца альфакальцидола относительное стандартное отклонение площади пика альфакальцидола должно быть не более 1,0 % (6 введений).

Содержание альфакальцидола C27H44O2 в субстанции в процентах в пересчёте на сухое вещество (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика альфакальцидола на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика альфакальцидола на хроматограмме раствора стандартного образца альфакальцидола;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца альфакальцидола, мг;
P – содержание альфакальцидола в фармакопейном стандартном образце альфакальцидола,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

Примечание – Если на хроматограмме испытуемого раствора присутствует пик пре-альфакальцидола, то в расчётах используется сумма площадей пиков альфакальцидола и пре-альфакальцидола.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, под инертным газом, в защищённом от света месте при температуре от 2 до 8 °С.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0051 Амброксола гидрохлорид

Амброксол
Ambroxoli hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0051.18

##### Определение

транс-4-{[(2-Амино-3,5-дибромфенил)метил]амино}циклогексан-1-ола гидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % амброксола гидрохлорида C13H18Br2N2O∙HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в метаноле, умеренно растворим в воде, практически нерастворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца амброксола гидрохлорида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в серной кислоты растворе 0,05 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора серной кислоты раствором 0,05 М до метки.

- Ультрафиолетовый спектр испытуемого раствора в области длин волн от 200 до 350 нм должен иметь максимумы поглощения при 245 нм и 310 нм. Отношение оптических плотностей А245/А310 должно составлять от 3,2 до 3,4.

3. Качественная реакция. Растворяют 25 мг субстанции в 2,5 мл воды, прибавляют 1 мл аммиака раствора 10 %, перемешивают, выдерживают в течение 5 мин и фильтруют. Фильтрат, подкислённый азотной кислотой разведённой 12,5 %, должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 20 мл метанола должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», не должна превышать эталон сравнения Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

рН раствора. От 4,5 до 6,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие амброксола гидрохлорид и его примеси, защищают от света и готовят непосредственно перед применением.

Метод 1

Буферный раствор. Растворяют 1,32 г аммония фосфата в 900 мл воды, доводят рН раствора до 7,50±0,05 фосфорной кислотой концентрированной. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Буферный раствор—ацетонитрил 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца амброксола гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца амброксола гидрохлорида, растворяют в воде и доводят объём тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси В. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси В, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 40 мг фармакопейного стандартного образца амброксола гидрохлорида, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора раствором стандартного образца примеси В до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10,0 мл раствора стандартного образца амброксола гидрохлорида и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь В: транс-4-[6,8-дибром-1,4-дигидрохиназолин-3(2Н)-ил] циклогексан-1-ол [18683-95-9].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 оС; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 248 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика амброксола. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца амброксола гидрохлорида и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Амброксол – 1 (около 7 мин); примесь В – около 0,7.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика амброксола должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси В и амброксола должно быть не менее 4,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца амброксола гидрохлорида:

- фактор асимметрии пика (AS) амброксола должен быть не менее 0,8 и не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика амброксола должно быть не более 3,0 % (6 введений).

Содержание каждой примеси в субстанции в процентах (X) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика каждой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика амброксола на хроматограмме раствора стандартного образца амброксола гидрохлорида;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца амброксола гидрохлорида, мг;
P - содержание амброксола гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце амброксола гидрохлорида,%.

Допустимое содержание примесей:

- каждая примесь – не более 0,1%;

- сумма примесей – не более 0,3%.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика амброксола на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Метод 2 (альтернативный)

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Метод 1» со следующими изменениями.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 5 мг субстанции в 0,2 мл метанола, прибавляют 0,04 мл смеси формальдегида раствор 35 %—вода 1:99 и нагревают при температуре 60 °C в течение 5 мин. Упаривают в токе азота досуха, остаток растворяют в 5 мл воды и доводят ПФ до 20 мл. Раствор содержит примесь В.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Амброксол – 1 (около 7 мин); примесь В – около 0,7.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика амброксола должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси В и амброксола должно быть не менее 4,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика амброксола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь пика амброксола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика амброксола на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 2), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,5 ЕЭ на 1 мг амброксола гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,4 г (точная навеска) субстанции в 50 мл безводной уксусной кислоты, прибавляют 5 мл раствора ртути(II) ацетата и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты.

Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают расход титранта между двумя точками перегиба на кривой титрования.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 41,46 мг амброксола гидрохлорида C13H18Br2N2O∙HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0350 Амикацина сульфат

Амикацин
Amikacini sulfas

Взамен ВФС 42-1879-89

##### Определение

1-N-[(2S)-4-Амино-2-гидроксибутаноил]-6-O-(3-амино-3-дезокси-α-D-глюкопиранозил)-4-O-(6-амино-6-дезокси-α-D-глюкопиранозил)-2-дезокси-D-стрептамина сульфат (1:2).

Субстанцию получают полусинтетическим путём из канамицина А. Cодержит не менее 96,5 % и не более 102,0 % амикацина сульфата C22H43N5O13·2H2SO4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 % и ацетоне.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца амикацина сульфата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика амикацина на хроматограмме раствора стандартного образца амикацина сульфата (раздел «Количественное определение»).

3. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Метиленхлорид—аммиака раствор—метанол 25:30:40.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

- Раствор стандартного образца амикацина сульфата. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного образца амикацина сульфата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

- Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца канамицина моносульфата, растворяют в 1 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (12,5 мкг), раствора стандартного образца амикацина сульфата (12,5 мкг) и раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (по 2,5 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в предварительно насыщенную в течение 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают нингидрина раствором уксусно-спиртовым 1,7 %, нагревают при 110 °C в течение 5 мин и просматривают при видимом свете.

- Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 разделённые зоны адсорбции.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции амикацина на хроматограмме раствора стандартного образца амикацина сульфата.

4. Качественная реакция. Раствор 45 мг субстанции в 5 мл воды должен давать реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +76 до +84 в пересчёте на сухое вещество (2 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 2,0 г субстанции в 5 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y4 или BY4 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 2,0 до 4,0 (1 % раствор, ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,8 г натрия октансульфоната, 20 г натрия сульфата безводного, растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, прибавляют 14 мл тетрагидрофурана и 50 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М, предварительно доведённого фосфорной кислоты раствором 1 М до рН 3,0.

Подвижная фаза Б (ПФБ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,8 г натрия октансульфоната, 28 г натрия сульфата безводного, растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, прибавляют 14 мл тетрагидрофурана и 50 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М, предварительно доведённого фосфорной кислоты раствором 1 М до рН 3,0.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 33 мг субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора ПФА до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца амикацина для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси A, B, F и H, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси I. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 6,6 мг фармакопейного стандартного образца примеси амикацина I, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Постколоночный раствор. Смесь натрия гидроксида раствор насыщенный, свободный от карбонатов—вода, свободная от углерода диоксида 1:24, который добавляется беспульсовым образом к эффлюенту колонки с помощью полимерной смесительной спирали объёмом 375 мкл.

Примечание

Примесь A:
1-N-[(2S)-4-амино-2-гидроксибутаноил]-4-O-(3-амино-3-дезокси-α-D-глюкопиранозил)-6-O-(6-амино-6-дезокси-α-D-глюкопиранозил)-2-дезокси-L-стрептамин [50725-24-1].

Примесь B:
1,3-N-бис[(2S)-4-амино-2-гидроксибутаноил]-6-O-(3-амино-3-дезокси-α-D-глюкопиранозил)-4-O-(6-амино-6-дезокси-α-D-глюкопиранозил)-2-дезокси-D-стрептамин [927821-99-6].

Примесь F:
4-O-{6-[(2S)-4-амино-2-гидроксибутанамидо]-6-дезокси-α-D-глюкопиранозил}-1-N-[(2S)-4-амино-2-гидроксибутаноил]-6-O-(3-амино-3-дезокси-α-D-глюкопиранозил)-2-дезокси-D-стрептамин [197909-67-4].

Примесь H:
1-N-[(2S)-4-амино-2-гидроксибутаноил]-6-O-(3-амино-3-дезокси-α-D-глюкопиранозил)-4-O-(2,6-диамино-2,6-дидезокси-α-D-глюкопиранозил)-2-дезокси-D-стрептамин [48237-20-3].

Примесь I: (2S)-4-Амино-2-гидроксибутановая кислота [40371-51-5].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | импульсный амперометрический или эквивалентный с золотым индикаторным электродом, хлорсеребряным электродом сравнения и вспомогательным электродом из нержавеющей стали, образующим корпус ячейки; потенциал детекции +0,05 В; потенциал окисления +0,75 В; потенциал восстановления −0,15 В; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Скорость постколоночного раствора | 0,3 мл/мин. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–3 | 100 | 0
3–38,0 | 100 → 30 | 0 → 70
38,0–38,1 | 30 → 0 | 70 → 100
38,1–68 | 0 | 100

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, растворы сравнения А и Б, стандартный раствор и раствор стандартного образца примеси I.

Относительное время удерживания соединений. Амикацина сульфат – 1 (около 28 мин); примесь I – около 0,13; примесь F – около 0,92; примесь B – около 0,95; примесь A – около 1,62; примесь H – около 1,95.

Для идентификации пиков примесей A, B, F и H используют хроматограмму стандартного раствора и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу амикацина для проверки пригодности системы. Для идентификации пика примеси I используют хроматограмму раствора стандартного раствора I.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси В и амикацина сульфата должно быть не менее 5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси I не должна превышать площади пика примеси I на хроматограмме раствора стандартного образца примеси I (не более 0,5 %);

- площадь пика каждой из примесей A, B, F и H не должна превышать 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 1,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 1,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (менее 0,1 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 13,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. От 23,3 до 25,8 % в пересчёте на сухое вещество. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 100 мл воды, доводят значение pH аммиака раствором концентрированным 25 % до 11,0. Прибавляют 10,0 мл 0,1 М раствора бария хлорида и 0,5 мг фталеинового пурпурного.

Полученный раствор титруют 0,1 М раствором натрия эдетата. Когда окраска начинает меняться, прибавляют 50 мл спирта 96 % и продолжают титрование до исчезновения фиолетово-синей окраски.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Разность объёмов 0,1 М раствора натрия эдетата соответствует объёму 0,1 М раствора бария хлорида, прореагировавшего с сульфатами.

Содержание сульфата SO4 в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где V1 - объём 0,1 М раствора натрия эдетата, израсходованный на титрование в основном опыте, мл;
V0 - объём 0,1 М раствора натрия эдетата, израсходованный на титрование в контрольном опыте, мл;
a – навеска субстанции, мг;
K - поправочный коэффициент 0,1 М раствора натрия эдетата;
9,606 - количество сульфата, мг, соответствующее 1 мл 0,1 М раствора бария хлорида, мг/мл;
W – потеря в массе при высушивании,%.

Сульфатная зола. Не более 1,0 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 1,0 мг амикацина в 0,5 мл натрия хлорида раствора 0,9 % для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения – 48 ч.

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,33 ЕЭ на 1 мг амикацина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

* Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,8 г натрия октансульфоната, 20 г натрия сульфата безводного, растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, прибавляют 58 мл ацетонитрила и 50 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М, предварительно доведённого фосфорной кислоты раствором 1 М до рН 3,0.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца амикацина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 37,4 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца амикацина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 200 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Хроматографируют раствор стандартного образца амикацина и испытуемый раствор.

Время удерживания амикацина – около 30 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца амикацина:

- фактор асимметрии пика (AS) амикацина должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика амикацина должно быть не более 1,5 % (6 введений).

Содержание амикацина сульфата C22H43N5O13·2H2SO4 в субстанции в процентах в пересчёте на сухое вещество (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика амикацина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика амикацина на хроматограмме раствора стандартного образца амикацина;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца амикацина, мг;
W – потеря в массе при высушивании,%;
P – содержание амикацина в фармакопейном стандартном образце амикацина,%;
585,60 – молекулярная масса амикацина;
781,76 – молекулярная масса амикацина сульфата.

##### Хранение

В герметично закрытой упаковке.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0351 Аминодигидрофталазиндион натрия

Aminodihydrophthalazindionum natricum

Взамен ВФС 42-3623-00

##### Определение

5-Амино-1,4-диоксо-1,2,3,4-тетрагидрофталазин-2-ид натрия.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 100,5 % аминодигидрофталазиндиона натрия С8Н6N3NaО2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области») Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца аминодигидрофталазиндиона натрия.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 210 до 380 нм должен иметь максимумы при 221, 297 и 347 нм и минимумы при 260 и 320 нм.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность раствора и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 8,3 до 9,5 (1,0 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»)

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Спирт 96 %—аммиака раствор концентрированный 25 %—бутанол 20:20:60.

Испытуемый раствор. Растворяют 10 мг субстанции в 1,0 мл воды.

Раствор стандартного образца аминодигидрофталазиндиона натрия. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг фармакопейного стандартного образца аминодигидрофталазиндиона натрия, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл раствора стандартного образца аминодигидрофталазиндиона натрия и доводят объём раствора водой до метки.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (50 мкг), раствора стандартного образца аминодигидрофталазиндиона натрия (0,1 мкг) и раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (0,01 мкг).

Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при 254 и 365 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по величине не должна превышать основную зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца аминодигидрофталазиндиона натрия (не более 0,2 %). Сумма примесей – не более 1,0 %.

Зону адсорбции на линии старта при оценке не учитывают.

Потеря в массе при высушивании. Не более 2,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). В химический стакан помещают 0,15 г субстанции, растворяют в 29 мл воды и прибавляют 1 мл азотной кислоты разведённой 16 %, перемешивают и фильтруют. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Хлориды. Не более 0,04 % (ОФС «Хлориды»). Для определения используют 10 мл раствора, полученного в испытании «Сульфаты».

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 1,75 ЕЭ на 1 мг аминодигидрофталазиндиона натрия (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 75 мг (точная навеска) субстанции в 5 мл воды, прибавляют 25 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, 0,5 г калия бромида, 10 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия нитрита. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 19,91 мг аминодигидрофталазиндиона натрия С8Н6N3NaО2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

*Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0001 Аминокапроновая кислота (Acidum aminocaproicum)

Взамен ФС.2.1.0001.15

##### Определение

6-Аминогексановая кислота.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % аминокапроновой кислоты C6H13NO2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало или очень мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца аминокапроновой кислоты.

2. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 2 мл воды, нейтрализуют 0,1 М раствором натрия гидроксида (индикатор – 0,15 мл фенолфталеина раствора 1 %), прибавляют 0,3 мл нингидрина раствора 0,1 % и нагревают до кипения; должно появиться окрашивание от синего до сине-фиолетового цвета.

3. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 2 мл воды, прибавляют 50 мкл фенолфталеина раствора 1 % и 0,4 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М; должно появиться красное окрашивание. После прибавления 0,1 мл формалина, нейтрализованного по фенолфталеину (слабо-розовое окрашивание), окраска должна исчезнуть.

##### Испытания

Температура плавления. От 202 до 206 °C (с разложением, ОФС «Температура плавления»).

Прозрачность раствора. Раствор 10 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным в течение 24 ч (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

pH раствора. От 7,5 до 8,0 (20 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Термическая устойчивость. Оптическая плотность испытуемого раствора в воде при длине волны 287 нм не должна превышать 0,15, при длине волны 450 нм – 0,03 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В чашку диаметром 9 см выкладывают тонким слоем 2,0 г субстанции, выдерживают при 100±2 °C в течение 72 ч, растворяют в воде, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объём раствора водой до метки.

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Аминокислоты

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—вода—бутанол 20:20:60.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца аминокапроновой кислоты. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца аминокапроновой кислоты, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора Б и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца аминокапроновой кислоты и 10 мг фармакопейного стандартного образца лейцина, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора А (50 мкг), испытуемого раствора Б (1 мкг), раствора стандартного образца аминокапроновой кислоты (10 мкг), раствора сравнения (0,25 мкг) и стандартного раствора (2 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат в токе воздуха в течение 10 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры и сушат в сушильном шкафу при температуре 95±5 °C в течение 7,5±2,5 мин до исчезновения запаха растворителей, после чего опрыскивают нингидрина раствором 0,25 %. Пластинку снова выдерживают в сушильном шкафу при температуре 95±5 °C в течение 12,5±2,5 мин и просматривают при дневном свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора должны наблюдаться две чётко разделённых зоны адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора А любая дополнительная зона адсорбции по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Суммарное содержание посторонних аминокислот не должно превышать 1,0 %.

Капролактам

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—вода—бутанол 12:27:77.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца капролактама. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного образца капролактама, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (500 мкг) и раствора сравнения (2,5 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат в токе воздуха в течение 10 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры и сушат в сушильном шкафу при температуре 90–100°C в течение 7,5±2,5 мин до исчезновения запаха растворителей, после чего опрыскивают фосфорномолибденовой кислоты раствором 3 %. Пластинку снова выдерживают в сушильном шкафу при температуре 90–100 °C в течение 12,5±2,5 мин и просматривают в УФ свете при 254 нм.

Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме раствора стандартного образца капролактама чётко видна зона адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора допускается наличие одной дополнительной зоны адсорбции на уровне зоны адсорбции раствора стандартного образца капролактама, не превышающей её по интенсивности окраски и величине (не более 0,5 %).

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,05 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии.

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции при нагревании до температуры 37,5±2,5 °С в 15 мл уксусной кислоты ледяной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до перехода фиолетовой окраски в сине-зелёную (индикатор – 2 капли кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 13,12 мг аминокапроновой кислоты C6H13NO2.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0358 Аминометилбензойная кислота (Acidum aminomethylbenzoicum)

Взамен ФС 42-1620-99

##### Определение

4-(Аминометил)бензойная кислота.

Cодержит не менее 99,0 % аминометилбензойной кислоты C8H9NO2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 % и хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца аминометилбензойной кислоты.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 210 до 260 нм должен иметь максимум при длине волны 320 нм.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 10 мл воды, прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М и 1 каплю фенолфталеина раствора 1 %; должно появиться малиновое окрашивание, исчезающее при прибавлении 1,0 мл формальдегида раствора 35 %, нейтрализованного по фенолфталеину.

4. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 10 мл воды, прибавляют 1 мл нингидрина раствора 0,25 %, нагревают на водяной бане в течение 5 мин; должно появиться сине-фиолетовое окрашивание.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 6,0 до 7,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). К 100 мл ацетонитрила прибавляют 900 мл воды и доводят значение рН полученного раствора уксусной кислотой разведённой 30 % до 3,45.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в 20 мл ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор примеси 1. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг примеси 1 (4-формилбензойная кислота [619-66-9]), прибавляют 20 мл ПФ, выдерживают на ультразвуковой бане до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФ до метки. Срок годности раствора – 24 ч.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, 1,0 мл раствора примеси 1 и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 7 мкм; |  |
Температура колонки | 27 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 30 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками аминометилбензойной кислоты и примеси 1 должно быть не менее 7,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси 1 умножают на 0,13.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- примесь 1 – не более 0,25 %;

- любая другая примесь – не более 0,25 %;

- сумма примесей – не более 0,75 %.

Вода. Не более 5,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции, выдерживают в 5 мл метанола в течение 5 мин при непрерывном перемешивании.

Железо. Не более 0,003 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Железо» (метод 1), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола».

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,1 г субстанции в 10 мл воды.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 3,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в 20 мл уксусной кислоты безводной. Полученный раствор титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до зелёного окрашивания (индикатор – 0,1 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 15,12 мг аминометилбензойной кислоты C8H9NO2.

##### Хранение

В герметично закрытой упаковке.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0473 Аминосалициловая кислота (Acidum aminosalicylicum0

Вводится впервые

##### Определение

4-Амино-2-гидроксибензойная кислота.

Содержит не менее 98,5 % и не более 100,5 % аминосалициловой кислоты C7H7NO3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Темнеет на свету.

Растворимость. Растворим в спирте 96 %, мало растворим в воде и эфире.

*Растворяется в разбавленных растворах азотной кислоты и в натрия гидроксида растворе концентрированном.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца аминосалициловой кислоты.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Растворы, содержащие аминосалициловую кислоту, готовят непосредственно перед использованием и защищают от света.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 250 мг субстанции, растворяют в 3 мл натрия гидроксида раствора 1 М и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и 12,5 мл фосфатного буферного раствора рН 7,0 (1), доводят объём раствора водой до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь максимумы поглощения при 265 нм и 299 нм. Отношение значений оптических плотностей A265/A299 должно быть 1,53±0,03.

3. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 10 мл воды, прибавляют 0,1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и 0,1 мл раствора железа(III) хлорида; должно появиться фиолетово-красное окрашивание. Полученный раствор выдерживают в течение 3 ч; не должно быть осадка.

4. Качественная реакция. Раствор 20 мг субстанции в 10 мл воды должен давать характерную реакцию на амины ароматические первичные (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления диацетильного производного. От 191 до 197 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1). В круглодонную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 г субстанции, прибавляют 10 мл уксусного ангидрида и нагревают на водяной бане для выпаривания в течение 30 мин, прибавляют 40 мл воды, фильтруют, охлаждают и выдерживают до выпадения кристаллического осадка. Осадок собирают на фильтре, тщательно промывают водой и высушивают в эксикаторе в течение 1 ч при температуре 105 °С.

pH раствора. От 3,0 до 3,7 (насыщенный раствор в воде, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие аминосалициловую кислоту, готовят непосредственно перед использованием и защищают от света.

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,2 г хлорной кислоты и 1,0 г фосфорной кислоты концентрированной, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,7 г хлорной кислоты и 1,0 г фосфорной кислоты концентрированной, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50,0 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мг 3-аминофенола (примесь А) и 5,0 мг месалазина (примесь В), растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь А: 3-аминофенол [591-27-5].

Примесь В (месалазин): 5-амино-2-гидроксибензойная кислота [89-57-6].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм силикагель октилсилильный, дезактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,25 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФ А, % | ПФ Б, %
--- | --- | ---
0–15 | 100 | 0
15–30 | 100 → 40 | 0 → 60

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, испытуемый раствор и раствор сравнения.

Относительное время удерживания соединений. Аминосалициловая кислота – 1 (около 17 мин); примесь А – около 0,31; примесь В – около 0,39.

Для идентификации примесей используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и примеси В должно быть не менее 4,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси A умножают на 0,62.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать трёхкратную площадь пика аминосалициловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика примеси В не должна превышать двадцатикратную площадь пика аминосалициловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать двукратную площадь пика аминосалициловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двадцатикратную площадь пика аминосалициловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,6 площади пика аминосалициловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,03 %).

Хлориды. Не более 0,042 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,12 г субстанции в 2 мл азотной кислоты разведённой 16 %, прибавляют 23 мл воды и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие аминосалициловую кислоту, готовят непосредственно перед использованием и защищают от света.

Раствор тетрабутиламмония гидроксида. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 2,54 г тетрабутиламмония гидроксида, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Раствор тетрабутиламмония гидроксида—динатрия гидрофосфата раствор 0,05 М—натрия дигидрофосфата раствор 0,05 М 150:425:425.

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 100 мг (точная навеска) парацетамола, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 12,5 мг (точная навеска) субстанции и растворяют в 15 мл ПФ, прибавляют 2,5 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объём раствора ПФ до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 12,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца аминосалициловой кислоты и растворяют в 15 мл ПФ, прибавляют 2,5 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика аминосалициловой кислоты. |  |

Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Аминосалициловая кислота – 1; парацетамол – около 0,83.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения:

- разрешение (RS) между пиками аминосалициловой кислоты и парацетамола должно быть не менее 1,7;

- относительное стандартное отклонение отношений площади пика аминосалициловой кислоты к площади пика парацетамола должно быть не более 1,0 % (6 введений).

После использования колонку промывают в течение 30 мин смесью метанол—вода—фосфорная кислота 77:23:0,6 и затем в течение 30 мин смесью метанол—вода 50:50.

Содержание аминосалициловой кислоты C7H7NO3 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где B1 – отношение площади пика аминосалициловой кислоты к площади пика парацетамола на хроматограмме испытуемого раствора;
B0 – отношение площади пика аминосалициловой кислоты к площади пика парацетамола на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца аминосалициловой кислоты, мг;
P – содержание аминосалициловой кислоты в фармакопейном стандартном образце аминосалициловой кислоты,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В герметично закрытой упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0053 Аминофиллин (Aminophyllinum)

Взамен ФС.2.1.0053.18

##### Определение

1,3-Диметил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион—этан-1,2-диамин (2:1).

Cодержит не менее 84,0 % и не более 87,4 % теофиллина C7H8N4O2 и не менее 13,5 % и не более 15,0 % этилендиамина C2H8N2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический, иногда гранулярный порошок со слабым аммиачным запахом. На воздухе поглощает диоксид углерода в результате чего уменьшается растворимость.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Растворим в воде (раствор при поглощении диоксида углерода мутнеет), очень мало растворим спирте 96 %.

##### Идентификация

Растворяют 1,0 г субстанции в 10 мл воды, прибавляют по каплям при перемешивании 2 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и фильтруют. Осадок на фильтре промывают водой, высушивают при температуре от 100 до 105 °С до постоянной массы и используют в испытаниях 1 и 2.

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца теофиллина.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Ультрафиолетовый спектр 0,001 % раствора субстанции в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты в области длин волн от 250 до 300 нм должен иметь максимум поглощения при длине волны 270 нм.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают около 5 мг субстанции, растворяют в 30 мл воды и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 3 мл воды. К полученному раствору прибавляют 0,2 мл меди(II) сульфата раствора 10 %. Должно появиться яркое фиолетовое окрашивание.

##### Испытания

Температура плавления. От 270 до 274 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1). Субстанцию предварительно высушивают при 105 °С до постоянной массы.

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл воды, свободной от диоксида углерода, приготовленный в закрытой ёмкости, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»). Испытание проводят сразу после приготовления раствора.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном GY6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН. От 8,0 до 9,5 (4 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3). Допускается нагрев на водяной бане до 50 °С и использование ультразвуковой ванны до полного растворения субстанции.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор натрия ацетата. Готовят 1,36 г/л раствора натрия ацетата, содержащего уксусной кислоты 0,5 %.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—раствор натрия ацетата 70:930.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 40 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 10 мг стандартного образца теобромина в ПФ, прибавляют 5,0 мл испытуемого раствора и разбавляют ПФ до 100,0 мл. 1,0 мл полученного раствора разбавляют ПФ до 10,0 мл.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 см, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 7 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 272 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3,5-кратное от времени удерживания теофиллина. |  |

Хроматографируют раствор сравнения, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Теофиллин – 1 (около 6 мин); теобромин – около 0,6.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками теобромина и теофиллина должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика теофиллина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей всех пиков примесей не должна превышать площадь пика теофиллина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика теофиллина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 4,5 % (ОФС «Определение воды»). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,7 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение приводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа»).

1. Этилендиамин

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 30 мл воды и титруют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до появления зелёного окрашивания (индикатор – 0,1 мл бромкрезолового зелёного раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 3,005 мг этилендиамина C2H8N2.

2. Теофиллин

Высушивают 0,2 г (точная навеска) субстанции при температуре 135±5 °С до исчезновения запаха аминов (около 3,5 ч). Остаток растворяют при нагревании в 100 мл воды, раствор кипятят 1 мин, охлаждают, прибавляют 20 мл серебра нитрата раствора 0,1 М и титруют натрия гидроксида раствором 0,1 М до появления синего окрашивания (индикатор – 1,0 мл бромтимолового синего раствора 0,1 % спиртового).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 18,02 мг теофиллина C7H8N4O2.

##### Хранение

В герметично закрытой упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0626 Амиодарона гидрохлорид

Амиодарон
Amiodaroni hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

(2-Бутил-1-бензофуран-3-ил){4-[2-(диэтиламино)этокси]-3,5-дииодфенил}метанона гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % амиодарона гидрохлорида C25H29I2NO3·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый мелкокристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде, растворим в метаноле, умеренно растворим в спирте 96 %, очень мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца амиодарона гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 159 до 163 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 20 мл метанола должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном GY5 или BY5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 3,2 до 3,8 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Допускается нагрев на водяной бане до 80 °С до полного растворения субстанции.

Родственные примеси

1. Примесь Н. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Растворы, содержащие амиодарон и его примеси, готовят непосредственно перед использованием и защищают от света.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота безводная—метанол—метиленхлорид 5:10:85.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 0,5 г субстанции, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора метиленхлоридом до метки.

Раствор примеси Н. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг примеси Н ((2-хлорэтил)диэтиламина гидрохлорид [869-24-9]), растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора метиленхлоридом до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метиленхлоридом до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Смешивают равные объёмы испытуемого раствора и раствора примеси Н.

На линию старта пластинки наносят по 50 мкл испытуемого раствора (5 мг), раствора примеси Н (1 мкг) и 100 мкл раствора для проверки пригодности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей в потоке холодного воздуха, опрыскивают калия йодовисмутата раствором разведённым, а затем водорода пероксида раствором разведённым и сразу же просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции, находящаяся на уровне зоны адсорбции примеси Н, по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции примеси Н на хроматограмме раствора примеси Н (не более 0,02 %).

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. К 800 мл воды прибавляют 3,0 мл уксусной кислоты ледяной и доводят рН раствора амммиака раствором 10 % до 4,9. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Буферный раствор—метанол—ацетонитрил 300:300:400.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 1:1.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,125 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси D, 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси Е и 5 мг фармакопейного стандартного образца амиодарона гидрохлорида, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А:
(2-бутил-1-бензофуран-3-ил){4-[2-(диэтиламино)этокси]фенил}метанон [23551-25-9].

Примесь В:
(2-бутил-1-бензофуран-3-ил){4-[2-(этиламино)этокси]-3,5-дииодфенил}метанон [83409-32-9].

Примесь С:
(2-бутил-1-бензофуран-3-ил){4-[2-(диэтиламино)этокси]-3-иодфенил}метанон [85642-08-6].

Примесь D:
(2-бутил-1-бензофуран-3-ил)(4-гидрокси-3,5-дииодфенил)метанон [1951-26-4].

Примесь Е:
(2-бутил-1-бензофуран-3-ил)(4-гидроксифенил)метанон [52490-15-0].

Примесь F:
(2-бутил-1-бензофуран-3-ил)(4-гидрокси-3-иодфенил)метанон [147030-50-0].

Примесь G:
{4-[2-(диэтиламино)этокси]-3,5-дииодфенил}[(1RS)-2-(1-метоксибутил)-1-бензофуран-3-ил]метанон [1087223-70-8].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 240 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика амиодарона. |  |

Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Амиодарон – 1 (около 24 мин); примесь А – около 0,26; примесь D – около 0,29; примесь Е – около 0,37; примесь В – около 0,49; примесь С – около 0,55; примесь G – около 0,62; примесь F – около 0,69.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора разрешение (RS) между пиками примеси D и примеси Е должно быть не менее 3,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей А, В, С, D, Е, F, G не должна превышать площадь пика амиодарона на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика амиодарона на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 2,5 площади пика амиодарона на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,25 площади пика амиодарона на хроматограмме стандартного раствора (менее 0,05 %).

Йодиды. Не более 0,015 %. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор, стандартный раствор и раствор сравнения готовят одновременно.

Раствор калия йодида. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 88,2 мг калия йодида, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,5 г субстанции, растворяют в 40 мл воды при 80 °С, встряхивают до полного растворения, охлаждают и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 15,0 мл раствора А, прибавляют 1,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и 1,0 мл калия йодата раствора 0,05 М, доводят объём раствора водой до метки. Выдерживают в защищённом от света месте в течение 4 ч.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 15,0 мл раствора А, прибавляют 1,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М, 1,0 мл раствора калия йодида и 1,0 мл раствора калия йодата 0,05 М, доводят объём раствора водой до метки. Выдерживают в защищённом от света месте в течение 4 ч.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 15,0 мл раствора А и 1,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и доводят объём раствора водой до метки.

Измеряют величину поглощения растворов при 420 нм относительно раствора сравнения. Величина поглощения испытуемого раствора не должна превышать половину величины поглощения стандартного раствора.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 50 °С и остаточном давлении 0,3 кПа до постоянной массы.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 1,0 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 1 мг в 1 мл воды для БЭТ, нагревая до полного растворения субстанции.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)».

Растворяют 0,6 г (точная навеска) субстанции в смеси 5,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М и 75 мл спирта 96 %. Полученный раствор титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают объём титранта между первой и второй точками перегиба на кривой титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 68,18 мг амиодарона гидрохлорида C25H29I2NO3·HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0002 Амлодипина безилат (Amlodipini besilas)

Амлодипин

Взамен ФС.2.1.0002.15

##### Определение

5-Метил-3-этил{(4RS)-2-[(2-аминоэтокси)метил]-6-метил-4-(2-хлорфенил)-1,4-дигидропиридин-3,5-дикарбоксилата} бензолсульфонат.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % амлодипина безилата С20Н25ClN2О5∙С6H6О3S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Производителям амлодипина безилата необходимо проводить оценку риска образования алкиловых эфиров бензолсульфоновой кислоты и загрязнения ими в процессе производства. При выявлении потенциального риска процесс производства должен быть изменён, чтобы исключить или минимизировать загрязнение.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Легко растворим в метаноле, умеренно растворим в спирте 96 %, мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца амлодипина безилата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика амлодипина на хроматограмме раствора стандартного образца амлодипина безилата (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Угол вращения. От –0,10° до +0,10° (1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Испытание проводят в защищённом от света месте.

Раствор аммония ацетата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,3 г аммония ацетата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Раствор аммония ацетата—метанол 300:700.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца амлодипина безилата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца амлодипина безилата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца амлодипина безилата и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца примеси B и 2,5 мг фармакопейного стандартного образца примеси G, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для идентификации пиков. Растворяют 2,5 мг фармакопейного стандартного образца амлодипина для идентификации пиков, содержащего примеси D, E и F, в 5 мл ПФ.

Примечание

Примесь A:
5-Метил-3-этил[(4RS)-2-{[2-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-2H-изоиндол-2-ил)этокси]метил}-6-метил-4-(2-хлорфенил)-1,4-дигидропиридин-3,5-дикарбоксилат] [88150-62-3].

Примесь B:
5-Метил-3-этил[(4RS)-6-метил-2-({2-[2-(метилкарбамоил) бензамидо]этокси}метил)-4-(2-хлорфенил)-1,4-дигидропиридин-3,5-дикарбоксилат] [721958-72-1].

Примесь D:
5-Метил-3-этил[(4RS)-2-[(2-аминоэтокси)метил]-6-метил-4-(2-хлорфенил)пиридин-3,5-дикарбоксилат] [113994-41-5].

Примесь E:
Диэтил[(4RS)-2-[(2-аминоэтокси)метил]-6-метил-4-(2-хлорфенил)-1,4-дигидропиридин-3,5-дикарбоксилат] [140171-65-9].

Примесь F:
Диметил[(4RS)-2-[(2-аминоэтокси)метил]-6-метил-4-(2-хлорфенил)-1,4-дигидропиридин-3,5-дикарбоксилат] [140171-66-0].

Примесь G:
Диметил[2,6-диметил-4-(2-хлорфенил)-1,4-дигидропиридин-3,5-дикарбоксилат] [43067-01-2].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 237 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика амлодипина. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, стандартный раствор, раствор стандартного образца примеси А, раствор сравнения и испытуемый раствор А.

Относительное время удерживания соединений. Амлодипин – 1 (около 20 мин); примесь G – около 0,21; примесь B – около 0,25; примесь D – около 0,5; примесь F – около 0,8; примесь E – около 1,3.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей D, E и F используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму стандартного раствора и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу амлодипина для идентификации пиков; для идентификации пика примеси A используют хроматограмму раствора стандартного образца примеси А.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика амлодипина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примесей G и B должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора сравнения относительное стандартное отклонение площади пика амлодипина должно быть не более 5 % (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь D – 1,7; примесь F – 0,7.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора А:

- площадь пика примеси А не должна превышать 1,5 площади пика примеси А на хроматограмме раствора стандартного образца примеси А (не более 0,15 %);

- площадь пика примеси D не должна превышать трёхкратную площадь пика амлодипина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика каждой из примесей E и F не должна превышать 1,5 площади пика амлодипина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика амлодипина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать восьмикратную площадь пика амлодипина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,8 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика амлодипина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %), а также все пики, соответствующие бензолсульфоновой кислоте (относительное время удерживания – около 0,14).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Алкиловые эфиры бензолсульфоновой кислоты. Определение проводят методом парофазной газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием (ОФС «Газовая хроматография»).

Все растворы готовятся непосредственно перед использованием.

Растворитель. Вода—ацетонитрил 20:80.

Раствор для дериватизации. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг натрия тиосульфата безводного и 60,0 г натрия йодида, прибавляют воду, выдерживают на ультразвуковой бане до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мкл фармакопейного стандартного образца бутилметансульфоната и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мкл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Контрольный раствор. Помещают 0,50 мл раствора для дериватизации и 0,50 мл раствора внутреннего стандарта во флакон для парофазного анализа и немедленно герметично укупоривают.

Испытуемый раствор. Во флакон для парофазного анализа объёмом 20 мл помещают 25,0 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 0,50 мл раствора для дериватизации и 0,50 мл раствора внутреннего стандарта и немедленно герметично укупоривают.

Примечание – В процессе реакции дериватизации может наблюдаться осадок, но это не влияет на качество определения.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают по 25,0 мг (точная навеска) метилбензолсульфоната, этилбензолсульфоната и изопропилметансульфоната, растворяют в толуоле и доводят объём раствора толуолом до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мкл полученного раствора и доводят объём раствора раствором внутреннего стандарта до метки.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 40 мкл стандартного раствора А и доводят объём раствора раствором внутреннего стандарта до метки. Во флакон для парофазного анализа объёмом 20 мл помещают 0,50 мл полученного раствора и 0,50 мл раствора для дериватизации и немедленно герметично укупоривают.

Стандартный раствор В. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 500 мкл стандартного раствора А и доводят объём раствора раствором внутреннего стандарта до метки. Во флакон для парофазного анализа объёмом 20 мл помещают 0,50 мл полученного раствора и 0,50 мл раствора для дериватизации и немедленно герметично укупоривают.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,25 мм, покрытая слоем полиэтиленгликоля, деактивированного по отношению к полярным соединениям, 1 мкм; |  |
Детектор | квадрупольный масс-спектрометрический; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:20; |  |
Скорость потока | 0,5 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1 мл; |  |
Время хроматографирования | 10 мин. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °C
--- | --- | ---
Колонка | 0–1 | 40
| 1–10 | 40 → 130
Инжектор |  | 220
Детектор | линия переноса | 280

Условия парофазного анализа

Температура уравновешивания | 60 °С
Время уравновешивания | 30 мин
Температура линии переноса | 120 °С

По окончании анализа температуру в колонке поднимают до 240 °С и поддерживают в течение 7 мин.

Условия МС/МС

Источник ионизации | электронная ионизация (EI, 70эВ);
Режим детектирования | мониторинг избранного иона (SIM);
Температура источников ионов | 250 °С;
Температура анализатора | 200 °С.

Характеристики компонентов

Компонент | Относительное время удерживания | Ион для количественного определения (m/z) | Ион для качественного анализа (m/z)
--- | --- | --- | ---
Метилйодид | около 0,51 | 142 | 127
Этилйодид | около 0,63 | 156 | 127
Изопропилйодид | около 0,68 | 170 | 127
Бутилйодид | 1 (около 8,5 мин) | 184 | 127

Примечание – Соединения образуются в процессе дериватизации.

Хроматографируют контрольный раствор, стандартный раствор Б, стандартный раствор В и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической систем

На хроматограмме стандартного раствора Б отношение сигнал/шум (S/N) для пика каждого из алкилйодидов должно быть не менее 10.

На хроматограмме стандартного раствора В разрешение (RS) между пиками этилйодида и изопропилйодида должно быть не менее 1,5.

Содержание каждой из примесей метилбензолсульфоната, этилбензолсульфоната и изопропилбензолсульфоната в ppm (X) рассчитывается по формуле:

где B1 – отношение площади пика соответствующего алкилйодида к площади пика бутилйодида на хроматограмме испытуемого раствора;
B0 – отношение площади пика соответствующего алкилйодида к площади пика бутилйодида на хроматограмме стандартного раствора В;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска алкилбензолсульфоната или алкилметансульфоната, использованная для приготовления стандартного раствора, мг;
P – содержание алкилбензолсульфоната,%.

Суммарное содержание примесей метилбензолсульфоната, этилбензолсульфоната и изопропилбензолсульфоната не должно превышать 150 ppm.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ одновременно с испытанием «Родственные примеси».

Хроматографируют раствор стандартного образца амлодипина безилата и испытуемый раствор Б.

Содержание амлодипина безилата С20Н25ClN2О5∙С6H6О3S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика амлодипина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика амлодипина на хроматограмме раствора стандартного образца амлодипина безилата;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца амлодипина безилата, мг;
P – содержание амлодипина безилата в фармакопейном стандартном образце амлодипина безилата,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0054 Амоксициллин натрия

Амоксициллин
Amoxicillinum natricum

Взамен ФС.2.1.0054.18

##### Определение

(2S,5R,6R)-6-[(2R)-2-Aмино-2-(4-гидроксифенил)ацетамидо]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоксилат натрия.

Cодержит не менее 89,0 % и не более 102,0 % амоксициллина натрия C16H18N3NaO5S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, умеренно растворим в этаноле, очень мало растворим в ацетоне.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр испытуемого раствора в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца амоксициллина тригидрата.

- Испытуемый образец. Растворяют 0,25 г субстанции в 5,0 мл воды, прибавляют 0,5 мл уксусной кислоты разведённой 12 %, взбалтывают и выдерживают в течение 10 мин в ледяной воде. Отфильтровывают кристаллы на стеклянном фильтре при пониженном давлении и промывают их 3 мл смеси вода—ацетон 1:9, после чего высушивают при 60 °С в течение 30 мин.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика амоксициллина на хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (А) (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерные реакции на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +240 до +290 в пересчёте на безводное вещество (ОФС «Оптическое вращение»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 62,5 мг субстанции, растворяют в калия гидрофталата растворе 0,4 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Прозрачность раствора. Опалесценция раствора 1 г субстанции в 10 мл воды не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», измеренная при длине волны 430 нм в кювете с толщиной слоя 1 см (по сравнению с водой), не должна превышать 0,20 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

pH раствора. От 8,0 до 10,0 (10 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие амоксициллин и его примеси, используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—фосфатный буферный раствор рН 5,0 0,05 М 10:990.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—фосфатный буферный раствор рН 5,0 0,05 М 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 15 мг субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца амоксициллина тригидрата (А). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца амоксициллина тригидрата, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца амоксициллина тригидрата (Б). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (А) и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 4 мг фармакопейного стандартного образца цефадроксила ((6R,7R)-7-[(2R)-2-амино-2-(4-гидроксифенил)ацетамидо]-3-метил-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота моногидрат [66592-87-8]), растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, прибавляют 5,0 мл раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (А) и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для идентификации примесей. К 0,2 г фармакопейного стандартного образца амоксициллина тригидрата прибавляют 1,0 мл воды. Взбалтывают и по каплям прибавляют натрия гидроксида раствора 8,5 % до растворения субстанции, раствор выдерживают при комнатной температуре в течение 4 ч. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Примечание

Примесь С: (4S)-2-[5-(4-гидроксифенил)-3,6-диоксопиперазин-2-ил]-5,5-диметил-1,3-тиазолидин-4-карбоновая кислота [94659-47-9].

Примесь J2: амоксициллина димер [73590-06-4].

Примесь J3: амоксициллина тример.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–tR | 92 | 8
tR–(tR+25) | 92 → 0 | 8 → 100
(tR+25)–(tR+40) | 0 | 100
(tR+40)–(tR+55) | 92 | 8
tR – время удерживания амоксициллина, определённое по хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (Б)

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для идентификации примесей, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца амоксициллина тригидрата (Б) и испытуемый раствор.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей С, J2, J3 используют хроматограмму раствора для идентификации примесей.

Относительное время удерживания соединений. Амоксициллин – 1 (около 9 мин); примесь С – около 3,4; примесь J2 – около 4,1; примесь J3 – около 4,5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками амоксициллина и цефадроксила должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси J2 не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика амоксициллина на хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (Б) (не более 3,0 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика амоксициллина на хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (Б) (не более 2,0 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать девятикратную площадь пика амоксициллина на хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (Б) (не более 9,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика амоксициллина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,1 %).

N,N-Диметиланилин. Не более 0,002 % (ОФС «N,N-Диметиланилин»).

Вода. Не более 3,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,4 г (точная навеска) субстанции.

2-Этилгексановая кислота. Не более 0,8 % (ОФС «2-Этилгексановая кислота»).

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 40 мг субстанции в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения – 48 ч.

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,1 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Подвижная фаза (ПФ). ПФБ—ПФА 80:920.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца амоксициллина тригидрата (А) и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (А) относительное стандартное отклонение площади пика амоксициллина не должно превышать 2,0 % (6 введений).

Содержание амоксициллина натрия C16H18N3NaO5S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика амоксициллина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика амоксициллина на хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (А);
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца амоксициллина тригидрата, мг;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание амоксициллина в фармакопейном стандартном образце амоксициллина тригидрата,%;
387,39 - молекулярная масса амоксициллина натрия;
419,45 - молекулярная масса амоксициллина тригидрата.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0055 Амоксициллин тригидрат

Амоксициллин
Amoxicillinum trihydricum

Взамен ФС.2.1.0055.18

##### Определение

(2S,5R,6R)-6-[(2R)-2-Амино-2-(4-гидроксифенил)ацетамидо]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота тригидрат.

Cодержит не менее 95,0 % и не более 102,0 % амоксициллина C16H19N3O5S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96 %.

* Растворяется в разбавленных кислотах и разбавленных растворах щелочей.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца амоксициллина тригидрата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика амоксициллина на хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (А) (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Помещают 2 мг субстанции в пробирку и смачивают 0,05 мл воды, прибавляют 2 мл формальдегида раствора в серной кислоте и встряхивают. Пробирку погружают на 1 мин в водяную баню. Раствор должен окраситься в тёмно-жёлтый цвет.

##### Испытания

Удельное вращение. От +290 до +315 в пересчёте на безводное вещество (ОФС «Оптическое вращение»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, при слабом нагреве или на ультразвуковой бане и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

pH раствора. От 3,5 до 5,5 (раствор, полученный в испытании «Удельное вращение», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие амоксициллин и его примеси, используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. В химический стакан помещают 250 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М и доводят значение pH натрия гидроксида раствором 10 % до 5,0. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 10:990.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—буферный раствор 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 15 мг субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца амоксициллина тригидрата (А). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца амоксициллина тригидрата, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца амоксициллина тригидрата (Б). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (А) и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 4 мг фармакопейного стандартного образца цефадроксила ((6R,7R)-7-[(2R)-2-амино-2-(4-гидроксифенил)ацетамидо]-3-метил-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота моногидрат [66592-87-8]), растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и 5,0 мл раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (А) и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Примечание

Примесь С: (4S)-2-[5-(4-гидроксифенил)-3,6-диоксопиперазин-2-ил]-5,5-диметил-1,3-тиазолидин-4-карбоновая кислота [94659-47-9].

Примесь J2: амоксициллина димер [73590-06-4].

Примесь J3: амоксициллина тример.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0– tR | 92 | 8
tR– (tR+25) | 92 → 0 | 8 → 100
(tR+25)–(tR+40) | 0 | 100
(tR+40)–(tR+55) | 92 | 8
tR – время удерживания амоксициллина, определённое по хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (Б).

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца амоксициллина тригидрата (Б) и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками амоксициллина и цефадроксила должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика амоксициллина на хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (Б) (не более 1,0 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика амоксициллина на хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (Б) (не более 5,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика амоксициллина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,1 %).

Вода. От 11,5 % до 14,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

N,N-Диметиланилин. Не более 0,002 % (ОФС «N,N-Диметиланилин»).

Сульфатная зола. Не более 1,0 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Подвижная фаза (ПФ). ПФБ—ПФА 80:920.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца амоксициллина тригидрата (А) и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (А) относительное стандартное отклонение площади пика амоксициллина не должно превышать 2,0 % (6 введений).

Содержание амоксициллина C16H19N3O5S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика амоксициллина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика амоксициллина на хроматограмме раствора стандартного образца амоксициллина тригидрата (А);
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца амоксициллина тригидрата, мг;
P - содержание амоксициллина в фармакопейном стандартном образце амоксициллина тригидрата,%;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0371 Аморолфина гидрохлорид

Аморолфин
Amorolfini hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

rac-(2R,6S)-2,6-Диметил-4-{(2R)-2-метил-3-[4-(2-метилбутан-2-ил)фенил]пропил}морфолина гидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % аморолфина гидрохлорида C21H35NO·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в метаноле и метиленхлориде, мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца аморолфина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Растворяют 20 мг субстанции в 4 мл воды. Полученный раствор должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 3,5 г калия гидрофосфата в 1000 мл воды и доводят значение рН до 7,0 фосфорной кислотой концентрированной.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор—метанол 50:350:600.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор—ацетонитрил—метанол 100:300:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА, и доводят объём раствора этим же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора этим же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 4 мг фармакопейного стандартного образца аморолфина для проверки пригодности (содержит примеси D, E, I и J), растворяют в ПФА, и доводят объём раствора этим же растворителем до метки.

Раствор для идентификации пиков. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 4 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца аморолфина для идентификации пиков (содержит примесь М), растворяют в ПФА, и доводят объём раствора этим же растворителем до метки.

Примечание

Примесь D: (2RS,6SR)-4-[(2RS)-3-(4-трет-бутилфенил-2-метилпропил]-2,6-диметилморфолин [67564-91-4].

Примесь E: (2R,6R)-2,6-диметил-4-[(2RS)-2-метил-3-[4-(2-метилбутан-2-ил)фенил]пропил]морфолин—(2S,6S)-2,6-диметил-4-[(2RS)-2-метил-3-[4-(2-метилбутан-2-ил)фенил]пропил]морфолин [2134097-34-8].

Примесь I: (2RS,6SR)-2,6-диметил-4-[(2Ξ)-2-метил-3-{4-[(2RS)-3-метилбутан-2-ил]фенил}пропил]морфолин [67468-13-7].

Примесь J: (2RS,6SR)-2,6-диметил-4-[(2RS)-2-метил-3-[3-(2-метилбутан-2-ил)фенил]пропил]морфолин.

Примесь M: (1R,2RS)-3-((2R,6S)-2,6-диметилморфолин-4-ил)-2-метил-1-[4-(2-метилбутан-2-ил)фенил]пропан-1-ол—(1S,2RS)-3-((2S,6R)-2,6-диметилморфолин-4-ил)-2-метил-1-[4-(2-метилбутан-2-ил)фенил]пропан-1-ол.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель амидогексадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 3 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 214 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2 | 90 | 10
2–25 | 90 → 0 | 10 → 100

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для идентификации пиков, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Аморолфин – 1 (около 15 мин); примесь М (стереоизомер 1) – около 0,56; примесь М (стереоизомер 2) – около 0,60; примесь D – около 0,85; примесь J – около 0,97; примесь I – около 1,05; примесь Е (стереоизомер 1) – около 1,14; примесь Е (стереоизомер 2) – около 1,17.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора сравнения отношение сигнал/шум (S/N) для пика аморолфина должно быть не менее 20.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси J и аморолфина должно быть не менее 2,0.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика аморолфина на хроматограмме раствора сравнения.

Допустимое содержание примесей:

- примесь D − не более 0,2 %;

- сумма стереоизомеров примеси Е − не более 0,2 %;

- примесь I − не более 0,15 %;

- каждый из стереоизомеров примеси М − не более 0,15 %;

- любая другая примесь − не более 0,10 %;

- сумма примесей − не более 0,4 %;

Не учитывают пики менее 0,05 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в смеси 10 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М и 40 мл спирта 96 %, и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида.

Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают объём титранта между двумя точками перегиба на кривой титрования.

1 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М соответствует 35,40 мг аморолфина гидрохлорида C21H35NO·HCl.

##### Хранение

Не требует особых условий.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0372 Ампициллин (Ampicillinum)

Взамен ФС 42-2040-98

##### Определение

(2S,5R,6R)-6-[(2R)-2-Амино-2-фенилацетамидо]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота.

Содержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % ампициллина C16H19N3O4S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Умеренно или мало растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

*Растворяется в разбавленных растворах кислот и щелочных гидроксидов.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ампициллина безводного.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика ампициллина на хроматограмме раствора стандартного образца ампициллина (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +280 до +305 в пересчёте на безводное вещество (0,25 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Опалесценция испытуемого раствора А и испытуемого раствора Б не должна превышать опалесценцию эталона сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Испытуемые растворы готовят непосредственно перед использованием

Испытуемый раствор А. Растворяют 1,0 г субстанции в 10 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М.

Испытуемый раствор Б. Растворяют 1,0 г субстанции в 10 мл аммиака раствора 2 М.

Оптическая плотность. Оптическая плотность 0,29 % раствора субстанции в воде, измеренная при длине волны 322 нм в кювете с толщиной слоя 1 см (по сравнению с водой), не должна превышать 0,15 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

рН раствора. От 3,5 до 5,5 (0,25 % раствор в воде, свободной от углерода диоксида, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Уксусная кислота разведённая 12 %—калия дигидрофосфата раствор 0,2 М—ацетонитрил—вода 1:100:100:1799.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Уксусная кислота разведённая 12 %—калия дигидрофосфата раствор 0,2 М—ацетонитрил—вода 1:100:800:299.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 27 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Раствор стандартного образца ампициллина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 27 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ампициллина безводного, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца ампициллина и доводят ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца цефрадина, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Смешивают 5,0 мл полученного раствора с 5,0 мл раствора стандартного образца ампициллина.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0 – tR | 85 | 15
tR – (tR+30) | 85 → 0 | 15 → 100
(tR+30) – (tR+45) | 0 | 100
(tR+45) – (tR+60) | 85 | 15
tR – время удерживания ампициллина, определённое по хроматограмме раствора сравнения.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения (ПФБ–ПФА 15:85) и испытуемый раствор (градиентный режим).

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение ® между пиками ампициллина и цефрадина должно быть не менее 3,0. При необходимости корректируют соотношение подвижных фаз.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика ампициллина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

** N,N-Диметиланилин. Не более 0,002 % (ОФС «N,N-Диметиланилина»).

Вода. Не более 2,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,5 % (ОФС «Сульфатная зола). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Подвижная фаза. ПФБ—ПФА 150:850.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 27 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца ампициллина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца ампициллина относительное стандартное отклонение площади пика ампициллина должно быть не более 1,0 % (6 определений).

Содержание ампициллина C16H19N3O4S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика ампициллина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика ампициллина на хроматограмме раствора стандартного образца ампициллина;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца ампициллина безводного, мг;
P - содержание ампициллина в фармакопейном стандартном образце ампициллина безводного,%;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Необходимость включения показателя обусловлена спецификой получения субстанции.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0056 Ампициллин натрия

Ампициллин
Ampicillinum natricum

Взамен ФС.2.1.0056.18

##### Определение

(2S,5R,6R)-6-[(2R)-2-Амино-2-фенилацетамидо]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоксилат натрия.

Cодержит не менее 91,0 % и не более 102,0 % ампициллина натрия C16H18N3NaO4S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в спирте 96 %, умеренно растворим в ацетоне.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр испытуемого образца, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ампициллина натрия.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика ампициллина на хроматограмме раствора стандартного образца ампициллина натрия (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А или Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +258 до +287 в пересчёте на безводное вещество (0,25 % раствор субстанции в калия гидрофталата растворе 0,4 %, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Опалесценция свежеприготовленных испытуемого раствора А и испытуемого раствора Б не должна превышать опалесценцию эталона сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Испытуемый раствор А. В коническую колбу помещают 1,0 г субстанции и медленно при постоянном помешивании добавляют 10 мл хлористоводородной кислоты раствор 1 М.

Испытуемый раствор Б. Растворяют 1,0 г субстанции в 10 мл воды.

Оптическая плотность. Оптическая плотность 10 % раствора субстанции в воде, измеренная при длине волны 430 нм в кювете с толщиной слоя 1 см (по сравнению с водой), не должна превышать 0,15 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

рН. От 8,0 до 10,0 (10 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие ампициллин и его примеси, используют свежеприготовленными или хранят при температуре 4 оС не более 1 суток.

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,5 мл уксусной кислоты разведённой 12 %, 50 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М, 50 мл ацетонитрила и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,5 мл уксусной кислоты разведённой 12 %, 50 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М, 400 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 31 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца ампициллина натрия. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 27 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ампициллина натрия, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца ампициллина натрия и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для идентификации. Раствор 0,2 г субстанции в 1 мл воды нагревают в течение 1 ч при температуре 60 °С. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца цефрадина, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Смешивают 5,0 мл полученного раствора с 5,0 мл раствора стандартного образца ампициллина натрия.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора ПФА до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0 – tR | 85 | 15
tR – (tR+30) | 85 → 0 | 15 → 100
(tR+30) – (tR+45) | 0 | 100
(tR+45) – (tR+60) | 85 | 15
(tR+60) – (tR+70) | 85 | 15
tR – время удерживания ампициллина, определённое по хроматограмме раствора сравнения.

Уравновешивают колонку при ПФБ–ПФА 15:85 в течение не менее 1 ч.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения (ПФБ–ПФА 15:85), раствор для идентификации и испытуемый раствор (градиентный режим).

Относительное время удерживания соединений. Ампициллин – 1 (около 11 мин); ампициллина димер – 2,8.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для идентификации.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение ® между пиками ампициллина и цефрадина должно быть не менее 3,0. При необходимости корректируют соотношение подвижных фаз.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика ампициллина димера не должна превышать 4,5 площади пика ампициллина на хроматограмме раствора сравнения (не более 4,5 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать двукратную площадь пика ампициллина на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0 %);

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика ампициллина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,1 %).

N,N-Диметиланилин. Не более 0,002 %
(ОФС «N,N-Диметиланилина»).

2-Этилгексановая кислота. Не более 0,8 % м/м
(ОФС «2-Этилгексановой кислоты»).

Вода. Не более 2,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 40 мг ампициллина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения – 48 ч.

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,1 ЕЭ на 1 мг ампициллина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

** Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

##### Количественное определение

Испытание проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Корректируют соотношение подвижных фаз при необходимости.

Хроматографируют испытуемый раствор и раствор стандартного образца ампициллина натрия.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца ампициллина натрия относительное стандартное отклонение площади пика ампициллина должно быть не более 1,0 % (6 определений).

Содержание ампициллина натрия C16H18N3NaO4S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика ампициллина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика ампициллина на хроматограмме раствора стандартного образца ампициллина натрия;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца ампициллина натрия, мг;
P - содержание ампициллина натрия в фармакопейном стандартном образце ампициллина натрия,%;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0057 Ампициллин тригидрат

Ампициллин
Ampicillinum trihydricum

Взамен ФС.2.1.0057.18

##### Определение

(2S,5R,6R)-6-[(2R)-2-Амино-2-фенилацетамидо]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота тригидрат.

Содержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % ампициллина C16H19N3O4S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

* Растворяется в разбавленных растворах кислот и щелочных гидроксидов.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр ампициллина тригидрата, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ампициллина тригидрата.

##### Испытания

Удельное вращение. От +280 до +305 в пересчёте на безводное вещество (0,25 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

рН раствора. От 3,5 до 5,5 (0,25 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие ампициллин и его примеси, используют свежеприготовленными или хранят при температуре 4 оС не более 1 сут.

Подвижная фаза А (ПФА). Смешивают 0,5 мл 4 % раствора фосфорной кислоты, 50 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М и 50 мл ацетонитрила и доводят водой до 1000 мл.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Смешивают 0,5 мл 4 % раствора фосфорной кислоты, 50 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М и 400 мл ацетонитрила и доводят водой до 1000 мл.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор стандартного образца ампициллина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ампициллина безводного растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы.

В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мг фармакопейного стандартного образца цефрадина, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки. Смешивают 5,0 мл полученного раствора с 5,0 мл раствора стандартного образца ампициллина.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объем пробы | 50 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,% | Режим
--- | --- | --- | ---
0 – tR | 85 | 15 | Изократический
tR – (tR+30) | 85 → 0 | 15 → 100 | Линейный градиент
(tR+30) – (tR+45) | 0 | 100 | Изократический
(tR+45) – (tR+60) | 85 | 15 | Изократический
tR – время удерживания ампициллина, определённое по хроматограмме раствора сравнения В.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы (ПФА—ПФБ 850:150) разрешение ® между пиками ампициллина и цефрадина должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси должна быть не более площади пика ампициллина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика ампициллина на хроматограмме раствора сравнения (не более 5,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади пика ампициллина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,1 %).

Вода. От 12 % до 15 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

N,N-Диметиланилин. Не более 0,002 % (ОФС «N,N-Диметиланилин»).

Сульфатная зола. Не более 0,5 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Испытание проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Подвижная фаза. ПФА—ПФБ 850:150.

Хроматографируют раствор стандартного образца ампициллина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца ампициллина относительное стандартное отклонение площади пика ампициллина должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание ампициллина C16H19N3O4S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика ампициллина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика ампициллина на хроматограмме раствора стандартного образца ампициллина;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца ампициллина безводного, мг;
P - содержание ампициллина в фармакопейном стандартном образце ампициллина безводного,%.
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0627 Анастрозол

Анастрозол
Anastrozolum

Вводится впервые

##### Определение

2,2′-[5-(1H-1,2,4-Триазол-1-илметил)-1,3-фенилен]бис(2-метилпропаннитрил).

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % анастрозола C17H19N5 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 %, очень мало растворим или практически нерастворим в воде, практически нерастворим в циклогексане.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца анастрозола.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика анастрозола на хроматограмме раствора стандартного образца анастрозола (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Температура плавления. От 81 до 85 °C (ОФС «Температура плавления»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Трифторуксусная кислота—ацетонитрил—метанол—вода 0,5:100:300:600.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Трифторуксусная кислота—ацетонитрил—вода—метанол 0,5:150:400:450.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 10 мл ацетонитрила и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор стандартного образца анастрозола. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца анастрозола, растворяют в 20 мл ацетонитрила и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца анастрозола и 5 мг стандартного образца примеси Н, растворяют в 4,0 мл ацетонитрила и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 мл раствора стандартного образца анастрозола и доводят объём раствора ПФА до метки.

Примечание

Примесь А: 2-метил-2{5-[(1H-1,2,4-триазол-1-илметил)-3-[(1RS)-1-цианоэтил]фенил}пропаннитрил [1215780-15-6].

Примесь В: (2RS)-2-метил-2,3-бис{5-[(1H-1,2,4-триазол-1-илметил)-3-(1-цианопропан-2-ил)фенил]}пропаннитрил [1216898-82-6].

Примесь С: 2,2′-[5-(бромметил)-1,3-фенилен]бис(2-метилпропаннитрил) [120511-84-4].

Примесь D: 2,2′-[5-(дибромметил)-1,3-фенилен]бис(2-метилпропаннитрил) [1027160-12-8].

Примесь Н: 2,2′-(5-метил-1,3-фенилен)бис(2-метилпропаннитрил) [120511-72-0].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 3,2 мм, силикагель мультиалкильный для хроматографии С18, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,75 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 215 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 100 | 0
10–40 | 100 → 0 | 0 → 100
40–41 | 0 → 100 | 100 → 0
41–56 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца анастрозола и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Анастрозол – 1 (около 6 мин); примесь А – около 0,6; примесь В ‒ около 2,0; примесь Н ‒ около 4,2; примесь С ‒ около 4,3, примесь D ‒ около 5,4.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками анастрозола и примеси Н должно быть не менее 2,0.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика анастрозола на хроматограмме раствора стандартного образца анастрозола;
а1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца анастрозола, мг;
P – содержание анастрозола в фармакопейном стандартном образце анастрозола,%;

Допустимое содержание примесей:

- примесь А – не более 0,2 %;

- примесь В – не более 0,2 %;

- примесь С – не более 0,1 %;

- примесь D – не более 0,1 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,3 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 20 мл ацетонитрила и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор стандартного образца анастрозола. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца анастрозола, растворяют в 20 мл ацетонитрила и доводят объём раствора ПФА до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца анастрозола и испытуемый раствор.

Содержание анастрозола C17H19N5 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика анастрозола на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика анастрозола на хроматограмме раствора стандартного образца анастрозола;
а1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца анастрозола, мг;
P – содержание анастрозола в фармакопейном стандартном образце анастрозола,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0337 Аргинин (Argininum)

Вводится впервые

##### Определение

(2S)-2-Амино-5-(карбамимидоиламино)пентановая кислота.

L-Аргинин.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % аргинина C6H14N4O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96 % , практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца аргинина.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец высушивают при температуре 105 °С и записывают спектры сухих остатков.

2. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»). Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора Б по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции аргинина на хроматограмме раствора стандартного образца аргинина (раздел «Родственные примеси. 1. Аминосоединения»).

3. Качественная реакция._ Растворяют 25 мг субстанции в 2 мл воды, прибавляют 1 мл α-нафтола раствора 0,1 % и 2 мл смеси, состоящей из натрия гипохлорита раствора концентрированного и воды (1:1); должно появиться красное окрашивание.

##### Испытания

Удельное вращение. От +25,5 до +28,5 в пересчёте на сухое вещество (8 % раствор субстанции в хлористоводородной кислоте 25 %, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл воды дистиллированной должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 10,5 до 12,0 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

1. Аминосоединения. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 %—2-пропанол 30:70.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоте разведённой 7,3 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца аргинина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца аргинина, растворяют в хлористоводородной кислоте растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10 мг стандартного образца аргинина и 10 мг стандартного образца лизина гидрохлорида, растворяют в хлористоводородной кислоте растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора А (50 мкг), испытуемого раствора Б (1 мкг), раствора стандартного образца аргинина (1 мкг), раствора сравнения А (0,25 мкг), раствора сравнения Б (0,1 мкг), раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (по 2 мкг аргинина и лизина гидрохлорида) и хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 %. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, в течение 10 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом.

Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей при температуре 100–105 °С, опрыскивают нингидрина раствором 0,2 %, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С в течение 15 мин и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения Б должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 разделённые зоны адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции аргинина на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %).

Суммарное содержание примесей, оцененное по совокупности величины и интенсивности окраски их зон адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора в сравнении с зонами адсорбции на хроматограммах растворов сравнения не должно превышать 2,0 %.

Зону адсорбции хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % не учитывают.

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Фосфорной кислоты раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1 мл фосфорной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Модифицирующий реактив. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл водорода пероксида и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 2,4 г натрия дигидрофосфата безводного и 1,9 г натрия гексансульфоната в 965 мл воды, доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 2,30±0,05, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Испытуемый раствор. Растворяют 20 мг субстанции в смеси 1 мл фосфорной кислоты раствора и 9 мл ПФ, при необходимости обрабатывают ультразвуком до растворения и охлаждают до комнатной температуры.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 20 мг субстанции, прибавляют 10 мл модифицирующего реактива, выдерживают в течение 2 ч при температуре 80 °С, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 6,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 2,6 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 195 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика аргинина. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Время удерживания аргинина – около 7,5 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика аргинина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси с относительным временем удерживания 0,85 и аргинина должно быть не менее 3,0.

На хроматограмме раствора сравнения относительное стандартное отклонение площади пика аргинина должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика аргинина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь пика аргинина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика аргинина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,03 %).

Аммоний. Не более 0,02 %.

Стандартный раствор аммония. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 74,1 мг (точная навеска) аммония хлорида, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10,0 мл полученного раствора. Раствор готовится непосредственно перед использованием.

Испытуемый раствор. В коническую колбу с притёртой пробкой вместимостью 25 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в 1 мл воды, прибавляют 0,3 г магния оксида и перемешивают.

Эталонный раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,1 мл стандартного раствора аммония, прибавляют 1 мл воды, 0,3 г магния оксида и перемешивают.

Над реакционными смесями испытуемого и эталонного растворов подвешивают по полоске полиэтилена шириной 1 см с прикреплёнными несколькими каплями воды отрезками серебряно-марганцевой бумаги, и закрывают колбы пробками. Содержимое колб перемешивают, не допуская попадания брызг на бумагу, и выдерживают на водяной бане при температуре 40 °С в течение 30 мин. Окраска бумаги, используемой в испытуемом растворе, не должна быть интенсивнее окраски бумаги, используемой в эталонном растворе.

Железо. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Железо» (метод 1), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции (ОФС «Сульфатная зола»), с использованием стандартного раствора железо(III)-иона 10 мкг/мл.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,03 %. (ОФС «Сульфаты», метод 1). В 10 мл воды растворяют 0,33 г субстанции.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). В 10 мл воды растворяют 0,1 г субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) с использованием эталонного раствора 1.

* Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 11 мг субстанции в 0,5 мл раствора натрия хлорида для инъекций 0,9 % на мышь, внутривенно, со скоростью 0,1 мл/с. Срок наблюдения – 48 часов.

* Бактериальные эндотоксины. Не более 10,0 ЕЭ на 1 г аргинина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией аргинина 45 мг/мл в хлористоводородной кислоты растворе 0,25 М, приготовленном на воде для определения бактериальных эндотоксинов. Коррекцию pH исходного раствора субстанции осуществляют с использованием буферных растворов.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 50 мл воды и титруют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до перехода окраски из зелёной в фиолетово-красную (индикатор – 0,2 мл метилового красного смешанного раствора).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 17,42 мг аргинина C6H14N4O2.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0005 Артикаина гидрохлорид

Артикаин
Articaini hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0005.15

##### Определение

Метил{4-метил-3-[(2RS)-2-(пропиламино)пропанамидо]тиофен-2-карбоксилата} гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % артикаина гидрохлорида C13H20N2O3S∙HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. От белого до белого с желтовато-зеленоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр испытуемого образца в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца артикаина гидрохлорида.

- Испытуемый образец. Растворяют 0,1 г субстанции в 5 мл воды, прибавляют 3 мл натрия карбоната раствора 4,2 % и дважды встряхивают с 2 мл метиленхлорида. Слои метиленхлорида объединяют, разбавляют метиленхлоридом до 5,0 мл и сушат над натрия сульфатом безводным.

- Стандартный образец. Встряхивают 0,12 г фармакопейного стандартного образца артикаина гидрохлорида с 10 мл метиленхлорида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 до 350 нм должен иметь максимум при 272 нм и минимум при 230 нм.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 167 до 172 °С (начало разложения, ОФС «Температура плавления»).

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном ВY6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,2 до 5,2 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 2,02 г натрия гептансульфоната и 4,08 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислотой до 2,0. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 250:750.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси А и 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси Е, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в 8 мл ПФ, прибавляют 0,2 мл стандартного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А:
метил{4-метил-3-[2-(пропиламино)ацетамидо]тиофен-2-карбоксилат} [1712677-79-6].

Примесь Е:
метил{4-метил-3-[(2RS)-2-[(пропан-2-ил)амино]пропанамидо]тиофен-2-карбоксилат} [1796888-45-3].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 45 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 276 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 5-кратное от времени удерживания пика артикаина. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения А, раствор сравнения Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Артикаин – 1 (около 9 мин); примесь A – около 0,8; примесь E – около 0,86.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примесей A и E должно быть не менее 1,2.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна превышать площадь пика примеси А на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей (кроме примеси А) не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,7 ЕЭ на 1 мг артикаина гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в смеси 5,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М и 50 мл спирта 96 % и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают объём титранта между двумя точками перегиба на кривой титрования.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 32,08 мг артикаина гидрохлорида C13H20N2O3S∙HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0058 Аскорбиновая кислота (Acidum ascorbicum)

Взамен ФС.2.1.0058.18

##### Определение

(5R)-5-[(1S)-1,2-Дигидроксиэтил]-3,4-дигидроксифуран-2(5H)-он.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % аскорбиновой кислоты C6H8O6 в пересчёте на свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы, обесцвечивающиеся при воздействии воздуха и влаги.

Растворимость. Легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос по поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца аскорбиновой кислоты.

2. Спектрофотометрия. (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 мг субстанции и растворяют в хлористоводородной кислоте растворе 0,1 М и доводят объём раствора до метки.

- Ультрафиолетовый спектр испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 300 нм должен иметь максимум поглощения при длине волны 243 нм с удельным показателем поглощения от 545 до 585.

3. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 2 мл воды и прибавляют 0,2 мл азотной кислоты разведённой 12,5 % и 0,5 мл серебра нитрата раствора 1,7 %; должен появиться тёмный осадок.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», должна выдерживать сравнение с эталоном BY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Удельное вращение. От +20,5 до +21,5 (1 г субстанции в 10 мл воды; определение проводят сразу после приготовления испытуемого раствора, ОФС «Оптическое вращение).

рН. От 2,1 до 2,6 (Испытание проводят в растворе, полученном в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. В химический стакан помещают 6,8 г калия дигидрофосфата, растворяют в 175 мл воды, фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора до метки.

Подвижная фаза. Буферный раствор―ацетонитрил 25:75.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,50 г (точная навеска) субстанции, растворяют в подвижной фазе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси С. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца аскорбиновой кислоты примеси С, растворяют в подвижной фазе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца аскорбиновой кислоты примеси D, 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца аскорбиновой кислоты, растворяют в подвижной фазе, прибавляют 2,5 мл раствора стандартного образца примеси С и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора подвижной фазой до метки и перемешивают. К 1 мл полученного раствора прибавляют 1 мл раствора стандартного образца примеси С и перемешивают.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель аминопропилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 45 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,5 – кратное от времени удерживания пика аскорбиновой кислоты. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Аскорбиновая кислота – 1 (около 11 мин); примесь D – около 0,4; примесь С – около 1,7.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси С и пика примеси D используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму стандартного раствора.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (Rs) между пиками аскорбиновой кислоты и примеси С должно быть не менее 3.

На хроматограмме стандартного раствора отношение сигнал/шум (S/N) для пика аскорбиновой кислоты должно быть не менее 20 (6 введений).

Допустимое содержание примесей

На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей С и D не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика соответствующей примеси на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,15 % каждая);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площади пика аскорбиновой кислоты на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,10%);

- сумма площадей пиков всех примесей (кроме С и D) не должна превышать двукратную площадь пика аскорбиновой кислоты на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика аскорбиновой кислоты на хроматограмме стандартного раствора (менее 0,05 %).

Щавелевая кислота. Не более 0,2 %.

Испытуемый раствор. Растворяют 0,25 г субстанции в 5 мл воды, нейтрализуют натрия гидроксида раствором 10 %, прибавляют 1 мл уксусной кислоты раствора 12 %, 0,5 мл кальция хлорида раствора 7,35 % и перемешивают.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 70 мг щавелевой кислоты, растворяют в воде, доводят объём раствора тем же растворителем до метки. К 5 мл полученного раствора прибавляют 1 мл раствора уксусной кислоты разведённой 12 %, 0,5 мл кальция хлорида раствора 7,35 % и перемешивают. Раствор готовят одновременно с испытуемым раствором.

Испытуемый раствор и раствор сравнения выдерживают в течение 1 ч.

Опалесценция испытуемого раствора не должна превышать опалесценцию раствора сравнения.

Медь. Не более 0,0005 %. Определение проводят методом ААС (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Используют свежеприготовленные растворы.

Растворитель. Азотной кислоты раствор 0,1 М с минимальным содержанием элементных примесей.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор меди. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,393 г меди сульфат пентагидрат, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Калибровочные растворы. В три мерные колбы вместимостью 100 мл помещают стандартный раствор меди в количестве: 2,0; 4,0; 6,0 мл, доводят объём каждого раствора растворителем до метки и перемешивают (содержание меди соответственно: 0,2; 0,4; 0,6 мкг/мл).

Условия испытания

Источник излучения | лампа с полым медным катодом;
Длина волны | 324,8 нм;
Атомизация | воздушно-ацетиленовое пламя.

Устанавливают нулевую точку на приборе, используя азотной кислоты раствор 0,1 М. Измеряют поглощение калибровочных растворов меди и испытуемого раствора. Для каждого раствора проводят не менее 3 измерений. Строят калибровочный график зависимости средних результатов величины поглощения от концентрации меди (мкг/мл). Определяют параметры линейной регрессии.

С помощью уравнения линейной регрессии находят концентрацию меди в испытуемом растворе.

Содержание меди в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где C - концентрация меди в испытуемом растворе, найденная по калибровочному графику, мкг/мл;
а - навеска субстанции, г.

Железо. Не более 0,0002 %. Определение проводят методом ААС (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Используют свежеприготовленные растворы.

Растворитель. Азотной кислоты раствор 0,1 М с минимальным содержанием элементных примесей.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 г (точная навеска) субстанции, растворяют в азотной кислоты растворе 0,1 М, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор железа. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,863 г квасцов железоаммониевых, растворяют в 25 мл серной кислоты разведённой 9,8 % и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Калибровочные растворы. В три мерные колбы вместимостью 100 мл помещают стандартный раствор железа в количестве: 1,0; 2,0; 3,0 мл, доводят объём каждого раствора растворителем до метки и перемешивают (содержание железа соответственно 0,2; 0,4; 0,6 мкг/мл).

Условия испытания

Источник излучения | лампа с полым железным катодом;
Длина волны | 248,3 нм;
Атомизация | воздушно-ацетиленовое пламя.

Устанавливают нулевую точку на приборе, используя азотной кислоты раствор 0,1 М. Измеряют поглощение калибровочных растворов железа и испытуемого раствора при длине волны 248,3 нм. Для каждого раствора проводят не менее 3 измерений. Строят калибровочный график зависимости средних результатов величины поглощения от концентрации железа (мкг/мл). Определяют параметры линейной регрессии.

С помощью уравнения линейной регрессии находят концентрацию железа в испытуемом растворе.

Содержание железа в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где C - концентрация железа в испытуемом растворе, найденная по калибровочному графику, мкг/мл;
а - навеска субстанции, г.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 1,2 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 50 мг/мл, а затем разводят его не менее чем в 100 раз.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в смеси 10 мл серной кислоты раствора 1 М и 80 мл воды и титруют 0,05 М раствором йода до появления устойчивого фиолетово-синего окрашивания (индикатор – 1 мл крахмала раствора 1 %, содержащего 0,01 % ртути(II) йодида).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора йода соответствует 8,806 мг аскорбиновой кислоты C6H8O6.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Испытания проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0352 Аспарагиновая кислота (Acidum asparticum)

Вводится впервые

##### Определение

(2S)-2-Аминобутандиовая кислота.

L-Аспарагиновая кислота.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % аспарагиновой кислоты C4H7NO4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Мало растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

* Растворяется в разбавленных растворах минеральных кислот и щелочей.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца аспарагиновой кислоты.

2. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Вещества, окрашивающиеся нингидрином.

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—вода—бутанол 20:20:60.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в аммиака растворе 10 % и доводят объём раствора водой до метки.

- Раствор стандартного образца аспарагиновой кислоты. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца аспарагиновой кислоты, растворяют в 2 мл аммиака раствора 10 % и доводят объём раствора водой до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца аспарагиновой кислоты. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают нингидрина раствором 0,2 %, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С в течение 15 мин и просматривают в видимом свете.

- Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора, по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции аспарагиновой кислоты на хроматограмме раствора стандартного образца аспарагиновой кислоты.

##### Испытания

Удельное вращение. От +24,0 до +26,0 в пересчёте на сухое вещество (8 % раствор субстанции в хлористоводородной кислоты растворе 6 М, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл хлористоводородной кислоты растворе 1 М должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH. От 2,5 до 3,5 (0,5 г субстанции растворяют в 100 мл кипящей воды и охлаждают, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

1. Энантиомерная чистота. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ): 2-пропанол—меди сульфата пентагидрата раствор 0,5 г/л 5:95 (об/об).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,10 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси I. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,10 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца D-аспарагиновой кислоты (примесь I), растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,3 мл раствора стандартного образца примеси I и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,10 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 90 мл воды, прибавляют 0,3 мл раствора сравнения и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь I (D-аспарагиновая кислота): (2R)-2-аминобутандиовая кислота [1783-96-6].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель для хиральной хроматографии, модифицированный L-пеницилламином, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 24 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси I, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Аспарагиновая кислота – 1 (около 12 мин); примесь I – около 0,85.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси I и аспарагиновой кислоты должно быть не менее 2,0.

Содержание примеси I в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси I на хроматограмме испытуемого раствора;
So – площадь пика примеси I на хроматограмме раствора сравнения;
a1 – навеска субстанции, мг;
ao – навеска фармакопейного стандартного образца примеси I, мг;
P – содержание примеси I в фармакопейном стандартном образце примеси I,%.

Допустимое содержание примеси I не более 0,3 %.

2. Другие дикарбоновые кислоты. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 900 мл воды, прибавляют 4,0 мл серной кислоты раствора 3,8 М, доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 2 мл хлористоводородной кислоты раствора 6 М и встряхивают до полного растворения в течение 10–20 мин, доводят объём раствора водой до метки.

Раствор яблочной кислоты (А). В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг (точная навеска) яблочной кислоты (примесь А), растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор яблочной кислоты (Б). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора яблочной кислоты (А) и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор малеиновой кислоты. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) малеиновой кислоты (примесь Н), растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор фумаровой кислоты. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фумаровой кислоты (примесь B), растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора малеиновой кислоты и доводят объём раствором яблочной кислоты (А) до метки.

Примечание

Примесь А (яблочная кислота): (2RS)-2-гидроксибутандиовая кислота [6915-15-7].

Примесь В (фумаровая кислота): (2E)-бут-2-ендиовая кислота [110-17-8].

Примесь H (малеиновая кислота): (2Z)-бут-2-ендиовая кислота [110-16-7].

Хроматографические условия

Колонка | 300 × 7,8 мм, сильная катионообменная смола, 9 мкм; |  |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 0,6 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 214 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 4-кратное от времени удерживания пика примеси B. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, растворы яблочной кислоты (А и Б), растворы малеиновой и фумаровой кислот и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Примесь H – 1 (около 7,5 мин); примесь А – около 1,2; примесь B – около 2,0.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (примеси A и H) и хроматограмму раствора фумаровой кислоты (примесь B).

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси H и примеси А должно быть не менее 1,5.

Содержание примеси А (яблочной кислоты) в субстанции в процентах (XA) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси А на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика яблочной кислоты на хроматограмме раствора яблочной кислоты (Б);
a – навеска субстанции, мг;
ɑ0 – навеска яблочной кислоты, мг;
P – содержание основного вещества в яблочной кислоте,%.

Содержание каждой из примесей В и Н в субстанции в процентах (XBH) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси В или H на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика малеиновой кислоты на хроматограмме раствора малеиновой кислоты;
a – навеска субстанции, мг;
ɑ0 – навеска малеиновой кислоты, мг;
P – содержание основного вещества в малеиновой кислоте,%.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (Xi) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика яблочной кислоты на хроматограмме раствора яблочной кислоты (Б);
a – навеска субстанции, мг;
ɑ0 – навеска яблочной кислоты, мг;
P – содержание основного вещества в яблочной кислоте,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь А – не более 0,2 %;

- примесь B – не более 0,10 %;

- примесь Н – не более 0,10 %;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,3 %.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

3. Нингидрин-положительные вещества. Определение проводят в соответствии с ОФС «Аминокислотный анализ» (метод 1).

Раствор A. Хлористоводородной кислоты раствор 0,01 М или буферный раствор для пробоподготовки, подходящий для используемого прибора.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворе A и доводят объём тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствором A до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствором А до метки.

Раствор пролина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 30 мг (точная навеска) пролина, растворяют в растворе A и доводят объём тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствором А до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 30 мг аланина (примесь D), 60 мг аспарагина (примесь G) и 30 мг глутаминовой кислоты (примесь С), растворяют в растворе А и доводят объём тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствором А до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг изолейцина и 30 мг лейцина, растворяют в растворе A и доводят объём тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствором А до метки.

Контрольный раствор. Раствор A.

Примечание

Примесь С (глутаминовая кислота): (2S)-2-аминопентандиовая кислота [56-86-0].

Примесь D (аланин): (2S)-2-аминопропановая кислота [56-41-7].

Примесь G (аспарагин): (2S)-2-амино-3-карбамоилпропановая кислота [70-47-3].

Вводят в аминокислотный анализатор подходящие равные объёмы контрольного раствора, раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы, стандартного раствора, раствора пролина, раствора сравнения и испытуемого раствора. Используют программу элюирования, подходящую для определения содержания протеиногенных аминокислот.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками изолейцина и лейцина должно быть не менее 1,5.

Содержание каждой из примесей C, D и G в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси C, D или G на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика примеси C, D или G на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, взятая для приготовления испытуемого раствора, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца примеси C, D или G, взятая для приготовления стандартного раствора, мг;
P – содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце примеси C, D или G соответственно,%.

Содержание любого другой примеси (нингидрин-положительного вещества), зарегистрированной при длине волны 570 нм, (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения.

Содержание любой другой примеси (нингидрин-положительного вещества), зарегистрированной при длине волны 440 нм, (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика пролина на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска пролина, взятая для приготовления раствора пролина, мг;
P – содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце пролина,%.

Если примесь регистрируется выше порога игнорирования как при 570 нм, так и при 440 нм, для количественного расчёта используют результат, полученный при 570 нм.

Допустимое содержание примесей:

- примеси С, D и G – не более 0,2 % каждая;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Аммоний. Не более 0,02 % (ОФС «Аммоний»). Взбалтывают 0,15 г субстанции с 15 мл воды свободной от аммиака в течение 5 мин и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Железо. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Железо» (метод 2) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции (ОФС «Сульфатная зола»), с использованием железа стандартного раствора 10 мкг/мл.

Сульфаты. Не более 0,03 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). В 4 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % растворяют 0,5 г субстанции и доводят объём раствора водой до 15 мл. Для определения используют 10 мл раствора.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,25 г субстанции, прибавляют в 3 мл азотной кислоты раствора 12,5 %, доводят объём раствора водой до метки. Для определения используют 10 мл раствора.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 2), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 7,5 мг субстанции в 0,5 мл натрия хлорида раствора 0,9 % на мышь, внутривенно в течение 30 с. Срок наблюдения – 48 ч. Испытуемый раствор с концентрацией 15 мг/мл: к навеске субстанции 900 мг прибавляют 3,4 мл раствора натрия гидроксида 2 М и нагревают до 90–100 °С до полного растворения субстанции, доводят объём раствора до 10 мл раствором натрия хлорида 0,9 %. К 1,0 мл полученного раствора прибавляют 5 мл раствора натрия хлорида 0,9 %.

** Бактериальные эндотоксины. Не более 10 ЕЭ на 1 г аспарагиновой кислоты (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 0,01 г субстанции в 1 мл воды для определения бактериальных эндотоксинов. При приготовлении исходного раствора допускается нагревание до температуры 70–80 °С, до полного растворения субстанции. Разведения исходного раствора субстанции выполняют с использованием растворов, корректирующих значение pH.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции (при слабом нагревании) в 50 мл воды, охлаждают и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до перехода окраски из жёлтой в синюю (индикатор – 0,1 мл бромтимолового синего раствор 0,05 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 13,31 мг аспарагиновой кислоты C4H7NO4.

##### Хранение

В плотно закрытой упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0380 Атазанавира сульфат

Атазанавир
Atazanaviri sulfas

Вводится впервые

##### Определение

Диметил[(3S,8S,9S,12S)-9-бензил-3,12-ди(трет-бутил)-8-гидрокси-4,11-диоксо-6-{[4-(пиридин-2-ил)фенил]метил}-2,5,6,10,13-пентаазатетрадекандиоата] сульфат (1:1).

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % атазанавира сульфата C38H54N6O11S в пересчёте на безводное и свободное от органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. От белого до светло-жёлтого цвета кристаллический порошок, может содержать агломераты.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в метаноле и спирте 96 %, мало растворим или практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом (3 мг субстанции в 300 мг калия бромида), в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца атазанавира сульфата.

- Если спектры различаются, 20 мг испытуемой субстанции и 20 мг фармакопейного стандартного образца по отдельности растворяют в 4 мл смеси изопропиловый спирт—этилацетат 1:1, нагревают на водяной бане при температуре около 50 °С до растворения, фильтруют, фильтр промывают 3 мл нагретого до той же температуры растворителя. Фильтрат выдерживают в холодильнике при температуре 5±1 °С в течение 14 ч и выпаривают в вакуумном шкафу при температуре не более 55 °С, выдерживают в эксикаторе в течение 1 ч при комнатной температуре и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика атазанавира на хроматограмме раствора стандартного образца атазанавира сульфата (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –40 до –44 в пересчёте на безводное и свободное от органических растворителей вещество (1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 2,73 г калия дигидрофосфата, растворяют в 900 мл воды и доводят значение pH раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,5. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Растворитель. Буферный раствор—ацетонитрил 50:50.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 250:750.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор—ацетонитрил 250:750.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 40 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком до растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4 мг фармакопейного стандартного образца атазанавира смеси для проверки пригодности системы (содержит примесь F), прибавляют 8 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком до растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A: 4-(пиридин-2-ил)бензойная кислота [4385-62-0].

Примесь B: 4-(пиридин-2-ил)бензальдегид [127406-56-8].

Примесь C: диметил[(3S,8S,9S,12S)-9-бензил-3,12-ди(трет-бутил)-8-гидрокси-4,11-диоксо-2,5,6,10,13-пентаазатетрадекандиоат] [1192224-24-0].

Примесь D: (2S,3S)-3-амино-1-[(E)-1-{[4-(пиридин-2-ил)фенил]метил}-2-{[4-(пиридин-2-ил)фенил]метилиден}гидразин-1-ил]-4-фенилбутан-2-ол.

Примесь F (атазанавир R,S,S,S-диастереомер): диметил[(3R,8S,9S,12S)-9-бензил-3,12-ди(трет-бутил)-8-гидрокси-4,11-диоксо-6-{[4-(пиридин-2-ил)фенил]метил}-2,5,6,10,13-пентаазатетрадекандиоат] [1332981-14-2].

Примесь I: метил{[(2S)-1-{[(2S,3S)-3-гидрокси-4-[(E)-1-{[4-(пиридин-2-ил)фенил]метил}-2-{[4-(пиридин-2-ил)фенил]метилиден}гидразин-1-ил]-1-фенилбутан-2-ил]амино}-3,3-диметил-1-оксобутан-2-ил]карбамат}.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |  |
Температура | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 215 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 100 | 0
5–45 | 100 → 0 | 0 → 100

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Атазанавир – 1 (около 30 мин); примесь A – около 0,3; примесь B – около 0,55; примесь C – около 0,66; примесь D – около 0,76; примесь F – около 0,99; примесь I – около 1,3.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, C, D и I используют относительное время удерживания соединений. Для идентификации пика примеси F используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу атазанавира смеси для проверки пригодности системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками атазанавира и пиком примеси F должно быть не менее 1,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь A – 0,625; примесь B – 0,435; примесь C – 1,695; примесь D – 0,67; примесь I – 0,67.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика атазанавира на хроматограмме раствора сравнения;
P – содержание атазанавира сульфата в фармакопейном стандартном образце атазанавира сульфата,%.

Допустимое содержание примесей:

- любая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики с относительными временами удерживания менее 0,2 и пики, площадь которых менее 0,5 площади пика атазанавира на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

** Примесь K. Не более 0,15 %. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца примеси К. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси К, прибавляют 9 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком до растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 3,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь K: (2S)-2-[(метоксикарбонил)амино]-3,3-диметилбутановая кислота [162537-11-3].

Хроматографические условия

Объём пробы | 20 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 95 | 5
5–8 | 95 → 0 | 5 → 100
8–14 | 0 | 100

Хроматографируют раствор стандартного образца примеси К и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Атазанавир – 1 (около 10 мин); примесь К – около 0,4.

Для идентификации пика примеси К используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора стандартного образца примеси К.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца примеси К относительное стандартное отклонение площади примеси К должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Содержание примеси К в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика примеси К на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика примеси К на хроматограмме раствора стандартного образца примеси К;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца примеси К, мг;
a1 - навеска субстанции, мг.

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3Б). Определение проводят в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 500:500.

Раствор стандартного образца атазанавира сульфата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца атазанавира сульфата, прибавляют 40 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком до растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Объём пробы | 25 мкл;
Время хроматографирования | 1,6-кратное от времени удерживания пика атазанавира.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности системы, раствор стандартного образца атазанавира сульфата и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Атазанавир – 1 (около 9,5 мин); примесь F – около 0,94.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца атазанавира сульфата:

- фактор асимметрии пика (AS) атазанавира должен быть не более 1,5.

Содержание атазанавира сульфата C38H52N6O7·H2SO4 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика атазанавира на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика атазанавира на хроматограмме раствора стандартного образца атазанавира сульфата;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца атазанавира сульфата, мг;
a1 – навеска субстанции, мг;
P – содержание атазанавира сульфата в фармакопейном стандартном образце атазанавира сульфата,%;
W – содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Определение проводят в случае, если присутствие примеси обусловлено технологическим процессом производства субстанции.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0059 Атенолол (Atenololum)

Взамен ФС.2.1.0059.18

##### Определение

2-{4-[(2RS)-2-Гидрокси-3-[(пропан-2-ил)амино]пропокси]фенил}ацетамид

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % атенолола C14H22N2O3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в воде, растворим или умеренно растворим в спирте 96 %, мало растворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области») Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца атенолола.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл, помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь максимумы поглощения при 275 нм и 282 нм; отношение оптических плотностей в указанных максимумах (А275/А282) должно быть от 1,15 до 1,20.

3. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254 силанизированного.

- Подвижная фаза (ПФ). Аммиак концентрированный—метанол 1:99.

- Растворитель. Метанол.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 1 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в метаноле, доводят объём раствора растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца атенолола. В мерную колбу вместимостью 1 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца атенолола, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (10 мкг) и раствора стандартного образца атенолола (10 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

- Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению и величине должна соответствовать зоне адсорбции атенолола на хроматограмме раствора стандартного образца атенолола.

##### Испытания

Температура плавления. От 152 до 155 ºС (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Угол вращения. От –0,10° до +0,10° (1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном В6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 1,0 г натрия октансульфоната и 0,4 г тетрабутиламмония гидросульфата, растворяют в смеси тетрагидрофуран—метанол—калия дигидрофосфата раствор 0,34 % 20:180:800, доводят рН раствора фосфорной кислотой до 3,00, количественно переносят раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки. Перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм и дегазируют.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в 20 мл ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 2 мг фармакопейного стандартного образца атенолола для проверки пригодности системы, содержащего примеси B, F, G, I и J в 1,0 мл ПФ.

Примечание

Примесь А: 2-(4-гидроксифенил)ацетамид [17194-82-0].

Примесь В: 2-{4-[(2RS)-2,3-дигидроксипропокси]фенила}ацетамид [61698-76-8].

Примесь D: 2-{4-[(2RS)-2-гидрокси-3-хлорпропокси]фенил}ацетамид [115538-83-5].

Примесь E: 2,2'-{2-гидроксипропан-1,3-диил)бис(окси-4,1-фенилен)} диацетамид [141650-31-9].

Примесь F: 2,2'-{(пропан-2-илазандиил)бис(2-гидроксипропан-3,1-диил)окси-4,1-фенилен}диацетамид [87619-83-8].

Примесь G (метопрололовая кислота): 2-{4-[(2RS)-2-гидрокси-3-[(пропан-2-иламино]пропокси]фенил}уксусная кислота [56392-14-4].

Примесь H: 2-{4-[(2RS)-2-гидрокси-3-[(пропан-2-иламино]пропокси]фенил}ацетонитрил [29277-73-4].

Примесь I: 2-{4-[(2RS)-2-гидрокси-3-(этиламино)пропокси]фенил}ацетамид [1797116-92-7].

Хроматографические условия.

Колонка | 125 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Скорость потока | 0,6 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 226 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 5-кратное от времени удерживания пика атенолола. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Атенолол – 1 (около 8 мин); примесь В – около 0,3; примесь J – около 0,7; примесь I – около 0,8; примесь F – около 2,0 (сдвоенный пик); примесь G – около 3,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей B, F, G, I и J используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение ® между пиками примеси J и примеси I должно быть не менее 1,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси В не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика атенолола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика каждой из примесей F, G, I, J не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика атенолола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика атенолола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика анетолола на хроматограмме раствора (не более 0,5 % ).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 %. (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,1 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,02 г субстанции в 10 мл воды.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии. (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 80 мл уксусной кислоты ледяной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 26,63 мг C14H22N2O3.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0060 Аторвастатин кальция тригидрат

Аторвастатин
Atorvastatinum calcicum trihydricum

Взамен ФС.2.1.0060.18

##### Определение

Бис{(3R,5R)-3,5-дигидрокси-7-[5-(пропан-2-ил)-3-фенил-4-(фенилкарбамоил)-2-(4-фторфенил)-1H-пиррол-1-ил]гептаноат} кальция, тригидрат.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % аторвастатина кальция С66Н68СаF2N4О10 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Очень мало растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %, легко растворим в метаноле, практически не растворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца аторвастатина кальция тригидрата.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец аторвастатина кальция тригидрата растворяют в минимальном объёме метанола, выпаривают досуха на водяной бане и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика аторвастатина на хроматограмме раствора стандартного образца аторвастатина кальция тригидрата (раздел «Количественное определение»).

3. Качественные реакции. Зольный остаток, полученный после сжигания 0,5 г субстанции (ОФС «Сульфатная зола»), растворяют в 5 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и при необходимости фильтруют. Полученный раствор должен давать характерные реакции на кальций (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

1. Энантиомерная чистота (примесь Е). Испытуемый раствор и растворы сравнения используют свежеприготовленными и защищают от света.

Подвижная фаза (ПФ). Трифторуксусная кислота—этанол—гексан 0,1:6:94.

Смесь растворителей. Этанол—метанол 50:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 4,0 мл смеси растворителей и доводят объём раствора гексаном до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, прибавляют 20,0 мл смеси растворителей и доводят объём гексаном до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 3,0 мл полученного раствора, прибавляют 5,0 мл смеси растворителей и доводят объём раствора гексаном до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы.

В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси Е и доводят объём раствора

метанолом до метки (раствор А). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 1,25 мл метанола, прибавляют 0,75 мл раствора А, 2,0 мл этанола и доводят объём раствора гексаном до метки.

Примечание

Примесь Е: (3S,5S)-3,5-дигидрокси-7-[5-(пропан-2-ил)-3-фенил-4-(фенилкарбамоил)-2-(4-фторфенил)-1H-пиррол-1-ил]гептановая кислота [501121-34-2].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм с силикагелем, модифицированным трис(5-хлор-2-метилфенилкарбамоил)амилозой для хиральной хроматографии 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 244 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,2-кратное от времени удерживания пика аторвастатина. |  |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Аторвастатин – 1 (около 44 мин); примесь Е – около 0,8.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси Е и аторвастатина должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси Е не должна превышать площадь пика аторвастатина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

2. Другие примеси.

Подвижная фаза А (ПФА). Тетрагидрофуран—ацетонитрил—аммония ацетата раствор 3,9 г/л, значение рН которого доводят уксусной кислотой ледяной до 5,0 12:21:67.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Тетрагидрофуран—ацетонитрил—аммония ацетата раствор 3,9 г/л, значение рН которого доводят уксусной кислотой ледяной до 5,0 12:61:27.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют и доводят объём раствора диметилформамидом до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50,0 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора диметилформамидом до метки. В мерную колбу вместимостью 20,0 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора диметилформамидом до метки.

Раствор для идентификации. Растворяют 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси А, 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси В, 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси С, 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси D и 2 мг субстанции в 40 мл диметилформамида.

Примечание

Примесь A: (3R,5R)-3,5-дигидрокси-7-[5-(пропан-2-ил)-2,3-дифенил-4-(фенилкарбамоил)-1H-пиррол-1-ил]гептановая кислота [433289-84-0].

Примесь B: rel-(3R,5S)-3,5-дигидрокси-7-[5-(пропан-2-ил)-3-фенил-4-(фенилкарбамоил)-2-(4-фторфенил)-1H-пиррол-1-ил]гептановая кислота [842103-12-2].

Примесь C: (3R,5R)-3,5-дигидрокси-7-[5-(пропан-2-ил)-4-(фенилкарбамоил)-2,3-бис(4-фторфенил)-1H-пиррол-1-ил]гептановая кислота [693794-20-6].

Примесь D: 2-(2-метилпропаноил)-N,3-дифенил-3-(4-фторбензоил)оксиран-2-карбоксамид [148146-51-4].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 35 °C; |  |
ПФ | Градиентный режим
| Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%;
| 0–40 | 100 | 0;
| 40–70 | 100 → 20 | 0 → 80;
| 70–85 | 20 → 0 | 80 → 100;
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 244 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Хроматографируют раствор для идентификации, раствор сравнения и испытуемый раствор

Относительное время удерживания. На хроматограмме раствора для идентификации. Аторвастатин – 1 (около 33 мин); примесь А – около 0,8; примесь В – около 0,9; примесь С – около 1,2; примесь D – около 2,1.

Пригодность хроматографической системы с использованием раствора для идентификации определяется в соответствии с ОФС «Хроматография».

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей А и В не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика аторвастатина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика каждой из примесей С и D не должны более чем в 1,5 раза превышать площадь пика аторвастатина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика аторвастатина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 15 раз превышать площадь пика аторвастатина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Натрий. Не более 0,4 %. Определение проводят методом ААС (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Смесь растворителей. Хлористоводородная кислота концентрированная—вода—метанол 2:25:75.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мг субстанции, растворяют смеси растворителей и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл эталонного раствора натрия 200 мкг/мл и доводят смесью растворителей до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят смесью растворителей до метки.

Источник излучения. Лампа с полым натриевым катодом.

Длина волны. 589,0 нм.

Атомизация. Воздушно-ацетиленовое пламя.

Определяют эффективные значения атомной абсорбции испытуемого раствора и раствора сравнения. Поглощение испытуемого раствора должно быть не более поглощения раствора сравнения.

Вода. От 3,5 % до 5,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,25 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 0,5 г субстанции с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в диметилформамиде, доводят объём раствора тем же растворителем до метки и перемешивают.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца аторвастатина кальция тригидрата, растворяют в диметилформамиде, доводят объём раствора тем же растворителем до метки и перемешивают.

Хроматографируют стандартный раствор не менее 5 раз. Хроматографическая система считается пригодной, если относительное стандартное отклонение площади пика аторвастатина не более 2,0 %.

Содержание аторвастатина кальция С66Н68СаF2N4О10 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика аторвастатина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика основного вещества на хроматограмме раствора стандартного образца аторвастатина;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца аторвастатина кальция тригидрата, мг;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце аторвастатина кальция тригидрата,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0628 Ацеклофенак (Aceclofenacum)

Вводится впервые

##### Определение

({[2-(2,6-Дихлоранилино)фенил]ацетил}окси)уксусная кислота.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % ацеклофенака C16H13Cl2NO4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в ацетоне, растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 650 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ацеклофенака.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 370 нм должен иметь максимум при 275 нм. Удельный показатель поглощения в максимуме должен быть от 320 до 350. В качестве раствора сравнения используют метанол.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 1,12 г фосфорной кислоты концентрированной в 900 мл воды и доводят pH раствора натрия гидроксида раствором 1 М до 7,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Вода—ацетонитрил 100:900.

Растворитель. ПФА—ПФБ 30:70.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 21,6 мг фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси F. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4 мг фармакопейного стандартного образца примеси F, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси H. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси H, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси I. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси I, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси А и 1,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор Б В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения, 1,0 мл раствора стандартного образца примеси F и 1,0 мл раствора стандартного образца примеси H и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для идентификации пиков. В 2,0 мл растворителя растворяют 4 мг фармакопейного стандартного образца ацеклофенака для идентификации пиков, содержащего примеси B, C, D, E и G.

Примечание

Примесь A: (диклофенак) [2-(2,6-дихлоранилино)фенил]уксусная кислота [15307-86-5].

Примесь B: метил{[2-(2,6-дихлоранилино)фенил]ацетат} [15307-78-5].

Примесь C: этил{[2-(2,6-дихлоранилино)фенил]ацетат} [15307-77-4].

Примесь D: метил[({[2-(2,6-дихлоранилино)фенил]ацетил}окси)ацетат] [139272-66-5].

Примесь E: этил[({[2-(2,6-дихлоранилино)фенил]ацетил}окси)ацетат] [139272-67-6].

Примесь F: бензил[({[2-(2,6-дихлоранилино)фенил]ацетил}окси)ацетат] [100499-89-6].

Примесь G: {[({[2-(2,6-дихлоранилино)фенил]ацетил}окси)ацетил]окси}уксусная кислота [1215709-75-3].

Примесь H: [({[({[2-(2,6-дихлоранилино)фенил]ацетил}окси)ацетил]окси}ацетил)окси]уксусная кислота [1216495-92-9].

Примесь I: 1-(2,6-дихлорфенил)-1,3-дигидро-2H-индол-2-он [15362-40-0].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм с размером пор 10 нм и содержанием углерода 19 %; |  |
Температура колонки | 40 оС; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 275 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА, % | ПФБ, %
--- | --- | ---
0–25 | 70 → 50 | 30 → 50
25–30 | 50 → 20 | 50 → 80
30–50 | 20 | 80

Хроматографируют раствор для идентификации пиков, стандартный раствор Б, стандартный раствор А, раствор стандартного образца примеси I, раствор стандартного образца примеси H, раствор стандартного образца примеси F и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ацеклофенак – 1 (около 11 мин); примесь А – около 0,8; примесь G – около 1,3; примесь H – около 1,5; примесь I – около 2,3; примесь D – около 3,1; примесь B – около 3,2; примесь E – около 3,3; примесь C – около 3,5; примесь F – около 3,7.

Идентификация примесей:

- для идентификации пика примеси А используется хроматограмма стандартного раствора А;

- для идентификации пиков примесей B, C, D, E и G используются хроматограммы раствора стандартного образца примеси А и раствора для идентификации пиков;

- для идентификации пика примеси F используется хроматограмма раствора стандартного образца примеси F;

- для идентификации пика примеси H используется хроматограмма раствора стандартного образца примеси H;

- для идентификации пика примеси I используется хроматограмма раствора стандартного образца примеси I.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора А разрешение (RS) между пиками примеси А и ацеклофенака должно быть не менее 5,0.

Допустимое содержание примесей:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика примеси А на хроматограмме стандартного раствора А (не более 0,2 %);

- площадь пика каждой из примесей B, C, D, E и G не должна превышать площадь пика ацеклофенака на хроматограмме стандартного раствора Б (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси F не должна превышать площадь пика примеси F на хроматограмме стандартного раствора Б (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси H не должна превышать 1,5 площади пика примеси H на хроматограмме стандартного раствора Б (не более 0,15 %);

- площадь пика примеси I не должна превышать 1,5 площади пика примеси I на хроматограмме раствора стандартного образца примеси I (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика ацеклофенака на хроматограмме стандартного раствора Б (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 3,5 площади пика ацеклофенака на хроматограмме стандартного раствора Б (не более 0,7 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,25 площади пика ацеклофенака на хроматограмме стандартного раствора Б (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают до постоянной массы 1 г (точная навеска) субстанции при температуре ±105 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 40 мл метанола безводного и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 35,42 мг ацеклофенака C16H13Cl2NO4.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### Ацетазоламид (Acetazolamidum)

Вводится впервые

##### Определение

N-(5-Сульфамоил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)ацетамид.

Содержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % ацетазоламида C4H6N4O3S2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Мало растворим в спирте 96 %, очень мало растворим в воде.

* Растворяется в разбавленных растворах щелочных гидроксидов.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 650 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ацетазоламида.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах спирта 96 %, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения испытуемого раствора А в области длин волн от 230 до 260 нм должен иметь максимум при 240 нм. Удельный показатель поглощения в максимуме должен быть от 162 до 176. Спектр поглощения испытуемого раствора Б в области длин волн от 260 до 350 нм должен иметь максимум при 292 нм. Удельный показатель поглощения в максимуме должен быть от 570 до 620.

- Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в натрия гидроксида растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора натрия гидроксида раствором 0,01 М до метки.

- Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора натрия гидроксида раствором 0,01 М до метки.

3. Качественная реакция. В пробирку помещают 20 мг субстанции, прибавляют 4 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % и 0,2 г цинка порошка. К краю пробирки подносят смоченную в воде свинцово-ацетатную бумагу; должно появиться коричнево-чёрное окрашивание.

4. Качественная реакция. Растворяют 25 мг субстанции в смеси 0,1 мл натрия гидроксида раствора 8,5 % и 5 мл воды, прибавляют 0,1 мл меди(II) сульфата раствора 10 %; должен образоваться зеленовато-голубой осадок.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Опалесценция раствора 1 г субстанции в 10 мл натрия гидроксида раствора 1 М не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y5 или ВY5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—калия дигидрофосфата раствор 0,05 М 100:900.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Содержимое флакона (виалы) фармакопейного стандартного образца ацетазоламида для проверки пригодности системы, содержащего примеси А, В, С, D, Е и F, растворяют в 1,0 мл ПФ.

Примечание

Примесь А: N-(5-хлор-1,3,4-тиадиазол-2-ил)ацетамид [60320-32-3].

Примесь В: N-(1,3,4-тиадиазол-2-ил)ацетамид [5393-55-5].

Примесь С: N-(5-сульфанил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)ацетамид [32873-56-6].

Примесь D: 5-амино-1,3,4-тиадиазол-2-сульфонамид [14949-00-9].

Примесь Е: 5-ацетамидо-1,3,4-тиадиазол-2-сульфоновая кислота [827026-60-8].

Примесь F: N,N'-[иминобис(сульфонил-1,3,4-тиадиазол-5,2-диил)]диацетамид [80495-47-2].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель пропоксибензольный, эндкепированный для хроматографии, 4 мкм; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 265 нм; |  |
Объём пробы | 25 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3,5-кратное от времени удерживания пика ацетазоламида. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ацетазоламид – 1 (около 8 мин); примесь Е – около 0,3; примесь D – около 0,4; примесь В – около 0,6; примесь C – около 1,4; примесь А – около 2,1; примесь F – около 2,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В, С, D, E и F используются хроматограммы раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси Е и примеси D должно быть не менее 2,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь В – 2,3; примесь С – 2,6; примесь D – 1,6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей А, B, C, D, Е и F не должна превышать 1,5-кратную площадь пика ацетазоламида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика ацетазоламида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать шестикратную площадь пика ацетазоламида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают до постоянной массы 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 100–105 °С.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Растворяют при нагревании до кипения 0,4 г субстанции в 20 мл воды очищенной, полученной методом дистилляции. После охлаждения до комнатной температуры, перемешивают и фильтруют.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 2.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 25 мл диметилформамида и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида этанольного. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида этанольного соответствует 22,22 мг ацетазоламида C4H6N4O3S2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0630 Ацетарсол (Acetarsolum)

Взамен ВФС 42-1789-88

##### Определение

3-Ацетамидо-4-гидроксифениларсоновая кислота.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % ацетарсола в пересчёте на сухое вещество

##### Свойства

Описание. Белый мелкокристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в натрия гидрокарбоната растворе 5 % и аммиака растворе, очень мало растворим или практически нерастворим в воде и спирте 96 %.

Легко растворим или растворим в разбавленных растворах щелочей, очень мало растворим или практически нерастворим в разбавленных растворах кислот.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ацетарсола.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в натрия гидроксида растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Cпектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 240 до 400 нм должен иметь максимумы при 252 нм и 301 нм. В качестве раствора сравнения используют натрия гидроксида раствор 0,01 М.

3. Качественная реакция. Раствор 1,0 г субстанции в 10 мл натрия гидроксида раствора 1 М должен давать характерную реакцию на ацетаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. Около 240 °С (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельный показатель поглощения. От 550 до 600 (в максимуме поглощения) при длине волны 252 нм в пересчёте на сухое вещество (0,001 % раствор субстанции в натрия гидроксида растворе 0,01 М, ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Родственные примеси

1. 3-Амино-4-гидроксифениларсоновая кислота. Не более 0,1 %.

Испытуемый раствор. Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 5 мл натрия гидрокарбоната раствора 2 % и прибавляют 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М.

Стандартный раствор. Помещают 12,4 мг (точная навеска) субстанции в колбу, прибавляют смесь 20 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М и 20 мл воды, кипятят в течение 5 мин с обратным холодильником, охлаждают и доводят объём раствора водой до 500 мл (концентрация 3-амино-4-гидроксифениларсоновой кислоты [2163-77-1] около 20 мкг/мл или 0,1 % от концентрации ацетарсола в испытуемом растворе).

По 10 мл испытуемого и стандартного растворов охлаждают до 5 °С и к каждому прибавляют по 2 мл натрия нитрита раствора 0,5 %, выдерживают 3 мин, прибавляют по 1 мл сульфаминовой кислоты раствора 10 %, интенсивно перемешивают, выдерживают 5 мин при 5 °С, прибавляют предварительно охлаждённый β-нафтола щелочной раствор 5 %, перемешивают и выдерживают 10 мин при 5 °С. Окраска раствора, полученного с испытуемым раствором, по интенсивности не должна превышать окраску раствора, полученного со стандартным раствором.

2. Арсенаты

Растворяют 1 г субстанции в 10 мл аммиака раствора 1 % и фильтруют.

В колбу Эрленмейера вместимостью 25 мл помещают 5 мл полученного раствора, прибавляют 5 мл магнезиальной смеси, энергично перемешивают и выдерживают в течение 30 мин; не должны появляться осадок или опалесценция.

3. Арсениты

Растворяют 1 г субстанции в 10 мл натрия гидроксида раствора 1 М, прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и фильтруют. К 5 мл полученного раствора прибавляют 0,1 мл натрия сульфида раствора 2 %; допускается только светло-жёлтое окрашивание и незначительная опалесценция.

Хлориды. Не более 0,07 % (ОФС «Хлориды»). К 0,3 г субстанции прибавляют 100 мл воды, интенсивно перемешивают в течение 2 мин и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Кислотно-основное титрование в неводных средах»).

Помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции в колбу Эрленмейера с притёртой пробкой вместимостью 250 мл, прибавляют 15 мл калия перманганата раствора 5 % и осторожно по стенкам колбы 15 мл серной кислоты концентрированной, перемешивают, нагревают до начала кипения, к горячему раствору прибавляют 20 мл аммония оксалата раствора 4 %, перемешивают до растворения образовавшегося в процессе реакции марганца(IV) оксида. Раствор в колбе охлаждают, прибавляют 20 мл хлороформа, 10 мл калия йодида раствора 10 %, колбу закрывают пробкой и интенсивно перемешивают в течение 1 мин, прибавляют 50 мл воды и титруют натрия тиосульфата раствором 0,1 М при интенсивном перемешивании до обесцвечивания хлороформного слоя.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл натрия тиосульфата раствора 0,1 М соответствует 13,75 мг ацетарсола C8H10AsNO5.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0631 Ацетилкарнитина гидрохлорид

Ацетилкарнитин
Acetylcarnitini hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

(3R)-3-(Ацетилокси)-4-(триметилазанийил)бутаноата гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % ацетилкарнитина гидрохлорида C9H17NO4·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок со слабым характерным запахом уксусной кислоты.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в спирте 96 % и практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 650 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ацетилкарнитина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Растворяют при кипячении 0,1 г субстанции в 2 мл серной кислоты растворе 50 %. Должен ощущаться запах уксусной кислоты.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,04 г субстанции в 2 мл воды. Полученный раствор должен давать реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 184 до 188 °С (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельное вращение. От –27,2 до –28,2 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 1,5 до 2,5 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 6,8 г (точная навеска) калия дигидрофосфата в 700 мл воды и доводят значение рН до 4,7 фосфорной кислотой концентрированной или натрия гидроксида раствором 0,2 М; количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Буферный раствор—ацетонитрил 350:650.

Все растворы готовят непосредственно перед использованием.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Стандартный раствор хлористоводородной кислоты. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мл воды, 1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают.

Раствор стандартного образца левокарнитина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца левокарнитина, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор хранят при температуре от 2 до 8 °С. Срок годности 30 суток.

В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят ПФ до метки и перемешивают.

Раствор стандартного образца кротонобетаина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца кротонобетаина, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор хранят при температуре от 2 до 8 °С. Срок годности 30 суток.

В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствор полученного раствора, доводят ПФ до метки и перемешивают.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. К 1,0 мл испытуемого раствора, прибавляют 0,1 мл раствора фармакопейного стандартного образца кротонобетаина и 1,0 мл раствора фармакопейного стандартного образца левокарнитина.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят ПФ до метки.

Примечание

Примесь 1 (кротонобетаин): 4-(триметилазанийил)бут-2-еноат [927-89-9].

Примесь 2 (левокарнитин): (3R)-3-гидрокси-4-(триметилазанийил)бутаноат [541-15-1].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель аминопропилсилильный для хроматографии,5 мкм; |  |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 205 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика ацетилкарнитина. |  |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартный раствор хлористоводородной кислоты и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ацетилкарнитин – 1 (около 5 мин); хлорид – около 0,7; примесь 2 – около 1,2; примесь 1– около 1,4.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (Rs) между пиками ацетилкарнитина и примеси 2 должно быть не менее 2,0;

- разрешение (Rs) между пиками примеси 2 и примеси 1 должно быть не менее 1,0.

На хроматограмме испытуемого раствора относительное стандартное отклонение площади пика ацетилкарнитина должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь 1 – 0,014; примесь 2 – 1,3.

Содержание примеси 2 (левокарнитина) в субстанции в процентах (Х1) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика левокарнитина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика левокарнитина на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца левокарнитина, мг;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце левокарнитина,%.

Содержание примеси 1 (кротонобетаина) в субстанции в процентах (Х2) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика кротонабетаина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика кротонабетаина на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца кротонабетаина, мг;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце кротонабетаина,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь 2 – не более 1,0 %;

- примесь 1 – не более 0,5 %;

- любая другая примесь – не более 1,8 %;

- суммарное содержание примесей – не более 3,0 %.

Не учитывают пик хлорид-аниона и пики с площадью менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,23 ЕЭ на 1 мг ацетилкарнитина гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 50 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до перехода жёлтой окраски в синюю (индикатор – 0,1 мл бромтимолового синего раствор 0,04 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 23,97 мг ацетилкарнитина гидрохлорида C9H17NO4·HCl

##### Хранение

В сухом, защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0006 Ацетилсалициловая кислота (Acidum acetylsalicylicum)

Взамен ФС.2.1.0006.15

##### Определение

2-(Ацетилокси)бензойная кислота.

Содержит не менее 99,5 % и не более 101,0 % ацетилсалициловой кислоты С9Н8O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы без запаха или со слабым запахом.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 %, растворим в хлороформе, мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см−1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ацетилсалициловой кислоты.

2. Качественная реакция. К 0,2 г субстанции прибавляют 4 мл натрия гидроксида раствора 8,5 %, кипятят в течение 3 мин, охлаждают, прибавляют 5 мл серной кислоты разведённой 9,8 %; должен образоваться белый кристаллический осадок. Осадок отфильтровывают через бумажный фильтр, промывают 50 мл воды и сушат при 100–105 °С в течение 2 ч. Определяют температуру плавления полученного продукта, которая должна быть от 156 до 161 °С.

3. Качественная реакция. Растворяют при нагревании 20 мг осадка, полученного в разделе «Подлинность. 2. Качественная реакция», в 10 мл воды, охлаждают. К 1 мл полученного раствора прибавляют 0,5 мл железа(III) хлорида раствора 10,5 %; должно появиться фиолетовое окрашивание, которое сохраняется после добавления 0,1 мл уксусной кислоты разведённой 30 %.

4. Качественная реакция. К 0,2 г субстанции прибавляют 0,5 мл серной кислоты концентрированной, перемешивают, прибавляют 0,1 мл воды; должен появиться запах уксусной кислоты. Прибавляют 0,1 мл формалина; должно появиться розовое окрашивание.

##### Испытания

Вещества, нерастворимые в растворе натрия карбоната. К 0,5 г субстанции прибавляют 10 мл тёплого натрия карбоната раствора 10 %, растворяют. Полученный раствор должен быть прозрачным.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы, содержащие ацетилсалициловую кислоту и салициловую кислоту, используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Фосфорная кислота концентрированная— ацетонитрил—вода 2:400:600

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции (точная навеска), растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг салициловой кислоты (точная навеска), растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг салициловой кислоты, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 0,2 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 237 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 7-кратное от времени удерживания пика ацетилсалициловой кислоты. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ацетилсалициловая кислота – 1 (около 5 мин); салициловая кислота – 1,3.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение ® между пиками ацетилсалициловой кислоты и салициловой кислоты должно быть не менее 6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси должна быть не более площади пика салициловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 2,5 площади пика салициловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,25 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1 или 3, температура 80–85 °С). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты»). К 1,5 г субстанции прибавляют 30 мл воды, взбалтывают в течение 2 мин и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Хлориды. Не более 0,004 % (ОФС «Хлориды»). Для определения используют 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Сульфаты».

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 1 г (точная навеска) субстанции в 10 мл спирта 96 %, прибавляют 50 мл 0,5 М раствора натрия гидроксида, закрывают притёртой пробкой, выдерживают 1 ч и титруют 0,5 М раствором хлористоводородной кислоты до исчезновения розового окрашивания (индикатор – 0,2 мл фенолфталеина раствора 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,5 М раствора натрия гидроксида соответствует 45,04 мг ацетилсалициловой кислоты С9Н8O4.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0061 Ацетилцистеин (Acetylcysteinum)

Взамен ФС.2.1.0061.18

##### Определение

(2R)-2-Ацетамидо-3-сульфанилпропановая кислота.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % ацетилцистеина C5H9NO3S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы со специфическим запахом.

Растворимость. Легко растворим в воде и спирте 96 %, практически нерастворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. ( ОФС Спектрометрия в средней инфракрасной области). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ацетилцистеина.

2. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 1,0 мл воды, прибавляют 0,1 мл натрия нитропруссида раствора 5 % и 0,1 мл раствора аммиака концентрированного 32 %; должно появиться тёмно-фиолетовое окрашивание.

##### Испытания

Температура плавления. От 104 до 110 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Удельное вращение. От +21 до +27 в пересчёте на сухое вещество (ОФС «Оптическое вращение»).

Испытуемый раствор. К 1,25 г (точная навеска) субстанции прибавляют 1 мл раствора натрия эдетата 0,01 г/мл и 7,5 мл 1 М раствора натрия гидроксида, перемешивают до растворения и доводят объём раствора фосфатным буферным раствором рН 7,0 до 25,0 мл.

рН раствора. От 2,0 до 2,8 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют сразу после приготовления.

Подвижная фаза (ПФ) Ацетонитрил—вода 3:97, доводят значение pH фосфорной кислотой до рН 3,0.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 80 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 1,0 мл хлористоводородной кислоты растворе 1 М и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 1 М до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 1 М до метки и перемешивают.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4 мг примеси А, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор B. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 3 мг примеси В, 5 мг примеси С и 2,5 мг примеси D, прибавляют 4,0 мл раствора примеси А, доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 1 М до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора испытуемым раствором до метки.

Стандартный раствор C. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2 мг 2-метил-2-тиазолин-4-карбоксилат натрия [15058-19-2], растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 1 М до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 1 М до метки.

Примечание

Примесь A (L-цистин): 3,3′-дисульфандиилбис[(2R)-2-аминопропановая кислота] [56-89-3].

Примесь B (L-цистеин): (2R)-2-амино-3-сульфанилпропановая кислота [52-90-4].

Примесь C (N, N' -диацетил-L-цистин): 3,3′-дисульфандиилбис[(2R)-2-ацетамидопропановая кислота] [5545-17-5].

Примесь D (N, S -диацетил-L-цистеин): (2R)-2-ацетамидо-3-(ацетилсульфанил)пропановая кислота [18725-37-6].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм силикагель октадецилсилильный, эндкепированная, 5 мкм; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика ацетилцистеина. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартные растворы A, B и C, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ацетилцистеин – 1 (около 5 мин); примесь А – около 0,48; примесь B – около 0,53; 2-метил-2-тиазолин-4-карбоновая кислота – около 0,8 примесь C – около 2,1; примесь D – около 2,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, C и D используют хроматограмму стандартного раствора В; хроматограмму стандартного раствора С используют для идентификации пика примеси 2-метил-2-тиазолин-4-карбоновой кислоты.

Пригодности хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы: отношение сигнал/шум (S/N) для пика ацетилцистеина должно быть не менее 10.

На хроматорамме стандартного раствора В:

- разрешение (RS) между пиками примесей A и B должно быть не менее 1,5;

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками 2-метил-2-тиазолин-4-карбоновая кислоты и ацетилцистеина должно быть не менее 5;

- фактор асимметрии пика (AS) ацетилцистеина, должен быть не более 2,2.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь B – 3,4; примесь C – 0,7; примесь D – 0,3.

Допустимое содержание примесей:

- примесь С – не более 0,3 %;

- примесь B – не более 0,2 %;

- примесь D – не более 0,15 %;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Содержание любой примеси в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где Si – площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика ацетилцистеина на хроматограмме раствора сравнения;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска стандартного образца примеси, мг;
k – поправочный коэффициент.

Не учитывают пик примеси 2-метил-2-тиазолин-4-карбоновой кислоты, который образуется в результате разложения ацетилцистеина в кислых растворах, таких как раствор хлористоводородной кислоты 1 М и пики, площадь которых менее площади пика ацетилцистеина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (не более 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 70 °С в течение 3 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции (ОФС «Сульфатная зола») с использованием эталонного раствора 1.

Цинк. Не более 0,001 %. Определение проводят методом ААС (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 г субстанции, растворяют в 0,001 М хлористоводородной кислоте и доводят объём тем же растворителем до метки.

Калибровочные растворы. Готовят разведения с использованием стандартного раствора цинка 5 мг/мл и 0,001 М хлористоводородной кислоты.

Источник излучения | Цинковая лампа с полым катодом;
Длина волны | 213,8 нм;
Атомизация | Воздушно-ацетиленовое пламя.

Определяют эффективные значения атомной абсорбции испытуемого раствора и калибровочных растворов. Учитывают величину неспецифической абсорбции. По калибровочной прямой рассчитывают концентрацию цинка в субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии c ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии c ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,14 г (точная навеска) субстанции в 50 мл воды, прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % и перемешивают. После охлаждения на ледяной бане прибавляют 10 мл калия йодида раствора 1 М и титруют 0,05 М раствором йода (индикатор – крахмала раствор 1 %).

1 мл 0,05 М раствора йода соответствует 16,32 мг C5H9NO3S.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Контроль по показателю «Бактериальные эндотоксины» проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0062 Ацикловир (Acyclovirum)

Взамен ФС.2.1.0062.18

##### Определение

2-Амино-9-(2-гидроксиэтокси)метил-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он.

Содержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % ацикловира C8H11N5O3 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

* Растворяется в разбавленных растворах минеральных кислот и щелочных гидроксидов.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ацикловира.

##### Свойства

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 20 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 6,0 г натрия дигидрофосфата моногидрата и 1,0 г натрия декансульфоната, растворяют в 900 мл воды, доводят рН раствора до 3,0 фосфорной кислотой концентрированной, прибавляют 40 мл ацетонитрила, переносят раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл, доводят водой до метки и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 10 мл смеси уксусная кислота ледяная—вода 1:4 и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора ПФ до метки и перемешивают.

Раствор гуанина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 7,0 мг гуанина (2-амино-1,7-дигидро-6Н-пурин-6-он [73-40-5]), растворяют в натрия гидроксида растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора раствором гуанина до метки и перемешивают.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 7-кратное от времени удерживания пика ацикловира. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор гуанина, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Время удерживания ацикловира – около 6,8 мин.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика ацикловира должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиком ацикловира и гуанина должно быть не менее 15,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) ацикловира должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика ацикловира должно быть не более 2,0 % (6 введений).

На хроматограмме раствора гуанина:

- фактор асимметрии пика (AS) гуанина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика гуанина должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика гуанина не должна превышать площади пика гуанина на хроматограмме раствора гуанина (не более 0,7 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика ацикловира на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика ацикловира на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади пика ацикловира на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 6,0 %. (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,17 ЕЭ на 1 мг ацикловира (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 1,0 мг/мл.

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 60 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 22,52 мг ацикловира C8H11N5O3.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0632 Баклофен (Baclofenum)

Вводится впервые

##### Определение

(3RS)-4-Амино-3-(4-хлорфенил)бутановая кислота.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % баклофена C10H12ClNO2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Мало растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в ацетоне.

* Растворяется в разбавленных растворах щелочей и минеральных кислот.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца баклофена.

- Если спектры различаются, по 0,1 г субстанции и фармакопейного стандартного образца по отдельности растворяют в 1 мл натрия гидроксида раствора 10 %, прибавляют 10 мл спирта 96 % и 1 мл уксусной кислоты разведённой 12 %. Растворы отстаивают в течение 1 ч, фильтруют, осадки промывают спиртом 96 % и сушат в вакууме. Полученные осадки используют для приготовления дисков с калия бромидом.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 70 мг, растворяют в 30 мл воды и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области от 240 до 350 нм должен иметь максимумы при 259 нм, 266 нм и 275 нм.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Опалесценция раствора 0,5 г субстанции в 25 мл натрия гидроксида раствора 1 М не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность растворов», должен выдерживать сравнение с эталоном BY5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,822 г натрия гептансульфоната, растворяют в смеси трифторуксусная кислота—метанол—вода 5:440:560 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 8 мл ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А ((4RS)-4-(4-хлорфенил)пирролидин-2-он [22518-27-0]), растворяют в 4 мл ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси А (А). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 12,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в 70 мл ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси А (Б). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл раствора стандартного образца примеси А (А) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В колбе смешивают 2,5 мл раствора стандартного образца баклофена, 0,5 мл раствора стандартного образца примеси А (А) и 2,0 мл ПФ.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 266 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 5-кратное от времени удерживания пика баклофена. |  |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси А (Б) и испытуемый раствор.

Для идентификации пиков используют хроматограмму раствора стандартного образца примеси А (Б) и хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками баклофена и примеси А должно быть не менее 2,0.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика примеси А на хроматограмме раствора стандартного образца примеси А (Б);
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца примеси А, мг;
Р – содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце примеси А,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь A – не более 1,0 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 2,0 %.

Не учитывают пики менее 0,05 %.

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции и в качестве растворителя 30 мл метанола.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 50,0 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 21,37 мг баклофена C10H12ClNO2.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0381 Беклометазона дипропионат (Beclometasoni dipropionas)

Вводится впервые

##### Определение

(11β-Гидрокси-16β-метил-3,20-диоксо-9-хлорпрегна-1,4-диен-17,21-диил)дипропионат.

Содержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % беклометазона дипропионата C28H37ClO7 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Практически нерастворим в воде, умеренно растворим в спирте 96 %, легко растворим в ацетоне.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца беклометазона дипропионата.

2. Качественная реакция. Сжигают в колбе с кислородом 25 мг субстанции, используя в качестве поглощающей жидкости смесь 1 мл натрия гидроксида раствора 1 М и 20 мл воды (ОФС «Метод сжигания в колбе с кислородом»). Полученный раствор должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +108 до +115 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в спирте 96 %, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от света и воздуха и используют сразу после приготовления.

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 2,72 г калия дигидрофосфата в воде и доводят значение рН раствора фосфорной кислотой до 2,35. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Тетрагидрофуран—ацетонитрил—метанол 100:460:500.

Растворитель. ПФА—ПФБ 450:550.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 28 мл ПФБ и доводят объём раствора ПФА до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора Б и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца беклометазона дипропионата для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примесь D, растворяют в 3 мл ПФБ и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для идентификации пиков. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца беклометазона дипропионата для идентификации пиков, содержащего примеси А, В, С, L и M, растворяют в 3 мл ПФБ и доводят объём раствора ПФА до метки. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца примесей F и N в 1,0 мл полученного раствора.

Примечание

Примесь А:
(11β,17-дигидрокси-16β-метил-3,20-диоксо-9-хлорпрегна-1,4-диен-21-ил)пропаноат [69224-79-9].

Примесь В:
[21-(ацетилокси)-11β-гидрокси-16β-метил-3,20-диоксо-9-хлорпрегна-1,4-диен-17-ил]пропаноат [5534-08-7].

Примесь С:
[11β-гидрокси-16β-метил-3,20-диоксо-17-(пропаноилокси)-9-хлорпрегна-1,4-диен-21-ил]бутаноат.

Примесь F:
(6α-бром-11β-гидрокси-16β-метил-3,20-диоксо-9-хлорпрегна-1,4-диен-17,21-диил)дипропаноат [887130-69-0].

Примесь L:
(11β-гидрокси-16β-метил-3,20-диоксо-9-хлорпрегн-4-ен-17,21-диил)дипропаноат [114371-33-4].

Примесь М:
(11β-гидрокси-16β-метил-3,20-диоксо-9-хлорпрегн-4,6-диен-17,21-диил)дипропаноат.

Примесь N:
(2-бром-11β-гидрокси-16β-метил-3,20-диоксо-9-хлорпрегна-1,4-диен-17,21-диил)дипропаноат [1204582-47-7].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 50 °C; |  |
Скорость потока | 1,4 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–4 | 40 | 60
4–12 | 40 → 45 | 60 → 55
12–59 | 45 | 55

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор для идентификации пиков, раствор сравнения и испытуемый раствор А.

Относительное время удерживания соединений. Беклометазона дипропионат – 1 (около 25 мин); примесь А – около 0,3; примесь В – около 0,6; примесь D – около 1,1; примесь М – около 1,2; примесь L – около 1,3; примесь С – около 1,8; примесь N – около 2,0; примесь F – около 2,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В, С, L, F, N и M используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для идентификации пиков и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу беклометазона дипропионата для идентификации пиков.

Для идентификации пика примеси D используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу беклометазона дипропионата для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками беклометазона дипропионата и примеси D должно быть не менее 1,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь F – 1,3; примесь M – 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора А:

- площадь пика примеси L не должна превышать шестикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6 %);

- площадь пика каждой из примесей B, F и M не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика каждой из примесей A, D и N не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси C не должна превышать 1,5-кратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать пятнадцатикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3Б). Определение проводят в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца беклометазона дипропионата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца беклометазона дипропионата, растворяют в 28 мл ПФБ и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца беклометазона дипропионата и испытуемый раствор Б.

Содержание беклометазона дипропионата C28H37ClO7 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика беклометазона дипропионата на хроматограмме испытуемого раствора Б;
S0 – площадь пика беклометазона дипропионата на хроматограмме раствора стандартного образца беклометазона дипропионата;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца беклометазона дипропионата, мг;
W – потеря в массе при высушивании,%;
P – содержание беклометазона дипропионата в фармакопейном стандартном образце беклометазона дипропионата безводного,%.

##### Хранение

В сухом защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0382 Бензидамина гидрохлорид

Бензидамин
Benzydamini hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

3-[(1-Бензил-1H-индазол-3-ил)окси]-N,N-диметилпропанамина гидрохлорид.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % бензидамина гидрохлорида C19H23N3O·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96 % и метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца бензидамина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,0 до 5,5 (раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

1. Диметиламинопропилхлорида гидрохлорид. Не более 0,0005 %. Определение проводят методом газовой хроматографии (ОФС «Газовая хроматография»). Все растворы используют свежеприготовленными.

Испытуемый раствор. Помещают 2 г (точная навеска) субстанции в коническую колбу вместимостью 10 мл, растворяют в 5 мл воды и перемешивают.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) диметиламинопропилхлорида гидрохлорида, растворяют воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Экстракция. К 5,0 мл каждого из полученных растворов прибавляют 1,5 мл натрия гидроксида раствора 30 %, экстрагируют двумя порциями по 2,5 мл гексана, встряхивая в течение 1 мин. После полного разделения слоёв органические извлечения переносят в мерную колбу вместимостью 5 мл, доводят объём раствора гексаном до метки и фильтруют через 1 г натрия сульфата безводного.

Хроматографические условия

Колонка | капиллярная 30 м × 0,32 мм, покрытая слоем поли[(цианопропил)(фенил)][диметил]силоксана, 1,8 мкм; |  |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | азот для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:5; |  |
Скорость потока | 1,1 мл/мин; |  |
Объём пробы | 2 мкл; |  |
Температура | колонка | 0–1 мин; | 40 °С;
|  | 1–11,5 мин; | 40 → 250 °С;
|  | 11,5–25,5 мин; | 250 °С;
| инжектор |  | 200 °С;
| детектор |  | 260 °С.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика диметиламинопропилхлорида должно быть не менее 5.

На хроматограмме стандартного раствора:

- фактор асимметрии пика (AS) диметиламинопропилхлорида должен быть не более 2,0;

- относительное стандартного отклонение площади пика диметиламинопропилхлорида должно быть не более 15,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику диметиламинопропилхлорида, должна составлять не менее 10 000 теоретических тарелок.

Содержание диметиламинопропилхлорида гидрохлорида в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика диметиламинопропилхлорида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика диметиламинопропилхлорида на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска диметиламинопропилхлорида гидрохлорида, мг;
P – содержание основного вещества в диметиламинопропилхлорида гидрохлориде,%.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика диметиламинопропилхлорида на хроматограмме для раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,00025 %).

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 1,36 г калия дигидрофосфата и 1,16 г натрия октансульфоната в воде, доводят значение рН до 3,0 фосфорной кислотой концентрированной, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Растворитель. Метанол—вода 1:1.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца бензидамина гидрохлорида. Помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца бензидамина гидрохлорида в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в растворителе, при необходимости обрабатывая ультразвуком, и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси В. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси В, растворяют в растворителе, при необходимости обрабатывая ультразвуком, и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси С. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси С, растворяют в растворителе, при необходимости обрабатывая ультразвуком, и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси А, 2,5 мл раствора стандартного образца примеси В и 1,0 мл раствора стандартного образца примеси С и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Смешивают равные объёмы испытуемого и стандартного раствора.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл раствора стандартного образца бензидамина гидрохлорида и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А: [3-(диметиламино)пропил][2-(бензиламино)бензоат] [87453-76-7].

Примесь В: 3-[(1,5-дибензил-1H-индазол-3-ил)окси]-N,N-диметилпропанамин [2196183-71-6] (HCl).

Примесь С: 1-бензил-1,2-дигидро-3H-индазол-3-он [2215-63-6].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии (1) (сверхчистый), 5 мкм; |  |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 0,6 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 320 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–50 | 50 → 10 | 50 → 90
50–55 | 10 → 50 | 90 → 50
55–65 | 50 | 50

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца бензидамина гидрохлорида и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Бензидамин – 1 (около 30 мин); примесь С – около 0,68; примесь А – около 1,16; примесь В – около 1,43.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика бензидамина должно быть не менее 10.

На хроматограмме для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси С и бензидамина должно быть не менее 2,5;

- разрешение (RS) между пиками бензидамина и примеси A должно быть не менее 2,5;

- разрешение (RS) между пиками примеси A и примеси B должно быть не менее 2,5.

На хроматограмме стандартного раствора:

- фактор асимметрии пика (AS) каждой из примесей А, В и С должен быть не более 2,0;

- относительное стандартного отклонение площади пика каждой из примесей А, В и С должно быть не более 10,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику каждой из примесей А, В и С, должна составлять не менее 5000 теоретических тарелок.

На хроматограмме раствора стандартного образца бензидамина гидрохлорида:

- фактор асимметрии пика (AS) бензидамина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартного отклонение площади пика бензидамина должно быть не более 10,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику бензидамина, должна составлять не менее 5000 теоретических тарелок.

Содержание каждой из примесей А, В и С в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь соответствующего пика на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь соответствующего пика на хроматограмме стандартного раствора;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца соответствующей примеси, мг;
Vi - объём раствора стандартного образца соответствующей примеси, вносимый в стандартный раствор, мл;
P - содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце соответствующей примеси,%.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика бензидамина на хроматограмме раствора стандартного образца бензидамина гидрохлорида;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца бензидамина гидрохлорида, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание бензидамина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце бензидамина гидрохлорида,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь В – не более 0,5 %;

- примесь А – не более 0,2 %;

- примесь С – не более 0,1 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,02 %).

Первичные амины. Не более 0,01 %.

Раствор диметиламинобензальдегида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г диметиламинобензальдегида, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают около 50 мг субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают около 10 мг 2-аминобензойной кислоты, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

К 10,0 мл испытуемого и стандартного раствора прибавляют по 0,1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и 2,0 мл раствора диметиламинобензальдегида; окраска испытуемого раствора не должна превышать окраску стандартного раствора.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 0,5 г (точная навеска) субстанции при температуре 102,5±2,5 °С и остаточном давлении 0,7 кПа в течение 3 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 2) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 100 мл уксусной кислоты ледяной, прибавляют 15 мл ртути(II) ацетата раствор 0,1 М и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 34,59 мг бензидамина гидрохлорида C19H23N3O·HCl.

##### Хранение

Не требует особых условий.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0063 Бензилбензоат (Benzylis benzoas)

Взамен ФС.2.1.0063.18

##### Определение

Бензилбензоат.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % бензилбензоата C14H12O2 в пересчёте на свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Бесцветная или почти бесцветная маслянистая прозрачная жидкость со слабым характерным запахом.

* При хранении ниже температуры затвердевания представляет собой бесцветные или почти бесцветные кристаллы.

Растворимость. Смешивается со спиртом 96 % и хлороформом, практически нерастворима в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в виде жидкой плёнки, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца бензилбензоата.

2. Спектрофотометрия. (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 до 300 нм должен иметь максимум при 230 нм и минимум при 215 нм.

##### Испытания

Температура затвердевания. Не ниже 17 °С (ОФС «Температура затвердевания»). Кристаллы получают охлаждением 5 г субстанции в химическом стакане при температуре от –18 до –20 °С.

Цветность раствора. Окраска раствора субстанции не должна превышать интенсивности наиболее близко подходящего по цвету эталона сравнения Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Плотность. От 1,118 до 1,122 г/см3 (ОФС «Плотность», метод 2).

Показатель преломления. От 1,568 до 1,570 (ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)»).

Кислотность. Раствор 2,0 г субстанции в 10 мл спирта 96 % должен окрашиваться в розовый цвет при прибавлении не более 0,2 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М (индикатор – 0,2 мл фенолфталеина раствора 0,1 %).

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Испытуемый раствор. Субстанция, термостатированная при 20 °C.

Раствор стандартных образцов. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,25 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца бензилового спирта и 0,025 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца бензальдегида и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Примечание

Примесь 1: бензальдегид [100-52-7].

Примесь 2 (бензиловый спирт): фенилметанол [100-51-6].

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,53 мм, полицианопропилфенилсилоксан – полидиметилсилоксан (6:94), 0,3 мкм; |  |
Газ носитель | азот; |  |
Линейная скорость | 3,0 мл/с; |  |
Деление потока | 1:50; |  |
Объём пробы | 1,0 мкл. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °С
--- | --- | ---
Колонка | 0–10 | 150
| 10–14,4 | 150 → 260
| 14,4–20,4 | 260
Инжектор |  | 200
Детектор |  | 310

Хроматографируют раствор стандартных образцов и испытуемый раствор.

Относительные времена удерживания соединений. Бензиловый спирт – 1; бензальдегид – 0,76.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (Rs) между пиками бензальдегида и бензилового спирта должно быть не менее 3;

- относительное стандартное отклонение, рассчитанное для площадей пиков бензилового спирта и бензальдегида должно быть не более 10 % (5 введений).

Содержание бензилового спирта C7H8O в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика бензилового спирта на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика бензилового спирта на хроматограмме раствора стандартного образца;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца бензилового спирта, г;
P – содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце бензилового спирта,%;
0,71 – отношение плотности спирта 96% к плотности субстанции.

Содержание бензальдегида C7H6O в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика бензальдегида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика бензальдегида на хроматограмме раствора стандартного образца;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца бензальдегида, г;
P – содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце бензальдегида спирта,%;
0,71 – отношение плотности спирта 96% к плотности субстанции.

Допустимое содержание примесей:

- бензиловый спирт не более 0,5 %;

- бензальдегид не более 0,05 %.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 2 г (точная навеска) субстанции в 50 мл калия гидроксида раствора спиртового 0,5 М, осторожно кипятят с обратным холодильником в течение 1 часа и титруют хлористоводородной кислоты раствором 0,5 М (индикатор – 0,1 мл 0,1 % раствора фенолфталеина) до обесцвечивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл калия гидроксида раствора спиртового 0,5 М соответствует 106,12 мг бензилбензоата C14H12O2.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0383 Бензилдиметил-миристоиламино-пропиламмония хлорид моногидрат

Benzyldimethyl-miristoylamino-propylammonii chloridum monohydricum

Взамен ФС 42-3498-98

##### Определение

N-Бензил-N,N-диметил-3-(тетрадеканамидо)пропан-1-аминий хлорид моногидрат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % бензилдиметил-миристоиламино-пропиламмония хлорид C26H47ClN2O в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество

##### Свойства

Описание. От белого до белого с коричневым оттенком цвета мелкокристаллический порошок без запаха или со слабым специфическим запахом.

Растворимость. Легко растворим в воде, спирте 96 % и хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца бензилдиметил-миристоиламино-пропиламмония хлорид моногидрата.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 240 до 280 нм должен иметь максимумы при 257 нм, 262 нм и 268 нм, минимумы при 259 нм, 266 нм и плечо от 250 до 254 нм.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 10 мл воды. К 1 мл полученного раствора прибавляют 1 каплю хлористоводородной кислоты концентрированной и 0,15 мл калия хромата раствора 5 %; должен образоваться аморфный осадок оранжевого цвета, нерастворимый в хлористоводородной кислоте разведённой 8,3 % и растворимый в аммиака растворе 10 %.

4. Качественная реакция. К раствору 0,5 г субстанции в 10 мл воды прибавляют 1,5 мл азотной кислоты разведённой 16 %, перемешивают и фильтруют. При выпадении в фильтрате осадка фильтруют повторно. Полученный фильтрат должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Опалесценция раствора 0,1 г субстанции в 10 мл воды не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном В6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН. От 5,2 до 6,8 (0,1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Диэтиламин—этилацетат 1:9.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца

бензилдиметил-миристоиламино-пропиламмония хлорид моногидрата. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г фармакопейного стандартного образца бензилдиметил-миристоиламино-пропиламмония хлорид моногидрата, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл раствора стандартного образца бензилдиметил-миристоиламино-пропиламмония хлорид моногидрата и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

На линию старта пластинки наносят по 20 мкл испытуемого раствора (200 мкг), раствора сравнения (1 мкг) и раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (0,5 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом Драгендорфа модифицированным и просматривают при дневном свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы на линии старта чётко видна зона адсорбции основного вещества оранжевого цвета.

Зона адсорбции любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции на линии старта на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Вода. От 4,0 % до 5,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,4 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 10 мл уксусной кислоты ледяной, прибавляют 5 мл ртути(II) ацетата раствора 5 %, перемешивают и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до появления голубого окрашивания (индикатор – одна капля кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 43,91 мг бензилдиметил-миристоиламино-пропиламмония хлорида C26H47ClN2O.

##### Хранение

Не требует особых условий.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0007 Бензилникотинат (Benzylis nicotinas)

Взамен ФС.2.1.0007.15

##### Определение

Бензил(пиридин-3-карбоксилат).

Содержит не менее 97,0 % и не более 100,5 % бензилникотината C13H11NO2.

Бензилникотинат является высокотоксичным веществом. Необходимо принять меры для исключения возможности его вдыхания или контакта с кожей и слизистыми оболочками.

##### Свойства

Описание. Маслянистая жидкость от желтоватого до желтовато-коричневого или слабо красноватого цвета с характерным запахом.

* Может кристаллизоваться при температуре ниже 24 °C.

Растворимость. Практически нерастворим в воде, смешивается со спиртом 96 % и хлороформом.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в виде жидкой плёнки между двумя пластинками калия бромида в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца бензилникотината.

2. Качественная реакция. К 0,05 мл субстанции прибавляют 0,5 г натрия карбоната безводного и нагревают на пламени горелки; должен появиться характерный запах бензальдегида.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,6 г субстанции в 5 мл спирта 96 %, прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 10 % и кипятят в течение 3 мин. Охлаждённый раствор нейтрализуют уксусной кислоты раствором 1 М по фенолфталеину, затем прибавляют 0,5 мл меди(II) сульфата раствора 10 %; должен образоваться синий осадок.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор субстанции 10 % в спирте 96 % должен быть прозрачным (в сравнении со спиртом 96 %) или выдерживать сравнение с эталоном 1 (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном GY5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Показатель преломления. От 1,569 до 1,571 (ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)»).

Никотиновая кислота. Не более 1,7 %. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,6 г субстанции (точная навеска) в 5 мл, предварительно нейтрализованного по фенолфталеину, спирта 96 % и титруют натрия гидроксида раствором 0,01 М с тем же индикатором до розового окрашивания.

1 мл натрия гидроксида раствора 0,01 М соответствует 1,231 мг бензилникотината C6H5NO2.

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. Субстанция (используется без разведения).

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют 25 мг фармакопейного стандартного образца метилникотината в 2,5 мл испытуемого раствора.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 25 м × 0,32 мм, полидиметилсилоксан, 1,5 мкм; |  |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | азот для хроматографии; |  |
Скорость потока | Газ-носитель | 4 мл/мин; |
Температура | Колонка | Время, мин | Температура, °C
|  | 0 0–5 5–10 | 180; 180 → 240; 240;
| Испаритель |  | 230 °C;
| Детектор |  | 250 °C;
Объём пробы | 0,8 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика бензилникотината. |  |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Время удерживания бензилникотината около 6 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками метилникотината и бензилникотината должно быть не менее 5,0.

Допустимое содержание примесей. Содержание в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- любая примесь – не более 0,5 %;

- сумма примесей – не более 1,0%.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,05 % площади основного пика.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3А или 3Б) с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 20 мл уксусной кислоты ледяной и титруют хлорной кислоты раствором 0,1 М до появления зелёного окрашивания (индикатор – 0,4 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %) или конечную точку титрования определяют потенциометрически.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл хлорной кислоты раствора 0,1 М соответствует 21,32 мг бензилникотината C13H11NO2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0376 Бензиловый спирт (Alcoholum benzylicum)

Вводится впервые

##### Определение

Фенилметанол.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 100,5 % бензилового спирта C7H8O.

##### Свойства

Описание. Прозрачная, бесцветная, маслянистая жидкость.

Растворимость. Растворим в воде, смешивается со спиртом 96 %, жирными и эфирными маслами.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца бензилового спирта.

##### Испытания

Относительная плотность. От 1,043 до 1,049 (ОФС «Плотность», метод 1).

Показатель преломления. От 1,538 до 1,541 (ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)»).

Прозрачность раствора. Растворяют 2,0 мл субстанции в 60 мл воды при взбалтывании. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность. К 10 мл субстанции прибавляют 10 мл спирта 96 % и 1 мл 0,1 % раствора фенолфталеина. Окраска раствора должна изменяться на розовую от прибавления не более 1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида.

Перекисное число. Не более 5,0 (ОФС «Пероксидное число», метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. Испытуемая субстанция.

Стандартный раствор этилбензола. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г этилбензола, растворяют в испытуемом растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём испытуемым раствором до метки.

Стандартный раствор дициклогексила. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 г дициклогексила, растворяют в испытуемом растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём испытуемым раствором до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,75 г примеси А и 0,5 г примеси В и доводят объём испытуемым раствором до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 2,0 мл стандартного раствора этилбензола и 3,0 мл стандартного раствора дициклогексила, после чего доводят объём раствора испытуемым раствором до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,25 г примеси А и 0,5 г примеси В, растворяют в испытуемом растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 2,0 мл стандартного раствора этилбензола и 2,0 мл стандартного раствора дициклогексила, после чего доводят объём раствора испытуемым раствором до метки.

Примечание

Примесь А: бензальдегид [100-52-7].

Примесь В: циклогексилметанол [100-49-2].

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,32 мм, покрытая слоем макрогола 20 000 (толщина слоя 0,5 мкм); |  |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Линейная скорость | 25 см/с; |  |
Объём пробы | 0,1 мкл; |  |
Температура | Колонка | 0–34 мин | 50–220 °С;
|  | 34–69 мин | 220 °С;
| Инжектор |  | 200 °С;
| Детектор |  | 310 °С.

Для бензилового спирта, не предназначенного для парентерального применения:

Хроматографируют раствор сравнения А и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения А разрешение между пиками примесей А и В должно быть не менее 3,0.

Относительное время удерживания соединений. Бензиловый спирт – 1 (около 26 мин); этилбензол – около 0,28; дициклогексил – около 0,59; примесь А – около 0,68; примесь В – около 0,71.

Если какие-либо пики на хроматограмме испытуемого раствора имеют время удерживания равные временам удерживания этилбензола и дициклогексила, площади этих пиков вычитаются из площадей соответствующих пиков на хроматограммах растворов сравнения А или Б (скорректированные площади пиков этилбензола и дициклогексила). Любой из таких пиков на хроматограмме испытуемого раствора должен быть включён в оценку суммы других пиков.

Допустимое содержание примесей:

- примесь А – не более разности между площадью пика примеси А на хроматограмме раствора сравнения А и площадью пика примеси А на хроматограмме испытуемого раствора (не более 0,15 %);

- примесь В – не более разности между площадью пика примеси В на хроматограмме раствора сравнения А и площадью пика примеси В на хроматограмме испытуемого раствора (не более 0,10 %);

- сумма других пиков с относительным временем удерживания менее, чем у бензилового спирта – не более 4-кратной площади пика этилбензола на хроматограмме раствора сравнения А, скорректированной при необходимости, как указано выше (не более 0,04 %);

- сумма других пиков с относительным временем удерживания более, чем у бензилового спирта: не более площади пика дициклогексила на хроматограмме раствора сравнения А, скорректированной при необходимости, как указано выше (не более 0,3 %).

Не учитывают пики с площадью менее 0,01 площади пика этилбензола на хроматограмме раствора сравнения А, скорректированной при необходимости, как указано выше (не более 0,0001 %).

Для бензилового спирта, предназначенного для парентерального применения:

Хроматографируют раствор сравнения Б и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения Б разрешение между пиками примесей А и В должно быть не менее 3,0.

Относительное время удерживания соединений. Бензиловый спирт – 1 (около 26 мин); этилбензол – около 0,28; дициклогексил – около 0,59; примесь А – около 0,68; примесь В – около 0,71.

Если какие-либо пики на хроматограмме испытуемого раствора имеют время удерживания равные времени удерживания этилбензола и дициклогексила, площади этих пиков вычитаются из площадей соответствующих пиков на хроматограммах растворов сравнения А или Б (скорректированные площади пиков этилбензола и дициклогексила). Любой из таких пиков на хроматограмме испытуемого раствора должен быть включён в оценку суммы других пиков.

Допустимое содержание примесей:

- примесь А – не более разности между площадью пика примеси А на хроматограмме раствора сравнения Б и площадью пика примеси А на хроматограмме испытуемого раствора (не более 0,05 %);

- примесь В – не более разности между площадью пика примеси В на хроматограмме раствора сравнения Б и площадью пика примеси В на хроматограмме испытуемого раствора (не более 0,10 %);

- сумма других пиков с относительным временем удерживания менее, чем у бензилового спирта: не более 2-кратной площади пика этилбензола на хроматограмме раствора сравнения Б, скорректированной при необходимости, как указано выше (не более 0,02 %);

- сумма других пиков с относительным временем удерживания более, чем у бензилового спирта – не более площади пика дициклогексила на хроматограмме раствора сравнения Б, скорректированной при необходимости, как указано выше (не более 0,2 %).

Не учитывают пики с площадью менее 0,01 площади пика этилбензола на хроматограмме раствора сравнения Б, скорректированной при необходимости, как указано выше (не более 0,0001 %).

Нелетучий остаток. Не более 0,05 %. После подтверждения соответствия требованию по показателю «Пероксидное число» около 10,0 г (точная навеска) субстанции выпаривают досуха в предварительно взвешенном кварцевом, фарфоровом или платиновом тигле при температуре не выше 200 °С, избегая кипения. Остаток высушивают на электроплите в течение 1 часа и охлаждают в эксикаторе. Масса остатка не должна превышать 5 мг.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

К 0,9 г (точная навеска) субстанции прибавляют свежеприготовленную смесь 14,0 мл безводного пиридина и 2,0 мл уксусного ангидрида. Нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 30 мин. Охлаждают, прибавляют 25 мл воды и титруют 1 М раствором натрия гидроксида (индикатор – 2 капли 1 % раствора фенолфталеина) до изменения цвета раствора от бесцветного до розового.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Содержание бензилового спирта C7H8O в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где V1 - объём 1 М раствора натрия гидроксида, пошедшего на титрование бензилового спирта, мл;
V2 - объём 1 М раствора натрия гидроксида, пошедшего на титрование контрольной пробы, мл;
m - навеска бензилового спирта, г.

##### Хранение

В герметичном контейнере в атмосфере азота, в защищённом от света месте при температуре от 2 °С до 8 °С.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0633 Бензобарбитал (Benzobarbitalum)

Взамен ГФ X, ст. 92, ФС 42-2417-93

##### Определение

(5RS)-1-Бензоил-5-фенил-5-этилпиримидин-2,4,6(1H,3H,5H)-трион.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % бензобарбитала C19H16N2O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в хлороформе, умеренно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идетификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца бензобарбитала.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в 20 мл спирта 95 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, прибавляют 0,2 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и доводят объём раствора водой до метки.

- Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл спирта 95 %, прибавляют 0,2 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и доводят объём раствора водой до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 350 нм (в кювете толщиной 1 см) должен иметь максимум при 257 нм и минимум при 230 нм.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,05 г субстанции при нагревании на водяной бане в 2 мл спирта 95 %, прибавляют 50 мкл кальция хлорида раствора 20 %, 0,1 мл кобальта нитрата раствора 5 % и 0,1 мл натрия гидроксида раствора 10 %; должно появиться сине-фиолетовое окрашивание.

##### Испытания

Температура плавления. От 134 до 137 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М должен быть прозрачным или не должен превышать эталон сравнения I (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 3,43 г натрия ацетата в 950 мл воды, доводят значение рН раствора уксусной кислотой ледяной до 6,0. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—метанол 1:1.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 20,0 мг фармакопейного стандартного образца фенобарбитала (5-фенил-5-этилпиримидин-2,4,6(1H,3H,5H)-трион [50-06-6]), растворяют в 10 мл ацетонитрила, прибавляют 5,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 3 мкм; |  |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 249 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–9 | 40 | 60
9–22 | 40 → 15 | 60 → 85
22–27 | 15 → 40 | 85 → 60
27–28 | 40 | 60

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Бензобарбитал – 1 (около 5 мин); фенобарбитал – около 0,5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме cтандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками бензобарбитала и фенобарбитала должно быть не менее 5,0;

- фактор асимметрии пика (AS) бензобарбитала и фенобарбитала должен быть не более 2,0 для каждого;

- относительное стандартное отклонение площади каждого из пиков бензобарбитала и фенобарбитала должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Содержание фенобарбитала в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика фенобарбитала на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика фенобарбитала на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца фенобарбитала, мг;
P – содержание фенобарбитала в фармакопейном стандартном образце фенобарбитала,%.

Содержание каждой неидентифицированной примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика бензобарбитала на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг.

Допустимое содержание примесей:

- фенобарбитала − не более 0,4 %;

- любая другая примесь – не более 0,2 %;

- сумма примесей – не более 0,8 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика бензобарбитала на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,025 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения используют 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Хлориды».

Хлориды. Не более 0,005 % (ОФС «Хлориды»). Для определения 1 г субстанции встряхивают с 25 мл горячей воды в течение 3 мин и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 10 мл спирта 95 % и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до синего окрашивания (индикатор – 0,1 мл тимолового синего раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 33,63 мг бензобарбитала C19H16N2O4.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0066 Бензойная кислота (Acidum benzoicum)

Взамен ФС.2.1.0066.18

##### Определение

Бензойная кислота.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % бензойной кислоты C7H6O2 в пересчёте на безводное вещество и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Бесцветные игольчатые кристаллы или от белого до почти белого цвета мелкокристаллический порошок.

* При нагревании возгоняется; перегоняется с водяным паром.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 % и хлороформе, растворим в кипящей воде, мало растворим в воде.

##### Идентификация

Качественная реакция. Растворяют 20 мг субстанции в 1,5 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М; полученный раствор должен давать характерную реакцию на бензоаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 121 до 124 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Вода. Не более 0,7 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции и, в качестве растворителя, смесь 10 мл метанола и 20 мл пиридина.

Восстанавливающие вещества. 100 мл воды доводят до кипения, прибавляют 1,5 мл серной кислоты разведённой 16 % и по каплям 0,02 М раствор калия перманганата до розового окрашивания, сохраняющегося в течение 30 с. В полученном горячем растворе растворяют 1 г бензойной кислоты и титруют 0,02 М раствором калия перманганата до розового окрашивания, устойчивого в течение 15 с.

На титрование должно расходоваться не более 0,5 мл 0,02 М раствора калия перманганата.

Легко обугливающиеся вещества. Растворяют 0,5 г субстанции в 5 мл серной кислоты концентрированной и оставляют на 15 мин. Окраска раствора не должна быть интенсивнее эталона Y5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Сульфаты. Не более 0,01 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Встряхивают 1,5 г субстанции с 15,0 мл воды в течение 1 мин и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Хлориды. Не более 0,005 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют при кипячении 1 г субстанции в 20 мл воды, охлаждают и фильтруют в мерную колбу вместимостью 25 мл. Объём раствора доводят водой до метки. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Фталевая кислота. 0,5 г субстанции должны полностью растворяться в 10 мл бензола при перемешивании в течение 5–10 мин.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 20 мл спирта 95 % и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до изменения окраски раствора от жёлтой до фиолетово-красной (индикатор – 0,1 мл фенолового красного раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 12,21 мг бензойной кислоты С7Н6О2.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0634 Бензокаин (Benzocainum)

Взамен ФС 42-3024-00

##### Определение

Этил(4-аминобензоат).

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % бензокаина C9H11NO2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 % и хлороформе, очень мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца бензокаина.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах этанола, выпаривают досуха и незамедлительно записывают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в 30 мл спирта 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора натрия гидроксида раствором 0,1 М до метки.

- Раствор сравнения. Натрия гидроксида раствор 0,1 М.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь максимум при 281 нм и минимум при 238 нм.

3. Качественная реакция. Раствор 50 мг субстанции в 2 мл спирта 96 % должен давать характерную реакцию на первичные ароматические амины (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 89 до 92 °C (ОФС «Температура плавления»). Субстанцию предварительно сушат при температуре от 60 до 65 °С в течение 2 ч.

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 10 мл спирта должен быть прозрачным или его опалесценция (мутность) не превышает опалесценцию (мутность) эталона сравнения I (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 5 мл спирта должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном В7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность. Раствор 1 г субстанции в 10 мл нейтрализованного по фенолфталеину спирта 96 % должен окрашиваться в розовый цвет при прибавлении не более 0,1 мл 0,05 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор аммония ацетата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 7,7 г аммония ацетата, растворяют в воде и доводят объём раствора ПФ до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—раствор аммония ацетата 350:650.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки, фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Раствор стандартного образца бензокаина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца бензокаина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг 4-аминобензойной кислоты, растворяют в ПФ и доводят объём ПФ до метки (раствор А). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в ПФ, прибавляют 1,0 мл раствора А и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца бензокаина и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 285 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика бензокаина. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца бензокаина и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Бензокаин – 1 (около 6 мин); 4-аминобензойная кислота – около 0,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пика 4-аминобензойной кислоты используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками 4-аминобензойной кислоты и бензокаина должно быть не менее 4.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика бензокаина на хроматограмме раствора стандартного образца бензокаина;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца бензокаина, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание бензокаина в фармакопейном стандартном образце бензокаина,%.

Допустимое содержание примесей:

- любая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения 1 г (точная навеска) субстанции сушат до постоянной массы при температуре от 60 до 65 °С.

Хлориды. Не более 0,002 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 1 г субстанции в 10 мл спирта 96 %.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в смеси 10 мл воды и 10 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и далее поступают, как указано в ОФС «Нитритометрия». В случае применения внутренних индикаторов используют нейтральный красный или тропеолин ОО в смеси с метиленовым синим.

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 16,52 мг бензокаина C9H11NO2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0635 Бета-аланин (Beta-alaninum)

Вводится впервые

##### Определение

3-Аминопропановая кислота.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,5 % бета-аланина C3H7NO2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца β-аланина.

2. Тонкослойная хроматография. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора Б по положению, интенсивности окраски и величине должна соответствовать основной зоне адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца β-аланина (раздел «Родственные примеси»).

##### Испытания

рН. От 5,7 до 7,5 (4 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—бутанол—вода—спирт 96 % 0,1:10:15:15.

Реактив для детектирования. Нингидрина раствор 0,2 %.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,5 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 15 мл воды и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца β-аланина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца β-аланина, растворяют в 5 мл воды и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мл испытуемого раствора Б и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют 5 мг α-аланина в 10 мл испытуемого раствора Б.

На линию старта пластинки наносят по 1 мкл испытуемого раствора А (50 мкг), испытуемого раствора Б (0,5 мкг), раствора стандартного образца β-аланина (0,5 мкг), раствора сравнения А (0,25 мкг), раствора сравнения Б (0,125 мкг) и раствора для проверки пригодности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат при комнатной температуре в течение 10 мин, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 1 ч ПФ, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, затем нагревают при температуре 105 ºС в течение 10 мин. Далее пластинку опрыскивают реактивом для детектирования, выдерживают при температуре 105 ºС в течение 2 мин и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения Б должна обнаруживаться зона адсорбции β-аланина.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы должны обнаруживаться две зоны адсорбции: зона адсорбции β-аланина и зона адсорбции λ-аланина.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора А допускается наличие только одной дополнительной зоны адсорбции, не превышающей по совокупности величины и интенсивности окраски зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,3 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 2 г (точная навеска) субстанции, высушенной в течение 5 ч при температуре от 100 до 105 °С.

Аммоний. Не более 0,02 % (ОФС «Аммоний»). Для определения используют раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды.

Железо. Не более 0,003 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Железо» (раздел «Определение солей железа в зольном остатке органических соединений», метод 1) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции.

Сульфаты. Не более 0,02 %. (ОФС «Сульфаты», метод 1). В 10 мл воды растворяют 0,5 г субстанции.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,1 г субстанции в 10 мл воды.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 30 мл воды, прибавляют 5,0 мл формальдегида раствора 35 % и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 8,909 мг бета-аланина C3H7NO2.

##### Хранение

При температуре не выше 25 °С.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0067 Бетагистина дигидрохлорид

Бетагистин
Betahistini dihydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0067.18

##### Определение

N-Метил-2-(пиридин-2-ил)этанамина дигидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % бетагистина дигидрохлорида C8H12N2·2HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. От белого до светло-жёлтого цвета кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, растворим в спирте
96 %, практически нерастворим в 2-пропаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца бетагистина дигидрохлорида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика бетагистина дигидрохлорида на хроматограмме стандартного раствора (раздел «Родственные примеси»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 150 до 154 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном В8 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH. От 2,0 до 3,0 (10 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 2,0 г натрий додецилсульфата в смеси 15 мл серной кислоты раствор 10 % (о/о), 35 мл тетрабутиламмония сульфата раствора 1,7 % и 650 мл воды, и доводят рН раствора натрия гидроксида раствором 10 % до 3,3, затем смешивают с 300 мл ацетонитрила.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 г (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца бетагистина дигидрохлорида, 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси В, 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси С, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 4,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения Б и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь A: 2-этенилпиридин [100-69-6].

Примесь В: 2-(пиридин-2-ил)этанол [103-74-2].

Примесь С: N-метил-2-(пиридин-2-ил)-N-[2-(пиридин-2-ил)этил]этанамин [5452-87-9].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,0 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 260 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 4-кратное от времени удерживания основного пика. |  |

Хроматографируют раствор сравнения Б, раствор сравнения А стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Бетагистин дигидрохлорид – 1 (около 7 мин); примесь В – около 0,2; примесь А – около 0,3; примесь С – около 3,0.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками примеси А и бетагистина дигидрохлорида должно быть не менее 3,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси В на хроматограмме испытуемого раствора умножают на поправочный коэффициент 0,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площади пика каждой из примесей А, В (с учётом поправочного коэффициента 0,4), С не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей с учётом поправочного коэффициента не должна превышать 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 80 мг (точная навеска) субстанции в 50 мл спирта 95 % и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования (до второй точки перегиба) определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 10,46 мг бетагистина дигидрохлорида C8H12N2·2HCl.

##### Хранение

В герметично закрытой упаковке.

* Приводится для информации

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0068 Бетаметазон (Betamethasonum)

Взамен ФС.2.1.0068.18

##### Определение

11β,17α,21-Тригидрокси-16β-метил-9α-фторпрегна-1,4-диен-3,20-дион.

Содержит не менее 97,0 % и не более 103,0 % бетаметазона C22H29FO5 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Умеренно растворим в этаноле и метаноле, очень мало растворим в метиленхлориде, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца бетаметазона.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метиленхлорида, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

- Подвижная фаза (ПФ). Метанол—метиленхлорид 10:90.

- Испытуемый раствор. Растворяют 10 мг субстанции в 10,0 мл ПФ.

- Раствор стандартного образца бетаметазона. Растворяют 10 мг фармакопейного стандартного образца бетаметазона в 10,0 мл ПФ.

- Реактив для детектирования. В химическом стакане вместимостью 100 мл растворяют 0,25 г 2,4-дигидроксибензальдегида в уксусной кислоте ледяной, доводят объём раствора тем же растворителем до 50,0 мл и прибавляют смесь 12,5 мл серной кислоты концентрированной и 37,5 мл уксусной кислоты ледяной.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца бетаметазона (по 5 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования и выдерживают при 90 °C в течение 35 мин или до тех пор, пока не проявятся пятна. Охлаждают пластинку до комнатной температуры и просматривают в видимом свете и в УФ-свете при длине волны 365 нм.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции бетаметазона на хроматограмме раствора стандартного образца бетаметазона.

3. Качественная реакция. К 2 мг субстанции прибавляют 2 мл серной кислоты концентрированной и перемешивают. В течение 5 мин должно появиться интенсивное красно-коричневое окрашивание. Раствор осторожно выливают при перемешивании в 10 мл воды. Окрашивание должно исчезнуть и должен остаться прозрачный раствор.

##### Испытания

Удельное вращение. От +118 до +126 в пересчёте на сухое вещество (0,5 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). К 250 мл ацетонитрила прибавляют 700 мл воды, выдерживают до уравновешивания объёма, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Ацетонитрил—метанол 1:1.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца бетаметазона и 2 мг фармакопейного стандартного образца метилпреднизолона и доводят объём раствора ПФА до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 45 °С; |  |
Скорость потока | 2,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФ А,% | ПФ Б,%
--- | --- | ---
0–15 | 100 | 0
15–40 | 100 → 0 | 0 → 100
40–41 | 0 → 100 | 100 → 0
41–46 | 100 | 0

Уравновешивают колонку ПФБ в течение не менее 30 мин и затем ПФА в течение 5 мин.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Бетаметазон – 1,0 (около 12,5 мин); метилпреднизолон – около 0,92.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение ® между пиками метилпреднизолона и бетаметазона должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика бетаметазона на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %), и площадь только одного такого пика может превышать 0,5 площади пика бетаметазона на хроматограмме раствора сравнения (более 0,5 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика бетаметазона на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,05 площади пика бетаметазона на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции и платиновый тигель.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Испытание проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 238,5 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения спирт 96 %.

Содержание бетаметазона C22H29FO5 в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где А - оптическая плотность испытуемого раствора;
a - навеска субстанции, г;
395 - удельный показатель поглощения бетаметазона ();
W - потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0069 Бетаметазона дипропионат

Бетаметазон
Betamethasoni dipropionas

Взамен ФС.2.1.0069.18

##### Определение

(11β-Гидрокси-16β-метил-3,20-диоксо-9-фторпрегна-1,4-диен-17,21-диил)дипропионат.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % бетаметазона дипропионата C28H37FO7 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в ацетоне и метиленхлориде, умеренно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца бетаметазона дипропионата.

2. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

- Подвижная фаза (ПФ). Метанол—метиленхлорид 10:90.

- Испытуемый раствор. Растворяют 10 мг субстанции в 10,0 мл ПФ.

- Раствор стандартного образца бетаметазона дипропионата. Растворяют 10 мг фармакопейного стандартного образца бетаметазона пропионата в 10,0 мл ПФ.

- Реактив для детектирования. В химическом стакане вместимостью 100 мл растворяют 0,25 г 2,4-дигидроксибензальдегида в уксусной кислоте ледяной, доводят объём раствора тем же растворителем до 50,0 мл и прибавляют смесь 12,5 мл серной кислоты концентрированной и 37,5 мл уксусной кислоты ледяной.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца бетаметазона дипропионата (по 5 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования и выдерживают при 90 °C в течение 35 мин или до тех пор, пока не проявятся пятна. Охлаждают пластинку до комнатной температуры и просматривают в видимом свете и в УФ-свете при длине волны 365 нм.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции бетаметазона дипропионата на хроматограмме раствора стандартного образца бетаметазона дипропионата.

3. Качественная реакция. К 2 мг субстанции прибавляют 2 мл серной кислоты концентрированной и перемешивают. В течение 5 мин должно появиться интенсивное красно-коричневое окрашивание. Раствор осторожно выливают при перемешивании в 10 мл воды. Окрашивание должно исчезнуть и должен остаться прозрачный раствор.

##### Испытания

Удельное вращение. От +84 до +88 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в этаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Вода—ацетонитрил 350:560.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 60 мг (точная навеска) субстанции и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют 5 мг фармакопейного стандартного образца бетаметазона дипропионата для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси В, С, D, Е, G и I, в 2 мл ПФ.

Раствор для идентификации пика примеси H. Растворяют 5 мг фармакопейного стандартного образца бетаметазона дипропионата для идентификации пика примеси Н в 2 мл ПФ.

Примечание

Примесь В:
(11β,21-дигидрокси-16β-метил-3,20-диоксо-9-фторпрегна-1,4-диен-17-ил)пропаноат(бетаметазона-17-пропионат)
[5534-13-4].

Примесь С:
(11β,17-дигидрокси-16β-метил-3,20-диоксо-9-фторпрегна-1,4-диен-21-ил)пропаноат(бетаметазона-21-пропионат)
[75883-07-7].

Примесь D:
(21-(ацетилокси)-11β-гидрокси-16β-метил-3,20-диоксо-9-фторпрегна-1,4-диен-17-ил]пропаноат(бетаметазона-21-ацетат-17-пропионат) [5514-81-8].

Примесь E:
(11β-гидрокси-16β-метил-3,20-диоксо-9-хлорпрегна-1,4-диен-17,21-диил)дипропаноат(беклометазона дипропионат)
[5534-09-8].

Примесь G:
(16β-метил-3,20-диоксо-9-фторпрегна-1,4-диен-11β,17,21-триил)трипропаноат(бетаметазона трипропионат)
[1186048-33-8].

Примесь I:
(11β-гидрокси-16β-метил-3,20-диоксо-9-фторпрегна-4-ен-17,21-диил)дипропаноат(1,2-дигидробетаметазона дипропионат)
[80163-83-3].

Примесь H:
(6α-бром-11β-гидрокси-16β-метил-3,20-диоксо-9-фторпрегна-1,4-диен-17,21-диил)дипропаноат(6α-бромбетаметазона дипропионат)
[1186048-34-9].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 2,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 2,5 мкм; |  |
Температура колонки | 20 °C; |  |
Скорость потока | 0,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика бетаметазона дипропионата. |  |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор для идентификации пика примеси H, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Бетаметазона дипропионат – 1 (около 10 мин); примесь В – около 0,4; примесь С – около 0,5; примесь D – около 0,7; примесь I – около 1,16; примесь E – около 1,22; примесь H – около 1,7; примесь G – около 2,1.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы, хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу бетаметазона дипропионата для проверки пригодности хроматографической системы, хроматограмму раствора для идентификации пика примеси H и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу бетаметазона дипропионата для идентификации пика примеси H.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси I и бетаметазона дипропионата должно быть не менее 2,0;

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси I и примеси E должно быть не менее 4,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь G – 1,3; примесь H – 1,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси С не должна более чем в 5 раз превышать площадь пика бетаметазона дипропионата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика каждой из примесей B и Н не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика бетаметазона дипропионата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика каждой из примесей D, E, G не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика бетаметазона дипропионата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси I не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика бетаметазона дипропионата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика бетаметазона дипропионата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь пика бетаметазона дипропионата на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика бетаметазона дипропионата на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции и платиновый тигель.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 25 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Испытание проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца бетаметазона дипропионата. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 60 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца бетаметазона дипропионата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца бетаметазона дипропионата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца бетаметазона дипропионата относительное стандартное отклонение площади пика бетаметазона дипропионата должно быть не более 1,0 % (6 введений).

Содержание бетаметазона дипропионата C28H37FO7 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика бетаметазона дипропионата на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика бетаметазона дипропионата на хроматограмме раствора стандартного образца бетаметазона дипропионата;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца бетаметазона дипропионата, мг;
P - содержание бетаметазона дипропионата в фармакопейном стандартном образце бетаметазона дипропионата,%;
W - потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0070 Бетаметазона натрия фосфат

Бетаметазон
Betamethasoni natrii phosphas

Взамен ФС.2.1.0070.18

##### Определение

(11β,17α-Дигидрокси-16β-метил-3,20-диоксо-9α-фторпрегна-1,4-диен-21-ил)фосфат динатрия.

Cодержит не менее 96,0 % и не более 103,0 % бетаметазона натрия фосфата C22H28FNa2O8P в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца бетаметазона натрия фосфата.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец бетаметазона натрия фосфата по отдельности растворяют в минимальных объёмах спирта 96 %, выпаривают на водяной бане досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика бетаметазона натрия фосфата на хроматограмме раствора стандартного образца бетаметазона натрия фосфата (раздел «Количественное определение»/ «Родственные примеси»).

3. Качественная реакция. К 2 мг субстанции прибавляют 2 мл серной кислоты концентрированной и перемешивают. В течение 5 мин должно появиться интенсивное красно-коричневое окрашивание. Раствор осторожно выливают при перемешивании в 10 мл воды. Окрашивание должно исчезнуть и должен остаться прозрачный раствор.

4. Качественные реакции. К 40 мг субстанции прибавляют 2 мл серной кислоты концентрированной и осторожно нагревают до появления белого дыма; по каплям прибавляют азотную кислоту и продолжают нагревание пока раствор не станет почти прозрачным, и охлаждают. Прибавляют 2 мл воды, нагревают до повторного появления белого дыма и охлаждают. Прибавляют 10 мл воды и нейтрализуют раствор по красной лакмусовой бумаге разбавленным раствором аммиака. Полученный раствор должен давать характерные реакции на натрий и фосфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +98 до +104 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном В7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 7,5 до 9,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Смешивают 1,36 г калия дигидрофосфата и 0,60 г гексиламина, выдерживают в течение 10 мин, растворяют в 185 мл воды и смешивают с 65 мл ацетонитрила.

Испытуемый раствор. Растворяют 60 мг субстанции в 25 мл ПФ.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 2 мг фармакопейного стандартного образца бетаметазона натрия фосфата и 2 мг фармакопейного стандартного образца дексаметазона натрия фосфата в 25 мл ПФ.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика бетаметазона фосфата. |  |

Уравновешивают колонку ПФ в течение не менее 45 мин.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Бетаметазона фосфат – 1 (около 14 мин); дексаметазона фосфат – около 1,1.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками бетаметазона фосфата и дексаметазона фосфата должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика бетаметазона фосфата на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0 %), при этом площадь пика только одной примеси может превышать площадь пика бетаметазона фосфата на хроматограмме раствора сравнения (более 1,0 %);

- сумма площадей всех пиков примесей не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика бетаметазона фосфата на хроматограмме раствора сравнения (не более 3,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,05 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 8,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Фосфаты. Не более 1 %. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в воде и доводят водой до метки. К 10 мл полученного раствора прибавляют 5 мл молибденованадиевого реактива, перемешивают и выдерживают в течение 5 мин. Появляющееся жёлтое окрашивание не должно превышать окрашивание эталонного раствора, приготовленного таким же образом с использованием 10 мл фосфата стандартного раствора 5 мкг/мл.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 17,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Испытание проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси».

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 60 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 4,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца бетаметазона натрия фосфата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 60 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца бетаметазона натрия фосфата растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 4,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца бетаметазона натрия фосфата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца бетаметазона натрия фосфата относительное стандартное отклонение площади пика бетаметазона фосфата должно быть не более 1,0 % (6 введений).

Содержание бетаметазона натрия фосфата C22H28FNa2O8P в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика бетаметазона натрия фосфата на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика бетаметазона натрия фосфата на хроматограмме раствора + стандартного образца бетаметазона натрия фосфата;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца бетаметазона натрия фосфата, мг;
P - содержание бетаметазона натрия фосфата в фармакопейном стандартном образце бетаметазона натрия фосфата,%;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке. В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0636 Бикалутамид (Bicalutamidum)* | |**

Вводится впервые

##### Определение

(2RS)-2-Гидрокси-2-метил-N-[3-(трифторметил)-4-цианофенил]-3-[(4-фторфенил)сульфонил]пропанамид.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % бикалутамида в пересчёте на безводное и свободное от органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Обладает полиморфизмом.

Растворимость. Легко растворим или растворим в ацетоне, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца бикалутамида.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах ацетона, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика бикалутамида на хроматограмме раствора стандартного образца бикалутамида (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,1 мл трифторуксусной кислоты и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,1 мл трифторуксусной кислоты и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Растворитель. ПФА—ПФБ 1:2.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца бикалутамида (А). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца бикалутамида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца бикалутамида (Б). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл раствора стандартного образца бикалутамида (А) и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца примеси Е, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и 0,25 мл раствора стандартного образца бикалутамида (А) и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца бикалутамида (Б) и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А:
(2RS)-2-гидрокси-2-метил-N-[3-(трифторметил)-4-цианофенил]-3-(фенилсульфонил)пропанамид [90357-05-4].

Примесь В:
(2RS)-2-гидрокси-2-метил-N-[3-(трифторметил)-4-цианофенил]-3-[(2-фторфенил)сульфонил]пропанамид [1159977-36-2].

Примесь С:
(2RS)-2-метил-N-[3-(трифторметил)-4-цианофенил]-3-[(4-фторфенил)сульфонил]пропанамид [906008-94-4].

Примесь D: 4-амино-2-(трифторметил)бензонитрил [654-70-6].

Примесь Е:
rac-(2R)-2-гидрокси-2-метил-N-[3-(трифторметил)-4-цианофенил]-3-[(R)-(4-фторфенил)сульфинил]пропанамид [945419-64-7].

Примесь F:
rac-(2R)-2-гидрокси-2-метил-N-[3-(трифторметил)-4-цианофенил]-3-[(S)-(4-фторфенил)сульфинил]пропанамид [1080647-26-2].

Примесь J:
(2RS)-2-гидрокси-2-метил-N-[3-(трифторметил)-4-цианофенил]-3-[(4-фторфенил)сульфанил]пропанамид [90356-78-8].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 3 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 270 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–16,5 | 67 | 33
16,5–26,5 | 67 → 40 | 33 → 60
26,5–32,5 | 40 → 5 | 60 → 95
32,5–32,6 | 5 → 67 | 95 → 33
32,6–35 | 67 | 33

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца бикалутамида (Б) и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Бикалутамид – 1 (около 16 мин); примесь D – около 0,3; примесь Е – около 0,64; примесь F – около 0,67; примесь А – около 0,83; примесь В – около 0,94; примесь С – около 1,33; примесь J – около 1,56.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примесей Е и F должно быть не менее 0,8;

- разрешение (RS) между пиками примеси F и бикалутамида должно быть не менее 8,5.

На хроматограмме раствора стандартного образца бикалутамида (Б):

- фактор асимметрии пика (AS) бикалутамида должен быть не более 1,3;

- относительное стандартное отклонение площади пика бикалутамида должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадей пиков примеси D умножают на 0,71, примеси А – на 0,91.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика бикалутамида на хроматограмме раствора стандартного образца бикалутамида (Б);
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца бикалутамида, мг;
P – содержание бикалутамида в фармакопейном стандартном образце бикалутамида,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь D – не более 0,1 %;

- примесь E – не более 0,1 %;

- примесь F – не более 0,1 %;

- примесь A – не более 0,2 %;

- примесь B – не более 0,2 %;

- примесь C – не более 0,2 %;

- примесь J – не более 0,1 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Подвижная фаза (ПФ). ПФБ—ПФА 480:520.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца бикалутамида. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,5 мл раствора стандартного образца бикалутамида (А) (раздел «Родственные примеси») и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Время хроматографирования | 15 мин. |  |

Хроматографируют раствор стандартного образца бикалутамида и испытуемый раствор.

Время удерживания бикалутамида – около 3 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца бикалутамида:

- фактор асимметрии пика (AS) бикалутамида должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика бикалутамида должно быть не более 2 % (6 введений).

Содержание бикалутамида C18H14F4N2O4S в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика бикалутамида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика бикалутамида на хроматограмме раствора стандартного образца бикалутамида;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца бикалутамида, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание бикалутамида в фармакопейном стандартном образце бикалутамида,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке. В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0384 Бипериден (Biperidenum)

Вводится впервые

##### Определение

rac-(1R)-1-[(1R,2S,4R)-Бицикло[2.2.1]гепт-5-ен-2-ил]-3-(пиперидин-1-ил)-1-фенилпропан-1-ол.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % биперидена C21H29NO в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в хлороформе, умеренно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца биперидена.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 90 мг субстанции, растворяют в воде, прибавляют 0,5 мл молочной кислоты и доводят объём раствора водой до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 240 до 270 нм должен иметь максимумы при 251 нм, 257 нм, 263 нм и минимумы при 254 нм и 261 нм.

3. Качественная реакция. К 20 мг субстанции прибавляют 5 мл фосфорной кислоты концентрированной; должно появиться зелёное окрашивание.

##### Испытания

Температура плавления. От 112 до 116 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Опалесценция раствора 40 мг субстанции в 20 мл метанола не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, прибавляют 7 мл метанола, обрабатывают ультразвуком до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют 5 мг субстанции и 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси А в 5,0 мл метанола. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Примечание

Примесь А:
rac-(1R)-1-[(1S,2S,4S)-бицикло[2.2.1]гепт-5-ен-2-ил]-3-(пиперидин-1-ил)-1-фенилпропан-1-ол.

Примесь В:
rac-(1R)-1-[(1S,2R,4S)-бицикло[2.2.1]гепт-5-ен-2-ил]-3-(пиперидин-1-ил)-1-фенилпропан-1-ол.

Примесь С:
rac-(1R)-1-[(1R,2R,4R)-бицикло[2.2.1]гепт-5-ен-2-ил]-3-(пиперидин-1-ил)-1-фенилпропан-1-ол.

Хроматографические условия

Колонка | капиллярная 50 м × 0,25 мм, покрытая слоем поли(диметил)силоксана 0,25 мкм; |  |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:75; |  |
Скорость потока | Газ-носитель | 0,9 мл/мин; |
Температура | Инжектор | 250°С; |
| Колонка | 200°С в течение 5 мин; |
Объём пробы | 2 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика биперидена. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °C
--- | --- | ---
Колонка | 0–5 | 200
| 5–55 | 200 → 300
| 55–60 | 300
Инжектор |  | 250
Детектор |  | 300

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Бипериден – 1 (около 28 мин); примеси А, В и С – 0,95–1,05.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика биперидена должно быть не менее 6.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками биперидена и примеси А должно быть не менее 2,5;

- фактор асимметрии пика (AS) биперидена должен быть не более 1,5;

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику биперидена, должна составлять не менее 7000 теоретических тарелок.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- примесь А, В и С – не более 0,5 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей А, В и С – не более 1,0 %;

- сумма других примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 % от суммы площадей всех пиков.

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 35 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции в спирте 96 % с концентрацией биперидена 0,5 мг/мл, а затем разводят водой для БЭТ.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,5 г (точная навеска) субстанции в 20 мл бензола и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до появления синей окраски (индикатор – 2 капли 0,1 % раствора кристаллического фиолетового).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 31,15 мг биперидена C21H29NO.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.063 Бисакодил (Bisacodylum)

Взамен ФС 42-3252-95

##### Определение

[4,4'-(Пиридин-2-илметилен)дифенил]диацетат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % бисакодила С22Н19NO4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в ацетоне, умеренно растворим в этаноле 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца бисакодила.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах хлороформа, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,05 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,05 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 нм до 290 нм должен иметь максимум при 263 нм, минимум при 243 нм и плечо в интервале от 273 до 277 нм.

3. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 0,5 мл серной кислоты разведённой 16 %; при нагревании должен появиться запах уксусной кислоты.

4. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 3 мл серной кислоты концентрированной, прибавляют 0,05 мл калия дихромата раствора 0,1 М; раствор должен окраситься в красно-фиолетовый цвет, переходящий при нагревании в тёмно-фиолетовый.

##### Испытания

Температура плавления. От 131 до 135 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1, прибор 3).

Кислотность или щёлочность. К 1,0 г субстанции прибавляют 20 мл воды, свободной от углерода диоксида, взбалтывают, нагревают до кипения, охлаждают и фильтруют. Прибавляют 0,2 мл натрия гидроксида раствора 0,01 М и 0,1 мл метилового красного раствора 0,05 %. Окраска раствора должна быть жёлтой. Для изменения окраски раствора на красную должно потребоваться не более 0,4 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 1,58 г аммония формиата в 800 мл воды и доводят значение рН муравьиной кислотой безводной до 5,0. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 450:550.

Растворитель. Уксусная кислота ледяная—ацетонитрил—вода 4:30:66.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в 25 мл ацетонитрила и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют 2 мг фармакопейного стандартного образца бисакодила для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси А, В, С, D и E, в 1,0 мл ацетонитрила и смешивают с 1,0 мл растворителя.

Раствор для идентификации пика примеси F. Растворяют 5 мг фармакопейного стандартного образца бисакодила для идентификации пиков, содержащего примесь F, в 2,5 мл ацетонитрила и смешивают с 2,5 мл растворителя.

Примечание

Примесь А: 4,4'-(пиридин-2-илметилен)дифенол [603-41-8].

Примесь В: 2,4'-[(RS)-пиридин-2-илметилен]дифенол [16985-05-0].

Примесь С: {4-[(4-гидроксифенил)(пиридин-2-ил)метил]фенил}ацетат [72901-16-7].

Примесь D: неизвестная структура.

Примесь Е: [2,4'-(пиридин-2-илметилен)дифенил]диацетат [111664-35-8].

Примесь F: неизвестная структура.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 265 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3,5-кратное от времени удерживания основного пика. |  |

Хроматографируют раствор для идентификации пика примеси F, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения, испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Бисакодил – 1 (около 13 мин); примесь А – около 0,2; примесь В – около 0,4; примесь С – около 0,45; примесь D – около 0,85; примесь Е – около 0,9; примесь F – около 2,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В, С, D и Е используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу бисакодила для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси А, В, С, D и E.

Для идентификации примеси F используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для идентификации пика примеси F.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси Е и бисакодила должно быть не менее 1,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси А умножают на 0,7.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A и B не должна превышать площадь пика бисакодила на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика каждой из примесей С и Е не должна более чем в 5 раз превышать площадь пика бисакодила на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси D не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика бисакодила на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси F не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика бисакодила на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика бисакодила на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь пика бисакодила на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади пика бисакодила на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения 0,5 г субстанции встряхивают в течение 5 мин с 25 мл воды и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). Для определения 5 мл фильтрата, полученного в испытании «Сульфаты», смешивают с 5 мл воды. Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с использованием индикатора (0,05 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %) до голубовато-зелёного окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 36,14 мг бисакодила С22Н19NO4.

##### Хранение

В хорошо укупоренной упаковке. В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0071 Бисопролола фумарат

Бисопролол
Bisoprololi fumaras

Взамен ФС.2.1.0071.18

##### Определение

(2RS)-3-[(Пропан-2-ил)амино]-1-[4-({2-[(пропан-2-ил)окси]этокси}метил)фенокси]пропан-2-ола (2E)-бут-2-ендиоат (2:1).

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % бисопролола фумарата (C18H31NO4)2C4H4O4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен. Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Очень легко или легко растворим в воде, легко растворим или растворим в спирте 96 % и хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца бисопролола фумарата.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают досуха, сушат в вакууме при остаточном давлении 0,7 кПа и температуре 60 °С и записывают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл, помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 70 мл метанола и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 210 до 350 нм должен иметь максимум при 222 нм.

##### Испытания

Температура плавления. От 101 до 105 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельное вращение. От –2 до +2 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворитель. Ацетонитрил—вода 20:80.

Подвижная фаза А (ПФА). Смешивают 5,8 мл фосфорной кислоты концентрированной и 994,2 мл воды.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Смешивают 5,8 мл фосфорной кислоты концентрированной и 994,2 мл ацетонитрила.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца бисопролола для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примесь G, растворяют в 1,0 мл растворителя.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для идентификации. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца бисопролола для идентификации примесей, содержащего примеси А и Е, растворяют в 1,0 мл растворителя.

Примечание

Примесь А:
(2RS)-1-[4-(гидроксиметил)фенокси]-3-[(пропан-2-ил)амино]пропан-2-ол [62572-93-4].

Примесь E:
(EZ)-N-(пропан-2-ил)-3-[4-({2-[(пропан-2-ил)окси]этокси}метил)фенокси]проп-2-ен-1-амин [1217245-60-7].

Примесь G:
(2RS)-3-[(пропан-2-ил)амино]-1-{4-[({2-[(пропан-2-ил)окси]этокси}метокси)метил]фенокси}пропан-2-ол [1215342-36-1].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 20 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 225 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА, % | ПФБ, %
--- | --- | ---
0–4 | 95 | 5
4–8 | 95 → 80 | 5 → 20
8–15 | 80 | 20
15–34 | 80 → 20 | 20 → 80
34–36 | 20 | 80

Хроматографируют раствор для идентификации, раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Бисопролол – 1 (около 18 мин); фумаровой кислоты – около 0,3; примесь A – около 0,5; примесь G – около 1,1; примесь E – около 1,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей фумаровой кислоты, А и Е используют хроматограмму раствора для идентификации и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу бисопролола для идентификации примесей. Для идентификации пика примеси G используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу бисопролола для проверки разделительной способности хроматографической системы, содержащего примесь G.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками бисопролола и примеси G должно быть не менее 2,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси G не должна более чем в 2,5 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси A не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика примеси Е не должна превышать площадь пика основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна более чем в 0,5 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем 2,5 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %) и пик фумаровой кислоты.

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания субстанции (ОФС «Сульфатная зола»), с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Бисопролола фумарат

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 38,35 мг бисопролола фумарата (C18H31NO4)2C4H4O4.

Фумаровая кислота. От 14,8 % до 15,4 % в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Растворяют 0,5 г (точная навеска) субстанции в 70 мл этанола, прибавляют 8 мл 0,1 М раствора тетрабутиламмония гидроксида, перемешивают в течение 2 мин и титруют 0,1 М раствором тетрабутиламмония гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора тетрабутиламмония гидроксида соответствует 5,804 мг фумаровой кислоты C4H4O4.

##### Хранение

В плотно закрытой упаковке в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0385 Бримонидина тартрат

Бримонидин
Brimonidini tartras

Вводится впервые

##### Определение

5-Бромо-N-(имидазолидин-2-илиден)хиноксалин-6-амина (2R,3R)-2,3-дигидроксибутандиоат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % бримонидина тартрата C11H10BrN5·C4H6O6 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или слегка желтоватый или коричневатый порошок.

Растворимость. Растворим в воде, практически нерастворим в этаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца бримонидина тартрата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика бримонидина на хроматограмме раствора фармакопейного стандартного образца бримонидина тартрата (раздел «Родственные примеси»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +9,0 до +10,5 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор бримонидина тартрата 0,2 % в воде должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», не должна превышать интенсивности наиболее близко подходящего по цвету эталона сравнения 2 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие бримонидина тартрат, защищают от света.

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,60 г натрия гептансульфоната, растворяют в 310 мл метанола, прибавляют 2,5 мл триэтиламина и 7,5 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 65 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца бримонидина тартрата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 65 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца бримонидина тартрата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 1,3 мг фармакопейного стандартного образца бримонидина для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примесь Е, в 1,0 мл воды.

Примечание

Примесь Е: 2-(5-бромохиноксалин-6-ил)гуанидин [168329-48-4].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 264 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика бримонидина. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения, раствор стандартного образца бримонидина тартрата и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Бримонидин – 1 (около 19 мин); примесь Е – около 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси Е используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу бримонидина для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси Е и бримонидина должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси».

Содержание бримонидина тартрата C11H10BrN5·C4H6O6 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика бримонидина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика бримонидина на хроматограмме раствора стандартного образца бримонидина тартрата;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца бримонидина тартрата, мг;
P – содержание бримонидина тартрата в фармакопейном стандартном образце бримонидина тартрата,%;
W – потеря в массе при высушивании субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0008 Бриллиантовый зелёный

Бриллиантовый зелёный
Viride nitens

Взамен ФС.2.1.0008.15

С29Н34N2О4 | М.м. 474,59

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

4-{[4-(Диэтиламино)фенил](фенил)метилен}-N,N-диэтилциклогекса-2,5-диен-1-иминия гидрооксалат.

Содержит не менее 99,0 % бриллиантового зелёного C29H34N2O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Зеленовато-золотистые комочки или золотисто-зелёный порошок.

Растворимость. Растворим в хлороформе, умеренно растворим в воде и спирте 96 %.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

1. Качественная реакция. К 5 мл испытуемого раствора прибавляют 5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %; должно наблюдаться оранжевое окрашивание.

2. Качественная реакция. К 1 мл испытуемого раствора прибавляют 0,5 мл натрия гидроксида раствора 10 %;должно наблюдаться образование бледно-зелёного осадка.

##### ИСПЫТАНИЯ

Вещества, нерастворимые в спирте 96 %. Не более 1,0 %.Помещают 1,0 г (точная навеска) субстанции на высушенный до постоянной массы и взвешенный стеклянный фильтр с размером пор 40–100 мкм (ПОР 100) и промывают порциями по 5 мл спирта 96 % до получения бесцветного фильтрата. Фильтр с остатком высушивают до постоянной массы при 102,5±2,5 °С.

Потеря в массе при высушивании. Не более 3,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 1,0 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,005 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 1 или 2).

Испытуемый раствор. Сульфатную золу, полученную в испытании «Сульфатная зола», обрабатывают при нагревании на сетке 5 мл аммония ацетата насыщенного раствора, нейтрализованного раствором натрия гидроксида, прибавляют 5 мл воды и фильтруют в пробирку через беззольный фильтр, предварительно промытый уксусной кислоты раствором 1 %, а затемгорячей водой. Тигель и фильтр промывают 15 мл воды, пропуская её через тот же фильтр в ту же пробирку. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 млполученного фильтрата и доводят объём раствора водой до метки.

Мышьяк. Не более 0,0004 % (ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения используют 0,125 г субстанции.

Остаточные органические растворители. Всоответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 г (точная навеска) субстанции, растворяютв спирте 60 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, прибавляют 10 мл серной кислоты разведённой 16 %, 25,0 мл 0,05 М раствора йода, тщательно взбалтывают в течение 1 мин и доводят объём раствора водой дометки. Раствор отстаивают до получения прозрачного верхнего слоя(40±20 мин) и фильтруют через вату, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.

В коническую колбу помещают 50,0 мл полученного фильтрата и титруютизбыток йода 0,1 М раствором натрия тиосульфата (индикатор–4 капликрахмала раствора 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

Разность объёмов 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует объёму 0,05 М раствора йода, прореагировавшего с бриллиантовым зелёным.

Содержание бриллиантового зелёного С29Н34N2О4 в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где V1 - объём 0,1 М раствора натрия тиосульфата, израсходованный на титрование в основном опыте, мл;
V0 - объём 0,1 М раствора натрия тиосульфата, израсходованный на титрование в контрольном опыте, мл;
a – навеска субстанции, г;
K - поправочный коэффициент 0,1 М раствора натрия тиосульфата;
5,932 - количество бриллиантового зелёного, соответствующее 1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата, мг;
W – потеря в массе при высушивании, %;
1000 – коэффициент пересчёта грамм в миллиграмм.

##### ХРАНЕНИЕ

В плотно укупореннойупаковке.

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0009 Бромгексина гидрохлорид

Бромгексин
Bromhexini hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0009.18

##### Определение

2,4-Дибром-6-{[метил(циклогексил)амино]метил}анилина гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % бромгексина гидрохлорида C14H20Br2N2·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Обладает полиморфизмом.

Растворимость. Очень мало растворим в воде, мало растворим в спирте 96 % и метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. (ОФС Спектрометрия в средней инфракрасной области). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца бромгексина гидрохлорида. Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в метаноле, выпаривают досуха и записывают новые спектры сухих остатков.

2. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

- Подвижная фаза (ПФ). Концентрированный аммиак-2-пропанол-ацетон 1:29:70.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца бромгексина гидрохлорид. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца бромгексина гидрохлорид, растворяют в метаноле и доводят объём раствора растворителем до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 2 мкл испытуемого раствора (2 мкг) и раствора стандартного образца бромгексина гидрохлорид (2 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

- Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и степени подавления флуоресценции должна соответствовать зоне адсорбции бромгексина гидрохлорида на хроматограмме раствора стандартного образца бромгексина гидрохлорида.

3. Качественная реакция. Растворяют 25 мг субстанции в смеси 0,6 мл серной кислоты разведённой 16 % и 50 мл воды, прибавляют 2 мл метиленхлорида, 5 мл хлорамина раствора 5 %, встряхивают и оставляют до разделения слоёв; в нижнем слое должно появиться коричнево-жёлтое окрашивание.

4. Качественная реакция. Раствор 1 мг субстанции в 3 мл хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М должен давать характерную реакцию на амины ароматические первичные (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

5. Качественная реакция. Раствор 20 мг субстанции в 1 мл метанола и 1 мл воды должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. В 950 мл воды растворяют 1,26 г формиата аммония и доводят рН до безводной муравьиной кислотой и доводят объём раствора водой до 1000 мл.

Растворитель: Ацетонитрил—буферный раствор 50:50.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 40:60.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают около 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 2 мл помещают около 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца бромгексина (содержащего примеси C и D), растворяют в растворителе и доводят объём раствора до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора сравнения и доводят растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл этого раствора и доводят растворителем до метки.

Примечание

Примесь С: 2-{[метил(циклогексил)амино]метил}анилин [57365-08-9].

Примесь D: 4-бром-2-{[метил(циклогексил)амино]метил}анилин [132004-28-5].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 2,1 мм; силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии (2,6 мкм); |  |
Температура | 30 °С; |  |
Скорость потока | 0,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 248 нм; |  |
Объём пробы | 3,0 мкл испытуемого раствора (а)и стандартных растворов (а) и (б); |  |
Время хроматографирования | в два раза больше времени удерживания бромгексина. |  |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Бромгексин – 1 (около 10 мин); примесь С – около 0,2; примесь D – около 0,3.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей C и D используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Поправочный коэффициент. Для расчёта содержания площадь пика примеси C умножают на 1,6.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примесей C и D должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси С не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площади пиков всех примесей не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади пика на хроматограмме раствора сравнения (0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Прибавляют 0,3 г (точная навеска) субстанции растворяют в 70 мл спирта 96 %, 1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают расход титранта между двумя точками перегиба на кривой титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 41,26 мг бромгексина гидрохлорида C14H20Br2N2·HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0072 Бромдигидрохлорфенилбензодиазепин (Bromdihydrochlorphenylbenzodiazepinum)

Взамен ФС.2.1.0072.18

##### Определение

7-Бром-5-(2-хлорфенил)-1,3-дигидро-2H-1,4-бензодиазепин-2-он.

Cодержит не менее 99,0 % бромдигидрохлорфенилбензодиазепина С15Н10BrClN2O в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в хлороформе, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца бромдигидрохлорфенилбензодиазепина.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2 мл испытуемого раствора А, и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора Б в области длин волн от 210 до 300 нм должен иметь максимум при 230 нм.

3. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,5 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 30 мл спирта 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора А в области длин волн от 300 до 350 нм должен иметь максимум при 320 нм.

4. Качественная реакция. Кипятят 20 мг субстанции с 10 мл натрия гидроксида раствора 10 % в течение 10 мин. Выделяющийся аммиак идентифицируют по посинению влажной красной лакмусовой бумаги. Полученный раствор подкисляют хлористоводородной кислотой и фильтруют. Раствор дает характерную реакцию А на бромиды.

##### Испытания

Температура плавления. От 225 до 230 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 10 мл хлороформа должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора» должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном В9 (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Калия дигидрофосфата раствор 0,01 М.

Растворитель. ПФА—ПФБ 420:580.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 10 мл метанола и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В коническую колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в 5 мл метанола, прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты 1 М, и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 30 мин. Полученный раствор охлаждают до комнатной температуры и количественно переносят с помощью растворителя в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объём раствора тем же растворителем до метки, перемешивают и фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор не более 0,45 %, отбрасывая первые порции фильтрата.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Температура образца | 8 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА, % | ПФБ, %
--- | --- | ---
0–40 | 42 | 58
40–41 | 42 → 60 | 58 → 40
41–60 | 60 | 40
60–61 | 60 → 42 | 40 → 58
61–70 | 42 | 58

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Время удерживания бромдигидрохлорфенилбензодиазепина – 1 (около 18–19 мин), неиндентифицированных пиков около 0,20–0,25; около 2,9 – 3,1; около 3,2 – 3,4.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиком с относительным временем удерживания 2,9 – 3,1 и пиком с относительным временем удерживания 3,2 – 3,4 должно быть не менее 6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 0,5 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания субстанции в испытании «Сульфатная зола».

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 35 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 1 мг в 1 мл спирта 96 %.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в смеси 20 мл уксусного ангидрида и 2 мл муравьиной кислоты и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 34,96 мг бромдигидрохлорфенилбензодиазепина С15Н10BrClN2O.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0638 Бромизовал (Bromisovalum)

Взамен ФС 42-2766-98

##### Определение

(2RS)-2-Бром-N-карбамоил-3-метилбутанамид.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 100,5 % бромизовала C6H11BrN2O2 в перёсчете на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в спирте 96 % и хлороформе, очень мало растворим в воде.

##### Подлинность

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца бромизовала.

2. Качественная реакция. К 0,2 г субстанции прибавляют 5 мл натрия гидроксида раствора 10 % и нагревают до кипения; должен выделяться аммиак, который обнаруживают по посинению красной лакмусовой бумаги (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

3. Качественная реакция. Охлаждают 1 мл раствора, полученного в испытании (Подлинность 2 Качественная реакция), и прибавляют 2 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %. Полученный раствор должен давать характерную реакцию А на бромиды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

4. Качественная реакция. К 0,2 г субстанции прибавляют смесь, состоящую из 3 мл воды и 2 мл серной кислоты концентрированной; должен ощущаться запах изовалериановой кислоты.

Температура плавления. От 145 до 155 °C (ОФС «Температура плавления»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,6 г субстанции в 10 мл спирта 96 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 5,0 до 7,0 (ОФС «Ионометрия», метод 3).

Испытуемый раствор. Встряхивают 2 г субстанции с 40 мл кипящей воды и охлаждают до комнатной температуры.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Вода–ацетонитрил 100:900.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,40 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 3,0 мл ПФ, перемешивают до полного растворения и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор примеси А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) мочевины (примесь А) с содержанием основного вещества не менее 99,5 %, прибавляют 20,0 мл ПФ, перемешивают до полного растворения и доводят объём раствора подвижной фазой до метки.

Раствор стандартного образца бромизовала. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца бромизовала, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 3.0 мл раствора примеси А и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 3.0 мл раствора стандартного образца бромизовала и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,4 г (точная навеска) бромизовала, растворяют в 2 мл ПФ, прибавляют 3 мл стандартного раствора мочевины и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мл раствора сравнения Б и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель аминопропилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 195 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 25 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, растворы сравнения (а) и (б) и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений: Бромизовала – 1 (около 3,3 мин.); примесь А – около 2,1.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора, для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками бромизовала и примеси А должно быть не менее 1.5.

На хроматограмме раствора сравнения А:

- фактор ассиметрии пика (AS) примеси А должен быть не более 1.5;

- относительное стандартное отклонение площади пика примеси А должно быть не более 10.0 %;

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику примеси А, должна составлять не менее 500 теоретических тарелок.

На хроматограмме раствора сравнения Б:

- фактор ассиметрии пика (AS) бромизовала должен быть не более 1.5;

- относительное стандартное отклонение площади пика бромизовала должно быть не более 10.0 %;

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику бромизовала, должна составлять не менее 500 теоретических тарелок.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика бромизовала должно быть не менее 10.

Содержание мочевины в субстанции в процентах (X) рассчитывают по формуле:

где Sм − площадь пика мочевины на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 − площадь пика мочевины на хроматограмме раствора сравнения (а);
а − навеска субстанции, мг;
a0 − навеска примеси А, мг;
Р − содержание основного вещества в мочевине,%.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (X),рассчитывают по формуле:

где Si − площадь пика примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 − площадь пика бромизовала на хромматограмме раствора сравнения Б;
а − навеска субстанции, мг;
a0 − навеска фармакопейного стандартного образца бромизовала, мг;
Р − содержание бромизовала в фармакопейном стандартном образце,%.

Допустимое содержание примесей:

- мочевина – 0,15 %;

- любая единичная неиндентифицированная примесь – не более 0,10 %;

- общее содержание примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика мочевины на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,004 % (ОФС «Хлориды»). Встряхивают 1 г субстанции с 18 мл воды и 2 мл азотной кислоты разведённой 16 % в течение 1 мин и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Помещают 0,3 г (точная навеска) субстанции в коническую колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 20 мл 1 М раствора натрия гидроксида и нагревают с обратным холодильником, поддерживая слабое равномерное кипение, в течение 15 мин. После охлаждения через холодильник прибавляют 50 мл воды, 15 мл азотной кислоты разведённой 16 %, 25,0 мл 0,1 М раствора серебра нитрата, перемешивают и титруют 0,1 М раствором аммония тиоцианата до появления красно-бурой окраски (индикатор – 2 мл железа(III) аммония сульфата раствора 30 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 22,31 мг бромизовала C6H11BrN2O2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0639 Бромокриптина мезилат

Бромокриптин
Bromocriptini mesilas

Взамен ВФС 42-1274-82

##### Определение

(6aR,9R)-5-Бром-N-[(2R,5S,10aS,10bS)-10b-гидрокси-5-(2-метилпропил)-3,6-диоксо-2-(пропан-2-ил)октагидро-8H-[1,3]оксазоло[3,2-a]пирроло[2,1-c]пиразин-2-ил]-7-метил-4,6,6a,7,8,9-гексагидроиндоло[4,3-fg]хинолин-9-карбоксамида метансульфонат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более бромокриптина мезилата 101,0 % C32H40BrN5O5·CH4SO3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. От белого до белого с серовато-кремовым оттенком мелкокристаллический порошок.

* Гигроскопичен. Чувствителен к свету.

Растворимость. Легко растворим в метаноле, растворим в спирте 96 %, очень мало растворим в метиленхлориде, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца бромокриптина мезилата.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 10,0 мг субстанции, растворяют в 10 мл метанола и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М до метки.

- Раствор хранят в защищённом от света месте.

- Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 10 мл метанола и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 250 до 380 нм должен иметь максимум при 305 нм и минимум при 270 нм. Удельный показатель поглощения в максимуме должен быть от 120 до 135 в пересчёте на сухое вещество.

##### Испытания

Удельное вращение. От +95 до +105 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в смеси метанол-метиленхлорид 1:1, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,25 г субстанции в 25 мл метанола должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном В5, BY5 или Y5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 3,1 до 3,8 (ОФС «Ионометрия», метод 3).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл, помещают 0,2 г субстанции, растворяют в 4 мл метанола и доводят объём раствора водой, свободной от углерода диоксида, до метки.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы, содержащие бромокриптина мезилат, защищают от действия света.

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,791 г аммония карбоната, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Полученный раствор фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Буферный раствор рН 2,0—метанол 1:1.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,500 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл метанола и доводят объём раствора буферным раствором рН 2,0 до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца бромокриптина мезилата для проверки пригодности системы, содержащего примеси A и B, растворяют в 1,0 мл растворителя.

Примечание

Примесь А:
(6aR,9R)-5-бром-N-[(2R,5S)-5-(2-метилпропил)-3,6-диоксо-2-(пропан-2-ил)-1,2,5,6,9,10-гексагидро-8H-[1,3]оксазоло[3,2-a]пирроло[2,1-c]пиразин-2-ил]-7-метил-4,6,6a,7,8,9-гексагидроиндоло[4,3-fg]хинолин-9-карбоксамид.

Примесь В:
(6aR,9R)-N-[(2R,5S,10aS,10bS)-10b-гидрокси-5-(2-метилпропил)-3,6-диоксо-2-(пропан-2-ил)октагидро-8H-[1,3]оксазоло[3,2-a]пирроло[2,1-c]пиразин-2-ил]-7-метил-4,6,6a,7,8,9-гексагидроиндоло[4,3-fg]хинолин-9-карбоксамид [511-09-1].

Примесь С:
(6aR,9S)-5-бром-N-[(2R,5S,10aS,10bS)-10b-гидрокси-5-(2-метилпропил)-3,6-диоксо-2-(пропан-2-ил)октагидро-8H-[1,3]оксазоло[3,2-a]пирроло[2,1-c]пиразин-2-ил]-7-метил-4,6,6a,7,8,9-гексагидроиндоло[4,3-fg]хинолин-9-карбоксамид [65700-36-9].

Хроматографические условия

Колонка | 120 × 4 мм, силикагель октадецилсилильный, для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 300 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–30 | 90 → 40 | 10 → 60
30–45 | 40 | 60

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения А, раствор сравнения Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Бромокриптин – 1; примесь В – около 0,85; примесь А – около 0,88; примесь С – около 1,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу бромокриптина мезилата для проверки пригодности системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси В и примеси А должно быть не менее 1,1.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна превышать 0,2 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,02 %);

- площадь пика примеси С не должна превышать четырёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,4 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,2 %), и площадь только одного такого пика может превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 1,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 1,5 %).

Не учитывают пики (кроме пика примеси А), площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 4,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают до постоянной массы 0,5 г (точная навеска) субстанции при температуре 80 °С и остаточном давлении не более 20 мм рт. ст. (2,66 кПа).

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания субстанции 1 г, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,5 г (точная навеска) субстанции в 80 мл смеси уксусной кислоты безводной—уксусный ангидрид 1:7 и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 75,07 мг бромокриптина мезилата C32H40BrN5O5S·CH4SO3.

##### Хранение

В герметично закрытой упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0640 Будесонид (Budesonidum)

Взамен ФС 42-3830-99

##### Определение

16α,17α-[(1RS)-Бутан-1,1-диилбис(окси)]-11β,21-дигидроксипрегна-1,4-диен-3,20-дион.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % будесонида (смесь эпимеров A и B) C25H34O6 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде, умеренно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца будесонида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в 70 мл спирта 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь максимум при 242 нм.

3. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

- Подвижная фаза (ПФ). Смесь 1,2 мл воды и 8 мл метанола прибавляют к смеси 15 мл эфира и 77 мл метиленхлорида.

- Растворитель. Метанол—метиленхлорид 10:90.

- Испытуемый раствор. Растворяют 25 мг субстанции в 10 мл растворителя.

- Раствор стандартного образца будесонида. Растворяют 25 мг фармакопейного стандартного образца будесонида в 10 мл растворителя.

- Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 12,5 мг фармакопейного стандартного образца триамцинолона ацетонида (11β,21-дигидрокси-16α,17α-[пропан-2,2-диилбис(окси)]прегна-1,4-диен-3,20-дион [76-25-5]) в 5 мл раствора стандартного образца будесонида.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора, раствора стандартного образца будесонида и раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 10 мин, помещают в предварительно насыщенную, в течение не менее 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине должна соответствовать зоне адсорбции будесонида на хроматограмме раствора стандартного образца будесонида.

- Затем пластинку опрыскивают спиртовым раствором серной кислоты, нагревают при температуре 120 °С в течение 10 мин или до проявления зон адсорбции на хроматограммах, охлаждают и просматривают при видимом и УФ-свете при длине волны 365 нм.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске (в видимом свете) или по положению, величине и цвету флуоресценции (в УФ-свете при 365 нм) должна соответствовать зоне адсорбции будесонида на хроматограмме раствора стандартного образца будесонида.

4. Качественная реакция. Растворяют 2 мг субстанции в 2 мл серной кислоты концентрированной; в течение 5 мин должно появиться жёлтое окрашивание, которое в течение 30 мин изменяется на коричневый или красно-коричневый цвет. После прибавления 10 мл воды окраска должна исчезнуть.

5. Качественная реакция. Растворяют 1 мг субстанции в 2 мл раствора, содержащего 2 г фосфорномолибденовой кислоты в смеси 10 мл натрия гидроксида раствора 8,5 %, 15 мл воды и 25 мл уксусной кислоты ледяной. Раствор нагревают в течение 5 мин на водяной бане, охлаждают в течение 10 мин в ледяной воде и прибавляют 3 мл натрия гидроксида раствора 8,5 %; должно появиться синее окрашивание.

##### Испытания

Температура плавления. От 248 до 258 °C (с разложением, ОФС «Температура плавления», скорость нагрева 3,5 °C/мин).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС«Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Определение проводят в защищённом от света месте, все растворы защищают от света.

Подвижная фаза А (ПФА). Этанол—ацетонитрил—фосфатный буферный раствор pH 3,2 20:320:680.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Фосфатный буферный раствор pH 3,2—ацетонитрил 500:500.

Растворитель. Ацетонитрил—фосфатный буферный раствор pH 3,2 32:68.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 15 мл ацетонитрила и доводят объём раствора фосфатным буферным раствором pH 3,2 до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца будесонида для проверки пригодности хроматографической системы (содержащего примеси A, D, G, K и L), растворяют в 1,5 мл ацетонитрила и доводят объём раствора фосфатным буферным раствором pH 3,2 до метки.

Примечание

Примесь А:
11β,16α,17α,21-тетрагидроксипрегна-1,4-диен-3,20-дион [13951-70-7].

Примесь D:
16α,17α-[(1RS)-бутан-1,1-диилбис(окси)]-11β,21-дигидрокси-3,20-диоксопрегна-1,4-диен-21-аль (смесь эпимеров [85234-63-5]).

Примесь G:
16α,17α-[(1RS)-бутан-1,1-диилбис(окси)]-11β,21-дигидроксипрегн-4-ен-3,20-дион (смесь эпимеров [137174-25-5]).

Примесь K:
\{16α,17α-[(1RS)-бутан-1,1-диилбис(окси)]-11β-гидрокси-3,20-диоксопрегна-1,4-диен-21-ил}ацетат (смесь эпимеров [51333-05-2]).

Примесь L:
16α,17α-[(1RS)-бутан-1,1-диилбис(окси)]-21-гидроксипрегна-1,4-диен-3,11,20-трион (смесь эпимеров, [216453-74-6]).

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |  |
Температура колонки | 50 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 240 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–38 | 100 | 0
38–50 | 100 → 0 | 0 → 100
50–60 | 0 | 100

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Будесонид (эпимер B, первый из двух пиков будесонида) – 1,0 (около 17 мин); примесь A – около 0,10; эпимеры примеси D – около 0,63 и 0,67; примесь L – около 0,95; эпимеры примеси G – около 1,20 и 1,30; эпимеры примеси K – около 2,9 и 3,0.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, D, G, K и L используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу будесонида для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- отношение максимум/минимум (p/v) между первым из двух пиков примеси G и вторым из двух пиков будесонида (эпимер A) должно быть не менее 2,5;

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиком примеси L и первым из двух пиков будесонида (эпимер B) должно быть не менее 3,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь D – 1,8; примесь K – 1,3.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A и L не должна более чем в 2 раза превышать сумму площадей обоих пиков эпимеров будесонида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 % каждая);

- сумма площадей двух пиков эпимеров каждой из примесей D и K не должна более чем в 2 раза превышать сумму площадей обоих пиков эпимеров будесонида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 % каждая);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать суммы площадей обоих пиков эпимеров будесонида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную сумму площадей обоих пиков эпимеров будесонида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее половины суммы площадей обоих пиков эпимеров будесонида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %).

Эпимер А будесонида. Не менее 40 % и не более 51 %. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 15 мл ацетонитрила и доводят объём раствора фосфатным буферным раствором pH 3,2 до метки.

Раствор стандартного образца будесонида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца будесонида, растворяют в 15 мл ацетонитрила и доводят объём раствора фосфатным буферным раствором pH 3,2 до метки.

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–21 | 100 | 0
21–22 | 100 → 0 | 0 → 100
22–31 | 0 | 100

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца будесонида и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Эпимер B будесонида – около 17 мин; эпимер A будесонида – около 19 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиком примеси L и первым из двух пиков будесонида (эпимер B) должно быть не менее 3,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца будесонида разрешение (RS) между двумя основными пиками (эпимеры A и B будесонида) должно быть не менее 1,5.

Содержание эпимера A будесонида в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где SA – площадь пика эпимера A будесонида на хроматограмме испытуемого раствора;
SB – площадь пика эпимера B будесонида на хроматограмме испытуемого раствора.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Эпимер А будесонида».

Содержание будесонида C25H34O6 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0386 Булевиртида ацетат

Булевиртид
Bulevirtidi acetas

Вводится впервые

##### Определение

N-Тетрадеканоилглицил-L-треонил-L-аспарагинил-L-лейцил-L-серил-L-валил-L-пролил-L-аспарагинил-L-пролил-L-лейцил-глицил-L-фенилаланил-L-фенилаланил-L-пролил-L-α-аспартил-L-гистидил-L-глутаминил-L-лейцил-L-α-аспартил-L-пролил-L-аланил-L-фенилаланил-глицил-L-аланил-L-аспарагинил-L-серил-L-аспарагинил-L-аспарагинил-L-пролил-L-α-аспартил-L-триптофил-L-α-аспартил-L-фенилаланил-L-аспарагинил-L-пролил-L-аспарагинил-L-лизил-L-α-аспартил-L-гистидил-L-триптофил-L-пролил-L-α-глутамил-L-аланил-L-аспарагинил-L-лизил-L-валилглицинамида ацетат.

Cодержит не менее 95,0 % и не более 105,0 % булевиртида ацетата C248H355N65O72·xC2H4O2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Мало или очень мало растворим в уксусной кислоте растворе 50 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца булевиртида ацетата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика булевиртида на хроматограмме раствора стандартного образца булевиртида ацетата (раздел «Количественное определение»).

3. Аминокислотный состав. Содержание аминокислот должно быть в следующих пределах (моль/моль): аланин от 2,55 до 3,45; аспарагин от 11,05 до 14,95; глутамин от 1,70 до 2,30; глицин от 3,40 до 4,60; гистидин от 1,70 до 2,30; лейцин от 2,55 до 3,45; лизин от 1,70 до 2,30; фенилаланин от 3,40 до 4,60; пролин от 5,95 до 8,05; серин от 1,40 до 2,60; треонин от 0,80 до 1,20; валин от 1,70 до 2,30. Остальные аминокислоты могут присутствовать не более чем в следовых количествах. Определение проводят в соответствии с ОФС «Аминокислотный анализ» (гидролиз по методу 1 в жидкой фазе, анализ по методу 1 или 7).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 10 мг субстанции в 10 мл уксусной кислоты раствора 50 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора» должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Трифторуксусной кислоты раствор 0,1 %.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Трифторуксусная кислота—ацетонитрил 1:999.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 370:630.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. Раствор готовят непосредственно перед применением.

Раствор стандартного образца булевиртида ацетата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца булевиртида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мл раствора стандартного образца булевиртида ацетата и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель фенилгексилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 2,6 мкм; |  |
Температура колонки | 60 °C; |  |
Температура образца | 5 °C; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 63 | 37
10–50 | 63 → 55 | 37 → 45
50–50,1 | 55 → 0 | 45 → 100
50,1–55 | 0 | 100
55–55,1 | 0 → 63 | 100 → 37

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца булевиртида ацетата и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Булевиртид – 1 (около 32 мин).

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика булевиртида должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора стандартного образца булевиртида ацетата:

- фактор асимметрии пика (AS) булевиртида должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика булевиртида должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси с относительным временем удерживания около 1,05 умножают на 2.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- примесь с относительным временем удерживания около 1,05 – не более 2,4 %;

- примеси с относительным временем удерживания около 0,97 и 0,99 – не более 1,0 % каждая;

- любая другая – не более 0,5 %;

- сумма примесей – не более 5,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Уксусная кислота. Не более 4,0 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 7 мл фосфорной кислоты и 5 мл аммиака раствора концентрированного 25 % в 900 мл воды и доводят рН раствора аммиака раствором концентрированным 25 % до 2,50. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Метанол—буферный раствор 20:1000.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—вода 500:500.

Растворитель. Хлористоводородной кислоты раствор 0,01 М.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор уксусной кислоты. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,107 г (точная навеска) уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, для хроматографии, 5 мкм, размер пор 12 нм; |  |
Температура колонки | 25 °C; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 100 | 0
5–6 | 100 → 0 | 0 → 100
6–14 | 0 | 100
14–15 | 0 → 100 | 100 → 0
15–25 | 100 | 0

Хроматографируют раствор уксусной кислоты и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора уксусной кислоты:

- относительное стандартное отклонение площади пика уксусной кислоты должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику уксусной кислоты, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

Содержание уксусной кислоты в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика уксусной кислоты на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика уксусной кислоты на хроматограмме раствора уксусной кислоты;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска уксусной кислоты, мг;
P – содержание основного вещества в уксусной кислоте,%.

Трифторуксусная кислота. Не более 0,1 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 1,4 мл фосфорной кислоты концентрированной в 900 мл воды и доводят рН раствора натрия гидроксида раствором 10 М до 3,00. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Метанол—буферный раствор 20:1000.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—вода 500:500.

Растворитель. Хлористоводородной кислоты раствор 0,01 М.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор трифторуксусной кислоты. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) трифторуксусной кислоты, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора трифторуксусной кислоты и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл раствора трифторуксусной кислоты и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, совместимый с водной подвижной фазой, эндкепированный, для хроматографии, 4 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °C; |  |
Скорость потока | 0,4 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 100 мкл. |  |

Режим промывки колонки

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–15 | 100 | 0
15–16 | 100 → 0 | 0 → 100
16–24 | 0 | 100
24–25 | 0 → 100 | 100 → 0
25–45 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- относительное стандартное отклонение площади пика трифторуксусной кислоты должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику трифторуксусной кислоты, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

Содержание трифторуксусной кислоты в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика трифторуксусной кислоты на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика трифторуксусной кислоты на хроматограмме раствора сравнения;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска трифторуксусной кислоты, мг;
P – содержание основного вещества в трифторуксусной кислоте,%.

Вода. Не более 10 % (ОФС «Определение воды», метод 2).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 10 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца булевиртида ацетата и испытуемый раствор.

Содержание булевиртида ацетата C248H355N65O72·xC2H4O2 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика булевиртида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика булевиртида на хроматограмме раствора стандартного образца булевиртида ацетата;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца булевиртида ацетата, мг;
P – содержание булевиртида ацетата в фармакопейном стандартном образце булевиртида ацетата,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте при температуре 2–8 °С.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0671 Бупивакаина гидрохлорид моногидрат

Бупивакаин
Bupivacaini hydrochloridum monohydricum

Вводится впервые

C18H28N2O·HCl·H2O [73360-54-0] | М.м. 342,90

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(2RS)-1-Бутил-N-(2,6-диметилфенил)пиперидин-2-карбоксамида гидрохлорид моногидрат.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % бупивакаина гидрохлорида C18H28N2O·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 %, растворим в воде, мало растворим в хлороформе.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца бупивакаина гидрохлорида.

2. Тонкослойная хроматография. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции бупивакаина на хроматограмме раствора стандартного образца бупивакаина.

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля G.

- Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 %—метанол 0,1:100.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца бупивакаина. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного образца бупивакаина, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Реактив для детектирования. Калия йодовисмутата раствор разведённый.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца бупивакаина Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования и просматривают в видимом свете.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### ИСПЫТАНИЯ

Угол вращения. От –0,10° до +0,10° в пересчёте на сухое вещество (5 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

Кислотность или щёлочность. К 10 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 0,2 мл натрия гидроксида раствора 0,01 М; рН полученного раствора должен быть не менее 4,7.

К полученному раствору прибавляют 0,4 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М; рН полученного раствора должен быть не более 4,7.

Родственные примеси

1. Примесь F._ Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

- Все растворы используют свежеприготовленными.

- Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 0,23 г натрия дигидрофосфата моногидрата и 3,626 г динатрия гидрофосфата дигидрата в 900 мл воды, доводят значение рН раствора фосфорной кислотой концентрированной или натрия гидроксида раствором 10 % до 8,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки. Смешивают равные объёмы полученного раствора и ацетонитрила.

- Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.

- Раствор стандартного образца примеси F. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси F, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

- Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного образца примеси F и 20 мг метилбензоата, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 3,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

- Примечание

- Примесь F: 2,6-Диметиланилин [87-62-7].

- Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки | 30 °С;
Скорость потока | 1,0 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 240 нм;
Объём пробы | 50 мкл.

- Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 100 | 0
10–15 | 100 → 80 | 0 → 20
15–25 | 80 | 20
25–28 | 80 →100 | 20 → 0
28–30 | 100 | 0

- Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси F и испытуемый раствор.

- Относительное время удерживания соединений. Бупивакаин – 1 (около 20 мин); примесь F – около 0,3; метилбензоат – около 0,4.

- Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (Rs) между пиками примеси F и метилбензоата должно быть не менее 4,0.

- На хроматограмме раствора стандартного образца примеси F:

  - отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси F должно быть не менее 40;

- Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси F не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца примеси F (не более 0,001 %).

2. Другие примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

- Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают около 25 мг метилбегената, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Испытуемый раствор. Растворяют около 50 мг субстанции в 2,5 мл воды, прибавляют 2,5 мл натрия гидроксида раствора 2 М и дважды экстрагируют порциями раствора внутреннего стандарта по 5 мл; нижний слой отделяют и фильтруют.

- Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора раствором внутреннего стандарта до метки.

- Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора раствором внутреннего стандарта до метки.

- Раствор сравнения В. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора раствором внутреннего стандарта до метки.

- Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют 10 мг субстанции, 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси В и 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси Е в 2,5 мл воды, прибавляют 2,5 мл раствора натрия гидроксида 10 % и дважды экстрагируют порциями раствора внутреннего стандарта по 5 мл; нижний слой отделяют и фильтруют. Полученный фильтрат помещают в мерную колбу вместимостью 20 мл и доводят объём раствора раствором внутреннего стандарта до метки.

- Примечание

- Примесь В: (2RS)-N-(2,6-Диметилфенил)пиперидин-2-карбоксамид [15883-20-2].

- Примесь Е: 6-(Бутиламино)-N-(2,6-диметилфенил)гексанамид [1330172-81-0].

- Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная, 30 м × 0,32 мм, покрытая слоем полиметилфенилсилоксилана, 0,25 мкм;
Детектор | пламенно-ионизационный;
Газ-носитель | гелий для хроматографии;
Деление потока | 1:12;
Скорость потока | 2,5 мл/мин;
Объём пробы | 1 мкл;

- Температурная программа

| Время, мин | Температура, °C
--- | --- | ---
Колонка | 0 | 180
| 0–10 | 180 → 230
| 10–15 | 230
Инжектор |  | 250
Детектор |  | 250

- Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, растворы сравнения А, Б, В и испытуемый раствор.

- Относительное время удерживания соединений. Бупивакаин – 1 (около 10 мин); примесь В – около 0,7; примесь Е – около 1,1; внутренний стандарт – около 1,4.

- Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

  - разрешение (Rs) между пиками бупивакаина и примеси Е должно быть не менее 3,0;

- Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

  - отношение площадей пиков примеси В и внутреннего стандарта должно быть не более отношения площадей пиков бупивакаина и внутреннего стандарта на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,5 %);

  - отношение площадей пиков любой другой примеси и внутреннего стандарта должно быть не более отношения площадей пиков бупивакаина и внутреннего стандарта на хроматограмме раствора сравнения В (не более 0,1 %);

  - отношение суммы площадей пиков примесей и внутреннего стандарта должно быть не более отношения площадей пиков бупивакаина и внутреннего стандарта на хроматограмме раствора сравнения А (не более 1,0 %).

- Не учитывают примеси, для которых отношение площади пика к площади внутреннего стандарта меньше отношения площадей пиков бупивакаина и внутреннего стандарта на хроматограмме раствора сравнения А (менее 0,05 %).

- Вода. Не менее 4,0 % и не более 6,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1).

- Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

- Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 5) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола».

- Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

- Бактериальные эндотоксины. Не более 0,4 ЕЭ на 1 мг бупивакаина гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

- Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в смеси 20 мл воды и 25 мл спирта 96 %, прибавляют 5,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида этанольным.

Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают расход титранта между двумя точками перегиба на кривой титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида этанольного соответствует 32,49 мг бупивакаина гидрохлорида C18H28N2O·HCl.

##### ХРАНЕНИЕ

В хорошо укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

#### ФС.2.1.0641 Бусерелина ацетат

|Бусерелин
|Buserelini acetas

Взамен ФС 42-3172-98

##### Определение

5-Оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-L-тирозил-O-трет-бутил-D-серил-L-лейцил-L-аргинил-N-этил-L-пролинамида ацетат.

Содержит не менее 95,0 % и не более 102,0 % бусерелина C60H86N16O13 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей и уксусной кислоты вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или слегка желтоватый порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Умеренно растворим в воде и хлористоводородной кислоте растворе 0,01 М.

##### Идентификация

Проводят либо испытания 1 и 2, либо испытания 2 и 3.

1. 1H-ЯМР-спектроскопия (ОФС «Спектроскопия ядерного магнитного резонанса»)

- Растворитель. Дейтерия оксид—дейтерированная уксусная кислота 20:80.

- Раствор используют свежеприготовленным.

- Испытуемый раствор. Раствор субстанции в растворителе с концентрацией 4 мг/мл.

- Раствор используют свежеприготовленным.

- Раствор стандартного образца бусерелина. Раствор стандартного образца бусерелина для ЯМР идентификации в растворителе с концентрацией бусерелина 4 мг/мл.

- Раствор используют свежеприготовленным.

- Оборудование. Импульсный ЯМР-спектрометр с рабочей частотой на протонах не менее 300 МГц.

- Параметры регистрации 1H ЯМР спектров

Ширина спектра | от 0 до 9 м.д.;
Температура образца | 27 °С.

- Анализ 1H ЯМР спектров:

  - спектр испытуемого раствора должен качественно соответствовать спектру раствора стандартного образца бусерелина после нормализации обоих спектров с целью уравнивания их по интенсивности.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика бусерелина на хроматограмме раствора стандартного образца бусерелина (раздел «Количественное определение»).

3. Аминокислотный состав. Содержание аминокислот должно быть в следующих пределах (моль/моль): глутаминовая кислота от 0,9 до 1,1; пролин от 0,8 до 1,2; лейцин от 0,9 до 1,1; гистидин от 0,9 до 1,1; аргинин от 0,9 до 1,1; серин от 1,4 до 2,0; тирозин от 0,9 до 1,1. Остальные аминокислоты могут присутствовать не более чем в следовых количествах. Определение проводят в соответствии с ОФС «Аминокислотный анализ» (гидролиз по методу 1 в жидкой фазе, анализ по методу 1 или 7).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора» должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Удельное вращение. От –49 до –58 в пересчёте на безводное, свободное от уксусной кислоты и остаточных органических растворителей вещество (1,0 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

pH. От 3,5 до 6,2 (0,2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. В химический стакан помещают 11,2 г фосфорной кислоты концентрированной растворяют в 800 мл воды, доводят значение рН триэтиламином до 2,5, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ): Ацетонитрил—буферный раствор 200:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца примеси A растворяют в соответствующем объёме ПФ до получения концентрации 1 мг/мл. К 1,0 мл полученного раствора прибавляют 1,0 мл испытуемого раствора.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФ до метки (концентрация бусерелина 0,001 мг/мл).

Раствор для идентификации примесей. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца бусерелина для идентификации примесей (содержит примеси F и G), растворяют в соответствующем объёме ПФ до получения концентрации 1 мг/мл.

Примечание

Примесь А: [2-D-гистидин]бусерелин [1872434-99-5].

Примесь F: эндо-3a-серин-бусерелин.

Примесь G: эндо-8a-пролин-бусерелин.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 42 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 60 мин. |  |

Хроматографируют раствор для идентификации примесей, раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Бусерелин – 1,0 (около 23 мин); примесь F – около 0,83; примесь A – около 0,91; примесь G – около 1,26.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси A используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы, для идентификации пиков примесей F и G используют хроматограмму раствора для идентификации примесей.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками бусерелина и примеси A должно быть не менее 1,5.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где Si – площадь пика любой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика бусерелина на хроматограмме раствора сравнения.

Допустимое содержание примесей:

- примесь А – не более 2,5 %;

- примеси F и G – не более 1% каждая;

- любая другая примесь – не более 0,5 %;

- сумма примесей – не более 4,0 %.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,1 %.

Вода. Не более 4 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 20 мг (точная навеска) субстанции и в качестве растворителя 3 мл метанола.

Уксусная кислота. От 3 до 7 % (ОФС «Определение уксусной кислоты в синтетических пептидах»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в растворителе состава ПФБ—ПФА 5:95 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 55,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для испытаний готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 1 мг субстанции в 1 мл воды для БЭТ.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца бусерелина. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца бусерелина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца бусерелина и испытуемый раствор.

Содержание бусерелина C60H86N16O13 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей и уксусной кислоты вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика бусерелина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика бусерелина на хроматограмме раствора стандартного образца бусерелина;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца бусерелина, мг;
W – содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
A – содержание уксусной кислоты в субстанции,%;
P – содержание бусерелина в фармакопейном стандартном образце бусерелина,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, защищённом от света месте при температуре от 2 до 8 °С.

* Приводится для информации

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0642 Бусульфан (Busulfanum)

Взамен ФС 42-3825-99

##### Определение

(Бутан-1,4-диил)ди(метансульфонат).

Cодержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % бусульфана C6H14O6S2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в ацетоне и ацетонитриле, очень мало растворим в спирте 96 % и воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца бусульфана.

2. Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля G.

- Подвижная фаза (ПФ). Ацетон—толуол 50:50.

- Раствор для детектирования. Анисового альдегида раствор уксуснокислый в метаноле.

- Испытуемый раствор. Растворяют 20 мг субстанции в 2 мл ацетона.

- Раствор стандартного образца бусульфана. Растворяют 20 мг фармакопейного стандартного образца бусульфана в 2 мл ацетона.

- На линию старта пластинки наносят 5 мкл испытуемого раствора и 5 мкл раствора стандартного образца бусульфана. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры и сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают раствором для детектирования, нагревают до температуры 120 °С и просматривают в видимом свете.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции раствора стандартного образца бусульфана.

3. Качественная реакция. К 0,1 г субстанции прибавляют 0,1 г калия нитрата и 0,25 г натрия гидроксида, нагревают до расплавления. Охлаждают, прибавляют 5 мл воды. Доводят рН хлористоводородной кислотой разведённой 7,3 % до 1–2. Полученный раствор должен давать реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

4. Качественная реакция. Нагревают 0,1 г субстанции с 15,0 мл воды и 1,0 мл натрия гидроксида раствора 10 %; должен ощущаться характерный запах. Охлаждают, делят раствор на две равные части. К одной прибавляют 0,05 мл перманганата раствора 0,1 %, должно появиться фиолетовое окрашивание, постепенно переходящее в зелёное. Вторую часть раствора подкисляют 2 мл серной кислоты разведённой 16 %, прибавляют 0,05 мл калия перманганата раствора 0,1 %, встряхивают. Раствор должен обесцветиться.

##### Испытания

Температура плавления. От 115 до 119 °С (высушивают при температуре от 60 до 65 °С в течение 2 ч (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Кислотность. Растворяют при нагревании до 30–40 °С 0,2 г субстанции в 50 мл этанола. К полученному раствору прибавляют 0,1 мл метилового красного раствор 0,05 %. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 0,05 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида.

Потеря в массе при высушивании. Не более 2,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме при температуре 60 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Помещают 0,25 г (точная навеска) субстанции в колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл воды и кипятят на сетке с обратным холодильником в течение 30 минут, при необходимости доводят до исходного объёма водой. После охлаждения до комнатной температуры, титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до появления розовой окраски (индикатор – 0,3 мл фенолфталеина раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 12,32 мг бусульфана C6H14O6S2.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0387 Бутамирата цитрат

|Бутамират
|Butamirati citras

Вводится впервые

##### Определение

{2-[2-(Диэтиламино)этокси]этил}[(2RS)-2-фенилбутаноата] 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоксилат (1:1).

Содержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % бутамирата цитрата C18H29NO3·C6H8O7 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Порошок белого или светло-жёлтого цвета, слегка воскообразный.

Растворимость. Легко растворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца бутамирата цитрата.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на цитраты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 74 до 78 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,25 г субстанции в 25 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 3,5 до 4,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

1. Примесь 1 (диэтиламиноэтоксиэтанол). Не более 0,15 %. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

- Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 250 мкл бензилового спирта, растворяют в хлороформе и доводят объём раствора хлороформом до метки. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлороформом до метки.

- Испытуемый раствор. В колбу помещают 2,0 г (точная навеска) субстанции, 2,5 г калия карбоната, прибавляют 8,0 мл воды и перемешивают. Прибавляют 40,0 мл раствора внутреннего стандарта, перемешивают в течение 30 мин и оставляют до разделения слоёв, но не менее чем на 1 ч. Для определения используют органический слой.

- Раствор диэтиламиноэтоксиэтанола. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 37,5 мг (точная навеска) диэтиламиноэтоксиэтанола, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

- Стандартный раствор. В колбу помещают 2,5 г калия карбоната, прибавляют 8,0 мл раствора диэтиламиноэтоксиэтанола и перемешивают. Прибавляют 40,0 мл раствора внутреннего стандарта, перемешивают в течение 30 мин и оставляют до разделения слоёв, но не менее чем на 1 ч. Для определения используют органический слой.

- Контрольный раствор. В колбу помещают 2,5 г калия карбоната, прибавляют 8,0 мл воды и перемешивают. Прибавляют 40,0 мл раствора внутреннего стандарта, перемешивают в течение 30 мин и оставляют до разделения слоёв, но не менее чем на 1 ч. Для определения используют органический слой.

- Хроматографические условия

Колонка | капиллярная 30 м × 0,53 мм, покрытая слоем поли[(цианопропил)(фенил)][диметил]силоксана, 3 мкм; |  |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии или азот для хроматографии; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1 мкл; |  |
Температура | колонка | 0–2 мин | 120–150 °C;
|  | 2–8,7 мин | 150–250 °C;
|  | 8,7–30,7 мин | 250 °C;
| инжектор |  | 250 °C;
| детектор |  | 270 °C.

- Хроматографируют контрольный, стандартный и испытуемый растворы.

- Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

  - разрешение (RS) между пиками диэтиламиноэтоксиэтанола и бензилового спирта должно быть не менее 3,0;

  - фактор асимметрии пика (AS) диэтиламиноэтоксиэтанола должен быть не более 2,0;

  - относительное стандартное отклонение отношения площади пика диэтиламиноэтоксиэтанола к площади пика бензилового спирта должно быть не более 5,0 % (6 введений).

- Содержание диэтиламиноэтоксиэтанола в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

- B1 - отношение площади пика диэтиламиноэтоксиэтанола к площади пика бензилового спирта на хроматограмме испытуемого раствора;
  B0 - отношение площади пика диэтиламиноэтоксиэтанола к площади пика бензилового спирта на хроматограмме стандартного раствора;
  a1 - навеска субстанции, мг;
  a0 - навеска диэтиламиноэтоксиэтанола, мг;
  P - содержание основного вещества в диэтиламиноэтоксиэтаноле,%.

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Все растворы используют свежеприготовленными.

- Буферный раствор. Растворяют 2,21 г калия дигидрофосфата и 2,44 г натрия гексансульфоната в 900 мл воды, прибавляют 1,81 мл триэтиламина и доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,0. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

- Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 350:650.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

- Раствор стандартного образца бутамирата цитрата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца бутамирата цитрата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

- Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца бутамирата цитрата и 3 мг 2-фенилмасляной кислоты (примесь 4), растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

- Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца бутамирата цитрата и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь 2: 2-[2-диэтиламино)этокси]этилфенилсалицилат [47092-75-1].

Примесь 3: (Е)-дегибробутамират.

Примесь 4 (2-фенилмасляная кислота): (2RS)-2-фенилбутановая кислота [90-27-7].

Примесь 5: N,N-диэтил-2-фенилбутанамид [92321-53-4].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель фенилгексилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °C; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3,5-кратное от времени удерживания пика бутамирата. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца бутамирата цитрата и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Бутамират – 1 (около 13 мин); цитрат-анион – около 0,2; примесь 2– около 0,55; примесь 3– около 0,87; примесь 4– около 1,30; примесь 5– около 3,30.

Пригодность хроматографической систем

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика бутамирата должно быть не менее 10.

На хроматограмме для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками бутамирата и примеси 4 должно быть не менее 3,5.

На хроматограмме раствора стандартного образца бутамирата цитрата:

- фактор асимметрии пика (AS) пика бутамирата должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика бутамирата должно быть не более 5,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику бутамирата, должна составлять не менее 5000 теоретических тарелок.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примеси 2 и 3 – 0,5; примесь 4 – 0,3; примесь 5 – 0,2.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика бутамирата на хроматограмме раствора стандартного образца бутамирата цитрата;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца бутамирата цитрата, мг;
P - содержание бутамирата цитрата в фармакопейном стандартном образце бутамирата цитрата,%.

Допустимое содержание примесей:

- каждой из примесей 2, 3, 4 и 5 – не более 0,15 %;

- любой другой примеси – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают пик цитрат-иона и пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,02 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции (в вакууме) при температуре 50 °C в течение 4 ч.

Хлориды. Не более 0,005 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 1,0 г субстанции в 25 мл воды.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 2) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 7,0 ЕЭ на 1 мг бутамирата цитрата (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 20 мл уксусной кислоты безводной, прибавляют 20 мл ртути(II) ацетата раствора 0,1 М и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 49,96 мг бутамирата цитрата C18H29NO3∙C6H8O7.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Поводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0643 Валацикловира гидрохлорид

Валацикловир
Valacicloviri hydrohcloridum

Вводится впервые

##### Определение

{2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9H-пурин-9-ил)метокси]этил}[(2S)-2-амино-3-метилбутаноата] гидрохлорид (1:1).

Cодержит не менее 95,0 % и не более 102,0 % валацикловира гидрохлорида C13H20N6O4·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый мелкокристаллический порошок.

* Гигроскопичный, проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96 %, практически не растворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца валацикловира гидрохлорида.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец валацикловира гидрохлорида по отдельности растворяют в минимальном объёме этанола и выпаривают досуха в эксикаторе под вакуумом над фосфора(V) оксидом и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика валацикловира на хроматограмме раствора стандартного образца валацикловира гидрохлорида (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. В 4 мл воды растворяют 40 мг субстанции. Раствор должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность», реакция А).

##### Испытания

Удельное вращение. От –8,5 до –11,5 в пересчёте на безводное и свободное от органических растворителей вещество (4 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

pH раствора. От 4,0 до 6,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Сумма примесей (метод 2 и 3) – не более 5,0 %.

1. Примеси E, F, G. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Пластину предварительно обрабатывают метанолом. Когда фронт метанола пройдёт около 4/5 длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе до удаления следов растворителя.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 %—тетрагидрофуран—метанол-метиленхлорид 3:12:34:54.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 0,25 г субстанции (точная навеска), прибавляют 2 мл воды и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают по 5 мг фармакопейных стандартных образцов примеси D валацикловира, примеси G валацикловира и примеси E валацикловира, 8,4 мг примеси F пара-толуенсульфоната, прибавляют 2 мл воды и 6 мл спирта 96 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 3,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Стандартный раствор В. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 мл стандартного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Реактив для детектирования. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг флуорескамина, растворяют в этиленхлориде и доводят объём раствора этиленхлоридом до метки.

Примечание

Примесь Е:
{2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9H-пурин-9-ил)метокси]этил}[(2S)-2-{[(бензилокси)карбонил]амино}-3-метилбутаноат] [124832-31-1].

Примесь F:
(2-гидроксиэтил)[(2S)-2-амино-3-метилбутаноат] [86150-60-9].

Примесь G:
N,N-диметилпиридин-4-амин [1122-58-3].

На линию старта пластинки наносят по 4 мкл испытуемого раствора (200 мкг), стандартного раствора, стандартного раствора А, стандартного раствора Б и стандартного раствора В. Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80—90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат в потоке воздуха до удаления следов растворителей, просматривают в УФ-свете при 254 нм и определяют зоны адсорбции примеси E и примеси G. Затем пластинку опрыскивают реактивом для детектирования, просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм и определяют зону адсорбции примеси F.

Фактор удерживания (Rf) соединений. Примесь А – около 0; примесь В – около 0,2; валацикловир – около 0,3; примесь С – около 0,5; примесь D – около 0,6; примесь E – около 0,7; примесь F – около 0,75; примесь G – около 0,79; примесь С маскируется передним краем пятна из-за валацикловира; примеси F и G могут совместно элюироваться, но это не оказывает отрицательного влияния на их количественную оценку, поскольку они визуализируются по-разному.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограммах стандартного раствора А, стандартного раствора Б и стандартного раствора В чётко видны по три зоны адсорбции.

Зона адсорбции примеси Е на хроматограмме испытуемого раствора по совокупности величины и степени подавления флуоресценции не должна превышать зону адсорбции соответствующей примеси на хроматограмме стандартного раствора Б (не более 0,20 %).

Зона адсорбции примеси F на хроматограмме испытуемого раствора по совокупности величины и степени подавления флуоресценции не должна превышать зону адсорбции соответствующей примеси F на хроматограмме стандартного раствора А (не более 0,3 % в пересчёте на гидрохлорид).

Зона адсорбции примеси G на хроматограмме испытуемого раствора по совокупности величины и интенсивности поглощения окраски не должна превышать зону адсорбции соответствующей примеси G на хроматограмме стандартного раствора В (не более 0,05 %).

2. Примеси A, B, I и R. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Хлорная кислота—метанол—вода 5:50:950.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 50 мл хлористоводородной кислоты 0,5 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца валацикловира гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца валацикловира гидрохлорида, растворяют в хлористоводородной кислоте 0,5 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислотой 0,5 % до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислотой 0,5 % до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют 2,5 мг фармакопейного стандартного образца валацикловира для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси A, B, C, D, H, I, J, M и R в 5,0 мл хлористоводородной кислоты 0,5 %.

Примечание

Примесь A
(гуанин): 2-амино-1,7-дигидро-6Н-пурин-6-он [73-40-5].

Примесь В
(ацикловир): 2-амино-[(2-гидроксиэтокси)метил]-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он [59277-89-3].

Примесь I
(ацетат ацикловира): {2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9H-пурин-9-ил)метокси]этил}ацетат [102728-64-3].

Примесь R
(D-валацикловир): {2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9H-пурин-9-ил)метокси]этил}[(2R)-2-амино-3-метилбутаноат] [142963-60-8].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4 мм, силикагель модифицированный оптически активным краун-эфиром для хиральной хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 10 °С; |  |
Скорость потока | 0,75 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время удерживания | 1,5–кратное от времени удерживания пика валацикловира. |  |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Валацикловир – 1 (около 21 мин); примесь А – около 0,2; примесь B – около 0,2; примесь I – около 0,4; примесь R – около 0,6; примесь С – около 0,6; примесь D – около 0,7; примесь M – около 1,3.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, C, D, I, M и R используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу валацикловира для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) должно быть не менее 1,5, где p – высота пика примеси D по отношению к базовой линии, v – высота над базовой линией самой низкой точки кривой, отделяющей этот пик от пика, обусловленного примесями C и R.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей на хроматограмме испытуемого раствора умножают на поправочный коэффициент: примесь А – 0,7; примесь В – 0,7.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси I – не более 0,2 %;

- площадь пика примеси R – не более 3,0 %; разность между содержанием примеси C (тест В), и соэлюирующих примесей C и R, определённых в этом тесте;

- сумма площадей пиков примесей А и В – не более 2,0 %.

Не учитывают любые пики примесей кроме пиков А+В, С+R или I; а также пики данных примесей, площадь которых не превышает площадь основного пика валацикловира на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,03 %).

3. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Трифторуксусная кислота—вода 2:1000.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Трифторуксусная кислота—метанол 2:1000.

Растворитель. Спирт 96 %—вода 1:4.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора этим же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца валацикловира для проверки пригодности хроматографической системы (содержит примеси A, B, C, D, H, I, J, M и R). В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца валацикловира для проверки пригодности хроматографической системы (содержит примеси A, B, C, D, H, I, J, M и R), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь С (N-метилацикловир):
{2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9H-пурин-9-ил)метокси]этил}[(2S)-3-метил-2-(метиламино)бутаноат] [1346747-65-6].

Примесь D:
{2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9H-пурин-9-ил)метокси]этил}[(2S)-3-метил-2-(этиламино)бутаноат] [1346747-69-0].

Примесь Н (аланинат ацикловира):+ {2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9H-пурин-9-ил)метокси]этил}[(2S)-2-аминопропаноат] [84499-64-9].

Примесь J (ацикловир L-изолейцинат):
{2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9H-пурин-9-ил)метокси]этил}[(2S,3S)-2-амино-3-метилпентаноат] [142963-63-1].

Примесь M (N-формилвалацикловир):
{2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9H-пурин-9-ил)метокси]этил}[(2S)-3-метил-2-формамидобутаноат] [847670-62-6].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель фенилгексилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 15 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 90 | 10
5–35 | 90 → 60 | 10 → 40

Хроматографируют раствор сравнения, раствор стандартного образца валацикловира для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Валацикловир – 1 (около 19 мин); примесь А – около 0,3; примесь В – около 0,4; примесь Н – около 0,5; примесь С – около 1,06; примесь I – около 1,09; примесь D – около 1,2; примесь J – около 1,3; примесь М – около 1,6.

Идентификация примесей. Для идентификации примесей A, B, C, D, H, I, J и M используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу валацикловира для проверки пригодности хроматографической системы, и хроматограмму раствора стандартного образца валацикловира для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора стандартного образца валацикловира для проверки пригодности хроматографической системы:

- отношение максимум/минимум (p/v) должно быть не менее 2,5, где p – высота пика примеси С по отношению к базовой линии, v – высота над базовой линией самой низкой точки кривой, отделяющей этот пик от пика валацикловира;

- полученная хроматограмма идентична хроматограмме, прилагаемой к фармакопейному стандартному образцу валацикловира для проверки пригодности хроматографической системы.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»).

Допустимое содержание примесей:

- примесь М – не более 1,5 %;

- примесь D – не более 0,5 %;

- примесь С – не более 0,3 %;

- примеси Н – не более 0,1 %;

- примесь J – не более 0,1 %;

- любая другая примесь – не более 0,05 %;

- сумма всех примесей – не более 5,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,6 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,03 %).

Не учитывают пики примесей примесей А, В и I.

Вода. Не более 2,0 % (ОФС «Определение воды», способ 1). Для определения используют 0,25 г (точная навеска) субстанции.

Палладий. Не более 0,001 %. (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия»).

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,6 г хлористоводородной кислоты концентрированной, растворяют в 90 мл диметилсульфоксида и доводят объём раствора диметилсульфоксидом до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочные растворы. Готовят калибровочные растворы, содержащие 2 мкг/мл, 1 мкг/мл и 0,2 мкг/мл палладия путем доведения соответственно 2,0 мл, 1,0 мл и 0,2 мл стандартного раствора палладия 20 мкг/мл до 20,0 мл.

Источник излучения. Палладиевая лампа с полым катодом.

Длина волны. 340,5 нм.

Определяют эффективные значения атомной абсорбции испытуемого раствора и калибровочных растворов. По калибровочной прямой рассчитывают концентрацию палладия в субстанции.

Хлориды. От 9,4 % до 9,9 % в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Растворяют 0,35 г (точная навеска) субстанции в 100 мл воды, прибавляют 0,2 мл азотной кислоты концентрированной и титруют 0,1 М раствором серебра нитрата. Точку эквивалентности определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»), используя серебряный и серебряно-хлорсеребряный электрод сравнения или комбинированный серебряный электрод. Не учитывают результаты первого титрования, которое проводят для кондиционирования электродов.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 3,543 мг Cl.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Примеси A, B, I и R.» со следующими изменениями:

Хроматографируют раствор стандартного образца валацикловира гидрохлорида и испытуемый раствор.

Содержание валацикловира гидрохлорида C13H20N6O4∙HCl в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика валацикловира на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика валацикловира на хроматограмме раствора стандартного образца валацикловира гидрохлорида;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца валацикловира гидрохлорида, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание валацикловира гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце валацикловира гидрохлорида,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0644 Валганцикловира гидрохлорид (Valgancicloviri hydrochloridum)

Вводится впервые

##### Определение

[(2RS)-2-[(2-Амино-6-оксо-1,6-дигидро-9H-пурин-9-ил)метокси]-3-гидроксипропил][(2S)-2-амино-3-метилбутаноата] гидрохлорид (1:1).

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % валганцикловира гидрохлорида C14H22N6O5·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, умеренно растворим в метаноле, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в 2-пропаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца валганцикловира гидрохлорида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания двух основных пиков на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика валганцикловира на хроматограмме раствора стандартного образца валганцикловира гидрохлорида (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 2 мл воды. Полученный раствор должен давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Сумма примесей, определённая методами 1 и 2 – не более 3,0 %.

1. Примесь N

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 2,5 г триэтиламина в воде и доводят рН раствора трифторуксусной кислотой до 3,0. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Растворитель. Хлористоводородной кислоты раствор 0,001 М.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси С (Метоксиметилгуанина). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца метоксиметилгуанина, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца валганцикловира гидрохлорида, растворяют в растворителе, прибавляют 2,5 мл раствора стандартного образца примеси С и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мг фармакопейного стандартного образца валганцикловира гидрохлорида и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь N: [(2RS)-2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9H-пурин-9-ил)метокси]-3-гидроксипропил][(2S)-3-метил-2-(метиламино)бутаноат] [1401661-95-7].

Примесь С: (метоксиметилгуанин): 2-амино-9-(метоксиметил)-1,9-дигидро-6Н-пурин-6-он [1202645-50-8].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель фенилсилильный для хроматографии, 3,5 мкм; |  |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 30 мин. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 93 | 7
10–20 | 93 → 70 | 7 → 30
20–25 | 70 → 93 | 30 → 7
25–30 | 93 | 7

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Валганцикловир (второй пик) – 1 (около 7,5мин); примесь N (относительно второго пика валганцикловира) – около 1,2.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для второго пика валганцикловира должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиком примеси С и первым пиком валганцикловира должно быть не менее 1,0;

- разрешение (RS) между двумя пиками валганцикловира должно быть не менее 1,0;

- фактор асимметрии второго пика (AS) валганцикловира должен быть не более 1,3;

- относительное стандартное отклонение площади второго пика валганцикловира должно быть не более 10,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по второму пику валганцикловира, должна составлять не менее 8000 теоретических тарелок.

Допустимое содержание примесей. Содержание примеси N в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»).

Примесь N – не более 0,3 %.

2. Другие примеси

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 11,5 г аммония дигидрофосфата в воде и доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 2,80. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Растворитель. Хлористоводородной кислоты раствор 0,001 М.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг субстанции растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси С (Метоксиметилгуанин). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси С, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца валганцикловира гидрохлорида, растворяют в растворителе, прибавляют 2,5 мл раствора стандартного образца примеси С и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А:
2-амино-9-{(1,3-дигидроксипропан-2-ил)окси]метил}-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он [82410-32-0].

Примесь В:
2-амино-1,7-дигидро-6Н-пурин-6-он [73-40-5].

Примесь С (метоксиметилгуанин):
2-амино-9-(метоксиметил)-1,9-дигидро-6Н-пурин-6-он [1202645-50-8].

Примесь D:
[(1RS)-1-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9H-пурин-9-ил)метокси]-2-гидроксипропил][(2S)-2-амино-3-метилбутаноата] [1356932-18-7].

Примесь Е:
[(2RS)-2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9H-пурин-9-ил)метокси]-3-гидроксипропил]ацетат [88110-89-8].

Примесь F:
{2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9H-пурин-9-ил)метокси]пропан-1,3-диил}бис[(2S)-2-амино-3-метилбутаноат] [130914-71-5].

Примесь G:
[(2RS)-2-{[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9H-пурин-9-ил)метокси]метокси}-3-гидроксипропил][(2S)-2-амино-3-метилбутаноат] [1356932-88-1].

Примесь Н: структура не установлена.

Примесь I: структура не установлена.

Примесь J:
[(2RS)-2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9H-пурин-9-ил)метокси]-3-гидроксипропил]пропаноат [194159-18-7].

Примесь К, L, М:
{метиленбис[азандиил(6-оксо-1,6-дигидро-9H-пурин-2,9-диил)метиленокси-3-гидроксипропан-2,1-диил]}[(2S, 2S')-бис(2-амино-3-метилбутаноат) [1401661-96-8].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 3,5 мкм, размер пор 8 нм, содержание углерода 10 %; |  |
Температура колонки | 27 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 40 мин. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 92 | 8
5–15 | 92 → 80 | 8 → 20
15–30 | 80 → 30 | 20 → 70
30–35 | 30 → 92 | 70 → 8
35–40 | 92 | 8

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Валганцикловир (второй пик) – 1 (около 5 мин); примесь В – около 0,28; примесь А – около 0,42; примесь С – около 0,81; примесь D – около 1,26; примесь Е – около 1,36; примесь Н – около 1,47; примесь I – около 1,52; примесь F – около 1,62; примесь G – около 1,66; примесь J – около 2,09; примесь К – около 2,49; примесь L – около 2,52; примесь М – около 2,54.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для второго пика валганцикловира должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиком примеси С и первым пиком валганцикловира должно быть не менее 1,0;

- разрешение (RS) между двумя пиками валганцикловира должно быть не менее 3,0;

- фактор асимметрии второго пика (AS) валганцикловира должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади второго пика валганцикловира должно быть не более 5,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по второму пику валганцикловира, должна составлять не менее 8000 теоретических тарелок.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь А – 0,7; примесь В – 0,5; примесь Е – 0,8; примесь F – 1,4; примесь Н – 0,8; примесь I – 0,7; примесь J – 0,9.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»).

- только одна примесь – не более 0,10%;

- примесь А – не более 1,5 %;

- примесь В – не более 0,25 %;

- примесь С – не более 0,30 %;

- примесь D – не более 0,50 %;

- примесь E – не более 0,15 %;

- примесь F – не более 0,10 %;

- примесь G – не более 0,25 %;

- примесь H – не более 0,10 %;

- примесь I – не более 0,10 %;

- примесь J – не более 0,15 %;

- примесь K – не более 0,10 %;

- примесь L – не более 0,10 %;

- примесь M – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,25 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Соотношение диастереомеров. От 45:55 до 55:45. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют испытуемый раствор.

Время удерживания соединений. Диастереомеры – около 7,5±1,5 мин.

Содержание диастереомеров в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формулам:

где SA – площадь пика R-эфира L-валина валганцикловира на хроматограмме испытуемого раствора;
SB – площадь пика S-эфира L-валина валганцикловира на хроматограмме испытуемого раствора.

Энантиомерная чистота. Не менее 97,0 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают воду, прибавляют 10 мл хлорной кислоты и доводят объём раствора водой до метки.

Растворитель. Хлористоводородной кислоты раствор 0,001 М.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца D-валганцикловира. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца D-валганцикловира, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца валганцикловира гидрохлорида, растворяют в растворителе, прибавляют 2,5 мл раствора стандартного образца D-валганцикловира и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,0 мм, силикагель модифицированный оптически активным краун-эфиром для хиральной хроматографии (+), 5 мкм; |  |
Температура колонки | 27 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 30 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между вторым пиком D-валинового эфира и первым пиком валганцикловира должно быть не менее 2,5;

- фактор асимметрии второго пика (AS) валганцикловира должен быть не более 1,4;

- относительное стандартное отклонение площади второго пика валганцикловира должно быть не более 5,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по второму пику валганцикловира, должна составлять не менее 1800 теоретических тарелок.

Содержание энантиомеров в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где SL – сумма площадей пиков валганцикловира (R и S эфира L-валина) на хроматограмме испытуемого раствора;
SD – сумма площадей пиков энантиомерных примесей (R и S эфира D-валина) на хроматограмме испытуемого раствора.

Вода. Не более 8,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—буферный раствор 80:920.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца валганцикловира гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца валганцикловира гидрохлорида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

- Время хроматографирования 20 мин.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца валганцикловира гидрохлорида и испытуемый раствор.

Время удерживания второго пика валганцикловира – между 5 и 8,5 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между первым пиком валганцикловира и пиком примеси С должно быть не менее 1,0;

- разрешение (RS) между двумя пиками валганцикловира диастереомеров должно быть не менее 3,0;

- фактор асимметрии второго пика (AS) валганцикловира должен быть не более 1,4;

- относительное стандартное отклонение площади второго пика валганцикловира должно быть не более 1,0% (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по второму пику валганцикловира, должна составлять не менее 8000 теоретических тарелок.

Содержание валганцикловира гидрохлорида C14H22N6O5·HCl в субстанции в процентах в пересчёте на безводное и свободное от органических растворителей вещество (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика валганцикловира в виде суммы двух пиков валганцикловира диастереомеров на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика валганцикловира в виде суммы двух пиков валганцикловира диастереомеров на хроматограмме раствора стандартного образца валганцикловира гидрохлорида;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца валганцикловира гидрохлорида, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание валганцикловира гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце валганцикловира гидрохлорида,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0388 Валсартан (Valsartanum)

Вводится впервые

##### Определение

(2S)-3-Метил-2-(N-{4-[2'-(1H-тетразол-5-ил)[1,1'-бифенил]-4-ил]метил}пентанамидо)бутановая кислота.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % валсартана C24H29N5O3 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Производителям валсартана необходимо проводить оценку риска образования N-нитрозаминов и загрязнения ими в процессе производства. При выявлении потенциального риска процесс производства должен быть изменён, чтобы исключить или минимизировать загрязнение.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в этаноле, умеренно растворим в метиленхлориде, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца валсартана.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика валсартана на хроматограмме раствора стандартного образца валсартана (раздел «Родственные примеси. 2. Другие примеси»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –64 до –69 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси

1. Энантиомерная чистота. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Трифторуксусная кислота—2-пропанол—гексан 1:150:850.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца валсартана для идентификации пика, содержащего примесь А ((2R)-3-метил-2-(N-{4-[2'-(1H-тетразол-5-ил)[1,1'-бифенил]-4-ил]метил}пентанамидо)бутановая кислота [137862-87-4]), растворяют в 2 мл ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель модифицированный трис(3,5-диметифенилкарбамоил)целлюлозой для хиральной хроматографии, 5мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика валсартана. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Валсартан – 1 (около 13 мин); примесь А – около 0,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу валсартана для идентификации пика.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками валсартана и примеси А должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика валсартана на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

2. Другие примеси

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—ацетонитрил—вода 1:500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца валсартана для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примесь С, в 1 мл ПФ.

Примечание

Примесь С: (2S)-3-метил-2-(N-{4-[2'-(1H-тетразол-5-ил)[1,1'-бифенил]-4-ил]метил}бутанамидо)бутановая кислота [952652-79-8].

Хроматографические условия

Колонка | 125 × 3,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,4 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 225 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 6-кратное от времени удерживания пика валсартана. |  |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Валсартан – 1 (около 5 мин); примесь С – около 0,8.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу валсартана для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси С и валсартана должно быть не менее 3,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси C не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика валсартана на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика валсартана на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей всех пиков примесей не должна превышать трёхкратную площадь пика валсартана на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика валсартана на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

N-нитрозамины. Определение проводят в соответствии с ОФС «Примеси N-нитрозаминов».

Допустимое содержание примесей:

- N-нитрозодиметиламин (НДМА) – не более 0,300 мкг/г;

- N-нитрозодиэтиламин (НДЭА) – не более 0,082 мкг/г.

Вода. Не более 2,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют около 0,5 г субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 5). В качестве смеси растворителей используют вода—ацетон 15:85.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях определения «Родственные примеси. 2. Другие примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца валсартана. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца валсартана, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

- Детектор спектрофотометрический, 273 нм.

Хроматографируют раствор стандартного образца валсартана и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца валсартана относительное стандартное отклонение площади пика валсартана должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание валсартана C24H29N5O3 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика валсартана на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика валсартана на хроматограмме стандартного раствора;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца валсартана, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание валсартана в фармакопейном стандартном образце валсартана,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0074 Вальпроат натрия

Вальпроевая кислота
Natrii valproas

Взамен ФС.2.1.0074.18

##### Определение

2-Пропилпентаноат натрия.

Содержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % вальпроата натрия C8H15NaO2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца вальпроата натрия.

2. Качественная реакция. Растворяют 0,25 г субстанции в 5 мл воды, прибавляют 1 мл кобальта(II) нитрата раствора 5 % и нагревают на водяной бане; должен образоваться фиолетовый осадок.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Опалесценция раствора 4 г субстанции в 20 мл воды не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. Растворяют 1,0 г субстанции в 10 мл воды, прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствора 0,1 %. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 0,25 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида или 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты.

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Растворы используют свежеприготовленными.

Испытуемый раствор. В делительную воронку помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 10 мл воды. Прибавляют 5 мл серной кислоты разведённой 9,8 % и перемешивают, затем прибавляют 20 мл гептана и встряхивают в течение 2 мин, отделяют верхний слой. Водный слой дважды экстрагируют порциями по 20 мл гептана, отделяя верхний слой. К объединённым гептановым извлечениям прибавляют сульфат натрия безводный, предварительно высушенный при температуре 160 °С в течение 4 ч, затем встряхивают в течение 10 мин и фильтруют через беззольный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объём раствора гептаном до метки и перемешивают.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора гептаном до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца вальпроевой кислоты для проверки пригодности системы (содержит примесь К: (2RS)-2-метил-2-этилпентановая кислота [5343-52-2]) растворяют в 1,0 мл гептана.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,53 мм, покрытая слоем макрогола 20 000 2-нитротерефталата, 0,5 мкм; |  |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:20; |  |
Скорость потока | 8 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1 мкл; |  |
Температура | Колонка | Время, мин | Температура ºС
|  | 0–5 5–15 15–28,3 28,3–30 | 80 °C; 80 °С → 150 °С; 150 °С → 190 °С; 190 °С;
| Инжектор |  | 220 °С;
| Детектор |  | 220 °С.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Вальпроевой кислоты – 1 (около 17 мин); примесь К – около 0,97.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси K и вальпроевой кислоты должно быть не менее 2,0;

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси К не должна превышать 0,15 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 0,2 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,03 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,03 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 2,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,25 г субстанции в 24 мл воды, прибавляют 1 мл азотной кислоты, перемешивают и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2, или методом 6.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,4 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 25 мл уксусной кислоты ледяной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 16,62 мг С8Н15NaO2.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0389 Вальпроевая кислота (Acidum valproicum)

Вводится впервые

##### Определение

2-Пропилпентановая кислота.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % вальпроевой кислоты C8H16O2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Бесцветная или слегка желтоватая, прозрачная, слегка вязкая жидкость.

Растворимость. Очень мало растворима в воде, смешивается со спиртом 96 % и метиленхлоридом.

* Растворяется в разбавленных растворах щёлочей.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения соответствует спектру фармакопейного стандартного образца вальпроевой кислоты.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 2 г субстанции в 10 мл натрия гидроксида раствора 8,5 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 г субстанции, растворяют в гептане и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора гептаном до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 5 мг фармакопейного стандартного образца вальпроевой кислоты для проверки пригодности хроматографической системы (содержащей примесь К) в 1 мл гептана.

Примечание

Примесь К: (2RS)-2-метил-2-этилпентановая кислота [5343-52-2].

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,53 мм, покрытая слоем макрогола 20 000 2-нитротерефталата с толщиной плёнки 0,5 мкм; |  |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ носитель | гелий для хроматографии; |  |
Линейная скорость | 8 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1 мкл. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °С
--- | --- | ---
Колонка | 0–5 | 80
5–15 | 80 → 150
15–28,3 | 150 → 190
28,3–30 | 190
Инжектор |  | 220
Детектор |  | 220

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Вальпроевая кислота – 1 (около 17 мин); примесь К – около 0,97.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси К и вальпроевой кислоты должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси К не должна превышать 0,15 площади пика вальпроевой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,05 площади пика вальпроевой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 0,2 площади пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,03 площади основного пика вальпроевой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,03 %).

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 2).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 г субстанции, растворяют в 15 мл смеси вода—спирт 96 % 15:85 и доводят объём той же смесью до метки.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии. (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в 25 мл спирта 96 %, добавляют 2 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 14,42 мг вальпроевой кислоты C8H16O2.

##### Хранение

В герметично закрытой упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0645 Ванкомицина гидрохлорид

Ванкомицин
Vancomycini hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

(1S,2R,18R,19R,22S,25R,28R,40S)-22-(2-Амино-2-оксоэтил)-48-{[2-O-(3-C-амино-2,3,6-тридезокси-3-метил-α-L-ликсо-гексопиранозил)-β-D-глюкопиранозил]окси}-2,18,32,35,37-пентагидрокси-19-[(2R)-4-метил-2-(метиламино)пентанамидо]-20,23,26,42,44-пентаоксо-5,15-дихлор-7,13-диокса-21,24,27,41,43-пентаазаоктацикло[26.14.2.23,6.214,17.18,12.129,33.010,25.034,39]пентаконта-3,5,8(48),9,11,14,16,29(45),30,32,34,36,38,46,49-пентадекаен-40-карбоновой кислоты гидрохлорид (1:1).

Cодержит не менее 900 мкг/мг ванкомицина C66H75Cl2N9O24 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Вещество, продуцируемое некоторыми штаммами Amycolatopsis orientalis.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый микрокристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, очень мало растворим или практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ванкомицина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора Б должно соответствовать времени удерживания основного пика (Ванкомицин В) на хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (раздел «Ванкомицин В»).

3. Качественная реакция. Раствор субстанции 10 % должен давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 2 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», измеренная в максимуме поглощения при длине волны 450 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать 0,1 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

рН раствора. От 2,5 до 4,5 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Приготовление испытуемого раствора. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1 г субстанции, растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Ванкомицин В. Не менее 91,0 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 2 мл триэтиламина в воде и доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 3,2, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Тетрагидрофуран—ацетонитрил—буферный раствор 10:70:920.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Тетрагидрофуран—ацетонитрил—буферный раствор 10:290:700.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг фармакопейного стандартного образца ванкомицина гидрохлорида, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. Раствор переносят в коническую колбу с пришлифованной пробкой, нагревают до 65 °С и выдерживают при этой температуре в течение 24 ч, после чего охлаждают до комнатной температуры. Раствор используют в течение 4 ч.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора Б и доводят объём раствора ПФА до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–13 | 100 | 0
13–22 | 100 → 0 | 0 → 100
22–27 | 0 | 100
27–30 | 0 → 100 | 100 → 0

Уравновешивают колонку в течение не менее 30 мин смесью ПФА—ПФБ в соотношении 0:100, уравновешивают колонку в течение 15 мин смесью ПФА—ПФБ в соотношении 100:0.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, испытуемые растворы А и Б.

Время удерживания ванкомицина В – около 11 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика ванкомицина В должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между двумя основными пиками должно быть не менее 5,0.

На хроматограмме испытуемого раствора Б:

- фактор асимметрии пика (AS) ванкомицина В должен быть не более 1,6;

- относительное стандартное отклонение площади пика ванкомицина В должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику ванкомицина В, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

Содержание ванкомицина В в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где SБ - площадь пика ванкомицина В на хроматограмме испытуемого раствора Б;
∑SА - сумма площадей пиков всех примесей на хроматограмме испытуемого раствора А;
25 - коэффициент разведения испытуемого раствора А.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,2 % от площади основного пика на хроматограмме испытуемого раствора А, а также пики, соответствующие пикам на хроматограмме ПФ.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Ванкомицин В».

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где SА - площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора А;
SБ - площадь пика ванкомицина В на хроматограмме испытуемого раствора Б;
∑SА - сумма площадей пиков всех примесей на хроматограмме испытуемого раствора А;
25 - коэффициент разведения испытуемого раствора А.

Допустимое содержание примесей:

- любая примесь – не более 4,0%;

- сумма примесей – не более 9,0%.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,1 % от площади основного пика на хроматограмме испытуемого раствора А, а также пики, соответствующие пикам на хроматограмме ПФ.

Вода. Не более 5,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 1,0 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,003 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола». Для приготовления эталонного раствора к 3 мл свинец стандартный раствор 10 мкг/мл прибавляют 7 мл воды.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 4 мг субстанции, растворённой в 0,5 мл воды для инъекций, на мышь, внутривенно со скоростью 0,1 мл/с. Срок наблюдения – 48 ч.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,25 ЕЭ на 1 мг субстанции (Ванкомицин В) (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят микробиологическим методом в соответствии с ОФС «Определение антимикробной активности антибиотиков методом диффузии в агар».

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0390 Варфарин натрия клатрат

Варфарин
Warfarinum natricum clathratum

Вводится впервые

##### Определение

2-Оксо-3-[(1RS)-3-оксо-1-фенилбутил]-2H-1-бензопиран-4-олят натрия—пропан-2-ол (2:1).

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % варфарина натрия C19H15NaO4 в пересчёте на безводное и свободное от 2-пропанола и остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок. *Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте, растворим в ацетоне, очень мало растворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца варфарина натрия клатрата.

2. ГХ (ОФС «Газовая хроматография»). Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика 2-пропанола на хроматограмме стандартного раствора (раздел «2-Пропанол»).

3. Качественная реакция. Растворяют 1 г субстанции в 10 мл воды, прибавляют 5 мл азотной кислоты концентрированной, фильтруют, прибавляют 2 мл калия дихромата раствора 0,5 % и встряхивают в течение 5 мин; через 20 мин должно появиться зеленовато-голубое окрашивание.

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH. От 7,6 до 8,6 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворитель. Метанол—вода 250:750.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—ацетонитрил—вода 10:250:750.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 40 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 мг примеси В и 2 мг примеси С, растворяют в 25 мл метанола и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь В: 4-гидрокси-2H-1-бензопиран-2-он [1076-38-6].

Примесь С: (3E)-4-фенилбут-3-ен-2-он [1896-62-4].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель цианосилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 260 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-х кратное от времени удерживания варфарина. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Варфарин – 1 (около 9 мин); примесь В – около 0,4; примесь С – около 0,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей В и С используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R) между пиками примеси В и примеси С должно быть не менее 2,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь В – 0,5; примесь С – 0,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей В и С не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее половины площади пика варфарина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

2-Пропанол. От 8,0 до 8,5 %. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,17 г пропанола и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. Растворяют 0,1 г субстанции в 2,0 мл воды и прибавляют 2,0 мл раствора внутреннего стандарта.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,17 г 2-пропанола и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. Смешивают 2,0 мл полученного раствора и 2,0 мл раствора внутреннего стандарта.

Хроматографические условия

Колонка | капиллярная 30 м × 0,32 мм, покрытая слоем поли[(цианопропил)(фенил)][диметил]силоксана, 1,8 мкм; |  |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Расход газа-носителя (азот) | 1,0 мл/мин; |  |
Деление потока | 80:1; |  |
Объём пробы | 1 мкл; |  |
Температура |  | Время, мин | Температура, °C
| Колонка | 0–20 20–40 40–50 | 40; 40 → 240; 240;
| Инжектор | – | 140;
| Детектор | – | 240.

Хроматографируют контрольный, стандартный и испытуемый растворы.

Относительное время удерживания соединений. 2-Пропанол – 1; пропанол – около 1,5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (Rs) между пиками 2-пропанола и пропанола должно быть не менее 5,0;

- фактор асимметрии пика (As) 2-пропанола должен быть не более 1,3;

- относительные стандартные отклонения площадей пиков 2-пропанола и пропанола должны быть не более 2,0 % (6 введений).

Допустимое содержание примесей. Содержание 2-пропанола в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где B1 – отношение площади пика 2-пропанола к площади пика внутреннего стандарта на хроматограмме испытуемого раствора;
B0 – отношение площади пика 2-пропанола к площади пика внутреннего стандарта на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска 2-пропанола, мг;
P – содержание основного вещества в 2-пропаноле,%.

Фенольные кетоны. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,25 г (точная навеска) субстанции, растворяют в натрия гидроксида растворе 2 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор используют сразу после приготовления.

Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 385 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения натрия гидроксида раствор 2 %.

Оптическая плотность испытуемого раствора не должна превышать 0,2.

Вода. Не более 0,3 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 2,5 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в натрия гидроксида растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 308 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения натрия гидроксида раствор 0,01 М.

Содержание варфарина натрия C19H15NaO4 в процентах (Х) в пересчёте на безводное, свободное от 2-пропанола и остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где A1 - оптическая плотность испытуемого раствора;
a1 - навеска субстанции, г;
431 - удельный показатель поглощения варфарина натрия, ( );
W - суммарное содержание воды, 2-пропанола и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В сухом, защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0075 Верапамила гидрохлорид

Верапамил
Verapamili hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0075.18

##### Определение

(2RS)-2-(3,4-Диметоксифенил)-5-\{[2-(3,4-диметоксифенил)этил](метил)амино}-2-(пропан-2-ил)пентаннитрила гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % верапамила гидрохлорида C27H38N2O4·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в хлороформе и метаноле, растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца верапамила гидрохлорида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика верапамила на хроматограмме раствора стандартного образца верапамила гидрохлорида (раздел «Количественное определение).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 140 до 144 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Угол вращения. От –0,10º до +0,10º (5 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,5 до 6,0 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,23 г натрия ацетата безводного, растворяют в 500 мл воды, прибавляют 33 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). 2-Аминогептан—ацетонитрил—раствор А 5:300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для идентификации пиков. Растворяют 5,0 мг субстанции и 4,0 мг фармакопейного стандартного образца верапамила примеси I ((2RS)-2-(3,4-Диметоксифенил)-2-(2-\{[2-(3,4-диметоксифенил)этил](метил)амино}этил)-3-метилбутаннитрил [2893-91-6]) в 20 мл ПФ.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 278 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 4-кратное от времени удерживания пика верапамила. |  |

Хроматографируют раствор для идентификации пиков, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Верапамил – 1 (около 1 мин); примесь I – около 0,88.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для идентификации:

- разрешение (R) между пиками примеси I и верапамила должно быть не менее 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика верапамила должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать 0,2 площади пика верапамила на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 0,6 площади пика верапамила на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади пика верапамила на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании, способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* *Бактериальные эндотоксины*. Не более 16,7 ЕЭ на 1 мг верапамила гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Испытание проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца верапамила гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца верапамила гидрохлорида, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца верапамила гидрохлорида и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца верапамила гидрохлорида:

- фактор асимметрии (AS) пика верапамила должен быть не более 2;

- относительное стандартное отклонение площади пика верапамила должно быть не более 1,5 % (6 введений).

Содержание верапамила гидрохлорида C27H38N2O4 · HCl в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика верапамила гидрохлорида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика верапамила гидрохлорида на хроматограмме раствора стандартного образца верапамила гидрохлорида;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца верапамила гидрохлорида, мг;
P - содержание верапамила гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце верапамила гидрохлорида,%;
W - потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке. В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0646 Вилдаглиптин (Vildagliptinum)

Вводится впервые

##### Определение

(2S)-1-{2-[(3-Гидрокси-1-адамантил)амино]ацетил}пирролидин-2-карбонитрил.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % вилдаглиптина C17H25N3O2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый со светло-жёлтым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде и метаноле, умеренно растворим в ацетоне.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца вилдаглиптина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика вилдаглиптина на хроматограмме раствора стандартного образца вилдаглиптина (А) (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор субстанции 5 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном GY5, Y5, BY5 или B5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси

1. Примесь 1. Определение проводят методом ионообменной хроматографии (ОФС «Ионообменная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 2000 мл помещают 5,75 г метансульфоновой кислоты, растворяют в воде, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ, доводят объём раствора ПФ до метки и перемешивают.

Раствор примеси 1. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) примеси 1 (3-амино-1-адамантанол [702-82-9]), растворяют в ПФ, доводят объём раствора ПФ до метки и перемешивают.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл раствора примеси 1, доводят объём раствора ПФ до метки и перемешивают.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, прибавляют 1,0 мл раствора примеси 1, растворяют в ПФ, доводят объём раствора ПФ до метки и перемешивают.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4 мм, катионит слабый (протонированная форма); |  |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | кондуктометрический; |  |
Объём пробы | 25 мкл; |  |
Время хроматографирования | 13 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Примесь 1 – около 3 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси 1 и вилдаглиптина должно быть не менее 0,8.

Содержание примеси 1 в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси 1 на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика примеси 1 на хроматограмме стандартного раствора;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска примеси 1, мг;
P – содержание основного вещества в стандартном образце примеси 1,%.

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,74 г дикалия гидрофосфата, растворяют в 900 мл воды, доводят значение pH фосфорной кислотой концентрированной до 6,50, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают.

Подвижная фаза Б (ПФБ). ПФА—ацетонитрил 250:750.

Растворитель. Фосфорная кислота концентрированная—ацетонитрил—вода 1:50:950.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 40 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе, доводят объём раствора растворителем до метки и перемешивают.

Раствор стандартного образца вилдаглиптина (А). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 40 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца вилдаглиптина, растворяют в растворителе, доводят объём раствора растворителем до метки и перемешивают.

Раствор стандартного образца вилдаглиптина (Б). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца вилдаглиптина (А) и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают по 1 мг примеси 2, примеси 3, примеси 4 и примеси 5, растворяют в растворе стандартного образца вилдаглиптина (А), доводят объём раствора тем же растворителем до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора тем же растворителем до метки и перемешивают.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца вилдаглиптина (Б), доводят объём раствора растворителем до метки и перемешивают.

Примечание

Примесь 2:
2-(3-гидрокси-1-адамантил)-1-имино-гексагидропирроло[1,2-а]пиразин-4-он [1789703-37-2].

Примесь 3:
1-{2-[(3-гидрокси-1-адамантил)амино]ацетил}пирролидин-2-карбоксамид [565453-39-6.].

Примесь 4:
2-(3-гидрокси-1-адамантил)-гексагидропирроло[1,2-а]пиразин-1,4-дион [1789703-36-1].

Примесь 5:
(2S)-1-(2-{[2-((2S)-2-цианопирролидин-1-ил)-2-оксоэтил]-(3-гидрокси-1-адамантил)амино}ацетил)пирролидин-2-карбонитрил [1036959-23-5].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 3,5 мкм; |  |
Температура колонки | 32 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0−10 | 95 → 34 | 5 → 66
10−12,5 | 34 | 66
12,5−12,6 | 34 → 95 | 66 → 5
12,6−15 | 95 | 5

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца вилдаглиптина (Б) и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Вилдаглиптин – 1; примесь 2 – около 0,7; примесь 3 – около 0,75; примесь 4 – около 1,14; примесь 5 – около 1,5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками вилдаглиптина и примеси 4 должно быть не менее 2,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь 2–0,6; примесь 3–0,9; примесь с относительным временем удерживания около 0,83–0,5; примесь 4–0,7; примесь 5–0,6.

Содержание каждой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика вилдаглиптина на хроматограмме раствора стандартного образца вилдаглиптина (Б);
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца вилдаглиптина, мг;
P – содержание вилдаглиптина в фармакопейном стандартном образце вилдаглиптина,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь 1– не более 0,1 %;

- примесь 3– не более 0,3 %;

- примесь 5– не более 0,1 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма любых других примесей – не более 0,3 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика вилдаглиптина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Энантиомерная чистота. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Трифторуксусная кислота—метанол—этанол—гексан 1:50:50:900.

Растворитель. Гексан—этанол 50:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл этанола и доводят объём раствора гексаном до метки.

Раствор стандартного образца вилдаглиптина. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца вилдаглиптина, растворяют в растворителе, доводят объём раствора растворителем до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора растворителем до метки и перемешивают.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г фармакопейного стандартного образца вилдаглиптина и 1 мг примеси 6 ((2R)-1-{2-[(3-гидрокси-1-адамантил)амино]ацетил}пирролидин-2-карбонитрил [1036959-27-9]), растворяют в 5 мл этанола и доводят объём раствора гексаном до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл раствора стандартного образца вилдаглиптина и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель модифицированный трис(3,5-диметилфенилкарбамоил)амилозой для хиральной хроматографии, 10 мкм; |  |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 215 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 15 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца вилдаглиптина и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Вилдаглиптин – 1; примесь 6 – около 0,8.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси 6 и вилдаглиптина должно быть не менее 1,5.

Содержание примеси 6 в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси 6 на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика вилдаглиптина на хроматограмме раствора стандартного образца вилдаглиптина;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца вилдаглиптина, мг;
P – содержание вилдаглиптина в фармакопейном стандартном образце вилдаглиптина,%.

Допустимое содержание примеси:

- примесь 6 – не более 0,5 %.

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Хроматографические условия

- Объём пробы - 5 мкл.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца вилдаглиптина (А) и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца вилдаглиптина (А) относительное стандартное отклонение площади пика вилдаглиптина должно быть не более 0,73 % (5 введений).

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками вилдаглиптина и примеси 4 должно быть не менее 2,0.

Содержание вилдаглиптина C17H25N3O2 в субстанции в процентах в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика вилдаглиптина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика вилдаглиптина на хроматограмме раствора стандартного образца вилдаглиптина (А);
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца вилдаглиптина, мг;
P – содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце вилдаглиптина,%;
W – содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

Не требует особых условий.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0076 Винпоцетин (Vinpocetinum)

Взамен ФС.2.1.0076.18

##### Определение

Этил[(13aS,13bS)-13a-этил-2,3,5,6,13a,13b-гексагидро-1H-индоло[3,2,1-de]пиридо[3,2,1-ij][1,5]нафтиридин-12-карбоксилат].

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % винпоцетина C22H26N2O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в хлороформе и метиленхлориде, мало растворим в этаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанциив области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца винпоцетина.

2. Спектрофотометрия. (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения 0,001 % раствора субстанции в метаноле в области длин волн от 220 до 400 нм должен иметь максимумы при 229±2 нм, 274±2 нм и 314±2 нм.

##### Испытания

Температура плавления. От 148 до 153 °С (ОФС «Температура плавления»).

Удельное вращение. От +127 до +134 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в диметилформамиде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 100 мл хлороформа должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Аммония ацетата раствор 0,2 М. В 500 мл воды растворяют 15,4 г аммония ацетата и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000 мл.

Подвижная фаза (ПФ). Аммония ацетата раствор 0,2 М—ацетонитрил 450:550.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50,0 мл помещают 50,0 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартных образцов винпоцетина. Растворяют 6,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, 5,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси В, 3,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси С и 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси D в 30 мл ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до 50,0 мл.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50,0 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора ПФ до метки. К 1,0 мл полученного раствора прибавляют 1,0 мл раствора стандартных образцов винпоцетина и доводят объём раствора ПФ до 20,0 мл.

Примечание

Примесь А: + этил[(12RS,13aSR,13bSR)-12-гидрокси-13a-этил-2,3,5,6,12,13,13a,13b-октагидро-1H-индоло[3,2,1-de]пиридо[3,2,1-ij][1,5]нафтиридин-12-карбоксилат] [68780-78-9].

Примесь В:
метил[(13aS,13bS)-13a-этил-2,3,5,6,13a,13b-гексагидро-1H-индоло[3,2,1-de]пиридо[3,2,1-ij][1,5]нафтиридин-12-карбоксилат] [4880-92-6].

Примесь С:
метоксивинпоцетин [70155-05-4].

Примесь D:
rac-этил[(12R,13aR,13bS)-13a-этил-2,3,5,6,12,13,13a,13b-октагидро-1H-индоло[3,2,1-de]пиридо[3,2,1-ij][1,5]нафтиридин-12-карбоксилат] (Дигидровинпоцетин).

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, 5 мкм; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 15 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания основного пика. |  |

Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Винпоцетин – 1,0 (около 16 мин); примесь А – около 0,40; примесь D – около 0,68; примесь В – около 0,75; примесь С – около 0,83.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения разрешение (R) между пиками примеси D и В должно быть не менее 2.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площади пика примеси А на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6 %);

- площадь каждой из примесей В и D не должна превышать площади соответствующего пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси С не должна превышать площади пика примеси С на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площади пика винпоцетина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее половины площади пика винпоцетина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 5,0 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины», метод А).

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции 0,5 мг/мл в 2 % растворе аскорбиновой кислоты, затем разбавляют его в 30 раз и нейтрализуют 0,1 М раствором натрия гидроксида до рН 6,0–7,0.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 50 мл смеси уксусный ангидрид—уксусная кислота ледяная в соотношении 1:1 и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

1 мл 0,1 М хлорной кислоты соответствует 35,05 мг винпоцетина C22H26N2O2.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке в защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0647 Вориконазол (Voriconazolum)

Вводится впервые

##### Определение

(2R,3S)-2-(2,4-Дифторфенил)-1-(1H-1,2,4-триазол-1-ил)-3-(5-фторпиримидин-4-ил)бутан-2-ол.

Содержит от 97,5 % до 102,0 % вориконазола C16H14F3N5O в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в ацетоне и метиленхлориде, очень мало растворим или практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца вориконазола.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора, должно соответствовать времени удерживания пика вориконазола на хроматограмме раствора стандартного образца вориконазола (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор, 0,5 г субстанции в 20 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

1. «Энантиомерная чистота». Примесь D – не более 0,2 %.

Буферный раствор. Растворяют 0,77 г аммония ацетата в 600 мл воды и доводят значение рН уксусной кислотой ледяной до 5,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 180:820.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 2 мл ацетонитрила и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси D (А). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси D ((2S,3R)-2-(2,4-дифторфенил)-1-(1H-1,2,4-триазол-1-ил)-3-(5-фторпиримидин-4-ил)бутан-2-ол [137234-63-0]), растворяют в 2 мл ацетонитрила и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси D (Б). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси D (А) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 2 мл ацетонитрила. К полученному раствору прибавляют 1 мл раствора стандартного образца примеси D (А) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия.

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель β-циклодекстриновый для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 256 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,5-кратное от времени удерживания вориконазола. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси D (Б), испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Вориконазол – 1 (около 7 мин); примесь D – около 1,5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками вориконазола и примеси D должно быть не менее 4,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца примеси D (Б):

- фактор асимметрии примеси D на хроматограмме (AS) должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади примеси D должно быть не более 5,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по основному пику, должна составлять не менее 1000 теоретических тарелок.

Содержание примеси D в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика примеси D на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика примеси D на хроматограмме раствора стандартного образца примеси D (Б);
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца примеси D, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание примеси D в фармакопейном стандартном образце примеси D,%.

2. Примеси А, В, С.

Буферный раствор. Растворяют 1,9 г аммония формиата в 500 мл воды, доводят значение рН муравьиной кислотой безводной до 4,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—метанол—буферный раствор 150:300:550.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ, обрабатывая при необходимости ультразвуком, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца вориконазола. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца вориконазола, растворяют в ПФ, при необходимости используя ультразвук, и доводят объём раствора ПФ до метки. Переносят 5,0 мл полученного раствора в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси В. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси В, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 100 мг (точная навеска) субстанции, суспендируют в 10 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М, используя при необходимости ультразвук, и доводят объём раствора ПФ до метки. Выдерживают в течение 30 мин. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки (путем деградации получают примеси А и С).

Примечание

Примесь А:
1-(2,4-дифторфенил)-2-(1H-1,2,4-триазол-1-ил)этан-1-он [86404-63-9].

Примесь В:
rac-(2R,3S)-2-(2,4-дифторфенил)-3-(пиримидин-4-ил)-1-(1H-1,2,4-триазол-1-ил)бутан-2-ол [182369-73-9].

Примесь С:
5-фтор-4-этилпиримидин [137234-88-9].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,9 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 4 мкм; |  |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 256 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания вориконазола. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца вориконазола, раствор стандартного образца вориконазола примеси В, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания. Вориконазол – 1 (около 8 мин); примесь А – около 0,25; примесь С – около 0,3; примесь В – около 0,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А и С используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы, для идентификации пика примеси В используют раствор стандартного образца примеси В.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примесей А и С должно быть не менее 1,8.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь А – 0,7; примесь В – 2,1; примесь С – 0,7.

Допустимое содержание примесей

На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей А, В, С не должна превышать 1,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

Сумма площадей пиков всех примесей (А, В, С, D, Е и любая другая примесь) не должна превышать 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

3. Примесь Е. Примесь Е – не более 0,1 %.

Раствор натрия гидроксида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 47 г натрия гидроксида, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Смешивают 1500 мл воды и 500 мл метанола, дегазируют. Прибавляют 175 мкл раствора натрия гидроксида.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл метанола и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси Е. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси Е (rac-[(1R,4R)-1,7,7-триметил-2-оксобицикло[2.2.1]гептан-1-ил]метансульфоновая кислота [5872-08-2]), растворяют в 50 мл метанола и доводят объём раствора ПФ до метки.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 17 мг натрия хлорида, растворяют в воде и, доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, 25 мл метанола, прибавляют 1,0 мл раствора стандартного образца примеси Е и доводят объём раствора ПФ до метки.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси Е, прибавляют 25 мл метанола, доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора Б, прибавляют 5 мл метанола и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия.

Колонка | 250 × 4,0 мм, анионообменная смола сильноосновная для хроматографии 8,5 мкм; |  |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | кондуктометрический; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания примеси Е. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартный раствор А, стандартный раствор Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений: примесь Е – 1 (около 4 мин); хлорид – около 1,5.

Пригодность хроматографической системы.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси Е должно быть не менее 10.

На хроматограмме стандартного раствора А:

- разрешение (RS) между пиками примеси Е и хлорида должно быть не менее 3,5.

На хроматограмме стандартного раствора Б:

- фактор асимметрии пика (AS) примеси Е должен быть не более 1,7;

- относительное стандартное отклонение площади пика примеси Е – не более 5,0 % (6 определений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику примеси Е должна составлять не менее 1000 теоретических тарелок.

Содержание примеси Е в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика примеси Е на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика примеси Е на хроматограмме стандартного раствора Б;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца примеси Е, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание примеси Е в фармакопейном стандартном образце примеси Е,%.

Вода. Не более 0,4 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции и платиновый тигель.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 1,5 ЕЭ на 1 мг вориконазола. (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции в этаноле 96 % с концентрацией 5 мг/мл, интенсивно перемешивают до полного растворения субстанции.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Примеси А, В, С» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора, приготовленного в разделе «Родственные примеси. Примеси А, В, С», и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

- Время хроматографирования - 30 мин.

Хроматографируют раствор стандартного образца вориконазола и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца вориконазола:

- фактор асимметрии вориконазола (AS) должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика вориконазола должно быть не более 2,0 % (6 введений);

Содержание вориконазола в субстанции в процентах (Х) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика вориконазола на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика вориконазола на хроматограмме раствора стандартного образца вориконазола;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца вориконазола, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание вориконазола в фармакопейном стандартном образце вориконазола,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0648 Габапентин (Gabapentinum)

Вводится впервые

##### Определение

[1-(Аминометил)циклогексил]уксусная кислота.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % габапентина C9H17NO2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в метиленхлориде.

* Проявляет полиморфизм. Растворяется в разбавленных растворах кислот и щелочей.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца габапентина.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают досуха и незамедлительно записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика габапентина на хроматограмме раствора стандартного образца габапентина (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 1,5 г субстанции в смеси уксусная кислота—метанол—вода 0,5:19,5:30 должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 6,5 до 7,5 (2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

Сумма примесей, определённая методами 1 и 2 – не более 0,5 %.

Метод 1. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы готовят непосредственно перед использованием.

Буферный раствор рН 1,80. Растворяют 0,58 г аммония дигидрофосфата и 1,83 г натрия перхлората в 950 мл воды, доводят значение рН раствора хлорной кислотой до 1,80, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Буферный раствор рН 2,00. Растворяют 2,32 г аммония дигидрофосфата в 950 мл воды, доводят значение рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 2,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор рН 1,80 240:760.

Растворитель. Буферный раствор рН 2,00.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,14 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 7 мг фармакопейного стандартного образца примеси А и 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси В, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A: 2-азаспиро[4.5]декан-3-он [64744-50-9].

Примесь В: (1-цианоциклогексил)уксусная кислота [133481-09-1].

Примесь D: (1-[(3-оксо-2-азаспиро[4.5]дец-2-ил)метил]циклогексил} уксусная кислота [1076198-17-8].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный с полярными группами и этиленовыми мостиками, гибридный, эндкепированный, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 215 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 4-кратное от времени удерживания пика габапентина. |  |

Примечание – После каждого хроматографирования, колонку следует промывать ацетонитрилом.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Габапентин – 1 (около 4 мин); примесь А – около 2,4; примесь В – около 2,8.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А и пика примеси В используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и примеси B должно быть не менее 2,3.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика примеси А на хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Метод 2. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Метод 1» со следующими изменениями.

Растворы готовят непосредственно перед использованием.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—буферный раствор 1,80—ацетонитрил 300:350:350.

Раствор стандартного образца примеси D. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 7 мг фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в 25 мл метанола и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Условия хроматографирования

Время хроматографирования: 1,2-кратное от времени удерживания пика примеси D.

Хроматографируют раствор стандартного образца примеси D габапентина и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Примесь D – 1 (около 10 мин).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца примеси D (не более 0,05 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,6 площади основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца примеси D (менее 0,03 %) и пики, с относительными временами удерживания менее 0,4 по отношению к пику примеси D.

Вода. Не более 0,3 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,01 %.

Помещают 1,5 г (точная навеска) субстанции в коническую колбу вместимостью 100 мл, растворяют в смеси уксусная кислота—метанол—вода 0,5:19,5:30. Полученный раствор титруют 0,001 М раствором серебра нитрата потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,001 М раствора серебра нитрата соответствует 0,03545 мг хлорид-иона.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Метод 1» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца габапентина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,14 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца габапентина, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца габапентина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца габапентина фактор асимметрии пика (AS) габапентина должен быть не более 5,0.

Содержание габапентина C9H17NO2 в субстанции в процентах (Х) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика габапентина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика габапентина на хроматограмме раствора стандартного образца габапентина;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца габапентина, мг;
P - содержание габапентина в фармакопейном стандартном образце габапентина,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0391 Гадобутрол моногидрат

Гадобутрол
Gadobutrolum monohydricum

Вводится впервые

##### Определение

2,2',2''-[10-((1RS,2SR)-1,3,4-Тригидроксибут-2-ил)-1,4,7,10-тетраазациклододекан-1,4,7-триил]триацетат гадолиния(III) моногидрат.

Cодержит:

- не менее 97,5 % и не более 102,5 % гадобутрола C18H31GdN4O9 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество;

- не менее 98,0 % и не более 102,0 % гадолиния Gd в пересчёте на безводный и свободный от остаточных органических растворителей гадобутрол.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Проявляет полиморфизм, гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, практически нерастворим в этаноле безводном и гептане.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гадобутрола моногидрата. Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец гадобутрола моногидрата по отдельности растворяют в 0,5 мл воды, прибавляют по 5 мл этанола безводного, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика гадобутрола моногидрата на хроматограмме раствора стандартного образца гадобутрола моногидрата (раздел «Родственные примеси»).

3. Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой. Величина эмиссии испытуемого раствора при длине волны 226,11 нм должна быть одного порядка с величиной эмиссии стандартного раствора, содержащего 1 мг/мл иттрия (раздел «Количественное определение». Гадолиний).

##### Испытания

Удельное вращение. От –0,05 до +0,05 в пересчёте на безводное вещество (30 % раствор субстанции, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 6 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pН раствора. От 5,5 до 6,8 (1 % раствор субстанции, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Для приготовления растворов используют подходящую пластиковую посуду. Все растворы хранят при 10 °С не более 42 ч.

Раствор муравьиной кислоты. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 900 мл воды, доводят значение pH до 3,6 смесью муравьиная кислота безводная—вода 1:1.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—раствор муравьиной кислоты 5:995.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 1 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца гадобутрола для идентификации пика, содержащего примесь С, и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФА до метки.

Примечание

Примесь С: 2,2',2"-(1,4,7,10-тетраазациклододекан-1,4,7-триил)триацетат гадолиния(III).

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель фенилгексилсилильный эндкепированный для хроматографии, 100 Å, 3 мкм; |  |
Температура колонки | 50 °С; |  |
Температура образца | 10 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | детектор заряженных аэрозолей, 100 пА; |  |
Объём пробы | 40 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0−15 | 100 | 0
15−30 | 100 → 75 | 0 → 25
30–35 | 75 → 100 | 25 → 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Гадобутрол – 1 (около 11 мин); примесь С – около 1,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси С используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу гадобутрола для идентификации пика и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси С и гадобутрола должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика гадобутрола должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать шестикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,6 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,03 %).

Свободный гадолиний. Не более 0,01 % в пересчёте на безводное вещество. Определение проводят методом титриметрии.

Буферный раствор. Растворяют 50,0 г натрия ацетата в 10,0 мл уксусной кислоты ледяной, разбавляют водой до 800 мл, доводят значение рН до 5,00 натрия гидроксида раствором 0,1 М или уксусной кислотой ледяной, количественно переносят раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор индикатора. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 30,0 мл буферного раствора, прибавляют 3,0 мл ксиленолового оранжевого раствора 0,05 % и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор гадолиния сульфата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 93,5 мг гадолиния сульфата октагидрата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 5,0 мл раствора гадолиния сульфата и 30 мл воды, обрабатывая ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 10,0 мл раствора индикатора и доводят значение pH до 5,0 хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М.

Стандартный раствор. Готовят так же, как и испытуемый раствор, но без навески субстанции.

Раствор натрия эдетата 0,00025 М. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают натрия эдетата раствора 0,1 М и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый и стандартный растворы титруют 0,00025 М раствором натрия эдетата. Конечную точку титрования определяют спектрофотометрически (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Используют автотитратор, снабжённый спектрофотометрическим детектором при длине волны 572±2 нм.

Содержание свободного гадолиния определяют по разнице объёмов титранта, израсходованного на титрование испытуемого и стандартного растворов.

1 мл 0,00025 М раствора натрия эдетата соответствует 0,03931 мг гадолиния.

Вода. От 2,0 % до 7,0 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции и испаритель при температуре 220 °С.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 26 ЕЭ на 1 г гадобутрола (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

1. Гадобутрол. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, полученного в испытании «Родственные примеси», и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор стандартного образца гадобутрола моногидрата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают около 50 мг фармакопейного стандартного образца гадобутрола моногидрата, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.

Хроматографические условия

- Детектор спектрофотометрический, 195 нм.

Хроматографируют раствор стандартного образца гадобутрола моногидрата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца гадобутрола моногидрата:

- фактор асимметрии пика (AS) гадобутрола должен быть от 0,8 до 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика гадобутрола должно быть не более 2,0 % (6 определений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику гадобутрола, должна составлять не менее 8000 теоретических тарелок.

Содержание гадобутрола C18H31GdN4O9 в субстанции в процентах в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика гадобутрола на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика гадобутрола на хроматограмме раствора стандартного образца гадобутрола моногидрата;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца гадобутрола моногидрата, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание гадобутрола в фармакопейном стандартном образце гадобутрола моногидрата,%.

2. Гадолиний. Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия»).

Примечание – В качестве стандартных растворов иттрия и гадолиния используют готовые стандартные растворы с аттестованным значениями концентрации соответствующих элементов.

Раствор модификатора. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 100,0 мл иттрия стандартного раствора 1 г/л, прибавляют 50 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 150 мл воды, прибавляют 7,5 мл раствора модификатора, 2 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Калибровочные растворы гадолиния. В мерные колбы вместимостью 50 мл помещают гадолиния стандартный раствор 1 мкг/мл в количестве 2 мл, 2,5 мл и 3 мл, прибавляют по 1,5 мл раствора модификатора, по 0,5 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки, получая растворы с содержанием гадолиния 0,08 мкг/мл; 0,09 мкг/мл; и 0,1 мкг/мл соответственно.

Контрольный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,5 мл раствора модификатора, прибавляют 0,5 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Условия испытания

Атомизатор | индуктивно связанная плазма; |  |
Длина волны | 217,07 нм, 217,77 нм, 219,10 нм, 226,11 нм (гадолиний); 224,31 нм (иттрий). |  |

Определяют эмиссию контрольного, калибровочных и испытуемого растворов. Для каждого раствора проводят не менее 5 измерений.

Строят калибровочную кривую, откладывая по оси абсцисс концентрацию в мг/мл, а по оси ординат – значения эмиссии. Определяют концентрацию гадолиния в испытуемом растворе по калибровочной кривой, используя средние значения эмиссии, полученные при разных длинах волн.

Содержание гадолиния в субстанции в процентах в пересчёте на безводный и свободный от остаточных органических растворителей гадобутрол (Х) вычисляют по формуле:

где C – концентрация гадолиния в испытуемом растворе, определенная по калибровочной кривой, мг/мл;
a – навеска субстанции, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте в герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0077 Галантамина гидробромид

Галантамин
Galantamini hydrobromidum

Взамен ФС.2.1.0077.18

##### Определение

(4aS,6R,8aS)-11-Метил-3-метокси-5,6,9,10,11,12-гексагидро-4aH-[1]бензофуро[3a,3,2-ef][2]бензазепин-6-ола гидробромид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % галантамина гидробромида C17H21NO3·HBr в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый мелкокристаллический или аморфный порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в воде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в 96 % спирте.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца галантамина гидробромида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика галантамина на хроматограмме раствора стандартного образца галантамина гидробромида («Количественное определение»).

3. Качественная реакция. К 10 мг субстанции в фарфоровой чашке прибавляют 0,1 мл раствора молибдата аммония в концентрированной серной кислоте, должно появиться синевато-зелёное окрашивание.

4. Качественная реакция. Раствор субстанции 2 % должен давать характерную реакцию Б на бромиды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –88 до –95 в пересчёте на сухое вещество (2 % водный раствор, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 100 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,5 до 6,5 (2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

1. Энантиомерная чистота (примесь F)

Определение проводят методом капиллярного электрофореза (ОФС «Капиллярный электрофорез»).

Растворы используют свежеприготовленными.

Буферный электролит. Растворяют 8,9 г динатрия гидрофосфата дигидрата в 900 мл воды и доводят рН раствора до 3,0 фосфорной кислотой концентрированной. В мерной колбе вместимостью 1000 мл доводят объём раствора водой до метки.

Разделяющий буферный раствор. Растворяют 0,196 г α-циклодекстрина в 10,0 мл буферного электролита и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,22 мкм.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки, фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,22 мкм.

Раствор для проверки разделительной способности электрофоретической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца рацемической смеси галантамина, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки, фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,22 мкм.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки, фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,22 мкм.

Контрольный раствор. Фильтруют воду через мембранный фильтр с размером пор 0,22 мкм.

Примечание

Примесь F:
(4aR,6S,8aR)-11-метил-3-метокси-5,6,9,10,11,12-гексагидро-4aH-[1]бензофуро[3a,3,2-ef][2]бензазепин-6-ол [60384-53-4].

Электрофоретические условия

Капилляр | плавленый кварц без покрытия, эффективная длина около 50 см, внутренний диаметр 75 мкм; |  |
Температура капилляра | 20 °С; |  |
Прекондиционирование капилляра | 5 мин вода при 137,9 кПа; 5 мин разделяющий буферный раствор при 137,9 кПа; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 214 нм; |  |
Инъекция | 4 сек при 3,45 Па; |  |
Напряжение | 15 кВ; |  |
Время разделения | 35 мин. |  |

Относительное время удерживания соединений. Галантамин – 1 (около 18 мин); примесь F – около 1,05.

Пригодность электрофоретической системы. На электрофореграмме раствора для проверки разделительной способности электрофоретической системы разрешение между пиками галантамина и примеси F должно быть не менее 2,5.

Допустимое содержание примесей. На электрофореграмме испытуемого раствора площадь пика примеси F не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 % ).

2. Примеси А, Е

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») в субстанции, получаемой из лекарственного растительного сырья.

Подвижная фаза А (ПФА). В мерной колбе вместимостью 1000 мл растворяют 3,15 г аммония формиата в 900 мл воды, доводят значение рН муравьиной кислотой безводной до 3,8. и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Смесь растворителей. ПФБ—ПФА 100:900.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 12 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл смеси растворителей и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 5 мг фармакопейного стандартного образца галантамина, полученного из лекарственного растительного сырья, для проверки пригодности системы, содержащего примеси А и Е, в 5,0 мл смеси растворителей.

Примечание

Примесь А:
(4aS,8aS)-11-метил-3-метокси-5,6,9,10,11,12-гексагидро-4aH-[1]бензофуро[3a,3,2-ef][2]бензазепин-6-он
[510-77-0].

Примесь E:
(4aS,6R,8aS)-3-метокси-5,6,9,10,11,12-гексагидро-4aH-[1]бензофуро[3a,3,2-ef][2]бензазепин-6-ол
[41303-74-6].

Хроматографические условия

Колонка | 25 × 0,46 см, силикагель октилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 287 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 95 | 5
5–20 | 95 → 80 | 5 → 20
20–23 | 80 → 50 | 20 → 50
23–31 | 50 → 20 | 50 → 80
31–35 | 20 | 80

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения А и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Галантамин – 1 (около 12 мин); примесь Е – около 0,8; примесь А – около 1,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А и Е используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу галантамина, полученного из лекарственного растительного сырья, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между галантамином и примесью Е должно быть не менее 5,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,15 %);

- площадь пика примеси Е не должна быть более чем в 6 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,6 %);

- площадь пика любой другой примеси должна быть не более площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать восьмикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,8 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (менее 0,05 %).

3. Примеси C, D

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») в субстанции, получаемой синтетическим способом.

Подвижная фаза А (ПФА). В мерной колбе вместимостью 1000 мл растворяют 0,79 г динатрия гидрофосфата дигидрата и 2,46 г натрия дигидрофосфата безводного в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. К 950 мл полученного раствора прибавляют 50 мл метанола.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Смесь растворителей. В мерной колбе вместимостью 1000 мл доводят 50 мл метанола водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 50 мл смеси растворителей и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 2,5 мг фармакопейного стандартного образца галантамина, полученного синтетическим способом, для проверки пригодности системы, содержащего примеси С и D, в 5,0 мл смеси растворителей.

Примечание

Примесь C:
(4aS,6R,8aS)-11-метил-3-метокси-5,6,7,8,9,10,11,12-октагидро-4aH-[1]бензофуро[3a,3,2-ef][2]бензазепин-6-ол
[21133-52-8].

Примесь D:
(4aS,8aS)-11-метил-3-метокси-9,10,11,12-тетрагидро-4aH-[1]бензофуро[3a,3,2-ef][2]бензазепин
[664995-65-7].

Хроматографические условия

Колонка | 10 × 0,46 см, силикагель октадецилсилильный, 3,5 мкм; |  |
Температура колонки | 55 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–6 | 100 | 0
6–20 | 100 → 95 | 0 → 5
20–35 | 95 → 85 | 5 → 15
35–50 | 85 → 80 | 15 → 20

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Галантамин – 1 (около 16 мин); примесь С – около 0,8; примесь D – около 2,1.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей С и D используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу галантамина, полученного синтетическим способом, для проверки пригодности системы.

Пригодность хроматографической системы .На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности разрешение (RS) между пиками галантамина и примеси С должно быть не менее 4,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси С не должна превышать 0,8 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,4 %);

- площадь пика примеси D не должна превышать 0,8 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,4 %);

- площадь пика любой другой примеси должна быть не более 0,2 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Палладий. Не более 0,001 %. Определение проводят методом ААС (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия») в субстанции, получаемой синтетическим способом.

Испытуемый раствор. Растворяют 1,0 г субстанции в 20 мл азотной кислоты концентрированной и выдерживают 1 ч. Упаривают на водяной бане под вытяжкой досуха. Прибавляют 0,125 мл азотной кислоты концентрированной, 0,375 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и 2 мл воды. Осторожно нагревают до растворения остатка и выдерживают до охлаждения. Доводят объём раствора водой до 10,0 мл.

Калибровочные растворы. Готовят калибровочные растворы, содержащие 2 мкг/мл, 1 мкг/мл и 0,2 мкг/мл палладия путём доведения соответственно 2 мл, 1 мл и 0,2 мл стандартного раствора палладия 20 мкг/мл до 20,0 мл.

Источник излучения. Палладиевая лампа с полым катодом.

Длина волны. 247,6 нм.

Определяют эффективные значения атомной абсорбции испытуемого раствора и калибровочных растворов. По калибровочной прямой рассчитывают концентрацию палладия в субстанции.

Сульфаты. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Растворяют 0,1 г субстанции в 10 мл воды.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 17,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

* Пирогенность. Субстанция должна быть апирогенной (ОФС «Пирогенность»). Тест-доза: 1 мг субстанции в 2 мл натрия хлорида раствора 0,9 % на 1 кг массы кролика.

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях, описанных в пункте 2 или 3 показателя «Родственные примеси», в зависимости от способа получения субстанции.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в смеси растворителей и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца галантамина гидробромида. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца галантамина гидробромида, растворяют в смеси растворителей и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца галантамина гидробромида и испытуемый раствор.

Содержание галантамина гидробромида C17H21NO3·HBr в субстанции в процентах в пересчёте на сухое вещество (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика галантамина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика галантамина на хроматограмме стандартного раствора;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца галантамина гидробромида, мг;
P – содержание галантамина гидробромида в фармакопейном стандартном образце галантамина гидробромида,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0078 Галоперидол

Взамен ФС.2.1.0078.18

##### Определение

4-[4-Гидрокси-4-(4-хлорфенил)пиперидин-1-ил]-1-(4-фторфенил)бутан-1-он.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % галоперидола C21H23ClFNO2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в хлороформе, мало растворим в спирте 96 % и метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца галоперидола.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 300 нм должен иметь максимум при 245 нм.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в смеси спирт 96 %—хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М в соотношении 9:1 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора смесью спирт 96 %—хлористоводородная кислота раствор 0,1 М в соотношении 9:1 до метки.

3. Качественная реакция. В платиновый тигель помещают 0,1 г субстанции, сплавляют с 0,5 г натрия карбоната безводного над открытым огнем в течение 10 мин и охлаждают до комнатной температуры. К полученному остатку прибавляют 5 мл азотной кислоты разведенной 12,5 % и фильтруют. К 1,0 мл полученного фильтрата прибавляют 1,0 мл воды. Полученный раствор должен давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 150 до 153 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1). Субстанцию предварительно высушивают при 105 °С до постоянной массы.

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 20 мл 0,5 % раствора молочной кислоты должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси

Примесь D. Не более 1 %. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции (точная навеска), растворяют в 30 мл метанола, прибавляют 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и доводят объём раствора метанолом до метки. Оптическая плотность полученного раствора, измеренная на спектрофотометре при 335 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, должна быть не более 0,3.

Примечание

Примесь D:
4-[4-гидрокси-4-(4-хлорфенил)пиперидин-1-ил]-1-{4-[4-гидрокси-4-(4-хлорфенил)пиперидин-1-ил]фенил}бутан-1-он
[67987-08-0].

Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленным и защищают от света.

Подвижная фаза А (ПФА). Тетрабутиламмония гидросульфата раствор 1,7 %.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная навеска) субстанции и 2,5 мг фармакопейного стандартного образца бромперидола, растворяют в 30 мл метанола и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии 3 мкм; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 4-кратное от времени удерживания основного пика |  | .

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,% |
--- | --- | --- | ---
0–15 | 90 → 50 | 90 → 50 | Линейный градиент
15–20 | 50 | 50 | Изократический
20–25 | 50 → 90 | 50 → 10 | Линейный градиент
25–0 | 90 | 10 | Изократический

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Галоперидол – 1 (около 5,5 мин); бромперидол – около 1,2.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками галоперидола и бромперидола должно быть не менее 3,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси должна быть не более площади пика галоперидола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика галоперидола на хроматограмме раствора сравнения (не более 1 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 10 % от площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 %. (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании ОФС «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 17,5 ЕЭ на 1 мг субстанция. Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции в спирте 96 %.с концентрацией галоперидола 10 мг/мл.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 15 мл уксусной кислоты ледяной, прибавляют 5 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 37,59 мг галоперидола C21H23ClFNO2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0392 Галоперидола деканоат

Галоперидол
Haloperidoli decanoas

Вводится впервые

##### Определение

[4-(4-Хлорфенил)-1-[4-(4-фторфенил)-4-оксобутил]пиперидин-4-ил]деканоат.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % галоперидола деканоата C31H41ClFNO3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в спирте 96 %, метаноле и метиленхлориде, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца галоперидола деканоата.

2. Качественная реакция. В фарфоровый тигель помещают 0,1 г субстанции, сплавляют с 0,5 г натрия карбоната безводного над открытым огнём в течение 10 мин и охлаждают до комнатной температуры. К полученному остатку прибавляют 5 мл азотной кислоты разведённой 12,5 % и фильтруют. К 1,0 мл полученного фильтрата прибавляют 1,0 мл воды. Полученный раствор должен давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор субстанции 10 % в метиленхлориде должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном B5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы готовят непосредственно перед использованием и защищают от света.

Подвижная фаза А (ПФА). Тетрабутиламмония гидросульфата раствор 0,08 М.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца галоперидола деканоата и 2,5 мг фармакопейного стандартного образца бромперидола деканоата, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь А:
{1-[4-(4-фторфенил)-4-оксобутил]-4-фенилпиперидин-4-ил}деканоат
[1797824-64-6].

Примесь В:
[4-(4-хлорфенил)-1-[4-(2-фторфенил)-4-оксобутил]пиперидин-4-ил]деканоат.

Примесь С:
[4-(4-хлорфенил)-1-[4-(3-этил-4-фторфенил)-4-оксобутил]пиперидин-4-ил]деканоат
[1797982-02-5].

Примесь D:
[4-(4-хлорфенил)-1-(4-{4-[4-(4-хлорфенил)-4-гидроксипиперидин-1-ил]фенил}-4-оксобутил)пиперидин-4-ил]деканоат
[17970008-46-8].

Примесь E:
[4-(4ʹ-хлорбифенил-4-ил)-1-[4-(4-фторфенил)-4-оксобутил]пиперидин-4-ил]деканоат
[1796933-22-6].

Примесь F:
[4-(3ʹ-хлорбифенил-4-ил)-1-[4-(4-фторфенил)-4-оксобутил]пиперидин-4-ил]деканоат
[1797131-50-0].

Примесь G:
4-[4-гидрокси-4-(4-хлорфенил)пиперидин-1-ил]-1-(4-фторфенил)бутан-1-он
(галоперидол) [52-86-8].

Примесь H:
[4-(4-хлорфенил)-1-[4-(4-фторфенил)-4-оксобутил]пиперидин-4-ил]октаноат
[1134807-34-3].

Примесь I:
[4-(4-хлорфенил)-1-[4-(4-фторфенил)-4-оксобутил]пиперидин-4-ил]нонаноат.

Примесь J:
[4-(4-хлорфенил)-1-[4-(4-фторфенил)-4-оксобутил]пиперидин-4-ил]ундеканоат
[1797983-18-6].

Примесь K:
[4-(4-хлорфенил)-1-[4-(4-фторфенил)-4-оксобутил]пиперидин-4-ил]додеканоат
[65135-24-2].

Примесь L: 1-(4-фторфенил)этанон [403-42-9].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 3 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–30 | 80 → 40 | 20 → 60
30–35 | 40 | 60
35–40 | 40 → 80 | 60 → 20

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Галоперидола деканоат – 1 (около 24 мин); примесь G – около 0,1; примесь L – около 0,2; примесь H – около 0,8; примесь I – около 0,88; примесь A – около 0,9; примесь B – около 0,98; бромперидола деканоат – около 1,02; примесь J – около 1,1; примесь C – около 1,15; примесь D – около 1,2; примесь K – около 1,22; примесь F – около 1,26; примесь E – около 1,28.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, С, D, E, F, G, H, I, J и K используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу галоперидола деканоата для идентификации примесей.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками галоперидола деканоата и бромперидола деканоата должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A, B, С, D, E, F, G, H, I, J и K не должна превышать площадь пика галоперидола деканоата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,2 площади пика галоперидола деканоата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь пика галоперидола деканоата на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади основного пика галоперидола деканоата на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 30 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции и платиновый тигель.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 2,3 ЕЭ на 1 мг галоперидола деканоата (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции в спирте 96 % с концентрацией галоперидола деканоата 10 мг/мл.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,425 г (точная навеска) субстанции в 50 мл смеси уксусная кислота безводная—метилэтилкетон 1:7 и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до перехода окраски в зелёную (индикатор – 0,2 мл нафтолбензеина раствора 0,2 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 53,01 мг галоперидола деканоата C31H41ClFNO3.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0079 Галотан

Взамен ФС.2.1.0079.18

##### Определение

(2RS)-2-Бром-1,1,1-трифтор-2-хлорэтан.

##### Свойства

Описание. Прозрачная, бесцветная, тяжёлая, подвижная, негорючая, легко летучая жидкость с характерным запахом.

* Не воспламеняется. Содержит 0,01 % (м/м) тимола, добавляемого в качестве стабилизатора.

Растворимость. Смешивается с этанолом, эфиром и с летучими и нелетучими маслами, мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в виде жидкой плёнки, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца галотана.

2. Качественная реакция. Нагревают 0,5 мл субстанции с 50 мг расплавленного металлического натрия, охлаждают, осторожно прибавляют 2 мл воды, раствор фильтруют и к фильтрату прибавляют 0,5 мл уксусной кислоты ледяной. К 0,1 мл полученного раствора прибавляют 0,2 мл смеси, состоящей из равных объёмов свежеприготовленного раствора ализарина S и цирконила нитрата раствора 0,1 %; красный цвет раствора должен перейти в светло-жёлтый.

3. Качественная реакция. К 5 мл субстанции прибавляют 5 мл серной кислоты концентрированной; субстанция должна находиться в нижнем слое (отличие от хлороформа и трихлорэтилена).

##### Испытания

Плотность. От 1,865 до 1,877 г/см3 (ОФС «Плотность», метод 1).

Показатель преломления. От 1,3695 до 1,3705 (ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)»).

Температура перегонки. Субстанция должна полностью перегоняться при температуре 49–51 °С (ОФС «Температурные пределы перегонки и точка кипения»). При этом в пределах 1 °С должно отгоняться не менее 95 % (о/о).

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. Субстанция галотана.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл фармакопейного стандартного образца примеси F (1,1,2-трифтор-1,2,2-трихлорэтана [76-13-1]), доводят объём раствора испытуемым раствором до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора испытуемым раствором до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора испытуемым раствором до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В качестве раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы используют раствор сравнения.

Хроматографические условия

Колонка | диатомит силанизированный для газовой хроматографии 2,75 м × 5 мм, первые 1,8 м которого пропитаны 30 % (м/м) макроголом 400, а оставшаяся часть – 30 % динонилфталатом; |  |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | азот для хроматографии; |  |
Линейная скорость | 30 мл/мин; |  |
Объём пробы | 5,0 мкл; |  |
Температура | Колонка | 50 °С; |
| Инжектор | 50 °С; |
| Детектор | 250 °С. |

Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения разрешение ® между пиками галотана и примеси F должно быть не менее 2.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать площадь пика примеси F на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,005 %).

Тимол. От 0,008 до 0,012 %. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,10 г левоментола или ментола рацемического, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. К 20,0 мл субстанции прибавляют 5,0 мл раствора внутреннего стандарта.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца тимола, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. К 20,0 мл полученного раствора прибавляют 5,0 мл раствора внутреннего стандарта.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 15 м × 0,53 мм, покрытая слоем поли(диметил)силоксана, 1,5 мкм; |  |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | азот для газовой хроматографии; |  |
Линейная скорость | 15 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1 мкл; |  |
Температура | Колонка | 150 °С; |
| Инжектор | 170 °С; |
| Детектор | 200 °С. |

Хроматографируют испытуемый раствор и раствор сравнения.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора разрешение ® между пиками тимола и ментола должно быть не менее 2,0.

Содержание тимола в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика тимола на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика тимола на хроматограмме стандартного раствора;
Si1 – площадь пика ментола на хроматограмме испытуемого раствора;
Si0 – площадь пика ментола на хроматограмме стандартного раствора;
V1 - объём субстанции, мл;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца тимола, г;
P - содержание тимола в фармакопейном стандартном образце тимола,%;
ρ – плотность препарата, г/см3.

Кислотность или щёлочность. Встряхивают 20 мл субстанции в течение 3 мин с 20 мл свежепрокипячённой и охлаждённой воды. На нейтрализацию водного слоя должно расходоваться не более 0,1 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида или 0,6 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты (индикатор – 0,2 мл бромкрезолового пурпурного раствор 0,04 %).

Хлориды и бромиды. Встряхивают 10 мл субстанции с 20 мл воды в течение 3 мин и оставляют до полного разделения слоёв жидкостей.

К 5 мл водного слоя прибавляют 5 мл воды, 0,05 мл азотной кислоты и 0,25 мл раствора серебра нитрата 2 %; не должна появляться опалесценция.

Свободные хлор и бром. К 10 мл этого же водного слоя прибавляют 1 мл бесцветного раствора калия йодида 10 % и 0,1 мл раствора крахмала 0,1 %; не должно появляться синее окрашивание.

Нелетучий остаток. Не более 0,002 %. Выпаривают 50 мл субстанции на водяной бане досуха. Сухой остаток после высушивания при 100–105 °С в течение 2 ч не должен превышать 1 мг.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0695 Ганцикловир

Ганцикловир
Ganciclovirum

Вводится впервые

C9H13N5O4 [82410-32-0] | М.м. 255,23

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

2-Амино-9-{(1,3-дигидроксипропан-2-ил)окси]метил}-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % ганцикловира C9H13N5O4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен. Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Мало растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96 %.

* Растворяется в разбавленных растворах минеральных кислот и щелочей.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ганцикловира.

- Если спектры различаются, 0,1 г субстанции и фармакопейного стандартного образца ганцикловира по отдельности растворяют в 3,6 мл воды при 80 °С, охлаждают на ледяной бане, фильтруют, высушивают осадок при температуре 105 °С в течение 3 ч и записывают спектры.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца ганцикловира. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мг фармакопейного стандартного образца ганцикловира, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора должен соответствовать спектру раствора стандартного образца ганцикловира.

##### ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность раствора. Раствор 1,25 г субстанции в 25 мл натрия гидроксида раствора 1 М должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—трифторуксусной кислоты раствор 0,05 % 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг субстанции, растворяют в ПФ, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца ганцикловира. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 3 мг фармакопейного стандартного образца ганцикловира, растворяют в ПФ, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Содержимое флакона с фармакопейным стандартным образцом смеси примесей ганцикловира, содержащим примеси А, В, С, D, Е и F, растворяют в 1,0 мл раствора стандартного образца ганцикловира.

Примечание

Примесь А:
2-амино-9-{(2-хлорпроп-2-ен-1-ил)окси]метил}-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он [1797982-93-4].

Примесь В:
[(2RS)-2-[(2-амино-6-оксо-1,6-дигидро-9H-пурин-9-ил)метокси]-3-гидроксипропил]пропаноат [194159-18-7].

Примесь С:
2-амино-9-({[(2RS)-1-гидрокси-3-хлорпропан-2-ил]окси}метил)-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он [108436-36-8].

Примесь D:
2-амино-9-({(1,3-дигидроксипропан-2-ил)окси]метокси}метил)-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он [1346598-14-8].

Примесь Е:
2-амино-9-{(2,3-дигидроксипропил)окси]метил}-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он [86357-09-7].

Примесь F (гуанин): 2-амино-1,7-дигидро-6Н-пурин-6-он [73-40-5].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель для хроматографии, сильный катионит; 10 мкм;
Температура колонки | 40 °С;
Скорость потока | 1,5 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм;
Объём пробы | 20 мкл;
Время хроматографирования | 2,5-кратное от времени удерживания пика ганцикловира.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ганцикловир – 1 (около 14 мин); примесь А – около 0,6; примесь В – около 0,67; примесь С – около 0,71; примесь D – около 0,8; примесь Е – около 0,9; примесь F – около 2,0.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В, С, D, E и F используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу смеси примесей ганцикловира.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы: отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси Е и ганцикловира должно быть не менее 5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь В – 1,3; примесь F – 0,7.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси F не должна более чем в 4 раза превышать площадь пика ганцикловира на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,4 %);

- площадь пика примеси В не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика ганцикловира на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика каждой из примесей А, С, D и Е не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика ганцикловира на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика ганцикловира на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать шестикратную площадь пика ганцикловира на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,3 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,03 %).

Вода. Не более 4,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции и в качестве растворителя метанол. Растворитель прибавляют до образования густой взвеси и заменяют после каждого титрования.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,84 ЕЭ на 1 мг ганцикловира (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 0,5 мг ганцикловира в 1 мл воды для БЭТ.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 10 мл муравьиной кислоты безводной, доводят объём раствора уксусной кислотой безводной до 60 мл и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 25,52 мг ганцикловира C9H13N5O4.

##### ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0649 Гексэстрол

Взамен ФС 42-0028-00

##### Определение

4,4′-[(3R,4S)-Гексан-3,4-диил]дифенол.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % гексэстрола C18H22O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 %, мало растворим в оливковом масле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 200 мл, помещают 10 мг субстанции, растворяют в 10 мл спирта 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 240 до 310 нм должен иметь максимум при 280 нм, минимум при 247 нм и плечо в интервале от 283 до 287 нм.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в 10 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 330 нм должен иметь максимумы при 240 нм и 295 нм и минимум при 270 нм.

3. Качественная реакция. Растворяют 2 мг субстанции в 4 мл хлороформа, прибавляют 2 мл серной кислоты концентрированной и 0,1 мл формальдегида раствора 35 %; нижний слой должен окраситься в тёмно-красный цвет.

##### Испытания

Температура плавления. От 184 до 187 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 25 мл спирта 96 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетон—гексан—бензол 20:20:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца гексэстрола А. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,025 г (точная навеска) стандартного образца гексэстрола, растворяют в 10 мл спирта 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца гексэстрола Б. Растворяют 1 мл полученного раствора стандартного образца гексэстрола А растворяют в 9 мл спирта 96 %.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10,0 мг дифенилметанола, растворяют в растворе стандартного образца гексэстрола А и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

На линию старта пластинки наносят 10 мкл испытуемого раствора (100 мкг), 5 мкл (0,5 мкг), 2,5 мкл (0,25 мкг), 1 мкл (0,1 мкг) раствора стандартного образца гексэстрола Б и 10 мкл раствора для проверки пригодности хроматографической системы (по 10 мкг гексэстрола и дифенилметанола). Пластинку с нанесёнными пробами сушат при комнатной температуре в течение 3 мин, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 2 ч ПФ, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей в течение 5 мин. Далее пластинку обрабатывают фосфорномолибденовой кислоты спиртовым раствором 5 %, выдерживают при температуре 100–105 °С в течение 10 мин и просматривают при дневном свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца гексэстрола Б, содержащего 0,1 мкг, должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции гексэстрола.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы должны обнаруживаться две разделённые зоны адсорбции: зона адсорбции гексэстрола и зона адсорбции дифенилметанола.

Суммарное содержание примесей, оцененное по совокупности величины и интенсивности окраски их зон адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора в сравнении с зонами адсорбции на хроматограммах раствора стандартного образца гексэстрола Б не должно превышать 0,5 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 4,37 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции в спирте 96 % с концентрацией 10 мг/мл.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В колбу, снабжённую обратным холодильником, помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 5 мл уксусного ангидрида раствора 12 % (о/о) в безводном пиридине и кипятят в течение 45 мин. Раствор охлаждают через обратный холодильник, прибавляют 25 мл воды, выдерживают в течение 15 мин и титруют при энергичном встряхивании 0,5 М раствором натрия гидроксида (индикатор – 0,1 мл фенолфталеина раствора 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,5 М раствора натрия гидроксида соответствует 67,59 мг гексэстрола C18H22O2.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0081 Гемцитабина гидрохлорид

Гемцитабин
Gemcitabini hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0081.18

##### Определение

4-Амино-1-(2-дезокси-2,2-дифтор-β-D-эритро-пентофуранозил)пиримидин-2(1H)-она гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % гемцитабина гидрохлорида C9H11F2N3O4·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Растворим в воде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в ацетоне.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гемцитабина гидрохлорида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика гемцитабина на хроматограмме раствора стандартного образца гемцитабина гидрохлорида (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +43,0 до +50,0 в пересчёте на сухое вещество (1,0 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 20 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», должна выдерживать сравнение с эталоном ВY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

pH. От 2,0 до 3,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). 0,1 М фосфатный буферный раствор рН 2,5.

Подвижная фаза В (ПФБ). Метанол.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гемцитабина гидрохлорида, 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Во флакон (колбу) вместимостью 10 мл помещают 50,0 мг субстанции, прибавляют 4 мл калия гидроксида раствора в метаноле 3 М и обрабатывают на ультразвуковой бане в течение 5 мин. Флакон закрывают и нагревают при 55 0С не менее 6 ч для получения примеси В. После охлаждения переносят содержимое флакона в мерную колбу вместимостью 100 мл, последовательно промывая флакон раствором фосфорной кислоты 1 %. Доводят объём раствора в мерной колбе тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь А (цитозин): 4-аминопиримидин-2(1H)-он [71-30-7].

Примесь В (гемцитабина α-аномер): 4-амино-1-(2-дезокси-2,2-дифтор-α-D-эритро-пентофуранозил)пиримидин-2(1H)-он [95058-85-8].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 275 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА, % | ПФБ, %
--- | --- | ---
0–8 | 97 | 3
8–13 | 97 → 50 | 3 → 50
13–20 | 50 | 50
20–25 | 50 → 97 | 50 →3
25–30 | 97 | 3

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Гемцитабин – 1 (около 8 мин); примесь А – около 0,4; примесь B – около 0,7.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси B и гемцитабина должно быть не менее 8,0.

На хроматограмме стандартного раствора относительное стандартное отклонение площади пика гемцитабина и примеси A должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание каждой из примесей A, B в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей A, B на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика каждой из примесей A, B на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца каждой из примесей A, B мг;
P – содержание примеси A, B в фармакопейном стандартном образце примеси A, B, соответственно,%.

Содержание любой примеси в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика гемцитабина на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца гемцитабина гидрохлорида, мг;
P – содержание гемцитабина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце гемцитабина гидрохлорида,%.

Допустимое содержание примесей:

- примеси А, В − не более 0,1 % каждая;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,2 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,05 ЕЭ на 1 мг гемцитабина гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца гемцитабина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гемцитабина гидрохлорида, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси B и гемцитабина должно быть не менее 8,0;

- фактор ассиметрии пика (AS) гемцитабина должен быть не более 1,5.

На хроматограмме раствора стандартного образца гемцитабина гидрохлорида:

- относительное стандартное отклонение площади пика гемцитабина должно быть не более 1,0 % (6 введений).

Содержание гемцитабина гидрохлорида C9H11F2N3O4·HCl в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика гемцитабина гидрохлорида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика гемцитабина гидрохлорида на хроматограмме раствора стандартного образца гемцитабина гидрохлорида;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца гемцитабина гидрохлорида, мг;
W – содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце гемцитабина гидрохлорида,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0082 Гентамицина сульфат

Гентамицин
Gentamicini sulfas

Взамен ФС.2.1.0082.18

C1a | R=CH2NH2 | C19H39N5O7·H2SO4 | М.м. 547,6
C1 | R=CH(CH3)NHCH3 | C21H43N5O7·H2SO4 | М.м. 575,7
C2 | R=(R)-CH(CH3)NH2 | C20H41N5O7·H2SO4 | М.м. 561,6
C2a | R=(S)-CH(CH3)NH2 | C20H41N5O7·H2SO4 | М.м. 561,6
C2b | R=CH2NHCH3 | C20H41N5O7·H2SO4 | М.м. 561,6

##### Определение

Смесь сульфатов гентамицина C1, гентамицина C1A, гентамицина C2A, гентамицина C2B и гентамицина C2, производимых Micromonospora purpurea.

Гентамицин C1a:
O-3-Дезокси-4-C-метил-3-(метиламино)-β-L-арабинопиранозил-(1→6)-O-[2,6-диамино-2,3,4,6-тетрадезокси-α-D-эритро-гексопиранозил-(1→4)]-2-дезокси-D-стрептамина сульфат (1:1).

Гентамицин C1:
O-3-дезокси-4-C-метил-3-(метиламино)-β-L-арабинопиранозил-(1→6)-O-[2-амино-2,3,4,6,7-пентадезокси-6-(метиламино)-α-D-эритро-гептопиранозил-(1→6)]-2-дезокси-D-стрептамина сульфат (1:1).

Гентамицин C2:
O-3-дезокси-4-C-метил-3-(метиламино)-β-L-арабинопиранозил-(1→6)-O-[(6R)-2,6-диамино-2,3,4,6,7-пентадезокси-α-D-эритро-гептопиранозил-(1→4)]-2-дезокси-D-стрептамина сульфат (1:1).

Гентамицин C2a:
O-3-дезокси-4-C-метил-3-(метиламино)-β-L-арабинопиранозил-(1→6)-O-[(6S)-2,6-диамино-2,3,4,6,7-пентадезокси-α-D-эритро-гептопиранозил-(1→4)]-2-дезокси-D-стрептамина сульфат (1:1).

Гентамицин C2b:
O-3-дезокси-4-C-метил-3-(метиламино)-β-L-арабинопиранозил-(1→6)-O-[2-амино-2,3,4,6-тетрадезокси-6-метил-6-(метиламино)-α-D-эритро-гексопиранозил-(1→4)]-2-дезокси-D-стрептамина сульфат (1:1).

1 мкг гентамицина сульфата соответствует специфической активности, равной одной единице действия (ЕД).

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ВЭЖХ. Время удерживания пяти основных пиков на хроматограмме испытуемого раствора Б должно соответствовать времени удерживания пяти основных пиков гентамицина, на хроматограмме раствора для идентификации пиков (раздел «Компонентный состав»).

2. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»)

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 %—метанол—хлороформ 33:33:33. После смешивания используют нижний слой.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают около 25 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца гентамицина сульфата. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают около 25 мг фармакопейного стандартного образца гентамицина сульфата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем де растворителем до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 10 мкл (50 мкг) испытуемого раствора и раствора стандартного образца гентамицина сульфата. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт подвижной фазы пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают нингидрина раствором 0,25 %, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 110 °С в течение 5 мин и просматривают в видимом свете.

- На хроматограмме испытуемого раствора должны наблюдаться три основные зоны адсорбции, соответствующие по положению, величине и интенсивности поглощения основным зонам адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца гентамицина сульфата.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +107 до +121 в пересчёте на безводное вещество (10 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,8 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», не должна превышать интенсивности наиболее близко подходящего по цвету эталона сравнения 6 (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

рН раствора. От 3,5 до 5,5 (раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Компонентный состав. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор А. Натрия гидроксида раствор насыщенный, свободный от карбонатов—вода 1:25.

Подвижная фаза (ПФ). К 900 мл воды прибавляют 7,0 мл трифторуксусной кислоты, 0,25 мл пентафторпропановой кислоты, 4,0 мл натрия гидроксида раствора насыщенного, свободного от карбонатов, перемешивают и доводят рН раствором А до 2,60. Полученный раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл, прибавляют 15 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,25 г гентамицина сульфата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для идентификации пиков. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца гентамицина для идентификации пиков, содержащего примесь В, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца сизомицина сульфата. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца сизомицина сульфата (примесь А), растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца сизомицина сульфата и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца сизомицина сульфата, прибавляют 5,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для постколоночной дериватизации. Раствор А, предварительно дегазированный, безимпульсно добавляется к элюату колонки с помощью смешивающей полимерной петли объёмом 375 мкл.

Примечание

Примесь A:
O-3-дезокси-4-C-метил-3-(метиламино)-β-L-арабинопиранозил-(1→6)-O-[2,6-диамино-2,3,4,6-тетрадезокси-α-D-эритро-гекс-4-енопиранозил-(1→4)]-2-дезокси-D-стрептамин
[32385-11-8].

Примесь B:
O-3-дезокси-4-C-метил-3-(метиламино)-β-L-арабинопиранозил-(1→4)-2-дезокси-L-стрептамин
[49751-51-1].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 35°C; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Раствор после колонки | натрия гидроксида раствор 20 % (свежеприготовленный); |  |
Детектор | пульс-амперометрический с золотым индикаторным электродом, хлорсеребряным электродом сравнения и стальным вспомогательными электродом, представляющим собой корпус электрохимической ячейки; потенциалы: +0,05 В детектирование, +0,75 В окисление, –0,15 В восстановление с продолжительностью импульса в соответствии с используемым инструментом; |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,2-кратное от времени удерживания пика гентамицина С1. |  |

Примечание – Если при проведении испытания наблюдается значительный дрейф времени удерживания компонентов растворов, следует предусмотреть промывку колонки между инжекциями смесью ацетонитрил—вода очищенная 80:20 в течение 15–30 мин с последующим уравновешиванием колонки подвижной фазой.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для идентификации пиков и испытуемый раствор Б.

Относительное время удерживания. Примесь А – 1,0 (около 23 мин); гентамицин С1А – около 1,1; гентамицин С2 – около 1,8; гентамицин С2B – около 2,0; гентамицин С2А – около 2,3; гентамицин С1 – около 3,0.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков гентамицина С1, С1А, С2, С2А, С2B используют хроматограмму раствора для идентификации пиков и хроматограмму, прилагаемую к фармакпейному стандартному образцу гентамицина для идентификации пиков.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика сизомицина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками сизомицина и гентамицина С1А должно быть не менее 1,2 (при необходимости увеличивают долю ацетонитрила в ПФ до 50 мл/л);

- разрешение (RS) между пиками гентамицина С2 и гентамицина С2В должно быть не менее 1,5 (при необходимости увеличивают долю ацетонитрила в ПФ до дополнительных 50 мл/л).

Допустимое содержание компонентов. Содержание каждого компонента в субстанции в процентах вычисляют методом нормирования (ОФС «Хроматография»):

- гентамицин С1 – от 25,0 до 45,0 %;

- гентамицин С1А – от 10,0 до 30,0 %;

- сумма гентамицинов С2, С2А и С2B – от 35,0 до 55,0 %.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Компонентный состав» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы и испытуемый раствор А.

Допустимое содержание примесей:

- площадь пика каждой из примесей А и В не должна более чем в 3 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (не более 3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна более чем в 3 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (не более 3 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 10 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (не более 10 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,5 %).

Метанол. Не более 1,0 %. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 0,2 г пропанола, прибавляют 20 мл воды, перемешивают и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл воды, прибавляют 1,0 мл раствора внутреннего стандарта, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают. Помещают 1,0 мл полученного раствора во флакон для парофазного анализа вместимостью 10 мл и герметично закрывают.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) метанола, прибавляют 20 мл воды, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора, прибавляют 1,0 мл раствора внутреннего стандарта, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают. Помещают 1,0 мл полученного раствора во флакон для парофазного анализа вместимостью 10 мл и герметично закрывают.

Контрольный раствор. Помещают 1,0 мл воды во флакон для парофазного анализа вместимостью 10 мл и герметично закрывают.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,53 мм, покрытая слоем полиэтиленгликоля, деактивированного по отношению к основаниям, 0,5 мкм; |  |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | азот; |  |
Деление потока | 1:4; |  |
Скорость потока | 1,7 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1 мкл. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °C
--- | --- | ---
Колонка | 0–5 | 40
| 5–11 | 40 → 100
Инжектор |  | 150
Детектор |  | 200

Условия парофазного анализа

Температура уравновешивания | 80 °С;
Время уравновешивания | 45 мин;
Температура петли | 90 °С;
Температура линии переноса | 100 °С.

Хроматографируют контрольный раствор, стандартный и испытуемый растворы.

Содержание метанола в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где B1 - отношение площади пика метанола к площади пика пропанола на хроматограмме испытуемого раствора;
B0 - отношение площади пика метанола к площади пика пропанола на хроматограмме стандартного раствора;
a1 - навеска испытуемой субстанции, г;
a0 - навеска метанола, взятая для приготовления стандартного раствора, г;
P – чистота метанола,%.

Сульфаты. От 32,0 до 35,0 % в пересчёте на безводное вещество. Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 100 мл воды и доводят значение рН до 11,0 аммиака раствором концентрированным 32 %. Прибавляют 10,0 мл 0,1 М раствора бария хлорида и около 0,5 мг фталеинового пурпурного. Титруют 0,1 М раствором натрия эдетата, прибавляя 50 мл спирта 96 % при начале изменения окраски, до исчезновения фиолетово-синего окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора бария хлорида соответствует 9,606 мг сульфат-иона SO4.

Сульфатная зола. Не более 1,0 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Вода. Не более 15,0 % (ОФС «Определение воды»). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

* Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 0,5 мг гентамицина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Скорость введения – 0,1 мл/с. Срок наблюдения – 48 ч.

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,71 ЕЭ на 1 мг гентамицина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

* Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

##### Количественное определение

Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение антимикробной активности антибиотиков методом диффузии в агар».

##### Хранение

В защищённом от света месте в герметично закрытой упаковке.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0394 Гестоден

Вводится впервые

##### Определение

17-Гидрокси-13-этил-18,19-динор-17α-прегна-4,15-диен-20-ин-3-он.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % гестодена C21H26O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде, растворим в метаноле, умеренно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гестодена.

Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах ацетона, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

##### Испытания

Удельное вращение. От –188 до –198 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Вода.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Вода—ацетонитрил 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси I. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца примеси I в 1,0 мл растворителя.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 3 мг фармакопейного стандартного образца гестодена для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси A, B, C и L, в 0,5 мл ацетонитрила и доводят водой до 1,0 мл.

Примечание

Примесь A (Δ6-гестоден):
17-гидрокси-13-этил-18,19-динор-17α-прегна-4,6,15-триен-20-ин-3-он.

Примесь B (Δ5(10)-гестоден):
17-гидрокси-13-этил-18,19-динор-17α-прегна-5(10),15-диен-20-ин-3-он.

Примесь C (2-изопропанол-гестоден):
17-гидрокси-2α-(2-гидроксипропан-2-ил)-13-этил-18,19-динор-17α-прегна-4,15-диен-20-ин-3-он.

Примесь I (5-метокси-гестоден):
17-гидрокси-5-метокси-13-этил-18,19-динор-5α,17α-прегн-15-ен-20-ин-3-он.

Примесь L (Δ5(6)-гестоден):
17-гидрокси-13-этил-18,19-динор-17α-прегна-5,15-диен-20-ин-3-он.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, cиликагель октилсилильный, эндкепированный, для хроматографии; сферический, 3,5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 205 нм и 254 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2 | 62 | 38
2–20 | 62 → 58 | 38 → 42
20–24 | 58 → 30 | 42 → 70
24–32 | 30 | 70
32–37 | 30 → 62 | 70 → 38

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси I, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Гестоден – 1 (около 12,5 мин); примесь A – около 0,9; примесь C – около 1,1; примесь I – около 1,2; примесь L – около 1,46; примесь B – около 1,53.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В, С и L используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу гестодена для проверки пригодности системы. Для идентификации пика примеси I используется хроматограмма раствора стандартного образца примеси I.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и гестодена должно быть не менее 2,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь А – 2,2; примесь I – 1,3.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора при 205 нм:

- площадь пика каждой из примесей I и L не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика гестодена на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика примеси В не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика гестодена на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

На хроматограмме испытуемого раствора при 254 нм:

- площадь пика примеси А не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика гестодена на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика примеси С не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика гестодена на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика гестодена на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика гестодена на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора (раздел «Родственные примеси») и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца гестодена. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гестодена, растворяют в 5 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют испытуемый раствор и раствор стандартного образца гестодена. Детектор спектрофотометрический, 254 нм.

Содержание гестодена C21H26O2 в субстанции в процентах (Х) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика гестодена на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика гестодена на хроматограмме раствора стандартного образца гестодена;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца гестодена, мг;
W – потеря в массе при высушивании,%;
P – содержание гестодена в фармакопейном стандартном образце гестодена,%.

##### Хранение

Не требует особых условий.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0395 Гефитиниб

Вводится впервые

##### Определение

7-Метокси-6-[3-(морфолин-4-ил)пропокси]-N-(4-фтор-3-хлорфенил)хиназолин-4-амин.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % гефитиниба C22H24ClFN4O3 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в диметилформамиде, мало растворим в этаноле и метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гефитиниба.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика гефитиниба на хроматограмме раствора стандартного образца гефитиниба (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Аммония ацетата раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 9,68 г аммония ацетата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—аммония ацетата раствор 380:620.

Растворитель. Ацетонитрил—трифторуксусной кислоты раствор 0,2 % 400:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 35 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе, обрабатывают ультразвуком в течение 5–10 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца гефитиниба для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примесь В, растворяют в 1,0 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком до полного растворения и охлаждают до комнатной температуры.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь В:
7-метокси-6-[3-(морфолин-4-ил)пропокси]-N-(3-фтор-4-хлорфенил)хиназолин-4-амин
[1603814-04-5].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 3 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 60 °С; |  |
Скорость потока | 0,9 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 247 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл; |  |
Время хроматографирования | 5-кратное от времени удерживания пика гефитиниба. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Гефитиниб – 1 (около 5,5 мин); примесь В – около 1,3.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси В используют хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу гефитиниба для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика гефитиниба должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиком гефитиниба и пиком примеси В должно быть не менее 3,0;

- фактор асимметрии пика (AS) гефитиниба должен быть не менее 0,8 и не более 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси В не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,4 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика гефитиниба на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 2) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца гефитиниба. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 35 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гефитиниба, растворяют в растворителе, обрабатывают ультразвуком в течение 5–10 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца гефитиниба и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца гефитиниба:

- относительное стандартное отклонение площади пика гефитиниба должно быть не более 1,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику гефитиниба, должна составлять не менее 4000 теоретических тарелок.

Содержание гефитиниба C22H24ClFN4O3 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика гефитиниба на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика гефитиниба на хроматограмме раствора стандартного образца гефитиниба;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца гефитиниба, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание гефитиниба в фармакопейном стандартном образце гефитиниба,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0672 Гидрокортизон

Гидрокортизон
Hydrocortisonum

Вводится впервые

C21H30O5 [50-23-7] | М.м. 362,46

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

11β,17,21-Тригидроксипрегн-4-ен-3,20-дион.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 103,0 % гидрокортизона C21H30O5 в пересчёте на сухое вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Умеренно растворим в ацетоне и спирте 96 %, мало растворим в метиленхлориде, очень мало растворим или практически нерастворим в воде.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гидрокортизона.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах ацетона, выпаривают досуха на водяной бане и незамедлительно записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика гидрокортизона на хроматограмме раствора стандартного образца гидрокортизона (раздел «Родственные примеси»).

3. _Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»)

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

- Подвижная фаза А (ПФА). Вода—метанол—эфир—метиленхлорид 1,2:8:15:77.

- Подвижная фаза Б (ПФБ). Бутанол, насыщенный водой—толуол—эфир 5:15:80.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца гидрокортизона. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного образца гидрокортизона, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мл раствора стандартного образца гидрокортизона и доводят объём раствора метиленхлоридом до метки.

- Раствор стандартного образца Б. В стеклянную пробирку длиной 100 мм и диаметром 20 мм с подходящей стеклянной притёртой пробкой или пробкой из политетрафторэтилена помещают 0,4 мл раствора стандартного образца гидрокортизона и выпаривают растворитель при слабом нагревании в потоке азота. Прибавляют 2 мл уксусной кислоты разведённой 15 % и 50 мг натрия висмутата, пробирку закрывают и встряхивают полученную суспензию в течение 1 ч на механическом встряхивателе, защищая раствор от света. Прибавляют 2 мл уксусной кислоты разведённой 15 % и фильтруют в делительную воронку вместимостью 50 мл, промывая фильтр двумя порциями воды по 5 мл каждая. Прозрачный фильтрат встряхивают с 10 мл метиленхлорида. Органический слой промывают 5 мл натрия гидроксида раствором 1 М и двумя порциями воды по 5 мл каждая и высушивают с использованием натрия сульфата безводного.

- Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора метиленхлоридом до метки.

- Раствор сравнения Б. В стеклянную пробирку длиной 100 мм и диаметром 20 мм с подходящей стеклянной притёртой пробкой или пробкой из политетрафторэтилена помещают 0,4 мл испытуемого раствора и выпаривают растворитель при слабом нагревании в потоке азота. Прибавляют 2 мл уксусной кислоты разведённой 15 % и 50 мг натрия висмутата, пробирку закрывают и встряхивают полученную суспензию в течение 1 ч на механическом встряхивателе, защищая раствор от света. Прибавляют 2 мл уксусной кислоты разведённой 15 % и фильтруют в делительную воронку вместимостью 50 мл, промывая фильтр двумя порциями воды по 5 мл каждая. Прозрачный фильтрат встряхивают с 10 мл метиленхлорида. Органический слой промывают 5 мл натрия гидроксида раствором 1 М и двумя порциями воды по 5 мл каждая и высушивают с использованием натрия сульфата безводного.

- Реактив для детектирования. Серной кислоты раствор спиртовой 36,6 %.

- На линию старта пластинки наносят 5 мкл раствора сравнения А, 5 мкл раствора стандартного образца А, 25 мкл раствора сравнения Б, 25 мкл раствора стандартного образца Б. Последние два раствора наносятся малыми количествами для получения пятен небольшого размера. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФА и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФА пройдёт около 15 см длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры с ПФА и помещают в камеру с ПФБ, хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФБ пройдёт около 15 см длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей.

- Просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

- Основные зоны адсорбции на хроматограмме растворов сравнения А и Б по положению и величине должны соответствовать зонам адсорбции гидрокортизона на хроматограмме растворов стандартных образцов А и Б.

- Пластинку опрыскивают реактивом для детектирования, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 120 °С в течение 10 мин или до появления пятен. Охлаждают и просматривают при видимом свете и в
  УФ-свете при длине волны 365 нм.

- Основные зоны адсорбции на хроматограмме растворов сравнения А и Б по положению, величине и окраске при видимом свете и положению, величине и интенсивности флуоресценции в УФ-свете должны соответствовать зонам адсорбции гидрокортизона на хроматограмме растворов стандартных образцов А и Б.

- Пригодность хроматографической системы. Значения Rf основных зон адсорбции на хроматограмме растворов сравнения Б и стандартного образца Б заметно выше значений Rf основных зон адсорбции на хроматограмме растворов сравнения А и стандартного образца А.

4. Качественная реакция. К 2 мг субстанции прибавляют 2 мл серной кислоты концентрированной и встряхивают до растворения; в течение 5 мин должно появиться интенсивное коричнево-красное окрашивание с зелёной флуоресценцией, более интенсивной при просмотре в УФ-свете при длине волны 365 нм. Полученный раствор прибавляют к 10 мл воды и перемешивают; окраска должна измениться на более тусклую, прозрачность раствора и зелёная флуоресценция в УФ-свете сохраняются.

##### ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От +162 до +168 в пересчёте на сухое вещество (ОФС «Оптическое вращение»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,2 г субстанции, растворяют в метаноле, доводят объём раствора тем же растворителем до метки и обрабатывают ультразвуком в течение 10 мин.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Вода.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 400:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе, доводят объём раствора растворителем до метки и обрабатывают раствор ультразвуком в течение 10 мин.

Раствор стандартного образца гидрокортизона. Растворяют 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гидрокортизона в 1,0 мл растворителя и обрабатывают раствор ультразвуком в течение 10 мин.

Раствор стандартного образца гидрокортизона, содержащего примеси D, E, G, H, I и N. Растворяют 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гидрокортизона содержащего примеси D, E, G, H, I и N в 1,0 мл растворителя и обрабатывают раствор ультразвуком в течение 10 мин.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для идентификации. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 4 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца преднизолона (примесь А), 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца кортизона (примесь B), 8 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гидрокортизона ацетата (примесь C) и 6 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца
11-дезоксикортизола (примесь F), растворяют в 40 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора испытуемым раствором до метки.

Примечание

Примесь А (преднизолон): 11β,17,21-тригидроксипрегна-1,4-диен-3,20-дион [50-24-8].

Примесь В (кортизон): 17,21-дигидроксипрегн-4-ен-3,11,20-трион [53-06-5].

Примесь С (гидрокортизона ацетат): (11β,17-дигидрокси-3,20-диоксопрегн-4-ен-21-ил) ацетат [50-03-3].

Примесь D: 6β,11β,17,21-Тетрагидроксипрегн-4-ен-3,20-дион [53-35-0].

Примесь Е (6-Дегидрокортизол): 11β,17,21-тригидроксипрегна-4,6-диен-3,20-дион [600-99-7].

Примесь F (11-дезоксикортизол): 17,21-дигидроксипрегн-4-ен-3,20-дион [152-58-9].

Примесь G: 11β,17-дигидрокси-3,20-диоксопрегн-4-ен-21-аль, [14760-49-7].

Примесь Н: 7α,11β,17,21-тетрагидроксипрегн-4-ен-3,20-дион.

Примесь I: 11β,14,17,21-тетрагидроксипрегн-4-ен-3,20-дион [103795-84-2].

Примесь N:
11β,17,21-тригидрокси-21-(11β,17,21-тригидрокси-3,20-диоксопрегн-4-ен-21-ил)прегн-4-ен-3,20-дион.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки | 25 °С;
Скорость потока | 0,8 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм;
Объём пробы | 10 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–18 | 74 | 26
18–32 | 74 → 55 | 26 → 45
32–48 | 55 → 30 | 45 → 70
48–50 | 74 | 26
50–55 | 74 | 26

Хроматографируют раствор для идентификации, раствор стандартного образца гидрокортизона, содержащего примеси D, E, G, H, I и N, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Гидрокортизон – 1 (около 24 мин); примесь D – около 0,2; примесь Н – около 0,3; примесь I – около 0,5; примесь G – около 0,8; примесь Е – около 0,86; примесь А – около 0,96; примесь В – около 1,1; примесь F – около 1,4; примесь С – около 1,5; примесь N – около 1,7.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей D, E, G, H, I и N используют хроматограмму стандартного образца гидрокортизона, содержащего примеси D, E, G, H, I и N и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу гидрокортизона. Для идентификации пиков примесей А, В, С и F используют хроматограмму раствора для идентификации.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для идентификации отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси А и гидрокортизона должно быть не менее 3,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь D – 1,8; примесь E – 2,7.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей С, D, E и I не должна более чем в 5 раз превышать площадь пика гидрокортизона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси G не должна более чем в 4 раза превышать площадь пика гидрокортизона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,4%);

- площадь пика примеси F не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика гидрокортизона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика каждой из примесей А и В не должна превышать 2 площади пика гидрокортизона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика каждой из примесей Н и N не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика гидрокортизона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика гидрокортизона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двадцатикратную площадь пика гидрокортизона на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0 %);

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика гидрокортизона на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 241,5 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. В качестве раствора сравнения используют спирт 96 %.

Содержание гидрокортизона C21H30O5 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
а - навеска субстанции, г;
440 - удельный показатель поглощения гидрокортизона ( );
W - потеря в массе при высушивании, %.

##### ХРАНЕНИЕ

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0083 Гидрокортизона ацетат

Гидрокортизон
Hydrocortisoni acetas

Взамен ФС.2.1.0083.18

##### Определение

(11β,17-Дигидрокси-3,20-диоксопрегн-4-ен-21-ил)ацетат.

Cодержит не менее 97,0% и не более 102,0% гидрокортизона ацетата C23H32O6 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в спирте 96% и в метиленхлориде, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гидрокортизона ацетата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика гидрокортизона ацетата на хроматограмме раствора стандартного образца гидрокортизона ацетата (раздел «Родственные примеси»).

3. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 2 мл спирта 96%, прибавляют 2 мл серной кислоты концентрированной и кипятят в течение 1 мин; должен выделяться этилацетат, обнаруживаемый по запаху.

4. Качественная реакция. Растворяют 2 мг субстанции в 2 мл серной кислоты концентрированной и встряхивают до полного растворения. В течение 5 минут должно появиться интенсивное коричнево-красное окрашивание с зелёной флуоресценцией. При добавлении 10 мл воды цвет раствора тускнеет, но флуоресценция не исчезает при просмотре в УФ-свете при 365 нм.

##### Испытания

Температура плавления. От 218 до 222 °C (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельное вращение. От +158 до +167 в пересчёте на сухое вещество (1% раствор субстанции в диоксане; раствор готовят при нагревании до кипения, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—вода 400:600.

Растворитель. Уксусная кислота—вода—метанол 1:10:90.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гидрокортизона ацетата и 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца преднизолона ацетата (примесь C), растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для идентификации пиков. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гидрокортизона ацетата для идентификации пиков, содержащего примеси A, B, D, E и G, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь A: 11β,17,21-тригидроксипрегн-4-ен-3,20-дион [50-23-7].

Примесь B: 11β,17-дигидроксипрегн-4-ен-3,20-дион [641-77-0].

Примесь C: (11β,17-дигидрокси-3,20-диоксопрегн-1,4-диен-21-ил)ацетат [52-21-1].

Примесь D: (17-гидрокси-3,11,20-триоксопрегн-4-ен-21-ил)ацетат [50-04-4].

Примесь E: [17-гидрокси-3,20-диоксопрегн-4,9(11)-диен-21-ил]ацетат [7753-60-8].

Примесь G: (17-гидрокси-3,20-диоксопрегн-4-ен-11β,21-диил)диацетат [81968-66-3].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 4-кратное от времени удерживания основного пика. |  |

Хроматографируют раствор для идентификации пиков, раствор сравнения, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Гидрокортизона ацетат – 1,0 (около 10 мин); примесь A – около 0,4; примесь B – около 0,7; примесь C – около 0,9; примесь D – около 1,2; примесь G – около 1,8; примесь E – около 2,3.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, D, E и G используют хроматограмму раствора для идентификации пиков и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу гидрокортизона ацетата для идентификации пиков содержащего примеси A, B, D, E и G. Для идентификации пика примеси C используют хроматограмму стандартного раствора.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора разрешение (RS) между пиками гидрокортизона ацетата и примеси C должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси C не должна более чем в 6 раз превышать площадь пика гидрокортизона ацетата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6%);

- площадь пика примеси A не должна более чем в 5 раз превышать площадь пика гидрокортизона ацетата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%);

- площадь каждого пика примесей B, D и E не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика гидрокортизона ацетата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3%);

- площадь пика примеси G не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика гидрокортизона ацетата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15%);

- площадь каждого пика неидентифицированных примесей не должна превышать площадь пика гидрокортизона ацетата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна более чем в 15 раз превышать площадь пика гидрокортизона ацетата на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,5%).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика гидрокортизона ацетата на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, приготовленного в испытании «Родственные примеси», и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца гидрокортизона ацетата. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гидрокортизона ацетата, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца гидрокортизона ацетата и испытуемый раствор.

Содержание гидрокортизона ацетата C23H32O6 в субстанции в процентах в пересчёте на сухое вещество (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика гидрокортизона ацетата на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика гидрокортизона ацетата на хроматограмме раствора стандартного образца гидрокортизона ацетата;
a1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца гидрокортизона ацетата, мг;
P – содержание гидрокортизона ацетата в фармакопейном стандартном образце гидрокортизона ацетата,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0396 Гидрокортизона бутират

Гидрокортизон
Hydrocortisoni butyras

Вводится впервые

##### Определение

(11β,21-Дигидрокси-3,20-диоксопрегн-4-ен-17-ил)бутаноат.

Содержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % гидрокортизона бутирата C25H36O6 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в тетрагидрофуране, хлороформе, 1,2-дихлорэтане, растворим в метаноле, умеренно растворим в этаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр предварительно высушенной субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гидрокортизона бутирата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика гидрокортизона бутирата на хроматограмме раствора стандартного образца гидрокортизона бутирата (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +47 до +54 (1 % раствор предварительно высушенной субстанции в хлороформе, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 10 мл дихлорметана должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

* Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 1,0 г калия дигидрофосфата в 1000 мл воды, доводят значение рН до 5,50 калия гидроксида раствором 45 %, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Растворитель. Буферный раствор—ацетонитрил 200:800.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца гидрокортизона бутирата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гидрокортизона бутирата, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 3 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–12,5 | 80 → 35 | 20 → 65
12,5–15,5 | 35 | 65
15,5–20,5 | 35 → 80 | 65 → 20
20,5–22,5 | 80 | 20

Хроматографируют раствор стандартного образца гидрокортизона бутирата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме испытуемого раствора разрешение (RS) между пиками любой примеси и гидрокортизона бутирата должно быть не менее 1,0.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика гидрокортизона бутирата на хроматограмме раствора стандартного образца гидрокортизона бутирата;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца гидрокортизона бутирата, мг;
P – содержание гидрокортизона бутирата в фармакопейном стандартном образце гидрокортизона бутирата,%.

Допустимое содержание примесей:

- любая примесь – не более 1,0 %;

- сумма всех примесей – не более 2,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,05 площади пика гидрокортизона бутирата на хроматограмме раствора стандартного образца гидрокортизона бутирата (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают в вакууме 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 78 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворитель А. Уксусная кислота ледяная—тетрагидрофуран 1:1000.

Растворитель Б. Уксусная кислота ледяная—вода—метанол 1:500:500.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—ацетонитрил—вода 5:380:620.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе А и доводят объём растворителем А до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём растворителем Б до метки.

Раствор стандартного образца гидрокортизона бутирата. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гидрокортизона бутирата, растворяют в растворителе А и доводят объём растворителем А до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём растворителем Б до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 3,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл. |  |

Хроматографируют раствор стандартного образца гидрокортизона бутирата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца гидрокортизона бутирата:

- фактор асимметрии пика (AS) гидрокортизона бутирата должен быть не более 1,6;

- относительное стандартное отклонение площади пика гидрокортизона бутирата должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику гидрокортизона бутирата, должна составлять не менее 4000 теоретических тарелок.

Содержание гидрокортизона бутирата C25H36O6 в субстанции в процентах (Х) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика гидрокортизона бутирата на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика гидрокортизона бутирата на хроматограмме раствора стандартного образца гидрокортизона бутирата;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца гидрокортизона бутирата, мг;
W – потеря в массе при высушивании,%;
P – содержание гидрокортизона бутирата в фармакопейном стандартном образце гидрокортизона бутирата,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Проверка разделительной способности хроматографической системы должна быть приведена в нормативной документации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0650 Гидроксизина гидрохлорид

Гидроксизин
Hydroxyzini hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

2-(2-{4-[(RS)-Фенил(4-хлорфенил)метил]пиперазин-1-ил}этокси)этанола дигидрохлорид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % гидроксизина гидрохлорида C21H27ClN2O2·2HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде и спирте 96 %, очень мало растворим в ацетоне.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гидроксизина гидрохлорида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика гидроксизина на хроматограмме раствора стандартного образца гидроксизина гидрохлорида (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 198 до 202 °C (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 2 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Угол вращения. От –0,10° до +0,10° (10 % раствор субстанции в воде при длине кюветы 1 дм, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы должны быть свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 0,5 г натрия метансульфоната в смеси триэтиламин—ацетонитрил—вода 14:300:686 и доводят значение рН серной кислотой концентрированной до 2,7.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца гидроксизина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гидроксизина гидрохлорида, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,5-кратное от времени удерживания основного пика. |  |

Хроматографируют раствор сравнения, раствор стандартного образца гидроксизина гидрохлорида и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца гидроксизина гидрохлорида отношение максимум/минимум (p/v) между пиками сразу перед пиком гидроксизина и гидроксизина должно быть не менее 10,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,3 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,03 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 5,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографические условия

Объём пробы | 5 мкл;
Время хроматографирования | 15 мин.

Хроматографируют раствор стандартного образца гидроксизина гидрохлорида и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца гидроксизина гидрохлорида:

- фактор асимметрии пика (AS) гидроксизина должен быть не более 2,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика гидроксизина должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пика гидроксизина должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику гидроксизина, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

Содержание гидроксизина гидрохлорида C21H27ClN2O2·2HCl в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика гидроксизина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика гидроксизина на хроматограмме раствора стандартного образца гидроксизина гидрохлорида;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца гидроксизина гидрохлорида, мг;
P – содержание гидроксизина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце гидроксизина гидрохлорида,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0651 Гидроксикарбамид

Вводится впервые

##### Определение

Гидроксимочевина.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % гидроксикарбамида CH4N2O2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителй вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен. Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в воде, в диметилформамиде, умеренно или мало растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гидроксикарбамида.

Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальном объёме спирта 96 %, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика гидроксикарбамида на хроматограмме раствора стандартного образца гидроксикарбамида (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Родственные примеси

1. Мочевина. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Пиридин—вода—этилацетат 2:2:10.

Испытуемый раствор. Растворяют 50 мг (точная навеска) субстанции в 1,0 мл воды.

Стандартный раствор мочевины. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 12,5 мг (точная навеска) мочевины, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5 мг субстанции и 5 мг мочевины, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (500 мкг), стандартного раствора мочевины (2,5 мкг) и раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (2,5 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С в течение 2–3 мин. Тёплую пластинку опрыскивают диметиламинобензальдегида раствором 1 % в 1 М растворе хлористоводородной кислоты и просматривают при дневном свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться две разделённые зоны адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции мочевины по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции мочевины на хроматограмме раствора стандартного образца мочевины (не более 0,5 %).

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—вода 50:950.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г гидроксиламина гидрохлорид и 5 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 214 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика гидроксикарбамида. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками гидроксиламина и гидроксикарбамида должно быть не менее 1,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика гидроксикарбамида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика гидроксикарбамида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,02 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,005 % (4 % раствор субстанции, ОФС «Хлориды»).

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания субстанции с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора (раздел «Родственные примеси») и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца гидроксикарбамида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гидроксикарбамида, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца гидроксикарбамида и испытуемый раствор.

Содержание гидроксикарбамида CH4N2O2 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика гидроксикарбамида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика гидроксикарбамида на хроматограмме раствора стандартного образца гидроксикарбамида;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца гидроксикарбамида, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание гидроксикарбамида в фармакопейном стандартном образце гидроксикарбамида,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0015 Гидроксиметилхиноксалиндиоксид

Взамен ФС.2.1.0015.15

##### Определение

2,3-Бис(гидроксиметил)хиноксалин-1,4-диоксид.

Содержит не менее 99,0 % гидроксиметилхиноксалиндиоксида C10H10N2O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Зеленовато-жёлтый кристаллический порошок.

* Под действием света разлагается.

Растворимость. Мало растворим в воде, мало и медленно растворим в спирте 96 % и хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гидроксиметилхиноксалиндиоксида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрофиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 280 нм должен иметь максимумы при 235 нм и 266 нм и минимум при 250 нм; в области длин волн от 340 до 400 нм должен иметь максимум при 382 нм.

3. Качественная реакция. К 0,02 г субстанции прибавляют 2 мл 1 М раствора натрия гидроксида и нагревают; должно появиться красное окрашивание.

##### Испытания

Температура плавления. От 169 до 172 °С (ОФС «Температура плавления»). Скорость подъёма температуры 2 °С/мин; субстанцию предварительно сушат при температуре 80 °С в течение 2 ч.

Прозрачность раствора. Растворяют 0,1 г субстанции при нагревании до 30 °С в 10 мл воды и охлаждают. Раствор должен выдерживать сравнение с эталоном I (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

рН раствора. От 5,8 до 7,0 (1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Спирт 96 %—хлороформ 1:19.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 1 мл смеси метанол—вода 2:3 и доводят тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл испытуемого раствора и доводят смесью метанол—вода 2:3 до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца хиноксидина, растворяют в хлороформе и доводят тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь хиноксидин: 2,3-ди[(ацетилокси)метил]-хиноксалин-1,4-диоксид [10103-89-6].

На линию старта пластинки в токе холодного воздуха наносят 50 мкл (500 мкг) испытуемого раствора, 50 мкл (5 мкг) и 20 мкл (2 мкг) раствора сравнения А, 10 мкл (1 мкг) раствора сравнения Б и в общую точку – 20 мкл (2 мкг) раствора сравнения А и 10 мкл (1 мкг) раствора сравнения Б. Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 10 мин и просматривают в УФ-свете при 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме общей точки нанесения раствора сравнения А (2 мкг) и раствора сравнения Б (1 мкг) должны наблюдаться 2 чёткие зоны адсорбции.

Допустимое содержание примесей. Зона адсорбции примеси на хроматограмме испытуемого раствора, находящаяся на уровне зоны адсорбции хиноксидина, по совокупности величины и интенсивности поглощения не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,2 %).

Суммарное содержание хиноксидина и других примесей, оцененное по совокупности величины и интенсивности поглощения их зон адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора в сравнении с зонами адсорбции на хроматограммах раствора сравнения А, не должно превышать 1 %.

Галогениды. Не более 0,02 % в пересчёте на хлориды. (ОФС «Хлориды»). Для определения используют раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора».

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Сушат 0,5 г (точная навеска) субстанции при температуре от 75 до 80 °С до постоянной массы.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 10 мг/мл при нагревании до 37 °С.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции, растёртой и предварительно высушенной при температуре от 75 до 80 °С до постоянной массы, в 50 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с индикатором (0,3 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %) до перехода окраски в жёлтую.

По мере прибавления титранта субстанция растворяется.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 22,22 мг диоксидина C10H10N2O4.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытания проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0652 Гидроксиникотиноилглутамат кальция

Вводится впервые

##### Определение

(2S)-2-[(5-Гидроксипиридин-3-карбонил)амино]пентандиоат кальция гидроксид.

Содержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % гидроксиникотиноилглутамата кальция C11H12CaN2O7 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в хлористоводородной кислоте разведённой 8,3 %, умеренно растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гидроксиникотиноилглутамата кальция.

2. Качественная реакция. В 10 мл воды растворяют 0,1 г субстанции. Полученный раствор должен давать характерную реакцию А на кальций (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,25 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH. От 5,5 до 7,5 (0,5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 2,8 г калия дигидрофосфата и 1,6 г тетрабутиламмония гидросульфата в 900 мл воды, прибавляют 2 мл триэтиламина и доводят значение рН фосфорной кислотой до 3,5. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 1 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл водорода пероксида раствора 3 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Полученный раствор кипятят на водяной бане в течение 15 мин.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 мл раствора сравнения и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,4 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 240 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 95 | 5
10–20 | 95 → 70 | 5 → 30
20–25 | 70 | 30
25–26 | 70 → 95 | 30 → 5
26–30 | 95 | 5

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками гидроксиникотиноилглутамата и примеси с относительным временем удерживания около 0,9 должно быть не менее 2.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) гидроксиникотиноилглутамата должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика гидроксиникотиноилглутамата должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику гидроксиникотиноилглутамата, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 2 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 8,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). В 50 мл воды растворяют 0,5 г субстанции. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). В 50 мл воды растворяют 0,5 г субстанции. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 14 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 5 мг субстанции в 1 мл воды для БЭТ.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 250 мл воды, прибавляют 10 мл аммония хлорида буферного раствора рН 9,5 и титруют 0,05 М раствором натрия эдетата до сине-фиолетового окрашивания (индикатор – 50 мг хромового тёмно-синего индикаторной смеси).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 16,22 мг гидроксиникотиноилглутамата кальция C11H12CaN2O7.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0397 Гидроксихлорохина сульфат

Гидроксихлорохин
Hydroxychloroquini sulfas

Вводится впервые

##### Определение

2-{[(4RS)-4-[(7-Хлорхинолин-4-ил)амино]пентил](этил)амино}этан-1-ола сульфат (1:1).

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % гидроксихлорохина сульфата C18H26ClN3O·H2SO4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или слегка желтоватый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гидроксихлорохина сульфата.

2. Спектрофотометрия. Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 нм до 400 нм должен соответствовать спектру раствора стандартного образца гидроксихлорохина (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

рН раствора. От 3,5 до 5,5 (1 % раствор в воде, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 2,72 г калия дигидрофосфата, растворяют в 850 мл воды, прибавляют 2,0 мл триэтиламина, доводят pH раствора до 8,0 потенциометрически натрия гидроксида раствором 1 М, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Растворитель. Смесь ПФБ—ПФА 470:530.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, прибавляют около 80 мл растворителя, выдерживают в ультразвуковой ванне до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца гидроксихлорохина (А). В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гидроксихлорохина сульфата, добавляют около 15 мл растворителя и выдерживают в ультразвуковой ванне до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца гидроксихлорохина (Б). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца гидроксихлорохина (А) и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца гидроксихлорохина (В). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца гидроксихлорохина (А) и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл переносят 5,0 мл раствора стандартного образца гидроксихлорохина (В) и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца гидроксихлорохина для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси B и C, прибавляют около 5 мл растворителя, выдерживают в ультразвуковой ванне до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём содержимого колбы растворителем до метки.

Примечание

Примесь B: 4(2-{[(4RS)-4-[(7-Хлорхинолин-4-ил)амино]пентил](этил) амино}этил)(гидро)сульфат [103152-84-7].

Примесь C: 2-{[(4RS)-4-[(7-Хлорхинолин-4-ил)амино]пентил]амино} этан-1-ол [4298-15-1].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–20 | 53 → 22 | 47 → 78
20–38 | 22 | 78
38–40 | 22 → 53 | 78 → 47
40–45 | 53 | 47

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца гидроксихлорохина (В), раствор стандартного образца гидроксихлорохина (Б) и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Гидроксихлорохин – 1 (около 14 мин); примесь B – 0,54; примесь C – 0,71.

Идентификация примесей. Для идентификации примесей B и C используют время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу гидроксихлорохина для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца гидроксихлорохина (В):

- фактор асимметрии пика (AS) гидроксихлорохина должен находиться в диапазоне от 0,8 до 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика гидроксихлорохина должно быть не более 5,0 % (6 введений).

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси С и гидроксихлорохина должно быть не менее 5.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика гидроксихлорохина должно быть не менее 10.

Содержание примесей B и C в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
SА – площадь пика гидроксихлорохина на хроматограмме раствора стандартного образца гидроксихлорохина (Б);
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца гидроксихлорохина, мг;
P – содержание гидроксихлорохина в фармакопейном стандартном образце гидроксихлорохина, %.

Содержание любой другой примеси вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
SБ – площадь пика гидроксихлорохина на хроматограмме раствора сравнения Б;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца гидроксихлорохина сульфата, мг;
P – содержание гидроксихлорохина в фармакопейном стандартном образце гидроксихлорохина сульфата,%.

Допустимое содержание примесей:

- примеси B и C − не более 0,5 % каждая;

- любая другая примесь − не более 0,10 %;

- сумма всех примесей − не более 1,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Хлориды. Не более 0,035 %. (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,286 г субстанции в 50 мл воды.

Потеря в массе при высушивании. Не более 2,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании» (способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 80 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и выдерживают в ультразвуковой ванне до полного растворения субстанции, охлаждают до комнатной температуры, доводят объём раствора тем же растворителем до метки и фильтруют. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Раствор стандартного образца гидроксихлорохина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гидроксихлорохина сульфата, прибавляют 80 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и выдерживают в ультразвуковой ванне до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры, доводят объём раствора тем же растворителем до метки, фильтруют. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5.0 мл полученного раствора и доводят объём раствора до метки хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М. Раствор используют свежеприготовленным.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора и раствора стандартного образца гидроксихлорохина на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 341 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М.

Содержание гидроксихлорохина сульфата C18H26ClN3O·H2SO4 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где A1 – оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 – оптическая плотность раствора стандартного образца гидроксихлорохина;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца гидроксихлорохина сульфата, мг;
P – содержание гидроксихлорохина в фармакопейном стандартном образце гидроксихлорохина сульфата, %;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0653 Гидроксиэтилдиметилдигидропиримидин

Взамен ФС 42-3846-99

##### Определение

1-(2-Гидроксиэтил)-4,6-диметилпиримидин-2(1H)-он.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % гидроксиэтилдиметилдигидропиримидина C8H12N2O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. От белого до светло-розового цвета или светло-розового цвета с желтоватым оттенком кристаллический порошок. Допускаются вкрапления более интенсивного оттенка.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96 %, легко растворим или растворим в хлороформе, растворим в диметилформамиде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гидроксиэтилдиметилдигидропиримидина.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в 80 мл воды и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 250 до 350 нм должен иметь максимум при 308 нм.

3. Качественная реакция. В 2 мл воды растворяют 0,1 г субстанции, прибавляют 2 мл натрия гидроксида раствора 10 % и 0,05 мл калия перманганата раствора 3 %; должно появиться голубовато-зелёное быстроисчезающее окрашивание.

##### Испытания

Температура плавления. От 138 до 142 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл воды должен выдерживать сравнение с эталоном II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном R4 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Примечание

Примесь: 4,6-диметилпиримидин-2(1H)-он [108-79-2].

Растворяют 1 г (точная навеска) субстанции в 20 мл диметилформамида и титруют из микробюретки 0,1 М раствором калия гидроксида спиртовым до синего окрашивания (индикатор – 0,05 мл тимолового синего раствора 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора калия гидроксида спиртового соответствует 12,41 мг 4,6-диметилпиримидин-2(1H)-она.

Допустимое содержание – не более 0,25 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 2 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы при температуре 100–105 °С.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). В 10 мл воды растворяют 0,1 г субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 10 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до зелёного окрашивания (индикатор – 1 капля кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 16,82 мг гидроксиэтилдиметилдигидропиримидина C8H12N2O2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0084 Гидрохлоротиазид

Взамен ФС.2.1.0084.18

##### Определение

1,1-Диоксо-6-хлор-3,4-дигидро-2H-1λ6,2,4-бензотиадиазин-7-сульфонамид.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % гидрохлоротиазида C7H8ClN3O4S2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Растворим в ацетоне, умеренно или мало растворим в спирте 96 %, очень мало растворим или практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гидрохлоротиазида.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах этанола, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора Б должно соответствовать времени удерживания пика гидрохлоротиазида на хроматограмме раствора стандартного образца гидрохлоротиазида (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. К 1 мг субстанции прибавляют 2 мл свежеприготовленного раствора хромотроповой кислоты натриевой соли 0,5 г/л в охлаждённой смеси серная кислота концентрированная—вода 65:35; должно появиться фиолетовое окрашивание.

##### Испытания

Кислотность или щёлочность. Взбалтывают 0,5 г растёртой в порошок субстанции в течение 2 мин с 25 мл воды и фильтруют. К 10 мл фильтрата прибавляют 0,2 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида и 0,15 мл метилового красного спиртового раствора 0,1 %. Раствор должен быть окрашен в жёлтый цвет. Окраска раствора должна измениться на красную при прибавлении не более 0,4 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Тетрагидрофуран—метанол—фосфатный буферный раствор рН 3,2 10:60:940.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Тетрагидрофуран—метанол—фосфатный буферный раствор рН 3,2 50:500:500.

Растворитель. Доводят 50 мл смеси ацетонитрил—метанол 1:1 фосфатным буферным раствором рН 3,2 до 200 мл.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 5,0 мл смеси ацетонитрил—метанол 1:1 и доводят объём раствора фосфатным буферным раствором рН 3,2 до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора фосфатным буферным раствором рН 3,2 до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 3 мг фармакопейного стандартного образца гидрохлортиазида и 3 мг фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в 5,0 мл смеси ацетонитрил—метанол 1:1, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора фосфатным буферным раствором рН 3,2 до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для идентификации пиков. В мерную колбу вместимостью 2 мл помещают 3 мг фармакопейного стандартного образца гидрохлоротиазида, содержащего примеси В и С, растворяют в 0,5 мл метанола и доводят объём раствора фосфатным буферным раствором рН 3,2 до метки.

Примечание

Примесь A:
1,1-диоксо-6-хлор-2H-1λ6,2,4-бензотиадиазин-7-сульфонамид
[58-94-6].

Примесь B: 4-амино-6-хлорбензол-1,3-дисульфонамид [121-30-2].

Примесь C:
N-[(1,1-диоксо-7-сульфамоил-6-хлор-2H-1λ6,2,4-бензотиадиазин-4-ил)метил]-1,1-диоксо-6-хлор-2H-1λ6,2,4-бензотиадиазин-7-сульфонамид
[402824-96-8].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 3 мкм; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 224 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–17 | 100 → 55 | 0 → 45
17–30 | 55 | 45

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для идентификации пиков, раствор сравнения и испытуемый раствор А.

Относительное время удерживания соединений. Гидрохлоротиазид – 1 (около 8 мин); примесь С – около 2,8; примесь А – около 0,9; примесь В – около 0,7.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси A используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Для идентификации пиков примесей В и С используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для идентификации пиков и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу гидрохлоротиазида для идентификации пиков.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и гидрохлоротиазида должно быть не менее 2,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора А:

- площадь пика каждой из примесей А, В и С не должна более чем в 5 раз превышать площадь пика гидрохлоротиазида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика гидрохлоротиазида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь пика гидрохлоротиазида на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 30 °С.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Взбалтывают 0,75 г субстанции в течение 2 мин с 25 мл воды и фильтруют.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца гидрохлоротиазида. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гидрохлоротиазида, растворяют в 5 мл смеси ацетонитрил—метанол 1:1, если необходимо, обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора фосфатным буферным раствором рН 3,2 до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

- Скорость потока: 1,6 мл/мин.

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ%
--- | --- | ---
0–4 | 80 | 20
4–10 | 80 → 20 | 20 → 80

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца гидрохлоротиазида и испытуемый раствор Б.

Относительное время удерживания соединений. Гидрохлоротиазид – 1 (около 2,2 мин); примесь А – около 0,9.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси A и гидрохлоротиазида должно быть не менее 2,0.

Содержание гидрохлоротиазида C7H8ClN3O4S2 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика гидрохлоротиазида на хроматограмме испытуемого раствора Б;
S0 – площадь пика гидрохлоротиазида на хроматограмме раствора стандартного образца гидрохлоротиазида;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца гидрохлоротиазида, мг;
P – содержание гидрохлоротиазида в фармакопейном стандартном образце гидрохлоротиазида,%;
W – потеря в массе при высушивании субстанции,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0398 Гимекромон

Вводится впервые

##### Определение

7-Гидрокси-4-метил-2H-1-бензопиран-2-он.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % гимекромона C10H8O3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в метаноле, мало растворим в метиленхлориде, очень мало растворим в воде.

* Растворяется в разбавленных растворах аммиака.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гимекромона.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в 10 мл аммония хлорида буферного раствора рН 10,4 и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 10,0 мл аммония хлорида буферного раствора рН 10,4 и доводят объём раствора водой до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 до 400 нм должен иметь два максимума при 229 нм и 360 нм и минимум при 276 нм.

- Удельный показатель поглощения в максимуме поглощения при длине волны 360 нм должен составлять от 1020 до 1120 в пересчёте на сухое вещество.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор натрия дигидрофосфата дигидрата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,56 г натрия дигидрофосфата дигидрата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор динатрия гидрофосфата додекагидрата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 3,58 г динатрия гидрофосфата додекагидрата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Буферный раствор. К 280 мл раствора натрия дигидрофосфата дигидрата прибавляют 720 мл раствора динатрия гидрофосфата додекагидрата и доводят значение рН раствора фосфорной кислотой разведённой 10 % до 7,00.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—буферный раствор 465:535.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца гимекромона, 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси A и 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси B, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь A (резорцин): бензол-1,3-диол [108-46-3].

Примесь B: 7-гидрокси-2-метил-4Н-1-бензопиран-4-он [6320-42-9].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель сферический октадецилсилильный для хроматографии, 10 мкм; |
Температура колонки | 25 °C; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 270 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика гимекромона. |  |

Хроматографируют стандартный раствор, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Гимекромон – 1 (около 6 мин); примесь A – около 0,5; примесь B – около 0,7.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А и В используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками примеси A и примеси B должно быть не менее 2,0;

- разрешение (RS) между пиками примеси B и гимекромона должно быть не менее 3,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна превышать площадь пика примеси A на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %);

- площадь пика примеси B не должна превышать площадь пика примеси B на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика гимекромона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика гимекромона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади пика гимекромона на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,01 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции в коническую колбу вместимостью 200 мл, растворяют в 80 мл 2-пропанола. Полученный раствор титруют 0,1 М раствором тетрабутиламмония гидроксида в 2-пропаноле. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора тетрабутиламмония гидроксида в 2-пропаноле соответствует 17,62 мг гимекромона C10H8O3.

##### ХРАНЕНИЕ

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0085 Гипромеллоза

Взамен ФС.2.1.0085.18

##### Определение

Гидроксипропилметилцеллюлоза.

Частично O-(2-гидроксипропилированная) и O-метилированная целлюлоза.

Процентное содержание метокси-групп (-OCH3) и 2-гидроксипропокси-групп (-OCH2CH(OH)CH3) (в пересчёте на сухое вещество), соответствующее определённому типу замещения, приведено в табл. 1.

Таблица 1. Характеристика типов замещения
Тип замещения | Содержание,%
--- | ---
метокси-групп | 2-гидроксипропокси-групп
1828 | 16,5–20,0 | 23,0–32,0
2208 | 19,0–24,0 | 4,0–12,0
2906 | 27,0–30,0 | 4,0–7,5
2910 | 28,0–30,0 | 7,0–12,0
Примечание – В номере типа замещения первые две цифры означают среднее процентное содержание метокси-групп, а последние две – среднее процентное содержание 2-гидроксипропоски-групп.

##### Свойства

Описание. Белый, желтовато-белый или серовато-белый волокнистый или гранулированный порошок.

* Гигроскопичен после высушивания.

Растворимость. Растворим в холодной воде с образованием коллоидного раствора, практически нерастворим в горячей воде, этаноле безводном, ацетоне и толуоле.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Равномерно распределяют 1,0 г испытуемого образца на поверхности 100 мл воды и оставляют на 1–2 мин; должна наблюдаться агрегация порошка на поверхности.

2. Качественная реакция. Равномерно распределяют 1,0 г испытуемого образца в 100 мл кипящей воды и тщательно перемешивают; должна образоваться суспензия нерастворимых частиц. Суспензию охлаждают до 10 °С и тщательно перемешивают; должен образоваться прозрачный или слегка мутный вязкий раствор.

3. Качественная реакция. К 0,1 мл раствора, полученного
   в испытании 2 «Качественная реакция», прибавляют 9 мл смеси серная кислота—вода 9:1, взбалтывают, нагревают на водяной бане в течение 3 мин, немедленно охлаждают во льду, осторожно прибавляют 0,6 мл нингидрина раствора 2 %, взбалтывают и выдерживают при 25 °С; должно появиться красное окрашивание. В течение 100 мин окрашивание должно постепенно перейти в фиолетовое.

4. Качественная реакция. На предметное стекло наносят 2–3 мл раствора, полученного в испытании 2 «Качественная реакция»; после испарения воды должна образоваться плотная прозрачная плёнка.

##### Испытания

Температура флокуляции. Не ниже 50 °С.

В химический стакан помещают 50,0 мл раствора, полученного в испытании 2 «Качественная реакция», и прибавляют 50,0 мл воды. Опускают в полученный раствор термометр. Перемешивают раствор при нагревании, повышая температуру со скоростью 2–5 °С/мин. Определяют температуру, при которой начинается увеличение мутности.

Прозрачность раствора. Растворяют 1 г испытуемого образца в 50 г воды, свободной от углерода диоксида, нагретой до 90 °С. Охлаждают, доводят массу раствора до 100 г водой, свободной от углерода диоксида. Опалесценция полученного раствора не должна превышать
эталон сравнения III (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Вязкость. В соответствии с ОФС «Вязкость».

От 80 до 120 % от номинального значения для образцов с вязкостью менее 600 мПа∙с, метод 1; от 75 до 140 % от номинального значения для образцов с вязкостью от 600 мПа∙с и более метод 2.

Метод 1. Взвешивают количество испытуемого образца, эквивалентное 4,0 г в пересчёте на сухое вещество. Переносят в широкогорлую ёмкость и доводят массу горячей водой (90–99 °С) до 200,0 г. Закрывают ёмкость и перемешивают содержимое со скоростью 400±50 об/мин в течение 10–20 мин до тщательного диспергирования и смачивания частиц. При необходимости соскабливают шпателем с внутренних стенок не диспергированный материал и продолжают перемешивание при охлаждении до температуры ниже 10 °С в течение следующих 20–40 мин. При необходимости доводят массу раствора до 200,0 г холодной водой. При наличии пузырьков воздуха раствор центрифугируют. Шпателем удаляют пену. Определяют кинематическую вязкость (ν) раствора с помощью капиллярного вискозиметра (ОФС «Вязкость»). Определяют плотность (ρ, ОФС «Плотность», метод 1) и рассчитывают динамическую вязкость (η): η = ρ∙ν.

Метод 2. Взвешивают количество испытуемого образца, эквивалентное 10,0 г в пересчёте на сухое вещество. Переносят в широкогорлую ёмкость и доводят массу горячей водой до 500,0 г. Закрывают ёмкость и перемешивают содержимое со скоростью 400±50 об/мин в течение 10–20 мин до тщательного диспергирования и смачивания частиц. При необходимости соскабливают шпателем с внутренних стенок не диспергированный материал и продолжают перемешивание при охлаждении до температуры ниже 10 °С в течение следующих 20–40 мин. При необходимости доводят массу раствора до 500,0 г холодной водой. При наличии пузырьков воздуха раствор центрифугируют. Шпателем удаляют пену. Определяют динамическую вязкость (η) раствора с помощью ротационного вискозиметра со шпинделем с одним цилиндром при температуре 20,0±0,1 °С в условиях, приведённых в табл. 2.

Для измерения используют вискозиметр типа Brookfield LV.

Таблица 2. Условия определения динамической вязкости
Номинальная вязкость, мПа∙с | Номер шпинделя | Скорость вращения, об/мин | Поправочный коэффициент
--- | --- | --- | ---
600–1400 | 3 | 60 | 20
1400–3500 | 3 | 12 | 100
3500–9500 | 4 | 60 | 100
9500–99500 | 4 | 6 | 1000
>99500 | 4 | 3 | 2000

Перед измерением шпиндель вращают в течение 2 мин. Между повторными измерениями выдерживают паузы в 2 мин. Определение проводят трижды и рассчитывают среднее арифметическое значение.

pH раствора. От 5,0 до 8,0 (Раствор, полученный в испытании «Вязкость», ОФС «Ионометрия», метод 3). Показание рН-метра считывают после нахождения электрода в растворе в течение 5±0,5 мин.

Сульфатная зола. Не более 1,5% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) испытуемого образца.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002% (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 9).

Потеря в массе при высушивании. Не более 5,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) испытуемого образца.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Степень замещения. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Условия испытания

Аппарат:
- реакционный флакон | – Герметичный флакон, объём 5 мл, высота 50 мм, внешний диаметр 20 мм, внутренний диаметр 13 мм у горлышка; снабжён герметичной пробкой из бутилкаучуковой мембраны, покрытой политетрафторэтиленом; обжимают алюминиевой крышкой или другой уплотнительной системой, обеспечивающей достаточную герметичность; |
- нагреватель | – Нагревательный модуль с квадратным алюминиевым блоком с отверстиями диаметром 20 мм и глубиной 32 мм (подходит для реакционных флаконов); перемешивание производят магнитной мешалкой, установленной в нагревательном модуле или с помощью возвратно-поступательного встряхивателя, совершающего около 100 циклов/мин. |

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3 г октана и доводят объём раствора о-ксилолом до метки.

Испытуемый раствор. В реакционный флакон помещают 65 мг (точная навеска) испытуемого образца, прибавляют 60–100 мг адипиновой кислоты, 2,0 мл раствора внутреннего стандарта и 2,0 мл йодистоводородной кислоты. Герметично закрывают пробкой и взвешивают. Перемешивают содержимое в течение 60 мин при температуре 130±2 °С. Если возвратный шейкер или магнитная мешалка не могут быть использованы, тщательно встряхивайте флакон вручную с 5-минутными интервалами в течение первых 30 мин нагревания. Охлаждают до комнатной температуры и повторно взвешивают. Потеря в массе не должна превышать 26 мг. Используют верхний слой.

Раствор сравнения. В реакционный флакон помещают 60–100 мг адипиновой кислоты, 2,0 мл раствора внутреннего стандарта и 2,0 мл йодистоводородной кислоты, герметично закрывают пробкой и взвешивают. С помощью шприца вводят 15–22 мкл 2-йодпропана, взвешивают. Шприцом вводят 45 мкл йодметана, снова взвешивают. Тщательно встряхивают реакционный сосуд и используют верхний слой.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,53 мм, покрытая слоем поли(диметил)силоксана, 3 мкм; |  |
Детектор | пламенно-ионизационный или определяющий теплопроводность; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:40; |  |
Скорость потока | 4,3 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1–2 мкл. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °С
--- | --- | ---
Колонка | 0–3 | 50
| 3–8 | 50 → 100
| 8–12,3 | 100 → 250
| 12,3–20,3 | 250
Инжектор |  | 250
Детектор |  | 280

Хроматографируют раствор внутреннего стандарта, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Октан –1 (около 10 мин); йодметан – около 0,4; 2-йодпропан – около 0,7.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения:

- разрешение (RS) между пиками йодметана и 2-йодпропана должно быть не менее 5,0;

- разрешение (RS) между пиками йодметана и октана должно быть не менее 5,0;

- относительное стандартное отклонение отношения площади пика йодметана к площади пика октана должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение отношения площади пика 2-йодпропана к площади пика октана должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание метокси-групп -OCH3 в испытуемом образце в пересчёте на сухое вещество в процентах (М) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика йодметана на хроматограмме испытуемого раствора;
S2 – площадь пика внутреннего стандарта на хроматограмме испытуемого раствора;
S3 – площадь пика йодметана на хроматограмме раствора сравнения;
S4 – площадь пика внутреннего стандарта на хроматограмме раствора сравнения;
a1 – навеска йодметана в растворе сравнения, мг;
a – навеска испытуемого образца в пересчёте на сухое вещество, мг;
21,86 – эмпирический коэффициент.

Содержание гидроксипропокси-групп -OCH2CH(OH)CH3 в испытуемом образце в пересчёте на сухое вещество в процентах (ГП) вычисляют по формуле:

где S5 – площадь пика 2-йодпропана на хроматограмме испытуемого раствора;
S6 – площадь пика внутреннего стандарта на хроматограмме испытуемого раствора;
S7 – площадь пика 2-йодпропана на хроматограмме раствора сравнения;
S8 – площадь пика внутреннего стандарта на хроматограмме раствора сравнения;
a2 – навеска 2-йодпропана в растворе сравнения, мг;
a – навеска испытуемого образца в пересчёте на сухое вещество, мг;
44,17 – эмпирический коэффициент.

Полученные содержания метокси-групп и гидроксипропокси-групп должны соответствовать определённому типу замещения.

##### Функциональные характеристики

Испытания проводят для гипромеллозы, применяемой в качестве связующего вещества, повышающего вязкость вещества или плёнкообразователя.

Вязкость. См. выше.

Степень замещения. См. выше.

Испытания проводят для гипромеллозы, применяемой в качестве формирователя матрицы в таблетках пролонгированного действия:

Вязкость. См. выше.

Размер частиц. В соответствии с ОФС «Ситовой анализ» или ОФС «Определение распределения частиц по размеру методом лазерной дифракции света».

Сыпучесть. В соответствии с ОФС «Сыпучесть порошков».

Молекулярно-массовое распределение. В соответствии с ОФС «Эксклюзионная хроматография».

Степень замещения. См. выше.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0654 Глибенкламид

Взамен ВФС 42-2510-95

##### Определение

2-Метокси-5-хлор-N-[2-(4-{[(циклогексилкарбамоил)амино]сульфонил}фенил)этил]бензамид.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % глибенкламида С23H28ClN3O5S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Умеренно растворим в метиленхлориде, мало растворим в спирте, метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца глибенкламида.

- Если спектры различаются, субстанцию и фармакопейный стандартный образец смачивают метанолом, растирают, высушивают при 100–105 °С и записывают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 30 мл метанола, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора, прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М и доводят объём раствора метанолом до метки.

- Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М и доводят объём раствора метанолом до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь максимумы при 300 нм и 275 нм с удельным показателем поглощения от 61 до 65 при длине волны 300 нм и от 27 до 32 при длине волны 275 нм.

3. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля GF254.

- Подвижная фаза (ПФ). Спирт 96 %—уксусная кислота ледяная—метиленхлорид—циклогексан 5:5:45:45.

- Растворитель. Метанол—метиленхлорид 50:50.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

- Раствор фармакопейного стандартного образца глибенкламида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца глибенкламида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (10 мкг) и раствора фармакопейного стандартного образца глибенкламида (10 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

- Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению и величине должна соответствовать зоне адсорбции глибенкламида на хроматограмме раствора фармакопейного стандартного образца глибенкламида.

4. Качественная реакция. Растворяют 20 мг субстанции в 2 мл серной кислоты концентрированной. Раствор должен быть бесцветным и должен иметь голубую флуоресценцию в УФ-свете при длине волны 365 нм. После прибавления 0,1 г хлоралгидрата в течение 5 мин должна появиться тёмно-жёлтая окраска, через 20 мин переходящая в коричневатый оттенок.

##### Испытания

Температура плавления. От 169 до 174 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы готовят непосредственно перед применением или хранят при температуре 5 °С не более 40 часов.

Буферный раствор. Растворяют 10 г триэтиламина в 80 мл воды и доводят значение рН до 3,0 фосфорной кислотой, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор—ацетонитрил—вода 20:50:930.

Подвижная фаза Б (ПФБ). ПФА—вода—ацетонитрил 20:65:915.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг субстанции (точная навеска), растворяют в 5 мл метанола, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора метанолом до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 6 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А и 6 мг фармакопейного стандартного образца примеси В, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для идентификации пиков. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 12,5 мг фармакопейного стандартного образца глибенкламида для идентификации пиков (содержит примесь С), растворяют в метаноле, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора метанолом до метки.

Примечание

Примесь А:
2-метокси-N-[2-(4-(сульфамоилфенил)этил]-5-хлорбензамид
[16673-34-0].

Примесь В:
метил[N-({4-[2-(2-метокси-5-хлорбензамидо)этил]фенил}сульфонил)карбамат]
[21165-77-5].

Примесь С:
1-циклогексил-3-[({2-[(циклогексилкарбамоил)амино]этил}фенил)сульфонил]мочевина
[10079-35-3].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–15 | 45 | 55
15–30 | 45 → 5 | 55 → 95
30–40 | 5 | 95

Хроматографируют стандартный раствор, раствор сравнения, раствор для идентификации пиков и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Глибенкламид – 1 (около 5 мин); примесь А – около 0,5; примесь В – около 0,6; примесь С – около 0,7.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А и В относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора; хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу глибенкламида для идентификации пиков (содержит примесь С)и хроматограмму раствора для идентификации пиков используют для идентификации пика примеси С.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора разрешение (RS) между пиками примеси A и примеси B должно быть не менее 2,0;

Содержание примеси А в субстанции в процентах (ХА) вычисляют по формуле:

где SA(B) – площадь пика примеси А на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика примеси А на хроматограмме стандартного раствора;
a – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца примеси А, взятая для приготовления стандартного раствора, мг;
P – содержание примеси А в фармакопейном стандартном образце примеси А,%.

Содержание любой другой единичной примеси в субстанции в процентах (Хi) вычисляют по формуле:

где Si – площадь примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика глибенкламида на хроматограмме раствора сравнения;
ki – поправочный коэффициент (1,8 при расчёте примеси С, в остальных случаях принимают равным 1).

Суммарное содержание примесей в субстанции в процентах (ХΣ) вычисляют по формуле:

Допустимое содержание примесей:

- примесь А – не более 0,3 %;

- примесь С – не более 0,15 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма всех примесей – не более 0,8 %.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 2). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 400 мг (точная навеска) субстанции при нагревании в 100 мл спирта 96 % и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с индикатором (1 мл фенолфталеина раствора 1 %) до перехода окраски в розовую.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 49,40 мг глибенкламида С23H28ClN3O5S.

##### Хранение

Не требует особых условий.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0012 Гликлазид

Взамен ФС.2.1.0012.15

##### Определение

N-[Гексагидроциклопента[c]пиррол-2(1H)-ил]-N'-[(4-метилфенил)сульфонил]мочевина.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % гликлазида C15H21N3O3S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде, умеренно растворим в ацетоне, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гликлазида.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы готовят непосредственно перед использованием.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 9:11.

Подвижная фаза (ПФ). Триэтиламин—трифторуксусная кислота—ацетонитрил—вода 1:1:450:550.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в 25 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси F. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси F, растворяют в 45 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг субстанции и 15 мг фармакопейного стандартного образца примеси F, растворяют в 25 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь F:
N-[гексагидроциклопента[c]пиррол-2(1H)-ил]-N'-[(2-метилфенил)сульфонил]мочевина
[1076198-18-9].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4 мм, силикагель октилсилильный для хроматографии, 4 мкм; |  |
Скорость потока | 0,9 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 235 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика гликлазида. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси F, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Гликлазид – 1 (около 16 мин); примесь F – около 0,9.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси F должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси F и гликлазида должно быть не менее 1,8.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) гликлазида должен быть не более 1,8;

- относительное стандартное отклонение площади пика гликлазида должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику гликлазида, должна быть не менее 10 000 теоретических тарелок.

На хроматограмме раствора стандартного образца примеси F:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси F должно быть не менее 10;

- фактор асимметрии пика (AS) примеси F должен быть не более 1,8;

- относительное стандартное отклонение площади пика примеси F должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси F не должна превышать площадь пика примеси F на хроматограмме раствора стандартного образца примеси F (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика гликлазида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей (кроме примеси F) не должна превышать двукратную площадь пика гликлазида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

2-Нитрозооктагидроциклопента[c]пиррол (примесь B). Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,4 г субстанции, растворяют в 2,5 мл диметилсульфоксида, доводят объём раствора водой до метки, перемешивают в течение 10 мин, выдерживают при температуре 4 °С в течение 30 мин и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Раствор стандартного образца примеси В. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца примеси В, растворяют в диметилсульфоксиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 12 мл диметилсульфоксида и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 12 мл диметилсульфоксида и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь В: 2-нитрозооктагидроциклопента[c]пиррол [54786-86-6].

Хроматографические условия

- Объём пробы^ 50 мкл.

Хроматографируют раствор стандартного образца примеси В и испытуемый раствор.

Время удерживания примеси В – около 7 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси В должно быть не менее 10;

- фактор асимметрии пика (AS) примеси В должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика примеси В должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику примеси В, должна быть не менее 10 000 теоретических тарелок.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси В не должна превышать площадь пика примеси В на хроматограмме раствора стандартного образца примеси В (не более 0,0002 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,25 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты ледяной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 32,34 мг гликлазида C15H21N3O3S.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0655 Глимепирид

Вводится впервые

##### Определеие

4-Метил-N-{2-[4-({[(1r,4r)-4-метилциклогексил]карбамоил}сульфамоил)фенил]этил}-2-оксо-3-этил-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-карбоксамид.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % глимепирида в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Растворим в диметилформамиде, мало растворим в метиленхлориде, очень мало растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца глимепирида.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах диметилформамида, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика глимепирида на хроматограмме раствора стандартного образца глимепирида (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Родственные примеси.

1. Примесь А. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—2-пропанол—гептан 1:100:899.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл метиленхлорида и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,8 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют 2,0 мг фармакопейного стандартного образца глимепирида для идентификации примеси А в 1 мл метиленхлорида и доводят объём раствора ПФ до 4 мл.

Примечание

Примесь А:
4-метил-N-{2-[4-({[(1s,4s)-4-метилциклогексил]карбамоил}сульфамоил)фенил]этил}-2-оксо-3-этил-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-карбоксамид
[684286-46-2].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,0 мм, силикагель модифицированный дигидроксипропильными группами, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25°С; |  |
Скорость потока | 0,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 228 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика глимепирида. |  |

Хроматографируют раствора для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Глимепирид - 1 (около 14 мин); примесь А – около 0,9.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси А и глимепирида должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика глимепирида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,8 %).

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы хранят при температуре не выше 12 °С не более 15 ч.

Буферный раствор. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 0,5 г натрия дигидрофосфата дигидрата, растворяют в 300 мл воды, доводят значение рН до 2,5 фосфорной кислотой концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Буферный раствор—ацетонитрил 500:500.

Растворитель. Вода—ацетонитрил 20:80.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца глимепирида для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси В, С и D, растворяют в 2 мл испытуемого раствора.

Примечание

Примесь В:
4-метил-N-[2-(4-сульфамоилфенил)этил]-2-оксо-3-этил-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-карбоксамид
[119018-29-0].

Примесь С:
метил(N-{4-[2-(4-метил-2-оксо-3-этил-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-карбоксамидо)этил]бензолсульфонил}карбамат)
[119018-30-3].

Примесь D:
4-метил-N-{2-[3-({[(1r,4r)-4-метилциклогексил]карбамоил}сульфамоил)фенил]этил}-2-оксо-3-этил-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-карбоксамид
[791104-62-6].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 4 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 228 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,5-кратное от времени удерживания пика глимепирида. |  |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Глимепирид – 1 (около 17 мин); примесь B – около 0,2; примесь С – около 0,3; примесь D – около 1,1.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси В и примеси С должно быть не менее 4,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси В не должна превышать четырёхкратную площадь пика глимепирида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,4 %);

- площадь пика примеси D не должна превышать двукратную площадь пика глимепирида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика глимепирида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей (кроме примеси В) не должна превышать пятикратную площадь пика глимепирида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 2). В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 0,25 г (точная навеска) субстанции, растворяют в диметилформамиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Для определения используют 1,0 мл полученного раствора; параллельно проводят контрольный опыт.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. 2. Другие примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца глимепирида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца глимепирида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца глимепирида и испытуемый раствор.

Содержание глимепирида C24H34N4O5S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика глимепирида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика глимепирида на хроматограмме раствора стандартного образца глимепирида;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца глимепирида, мг;
Р – содержание глимепирида в фармакопейном стандартном образце глимепирида,%;
W – содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0086 Глицин

Взамен ФС.2.1.0086.18

##### Определение

Аминоуксусная кислота.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % глицина C2H5NO2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в воде и муравьиной кислоте, очень мало растворим или практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца глицина.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах спирта 60 %, выпаривают досуха и записывают спектры полученных образцов.

2. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем целлюлозы.

- Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота—вода—бутанол 20:20:60.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца глицина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца глицина, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Реактив для детектирования. Нингидрина раствор 0,2 %.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца глицина. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт подвижной фазы пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей при температуре 80 оС в течение 30 мин, опрыскивают реактивом для детектирования, повторно сушат при температуре 105 оС в течение 15 мин и просматривают в видимом свете.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, окраске и величине должна соответствовать зоне адсорбции глицина на хроматограмме раствора стандартного образца глицина.

3. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 5 мл воды, прибавляют 1 мл натрия гипохлорита раствора концентрированного и кипятят в течение 2 мин. Прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и кипятят в течение 4–5 мин. Прибавляют 2 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и 1 мл резорцина раствора 20 г/л, кипятят в течение 1 мин и охлаждают до комнатной температуры. К полученному раствору прибавляют 10 мл воды и перемешивают. К 5 мл полученного раствора прибавляют 6 мл раствора натрия гидроксида 8,5 %; раствор должен окраситься в фиолетовый цвет с зеленовато-жёлтой флуоресценцией, с постепенным переходом окраски в оранжевую и в жёлтую, с сохранением интенсивной флуоресценции.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 10 % субстанции в воде, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

pH раствора. От 5,9 до 6,4 (5 % раствор в воде, свободной от углерода диоксида, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 1,4 г натрия пентансульфоната растворяют в 900 мл воды, доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 2,2. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Растворитель. Фосфорная кислота концентрированная—ПФ 1,5:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг javascript:try%20%7B%20openDoc('1192200E.htm',%20'_self')%20%7D%20catch(e)%20%7B%20%7D;[глицина] ангидрида (примесь В) (точная навеска), 50 мг диглицина (примесь Н) (точная навеска) и 50 мг триглицина (примесь I) (точная навеска) растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 80 мг субстанции и 80 мг иминодиуксусной кислоты (примесь А) (точная навеска) растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A (иминодиуксусная кислота): 2,2ʹ-азандиилдиуксусная кислота [142-73-4].

Примесь B (глицина ангидрид): пиперазин-2,5-дион [106-57-0].

Примесь H (диглицин): глицилглицин [556-50-3].

Примесь I (триглицин): глицилглицилглицин [556-33-2].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 4-кратное от времени удерживания пика глицина. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, стандартный раствор, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Глицин – 1,0 (около 5,5 мин); примесь А – около 0,7; примесь В – около 0,75; примесь Н – около 1,7; примесь I – около 2,0.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей В, Н и I используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и глицина должно быть не менее 5,0.

Содержание каждой из примесей B, H и I в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей B, H и I на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика каждой соответствующей примеси на хроматограмме стандартного раствора;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска каждой соответствующей примеси мг;
P – содержание основного вещества в каждой соответствующей примеси,%.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика глицина на хроматограмме раствора сравнения.
а1 – навеска субстанции, мг;

Допустимое содержание примесей:

- примеси B, H и I – не более 0,1 % каждая;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,2 %.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

Нингидрин-положительные примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Аминокислотный анализ» (Метод 1).

Примечание – Концентрации испытуемого и стандартных растворов могут быть адаптированы в соответствии с чувствительностью используемого оборудования. Концентрации всех растворов допускается регулировать, таким образом, чтобы выполнялись требования пригодности системы, при сохранении соотношений концентраций между всеми растворами, как описано.

Растворитель. Вода или буферный раствор для пробоподготовки, подходящий для используемого прибора.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе, доводят объём растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём растворителем до метки, перемешивают. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор L-пролина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 30 мг (точная навеска) L-пролина растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) L-изолейцина и 30 мг (точная навеска) L-лейцина растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Детектор | спектрофотометрический, 570 нм (для определения нингидрин-положительного вещества); |
| спектрофотометрический, 440 нм (для определения нингидрин-положительного вещества). |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор L-пролина, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками L-изолейцина и L-лейцина должно быть не менее 1,5.

Содержание любой нингидрин-положительной примеси, обнаруженной при длине волны 570 нм, в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой нингидрин-положительной примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика глицина на хроматограмме раствора сравнения.
а1 – навеска субстанции, мг;

Содержание любой нингидрин-положительной примеси, обнаруженной при длине волны 440 нм в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой нингидрин-положительной примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика L-пролина на хроматограмме раствора L-пролина.
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска L-пролина, мг;
P – содержание основного вещества в L-пролине,%.

Если концентрация обнаруженной нингидрин-положительной примеси при обоих значениях длины волны превышает 0,05 %, следует использовать результат, полученный при длине волны 570 нм.

Допустимое содержание примесей:

- любой нингидрин-положительной примеси – не более 0,1 % каждая;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают примеси, содержание которых менее 0,05 %.

Хлориды. Не более 0,0075 % (ОФС «Хлориды»). 0,267 г субстанции растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 10 мл.

Сульфаты. Не более 0,0065 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). 1,54 г субстанции растворяют в воде при нагревании на водяной бане до 40 °С и доводят водой до 10,0 мл.

*** Аммоний. Определение проводят в соответствии с ОФС «Аминокислотный анализ» (Метод 1) в условиях испытания «Нингидрин-положительные примеси» со следующими изменениями.

Стандартный раствор аммоний-иона. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 6,0 мл аммония стандартного раствора 100 мкг/мл, доводят объём растворителем до метки, перемешивают. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Контрольный раствор. Растворитель.

Хроматографические условия

- Детектор спектрофотометрический, 570 нм.

Хроматографируют контрольный раствор, стандартный раствор аммоний-иона и испытуемый раствор.

Допустимое содержание примесей

На хроматограмме испытуемого раствора (при длине волны 570 нм) площадь пика аммоний-иона не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме стандартного раствора аммоний-иона с учётом пика аммония-иона на хроматограмме контрольного раствора (не более 0,02 %).

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 1.

*** Железо. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Железо» (метод 3) в зольном остатке, полученном после сжигания 0,3 г субстанции (ОФС «Сульфатная зола»), с использованием стандартного раствора железо(III)-иона 1 мкг/мл.

** Мышьяк. Не более 0,0001 %. (ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения используют 0,5 г субстанции.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 6,0 ЕЭ на 1 г субстанции глицина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 70 мг (точная навеска) субстанции в 5 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 50 мл кислоты уксусной ледяной и немедленно после растворения титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 7,51 мг глицина C2H5NO2.

##### Хранение

В хорошо укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

*** Если допускается технологическим процессом.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0087 Глутаминовая кислота

Взамен ФС.2.1.0087.18

##### Определение

(2S)-2-Аминопентандиовая кислота.

L-Глутаминовая кислота.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 100,5 % глутаминовой кислоты C5H9NO4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Легко растворим в кипящей воде, мало растворим в воде, практически нерастворим в ацетоне и в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца глутаминовой кислоты.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах воды, выпаривают досуха при 60 °С и записывают спектры сухих остатков.

2. ТСХ. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора Б по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции глутаминовой кислоты на хроматограмме раствора стандартного образца глутаминовой кислоты (раздел «Родственные примеси»).

3. Качественная реакция. Растворяют при нагревании 20 мг субстанции в 1 мл воды, прибавляют 1 мл свежеприготовленного нингидрина раствора 0,1 % и нагревают; должно появиться сине-фиолетовое окрашивание.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Растворяют 5 г субстанции при нагревании в 50 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Удельное вращение. От +30,5 до +32,5 в пересчёте на сухое вещество (10 % раствор субстанции в хлористоводородной кислоте разведённой 8,3 %, ОФС «Оптическое вращение»).

рН раствора. От 3,1 до 3,7 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—вода—бутанол 20:20:60.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в 5 мл аммиака раствора разведённого 3,5 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца глутаминовой кислоты. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца глутаминовой кислоты, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора Б и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца глутаминовой кислоты и 10 мг фармакопейного стандартного образца аспарагиновой кислоты, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора А, испытуемого раствора Б, раствора стандартного образца глутаминовой кислоты, раствора сравнения и раствора для проверки пригодности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают нингидрина раствором 0,2 %, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С в течение 15 мин и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 разделённые зоны адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора А зона адсорбции любой примеси по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции глутаминовой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Аммоний. Не более 0,02 % (ОФС «Аммоний»). Взбалтывают 0,2 г субстанции с 20 мл воды, свободной от аммиака, в течение 5 мин и фильтруют.

Железо. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Железо» (раздел «Определение солей железа в зольном остатке органических соединений», метод 1) с использованием 3,0 г субстанции.

Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Растворяют 1,25 г субстанции при нагревании в хлористоводородной кислоте разведённой 8,3 %, доводят тем же растворителем до 25 мл и фильтруют.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,25 г субстанции в 24 мл воды, прибавляют 1 мл азотной кислоты разведённой 12,5 %, перемешивают и фильтруют.

Сульфатная зола. Не более 0,1 %. (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,13 г (точная навеска) субстанции при нагревании в 50 мл воды, свободной от диоксида углерода, охлаждают и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до перехода жёлтой окраски в голубовато-зелёную (индикатор – 0,1 мл бромтимолового синего раствора 0,05 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 14,71 мг глутаминовой кислоты C5H9NO4.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0399 Глутатион

Вводится впервые

##### Определение

L-γ-Глутамил-L-цистеинилглицин.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % глутатиона C10H17N3O6S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Легко растворим в воде, очень мало растворим в этаноле 96 % и метиленхлориде.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца глутатиона.

##### Испытания

Удельное вращение. От −15,5 до −17,5 в пересчёте на сухое вещество (4 % раствор субстанции в воде ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 5,0 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом капиллярного электрофореза (ОФС «Капиллярный электрофорез»).

Все растворы используют сразу после приготовления.

Ведущий электролит (ВЭ). В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 1,5 г натрия дигидрофосфата безводного, растворяют в 230 мл воды, доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 1,8 и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор внутреннего стандарта А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г (точная навеска) фенилаланина, растворяют в ВЭ и доводят объём раствора ВЭ до метки.

Раствор внутреннего стандарта Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл раствора внутреннего стандарта А и доводят объём раствора ВЭ до метки.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции, растворяют в ВЭ и доводят объём раствора ВЭ до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворе внутреннего стандарта Б и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворе внутреннего стандарта А и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ВЭ до метки.

Раствор для проверки пригодности электрофоретической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают по 5 мг L-цистеина, глутатиона окисленного и L-γ-глутамил-L-цистеина, растворяют в ВЭ и доводят объём раствора ВЭ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,2 г субстанции, растворяют в 5 мл ВЭ, прибавляют 1,0 мл раствора внутреннего стандарта А, 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ВЭ до метки.

Контрольный раствор. ВЭ.

Примечание

Примесь А: L-цистеинилглицин [19246-18-5].

Примесь В (L-цистеин): (2R)-2-амино-3-сульфанилпропановая кислота [52-90-4].

Примесь С (глутатион окисленный): (2→2')-бис(L-γ-глутамил-L-цистеинилглицин)дисульфид [27025-41-8].

Примесь D: L-γ-глутамил-L-цистеин [636-58-8].

Примесь E: неизвестная структура.

Электрофоретические условия

Капилляр | кварцевая капиллярная, 50 см × 75 мкм; |
Прекондиционирование нового капилляра | Растворитель | Время, мин | Давление, кПа
| хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М | 20 | 138;
| вода | 10 | 138;
| ВЭ | 40 | 350;
| Для полного уравновешивания капилляра предыдущую стадию промывки повторяют при напряжении 20 кВ в течение 60 мин; |
Прекондиционирование капилляра | ВЭ | 40 | 138;
Промывка капилляра | вода | 1 | 138;
| натрия гидроксида раствор 0,1 М | 2 | 138;
| вода | 1 | 138;
| хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М | 3 | 138;
| ВЭ | 10 | 138;
Температура капилляра | 25 °C; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 200 нм; |  |
Ввод пробы | 5 с·3,45 кПа; |  |
Напряжение | 20 кВ; |  |
Время анализа | 45 мин. |  |

Последовательно анализируют контрольный раствор, раствор для проверки пригодности электрофоретической системы, стандартный раствор, испытуемый раствор А и испытуемый раствор Б.

Относительное время миграции. Внутренний стандарт – 1 (около 14 мин); примесь А – около 0,77; примесь В – около 1,04; примесь Е – около 1,2; примесь С – около 1,26; примесь D – около 1,3.

Пригодность электрофоретической системы. На электрофореграмме испытуемого раствора А не должно быть пика, соответствующего по времени миграции пику внутреннего стандарта, при необходимости корректируют площадь внутреннего стандарта.

На электрофореграмме раствора для проверки пригодности электрофоретической системы:

- разрешение (RS) между пиками внутреннего стандарта и примеси В должно быть не менее 1,5, при необходимости увеличивают значение рН натрия гидроксида раствором 8,5 %;

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси D и глутатиона должно быть не менее 2,5, при необходимости уменьшают значение рН фосфорной кислотой концентрированной.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь В – 3,0; примесь D – 1,4.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где B1 – отношение площади пика любой примеси к площади пика внутреннего стандарта на электрофореграмме испытуемого раствора (Б);
B0 - отношение площади пика глутатиона к площади пика внутреннего стандарта на электрофореграмме стандартного раствора;
t1 - время миграции соответствующей примеси на электрофореграмме испытуемого раствора (Б), мин;
t0 - время миграции глутатиона на электрофореграмме стандартного раствора, мин;
tis1 - время миграции внутреннего стандарта на электрофореграмме испытуемого раствора (Б), мин;
tis0 - время миграции внутреннего стандарта на электрофореграмме стандартного раствора, мин.

Допустимое содержание примесей:

- примеси А, В, Е – не более 0,5 % каждая;

- примесь С – не более 1,5 %;

- примесь D – не более 1,0 %;

- любая другая примесь – не более 0,2 %;

- сумма примесей – не более 2,5 %.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Аммоний. Не более 0,02 %

Стандартный раствор аммония. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 74,1 мг (точная навеска) аммония хлорида, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10,0 мл полученного раствора. Раствор готовится непосредственно перед использованием.

Испытуемый раствор. В коническую колбу с притёртой пробкой вместимостью 25 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в 1 мл воды, прибавляют 0,3 г магния оксида и перемешивают.

Эталонный раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,1 мл стандартного раствора аммония, прибавляют 1 мл воды, 0,3 г магния оксида и перемешивают.

Над реакционными смесями испытуемого и эталонного растворов подвешивают по полоске полиэтилена шириной 1 см с прикреплёнными несколькими каплями воды отрезками серебряно-марганцевой бумаги, и закрывают колбы пробками. Содержимое колб перемешивают, не допуская попадания брызг на бумагу, и выдерживают на водяной бане при температуре 40 ºС в течение 30 мин. Окраска бумаги, используемой в испытуемом растворе, не должна быть интенсивнее окраски бумаги, используемой в эталонном растворе.

Железо. Не более 0,001 % (ОФС «Железо», метод 2).

Испытуемый раствор. В делительную воронку помещают 1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 10 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 %, экстрагируют тремя порциями метилизобутилкетона по 10 мл, каждый раз встряхивая в течение 3 мин. Объединяют органические извлечения, прибавляют 10 мл воды и встряхивают в течение 3 мин. Используют водный слой.

Сульфаты. Не более 0,03 % (ОФС «Сульфаты», метод 2).

Испытуемый раствор. Смешивают 5 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», и 15 мл воды.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в азотной кислоте разведённой 12,5 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора, прибавляют 10 мл водорода пероксида, нагревают на водяной бане в течение 30 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии. (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В коническую колбу с притёртой пробкой помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, 2,0 г калия йодида растворяют в 50 мл воды, охлаждают на ледяной бане, прибавляют 10,0 мл хлористоводородной кислоты 25 %, 20,0 мл йода раствора 0,05 М, закрывают колбу пробкой и выдерживают в тёмном месте в течение 15 мин, титруют натрия тиосульфата раствором 0,1 М. Индикатор прибавляют ближе к концу титрования (индикатор – 1,0 мл крахмала раствор 1 %, содержащий 0,01 % ртути(II)).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл раствора йода 0,05 М соответствует 30,73 мг глутатиона C10H17N3O6S.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0656 Гозерелина ацетат

Гозерелин
Goserelini acetas

Вводится впервые

##### Определение

2-(5-Оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-L-тирозил-O-трет-бутил-D-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамида ацетат.

Cодержит не менее 94,5 % и не более 103,0 % гозерелина C59H84N18O14 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей и уксусной кислоты вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Легко растворим в уксусной кислоте ледяной, легко растворим или растворим в воде, растворим в натрия гидроксида растворе 0,1 М.

##### Идентификация

1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика гозерелина на хроматограмме раствора фармакопейного стандартного образца гозерелина (раздел «Количественное определение»).

2. Аминокислотный состав. Определение проводят в соответствии с ОФС «Аминокислотный анализ» (гидролиз по методу 1 в жидкой фазе, анализ по методу 1). Относительное содержание каждой аминокислоты рассчитывают в мольных долях, принимая за единицу одну шестую суммарного мольного содержания глутаминовой кислоты, гистидина, тирозина, лейцина, аргинина, пролина и серина по формуле:

где ni – количество молей соответствующей аминокислоты, мкмоль;
– сумма мольного содержания глутаминовой кислоты, гистидина, тирозина, лейцина, аргинина, пролина, серина, мкмоль.

Относительное содержание аминокислот должно быть в следующих пределах: глутаминовая кислота от 0,9 до 1,1; гистидин от 0,9 до 1,1; тирозин от 0,9 до 1,1; лейцин от 0,9 до 1,1; аргинин от 0,9 до 1,1; пролин от 0,9 до 1,1; серин от 1,6 до 2,2. Остальные аминокислоты могут присутствовать не более чем в следовых количествах, за исключением триптофана.

##### Испытания

Удельное вращение. От –52 до –56 в пересчёте на безводное, свободное от уксусной кислоты и остаточных органических растворителей вещество (0,2 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,05 г субстанции в 25 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН. От 4,0 до 6,5 (раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

* Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Трифторуксусная кислота—ацетонитрил—вода 0,5:200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Готовят раствор фармакопейного стандартного образца примеси А в воде с концентрацией 0,1 мг/мл. К 1,0 мл полученного раствора прибавляют 1,0 мл раствора сравнения Б.

Раствор для идентификации пиков. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца гозерелина смеси для валидации растворяют в 1,0 мл воды.

Примечание

Примесь А ([4-D-серин]гозерелин):
2-(5-оксо-L-пролил-D-гистидил-L-триптофил-L-серил-L-тирозил-O-трет-бутил-D-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамид
[1926163-39-4].

Примесь В ([6-O-трет-бутил-L-серин]гозерелин):
2-(5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-L-тирозил-O-трет-бутил-L-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.

Примесь С ([9-D-пролин]гозерелин):
2-(5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-L-тирозил-O-трет-бутил-D-серил-L-лейцил-L-аргинил-D-пролил)гидразинкарбоксамид.

Примесь D (де-9-L-пролин-гозерелин):
2-(5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-L-тирозил-O-трет-бутил-D-серил-L-лейцил-L-аргинил)гидразинкарбоксамид.

Примесь E (гозерелин-(1-8)-пептидил-L-пролингидразид):
5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-L-тирозил-O-трет-бутил-D-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролингидразид.

Примесь F ([5-D-тирозин]гозерелин):
2-(5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-D-тирозил-O-трет-бутил-D-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.

Примесь G ([2-D-гистидин]гозерелин):
2-(5-оксо-L-пролил-D-гистидил-L-триптофил-L-серил-D-тирозил-O-трет-бутил-L-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.

Примесь Н ([1-(5-оксо-D-пролин)]гозерелин):
2-(5-оксо-D-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-D-тирозил-O-трет-бутил-L-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.

Примесь I (эндо-8a,8b-ди-L-пролин-гозерелин):
2-(5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-D-тирозил-O-трет-бутил-L-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил-L-пролил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.

Примесь J (эндо-8a-L-пролин-гозерелин):
2-(5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-D-тирозил-O-трет-бутил-L-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.

Примесь К ([4-O-ацетил-L-серин]гозерелин):
2-(5-оксо-L-пролил-O-ацетил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-D-тирозил-O-трет-бутил-L-серил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.

Примесь L ([7-D-лейцин]гозерелин):
2-(5-оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-D-тирозил-O-трет-бутил-L-серил-D-лейцил-L-аргинил-L-пролил)гидразинкарбоксамид.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, кремнийорганический полимер, аморфный, октадецилсилильный с полярными мостиками, эндкепированный для хроматографии, 3,5 мкм, размер пор 12,5 нм; |
Температура колонки | 50-55 °С; |  |
Скорость потока | 0,7-1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 90 мин. |  |

Хроматографируют раствор для идентификации пиков, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения А и испытуемый раствор.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков используют хроматограмму раствора для идентификации пиков и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу гозерелина смеси для валидации.

Относительное время удерживания соединений. Гозерелин – 1 (от 40 до 50 мин); примесь А – около 0,67; примесь С – около 0,78; примесь В – около 0,79; примесь D – около 0,85; примесь Е – около 0,89; примесь F – около 0,92; примесь G – около 0,94; примесь H – около 0,98; примесь I – около 1,43; примесь J – около 1,53; примесь K – около 1,67; примесь L – около 1,77.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси А и гозерелина должно быть не менее 7,0;

- фактор асимметрии пика (AS) гозерелина должен быть от 0,8 до 2,5;

- фактор асимметрии пика (AS) примеси А должен быть от 0,8 до 2,5.

На хроматограмме раствора для идентификации пиков расположение пиков должно быть аналогично хроматограмме, прилагаемой к фармакопейному стандартному образцу гозерелина смеси для валидации; 2 пика, расположенные до пика основного вещества (соответствуют примесям E и G), должны быть хорошо различимы.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси Е не должна превышать площадь пика гозерелина на хроматограмме раствора сравнения А (не более 1,0 %);

- площадь пика любой примеси не должна превышать 0,5 площади пика гозерелина на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 2,5 площади пика гозерелина на хроматограмме раствора сравнения А (не более 2,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,05 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (менее 0,05 %).

Вода. Не более 10,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 50 мг (точная навеска) субстанции.

Уксусная кислота. От 4,5 до 15,0 %. (ОФС «Определение уксусной кислоты в синтетических пептидах»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в смеси ПФБ—ПФА 5:95 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 16,0 ЕЭ на 1 мг гозерелина ацетата (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца гозерелина. Готовят раствор фармакопейного стандартного образца гозерелина в воде с концентрацией гозерелина около 1,0 мг/мл.

Хроматографические условия

- Время хроматографирования: 60 мин

Хроматографируют раствор фармакопейного стандартного образца гозерелина и испытуемый раствор.

Содержание гозерелина C59H84N18O14 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей и уксусной кислоты вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика гозерелина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика гозерелина на хроматограмме раствора фармакопейного стандартного образца гозерелина;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца гозерелина, мг;
P – содержание гозерелина в фармакопейном стандартном образце гозерелина,%;
W – содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
A – содержание уксусной кислоты в субстанции,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте при температуре от 2 до 8 °С.

* При необходимости следует отрегулировать скорость потока ПФ; если регулировка скорости потока не приводит к указанному времени удерживания основного пика, рекомендуется изменить долю ацетонитрила в ПФ, чтобы получить указанное время удерживания для гозерелина.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0657 Гранисетрона гидрохлорид

Гранисетрон
Granisetroni hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

1-Метил-N-[(1R,3r,5S)]-9-метил-9-азабицикло[3.3.1]нон-3-ил]-1H-индазол-3-карбоксамида гидрохлорид.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % гранисетрона гидрохлорида C18H24N4O·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, умерено растворим в метиленхлориде, мало растворим в метаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гранисетрона гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 20 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 4,0 до 6,5 (раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

Примесь Е. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 %—2-пропанол—этилацетат 6,5:30:50.

Растворитель. Вода—ацетонитрил 20:80.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 0,25 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси Е. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси Е ((1R,3r,5S)-9-метил-9-азабицикло[3.3.1]нонан-3-амин [76272-41-8], растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

На линию старта пластинки наносят по 2 мкл испытуемого раствора (100 мкг) и раствора стандартного образца примеси Е (0,5 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе до удаления следов растворителей, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, высушивают до удаления следов растворителей. Пластинку помещают в камеру, насыщенную парами йода и выдерживают в течение 30 мин, вынимают из камеры и просматривают при дневном свете.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции, находящаяся на уровне зоны адсорбции примеси E, по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца примеси Е (не более 0,5 %).

Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от воздействия света.

Подвижная фаза (ПФ). Прибавляют 1,6 мл фосфорной кислоты концентрированной к 800 мл воды для хроматографии, прибавляют 200 мл ацетонитрила и перемешивают. К полученному раствору прибавляют 1 мл гексиламина, перемешивают и доводят значение рН свежеперегнанным триэтиламином (около 4 мл) до 7,5.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца гранисетрона примеси А [127472-42-8] в 1,0 мл ПФ.

Раствор стандартного образца примеси В. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца гранисетрона примеси B [107007-95-4] в 1,0 мл ПФ.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В прозрачную пробирку помещают 2,0 мл испытуемого раствора, выдерживают в течение 4 ч при прямом солнечном свете или 16 ч при УФ-свете. Раствор содержит примесь С [160177-67-3], полученную путём частичной деградации гранисетрона.

В процессе деградации должно образоваться не менее 0,3 % примеси С. Степень деградации гранисетрона контролируется по хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы по величине соответствующего пика. Если в полученном растворе содержание примеси С менее 0,3 %, то раствор повторно выдерживают при солнечном свете или под УФ-лампой до достижения необходимого значения.

Примечание

Примесь А:
2- метил-N-[(1R,3r,5S)]-9-метил-9-азабицикло[3.3.1]нон-3-ил]-2H-индазол-3-карбоксамид
[127472-42-8].

Примесь В:
N-[(1R,3r,5S)]-9-метил-9-азабицикло[3.3.1]нон-3-ил]-1H-индазол-3-карбоксамид
[107007-95-4].

Примесь С:
N-[(1R,3r,5S)]-9-азабицикло[3.3.1]нон-3-ил]-1-метил-1H-индазол-3-карбоксамид
[160177-67-3].

Примесь D: 1-метил-1H-индазол-3-карбоновая кислота [50890-83-0].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 305 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика гранисетрона. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси В, раствор стандартного образца примеси А, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Гранисетрон –1 (около 7 мин); примесь D – около 0,4; примесь В – около 0,5; примесь А – около 0,7; примесь С – около 0,8.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками гранисетрона и примеси С должно быть не менее 3,5.

На хроматограмме раствора сравнения фактор асимметрии (AS) пика гранисетрона должен быть не более 2,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси В умножают на 1,7.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси В не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси С не должна превышать 0,4 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси А не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

- площадь пика примеси D не должна превышать 0,2 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,2 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 105 °С в течение 4 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 25 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца гранисетрона гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гранисетрона гидрохлорида, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца гранисетрона гидрохлорида и испытуемый раствор.

Содержание гранисетрона гидрохлорида C18H24N4O·HCl в субстанции в процентах в пересчёте на сухое вещество (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика гранисетрона на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика гранисетрона на хроматограмме раствора стандартного образца гранисетрона гидрохлорида;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца гранисетрона гидрохлорида, мг;
P – содержание гранисетрона гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце гранисетрона гидрохлорида,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0673 Гризеофульвин

Гризеофульвин
Griseofulvinum

Взамен ФС 42-1878-97

C17H17ClO6 [126-07-8] | М.м. 352,77

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(1'S,6'R)-6'-Метил-2',4,6-триметокси-7-хлор-3H-спиро[1-бензофуран-2,1'-циклогекс[2]ен]-3,4'-дион.

Субстанция образуется в результате роста определённых штаммов Penicillium griseofulvum.

Cодержит не менее 94,0 % и не более 102,0 % гризеофульвина C17H17ClO6 в пересчёте на сухое вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или желтовато-белый кристаллический порошок со слабым специфическим запахом.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в диметилформамиде, мало растворим в этаноле, практически нерастворим в воде.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гризеофульвина.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах ацетона, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика гризеофульвина на хроматограмме раствора стандартного образца гризеофульвина (раздел «Количественное определение»).

##### ИСПЫТАНИЯ

Размер частиц. Не более 4 мкм; отдельные частицы (не более 3 в поле зрения) не более 15 мкм (ОФС «Оптическая микроскопия). Для проведения испытания к 10 мг субстанции прибавляют 1 мл воды и 2 капли полисорбата-80.

Температура плавления. От 217 до 224 °C (ОФС «Температура плавления»).

Удельное вращение. От +354 до +364 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в диметилформамиде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,75 г субстанции в 10 мл диметилформамида должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y4 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность. Суспендируют 0,25 г субстанции в 20 мл спирта 96 %, прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствора 0,1 %. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 1,0 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. К 950 мл воды прибавляют 1,0 мл муравьиной кислоты безводной и доводят рН раствора аммиака раствором 2 М до 4,5. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор—вода 200:800.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Вода—буферный раствор—ацетонитрил 150:200:650.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФБ и доводят объём раствора ПФБ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФБ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца гризеофульвина для проверки пригодности системы, содержащего примеси А, В и С, растворяют в ПФБ и доводят объём раствора ПФБ до метки.

Примечание

Примесь A:
(1′S,6′R)-6′-метил-4,6-диметокси-7-хлор-3H-спиро[1-бензофуран-2,1′-циклогексан]-2′,3,4′-трион.

Примесь B:
(1′S,6′R)-6′-метил-2′,4,6-триметокси-3H-спиро[1-бензофуран-2,1′-циклогекс[2]ен]-3,4′-дион.

Примесь C:
(1′S)-6′-метил-2′,4,6-триметокси-7-хлор-3H-спиро[1-бензофуран-2,1′-циклогекса[2,5]диен]-3,4′-дион.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки | 30 °С;
Скорость потока | 1,0 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 290 нм;
Объём пробы | 10 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–3 | 50 | 50
3–13 | 50 → 40 | 50 → 60
13–16 | 40 → 10 | 60 → 90
16–24 | 10 | 90
24–30 | 10 → 50 | 90 → 50

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Гризеофульвин – 1 (около 16 мин); примесь А – около 0,4; примесь В – около 0,7; примесь С – около 1,1.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В и С используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками гризеофульвина и примеси С должно быть не менее 3,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси А умножают на 0,6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси В не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика гризеофульвина на хроматограмме раствора сравнения (не более 3,0 %);

- площадь пика примеси А не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика гризеофульвина на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0 %);

- площадь пика примеси С не должна превышать 0,75 площади пика гризеофульвина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,75 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,15 площади пика гризеофульвина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика гризеофульвина на хроматограмме раствора сравнения (не более 5,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,1 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,0025 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 0,4 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца гризеофульвина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гризеофульвина, растворяют в ПФБ и доводят объём раствора ПФБ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца гризеофульвина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца гризеофульвина относительное стандартное отклонение площади пика гризеофульвина должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание гризеофульвина C17H17ClO6 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика гризеофульвина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика гризеофульвина на хроматограмме раствора стандартного образца гризеофульвина;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца гризеофульвина, мг;
P – содержание гризеофульвина в фармакопейном стандартном образце гризеофульвина, %;
W – потеря в массе при высушивании субстанции, %.

##### ХРАНЕНИЕ

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0400 Дазатиниб

Вводится впервые

##### Определение

2-({6-[4-(2-Гидроксиэтил)пиперазин-1-ил]-2-метилпиримидин-4-ил}амино)-N-(2-метил-6-хлорфенил)-1,3-тиазол-5-карбоксамид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % дазатиниба C22H26СlN7O2S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком мелкокристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в диметилсульфоксиде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дазатиниба.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 250 до 400 нм должен иметь минимум при 277±3 нм и максимум при 322±3 нм.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие дазатиниб, используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 3,85 г аммония ацетата в 900 мл воды и доводят рН раствора уксусной кислотой ледяной до 5,25. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Метанол—ацетонитрил—буферный раствор 50:250:700.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол—ацетонитрил 50:950.

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 200 мл воды, 8,3 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 500 мл полученного раствора и 500 мл метанола.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, прибавляют 30 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком до растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг субстанции, прибавляют 25 мл метанола и 15 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М и обрабатывают ультразвуком до растворения. Охлаждают до комнатной температуры, доводят объём раствора натрия гидроксида раствором 0,1 М до метки, переносят раствор в коническую колбу и нагревают на водяной бане при температуре 80 °С в течение 2 ч. Раствор охлаждают до комнатной температуры.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А:
2-[(2-метил-6-хлорпиримидин-4-ил)амино]-N-(2-метил-6-хлорфенил)-1,3-тиазол-5-карбоксамид
[302964-08-5].

Примесь B: 2-амино-N-(2-метил-6-хлорфенил)-1,3-тиазол-5-карбоксамид [302964-24-5].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Температура образца | 10 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 320 нм по сравнению с 400 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2 | 100 | 0
2–31 | 100 → 80 | 0 → 20
31–36 | 80 | 20
36–38 | 80 → 100 | 20 → 0
38–43 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дазатиниб – 1 (около 11 мин); примесь В – около 0,5; примесь А – около 2,8.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика дазатиниба должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиком с относительным временем удерживания около 0,79 и пиком дазатиниба должно быть не менее 3,0.

На хроматограмме испытуемого раствора:

- фактор асимметрии пика (AS) дазатиниба должен быть не более 2,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика дазатиниба должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику дазатиниба, должна составлять не менее 5000 теоретических тарелок.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси В умножают на 2,7.

Допустимое содержание примесей. Содержание любой примеси в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- любая примесь – не более 0,2%;

- сумма примесей – не более 0,6 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции и в качестве растворителя 5 мл метанола безводного.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 2) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в смеси 60 мл уксусной кислоты безводной и 10 мл ртути(II) ацетата раствора 5 % и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 24,4 мг дазатиниба C22H26 СlN7O2S.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0401 Дактиномицин

Взамен ФС 42-1554-87

##### Определение

Акриноцинил-бис(L-треонил-D-валинил-L-пролинил-саркозил-N-метил-L-валинил)-лактон.

Содержит не менее 95,0 % и не более 103,0 % дактиномицина C62H86N12O16 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Оранжево-красный кристаллический порошок.

* Чувствителен к свету. Гигроскопичен.

Растворимость. Растворим в ацетоне, мало растворим в метаноле и спирте 96 %, очень мало растворим в воде при температуре от 8 до 10 °C, практически нерастворим в воде при температуре 20 °С.

##### Идентификация

1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика дактиномицина на хроматограмме раствора стандартного образца дактиномицина (раздел «Родственные примеси»).

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца дактиномицина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца дактиномицина, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Оптическая плотность испытуемого раствора при длине волны 445 нм должна быть не менее 95,0 % и не более 103,0 % по отношению к раствору стандартного образца дактиномицина.

- Отношение значений оптической плотности испытуемого раствора и раствора стандартного образца дактиномицина А240/А445 должно быть 1,4±0,1.

##### Испытания

Удельное вращение. От −293 до −329 в пересчёте на сухое вещество (0,1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 1 мг субстанции в 1 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»). Раствор выдерживают в течение 30 мин при температуре от −5 до −7 °С и доводят до комнатной температуры.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—ацетонитрил 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца дактиномицина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дактиномицина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор феноксазина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг феноксазина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Смешивают раствор стандартного образца дактиномицина и раствор феноксазина 2:1.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца дактиномицина и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 20 °С; |  |
Скорость потока | 1,9 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика дактиномицина. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дактиномицин – 1 (около 5 мин); феноксазин – около 0,8.

Пригодность хроматографической систем

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика дактиномицина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками феноксазина и дактиномицина должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- любая примесь – не более 0,5 %;

- сумма примесей – не более 3,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 % от суммы площадей всех пиков.

Потеря в массе при высушивании. Не более 5,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают в вакууме до постоянной массы 0,1 г (точная навеска) субстанции при температуре 60 °С и остаточном давлении 5 мм.рт.ст.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 7 мкг дактиномицина в 0,5 мл воды на мышь, внутривенно со скоростью 0,1 мл/с. Срок наблюдения – 14 сут.

Бактериальные эндотоксины. Не более 80 ЕЭ на 1 мг дактиномицина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ одновременно с испытанием «Родственные примеси».

Хроматографируют раствор стандартного образца дактиномицина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца дактиномицина:

- фактор асимметрии пика (AS) дактиномицина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика дактиномицина должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику дактиномицина, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

Содержание дактиномицина C62H86N12O16 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика дактиномицина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика дактиномицина на хроматограмме раствора стандартного образца дактиномицина;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца дактиномицина, мг;
P - содержание дактиномицина в фармакопейном стандартном образце дактиномицина,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0658 Дапсон

Взамен ФС 42-2316-85

##### Определение

4,4′-Сульфонилдианилин.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % дапсона C12H12N2O2S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или желтовато-белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в ацетоне, умеренно растворим в спирте 96 %, очень мало или практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дапсона.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь максимумы при 260 нм с удельным показателем поглощения от 700 до 760 и при 295 нм с удельным показателем поглощения от 1150 до 1250.

##### Испытания

Температура плавления. От 175 до 181 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Вода.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 50:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 30 мл растворителя и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2 мг субстанции, 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси A, 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси B и 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси C, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A: 4-(4-аминобензол-1-сульфонил)фенол [25963-47-7].

Примесь B: 4-(бензолсульфонил)анилин [7146-68-1].

Примесь C: 4,4′-[оксибис[(4,1-фенилен)сульфонил]]дианилин [25963-47-7].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время,мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 75 | 25
10–20 | 75 → 50 | 25 → 50
20–35 | 50 | 50

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дапсон − 1 (около 7 мин); примесь A − около 1,1; примесь B − около 2,5; примесь C − около 3,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примеси A, B и C используют хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками дапсона и примеси A должно быть не менее 2,0.

Поправочные коэффициенты

Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь А – 1,9; примесь В – 2,7; примесь С – 1,7.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика дапсона на хроматограмме раствора сравнения;
a1 – навеска субстанции, мг.

Допустимое содержание примесей:

- примесь B – не более 0,4 %;

- примеси A и C – не более 0,3 % каждая;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в 25 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, прибавляют 3 г калия бромида, перемешивают, выдерживают от 10 до 15 мин при температуре 5 °С на ледяной бане, прибавляют 0,2 мл тропеолина 00 раствора 0,1 % и 0,1 мл раствора метиленового синего и титруют 0,1 М раствором натрия нитрита до синего окрашивания без фиолетового оттенка. Первые 7 мл раствора натрия нитрита прибавляют со скоростью 2 мл/мин, затем продолжают титрование со скоростью 50 мкл/мин.

Параллельно проводят контрольный опыт со скоростью титрования 50 мкл в мин.

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 12,42 мг дапсона C12H12N2O2S.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0402 Дарунавир

Вводится впервые

##### Определение

[(3R,3aS,6aR)-Гексагидрофуро[2,3-b]фуран-3-ил](N-{(2S,3R)-4-[4-амино-N-(2-метилпропил)бензолсульфонамидо]-3-гидрокси-1-фенилбутан-2-ил}карбамат).

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % дарунавира C27H37N3O7S в пересчёте на безводное и свободное от органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. От белого до светло-жёлтого или светло-коричневого цвета порошок.

Растворимость. Легко растворим в дихлорметане, растворим или умеренно растворим в метаноле, очень мало растворим в этаноле, очень мало растворим или практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дарунавира.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метиленхлорида, выпаривают досуха при 60 °С и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика дарунавира на хроматограмме раствора стандартного образца дарунавира (раздел «Количественное определение. ВЭЖХ»).

##### Испытания

Угол вращения. От –5,0° до +5,0° (1 % раствор субстанции в метаноле при длине кюветы 2 дм, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС («Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие дарунавир и его примеси, используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Фосфорная кислота концентрированная—вода 1:1000.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Фосфорная кислота концентрированная—метанол—ацетонитрил 1:150:850.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 70:30.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 55 мг субстанции, прибавляют 15 мл ацетонитрила, перемешивают, обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин, прибавляют 25 мл воды, охлаждают до комнатной температуры, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в 2 мл ацетонитрила и доводят объём раствора растворителем до метки. В коническую колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М, перемешивают и выдерживают в течение 15 мин при температуре 40 °С, охлаждают раствор до комнатной температуры, прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М, перемешивают и фильтруют.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 45 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 265 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 70 | 30
5–15 | 70 → 50 | 30 → 50
15–25 | 50 | 50
25–40 | 50 → 40 | 50 → 60
40–45 | 40 | 60
45–55 | 40 → 25 | 60 → 75
55–60 | 25 | 75
60–65 | 25 → 70 | 75 → 30
65–75 | 70 | 30

Перед началом работы колонку уравновешивают в течение не менее 40 мин смесью ПФА—ПФБ 70:30 при скорости потока 1,0 мл/мин.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы должны присутствовать два пика: продукт разложения с относительным временем удерживания около 0,96 и дарунавир.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика дарунавира должно быть не менее 10;

- относительное стандартное отклонение площади пика дарунавира должно быть не более 10,0 % (6 введений).

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками продукта разложения с относительным временем удерживания около 0,96 и дарунавира должно быть не менее 2,0;

- фактор асимметрии пика (AS) дарунавира должен быть не более 1,5;

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику дарунавира, должна составлять не менее 10 000 теоретических тарелок.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- любая примесь – не более 0,4 %;

- сумма примесей – не более 1,2 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 % от суммы площадей всех пиков.

Вода. Не более 2,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1, методика Б). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») или титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Все растворы, содержащие дарунавир, используют свежеприготовленными.

1. ВЭЖХ

Растворитель. Ацетонитрил—вода 300:700.

Подвижная фаза (ПФ). Фосфорная кислота концентрированная—вода—метанол 1:400:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 5 мл ацетонитрила, перемешивают до растворения и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца дарунавира. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дарунавира, прибавляют 5 мл ацетонитрила, перемешивают до растворения и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 45 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 265 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 15 мин. |  |

Хроматографируют раствор стандартного образца дарунавира и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца дарунавира:

- фактор асимметрии пика (AS) дарунавира должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика дарунавира должно быть не более 1,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику дарунавира, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

Содержание дарунавира C27H37N3O7S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика дарунавира на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика дарунавира на хроматограмме раствора стандартного образца дарунавира;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца дарунавира, мг;
P – содержание дарунавира в фармакопейном стандартном образце дарунавира,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

2. Титриметрия (альтернативный)

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 30 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»), используя стеклянный индикаторный электрод.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 54,77 мг дарунавира C27H37N3O7S.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0403 Дарунавира этанолат

Дарунавир
Darunaviri ethanolas

Вводится впервые

##### Определение

[(3R,3aS,6aR)-Гексагидрофуро[2,3-b]фуран-3-ил](N-{(2S,3R)-4-[4-амино-N-(2-метилпропил)бензолсульфонамидо]-3-гидрокси-1-фенилбутан-2-ил}карбамат)—этанол (1:1).

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % дарунавира этанолата C27H37N3O7S·C2H6O в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Порошок от белого до светло-жёлтого или светло-коричневого цвета.

Растворимость. Легко растворим в ацетоне и этилацетате, умеренно растворим в метаноле, очень мало растворим или практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дарунавира этанолата.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метиленхлорида, выпаривают досуха при 60 °С и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика дарунавира на хроматограмме раствора стандартного образца дарунавира этанолата (раздел «Количественное определение. ВЭЖХ»).

##### Испытания

Угол вращения. От –5,0° до +5,0° (1 % раствор субстанции в метаноле при длине кюветы 2 дм, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие дарунавира этанолат и его примеси, используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Фосфорная кислота концентрированная—вода 1:1000.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Фосфорная кислота концентрированная—метанол—ацетонитрил 1:150:850.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 30:70.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 55 мг субстанции, прибавляют 15 мл ацетонитрила, перемешивают, обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин, прибавляют 25 мл воды, охлаждают до комнатной температуры, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в 2 мл ацетонитрила и доводят объём раствора растворителем до метки. В коническую колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М, перемешивают и выдерживают в течение 15 мин при температуре 40 °С. Охлаждают раствор до комнатной температуры, прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М, перемешивают и фильтруют.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 45 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 265 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 70 | 30
5–15 | 70 → 50 | 30 → 50
15–25 | 50 | 50
25–40 | 50 → 40 | 50 → 60
40–45 | 40 | 60
45–55 | 40 → 25 | 60 → 75
55–60 | 25 | 75
60–65 | 25 → 70 | 75 → 30
65–75 | 70 | 30

Уравновешивают колонку смесью ПФА—ПФБ 70:30 при скорости потока 1,0 мл/мин в течение не менее 40 мин.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы должны присутствовать два пика – продукта разложения с относительным временем удерживания около 0,96 и дарунавира.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика дарунавира должно быть не менее 10;

- относительное стандартное отклонение площади пика дарунавира должно быть не более 10,0 % (6 введений).

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками продукта разложения с относительным временем удерживания около 0,96 и дарунавира должно быть не менее 2,0;

- фактор асимметрии пика (AS) дарунавира должен быть не более 1,5;

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику дарунавира, должна составлять не менее 10 000 теоретических тарелок.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- любая примесь – не более 0,4 %;

- сумма примесей – не более 1,2 %.

Не учитывают пики, содержание каждой из которых составляет менее 0,05 % от суммы площадей всех пиков.

Этанол. От 6,0 до 8,5 %. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 200 мл диметилформамида, прибавляют 50 мкл 2-метилпропанола и доводят объём раствора диметилформамидом до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворе внутреннего стандарта и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 80 мл раствора внутреннего стандарта, прибавляют 5,0 мл этанола и доводят объём раствора раствором внутреннего стандарта до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мл раствора внутреннего стандарта, прибавляют 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора раствором внутреннего стандарта до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 40 мл раствора внутреннего стандарта, прибавляют 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора раствором внутреннего стандарта до метки.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,53 мм, покрытая слоем поли(цианопропилфенил)(6)(метил)(94) силоксана, 3,0 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:4; |  |
Скорость потока | 4 мл/мин (30 см/с); |  |
Объём пробы | 1 мкл; |  |
Время хроматографирования | 17 мин. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °C
--- | --- | ---
Колонка | 0–2,5 | 65
| 2,5–3,5 | 65 → 100
| 3,5–5,5 | 100
| 5,5–7,5 | 100 → 160
| 7,5–10,0 | 160
| 10,0–13,2 | 160 → 240
| 13,2–16,2 | 240
Инжектор |  | 180
Детектор |  | 250

Время удерживания соединений: этанол – около 3 мин, 2-метилпропанол – около 5 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- фактор асимметрии пика (AS) этанола должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение отношения площади пика этанола к площади пика внутреннего стандарта должно быть не более 3,0 % (6 введений).

Содержание этанола C2H6O в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где B1 – отношение площади пика этанола к площади пика 2-метилпропанола на хроматограмме испытуемого раствора;
B0 – отношение площади пика этанола к площади пика 2-метилпропанола на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг;
P – содержание основного вещества в этаноле,%;
789,5 – плотность этанола, мг/мл.

Вода. Не более 2,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») или титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Все растворы, содержащие дарунавира этанолат, используют свежеприготовленными.

1. ВЭЖХ

Растворитель. Ацетонитрил—вода 30:70.

Подвижная фаза (ПФ). Фосфорная кислота концентрированная—вода—метанол 1:400:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 5 мл ацетонитрила, перемешивают до растворения и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца дарунавира этанолата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дарунавира этанолата, прибавляют 5 мл ацетонитрила, перемешивают до растворения и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 45 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 265 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 15 мин. |  |

Хроматографируют раствор стандартного образца дарунавира этанолата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца дарунавира этанолата:

- фактор асимметрии пика (AS) дарунавира должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика дарунавира должно быть не более 1,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику дарунавира, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

Содержание дарунавира этанолата C27H37N3O7S·C2H6O в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика дарунавира на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика дарунавира на хроматограмме раствора стандартного образца дарунавира;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца дарунавира этанолата, мг;
P – содержание дарунавира этанолата в фармакопейном стандартном образце дарунавира этанолата,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

2. Титриметрия

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 30 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»), используя стеклянный индикаторный электрод.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 59,37 мг дарунавира этанолата C27H37N3O7S·C2H6O.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0404 Даунорубицина гидрохлорид

Даунорубицин
Daunorubicini hydrochloridum

Взамен ФС 42-2612-97

##### Определение

(8S,10S)-10-[(3-амино-2,3,6-тридезокси-α-L-ликсо-гексопиранозил)окси]-8-ацетил-6,8,11-тригидрокси-1-метокси-7,8,9,10-тетрагидротетрацен-5,12-диона гидрохлорид.

Субстанция представляет собой смесь компонентов, продуцируемых определёнными штаммами Streptomyces coeruleorubidus или Streptomyces peucetius, или получаемых другим путём.

Cодержит не менее 95,0 % и не более 102,0 % даунорубицина гидрохлорида C27H29NO10·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Оранжево-красный кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде и метаноле, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в ацетоне.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца даунорубицина гидрохлорида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика даунорубицина на хроматограмме раствора стандартного образца даунорубицина гидрохлорида (А) (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 20 мг субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

рН раствора. От 4,5 до 6,5 (0,5 % раствор в воде, свободной от углерода диоксида, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы готовят непосредственно перед использованием.

Раствор А. Растворяют 2,88 г натрия лаурилсульфата в воде, прибавляют 2,25 г фосфорной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 1000 мл.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—раствор А 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца даунорубицина гидрохлорида (А). В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца даунорубицина гидрохлорида, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца даунорубицина гидрохлорида (Б). В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца даунорубицина гидрохлорида (А) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца даунорубицинона и 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца доксорубицина гидрохлорида [25316-40-9], растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца доксорубицина гидрохлорида и 10 мг фармакопейного стандартного образца эпирубицина гидрохлорида, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца даунорубицина гидрохлорида (Б) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А (даунорубицинон):
(8S,10S)-8-ацетил-6,8,10,11-тетрагидрокси-1-метокси-7,8,9,10-тетрагидротетрацен-5,12-дион
[21794-55-8].

Примесь В (даунорубицинол):
(8S,10S)-10-[(3-амино-2,3,6-тридезокси-α-L-ликсо-гексопиранозил)окси]-6,8,11-тригидрокси-8-[(1RS)-1-гидроксиэтил]-1-метокси-7,8,9,10-тетрагидротетрацен-5,12-дион
[28008-55-1].

Примесь D (доксорубицин):
(8S,10S)-10-[(3-амино-2,3,6-тридезокси-α-L-ликсо-гексопиранозил)окси]-6,8,11-тригидрокси-8-(гидроксиацетил)-1-метокси-7,8,9,10-тетрагидротетрацен-5,12-дион
[23214-92-8].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика даунорубицина. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца даунорубицина гидрохлорида (Б), стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Даунорубицин – 1 (около 15 мин); примесь А – около 0,4; примесь D – около 0,5; эпирубицин – около 0,6; примесь В – около 0,7.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика даунорубцина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками доксорубцина и эпирубицина должно быть не менее 2,0.

Содержание примеси А в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси А на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика примеси А на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца даунорубицинона, мг;
P – содержание даунорубицинона в фармакопейном стандартном образце даунорубицинона,%.

Содержание примеси D в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси D на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика примеси D на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца доксорубицина гидрохлорида, мг;
P – содержание доксорубицина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце доксорубицина гидрохлорида,%.
580,0 – молекулярная масса доксорубицина гидрохлорида;
543,5 – молекулярная масса доксорубицина.

Содержание примеси B в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси B на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика даунорубицина на хроматограмме раствора стандартного образца даунорубицина гидрохлорида (Б);
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца даунорубицина гидрохлорида, мг;
P – содержание даунорубицина в фармакопейном стандартном образце даунорубицина гидрохлорида,%.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика даунорубицина на хроматограмме раствора стандартного образца даунорубицина гидрохлорида (Б);
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца даунорубицина гидрохлорида, мг;
P – содержание даунорубицина в фармакопейном стандартном образце даунорубицина гидрохлорида,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь A и D – не более 0,5 % каждая;

- примесь B – не более 1,5 %;

- любая другая примесь – не более 0,5 %;

- сумма примесей – не более 2,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 3,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 0,2 мг даунорубицина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения – 14 суток.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,55 ЕЭ на 1 мг даунорубицина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Депрессорные вещества. Субстанция не должна обладать депрессорным действием (ОФС «Испытание на депрессорные вещества»). Тест-доза – 1,5 мг даунорубицина в 0,2 мл натрия хлорида раствора 0,9 % на 1 кг массы животного.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца даунорубицина гидрохлорида (А) и испытуемый раствор.

Содержание даунорубицина гидрохлорида C27H29NO10·HCl в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (Х) рассчитывают по формуле:

где S1 - площадь пика даунорубицина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика даунорубицина на хроматограмме раствора стандартного образца даунорубицина гидрохлорида (А);
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца даунорубицина гидрохлорида, мг;
P - содержание дауноубицина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце даунорубицина гидрохлорида,%;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0405 Дезлоратадин

Вводится впервые

##### Определение

11-(Пиперидин-4-илиден)-8-хлор-6,11-дигидро-5H-бензо[5,6]циклогепта[1,2‑b]пиридин.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % дезлоратадина C19H19ClN2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый, белый с розоватым оттенком или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 %, мало растворим или очень мало растворим в гептане, очень мало растворим или практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дезлоратадина.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метилизобутилкетона, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика дезлоратадина на хроматограмме раствора стандартного образца дезлоратадина (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Рентгеновская порошковая дифрактометрия. Дифрактограмма субстанции должна соответствовать дифрактограмме фармакопейного стандартного образца дезлоратадина (ОФС «Рентгеновская порошковая дифрактометрия»).

Для определения испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец дезлоратадина раздельно растирают в агатовой ступке в тонкодисперсный порошок. Помещают образцы в держатель, уплотняют и затирают полированным предметным стеклом. Записывают дифрактограммы испытуемого и фармакопейного стандартного образцов.

Условия дифракционного рентгеновского анализа

Кβ-фильтр | никель;
Напряжение | 40 кВ;
Ток | 35 мА;
Длина волны | 1,5418 Å;
Начальный угол 2θ | 2°;
Конечный угол 2θ | 50°;
Скорость сканирования | 0,2 с/шаг;
Увеличение | 0,02°/шаг;
Тип сканирования | непрерывное;
Скорость вращения | 30 об/мин;
Тип щели расходимости | фиксированный;
Размер щели | 0,3°;
Антирассеивающая щель | 3 мм.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,865 г натрия додецилсульфата, растворяют в 800 мл воды, прибавляют 0,5 мл трифторуксусной кислоты и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—раствор А 430:570.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 15 мл ПФ и обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца дезлоратадина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дезлоратадина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 4 мг фармакопейного стандартного образца дезлоратадина для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси А и В, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца дезлоратадина и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А:
(11RS)-11-(пиперидин-4-ил)-11-фтор-8-хлор-6,11-дигидро-5H-бензо[5,6]циклогепта[1,2‑b]пиридин
[298220-99-2].

Примесь В:
(11RS)-11-(1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)-8-хлор-6,11-дигидро-5H-бензо[5,6]циклогепта[1,2‑b]пиридин
[183198-49-4].

Хроматографические условия.

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 100 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,5-кратное от времени удерживания пика дезлоратадина. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца дезлоратадина, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дезлоратадин –1 (около 21 мин); примесь А – около 0,8; примесь В – около 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу дезлоратадина для проверки пригодности системы.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика дезлоратадина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси В и дезлоратадина должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) дезлоратадина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика дезлоратадина должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь А – 1,6; примесь В – 1,6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси В не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика дезлоратадина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика примеси A не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика дезлоратадина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика дезлоратадина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать четырёхкратную площадь пика дезлоратадина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,4 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,25 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца дезлоратадина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца дезлоратадина:

- фактор асимметрии пика (AS) дезлоратадина должен быть не менее 0,5 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика дезлоратадина должно быть не более 2 % (6 введений).

Содержание дезлоратадина C19H19ClN2 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика дезлоратадина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика дезлоратадина на хроматограмме раствора стандартного образца дезлоратадина;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца дезлоратадина, мг;
P – содержание дезлоратадина в фармакопейном стандартном образце дезлоратадина,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0089 Дексаметазон

Взамен ФС.2.1.0089.18

##### Определение

11β,17,21-Тригидрокси-16α-метил-9-фторпрегна-1,4-диен-3,20-дион.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 103,0 % дексаметазона C22H29FO5 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в этаноле, мало растворим в метиленхлориде, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дексаметазона.

2. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

- Подвижная фаза (ПФ). Метанол―метиленхлорид 10:90.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца дексаметазона. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дексаметазона, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор А. В химический стакан вместимостью 50 мл помещают 12,5 мл серной кислоты концентрированной и смешивают с 37,5 мл уксусной кислоты ледяной.

- Реактив для детектирования. Растворяют 0,25 г 2,4- дигидроксибензальдегида в 50 мл уксусной кислоты ледяной и прибавляют раствор А.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (5 мкг) и раствора сравнения (5 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, обрабатывают реактивом для детектирования, нагревают при 90 оC в течение 35 мин или до появления пятен, охлаждают до комнатной температуры и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению и величине должна соответствовать зоне адсорбции на хроматограмме раствора сравнения.

3. Качественная реакция. Около 2 мг субстанции помещают в колбу с 2 мл серной кислоты концентрированной и взбалтывают до растворения. В течение 5 мин должно образоваться бледное красновато-коричневое окрашивание. К полученному раствору прибавляют 10 мл воды и перемешивают. Окрашивание должно исчезнуть.

##### Испытания

Удельное вращение. От +86 до +92 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в этаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы защищают от света и используют свежеприготовленными или хранят при температуре 4 °С не более суток.

Подвижная фаза А (ПФА): Ацетонитрил―вода для хроматографии 250:750.

Подвижная фаза Б (ПФБ): Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в 1,5 мл ацетонитрила и прибавляют 5 мл ПФА, обрабатывают раствор ультразвуком до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дексаметазона для проверки пригодности хроматографической системы (содержит примеси B, F и G), растворяют в 0,5 мл ацетонитрила и прибавляют 1 мл ПФА, обрабатывают ультразвуком до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры.

Раствор для идентификации. Растворяют 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дексаметазона для идентификации пиков (содержит примеси J и K) в 0,5 мл ацетонитрила, прибавляют 1 мл ПФА, обрабатывают ультразвуком до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят ПФА до 2 мл.

Примечание

Примесь B:
(бетаметазон) 11β,17,21-тригидрокси-16β-метил-9-фторпрегна-1,4-диен-3,20-дион
[378-44-9].

Примесь F:
11β,21-Тригидрокси-16α-метил-9-фторпрегна-1,4-диен-3,20-дион
[382-67-2].

Примесь G:
(дексаметазона ацетат) (11β,17-дигидрокси-16α-метил-3,20-диоксо-9-фторпрегна-1,4-диен-21-ил)ацетат
[1177-87-3].

Примесь J:
17,21-дигидрокси-16α-метилпрегна-1,4-диен-3,11,20-трион
[2036-77-3].

Примесь K:
17,21-дигидрокси-16α-метилпрегна-1,4,7,9(11)-тетраен-3,20-дион
[1809224-82-5].

Условия хроматографирования

Колонка | 150 × 4,6 мм, октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии силикагель (5 мкм); |
Температура колонки | 45 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём вводимой пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,%
--- | ---
0–15 | 100
15–40 | 100 → 0

Хроматографируют раствор идентификации, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дексаметазон –1 (около 15 мин); примесь J – около 0,9; примесь B – около 0,94; примесь K –около 1,3; примесь F – около 1,5; примесь G –около 1,7.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей B, F и G используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу дексаметазона для идентификации пиков.

Для идентификации пиков примесей J и K используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для идентификации и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу дексаметазона для идентификации пиков.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси B и дексаметазона должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси G не должна превышать трёхкратную площадь пика дексаметазона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика каждой из примесей В, F, J и K не должна превышать полуторакратную площадь пика дексаметазона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика дексаметазона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика дексаметазона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика дексаметазона на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят спиртом 96 % до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 238,5 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения спирт 96 %.

Содержание дексаметазона C22H29FO5 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где A – оптическая плотность испытуемого раствора;
394 – удельный показатель поглощения дексаметазона ;
a – навеска субстанции, г;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0090 Дексаметазона натрия фосфат

Дексаметазон
Dexamethasonum

Взамен ФС.2.1.0090.18

##### Определение

(11β,17-Дигидрокси-16α-метил-3,20-диоксо-9-фторпрегна-1,4-диен-21-ил)фосфат динатрия.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % дексаметазона натрия фосфата C22H28FNa2O8P в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен. Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дексаметазона натрия фосфата.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец дексаметазона натрия фосфата растворяют в минимальных объёмах спирта 96 %, выпаривают досуха на водяной бане и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца дексаметазона натрия фосфата (испытание «Количественное определение»).

3. Качественная реакция._ К 40 мг субстанции прибавляют 2 мл серной кислоты концентрированной и осторожно нагревают до выделения белых паров, прибавляют по каплям азотную кислоту концентрированную, продолжают нагревание до почти полного обесцвечивания раствора, после чего охлаждают. Прибавляют 2 мл воды, нагревают до повторного выделения белых паров, охлаждают, прибавляют 10 мл воды и нейтрализуют по красной лакмусовой бумаге аммиака раствором разведённым 3,4 %. Полученный раствор должен давать реакцию А на натрий и реакцию В на фосфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От + 75 до + 83 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном В7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН. От 7,5 до 9,5 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие дексаметазона натрия фосфат и его примеси, защищают от света и используют свежеприготовленными или хранят при температуре 4 °С не более суток.

Раствор А. В колбу вместимостью 1000 мл помещают 7,0 г аммония ацетата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Смешивают 300 мл раствора А и 350 мл воды, доводят значение рН уксусной кислотой разведённой 30 % до 3,8. К полученному раствору прибавляют 350 мл метанола.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Доводят 300 мл раствора А уксусной кислотой разведённой 30 % до рН 4,0. К полученному раствору прибавляют 700 мл метанола.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дексаметазона натрия фосфата и 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца бетаметазона натрия фосфата (примесь B), растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для идентификации. Растворяют 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дексаметазона натрия фосфата для идентификации пиков, содержащего примеси A, C, D, E, F и G, в 2,0 мл ПФА.

Примечание

Примесь А (дексаметазон):
11β,17,21-тригидрокси-16α-метил-9-фторпрегна-1,4-диен-3,20-дион
[50-02-2].

Примесь В (бетаметазон фосфат):
(11β,17-дигидрокси-16β-метил-3,20-диоксо-9-фторпрегна-1,4-диен-21-ил)дигидрофосфат
[151-73-5].

Примесь С:
[(11β,17aξ-дигидрокси-16ξ-метил-3,17-диоксо-9α-фтор-D-гомо-андроста-1,4-диен-17aξ-ил)метил]дигидрофосфат.

Примесь D:
[(11β,17ξ-дигидрокси-16α-метил-3,17a-диоксо-9α-фтор-D-гомо-андроста-1,4-диен-17ξ-ил)метил]дигидрофосфат.

Примесь E:
[(11β,17a-дигидрокси-16-метил-3,17-диоксо-9α-фтор-D-гомо-андроста-1,4-диен-17a-ил)метил]дигидрофосфат.

Примесь F:
[(11β,17-дигидрокси-16α-метил-3,17a-диоксо-9α-фтор-D-гомо-андроста-1,4-диен-17-ил)метил]дигидрофосфат.

Примесь G:
11β,17-дигидрокси-16α-метил-3-оксо-9α-фторандроста-1,4-диен-17β-карбоновая кислота
[37927-01-8].

Условия хроматографирования

Колонка | 125 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём вводимой пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–3,5 | 90 | 10
3,5–23,5 | 90 → 60 | 10 → 40
23,5–34,5 | 60 → 5 | 40 → 95
34,5–50 | 5 | 95

Хроматографируют раствор для идентификации, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дексаметазона натрия фосфат – 1 (около 22 мин); примесь C – около 0,5; примесь D – около 0,6; примесь E – около 0,8; примесь F – около 0,92; примесь B – около 0,95; примесь A – около 1,37; примесь G – около 1,41.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси B используют хроматограмму для проверки разделительной способности хроматографической системы; для идентификации пиков примесей A, C, D, E, F и G используют хроматограммы раствора для идентификации пиков и прилагаемую к стандартному образцу дексаметазона натрия фосфата для идентификации пиков.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R) между пиками дексаметазона натрия фосфата и примеси B должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора сравнения относительное стандартное отклонение площади основного пика должно быть не более 5 % (6 введений).

Поправочный коэффициент. Для расчёта содержания примеси А, площадь пика этой примеси умножают на соответствующий поправочный коэффициент 0,75.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси G не должна превышать трёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площади пиков примесей B, C, D, E и F не должны превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения каждая (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 10,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Неорганические фосфаты. Не более 1 %.

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции растворяют в воде и доводят тем же растворителем до метки. К 10 мл полученного раствора прибавляют 5 мл молибденованадиевого реактива, перемешивают и оставляют на 5 мин. Жёлтое окрашивание раствора должно быть не более интенсивным, чем окрашивание стандарта, приготовленного таким же образом с использованием 10 мл стандартного раствора фосфата (0,0005 % PO43-, ОФС «Фосфаты»).

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,83 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие дексаметазона натрия фосфат и его примеси, защищают от света и используют свежеприготовленными или хранят при температуре 4 °С не более суток.

Подвижная фаза (ПФ). Смешивают 520 мл воды с 2 мл фосфорной кислоты концентрированной. Доводят температуру до 20 °С, после чего доводят рН до 2,6 натрия гидроксида раствором 20 %. Смешивают полученный раствор с 36 мл тетрагидрофурана и 364 мл метанола.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца дексаметазона натрия фосфата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дексаметазона натрия фосфата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора этим же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дексаметазона (примесь А) и 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дексаметазона натрия фосфата, растворяют в 2 мл тетрагидрофурана и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят ПФ до метки.

Условия хроматографирования

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 7 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания основного пика. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси A используют хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Относительное время удерживания соединений. Дексаметазона натрия фосфат (около 8 мин) – 1; примесь А – около 2,0.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R) между пиками дексаметазона натрия фосфата и примеси А должно быть не менее 6,0.

На хроматограмме раствора сравнения относительное стандартное отклонение площади пика дексаметазона натрия фосфата не должно превышать 1,0 % (6 введений).

Содержание дексаметазона натрия фосфата C22H28FNa2O8P в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика дексаметазона натрия фосфата на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика дексаметазона натрия фосфата на хроматограмме раствора стандартного образца;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца дексаметазона натрия фосфата, мг;
P - содержание дексаметазона натрия фосфата в фармакопейном стандартном образце дексаметазона натрия фосфата,%;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0406 Декскетопрофена трометамол

Декскетопрофен
Dexketoprofenum trometamolum

Вводится впервые

##### Определение

(2S)-2-(3-Бензоилфенил)пропаноат 2-амино-2-(гидроксиметил)пропан-1,3-диола.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % декскетопрофена трометамола в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок. *Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в метаноле, растворим в воде и этаноле 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца декскетопрофена трометамола.

2. Качественная реакция._ В 5 мл воды растворяют 50 мг субстанции, прибавляют 1,0 мл раствора динитрофенилгидразина и нагревают; должен появиться оранжевый осадок.

- Раствор динитрофенилгидразина. В холодной смеси 10 мл серной кислоты концентрированной и 10 мл воды растворяют 2 г динитрофенилгидразина, перемешивают и прибавляют 35 мл воды.

##### Испытания

Удельное вращение. От –4 до –6 в пересчёте на сухое вещество (1,47 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Удельный показатель поглощения. От 425 до 451 (в максимуме поглощения) при длине волны 260 нм в пересчёте на сухое вещество (0,01 % раствор субстанции в воде, ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,25 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 5,5 до 7,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

1. Энантиомерная чистота. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Трифторуксусная кислота—2-пропанол—1,1-диметилэтилметиловый эфир—гексан 1:20:80:900.

Растворитель. 2-пропанол—ПФ 100:900.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 1 мл 2-пропанола и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца кетопрофена. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,4 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца кетопрофена, растворяют в 5 мл 2-пропанола и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца кетопрофена и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

R-кетопрофен: (2S)-2-(3-Бензоилфенил)пропановая кислота [56105-81-8].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель модифицированный трис(3,5-диметилфенилкарбамоил)амилозой для хиральной хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 80 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца кетопрофена и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Декскетопрофен – 1 (около 50 мин); R-кетопрофен – 0,9.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца кетопрофена:

- разрешение (RS) между пиками R-кетопрофена и декскетопрофеном должно быть не менее 1,3;

- фактор асимметрии пика (AS) R-кетопрофена должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика R-кетопрофена должно быть не более 5 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику R-кетопрофена, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика R-кетопрофена должно быть не менее 10.

Содержание R-кетопрофена в субстанции в процентах (Х) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика R-кетопрофена на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика R-кетопрофена на хроматограмме раствора стандартного образца кетопрофена;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца кетопрофена, мг;
P - содержание кетопрофена в фармакопейном стандартном образце кетопрофена,%;
К - отношение площади пика R-кетопрофена к сумме площадей пиков R-кетопрофена и декскетопрофена на хроматограмме раствора стандартного образца кетопрофена;
0,677 - коэффициент пересчёта декскетопрофена трометамола на декскетопрофен.

Допустимое содержание примесей:

- R-кетопрофен – не более 2,0 %.

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Фосфатный буферный раствор рН 3,5—ацетонитрил—вода 20:430:550.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 мг 3-бензоилбензойной кислоты, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора раствором сравнения до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 233 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-х кратное от времени удерживания пика декскетопрофена. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Декскетопрофен – 1 (около 6 мин); 3-бензоилбензойная кислота – 0,75.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками 3-бензоилбензойной кислоты и декскетопрофеном должно быть не менее 3.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) декскетопрофена должен быть не более 2;

- относительное стандартное отклонение площади пика декскетопрофена должно быть не более 5 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику декскетопрофена, должна составлять не менее 5000 теоретических тарелок.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика декскетопрофена должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей не должна превышать площадь пика декскетопрофена на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать 10-кратную площадь пика декскетопрофена на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее площади пика декскетопрофена на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 60 °С и остаточном давлении не более 670 Па.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 6) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 7 ЕЭ на 1 мг декскетопрофена трометамола (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии. (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 25 мл этанола 96 % и 25 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 37,54 мг дексокетопрофена трометамола C16H14O3·C4H11NO3.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0659 Декспантенол

Вводится впервые

##### Определение

(2R)-2,4-Дигидрокси-N-(3-гидроксипропил)-3,3-диметилбутанамид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % декспантенола C9H19NO4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Прозрачная бесцветная или слегка желтоватая вязкая жидкость или белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 %, легко растворим или растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца декспантенола.

- Подготовка образцов. Готовят раствор субстанции и стандартного образца декспантенола в этаноле с концентрацией около 5 мг/мл. Наносят по 0,5 мл полученных растворов на диски с калия бромидом и высушивают при температуре 100–105 °C в течение 15 мин.

2. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—вода—2-пропанол 5:15:80.

- Испытуемый раствор. Около 10 мг субстанции растворяют в 0,25 мл воды и 4 мл метанола.

- Раствор стандартного образца декспантенола. Около 10 мг фармакопейного стандартного образца декспантенола растворяют в 0,25 мл воды и 4 мл метанола.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца декспантенола. Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в насыщенную камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры и сушат в сушильном шкафу при температуре 120 °С в течение 20 мин до удаления следов растворителей, после чего опрыскивают 1,7 % уксусно-спиртовым раствором нингидрина. Пластинку снова выдерживают в сушильном шкафу при температуре 120 °С в течение 5 мин и просматривают при дневном свете. *Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать основной зоне адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца декспантенола.

3. Качественная реакция. К 1 мл раствора субстанции 5 % прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 8,5 % и 0,1 мл меди(II) сульфата раствора 12,5 %; должно образоваться синее окрашивание.

##### Испытания

Удельное вращение. От +29 до +32 в пересчёте на безводное вещество (5 % раствор субстанции в воде, свободной от углерода диоксида, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 50 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном B6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. Не более 10,5 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

1. 3-Аминопропанол. Не более 0,5 %. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 4 г (точная навеска) субстанции в 60 мл уксусной кислоты ледяной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М хлорной кислоты соответствует 7,511 мг 3-аминопропанола C3H9NO.

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы защищают от света и используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 1,56 г натрия дигидрофосфата в 800 мл воды, доводят значение pH фосфорной кислотой до 2,50, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор10:990.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Растворяют1,78 г динатрия гидрофосфата дигидрата в 800 мл воды, доводят значение pH фосфорной кислотой концентрированной до 7,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,6 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси B и 3,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси C, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и 1,0 мл раствора сравнения Б и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь B: (2R)-2,4-дигидрокси-3,3-диметилбутановая кислота [1112-33-0].

Примесь C: (3R)-3-гидрокси-4,4-диметилоксолан-2-он [599-04-2].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 200 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–6 | 100 | 0
6–21 | 100 → 50 | 0 → 50
21–30 | 50 | 50

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, растворы сравнения А и Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Декспантенол –1 (около 6 мин); примесь B – около 0,4; примесь C – около 0,6.

Идентификация пиков. Для идентификации пиков примесей B и C используют хроматограмму раствора сравнения Б.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси B и примеси C должно быть не менее 2,5;

- разрешение (RS) между пиками примеси C и декспантенола должно быть не менее 1,5;

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси C должно быть не менее 10.

Содержание каждой из примесей B и C в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика примеси C на хроматограмме раствора сравнения Б;
а1 – навеска примеси C, взятая для приготовления раствора сравнения Б, мг;
а0 – навеска субстанции, мг.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика декспантенола на хроматограмме раствора сравнения А.

Допустимое содержание примесей:

- примесь B – не более 0,5 %;

- примесь C – не более 1,0 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 2,0 %.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Примечание – Не допускают попадания влаги в используемую колбу.

К 0,400 г (точная навеска) субстанции прибавляют 50,0 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты, кипятят с обратным холодильником в течение 5 ч, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 50 мл диоксана, промывая им колбу и обратный холодильник, и титруют 0,1 М раствором калия гидрофталата до перехода окраски из зелёной в жёлтую (индикатор – 0,2 мл нафтолбензеина раствора 0,2 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 20,53 мг декспантенола C9H19NO4.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0660 Десмопрессина ацетат

Десмопрессин
Desmopressini acetas

Вводится впервые

##### Определение

S1,S6-Цикло[(3-сульфанилпропаноил)-L-тирозил-L-фенилаланил-L-глутаминил-L-аспарагинил-L-цистеинил-L-пролил-D-аргинилглицинамида] ацетат.

Cодержит не менее 95,0 % и не более 105,0 % десмопрессина C46H64N14O12S2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей и уксусной кислоты вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый аморфный порошок.

Растворимость. Растворим в воде, в спирте 96 % и уксусной кислоте ледяной.

##### Идентификация

1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика десмопрессина на хроматограмме раствора стандартного образца десмопрессина (раздел «Количественное определение»).

2. Аминокислотный состав. Определение проводят в соответствии с ОФС «Аминокислотный анализ» (гидролиз по методу 1, анализ по методу 1, 2, 3 или 4). Относительное содержание каждой аминокислоты рассчитывают в мольных долях, принимая за единицу одну шестую суммарного мольного содержания аспарагиновой кислоты, глутаминовой кислоты, пролина, глицина, аргинина и фенилаланина, по формуле:

где ni – количество молей соответствующей аминокислоты, мкмоль;
– сумма мольного содержания аспарагиновой кислоты, глутаминовой кислоты, пролина, глицина, аргинина и фенилаланина, мкмоль

Относительное содержание аминокислот должно быть в следующих пределах: аспарагиновая кислота 0,90 до 1,10; глутаминовая кислота от 0,90 до 1,10; пролин от 0,90 до 1,10; глицин 0,90 до 1,10; аргинин от 0,90 до 1,10; фенилаланин 0,90 до 1,10; тирозин от 0,70 до 1,05; полуцистин 0,30 до 1,05. Лизин, изолейцин и лейцин должны отсутствовать (не более 0,01). Остальные аминокислоты (треонин, серин, аланин, валин, метионин и гистидин) могут присутствовать не более чем в следовых количествах (не более 0,03).

##### ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От –72 до –82 в пересчёте на безводное и свободное от уксусной кислоты и остаточных органических растворителей вещество (0,2 % раствор субстанции в уксусной кислоте раствора 1 %, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 50 мг субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора» должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 3,5 до 6,5 (0,1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаз А (ПФА). 0,067 М фосфатный буферный раствор рН 7,0.

Подвижная фаз Б (ПФБ). Ацетонитрил—ПФА 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 5 мл воды и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца окситоцин/десмопрессин валидационной смеси растворяют в 0,5 мл воды.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 120 × 4 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА, % | ПФБ, %
--- | --- | ---
0–4 | 76 | 24
4–18 | 76 → 58 | 24 → 42
18–35 | 58 → 48 | 42 → 52
35–40 | 48 → 76 | 52 → 24
40–50 | 76 | 24

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Десмопрессин – 1 (около 16 мин); окситоцин – около 1,06.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками десмопрессина и окситоцина должно быть не менее 1,5;

- фактор асимметрии пика (AS) десмопрессина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика десмопрессина должно быть не более 10,0 % (5 введений);

- относительное стандартное отклонение площади пика окситоцина должно быть не более 10,0 % (5 введений).

Допустимое содержание примесей. Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- любая примесь – не более 0,5 %;

- сумма примесей – не более 1,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 % от суммы площадей всех пиков.

Вода. Не более 6,0 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 20 мг (точная навеска) субстанции.

Уксусная кислота. От 3,0 до 8,0 % (ОФС «Определение уксусной кислоты в синтетических пептидах»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в смеси ПФБ—ПФА 5:95 и доводят объём раствора той же смесью до метки.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 500 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями:

Подвижная фаза. ПФА—ПФБ 60:40.

Раствор стандартного образца десмопрессина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца десмопрессина, прибавляют 15 мл воды и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия:

- Скорость потока: 2,0 мл/мин.

Хроматографируют раствор стандартного образца десмопрессина и испытуемый раствор.

Время удерживания десмопрессина – около 5 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца десмопрессина:

- фактор асимметрии пика (AS) десмопрессина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика десмопрессина должно быть не более 10,0 % (5 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику десмопрессина, должна составлять не менее 500 теоретических тарелок.

Содержание десмопрессина C46H64N14O12S2 в субстанции в процентах в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей и уксусной кислоты вещество (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика десмопрессина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика десмопрессина на хроматограмме раствора стандартного образца десмопрессина;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца десмопрессина, мг;
W – содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
A – содержание уксусной кислоты в субстанции,%;
P – содержание десмопрессина в фармакопейном стандартном образце десмопрессина,%.

##### Хранение

В сухом защищённом от света месте при температуре от 2 до 8 °С.

* Испытания проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0093 Диазепам

Взамен ФС.2.1.0093.18

##### Определение

1-Метил-5-фенил-7-хлор-1,3-дигидро-2H-1,4-бензодиазепин-2-он.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % диазепама C16H13ClN2O в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в спирте 96 %, очень мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанциив области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца диазепама.

2. Спектрофотометрия. (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100,0 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в смеси метанол—хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М 1:49 и доводят этим же растворителем объём раствора до метки. В мерную колбу вместимостью 10,0 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят смесью метанол—хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М 1:49 объём раствора до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 нм до 380 нм должен иметь максимумы при 240 нм и 284 нм и 360 нм и минимумы при 262 нм и 330 нм.

##### Испытания

Температура плавления. От 131 до 135 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 10 мл ацетона должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», должна выдерживать сравнение с эталоном BY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие диазепам и его примеси, защищают от света и используют свежеприготовленными или хранят при температуре 4 °С не более суток.

Буферный раствор. Калия дигидрофосфата раствор 0,025 М, доведённый натрия гидроксида раствором 8,5 % до pH 5,0.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—метанол—буферный раствор 220:340:440.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 0,5 мл ацетонитрила и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют 0,5 мг фармакопейного стандартного образца диазепама для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси А, В и Е, в 1,0 мл ПФ.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А (нордазепам): 7-хлор-5-фенил-1,3-дигидро-2H-1,4-бензодиазепин-2-он [1088-11-5].

Примесь В: (2-бензоил-4-хлорфенил)-2-хлор-N-метилацетамид.

Примесь Е: 6-хлор-1-метил-4-фенилхиназолин-2(1H)-он.

Условия хроматографирования

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель сферический октилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём вводимой пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 4-кратное от времени удерживания пика диазепама. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Диазепам –1 (около 9 мин); примесь E – около 0,7; примесь A – около 0,8; примесь B – около 1,3.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, В и E используют хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу диазепама для идентификации пиков.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси Е и примеси А должно быть не менее 2,5;

- разрешение (RS) между пиками примеси А и диазепама должно быть не менее 6,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие коэффициенты: примесь В – 1,3; примесь Е – 1,3.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A, В, Е не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают примеси, площадь пика которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 %. (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 %. (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 11,6 ЕЭ на 1 мг диазепама (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 5 мг диазепама в 1 мл спирта 96 %.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,200 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 28,47 мг диазепама C16H13ClN2O.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0407 Диацереин

Вводится впервые

##### Определение

4,5-Бис(ацетилокси)-9,10-диоксоантрацен-2-карбоновая кислота.

Cодержит не менее 98,0% и не более 102,0% диацереина C19H12O8 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Жёлтый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в диметилацетамиде, мало растворим в тетрагидрофуране, практически нерастворим в воде и этаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца диацереина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика диацереина на хроматограмме раствора стандартного образца диацереина (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Испытание проводят в защищённом от света месте.

1. Примеси В и Н

Лимонной кислоты раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,4 г лимонной кислоты, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Тетрагидрофуран—ацетонитрил—лимонной кислоты раствор 80:275:645.

Раствор А. Растворяют 14,7 г натрия хлорида и 18,8 г глицина в 500 мл воды.

Раствор Б. Смешивают 25,3 мл натрия гидроксида раствора 2% и 74,6 мл раствора А, при необходимости доводят значение рН натрия гидроксида раствором 8,5% или серной кислоты раствором 1 М до 9,5.

Испытуемый раствор. Растворяют 0,1 г субстанции в 30 мл натрия гидроксида раствора 2%, перемешивают в течение 10 мин, прибавляют 70 мл раствора А и при необходимости доводят значение рН натрия гидроксида раствором 8,5% или серной кислоты раствором 1 М до 9,5. Полученный раствор экстрагируют тремя порциями метиленхлорида, каждая по 25 мл, извлечения объединяют, промывают раствором Б 2 раза по 8 мл, и 1 раз серной кислоты раствором 0,01 М 10 мл. Органический слой отделяют и упаривают при температуре 33 °С досуха, высушивание завершают, используя сжатый воздух. Полученный сухой остаток растворяют в 2,0 мл ПФ.

Раствор стандартного образца примеси В. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 7,5 мг фармакопейного стандартного образца примеси В, растворяют в тетрагидрофуране, доводят объём раствора тем же растворителем до метки, обрабатывают полученный раствор ультразвуком в течение не более 30 с и охлаждают до комнатной температуры. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора натрия гидроксида раствором 2% до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора натрия гидроксида раствором 2% до метки. Смешивают 5,0 мл полученного раствора и 25 мл натрия гидроксида раствора 2%, перемешивают в течение 10 мин, прибавляют 70 мл раствора А и при необходимости доводят значение рН натрия гидроксида раствором 8,5% или серной кислоты раствором 1 М до 9,5. Полученный раствор экстрагируют тремя порциями метиленхлорида, каждая по 25 мл, извлечения объединяют, промывают раствором Б 2 раза по 8 мл, и 1 раз серной кислоты раствором 0,01 М 10 мл. Органический слой отделяют и упаривают при температуре 33 °С досуха, высушивание завершают, используя сжатый воздух. Полученный сухой остаток растворяют в 2,0 мл ПФ.

Примечание – Время между растворением фармакопейного стандартного образца примеси В и экстракцией не должно превышать 30 мин.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси В и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь В: 1,8-дигидрокси-3-(гидроксиметил)антрацен-9,10-дион [481-72-1].

Примесь Н: 3-[(ацетилокси)метил]-9,10-диоксоантрацен-1,8-диил диацетат [25395-11-3].

Хроматографические условия

Колонка | 125 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 16 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 100 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,5-кратное от времени удерживания пика примеси В. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси В и испытуемый раствор.

Время удерживания примеси В – около 11 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика диацереина должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора сумма площадей пиков примесей В и Н не должна превышать площадь пика примеси В на хроматограмме раствора стандартного образца примеси В (не более 0,0015%).

2. Другие примеси

Подвижная фаза А (ПФА). Смешивают 353 мл воды и 147 мл фосфорной кислоты концентрированной. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. ПФА—ПФБ 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в 50 мл тетрагидрофурана и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора тетрагидрофураном до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, прибавляют 10 мл натрия гидроксида раствора 0,01 М, 40 мл тетрагидрофурана и доводят объём раствора растворителем до метки (раствор содержит примеси D и E).

Раствор для идентификации пиков. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца диацереина смеси примесей, содержащего примеси С и F, растворяют в смеси 0,5 мл тетрагидрофурана и 0,5 мл растворителя.

Примечание

Примесь С: 4,5-дигидрокси-9,10-диоксоантрацен-2-карбоновая кислота [478-43-3].

Примесь D: 5-(ацетилокси)-4-гидрокси-9,10-диоксоантрацен-2-карбоновая кислота [875535-35-6].

Примесь Е: 4-(ацетилокси)-5-гидрокси-9,10-диоксоантрацен-2-карбоновая кислота [875535-36-7].

Примесь F: (10S)-3-[(ацетилокси)метил]-10-(2,3,4,6-тетра-О-ацетил-β-D-глюкопиранозил)-9-оксоантрацен-1,8-диил диацетат [13928-72-8].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, кремнийорганический полимер, аморфный, октадецилсилильный с полярными мостиками, эндкепированный, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–3 | 80 | 20
3–13 | 80 → 60 | 20 → 40
13–20 | 60 | 40

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для идентификации пиков, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Диацереин – 1 (около 13,5 мин); примесь D – около 1,1; примесь Е – около 1,15; примесь С – около 1,2; примесь F – около 1,3.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей С и F используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для идентификации пиков и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу диацереина смеси примесей.

Для идентификации пиков примесей D и Е используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси D и примеси Е должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора сравнения отношение сигнал/шум (S/N) для пика диацереина должно быть не менее 100.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь С – 1,4; примесь D – 1,3; примесь Е – 1,3; примесь F – 9,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей D и Е не должна более чем в 5 раз превышать площадь пика диацереина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%);

- площадь пика примеси С не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика диацереина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2%);

- площадь пика примеси F не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика диацереина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15%);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика диацереина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двадцатикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0%).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002%. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 60 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в тетрагидрофуране и доводят объём раствора тетрагидрофураном до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца диацереина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 60 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца диацереина, растворяют в тетрагидрофуране и доводят объём раствора тетрагидрофураном до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца диацереина и испытуемый раствор.

Содержание диацереина C19H12O8 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика диацереина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика диацереина на хроматограмме раствора стандартного образца диацереина;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца диацереина, мг;
a1 – навеска субстанции, мг;
W – потеря в массе при высушивании,%;
Р – содержание диацереина в фармакопейном стандартном образце диацереина,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0661 Диглицидил метилфосфонат (Diglycidyli methylphosphonas)

Взамен ФС 42-3754-99

##### Определение

Бис[(оксиран-2-ил)метил]метилфосфонат.

Содержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % диглицидила метилфосфоната C7H13O5P.

##### Свойства

Описание. Бесцветная или желтоватая жидкость с характерным запахом.

Растворимость. Очень легко растворим в спирте 96 %, хлороформе, легко растворим воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в виде жидкой плёнки между двумя пластинками калия бромида, в области от 4000 до 400 см -1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца диглицидила метилфосфоната.

2. Качественная реакция. К 0,2 мл субстанции при нагревании прибавляют 2 мл кальция хлорида раствора 20 % и 0,2 мл фенолфталеина раствора 1 %; должно появиться красно-фиолетовое окрашивание.

3. Качественная реакция. К 0,1 мл субстанции прибавляют 0,1 г смеси для спекания и озоляют. Зольный остаток вымывают 20 мл воды и фильтруют; к фильтрату прибавляют 10 мл аммония ванадата раствора 0,25 %, 10 мл аммония молибдата раствора 10 % и 10 мл серной кислоты разведённой 16 %; должно появиться жёлтое окрашивание.

##### Испытания

Плотность. От 1,270 до 1,290 г/см3 (ОФС «Плотность», метод 1).

Показатель преломления. От 1,4610 до 1,4640 (ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)»).

Прозрачность. Субстанция должна быть прозрачной (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность. Субстанция должна выдерживать сравнение с эталоном Y5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,5 до 6,5 (1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Глицидол. Не более 0,5 %. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»). Растворы используют свежеприготовленными.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 г (точная навеска) субстанции и 30 мг (точная навеска) пентанола, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) глицидола и 30 мг (точная навеска) пентанола, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 50 м × 0,32 мм, покрытая слоем макрогола 20000 2-нитротерефталата, 0,5 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:20; |  |
Скорость потока | 1,6 мл/мин; |  |
Объём пробы | 0,1 мкл; |  |
Температура | Колонка | 120 °С; |
| Инжектор | 150 °С; |
| Детектор | 190 °С; |
Время хроматографирования | 14 мин. |  |

Хроматографируют стандартный и испытуемый растворы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками глицидола и пентанола должно быть не менее 1,5.

Поправочный коэффициент (К) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика пентанола на хроматограмме стандартного раствора;
S0 - площадь пика глицидола на хроматограмме стандартного раствора;
a0 - навеска глицидола, мг;
a1 - навеска пентанола, взятая для приготовления стандартного раствора, мг;
P - содержание глицидола,%.

Содержание глицидола C7H13O5P в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S0 - площадь пика пентанола на хроматограмме испытуемого раствора;
S1 - площадь пика глицидола на хроматограмме испытуемого раствора;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска пентанола, взятая для приготовления испытуемого раствора, мг;
К - поправочный коэффициент.

Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Растворяют 1,0 г субстанции в 10 мл воды. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 1,0 г субстанции в 10 мл воды. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в 10 мл тетраэтиламмония бромида раствора 10 % и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до перехода окраски от фиолетовой к голубовато-зелёной (индикатор – 0,15 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 10,41 мг диглицидила метилфосфоната C7H13O5P.

##### Хранение

В защищённом от света месте, при температуре не выше 8 °С.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0690 Дигоксин

Дигоксин
Digoxinum

Взамен ФС 42-1537-98

С41Н64О14 [20830-75-5] | М.м. 780,94

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

12β,14-Дигидрокси-3β-{[2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил-(1→4)-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил-(1→4)-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил]окси}-5β-кард-20(22)-енолид.

Cодержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % дигоксина С41Н64О14 в пересчёте на сухое и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Растворим в смеси равных объёмов метанола и метиленхлорида, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дигоксина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика дигоксина на хроматограмме раствора стандартного образца дигоксина (раздел «Количественное определение»).

##### ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От +13,9 до +15,9 в пересчёте на сухое и свободное от остаточных органических растворителей вещество (2 % раствор субстанции в смеси метанол—метиленхлорид 1:1). (ОФС «Оптическое вращение»)

Прозрачность раствора. Раствор субстанции 0,5 % в смеси метанол—метиленхлорид (1:1) должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей».

Цветность раствора. Раствор субстанции 0,5 % в смеси метанол—метиленхлорид (1:1) должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкости»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—вода 10:90.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Вода—ацетонитрил 10:90.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца дигоксигенина. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца дигоксигенина (примесь С), растворяют в метаноле, доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг ланатозида Ц (примесь Н) и растворяют в метаноле, доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для идентификации пиков. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мг фармакопейного стандартного образца дигоксина для идентификации пиков, содержащего примеси A, B, C, E, F, G и K, доводят объём раствора метанолом до метки.

Примечание

Примесь A:
14-гидрокси-3β-{[2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил-(1→4)-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил-(1→4)-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил]окси}-5β-кард-20(22)-енолид (дигитоксин) [71-63-6].

Примесь B:
14,16β-дигидрокси-3β-{[2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил-(1→4)-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил-(1→4)-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил]окси}-5β-кард-20(22)-енолид (гитоксин) [4562-36-1].

Примесь C: 3β,12β,14-тригидрокси-5β-кард-20(22)-енолид (дигоксигенин) [1672-46-4].

Примесь D:
12β,14-дигидрокси-3β-(2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозилокси)-5β-кард-20(22)-енолид (дигоксигенина монодигитоксозид) [5352-63-6].

Примесь E:
12β,14,16β-тригидрокси-3β-{[2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил-(1→4)-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил-(1→4)-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил]окси}-5β-кард-20(22)-енолид (дигинатин) [52589-12-5].

Примесь F:
12β,14-дигидрокси-3β-{[2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил-(1→4)-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил]окси}-5β-кард-20(22)-енолид (дигоксигенина бисдигитоксозид) [5297-05-2].

Примесь G: 12β,14-дигидрокси-3β-{[2,6-дидезокси-β-D-арабино-гексопиранозил-(1→4)-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил-(1→4)-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил]окси}-5β-кард-20(22)-енолид (неодигоксин) [55576-67-5].

Примесь H: 12β,14-дигидрокси-3β-{[β-D-глюкопиранозил-(1→4)-3-O-ацетил-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил-(1→4)-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил]окси}-5β-кард-20(22)-енолид (ланатозид Ц) [17575-22-3].

Примесь I: 3β-{[3-O-ацетил-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил-(1→4)-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил-(1→4)-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил]окси}-12β,14-дигидрокси-5β-кард-20(22)-енолид (α-ацетилдигоксин) [5511-98-8].

Примесь J: 3β-{[4-O-ацетил-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил-(1→4)-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил-(1→4)-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил]окси}-12β,14-дигидрокси-5β-кард-20(22)-енолид (β-ацетилдигоксин) [5355-48-6].

Примесь K: 12β,14-дигидрокси-3β-{[2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил-(1→4)-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил-(1→4)-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил-(1→4)-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил]окси}-5β-кард-20(22)-енолид (дигоксигенина тетракисдигитоксозид) [31539-05-6].

Примесь L: неизвестная структура.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,9 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Скорость потока | 1,5 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм;
Объём пробы | 10 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 78 | 22
5–15 | 78 → 30 | 22 → 70

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца дигоксигенина, раствор для идентификации пиков, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дигоксин – 1 (около 4,3 мин); примесь С – около 0,3; примесь Е – около 0,5; примесь F – около 0,6; примесь G – около 0,8; примесь L – около1,4; примесь К – около 1,6; примесь В – около 2,2; примесь А – около 2,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу дигоксина для идентификации пиков, содержащего примеси A, B, C, E, F, G и K.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками ланатозида Ц (примесь Н) и дигоксина должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси F не должна более чем в 2,5 раза превышать площадь пика дигоксина на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,5 %);

- площадь пика примеси С не должна более чем в 5 раз превышать площадь пика дигоксина на хроматограмме раствора стандартного образца дигоксигенина (не более 1,0 %);

- площадь каждого из пиков примеси Е, K не должна превышать площадь пика дигоксина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

- площадь пика примеси G не должна превышать 0,8 площади пика дигоксина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,8 %);

- площадь каждого из пиков примеси А, В не должна превышать 0,5 площади пика дигоксина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси L не должна превышать 0,3 площади пика дигоксина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,2 площади пика дигоксина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- сумма площадей пиков всех примесей, кроме примесей A, B, C, E, F, G, K, L не должна превышать 0,7 площади пика дигоксина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,7 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 3,5 площади пика дигоксина на хроматограмме раствора сравнения (не более 3,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,05 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г (точная навеска) субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Менее 200 МЕ/мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях, описанных в разделе «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца дигоксина. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дигоксина, растворяют в метаноле, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца дигоксина и испытуемый раствор.

Содержание дигоксина С41Н64О14 в субстанции в пересчёте на сухое и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика дигоксина на хроматограмме испытуемого раствора;
So - площадь пика дигоксина на хроматограмме раствора стандартного образца дигоксина;
a1 - навеска субстанции, мг;
ao - навеска фармакопейного стандартного образца дигоксина, мг;
P – содержание дигоксина в фармакопейном стандартном образце дигоксина, %;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

##### ХРАНЕНИЕ

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0662 Диданозин (Didanosinum)

Вводится впервые

##### Определение

9-(2,3-Дидезокси-β-D-глицеро-пентофуранозил)-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он.

Содержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % диданозина C27H37N3O7S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в диметилсульфоксиде, умеренно растворим в воде, мало растворим в этаноле 96 % и метаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца диданозина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика диданозина на хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (раздел «Родственные примеси»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –24,2 до –28,2 в пересчёте на безводное вещество (1,0 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть прозрачным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 4,0 до 7,2 (2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы готовят непосредственно перед использованием.

Буферный раствор. Растворяют 3,86 г аммония ацетата в 800 мл воды и доводят pH раствора аммиака раствором 25 % до 8,0. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Метанол—буферный раствор 80:920.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол—буферный раствор 300:700.

Растворитель. ПФБ—ПФА 80:920.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси G. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси G, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца диданозина для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси от A до F, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А:
1,7-дигидро-6H-пурин-6-он [68-94-0].

Примесь В:
9-(β-D-рибофуранозил)-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он [58-63-9].

Примесь С:
9-(2-дезокси-β-D-эритро-пентофуранозил)-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он [890-38-0].

Примесь D:
9-(3-дезокси-β-D-эритро-пентофуранозил)-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он [13146-72-0].

Примесь E:
9-(2,3-ангидро-β-D-рибофуранозил)-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он [31766-13-9].

Примесь F:
9-(2,3-дидезокси-β-D-глицеро-пент-2-ен-фуранозил)-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он [42867-68-5].

Примесь G:
9-(2,3-дидезокси-β-D-глицеро-пентофуранозил)-9H-пурин-6-амин [4097-22-7].

Условия хроматографирования

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–18 | 100 | 0
18–25 | 100 → 0 | 0 → 100
25–45 | 0 | 100
45–50 | 0 → 100 | 100 → 0
50–60 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси G, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Диданозин – 1 (около 14 мин); примесь A – около 0,3; примесь B – около 0,4; примесь C – около 0,44; примесь D – около 0,48; примесь E – около 0,5; примесь F – около 0,8; примесь G – около 1,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, C, D, E и F используется хроматограмма раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы, хроматограмма прилагаемая к стандартному образцу диданозина для проверки пригодности системы и относительное время удерживания соединений. Для идентификации пика примеси G используется хроматограмма раствора стандартного образца примеси G.

Проверка пригодности хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примесей C и D должно быть не менее 2,5.

Поправочный коэффициент. Для расчёта содержания площадь пика примеси A умножают на 0,59.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A, не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца примеси А (не более 0,5 %);

- площадь пика каждой из примесей В, C, D, Е, F, G не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения каждая (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

- не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %).

Вода. Не более 2,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют около 0,5 г субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 %. (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты ледяной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»), используя стеклянный индикаторный электрод.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 23,62 мг диданозина C10H12N4O3.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0408 Дидрогестерон (Dydrogesteronum)

Вводится впервые

##### Определение

9β,10α-Прегна-4,6-диен-3,20-дион.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % дидрогестерона C21H28O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в ацетоне, умеренно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дидрогестерона.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика дидрогестерона на хроматограмме раствора стандартного образца дидрогестерона (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Температура плавления. От 167 до 171 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельное вращение. От −469 до –485 в пересчёте на сухое вещество, измеряется при 25 °С (0,5 % раствор субстанции в метиленхлориде, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор натрия гидроксида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,84 г натрия гидроксида, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствору дают отстояться и используют прозрачную надосадочную жидкость.

Раствор хлористоводородной кислоты. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 70 мл воды, прибавляют 2,06 г хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—спирт 96 %—вода 210:250:540.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца дидрогестерона примеси А. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 3 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дидрогестерона примеси А, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в растворе стандартного образца дидрогестерона примеси А и доводят объём тем же растворителем до метки.

Раствор для идентификации пиков. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в 30 мл спирта 96 %, прибавляют 1,0 мл раствора натрия гидроксида, нагревают при 85 °С в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 1,0 мл раствора хлористоводородной кислоты, 20 мл ацетонитрила и 2,0 мг фармакопейного стандартного образца дидрогестерона примеси В и доводят объём раствора водой до метки (содержит примеси В и С).

Примечание

Примесь А: 9β,10α-прегна-4,6,8(14)-триен-3,20-дион [23035-53-2].

Примесь В: прегна-4,6-диен-3,20-дион [2640-38-2].

Примесь С: 9β,10α,17α-прегна-4,6-диен-3,20-дион [246038-13-1].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический; |  |
Длина волны | основная – 280 нм; примесь А – 385 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика дидрогестерона. |  |

Хроматографируют раствор для идентификации пиков, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца дидрогестерона примеси А, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дидрогестерон – 1 (около 13 мин); примесь А – около 0,9; примесь В – около 1,1; примесь С – около 1,2.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (Rs) между пиками примеси А и дидрогестерона при 385 нм должно быть не менее 1,1.

На хроматограмме раствора для идентификации пиков:

- разрешение (Rs) между пиками дидрогестерона и примеси В должно быть не менее 4,5;

- разрешение (Rs) между пиками примеси В и примеси С должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца дидрогестерона примеси А (не более 0,3 %);

- площадь пика примеси В не должна превышать 1,5-кратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика примеси С не должна превышать трёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика единичной неидентифицированной примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1).

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца дидрогестерона. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дидрогестерона и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца дидрогестерона и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца дидрогестерона относительное стандартное отклонение площади пика дидрогестерона должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание дидрогестерона C21H28O2 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика дидрогестерона на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика дидрогестерона на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца дидрогестерона, мг;
P – содержание дидрогестерона в фармакопейном стандартном образце дидрогестерона,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

Не требует особых условий.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0409 Дииндолилметан (Diindolylmethanum)

Вводится впервые

##### Определение

3,3ʹ-Метиленди(1H-индол).

Содержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % дииндолилметана C17H14N2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Кристаллический порошок от белого до светло-жёлтого или светло-коричневого цвета с характерным запахом.

Растворимость. Легко растворим в ацетоне, умеренно или мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дииндолилметана.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика дииндолилметана на хроматограмме раствора стандартного образца дииндолилметана (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Цветность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл спирта 96 % должен выдерживать сравнение с эталоном Y5 или BY5. (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие дииндолилметан и индол, используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—ацетонитрил 400:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Раствор стандартного образца дииндолилметана. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дииндолилметана, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг индола, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 15 мл раствора стандартного образца дииндолилметана и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца дииндолилметана и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 30 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Порядок выхода пиков: индол, дииндолилметан.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика дииндолилметана должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками индола и дииндолилметана должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. Содержание любой примеси в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- любая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 2,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 2,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 2). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца дииндолилметана и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца дииндолилметана:

- фактор асимметрии пика (AS) дииндолилметана должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика дииндолилметана должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику дииндолилметана, должна составлять не менее 1500 теоретических тарелок.

Содержание дииндолилметана С17Н14N2 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика дииндолилметана на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика дииндолилметана на хроматограмме раствора стандартного образца дииндолилметана;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца дииндолилметана, мг;
P – содержание дииндолилметана в фармакопейном стандартном образце дииндолилметана,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0094 Диклофенак натрия

Диклофенак
Diclofenacum natricum

Взамен ФС.2.1.0094.18

##### Определение

[2-(2,6-Дихлоранилино)фенил]ацетат натрия.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % диклофенака натрия С14Н10Cl2NNaO2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в метаноле, растворим в спирте 96 %, умеренно растворим в воде.

* Гигроскопичен.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца диклофенака натрия.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в натрия гидроксида растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора натрия гидроксида раствором 0,1 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 240 до 350 нм должен иметь максимум при 276 нм и минимум при 249 нм.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл метанола должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», измеренная при длине волны 440 нм в кювете с толщиной слоя 1 см (по сравнению с метанолом), не должна превышать 0,05 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 0,8 г натрия дигидрофосфата моногидрата в 900 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислотой разведённой 10 % до 2,5. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Буферный раствор—метанол 340:660.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют содержимое флакона с фармакопейным стандартным образцом диклофенака для проверки разделительной способности хроматографической системы, содержащим примеси А и F, в 1,0 мл ПФ.

Примечание

Примесь A: 1-[2,6-дихлорфенил]-1,3-дигидро-2Н-индол-2-он [15362-40-0)].

Примесь F: 2-(2,6-дихлорфенил)-N-(4-хлорфенил)ацетамид [560075-65-2].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 оС; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика диклофенака. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Диклофенак – 1 (около 25 мин); примесь А – около 0,4; примесь F – около 0,8.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A и F используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу диклофенака для проверки разделительной способности хроматографической системы, и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси F и диклофенака должно быть не менее 4,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь А – 0,7; примесь F – 0,3.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика диклофенака на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси F не должна превышать 0,75 площади пика диклофенака на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика диклофенака на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 2,5 площади пика диклофенака на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,25 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 4,67 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 60 мл уксусной кислоты ледяной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствор хлорной кислоты соответствует 31,81 мг диклофенака натрия С14Н10Cl2NNaO2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0410 Дименгидринат (Dimenhydrinatum)

Вводится впервые

##### Определение

2-(Дифенилметокси)-N,N-диметилэтан-1-амина 1,3-диметил-8-хлоро-7H-пурин-2,6-дион (1:1) (дифенгидрамина 8-хлортеофиллин).

Cодержит:

- не менее 53,0 % и не более 55,5 % дифенгидрамина C17H21NO в пересчёте на сухое вещество;

- не менее 44,0 % и не более 47,0 % 8-хлортеофиллина C7H7ClN4O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Очень легко растворим в хлороформе, легко растворим в спирте 96 %, мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дименгидрината.

2. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 6 мл смеси вода—спирт 96 % 1:1, прибавляют 6 мл воды, 1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % и охлаждают на ледяной бане в течение 30 мин, при необходимости потирая стеклянной палочкой о стенки сосуда для инициирования кристаллизации. Помещают 10 мг полученного осадка в фарфоровый тигель, растворяют в 1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, прибавляют 0,1 г калия хлората и выпаривают досуха в фарфоровой посуде; должен образоваться красноватый остаток, который становится красно-фиолетовым при контакте с парами аммиака.

##### Испытания

Температура плавления. От 102 до 106 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор субстанции 5 % в спирте 96 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 7,1 до 7,6 (ОФС «Ионометрия», метод 3).

Испытуемый раствор. К 0,4 г субстанции прибавляют 20 мл воды, встряхивают в течение 2 мин и фильтруют.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 10 г триэтиламина в 950 мл воды и доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 2,50. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 180:820.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца дифенгидрамина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 57 мг фармакопейного стандартного образца дифенгидрамина гидрохлорида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца дифенгидрамина гидрохлорида и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси F, растворяют в 5 мл раствора стандартного образца дифенгидрамина гидрохлорида и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для идентификации пиков. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца дименгидрината для идентификации пиков, содержащего примеси А и Е, растворяют в 1,0 мл растворителя.

Примечание

Примесь А (теофиллин): 1,3-диметил-7H-пурин-2,6-дион [58-55-9].

Примесь Е (8-хлоркофеин): 1,3,7-триметил-8-хлорпурин-2,6-дион [4921-49-7].

Примесь F: 2-(дифенилметокси)-N-метилэтан-1-амин [17471-10-2].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 225 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,% | Скорость потока, мл/мин
--- | --- | --- | ---
0–2 | 82 | 18 | 1,2
2–15 | 82 → 50 | 18 → 50 | 1,2
15–20 | 50 → 20 | 50 → 80 | 1,2 → 2,0
20–30 | 20 | 80 | 2,0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для идентификации пиков, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дифенгидрамин – 1 (около 13 мин); примесь А – около 0,3; примесь Е – около 0,7; примесь F – около 0,95.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A и E используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу дименгидрината для идентификации пиков. Для идентификации пика примеси F используют относительное время удерживания соединения и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси F и дифенгидрамина должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A и F не должна превышать площадь пика дифенгидрамина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси E не должна превышать 0,75 площади пика дифенгидрамина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика дифенгидрамина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 2,5 площади пика дифенгидрамина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,25 площади пика дифенгидрамина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 30 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Дифенгидрамин

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 60 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 25,54 мг дифенгидрамина C17H21NO.

8-Хлортеофиллин

К 0,8 г (точная навеска) субстанции прибавляют 50 мл воды, 3 мл аммиака раствора 10 %, 0,6 г аммония нитрата и нагревают на водяной бане в течение 5 мин, прибавляют 25,0 мл 0,1 М раствора серебра нитрата и продолжают нагревать на водяной бане при перемешивании в течение 15 мин, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 25 мл азотной кислоты разведённой 12,5 %, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 250 мл, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют, отбрасывая первые 25 мл фильтрата. Титруют 100 мл фильтрата 0,1 М раствором аммония тиоцианата до перехода окраски в жёлто-коричневую (индикатор – 5 мл железа(III) аммония сульфата раствора 10 %).

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 21,46 мг 8-хлортеофиллина C7H7ClN4O2.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0663 Димеркаптопропансульфоната натрия моногидрат

Димеркаптопропансульфонат натрия
Natrii dimercaptosulfonas monohydricus

Взамен ФС 42-2325-99

##### Определение

(2RS)-2,3-Бис(сульфанил)пропан-1-сульфонат натрия моногидрат.

Содержит не менее 98,0 % и не более 100,5 % димеркаптопропансульфоната натрия C3H7NaO3S3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым или коричневатым оттенком мелкокристаллический порошок со слабым характерным запахом.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца димеркаптопропансульфоната натрия.

2. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 5 мл воды, прибавляют 0,2 мл натрия нитропруссида раствора 1 % и 0,1 мл натрия гидроксида раствора 10 %; должно появиться интенсивное красно-фиолетовое окрашивание.

3. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 5 мл воды и прибавляют 5 мл свинца(II) ацетата раствора 10 %; должен образоваться жёлтый осадок.

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 2 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор 0,25 г субстанции в 5 мл воды должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 3,1 до 5,5 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Потеря в массе при высушивании. От 6,5 до 8,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Железо. Не более 0,006 % (ОФС «Железо»). Определение проводят в соответствии с ОФС «Железо» (метод 1) в зольном остатке, полученном после сжигания 0,5 г субстанции (ОФС «Сульфатная зола»).

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,7 ЕЭ на 1 мг димеркаптопропансульфоната натрия моногидрата (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 30 мл воды и титруют 0,05 М раствором йода до появления синего окрашивания (индикатор – 1 мл крахмала раствора 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора йода соответствует 10,51 мг димеркаптопропансульфоната натрия C3H7NaO3S3.

##### Хранение

В сухом, защищённом от света месте.

* Проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0411 Диметилсульфоксид (Dimethylis sulfoxidum)

Вводится впервые

##### Определение

(Метансульфинил)метан.

Cодержит не менее 99,0 % диметилсульфоксида C2H6OS.

##### Свойства

Описание. Бесцветная прозрачная жидкость или бесцветные кристаллы.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Смешивается с водой и спиртом 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца диметилсульфоксида.

2. Качественная реакция. К 1 мл субстанции прибавляют 1 мл бензилового спирта и 1,5 мл серебра нитрата аммиачного раствора 5 %, выдерживают на водяной бане при температуре 80 °C в течение 5 мин; должен образоваться осадок серого цвета.

##### Испытания

Температура затвердевания. От 17,3 до 18,5 °С (ОФС «Температура затвердевания»).

Плотность. От 1,095 до 1,103 г/см3 (ОФС «Плотность», метод 1).

Показатель преломления. От 1,4770 до 1,4810 (ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)»).

Оптическая плотность. Субстанцию продувают азотом в течение 15 мин. Оптическая плотность субстанции, измеренная при длине волны 275 нм, не должна превышать 0,30. Оптическая плотность субстанции, измеренная при длине волны 285 нм и 295 нм, не должна превышать 0,20. Не должно обнаруживаться максимумов поглощения между 270 нм и 350 нм. В качестве раствора сравнения используют воду (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Кислотность. Растворяют 50 г субстанции в 100 мл воды, свободной от углерода диоксида, и прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствора 1 %. Раствор должен оставаться бесцветным. Для изменения окраски раствора на розовую должно потребоваться не более 5,0 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Испытуемый раствор. Субстанция.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют 0,1 г фармакопейного стандартного образца диметилсульфона и 0,15 г диметилформамида в 0,5 г субстанции. В коническую колбу с притёртой пробкой помещают 0,1 г полученного раствора, прибавляют 13,3 г субстанции и перемешивают.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 30 мг фармакопейного стандартного образца диметилсульфона, растворяют в диметилформамиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора диметилформамидом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора диметилформамидом до метки.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 50 м × 0,32 мм, покрытая слоем макрогола 20 000 2-нитротерефталата, 0,5 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |  |
Деление потока | 1:10; |  |  |
Скорость потока | 0,3 мл/мин; |  |  |
Объём пробы | 1 мкл; |  |  |
Температура | колонка | 0–20 мин | 180 °С; |
|  | 20–22 мин | 180 → 200 °С; |
|  | 22–45 мин | 200 °С; |
| инжектор |  | 240 °С; |
| детектор |  | 250 °С; |
Время хроматографирования | 45 мин. |  |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Диметилсульфоксид –1 (около 21,5 мин); диметилформамид – около 0,73; диметилсульфон – около 1,7.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика диметилсульфона должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками диметилформамида и диметилсульфоксида должно быть не менее 3,0;

- разрешение (RS) между пиками диметилсульфоксида и диметилсульфона должно быть не менее 3,0;

- фактор асимметрии пика (AS) диметилсульфона должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика диметилсульфона должно быть не более 10,0 % (6 введений).

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- диметилсульфон – не более 0,1 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 5 г (точная навеска) субстанции.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ГХ одновременно с испытанием «Родственные примеси».

Содержание диметилсульфоксида C2H6OS в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где ∑X - сумма примесей;
W – содержание воды,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной стеклянной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0664 Диметилсульфон (Dimethylsulfonum)

Вводится впервые

##### Определение

(Метансульфонил)метан.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % диметилсульфона C2H6O2S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, легко растворим или растворим в ацетоне, растворим или умеренно растворим в метаноле, умеренно растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца диметилсульфона.

2. ГХ. Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика диметилсульфона на хроматограмме стандартного раствора диметилсульфона (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Температура плавления. От 108,5 до 110,5 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1). Субстанцию предварительно высушивают при 30 °C и остаточном давлении 20 мм рт. ст. (2,66 кПа) в течение 4 ч.

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Срок годности растворов 24 ч при хранении в защищённом от света месте.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 10 мл метанола, обрабатывая ультразвуком при 50 °C в течение 1 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца диметилсульфона. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца диметилсульфона, растворяют в 10 мл метанола, обрабатывают ультразвуком при 50 °C в течение 1 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца диметилсульфоксида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца диметилсульфоксида, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл раствора стандартного образца диметилсульфона, 5,0 мл раствора стандартного образца диметилсульфоксида и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл раствора стандартного образца диметилсульфона и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 1,0 мл раствора стандартного образца диметилсульфоксида и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,53 мм, покрытая слоем поли(диметил)силоксана, 5 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |  |
Деление потока | 1:5; |  |  |
Скорость потока | 5,0 мл/мин; |  |  |
Объём пробы | 2 мкл; |  |  |
Температура | Колонка | 120 °С; |  |
| Инжектор | 250 °С; |  |
| Детектор | 250 °С; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика диметилсульфона. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Диметилсульфон – 1 (около 5 мин); диметилсульфоксид – около 0,74.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика диметилсульфона должно быть не менее 3;

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика диметилсульфоксида должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками диметилсульфоксида и диметилсульфона должно быть не менее 2,0.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»).

Допустимое содержание примесей:

- диметилсульфоксид – не более 0,1 %;

- любая другая примесь – не более 0,05 %;

- сумма примесей – не более 0,2 %.

Не учитывают пики с коэффициентом ёмкости (k′) менее 1,5 и пики, площадь которых менее площади пика диметилсульфона на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,025 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,0003 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,67 г субстанции. Для приготовления эталонного раствора к 1 мл стандартного раствора свинец-иона 5 мкг/мл прибавляют 9 мл воды.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ГХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 950 мл метанола, прибавляют 0,6 мл диэтиленгликоля метилового эфира, доводят объём раствора метанолом до метки и перемешивают.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 20 мл раствора внутреннего стандарта, обрабатывая ультразвуком при 50 °C в течение 1 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца диметилсульфона, растворяют в 20 мл раствора внутреннего стандарта, обрабатывая ультразвуком при 50 °C в течение 1 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют стандартный и испытуемый растворы.

Относительное время удерживания соединений. Диметилсульфон – 1 (около 5 мин); диэтиленгликоля метиловый эфир – около 1,2.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками диметилсульфона и диэтиленгликоля метилового эфира должно быть не менее 3,0.

- относительное стандартное отклонение отношения площади пика диметилсульфона к площади пика диэтиленгликоля метилового эфира должно быть не более 0,73 % (6 введений).

Содержание диметилсульфона C2H6O2S в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где B1 - отношение площади пика диметилсульфона к площади пика диэтиленгликоля метилового эфира на хроматограмме испытуемого раствора;
B0 - отношение площади пика диметилсульфона к площади пика диэтиленгликоля метилового эфира на хроматограмме стандартного раствора;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца диметилсульфона, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание диметилсульфона в фармакопейном стандартном образце диметилсульфона,%.

##### Хранение

В хорошо укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0412 Диметилфумарат (Dimethylii fumaras)

Вводится впервые

##### Определение

Диметил[(Е)-бут-2-ендиоат].

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % диметилфумарата C6H8O4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с жёлтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в хлороформе, мало растворим в метаноле, спирте 96 % и воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 , снятый в диске с калия бромидом, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца диметилфумарата.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Срок годности растворов – 2 ч.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Раствор стандартного образца диметилфумарата. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца диметилфумарата, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Спектры поглощения испытуемого раствора и раствора стандартного образца диметилфумарата в области длин волн от 190 до 350 нм (в кювете толщиной 1 см) должны иметь максимум при одной и той же длине волны.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 5 мл спирта 96 %, прибавляют 1 каплю калия перманганата раствора 3 %; должно появиться коричневое окрашивание и через некоторое время должен образовываться коричневый осадок.

4. Качественная реакция. К 0,5 г субстанции прибавляют 1 г резорцина и перемешивают. В фарфоровую чашку помещают 0,5 г полученной смеси, прибавляют 6 капель серной кислоты концентрированной и осторожно нагревают; должна образовываться тёмно-оранжевая полутвёрдая масса, при осторожном прибавлении к которой 100 мл воды должно появиться жёлтое окрашивание.

##### Испытания

Температура плавления. От 102 °C до 106 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

pH раствора. От 4,0 до 6,0 (ОФС «Ионометрия», метод 3).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,5 г субстанции, прибавляют 30 мл воды, перемешивают на магнитной мешалке в течение 15 мин и доводят объём раствора водой до метки.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 1,15 г аммония дигидрофосфата в 900 мл воды, прибавляют 2 мл триэтиламина и доводят значение рН фосфорной кислотой разведённой 10 % до 3,0. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—буферный раствор 250:750.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 10 мл метанола, растворяют, при необходимости обрабатывая ультразвуком в течение 5 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФ до метки. Срок годности раствора – 2 ч.

Раствор фумаровой кислоты. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) фумаровой кислоты, растворяют в 50 мл ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,3 мл испытуемого раствора, 0,3 мл раствора фумаровой кислоты и доводят объём раствора ПФ до метки. Срок годности раствора – 6 ч.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 10 мг субстанции в 20 мл метанола, прибавляют 2 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М, выдерживают при температуре 50–55 °C в течение 30 мин и охлаждают до комнатной температуры. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 50 мл ПФ, 1,0 мл испытуемого раствора, 1,0 мл раствора фумаровой кислоты и доводят объём раствора ПФ до метки.

Срок годности раствора – 2 ч.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. Срок годности раствора – 6 ч.

Примечание

Фумаровая кислота: (2E)-бут-2-ендиовая кислота [110-17-8].

Монометилфумарат: (E)-4-метокси-4-оксобут-2-еновая кислота [2756-87-8].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °C; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 100 мкл. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, стандартный и испытуемый растворы.

Относительное время удерживания соединений. Диметилфумарат – 1 (около 12 мин); фумаровая кислота – около 0,17; монометилфумарат – около 0,3.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для каждого из пиков диметилфумарата и фумаровой кислоты должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками фумаровой кислоты и монометилфумарата должно быть не менее 3,0;

- разрешение (RS) между пиками монометилфумарата и диметилфумарата должно быть не менее 7,0.

На хроматограмме стандартного раствора:

- фактор асимметрии пика (AS) диметилфумарата должен быть не более 1,8;

- относительное стандартное отклонение площади каждого из пиков диметилфумарата и фумаровой кислоты должно быть не более 3,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику диметилфумарата, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

Содержание фумаровой кислоты в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика фумаровой кислоты на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика фумаровой кислоты на хроматограмме стандартного раствора;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фумаровой кислоты, мг;
P – содержание основного вещества в образце фумаровой кислоты,%.

Содержание монометилфумарата и любой другой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика монометилфумарата или любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика диметилфумарата на хроматограмме стандартного раствора;
0,3 – содержание диметилфумарата в растворе сравнения,% от испытуемого раствора.

Допустимое содержание примесей:

- фумаровая кислота – не более 0,3 %;

- монометилфумарат – не более 0,3 %;

- любая другая примесь – не более 0,2 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,03 %.

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %, ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Помещают 1 г (точная навеска) субстанции в колбу для титрования, прибавляют 50,0 мл 0,5 М раствора натрия гидроксида, нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 15 мин, холодильник промывают 15 мл воды, охлаждают колбу до комнатной температуры и титруют 0,5 М раствором хлористоводородной кислоты до перехода голубой окраски в жёлтую (индикатор 3–5 капель бромтимолового синего раствора 0,04 % спиртового).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,5 М раствора натрия гидроксида соответствует 36,03 мг диметилфумарата C6H8O4.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0413 Диметиндена малеат

Диметинден
Dimetindeni maleas

Вводится впервые

##### Определение

N,N-Диметил-2-{3-[(1RS)-1-(пиридин-2-ил)этил]-1H-инден-2-ил}этан-1-амин (2Z)-бут-2-ендиоат (1:1).

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % диметиндена малеата C20H24N2∙C4H4O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в метаноле, мало растворим в воде.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца диметиндена малеата.

##### Испытания

Угол вращения. От –0,10° до +0,10° (1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 20,0 мл метанола должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Растворитель. Ацетон—метиленхлорид 50:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор примеси А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг 2-этилпиридина (примеси А), растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A: 2-этилпиридин [100-71-0].

Примесь B: 2-(1H-инден-2-ил)-N,N′-диметилэтан-1-амин [92039-36-6].

Примесь C: этил[(2RS)-2-бензил-4-(диметиламино)бутаноат] [92726-29-9].

Примесь D: (2RS)-2-бензил-4-(диметиламино)бутановая кислота [1613-23-6].

Примесь E: (2RS)-2-[2-(диметиламино)этил]-2,3-дигидро-1H-инден-1-он [3409-21-0].

Примесь F: 2-(3-бутил-1H-инден-2-ил)-N,N-диметилэтан-1-амин [1346746-53-9].

Примесь G: N,N-диметил-2-(3-фенил-1H-инден-2-ил)этан-1-амин [803617-18-7].

Примесь H: 2-[(1RS)-1-(2-этенил-1H-инден-3-ил)этил]пиридин [1346597-95-2].

Примесь I: N-метил-2-{3-[(1RS)-1-(пиридин-2-ил)этил]-1H-инден-2-ил}этан-1-амин [151562-10-6].

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,32 мм покрытая слоем поли(фенил)(50)[диметил](50)силоксана, 0,25 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:20; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Объём пробы | 2 мкл; |  |
Температура | колонка | 0–1 мин | 60 °C;
|  | 1–34,3 мин | 60 → 260 °C;
|  | 34,3–46,3 мин | 260 °C;
| инжектор |  | 240 °C;
| детектор |  | 260 °C;
Время хроматографирования | 1,3-кратное от времени удерживания пика диметиндена. |

Хроматографируют раствор примеси A, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Время удерживания соединений. Примесь A и малеиновая кислота удерживаются в течение первых 8 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения фактор асимметрии пика (AS) диметиндена должен быть не более 1,3.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна превышать площадь пика 2-этилпиридина на хроматограмме раствора примеси A (не более 0,1 %);

- площадь пика каждой из примесей B, С, D, E, F, G, H и I не должна превышать 0,2 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- сумма площадей пиков всех примесей (кроме примеси A) не должна превышать 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пик малеиновой кислоты и пики, площадь которых менее 0,05 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,1 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 80 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 20,43 мг диметиндена малеата C20H24N2∙C4H4O4.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0310 Диметикон (Dimeticonum)

Вводится впервые

##### Определение

α-(Триметилсилил)-ω-метилполи[окси(диметилсиландиил)].

Поли(диметилсиликон) получают методом гидролиза диметилдихлорсилана и триметилхлорсилана с последующей поликонденсацией. В зависимости от степени полимеризации (n = от 20 до 400) существуют разные марки диметикона, которые различают и обозначают с помощью значений кинематической вязкости (от 20 мм2/с до 1300 мм2/с). Диметиконы с номинальной вязкостью 50 мм2/с или ниже предназначены только для наружного применения.

##### Свойства

Описание. Прозрачная бесцветная жидкость различной вязкости.

Растворимость. Очень мало растворим или практически нерастворим в этаноле, практически нерастворим в воде.

Смешивается с этилацетатом, метилэтилкетоном и толуолом.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца диметикона. Область спектра от 850 см-1 до 750 см-1 не учитывают.

2. Качественная реакция. В пробирку А помещают 0,5 г субстанции, в пробирку Б − 1 мл хромотроповой кислоты натриевой соли раствора 0,1 %. Пробирку А закрывают крышкой с газоотводной трубкой, конец которой помещают в пробирку Б, и медленно нагревают до выделения белых паров. Пробирку Б встряхивают в течение 10 с и нагревают на водяной бане в течение 5 мин; должно появиться фиолетовое окрашивание.

3. Качественная реакция. Остаток, полученный при сжигании 50 мг субстанции в платиновом тигле (ОФС «Сульфатная зола»), должен давать реакцию на силикаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

* Кинематическая вязкость. От 90 % до 110 % от заявленной кинематической вязкости (ОФС «Вязкость»). Измерение проводят при температуре 25 °С.

Кислотность. К 2 г субстанции прибавляют 25 мл смеси этанол—эфир 1:1, предварительно нейтрализованной по бромтимоловому синему раствору 0,05 % (0,2 мл), и встряхивают. Раствор должен окрашиваться в синий цвет при прибавлении не более 0,15 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида.

Минеральные масла. Флуоресценция 2 г субстанции, измеренная на спектрофлуориметре при длине волны 365 нм, не должна превышать флуоресценцию раствора сравнения (ОФС «Флуориметрия»).

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мг хинина сульфата, растворяют в 0,005 М растворе серной кислоты и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Фенилированные соединения. Оптическая плотность испытуемого раствора в диапазоне длин волн от 250 до 270 нм не должна превышать 0,2 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. Встряхивают 5 г субстанции с 10 мл циклогексана до растворения.

Летучие вещества. Не более 0,3 % для диметикона с заявленной кинематической вязкостью более 50 мм2/с. Помещают 1,0 г (точная навеска) субстанции в чашку Петри (диаметр – 60 мм, глубина – 10 мм) и нагревают при температуре 150 °С в течение 2 ч.

Тяжёлые металлы. Не более 0,0005 %.

Испытуемый раствор. Растворяют 1,0 г субстанции в метиленхлориде и доводят объём раствора до 20,0 мл. К полученному раствору прибавляют 1,0 мл дитизона раствора 0,002 % в метиленхлориде, 0,5 мл воды и 0,5 мл смеси аммиака раствора 2 М—гидроксиламина гидрохлорида
раствора 0,2 % (1:9).

Эталонный раствор. К 20,0 мл метиленхлорида прибавляют 1,0 мл дитизона раствора 0,002 % в метиленхлориде, 0,5 мл свинца стандартного раствора 10 мкг/мл и 0,5 мл смеси аммиака раствора 2 М—гидроксиламина гидрохлорида раствора 0,2 % (1:9).

Растворы готовят параллельно, сразу после приготовления испытуемый и эталонный раствор сильно встряхивают в течение 1 мин.

Допустимое содержание тяжёлых металлов. Окраска испытуемого раствора не должна превышать по интенсивности окраску эталонного раствора.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Хранение. В герметично укупоренной упаковке

*Испытание проводят, если диметикон применяется в качестве смягчающего вещества.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0095 Диоксометилтетрагидропиримидин (Dioxomethyltetrahydropyrimidinum)

Взамен ФС.2.1.0095.18

##### Определение

6-Метилпиримидин-2,4(1H,3H)-дион.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % диоксометилтетрагидропиримидина C5H6N2O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца диоксометилтетрагидропиримидина.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 300 нм должен иметь максимум при 260 нм и минимум при 231 нм.

3. Качественная реакция. К 0,1 г субстанции прибавляют 10 мл бромной воды и встряхивают; бромная вода должна обесцветиться в течение 5 мин.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Калия дигидрофосфата раствор 0,01 М.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 25 мл горячей воды (около 80 °С), охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор мочевины. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) мочевины, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца диоксометилтетрагидропиримидина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца диоксометилтетрагидропиримидина, растворяют в 30 мл горячей воды (около 80 °С), охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 4,0 мл раствора мочевины, прибавляют 2,0 мл раствора стандартного образца диоксометилтетрагидропиримидина и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 200 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика диоксометилтетрагидропиримидина. |

Уравновешивают колонку ПФ в течение 30 мин.

Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Диоксометилтетрагидропиримидин – 1 (около 13 мин); мочевина – около 0,17.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика диоксометилтетрагидропиримидина должно быть не менее 10;

- разрешение (RS) между пиками мочевины и диоксометилтетрагидропиримидина должно быть не менее 2,0;

- фактор асимметрии пика (AS) диоксометилтетрагидропиримидина должен быть не более 1,5.

Содержание примеси мочевины в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика мочевины на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика мочевины на хроматограмме стандартного раствора;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска мочевины, мг;
P - содержание основного вещества в мочевине,%.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика диоксометилтетрагидропиримидина на хроматограмме стандартного раствора;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца диоксометилтетрагидропиримидина, мг;
P - содержание диоксометилтетрагидропиримидина в фармакопейном стандартном образце диоксометилтетрагидропиримидина,%.

Допустимое содержание примесей:

- мочевина – не более 0,2 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика диоксометилтетрагидропиримидина на хроматограмме стандартного раствора (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,3 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Взбалтывают 1 г субстанции в течение 1 мин с 50 мл воды и фильтруют.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 25 мл диметилформамида, предварительно нейтрализованного по тимолового синего раствору 1 %, и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида в смеси метанола и бензола до появления сине-голубого окрашивания (индикатор – тимолового синего раствор 1 %), не исчезающего в течение 30 с.

Титрование рекомендуется проводить в атмосфере инертного газа.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 12,61 мг диоксометилтетрагидропиримидина C5H6N2O2.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0414 Диоксотетрагидрокситетрагидронафталин (Dioxotetrahydroxytetrahydronaphthalinum)

Взамен ФС 42-0062-01

##### Определение

2,2,3,3-Тетрагидрокси-2,3-дигидронафталин-1,4-дион.

Содержит не менее 99,0 % и не более 102,0 % диоксотетрагидрокситетрагидронафталина C10H4O4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с розоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде и спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца диоксотетрагидрокситетрагидронафталина.

2. Спектрофотометрия_ (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 до 340 нм должен иметь максимумы при 228, 260 и 305 нм и минимумы при 246 и 287 нм.

3. Качественная реакция._ Растворяют 10 мг субстанции в 5 мл воды и прибавляют 0,2 мл натрия гидроксида раствора 30 %; должно появиться сине-фиолетовое окрашивание.

4. Качественная реакция._ Растворяют 0,2 г субстанции в 5 мл воды, прибавляют 5 мл натрия гидросульфита раствора 5 % и нагревают при перемешивании в течение 2 мин на водяной бане; должно появиться красное окрашивание, в течение 10 мин должен образоваться кирпично-красный осадок изонафтазарина. Осадок отфильтровывают на воронке Бюхнера, промывают 5 мл воды и сушат на воздухе в течение 1 ч. Определяют температуру разложения изонафтазарина, которая должна быть не ниже 276 °С.

##### Испытания

pH раствора. От 4,0 до 5,0 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Изонафтазарин. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Предварительная подготовка пластинки. Пластинку погружают в щавелевой кислоты раствор 2 % в этаноле, сушат на воздухе и высушивают при температуре 96 °С в течение 5 мин.

Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота безводная—бензол—этилацетат 10:50:50.

Испытуемый раствор. Растворяют 0,1 г субстанции в 2 мл смеси муравьиная кислота безводная—ацетон 5:95.

Раствор изонафтазарина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг изонафтазарина, полученного в испытании «Подлинность. 4. Качественная реакция», растворяют в 85 мл ацетона и доводят объём раствора ацетоном до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Испытуемый раствор—раствор изонафтазарина 1:1.

На линию старта пластинки полосами длиной 0,5 см наносят по 5 мкл испытуемого раствора (250 мкг), раствора изонафтазарина (0,5 мкг) и 10 мкл раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Не допуская высушивания нанесённых проб, пластинку помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 5 мин, выдерживают в камере с парами аммиака, предварительно насыщенной с помощью 20 мл аммиака водного, в течение не менее 3 мин до чёткого проявления зон адсорбции и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 разделённые зоны адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции, находящаяся на уровне зоны адсорбции изонафтазарина, по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции изонафтазарина на хроматограмме раствора изонафтазарина (не более 0,2 %).

Зону адсорбции на линии старта при оценке не учитывают.

Вода. От 15,8% до 17,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,1 г субстанции в 10 мл воды.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 60 мг (точная навеска) субстанции в 200 мл воды, прибавляют 2 мл серной кислоты концентрированной и 25,0 мл 0,1 М раствора церия(IV) сульфата, перемешивают, нагревают на водяной бане при температуре 50–60 °С в течение 30 мин, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 25 мл калия йодида раствора 10 % , выдерживают в темноте в течение 30 мин и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата до исчезновения окраски (индикатор – 1 мл крахмала раствора 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

Разность объёмов 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует объёму 0,1 М раствора церия(IV) сульфата, прореагировавшего с диоксотетрагидрокситетрагидронафталином.

Содержание диоксотетрагидрокситетрагидронафталина C10H4O4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где V1 - объём 0,1 М раствора натрия тиосульфата, пошедший на титрование испытуемого раствора, мл;
V0 - объём 0,1 М раствора натрия тиосульфата, пошедший на титрование контрольного опыта, мл;
а1 – навеска субстанции, мг;
K - поправочный коэффициент 0,1 М раствора натрия тиосульфата;
3,136 - количество диоксотетрагидрокситетрагидронафталина безводного, соответствующее 1 мл 0,1 М раствора церия(IV) сульфата, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

При температуре не выше 7 °С.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0665 Диосмин (Diosminum)

Вводится впервые

##### Определение

5-Гидрокси-2-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-7-[(6-O-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)-β-D-глюкопиранозил)окси]-4H-1-бензопиран-4-он.

Cодержит не менее 90,0 % и не более 102,0 % диосмина C28H32O15 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Серовато-жёлтого или светло-жёлтого цвета порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим или растворим в диметилсульфоксиде, практически нерастворим в воде и спирте 96 %.

*Растворяется в разбавленных растворах щелочей.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца диосмина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика диосмина на хроматограмме раствора стандартного образца диосмина (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—уксусная кислота ледяная—метанол—вода 20:60:280:660.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в диметилсульфоксиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора диметилсульфоксидом до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают около 5 мг фармакопейного стандартного образца диосмина для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси А, В, С, D, Е и F, растворяют в диметилсульфоксиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора диметилсульфоксидом до метки.

Примечание

Примесь А (ацетоизованиллон):
1-(3-гидрокси-4-метоксифенил)этан-1-он
[6100-74-9].

Примесь В (гесперидин):
(2S)-5-гидрокси-2-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-7-{[6-O-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)-β-D-глюкопиранозил]окси}-2,3-дигидро-4H-1-бензопиран-4-он
[520-26-3].

Примесь С (изороифолин):
5-гидрокси-2-(4-гидроксифенил)-7-[(6-O-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)-β-D-глюкопиранозил)окси]-4H-1-бензопиран-4-он
[552-57-8].

Примесь D (6-йододиосмин):
5-гидрокси-2-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-7-[(6-O-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)-β-D-глюкопиранозил)окси]-6-иод-4H-1-бензопиран-4-он
[1431536-92-3].

Примесь Е (линарин):
5-гидрокси-7-[(6-O-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)-2-(4-метоксифенил)-β-D-глюкопиранозил)окси]-4H-1-бензопиран-4-он
[480-36-4].

Примесь F (диосметин):
5,7-дигидрокси-2-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-4H-1-бензопиран-4-он
[520-34-3].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 275 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 6-кратное от времени удерживания диосмина. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Диосмина – 1 (около 4 мин); примесь А – около 0,5; примесь В – около 0,6; примесь С – около 0,8; примесь D – около 2,2; примесь E – около 2,6; примесь F – около 4,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образца диосмина для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика диосмина должно быть не менее 10;

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (Rs) между пиками примеси В и примеси С должно быть не менее 2,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь А – 0,4; примесь F – 0,6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси В не должна превышать четырёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 4,0 %);

- площадь пика каждой из примесей С и E не должна превышать трёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 3,0 %);

- площадь пика примеси D не должна превышать 0,6 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6 %);

- площадь пика примеси F не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,4 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,4 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 8,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 8,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (0,1 %).

Йод. Не более 0,1 %. Определение проводят потенциометрическим титрованием, используя йодид-селективный электрод. (ОФС «Потенциометрическое титрование») после сжигания 0,1 г (точная навеска) субстанции (ОФС «Метод сжигания в колбе с кислородом»).

Раствор гидразина. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 0,1 г гидразина растворяют в 100 мл воды и доводят объём раствора до метки тем же растворителем.

Раствор калия нитрата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 200 г калия нитрата, растворяют в 400 мл азотной кислоты 0,1 М растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор калия йодида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,66 г калия йодида растворяют в 30 мл воды и доводят объём раствора до метки тем же растворителем.

Испытуемый раствор. Помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции в центр не содержащей галогенидов фильтровальной бумаги и заворачивают в виде пакетика, оставляя свободный конец в виде узкой полоски. Подготовленную пробу помещают в держатель. В колбу для сжигания наливают 50 мл гидразина раствора 0,02 %, увлажняют горло колбы водой и пропускают в течение 10 мин ток кислорода через трубку, конец которой находится выше уровня жидкости. Затем осторожно поджигают узкий конец свободной полоски фильтровальной бумаги и немедленно плотно закрывают колбу, пробкой, смоченной водой. По окончании сжигания содержимое колбы встряхивают и оставляют на 1 ч при периодическом перемешивании.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл раствор калия йодида и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

В химический стакан вместимостью 50 мл помещают 30 мл раствор калия нитрата, в раствор погружают электроды и перемешивают в течение 10 мин. Потенциал раствора должен оставаться стабильным (nT1). Прибавляют 1,0 мл испытуемого раствора, перемешивают и измеряют потенциал раствора (nT2).

В химический стакан вместимостью 50 мл помещают 30 мл раствор калия нитрата, в раствор погружают электроды и перемешивают в течение 10 мин. Потенциал раствора должен оставаться стабильным (nR1). Прибавляют 80 мкл стандартного раствора, перемешивают и измеряют потенциал раствора (nR2).

Абсолютная величина |nT2-nT1| не должна превышать абсолютную величину |nR2-nR1|.

Вода. Не более 6,0 % (ОФС «Определение воды», метод К.Фишера (полумикрометод,) методика Б). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 6).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца диосмина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца диосмина, растворяют в диметилсульфоксиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Хроматографируют раствор стандартного образца диосмина и испытуемый раствор.

Содержание диосмина C28H32O15 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика диосмина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика диосмина на хроматограмме раствора стандартного образца диосмина;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца диосмина, мг;
W – содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание диосмина в фармакопейном стандартном образце диосмина,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0415 Дисульфирам (Disulfiramum)

Вводится впервые

##### Определение

N1, N1, N3, N3-Тетраэтил-2-дитиоперокси-1,3-дитиокарбондиамид.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % дисульфирама C10H20N2S4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый, почти белый или желтовато-белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде, диметилсульфоксиде и ацетоне, растворим в эфире, умеренно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дисульфирама.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика дисульфирама на хроматограмме раствора стандартного образца дисульфирама (Б) (раздел «Родственные примеси. Другие примеси»).

3. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 10 мл метанола, прибавляют 2 мл меди(II) хлорида раствора 0,05 % в метаноле; должно появиться жёлтое окрашивание, переходящее в зеленовато-жёлтое.

##### Испытания

Температура плавления. От 70 до 73 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор субстанции 25 % в диметилсульфоксиде должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность 25 % раствора субстанции в диметилсульфоксиде, измеренная при длине волны 500 нм в кювете с толщиной слоя 1 см (по сравнению с диметилсульфоксидом), не должна превышать 0,15 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Родственные примеси

1. Диэтилдитиокарбамат. Не более 0,015 %. Определение проводят методом визуальной колориметрии.

Испытуемый раствор. В делительную воронку помещают 0,2 г субстанции, растворяют в 10 мл эфира, прибавляют 5 мл буферного раствора рН 8,0 и тщательно перемешивают в течение 2 мин. Эфирный слой отделяют и отбрасывают, а водный слой промывают 10 мл эфира.

Параллельно аналогично испытуемому раствору готовят контрольный раствор, используя вместо субстанции 0,2 мл натрия диэтилдитиокарбамата раствора 0,015 %.

К водным слоям испытуемого и контрольного растворов прибавляют по 0,2 мл меди(II) сульфата раствора 0,4 % и 5 мл циклогексана. Встряхивают. Жёлтая окраска циклогексанового слоя испытуемого раствора не должна превышать по интенсивности окраску циклогексанового слоя контрольного раствора.

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы хранят в защищённом от света месте и используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 6,8 г калия дигидрофосфата в 950 мл воды и доводят значение pH натрия гидроксида раствором 30 % до 7,00. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Буферный раствор—метанол 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 20 мл этанола, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 10 мин и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца дисульфирама (А). В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дисульфирама, прибавляют 20 мл этанола, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 10 мин и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца дисульфирама (Б). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг натрия диэтилдитиокарбамата, прибавляют 5 мл раствора стандартного образца дисульфирама А, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 10 мин и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца дисульфирама (Б) и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °C; |  |
Скорость потока | 1 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 250 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 4-кратное от времени удерживания пика дисульфирама. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дисульфирам – 1 (около 8 мин); диэтилдитиокарбамат – около 0,25.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика дисульфирама должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками диэтилдитиокарбамата и дисульфирама должно быть не менее 2,0;

- фактор асимметрии пика (AS) дисульфирама должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика дисульфирама должно быть не более 3,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику дисульфирама, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

Допустимое содержание примесей. Содержание любой примеси в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- любая примесь – не более 0,2 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 % от суммы площадей всех пиков.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают в вакууме до постоянной массы 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 55±5 °C и остаточном давлении 1,2–2,5 кПа.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 0,5 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,4 ЕЭ на 1 мг дисульфирама (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции в диметилсульфоксиде c концентрацией 100 мг/мл.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца дисульфирама (Б) и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца дисульфарма (Б):

- фактор асимметрии пика (AS) дисульфирама должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика дисульфирама должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику дисульфирама, должна составлять не менее 1800 теоретических тарелок.

Содержание дисульфирама C10H20N2S4 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляется по формуле:

где S1 – площадь пика дисульфирама на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика дисульфирама на хроматограмме раствора стандартного образца дисульфирама (Б);
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца дисульфирама, мг;
Р – содержание дисульфирама в фармакопейном стандартном образце дисульфирама,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0096 Дифенгидрамина гидрохлорид

Дифенгидрамин
Diphenhydramini hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0096.18

##### Определение

2-(Дифенилметокси)-N,N-диметилэтан-1-амина гидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % дифенгидрамина гидрохлорида C17H21NO·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96 % и хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дифенгидрамина гидрохлорида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь максимум при 253 нм, 258 нм и 264 нм.

3. Качественная реакция. На часовое стекло наносят 0,2 мл концентрированной серной кислоты и прибавляют 20 мг субстанции; должно появиться ярко-жёлтое окрашивание, постепенно переходящее в кирпично-красное; от прибавления нескольких капель воды окраска должна исчезнуть.

4. Качественная реакция. Растворяют 20 мг субстанции в 2 мл воды. Раствор должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 168 до 172 ºС (ОФС «Температура плавления»).

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в воде, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном ВY6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 5,0 до 6,5 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Кислотность или щёлочность. К 10 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 0,15 мл раствора метилового красного и 0,25 мл 0,01 М раствор хлористоводородной кислоты. Для изменения окраски раствора на жёлтую должно потребоваться не более 0,5 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Фосфатный буферный раствор рН 3,0 (2).

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 350:650.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 70 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси А и 5 мг (точная навеска) бензгидрола, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, прибавляют 1,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь A: 2-дифенилметокси-N-метилэтанамин [53499-40-4].

Примесь В: 2-[(RS)-(4-метилфенил)фенилметокси]-N,N-диметилэтанамин [19804-27-4].

Примесь C: 2--N,N-диметилэтанамин [1808-12-4].

Примесь D (бензгидрол): дифенилметанол [91-01-0].

Примесь E (бензофенон): дифенилметанон [119-61-9].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 5 мкм; |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 7-кратное от времени удерживания основного пика. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дифенгидрамин – 1 (около 6 мин); примесь A – около 0,9; примесь В – около 1,5; примесь C – около 1,8; примесь D – около 2,6; примесь E – около 5,1.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками дифенгидрамина и примеси А должно быть не менее 2,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси D умножают на 0,7.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика любой примеси не должна превышать 0,6 площади пика дифенгидрамина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 %. (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 3,4 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 50 мл спирта 96 % и прибавляют 5,0 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты. Титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 29,18 мг C17H21NO·HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0097 Доксазозина мезилат

Доксазозина
Doxazosini mesilas

Взамен ФС.2.1.0097.18

##### Определение

2-{4-[(2RS)-2,3-Дигидро-1,4-бензодиоксин-2-карбонил]пиперазин-1-ил}-6,7-диметоксихиназолин-4-амина метансульфонат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % доксазозина мезилата C23H25N5O5∙CH4SO3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим или растворим в диметилсульфоксиде, очень мало растворим в спирте 96 % и метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия._ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца доксазозина мезилата.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец доксазозина мезилата растворяют в этаноле (1:10), кипятят с обратным холодильником в течение 3 часов, охлаждают и фильтруют. Записывают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия._ «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. Растворяют при энергичном перемешивании 25 мг субстанции в 50 мл смеси метанол—хлористоводородная кислота концентрированная 99,9:0,1. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят той же смесью растворителей до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 400 нм должен иметь максимумы при 246 нм, 330 нм и 342 нм, минимумы при 226 нм и 293 нм и плечи в интервалах от 278 до 282 нм и от 316 до 322 нм.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в смеси 15 мл воды и 35 мл тетрагидрофурана должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей».

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдержать сравнение с эталоном BY6 . (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,5 г фосфорной кислоты концентрированной, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,5 г фосфорной кислоты концентрированной, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл ПФБ и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят водой объём раствора до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси D и 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси растворяют в 5 мл ПФБ и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь D: 6,7-диметоксихиназолин-2,4(1H,3H)-дион [28888-44-0].

Примесь F: 2-хлор-6,7-диметоксихиназолин-4-амин [23680-84-4].

Хроматографические условия

Колонка | 250 мм × 4,0 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии(5 мкм); |
Температура колонки | 35 оС; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 90 | 10
5–40 | 90 → 50 | 10 → 50
40–45 | 50 | 50

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания компонентов. Доксазозин – 1 (около 30 мин); примесь D – около 0,5; примесь F – около 0,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей D и F используют хроматограмму раствора сравнения В.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение ® между пиками примеси D и F должно быть не менее 4,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси должна быть не более площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,5 %. (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании ОФС «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в смеси 10 мл диметилформамида и 5 мл воды при перемешивании на магнитной мешалке. Полученный раствор титруют при непрерывном перемешивании 0,1 М раствором натрия гидроксида до появления розовой окраски, устойчивой в течение 1 мин (индикатор – 1 % раствор фенолфталеина).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 54,76 мг доксазозина мезилата C23H25N5O5∙CH4SO3.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0416 Доксиламина сукцинат

Доксиламин
Doxylamini succinas

Вводится впервые

##### Определение

N,N-Диметил-2-[(1RS)-1-фенил-1-(пиридин-2-ил)этокси]этанамина бутандиоат (1:1).

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % доксиламина сукцината C17H22N2O·C4H6О4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца доксиламина гидросукцината.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия_ (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 10 мг субстанции, прибавляют 2 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М, перемешивают тщательно до растворения и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь максимум при 262 нм с удельным показателем поглощения от 229 до 243 нм.

##### Испытания

Температура плавления. От 103 до 108 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Угол вращения. От –0,1° до +0,1° (10 % раствор субстанции в воде при длине кюветы 1 дм, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,4 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей», метод 2).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,65 г субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоте 0,37 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. К полученному раствору прибавляют 3 мл натрия гидроксида раствора 10 % и экстрагируют тремя порциями метиленхлорида, каждая по 25 мл. Полученные экстракты в метиленхлориде объединяют и фильтруют с использованием бумажного гидрофобного фильтра с разделением фаз. Фильтр промывают 10 мл метиленхлорида и объединяют с фильтратами. Полученный раствор выпаривают при пониженном давлении и температуре не выше 40 °C. Полученный сухой остаток растворяют в 20,0 мл этанола.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора этанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора этанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг фармакопейного стандартного образца доксиламина для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примесь С (N,N-диметил-2-[(1RS)-1-фенил-1-(пиридин-2-ил)метокси]этанамин [1221-70-1]), растворяют в хлористоводородной кислоте 0,37 %. К полученному раствору прибавляют 1,5 мл натрия гидроксида раствора 10 % и экстрагируют тремя порциями метиленхлорида, каждая по 25 мл. Полученные экстракты в метиленхлориде объединяют и фильтруют с использованием бумажного гидрофобного фильтра с разделением фаз. Фильтр промывают 10 мл метиленхлорида и объединяют с фильтратами. Полученный раствор выпаривают при пониженном давлении и температуре не выше 40 °C. Полученный сухой остаток растворяют в 5,0 мл этанола.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,53 мм, покрытая слоем поли(диметил)(дифенил)силоксана, 1,5 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий; |  |
Скорость потока | 7,0 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1 мкл. |  |

Температурная программа

Температура | Время, мин | Температура, °C
--- | --- | ---
Колонка | 0–12 | 160 → 220
| 12–27 | 220
Инжектор |  | 250
Детектор |  | 250

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Доксиламин – 1 (около 12 мин); примесь С – около 0,96.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси С используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу доксиламина для проверки пригодности хроматографической системы, и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси С и доксиламина должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси С не должна более чем в 5 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать семикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,7 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 19,43 мг доксиламина сукцината C17H22N2O∙C4H6O4.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0674 Доксициклина гиклат

Доксициклин
Doxycyclini hyclas

Взамен ФС 42-2545-88

C22H24N2O8·HCl·0,5C2H6O·0,5H2O [24390-14-5] | М.м. 512,94

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(4S,4aR,5S,5aR,6R,12aS)-3,5,10,12,12a-Пентагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамида гидрохлорид гемиэтанол гемигидрат.

Полусинтетический продукт из продукта ферментации.

Cодержит не менее 95,0 % и не более 102,0 % доксициклина гидрохлорида C22H24N2O8·HCl в пересчёте на безводное и свободное от этанола и органических растворителей вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Жёлтый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в метаноле, легко растворим или растворим в воде, умеренно или мало растворим в спирте 96 %.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца доксициклина гиклата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика доксициклина на хроматограмме раствора стандартного образца доксициклина гиклата (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. К 2 мг субстанции прибавляют 5 мл серной кислоты концентрированной. Должно появиться жёлтое окрашивание.

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлорид-ион (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От −105 до −120 в пересчёте на безводное и свободное от этанола и остаточных органических растворителей вещество (1 % раствор субстанции в смеси хлористоводородной кислоты раствор 1 М—метанол 1:99; ОФС «Оптическое вращение»). Раствор используют в течение 5 мин после приготовления.

Оптическая плотность. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, в пересчёте на безводное и свободное от этанола и остаточных органических растворителей вещество, растворяют в смеси хлористоводородной кислоты раствор 1 М—метанол 1:99 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Оптическая плотность полученного раствора при длине волны 490 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, измеренная по сравнению с указанной смесью, не должна превышать 0,07. Раствор используют в течение 1 ч после приготовления.

pH. От 2,0 до 3,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы субстанции и стандартных образцов готовят непосредственно перед использованием.

Буферный раствор А. Растворяют 67,9 г тетрабутиламмония гидросульфата в 900 мл воды и доводят pH раствора аммиака раствором концентрированным 25 % до 7,0. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Буферный раствор Б. Растворяют 111,6 г натрия эдетата в 900 мл воды и доводят pH раствора аммиака раствором концентрированным 25 % до 7,0. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—вода—буферный раствор А—буферный раствор Б 130:170:350:350.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоте разведённой 0,11 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислотой разведённой 0,11 % до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца доксициклина для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси A, B, C и F, растворяют в хлористоводородной кислоте разведённой 0,11 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь A (6-эпидоксициклин):
(4S,4aR,5S,5aR,6S,12aS)-3,5,10,12,12a-пентагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамид [3219-99-6].

Примесь B (метациклин):
(4S,4aR,5S,5aR,12aS)-3,5,10,12,12a-пентагидрокси-4-(диметиламино)-6-метилиден-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамид [914-00-1].

Примесь C (4-эпидоксициклин):
(4R,4aR,5S,5aR,6R,12aS)-3,5,10,12,12a-пентагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамид [6543-77-7].

Примесь F (2-ацетил-2-декарбамоилдоксициклин):
(4S,4aR,5S,5aR,6R,12aS)-2-ацетил-3,5,10,12,12a-пентагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-4a,5a,6,12a-тетрагидротетрацен-1,11(4H,5H)-дион [122861-53-4].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, кремнийорганический полимер, аморфный, октадецильный с полярными мостиками, эндкепированный, 5 мкм;
Температура колонки | 35 °С;
Скорость потока | 1,0 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм;
Объём пробы | 20 мкл;
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика доксициклина.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Доксициклин – 1 (около 21 мин); примесь C – около 0,4; примесь A – около 0,7; примесь B – около 0,8; примесь F – около 1,3.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков используются хроматограмма раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмма, прилагаемая к фармакопейному стандартному образцу доксициклина для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примесей A и B должно быть не менее 2,0;

- разрешение (RS) между пиками примеси B и доксициклина должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна более чем в 4 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0 %);

- площадь пика примеси F не должна более чем в 2,4 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,2 %);

- площадь пика примеси B не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси C не должна превышать 0,4 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,2 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна более чем в 6 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 3,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не менее 1,4 % и не более 2,8 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1,2 г (точная навеска) субстанции.

Этанол. Не менее 4,3 % и не более 6,0 % (ОФС «Определение спирта этилового в лекарственных средствах», метод газовой хроматографии).

Сульфатная зола. Не более 0,4 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

** Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 2,5 мг доксициклина гиклата в 0,5 мл натрия хлорида раствора 0,9 % для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения 48 ч.

** Бактериальные эндотоксины. Не более 1,25 ЕЭ на 1 мг доксициклина хиклата (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

** Испытание на депрессорные вещества. Субстанция не должна обладать депрессорным действием (ОФС «Испытание на депрессорные вещества»). Тест-доза – 5 мг доксициклина гиклата в 1 мл натрия хлорида раствора 0,9 % на 1 кг массы животного.

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца доксициклина гиклата. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 20 мг (точная навеска) стандартного образца доксициклина гиклата, растворяют в хлористоводородной кислоте разведённой 0,11 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца доксициклина гиклата:

- фактор асимметрии пика (AS) доксициклина должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика доксициклина должно быть не более 0,85 % (6 введений).

Содержание доксициклина гидрохлорида C22H24N2O8·HCl в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от этанола и остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика доксициклина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика доксициклина на хроматограмме раствора стандартного образца доксициклина гиклата;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска стандартного образца доксициклина гиклата, мг;
W – суммарное содержание воды, этанола и остаточных органических растворителей в субстанции, %;
P – содержание доксициклина гидрохлорида в стандартном образце доксициклина гиклата, %.

##### ХРАНЕНИЕ

В сухом, защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0311 Доксициклина моногидрат

Доксициклин
Doxycyclinum monohydricum

Вводится впервые

##### Определение

(4S,4aR,5S,5aR,6R,12aS)-3,5,10,12,12a-Пентагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамид, моногидрат.

Полусинтетический продукт из продукта ферментации. Cодержит не менее 95,0 % и не более 102,0 % доксициклина C22H24N2O8 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Жёлтый кристаллический порошок.

Растворимость. Очень мало растворим в воде и спирте 96 %.

* Растворим в разбавленных растворах минеральных кислот и щелочей.

##### Идентификация

1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика доксициклина на хроматограмме раствора стандартного образца доксициклина хиклата (раздел «Количественное определение»).

2. Качественная реакция. К 2 мг субстанции прибавляют 5 мл серной кислоты концентрированной. Должно появиться жёлтое окрашивание.

##### Испытания

Удельное вращение. От –113 до –130 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (1 % раствор субстанции в смеси хлористоводородная кислота 25 %—метанол 0,5:99,5; ОФС «Оптическое вращение»). Раствор используют в течение 1 ч после приготовления.

Оптическая плотность. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в смеси хлористоводородной кислоты концентрированной—метанол 0,5:99,5 и доводят объём тем же растворителем до метки. Оптическая плотность полученного раствора, измеренная при длине волны 490 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать 0,07 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Раствор используют в течение 1 ч после приготовления.

pH. От 5,0 до 6,5 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы субстанции и стандартных образцов готовят непосредственно перед использованием.

Буферный раствор А. Растворяют 67,9 г тетрабутиламмония гидросульфата в 900 мл воды и доводят значение pH аммиака раствором концентрированным 25 % до 7,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Буферный раствор Б. Растворяют 111,6 г натрия эдетата в 900 мл воды и доводят значение pH аммиака раствором концентрированным 25 % до 7,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—вода—буферный раствор А—буферный раствор Б 130:170:350:350.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоте разведённой 0,11 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём хлористоводородной кислотой разведённой 0,11 % до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца доксициклина для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси A, B, C и F, растворяют в хлористоводородной кислоте разведённой 0,11 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь A (6-эпидоксициклин):
(4S,4aR,5S,5aR,6S,12aS)-3,5,10,12,12a-пентагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамид
[3219-99-6].

Примесь B (метациклин):
(4S,4aR,5S,5aR,12aS)- 4-(диметиламино)-3,5,10,12,12a-пентагидрокси-6-метилиден-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамид
[914-00-1].

Примесь C (4-эпидоксициклин):
(4R,4aR,5S,5aR,6R,12aS)-3,5,10,12,12a-пентагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамид
[6543-77-7].

Примесь F (2-ацетил-2-декарбамоилдоксициклин):
(4S,4aR,5S,5aR,6R,12aS)-2-ацетил-3,5,10,12,12a-пентагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-1,4a,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-1,11(4H,5H)-дион
[122861-53-4].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, кремнийорганический полимер, аморфный, октадецильный с полярными мостиками, эндкепированный, 5 мкм; |
Температура колонки | 35 °C; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика доксициклина. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Доксициклин – 1 (около 21 мин); примесь C – около 0,4; примесь A – около 0,7; примесь B – около 0,8; примесь F – около 1,3.

Идентификация пиков. Для идентификации пиков А, В, С и F используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примесей A и B должно быть не менее 2,0;

- разрешение (RS) между пиками примеси B и доксициклина должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна более чем в 4 раза превышать площади пика доксициклина на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0 %);

- площадь пика примеси F не должна более чем в 2,4 раза превышать площади пика доксициклина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,2 %);

- площадь пика примеси B не должна превышать площади пика доксициклина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси C не должна превышать 0,4 площади пика доксициклина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,2 площади пика доксициклина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 6 раз превышать площадь пика доксициклина на хроматограмме раствора сравнения (не более 3,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. От 3,6 до 4,6 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,4 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца доксициклина хиклата. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают около 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца доксициклина хиклата, растворяют в хлористоводородной кислоте разведённой 0,11 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца доксициклина хиклата фактор асимметрии пика (AS) доксициклина должен быть не более 1,5;

Содержание доксициклина C22H24N2O8 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика доксициклина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика доксициклина на хроматограмме раствора стандартного образца доксициклина хиклата;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца доксициклина хиклата, мг;
P – содержание доксициклина в фармакопейном стандартном образце доксициклина хиклата,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0417 Доксорубицина гидрохлорид

Доксорубицин
Doxorubicini hydrochloridum

Взамен ФС 42-3369-97

##### Определение

(8S,10S)-10-[(3-Амино-2,3,6-тридезокси-α-L-ликсо-гексопиранозил)окси]-6,8,11-тригидрокси-8-(гидроксиацетил)-1-метокси-7,8,9,10-тетрагидротетрацен-5,12-диона гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % доксорубицина гидрохлорида C27H29NO11·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. От красного до красно-оранжевого цвета кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Растворим или умеренно растворим в воде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения соответствует спектру фармакопейного стандартного образца доксорубицина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 20 мг субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

pH раствора. От 3,8 до 6,5 (0,5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие доксорубицина гидрохлорид и эпирубицина гидрохлорид используют свежеприготовленными.

Раствор натрия лаурилсульфата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,88 г натрия лаурилсульфата, растворяют в воде, прибавляют 1,34 мл фосфорной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—раствор натрия лаурилсульфата 500:500.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл, помещают 10,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца доксорубицина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца доксорубицина гидрохлорида, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца доксорубицина гидрохлорида и 10 мг фармакопейного стандартного образца эпирубицина гидрохлорида, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца доксорубицина гидрохлорида и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание.

Примесь А (даунорубицин):
(8S,10S)-10-[(3-амино-2,3,6-тридезокси-α-L-ликсо-гексопиранозил)окси]-8-ацетил-6,8,11-тригидрокси-1-метокси-7,8,9,10-тетрагидротетрацен-5,12-дион
[20830-81-3].

Примесь D:
(8S,10S)-6,8,10,11-тетрагидрокси-8-(гидроксиацетил)-1-метокси-7,8,9,10-тетрагидротетрацен-5,12-дион
[24385-10-2].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3,5-кратное от времени удерживания пика доксорубицина. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор А.

Относительное время удерживания соединений. Доксорубицин – 1 (около 8 мин); примесь D – около 0,5; эпирубицин – около 1,3; примесь А – около – 1,8.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика доксорубицина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками доксорубицина и эпирубицина должно быть не менее 2,0.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора А;
S0 - площадь пика каждой из примесей на хроматограмме раствора сравнения;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца доксорубицина гидрохлорида, мг;
P - содержание доксорубицина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце доксорубцина гидрохлорида,%.

Допустимое содержание примесей:

- каждая из примесей – не более 0,5 %;

- сумма примесей – не более 2,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 4,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 2) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 0,1 мг доксорубицина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь внутривенно. Срок наблюдения – 10 суток.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,6 ЕЭ на 1 мг доксорубицина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Испытание на депрессорные вещества. Субстанция не должна обладать депрессорным действием (ОФС «Испытание на депрессорные вещества»). Тест-доза – 1,5 мг субстанции в 0,2 мл натрия хлорида раствора 0,9 % на 1 кг массы животного.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца доксорубицина гидрохлорида и испытуемый раствор Б.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца доксорубцина гидрохлорида:

- фактор асимметрии пика (AS) доксорубцина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика доксорубцина должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание доксорубицина гидрохлорида C27H29NO11·HCl в субстанции в процентах (Х) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество рассчитывают по формуле:

где S1 - площадь пика доксорубицина на хроматограмме испытуемого раствора Б;
S0 - площадь пика доксорубицина на хроматограмме раствора стандартного образца доксорубицина гидрохлорида;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца доксорубицина гидрохлорида, мг;
P - содержание доксорубицина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце доксорубицина гидрохлорида,%.
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0666 Домперидон (Domperidonum)

Вводится впервые

##### Определение

1-{1-[3-(2-Оксо-2,3-дигидро-1H-бензимидазол-1-ил)пропил]пиперидин-4-ил}-5-хлор-1,3-дигидро-2Н-бензимидазол-2-он.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % домперидона C22H24ClN5O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Растворим в диметилформамиде, мало растворим в метаноле и спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца домперидона.

2. Качественная реакция._ Растворяют 5 мг субстанции в 3 мл метанола, прибавляют по 0,1 мл кобальта нитрата раствора 10 % и кальция хлорида раствора 10 %, перемешивают и прибавляют при встряхивании 0,1 мл натрия гидроксида раствор 2 М; должно появиться сине-фиолетовое окрашивание и образоваться осадок.

##### Испытания

Температура плавления. От 244 до 248 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 20 мл диметилформамида должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы готовят непосредственно перед использованием.

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 5 г аммония ацетата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в диметилформамиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора диметилформамидом до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора диметилформамидом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора диметилформамидом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца домперидона, содержащего примеси A и D, растворяют в 1,0 мл испытуемого раствора Б.

Примечание

Примесь А:
5-хлор-1-(пиперидин-4-ил)-1,3-дигидро-2Н-бензимидазол-2-он
[53786-28-0].

Примесь D:
5-хлор-3-[3-(2-оксо-2,3-дигидро-1Н-бензимидазол-1-ил)пропил]-1-{1-[3-(2-оксо-2,3-дигидро-1Н-бензимидазол-1-ил)пропил]пиперидин-4-ил}-1,3-дигидро-2Н-бензимидазол-2-он
[1614255-34-3].

Примесь Е:
1-{3-[4-(5-хлор-2-оксо-2,3-дигидро-1Н-бензимидазол-1-ил)пиперидин-1-ил]пропил}-3-[3-(2-оксо-2,3-дигидро-1Н-бензимидазол-1-ил)пропил]-1,3-дигидро-2Н-бензимидазол-2-он
[1346602-50-3].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 70 → 0 | 30 → 100
10–12 | 0 | 100

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор А.

Относительное время удерживания соединений. Домперидон – 1 (около 7 мин); примесь А – около 0,4; примесь D – около 1,2; примесь Е – около 1,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, D и Е используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу домперидона, содержащему примеси A и D.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками домперидона и примесью D должно быть не менее 5,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси А умножают на 1,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- сумма площадей пиков примесей D и Е не должна превышать 2,5 площади пика домперидона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,25 %);

- площадь пика примеси А не должна превышать двукратную площадь пика домперидона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика домперидона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика домперидона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади домперидона на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 7).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 50 мл смеси уксусная кислота безводная—метилэтилкетон 1:7 и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до перехода оранжево-жёлтой окраски в зелёную (индикатор – 0,2 мл нафтолбензеина раствора 0,2 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 42,59 мг домперидона C22H24ClN5O2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0667 Допамина гидрохлорид

Допамин
Dopamini hydrochloridum

Взамен ФС 42-1526-85

##### Определение

4-(2-Аминоэтил)бензол-1,2-диола гидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % допамина гидрохлорида C8H11NO2HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим или растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца допамина гидрохлорида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь максимум при 280 нм. Удельный показатель поглощения в максимуме должен быть от 136 до 150.

3. Качественная реакция. Растворяют 5 мг субстанции в 5 мл воды, прибавляют 20 мкл железа(III) хлорида раствора 3 %; должно появиться ярко-зелёное окрашивание, которое должно перейти в тёмно-красное от прибавления 50 мкл аммиака раствора.

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 245 до 250 °C (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,4 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора» должен выдерживать сравнение с эталоном B6 или Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. Растворяют 0,5 г субстанции в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до 10 мл. Прибавляют 0,1 мл метилового красного раствора 0,05 % и 0,75 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида; должно появиться жёлтое окрашивание, которое должно измениться на красное при прибавлении не более 1,5 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты.

рН раствора. От 3,0 до 5,5 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от действия света.

Буферный раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 21 г лимонной кислоты, растворяют в 200 мл 1 М раствора натрия гидроксида и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 600 мл полученного раствора и доводят объём раствора 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,08 г натрия октансульфоната, растворяют в 880 мл буферного раствора, прибавляют 50 мл метанола и 70 мл ацетонитрила.

Подвижная фаза Б (ПФБ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,08 г натрия октансульфоната, растворяют в 700 мл буферного раствора, прибавляют 100 мл метанола и 200 мл ацетонитрила.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг 3-О-метилдопамина гидрохлорида (примесь B) и 10 мг 4-О-метилдопамина гидрохлорида (примесь A), растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 6,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФА до метки.

Примечание

Примесь A: 5-(2-аминоэтил)-2-метоксифенол (4-О-метилдопамин) [3213-30-7].

Примесь В: 4-(2-аминоэтил)-2-метоксифенол (3-О-метилдопамин) [554-52-9].

Примесь С: 2-(3,4-диметоксифенил)этан-1-амин [120-20-7].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,9 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 4 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 90 | 10
5–20 | 90 → 40 | 10 → 60
20–25 | 40 | 60
25,1–35 | 90 | 10

Уравновешивают колонку ПФА и ПФБ 90:10 в течение не менее 10 мин.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения, испытуемый раствор, раствор для проверки чувствительности хроематографической системы.

Время удерживания допамина – около 5 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси B и примеси A должно быть не менее 5,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). В 10 мл воды растворяют 0,5 г субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 3,9 ЕЭ на 1 мг допамина гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Во избежание перегрева реакционную смесь тщательно перемешивают и немедленно прекращают титрование после достижения конечной точки титрования.

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 10 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 50 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 18,96 мг допамина гидрохлорида C8H11NO2HCl.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0418 Дорзоламида гидрохлорид

Дорзоламид
Dorzolamidi hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

(4S,6S)-6-Метил-7,7-диоксо-4-(этиламино)-5,6-дигидро-4H-7λ6-тиено[2,3-b]тиопиран-2-сульфонамида гидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % дорзоламида гидрохлорида C10H16N2O4S3·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Растворим в воде, мало растворим в метаноле, очень мало растворим или практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрофотометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дорзоламида гидрохлорида.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец дорзоламида гидрохлорида по отдельности растворяют в минимальных объемах метанола, выпаривают досуха и незамедлительно записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика дорзоламида на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы (раздел «Родственные примеси. Примесь А»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Растворяют 0,4 г субстанции в 20 мл воды. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном В8 (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

рН раствора. От 3,0 до 4,5 (2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

1. Примесь А. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Раствор аммиака. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,5 г аммиака раствора концентрированного 25 %, смешивают с 50 мл воды и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—ацетонитрил—гептан—трет-бутилметиловый эфир 2:20:350:630.

Растворитель. Ацетонитрил—уксусная кислота ледяная—трет-бутилметиловый эфир 3:10:87.

Испытуемый раствор. В центрифужную пробирку помещают 20 мг субстанции, растворяют в 4 мл раствора аммиака, прибавляют 4 мл этилацетата, перемешивают и переносят органический слой в другую центрифужную пробирку. Извлечение повторяют. Объединённые органические фракции выпаривают досуха на водяной бане при 50 °С в токе азота. Остаток растворяют в 3 мл ацетонитрила, прибавляют 60 мкл (S)-(–)-α-метилбензилизоцианата, нагревают на водяной бане при температуре 50 °С в течение 5 мин; выпаривают досуха на водяной бане при 50 °С в токе азота. Остаток растворяют в 10 мл растворителя.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В центрифужную пробирку помещают 18 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дорзоламида гидрохлорида и 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А дорзоламида гидрохлорида ((4R,6R)-6-Метил-7,7-диоксо-4-(этиламино)-5,6-дигидро-4H-7λ6-тиено[2,3-b]тиопиран-2-сульфонамид [120279-95-0]), растворяют в 4 мл раствора аммиака, прибавляют 4 мл этилацетата, перемешивают и переносят органический слой в другую центрифужную пробирку. Извлечение повторяют. Объединённые органические фракции выпаривают на водяной бане при 50 °С в токе азота. Остаток растворяют в 3 мл ацетонитрила прибавляют 60 мкл (S)-(–)-α-метилбензилизоцианата, нагревают на водяной бане при температуре 50 °С в течение 5 мин и выпаривают на водяной бане при 50 °С в токе азота. Остаток растворяют в 10 мл растворителя.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, растворитель и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дорзоламид – 1 (около 12 мин); примесь А – около 1,4.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками дорзоламида и примесью А должно быть не менее 4,0;

- фактор асимметрии пика (AS) дорзоламида и пика примеси А должен быть не более 2,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика дорзоламида и пика примеси А должно быть не более 2,0 % (6 введений);

Содержание примеси А в субстанции в процентах (Х) вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»).

Допустимое содержание примесей:

- примесь A – не более 0,5 % .

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор калия дигидрофосфата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 3,7 г калия дигидрофосфата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). В мерной колбе вместимостью 1000 мл смешивают 65 мл ацетонитрила и 935 мл раствора калия дигидрофосфата.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг субстанции, прибавляют 40 мл ПФА, обрабатывают ультразвуком до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 2 мг фармакопейного стандартного образца дорзоламида для проверки пригодности системы, содержит примесь С: 2-{[(4S,6S)-6-Метил-7,7-диоксо-2-сульфамоил-5,6-дигидро-4H-7λ6-тиено[2,3-b]тиопиран-2-сульфонамид-4-ил]амино}этанбороновая кислота) в 2,0 мл ПФА.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФА до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–15 | 100 | 0
15–30 | 100 → 50 | 0 → 50
30–37 | 50 → 100 | 50 → 0
37–45 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дорзоламид – 1 (около 12 мин); примесь С – около 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси С используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы, хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу дорзоламида для проверки пригодности системы.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика дорзоламида должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками дорзоламида и примесью С должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси С не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика дорзоламида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика дорзоламида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь пика дорзоламида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика дорзоламида на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М и 50 мл спирта 96 %, при необходимости обрабатывая ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида.

Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают расход титранта между первым и третьим перегибами на кривой титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 18,05 мг дорзоламида гидрохлорида C10H16N2O4S3·HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0419 Дорипенем моногидрат

Дорипенем
Doripenemum monohydricum

Вводится впервые

##### Определение

(4R,5S,6S)-6-[(1R)-1-Гидроксиэтил]-4-метил-7-оксо-3-(\{(3S,5S)-5-[(сульфамоиламино)метил]пирролидин-3-ил}сульфанил)-1-азабицикло[3.2.0]гепт-2-ен-2-карбоновая кислота моногидрат.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % дорипенема C15H24N4O6S2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым или коричневатым оттенком порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в воде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в этаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дорипенема моногидрата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика дорипенема на хроматограмме раствора стандартного образца дорипенема (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +30,0 до +40,0 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y4 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 4,5 до 6,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС«Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор калия дигидрофосфата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,04 г калия дигидрофосфата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор дикалия гидрофосфата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,61 г дикалия гидрофосфата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Буферный раствор. Доводят значение pH калия дигидрофосфата раствором дикалия гидрофосфатом до 5,65.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 30:970.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—буферный раствор 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца дорипенема моногидрата А. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают около 25 мг фармакопейного стандартного образца дорипенема моногидрата и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца дорипенема моногидрата Б. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 4 мл раствора стандартного образца дорипенема моногидрата (А) и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 4 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл раствора стандартного образца дорипинема моногидрата Б и доводят объём водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–15 | 100 | 0
15–45 | 100 → 50 | 0 → 50
45–50 | 50 → 0 | 50 → 100
50–55 | 0 | 100
55–60 | 0 → 100 | 100 → 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца дорипенема моногидрата Б и испытуемый раствор.

* Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) дорипенема должен быть не более 1,3;

- относительное стандартное отклонение площади пика дорипенема должно быть не более 5,0 % (6 введений);

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика дорипенема на хроматограмме раствора стандартного образца дорипенема моногидрата (Б);
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца дорипенема моногидрата, мг;
P – содержание дорипенема в фармакопейном стандартном образце дорипенема моногидрата,%.

Допустимое содержание примесей:

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,02 %).

Вода. От 3,9 % до 5,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза –6,0 мг дорипенема в 0,5 мл натрия хлорида раствора 0,9 % на мышь, внутривенно. Срок наблюдения –48 ч.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,35 ЕЭ на 1 мг дорипенема (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 90 мл калия дигидрофосфата раствора 0,02 М и доводят значение pH дикалия гидрофосфата раствором 0,02 М до 5,65, переносят 100 мл полученного раствора в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза. Ацетонитрил—буферный раствор 30:970.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | подбирают таким образом, чтобы время удерживания дорипенема составляло около 15 мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 300 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Хроматографируют раствор стандартного образца дорипенема моногидрата А (раздел «Родственные примеси») и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца дорипенема моногидрата А:

- фактор асимметрии пика (AS) дорипенема должен быть не более 1,3;

- относительное стандартное отклонение площади пика дорипенема должно быть не более 1,0 % (6 введений);

Содержание дорипенема C15H24N4O6S2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика дорипенема на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика дорипенема на хроматограмме раствора стандартного образца дорипенема моногидрата (А);
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца дорипенема моногидрата, мг;
P – содержание дорипенема в фармакопейном стандартном образце дорипенема моногидрата,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
420,5 – молекулярная масса дорипенема;
438,5 – молекулярная масса дорипенема моногидрата.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте, при температуре от 2 до 8 °С.

* Проверка разделительной способности должна быть приведена в нормативной документации производителя.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0668 Доцетаксел тригидрат

Доцетаксел
Docetaxelum trihydricum

Вводится впервые

##### Определение

[4-(Ацетилокси)-13α-{[(2R,3S)-3-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β,10β-тригидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат тригидрат.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % доцетаксела C43H53NO14 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в этаноле, растворим в метиленхлориде, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца доцетаксела тригидрата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика доцетаксела на хроматограмме раствора стандартного образца доцетаксела тригидрата (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –38,5 до –41,5 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Опалесценция 5 % раствора субстанции в этаноле не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном В5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаз А (ПФА). Вода.

Подвижная фаз Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Уксусная кислота ледяная—ацетонитрил—вода 0,1:100:100.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 2,5 мл этанола и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца доцетаксела тригидрата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца доцетаксела тригидрата, прибавляют 2,5 мл этанола и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца доцетаксела для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси А, В и С, растворяют в 0,25 мл этанола и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца доцетаксела тригидрата и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А:
[4-(ацетилокси)-13α-{[(2R,3S)-3-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β,10β-тригидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил][(2E)-2-метилбут-2-еноат].

Примесь В:
[4-(ацетилокси)-13α-{[(2R,3S)-3-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β-дигидрокси-9,10-диоксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат
[167074-97-7].

Примесь С:
[4-(ацетилокси)-13α-{[(2R,3S)-3-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7α,10β-тригидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат
[153381-68-1].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 232 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–9 | 72 | 28
9–39 | 72 → 28 | 28 → 72

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца доцетаксела тригидрата и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Доцетаксела – 1 (около 27 мин); примесь А – около 0,97; примесь В – около 1,08; примесь С – около 1,13.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B и C используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу доцетаксела для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси А, В и С.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси А и доцетаксела должно быть не менее 3,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца доцетаксела тригидрата:

˗ фактор асимметрии пика (AS) доцетаксела должен быть не более 2,0;

˗ относительное стандартное отклонение площади пика доцетаксела должно быть не более 5,0 % (5 введений);

˗ эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику доцетаксела, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси А умножают на 1,6.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика доцетаксела на хроматограмме раствора стандартного образца доцетаксела тригидрата;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца доцетаксела тригидрата, мг;
P – содержание доцетаксела тригидрата в фармакопейном стандартном доцетаксела тригидрата,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь А – не более 0,5 %;

- примесь В – не более 0,3 %;

- примесь С – не более 0,3 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. От 5,0 % до 7,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 60 мг (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 1 ЕЭ на 1 мг доцетаксела безводного (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 10 мг доцетаксела безводного в 1 мл спирта 96 %. Коррекцию рН исходного раствора субстанции осуществляют с помощью буферных растворов.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями:

Раствор стандартного образца доцетаксела тригидрата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца доцетаксела тригидрата, прибавляют 2,5 мл этанола и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Содержание доцетаксела C43H53NO14 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика доцетаксела на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика доцетаксела на хроматограмме раствора стандартного образца доцетаксела тригидрата;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца доцетаксела тригидрата, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание доцетаксела тригидрата в фармакопейном стандартном образце доцетаксела тригидрата,%.

##### Хранение

В хорошо укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0016 Дроперидол (Droperidolum)

Взамен ФС.2.1.0016.15

##### Определение

1-{1-[4-Оксо-4-(4-фторфенил)бутил]-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил}-1,3-дигидро-2H-бензимидазол-2-он.

Cодержит не менее 99,0 % и не более дроперидола 101,0 % С22Н22FN3O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. От белого до желтовато-коричневого цвета аморфный или микрокристаллический порошок. На воздухе и на свету темнеет.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Растворим в хлороформе, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дроперидола.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах ацетона, выпаривают досуха на водяной бане и записывают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 15 мг винной кислоты, растворяют в 20 мл воды и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор сравнения. Винной кислоты раствор 0,0015 % в воде.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 300 нм должен иметь максимумы при 247 нм и 276 нм.

3. Качественная реакция. Нагревают 0,5 мл калия хромата раствора 1 % в серной кислоте концентрированной в пробирке на водяной бане в течение 5 мин. Раствор легко смачивает стенки пробирки, не оставляя масляных капель. Прибавляют 10 мг субстанции и снова нагревают в течение 5 мин; раствор не должен смачивать стенки пробирки, оставаясь в виде масляных капель.

##### Испытания

Температура плавления. От 144 до 148 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1). Субстанцию предварительно сушат в течение 4 ч при температуре 70 °С и остаточном давлении 20 мм рт. ст.

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 20 мл метиленхлорида должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном ВY5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы готовят непосредственно перед использованием.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Тетрабутиламмония гидросульфата раствор 1 %.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в диметилформамиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора диметилформамидом до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца дроперидола и 2,5 мг фармакопейного стандартного образца бенперидола (1-[1-[4-оксо-4-(4-фторфенил)бутил]пиперидин-4-ил]-1,3-дигидро-2H-бензимидазол-2-он [2062-84-2]), растворяют в 50 мл диметилформамида и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 275 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–15 | 0 → 40 | 100 → 60
15–20 | 40 | 60
20–25 | 40 → 0 | 60 → 100
25–30 | 0 | 100

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дроперидол − 1 (около 7 мин); примесь А − около 0,2; примесь B− около 0,85; бенперидол − около 0,9; примесь С − около 0,95; примесь D− около 1,2; примесь Е − около 1,5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками бенперидола и дроперидола должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A, B, С, D, E не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,25 %);

- площадь пика любой неидентифицированной примеси должна быть не более 0,4 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 2 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,2 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). 1 г субстанции встряхивают в течение 5 мин с 19 мл воды и 1 мл азотной кислоты разведённой 16 % и фильтруют. Для определения 2 мл фильтрата доводят водой до 10 мл.

Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты»). Для определения используют 10 мл фильтрата, полученного в испытании на «Хлориды».

Примечание – Разделы «Хлориды» и «Сульфаты» вводят при необходимости в зависимости от способа получения.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы», в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 8,3 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 2,5 мг/мл: к 10 мг субстанции прибавляют 4 мл винной кислоты раствора 0,15 %.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,24 г (точная навеска) субстанции в 50 мл смеси уксусной кислоты ледяной и метилэтилкетона 1:7 и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до перехода окраски в зелёную (индикатор − 0,2 мл нафтолбензеина раствора 0,2 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 37,94 мг дроперидола С22Н22FN3O2.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0420 Дроспиренон (Drospirenonum)

Вводится впервые

##### Определение

3-Оксо-6α,7α,15α,16α-тетрагидро-3′H,3′′H-дициклопропа-[6,7:15,16]-17α-прегн-4-ен-21,17-карболактон.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % дроспиренона C24H30O3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде, растворим в метаноле, умеренно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дроспиренона.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика дроспиренона на хроматограмме раствора стандартного образца дроспиренона (раздел «Количественное определение»).

Удельное вращение. От –187 до –193 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в метаноле; ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Вода.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Вода—ацетонитрил 50:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для идентификации примеси А. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 3 мг фармакопейного стандартного образца дроспиренона для идентификации пиков, содержащий примесь А, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца примеси Е в 1,0 мл полученного раствора.

Примечание

Примесь А:
3-оксо-15α,16α-дигидро-3′H-циклопропа[15,16]-17α-прегн-4-ен-21,17-карболактон
[67372-68-3].

Примесь Е:
3-оксо-6α,7α,15α,16α-тетрагидро-3′H,3′′H-дициклопропа-[6,7:15,16]прегн-4-ен-21,17-карболактон
[90457-65-1].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, cиликагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 245; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2 | 63 | 37
2–16 | 63 → 52 | 37 → 48
16–23 | 52 | 48
23–31 | 52 → 20 | 48 → 80
31–39 | 20 | 80
39–45 | 20 → 63 | 80 → 37

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для идентификации примеси А, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дроспиренон – 1 (около 22 мин); примесь Е – около 1,1; примесь А – около 1,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси Е используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу примеси Е. Для идентификации примеси А используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для идентификации примеси А и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу дроспиренона для идентификации пиков.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками между пиками дроспиренона и примеси Е должно быть не менее 5,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси А умножают на 0,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика дроспиренона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика дроспиренона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь пика дроспиренона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают до постоянной массы 1 г (точная навеска) субстанции в течение 3 ч.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца дроспиренона. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дроспиренона, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют испытуемый раствор и раствор стандартного образца дроспиренона.

Содержание дроспиренона C24H30O3 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика дроспиренона на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика дроспиренона на хроматограмме раствора стандартного образца дроспиренона;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца дроспиренона, мг;
P – содержание дроспиренона в фармакопейном стандартном образце дроспиренона,%;
W – потеря в массе при высушивании субстанции,%.

##### Хранение

Не требует особых условий.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0098 Дротаверина гидрохлорид

Дротаверин
Drotaverini hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0098.18

##### Определение

1-[(3,4-Диэтоксифенил)метил]-6,7-диэтокси-3,4-дигидроизохинолина гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % дротаверина гидрохлорида C24H31NO4·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. От светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в хлороформе, растворим в спирте 96 %, умеренно растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дротаверина гидрохлорида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,15 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 70 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 210 до 440 нм должен иметь максимумы при 241 нм, 302 нм, 353 нм и минимумы при 223 нм, 262 нм, 322 нм.

3. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 5 мл серной кислоты концентрированной, прибавляют 0,03 мл железа(III) хлорида раствора 0,1 М; при нагревании смеси должно появиться зелёное окрашивание. После охлаждения прибавляют 0,03 мл азотной кислоты разведённой 16 %; должно появиться коричнево-красное окрашивание.

4. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 2 мл спирта 96 %; полученный раствор должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 208 до 212 °С (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», должна по своей интенсивности находиться между эталонами GY3 и GY4 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 3,5 до 5,5 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Ацетатный буферный раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 10,88 г натрия ацетата, растворяют в 500 мл воды, прибавляют 30 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—ацетатный буферный раствор—ацетонитрил 80:440:480.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют 20 мг субстанции в 19 мл воды при нагревании до 40–50 ºС, прибавляют 5 мг растёртого калия перманганата, перемешивают в течение 2 мин, прибавляют 1 мл фосфорной кислоты концентрированной и вновь перемешивают до получения прозрачного раствора.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания основного пика. |  |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения, испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между соседними пиками должно быть не менее 3,0;

- фактор ассиметрии пика (AS) дротаверина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика дротаверина должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика дротаверина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика дротаверина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 от площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 3,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения 0,5 г (точная навеска) субстанции растворяют в 10 мл смеси хлороформ—метанол 9:1.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции (ОФС «Сульфатная зола»), с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 4,3 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 10 мг в 1 мл воды для БЭТ.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 20 мл уксусной кислоты ледяной, прибавляют 3 мл ртути(II) ацетата раствора 5 % и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до перехода окраски в зелёную (индикатор – кристаллического фиолетового раствор 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 43,40 мг дротаверина гидрохлорида C24H31NO4·HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0421 Дутастерид (Dutasteridum)

Вводится впервые

##### Определение

N-[2,5-Бис(трифторметил)фенил]-3-оксо-4-аза-5α-андрост-1-ен-17ß-карбоксамид.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % дутастерида C27H30F6N2O2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или светло-жёлтый порошок.

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде, растворим или умеренно растворим в этаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом в области от 4000 до 400 см−1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца дутастерида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика дутастерида на хроматограмме раствора стандартного образца дутастерида (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +33,0 до +39,0 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (0,5 % раствор субстанции в этаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Метод 1

Подвижная фаза (ПФ). Трифторуксусная кислота—вода—ацетонитрил 0,25:480:520.

Растворитель. Вода—ацетонитрил 400:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца дутастерида для пригодности хроматографической системы (содержит примеси А, В, С, Е, F, G, H и I) растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A:
3-оксо-4-аза-5α-андрост-1-ен-17β-карбоновая кислота
[104239-97-6].

Примесь B:
N,N-диметил-3-оксо-4-аза-5α-андрост-1-ен-17β-карбоксамид.

Примесь C:
этил(3-оксо-4-аза-5α-андрост-1-ен-17β-карбоксилат)
[157307-36-3].

Примесь E:
N-[2,5-бис(трифторметил)фенил]-3-оксо-4-аза-5α-андрост-1-ен-17α-карбоксамид
[1796930-46-5].

Примесь F:
N-[2,5-бис(трифторметил)фенил]-1α-хлор-3-оксо-4-аза-5α-андростан-17β-карбоксамид
[1365545-42-1].

Примесь G:
N-[2,5-бис(трифторметил)фенил]-3-оксо-4-азаандрост-1,5-диен-17β-карбоксамид
[1430804-85-5].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, cиликагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,6-кратное от времени удерживания пика дутастерида. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дутастерид – 1 (около 36 мин); примесь А – около 0,1; примесь В – около 0,11; примесь С – около 0,4; примесь E – около 0,9; примесь F – около 1,1; примесь G – около 1,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В, С, Е, F, G и H используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу дутастерида для пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси Е и дутастерида должно быть не менее 1,5;

- разрешение (RS) между пиками примеси А и примеси В должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора сравнения отношение сигнал/шум (S/N) для пика дутастерида должно быть не менее 30.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь B – 0,7; примесь F – 3,0.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика дутастерида на хроматограмме раствора сравнения.

Допустимое содержание примесей:

- примесь F – не более 0,4 %;

- примеси Е и G – не более 0,3 % для каждой примеси;

- примеси A и C – не более 0,2 % для каждой примеси;

- примесь В – не более 0,15 %;

- любая другая примесь – не более 0,10 %.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

Метод 2. Определение проводят в условиях испытания «Родственные примеси. Метод 1» со следующими изменениями.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—ацетонитрил 200:800.

Примечание

Примесь H (дутастерид-α-димер):
N-[2,5-Бис(трифторметил)фенил]-3-оксо-4-[3-оксо-4-аза-5α-андрост-1-ен-17α-карбонил]-4-аза-5α-андрост-1-ен-17β-карбоксамид
[1648593-70-7].

Примесь I (дутастерид-β-димер):
N-[2,5-Бис(трифторметил)фенил]-3-оксо-4-[3-оксо-4-аза-5α-андрост-1-ен-17β-карбонил]-4-аза-5α-андрост-1-ен-17β-карбоксамид
[1648593-70-7].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм силикагель фенилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 5-кратное от времени удерживания пика дутастерида. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дутастерид – 1 (около 4 мин); примесь H – около 3,4; примесь I – около 3,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей H и I используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу дутастерида для пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси Н и примеси I должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей:

- примесь I – не более 0,5 %;

- примесь H – не более 0,3 %;

- любая другая примесь, элюирующаяся после дутастерида – не более 0,10 % для каждой примеси.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

Сумма примесей, определяемых методом 1 и методом 2, – не более 1,5 %.

Вода. Не более 0,2 % (ОФС «Определение воды», метод 2, с использованием испарителя). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции, температуру 180 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции и платиновый тигель.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Метод 1» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца дутастерида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца дутастерида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

- Объём пробы: 10 мкл.

Хроматографируют раствор стандартного образца дутастерида и испытуемый раствор.

Содержание дутастерида C27H30F6N2O2 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика дутастерида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика дутастерида на хроматограмме раствора стандартного образца дутастерида;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца дутастерида, мг;
P – содержание дутастерида в фармакопейном стандартном образце дутастерида,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0625 Железа полиакрилат (Ferri polyacrylas)

Взамен ФС 42-2742-99

[(C3H4O2)m·C6H6FeO4]n [(C3H4O2)m·C9H9FeO6]n m ≥ 150; n = 50–100 [55492-43-8] | М.м. 500000–800000 |  |

##### Определение

Смесь полиакрилатов железа (II,III).

Содержит не менее 0,10% и не более 0,40% железа в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. От жёлтого до красно-коричневого цвета хрупкие стеклообразные пластинки.

Растворимость. Умеренно и медленно растворим в воде после набухания в течение 24 ч, практически нерастворим в спирте 96%.

##### Идентификация

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 80 мл воды, прибавляют 1,0 г (точная навеска) субстанции, закрывают притёртой пробкой и оставляют на 24 ч. По истечении указанного времени содержимое колбы доводят водой до метки.

Раствор альбумина. В 100 мл воды растворяют 0,5 г альбумина бычьего или альбумина яичного. Раствор используют свежеприготовленным.

1. Качественная реакция. К 2 мл испытуемого раствора прибавляют 1 мл калия йодида раствора 10%, 1 мл калия йодата раствора 1% и 1 мл крахмала раствора 1%; должно наблюдаться синее окрашивание.

2. Качественная реакция. К 1 мл испытуемого раствора прибавляют 2 мл сульфосалициловой кислоты раствора 10% и 0,5 мл аммиака раствора 10%; должно наблюдаться ярко-жёлтое окрашивание.

3. Качественная реакция. К 1 мл испытуемого раствора прибавляют 0,5 мл раствора альбумина; должно образоваться каучукоподобное вещество, нерастворимое в воде.

##### Испытания

Относительная вязкость. От 2,0 до 5,0 (испытуемый раствор, полученный в разделе «Идентификация», ОФС «Вязкость»).

pH раствора. От 2,9 до 4,0 (1% раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Потеря в массе при высушивании. Не более 5,0% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 0,5 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы при температуре 100–105 °С.

Сульфаты. Не более 0,5% (ОФС «Сульфаты», метод 1). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора, полученного в разделе «Идентификация», и доводят объём раствора водой до метки.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 2) в зольном остатке, полученном после сжигания 0,5 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора, полученного в разделе «Идентификация», прибавляют 10 мл сульфосалициловой кислоты раствора 10%, 2,5 мл аммиака раствора 10% и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор. Навеску железа(III) аммония сульфата, эквивалентную 0,1 г железа, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, прибавляют 10 мл сульфосалициловой кислоты раствора 10%, 10 мл аммиака раствора 10% и доводят объём раствора водой до метки. Срок годности раствора – 1 сут.

Через 10 мин после приготовления измеряют оптическую плотность испытуемого и стандартного растворов на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 425 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя воду в качестве раствора сравнения.

Содержание железа в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A1 - оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 - оптическая плотность стандартного раствора;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска железа(III) аммония сульфата, мг;
W - потеря в массе при высушивании субстанции,%;
0,1158 - поправочный коэффициент.

##### Хранение

В сухом, защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0596 Зидовудин (Zidovudinum)

Взамен ФС 42-3412-97

##### Определение

1-(3-Азидо-2,3-дидезокси-β-D-эритро-пентофуранозил)-5-метилпиримидин-2,4(1H,3H)-дион.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % зидовудина C10H13N5O4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый с коричневатым оттенком кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в метаноле, растворим в спирте 96 %, умеренно растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца зидовудина.

- Если спектры различаются, субстанцию и фармакопейный стандартный образец зидовудина по отдельности растворяют в минимальном количестве воды, упаривают в вакууме, высушивают в вакуумном эксикаторе над фосфора(V) оксидом и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика зидовудина на хроматограмме стандартного раствора (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +60,5 до +63,0 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (1 % раствор субстанции в спирте 96 %, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,25 г субстанции в 25 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»). При необходимости раствор подогревают.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 5,0 до 7,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Сумма примесей, определённая методами 1 и 2, – не более 1,0%.

1. Примеси A, B, C, E, F, G

Буферный раствор. Растворяют 2,0 г ацетата аммония в 850 мл воды, доводят pH до 6,80 уксусной кислотой разведённой 12 %. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Ацетонитрил—метанол—буферный раствор 4:20:76.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси B. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси B, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца зидовудина для проверки пригодности системы, содержащего примесь G, растворяют в растворе стандартного образца примеси B и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси D. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1 мг фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в смеси растворителей (ацетонитрил—метанол—буферный раствор 4:40:56) и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора той же смесью растворителей до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A:
1-(2,3-дидезокси-β-D-глицеро-пент-2-ен-фуранозил)-5-метилпиримидин-2,4(1H,3H)-дион
[3056-17-5].

Примесь B: З'-хлор-3'-дезокситимидин [25526-94-7].

Примесь C: 5-метилпиримидин-2,4(1H,3H)-дион [65-71-4].

Примесь D: трифенилметанол [76-84-6].

Примесь E:
1-(2-дезокси-β-D-эритро-пентофуранозил)-5-метилпиримидин-2,4(1H,3H)-дион
[50-89-5].

Примесь F:
1-(2-Дезокси-β-D-трео-пентофуранозил)-5-метилпиримидин-2,4(1H,3H)-дион
[16053-52-4].

Примесь G: З'-(З'-азидо-З'-дезокситимидин-3-ил)-З'-дезокситимидин [148665-49-0].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 265 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА, % | ПФБ, %
--- | --- | ---
0–3 | 95 | 5
3–18 | 95 → 85 | 5 → 15
18–28 | 85 → 30 | 15 → 70
28–43 | 30 | 70

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси D, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Зидовудин − 1 (около 16 мин); примесь B − около 1,05; примесь G − около 1,5; примесь D − около 2,0.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей B и G используют хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу зидовудина для пригодности системы. Для идентификации пика примеси D используют хроматограмму раствора стандартного образца примеси трифенилметанола.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками зидовудина и примеси B должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси G не должна превышать двукратную площадь пика зидовудина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика зидовудина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %).

Не учитывают пики, обусловленные примесью D, пики, элюирующиеся после пика примеси D, и пики, площадь которых менее 0,5 площади пика зидовудина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

2. Примеси D, J, K

Подвижная фаза (ПФ). Вода—ацетонитрил 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 10 мл ацетонитрила и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси D. В мерную колбу вместимостью 10 мл добавляют 5,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси D и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл добавляют 1,0 мл раствора стандартного образца примеси D и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл добавляют 1,0 мл раствора стандартного образца примеси D и доводят объём раствора испытуемым раствором до метки.

Примечание

Примесь D: трифенилметанол [76-84-6].

Примесь J:
1-[3-азидо-5-O-(трифенилметил)-2,3-дидезокси-β-D-эритро-пентофуранозил]-5-метилпиримидин-2,4(1H,3H)-дион
[29706-84-1].

Примесь K: 1,1',1"-(метоксиметантриил)трибензол [596-31-6].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 10-кратное от времени удерживания пика зидовудина. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Зидовудин – 1 (около 1,5 мин); примесь D – около 2,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси D используют хроматограмму раствора сравнения.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками зидовудина и примеси D должно быть не менее 5,0.

Содержание примеси D в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика примеси D на хроматограмме раствора стандартного образца примеси D;
a1 – навеска субстанции, мг.

Допустимое содержание примесей:

- любая примесь – не более 0,10 %.

Не учитывают пики, элюирующиеся до пика примеси D, и пики, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,25 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 1 мг зидовудина в 1 мл воды для БЭТ.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Примеси A, B, C, E, F, G» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл добавляют 10,0 мл испытуемого раствора из раздела «Родственные примеси» и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца зидовудина. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца зидовудина, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца зидовудина и испытуемый раствор.

Содержание зидовудина C10H13N5O4 в субстанции в процентах в пересчёте на безводное и свободное от остаточных растворителей вещество (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика зидовудина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика зидовудина на хроматограмме стандартного раствора;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца зидовудина, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание зидовудина в фармакопейном стандартном образце зидовудина,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0601 Золедроновая кислота моногидрат

Золедроновая кислота
Acidum zoledronicum monohydricum

Вводится впервые

##### Определение

[1-Гидрокси-2-(1H-имидазол-1-ил)этан-1,1-диил]бис(фосфоновая кислота) моногидрат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % золедроновой кислоты C5H10N2O7P2 в пересчёте на безводное вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 % и диметилсульфоксиде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца золедроновой кислоты моногидрата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика золедроновой кислоты на хроматограмме стандартного раствора Б (раздел «Родственные примеси»).

3. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл, помещают 0,01 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 190 до 250 нм должен иметь максимумы при 210 нм и минимумы при 200 нм.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном В9 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Светопоглощающие примеси. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. Помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 70 мл воды при нагревании на водяной бане при 40 °С, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. Вода.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 420 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.

Оптическая плотность испытуемого раствора не должна превышать 0,05.

рН раствора. От 2,0 до 3,5 (0,2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Во избежание сорбции золедроновой кислоты на стекле, для приготовления, хранения и ввода в инжектор растворов, содержащих золедроновую кислоту, используют полимерные флаконы. Использование стеклянных мерных колб допустимо при условии того, что полученные растворы переносят в полимерные ёмкости сразу после приготовления.

Раствор натрия эдетата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,372 г натрия эдетата дигидрата, растворяют в 5 мл натрия гидроксида раствора 2 М и доводят объём раствора водой до метки.

Буферный раствор. Растворяют 1 г тетрабутиламмония гидросульфата в 800 мл воды, прибавляют 4 мл раствора натрия эдетата, 5 мл триэтиламина и доводят рН раствора фосфорной кислотой разведённой 10 % до 7,2. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 50:950.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 18,7 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 15 мл ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца золедроновой кислоты моногидрата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца золедроновой кислоты моногидрата, растворяют в 80 мл ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси A и 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в 80 мл ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,75 мл раствора стандартного образца золедроновой кислоты, 1,05 мл стандартного раствора А и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 105 мкл стандартного раствора А и доводят объём раствора испытуемым раствором до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора Б и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А: 1H-имидазол [288-32-4].

Примесь D: (1H-имидазол-1-ил)уксусная кислота [22884-10-2].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,75 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 215 нм; |  |
Объём пробы | 30 мкл; |  |
Время хроматографирования | 50 мин. |  |

Уравновешивают хроматографическую колонку ПФ до достижения стабильной базовой линии в течение не менее 60 мин.

Последовательно хроматографируют 100 мкл ПФ, 30 мкл ПФ, после чего по 30 мкл раствора для проверки чувствительности хроматографической системы, раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы, стандартного раствора Б и испытуемого раствора.

Относительное время удерживания соединений. Золедроновая кислота – 1 (около 21 мин); примесь А – около 0,3; примесь D – около 0,4.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму стандартного раствора Б и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Для идентификации пика примеси D и пика имидазола используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму стандартного раствора Б и хроматограмму испытуемого раствора.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси А и примеси D должно быть не менее 5,0;

- разрешение (RS) между пиками примеси D и золедроновой кислоты должно быть не менее 5,0.

На хроматограмме стандартного раствора Б:

- фактор ассиметрии пика (AS) золедроновой кислоты должен быть не более 1,5;

- фактор ассиметрии пика (AS) примеси А должен быть не более 2,0;

- фактор ассиметрии пика (AS) примеси D должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика золедроновой кислоты, примеси А, примеси D должно быть не более 5,0 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение площади пика золедроновой кислоты должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику золедроновой кислоты, должна составлять не менее 5000 теоретических тарелок.

Содержание примесей А и D в субстанции в процентах (Х) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика примеси А или D на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика каждой соответствующей примеси на хроматограмме стандартного раствора Б;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца соответствующей примеси, мг;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание примеси А или D в соответствующем стандартном образце,%.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (Х) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика золедроновой кислоты на хроматограмме стандартного раствора Б;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца золедроновой кислоты моногидрата, мг;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание золедроновой кислоты в фармакопейном стандартном образце золедроновой кислоты моногидрата,%.

Допустимое содержание примесей:

- примеси А и D – не более 0,15 % каждая;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики менее 0,05 %.

Вода. От 5,0 % до 8,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1).

Фосфат-ион, фосфит-ион и хлорид-ион. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Азотной кислоты раствор 1 % в метаноле. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 15 мл азотной кислоты концентрированной, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки.

Растворитель. Ацетонитрил—метанол 15:85.

Азотной кислоты раствор 0,016 М. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 10 мл азотной кислоты раствора 70 %, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 100 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Растворитель—азотной кислоты раствор 0,016 М 400:600.

Раствор натрия гидроксида 0,15 М. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 150 мл натрия гидроксида раствора 1 М и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,3 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворе натрия гидроксида 0,15 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 135 мг (точная навеска) калия дигидрофосфата, 100 мг (точная навеска) фосфористой кислоты и 155 мг (точная навеска) натрия хлорида, растворяют в растворе натрия гидроксида 0,15 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора раствором натрия гидроксида 0,15 М до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют 30 мг стандартного образца золедроновой кислоты моногидрата в 1,0 мл стандартного раствора.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора раствором натрия гидроксида 0,15 М до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,1 мм, анионообменная смола на основе полистирол-дивинилбензола, 10 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,4 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 240 нм, косвенное детектирование; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,2-кратное от времени удерживания хлорид-иона (около 20 мин). |  |

Перед проведением испытания хроматограф и колонку в течение 1 ч промывают азотной кислоты раствором 1 % в метаноле со скоростью 1 мл/мин, затем в течение 1 ч водой, после чего уравновешивают в течение 30 мин ПФ.

Хроматографируют раствор натрия гидроксида 0,15 М, раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Порядок пиков на хроматограмме: фосфат-ион, золедронат-ион, фосфит-ион, хлорид-ион.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками золедронат-иона и фосфат-иона должно быть не менее 2,5;

- разрешение (RS) между пиками золедронат-иона и фосфит-иона должно быть не менее 3,0;

- отношение высоты пика фосфат-иона и высоты долины, отделяющей пик фосфат-иона от пика золедронат-иона, (отношение p/v) должно быть не менее 10;

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками фосфит-иона и золедронат-иона должно быть не менее 10.

На хроматограмме стандартного раствора:

- относительное стандартное отклонение (RSD) площади пиков фосфат-иона, фосфит-иона и хлорид-иона должно быть не более 10 % (6 введений).

Расчёт содержания фосфат-иона, фосфит-иона и хлорид-иона.

Содержание каждого из трёх ионов в процентах (X) рассчитывают по формуле:

где S1 - площадь пика фосфат-иона, фосфит-иона или хлорид-иона на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика каждой соответствующей примеси на хроматограмме стандартного раствора;
a0 - навеска калия дигидрофосфата, фосфористой кислоты или натрия хлорида, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание калия дигидрофосфата, фосфористой кислоты или натрия хлорида в соответствующем реактиве,%;
К - коэффициент пересчёта; K = 0,698 для пересчёта калия дигидрофосфата в фосфат-ион (PO43–), K = 0,963 для пересчёта фосфористой кислоты на условную частицу PO3, K = 0,607 для пересчёта натрия хлорида в хлорид-ион (Cl–).

При содержании иона менее 0,25 % результат записывают как «менее 0,25 %».

Допустимое содержание примесей:

- фосфат-ион – не более 0,5 %;

- фосфит-ион – не более 0,5 %;

- хлорид-ион – не более 0,5 %.

Сульфатная зола. Не более 5,0 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 43,7 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 1 мг в 1 мл воды для БЭТ.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 80 мг (точная навеска) субстанции в 50 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») по третьему перегибу на кривой титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 9,07 мг золедроновой кислоты C5H10N2O7P2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0675 Зопиклон

Зопиклон
Zopiclonum

Вводится впервые

C17H17ClN6O3 [43200-80-2] | М.м. 388,81

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

[(5RS)-7-Оксо-6-(5-хлорпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5H-пирроло[3,4-b]пиразин-5-ил](4-метилпиперазин-1-карбоксилат).

Cодержит не менее 98,5 % и не более 100,5 % зопиклона C17H17ClN6O3.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком порошок.

* Проявляет полиморфизм

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде, практически нерастворим в воде и спирте 96 %.

* Растворяется в разбавленных растворах минеральных кислот.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца зопиклона.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения 0,001 % раствора субстанции в растворе хлористоводородной кислоты в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимум при 303 нм с удельным показателем поглощения от 340 до 380.

- Раствор хлористоводородной кислоты. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 900 мл воды, прибавляют 3,0 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

##### ИСПЫТАНИЯ

Угол вращения. От −0,05° до +0,05° (1 % раствор субстанции в диметилформамиде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 20 мл диметилформамида не должен превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y5 или BY5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 8,1 г натрия лаурилсульфата и 1,6 г натрия дигидрофосфата дигидрата в 900 мл воды и доводят значение рН фосфорной кислотой разведённой 10 % до 3,5, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 38:62.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 40 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси B. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси B, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, прибавляют 0,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь A:
[(5RS)-7-оксо-6-(5-хлорпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5H-пирроло[3,4-b]пиразин-5-ил](4-метилпиперазин-1-карбоксилат 4-оксид), [43200-96-0].

Примесь B:
(7RS)-7-гидрокси-6-(5-хлорпиридин-2-ил)-6,7-дигидро-5H-пирроло[3,4-b]пиразин-5-он, [43200-81-3].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки | 30 °С;
Скорость потока | 1,5 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 303 нм;
Объём пробы | 20 мкл;
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика зопиклона.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси B, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Зопиклон – 1
(27–31 мин); примесь B – около 0,1; примесь A – около 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси B используют относительное время удерживания соединения и хроматограмму раствора стандартного образца примеси B.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и зопиклона должно быть не менее 3,0.

При необходимости корректируют pH подвижной фазы фосфорной кислотой разведённой 10 % до 4,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси B не должна более чем в 2 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца примеси B (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей (кроме примеси В) не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,25 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в смеси 10 мл уксусной кислоты безводной и 40 мл уксусного ангидрида, и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты.

Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 38,88 мг зопиклона C17H17ClN6O3.

##### ХРАНЕНИЕ

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0100 Ибупрофен (Ibuprofenum)

Взамен ФС.2.1.0100.18

##### Определение

(2RS)-2-[4-(2-Метилпропил)фенил]пропановая кислота.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % ибупрофена C13H18O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Легко растворим в ацетоне, метаноле, метиленхлориде, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения соответствует спектру фармакопейного стандартного образца ибупрофена.

2. Спектрофотометрия. (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг субстанции, растворяют в натрия гидроксида растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 240 до 300 нм должен иметь максимумы при 264 нм, 272 нм и плечо при 258 нм. Отношение оптических плотностей А264/А258 от 1,20 до 1,30 и А272/А258 от 1,00 до 1,10.

##### Испытания

Температура плавления. От 75 до 78 ºС (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 2,0 г субстанции в 20 мл метанола должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

Угол вращения. От –0,05° до +0,05° (2,5 % раствор субстанции в метаноле при длине кюветы 1 дм, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 0,5 мл фосфорной кислоты концентрированной, 340 мл ацетонитрила и 600 мл воды и доводят объём раствора водой до 1000 мл.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в 2,0 мл ацетонитрила и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора ПФА до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора ПФА до метки и перемешивают.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл 0,06 % раствора стандартного образца, содержащего примесь В (2RS)-2-(4-бутилфенил) пропановая кислота [3585-49-7] в ацетонитриле, доводят объём раствора ПФА до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки и перемешивают.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 оС; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 214 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
0–25 | 100 | 0
25–55 | 100 → 15 | 0 → 85
55–70 | 15 | 85

Уравновешивают колонку ПФА в течение не менее 45 мин. Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматорафической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ибупрофен – 1 (около 16 мин); примесь В – около 1,1.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматорафической системы разрешение (RS) между пиками примеси В и ибупрофена должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой другой примеси не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика ибупрофена на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика ибупрофена на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,3 от площади пика ибупрофена на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,03 %).

Примесь F. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Раствор для метилирования. К 1,0 мл диметилформамида диметилацеталя прибавляют 1,0 мл пиридина и разбавляют этилацетатом до объёма 10,0 мл.

Испытуемый раствор. В хроматографический флакон помещают 50 мг субстанции, растворяют в 1 мл этилацетата, прибавляют 1 мл раствора для метилирования, флакон герметизируют и выдерживают при температуре 100 ºС в течение 20 мин. Флакон охлаждают, продувают азотом до удаления реагентов и растворяют остаток в 5 мл этилацетата.

Раствор сравнения. В 10,0 мл этилацетата растворяют 0,5 мг фармакопейного стандартного образца примеси F (3-[4-(2-метилпропил)фенил]пропановая кислота [65322-85-2]. В хроматографический флакон помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 1 мл раствора для метилирования, флакон герметизируют и выдерживают при температуре 100 ºС в течение 20 мин. Флакон охлаждают, продувают азотом до удаления реагентов и растворяют остаток в 5,0 мл этилацетата.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 25 м × 0,53 мм, покрытая слоем полиэтиленгликоля 20 000, 2 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Скорость потока | 5 мл/мин; |  |
Температура | Инжектор | 200 ºС; |
| Колонка | 150 ºС; |
| Детектор | 250 ºС; |
Объем пробы | 1 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика ибупрофена. |  |

Хроматографируют испытуемый раствор и раствор сравнения.

Относительное время удерживания соединений. Ибупрофен – 1 (около 17 мин); примесь F – около 1,5.

Допустимое содержание примеси. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси F не должна превышать площадь пика примеси F на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 2). Сушат в вакуум-эксикаторе над фосфора(V) оксидом до постоянной массы 1 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,1 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,02 г субстанции в 10 мл воды.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,017 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС Титриметрия (титриметрические методы анализа)).

Растворяют 0,45 г (точная навеска) субстанции в 50 мл метанола и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до появления розового окрашивания (индикатор – фенолфталеина раствор 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 20,63 мг ибупрофена C13H18O2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

*Испытание проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0503 Ивабрадина гидробромид

Ивабрадин
Ivabradini hydrobromidum

Вводится впервые

##### Определение

3-[3-({[(7S)-3,4-Диметоксибицикло[4.2.0]окта-1,3,5-триен-7-ил]метил}(метил)амино)пропил]-7,8-диметокси-1,3,4,5-тетрагидро-2H-3-бензазепин-2-она гидробромид.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % ивабрадина гидробромида C27H36N2O5·HBr в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в метаноле, мало растворим в воде, очень мало растворим в этаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ивабрадина гидробромида.

2. Качественная реакция_. Раствор 20 мг субстанции в 2 мл воды должен давать характерную реакцию Б на бромиды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

* Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 1,32 г аммония фосфата, растворяют в 800 мл воды, доводят рН раствора потенциометрически аммиака раствором концентрированным 25 % до 9,5, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—метанол 300:700.

Растворитель. Ацетонитрил—хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М 1:9.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 30 мг субстанции, прибавляют 8,0 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане до растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки. Срок годности раствора – 48 ч, при температуре 7 °С.

Примечание

Примесь 1:
3-[3-({[(7S)-3,4-диметоксибицикло[4.2.0]окта-1,3,5-триен-7-ил]метил}(метил)амино)пропил]-7,8-диметокси-1,3-дигидро-2H-3-бензазепин-2-он
[1086026-31-4].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель фенилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Температура образца | 7 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 225 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–35 | 65 → 55 | 35 → 45
35–40 | 55 → 40 | 45 → 60
40–45 | 40 | 60
45–46 | 40 → 65 | 60 → 35
46–50 | 65 | 35

Перед началом анализа колонку промывают смесью вода—ацетонитрил 5:95.

Хроматографируют испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ивабрадин – 1 (около 29 мин); бромид-анион – около 0,07; примесь 1 – около 1,19.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- примесь 1 – не более 0,3 %;

- любая другая примесь – не более 0,15 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают пик бромид-аниона и пики площадь которых менее 0,05 %.

Вода. Не более 4,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы»).

Испытуемый раствор. В кварцевый тигель помещают 1,0 г субстанции, прибавляют 4 мл магния сульфата раствора 25 % в серной кислоты растворе 1 М, перемешивают тонкой стеклянной палочкой, нагревают до температуры 800 °C, пока остаток в тигле не приобретёт белый или серый цвет. Полученный остаток охлаждают, смачивают несколькими каплями серной кислотой разведённой 9,8 %, выпаривают, повторно прокаливают и охлаждают. Полученный остаток количественно переносят двумя порциями по 5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % в мерную колбу вместимостью 20 мл, прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствора 0,1 %, затем осторожно прибавляют аммиака раствор концентрированный 25 % до перехода окраски в розовую. К полученному раствору прибавляют уксусную кислоту ледяную до обесцвечивания раствора и дополнительно 0,5 мл уксусной кислоты ледяной. Доводят объём раствора водой до метки. При необходимости фильтруют.

Эталонный раствор. Готовят, как описано для испытуемого раствора, используя вместо испытуемой субстанции 4,0 мл стандартного раствора 5 мкг/мл свинец-иона (ОФС «Тяжёлые металлы»). К 10,0 мл полученного раствора прибавляют 2,0 мл испытуемого раствора.

Раствор для проверки пригодности системы. Готовят, как описано для испытуемого раствора, предварительно прибавляя к испытуемой субстанции 2,0 мл стандартного раствора 10 мкг/мл свинец-иона. К 10,0 мл полученного раствора прибавляют 2,0 мл испытуемого раствора.

Контрольный раствор. К 10,0 мл воды прибавляют 2,0 мл испытуемого раствора.

Прибавляют к 12,0 мл каждого раствора 2,0 мл буферного раствора рН 3,5. Перемешивают и прибавляют 1,2 мл тиоацетамидного реактива. Немедленно перемешивают. Через две минуты сравнивают окраски полученных растворов.

Пригодность системы:

- эталонный раствор по сравнению с контрольным раствором должен быть окрашен в светло-коричневый цвет;

- окраска раствора для проверки пригодности системы должна быть не менее интенсивна, чем окраска эталонного раствора.

Допустимое содержание тяжёлых металлов. Окраска испытуемого раствора не должна превышать по интенсивности окраску эталонного раствора.

При затруднении в оценке растворы фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм. Фильтрование проводят медленно и единообразно при умеренном и постоянном нажатии на поршень. Сравнивают пятна на фильтрах, полученные от фильтрования различных растворов. Коричневая окраска пятна на фильтре, полученного после фильтрования испытуемого раствора, не должна превосходить по интенсивности окраску пятна на фильтре, полученного после фильтрования эталонного раствора.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,5 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты безводной, прибавляют 10 мл ртути(II) ацетата раствора 5 % и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 54,95 мг ивабрадина гидробромида C27H36N2O5∙HBr.

##### Хранение

Не требует особых условий.

* Проверка разделительной способности хроматографической системы должна быть приведена в нормативной документации производителя.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0101 Изониазид (Isoniazidum)

Взамен ФС.2.1.0101.18

##### Определение

Пиридин-4-карбогидразид.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % изониазида С6Н7N3O в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96 %, мало растворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрофотометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца изониазида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и доводят объём раствора хлористоводородной кислотой раствором 0,1 М до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислотой раствором 0,1 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 нм до 350 нм должен иметь максимум при 266 нм и минимум при 234 нм.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 2 мл воды, прибавляют 10 мл тёплого ванилина раствора 10 г/л; дают постоять, затем протирают стенку пробирки стеклянной палочкой; должен выпасть осадок жёлтого цвета, который после перекристаллизации из 5 мл спирта 70 %, высушивают при температуре 100–105°С и определяют температуру плавления; температура плавления кристаллов должна быть от 226 до 231 °С.

##### Испытания

Температура плавления. От 170 до 174 ºС (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 6,0 до 8,0 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля GF254.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—ацетон—метанол—этилацетат 10:20:20:50.

Растворитель. Ацетон—вода 1:1.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,08 г гидразина сульфата, растворяют в 50 мл воды и доводят объём раствора ацетоном до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мл полученного раствора, прибавляют 0,2 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Реактив для детектирования. Диметиламинобензальдегида раствор 1 % в спирте 96%.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (1000 мкг) и раствора сравнения (2 мкг изониазида и эквивалент 0,2 мкг гидразина). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ свете при длине волны 254 нм.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции, находящаяся на уровне зоны адсорбции изониазида, по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции изониазида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %)

Пластинку опрыскивают реактивом для детектирования, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С в течение 5 мин и просматривают при видимом свете.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции, находящаяся на уровне зоны адсорбции гидразина, по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции гидразина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,02 %).

Зона адсорбции на линии старта при оценке не учитывается.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 %. (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения используют 10 мл раствора, полученного в испытании «Хлориды».

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,5 г субстанции в 25 мл воды. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 3 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,3 ЕЭ на 1 мг изониазида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 100 мл воды. К 20 мл полученного раствора прибавляют 100 мл воды, 20 мл хлористоводородной кислоты 25 %, 0,2 г калия бромида и титруют 0,0167 М раствором калия бромата до исчезновения красного окрашивания (индикатор – 1 капля 0,1 % раствора метилового красного спиртового).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,0167 М раствора калия бромата соответствует 3,429 мг изониазида С6Н7N3O.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытания проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0597 Изоникотиноилгидразин железа сульфат дигидрат (Isonicotinoylhydrazini ferri sulfas dihydricus)

Взамен ВФС 42-2998-97

##### Определение

(Изоникотиноилгидразино-O,Nʹ)железа(II) сульфат дигидрат.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % изоникотиноилгидразина железа сульфата C6H7N3O·FeSO4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Содержит не менее 46,5 % и не более 48,5 % изониазида в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Содержит не менее 51,7 % и не более 53,3 % железа(II) сульфата FeSO4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. От оранжевого до оранжево-коричневого цвета кристаллический порошок с характерным запахом.

Растворимость. Практически нерастворим в воде, спирте 96 % и ацетоне.

*Мало растворяется в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М, допускается образование мутных растворов.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца изоникотиноилгидразина железа сульфата.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 нм до 300 нм должен иметь максимум при 266 нм и минимум при 235 нм.

3. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 2 мл хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и прибавляют 1 мл калия феррицианида раствора 5 %. Полученный раствор должен давать характерную реакцию на железо(II) (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

4. Качественная реакция. Растворяют 2 мг субстанции в 2 мл хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М. Полученный раствор должен давать характерную реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

1. Изониазид

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля FG254.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—ацетон—метанол—этилацетат 10:20:20:50.

Испытуемый раствор. Перемешивают 2,5 г субстанции и 35 мл ацетона на магнитной мешалке в течение 30 мин. Полученную смесь фильтруют. Осадок промывают 15 мл ацетона, фильтрат переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объём ацетоном до метки.

Раствор стандартного образца изониазида (А). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца изониазида, растворяют в 60 мл ацетона и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца изониазида (Б). К 4,0 мл раствора стандартного образца изониазида (А) прибавляют 1,0 мл ацетона.

Раствор стандартного образца изониазида (В). К 3,0 мл раствора стандартного образца изониазида (А) прибавляют 2,0 мл ацетона.

Раствор стандартного образца изониазида (Г). К 2,0 мл раствора стандартного образца изониазида (А) прибавляют 3,0 мл ацетона.

Раствор стандартного образца изониазида (Д). К 1,0 мл раствора стандартного образца изониазида (А) прибавляют 4,0 мл ацетона.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. К 0,5 мл раствора стандартного образца изониазида (А) прибавляют 4,5 мл ацетона.

На линию старта пластинки наносят по 4 мкл испытуемого раствора (200 мкг), раствора стандартного образца изониазида (А) (1 мкг), раствора стандартного образца изониазида (Б) (0,8 мкг), раствора стандартного образца изониазида (В) (0,6 мкг), раствора стандартного образца изониазида (Г) (0,4 мкг), раствора стандартного образца изониазида (Д) (0,2 мкг) и раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (0,1 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе до удаления следов растворителей и просматривают в УФ свете при 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

На хроматограмме испытуемого раствора допускается наличие только одной дополнительной зоны адсорбции, не превышающей по совокупности величины и интенсивности флуоресценции зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца изониазида (А) (не более 0,5 %).

2. Гидразин

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Хлористоводородной кислоты раствор 0,5 М—ацетон—метанол—этилацетат 10:20:20:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,8 г субстанции и 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М, перемешивают в течение 10 мин на ультразвуковой бане, охлаждают раствор до комнатной температуры и доводят объём раствора ацетоном до метки.

Раствор стандартного образца гидразина сульфата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 80 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гидразина сульфата, растворяют в 50 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М и доводят объём раствора ацетоном до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

На линию старта пластинки наносят 5 мкл (400 мкг) испытуемого раствора, 1 мкл (0,2 мкг) и 0,5 мкл (0,1 мкг) раствора стандартного образца гидразина сульфата. Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают диметиламинобензальдегида спиртовым раствором и просматривают при дневном свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца гидразина сульфата, содержащей 0,1 мкг гидразина сульфата, должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции основного вещества.

На хроматограмме испытуемого раствора допускается наличие только одной дополнительной зоны адсорбции, не превышающей по совокупности величины и интенсивности флуоресценции зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца гидразина (не более 0,05 %).

Зону адсорбции на линии старта при оценке не учитывают.

Вода. Не более 14,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 50 мг (точная навеска) субстанции и, в качестве растворителя, смесь 1 мл уксусной кислоты безводной и 5 мл метанола.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

1. Изониазид

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М, при необходимости обрабатывая ультразвуком, доводят объём раствора тем же растворителем до метки и фильтруют (раствор А). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл раствора А и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 42 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца изониазида и 0,12 г (точная навеска) железа(II) аммония сульфата, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки (раствор Б).

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл раствора Б и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Измеряют оптическую плотность испытуемого и стандартного растворов на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 266 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. В качестве раствора сравнения используют хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М.

Содержание изониазида в субстанции в пересчёте на безводное вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A1 - оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 - оптическая плотность стандартного раствора;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца изониазида, мг;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце изониазида,%.

2. Железа(II) сульфат

о-Фенантролина раствор 0,5 %. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 г о-фенантролина сульфата, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Натрия ацетата раствор 2,5 %. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мл натрия ацетата раствора 10 % и доводят объём раствора водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл раствора А (количественное определение изониазида), прибавляют 1 мл натрия ацетата раствора 2,5 % и 2 мл о-фенантролина раствора 0,5 %, выдерживают 1 ч и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл раствора Б (количественное определение изониазида), прибавляют 1 мл натрия ацетата раствора 2,5 % и 2 мл о-фенантролина раствора 0,5 %, выдерживают 1 ч и доводят объём раствора водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл натрия ацетата раствора 2,5 % и 2 мл о-фенантролина раствора 0,5 %, выдерживают 1 ч и доводят объём раствора водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Измеряют оптическую плотность испытуемого и стандартного растворов на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 510 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.

Содержание железа(II) сульфата в субстанции в процентах в пересчёте на безводное вещество (X) вычисляют по формуле:

где A1 - оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 - оптическая плотность стандартного раствора;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска железа(II) аммония сульфата, мг;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание основного вещества в железа(II) аммония сульфате,%;
0,3873 - поправочный коэффициент.

3. Изоникотиноилгидразина железа сульфат

Содержание изоникотиноилгидразина железа сульфата рассчитывают как сумму содержания изониазида и железа(II) сульфата.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0669 Изосорбида динитрат разбавленный

Изосорбида динитрат
Isosorbidi dinitras dilutus

Взамен ФС 42-422-86

##### Определение

[(3R,3aS,6S,6aR)-Гексагидрофуро[3,2-b]фуран-3,6-диил]динитрат.

Cодержит не менее 95,0 % и не более 105,0 % изосорбида динитрата C6H8N2O8 в пересчёте на сухое вещество от заявленного количества.

Представляет собой сухую смесь изосорбида динитрата с лактозой или другим подходящим наполнителем для обеспечения безопасного использования.

##### Свойства

Описание. Неразбавленный изосорбида динитрат белого или почти белого цвета мелкокристаллический порошок.

*Взрывоопасен. Неразбавленный изосорбида динитрат может взорваться при ударе или чрезмерном нагревании. Необходимо принимать меры предосторожности и обрабатывать только небольшие количества.

Растворимость. Неразбавленный изосорбида динитрат очень легко растворим в ацетоне, умеренно растворим в спирте 96 %, очень мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр испытуемого образца в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца изосорбида динитрата.

- Испытуемый образец. Навеску субстанции, соответствующую 25 мг изосорбида динитрата, встряхивают с 10 мл ацетона в течение 5 мин, фильтруют, упаривают досуха при температуре не выше 40 °С и сушат в эксикаторе над фосфора(V) оксидом при остаточном давлении 0,7 кПа.

- Стандартный образец. Навеску фармакопейного стандартного образца изосорбида динитрата, соответствующую 25 мг изосорбида динитрата, встряхивают с 10 мл ацетона в течение 5 мин, фильтруют, упаривают досуха при температуре не выше 40 °С и сушат в эксикаторе над фосфора(V) оксидом при остаточном давлении 0,7 кПа.

2. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля G.

- Подвижная фаза (ПФ). Метанол—метиленхлорид 5:95.

- Испытуемый раствор. Навеску субстанции, соответствующую 10 мг изосорбида динитрата, встряхивают с 10 мл спирта 96 % в течение 5 мин и фильтруют.

- Раствор стандартного образца изосорбида динитрата. Навеску фармакопейного стандартного образца изосорбида динитрата, соответствующую 10 мг изосорбида динитрата, встряхивают с 10 мл спирта 96 % в течение 5 мин и фильтруют.

- На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (10 мкг) и раствора стандартного образца изосорбида динитрата (10 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение 30 мин подвижной фазой и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат в потоке воздуха до удаления следов растворителей, опрыскивают крахмала раствором с калия йодидом, выдерживают в УФ-свете при 254 нм в течение 15 мин и просматривают в видимом свете.

- Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции изосорбида динитрата на хроматограмме раствора стандартного образца изосорбида динитрата.

3. Качественная реакция. Растворяют около 10 мг испытуемого образца, полученного в испытании «Идентификация. ИК-спектрометрия», на часовом стекле в капле серной кислоты концентрированной и прибавляют кристалл дифениламина; должно появиться фиолетовое окрашивание.

##### Испытания

Температура плавления. От 69 до 72 ºС (ОФС «Температура плавления»). Используют испытуемый образец, полученный в испытании «Подлинность. ИК-спектрометрия».

Удельное вращение. От +133 до +140 (1 % раствор испытуемого образца, полученного в испытании «Идентификация. ИК-спектрометрия», в спирте 96 %, ОФС «Оптическое вращение»).

Кислотность

Навеску субстанции, соответствующую 2 г изосорбида динитрата, встряхивают с 40 мл воды, свободной от углерода диоксида, в течение 2 мин и фильтруют. Для изменения окраски 5,0 мл полученного раствора на жёлтую должно потребоваться не более 0,02 мл метилового красного спиртового раствора 0,1 %.

Родственные примеси

Неорганические нитраты. Испытание проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза. Уксусная кислота ледяная—ацетон—толуол 15:30:60.

Испытуемый раствор. Навеску субстанции, соответствующую 0,1 г изосорбида динитрата, встряхивают с 5 мл спирта 96 % и фильтруют.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг калия нитрата, растворяют в 1 мл воды и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (200 мкг) и стандартного раствора (1 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с подвижной фазой и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат в токе воздуха до испарения уксусной кислоты, опрыскивают крахмала раствором с калия йодидом, выдерживают в УФ-свете при 254 нм в течение 15 мин и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции, находящаяся на уровне зоны адсорбции изосорбида динитрата, по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы (не более 0,5 % в пересчёте на калия нитрат).

Изосорбид-2-нитрат и изосорбида мононитрат. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Этанол—триметилпентан 15:85.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают точную навеску субстанции, соответствующую около 25 мг изосорбида динитрата, прибавляют 20 мл ПФ, обрабатывают ультразвуком в течение 15 мин, охлаждают до комнатной температуры, доводят объём раствора ПФ до метки и фильтруют.

Раствор стандартного образца изосорбида динитрата. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают точную навеску фармакопейного стандартного образца изосорбида динитрата, соответствующую около 25 мг изосорбида динитрата, прибавляют 20 мл ПФ, обрабатывают ультразвуком в течение 15 мин, охлаждают до комнатной температуры, доводят объём раствора ПФ до метки и фильтруют.

Раствор стандартного образца изосорбид-2-нитрата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают навеску фармакопейного стандартного образца изосорбид-2-нитрата, соответствующую 10 мг (точная навеска) изосорбид-2-нитрата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,1 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца изосорбида мононитрата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают навеску фармакопейного стандартного образца изосорбид-2-нитрата, соответствующую 10 мг (точная навеска) изосорбид-2-нитрата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,1 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают навеску фармакопейного стандартного образца изосорбид-2-нитрата, соответствующую 5 мг изосорбид-2-нитрата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 0,5 мл раствора стандартного образца изосорбида динитрата и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь В: (изосорбид-2-нитрат)
[(3S,3aS,6R,6aR)-6-гидроксигексагидрофуро[3,2-b]фуран-3-ил]нитрат
[16106-20-0.].

Примесь С: (изосорбида мононитрат):
[(3R,3aS,6S,6aR)-6-гидроксигексагидрофуро[3,2-b]фуран-3-ил]нитрат
[16051-77-7].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель аминопропилсилильный для хроматографии, 10 мкм; |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210–215 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца изосорбид-2-нитрата, раствор стандартного образца изосорбида мононитрата и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Изосорбида динитрат – 1 (около 5 мин); примесь В – около 1,6; примесь С – около 2,2.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками изосорбида динитрата и изосорбид-2-нитрата должно быть не менее 6,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси В не должна превышать 0,1 площади пика изосорбид-2-нитрата на хроматограмме раствора стандартного образца изосорбид-2-нитрата (не более 0,5 %);

- площадь пика изосорбида мононитрата не должна превышать 0,1 площади пика изосорбида мононитрата на хроматограмме раствора стандартного образца изосорбида мононитрата (не более 0,5 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании»). Сушат 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме над кальция хлорида безводным при комнатной температуре в течение 16 ч.

Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения используют 10 мл испытуемого раствора, полученного в испытании «Кислотность».

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора, полученного в испытании «Кислотность», и доводят объём раствора водой до метки.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 7 ЕЭ на 1 мг изосорбида динитрата (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Изосорбид-2-нитрат и изосорбида мононитрат» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, полученного в испытании «Изосорбид-2-нитрат и изосорбида мононитрат», и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца изосорбида динитрата. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца изосорбида динитрата, полученного в испытании «Изосорбид-2-нитрат и изосорбида мононитрат», и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

- Детектор: спектрофотометрический, 230 нм;
  Объём пробы: 20 мкл.

Хроматографируют раствор стандартного образца изосорбида динитрата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца изосорбида динитрата относительное стандартное отклонение площади пика изосорбида динитрата должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Если площади пиков от двух последовательных введений испытуемого раствора не совпадают в пределах 1 %, вводят ещё 4 раза и рассчитывают относительное стандартное отклонение для 6 введений.

Содержание изосорбида динитрата C6H9NO6 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах от заявленного количества (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика изосорбида динитрата на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика основного вещества на хроматограмме раствора стандартного образца изосорбида динитрата;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца изосорбида динитрата, мг;
P – содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце изосорбида динитрата,%;
L – заявленное количество изосорбида динитрата в субстанции, г/г;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в прохладном, защищённом от света месте, вдали от огня.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0602 Изотретиноин (Isotretinoinum)

Взамен ФС 42-2617-95

##### Определение

(2Z,4E,6E,8E)-3,7-Диметил-9-(2,6,6-триметилциклогекс-1-ен-1-ил)нона-2,4,6,8-тетраеновая кислота.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % изотретиноина C20H28O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Жёлтый или светло-оранжевый кристаллический порошок.

* Субстанция и растворы субстанции чувствительны к воздействию воздуха, температуры и света. Содержимое вскрытой упаковки должно сразу использоваться, любая неиспользованная часть субстанции должна помещаться в среду инертного газа.

Является тератогенным веществом. Рекомендуется избегать вдыхания и контакта с кожей.

Растворимость. Растворим в метиленхлориде, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца изотретиноина.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы готовят непосредственно перед использованием в посуде из тёмного стекла.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—вода—метанол 5:225:770.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,5 мл испытуемого раствора, 1,0 мл раствора стандартного образца примеси А (третиноин) ((2E,4E,6E,8E)-3,7-диметил-9-(2,6,6-триметилциклогекс-1-ен-1-ил)нона-2,4,6,8-тетраеновая кислота [302-79-4]) и доводят объём раствора метанолом до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 3 мкм; |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 355 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,6-кратное от времени удерживания пика изотретиноина. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Изотретиноин – 1 (около 26 мин); примесь А – около 1,3.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками изотретиноина и примеси А должно быть не менее 5,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика изотретиноина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика изотретиноина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь основного пика изотретиноина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика изотретиноина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают до постоянной массы 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме в течение 16 ч при комнатной температуре.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 70 мл ацетона и титруют 0,1 М раствором тетрабутиламмония гидроксида в 2-пропаноле. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора тетрабутиламмония гидроксида в 2-пропаноле соответствует 30,04 мг изотретиноина C20H28O2.

##### Хранение

Под инертным газом в герметичной, защищённой от света упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0422 Иматиниба мезилат

Иматиниб
Imatinibi mesilas

Вводится впервые

##### Определение

N-(4-Метил-3-{[(4-пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил]амино}фенил)-4-[(4-метилпиперазин-1-ил)метил]бензамида метансульфонат (1:1).

Cодержит:

- не менее 95,0 % и не более 105,0 % иматиниба мезилата C29H31N7O·CH4O3S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество;

- не менее 15,0 % и не более 17,0 % метансульфоновой кислоты CH4O3S (М.м. 96,11) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Производителям иматиниба мезилата необходимо в процессе производства проводить оценку риска загрязнения субстанции сложными эфирами алкилметансульфоната. При выявлении потенциального риска процесс производства должен быть изменён, чтобы исключить или минимизировать загрязнение.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с коричневатым или желтоватым оттенком цвета мелкокристаллический порошок или аморфный порошок.

* Проявляет полиморфизм. Аморфный порошок очень гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим или легко растворим в воде, растворим или легко растворим в диметилсульфоксиде, мало растворим или очень мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в ацетонитриле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца иматиниба мезилата.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах этанола, растворы выпаривают досуха под вакуумом при 60 °С и давлении 0,7 МПа и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика иматиниба на хроматограмме раствора стандартного образца иматиниба мезилата (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Родственные примеси

1. Примесь F. Не более 0,002 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Примесь F является высокотоксичным веществом. Необходимо принять меры для исключения возможности его вдыхания или контакта с кожей и слизистыми оболочками.

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 1,26 г аммония формиата в воде и доводят значение pH муравьиной кислотой безводной до 3,45, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 500 мл ацетонитрила, прибавляют 0,5 мл муравьиной кислоты безводной и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Растворитель. Ацетонитрил—вода для хроматографии 30:70.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси F. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси F, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца примеси F и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь F: N-(5-амино-2-метилфенил)-4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-амин [152460-10-1].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 0,5 мл/мин; |  |
Детектор | масс-спектрометрический; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Тип ионизации | электроспрей (ESI); |  |
Режим электрораспыления | положительный (ESI+); |  |
Напряжение ионизации | 4,0 Кв; |  |
Рабочий режим | мониторинг избранного иона (SIM); |  |
Массовый заряд | 278,20 m/z; |  |
Напряжение на капилляре | +3 кВ; |  |
Температура газа | 300 °С; |  |
Расход газа-распылителя | 3 л/мин. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–6 | 80 | 20
6–10 | 80 → 20 | 20 → 80
10–15 | 20 | 80
15,1–20 | 20 → 80 | 80 → 20

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси F и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси F должно быть не менее 10,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца примеси F:

- фактор асимметрии пика (AS) примеси F должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика примеси F должно быть не более 10,0 % (6 введений);

Содержание примеси F в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика примеси F на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика примеси F на хроматограмме раствора стандартного образца примеси F;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца примеси F, мг;
P - содержание примеси F в фармакопейном стандартном образце примеси F,%.

2. Примесь H. Не более 0,02 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 2,12 г натрия октансульфоната в смеси фосфорная кислота разведённая 10 %—ацетонитрил—вода 1,2:300:700.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Растворяют 2,12 г натрия октансульфоната в смеси фосфорная кислота разведённая 10 %—вода—ацетонитрил 1,2:100:900.

Растворитель. Ацетонитрил—вода для хроматографии 30:70.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,15 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. Содержимое виалы с фармакопейным стандартным образцом примеси А растворяют в 1,0 мл растворителя.

Раствор стандартного образца примеси H (А). В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 60 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси H, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси H (Б). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца примеси H (А) и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,15 г субстанции, прибавляют 1,0 мл раствора стандартного образца примеси H (А) и 1,0 мл раствора стандартного образца примеси А и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А: (2E)-3-(диметиламино)-1-(пиридин-3-ил)проп-2-ен-1-он [55314-16-4].

Примесь H: 1-(пиридин-3-ил)этан-1-он [350-03-8].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 2,3 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 227 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–6 | 98 | 2
6–8 | 98 → 20 | 2 → 80
8–10 | 20 | 80

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси H (Б) и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Иматиниб – 1 (около 8 мин); примесь A – около 0,17; примесь H – около 0,2.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси A и примеси H должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора стандартного образца примеси Н (Б) относительное стандартное отклонение площади пика примеси Н должно быть не более 10,0 % (6 введений).

Содержание примеси H в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика примеси H на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика примеси H на хроматограмме раствора стандартного образца примеси H (Б);
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца примеси H, мг;
P - содержание примеси H в фармакопейном стандартном образце примеси H,%.

3. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Примесь Н» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 1 мг фармакопейного стандартного образца иматиниба для проверки пригодности системы, содержит примеси A, B, C, D и J в 2,0 мл растворителя.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь B:
N-(3-карбамимидамидо-4-метилфенил)-4-[(4-метилпиримидин-1-ил)метил]бензамид
[581076-65-5].

Примесь C:
N-(4-метил-3-{[(4-пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил]амино}фенил)-4-(пиперазин-1-илметил)бензамид
[404844-02-6].

Примесь D:
1-метил-1,4-бис({4-[(4-метил-3-{[4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил]амино}фенил)карбамоил]фенил}метил)-1λ5-пиперазин-1-илий
хлорид.

Примесь J:
1-метил-4-({4-[(4-метил-3-{[4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил]амино}фенил)карбамоил]фенил}метил)-1λ5-пиперазин-1-илий-1-олат
[571186-91-9].

Хроматографические условия

- Детектор: спектрофотометрический, 267 нм.

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–16 | 98 | 2
16–30 | 98 → 50 | 2 → 50
30–35 | 50 → 98 | 50 → 2

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу иматиниба для проверки пригодности системы.

Относительное время удерживания соединений. Иматиниб – 1 (около 11 мин); примесь A – около 0,2; примесь B – около 0,6; примесь J – около 0,9; примесь C – около 1,2; примесь D – около 2,3.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика иматиниба должно быть не менее 10,0.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками иматиниба и примеси С должно быть не менее 3,0;

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси J и иматиниба должно быть не менее 1,3;

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика иматиниба должно быть не менее 20,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь A – 2,2; примесь B – 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A и B не должна превышать 1,5 площади пика иматиниба на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика примеси C не должна превышать трёхкратную площадь пика иматиниба на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика примеси D не должна превышать двукратную площадь пика иматиниба на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика иматиниба на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать восьмикратную площадь пика иматиниба на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,8).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 3,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 2) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Иматиниба мезилат. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца иматиниба мезилата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца иматиниба мезилата, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца иматиниба мезилата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца иматиниба мезилата:

- фактор асимметрии пика (AS) иматиниба должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика иматиниба должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание иматиниба мезилата C29H31N7O·CH4O3S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика иматиниба на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика иматиниба на хроматограмме раствора стандартного образца иматиниба мезилата;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца иматиниба мезилата, мг;
P - содержание иматиниба мезилата в фармакопейном стандартном образце иматиниба мезилата,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

Метансульфоновая кислота (мезилат). Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,35 г (точная навеска) субстанции в 40 мл смеси ацетонитрил—вода 2:5 и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 9,611 мг метансульфоновой кислоты (CH3SO3H).

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0603 Имидазолилэтанамид пентандиовой кислоты (Acidi pentandioici imidazolylaethanamidum)

Вводится впервые

##### Определение

5-{[2-(1H-Имидазол-4-ил)этил]амино}-5-оксопентановая кислота.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % имидазолилэтанамид пентандиовой кислоты C10H15N3О3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый мелкокристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 % и метаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца имидазолилэтанамида пентандиовой кислоты.

2. Качественная реакция._ Растворяют 50 мг субстанции в 2 мл воды. На предметное стекло или листок фильтровальной бумаги наносят каплю полученного раствора, прибавляют 1 каплю сульфаниловой кислоты раствор диазотированный. В месте соприкосновения растворов должно появиться ярко-красное окрашивание, переходящее в жёлтое при прибавлении 1 капли хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл воды должен выдерживать сравнение c эталоном I (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл воды должен выдерживать сравнение с эталоном Y6, B6 или BY6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 5,0 до 6,5 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 6,8 г калия дигидрофосфата и 4,5 г дикалия гидрофосфат тригидрата, растворяют в 900 мл воды, доводят объём раствора водой до метки, перемешивают и фильтруют.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 60 мг субстанции, растворяют в 70 мл ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца имидазолилэтанамида пентандиовой кислоты. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 15 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца имидазолилэтанамида пентандиовой кислоты, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл переносят 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца гистамина дигидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гистамина дигидрохлорида, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл переносят 1,0 мл раствора стандартного образца имидазолилэтанамида пентандиовой кислоты, 1,0 мл раствора стандартного образца гистамина дигидрохлорида и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, совместимый с водной подвижной фазой, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | не менее чем в 3 раза превышает время удерживания пика имидазолилэтанамида пентандиовой кислоты. |  |

Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый растворы.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками гистамина и имидазолилэтанамида пентандиовой кислоты должно быть не менее 2,0.

Содержание гистамина в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика гистамина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика гистамина на хроматограмме стандартного раствора;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца гистамина дигидрохлорида, мг;
P - содержание гистамина в фармакопейном стандартном образце гистамина дигидрохлорида,%.

Содержание любой неидентифицированной примеси в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой неидентифицированной примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика имидазолилэтанамида пентандиовой кислоты на хроматограмме стандартного раствора;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца имидазолилэтанамида пентандиовой кислоты, мг;
P - содержание имидазолилэтанамида пентандиовой кислоты в фармакопейном стандартном образце имидазолилэтанамида пентандиовой кислоты,%.

Допустимое содержание примесей:

- гистамин – не более 0,15 %;

- любая неидентифицированная примесь – не более 0,1 %;

- сумма всех примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают примеси менее 0,05 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 %. (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,04 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 50 мг субстанции в 10 мл воды.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют при нагревании 0,15 г (точная навеска) субстанции в 30 мл уксусной кислоты безводной, охлаждают до комнатной температуры и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Точку эквивалентности определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с индикатором (0,15 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %) до перехода окраски из фиолетовой в ярко-голубую.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 22,52 мг имидазолилэтанамида пентандиовой кислоты C10H15N3О3.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0423 Имипенем моногидрат

Имипенем
Imipenemum monohydricum

Вводится впервые

##### Определение

(5S,6S)-6-[(R)-1-Гидроксиэтил]-3-(\{2-[(иминометил)амино]этил}сульфанил)-7-оксо-1-азабицикло[3.2.0]гепт-2-ен-2-карбоновая кислота моногидрат.

Субстанция представляет собой полусинтетический антибиотик из группы карбапенемов, полученный из продуктов брожения.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % имипенема C12H17N3O4S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. От белого или почти белого до светло-жёлтого цвета порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Мало растворим в воде и метаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца имипенема моногидрата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика имипенема моногидрата на хроматограмме раствора стандартного образца имипенема моногидрата (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +90 до +95 в пересчёте на безводное вещество (ОФС «Оптическое вращение»). В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,125 г субстанции, растворяют в фосфатном буферном растворе рH 7,0 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Прозрачность раствора. Опалесценция раствора 0,5 г субстанции в 50 мл фосфатного буферного раствора рH 7,0 не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном 6 (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

рН раствора. От 4,5 до 7,5 (0,5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 0,32 г натрия дигидрофосфата безводного и 1,04 г динатрия гидрофосфата в 900 мл воды и доводят значение рН фосфорной кислотой разведённой 10 % до 7,3, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор динатрия гидрофосфата безводного. Растворяют 0,11 г динатрия гидрофосфата безводного в 900 мл воды и доводят значение рН фосфорной кислотой разведённой 10 % до 6,8, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Растворитель. Ацетонитрил — раствор динатрия гидрофосфата безводного 7:993.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 7:993.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—буферный раствор 250:750.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца имипенема. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца имипенема, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг субстанции и растворяют в 8 мл смеси серная кислота разведённая 9,8 %—вода 4:800, оставляют на 5 мин. В полученном растворе растворяют 10 мг натрия карбоната и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь А (тиенамицин):
(5S,6S)-3-[(2-аминоэтил)сульфанил]-6-[(R)-1-гидроксиэтил]-7-оксо-1-азабицикло[3.2.0]гетп-2-ен-2-карбоновая
кислота [59995-64-1].

Примесь B (имипенемовая кислота):
(2R,4RS)-2-[(1S,2R)-2-гидроксипропил-1-карбокси]-4-(\{2-[(иминометил)амино}этил]сульфанил)-3,4-дигилро-2Н-пиррол-5-карбоновая
кислота [1197869-90-1].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Температура инжектора | 5 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–9 | 100 | 0
9–24 | 100 → 68 | 0 → 32
24–24,5 | 68 → 50 | 32 → 50
24,5–29 | 50 | 50

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Имипенема – 1 (около 8 мин); эпимер I примеси B – около 0,33; эпимер II примеси B – около 0,35; примесь A – около 0,8.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков эпимеров примеси В используется хроматограмма раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками эпимера I и II примеси B должно быть не менее 2,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси A умножают на 2,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика имипенема на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика примеси В не должна превышать 0,3 площади пика имипенема на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,1 площади пика имипенема на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 1,5 площади пика имипенема на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,05 площади пика имипенема на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. От 5,0 % до 8,0 %. (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции. Используйте йодосернистый реагент, содержащий имидазол вместо пиридина и чистый контейнер для каждого определения.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

** Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 10 мг имипенема в 0,5 мл натрия хлорида раствор 0,9 % на мышь, внутривенно со скоростью 0,1 мл/с. Срок наблюдения – 48 ч.

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,17 ЕЭ на 1 мг имипенема (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

** Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси».

Хроматографируют раствор стандартного образца имипенема и испытуемый раствор.

Содержание имипенема в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика имипенема на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика имипенема на хроматограмме раствора стандартного образца имипенема;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца имипенема, мг;
P – содержание имипенема в фармакопейном стандартном образце имипенема,%.
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, при температуре от 2 до 8 °С. Если вещество стерильное, хранить в стерильной, герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0102 Имипрамина гидрохлорид

Имипрамин
Imipramini hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0102.18

##### Определение

3-(10,11-Дигидро-5H-дибензо[b,f]азепин-5-ил)-N,N-диметилпропан-1-амина гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % имипрамина гидрохлорида C19H24N2∙НСl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок без запаха или со слабым запахом.

Растворимость. Легко растворим в воде и спирте 96 %, умеренно растворим в ацетоне.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца имипрамина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. К 5 мг субстанции прибавляют 2 мл азотной кислоты концентрированной; должно появиться интенсивное синее окрашивание.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 170 до 174 °C (ОФС «Температура плавления»).

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 10 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 3,6 до 5,0 (10 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 5,2 г дикалия гидрофосфата в 800 мл воды и доводят значение pH фосфорной кислотой концентрированной до 7,0, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 400:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца имипрамина для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примесь B (3-(5H-дибензо[b,f]азепин-5-ил)-N,N-диметилпропан-1-амин [303-54-8]), растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, кремнийорганический полимер, аморфный, октадецилсилильный с полярными мостиками, эндкепированный, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,5-кратное от времени удерживания основного пика. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Имипрамина гидрохлорид − 1 (около 7 мин); примесь B − около 0,7.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками имипрамина гидрохлорида и примеси B должно быть не менее 5,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси В должна быть не более площади соответствующего пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика имипрамина гидрохлорида на хроматограмме раствора сравнения
  (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 3 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 50 мл спирта 96 %, прибавляют 5,0 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают расход титранта между двумя точками перегиба на кривой титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 31,69 мг имипрамина гидрохлорида C19H24N2∙НСl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0017 Индапамид (Indapamidum)

Взамен ФС.2.1.0017.15

##### Определение

N-[(2RS)-2-Метил-2,3-дигидро-1H-индол-1-ил]-3-сульфамоил-4-хлорбензамид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % индапамида C16H16CIN3O3S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в спирте 96 %, очень мало растворим в хлороформе, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца индапамида.

2. Спектрофотометрия_ (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимум при 242 нм и плечо в интервале от 279 до 287 нм.

##### Испытания

Оптическое вращение. От –0,02° до +0,02° (1 % раствор субстанции в спирте 96 %, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными или хранят при температуре 4оС не более суток и защищают от света.

Раствор динатрия эдетата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,2 г динатрия эдетата, растворяют в воде и доводят объём раствора этим же растворителем до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—ацетонитрил—метанол—раствор натрия эдетата 1:175:175:650.

Растворитель. Ацетонитрил—метанол 50:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 17,5 мл растворителя и доводят объём раствором динатрия эдетата до метки.

Раствор стандартного образца примеси B. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси B, растворяют в 35 мл растворителя и доводят объём раствором динатрия эдетата до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл переносят 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 35 мл растворителя и доводят объём раствором динатрия эдетата до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, прибавляют 17,5 мл растворителя и доводят объём раствора раствором динатрия эдетата до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1 мл полученного раствора, прибавляют 7 мл растворителя и доводят объём раствора раствором динатрия эдетата до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца индапамида и 45 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в 17,5 мл растворителя и доводят объём раствора раствором динатрия эдетата до метки.

Примечание

Примесь А (метилнитрозоиндолин):
(2RS)-2-метил-1-нитрозо-2,3-дигидро-1H-индол [85440-79-5].

Примесь B:
N-(2-метил-1H-индол-1-ил)-3-сульфамоил-4-хлорбензамид [63968-75-2].

Хроматографические условия

Колонка | 200 мм × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | В 2,5 раза больше от времени удерживания основного пика. |

Колонку уравновешивают ПФ до достижения стабильной базовой линии.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси B, раствор стандартного образца индапамида, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Индапамид – 1 (около 11 мин); примесь А – около 1,4; примесь В – около 1,7.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примеси А используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками индапамида и примеси А должно быть не менее 4,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси В не должна превышать площадь пика индапамида на хроматограмме раствора стандартного образца примеси B (не более 0,3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика индапамида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков любых других примесей не должна превышать пятикратную площадь основного пика индапамида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика индапамида на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Метилнитрозоиндолин. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от света.

Буферный раствор рН 2,8. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,5 г триэтиламина, растворяют в 900 мл воды, доводят рН раствора до 2,8 фосфорной кислотой концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—тетрагидрофуран—буферный раствор рН 2,8 70:200:730.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в 1,0 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки. Полученный раствор встряхивают в течение 15 мин, выдерживают в течение 1 ч при температуре 4 °С и фильтруют.

Раствор стандартного образца метилнитрозоиндолина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца метилнитрозоиндолина, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в 1,0 мл раствора стандартного образца метилнитрозоиндолина и доводят объём раствора водой до метки. Полученный раствор встряхивают в течение 15 мин, выдерживают в течение 1 ч при температуре 4 °С и фильтруют.

Примечание

Метилнитрозоиндолин: [(2RS)-2-метил-1-нитрозо-2,3-дигидро-1H-индол [85440-79-5].

Хроматографические условия

Колонка | 150 мм × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Скорость потока | 1,4 мл/мин; |  |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 305 нм; |  |
Объём пробы | 100 мкл. |  |

Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения:

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками метилнитрозоиндолина и индапамида должно быть не менее 6,7;

- отношение сигнал/шум для пика метилнитрозоиндолина должно быть не менее 3.

Допустимое содержание примеси. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси метилнитрозоиндолина не должна превышать разницу площадей пиков метилнитрозоиндолина на хроматограммах раствора сравнения и испытуемого раствора (не более 0,0005 %).

Примесь С. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор динатрия эдетата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,2 г динатрия эдетата, растворяют в воде, прибавляют 1,5 мл уксусной кислоты безводной и доводят объём раствора этим же растворителем до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—раствор динатрия эдетата 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 75 мг субстанции, растворяют в 7,5 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца примеси С индапамида. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 9,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси С индапамида, растворяют в 1 мл воды, прибавляют 6,0 мл ацетонитрила и доводят водой до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 7,5 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси С индапамида, прибавляют 3,0 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси С индапамида и доводят объём раствора испытуемым раствором до метки.

Примечание

Примесь С: (2RS)-2-метил-2,3-дигидро-1H-индол-1-амин [31529-46-1].

Хроматографические условия

Колонка | 50 мм × 2,1 мм, силикагель октадецилсилильный, совместимый с водной подвижной фазой, эндкепированный, для хроматографии, 1,8 мкм; |
Скорость потока | 0,7 мл/мин; |  |
Температура колонки | 50 °С; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 235 нм; |  |
Объём пробы | 2 мкл; |  |
Время хроматографирования | В 3 раза больше от времени удерживания основного пика. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Индапамид – 1 (около 1,3 мин); примесь С – около 0,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примеси С используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора сравнения.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (Rs) между пиками примеси С и пиком индапамида должно быть не менее 4,0;

- отношение сигнал/шум для пика примеси С должно быть не менее 20.

Содержание примеси С в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси С на хроматограмме раствора сравнения;
S0 – площадь пика примеси С на хроматограмме раствора; стандартного образца примеси С индапамида;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца примеси С, мг;
P – содержание примеси С в фармакопейном стандартном образце примеси С,%.
W суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;

Допустимое содержание примеси:

- примесь С – не более 0,06 %.

Вода. Не более 3,0 % (ОФС «Определение воды»). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции и, в качестве растворителя, 10 мл смеси хлороформ—метанол 9:1.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях, описанных в разделе «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца индапамида. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца индапамида, растворяют в 7 мл растворителя и доводят объём раствора раствором динатрия эдетата до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца индапамида и испытуемый раствор.

Время удерживания соединений: Индапамид – около 11 мин.

Содержание индапамида C16H16ClN3O3S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика индапамида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика индапамида на хроматограмме раствора стандартного образца индапамида;
a1 - навеска субстанции, г;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца индапамида, г;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце индапамида,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0598 Индолилметиламиноэтанол (Indolylmethylaminoethanolum)

Вводится впервые

##### Определение

1-(1H-Индол-3-ил)-2-(метиламино)этан-1-ол.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % индолилметиламиноэтанола C11H14N2O.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в спирте 96 %, мало растворим в воде, очень мало растворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области») Инфракрасный спектр испытуемого образца в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца индолилметиламиноэтанола.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 15 мг субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 330 нм должен иметь максимумы при 279±2 нм и 288±2 нм, минимумы при 240±2 нм и 286±2 нм и плечо в интервале от 272 до 277 нм.

3. Качественная реакция. Растворяют 20 мг субстанции в 2 мл спирта 40 %, прибавляют 2 мл пикриновой кислоты насыщенного раствора; должен появиться осадок жёлтого цвета.

##### Испытания

Температура плавления. От 127 до 131 °C (ОФС «Температура плавления»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 10 мл спирта 96 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном B7 или BY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Растворы, содержащие индолилметиламиноэтанол, используют свежеприготовленными.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). В делительную воронку помещают 20 мл хлороформа, 2 мл метанола и 2 мл аммиака раствора концентрированного 25 %. Встряхивают в течение 2 мин и оставляют для разделения слоёв. Отделяют хлороформный слой и используют в качестве ПФ.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 12 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца индолилметиламиноэтанола, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 2,5 мл раствора стандартного образца и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 12 мг стандартного образца 3-метиламиноацетилиндола [15879-28-4], растворяют в этаноле 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 2,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора раствором стандартного образца до метки.

На линию старта пластинки наносят 10 мкл (200 мкг) испытуемого раствора, 20 мкл (1,2 мкг), 10 мкл (0,6 мкг) и 5 мкл (0,3 мкг) раствора сравнения, 10 мкл раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, высушивают до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения, содержащего 0,3 мкг основного вещества, обнаруживается чёткая зона адсорбции.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны наблюдаться 2 разделённые зоны адсорбции.

Зона адсорбции любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора по совокупности величины и интенсивности поглощения не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца индолилметиламиноэтанола.

Суммарное содержание примесей, оцененное по совокупности величины и интенсивности поглощения на хроматограмме испытуемого раствора в сравнении с зоной адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца индолилметиламиноэтанола, содержащего 0,6 мкг индолилметиламиноэтанола, не должно превышать 0,6 %.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриетрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 50 мл спирта 96 %, прибавляют 50 мл воды и титруют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М соответствует 19,03 мг индолилметиламиноэтанола C11H14N2O.

##### Хранение

В защищённом от света месте при температуре не выше 15 °С.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0424 Индометацин (Indometacinum)

Вводится впервые

##### Определение

[2-Метил-5-метокси-1-(4-хлорбензоил)-1H-индол-3-ил]уксусная кислота.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % индометацина C19H16ClNO4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. От белого до жёлтого цвета кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Умеренно растворим в спирте 96 % и хлороформе; практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области», без предварительной перекристаллизации). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца индометацина.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Растворитель. Хлористоводородной кислоты раствор 1 М—метанол 1:9.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 300 до 350 нм должен иметь максимум при 318 нм. Удельный показатель поглощения в максимуме должен быть от 170 до 190.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 10 мл спирта 96 %, при необходимости слегка нагревают. После прибавления к 0,1 мл полученного раствора 2 мл свежеприготовленной смеси гидроксиламина гидрохлорида раствор 25 %—натрия гидроксида раствор 8,5 % 1:3, 2 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % и 1 мл железа(III) хлорида раствора 1,3 % должно появиться фиолетово-розовое окрашивание.

4. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 10 мл спирта 96 %, при необходимости слегка нагревают. К 0,5 мл раствора полученного раствора прибавляют 0,5 мл диметиламинобензальдегида раствора 2 %; должен образоваться осадок, который растворяется при встряхивании. Полученный раствор нагревают на водяной бане до образования голубовато-зелёной окраски, продолжают нагревание в течение 5 мин и охлаждают на ледяной бане в течение 2 мин; должен образоваться осадок и окраска должна измениться на серовато-зелёную. После прибавления 3 мл спирта 96 % раствор становится прозрачным, окраска должна измениться на фиолетово-розовую.

##### Испытания

Температура плавления. От 158 до 162 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Муравьиной кислоты безводной раствор 5 г/л.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Муравьиной кислоты безводной раствор 5 г/л в ацетонитриле.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 50:50.

Растворы готовят непосредственно перед использованием.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в растворителе, при необходимости выдерживают на ультразвуковой бане и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца индометацина смеси примесей, содержит примеси I и J в 1,0 мл растворителя.

Примечание

Примесь I:
этил{[2-метил-5-метокси-1-(4-хлорбензоил)-1H-индол-3-ил]ацетат}
[16401-99-3].

Примесь J:
N′-{[2-метил-5-метокси-1-(4-хлорбензоил)-1H-индол-3-ил]ацетил}-N-(4-метоксифенил)-4-хлорбензогидразид
[402849-25-6].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 2,1 мм, силикагель фенилсилильный с этиленовыми мостиками, гибридный, эндкепированный, для хроматографии, 1,7 мкм; |
Температура колонки | 50 °С; |  |
Скорость потока | 0,3 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 1,4 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0‑5,5 | 60 | 40
5,5‑5,6 | 60 → 30 | 40 → 70
5,6‑9 | 30 | 70

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Индометацин – 1 (около 6 мин); примесь I – около 1,3; примесь J – около 1,4.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примесей I и J должно быть не менее 3,0.

Допустимое содержание примесей. Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- единичная неидентифицированная примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,3 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Количественное определение. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Уксусной кислоты раствор 1 %.

Подвижная фаза Б (ПФБ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 10,0 г уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 50:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе, при необходимости выдерживают на ультразвуковой бане и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца индометацина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца индометацина, растворяют в растворителе, при необходимости выдерживают на ультразвуковой бане и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный с твёрдой сердцевиной, эндкепированный для хроматографии, 2,6 мкм; |
Температура колонки | 50 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 50 | 50
5–5,5 | 50 → 0 | 50 → 100
5,5–8 | 0 | 100

Хроматографируют раствор стандартного образца индометацина и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Индометацин – 1 (около 4 мин).

Содержание индометацина C19H16ClNO4 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика индометацина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика индометацина на хроматограмме раствора стандартного образца индометацина;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца индометацина, мг;
P – содержание индометацина в фармакопейном стандартном образце индомет ацина,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0103 Инозин (Inosinum)

Взамен ФС.2.1.0103.18

##### Определение

9-(β-D-Рибофуранозил)-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он.

Содержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % C10H12N4O5 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно или мало растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца инозина.

2. ВЭЖХ. (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца инозина (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 20 мл воды. К 2 мл полученного раствора прибавляют 5 мл железа (III) хлорида 0,1 % раствора в хлористоводородной кислоте концентрированной и 5 мл орцина раствора 10 % в спирте 96 %. Смесь выдерживают в течение 20 мин в кипящей водяной бане; должно появиться зелёное окрашивание.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

Удельное вращение. От –47 до –54 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

рН раствора. От 4,8 до 5,8 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 2,72 г калия дигидрофосфата в 700 мл воды и доводят значение рН калия гидроксида раствором 10 % до 5,55, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл вносят 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФ до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца инозина, 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси В и 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А (гуанозин): 2-амино-9-(β-D-рибофуранозил)-1,9-дигидро-6H-пурин-6-он [118-00-3].

Примесь В (гипоксантин): 1,7-Дигидро-6Н-пурин-6-он.

Хроматографические условия

Колонка | 300 × 2,9 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 10 мкм; |
Температура колонки | 50 °С; |  |
Скорость потока | 0,6 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания основного пика. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор сравнения, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Инозин – 1 (около 10 мин); примесь В – около 0,5; примесь А – около 1,1.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А и В используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) инозина должен быть не более 1,2;

- относительное стандартное отклонение площади пика инозина должно быть не более 5,0 % (6 введений);

На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками инозина и примеси А должно быть не менее 1,25;

- разрешение (RS) между пиками примеси В и инозина должно быть не менее 1,25.

Содержание примеси А или примеси В в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика примеси А или примеси В на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика примеси А или примеси В на хроматограмме испытуемого раствора;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца примеси А или фармакопейного стандартного образца примеси В, мг;
P - содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце индапамида,%.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- сумма площадей пиков примесей А и В не должна превышать площадь пика инозина на хроматограмме стандартного раствора (не более 2,5 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 0,5 площади пика инозина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Железо. Не более 0,0015 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Железо», в зольном остатке, полученном после сжигания 2,0 г субстанции (ОФС «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 3 мкг/мл).

Медь. В фарфоровом тигле прокаливают 1,5 г субстанции, остаток растворяют в 5 мл азотной кислоты, осторожно разбавляют водой до 15 мл и фильтруют. К 5 мл фильтрата прибавляют 5 мл аммиака раствора 10 % и фильтруют; фильтрат не должен окрашиваться в голубой цвет.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 4 мг субстанции в 0,5 мл N-метилглюкамина раствора 0,8 % на мышь, внутривенно. Срок наблюдения – 48 ч.

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,29 ЕЭ на 1 мг субстанции.

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции 20 мг/мл. Для проведения испытания препарат разводят не менее чем в 60 раз.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца инозина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца инозина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца и раствор сравнения.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца инозина:

- относительное стандартное отклонение площади пика инозина должно быть не более 0,73 % (6 введений);

- фактор ассиметрии пика (As) инозина должен быть не более 1,5.

Содержание инозина C10H12N4O5 в субстанции в процентах (Х) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика инозина на хроматограмме раствора сравнения;
S~0 – площадь пика инозина на хроматограмме раствора стандартного образца инозина;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца инозина, мг;
P – содержание инозина в фармакопейном стандартном образце инозина,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0425 Инозин пранобекс (Inosinum pranobexum)

Вводится впервые

##### Определение

9-(β-D-Рибофуранозил)-1,9-дигидро-6H-пурин-6-она и 4-ацетамидобензоат (2RS)-2-гидрокси-N,N-диметилпропан-1-аминия (1:3).

Cодержит не менее 22,8 % и не более 25,2 % инозина C10H12N4O5 и не менее 72,2 % и не более 79,8 % 4-ацетамидобензоат (2RS)-2-гидрокси-N,N-диметилпропан-1-аминия C14H22N2O4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, очень мало растворим или практически нерастворим в метаноле.

##### Идентификация

1. ВЭЖХ. Время удерживания двух основных пиков на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пиков инозина и 4-ацетамидобензойной кислоты на хроматограмме стандартного раствора (раздел «Количественное определение»).

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,15 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 до 300 нм должен иметь максимум при 261 нм.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 10 г субстанции в 100 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

рН раствора. От 6,0 до 7,0 (10 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 2,65 г дикалия гидрофосфата в 800 мл воды, доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 2,5, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б(ПФБ). Метанол.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 100 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси 1. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси 1, растворяют в 4 мл аммиака раствора 4 % и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца примеси 2. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси 2, растворяют в 10 мл метанола и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца 4-ацетамидобензойной кислоты. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца 4-ацетамидобензойной кислоты, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси 1, 1,0 мл раствора стандартного образца примеси 2 и 1,0 мл раствора стандартного образца 4-ацетамидобензойной кислоты и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 24 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца инозина, растворяют в 50 мл воды, прибавляют 1,0 мл раствора стандартного образца примеси 1, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают на магнитной мешалке в течение 10 мин.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 4,4 мг фармакопейного стандартного образца 4-ацетамидобензойной кислоты, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь 1: 1,7-дигидро-6Н-пурин-6-он [68-94-0].

Примесь 2: 4-аминобензойная кислоты [150-13-0].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению коснованиям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,7 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–4,0 | 83 | 17
4,0–4,1 | 83 → 60 | 17 → 40
4,1–40,0 | 60 | 40
40,0–40,1 | 60 → 83 | 40 → 17
40,1–55,0 | 83 | 17

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Инозин – 1 (около 6 мин); примесь 1 – около 0,9; примесь 2 – около 1,9; 4-ацетамидобензойная кислота – около 3.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примеси 1 и примеси 2 используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика 4-ацетамидобензойной кислоты должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками инозина и гипоксантина должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме стандартного раствора фактор асимметрии пика (AS) примеси 1, 4-ацетамидобензойной кислоты и примеси 2 должен быть не более 1,5;

Содержание примеси 1 в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика гипоксантина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика гипоксантина на хроматограмме стандартного раствора;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца гипоксантина, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание гипоксантина в фармакопейном стандартном образце гипоксантина,%;
0,24 - массовая доля инозина в субстанции.

Содержание примеси 2 в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика 4-аминобензойной кислоты на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика 4-аминобензойной кислоты на хроматограмме стандартного раствора;
a0 - навеска стандартного образца 4-аминобензойной кислоты, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание4-аминобензойной кислоты в стандартном образце4-аминобензойной кислоты,%;
0,48 - массовая доля 4-ацетамидобензойной кислоты в субстанции.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой неидентифицированной примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика 4-ацетамидобензойной кислоты на хроматограмме стандартного раствора;
a0 - навеска стандартного образца 4-ацетамидобензойной кислоты, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание 4-ацетамидобензойной кислоты в стандартном образце 4-ацетамидобензойной кислоты,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь 1 – не более 0,2 %;

- примесь 2 – не более 0,2 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика 4-ацетамидобензойной кислоты на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,025 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %.Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

1. Инозин и 4-ацетамидобензойная кислота. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Смешивают 800 мл воды, 6,8 мл фосфорной кислоты концентрированной и 50 мл метанола. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл, помещают в ледяную баню, доводят значение рН натрия гидроксида раствором 5 М до 7,0 и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём ПФ до метки.

Раствор стандартного образца инозина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 60 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца инозина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца 4-ацетамидобензойной кислоты. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 120 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца 4-ацетамидобензойной кислоты, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца инозина и 5,0 мл раствора стандартного образца 4-ацетамидобензойной кислоты, доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25,0 мл полученного раствора и доводят объём ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 10 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,5-кратное от времени удерживания пика 4-ацетамидобензойной кислоты. |

Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. 4-ацетамидобензойная кислота – около 8 мин; инозин – около 13 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками 4-ацетамидобензойной кислоты и инозина должно быть не менее 3,0;

- фактор асимметрии пика (AS) 4-ацетамидобензойной кислоты и инозина должен быть не более 2,0.

Содержание 4-ацетамидобензойной кислоты C9H9NO3 и инозина C10H12N4O5 в субстанции в пересчёте на безводное и не содержащее остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика инозина или 4-ацетамидобензойной кислоты на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика инозина или 4-ацетамидобензойной кислоты на хроматограмме стандартного раствора;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца инозина или 4-ацетамидобензойной кислоты, мг;
P – содержание инозина в фармакопейном стандартном образце инозина или 4-ацетамидобензойной кислоты в фармакопейном стандартном образце ацетамидобензойной кислоты,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

2. N,N-диметиламино-2-пропанол. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 40 мл воды и титруют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 10,317 мг N,N-диметиламино-2-пропанола C5H13NO.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0604 Йодофеназон (Iodophenazonum)

Взамен ВФС 42-2776-96

##### Определение

4-Йод-1,5-диметил-2-фенил-1,2-дигидро-3H-пиразол-3-он.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % йодофеназона C11H11IN2O в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок без запаха или со слабым характерным запахом.

Растворимость. Легко растворим в хлороформе, умеренно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца йодофеназона.

2. Спектрофотометрия_ (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в 10 мл спирта 96 % и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 320 нм должен иметь максимум при 266 нм.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию В на йодиды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 160 до 165 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1), без предварительного подсушивания).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

0,01 М раствор динатрия гидрофосфата рН 8,0. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,78 г динатрия гидрофосфата безводного, растворяют в 950 мл воды, доводят раствором фосфорной кислотой разведённой 10 % до рН 8,0. Доводят объём раствора водой до метки.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 30:70.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—0,01 М раствор динатрия гидрофосфата рН 8,0 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 40 мл растворителя и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца антипирина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца антипирина, растворяют в 40 мл растворителя и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца йодантипирина и 4 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца антипирина ((феназон): 1,5-диметил-2-фенил-1,2-дигидро-3H-пиразол-3-он [60-80-0]), растворяют в 40 мл растворителя и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Смешивают 1,5 мл испытуемого раствора и 20 мкл раствора стандартного образца антипирина.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 30 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Антипирина – 1 (около 4 мин); йодантипирина – 2,25.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков используют хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками йодантипирина и антипирина должно быть не менее 10,0.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где Sx – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика антипирина на хроматограмме стандартного раствора;
ax – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца антипирина, мг;
Р – содержание антипирина в фармакопейном стандартном образце антипирина,%

Допустимое содержание примесей:

- антипирин – не более 0,15 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,2 %.

Не учитывают пики менее 0,05 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Йод. К 0,5 г субстанции прибавляют 5 мл воды, встряхивают в течение 5 мин и фильтруют. К фильтрату прибавляют 1 мл хлороформа и встряхивают; хлороформный слой не должен окрашиваться в розовый цвет.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 г субстанции, встряхивают в течение 5 мин с 5 мл горячей воды, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 2 мл хлороформа, прибавляют 20 мл пропионового ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до перехода окраски в зеленовато-жёлтую (индикатор – 0,15 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 31,41 мг йодофеназона C11H11IN2O.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0605 Йопромид (Iopromidum)

Вводится впервые

##### Определение

N1,N3-Бис[(2RS)-2,3-дигидроксипропил]-2,4,6-трииод-N1-метил-5-(2-метоксиацетамидо)бензол-1,3-дикарбоксамид.

Содержит не менее 97,0 % и не более 102,5 % йопромида C18H24I3N3O8 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. От белого до светло-жёлтого цвета порошок.

* Смесь диастереоизомеров и атропоизомеров.

Растворимость. Легко растворим в воде и диметилсульфоксиде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца йопромида.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 16,5 г субстанции в 20 мл воды, свободной от диоксида углерода, приготовленный при нагревании на водяной бане при температуре не выше 70 °С, после охлаждения должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном B6, BY6, или Y6, (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН. От 5,2 до 6,5 (раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

1. Примесь А и первичные ароматичные амины. Не более 0,01 %. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Все растворы защищают от действия света, все временные параметры являются критическими для результатов испытания. Испытуемый и контрольный растворы и раствор стандартного образца примеси А йопромида должны обрабатываться параллельно.

Раствор нафтилэтилендиамина дигидрохлорида. Растворяют 10 мг нафтилэтилендиамина дигидрохлорида в смеси 3,0 мл воды и 7,0 мл пропиленгликоля.

Раствор сульфаминовой кислоты. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 80,0 г сульфаминовой кислоты, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 20 мл воды и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси А йопромида. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца примеси А йопромида (5-амино-N1,N3-бис(2,3-дигидроксипропил)-2,4,6-трииод-N1-метилбензол-1,3-дикарбоксамид [154361-51-0]) растворяют в 5,0 мл воды. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и прибавляют 18,0 мл воды.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 20,0 мл воды.

Испытуемый раствор, раствор стандартного образца примеси А йопромида и раствор сравнения охлаждают на ледяной бане в течение 5 мин. К каждому раствору прибавляют 1,0 мл хлористоводородной кислоты 25 % и охлаждают на ледяной бане в течение 5 мин. К растворам прибавляют по 1,0 мл натрия нитрита раствора 2 %, встряхивают, охлаждают на ледяной бане в течение 5 мин, прибавляют 0,5 мл раствора сульфаминовой кислоты и встряхивают в течение 5 мин периодически, открывая колбы для выхода выделяющегося газа. К каждому раствору прибавляют по 1,0 мл раствора нафтилэтилендиамина дигидрохлорида, встряхивают, охлаждают до комнатной температуры, выдерживают в течение 10 мин и доводят объёмы растворов водой до метки. Растворы дегазируют на ультразвуковой бане в течение 1 мин.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора и раствора стандартного образца примеси А йопромида на спектрофотометре при длине волны 495 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения не позднее чем через 5 мин после приготовления.

Испытание действительно, если поглощение раствора стандартного образца примеси А йопромида не менее 0,08.

Поглощение испытуемого раствора не должно превышать поглощение раствора стандартного образца примеси A йопромида.

2. Примесь В. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворитель. Вода—Метанол 50:50.

Подвижная фаза (ПФ). Хлороформ—метанол—вода 6:59:900. К смеси 6 г хлороформа и 59 г метанола прибавляют небольшими порциями 900 мл воды и перемешивают до получения гомогенного раствора (в течение не менее 2 ч).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 40 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 40 мг фармакопейного стандартного образца йопромида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь В:
5-ацетамидо-N1,N3-бис(2,3-дигидроксипропил)-2,4,6-трииод-N1-метилбензол-1,3-дикарбоксамид
[76350-28-2].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 20 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 50 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Изомер Z2 йопромида – 1 (около 34 мин); изомер Y1 примеси В – около 0,28; изомер Y2 примеси В – около 0,31.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков изомеров Y1, Y2 примеси В используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу йопромида.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны быть видны 2 пика изомеров примеси В.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора сумма площадей пиков изомеров Y1 и Y2 примеси В не должна превышать сумму площадей 2 основных пиков на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,5 %).

3. Другие примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Растворитель. Метанол—вода 50:50.

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,70 г железа хлорида гексагидрата, растворяют в хлористоводородной кислоте разведённой 7,3 % и доводят тем же растворителем до метки. Раствор хранят в холодильнике.

Раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,50 г калия феррицианида, растворяют в небольшом количестве воды и доводят тем же растворителем до метки. Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Раствор В. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 г натрия арсенита, растворяют в 30 мл натрия гидроксида растворе 1 М при температуре 0 °С и прибавляют 65 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 %. Раствор хранят в холодильнике.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения В. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения Г. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца йопромида для проверки пригодности хроматографической системы (содержит примеси В и Е) в 50 мкл растворителя.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы, содержащей примеси В, С, D, F. Растворяют содержимое флакона с фармакопейным стандартным образцом йопромида для проверки пригодности хроматографической системы (содержит примеси В, С, D, F) в 50 мкл растворителя.

Реактив для детектирования. Раствор В—раствор Б—раствор А 1:5:5. Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Примечание

Примесь В:
5-ацетамидо-N1,N3-бис(2,3-дигидроксипропил)-2,4,6-трииод-N1-метилбензол-1,3-дикарбоксамид
[76350-28-2].

Примесь С:
5-(2-гидроксиацетамидо)-N1,N3-бис(2,3-дигидроксипропил)-2,4,6-трииод-N1-метилбензол-1,3-дикарбоксамид
[154361-52-1].

Примесь D:
5-[N-(2-гидрокси-3-{3-[(2,3-дигидроксипропил)(метил)карбамоил]-2,4,6-трииод-5-(2-метоксиацетамидо)бензамидо}пропил)-2-метоксиацетамидо]-N1,N3-бис(2,3-дигидроксипропил)-2,4,6-трииод-N1-метилбензол-1,3-дикарбоксамид
[154361-55-4].

Примесь Е:
(2-гидрокси-3-{3-[(2,3-дигидроксипропил)карбамоил]-2,4,6-трииод-N-метил-5-(2-метоксиацетамидо)бензамидо}пропил){3-[(2,3-дигидроксипропил)карбамоил]-2,4,6-трииод-5-(3-метокси-2-оксопропил)бензоат}
[154397-78-1].

Примесь F:
N1-{[2-(гидроксиметил)-2-метил-1,3-диоксолан-4-ил]метил}-N3-(2,3-дигидроксипропил)-2,4,6-трииод-N1-метил-5-(2-метоксиацетамидо)бензол-1,3-дикарбоксамид
[154361-54-3].

Методика 1

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор 13,5 М—вода—диоксан 4:15:85.

На линию старта хроматографической пластинки наносят по 2 мкл испытуемого раствора (200 мкг), раствора сравнения Б (1 мкг), раствора сравнения Г (0,2 мкг) и раствора для проверки пригодности хроматографической системы, (содержащей примеси В и Е). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт подвижной фазы пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 120 °С в течение 30 мин, выдерживают в УФ-свете при длине волны 254 нм в течение 2–5 мин до появления основных зон адсорбции жёлтого цвета, опрыскивают реактивом для детектирования и немедленно просматривают при видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы (содержащей примеси В и Е) должны обнаруживаться 3 раздельные зоны адсорбции в следующей последовательностями по возрастанию Rf: примесь В, йопромид, примесь Е.

Фактор удерживания соединений (Rf). Йопромид – около 0,34; примесь В – около 0,26; примесь Е – около 0,41.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции примеси Е по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать основную зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,5 %).

На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой другой примеси по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать основную зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения Г (не более 0,10 %).

Зону адсорбции примеси В не учитывают.

Методика 2

Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота безводная—вода—метанол—хлороформ 2:6:32:62.

На линию старта хроматографической пластинки наносят по 2 мкл испытуемого раствора (200 мкг), раствора сравнения А (2 мкг), раствора сравнения Б (1 мкг), раствора сравнения В (0,4 мкг), раствора сравнения Г (0,2 мкг) и раствора для проверки пригодности хроматографической системы, содержащей примеси В, С, D, F. Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 120 °С в течение 30 мин и немедленно просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм. Затем пластинку помещают на 30 мин в камеру, насыщенную парами аммиака, сушат в струе воздуха в течение 10 мин, выдерживают в УФ-свете при длине волны 254 нм в течение 2–5 мин до появления основных зон адсорбции жёлтого цвета, опрыскивают реактивом для детектирования и немедленно просматривают при видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы, содержащей примеси В, С, D, F, должны обнаруживаться 5 раздельных зон адсорбции в следующей последовательностями по возрастанию Rf: примесь С, примесь D, примесь В, йопромид, примесь F.

Фактор удерживания соединений (Rf). Йопромид – около 0,43; примесь С – около 0,23; примесь D – около 0,29; примесь В – около 0,36; примесь F – около 0,71.

На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции примеси D по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать основную зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения А (не более 1,0 %).

На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции примеси С по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать основную зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,5 %).

На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции примеси F по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать основную зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения В (не более 0,2 %).

Любая другая зона адсорбции по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать основную зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения Г (не более 0,10 %).

Зону адсорбции примеси В не учитывают.

Изомерный состав. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Количественное определение».

Суммарное содержание изомеров E1 и Z1 йопромида (X1) и изомеров E2 и Z2 йопромида (X2) в субстанции в процентах вычисляют по формулам:

где SE1 – площадь пика изомера E1 йопромида на хроматограмме испытуемого раствора;
SZ1 – площадь пика изомера Z1 йопромида на хроматограмме испытуемого раствора;
SE2 – площадь пика изомера E2 йопромида на хроматограмме испытуемого раствора;
SZ2 – площадь пика изомера Z2 йопромида на хроматограмме испытуемого раствора.

Допустимое содержание изомеров:

- суммарное содержание изомеров E1 и Z1 от 40,0 % до 51,0 %;

- суммарное содержание изомеров E2 и Z2 от 49,0 % до 60,0 %.

Йод. Около 2,0 г субстанции помещают в пробирку с притёртой пробкой, растворяют в 20 мл воды, прибавляют 2 мл серной кислоты разведённой 9,8 %, 2 мл толуола и встряхивают. Слой толуола должен оставаться бесцветным.

Йодиды. Не более 0,0002 %. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Испытуемый раствор. Растворяют 10,0 г (точная навеска) субстанции в 50 мл воды, свободной от диоксида углерода, доводят рН раствора до 3–4, прибавляя 0,15 мл серной кислоты раствора 0,05 М. Полученный раствор титруют потенциометрически 0,001 М раствором серебра нитрата. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»), с использованием серебряного электрода в качестве индикаторного и хлорсеребряного электрода сравнения.

На титрование должно израсходоваться не более 0,15 мл 0,001 М раствора серебра нитрата.

Вода. Не более 1,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 1,0 ЕЭ на 1 г йопромида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Примесь В» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца йопромида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 40 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца йопромида, растворяют в 15 мл растворителя и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для идентификации изомеров. В герметичной ёмкости нагревают 2 мл раствора стандартного образца йопромида при температуре 120 °С в течение 15 мин.

Хроматографируют раствор стандартного образца йопромида, раствор для идентификации изомеров и испытуемый раствор.

Идентификация изомеров. Два основных пика на хроматограмме раствора стандартного образца йопромида принадлежат изомерам Z1 и Z2 йопромида. Два пика, которые на хроматограмме раствора для идентификации пиков имеют больший размер, чем на хроматограмме раствора стандартного образца йопромида, принадлежат изомерам E1 и E2 йопромида.

Относительное время удерживания соединений. Изомер йопромида Z2 (около 34 мин); йопромида изомер E1 – около 0,70; йопромида изомер E2 – около 0,75; йопромида изомер Z1 –около 0,85.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца йопромида разрешение (Rs) между пиками изомеров Z1 и Z2 йопромида на хроматограмме должно быть не менее 2,0.

Содержание йопромида С18Н24I3N3O8 в субстанции в процентах в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – сумма площадей пиков изомеров E1, E2, Z1, и Z2 йопромида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – сумма площадей пиков изомеров E1, E2, Z1, и Z2 йопромида на хроматограмме раствора стандартного образца йопромида;
а1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца йопромида, мг;
P – содержание йопромида в фармакопейном стандартном образце йопромида,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0426 Ипидакрина гидрохлорид моногидрат

Ипидакрин
Ipidacrini hydrochloridum monohydricum

Взамен ФС 42-3224-95

##### Определение

9-Амино-2,3,5,6,7,8-гексагидро-1H-циклопента[b]хинолина гидрохлорида моногидрат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % ипидакрина гидрохлорида C12H16N2∙HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый мелкокристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в метиленхлориде.

* При растворении в воде допускается образование лёгкой опалесценции.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ипидакрина.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл приготовленного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 300 нм должен иметь максимум при 267 нм и минимум при 238 нм.

3. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 5 мл воды, прибавляют 0,5 мл натрия гидроксида раствора 10 % и фильтруют; фильтрат должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»)

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,15 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора» должен выдерживать сравнение с эталоном Y7 или ВY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 5,0 до 7,0 (ОФС «Ионометрия», метод 3). Испытание проводят с раствором, приготовленным в разделе «Прозрачность раствора».

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы должны быть защищены от действия света.

Буферный раствор. Растворяют 1,36 г калия дигидрофосфата в 950 мл воды, и доводят значение рН фосфорной кислотой 2 М до 3,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки. При необходимости, раствор фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 100:900.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ, при необходимости выдерживают на ультразвуковой бане не более 1 мин, охлаждают до температуры 15–25 °С, доводят объём раствора ПФ до метки и перемешивают. Раствор фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм. Раствор хранят не более 53 ч при температуре 20 °С.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. Раствор хранят не более 53 ч при температуре 20 °С.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, предварительно выдержанной при температуре 150 °C в течение 1,5 ч, растворяют в ПФ, при необходимости выдерживая на ультразвуковой бане не более 1 мин, доводят объём раствора ПФ до метки, перемешивают и фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм,силикагель алкиламидный эндкепированный, для хроматографии, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 35 °C; |  |
Температура образцов | 20 °C; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 225 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | Буферный раствор,% | Ацетонитрил,%
--- | --- | ---
0–2 | 100 | 0
2–42 | 100 → 60 | 0 → 40
42–43 | 60→ 100 | 40→ 0
43–53 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Время удерживания соединений. Ипидакрин – около 10 мин.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика ипидакрина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси с относительным временем удерживания 0,63 и примеси с относительным временем удерживания 0,65 должно быть не менее 2,5;

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) ипидакрина должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика ипидакрина должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Содержание любой единичной примеси в субстанции, в процентах (Хi) вычисляют по формуле:

где Si - площадь пика единичной примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика ипидакрина на хроматограмме раствора сравнения;
a1 - навеска субстанции, взятая для приготовления испытуемого раствора, г.

Сумму примесей в процентах (X) определяют суммированием содержания всех единичных примесей.

Допустимое содержание примесей:

- любой единичной – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,2 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. От 6,5 % до 8,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 11,67 ЕЭ на 1 мг ипидакрина гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты безводной, прибавляют 5 мл ртути (II) ацетата раствора 5 % и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически, используя стеклянный индикаторный электрод и хлорсеребряный электрод сравнения (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 22,473 мг ипидакрина гидрохлорида C12H16N2∙HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0606 Ипратропия бромид моногидрат

Ипратропия бромид
Ipratropii bromidum monohydricum

Взамен ФС 42-422-86

##### Определение

(1R,3r,5S,8r)-3-{[(2RS)-3-Гидрокси-2-фенилпропаноил]окси}-8-метил-8-(пропан-2-ил)-8-азабицикло[3.2.1]октан-8-ий бромид моногидрат.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % ипратропия бромида C20H30BrNO3 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в метаноле, растворим в воде, умеренно или мало растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ипратропия бромида моногидрата.

2. Тонкослойная хроматография. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции ипратропия бромида на хроматограмме раствора стандартного образца ипратропия бромида (раздел «Родственные примеси. Примесь А»).

3. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 5 мл воды, прибавляют 2 мл натрия гидроксида раствора 8,5 %; не должен образовываться осадок.

4. Качественная реакция. К 1 мг субстанции прибавляют 0,2 мл азотной кислоты концентрированной и выпаривают досуха на водяной бане. Сухой остаток растворяют в 2 мл ацетона, прибавляют 0,1 мл калия гидроксида раствора в метаноле 3 %; должно появиться фиолетовое окрашивание.

5. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на бромиды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. Около 230 °C (с разложением, ОФС «Температура плавления»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,25 г субстанции в 25 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном GY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 5,0 до 7,5 (1% раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

1. Примесь A. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота безводная—вода—спирт 96 %—метиленхлорид 2:6:36:36.

Испытуемый раствор. Растворяют 20 мг субстанции в 1,0 мл метанола.

Раствор стандартного образца ипратропия бромида. Растворяют 20 мг фармакопейного стандартного образца ипратропия бромида моногидрата в 1,0 мл метанола.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси A (1R,3r,5S,8r)-3-гидрокси-8-метил-8-(пропан-2-ил)-8-азониабицикло[3.2.1]октана бромид [58005-18-8]), растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца метилатропина бромида в 1,0 мл раствора стандартного образца ипратропия бромида.

На линию старта пластинки наносят по 1 мкл испытуемого раствора (20 мкг), раствора стандартного образца ипратропия бромида (20 мкг), раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (20 мкг) и раствора стандартного образца примеси А (0,02 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80—90 % длины пластинки от линии страта, её вынимают из камеры, высушивают при температуре 60 °С в течение 15 мин, опрыскивают калия йодовисмутата раствором, сушат на воздухе, опрыскивают натрия нитрита раствором 5 %, немедленно накрывают стеклянной пластинкой и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 разделённые зоны адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции, находящаяся на уровне зоны адсорбции примеси А, по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции примеси А на хроматограмме раствора стандартного образца примеси А (не более 0,1 %).

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Динатрия гидрофосфата додекагидрата раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 18 г динатрия гидрофосфата додекагидрата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 12,4 г натрия дигидрофосфата дигидрата и 1,7 г тетрапропиламмония хлорида в 870 мл воды, доводят рН раствора динатрия гидрофосфата додекагидрата раствором до 5,5 и прибавляют 130 мл метанола.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,2 г субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца ипратропия бромида. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ипратропия бромида моногидрата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают по 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ипратропия бромида моногидрата и фармакопейного стандартного образца примеси B, растворяют в 1 мл метанола и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь B:
(1R,3r,5S,8s)-3-{[(2RS)-3-гидрокси-2-фенилпропаноил]окси}-8-метил-8-(пропан-2-ил)-8-азониабицикло[3.2.1]октана
бромид [58073-59-9].

Примесь C: (2RS)-3-гидрокси-2-фенилпропановая кислота [552-63-6].

Примесь D: 2-фенилпроп-2-еновая кислота [492-38-6].

Примесь E:
[(1R,3r,5S)-8-(пропан-2-ил)-8-азабицикло[3.2.1]окт-3-ил][(2RS)-3-гидрокси-2-фенилпропаноат]
[22235-81-0].

Примесь F:
(1R,3r,5S,8r)-8-метил-8-(пропан-2-ил)-3-[(2-фенилпроп-2-еноил)окси]-8-азониабицикло[3.2.1]октана
бромид [17812-46-3].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,9 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл; |  |
Время хроматографирования | 6-кратное от времени удерживания пика ипратропия. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца ипратропия бромида и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ипратропий – 1 (около 4,9 мин); примесь C – около 0,7; примесь B – около 1,2; примесь D – около 1,8; примесь E – около 2,3; примесь F – около 5,1.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками ипратропия и примеси B должно быть не менее 3,0;

- фактор асимметрии пика (AS) ипратропия должен быть не более 2,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь C – 0,3; примесь D – 0,2; примесь F – 0,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей B и С не должна превышать площадь пика ипратропия на хроматограмме раствора стандартного образца ипратропия бромида (не более 0,1 %);

- площадь пика примеси D не должна превышать 0,5 площади пика ипратропия на хроматограмме раствора стандартного образца ипратропия бромида (не более 0,05 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика ипратропия на хроматограмме раствора стандартного образца ипратропия бромида (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 2,5 площади пика ипратропия на хроматограмме раствора стандартного образца ипратропия бромида (не более 0,25 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,3 площади основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца ипратропия бромида (менее 0,03 %).

Вода. От 3,9 % до 4,4 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,35 г (точная навеска) субстанции в 50 мл воды, прибавляют 3 мл азотной кислоты разведённой 12,5 % и титруют 0,1 М раствором серебра нитрата. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 41,24 мг ипратропия бромида C20H30BrNO3.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0607 Ирбесартан (Irbesartanum)

Вводится впервые

##### Определение

2-Бутил-3-{[2'-(1H-тетразол-5-ил)[1,1'-бифенил]-4-ил]метил}-1,3-диазаспиро[4.4]нон-1-ен-4-он.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % ирбесартана C25H28N6O в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Умеренно растворим в метаноле, мало растворим в метиленхлориде, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ирбесартана.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец ирбесартана по отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают досуха при 60 °С и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания пика ирбесартана на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика ирбесартана на хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (раздел «Родственные примеси»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл смеси натрия гидроксида раствор 2 М—метанол 1:9 должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном В7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Азид. Не более 0,001 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаз А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,5 г фосфорной кислоты концентрированной, растворяют в воде, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Подвижная фаз Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Фосфорная кислота разведённая 10 %—натрия гидроксида раствор 0,1 М 10:90.

Испытуемый раствор. В центрифужную пробирку вместимостью 10 мл помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 4,5 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М, обрабатывают ультразвуком в течение 10 мин, периодически перемешивая, и охлаждают до комнатной температуры. К полученному раствору прибавляют 0,5 мл фосфорной кислоты разведённой 10 %, интенсивно перемешивают в течение 2 мин, центрифугируют в течение 20 мин со скоростью 10000 об/мин и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Раствор стандартного образца натрия азида. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца натрия азида, растворяют в 150 мл растворителя и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца натрия азида и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Предколонка | 4,0 × 3,0 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 205 нм; |  |
Объём пробы | 100 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–4,5 | 100 | 0
4,5–5 | 100 → 50 | 0 → 50
5–10 | 50 | 50
10–10,5 | 50 → 100 | 50 → 0
10,5–25 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца натрия азида и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Азид – 1 (около 5 мин).

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика азида должно быть не менее 10,0.

Содержание азида в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика азида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика азида на хроматограмме раствора стандартного образца натрия азида;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца натрия азида, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание натрия азида в фармакопейном стандартном образце натрия азида,%;
42,02 - молекулярная масса азида;
65,01 - молекулярная масса натрия азида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 5,5 мл фосфорной кислоты концентрированной в воде, доводят значение рН до 3,2 триэтиламином, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 380:620.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают около 10 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ирбесартана и 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А (1-пропанамидо-N-{[2'-(1H-тетразол-5-ил)[1,1'-бифенил]-4-ил]метил}циклопентан-1-карбоксамид [748812-53-5]), растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 3,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора метанолом до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 30 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ирбесартан – 1 (около 14,4 мин); примесь А – около 0,74.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и ирбесартана должно быть не менее 3,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать 1,5 площади пика ирбесартана на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика ирбесартана на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика ирбесартана на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики со временем удерживания менее 4 мин и пики, площадь которых менее площади пика ирбесартана на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

N-нитрозамины. Определение проводят в соответствии с ОФС «Примеси N-нитрозаминов».

Допустимое содержание примесей:

- N-нитрозодиметиламин (НДМА) – не более 0,320 мкг/г;

- N-нитрозодиэтиламин (НДЭА) – не более 0,088 мкг/г.

Производителям ирбесартана необходимо проводить оценку риска образования N-нитрозаминов и загрязнения ими в процессе производства. При выявлении потенциального риска процесс производства должен быть изменён, чтобы исключить или минимизировать загрязнение.

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 11).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты ледяной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 42,85 мг ирбесартана C25H28N6O.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, при температуре не более 30 °С.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0608 Иринотекана гидрохлорид тригидрат

Иринотекан
Irinotecani hydrochloridum trihydricum

Вводится впервые

##### Определение

[(4S)-4-Гидрокси-3,14-диоксо-4,11-диэтил-3,4,12,14-тетрагидро-1H-пирано[3',4':6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-9-ил]{[1,4'-бипиперидин]-1'-карбоксилата} гидрохлорид (1:1) тригидрат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % иринотекана гидрохлорида C33H38N4O6·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Жёлтый или светло-жёлтый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Мало растворим в воде, спирте 96 % и хлороформе, очень мало растворим в ацетоне.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца иринотекана гидрохлорида тригидрата.

- При различии спектров субстанцию и фармакопейный стандартный образец иринотекана гидрохлорида тригидрата растворяют в метаноле, выпаривают досуха и снимают спектры.

2. ВЭЖХ. Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика иринотекана на хроматограмме раствора стандартного образца иринотекана гидрохлорида (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в 30 мл воды, доводят объём раствора водой до метки.

##### Испытания

Удельное вращение. От +60 до +73 в пересчёте на безводное и свободное от органических растворителей вещество (1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»). В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,2 г субстанции, растворяют в 15 мл воды при нагревании до 80 °С на водяной бане в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Прозрачность раствора. Раствор, полученный в испытании «Удельное вращение», должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Удельное вращение», должен выдерживать сравнение с эталоном GY2 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 3,0 до 5,0 (раствор, полученный в испытании «Удельное вращение», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

1. Энантиомерная чистота (Примесь L). Не более 0,15 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Диэтиламин—этанол—гексан 2:500:500.

Растворитель. Диэтиламин—этанол 1:250.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 15 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца иринотекана для пригодности хроматографической системы, содержащего примесь L, растворяют в 1,0 мл растворителя.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель модифицированный трис(3,5-диметилфенилкарбамоил)целлюлозой для хиральной хроматографии, 10 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 370 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | Не менее чем в 1,5 раза превышает время удерживания пика иринотекана. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Иринотекан – 1 (около 15 мин); примесь L – около 0,7.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика иринотекана должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками иринотекана и примеси L должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) иринотекана должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение (RSD) площади пика иринотекана должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Содержание примеси L в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика примеси L на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика иринотекана на хроматограмме раствора сравнения;
a1 - навеска субстанции, мг.

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от света.

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 2,72 г калия дигидрофосфата в 950 мл воды, доводят значение рН до 3,5 фосфорной кислотой разведённой 10 %, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол—ацетонитрил 400:600.

Растворитель. Ацетонитрил—метанол—ПФА 25:25:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для идентификации пиков. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца иринотекана для идентификации пиков, содержащего примеси С и Е, растворяют в 1,0 мл растворителя.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца иринотекана для пригодности хроматографической системы, содержащего примесь М, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь C: (11-этил иринотекан)
[(4S)-4-гидрокси-3,14-диоксо-4,8,11-триэтил-3,4,12,14-тетрагидро-1H-пирано[3',4':6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-9-ил]{[1,4'-бипиперидин]-1'-карбоксилат}
[947687-02-7].

Примесь E:
(4S)-4,9-дигидрокси-4,11-диэтил-1H-пирано[3',4':6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-3,14(4H,12H)-дион
[86639-52-3].

Примесь L:
[(4R)-4-гидрокси-3,14-диоксо-4,11-диэтил-3,4,12,14-тетрагидро-1H-пирано[3',4':6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-9-ил]{[1,4'-бипиперидин]-1'-карбоксилат.

Примесь M:
[(4S,12RS)-4,12-дигидрокси-3,14-диоксо-4,11-диэтил-3,4,12,14-тетрагидро-1H-пирано[3',4':6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-9-ил]{[1,4'-бипиперидин]-1'-карбоксилат
[185336-12-3].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2 | 80 | 20
2–42 | 80 → 30 | 20 → 70
42–47 | 30 | 70

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор для идентификации пиков, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Иринотекан – 1 (около 17 мин); примесь М – около 0,9; примесь C – около 1,3; примесь E – около 1,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей С и Е используют хроматограмму раствора для идентификации пиков, для идентификации пика примеси М используют хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика иринотекана должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками иринотекана и примеси M должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) иринотекана должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение (RSD) площади пика иринотекана должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Поправочный коэффициент. Для расчёта содержания площадь пика примеси М умножают на 1,3.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика иринотекана на хроматограмме раствора сравнения;
a1 – навеска субстанции, мг;
К – поправочный коэффициент.

Допустимое содержание примесей:

- примеси С, Е, М – не более 0,15 % каждая;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

Вода. От 7,0 % до 9,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,28 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца иринотекана гидрохлорида тригидрата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца иринотекана гидрохлорида тригидрата, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца иринотекана гидрохлорида тригидрата и испытуемый раствор (объём пробы – 5 мкл).

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0105 Итраконазол (Itraconazolum)

Взамен ФС.2.1.0105.18

##### Определение

2-[(2RS)-Бутан-2-ил]-4-{4-[4-(4-{[rel-(2R,4S)-2-(2,4-дихлорфенил)-2-(1H-1,2,4-триазол-1-илметил)-1,3-диоксолан-4-ил]метокси}фенил)пиперазин-1-ил]фенил}-4,5-дигидро-3H-1,2,4-триазол-3-он.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % итраконазола C35H38Cl2N8O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде, очень мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца итраконазола.

##### Испытания

Угол вращения. От –0,1° до +0,1° (10 % раствор субстанции в метиленхлориде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 2 г субстанции в 20 мл метиленхлорида должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном B6 или R6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы готовят непосредственно перед использованием.

Подвижная фаза А (ПФА). Тетрабутиламмония гидросульфата раствор 0,08 М.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 1000 мл, содержащую метанол, помещают 4,0 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора метанолом до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца итраконазола для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси B, C, D, E, F, и G, в 1,0 мл растворителя.

Примечание

Примесь B:
2-[(2RS)-бутан-2-ил]-4-{4-[4-(4-{[rel-(2R,4S)-2-(2,4-дихлорфенил)-2-(4H-1,2,4-триазол-4-илметил)-1,3-диоксолан-4-ил]метокси}фенил)пиперазин-1-ил]фенил}-4,5-дигидро-3H-1,2,4-триазол-3-он
[854372-77-3].

Примесь С:
4-{4-[4-(4-{[rel-(2R,4S)-2-(2,4-дихлорфенил)-2-(1H-1,2,4-триазол-1-илметил)-1,3-диоксолан-4-ил]метокси}фенил)пиперазин-1-ил]фенил}-2-пропил-4,5-дигидро-3H-1,2,4-триазол-3-он
[74855-91-7].

Примесь D:
4-{4-[4-(4-{[rel-(2R,4S)-2-(2,4-дихлорфенил)-2-(1H-1,2,4-триазол-1-илметил)-1,3-диоксолан-4-ил]метокси}фенил)пиперазин-1-ил]фенил}-2-(пропан-2-ил)-4,5-дигидро-3H-1,2,4-триазол-3-он
[89848-49-7].

Примесь Е:
2-[(2RS)-бутан-2-ил]-4-{4-[4-(4-{[rel-(2R,4R)-2-(2,4-дихлорфенил)-2-(1H-1,2,4-триазол-1-илметил)-1,3-диоксолан-4-ил]метокси}фенил)пиперазин-1-ил]фенил}-4,5-дигидро-3H-1,2,4-триазол-3-он
[252964-65-1].

Примесь F:
2-бутил-4-{4-[4-(4-{[rel-(2R,4S)-2-(2,4-дихлорфенил)-2-(1H-1,2,4-триазол-1-илметил)-1,3-диоксолан-4-ил]метокси}фенил)пиперазин-1-ил]фенил}-4,5-дигидро-3H-1,2,4-триазол-3-он [89848-51-1].

Примесь G:
2-{[rel-(2R,4S)-2-(2,4-дихлорфенил)-2-(1H-1,2,4-триазол-1-илметил)-1,3-диоксолан-4-ил]метил}-4-{4-[4-(4-{[rel-(2R,4S)-2-(2,4-дихлорфенил)-2-(1H-1,2,4-триазол-1-илметил)-1,3-диоксолан-4-ил]метокси}фенил)пиперазин-1-ил]фенил}-4,5-дигидро-3H-1,2,4-триазол-3-он.

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 3,0 или 3,5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 225 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2 | 80 | 20
2–22 | 80 → 50 | 20 → 50
22–27 | 50 | 50

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Итраконазол – 1 (около 14 мин); примесь B – около 0,7; примеси С и D – около 0,8; примесь E – около 0,9; примесь F – около 1,05; примесь G – около 1,3.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей B, C, D, E, F, и G используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу итраконазола для проверки пригодности хроматорафической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками итраконазола и примеси F должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей B и G не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика итраконазола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика примеси Е не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика итраконазола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- сумма площадей пиков примесей С и D не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика итраконазола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика итраконазола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать восьмикратную площадь пика итраконазола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,8 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в смеси уксусная кислота безводная—метилэтилкетон 1:7 при тщательном перемешивании в течение 10 мин и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») по второму перегибу на кривой титрования.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 35,3 мг итраконазола C35H38Cl2N8O4.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0609 Ифосфамид (Ifosfamidum)

Вводится впервые

##### Определение

(2RS)-3-(2-Хлорэтил)-2-[(2-хлорэтил)амино]-1,3,2λ5-оксазафосфинан-2-он.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % ифосфамида C7H15Cl2N2O2P в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый мелкокристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Растворим в воде, легко растворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ифосфамида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика ифосфамида на хроматограмме раствора стандартного образца ифосфамида (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Угол вращения. От –0,10° до +0,10° (10 % раствор субстанции, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 10 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен выдерживать сравнение с эталоном 1 (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. Готовят раствор 0,5 г субстанции в 50 мл воды, свободной от углерода диоксида. К 10 мл раствора прибавляют 0,1 мл метилового красного раствор 0,05 %. Для изменения окраски раствора на красную должно потребоваться не более 0,1 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М. К 10 мл раствора прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствор 0,1 %. Для изменения окраски раствора на розовую должно потребоваться не более 0,3 мл натрия гидроксида раствора 0,01 М.

рН раствора. От 4,0 до 7,0 (10 % раствор субстанции в воде, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Примеси Е и F.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Растворитель. Метанол—метиленхлорид 1:1.

Подвижная фаза (ПФ). Метиленхлорид—ацетон 1:10.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,200 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси Е ифосфамида и 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси F ифосфамида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси Е ифосфамида и 10 мг фармакопейного стандартного образца ифосфамида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь Е: 3-хлор-N-(2-хлоэтил)пропан-1-амин [42453-19-0].

Примесь F: (2RS)-2-хлор-3-(2-хлорэтил)-1,3,2λ5-оксазафосфинан-2-он [40722-73-4].

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (100 мкг), стандартного раствора (по 0,25 мкг примеси Е и примеси F) и раствора для проверки пригодности хроматографической системы (по 0,5 мкг примеси E и фармакопейного стандартного образца ифосфамида). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе до удаления следов растворителей и нагревают при температуре 115 °С в течение 45 мин.

Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы чётко видны две зоны адсорбции.

Зона адсорбции каждой из примесей Е и F на хроматограмме испытуемого раствора по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать соответствующую зону адсорбции на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,25 %).

Другие примеси

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Растворитель. Метанол—вода 1:1.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—метанол—уксусная кислота безводная—метиленхлорид 10:15:25:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,00 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А ифосфамида и 25 мг 2-хлорэтиламина гидрохлорида (примесь C в форме гидрохлорида), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси В ифосфамида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 15 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси В ифосфамида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг этаноламина (примесь D), 20 мг фармакопейного стандартного образца примеси А ифосфамида, 80 мг 2-хлорэтиламина гидрохлорида (примесь С в форме гидрохлорида), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А: (3-{[(2-хлорэтил)амино]пропокси})дигидрофосфат [22608-58-8].

Примесь В: 1,3-бис(3-{[(2-хлорэтил)амино]пропокси})дигидродифосфат [241482-18-8].

Примесь С: (2-хлорэтиламин), 2-хлорэтан-1-амин [689-98-5].

Примесь D: (этаноламин), 2-аминоэтан-1-ол [141-43-5].

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (1000 мкг), стандартного раствора (по 2,5 мкг примеси A и примеси C), раствора стандартного образца примеси В ифосфамида (1,5 мкг) и раствора для проверки пригодности хроматографической системы (по 0,5 мкг примеси D, 2 мкг примеси А, 8 мкг примеси С в форме гидрохлорида). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе до удаления следов растворителей и нагревают при температуре 115 °С в течение 45 мин.

На дно другой камеры помещают выпарительную чашу с калия перманганата раствором 0,02 М, добавляют равный объём хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 %, камеру закрывают и оставляют на 10 мин. Горячую пластинку помещают в эту камеру, избегая контакта пластинки с раствором, закрывают камеру и выдерживают в течение 20 мин. Затем пластинку вынимают из камеры и сушат в токе холодного воздуха до удаления избытка хлора (около 20 мин) и пока поверхность пластинки ниже линии старта не будет давать синего окрашивания при нанесении 0,05 мл крахмала раствора с калия йодидом. Опрыскивают пластинку тетраметилбензидина спиртовым раствором 0,1 % в течение 5 с, дают пластинке высохнуть и просматривают.

Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы чётко видны три зоны адсорбции.

Зона адсорбции каждой из примесей A и C на хроматограмме испытуемого раствора по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать соответствующую зону адсорбции на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,25 %).

Зона адсорбции примеси В на хроматограмме испытуемого раствора по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать соответствующую зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца примеси В ифосфамида (не более 0,15 %).

Любая другая зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбцию на хроматограмме раствора стандартного образца примеси В ифосфамида (не более 0,15 %).

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,2 г субстанции в 10 мл воды.

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2). Растворяют 0,5 г субстанции в 10 мл воды.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,0625 ЕЭ на 1 мг ифосфамида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Срок годности растворов 24 ч.

Этилпарагидроксибензоата раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50,0 мг этилпарагидроксибензоата, растворяют в 25 мл спирта 96 %, доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—вода 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 0,15 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 10,0 мл этилпарагидроксибензоата раствора, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 15 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ифосфамида и 1,0 мл этилпарагидроксибензоата раствора, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 195 нм; |  |
Объём пробы | 1 мкл. |  |

Хроматографируют стандартный и испытуемый растворы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками ифосфамида и этилпарагидроксибензоата должно быть не менее 6,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика ифосфамида должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание ифосфамида C7H15Cl2N2O2P в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика ифосфамида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика ифосфамида на хроматограмме стандартного раствора;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца ифосфамида, мг;
W – содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание ифосфамида в фармакопейном стандартном образце ифосфамида,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0599 Каберголин (Cabergolinum)

Вводится впервые

##### Определение

N-[3-(Диметиламино)пропил]-N-(этилкарбамоил)-6-(проп-2-енил)эрголин-8β-карбоксамид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % каберголина C26H37N5O2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 %, очень мало растворим в гексане, практически нерастворим в воде.

* Мало растворим в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца каберголина.

- Если спектры различаются, 50 мг испытуемой субстанции и 50 мг фармакопейного стандартного образца по отдельности растворяют в 1 мл спирта 96 %, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика каберголина на хроматограмме раствора стандартного образца каберголина (раздел «Родственные примеси»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –77 до –83 в пересчёте на безводное вещество (0,2 % раствор субстанции в спирте 96 %, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Буферный раствор. Растворяют 6,8 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 2,0. Раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Триэтиламин—ацетонитрил—буферный раствор 2:160:840.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Суспендируют 50 мг субстанции в 10,0 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М и перемешивают в течение 15 мин. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученной суспензии, прибавляют 1,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и доводят объём раствора ПФ до метки, обрабатывают ультразвуком до растворения и охлаждают до комнатной температуры. В ходе реакции образуется продукт разложения каберголина (примесь А).

Примечание

Примесь А:
(6aR,9R,10aR)-7-(проп-2-енил)-4,6,6a,7,8,9,10,10a-октагидроиндоло[4,3-fg]хинолин-9-карбоновая
кислота [81409-74-7].

Примесь B:
(6aR,9R,10aR)-N9-[3-(диметиламино)пропил]-N4-этил-7-(проп-2-енил)-6a,7,8,9,10,10a-гексагидроиндоло[4,3-fg]хинолин-4,9(6H)-дикарбоксамид
[166533-36-4].

Примесь С:
(6aR,9R,10aR)-N9-[3-(диметиламино)пропил]-N4-этил-N9-(этилкарбомоил)-7-(проп-2-енил)-6a,7,8,9,10,10a- гексагидроиндоло[4,3-fg]хинолин-4,9(6H)-дикарбоксамид
[126554-50-5].

Примесь D:
(6aR,9R,10aR)-N-[3-(диметиламино)пропил]-7-(проп-2-енил)-4,6,6a,7,8,9,10,10a-октагидроиндоло[4,3-fg]хинолин-9-карбоксамид
[85329-86-8].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 10 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 4-кратное от времени удерживания пика каберголина. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Каберголин – 1 (около 12 мин); примесь D – около 0,3; примесь В – около 0,6; примесь А – около 0,8; примесь С – около 2,9.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы: разрешение (RS) между пиками примеси А и каберголина должно быть не менее 3,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площади пиков каждой из примесей A и С не должны превышать 1,5 площадь пика каберголина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика каждой из примесей В и D не должна превышать 0,5 площади пика каберголина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика каберголина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать четырёхкратную площадь пика каберголина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,8 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,25 площади пика каберголина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями:

Раствор стандартного образца каберголина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца каберголина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца каберголина и испытуемый раствор.

Содержание каберголина C26H37N5O2 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика каберголина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика каберголина на хроматограмме раствора стандартного образца каберголина;
a1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца каберголина, мг;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце каберголина,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте, при температуре от 2 °C до 8 °С, в плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0427 Кабозантиниба (S)-малат

Кабозантиниб
Cabozantinibi (S)-malas

Вводится впервые

##### Определение

N-{4-[(6,7-Диметоксихинолин-4-ил)окси]фенил}-Nʹ-(4-фторфенил)циклопропан-1,1-дикарбоксамид—(2S)-2-гидроксибутандиовая кислота (1:1).

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % кабозантиниба (S)-малата C28H24FN3O5·C4H6O5 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Кабозантиниба (S)-малат и его примеси являются высокотоксичными веществами. Необходимо принять меры для исключения возможности их вдыхания или контакта с кожей и слизистыми оболочками.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Растворим в диметилсульфоксиде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца кабозантиниба (S)-малата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика кабозантиниба на хроматограмме раствора стандартного образца кабозантиниба (S)-малата (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Родственные примеси

Растворы, содержащие кабозантиниба (S)-малата и его примеси, хранят в защищённом от света месте при температуре 5 °С.

Сумма примесей 2 и 3 – не более 0,0013 %.

1. Примеси 1 и 2. Примесь 1 – не более 0,0019 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 1,54 г ацетата аммония в 900 мл воды, прибавляют 50 мл ацетонитрила и доводят значение рН аммиака раствором концентрированным 25 % до 8,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Метанол—диметилсульфоксид 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 15 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси 1 и 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси 2 растворяют в 20 мл растворителя и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочный раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочный раствор В. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 3,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочный раствор Г. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочный раствор Д. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10,0 мл калибровочного раствора Г и доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочный раствор Е. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4,0 мл калибровочного раствора Д и доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочный раствор Ж. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл калибровочного раствора Д и доводят объём раствора растворителем до метки

Примечание

Примесь 1: 6,7-диметоксихинолин-4-ол [127285-54-5].

Примесь 2: 4-[(6,7-диметоксихинолин-4-ил)окси]анилин [190728-25-7].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 3 мкм, размер пор 110 нм, содержание углерода 14 %; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Температура образца | 5 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | масс-спектрометрический; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Тип ионизации | электроспрей (ESI); |  |
Режим электрораспыления | положительный (ESI+); |  |
Рабочий режим | мониторинг множественных реакций (MRM); |  |
Напряжение на капилляре | +3,5 кВ; |  |
Напряжение на конусе | 80 В; |  |
Температура источников ионов | 120 °С; |  |
Температура испарения | 450 °С; |  |
Расход газа-распылителя | 575 л/ч; |  |
Расход газа в конусе | 70 л/ч; |  |
Деление потока | 0,2 мл/мин. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 97 → 30 | 3 → 70
5–5,5 | 30 → 0 | 70 → 100
5,5–6,5 | 0 | 100
6,5–7 | 0 → 97 | 100 → 3
7–10 | 97 | 3

Переходы сканирования масс и энергии столкновений

Компонент | Время удерживания | Переходы сканирования масс, Да | Энергия столкновений, эВ
--- | --- | --- | ---
Примесь 1 | около 3,0 мин | 206,00 → 190,00 | 28
Примесь 2 | около 4,9 мин | 297,00 → 281,00 | 28

Хроматографируют калибровочные растворы А – Ж и испытуемый раствор.

Строят калибровочный график зависимости площадей пиков Si примесей 1 и 2 от концентрации примесей 1 и 2. Определяют параметры линейной регрессии.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме калибровочного раствора с концентрацией примеси 1 0,0075 мкг/мл и примеси 2 0,005 мкг/мл отношение сигнал/шум (S/N) для пиков примесей 1 и 2 должно быть не менее 10.

На хроматограмме калибровочного раствора с концентрацией примеси 1 0,1125 мкг/мл и примеси 2 0,075 мкг/мл относительное стандартное отклонение площади пиков примесей 1 и 2 должно быть не более 10,0 % (6 введений).

С помощью уравнения линейной регрессии находят концентрацию примесей 1 и 2 в испытуемом растворе (мкг/мл).

Содержание примесей 1 и 2 в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где C – концентрация примесей 1 и 2 в испытуемом растворе, определённая по калибровочному графику, мкг/мл;
a1 – навеска субстанции, мг;
P – содержание основного вещества в примесях 1 и 2 соответственно, %.

2. Примесь 3. Не более – 0,0013 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 1,54 г ацетата аммония в 900 мл воды, прибавляют 50 мл ацетонитрила и доводят значение рН аммиака раствором концентрированным 25 % до 8,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Метанол—диметилсульфоксид 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 125 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. Раствор запрещается обрабатывать ультразвуком!

Раствор примеси 3. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) 4-фторанилина (примесь 3 [371-40-4]), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочные растворы. В три мерные колбы вместимостью 20 мл помещают раствор примеси 3 6,0 мл, 4,0 мл и 2,0 мл соответственно и доводят объём каждого раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 3 мкм, размер пор 110 нм, содержание углерода 14 %; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Температура образца | 5 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический (диодно-матричный), 240 нм; |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–8 | 95 → 55 | 5 → 45
8–15 | 55 → 45 | 45 → 55
15–20 | 45 → 0 | 55 → 100
20–21 | 0 | 100
21–23 | 0 → 95 | 100 → 5
23–28 | 95 | 5

Хроматографируют калибровочные растворы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Кабозантиниб – 1 (около 12 мин); примесь 3 – около 0,46.

Строят калибровочный график зависимости площади пика Si примеси 3 от концентрации примеси 3. Определяют параметры линейной регрессии.

Пригодность хроматографической системы. Относительное стандартное отклонение площади пика примеси 3 при концентрации 125 мкг/мл должно быть не более 20 % (6 введений).

С помощью уравнения линейной регрессии находят концентрацию примеси 3 в испытуемом растворе (мкг/мл).

Содержание примеси 3 в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где C – концентрация примеси 3 в испытуемом растворе, определённая по калибровочному графику, мкг/мл;
a1 – навеска субстанции, мг;
P – содержание основного вещества в примеси 3,%.

3. Примесь 4. Не более – 0,0014 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Фосфорная кислота концентрированная—ацетонитрил—вода 3:300:700.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Фосфорная кислота концентрированная—ацетонитрил 20:1000.

Растворитель. Растворяют 100 мг аскорбиновой кислоты в 500 мл воды, прибавляют 1 мл трифторуксусной кислоты и 500 мл ацетонитрила.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 45 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор примеси 4. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг (точная навеска) 4-аминофенола (примесь 4 [123-30-8]), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 9,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу 200 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Калибровочные растворы. В три мерные колбы вместимостью 20 мл помещают раствор примеси 4 5,0 мл, 10,0 мл и 15,0 мл соответственно и доводят объём каждого раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, сорбент комбинированный для ВЭЖХ; 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Температура образца | 5 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический (диодно-матричный), 192 нм; |
Объём пробы | 100 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–6,5 | 100 | 0
6,5–6,6 | 100 → 5 | 0 → 95
6,6–25 | 5 | 95
25–25,1 | 5 → 100 | 95 → 0
25,1–33 | 100 | 0

Хроматографируют калибровочные растворы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Кабозантиниб – 1 (около 10 мин); примесь 4 – около 0,53.

Строят калибровочный график зависимости площади пика Si примеси 4 от концентрации примеси 4. Определяют параметры линейной регрессии.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме калибровочного раствора с концентрацией 0,0225 мкг/мл:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси 4 должно быть не менее 10;

- относительное стандартное отклонение площади пика примеси 4 должно быть не более 10,0 % (6 введений).

С помощью уравнения линейной регрессии находят концентрацию примеси 4 в испытуемом растворе (мкг/мл).

Содержание примеси 4 в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где C – концентрация примеси 4 в испытуемом растворе, определённая по калибровочному графику, мкг/мл;
a1 – навеска субстанции, мг;
P – содержание основного вещества в примеси 4,%.

4. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях определения «Родственные примеси. Примесь 2» со следующими изменениями.

Растворитель. Вода—метанол—диметилсульфоксид 100:400:500.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 60 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком до растворения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца кабозантиниба (S)-малата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца кабозантиниба (S)-малата, прибавляют 60 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком до растворения и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мл раствора стандартного образца кабозантиниба (S)-малата и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу 10 мл переносят 1,0 мл полученного раствора и доводят объём растворителем до метки.

Примечание

Примесь 5:
N-{4-[(6,7-диметоксихинолин-4-ил)окси]фенил}-Nʹ-(2-фторфенил)циклопропан-1,1-дикарбоксамид.

Примесь 6:
1-N,1-Nʹ-бис{4-[(6,7-диметоксихинолин-4-ил)окси]фенил}циклопропан-1,1-дикарбоксамид [2439164-91-5].

Хроматографические условия

Температура образца | 25 °С;
Объём пробы | 5 мкл.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы и испытуемый раствор А.

Относительное время удерживания соединений. Кабозантиниб – 1 (около 12 мин); примесь 6 – около 0,97; примесь 5 – около 1,03.

** Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика кабозантиниба должно быть не менее 10.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь 5–1,27; примесь 6–1,45.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- примесь 6 – не более 0,3 %;

- любая другая примесь – не более 0,15 %;

- сумма примесей – не более 1,0%.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 0,18 г (точная навеска) субстанции, в качестве растворителя, 3 мл диметилацетамида.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца кабозантиниба (S)-малата и испытуемый раствор Б.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца кабозантиниба (S)-малата:

- фактор асимметрии пика (AS) кабозантиниба должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика кабозантиниба должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание кабозантиниба (S)-малата C28H24FN3O5·C4H6O5 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика кабозантиниба (S)-малата на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика кабозантиниба (S)-малата на хроматограмме раствора стандартного образца кабозантиниба (S)-малата;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца кабозантиниба (S)-малата, мг;
P – содержание кабозантиниба (S)-малата в стандартном образце кабозантиниба (S)-малата,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации

** Перед проведением испытания должна быть проверена разделительная способность хроматографической системы.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0428 Кавутилида гидрохлорид

Кавутилид
Cavutilidum hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

rac-4-Нитро-N-[(1R)-1-(4-фторфенил)-2-(1-этилпиперидин-4-ил)этил]бензамида гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,5 % кавутилида гидрохлорида C22H26FN3O3·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с зеленовато-желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в метаноле, умеренно растворим в воде и спирте 96 %, практически нерастворим в ацетоне.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца кавутилида гидрохлорида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 30 мл воды и 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М, встряхивают до растворения и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1 мл полученного раствора, прибавляют 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и доводят объём раствора водой до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 210 до 350 нм должен иметь максимум при 270 нм, минимум при 228 нм и плечо в интервале от 264 до 267 нм. В качестве раствора сравнения используют хлористоводородной кислоты раствор 0,01 М.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 10 мг субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном B8 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 5,5 до 7,2 (0,1 % раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 %—спирт 96 %—бензол 1:20:40.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор 4-нитробензойной кислоты. Растворяют 50 мг (точная навеска) 4-нитробензойной кислоты в 5 мл метанола. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор стандартного образца кавутилида гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца кавутилида гидрохлорида, растворяют в 5 мл метанола и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 3 мл раствора стандартного образца кавутилида гидрохлорида и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 6,67 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мл раствора сравнения Б и доводят объём раствора метанолом до метки.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (100 мкг), раствора сравнения А (1,5 мкг), раствора сравнения Б (1 мкг), раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (0,5 мкг) и в одну точку – 5 мкл раствора 4-нитробензойной кислоты и 5 мкл раствора стандартного образца кавутилида гидрохлорида. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат в токе тёплого воздуха или выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С в течение 10 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

На хроматограмме, полученной при нанесении в одну точку раствора стандартного образца кавутилида гидрохлорида и раствора 4-нитробензойной кислоты:

- должны обнаруживаться 2 разделённые зоны адсорбции, одна из которых находится на уровне зоны адсорбции кавутилида гидрохлорида на хроматограмме раствора сравнения А, а другая – на уровне зоны адсорбции раствора 4-нитробензойной кислоты на хроматограмме раствора 4-нитробензойной кислоты;

- коэффициент селективности (К) должен быть от 3,8 до 5,2.

Величину К вычисляют по формуле:

где a1 - расстояние от линии старта до центра зоны адсорбции кавутилида гидрохлорида, мм;
а2 - расстояние от линии старта до центра зоны адсорбции 4-нитробензойной кислоты, мм.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- зона адсорбции, находящаяся на уровне зоны адсорбции 4-нитробензойной кислоты, по совокупности величины и степени подавления флуоресценции не должна превышать зону адсорбции 4-нитробензойной кислоты на хроматограмме, полученной при нанесении в одну точку раствора стандартного образца кавутилида гидрохлорида и раствора 4-нитробензойной кислоты (не более 0,5 %);

- зона адсорбции любой другой примеси по совокупности величины и степени подавления флуоресценции не должна превышать зону адсорбции кавутилида гидрохлорида на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 1,0 %).

Сумма примесей – не более 1,5 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 166 ЕЭ на 1 мг кавутилида гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции в воде с концентрацией кавутилида гидрохлорида 1 мг/мл, а затем разводят его не менее чем в 10 раз водой для БЭТ.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 20 мл уксусной кислоты ледяной, прибавляют 10 мл ртути(II) ацетата раствора 5 % и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до перехода окраски из фиолетовой в зелёную (индикатор – 0,1 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 43,59 мг кавутилида гидрохлорида.

##### Хранение

Не требует особых условий.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0610 Кальция глицерофосфат (Calcii glycerophosphas)

Вводится впервые

##### Определение

Смесь, в различных пропорциях, кальция (RS)-2,3-дигидроксипропилфосфата и кальция 2-гидрокси-1-(гидроксиметил)этилфосфата, может быть гидратирована.

Содержит не менее 18,6 % и не более 19,4 % кальция в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в хлористоводородной кислоте разведённой 10 %, очень мало растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерные реакции А и Б на кальций (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

2. Качественная реакция. Нагревают 0,1 г субстанции в тигле до обугливания. Остаток растворяют в 5 мл азотной кислоты концентрированной, нагревают на водяной бане в течение 1 мин и фильтруют. Полученный фильтрат должен давать характерную реакцию А на фосфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

3. Качественная реакция. Смешивают 1,0 г субстанции и 1,0 г калия гидросульфата, затем нагревают в тигле, в образующийся белый пар вносят фильтровальной бумагу пропитанную свежеприготовленным раствором натрия нитропруссида раствором 1 %; должно наблюдаться синее окрашивание фильтровальной бумаги.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Опалесценция раствора 0,15 г субстанции растворяют в 15,0 мл воды не должна превышать раствор сравнения III (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Кислотность или щёлочность. Около 1,0 г субстанции растворяют в 100 мл воды. К полученному раствору прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствора 1 %. При прибавлении не более 0,5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М окраска раствора должна измениться с розовой до бесцветной.

Потеря в массе при высушивании. Не более 12 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании»). Высушивают 1,0 г (точная навеска) субстанции при температуре 150 °С до постоянной массы в течение 4 ч.

Вещества, растворимые в глицерине и спирте 96 %. Не более 0,5 %. Около 1,0 г субстанции встряхивают в 25 мл спирта в течение 1 мин, фильтруют и полученный фильтрат упаривают досуха на водяной бане. Сухой остаток высушивают до постоянной массы при температуре 70 °С в течение 1 ч. Масса остатка не должна превышать 5 мг.

Альдегиды и другие восстанавливающие вещества. Растворяют 1,0 г субстанции в 10 мл уксусной кислоты разведённой 12 %. К полученному раствору прибавляют 0,1 мл калия перманганата раствора 0,1 М; раствор не должен обесцвечиваться в течение 5 мин.

Другие соли кальция. Не более 0,03 % (ОФС «Кальций», метод 1). Взбалтывают 1,0 г субстанции с 10 мл спирта в течение 3 мин, фильтруют через бумажный фильтр и промывают осадок 2 раза по 1 мл того же растворителя. Фильтрат выпаривают досуха на водяной бане, остаток растворяют в 10 мл воды.

Железо. Не более 0,005 % (ОФС «Железо», метод 2). Растворяют 0,2 г субстанции в 10 мл воды.

Мышьяк. Не более 0,0003 % (ОФС «Мышьяк», метод 1). В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают около 0,33 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Лимонная кислота. Около 5,0 г субстанции смешивают с 20 мл воды, свободной от углерода диоксида и фильтруют. К полученному фильтрату прибавляют 0,15 мл серной кислоты концентрированной и фильтруют. К полученному фильтрату прибавляют 5 мл ртути сульфата раствора и нагревают до кипения. К полученному раствору прибавляют 0,5 мл калия перманганата раствора 0,2 М и нагревают до кипения; не должно наблюдаться образование осадка.

Сульфаты. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Растворяют 0,15 г субстанции в 15,0 мл воды при комнатной температуре.

Фосфаты. Не более 0,04 % (ОФС «Фосфаты»). Растворяют 0,15 г субстанции в 15 мл воды при комнатной температуре. 2,5 мл полученного раствора разводят водой до 100,0 мл.

Хлориды. Не более 0,05 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,1 г субстанции в 2 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и 8 мл воды и доводят водой до 15,0 мл.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 300 мл воды, прибавляют 6 мл 10 М раствора натрия гидроксида и 15 мг хальконкарбоновой кислоты. Титруют 0,1 М раствором натрия эдетата до появления стойкого синего окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл натрия эдетата раствора 0,1 М соответствует 4.008 мг кальция.

##### Хранение

В сухом месте.

* Приводится для информации

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0019 Кальция глюконат (Calcii gluconas)

Взамен ФС.2.1.0019.15

##### Определение

Кальция бис[( 2R, 3S , 4R , 5R )-2,3,4,5,6-пентагидроксигексаноат] моногидрат (моногидрат ди(D-глюконата) кальция).

Cодержит не менее 98,5 % и не более 102,0 % кальция глюконата С12Н22CaO14∙H2O для субстанции, предназначенной для производства нестерильных лекарственных препаратов.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % кальция глюконата С12Н22CaO14∙H2O для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый зернистый или кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в кипящей воде, умеренно (медленно) растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца кальция глюконата.

2. Качественная реакция. 1 г субстанции растворяют в 50 мл воды, прибавляют 0,3 мл железа(III) хлорида раствора 3 %; должно появиться светло-зелёное окрашивание.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерные реакции на кальций (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Растворяют 1 г субстанции в 50 мл воды при температуре 60 °С, охлаждают. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», не должна превышать интенсивности наиболее близко подходящего по цвету эталона сравнения Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

В случае, если субстанция предназначена для приготовления лекарственных форм для парентерального применения, окраска полученного раствора не должна превышать эталон В7.

* рН. От 6,4 до 8,3 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Посторонние органические примеси и борная кислота. Смешивают 0,5 г субстанции и 2 мл охлажденной серной кислоты концентрированной в фарфоровой чашке, которую предварительно ополаскивают тем же растворителем и помещают на лёд. Не должно быть жёлтого или коричневого окрашивания раствора. Прибавляют 1 мл хромотропа II В раствора 0,005 % и перемешивают. Должно появиться фиолетовое окрашивание, которое не переходит со временем в тёмно-синее. Окраска полученного раствора не должна превышать окраску смеси 1 мл хромотропа II В раствора 0,005 % и 2 мл охлаждённой серной кислоты концентрированной.

* Оксалаты. Не более 0,01 %. Определение проводят методом ионообменной ВЭЖХ (ОФС «Ионообменная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,212 г натрия карбоната безводного и 63 мг натрия гидрокарбоната, растворяют в воде для хроматографии и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Регенерирующий раствор. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 200 мл воды для хроматографии, прибавляют 1,23 г серной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 1000 мл.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде для хроматографии и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор натрия оксалата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 15,2 мг натрия оксалата, растворяют в воде для хроматографии и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде для хроматографии, прибавляют 0,5 мл раствора натрия оксалата и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Предколонка | 30 × 4 мм, сильная анионообменная смола, 30−50 мкм; |
Колонки 1 и 2 | 250 × 4,0 мм, сильная анионообменная смола, 30−50 мкм; |
Анионоподавительная колонка | соединена последовательно с предколонкой и аналитическими колонками и снабжена микромембраной, отделяющей подвижную фазу от регенерирующего раствора, текущего в противоположном направлении; |
Скорость потока | 2 мл/мин; |  |
Скорость потока регенерирующего раствора | 4 мл/мин; |  |
Детектор | кондуктометрический; |  |
Объём пробы | 50 мкл. |  |

Хроматографируют испытуемый раствор и раствор сравнения.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения:

- разрешение (RS) между пиками сульфата и оксалата должно быть не менее 4,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика оксалата должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание оксалатов в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика оксалата на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика оксалата на хроматограмме раствора сравнения.

Декстрин, сахароза. 0,5 г субстанции растворяют при нагревании в смеси 2 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и 10 мл воды. К охлаждённому раствору постепенно прибавляют 8 мл натрия карбоната раствора 10,6 % и через 5 мин фильтруют. К 5 мл фильтрата прибавляют 1 мл медно-тартратного реактива и кипятят на водяной бане; не должен образовываться красный осадок.

Хлориды. Не более 0,02 % (для субстанции, предназначенной для производства нестерильных лекарственных препаратов, ОФС «Хлориды»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,5 г субстанции, растворяют в 40 мл воды, нагревая при необходимости на водяной бане до 60 °С, охлаждают, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Не более 0,005 % (ОФС «Хлориды», для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 4,0 г субстанции, растворяют в 90 мл воды, нагревая при необходимости на водяной бане, охлаждают, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

* Фосфаты. Не более 0,01 % (ОФС «Фосфаты», метод 1). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 г субстанции, растворяют в 90 мл воды, нагревая при необходимости на водяной бане*, охлаждают, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл фильтрата, доводят объём раствора водой до метки.

* Сульфаты. Не более 0,005 % (ОФС «Сульфаты», метод 2).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 г субстанции, растворяют в 90 мл воды, нагревая при необходимости на водяной бане, охлаждают, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Эталонный раствор. 7,5 мл сульфата стандартного раствора 10 мкг/мл смешивают с 7,5 мл воды.

* Железо. Не более 0,0005 %. Определение проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 1).

Испытуемый раствор. Помещают 2,0 г субстанции в стакан из кварцевого стекла вместимостью 100 мл и прибавляют 5 мл азотной кислоты концентрированной. Кипятят, упаривая почти досуха. Прибавляют 1 мл водорода пероксида 30 % и снова упаривают почти досуха. Повторяют обработку водорода пероксидом 30 % до тех пор, пока не получится прозрачный раствор. При помощи 2 мл азотной кислоты концентрированной переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объём раствора хлористоводородной кислотой разведённой 7,3 % до метки и перемешивают.

Контрольный раствор готовят таким же образом, используя вместо субстанции 0,65 г кальция хлорида безводного, предварительно проверенного на содержание железа (не более 0,0005 %).

Калибровочные растворы железа. Калибровочные растворы с концентрациями ионов железа 0,4 мкг/мл, 1,0 мкг/мл, 2,0 мкг/мл готовят соответствующими разведениями стандартного раствора 20 мкг/мл железо(III)-иона хлористоводородной кислотой разведённой 7,3 %.

Условия испытания

Источник излучения | лампа для определения железа с полым катодом;
Длина волны | 248,3 нм;
Атомизация | воздушно—ацетиленовое пламя.

Проводят основную коррекцию, используя дейтериевую лампу.

Определяют значения атомной абсорбции испытуемого раствора и калибровочных растворов. По калибровочной кривой рассчитывают концентрацию железа в субстанции.

Магний и щелочные металлы. Не более 0,4 %. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1 г субстанции, растворяют в 100 мл кипящей воды, прибавляют 10 мл аммония хлорида раствора 10,7 %, 1 мл аммиака раствора и по каплям 50 мл нагретого до 60 °С аммония оксалата раствора 4 % и выдерживают в течение 4 ч. Объём полученного раствора доводят водой до метки и фильтруют. 100 мл фильтрата выпаривают досуха и прокаливают сухой остаток при 500 °С. После прокаливания масса остатка не должна превышать 2 мг.

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Мышьяк. Не более 0,0002 % (ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения используют 0,25 г субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (для субстанции, предназначенной для производства нестерильных лекарственных препаратов), не более 0,001 % (для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения) (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 4). Растворяют 0,5 г субстанции при нагревании в смеси 2 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и 8 мл воды, охлаждают до комнатной температуры.

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,17 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,35 г (точная навеска) субстанции при нагревании в 20 мл воды. После охлаждения прибавляют 10 мл аммиачного буферного раствора, разбавляют водой до 300 мл и титруют натрия эдетата раствором 0,1 М до перехода окраски в сине-фиолетовый цвет (индикатор − 0,5 мл хромового тёмно-синего раствора).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия эдетата соответствует 44,84 мг кальция глюконата С12Н22CaO14.H2O.

##### Хранение

Хранение. В плотно укупоренной упаковке.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0611 Камфора рацемическая

Камфора
Camphora racemica

Взамен ФС 42-2315-99

##### Определение

rac-(1R,4R)-1,7,7-Триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-он.

Cодержит не менее 96,0 % камфоры C10H16O.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или рыхлая кристаллическая масса с характерным запахом.

* Легколетучая даже при комнатной температуре.

Растворимость. Легко растворима в спирте 96 % и петролейном эфире, мало растворима в воде, очень мало растворима в глицерине.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в вазелиновом масле, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца камфоры рацемической.

2. ГХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика камфоры на хроматограмме стандартного раствора (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Около 1,0 г субстанции растворяют в 30 мл метанола, прибавляют 1,0 г гидроксиламина гидрохлорида и 1,0 г натрия ацетата безводного. Кипятят с обратным холодильником в течение 2 ч, охлаждают до комнатной температуры и прибавляют 100 мл воды; должен образоваться осадок, который отфильтровывают, промывают 10 мл воды и перекристаллизовывают из 10 мл смеси спирт 96 %—вода 4:6, высушивают под вакуумом и определяют температуру плавления. Температура плавления должна быть от 118 до 121 °С (ОФС «Температура плавления»).

##### Испытания

Температура плавления. От 172 до 180 °C (без предварительного высушивания, ОФС «Температура плавления», метод 1).

Угол вращения. От –0,15°до +0,15° (10 % раствор субстанции в спирте 96 % при длине кюветы 20 см, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 25 мл спирта 96 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. Раствор 1,0 г субстанции в 10 мл нейтрализованного по фенолфталеину спирта 96 % должен окрашиваться в розовый цвет при прибавлении не более 0,2 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50,0 мг субстанции, растворяют в гексане и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора гексаном до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции и 50 мг борнилацетата, растворяют в гексане и доводят объём раствора гексаном до метки

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора гексаном до метки.

Хроматографические условия

Колонка | капиллярная 30 м × 0,25 мм, покрытая слоем 100 % полиэтиленгликоля, 0,5 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | Азот для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:15; |  |
Скорость потока | 45 см/с; |  |
Температура | Инжектор | 220 °С; |
| Колонка | 80 °С в течение 5 мин, подъём 5 °С/мин до 100 °С, подъём 10 °С/мин до 200 °С, выдержка 3 мин; |
| Детектор | 250 °С; |
Объём пробы | 1 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика камфоры. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Порядок выхода пиков: гексан, камфора, борнилацетат.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика камфоры должно быть не менее 5.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками камфоры и борнилацетата должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) камфоры должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика камфоры должно быть не более 15 % (6 введений).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика камфоры на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика камфоры на хроматограмме раствора сравнения (не более 4,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика камфоры на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,5 %).

Нелетучий остаток. Не более 0,05 %. Выпаривают 2 г (точная навеска) субстанции на водяной бане и сушат при температуре от 100 до 105 °С до постоянной массы. Масса остатка должна составлять не более 1 мг.

Вода. Растворяют 1,0 г субстанции в 10 мл петролейного эфира. Полученный раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). В коническую колбу со шлифом вместимостью 100 мл помещают около 1,0 г субстанции, прибавляют 10 мл спирта 96 %, 2 мл натрия гидроксида раствора 10 % и нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 15 мин. Содержимое колбы упаривают на водяной бане досуха, смешивают сухой остаток с 5 мл воды и фильтруют в мерную колбу вместимостью 10 мл через фильтр беззольный, смоченный предварительно водой. Колбу и фильтр промывают 3 мл воды, объединяя фильтраты. Объём раствора в мерной колбе доводят водой до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мл полученного раствора, прибавляют при перемешивании 10 мл азотной кислоты разведённой 16 % и доводят объём раствора водой до метки.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 г борнилацетата, растворяют в гексане, доводят объём раствора гексаном до метки и перемешивают.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 15 мл гексана, прибавляют 5,0 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объём раствора гексаном до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 80 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца камфоры рацемической, растворяют в 5 мл гексана, прибавляют 2,0 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объём раствора гексаном до метки.

Хроматографические условия

Колонка | капиллярная 30 м × 0,25 мм, покрытая слоем 100 % полиэтиленгликоля, 0,5 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | азот для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:15; |  |
Скорость потока | 45 см/с; |  |
Температура | Инжектор | 220 °С; |
| Колонка | 80 °С в течение 5 мин, подъём 10 °С/мин до 200 °С, выдержка 3 мин; |
| Детектор | 250 °С; |
Объём пробы | 1 мкл; |  |
Время хроматографирования | 20 мин. |  |

Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками камфоры и борнилацетата должно быть не менее 1,5;

- фактор асимметрии пиков (AS) камфоры и борнилацетата должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение отношений площади пика камфоры к площади пика борнилацетата должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Содержание камфоры C10H16O в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где B1 – отношение площади пика камфоры к площади пика борнилацетата на хроматограмме испытуемого раствора;
B0 – отношение площади пика камфоры к площади пика борнилацетата на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца камфоры рацемической, мг;
P – содержание камфоры рацемической в фармакопейном стандартном образце камфоры рацемической,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0429 Канамицина сульфат кислый

Канамицин
Kanamycini sulfas acidus

Вводится впервые

##### Определение

O-3-Амино-3-дезокси-α-D-глюкопиранозил-(1→6)-O-[6-амино-6-дезокси-α-D-глюкопиранозил-(1→4)]-2-дезокси-D-стрептамина сульфат.

Канамицина сульфат кислый является производной формой канамицина моносульфата, полученный путём биосинтеза с добавлением серной кислоты. Активность не менее 670 ЕД/мг в пересчёте на сухое вещество.

Один микрограмм химически чистого канамицина соответствует специфической активности, равной одной единице действия (ЕД).

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 % и ацетоне.

##### Идентификация

1. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Предварительная подготовка пластинки. Пластинку выдерживают при температуре 110 °С в течение 1 ч.

- Подвижная фаза (ПФ). Калия дигидрофосфата раствор 0,5 М.

- Испытуемый раствор. Растворяют 10 мг субстанции в 10 мл воды.

- Раствор стандартного образца канамицина моносульфата. Растворяют 10 мг фармакопейного стандартного образца канамицина моносульфата в 10 мл воды.

- Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 10 мг фармакопейного стандартного образца канамицина моносульфата, 10 мг фармакопейного стандартного образца стрептомицина сульфата и 10 мг фармакопейного стандартного образца неомицина сульфата в 10 мл воды.

- Реактив для детектирования. Смешивают равные объёмы 1,3-дигидроксинафталина раствора 0,2 % и серной кислоты раствора 50 %.

- На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора, раствора стандартного образца канамицина моносульфата и раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 15 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат в токе холодного воздуха до удаления следов растворителей, опрыскивают раствором для детектирования и нагревают при температуре 150 °С в течение 5–10 мин. Пластинку охлаждают и просматривают в видимом свете.

- Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться 3 чётко разделённые зоны адсорбции.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, окраске и величине должна соответствовать основной зоне адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца канамицина моносульфата.

2. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 2 мл воды, прибавляют 1 мл нингидрина раствора 1 % и нагревают на водяной бане; должно появиться фиолетовое окрашивание.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления производного. Растворяют 0,5 г субстанции в 10 мл воды, прибавляют 10 мл пикриновой кислоты раствора 1 %, при необходимости инициируют кристаллизацию трением стеклянной палочкой о стенки сосуда и оставляют стоять для образования осадка. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают 20 мл воды и сушат при температуре 100 °С. Температура плавления около 235 °С (с разложением, ОФС «Температура плавления»).

Удельное вращение. От +112 до +123 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 6,5 до 8,5 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Канамицин В. Не более 4 %. Испытание проводят методом ТСХ в условиях испытания «Идентификация 1. Тонкослойная хроматография», со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,10 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца канамицина В сульфата. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 4 мг фармакопейного стандартного образца канамицина B сульфата (O-3-амино-3-дезокси-α-D-глюкопиранозил-(1→6)-O-[2,6-диамино-2,6-дидезокси-α-D-глюкопиранозил-(1→4)]-2-дезокси-D-стрептамина сульфат (1:1) [29701-07-3]), растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

На линию старта пластинки наносят по 4 мкл испытуемого раствора (20 мкг) и раствора стандартного образца канамицина В сульфата (0,8 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат в токе тёплого воздуха до удаления следов растворителей, опрыскивают нингидрина и олова(II) хлорида реактивом (1) и выдерживают при температуре 110 °С в течение 15 мин. Пластинку охлаждают и просматривают в видимом свете.

Зона адсорбции канамицина В на хроматограмме испытуемого раствора по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать аналогичную зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца.

Потеря в массе при высушивании. Не более 5,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Сушат 1 г (точная навеска) субстанции в вакуум-сушильном шкафу при температуре 60 °С и остаточном давлении не превышающем 0,67 кПа (5 мм рт. ст.) в течение 3 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,5 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. От 23,0 до 26,0 % в пересчёте на сухое вещество.

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,175 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде, тщательно перемешивают, рН полученного раствора доводят до значения 11 (потенциометрически) аммиака раствором 13,5 М. К полученному раствору прибавляют 10 мл 0,1 М раствора бария хлорида и около 0,5 мг индикатора фталеинового пурпурного. Избыток хлорида бария титруют 0,1 М раствором эдетата натрия до начала изменения окраски. Далее прибавляют 50 мл спирта 96 % и продолжают титрование до исчезновения фиолетово-синей окраски раствора.

1 мл 0,1 М раствора бария хлорида соответствует 9,606 мг сульфатов SO4.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

** Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 1,8 мг канамицина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь. Скорость введения – 0,1 мл/с. Срок наблюдения – 48 ч.

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,35 ЕЭ на 1 мг канамицина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

** Испытание на депрессорные вещества. Субстанция не должна обладать депрессорным действием (ОФС «Испытание на депрессорные вещества»). Тест-доза – 10 мг канамицина в 1 мл воды для инъекций на 1 кг массы животного.

** Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

##### Количественное определение

Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение антимикробной активности антибиотиков методом диффузии в агар». В качестве стандартного образца используют фармакопейный стандартный образец канамицина моносульфата.

##### Хранение

В герметично укупоренном контейнере.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0430 Кандесартана цилексетил

Кандесартан
Candesartani cilexetili

Вводится впервые

##### Определение

[(1RS)-1-{[(Циклогексилокси)карбонил]окси}этил](1-{[2'-(1H-1,2,3,4-тетразол-5-ил)[1,1'-бифенил]-4-ил]метил}-2-этокси-1H-1,3-бензодиазол-7-карбоксилат).

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % кандесартана цилексетила в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Производителям кандесартана цилексетила необходимо проводить оценку риска образования N-нитрозаминов и загрязнения ими в процессе производства. При выявлении потенциального риска процесс производства должен быть изменён, чтобы исключить или минимизировать загрязнение.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде, мало растворим в этаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца кандесартана цилексетила.

Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в этаноле, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Уксусная кислота ледяная—вода—ацетонитрил 10:430:570.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Уксусная кислота ледяная—вода—ацетонитрил 10:100:900.

Растворитель. Вода—ацетонитрил 40:60.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в растворителе, перемешивают и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца кандесартана цилексетила для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси А, В и F, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для идентификации пиков. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца кандесартана цилексетила для идентификации пиков, содержащего примеси G и H, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А:
этил(1-{[2'-(1H-1,2,3,4-тетразол-5-ил)[1,1'-бифенил]-4-ил]метил}-2-этокси-1H-1,3-бензодиазол-7-карбоксилат)
[139481-58-6].

Примесь В:
[(1RS)-1-{[(циклогексилокси)карбонил]окси}этил](2-оксо-1-{[2'-(1H-1,2,3,4-тетразол-5-ил)[1,1'-бифенил]-4-ил]метил}-2,3-дигидро-1H-1,3-бензодиазол-7-карбоксилат)
[869631-11-8].

Примесь F:
N2-ethyl candesartan cilexetil, [(1RS)-1-{[(циклогексилокси)карбонил]окси}этил](1-{[2'-(2H-2-этил-1,2,3,4-тетразол-5-ил)[1,1'-бифенил]-4-ил]метил}-2-этокси-1H-1,3-бензодиазол-7-карбоксилат)
[914613-36-8].

Примесь G:
1-{[2'-(1H-1,2,3,4-тетразол-5-ил)[1,1'-бифенил]-4-ил]метил}-2-этокси-1H-1,3-бензодиазол-7-карбоновая
кислота [139481-59-7].

Примесь Н:
[(1RS)-1-{[(циклогексилокси)карбонил]окси}этил][1-({2'-[1H-1-(трифенилметил)-1,2,3,4-тетразол-5-ил][1,1'-бифенил]-4-ил}метил)-2-этокси-1H-1,3-бензодиазол-7-карбоксилат]
[170791-09-0].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,9 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 4 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм;v |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–3 | 100 | 0
3–33 | 100 → 0 | 0 → 100
33–40 | 0 | 100
40–50 | 0 → 100 | 100 → 0

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для идентификации пиков, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Кандесартана цилексетил – 1 (около 11 мин); примесь G – около 0,2; примесь А – около 0,4; примесь В – около 0,5; примесь F – около 2,0; примесь Н – около 3,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В и F используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу кандерсатана цилексетила для проверки пригодности хроматографической системы, и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Для идентификации пиков примесей G и H используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу кандесартана для идентификации пиков, и хроматограмму раствора для идентификации примесей.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примесей А и В должно быть не менее 4,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примеси А и G – 0,7; примесь Н – 1,6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси В не должна более чем в три раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика каждой из примесей F и G не должна более чем в два раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика каждой из примесей A и Н не должна более чем в полтора раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать шестикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

N-нитрозамины. Определение проводят в соответствии с ОФС «Примеси N-нитрозаминов».

Допустимое содержание примесей:

- N-нитрозодиметиламин (НДМА) – не более 0,03 мкг/г;

- N-нитрозодиэтиламин (НДЭА) – не более 0,02 мкг/г.

Вода. Не более 0,3 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 60 мг (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,5 г (точная навеска) субстанции в 60 мл уксусной кислоты безводной и немедленно титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») по первому перегибу на кривой титрования.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 61,07 мг кандесартана цилексетила C33H34N6O6.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0431 Капецитабин (Capecitabinum)

Вводится впервые

##### Определение

Пентил{N-[1-(5-дезокси-β-D-рибофуранозил)-2-оксо-5-фтор-1,2-дигидропиримидин-4-ил]карбамат}.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % капецитабина C15H22FN3O6 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в метаноле, в спирте 96 % и ацетонитриле, умеренно растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца капецитабина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика капецитабина на хроматограмме раствора стандартного образца капецитабина (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +96,0 до +100,0 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы готовят непосредственно перед использованием или хранят при температуре 2–8 °С.

Растворитель. Ацетонитрил—метанол—вода 50:350:600.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—метанол—уксусной кислоты раствор 0,1 % 50:350:600.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—уксусной кислоты раствор 0,1 %—метанол 50:150:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 60 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 40 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком до полного растворения, охлаждают до температуры 20±5 °С и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца капецитабина. В мерную колбу вместимостью 100 мл вносят 60 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца капецитабина, прибавляют 80 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком до полного растворения, охлаждают до температуры 20±5 °С и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3 мг капецитабина, 3 мг капецитабина примеси А, 3 мг капецитабина примеси В и 5 мг капецитабина примеси D, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца капецитабина и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А:
4-Амино-1-(5-дезокси-β-D-рибофуранозил)-5-фторпиримидин-2(1H)-он
[66335-38-4].

Примесь В:
1-(5-Дезокси-β-D-рибофуранозил)-5-фторпиримидин-2,4(1H,3H)-дион
[3094-09-5].

Примесь D:
[(2RS)-2-Метилбутил]{N-[1-(5-дезокси-β-D-рибофуранозил)-2-оксо-5-фтор-1,2-дигидропиримидин-4-ил]карбамат}
[910129-15-6].

Примесь Е:
(3-Метилбутил){N-[1-(5-дезокси-β-D-рибофуранозил)-2-оксо-5-фтор-1,2-дигидропиримидин-4-ил]карбамат}
[162204-30-0].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 250 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 100 | 0
5–20 | 100 → 49 | 0 → 51
20–30 | 49 | 51
30–35 | 49 → 100 | 51 → 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Капецитабин – 1 (около 17 мин); примесь А – 0,18; примесь В – 0,19; примеси D и Е – 0,95.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (Rs) между пиками примесей А и В должно быть не менее 1,5;

- разрешение (Rs) между пиками примеси D и капецитабина должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика капецитабина должно быть не менее 10.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси В умножают на 1,3.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A и B не должна более чем в 6 раз превышать площадь пика капецитабина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- сумма площадей пиков примесей D и Е не должна превышать четырёхкратную площадь пика капецитабина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика капецитабина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь пика капецитабина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,03 %).

Вода. Не более 0,3 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Определение проводят в платиновом тигле с использованием 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца капецитабина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца капецитабина:

- фактор асимметрии пика (AS) капецитабина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика капецитабина должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание капецитабина C15H22FN3O6 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь основного пика на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика капецитабина на хроматограмме раствора стандартного образца капецитабина;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска стандартного образца капецитабина, мг;
P – содержание капецитабина в стандартном образце капецитабина,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0106 Каптоприл (Captoprilum)

Взамен ФС.2.1.0106.18

##### Определение

(2S)-1-[(2S)-2-Метил-3-сульфанилпропаноил]пирролидин-2-карбоновая кислота.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,5 % каптоприла С9Н15NО3S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде и метаноле, растворим в воде.

* Растворяется в разбавленных растворах щелочей.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области») Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца каптоприла.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 10 мл воды, свободной от углерода диоксида должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 2,0 до 2,6 (2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Удельное вращение. От −127 до −132 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в этаноле безводном, ОФС «Оптическое вращение»).

Примесь F. Не более 0,2 %. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Раствор реактива. К 17,2 мл безводного метанола при 0 °С по каплям прибавляют 2,8 мл ацетилхлорида и перемешивают. Перед использованием выдерживают 20 мин при комнатной температуре.

Испытуемый раствор. Помещают 20,0 мг (точная навеска) субстанции в пробирку и прибавляют 1,0 мл раствора реактива. Перемешивают и нагревают при 60 °С в течение 30 мин. Упаривают досуха в потоке азота. Остаток растворяют в 0,5 мл этилацетата, прибавляют 0,5 мл пентафторпропионового ангидрида [356-42-3], перемешивают и нагревают при 60 °С в течение 30 мин. Упаривают досуха в потоке азота. Остаток растворяют в 1,0 мл бутилацетата.

Раствор сравнения А. Содержимое флакона с фармакопейным стандартным образцом каптоприла для проверки пригодности системы, содержащим примесь F, растворяют в 1,0 мл раствора реактива. Обрабатывают как описано для испытуемого раствора.

Раствор сравнения Б. Смешивают 0,25 мл раствора сравнения А и 0,75 мл бутилацетата.

Примечание

Примесь F:
(2S)-1-[(2R)-2-метил-3-сульфанилпропаноил]пирролидин-2-карбоновая кислота
[63250-36-2)].

Хроматографические условия

Колонка | плавленый кварц 25 м × 0,32 мм;
Неподвижная фаза | поли(диметил)(дифенил)силоксан, толщина слоя 1 мкм;
Детектор | пламенно-ионизационный;
Газ носитель | гелий для хроматографии;
Линейная скорость | 1,2 мл/мин;
Деление потока | 1:20;
Объём пробы | 1 мкл.

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °С
--- | --- | ---
Колонка | 0–10 | 200
| 10–14 | 200 → 240
| 14–34 | 240
Инжектор |  | 270
Детектор |  | 300

Хроматографируют растворы сравнения А и Б и испытуемый раствор.

Относительное временя удерживания соединений. Каптоприл – 1 (около 6 мин); примесь F – около 0,96.

Пригодность хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси F и каптоприла на хроматограмме раствора сравнения А должно быть не менее1,5;

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси F на хроматограмме раствора сравнения Б должно быть не менее 10.

Содержание примеси F в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где SF - площадь пика примеси F на хроматограмме испытуемого раствора;
SC - площадь пика каптоприла на хроматограмме испытуемого раствора.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Фосфорная кислота концентрированная—вода для хроматографии 0,08:100.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Фосфорная кислота концентрированная—ацетонитрил—вода для хроматографии 0,08:50:50.

Растворитель. Фосфорная кислота концентрированная—ацетонитрил—вода 0,08:10:90.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 125 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 4,0 мг(точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси J, 5,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси B, 5,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси C и 5,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20,0 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. Готовят непосредственно перед использованием.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мг субстанции и 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси Е, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора до метки тем же растворителем. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 4,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор В. Для приготовления примеси А, в мерную колбу вместимостью 50 мл вносят 1,0 мл испытуемого раствора и добавляют 230 мкл 0,05 М йода. Если раствор не обесцветился, добавляют по каплям 0,1 М раствор тиосульфата натрия, пока он не станет бесцветным, и доводят растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A: каптоприла дисульфид
1,1'-{дисульфандиилбис[(2S)-2-метил-1-оксопропан-3,1-диил]}бис[(2S)-пирролидин-2-карбоновая кислота]
[64806-05-9].

Примесь B:
(2S)-1-[(2S)-3-Бром-2-метилпропаноил]пирролидин-2-карбоновая
[80629-35-2].

Примесь C: (2RS)-2-метил-3-сульфанилпропановая кислота.

Примесь D: (2RS)- 3-бром-2-метилпропановая.

Примесь J:
(2S)-1-[(2S)-3-(ацетилсульфанил)-2-метилпропаноил] пирролидин-2-карбоновая кислота.

Хроматографические условия

Колонка | 300 × 3,9 мм, Силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии (10 мкм); |
Температура колонки | 50 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 25 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА, (% об./об.) | ПФБ,(% об./об.)
--- | --- | ---
0–5 | 90 | 10
5–20 | 90 → 50 | 10 → 50
20–45 | 50 | 50

Хроматографируют стандартный раствор А, стандартный раствор Б, стандартный раствор В, раствор сравнения, испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Каптоприл – 1 (около 15 мин); примесь C – около 0,6; примесь D – около 0,8; примесь Е – около 0,9; примесь B – около 1,17; примеси J – около 1,22; примесь А – около 1,7.

Для идентификации пиков:

- обусловленных примесями B, C, D и J, используют хроматограмму, полученную со стандартным раствором А;

- обусловленных примесью E, используют хроматограмму, полученную со стандартным раствором Б;

- обусловленных примесью А, используют хроматограмму, полученную со стандартным раствором В.

Пригодность хроматографической системы:

- разрешающая способность(RS) между пиками примесей B и J на хроматограмме стандартного раствора А должна быть не менее 1,5;

- разрешающая способность(RS) между пиками примеси Е и каптоприла на хроматограмме стандартного раствора Б должна быть не менее 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика каптоприла на хроматограмме раствора сравнения должно быть не более 2,5 (6 введений);

- асимметрия пика каптоприла на хроматограмме раствора сравнения не более 1,2.

Допустимое содержание примесей:

- площадь пика примеси А не должна превышать десятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

- площадь пика примеси J не должна превышать 2,5 площади соответствующего пика на хроматограмме стандартного раствора А (не более 0,2 %);

- площадь пика каждой примеси B, C, D не должна превышать 1,5 площади соответствующего пика на хроматограмме стандартного раствора А для каждой примеси (не более 0,15 %);

- площадь пика примеси Е не должна превышать 1,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика для каждой неиденфицированной примеси не должна превышать одной площади основного пика на хроматограмме, полученной с раствором сравнения (не более 0,10 %);

Общее содержание примесей: не более 1,2 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (0,05%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме при температуре 60 °С в течение 3 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 30 мл воды и титруют 0,05 М раствором йода. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора йода соответствует 21,73 мг каптоприла C9H15NO3S.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводят для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0020 Карбамазепин (Carbamazepin)

Взамен ФС.2.1.0020.15

##### Определение

5H-Дибенз[b,f]азепин-5-карбоксамид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % карбамазепина C15H12N2O в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Обладает полиморфизмом.

Растворимость. Легко растворим в хлороформе, умеренно растворим в спирте 96 %, очень мало или практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца карбамазепина. Испытание следует проводить в виде дисков без предварительной обработки.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл приготовленного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимумы при 237 и 285 нм и минимумы при 233 и 258 нм.

##### Испытания

Температура плавления. От 189 до 193 °С (ОФС «Температура плавления»).

Кислотность или щёлочность. К 1,0 г субстанции прибавляют 20 мл воды, свободной от углерода диоксида, перемешивают в течение 15 мин и фильтруют. К 10 мл фильтрата прибавляют 50 мкл фенолфталеина раствора 1 % и 0,5 мл натрия гидроксида раствора 0,01 М; раствор должен окраситься в красный цвет. Прибавляют 1,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М; раствор должен обесцветиться. Прибавляют 0,15 мл метилового красного раствора 0,05 %; раствор должен окраситься в красный цвет.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Растворитель. Метанол―вода 500:500.

Подвижная фаза. Тетрагидрофуран―метанол―вода 30:120:850. К 1000 мл полученного раствора прибавляют 0,2 мл муравьиной кислоты 99,7 % и 0,5 мл триэтиламина.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 60 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле с использованием ультразвуковой бани и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают по 7,5 мг фармакопейных стандартных образцов карбамазепина, примеси А и примеси Е, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А: (дигидрокарбамазепин) 10,11-дигидро-5H-дибенз[b,f]азепин-5-карбоксамид [3564-73-6].

Примесь Е: (иминодибензил) 10,11-Дигидро-5H-дибенз[b,f]азепин [494-19-9].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель цианосилильный для хроматографии, 10 мкм; |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 8-кратное от времени удерживания карбамазепина. |

Хроматографируют стандартный и испытуемый растворы.

Относительное время удерживания соединений. Карбамазепин – 1 (около 10 мин ): примесь А – около 0,9; примесь Е – около 3,5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора разрешение ® между пиками примеси А и карбамазепина должно быть не менее 1,7.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей А и Е не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь соответствующего пика на хроматограмме, стандартного раствора (не более 0,15 %).

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика карбамазепина на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,1 %),

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика карбамазепина на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,5 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,02 %.

Испытуемый раствор. В коническую колбу помещают 0,6 г субстанции, прибавляют 20 мл воды, перемешивают, нагревают на водяной бане в течение 10 мин, охлаждают и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,8 мкм. Доводят 10 мл полученного раствора водой до 15 мл.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл хлорида стандартного раствора 400 мкг/мл и доводят объём раствора водой до метки.

К 5 мл испытуемого раствора и 5 мл раствора сравнения прибавляют по 1 мл азотной кислоты разведённой 12,5 % и выливают в пробирки, содержащие 1 мл серебра нитрата раствора 1,7 %.

Пробирки с испытуемым раствором и раствором сравнения помещают в защищённое от света место. Через 5 мин пробирки просматривают на чёрном фоне перпендикулярно оси пробирок.

Опалесценция испытуемого раствора не должна превышать опалесценцию раствора сравнения.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают около 10 мл испытуемого раствора (раздел «Родственные примеси») и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца карбамазепина. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 60 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца карбамазепина, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца карбамазепина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца карбамазепина относительное стандартное отклонение площади пика карбамазепина должно быть не более 2,0 %.

Содержание C15H12N2O в субстанции в процентах (Х) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика карбамазепина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика карбамазепина на хроматограмме раствора стандартного образца карбамазепина;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца карбамазепина, мг;
P - содержание карбамазепина в фармакопейном стандартном образце карбамазепина,%.
W - потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0432 Карбоплатин (Carboplatinum)

Вводится впервые

##### Определение

(SP-4-2)-Диаммин[циклобутан-1,1-ди(карбоксилато-κO)(2-)]платина(II).

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % карбоплатина C6H12N2O4Pt в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в ацетоне.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца карбоплатина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика карбоплатина на хроматограмме раствора стандартного образца карбоплатина (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,25 г субстанции в 25 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

рН раствора. От 5,0 до 7,0 (раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

1. Циклобутан-1,1-дикарбоновая кислота. Не более 0,5 %. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в 10 мл воды, свободной от углерода диоксида, и прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствора 1 %. Окраска раствора должна изменяться на розовую при прибавлении не более 0,7 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида.

2. Другие примеси

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—ацетонитрил 130:870.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 0,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А: (SP-4-2)-диамминдихлорплатина(II) [15663-27-1].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель аминопропилметилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,5-кратное от времени удерживания пика карбоплатина. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Карбоплатин – 1 (около 7 мин); примесь A – около 0,3.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединений.

Пригодность хроматографической системы*

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика карбоплатина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора сравнения относительное стандартное отклонение площади пика карбоплатина должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика карбоплатина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,25 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика карбоплатина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,2 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Аммоний. Не более 0,01 % (ОФС «Аммоний», метод 1). Помещают 0,2 г субстанции в мерную колбу вместимостью 10 мл, растворяют в 1 мл воды и доводят объём раствора водой до метки.

Серебро. Не более 0,001 %. Определение проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) карбоплатина, растворяют в азотной кислоты 0,5 М растворе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора азотной кислоты 0,5 М раствором до метки.

Калибровочные растворы серебра. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 мл серебра стандартного раствора 100 мкг/мл и доводят объём раствора азотной кислоты 0,5 М раствором до метки. В отдельные мерные колбы вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл, 1,0 мл и 2,0 мл полученного раствора и доводят объём каждого раствора азотной кислоты 0,5 М раствором до метки, получая растворы с концентрациями 0,5 нг/мл, 1,0 нг/мл и 2,0 нг/мл, соответственно.

Условия испытания

Оборудование | атомно-абсорбционный спектрофотометр, оснащенный электротермическим атомизатором;
Источник излучения | серебряная лампа с полым катодом;
Газ | аргон;
Длина волны | 328,1 нм;
Атомизация | графитовая печь;
Объём ввода проб | 20 мкл.

Определяют абсорбцию калибровочных растворов серебра и строят калибровочный график.

Содержание серебра в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где С – концентрация серебра в испытуемом растворе, определённая по калибровочному графику, нг/мл;
a – навеска субстанции, мг.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,2 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,25 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца карбоплатина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца карбоплатина, растворяют в воде и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца карбоплатина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца карбоплатина:

- фактор асимметрии пика (AS) карбоплатина должен быть не более 2,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика карбоплатина должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику карбоплатина, должна составлять не менее 2500 теоретических тарелок.

Содержание карбоплатина C6H12N2O4Pt в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика карбоплатина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика карбоплатина на хроматограмме раствора стандартного образца карбоплатина;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца карбоплатина, мг;
P – содержание карбоплатина в фармакопейном стандартном образце карбоплатина,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке в защищённом от света месте.

* Перед проведением испытания должна быть проверена разделительная способность хроматографической системы.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0433 Карведилол (Carvedilolum)

Вводится впервые

##### Определение

(2RS)-1-(9H-Карбазол-4-илокси)-3-{[2-(2-метоксифенокси)этил]амино}про-пан-2-ол.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % карведилола C24H26N2O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Умеренно растворим в метиленхлориде, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца карведилола.

Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах 2-пропанола, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 2,72 г калия дигидрофосфата, растворяют в 900 мл воды, доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 2,00, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 350:650.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора ПФ до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси С. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси C, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мг стандартного образца карведилола для проверки пригодности системы, содержащего примеси A и D, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А:
1-{[9-(2-гидрокси-3-{[2-(2-метоксифенокси)этил]амино}пропил)-9H-карбазол-4-ил]окси}-3-{[2-(метоксифенокси)этил]амино}пропан-2-ол
[1198090-73-1].

Примесь С:
(2RS)-1-{бензил[2-(2-метоксифенокси)этил]амино}-3-(9H-карбазол-4-илокси)пропан-2-ол
[72955-94-3].

Примесь D:
1-[4-(2-гидрокси-3-{[2-(2-метоксифенокси)этил]амино} пропокси)-9H-карбазол-9-ил]-3-(9H-карбазол-4-илокси)пропан-2-ол
[1391052-16-6].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 55 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 240 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 6-кратное от времени удерживания пика карведилола. |  |

Хроматографируют раствор сравнения, раствор стандартного образца примеси C, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Карведилол – 1 (около 4 мин); примесь A – около 0,5; примесь C – около 2,9; примесь D – около 3,8.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A и D используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу карведилола для проверки пригодности системы; для идентификации пика примеси C используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора стандартного образца примеси C.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси A и карведилола должно быть не менее 3,5.

На хроматограмме раствора стандартного образца примеси C отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси C должно быть не менее 10.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси A умножают на поправочный коэффициент 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна более чем в 2 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси C не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца примеси C (не более 0,02 %);

- площадь пика примеси D не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей, кроме примеси С, не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,35 г (точная навеска) субстанции в 60 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты.

Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 40,65 мг карведилола C24H26N2O4.

##### Хранение

В плотно закрытой упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0377 Кармеллоза натрия

Кармеллоза
Carmellosum natricum

Вводится впервые

##### Определение

Карбоксиметилцеллюлоза натрия.

Натриевая соль частично O-карбоксиметилированной целлюлозы.

Содержит от 6,5 % до 10,8 % натрия (Na) в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый гранулированный порошок.

* Гигроскопичен после высушивания.

Растворимость. Практически нерастворим в этаноле безводном, ацетоне и толуоле.

* Легко диспергируется в воде с образованием коллоидного раствора.

##### Идентификация

Исходный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 90 мл воды, свободной от углерода диоксида, прибавляют 1 г субстанции и перемешивают при температуре 40–50 °С до получения коллоидного раствора, охлаждают и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

1. Качественная реакция. К 10 мл исходного раствора прибавляют 1 мл меди(II) cульфата раствора 12,5 %; должен образоваться синий осадок.

2. Качественная реакция. Кипятят 5 мл исходного раствора в течение нескольких минут; не должен образовываться осадок.

3. Качественная реакция. К остатку, полученному в испытании «Сульфатная зола», прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и выпаривают на водяной бане досуха. Сухой остаток растворяют в 20 мл воды. Полученный раствор должен давать характерные реакции на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Опалесценция исходного раствора не должна превышать эталон сравнения III (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Исходный раствор должен выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Вязкость. От 75 до 140 % от заявленного значения (ОФС «Вязкость»).

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мл воды, нагретой до 90 °С, прибавляют при перемешивании 2 г высушенной субстанции. Для препарата с низкой вязкостью, при необходимости, используют навеску, необходимую для получения концентрации, указанной на этикетке. Полученный раствор охлаждают и доводят объём раствора тем же растворителем до метки, перемешивая до полного растворения. Определяют динамическую вязкость (η) раствора с помощью ротационного вискозиметра при температуре 20 °С со скоростью сдвига 10 с–1. Если невозможно получить точно данную скорость сдвига, используйте скорость сдвига немного выше и скорость немного ниже и интерполируйте.

pH раствора. От 6,0 до 8,0 (исходный раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Натрия гликолят

Испытуемый раствор. В химический стакан помещают 0,5 г субстанции, прибавляют 5 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и 5 мл воды, перемешивают около 30 мин до полного растворения. Прибавляют 80 мл ацетона и 2 г натрия хлорида. В мерную колбу вместимостью 100 мл фильтруют полученный раствор через быстро фильтрующий беззольный фильтр, смоченный ацетоном, промывают химический стакан ацетоном и фильтруют в ту же колбу через тот же фильтр, доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Выдерживают 24 ч, без встряхивания. Используют прозрачный супернатант.

Раствор гликолевой кислоты. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,31 г гликолевой кислоты, предварительно высушенной в эксикаторе, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мл полученного раствора, прибавляют 5 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и выдерживают около 30 мин. Прибавляют 80 мл ацетона, 2 г натрия хлорида и доводят объём раствора ацетоном до метки.

Помещают 2 мл испытуемого раствора и раствора гликолевой кислоты в отдельные мерные колбы вместимостью 25 мл. Нагревают на водяной бане, чтобы удалить ацетон. Охлаждают и прибавляют в каждую колбу по 5 мл 2,7-дигидроксинафталина раствора, встряхивают и добавляют по 15 мл 2,7-дигидроксинафталина раствора. Закрывают колбы алюминиевой фольгой и нагревают на водяной бане 20 мин. Охлаждают под проточной водой и доводят объёмы растворов серной кислотой концентрированной до меток. В течение 10 мин переносят по 10 мл каждого раствора в пробирки с плоским дном, просматривают их по вертикали. Окраска испытуемого раствора не должна превышать интенсивности раствора гликолевой кислоты.

Хлориды. Не более 0,25 % (ОФС «Хлориды»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,8 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём водой до метки.

Сульфатная зола. От 20,0 % до 33,3 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции и смесь растворителей серная кислота концентрированная—вода 1:1.

Потеря в массе при высушивании. Не более 10,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0434 Кветиапина фумарат

Кветиапин
Quetiapini fumaras

Вводится впервые

##### Определение

2-{2-[4-(Дибензо[b,f][1,4]тиазепин-11-ил)пиперазин-1-ил]этокси}этанола (2E)-бут-2-ендиоат (2:1).

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % кветиапина фумарата (C21H25N3O2S)2∙C4H4O4 в пересчёте на сухое вещество.

Cодержит не менее 12,5 % и не более 13,8 % фумаровой кислоты C4H4O4.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок. *Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим или растворим в ледяной уксусной кислоте, умеренно или мало растворим в спирте 96 %, мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца кветиапина фумарата.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 80 мг субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, 10 мл воды, 5,0 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М, 30 мл спирта 96 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Cпектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 380 нм должен иметь максимумы при 250±3 нм, 294±2 нм и минимумы при 246±3 нм, 285±3 нм.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,2 г субстанции в 25 мл метанола, прибавляют 2 мл раствора меди(II) сульфата и пиридина; должно появиться синее окрашивание.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Триэтиламин—вода—метанол 4:330:670. Доводят рН раствора фосфорной кислотой до 6,80.

Раствор фумаровой кислоты. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг фумаровой кислоты, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 75 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мл испытуемого раствора, прибавляют 0,75 мл водорода пероксида и выдерживают при температуре 70 °С в течение 15 мин.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 289 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика кветиапина. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения, раствор фумаровой кислоты и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Кветиапин – 1 (около 13 мин); основной продукт разложения – около 0,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика кветиапина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками основного продукта разложения и кветиапина должно быть не менее 2.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) кветиапина должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика кветиапина должно быть не более 10,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику кветиапина, должна составлять не менее 4500 теоретических тарелок.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пик фумаровой кислоты и пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Кветиапина фумарат. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 20 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») по второму перегибу на кривой титрования или с индикатором (1 капля кристаллического фиолетового раствора 0,1 %) до перехода фиолетовой окраски в зелёную.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 22,08 мг кветиапина фумарата (C21H25N3O2S)2∙C4H4O4.

Фумаровая кислота. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 40 мл спирта 96 % и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 5,80 мг фумаровой кислоты C4H4O4.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0021 Кетамина гидрохлорид

Кетамин
Ketamini hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0021.15

##### Определение

(2RS)-2-(Метиламино)-2-(2-хлорфенил)циклогексанона гидрохлорид.

Содержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % кетамина гидрохлорида C13H16ClNO∙HCl.

##### Свойства

Описание. Белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде и метаноле, растворим в спирте 96 %, умеренно растворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца кетамина гидрохлорида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,3 г субстанции, растворяют в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 250 до 320 нм должен иметь максимумы при 270 нм и 276 нм, минимум при 274 нм и плечо в интервале от 260 до 266 нм.

3. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,8 г субстанции, растворяют в смеси 0,1 М раствор натрия гидроксида—вода—метанол 1:4:95 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора смесью 0,1 М раствор натрия гидроксида—вода—метанол 1:4:95 до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 250 до 350 нм должен иметь максимумы при 263 нм, 269 нм, 277 нм и 302 нм и минимум при 282 нм.

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Угол вращения. От –0,2° до +0,2° (2 % раствор субстанции в воде, свободной от диоксида углерода, ОФС «Оптическое вращение»).

Температура плавления. От 258 до 262 °С (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1, без предварительного подсушивания).

Прозрачность раствора. Раствор 2 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 3,5 до 4,1 (10 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 0,95 г натрия гексансульфоната в 1000 мл смеси ацетонитрил—вода 25:75 и прибавляют 4 мл уксусной кислоты ледяной.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл полученного раствора, прибавляют 0,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Примечание

Примесь А: 1-[(метилимино)(2-хлорфенил)метил]циклопентанол [6740-87-0].

Хроматографические условия

Колонка | 125 × 4 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 215 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 10-кратное от времени удерживания пика кетамина. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Время удерживания кетамина – около 3–4,5 мин.

Порядок выхода пиков: примесь А, кетамин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси А и кетамина должно быть не менее 1,5;

- фактор асимметрии пика (AS) кетамина должен быть не более 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,2 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,1 %).

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,4 ЕЭ на 1 мг кетамина гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 50 мг/мл, а затем разводят его не менее чем в 200 раз.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 1 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 20 мл уксусной кислоты ледяной, 5 мл раствора ртути(II) ацетата и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до появления сине-зелёного окрашивания (индикатор – 2 капли кристаллического фиолетового раствора 0,1%).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 27,42 мг кетамина гидрохлорида C13H16ClNO∙HCl.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0435 Кетоконазол (Кетоконазол)

Ketoconazolum

Вводится впервые

##### Определение

1-Ацетил-4-(4-{[(2RS,4SR)-2-(1Н-имидазол-1-илметил)-2-(2,4-дихлорфенил)-1,3-диоксолан-4-ил]метокси}фенил)пиперазин.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % кетоконазола C26H28Cl2N4O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде, растворим в метаноле, умеренно растворим в спирте 96 % и практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца кетоконазола.

2. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Аммония ацетат—диоксан—метанол 20:40:40.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 30 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца кетоконазола. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 30 мг фармакопейного стандартного образца кетоконазола, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 30 мг фармакопейного стандартного образца кетоконазола, 30 мг фармакопейного стандартного образца эконазола нитрата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (30 мкг), раствора стандартного образца кетоконазола (30 мкг) и раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (30 мкг кетоконазола и 30 мкг эконазола нитрата). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, помещают в камеру, насыщенную парами йода, до появления зон адсорбции и просматривают в видимом свете.

- Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 разделённые зоны адсорбции.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции кетоконазола на хроматограмме раствора стандартного образца кетоконазола.

3. Качественная реакция. В фарфоровом тигле смешивают 30 мг субстанции и 0,3 г натрия карбоната безводного, нагревают на открытом огне в течение 10 мин, охлаждают, растворяют сухой остаток в 5 мл азотной кислоты разведённой 12,5 % и фильтруют. Полученный фильтрат должен давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 148 до 152 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Угол вращения. От –0,10° до +0,10° в пересчёте на сухое вещество (раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор субстанции 10 % в метиленхлориде должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY4 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие кетоконазол, используют свежеприготовленными.

Раствор тетрабутиламмония гидросульфата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 3,4 г тетрабутиламмония гидросульфата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—раствор тетрабутиламмония гидросульфата 50:950.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—раствор тетрабутиламмония гидросульфата 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца кетоконазола и 2,5 мг фармакопейного стандартного образца лоперамида гидрохлорида, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора метанолом до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 100 → 0 | 0 → 100
10–15 | 0 | 100
15–20 | 0 → 100 | 100 → 0
20–25 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Кетоконазол – 1 (около 6 мин); лоперамид – около 1,3.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика кетоконазола должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками кетоконазола и лоперамида должно быть не менее 15.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 70 мл смеси уксусная кислота безводная—метилэтилкетон 1:7 и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 26,57 мг кетоконазола C26H28Cl2N4O4.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0107 Кетопрофен (Ketoprofenum)

Взамен ФС.2.1.0107.18

##### Определение

(2RS)-2-(3-Бензоилфенил)пропановая кислота.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % кетопрофена C16H14O3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в ацетоне, спирте 96 % и метиленхлориде, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца кетопрофена.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь только один максимум при 255 нм с удельным показателем поглощения от 615 до 680.

3. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля GF254.

- Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—метиленхлорид—ацетон 1:49:50.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в ацетоне и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца кетопрофена. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца кетопрофена, растворяют в ацетоне и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца индометацина, растворяют в ацетоне и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Смешивают 1,0 мл полученного раствора и 1,0 мл раствора стандартного образца кетопрофена.

- На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (10 мкг), раствора стандартного образца кетопрофена (10 мкг) и раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм

- Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 разделённые зоны адсорбции.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению и величине должна соответствовать зоне адсорбции кетопрофена на хроматограмме раствора стандартного образца кетопрофена.

##### Испытания

Температура плавления. От 94 до 97 °C (ОФС «Температура плавления»).

Удельное вращение. От –1 до +1 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в этаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 10 мл ацетона должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие кетопрофен и его примеси, готовят непосредственно перед использованием и защищают от света.

Буферный раствор. Растворяют 68 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,50. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Буферный раствор—ацетонитрил—вода 20:430:550.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца кетопрофена. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца кетопрофена, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси С. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси С, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. Смешивают 1,0 мл полученного раствора и 1,0 мл раствора стандартного образца примеси А.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца кетопрофена и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А: 1-(3-бензоилфенил)этан-1-он [66067-44-5].

Примесь В: 2-(3-бензоилфенил)уксусная кислота [22071-22-3].

Примесь С: 3-[(1RS)-1-карбоксиэтил]бензойная кислота [68432-95-1].

Примесь D: (2RS)-2-[3-(4-метилбензоил)фенил]пропановая кислота [107257-20-5].

Примесь E: (2RS)-2-(3-бензоилфенил)пропанамид [59512-16-2].

Примесь F: (2RS)-2-(3-бензоилфенил)пропаннитрил [42872-30-0].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм, удельная площадь поверхности 350 м2/г, размер пор 10 нм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 233 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 7-кратное от времени удерживания пика кетопрофена. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца кетопрофена, раствор стандартного образца примеси А, раствор стандартного образца примеси С и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Кетопрофен – 1 (около 7 мин); примесь С – около 0,3; примесь E – около 0,69; примесь B – около 0,73; примесь D – около 1,35; примесь А – около 1,5; примесь F – около 2,0.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют хроматограмму раствора стандартного образца примеси А. Для идентификации примеси С используют хроматограмму раствора стандартного образца примеси С.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика кетопрофена должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками кетопрофена и примеси А должно быть не менее 7,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца кетопрофена:

- фактор асимметрии пика (AS) кетопрофена должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика кетопрофена должно быть не более 5,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику кетопрофена, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика примеси А на хроматограмме раствора стандартного образца примеси А (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси С не должна превышать площадь пика примеси С на хроматограмме раствора стандартного образца примеси С (не более 0,2 %);

- площадь пика каждой из примесей B, D, E, F не должна превышать площадь пика кетопрофена на хроматограмме раствора стандартного образца кетопрофена (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика кетопрофена на хроматограмме раствора стандартного образца кетопрофена (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей (кроме А и С) не должна превышать двукратную площадь пика кетопрофена на хроматограмме раствора стандартного образца кетопрофена (не более 0,4 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 60 °С и давлении не более 0,67 кПа до постоянной массы.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 1 ЕЭ на 1 мг кетопрофена (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Растворяют 0,2 г субстанции в диметилформамиде и доводят объём раствора диметилформамидом до 10,0 мл. При использовании ЛАЛ-реактива с чувствительностью 0,03 ЕЭ/мл испытуемый раствор готовят разведением исходного раствора водой для ЛАЛ-теста не менее чем в 200 раз. Параллельно проводят качественный анализ растворителя (диметилформамида) в разведении 1:200 на воде для ЛАЛ-теста.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 25 мл спирта 96 %, прибавляют 25 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 25,43 мг кетопрофена C16H14O3.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0022 Кеторолака трометамол

Кеторолак Ketorolacum trometamolum

Взамен ФС.2.1.0022.15

##### Определение

(1RS)-5-Бензоил-2,3-дигидро-1H-пирролизин-1-карбоновая кислота—2-амино-2-(гидроксиметил)пропан-1,3-диол (1:1).

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % кеторолака трометамола C15H13NO3∙C4H11NO3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде и метаноле, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца кеторолака трометамола.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

- Раствор стандартного образца кеторолака трометамола. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца кеторолака трометамола, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 до 380 нм должен соответствовать спектру раствора стандартного образца кеторолака трометамола.

3. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—ацетон—метиленхлорид 2:5:95.

- Растворитель. Метиленхлорид—метанол 2:1.

- Испытуемый раствор. Растворяют 10 мг субстанции в 2,0 мл растворителя.

- Раствор стандартного образца кеторолака трометамола. Растворяют 10 мг фармакопейного стандартного образца кеторолака трометамола в 2,0 мл растворителя.

- На линию старта пластинки наносят по 40 мкл (200 мкг) испытуемого раствора и раствора стандартного образца кеторолака трометамола. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают нингидрина раствором 3 % в спирте, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 150 °С в течение 2–5 мин и просматривают в видимом свете.

- Результат. Основные зоны адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должны соответствовать зонам адсорбции кеторолака трометамола на хроматограмме раствора стандартного образца кеторолака трометамола.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,75 г субстанции в 25 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», измеренная при длине волны 430 нм, не должна превышать 0,10 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

рН раствора. От 5,7 до 6,7 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие кеторолака трометамол и его примеси, защищают от света.

Буферный раствор. Растворяют 5,75 г аммония фосфата в 900 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислоты концентрированной до 3,00. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Тетрагидрофуран—буферный раствор 300:700.

Растворитель. Тетрагидрофуран—вода 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца кеторолака трометамола. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца кеторолака трометамола, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 2 мг фармакопейного стандартного образца кеторолака трометамола для идентификации пиков примесей, содержащего примеси А, В, С и D, в 5,0 мл растворителя.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца кеторолака трометамола и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А: [(1RS)-1-гидрокси-2,3-дигидро-1H-пирролизин-5-ил](фенил)метанон [154476-25-2].

Примесь В: 5-бензоил-2,3-дигидро-1H-пирролизин-1-он [113502-52-6].

Примесь С: (1RS)-6-бензоил-2,3-дигидро-1H-пирролизин-1-карбоновая кислота [1026936-07-1].

Примесь D: (1RS)-5-бензоил-1-метокси-2,3-дигидро-1H-пирролизин-1-карбоновая кислота [1391053-45-4].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 313 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика кеторолака. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца кеторолака трометамола и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Кеторолак – 1 (около 10 мин); примесь С – около 0,5; примесь А – около 0,6; примесь D – около 0,7; примесь В – около 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В, С и D используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу кеторолака трометамола для идентификации пиков примесей.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика кеторолака должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси В и кеторолака должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора стандартного образца кеторолака трометамола:

- фактор асимметрии пика (AS) кеторолака должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика кеторолака должно быть не более 5,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику кеторолака, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь А – 0,67; примесь В – 0,52; примесь С – 2,2.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A, B, С и D не должна превышать площадь пика кеторолака на хроматограмме раствора стандартного образца кеторолака трометамола (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика кеторолака на хроматограмме раствора стандартного образца кеторолака трометамола (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь пика кеторолака на хроматограмме раствора стандартного образца кеторолака трометамола (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика кеторолака на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 60 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 5,8 ЕЭ на 1 мг кеторолака трометамола (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 30 мг/мл, а затем разводят его не менее чем в 500 раз.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты ледяной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 37,64 мг кеторолака трометамола C15H13NO3∙C4H11NO3.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0436 Кетотифена фумарат

Кетотифен
Ketotifeni fumaras

Вводится впервые

##### Определение

4-(1-Метилпиперидин-4-илиден)-4,9-дигидро-10Н-бензо[4,5]циклогепта[1,2-b]тиофен-10-он (2E)-бут-2-ендиоат.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % кетотифена фумарата C19H19NOS·C4H4O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. От белого до коричневато-жёлтого цвета мелкокристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в воде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в гептане.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца кетотифена фумарата.

2. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254, 2–10 мкм, на алюминиевой подложке.

- Предварительная подготовка пластинки. Пластинку помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт 100 % длины пластинки, её выдерживают в течение 10 мин, вынимают и сушат на воздухе в течение 15 мин. Подготовку пластинки проводят непосредственно перед использованием.

- Подвижная фаза (ПФ). Вода - муравьиная кислота безводная - диизопропиловый эфир 3:7:90.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 40 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца фумаровой кислоты. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 11 мг фармакопейного стандартного образца фумаровой кислоты, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (20 мкг) и раствора стандартного образца фумаровой кислоты (5,5 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей в потоке тёплого воздуха и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм. Затем пластинку слегка опрыскивают калия перманганата раствором 0,5 % в серной кислоты растворе 1,4 % (о/о) и просматривают сквозь стеклянную подложку при дневном освещении.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции фумаровой кислоты на хроматограмме раствора стандартного образца фумаровой кислоты.

##### Испытания

Температура плавления. От 190 до 196 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 10 мл метанола должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y4, BY4 или B4 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Подвижная фаза А (ПФА). Триэтиламин—вода 0,35:1000.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Триэтиламин—метанол 0,35:1000.

Растворитель. Метанол—вода 50:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 30 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В 1,0 мл полученного раствора растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца примеси G, при необходимости обрабатывая ультразвуком, и охлаждают до комнатной температуры.

Раствор для идентификации пика примеси A. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца кетотифена для идентификации пика, содержащего примесь А, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A:
4-(4Н-бензо[4,5]циклогепта[1,2-b]тиофен-4-илиден)-1-метилпиперидин
[4673-38-5].

Примесь G:
4-(1-метилпиперидин-4-илиден)-4Н-бензо[4,5]циклогепта[1,2-b]тиофен-9,10-дион
[43076-16-0].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 40 °C; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 297 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА, % | ПФБ, %
--- | --- | ---
0–12 | 40 | 60
12–20 | 40 → 10 | 60 → 90
20–25 | 10 | 90

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для идентификации пика примеси A, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Кетотифен – 1 (около 11 мин); фумаровая кислота – около 0,1; примесь G – около 0,8; примесь A – около 1,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси A используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для идентификации пика примеси A и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу кетотифена для идентификации пика. Для идентификации пика примеси G используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу примеси G.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси G и кетотифена должно быть не менее 1,5.

Поправочный коэффициент. Для расчёта содержания площадь пика примеси G умножают на 1,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна более чем в 2 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси G не должна превышать 1,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пик фумаровой кислоты и пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,35 г (точная навеска) субстанции в смеси 30 мл уксусного ангидрида и 30 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 42,55 мг кетотифена фумарата C19H19NOS·C4H4O4.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0600 Кладрибин (Cladribinum)

Вводится впервые

##### Определение

9-(2-Деокси-β-D-эритро-пентофуранозил)- 2-хлор-9H-пурин-6-амин.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % кладрибина C10H12ClN5O3 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Растворим в диметилсульфоксиде, мало растворим в воде и метаноле, практически нерастворим в ацетонитриле.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца кладрибина.

Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают на водяной бане досуха при температуре 45 °С, высушивают при 105 °С в течение 2 ч и записывают спектры сухих остатков.

##### Испытания

Удельное вращение. От –21,0 до –27,0 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в диметилсульфоксиде, ОФС «Оптическое вращение»).

** Прозрачность раствора. Растворяют 0,15 г субстанции в 50 мл воды, обрабатывают ультразвуком до растворения. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

** Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Примеси А, B, C, D. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Вода.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Подвижная фаза В (ПФВ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 800 мл воды, прибавляют 30 мл фосфорной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 10:90.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси C, растворяют в 10 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для идентификации примесей. Растворяют 3 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца для идентификации пиков (содержит примеси A, B, C и D) в 2,0 мл растворителя.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения Б и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А: 9-(2-деокси-β-D-эритро-пентофуранозил)-9H-пурин-2,6-диамин [4546-70-7].

Примесь B: 9-(2-деокси-β-D-эритро-пентофуранозил)-2-метокси-9H-пурин-6-амин [24757-70-8].

Примесь C: 2-хлор-7H-пурин-6-амин [1839-18-5].

Примесь D: 2-хлор-9-(2-деокси-α- D-эритро-пентофуранозил)-9H-пурин-6-амин [5542-92-7].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 252 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,% | ПФВ,%
--- | --- | --- | ---
0–10 | 80 → 70 | 10 → 20 | 10
10–25 | 70 → 20 | 20 → 70 | 10
25–30 | 20 | 70 | 10

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для идентификации примесей, раствор сравнения Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Кладрибин – 1 (около 10 мин); примесь A – около 0,33; примесь B – около 0,44; примесь C – около 0,73; примесь D – около 0,92.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, C и D используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора сравнения Б и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу для идентификации примесей A, B, C и D.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси С и кладрибина должно быть не менее 4,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей B и C, площади пиков этих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь B – 1,7; примесь С – 0,8.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A и C не должна более чем в три раза превышать площадь пика кладрибина на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,3 %);

- площадь пика каждой из примесей B и D не должна более чем в два раза превышать площадь пика кладрибина на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика кладрибина на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь пика кладрибина на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика кладрибина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Примесь Е. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 %—спирт 96 %—этилацетат 20:40:40.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 2 мл помещают 40 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в диметилформамиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси Е. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси Е (2-деокси-D-эритро-пентофураноза [1831121-84-6]), растворяют в 10 мл диметилформамида и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 3,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора диметилформамидом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси Е, растворяют в диметилформамиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Смешивают полученный раствор и испытуемый раствор 9:1.

Реактив для детектирования. Растворяют 0,5 г тимола в 100 мл смеси растворителей спирт 96 %—серная кислота концентрированная 95:5.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (100 мкг), раствора стандартного образца примеси Е (0,3 мкг) и раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами высушивают в потоке тёплого воздуха до удаления следов растворителей, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе, затем нагревают при температуре 45 °С в течение 10 мин, опрыскивают реактивом для детектирования, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 110 °С в течение 20 мин или до появления зон адсорбции и просматривают в УФ – свете при длине волны 254 нм.

Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы чётко видны две зоны адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции, находящаяся на уровне зоны адсорбции примеси E, по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца примеси Е (не более 0,3 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 41,67 ЕЭ на 1 мг кладрибина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытаний готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 0,5 мг/мл.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца кладрибина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца кладрибина, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца кладрибина и испытуемый раствор.

Содержание кладрибина C10H12ClN5O3 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика кладрибина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика кладрибина на хроматограмме раствора стандартного образца кладрибина;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца кладрибина, мг;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.
P - содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце кладрибина,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте при температуре от 2 до 8 °С.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0108 Кларитромицин (Clarithromycinum)

Взамен ФС.2.1.0108.18

##### Определение

(3R,4S,5S,6R,7R,9R,11R,12R,13S,14R)-12,13-Дигидрокси-4-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,7,9,11,13-гексаметил-7-метокси-6-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-14-этил-1-оксациклотетрадекан-2,10-дион.

Cодержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % кларитромицина C38H69NO13 в пересчёте на безводное вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим или растворим в метиленхлориде, растворим в ацетоне, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца кларитромицина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемой субстанции должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме фармакопейного стандартного образца кларитромицина (раздел «Родственные примеси»).

3. Качественная реакция. Растворяют 3 мг кларитромицина в 2 мл ацетона и прибавляют 2 мл хлористоводородной кислоты концентрированной. Должно появиться оранжевое окрашивание, быстро переходящее в красное.

##### Испытания

Удельное вращение. От –94 до –102 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в метиленхлориде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 50 мл метиленхлорида должен быть прозрачным или степень его мутности не должна превышать степень мутности эталонной суспензии II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном GY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы используют свежеприготовленными или хранят при температуре от 2 до 8 °С не более 1 суток.

Буферный раствор. Растворяют 4,76 г дигидрофосфата натрия в 900 мл воды, доводят значение рН фосфорной кислотой или калия гидроксида раствором до рН 4,4±0,05. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 1:1.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 75,0 мг субстанции, растворяют в 25 мл ацетонитрила, прибавляют 20 мл воды, перемешивают, выдерживают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца кларитромицина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 75,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца кларитромицина, растворяют в 25 мл ацетонитрила, прибавляют 20 мл воды, перемешивают, выдерживают до комнатной температуры, и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца кларитромицина и доводят растворителем до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения А и доводят растворителем до метки.

Раствор стандартного образца кларитромицина для идентификации примесей. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 15,0 мг фармакопейного стандартного образца кларитромицина для идентификации примесей, растворяют в 5,0 мл ацетонитрила и доводят объём водой до метки.

Примечание

Примесь А:
(3R,4S,5S,6R,7R,9R,11R,12R,13S,14R)-12,13-дигидрокси-3-(гидроксиметил)-4-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-5,7,9,11,13-пентаметил-7-метокси-6-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-14-этил-1-оксациклотетрадекан-2,10-дион
[124412-58-4].

Примесь В:
(3R,4S,5S,6R,7R,9R,11R,12R,13S,14R)-12,13-дигидрокси-4-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,7,9,11,13,14-гептаметил-7-метокси-6-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-1-оксациклотетрадекан-2,10-дион
[299409-85-1].

Примесь С:
(3R,4S,5S,6R,7R,9R,10E,11R,12R,13S,14R)-12,13-дигидрокси-10-(гидроксиимино)-4-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,7,9,11,13-гексаметил-7-метокси-6-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-14-этил-1-оксациклотетрадекан-2-он
[127253-06-9].

Примесь D:
(3R,4S,5S,6R,7R,9R,10Z,11R,12R,13S,14R)-12,13-дигидрокси-4-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,7,9,11,13-гексаметил-7-метокси-6-{[3,4,6-тридезокси-3-(метиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-14-этил-1-оксациклотетрадекан-2,10-дион
[101666-68-6].

Примесь Е:
(3R,4S,5S,6R,7R,9R,11R,12R,13S,14R)-12-гидрокси-4-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,7,9,11,13-гексаметил-7,13-диметокси-6-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-14-этил-1-оксациклотетрадекан-2,10-дион
[81103-14-2].

Примесь F:
(3R,4S,5S,6R,7R,9R,11R,12R,13S,14R)-13-гидрокси-4-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,7,9,11,13-гексаметил-7,12-диметокси-6-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-14-этил-1-оксациклотетрадекан-2,10-дион
[128940-83-0].

Примесь G:
(3R,4S,5S,6R,7R,9R,10E,11R,12R,13S,14R)-12,13-дигидрокси-4-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,7,9,11,13-гексаметил-10-(метоксиимино)-7-метокси-6-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-14-этил-1-оксациклотетрадекан-2-он
[127182-44-9].

Примесь H:
(3R,4S,5S,6R,7R,9R,11R,12R,13S,14R)-12,13-дигидрокси-4-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,7,9,11,13-гексаметил-7-метокси-6-{[3,4,6-тридезокси-3-(N-метилформамидо)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-14-этил-1-оксациклотетрадекан-2,10-дион
[127140-69-6].

Примесь I:
(3R,4S,5S,6R,7R,9R,11R,12R,13S,14R)-4,12,13-тригидрокси-3,5,7,9,11,13-гексаметил-7-метокси-6-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-14-этил-1-оксациклотетрадекан-2,10-дион
[118058-74-5].

Примесь J:
(3R,4S,5S,6R,7R,9R,10E,11R,12R,13S,14R)-7,12,13-тригидрокси-10-(гидроксиимино)-4-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,7,9,11,13-гексаметил-6-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-14-этил-1-оксациклотетрадекан-2-он
[13127-18-9].

Примесь K:
(1R,2R,5R,6S,7S,8R,9R,11Z)-6-гидрокси-9-метокси-1,5,7,9,11,13-гексаметил-8-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-2-этил-3,15-диоксабицикло[10.2.1]пентадека-11,13-диен-4-он
[127157-35-1].

Примесь L:
(3R,4S,5S,6R,7R,9R,10Z,11R,12R,13S,14R)-12,13-дигидрокси-10-(гидроксиимино)-4-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,7,9,11,13-гексаметил-7-метокси-6-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-14-этил-1-оксациклотетрадекан-2-он
[127253-05-8].

Примесь M:
(3R,4S,5S,6R,7R,9R,10E,11R,12R,13S,14R)-12,13-дигидрокси-4-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,7,9,11,13-гексаметил-10-(гидроксиимино)-7-метокси-6-{[3,4,6-тридезокси-3-(метиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-14-этил-1-оксациклотетрадекан-2-он
[127182-43-8].

Примесь N:
(3R,4S,5S,6R,7R,9R,11R,12R,13S,14R)-13-гидрокси-4-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,7,9,11,13-гексаметил-7-метокси-6-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-14-этил-1-оксациклотетрадец-11-ен-2,10-дион
[144604-03-5].

Примесь O:
(3R,4S,5S,6R,7R,9R,10Z,11R,12R,13S,14R)-12,13-дигидрокси-4-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-3,5,7,9,11,13-гексаметил-10-(метоксиимино)-7-метокси-6-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-14-этил-1-оксациклотетрадекан-2-он
[127252-80-6].

Примесь P:
(3R,4S,5S,6R,7R,9R,11R,12R,13S,14R)-12,13-дигидрокси-4-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3,4-ди-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-5,7,9,11,13-пентаметил-7-метокси-6-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-3,14-диэтил-1-оксациклотетрадекан-2,10-дион
[123967-58-8].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм силикагель октадецилсилильный, для хроматографии, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,1 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 205 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–32 | 75 → 40 | 25 → 60
32–34 | 40 | 60
34–35 | 40 → 5 | 60 → 25
35–45 | 75 | 25

Хроматографируют и раствор стандартного образца кларитромицина для идентификации примесей, раствор стандартного образца кларитромицина, раствор сравнения А, раствор сравнения Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Кларитромицин – 1 (около 11 мин); примесь I – около 0,38; примесь A – около 0,42; примесь J – около 0,63; примесь L – около 0,74; примесь B – около 0,79; примесь M – около 0,81; примесь С – около 0,89; примесь D – около 0,96; примесь N – около 1,15; примесь Е – около 1,27; примесь F – около 1,33; примесь P – около 1,35; примесь О – около 1,41; примесь К – около 1,59; примесь G – около 1,72; примесь Н – около 1,82.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора стандартного образца кларитромицина для идентификации примесей.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения А фактор асимметрии пика (As) кларитромицина должен быть не более 1,7.

На хроматограмме раствора стандартного образца кларитромицина для идентификации примесей отношение максимум/минимум (Нp/Нv) между пиком примеси D и пиком кларитромицина должно быть не менее 3, где Нр – высота пика примеси D по отношению к базовой линии, Hv – высота между базовой линией и нижней точкой кривой, разделяющей этот пик от пика кларитромицина.

На хроматограмме раствора сравнения Б:

- относительное стандартное отклонение площади пика кларитромицина должно быть не более 5,0 % (6 введений);

- фактор асимметрии пика (AS) кларитромицина должен быть не более 2,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь G – 0,27; примесь Н – 0,15.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- содержание любой единичной примеси на хроматограмме раствора сравнения Б должно быть не более 1,0 % (площадь пика любой примеси не должна превышать более чем в 2 раза площадь пика кларитромицина).

- содержание не более четырёх единичных примесей на хроматограмме раствора сравнения Б может быть более 0,4 % (площадь не более четырёх пиков примесей может превышать 0,8 площади пика кларитромицина).

- сумма всех единичных примесей на хроматограмме раствора сравнения Б, должна быть не более 3,5 % (сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 7 раз превышать площадь пика кларитромицина).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,2 площади кларитромицина на хроматограмме раствора сравнения Б (менее 0,1 %), а также пики, появляющиеся до примеси I или после примеси Н.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции (ОФС «Сульфатная зола») с использованием эталонного раствора 1.

Вода. Не более 2,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца кларитромицина и испытуемый раствор.

Содержание кларитромицина C38H69NO13 в субстанции в пересчёте на безводное вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика кларитромицина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика кларитромицина на хроматограмме раствора сравнения А;
а1 – навеска субстанции, г;
а0 – навеска стандартного образца кларитромицина, г;
W – суммарное содержание воды в субстанции,%;
P – содержание основного вещества в стандартном образце кларитромицина,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0109 Клемастина фумарат

Клемастина
Clemastini fumaras

Взамен ФС.2.1.0109.18

##### Определение

(2R)-1-Метил-2-{2-[(1R)-1-фенил-1-(4-хлорфенил)этокси]этил}пирролидина (2E)-бут-2-ендиоат (1:1).

Содержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % клемастина фумарата C21H26ClNO∙C4H4O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в спирте 70 %, мало растворим в метаноле, очень мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца клемастина фумарата.

2. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля G.

- Подвижная фаза (ПФ). Аммиак концентрированный—метанол—тетрагидрофуран 1:20:80.

- Испытуемый раствор. Растворяют 20 мг субстанции в 10,0 мл метанола.

- Раствор сравнения. Растворяют 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца клемастина фумарата в 10,0 мл метанола.

- На линию старта ТСХ пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (2 мкг) и раствора сравнения Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат в токе холодного воздуха в течение 5 мин., опрыскивают свежеприготовленной смесью калия йодовисмутата раствора с уксусной кислотой разведённой (1:10). Далее опрыскивают водорода пероксида раствором разведённым и сразу же накрывают пластинку стеклянной пластинкой того же размера. Через 2 мин исследуют хроматограмму.

- Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и интенсивности поглощения должна соответствовать основной зоне адсорбции на хроматограмме раствора сравнения

3. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля G.

- Подвижная фаза (ПФ). Вода—муравьиная кислота—диизопропиловый эфир 5:25:70.

- Испытуемый раствор. Растворяют 40 мг субстанции в 2,0 мл метанола.

- Раствор сравнения. Растворяют 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца фумаровой кислоты в 10,0 мл спирта 96 %.

- На линию старта ТСХ пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (20 мкг) и раствора сравнения. Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С в течение 30 мин и дают остыть. Опрыскивают калия перманганата раствором 1,6 % и высушивают на воздухе.

- Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и интенсивности поглощения должна соответствовать основной зоне адсорбции на хроматограмме раствора сравнения.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 20 мл метанола должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», должна выдерживать сравнение с эталоном ВY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 3,2 до 4,2 (1 г субстанции встряхивают в течение 5 мин с 10 мл воды, ОФС «Ионометрия»).

Удельное вращение. От +15,0 до +18,0 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Фосфатный буферный раствор рН 7,1.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Фосфатный буферный раствор рН 7,1—ацетонитрил 400:600.

Фосфатный буферный раствор рН 7,1. К 19 мл натрия дигидрофосфата моногидрата раствора 13,8 % прибавляют 68 мл динатрия гидрофосфата дигидрата раствора 8,9 % и 913 мл воды.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 20:80.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в 30 мл смеси растворителей и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца клемастина для проверки пригодности системы, содержащего примесь В (4-[(1R)-1-(4-хлорфенил)-1-фенилэтокси]-1-метилазепан), растворяют в 1,0 мл смеси растворителей, используя при необходимости ультразвуковую ванну.

Испытуемый раствор и растворы сравнения используют свежеприготовленными.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, с полярными группами и этиленовыми мостиками, гибридный, эндкепированный, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 225 нм; |  |
Объём пробы | 90 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания основного пика. |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–3 | 45 | 55
3–23 | 45 → 5 | 55 → 95
23–26 | 5 | 95
26–30 | 5 → 45 | 95 → 55

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, испытуемый раствор и раствор сравнения.

Относительное время удерживания соединений. Клемастин – 1 (около 17 мин); фумаровая кислота – около 0,1; примесь В – около 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси В используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу клемастина для проверки пригодности системы и хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение ® между пиками примеси В и клемастина должно быть не менее 2,0.

Содержание каждой примеси в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения.

Допустимое содержание примесей:

- любая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,2 %.

Не учитывают примеси, составляющие менее 0,05 % и пик фумаровой кислоты.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 175 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,35 г (точная навеска) субстанции в 60 мл уксусной кислоты ледяной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 45,96 мг клемастина фумарата C21H26ClNO·C4H4O4.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0676 Клиндамицина гидрохлорид

Клиндамицин
Clindamycini hydrochloridum

Взамен ВФС 42-2956-97

C18H33ClN2O5S·HCl [21462-39-5] | М.м. 461,44

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(2S,4R)-1-Метил-N-[(1S,2S)-1-[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-тригидрокси-6-(метилсульфанил)оксан-2-ил]-2-хлорпропил]-4-пропилпирролидин-2-карбоксамида гидрохлорид.

Полусинтетический продукт из продукта ферментации. Содержит переменное количество воды. Cодержит не менее 92,0 % и не более 102,0 % клиндамицина гидрохлорида C18H33ClN2O5S·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца клиндамицина гидрохлорида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика клиндамицина на хроматограмме раствора стандартного образца клиндамицина гидрохлорида (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От +135 до +150 в пересчёте на безводное вещество (4 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

рН раствора. От 3,0 до 5,0 (10 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 6,8 г калия дигидрофосфата, растворяют в 900 мл воды, доводят значение рН раствора с помощью калия гидроксида раствора 25 % до 7,5, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 450:550.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца линкомицина гидрохлорида (примесь А), растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, 10,0 мл раствора стандартного образца клиндамицина гидрохлорида и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь A (линкомицин):
(2S,4R)-N-[(1S,2S)-2-Гидрокси-1-[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-тригидрокси-6-(метилсульфанил)оксан-2-ил]пропил]-1-метил-4-пропилпирролидин-2-карбоксамид [154-21-2].

Примесь В (клиндамицин B):
(2S,4R)-1-Метил-N-[(1S,2S)-1-[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-тригидрокси-6-(метилсульфанил)оксан-2-ил]-2-хлорпропил]-4-этилпирролидин-2-карбоксамид [18323-43-8].

Примесь C (7-эпиклиндамицин):
(2S,4R)-1-Метил-N-[(1S,2R)-1-[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-тригидрокси-6-(метилсульфанил)оксан-2-ил]-2-хлорпропил]-4-пропилпирролидин-2-карбоксамид [16684-06-3].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки | 25 °С;
Скорость потока | 1,0 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм;
Объём пробы | 20 мкл;
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика клиндамицина.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Клиндамицин – 1 (около 10 мин); примесь A – около 0,4; примесь B – около 0,65; примесь C – около 0,8.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси A и клиндамицина должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси B не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0 %);

- площадь пика примеси C не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 4,0 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,25 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 3 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 6,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,025 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. От 3,0 % до 6,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,5 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца клиндамицина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца клиндамицина гидрохлорида, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца клиндамицина гидрохлорида и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца клиндамицина гидрохлорида относительное стандартное отклонение площади пика клиндамицина должно быть не более 1,0 % (6 введений).

Содержание клиндамицина гидрохлорида C18H33ClN2O5S·HCl в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика клиндамицина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика клиндамицина на хроматограмме раствора стандартного образца клиндамицина гидрохлорида;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца клиндамицина гидрохлорида, мг;
W – содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;
P – содержание клиндамицина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце клиндамицина гидрохлорида, %.

##### ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке.

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0437 Клиндамицина фосфат

Клиндамицин
Clindamycini phosphas

Вводится впервые

##### Определение

[(2R,3R,4S,5R,6R)-4,5-Дигидрокси-6-[(1S,2S)-1-[(2S,4R)-1-метил-4-пропилпирролидин-2-карбоксамидо]-2-хлорпропил]-2-(метилсульфанил)оксан-3-ил]дигидрофосфат.

Субстанцию получают полусинтетическим путём.

Cодержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % клиндамицина фосфата C18H34ClN2O8PS в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен. Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца клиндамицина фосфата.

- Если спектры различаются, то 50 мг субстанции и фармакопейного стандартного образца клиндамицина фосфата по отдельности растворяют в 0,2 мл воды и нагревают до полного растворения. Растворы выпаривают под вакуумом досуха, сушат остатки при температуре 100–105 °С в течение 2 ч и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика клиндамицина фосфата на хроматограмме раствора стандартного образца клиндамицина фосфата (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 5 мл воды, прибавляют 5 мл натрия гидроксида раствора 40 %, перемешивают и кипятят с обратным холодильником в течение 90 мин, охлаждают и прибавляют 5 мл азотной кислоты концентрированной. Полученный раствор трижды экстрагируют метиленхлоридом порциями по 15 мл, отбрасывая экстракты. Верхний слой фильтруют. Фильтрат должен давать характерную реакцию В на фосфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +115 до +130 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 25 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»). При необходимости для растворения субстанции применяют нагревание.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 3,5 до 4,5 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 13,6 г калия дигидрофосфата в воде и доводят значение рН калия гидроксида раствором 45 % до 6,0. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 210:790.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор—ацетонитрил 400:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 3 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца клиндамицина фосфата для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси B, E, F, G, I, J, K и L, в 1,0 мл ПФА.

Примечание

Примесь В (клиндамицин B 2-фосфат):
[(2R,3R,4S,5R,6R)-4,5-дигидрокси-6-[(1S,2S)-1-[(2S,4R)-1-метил-4-этилпирролидин-2-карбоксамидо]-2-хлорпропил]-2-(метилсульфанил)оксан-3-ил]дигидрофосфат
[54887-31-9].

Примесь Е (клиндамицин):
(2S,4R)-1-метил-N-[(1S,2S)-1-[(2R,3R,4S,5R,6R)-3,4,5-тригидрокси-6-(метилсульфанил)оксан-2-ил]-2-хлорпропил]-4-пропилпирролидин-2-карбоксамид
[18323-44-9].

Примесь F (линкомицин 2-фосфат):
[(2R,3R,4S,5R,6R)-4,5-дигидрокси-6-[(1S,2S)-2-гидрокси-1-[(2S,4R)-1-метил-4-пропилпирролидин-2-карбоксамидо]пропил]-2-(метилсульфанил)оксан-3-ил]дигидрофосфат
[27480-30-4].

Примесь G (2,4-фосфатидиллинкомицин):
[(2R,3R,4S,5R,6R)-4-гидрокси-2-[(1S,2R)-2-гидрокси-1-[(2S,4R)-1-метил-4-пропилпирролидин-2-карбоксамидо]пропил]-6-(метилсульфанил)оксан-3,5-диил]гидрофосфат.

Примесь I (клиндамицин 2,4-бисфосфат):
[(2R,3R,4S,5R,6R)-4,5-дигидрокси-6-[(1S,2S)-2-гидрокси-1-[(2S,4R)-1-метил-4-пропилпирролидин-2-карбоксамидо]пропил]-2-(метилсульфанил)оксан-3,5-диил]бис(дигидрофосфат)
[1309048-48-3].

Примесь J (пропилиденовый аналог клиндамицина 2-фосфата):
[(2R,3R,4S,5R,6R)-4,5-дигидрокси-6-[(1S,2S)-1-[(2S,4R)-1-метил-4-пропилиденпирролидин-2-карбоксамидо]-2-хлорпропил]-2-(метилсульфанил)оксан-3-ил]дигидрофосфат
[1309349-64-1].

Примесь K (диклиндамицинпирофосфат):
{[(2R,3R,4S,5R,6R)-4,5-дигидрокси-6-[(1S,2S)-1-[(2S,4R)-1-метил-4-пропилпирролидин-2-карбоксамидо]-2-хлорпропил]-2-(метилсульфанил)оксан-3-ил]окси}фосфоновый
ангидрид.

Примесь L (7-эпиклиндамицина 2-фосфат):
[(2R,3R,4S,5R,6R)-4,5-дигидрокси-6-[(1S,2R)-1-[(2S,4R)-1-метил-4-пропилпирролидин-2-карбоксамидо]-2-хлорпропил]-2-(метилсульфанил)оксан-3-ил]дигидрофосфат
[620181-05-7].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,1 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–13 | 100 | 0
13–18 | 100 → 50 | 0 → 50
18–39 | 50 | 50

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Клиндамицина фосфат – 1 (около 12 мин); примесь F– около 0,15; примесь G – около 0,19; примесь I – около 0,34; примесь B – около 0,45; примесь L – около 0,64; примесь J– около 1,20; примесь E – около 1,73; примесь K – около 1,90.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей B, E, F, G, I, J, K и L используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу клиндамицина фосфата для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси F и G должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей B и L не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика клиндамицина фосфата на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

- площадь пика каждой из примесей E и F не должна превышать площадь пика клиндамицина фосфата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика каждой из примесей G, I, J и K не должна превышать 0,4 площади пика клиндамицина фосфата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,2 площади пика клиндамицина фосфата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать четырёхкратную площадь пика клиндамицина фосфата на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 5,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

** Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 10 мг клиндамицина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения – 48 ч.

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,29 ЕЭ на 1 мг клиндамицина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца клиндамицина фосфата. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца клиндамицина фосфата, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца клиндамицина фосфата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца клиндамицина фосфата фактор асимметрии пика (AS) клиндамицина фосфата должен быть не более 3,0.

Содержание клиндамицина фосфата C18H34ClN2O8PS в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика клиндамицина фосфата на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика клиндамицина фосфата на хроматограмме раствора стандартного образца клиндамицина фосфата;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца клиндамицина фосфата, мг;
W – содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание клиндамицина фосфата в фармакопейном стандартном образце клиндамицина фосфата,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0612 Клозапин (Clozapinum)

Взамен ФС 42-2803-99

##### Определение

11-(4-Метилпиперазин-1-ил)-8-хлор-5Н-дибензо[b,e][1,4]диазепин.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % клозапина С18Н19ClN4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических соединений вещество.

##### Свойства

Описание. Жёлтый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде, растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

*Растворяется в уксусной кислоте разведённой 12 %.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца клозапина.

##### Испытания

Температура плавления. От 182 до 186 °С (ОФС «Температура плавления»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 2,04 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят значение рН до 2,4 фосфорной кислотой разведённой 10 %. Количественно переносят полученный раствора в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—метанол—буферный раствор 1:1:8.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор—ацетонитрил—метанол—2:4:4.

Растворитель. Вода—метанол 20:80.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 75 мг субстанции, растворяют в 80 мл метанола и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Содержимое виалы стандартного образца клозапина для идентификации пиков (содержит примеси А, В, С и D) растворяют в 1,0 мл растворителя.

Примечание

Примесь А:
8-хлор-5,10-дигидро-11Н-дибензо[b,e][1,4]диазепин11-он
[50892-62-1].

Примесь В:
11,11'-(пиперазин-1,4-диил)бис(8-хлор-5Н-дибензо[b,e][1,4]диазепин)
[263366-81-0].

Примесь С:
11-(пиперазин-1-ил)-8-хлор-5Н-дибензо[b,e][1,4]диазепин
[6104-71-8].

Примесь D:
{2-[(2-амино-4-хлорфенил)амино]фенил}(4-метилпиперазин-1-ил)метанон
[65514-71-8].

Хроматографические условия

Колонка | 125 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 257 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА, % | ПФБ, %
--- | --- | ---
0–4 | 100 | 0
4–24 | 100 → 0 | 0 → 100
24–29 | 0 | 100

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Клозапин – 1 (около 11 мин); примесь С – около 0,9; примесь D – около 1,1; примесь A – около 1,6; примесь В – около 1,7.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В, С и D используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу клозапина для идентификации примесей.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками клозапина и примеси С должно быть не менее 2,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси D умножают на 2,7.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика клозапина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площади пиков каждой из примесей В и D не должны превышать двукратную площадь пика клозапина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площади пика примеси C не должны превышать трёхкратную площадь пика клозапина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика клозапина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать шестикратную площадь пика клозапина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы при температуре 105 °С.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Помещают 0,6 г субстанции в мерную колбу вместимостью 15 мл, встряхивают в течение 5 мин с 15 мл воды, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют. Для определения используют 5 мл полученного фильтрата разведённого водой до 10 мл.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 16,34 мг клозапина C18H19ClN4.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0438 Клоназепам (Clonazepamum)

Вводится впервые

##### Определение

7-Нитро-5-(2-хлорфенил)-1,3-дигидро-2H-1,4-бензодиазепин-2-он.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % клоназепама C15H10ClN3O3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в спирте 96 % и метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца клоназепама.

##### Испытания

Температура плавления. От 237 до 241 °С (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,3 г субстанции в 10 мл ацетона должен быть прозрачным. При возникновении голубого окрашивания раствор оставляют на 2 ч; раствор должен обесцветиться. Полученный раствор должен выдерживать сравнение с эталоном I (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном ВY6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН. От 4,5 до 7,0 (ОФС «Ионометрия», метод 3). К 0,5 г субстанции прибавляют 50 мл воды, встряхивают в течение 15 мин и фильтруют через бумажный фильтр с размером пор 12–15 мкм.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Буферный раствор. Растворяют 6,6 г аммония фосфата в 900 мл воды и доводят значение рН фосфорной кислотой разведённой 10 % или натрия гидроксида раствором 1 М до 8,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Тетрагидрофуран—метанол—буферный раствор 100:420:480.

Растворитель. Тетрагидрофуран—метанол—вода 100:420:480.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси В. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси В клоназепама, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца клоназепама, 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А и 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси В, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А: (2-амино-5-нитрофенил)(2-хлорфенил)метанон [2011-66-7].

Примесь B: 3-амино-6-нитро-4-(2-хлорфенил)хинолин-2(1H)-он [55198-89-5].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания клоназепама. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси В, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Клоназепам – 1 (около 7 мин); примесь В – около 2,1; примесь А – около 2,4.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А и В используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и примеси В должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика клоназепама должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- примесь В – не более 0,1%.

Содержание примеси В в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси В на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика примеси В на хроматограмме раствора стандартного образца примеси В;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска стандартного образца примеси В клоназепама, мг;
P – содержание примеси В в стандартном образце примеси В клоназепама,%.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,275 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 31,57 мг клоназепама C15H10ClN3O3.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0110 Клонидина гидрохлорид

Клонидин
Clonidini hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0110.18

##### Определение

N-(Имидазолидин-2-илиден)-2,6-дихлоранилина гидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % клонидина гидрохлорида C9H9Cl2N3∙HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в воде, спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области») Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца клонидина гидрохлорида.

2. Спектрофотометрия. (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл, помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 245 нм до 350 нм имеет максимумы поглощения при 272 нм и 279 нм. Удельный показатель поглощения при 272 нм составляет около 18 и при 279 нм – около 16.

3. Качественная реакция. Субстанция дает характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

* Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

* Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», должна выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,5 до 5,5 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,0 мл триэтиламина и доводят водой до метки.

Подвижная фаза. Ацетонитрил—раствор А 320:680. Доводят рН фосфорной кислотой до 6,9.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 15 мг (точная навеска) субстанции растворяют в 60 мл ПФ, используя при необходимости ультразвуковую ванну, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца клонидина гидрохлорида и 30 мг (точная навеска) 2,6-дихлоранилина [608-31-1] растворяют в ацетонитриле и доводят объём тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Раствор защищают от света и используют свежеприготовленным или хранят при температуре 4 °С в течение 30 сут.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения А доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 300 × 3,9 мм, силикагель октадецилсилильный 10 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл; |  |
Время хроматографирования | 6,6-кратное от времени удерживания пика клонидина гидрохлорида. |

Хроматографируют растворы сравнения А и Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Клонидина гидрохлорид – 1, 2,6-дихлоранилин – 3,3.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения А:

- относительное стандартное отклонение площадей всех пиков должно быть не более 5,0 % (6 введений);

- коэффициент ёмкости (k′) для всех пиков должен быть не менее 1,7.

Содержание примеси 2,6-дихлоранилина в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика 2,6-дихлоранилина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика 2,6-дихлоранилина на хроматограмме раствора сравнения Б;
а1 - навеска субстанции клонидина гидрохлорида, мг;
а0 - навеска стандартного образца 2,6-дихлоранилина, мг.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - средняя площадь пика клонидина гидрохлорида на хроматограмме раствора сравнения Б;
а1 - навеска субстанции клонидина гидрохлорида, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца клонидина гидрохлорида, мг.

Допустимое содержание примесей:

- примесь 2,6-дихлоранилина – не более 0,1 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,2 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,1 площади пика клонидина гидрохлорида на хроматограмме раствора сравнения Б (менее 0,04 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 1215 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 0,5 мл муравьиной кислоты, прибавляют 25 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до появления зелёного окрашивания (индикатор – 0,1 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 26,66 мг клонидина гидрохлорида C9H9Cl2N3∙HCl.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Контроль по показателям качества «Прозрачность раствора», «Цветность раствора», «Бактериальные эндотоксины» проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0111 Клопидогрела сульфат

Клопидогрел
Clopidogreli sulfas

Взамен ФС.2.1.0111.18

##### Определение

Метил[(2S)-2-(4,5,6,7-тетрагидротиено[3,2-c]пиридин-5-ил)-2-(2-хлорфенил)ацетата] сульфат (1:1).

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % клопидогрела сульфата C16H16ClNO2S·H2SO4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок. *Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в воде и метаноле, практически нерастворим в циклогексане.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 , снятый в диске с калия бромидом, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца клопидогрела.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец клопидогрела растворяют по отдельности в минимальных объёмах этанола безводного, выпаривают досуха на водяной бане и записывают спектры сухих остатков.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +54,0 до +58,0 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор субстанции 5 % в метаноле должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным и выдерживать сравнение с эталоном Y6. (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси

1. Энантиомерная чистота. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Безводный этанол – гептан 15:85.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в 25 мл безводного этанола и доводят объём раствора гептаном до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца клопидогрела, содержащего примеси В и С, растворяют в 2,5 мл безводного этанола и доводят объём раствора гептаном до метки.

Примечание

Примесь B:
метил[(2S)-(2-хлорфенил)(4,5,6,7-тетрагидротиено[2,3-c]пиридин-6-ил)ацетат]
[1396841-05-6].

Примесь C:
метил[(2R)-(4,5,6,7-тетрагидротиено[3,2-c]пиридин-5-ил)(2-хлорфенил)ацетат]
[120202-71-3].

Хроматографические условия

Колонка | 25 × 0,46 см силикагель, модифицированный целлюлозой, для хиральной хроматографии, 10 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,25 от времени удерживания клопидогрела. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Клопидогрел – 1 (около 18 мин); примесь С – около 0,6; примесь В – около 0,7.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей В и С используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической систем

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси С должно быть не менее 20.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение между пиками примесей В и С должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. Примесь С – не более 0,5 %.

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 0,96 г натрия пентансульфоната моногидрата в 800 мл воды и доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 2,5, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Метанол—буферный раствор 50:950.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол—ацетонитрил 50:950.

Растворитель. ПФА—ацетонитрил 40:60.

Испытуемый раствор. Растворяют 65 мг субстанции в 10 мл растворителя.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. Растворяют 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А в 25 мл растворителя.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 32 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца клопидогрела для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси В и С, растворяют в 3 мл растворителя и прибавляют 0,5 мл раствора стандартного образца примеси А, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь А:
(2S)-2-(2-хлорфенил)-2-(4,5,6,7-тетрагидротиено[3,2-c]пиридин-5-ил)уксусная
кислота [144457-28-3].

Примесь В:
Метил[(2S)-2-(2-хлорфенил)-2-(4,5,6,7-тетрагидротиено[2,3‑c]пиридин-6-ил)ацетат]
[1396841-05-6].

Примесь С:
Метил[(2R)-2-(4,5,6,7-тетрагидротиено[3,2-c]пиридин-5-ил)-2-(2-хлорфенил)ацетат]
[120202-69-9].

Хроматографические условия

Колонка | 15 × 0,39 см, эндкепированный октадецилсилил силикагель, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–3 | 89,5 | 10,5
3–48 | 89,5 → 31,5 | 10,5 → 68,5
48–68 | 31,5 | 68,5

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Клопидогрел – 1 (около 25 мин); примесь А – около 0,4; примесь В – около 1,1.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А и В используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между высотой пика примеси В и высотой нижней точки линии перегиба между пиками примеси В и пика клопидогрела относительно базовой линии должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси В не должна превышать трёхкратную площадь пика клопидогрела на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика примеси А не должна превышать двукратную площадь пика клопидогрела на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси должна быть не более площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей, не должна более чем в 5 раз превышать площадь пика клопидогрела на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика клопидогрела на хроматограмме раствора сравнения В (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,16 г (точная навеска) субстанции в смеси 10 мл ацетона, 10 мл метанола и 30 мл воды. Титруют натрия гидроксида раствором 0,1 М. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»); во время титрования может наблюдаться образование осадка.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М соответствует 20,99 мг клопидогрела сульфата C16H18ClNO6S2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0112 Клотримазол (Clotrimazolum)

Взамен ФС.2.1.0112.18

##### Определение

1-[Дифенил(2-хлорфенил)метил]-1H-имидазол.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 100,5 % клотримазола С22Н17ClN2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в спирте 96 %, мало растворим в эфире, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца клотримазола.

2. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 3 мл серной кислоты концентрированной; раствор имеет светло-жёлтый цвет. Прибавляют 10 мг ртути(II) оксида и 20 мг натрия нитрита. Смесь выдерживают при периодическом встряхивании; должно появиться оранжевое окрашивание, переходящее в оранжево-коричневое.

##### Испытания

Температура плавления. От 141 до 145 °С (ОФС «Температура плавления»).

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 20 мл спирта 96 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», должна выдерживать сравнение с эталоном BY6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). В колбу помещают 1,0 г калия дигидрофосфата и 0,5 г тетрабутиламмония гидросульфата, растворяют в воде и доводят тем же растворителем до 1000 мл.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции растворяют в 20 мл ацетонитрила и доводят тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора доводят ацетонитрилом до метки. В мерную колбу вместимостью 10,0 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят ацетонитрилом до метки.

Раствор сравнения Б. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца клотримазола для идентификации пиков (содержащего примеси А, В и F) растворяют в 1,0 мл ацетонитрила.

Раствор сравнения В. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца имидазола (примесь D) и 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси Е растворяют в 1,0 мл ацетонитрила и доводят тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25,0 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят ацетонитрилом до метки.

Примечание

Примесь А: дифенил(2-хлорфенил)метанол [66774-02-5].

Примесь В: 1-[дифенил(4-хлорфенил)метил]-1H-имидазол [23593-71-7].

Примесь D: 1H-имидазол [288-32-4].

Примесь E: фенил(2-хлорфенил)метанон [5162-03-8].

Примесь F: 1-(трифенилметил)-1H-имидазол [15469-97-3].

Хроматографические условия

Колонка | 150 мм × 4,6 мм, сферический эндкепированный октилсилил силикагель, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,% | Режим
--- | --- | --- | ---
0–3 | 75 | 25 | Изократический
3–25 | 75 → 20 | 25 → 80 | Линейный градиент
25–30 | 20 | 80 | Изократический

Хроматографируют растворы сравнения А, Б, В и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания компонентов. Клотримазол – 1 (около 12 мин); примесь D – около 0,1; примесь F – около 0,9; примесь B – около 1,1; примесь E – около 1,5; примесь A – около 1,8.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, B, F используют относительное время удерживания компонентов, хроматограмму раствора сравнения Б и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу; для идентификации пиков примесей D и E используют хроматограмму раствора сравнения В.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения Б разрешение ® между пиками примеси F и клотримазола должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А должна быть не более двукратной площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси В должна быть не более двукратной площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси D должна быть не более площади соответствующего пика на хроматограмме раствора сравнения B (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси E должна быть не более площади соответствующего пика на хроматограмме раствора сравнения B (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси F должна быть не более площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,1 %);

- площадь пика любой неидентифицированной примеси должна быть не более площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения A (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей, не должна более чем в 5 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения A (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения A (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г субстанции (точная навеска) в 80 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до зелёного окрашивания (индикатор – 0,1 мл нафтолбензеина раствора 0,2 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 34,48 мг клотримазола С22Н17ClN2.

##### Хранение

Хранение. В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0116 Кофеин (Coffeinum)

Взамен ФС.2.1.0116.18

##### Определение

1,3,7-Триметил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % кофеина C8H10N4O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белые шелковистые игольчатые кристаллы или белый кристаллический порошок. На воздухе выветривается, при нагревании возгоняется.

Растворимость. Легко растворим в горячей воде и хлороформе, умеренно (медленно) растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца кофеина.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл, помещают 0,10 г субстанции, растворяют в 70 мл хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 250 до 300 нм должен иметь максимум при 273 нм.

3. Качественная реакция. В фарфоровую чашку помещают 10 мг субстанции, прибавляют 0,5 мл водорода пероксида, 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и выпаривают на водяной бане досуха. Остаток смачивают 0,1 мл раствора аммиака; должно появиться красно-фиолетовое окрашивание.

4. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 5 мл горячей воды, охлаждают, прибавляют 0,2 мл раствора йода 0,1 М; не должно появиться ни помутнения, ни осадка. При прибавлении нескольких капель хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % должен образоваться коричневый осадок, растворимый в натрия гидроксида растворе 2 М.

##### Испытания

Температура плавления. От 234 до 239 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Растворяют 0,5 г субстанции в 50 мл горячей воды. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкости», метод 2).

Кислотность или щёлочность. Растворяют 0,2 г субстанции в 10 мл горячей воды. После охлаждения к раствору прибавляют 0,1 мл бромтимолового синего раствора 0,05 %. Должно появиться жёлтое или зелёное окрашивание. Для изменения окраски раствора на синий должно потребоваться не более 0,1 мл натрия гидроксида раствора 0,02 М.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор рН 4,5. Растворяют 0,82 г (точная навеска) натрия ацетата безводного в 900 мл воды и доводят значение рН уксусной кислотой ледяной до 4,5, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Смесь тетрагидрофуран—ацетонитрил—буферный раствор рН 4,5 20:25:955.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца кофеина для проверки пригодности хроматографической системы (содержащего примеси А, C, D и F) в 3,0 мл ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до 5 мл. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Примечание

Примесь A: 1,3-диметил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион [58-55-9].

Примесь C: 1,3,9-триметил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион [519-32-4].

Примесь D: 3,7-диметил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион [83-67-0].

Примесь F: 1,7-диметил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион [611-59-6].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 275 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания основного пика. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения, испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Кофеин – 1 (около 8 мин); примесь С – около 0,42; примесь D – около 0,46; примесь F – около 0,63; примесь A – около 0,69.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу кофеина для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примесей С и D должно быть не менее 2,0;

- разрешение (RS) между пиками примесей А и F должно быть не менее 2,5;

- фактор ассиметрии пика (AS) кофеина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика кофеина должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси должна быть не более 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 0,5 площади пика основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,25 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Посторонние алкалоиды. К 10 мл 2 % раствора субстанции прибавляют 0,2 мл реактива Майера; не должно наблюдаться помутнения раствора.

Органические примеси. Раствор 0,5 г субстанции в 5 мл серной кислоты концентрированной должен быть прозрачным и бесцветным. Раствор 0,5 г субстанции в 5 мл азотной кислоты концентрированной должен быть прозрачным и бесцветным.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения используют 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Хлориды».

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Помещают 1 г субстанции в мерную колбу вместимостью 50 мл, встряхивают в течение 1 мин с 5 мл горячей воды, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции, предварительно высушенной до постоянной массы, в 2 мл хлороформа, прибавляют 40 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты в метаноле. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 19,42 мг кофеина безводного С8Н10N4O2.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0117 Кофеин-бензоат натрия

Кофеин
Coffeinum-natrii benzoas

Взамен ФС.2.1.0117.18

##### Определение

1,3,7-Триметил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион— бензоат натрия (1/2).

Cодержит не менее 38,0 % и не более 42,0 % кофеина C8H10N4O2 и не менее 58,0 % и не более 62,0% натрия бензоата C7H5NaO2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в уксусной кислоте ледяной, умеренно растворим в спирте 95 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр остатка субстанции, полученного в испытании «Идентификация, 2. Качественная реакция» в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца кофеина.

2. Качественная реакция. Растворяют 0,5 г субстанции в 3 мл воды, добавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 10 %, 10 мл хлороформа и взбалтывают в течение 2 мин. Хлороформный раствор фильтруют через фильтр с натрия сульфатом безводным и выпаривают хлороформ на водяной бане. Остаток после высушивания до постоянной массы при 80 °С имеет температуру плавления 234-237 °С.

3. Качественная реакция. Раствор 1,0 г субстанции в 100 мл воды должен давать характерную реакцию на бензоаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным и не должен мутнеть или выделять осадка при нагревании в закрытой пробирке на водяной бане в течение 30 мин (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкости», метод 2).

Кислотность или щёлочность. Растворяют 0,25 г субстанции в 5 мл свежепрокипячённой и охлажденной воды. К раствору прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствора 1 %. Раствор не должен окрашиваться в розовый цвет. Для изменения окраски раствора на розовую должно потребоваться не более 0,15 мл натрия гидроксида раствора 0,05 М.

Потеря в массе при высушивании. Не более 5,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции и высушивают при температуре 80 °С.

Легко обугливающиеся вещества. Растворяют 0,3 г субстанции в 3,0 мл серной кислоты концентрированной. Окраска раствора не должна быть интенсивнее эталона B5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения, этот раствор должен быть бесцветным.

Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). В 5,0 мл воды растворяют 0,5 г субстанции, прибавляют 5,0 мл спирта 95 %.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,1 г субстанции в 5,0 мл воды, прибавляют 5,0 мл спирта 95 %.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % ОФС («Тяжёлые металлы», метод 3А). Растворяют 1,0 г субстанции в 10,0 мл воды.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,7 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

1. Натрия бензоат. Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции, предварительно высушенной до постоянной массы, при нагревании в 50 мл смеси уксусный ангидрид—уксусная кислота безводная 6:1, охлаждают и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты в метаноле до первой точки эквивалентности, определяемой потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

- Параллельно проводят контрольный опыт.

- 1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты в метаноле соответствует 14,41 мг натрия бензоата C7H5NaO2.

2. Кофеин. Продолжают титрование от первой до второй точки эквивалентности, определяемой потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

- 1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты в метаноле соответствует 19,42 мг кофеина С8Н10N4O2.

##### Хранение

В герметично закрытой упаковке.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0118 Ксилометазолина гидрохлорид

Ксилометазолин
Xylometazolini hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0118.18

##### Определение

2-[(4-трет-Бутил-2,6-диметилфенил)метил]-4,5-дигидро-1H-имидазола гидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % ксилометазолина гидрохлорида C16H24N2·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, в спирте 96 % и в метаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области») Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ксилометазолина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Растворяют 0,5 мг субстанции в 1 мл метанола, прибавляют 0,5 мл свежеприготовленного натрия нитропруссида раствора 5 % и 0,5 мл натрия гидроксида раствора 2 %, выдерживают в течение 10 мин и прибавляют 1 мл натрия гидрокарбоната раствора 8 %; должно появиться фиолетовое окрашивание.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным и выдерживать сравнения с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают около 0,25 г субстанции, растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. К полученному раствору прибавляют 0,1 мл метилового красного раствора 0,05 % и 0,1 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М; окраска раствора должна перейти в жёлтую от прибавления не более 0,2 мл натрия гидроксида раствора 0,01 М.

pH раствора. От 5,0 до 7,0 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Калия дигидрофосфата раствор 0,01 М доводят до значения рН фосфорной кислотой концентрированной 3,0.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор выдерживают в течение 1 часа.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси A (N-(2-аминоэтил)-2-(4-трет-бутил-2,6-диметилфенил)ацетамид [94266-17-8]) и 5 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора А и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, с полярными группами, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 70 | 30
5–20 | 70 → 15 | 30 → 85
20–35 | 15 | 85
35–40 | 15 → 70 | 85 → 30

Хроматографируют стандартный раствор А, стандартный раствор Б, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ксилометазолин – 1 (около 7,2 мин); примесь А – около 0,79.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора А разрешение (RS) между пиками примеси А и ксилометазолина должно быть не менее 2,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика ксилометазолина на хроматограмме стандартного раствора Б (не более 0,2 %);

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь ксилометазолина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 5 раз превышать площадь пика ксилометазолина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади ксилометазолина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 25 мл уксусной кислоты безводной, прибавляют 10 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 28,08 мг ксилометазолина гидрохлорида C16H24N2·HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0119 Лактоза моногидрат

Лактоза
Lactosum monohydricum

Взамен ФС.2.1.0119.18

##### Определение

β-D-Галактопиранозил-(1→4)-α-D-глюкопираноза моногидрат.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или белые кристаллы.

Растворимость. Легко растворим в воде, очень мало растворим или практически нерастворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца лактозы.

2. Качественная реакция. В мерной колбе вместимостью 100 мл растворяют 5 г субстанции в 50 мл воды и доводят до метки. К 5 мл полученного раствора прибавляют 5 мл медно-тартратного реактива и смесь нагревают до кипения; должен выпасть жёлтый осадок, переходящий затем в коричневато-красный.

##### Испытания

Удельное вращение. От +54,4 до +55,9 в пересчёте на безводное вещество (10 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»). В мерной колбе вместимостью 100 мл растворяют 10 г субстанции в 80 мл воды при нагревании до 50 °С. Охлаждают и прибавляют 0,2 мл аммиака раствора 6 М, выдерживают 30 мин и доводят объём раствора водой до метки.

Прозрачность раствора. Растворяют 1 г субстанции в 10 мл кипящей воды. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Оптическая плотность

Испытуемый раствор А. В мерной колбе вместимостью 20 мл растворяют 2,0 г субстанции в кипящей воде и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерной колбе вместимостью 20 мл доводят 2,0 мл испытуемого раствора А водой до метки.

Оптическая плотность раствора А, измеренная при длине волны 400 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать 0,04 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Оптическая плотность раствора Б, измеренная в области от 210 до 220 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать 0,25 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Оптическая плотность раствора Б, измеренная в области от 270 до 300 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать 0,07 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Кислотность или щёлочность. Растворяют 2,5 г субстанции в 50 мл воды и прибавляют 0,1–0,15 мл фенолфталеина раствора 0,1 %; красное окрашивание должно появиться от прибавления не более 0,1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида.

Вода. Не менее 4,5 % и не более 5,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции и в качестве растворителя смесь формамид—метанол 1:2.

Глюкоза или сахароза. Не более 0,5 %. Выпаривают 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Декстрин», в предварительно взвешенном тигле досуха на водяной бане. Масса остатка не должна превышать 5 мг.

Декстрин. К 2 г измельчённой субстанции прибавляют 20 мл спирта 70 %, имеющего температуру 15 °С, и часто встряхивают в течение 30 мин при 15 °С, а затем фильтруют. При смешении 10 мл полученного фильтрата с равным объёмом этанола раствор должен быть прозрачным.

Кальций. Не более 0,06 % (ОФС «Кальций», метод 1). Для определения используют 10 мл раствора, полученного в испытании «Хлориды».

Крахмал. Растворяют 1,5 г субстанции в 10 мл кипящей воды. При прибавлении к охлаждённому раствору 0,05 мл йода раствора 0,05 М не должно появляться синее окрашивание.

Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты», метод 2). Для определения используют 10 мл раствора, полученного в испытании «Хлориды».

Хлориды. Не более 0,004 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 2 г субстанции в 40 мл воды.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,0005 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2). Растворяют 4 г субстанции в 20 мл кипящей воды. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС Микробиологическая чистота».

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0439 Ламивудин (Lamivudinum)

Вводится впервые

##### Определение

4-Амино-1-[(2R,5S)-2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил] пиримидин-2(1H)-он.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % ламивудина C8H11N3O3S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Растворим в воде, умеренно растворим в метаноле, мало растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ламивудина.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика ламивудина на хроматограмме раствора стандартного образца ламивудина (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –97,0 до –99,0 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность 5 % раствора субстанции, измеренная при длине волны 440 нм в кювете с толщиной слоя 4 см, не должна превышать 0,0015 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Родственные примеси

1. Энантиомерная чистота (Примесь D). Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор аммония ацетата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 7,7 г аммония ацетата, растворяют в 900 мл воды и доводят обьём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—раствор аммония ацетата 50:950.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ламивудина для проверки пригодности хроматографической системы, содержащей примесь D, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь D:
4-Амино-1-[(2S,5R)-2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]пиримидин-2(1H)-он [134680-32-3].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель β-циклодекстрин деривативный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 15–30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 270 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | двухкратное от времени удерживания пика ламивудина. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ламивудин – 1 (около 8 минут); примесь D – около 1,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси D используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы: отношение максимум/минимум (p/v) между пиками ламивудина и примеси D должно быть не менее 15.

Допустимое содержание примеси D. Не более 0,3 %. Содержание примеси D в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»).

Вычисляется сумма площадей пиков в процентах только примесей с относительным временем удерживания от 1,2 до 1,5, за вычетом процентного содержания примеси В, полученного в испытании «Родственные примеси».

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 1,9 г аммония ацетата в 900 мл воды, доводят значение pH уксусной кислотой ледяной до 3,8, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол – буферный раствор 50:950.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси С. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) салициловой кислоты, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) цитозина и 5 мг (точная навеска) урацила, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ламивудина для проверки разделительной способности хроматографической системы, содержащей примеси А и В, растворяют в 2,0 мл ПФ, добавляют 1,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А:
rac-(2R,5S)-5-[4-амино-2-оксо-5-фторпиримидин-1(2H)-ил]-1,3-оксатиолан-2-карбоновая кислота [173602-25-0].

Примесь В:
4-амино-1-[(2R,5R)-2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]пиримидин-2(1H)-он, CAS 139757-68-9 и
4-амино-1-[(2S,5S)-2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]пиримидин-2(1H)-он [136846-20-3].

Примесь С (салициловая кислота): 2-Гидроксибензойная кислота [69-72-7].

Примесь Е (цитозин): 4-аминопиримидин-2(1H)-он [71-30-7].

Примесь F (урацил): Пиримидин-2,4(1H,3H)-дион [66-22-8].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 277 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика ламивудина. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси С и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ламивудин – 1 (около 8 минут); примесь Е – около 0,28; примесь F – около 0,32;. примесь A – около 0,36; примесь B – около 0,91; примесь J – около 1,45; примесь C – около 2,32.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, E и F используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Для идентификации пика примеси С используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора стандартного образца примеси С.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (Rs) между пиками примесей F и A должно быть не менее 1,5;

- разрешение (Rs) между пиками примеси В и ламивудина должно быть не менее 1,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие коэффициенты: примесь Е – 0,6; примесь F – 2,2; примесь J – 2,2.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать трёхкратную площадь пика ламивудина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика примеси В не должна превышать двухкратную площадь пика ламивудина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси С не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца примеси С (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должны превышать площадь пика ламивудина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать шестикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 2,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца ламивудина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ламивудина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца ламивудина и испытуемый раствор.

Содержание ламивудина C8H11N3O3S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика ламивудина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика ламивудина на хроматограмме раствора стандартного образца ламивудина;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца ламивудина, мг;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание ламивудина в фармакопейном стандартном образце ламивудина,%.

##### Хранение

В сухом защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0120 Ланолин безводный (Lanolinum anhydricum)

Взамен ФС.2.1.0120.18

##### Определение

По химической природе представляет собой очищенное жироподобное вещество, получаемое из шерсти овцы домашней (Ovis aries), состоящее из сложных эфиров высокомолекулярных спиртов и кислот, а также свободных высокомолекулярных спиртов (смеси алифатических, стероидных и тритерпеновых спиртов).

##### Свойства

Описание. Густая вязкая масса от светло-жёлтого до коричневато-жёлтого цвета со слабым специфическим запахом.

Растворимость. Очень легко растворим в циклогексане, легко растворим в хлороформе, очень мало растворим или практически нерастворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

* При растирании с водой субстанция поглощает до 150 % воды без потери мазеобразной консистенции.

##### Идентификация

Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 5 мл хлороформа и осторожно наслаивают в пробирке на 5 мл серной кислоты концентрированной; на месте соприкосновения жидкостей должно постепенно образоваться яркое красно-коричневое окрашивание (холестерин); слой серной кислоты должен проявить зелёную флуоресценцию при просмотре в УФ-свете при 365 нм.

##### Испытания

Температура плавления. От 36 до 42 °C (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 4). Субстанцию предварительно охлаждают до 8–10 °С.

Кислотное число. Не более 1 (ОФС «Кислотное число»).

Йодное число. От 18 до 36 (ОФС «Йодное число»).

Число омыления. От 90 до 105 (ОФС «Число омыления»). Прибавляют к 2 г субстанции 25 мл 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового и кипятят с обратным холодильником в течение 4 ч.

Вода. Не более 0,25 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 10 г (точная навеска) субстанции и, в качестве растворителя, 40 мл смеси хлороформ—метанол 3:2.

Водорастворимые окисляемые вещества. К 5 мл фильтрата, полученного в испытании «Растворимые в воде кислоты и щёлочи», прибавляют 0,25 мл 0,002 М раствора калия перманганата и выдерживают в течение 5 мин. Красное окрашивание раствора не должно исчезнуть.

Растворимые в воде кислоты и щёлочи. Прибавляют к 10 г субстанции 50 мл воды, погружают стакан в воду с температурой 70–80 °С и смесь выдерживают при постоянном помешивании палочкой до расплавления субстанции. После этого стакан вынимают из водяной бани и оставляют медленно охлаждаться при комнатной температуре до образования на поверхности жидкости жёлтой плёнки, водный слой фильтруют. Полученный фильтрат должен быть прозрачным и иметь нейтральную реакцию по лакмусу.

Аммиак. К 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Растворимые в воде кислоты и щёлочи», прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 1 М и нагревают до кипения. Образующиеся пары не должны вызывать посинение влажной красной лакмусовой бумаги.

Хлориды. Не более 0,035 %.

Испытуемый раствор. К 1 г субстанции прибавляют 20 мл спирта 96 % и кипятят с обратным холодильником в течение 5 мин, охлаждают, прибавляют 1 мл азотной кислоты 2 М раствора и фильтруют. К фильтрату прибавляют 0,2 мл серебра нитрата спиртового раствора 2 %.

Эталонный раствор. В течение 5 мин 20 мл спирта 96 % кипятят с обратным холодильником, охлаждают, прибавляют 1 мл азотной кислоты 2 М раствора и фильтруют. К фильтрату прибавляют 0,2 мл серебра нитрата спиртового раствора 2 %. Прибавляют 0,5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,02 М.

Опалесценция испытуемого раствора не должна превышать опалесценцию эталонного раствора.

Общая зола. Не более 0,1 % (ОФС «Зола общая»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, заполненной доверху, в прохладном, защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0121 Ланолин водный (Lanolinum hydricum)

Взамен ФС.2.1.0121.18

##### Определение

Содержит от 70 % до 75 % ланолина и от 25 % до 30 % воды.

##### Свойства

Описание. Густая вязкая масса желтовато-белого цвета со слабым характерным запахом.

* При нагревании на водяной бане плавится, разделяясь на 2 слоя: верхний – жироподобный и нижний – водный.

Растворимость. Легко растворим в хлороформе, растворим в циклогексане с отделением водного слоя, мало растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 5 мл хлороформа и осторожно наслаивают в пробирке на 5 мл серной кислоты концентрированной; на месте соприкосновения жидкостей должно постепенно образоваться яркое красно-коричневое окрашивание (холестерин); слой серной кислоты должен проявить зелёную флуоресценцию при просмотре в УФ-свете при 365 нм.

##### Испытания

Температура плавления. От 36 до 42 °C (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 4). Субстанцию предварительно охлаждают до 8–10 °С.

Кислотное число. Не более 1 (ОФС «Кислотное число»).

Йодное число. От 18 до 36 (ОФС «Йодное число»).

Число омыления. От 90 до 105 (ОФС «Число омыления»). Прибавляют к 2 г субстанции 25 мл 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового и кипятят с обратным холодильником в течение 4 ч.

Вода. От 25,0 % до 30,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции и, в качестве растворителя, 50 мл смеси хлороформ—метанол 3:2.

Водорастворимые окисляемые вещества. К 5 мл фильтрата, полученного в испытании «Растворимые в воде кислоты и щёлочи», прибавляют 0,25 мл 0,002 М раствора калия перманганата и выдерживают в течение 5 мин. Красное окрашивание раствора не должно исчезнуть.

Растворимые в воде кислоты и щёлочи. Прибавляют к 10 г субстанции 50 мл воды, погружают стакан в воду с температурой 70–80 °С и смесь выдерживают при постоянном помешивании палочкой до расплавления субстанции. После этого стакан вынимают из водяной бани и оставляют медленно охлаждаться при комнатной температуре до образования на поверхности жидкости жёлтой плёнки, водный слой фильтруют. Полученный фильтрат должен быть прозрачным и иметь нейтральную реакцию по лакмусу.

Аммиак. К 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Растворимые в воде кислоты и щёлочи», прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 1 М и нагревают до кипения. Образующиеся пары не должны вызывать посинение влажной красной лакмусовой бумаги.

Хлориды. Не более 0,035 %.

Испытуемый раствор. К 1 г субстанции прибавляют 20 мл спирта 96 % и кипятят с обратным холодильником в течение 5 мин, охлаждают, прибавляют 1 мл азотной кислоты 2 М раствора и фильтруют. К фильтрату прибавляют 0,2 мл серебра нитрата спиртового раствора 2 %.

Эталонный раствор. В течение 5 мин 20 мл спирта 96 % кипятят с обратным холодильником, охлаждают, прибавляют 1 мл азотной кислоты 2 М раствора и фильтруют. К фильтрату прибавляют 0,2 мл серебра нитрата спиртового раствора 2 %. Прибавляют 0,5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,02 М.

Опалесценция испытуемого раствора не должна превышать опалесценцию эталонного раствора.

Общая зола. Не более 0,1 % (ОФС «Зола общая»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, заполненной доверху, в прохладном, защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0440 Леветирацетам (Levetiracetamum)

Вводится впервые

##### Определение

(2S)-2-(2-Оксопирролидин-1-ил)бутанамид.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % леветирацетама С8Н14N2O2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, растворим в ацетонитриле, практически нерастворим в гептане.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца леветирацетама.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика леветирацетама на хроматограмме раствора стандартного образца леветирацетама (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От −76 до −82 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (2 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

1. Энантиомерная чистота

Подвижная фаза (ПФ). 2-Пропанол—гептан 18:82.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,200 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 2-пропаноле и доводят объём раствора этим же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки, перемешивают.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5,0 мг (точная навеска) субстанции и 5,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки, перемешивают.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора ПФ до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора ПФ до метки, перемешивают.

Примечание

Примесь D: ((2R)-2-(2-оксопирролидин-1-ил)бутанамид [103765-01-1].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель модифицированный трис(3,5-диметифенилкарбамоил)целлюлозой для хиральной хроматографии, 10 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 205 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,4-кратное от времени удерживания пика леветирацетама. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Леветирацетам – 1 (около 12 мин); примесь D – около 0,8.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси D используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора сравнения.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения:

- разрешение (RS) между пиками примеси D и леветирацетама должно быть не менее 1,5;

- фактор асимметрии пика (AS) леветирацетама должен быть не более 2,4.

Допустимое содержание примесей. Содержание примеси D вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография») и оно должно быть не более 0,8%.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,1 %).

2. Примесь G

Буферный раствор. Растворяют 1,22 г натрия декансульфоната в 850 мл воды, прибавляют 1,3 мл фосфорной кислоты концентрированной и доводят значение рН калия гидроксида раствором 20 % до 3,0. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 15:85.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20,0 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки, перемешивают.

Раствор стандартного образца примеси G. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси G, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки, перемешивают.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси G и доводят объём раствора ПФ до метки, перемешивают.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси G и 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора ПФ до метки, перемешивают.

Примечание

Примесь G: (2S)-2-аминобутанамид [143164-46-9].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 27 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 200 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл; |  |
Время хроматографирования | 5-кратное от времени удерживания пика леветирацетама. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения, и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Леветирацетам – 1 (около 4 мин); примесь G – около 3,8.

Идентификация примесей. Для идентификации примеси G используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора сравнения.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками леветирацетама и примеси G должно быть не менее 5,0.

Содержание примеси G в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика примеси G на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика примеси G на хроматограмме раствора сравнения;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца примеси G, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание примеси G в фармакопейном стандартном образце примеси G,%;
102,14 – молекулярная масса примеси G;
138,60 – молекулярная масса примеси G в виде гидрохлорида.

Допустимое содержание примесей:

Примесь G – не более 0,05 %.

3. Другие примеси

Подвижная фаза (ПФА). Ацетонитрил—фосфатный буферный раствор рН 5,5 5:95.

Подвижная фаза (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50,0 мг (точная навеска) субстанции и доводят объём раствора ПФА до метки, перемешивают.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А и 5,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси Е, прибавляют 1,0 мл испытуемого раствора, растворяют в 80 мл ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки, перемешивают.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора ПФА до метки, перемешивают.

Раствор стандартного образца примеси С. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 5,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси С и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки, перемешивают.

Раствор для проверки чувствительности хроматоргафической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки, перемешивают.

Примечание

Примесь А: (2RS)-2-(2-оксопирролидин-1-ил)бутановая кислота [67118-31-4].

Примесь C: пиридин-2(1H)-ол [72762-00-6].

Примесь E: (1R)-1-фенилэтан-1-амин [3886-69-9].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,9 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 205 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–3 | 100 | 0
3–20 | 100 → 71 | 0 → 29
20–25 | 71 | 29
25–30 | 71 → 100 | 29 → 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартный раствор, раствор сравнения, раствор стандартного образца примеси С и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Леветирацетам – 1 (около 11 мин); примесь С – около 0,5; примесь А – около 0,7; примесь Е – около 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации примесей А и Е используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора; для идентификации примеси С используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора стандартного образца примеси С.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора разрешение (RS) между пиками примеси Е и леветирацетама должно быть не менее 3,5.

Содержание примеси С в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика примеси С на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика примеси С на хроматограмме раствора стандартного образца примеси С;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца примеси С, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание примеси С в фармакопейного стандартном образце примеси С,%.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика леветирацетама на хроматограмме раствора сравнения;
a1 - навеска субстанции.

Допустимое содержание примесей:

- примесь А – не более 0,3 %;

- примесь С – не более 0,025 %;

- любая другая примесь – не более 0,05 %;

- сумма примесей – не более 0,4 %.

Не учитывают пики (за исключением пика примеси С), площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,03 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50,0 мг (точная навеска) субстанции и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки, перемешивают.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца леветирацетама и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки, перемешивают.

Хроматографируют раствор стандартного образца леветирацетама и испытуемый раствор.

Содержание леветирацетама C8H14N2O2 в субстанции в процентах (Х) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика леветирацетама на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика леветирацетама на хроматограмме раствора фармакопейного стандартного образца леветирацетама;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца леветирацетама, мг;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание леветирацетама в фармакопейном стандартном образце леветирацетама,%.

##### Хранение

Не требует особых условий.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0441 Левокарнитин (Levocarnitine)

Вводится впервые

##### Определение

(3R)-3-Гидрокси-4-(триметилазанийил)бутаноат.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 103,0 % левокарнитина C7H15NO3 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в тёплом спирте 96 %, практически нерастворим в ацетоне.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом с предварительно высушенной субстанцией в вакууме при 50 °С в течение 5 часов, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру аналогично высушенного фармакопейного стандартного образца левокарнитина.

##### Испытания

Удельное вращение. От –29,0 до –32,0 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (10 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 5 г субстанции в 50 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 6,5 до 8,5 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Калия дигидрофосфата раствор 0,05 М доводят натрия гидроксида раствором 8,5 % до pH 4,7.

Подвижная фаза (ПФ). Буферный раствор—ацетонитрил 350:650.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в 10 мл ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 12,5 мг фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в растворе стандартного образца примеси А и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь А: 4-(триметилазанийил)бут-2-еноат [927-89-9].

Хроматографические условия

Колонка | 300 × 3,9 мм, силикагель аминопропилметилсилильный для хроматографии, 10 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 205 нм; |  |
Объём пробы | 25 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика левокарнитина. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси A, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Левокарнитин – 1 (около 10 мин); примесь A – около 1,1.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками левокарнитина и примеси А должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна превышать 0,6 площади пика примеси A на хроматограмме раствора стандартного образца примеси А (не более 0,3 %);

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика левокарнитина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей (кроме примеси А) не должна превышать пятикратную площадь пика левокарнитина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика левокарнитина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 2 г (точная навеска) субстанции.

Мышьяк. Не более 0,0002 % (ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения используют 0,25 г субстанции.

Сульфаты. Не более 0,03 % (ОФС «Сульфаты», метод 2). Растворяют 0,33 г субстанции в 10 мл воды.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,1 г субстанции в 10 мл воды.

Сульфатная зола. Не более 0,5 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3Б).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,1 ЕЭ на 1 мг левокарнитина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,125 г (точная навеска) субстанции в 3 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 50 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 16,12 мг левокарнитина C7H15NO3.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства стерильных лекарственных форм.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0023 Левоментол (Levomentholum)

Взамен ФС.2.1.0023.15

##### Определение

(1R,2S,5R)-5-Метил-2-(пропан-2-ил)циклогексанол.

Содержит не менее 99,0 % левоментола C10H20O.

##### Свойства

Описание. Бесцветные кристаллы или кристаллический порошок с сильным характерным запахом.

Растворимость. Очень легко растворим в спирте 96 %, эфире, уксусной кислоте, легко растворим в жидком парафине и жирных маслах, очень мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр образца субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца левоментола.

2. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 1 мл серной кислоты концентрированной и прибавляют 1 мл ванилина раствора 1 % в серной кислоте; должно появиться жёлтое окрашивание, которое при прибавлении 1 мл воды должно переходить в красное.

##### Испытания

Температура плавления. От 41 до 44 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельное вращение. От –48 до –51 (10 % раствор в спирте 96 %, ОФС «Оптическое вращение»).

Кислотность или щёлочность. Растворяют 1 г субстанции в 10 мл спирта 96 %. К полученному раствору прибавляют 0,05 мл метилового красного спиртового раствора 0,1 %. Розовая окраска раствора должна изменяться на жёлтую при прибавлении не более 0,05 мл 0,05 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,2 г субстанции, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца левоментола и 20 мг изоментола, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | стеклянная 2 м × 2,0 мм, 15 % макрогол 1500 на кальцинированном кизельгуре, промытом хлористоводородной кислотой, 0,125–0,180 мм (80–120 меш); |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | азот; |  |
Скорость потока газа-носителя | 30 мл/мин; |  |
Температура: | Инжектор | 150 °С; |
| Колонка | 120 °С; |
| Детектор | 200 °С; |
Объём пробы | 1 мкл |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика левоментола. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками изоментола и ментола должно быть не менее 1,4.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- сумма примесей – не более 3,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 % от суммы площадей всех пиков.

Нелетучий остаток. Не более 0,05 %. Выпаривают 2,0 г (точная навеска) субстанции на водяной бане досуха. Остаток, высушенный до постоянной массы при температуре от 100 до 105 °C, не должен превышать 0,05 %.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Помещают 0,7 г (точная навеска) субстанции в колбу с обратным холодильником, прибавляют 10 мл уксусного ангидрида раствора 12 % (о/о) в безводном пиридине. Нагревают с обратным холодильником на песчаной бане при слабом кипении в течение 2 ч, затем прибавляют через холодильник 25 мл воды, охлаждают и титруют образовавшуюся уксусную кислоту 0,5 М раствором натрия гидроксида до появления розового окрашивания (индикатор – 1 капля фенолфталеина раствора 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,5 М раствора натрия гидроксида соответствует 78,14 мг левоментола C10H20O.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0442 Левосимендан (Levosimendanum)

Вводится впервые

##### Определение

N-{4-[(4R)-4-Метил-6-оксо-1,4,5,6-тетрагидропиридазин-3-ил]фенил}карбоногидразоноилдицианид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % левосимендана C14H12N6O в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. От жёлтого или жёлтого с зеленоватым, или жёлтого с оранжевым оттенком цвета до тёмно-жёлтого с коричневатым оттенком цвета аморфный порошок.

Растворимость. Легко растворим в диметилформамиде, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца левосимендана.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 12 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в этаноле и доводят объём раствора до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл и доводят объём раствора этанолом до метки.

Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 до 450 нм должен иметь максимумы при 383 нм и 289 нм, и минимум при 318 нм.

##### Испытания

Удельное вращение. От –596 до –632 в пересчёте на сухое вещество (0,1 % раствор субстанции в диметилформамиде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,05 г субстанции в 20 мл этанола должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», измеренная при длине волны 600 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать 0,3 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 2,0 г натрия дигидрофосфата дигидрата в 900 мл воды, доводят значение рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 2,10, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Метанол—ПФА 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20,0 мг субстанции, растворяют в 10 мл диметилсульфоксида, прибавляют 10 мл этанола и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь 1:
(2Z)-({4-[(4R)-4-метил-6-оксо-1,4,5,6-тетрагидропиридазин-3-ил]фенил}гидразинилиден)-2-цианоацетамид
[274263-65-9].

Примесь 2:
этил[(2Z)-({4-[(4R)-4-Метил-6-оксо-1,4,5,6-тетрагидропиридазин-3-ил]фенил}гидразинилиден)-2-цианоацетат]
[58782509].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 25 °C; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 380 нм; |  |
Объём пробы | 30 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 80 → 70 | 20 → 30
5–15 | 70 | 30
15–30 | 70 → 10 | 30 → 90

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Левосимендан – 1 (около 14 мин); примесь 1 – около 0,4; примесь 2 – около 1,1.

*Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика левосимендана должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) левосимендана должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика левосимендана должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей 1 и 2 не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика левосимендана на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика левосимендана на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Энантиомерная чистота. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 2,3 г аммония дигидрофосфата в 900 мл воды, доводят значение рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,50, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—буферный раствор 75:925.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20,0 мг субстанции, растворяют в 10 мл диметилсульфоксида и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 3,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 24 мг симендана, прибавляют 10 мл диметилсульфоксида и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и 20 мг фармакопейного стандартного образца левосимендана, прибавляют 10 мл диметилсульфоксида и доводят объём раствора метанолом до метки.

Примечание

Декстросимендан:
N-{4-[(4S)-4-метил-6-оксо-1,4,5,6-тетрагидропиридазин-3-ил]фенил}карбоногидразоноилдицианид [144238-75-5].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель модифицированный овомукоидом для хиральной хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °C; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 380 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл; |  |
Время хроматографирования | 20 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Левосимендан – 1 (около 10 мин); декстросимендан – около 1,2.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками левосимендана и декстросимендана должно быть не менее 1,25.

На хроматограмме раствора сравнения:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика левосимендана должно быть не менее 20;

- фактор асимметрии пика (AS) левосимендана должен быть не более 2,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика левосимендана должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика декстросимендана не должна превышать площадь пика левосимендана на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3Б).

Бактериальные эндотоксины. Не более 16 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции концентрацией 1 мг левосимендана в 1 мл этилового спирта 96 %, нагревают не выше 70 °С и перемешивают до полного растворения субстанции.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). ПФБ—ПФА 400:600.

Растворитель. Диметилсульфоксид—этанол 10:10.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца левосимендана. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца левосимендана, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

- Объём пробы: 20 мкл;
  Время хроматографирования: 15 мин.

Хроматографируют раствор стандартного образца левосимендана и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца левосимендана:

- фактор асимметрии пика (AS) левосимендана должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика левосимендана должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание левосимендана C14H12N6O в субстанции в процентах в пересчёте на сухое вещество (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика левосимендана на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика левосимендана на хроматограмме раствора стандартного образца левосимендана;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца левосимендана, мг;
W – потеря в массе при высушивании,%;
P – содержание левосимендана в фармакопейном стандартном образце левосимендана,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Перед проведением испытания должна быть проверена разделительная способность хроматографической системы.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0443 Левотироксин натрия гидрат

Левотироксин натрия
Levothyroxinum natricum hydricum

Вводится впервые

##### Определение

(2S)-2-Амино-3-[4-(4-гидрокси-3,5-дииодфенокси)-3,5-дииодфенил]пропаноат натрия гидрат.

Содержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % левотироксина натрия C15H10I4NNaO4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество. Содержит переменное количество воды.

##### Свойства

Описание. Почти белый или слегка коричневато-жёлтый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Мало растворим в спирте 96 %, очень мало или практически нерастворим в воде.

* Растворяется в разбавленных растворах минеральных кислот и щелочей.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца левотироксина натрия.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика левотироксина на хроматограмме раствора стандартного образца левотироксина натрия (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. К 0,2 г субстанции прибавляют 2 мл серной кислоты разведённой 9,8 %, нагревают на водяной бане и, с осторожностью, продолжают нагревать на открытом пламени, повышая температуру до 600±50 °С. Нагревание продолжают до исчезновения частиц чёрного цвета. Полученный после сжигания остаток растворяют в 2,0 мл воды; полученный раствор должен давать характерную реакцию на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +16 до +20 в пересчёте на безводное вещество (ОФС «Оптическое вращение»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 23 мл слегка кипящей смеси хлористоводородной кислоты раствор 1 М—спирт 96 % 1:4, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Удельное вращение», должен выдерживать сравнение с эталоном ВY3 (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 2000 мл помещают 900 мл воды, прибавляют 1,97 г фосфорной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). В мерную колбу вместимостью 2000 мл помещают 1,97 г фосфорной кислоты концентрированной и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Растворитель. ПФА—спирт 96 % 25:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца левотироксина натрия и 2,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл стандартного раствора А и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца левотироксина, содержащего примеси F и G, растворяют в растворителе, обрабатывают ультразвуком в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора Б и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А:
(2S)-2-амино-3-[4-(4-гидрокси-3-иодфенокси)-3,5-дииодфенил]пропановая кислота [6893-02-3].

Примесь F:
(2S)-2-амино-3-{4-[4-(4-гидрокси-3,5-дииодфенокси)-3,5-дииодфенокси]-3,5-дииодфенил}пропановая кислота [911661-90-0].

Примесь G: неизвестная структура.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 225 нм; |  |
Объём пробы | 25 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 70 | 30
10–40 | 70 → 20 | 30 → 80
40–50 | 20 | 80

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, стандартный раствор А, стандартный раствор Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Левотироксин – 1 (около 11 мин); примесь А – около 0,5; примесь F – около 2,0; примесь G – около 2,4.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора А. Для идентификации пиков примесей F и G используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика левотироксина должно быть не менее 10.

На хроматограмме стандартного раствора А:

- разрешение (RS) между пиками примеси А и левотироксина должно быть не менее 5,0;

- фактор асимметрии пика (AS) левотироксина и примеси А должен быть не более 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика примеси А на хроматограмме стандартного раствора А (не более 1,0 %);

- площадь пика примеси F не должна превышать пятикратную площадь пика левотироксина на хроматограмме стандартного раствора Б (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси G не должна превышать трёхкратную площадь пика левотироксина на хроматограмме стандартного раствора Б (не более 0,3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать двукратную площадь пика левотироксина на хроматограмме стандартного раствора Б (не более 0,2 %);

- сумма примесей – не более 2,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика левотироксина на хроматограмме стандартного раствора Б (менее 0,05 %).

Вода. От 6,0 % до 12,0 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца левотироксина натрия. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца левотироксина натрия, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца левотироксина натрия и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца левотироксина натрия фактор асимметрии пика (AS) левотироксина должен быть не более 1,5.

Содержание левотироксина натрия C15H10I4NNaO4 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика левотироксина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика левотироксина на хроматограмме раствора стандартного образца левотироксина натрия;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца левотироксина натрия, мг;
P - содержание левотироксина натрия в фармакопейном стандартном образце левотироксина натрия,%;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В сухом, защищённом от света месте при температуре от 2 до 8 °С.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0122 Левофлоксацин гемигидрат

Левофлоксацин
Levofloxacinum hemihydricum

Взамен ФС.2.1.0122.18

##### Определение

(3S)-3-Метил-10-(4-метилпиперазин-1-ил)-7-оксо-9-фтор-2,3-дигидро-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота гемигидрат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % левофлоксацина в пересчёте на безводное и не содержащее остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в воде, растворим в уксусной кислоте, мало растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области частот от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца левофлоксацина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика левофлоксацина на хроматограмме раствора фармакопейного стандартного образца левофлоксацина (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –92 до –106 в пересчёте на безводное вещество (0,5 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 100 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y5 или GY5. (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

Родственные примеси

Энантиомерная чистота. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,32 г D-фенилаланина и 0,75 г меди(II) сульфата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—раствор А 150:850.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 10 мл воды и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца левофлоксацина, прибавляют 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси Е, растворяют в 10 мл воды и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь Е:
(3R)-3-метил-10-(4-метилпиперазин-1-ил)-7-оксо-9-фтор-2,3-дигидро-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота [100986-86-5].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 0,7 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 294 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 30 мин. |  |

Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Левофлоксацин – 1; примесь Е – около 0,91.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси Е используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками примеси 5 и левофлоксацина должно быть не менее 2,0;

- фактор асимметрии пика (AS) левофлоксацина должен быть не более 1,5.

Допустимое содержание примесей. Содержание примеси Е в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- примесь Е – не более 1,0 %.

Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

В зависимости от способа получения субстанции левофлоксацина гемигидрата и от предполагаемого наличия примесей, для определения показателя «Родственные примеси» применяют различные подходы. В случае если потенциальной примесью является примесь 3, рекомендуется использовать метод 1. Метод 2 в сочетании с определением энантиомерной чистоты рекомендуется использовать при потенциальном наличии примеси 6.

Метод 1

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 8,5 г аммония ацетата, 1,25 г меди(II) сульфата и 1,3 г L-изолейцина, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—раствор А 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца левофлоксацина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца левофлоксацина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают около 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси Е, растворяют в растворе стандартного образца левофлоксацина и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца левофлоксацина и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А:
(3S)-3-метил-7-оксо-10-(пиперазин-1-ил)-9-фтор-2,3-дигидро-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая
кислота [117707-40-1].

Примесь В:
(3S)-3-метил-10-{[2-(метиламино)этил]амино}-7-оксо-9-фтор-2,3-дигидро-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая
кислота [151250-76-9].

Примесь С:
4-{(3S)-6-марбокси-3-метил-7-оксо-9-фтор-2,3-дигидро-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-10-ил}-1-метилпиперазин-1-оксид
[117678-38-3].

Примесь D:
(3S)-3-метил-10-(4-метилпиперазин-1-ил)-7-оксо-2,3-дигидро-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая
кислота [117620-85-6].

Примесь E:
(3R)-3-метил-10-(4-метилпиперазин-1-ил)-7-оксо-9-фтор-2,3-дигидро-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая
кислота [100986-86-5].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 45 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 360 нм; |  |
Объём пробы | 25 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное времени удерживания пика левофлоксацина. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца левофлоксацина и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Левофлоксацин – 1 (около 12 мин); примесь А – около 0,47; примесь В – около 0,52; примесь С – около 0,63; примесь D – около 0,73; примесь E – около 1,21.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси E используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Для идентификации пиков примесей А, В, С и D используют относительное время удерживания соединений.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика левофлоксацина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками левофлоксацина и примеси Е должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца левофлоксацина фактор асимметрии пика (AS) левофлоксацина должен быть не менее 0,5 и не более 1,5;

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь В – 1,1; примесь С – 0,9.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- примесь A – не более 0,3%;

- примесь B – не более 0,3%;

- примесь C – не более 0,3%;

- примесь D – не более 0,3%;

- примесь E – не более 0,8%;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %, не считая примесь С.

Метод 2

Буферный раствор. Растворяют 3,08 г аммония ацетата и 8,43 г натрия перхлората в 900 мл воды, доводят значение рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 2,2, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 160:840.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—метанол—буферный раствор 300:200:500.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 1:10.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 8 мл ацетонитрила, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца левофлоксацина А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца левофлоксацина, растворяют в 8 мл ацетонитрила, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца левофлоксацина Б. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца левофлоксацина А и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в растворе аммиака 0,2 % в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси F. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси F, растворяют в метаноле, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца левофлоксацина А, прибавляют 2,0 мл раствора стандартного образца примеси А и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца левофлоксацина Б, прибавляют 1,0 мл раствора стандартного образца примеси F и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора для проверки пригодности хроматографической системы и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A:
(3S)-3-метил-7-оксо-10-(пиперазин-1-ил)-9-фтор-2,3-дигидро-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая
кислота [117707-40-1].

Примесь F:
(3S)-3-метил-7-оксо-9,10-дифтор-2,3-дигидро-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота
[100986-89-8].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 3,0 мкм; |
Температура колонки | 38 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Градиентное элюирование

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 100 | 0
5–10 | 100 → 82 | 0 → 18
10–15 | 82 → 40 | 18 → 60
15–30 | 40 | 60
30–30,1 | 40 → 100 | 60 → 0
30,1–38 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Левофлоксацин – 1; примесь А – около 0,9; примесь F – около 2,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Для идентификации пика примеси F используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика левофлоксацина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и левофлоксацина должно быть не менее 2,0.

Содержание примеси F в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика примеси F на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика примеси F на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца примеси F, мг;
P – содержание примеси F в фармакопейном стандартном образце примеси F,%.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика левофлоксацина на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца левофлоксацина, мг;
P – содержание левофлоксацина в фармакопейном стандартном образце левофлоксацина,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь А – не более 0,2 %;

- примесь F – не более 0,13 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Вода. От 2,0 % до 3,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции и, в качестве растворителя, смесь формамид—метанол 1:1.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции и платиновый тигель.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 0,5 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,5 ЕЭ на 1 мг левофлоксацина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—буферный раствор 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца левофлоксацина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца левофлоксацина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца левофлоксацина фактор асимметрии пика (AS) левофлоксацина должен быть не менее 0,5 и не более 1,5;

Содержание левофлоксацина C18H20FN3O4 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (\($X)$\) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика левофлоксацина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика левофлоксацина на хроматограмме раствора стандартного образца левофлоксацина;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца левофлоксацина, мг;
Р - содержание левофлоксацина в фармакопейном стандартном образце левофлоксацина,%;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0444 Леналидомид (Lenalidomidum)

Вводится впервые

##### Определение

(3RS)-3-(4-Амино-1-оксо-1,3-дигидро-2H-изоиндол-2-ил)пиперидин-2,6-дион.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % леналидомида C13H13N3O3 в в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Кристаллический порошок от белого до светло-жёлтого цвета.

Растворимость. Легко растворим или растворим в диметилсульфоксиде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца леналидомида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 мг субстанции, растворяют в 80 мл диметилсульфоксида и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 до 400 нм должен иметь максимумы при 259 нм и 315 нм и минимум при 280 нм.

##### Испытания

Угол вращения. От –0,1° до +0,1° (1 % раствор субстанции в диметилсульфоксиде при длине кюветы 2 дм, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 1,08 г натрия октансульфоната и 1,36 г калия дигидрофосфата в 800 мл воды, доводят значение рН до 2,5 фосфорной кислотой концентрированной, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил–метанол 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 40 мг субстанции, прибавляют 40 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М, обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин, охлаждают до комнатной температуры, доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки и фильтруют. Срок годности раствора – 2 ч при комнатной температуре или 10 ч при температуре 5±3 °С.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки. Срок годности раствора – 6 ч.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Выдерживают 5,0 мл испытуемого раствора при температуре 80 °С в течение 5 часов. Срок годности раствора – 2 сут.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки. Срок годности раствора – 6 ч.

Примечание

Примесь 1:
(2RS)-5-амино-2-(4-амино-1-оксо-1,3-дигидро-2H-изоиндол-2-ил)-5-оксопентановая кислота [2197420-75-8].

Примесь 2:
(4RS)-5-амино-4-(4-амино-1-оксо-1,3-дигидро-2H-изоиндол-2-ил)-5-оксопентановая кислота [2197414-57-4].

Примесь 3:
(2RS)-2-(4-амино-1-оксо-1,3-дигидро-2H-изоиндол-2-ил)пентандиовая кислота [295357-66-3].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель нитрильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 50 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Леналидомид – 1 (около 14 мин); примесь 1 – около 0,63; примесь 2 – около 0,75; примесь 3 – около 0,89.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика леналидомида должно быть не менее 10,0.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси 3 и леналидомида должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) леналидомида должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика леналидомида должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь 1 – 1,9; примесь 2 – 1,8; примесь 3 – 1,9.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей 1, 2 и 3 не должна превышать площадь пика леналидомида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика леналидомида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика леналидомида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1 или метод 2, с использованием испарителя). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции. При использовании метода 2 устанавливают температуру 150 °С и скорость потока 60±10 мл/мин.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты ледяной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 25,93 мг леналидомида C13H13N3O3.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0445 Летрозол (Letrozolum)

Вводится впервые

##### Определение

4,4'-(1H-1,2,4-Триазол-1-илметилен)дибензонитрил.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % летрозола C17H11N5 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим или растворим в метиленхлориде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца летрозола.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика летрозола на хроматограмме раствора стандартного образца летрозола А (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Температура плавления. От 181 до 188 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Вода.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 30:70.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 60 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца летрозола А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца летрозола, растворяют в 30 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца летрозола Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца летрозола А и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца летрозола и 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси A, растворяют в 30 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца летрозола Б и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A: 4,4'-(4H-1,2,4-триазол-4-илметилен)дибензонитрил [112809-52-6].

Примесь B: 4,4',4"-метантриилтрибензонитрил [113402-31-6].

Хроматографические условия

Колонка | 125 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °C; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–25 | 70 → 30 | 30 → 70
25–25,01 | 30 → 70 | 70 → 30
25–35 | 70 | 30

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца летрозола Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Летрозол – 1 (около 13 мин); примесь A – около 0,67; примесь B – около 2,40.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Для идентификации пика примеси В используют относительное время удерживания соединений.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика летрозола должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси A и летрозола должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца летрозола Б фактор асимметрии пика (AS) летрозола должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика летрозола на хроматограмме раствора стандартного образца летрозола (Б);
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска стандартного образца летрозола, мг;
P – содержание летрозола в стандартном образце летрозола,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь A – не более 0,3 %;

- примесь B – не более 0,2 %;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,3 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 30 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца летрозола А и испытуемый раствор.

На хроматограмме раствора стандартного образца летрозола А фактор асимметрии пика (AS) летрозола должен быть не менее 0,8 и не более 1,5.

Содержание летрозола C17H11N5 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика летрозола на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика летрозола на хроматограмме раствора стандартного образца летрозола (А);
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца летрозола, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание летрозола в фармакопейном стандартном образце летрозола,%.

##### Хранение

В плотно закрытой упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0446 Лефлуномид (Leflunomidum)

Вводится впервые

##### Определение

5-Метил-N-[4-(трифторметил)фенил]-1,2-оксазол-4-карбоксамид.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 103,0 % лефлуномида C12H9F3N2O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в метаноле, растворим в спирте 96 %, умеренно растворим в метиленхлориде, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца лефлуномида. Субстанцию и фармакопейный стандартный образец предварительно высушивают при температуре 130 °С в течении 10 мин.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика лефлуномида на хроматограмме раствора стандартного образца лефлуномида (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Температура плавления. От 164 до 168 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Все испытания выполняют в месте, защищённом от прямого света, используя свежеприготовленные растворы.

Буферный раствор. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 5 мл триэтиламина, растворяют в 650 мл воды и доводят значение рН фосфорной кислотой до 3,4.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 350:650.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл ацетонитрила и доводят объём раствора ПФ до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 125 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл ацетонитрила и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 12,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в 5 мл ацетонитрила и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца лефлуномида для идентификации пиков, содержащего примеси В и С, растворяют в 2 мл ПФ при обработке ультразвуком в течение 10 мин.

Примечание

Примесь А: 4-(Трифторметил)анилин [455-14-1].

Примесь В: (2Z)-3-Гидрокси-N-[4-(трифторметил)фенил]-2-цианобут-3-енамид [163451-81-8].

Примесь С: 5-Метил-N-[3-(трифторметил)фенил]-1,2-оксазол-4-карбоксамид [61643-23-0].

Хроматографические условия

Колонка | 125 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика лефлуномида. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси А, раствор сравнения, испытуемый раствор А и испытуемый раствор Б.

Относительное время удерживания соединений. Лефлуномид – 1 (около 25 мин); примесь В – около 0,2; примесь А – около 0,4; примесь С – около 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу лефлуномида и хроматограмму раствора для проверки пригодности системы для идентификации пиков примесей В и С.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси С и лефлуномидом должно быть не менее 3,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора А:

- площадь пика примеси В не должна превышать трёхкратную площадь пика лефлуномида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика лефлуномида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей, кроме примеси В, не должна превышать двукратную площадь пика лефлуномида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

На хроматограмме испытуемого раствора Б. Площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика лефлуномида на хроматограмме раствора стандартного образца примеси А (не более 0,01 %).

На хроматограмме испытуемого раствора А не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика лефлуномида на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают (в вакууме) до постоянной массы 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 60 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца лефлуномида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца лефлуномида, растворяют в 5 мл ацетонитрила и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца лефлуномида и испытуемый раствор А.

Содержание лефлуномида C12H9F3N2O2 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика лефлуномида на хроматограмме испытуемого раствора А;
S0 – площадь пика лефлуномида на хроматограмме раствора стандартного образца лефлуномида;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца лефлуномида, мг;
P – содержание лефлуномида в фармакопейном стандартном образце лефлуномида,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0123 Лидокаина гидрохлорид

Лидокаин
Lidocaini hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0123.18

##### Определение

N-(2,6-Диметилфенил)-2-(диэтиламино)ацетамида гидрохлорид моногидрат.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % C14H22N2O·HCl в пересчёте на безводное, свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96 %, растворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца лидокаина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Прибавляют к 0,25 г субстанции 10,0 мл воды, подщелачивают по красной лакмусовой бумаге 8,5 % раствором натрия гидроксида. Выпавший осадок фильтруют и промывают на фильтре водой. Половину осадка растворяют в 1,0 мл спирта 96 % и прибавляют 0,5 мл 5 % раствора кобальта нитрата; должен образоваться голубовато-зелёный осадок. (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 74 до 79 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1). Субстанцию предварительно не высушивают.

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10,0 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,0 до 5,5 (0,5 % раствор, ОФС «Ионометрия»,
метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 4,85 г калия дигидрофосфата в 800 мл воды и доводят рН раствора натрия гидроксида раствором 30 % до 8,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 100 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор примеси А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор примеси Н. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси Н и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора примеси А, 1,0 мл раствора примеси Н и 1,0 мл раствора сравнения, доводят объём полученного раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь A: 2,6-диметиланилин [87-62-7].

Примесь Н: N-(2,6-диметилфенил)-2-хлорацетамид [1131-01-7].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,9 мм, кремнийорганический полимер, аморфный, октадецилсилильный с полярными мостиками, эндкепированный, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3,5-кратное от времени удерживания основного пика. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор примеси А, раствор примеси Н и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Лидокаин – 1 (около 17 мин); примесь H – около 0,37; примесь А – около 0,40.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примесей Н и А должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь соответствующего пика на хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (не более 0,01 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика лидокаина на хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика лидокаина на хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (не более 0,5 %);

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика лидокаина на хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. От 5,5 % до 7,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,25 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3Б).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,58 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 1 мл муравьиной кислоты 99,7 % на магнитной мешалке, прибавляют 50 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 27,08 мг лидокаина гидрохлорида C14H22N2O·HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0124 Лизиноприла дигидрат

Лизиноприл
Lisinoprilum dihydricum

Взамен ФС.2.1.0124.18

##### Определение

(2S)-1-[(2S)-6-Амино-2-{[(1S)-1-карбокси-3-фенилпропил]амино}гексаноил]пирролидин-2-карбоновая кислота, дигидрат.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % лизиноприла C21H31N3O5 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в воде, умеренно растворим в метаноле, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца лизиноприла дигидрата.

##### Испытания

Удельное вращение. От –43 до –47 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в растворе цинка ацетата, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Фосфатный буферный раствор рН 3,8. Растворяют 3,12 г натрия дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислотой разведённой 10 % до 3,8, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Фосфатный буферный раствор рН 3,5. Растворяют 3,12 г натрия дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислотой разведённой 10 % до 3,5, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—фосфатный буферный раствор рН 3,8 30:970.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—фосфатный буферный раствор рН 3,5 205:795.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор стандартного образца примеси F. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси F, растворяют в ПФА и доводят ПФА до метки. В мерную колбу объёмом 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор стандартного образца примеси G. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси G, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу объёмом 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу объёмом 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 7,5 мг (точная навеска) стандартного образца лизиноприла, 5 мг (точная навеска) стандартного образца примеси А и 5 мг (точная навеска) стандартного образца примеси Е, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Примечание

Примесь А: (2RS)-2-амино-4-фенилбутановая кислота [7636-28-4].

Примесь Е:
(2S)-1-[(2S)-6-амино-2-{[(1R)-1-карбокси-3-фенилпропил]амино}гексаноил]пирролидин-2-карбоновая кислота [85955-59-5].

Примесь F: (2S)-1-[(2S)-6-амино-2-{[(1S)-1-карбокси-3-циклогексилпропил]амино}гексаноил]пирролидин-2-карбоновая кислота [1132650-67-9].

Примесь G:
(2S)-1-[(2S)-6-амино-2-{[(1S)-1-{[(5S)-5-{[(1S)-1-карбокси-3-фенилпропил]амино}-6-[(2S)-2-карбоксипирролидин-1-ил]-6-оксогексил]карбамоил}-3-фенилпропил]амино}гексаноил]пирролидин-2-карбоновая кислота [1356839-89-8].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 50 °С; |  |
Скорость потока | 1,6 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2 | 100 | 0
2–37 | 100 → 0 | 0 → 100
37–62 | 0 | 100
62–80 | 0 → 100 | 100 → 0

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси F, раствор стандартного образца примеси G, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Лизиноприл – 1 (около 14 мин); примесь A – около 0,7; примесь Е – около 1,2; примесь F – около 1,9; примесь G – около 2,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси A и E используют хроматограмму для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками лизиноприла и примеси Е должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора сравнения отношение сигнал/шум (S/N) для пика лизиноприла дигидрата должно быть не менее 45.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси F умножается на 2,1.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A, E и F не должна превышать трёхкратную площадь пика лизиноприла на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика примеси G не должна превышать 1,5 площади пика лизиноприла на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика лизиноприла на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика лизиноприла на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика лизиноприла на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %), а также пики с временем удерживания менее 3 мин.

Вода. От 8,0 % до 9,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3Б).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,35 г (точная навеска) субстанции в 50 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически по первой точке перегиба кривой титрования.
(ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 40,55 мг лизиноприла C21H31N3O5.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0692 Лимонная кислота безводная

Лимонная кислота
Acidum citricum аnhydricum

Вводится впервые

С6H8O7 [77-92-9] | М.м. 192,12

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

2-Гидроксипропан-1,2,3-трикарбоновая кислота.

Cодержит не менее 99,5 % и не более 100,5 % лимонной кислоты С6H8O7 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок, бесцветные кристаллы или гранулы.

Растворимость. Очень легко растворима в воде, легко растворима в спирте 96 %.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца лимонной кислоты безводной.

- Субстанцию и стандартный образец лимонной кислоты моногидрата предварительно высушивают при температуре 100–105 °С в течение 2 ч.

2. Качественная реакция. Растворяют 1 г субстанции в 10 мл воды; полученный раствор должен окрашивать конго красного бумагу в синий или зелёный цвет.

3. Качественная реакция. К смеси, состоящей из 1 мл уксусного ангидрида и 3 мл пиридина, добавляют 5 мг субстанции; появляется красное окрашивание раствора.

4. Качественная реакция. Растворяют 0,5 г субстанции в 5 мл воды, нейтрализуют 1 М раствором натрия гидроксида (около 7 мл), прибавляют 10 мл кальция хлорида раствора 7,35 % и нагревают до кипения; появляется осадок белого цвета.

##### ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность раствора. Растворяют 2,0 г субстанции в свежепрокипячённой и охлаждённой воде и доводят водой до 10 мл; полученный раствор (раствор 1) должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора 1, полученного в испытании «Прозрачность раствора», не должна превышать эталоны сравнения Y7, BY7 или GY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей» метод 2).

Температура плавления. Около 153 °C, с разложением (ОФС «Температура плавления»).

Легко обугливающиеся вещества. В пробирку помещают 1,0 г субстанции, прибавляют 10 мл серной кислоты концентрированной, тотчас нагревают на водяной бане при температуре 90±1 °С точно в течение 60 мин и быстро охлаждают; окраска полученного раствора не должна превышать окраску раствора, состоящего из 1 мл красного раствора и 9 мл жёлтого раствора (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 1).

Щавелевая кислота. Не более 0,036 % в пересчёте на безводную щавелевую кислоту. Растворяют 0,80 г субстанции в 4 мл воды, прибавляют 3 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, 1 г цинка гранулированного, кипятят в течение 1 мин и выдерживают в течение 2 мин. Надосадочную жидкость переносят в пробирку, содержащую 0,25 мл фенилгидразина гидрохлорида раствора 1 %, и нагревают до кипения. Быстро охлаждают, переносят раствор в мерный цилиндр и прибавляют равный объём хлористоводородной кислоты концентрированной и 0,25 мл калия феррицианида раствора 5 %, перемешивают и выдерживают в течение 30 мин. Интенсивность розовой окраски полученного раствора не должна превышать интенсивность окраски эталонного раствора, приготовленного параллельно таким же образом с использованием 4 мл щавелевой кислоты раствора 0,01 %.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,015 % (ОФС «Сульфаты», метод 2). 2,0 г субстанции растворяют в воде и доводят водой до 30 мл.

* Алюминий. Не более 0,00002 % (ОФС «Алюминий» метод 2).

Испытуемый раствор. Растворяют 20,0 г субстанции в 100 мл воды.

Эталонный раствор. К 2 мл стандартного раствора алюминий-иона (2 мкг/мл) прибавляют 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 и 98 мл воды и перемешивают.

Контрольный раствор. К 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 прибавляют 100 мл воды и перемешивают.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 4)

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1).Определяют в 2 г субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,5 МЕ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,55 г (точная навеска) субстанции в 50 мл воды и титруют 1 М раствором натрия гидроксида до появления слабо-розовой окраски (индикатор – 0,5 мл фенолфталеина раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 1 М раствора натрия гидроксида соответствует 64,03 мг лимонной кислоты С6Н8О7.

##### ХРАНЕНИЕ

В хорошо укупоренной упаковке.

*Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0024 Лимонная кислота моногидрат

Лимонная кислота
Acidum citricum monohydricum

Взамен ФС.2.1.0024.15

С6H8O7∙H2O [5949-29-1] | М.м. 210,14

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

2-Гидроксипропан-1,2,3-трикарбоновая кислота моногидрат.

Cодержит не менее 99,5 % и не более 100,5 % лимонной кислоты С6H8O7 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок, бесцветные кристаллы или гранулы, выветривающиеся на воздухе.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96 %.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца лимонной кислоты моногидрата. Субстанцию и стандартный образец лимонной кислоты моногидрата предварительно высушивают при температуре 100–105 °С в течение 2 ч.

2. Качественная реакция. Растворяют 1 г субстанции в 10 мл воды; полученный раствор должен окрашивать конго красного бумагу в синий или зелёный цвет.

3. Качественная реакция. К смеси, состоящей из 1 мл уксусного ангидрида и 3 мл пиридина, добавляют 5 мг субстанции; появляется красное окрашивание раствора.

4. Качественная реакция. Растворяют 0,5 г субстанции в 5 мл воды, нейтрализуют 1 М раствором натрия гидроксида (около 7 мл), прибавляют 10 мл кальция хлорида раствора 7,35 % и нагревают до кипения; появляется осадок белого цвета.

##### ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность раствора. Растворяют 2,0 г субстанции в свежепрокипячённой и охлаждённой воде и доводят водой до 10 мл; полученный раствор (раствор 1) должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора 1, полученного в испытании «Прозрачность раствора», не должна превышать эталоны сравнения Y7, BY7 или GY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Вода. От 7,5 % до 9,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Растворяют 0,5 г (точная навеска) субстанции в 20 мл метанола безводного.

* Алюминий. Не более 0,00002 % (ОФС «Алюминий»).

Испытуемый раствор. Растворяют 20,0 г субстанции в 100 мл воды.

Стандартный раствор. К 2 мл стандартного раствора алюминий-иона (2 мкг/мл) прибавляют 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 и 98 мл воды и перемешивают.

Контрольный раствор. К 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 прибавляют 100 мл воды и перемешивают.

* Легко обугливающиеся вещества. К 0,2 г субстанции прибавляют 10 мл серной кислоты концентрированной, нагревают на водяной бане при 90±1 °С в течение 60 мин. Быстро охлаждают. Окраска раствора должна выдерживать сравнение с эталоном Y2 или GY2 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 1). Для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения, этот раствор должен быть бесцветным.

Сульфаты. Не более 0,015 % (ОФС «Сульфаты», метод 2). В мерную колбу вместимостью 30 мл помещают 2,0 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Щавелевая кислота. Не более 0,036 %. Растворяют 0,8 г субстанции в 4 мл воды, прибавляют 3 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, 1 г цинка гранулированного, кипятят в течение 1 мин и выдерживают в течение 2 мин. Надосадочную жидкость переносят в пробирку, содержащую 0,25 мл фенилгидразина гидрохлорида раствора 1 %, и нагревают до кипения. Раствор переносят в градуированный цилиндр вместимостью 25 мл, быстро охлаждают, прибавляют равный объём хлористоводородной кислоты концентрированной и 0,25 мл калия феррицианида раствора 5 %, перемешивают и выдерживают в течение 30 мин. Интенсивность розовой окраски полученного раствора не должна превышать интенсивность окраски эталонного раствора, приготовленного параллельно таким же образом с использованием 4 мл щавелевой кислоты раствора 0,01 %.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 4)

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,5 МЕ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,55 г (точная навеска) субстанции в 50 мл воды и титруют 1 М раствором натрия гидроксида до появления слабо-розовой окраски (индикатор – 0,5 мл фенолфталеина раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 1 М раствора натрия гидроксида соответствует 64,03 мг лимонной кислоты С6Н8О7.

##### ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0447 Линезолид (Linezolidum)

Вводится впервые

##### Определение

N-{[(5S)-3-[4-(Морфолин-4-ил)-3-фторфенил]-2-оксо-1,3-оксазолидин-5-ил]метил}ацетамид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % линезолида C16H20FN3O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок с характерным запахом.

Растворимость. Легко растворим в хлороформе, умеренно растворим в метаноле, мало растворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца линезолида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика линезолида на хроматограмме раствора стандартного образца линезолида (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –9,0 до –14,0 в пересчёте на сухое вещество (0,9 % раствор субстанции в хлороформе, ОФС «Оптическое вращение»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,9 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 70 мл хлороформа, обрабатывают ультразвуком до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном В5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор аммония дигидрофосфата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,23 г аммония дигидрофосфата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Раствор аммония дигидрофосфата.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Растворитель. ПФБ—ПФА 250:750.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 25 мл ПФБ, выдерживают на ультразвуковой бане до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор стандартного образца линезолида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца линезолида, прибавляют 12,5 мл ПФБ и выдерживают на ультразвуковой бане до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора фармакопейного стандартного образца линезолида и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси В и 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси С, прибавляют 12,5 мл ПФБ, выдерживают на ультразвуковой бане до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 0,1 г фармакопейного стандартного образца линезолида, прибавляют 50 мл ПФБ и выдерживают на ультразвуковой бане до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 1,5 мл стандартного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А:
(5R)-5-(азидометил)-3-[4-(морфолин-4-ил)-3-фторфенил]-1,3-оксазолидин-2-он [168828-84-0].

Примесь В:
N-{[(5S)-3-[4-(морфолин-4-ил)-3-фторфенил]-2-оксо-1,3-оксазолидин-5-ил]метил}этантиоамид [216868-57-4].

Примесь С:
(5S)-5-(аминометил)-3-[4-(морфолин-4-ил)-3-фторфенил]-1,3-оксазолидин-2-он [168828-90-8].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 60 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 251 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–15 | 75 | 25
15–20 | 75 → 70 | 25 → 30
20–50 | 70 → 35 | 30 → 65
50–55 | 35 | 65
55–60 | 35 → 75 | 65 → 25
60–65 | 75 | 25

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Линезолид – 1 (около 22 мин); примесь С – около 0,5; примесь В – около 1,66; примесь А – около 1,70.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика линезолида должно быть не менее 10,0.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси В и примеси А должно быть не менее 1,2.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) линезолида должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика линезолида должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь А – 1,05; примесь В – 0,93; примесь С – 1,02.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика линезолида на хроматограмме раствора сравнения;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца линезолида, мг;
P - содержание линезолида в фармакопейном стандартном образце линезолида,%.

Допустимое содержание примесей:

- примеси А, В и С – не более 0,15 % каждая;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,025 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,3 ЕЭ на 1 мг субстанции линезолида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции в 1 мл воды с концентрацией 1 мг/мл для определения бактериальных эндотоксинов; для приготовления исходного раствора субстанцию растирают в тонкий порошок.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Подвижная фаза (ПФ). ПФБ — ПФА 250:750.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора, полученного в испытании «Родственные примеси», и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца линезолида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца линезолида и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 50 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 251 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 30 мин. |  |

Хроматографируют раствор стандартного образца линезолида и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца линезолида относительное стандартное отклонение площади пика линезолида должно быть не более 3,0 % (6 введений).

Содержание линезолида C16H20FN3O4 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика линезолида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика линезолида на хроматограмме раствора стандартного образца линезолида;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца линезолида, мг;
Р – содержание линезолида в фармакопейном стандартном образце линезолида,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Испытания проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0448 Линкомицина гидрохлорид моногидрат

Линкомицин
Lincomycini hydrochloridum monohydricus

Взамен ФС 42-2223-92

##### Определение

(2S,4R)-1-Метил-4-пропил-N-[1,6,8-тридезокси-1-(метилсульфанил)-D-эритро-α-D-галакто-октопираноз-6-ил]пирролидин-2-карбоксамида гидрохлорид моногидрат.

Представляет собой смесь антибиотиков, продуцируемых штаммами Streptomyces lincolnensis var. lincolnensis или полученных другим способом.

Содержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % линкомицина гидрохлорида C18H34N2O6S·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %, очень мало растворим в ацетоне.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца линкомицина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +135° до +150° в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (4 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 2 г субстанции в 20 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным
(ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдержать сравнение с эталоном Y~6
~(ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 3,5 до 5,5 (раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 34 г фосфорной кислоты концентрированной в 900 мл воды и доводят значение рН аммиака раствором концентрированным 25 % до 6,10. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—ацетонитрил—буферный раствор 80:170:750.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца линкомицина гидрохлорида (А). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца линкомицина гидрохлорида, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца линкомицина гидрохлорида (Б). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (А) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В). В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (Б) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца линкомицина гидрохлорида для проверки пригодности системы (содержит примеси А, В и С) в 2 мл ПФ.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (Б) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Линкомицин B:
(2S,4R)-1-метил-N-[1,6,8-тридезокси-1-(метилсульфанил)-D-эритро-α-D-галакто-октопираноз-6-ил]-4-этилпирролидин-2-карбоксамид
[2520-24-3].

Примесь А:
(2R,4R)-1-метил-4-пропил-N-[1,6,8-тридезокси-1-(метилсульфанил)-D-эритро-α-D-галакто-октопираноз-6-ил]пирролидин-2-карбоксамид.

Примесь В:
(2S,4EZ)-1-метил-4-пропилиден-N-[1,6,8-тридезокси-1-(метилсульфанил)-D-эритро-α-D-галакто-октопираноз-6-ил]пирролидин-2-карбоксамид
[37744-65-3].

Примесь С:
(2S,4R)-4-пропил-N-[1,6,8-тридезокси-1-(метилсульфанил)-D-эритро-α-D-галакто-октопираноз-6-ил]пирролидин-2-карбоксамид
[2256-16-8].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 50 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 5,5-кратное от времени удерживания пика линкомицина. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В), раствор стандартного образца линкомицина гидрохлорида (Б) и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Линкомицин – 1 (около 10 мин); примесь С – около 0,4; линкомицин В – около 0,5; примесь А – около 0,7; примесь В – около 1,2 (первый пик) и около 1,3 (второй пик).

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение _(_RS) между пиком линкомицина и первым пиком примеси В должно быть не менее 1,8.

На хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В):

- фактор асимметрии пика (AS) линкомицина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика линкомицина должно быть не более 5,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику линкомицина, должна составлять не менее 2500 теоретических тарелок.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика линкомицина должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать пятикратную площадь пика линкомицина на хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В) (не более 0,5 %);

- сумма площадей пиков примеси В не должна превышать пятикратную площадь пика линкомицина на хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В) (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси С не должна превышать двукратную площадь пика линкомицина на хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В) (не более 0,2 %);

- площадь пика единичной неидентифицированной примеси не должна превышать площадь пика линкомицина на хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В) (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать площадь пика линкомицина на хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (Б) (не более 2,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика линкомицина на хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (В) (менее 0,05 %).

Линкомицин В. Не более 5,0 %. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси».

Содержание линкомицина В в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика линкомицина В на хроматограмме испытуемого раствора;
S2 – площадь пика линкомицина на хроматограмме испытуемого раствора.

Вода. От 3,1 % до 4,6 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,5 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,0005 %. ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 6) в зольном остатке, полученном после сжигания 2,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 2 мг линкомицина в 0,5 мл натрия хлорида раствора 0,9 % на мышь, внутривенно.
Срок наблюдения – 48 ч.

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,50 ЕЭ на 1 мг линкомицина гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси».

Хроматографируют раствор стандартного образца линкомицина гидрохлорида (А) и испытуемый раствор.

Содержание линкомицина гидрохлорида C18H34N2O6S·HCl в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика линкомицина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика линкомицина на хроматограмме раствора стандартного образца линкомицина гидрохлорида (А);
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца линкомицина гидрохлорида, мг;
P – содержание линкомицина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце линкомицина гидрохлорида,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0125 Лозартан калия

Лозартан
Losartanum kalcium

Взамен ФС.2.1.0125.18

##### Определение

5-(4'-{[2-Бутил-5-(гидроксиметил)-4-хлор-1H-имидазол-1-ил]метил}[1,1'-бифенил]-2-ил)-1H-тетразол-1-ид калия.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % лозартана калия C22H22ClKN6O в пересчёте на сухое вещество.

Производителям лозартана необходимо проводить оценку риска образования N-нитрозаминов и загрязнения ими в процессе производства. При выявлении потенциального риска процесс производства должен быть изменён, чтобы исключить или минимизировать загрязнение.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен. Обладает полиморфизмом.

Растворимость. Легко растворим в воде и метаноле, умеренно растворим в 2-пропаноле, мало растворим в ацетонитриле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца лозартана калия.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. Качественная реакция. Растворяют 25 мг субстанции в 3 мл воды. Раствор должен давать реакцию А на калий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы используют свежеприготовленными или хранят при температуре 4 °С не более суток.

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,0 мл фосфорной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 15 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём метанолом до метки.

Раствор стандартного образца примеси D. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,0 мг фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,5 мл полученного раствора и доводят объём метанолом до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 6 мг трифенилметанола (примесь G), растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём метанолом до метки. В 1,0 мл полученного раствора растворяют с использованием ультразвуковой бани содержимое флакона фармакопейного стандартного образца лозартана для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси J, K, L и M.

Примечание

Примесь D: 2-бутил-4-хлор-1H-имидазол-5-карбальдегид.

Примесь G: трифенилметанол.

Примесь J:
[(2-бутил-1-{[2'-(1H-тетразол-5-ил)-1,1'-бифенил-4-ил]метил}-4-хлор-1H-имидазол-5-ил)метил]ацетат.

Примесь K:
2-бутил-1-{[2'-(1H-тетразол-5-ил)-1,1'-бифенил-4-ил]метил}-4-хлор-1H-имидазол-5-карбальдегид.

Примесь L:
{2-бутил-1-[(2'-{1-[(2-бутил-1-{[2'-(1H-тетразол-5-ил)-1,1'-бифенил-4-ил]метил}-4-хлор-1H-имидазол-5-ил)метил]-1H-тетразол-5-ил}-1,1'-бифенил-4-ил)метил]-4-хлор-1H-имидазол-5-ил}метанол.

Примесь M:
{2-бутил-1-[(2'-{2-[(2-бутил-1-{[2'-(1H-тетразол-5-ил)-1,1'-бифенил-4-ил]метил}-4-хлор-1H-имидазол-5-ил)метил]-2H-тетразол-5-ил}-1,1'-бифенил-4-ил)метил]-4-хлор-1H-имидазол-5-ил}метанол.

Условия хроматографирования

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,3 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 75 | 25
5–30 | 75 → 10 | 25 → 90
30–40 | 10 | 90
40–45 | 10 → 75 | 90 → 25

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси D, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Лозартан – 1 (около 14 мин); примесь D – около 0,9; примесь J – около 1,4; примесь K – около 1,5; примесь L – около 1,6, примесь М – около 1,75; примесь G – около 1,8.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей G, J, K, L и M используют хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу лозартана для проверки пригодности хроматографической системы. Для идентификации пика примеси D используют хроматограмму раствора стандартного образца примеси D.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примесей М и G должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси D не должна превышать площадь соответствующего пика на хроматограмме раствора стандартного образца примеси D (не более 0,15 %);

- площадь пика каждой из примесей J, K, L и M не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,30 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 %. (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

N-нитрозамины. Определение проводят в соответствии с
ОФС «Примеси N-нитрозаминов».

Допустимое содержание примесей:

- N-нитрозодиметиламин (НДМА) – не более 0,300 мкг/г;

- N-нитрозодиэтиламин (НДЭА) – не более 0,082 мкг/г.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 5). Растворяют 2,0 г субстанции в 20 мл смеси равных объёмов спирта 96 % и воды.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Подвижная фаза: ПФБ—ПФА 400:600.

Растворитель. Метанол—вода 400:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём растворителем до метки.

Раствор стандартного образца лозартана калия. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца лозартана калия, растворяют в растворителе и доводят объём растворителем до метки.

Хроматографические условия

- Детектор спектрофотометрический, 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца лозартана калия:

- фактор асимметрии пика (AS) лозартана должен быть не более 1,4;

- относительное стандартное отклонение площади основного пика должно быть не более 0,5 % (6 введений).

Содержание лозартана калия C22H22ClKN6O в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика лозартана на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика лозартана на хроматограмме раствора стандартного образца лозартана калия;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца лозартана калия, мг;
W - потеря в массе при высушивании субстанции,%;
P - содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце лозартана калия,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0613 Лоперамида гидрохлорид

Лоперамид
Loperamidi hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

4-[4-Гидрокси-4-(4-хлорфенил)пиперидин-1-ил]-N,N-диметил-2,2-дифенилбутанамида гидрохлорид.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % лоперамида гидрохлорида C29H33ClN2O2·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в хлороформе, легко растворим или растворим в спирте 96 %, мало растворим или очень мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца лоперамида гидрохлорида.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метиленхлорида, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Растворитель. Хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М—2-пропанол 1:10.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца лоперамида гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца лоперамида гидрохлорида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

- Спектры поглощения испытуемого раствора и раствора стандартного образца лоперамида гидрохлорида в области от 250 до 300 нм должны иметь минимумы и максимумы при одних и тех же длинах волн. В качестве раствора сравнения используют растворитель.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 17 г тетрабутиламмония гидросульфата, растворяют в воде, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 10 мг фармакопейного стандартного образца лоперамида гидрохлорида для проверки пригодности системы, содержащего примеси A, B, D, E, G и H, в 1 мл метанола и доводят объём раствора метанолом до метки.

Примечание

Примесь А:
4-[4-гидрокси-4-(4'-хлор[1,1'-бифенил]-4-ил)пиперидин-1-ил]-N,N-диметил-2,2-дифенилбутанамид [1391052-94-0].

Примесь B:
1,1-бис[4-(диметиламино)-4-оксо-3,3-дифенилбутил]-4-гидрокси-4-(4-хлорфенил)пиперидин-1-ий (бромид).

Примесь D:
4-(4-гидрокси-4-фенилпиперидин-1-ил)-N,N-диметил-2,2-дифенилбутанамид [37743-41-2].

Примесь E:
1,4-бис[4-гидрокси-4-(4-хлорфенил)пиперидин-1-ил]-2,2-дифенилбутан-1-он [1426322-82-8].

Примесь G:
(1s,4r)-4-гидрокси-1-[4-(диметиламино)-4-оксо-3,3-дифенилбутил]-4-(4-хлорфенил)-1λ5-пиперидин-1-илий-1-олат [109572-89-6].

Примесь H:
4-[4-гидрокси-4-(4-хлорфенил)-3,6-дигидропиперидин-1(2H)-ил]-N,N-диметил-2,2-дифенилбутанамид [61299-42-1].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–15 | 90 → 30 | 10 → 70
15–17 | 30 | 70

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Лоперамид – 1 (около 6 мин); примесь D – около 0,8; примесь G – около 1,20; примесь H – около 1,25; примесь E – около 1,45; примесь A – около 1,50; примесь B – около 1,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, D, E, G и H используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу лоперамида гидрохлорида для проверки пригодности системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси G и примеси H должно быть не менее 1,5;

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси E и примеси A должно быть не менее 1,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси D умножают на 1,7.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей B и D не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика лоперамида на хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (не более 0,2%);

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика лоперамида на хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика лоперамида на хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика лоперамида на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии. (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,4 г (точная навеска) субстанции в 50 мл спирта 96 %, прибавляют 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают объём титранта между двумя точками перегиба на кривой титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 51,35 мг лоперамида гидрохлорида C29H33ClN2O2·HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0449 Лопинавир (Lopinavirum)

Вводится впервые

##### Определение

(2S)-N-[(2S,4S,5S)-4-Гидрокси-5-[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % лопинавира C37H48N4O5 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или желтовато-белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм. Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко или легко растворим в метаноле, легко растворим спирте 96 %, легко растворим или растворим в 2-пропаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца лопинавира.

- Если спектры различаются, субстанцию и стандартный образец лопинавира по отдельности растворяют в метаноле, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика лопинавира на хроматограмме раствора стандартного образца лопинавира (А) (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –22,0 до –27,0 в пересчёте на безводное вещество (0,8 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси

Сумма примесей, определённая методами А и Б − не более 0,7 %.

1. Метод А. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 0,9 г дикалия гидрофосфата и 2,7 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды, доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 6,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 450:550.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор—ацетонитрил 250:750.

Растворитель. Вода—ацетонитрил 50:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца лопинавира (А). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца лопинавира, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца лопинавира (Б). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца лопинавира (А) и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 2,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца лопинавира для проверки пригодности системы, содержащего примеси А, В, С, F, G, I, N, Q, R, S и T в 5 мл растворителя.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца лопинавира (Б) и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A:
(2S)-N-[(2S,4S,5S)-5-амино-4-гидрокси-1,6-дифенилгексан-2-ил]-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамид
[192726-05-9].

Примесь B:
(2S)-N-[(2S,4S,5S)-4-гидрокси-1,6-дифенил-5-формамидогексан-2-ил]-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамид
[76966392].

Примесь C:
(2R)-N-[(2S,3S,5S)-3-гидрокси-5-[(2S)-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамид
[76962186].

Примесь D:
[(2S,3S,5S)-2-[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамидо]-5-[(2S)-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамидо]-1,6-дифенилгексан-3-ил]сульфат
[76969994].

Примесь E:
N-[(2S,3S,5S)-5-амино-3-гидрокси-1,6-дифенилгексан-2-ил]-2-(2,6-диметилфенокси)ацетамид
[192725-49-8].

Примесь F:
N-[(2S,3S,5S)-3-гидрокси-1,6-дифенилгексан-5-формамидо-2-ил]-2-(2,6-диметилфенокси)ацетамид
[76971469].

Примесь G:
N-[(2S,3S,5S)-5-ацетамидо-3-гидрокси-1,6-дифенилгексан-2-ил]-2-(2,6-диметилфенокси)ацетамид
[76965218].

Примесь H:
N-[(1S)-1-[(2S,6S)-4-бензил-2-оксо-1,3-оксазинан-6-ил]-2-фенилэтил]-2-(2,6-диметилфенокси)ацетамид
[76968681].

Примесь I:
(2S)-N-[(2S,3S,5S)-3-гидрокси-5-[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамид
[76966912].

Примесь J:
(2S)-N-[(2S,4S,5S)-4-гидрокси-5-[2-(2,4-диметилфенокси)ацетамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамид
[76960930].

Примесь K:
(2R)-N-[(2S,4S,5S)-4-гидрокси-5-[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамид
[1623021-24-8].

Примесь L:
N,N'-[(Z)-этен-1,2-диил]бис[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамид] [76969209].

Примесь M:
(2S)-N-[(2R,4R,5S)-4-гидрокси-5-[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамид
[76968402].

Примесь N:
(2S)-N-[(2S,4R,5S)-4-гидрокси-5-[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамид
[1798014-18-2].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 4 мкм; |
Температура колонки | 50 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 215 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–60 | 100 | 0
60–61 | 100 → 0 | 0 → 100
61–81 | 0 | 100
81–82 | 0 → 100 | 100 → 0
82–100 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца лопинавира (Б) и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Лопинавир – 1; примесь A – около 0,03; примесь B – около 0,07; примесь C – около 0,10; примесь D – около 0,13; примесь E – около 0,25; примесь F – около 0,59; примесь G – около 0,62; примесь H – около 0,90; примесь I – около 1,10; примесь J – около 1,13; примесь K – около 1,25; примесь L – около 1,28; примесь M – около 1,32; примесь N – около 1,38.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В, С, F, G, I, N, Q, R, S и T используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Для идентификации пиков примесей D, Е, H, I, J, K, L, M и N используют относительное время удерживания соединений.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика лопинавира должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси F и примеси G должно быть не менее 1,2.

На хроматограмме раствора стандартного образца лопинавира (Б):

- коэффициент ёмкости (k′), рассчитанный по пику лопинавира, должен быть не менее 15,0;

- фактор асимметрии пика (AS) лопинавира должен быть от 0,8 до 1,5;

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь A – 1,64; примесь B – 1,25; примесь C – 1,54; примесь D – 1,32; примесь F – 0,77; примесь L – 0,71.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика лопинавира на хроматограмме раствора стандартного образца лопинавира (Б);
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска стандартного образца лопинавира, мг;
P - содержание лопинавира в стандартном образце лопинавира,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь B – не более 0,2 %;

- примесь I – не более 0,2 %;

- примесь A, C, D, E, F, G, H, J, K, L, M, N и любая другая – не более 0,15 % каждая.

Не учитывают пики, элюирующиеся после пика примеси N и пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

2. Метод Б. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Метод А» со следующими изменениями.

Подвижная фаза (ПФ). ПФА—ПФБ 300:700.

Примечание

Примесь O:
[(2S,3S,5S)-2-[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамидо]-5-[(2S)-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамидо]-1,6-дифенилгексан-3-ил][(2S)-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутаноат]
[76962151].

Примесь P:
(2S)-N-[(2R,4S,5S)-4-гидрокси-5-[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамид
[1217628-64-2].

Примесь Q:
N,N'-[(2S,4S,5S)-4-гидрокси-1,6-дифенилгексан-2,5-диил]бис[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамид]
[667904-94-1].

Примесь R:
(2S)-N-[(2S,4S,5S)-4-гидрокси-5-[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]-3-метил-2-{3-[(диметилфенокси)ацетил]-2-оксо-1,3-диазинан-1-ил}бутанамид
[943250-66-6].

Примесь S:
[(2S,3S,5S)-2-[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамидо]-5-[(2S)-3-метил-2-(2-оксо-1,3-диазинан-1-ил)бутанамидо]-1,6-дифенилгексан-3-ил][(2,6-диметилфенокси)ацетат]
[943250-65-5].

Примесь T:
N,N'-бис[(2S,4S,5S)-4-гидрокси-5-[2-(2,6-диметилфенокси)ацетамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]мочевина
[1797024-56-6].

Хроматографические условия

- Время хроматографирования: 50 мин.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца лопинавира (Б) и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Лопинавир – 1 (около 6 мин); примесь O – около 1,49; примесь P – около 1,91; примесь Q – около 4,39; примесь R – около 6,01; примесь S – около 7,14; примесь T – около 8,46.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей O, P, Q, R, S и Т используют относительное время удерживания соединений.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика лопинавира должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси S и примеси T должно быть не менее 3,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца лопинавира (Б):

- коэффициент ёмкости (k′), рассчитанный по пику лопинавира, должен быть не менее 1,5;

- фактор асимметрии пика (AS) лопинавира должен быть от 0,8 до 1,5;

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь O – 1,30; примесь Q – 0,71; примесь R – 0,77; примесь T – 0,77.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика лопинавира на хроматограмме раствора стандартного образца лопинавира (Б);
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска стандартного образца лопинавира, мг;
P - содержание лопинавира в стандартном образце лопинавира,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь O, P, Q, R, S, T и любая другая примесь – не более 0,15 % .

Не учитывают пики, элюирующиеся до пика примеси N, пик примеси N и пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 4,4 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Метод А» со следующими изменениями.

Подвижная фаза (ПФ). ПФА.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, полученного в испытании «Родственные примеси. Метод А» и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

- Время хроматографирования: 60 мин.

Хроматографируют раствор стандартного образца лопинавира (А) и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца лопинавира (А):

- коэффициент ёмкости (k′), рассчитанный по пику лопинавира, должен быть не менее 15,0;

- фактор асимметрии пика (AS) лопинавира должен быть от 0,8 до 1,5.

Содержание лопинавира C37H48N4O5 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика лопинавира на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика лопинавира на хроматограмме раствора стандартного образца лопинавира (A);
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца лопинавира, мг;
P - содержание лопинавира в фармакопейном стандартном образце лопинавира,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В сухом защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0126 Лоратадин (Loratadinum)

Взамен ФС.2.1.0126.18

##### Определение

Этил[4-(8-хлор-5,6-дигидро-11H-бензо[5,6]циклогепта[1,2‑b]пиридин-11-илиден)пиперидин-1-карбоксилат].

Содержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % лоратадина C22H23ClN2O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в ацетоне и метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца лоратадина.

Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах ацетона, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 20 мл метанола должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси

1. Примесь H. Не более 0,1 %. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг изоамилбензоата, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метиленхлоридом до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в метиленхлориде, прибавляют 1,0 мл раствор стандартного образца примеси Н, 1,0 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объём раствора метиленхлоридом до метки.

Раствор стандартного образца примеси Н. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного образца примеси Н, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метиленхлоридом до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 1,0 мл раствор стандартного образца примеси Н, прибавляют 1,0 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объём раствора метиленхлоридом до метки.

Примечание

Примесь H: этил(4-оксопиперидин-1-карбоксилат) [29976-53-2].

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 25 м × 0,32 мм, покрытая слоем поли(диметил)силоксана, 0,52 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:30; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1 мкл. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °C
--- | --- | ---
Колонка | 0–1 | 80
| 1–23 | 80 → 300
| 23–33 | 300
Инжектор |  | 260
Детектор |  | 300

Хроматографируют стандартный и испытуемый растворы.

Относительное время удерживания соединений. Лоратадин – 1 (около 32 мин); примесь Н – около 0,33; изоамилбензоат – около 0,37.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками примеси Н и изоамилбензоата должно быть не менее 2,0;

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси Н должно быть не менее 10.

Содержание примеси H в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где B1 – отношение площади пика примеси Н к площади пика изоамилбензоата на хроматограмме испытуемого раствора;
B0 – отношение площади пика примеси Н к площади пика изоамилбензоата на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска стандартного образца примеси Н, мг;
P – содержание примеси Н в стандартном образце примеси Н,%.

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы используют свежеприготовленными или хранят при температуре 4 °С не более суток.

Буферный раствор. Растворяют 6,8 г калия дигидрофосфата в 500 мл воды и доводят рН фосфорной кислотой концентрированной до 2,80, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводя объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—буферный раствор—ацетонитрил 300:350:400.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём ПФ до 50 мл. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси F. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси F, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца лоратадина для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси А и Е, растворяют в ПФ, прибавляют 0,5 мл раствора стандартного образца примеси F и доводят объём ПФ до метки.

Примечание

Примесь A:
этил{4-[(11RS)-11-гидрокси-8-хлор-6,11-дигидро-5H-бензо[5,6]циклогепта[1,2‑b]пиридин-11-ил]пиперидин-1-карбоксилат}
[133284-74-9].

Примесь B:
8-хлор-5,6-дигидро-11H-бензо[5,6]циклогепта[1,2‑b]пиридин-11-он
[31251-41-9].

Примесь C:
этил[4-(4,8-дихлор-5,6-дигидро-11H-бензо[5,6]циклогепта[1,2‑b]пиридин-11-илиден)пиперидин-1-карбоксилат]
[165739-83-3].

Примесь D:
11-(пиперидин-4-илиден)-8-хлор-6,11-дигидро-5H-бензо[5,6]циклогепта[1,2‑b]пиридин
[100643-71-8].

Примесь E:
этил{4-[(11RS)-8-хлор-6,11-дигидро-5H-бензо[5,6]циклогепта[1,2‑b]пиридин-11-ил]-3,6-дигидропиперидин-1(2H)-карбоксилат}
[170727-59-0].

Примесь F:
этил{4-[(11RS)-11-фтор-8-хлор-6,11-дигидро-5H-бензо[5,6]циклогепта[1,2‑b]пиридин-11-ил]пиперидин-1-карбоксилат}
[125743-80-8].

Условия хроматографирования

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; сферический, с очень низкой силанольной активностью; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём вводимой пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 5-кратное от времени удерживания пика лоратадина. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Лоратадин – 1 (около 12 мин); примесь D – около 0,2; примесь B – около 0,4; примесь F – около 0,9; примесь E – около 1,1; примесь А – около 2,4; примесь C – около 2,7.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примесей A и E используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу лоратадина для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками лоратадина и примеси Е должно быть не менее 2,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь А – 1,7; примесь Е – 1,9; примесь F – 1,6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси F не должна более чем в 2 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика каждой из примесей A, B, C, D и E не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 %. (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,015 % (ОФС «Сульфаты», метод 2). Озоляют 1,33 г субстанции при 800±25 °С и остаток растворяют в 20 мл воды. При необходимости фильтруют до получения прозрачного раствора.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»)

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты ледяной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты.

Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 38,29 мг лоратадина C22H23ClN2O2.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0450 Лорноксикам (Lornoxicamum)

Вводится впервые

##### Определение

4-Гидрокси-2-метил-1,1-диоксо-N-(пиридин-2-ил)-6-хлор-2H-1λ6-тиено[2,3-e][1,2]тиазин-3-карбоксамид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % лорноксикама C13H10ClN3O4S2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Жёлтый или жёлтый с зеленоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в диметилформамиде, очень мало растворим в натрия гидроксида растворе 0,1 М и в метиленхлориде, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца лорноксикама.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика лорноксикама на хроматограмме раствора стандартного образца лорноксикама (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Растворяют 5 мг субстанции в 5 мл хлороформа, прибавляют 1 каплю железа(III) хлорида раствора 10,5 %, слегка нагревают и встряхивают; через 30 мин должно появиться красно-коричневое окрашивание.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 5 мг субстанции в 100 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y3 или GY3 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 5 г аммония ацетата в 700 мл воды и доводят значение рН натрия гидроксида раствором 1 М до 8,5, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—2-пропанол—буферный раствор 50:150:800.

Растворитель. 2-Пропанол—вода 400:600, прибавляют 20 мл натрия гидроксида раствора 0,4 М.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца лорноксикама. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца лорноксикама, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца лорноксикама и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Выдерживают субстанцию в сушильном шкафу при температуре 180 °С в течение 25 часов. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг (точная навеска) полученного образца, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 см, силикагель фенилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 50 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 288 нм; |  |
Объём пробы | 30 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика лорноксикама. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца лорноксикама, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика лорноксикама должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками лорноксикама и ближайшей примеси с площадью пика, превышающей 0,1 % суммы площадей всех пиков, должно быть не менее 4,0.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика лорноксикама на хроматограмме раствора сравнения;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца лорноксикама, мг;
P - содержание лорноксикама в фармакопейном стандартном образце лорноксикама,%.

Допустимое содержание примесей:

- любая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,03 % (ОФС «Хлориды»). Встряхивают 1,07 г субстанции в течение нескольких секунд с 20 мл воды и фильтруют через фильтровальную бумагу, смоченную азотной кислотой. В цилиндр с притёртой пробкой помещают 5 мл полученного фильтрата, доводят объём раствора водой до 25 мл, прибавляют 10 мл азотной кислоты и доводят объём раствора водой до 40 мл. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 21,8 ЕЭ на 1 мг лорноксикама (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 1 мг/мл лорноксикама в диметилсульфоксида или в натрия гидроксида раствора 0,1 М при нагревании раствора до 70 °С.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ одновременно с испытанием «Родственные примеси».

Хроматографируют раствор стандартного образца лорноксикама и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца лорноксикама фактор асимметрии пика (AS) лорноксикама должен быть не более 2,0.

Содержание лорноксикама C13H10ClN3O4S2 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика лорноксикама на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика лорноксикама на хроматограмме раствора стандартного образца лорноксикама;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца лорноксикама, мг;
P – содержание лорноксикама в фармакопейном стандартном образце лорноксикама,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0614 Магния оротат дигидрат

Оротовая кислота
Magnesii orotas dihydricus

Вводится впервые

##### Определение

2,6-Диоксо-1,2,3,6-тетрагидропиримидин-4-карбоксилат магния (2:1) дигидрат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % оротата магния дигидрата C10H6MgN4O8·2H2O в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Мало (медленно) растворим в воде, практически нерастворим в метаноле и спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 650 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца магния оротата дигидрата.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на магний (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельный показатель поглощения. От 298 до 318 (в максимуме поглощения) при длине волны 285 нм в пересчёте на сухое вещество (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг (точная навеска) субстанции и 40 мг натрия эдетата, растворяют в аммиака растворе разведённом 3,4 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора аммиака раствором разведённым 3,4 % до метки.

Раствор сравнения. Аммиака раствор разведённый 3,4 %.

Кислотность или щёлочность. Встряхивают 0,5 г субстанции с 10 мл воды в течение 5 мин и фильтруют. К полученному раствору прибавляют 0,15 мл метилового красного раствора 0,05 %. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 0,50 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида или 0,25 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты.

Аминокислоты. Встряхивают 1,0 г субстанции с 10 мл нингидрина раствора 0,25 % и фильтруют. Доводят значение рН полученного фильтрата натрия гидроксида раствором 0,1 М до 6,0 и кипятят на водяной бане в течение 10 мин; не должно появляться сине-фиолетового окрашивания.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,8 мл фосфорной кислоты концентрированной, растворяют в воде и доводят объём раствора растворителем до метки.

Испытуемый раствор. Взбалтывают 0,5 г (точная навеска) субстанции в течение 1 ч с 8 мл ПФ, фильтруют в мерную колбу вместимостью 10 мл и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор примеси 1 (А). В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) примеси 1, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор примеси 1 (Б). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора примеси 1 (А) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 мл раствора сравнения и доводят объём раствора до метки раствором примеси 1 (А).

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь 1: (цианометил)мочевина [5962-07-2].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, совместимый с водной подвижной фазой, эндкепированный, для хроматографии, 4 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика оротата магния. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор примеси 1 (Б), раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Магния оротат – 1 (около 5 мин); примесь 1 – около 0,5.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси 1 и оротата магния должно быть не менее 5,0.

На хроматограмме раствора примеси 1 (Б):

- фактор асимметрии пика (AS) примеси 1 должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика примеси 1 должно составлять не более 5,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику примеси 1, должна составлять не менее 1000 теоретических тарелок.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика магния оротата должно быть не менее 10.

Содержание примеси 1 в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси 1 на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика примеси 1 на хроматограмме раствора примеси 1 (Б);
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска примеси 1, мг;
P – содержание основного вещества в примеси 1,%.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика оротата магния на хроматограмме раствора сравнения.

Допустимое содержание примесей:

- примесь 1 – не более 0,2 %;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,3 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,1 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,01 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты», метод 2).

Растворитель. Хлористоводородная кислота разведённая 7,3 %—вода 1:2.

К 15 мл растворителя прибавляют 3,0 г субстанции, перемешивают и нагревают при температуре 50 °С в течение 15 мин, поддерживая перемешивание. После охлаждения до комнатной температуры раствор фильтруют через бумажный фильтр, промывают фильтр растворителем и доводят объём фильтрата растворителем до 30 мл (раствор А). Доводят 7,5 мл раствора А водой до 15 мл.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2). К 10 мл раствора А (раздел «Сульфаты») прибавляют аммиака раствор 3,4 % до получения рН раствора 3,5 и доводят объём раствора водой до 20 мл. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции растворяют в 300 мл горячей воды и далее поступают, как указано в ОФС «Комплексонометрическое титрование» (магний). В качестве титранта используют 0,1 М раствор натрия эдетата.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия эдетата соответствует 37,05 мг магния оротата дигидрата C10H6MgN4O8·2H2O.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0451 Магния аспарагинат рацемический тетрагидрат

Магния аспарагинат рацемический
Magnesii asparaginas racemicus tetrahydricus

Взамен ФС 42-1598-98

##### Определение

Ди[(2RS)-2-аминобутандиоат водорода] магния тетрагидрат.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 102,0 % магния аспарагината С8Н12MgN2О8 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца магния аспарагината тетрагидрата.

2. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора Б по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции на хроматограмме раствора фармакопейного стандартного образца магния аспарагината тетрагидрата (раздел «Родственные примеси»).

3. Качественная реакция. Растворяют 0,06 г субстанции в 2 мл воды при нагревании; 1 мл полученного раствора должен давать характерную реакцию на магний (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Угол вращения. От –0,05° до +0,05° в пересчёте на безводное вещество (5 % раствор субстанции, в воде ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Растворяют 0,5 г субстанции при нагревании в 10 мл воды, охлаждают. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH. От 5,5 до 7,5 (2,5 % водный раствор, ОФС «Ионометрия»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля 60 F254.

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—вода—бутанол 20:20:60.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца магния аспарагината тетрагидрата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца магния аспарагината тетрагидрата, растворяют в воде, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора Б и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца магния аспарагината тетрагидрата и 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца глутаминовой кислоты, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мл раствора сравнения и доводят объём раствора водой до метки.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора А (50 мкг), испытуемого раствора Б (1 мкг), раствора сравнения (0,25 мкг), раствора стандартного образца магния аспарагината тетрагидрата (1 мкг), раствора для проверки чувствительности хроматографической системы и раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 10–15 мин, помещают в предварительно насыщенную в течение 2,5 ч камеру с ПФ, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт 80–90 % от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителя в течение 30 мин, опрыскивают нингидрина раствором 0,2 %, и выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С в течение 15 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

На хроматограмме раствора разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться две разделённые зоны адсорбции.

На хроматограмме раствора сравнения должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора А, кроме основного пятна, допускается наличие только одной дополнительной зоны адсорбции, не превышающей по совокупности величины и интенсивности окраски зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Вода. От 18,0 % до 22,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1, методика Б). Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в 10 мл формамида (при необходимости растворение проводят при температуре 50 °С), прибавляют 10 мл метанола безводного, и охлаждают.

Железо. Не более 0,003 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Железо» (метод 1) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г (точная навеска) субстанции (ОФС «Сульфатная зола»).

Мышьяк. Не более 0,0001 % (ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения используют 0,5 г субстанции.

Сульфаты. Не более 0,01 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Растворяют 1,5 г субстанции при нагревании в 15 мл воды. Для определения используют 10 мл раствора.

Хлориды. Не более 0,005 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,4 г субстанции в 10 мл воды. Для определения используют 10 мл раствора.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,44 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,26 г (точная навеска) субстанции при нагревании до 60 °С в 10 мл воды, охлаждают, прибавляют 10 мл буферного раствора аммония хлорида рН 10,0 и 0,1 г индикаторной смеси эриохрома чёрного, титруют 0,1 М раствором натрия эдетата до перехода красно-фиолетовой окраски в синюю.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия эдетата соответствует 28,85 мг аспарагината магния С8Н12MgN2О8.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0378 Магния стеарат (Magnesii stearas)

Вводится впервые

[557-04-0]/[2601-98-1]

##### Определение

Соединение магния со смесью твёрдых органических кислот, состоящее главным образом из магния стеарата (диоктадеканоата магния) и магния пальмитата (дигексадеканоата магния) в различных пропорциях, полученных из источников растительного или животного происхождения.

Содержит:

- не менее 4,0 % и не более 5,0 % магния в пересчёте на сухое вещество;

- не менее 40,0 % стеариновой кислоты во фракции жирных кислот;

- не менее 90,0 % суммы стеариновой кислоты и пальмитиновой кислоты во фракции жирных кислот.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый очень мелкий, лёгкий порошок, жирный на ощупь.

Растворимость. Практически нерастворим в воде и в этаноле безводном.

##### Идентификация

1. Газовая хроматография. Время удерживания двух основных пиков на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания двух основных пиков на хроматограмме раствора сравнения (раздел «Количественное определение Стеариновая кислота и пальмитиновая кислота»).

2. Качественная реакция. В колбу помещают 1 мл исходного раствора (раздел «Испытания»), прибавляют 1 мл аммиака раствора 10 %; должен образоваться белый осадок, который после прибавления 1 мл аммония хлорида раствора 10,7 % должен раствориться. Далее к полученному раствору прибавляют 1 мл динатрия гидрофосфата додекагидрата раствора 12 %; должен образоваться белый кристаллический осадок.

##### Испытания

Исходный раствор. К 5,0 г испытуемого образца прибавляют 50 мл эфира, свободного от пероксидов, 20 мл азотной кислоты разведённой 12,5 %, 20 мл воды и нагревают с обратным холодильником до полного растворения испытуемого образца. Раствор охлаждают, помещают в делительную воронку и удаляют водный слой. Эфирный слой дважды встряхивают с водой порциями по 4 мл. Водные слои объединяют, промывают 15 мл эфира, свободного от пероксидов, и доводят водой до объёма 50,0 мл. Раствор используют для последующих испытаний.

Органический слой выпаривают досуха и сушат остаток при температуре от 100 до 105 °C. Остаток используют для проведения испытания в разделах «Температура затвердевания», «Кислотное число».

Температура затвердевания. Не менее 53 °C (ОФС «Температура затвердевания», методика 2). Определение проводят с использованием остатка, полученного при приготовлении исходного раствора
(раздел «Испытания»).

Кислотное число. От 195 до 210 (ОФС «Кислотное число», метод 2).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,2 г остатка, полученного при приготовлении исходного раствора (раздел «Испытания»), растворяют в смеси растворителей и доводят той же смесью до метки.

Кислотность или щёлочность. К 1,0 г испытуемого образца прибавляют 20 мл воды, свободной от углерода диоксида и кипятят в течение 1 мин при постоянном встряхивании, после охлаждения раствор фильтруют. К 10 мл фильтрата прибавляют 0,05 мл бромтимолового синего раствора 0,1 % спиртового. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 0,05 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М или натрия гидроксида раствора 0,1 М.

Хлориды. Не более 0,1 %. Помещают 10,0 мл исходного раствора (см. выше) в колбу, доводят водой до 40 мл и при необходимости нейтрализуют азотной кислотой концентрированной (проба на лакмусовую бумагу). Прибавляют 1 мл азотной кислоты концентрированной и 1 мл серебра нитрата раствора 0,1 М и доводят водой до 50 мл. Перемешивают и выдерживают в течение 5 мин в защищённом от света месте. Полученный раствор по степени мутности не должен превышать раствор, содержащий 1,4 мл 0,02 М раствора хлористоводородной кислоты.

Сульфаты. Не более 1,0 %. Помещают 6,0 мл исходного раствора (см. выше) в колбу и доводят водой до 40 мл и при необходимости нейтрализуют хлористоводородной кислотой концентрированной (проба на лакмусовую бумагу). Прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты раствора 3 М и 3 мл бария хлорида раствора 12 % и доводят водой до объёма 50 мл. Перемешивают и выдерживают в течение 10 мин. Полученный раствор по степени мутности не должен превышать раствор, содержащий 3,0 мл 0,02 М раствора кислоты серной.

Кадмий. Не более 0,0003 % («ОФС Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 2).

Для ополаскивания стеклянной посуды перед использованием и для приготовления всех водных растворов применяют воду, предварительно пропущенную через сильнокислотную, сильноосновную смешанную ионообменную смолу. Используют реактивы с максимально низким содержанием кадмия, свинца и никеля и хранят все растворы реактивов в контейнерах из боросиликатного стекла. Стеклянную посуду перед использованием очищают путём замачивания в тёплом растворе азотной кислоты с концентрацией 773 г/л в течение 30 мин и последующим ополаскиванием деионизированной водой (водой для хроматографии).

Раствор модификатора. Растворяют в воде 20 г аммония дигидрофосфата и 1 г магния нитрата и доводят до объёма 100 мл этим же растворителем. (Альтернативно может использоваться подходящий матричный модификатор, рекомендованный производителем графитовой печи атомно-абсорбционного спектрометра).

Испытуемый раствор. Помещают 0,100 г испытуемого вещества в политетрафторэтиленовый сосуд для минерализации, прибавляют 2,5 мл азотной кислоты, свободной от свинца и кадмия и плотно укупоривают в соответствии с инструкциями производителя. Сосуд нагревают при температуре 170 °C в течение 3 ч и медленно охлаждают на воздухе до комнатной температуры в соответствии с инструкциями производителя. Так как могут выделяться едкие газы, сосуд осторожно открывают в вытяжном шкафу. Полученный остаток растворяют в воде и доводят до объёма 10,0 мл этим же растворителем.

Примечание – Использование сосуда для минерализации осуществляется строго в соответствии с инструкциями по технике безопасности и по применению. Для минерализации нельзя использовать сосуды с металлической оболочкой или вкладыши, которые использовались при работе с соляной кислотой из-за загрязнения в результате коррозии металлической оболочки соляной кислотой.

Контрольный раствор. Доводят 25 мл азотной кислоты, свободной от свинца и кадмия, водой до объёма 100,0 мл.

Эталонный раствор кадмия 0,0030 мкг/мл. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 3 мл кадмия стандартного раствора 1 мкг/мл и доводят контрольным раствором до метки.

Доводят 1,0 мл испытуемого раствора контрольным раствором до объема 10,0 мл. Готовят смеси из полученного раствора, эталонного раствора кадмия 0,0030 мкг/мл и контрольного раствора в следующих соотношениях: (1,0:0:1,0 о/о/о), (1,0:0,5:0,5 о/о/о), (1,0:1,0:0 о/о/о). К каждой смеси прибавляют 50 мкл раствора модификатора и перемешивают.

Полученные растворы содержат соответственно 0 мкг/мл, 0,00075 мкг/мл и 0,0015 мкг/мл кадмия из эталонного раствора кадмия 0,0030 мкг/мл.

Оставшийся испытуемый раствор сохраняют для проведения испытаний «Свинец» и «Никель».

Условия испытания

Источник излучения | лампа с полым катодом для определения кадмия;
Длина волны | 228,8 нм;
Атомизатор | графитовая печь;
Платформа | с пиропокрытием с интегрированной кюветой.

Условия проведения испытания: используют температурную программу для кадмия, рекомендуемую производителем атомно-абсорбционного спектрометра.

Температурные условия для определения кадмия методом атомно-абсорбционной спектрометрии в графитовой печи

Стадия | Конечная температура, °С | Время поднятия температуры, с | Время удерживания температуры, с
--- | --- | --- | ---
Высушивание | 110 | 10 | 20
Озоление | 600 | 10 | 30
Атомизация | 1800 | 0 | 5

Свинец. Не более 0,0010 %. («ОФС Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 2).

Химическую посуду обрабатывают аналогично, как указано в испытании «Кадмий».

Раствор модификатора. Раствор модификатора, приготовленный в испытании «Кадмий».

Испытуемый раствор. Испытуемый раствор, приготовленный в испытании «Кадмий».

Контрольный раствор. Контрольный раствор, приготовленный в испытании «Кадмий».

Эталонный раствор свинца 0,100 мкг/мл. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл свинца стандартного раствора 100 мкг/мл и доводят контрольным раствором до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят контрольным раствором до метки.

Готовят смеси из испытуемого раствора, эталонного раствора свинца 0,100 мкг/мл и контрольного раствора в следующих соотношениях: (1,0:0:1,0, о/о/о), (1,0:0,5:0,5, о/о/о), (1,0:1,0:0, о/о/о). К каждой смеси прибавляют 50 мкл раствора модификатора и перемешивают. Полученные растворы содержат соответственно 0 мкг/мл, 0,025 мкг/мл и 0,05 мкг/мл свинца из эталонного раствора свинца 0,100 мкг/мл.

Условия испытания

Источник излучения | лампа с полым катодом для определения свинца;
Длина волны | 283,3 нм;
Атомизатор | графитовая печь;
Платформа | с пиропокрытием с интегрированной кюветой.

Условия проведения испытания: используют температурную программу для свинца, рекомендуемую производителем атомно-абсорбционного спектрометра.

Температурные условий для определения свинца методом атомно-абсорбционной спектрометрии в графитовой печи

Стадия | Конечная температура (°С) | Время поднятия температуры (с) | Время удерживания температуры (с)
--- | --- | --- | ---
Высушивание | 110 | 10 | 20
Озоление | 450 | 10 | 30
Атомизация | 2000 | 0 | 5

Никель. Не более 0,0005 %. («ОФС Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 2).

Химическую посуду обрабатывают аналогично, как указано в испытании «Кадмий».

Раствор модификатора. 20 г аммония дигидрофосфата растворяют в воде и доводят до объёма 100 мл этим же растворителем. Альтернативно может использоваться матричный модификатор, рекомендованный производителем графитовой печи атомно-абсорбционного спектрометра.

Испытуемый раствор. Испытуемый раствор, приготовленный в испытании «Кадмий».

Контрольный раствор. Контрольный раствор, приготовленный в испытании «Кадмий».

Эталонный раствор никеля 0,050 мкг/мл. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мл никеля стандартного раствора 1 мкг/мл и доводят контрольным раствором до метки.

Готовят смеси из испытуемого раствора, эталонного раствора никеля 0,050 мкг/мл и контрольного раствора в следующих соотношениях: (1,0:0:1,0, о/о/о), (1,0:0,5:0,5, о/о/о), (1,0:1,0:0, о/о/о). К каждой смеси прибавляют 50 мкл раствора модификатора и перемешивают. Полученные растворы содержат соответственно 0 мкг/мл, 0,0125 мкг/мл и 0,025 мкг/мл никеля из эталонного раствора никеля 0,050 мкг/мл.

Условия испытания

Источник излучения | лампа с полым катодом для определения никеля;
Длина волны | 232,0 нм;
Атомизатор | графитовая печь;
Платформа | с пиропокрытием с интегрированной кюветой.

Условия проведения испытания: используют температурную программу для никеля, рекомендуемую производителем атомно-абсорбционного спектрометра.

Температурные условия для определения никеля методом атомно-абсорбционной спектрометрии в графитовой печи

Стадия | Конечная температура (С) | Время поднятия температуры (с) | Время удерживания температуры (с)
--- | --- | --- | ---
Высушивание | 110 | 10 | 20
Озоление | 1000 | 20 | 30
Атомизация | 2300 | 0 | 5

Потеря в массе при высушивании. Не более 6,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Около 1,0 г испытуемого вещества высушивают до постоянной массы при температуре 105 °С.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Магний

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В коническую колбу вместимостью 250 мл помещают 0,500 г испытуемого вещества, прибавляют 50 мл смеси из равных объёмов бутанола и этанола, 5 мл аммиака раствора концентрированного 25 %, 3 мл аммиачного буферного раствора, 30,0 мл 0,1 М раствора натрия эдетата и 15 мг эриохрома чёрного Т индикаторной смеси и нагревают при температуре 45–50 °C до получения прозрачного раствора.

Титруют 0,1 М раствором цинка сульфата до изменения окраски раствора от синей до фиолетовой.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия эдетата соответствует 2,431 мг магния.

Стеариновая кислота и пальмитиновая кислота

Определение проводят методом газовой хроматографии (ОФС «Газовая хроматография» (метод внутренней нормализации)).

Испытуемый раствор. В коническую колбу вместимостью 50 мл помещают 0,10 г испытуемого вещества и растворяют в 5 мл бора фторида в метаноле 14 %, далее колбу присоединяют к обратному холодильнику и кипятят в течение 10 мин. Затем в колбу через холодильник прибавляют 4 мл гептана, кипятят в течение 10 мин и охлаждают. В колбу прибавляют 20 мл натрия хлорида насыщенного раствора, встряхивают и выдерживают до разделения слоёв.

Органический слой сушат с использованием 0,1 г натрия сульфата безводного (предварительно промытого гептаном). 1,0 мл полученного раствора доводят гептаном до объёма 10,0 мл.

Раствор сравнения. Готовят как испытуемый раствор, используя вместо испытуемого вещества 50,0 мг фармакопейного стандартного образца пальмитиновой кислоты и 50,0 мг фармакопейного стандартного образца стеариновой кислоты.

Хроматографические условия

Колонка | 30 м × 0,32 мм, кварцевая капиллярная, покрытая слоем макрогола 20 000 толщиной 0,5 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Скорость потока | 2,4 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1 мкл. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °C
--- | --- | ---
Колонка | 0–2 | 70
| 2–36 | 70 → 240
| 36–41 | 240
Блок ввода проб (инжектор) |  | 220
Детектор |  | 260

Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания. Метилстеарат – 1; метилпальмитат – около 0,9.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения:

- разрешение между пиками метилпальмитата и метилстеарата должно быть не менее 5,0;

- относительное стандартное отклонение площади каждого из пиков метилпальмитата и метилстеарата должно быть не более 3,0 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение отношения площадей пиков метилпальмитата к площадям пиков метилстеарата должно быть не более 1,0 % (6 введений).

##### Функциональные характеристики

Испытание проводят, если магния стеарат применяется в качестве смазывающего вещества при производстве таблеток и капсул.

Распределение частиц по размерам. В соответствии с ОФС «Ситовой анализ» или ОФС «Определение распределения частиц по размеру методом лазерной дифракции света».

Удельная площадь поверхности. В соответствии с ОФС «Определение удельной площади поверхности порошков методом газовой адсорбции». Определяют удельную площадь поверхности в диапазоне P/P0 от 0,05 до 0,15.

Образец дегазации: в течение 2 ч при температуре 40 °C.

Термогравиметрия. В соответствии с ОФС «Термический анализ» (метод 1).

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0452 Маннитол (Mannitolum)

Взамен ВФС 42-3421-99

##### Определение

D-Маннит.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % маннитола C6H14O6 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в воде, очень мало растворим или практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца маннитола.

- Если спектры различаются, 25 мг субстанции и фармакопейного стандартного образца маннитола по отдельности растворяют без нагревания в 0,25 мл воды; раствор должен быть прозрачным. Полученный раствор выпаривают при 100 °С в течение 1 ч, затем постепенно применяют вакуум до получения сухих остатков, которые представляют собой не липкий, белый или слегка жёлтоватый порошок. Записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика маннитола на хроматограмме раствора стандартного образца маннитола (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Температура плавления. От 165 до 170 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельное вращение. От +23 до +25 в пересчёте на сухое вещество (ОФС «Оптическое вращение»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 г субстанции и 2,6 г натрия тетрабората, растворяют в 20 мл воды при температуре 30 °С, встряхивают в течение 15–30 мин без последующего нагревания и доводят объём раствора водой до метки.

Прозрачность раствора. Раствор 5,0 г субстанции в 50,0 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. Около 10,0 г субстанции растворяют в 120,0 мл воды, свободной от углерода диоксида, нейтрализованной по фенолфталеину 0,02 М раствором натрия гидроксида. Для изменения окраски раствора на розовую должно потребоваться не более 0,2 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида.

Электропроводность. Не более 20 мкСм∙см^–1 (ОФС «Электропроводность»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20,0 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, нагревая при температуре 40–50 °С, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Измеряют электропроводность полученного раствора при постоянном перемешивании.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Вода.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,5 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,25 г маннитола и 0,25 г сорбита (примесь А) и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для идентификации пиков. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г мальтита (примесь В) и 0,1 г изомальтита (примесь С) и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь А (сорбит): D-Глюцит [50-70-4].

Примесь В (мальтит): 4-O-(α-D-Глюкопиранозил)-D-глюцит [585-88-6].

Примесь С (изомальтит): 6-O-(α-D-Глюкопиранозил)-D-глюцит—1-O-(α-D-глюкопиранозил)-D-маннит [64519-82-0].

Хроматографические условия

Колонка | 300 × 7,8 мм, ионообменная смола сильнокислотная (кальциевая форма), 9 мкм; |
Температура колонки | 85 ± 2 °С; |  |
Скорость потока | 0,5 мл/мин; |  |
Детектор | рефрактометрический, термостатируемый (например 40 °С); |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика маннитола. |

Хроматографируют раствор для идентификации пиков, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения Б, раствор сравнения А и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Маннитол – 1 (около 20 мин); примесь С (первый пик) – около 0,6; примесь В – около 0,7; примесь С (второй пик) – около 0,73; примесь А – около 1,2. Может наблюдаться слияние пика примеси В и второго пика примеси С.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (Rs) между пиками маннитола и примеси А должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 2,0 %);

- суммарная площадь пиков примесей В и С не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 2,0 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,1 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 2,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (менее 0,05 %).

Восстанавливающие сахара. Не более 0,1 % в пересчёте на глюкозу.

К 7,0 г субстанции прибавляют 13 мл воды, 40 мл медно-тартратного реактива, осторожно кипятят в течение 3 мин и выдерживают 2 мин до образования осадка. Раствор фильтруют через фильтр из сплавленного стекла с размером пор от 4 до 10 мкм. Полученный осадок промывают водой, нагретой до температуры от 50 до 60 °С, до исчезновения щелочной реакции среды и фильтруют смывы через тот же фильтр. Полученный осадок немедленно растворяют в 20 мл железа(III) сульфата раствора в серной кислоте 5 %, фильтруют через тот же фильтр и промывают фильтр 20 мл воды. Полученные смывы объединяют с фильтратом, нагревают до температуры от 78 до 82 °С и титруют 0,02 М раствором калия перманганата, до изменения окраски с зелёной на розовую, сохраняющуюся не менее 10 с.

Должно потребоваться не более 3,2 мл 0,02 М раствора калия перманганата.

Никель. В соответствии с ОФС «Никель в полиолах».

Испытуемый раствор. В мерной колбе вместимостью 100 мл суспендируют 10,0 г субстанции с 30,0 мл уксусной кислоты разведённой 12 % и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание – Перед каждым измерением промывают водой и устанавливают нулевую точку на приборе.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Сушат 1,0 г (точная навеска) субстанции при температуре 105 °С в течение 4 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,0005 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы», (метод 3 А или 3 Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

** Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 75 мг субстанции в 0,5 мл натрия хлорида раствора 0,9 % на мышь.

** Бактериальные эндотоксины. В соответствии с ОФС «Бактериальные эндотоксины».

Для растворов для парентерального применения с концентрацией маннитола:

- 100 г/л и менее: не более 4,0 ЕЭ на 1 г маннитола;

- более 100 г/л: не более 2,5 ЕЭ на 1 г маннитола.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца маннитола. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца маннитола и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца маннитола и испытуемый раствор.

Содержание маннитола C6H14O6 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика маннитола на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика маннитола на хроматограмме раствора стандартного образца маннитола;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца маннитола, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
W - потеря в массе при высушивании,%;
P - содержание маннитола в фармакопейном стандартном образце маннитола,%.

##### Хранение

Не требует специальных условий хранения.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения. Испытанию на аномальную токсичность подлежит субстанция, полученная из растительного сырья.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0379 Мальтодекстрин (Maltodextrinum)

Вводится впервые

[9050-36-6]

##### Определение

Смесь глюкозы, дисахаридов и полисахаридов, полученная путём частичного гидролиза крахмала.

Степень гидролиза, выраженная в единицах декстрозного эквивалента, составляет не более 20 (заявленного значения).

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок или гранулы.

* Гигроскопичен

Растворимость. Легко растворим в воде.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г испытуемого образца в 2,5 мл воды, прибавляют 2,5 мл медно-тартратного реактива. При нагревании должен образоваться осадок красного цвета.

2. Качественная реакция. Индикаторную полоску, рабочая часть которой пропитана глюкозооксидазой, пероксидазой и веществом – донором протонов, (например, тетраметилбензидином) погружают на 1 с в 10 % раствор испытуемого образца. Рабочая часть индикаторной полоски в течение 60 с должна изменить окраску, характерную для вещества – донора протонов (с жёлтой на зелёную или синюю при использовании тетраметилбензидина).

##### Испытания

pH раствора. От 4,0 до 7,0 (ОФС «Ионометрия», метод 3).

Испытуемый раствор. Смешивают 1 мл калия хлорида раствора 3 М и 30 мл 25 % раствора испытуемого образца в воде.

Белок. Не более 0,1 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение азота в органических соединениях методом Кьельдаля» со следующими изменениями: используют 10,0 г (точная навеска) вещества и 60 мл серной кислоты концентрированной.

Потеря в массе при высушивании. Не более 6,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 10,0 г (точная навеска) испытуемого образца до постоянной массы при температуре около 105 оC.

Серы диоксид. Не более 0,002 % (ОФС «Определение серы диоксида», метод 1).

Декстрозный эквивалент. Должен отличаться от заявленного значения не более чем на 2 единицы.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 г (точная навеска) мальтодекстрина, растворяют в горячей воде, охлаждают и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор декстрозы. Растворяют точно взвешенное количество декстрозы в воде и разбавляют водой до получения раствора с известной концентрацией около 10 мг/мл.

Помещают 25,0 мл медно-тартратного реактива в каждую из двух колб. Содержимое одной из колбы доводят до кипения в течение 2 мин, одновременно титруя стандартным раствором декстрозы, недотитровывая около 0,5 мл до ожидаемой точки эквивалентности. Осторожно кипятят в течение 2 мин. Продолжая кипячение раствора, прибавляют 2 капли индикатора метиленового синего раствора 1 % и завершают титрование в течение 1 мин прибавлением стандартного раствора декстрозы до исчезновения синей окраски. Если после внесения индикатора на титрование потребуется более 0,5 мл титранта, то титрование повторяют, прибавляя необходимый объём титранта перед внесением индикатора. Содержимое другой колбы доводят до кипения и титруют аналогичным образом испытуемым раствором.

Декстрозный эквивалент в пересчёте на сухое вещество (Х) вычисляют по формуле:

где V0 - объём стандартного раствора декстрозы, израсходованный на титрование, мл;
V1 - объём испытуемого раствора, израсходованный на титрование, мл;
C0 - концентрация декстрозы в стандартном растворе декстрозы, мг/мл;
C1 - концентрация мальтодекстрина в испытуемом растворе, мг/мл;
W - потеря в массе при высушивании,%.

Сульфатная зола. Не более 0,5 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) испытуемого образца.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 8)).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Функциональные характеристики

Испытание проводят, если мальтодекстрин применяется в качестве наполнителя и связующего вещества.

Декстрозный эквивалент. (см. раздел «Испытания»).

Распределение частиц по размерам. В соответствии с ОФС «Ситовой анализ» или «Определение распределения частиц по размеру методом лазерной дифракции света».

Сыпучесть. В соответствии с ОФС «Сыпучесть порошков».

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в сухом месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0127 Макрогол 3350

Макрогол
Macrogolum 3350

Взамен ФС.2.1.0127.18

##### Определение

α-Гидро-ω-гидроксиполи(оксиэтан-1,2-диил).

Смеси полимеров общей формулы Н-(OCН2-CН2)n-OН, где n представляет собой среднее число оксиэтиленовых групп.

Содержит не менее 97,0 % и не более 103,0 % макрогола в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белые или почти белые твёрдые частицы воскообразного вида.

Растворимость. Легко растворим в воде, хлороформе, метиленхлориде, очень мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в жирных и минеральных маслах.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в виде жидкой плёнки, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца полиэтиленгликоля 3350.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. К 0,1 г субстанции прибавляют 0,1 г калия тиоцианата и 0,1 г кобальта нитрата, тщательно перемешивают стеклянной палочкой. Прибавляют 5 мл метиленхлорида и взбалтывают; жидкая фаза должна окраситься в синий цвет.

##### Испытания

Температура затвердевания. От 53 до 57 °С (ОФС «Температура затвердевания»). Перед определением субстанцию сушат в течение 4 ч при температуре от 100 до 105 °С.

Кинематическая вязкость. От 76 до 110 мм2/с (ОФС «Вязкость»). Определяют вязкость, используя 50 % (м/м) водный раствор субстанции. Измерение проводят на вискозиметре Уббелоде.

Прозрачность раствора. Раствор 25 г субстанции в 100 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,5 до 7,5 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Гидроксильное число. От 30 до 38 (ОФС «Гидроксильное число», метод 2). Для определения используют 12,0 г (точная навеска) субстанции.

Среднее значение молекулярной массы и полидисперсность. Масса от 3015 до 3685 г/моль, полидисперсность от 90 % до 110 % от указанного на упаковке значения или в области значений, приведённых на упаковке.

Определение проводят методом эксклюзионной хроматографии (ОФС «Эксклюзионная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Вода.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора до метки тем же растворителем. Фильтруют через гидрофильный тефлоновый мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм, отбрасывая первые 2 мл фильтрата.

Растворы сравнения А, Б, В, Г, Д. В мерные колбы вместимостью 100 мл помещают по 0,1 г стандартных образцов макрогола 1000, 2000, 3000, 4000 и 6000, растворяют в ПФ и доводят объём каждого раствора тем же растворителем до метки. Фильтруют через гидрофильный тефлоновый мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм, отбрасывая первые 2 мл фильтрата.

Хроматографические условия

Колонка | 30×0,78 см, полиметакрилатный гидроксилированный гель для хроматографии, 6 мкм |
Детектор | рефрактометрический; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |
Температура колонки | 35 °C |  |
Температура детектора | 35 °C |  |
Время хроматографирования | 18 мин |  |

Хроматографируют растворы сравнения А, Б, В, Г, Д и испытуемый раствор, определяя время выхода максимумов пиков.

Строят график зависимости времени выхода пиков (по оси абсцисс) от логарифма молекулярной массы (по оси ординат) стандартных образцов. Из полученной кривой рассчитывают среднюю арифметическую и средневзвешенную молекулярные массы субстанции. Вычисляют полидисперсность как отношение средневзвешенной молекулярной массы к средней арифметической молекулярной массе.

Свободная уксусная кислота. Не более 0,025 %. Растворяют 5,0 г (точная навеска) субстанции при нагревании до 30 °С в 20 мл предварительно нейтрализованного по фенолфталеину спирта 96 % и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до перехода окраски в розовую (индикатор – 2 капли фенолфталеина раствора 0,1 %).

Содержание уксусной кислоты в процентах (X) вычисляют по формуле:

где V – объём 0,1 М раствора натрия гидроксида, мл;
a – навеска субстанции, г.

Формальдегид. Не более 0,003 %. (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Хромотроповой кислоты натриевой соли раствор 0,6 %. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,6 г хромотроповой кислоты натриевой соли, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор используют свежеприготовленным.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10,0 мл помещают 1,0 г субстанции, прибавляют 0,25 мл хромотроповой кислоты натриевой соли раствора 0,6 %, охлаждают на ледяной бане и прибавляют 5,0 мл серной кислоты концентрированной. Выдерживают в течение 15 мин и медленно доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,860 г 35 % раствора формальдегида и доводят водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 0,25 мл хромотроповой кислоты натриевой соли раствора 0,6 %, охлаждают на ледяной бане и прибавляют 5,0 мл серной кислоты концентрированной. Выдерживают в течение 15 мин и медленно доводят объём раствора водой до метки.

Контрольный раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл воды, прибавляют 0,25 мл хромотроповой кислоты натриевой соли раствора 0,6 %, охлаждают на ледяной бане и прибавляют 5,0 мл серной кислоты концентрированной. Выдерживают в течение 15 мин и медленно доводят объём раствора водой до метки.

Измеряют оптическую плотность раствора сравнения и испытуемого раствора при длине волны 567 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, относительно контрольного раствора. Оптическая плотность испытуемого раствора не должна превышать оптическую плотность раствора сравнения.

Этиленгликоль и диэтиленгликоль. Этиленгликоль – не более 0,28 %; диэтиленгликоль – не более 0,12 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Натрия азида раствор 0,005 %.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,2 г (точная навеска) стандартного образца диэтиленгликоля и 0,2 г (точная навеска) стандартного образца этиленгликоля, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 30 × 0,78 см, полиметакрилатная смола, поперечносшитая полигидроксилированным эфиром для хроматографии, 7 мкм; |
Детектор | рефрактометрический; |  |
Скорость потока | 0,5 мл/мин; |  |
Объём пробы | 100 мкл; |  |
Температура колонки | 35 °C; |  |
Температура детектора | 35 °C; |  |
Время хроматографирования | 30 мин. |  |

Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Диэтиленгликоль – 1; этиленгликоль – около 1,1.

Идентификация примесей. Хроматограмма раствора сравнения используется для идентификации пиков диэтиленгликоля и этиленгликоля.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения:

- разрешение (Rs) между пиками диэтиленгликоля и этиленгликоля должно быть не менее 0,9.

Содержание диэтиленгликоля и этиленгликоля в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S – площадь пика диэтиленгликоля или этиленгликоля на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика каждой соответствующей примеси на хроматограмме раствора сравнения; a – навеска субстанции, г;
a0 – навеска стандартного образца диэтиленгликоля или этиленгликоля, г;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание диэтиленгликоля или этиленгликоля в стандартном образце,%.

Этиленоксид и диоксан. Этиленоксид – не более 0,0001 %; диоксан – не более 0,001 % (ОФС «Этиленоксид и диоксан»). Объём вводимой пробы 1 мл газовой фазы.

Восстанавливающие вещества. Растворяют при осторожном нагревании 1,0 г субстанции в 1,0 мл резорцина раствора 1 %. Прибавляют 2,0 мл хлористоводородной кислоты концентрированной. Через 5 мин полученный раствор должен выдерживать сравнение с эталоном R3 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 1).

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 2,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Натрия азида раствор 0,005 %.

Испытуемый раствор. Помещают 0,4 г (точная навеска) субстанции в мерную колбу вместимостью 20 мл, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца макрогола 3350. Помещают 0,4 г (точная навеска) стандартного образца макрогола 3350 в мерную колбу вместимостью 20 мл, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Предколонка | 4 × 0,6 см, полиметакрилатный гидроксилированный гель для хроматографии, 6 мкм; |
Колонка | 30 × 0,78 см, полиметакрилатный гидроксилированный гель для хроматографии, 6 мкм; |  |
Детектор | рефрактометрический; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Температура колонки | 35 °C. |  |

Хроматографируют раствор стандартного образца макрогола 3350 и испытуемый раствор. Время удерживания макрогола 3350 составляет около 8,5 минут.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- относительное стандартное отклонение площади пика макрогола 3350 должно быть не более 1,5 % (6 введений).

Содержание макрогола 3350 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S – площадь пика макрогола 3350 на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика макрогола 3350 на хроматограмме раствора стандартного образца макрогола 3350;
a – навеска субстанции, г;
a0 – навеска стандартного образца макрогола 3350, г;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание основного вещества в стандартном образце макрогола 3350,%.

##### Функциональные характеристики

Испытание проводят, если макрогол применяется в качестве связующего вещества в таблетках:

Распределение частиц по размерам. В соответствии с ОФС «Определение распределения частиц по размеру методом лазерной дифракции света».

Испытание проводят, если макрогол применяется в качестве основы для суппозиториев и в гидрофильных мазях:

Кинематическая вязкость. (В разделе «Испытания. Кинематическая вязкость.»)

Температура плавления. В соответствии с ОФС «Температура плавления» (метод 2).

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0379 Мальтодекстрин (Maltodextrinum)

Вводится впервые

[9050-36-6]

##### Определение

Смесь глюкозы, дисахаридов и полисахаридов, полученная путём частичного гидролиза крахмала.

Степень гидролиза, выраженная в единицах декстрозного эквивалента, составляет не более 20 (заявленного значения).

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок или гранулы.

* Гигроскопичен

Растворимость. Легко растворим в воде.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г испытуемого образца в 2,5 мл воды, прибавляют 2,5 мл медно-тартратного реактива. При нагревании должен образоваться осадок красного цвета.

2. Качественная реакция. Индикаторную полоску, рабочая часть которой пропитана глюкозооксидазой, пероксидазой и веществом – донором протонов, (например, тетраметилбензидином) погружают на 1 с в 10 % раствор испытуемого образца. Рабочая часть индикаторной полоски в течение 60 с должна изменить окраску, характерную для вещества – донора протонов (с жёлтой на зелёную или синюю при использовании тетраметилбензидина).

##### Испытания

pH раствора. От 4,0 до 7,0 (ОФС «Ионометрия», метод 3).

Испытуемый раствор. Смешивают 1 мл калия хлорида раствора 3 М и 30 мл 25 % раствора испытуемого образца в воде.

Белок. Не более 0,1 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение азота в органических соединениях методом Кьельдаля» со следующими изменениями: используют 10,0 г (точная навеска) вещества и 60 мл серной кислоты концентрированной.

Потеря в массе при высушивании. Не более 6,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 10,0 г (точная навеска) испытуемого образца до постоянной массы при температуре около 105 оC.

Серы диоксид. Не более 0,002 % (ОФС «Определение серы диоксида», метод 1).

Декстрозный эквивалент. Должен отличаться от заявленного значения не более чем на 2 единицы.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 г (точная навеска) мальтодекстрина, растворяют в горячей воде, охлаждают и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор декстрозы. Растворяют точно взвешенное количество декстрозы в воде и разбавляют водой до получения раствора с известной концентрацией около 10 мг/мл.

Помещают 25,0 мл медно-тартратного реактива в каждую из двух колб. Содержимое одной из колбы доводят до кипения в течение 2 мин, одновременно титруя стандартным раствором декстрозы, недотитровывая около 0,5 мл до ожидаемой точки эквивалентности. Осторожно кипятят в течение 2 мин. Продолжая кипячение раствора, прибавляют 2 капли индикатора метиленового синего раствора 1 % и завершают титрование в течение 1 мин прибавлением стандартного раствора декстрозы до исчезновения синей окраски. Если после внесения индикатора на титрование потребуется более 0,5 мл титранта, то титрование повторяют, прибавляя необходимый объём титранта перед внесением индикатора. Содержимое другой колбы доводят до кипения и титруют аналогичным образом испытуемым раствором.

Декстрозный эквивалент в пересчёте на сухое вещество (Х) вычисляют по формуле:

где V0 - объём стандартного раствора декстрозы, израсходованный на титрование, мл;
V1 - объём испытуемого раствора, израсходованный на титрование, мл;
C0 - концентрация декстрозы в стандартном растворе декстрозы, мг/мл;
C1 - концентрация мальтодекстрина в испытуемом растворе, мг/мл;
W - потеря в массе при высушивании,%.

Сульфатная зола. Не более 0,5 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) испытуемого образца.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 8)).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Функциональные характеристики

Испытание проводят, если мальтодекстрин применяется в качестве наполнителя и связующего вещества.

Декстрозный эквивалент. (см. раздел «Испытания»).

Распределение частиц по размерам. В соответствии с ОФС «Ситовой анализ» или «Определение распределения частиц по размеру методом лазерной дифракции света».

Сыпучесть. В соответствии с ОФС «Сыпучесть порошков».

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в сухом месте.

* Приводится для информации.

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0014 Мебгидролина нападизилат

Мебгидролин
Mebhydrolini napadisilas

Взамен ФС.2.1.0014.15

##### Определение

5-Бензил-2-метил-2,3,4,5-тетрагидро-1H-пиридо[4,3-b]индола 1,5-нафталиндисульфонат (2:1).

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % мебгидролина нападизилата (С19Н20N2)2∙C10H8O6S2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Очень мало растворим в диметилформамиде, практически нерастворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать рисунку спектра мебгидролина (Приложение).

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В делительную воронку помещают 0,1 г субстанции, прибавляют 10 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида, 20 мл эфира и встряхивают в течение 1 мин. Верхний (эфирный) слой переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 мл полученного раствора и доводят объём водой до метки.

- Спектр поглощения полученного раствора в области длин волн от 240 до 350 нм должен иметь максимум при 280 нм.

3. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 2 мл серной кислоты концентрированной и прибавляют 10 мг натрия нитрита; через 2 мин должно появиться фиолетовое окрашивание.

4. Качественная реакция. Сплавляют в тигле 0,1 г субстанции с 0,1 г натрия гидроксида в течение 15 мин. После охлаждения содержимое тигля растворяют при осторожном нагревании в 5 мл воды, прибавляют 5 мл серной кислоты раствора 50 %. Тигель накрывают фильтровальной бумагой, смоченной смесью 10 мл калия дихромата раствора и 0,1 мл серной кислоты концентрированной; в течение 5 мин должно появиться зелёное пятно.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография».

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза. Диэтиламин—этилацетат 1:50.

Испытуемый раствор. В делительную воронку помещают 0,1 г субстанции, прибавляют 2 мл натрия гидроксида раствора 0,5 М, 10 мл хлороформа и встряхивают в течение 1 мин. Хлороформный слой отделяют и фильтруют.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора хлороформом до метки.

На линию старта пластинки наносят 10 мкл (100 мкг) испытуемого раствора, 15 мкл (1,5 мкг), 10 мкл (1,0 мкг), 5 мкл (0,5 мкг) и 3 мкл (0,3 мкг) раствора сравнения. Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе, помещают в камеру со свежеприготовленной ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме раствора сравнения, содержащего 0,3 мкг вещества, чётко видна зона адсорбции основного вещества.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по совокупности величины и степени подавления флуоресценции не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения, содержащего 0,5 мкг вещества (не более 0,5 %).

Суммарное содержание примесей не должно превышать 1,5 %.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Встряхивают 0,4 г субстанции со смесью 18 мл воды и 2 мл азотной кислоты разведённой 16 % в течение 1 мин и фильтруют.

Сульфаты. Не более 0,04 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Встряхивают 0,5 г субстанции со смесью 18 мл воды и 2 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % в течение 1 мин и фильтруют.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Встряхивают 0,2 г (точная навеска) субстанции в делительной воронке с 10 мл 0,5 М раствора натрия гидроксида в течение 1 мин. Прибавляют 10 мл хлороформа, встряхивают до полного растворения образовавшегося мебгидролина основания и выдерживают в течение 40 мин. Хлороформный слой помещают в коническую колбу, не допуская попадания водного слоя. Водный слой экстрагируют ещё 2 раза порциями по 5 мл хлороформа, сливая хлороформный слой в ту же колбу. К объединённому хлороформному извлечению прибавляют 20 мл уксусной кислоты ледяной, 5 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до появления зелёного окрашивания (индикатор – 0,3 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 42,05 мг мебгидролина нападизилата (С19Н20N2)2∙C10H8O6S2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0677 Мебеверина гидрохлорид

Мебеверин
Mebeverini hydrochloridum

Вводится впервые

C25H35NO5·HCl [2753-45-9] | М.м. 466,01

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(4-{[(2RS)-1-(4-Метоксифенил)пропан-2-ил](этил)амино}бутил)(3,4-диметоксибензоата) гидрохлорид.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % мебеверина гидрохлорида C25H35NO5·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Очень легко или легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96 % и метиленхлориде.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрофотометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца мебеверина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 4,0 мл воды, прибавляют 0,6 мл азотной кислоты разведённой 12,5 % и центрифугируют при 1800 g в течение 15 мин. Надосадочная жидкость должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### ИСПЫТАНИЯ

рН раствора. От 4,5 до 6,5 (2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. В химическом стакане смешивают 10 мл триэтиламина с 1000 мл воды, доводят значение рН раствора до 5,0 с помощью фосфорной кислоты концентрированной.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Смешивают 500 мл ацетонитрила с 500 мл воды.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10,0 мл помещают 100,0 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100,0 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10,0 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца мебеверина для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примесь J (смесь N-[(2R)-1-(4-метоксифенил)пропан-2-ил]-4-(4-{[(2RS)-1-(4-метоксифенил)пропан-2-ил](этил)амино}бутокси)-N-этилбутан-1-амина и N-[(2S)-1-(4-метоксифенил)пропан-2-ил]-4-(4-{[(2RS)-1-(4-метоксифенил)пропан-2-ил](этил)амино}бутокси)-N-этилбутан-1-амина) растворяют в 1 мл растворителя.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки | 25 °С;
Скорость потока | 1,0 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм;
Объём пробы | 2 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–6 | 75 | 25
6–20 | 75 → 30 | 25 → 70
20–40 | 30 | 70
40–43 | 30 → 75 | 70 → 25
43–50 | 75 | 25

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Мебеверин – 1 (около 15 мин); примесь J – около 0,82.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы хроматограмму и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу мебеверина для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси J и мебеверина должно быть не менее 3,5.

На хроматограмме раствора сравнения отношение сигнал/шум (S/N) для пика мебеверина должно быть не менее 70.

Поправочный коэффициент. Для расчёта содержания площадь пика примеси J умножают на 3,5.

Содержание каждой из примесей в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X] вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика соответствующей примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика мебеверина на хроматограмме раствора сравнения;
W - потеря в массе при высушивании испытуемой субстанции, %.

Допустимое содержание примесей:

- примесь J – не более 0,2 %;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,3 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика мебеверина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции, сушат при температуре 105 °С в течение 1 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Кислотно-основное титрование в неводных средах»).

Растворяют 0,4 г (точная навеска) субстанции в 50 мл этанола безводного, прибавляют 5,0 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают объём титрованного раствора между двумя точками перегиба на кривой титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 46,60 мг мебеверина гидрохлорида C25H35NO5·HCl.

##### ХРАНЕНИЕ

В защищённом от света месте.

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0453 Мебендазол (Mebendazolum)

Вводится впервые

##### Определение

Метил[N-(5-бензоил-1H-бензимидазол-2-ил)карбамат].

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % мебендазола C16H13N3O3 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок. *Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в муравьиной кислоте, очень мало растворим в ацетоне и хлороформе, практически нерастворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца мебендазола.

2. Спектрофотометрия_ (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл муравьиной кислоты безводной и доводят объём раствора 2-пропанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора 2-пропанолом до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 190 до 380 нм должен иметь максимум при 312 нм.

##### Испытания

Удельный показатель поглощения. От 485 до 505 при длине волны 312 нм в пересчёте на сухое вещество (0,001 % раствор субстанции, полученный в испытании «Подлинность. Спектрофотометрия», ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Подвижная фаза А (ПФА). Аммония ацетата раствор 0,75 %.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Диметилформамид.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 40 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком в течение 10 мин, и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца мебендазола. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца мебендазола, прибавляют 40 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком в течение 10 мин, и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца мебендазола и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца мебендазола, содержащего примеси A, B, C, D, E, F и G, для проверки пригодности хроматографической системы, растворяют в растворителе, обрабатывают ультразвуком в течение 10 мин, и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, прибавляют 1,0 мл раствора стандартного образца мебендазола и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь А: (2-Амино-1H-бензимидазол-5-ил)(фенил)метанон [52329-60-9].

Примесь B: 5-Бензоил-1,3-дигидро-2H-бензимидазол-2-он [21472-33-3].

Примесь C: (2-Амино-1-метил-1H-бензимидазол-5-ил)(фенил)метанон [66066-76-0].

Примесь D: Метил[N-(5-бензоил-1-метил-1H-бензимидазол-2-ил)карбамат] [132119-11-0].

Примесь E: Этил[N-(5-бензоил-1H-бензимидазол-2-ил)карбамат] [31430-19-0].

Примесь F: Метил{N-[5-(4-метилбензоил)-1H-бензимидазол-2-ил]карбамат} [31545-31-0].

Примесь G: N,N'-Бис(5-бензоил-1H-бензимидазол-2-ил)мочевина [129165-82-8].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 250 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА, % | ПФБ, %
--- | --- | ---
0–15 | 80 → 70 | 20 → 30
15–20 | 70 → 10 | 30 → 90
20–25 | 10 | 90
25–26 | 10 → 80 | 90 → 20
26–30 | 80 | 20

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения, раствор стандартного образца мебендазола и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Мебендазол – 1 (около 13 мин); примесь А – около 0,4; примесь B – около 0,5; примесь C – около 0,67; примесь D – около 1,1; примесь Е – около 1,3; примесь F – около 1,4; примесь G – около 1,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, C, D, E, F и G используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение ® между пиками мебендазола и примеси D должно быть не менее 3,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси G умножают на 1,41.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси G не должна более чем в 2 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика каждой из примесей А, В, С, D, Е и F не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,25 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,4 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать четырёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика каждой примеси на хроматограмме раствора сравнения;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца мебендазола, мг;
P – содержание мебендазола в фармакопейном стандартном образце мебендазола,%.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,2 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца мебендазола. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца мебендазола, полученного в испытании «Родственные примеси», и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца мебендазола и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца мебендазола фактор асимметрии пика (AS) мебендазола должен быть не более 2,0.

Содержание мебендазола C16H13N3O3 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика мебендазола на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика мебендазола на хроматограмме раствора стандартного образца мебендазола;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца мебендазола, мг;
P – содержание мебендазола в фармакопейном стандартном образце мебендазола,%.
W – Потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте, в герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0454 Меглюмин (Megluminum)

Взамен ФС 42-2265-89

##### Определение

1-Дезокси-1-(метиламино)-D-глюцит.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % меглюмина C7H17NO5 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, умеренно или мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца меглюмина.

2. Качественная реакция. Растворяют 0,2 г субстанции в 2 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, прибавляют 2 капли натрия нитрита раствора 3,5 %; должно появиться жёлтое окрашивание. При взбалтывании полученного раствора с 3 мл эфира окраска должна перейти в эфирный слой.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 1 мл воды, прибавляют 1 мл серебра нитрата аммиачного раствора 5 % и нагревают до кипения; должно выделиться металлическое серебро.

##### Испытания

Температура плавления. От +128 до +132 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1, без предварительного высушивания).

Удельное вращение. От −15,5 до −17,3 в пересчёте на сухое вещество (10 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Оптическая плотность раствора субстанции, полученного в испытании «Прозрачность раствора», измеренная в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 420 нм, не должна превышать 0,03 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1)). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Восстанавливающие вещества. Не более 0,2 % в пересчёте на глюкозу.

Испытуемый раствор. Растворяют 1 г субстанции в 10 мл воды.

Эталонный раствор. Растворяют 20 мг глюкозы в 100 мл воды.

По 2,5 мл испытуемого и эталонного растворов помещают в отдельные пробирки. В каждую пробирку прибавляют 2 мл медно-тартратного реактива и нагревают на водяной бане в течение 10 мин. Охлаждают пробирки с растворами под проточной водой в течение 1 мин и обрабатывают ультразвуком в течение 20 с. Немедленно фильтруют полученные растворы через мембранные фильтры с размером пор 0,5 мкм и диаметром 25 мм. Промывают каждый фильтр 10 мл воды.

Окраска осадка на фильтре, полученного после фильтрования испытуемого раствора, не должна превосходить по интенсивности окраску осадка на фильтре, полученного после фильтрования эталонного раствора.

Железо. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Железо» (раздел «Определение солей железа в зольном остатке органических соединений», метод 1), с использованием 1,0 г субстанции и железа стандартного раствора 10 мкг/мл.

Сульфаты. Не более 0,015 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Растворяют 1,0 г субстанции в 15,0 мл воды. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Хлориды. Не более 0,002 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 1,0 г субстанции в 10,0 мл воды.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 8 ЕЭ на 1 г субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,4 г (точная навеска) субстанции в 50 мл воды и титруют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до появления розовой окраски (индикатор – 1 капля метилового красного спиртового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 19,52 мг меглюмина C7H17NO5.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0455 Меглюмина акридонацетат (Meglumini acridоnacetas)

Вводится впервые

##### Определение

1-Дезокси-1-(метиламино)-D-глюцит—(9-оксоакридин-10(9H)-ил)уксусная кислота (1:1).

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % меглюмина акридонацетата C7H17NO5·C15H11NO3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. От жёлтого до жёлто-зелёного цвета порошок.

* Светочувствителен. Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ВЭЖХ. Время удерживания пика акридонуксусной кислоты на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика акридонуксусной кислоты на хроматограмме раствора стандартного образца акридонуксусной кислоты (раздел «Количественное определение»).

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения испытуемого раствора, приготовленного для испытания «Количественное определение. Акридонуксусная кислота», в области длин волн от 340 до 450 нм должен соответствовать спектру раствора стандартного образца акридонуксусной кислоты и иметь максимумы при 392 нм и 408 нм.

- Отношение оптической плотности испытуемого раствора при длине волн 392 нм к оптической плотности при длине волн 408 нм должно быть не менее 0,9 и не более 1,1.

3. Визуальная колориметрия. Раствор субстанции (раздел «Количественное определение») должен иметь характерную фиолетово-синюю люминесценцию при толщине слоя раствора не менее 1 см.

4. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 2 мл воды, прибавляют 1 мл серебра нитрата аммиачного раствора 5 % и нагревают на кипящей водяной бане. В течение 15–40 с должно выделиться металлическое серебро.

##### Испытания

Удельный показатель поглощения. От 185,0 до 220,0 при длине волны 408 нм в пересчёте на сухое вещество (0,002 % раствор субстанции в воде, ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Прозрачность раствора. Растворяют 5,5 г субстанции в 25 мл воды. 5 мл полученного раствора должны выдерживать сравнение с эталоном I (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

рН. От 6,0 до 8,0 (22 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от света и используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 6,8 г калия дигидрофосфата, растворяют в 900 мл воды, доводят значение рН фосфорной кислотой до 2,80, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—ацетонитрил—буферный раствор 5:30:65.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,26 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 10 мл натрия гидроксида раствора 5 % и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца акридонуксусной кислоты. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,15 г (точная навеска) стандартного образца акридонуксусной кислоты, растворяют в 10 мл натрия гидроксида раствора 5 % и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В хроматографический флакон из бесцветного стекла помещают раствор стандартного образца акридонуксусной кислоты, закрывают крышкой и подвергают воздействию солнечного света в течение 15 мин или воздействию УФ-облучения с длиной волны 365 нм в течение 7 ч.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца акридонуксусной кислоты и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,0 мм, силикагель октилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,35 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 30 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика акридонуксусной кислоты должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение ® между пиком акридонуксусной кислоты и пиком с относительным временем удерживания 1,2 должно быть не менее 3,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика акридонуксусной кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 10-кратную площадь пика акридонуксусной кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца акридонуксусной кислоты и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца акридонуксусной кислоты:

- фактор асимметрии пика (AS) акридонуксусной кислоты должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика акридонуксусной кислоты должно быть не более 3,0 % (6 введений).

Содержание меглюмина акридонацетата C7H17NO5·C15H11NO3 в субстанции в процентах в пересчёте на сухое вещество (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика акридонуксусной кислоты на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика акридонуксусной кислоты на хроматограмме раствора стандартного образца акридонуксусной кислоты;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска стандартного образца акридонуксусной кислоты, мг;
P – содержание акридонуксусной кислоты в стандартном образце акридонуксусной кислоты,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В сухом, защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0456 Медазепам (Medazepamum)

Взамен ФС 42-2739-96

##### Определение

1-Метил-5-фенил-7-хлор-2,3-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин.

Cодержит не менее 99,0 % медазепама C16H15ClN2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. От светло-жёлтого до зеленовато-жёлтого цвета мелкокристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 %, хлороформе, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца медазепама.

- Допускается сравнение ИК-спектров субстанции и стандартного образца медазепама методом нарушенного полного внутреннего отражения в области от 40000 до 650 см-1.

2. Спектрофотомерия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения 0,001 % раствора субстанции в хлористоводородной кислоты растворе 0,01 М в области длин волн от 230 до 320 нм должен иметь максимум при 254 нм.

3. Спектрофотомерия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения 0,004 % раствора субстанции в хлористоводородной кислоты растворе 0,01 М в области длин волн от 310 до 550 нм должен иметь максимум при 455 нм.

##### Испытания

Температура плавления. От 100 до 104 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом высокоэффективной ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»). Все растворы защищают от света и используют свежеприготовленными.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Бензол—диэтиламин—гексан 1:3:16.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, добавляют 3,0 мл ацетона, перемешивают до полного растворения, доводят объём раствора ацетоном до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора ацетоном до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг стандартного образца диазепама, доводят объём раствора раствором сравнения до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл раствора сравнения, доводят объём раствора ацетоном до метки.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (500 мкг), раствора сравнения (0,5 мкг), раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (0,1 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в насыщенную камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 10 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 разделённые зоны адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по совокупности величины и интенсивности поглощения не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %). Суммарное содержание примесей не должно превышать 0,3 %.

Зону адсорбции на линии старта не учитывают.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции, температуру 50 °С

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Помещают 2 г субстанции в мерную колбу вместимостью 20 мл, встряхивают в течение 5 мин с 15 мл воды, доводят объём раствора тем же растворителем до метки и фильтруют. Разводят 2,0 мл фильтрата водой до 10,0 мл. Полученный раствор должен выдерживать испытание на хлориды.

Сульфаты. Не более 0,01 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения используют 10,0 мл раствора полученного в испытании «Хлориды». Полученный раствор должен выдерживать испытание на сульфаты.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 30 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 27,08 мг медазепама C16H15ClN2.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0458 Мезокарб (Mesocarbum)

Взамен ФС 42-1623-99

##### Определение

(5E)-5-[(Фенилкарбамоил)имино]-3-(1-фенилпропан-2-ил)-5H-1,2,3-оксадиазол-3-ий-2-ид.

Cодержит не менее 99,0 % мезокарба C18H18N4O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый с желтовато-зеленоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в хлороформе и ацетоне, умеренно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца мезокарба.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в 20 мл спирта 96 %, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мл полученного раствора, прибавляют 30 мл спирта 96 %, 1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида, доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Спектр поглощения полученного 0,001 % раствора субстанции в области длин волн от 220 до 380 нм должен иметь максимумы при 254 нм, 337 нм и минимумы при 228 нм, 282 нм.

3. Качественная реакция. К 50 мг субстанции прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 30 %, нагревают до кипения; в выделяющихся парах красная лакмусовая бумага должна посинеть.

4. Качественная реакция. Растворяют при нагревании 50 мг субстанции в 1 мл спирта 96 %, прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 30 %, нагревают до кипения и охлаждают. В пробирку помещают 0,3 мл верхнего слоя, осторожно прибавляют хлористоводородную кислоту концентрированную до появления белого осадка. Прибавляют 0,3 мл реактива Грисса и нагревают; должно появиться ярко-розовое окрашивание.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетон—хлороформ 1:6.

Испытуемый раствор. Растворяют 50 мг субстанции в 1 мл ацетона.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора ацетоном до метки.

На линию старта пластинки наносят 10 мкл испытуемого раствора (500 мкг), 30 мкл раствора сравнения (3 мкг), 15 мкл раствора сравнения (1,5 мкг) и 10 мкл раствора сравнения (1 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 10 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме раствора, содержащего 1 мкг субстанции, чётко видна зона адсорбции действующего вещества.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора допускается наличие только двух дополнительных зон адсорбции, зона адсорбции только одной примеси не должна превышать по величине и интенсивности окраски зону адсорбции мезокарба на хроматограмме раствора сравнения, содержащего 3 мкг действующего вещества (не более 0,6 %). Суммарное содержание примесей, оценённое по совокупности величины и интенсивности окраски их зон адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора в сравнении с зоной адсорбции на хроматограмме раствора сравнения, содержащего 1,5 мкг мезокарба не должно превышать 0,6 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 0,5 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы при температуре 75–80 °С.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Помещают 0,5 г субстанции в мерную колбу вместимостью 25 мл, встряхивают в течение 1 мин с 15 мл воды, доводят объём раствора тем же растворителем до метки и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска).

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1/2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 20 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до зеленовато-жёлтого окрашивания (индикатор – 0,3 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 32,24 мг мезокарба C18H18N4O2.

##### Хранение

В сухом, защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0459 Мелатонин (Melatoninum)

Вводится впервые

##### Определение

N-[2-(5-Метокси-1H-индол-3-ил)этил]ацетамид.

Содержит не менее 98,0 % и не более 101,5 % мелатонина C13H16N2O2, в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в метаноле, умеренно растворим в хлороформе и этилацетате, мало или очень мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца мелатонина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика мелатонина на хроматограмме раствора стандартного образца мелатонина (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Температура плавления. От 116 до 119 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 2,45 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят значение рН фосфорной кислотой разведённой 10 % до 3,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель (А). Ацетонитрил ―Вода 200:800.

Растворитель (Б). ПФБ―ПФА 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе А и доводят объём раствора этим же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем А до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца мелатонина и 50 мг (точная навеска) примеси 5-метокситриптамина, растворяют в растворителе А и доводят объём раствора этим же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем А до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем А до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем А до метки.

Примечание

Примесь 1: 5-метокситриптамин: 2-(5-метокси-1H-индол-3-ил)этан-1-амин [608-07-1].

Хроматографические условия.

Колонка | 50 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 1,8 мкм; |
Температура колонки | 25 °C; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 225 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время регистрации хроматограммы | 36 мин. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–20 | 90 → 70 | 10 → 30
20–36 | 70 → 30 | 30 → 70
36–41 | 30 → 90 | 70 → 10

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Мелатонин – 1 (около 7 мин); примесь 1 – около 0,3.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси 1 используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствор для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пиков мелатонина и примеси 1 должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками 5-метокситриптамина и мелатонина должно быть не менее 10,0;

- фактор асимметрии пика (AS) мелатонина должен быть не более 2,0.

Содержание 5-метокситриптамина в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика 5-метокситриптамина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика 5-метокситриптамина на хроматограмме стандартного раствора;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска стандартного образца 5-метокситриптамина, мг;
P - содержание 5-метокситриптамина в стандартном образце 5-метокситриптамина,%.

Содержание любой другой примеси в субстанции (Xi) в процентах вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика мелатонина на хроматограмме стандартного раствора;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска стандартного образца мелатонина, мг;
P - содержание мелатонина в стандартном образце мелатонина,%

Допустимое содержание примесей:

- примесь 1 – не более 0,15 %;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма всех примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

Вода. Не более 0,3 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с
ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с
ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями:

Подвижная фаза (ПФ). ПФБ—ПФА 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе Б и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем Б до метки.

Раствор стандартного образца мелатонина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца мелатонина, растворяют в растворителе Б и доводят объём раствора этим же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем Б до метки.

Объём вводимой пробы в хроматографическую систему – 5 мкл.

Хроматографируют раствор стандартного образца мелатонина и испытуемый раствор.

Время хроматографирования: двукратное от времени удерживания пика мелатонина (около 2 мин).

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца мелатонина фактор асимметрии пика (AS) мелатонина должен быть не более 2,0;

Содержание мелатонина C13H16N2O2 в субстанции в процентах в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика мелатонина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика мелатонина на хроматограмме раствора стандартного образца мелатонина;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска стандартного образца мелатонина, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;
P - содержание мелатонина в стандартном образце мелатонина,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0025 Мелоксикам (Meloxicamum)

Взамен ФС.2.1.0025.15

##### Определение

4-Гидрокси-2-метил-N-(5-метил-1,3-тиазол-2-ил)-1,1-диоксо-2H-1λ6,2-бензотиазин-3-карбоксамид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % мелоксикама C14H13N3O4S2 в пересчёте на сухое вещество.

* Проявляет полиморфизм.

##### Свойства

Описание. Светло-жёлтый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в диметилформамиде, очень мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца мелоксикама.

- Если спектры, полученные в твёрдом состоянии, различаются, растворяют субстанцию и стандартный образец отдельно в ацетоне, выпаривают досуха и по остатку записывают новые спектры.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,5 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 240 нм до 450 нм должен иметь максимум при 354 нм.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). 1 г калия дигидрофосфата растворяют в 1000 мл воды и доводят рН раствора 1 М раствором натрия гидроксида до 6,0.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 40 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в смеси 5 мл метанола и 0,3 мл 1 М раствора натрия гидроксида, доводят объём раствора метанолом до метки и перемешивают.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора метанолом до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора метанолом до метки и перемешивают.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2 мг субстанции, 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси А, 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси В, 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси С и 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в смеси 5 мл метанола и 0,3 мл 1 М раствора натрия гидроксида, доводят объём раствора метанолом до метки и перемешивают.

Примечание

Примесь А: этил(4-гидрокси-2-метил-1,1-диоксо-2H-1λ6,2-бензотиазин-3-карбоксилат) [24683-26-9].

Примесь В: 5-метил-1,3-тиазол-2-амин [7305-71-7].

Примесь С: 4-гидрокси-2-метил-N-[(2Z)-3,5-диметил-1,3-тиазол-2(3H)-илиден]-1,1-диоксо-2H-1λ6,2-бензотиазин-3-карбоксамид [1262333-25-4].

Примесь D: 4-гидрокси-2-метил-N-[(2Z)-5-метил-3-этил-1,3-тиазол-2(3H)-илиден]-1,1-диоксо-2H-1λ6,2-бензотиазин-3-карбоксамид [1331636-17-9].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 45 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 350 нм, 260 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2 | 60 | 40
2–10 | 60 → 30 | 40 → 70
10–15 | 30 | 70

Хроматографируют раствор сравнения А, раствор сравнения Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Мелоксикам – 1 (около 7 мин), примесь В – около 0,5, примесь А – около 1,4, примесь С – около 1,7, примесь D – около 1,9.

Хроматографируют раствор сравнения А при 350 нм и испытуемый раствор при 260 нм и 350 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения Б:

- разрешение (Rs) между пиками мелоксикама и примеси А при 350 нм должно быть не менее 3,0;

- разрешение (Rs) между пиками мелоксикама и примеси В при 260 нм должно быть не менее 3,0.

Поправочный коэффициент. Для расчёта содержания площадь пика примеси А умножают на 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А при 350 нм не должна превышать площадь пика мелоксикама на хроматограмме раствора сравнения А при 350 нм (не более 0,1 %);

- площадь пика примеси В при 260 нм не должна превышать площадь пика мелоксикама на хроматограмме раствора сравнения А при 350 нм (не более 0,1 %);

- площадь пика примеси С и примеси D при 350 нм для каждой примеси не должна превышать 0,5 площади пика мелоксикама на хроматограмме раствора сравнения А при 350 нм (не более 0,05 %);

- площадь пика любой неидентифицированной примеси при длине волны наибольшего отклика (260 нм или 350 нм) не должна превышать площадь пика мелоксикама на хроматограмме раствора сравнения А при той же длине волны (не более 0,1 %).

- сумма примесей – не более 0,3 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,3 площади пика мелоксикама на хроматограмме раствора сравнения А при соответствующей длине волны.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 23,3 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Для проведения испытания готовят исходный раствор 10 мг (точная навеска) субстанции в 1 мл диметилформамида. К 0,1 мл исходного раствора прибавляют 0,9 мл диметилформамида. Для определения полученный раствор разводят водой для ЛАЛ-теста не менее чем в 64 раза.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Во избежание перегрева во время титрования тщательно перемешивают и останавливают титрование сразу после достижения конечной точки.

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в смеси 50 мл уксусной кислоты ледяной и 5 мл муравьиной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 35,14 мг мелоксикама C14H13N3O4S2.

##### Хранение

В плотно закрытой упаковке.

* Приводится для информации

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0128 Мельдоний дигидрат

Мельдоний
Meldonium dihydricum

Взамен ФС.2.1.0128.18

##### Определение

3-(2,2,2-Триметилгидразин-2-ий-1-ил)пропаноат дигидрат.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % мельдония С6Н14N2O2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Бесцветные или белые кристаллы, белый или почти белый кристаллический порошок со слабым запахом.

* Очень гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в метаноле и в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца мельдония дигидрата.

2. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 3 мл воды, прибавляют 1 мл реактива Драгендорфа и перемешивают; должен образоваться осадок оранжевого цвета.

##### Испытания

Температура плавления. От 85 до 90 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 2 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 7,5 до 8,3 для субстанции, предназначенной для приготовления лекарственных препаратов для парентерального применения; от 7,5 до 9,0 для субстанции, предназначенной для приготовления препаратов для перорального применения (10 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Гептафтормасляная кислота—вода для хроматографии 1:999.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Гептафтормасляная кислота—метанол 1:999.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца каждой из примесей A, B, C, D, E и F, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Примечание

Примесь А: триметиламмония бромид [2840-24-6].

Примесь В: 1,1,1-триметилгидразин-1-ия бромид [34810-18-9].

Примесь С: 1,1,1-триметил-2-(3-метокси-3-оксопропил)гидразин-1-ия бромид [106966-25-0].

Примесь D: 1,1,1-триметил-2-(3-оксо-3-этоксипропил)гидразин-1-ия бромид [76144-84-8].

Примесь Е: 1,1,1-триметил-2-[3-оксо-3-(пропан-2-илокси)пропил]гидразин-1-ия бромид [1093122-25-8].

Примесь F: 1,1-диметил-4,5-дигидро-1H-пиразол-1-ий-3-олат [60250-35-3].

Хроматографические условия

Колонка | 3,0 × 150 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,2 мл/мин; |  |
Детектор | квадрупольный тандемный масс-спектрометрический (МС/МС); |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–7 | 90 → 65 | 10 → 35
7–12 | 65 → 40 | 35 → 60
12–18 | 40 → 25 | 60 → 75
18–19 | 25 → 90 | 75 → 10
19–25 | 90 | 10

Условия МС/МС

Тип ионизации | электроспрей (ESI); |  |
Режим электрораспыления | положительный (ESI+); |  |
Рабочий режим | мониторинг реакций заданных ионов (MRM); |  |
Режим сканирования | 50–300 m/z |  |
Температура источников ионов | 110 °С; |  |
Температура испарения | 220 °С; |  |
Напряжение: | на конусе | 15 В; |
| на капилляре | 3,00 кВ; |
Газ столкновения (CID) | аргон; |  |
Давление газа столкновений (CID) | 3,0∙10–3 мбар. |  |

Переходы сканирования масс и энергии столкновений

Компонент | Переходы сканирования масс, Да | Энергия столкновений, эВ
--- | --- | ---
Примесь F | 115,19 → 71,92 | 19
Примесь B | 74,99 → 59,04 | 15
Примесь А | 59,97 → 44,98 | 18
Мельдоний | 147,0 → 59,0 | 18
Примесь C | 161,19 → 59,00 | 23
Примесь D | 175,19 → 58,07 | 23
Примесь E | 189,26 → 58,01 | 22

Хроматографируют раствор сравнения А, раствор сравнения Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Мельдоний – 1 (около 9 мин); примесь F – около 0,7; примесь В – около 0,8; примесь А – около 0,9; примесь С – около 1,5; примесь D – около 1,8; примесь Е – около 2,0.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения А:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси А должно быть не менее 10, для каждого из пиков примеси В и примеси F – не менее 50, для пика примеси С – не менее 200, для каждого из пиков примеси D и примеси E – не менее 1000;

- относительное стандартное отклонение площадей пиков А, В, С, D и Е должно быть не более 10,0 % (6 введений).

Содержание каждой идентифицируемой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле (1):

где S1 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика каждой соответствующей примеси на хроматограмме раствора сравнения А;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска стандартного образца соответствующей примеси, мг.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле (2):

где S1 – площадь пика каждой из неидентифицированных примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б.

Допустимое содержание примесей:

- примеси A, B, C, D, E, F – не более 0,15 % каждой;

- любая другая единичная примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (менее 0,05 %).

Вода. Не менее 19,7 % и не более 21,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,5 г субстанции в 25 мл воды. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения используют 10 мл раствора, полученного в испытании «Хлориды».

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1/2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,35 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции 100 мг/мл, а затем разводят его в 100 раз водой для ЛАЛ-теста.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в 40 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с индикатором (0,1 мл 0,5 % раствора кристаллического фиолетового) до перехода окраски в голубовато-зелёную.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М хлорной кислоты соответствует 14,62 мг мельдония С6Н14N2O2.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0460 Мемантина гидрохлорид

Мемантин
Memantini hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

3,5-Диметиладамантан – 1-амина гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % мемантина гидрохлорида C12H21N·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в воде, легко растворим в спирте 96 %, растворим или умеренно растворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области частот от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца мемантина гидрохлорида.

2. ГХ (ОФС «Газовая хроматография»). Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика мемантина на хроматограмме раствора стандартного образца (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды. (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

рН. От 4,5 до 6,5 (3 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. В колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 15 мл натрия гидроксида раствора 5 М и 20,0 мл гексана, встряхивают в течение 10 мин и переносят содержимое в делительную воронку. После разделения слоёв фильтруют часть верхнего (гексанового) слоя, высушивают, перемешивая с натрия сульфатом безводным, и дают отстояться. В качестве испытуемого раствора используют надосадочную жидкость.

Раствор стандартного образца мемантина гидрохлорида. В колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца мемантина гидрохлорида, прибавляют 20 мл раствора натрия гидроксида 5 М и 20 мл гексана, встряхивают в течение 10 мин и переносят содержимое в делительную воронку. После разделения слоёв фильтруют часть верхнего (гексанового) слоя, высушивают, перемешивая с натрия сульфатом безводным, и дают отстояться. В качестве испытуемого раствора используют надосадочную жидкость.

Раствор стандартного образца А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг (точная навеска) стандартного образца примеси А, 25 мг (точная навеска) стандартного образца примеси В, 25 мг (точная навеска) стандартного образца примеси С, 25 мг (точная навеска) стандартного образца примеси D и 25 мг (точная навеска) стандартного образца примеси Е, растворяют в гексане и доводят объём раствора гексаном до метки.

Раствор стандартного образца Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают по 1,0 мл раствора стандартного образца А и раствора стандартного образца мемантина гидрохлорида и доводят объём раствора гексаном до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора гексаном до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 мл раствора стандартного образца А и доводят объём раствора раствором стандартного образца мемантина гидрохлорида до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл раствора стандартного образца Б, и доводят объём раствора гексаном до метки.

Примечание

Примесь А: 1,3-диметиладамантан [702-79-4].

Примесь B: 3,5-диметиладамантан -1-ол [707-37-9].

Примесь С: 1,3-диметил-5-хлорадамантан [707-36-8].

Примесь D: 1-бром-3,5-диметиладамантан [941-37-7].

Примесь E: N-(3,5-диметиладамантан-1-ил)формамид [351329-88-9].

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 50 м × 0,32 мм, покрытая слоем поли(диметил)(дифенил)силоксана, 0,52 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:50; |  |
Скорость потока | 4,0 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1 мкл; |  |
Температура | Инжектор | 220 °С; |
| Колонка | 50 °С в течение 19 мин, подъём 5 °С/мин до 145°С, 145 °С в течение 10,5 мин, подъём 5 °С/мин до 250°С, выдержка 20 мин; |
| Детектор | 300 °С. |

Уравновешивают колонку при температуре 220 °С в течение не менее 30 мин и охлаждают до 50 °С.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Мемантин – 1; примесь A – около 0,77; примесь B – около 1,03; примесь C – около 1,07; примесь D – около 1,19; примесь E – около 1,44.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика мемантина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками мемантина и примеси B должно быть не менее 6,0;

- разрешение (RS) между пиками примеси B и примеси C должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца Б:

- фактор асимметрии пика (AS) мемантина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика мемантина должно быть не более 10,0 % (6 введений).

Содержание каждой из примесей A, B, C, D и E в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика каждой из примесей A, B, C, D и E на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика каждой соответствующей примеси на хроматограмме раствора стандартного образца Б;
a1 - навеска субстанции, мг;
C0 - концентрация стандартного образца соответствующей примеси в растворе стандартного образца Б, мг/мл;
P - содержание основного вещества в стандартном образце соответствующей примеси,%.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика мемантина на хроматограмме раствора стандартного образца Б;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца мемантина гидрохлорида, мг;
P - содержание мемантина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце мемантина гидрохлорида,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь A – не более 0,15 %;

- примесь B – не более 0,15 %;

- примесь C – не более 0,15 %;

- примесь D – не более 0,15 %;

- примесь E – не более 0,15 %;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,50 %.

Не учитывают пики с относительным временем удерживания 0,11; 0,12; 0,13; 0,18 и 0,26 (пики остаточных растворителей) и пики, площадь которых менее площади мемантина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,01 %).

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография») в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями:

Раствор внутреннего стандарта. Готовят раствор адамантана в гексане с концентрацией 4,0 мг/мл.

Испытуемый раствор. В центрифужную пробирку вместимостью 50 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 15 мл натрия гидроксида раствора 1 М, перемешивают, прибавляют 25 мл раствора внутреннего стандарта и встряхивают в течение 15 мин. После разделения слоёв фильтруют часть верхнего (гексанового) слоя через натрия сульфат безводный.

Раствор стандартного образца. В центрифужную пробирку вместимостью 50 мл помещают 0,1 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца мемантина гидрохлорида, прибавляют 15 мл натрия гидроксида раствора 1 М, перемешивают, прибавляют 25 мл раствора внутреннего стандарта и встряхивают в течение 15 мин. После разделения слоёв фильтруют часть верхнего (гексанового) слоя через натрия сульфат безводный.

Хроматографируют раствор стандартного образца и испытуемый растворы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца:

- фактор асимметрии пика (AS) мемантина и внутреннего стандарта должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение отношения площади пика мемантина к площади пика внутреннего стандарта должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание мемантина гидрохлорида C12H21N·HCl в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (Х) вычисляют по формуле:

где B1 - отношение площади пика мемантина к площади пика внутреннего стандарта на хроматограмме испытуемого раствора;
B0 - отношение площади пика мемантина к площади пика внутреннего стандарта на хроматограмме раствора стандартного образца;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца мемантина гидрохлорида, мг;
P - содержание мемантина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце мемантина гидрохлорида,%;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0461 Менадиона натрия бисульфит тригидрат

Менадиона натрия бисульфит
Menadioni natrii bisulfis trihydricus

Взамен ФС 42-3348-96

##### Определение

(2RS)-2-Метил-1,4-диоксо-1,2,3,4-тетрагидронафталин-2-сульфоната натрия тригидрат.

Cодержит не менее 95,0 % и не более 100,5 % менадиона натрия бисульфита C11H9NaO5S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком или бледно-жёлтый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 500 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца менадиона натрия бисульфита.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём водой до метки.

- Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём водой до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора А в области длин волн от 220 до 280 нм должен иметь максимумы поглощения при 230 нм, 265 нм и минимум при 248 нм. Спектр поглощения испытуемого раствора Б в области длин волн от 280 до 340 нм должен иметь максимум поглощения при 305 нм.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном В9 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

1,4-Дигидро-3-метилнафталин-2-сульфонат натрия. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора» не должен мутнеть от прибавления 2 капель о-фенантролина сульфата раствора.

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Хлороформ.

Испытуемый раствор. Растворяют 0,2 г субстанции в 5,0 мл воды.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг менадиона (2-метилнафталин-1,4-дион [58-27-5]), растворяют в ацетоне и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. К 1,0 мл раствора сравнения прибавляют 4,0 мл ацетона.

На линию старта пластинки наносят 5 мкл (200 мкг) испытуемого раствора; 20 мкл (4 мкг), 10 мкл (2 мкг) и 5 мкл (1 мкг) раствора сравнения; 10 мкл (0,4 мкг) раствора для проверки пригодности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 10 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 10 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм. Сравнивают зоны адсорбции примесей на хроматограмме испытуемого раствора с зонами адсорбции на хроматограммах раствора сравнения.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы должна чётко наблюдаться зона адсорбции с Rf около 0,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по совокупности величины и интенсивности флуоресценции не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения, содержащего 1 мкг менадиона (не более 0,5 %); суммарное содержание примесей не должно превышать 2,0 %.

Вода. От 12,0 % до 16,5 %. (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 50 мг (точная навеска) субстанции.

Гидросульфит натрия. Не более 2,0 %. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В коническую колбу с притёртой пробкой помещают 1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 30 мл воды, прибавляют 20 мл серной кислоты раствора 0,05 М и 30 мл 0,05 М раствора йода, встряхивают и титруют избыток йода 0,1 М раствором натрия тиосульфата (индикатор – 1 мл крахмала раствора 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора йода соответствует 5,203 мг гидросульфита натрия.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 11,6 ЕЭ на 1 мг менадиона натрия бисульфита тригидрата (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в 20 мл воды, переносят в делительную воронку, быстро прибавляют 17 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М и немедленно экстрагируют три раза по 20 мл хлороформа. Объединённые экстракты промывают 10 мл воды, фильтруют через бумажный фильтр смоченный хлороформом, фильтр промывают 5 мл хлороформа. Раствор упаривают в вакууме досуха при комнатной температуре. Остаток растворяют в 15 мл уксусной кислоты ледяной, прибавляют 15 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, 3 г цинковой пыли и выдерживают в защищённом от света месте в течение 30 мин, изредка перемешивая. Смесь фильтруют через вату; осадок в колбе и фильтр трижды промывают по 10 мл воды, которые объединяют с фильтратом. Полученный раствор титруют 0,1 М раствором церия(IV) сульфата до появления зелёного окрашивания (индикатор – 2–3 капли
о-фенантролина сульфата раствора).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора церия(IV) сульфата соответствует 13,81 мг менадиона натрия бисульфита C11H9NaO5S.

##### Хранение

В сухом защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0462 Мепивакаина гидрохлорид

Мепивакаин
Mepivacaini hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

(2RS)-N-(2,6-Диметилфенил)-1-метилпиперидин-2-карбоксамида гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % мепивакаина гидрохлорида C15H22N2O·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 %, метаноле и воде, очень мало растворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца мепивакаина гидрохлорида.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают при температуре 80 °С в течение 45 мин и записывают спектры сухих остатков.

2. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

- Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 % - метанол-трет-бутилметиловый эфир 1:5:100.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 20,0 мг субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца мепивакаина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца мепивакаина гидрохлорида, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца мепивакаина гидрохлорида и 20 мг фармакопейного стандартного образца лидокаина гидрохлорида, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора, раствора стандартного образца мепивакаина гидрохлорида и раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, высушивают до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

- Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны наблюдаться две чётко разделённые зоны адсорбции.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению и величине должна соответствовать основной зоне адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца мепивакаина гидрохлорида.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. Около 260 °С (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 1,5 г субстанции в 30 мл воды, свободной от диоксида углерода, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном B7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,0 до 5,0 (2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Угол вращения. От –0,1° до +0,1° (раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», при длине кюветы 1 дм, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси

Примесь А. Не более 0,002 %. Определение проводят методом ГХ (анализ равновесного пара; ОФС «Газовая хроматография»).

Натрия гидроксида раствор 12,6 %. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 12,6 г натрия гидроксида, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хлористоводородной кислоты раствор 10,3 %. Приливают 10,3 г хлористоводородной кислоты концентрированной к 100 мл воды.

Испытуемый раствор. Помещают 60 мг (точная навеска) субстанции в виалу для парофазного анализа вместимостью 20 мл, прибавляют 2,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 10,3 % и 1,0 мл натрия гидроксида раствора 12,6 %, немедленно закрывают крышкой.

Раствор стандартного образца примеси А. Помещают 6 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси A (2,6-диметиланилин [87-62-7]) в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 10,3 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 10,3 % до метки. В виалу для парофазного анализа вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, прибавляют 1,0 мл натрия гидроксида раствора 12,6 % и немедленно закрывают крышкой.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная, 30 м × 0,53 мм, покрытая слоем поли(цианопропил)(3)(фенил)(3)(метил)(94) силоксана, 3 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Расход газа-носителя (азот) | 4 мл/мин; |  |
Деление потока | 1:1; |  |
Температура уравновешивания | 90 °C; |  |
Время уравновешивания | 25 мин; |  |
Время подачи газа-носителя в виалу с пробой | 2 мин; |  |
Температура | Инжектор | 225 °С; |
| Колонка | 130 °С в течение 10 мин, подъём 10 °С/мин до 230 °С, выдержка 10 мин; |
| Детектор | 250 °С. |

Хроматографируют раствор стандартного образца примеси А и испытуемый раствор.

Время удерживания соединения. Примесь А – около 6 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца примеси А относительное стандартное отклонение площади пика примеси А должно быть не более 15 % (6 введений).

Содержание примеси А в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика примеси A на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика примеси A на хроматограмме раствора стандартного образца примеси А;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца примеси А, мг;
a - навеска субстанции, мг;
P - содержание примеси А в фармакопейном стандартном образце примеси А,%.

Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 2,25 г фосфорной кислоты концентрированной в 900 мл воды и доводят рН раствора натрия гидроксида раствором концентрированным до 7,6. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 350:650.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20,0 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг субстанции, 30 мг фармакопейного стандартного образца мепивакаина примеси В ((2RS)-N-(2,6-диметилфенил)пиперидин-2-карбоксамид [15883-20-2]), растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 125 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика мепивакаина. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Мепивакаин – 1 (около 7 мин), примесь В – около 0,5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси В и мепивакаина должно быть не менее 2,5.

На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,0005 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3А или 3Б). Растворяют 2,0 г субстанции в 10 мл воды.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,8 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции c концентрацией 50 мг/мл, а затем разводят его не менее чем в 40 раз.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в смеси 5,0 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты и 50 мл спирта 96 %, и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают объём титранта между двумя точками перегиба на кривой титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 28,28 мг мепивакаина гидрохлорида C15H22N2O·HCl.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0129 Меркаптопурин моногидрат

Меркаптопурин
Mercaptopurinum monohydricum

Взамен ФС.2.1.0129.18

##### Определение

7H-Пурин-6-тиол моногидрат.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % меркаптопурина C5H4N4S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Жёлтый кристаллический порошок без запаха или почти без запаха.

Растворимость. Растворим в горячей воде и серной кислоте разведённой 16 %, умеренно растворим в натрия гидроксида растворе 0,1 М, мало растворим в хлористоводородной кислоте разведённой 8,3 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейный стандартного образца изониазида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»)

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в 5 мл диметилсульфоксида и доводят объём раствора хлористоводородной кислотой 0,37 % до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислотой 0,37 % до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь только один максимум при 325 нм.

3. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 0,5 мл натрия гидроксида раствора 10 %, доводят объём раствора водой до 2 мл и прибавляют 0,5 мл свежеприготовленного натрия нитропруссида раствора 1 %. Полученный раствор встряхивают; должно появиться желтовато-зелёное окрашивание, переходящее при подкислении хлористоводородной кислотой разведённой 8,3 % в тёмно-зелёное.

4. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 5 мл аммиака раствора 10 % и прибавляют по каплям свежеприготовленную смесь равных объёмов меди(II) хлорида раствора 3 % и гидроксиламина гидрохлорида раствора 20 %; должен выпасть оранжево-жёлтый осадок.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы готовят непосредственно перед использованием.

Подвижная фаза А (ПФА). Метанол—муравьиной кислоты безводной раствор 0,1 % о/о 20:980.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол—муравьиной кислоты безводной раствор 0,1 % о/о 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 12 мг субстанции, растворяют в 2,5 мл метанола и доводят объём раствора муравьиной кислоты безводной раствором 0,1 % о/о до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 4,5 мг стандартного образца примеси А и 3,0 мг стандартного образца примеси В, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём ПФА до метки.

Раствор стандартного образца примеси D. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 3 мг стандартного образца примеси D, растворяют в 10 мл диметилсульфоксида и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём муравьиной кислоты безводной раствором 0,1 % о/о до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём муравьиной кислоты безводной раствором 0,1 % о/о до метки.

Примечание

Примесь А (гипоксантин): 1,7-Дигидро-6H-пурин-6-он [68-94-0].

Примесь В (аденин): 7H-пурин-6-амин [443-72-1].

Примесь D: 6,6’-дисульфанедиил-7-H-пурин [90947-51-6].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Температура образца | 4 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 260 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–8 | 100 | 0
8–20 | 100 → 0 | 0 → 100
20–25 | 0 | 100
25–30 | 0 → 100 | 100 → 0

Хроматографируют стандартный раствор, раствор стандартного образца примеси D, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Меркаптопурин – 1 (около 6 мин); примесь В – около 0,3; примесь А – около 0,5; примесь D – около 3,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А и В используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора; для идентификации пика примеси D используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора стандартного образца примеси D.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора разрешение (RS) между пиками примесей В и А должно быть не менее 5,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси D умножают на 0,25.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика примеси А на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,15 %);

- площадь пика примеси B не должна превышать площадь пика примеси B на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,10 %);

- площадь пика примеси D не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма примесей не должна превышать 0,3 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не менее 10,0 % и не более 12,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в 50 мл диметилформамида и титруют 0,1 М раствором тетрабутиламмония гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора тетрабутиламмония гидроксида соответствует 15,22 мг безводного меркаптопурина C5H4N4S.

##### Хранение

Хранение. В герметично закрытой упаковке в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0463 Меропенема тригидрат

Меропенем
Meropenemum trihydricum

Вводится впервые

##### Определение

(4R,5S,6S)-6-[(1R)-1-Гидроксиэтил]-3-{[(3S,5S)-5-(диметилкарбамоил)пирролидин-3-ил]сульфанил}-4-метил-7-оксо-1-азабицикло[3.2.0]гепт-2-ен-2-карбоновой кислоты тригидрат.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % меропенема в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. От белого до светло-жёлтого цвета кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 % и в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца меропенема тригидрата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика меропенема на хроматограмме раствора стандартного образца меропенема тригидрата (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –17 до –21 в пересчёте на безводное вещество (0,5 % раствор субстанции, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 20 мл натрия гидрокарбоната раствора 5 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,0 до 6,0 (1,0 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. К 1,0 мл триэтиламина прибавляют 900 мл воды, доводят значение рН фосфорной кислотой разведённой 10 % до 5,0. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 7:100.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в буферном растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор готовится непосредственно перед использованием.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора буферным раствором до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора буферным раствором до метки. Раствор хранят при температуре 4 °С в течение 6 ч.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Выдерживают 10 мл испытуемого раствора в течение 20 мин при температуре 60 °С или в течение 8 ч при комнатной температуре.

Примечание

Примесь А:
(4R,5S)-5-[(1S,2R)-2-Гидрокси-1-карбоксипропил]-3-{[(3S,5S)-5-(диметилкарбамоил)пирролидин-3-ил]сульфанил}-4-метил-4,5-дигидро-1H-пиррол-2-карбоновая кислота
[1053703-36-8].

Примесь В:
(4R,5S,6S)-3-{[(3S,5S)-1-[(2S,3R)-2-[(2S,3R)-3-Гидрокси-4-{[(3S,5S)-5-(диметилкарбамоил)пирролидин-3-ил]сульфанил}-5-карбокси-3-метил-2,3-дигидро-1H-пиррол-2-ил]-бутаноил]-5-(диметилкарбамоил)пирролидин-3-ил]сульфанил}-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-4-метил-7-оксо-1-азабицикло[3.2.0]гепт-2-ен-2-карбоновая кислота
[166901-45-7].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,6 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 4-кратное от времени удерживания меропенема. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Меропенем – 1 (около 7 мин); примесь А – около 0,5; примесь В – около 2,2.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и меропенема должно быть не менее 5,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси А умножают на 1,6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать пятикратную площадь пика меропенема на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси В не должна превышать трёхкратную площадь пика меропенема на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика меропенема на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей (кроме А и В) не должна превышать трёхкратную площадь пика меропенема на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади пика меропенема на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. От 11,4 % до 13,4 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 20 мг меропенема тригидрата в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения 48 ч.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,125 ЕЭ на 1 мг меропенема тригидрата (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Растворы готовятся непосредственно перед использованием.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца меропенема тригидрата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца меропенема тригидрата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца меропенема тригидрата и испытуемый раствор.

Содержание меропенема C17H25N3O5S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика меропенема на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика меропенема на хроматограмме раствора стандартного образца меропенема тригидрата;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца меропенема тригидрата, мг;
P – содержание меропенема в фармакопейном стандартном образце меропенема тригидрата,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0464 Месна (Mesnum)

Вводится впервые

##### Определение

2-Сульфанилэтан-1-сульфонат натрия.

Cодержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % месны C2H5NaO3S2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или желтоватый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в циклогексане.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца месны.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Опалесценция раствора 10 г субстанции в 50 мл воды не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 4,5 до 6,0 (10 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 2,94 г калия дигидрофосфата, 2,94 г дикалия гидрофосфата и 2,6 г тетрабутиламмония гидросульфата в 600 мл воды, доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 2,3. Полученный раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл, прибавляют 335 мл метанола и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяю в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси С. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 4 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси С, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси D. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 6 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 3,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 6,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10 мл полученного раствора и доводят объём раствора раствором стандартного образца примеси С.

Примечание

Примесь А: 2-(карбамимидоилсульфанил)этан-1-сульфоновая кислота [25985-57-3].

Примесь В: 2-[(N-карбамимидоилкарбамимидоил)сульфанил]этан-1-сульфоновая кислота [1391053-66-9].

Примесь С: 2-(ацетилсульфанил)этан-1-сульфоновая кислота [69536-71-6].

Примесь D: 2,2'-(дисульфандиил)бис(этан-1-сульфоновая кислота) [45127-11-5].

Примесь Е: 2-[(4,6-диамино-1,3,5-триазин-2-ил)сульфанил]этан-1-сульфоновая кислота [1391054-56-0].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 10 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 235 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 4-кратное от времени удерживания пика месны. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси D, раствор стандартного образца примеси С, раствор сравнения Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Месна – 1 (около 4,8 мин); примесь А – около 0,6; примесь В – около 0,6; примесь Е – около 0,8; примесь C – около 1,4; примесь D – около 2,3.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиком месны и примесью С должно быть не менее 3,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков примесей А, В и Е умножаются на 0,01.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси C не должна превышать площадь пика месны на хроматограмме раствора стандартного образца примеси С (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси D не должна превышать площадь пика месны на хроматограмме раствора стандартного образца примеси D (не более 3,0 %);

- площадь пиков каждой из примесей А, В, Е не должна превышать площадь пика месны на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать одну треть от площади пика месны на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать площадь пика месны на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,15 площади пика месны на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,045 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 60 °С.

Хлориды. Не более 0,025 % (ОФС «Хлориды»).

Растворяют 10,0 г субстанции в 50 мл воды. К 1,0 мл полученного раствора добавляют 15 мл воды.

Сульфаты. Не более 0,03 % (ОФС «Сульфаты», метод 2).

В 50,0 мл воды растворяют 10,0 г субстанции. К 5,0 мл полученного раствора добавляют 30 мл воды.

Динатрия эдетат. Не более 0,05 % (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 4,0 г субстанции в 90 мл воды и доводят значение рН хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до 4,5. Прибавляют 10 мл ацетатного буферного раствора рН 4,5 и 50 мл 2-пропанола. Прибавляют 2,0 мл 0,25 г/л раствора дитизона в 2-пропаноле. Полученный раствор титруют 0,01 М раствором цинка сульфата до перехода окраски от синевато-серой до розовой.

1 мл 0,01 М раствора цинка сульфата соответствует 3,72 мг C10H14N2Na2O8·2H2O.

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,4 ЕЭ на 1 мг месны (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота»

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,12 г (точная навеска) субстанции в 10 мл воды, прибавляют 10 мл серной кислоты раствора 1 М, 10 мл йода раствора 0,1 М и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата. Конечную точку титрования определяют с индикатором (1 мл крахмала раствора 1 %, содержащего 0,01 % ртути(II) йодида), который добавляют вблизи точки эквивалентности до полного обесцвечивания раствора.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 16,42 мг месны C2H5NaO3S2.

##### Хранение

В плотно укупоренной таре.

* Приводится для информации

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0130 Месульфамид натрия

Месульфамид
Mesulfamidum natricum

Взамен ФС.2.1.0130.18

##### Определение

(4-Сульфамоиланилино)метансульфонат натрия.

Содержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % месульфамида натрия C7H9N2NaO5S2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

Проводят определения 1 и 3–5 или 2–5.

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца месульфамида натрия.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём водой до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 240 до 350 нм должен иметь максимум при 269 нм.

3. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 2 мл воды, прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и кипятят в течение 1 мин. 1 мл охлаждённого раствора должен давать характерную реакцию на амины ароматические первичные (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

4. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 0,5 мл серной кислоты концентрированной, прибавляют 10 мг салициловой кислоты и нагревают на водяной бане; должно появиться малиновое окрашивание.

5. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 25 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 4,0 до 6,0 (4 % водный раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—уксусной кислоты раствор 1 % 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 15 мл воды, перемешивают в течение 30 мин и доводят объём раствора водой до метки. Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Раствор стандартного образца сульфаниламида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца сульфаниламида, растворяют в 15 мл воды и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,0 мл раствора стандартного образца сульфаниламида, прибавляют 0,1 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 20 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика месульфамида. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца сульфаниламида и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Месульфамид – 1 (около 5 мин); сульфаниламид – около 0,9.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками сульфаниламида и месульфамида должно быть не менее 1,5;

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика месульфамида должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора стандартного образца сульфаниламида:

- фактор асимметрии пика (AS) сульфаниламида должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика сульфаниламида должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- коэффициент ёмкости (k`), рассчитанный по пику сульфаниламида должен быть не менее 0,1.

Содержание сульфаниламида C6H8N2O2S в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика сульфаниламида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика сульфаниламида на хроматограмме раствора стандартного образца сульфаниламида;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска стандартного образца сульфаниламида, мг;
P – содержание сульфаниламида в стандартном образце сульфаниламида,%.

Содержание суммы неидентифицированных примесей в субстанции в процентах (ΣX) вычисляют по формуле:

где ∑Si – сумма площадей пиков неидентифицированных пиков на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика сульфаниламида на хроматограмме раствора стандартного образца сульфаниламида;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска стандартного образца сульфаниламида, мг;
P – содержание сульфаниламида в стандартном образце сульфаниламида,%.

Допустимое содержание примесей:

- сульфаниламид – не более 4,0 %;

- сумма любых других примесей – не более 2,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика месульфамида на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы (менее 0,1 %).

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,5 г субстанции в 50 мл воды и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Сульфит натрия. К 40 мл раствора, полученного в испытании «Хлориды», прибавляют 2 мл крахмала раствора 1 % и титруют 0,01 М раствором йода до слабо-синего окрашивания. На титрование должно расходоваться не более 0,5 мл 0,01 М раствора йода.

Потеря в массе при высушивании. Не более 3,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2). Растворяют 1 г субстанции в 10 мл воды.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В химический стакан вместимостью 300 мл помещают 0,3 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл натрия гидроксида раствора 10 % и выпаривают при нагревании на водяной бане. Остаток растворяют в смеси 10 мл воды и 20 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %. Кипятят в течение 10 мин, охлаждают и проводят определение в соответствии с ОФС «Нитритометрия». В случае применения внутренних индикаторов используют тропеолин 00 в смеси с метиленовым синим.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 28,83 мг месульфамида C7H9N2NaO5S2.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0465 Метазид (Metazidum)

Взамен ФС 42-2468-96

##### Определение

N',N'"-Метиленди(пиридин-4-карбогидразид).

Cодержит не менее 98,5 % метазида C13H14N6O~2 ~ в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в хлористоводородной кислоте разведённой 8,3 %, практически нерастворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в вазелиновом масле, в области от 4000 см-1 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца метазида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,5 мг субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоте растворе 0,1 М и доводят тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 до 310 нм должен иметь максимум при 266±2 нм и минимум при 235±2 нм.

3. Качественная реакция. К 10 мг субстанции прибавляют 50 мг 2,4-динитрохлорбензола, 3 мл спирта 96 % и кипятят 3 мин. После охлаждения до температуры 15–25 °С прибавляют две капли натрия гидроксида раствора 10 %; должно появиться жёлтое окрашивание, переходящие в красновато-коричневое.

4. Качественная реакция. К 5 мл хромотроповой кислоты натриевой соли раствора 2 % прибавляют 5 мл серной кислоты концентрированной и 2 мг субстанции; должно появиться красно-фиолетовое окрашивание, переходящее в фиолетовое.

##### Испытания

Температура плавления. От 176 до 182 °С (с разложением, ОФС «Температура плавления»).

Гидразид изоникотиновой кислоты. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота—аммиака раствор концентрированный 25 %— вода 1:1:80.

Все растворы используют свежеприготовленными.

Испытуемый раствор. Встряхивают 1,00 г субстанции с 10 мл спирта 96 % в течение 10 мин, фильтруют через бумажный фильтр с размером пор 8–15 мкм, отбрасывая первую порцию фильтрата.

Раствор стандартного образца гидразида изоникотиновой кислоты. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гидразида изоникотиновой кислоты, растворяют в 20 мл спирта 96 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл испытуемого раствора и 9 мл раствора стандартного образца гидразида изоникотиновой кислоты.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (1000 мкг), раствора стандартного образца гидразида изоникатиновой кислоты (1 мкг), раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 10 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 10 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 чётко разделенные зоны адсорбции.

Допустимое содержание примесей. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора, по положению, величине и степени подавления флуоресценции должна соответствовать зоне адсорбции гидразида изоникотиновой кислоты, на хроматограмме раствора стандартного образца гидразида изоникотиновой кислоты (не более 0,1 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают до постоянной 0,5 г (точная навеска) субстанции при температуре от 100 до 105 °С.

Формальдегид. Фильтрат. Встряхивают 2 г субстанции с 40 мл воды, охлаждённой до 0–5 °С, и фильтруют через бумажный фильтр с размером пор 8–15 мкм, отбрасывая первую порцию фильтрата.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 3 мл полученного фильтрата, доводят водой до метки, прибавляют 1 мл серной кислоты разведённой 9,8 % и 5 мл фуксинсернистой кислоты; раствор не должен окрашиваться в течение 4 мин в фиолетовый цвет.

Мышьяк. Не более 0,0002 % (ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения используют 0,25 г субстанции.

Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения используют 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Формальдегид».

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Доводят 4 мл фильтрата, полученного в испытании «Формальдегид», водой до 10 мл.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В коническую колбу с притёртой пробкой вместимостью 500 мл помещают 0,10 г (точная навеска) субстанции, растворяют при нагревании в 100 мл воды до температуры 30 °С, прибавляют 50,0 мл 0,05 М раствора йода и тотчас мерным цилиндром (в один приём) 30 мл натрия гидроксида раствора 1 М, и оставляют в закрытой колбе в тёмном месте на 20 мин. Прибавляют 50 мл серной кислоты раствора 1 М и титруют выделившейся йод 0,1 М раствором натрия тиосульфата (индикатор – 1 мл крахмала раствора 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора йода соответствует 2,86 мг метазида C13H14N6O2.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0466 Метенамина кальция хлорида декагидрат

Метенамина кальция хлорид
Methenaminum calcii chloridum decahydricum

Взамен ФС 42-1489-93

##### Определение

1,3,5,7-Тетраазатрицикло[3.3.1.13,7]декан—хлорид кальция—вода (2:1:10).

Cодержит не менее 48,0 % метенамина C6H12N4 и не менее 18,5 % кальция хлорида CaCl2.

Отношение содержания метенамина C6H12N4 к содержанию кальция хлорида CaCl2 безводного в субстанции должно быть от 2,48 до 2,60.

##### Свойства

Описание. Белый мелкокристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 95 %.

##### Идентификация

Испытуемый раствор. Растворяют 1,0 г субстанции в 10 мл воды.

1. Качественная реакция._ К 2 мл испытуемого раствора прибавляют 2 мл серной кислоты разведённой 16 % и нагревают; должен появиться запах формальдегида. К полученному раствору прибавляют 2 мл натрия гидроксида раствора 30 % и нагревают; должен выделяться аммиак, обнаруживаемый по запаху и по посинению влажной лакмусовой бумаги красной.

2. Качественная реакция._ Испытуемый раствор должен давать характерную реакцию А на кальций (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

3. Качественная реакция._ Испытуемый раствор должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Опалесценция раствора 1,0 г субстанции в 10 мл воды не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Сульфаты. Не более 0,01 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 г субстанции, растворяют в воде, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют.

Барий. К 5 мл фильтрата, полученного в испытании «Сульфаты», прибавляют 5 мл кальция сульфата раствора насыщенного. Опалесценция полученного раствора в течение часа не должна превышать опалесценцию смеси 5 мл воды и 5 мл фильтрата, полученного в испытании «Сульфаты».

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 1). К 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Сульфаты», прибавляют 10 мл воды.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Метенамин

Раствор индикаторов. Смешивают 2 мл метилового оранжевого спиртового раствора 0,1 % и 1 мл метиленового синего раствора.

Эталонный раствор. Смешивают 35 мл воды, 2 капли раствора индикаторов и 0,1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты.

Испытуемый раствор объёмом 20,0 мл титруют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до появления окраски, соответствующей окраске эталонного раствора (индикатор – 2 капли раствора индикаторов).

При расчётах вычитают 0,1 мл из объёма 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты, израсходованного на титрование субстанции.

1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 14,02 мг метенамина C6H12N4.

Кальция хлорид

К испытуемому раствору объёмом 20,0 мл прибавляют 5 мл аммония хлорида буферного раствора pH 10,0 и титруют 0,05 М раствором натрия эдетата до перехода окраски в сине-фиолетовую (индикатор – 0,35 мл хромового тёмно-синего раствора).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 5,55 мг кальция хлорида CaCl2.

##### Хранение

В cухом месте.

* Приводится для информации

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0467 Метилпреднизолон (Methylprednisolonum)

Вводится впервые

##### Определение

11β,17,21-Тригидрокси-6α-метилпрегна-1,4-диен-3,20-дион.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % метилпреднизолона C22H30O5 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Умеренно растворим в спирте 96 %, мало растворим в ацетоне и метиленхлориде, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца метилпреднизолона.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах ацетона, выпаривают на водяной бане досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика метилпреднизолона на хроматограмме раствора стандартного образца метилпреднизолона (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Растворяют 2 мг субстанции в 2 мл серной кислоты, встряхивают; через 5 мин должно появиться интенсивно красное окрашивание. Просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм; должна наблюдаться коричневато-красная флуоресценция. К полученному раствору добавляют 10 мл воды и встряхивают. Должно наблюдаться исчезновение коричневато-красной флуоресценции и появление желтовато-зелёной флуоресценции.

##### Испытания

Удельное вращение. От +97 до +103 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в спирте 96 %, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворитель. Фосфорная кислота—ацетонитрил—вода 0,1:50:50.

Подвижная фаза А (ПФА). Фосфорная кислота—тетрагидрофуран—ацетонитрил—вода 1:15:100:900.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Фосфорная кислота—тетрагидрофуран—ацетонитрил 1:15:1000.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 3 мг фармакопейного стандартного образца метилпреднизолона для проверки пригодности хроматографической системы (содержащего примеси А, В, С, D, E, F, G, H, I), растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь A: 17,21-дигидрокси-6α-метилпрегна-1,4-диен-3,11,20-трион [91523-05-6].

Примесь В: 11β,17,21,21-тетрагидрокси-6α-метилпрегна-1,4-диен-3,20-дион.

Примесь С: 11β-гидрокси-6α-метиландроста-1,4-диен-3,17-дион [61919-52-6].

Примесь D: 11β,17,20-тригидрокси-6α-метил-3-оксопрегна-1,4,17(20)-триен-21-аль [1338549-02-2].

Примесь Е: 11β-гидрокси-6α-метил-3-оксоандроста-1,4-диен-17β-карбоновая кислота [229019-44-7].

Примесь F: 11β,17,21-тригидрокси-6α-метилпрегн-4-ен-3,20-дион [1625-39-4].

Примесь G: 17,21-дигидрокси-6α-метилпрегна-1,4,9(11)-триен-3,20-дион [93269-35-3].

Примесь Н: 11β,17,21-тригидрокси-6β-метилпрегна-1,4-диен-3,20-дион [18462-27-6].

Примесь I: структура не определена.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 45 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 247 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–14 | 83 | 17
14–30 | 83 → 52 | 17 → 48
30–46 | 52 → 83 | 48 → 17
46–60 | 83 | 17

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Метилпреднизолон – 1 (около 12 мин); примесь В – около 0,85; примесь Н – около 0,88; примесь А – около 0,92; примесь F – около 1,1; примеси G и I – около 1,54; примесь С – около 1,7; примесь Е – около 1,9; примесь D (изомер 1) – около 2,10; примесь D (изомер 2) – около 2,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу метилпреднизолона для проверки пригодности системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси A и метилпреднизолона должно быть не менее 1,7;

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси F и метилпреднизолона должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- сумма площадей пиков двух изомеров примеси D не должна превышать 0,5 площади пика метилпреднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси А не должна превышать 0,3 площади пика метилпреднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- сумма площадей пиков примесей G и I не должна превышать 0,3 площади пика метилпреднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площади пиков каждой из примесей В и Н не должна превышать 0,2 площади пика метилпреднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площади пиков каждой из примесей С, Е, F не должна превышать 0,15 площади пика метилпреднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,1 площади пика метилпреднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика метилпреднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца метилпреднизолона. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца метилпреднизолона, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца метилпреднизолона и испытуемый раствор.

Содержание метилпреднизолона C22H30O5 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика метилпреднизолона на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика метилпреднизолона на хроматограмме раствора стандартного образца метилпреднизолона;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца метилпреднизолона, мг;
W – потеря в массе при высушивании,%;
P – содержание метилпреднизолона в фармакопейном стандартном образце метилпреднизолона,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте, при температуре от 2 до 8 °С.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0468 Метилсалицилат (Methylis salicylas)

Взамен ФС 42-3356-97

##### Определение

Метил(2-гидроксибензоат).

Cодержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % метилсалицилата C8H8O3 в пересчёте на свободное от органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Бесцветная или слегка желтоватая жидкость с характерным запахом.

Растворимость. Очень мало растворим в воде, смешивается со спиртом 96 %, эфиром.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Взбалтывают 0,1 мл субстанции с 10 мл воды, прибавляют 0,05 мл железа(III) хлорида раствора 3 %; должно появиться фиолетовое окрашивание.

2. Качественная реакция. Растворяют 0,2 мл субстанции при нагревании в 2 мл натрия гидроксида раствора 10 %. Прибавляют 10 мл воды и 3 мл хлористоводородной кислоты разведённой 10 %; должен образоваться белый кристаллический осадок (салициловая кислота), который отфильтровывают, промывают водой и сушат в эксикаторе над серной кислотой концентрированной. Температура плавления полученного остатка должна быть от 156 до 161 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

##### Испытания

Относительная плотность. От 1,180 до 1,186 (ОФС «Плотность», метод 1).

Показатель преломления. От 1,535 до 1,538 (ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)»).

Прозрачность раствора. Раствор 2 мл субстанции в 10 мл спирта 96 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность. Встряхивают 5 мл субстанции с 25 мл воды, свободной от углерода диоксида в течение 3 мин и сразу титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до розового окрашивания водного слоя (индикатор – 1 капля фенолфталеина раствора 1 %). Для изменения окраски раствора на розовую должно потребоваться не более 0,4 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида.

Фенол. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Растворы используют свежеприготовленными или хранят при температуре 4 °С не более суток.

Испытуемый раствор. Помещают 2 г (точная навеска) субстанции в мерную колбу вместимостью 10 мл, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. Помещают 50 мг (точная навеска) фенола в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают по 10 мг субстанции и фенола, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая каппилярная, покрытая слоем поли(диметил)(дифенил)силоксана, 30 м × 0,32 мм, 0,5 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Линейная скорость | 1,0 мл/мин; |  |
Деление потока | 1:30; |  |
Объём пробы | 1 мкл; |  |
Время хроматографирования | 20 мин. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °С | Скорость, °С/мин
--- | --- | --- | ---
Колонка | 0–5 | 90 | –
| 5–14 | 90 → 180 | 10
Инжектор |  | 210 |
Детектор |  | 220 |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, стандартный и испытуемый растворы.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками этанола и фенола должно быть не менее 5,0;

- фактор ассиметрии (As) пика фенола должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика фенола должно быть не более 4 % (6 определений).

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика фенола должно быть не менее 10.

Содержание фенола в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика фенола на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика фенола на хроматограмме стандартного раствора;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фенола, мг;
P - содержание основного вещества в феноле,%.

Допустимое содержание примесей:

- фенол – не более 0,05 %.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Помещают 1 г (точная навеска) субстанции в коническую колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 25,0 мл натрия гидроксида раствора 0,5 М и взбалтывают до полного растворения. Колбу соединяют с обратным холодильником и нагревают на кипящей водяной бане от 10 до 15 мин. Раствор охлаждают и титруют 0,5 М раствором хлористоводородной кислоты (индикатор – 1 капля фенолфталеина раствора 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,5 М раствора натрия гидроксида соответствует 76,07 мг метилсалицилата C8H8О3.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0132 Метилтиониния хлорид (Methylthioninii chloridum)

Взамен ФС.2.1.0132.18

##### Определение

3,7-Бис(диметиламино)-5λ4-фенотиазин-5-ий хлорид гидрат.

Содержит не менее 93,0 % и не более 102,0 % метилтиониния хлорида C16H18ClN3S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Тёмно-зелёный или тёмно-синий кристаллический порошок или от тёмно-зелёного до тёмно-синего цвета с металлическим отблеском кристаллы. Водные растворы субстанции синего цвета.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Мало растворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

Проводят определения 1 и 3–5 или 2–5.

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца метилтиониния хлорида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоте разведённой 7,3 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём хлористоводородной кислотой разведённой 7,3 % до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 240 до 800 нм должен иметь максимумы при 255–260 нм, 285–290 нм, 670–680 нм и 740–750 нм.

3. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика метилтиониния на хроматограмме раствора стандартного образца метилтиониния хлорида (раздел «Родственные примеси)».

4. Качественная реакция. Растворяют кристаллик субстанции в серной кислоте разведённой 16 %. При прибавлении небольшими порциями цинковой пыли раствор должен обесцветиться; профильтрованная жидкость при стоянии на воздухе или при прибавлении водорода пероксида раствора разведённого должна вновь приобрести синюю окраску.

5. Качественная реакция. Прокаливают 50 мг субстанции с 0,5 г натрия карбоната безводного. Остаток охлаждают, растворяют в 10 мл азотной кислоты разведённой 12,5 % и фильтруют. Фильтрат без дальнейшего добавления азотной кислоты должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Трифторуксусная кислота 0,1 % (о/о).

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Смесь растворителей. Ацетонитрил—ПФА 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в смеси растворителей, выдерживая на ультразвуковой бане в течение 5 мин, и доводят объём раствора смесью растворителей метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём смесью растворителей до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10,0 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца метилтиониния для проверки пригодности системы, содержащего примесь А, растворяют в смеси растворителей и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Примечание

Примесь А: 3-(диметиламино)-3-(метиламино)-5λ4-фенотиазин-5-ий хлорид [531-55-5].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель фенилсилильный с этиленовыми мостиками, гибридный, эндкепированный, для хроматографии, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 246 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 80 | 20
5–25 | 80 → 30 | 20 → 70
25–32 | 30 | 70
32–35 | 30 → 80 | 70 → 20

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, растворы сравнения А и Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Метилтиониний – 1 (около 11 мин); примесь А – около 0,8.

Идентификация примесей. Для идентификации примеси А используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу метилтиониния для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (Rs) между пиками примеси А и метилтиониния должно быть не менее 3,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать 5-кратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 5,0 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей, кроме примеси А, не должна превышать 5-кратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,5 %).

Не учитывают пики с площадью менее половины площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (менее 0,05 %).

Металлы. Определение проводят методом АЭС (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия») в аргоновой плазме с использованием стандартной оптической системы или масс-спектрометра (кроме определения железа и хрома); в последнем случае в качестве внутреннего стандарта используют индий.

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 4,0 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор индия 10 мкг/мл. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора индия для атомной спектрометрии 1 мг/мл и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор 1 мкг/мл. В мерные колбы вместимостью по 50 мл помещают по 1,0 мл стандартного раствора каждого определяемого металла для атомной спектрометрии с концентрацией 1,0 мг/мл и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют при перемешивании в 9 мл воды, прибавляют 0,1 мл раствора индия 10 мкг/мл и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл стандартного раствора 1 мкг/мл, прибавляют 1,0 мл раствора индия 10 мкг/мл и доводят объём раствора водой до метки.

Контрольный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора индия 10 мкг/мл и доводят объём раствора водой до метки.

Условия определения

Элемент | Оптическая детекция | Детекция по массе
--- | --- | ---
сигнал, нм | фон 1, нм | фон 2, нм | изотоп
Алюминий | 396,15 | 396,05 | 396,25 | 27
Железо | 238,20 | 238,27 | 238,14 | –
Кадмий | 214,44 | 214,37 | 214,51 | 114
Марганец | 260,57 | 260,50 | 260,64 | 55
Медь | 327,40 | 327,31 | 327,48 | 65
Молибден | 202,03 | 202,02 | 202,04 | 95
Никель | 231,60 | 231,54 | 231,66 | 60
Олово | 190,00 | 189,90 | 190,10 | 118
Ртуть | 253,70 | 253,60 | 253,80 | 200
Свинец | 217,00 | 216,90 | 217,10 | 208
Хром | 283,56 | 283,49 | 283,64 | –
Цинк | 213,86 | 213,80 | 213,91 | 66
Индий | – | – | – | 115

Примечания

1. Для определения ртути необходим прибор с приставкой для генерации гидридов.

2. Определение олова и свинца методом стандартной оптической спектрометрии находится на границе чувствительности.

Допустимое содержание примесей

Элемент | Максимальное содержание, ppm
--- | ---
Алюминий | 100
Железо | 200
Кадмий | 1
Марганец | 10
Медь | 300
Молибден | 10
Никель | 10
Олово | 10
Ртуть | 1
Свинец | 10
Хром | 100
Цинк | 100

Потеря в массе при высушивании. Не менее 8,0 и не более 24,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,25 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,35 ЕЭ на 1 мг субстанции метилтиониния хлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца метилтиониния хлорида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг фармакопейного стандартного образца метилтиониния хлорида, растворяют в смеси растворителей и доводят объём той же смесью до метки.

Хроматографируют испытуемый раствор и раствор стандартного образца метилтиониния хлорида.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца метилтиониния хлорида фактор асимметрии пика (AS) метилтиониния должен быть не более 3,0.

Содержание метилтиониния хлорида C16H18ClN3S в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика метилтиониния на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика метилтиониния на хроматограмме раствора стандартного образца метилтиониния хлорида;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца метилтиониния хлорида, мг;
P – содержание метилтиониния хлорида в фармакопейном стандартном образце метилтиониния хлорида,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0615 Метионин рацемический

Метионин
Methioninum racemicum

Взамен ФС 42-2787-99

##### Определение

(2RS)-2-Амино-4-(метилсульфанил)бутановая кислота.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % метионина рацемического C5H11NO2S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Кристаллический порошок белого или почти белого цвета с характерным запахом.

Растворимость. Легко растворим в хлористоводородной кислоте разведённой 8,3 %, аммиака растворе 10 % и натрия гидроксида растворе 10 %, умеренно растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца метионина рацемического.

- Субстанцию предварительно высушивают при температуре 105 °С.

2. Тонкослойная хроматография. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора Б по положению и интенсивности окраски должна соответствовать основной зоне адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца метионина рацемического (раздел «Родственные примеси»).

3. Качественная реакция. Растворяют 0,05 г субстанции в 2 мл натрия гидроксида растворе 10 %, прибавляют 0,3 мл натрия нитропруссида раствора 10 %, перемешивают и прибавляют 1 мл серной кислоты разведённой 16 %. Появляется красно-фиолетовое окрашивание.

##### Испытания

Угол вращения. От –0,05° до +0,05° (5 % раствор субстанции в хлористоводородной кислоты растворе 1 М при длине кюветы 1 дм, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Растворяют 1 г субстанции при нагревании от 40 до 50 °С в 50 мл воды, свободной от углерода диоксида. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 5,4 до 6,5 (2 % раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля G.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—вода—бутанол 20:20:60.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,2 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца метионина рацемического. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца метионина рацемического, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора водой до метки.

Реактив для детектирования. Нингидрина раствор 0,2 %.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора А (100 мкг), испытуемого раствора Б (2 мкг), раствора сравнения 5 мкл (0,2 мкг), раствора стандартного образца метионина рацемического (2 мкг) и 2,5 мкл раствора сравнения (0,1 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 10 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 15 мин. Пластинку опрыскивают нингидрина раствором 0,2 %, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С в течение 15 мин и просматривают в видимом свете.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора А допускается наличие дополнительных зон адсорбции, не превышающих по величине и интенсивности окраски основную зону адсорбции на хроматограмме 5 мкл раствора сравнения А (не более 0,2 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Аммоний. Не более 0,01 % (ОФС «Аммоний»). В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,5 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. Для определения используют 10,0 мл полученного раствора.

Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения используют 10 мл раствора, полученного в испытании «Аммоний».

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,25 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 20 ЕЭ на 1 г субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии. (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,14 г (точная навеска) субстанции в 3 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 30 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 14,92 мг метионина C5H11NO2S.

##### Хранение

В хорошо укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0469 Метоклопрамида гидрохлорид моногидрат

Метоклопрамид
Metoclopramidi hydrochloridum monohydricum

Взамен ВФС 42-3674-00

##### Определение

(4-Амино-N-[2-(диэтиламино)этил]-2-метокси-5-хлорбензамида гидрохлорид (1:1) моногидрат.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % метоклопрамида гидрохлорида C14H22ClN3O2·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, растворим в спирте 96 %, умеренно растворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия хлоридом, в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца метоклопрамида гидрохлорида.

2. Тонкослойная хроматография. Хроматограмму, полученную в испытании «Родственные примеси. Примесь Е», просматривают в УФ-свете при 254 нм до опрыскивания раствором диметиламинобензальдегида. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора Б по положению и величине должна соответствовать зоне адсорбции метоклопрамида гидрохлорида на хроматограмме раствора сравнения А.

3. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %. К 5 мл полученного раствора прибавляют 1 мл диметиламинобензальдегида раствора 1 % в 1 М растворе хлористоводородной кислоты; должен образоваться красновато-оранжевый осадок.

4. Качественная реакция. Раствор 1 г субстанции в 20 мл воды должен давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. Около 183 °С, с разложением (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 25 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,5 до 6,0 (10 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

1. Примесь Е. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный—диоксан—метанол—метиленхлорид 2:10:14:90.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,4 г субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца метоклопрамида гидрохлорида, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг N,N-диэтилендиамина (примесь Е: N,N-диэтилэтан-1,2-диамин [100-36-7]), растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора А (200 мкг), испытуемого раствора Б (20 мкг), раствора сравнения А (20 мкг метоклопрамида гидрохлорида), раствора сравнения Б (1 мкг N,N-диэтилендиамина). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, просматривают сначала в УФ-свете при 254 нм (раздел «Подлинность»), затем опрыскивают диметиламинобензальдегида спиртовым раствором, высушивают на воздухе и просматривают при дневном свете.

Для примеси Е значение Rf составляет около 0,2, для метоклопрамида – около 0,6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора А любая дополнительная зона адсорбции не должна превышать по интенсивности окраски и величине зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,5 %).

Зону адсорбции на линии старта при оценке не учитывают.

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 5 г аммония ацетата в 900 мл воды и доводят значение рН аммиака раствором или уксусной кислотой разведённой 30 % до 7,0. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. ПФБ—ПФА 5:95.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 24 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси А (4-ацетамидо-N-[2-(диэтиламино)этил]-2-метокси-5-хлорбензамид [5608-13-9]), растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 0,1 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, с полярными группами и этиленовыми мостиками, гибридный, эндкепированный, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 37 °С; |  |
Скорость потока | 0,9 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 275 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–1,5 | 95 | 5
1,5–16,5 | 95 → 42,5 | 5 → 57,5

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Метоклопрамид – 1 (около 9 мин); примесь А – около 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и метоклопрамида должно быть не менее 2,0.

Содержание каждой из примесей в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика метоклопрамида на хроматограмме раствора сравнения.

Допустимое содержание примесей:

- любая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,2 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика метоклопрамида на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. От 4,5 % до 5,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 2,5 ЕЭ на 1 мг метоклопрамида гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в смеси 5,0 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты и 50 мл спирта 96 %. Титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают расход титранта между 2 точками перегиба на кривой титрования.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 33,63 мг метоклопрамида гидрохлорида C14H23Cl2N3O2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0134 Метопролола сукцинат

Метопролол
Metoprololi succinas

Взамен ФС.2.1.0134.18

##### Определение

(2RS)-1-[4-(2-Метоксиэтил)фенокси]-3-(пропан-2-иламино)пропан-2-ола бутандиоат (2:1).

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % метопролола сукцината (C15H25NO3)2·C4H6O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в метаноле, мало растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца метопролола сукцината.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 50 мл воды должен выдерживать сравнение с эталоном II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH. От 7,0 до 7,6 (2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

1. Примеси M, N и O. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). На дно хроматографической камеры, содержащей смесь метанол—этилацетат 20:80, помещают два стакана с 30 мл аммиака водного в каждом.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём метанолом до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём метанолом до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (500 мкг), раствора сравнения (1 мкг) и раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (0,5 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ (предварительное насыщение не менее 1 часа) и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат не менее 3 ч и помещают в камеру с парами йода не менее чем на 15 ч.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции основного вещества.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Зона адсорбции на линии старта при оценке не учитывается.

2. Примесь С и другие. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография».

Подвижная фаза (ПФ). В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 3,9 г аммония ацетата, растворяют в 810 мл воды, прибавляют 2,0 мл триэтиламина, 3,0 мл фосфорной кислоты концентрированной, 10,0 мл уксусной кислоты ледяной и 146 мл ацетонитрила, перемешивают.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А и 5 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём ПФ до метки.

Примечание

Примесь A: (2RS)-1-[4-(2-метоксиэтил)фенокси]-3-(этиламино)пропан-2-ол [109632-08-8].

Примесь C: 4-{(2RS)-2-гидрокси-3-(пропан-2-иламино)пропокси}бензальдегид [29122-74-5].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,9 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное времени удерживания основного пика. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (Rs) между пиками примеси А и метопролола должно быть не менее 6,0.

Относительное время удерживания соединений. Метопролол – 1 (около 7 мин); примесь С – около 0,4; примесь А – около 0,8.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси С умножают на 0,1.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси С не должна превышать 1,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %)

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна более чем в 5 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %), и пик янтарной кислоты.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 17,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 40 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 32,64 мг метопролола сукцината (C15H25NO3)2·C4H6O4.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0135 Метопролола тартрат

Метопролол
Metoprololi tartras

Взамен ФС.2.1.0135.18

##### Определение

(2RS)-1-[4-(2-Метоксиэтил)фенокси]-3-(пропан-2-иламино)пропан-2-ола (2R,3R)-2,3-дигидроксибутандиоат (2:1).

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % метопролола тартрата (C15H25NO3)2·C4H6O6 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96 %, мало растворим или практически нерастворим в ацетоне.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца метопролола тартрата.

Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метиленхлорида, растворы наносят на диски калия бромида, выпаривают досуха и незамедлительно записывают спектры сухих остатков.

##### Испытания

Удельное вращение. От +7,0 до +10,0 в пересчёте на сухое вещество (2 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном B8 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH. От 6,0 до 7,0 (2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

1. Примеси M, N и O. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). На дно хроматографической камеры, содержащей смесь метанол—этилацетат 20:80, помещают два стакана с 30 мл аммиака водного в каждом.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём метанолом до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 8,0 мл раствора сравнения А и доводят объём метанолом до метки.

Примечание

Примесь М: 1,3-Бис[(пропан-2-ил)амино]пропан-2-ол [343785-33-1].

Примесь N: 3-[(Пропан-2-ил)амино]пропан-1,2-диол [6452-57-9].

Примесь О: 1,1'-[(Пропан-2-ил)азандиил]бис\{3-[4-(2-метоксиэтил)фенокси]пропан-2-ол} [154784-36-8].

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (500 мкг) и растворов сравнения А (2,5 мкг) и Б (1,0 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ (предварительное насыщение не менее 1 ч) и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат не менее 3 ч и помещают в камеру с парами йода не менее чем на 15 ч.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %) и зона адсорбции только одной такой примеси может превышать по совокупности величины и интенсивности окраски на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,2 %).

Зона адсорбции на линии старта при оценке не учитывается.

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 3,9 г аммония ацетата, растворяют в 810 мл воды, прибавляют 2,0 мл триэтиламина, 3,0 мл фосфорной кислоты концентрированной, 10,0 мл уксусной кислоты ледяной и 146 мл ацетонитрила, перемешивают.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём ПФ до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А и 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца метопролола тартрата, растворяют в ПФ и доводят объём ПФ до метки.

Примечание

Примесь A: (2RS)-1-[4-(2-метоксиэтил)фенокси]-3-(этиламино)пропан-2-ол [109632-08-8].

Примесь В: 4-(2-метоксиэтил)фенол [56718-71-9].

Примесь C: 4-\{(2RS)-2-гидрокси-3-(пропан-2-иламино)пропокси}бензальдегид [29122-74-5].

Примесь D: (2RS)-3-[4-(2-метоксиэтил)фенокси]пропан-1,2-ол [62572-90-1].

Примесь E: (2RS)-1-[2-(2-метоксиэтил)фенокси]-3-(пропан-2-иламино)пропан-2-ол [163685-38-9].

Примесь F: (2RS)-3-(пропан-2-иламино)-1-феноксипропан-2-ол [7695-63-8].

Примесь G: 2-(гидроксиэтил)фенол [501-94-0].

Примесь H: (2RS)-1-[4-(2-гидроксиэтил)фенокси]-3-(пропан-2-иламино)пропан-2-ол [62572-94-5].

Примесь J: 1-[2-гидрокси-3-(пропан-2-иламино)пропокси]-3-[4-(2-метоксиэтил)фенокси]пропан-2-ол [163685-37-8].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,9 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания метопролола. |

Хроматографируют стандартный раствор, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания компонентов. Метопролол – 1 (около 7 мин); примесь H – около 0,3; примесь С – около 0,4; примесь G – около 0,45; примесь F – около 0,7; примесь А – около 0,8; примесь J – около 1,4; примесь D – около 1,6; примесь E – около 1,8; примесь В – около 2.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора разрешение (Rs) между пиками примеси А и метопролола не менее 6,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси С умножается на 0,1.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A, B, С, D, E, F, G, H, J не должна более чем в 3 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 5 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %), а также пики с относительным временем удерживания менее 0,2.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме при температуре 60±2 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 17,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 40 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 34,24 мг метопролола тартрата (C15H25NO3)2·C4H6O6.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0470 Метотрексат (Methotrexatum)

Взамен ФС 42-1592-88

##### Определение

(2S)-2-(4-{[(2,4-Диаминоптеридин-6-ил)метил](метил)амино}бензамидо)пентандиовая кислота.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % метотрексата C20H22N8O5 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Жёлтый или оранжевый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Практически нерастворим в воде, спирте 96 %, метиленхлориде.

*Растворяется в разбавленных растворах минеральных кислот, щелочей и карбонатах.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца метотрексата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика метотрексата на хроматограмме раствора стандартного образца метотрексата (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +19 до +24 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в натрия карбоната растворе 0,05 М, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 50 мг субстанции в 10 мл натрия карбоната растворе 0,05 М должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

1. Энантиомерная чистота

Буферный раствор. Смешивают 600 мл натрия дигидрофосфата раствора 0,05 М с 500 мл динатрия гидрофосфата раствора 0,05 М и доводят значение pH раствора натрия гидроксида раствором 8,5 % до 6,9.

Подвижная фаза (ПФ). Пропанол—буферный раствор 80:920.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 4 мг фармакопейного стандартного образца метотрексата, для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примесь F, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь F: (2R)-2-(4-{[(2,4-диаминоптеридин-6-ил)метил](метил)амино}бензамидо)пентандиовая кислота [51865-79-3].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,9 мм, силикагель модифицированный альбумином для хиральной хроматографии, 7 мкм, размер пор 30 нм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 302 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика метотрексата. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Метотрексат – 1 (около 7,5 мин); примесь F – около 2,3.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси F используют относительное время удерживания соединения и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками метотрексата и примеси F должно быть не менее 2,0. Для достижения требуемого разрешения содержание пропанола в ПФ может быть уменьшено на 6–8 %.

Допустимое содержание примеси. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси F не должна более чем в 3 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 3,0 %).

2. Другие примеси

Буферный раствор. Растворяют 3,4 г натрия дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят значение рН раствора натрия гидроксида раствором 1 М до 6,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 50:950.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—буферный раствор 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в смеси 0,5 мл аммиака раствора 10 % и 5 мл ПФА, и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг субстанции, 5 мг примеси B, 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси C, 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси D и 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси E, растворяют в смеси 0,5 мл аммиака раствора 10 % и 5 мл ПФА, и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 3,0 мл раствора сравнения Б и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для идентификации. Растворяют 8 мг фармакопейного стандартного образца метотрексата для идентификации пиков, содержащего примеси H и I, в смеси 0,1 мл аммиака раствора 10 % и 1 мл ПФА, и доводят объём раствора ПФА до метки.

Примечание

Примесь В:
(2S)-2-(4-{[(2,4-Диаминоптеридин-6-ил)метил]амино}бензамидо)пентандиовая кислота [54-62-6].

Примесь C:
(2S)-2-(4-{[(2-амино-4-оксо-1,4-дигидроптеридин-6-ил)метил](метил)амино}бензамидо)пентандиовая кислота [2410-93-7].

Примесь D:
4-{[(2-амино-4-оксо-1,4-дигидроптеридин-6-ил)метил](метил)амино}бензойная кислота [5623-18-7].

Примесь E:
4-{[(2,4-диаминоптеридин-6-ил)метил](метил)амино}бензойная кислота [19741-14-1].

Примесь H:
(2S)-2-(4-{[(2,4-диаминоптеридин-6-ил)метил](метил)амино}бензамидо)-5-метокси-5-оксопентановая кислота [67022-39-3].

Примесь I:
(4S)-4-(4-{[(2,4-диаминоптеридин-6-ил)метил](метил)амино}бензамидо)-5-метокси-5-оксопентановая кислота [66147-29-3].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 100 | 0
10–20 | 100 → 95 | 0 → 5
20–28 | 95 → 50 | 5 → 50
28–37 | 50 | 50

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для идентификации, раствор сравнения Б, раствор сравнения А и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Метотрексат – 1 (около 18 мин); примесь B – около 0,3; примесь C – около 0,4; примесь D – около 0,9; примесь E – около 1,4; примесь I – около 1,5; примесь H – около 1,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей В, С, D и Е используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Для идентификации пиков примесей I и H используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствор для идентификации.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика метотрексата должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примесей B и C должно быть не менее 2,0;

- разрешение (RS) между пиками примеси D и метотрексата должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора для идентификации разрешение (RS) между пиками примесей I и H должно быть не менее 1,5.

Если разрешение между пиками примеси D и метотрексата менее требуемого, следует увеличить скорость потока.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь E – 0,8; примесь I – 1,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси C не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %);

- площадь пика каждой из примесей B и E не должна превышать 0,6 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,3 %);

- площадь пика каждой из примесей H и I не должна превышать более чем в 2 раза площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,05 %);

- сумма площадей пиков всех примесей, за исключением примесей B, C и E, не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,03 %).

Вода. Не более 13,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,2 ЕЭ на 1 мг метотрексата (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией метотрексата 10 мг/мл в натрия гидроксида раствора 0,1 М.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в смеси 0,5 мл аммиака раствора 10 % и 5 мл ПФА, и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор стандартного образца метотрексата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца метотрексата, растворяют в смеси 0,5 мл аммиака раствора 10 % и 5 мл ПФА, и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца метотрексата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца метотрексата фактор асимметрии пика (AS) метотрексата должен быть не более 1,5;

Содержание метотрексата C20H22N8O5 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика метотрексата на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика метотрексата на хроматограмме раствора стандартного образца метотрексата;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца метотрексата, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание метотрексата в фармакопейного стандартном образце метотрексата,%.

##### Хранение

В плотно закрытой упаковке в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0471 Метоциния йодид (Metocinii iodidum)

Взамен ФС 42-2880-92

##### Определение

2-{[Гидрокси(дифенил)ацетил]окси}-N,N,N-триметилэтанаминия иодид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % метоциния йодид C19H24INO3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или желтоватый кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в воде, мало растворим в спирте 95 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 2 мл серной кислоты концентрированной при нагревании; должно появиться окрашивание в пурпурно-красный цвет. При дальнейшем нагревании выделяются пары фиолетового цвета.

2. Качественная реакция. В пробирку помещают 0,1 г субстанции и 0,35 мл калия дихромата раствора в серной кислоте. Пробирку накрывают кусочком фильтровальной бумаги, смоченной свежеприготовленным натрия нитропруссида раствором 1 % и каплей пиперидина, и нагревают на небольшом пламени горелки, должно появиться синее пятно.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 10 мл воды при температуре 30 °С; раствор должен давать качественные реакции А и Б на йодиды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 193 до 196 °C (ОФС «Температура плавления»).

Прозрачность раствора. Раствор 10 мг субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH. От 5,5 до 7,0. (1,0 г субстанции встряхивают с 40 мл воды в течение 2 мин и фильтруют, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза. Уксусная кислота ледяная—бензол 5:9.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,2 г субстанции, растворяют при температуре 40–50 °С в 8 мл ацетонитрила, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20,0 мг бензиловой кислоты, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20,0 мг диметиламиноэтилбензилата, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

На линию старта пластинки наносят по 20 мкл испытуемого раствора (400 мкг), 1 мкл раствора сравнения А (2 мкг), 0,6 мкл раствора сравнения А (1,2 мкг), 2 мкл раствора сравнения Б (4 мкг) и 1 мкл раствора сравнения Б (2 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме 0,6 мкл раствора сравнения А должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции бензиловой кислоты по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции бензиловой кислоты на хроматограмме 1 мкл раствора сравнения А (не более 0,5 %).

Пластинку опрыскивают реактивом Драгендорфа, выдерживают в течение 10 мин и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме 1 мкл раствора сравнения Б должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции диметиламиноэтилбензилата по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции диметиламиноэтилбензилата на хроматограмме 2 мкл раствора сравнения Б (не более 1,0 %).

Свободный йод. Растворяют 0,5 г субстанции в 20 мл воды при температуре 60 °С, прибавляют 0,5 мл йодида калия раствора 16,6 % и 1 мл крахмала раствора 1 %; не должно появляться синее окрашивание.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 175 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии.

Растворяют 0,5 г (точная навеска) субстанции при нагревании в 100 мл воды. Раствор охлаждают, прибавляют 5 мл азотной кислоты 16 %, 25 мл 0,1 М раствора нитрата серебра и избыток нитрата серебра, титруют 0,1 М раствором тиоцианата аммония (индикатор – 2 мл железа(III) аммония сульфата раствора 0,2 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора нитрата серебра соответствует 44,13 мг метоциния йодида C19H24INO3.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0136 Метронидазол (Metronidazolum)

Взамен ФС.2.1.0136.18

##### Определение

2-(2-Метил-5-нитро-1H-имидазол-1-ил)этан-1-ол.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % метронидазола C6H9N3O3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. От белого до светло-жёлтого цвета кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в воде, ацетоне, спирте 96 % и метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца метронидазола.

2. Спектрофотометрия. (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»)

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг субстанции, растворяют в растворе кислоты хлористоводородной 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора раствором кислоты хлористоводородной 0,1 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь максимум поглощения при 277 нм и минимум поглощения при длине волны 240 нм. Удельный показатель поглощения в максимуме должен быть от 365 до 395.

- В качестве раствора сравнения используют раствор кислоты хлористоводородной 0,1 М.

3. Качественная реакция.

- К 10 мг субстанции прибавляют 10 мг цинковой пыли, 1 мл воды и 0,25 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, после чего нагревают на водяной бане в течение 5 мин. Далее поступают в соответствии с ОФС «Общие реакции на подлинность» (реакция на амины ароматические первичные).

##### Испытания

Температура плавления. От 159 до 163 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Растворяют 1,0 г субстанции в 20 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты. Опалесценция полученного раствора не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном GY6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Растворы готовят в защищённом от света месте.

Раствор калия дигидрофосфата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,36 г калия дигидрофосфата, растворяют в 800 мл воды и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—раствор калия дигидрофосфата 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в 10 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание.

Примесь А: 2-Метил-5-нитро-1H-имидазол [696-23-1].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, для хроматографии, 5 мкм; |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 315 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика метранидазола. |

Хроматографируют раствор сравнения, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение между пиками примеси А и метронидазола должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой единичной примеси не должна превышать площадь пика метранидазола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать более чем в 2 раза площадь пика метранидазола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2%).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади пика метронидазола на хроматограмме раствора сравнения (0,01 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители»

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,35 ЕЭ на 1 мг метронидазола и не более 0,035 ЕЭ на 1 мг метронидазола, используемого в приготовлении радиосенсибилизирующей субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией метронидазола 5 мг/мл при нагревании до полного растворения.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 17,12 мг метронидазола C6H9N3O3.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0137 Метформина гидрохлорид

Метформин
Metformini hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0137.18

##### Определение

N,N-Диметилимидодикарбоимид диамида гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % метформина гидрохлорида C4H11N5·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в ацетоне.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца метформина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 222 до 226 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Растворяют 2,0 г субстанции при нагревании до 50 °С в 20 мл воды. Полученный раствор охлаждают до комнатной температуры. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

1. Диметиламин

Подвижная фаза А (ПФА). Фосфорная кислота—вода 1:999.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Раствор для дериватизации. Растворяют 1 мл фтординитробензола в 100 мл ацетонитрила. Готовят непосредственно перед использованием.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, суспендируют в 5 мл ацетонитрила и обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин. Прибавляют 0,1 мл триэтиламина и 1 мл раствора для дериватизации, тщательно встряхивают, нагревают при 60 °С в течение 30 мин, охлаждают, доводят ацетонитрилом до метки и фильтруют. Готовят непосредственно перед использованием.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца диметиламина (20 мг/мл) и доводят ацетонитрилом до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мл полученного раствора и доводят ацетонитрилом до метки. К 1,0 мл полученного раствора прибавляют последовательно 5,0 мл ацетонитрила, 0,1 мл триэтиламина и 1,0 мл раствора для дериватизации. Тщательно встряхивают и нагревают при 60 °С в течение 30 мин. После охлаждения доводят ацетонитрилом до 10,0 мл.

Контрольный раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл ацетонитрила, 0,1 мл триэтиламина и 1,0 мл раствора для дериватизации, тщательно встряхивают и нагревают при 60 °С в течение 30 мин. После охлаждения доводят ацетонитрилом до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 125 × 3 мм, cиликагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 0,7 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 380 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 60 → 45 | 40 → 55
10–11 | 45 → 25 | 55 → 75
11–15 | 25 | 75

Хроматографируют раствор сравнения, контрольный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Дериват диметиламина – около 4 мин.

Идентификация примесей. Для идентификации пика деривата диметиламина используют хроматограммы контрольного раствора и раствора сравнения.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения разрешение ® между пиками деривата диметиламина и фтординитробензола должно быть не менее 3,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика деривата диметиламина должна быть не более площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %).

2. Другие примеси

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 17 г аммония дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят значение рН до 3,0 ортофосфорной кислотой концентрированной, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в 90 мл воды, прибавляют 5,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят ПФ до метки.

Примечание

Примесь А (N-цианогуанидин) [461-58-5].

Примесь D (меламин): 1,3,5-триазин-2,4,6-триамин [108-78-1].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель для хроматографии, сильный катионит, 10 мкм; |
Скорость потока | 1 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 218 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания основного пика. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси А, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Метформин – 1 (около 10 мин); примесь А – около 0,2; примесь D – около 0,3.

Идентификация примесей. Для идентификации примеси А используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора стандартного образца примеси А. Для идентификации примеси D используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси D и метформина должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца примеси А (не более 0,02 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика метформина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика метформина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,3 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,03 %), за исключением пика примеси А.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в 4 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 80 мл ацетонитрила и сразу титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 16,56 мг метформина гидрохлорида C4H11N5·HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0472 Мефлохина гидрохлорид

Мефлохин
Mefloquini hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

rac-(R)-[2,8-Бис(трифторметил)хинолин-4-ил][(2S)-пиперидин-2-ил]метанола гидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % мефлохина гидрохлорида C17H16F6N2O·HCl в пересчёте на безводное вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или светло-жёлтого цвета кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в метаноле, растворим в спирте 96 %, очень мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца мефлохина гидрохлорида.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают досуха и незамедлительно записывают спектры сухих остатков.

2. Качественная реакция. Раствор 23 мг субстанции в 2 мл метанола должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»). Испытание растворимости образовавшегося осадка проводят после отфильтровывания и промывания осадка метанолом.

##### Испытания

Удельное вращение. От –0,2 до +0,2 в пересчёте на безводное вещество (5 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор натрия гидросульфата 0,15 %. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,5 г натрия гидросульфата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 1,0 г тетрагептиламмония бромида в смеси метанол—раствор натрия гидросульфата 0,15 %—ацетонитрил 200:400:400.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,10 г (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 8 мг фармакопейного стандартного образца мефлохина гидрохлорида и 8 мг хинидина сульфата дигидрата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А: [2,8-бис(трифторметил)хинолин-4-ил](пиридин-2-ил)метанон [35853-55-5].

Примесь В: (RS)-[2,8-бис(трифторметил)хинолин-4-ил](пиридин-2-ил)метанол [68496-04-8].

Хроматографические условия

Предколонка | 25 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 10-кратное от времени удерживания основного пика. |  |

Уравновешивают колонку ПФ при скорости потока 2,0 мл/мин в течение 30 мин.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Время удерживания соединений. Мефлохин – 1 (около 4 мин); хинидин – около 0,5; примесь В – около 3,75; примесь А – около 9,0.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками хинидина и мефлохина должно быть не менее 8,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси с относительным временем удерживания около 0,7 не должна более чем в 2 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей (кроме примеси с относительным временем удерживания около 0,7) не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 3,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции (и платиновый тигель).

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,35 г (точная навеска) субстанции в 15 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 40 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 41,48 мг мефлохина гидрохлорида C17H16F6N2O·HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0505 Микофенолат натрия

Микофеноловая кислота
Mycophenolatum natricum

Вводится впервые

##### Определение

(4E)-6-(4-Гидрокси-7-метил-6-метокси-3-оксо-1,3-дигидро-2-бензофуран-5-ил)-4-метилгекс-4-еноат натрия.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % микофенолата натрия C17H19NaO6 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Растворим в метаноле, мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца микофенолата натрия.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают досуха и незамедлительно записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика микофенолата на хроматограмме раствора стандартного образца микофенолата натрия (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Раствор 1,5 г субстанции в 2 мл воды должен давать характерную реакцию на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Растворы готовят непосредственно перед использованием.

Буферный раствор. Растворяют 0,77 г ацетата аммония в 600 мл воды для хроматографии, перемешивают и доводят значение рН уксусной кислотой разведённой 12 % до 4,86, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Вода—ацетонитрил 40:60.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца микофенолата натрия для определения пригодности системы (содержащего примеси A и B), доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А:
7-Гидрокси-4-метил-5-метокси-6-{2-[(2RS)-2-метил-5-оксооксолан-2-ил]этил}-2-бензофуран-1(3H)-он [26675-76-3].

Примесь В:
(4Z)-6-(4-Гидрокси-7-метил-6-метокси-3-оксо-1,3-дигидро-2-бензофуран-5-ил)-4-метилгекс-4-еновая кислота [483-60-3].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный,совместимый с водной подвижной фазой, эндкепированный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 45 °С; |  |
Температура образца | 10 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 250 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–15 | 71 | 29
15–34 | 71 → 21,3 | 29 → 78,7

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Микофеноловая кислота – 1 (около 12 мин); примесь В – около 0,93; примесь A – около 1,1.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А и В используют хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу микофенолата натрия для пригодности примесей.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси А и пиком микофенолофой кислоты должно быть не менее 1,5;

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси В и пиком микофеноловой кислоты должно быть не менее 10,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси и сумма площадей пиков всех примесей не должны превышать площадь пика микофеноловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10%).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади пика микофенолата натрия на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05%).

Вода. Не более 2,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор фармакопейного стандартного образца микофенолата натрия и испытуемый раствор.

Раствор стандартного образца микофенолата натрия. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца микофенолата натрия и доводят объём раствора растворителем до метки.

Содержание микофенолата натрия C17H19NaO6 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика микофеноловой кислоты на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика микофеноловой кислоты на хроматограмме раствора стандартного образца микофенолата натрия;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца микофенолата натрия, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание микофенолата натрия в фармакопейном стандартном образце микофенолата натрия,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0506 Микофенолата мофетил

Микофеноловая кислота
Mofetilis mycophenolas

Вводится впервые

##### Определение

[2-(Морфолин-4-ил)этил][(4E)-6-(4-гидрокси-7-метил-6-метокси-3-оксо-1,3-дигидро-2-бензофуран-5-ил)-4-метилгекс-4-еноат].

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % микофенолата мофетила в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в ацетоне, умеренно или мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца микофенолата мофетила.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика микофенолата мофетила на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы (раздел «Родственные примеси»).

##### Испытания

Температура плавления. От 94 до 98 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл спирта 96 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Растворы микофенолата мофетила используют свежеприготовленными и защищают от света. Перед хроматографированием растворы выдерживают 15 мин при 10 °С.

Буферный раствор. К 600 мл воды прибавляют 2,0 мл триэтиламина, перемешивают, доводят значение рН фосфорной кислотой разведённой 10 % до 5,3 и доводят объём раствора водой до 650 мл.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 350:650.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Раствор для проверки разрешающей способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают около 10 мг фармакопейного стандартного образца для идентификации пиков, содержащего примеси А, В, D, E, F, G и H, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Примечание

Примесь A:
[2-(морфолин-4-ил)этил][(4E)-6-(4,6-дигидрокси-7-метил-3-оксо-1,3-дигидро-2-бензофуран-5-ил)-4-метилгекс-4-еноат]
[1322681-36-6].

Примесь B:
[2-(морфолин-4-ил)этил][(4E)-6-[(1RS)-4-гидрокси-7-метил-6-метокси-1-[2-(морфолин-2-ил)этокси]-3-оксо-1,3-дигидро-2-бензофуран-5-ил)]-4-метилгекс-4-еноат]
[1094322-91-4].

Примесь D:
[2-(морфолин-4-ил)этил][(4E)-6-(7-метил-4,6-диметокси-3-оксо-1,3-дигидро-2-бензофуран-5-ил)-4-метилгекс-4-еноат]
[1322681-37-7].

Примесь E:
метил[(4E)-6-(4-гидрокси-7-метил-6-метокси-3-оксо-1,3-дигидро-2-бензофуран-5-ил)-4-метилгекс-4-еноат]
[31858-66-9].

Примесь F:
[(4E)-6-(4-гидрокси-7-метил-6-метокси-3-оксо-1,3-дигидро-2-бензофуран-5-ил)-4-метилгекс-4-еновая
кислота [24280-93-1].

Примесь G:
4-(2-{[(4E)-6-(4-гидрокси-7-метил-6-метокси-3-оксо-1,3-дигидро-2-бензофуран-5-ил)-4-метилгекс-4-еноил]окси}этил)морфолин-4-ий-4-олат
[224052-51-1].

Примесь H:
7-гидрокси-4-метил-5-метокси-6-{2-[(2RS)-2-метил-5-оксооксолан-2-ил]этил}-2-бензофуран-1(3H)-он
[26675-76-3].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм силикагель октилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 45 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 250 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика микофенолата мофетила. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разрешающей способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Микофенолата мофетил – 1 (около 22 мин); примесь F – около 0,3; примесь A – около 0,4; примесь Н – около 0,5; примесь G – около 0,6; примесь B – около 0,8; примесь D – около 1,2; примесь E – около 1,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разрешающей способности хроматографической системы, хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу для идентификации пиков.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разрешающей способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примесей А и Н должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика микофенолата мофетила должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора сравнения:

- относительное стандартное отклонение площади пика микофенолата мофетила должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси В умножается на 2,1.

Допустимое содержание примесей:

- примеси A, D, E, G, H, любая другая примесь – не более 0,1 %;

- примесь В – не более 0,2 %;

- примесь F – не более 0,5 %;

- суммарное содержание примесей – не более 0,7 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика микофенолата мофетила на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,4 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 43,35 мг микофенолата мофетила C23H31NO7.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0507 Митомицин (Mitomycinum)

Вводится впервые

##### Определение

Субстанция представляет собой смесь компонентов, продуцируемых штаммом Streptomyces caespitosus.

{[(1aS,8S,8aR,8bS)-6-Амино-5-метил-8a-метокси-4,7-диоксо-1,1a,2,4,7,8,8a,8b-октагидроазирино[2',3':3,4]пирроло[1,2-a]индол-8-ил]метил}карбамат.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % митомицина C15H18N4O5 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Сине-фиолетовый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в диметилацетамиде, умеренно растворим в метаноле, мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца митомицина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика митомицина на хроматограмме раствора стандартного образца митомицина (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

рН раствора. От 5,5 до 7,5 (0,1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы готовят непосредственно перед использованием.

Раствор аммония ацетата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,77 г аммония ацетата, растворяют воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Метанол—раствор аммония ацетата 200:800.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол—раствор аммония ацетата 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца циннамамида, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Примечание

Примесь А (циннамамид): (2E)-3-фенилпроп-2-енамид [22031-64-7].

Примесь В (митомицин A):
{[(1aS,8S,8aR,8bS)-5-метил-6,8a-диметокси-4,7-диоксо-1,1a,2,4,7,8,8a,8b-октагидроазирино[2',3':3,4]пирроло[1,2-a]индол-8-ил]метил}карбамат
[4055-39-4].

Примесь С (митомицин B):
{[(1aS,8R,8aR,8bS)-8a-гидрокси-1,5-диметил-6-метокси-4,7-диоксо-1,1a,2,4,7,8,8a,8b-октагидроазирино[2',3':3,4]пирроло[1,2-a]индол-8-ил]метил}карбамат
[4055-40-7].

Примесь D (альбомитомицин C):
{[(1S,2S,4S,5R,6S,6aR,10aS,11S)-8-амино-9-метил-5-метокси-7,10-диоксо-2,3,6,6a,7,10-гексагидро-1,2,5-эпиметантриил-1H,5H-имидазо[2,1-i] индол-6-ил]метил}карбамат
[111750-67-5].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм, сферический; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 100 | 0
10–30 | 100 → 0 | 0 → 100
30–45 | 0 | 100
45–50 | 0 → 100 | 100 → 0
50–55 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Митомицин – 1 (около 21 мин); примесь D– около 0,6; примесь С– около 1,2; примесь А – около 1,3; примесь В – около 1,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединения и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Для идентификации пиков примесей С, B и D используют относительное время удерживания соединений.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и митомицина должно быть не менее 15,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси А умножают на 0,35.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A, B, C и D не должна превышать площадь пика митомицина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика митомицина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать четырёхкратную площадь пика митомицина на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади основного пика митомицина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 2,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 0,1 мг митомицина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения 10 суток.

Бактериальные эндотоксины. Не более 5 ЕЭ на 1 мг митомицина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Депрессорные вещества. Субстанция не должна обладать депрессорным действием (ОФС «Испытание на депрессорные вещества»). Тест-доза – 0,1 мг митомицина в 1 мл воды для инъекций на 1 кг массы животного, внутривенно.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы готовят непосредственно перед использованием.

Раствор аммония ацетата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,05 г аммония ацетата, растворяют в 100 мл воды, добавляют 2,8 мл уксусной кислоты разведённой 12 % и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Метанол—раствор аммония ацетата 200:800.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол—раствор аммония ацетата 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в диметилацетамиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца митомицина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца митомицина, растворяют в диметилацетамиде и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10 мг циннамида, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Смешивают 2,0 мл полученного раствора и 2,0 мл раствора стандартного образца митомицина.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель фенилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 10 мкм; |
Температура колонки | 20 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 365 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 100 | 0
5–10 | 100 → 0 | 0 → 100
10–11 | 0 → 100 | 100 → 0
11–15 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца митомицина и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Митомиицн – 1 (около 8 мин); примесь А – около 1,2.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси А и митомицина должно быть не менее 1,8 при 254 нм;

- фактор асимметрии пика (AS) митомицина должен быть не более 1,8 при 365 нм.

Содержание митомицина C15H18N4O5 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика митомицина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика митомицина на хроматограмме раствора стандартного образца митомицина;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца митомицина, мг;
P – содержание митомицина в фармакопейном стандартном образце митомицина,%;
W – содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0508 Митотан (Mitotanum)

Взамен ФС 42-2441-86

##### Определение

1-[(1RS)-2,2-Дихлор-1-(4-хлорфенил)этил]-2-хлорбензол.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 103,0 % митотана C14H10Cl4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в хлороформе, растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в вазелиновом масле, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца митотана.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика митотана на хроматограмме раствора стандартного образца митотана (раздел «Количественное определение»).

3. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора А и раствора стандартного образца митотана в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимум при 230 нм.

- Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 200 мг субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора Б и раствора стандартного образца митотана в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимумы при 261 нм, 268 нм и 275 нм.

##### Испытания

Температура плавления. От 74 до 77 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельный показатель поглощения. От 490 до 520 (в максимуме поглощения) при длине волны 230 нм в пересчёте на сухое вещество (0,001 % раствор субстанции в спирте 96 %, ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Вода—ацетонитрил 280:720.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,3 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 40 мл спирта 96 %, перемешивают на орбитальном шейкере при 560 об/мин в течение 30 мин и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца митотана. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца митотана, растворяют в 40 мл спирта 96 %, перемешивают на орбитальном шейкере при 560 об/мин в течение 30 мин и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца митотана и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 6 мг 1,1-дихлор-1,2-бис-(п-хлорфенил)этана (п,п-ДДД), прибавляют 8,0 мл раствора стандартного образца митотана, перемешивают на орбитальном шейкере при 560 об/мин в течение 30 мин и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель додецилсилильный для хроматографии, 4 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–8 | 90 | 10
8–11 | 90 → 10 | 10 → 90
11–14 | 10 | 90
14–15 | 10 → 90 | 90 → 10
15–20 | 90 | 10

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Митотан – 1 (около 8 мин); п,п-ДДД – около 0,93.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками п,п-ДДД и митотана должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора сравнения относительное стандартное отклонение площади пика митотана должно быть не более 2,0 %.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика митотана должно быть не менее 10.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика митотана на хроматограмме раствора стандартного образца митотана;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца митотана, мг;
P – содержание митотана в фармакопейном стандартном образце митотана,%.

Допустимое содержание примесей:

- любая примесь – не более 0,05 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,01 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Железо. Не более 0,005 % (ОФС «Железо», метод 1), определение солей железа в зольном остатке органических соединений»). Для определения используют 60 мг субстанции и стандартный раствор железо(III)-иона 3 мкг/мл.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Встряхивают 0,5 г субстанции в течение 10 мин с 25,0 мл воды и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Для определения используют 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Сульфаты».

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, полученного в испытании «Родственные примеси», и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца митотана:

- фактор асимметрии пика (AS) митотана должен быть не менее 0,9 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика митотана должно быть не более 1,3 %.

Содержание митотана C14H10Cl4 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (X) в процентах вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика митотана на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика митотана на хроматограмме раствора стандартного образца митотана;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца митотана, мг;
Р – содержание митотана в фармакопейном стандартном образце митотана,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0244 Мифепристон (Mifepristonum)

Взамен ФС.2.1.0244.22

##### Определение

17β-Гидрокси-11β-[(4-диметиламино)фенил]-17α-(проп-1-инил)эстра-4,9-диен-3-он.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0% мифепристона C29H35NO2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. От светло-жёлтого до жёлтого цвета с зеленоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в хлороформе, растворим в спирте 96 %, ацетоне, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика мифепристона на хроматограмме раствора стандартного образца мифепристона (раздел «Родственные примеси»).

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 380 нм должен иметь максимумы при 256 нм и 306 нм, и минимум при 276 нм.

- Буферный раствор. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 50 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М, 24 мл натрия гидроксида раствора 0,2 М и доводят объём раствора водой до метки.

- Срок годности раствора – 1 сут.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в 35 мл спирта 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 25 мл спирта 96 %, 20 мл воды, 10 мл буферного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Раствор используют свежеприготовленным.

- Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мл спирта 96 %, 10 мл воды, 5 мл буферного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

##### Испытания

Температура плавления. От 192 до 196 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельное вращение. От +124 до +135 в пересчёте на сухое вещество (2,5 % раствор субстанции в метиленхлориде, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Все растворы защищают от действия света.

Подвижная фаза (ПФ). Натрия дигидрофосфата раствор 0,05 М—ацетонитрил 350:650.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают около 25 мг субстанции, прибавляют 15 мл ПФ, тщательно перемешивают и доводят объём полученного раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца мифепристона. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца мифепристона, прибавляют 30 мл ПФ, встряхивают до растворения навески и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл раствора стандартного образца мифепристона и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии , 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 302 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,5-кратное от времени удерживания пика мифепристона. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца мифепристона и испытуемый раствор.

Время удерживания мифепристона – около 8 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика мифепристона должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора стандартного образца мифепристона:

- фактор асимметрии пика (AS) мифепристона должен быть не более 1,2;

- относительное стандартное отклонение площади пика мифепристона должно быть не более 2,5 % (6 введений).

Содержание каждой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика мифепристона на хроматограмме раствора стандартного образца мифепристона;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска стандартного образца мифепристона, мг;
P – содержание мифепристона в стандартном образце мифепристона,%.

Допустимое содержание примесей:

- любая примесь – не более 1,5 %;

- сумма примесей – не более 3,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (не более 0,3 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании» (способ 1)). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). 0,3 г субстанции встряхивают в течение 3 мин с 15 мл воды, фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 20 мл уксусной кислоты ледяной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до перехода окраски в сине-зелёную (индикатор – 1 капля кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 42,96 мг мифепристона C29H35NO2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0509 Моксифлоксацина гидрохлорид

Моксифлоксацин
Moxifloxacinum hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

8-Метокси-4-оксо-7-[(4aS,7aS)-октагидро-6H-пирроло[3,4-b]пиридин-6-ил]-6-фтор-1-циклопропил-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновой кислоты гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % моксифлоксацина гидрохлорида C21H24FN3O4·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Кристаллический порошок или кристаллы от светло-жёлтого до жёлтого цвета.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Умеренно растворим в воде, мало растворим или очень мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в ацетоне.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца моксифлоксацина гидрохлорида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора Б должно соответствовать времени удерживания пика моксифлоксацина на хроматограмме раствора стандартного образца моксифлоксацина гидрохлорида (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 5 мл воды, прибавляют 1 мл азотной кислоты разведённой 12,5 %, выдерживают в течение 5 мин и фильтруют. Фильтрат должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –125 до –138 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в смеси ацетонитрил—вода 1:1, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 20 мл натрия гидроксида раствора 8,5 % должен быть прозрачным для субстанции, предназначенной для приготовления парентеральных лекарственных форм, или выдерживать сравнение с эталоном II для остальных (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном GY2 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH. От 3,9 до 4,6 (0,2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

1. Энантиомерная чистота

Все растворы защищают от света.

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,49 г меди(II) сульфата безводного и 2,6 г L-Изолейцина, растворяют в воде для хроматографии и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—раствор А 250:750.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5,0 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 3,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси G, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, прибавляют 10 мг фармакопейного стандартного образца моксифлоксацина гидрохлорида, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь G:
8-метокси-4-оксо-7-[(4aR,7aR)-октагидро-6H-пирроло[3,4-b]пиридин-6-ил]-6-фтор-1-циклопропил-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновой кислоты [268545-13-7].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 293 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика моксифлоксацина. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Моксифлоксацин – 1 (около 16 мин); примесь G – около 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси G используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси G и моксифлоксацина должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси G не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %).

2. Другие примеси

Все растворы защищают от света.

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,5 г тетрабутиламмония гидросульфата и 1 г калия дигидрофосфата, растворяют в 500 мл воды, прибавляют 3,4 мл фосфорной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—раствор А 280:720.

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,5 г тетрабутиламмония гидросульфата и 1 г калия дигидрофосфата, растворяют в 500 мл воды, прибавляют 2 мл фосфорной кислоты концентрированной и 50 мг безводного сульфита натрия, доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца моксифлоксацина гидрохлорида, прибавляют 1,0 мл полученного раствора, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A:
4-оксо-7-[(4aS,7aS)-октагидро-6H-пирроло[3,4-b]пиридин-6-ил]-6,8-дифтор-1-циклопропил-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая
кислота [151213-15-9].

Примесь B:
6,8-диметокси-4-оксо-7-[(4aS,7aS)-октагидро-6H-пирроло[3,4-b]пиридин-6-ил]-1-циклопропил-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая
кислота [1029364-73-5].

Примесь C:
4-оксо-7-[(4aS,7aS)-октагидро-6H-пирроло[3,4-b]пиридин-6-ил]-6-фтор-1-циклопропил-8-этокси-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая
кислота [1029364-75-7].

Примесь D:
6-метокси-4-оксо-7-[(4aS,7aS)-октагидро-6H-пирроло[3,4-b]пиридин-6-ил]-8-фтор-1-циклопропил-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая
кислота [1029364-77-9].

Примесь E:
8-гидрокси-4-оксо-7-[(4aS,7aS)-октагидро-6H-пирроло[3,4-b]пиридин-6-ил]-6-фтор-1-циклопропил-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая
кислота [721970-36-1].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель фенилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 45 °С; |  |
Скорость потока | 1,3 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 293 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,5-кратное от времени удерживания пика моксифлоксацина. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор А.

Относительное время удерживания соединений. Моксифлоксацин – 1 (около 14 мин); примесь F – около 0,9; примесь A – около 1,1; примесь B – около 1,3; примесь C – около 1,4; примесь D – около 1,6; примесь E – около 1,7.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединения и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Для идентификации пиков примесей С, B, D, Е и F используют относительное время удерживания соединений.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками моксифлоксацина и примеси A должно быть не менее 1,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь B – 1,4; примесь E – 3,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей B, E и F не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 3 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее половины площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 4,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 1,5 мг моксифлоксацина в 0,5 мл натрия хлорида раствора 0,9 % на мышь. Срок наблюдения 48 ч.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,8 ЕЭ на 1 мг моксифлоксацина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, полученного в испытании «Родственные примеси» и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца моксифлоксацина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца моксифлоксацина гидрохлорида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца моксифлоксацина гидрохлорида и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца моксифлоксацина гидрохлорида:

- фактор асимметрии пика (AS) моксифлоксацина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика моксифлоксацина должно быть не более 2,0 %.

Содержание моксифлоксацина гидрохлорида C21H24FN3O4·HCl в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика моксифлоксацина на хроматограмме испытуемого раствора Б;
S0 – площадь пика моксифлоксацина на хроматограмме раствора стандартного образца моксифлоксацина гидрохлорида;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца моксифлоксацина гидрохлорида, мг;
Р – содержание моксифлоксацина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце моксифлоксацина гидрохлорида,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В герметично закрытой упаковке в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0510 Моксонидин (Moxonidinum)

Вводится впервые

##### Определение

N-(Имидазолидин-2-илиден)-2-метил-4-метокси-6-хлорпиримидин-5-амин.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % моксонидина C9H12ClN5O в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в метаноле, мало растворим в метиленхлориде, очень мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца моксонидина.

2. ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика моксонидина на хроматограмме раствора стандартного образца моксонидина (А) (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 3,48 г натрия пентансульфоната в воде и доводят значение рН до 3,5 серной кислотой разведённой 16 %, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 136:1000.

Растворитель. Вода—метанол 1:1.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца моксонидина (А). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца моксонидина, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца моксонидина (Б). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца моксонидина (А) и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси А (А). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси А (Б). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 6,0 мл раствора стандартного образца примеси А (А) и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,5 мл раствора стандартного образца моксонидина (А) и доводят объём раствора раствором стандартного образца примеси А (А) до метки

Примечание

Примесь А:
N-(имидазолидин-2-илиден)-2-метил-4,6-дихлорпиримидин-5-амин [352457-35-3].

Примесь В:
N-(имидазолидин-2-илиден)-2-метил-4,6-диметоксипиримидин-5-амин [75439-01-9].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика моксонидина. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца моксонидина (Б), раствор стандартного образца примеси А (Б) и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Моксонидин – 1 (около 11,6 мин); примесь А – около 0,9; примесь B – около 1,7.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и моксонидина должно быть не менее 2,0.

Содержание примеси А в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси А на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика примеси А на хроматограмме раствора стандартного образца примеси А(Б);
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца моксонидина примеси А, мг;
Р – содержание примеси А в фармакопейном стандартном образце моксонидина примеси А,%.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика моксонидина на хроматограмме раствора стандартного образца моксонидина (Б);
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца моксонидина, мг;
Р – содержание моксонидина в стандартном фармакопейном образце моксонидина,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь А – не более 0,3 %;

- примесь В – не более 0,3 %;

- единичная неидентифицированная примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца моксонидина (Б) (не более 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы при температуре 105 °С в течение 3 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца моксонидина (А) и испытуемый раствор.

Содержание моксонидина C9H12ClN5O в субстанции в процентах в пересчёте на сухое вещество (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика моксонидина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика моксонидина на хроматограмме раствора стандартного образца моксонидина (А);
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца моксонидина, мг;
W – потеря в массе при высушивании,%;
Р – содержание моксонидина в фармакопейном стандартном образце моксонидина,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0511 Молнупиравир (Molnupiravirum)

Вводится впервые

##### Определение

({(2R,3S,4R,5R)-3,4-Дигидрокси-5-[4-(гидроксиамино)-2-оксопиримидин-1(2H)-ил]оксолан-2-ил}метил)(2-метилпропаноат).

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % молнупиравира C13H19N3O7 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Легко растворим в диметилсульфоксиде и в метаноле, умеренно растворим в воде, практически нерастворим в дихлорметане.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца молнупиравира.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика молнупиравира на хроматограмме раствора стандартного образца молнупиравира (раздел «Количественное определение»)».

##### Испытания

Температура плавления. От 159 до 163 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельное вращение. От –7,5 до –9,5 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными, хранят при температуре 4 °С не более суток и защищают от света.

Буферный раствор рН 2,5. Растворяют 1,36 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 2,5, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Буферный раствор рН 7,0. Растворяют 1,74 г дикалия гидрофосфата безводного в 900 мл воды и доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 7,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Метанол—буферный раствор рН 2,5 20:980.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор рН 2,5—ацетонитрил 200:800.

Растворитель. Метанол—буферный раствор рН 7,0 20:980.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 60 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе, при необходимости обрабатывают ультразвуком в течение 1 мин не допуская нагревания раствора, и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца молнупиравира. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 60 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца молнупиравира, растворяют в растворителе, при необходимости обрабатывают ультразвуком в течение 1 мин не допуская нагревания раствора, и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца молнупиравира и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 60 мг субстанции, прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М, выдерживают в течение 15 мин при комнатной температуре, прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М, растворяют в растворителе, при необходимости обрабатывают ультразвуком в течение 1 мин не допуская нагревания раствора, и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь 1:
({(3aR,4R,6R,6aR)-6-[4-(гидроксиамино)-2-оксопиримидин-1(2H)-ил]-2,2-диметилтетрагидрофуро[3,4-d][1,3]диоксол-4-ил}метил)(2-метилпропаноат)
[2346620-55-9].

Примесь 2:
4-(гидроксиамино)-1-[(2R,3R,4S,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)оксолан-2-ил]пиримидин-2(1H)-он
[3258-02-4].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,0 мм, cиликагель диизобутилоктадецилсилильный для хроматографии, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Температура образца | 10 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 235 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–4 | 100 | 0
4–12 | 100 → 90 | 0 → 10
12–16 | 90 | 10
16–39 | 90 → 40 | 10 → 60
39–44 | 40 | 60
44–46 | 40 → 100 | 60 → 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений: молнупиравир – 1 (около 21 мин); примесь 2 – около 0,15; примесь 1 – около 1,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси 1 и примеси 2 используют относительное время удерживания соединений.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика молнупиравира должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение ® между пиками примеси с относительным временем удерживания около 0,98 и молнупиравира должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) молнупиравира должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика молнупиравира должно быть не более 5,0 %.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме раствора сравнения;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца молнупиравира, мг;
P – содержание молнупиравира в фармакопейном стандартном образце молнупиравира,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь 1 – не более 0,10 %;

- примесь 2 – не более 0,15 %;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика молнупиравира на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 %.(ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска).

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ одновременно с испытанием «Родственные примеси».

Хроматографируют раствор стандартного образца молнупиравира и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца молнупиравира:

- фактор асимметрии пика (AS) молнупиравира должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика молнупиравира должно быть не более 1,0 %.

Содержание молнупиравира C13H19N3O7 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика молнупиравира на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика молнупиравира на хроматограмме раствора стандартного образца молнупиравира;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца молнупиравира, мг;
P – содержание молнупиравира в фармакопейном стандартном образце молнупиравира,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

Не требует особых условий.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0693 Молочная кислота

Acidum lacticum

Вводится впервые

C3H6O3 [50-21-5] | М.м. 90,08

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(2RS)-2-Гидроксипропановая кислота.

Состоит из молочной кислоты, продуктов её конденсации, таких как лактоилмолочная кислота и полимолочные кислоты, и воды. Равновесие между молочной кислотой и полимолочными кислотами зависит от концентрации и температуры. Обычно это рацемат ((RS)-молочная кислота).

Содержит не менее 88,0 % и не более 92,0 % в пересчёте на молочную кислоту C3H6O3.

##### СВОЙСТВА

Описание. Бесцветная или светло-жёлтого цвета сиропообразная жидкость.

Растворимость. Смешивается с водой и спиртом 96 %.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на лактаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

2. Качественная реакция. 10 % раствор субстанции в воде должен иметь сильнокислую реакцию (pH˂4, индикатор – конго красного бумага).

##### ИСПЫТАНИЯ

Исходный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 г субстанции, растворяют в 42 мл натрия гидроксида раствора 1 М и доводят объём раствора водой до метки.

Относительная плотность. От 1,20 до 1,21 (ОФС «Плотность», метод 3).

Цветность раствора. Испытуемый образец субстанции должен выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Вещества, нерастворимые в эфире. Растворяют 1,0 г субстанции в 25 мл эфира. Опалесценция полученного раствора должна быть не интенсивнее опалесценции растворителя.

Сахара и другие восстанавливающие вещества. К 1 мл исходного раствора прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты 1 М, нагревают до кипения, охлаждают, прибавляют 1,5 мл натрия гидроксида раствора 1 М, 2 мл медно-тартратного реактива и нагревают до кипения; не должен образовываться осадок красного или зеленоватого цвета.

Лимонная, щавелевая и фосфорная кислоты. К 5,0 мл исходного раствора прибавляют аммиака раствор 10 % до слабощелочной среды
(рН 8–10), 1,0 мл кальция хлорида раствора 7,35 % и нагревают на водяной бане в течение 5 мин. Опалесценция раствора как до, так и после нагревания не должна превышать опалесценцию смеси 1 мл воды и 5 мл исходного раствора.

Кальций. Не более 0,02 % (ОФС «Кальций», метод 2). Разводят 5 мл исходного раствора до 15 мл водой.

Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты», метод 2). Разводят 7,5 мл исходного раствора до 15 мл водой.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Менее 5,0 МЕ на 1 г молочной кислоты (ОФС «Бактериальные эндотоксины»), если субстанция предназначена для изготовления парентеральных препаратов без дальнейшей процедуры удаления бактериальных эндотоксинов.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В коническую колбу с притёртой пробкой вместимостью 10 мл помещают 1,0 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 10 мл воды и 20,0 мл 1 М раствора натрия гидроксида. Закрывают колбу, выдерживают в течение 30 мин и титруют 1 М раствором хлористоводородной кислоты до исчезновения розовой окраски (индикатор – 0,5 мл фенолфталеина раствор 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 1 М раствора натрия гидроксида соответствует 90,08 мг молочной кислоты C3H6O3.

##### ХРАНЕНИЕ

В плотно укупоренной упаковке.

* Определяется для субстанции, предназначенной для производства парентеральных лекарственных форм.

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0512 Мометазона фуроат

Мометазон
Mometasoni furoas

Вводится впервые

##### Описание

(11β-Гидрокси-16α-метил-3,20-диоксо-9,21-дихлорпрегна-1,4-диен-17-ил)фуран-2-карбоксилат.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 103,0 % мометазона фуроата C27H30Cl2O6 в пересчете на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Растворим в ацетоне и метиленхлориде, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца мометазона фуроата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика мометазона фуроата на хроматограмме раствора стандартного образца мометазона фуроата моногидрата (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Температура плавления. Около 220 °С (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельное вращение. От +50 до +55 в пересчёте на сухое вещество (0,5 % раствор субстанции в этаноле 96 %, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—вода 50:50.

Растворитель. Смешивают 200 мл ацетонитрила и 200 мл воды. К полученному раствору прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 15 мл ацетонитрила и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца мометазона фуроата для проверки разделительной способности хроматографической системы, содержащего примеси C и J, растворяют в 3 мл ацетонитрила и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь С:
(16α-Метил-3,11,20-триоксо-21-хлорпрегна-1,4-диен-17-ил)фуран-2-карбоксилат
[1305334-31-9].

Примесь J:
9,21-дихлор-11β-гидрокси-6α,16α-диметил-3,20-диоксопрегна-1,4-диен-17-илфуран-2-карбоксилат.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3,5 кратное от времени удерживания пика мометазона фуроата. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Мометазона фуроат – 1 (около 24 мин); примесь C – около 0,9; примесь J – около 1,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей С и J используют относительное время удерживания соединения и хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение ® между пиками мометазона фуроата и примеси С должно быть не менее 2,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси J не должна превышать 1,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей, кроме примеси D, не должна превышать трехкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,05 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают до постоянной массы 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 105˚С в течение 2 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют около 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,003 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 0,67 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора, полученного в испытании «Родственные примеси», и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца мометазона фуроат моногидрата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают около 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца мометазона фуроат моногидрата, растворяют в 15 мл ацетонитрила и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца мометазона фуроат моногидрата и испытуемый раствор.

Содержание мометазона фуроат C16H18N2O5S в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика мометазона фуроат на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика мометазона фуроат на хроматограмме раствора стандартного образца мометазона фуроат моногидрата;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца мометазона фуроат моногидрата, мг;
P – содержание мометазона фуроат в фармакопейном стандартном образце мометазона фуроат моногидрата,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0694 Мочевина

Мочевина
Urea

Вводится впервые

CH4N2O [57-13-6] | М.м. 60,06

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Карбамид.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % мочевины CH4N2O в пересчёте на сухое вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или прозрачные кристаллы.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворима в воде, растворима в спирте 96 %, практически нерастворима в метиленхлориде.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектроскопия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца мочевины.

2. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 1 мл воды, прибавляют 1 мл азотной кислоты концентрированной; должен образоваться белый кристаллический осадок.

3. Качественная реакция. Нагревают в пробирке 0,5 г субстанции до расплавления и образования мутной жидкости, охлаждают и растворяют в смеси 1 мл натрия гидроксида раствора 8,5 % и 10 мл воды. К полученному раствору прибавляют 0,05 мл меди(II) сульфата раствора 12,5 %; должно появиться красно-фиолетовое окрашивание.

Температура плавления. От 132 до 135 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки (раствор А). К 2,5 мл раствора А прибавляют 7,5 мл воды. Полученный раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Щёлочность. Разводят 2,5 мл раствора А, полученного в испытании «Прозрачность раствора», водой до 10 мл. К полученному раствору прибавляют 0,1 мл метилового красного раствора 0,05 % и 0,4 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты; окраска раствора должна быть от красного до оранжевого цвета.

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании» способ 1). Высушивают субстанцию мочевины при 105 °С в течение 1 ч.

Аммоний. Не более 0,05 % (ОФС «Аммоний»). 0,1 мл раствора А полученного в испытаниях «Прозрачность раствора должен выдерживать испытание на соли аммония.

Биурет. Не более 0,1 %.

Раствор биурета. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг биурета, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

К 10 мл раствора А, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 5 мл воды, 0,5 мл меди(II) сульфата раствор 0,5 % и 0,5 мл натрия гидроксида раствора концентрированного и оставляют на 5 мин. Окраска полученного раствора по интенсивности не должна превышать окраску эталонного раствора, приготовленного одновременно таким же образом с использованием 10 мл раствора биурета.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В колбу Кьельдаля помещают 1,0 мл полученного раствора, три стеклянных шарика и 4 г растёртой смеси калия сульфат—меди сульфат—селен 10:0,5:0,25. Смывают оставшиеся на стенках колбы частицы 5 мл серной кислоты концентрированной и перемешивают. Затем поступают, как указано в ОФС «Определение азота в органических соединениях методом Кьельдаля» (микрометод Кьельдаля). В качестве титранта используют 0,01 М раствор серной кислоты.

1 мл 0,01 М раствор серной кислоты соответствует 0,6006 мг мочевины CH4N2O.

##### ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0513 Налоксона гидрохлорид дигидрат

Налоксон
Naloxoni hydrochloridum dihydricum

Вводится впервые

##### Определение

3,14-Дигидрокси-17-(проп-2-ен-1-ил)-4,5α-эпоксиморфинан-6-она гидрохлорид дигидрат).

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % налоксона гидрохлорида C19H21NO4·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, умеренно или мало растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца налоксона гидрохлорида дигидрата.

2. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля G.

- Подвижная фаза (ПФ). Метанол—смесь растворителей 5:95.

- Растворитель. Аммиака раствор 2 М—бутанол 36:60; используют верхний слой.

- Испытуемый раствор. Растворяют 8 мг субстанции в 0,5 мл воды и доводят объём раствора метанолом до 1 мл.

- Раствор стандартного образца налоксона гидрохлорида дигидрата. Растворяют 8 мг фармакопейного стандартного образца налоксона гидрохлорида дигидрата в 0,5 мл воды и доводят объём раствора метанолом до 1 мл.

- Реактив для детектирования. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 г калия феррицианида, растворяют в железа(III) хлорида растворе 10,5 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца налоксона гидрохлорида дигидрата. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования и просматривают в видимом свете.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции налоксона на хроматограмме раствора стандартного образца налоксона гидрохлорида дигидрата.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –170 до –181 в пересчёте на безводное вещество (2 % раствор субстанции в воде, свободной от углерода диоксида, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор субстанции 2 % в воде должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном B9 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. К 10 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 50 мкл метилового красного раствора 0,05 %. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 0,2 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида или 0,2 мл 0,02 М раствора хлористоводородной кислоты.

Родственные примеси

1. Примесь D. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 1,58 г аммония гидрокарбоната в 950 мл воды и доводят значение pH аммиака раствором концентрированным 25 % до 9,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 200:800.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—буферный раствор 400:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 1 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси D. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 1 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 1 % до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца примеси D и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 1 % до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 4,0 мл испытуемого раствора, 2,0 мл раствора стандартного образца примеси D и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 1 % до метки.

Примечание

Примесь D:
3,14-Дигидрокси-7,8-дидегидро-17-(проп-2-ен-1-ил)-4,5α-эпоксиморфинан-6-он [26451-92-3].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура | 40 °С |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–50 | 100 | 0
50–51 | 100 → 0 | 0 → 100
51–60 | 0 | 100

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Налоксон – 1 (около 50 мин), примесь D – около 0,8.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси D используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора сравнения.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси D и налоксона должно быть не менее 5;

- фактор асимметрии пика (AS) примеси D должен быть не более 1,8.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси D не должна превышать 1,5 площади пика примеси D на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,0075 %).

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 1,1 г натрия октансульфоната в 950 мл воды и доводят значение pH фосфорной кислотой разведённой 42,5 % до 2,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—тетрагидрофуран—буферный раствор 20:40:940.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Тетрагидрофуран—ацетонитрил—буферный раствор 40:170:790.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,125 г субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 1 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 1 % до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 1 % до метки.

Раствор для идентификации. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца налоксона для идентификации пиков, содержащего примеси A, B, C, D, E и F в 1,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 %.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл раствора сравнения и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 1 % до метки.

Примечание

Примесь A: 3,14-дигидрокси-4,5α-эпоксиморфинан-6-он [33522-95-1].

Примесь B:
14-дигидрокси-17-(проп-2-ен-1-ил)-3-[(проп-2-ен-1-ил)окси]-4,5α-эпоксиморфинан-6-он [1352085-46-1].

Примесь C:
3,10α,14-тригидрокси-17-(проп-2-ен-1-ил)-4,5α-эпоксиморфинан-6-он [2139253-68-0].

Примесь E:
3,3',14,14'-тетрагидрокси-17,17'-бис(проп-2-ен-1-ил)-4,5α:4',5’α-диэпокси[2,2'-биморфинан]-6,6'-дион [211738-08-8].

Примесь F:
3,10β,14-тригидрокси-17-(проп-2-ен-1-ил)-4,5α-эпоксиморфинан-6-он [2139253-69-1].

Хроматографические условия

Колонка | 125 × 4,0 мм, силикагель октилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–40 | 100 → 0 | 0 → 100
40–50 | 0 | 100
50–51 | 0 → 100 | 100 → 0
51–60 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для идентификации, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Налоксон – 1 (около 11 мин); примесь C – около 0,6; примесь A – около 0,8; примесь F – около 0,9; примесь D – около 1,1; примесь E – около 3,0; примесь B – около 3,2.

Идентификация примеси. Для идентификации пиков примесей A, B, C, D, E и F относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для идентификации.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика налоксона должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для идентификации пиков отношение максимум/минимум (p/v) между высотой пика примеси D над нулевой линией и расстоянием от наиболее низко расположенной точки кривой, отделяющей пик примеси D от пика налоксона, над нулевой линией должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) налоксона должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика налоксона должно быть не более 5,0 %.

Поправочный коэффициент. Для расчёта содержания площадь пика примеси E умножают на 0,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A, B, С, E и F не должна превышать площадь пика налоксона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика налоксона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать четырёхкратную площадь пика налоксона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,8 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. От 7,5 % до 11,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 %. (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 35 ЕЭ на 1 мг налоксона гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 50 мл спирта 96 %, прибавляют 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида, приготовленном в этаноле. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают объём титранта между двумя точками перегиба на кривой титрования.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида этанольного соответствует 36,38 мг налоксона гидрохлорида C19H21NO4·HCl.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0514 Налтрексона моногидрат

Налтрексон
Naltrexoni monohydricum

Вводится впервые

##### Определение

3,14-Дигидрокси-17-(циклопропилметил)-4,5α-эпоксиморфинан-6-она моногидрат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,5 % налтрексона C20H23NO4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. От белого до светло-жёлтого или светло-коричневого цвета кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в бензиловом спирте, растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца налтрексона.

- Испытуемый образец. Растворяют 50 мг субстанции в 5 мл спирта 96 %, выпаривают досуха и сушат при температуре 60 °С под вакуумом в течение 12 часов.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика налтрексона на хроматограмме раствора стандартного образца налтрексона (раздел «Родственные примеси»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –205 до –220 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном B6 или Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 1,1 г натрия октансульфоната, растворяют в воде, доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 2,3, переносят раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

Раствор стандартного образца налтрексона. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20,0 мг фармакопейного стандартного образца налтрексона, растворяют в 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца налтрексона примеси С. В 2,5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М растворяют 5,0 мг фармакопейного стандартного образца налтрексона примеси С.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и 1,0 мл раствора стандартного образца налтрексона примеси С, доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

Примечание

Примесь А:
3,14-Дигидрокси-6-оксо-4,5α-эпоксиморфинан-17-карбальдегид [1007856-83-8].

Примесь В:
3,14-Дигидрокси-4,5α-эпоксиморфинан-6-он [33522-95-1].

Примесь С:
17-(Бут-3-ен-1-ил)-3,14-дигидрокси-4,5α-эпоксиморфинан-6-он [131670-05-8].

Примесь D:
3,3',14,14'-Тетрагидрокси-17,17'-бис(циклопропилметил)-4,5α:4',5’α-диэпокси[2,2'-биморфинан]-6,6'-дион [607732-61-6].

Примесь E:
14-Гидрокси-17-(циклопропилметил)- 3-(циклопропилметокси)-4,5α-эпоксиморфинан-6-он [767615-69-0].

Примесь F:
3,10α,14-Тригидрокси-17-(циклопропилметил)-4,5α-эпоксиморфинан-6-он [604767-82-0].

Примесь G:
3,10β,14-Тригидрокси-17-(циклопропилметил)-4,5α-эпоксиморфинан-6-он [604767-82-0].

Примесь Н:
17-Бутил-3,14-дигидрокси-4,5α-эпоксиморфинан-6-он [49835-64-1].

Примесь I:
3,14-Дигидрокси-17-(циклопропилметил)-4,5α-эпоксиморфинан-6,10-дион [96445-14-6].

Примесь J:
14-Гидрокси-3-метокси-17-(циклопропилметил)-4,5α-эпоксиморфинан-6-он [16617-07-5].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–45 | 90 → 55 | 10 → 45
45–47 | 55 → 90 | 45 → 10
47–55 | 90 | 10

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца налтрексона, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Налтрексон – 1 (около 17,5 мин); примесь A – около 0,4; примесь B – около 0,6; примесь F – около 0,7; примесь G – около 0,8; примесь C – около 1,05; примесь H – около 1,1; примесь I – около 1,2; примесь J – около 1,28; примесь D – около 1,32; примесь E – около 1,8.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение ® между пиками налтрексона и примеси С должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика налтрексона должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) налтрексона должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика налтрексона должно быть не более 5,0 % (6 определений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику налтрексона, должна составлять не менее 4000 теоретических тарелок.

Поправочный коэффициент. Для расчёта содержания площадь пика примеси D умножается на 0,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площади пиков каждой из примесей С, D, E, F и G не должны более чем в два раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площади пиков каждой из примесей A, B, H, I и J не должны превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 6,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции и, в качестве растворителя, 40 мл метанола.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

*Бактериальные эндотоксины. Не более 0,21 ЕЭ на 1 мг налтрексона (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции концентрация 10 мг налтрексона в 1 мл спирта 96 %.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,26 г (точная навеска) субстанции в 80 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 34,14 мг налтрексона C20H23NO4.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0138 Напроксен (Naproxenum)

Взамен ФС.2.1.0138.18

##### Определение

(2S)-2-(6-Метоксинафталин-2-ил)пропановая кислота.

Cодержит не менее 99,0% и не более 101,0% напроксена C14H14O3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в спирте 96% и метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца напроксена.

2. Спектрофотометрия. (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимум при 262 нм с удельным показателем поглощения от 216 до 238, при 271 нм с удельным показателем поглощения от 219 до 241, при 316 нм с удельным показателем поглощения от 61 до 69, и при 331 нм с удельным показателем поглощения от 79 до 87.

##### Испытания

Температура плавления. От 154 до 158 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельное вращение. От +59 до +62 в пересчёте на сухое вещество (2% раствор субстанции в спирте 96%, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси

1. Энантиомерная чистота (Примесь G). Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—ацетонитрил—2-пропанол—гексан 5:50:100:845.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в тетрагидрофуране и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца напроксена рацемического, растворяют в 10 мл тетрагидрофурана и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь G: (2R)-2-(6-метоксинафталин-2-ил)пропановая кислота [23979-41-1].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель π-акцептор/π-донор для хиральной хроматографии, 5 мкм (S, S); |
Температура | 25 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 263 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика напроксена. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Время удерживания соединений. Напроксен – около 5 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограме для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси G и напроксена должно быть не менее 3,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси G не должна превышать площадь пика напроксена на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,5%).

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Буферный раствор. Растворяют 1,36 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды, доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 2,0, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 420:580.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 12 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 6 мг каждого из фармакопейных стандартных образцов примесей L, O, K и N, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь L: 1-(6-метоксинафталин-2-ил)этанон [3900-45-6].

Примесь О: 6-метоксинафталин-2-карбоновая кислота [2471-70-7].

Примесь K: (1RS)-1-(6-метоксинафталин-2-ил)этанол [77301-42-9].

Примесь N: 2-бром-6-метоксинафталин [5111-65-9].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,0 см, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура | 50 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания примеси N. |

Хроматографируют стандартный раствор, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительные времена удерживания соединений. Напроксен – 1 (около 2,5 мин); примесь O – около 0,8; примесь K – около 0,9; примесь L – около 1,4; примесь N – около 5,3.

Идентификация примесей. Хроматограмму стандартного раствора используют для идентификации пиков примесей K, L, N и O.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора разрешение (RS) между пиками примеси K и напроксена должно быть не менее 2,2.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси О умножают на 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси O не должна превышать 1,5 площади пика напроксена на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15%);

- площадь пика примеси L не должна превышать 1,5 площади пика напроксена на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,15%);

- площадь любой другой примеси не должна превышать площадь пика напроксена на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10%);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь пика напроксена на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3%).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1%. (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в смеси 25 мл воды и 75 мл метанола, и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до появления розового окрашивания (индикатор – 0,1 мл фенолфталеина раствор 0,1%).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 23,03 мг напроксена C14H14O3.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0515 Натамицин (Natamycinum)

Вводится впервые

##### Определение

(1R,3S,5R,7R,8E,12R,14E,16E,18E,20E,22R,24S,25R,26S)-22-[(3-Амино-3,6-дидезокси-β-D-маннопиранозил)окси]-1,3,26-тригидрокси-12-метил-10-оксо-6,11,28-триоксатрицикло[22.3.1.05,7]октакоза-8,14,16,18,20-пентаен-25-карбоновая кислота.

Cодержит не менее 90,0 % и не более 102,0 % натамицина C33H47NO13 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. От белого до белого с желтоватым оттенком цвета кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в диметилформамиде, растворим или мало растворим в уксусной кислоте ледяной, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика натамицина на хроматограмме раствора стандартного образца натамицина (раздел «Количественное определение»).

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Растворитель. Уксусная кислота ледяная—метанол 1:1000.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 50 мг субстанции и прибавляют 5 мл воды. Прибавляют 100 мл растворителя, встряхивают в темноте до растворения и доводят объём растворителем до метки. В мерную колбу вместимость 50 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца натамицина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг стандартного образца натамицина и прибавляют 2,5 мл воды. Прибавляют 50 мл растворителя, встряхивают в темноте до растворения и доводят объём растворителем до метки. В мерную колбу вместимость 50 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём растворителем до метки.

- Спектры поглощения испытуемого раствора и раствора стандартного образца натамицина в области от 190 до 400 нм должны иметь максимумы и минимумы при одних и тех же длинах волн.

3. Качественная реакция. К 3 мг натамицина прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной; должно появиться сине-фиолетовое окрашивание.

##### Испытания

Удельное вращение. От +243 до +259 в пересчёте на безводное вещество (0,4 % раствор субстанции в уксусной кислоте безводной, ОФС «Оптическое вращение»).

рН. От 5,0 до 7,5 (1 % суспензия в воде, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы, содержащие натамицин, используют свежеприготовленными и защищают от света.

Растворитель. Хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М—метанол 1:99.

Подвижная фаза (ПФ). В коническую колбу вместимостью 1500 мл помещают 3,0 г аммония ацетата и 1,0 г аммония хлорида, растворяют в 760 мл воды, прибавляют 5,0 мл тетрагидрофурана и 240 мл ацетонитрила. Фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 5 мл тетрагидрофурана и обрабатывают ультразвуком в течение 10 мин. Прибавляют 60 мл метанола, 25 мл воды, перемешивают, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки. Фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в растворителе и выдерживают в течение 2 часов.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Метиловый эфир натамицина: Метил[(1R,3S,5R,7R,8E,12R,14E,16E,18E,20E,22R,24S,25R,26S)-22-[(3-амино-3,6-дидезокси-β-D-маннопиранозил)окси]-1,3,26-тригидрокси-12-метил-10-оксо-6,11,28-триоксатрицикло[22.3.1.05,7]октакоза-8,14,16,18,20-пентаен-25-карбонат].

Хроматографические условия

Предколонка | 20 × 3,9 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |  |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 3,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 303 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания основного вещества. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Натамицин – 1 (около 14 мин), метиловый эфир натамицина – около 1,3.

Идентификация примесей. Для идентификации пика метилового эфира натамицина используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика натамицина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение ® между пиками натамицина и метилового эфира натамицина должно быть не менее 2,5;

- фактор ассиметрии пика (AS) натамицина должен быть не более 1,3.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика метилового эфира натамицина не должна более чем в 2 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать четырёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 4,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. От 6,0 % до 9,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца натамицина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца натамицина, прибавляют 5 мл тетрагидрофурана и обрабатывают ультразвуком в течение 10 мин. Прибавляют 60 мл метанола, 25 мл воды, перемешивают, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки. Фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца натамицина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца натамицина:

- фактор асимметрии пика (AS) натамицина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика натамицина должно быть не более 2,0 % (6 введений);

Содержание натамицина C33H47NO13 в пересчёте на безводное и свободное от органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика натамицина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика натамицина на хроматограмме раствора стандартного образца натамицина;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца натамицина, мг;
P – содержание натамицина в фармакопейном стандартном образце натамицина,%;
W – содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0052 Натрия аминосалицилат дигидрат

Аминосалициловая кислота
Natrii aminosalicylas dihydricus

Взамен ФС.2.1.0052.18

##### Определение

4-Амино-2-гидроксибензоат натрия дигидрат.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % натрия аминосалицилата C7H6NNaO3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96 %, очень мало растворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца натрия аминосалицилата дигидрата.

2. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 10 мл воды, прибавляют 0,1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и 0,1 мл раствора железа(III) хлорида; должно появиться фиолетово-красное окрашивание. Полученный раствор выдерживают в течение 3 ч; не должно быть осадка.

3. Качественная реакция. Раствор 20 мг субстанции в 10 мл воды должен давать характерную реакцию на амины ароматические первичные (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления сублимата. От 120 до 124 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1). В фарфоровый тигель помещают 0,3 г субстанции и нагревают на малом пламени до появления пара. Тигель накрывают часовым стеклом и собирают сублимат.

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY5 или В5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 6,5 до 8,5 (2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие натрия аминосалицилат, готовят непосредственно перед использованием.

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,2 г хлорной кислоты и 1,0 г фосфорной кислоты концентрированной, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,7 г хлорной кислоты и 1,0 г фосфорной кислоты концентрированной, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50,0 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мг 3-аминофенола (примесь А) и 5,0 мг месалазина (примесь В), растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь А: 3-аминофенол [591-27-5].

Примесь В (месалазин): 5-амино-2-гидроксибензойная кислота [89-57-6].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм силикагель октилсилильный, дезактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,25 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФ А, % | ПФ Б, %
--- | --- | ---
0–15 | 100 | 0
15–30 | 100 → 40 | 0 → 60

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. 4-Аминосалицилициловая кислота – 1 (около 17 мин); примесь А – около 0,31; примесь В – около 0,39.

Для идентификации примесей используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и примеси В должно быть не менее 4,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси A умножают на 0,62.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать трёхкратную площадь пика 4-аминосалициловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика примеси В не должна превышать двадцатикратную площадь пика 4-аминосалициловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать двукратную площадь пика 4-аминосалициловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двадцатикратную площадь пика 4-аминосалициловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,6 площади пика 4-аминосалициловой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,03 %).

Хлориды. Не более 0,005 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 1,0 г субстанции в 25 мл воды, прибавляют 2 мл азотной кислоты разведённой 16 % и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты»). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мл фильтрата, полученного в испытании «Хлориды», и доводят объём раствора водой до метки.

Потеря в массе при высушивании. От 16,0 до 17,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,02 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 20 мл воды, прибавляют 10 мл натрия бромида раствора 50 % и 25 мл уксусной кислоты ледяной. Быстро прибавляют 5 мл 0,1 М раствора натрия нитрита и продолжают титрование тем же титрантом. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 17,51 мг натрия аминосалицилата C7H6NNaO3.

##### Хранение

В герметично закрытой упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0516 Натрия бензоат (Natrii benzoas)

Взамен ФС 42-2458-94

##### Определение

Бензоат натрия.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % натрия бензоата C7H5NaO2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый порошок без запаха или со слабым характерным запахом.

Растворимость. Легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 90 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца натрия бензоата.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения 0,001 % раствора субстанции в воде в области длин волн от 220 до 300 нм должен иметь максимум при 226±2 нм.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на бензоаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерные реакции А и Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Растворяют 1 г субстанции в 10 мл воды, свободной от углерода диоксида. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора» должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. К раствору, полученному в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствора 0,1 %. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 0,2 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида или 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты.

Потеря в массе при высушивании. Не более 2,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты», метод 1).

Испытуемый раствор. Растворяют 0,5 г субстанции в 4,5 мл воды, прибавляют 5 мл спирта 96 % и 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»).

Испытуемый раствор. Растворяют 0,1 г субстанции в 5 мл воды и прибавляют 5 мл спирта 96%.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод С).

Испытуемый раствор. Растворяют 0,5 г субстанции в 10 мл смеси равных объёмов спирта 96 % и воды.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,09 ЕЭ на 1 мг субстанции.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Индикатор. Метилового оранжевого раствор 0,1 %—метиленового синего раствор 0,15% 1:1. Раствор используют свежеприготовленным.

Растворяют 1,5 г (точная навеска) субстанции в 20 мл воды, прибавляют 45 мл эфира, 0,2 мл индикатора и титруют 0,5 М раствором хлористоводородной кислоты при интенсивном встряхивании до перехода окраски водного слоя в сиреневую.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,5 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 72,05 мг натрия бензоата C7H5NaO2.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0140 Натрия кромогликат

Кромоглициевая кислота
Natrii cromoglicas

Взамен ФС.2.1.0140.18

##### Определение

5,5'-[(2-Гидроксипропан-1,3-диил)бис(окси)]бис(4-оксо-4H-1-бензопиран-2-карбоксилат) динатрия.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % натрия кромогликата C23H14Nа2O11 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим или растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца натрия кромогликата.

2. Спектрофотометрия_ (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в фосфатном буферном растворе рН 7,4 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора фосфатным буферным раствором рН 7,4 до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь максимумы при 239 нм и 327 нм. Отношение значений оптической плотности А327/А239 должно составлять от 0,25 до 0,30.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Опалесценция раствора 0,2 г субстанции в 10 мл воды не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном ВY5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. Растворяют 0,2 г субстанции в 10 мл воды, свободной от углерода диоксида, прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствора 0,1 %; раствор должен быть бесцветным. Прибавляют 0,2 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида; раствор должен окраситься в розовый цвет. Прибавляют 0,4 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты; раствор должен обесцветиться. Прибавляют 0,25 мл метилового красного раствора 0,05 %; раствор должен окраситься в красный цвет.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—тетрабутиламмония гидросульфата раствор 1 % 50:950.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—тетрабутиламмония гидросульфата раствор 1 % 500:500.

Растворитель. Вода—ацетонитрил 40:60.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 7 мг фармакопейного стандартного образца натрия кромогликата для проверки пригодности системы, содержащего примесь С, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 330 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–15 | 100 → 0 | 0 → 100
15–20 | 0 | 100

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Натрия кромогликат – 1 (около 11 мин); примесь С – около 1,1.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками натрия кромогликата и примеси С должно быть не менее 5,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси С не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика натрия кромогликата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика натрия кромогликата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 5 раз превышать площадь пика натрия кромогликата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 10,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Оксалаты. Не более 0,35 %. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в 20 мл воды, прибавляют 5 мл железа салицилата раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,35 мг щавелевой кислоты дигидрата, растворяют в 20 мл воды, прибавляют 5 мл железа салицилата раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Измеряют оптическую плотность полученных растворов при 480 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения воду. Оптическая плотность испытуемого раствора не должна превышать оптическую плотность стандартного раствора.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции при нагревании в смеси 5 мл 2-пропанола и 25 мл этиленгликоля и охлаждают. Прибавляют смесь 6 мл тетрагидрофурана и 24 мл ацетонитрила и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 25,62 мг натрия кромогликата C23H14Nа2O11.

##### Хранение

Хранение. В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0517 Натрия лаурилсульфоацетат (Natrii laurilsulfoacetas)

Вводится впервые

##### Определение

2-(Додецилокси)-2-оксоэтан-1-сульфонат натрия.

Содержит не менее 98,0 % и не более 101,5 % натрия лаурилсульфоацетата C14H27NaO5S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим или умеренно растворим в диметилсульфоксиде, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1, снятый в диске с калия бромидом или методом нарушенного полного внутреннего отражения, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца натрия лаурилсульфоацетата.

- Если спектры различаются, то 5,0 мг субстанции и фармакопейного стандартного образца по отдельности растворяют в 2,0 мл этанола и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор не более 0,45 мкм. В агатовую ступку помещают 0,5 мл полученного раствора, накрывают часовым стеклом, оставляя зазор. Ступку с раствором помещают в вакуум-сушильный шкаф, упаривают раствор при комнатной температуре в течение 1,5 ч и записывают спектры сухих остатков.

2. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 10 мл воды и интенсивно встряхивают; должна образоваться обильная пена.

3. Качественная реакция. В пробирку помещают 0,1 мл раствора, полученного в предыдущем испытании, прибавляют 0,1 мл метиленового синего раствора, 2,0 мл серной кислоты раствора 1 М и перемешивают. К полученному раствору прибавляют 2,0 мл метиленхлорида и перемешивают; органический слой должен окраситься в тёмно-синий цвет.

4. Качественная реакция. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают зольный остаток, полученный после сжигания 1,5 г субстанции, растворяют в 5,0 мл воды при нагревании, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки. Полученный раствор должен давать характерную реакцию А на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Цветность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10,0 мл воды должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 5,0 до 7,0 (1 % раствор субстанции в смеси 2-пропанол—вода 1:1, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 60,0 мг 4ʹ-трет-бутилацетофенона [943-27-1], растворяют в этилацетате и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора этилацетатом до метки.

Испытуемый раствор. В стеклянную центрифужную пробирку вместимостью 10 мл с герметично закрывающейся крышкой помещают 50,0 мг (точная навеска) субстанции и растворяют в 5,0 мл воды, при необходимости обрабатывая ультразвуком, при этом, не допуская нагревания раствора. К полученному раствору прибавляют 50,0 мг натрия хлорида, перемешивают, прибавляют 5,0 мл раствора внутреннего стандарта, встряхивают в течение 2 мин и центрифугируют при 4000 об/мин в течение 5 мин. В стеклянную центрифужную пробирку вместимостью 10 мл с герметично закрывающейся крышкой помещают 4,0 мл верхнего (органического) слоя, прибавляют 6,0 мл воды, встряхивают в течение 1 мин и центрифугируют при 4000 об/мин в течение 5 мин. Используют верхний (органический) слой. Срок годности раствора – 24 ч при хранении в защищённом от света месте.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 75,0 мг (точная навеска) лаурилового спирта и 50,0 мг (точная навеска) додецил-2-хлорацетата [6316-04-7], растворяют в растворе внутреннего стандарта и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора раствором внутреннего стандарта до метки (раствор А).

В стеклянную центрифужную пробирку вместимостью 10 мл с герметично закрывающейся крышкой помещают 5,0 мл раствора А, прибавляют 5,0 мл воды, 50,0 мг натрия хлорида, встряхивают в течение 2 мин и центрифугируют при 4000 об/мин в течение 5 мин. В стеклянную центрифужную пробирку вместимостью 10 мл с герметично закрывающейся крышкой помещают 4,0 мл верхнего (органического) слоя, прибавляют 6,0 мл воды, встряхивают в течение 1 мин и центрифугируют при 4000 об/мин в течение 5 мин. Используют верхний (органический) слой. Срок годности раствора – 24 ч при хранении в защищённом от света месте.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В стеклянную центрифужную пробирку вместимостью 10 мл с герметично закрывающейся крышкой помещают 2,5 мл раствора А, прибавляют 2,5 мл раствора внутреннего стандарта, 5,0 мл воды, 50,0 мг натрия хлорида, встряхивают в течение 2 мин и центрифугируют при 4000 об/мин в течение 5 мин. В стеклянную центрифужную пробирку вместимостью 10 мл с герметично закрывающейся крышкой помещают 4,0 мл верхнего (органического) слоя, прибавляют 6,0 мл воды, встряхивают в течение 1 мин и центрифугируют при 4000 об/мин в течение 5 мин. Используют верхний (органический) слой. Срок годности раствора – 24 ч при хранении в защищённом от света месте.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,32 мм, покрытая слоем поли(диметил)(дифенил)силоксана, 1 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:10; |  |
Скорость потока | 30 см/с; |  |
Объём пробы | 1 мкл; |  |
Температура | колонка | 0–2 мин | 120 °C,
|  | 2–20 мин | 120 → 210 °C,
|  | 20–29 мин | 210 → 300 °C,
|  | 29–39 мин | 300 °C;
| инжектор | 250 °C; |
| детектор | 300 °C; |
Время хроматографирования | 39 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Порядок выхода пиков: 4ʹ-трет-бутилацетофенон, лауриловый спирт, додецил-2-хлорацетат.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика додецил-2-хлорацетата должно быть не менее 10.

На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками 4ʹ-трет-бутилацетофенона и лаурилового спирта должно быть не менее 5,0;

- фактор асимметрии пика (AS) лаурилового спирта и додецил-2-хлорацетата должен быть не менее 0,8 и не более 1,5, для каждого;

- относительное стандартное отклонение времени удерживания каждого из пиков 4ʹ-трет-бутилацетофенона, лаурилового спирта и додецил-2-хлорацетата должно быть не более 1,0 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение отношения площади каждого из пиков лаурилового спирта и додецил-2-хлорацетата к площади пика 4ʹ-трет-бутилацетофенона должно быть не более 10,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику лаурилового спирта, должна составлять не менее 10 000.

Содержание лаурилового спирта в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где B1 – отношение площади пика лаурилового спирта к площади пика 4ʹ-трет-бутилацетофенона на хроматограмме испытуемого раствора;
B0 - отношение площади пика лаурилового спирта к площади пика 4ʹ-трет-бутилацетофенона на хроматограмме стандартного раствора;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска лаурилового спирта, мг;
P - содержание основного вещества в лауриловом спирте,%.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где B1 – отношение площади пика любой другой примеси к площади пика 4ʹ-трет-бутилацетофенона на хроматограмме испытуемого раствора;
B0 - отношение площади пика додецил-2-хлорацетата к площади пика 4ʹ-трет-бутилацетофенона на хроматограмме стандартного раствора;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска додецил-2-хлорацетата, мг;
P - содержание основного вещества в додецил-2-хлорацетате,%.

Допустимое содержание примесей:

- лауриловый спирт – не более 0,15 %;

- додецил-2-хлорацетат – не более 0,10 %;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,2 %.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме при температуре 50 °C в течение 3 ч.

Хлоруксусная кислота. Натрия хлорид. Натрия сульфат. Динатрия сульфоацетат. Определение проводят методом капиллярного электрофореза (ОФС «Капиллярный электрофорез»).

Непосредственно перед использованием ведущий электролит и все анализируемые растворы центрифугируют при 4000 об/мин в течение 3 мин.

Раствор хрома(VI) оксида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,500 г хрома(VI) оксида, растворяют в воде для хроматографии и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор диэтаноламина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,263 г диэтаноламина, растворяют в воде для хроматографии и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор цетилтриметиламмония гидроксида. В мерную колбу вместимостью 25 мл, содержащую 5,0 мл воды для хроматографии, помещают 0,75 мл цетилтриметиламмония гидроксида раствора 10 % и доводят объём раствора водой для хроматографии до метки.

Ведущий электролит (ВЭ). В химический стакан вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл раствора хрома(VI) оксида, 3,0 мл раствора диэтаноламина, 3,0 мл воды для хроматографии и перемешивают. К полученному раствору прибавляют 2,0 мл раствора цетилтриметиламмония гидроксида, перемешивают и фильтруют через нейлоновый мембранный фильтр с диаметром пор не более 0,45 мкм.

Примечание – При приготовлении ВЭ не допускается менять порядок прибавления реактивов.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде для хроматографии, при необходимости обрабатывая ультразвуком не более 1 мин, при этом, не допуская нагревания, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) натрия хлорида и 15 мг (точная навеска) натрия сульфата, растворяют в воде для хроматографии и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание – Раствор допускается готовить с использованием стандартного раствора хлорид-ионов (10 г/дм3) и стандартного раствора сульфат-ионов (10 г/дм3), с учётом проведения в вычислениях необходимых пересчётов хлорид-ионов и сульфат-ионов на натрия хлорид и натрия сульфат, соответственно.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) хлоруксусной кислоты, растворяют в воде для хроматографии и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой для хроматографии до метки.

Стандартный раствор В. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл стандартного раствора Б, 2,0 мл стандартного раствора А и доводят объём раствора водой для хроматографии до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Стандартный раствор Г. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 40 мг (точная навеска) сульфоуксусной кислоты [123-43-3], растворяют в воде для хроматографии и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой для хроматографии до метки.

Стандартный раствор Д. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл стандартного раствора Г, прибавляют 1,0 мл аммиака раствора 10 % и доводят объём раствора водой для хроматографии до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Раствор для проверки чувствительности электрофоретической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора Б и доводят объём раствора водой для хроматографии до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой для хроматографии до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Контрольный раствор. Вода для хроматографии.

Электрофоретические условия

Капилляр | плавленый кварц, эффективная длина 50 см, внутренний диаметр 75 мкм;
Кондиционирование капилляра | Промывка капилляра перед началом работы: вода для хроматографии – 3 мин при 1000 мбар; натрия гидроксида раствор 0,5 М – 5 мин при 1000 мбар; вода для хроматографии – 5 мин при 1000 мбар; ВЭ – 3 мин при 1000 мбар. Промывка капилляра между анализами: ВЭ – 3 мин (отдельная пробирка). Промывка капилляра в конце работы: вода для хроматографии – 2 мин при 1000 мбар; хлористоводородной кислоты раствор 1 М – 5 мин при 1000 мбар; вода для хроматографии – 5 мин при 1000 мбар; натрия гидроксида раствор 0,5 М – 5 мин при 1000 мбар; вода для хроматографии – 5 мин при 1000 мбар.
Температура капилляра | 20 °C;
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм;
Ввод пробы | 10 с·30 мбар;
Напряжение | –25 кВ;
Время регистрации электрофореграммы | 4 мин.

Последовательно анализируют контрольный раствор, раствор для проверки чувствительности электрофоретической системы, стандартный раствор Д, стандартный раствор В и испытуемый раствор.

Порядок выхода пиков. Хлорид-ион, сульфат-ион, сульфоуксусная кислота, карбонат-ион и хлоруксусная кислота.

Идентификация примесей. Электрофореграмму стандартного раствора В используют для идентификации пиков хлорид-иона, сульфат-иона и хлоруксусной кислоты. Электрофореграмму стандартного раствора Д используют для идентификации пика сульфоуксусной кислоты.

Пригодность электрофоретической системы. На электрофореграмме контрольного раствора не должно быть пиков, соответствующих по времени миграции пикам определяемых примесей.

На электрофореграмме раствора для проверки чувствительности электрофоретической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика хлоруксусной кислоты должно быть не менее 10.

На электрофореграмме стандартного раствора В:

- разрешение (RS) между пиками хлорид-иона и сульфат-иона должно быть не менее 3,0;

- относительное стандартное отклонение времени миграции каждого из пиков хлорид-иона, сульфат-иона, хлоруксусной кислоты должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение площади каждого из пиков хлорид-иона, сульфат-иона, хлоруксусной кислоты должно быть не более 10,0 % (6 введений).

На электрофореграмме стандартного раствора Д:

- относительное стандартное отклонение времени миграции пика сульфоуксусной кислоты должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение площади пика сульфоуксусной кислоты должно быть не более 10,0 % (6 введений).

Содержание натрия хлорида в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика хлорид-иона на электрофореграмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика хлорид-иона на электрофореграмме стандартного раствора В;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска натрия хлорида, мг;
P - содержание основного вещества в натрия хлориде,%.

Содержание натрия сульфата в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика сульфат-иона на электрофореграмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика сульфат-иона на электрофореграмме стандартного раствора В;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска натрия сульфата, мг;
P - содержание основного вещества в натрия сульфате, %.

Содержание хлоруксусной кислоты в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика сульфат-иона на электрофореграмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика сульфат-иона на электрофореграмме стандартного раствора В;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска натрия сульфата, мг;
P - содержание основного вещества в натрия сульфате,%.

Содержание динатрия сульфоацетата в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика сульфоуксусной кислоты на электрофореграмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика сульфоуксусной кислоты на электрофореграмме стандартного раствора Д;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска сульфоуксусной кислоты, мг;
P - содержание основного вещества в сульфоуксусной кислоте,%;
184,08 - молекулярная масса динатрия сульфоацетата;
140,12 - молекулярная масса сульфоуксусной кислоты.

Допустимое содержание примесей:

- натрия сульфат – не более 0,15 %;

- натрия хлорид – не более 0,10 %;

- хлоруксусная кислота – не более 0,10 %;

- динатрия сульфоацетат – не более 0,10 %.

Не учитывают пик карбонат-иона.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции с использованием эталонного раствора 1.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,25 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде, добавляя при вспенивании 2–3 капли спирта 96 %, и доводят объём раствора водой до метки. К 10,0 мл полученного раствора прибавляют 40,0 мл смеси 2-пропанол—вода 10:30, 10,0 мл димидия бромида и сульфанового синего смешанного раствора, 1 мл октанола, 10,0 мл хлороформа и титруют 0,02 М раствором бензэтония хлорида. Титрант сначала добавляют по 1 мл, смешивая слои до исчезновения пены. Вблизи точки эквивалентности титрант добавляют по 0,05 мл до перехода розовой окраски хлороформного (нижнего) слоя в синюю.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,02 М раствор бензэтония хлорида соответствует 6,608 мг натрия лаурилсульфоацетата C14H27NaO5S.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0027 Натрия никотиноил-гамма-аминобутират

Никотиноил-гамма-аминомасляная кислота
Natrii nicotinoyl-gamma-aminobutyras

Взамен ФС.2.1.0027.15

##### Определение

4-(Пиридин-3-карбоксамидо)бутаноат натрия.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % натрия никотиноил-гамма-аминобутирата С10Н11N2NaO3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый кристаллический порошок; гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца натрия никотиноил-гамма-аминобутирата.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоте 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислотой 0,1 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 300 нм должен иметь максимум при 262 нм.

3. Качественная реакция. К 20 мг субстанции прибавляют 10 мг лимонной кислоты, 0,5 мл уксусного ангидрида и выдерживают на водяной бане в течение 2 мин; должно появиться интенсивное фиолетово-красное окрашивание.

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,25 г субстанции в 5 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании на «Прозрачность раствора», не должна превышать эталон Υ7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН. От 7,3 до 8,5 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Испытание проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—метанол—углерода тетрахлорид 8:14:60.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,2 г субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца никотиновой кислоты. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца никотиновой кислоты, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Срок годности раствора 1 мес.

Раствор стандартного образца гамма-аминомасляной кислоты. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца гамма-аминомасляной кислоты, растворяют в 5 мл воды и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки. Срок годности раствора 1 мес.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мл испытуемого раствора, прибавляют 20 мл раствора стандартного образца никотиновой кислоты и 20 мл раствора стандартного образца гамма-аминомасляной кислоты, и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

На линию старта пластинки наносят 5 мкл (100 мкг) испытуемого раствора, 2 мкл (0,4 мкг) раствора стандартного образца никотиновой кислоты, 1 мкл (0,1 мкг) раствора стандартного образца гамма-аминомасляной кислоты и 5 мкл раствора для проверки пригодности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей в течение 10 мин и просматривают в УФ-свете при 254 нм.

Зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора, находящаяся на уровне зоны адсорбции никотиновой кислоты, по величине не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца никотиновой кислоты (не более 0,4 %).

Затем пластинку опрыскивают нингидрина раствором 0,2 % в спирте 96 % и нагревают в течение 15 мин при температуре 110-120 °С.

Красно-фиолетовая зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора, находящаяся на уровне зоны адсорбции гамма-аминомасляной кислоты, не должна превышать по совокупности величины и интенсивности окраски зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца гамма-аминомасляной кислоты (не более 0,1 %).

Допускается жёлтая зона адсорбции (ион натрия), расположенная между основной зоной адсорбции, поглощающей в УФ-свете, и зоной адсорбции гамма-аминомасляной кислоты.

Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы чётко видны 2 зоны адсорбции, проявляющиеся при просматривании пластинки в УФ-свете, и одна зона адсорбции, проявляющаяся после опрыскивания пластинки 0,2 % раствором нингидрина в спирте 96 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 3,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 1,7 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Помещают 0,15 г (точная навеска) субстанции в коническую колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 20 мл уксусной кислоты безводной, прибавляют 1 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до зелёного окрашивания (индикатор – 0,3 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 11,51 мг натрия никотиноил-гамма-аминобутирата С10Н11N2NaO3.

##### Хранение

В хорошо укупоренной упаковке при температуре не выше 30 °С.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0518 Натрия пикосульфат моногидрат

Натрия пикосульфат
Natrii picosulfas monohydricus

Вводится впервые

##### Определение

[4,4′-(Пиридин-2-илметилен)дифенил]дисульфат динатрия моногидрат.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 100,5 % натрия пикосульфата C18H13NNa2O8S2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца натрия пикосульфата.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на натрий с образованием осадка белого цвета (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 50 мл воды, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном GY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. К 10 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора» прибавляют 1 каплю фенолфталеина раствора 0,1 %; раствор должен оставаться бесцветным. Для изменения окраски раствора на розовую должно потребоваться не более 0,25 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и хранят при температуре 15–25 °С не более суток.

Буферный раствор рН 7,5. Растворяют 2,3 г динатрия гидрофосфата дигидрата в 800 мл воды, прибавляют 0,2 г цетилтриметиламмония бромида, доводят значение pH раствором фосфорной кислоты концентрированной до 7,5, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 450:550.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца пикосульфата для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси А и В, в 1,0 мл ПФ.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А: 4-[(RS)-(4-гидроксифенил)(пиридин-2-ил)метил]фенил натрия сульфат [32500-19-9].

Примесь В: 4,4′-[(пиридин-2-ил)метилен]дифенол [603-41-8].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 263 нм; |  |
Объём пробы | 40 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика пикосульфата. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Натрия – 1 (около 7,4 мин), примесь В – около 0,5; примесь А – около 0,7.

Идентификация примесей. Для индентификации пиков примесей А и В используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси В и А должно быть не менее 4,0.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика натрия пикосульфата должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора сравнения:

- относительное стандартное отклонение площади пика натрия пикосульфата, должно быть не более 5%;

- фактор ассиметрии (As) пика натрия пикосульфата должен быть не более 2,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь А – 0,7; примесь В – 0,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A и B не должна юолее чем в 2 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика натрия пикосульфата на хроматограмме раствора стандартного образца натрия пикосульфата;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска стандартного образца натрия пикосульфата, мг;
P – содержание натрия пикосульфата в стандартном образце натрия пикосульфата,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. От 3,0 до 5,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,04 % (ОФС «Сульфаты», метод 2). Для определения используют 7,5 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», доведенного водой до 15,0 мл.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). Для определения используют 5 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», доведенного водой до 15,0 мл.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3А). Для определения используют 10 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора».

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,40 г (точная навеска) субстанции в 80 мл метанола и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 48,14 мг натрия пикосульфата C18H13NNa2O8S2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0519 Натрия фумарат (Natrii fumaras)

Взамен ВФС 42-3419-99

##### Определение

(2E)-Бут-2-ендиоат динатрия.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % натрия фумарата C4H2Na2O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца натрия фумарата.

2. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 10 мл воды, прибавляют 2 мл бромной воды, и нагревают на водяной бане; раствор должен обесцветиться.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 6,5 до 8,5 (2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—метанол—бензол 8:36:70.

Испытуемый раствор. Растворяют 0,4 г субстанции в 10 мл спирта 96 %, перемешивают в течение 5 мин и фильтруют.

Раствор стандартного образца фумаровой кислоты. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца фумаровой кислоты, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

На линию старта пластинки наносят 10 мкл испытуемого раствора (400 мкг), 10 мкл раствора стандартного образца фумаровой кислоты (2 мкг) и 5 мкл раствора стандартного образца фумаровой кислоты (1 мкг) Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца фумаровой кислоты, содержащего 1 мкг фумаровой кислоты, должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по совокупности величины и степени подавления флуоресценции не должна превышать зону адсорбции фумаровой кислоты на хроматограмме раствора стандартного образца фумаровой кислоты, содержащего 2 мкг фумаровой кислоты (не более 0,5 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2). Растворяют 1 г субстанции в 20 мл смеси хлористоводородной кислоты раствор 1 М—вода 1:4, перемешивают в течение 5 мин при нагревании до 30 °С, охлаждают до комнатной температуры и фильтруют.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,01 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 50 мг (точная навеска) субстанции при нагревании до 30 °С в 25 мл уксусной кислоты безводной, охлаждают до комнатной температуры и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до перехода окраски в зелёную (индикатор – 0,3 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 8,002 мг натрия фумарата C4H2Na2O4.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0520 Нафазолина нитрат

Нафазолин
Naphazolini nitras

Взамен ФС 42-2911-92

##### Определение

2-(Нафталин-1-илметил)-4,5-дигидро-1H-имидазола нитрат.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % нафазолина нитрата C14H14N2HNO3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в спирте 96 %, умеренно растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца нафазолина нитрата.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь максимумы при 270±2 нм, 280±2 нм, 287±2 нм и 291±2 нм. Отношение оптических плотностей А270/А280 и А291/А280 должны составлять от 0,82 до 0,86 и от 0,65 до 0,69 соответственно. В качестве раствора сравнения используют хлористоводородной кислоты раствор 0,01 М.

3. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 1 мл воды, прибавляют 0,5 мл свежеприготовленного натрия нитропруссида раствора 0,5 %, 0,5 мл натрия гидроксида раствора 1 М, перемешивают и выдерживают при комнатной температуре в течение 10 мин, прибавляют 2 мл натрия гидрокарбоната раствора 4,2 % и перемешивают; должно появиться фиолетовое окрашивание.

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на нитраты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 167 до 170 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Растворяют 0,5 г субстанции при нагревании в 50 мл воды. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 5,5 до 7,0 (1 % раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 1,1 г натрия октансульфоната в 1000 мл смеси уксусная кислота ледяная—ацетонитрил—вода 5:300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг примеси B, растворяют в ПФ, прибавляют 5,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А: N-(2-аминоэтил)-2-(нафталин-1-ил)ацетамид [36321-43-4].

Примесь B: (нафталин-1-ил)уксусная кислота [86-87-3].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 4 мкм, размер пор 6 нм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика нафазолина. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси А, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Нафазолин – 1 (около 14 мин); примесь А – около 0,76; примесь В – около 1,27.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора стандартного образца примеси А. Для идентификации пика примеси В используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками нафазолина и примеси В должно быть не менее 5,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площади пика примеси А на хроматограмме раствора стандартного образца примеси А (не более 0,5 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика нафазолина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика нафазолина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,25 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %), и пики нитрат-иона.

Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты»). Растворяют 1 г субстанции в 20 мл воды. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,2 г субстанции в 20 мл воды. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 30 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 27,33 мг нафазолина нитрата C14H14N2HNO3.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0521 Нафтифина гидрохлорид

Нафтифин
Naftifini hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

(2E)-N-Метил-N-[(нафталин-1-ил)метил]-3-фенилпроп-2-ен-1-амина гидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % нафтифина гидрохлорида C21H21N·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим или растворим в метаноле, растворим или умеренно растворим в спирте 96 %, мало растворим в ацетоне и воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца нафтифина гидрохлорида.

2. ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика нафтифина на хроматограмме раствора стандартного образца нафтифина гидрохлорида (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 175 до 179 °С (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота—диметилформамид—этанол—гексан 6:120:180:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, прибавляют 70 мл ПФ, перемешивают в течение 1 ч и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца нафтифина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г фармакопейного стандартного образца нафтифина гидрохлорида, прибавляют 70 мл ПФ, перемешивают в течение 1 ч и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца нафтифина гидрохлорида и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг коричного альдегида, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора раствором сравнения до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 270 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика нафтифина. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Нафтифин – 1 (около 10 мин); коричный альдегид – около 0,4.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика нафтифина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками коричного альдегида и нафтифина должно быть не менее 5,0;

- фактор асимметрии пика (AS) нафтифина должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика нафтифина должно быть не более 3,0 %.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика нафтифина на хроматограмме раствора сравнения;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца нафтифина гидрохлорида, мг;
P – содержание нафтифина в фармакопейном стандартном образце нафтифина гидрохлорида,%.

Допустимое содержание примесей:

- любая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 70 мл ПФ, перемешивают в течение 1 ч и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца нафтифина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца нафтифина гидрохлорида, прибавляют 70 мл ПФ, перемешивают в течение 1 ч и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца нафтифина гидрохлорида и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца нафтифина гидрохлорида:

- фактор асимметрии пика (AS) нафтифина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика нафтифина должно быть не более 2,0 %.

Содержание нафтифина гидрохлорида C21H21N·HCl в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика нафтифина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика нафтифина на хроматограмме раствора стандартного образца нафтифина гидрохлорида;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца нафтифина гидрохлорида, мг; P – содержание нафтифина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце нафтифина гидрохлорида,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0522 Невирапин (Nevirapinum)

Вводится впервые

##### Определение

4-Метил-11-циклопропил-5,11-дигидро-6H-дипиридо[3,2-b:3',2'-e][1,4]диазепин-6-он.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % невирапина C15H14N4O в пересчёте на безводное и свободное от остаточных растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим или мало растворим в метиленхлориде, мало растворим в спирте 96 % и метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца невирапина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика невирапина на хроматограмме раствора стандартного образца невирапина (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 2,88 г аммония дигидрофосфата в 900 мл воды, доводят значение pH натрия гидроксида раствором 1 М до 5,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 24 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 4 мл ацетонитрила и прибавляют 80 мл ПФ, обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца невирапина А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 24 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца невирапина, растворяют в 3 мл ацетонитрила и прибаляют 60 мл ПФ, обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца невирапина Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл раствора стандартного образца невирапина (А) и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси A. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 12 мг стандартного образца примеси A, растворяют в 10 мл ацетонитрила и прибавляют 25 мл ПФ, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси B. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 3 мг стандартного образца примеси B, растворяют в 10 мл ацетонитрила и прибавляют 25 мл ПФ, обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 3 мл раствора стандартного образца невирапина А, 3 мл раствора стандартного образца примеси A, 6 мл раствора стандартного образца примеси B и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,5 мл раствора стандартного образца невирапина (Б) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечания

Примесь A:
4-метил-11-этил-5,11-дигидро-6H-дипиридо[3,2-b:3',2'-e][1,4]диазепин-6-он
[133627-17-5].

Примесь B:
4-метил-5,11-дигидро-6H-дипиридо[3,2-b:3',2'-e][1,4]диазепин-6-он
[287980-84-1].

Примесь C:
4-метил-11-пропил-5,11-дигидро-6H-дипиридо[3,2-b:3',2'-e][1,4]диазепин-6-он
[287980-85-2].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель алкиламидный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 10-кратное от времени удерживания пика невирапина. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца невирапина (Б) и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Невирапин – 1 (около 7,5 мин); примесь B – около 0,7; примесь A – около 1,5; примесь C – около 2,8.

Идентификация примесей. Для индентификации пиков примесей А и В используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Для индентификации пика примеси С используют относительное время удерживания соединений.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика невирапина должно быть не менее 10.

На хроматограмме для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси B и невирапина должно быть не менее 4,0;

- разрешение (RS) между пиками невирапина и примеси A должно быть не менее 6,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца невирапина (Б):

- фактор асимметрии пика (AS) невирапина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика невирапина должно быть не более 5,0 %.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси B умножают на 0,77.

Содержание каждой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика невирапина на хроматограмме раствора стандартного образца невирапина (Б);
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца невирапина, мг;
P - содержание невирапина в фармакопейном стандартном образце невирапина,%.

Допустимое содержание примесей:

- примеси А, В и С – не более 0,2 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,6 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,015 %).

Вода. Не более 0,2 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 24 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 4 мл ацетонитрила и прибавляют 80 мл ПФ, обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 3,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца невирапина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 3,0 мл раствора стандартного образца невирапина (А) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца невирапина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца невирапина относительное стандартное отклонение площади пика невирапина должно быть не более 2,0 %.

Содержание невирапина C15H14N4O в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика невирапина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика невирапина на хроматограмме раствора стандартного образца невирапина;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца невирапина, мг;
P - содержание невирапина в фармакопейном стандартном образце невирапина,%;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте, в герметично укупоренной упаковке.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0678 Неомицина сульфат

Неомицин
Neomycini sulfas

Взамен ФС 42-1946-89

C23H46N6O13 x H2SO4 [1405-10-3] | М.м. 614,64 (основание)

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Субстанция представляет собой смесь сульфатов аминогликозидов, основным компонентом является сульфат 4-O-(2,6-диамино-2,6-дидезокси-α-D-глюкопиранозил)-5-O-[3-O-(2,6-диамино-2,6-дидезокси-β-L-идопиранозил)-β-D-рибофуранозил]-2-дезокси-D-стрептамина (неомицин B).

Активность неомицина сульфата C23H46N6O13xH2SO4 должна быть не менее 680 МЕ/мг в пересчёте на сухое вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или желтовато-белый порошок без запаха или со слабым характерным запахом.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96%, практически нерастворим в ацетоне.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика неомицина В на хроматограмме раствора стандартного образца неомицина сульфата (раздел «Родственные примеси»).

2. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля 60.

- Подвижная фаза (ПФ). Метанол—натрия хлорида раствор 20% 20:80.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

- Раствор стандартного образца неомицина сульфата. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца неомицина сульфата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

- Реактив для детектирования. Нингидрина раствор 1% в спирте.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца неомицина сульфата. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 10 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90% длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С в течение 10 мин, опрыскивают реактивом для детектирования, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 110 °С в течение 15 мин и просматривают в видимом свете.

- Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции неомицина В на хроматограмме раствора стандартного образца неомицина сульфата.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От +53,5 до +59,0 в пересчёте на сухое вещество (10% раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

pH раствора. От 5,0 до 7,5 (1% раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 500 мл воды, 20 мл трифторуксусной кислоты, 6,0 мл натрия гидроксида раствора насыщенного, свободного от карбонатов, выдерживают при комнатной температуре, доводят объём раствора водой до метки и дегазируют.

Постколоночный раствор. Натрия гидроксида раствор насыщенный, свободный от карбонатов—ПФ 1:25. Постколоночный раствор прибавляют без импульсов к жидкости, выходящей из колонки, при помощи полимерной смесительной петли вместимостью 375 мкл.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца неомицина сульфата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца неомицина сульфата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают содержимое флакона с фармакопейным стандартным образцом неамина (соответствует 0,5 мг неамина (примесь А)), растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца фрамицетина сульфата. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 12,5 мг фармакопейного стандартного образца фрамицетина сульфата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца фрамицетина сульфата и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А (неамин или неомицин А-LP): 4-O-(2,6-диамино-2,6-дидезокси-α-D-глюкопиранозил)-2-дезокси-D-стрептамин [3947-65-7].

Примесь С (неомицин С): 4-O-(2,6-диамино-2,6-дидезокси-α-D-глюкопиранозил)-5-O-[3-O-(2,6-диамино-2,6-дидезокси-α-D-глюкопирано-зил)-β-D-рибофуранозил]-2-дезокси-D-стрептамин [66-86-4].

Примесь G (неомицин В-LP): 3-N-ацетил-4-O-(2,6-диамино-2,6-дидезокси-α-D-глюкопиранозил)-5-O-[3-O-(2,6-диамино-2,6-дидезокси-β-L-идопиранозил)-β-D-рибофуранозил]-2-дезокси-D-стрептамин.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки | 25 °С;
Скорость потока ПФ | 0,7 мл/мин;
Скорость потока постколоночного раствора | 0,5 мл/мин;
Детектор | пульс-амперометрический с золотым рабочим электродом, хлорсеребряным электродом сравнения и вспомогательным стальным электродом из нержавеющей стали, который является камерой ячейки, поддерживаемой при потенциалах 0,00 В детектирования, +0,80 В окисления и –0,60 В восстановления, соответственно, с длительностью пульсации, соответствующей используемому аппарату;
Объём пробы | 10 мкл;
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика неомицина В.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца неомицина сульфата, раствор стандартного образца фрамицетина сульфата, раствор стандартного образца примеси А и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Неомицин В – 1 (около 10 мин); примесь А – около 0,65; примесь С – около 0,9; примесь G – около 1,1.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика фрамицетина должно быть не менее 10,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца неомицина сульфата разрешение (RS) между пиками примеси С и неомицина В должно быть не менее 2,0. При необходимости корректируют объём натрия гидроксида раствора насыщенного, свободного от карбонатов, в составе ПФ.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика примеси А на хроматограмме раствора стандартного образца примеси А (не более 2,0%);

- площадь пика примеси С должна превышать 0,6 площади пика фрамицетина и не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика фрамицетина на хроматограмме раствора стандартного образца фрамицетина сульфата (не менее 3,0% и не более 15,0%);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика фрамицетина на хроматограмме раствора стандартного образца фрамицетина сульфата (не более 5,0%);

- сумма площадей пиков всех примесей (кроме А и С) не должна превышать трёхкратную площадь пика фрамицетина на хроматограмме раствора стандартного образца фрамицетина сульфата (не более 15,0%).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 1,0%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 8,0% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 60 °С и остаточном давлении не более 0,7 кПа.

Сульфаты. От 27,0% до 31,0% в пересчёте на сухое вещество. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 100 мл воды и доводят рН аммиака раствором концентрированным 25% до 11,0. К полученному раствору прибавляют 10 мл 0,1 М раствора бария хлорида и 0,5 мг фталеинового пурпурного. Избыток 0,1 М раствора бария хлорида титруют 0,1 М раствором натрия эдетата до начала изменения окраски, прибавляют 50 мл спирта 96% и продолжают титрование до исчезновения фиолетово-голубой окраски.

1 мл 0,1 М раствора бария хлорида соответствует 9,606 мг сульфат-ионов SO42-.

Сульфатная зола. Не более 1,0% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят микробиологическим методом в соответствии с ОФС «Определение антимикробной активности антибиотиков методом диффузии в агар» с использованием фармакопейного стандартного образца неомицина сульфата для количественного микробиологического анализа.

##### ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0679 Неостигмина метилсульфат

Неостигмина метилсульфат
Neostigmini metilsulfas

Взамен ФС 42-2503-87

C13H22N2O6S [51-60-5] | М.м. 334,39

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

3-[(Диметилкарбамоил)окси]-N,N,N-триметиланилиний метилсульфат.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % неостигмина метилсульфата C13H22N2O6S в пересчёте на сухое вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96 % и хлороформе.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца неостигмина метилсульфата.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в серной кислоты растворе 0,5 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь максимумы при 261 нм и 267 нм. Отношение значений оптической плотности A267/A261 должно составлять от 0,84 до 0,87.

- Разрешающая способность для отношения оптических плотностей не менее 1,9.

3. Качественная реакция. К 50 мг субстанции прибавляют 0,4 г калия гидроксида и 2 мл спирта 96 %, нагревают на водяной бане в течение 3 мин, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 2 мл воды и 2 мл диазореактива; должно появиться оранжево-красное окрашивание.

4. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 5 мл воды и прибавляют 1 мл бария хлорида раствора 6,1 %; не должен выпадать осадок. Прибавляют 2 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и нагревают на водяной бане в течение 10 мин; должен образоваться белый микрокристаллический осадок.

##### ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 144 до 149 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 1,25 г субстанции в 25 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Светопоглощающие примеси. Оптическая плотность 0,5 % раствора субстанции в смеси натрия карбоната раствор 10 %—вода 1:9, измеренная при длине волны 294 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать 0,20 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

рН раствора. От 5,5 до 7,0 (2,0 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 3,6 г натрия дигидрофосфата дигидрата в 900 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,2. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 4,3 г натрия лаурилсульфата в 710 мл буферного раствора и прибавляют 290 мл ацетонитрила.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор 3-диметиламинофенола. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 4 мг 3-диметиламинофенола (примесь В), растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют содержимое флакона с фармакопейным стандартным образцом примеси А в 1,0 мл раствора 3-диметиламинофенола.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. Смешивают 1,0 мл ПФ и 1,0 мл раствора сравнения.

Примечание

Примесь A: 3-гидрокси-N,N,N-триметиланилиний.

Примесь В: 3-(диметиламино)фенол [99-07-0].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки | 30 °C;
Скорость потока | 1,6 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм;
Объём пробы | 50 мкл;
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика неостигмина.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Неостигмин – 1 (около 20 мин); примесь В – около 0,56; примесь A – около 0,61.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А и В используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика неостигмина должно быть не менее 25.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси В и примеси А должно быть не менее 1,5.

Поправочный коэффициент. Для расчёта содержания площадь пика примеси В умножают на 0,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси В не должна превышать 0,1 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,01 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики (за исключением пика примеси В), площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,025 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Растворяют 0,6 г субстанции в 15 мл воды. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Для определения 5 мл раствора, полученного в испытании «Сульфаты», разбавляют водой до 10 мл.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 58 ЕЭ на 1 мг неостигмина метилсульфата (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В колбу Кьельдаля помещают 0,5 г (точная навеска) растёртой субстанции и растворяют в 325 мл воды. Колбу присоединяют к прибору для определения азота, из делительной воронки медленно прибавляют 15 мл натрия гидроксида раствора 40 % и отгоняют аммиак в приёмник, в который предварительно помещают 15 мл борной кислоты раствора 4 % и 0,3 мл смешанного индикатора раствора. Отгонку ведут до получения около 200 мл раствора. Полученный раствор титруют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 33,44 мг неостигмина метилсульфата C13H22N2O6S.

##### ХРАНЕНИЕ

В сухом, защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0142 Никетамид (Nicethamidum)

Взамен ФС.2.1.0142.18

##### Определение

N,N-Диэтилпиридин-3-карбоксамид.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % никетамида C10H14N2O в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Бесцветная или слегка желтоватая маслянистая жидкость или кристаллическая масса со слабым своеобразным запахом.

Растворимость. Смешивается с водой, спиртом 96 % и хлороформом во всех соотношениях.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в виде жидкой плёнки, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца никетамида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,15 г субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоте 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём хлористоводородной кислотой 0,01 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм (в кювете толщиной 2 см) должен иметь только один максимум при 263 нм с удельным показателем поглощения около 285.

3. Качественная реакция. При кипячении 0,1 мл субстанции с 3 мл натрия гидроксида раствора 10 % должен выделяться диэтиламин, который обнаруживается по характерному запаху и изменению окраски красной лакмусовой бумаги на синюю.

4. Качественная реакция. К 5 мл 10 % раствора субстанции прибавляют 5 мл меди(II) сульфата раствора 5 %; должно появиться синее окрашивание; после прибавления 3 мл аммония тиоцианата раствора 5 % должен образоваться ярко-зелёный осадок.

##### Испытания

Температура затвердевания. От 20 до 25 °С (ОФС «Температура затвердевания»).

Плотность. От 1,058 до 1,066 г/см3 (ОФС «Плотность», метод 2) При необходимости субстанцию предварительно расплавляют при 42,5±2,5 °С.

Показатель преломления. От 1,524 до 1,526 (ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)»). При необходимости субстанцию предварительно расплавляют при 42,5±2,5 °С.

Прозрачность раствора. Раствор 5 г субстанции в 20 мл воды, свободной от углерода диоксида должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH. От 6,0 до 7,8 (25 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля GF254.

Подвижная фаза (ПФ). Пропанол—хлороформ 25:75.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,4 г (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца N-этилникотинамида А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг фармакопейного стандартного образца N-этилникотинамида [4314-66-3], растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца N-этилникотинамида Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца N-этилникотинамида А и доводят объём раствора метанолом до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл (400 мкг) испытуемого раствора, раствора стандартного образца N-этилникотинамида А (4 мкг) и раствора стандартного образца N-этилникотинамида Б (0,4 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при 254 нм.

Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме раствора стандартного образца N-этилникотинамида Б чётко видна зона адсорбции основного вещества.

На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции N-этилникотинамида по совокупности величины и интенсивности подавления флуоресценции не должна превышать соответствующую зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца N-этилникотинамида А (не более 1,0 %). Любая зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора, за исключением зон адсорбции основного вещества и N-этилникотинамида, по совокупности величины и интенсивности поглощения не должна превышать зону адсорбции основного вещества на хроматограмме раствора стандартного образца N-этилникотинамида Б (не более 0,1 %).

Зону адсорбции на линии старта при оценке не учитывают.

Вода. Не более 0,3 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 2,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,28 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Помещают 0,15 г (точная навеска) субстанции в колбу, растворяют в смеси 5 мл уксусного ангидрида и 20 мл уксусной кислоты безводной. Титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с индикатором (кристаллического фиолетового раствор 0,1 %) до перехода окраски в сине-зелёную.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 17,82 мг никетамида C10H14N2O.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0523 Никорандил (Nicorandilum)

Вводится впервые

##### Определение

{2-[(Пиридин-3-ил-карбонил)амино]этил}нитрат.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % никорандила C8H9N3O4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в безводном этаноле, умеренно растворим в воде, практически нерастворим в гептане.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца никорандила.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 16 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 300 нм должен иметь максимум при 262 нм. В качестве раствора сравнения используют хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М.

3. Качественная реакция. Растворяют 20 мг субстанции в 1 мл дифениламина; должно появиться синее окрашивание.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном В7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH. От 5,5 до 7,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Трифторуксусная кислота-триэтиламин-тетрагидрофуран-вода 3:5:10:982.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2 мг стандартного образца примеси А, прибавляют 15 мл ПФ, обрабатывают ультразвуком, охлаждают до температуры 15–25 °С и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора испытуемым раствором до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А: 2-[(пиридин-4-ил-карбонил)амино]этил нитрат [65141-47-1].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, совместимый с водной подвижной фазой, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика никорандила. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Никорандил – 1 (около 19 мин); примесь А – около 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделитальной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и никорандила должно быть не менее 2,5;

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика никорандила должно быть не менее 10;

- фактор асимметрии пика (AS) никорандила должен быть не более 1,5;

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика никорандила на хроматограмме раствора сравнения.

Допустимое содержание примесей:

- любая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,2 %.

Не учитывают пики менее 0,05 %.

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,01 % (ОФС «Сульфаты», метод 1).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 г субстанции, растворяют в 30 мл спирта 50 %, прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % и доводят объём раствора водой до метки.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 21,12 мг никорандила C8H9N3O4.

##### Хранение

В защищённом от света месте при температуре от 2 до 8 °С.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0143 Никотинамид (Nicotinamidum)

Взамен ФС.2.1.0143.18

##### Определение

Пиридин-3-карбоксамид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % С6H6N2O в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Легко растворим в воде и этаноле, растворим в глицерине, мало растворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца никотинамида.

2. Качественная реакция. Кипятят 0,1 г субстанции с 1 мл натрия гидроксида раствора 2 М; должен появиться характерный запах аммиака.

##### Испытания

Температура плавления. От 128 до 131 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 50 мл воды, свободной от углерода диоксида должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», должна выдерживать сравнение с эталоном ВY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН. От 6,0 до 7,5 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Уксусная кислота разведённая 12 %—ацетонитрил—аммиака раствор разведённый 0,18 %—вода 5:15:30:950.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—ПФА 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 150 мл помещают 0,15 г субстанции, растворяют в 100 мл ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси D (пиридин-4-карбоксамид [1453-82-3]), растворяют в 50 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора испытуемым раствором до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФА до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 264 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2 | 98 | 2
2–16 | 98 → 0 | 2 → 100

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Никотинамид – 1 (около 7 мин); примесь D – около 0,9.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика никотинамида должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (Rs) между пиками примеси D и никотинамидом должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) никотинамида должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика никотинамида должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой единичной примеси не должна превышать площадь пика никотинамида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двухкратную площадь пика никотинамида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 2). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме в течение 18 ч при комнатной температуре и остаточном давлении не более 20 мм рт.ст.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 3,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 12,21 мг никотинамида С6H6N2O.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0524 Нилотиниба гидрохлорид моногидрат

Нилотиниб
Nilotinibi hydrochloridum monohydricus

Вводится впервые

##### Определение

4-Метил-N-[3-(4-метил-1H-имидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-{[4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил]амино}бензамида гидрохлорид (1:1) моногидрат.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % нилотиниба гидрохлорида C28H22F3N7O·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или желтоватый, или зеленовато-жёлтый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен. Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в диметилсульфоксиде, мало растворим или умеренно растворим в этаноле, очень мало растворим или практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом в области от 4000 до 400 см–1, или методом нарушенного полного внутреннего отражения в области от 4000 до 650 см–1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца нилотиниба гидрохлорида моногидрата.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах этанола, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика нилотиниба на хроматограмме раствора стандартного образца нилотиниба гидрохлорида моногидрата (раздел «Количественное определение»).

3. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,05 г (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 400 нм должен иметь максимум при 260 нм.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл диметилсульфоксида должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталонами Y3, GY3 или BY3 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 1).

Родственные примеси

1. Примесь А. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Буферный раствор. Растворяют 1,36 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 3,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор—ацетонитрил 200:800.

Растворитель. Диметилсульфоксид—вода 20:80.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,3 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 2 мл диметилсульфоксида, прибавляют 7 мл воды, охлаждают до комнатной температуры, не перемешивая, и доводят объём раствора водой до метки. Полученный раствор перемешивают, выдерживают в защищённом от света месте в течение 2 ч и фильтруют.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 9 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в диметилсульфоксиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора диметилсульфоксидом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь А: 3-(4-метил-1H-имидазол-1-ил)-5-(трифторметил)анилин [641571-11-1].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,0 мм, силикагель октадецилсилильный, совместимый с водной подвижной фазой, эндкепированный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 207 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2 | 85 | 15
2–8 | 85 → 80 | 15 → 20
8–10 | 80 → 75 | 20 → 25
10–16 | 75 → 10 | 25 → 90
16–17 | 10 | 90
17–17,1 | 10 → 85 | 90 → 15
17,1–20 | 85 | 15

Хроматографируют раствор стандартного образца примеси А и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Нилотиниб – 1 (около 15,5 мин); примесь A – около 0,4.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора стандартного образца примеси А.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца примеси А отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси А должно быть не менее 10.

Содержание примеси А в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси А на хроматограмме испытуемого раствора;
S~0 - площадь пика примеси А на хроматограмме раствора стандартного образца примеси А;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца примеси А, мг;
P - содержание примеси А в фармакопейном стандартном образце примеси А,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь А – не более 0,0003 %.

2. Примеси В и С. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») в условиях испытания «Родственные примеси. Примесь А» со следующими изменениями.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 6 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси В и 6 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси С, растворяют в диметилсульфоксиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора диметилсульфоксидом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь В: метил(3-амино-4-метилбензоат) [18595-18-1].

Примесь С: 3-амино-4-метилбензойная кислота [2458-12-0].

Хроматографические условия

- Детектор спектрофотометрический, 225 нм.

Хроматографируют стандартный и испытуемый растворы.

Относительное время удерживания соединений. Нилотиниб – 1 (около 15,5 мин); примесь С – около 0,2; примесь В – около 0,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей В и С используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора отношение сигнал/шум (S/N) для пика каждой из примесей B и C должно быть не менее 10.

Содержание каждой из примесей В и С в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси В или примеси С на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика примеси В или примеси С на хроматограмме стандартного раствора, соответственно;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца примеси В или фармакопейного стандартного образца примеси С, соответственно, мг;
P - содержание примеси В в стандартном образце примеси В, или содержание примеси С в стандартном образце примеси С, соответственно,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь В – не более 0,0002 %;

- примесь С – не более 0,0002 %.

3. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Буферный раствор. Растворяют 1,36 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды, доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 3,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор—ацетонитрил 200:800.

Растворитель. Этанол—вода 50:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца нилотиниба гидрохлорида моногидрата А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца нилотиниба гидрохлорида моногидрата, растворяют в растворителе и доводят объём раствора этим же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца нилотиниба гидрохлорида моногидрата Б. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца нилотиниба гидрохлорида моногидрата А и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца нилотиниба гидрохлорид моногидрата для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси Е, F и G, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца нилотиниба гидрохлорида моногидрата (Б) и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь D:
4-метил-3-{[4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил]амино}бензойная кислота [641569-94-0].

Примесь E:
4-метил-N-[3-(1H-имидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-{[4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил]амино}бензамид
[2119583-26-3].

Примесь F:
4-метил-N-[5-(трифторметил)-3-(5-этил-1H-имидазол-1-ил)фенил]-3-{[4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил]амино}бензамид
[2119583-24-1].

Примесь G:
метил(4-метил-3-{[4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил]амино}бензоат) [917392-54-2].

Примесь H:
4-метил-N-[3-(5-метил-1H-имидазол-1-ил)-5-(трифторметил)фенил]-3-{[4-(пиридин-3-ил)пиримидин-2-ил]амино}бензамид
[641571-15-5].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,0 мм, силикагель октадецилсилильный, совместимый с водной подвижной фазой, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 240 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–14 | 90 → 10 | 10 → 90
14–15 | 10 | 90
15–15,1 | 10 → 90 | 90 → 10
15,1–18 | 90 | 10

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца нилотиниба гидрохлорида моногидрата Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Нилотиниб – 1 (около 15,5 мин); примесь D – около 0,82; примесь Н – около 0,96; примесь Е – около 1,03; примесь F – около 1,08; примесь G – около 1,10.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей Е, F и G используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Для идентификации пиков примесей D и H используют относительное время удерживания соединений

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика нилотиниба должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси F и примеси G должно быть не менее 1,5;

- разрешение (RS) между пиками нилотиниба и примеси Е должно быть не менее 1,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примеси D и G – 0,73; примесь Е – 0,96; примесь Н – 1,15.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика нилотиниба на хроматограмме раствора стандартного образца нилотиниба гидрохлорида моногидрата (Б);
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца нилотиниба гидрохлорида моногидрата, мг.

Допустимое содержание примесей:

- примесь F – не более 0,2 %;

- примесь D – не более 0,1 %;

- примесь G – не более 0,1 %;

- любая другая примесь – не более 0,08 %;

- сумма неидентифицированных примесей – не более 0,15;

- сумма примесей – не более 0,4 %.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

Вода. От 3,0 % до 5,0 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции и, в качестве растворителя, 5 мл метанола.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции и платиновый тигель.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ одновременно с испытанием «Родственные примеси».

Хроматографируют раствор стандартного образца нилотиниба гидрохлорида моногидрата А и испытуемый раствор.

Содержание нилотиниба гидрохлорида C28H22F3N7O·HCl в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика нилотиниба на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика нилотиниба на хроматограмме раствора стандартного образца нилотиниба гидрохлорида моногидрата (А);
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца нилотиниба гидрохлорида моногидрата, мг;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание нилотиниба гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце нилотиниба гидрохлорида моногидрата,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0145 Нимесулид (Nimesulidum)

Взамен ФС.2.1.0145.18

##### Определение

N-(4-Нитро-2-феноксифенил)метансульфонамид.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % нимесулида C13H12N2O5S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Светло-жёлтый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в ацетоне, мало растворим в этаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца нимесулида.

Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец растворяют в минимальном объёме ацетона, упаривают досуха и регистрируют спектры сухих остатков.

##### Испытания

Температура плавления. От 147 до 151 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Оптическая плотность. Оптическая плотность 10 % раствора субстанции в ацетоне, измеренная при длине волны 450 нм в кювете с толщиной слоя 1 см (по сравнению с ацетоном), не должна превышать 0,5 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Буферный раствор. Растворяют 1,15 г аммония дигидрофосфата в 600 мл воды и доводят значение pH аммиака раствором до 7,0; количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 35:65.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 8 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мг 2-феноксианилина (примесь C), растворяют в 10 мл ацетонитрила и доводят водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят ПФ до метки. Прибавляют 1,0 мл полученного раствора к содержимому флакона со стандартным образцом примеси D, предварительно растворённом в 1,0 мл ацетонитрила.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора и доводят ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят ПФ до метки.

Раствор сравнения В. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4 мг фармакопейного стандартного образца нимесулида для идентификации пиков (содержащего примеси А, B, E и F), растворяют в 4,0 мл ацетонитрила и доводят ПФ до метки.

Примечание

Примесь A: N-(2,4-динитро-6-феноксифенил)метансульфонамид [51765-56-1].

Примесь В: N-(2-феноксифенил)метансульфонамид [51765-51-6].

Примесь С: 2-феноксианилин [2688-84-8].

Примесь D: 4-нитро-2-феноксианилин [5422-92-4].

Примесь E: N-метансульфонил-N-(2-феноксифенил)метансульфонамид [905858-63-1].

Примесь F: N-метансульфонил-N-(2-нитро-2-феноксифенил)метансульфонамид [51765-72-1].

Хроматографические условия

Колонка | 125 × 4 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,3 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 7-кратное от времени удерживания пика нимесулида. |

Хроматографируют раствор сравнения А, раствор сравнения Б, раствор сравнения В и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Нимесулид – 1 (около 5 мин); примесь A – около 0,3; примесь B – около 2,4; примесь C – около 3,2; примесь D – около 3,7; примесь E – около 4,2; примесь F – около 6,1.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь C – 0,7; примесь E – 1,4.

Идентификация примесей. Используют хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу нимесулида для идентификации пиков и хроматограмму раствора сравнения В для идентификации пиков примесей А, B, E и F; хроматограмму раствора сравнения А используют для идентификации пиков примесей C и D.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения А разрешение (Rs) между пиками примесей C и D не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси E не должна более чем в 2 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,2 %);

- площадь каждого пика примесей A, B, C, D, F не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,15 %);

- площадь каждого пика неидентифицированных примесей не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,1 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна более чем в 5 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 0,5 г субстанции (ОФС «Сульфатная зола»), с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,24 г (точная навеска) субстанции в 30 мл ацетона и прибавляют 20 мл воды. Титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида.

Конечную точку титрования определяют потенциометрически.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 30,83 мг нимесулида C13H12N2O5S.

##### Хранение

Не требует особых условий.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0525 Нимодипин (Nimodipinum)

Вводится впервые

##### Определение

3-(2-Метоксиэтил)-5-(пропан-2-ил)[(4RS)-2,6-диметил-4-(3-нитрофенил)-1,4-дигидропиридин-3,5-дикарбоксилат].

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % нимодипина C21H26N2O7 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Светло-жёлтый или жёлтый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в этилацетате, умеренно растворим в этаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца нимодипина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика нимодипина на хроматограмме раствора стандартного образца нимодипина (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Температура плавления. От 123 до 126 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Угол вращения. От –0,10° до +0,10° (5 % раствор субстанции в ацетоне, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор, полученный в испытании «Угол вращения», должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Подвижная фаза (ПФ). Тетрагидрофуран—ацетонитрил—вода 200:200:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл тетрагидрофурана и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в 2,5 мл тетрагидрофурана и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца нимодипина, растворяют в 5 мл тетрагидрофурана, прибавляют 0,6 мл раствора стандартного образца примеси А и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А:
(3-(2-Метоксиэтил)-5-(пропан-2-ил)[2,6-диметил-4-(3-нитрофенил)пиридин-3,5-дикарбоксилат [85677-93-6]).

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель додецилсилильный для хроматографии, 4 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 235 нм; |  |
Объём пробы | 60 мкл; |  |
Время хроматографирования | 45 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Нимодипин – 1 (около 18 мин); примесь А – около 0,85.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика нимодипина должно быть не менее 10,0.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и нимодипина должно быть менее 2,5.

На хроматограмме раствора сравнения фактор асимметрии пика (AS) нимодипина должен быть не более 2,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика нимодипина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика нимодипина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика нимодипина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых меньше площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают до постоянной массы 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 100–105 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Бактериальные эндотоксины. Не более 25 ЕЭ на 1 мг нимодипина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции в этаноле 95 % c концентрацией нимодипина 1 мг/мл, а затем разводят его не менее чем в 100 раз.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—вода 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл тетрагидрофурана и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца нимодипина. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 50 мг (точная навеска) стандартного образца нимодипина, растворяют в 5 мл тетрагидрофурана и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 235 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 10 мин. |  |

Хроматографируют раствор стандартного образца нимодипина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца нимодипина фактор асимметрии пика (AS) нимодипина должен быть не более 2,5.

Содержание нимодипина C21H26N2O7 в субстанции в пересчёте на сухое вещество (X) в процентах вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика нимодипина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика нимодипина на хроматограмме раствора стандартного образца нимодипина;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска стандартного образца нимодипина, мг;
Р – содержание нимодипина в стандартном образце нимодипина,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В герметично укупоренном упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0526 Нистатин (Nystatinum)

Взамен ФС 42-1140-98

##### Определение

Полиеновый антибиотик, продуцируемый актиномицетом Streptomyces noursei. (1S,3R,4R,7R,9R,11R,15S,16R,17R,18S,19E,21E,25E,27E,29E,31E,33R,35S,36R,37S)-33-[(3-Амино-3,6-дидезокси-β-D-маннопиранозил)окси]-1,3,4,7,9,11,17,37-октагидрокси-15,16,18-триметил-13-оксо-14,39-диоксабицикло[33.3.1]нонатриаконта-19,21,25,27,29,31-гексаен-36-карбоновая кислота (основной компонент – нистатин A1).

Cодержит не менее 4400 единиц действия (ЕД) на один миллиграмм нистатина C47H75NO17 в пересчёте на сухое вещество. Одна ЕД соответствует одной единице действия Международного стандарта нистатина.

##### Свойства

Описание. Жёлтого или жёлто-коричневого цвета порошок.

* Гигроскопичен. Неустойчив к воздействию света, кислороду воздуха и нагреванию.

Растворимость. Легко растворим в диметилформамиде и диметилсульфоксиде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца нистатина.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Спектр поглощения испытуемого раствора, полученного в разделе «Оптическая плотность», в области длин волн от 220 до 350 нм (в кювете с толщиной слоя 1 см) должен иметь максимумы при 230 нм, 291 нм, 304 нм и 319 нм. Отношение оптических плотностей раствора в максимумах при 291 нм и 319 нм к оптической плотности в максимуме при 305 нм должно быть от 0,61 до 0,73 и от 0,83 до 0,96, соответственно.

- Отношение оптической плотности в максимуме при 230 нм к оптической плотности на плече при 280 нм должно быть от 0,83 до 1,25.

3. Качественная реакция с хлористоводородной кислотой концентрированной. К 2,0 мг субстанции прибавляют 0,1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, должно появиться коричневое окрашивание.

4. Качественная реакция с серной кислотой концентрированной. К 2,0 мг субстанции прибавляют 0,1 мл серной кислоты концентрированной, должно появиться коричневое окрашивание. При отстаивании окраска должна измениться на фиолетовую.

##### Испытания

Оптическая плотность. Оптическая плотность испытуемого раствора, измеренная при длине волны 305 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, относительно раствора сравнения, должна быть не менее 0,60 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора метанолом до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. Измерение проводят в течение не более 30 мин после приготовления.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл растворителя и доводят объём раствора метанолом до метки.

Содержание компонентов А1 и АХ нистатина. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Буферный раствор. К 1500 мл воды прибавляют 5,78 г аммония ацетата, фильтруют через мембранный фильтр и дегазируют ультразвуком.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—Буферный раствор 290:710.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор—ацетонитрил 400:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции и доводят объём раствора диметилсульфоксидом до метки.

Раствор стандартного образца нистатина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца нистатина и доводят объём раствора диметилсульфоксидом до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20,0 мг (точная навеска) субстанции, растворяю в 25,0 мл метанола и доводят объём раствора водой до метки. К 10 мл полученного раствора прибавляют 2,0 мл кислоты хлористоводородной разведённой 7,3 % и выдерживают при комнатной температуре в течение 1 ч.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца нистатина и доводят объём раствора диметилсульфоксидом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора диметилсульфоксидом до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, эндкепированный октадецилсилил силикагель, деактивированный по отношению к основаниям, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 305 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 4-кратное от времени удерживания основного пика. |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–25 | 100 | 0
25–35 | 100 → 0 | 0 → 100
35–45 | 0 | 100
45–50 | 0 → 100 | 100 → 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Нистатин А1 – 1 (около 14 мин). Для идентификации пиков используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора сравнения.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения разрешение (RS) между двумя основными пиками должно быть не менее 3,5 (время удерживания – около 13 мин и 19 мин).

Основного компонента А1 должно быть не менее 85 %, любых других компонентов АХ – не более 4 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика компонента А1 на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы и любые пики, время удерживания которых менее 2 мин.

Потеря в массе при высушивании. Не более 5,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Сушат 1,0 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы при температуре 60 °С в течение 3 ч при остаточном давлении не более 0,1 кПа.

Сульфатная зола. Не более 3,5 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом диффузии в агар (ОФС «Определение антимикробной активности антибиотиков методом диффузии в агар»).

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте при температуре не выше 5 °С.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0457 Нитизинон (Nitisinonum)

Вводится впервые

##### Определение

2-[2-Нитро-4-(трифторметил)бензоил]циклогексан-1,3-дион.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % нитизинона C14H10F3NO5 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. От белого до светло-жёлтого цвета кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в ацетонитриле, умеренно растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца нитизинона.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика нитизинона на хроматограмме раствора стандартного образца нитизинона (раздел «Количественное определение»).

3. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения основного пика на хроматограмме испытуемого раствора, полученный с помощью диодно-матричного детектора в области длин волн от 200 до 380 нм, должен соответствовать спектру поглощения пика нитизинона на хроматограмме раствора стандартного образца нитизинона (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Температура плавления. От 139,5 до 141,0 °C (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—метанол—фосфорной кислоты раствор 0,02 М 200:300:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 40 мл ПФ, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 10 мин, периодически встряхивая колбу, не допуская нагревания выше 25 °С, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Срок годности раствора – 24 ч при температуре 10 °С.

Раствор стандартного образца нитизинона. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца нитизинона, прибавляют 15 мл ацетонитрила, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 2–3 мин, периодически встряхивая колбу, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. Срок годности раствора – 24 ч.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца нитизинона и доводят объём раствора ПФ до метки. Срок годности раствора – 24 ч.

Раствор примеси 1. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси 1, растворяют в 50 мл ацетонитрила, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 2 мин, периодически встряхивая колбу и не допуская нагревания выше 25 °C, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор хранят при температуре не выше 8 °С.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В коническую колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца нитизинона, прибавляют 50 мл ПФ, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 3 мин, периодически встряхивая. Колбу герметично закрывают, выдерживают в термостате при температуре 60 °C в течение 2 ч, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 0,1 мл раствора примеси 1, перемешивают и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм. Раствор хранят при температуре не выше 8 °С.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца нитизинона и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь 1: 2-нитро-4-(трифторметил)бензойная кислота [320-94-5].

Примесь 2: циклогексан-1,3-дион [504-02-9].

Примесь 3: 6-(трифторметил)-3,4-дигидро-1H-ксантен-1,9(2H)-дион.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Температура образца | 10 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 240 нм; |  |
Объём пробы | 30 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика нитизинона. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Нитизинон – 1 (около 16 мин); примесь 2 – около 0,1; примесь 1 – около 0,3; примесь 3 – около 0,4.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика нитизинона должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси 1 и примеси 3 должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) нитизинона должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика нитизинона должно быть не более 5,0 % (6 введений);

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь 1 – 1,8; примесь 2 – 0,5.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика нитизинона на хроматограмме раствора сравнения;
а1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска стандартного образца нитизинона, мг;
P – содержание нитизинона в стандартном образце нитизинона,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь 1 – не более 0,15 %;

- примесь 2 – не более 0,15 %;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,1 % (ОФС «Хлориды»). В коническую колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, прибавляют 25 мл воды, перемешивают на магнитной мешалке в течение 30 мин, периодически встряхивая, и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания родственные примеси со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 70 мл ПФ, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 10 мин, периодически встряхивая колбу, не допуская нагревания выше 25 °C, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца нитизинона. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца нитизинона, растворяют в 15 мл ацетонитрила, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 2–3 мин, периодически встряхивая колбу, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 55 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический (диодно-матричный), 240 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика нитизинона. |

Хроматографируют раствор стандартного образца нитизинона и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца нитизинона:

- фактор асимметрии пика (AS) нитизинона должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика нитизинона должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание нитизинона C14H10F3NO5 в субстанции в процентах в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика нитизинона на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика нитизинона на хроматограмме раствора стандартного образца нитизинона;
а1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца нитизинона, мг;
P – содержание нитизинона в фармакопейном стандартном образце нитизинона,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

При температуре не выше 8 °С.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0527 Нитроксолин (Nitroxolinum)

Взамен ФС 42-1854-94

##### Определение

5-Нитрохинолин-8-ол.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % нитроксолина C9H6N2O3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Жёлтый или серовато-жёлтый мелкокристаллический порошок, допускается зеленоватый оттенок.

Растворимость. Умеренно растворим в хлороформе, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца нитроксолина.

2. Качественная реакция. Растворяют 2 мг субстанции в 5 мл метанола, прибавляют 0,15 мл железа(III) хлорида раствор 3 %; должно появиться тёмно-зелёное окрашивание.

##### Испытания

Температура плавления. От 178 до 182 °С (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Диметилформамид—метанол—бензол 1:6:24.

Испытуемый раствор. Растворяют 0,1 г субстанции в 2,0 мл диметилформамида.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 12,5 мг пикриновой кислоты и 1,25 г фармакопейного стандартного образца нитроксолина, растворяют в 20 мл диметилформамида и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Натрия эдетата раствор. Растворяют 12 г натрия эдетата дигидрата в 90 мл воды.

Раствор для детектирования. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3 г α-нафтиламина, растворяют в 70 мл смеси хлористоводородная кислота концентрированная—этиленгликоль—метанол 1:4:5 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор используют свежеприготовленным.

Предварительная подготовка пластинки. Пластинку помещают в камеру с натрия эдетата раствором и пропитывают восходящим методом. Когда фронт указанного раствора пройдёт до конца пластинки, её вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 3 ч и размечают в соответствии с рис. 1. С пятиугольников, заштрихованных на рис. 1, аккуратно удаляют слой сорбента (шпателем, скальпелем или др.), не затрагивая сорбент на других поверхностях; затем из верхних углов пятиугольников до конца пластинки проводят глубокие продольные разделительные линии шириной 1 мм.

Рисунок 1. Пластинка, размеченная по методу «клиновидных полос»

Каждую пробу наносят в отдельную точку по центру между пятиугольниками на расстоянии 2 см от нижнего края пластинки: 2 мкл испытуемого раствора (100 мкг), 2 мкл раствора сравнения (1 мкг пикриновой кислоты и 100 мкг нитроксолина). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают при температуре 60–70 °С в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, высушивают до удаления следов растворителей и просматривают при дневном свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения должны обнаруживаться две чёткие разделённые зоны адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции с Rf около 0,3, соответствующая 5,7-динитро-8-оксихинолину, по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции с Rf около 0,35 на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Зоны адсорбции на линии старта при оценке не учитывают.

Пластинку опрыскивают раствором для детектирования, высушивают при температуре 110 °С в течение 10 мин и просматривают при дневном свете.

На хроматограмме испытуемого раствора на уровне Rf около 0,6 не должна наблюдаться зона адсорбции фиолетового цвета, соответствующая 5-нитрозо-8-оксихинолину.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 0,5 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы при температуре 70–80 °С.

Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Встряхивают 1,0 г субстанции с 20 мл воды в течение 5 мин и фильтруют, отбрасывая первые 2 мл фильтрата. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). Для определения используют 2 мл фильтрата, полученного в испытании «Сульфаты», разведённые водой до 10 мл.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)».

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 2 мл муравьиной кислоты, прибавляют 20 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до перехода окраски из тёмно-зелёной в жёлтую (индикатор – 5 капель малахитового зелёного раствора 0,5 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 19,02 мг нитроксолина C9H6N2O3.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0528 Нитрофурантоин (Nitrofurantoinum)

Взамен ФС 42-3217-95

##### Определение

1-{[(5-Нитрофуран-2-ил)метилиден]амино}имидазолидин-2,4-дион.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % нитрофурантоина C8H6N4O5 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Жёлтый кристаллический порошок или жёлтые кристаллы.

Растворимость. Растворим в диметилформамиде, очень мало растворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца нитрофурантоина. Субстанцию предварительно высушивают при температуре 140 °С в течение 30 мин.

2. Спектрофотометрия. Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 400 нм должен иметь максимумы при 266 нм и 367 нм (раздел «Количественное определение»). Отношение значений оптической плотности А367/А266 должно быть от 1,36 до 1,42.

3. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 10 мл диметилформамида. К 1 мл полученного раствора прибавляют 0,1 мл калия гидроксида раствора спиртового 0,5 М; должно появиться коричневое окрашивание.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—нитрометан 10:90.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,25 г субстанции, растворяют в минимальном количестве диметилформамида и доводят объём раствора ацетоном до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ацетоном до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ацетоном до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (250 мкг), раствора сравнения (2,5 мкг) и раствора для проверки пригодности хроматографической системы (1,25 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 10 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С в течение 5 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм. Опрыскивают фенилгидразина гидрохлорида раствором 0,36 %, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С в течение 10 мин и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора при просматривании пластинки в УФ-свете и после её опрыскивания, кроме основной зоны адсорбции, допускается наличие дополнительных зон адсорбции, каждая из которых по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты»). Взбалтывают 0,5 г субстанции с 25 мл воды в течение 2 мин и фильтруют.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Для определения используют 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Сульфаты».

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытание проводят в защищённом от яркого света месте.

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 18 г натрия ацетата, прибавляют 1,4 мл уксусной кислоты ледяной, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,12 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 50 мл диметилформамида и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 367 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения растворитель.

Содержание нитрофурантоина C8H6N4O5 в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
а - навеска субстанции, г;
765 - удельный показатель поглощения нитрофурантоина ();
W - потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0529 Нифуроксазид (Nifuroxazidum)

Вводится впервые

##### Определение

(Е)-4-Гидрокси-Nʹ-[(5-нитрофуран-2-ил)метилиден]бензогидразид.

Содержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % нифуроксазида C12H9N3О5 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Жёлтый кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим или очень мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде и метиленхлориде.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца нифуроксазида.

##### Испытания

Удельный показатель поглощения. От 940 до 1000 в максимуме поглощения при длине волны 367 нм в пересчёте на сухое вещество (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в 10 мл этиленгликоля монометилового эфира и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. Раствор защищают от действия света.

Родственные примеси

1. Примесь А. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Все растворы готовят в посуде из тёмного стекла и используют свежеприготовленными.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 1 мл диметилсульфоксида и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,5 мл испытуемого раствора А, прибавляют 50 мл воды, доводят объём раствора водой до метки, перемешивают, выдерживают в течение 15 мин и фильтруют.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в диметилсульфоксиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,5 мл испытуемого раствора А, прибавляют 5 мл раствора стандартного образца примеси А, доводят объём раствора до метки, перемешивают, выдерживают в течение 15 мин и фильтруют.

В две конические колбы помещают по 10 мл испытуемого раствора Б и стандартного раствора, прибавляют в каждую колбу 0,5 мл реактива Фолина-Чокальтеу и 10 мл натрия карбоната раствора 1 М, перемешивают и выдерживают в течение 1 ч.

Оптическая плотность испытуемого раствора Б, измеренная при длине волны 750 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать оптическую плотность стандартного раствора.

Примечание

Примесь А: 4-гидроксибензогидразид [5351-23-5].

Допустимое содержание примесей:

- примесь А – не более 0,05 %.

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы готовят в посуде из тёмного стекла и используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Тетрагидрофуран—вода 50:950.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 400:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе, обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси В. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси В, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг субстанции, растворяют в растворителе, обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Полученный раствор выдерживают в течение 1 ч в освещённом месте (раствор содержит примесь E).

Примечание

Примесь В: метилпарагидроксибензоат [99-76-3].

Примесь С: [(5-нитрофуран-2-ил)метилиден]диацетат [92-55-7].

Примесь D (5-нитрофурфуралазин): (E,E)-N,Nʹ-бис[(5-нитрофуран-2-ил)метилиден]гидразин [112537-96-9].

Примесь Е: (Z)-4-гидрокси-Nʹ-[(5-нитрофуран-2-ил)метилиден]бензогидразид.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 10 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 67 | 33
10–30 | 67 → 43 | 33 → 57

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения, раствор стандартного образца метилпарагидроксибензоата и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Нифуроксазид – 1 (около 8 мин); примесь А (кето-енольные таутомеры) – около 0,36 и 0,39; примесь Е – около 0,9; примесь В – около 1,2; примесь С – около 2,6; примесь D – около 3,4.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси В используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора стандартного образца примеси В. Для идентификации пиков примесей Е, С и D используют относительное время удерживания соединений.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси Е и нифуроксазида должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси Е не должна более чем в 3 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика каждой из примесей В, С и D не должна превышать 0,6 площади основного пика на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,3 %) и площадь только одного такого пика может превышать 0,2 площади основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца метилпарагидроксибензоата (0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей (кроме примеси Е) не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца метилпарагидроксибензоата (не более 0,5 %).

Не учитывают пик примеси А и пики, площадь которых составляет менее 0,1 площади основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца метилпарагидроксибензоата (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают до постоянной массы 1 г (точная навеска) субстанции в течение 3 часов при температуре 102,5±2,5 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 30 мл диметилформамида (при необходимости нагревают), прибавляют 20 мл воды, перемешивают и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 27,52 мг нифуроксазида C12H9N3О5.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0530 Ницерголин (Nicergolinum)

Взамен ФС 42-3284-96

##### Определение

[(6aR,9R,10aS)-10a-Метокси-4,7-диметил-4,6,6a,7,8,9,10,10a-октагидроиндоло[4,3-fg]хинолин-9-ил]метил-5-бромпиридин-3-карбоксилат.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % ницерголина C24H26BrN3O3 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или желтоватый мелкокристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде, растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ницерголина.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец ницерголина по отдельности растворяют в минимальных объёмах спирта 96 %, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимум при 288 нм и минимум при 251 нм.

3. Качественная реакция. Растворяют 2 мг субстанции в 2 мл серной кислоты концентрированной, должно появиться синее окрашивание.

##### Испытания

Температура плавления. От 133 до 137°С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельное вращение. От +4,8 до +5,8 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (5 % раствор субстанции в спирте 96 %, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Опалесценция раствора 0,5 г субстанции в 10 мл спирта 96 % не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном 5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Буферный раствор. Растворяют 21,21 г тетрабутиламмония гидросульфата в 225 мл калия дигидрофосфата растворе 0,25 М и доводят значение рН калия гидроксида раствором 30 % до 7,5, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 250 мл и доводят объём раствора калия дигидрофосфата раствором 0,034 % до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор—ацетонитрил—вода 2:300:700.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор—вода—ацетонитрил 2:300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Раствор стандартного образца примеси D. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг стандартного образца примеси D, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 2 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца ницерголина для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси А, В, С, D, F и Н, растворяют в 2 мл ацетонитрила и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для идентификации. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца ницерголина для идентификации пиков, содержащего примесь I, в 1 мл ацетонитрила.

Примечание

Примесь А:
{[(6aR,9R,10aS)-4,7-диметил-10a-метокси-4,6,6a,7,8,9,10,10a-октагидроиндоло[4,3-fg]хинолин-9-ил]метил}(5-хлорпиридин-3-карбоксилат)
[38536-28-6].

Примесь В:
[(6aR,9R,10aS)-10a-метокси-7-метил-4,6,6a,7,8,9,10,10a-октагидроиндол[4,3-fg]хинолин-9-ил]метил-5-бромпиридин-3-карбоксилат
[35264-46-1].

Примесь С:
[(6aR,9R,10aS)-10a-метокси-4,7-диметил-4,6,6a,7,8,9,10,10a-октагидроиндол[4,3-fg]хинолин-9-ил]метанол
[35155-28-3].

Примесь D: 5-бромпиридин-3-карбоновая кислота [20826-04-4].

Примесь F:
[(6aR,9S,10aS)-10a-метокси-4,7-диметил-4,6,6a,7,8,9,10,10a-октагидроиндол[4,3-fg]хинолин-9-ил]метил-5-бромпиридин-3-карбоксилат
[58001-19-7].

Примесь H:
[(6aR,9R,10aS)-10a-метокси-4-метил-4,6,6a,7,8,9,10,10a-октагидроиндол[4,3-fg]хинолин-9-ил]метил-5-бромпиридин-3-карбоксилат
[192504-81-7].

Примесь I:
[(6aR,6aʹR,9R,9ʹR,10aS,10aʹS)-9ʹ-({[(5-бромпиридин-3-ил)карбонил]окси}метил)-10a,10aʹ-диметокси-7,7ʹ-диметил-4ʹ,6ʹ,6a,6aʹ,7,7ʹ,8,8ʹ,9,9ʹ,10,10ʹ,10a,10aʹ-тетрадекагидро-6H-4,5ʹ-бииндол[4,3-fg]хинолин-9-ил]метил-5-бромпиридин-3-карбоксилат.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный с полярными группами и этиленовыми мостиками, гибридный, эндкепированный, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 288 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА, % | ПФБ, %
--- | --- | ---
0–3 | 100 | 0
3–30 | 100 → 70 | 0 → 30
30–40 | 70 → 0 | 30 → 100
40–50 | 0 | 100

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для идентификации пиков, раствор стандартного образца примеси D, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ницерголин – 1 (около 34 мин); примесь D – около 0,06; примесь С – около 0,1; примесь B – около 0,6; примесь H – около 0,8; примесь A – около 0,96; примесь F – около 1,1; примесь I – около 1,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В, С, F и Н используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Для идентификации пика примеси D используют хроматограмму раствора стандартного образца примеси D. Для идентификации пика примеси I используется хроматограмма раствора для идентификации.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками ницерголина и примеси А должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси В не должна более чем в 4 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,8 %);

- площадь пика примеси А не должна более чем в 2,5 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси D не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца примеси D (не более 0,1 %);

- площадь пика примеси Н не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика каждой из примесей С, F, I не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать шестикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 43,8 ЕЭ на 1 мг ницерголина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции в спирте 96 % c концентрацией 10 мг/мл.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,4 г (точная навеска) субстанции в 50 мл ацетона и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») по первому перегибу на кривой титрования.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 48,44 мг ницерголина C24H26BrN3O3.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0531 Оксазепам (Oxazepamum)

Взамен ФС 42-1825-97

##### Определение

(3RS)-3-Гидрокси-5-фенил-7-хлор-1,3-дигидро-2H-1,4-бензодиазепин-2-он.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % оксазепама C15H11ClN2O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в спирте 96 % и хлороформе, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца оксазепама.

2. Качественная реакция. К 50 мг субстанции прибавляют 2 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, кипятят в течение 2 мин и охлаждают до комнатной температуры. Полученный раствор должен давать характерную реакцию на амины ароматические первичные с образованием оранжево-красного осадка (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы используют сразу после приготовления.

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 3,48 г дикалия гидрофосфата в 900 мл воды, доводят значение рН до 10,50 натрия гидроксида раствором 1 М, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Вода—ацетонитрил 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 40 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для идентификации пиков. Содержимое флакона стандартного образца оксазепама для идентификации пиков, содержащего примеси A, B, C, D и E, растворяют в 1,0 мл испытуемого раствора.

Примечание

Примесь A:
(5RS)-5-фенил-7-хлор-4,5-дигидро-1H-1,4-бензодиазепин-2,3-дион [19554-95-1].

Примесь B:
[(3RS)-2-оксо-5-фенил-7-хлор-1,2-дигидро-3H-1,4-бензодиазепин-3-ил]ацетат [1824-74-4].

Примесь C: 4-фенил-6-хлорхиназолин-2-карбальдегид [5958-05-4].

Примесь D: (2-амино-5-хлорфенил)(фенил)метанон [719-59-5].

Примесь E: 5-фенил-7-хлор-1,3-дигидро-2H-1,4-бензодиазепин-2-он 4-оксид [963-39-3].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, устойчивый к основаниям до pH 11, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 235 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–4 | 75 | 25
4–34 | 75 → 25 | 25 → 75
34–45 | 25 | 75
45–50 | 25 → 75 | 75 → 25
50–60 | 75 | 25

Хроматографируют раствор для идентификации пиков, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Оксазепам – 1 (около 15 мин); примесь E – около 0,7; примесь A – около 0,8; примесь B – около 1,2; примесь C – около 1,4; примесь D – около 2,0.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, C, D и E используют хроматограмму раствора для идентификации пиков и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу оксазепама для идентификации пиков.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для идентификации пиков разрешение (RS) между пиками примесей E и A должно быть не менее 1,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь A – 4,0; примесь B – 1,1.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A, B, C, D и E не должна превышать площадь пика оксазепама на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика оксазепама на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика оксазепама на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,25 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы при температуре 105 °С и остаточном давлении не более 0,7 кПа.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в смеси уксусная кислота безводная—уксусный ангидрид 10:90 и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 28,67 мг оксазепама C15H11ClN2O2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0532 Оксалиплатин (Oxaliplatinum)

Вводится впервые

##### Определение

(SP-4-2)-[(1R,2R)-Циклогексан-1,2-диамин-κN,κN'][этандиоато(2-)-κO1,κO2]платина(II).

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % оксалиплатина C8H14N2O4Pt в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в воде, мало или очень мало растворим в метаноле, практически нерастворим в этаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца оксалиплатина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика оксалиплатина на хроматограмме раствора стандартного образца оксалиплатина (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +74,5 до +78,0 в пересчёте на сухое вещество (0,5 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном B9 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. К раствору 0,1 г субстанции в 50 мл воды прибавляют 0,5 мл фенолфталеина раствора 0,1 %; раствор должен быть бесцветным. Для изменения окраски раствора на розовую должно потребоваться не более 0,6 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и готовят в полипропиленовых сосудах.

1. Щавелевая кислота

Буферный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 16 г тетрабутиламмония гидроксида 30-водного, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. Растворяют 1,36 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды, прибавляют 10 мл полученного раствора, доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 6,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 25 мл воды, встряхивают в течение 5 мин, обрабатывают ультразвуком в течение 1 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки. Готовый раствор используют в течение 20 мин после приготовления.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 14 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 5 мл раствора стандартного образца примеси А и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 12,5 мг натрия нитрата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 мл полученного раствора, 25 мл раствора стандартного образца примеси А и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь А: Щавелевая кислота [144-62-7].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 205 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика примеси А. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Щавелевая кислота – 1 (около 4,7 мин); нитрат-ион – 0,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора сравнения.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение ® между пиками нитрата и щавелевой кислотой должно быть не менее 9,0.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси А должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора сравнения фактор асимметрии пика (AS) щавелевой кислоты должен быть не более 2,0;

Содержание примеси А в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика щавелевой кислоты на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика щавелевой кислоты на хроматограмме раствора сравнения;
a0 - навеска щавелевой кислоты, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание щавелевой кислоты в фармакопейном стандартном образце примеси А,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь А – не более 0,15 %.

2. Примесь В

Буферный раствор. Растворяют 1,36 г калия дигидрофосфата и 1 г натрия гептансульфоната в 900 мл воды, доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 3,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 40 мл воды, встряхивают в течение 5 мин, обрабатывают ультразвуком в течение 2 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки. Готовый раствор используют в течение 20 мин после приготовления.

Раствор стандартного образца примеси В. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси В, прибавляют 25,0 мл метанола и доводят объём раствора водой до метки. Полученный раствор обрабатывают ультразвуком в течение 30 мин до полного растворения навески и охлаждают до комнатной температуры.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 3,0 мл раствора стандартного образца примеси В и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В стеклянный химический стакан помещают 50,0 мл раствора стандартного образца примеси В и доводят значение рН раствором натрия гидроксида 0,05 М до 6,0. Полученный раствор нагревают при температуре 70 °С в течение 4 ч (образуется примесь Е), охлаждают до комнатной температуры.

Примечание

Примесь В:
(SP-4-2)-динитрато[(1R,2R)-циклогексан-1,2-диамин-κN,κN']платина(II) [66900-68-3].

Примесь Е:
(SP-4-2)-ди-µ-оксобис[(1R,2R)-циклогексан-1,2-диамин-κN,κN′]диплатина(II) [82398-34-3].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 м, силикагель октадецилсилильный деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 215 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 12 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Примесь В – 1 (около 5 мин); примесь Е – 1,4.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси В используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора сравнения. Для идентификации пика примеси Е используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение ® между пиками примеси В и примеси Е должно быть не менее 7,0.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси В должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) примеси В должен быть не более 2,0.

Допустимое содержание примесей. Содержание примеси В в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика примесь В на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика примеси В на хроматограмме раствора сравнения;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца примеси В, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание примеси В в фармакопейном стандартном образце примеси В,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь В – не более 0,15 %.

3. Другие примеси

Буферный раствор. К 900 мл воды прибавляют 0,6 мл фосфорной кислоты раствора 10 % и доводят значение рН фосфорной кислоты раствором 10 % или натрия гидроксида раствором 20 % до 3,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 л и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 10:990.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 30 мл воды, обрабатывают ультразвуком в течение 2 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки. Готовый раствор используют в течение 20 мин.

Раствор стандартного образца оксалиплатина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца оксалиплатина, прибавляют 50 мл воды, обрабатывают ультразвуком в течение 2 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца оксалиплатина и 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси С, прибавляют 50 мл воды, обрабатывают ультразвуком в течение 2 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца дихлородиаминоциклогексанплатины, растворяют в растворе стандартного образца оксалиплатина и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь С:
(OC-6-33)-дигидрокси[(1R,2R)-циклогексан-1,2-диамин-κN,κN'][этандиоато(2-)-κO1,κO2]платина(IV)
[111321-67-6].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика оксалиплатина. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Оксалиплатин – 1 (около 8 мин); примесь С – 0,5; дихлородиаминоциклогексанплатина – 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси С используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение ® между пиками оксалиплатина и дихлородиаминоциклогексанплатины должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси С должно быть не менее 50;

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика оксалиплатина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора сравнения фактор асимметрии пика (AS) оксалиплатина должен быть не более 2,0.

Допустимое содержание примесей. Содержание примеси С в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика примеси С на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика примеси С на хроматограмме раствора сравнения;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца примеси С, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце примеси С,%.

Содержание единичной любой другой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика оксалиплатина на хроматограмме раствора сравнения;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца оксалиплатина, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание оксалиплатина в фармакопейном стандартном образце оксалиплатина,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь С – не более 0,15 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей (кроме примеси D) – не более 0,3 %.

Не учитывают пики с относительным временем удерживания менее 0,25 и пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

4. Примесь D

Подвижная фаза (ПФ). Этанол—метанол 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца оксалиплатина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 37,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца оксалиплатина, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца оксалиплатина примеси D. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца оксалиплатина примеси D, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 15,0 мл раствора стандартного образца примеси D и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 3,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения В. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца оксалиплатина и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 4,0 мл раствора стандартного образца примеси D, прибавляют 5,0 мл раствора сравнения В и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 40,0 мл раствора стандартного образца оксалиплатина, прибавляют 1,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора метанолом до метки.

Примечание

Примесь D:
(SP-4-2)-[(1S,2S)-циклогексан-1,2-диамин-κN,κN'] [этандиоато(2-)-κO1,κO2]платина(II) [61758-77-8].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель модифицированный трис(фенилкарбамоил)целлюлозой для хиральной хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 0,3 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 30 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Оксалиплатин – 1 (около 14 мин); примесь D – 1,14.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси D используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора стандартного образца оксалиплатина примеси D.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение ® между пиками оксалиплатина и примесью D должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси D должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора сравнения Б фактор асимметрии пика (AS) примеси D должен быть не более 2,0;

Допустимое содержание примесей. Содержание примеси D в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика примесь D на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика примеси D на хроматограмме раствора сравнения Б;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца примеси D, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце примеси D,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь D – не более 0,15 %.

Серебро. Не более 0,0005 %. Определение проводят методом ААС (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 1).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Калибровочные растворы серебра. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл серебра стандартного раствора 100 мкг/мл и доводят объём раствора водой до метки. В мерные колбы вместимостью 50 мл помещают полученный раствор в количествах: 0,5 мл, 1,0 мл, 1,5 мл, 2,0 мл и 2,5 мл, доводят объём растворов водой до метки (получают растворы с содержанием серебра соответственно 0,01 мкг/мл, 0,02 мкг/мл, 0,03 мкг/мл, 0,04 мкг/мл и 0,05 мкг/мл.

Источник излучения | лампа для определения серебра (полая катодная лампа), в качестве альтернативного источника излучения можно использовать ксеноновую лампу, если конструкция прибора не предусматривает использование лампы с полым катодом.
Газ | аргон;
Длина волны | 328,1 нм;
Атомизация | Электротермическая;
Объём ввода проб | 10 мкл.

Определяют эффективные значения атомной абсорбции испытуемого раствора и калибровочных растворов. По калибровочной кривой рассчитывают концентрацию серебра в испытуемом растворе.

Содержание серебра в субстанции в процентах (Х) в вычисляют по формуле:

где С - концентрация серебра в испытуемом растворе, определённая по калибровочному графику, мкг/мл;
a - навеска субстанции, мг.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 1,0 ЕЭ на 1 мг оксалиплатина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания 0,01 г (точная навеска) оксалиплатина растворяют в 10 мл воды для ЛАЛ-теста.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. 3. Другие примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 50 мл воды, обрабатывают ультразвуком в течение 15 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

- Объём пробы: 20 мкл;

- Время хроматографирования: 15 мин.

Хроматографируют раствор стандартного образца оксалиплатина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца оксалиплатина фактор асимметрии пика (AS) оксалиплатина должен быть не более 2,0.

Содержание оксалиплатина C8H14N2O4Pt в субстанции в процентах (Х) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика оксалиплатина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика оксалиплатина на хроматограмме раствора стандартного образца оксалиплатина;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца оксалиплатина, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
W - потеря в массе при высушивании субстанции,%;
P - содержание оксалиплатина в фармакопейном стандартном образце оксалиплатина,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в сухом, защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0533 Оксациллина натрия моногидрат

Оксациллин
Oxacillinum natricum monohydricum

Взамен ФС 42-2884-92

##### Определение

(2S,5R,6R)-3,3-Диметил-6-(5-метил-3-фенил-1,2-оксазол-4-карбоксамидо)-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоксилат натрия, моногидрат.

Cодержит не менее 95,0 % и не более 102,0 % оксациллина натрия C19H18N3NaO5S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца оксациллина натрия моногидрата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора Б должно соответствовать времени удерживания пика оксациллина на хроматограмме раствора стандартного образца оксациллина натрия моногидрата (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +196 до +212 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 25 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность 10 % раствора субстанции в воде, измеренная при длине волны 430 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать 0,1 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

pH раствора. От 4,5 до 7,5 (3 % раствор в воде, свободной от углерода диоксида, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Светопоглощающие примеси. Оптическая плотность 1 % раствора субстанции в воде, измеренная при длине волны 335 нм в кювете с толщиной слоя 1 см (по сравнению с водой), не должна превышать 0,1 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы, содержащие оксациллин, защищают от света.

Буферный раствор. Растворяют 2,7 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят значение рН натрия гидроксида раствором 8,5 % до 5,0. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 250:750.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора Б и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси Е и 5 мг фармакопейного стандартного образца оксациллина натрия моногидрата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для идентификации А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют 1 мл натрия гидроксида раствора 0,05 М, выдерживают при комнатной температуре в течение 3 мин, прибавляют ПФ, перемешивают до полного растворения и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для идентификации Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца оксациллина натрия для идентификации пиков, содержащего примеси E, F, G, I и J, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь B:
(4S)-2-[карбокси(5-метил-3-фенил-1,2-оксазол-4-карбоксамидо)метил]-5,5-диметил-1,3-тиазолидин-4-карбоновая кислота.

Примесь D:
(4S)-2-[(5-метил-3-фенил-1,2-оксазол-4-карбоксамидо) метил]-5,5-диметил-1,3-тиазолидин-4-карбоновая кислота [1642559-63-4].

Примесь Е:
(2S,5R,6R)-3,3-диметил-6-[5-метил-3-(2-хлорфенил)-1,2-оксазол-4-карбоксамидо]-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота [61-72-3].

Примесь F:
(2R,5R,6R)-3,3-диметил-6-(5-метил-3-фенил-1,2-оксазол-4-карбоксамидо)-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карботионовая кислота [5053-35-0].

Примесь G:
(2S,5R,6R)-3,3-диметил-6-[5-метил-3-(хлорфенил)-1,2-оксазол-4-карбоксамидо]-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота [724695-30-1] (3-хлорфенил изомер).

Примесь I:
(2S,5R,6R)-6-[(2S,5R,6R)-3,3-диметил-6-(5-метил-3-фенил-1,2-оксазол-4-карбоксамидо)-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоксамидо]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота.

Примесь J:
(2S,5R,6R)-6-[(2R)-2-[(2R,4S)-4-карбокси-5,5-диметил-1,3-тиазолидин-2-ил]-2-(5-метил-3-фенил-1,2-оксазол-4-карбоксамидо)ацетами-до]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 225 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 7-кратное от времени удерживания пика оксациллина. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для идентификации А, раствор для идентификации Б, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор А.

Относительное время удерживания соединений. Оксациллин– 1 (около 5 мин); примесь В (изомер 1) – около 0,4; примесь В (изомер 2) – около 0,5; примесь D (два изомера) – около 0,9; примесь Е – около 1,5; примесь F – около 1,9; примесь G – около 2,1; примесь I – около 3,8; примесь J – около 5,8.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей В и D используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для идентификации А.

Для идентификации пиков примесей E, F, G, I и J используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для идентификации Б и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу оксациллина натрия для идентификации пиков.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика оксациллина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками оксациллина и примеси Е должно быть не менее 2,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора А:

- сумма площадей пиков изомеров примеси В не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика оксациллина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,5 %);

- площадь пика примеси Е не должна превышать площадь пика оксациллина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

- площадь пика каждой из примесей D (сумма двух изомеров), F, G, I и J не должна превышать 0,5 площади пика оксациллина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика оксациллина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь пика оксациллина на хроматограмме раствора сравнения (не более 3,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. От 3,5 % до 5,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 30 мг (точная навеска) субстанции.

N,N-Диметиланилин. Не более 0,002 % (ОФС «N,N-Диметиланилин»).

2-Этилгексановая кислота. Не более 0,8 % (ОФС «2-Этилгексановая кислота»).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 10 мг оксациллина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения – 48 ч.

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,2 ЕЭ на 1 мг оксациллина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца оксациллина натрия моногидрата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца оксациллина натрия моногидрата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца оксациллина натрия моногидрата и испытуемый раствор Б.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца оксациллина натрия моногидрата:

- фактор асимметрии пика (AS) оксациллина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика оксациллина должно быть не более 3,0 % (6 введений).

Содержание оксациллина натрия C19H18N3NaO5S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика оксациллина на хроматограмме испытуемого раствора Б;
S0 - площадь пика оксациллина на хроматограмме раствора стандартного образца оксациллина натрия моногидрата;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца оксациллина натрия моногидрата, мг;
P - содержание оксациллина натрия моногидрата в фармакопейном стандартном образце оксациллина натрия моногидрата,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В сухом месте.

* Приводится для информации.

** Испытания проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0534 Оксиметазолина гидрохлорид

Оксиметазолин
Oxymetazolini hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

6-трет-Бутил-3-[(4,5-дигидро-1H-имидазол-2-ил)метил]-2,4-диметилфенола гидрохлорид.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % оксиметазолина гидрохлорида C16H24N2O·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 % и воде, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца оксиметазолина гидрохлорида.

2. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля G.

- Растворитель. Этилацетат—метанол 1:1.

- Подвижная фаза (ПФ). Диэтиламин—циклогексан—этанол 6:15:79.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца оксиметазолина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца оксиметазолина гидрохлорида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор для детектирования. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 г калия феррицианида, растворяют в железа(III) хлорида растворе 1,3 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца оксиметазолина гидрохлорида. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают раствором для детектирования и просматривают в видимом свете.

- Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, окраске и величине должна соответствовать зоне адсорбции оксиметазолина на хроматограмме раствора стандартного образца оксиметазолина гидрохлорида.

3. Качественная реакция. Растворяют 2 мг субстанции в 1 мл воды, прибавляют 0,2 мл натрия нитропруссида раствора 5 %, 0,2 мл натрия гидроксида раствора 8,5 % и выдерживают в течение 10 мин. К полученному раствору прибавляют 2 мл натрия гидрокарбоната раствора 4,2 %; должно появиться фиолетовое окрашивание.

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,25 г субстанции, растворяют в воде, свободной от диоксида углерода, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. К полученному раствору прибавляют 0,1 мл метилового красного раствора 0,05 % и 0,2 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты; должно появиться красное окрашивание. Окраска раствора должна изменяться на жёлтую при прибавлении не более 0,4 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют сразу после приготовления.

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 1,36 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,0. Раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси А (N-(2-аминоэтил)-2-(4-трет-бутил-3-гидрокси-2,6-диметилфенил)ацетамид [1391194-44-7]) и 5 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения В. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения Б и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, с полярными группами, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 70 | 30
5–20 | 70 → 15 | 30 → 85
20–35 | 15 | 85

Хроматографируют раствор сравнения В, раствор сравнения Б, раствор сравнения А и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Оксиметазолин – 1 (около 5 мин), примесь А – около 0,9.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения Б разрешение (RS) между пиками примеси А и оксиметазолина должно быть не менее 4,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна превышать 1,5-кратную площадь соответствующего пика на хроматограмме раствора сравнения В (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,3 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в смеси 20 мл уксусной кислоты безводной и 20 мл уксусного ангидрида, и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 29,68 мг оксиметазолина гидрохлорида C16H24N2O·HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0691 Окситоцин

Окситоцин
Oxytocinum

Взамен ВФС 42-2059-96

C43H66N12O12S2 [50-56-6] | М.м. 1007,2

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

S3.1,S3.6-Цикло(L-цистеинил-L-тирозил-L-изолейцил-L-глутаминил-L-аспарагинил-L-цистеинил-L-пролил-L-лейцилглицинамид).

Содержит не менее 93,0 % и не более 102,0 % окситоцина C43H66N12O12S2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей и уксусной кислоты вещество.

*Существует в форме окситоцина ацетата.

Биологическая активность окситоцина соответствует 600 МЕ на 1 мг окситоцина C43H66N12O12S2.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в хлористоводородной кислоты растворе 0,01 М.

*Растворяется в разбавленном растворе уксусной кислоты.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Проводят определения 1 и 2 или 1 и 3.

1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика окситоцина на хроматограмме раствора стандартного образца окситоцина (раздел «Количественное определение»).

2. Аминокислотный состав. Определение проводят в соответствии с ОФС «Аминокислотный анализ», гидролиз по методу 1, анализ по методу 1. Относительное содержание каждой аминокислоты рассчитывают в мольных долях, принимая за единицу одну шестую суммарного мольного содержания аспарагиновой кислоты, глутаминовой кислоты, пролина, глицина, изолейцина и лейцина по формуле:

- где n_i – количество молей соответствующей аминокислоты, мкмоль;+ ∑ n(Asp, Glu, Pro, Gly, Ile, Leu) – сумма мольного содержания аспарагиновой кислоты, глутаминовой кислоты, пролина, глицина, изолейцина и лейцина, мкмоль.

- Относительное содержание аминокислот должно быть в следующих пределах: аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота, пролин, глицин, лейцин и изолейцин – от 0,90 до 1,10; тирозин – от 0,7 до 1,05; полуцистин – от 1,4 до 2,1. Остальные аминокислоты могут присутствовать не более чем в следовых количествах.

3. 1H-ЯМР-спектроскопия (ОФС «Спектроскопия ядерного магнитного резонанса»).

Растворитель. Дейтерия оксид, содержащий 0,02 мг/мл дейтерированного триметилсилилпропионата натрия (ТСП), доводят pH дейтерированной уксусной кислотой до значений 5–6. Хранят в контейнере из полиэтилена высокой плотности.

Испытуемый раствор. Готовят раствор субстанции в растворителе с концентрацией окситоцина около 10 мг/мл.

Раствор стандартного образца окситоцина. Готовят раствор фармакопейного стандартного образца окситоцина для ЯМР идентификации в растворителе с концентрацией окситоцина около 10 мг/мл.

Оборудование. Импульсный ЯМР-спектрометр с рабочей частотой на протонах не менее 300 МГц.

Параметры регистрации 1H ЯМР спектров

Ширина спектра | от 0 до 9 м.д.
Температура образца | 22–27 °С;
Число сканирований | не менее 32.

Примечание – Спектры испытуемого раствора и раствора сравнения должны записываться без вращения образца и при одинаковой температуре.

Анализ 1H ЯМР спектров. Спектр испытуемого раствора должен соответствовать спектру раствора стандартного образца окситоцина после нормализации обоих спектров с целью уравнивания их по интенсивности. Допускается наличие сигналов протонов уксусной кислоты при 1,9 м.д., воды при 4,9 м.д. и сигналов остаточных растворителей. Допускается различная интенсивность сигналов уксусной кислоты.

##### ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность раствора. Раствор 10 мг субстанции в 10 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 3,0 до 6,0 (2,0 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФА). Растворяют 15,6 г натрия дигидрофосфата дигидрата в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000 мл.

Подвижная фаза (ПФБ). Ацетонитрил—вода 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси F. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца примеси F окситоцина растворяют в 1,0 мл ПФА.

Раствор для идентификации. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца окситоцина для идентификации, содержащий примеси В, D, E и I, растворяют в 1,0 мл ПФА.

Примечание

Примесь В: S3.1,S3.6′:_S_3.6,S3.1′-цикло[бис(L-цистеинил-L-тирозил-L-изолейцил-L-глутаминил-L-аспарагинил-L-цистеинил-L-пролил-L-лейцилглицинамид)] [20054-93-7].

Примесь D: [3-лейцин]окситоцин [4294-11-5].

Примесь Е: N2.1-ацетилокситоцин [10551-48-1].

Примесь F: [5-(3-цианоаланин)]окситоцин [87590-89-4].

Примесь I: [5-аспарагиновая кислота]окситоцин [65907-78-0].

Хроматографические условия

Колонка | 125 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 3 мкм;
Температура колонки | 25 °С;
Скорость потока | 1,0 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм;
Объём пробы | 50 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–30 | 70 → 40 | 30 → 60
30–30,1 | 40 → 70 | 60 → 30
30,1–45 | 70 | 30

Хроматографируют раствор для идентификации, раствор стандартного образца примеси F и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Окситоцин – 1 (около 10 мин); примесь I – около 0,9; примесь D – около 0,95; примеси Е и F – около 1,4; примесь В – около 1,7.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей В, D, E и I используют хроматограмму раствора для идентификации. Для идентификации пика примеси F используют хроматограмму раствора стандартного образца примеси F и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу примеси F.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для идентификации отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси D и окситоцина должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. Содержание любой примеси в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- примесь В – не более 1,0 %;

- примесь I – не более 1,0 %;

- сумма примесей Е и F – не более 1,5 %;

- любая другая примесь – не более 1,0 %;

- сумма примесей – не более 5,0 %.

Не учитывают пики менее 0,1 %.

Вода. Не более 5,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 50 мг (точная навеска) субстанции.

Уксусная кислота. От 6,0 % до 10,0 %. (ОФС «Определение уксусной кислоты в синтетических пептидах»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 15 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в смеси ПФБ и ПФА в соотношении 5:95 по объёму и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 300 ЕЭ на 1 мг окситоцина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца окситоцина. Готовят раствор фармакопейного стандартного образца окситоцина в ПФА с концентрацией окситоцина в растворе около 0,25 мг/мл.

Хроматографические условия

Объём пробы: 25 мкл.

Хроматографируют раствор стандартного образца окситоцина и испытуемый раствор.

Содержание окситоцина C43H66N12O12S2 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей и уксусной кислоты вещество в процентах (Х), вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика окситоцина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика окситоцина на хроматограмме раствора стандартного образца окситоцина;
C1 – концентрация окситоцина в испытуемом растворе, мг/мл;
C0 – концентрация окситоцина в растворе стандартного образца окситоцина, мг/мл;
P – содержание окситоцина в фармакопейном стандартном образце окситоцина, %;
А – содержание уксусной кислоты в субстанции, %;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

##### ХРАНЕНИЕ

В сухом, защищённом от света месте, при температуре от 2 до 8 °C.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0535 Оксиэтиламмония метилфеноксиацетат (Oxyaethylammonii methylphenoxyacetas)

Взамен ФС 42-3848-99

##### Определение

(2-Метилфенокси)уксусная кислота—2,2',2''-нитрилотриэтанол (1/1).

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % оксиэтиламмония метилфеноксиацетата C9H10O3·C6H15NO3 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым или коричневатым оттенком кристаллический порошок, со слабым характерным запахом.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96 %, мало растворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1, снятый в диске с калия бромидом, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца оксиэтиламмония метилфеноксиацетата.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,25 г фармакопейного стандартного образца оксиэтиламмония метилфеноксиацетата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора и раствора стандартного образца в области от 230 до 300 нм должны иметь максимумы при 270 нм, 276 нм и минимумы при 242 нм, 274 нм.

3. Качественная реакция._ Растворяют 50 мг субстанции в 1 мл натрия гидроксида раствора 10 %, прибавляют 0,1 мл калия тетрайодомеркурата щелочного раствора и нагревают; должен выпасть осадок серого цвета.

##### Испытания

Температура плавления. От 80,5 до 84,5 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1). Субстанции высушивают в вакууме до постоянной массы при температуре 40 °С и остаточном давлении 100 мм рт.ст.

pH раствора. От 5,0 до 7,0 (10,0 % раствор в воде, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Трифторуксусной кислоты раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 600 мл воды, прибавляют 0,8 мл трифторуксусной кислоты и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—ацетонитрил—раствор трифторуксусной кислоты 130:270:600.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 30:70.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 30 мг субстанции, растворяют в растворителе, доводят объём раствора растворителем до метки и фильтруют.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В пробирку помещают 5 мг субстанции, растворяют в 0,2 мл водорода пероксида раствора разведённого, выдерживают на водяной бане при температуре 90 °С в течение 1 ч и охлаждают до комнатной температуры. К полученному раствору прибавляют 10 мл растворителя и фильтруют.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель фенилгексилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 270 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 20 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор. Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками оксиэтиламмония метилфеноксиацетата и пиком ближайшей примеси с площадью пика более 0,1 % пика оксиэтиламмония метилфеноксиацетата должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика оксиэтиламмония метилфеноксиацетата должно быть не менее 10;

- фактор асимметрии пика (AS) оксиэтиламмония метилфеноксиацетата должен быть не менее 0,8 и не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика оксиэтиламмония метилфеноксиацетата должно быть не более 2 % (6 введений).

На хроматограмме испытуемого раствора:

- фактор асимметрии пика (AS) оксиэтиламмония метилфеноксиацетата должен быть не менее 0,8 и не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика оксиэтиламмония метилфеноксиацетата должно быть не более 2 % (6 введений).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать трёхкратную площадь пика оксиэтиламмония метилфеноксиацетата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь пика оксиэтиламмония метилфеноксиацетата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 2,5 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,03 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,2 г субстанции в 30 мл воды, прибавляют 0,5 мл азотной кислоты, перемешивают и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 10 мл уксусной кислоты ледяной, прибавляют 10 мл ацетона и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до перехода окраски в малиновую (индикатор – 2 капли тропеолина 00 раствора 0,2 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 31,54 мг оксиэтиламмония метилфеноксиацетата C9H10O3·C6H15NO3.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в сухом месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0536 Окскарбазепин (Oxcarbazepinum)

Вводится впервые

##### Определение

10-Оксо-10,11-дигидро-5H-дибенз[b,f]азепин-5-карбоксамид.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % окскарбазепина C15H12N2O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или слегка оранжевый кристаллический порошок.

Растворимость. Практически нерастворим в воде и спирте 96 %, мало растворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца окскарбазепина.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Испытание проводят в защищённом от света месте. Растворы, содержащие окскарбазепин и его примеси, защищают от света.

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,54 г калия дигидрофосфата и 8,9 г динатрия гидрофосфата дигидрата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор Б. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,8 г аскорбиновой кислоты, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор В. Растворяют 1,8 г натрия эдетата в смеси раствор А—вода 500:500.

Растворитель. Ацетонитрил—раствор Б 50:50.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—раствор В—тетрагидрофуран—вода 50:100:100:750.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Раствор В—тетрагидрофуран—вода—ацетонитрил 100:100:200:600.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 25 мл ацетонитрила, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора раствором Б до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца смеси примесей окскарбазепина, содержащего примеси A, В, I и K, в 0,5 мл ацетонитрила и доводят объём раствора до 1,0 мл раствором Б.

Примечание

Примесь A
(карбамазепин): 5H-дибенз[b,f]азепин-5-карбоксамид [298-46-4].

Примесь В:
10-метокси-5H-дибенз[b,f]азепин-5-карбоксамид [28721-09-7].

Примесь I:
10,11-диоксо-10,11-дигидро-5H-дибенз[b,f]азепин-5-карбоксамид [537693-29-1].

Примесь K:
10-оксо-N-формил-10,11-дигидро-5H-дибенз[b,f]азепин-5-карбоксамид [1346601-76-0].

Примесь L:
N-ацетил-10-оксо-10,11-дигидро-5H-дибенз[b,f]азепин-5-карбоксамид.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель фенилгексилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 240 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 60 | 40
10–20 | 60 → 5 | 40 → 95
20–27 | 5 | 95
27–30 | 5 → 60 | 95 → 40

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор А.

Относительное время удерживания соединений. Окскарбазепин – 1 (около 6 мин); примесь I – около 0,8; примесь A – около 1,3; примеси K и L – около 1,4; примесь В – около 1,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В, I и K используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу смеси примесей окскарбазепина.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примесей K и L и примеси A должно быть не менее 4,0.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Хi) вычисляют по формуле:

где Si – площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора А;
S0 – площадь пика окскарбазепина на хроматограмме раствора сравнения.

Допустимое содержание примесей:

- примеси В и I – не более 0,1 % каждая;

- сумма примесей K и L – не более 0,1 %;

- любая другая примесь – не более 0,05 %;

- сумма всех примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,3 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,03 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца окскарбазепина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца окскарбазепина, растворяют в 25 мл ацетонитрила, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора раствором Б до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–7 | 60 | 40
7–8 | 60 → 5 | 40 → 95
8–13 | 5 | 95

Хроматографируют раствор стандартного образца окскарбазепина и испытуемый раствор Б.

Содержание окскарбазепина C15H12N2O2 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика окскарбазепина на хроматограмме испытуемого раствора Б;
S0 – площадь пика окскарбазепина на хроматограмме раствора стандартного образца окскарбазепина;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца окскарбазепина, мг;
W – потеря в массе при высушивании,%;
P – содержание окскарбазепина в фармакопейном стандартном образце окскарбазепина,%.

##### Хранение

Не требует особых условий.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0537 Октенидина дигидрохлорид

Октенидин
Octenidini dihydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

1,1ʹ-Декан-1,10-диилбис[N-октилпиридин-4(1H)-имина] дигидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % октенидина дигидрохлорида C36H62N4·2HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый мелкокристаллический порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в метаноле, легко растворим в метиленхлориде и спирте 96 %, практически нерастворим в диметилформамиде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца октенидина дигидрохлорида.

2. Спектрофотометрия_ (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 до 350 нм должен иметь максимумы при 212 нм и 281 нм и минимумы при 204 нм и 231 нм.

##### Испытания

рН раствора. От 5,0 до 7,5 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3). Допускается нагрев на водяной бане до температуры 40 °С при растворении субстанции.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворитель. Вода—ацетонитрил 40:60.

Подвижная фаза (ПФ). Трифторуксусная кислота—вода—ацетонитрил 1:400:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 60 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 50 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг субстанции и 5 мг 4-октиламинопиридина (N-октилпиридин-4-амин [64690-19-3]), растворяют в 70 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 4-кратное от времени удерживания пика октенидина дигидрохлорида. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Порядок выхода пиков: 4‑октиламинопиридин, октенидина дигидрохлорид.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика октенидина дигидрохлорида должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками 4-октиламинопиридина и октенидина дигидрохлорида должно быть не менее 10,0;

- фактор асимметрии пика (AS) октенидина дигидрохлорида должен быть не более 1,5.

На хроматограмме испытуемого раствора относительное стандартное отклонение площади пика октенидина дигидрохлорида должно быть не более 1,5 % (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси 4-октиламинопиридина умножают на 0,85.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- 4-октиламинопиридин – не более 0,15 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,7 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 2,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 20 мл уксусной кислоты безводной, прибавляют 15 мл ртути(II) ацетата раствора 5 % и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически, используя стеклянный индикаторный электрод (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 31,19 мг октенидина дигидрохлорида C36H62N4·2HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0538 Октреотида ацетат

Октреотид
Octreotidi acetas

Взамен ВФС 42-3552-99

##### Определение

S2,S7-Цикло\{D-фенилаланил-L-цистеинил-L-фенилаланил-D-триптофил-L-лизил-L-треонил-N1-[(2R,3R)-1,3-дигидроксибутан-2-ил]-L-цистеинамида} ацетат.

Cодержит не менее 95,0 % и не более 105,0 % октреотида C49H66N10O10S2 в пересчёте на безводное и свободное от уксусной кислоты и остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый порошок со слабым запахом уксусной кислоты.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало и медленно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

Проводят определения 1 и 2 или 2 и 3.

1. 1H-ЯМР-спектроскопия (ОФС «Спектроскопия ядерного магнитного резонанса»).

- Растворитель. Смесь дейтерированной уксусной кислоты и дейтерия оксида, содержащего 0,03 мг/мл дейтерированного триметилсилилпропионата натрия (ТСП) 10:90.

- Испытуемый раствор. Раствор субстанции в растворителе с концентрацией 2 мг/мл.

- Раствор стандартного образца октреотида ацетата. Раствор стандартного образца октреотида ацетата для ЯМР идентификации в растворителе с концентрацией 2 мг/мл.

- Оборудование. Импульсный ЯМР-спектрометр с рабочей частотой на протонах не менее 300 МГц.

- Параметры регистрации 1H ЯМР спектров

  - Ширина спектра: от 0 до 8 м.д;

  - Температура образца: 25 °С.

- Примечание – Спектры испытуемого раствора и раствора стандартного образца октреотида ацетата должны записываться без вращения образца и при одинаковой температуре.

- Анализ 1H ЯМР спектров:

  - спектр испытуемого раствора должен качественно соответствовать спектру раствора стандартного образца октреотида ацетата после нормализации обоих спектров с целью уравнивания их по интенсивности.

3. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика октреотида на хроматограмме раствора стандартного образца октреотида ацетата (раздел «Количественное определение»).

4. Аминокислотный состав. Определение проводят в соответствии с ОФС «Аминокислотный анализ». Относительное содержание каждой аминокислоты рассчитывают в мольных долях, принимая за единицу одну третью суммарного мольного содержания фенилаланина и лизина, по формуле:

где ni – количество молей соответствующей аминокислоты, нмоль;
∑n(2 Phe, 1 Lys) – сумма мольного содержания фенилаланина и лизина, нмоль.

Относительное содержание аминокислот должно быть в следующих пределах: треонин – от 0,70 до 1,11; лизин – от 0,90 до 1,30; фенилаланин – от 1,80 до 2,20; цистеин – от 1,00 до 2,20; треонинол – от 0,60 до 1,30.

##### Испытания

Удельное вращение. От –52,0 до –62,0 в пересчёте на безводное, свободное от уксусной кислоты и остаточных органических растворителей вещество (0,5 % раствор субстанции в уксусной кислоте ледяной, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 10 мг субстанции в 100 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 4,5 до 6,5 (0,01 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Трифторуксусной кислоты раствор 0,02 %.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца маркера октреотида нециклического для проверки пригодности системы (D-фенилаланил-L-цистеинил-L-фенилаланил-D-триптофил-L-лизил-L-треонил-S-(ацетамидометил)-N-[(2R,3R)-1,3-дигидроксибут-2-ил]-L-цистеинамид [774239-80-4]), растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки (раствор А). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в 40 мл ПФА, прибавляют 1,0 мл раствора А и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель додецилсилильный для хроматографии, 4 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–25 | 90 → 65 | 10 → 35
25–30 | 65 → 10 | 35 → 90
30–35 | 10 | 90
35–40 | 10 → 90 | 90 → 10
40–45 | 90 | 10

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Октреотид – 1 (около 16,5 мин); октреотид нециклический – около 1,1.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика октреотида должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками октреотида и нециклического октреотида должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- любая примесь – не более 0,5 %;

- сумма примесей – не более 2,0 %.

При оценке примесей не учитывают любой пик со временем удерживания менее 5 мин. Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,1 %).

Вода. Не более 10 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 20 мг (точная навеска) субстанции.

Уксусная кислота. От 5,0% до 12,8 %. (ОФС «Определение уксусной кислоты в синтетических пептидах»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 11,67 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции в воде с концентрацией октреотида 10 мг/мл, затем разводят его не менее чем в 100 раз.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца октреотида ацетата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца октреотида ацетата, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца октреотида ацетата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца октреотида ацетата:

- фактор асимметрии пика (AS) октреотида должен быть не менее 0,8 и не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика октреотида должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание октреотида C49H66N10O10S2 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от уксусной кислоты и остаточных органических растворителей вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика октреотида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика октреотида на хроматограмме раствора стандартного образца октреотида ацетата;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца октреотида ацетата, мг;
P - содержание октреотида в фармакопейном стандартном образце октреотида ацетата,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
A – содержание уксусной кислоты в субстанции,%.

##### Хранение

В сухом, защищённом от света месте, при температуре от 2 до 8 °С.

* Приводится для информации.

** Испытания проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0539 Оланзапин (Olanzapinum)

Вводится впервые

##### Определение

2-Метил-4-(4-метилпиперазин-1-ил)-10H-тиено[2,3-b][1,5]бензодиазепин.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % оланзапина C17H20N4S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Жёлтый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде и хлороформе, мало растворим в метаноле и спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца оланзапина.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах этилацетата, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика оланзапина на хроматограмме раствора стандартного образца оланзапина (Б) (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Температура плавления. От 188 до 197 °С (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными или хранят при температуре от 2 до 8 °С не более 20 ч.

Буферный раствор. Растворяют 17,5 г натрия лаурилсульфата в 1950 мл воды, прибавляют 6,7 мл фосфорной кислоты концентрированной и доводят значение рН раствора, медленно прибавляя натрия гидроксида раствор 40 % до 2,5. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 2000 мл и доводят объём раствора водой до метки. В случае образования осадка, необходимо его растворить перед окончательным доведением рН.

Раствор натрия эдетата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 37 мг натрия эдетата, растворяют в буферном растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Растворитель. Ацетонитрил—раствор натрия эдетата 400:600.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 480:520.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор—ацетонитрил 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 4 мг фармакопейного стандартного образца оланзапина для проверки пригодности системы, содержащего примеси B, C и D, в 10 мл растворителя.

Примечание

Примесь В:
2-метил-5,10-дигидро-4H-тиено[2,3-b][1,5]бензодиазепин-4-он [221176-49-4].

Примесь С:
1-метил-4-(2-метил-10H-тиено[2,3-b][1,5]бензодиазепин-4-ил)-1-(хлорметил)пиперазин-1-ий хлорид [719300-59-1].

Примесь D:
1-метил-4-(2-метил-10H-тиено[2,3-b][1,5]бензодиазепин-4-ил)пиперазин 1-оксид [174794-02-6].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 100 | 0
10–20 | 100 → 0 | 0 → 100
20–25 | 0 | 100

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Оланзапин – 1 (около 13 мин); примесь B – около 0,3; примесь D – около 0,9; примесь С – около 1,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей В, С и D используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу оланзапина для проверки пригодности системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси D и оланзапина должно быть не менее 1,5.

Поправочный коэффициент. Для расчёта содержания площадь пика примеси B умножают на 0,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей B, C и D не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика оланзапина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика оланзапина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика оланзапина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,25 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными или хранят при температуре от 2 до 8 °С не более 20 ч.

Буферный раствор. Растворяют 6,9 г натрия дигидрофосфата моногидрата в 950 мл воды, доводят значение pH фосфорной кислотой концентрированной до 2,5, прибавляют 12 г натрия лаурилсульфата и перемешивают. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 470:530.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца оланзапина (А). В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца оланзапина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца оланзапина (Б). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца оланзапина (А) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси A (5-метил-2-(2-нитроанилино)тиофен-2-карбонитрил [138564-59-7]), растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 1,0 мл раствора стандартного образца оланзапина (А) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 20 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 260 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,2-кратное от времени удерживания пика оланзапина. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца оланзапина (Б) и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Оланзапин – 1 (около 7 мин); примесь A – около 0,8.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси A и оланзапина должно быть не менее 2,0;

- фактор асимметрии пика (AS) оланзапина должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика оланзапина должно быть не более 1,0 % (6 введений).

Содержание оланзапина C17H20N4S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика оланзапина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика оланзапина на хроматограмме раствора стандартного образца оланзапина (Б);
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца оланзапина, мг;
P – содержание оланзапина в фармакопейном стандартном образце оланзапина,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В сухом, защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0150 Омепразол (Omeprazolum)

Взамен ФС.2.1.0150.18

##### Определение

2-{(RS)-[(3,5-Диметил-4-метоксипиридин-2-ил)метил]сульфинил}-5-метокси-1H-бензимидазол.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % омепразола C17H19N3O3S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Обладает полиморфизмом.

Растворимость. Очень легко растворим в диметилформамиде, растворим в дихлорметане, умеренно растворим в спирте 96 %, очень мало растворим или практически нерастворим в воде. Растворяется в разбавленных растворах гидроксидов щелочных металлов.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца омепразола.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец омепразола по отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают досуха и регистрируют спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика омепразола на хроматограмме раствора фармакопейного стандартного образца («Количественное определение»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 25 мл метиленхлорида должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность 2 % раствора субстанции в метиленхлориде, измеренная при длине волны 440 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать 0,1 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»), что соответствует не более 0,035 % суммы примесей F и G.

Примечание

Примесь F: 1,3-Диметил-8-метокси-12 тиоксопиридо[1',2':3,4]имидазо [1,2-a]бензимидазол-2(12H)-он [125656-82-8].

Примесь G: 1,3-Диметил-9-метокси-12-тиоксопиридо[1',2':3,4]имидазо [1,2-a]бензимидазол-2(12H)-он [125656-83-9].

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 1,4 г динатрия гидрофосфата додекагидрата в воде и доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 7,6. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 270:730.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 12 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для идентификации пика примеси Е. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 3,0 мг фармакопейного стандартного образца омепразола для идентификации пиков, содержащего примесь E, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мг фармакопейного стандартного образца омепразола и 1,0 мг фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь D:
2-{[(3,5-диметил-4-метоксипиридин-2-ил)метил]сульфонил}-5-метокси-1H-бензимидазол [88546-55-8].

Примесь E:
3,5-диметил-4-метокси-2-{[(RS)-(5-метокси-1H-бензимидазол-2-ил)сульфинил]метил}пиридин-1-оксид [176219-04-8].

Хроматографические условия

Колонка | 125 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 40 мкл; |  |
Время хроматографирования | 5-кратное от времени удерживания омепразола. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для идентификации пика примеси Е, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Омепразол – 1 (около 9 мин); примесь E – около 0,6; примесь D – около 0,8.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси D используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Для идентификации пика примеси Е используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для идентификации пика примеси Е и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу омепразола для идентификации пиков.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси D и омепразола должно быть не менее 3,0; при необходимости увеличивают рН буферного раствора.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей D и E не должна превышать 1,5 площади пика омепразола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика омепразола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь пика омепразола на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают (в вакууме) до постоянной массы 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 60 °С в течение 4 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 5,8 ЕЭ/мг омепразола (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 12 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца омепразола, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

- Объём пробы: 20 мкл.

Хроматографируют стандартный и испытуемый растворы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- фактор ассиметрии пика (АS) омепразола должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика омепразола должно быть не более 1,0 % (6 введений).

Содержание омепразола C17H19N3O3S в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика омепразола на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика омепразола на хроматограмме стандартного раствора;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца омепразола, мг;
W - потеря в массе при высушивании,%;
P - содержание омепразола в фармакопейном стандартном образце омепразола,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте, при температуре от 2 до 8 °C.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0151 Ондансетрона гидрохлорид дигидрат

Ондансетрон
Ondansetroni hydrochloridum dihydricum

Взамен ФС.2.1.0151.18

##### Определение

(3RS)-9-Метил-3-(2-метил-1H-имидазол-1-ил)метил-1,2,3,9-тетрагидро-4H-карбазол-4-она гидрохлорид, дигидрат.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % C18H20 ClN3О в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Растворим в метаноле, умеренно растворим в воде и в спирте 96 %, мало растворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ондансетрона гидрохлорида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме раствора испытуемой субстанции должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме раствора фармакопейного стандартного образца ондансетрона гидрохлорида (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность раствора субстанции, полученного в испытании «Прозрачность раствора», измеренная при длине волны 390 нм в кювете с толщиной слоя 1 см (по сравнению с водой), не должна превышать 0,1 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

рН раствора. От 4,0 до 5,5 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

1. Примесь В

Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 %―метанол―этилацетат―метиленхлорид 2:40:50:90.

Растворитель. Аммиака раствор концентрированный 25 %―этанол 96 % ―метанол 0,5:100:100.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,125 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют 12,5 мг фармакопейного стандартного образца ондансетрона для проверки пригодности системы, содержащего примеси А и В, в 1 мл смеси растворителей.

Примечание

Примесь А: (3RS)-3-[(диметиламино)метил]-9-метил-1,2,3,9-тетрагидро-4H-карбазол-4-он [132659-89-3].

Примесь В: 6,6'-метиленбис{(3RS)-9-метил-3-(2-метил-1H-мидазол-1-ил) метил-1,2,3,9-тетрагидро-4H-карбазол-4-он} [1076198-52-1].

На линию старта пластинки наносят по 20 мкл испытуемого раствора (250 мкг), раствора сравнения (1 мкг) и раствора для проверки пригодности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы должны обнаруживаться три чётко разделённые зоны адсорбции в следующей последовательности по фактору удерживания (Rf): примесь А – около 0,3; примесь В – около 0,4; ондансетрон – около 0,6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции, находящаяся на уровне зоны адсорбции примеси В, по совокупности величины и интенсивности флуоресценции не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,4 %).

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 2,8 г натрия дигидрофосфата моногидрата в 900 мл воды и доводят значение рН натрия гидроксида раствором 1 М до 5,4, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил―буферный раствор 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём ПФ до метки.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ондансетрона примеси А и 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ондансетрона примеси Е, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ондансетрона примеси F и 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ондансетрона примеси G, растворяют в ПФ и доводят объём ПФ до метки.

Стандартный раствор В. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл стандартного раствора А и 1 мл стандартного раствора Б и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца ондансетрона примеси D. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ондансетрона примеси D, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ондансетрона для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси С и D, растворяют в ПФ и доводят объём тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь С: 1,2,3,9-тетрагидро-9-метил-4Н-карбазол-4-он [27387-31-1].

Примесь D: 1,2,3,9-тетрагидро-9-метил-3-метилен-4Н-карбазол-4-он [99614-64-9].

Примесь Е: 1Н-имидазол [288-32-4].

Примесь F: 2-метил-1Н-имидазол [693-98-1].

Примесь G (С-десметилондансетрон): (3RS)-3-[(1H-имидазол-1-ил)метил]-9-метил-1,2,3,9-тетрагидро-4Н-карбазол-4-он [99614-03-6].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель цианосилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 216 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, стандартный раствор А, стандартный раствор Б, стандартный раствор В, раствор стандартного образца ондансетрона примеси D, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ондансетрон – 1 (около 18 мин); примесь Е – около 0,17; примесь F – около 0,20 (Е и F могут элюироваться совместно); примесь С – около 0,35; примесь D – около 0,45; примесь А – около 0,80; примесь G – около 0,89 (А и G могут элюироваться совместно).

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей Е и А используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора А. Для идентификации пика примесей С и D используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу ондансетрона для проверки пригодности хроматографической системы. Для идентификации пиков примесей F и G используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора Б.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (Rs) между пиками примесей С и D должно быть не менее 2,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси С умножают на 0,6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси С не должна превышать площадь пика ондансетрона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси D не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика примеси D на хроматограмме раствора стандартного образца примеси D (не более 0,15 %);

- сумма площадей пиков примесей А и G не должна превышать площадь пика ондансетрона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- сумма площадей пиков примесей Е и F не должна превышать сумму площадей пиков примеси Е и F на хроматограмме стандартного раствора В (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой единичной примеси не должна превышать половину площади пика ондансетрона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика ондансетрона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,4 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,25 от площади пика ондансетрона на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. От 9,0 % до 10,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,25 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 9,9 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции 2 мг/мл, а затем разводят не менее, чем в 160 раз.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 90 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём ПФ до метки.

Раствор стандартного образца ондансетрона гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 90 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ондансетрона гидрохлорида, растворяют в ПФ и доводят объём тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца ондансетрона гидрохлорида и испытуемый раствор.

Содержание ондансетрона гидрохлорида C18H19N3O HCl в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика ондансетрона на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика ондансетрона на хроматограмме раствора стандартного образца ондансетрона гидрохлорида;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца ондансетрона гидрохлорида, мг;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце ондансетрона гидрохлорида,%.

##### Хранение

В герметичной укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0540 Орлистат (Orlistatum)

Вводится впервые

##### Определение

[(2S)-1-[(2S,3S)-3-Гексил-4-оксооксетан-2-ил]тридекан-2-ил][(2S)-4-метил-2-формамидопентаноат].

Содержит не менее 98,0 % и не более 101,5 % орлистата C29H53NO5 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в этаноле и метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца орлистата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика орлистата на хроматограмме раствора стандартного образца орлистата (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –48 до –51 в пересчёте на безводное вещество (3 % раствор субстанции в этаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси.

1. Примесь 1. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Этилацетат—толуол 20:80.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в ацетоне и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси 1. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси 1 ((3S,4S)-3-гексил-4-[(2R)-2-гидрокситридецил]оксетан-2-он [104872-06-2]), растворяют в ацетоне и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мл раствора стандартного образца примеси 1 и доводят объём раствора ацетоном до метки.

Реактив для детектирования. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 г фосфорномолибденовой кислоты, 1 г церия сульфата, прибавляют метанол, обрабатывают ультразвуком в течение 30 мин, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (500 мкг), раствора стандартного образца примеси 1 (1 мкг) и раствора для проверки пригодности хроматографической системы (0,5 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 120 °С в течение 30 мин и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции примеси 1.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции примеси 1 по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца примеси 1 (не более 0,2 %).

2. Примесь 2. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси 2. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси 2, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5 мл полученного раствора и доводят объём раствора метиленхлоридом до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворе стандартного образца примеси 2 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь 2: ди(пропан-2-ил)гидразин-1,2-дикарбоксилат [19740-72-8].

Хроматографические условия

Колонка | капиллярная 30 м × 0,32 мм, покрытая слоем поли[метил(95)фенил(5)]силоксана, 0,25 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Скорость потока | Газ-носитель | 1 мл/мин, |
| Водород | 35 мл/мин, |
| Воздух | 350 мл/мин; |
Деление потока | 20:1; |  |
Объём пробы | 2 мкл. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °C
--- | --- | ---
Колонка | 0–30 | 50 → 170
| 30–34 | 170 → 300
| 34–64 | 300
Инжектор |  | 270
Детектор |  | 280

Хроматографируют раствор стандартного образца примеси 2, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Примесь 2 – около 26 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца примеси 2:

- относительное стандартное отклонение площади пика примеси 2 должно быть не более 10,0 % (6 введений).

Содержание примеси 2 в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси 2 на хроматограмме испытуемого раствора;
S2 – площадь пика примеси 2 на хроматограмме раствора сравнения;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца примеси 2, мг;
a1 – навеска субстанции, мг;
a2 – навеска субстанции, взятая для приготовления раствора сравнения, мг;
P – содержание орлистата в фармакопейном стандартном образце орлистата,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь 2 – не более 0,05 %.

3. Примесь 4 и 8. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Испытуемый раствор и раствор стандартного образца орлистата хранят при температуре 8 °С.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—метанол 170:830.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ацетонитриле, обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца орлистата. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца орлистата, растворяют в ацетонитриле, обрабатывают ультразвуком в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси 4. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,4 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси 4, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 40 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца орлистата, растворяют в ацетонитриле, обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 1 мл раствора стандартного образца примеси 4 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь 4:
[(3S,4R,6S)-3-гексил-2-оксо-6-ундецилтетрагидро-2H-пиран-4-ил][(2S)-4-метил-2-формамидопентаноат]
[130793-27-0].

Примесь 8:
[(7S,8S,10S)-8-гидрокси-7-[(1R)-1-фенилэтил)карбамоил]генэйкозан-10-ил][(2S,3S)-3-метил-2-формамидопентаноат].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм силикагель октилсилильный для хроматографии, 4 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Температура образца | 5 °С; |  |
Скорость потока | 0,6 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 205 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика орлистата. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси 4, раствор стандартного образца орлистата и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Орлистат – 1 (около 40 мин); примесь 4 – около 0,94; примесь 8 – около 1,25.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси 4 используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора стандартного образца примеси 4. Для идентификации пика примеси 8 используют относительное время удерживания соединений.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси 4 должно быть не менее 3.

На хроматограмме раствора стандартного образца орлистата относительное стандартное отклонение площади пика орлистата должно быть не более 2,0 % (6 введений);

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси 8 умножают на 0,23.

Содержание примеси 4 и 8 в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика основного вещества на хроматограмме раствора стандартного образца орлистата;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца орлистата, мг;
P – содержание орлистата в фармакопейном стандартном образце орлистата,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь 4 – не более 0,2 %;

- примесь 8 – не более 0,1 %.

4. Примесь 5. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и хранят в защищённом от света месте.

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 4,1 г натрия ацетата и 40 мг ЭДТА в 950 мл воды, доводят значение pH натрия гидроксида раствором 0,1 М до 7,2, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл, доводят объём раствора водой до метки и прибавляют 2,5 мл тетрагидрофурана.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Растворяют 2,7 г натрия ацетата и 40 мг ЭДТА в 200 мл воды, доводят значение pH натрия гидроксида раствором 0,1 М до 7,2, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Дериватизирующий реагент. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,5 г (точная навеска) фталевого альдегида и 0,5 мл меркаптопропионовой кислоты, прибавляют 40 мл боратного буферного раствора рН 10,4, обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки и перемешивают.

Испытуемый раствор. В мерную колбу с притёртой крышкой вместимостью 20 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 10 мл натрия гидроксида раствора 4 М, герметично закрывают, выдерживают на кипящей водяной бане в течение 1 ч, охлаждают до комнатной температуры и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. Смешивают 1,0 мл полученного раствора, 4 мл боратного буферного раствора рН 10,4 и 1 мл дериватизирующего реагента.

Раствор стандартного образца примеси 5. В мерную колбу с притёртой крышкой вместимостью 20 мл помещают 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси 5, прибавляют 10 м натрия гидроксида раствора 4 М, герметично закрывают, выдерживают на кипящей водяной бане в течение 1 ч, охлаждают до комнатной температуры и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. Смешивают 1 мл полученного раствора, 4 мл боратного буферного раствора рН 10,4 и 1 мл дериватизирующего реагента.

Контрольный раствор. В мерную колбу с притёртой крышкой помещают 10 мл натрия гидроксида раствора 4 М, герметично закрывают, выдерживают на кипящей водяной бане в течение 1 ч и охлаждают до комнатной температуры. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. Смешивают 1,0 мл полученного раствора, 4 мл боратного буферного раствора рН 10,4 и 1 мл дериватизирующего реагента.

Примечание

Примесь 5:
[(2S)-1-[(2S,3S)-3-гексил-4-оксооксетан-2-ил]тридекан-2-ил][(2S,3S)-3-метил-2-формамидопентаноат] [1072902-75-0].

Хроматографические условия

Предколонка | 20 × 2,1 мм силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Колонка | 200 × 2,1 мм силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Температура образца | 5 °С; |  |
Скорость потока | 0,5 мл/мин; |  |
Детектор | флуорометрический, волна возбуждения – 340 нм; волна испускания – 450 нм; |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–20 | 96,7 → 60 | 3,3 → 40
20–24 | 60 → 0 | 40 → 100
24–38 | 0 | 100
38–38,1 | 0 → 96,7 | 100 → 3,3
38,1–45 | 96,7 | 3,3

Хроматографируют раствор стандартного образца примеси 5, испытуемый раствор и контрольный раствор.

Относительное время удерживания соединений. Примесь 5 – около 15 мин.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси 5 используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора стандартного образца примеси 5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца примеси 5 фактор асимметрии пика (AS) примеси 5 должен быть не более 2,0.

Содержание примеси 5 в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси 5 на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика примеси 5 на хроматограмме раствора стандартного образца примеси 5;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца примеси 5, мг;
P – содержание примеси 5 в фармакопейном стандартном образце примеси 5,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь 5 – не более 0,2 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее площади пика примеси 5 на хроматограмме контрольного раствора.

5. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Испытуемый раствор и раствор фармакопейного стандартного образца орлистата хранят при температуре 5 °С.

Подвижная фаза. Фосфорная кислота концентрированная—вода—ацетонитрил 0,05:140:860.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца орлистата. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца орлистата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,5 мг фармакопейного стандартного образца примеси 3, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл полученного раствора, 2 мл раствора стандартного образца орлистата и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь 3: трифенил-λ5-фосфанон [791-28-6].

Примесь 6: (2S)-4-метил-2-формамидопентановая кислота [6113-61-7].

Примесь 7: (2S,3R,5S)-2-гексил-3-гидрокси‐5‐{[(2S)‐2‐формамидо‐

4-метилпентаноил]окси}гексадекановая кислота [130793-28-1].

Примесь 9: [(2S)-1-[(2S,3S)-3-гексил-4-оксооксетан-2-ил]тридекан-2-ил][(2R)-4-метил-2-формамидопентаноат] [104872-28-8].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,9 мм силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 4 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Температура образца | 5 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 195 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика орлистата. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца орлистата и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Орлистат – 1 (около 10,5 мин); примесь 6 – около 0,10; примесь 3 – около 0,13; примесь 7 – около 0,44; примесь 4 – около 0,90; примесь 8 – около 0,90; примесь 9 – около 1,18.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси 3 используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы. Для идентификации пиков примесей 4, 6, 7 и 8 используют относительное время удерживания соединений.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси 3 должно быть не менее 3.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь 6 – 0,25; примесь 3 – 0,03.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика орлистата на хроматограмме раствора стандартного образца орлистата;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца орлистата, мг;
P – содержание орлистата в фармакопейном стандартном образце орлистата,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь 3 – не более 0,05 %;

- примесь 6 – не более 0,2 %;

- примесь 7 – не более 0,2 %;

- примесь 9 – не более 0,2 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Вода. Не более 0,2 %. (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ одновременно с испытанием «Родственные примеси. Другие примеси».

Хроматографируют раствор стандартного образца орлистата и испытуемый раствор.

Содержание орлистата C29H53NO5 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика орлистата на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика основного вещества на хроматограмме раствора стандартного образца орлистата;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца орлистата, мг;
P – содержание орлистата в фармакопейном стандартном образце орлистата,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, при температуре от 2 до 8 °С.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0541 Орнидазол (Ornidazolum)

Вводится впервые

##### Определение

(2RS)-1-(2-Метил-5-нитро-1H-имидазол-1-ил)-3-хлорпропан-2-ол.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % орнидазола C7H10ClN3O3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

* Чувствителен к действию света.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 %, легко растворим или растворим в хлороформе, умеренно или мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца орнидазола.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в спирте 95 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 95 % до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 до 400 нм должен иметь максимумы при 230 и 312 нм и минимум при 262 нм.

##### Испытания

Температура плавления. От 85 до 90 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—вода 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Полученный раствор переносят в колбу с обратным холодильником, нагревают до закипания, выдерживают в течение 1 ч и охлаждают до комнатной температуры. Смешивают полученный раствор с раствором стандартного образца примеси А в соотношении 1:1.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А: 2-метил-5-нитро-1H-имидазол [696-23-1].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Температура образца | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 318 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика орнидазола. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси А, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Орнидазол – 1 (около 24 мин); примесь А – около 0,25.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора стандартного образца примеси А.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика орнидазола должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и примеси с относительным временем удерживания 0,28 должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора стандартного образца примеси А фактор асимметрии пика (AS) примеси А должен быть не более 2,0;

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей (кроме примеси А) не должна превышать пятикратную площадь пика орнидазола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

Содержание примеси А в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси А на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика примеси А на хроматограмме раствора стандартного образца примеси А;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца примеси А, мг;
P – содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце примеси А,%.

- примесь А – не более 0,2 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают до постоянной массы 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 60 °С и остаточном давлении 1,5–2,5 кПа.

Железо. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Железо» (метод 3) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,5 г субстанции (ОФС «Сульфатная зола»), с использованием стандартного раствора железо(III)-иона 30 мкг/мл.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,2 г субстанции в 20 мл воды и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 2), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,23 ЕЭ на 1 мг орнидазола (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты безводной. Полученный раствор титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с индикатором (2 капли нафтолбензеина раствора 0,1 %) до перехода окраски в зелёный цвет.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 21,96 мг орнидазола C7H10ClN3O3.

##### Хранение

В сухом, защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0542 Осельтамивира фосфат

Осельтамивир
Oseltamiviri phosphas

Вводится впервые

##### Определение

Этил[(3R,4R,5S)-5-амино-4-ацетамидо-3-(пентан-3-илокси)циклогекс-1-ен-1-карбоксилата] фосфат (1:1).

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % осельтамивира фосфата C16H28N2O4·H3PO4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в метаноле, практически нерастворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1, снятый в диске с калия бромидом, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца осельтамивира фосфата.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика осельтамивира на хроматограмме раствора стандартного образца осельтамивира фосфата (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на фосфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –30,7 до –32,6 в пересчёте на сухое вещество (1,0 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси

Примесь В. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор аммония ацетата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,54 г аммония ацетата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Раствор аммония ацетата—ацетонитрил—вода для хроматографии 100:300:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси В. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси В, растворяют в 5 мл этанола и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца осельтамивира фосфата, не содержащего примесь В, растворяют в растворе стандартного образца примеси В и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси В и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь В:
этил{(1R,2R,3R,4R,5S)-2-азидо-5-амино-4-ацетамидо-3-(пентан-3-илокси)циклогексан-1-карбоксилат}.

Хроматографические условия

Колонка | 50 × 3,0 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 0,5 мл/мин (без деления потока); |  |
| Примечание - Возможно использование скорости потока до 1,5 мл/мин при применении деления потока;
Детектор | масс-спектрометрический; |  |
Объём пробы | 1 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика осельтамивира фосфата. |

Условия детектирования

Приводимые значения параметров являются рекомендуемыми и при необходимости могут быть изменены при условии выполнения критериев пригодности системы.

Источник ионизации | электроспрей (ESI);
Режим ионизации | положительный (ESI+);
Режим детектирования | мониторинг избранного иона (SIM);
Величина m/z для детектируемого иона | 356,2;
Напряжение на капилляре | 3 кВ;
Время выдержки | 580 мс;
Напряжение на фрагментаторе | 120 В;
Температура газа | 350 °С;
Расход газа-осушителя | 13 л/мин;
Давление небулайзера | 345 кПа.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси В используют хроматограмму раствора стандартного образца примеси В.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси В должно быть не менее 10,0.

Содержание примеси В в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси В на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика примеси В на хроматограмме раствора сравнения;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска стандартного образца примеси В, мг;
P – содержание примеси В в стандартном образце примеси В,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь В – не более 0,01 %.

Примесь Н. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

* Гигроскопична.

Силулирующий реагент. Хлортриметилсилан-гексаметилдисилазан-пиридин безводный 1:2:10.

Испытуемый раствор. К 0,15 г субстанции прибавляют 10,0 мл силулирующего реагента, перемешивают, нагревают при температуре 60 °С в течение 20 мин и центрифугируют в течение 10 мин при 1500 об/мин.

Стандартный раствор. Растворяют 15 мг (точная навеска) стандартного образца примеси Н в 1 мл пиридина безводного. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мкл полученного раствора, прибавляют 10 мкл испытуемого раствора и доводят объём раствора пиридином безводным до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл стандартного раствора и доводят объём раствора пиридином безводным до метки.

Примечание

Примесь H: трибутил-λ5-фосфанон [814-29-9].

Хроматографические условия

Колонка | капиллярная 30 м × 0,32 мм, покрытая поли(диметил)силоксаном, 0,25 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Расход: газа-носителя (азот) | 1,2 мл/мин; |  |
Деление потока | 1:50; |  |
Объём пробы | 1 мкл; |  |
Время хроматографирования | 21 мин. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °C
--- | --- | ---
Колонка | 0–2 | 180
| 2–11 | 180 → 250
| 11–21 | 250
Инжектор |  | 260
Детектор |  | 260

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Осельтамивир – 1 (около 10 мин); примесь Н – около 0,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси H используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси Н должно быть не менее 10,0.

На хроматограмме стандартного раствора фактор асимметрии пика (AS) примеси Н должен быть не более 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси Н не должна превышать 1,5 площади пика примеси Н на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,15 %).

Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 6,8 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды, доводят значение рН калия гидроксида раствором 1 М до 6,0, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—метанол—буферный раствор 135:245:620.

Растворитель. Ацетонитрил—метанол—вода 135:245:620.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 15 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А и 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси С, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А:
(3R,4R,5S)-4-амино-5-ацетамидо-3-(пентан-3-илокси)циклогекс-1-ен-1-карбоновая кислота [1364932-19-3].

Примесь С:
(3R,4R,5S)-5-амино-4-ацетамидо-3-(пентан-3-илокси)циклогекс-1-ен-1-карбоновая кислота [187227-45-8].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 50 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 207 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика осельтамивира. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Осельтамивир – 1 (около 17 мин); примесь А – около 0,17; примесь С – около 0,18.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А и C используют относительное время удерживания и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика осельтамивира должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и примеси C должно быть не менее 1,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси С умножают на поправочный коэффициент 0,71.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси С не должна превышать трёхкратную площадь пика осельтамивира на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика осельтамивира на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать семикратную площадь пика осельтамивира на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,7 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца осельтамивира фосфата. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 15 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца осельтамивира фосфата, не содержащего примесь В, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца осельтамивира фосфата и испытуемый раствор.

Содержание осельтамивира фосфата C16H28N2O4·H3PO4 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси В на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика примеси В на хроматограмме раствора сравнения;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска стандартного образца примеси В, мг;
P – содержание примеси В в стандартном образце примеси В,%.

##### Хранение

В сухом, защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0152 Офлоксацин (Ofloxacinum)

Взамен ФС.2.1.0152.18

##### Определение

(3RS)-3-Метил-10-(4-метилпиперазин-1-ил)-7-оксо-9-фтор-2,3-дигидро-7H- пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % офлоксацина C18H20FN3O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. От белого с желтоватым оттенком до светло-жёлтого цвета кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в уксусной кислоте ледяной, умеренно растворим в хлороформе, мало растворим в воде и метаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца офлоксацина.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 6,5 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 до 400 нм должен иметь максимумы поглощения при 227 и 298 нм и минимум поглощения при 264 нм.

##### Испытания

Угол вращения. От –0,1° до +0,1° (3 % раствор субстанции в смеси метанол—метиленхлорид 1:4, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл натрия гидроксида раствора 10 М должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность раствора 0,5 г субстанции в 100 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М, измеренная при длине волны 440 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать 0,25 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 3,08 г аммония ацетата и 5,38 г натрия перхлората в 900 мл воды и доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 2,2. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 160:840.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол—ацетонитрил—буферный раствор 200:300:500.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 10:60.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в 42 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси D и 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси Е, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А:
(3RS)-3-метил-7-оксо-9,10-дифтор-2,3-дигидро-7H-пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота [82419-35-0].

Примесь D:
(3RS)-3-метил-9-(4-метилпиперазин-1-ил)-7-оксо-10-фтор-2,3-дигидро-7H- пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота [197291-75-1].

Примесь Е: (3RS)-3-метил-10-(пиперазин-1-ил)-7-оксо-9-фтор-2,3-дигидро-7H- пиридо[1,2,3-de][1,4]бензоксазин-6-карбоновая кислота [82419-52-1].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 38 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 240 нм (для определения примеси А); спектрофотометрический, 294 нм (для определения других примесей); |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 100 | 0
5–10 | 100 → 82 | 0 → 18
10–15 | 82 → 40 | 18 → 60
15–30 | 40 | 60

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения, раствор стандартного образца примеси А и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Офлоксацин – 1 (около 10 мин); примесь D – около 0,7; примесь E – около 0,93; примесь А – около 2,8.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют хроматограмму раствора стандартного образца примеси А. Для идентификации пиков примесей D и Е используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения отношение сигнал/шум (S/N) для пика офлоксоцина должно быть не менее 90.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (Rs) между пиками примеси Е и офлоксацина должно быть не менее 2,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси D умножают на 4,5.

Содержание примеси А в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика примеси А на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика примеси А на хроматограмме раствора стандартного образца примеси А;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца примеси А, мг;
P - содержание примеси А в фармакопейном стандартном образце примеси А,%.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика офлоксацина на хроматограмме раствора сравнения.

Допустимое содержание примесей:

- примесь А – не более 0,2 %;

- примесь D – не более 0,1 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма всех примесей – не более 0,4 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,2 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Мышьяк. Не более 0,0001 % (ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения используют 1 г субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). К 10 мг субстанции прибавляют 1,0 мл воды для инъекций и 1 мкл уксусной кислоты ледяной.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 100 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 36,14 мг офлоксацина C18H20FN3O4.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0543 Пазопаниба гидрохлорид

Пазопаниб
Pazopanibi hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

5-({4-[(2,3-Диметил-2H-индазол-6-ил)(метил)амино]пиримидин-2-ил}амино)-2-метилбензолсульфонамида гидрохлорид.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % пазопаниба гидрохлорида C21H23N7O2S·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с жёлтым или серым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в диметилсульфоксиде, мало или очень мало растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика пазопаниба на хроматограмме раствора стандартного образца пазопаниба гидрохлорида (раздел «Количественное определение»).

2. Качественная реакция. В колбу вместимостью 50 мл помещают 9 мл пропионового ангидрида, 1 мл уксусной кислоты и 4 г лимонной кислоты, нагревают при постоянном перемешивании до полного растворения лимонной кислоты. К 3 мл полученного раствора прибавляют 5 мг субстанции, перемешивают в течение 1 мин и нагревают при постоянном перемешивании до кипения; должно появиться тёмное фиолетово-красное окрашивание.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 1,36 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят значение рН фосфорной кислотой до 3,00, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). ПФА—метанол 150:850.

Растворитель. Вода—метанол 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В колбу вместимостью 20 мл помещают 5 мг субстанции, прибавляют 0,2 мл водорода пероксида, нагревают на водяной бане при температуре 90 °С в течение 5 мин, прибавляют 15 мл растворителя и фильтруют. Раствор используют свежеприготовленным.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель алкиламидный эндкепированный для хроматографии, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 215 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 70 | 30
5–30 | 70 → 20 | 30 → 80
30–35 | 20 → 70 | 80 → 30
35–45 | 70 | 30

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Время удерживания пазопаниба – около 14 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками пазопаниба и примеси с относительным временем удерживания около 1,1 должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора сравнения отношение сигнал/шум (S/N) для пика пазопаниба должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. От 6,5 % до 8,5 % в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 60 мл метанола, прибавляют к полученному раствору азотную кислоту разведённую 6 % до кислой реакции (проба на Конго красному бумаге), прибавляют около 0,5 г бария нитрата и титруют 0,1 М раствором серебра нитрата. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 3,545 мг хлорид-иона.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца пазопаниба гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца пазопаниба гидрохлорида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца пазопаниба гидрохлорида и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца пазопаниба гидрохлорида:

- фактор асимметрии пика (AS) пазопаниба должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика пазопаниба должно быть не более 2,0 % (6 введений);

Содержание пазопаниба гидрохлорида C21H23N7O2S·HCl в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика пазопаниба на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика пазопаниба на хроматограмме раствора стандартного образца пазопаниба гидрохлорида;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца пазопаниба гидрохлорида, мг;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание пазопаниба гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце пазопаниба гидрохлорида,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0544 Паклитаксел (Paclitaxelum)

Вводится впервые

##### Определение

[4,10β-Бис(ацетилокси)-13α-{[(2R,3S)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β-дигидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % паклитаксела C47H51NO14 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Субстанцию получают из природного сырья или производят полусинтетическим способом.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде, растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца паклитаксела.

- Если спектры различаются, растворяют по отдельности 10 мг испытуемой субстанции и 10 мг фармакопейного стандартного образца в 0,4 мл метиленхлорида, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика паклитаксела на хроматограмме раствора стандартного образца паклитаксела (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –49,0 до –55,0 в пересчёте на безводное вещество (1,0 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл метанола должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

1. Для субстанции, полученной полусинтетическим способом. Растворы, содержащие паклитаксел и его примеси, используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—вода 200:300.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в ацетонитриле, при необходимости используя ультразвуковую баню, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси 8. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 7,5 мг фармакопейного стандартного образца примеси 8, растворяют в ацетонитриле, встряхивают 10 мин и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 30 мг фармакопейного стандартного образца паклитаксела, прибавляют 1,0 мл раствора стандартного образца примеси 8, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора для проверки пригодности хроматографической системы и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Примечание

Примесь 1 (10-дезацетилбаккатин III):
[4-(ацетилокси)-1,7β,10β,13α-тетрагидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат [32981-86-5].

Примесь 2 (баккатин III):
[4,10β-бис(ацетилокси)-1,7β,13α-тригидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат [27548-93-2].

Примесь 3:
[(2R,4S,5S,7R,10S,12S,13S,15S,16S)-2,10-бис(ацетилокси)- 15-{[(2R,3S)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-5,13-дигидрокси-4,16,17,17-тетраметил-3-оксо-8-оксапентацикло[11.3.1.01,11.04,11.07,10]гептадекан-12-ил]бензоат [146139-03-9].

Примесь 4 (10-дезацетилпаклитаксел):
[4-(ацетилокси)-13α-{[(2R,3S)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β,10β-тригидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат [78432-77-6].

Примесь 5 (2-дебензоилпаклитаксел-2-пентеноат):
[4,10β-бис(ацетилокси)-13α-{[(2R,3S)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β-дигидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил][(2E)-2-метилбут-2-еноат]
[173101-54-7].

Примесь 6:
[5β,10β-бис(ацетилокси)-13α-{[(2R,3S)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,2α,4,7β-тетрагидрокси-9-оксотакс-11-ен-20-ил]бензоат [932042-85-8].

Примесь 7 (10-ацетоацетилпаклитаксел):
[4-(ацетилокси)-13α-{[(2R,3S)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β-дигидрокси-9-оксо-10β-[(3-оксобутаноил)окси]-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат.

Примесь 8 (10-дезацетил-7-эпипаклитаксел):
[4-(ацетилокси)-13α-{[(2R,3S)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β,10α-тригидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат [78454-17-8].

Примесь 9 (7-эпипклитаксел):
[4,10β-бис(ацетилокси)-13α-{[(2R,3S)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7α-дигидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат [105454-04-4].

Примесь 10:
[4-(ацетилокси)-13α-бис{[(2R,3S)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-10β-бис{[(2S,3S)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β-дигидрокси-2-гидрокси)окси]-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат.

Примесь 11 (7-ацетилпаклитаксел):
[4,7β,10β-трис(ацетилокси)-13α-{[(2R,3S)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1-гидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат [92950-39-5].

Примесь 12 (13-O-триэтилсилилбаккатин III):
[4,10β-бис(ацетилокси)-1,7β-дигидрокси-9-оксо-13α-[(триэтилсилил)окси]-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат [208406-86-4].

Примесь 13 (7-O-триэтилсилилпаклитаксел):
[4,10β-бис(ацетилокси)-13α-{[(2R,3S)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1-гидрокси-9-оксо-7β-[(триэтилсилил)окси]-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат [148930-55-6].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 227 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–26 | 100 | 0
26–60 | 100 → 17 | 0 → 83
60–67 | 17 → 100 | 83 → 0
67–75 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Паклитаксел – 1 (около 21 мин); примесь 1 – около 0,11; примесь 2 – около 0,19; примесь 3 – около 0,42; примесь 4 – около 0,47; примесь 5 – около 0,80; примеси 6 и 7 – около 0,92; примесь 8 – около 0,94; примесь 9 – около 1,37; примесь 10 – около 1,45; примесь 11 – около 1,54; примесь 12 – около 1,80; примесь 13 – около 2,14.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси 8 должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси 8 и паклитаксела должно быть не менее 1,2;

- фактор асимметрии пика (AS) паклитаксела должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика паклитаксела должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь 1 – 1,24; примесь 2 – 1,29; примесь 3 – 1,39; примесь 12 – 1,75.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- примесь 5 – не более 0,7 %;

- примесь 11 – не более 0,6 %;

- примеси 4, 9 и 10 – не более 0,5 % каждая;

- примесь 13 – не более 0,3 %;

- примесь 2 – не более 0,2 %;

- примеси 1, 3 и 12 – не более 0,1 % каждая;

- сумма примесей 6, 7 и 8 – не более 0,4 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 2,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика примеси 8 на хроматограмме раствора для оценки чувствительности хроматографической системы (менее 0,06 %).

2. Для субстанции, полученной из природного сырья. Растворы, содержащие паклитаксел и его примеси, используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Вода.

Растворитель. Уксусная кислота—метанол 1:200.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в растворителе, при необходимости используя ультразвуковую баню, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца паклитаксела. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мг фармакопейного стандартного образца паклитаксела, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают по 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси 15 и фармакопейного стандартного образца примеси 8, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца паклитаксела и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь 2 (баккатин III):
[4,10β-бис(ацетилокси)-1,7β,13α-тригидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат [27548-93-2].

Примесь 4 (10-дезацетилпаклитаксел):
[4-(ацетилокси)-13α-{[(2R,3S)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β,10β-тригидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат [78432-77-6].

Примесь 8 (10-дезацетил-7-эпипаклитаксел):
[4-(ацетилокси)-13α-{[(2R,3S)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β,10α-тригидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат [78454-17-8].

Примесь 9 (7-эпипклитаксел):
[4,10β-бис(ацетилокси)-13α-{[(2R,3S)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7α-дигидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат [105454-04-4].

Примесь 14 (7-ксилозилпаклитаксел):
[4,10β-бис(ацетилокси)-13α-{[(2R,3S)-3-бензамидо-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1-гидрокси-7β-[(β-D-ксилопиранозил)окси]-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат [90332-66-4].

Примесь 15 (цефаломанин):
[4,10β-бис(ацетилокси)-1,7β-дигидрокси-13α-{[(2R,3S)-2-гидрокси-3-[(2E)-2-метилбут-2-енамидо]-3-фенилпропаноил]окси}-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат [71610-00-9].

Примесь 16 (2'',3''-дигидроцефаломанин):
[4,10β-бис(ацетилокси)-13α-{[(2R,3S)-2-гидрокси-3-[(2RS)-2-метилбутанамидо]-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β-дигидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат [159001-25-9].

Примесь 17:
[4,10β-бис(ацетилокси)-13α-{[(2R,3S)-2-гидрокси-3-фенил-3-(2-фенилацетамидо)пропаноил]окси}-1,7β-дигидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат [173101-56-9].

Примесь 18 (3'',4''-дегидропаклитаксел C):
[4,10β-бис(ацетилокси)-13α-{[(2R,3S)-3-[(3E)-гекс-3-енамидо]-2-гидрокси-3-фенилпропаноил]окси}-1,7β-дигидрокси-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат [502626-06-4].

Примесь 19 (7-эпицефаломаннин):
[4,10β-бис(ацетилокси)-1,7α-дигидрокси-13α-{[(2R,3S)-2-гидрокси-3-[(2E)-2-метилбут-2-енамидо]-3-фенилпропаноил]окси}-9-оксо-5β,20-эпокситакс-11-ен-2α-ил]бензоат [150547-36-7].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель пентафторфенилпропильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 2,6 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 227 нм; |  |
Объём пробы | 15 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–35 | 35 | 65
35–60 | 35 → 80 | 65 → 20
60–70 | 80 → 35 | 20 → 65
70–80 | 35 | 65

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца паклитаксела и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Паклитаксел – 1; примесь 2 – около 0,24; примесь 4 – около 0,53; примесь 14 – около 0,57; примеси 15 и 16 – около 0,78; примесь 8 – около 0,86; примеси 17 и 18 – около 1,10; примесь 19 – около 1,40; примесь 9 – около 1,85.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика паклитаксела должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси 15 и примеси 8 должно быть не менее 1,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца паклитаксела относительное стандартное отклонение площади пика паклитаксела должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примеси 15 и 16 – 1,26; примесь 2 – 1,29.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- примеси 4, 8 и 9 – не более 0,5 % каждая;

- примесь 19 – не более 0,3 %;

- примеси 2 и 14 – не более 0,2 % каждая;

- сумма примесей 15 и 16 – не более 0,5 %;

- сумма примесей 17 и 18 – не более 0,5 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 2,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 % от суммы площадей всех пиков.

Вода. Не более 3,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,05 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,4 ЕЭ на 1 мг паклитаксела (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 5 мг паклитаксела в 1 мл этилового спирта 96 %.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—вода 450:550.

Растворитель. Уксусная кислота—метанол 1:200.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе, при необходимости используя ультразвуковую баню, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца паклитаксела. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца паклитаксела, растворяют в растворителе, при необходимости используя ультразвуковую баню, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель пентафторфенилпропильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 227 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 18 мин. |  |

Хроматографируют раствор стандартного образца паклитаксела и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца паклитаксела:

- фактор асимметрии пика (AS) паклитаксела должен быть не более 1,3;

- относительное стандартное отклонение площади пика паклитаксела должно быть не более 1,5 % (6 введений);

Содержание паклитаксела C47H51NO14 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика паклитаксела на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика паклитаксела на хроматограмме раствора стандартного образца паклитаксела;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца паклитаксела, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание паклитаксела в фармакопейном стандартном образце паклитаксела,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0153 Папаверина гидрохлорид

Папаверин
Papaverini hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0153.18

##### Определение

1-[(3,4-Диметоксифенил)метил]-6,7-диметоксиизохинолина гидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % папаверина гидрохлорида C20H21NO4·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или белые или почти белые кристаллы.

Растворимость. Растворим в хлороформе, умеренно растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца папаверина гидрохлорида.

2. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля GF254.

- Подвижная фаза (ПФ). Диэтиламин—этилацетат—толуол 10:20:70.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца папаверина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца папаверина гидрохлорида, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 10 мкл (5 мкг) испытуемого раствора и раствора стандартного образца папаверина гидрохлорида. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С в течение 2 ч и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

- Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и степени подавления флуоресценции должна соответствовать зоне адсорбции папаверина гидрохлорида на хроматограмме раствора стандартного образца папаверина гидрохлорида.

3. Качественная реакция. К 0,1 г субстанции прибавляют 1 мл серной кислоты концентрированной и нагревают; должно появиться фиолетовое окрашивание.

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Растворяют 0,5 г растёртой субстанции в 25 мл воды, свободной от углерода диоксида, при нагревании до 50 °С. После охлаждения раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном ВY6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН. От 3,0 до 4,5 (2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Легко карбонизируемые примеси. К 50 мг субстанции прибавляют 5 мл серной кислоты концентрированной и выдерживают раствор в течение 15 мин. Полученный раствор должен выдерживать сравнение с эталоном R4 или Y4 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Фосфатный буферный раствор рН 3,0 (1).

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Подвижная фаза В (ПФВ). Метанол.

Растворитель. Ацетонитрил—ПФА 20:80.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 12 мг фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А:
(3S)-3-[(5R)-6-метил-4-метокси-5,6,7,8-тетрагидро[1,3]диоксоло[4,5-g]изохинолин-5-ил]-6,7-диметокси-2-бензофуран-1(3H)-он [128-62-1].

Примесь В:
(RS)-[(3,4-диметоксифенил)метил](6,7-диметоксиизохинолин-1-ил)метанол [482-76-8].

Примесь С:
1-[(3,4-диметоксифенил)метил]-6,7-диметокси-3,4-дигидроизохинолин [6957-27-3].

Примесь D:
[(3,4-диметоксифенил)метил](6,7-диметоксиизохинолин-1-ил)метанон [522-57-6].

Примесь E:
(1RS)-1-[(3,4-диметоксифенил)метил]-6,7-диметокси-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин [13074-31-2].

Примесь F:
2-(3,4-диметоксифенил)-N-[2-(3,4-диметоксифенил)этил]ацетамид [139-76-4].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октилсилильный, деактивиронный по отношению к основаниям, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 238 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,% | ПФВ,%
--- | --- | --- | ---
0–30 | 85 | 5 | 10
5–12 | 85 → 60 | 5 | 10 → 35
12–20 | 60 | 5 | 35
20–24 | 60 → 40 | 5 → 20 | 35 → 40
24–27 | 40 | 20 | 40
27–32 | 40 → 85 | 20 → 5 | 40 → 10

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Папаверин – 1 (около 24 мин), примесь Е – около 0,7; примесь С – около 0,75; примесь В – около 0,8; примесь А – около 0,9; примесь F – около 1,1; примесь D – около 1,2.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и папаверина должно быть не менее 1,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь А – 6,2; примесь С – 2,7; примесь D – 0,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика папаверина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 5 раз превышать площадь пика папаверина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Железо. Не более 0,003 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Железо» в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции (ОФС «Сульфатная зола»).

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 2,9 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции в воде с концентрацией 10 мг/мл, а затем разводят его не менее чем в 100 раз.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 1,0 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 20 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 37,59 мг папаверина гидрохлорида С20Н21NO4HCl.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0154 Парацетамол (Paracetamolum)

Взамен ФС.2.1.0154.18

##### Определение

N-(4-Гидроксифенил)ацетамид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % парацетамола C8H9NO2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 %, растворим в ацетоне, умеренно растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца парацетамола.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50,0 мг субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл полученного раствора, прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора, снятый сразу после приготовления раствора, в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимум при 249 нм. Удельный показатель поглащения в максимуме должен быть от 860 до 980.

3. Качественная реакция. Встряхивают 0,1 г субстанции с 10 мл воды и прибавляют 0,5 мл железа(III) хлорида раствора 3 %; должно появиться сине-фиолетовое окрашивание.

##### Испытания

Температура плавления. От 168 до 172 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

рН раствора. От 5,4 до 6,6 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Раствор тетрабутиламмония гидроксида. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 4,6 г тетрабутиламмония гидроксида раствора 40 %, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Растворитель. Динатрия гидрофосфата раствор 0,1 М—натрия гидрофосфата раствор 0,05 М 1:1.

Подвижная фаза (ПФ). Раствор тетрабутиламмония гидроксида—растворитель 500:750.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 2,5 мл раствора тетрабутиламмония гидроксида и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси K и 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси J, растворяют в метаноле и доводят объём тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь J (хлорацетанилид): N-(4-хлорфенил) ацетамид [539-03-7].

Примесь K: 4-аминофенол [123-30-8].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 245 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 12-кратное от времени удерживания парацетамола. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Парацетамол – 1,0 (около 4 мин); примесь K– около 0,8; примесь J – около 7.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси K и парацетамола должно быть не менее 4,0;

- отношение сигнал/шум для пика примеси J должно быть не менее 50.

Содержание примеси K и J в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика примеси K или J на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика примеси K или J на хроматограмме стандартного раствора;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца примеси K или J, мг.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (Y) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика парацетамола на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Допустимое содержание примесей:

- примесь K – не более 0,005 %;

- примесь J – не более 0,001 %;

- любая другая примесь – не более 0,05 %;

- сумма примесей – не более 0,1 %.

Не учитывают пики примесей, кроме примесей J и K, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,01 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты»). Встряхивают 0,5 г субстанции с 25 мл воды в течение 2 мин и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Хлориды. Не более 0,01% (ОФС «Хлориды»). Для определения используют 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Сульфаты».

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины: Не более 0,1 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Кипятят 0,25 г (точная навеска) субстанции с обратным холодильником с 10 мл серной кислоты раствора 50 % в течение 1 ч. Холодильник промывают 30 мл воды, объём раствора доводят водой до 80 мл, прибавляют 1,0 г калия бромида и титруют 0,1 М раствором натрия нитрита (ОФС «Нитритометрия»). Конечную точку титрования устанавливают по йодкрахмальной бумаге.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 15,12 мг парацетамола C8H9NO2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанций, предназначенных для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0545 Пеметрексед динатрия гептагидрат

Пеметрексед
Pemetrexedum dinatricum heptahydricum

Вводится впервые

##### Определение

(2S)-2-{4-[2-(2-Амино-4-оксо-4,7-дигидро-1H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-ил)этил]бензамидо}пентандикарбоксилат динатрия гептагидрат.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % пеметрекседа динатрия C20H19N5Na2O6 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 % и метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца пеметрекседа динатрия гептагидрата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика пеметрекседа на хроматограмме раствора стандартного образца пеметрекседа динатрия гептагидрата (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

* Прозрачность раствора. Опалесценция раствора 0,56 г субстанции в 10,0 мл воды не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

* Цветность раствора. Оптическая плотность раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», измеренная в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 580 нм, не должна превышать 0,10 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

рН. От 7,5 до 8,4 (раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют сразу после приготовления или хранят при температуре 2–8 °С не более 24 ч.

Буферный раствор. Растворяют 1,45 г аммония формиата в 900 мл воды и доводят значение рН муравьиной кислотой безводной до 3,5. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 50:950.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—буферный раствор 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают около 20 мг субстанции, растворяют в 80 мл воды и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 30 мг субстанции, растворяют в 7 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Полученный раствор нагревают при 70 °С в течение 40 мин и охлаждают. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь А:
(2S)-2-{4-[2-(2-Амино-1-метил-4-оксо-4,7-дигидро-1H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-ил)этил]бензамидо}пентандикарбоновая кислота
[869791-42-4].

Примесь В:
(2S,2'S)-2,2'-{[(5R)-2,2'-Диамино-4,4',6-триоксо-1,4,4',6,7,7'-гексагидро-1'H,5H-[5,6'-бипирроло[2,3-d]пиримидин]-5,5'-диил]бис[(этан-2,1-диил)бензол-4,1-диил]карбонилимино)}дипентандиовая кислота
[1802552-04-0].

Примесь С:
(2S,2'S)-2,2'-{[(5S)-2,2'-Диамино-4,4',6-триоксо-1,4,4',6,7,7'-гексагидро-1'H,5H-[5,6'-бипирроло[2,3-d]пиримидин]-5,5'-диил]бис[(этан-2,1-диил)бензол-4,1-диил]карбонилимино)}дипентандиовая кислота
[1802552-16-4].

Примесь D:
(2S)-2-[(4S)-4-{4-[2-(2-Амино-4-оксо-4,7-дигидро-3H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-ил)этил]бензамидо}-4-карбоксибутанамидо]пентандикарбоновая кислота
[144051-68-3].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 250 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–3 | 100 | 0
3–45 | 100 → 0 | 0 → 100

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Пеметрексед – 1 (около 25 мин); примесь А ‒ около 0,82; примесь В – около 0,87; примесь С ‒ около 0,88; примесь D ‒ около 0,91.

Идентификация примесей. Хроматограмма раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы используется для идентификации пиков примесей B и С.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика пеметрекседа должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси В и примеси С должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей А, D не должны более чем в 1,5 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать шестикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Энантиомерная чистота (примесь Е). Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют сразу после приготовления или хранят при температуре 2–8 °С не более 24 ч.

Буферный раствор. Растворяют 8,0 г β-циклодекстрина в 900 мл воды, прибавляют 15 мл триэтиламина, 6 мл фосфорной кислоты концентрированной и доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 6,00. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 50:950.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают около 12 мг субстанции, растворяют в 40 мл воды и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 3,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 6 мг стандартного образца пеметрекседа для проверки пригодности системы, растворяют в 15 мл воды и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь Е:
(2R)-2-{4-[2-(2-Амино-4-оксо-4,7-дигидро-3H-пирроло[2,3-d]пиримидин-5-ил)этил]бензамидо}пентандикарбоновая кислота
[150399-23-8].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика пеметрекседа. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Пеметрексед – 1 (около 25 мин); примесь Е – около 0,94.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси Е и пеметрекседа должно быть не менее 5,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) пеметрекседа должен быть не более 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси Е не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Промывка колонки

Время, мин | ПФ,% | Вода,% | Ацетонитрил,%
--- | --- | --- | ---
0–4 | 100 → 0 | 0 → 50 | 0 → 50
4–9 | 0 | 50 | 50
9–14 | 0 | 50 → 10 | 50 → 90
14–54 | 0 | 10 | 90
54–69 | 0 | 10 → 95 | 90 → 5
69–100 | 0 | 95 | 5

Вода. От 19,0 % до 22,1 %.(ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 20 мг (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 2), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,17 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют сразу после приготовления или хранят при температуре 2–8 °С не более 24 ч.

Буферный раствор. Растворяют 1,7 мл уксусной кислоты ледяной в 900 мл воды и доводят значение рН натрия гидроксида раствором 10 М до 5,30, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 110:890.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца пеметрекседа динатрия гептагидрата. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца пеметрекседа динатрия гептагидрата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 285 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 10 мин. |  |

Хроматографируют раствор стандартного образца пеметрекседа динатрия гептагидрата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца пеметрекседа динатрия гептагидрата:

- фактор асимметрии пика (AS) пеметрекседа должен быть не более 2,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика пеметрекседа должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику пеметрекседа, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

Содержание пеметрекседа динатрия C20H19N5Na2O6 в субстанции в процентах в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (Х) вычисляют по формуле:

где
S1 – площадь пика пеметрекседа на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика пеметрекседа на хроматограмме раствора стандартного образца пеметрекседа динатрия гептагидрата;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска стандартного образца пеметрекседа динатрия гептагидрата, мг;
P – содержание пеметрекседа динатрия в стандартном образце пеметрекседа динатрия гептагидрата,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Контроль по показателям качества «Прозрачность раствора», «Цветность раствора» и «Бактериальные эндотоксины» проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0155 Пентоксифиллин (Pentoxifyllinum)

Взамен ФС.2.1.0155.18

##### Определение

3,7-Диметил-1-(5-оксогексил)-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % пентоксифиллина C13H18N4O3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в дихлорметане, растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца пентоксифиллина.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,015 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 320 нм (в кювете толщиной 1 см) должен иметь максимум при 274 нм, минимум при 246 нм и плечо в интервале от 226 до 235 нм.

3. Качественная реакция. К 50 мг субстанции прибавляют 0,5 мл водорода пероксида, 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % и выпаривают на водяной бане досуха. Образовавшийся желтовато-красный остаток охлаждают и прибавляют к нему 0,1 мл аммиака раствора разведённого 3,4 %. Окраска остатка должна измениться на фиолетово-красную.

##### Испытания

Температура плавления. От 103 до 107 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1). Субстанцию предварительно высушивают при температуре 80 °С в течение 2 ч.

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным. (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. 5 мл 2 % раствора субстанции в воде должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. К 8 мл 5 % раствора субстанции в воде прибавляют 50 мкл раствора бромтимолового синего 0,05 %. Раствор должен окраситься в зелёный или жёлтый цвет. Окраска должна измениться на синюю при прибавления не более 0,2 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор калия дигидрофосфата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 5,44 г калия дигидрофосфата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Смесь растворителей. 250 мл раствора калия дигидрофосфата смешивают с 250 мл метанола.

Подвижная фаза А (ПФА). Метанол—раствор калия дигидрофосфата 300:700.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол—раствор калия дигидрофосфата 700:300.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции растворяют в смеси растворителей и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Раствор сравнения В. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мг примеси C и 2,0 мг примеси F, растворяют в 3,0 мл смеси растворителей, прибавляют 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Раствор сравнения Г. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мг примеси А, 5,0 мг примеси C и 5,0 мг примеси F, растворяют в 3,0 мл смеси растворителей и доводят объём раствора смесью растворителей до метки. В мерную колбу объёмом 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Примечание

Примесь А (теобромин): 3,7-диметил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион [83-67-0].

Примесь C (теофиллин): 1,3-диметил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион [58-55-9].

Примесь F (кофеин): 1,3,7-триметил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион [58-08-2].

Примесь J: 1,1ʹ-[(5E)-5-метил-7-оксоундец-5-ен-1,11-диил]бис(3,7-диметил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион [874747-30-5].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 272 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 4-кратное от времени удерживания пентоксифиллина. |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–6 | 85 | 15
6–13 | 85 → 10 | 15 → 90
13–30 | 10 | 90
30–35 | 10 → 85 | 90 → 15
35–50 | 85 | 15

Хроматографируют испытуемый раствор и растворы сравнения А, Б, В и Г.

Относительное время удерживания компонентов. Пентоксифиллин – 1 (от 9 до 13 мин); примесь А – около 0,3; примесь C – около 0,4; примесь F – около 0,5; примесь J – около 1,6.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения В разрешение (RS) между пиками примеси C и примеси F должно быть не менее 4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей А, С и F не должна превышать площадь соответствующего пика на хроматограмме раствора сравнения Г (не более 0,1 %);

- площадь пика примеси J не должна превышать площадь пика пентоксифиллина на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика пентоксифиллина на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 5 раз превышать площадь пика пентоксифиллина на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (менее 0,02 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 60 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы», в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции (ОФС «Сульфатная зола») с использованием эталонного раствора 2.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 1,0 г субстанции в 25 мл воды и фильтруют. К 5 мл фильтрата прибавляют 5 мл воды.

Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты»). Для анализа отбирают 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Хлориды».

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 1,16 ЕЭ/мг (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Количественное определение. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 5 мл уксусной кислоты безводной, добавляют 20 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 27,83 мг пентоксифиллина C13H18N4O3.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0156 Периндоприл-эрбумин

Периндоприл
Perindoprilum-erbuminum

Взамен ФС.2.1.0156.18

##### Определение

(2S,3aS,7aS)-1-[(2S)-2-{[(1S)-1-Оксо-1-этоксипентан-2-ил]амино}про-паноил]октагидро-1H-индол-2-карбоновая кислота—2-метилпропан-2-амин (1/1).

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % периндоприла-эрбумина C19H32N2O5·C4H11N в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Слегка гигроскопичен. Обладает полиморфизмом.

Растворимость. Легко растворим в воде и спирте 96 %, растворим или умеренно растворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца периндоприла-эрбумина.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метиленхлорида, выпаривают досуха на водяной бане и записывают спектры сухих остатков.

2. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»). Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора (раздел «Родственные примеси. Примесь А») по положению (Rf) должна соответствовать зоне адсорбции с максимальным значением Rf на хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (2-метилпропан-2-амин).

##### Испытания

Удельное вращение. От –66 до –69 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (1 % раствор субстанции в спирте 96 %, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси

1. Примесь А. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—толуол—метанол 1:40:60.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,2 г субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси А ((2S,3aS,7aS)-октагидро-1H-индол-2-карбоновая кислота [80875-98-5]), растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки (раствор А). В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл раствора А и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. К 5,0 мл раствора А прибавляют 5,0 мл 2 % раствора трет-бутиламина в метаноле.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (200 мкг), раствора стандартного образца примеси А (0,5 мкг) и раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (1 мкг примеси А и 100 мкг трет-бутиламина). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей в потоке тёплого воздуха, выдерживают не менее 20 ч в камере с парами йода и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 разделённые зоны адсорбции.

На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции, находящаяся на уровне зоны адсорбции примеси А, по величине и окраске не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца примеси А (не более 0,25 %).

2. Стереохимическая чистота. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 1,5 г натрия гептансульфоната в 900 мл воды и доводят рН раствора смесью равных объёмов хлорной кислоты и воды до 2,0. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—пентанол—буферный раствор 217:3:780.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца периндоприла для проверки стереохимической чистоты, содержащего примесь I (rel-(2R,3aR,7aR)-1-[(2R)-2-{[(1S)-1-оксо-1-этоксипентан-2-ил]амино}пропаноил]октагидро-1H-индол-2-карбоновая кислота [145513-33-3]), растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 50 °С (колонка и соединительная трубка перед ней); |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 215 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика периндоприла. |

Колонку уравновешивают не менее 4 ч. Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Периндоприл – 1 (около 100 мин); примесь I – около 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси I используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу периндоприла для проверки стереохимической чистоты.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения отношение сигнал/шум (S/N) для пика периндоприла должно быть не менее 3.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси I и периндоприла должно быть не менее 3.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси I не должна превышать площадь пика периндоприла на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика периндоприла на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %).

Не учитывают пики с относительным временем удерживания менее 0,6 и более 1,4.

3. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы используют свежеприготовленными или хранят при температуре 10 °С не более суток.

Подвижная фаза А (ПФА). Вода, доведённая до рН 2,5 смесью равных объёмов хлорной кислоты и воды.

Подвижная фаза Б (ПФБ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,3 мл хлорной кислоты и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 60 мг субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 3 мг фармакопейного стандартного образца периндоприла для идентификации пиков, содержащего примеси В, Е, F, H и K в 1 мл ПФА.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФА до метки.

Примечание

Примесь В:
(2S,3aS,7aS)-1-[(2S)-2-{[(1S)-1-карбоксибутил]амино}пропаноил]октагидро-1H-индол-2-карбоновая кислота
[95153-31-4].

Примесь Е:
(2S,3aS,7aS)-1-[(2S)-2-{[(1S)-1-оксо-1-(пропан-2-илокси)пентан-2-ил]амино}пропаноил]октагидро-1H-индол-2-карбоновая кислота
[1356837-89-2].

Примесь F:
этил[(2S)-2-[(3S,5aS,9aS,10aS)-3-метил-1,4-диоксодекагидропиразино[1,2-a]индол-2-ил]пентаноат]
[129970-98-5].

Примесь Н:
(2S,3aS,7aS)-1-[(2S)-2-[(5RS)-4-оксо-5-пропил-3-циклогексил-2-(циклогексилимино)имидазолидин-1-ил]пропаноил]оксагидро-1H-индол-2-карбоновая кислота
[353777-64-7].

Примесь K:
(3S,5aS,9aS,10aS)-3-метилдекагидропиразино[1,2-a]индол-1,4-дион.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,0 мм, силикагель октилсильный, эндкепированный, для хроматографии, сферический, 5 мкм, размер пор – 15 нм; |
Температура колонки | 60 °С (колонка и соединительная трубка перед ней); |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 215 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–(5 – t) | 95 | 5
(5 – t)–(60 – t) | 95 → 40 | 5 → 60
(60 – t)–(65 – t) | 40 → 95 | 60 → 5

Изократический этап изложен для хроматографической системы с объёмом задержки (D) 2 мл. Если D отличен от 2 мл, следует скорректировать времена градиента на величину t, рассчитываемую по формуле:

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Периндоприл – 1 (около 25 мин); примесь В – около 0,68; примесь К – около 0,72; примесь Е – около 1,2; примесь F – около 1,6; примесь H – около 1,8 (выходит в виде одного или двух пиков).

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей В, Е, F, H и K используют хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу периндоприла для идентификации пиков, и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примесей В и K должно быть не менее 3.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси Е не должна превышать 0,8 площади пика периндоприла на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,4 %);

- площадь пика примеси В не должна превышать 0,6 площади пика периндоприла на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика каждой из примесей F и H не должна превышать 0,4 площади пика периндоприла на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,2 площади пика периндоприла на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика периндоприла на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,16 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 22,08 мг периндоприла C19H32N2O5·C4H11N.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0546 Перметрин (Permethrinum)

Вводится впервые

##### Определение

все-rac-3-Феноксибензил[2,2-диметил-3-(2,2-дихлорвинил)циклопропан-1-карбоксилат].

Перметрин представляет собой смесь цис- и транс- изомеров.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % перметрина C21H20Cl2O3 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Бесцветная или слегка коричневатая вязкая жидкость, полутвёрдое вещество или кристаллический порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в гептане, легко растворим в этаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области», без предварительной перекристаллизации). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца перметрина (содержит цис-перметрин и транс-перметрин в соотношении 25:75).

2. ВЭЖХ. Время удерживания каждого из двух основных пиков на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания соответствующих пиков цис-перметрина и транс-перметрина на хроматограмме раствора стандартного образца перметрина.

- Отношение площади пика цис-перметрина к площади пика транс-перметрина должно составлять около 0,3 (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. Субстанцию нагревают при температуре 70–85 °С в течение 20 мин. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 г (точная навеска) субстанции, растворяют в гептане и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 50 мг фармакопейного стандартного образца для проверки пригодности хроматографической системы (содержит примеси В, С и G) в 1,0 мл гептана.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора гептаном до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора гептаном до метки.

Примечание

Примесь В:
все-rac-метил[2,2-диметил-3-(2,2-дихлорэтенил)циклопропан-1-карбоксилат] [61898-95-1].

Примесь С: (3-феноксифенил)метанол [13826-35-2].

Примесь G:
все-rac-[(3-феноксифенил)метил][2,2-диметил-3-(2-хлорэтинил)циклопропан-1-карбоксилат]
[85576-82-5].

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 15 м × 0,53 мм, покрытая слоем метилполисилоксана, 1,5 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | азот для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:10; |  |
Скорость потока | 12,0 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1 мкл; |  |
Температура | колонка | 0–2 мин | 45 °С,
|  | 2–26,5 мин | 45 → 290 °С,
|  | 26,5–40,5 мин | 290 °С;
| инжектор | 250 °С; |
| детектор | 290 °С. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Перметрин – 1 (около 24 мин); примесь В – около 0,5; примесь С – около 0,7; примесь G – около 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков используются хроматограмма раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмма, прилагаемая к фармакопейному стандартному образцу для проверки пригодности системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение между пиками примеси G и перметрина должно быть не менее 2,0.

Поправочный коэффициент. Для расчёта содержания площадь пика примеси В умножают на 1,5.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- каждая из примесей В и С – не более 0,15 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 % от площади пика перметрина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы.

Компонентный состав. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») одновременно с испытанием «Количественное определение».

Содержание цис-перметрина и транс-перметрина в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»).

Допустимое содержание компонентов:

- цис-перметрина – не менее 23,0 % и не более 27,0 % в пересчёте на безводное вещество;

- транс-перметрина – не менее 73,0 % и не более 77,0 % в пересчёте на безводное вещество.

Вода. Не более 0,25 % (ОФС «Определение воды», метод 2, с использованием испарителя). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции; температура 110 °С, время нагрева 3 мин.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Диоксан—гептан 11:989.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, предварительно нагретой при температуре 70–85 °С в течение 20 мин, прибавляют 30 мл ПФ, обрабатывают ультразвуком до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца перметрина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца перметрина (содержит цис-перметрин и транс-перметрин в соотношении 25:75), предварительно нагретого при температуре 70–85 °С в течение 20 мин, прибавляют 30 мл ПФ, обрабатывают ультразвуком до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика цис-перметрина. |

Хроматографируют раствор стандартного образца перметрина и испытуемый раствор.

Время удерживания соединения цис-перметрина – около 6 мин.

Порядок выхода пиков: цис-перметрин, транс-перметрин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца перметрина разрешение (RS) между пиками цис-перметрина и транс-перметрина должно быть не менее 2,0.

Содержание перметрина C21H20Cl2O3 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 – сумма площадей пиков цис-перметрина и транс-перметрина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – сумма площадей пиков цис-перметрина и транс-перметрина на хроматограмме раствора стандартного образца перметрина;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца перметрина, мг;
P – содержание перметрина в фармакопейном стандартном образце перметрина,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0157 Пилокарпина гидрохлорид

Пилокарпин
Pilocarpini hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0157.18

##### Определение

(3S,4R)-4-[(1-Метил-1H-имидазол-5-ил)метил]-3-этилоксолан-2-она гидрохлорид.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % пилокарпина гидрохлорида C11H16N2O2·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия хлоридом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца пилокарпина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +89 до +93 в пересчёте на сухое вещество (5 % раствор субстанции в воде, свободной от углерода диоксида, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 2,50 г субстанции в 50 мл воды, свободной от углерода диоксида должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 3,5 до 4,5 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Буферный раствор. Растворяют 0,679 г тетрабутиламмония дигидрофосфата в 600 мл воды и доводят значение pH аммиака раствором разведённым 3,4 % до 7,7, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—ацетонитрил—буферный раствор 55:60:885.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца пилокарпина нитрата для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примесь A, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для идентификации примеси В. К 5 мл испытуемого раствора прибавляют 0,1 мл аммиака раствора и нагревают на водяной бане в течение 30 мин. После охлаждения раствор помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят водой до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 3,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. Образуется в основном пилокарпиновая кислота (примесь В).

Примечание

Примесь А (изопилокарпин):
(3R,4R)-4-[(1-метил-1H-имидазол-5-ил)метил]-3-этилоксолан-2-он [531-35-1].

Примесь В (пилокарпиновая кислота):
(2S,3R)-4-гидрокси-3-[(1-метил-1H-имидазол-5-ил)метил]-2-этилбутановая кислота [28406-15-7].

Примесь С (изопилокарпиновая кислота):
(2R,3R)-4-гидрокси-3-[(1-метил-1H-имидазол-5-ил)метил]-2-этилбутановая кислота [34350-99-7].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии (1) (сверхчистый), 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания основного пика. |

Хроматографируют раствор для идентификации примеси В, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Порядок выхода пиков: примесь В, примесь С, примесь А, пилокарпин.

Время удерживания пилокарпина – около 20 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и пилокарпина должно быть не менее 1,6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна более чем в 2 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

- сумма площадей пиков примесей А и В не должна более чем в 3 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,5 %);

- сумма площадей пиков (кроме примесей А и В) не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,4 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,2 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 %. (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Железо. Не более 0,001 % (ОФС «Железо», метод 2). Растворяют 0,5 г субстанции в 10 мл воды, используя эталонный раствор из 5 мл железа стандартного раствора 1 мкг/мл и 5 мл воды.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 50 мл смеси уксусного ангидрида и безводной уксусной кислоты в соотношении 7:3 и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с индикатором (0,1 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %) до перехода окраски в сине-зелёную.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 24,47 мг пилокарпина гидрохлорида C11H16N2O2·HCl.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0547 Пипекурония бромид (Pipecuronii bromidum)

Вводится впервые

##### Определение

4,4'-[3α,17β-Ди(ацетилокси)-5α-андростан-2β,16β-диил]бис(1,1-диметилпиперазин-1-ий) дибромид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % пипекурония бромида C35H62Br2N4O4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в метаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца пипекурония бромида.

2. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»). Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции пипекурония бромида на хроматограмме раствора стандартного образца пипекурония бромида (раздел «Родственные примеси»).

3. Качественная реакция. Раствор 15 мг субстанции в 2 мл воды должен давать характерную реакцию (Б) на бромиды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +6,0 до +10,0 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,25 г субстанции в 25 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY7 или Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 5,0 до 7,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Аммония хлорида раствор 20 % в аммиака растворе концентрированном 25 %—аммония карбоната раствор 7 % в аммиака растворе концентрированном 25 %—метанол—ацетонитрил 20:100:386:514.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца пипекурония бромида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г фармакопейного стандартного образца пипекурония бромида, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл раствора стандартного образца пипекурония бромида и доводят объём раствора метанолом до метки.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мл стандартного раствора А и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл стандартного раствора А и доводят объём раствора до метки метанолом.

Реактив для детектирования. Реактив Драгендорфа.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (100 мкг), раствора стандартного образца пипекурония бромида (100 мкг), стандартного раствора А (1 мкг), стандартного раствора Б (0,5 мкг) и раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (0,25 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе, помещают в предварительно насыщенную камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме стандартного раствора А (не более 1,0 %). Суммарное содержание примесей не должно превышать 1,5 %.

Вода. Не более 8,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 25 мг (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 62,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в 8,5 мл уксусной кислоты ледяной, прибавляют 1,5 мл ртути(II) ацетата раствора 5 %, 20 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). В качестве индикаторного электрода используют стеклянный электрод, в качестве электрода сравнения – хлорсеребряный.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 19,07 мг пипекурония бромида C35H62Br2N4O4.

##### Хранение

В защищённом от света месте, в герметично укупоренной таре, при температуре от 5 до 8 °C.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0548 Пипемидовая кислота тригидрат

Пипемидовая кислота
Acidum pipemidicum trihydricum

Вводится впервые

##### Определение

5-Оксо-2-(пиперазин-1-ил)-8-этил-5,8-дигидропиридо[2,3-d]пиримидин-6-карбоновая кислота тригидрат.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % пипемидовой кислоты C14H17N5O3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Жёлтый или светло-жёлтый кристаллический порошок.

Растворимость. Очень мало растворим в воде и метиленхлориде, практически нерастворим в спирте 96 %.

* Растворяется в разбавленных растворах кислот и щелочей.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца пипемидовой кислоты тригидрата.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 5,7 г лимонной кислоты и 1,7 г натрия декансульфоната, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—метанол—раствор А 200:200:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20,0 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 10 мл ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мг этилпарагидроксибензоата, растворяют в 2,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 275 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,5-кратное от времени удерживания пика пипемидовой кислоты. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Пипемидовая кислота – 1 (около 15 мин), этилпарагидроксибензоат – около 0,8.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками этилпарагидроксибензоата и пипемидовой кислоты должно быть не менее 4,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать 0,5 площади пика пипемидовой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать площадь пика пипемидовой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,25 площади пика пипемидовой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не менее 14 % и не более 16 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 6).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,24 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 30,33 мг пипемидовой кислоты C14H17N5O3.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0030 Пиразинамид (Pyrazinamidum)

Взамен ФС.2.1.0030.15

##### Определение

Пиразин-2-карбоксамид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0% пиразинамида C5H5N3O в пересчёте на безводное вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Умеренно растворим в воде, мало растворим в спирте 96 % и метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца пиразинамида.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах спирта 96 %, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

- Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора водой до метки.

- Испытуемый раствор В. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора водой до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора Б в области длин волн от 290 до 350 нм должен иметь максимум при 310 нм.

- Спектр поглощения испытуемого раствора В в области длин волн от 230 до 290 нм должен иметь максимум при 268 нм с удельным показателем поглощения от 640 до 680.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 5 мл воды, прибавляют 1 мл железа(II) сульфата раствора 0,45 % в хлористоводородной кислоте; должно появиться оранжевое окрашивание. После прибавления 1 мл натрия гидроксида раствора 8,5 % окрашивание должно измениться на тёмно-синее.

##### Испытания

Температура плавления. От 188 до 191 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,5 г субстанции, растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора водой до метки. К 25 мл полученного раствора прибавляют 0,05 мл фенолфталеина раствора 0,1 % и 0,2 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида; раствор должен окрашиваться в розовый цвет. К полученному раствору прибавляют 1,0 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты; раствор должен обесцветиться. После прибавления 0,15 мл метилового красного раствора 0,04 % раствор должен окрашиваться в красный цвет.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 6,8 г калия дигидрофосфата в 800 мл воды, прибавляют 1,84 г натрия гидроксида и доводят значение pH фосфорной кислотой разведённой 10 % до 3,0. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Тетрагидрофуран—ацетонитрил—буферный раствор 1:10:1000.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг пиразин-2-карбонитрила (примесь В [19847-12-2]), растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, 5,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 270 нм; |  |
Объём пробы | 40 мкл; |  |
Время хроматографирования | 4-кратное от времени удерживания пика пиразинамида. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Пиразинамид – 1 (около 5 мин); примесь В – около 1,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси В используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками пиразинамида и примеси В должно быть не менее 4,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси В не должна превышать площадь пика пиразинамида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика пиразинамида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика пиразинамида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,3 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,03 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 2,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 12,31 мг пиразинамида C5H5N3O.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0158 Пирацетам (Piracetamum)

Взамен ФС.2.1.0158.18

##### Определение

2-(2-Оксопирролидин-1-ил)ацетамид.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % пирацетама С6Н10N2O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца пирацетама.

Если спектры различаются, субстанцию и фармакопейный стандартный образец пирацетама по отдельности растворяют в минимальных объёмах спирта 96 %, выпаривают досуха на водяной бане и записывают спектры сухих остатков.

##### Испытания

Температура плавления. От 151 до 155 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 2,0 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном В9 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 900 мл смеси растворителей ацетонитрил—дикалия гидрофосфата раствор 0,1 % 10:90, доводят значение рН фосфорной кислотой разведённой 10% до 6,0 и доводят объём раствора той же смесью растворителей до метки.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 100:900.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг субстанции и 10 мкл 2-пирролидона (примесь А), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А (2-пирролидон): пирролидин-2-он [616-45-5].

Примесь В: метил[(2-оксопирролидин-1-ил)ацетат] [59776-88-4].

Примесь С: этил[(2-оксопирролидин-1-ил)ацетат] [61516-73-2].

Примесь D: (2-оксопирролидин-1-ил)уксусная кислота [53934-76-2].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, совместимый с водной подвижной фазой, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 205 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 8-кратное от времени удерживания пирацетама. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Пирацетам – 1 (около 4 мин); примесь D – около 0,8; примесь A – около 1,15; примесь B – около 2,8; примесь C – около 6,3.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками пирацетама и примеси A должно быть не менее 3,0.

- фактор асимметрии пика (AS) пирацетама должен быть не более 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика пирацетама на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать шестикратную площадь пика пирацетама на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,6 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,03 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,029 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мл испытуемого раствора, полученного в разделе «Родственные примеси», и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца пирацетама. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца пирацетама, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца пирацетама и испытуемый раствор.

Содержание пирацетама C6H10N2O2 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика пирацетама на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика пирацетама на хроматограмме раствора стандартного образца пирацетама;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца пирацетама, мг;
W - потеря в массе при высушивании субстанции,%;
P - содержание пирацетама в фармакопейном стандартном образце пирацетама,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0616 Пирибедил (Piribedilum)

Вводится впервые

##### Определение

2-{4-[(2H-1,3-Бензодиоксол-5-ил)метил]пиперазин-1-ил}пиримидин.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % пирибедила C16H18N4O2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде, умеренно растворим или мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать рисунку спектра фармакопейного стандартного образца пирибедила (Приложение А).

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения 0,001 % раствора субстанции в ацетонитриле (для растворения субстанции в ацетонитриле допускается обработка ультразвуком не более 1 мин) в области длин волн от 190 до 400 нм должен иметь максимумы при 198 нм, 245 нм, 288 нм и минимумы при 219 нм и 268 нм. В качестве раствора сравнения используют ацетонитрил.

##### Испытания

Температура плавления. От 96 до 99°С (ОФС «Температура плавления», метод 1). Субстанцию предварительно высушивают под вакуумом при температуре 80 °С в течение 3 ч до постоянной массы.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Все растворы защищают от света.

Растворитель. ПФА—ПФБ 400:100.

Модифицирующий реактив. Смешивают 1 мл водорода пероксида, 9 мл муравьиной кислоты и выдерживают при комнатной температуре в течение 1 ч. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 2,3 г калия дигидрофосфата, и 1,01 г натрия гептансульфоната в 950 мл воды и доводят значение рН калия гидроксида раствором 1 % или фосфорной кислоты раствором 0,05 М до 4,6. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают полученный раствор и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 40,0 мг субстанции, растворяют в 10 мл ПФБ, при необходимости обрабатывают ультразвуком в течение 1 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 20,0 мг субстанции, растворяют в 5 мл ПФБ, при необходимости обрабатывают ультразвуком в течение 1 мин, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 0,2 мл модифицирующего реактива и выдерживают при комнатной температуре в течение 1 ч, доводят объём раствора ПФА до метки. Полученный раствор центрифугируют при 4000 об./мин в течение 10 мин.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для идентификации пиков примесей. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 20,0 мг стандартного образца буспирона примеси А (пирибедила примесь А) и около 20,0 мг спирта пиперонилового (пирибедила примесь В), растворяют в 5 мл ПФБ, при необходимости обрабатывают ультразвуком в течение 1 мин, охлаждают до комнатной температуры, доводят объём раствора ПФБ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание.

Примесь А: 2-(пиперазин-1-ил)пиримидин [20980-22-7].

Примесь В: (2H-1,3-бензодиоксол-5-ил)метанол [495-76-1].

Примесь С: 1-[(2H-1,3-бензодиоксол-5-ил)метил]-4-(пиримидин-2-ил)-λ5-пиперазин-1-ий-1-олат [53954-71-5].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,4 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 240 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–15 | 81 | 19
15–43 | 81 → 46 | 19 → 54
43–48 | 46 | 54
48–49 | 46 → 81 | 54 → 19
49–60 | 81 | 19

Хроматографируют раствор для идентификации пиков примесей, раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Идентификация примесей. Хроматограмма раствора для идентификации пиков примесей используется для идентификации пиков примесей А и В; хроматограмма раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы используется для идентификации пика примеси С.

Относительное время удерживания соединений. Пирибедил – 1 (около 12,5 мин), примесь А – около 0,18; примесь В – около 0,31; примесь С – около 0,64.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика пирибедила должно быть не менее 20.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение ® между пиками пирибедила и примесью С должно быть не менее 8,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) пирибедила должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика пирибедила должно быть не более 5 % (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь А – 0,75; примесь В – 3,95; примесь С – 1,55.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площади пиков каждой из примесей A, B и С не должны превышать площадь пика пирибедила на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика пирибедила на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика пирибедила на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически, используя в качестве индикаторного электрода – стеклянный, в качестве электрода сравнения – хлорсеребряный (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 14,915 мг пирибедила C16H18N4O2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

##### Приложение А. Рисунок спектра фармакопейного стандартного образца пирибедила

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0159 Пиридоксина гидрохлорид

Пиридоксин
Pyridoxini hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0159.18

##### Определение

4,5-Бис(гидроксиметил)-2-метилпиридин-3-ола гидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0% и не более 101,0% пиридоксина гидрохлорида C8H11NO3·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96%, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца пиридоксина гидрохлорида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,5 г субстанции, растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

- Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

- Испытуемый раствор В. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора фосфатным буферным раствором рН 7,4 до метки.

- Ультрафиолетовый спектр поглощения испытуемого раствора Б в области длин волн от 250 до 350 нм должен иметь максимум в интервале от 288 до 296 нм с удельным показателем поглощения от 425 до 445.

- Ультрафиолетовый спектр поглощения испытуемого раствора В в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимумы в интервалах от 248 до 256 нм и от 320 до 327 нм с удельным показателем поглощения от 175 до 195 и от 345 до 365 соответственно.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 50 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 2,4 до 3,0 (5% раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 2,72 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислотой разведённой 10% до 3,0. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца примеси А и 2,5 мг 4-Дезоксипиридоксина гидрохлорида (примесь В), растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь А: 6-метил-1,3-дигидрофуро[3,4-c]пиридин-7-ол [5196-20-3].

Примесь В: 5-гидроксиметил-2,4-диметилпиридин-3-ол [61-67-6].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,5-кратное от времени удерживания пика пиридоксина. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Пиридоксин – 1 (около 12 мин), примесь А – около 1,7; примесь В – около 1,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А и В используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и примеси В должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора сравнения:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика пиридоксина должно быть не менее 20;

- относительное стандартное отклонение площади пика пиридоксина должно быть не более 5,0% (6 введений).

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Хi) вычисляют по формуле:

где Si – площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика пиридоксинана хроматограмме раствора сравнения.

Допустимое содержание примесей:

- примесь В – не более 0,15%;

- любая другая примесь – не более 0,10%;

- сумма примесей – не более 0,2%.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,4 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Во избежание перегрева реакционной среды, титрование проводят при постоянном перемешивании и прекращают немедленно после достижения конечной точки.

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 5 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 50 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с индикатором (50 мкл кристаллического фиолетового раствора 0,1%) до перехода окраски в изумрудно-зелёную.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 20,56 мг пиридоксина гидрохлорида C8H11NO3·HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0617 Пиридостигмина бромид (Pyridostigmini bromidum)

Вводится впервые

##### Определение

4,5-Бис(гидроксиметил)-2-метилпиридин-3-ола гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % пиридостигмина бромида C9H13BrN2O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен, расплывается на воздухе.

Растворимость. Легко растворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца пиридостигмина бромида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 300 нм должен иметь максимум при 270 нм и минимум при 240 нм.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на бромиды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 100 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. К 40 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют несколько капель метилового красного раствора 0,05 % и делят полученный раствор на две равные части. К первой части прибавляют 0,2 мл натрия гидроксида раствора 0,02 М; раствор должен окраситься в жёлтый цвет. Ко второй части прибавляют 0,2 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,02 М; раствор должен окраситься в красный цвет.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 4,33 г натрия лаурилсульфата в воде и доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 2,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФ при нагревании до температуры 40 °С, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Готовят раствор фармакопейного стандартного образца пиридостигмина бромида, фармакопейного стандартного образца примеси А и фармакопейного стандартного образца примеси В в ПФ с концентрацией каждого компонента 2 мкг/мл.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А: (пиридин-3-ил)(диметилкарбамат) [51581-32-9].

Примесь В: 3-гидрокси-1-метилпиридин-1-ий бромид [31034-86-3].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 5–10 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,1 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика пиридостигмина. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Пиридостигмин – 1 (около 32 мин); примесь В – около 0,7; примесь А – около 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А и В используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика пиридостигмина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси A и пиридостигмина должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A и B не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика пиридостигмина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,4 %). Площадь только одного пика примесей А и В может превышать площадь пика пиридостигмина на хроматограмме раствора сравнения (0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика пиридостигмина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 2,5-кратную площадь пика пиридостигмина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пик бромид-иона и пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 2,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 5 мл уксусной кислоты безводной, прибавляют 20 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 26,11 мг C9H13ВгN2О2.

##### Хранение

В сухом, защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0618 Пиритион цинка (Pyrithionum zincicum)

Вводится впервые

##### Определение

Бис(2-пиридилтио)1,1'-диоксид цинка.

Cодержит не менее 95,0 % пиритиона цинка C10H8N2O2S2Zn в пересчёте на сухое вещество.

Содержит цинка от 19,0 % до 22,0 % в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый с сероватым оттенком или светло-жёлтый мелкокристаллический порошок со слабым специфическим запахом.

Растворимость. Растворим или умеренно растворим в диметилсульфоксиде, мало растворим в хлороформе, практически нерастворим в воде.

* Растворяется в минеральных кислотах с образованием опалесцирующего раствора.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца пиритиона цинка.

2. Качественная реакция. Раствор 0,1 г субстанции в 1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной должен давать характерную реакцию Б на цинк (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 246 до 258 °C (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

pH. От 6,0 до 9,0 (5 % суспензия субстанции, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Предварительная подготовка пластинки. Пластинку предварительно погружают в метанол и сушат при температуре 100 °C в течение 5 мин.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 %—бутанол 10:90.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в 1,0 мл хлористоводородной кислоты 25 % и доводят объём раствора метанолом до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,5 мл испытуемого раствора Б и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора Б и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения В. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 мл испытуемого раствора Б и доводят объём раствора метанолом до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора А (100 мкг), раствора сравнения А (1,5 мкг), раствора сравнения Б (1 мкг) и раствора сравнения В (0,5 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ, предварительно насыщенную в течение не менее 1 ч, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт до конца пластинки, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения В должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по совокупности величины не должна превышать зону адсорбции пиритиона цинка на хроматограмме раствора сравнения А (не более 1,5 %).

Сумма примесей – не более 3,0 %.

Зону адсорбции на линии старта при оценке не учитывают.

Потеря в массе при высушивании. Не более 3,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Встряхивают 1 г субстанции с 10 мл воды в течение 2 мин и фильтруют. К 2 мл полученного фильтрата прибавляют 8 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Встряхивают 0,5 г субстанции в течение 1 мин с 25 мл воды и фильтруют.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

1. Пиритион цинка. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 20 мл хлористоводородной кислоты 25 %, прибавляют 55 мл воды и сразу титруют 0,05 М раствором йода. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора йода соответствует 15,88 мг пиритиона цинка C10H8N2O2S2Zn.

2. Цинк. Определение проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 1).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) цинка, растворяют в 5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Калибровочные растворы. В отдельные мерные колбы вместимостью 50 мл помещают по 0,5; 1,0 и 2,0 мл стандартного раствора и доводят объём растворов водой до метки, получая растворы с содержанием цинка соответственно 1; 2 и 4 мкг/мл.

Условия испытания

- Источник излучения: лампа для определения цинка;

- Длина волны: 213,9 нм;

- Атомизация: воздушно-ацетиленовое пламя.

Измеряют поглощение калибровочных и испытуемого растворов. Для каждого раствора проводят не менее 3 измерений.

Строят калибровочную кривую, откладывая по оси ординат значения поглощения, а по оси абсцисс − концентрацию (мкг/мл). Содержание цинка в испытуемом растворе определяют по калибровочному графику.

Содержание цинка в субстанции в процентах в пересчёте на сухое вещество (Х) вычисляют по формуле:

где C – содержание цинка, определённое по калибровочному графику, мкг/мл;
a – навеска субстанции, мг;
W – потеря в массе при высушивании субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0160 Пироксикам (Piroxicamum)

Взамен ФС.2.1.0160.18

##### Определение

4-Гидрокси-2-метил-1,1-диоксо-N-(пиридин-2-ил)-2H-1λ6,2-бензотиазин-3-карбоксамид.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % пироксикама C15H13N3O4S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или светло-жёлтый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Растворим в метиленхлориде, мало растворим в спирте 96 % и ацетонитриле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца пироксикама.

Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метиленхлорида, выпаривают досуха на водяной бане и записывают спектры сухих остатков.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 6,81 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,0. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 75 мг субстанции, растворяют при слабом нагревании, если необходимо, в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 7 мг фармакопейного стандартного образца пироксикама для проверки пригодности системы, содержащего примеси A, B, D, G и J, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь А: пиридин-2-амин [504-29-0].

Примесь В:
4-гидрокси-1,1-диоксо-N-(пиридин-2-ил)-2H-1λ6,2-бензотиазин-3-карбоксамид
[65897-46-3].

Примесь D:
метил[2-(1,1,3-триоксо-2,3-дигидро-1λ6,2-бензотиазол-2-ил)ацетат]
[6639-62-9].

Примесь G:
метил(4-гидрокси-1,1-диоксо-2H-1λ6,2-бензотиазин-3-карбоксилат)
[35511-14-9].

Примесь J:
метил(4-гидрокси-2-метил-1,1-диоксо-2H-1λ6,2-бензотиазин-3-карбоксилат)
[35511-15-0].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 50 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 5-кратное от времени удерживания пика пироксикама. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Пироксикам – 1 (около 16 мин); примесь А – около 0,1; примесь D – около 0,6; примесь G – около 0,7; примесь B – около 0,8; примесь J – около 1,8.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В, D, G и J используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу для проверки пригодности системы, и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примесей G и B должно быть не менее 1,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси А умножают на 0,6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A, В, D, G и J не должна превышать площадь пика пироксикама на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика пироксикама на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика пироксикама на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,4 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,25 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают до постоянной массы 1 г (точная навеска) субстанции при температуре от 100 до 105 °С и остаточном давлении 5 мм рт.ст.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 60 мл смеси равных объёмов уксусной кислоты безводной и уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 33,14 мг пироксикама C15H13N3O4S.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0161 Питофенона гидрохлорид

Питофенон
Pitophenoni hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0161.18

##### Определение

Метил(2-{4-[2-(пиперидин-1-ил)этокси]бензоил}бензоата) гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % питофенона гидрохлорида C22H25NO4∙HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде (с образованием опалесцирующего раствора) и хлороформе, растворим в спирте 96 %, умеренно растворим в ацетоне.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в вазелиновом масле, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца питофенона гидрохлорида.

2. Спектрофотометрия_ (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 до 360 нм должен иметь максимум при 290 нм, минимум при 250 нм и плечо в интервале от 215 до 220 нм.

##### Испытания

Температура плавления. От 171 до 174 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», должна выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,0 до 6,0 (2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—метанол—хлороформ 3:15:90.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 6,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора метанолом до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (100 мкг), растворов сравнения А (0,5 мкг), Б (0,3 мкг) и раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (0,1 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции питофенона гидрохлорида с величиной фактора замедления (Rf) около 0,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по совокупности величины и интенсивности флуоресценции не должна превышать зону адсорбции питофенона гидрохлорида на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,3 %). Суммарное содержание примесей, оцененное по совокупности величины и интенсивности флуоресценции их зон адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора в сравнении с зонами адсорбции на хроматограммах раствора сравнения, не должно превышать 0,5 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,3 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают до постоянной массы 0,5 г (точная навеска) субстанции при температуре 65 °С и остаточном давлении 30 мм рт. ст.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3 Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 15 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции концентрацией 1 мг/мл.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты безводной, прибавляют 10 мл ртути(II) ацетата раствора 5 % и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с индикатором (1 капля кристаллического фиолетового раствора 0,1 %) до перехода окраски в сине-зелёную.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 40,39 мг питофенона гидрохлорида C22H25NO4·HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0162 Платифиллина гидротартрат

Платифиллин
Platyphyllini hydrotartras

Взамен ФС.2.1.0162.18

##### Определение

(3Z,5R,6R,9aS,14aR,14bR)- 6-Гидрокси-5,6-диметил-3-этилидендодекагидро[1,6]диоксациклододека[2,3,4-gh]пирролизин-2,7-диона (2R,3R)-2,3-дигидроксибутандиоат (1:1).

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % платифиллина гидротатрата C18H27NO5∙С4Н6О6 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый кристаллический порошок без запаха или с очень слабым характерным запахом.

Растворимость. Легко растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в вазелиновом масле, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца платифиллина гидротартрата.

2. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 5 мл воды, прибавляют 3 капли реактива Майера; должен выпасть осадок белого цвета.

3. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в фарфоровой чашке в 0,5 мл серной кислоты концентрированной, прибавляют несколько крупинок α-нафтола и нагревают на водяной бане; должно появиться зелёное окрашивание.

4. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 1 мл воды. Полученный раствор должен давать характерную реакцию А на тартраты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 190 до 195 °C (с разложением, ОФС «Температура плавления»).

Удельное вращение. От –40 до –38 (5 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 50 мг субстанции в 25 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 3,6 до 4,0 (0,2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 %—метанол—хлороформ 1:14:85.

Испытуемый раствор. Растворяют 0,1 г субстанции в 4 мл воды.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки.

На линию старта пластинки при подсушивании током теплого воздуха наносят по 10 мкл (250 мкг) испытуемого раствора и 10 мкл (2,5 мкг) раствора сравнения. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 10 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 15 мин, опрыскивают реактивом Драгендорфа и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора допускается наличие только одной дополнительной зоны адсорбции, не превышающей по совокупности величины и интенсивности окраски зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения (не более 1 %).

Зону адсорбции на линии старта при оценке не учитывают.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,5 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). Для определения используют 10 мл раствора, полученного в испытании «Сульфаты».

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 35 ЕЭ на 1 мг платифиллина гидротартрата (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,4 г (точная навеска) субстанции в 25 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с индикатором (2 капли кристаллического фиолетового раствора 0,1 %) до перехода окраски в светло-зелёную.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 48,75 мг платифиллина гидротартрата C18H27NO5∙С4Н6О6.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0619 Повидон (Povidonum)

Взамен ФС 42-1194-98

##### Определение

α-Гидро-ω-гидрополи[1-(2-оксопирролидин-1-ил)этилен].

Содержит не менее 11,5 % и не более 12,8 % азота в пересчёте на безводное вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или желтовато-белый аморфный порошок или хлопья.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, спирте 96 % и метаноле, очень мало растворим в ацетоне.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца повидона.

- Субстанцию предварительно высушивают при температуре 105 °С в течение 6 ч.

2. Качественная реакция. К 0,4 мл испытуемого раствора прибавляют 10 мл воды, 5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % и 2 мл калия дихромата раствора 10,6 %; должен образоваться оранжево-жёлтый осадок.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,5 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

3. Качественная реакция. К 1 мл испытуемого раствора, полученного в испытании «Подлинность. 2. Качественная реакция», прибавляют 0,2 мл диметиламинобензальдегида спиртового раствора и 0,1 мл серной кислоты концентрированной; раствор должен окраситься в розовый цвет.

4. Качественная реакция. К 0,1 мл испытуемого раствора, полученного в испытании «Подлинность. 2. Качественная реакция», прибавляют 5 мл воды и 0,2 мл йода раствора 0,05 М; должно образоваться красное окрашивание.

##### Испытания

Вязкость, выраженная константой Фикентчера. Для субстанции, имеющей установленное значение 18 или менее, используют раствор с концентрацией 50 г/л. Для субстанции, имеющей значение от 18 до 95, используют раствор с концентрацией 10 г/л. Для субстанции, имеющей значение более 95, используют раствор с концентрацией 1,0 г/л.

Раствор оставляют на 1 ч и определяют вязкость при температуре 25 °С, используют вискозиметр стеклянный капиллярный ВПЖ-1 (ОФС «Вязкость»), минимальное время потока 100 с.

Рассчитывают значение K по формуле:

где c - концентрация раствора в пересчёте на безводное вещество, г на 100 мл;
vrel - кинематическая вязкость раствора относительно вязкости воды.

Значение К для субстанции, имеющего установленное значение К 15 и менее, должно составлять 85,0–115,0 % от заявленного значения.

Значение К для субстанции, имеющей установленное значение К более 15, должно составлять 90,0–108,0% от заявленного значения.

Прозрачность раствора. Растворяют маленькими порциями 1,0 г субстанции в 20 мл воды, свободной от углерода диоксида при перемешивании на магнитной мешалке. Полученный раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном B6, BY6 или R6 (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

рН раствора. От 3,0 до 5,0 при значении константы Фикентчера не более 30. От 4,0 до 7,0 при значении константы Фикентчера более 30 (раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Вода. Не более 5,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Альдегиды. Не более 0,05 % в пересчёте на ацетальдегид. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают точную навеску, эквивалентную 1,0 г безводной субстанции, растворяют в 50 мл буферного (фосфатного) раствора рН 9,0 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Колбу закрывают пробкой, нагревают при 60 °С в течение 1 ч, охлаждают до комнатной температуры.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 0,140 г ацетальдегида-аммония тримера тригидрата, растворяют в 10 мл воды и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора буферным (фосфатным) раствором рН 9,0 до метки.

В три отдельные спектрофотометрические кюветы с толщиной слоя 1 см помещают по 0,5 мл испытуемого раствора, стандартного раствора и воды. В каждую кювету прибавляют 2,5 мл буферного (фосфатного) раствора рН 9,0 и 0,2 мл никотинамидадениндинуклеотида раствора 0,4 %, перемешивают и плотно закрывают. Выдерживают при температуре 22±2 °С в течение 2–3 мин.

Измеряют оптическую плотность полученных растворов на спектрофотометре при длине волны 340 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения воду.

В каждую кювету прибавляют 0,05 мл альдегиддегидрогеназы раствора, перемешивают, плотно закрывают и выдерживают при температуре 22±2 °С в течение 5 мин. Повторно измеряют оптическую плотность полученных растворов на спектрофотометре при длине волны 340 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения воду.

Содержание альдегидов в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где At1 - оптическая плотность испытуемого раствора без добавления альдегиддегидрогеназы;
At2 - оптическая плотность испытуемого раствора после добавления альдегиддегидрогеназы;
As1 - оптическая плотность стандартного раствора без добавления альдегиддегидрогеназы;
As2 - оптическая плотность стандартного раствора после добавления альдегиддегидрогеназы;
Ab1 - оптическая плотность воды без добавления альдегиддегидрогеназы;
Ab2 - оптическая плотность воды после добавления альдегиддегидрогеназы;
a - навеска субстанции безводной, г;
C - концентрация ацетальдегида в стандартном растворе, рассчитанная по массе ацетальдегида-аммония тримера тригидрата с коэффициентом 0,72, мг/мл.

Пероксиды. Не более 0,04 % в пересчёте на перекись водорода. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают точную навеску, эквивалентную 4,0 мг безводной субстанции, растворяют в 50 мл воды и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В коническую колбу вместимостью 50 мл помещают 25,0 мл полученного раствора, прибавляют 2,0 мл титана(III) хлорид—серной кислоты реактива и выдерживают в течение 30 мин.

Измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 405 нм в кювете с толщиной слоя 1 мм, используя в качестве раствора сравнения смесь 25 мл испытуемого раствора и 2,0 мл серной кислоты разведённой 13 %.

Оптическая плотность испытуемого раствора не должна превышать 0,35.

Муравьиная кислота. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Хлорная кислота—вода 1:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают точную навеску, эквивалентную 2 г безводной субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Заполняют колонку с внутренним диаметром 8 мм и длиной 20 мм суспензией катионообменной смолы сильной (протонированной формы) и хранят постоянно погружённой в воду. Наносят на колонку 5 мл воды и регулируют скорость потока до 20 капель/мин. Когда уровень воды опустится до верха ионообменной смолы, на колонку наносят испытуемый раствор. После элюирования 2 мл раствора, собирают 1,5 мл раствора и используют в качестве испытуемого раствора.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г муравьиной кислоты безводной, растворяют в 50 мл воды и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 300 × 7,8 мм, катионообменная смола сильная (протонированная форма), 9 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл; |  |
Время хроматографирования | 11 мин. |  |

Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Муравьиная кислота – 1 (около 8 мин).

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) муравьиной кислоты должен быть не менее 0,5 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика муравьиной кислоты должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику муравьиной кислоты, должна составлять не менее 1000 теоретических тарелок.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика муравьиной кислоты не должна более чем в 10 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Гидразин. Определение проводят методом тонкослойной хроматографии (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Салицилового альдегида азина раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г салицилового альдегида азина, растворяют в 5 мл метанола и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля силанизированного F254.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—метанол 1:2.

Испытуемый раствор. Растворяют точную навеску, эквивалентную 2,5 г безводной субстанции в 25 мл воды, прибавляют 0,5 мл салицилового альдегида азина раствора, смешивают и нагревают на водяной бане при температуре 60 °С в течение 15 мин. Охлаждают, прибавляют 2,0 мл толуола, встряхивают в течение 2 мин, центрифугируют и охлаждают до комнатной температуры. Используют верхний слой супернатанта.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 90 мг салицилового альдегида азина, растворяют в 50 мл толуола и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора толуолом до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (10 мг) и раствора сравнения (0,09 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

Зона адсорбции салицилового альдегида на хроматограмме испытуемого раствора по положению и величине должна соответствовать основной зоне адсорбции на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,0001 %).

1-Винилпирролидин-2-он. Не более 0,001 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—вода 100:900.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают точную навеску, эквивалентную 0,25 г безводной субстанции, растворяют в 5 мл ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг 1-винилпирролидин-2-она, растворяют в 50 мл ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг 1-винилпирролидин-2-она и 0,5 г винилацетата, растворяют в 50 мл метанола и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Предколонка | 100 × 4,0 мм; силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 235 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

После каждого введения испытуемого раствора выдерживают колонку около 2 мин и промывают предколонку пропусканием ПФ через колонку в обратном направлении в течение 30 мин при той же скорости потока, которая указана в хроматографических условиях.

Относительное время удерживания соединений. Винилацетат – 1 (около 14 мин); 1-винилпирролидин-2-он – около 0,6.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками 1-винилпирролидин-2-она и винилацетата должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора сравнения относительное стандартное отклонение площади пика 1-винилпирролидин-2-она должно быть не более 2,0 % (6 введений);

Содержание 1-винилпирролидин-2-она в субстанции в процентах от заявленного количества (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика 1-винилпирролидин-2-она на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика 1-винилпирролидин-2-она на хроматограмме раствора сравнения;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска 1-винилпирролидин-2-она, мг;
Р – содержание 1-винилпирролидин-2-она в 1-винилпирролидин-2-оне,%.

2-Пирролидон. Не более 3,0 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—вода 50:950.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают точную навеску, эквивалентную 0,5 г безводной субстанции, растворяют в 50 мл ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,15 г 2-пирролидона, растворяют в 50 мл ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Предколонка | 100 × 4,0 мм; силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 205 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл. |  |

Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор.

После каждого введения испытуемого раствора выдерживают колонку около 2 мин и промывают предколонку пропусканием ПФ через колонку в обратном направлении в течение 30 мин при той же скорости потока, которая указана в хроматографических условиях.

Относительное время удерживания соединений. 2-Пирролидон – 1 (около 7 мин).

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения:

- относительное стандартное отклонение площади пика 2-пирролидон должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику 2-пирролидона, должна составлять не менее 5000 теоретических тарелок.

Содержание 2-пирролидона в субстанции в процентах от заявленного количества (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика 2-пирролидона на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика 2-пирролидона на хроматограмме раствора сравнения;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска 2-пирролидона, мг;
Р – содержание 2-пирролидона в 2-пирролидоне,%.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 30 мг субстанции в 0,5 мл натрия хлорида раствора 0,9 % для инъекций на мышь, внутривенно, время введения 30 с. Срок наблюдения 72 ч.

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,05 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение азота в органических соединениях методом Кьельдаля» (метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

##### Хранение

В герметично закрытой упаковке.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0620 Повидон-Йод (Povidonum-Iodum)

Взамен ФС 42-3156-95

##### Определение

Поли[1-(2-оксопирролидин-1-ил)этилен]—иод (n/m).

Cодержит не менее 9,0 % и не более 12,0 % активного йода в пересчёте на сухое вещество, азота – не менее 9,0 % и не более 11,5 % в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Аморфный порошок со слабым характерным запахом. Цвет от желтовато-коричневого до коричневого.

Растворимость. Растворим в воде и спирте 96 %, практически нерастворим в ацетоне.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца повидона-йода.

2. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 20 мл воды, прибавляют 2 мл крахмала раствора 1 %; должно появиться сине-бурое окрашивание.

##### Испытания

Относительная вязкость. От 1,5 до 2,5 (6 % раствор, ОФС «Вязкость»). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 6,0 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. Фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм. В вискозиметр Оствальда со временем истечения воды 80–120 с помещают 10 мл полученного фильтрата и термостатируют в течение 15 мин при температуре 25±0,1 °С. Измеряют время истечения раствора. Измерения проводят не менее 6 раз и вычисляют среднее арифметическое значение.

Относительную вязкость раствора вычисляют (ηотн) по формуле:

где tcp – среднее время истечения испытуемого раствора;
tocp – среднее время истечения воды;
ρ – плотность испытуемого раствора;
ρ0 – плотность воды.

рН раствора. От 1,5 до 5,0 (10 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Йодид-ион. Не более 6,6 % в пересчёте на сухое вещество.

А. Определение общего йода. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Раствор натрия метабисульфита. Растворяют 10 г натрия метабисульфита в 30 мл воды.

В коническую колбу с притёртой пробкой вместимостью 250 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 100 мл воды и прибавляют раствор натрия метабисульфита до исчезновения окраски. Прибавляют 25 мл 0,1 М раствора серебра нитрата и 10 мл азотной кислоты разведённой. Избыток серебра нитрата титруют 0,1 М раствором аммония тиоцианата до появления розового окрашивания (индикатор – 3 мл железоаммонийных квасцов раствора).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 12,69 г йода.

Б. Содержание йодид-иона определяют как разность между процентным содержанием общего и активного йода (раздел «Количественное определение. 1. Активный йод»).

Потеря в массе при высушивании. Не более 8,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

1. Активный йод. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

- В коническую колбу с притёртой пробкой вместимостью 250 мл помещают 1,0 г (точная навеска) субстанции, растворяют при перемешивании в 15 мл воды, прибавляют 35 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата до обесцвечивания (индикатор – 0,5 мл крахмала раствора 1 %).

- 1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 12,69 мг активного йода.

2. Общий азот. В грушевидную колбу с длинным горлом вместимостью 200 мл помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции и далее испытание проводят, как указано в ОФС «Определение азота в органических соединениях методом Кьельдаля».

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0621 Помалидомид (Pomalidomidum)

Вводится впервые

##### Определение

(3RS)-4-Амино-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-1,3-дион.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % помалидомида C13H11N3O4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Жёлтый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в диметилсульфоксиде, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1, снятый в диске с калия бромидом, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца помалидомида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика помалидомида на хроматограмме раствора стандартного образца помалидомида (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Угол вращения. От −0,5° до +0,5° (1 % раствор субстанции в диметилсульфоксиде, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от света и хранят при температуре 2–8 °С не более 8 ч.

Подвижная фаза А (ПФА). Фосфорная кислота разведённая 0,1 %.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Подвижная фаза В (ПФВ). Метанол.

Растворитель. Вода—ацетонитрил 1:1.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, прибавляют 80 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси 5. Готовят раствор фармакопейного стандартного образца примеси 5, в растворителе с концентрацией 6 мкг/мл.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2 мг субстанции, прибавляют 16 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 1,0 мл раствора стандартного образца примеси 5 и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь 1:
3-аминобензол-1,2-дикарбоновая кислота (3-аминофталевая кислота) [5434-20-8].

Примесь 2:
4-амино-2-(4-амино-1,3-диоксо-1,3-дигидро-2H-изоиндол-2-ил)-5-оксопентановая кислота [2635-64-5].

Примесь 3:
4-амино-4-(4-амино-1,3-диоксо-1,3-дигидро-2H-изоиндол-2-ил)-5-оксопентановая кислота [918314-45-1].

Примесь 4:
4-амино-5-гидрокси-2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-1,3-дион [1547162-41-3].

Примесь 5 (талидомид):
2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-2,3-дигидро-1H-изоиндол-1,3-дион [50-35-1].

Примесь 6:
2-(2,6-диоксопиперидин-3-ил)-4-нитро-2,3-дигидро-1H-изоиндол-1,3-дион [19171-18-7].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 225 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,% | ПФВ,%
--- | --- | --- | ---
0–10 | 85 | 10 | 5
10–10,5 | 85 | 10 → 15 | 5 → 0
10,5–28 | 85 → 55 | 15 → 45 | 0
28–30 | 55 → 40 | 45 → 60 | 0
30–40 | 40 | 60 | 0
40–42 | 40 → 85 | 60 → 10 | 0 → 5
42–50 | 85 | 10 | 5

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Помалидомид – 1 (около 21 мин); примесь 1 – около 0,33; примесь 2 – около 0,48; примесь 3 – около 0,53; примесь 4 – около 0,82; примесь 5 – около 1,06; примесь 6 – около 1,08.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками помалидомида и примеси 5 должно быть не менее 4,5.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика помалидомида должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) помалидомида должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика помалидомида должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь 1 – 1,59; примесь 2 – 1,32; примесь 3 – 1,28; примесь 4 – 1,16; примесь 5 – 0,62; примесь 6 – 1,16.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика помалидомида на хроматограмме раствора сравнения.

Допустимое содержание примесей:

- примесь 1, 2, 3, 4, 5 и 6 − не более 0,15 % каждая;

- любая другая примесь − не более 0,10 %;

- сумма примесей − не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1, методика Б). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—фосфорная кислота разведённая 0,1 % 300:700.

Растворитель. Вода—ацетонитрил 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 40 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. Срок годности раствора – 24 ч.

Раствор стандартного образца помалидомида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца помалидомида, прибавляют 40 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. Срок годности раствора – 24 ч.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 225 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика помалидомида. |

Хроматографируют раствор стандартного образца помалидомида и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца помалидомида:

- фактор асимметрии пика (AS) помалидомида должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика помалидомида должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику помалидомида, должна составлять не менее 5000 теоретических тарелок.

Содержание помалидомида C13H11N3O4 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика помалидомида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика помалидомида на хроматограмме раствора стандартного образца помалидомида;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца помалидомида, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание помалидомида в фармакопейном стандартном образце помалидомида,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0622 Прамипексола дигидрохлорид моногидрат

Прамипексол
Pramipexoli dihydrochloridum monohydricum

Вводится впервые

##### Определение

(6S)-N6-Пропил-4,5,6,7-тетрагидро-1,3-бензотиазол-2,6-диамина дигидрохлорид моногидрат.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % прамипексола дигидрохлорида C10H17N3S·2HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в метаноле, умерено или мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца прамипексола дигидрохлорида моногидрата.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –65 до –69,5 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (1 % раствор субстанции в метаноле при длине кюветы 1 см, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 2,8 до 3,4 (2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

1. Примесь D

Подвижная фаза (ПФ). Диэтиламин—этанол—гексан 1:150:850.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 6,0 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл этанола и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Готовят раствор фармакопейного стандартного образца примеси D ((6R)-N6-пропил-4,5,6,7-тетрагидро-1,3-бензотиазол-2,6-диамин, [104632-28-2]) в ПФ с концентрацией 0,2 мг/мл. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель модифицированный трис(3,5-диметилфенилкарбамоил)амилозой для хиральной хроматографии; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 75 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика прамипексола. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Прамипексол – 1 (около 11 мин); примесь D – около 0,5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси D и прамипексола должно быть не менее 5.

На хроматограмме раствора сравнения фактор асимметрии пика (AS) прамипексола должен быть не более 2,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси D не должна превышать площадь пика прамипексола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

2. Другие примеси

Буферный раствор. Растворяют 5 г натрия октансульфоната моногидрата, 9,1 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 3,00. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор—ацетонитрил 500:500.

Растворитель. Ацетонитрил—буферный раствор 20:80.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 75,0 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 7,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца прамипексола для проверки пригодности системы, содержащего примеси A, В и С, в 5,0 мл растворителя.

Примечание

Примесь А: (6S)-4,5,6,7-тетрагидро-1,3-бензотиазол-2,6-диамин, [106092-09-5].

Примесь В:
(6S)-N2,N6-дипропил-4,5,6,7-тетрагидро-1,3-бензотиазол-2,6-диамин, [1246815-83-7].

Примесь С:
N6,N6'-(2-метилпентан-1,3-диил)бис[(6S)-4,5,6,7-тетрагидро-1,3-бензотиазол-2,6-диамин, [1973461-14-1].

Хроматографические условия

Колонка | 125 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 264 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл; |  |
Время регистрации хроматограммы | 2,5-кратное от времени удерживания пика прамипексола. |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–15 | 60 → 20 | 40 → 80
15–20 | 20 → 60 | 80 → 40

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Прамипексол – 1 (около 6 мин); примесь A – около 0,7; примесь B – около 1,5; примесь C – около 1,7.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В и С используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу прамипексола для проверки пригодности системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и прамипексола должно быть не менее 6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей А, B и C не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика прамипексола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика прамипексола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика прамипексола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. От 4,5 % до 7,0 %. (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Азотной кислоты раствор 3 М. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 290,7 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Растворяют 0,12 г (точная навеска) субстанции в 150 мл воды, прибавляют 10,0 мл азотной кислоты раствора 3 М и титруют 0,1 М раствором серебра нитрата. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 14,213 мг прамипексола дигидрохлорида C10H17N3S·2HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0164 Преднизолон (Prednisolonum)

Взамен ФС.2.1.0164.18

##### Определение

11β,17,21-Тригидроксипрегна-1,4-диен-3,20-дион.

Cодержит не менее 96,5 % и не более 102,0 % преднизолона C21H28O5 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен. Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Растворим в метаноле и спирте 96 %, умеренно растворим в ацетоне, очень мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца преднизолона.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах ацетона, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца преднизолона (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Прибавляют 2 мг испытуемой субстанции к 2 мл серной кислоты концентрированной, встряхивают до растворения и оставляют на 5 мин; должно появиться красное окрашивание, при наблюдении в ультрафиолетовом свете при 365 нм должна быть видна красно-коричневая флуоресценция. К полученному раствору осторожно прибавляют 10 мл воды; окраска должна побледнеть или исчезнуть, при наблюдении в ультрафиолетовом свете при 365 нм должна быть видна жёлтая или зеленовато-жёлтая флуоресценция и должен образоваться серый хлопьевидный осадок или наблюдаться помутнение раствора.

##### Испытания

Удельное вращение. От +113 до +119 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в спирте 96 %, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы преднизолона в процессе испытания защищают от света.

Подвижная фаза А (ПФА). Вода.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—метанол 500:500.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 400:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для идентификации пиков. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мг фармакопейного стандартного образца преднизолона для идентификации пиков (содержащего примеси F и J), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мг фармакопейного стандартного образца преднизолона для проверки пригодности хроматографической системы (содержащего примеси A, B и C), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A (гидрокортизон):
11β,17,21-тригидроксипрегн-4-ен-3,20-дион [50-23-7].

Примесь B (преднизон):
17,21-дигидроксипрегна-1,4-диен-3,11,20-трион [53-03-2].

Примесь C (преднизолона ацетат):
11β,17-дигидрокси-3,20-диоксопрегна-1,4-диен-21-ил)ацетат [52-21-1].

Примесь F(11-эпи-преднизолон):
11α,17,21-тригидроксипрегна-1,4-диен-3,20-дион [600-90-8].

Примесь J (11-дезоксипреднизолон):
17,21-дигидроксипрегна-1,4-диен-3,20-дион [1807-14-3].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, совместимый с водной подвижной фазой, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–14 | 60 | 40
14–20 | 60 → 20 | 40 → 80
20–25 | 20 | 80

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор для идентификации пиков, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Преднизолон – 1 (около 12 мин); примесь F – около 0,7; примесь В – около 0,9; примесь A – 1,05; примесь J – 1,5; примесь C – 1,7.

Идентификация примесей. Для идентификации примесей A, B и C используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу преднизолона для проверки пригодности хроматографической системы. Для идентификации примесей F и J используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для идентификации пиков и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу преднизолона для идентификации пиков.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками преднизолона и примеси A должно быть не менее 3.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать десятикратную площадь пика преднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

- площадь пика примеси F не должна превышать пятикратную площадь пика преднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика каждой из примесей B, C и J не должна превышать трёхкратную площадь пика преднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика преднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 15 раз превышать площадь пика преднизолона на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,5 %);

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика преднизолона на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца преднизолона. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца преднизолона, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца преднизолона и испытуемый раствор.

Содержание преднизолона C21H28O5 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика преднизолона на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика преднизолона на хроматограмме раствора стандартного образца преднизолона;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца преднизолона, мг;
W - потеря в массе при высушивании,%;
P - содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце преднизолона,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0165 Преднизолона натрия фосфат

Преднизолон
Prednisoloni natrii phosphas

Взамен ФС.2.1.0165.18

##### Определение

(11β,17-Дигидрокси-3,20-диоксопрегна-1,4-диен-21-ил)фосфат динатрия.

Cодержит не менее 96,0 % и не более 103,0 % преднизолона натрия фосфата C21H27Na2O8P в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или слегка желтоватый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в метаноле, очень мало растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца преднизолона натрия фосфата.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец преднизолона натрия фосфата по отдельности растворяют в минимальных объёмах спирта 96 %, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

- Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—вода—бутанол 20:20:60.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца преднизолона натрия фосфата. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца преднизолона натрия фосфата, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца дексаметазона натрия фосфата, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мл полученного раствора и доводят объём раствора раствором стандартного образца преднизолона натрия фосфата до метки.

- Реактив для детектирования. Серной кислоты раствор спиртовой 36,6 %

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора, раствора стандартного образца преднизолона натрия фосфата и раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную, в течение 1 ч, камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при 254 нм.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению и величине должна соответствовать зоне адсорбции преднизолона натрия фосфата на хроматограмме раствора стандартного образца преднизолона натрия фосфата.

- Опрыскивают пластинку реактивом для детектирования, нагревают при 120 °C в течение 10 мин или до тех пор, пока не проявятся зоны адсорбции, охлаждают до комнатной температуры и просматривают в видимом свете и в УФ-свете при длине волны 365 нм.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске в видимом свете и цвету флуоресценции в УФ-свете при 365 нм должна соответствовать зоне адсорбции преднизолона натрия фосфата на хроматограмме раствора стандартного образца преднизолона натрия фосфата.

- Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 зоны адсорбции, которые могут быть разделены не до конца.

3. Качественная реакция. Прибавляют 2 мг субстанции к 2 мл серной кислоты концентрированной, встряхивают до растворения и оставляют на 5 мин; должно появиться красное окрашивание, при наблюдении в ультрафиолетовом свете при 365 нм должна быть видна красно-коричневая флуоресценция. К полученному раствору осторожно прибавляют 10 мл воды; окраска должна побледнеть или исчезнуть, при наблюдении в ультрафиолетовом свете при 365 нм должна быть видна жёлтая или зеленовато-жёлтая флуоресценция и должен образоваться серый хлопьевидный осадок или наблюдаться помутнение раствора.

4. Качественная реакция. К 40 мг субстанции прибавляют 2 мл серной кислоты концентрированной и осторожно нагревают до выделения белых паров, прибавляют по каплям азотную кислоту концентрированную, продолжают нагревание до почти полного обесцвечивания раствора и охлаждают. Прибавляют 2 мл воды, нагревают до повторного выделения белых паров, охлаждают, прибавляют 10 мл воды и нейтрализуют по лакмусовой бумаге красной аммиака раствором 10 %. Полученный раствор должен давать характерные реакцию А на натрий и реакцию Б на фосфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +94 до +100 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 20 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном В7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 7,5 до 9,0 (раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 5,440 г калия дигидрофосфата и 2,400 г гексиламина и оставляют на 10 мин. Прибавляют 740 мл воды и 260 мл ацетонитрила, перемешивают и фильтруют через фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 62,5 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25,0 мг фармакопейного стандартного образца преднизолона натрия фосфата и 25,0 мг фармакопейного стандартного образца преднизолона, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика преднизолона натрия фосфата. |

Уравновешивают колонку ПФ в течение не менее 30 мин.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Преднизолона натрия фосфат – 1 (около 6,5 мин); преднизолон – около 1,3.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками преднизолона натрия фосфата и преднизолона должно быть не менее 4,5. При необходимости увеличивают концентрацию ацетонитрила или воды в ПФ.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика преднизолона натрия фосфата на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0 %), и площадь только одного такого пика может превышать 0,5 площади пика преднизолона натрия фосфата на хроматограмме раствора сравнения (1,0 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика преднизолона натрия фосфата на хроматограмме раствора сравнения (не более 3,0 %);

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,025 площади пика преднизолона натрия фосфата на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 8,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Неорганические фосфаты. Не более 1,0 %. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в воде и доводят водой до метки. К 10 мл полученного раствора прибавляют 5 мл молибденованадиевого реактива, перемешивают и выдерживают в течение 5 мин. Появляющееся жёлтое окрашивание не должно превышать окрашивание эталонного раствора, приготовленного таким же образом с использованием 10 мл стандартного раствора 5 мкг/мл фосфат-иона.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 1,16 ЕЭ на 1 мг преднизолона (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 247 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения воду.

Содержание преднизолона натрия фосфата C21H27Na2O8P в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
a - навеска субстанции, г;
312 - удельный показатель поглощения преднизолона натрия фосфата (А_1см^(1%));
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0680 Прогестерон

Прогестерон
Progesteronum

Взамен ФС 42-2831-92

C21H30O2 [57-83-0] | М.м. 314,46

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Прегн-4-ен-3,20-дион.

Содержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % прогестерона C21H30O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Очень легко растворим в хлороформе и этаноле, умеренно или мало растворим в жирных маслах, практически нерастворим в воде.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца прогестерона.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец прогестерона по отдельности растворяют в этаноле, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика прогестерона на хроматограмме раствора стандартного образца прогестерона (раздел «Количественное определение»).

3. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

- Подвижная фаза (ПФ). Этилацетат — метиленхлорид 33:66.

- Растворитель. Метанол — метиленхлорид 1:9.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца прогестерона. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца прогестерона, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца прогестерона. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

- Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и степени подавления флуоресценции должна соответствовать зоне адсорбции прогестерона на хроматограмме раствора стандартного образца прогестерона.

4. Качественная реакция. К 5 мг субстанции прибавляют 2 мл серной кислоты концентрированной и 3 мл воды; должно появиться жёлтое окрашивание с зелёной флуоресценцией. Раствор охлаждают, прибавляют 3 мл хлороформа и встряхивают, окраска обоих слоёв должна исчезнуть.

##### ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От +186 до +194 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в этаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 20 мл этанола должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФА). Ацетонитрил—вода 500:500.

Подвижная фаза (ПФБ). Вода—ацетонитрил 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФБ и доводят объём раствора ПФБ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФБ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФБ до метки.

Раствор стандартного образца прогестерона, содержащего примеси B, C, G, I и М. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 2мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца прогестерона, содержащего примеси B, C, G, I и М, растворяют в ПФБ и доводят объём раствора ПФБ до метки.

Раствор стандартного образца прогестерона, содержащего примеси D, E, J, K и L. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца прогестерона, содержащего примеси D, E, J, K и L, растворяют в ПФБ и доводят объём раствора ПФБ до метки.

Раствор стандартного образца прогестерона, содержащего примесь H.

В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца прогестерона, содержащего примесь H (с заданным содержанием примеси H), растворяют в ПФБ и доводят объём раствора ПФБ до метки.

Примечание

Примесь B: (20S)-20-гидроксипрегн-4-ен-3-он [145-14-2].

Примесь C: (20R)-20-гидроксипрегн-4-ен-3-он [145-15-3].

Примесь D: [(20S)-3-оксопрегн-4-ен-20-ил]ацетат [5035-09-6].

Примесь E: [(20R)-3-оксопрегн-4-ен-20-ил]ацетат [5062-62-4].

Примесь G: 21-(циклогексилиден)прегн-4-ен-3,20-дион [2257421-79-5].

Примесь H (Δ6-прогестерон): прегна-4,6-диен-3,20-дион [1162-56-7].

Примесь I: (20RS)-20-метил-3-оксопрегн-4-ен-21-аль [24254-01-1].

Примесь J: прегна-1,4-диен-3,20-дион [1162-54-5].

Примесь K: прегна-4,9(11)-диен-3,20-дион [17652-16-3].

Примесь L: 20-метилиден-3-оксопрегн-4-ен-21-аль [2257421-80-8].

Примесь M:(17α)-прегн-4-ен-3,20-дион [2000-66-0].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, экстра плотно связанный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм;
Скорость потока | 1,0 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 241 нм; спектрофотометрический, 286 нм (для определения примеси Н);
Объём пробы | 10 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА, % | ПФБ, %
--- | --- | ---
0–20 | 100 | 0
20–27 | 100 → 0 | 0 → 100
27–45 | 0 | 100
45–52 | 100 | 0
52–55 | 100 | 0

Хроматографируют раствор стандартного образца прогестерона, содержащего примеси B,C,G,I и М, раствор стандартного образца прогестерона, содержащего примеси D,E,J,K и L, раствор стандартного образца прогестерона, содержащего примесь H, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Прогестерон – 1 (около 14 мин); примесь B – около 0,6; примесь J – около 0,65; примесь H – около 0,82; примесь K – около 0,85; примесь C – около 0,93; примесь M – около 1,1; примесь L – около 1,90; примесь I – около 1,95; примеси D и E – около 2,05; примесь G – около 2,65.

Для идентификации пиков используют хроматограммы прилагаемые к фармакопейному стандартному образцу прогестерона, к фармакопейному стандартному образцу прогестерона, содержащего примеси B,C,G,I и М, к фармакопейному стандартному образцу прогестерона, содержащего примеси D,E,J,K и L и фармакопейному стандартному образцу прогестерона содержащего примесь H.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца прогестерона, содержащего примеси B,C,G,I и М отношение максимум/минимум (p/v) между пиком М и высотой нижней точки линии перегиба между пиками примеси М и прогестерона относительно базовой линии должно быть не менее 4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси I (сумма двух эпимеров) не должна более чем в 6 раз превышать площадь пика прогестерона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6 %);

- площадь пика примеси С не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика прогестерона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика примеси B не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика прогестерона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика каждой из примесей G, J, K, L, M не должна более чем в 1,5 раз превышать площадь пика прогестерона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика примеси H (при 286 нм) рассчитывается по площади соответствующего пика на хроматограмме, полученной с использованием раствора стандартного образца прогестерона, содержащего примесь H с учётом заданного содержания примеси H в стандартном образце прогестерона, содержащего примесь H (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика прогестерона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков D и E не должна превышать 1,5 площади пика прогестерона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- сумма площадей пиков всех примесей (кроме H) не должна превышать десятикратную площадь пика прогестерона на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика прогестерона на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают до постоянной массы 0,5 г (точная навеска) субстанции при температуре 105 °С в течение 2 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют около 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3Б, в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 3,5 ЕЭ на 1 мг прогестерона (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции c концентрацией 0,5 мг прогестерона в 1 мл этанола.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца прогестерона и испытуемый раствор.

Раствор стандартного образца прогестерона. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца прогестерона, растворяют в ПФБ и доводят объём раствора ПФБ до метки.

Содержание прогестерона C21H30O2 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика прогестерона на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика прогестерона на хроматограмме раствора стандартного образца прогестерона;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца прогестерона, мг;
W – потеря в массе при высушивании, %;
P – содержание прогестерона в фармакопейном стандартном образце прогестерона, %.

##### ХРАНЕНИЕ

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Контроль по показателю проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0166 Прокаина гидрохлорид

Прокаин
Procaini hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0166.18

##### Определение

[2-(Диэтиламино)этил]-4-аминобензоата гидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % прокаина гидрохлорида C13H20N2O2HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, растворим в спирте 96 %, мало растворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца прокаина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на первичные ароматические амины (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

3. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 2 мл воды, прибавляют 0,15 мл серной кислоты разведённой 16 % и 1 мл 0,1 М раствора калия перманганата; фиолетовое окрашивание должно сразу исчезнуть.

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 154 до 158 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Растворяют 1 г субстанции в 10 мл воды, свободной от углерода диоксида. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора» должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН. От 5,0 до 6,5 (ОФС «Ионометрия», метод 3).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 г субстанции, растворяют в воде, свободной от углерода диоксида и доводят объём раствора водой до метки.

4-Аминобензойная кислота и бензокаин. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Растворы используют свежеприготовленными или хранят при температуре 4 °С не более суток.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетон—бензол 1:4.

Испытуемый раствор. В мерной колбе вместимостью 10 мл растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 0,6 мл воды, доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца 4-аминобензойной кислоты и 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца бензокаина (этил(4-аминобензоат) [94-09-]), растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят спиртом 96 % до метки.

На линию старта пластинки наносят 20 мкл (400 мкг) испытуемого раствора и 20 мкл стандартного раствора (0,2 мкг 4-аминобензойзойной кислоты и 0,2 мкг бензокаина). Пластинку с нанесёнными пробами сушат при температуре от 15 до 25 °С в течение 5 мин, помещают в камеру, насыщенную в течение 1 ч ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции примеси 4-аминобензойной кислоты по совокупности величины и степени подавления флуоресценции не должна превышать зону адсорбции 4-аминобензойной кислоты на хроматограмме стандартного раствора, содержащего 0,2 мкг 4-аминобензойной кислот (не более 0,05 %) и зона адсорбции примеси бензокаина по совокупности величины и степени подавления флуоресценции не должна превышать зону адсорбции бензокаина на хроматограмме стандартного раствора, содержащего 0,2 мкг бензокаина (не более 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 %. (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3 Б). Определение проводят в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,14 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции 100 мг/мл, а затем разбавляют его не менее чем в 400 раз.

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 10 мл воды, прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и далее поступают, как указано в ОФС «Нитритометрия».

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 27,28 мг прокаина гидрохлорида C13H20N2O2HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Контроль по показателю качества «Бактериальные эндотоксины» проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0167 Прокаинамида гидрохлорид

Прокаинамид
Procainamidi hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0167.18

##### Определение

4-Амино-N-[2-(диэтиламино)этил]бензамида гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % прокаинамида гидрохлорида C13H21N3O·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96 %, мало растворим в ацетоне и хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца прокаинамида гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на первичные ароматические амины (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

4. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 1 мл воды, прибавляют 10 мг аммония ванадата, 1–2 капли серной кислоты концентрированной и нагревают; должно появиться вишнёво-красное окрашивание (отличие от прокаина).

##### Испытания

Температура плавления. От 165 до 170 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном B6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН. От 5,0 до 6,5 (ОФС «Ионометрия», метод 3).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

4-аминобензойная кислота. Не более 0,1 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы используют свежеприготовленными или хранят при температуре 4 °С не более суток.

Подвижная фаза (ПФ). Триэтиламин—метанол—вода 5:300:700; доводят фосфорной кислотой до pH 7,5.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца 4-аминобензойной кислоты. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца 4-аминобензойной кислоты, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца прокаинамида, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и 4,0 мл раствора стандартного образца 4-аминобензойной кислоты, доводят объём раствора ПФ до метки.

Условия хроматографирования

Колонка | 300 × 3,9 мм, силикагель октадецилсилильный (С18), 10 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания основного пика. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца
4-аминобензойной кислоты и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Прокаинамида гидрохлорида – 1; 4-аминобензойной кислоты – около 0,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси 4-аминобензойной кислоты используют хроматограмму раствора стандартного образца 4-аминобензойной кислоты.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение ® между пиками 4-аминобензойной кислоты и прокаинамида гидрохлорида должно быть не менее 5,0;

- фактор ассиметрии (As) пика 4-аминобензойной кислоты должен быть не более 2,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца 4-аминобензойной кислоты относительное стандартное отклонение площади пика
4-аминобензойной кислоты должно быть не более 3,0 % (6 определений).

Содержание 4-аминобензойной кислоты в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика 4-аминобензойной кислоты на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика 4-аминобензойной кислоты на хроматограмме раствора стандартного образца 4-аминобензойной кислоты;
a1 - навеска субстанции прокаинамида гидрохлорида, мг;
a0 - навеска стандартного образца 4-аминобензойной кислоты, мг;
P – содержание 4-аминобензойной кислоты в стандартном образце 4-аминобензойной кислоты,%.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 %. (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы» метод, 3А и 3Б). Определение проводят в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,35 ЕЭ на 1 мг прокаинамида гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 10 мл воды, прибавляют 20 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и далее поступают, как указано в ОФС «Нитритометрия».

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 27,18 мг прокаинамида гидрохлорида C13H21N3O∙НСl.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0549 Промазина гидрохлорид

Промазин
Promazini hydrochloridum

Взамен ФС 42-2502-94

##### Определение

N,N-Диметил-3-(10H-фенотиазин-10-ил)пропанамина гидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % промазина гидрохлорида C17H20N2S·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен. На свету субстанция и её растворы приобретают синевато-зелёную или розовую окраску.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96 % и хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектроскопия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца промазина гидрохлорида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,25 г субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислотой раствором 0,01 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 400 нм должен иметь максимумы при 250 нм и 302 нм.

3. Качественная реакция. К 1 мл 0,1 % раствора субстанции в воде прибавляют 0,15 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и 0,15 мл калия бромата раствора 1 %. Должно появиться розовато-оранжевое окрашивание, переходящее в коричневое.

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 177 до 181 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном B7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH. От 4,2 до 5,4 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Все растворы готовят непосредственно перед использованием и защищают от света.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетон—диэтиламин—циклогексан 10:10:80.

Растворитель. Диэтиламин—метанол 5:95.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца хлорпротиксена гидрохлорида, растворяют в растворителе, прибавляют 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (100 мкг), раствора сравнения (0,5 мкг) и раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 3 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 5 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции промазина гидрохлорида.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 разделённые зоны адсорбции в следующей последовательности по возрастанию Rf: хлорпротиксена гидрохлорид около 0,25; промазина гидрохлорид около 0,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора допускается наличие только четырёх дополнительных зон адсорбции, каждая из которых по совокупности величины и степени подавления флуоресценции не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Суммарное содержание примесей не должно превышать 2,0 %.

Зоны адсорбции на линии старта при оценке не учитывают.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы при температуре 105 °С.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). В 20 мл воды растворяют 0,4 г субстанции. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 1,4 ЕЭ на 1 мг промазина гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 1,5 мл уксусной кислоты безводной, прибавляют 20 мл уксусного ангидрида, 5 мл бензола и титруют хлорной кислоты раствором 0,1 М до перехода фиолетовой окраски в зелёную (индикатор – 0,2 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл хлорной кислоты раствора 0,1 М соответствует 32,09 мг промазина гидрохлорида C17H20N2S·HCl.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0550 Пропифеназон (Propyphenazonum)

Вводится впервые

##### Определение

1,5-Диметил-4-(1-метилэтил)-2-фенил-1,2-дигидро-3H-пиразол-3-он.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % пропифеназона C14H18N2O в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или слегка желтоватый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 % и метиленхлориде, мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца пропифеназона.

2. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

- Подвижная фаза (ПФ). Бутанол—циклогексан—этилацетат 10:45:45.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 80 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца пропифеназона. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 80 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца пропифеназона, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (80 мкг) и раствора стандартного образца пропифеназона (80 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат в потоке горячего воздуха в течение 15 мин до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и степени подавления флуоресценции должна соответствовать зоне адсорбции пропифеназона на хроматограмме раствора стандартного образца пропифеназона.

3. Качественная реакция. К 1 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора» прибавляют 0,1 мл железа(III) хлорида раствора 10,5 %; должно появиться коричневато-красное окрашивание. После прибавления 1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % окраска должна измениться на жёлтую.

##### Испытания

Температура плавления. От 102 до 106 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 г субстанции, растворяют в 50 мл смеси вода—спирт 96 % 1:1. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

Кислотность или щёлочность. К 10 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствора 0,1 %; раствор должен оставаться бесцветным. Для изменения окраски раствора на розовую должно потребоваться не более 0,2 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида. Розовое окрашивание должно исчезать при прибавлении 0,4 мл раствора 0,01 М хлористоводородной кислоты. При прибавлении 0,2 мл метилового красного раствора 0,05 % раствор должен окраситься в оранжевый или красный цвет.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 13,7 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят значение pH натрия гидроксида раствором 8,5 % до 5,2. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 400:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в ПФ, прибавляют 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь A (феназон): 1,5-диметил-2-фенил-1,2-дигидро-3H-пиразол-3-он [60-80-0].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 4-кратное от времени удерживания пика пропифеназона. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Пропифеназон – 1 (около 7 мин); примесь A – около 0,4.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительно время удерживания и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и пропифеназона должно быть не менее 4,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика пропифеназона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика пропифеназона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции высушивают в вакууме до постоянной массы при температуре 60 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3 Б), в остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,175 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 23,03 мг пропифеназона C14H18N2O.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0170 Пропранолола гидрохлорид

Пропранолол
Propranololi hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0170.18

##### Определение

(2RS)-1-(Нафталин-1-илокси)-3-(пропан-2-иламино)пропан-2-ола гидрохлорид.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % пропранолола гидрохлорида C16H21NO2·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Легко растворим в метаноле, растворим в воде и спирте 96 %, мало растворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца пропранолола гидрохлорида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

- Раствор стандартного образца пропранолола гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца пропранолола гидрохлорида, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь максимумы при 290 нм, 306 нм и 319 нм. Значения оптической плотности испытуемого раствора при этих длинах волн должны составлять около 0,42, 0,25 и 0,15 соответственно и не должны отличаться от значений оптической плотности раствора стандартного образца пропранолола, измеренных при этих же длинах волн, более чем на 3 %.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 163 до 166 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 2 г субстанции в 20 мл метанола должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», не должна превышать интенсивности наиболее близко подходящего по цвету эталона сравнения 6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. Растворяют 0,2 г субстанции в 20 мл воды, свободной от углерода диоксида, прибавляют 0,2 мл метилового красного раствора 0,05 % и 0,2 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты. Должно появиться красное окрашивание. Для изменения окраски раствора на жёлтую должно потребоваться не более 0,4 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворитель. Серная кислота концентрированная—вода—ацетонитрил 1:450:550.

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 0,31 г тетрабутиламмония дигидрофосфата и 1,60 г натрия лаурилсульфата в 900 мл растворителя и доводят значение pH раствора натрия гидроксида раствором 8,5 % до 3,30, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора растворителем до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца пропранолола для проверки пригодности системы (содержащего примесь А), растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки

Примечание

Примесь А: (2RS)-3-(нафталин-1-илокси)пропан-1,2-диол [36112-95-5].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 292 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 7-кратное от времени удерживания пика пропранолола. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Пропранолол – 1 (около 3 мин); примесь А – около 0,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу пропранолола для проверки пригодности системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и пропранолола должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика пропранолола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика пропранолола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 8,75 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 25 мл спирта 96 % и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М натрия гидроксида соответствует 29,58 мг пропранолола гидрохлорида C16H21NO2·HCl.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0551 Пророксана гидрохлорид

Пророксан
Proroxani hydrochloridum

Взамен ФС 42-1992-99

##### Определение

1-(2,3-Дигидро-1,4-бензодиоксин-6-ил)-3-[(3RS)-3-фенилпирролидин-1-ил]пропан-1-она гидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % пророксана гидрохлорида C21H23NO3·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый со слегка желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в хлороформе, умеренно или мало растворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

1. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,001 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мл полученного раствора и доводят объём хлористоводородной кислоты раствором 0,001 М до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 300 нм должен иметь максимумы при 232 и 277 нм и минимум при 249 нм.

2. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 10 мл воды при нагревании до 30 °С, прибавляют 1 мл азотной кислоты разведённой 16 %, встряхивают в течение 5 мин и фильтруют. Фильтрат должен давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

3. Качественная реакция. Растворяют 25 мг субстанции в 1 мл воды при температуре 40–50 °С, прибавляют 0,1 мл кобальта хлорида раствора 5 % и 0,1 мл калия ферроцианида раствора 5 %; раствор должен помутнеть, и должно появиться устойчивое зелёное окрашивание.

4. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 10 мл воды при нагревании до 30 °С и прибавляют 2 мл натрия карбоната раствора 20 %; должны выделиться капли неокрашенного масла, при затирании в течение 5 мин должны кристаллизироваться.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»). Допускается нагрев на водяной бане до 30 °С и использование ультразвуковой ванны до полного растворения субстанции.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 4,5 до 5,8 (1 % раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы, содержащие пророксан, защищают от света и готовят непосредственно перед применением.

Раствор аммония ацетата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 3,85 г (точная навеска) аммония ацетата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Раствор аммония ацетата—ацетонитрил 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ацетонитриле, обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин, доводят объём раствора ацетонитрилом до метки и выдерживают 10 мин в защищённом от света месте.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,25 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мг 3-фенилпирролидина гидрохлорида, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл полученного раствора, 0,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика пророксана. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками пророксана и 3-фенилпирролидина должно быть не менее 5.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика пророксана на хроматограмме раствора сравнения.

Допустимое содержание примесей:

- любая другая примесь – не более 0,25 %;

- сумма примесей – не более 0,75 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 % от площади пика пророксана на хроматограмме раствора сравнения.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). В коническую колбу вместимостью 25 мл помещают 0,3 г субстанции, прибавляют 15 мл воды, встряхивают в течение 15 мин и фильтруют. Для определения используют 10 мл полученного фильтрата.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Помещают 0,15 г (точная навеска) субстанции в коническую колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 1 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 20 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до зелёного окрашивания (индикатор – 0,1 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 37,39 мг пророксана гидрохлорида C21H23NO3·HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0552 Протионамид (Prothionamidum)

Вводится впервые

##### Определение

2-Пропилпиридин-4-карботиоамид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % протионамида C9H12N2S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Жёлтый кристаллический порошок со слабым характерным запахом.

Растворимость. Растворим в метаноле, умеренно растворим в хлороформе и спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца протионамида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,02 г (точная навеска) субстанции, растворяют в спирте безводном 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом безводным 96 % до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь максимум при 291 нм. Удельный показатель поглощения в максимуме должен быть от 0,76 до 0,80.

3. Качественная реакция. Нагревают 0,1 г (точная навеска) субстанции с 5 мл хлористоводородной кислоты разведённой; выделяющийся газ должен окрашивать свинцово-ацетатную бумагу в чёрный цвет.

##### Испытания

Температура плавления. От 140 до 143 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г в 20 мл спирта 96 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Кислотность. Растворяют 2,0 г субстанции в 20,0 мл тёплого метанола, прибавляют 20,0 мл воды, охлаждают, взбалтывают до появления кристаллизации и прибавляют 0,2 мл крезолового красного раствора спиртового 0,1 %. Для изменения окраски раствора на красную должно потребоваться не более 0,2 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—хлороформ 1:9.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 г (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Растворы сравнения Б, В, Г. В мерные колбы вместимостью 100 мл помещают по отдельности 2,0 мл, 3,0 мл и 4,0 мл испытуемого раствора и доводят объём растворов метанолом до метки. По 1,0 мл полученных растворов помещают по отдельности в мерные колбы вместимостью 10 мл и доводят объём растворов метанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г субстанции, прибавляют 1 мл водорода пероксида раствора разведённого и 5 мл метанола, обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора метанолом до метки. Раствор используют в течение 10 мин после приготовления.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (250 мкг), раствора сравнения А (1,25 мкг), раствора сравнения Б (0,25 мкг), раствора сравнения В (0,5 мкг), раствора сравнения Г (0,75 мкг), раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (1 мкг) и 5 мкл раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (250 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться чёткие зоны адсорбции протионамида и продуктов распада.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по величине не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %).

Суммарное содержание примесей, оцененное по величине их зон адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора в сравнении с зонами адсорбции на хроматограммах растворов сравнения А, Б, В и Г, не должно превышать 2,0 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Растворяют 0,35 г (точная навеска) субстанции в 20 мл уксусной кислоты ледяной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до появления желтовато-зелёного окрашивания (индикатор – 0,1 мл кристаллического фиолетового раствора 0,5 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 18,03 мг протионамида C9H12N2S.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0553 Прукалоприда сукцинат

Прукалоприд
Prucalopridi succinas

Вводится впервые

##### Определение

4-Амино-N-[1-(3-метоксипропил)пиперидин-4-ил]-5-хлор-2,3-дигидро-1-бензофуран-7-карбоксамида бутандиоат (1:1).

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % прукалоприда сукцината C18H26ClN3O3·C4H6О4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, практически нерастворим в ацетоне и метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца прукалоприда сукцината.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика прукалоприда сукцината на хроматограмме раствора стандартного образца прукалоприда сукцината (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. В сухую пробирку помещают 5 мг субстанции и 10 мг резорцина, прибавляют 0,1 мл серной кислоты концентрированной и осторожно нагревают над пламенем горелки до окрашивания смеси в тёмно-коричневый цвет. Смесь охлаждают, прибавляют 0,5 мл воды, натрия гидроксида раствора 10 % до щелочной реакции и доводят объём раствора водой до 20 мл; должно появиться оранжевое окрашивание с зелёной флуоресценцией.

##### Испытания

рН раствора. От 4,0 до 6,0 (10 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие прукалоприда сукцинат, хранят в защищённом от света месте.

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,98 г аммония ацетата, растворяют в 500 мл воды, прибавляют 100 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл раствора стандартного образца прукалоприда сукцината и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Во флакон из тёмного стекла с завинчивающейся крышкой помещают 0,5 мл полученного раствора, прибавляют 0,5 мл водорода пероксида раствора разведённого, закрывают крышкой, выдерживают при температуре 80 °C в течение 30 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФА до 5 мл.

Хроматографические условия

Колонка | 50 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 30 °C; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 275 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–4 | 100 → 60 | 0 → 40
4–4,5 | 60 → 20 | 40 → 80
4,5–6,0 | 20 | 80
6,0–6,5 | 20 → 100 | 80 → 0
6,5–8,0 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Время удерживания прукалоприда – около 3 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиком с относительным временем удерживания около 0,92 и пиком прукалоприда должно быть не менее 3,0.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика прукалоприда на хроматограмме раствора сравнения;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца прукалоприда сукцината, мг;
P - содержание прукалоприда сукцината в фармакопейном стандартном образце прукалоприда сукцината,%.

Допустимое содержание примесей:

- любая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца прукалоприда сукцината. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца прукалоприда сукцината, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца прукалоприда сукцината и испытуемый раствор.

Содержание прукалоприда сукцината C18H26ClN3O3·C4H6О4 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика прукалоприда на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика прукалоприда на хроматограмме раствора стандартного образца прукалоприда сукцината;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца прукалоприда сукцината, мг;
P - содержание прукалоприда сукцината в фармакопейном стандартном образце прукалоприда сукцината,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0554 Рабепразол натрия

Рабепразол
Rabeprazolum natricum

Вводится впервые

##### Определение

2-[(RS)-{[4-(3-Метоксипропокси)-3-метилпиридин-2-ил]метил}сульфинил]-1Н-бензимидазол-1-ид натрия.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % рабепразола натрия C18H20N3NaO3S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в метаноле, очень легко или легко растворим в воде, легко растворим в этаноле, хлороформе, практически нерастворим в гептане.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца рабепразола натрия.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика рабепразола на хроматограмме раствора стандартного образца рабепразола натрия (раздел «Количественное определение»/«Родственные примеси»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

рН раствора. От 9,5 до 11,5 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Буферный раствор рН 7,0. Растворяют 4,35 г дикалия гидрофосфата в 950 мл воды и доводят значение рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 7,00, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Буферный раствор рН 11,3. Растворяют 17,4 г дикалия гидрофосфата в 950 мл воды и доводят значение рН раствора калия гидроксида раствором 10 % до 11,30, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор рН 7,0 50:950.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Подвижная фаза В (ПФВ). Ацетонитрил.

Растворитель. Метанол—буферный раствор рН 11,3 20:80.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца рабепразола натрия. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца рабепразола натрия, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси A, 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси B, 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси C, 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси D, 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси E и 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси F, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца рабепразола натрия, растворяют в растворителе, прибавляют 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10 мл раствора стандартного образца рабепразола натрия и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A (рабепразолсульфон):
2-({[4-(3-метоксипропокси)-3-метилпиридин-2-ил]метил}сульфонил)-1Н-бензимидазол
[117976-47-3].

Примесь B (рабепразолсульфид):
2-({[4-(3-метоксипропокси)-3-метилпиридин-2-ил]метил}сульфанил)-1Н-бензимидазол
[117977-21-6].

Примесь C (пиридинонаналог):
1-(1H-бензимидазол-2-ил)-3-метил-4-оксо-1,4-дигидропиридин-2-карбоксилат
динатрия [2437254-50-5].

Примесь D (рабепразол-N-оксид):
2-{[(RS)-(1H-бензимидазол-2-ил)сульфинил]метил}-4-(3-метоксипропокси)-3-метилпиридин-1-оксид
[924663-38-7].

Примесь E (метоксианалог):
2-[(RS)-[(4-метокси-3-метилпиридин-2-ил)метил]сульфинил]-1Н-бензимидазол
[102804-77-3].

Примесь F (меркаптобензимидазол): 1Н-бензимидазол-2-тиол [583-39-1].

Примесь G (метоксисульфиданалог):
2-{[(4-метокси-3-метилпиридин-2-ил)метил]сульфанил}-1Н-бензимидазол
[102804-82-0].

Примесь H (хлораналог):
2-[(RS)-[(4-хлор-3-метилпиридин-2-ил)метил]сульфинил]-1Н-бензимидазол
[168167-42-8].

Примесь I (рабепразолсульфон-N-оксид):
2-{[(1H-бензимидазол-2-ил)сульфонил]метил}-4-(3-метоксипропокси)-3-метилпиридин-1-оксид
[924663-37-6].

Примесь K (бензимидазолол): 1Н-бензимидазол-2-ол [615-16-7].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 45 °С; |  |
Температура образца | 6 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,% | ПФВ,%
--- | --- | --- | ---
0–2 | 100 | 0 | 0
2–7 | 100 → 85 | 0 | 0 → 15
7–27 | 85 → 30 | 0 → 40 | 15 → 30
27–32 | 30 → 15 | 40 → 55 | 30

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца рабепразола натрия и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Рабепразол – 1 (около 19 мин); примесь C – около 0,32; примесь K – около 0,47; примесь F – около 0,50; примесь I – около 0,74; примесь D – около 0,76; примесь E – около 0,82; примесь A – около 0,90; примесь H – около 0,98; примесь G – около 1,04; примесь B – около 1,24.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика рабепразола должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси H и рабепразола должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора стандартного образца рабепразола натрия относительное стандартное отклонение площади пика рабепразола должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика рабепразола на хроматограмме раствора стандартного образца рабепразола натрия;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца рабепразола натрия, мг;
а1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание рабепразола натрия в фармакопейном стандартном образце рабепразола натрия,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь A – не более 0,8 %;

- примеси C, D, E, B – не более 0,15 % каждая;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», метод 2). Сушат 1 г (точная навеска) субстанции в вакуум-эксикаторе над фосфора(V) оксидом при комнатной температуре в течение 24 ч до постоянной массы.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 17,5 ЕЭ/мг на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца рабепразола натрия. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца рабепразола натрия, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца рабепразола натрия и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца рабепразола натрия:

- фактор асимметрии пика (AS) рабепразола должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика рабепразола должно быть не более 0,73 % (6 введений).

Содержание рабепразола натрия C18H20N3NaO3S в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика рабепразола на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика рабепразола на хроматограмме раствора стандартного образца рабепразола натрия;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца рабепразола, мг;
P – содержание рабепразола натрия в фармакопейном стандартном образце рабепразола натрия,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке. В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанций, предназначенных для производства стерильных лекарственных форм.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0555 Разагилина мезилат

Разагилин
Rasagilini mesylas

Вводится впервые

##### Определение

(1R)-N-(Проп-2-ин-1-ил)-2,3-дигидро-1H-инден-1-амина метансульфонат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % разагилина мезилата C12H13N·CH4O3S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Очень легко или легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96 %, умеренно растворим в 2-пропаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1, снятый в диске с калия бромидом, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца разагилина мезилата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика разагилина на хроматограмме раствора стандартного образца разагилина мезилата (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +18 до +22 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в этаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси

1. Энантиомерная чистота. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Диэтиламин—2-пропанол—спирт 96 %—гексан 0,1:20:20:960.

Растворитель. Спирт 96 %—2-пропанол 20:60.

Испытуемый раствор. Растворяют 80 мг субстанции в 2 мл растворителя, при необходимости обрабатывают ультразвуком до полного растворения.

Раствор стандартного образца (S)-разагилина мезилата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца S-изомера разагилина мезилата [202464-89-9], растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 6,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца разагилина мезилата (R-изомер) и 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца S-изомера разагилина мезилата в 1 мл растворителя, при необходимости обрабатывают ультразвуком до полного растворения и фильтруют.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель модифицированный трис(4-метилбензоил)целлюлозой для хиральной хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,4 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 215 нм; |  |
Объём пробы | 1 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,2-кратное от времени удерживания пика R-изомера. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца (S)-разагилина мезилата и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. R-изомер – 1 (около 6 мин); S-изомер – около 0,9.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (Rs) между пиками R-изомера и S-изомера должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора стандартного образца (S)-разагилина мезилата:

- фактор асимметрии пика (As) (S)-разагилина должен быть от 0,7 до 1,3;

- относительное стандартное отклонение площади пика (S)-разагилина должно быть не более 5,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику (S)-разагилина, должна составлять не менее 4000 теоретических тарелок;

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика (S)-разагилина должно быть не менее 10,0.

Содержание (S)-разагилина в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика (S)-разагилина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика (S)-разагилина на хроматограмме раствора стандартного образца (S)-разагилина мезилата;
a0 - навеска стандартного образца (S)-разагилина мезилата, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание (S)-разагилина мезилата в стандартном образце (S)-разагилина мезилата,%.

Допустимое содержание примесей:

- (S)-разагилин – не более 0,15 %.

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 10 г натрия перхлората в 950 мл воды, выдерживают при комнатной температуре в течение 1 ч, доводят значение рН хлорной кислотой до 2,5. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 32 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 30 мл ПФ, обрабатывают ультразвуком в течение 15 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФ до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца разагилина мезилата, 10 мг (точная навеска) 1-аминоиндана и 10 мг (точная навеска) индан-1-она, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,4 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 100 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика разагилина. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартный и испытуемый растворы.

Относительное время удерживания соединений. Разагилин – 1 (около 6 мин); 1-аминоиндан – около 0,6; индан-1-он – около 1,8.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика разагилина должно быть не менее 10,0.

На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (Rs) между пиками 1-аминоиндана и разагилина должно быть не менее 3,0;

- разрешение (Rs) между пиками разагилина и индан-1-она должно быть не менее 3,0;

- фактор асимметрии пика (As) каждого из пиков должен быть от 0,7 до 1,3;

- относительное стандартное отклонение площади каждого из пиков должно быть не более 5,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по каждому из пиков, должна составлять не менее 4000 теоретических тарелок.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика 1-аминоиндана или индан-1-она или любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика 1-аминоиндана или индан-1-она или разагилина на хроматограмме стандартного раствора;
a1 - навеска субстанции;
a0 - навеска 1-аминоиндана или индан-1-она или стандартного образца разагилина мезилата, мг;
P - содержание 1-аминоиндана в 1-аминоиндане или содержание индан-1-она в индан-1-оне или содержание разагилина мезилата стандартном образце разагилина мезилата,%.

Допустимое содержание примесей:

- любая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают пики с относительным временем удерживания менее 0,3 и пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1Б). Для определения используют около 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл испытуемого раствора, полученного в испытании «Родственные примеси. Другие примеси», и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца разагилина мезилата. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 16 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца разагилина мезилата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца разагилина мезилата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца разагилина мезилата:

- фактор асимметрии пика (As) разагилина должен быть от 0,7 до 1,3;

- относительное стандартное отклонение площади пика разагилина должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику разагилина, должна составлять не менее 1000 теоретических тарелок.

Содержание разагилина мезилата C12H13N·CH4O3S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика разагилина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика разагилина на хроматограмме раствора стандартного образца разагилина мезилата;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска стандартного образца разагилина мезилата, мг;
P – содержание разагилина мезилата в стандартном образце разагилина мезилата,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0556 Ралтегравир калия

Ралтегравир
Raltegravirum kalicum

Вводится впервые

##### Определение

1-Метил-2-[2-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-карбоксамидо)пропан-2-ил]-6-оксо-4-{[(4-фторфенил)метил]карбамоил}-1,6-дигидропиримидин-5-олат калия.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % ралтегравира калия C20H20FKN6O5 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Растворим в воде, мало растворим в метаноле, очень мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в гептане.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ралтегравира калия.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика ралтегравира на хроматограмме раствора стандартного образца ралтегравира калия (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерные реакции на калий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Фосфорная кислота разведённая 0,1 %.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 250:750.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 100 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин, охлаждают до температуры 15–25 °С и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца ралтегравира примеси Е, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора испытуемым раствором.

Раствор для идентификации пика C. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в натрия гидроксида растворе 1 М, доводят объём раствора тем же растворителем до метки и перемешивают в течение 30 мин. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, прибавляют 5,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для идентификации пиков F и G. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца ралтегравира для идентификации пиков (содержит примесь F и примесь G), прибавляют 20 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь С:
2-{2-[2-(ацетогидразидо)-2-оксоацетамидо]пропан-2-ил}-5-гидрокси-1-метил-6-оксо-N-[(4-фторфенил)метил]-1,6-дигидропиримидин-4-карбоксамид
[1391918-17-4].

Примесь Е:
1-метил-2-[2-(5-метил-1,3,4-оксадиазол-2-карбоксамидо) пропан-2-ил]-6-оксо-1,6-дигидропиримидин
[1193687-87-4].

Примесь F:
этил[(1E)-N-{[2-(5-Гидрокси-1-метил-6-оксо-4-{[(4-фторфенил)метил]карбамоил}-1,6-дигидропиримидин-2-ил)пропан-2-ил]оксамоил}этангидразонат].

Примесь G:
этил[(1Z)-N-{[2-(5-гидрокси-1-метил-6-оксо-4-{[(4-фторфенил)метил]карбамоил}-1,6-дигидропиримидин-2-ил)пропан-2-ил]оксамоил}этангидразонат].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель фенилсилильный для хроматографии, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 15 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2 | 75 | 25
2–5 | 75 → 60 | 25 → 40
5–10 | 60 → 55 | 40 → 45
10–19 | 55 → 10 | 45 → 90
19–22 | 10 → 5 | 90 → 95

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для идентификации пика С, раствор для идентификации пиков F и G, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ралтегравир – 1 (около 10 мин), примесь С – около 0,7; примесь Е – около 0,95; примесь G – около 1,1; примесь F – около 1,15.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси C используют хроматограмму раствора для идентификации пика C. Для идентификации пика примеси E используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Для идентификации пиков примеси F и G используют хроматограмму раствора для идентификации пиков F и G и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу ралтегравира для идентификации пиков.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси Е и ралтегравира должно быть не менее 1,5;

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси C умножают на 1,6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси С не должна превышать двухкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика каждой из примесей Е, F и G не должны более чем в 1,5 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,6 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции и, в качестве растворителя, смесь метанол—формамид 1:1.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с
ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с
ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца ралтегравира калия. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ралтегравира калия, прибавляют 100 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком в течение 5 мин, охлаждают до температуры 15–25 °С и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца ралтегравира калия и испытуемый раствор.

Содержание ралтегравира калия C20H20FKN6O5 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика ралтегравира на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика ралтегравира на хроматограмме раствора стандартного образца ралтегравира калия;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца ралтегравира калия, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание ралтегравира калия в фармакопейном стандартном образце ралтегравира калия,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0557 Рамиприл (Ramiprilum)

Вводится впервые

##### Определение

(2S,3aS,6aS)-1-[(2S)-2-{[(2S)-1-Оксо-4-фенил-1-этоксибутан-2-ил]амино}пропаноил]октагидроциклопента[b]пиррол-2-карбоновая кислота.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % рамиприла C23H32N2O5 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в метиленхлориде, легко растворим в метаноле, умеренно или мало растворим в воде.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца рамиприла.

##### Испытания

Удельное вращение. От +32,0 до +38,0 в пересчёте на сухое вещество (1,0 % раствор субстанции в смеси хлористоводородная кислота 25 %—метанол 14:86, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл метанола должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 2 г натрия перхлората в смеси триэтиламин—вода 0,5:800, доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 3,6 и прибавляют 200 мл ацетонитрила.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Растворяют 2 г натрия перхлората в смеси триэтиламин—вода 0,5:300, доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 2,6 и прибавляют 700 мл ацетонитрила.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФБ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФБ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают по 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, фармакопейного стандартного образца примеси В, фармакопейного стандартного образца примеси С и фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в 5,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФБ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФБ до метки.

Примечание

Примесь A:
(2S,3aS,6aS)-1-[(2S)-2-{[(2S)-1-метокси-1-оксо-4-фенилбутан-2-ил]амино}пропаноил]октагидроциклопента[b]пиррол-2-карбоновая кислота
[108313-11-7].

Примесь B:
(2S,3aS,6aS)-1-[(2S)-2-{[(2S)-1-оксо-1-(пропан-2-илокси)-4-фенилбутан-2-ил]амино}пропаноил]октагидроциклопента[b]пиррол-2-карбоновая кислота
[295328-72-2].

Примесь C:
(2S,3aS,6aS)-1-[(2S)-2-{[(2S)-1-оксо-4-циклогексил-1-этоксибутан-2-ил]амино}пропаноил]октагидроциклопента[b]пиррол-2-карбоновая кислота
[99742-35-5].

Примесь D:
этил[(2S)-2-[(3S,5aS,8aS,9aS)-3-метил-1,4-диоксотетрагидро-2H-циклопента[4,5]пирроло[1,2-a]пиразин-2-ил]-4-фенилбутаноат]
[108731-95-9].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 65 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–6 | 90 | 10
6–7 | 90 → 75 | 10 → 25
7–20 | 75 → 65 | 25 → 35
20–30 | 65 → 25 | 35 → 75
30–50 | 25 | 75
50–51 | 25 → 90 | 75 → 10
51–55 | 90 | 10

Уравновешивают подвижной фазой первого этапа градиента в течение не менее 35 мин. Если невозможно получить удовлетворительную базовую линию, изменяют количество триэтиламина.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Рамиприл – 1 (около 21 мин); примесь A – около 0,8; примесь B – около 1,3; примесь C – около 1,5; примесь D – около 1,7.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В, С и D используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительно способности хроматографической системы разрешение (Rs) между пиками примеси А и рамиприла должно быть не менее 3,0.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика рамиприла должно быть не менее 10,0.

На хроматограмме испытуемого раствора:

- фактор асимметрии пика (As) рамиприла должен быть не более 2,0;

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику рамиприла, должна составлять не менее 5000 теоретических тарелок.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примеси площадь пика примеси С умножают на 2,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A, B, С и D не должна превышать площадь пика рамиприла на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,2 площади пика рамиприла на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика рамиприла на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,2 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы в вакууме при температуре 60 °С.

Палладий. Не более 0,002 %. Определение проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 1).

Растворитель. Азотная кислота концентрированная—вода 0,3:99,7.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) палладия, растворяют в 9,0 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание – Для приготовления стандартного раствора допускается использование готового раствора стандартного образца палладия в азотной кислоте с аттестованным значением концентрации палладия.

Калибровочные растворы. В мерные колбы вместимостью 50 мл помещают по 2,0, 3,0 и 5,0 мл стандартного раствора и доводят объём растворов растворителем до метки (концентрация палладия: 0,02, 0,03 и 0,05 мкг/мл соответственно). Растворы используют свежеприготовленными.

Раствор модификатора. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,150 г магния нитрата, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Холостой раствор. Растворитель.

Условия испытания

Источник излучения | лампа для определения палладия; |
Атомизатор | электротермический; |  |
Длина волны | 247,6 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл + 10 мкл раствора модификатора (для каждого раствора). |

Определяют поглощение холостого, калибровочных и испытуемого растворов. Для каждого раствора проводят не менее 3 измерений.

Строят калибровочную кривую, откладывая по оси ординат значения поглощения, а по оси абсцисс − концентрацию (мкг/мл). Определяют концентрацию палладия в испытуемом растворе по калибровочной кривой.

Содержание палладия в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где C – содержание палладия, определённое по калибровочному графику, мкг/мл;
a – навеска субстанции, мкг.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 25 мл метанола, прибавляют 25 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 41,65 мг рамиприла C23H32N2O5.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0171 Ранитидина гидрохлорид

Ранитидин
Ranitidini hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0171.18

##### Определение

N-{2-[({5-[(Диметиламино)метил]фуран-2-ил}метил)сульфанил]этил}-N'-метил-2-нитроэтен-1,1-диамина гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % ранитидина гидрохлорида C13H22N4O3S·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. От белого до светло-жёлтого цвета кристаллический порошок.

* Гигроскопичен, обладает полиморфизмом.

Растворимость. Очень легко или легко растворим в воде, умеренно или мало растворим в этаноле, очень мало растворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ранитидина гидрохлорида.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают досуха при пониженном давлении при температуре 40 °С, остаток сушат в вакууме при 60 °С в течение 1 ч и записывают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 360 нм должен иметь максимумы при 229 и 315 нм.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 137 до 143 °C (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном GY5 или BY5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 4,5 до 6,0 (1 % раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 6,80 г натрия дигидрофосфата, растворяют в 950 мл воды для хроматографии, доводят pH до 7,10 натрия гидроксида раствором концентрированным, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой для хроматографии до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 20:980.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—буферный раствор 220:780.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 13,0 мг субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор стандартного образца примеси A. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 6,5 мг фармакопейного стандартного образца ранитидина для идентификации примеси А, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца ранитидина примеси J в 1,0 мл испытуемого раствора.

Контрольный раствор. ПФА.

Примечание

Примесь А:
N,N'-Бис{2-[({5-[(диметиламино)метил]-2-фурил}метил) сульфанил]этил}-2-нитроэтен-1,1-диамин [72126-78-4].

Примесь J:
1,1'-N-[Метиленбис(сульфандиилэтан-1,2-диил)]бис(N'-метил-2-нитроэтен-1,1-диамин) [1331637-48-9].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, кремнийорганический полимер, аморфный, октадецилсилильный, эндкепированный, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 100 → 0 | 0 → 100
10–15 | 0 | 100

Хроматографируют контрольный раствор, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси A, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ранитидин – 1 (около 7 мин); примесь J – около 0,9; примесь А – около 1,7.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора стандартного образца примеси А. Для идентификации пика примеси J используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси J и ранитидина должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме контрольного раствора отсутствуют пики с относительным временем удерживания, соответствующим относительному времени удерживания пика примеси А на хроматограмме раствора стандартного образца примеси A.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси J умножают на 2.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна превышать трёхкратную площадь пика ранитидина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика примеси J не должна превышать 1,5 площади пика ранитидина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика ранитидина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика ранитидина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики примесей, площадь которых менее 0,5 площади пика ранитидина на хроматограмме раствора сравнения (0,05 %), и пики контрольного раствора.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,75 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы при температуре 60 °С и остаточном давлении не более 0,1 кПа.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 7,0 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,28 г (точная навеска) субстанции в 35 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М натрия гидроксида соответствует 35,09 мг ранитидина гидрохлорида C13H22N4O3S·HCl.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0011 Раствор левоментола в ментилизовалерате (Solutio Levomentholi in menthylii isovalerate)

Взамен ФС.2.1.0011.18

##### Определение

(1R,2S,5R)-5-Метил-2-(пропан-2-ил)циклогексанол (левоментол).

[5-Метил-2-(пропан-2-ил)циклогексил](3-метилбутаноат) (ментилизовалерат).

Содержит:

- не менее 21,0 % и не более 31,0 % левоментола С10Н20О.

- не менее 68,5 % и не более 75,0 % ментилизовалерата С15Н28О2.

##### Свойства

Описание. Прозрачная бесцветная или слегка окрашенная маслянистая жидкость с запахом ментола.

Растворимость. Смешивается со спиртом 96 % и хлороформом, не смешивается с водой.

##### Идентификация

1. ГХ (ОФС «Газовая хроматография»). На хроматограмме испытуемого раствора время удерживания первого пика из двух основных пиков должно соответствовать времени удерживания пика левоментола, второго пика – времени удерживания пика ментилизовалерата на хроматограмме стандартного раствора (раздел «Родственные примеси»).

2. Качественная реакция. Растворяют 1 г субстанции в 1 мл серной кислоты концентрированной, прибавляют 1 мл раствора ванилина в серной кислоте, перемешивают и прибавляют 1 мл воды; должно появиться малиново-красное окрашивание и характерный запах изовалериановой кислоты.

##### Испытания

Показатель преломления. От 1,4490 до 1,4515 (ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)»).

Кислотность. Смешивают 5 г субстанции с 10 мл спирта 96 %, нейтрализованного по фенолфталеину, и прибавляют 0,05 мл 1 % раствора фенолфталеина. Раствор должен окрашиваться в розовый цвет при прибавлении не более 0,1 мл 0,05 М раствора натрия гидроксида.

Нелетучий остаток. Не более 0,1 %. Помещают 1 г (точная навеска) субстанции в выпарительную чашку, предварительно доведённую до постоянной массы при температуре 105–110 °С и взвешенную, затем выпаривают досуха на водяной бане. Чашку с нелетучим остатком высушивают в сушильном шкафу при температуре 105–110 °С до постоянной массы (не менее 1–2 ч), охлаждают и выдерживают в эксикаторе в течение 30–40 мин.

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. Испытуемая субстанция.

Стандартный раствор. Растворяют 2,5 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца левоментола в 7,0 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ментилизовалерата.

Хроматографические условия

Колонка | из нержавеющей стали, 3,0 м × 3,0 мм, 5 % пропиленгликоль-1,2-адипинат на кальцинированном кизельгуре, промытом хлористоводородной кислотой, 0,15–0,20 мм (70–100 меш); |
Температура: | колонки | 130 °С; |
| испарителя | 165 °С; |
| детектора | 190 °С; |
Расход: | газа-носителя (азот) | 25 мл/мин; |
| воздуха | 500 мл/мин; |
| водорода | 30 мл/мин; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Объём пробы | 0,2 мкл. |  |

Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.

Порядок выхода пиков: левоментол, ментилизовалерат.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками левоментола и ментилизовалерата должно быть не менее 2;

- относительное стандартное отклонение площади пика левоментола должно быть не более 2 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение площади пика ментилизовалерата должно быть не более 3 % (6 введений);

Допустимое содержание примесей. Содержание примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где ΣSi – сумма площадей пиков всех примесей;
S1 – площадь пика левоментола;
S2 – площадь пика ментилизовалерата.

- сумма примесей – не более 4,0 %.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

1. Определение проводят методом ГХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями:

- Хроматографируют испытуемый раствор.

- Содержание ментилизовалерата C15H28O2 в субстанции в процентах (Х1) вычисляют по формуле:

- где Sми – площадь пика ментилизовалерата;
  ΣSi – сумма площадей всех пиков.

- Содержание левоментола C10H20O в субстанции в процентах (Х2) вычисляют по формуле:

- где Sм – площадь пика левоментола;
  ΣSi – сумма площадей всех пиков.

2. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

- Помещают 0,7 г (точная навеска) субстанции в колбу с обратным холодильником, прибавляют 10 мл 12 % (о/о) раствора уксусного ангидрида в безводном пиридине. Нагревают с обратным холодильником на песчаной бане при слабом кипении в течение 2 ч, затем прибавляют через холодильник 25 мл воды, охлаждают и титруют образовавшуюся уксусную кислоту 0,5 М раствором натрия гидроксида (индикатор – 1 капля 1 % раствора фенолфталеина).

- Параллельно проводят контрольный опыт.

- 1 мл 0,5 М раствора натрия гидроксида соответствует 78,14 мг левоментола C10H20O.

- Расхождение между двумя методами не должно превышать 2 %.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке при температуре не выше 15 °С.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0026 Рацементол (Racementholum)

Взамен ФС.2.1.0026.15

##### Определение

rac-(1R,2S,5R)-5-Метил-2-(пропан-2-ил)циклогексан-1-ол.

Содержит не менее 99,0 % рацементола C10H20O.

##### Свойства

Описание. Бесцветные кристаллы или белый кристаллический порошок с характерным запахом.

Растворимость. Очень легко растворим в спирте 96 %, уксусной кислоте, легко растворим в жидком парафине и маслах жирных, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца рацементола.

2. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 1 мл серной кислоты концентрированной и прибавляют 1 мл ванилина раствора в серной кислоте; должно появиться жёлтое окрашивание. После прибавлении 1 мл воды окраска должна измениться на малиново-красную.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,2 г субстанции в 0,5 мл пиридина безводного, добавляют 3 мл динитробензоилхлорида в безводном пиридине 150 г/л; нагревают на водяной бане в течение 10 мин. Небольшими порциями при перемешивании добавляют 7 мл воды и выдерживают в воде в течение 30 мин. Образуется осадок, который отстаивают и процеживают супернатант. Осадок промывают двумя порциями по 5 мл воды, перекристаллизовывают из 10 мл ацетона, промывают ацетоном и сушат при температуре 75 °С, давлении не более 2,7 кПа в течение 30 мин. Кристаллы плавятся при температуре от 130 °С до 131 °С.

##### Испытания

Температура плавления. Около 34 °С (ОФС «Температура плавления»).

Температура затвердевания. Не ниже 27 и не выше 32 °С (ОФС «Температура затвердевания»).

Угол вращения. От –0,2 ° до +0,2 ° (10 % раствор в спирте 96 %, ОФС «Оптическое вращение»).

Кислотность. Раствор 1,0 г субстанции в 10 мл нейтрализованного по фенолфталеину спирта 96 % должен окрашиваться в розовый цвет при прибавлении не более 0,5 мл, 0,01 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,2 г субстанции, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца ментола. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг фармакопейного стандартного образца ментола, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 мл испытуемого раствора, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг субстанции и 40 мг изоментола, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | стеклянная 2,0 м × 2 мм, макрогол 1500; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | азот для хроматографии; |  |
Скорость потока | Газ-носитель | 30 мл/мин; |
Температура | Инжектор | 150 °С, |
| Колонка | 120 °С, |
| Детектор | 200 °С; |
Объём пробы | 1 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика ментола. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца ментола, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (R) между пиками изоментола и ментола должно быть не менее 1,4.

На хроматограмме раствора сравнения отношение сигнал/шум (S/N) для основного пика должно быть не менее 5.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 % от площади пика ментола.

Нелетучий остаток. Не более 0,05 %. Помещают 2 г (точная навеска) субстанции в фарфоровую чашку и нагревают на водяной бане; образуется бесцветная прозрачная жидкость, которая при дальнейшем нагревании улетучивается. Остаток высушивают до постоянной массы при температуре от 100 до 105 °C.

Водорастворимые окисляемые вещества. Растворяют 0,5 г субстанции в 10 мл калия перманганата раствора, приготовленного доведением 3 мл калия перманганата раствора 0,1 М водой до 100 мл; выдерживают в водяной бане с температурой от 40 до 50 °С в течение 5 мин. Красное окрашивание раствора не должно исчезнуть.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Помещают 0,7 г (точная навеска) субстанции в колбу с обратным холодильником, прибавляют 10 мл уксусного ангидрида раствора 12 % (о/о) в безводном пиридине. Нагревают с обратным холодильником на песчаной бане при слабом кипении в течение 2 ч, затем прибавляют через холодильник 25 мл воды и, по охлаждении, титруют образовавшуюся уксусную кислоту 0,5 М раствором натрия гидроксида (индикатор – 1 капля фенолфталеина раствора 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,5 М раствора натрия гидроксида соответствует 78,13 мг рацементола C10H20O.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке. В защищённом от света месте.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0681 Резорцин

Резорцин
Resorcinolum

Взамен ФС 42-3267-96

C6H6O2 [108-46-3] | М.м. 110,11

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Бензол-1,3-диол.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % резорцина C6H6O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или белый с желтоватым или розоватым оттенком кристаллический порошок или пластинки.

* Под действием света и воздуха постепенно окрашивается в розовый цвет.

Растворимость. Легко растворим в воде и спирте 96 %, очень мало растворим в хлороформе.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения 0,003 % раствора субстанции в смеси спирт 96 %—вода 1:2 в области длин волн от 250 до 350 нм должен иметь максимум при 275±2 нм.

2. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 5 мл воды, прибавляют 0,1 мл железа(III) хлорида раствора 3 %; должно появиться сине-фиолетовое окрашивание. После прибавления 0,1 мл аммиака раствора окраска должна измениться на буро-жёлтую.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 1 мл воды, прибавляют 1 мл раствора натрия гидроксида 10 М и 0,1 мл хлороформа, нагревают и охлаждают до комнатной температуры; должно появиться интенсивное тёмно-красное окрашивание. После прибавления небольшого избытка соляной кислоты окраска должна измениться на бледно-жёлтую.

4. Качественная реакция. Сплавляют 20 мг субстанции с 20 мг калия гидрофталата до образования сплава жёлто-красного цвета. Сплав охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 8,3 % и 10 мл воды. Полученный раствор должен обладать интенсивной зелёной флуоресценцией.

##### ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 109 до 112 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1, без предварительного подсушивания).

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 25 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном B5 или R5, Y6 или Y5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. К 10 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 1 каплю бромфенолового синего раствора 0,1 %. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 0,05 мл 0,1 М натрия гидроксида раствора или 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты.

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F.

Подвижная фаза (ПФ). Этилацетат—гексан 40:60.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор фенола. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,25 г фенола, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г субстанции, растворяют в метаноле, прибавляют 1,0 мл раствора фенола и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора метанолом до метки.

На линию старта пластинки наносят по 2 мкл испытуемого раствора (100 мкг), раствора сравнения (0,5 мкг), раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (0,25 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 15 мин, помещают в предварительно насыщенную, в течение не менее 1 ч камеру с ПФ, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 15 мин, проявляют в парах йода и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться две разделённые зоны адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции резорцина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 2). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в эксикаторе над силикагелем в течение 4 часов.

Фенол. При нагревании раствора 1 г субстанции в 2 мл воды при температуре 40–50 °С не должен ощущаться запах фенола.

Пирокатехин. Не более 0,1 %.

Все растворы используют свежеприготовленными.

Испытуемый раствор. К 1 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют1 мл аммония молибдата раствора 2 %.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 г пирокатехина, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. К 1 мл полученного раствора прибавляют 1 мл аммония молибдата раствора 2 %.

Окраска испытуемого раствора не должна превышать окраску раствора сравнения.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. К 25,0 мл полученного раствора прибавляют 1 г калия бромида, 50 мл 0,0167 М калия бромата раствора, 15 мл хлороформа и 15 мл хлористоводородной кислоты 25 %, выдерживают в тёмном месте в течение 15 мин, периодически встряхивая, прибавляют 10 мл калия йодида раствора 10 %, энергично встряхивают, выдерживают при комнатной температуре в течение 5 мин и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата до обесцвечивания (индикатор – 1 мл крахмала раствора 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,0167 М раствора калия бромата соответствует 1,835 мг резорцина C6H6O2.

##### ХРАНЕНИЕ

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0558 Репаглинид (Repaglinidum)

Вводится впервые

##### Определение

4-(2-{[(1S)-3-Метил-1-[2-(пиперидин-1-ил)фенил]бутил]амино}-2-оксоэтил)-2-этоксибензойная кислота.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % репаглинида C27H36N2O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в метаноле и метиленхлориде, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца репаглинида.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец репаглинида растворяют по отдельности в этаноле, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

##### Испытания

Удельное вращение. От +6,3 до +7,7 в пересчёте на сухое вещество (5 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

1. Энантиомерная чистота

Растворы готовят в посуде из тёмного стекла.

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 1,0 г калия дигидрофосфата в воде, доводят значение рН до 4,70 фосфорной кислотой разведённой 10 % или натрия гидроксида раствором 8,5 %, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10,0 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси Е. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мг фармакопейного стандартного образца примеси Е репаглинида, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл раствора стандартного образца примеси Е и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и 10,0 мл раствора стандартного образца примеси Е и доводят объём раствора метанолом до метки.

Примечание

Примесь Е:
4-(2-{[(1R)-3-метил-1-[2-(пиперидин-1-ил)фенил]бутил]амино}-2-оксоэтил)-2-этоксибензойная кислота [147852-26-4].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,0 мм, силикагель модифицированный α1-кислотным гликопротеином для хиральной хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25°С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 240 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–4 | 80 → 60 | 20 → 40
4–6 | 60 | 40
6–10 | 60 → 80 | 40 → 20

Примечание – Приводят колонку в состояние равновесия, медленно повышая скорость потока от 0,2 мл/мин до 0,5 мл/мин, сохраняя её в течение 5 мин. Перед анализом колонку промывают водой при скорости 0,1 мл/мин в течение 1 ч, затем ПФ при исходных условиях в течение не менее 1 ч.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси Е, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Репаглинид – 1 (около 3,3 мин); примесь Е – около 1,5.

Идентификация примесей. Для идентификации примеси Е используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками репаглинида и примеси Е должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси Е не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

2. Другие примеси

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 4,0 г калия дигидрофосфата в воде, доводят значение рН до 3,2 фосфорной кислотой разведённой 10 %, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). ПФА—ацетонитрил 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца репаглинида для проверки пригодности хроматографической системы растворяют в 2,0 мл ацетонитрила, используя ультразвуковую баню.

Примечание

Примесь А: 4-(карбоксиметил)-2-этоксибензойная кислота [220438-80-2].

Примесь В: [3-этокси-4-(этоксикарбонил)фенил]уксусная кислота [99469-99-5].

Примесь С: (1S)-3-метил-1-[2-(пиперидин-1-ил)фенил]бутан-1-амин [147769-93-5].

Примесь D: этил[4-(2-{[(1S)-3-Метил-1-[2-(пиперидин-1-ил)фенил]бутил]амино}-2-оксоэтил)-2-этоксибензоат] [147770-06-7].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель алкилированный для хроматографии, для использования с подвижными фазами с высоким содержанием воды, 5 мкм; |
Температура колонки | 45 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 240 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–20 | 50 → 7 | 50 → 93
20–30 | 7 | 93

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Репаглинид – 1 (около 10 мин); примесь А – около 0,2; примесь В – около 0,3; примесь С – около 0,4; примесь D – около 1,5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси B и примеси C должно быть не менее 5,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика репаглинида должно быть не более 3,0 % (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь А – 0,6; примесь В – 0,7, примесь С – 3,1.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A, B, С и D, не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков примесей не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее половины площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции, высушивают при 105 оС до постоянной массы.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,32 г (точная навеска) субстанции в 10 мл метанола, прибавляют 60 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 45,26 мг репаглинида C27H36N2O4.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0031 Рибавирин (Ribavirinum)

Взамен ФС.2.1.0031.15

##### Определение

1-(β-D-Рибофуранозил)-1H-1,2,4-триазол-3-карбоксамид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % рибавирина C8H12N4O5 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %, мало или очень мало растворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца рибавирина.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец рибавирина по отдельности растворяют в метиленхлориде, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика рибавирина на хроматограмме раствора стандартного образца рибавирина (раздел «Родственные примеси»).

3. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Аммония хлорида раствор 0,1 М– ацетонитрил 20:90.

- Испытуемый раствор. Растворяют 10 мг субстанции в 1 мл воды.

- Раствор стандартного образца рибавирина. Растворяют 10 мг фармакопейного стандартного образца рибавирина в 1 мл воды.

- Раствор для детектирования. Смешивают 5 мл анисового альдегида, 90 мл спирта 96 %, 5 мл серной кислоты концентрированной и 1 мл уксусной кислоты ледяной.

- На линию старта пластинки наносят по 10 мкл (100 мкг) испытуемого раствора и 10 мкл (100 мкг) раствора стандартного образца рибавирина. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 10 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают раствором для детектирования, нагревают при 110 °C в течение 30 мин и просматривают в видимом свете.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции рибавирина на хроматограмме раствора стандартного образца рибавирина.

##### Испытания

Удельное вращение. От –33 до –37 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции, ОФС «Оптическое вращение»). Измерение проводят в течение 10 мин после приготовления раствора.

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,0 до 6,5 (2 % раствор в воде, свободной от углерода диоксида, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 1,0 г натрия сульфата безводного в 950 мл воды, добавляют 2 мл фосфорной кислоты разведённой 5 % и доводят значение pH фосфорной кислотой разведённой 5 % до 2,80, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—ПФА 50:950.

Растворитель. Вода.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца рибавирина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг фармакопейного стандартного образца рибавирина, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Смешивают 5 мл испытуемого раствора с 5 мл натрия гидроксида раствора 1 М и выдерживают 90 мин, затем добавляют 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М.

Примечание

Примесь А: 1-β-D-рибофуранозил-1H-1,2,4-триазол-3-карбоновая кислота [39925-19-4].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–15 | 100 | 0
15–25 | 100 → 0 | 0 → 100
25–35 | 0 | 100

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца рибавирина, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Рибавирин – 1 (около 6 мин); примесь А – около 0,8.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками рибавирина и примесью А должно быть не менее 4,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси А умножают на 2,3.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме раствора сравнения:

- площадь пика примеси А не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика рибавирина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика рибавирина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь пика рибавирина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика рибавирина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,15 ЕЭ на 1 мг рибавирина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца рибавирина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг фармакопейного стандартного образца рибавирина, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца рибавирина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца рибавирина относительное стандартное отклонение площади пика рибавирина должно быть не более 1,0 % (6 введений).

Содержание рибавирина C8H12N4O5 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика рибавирина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика рибавирина на хроматограмме раствора стандартного образца рибавирина;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца рибавирина, мг;
P - содержание рибавирина в фармакопейном стандартном образце рибавирина,%;
W - потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0559 Рибофлавин (Riboflavinum)

Взамен ФС 42-2954-93

##### Определение

7,8-Диметил-10-[(2S,3S,4R)-2,3,4,5-тетрагидроксипентил]бензо[g]птеридин-2,4(3H,10H)-дион.

Субстанция представляет собой продукт ферментации.

Содержит не менее 97,0 % и не более 103,0 % рибофлавина C17H20N4O6 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Жёлтый или оранжево-жёлтый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм. Растворы рибофлавина неустойчивы на свету, особенно в присутствии щелочей.

Растворимость. Очень мало растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. Смешивают равные объёмы испытуемого раствора, полученного в испытании «Количественное определение», и воды.

- Спектр поглощения испытуемого раствора должен иметь максимумы при 223 нм, 267 нм, 373 нм и 444 нм. Отношение значений оптических плотностей A373/A267 должно быть от 0,31 до 0,33. Отношение значений оптических плотностей A444/A267 должно быть от 0,36 до 0,39.

2. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля (2-10 мкм).

- Подвижная фаза (ПФ). Вода.

- Испытуемый раствор. К 25 мг субстанции прибавляют 10 мл воды, встряхивают в течение 5 мин и фильтруют.

- Раствор стандартного образца рибофлавина. К 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца рибофлавина прибавляют 10 мл воды, встряхивают в течение 5 мин и фильтруют.

- На линию старта пластинки наносят:

  - 1 точка: 2 мкл метиленхлорида и затем 2 мкл испытуемого раствора;

  - 2 точка: 2 мкл метиленхлорида и затем 2 мкл раствора стандартного образца рибофлавина.

- После каждого последовательного нанесения в точках 1 и 2 пластинку подсушивают в токе холодного воздуха, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат в потоке холодного воздуха до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и цвету флуоресценции должна соответствовать зоне адсорбции рибофлавина на хроматограмме раствора стандартного образца рибофлавина.

3. Качественная реакция. Растворяют 1 мг субстанции в 100 мл воды. В проходящем свете раствор должен иметь бледно-зеленовато-жёлтый цвет, в отражённом свете − интенсивную желтовато-зелёную флуоресценцию, которая должна исчезать при добавлении минеральных кислот или щелочей.

##### Испытания

Удельное вращение. От –115,0 до –135,0 в пересчёте на сухое вещество (ОФС «Оптическое вращение»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в натрия гидроксида растворе 0,05 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор используют в течение 30 мин.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют сразу после приготовления и защищают от света.

Подвижная фаза А (ПФА). Фосфорная кислота концентрированная—вода 1:1000.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Натрия ацетата раствор 0,1 М.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,12 г субстанции, растворяют в 10 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М, при необходимости обрабатывая ультразвуком, и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в 1 мл натрия гидроксида раствора 0,5 М, выдерживают в дневном свете в течение 1,5 ч, прибавляют 0,5 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и доводят объём раствора водой до метки (содержит примеси A и B).

Раствор для идентификации пиков. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца рибофлавина для идентификации пиков, содержащего примеси С и D, растворяют в 1 мл смеси ПФБ—ПФА 1:9, при необходимости обрабатывая ультразвуком.

Примечание

Примесь А:
7,8,10-триметилбензо[g]птеридин-2,4(3H,10H)-дион [1088-56-8].

Примесь В:
7,8-диметилбензо[g]птеридин-2,4(1H,3H)-дион [1086-80-2].

Примесь С:
6,7-диметил-8-[(2S,3S,4R)-2,3,4,5-тетрагидроксипентил]птеридин-2,4(3H,8H)-дион [5118-16-1].

Примесь D:
8-(гидроксиметил)-7-метил-10-[(2S,3S,4R)-2,3,4,5-тетрагидроксипентил]бензо[g]птеридин-2,4(3H,10H)-дион [52134-62-0].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 267 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 90 | 10
5–20 | 90 → 80 | 10 → 20
20–25 | 80 | 20
25–35 | 80 → 50 | 20 → 50
35–45 | 50 | 50

Хроматографируют раствор для идентификации пиков, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Рибофлавин – 1 (около 16 мин); примесь С – около 0,2; примесь D – около 0,5; примесь А – около 1,4; примесь В – около 1,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей С и D используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для идентификации пиков и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу рибофлавина для идентификации пиков.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и примеси В должно быть не менее 5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь А – 0,7; примесь В и D – 1,4, примесь С – 2,3.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать 0,25 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,025 %);

- площадь пика каждой из примесей B, С и D не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, кроме пика примеси А, площадь которых составляет менее 0,5-площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 1.

** Бактериальные эндотоксины. Не более 7,1 ЕЭ на 1 мг рибофлавина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Все растворы защищают от света.

Раствор натрия ацетата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,4 г натрия ацетата тригидрата, растворяют воде и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу из тёмного стекла вместимостью 500 мл помещают 65 мг (точная навеска) субстанции, суспендируют с 5 мл воды до полного смачивания, прибавляют 5 мл натрия гидроксида раствора 8,5 %, перемешивают до полного растворения, тотчас прибавляют 100 мл воды, 2,5 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу из тёмного стекла вместимостью 200 мл помещают 20,0 мл полученного раствора, прибавляют 3,5 мл раствора натрия ацетата и доводят объём раствора водой до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 444 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения воду.

Содержание рибофлавина C17H20N4O6 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
328 - удельный показатель поглощения рибофлавина, ();
a - навеска субстанции, г;
W - потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0560 Ривароксабан (Rivaroxabanum)

Вводится впервые

##### Определение

5-Хлор-N-({(5S)-2-оксо-3-[4-(3-оксоморфолин-4-ил)фенил]-1,3-оксазолидин-5-ил}метил)тиофен-2-карбоксамид.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % ривароксабана C19H18ClN3O5S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Порошок от белого до желтоватого цвета.

Растворимость. Легко растворим в диметилсульфоксиде, практически нерастворим в воде, этаноле и гептане.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ривароксабана.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика ривароксабана на хроматограмме раствора стандартного образца ривароксабана (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –36 до –38 в пересчёте на сухое вещество (0,5 % раствор субстанции в диметилсульфоксиде, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси

1. Энантиомерная чистота. Не более 0,5 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Этанол—гептан 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в 25 мл ацетонитрила и доводят объём раствора этанолом до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в 5 мл ацетонитрила и доводят объём раствора этанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг субстанции растворяют в 25 мл ацетонитрила, прибавляют 1 мл раствора стандартного образца примеси А, и доводят объём раствора этанолом до метки.

Примечание

Примесь А ((R)-ривароксабан):
5-хлор-N-({(5R)-2-оксо-3-[4-(3-оксоморфолин-4-ил)фенил]-1,3-оксазолидин-5-ил}метил)тиофен-2-карбоксамид
[865479-71-6].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 2,0 мм, силикагель, модифицированный целлюлозой, для хиральной хроматографии, 10 мкм; |
Температура колонки | 50 °С; |  |
Скорость потока | 0,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 250 нм; |  |
Объём пробы | 3 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика ривароксабана. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ривароксабан – 1 (около 17 мин); примесь А – около 0,9.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и ривароксабана должно быть не менее 1,5.

Содержание примеси А в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси А на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика ривароксабана на хроматограмме испытуемого раствора.

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор калия дигидрофосфата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,36 г калия дигидрофосфата, растворяют в воде, прибавляют 0,2 мл фосфорной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор натрия гексансульфоната. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,0 г натрия гексансульфоната, растворяют в растворе калия дигидрофосфата и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Метанол—раствор натрия гексансульфоната 50:950.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Ацетонитрил—раствор калия дигидрофосфата 40:60.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 2,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ривароксабана для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примесь G, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь G:
2-({(5S)-2-оксо-3-[4-(3-оксоморфолин-4-ил)фенил]-1,3-оксазолидин-5-ил}метил)изоиндол-1,3(2Н)-дион
[446292-08-6].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,0 мм, силикагель октадецилсилильный, экстра плотно связанный, эндкепированный, для хроматографии, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 60 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 250 нм; |  |
Объём пробы | 3 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2 | 98 | 2
2–8 | 98 → 84 | 2 → 16
8–25 | 84 → 64 | 16 → 36
25–37 | 64 → 20 | 36 → 80

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ривароксабан – 1 (около 16 мин); примесь G – около 0,9.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси G и ривароксабана должно быть не менее 7,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика ривароксабана на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь пика ривароксабана на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика ривароксабана на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме при температуре 80±5 °С и остаточном давлении не более 2,67 кПа в течение 3 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 2 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 6).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца ривароксабана. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ривароксабана, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца ривароксабана и испытуемый раствор.

Содержание ривароксабана C19H18ClN3O5S в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика ривароксабана на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика ривароксабана на хроматограмме раствора стандартного образца ривароксабана;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска стандартного образца ривароксабана, мг;
W - потеря в массе при высушивании,%;
P - содержание ривароксабана в стандартном образце ривароксабана,%.

##### Хранение

Не требует особых условий.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0561 Рилпивирина гидрохлорид

Рилпивирин
Rilpivirini hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

4-[(4-{2,6-Диметил-4-[(1E)-2-цианоэт-1-ен-1-ил]анилино}пиримидин-2-ил)амино]бензонитрила гидрохлорид.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % рилпивирина гидрохлорида C22H18N6∙HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в диметилформамиде, практически нерастворим в воде, метаноле, этаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца рилпивирина гидрохлорида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика рилпивирина на хроматограмме раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 3,0 г натрия октансульфоната в 1000 мл воды, прибавляют 1,0 мл фосфорной кислоты концентрированной и перемешивают.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор—ацетонитрил 300:700. Срок годности – 24 ч.

Растворитель. Метанол—ацетонитрил 50:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки. Срок годности раствора – 2 ч.

Раствор стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (А). В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца рилпивирина гидрохлорида, растворяют в растворителе, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки. Срок годности раствора – 2 ч.

Раствор стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (Б). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (А) и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор Z-изомера. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1 мг Z-изомера рилпивирина гидрохлорида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Z-изомер:
4-[(4-{2,6-диметил-4-[(1Z)-2-цианоэт-1-ен-1-ил]анилино}пиримидин-2-ил)амино]бензонитрил [500287-94-5].

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца рилпивирина гидрохлорида, растворяют в 2 мл растворителя, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 0,5 мл раствора Z-изомера и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (Б) и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 290 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–20 | 50 → 35 | 50 → 65
20–30 | 35 → 10 | 65 → 90
30–38 | 10 | 90
38–38,5 | 10 → 50 | 90 → 50
38,5–50 | 50 | 50

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (Б) и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика рилпивирина должно быть не менее 10,0.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками рилпивирина и Z-изомера должно быть не менее 1,5;

- фактор асимметрии пика (AS) рилпивирина должен быть не более 2,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (Б):

- относительное стандартное отклонение площади пика рилпивирина должно быть не более 5,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику рилпивирина, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика рилпивирина на хроматограмме раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (Б);
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца рилпивирина гидрохлорида, мг;
P - содержание рилпивирина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце рилпивирина гидрохлорида,%.

Допустимое содержание примесей:

- Z-изомер – не более 0,5 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3B), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, полученного в испытании «Родственные примеси», и доводят объём раствора растворителем до метки. Срок годности раствора – 2 ч.

Раствор стандартного образца рилпивирина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида (А), полученного в испытании «Родственные примеси», и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

- Объём пробы: 10 мкл;

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–18 | 45 → 30 | 55 → 70
18–20 | 30 → 10 | 70 → 90
20–25 | 10 | 90
25–25,1 | 10 → 45 | 90 → 55
25,1–32 | 45 | 55

Хроматографируют раствор стандартного образца рилпивирина гидрохлорида и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида:

- фактор асимметрии пика (AS) рилпивирина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика рилпивирина должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику рилпивирина, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

Содержание рилпивирина гидрохлорида C22H18N6∙HCl в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика рилпивирина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика рилпивирина на хроматограмме раствора стандартного образца рилпивирина гидрохлорида;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца рилпивирина гидрохлорида, мг;
P – содержание рилпивирина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце рилпивирина гидрохлорида,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0562 Римантадина гидрохлорид

Римантадин
Rimantadini hydrochloridum

Взамен ФС 42-1667-97

##### Определение

1-(Адамантан-1-ил)этан-1-амина гидрохлорид.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % римантадина гидрохлорида C12H21N·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в хлороформе и метаноле, растворим в спирте 96 %, растворим или умеренно растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца римантадина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. В 2 мл воды растворяют 20 мг субстанции, прибавляют 1 мл ацетона, 1 мл натрия нитропруссида раствора 1 % и 0,1 мл натрия карбоната раствора 10 %; в течение 3 мин должно появиться фиолетовое окрашивание.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,5 до 6,5 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»). Все растворы используют свежеприготовленными.

Испытуемый раствор. В коническую колбу вместимостью 50 мл помещают 0,4 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 4 мл хлороформа, прибавляют 10 мл воды и 2 мл натрия гидроксида раствора 20 %, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 10 мин и охлаждают до комнатной температуры. Полученный раствор помещают в делительную воронку вместимостью 50 мл, выдерживают до разделения слоёв, нижний слой хлороформа фильтруют через натрия сульфат безводный.

Стандартный раствор. В коническую колбу вместимостью 50 мл помещают 4 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца римантадина гидрохлорида, 4 мг адамантанола, растворяют в 4 мл хлороформа, прибавляют 10 мл воды и 2 мл натрия гидроксида раствора 20 %, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 10 мин и охлаждают до комнатной температуры. Полученный раствор помещают в делительную воронку вместимостью 50 мл, выдерживают до разделения слоёв, нижний слой хлороформа фильтруют через натрия сульфат безводный. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлороформом до метки.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 50 м × 0,32 мм, покрытая слоем поли(диметил)силоксана, 0,5 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | азот; |  |
Деление потока | 1:10; |  |
Скорость потока | 1 мл/мин; |  |
Температура | Инжектор | 240 °С; |
| Колонка | 100 °С в течение 8 мин, от 100 °С в течение 26 мин подъём 5 °С/мин до 230 °С, выдержка 10 мин; |
| Детектор | 230 °С; |
Объём пробы | 2 мкл. |  |

Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Римантадин – 1, адамантанол – около 0,8.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками адамантанола и римантадина должно быть не менее 1,5;

- фактор асимметрии пика (AS) римантадина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика римантадина должно быть не более 15,0 % (6 введений).

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика римантадина на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца римантадина гидрохлорида, мг;
P – содержание римантадина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце римантадина гидрохлорида ,%.

Допустимое содержание примесей:

- любая примесь – не более 0,3 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы при температуре 100–105 °С.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Встряхивают 0,3 г субстанции с 15 мл воды в течение 10 мин и фильтруют. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 1 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 20 мл уксусного ангидрида, перемешивают и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до ярко-жёлтого окрашивания (индикатор – 0,1 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 21,58 мг римантадина гидрохлорида C12H21N·HCl.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, при температуре от 15 до 30 °С.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0174 Рисперидон (Risperidonum)

Взамен ФС.2.1.0174.18

##### Определение

2-Метил-3-{2-[4-(6-фтор-1,2-бензоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этил}-6,7,8,9-тетрагидро-4H-пиридо[1,2-a]пиримидин-4-он.

Cодержит не менее 99,0% и не более 101,0% рисперидона С23H27FN4O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде, умеренно растворим в спирте 96%, практически нерастворим в воде.

* Растворяется в разбавленных растворах кислот.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца рисперидона.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах ацетона, выпаривают досуха на водяной бане и записывают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,04 г (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн 270 до 350 нм должен иметь максимумы при длинах волн 290 нм, 306 нм и 319 нм.

##### Испытания

Температура плавления. От 169 до 173 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 100 мл винной кислоты растворе 0,75% должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Аммония ацетата 0,5% раствор.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 10 мг фармакопейного стандартного образца рисперидона, содержащего примеси A, В, С, D и Е, в 1,0 мл метанола.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси K. Содержимое флакона со стандартным образцом примеси K растворяют в 1,0 мл метанола.

Примечание

Примесь A:
3-(2-{4-[(E)-(гидроксиимино)(2,4-дифторфенил)метил]пиперидин-1-ил}этил)-2-метил-6,7,8,9-тетрагидро-4H-пиридо[1,2-a]пиримидин-4-он
[691007-09-7].

Примесь B:
3-(2-{4-[(Z)-(гидроксиимино)(2,4-дифторфенил)метил]пиперидин-1-ил}этил)-2-метил-6,7,8,9-тетрагидро-4H-пиридо[1,2-a]пиримидин-4-он
[132961-05-8].

Примесь C:
(9RS)-9-гидрокси-2-метил-3-{2-[4-(6-фтор-1,2-бензоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этил}-6,7,8,9-тетрагидро-4H-пиридо[1,2-a]пиримидин-4-он
[144598-75-4].

Примесь D:
2-метил-3-{2-[4-(5-фтор-1,2-бензоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этил}-6,7,8,9-тетрагидро-4H-пиридо[1,2-a]пиримидин-4-он
[1199589-74-6].

Примесь E:
(6RS)-2,6-диметил-3-{2-[4-(6-фтор-1,2-бензоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этил}-6,7,8,9-тетрагидро-4H-пиридо[1,2-a]пиримидин-4-он
[1346602-28-5].

Примесь K:
(3-{2-[4-(1,2-бензоксазол-3-ил)пиперидин-1-ил]этил}-2-метил-6,7,8,9-тетрагидро-4H-пиридо[1,2-a]пиримидин-4-он)
[106266-09-5].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, деактивированный по отношению к основаниям, 3 мкм |
Температура колонки | 25 °С |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин |  |
Детектор | спектрофотометрический, 260 нм |  |
Объём пробы | 10 мкл |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2 | 70 | 30
2–17 | 70 → 30 | 30 → 70
17–22 | 30 | 70

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси К, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Рисперидон – 1 (около 12 мин); примесь А – около 0,7; примесь В – около 0,75; примесь С – около 0,8; примесь K – около 0,9; примесь D – около 0,94; примесь Е – около 1,1.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В, С, D и Е используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу рисперидона для идентификации примесей. Хроматограмма раствора стандартного образца примеси K используется для идентификации пика примеси K.

Пригодность хроматографической системы. Хроматограмма раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должна быть аналогична прилагаемой к стандартному образцу:

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси D и пиком рисперидона должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей А, В, С, D и Е не должна превышать площадь пика рисперидона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2%);

- площадь пика примеси K не должна превышать 0,75 площади пика рисперидона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15%);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика рисперидона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10%);

- сумма площадей пиков всех примесей пиков не должна превышать 1,5 площади пика рисперидона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3%).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,25 площади пика рисперидона на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции. Высушивают при 105 °С в течение 4 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,1% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции и платиновый тигель.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,16 г (точная навеска) субстанции в 70 мл смеси 1 объёма уксусной кислоты безводной и 7 объёмов метилэтилкетона и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 20,53 мг рисперидона С23H27FN4O2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0563 Ритонавир (Ritonavirum)

Вводится впервые

##### Определение

[(1,3-Тиазол-5-ил)метил]{N-[(2S,3S,5S)-3-гидрокси-5-[(2S)-3-метил -2-[(метил{[2-(пропан-2-ил)-1,3-тиазол-4-ил]метил}карбамоил)амино]бутанамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]карбамат}.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % ритонавира C37H48N6O5S2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. От белого до почти белого цвета кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в метаноле и метиленхлориде, мало растворим или очень мало растворим в ацетонитриле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ритонавира.

- Если спектры различаются, субстанцию и фармакопейный стандартный образец ритонавира по отдельности растворяют в минимальных объёмах метиленхлорида, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика ритонавира на хроматограмме раствора стандартного образца ритонавира (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Бутанол—тетрагидрофуран—ацетонитрил—калия дигидрофосфата раствор 0,03 М 50:80:180:690.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Бутанол—тетрагидрофуран—калия дигидрофосфата раствор 0,03 М—ацетонитрил 50:80:400:470.

Растворитель. Ацетонитрил—калия дигидрофосфата раствор 0,03 М 50:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе обрабатывая, при необходимости, ультразвуком и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца ритонавира для идентификации пиков (содержит примеси E, F, L, O и T), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь E:
[(1,3-тиазол-5-ил)метил]{N-[(2S,3S,5S)-3-гидрокси-5-[(2S)-2-[({[2-(2-гидроксипропан-2-ил)-1,3-тиазол-4-ил]метил}(метил)карбамоил)амино]-3-метилбутанамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]карбамат}
[176655-56-4].

Примесь F:
[(1,3-тиазол-5-ил)метил]{N-[(2S,3S,5S)-3-гидрокси-5-[(4S)-2,5-диоксо-4-(пропан-2-ил)имидазолидин-1-ил]-1,6-дифенилгексан-2-ил]карбамат}
[1010809-61-6].

Примесь L:
(4S,5S)-4-бензил-5-[(2S)-2-[(2S)-3-метил-2-({метил[2-(пропан-2-ил)-1,3-тиазол-4-ил]карбамоил}амино)бутанамидо]-3-фенилпропил]-1,3-оксазолидин-2-он
[256328-82-2].

Примесь O:
[(1,3-тиазол-5-ил)метил]{N-[(2S,3R,5S)-3-гидрокси-5-[(2S)-3-метил -2-[(метил{[2-(пропан-2-ил)-1,3-тиазол-4-ил]метил}карбамоил)амино]бутанамидо]-1,6-дифенилгексан-2-ил]карбамат}
[1414933-81-5].

Примесь T:
N,N'-[(2S,3S,5S)-3-гидрокси-1,6-дифенилгексан-2,5-диил]бис[(2S)-3-метил-2-[(метил{[2-(пропан-2-ил)-1,3-тиазол-4-ил]метил}карбамоил)амино]бутанамид]
[869368-48-9].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель бутилсилильный эндкепированный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 60 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 240 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–60 | 100 | 0
60–120 | 100 → 0 | 0 → 100
120–121,1 | 0 → 100 | 100 → 0
121,1–155 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ритонавир – 1 (около 34 мин); примесь E – около 0,39; примесь F – около 0,40; примесь L – около 0,8; примесь O – около 1,1; примесь T – около 2,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу ритонавира для идентификации пиков.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси E и примеси F должно быть не менее 1,2.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь F – 1,4; примесь L – 1,9; примесь T – 1,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей E и O не должна превышать трёхкратную площадь пика ритонавира на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика примеси T не должна превышать двукратную площадь пика ритонавира на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика каждой из примесей F и L не должна превышать площадь пика ритонавира на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика ритонавира на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь пика ритонавира на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора, полученного в испытании «Родственные примеси», и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца ритонавира. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ритонавира, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца ритонавира и испытуемый раствор.

Содержание ритонавира C37H48N6O5S2 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика ритонавира на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика ритонавира на хроматограмме раствора стандартного образца ритонавира;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца ритонавира, мг;
P – содержание ритонавира в фармакопейном стандартном образце ритонавира,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте, при температуре от 15 до 30 °С.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0623 Рифабутин (Rifabutinum)

Вводится впервые

##### Определение

[(9S,12E,14S,15R,16S,17R,18R,19R,20S,21S,22E,24Z)-6,18,20-Тригидрокси-7,9,15,17,19,21,25-гептаметил-1'-(2-метилпропил)-14-метокси-5,10,26-триоксо-3,5,9,10-тетрагидроспиро\{9,4-[эпокси(пентадека-1,11,13-триен)имино]-2H-фуро[2',3':7,8]нафто[1,2-d]имидазол-2,4'-пиперидин}-16-ил]ацетат.

Cодержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % рифабутина C46H62N4O11 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Красно-фиолетовый аморфный порошок.

Растворимость. Растворим в метаноле, мало растворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца рифабутина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика рифабутина на хроматограмме раствора стандартного образца рифабутина (А) (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Родственные примеси

1. Примесь А. Определение проводят методом ТСХ (ОФС Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза. Ацетон—петролейный эфир 23:77.

Растворитель. Метанол—метиленхлорид 50:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси А (1-(2-метилпропил)пиперидин-4-он [72544-16-2]), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (100 мкг) и раствора стандартного образца примеси А (0,3 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и помещают в камеру насыщенную парами йода на 5 мин, вынимают пластинку, опрыскивают крахмала раствором с калия йодидом, выдерживают в течение 5 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции, находящаяся на уровне зоны адсорбции примеси А, по совокупности величины и интенсивности поглощения не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора фармакопейного стандартного образца примеси А (не более 0,3 %).

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 500:500.

Буферный раствор. Растворяют 13,6 г калия дигидрофосфата в 800 мл воды, доводят значение рН натрия гидроксида раствором 8,5 % до 6,5, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца рифабутина (А). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца рифабутина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца рифабутина (Б). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца рифабутина (А) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца рифабутина, растворяют в 2 мл метанола, прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 8,5 % и выдерживают при комнатной температуре в течение 4 мин. К полученному раствору прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты разведенной 7,3 % и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь В: 3-аминорифамицин S [51756-80-0].

Примесь С: 21,31-дидегидрорифабутин [2241829-23-0].

Примесь D: 3-амино-4-иминдорифамицин S [62041-01-4].

Примесь Е: 16-O-дезацетилрифабутин [100324-63-8].

Хроматографические условия

Колонка | 110 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,5-кратное от времени удерживания пика рифабутина. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца рифабутина (Б) и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Рифабутин – 1 (около 9 мин); примесь E – около 0,5; примесь В – около 0,6; примесь D – около 0,9; примесь С – около 1,3.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между вторым пиком из трёх продуктов разложения и пиком рифабутина должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика рифабутина на хроматограмме раствора стандартного образца рифабутина (Б) (не более 1,0 %) и площадь только одного такого пика может превышать 0,5 площади пика рифабутина на хроматограмме раствора стандартного образца рифабутина (Б) (0,5 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь пика рифабутина на хроматограмме раствора стандартного образца рифабутина (Б) (не более 3,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,05 площади основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца рифабутина (Б) (не более 0,05 %).

Вода. Не более 2,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,3 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца рифабутина (А) и испытуемый раствор.

Содержание рифабутина C46H62N4O11 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика рифабутина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика рифабутина на хроматограмме раствора стандартного образца рифабутина (А);
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца рифабутина, мг;
P – содержание рифабутина в фармакопейном стандартном образце рифабутина,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0032 Рифампицин (Rifampicinum)

Взамен ФС.2.1.0032.15

##### Определение

[(2S,12Z,14E,16S,17S,18R,19R,20R,21S,22R,23S,24E)-5,6,9,17,19-Пентагидрокси-2,4,12,16,18,20,22-гептаметил-8-[N-(4-метилпиперазин-1-ил)метанимидоил]-23-метокси-1,11-диоксо-1,2-дигидро-2,7-(эпоксипентадека[1,11,13]триеназано)нафто[2,1-b]фуран-21-ил]ацетат.

Рифампицин – полусинтетический антибиотик, получаемый из рифамицина SV.

Содержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % рифампицина C43Н58N4O12 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Красно-коричневый или коричнево-красный кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в метаноле, мало растворим в ацетоне, спирте 96 % и воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в вазелиновом масле, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца рифампицина.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Cпектр поглощения раствора субстанции, приготовленного для количественного определения, в области длин волн от 220 до 500 нм должен иметь максимумы при 237, 254, 334 и 475 нм. Отношение оптической плотности при 334 нм к оптической плотности при 475 нм должно быть около 1,75.

##### Испытания

рН. От 4,5 до 6,5 (1 % суспензия субстанции в воде, свободной от углерода диоксида, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор для приготовления подвижной фазы. Растворяют 1,9 г натрия перхлората в 200 мл воды, прибавляют 1 мл фосфорной кислоты концентрированной, 5,9 г лимонной кислоты, 20,9 г калия фосфата однозамещённого, доводят водой до 1000 мл.

Подвижная фаза. Ацетонитрил—раствор для приготовления подвижной фазы 350:650.

Смесь растворителей. К 10 объёмам 21,01 % раствора лимонной кислоты прибавляют 23 объёма 13,61 % раствора калия фосфата однозамещённого, 77 объёмов 17,42 % раствора калия фосфата двузамещённого, 250 объёмов ацетонитрила и 640 объёмов воды.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20,0 мг субстанции, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20,0 мг стандартного образца рифампицина хинона, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Примечание

Рифампицина хинон:
([(2S,12Z,14E,16S,17S,18R,19R,20R,21S,22R,23S,24E)-5,17,19-Тригидрокси-2,4,12,16,18,20,22-гептаметил-8-[N-(4-метилпиперазин-1-ил)метанимидоил]-23-метокси-1,6,9,11-тетраоксо-1,2,6,9-тетрагидро-2,7-(эпоксипентадека[1,11,13]триеназано)нафто[2,1-b]фуран-21-ил]ацетат [13983-13-6].

Хроматографические условия

Колонка | 120 × 4,6 см, силикагель октадецилсилильный для хроматографии (С18), 5 мкм; |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | двукратное от времени удерживания основного пика. |

Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора разрешение (R) между пиками рифампицина и рифампицина хинона должно быть не менее 4,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика рифампицина хинона должна быть не более 1,5-кратной площади пика рифампицина хинона на хроматограмме стандартного раствора (не более 1,5 %);

- площадь любого пика, кроме пиков рифампицина и рифампицина хинона, должна быть не более площади пика рифампицина на хроматограмме стандартного раствора (не более 1,0 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей, кроме пика рифампицина хинона, не должна более чем в 3,5 раза превышать площадь пика рифампицина на хроматограмме стандартного раствора (не более 3,5 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции, сушат при температуре 80 °С и остаточном давлении не более 0,67 кПа в течение 4 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы»). Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 10 мг субстанции в 0,5 мл 1 % раствора желатина на мышь, внутрь. Срок наблюдения 48 ч.

Для субстанций, предназначенных для приготовления лекарственных форм для парентерального введения, испытание проводится следующим образом.

Тест-доза – 4 мг субстанции в 0,5 мл приготовленного раствора на мышь, внутривенно. Срок наблюдения 48 ч.

Испытуемый раствор. Помещают 300 мг (точная навеска) субстанции в стерильную ступку, растирают. В мерную колбу вместимостью 15 мл помещают 30 мг аскорбиновой кислоты и 6 мг натрия сульфита, доводят объём раствора водой для инъекций до метки и перемешивают. Полученный раствор при постоянном перемешивании прибавляют к навеске субстанции, а затем по каплям прибавляют натрия гидроксида раствор 2 М (около 50 – 200 мкл) до полного растворения субстанции (рН 8 – 10). Концентрация рифампицина в полученном растворе – 20 мг в 1 мл. К 2 мл полученного раствора прибавляют 3 мл воды для инъекций для приготовления испытуемого раствора с концентрацией рифампицина 8 мг в 1 мл.

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,5 ЕЭ на 1 мг рифампицина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции в спирте 96 % c концентрацией 5 мг/мл, а затем разводят его водой для ЛАЛ-теста не менее чем в 40 раз.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют фосфатный буферный раствор рН 7,4 и доводят объём раствора фосфатным буферным раствором рН 7,4 до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 475 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. В качестве раствора сравнения используют фосфатный буферный раствор рН 7,4.

Содержание рифампицина С43Н58N4O12 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A – оптическая плотность испытуемого раствора;
a – навеска субстанции, г;
187 – удельный показатель поглощения рифампицина при длине волны 475 нм ();
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте при температуре не выше 25 °С.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0564 Розувастатин кальция

Розувастатин
Rosuvastatinum calcicum

Вводится впервые

##### Определение

(3R,5S,6E)-3,5-Дигидрокси-7-{2-[N-метилметансульфонамидо]-4-(пропан-2-ил)-6-(4-фторфенил)пиримидин-5-ил}гепт-6-еноат кальция (2:1).

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % розувастатина кальция в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый аморфный порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде, мало растворим в воде, практически нерастворим в этаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца розувастатина кальция.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика розувастатина на хроматограмме раствора фармакопейного стандартного образца розувастатина кальция (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерные реакции Б на кальций (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Родственные примеси

1. Энантиомерная чистота. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

- Все растворы защищают от света.

- Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—трифторуксусной кислоты раствор 0,1 % 250:750.

- Растворитель. Ацетонитрил—вода 25:75.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в 6 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

- Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

- Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца примеси G розувастатина (примесь G: (3S,5R,6E)-3,5-дигидрокси-7-{2-[N-метилметансульфонамидо]-4-(пропан-2-ил)-6-(4-фторфенил)пиримидин-5-ил}гепт-6-еновая кислота [242184-42-4]) растворяют в 1,0 мл испытуемого раствора.

- Хроматографические условия

| Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель модифицированный трис(3,5-диметилфенилкарбамоил)целлюлозой для хиральной хроматографии, 5 мкм; |
| Температура колонки | 35 °C; |  |
| Скорость потока | 0,5 мл/мин; |  |
| Детектор | спектрофотометрический, 242 нм; |  |
| Объём пробы | 10 мкл; |  |
| Время хроматографирования | 2,6-кратное от времени удерживания пика розувастатина. |

- Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

- Относительное время удерживания соединений. Розувастатин – 1 (около 29 мин); примесь G – около 0,9.

- Идентификация примеси. Для идентификации пика примеси G используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

- Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси G и розувастатина должно быть не менее 1,5.

- Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси G не должна более, чем в 1,5 раза превышать площадь пика розувастатина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %).

2. Примесь L. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

- Все растворы защищают от света.

- Раствор А. Этанол 96 %—ацетонитрил для хроматографии 1:2.

- Подвижная фаза (ПФ). Раствор А—трифторуксусной кислоты раствор 0,02 % 350:650.

- Растворитель. Ацетонитрил—вода 50:50.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в 50 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

- Раствор стандартного образца розувастатина кальция для идентификации примеси L. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5 мг стандартного образца розувастатина кальция для идентификации примеси L (примесь L: (3Ξ,5Ξ)-3,5-дигидрокси-7-[2-(N-метилметансульфонамидо)-6-(пропан-2-ил)-4-(4-фторфенил)пиримидин-5-ил]гептановая кислота [1347797-73-2], [1024064-70-7] (Ca), [1347362-67-7] (Na)), растворяют в 10 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

- Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

- Хроматографические условия

| Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный, с пористой поверхностью на непористой основе, эндкепированный, для хроматографии, 2,7 мкм; |
| Скорость потока | 0,7 мл/мин; |  |
| Детектор | спектрофотометрический, 243 нм; |  |
| Объём пробы | 10 мкл; |  |
| Время хроматографирования | трёхкратное от времени удерживания пика розувастатина. |

- Хроматографируют раствор стандартного образца розувастатина кальция для идентификации примеси L, раствор сравнения и испытуемый раствор.

- Относительное время удерживания соединений. Розувастатин – 1 (около 22 минут); примесь L – около 1,1.

- Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси L используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу розувастатина для идентификации примеси L и хроматограмму раствора стандартного образца розувастатина для идентификации примеси L.

- Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца розувастатина для идентификации примеси L: отношение максимум/минимум (p/v) между пиками розувастатина кальция и примеси L должно быть не менее 2,5.

- Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси L умножается на поправочный коэффициент – 1,8.

- Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора: площадь пика примеси L не должна более, чем в 1,5 раза превышать площадь пика розувастатина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %).

3. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

- Все растворы защищают от воздействия света и используют свежеприготовленными.

- Подвижная фаза А (ПФА). Трифторуксусной кислоты раствор 1 %—ацетонитрил для хроматографии—вода 10:290:700.

- Подвижная фаза Б (ПФБ). Трифторуксусной кислоты раствор 1 %—вода—ацетонитрил для хроматографии 10:240:750.

- Растворитель. Ацетонитрил—вода 25:75.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 35 мг субстанции, растворяют в 12 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

- Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

- Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 7 мг фармакопейного стандартного образца розувастатина для проверки пригодности хроматографической системы (содержит примеси А, В и С), растворяют в 2,5 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь A:
(3R,5S,6E)-3,5-дигидрокси-7-{2-[2-гидрокси-N,2-диметилпропансульфонамидо]-4-(пропан-2-ил)-6-(4-фторфенил)пиримидин-5-ил}гепт-6-еновая кислота.

Примесь B:
rac-(3R,5R,6E)-3,5-дигидрокси-7-{2-[N-метилметансульфонамидо]-4-(пропан-2-ил)-6-(4-фторфенил)пиримидин-5-ил}гепт-6-еновая кислота [1094100-06-7].

Примесь C:
(3R,6E)-3-гидрокси-7-{2-[N-метилметансульфонамидо]-4-(пропан-2-ил)-6-(4-фторфенил)пиримидин-5-ил}-5-оксогепт-6-еновая кислота [1422619-13-3].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,0 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 40 °C; |  |
Скорость потока | 0,75 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 242 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–30 | 100 | 0
30–50 | 100 → 60 | 0 → 40
50–60 | 60 → 0 | 40 → 100
60–70 | 0 | 100

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Розувастатин – 1,0 (около 25 мин); примесь А – около 0,9; примесь В – около 1,1; примесь С – около 1,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В и С используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу розувастатина для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками розувастатина и примеси B должно быть не менее 2,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси С умножают на 1,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика розувастатина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси В не должна превышать 2,5 площади пика розувастатина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси С не должна превышать четырёхкратную площадь пика розувастатина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,8 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика розувастатина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать шестикратную площадь пика розувастатина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,25 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 6,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 0,5 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца розувастатина кальция. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 35 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца розувастатина кальция, растворяют в 12 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца розувастатина кальция и испытуемый раствор.

Содержание розувастатина кальция C44H54CaF2N6O12S2 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика розувастатина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика розувастатина на хроматограмме раствора стандартного образца розувастатина кальция;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца розувастатина кальция, мг;
P - содержание розувастатина кальция в фармакопейном стандартном образце розувастатина кальция,%;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте при температуре от 2 до 8 °С.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0565 Ропивакаина гидрохлорид моногидрат

Ропивакаин
Ropivacaini hydrochloridum monohydricum

Вводится впервые

##### Определение

(2S)-N-(2,6-Диметилфенил)-1-пропилпиперидин-2-карбоксамида гидрохлорид, моногидрат.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % ропивакаина гидрохлорида моногидрата в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в воде и этаноле 96 %, мало растворим в метиленхлориде, практически нерастворим в этилацетате.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ропивакаина гидрохлорида моногидрата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика ропивакаина гидрохлорида моногидрата на хроматограмме раствора стандартного образца ропивакаина гидрохлорида моногидрата (раздел «Родственные примеси. Другие примеси»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –64 до –74 в пересчёте на безводное вещество (ОФС «Оптическое вращение»).

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 мл натрия гидроксида раствора 20 %, прибавляют 30 мл воды и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 25 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Удельный показатель поглощения. Оптическая плотность раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», измеренная в кювете с толщиной слоя 5 см (по сравнению с водой) при длине волны 405 нм, не должна превышать 0,030; при длине волны 436 нм не должна превышать 0,025 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

рН раствора. От 4,5 до 6,0 (2,0 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

1. Энантиомерная чистота (примесь G). Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы должны быть свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 6,8 г натрия ацетата в 900 мл воды и доводят значение рН до 7,0 уксусной кислотой разведённой 30 %. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). 2-Пропанол—буферный раствор 120:880.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор фармакопейного стандартного образца ропивакаина примеси G. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 12,5 мг фармакопейного стандартного образца ропивакаина примеси G ((2R)-N-(2,6-диметилфенил)-1-пропилпиперидин-2-карбоксамид [98717-16-9]), растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,1 мл раствора стандартного образца ропивакаина примеси G и доводят объём раствора испытуемым раствором до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают по 5,0 мл испытуемого раствора и раствора стандартного образца ропивакаина примеси G и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,0 мм, силикагель модифицированный α1-кислотным гликопротеином для хиральной хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,9 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 10 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ропивакаин – 1; примесь G – около 0,9.

Идентификация примеси. Для идентификации пика примеси G используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси G и ропивакаина должно быть не менее 1,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси G не должна превышать разницу между площадью пика примеси G на хроматограмме раствора сравнения и площадью пика примеси G на хроматограмме испытуемого раствора (не более 0,5 %).

2. Примесь H. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 2,425 г дикалия гидрофосфата в 450 мл воды, доводят значение рН до 8,0 фосфорной кислотой, переносят в мерную колбу вместимостью 500 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор 2,6-диметиланилина. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 10 мг 2,6-диметиланилина (примесь H: 2,6-диметиланилин [87-62-7]), растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, прибавляют 5,0 мл раствора 2,6-диметиланилина и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 240 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | двукратное от времени удерживания пика ропивакаина. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор 2,6-диметиланилина и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ропивакаин – 1 (около 6 мин); примесь H – около 0,4.

Идентификация примеси. Для идентификации пика примеси H используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси H и ропивакаина должно быть не менее 10,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси H не должна превышать площадь пика примеси H на хроматограмме раствора 2,6-диметиланилина (не более 0,001 %).

3. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Примесь Н» со следующими изменениями.

Все растворы используют свежеприготовленными.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 70 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца ропивакаина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 14 мг фармакопейного стандартного образца ропивакаина гидрохлорида моногидрата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца бупивакаина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 14 мг фармакопейного стандартного образца бупивакаина гидрохлорида (примесь А: (2S)-1-бутил-N-(2,6-диметилфенил)пиперидин-2-карбоксамид [27262-47-1]), растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают по 1,0 мл раствора стандартного образца ропивакаина гидрохлорида и раствора стандартного образца бупивакаина гидрохлорида и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ропивакаин – 1 (около 6 мин); примесь А – около 1,6.

Идентификация примеси. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора разрешение (RS) между пиками ропивакаина и примеси А должно быть не менее 6,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика ропивакаина гидрохлорида на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика ропивакаина гидрохлорида на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика ропивакаина гидрохлорида на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади пика ропивакаина гидрохлорида на хроматограмме стандартного раствора (менее 0,05 %).

Вода. Не менее 5,0 % и не более 6,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,7 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 1 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 20 мл уксусного ангидрида и титруют хлорной кислоты раствором 0,1 М до жёлто-коричневого окрашивания (индикатор – 0,1 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 31,09 мг ропивакаина гидрохлорида C17H26N2O·HCl.

##### Хранение

В плотно укупоренном контейнере.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯИ

#### ФС.2.1.0175 Рутозид тригидрат

Рутозид
Rutosidum trihydricum

Взамен ФС.2.1.0175.18

##### Определение

3-{[6-O-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)-β-D-глюкопиранозил]окси}-2-(3,4-дигидроксифенил)- 5,7-Дигидрокси-4H-1-бензопиран-4-он тригидрат.

##### Свойства

Cодержит не менее 95,0 % и не более 101,0 % рутозида С27H30O16 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Описание. Жёлтый или зеленовато-жёлтый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в метаноле, умеренно или мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

* Растворяется в растворах гидроксидов щелочных металлов.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца рутозида тригидрата.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят этим же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области спектрального диапазона от 210 до 450 нм должен иметь максимумы при 257 нм и 358 нм. Удельное поглощение при максимуме поглощения при 358 нм должно быть от 305 до 330 нм (безводное вещество).

3. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в метаноле, доводят этим же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца рутозида тригидрата. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного образца рутозида тригидрата, растворяют в метаноле, доводят этим же растворителем до метки.

- Подвижная фаза (ПФ). Бутанол―уксусная кислота безводная―вода―метилэтилкетон―этилацетат 5:10:10:30:50.

- На линию старта хроматографической пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (25 мкг) и раствора стандартного образца рутозида тригидрата (25 мкг).

- Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в (предварительно насыщенную, в течение 1 ч) камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают смесью 2,5 мл железа (III) хлорида раствора 10 % и 7,5 мл раствора калия феррицианида и просматривают в течение 10 мин в видимом свете.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению и окраске должна соответствовать зоне адсорбции рутозида тригидрата на хроматограмме раствора стандартного образца рутозида тригидрата.

4. Качественная реакция._ Растворяют 10 мг субстанции в 5 мл спирта 96 %, прибавляют 1 г цинка и 2 мл хлористоводородной кислоты раствора 25 %. Раствор должен окраситься в красный цвет.

##### Испытания

Вещества нерастворимые в метаноле. Не более 3,0 %.

Испытуемый раствор. Встряхивают 2,5 г субстанции в 50 мл метанола при температуре 20–25 °С в течение 15 мин. Раствор фильтруют при пониженном давлении через фильтр из пористого стекла с диаметром пор 1,6 мкм, предварительно высушенный в течение 15 мин при температуре 100–105 °C, охлаждённый в эксикаторе и взвешенный. Фильтр промывают тремя порциями метанола по 20 мл, сушат при температуре 100–105 °C в течение 30 мин, охлаждают и взвешивают. Масса вещества на фильтре не должна превышать 75 мг.

Светопоглощающие примеси. Спектр поглощения полученного раствора в диапазоне длин волн от 450 до 800 нм в кювете с толщиной слоя 1 см не должен превышать 0,10.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,2 г субстанции, растворяют в 40 мл 2-пропанола, перемешивают в течение 15 мин, доводят объём раствора до метки и фильтруют. В качестве раствора сравнения используют 2-пропанол.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы должны быть свежеприготовленными.

Буферный раствор. В химическом стакане вместимостью 1000 мл помещают 15,6 г натрия дигидрофосфата дигидрата, растворяют в 900 мл воды, доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,0. Полученный раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл, доводят объём раствора водой до метки, перемешивают и фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.

Подвижная фаза А (ПФА). Тетрагидрофуран—буферный раствор 5:95.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Тетрагидрофуран—буферный раствор 40:60.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 20 мл метанола и доводят объём раствора ПФБ до метки.

Раствор стандартного образца рутозида тригидрата. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца рутозида тригидрата, растворяют в 2 мл метанола и доводят объём раствора ПФБ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора ПФБ до метки и перемешивают.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1 мл раствора сравнения, доводят объём раствора ПФБ до метки и перемешивают. Концентрация раствора составляет 0,1 % от концентрации испытуемого раствора.

Примечание

Примесь А:
5,7-дигидрокси-3-(β-D-глюкофуранозилокси)-2-(3,4-дигидроксифенил)-4H-1-бензопиран-4-он (изокверцитрозид).
[21637-25-2].

Примесь В:
5,7-дигидрокси-2-(4-гидроксифенил)-3-{[6-O-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)-β-D-глюкопиранозил]окси}-4H-1-бензопиран-4-он.
[17650-84-9].

Примесь С:
3,5,7-тригидрокси-2-(3,4-дигидроксифенил)-4H-1-бензопиран-4-он (кверцетин).
[117-39-5].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 50 → 0 | 50 → 100
10–15 | 0 | 100
15–16 | 0 → 50 | 100 → 50
16–20 | 50 | 50

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца рутозида тригидрата, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Рутозид – 1 (около 7 мин); примесь В – около 1,1; примесь А – около 1,2; примесь С – около 2,5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца рутозида тригидрата разрешение ® между пиками рутозида и примеси B должно быть не менее 2,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примеси А – 0,8; примеси В – 1,0; примеси С – 0,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь каждого из пиков примесей А, В и С не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 4,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,1 %).

Содержание любой единичной примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – среднее значение площади пика любой единичной примеси на хроматограммах испытуемого раствора;
S0 – среднее значение площади пика рутозида на хроматограммах раствора сравнения;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца рутозида тригидрата, мг;
P – содержание рутозида тригидрата в стандартном образце рутозида тригидрата,%;
K – поправочный коэффициент для единичной примеси.

Суммарное содержание примесей в субстанции вычисляют арифметическим сложением найденного содержания каждой единичной примеси.

Вода. От 7,5 % до 9,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,10 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 20 мл диметилформамида и титруют 0,1 М раствором тетрабутиламмония гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора тетрабутиламмония гидроксида соответствует 30,53 мг рутозида С27H30O16.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0566 Саквинавира мезилат

Саквинавир
Saquinaviri mesilas

Вводится впервые

##### Определение

(2S)-N1-[(2S,3R)-4-[(3S,4aS,8aS)-3-(трет-Бутилкарбамоил)окстагидроизохинолин-2(1H)-ил]-3-гидрокси-1-фенилбутан-2-ил]-2-(хинолин-2-карбоксамидо)бутандиамида метансульфонат.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % саквинавира мезилата C38H50N6O5·CH4O3S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Умеренно растворим в метаноле, мало растворим в спирте 96 % и практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца саквинавира мезилата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика саквинавира на хроматограмме раствора стандартного образца саквинавира мезилата (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –35,0 до –42,0 в пересчёте на безводное вещество (0,5 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворитель. Вода для хроматографии—ацетонитрил 47:53.

Подвижная фаза А (ПФА). В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 2,5 мл натрия гидроксида раствора концентрированного, прибавляют 900 мл воды для хроматографии и доводят рН хлорной кислотой до 1,8. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой для хроматографии до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). ПФА—ацетонитрил 38:62.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе, обрабатывая ультразвуком, и после охлаждения до комнатной температуры доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца саквинавира для проверки пригодности системы (содержит примеси А, B, С и D) растворяют в 1,0 мл растворителя и обрабатывают ультразвуком в течение 2 мин.

Примечание

Примесь А:
(2S)-1-амино-1-оксо-2-(хинолин-2-илкарбоксамидо)бутановая кислота [136465-98-0].

Примесь В:
этил[(2S)-1-Амино-1-оксо-2-(хинолин-2-илкарбоксамидо)бутаноат].

Примесь С:
(3S,4aS,8aS)-2-[(2R,3S)-3-амино-2-гидрокси-4-фенилбутил]-N-трет-бутил декагидроизохинолин-3-карбоксамид [136522-17].

Примесь D:
(2R)-N1-[(2S,3R)-4-[(3S,4aS,8aS)-3-(трет-бутилкарбамоил)окстагидроизохинолин-2(1H)-ил]-3-гидрокси-1-фенилбутан-2-ил]-2-(хинолин-2-карбоксамидо)бутандиамид.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 3,5 мкм, сферический; |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–1 | 50 | 50
1–31 | 50 → 0 | 50 → 100

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Саквинавир – 1 (около 17 мин); примесь А – около 0,2; примесь В – около 0,3; примесь С – около 0,5, примесь D – около 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, C и D используют хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу саквинавира для проверки пригодности системы (содержит примеси А, B, С и D).

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси D и саквинавира должно быть не менее 3,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь А – 0,5; примесь В – 0,5; примесь С – 2,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площади пиков каждой из примесей A, B и С не должны более чем в 1,5 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 5 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,3 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,03 %).

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца саквинавира мезилата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца саквинавира мезилата, растворяют в растворителе, обрабатывая ультразвуком, и после охлаждения до комнатной температуры доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца саквинавира мезилата и испытуемый раствор.

Содержание саквинавира мезилата C38H50N6O5·CH4O3S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика саквинавира на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика саквинавира на хроматограмме раствора стандартного образца саквинавира мезилата;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца саквинавира мезилата, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание саквинавира мезилата в фармакопейном стандартном образце саквинавира мезилата,%.

##### Хранение

В герметично укупоренном упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0567 Салициламид (Salicylamidum)

Взамен ФС 42-2972-99

##### Определение

2-Гидроксибензамид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % салициламида C7H7NO2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый кристаллический порошок, при нагревании возгоняется.

Растворимость. Растворим в спирте 96 % и пропиленгликоле, мало растворим в воде и хлороформе.

* Растворяется в разбавленных растворах щелочей.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрофотометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца салициламида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика салициламида на хроматограмме раствора стандартного образца салициламида (раздел «Родственные примеси»).

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 5 мл спирта 96 %, прибавляют 0,15 мл железа(III) хлорида раствора 3 %; должно появиться фиолетовое окрашивание.

4. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 5 мл натрия гидроксида раствора 30 %, кипятят в течение 1 мин; пары изменяют цвет влажной красной лакмусовой бумаги на синий.

##### Испытания

Температура плавления. От 139 до 142 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

pH раствора. От 4,0 до 6,0 (5 % суспензия, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Фосфорная кислота концентрированная—ацетонитрил—вода 2:400:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца салициламида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца салициламида, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл переносят 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг салициловой кислоты, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 237 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 25 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Салициламид – 1 (около 5 мин); салициловая кислота – около 2,0.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси салициловой кислоты используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы, хроматограмму раствора сравнения и хроматограмму раствора стандартного образца салициламида.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- фактор асимметрии пика (AS) салициламида должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика салициламида должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика салициловой кислоты не должна превышать площадь пика салициламида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика салициламида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 10 раз превышать площадь пика салициламида на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Аммоний. Не более 0,02 % (ОФС «Аммоний»). Взбалтывают 0,2 г субстанции с 20 мл воды, свободной от аммиака, в течение 5 мин и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Сульфаты. Не более 0,01 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Растворяют 2 г субстанции в 20 мл воды, встряхивают в течение 5 мин и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,4 г субстанции в 20 мл воды, встряхивают в течение 5 мин и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии.

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в 20 мл диметилформамида, предварительно нейтрализованного по индикатору (индикатор – 4–5 капель ализаринового жёлтого раствора 0,1 %), и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до перехода жёлтой окраски в лиловую.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 13,71 мг салициламида C7H7NO2.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0033 Салициловая кислота (Acidum salicylicum)

Взамен ФС.2.1.0033.15

##### Определение

2-Гидроксибензойная кислота.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % салициловой кислоты C7H6O3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белые или бесцветные мелкие игольчатые кристаллы или кристаллический порошок от белого до почти белого цвета.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 % и эфире, растворим в кипящей воде, умеренно растворим в хлороформе, мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца салициловой кислоты.

2. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 10 мл воды. Раствор должен давать характерную реакцию на салицилаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

3. Качественная реакция. Нагревают 1,0 г субстанции с 2 мл серной кислоты концентрированной и пропускают выделяющийся газ через раствор кальция гидроксида; должно появиться помутнение.

##### Испытания

Температура плавления. От 158 до 161 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Растворяют 1 г субстанции в 10 мл спирта 96 %. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора» должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—метанол—вода 10:400:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор примеси С. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фенола, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси В. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси B, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор примеси А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) 4-гидроксибензойной кислоты, растворяют в ПФ и доводят объём ПФ до метки.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора примеси С и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора примеси С, 1,0 мл раствора стандартного образца примеси В, 1,0 мл раствора примеси А и доводят объём раствора ПФ до метки.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора для проверки пригодности хроматографической системы и доводят объём ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл стандартного раствора Б и доводят объем ПФ до метки.

Примечание

Примесь A: 4-гидроксибензойная кислота [99-96-7].

Примесь B (4-гидроксиизофталевая кислота): 4-гидроксибензол-1,3-дикарбоновая кислота [636-46-4].

Примесь C: фенол [108-95-2].

Условия хроматографирования

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии (С18), 5 мкм; |
Скорость потока | 0,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 270 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартный раствор А, стандартный раствор Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Салициловая кислота – 1; примесь А – около 0,35; примесь B – около 0,45; примесь С – около 0,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму стандартных растворов А и Б.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (Rs) между пиками примеси А и примеси С должно быть не менее 1,0 (допустимо изменение количества уксусной кислоты ледяной в составе ПФ, не вызывающее изменение порядка выхода компонентов);

- относительное стандартное отклонение площади каждого из пиков примеси А, В и С должно быть не более 2 % (6 введений);

- время удерживания третьего пика должно соответствовать времени удерживания пика примеси С, полученного на хроматограмме стандартного раствора А;

- фактор ассиметрии (As) пика примеси С на хроматограмме стандартного раствора А, должен быть не более 2,0;

- эффективность хроматографической колонки (N) рассчитанная по пику примеси С на хроматограмме стандартного раствора А, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок;

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси А на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы, должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика примеси А на хроматограмме стандартного раствора Б (не более 0,1 %);

- площадь пика примеси B не должна превышать площадь пика примеси B на хроматограмме стандартного раствора Б (не более 0,05 %);

- площадь пика примеси C не должна превышать площадь пика примеси C на хроматограмме стандартного раствора Б (не более 0,02 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика примеси В на хроматограмме стандартного раствора Б (не более 0,05 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика примеси А на хроматограмме стандартного раствора Б (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 1,0 % от площади пика примеси А на хроматограмме стандартного раствора Б.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 %. (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1,0 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы при температуре 60 °С.

Железо. Не более 0,006 % (ОФС «Железо»). Определение проводят в зольном остатке, полученном после сжигания 0,5 г субстанции (ОФС «Сульфатная зола»).

Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты»). Определение проводят, используя раствор, полученный в испытании «Хлориды».

Хлориды. Не более 0,004 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 1,5 г субстанции в 30 мл кипящей воды, охлаждают и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3А или 3Б). Определение проводят в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии.

Растворяют 0,12 г (точная навеска) субстанции в 30 мл спирта 96%, прибавляют 20 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с индикатором (2 капли фенолового красного раствора 0,1 %) до появления красно-фиолетовой окраски.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 13,81 мг салициловой кислоты C7H6O3.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0568 Салметерола ксинафоат

Салметерол
Salmeteroli xinafoas

Вводится впервые

##### Определение

(1RS)-1-[4-Гидрокси-3-(гидроксиметил)фенил]-2-\{[6-(4-фенилбутокси)гексил]амино}этанола 1-гидроксинафталин-2-карбоксилат.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % салметерола ксинафоата C25H37NO4⋅C11H8O3 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Растворим в метаноле, мало растворим в этаноле, практически нерастворим в воде и в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца салметерола ксинафоата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика салметерола на хроматограмме раствора стандартного образца салметерола ксинафоата (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от света.

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 28,84 г натрия лаурилсульфата в 1000 мл воды. В химический стакан помещают 240 мл полученного раствора прибавляют 240 мл аммония ацетата раствора 0,1 М и доводят значение pH уксусной кислотой ледяной до 2,7, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и прибавляют 520 мл ацетонитрила.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Вода—ацетонитрил 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор. Растворяют 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца салметерола ксинафоата для идентификации пиков (содержащего примесь D) в 1,0 мл растворителя.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют 11 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца салметерола ксинафоата для проверки пригодности хроматографической системы (содержащего примеси Е и G) в 2,0 мл растворителя.

Примечание

Примесь D:
1-[4-[2-гидрокси-2-[4-гидрокси-3-(гидроксиметил)фенил]этокси]-3-(гидроксиметил)фенил]-2-[[6-(4-фенилбутокси)гексил]амино]этанол
[1391052-04-2].

Примесь E:
1-[4-гидрокси-3-(гидроксиметил)фенил] -2-[[6-(1-метил-3-фенилпропокси)гексил]амино]этанол
[108928-81-0].

Примесь G:
1-[4-гидрокси-3-[[[2-гидрокси-2-[4-гидрокси-3-(гидроксиметил)фенил]этил[6-(4-фенилбутокси)гексил]амино]метил]фенил]-2-[[6-(4-фенилбутокси)гексил]амино]этанол
[1391051-88-9].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 278 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–16 | 100 | 0
16–36 | 100 → 30 | 0 → 70
36–45 | 30 | 70

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, стандартный раствор, раствор сравнения А и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Салметерол – 1 (около 13 мин); ксинафоевая кислота – около 0,2; примесь D – около 0,8; примесь Е – около 0,9; примесь G – около 2,7.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примеси Е и G используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Для идентификации пика примеси D используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси Е и салметерола должно быть не менее 10.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика любой примеси в субстанции на хроматограмме раствора сравнения А.

Допустимое содержание примесей:

- каждой из примесей D и G – не более 0,2 %;

- любой другой примеси – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пик ксинафоевой кислоты и пики площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 28,84 г натрия лаурилсульфата в 1000 мл воды. В химический стакан помещают 240 мл полученного раствора прибавляют 240 мл аммония ацетата раствора 0,1 М и доводят значение pH уксусной кислотой ледяной до 2,7, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и прибавляют 520 мл ацетонитрила.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца салметерола ксинафоата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца салметерола ксинафоата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора для проверки пригодности хроматографической системы, полученного в разделе «Родственные примеси», и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографируют раствор сравнения, раствор стандартного образца салметерола ксинафоата и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Салметерол – около 16 мин).

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси Е и салметерола должно быть не менее 10.

Содержание салметерола ксинафоата C25H37NO4⋅C11H8O3 в субстанции в процентах в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика салметерола на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика салметерола на хроматограмме раствора стандартного образца салметерола ксинафоата;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца салметерола ксинафоата, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание салметерола ксинафоата в фармакопейном стандартном образце салметерола ксинафоата,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0569 Севофлуран (Sevofluranum)

Вводится впервые

##### Определение

1,1,1,3,3,3-Гексафтор-2-(фторметокси)пропан.

Cодержит не менее 99,97 % севофлурана C4H3F7O.

##### Свойства

Описание. Прозрачная бесцветная летучая жидкость.

Растворимость. Смешивается с этанолом 96 %, растворим в хлороформе, мало растворим в воде.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в виде жидкой плёнки, в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца севофлурана.

##### Испытания

Показатель преломления. От 1,2745 до 1,2760 (ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)»).

Прозрачность. Субстанция должна быть прозрачной (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкости»).

Цветность. Субстанция должна быть бесцветной (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. В делительную воронку помещают 20 мл субстанции, прибавляют 20 мл воды, встряхивают в течение 3 мин, оставляют раствор до разделения слоёв. Водный слой переносят в колбу для титрования, прибавляют 1–2 капли бромкрезолового пурпурного раствора 0,1 %. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 0,1 мл натрия гидроксида раствора 0,01 М или 0,6 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М.

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Раствор внутреннего стандарта. Диметоксиметан.

Испытуемый раствор. В колбу с притёртой пробкой помещают 20 мл субстанции и прибавляют 5 мкл раствора внутреннего стандарта.

Раствор сравнения А. В виалу помещают 2 мл этиленхлорида, немедленно закупоривают, прибавляют 20 мкл субстанции, взвешивают, прибавляют 20 мкл раствора внутреннего стандарта. Взвешивают.

Раствор сравнения Б. В виалу помещают 20 мл этиленхлорида, прибавляют 20 мкл субстанции. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора этиленхлоридом до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Используют готовый раствор стандартного образца для проверки пригодности (содержит примеси А и В).

Примечание

Примесь А: 1,1,3,3,3-пентафтор-2-(фторметокси)проп-1-ен, [58109-34-5].

Примесь В: 2-метокси-1,1,1,3,3,3-гексафторпропан, [13171-18-1].

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,32 мм, покрытая слоем поли(цианопропил)(3)(фенил)(3)(метил)(94)силоксана, 3 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:20; |  |
Скорость потока | 1 мл/мин; |  |
Объём пробы | 2 мкл. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °C
--- | --- | ---
Колонка | 0–10 | 40
| 10–26 | 40 → 200
| 26–40 | 200
Инжектор |  | 200
Детектор |  | 225

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения А, раствор сравнения Б и испытуемый раствор.

Перед инжектированием растворов сравнения промывка шприца осуществляется этиленхлоридом. Перед инжектированием испытуемого раствора промывка шприца осуществляется субстанцией.

Относительное время удерживания соединений. Севофлуран – 1 (около 6,6 минут); примесь А – около 0,78; примесь В – около 0,83; внутренний стандарт – около 1,35.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков используют хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к готовому стандартному образцу для проверки пригодности (содержит примеси А и В).

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и примеси В должно быть не менее 2,0.

Содержание каждой из примесей в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где 0,859 - плотность внутреннего стандарта;
1,52 - плотность севофлурана;
B1 - отношение площади пика примеси к площади пика внутреннего стандарта на хроматограмме испытуемого раствора;
F1 - фактор отклика на хроматограмме раствора сравнения А.

Фактор отклика (F1) вычисляют по формуле:

где B0 - отношение площади пика севофлурана к площади пика внутреннего стандарта на хроматограмме раствора сравнения А;
a1 - навеска внутреннего стандарта в растворе сравнения А, мг;
a2 - навеска субстанции в растворе сравнения А, мг.

Допустимое содержание примесей:

- примесь А – не более 0,0025%;

- примесь В – не более 0,01%;

- любая неидентифицированная примесь – не более 0,01%;

- сумма примесей – не более 0,03%.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (менее 0,0005 %).

Нелетучий остаток. Не более 0,01 %. Выпаривают 10 мл (точная навеска) субстанции на водяной бане досуха. Остаток не должен превышать 1,0 мг.

Вода. Не более 0,1 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 10 мл (точная навеска) субстанции.

Фториды. Не более 2,0 мкг/мл. Определение проводят методом потенциометрии. При проведении испытания используют пластиковую лабораторную посуду.

Буферный раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 55 г натрия хлорида, 0,5 г натрия цитрата, 350 мл воды. К полученному раствору осторожно прибавляют 75 г натрия гидроксида и перемешивают до растворения. Охлаждают до комнатной температуры и осторожно при перемешивании добавляют 225 мл уксусной кислоты ледяной. Раствор охлаждают до комнатной температуры. Прибавляют 300 мл изопропилового спирта, и доводят объём раствора водой до метки. рН раствора должен составлять 5,0–5,5.

Испытуемый раствор. В делительную воронку вместимостью 250 мл помещают 50 мл субстанции, прибавляют 50 мл воды, осторожно встряхивают в течение 3 мин. Раствор оставляют до разделения слоёв жидкостей. Водный слой отделяют. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25,0 мл верхнего водного слоя и доводят объём раствора буферным раствором до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,221 г (точная навеска) предварительно высушенного при 150 °С в течение 4 ч натрия фторида, прибавляют 20 мл воды. К полученному раствору прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 0,01 М, доводят объём раствора водой до метки. Срок годности – в пластиковом флаконе в холодильнике в течение 2 недель.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора водой до метки. 1 мл полученного раствора содержит около 0,2 мкг фторид-ионов.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора А и доводят объём раствора водой до метки. 1 мл полученного раствора содержит около 0,5 мкг фторид-ионов.

Стандартный раствор В. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл стандартного раствора А и доводят объём раствора водой до метки. 1 мл полученного раствора содержит около 2,0 мкг фторид-ионов.

Стандартный раствор Г. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора Б и доводят объём раствора водой до метки. 1 мл полученного раствора содержит около 5,0 мкг фторид-ионов.

Контрольный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мл воды и доводят объём раствора буферным раствором до метки.

Методика. Электрод соединяют с рН-метром и устанавливают прибор на измерения в мВ. В мерные колбы вместимостью 50 мл помещают по 25,0 мл испытуемого раствора, стандартного раствора А, стандартного раствора Б, стандартного раствора В, стандартного раствора Г и доводят объём растворов буферным раствором до метки. Каждый раствор переносят в химический стакан вместимостью 100 мл. В каждый раствор последовательно погружают фторселективный индикаторный электрод и хлорсеребряный электрод сравнения и при перемешивании магнитной мешалкой, покрытой тефлоном производят измерение разности потенциалов ионометром или рН-метром.

Строят калибровочный график зависимости разности потенциалов от логарифма концентрации фторид-ионов. По графику находят значение логарифма концентрации (lg С) для испытуемого раствора.

Концентрацию фторид-ионов в испытуемом растворе (С) в мкг/мл вычисляют по формуле:

где: х = lgС.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ГХ в условиях испытания «Родственные примеси».

Хроматографируют испытуемый раствор.

Содержание севофлурана C4H3F7O в субстанции в процентах (X) определяют расчётным методом:

где Σр – сумма примесей,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной светонепроницаемой упаковке (в воздухонепроницаемом контейнере из нержавеющей стали).

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0504 Сибутрамина гидрохлорид моногидрат

Сибутрамин
Sibutramini hydrochloridum monohydricum

Вводится впервые

##### Определение

(1RS)-N,N,3-триметил-1-[1-(4-хлорфенил)циклобутил]бутан-1-амина гидрохлорид моногидрат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % сибутрамина гидрохлорида C17H26ClN·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим или растворим в метаноле и диметилформамиде, умеренно или мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца сибутрамина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Угол вращения. От –0,1 ° до +0,1 ° (15 % раствор субстанции в этаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ
(ОФС «Газовая хроматография»).

Растворитель. Натрия гидроксида раствор 1 М—метанол для жидкостной хроматографии—метиленхлорид 5:50:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают по 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси 3, фармакопейного стандартного образца примеси 4, фармакопейного стандартного образца примеси 5 и фармакопейного стандартного образца примеси 6 (в виде гидрохлоридов), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 50 мг фармакопейного стандартного образца сибутрамина гидрохлорида, растворяют в стандартном растворе и доводят объём раствора стандартным раствором до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь 1: (1RS)-N,N,3-триметил-1-[1-фенилциклобутил]бутан-1-амин.

Примесь 2: N,N-диметил-1-[1-(4-хлорфенил)циклобутил]метанамин.

Примесь 3: (1RS)-N,N,3-триметил-1-[1-(2-хлорфенил)циклобутил] бутан-1-амин.

Примесь 4: (1RS)-N,N,3-триметил-1-[1-(3-хлорфенил)циклобутил] бутан-1-амин.

Примесь 5: (1RS)-N,N,3-триметил-1-[1-(4-хлорфенил)циклобутил] пентан-1-амин.

Примесь 6: (1RS)-N,3-диметил-1-[1-(4-хлорфенил)циклобутил]бутан-1-амин [168835-59-4].

Примесь 7: (1RS)-3-метил-1-[1-(4-хлорфенил)циклобутил]бутан-1-амин [84467-54-9].

Примесь 8: (1RS)-N,N-диметил-2-фенил-1-[1-(4-хлорфенил) циклобутил]этан-1-амин [1446140-91-5].

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 15 м × 0,5 мм, покрытая слоем поли(цианопропил)(50)(метил)(50)силоксана, 0,5 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | азот; |  |
Скорость потока | 7,5 мл/мин (устанавливают так, чтобы время удерживания пика сибутрамина было около 20 мин); |  |
Температура | Инжектор | 200 °С; |
| Колонка | 100 °С в течение 10 мин, 100 °С в течение 30 мин, подъём 1 °С/мин до 130 °С, 130 °С в течение 9 мин, подъём 5 °С/мин до 175 °С, выдержка 10 мин; 175 °С в течение 26,7 мин, подъём 1,5 °С/мин до 215 °С, выдержка 15 мин; |
Детектор | 250 °С; |  | Объём пробы

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Сибутрамин – 1 (около 20 мин); примесь 1 – около 0,33; примесь 2 – около 0,42; примесь 3 – около 0,73; примесь 4 – около 0,83; примесь 5 – около 1,14; примесь 6 – около 1,19; примесь 7 – около 1,45; примесь 8 – около 2,2.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси 3 и примеси 4 должно быть не менее 1,3.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- единичная идентифицированная примесь – не более 0,1 %;

- единичная неидентифицированная примесь – не более 0,1 %;

- сумма идентифицированных примесей – не более 0,3 %;

- сумма неидентифицированных примесей – не более 0,2 %.

Не учитывают пики менее 0,05 %.

Вода. От 4,5 % до 6,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 0,9 г натрия бутансульфоната в 675 мл воды, доводят значение рН до 3,00 фосфорной кислотой концентрированной, прибавляют 325 мл ацетонитрила и 10 мл тетрагидрофурана.

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 75 мг (точная навеска) 4-бромфенола, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле, прибавляют 10,0 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца сибутрамина гидрохлорида, растворяют в метаноле, прибавляют 10,0 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси 6, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и 50 мг фармакопейного стандартного образца сибутрамина гидрохлорида, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора, 10,0 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объём раствора метанолом до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 300 × 3,9 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 10 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 15 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика сибутрамина. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Сибутрамин – 1 (около 14,7 мин); внутренний стандарт – около 0,43; примесь 6 – около 0,9.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси 6 и сибутрамина должно быть не менее 1,4.

На хроматограмме стандартного раствора относительное стандартное отклонение отношения площади пика сибутрамина к площади пика внутреннего стандарта должно быть не более 1,0 % (6 введений).

Содержание сибутрамина гидрохлорида C17H26ClN·HCl в субстанции в процентах в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (X) вычисляют по формуле:

где B1 – отношение площади пика сибутрамина к площади пика внутреннего стандарта на хроматограмме испытуемого раствора;
B0 – отношение площади пика сибутрамина к площади пика внутреннего стандарта на хроматограмме стандартного раствора;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца сибутрамина гидрохлорида, мг;
P – содержание сибутрамина гидрохлорида моногидрата в фармакопейном стандартном образце сибутрамина гидрохлорида,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В герметично укупоренном упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0570 Силденафила цитрат

Силденафил
Sildenafili citras

Вводится впервые

##### Определение

1-Метил-5-{5-[(4-метилпиперазин-1-ил)сульфонил]-2-этоксифенил}-3-пропил-1,6-дигидро-7H-пиразоло[4,3-d]пиримидин-7-она 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоксилат (1:1).

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % силденафила цитрата C22H30N6O4S·C6H8O7 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Слегка гигроскопичен.

Растворимость. Мало растворим в метаноле и воде, практически нерастворим в гексане.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца силденафила цитрата.

##### Испытания

Родственные примеси

1. Примесь Е. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254, 2–10 мкм.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 32 %—спирт 96 %—этилацетат—метиленхлорид 1:20:30:50.

Растворитель. Аммиака раствор концентрированный 32 %—вода—метанол 5:25:75.

Испытуемый раствор. Растворяют 35 мг (точная навеска) субстанции в 2,0 мл растворителя.

Раствор стандартного образца примеси Е. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 7 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси Е (1H-имидазол, [288-32-4]), растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца примеси Е и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Смешивают 1,0 мл испытуемого раствора и 1,0 мл раствора стандартного образца примеси Е.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (175 мкг), раствора сравнения (0,175 мкг) и раствора для проверки пригодности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают, (предварительно насыщенную, в течение 1 ч), в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и выдерживают при температуре 100–105 °С в течение 15 мин. Пластинку обрабатывают парами йода до образования светло-коричневого окрашивания и просматривают в УФ-свете при 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы должны обнаруживаться две разделённые зоны адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по совокупности величины и интенсивности поглощения не должна превышать зону адсорбции примеси Е на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %).

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от света.

Буферный раствор. Растворяют 7 мл триэтиламина в 900 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,00. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—метанол—буферный раствор 170:250:580.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 35 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца силденафила цитрата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 35 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца силденафила цитрата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 3 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для идентификации примеси В. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 70 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 1,0 мл смеси муравьиная кислота безводная—водорода пероксид 1:2, выдерживают в течение 10 мин и доводят объём раствора ПФ до метки (раствор содержит силденафила цитрат и примесь В).

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора силденафила цитрата и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А:
1-метил-5-{5-[(4-метилпиперазин-1-ил)сульфонил]-2-этоксифенил}-3-(2-метилпропил)-1,6-дигидро-7H-пиразоло[4,3-d]пиримидин-7-он
[1391053-95-4].

Примесь В:
1-метил-4-[3-(1-метил-7-оксо-3-пропил-6,7-дигидро-1H-пиразоло[4,3-d]пиримидин-5-ил)-4-этоксибензолсульфонил]пиперазин
1-оксид [1094598-75-0].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,9 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии (С18), 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 290 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика силденафила. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца силденафила цитрата, раствор стандартного образца примеси А, раствор для идентификации примеси В и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Силденафил ˗ 1 (около 7 мин), примесь А ˗ около 1,7; примесь В ˗ около 1,2;

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А и В используют хроматограммы раствора стандартного образца примеси А и раствора для идентификации примеси В.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для идентификации примеси В разрешение (RS) между пиками силденафила и примесью В должно быть не менее 2,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать 0,75 площади основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца силденафила цитрата (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца силденафила цитрата (не более 0,1 %);

- суммарная площадь пиков всех неидентифицированных примесей (кроме примеси А) не должна превышать более чем в 1,5 раза площадь основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца силденафила цитрата (не более 0,3 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать более чем в 2,5 раза площадь основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца силденафила цитрата (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 2,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 35 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца силденафила цитрата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 35 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца силденафила цитрата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца силденафила цитрата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца силденафила цитрата относительное стандартное отклонение площади пика силденафила должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание силденафила цитрата C22H30N6O4S·C6H8O7 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика силденафила на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика силденафила на хроматограмме раствора стандартного образца силденафила цитрата;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца силденафила цитрата, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание силденафила цитрата в фармакопейном стандартном образце силденафила цитрата,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0176 Симвастатин (Simvastatinum)

Взамен ФС.2.1.0176.18

##### Определение

[(1S,3R,7S,8S,8aR)-8-{2-[(2R,4R)-4-Гидрокси-6-оксооксан-2-ил]этил}-3,7-диметил-1,2,3,7,8,8a-гексагидронафталин-1-ил](2,2-диметилбутаноат).

Содержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % симвастатина C25H38O5 в пересчёте на сухое вещество.

* Может быть добавлен подходящий антиоксидант.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в метиленхлориде, легко растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца симвастатина.

##### Испытания

Удельное вращение. От +285 до +300 в пересчёте на сухое вещество (0,5 % раствор субстанции в ацетонитриле, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность. Раствор 0,2 г субстанции в 20 мл метанола должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Фосфорной кислоты раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл вносят 1,0 мл фосфорной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—фосфорной кислоты раствор 500:500.

Подвижная фаза Б (ПФБ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл вносят 1,0 мл фосфорной кислоты концентрированной и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Растворитель. Раствор калия дигидрофосфата с концентрацией 1,4 г/л доводят до рН 4,0 фосфорной кислотой концентрированной. Смешивают 40 объёмов полученного раствора и 60 объёмов ацетонитрила.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 75 мг (точная навеска) субстанции растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 40 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 40 мг (точная навеска) стандартного образца симвастатина, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 1 мг фармакопейного стандартного образца симвастатина, 1 мг фармакопейного стандартного образца примеси Е и 1 мг фармакопейного стандартного образца примеси F в 50 мл растворителя.

Примечание

Примесь А:
(3R,5R)-3,5-дигидрокси-7-{(1S,2S,6R,8S,8aR)-8-[(2,2-диметилбутаноил)окси]-2,6-диметил-1,2,6,7,8,8a-гексагидронафталин-1-ил}гептановая кислота
[121009-77-6].

Примесь В:
[(1S,3R,7S,8S,8aR)-8-{2-[(2R,4R)-4-(ацетилокси)-6-оксооксан-2-ил]этил}-3,7-диметил-1,2,3,7,8,8a-гексагидронафталин-1-ил](2,2-диметилбутаноат)
[145576-25-6].

Примесь С:
[(1S,3R,7S,8S,8aR)-3,7-диметил-8-{2-[(2R)-6-оксо-3,6-дигидро-2H-пиран-2-ил]этил}-1,2,3,7,8,8a-гексагидронафталин-1-ил](2,2-диметилбутаноат)
[210980-68-0].

Примесь D:
[(2R,4R)-2-{2-[(1S,2S,6R,8S,8aR)-8-[(2,2-диметилбутаноил)окси]-2,6-диметил-1,2,6,7,8,8a-гексагидронафталин-1-ил]этил}-6-оксооксан-4-ил]{(3R,5R)-7-[(1S,2S,6R,8S,8aR)-3,5-дигидрокси-8-[(2,2-диметилбутаноил)окси]-2,6-диметил-1,2,6,7,8,8a-гексагидронафталин-1-ил]гептаноат}
[476305-24-5].

Примесь Е:
[(1S,3R,7S,8S,8aR)-8-{2-[(2R,4R)-4-гидрокси-6-оксооксан-2-ил]этил}-3,7-диметил-1,2,3,7,8,8a-гексагидронафталин-1-ил][(2S)-2-метилбутаноат]
[75330-75-5].

Примесь F:
[(1S,3R,7S,8S,8aR)-8-{2-[(2R,4R)-4-гидрокси-6-оксооксан-2-ил]этил}-3,7-диметил-1,2,3,7,8,8a-гексагидронафталин-1-ил][(2R)-2-метилбутаноат]
[79952-44-6].

Примесь G:
[(1S,3R,7S,8S,8aR)-8-{2-[(2R,4R)-4-гидрокси-6-оксооксан-2-ил]этил}-3,7-диметил-1,2,3,7,8,8a-гексагидронафталин-1-ил](2,2-диметилбут-3-еноат)
[1449248-72-9].

Хроматографические условия

Колонка | 33 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 3,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 238 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–4,5 | 100 | 0
4,5–4,6 | 100 → 95 | 0 → 5
4,6–8,0 | 95 → 25 | 5 → 75
8,0–11,5 | 25 | 75
11,5–11,6 | 25 → 100 | 75 → 0
11,6–13 | 100 | 0

Хроматографируют испытуемый раствор А и растворы сравнения А, Б и раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Относительное время удерживания соединений. Симвастатин-1 (около 2,6 мин); примесь А – около 0,45–0,5 мин; примеси Е и F – около 0,6 мин; примесь G – около 0,8 мин; примеси B и C – около 2,4 мин; примесь D – около 3,4–3,8 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение ® между объединённым пиком ловастатина и эпиловастатина и пиком симвастатина должно быть не менее 4,0.

На хроматограмме раствора сравнения Б:

- относительное стандартное отклонение площади пика симвастатина должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора А:

- сумма площадей пиков примесей E и F не должна превышать двукратную площадь пика симвастатина на хроматограмме раствора сравнения А (не более 1,0 %);

- сумма площадей пиков примесей В и С не должна превышать 1,6 площади пика симвастатина на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,8 %);

- площадь каждой из примесей A, D и G не должна превышать 0,8 площади пика симвастатина на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,4 %);

- площадь пика любой неидентифицированной примеси не должна превышать 0,2 площади пика симвастатина на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков любых примесей, кроме суммы площадей пиков примесей E и F, не должна превышать двукратную площадь пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,1 площади пика симвастатина на хроматограмме раствора сравнения А (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Сушат 1 г субстанции (точная навеска) при температуре 60 °С при остаточном давлении не более 670 Ра.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Испытание проводят методом ВЭЖХ по методике, описанной в разделе «Родственные примеси».

Хроматографируют испытуемый раствор Б и раствор сравнения Б.

Содержание симвастатина в процентах (Х) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика симвастатина на хроматограмме испытуемого раствора Б;
S0 - площадь пика симвастатина на хроматограмме раствора сравнения Б;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца симвастатина, мг;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце симвастатина,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте. Если антиоксидант отсутствует, хранить в герметично укупоренной упаковке под азотом.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0248 Симетикон (Simeticonum)

Взамен ФС.2.1.0248.22

##### Определение

Смесь α-(Триметилсилил)-ω-метилполи[окси(диметилсилилен)] и кремния диоксида.

Содержит не менее 90,5 % и не более 99,0 % полидиметилсилоксана [-(СH3)2SiO-] n, и не менее 4,0 % и не более 7,0 % кремния диоксида SiO2 (при 20<n<400).

##### Свойства

Описание. Вязкая, серовато-белого цвета опалесцирующая жидкость.

Растворимость. Очень мало растворим или практически нерастворим в этаноле, практически нерастворим в воде и метаноле, частично смешивается с этилацетатом, метиленхлоридом и толуолом.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в виде жидкой плёнки, помещённой между пластинами из натрия хлорида, в области от 4000 см–1 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен иметь максимумы поглощения при 2964 см–1, 2905 см–1, 1412 см–1, 1260 см–1 и 1020 см–1.

2. Качественная реакция. В пробирку А помещают 0,5 г субстанции, в пробирку Б помещают 1 мл хромотроповой кислоты натриевой соли раствора в серной кислоте. Пробирку А закрывают крышкой с газоотводной трубкой, конец которой помещают в пробирку Б и медленно нагревают до выделения белых паров, которые пропускают через раствор в пробирке Б. Пробирку Б встряхивают в течение 10 с и нагревают на водяной бане в течение 5 мин; окраска раствора в пробирке Б должна приобрести фиолетовое окрашивание.

- Хромотроповой кислоты натриевой соли раствор в серной кислоте. Растворяют 0,1 г хромотроповой кислоты натриевой соли в 100 мл серной кислоты концентрированной.

3. Качественная реакция. Остаток, полученный в испытании «Количественное определение. Кремний», должен давать характерную реакцию на силикаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Кислотность. Раствор 2 г субстанции в 25 мл смеси этанол—эфир 1:1, нейтрализованной 0,2 мл бромтимолового синего раствором 0,05 %, должен окрашиваться в голубой цвет при прибавлении не более 3,0 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида.

Противопенная активность. Не более 15 с.

Испытуемый раствор. В колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мл метилэтилкетона, прибавляют 0,25 г субстанции, предварительно нагретой до температуры не более 50 °C, и встряхивают.

Пенообразующий раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 5 г натрия докузата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. При необходимости раствор нагревают до температуры 50 °C.

В цилиндр вместимостью 250 мл и диаметром 5 см помещают 1,0 мл испытуемого раствора, прибавляют 100 мл пенообразующего раствора, плотно закрывают и закрепляют на устройстве, отвечающему условиям испытания.

Условия испытания

- Количество колебаний: 250–300 колебаний/мин;

- Угол колебания: около 10°;

- Радиус колебания: около 10 см.

Встряхивают в течение 10 с, затем отмечают время между окончанием встряхивания и исчезновением пены на минимальной площади поверхности жидкости.

Минеральные масла. Флуоресценция 2 г субстанции, измеренная на спектрофотометре при длине волны 365 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать флуоресценцию раствора сравнения.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг хинина сульфата, растворяют в 80 мл серной кислоты раствора 0,005 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора серной кислоты раствором 0,005 М до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора серной кислоты раствором 0,005 М до метки.

Фенилированные соединения. Скорректированная оптическая плотность не должна превышать 0,2 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. Растворяют 5 г субстанции в 10 мл циклогексана.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в диапазоне волн от 200 до 350 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.

Скорректированную оптическую плотность (Х) вычисляют по формуле:

где A0 – оптическая плотность испытуемого раствора в максимуме поглощения в диапазоне волн от 250 до 270 нм;
A1 – оптическая плотность испытуемого раствора при длине волны 300 нм.

Летучие вещества. Не более 1,0 %. Помещают 1,0 г (точная навеска) субстанции в тигель диаметром 60 мм и глубиной 10 мм и прокаливают при температуре 150 °C в течение 2 ч.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

1. Полидиметилсилоксан. Определение проводят методом ИК-спектрометрии (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»).

Испытуемый раствор. Помещают 50 мг (точная навеска) субстанции в пробирку вместимостью 120 мл, прибавляют 25,0 мл толуола, перемешивают, прибавляют 50 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 %, плотно укупоривают и встряхивают в течение 5 мин. Содержимое пробирки переносят в делительную воронку и выдерживают до разделения фаз. В пробирку, содержащую 0,5 г натрия сульфата безводного помещают 5,0 мл верхнего слоя, перемешивают, плотно укупоривают, встряхивают в течение 5 мин и центрифугируют со скоростью 6000 об/мин в течение 5 мин.

Раствор стандартного образца полидиметилсилоксана. Помещают 0,2 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца полидиметилсилоксана в колбу вместимостью 200 мл, прибавляют 100,0 мл толуола и перемешивают в течение 5 мин. В пробирку вместимостью 120 мл помещают 25,0 мл полученного раствора, прибавляют 50 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 %, плотно укупоривают и встряхивают в течение 5 мин. Содержимое пробирки переносят в делительную воронку и выдерживают до разделения фаз. В пробирку, содержащую 0,5 г натрия сульфата безводного помещают 5,0 мл верхнего слоя, перемешивают, плотно укупоривают, встряхивают в течение 5 мин и центрифугируют со скоростью 6000 об/мин в течение 5 мин.

Раствор сравнения. В пробирку помещают 10 мл толуола, прибавляют 1 г натрия сульфата безводного, перемешивают, плотно укупоривают, встряхивают в течение 5 мин и центрифугируют со скоростью 6000 об/мин в течение 5 мин.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора и раствора стандартного образца полидиметилсилоксана на ИК-спектрометре при длине волны 1260 см–1 в кювете с толщиной слоя 0,5 мм.

Содержание полидиметилсилоксана n в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где А1 – оптическая плотность испытуемого раствора;
А0 – оптическая плотность раствора стандартного образца полидиметилсилоксана;
C1 – концентрация испытуемого раствора, мг/мл;
C0 – концентрация раствора стандартного образца полидиметилсилоксана, мг/мл.

2. Кремния диоксид. Нагревают 20 мг субстанции в токе азота со скоростью потока 200 мл/мин до 800 °C, со скоростью повышения температуры 20 °C/мин; полученный остаток взвешивают.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0571 Ситаглиптина фосфат моногидрат

Ситаглиптин
Sitagliptini phosphas monohydricus

Вводится впервые

##### Определение

(3R)-3-Амино-1-[3-(трифторметил)-5,6-дигидро[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиразин-7(8H)-ил]-4-(2,4,5-трифторфенил)бутан-1-она фосфат (1:1) моногидрат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % ситаглиптина фосфата C16H15F6N5O·H3PO4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Растворим в воде, мало растворим в метаноле, очень мало растворим в этаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца ситаглиптина фосфата моногидрата.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика ситаглиптина на хроматограмме раствора стандартного образца ситаглиптина фосфата моногидрата (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Раствор 0,2 г субстанции в 5,0 мл воды должен давать характерную реакцию А на фосфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Энантиомерная чистота. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Вода для хроматографии—диэтиламин—гептан—этанол 1:1:400:600.

Растворитель. Вода—метанол 1:9.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают около 80 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 8 мг фармакопейного стандартного образца ситаглиптина, содержащего примесь А, в 1,0 мл растворителя.

Примечание

Примесь А: (3S)-3-амино-1-[3-(трифторметил)-5,6-дигидро[1,2,4] триазоло[4,3-a]пиразин-7(8H)-ил]-4-(2,4,5-трифторфенил)бутан-1-он [823817-55-6].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель модифицированный трис(3,5-диметилфенилкарбамоил)амилозой для хиральной хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 268 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,6-кратное от времени удерживания пика ситаглиптина. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ситаглиптин – 1 (около 15 мин); примесь А – около 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси A используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу ситаглиптина, содержащего примесь А.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и ситаглиптина должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. Площадь пика примеси А не должна превышать пятикратную площадь пика ситаглиптина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее площади пика ситаглиптина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,1 %).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 1,36 г калия дигидрофосфата в воде, доводят значение рН до 2,0 фосфорной кислотой концентрированной, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 150:850.

Растворитель. Ацетонитрил—фосфорная кислота разведённая 0,1 % 5:95.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают около 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. К 1 мг стеарилфумарата натрия и 10 мг субстанции прибавляют 1 мл воды, герметично закрывают, термостатируют при 80 °С в течение 30 ч. Содержимое разбавляют растворителем до 100 мл, перемешивают в течение 1 ч, центрифугируют и используют прозрачный супернатант.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель цианосилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 205 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 5,5-кратное от времени удерживания пика ситаглиптина. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ситаглиптин – 1 (около 5,5 мин); фумаратный аддукт ситаглиптина – около 1,2.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками ситаглиптина и фумаратного аддукта ситаглиптина должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика ситаглиптина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика ситаглиптина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика ситаглиптина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. От 3,3 % до 3,7 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции и платиновый тигель.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца ситаглиптина фосфата моногидрата. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 25 мг (точная навеска) стандартного образца ситаглиптина фосфата моногидрата, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

- Время хроматографирования: 2-кратное от времени удерживания пика ситаглиптина.

Хроматографируют раствор стандартного образца ситаглиптина фосфата моногидрата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца ситаглиптина фосфата моногидрата относительное стандартное отклонение площади пика ситаглиптина должно быть не более 0,73 % (6 определений).

Содержание ситаглиптина фосфата C16H15F6N5O·H3PO4 в субстанции в процентах (Х) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика ситаглиптина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика ситаглиптина на хроматограмме раствора стандартного образца ситаглиптина фосфата моногидрата;
а1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска стандартного образца ситаглиптина фосфата моногидрата, мг;
P – содержание ситаглиптина фосфата в стандартном образце ситаглиптина фосфата моногидрата,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

Не требует особых условий.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0572 Сорафениба тозилат

Сорафениб
Sorafenibi tosilas

Вводится впервые

##### Определение

N-Метил-4-[4-({[3-(трифторметил)-4-хлорфенил]карбамоил}амино)фенокси]пиридин-2-карбоксамида 4-метилбензолсульфонат.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % сорафениба тозилата C21H16ClF3N4O3·C7H8O3S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или желтовато-белый или коричневато-белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в диметилформамиде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца сорафениба тозилата.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в 50 мл метанола и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 400 нм (в кювете толщиной 1 см) должен иметь максимум при 264 нм и минимум при 238 нм.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие сорафениба тозилат или его примеси, используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 1,36 г калия дигидрофосфата в воде, доводят значение рН до 4,5 фосфорной кислотой концентрированной, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор—ацетонитрил 450:550.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. К 600 мл смеси спирт 96 %—ацетонитрил (2:3) прибавляют 200 мл воды, предварительно доведённой фосфорной кислотой концентрированной до значения рН 2,40.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 40 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца сорафениба тозилата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца сорафениба тозилата, растворяют в растворителе, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 15 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси С. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси С (3-(трифторметил)-4-хлоранилин [320-51-4]), прибавляют 80 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане до растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца сорафениба тозилата, прибавляют 8 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 15 мин, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 1,0 мл раствора стандартного образца примеси С и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца сорафениба тозилата и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Температура образца | 10 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 235 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 100 | 0
10–20 | 100 → 45 | 0 → 55
20–25 | 45 | 55
25–35 | 45 → 100 | 55 → 0
35–45 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца сорафениба тозилата и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Сорафениб – 1 (около 10 мин); примесь С – около 0,6.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика сорафениба должно быть не менее 10,0.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси С и сорафениба должно быть не менее 5,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца сорафениба тозилата:

- фактор асимметрии пика (AS) сорафениба должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика сорафениба должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика сорафениба на хроматограмме раствора стандартного образца сорафениба тозилата;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца сорафениба тозилата, мг;
P - содержание сорафениба тозилата в фармакопейном стандартном образце сорафениба тозилата,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь С – не более 0,12 %;

- любая примесь – не более 0,1%;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции и, в качестве растворителя, метанол.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,4 г (точная навеска) предварительно растёртой субстанции в 40 мл уксусной кислоты ледяной и 160 мл пропионового ангидрида, перемешивают в течение 5 мин, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 30 мин, охлаждают до комнатной температуры и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 63,70 мг сорафениба тозилата C21H16ClF3N4O3·C7H8O3S.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0573 Соталола гидрохлорид

Соталол
Sotaloli hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

N-{4-[(1RS)-1-Гидрокси-2-(пропан-2-иламино)этил]фенил} метансульфонамида гидрохлорид.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % соталола гидрохлорида C12H20N2O3S·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Легко (медленно) растворим в воде, растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца соталола гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Угол вращения. От –0,10° до +0,10° (5 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Опалесценция раствора 1,0 г субстанции в 10 мл воды не должна превышать эталон сравнения III (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 4,0 до 5,0 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 2,0 г натрия октансульфоната, растворяют в 790 мл воды, доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 3,0 и прибавляют 210 мл ацетонитрила.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20,0 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси В. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 8,0 мг фармакопейного стандартного образца соталола гидрохлорида примеси В, растворяют в ПФ, доводят объём раствора ПФ до метки и перемешивают.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора ПФ до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 3,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора ПФ до метки и перемешивают.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси В, доводят объём раствора ПФ до метки и перемешивают.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,5 мл раствора стандартного образца примеси В, доводят объём раствора ПФ до метки и перемешивают. К 1,0 мл полученного раствора прибавляют 1,0 мл раствора сравнения А.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора ПФ до метки и перемешивают.

Примечание

Примесь В: N-{4-[1-оксо-2-(пропан-2-иламино)этил]фенил} метансульфонамид [60735-85-5].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 228 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,5-кратное от времени удерживания пика соталола. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения А, раствор сравнения Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Соталол – 1 (около 12 мин); примесь В – около 1,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси B используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора сравнения Б.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (Rs) между пиками соталола и примеси В должно быть не менее 4,0;

- фактор асимметрии пика (AS) соталола должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика соталола должно быть не более 5 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику соталола, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика соталола должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси В не должна превышать 0,25 площади пика соталола на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика соталола на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,3 %), и площадь только одного такого пика может превышать 0,3 площади пика соталола на хроматограмме раствора сравнения А (0,1 %);

- сумма площадей пиков всех неидентифицированных примесей не должна превышать 1,65 площади пика соталола на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,17 площади пика соталола на хроматограмме раствора сравнения А (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 2), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 2,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 10 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 40 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл хлорной кислоты раствора 0,1 М соответствует 30,88 мг соталола гидрохлорида C12H20N2O3S·HCl.

Примечание – Во избежание перегрева во время титрования испытуемый раствор тщательно перемешивают и прекращают титрование сразу после достижения конечной точки титрования.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0177 Спиронолактон (Spironolactonum)

##### Определение

(2'R)-7α-(Ацетилсульфанил)-3',4'-дигидро-5'H-спиро[андрост-4-ен-17,2'-фуран]-3,5'-дион.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % спиронолактона C24H32O4S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или желтовато-белый порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца спиронолактона.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, растворы наносят на диски калия бромида, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимум поглощения при 238 нм (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. К 0,01 г субстанции прибавляют 2 мл серной кислоты раствора 50 % и встряхивают. Раствор должен окраситься в оранжевый цвет с интенсивной желтовато-зелёной флуоресценцией. Осторожно нагревают раствор; окраска должна измениться с оранжевой на интенсивно красную и должен выделиться сероводород, вызывающий почернение свинцово-ацетатной бумаги. Прибавляют 10 мл воды; должно появиться зелёно-жёлтое окрашивание с флуоресценцией или должен выпасть осадок.

##### Испытания

Удельное вращение. От –41 до –46 ° в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в этаноле 96 %, ОФС «Оптическое вращение»).

Меркаптосоединения. Встряхивают 2,0 г субстанции с 20 мл воды в течение 1 мин и фильтруют. К 10 мл фильтрата прибавляют 0,05 мл 0,01 М йода раствора и 0,1 мл крахмала раствора 0,1 % и перемешивают; должно появиться голубое окрашивание.

Хром. Не более 0,005 %.

Раствор сравнения. В цилиндр помещают 0,5 мл свежеприготовленного раствора калия бихромата (концентрация 28,3 мг/л), 10 мл воды и перемешивают. Прибавляют 1 мл серной кислоты разведённой 16 %, выдерживают до комнатной температуры, доводят объём раствора водой до 20 мл и прибавляют 0,5 мл раствора дифенилкарбазида.

Помещают 0,2 г субстанции в платиновый тигель, прибавляют 1,0 г калия карбоната и 0,3 г калия нитрата. Осторожно нагревают до расплавления и прокаливают при температуре от 600 до 650 °С до сгорания углерода. Полученный остаток охлаждают, растворяют при осторожном нагревании в 10 мл воды, фильтруют и доводят объём раствора водой до 20,0 мл. В цилиндр помещают 10 мл полученного раствора, прибавляют 0,5 г мочевины и затем серной кислоты разведённой 16 % до получения кислой реакции среды (по лакмусовой индикаторной бумаге). После прекращения газовыделения прибавляют 1 мл серной кислоты разведённой 16 %, выдерживают до комнатной температуры, доводят объём раствора водой до 20 мл и прибавляют 0,5 мл раствора дифенилкарбазида. Интенсивность окраски полученного раствора не должна превышать интенсивность окраски раствора сравнения.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Растворы готовятся непосредственно перед использованием.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—тетрагидрофуран—вода 80:180:740.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 62,5 мг субстанции растворяют в 2,5 мл тетрагидрофурана и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного образца канренона ((2'R)-7α-3',4'-дигидро-5'H-спиро[андрост-4,6-диен-17,2'-фуран]-3,5'-дион [976-71-6)]), растворяют в 1 мл тетрагидрофурана и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения В. В мерную колбу объёмом 100 мл помещают 1 мл раствора сравнения Б и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы 1. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл испытуемого раствора и 1 мл раствора сравнения Б и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы 2.В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Скорость потока | 1,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 и 283 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания основного пика. |

Хроматографируют растворы для проверки пригодности хроматографической системы 1 (детектирование при 283 нм) и 2 (детектирование при 254 нм), растворы сравнения А (детектирование при 254 нм) и В (детектирование при 283 нм), а также испытуемый раствор (детектирование при 254 и 283 нм).

Относительное время удерживания соединений. Спиронолактон – 1 (около 30 мин); канренон – около 1,2.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы 1 разрешение (RS) между пиками канренона и спиронолактона должно быть не менее 1,4.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы 2 отношение сигнал/шум (S/N)для пика спиронолактона должно быть не менее 6.

На хроматограмме раствора сравнения А относительное стандартное отклонение площади пика спиронолактона должно быть не более 5 % (6 введений).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика канренона не должна превышать 0,3 площади пика спиронолактона на хроматограмме раствора сравнения В (не более 0,3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,3 площади пика спиронолактона на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,3 %);

- сумма площадей пиков примесей, определённых при двух волнах детектирования, должна быть не более 1,0 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,05 г (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 238 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.

Содержание спиронолактона C24H32O4S в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
а - навеска субстанции, г;
470 - удельный показатель поглощения спиронолактона ();
W - потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0178 Спирт этиловый 40%, 70%, 90%

Этанол 40%, 70%, 90%
Ethanolum 40%, 70%, 90%

Взамен ФС.2.1.0178.18

##### Определение

Этанол.

Смесь этанола с водой.

Спирт этиловый 40% содержит этанол С2Н6О от 39,4% до 40,7% (о/о), от 32,8% до 33,9% (м/м);

Спирт этиловый 70% содержит этанол С2Н6О от 69,8% до 71,0% (о/о), от 62,2% до 63,5% (м/м);

Спирт этиловый 90% содержит этанол С2Н6О от 89,8% до 91,0% (о/о), от 85,4% до 86,9% (м/м).

##### Свойства

Описание. Прозрачная бесцветная подвижная жидкость с характерным запахом.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Смешивают 2 мл субстанции с 0,5 мл уксусной кислоты ледяной и 1 мл серной кислоты концентрированной и нагревают до кипения; должен появиться запах этилацетата.

2. Качественная реакция. Смешивают 0,5 мл субстанции с 5 мл натрия гидроксида раствора 10%, прибавляют 2 мл йода раствора 0,05 М; должен появиться запах йодоформа и в течение 30 мин образоваться жёлтый осадок.

- Для получения спирта этилового 40%, 70% и 90% из фармацевтической субстанции спирт этиловый 95%, 96% необходимо пользоваться алкоголеметрическими таблицами.

##### Испытания

Плотность. (ОФС «Плотность», метод 1).

Спирт этиловый 40%. От 0,949 до 0,947 г/см3, что соответствует содержанию С2Н6О 39,4–40,7% (о/о).

Спирт этиловый 70%. От 0,886 до 0,883 г/см3, что соответствует содержанию С2Н6О 69,8–71,0% (о/о).

Спирт этиловый 90%. От 0,830 до 0,826 г/см3, что соответствует содержанию С2Н6О 89,8–91,0% (о/о).

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0036 Спирт этиловый 95 %, 96 %

Этанол 95 %, 96 %
Ethanolum 95 %, 96 %

Взамен ФС.2.1.0036.15

##### Определение

Этанол.

Смесь этанола с водой.

Спирт этиловый 95 % содержит этанол С2Н6О от 94,9 % до 96,0 % (о/о), от 92,3 % до 93,8 % (м/м);

Спирт этиловый 96 % содержит этанол С2Н6О от 95,1 % до 96,9 % (о/о), от 92,6 % до 95,2 % (м/м).

##### Свойства

Описание. Прозрачная бесцветная подвижная жидкость с характерным запахом.

Растворимость. Смешивается с водой, хлороформом, ацетоном и глицерином во всех отношениях.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Смешивают 2 мл субстанции с 0,5 мл уксусной кислоты ледяной и 1 мл серной кислоты концентрированной и нагревают до кипения; должен появиться запах этилацетата.

2. Качественная реакция. Смешивают 0,5 мл субстанции с 5 мл натрия гидроксида раствора 10 %, прибавляют 2 мл йода раствора 0,05 М; должен появиться запах йодоформа и в течение 30 мин образоваться жёлтый осадок.

##### Испытания

Плотность. Спирт этиловый 95 %: от 0,808 до 0,812 г/см3 (при 20 °С, ОФС «Плотность», метод 1).

Спирт этиловый 96 %: от 0,804 до 0,811 г/см3 (при 20 °С, ОФС «Плотность», метод 1).

Прозрачность. Смесь равных объёмов субстанции и воды должна быть прозрачной (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность. Субстанция должна быть бесцветной (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Оптическая плотность. Оптическая плотность субстанции, измеренная в области длин волн от 235 до 340 нм в кювете с толщиной слоя 5 см относительно воды, не должна превышать 0,40 при 240 нм, 0,30 – между 250 и 260 нм и 0,10 – между 270 и 340 нм (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр должен представлять собой постепенно снижающуюся кривую без пиков и плеч.

Кислотность или щёлочность. К 20 мл субстанции прибавляют 25 мл свежепрокипячённой и охлаждённой воды и 0,1 мл 1 % раствора фенолфталеина. Раствор должен оставаться бесцветным и окрашиваться в розовый цвет, устойчивый в течение 30 с, при прибавлении не более 0,2 мл натрия гидроксида раствора 0,05 М.

Хлориды. Не более 0,001 % (ОФС «Хлориды»). Доводят 6 мл субстанции водой до 30 мл.

Сульфаты. Не более 0,005 % (ОФС «Сульфаты»). Для определения используют раствор, приготовленный в испытании «Хлориды».

Тяжёлые металлы. Не более 0,0005 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 1). Для определения используют раствор, приготовленный в испытании «Хлориды».

Метанол, альдегиды, бензол и другие летучие соединения. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор А. Испытуемая субстанция.

Испытуемый раствор Б. К 500 мл испытуемой субстанции прибавляют 150 мкл 4-метилпентан-2-ола.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 50 мл, содержащую около 30 мл испытуемой субстанции, помещают 100 мкл метанола и доводят объём раствора испытуемой субстанцией до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём испытуемой субстанцией до метки.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл, содержащую около 30 мл испытуемой субстанции, помещают 50 мкл метанола, 50 мкл ацетальдегида и доводят объём раствора испытуемой субстанцией до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл, содержащую около 5 мл испытуемой субстанции, помещают 100 мкл полученного раствора и доводят объём испытуемой субстанцией до метки.

Стандартный раствор В. В мерную колбу вместимостью 50 мл, содержащую около 30 мл испытуемой субстанции, помещают 150 мкл ацеталя и доводят объём раствора испытуемой субстанцией до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл, содержащую около 5 мл испытуемой субстанции, помещают 100 мкл полученного раствора и доводят объём испытуемой субстанцией до метки.

Стандартный раствор Г. В мерную колбу вместимостью 100 мл, содержащую около 50 мл испытуемой субстанции, помещают 100 мкл бензола и доводят объём раствора испытуемой субстанцией до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл, содержащую около 30 мл испытуемой субстанции, помещают 100 мкл полученного раствора и доводят объём испытуемой субстанцией до метки.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,32 мм, покрытая слоем поли(цианопропил)(3) (фенил)(3)(метил)(94)силоксана, 1,8 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Линейная скорость | 35 см/с; |  |
Деление потока | 1:20; |  |
Объём пробы | 1 мкл. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °C
--- | --- | ---
Колонка | 0–12 | 40
| 12–32 | 40 → 240
| 32–42 | 240
Инжектор |  | 200
Детектор |  | 280

Хроматографируют стандартные растворы А, Б, В, Г и испытуемые растворы А и Б.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора Б разрешение (R) между пиками ацетальдегида и метанола должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей

Метанол. На хроматограмме испытуемого раствора А площадь пика метанола не должна превышать 0,5 площади пика метанола на хроматограмме стандартного раствора А (не более 200 ppm о/о).

Ацетальдегид и ацеталь. Не более 10 ppm (о/о) в пересчёте на ацетальдегид. Суммарное содержание ацетальдегида С2Н4O и ацеталя С6Н14О2 в субстанции в ppm (Х) вычисляют по формуле:

где A1 – площадь пика ацетальдегида на хроматограмме испытуемого раствора А;
A0 – площадь пика ацетальдегида на хроматограмме стандартного раствора Б;
С1 – площадь пика ацеталя на хроматограмме испытуемого раствора А;
С0 – площадь пика ацеталя на хроматограмме стандартного раствора В;
44,05 – молекулярная масса ацетальдегида;
118,17 – молекулярная масса ацеталя.

Бензол. Не более 2 ppm (о/о). Содержание бензола С6Н6 в субстанции в ppm (Х) вычисляют по формуле:

где B1 – площадь пика бензола на хроматограмме испытуемого раствора А;
B0 – площадь пика бензола на хроматограмме стандартного раствора Г.

При необходимости подлинность бензола может быть подтверждена с использованием другой подходящей хроматографической системы (неподвижная фаза с другой полярностью).

Сумма других примесей. На хроматограмме испытуемого раствора Б сумма площадей пиков других примесей не должна превышать площадь пика 4-метилпентан-2-ола на хроматограмме испытуемого раствора Б (не более 300 ppm).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,03 площади пика 4-метилпентан-2-ола на хроматограмме испытуемого раствора Б (менее 9 ppm).

Фурфурол. В градуированный цилиндр с притёртой пробкой помещают 10 мл субстанции, прибавляют 0,5 мл свежеперегнанного анилина, 2 мл ледяной уксусной кислоты, закрывают пробкой и перемешивают. Через 20 мин смесь должна оставаться бесцветной.

Восстанавливающие вещества

Эталонный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мл кобальта хлорида раствора 5 %, прибавляют 7 мл калия дихромата раствора 0,02 % и доводят объём раствора водой до метки.

В предварительно промытый испытуемой субстанцией цилиндр с притёртой пробкой помещают 50 мл субстанции и погружают цилиндр на 10 мин в водяную баню с температурой 15 °С таким образом, чтобы уровень воды в бане был выше уровня субстанции в цилиндре. Прибавляют 1 мл калия перманганата раствора 0,02 %, закрывают цилиндр пробкой, перемешивают и вновь погружают в баню. При стоянии красно-фиолетовая окраска смеси постепенно изменяется, но не должна достигнуть окраски эталонного раствора в течение 20 мин.

Нелетучие вещества. Не более 0,01 %. На водяной бане выпаривают досуха 100 мл субстанции и сушат при температуре 102,5±2,5 °С до постоянной массы; остаток не должен превышать 10 мг.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, вдали от огня, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0037 Стрептомицина сульфат

Стрептомицин
Streptomycini sulfas

Взамен ФС.2.1.0037.15

##### Определение

N,N′-Бис(аминоиминометил)-[O-2-дезокси-2-(метиламино)-α-L-глюкопиранозил-(1→2)-О-5-дезокси-3-С-формил-α-L-ликсофуранозил-(1→4)-D-стрептамина сульфат (2:3).

Стрептомицин образуется несколькими штаммами Streptomyces griseus. 1 мкг химически чистого стрептомицина основания соответствует специфической активности, равной одной единице действия (ЕД).

Cодержит не менее 730 мкг/мг активного вещества в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка с 0,75 мм слоем следующего состава: смешивают 0,3 г карбомера с 240 мл воды, выдерживают при умеренном встряхивании в течение 1 ч и доводят рН раствора натрия гидроксида раствором 8,5 % до 7, прибавляют 30 г силикагеля Н.

- Предварительная подготовка пластинки. Пластинку выдерживают при температуре 110 °С в течение 1 ч и охлаждают. Подготовку пластинки проводят непосредственно перед использованием.

- Подвижная фаза (ПФ). Калия дигидрофосфата раствор 0,5 М.

- Испытуемый раствор. В колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

- Раствор сравнения. В колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца стрептомицина сульфата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

- Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца стрептомицина сульфата, 10 мг фармакопейного стандартного образца канамицина моносульфата и 10 мг фармакопейного стандартного образца неомицина сульфата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

- Реактив для детектирования. 1,3-дигидроксинафталина в растворе серной кислоты. Смешивают равные объёмы 1,3-дигидроксинафталина раствора 0,2 % и серной кислоты раствора 50 %.

- На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора, 10 мкл раствора сравнения и 10 мкл раствора для проверки пригодности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат в токе холодного воздуха до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования и выдерживают при температуре 150 °С в течение 5–10 мин. Пластинку охлаждают и просматривают в видимом свете.

- Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы должны обнаруживаться 3 разделённые зоны адсорбции.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции фармакопейного стандартного образца стрептомицина сульфата на хроматограмме раствора сравнения.

2. Качественная реакция. Растворяют 8 мг субстанции в 4 мл воды и прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 1 М. Нагревают на водяной бане в течение 4 мин. Полученный раствор нейтрализуют хлористоводородной кислоты раствором 2 М и прибавляют 0,1 мл железа(III) хлорида раствора 1 %. Должно появиться фиолетовое окрашивание.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 2 мл воды, прибавляют 1 мл α-нафтола раствора 0,1 % и 2 мл смеси равных объёмов натрия гипохлорита раствора концентрированного и воды; должно появиться красное окрашивание.

4. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 5 мл воды и прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М. Нагревают на водяной бане в течение 2 мин. Прибавляют 2 мл α-нафтола раствора 0,5 % в натрия гидроксида растворе 1 М. Нагревают на водяной бане в течение 1 мин. Должно появиться светло-жёлтое окрашивание.

5. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельный показатель поглощения. Величина оптической плотности испытуемого раствора должна составлять не менее 90,0 % от величины оптической плотности раствора стандартного образца (ОФС «Спектрофотомерия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. Субстанцию сушат в вакуум-сушильном шкафу при температуре 60 °С и остаточном давлении, не превышающем 0,7 кПа (5 мм рт. ст.), в течение 3 ч. В мерную колбу объёмом 100 мл помещают 0,1 г высушенной субстанции растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца. В мерную колбу объёмом 100 мл помещают 0,1 г фармакопейного стандартного образца стрептомицина сульфата, высушенного, как указано для испытуемого раствора, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. К 5 мл воды прибавляют 5 мл 0,2 М раствора натрия гидроксида и нагревают на кипящей водяной бане в течение 10 мин. Затем колбу помещают на 5 мин в баню со льдом, прибавляют 3 мл 1,5 % раствора железа(III) хлорида в 0,5 М растворе серной кислоты и доводят объём раствора водой до метки.

Железа(III) хлорида раствор 1,5 % в серной кислоты растворе 0,5 М

В мерную колбу объёмом 1000 мл помещают 15 г железа(III) хлорида, растворяют в 250 мл серной кислоты растворе 0,5 М и доводят объём раствора водой до метки.

В мерные колбы вместимостью по 25 мл помещают по 5,0 мл испытуемого и стандартного растворов. В каждую колбу прибавляют по 5,0 мл натрия гидроксида раствора 0,2 М и нагревают на кипящей водяной бане в течение 10 мин. Затем колбы помещают на 5 мин в баню со льдом, прибавляют 3 мл железа(III) хлорида раствор 1,5 % в серной кислоты растворе 0,5 М и доводят объёмы растворов водой до метки. Через 20 мин измеряют оптическую плотность испытуемого и стандартного растворов в кювете с толщиной слоя 10 мм в максимуме поглощения при 525 нм относительно раствора сравнения.

Прозрачность раствора. Опалесценция 25 % раствора субстанции в воде после выдерживания его в защищённом от света месте при температуре 20 °С в течение 24 ч не должна превышать опалесценцию эталона сравнения II. (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», не должна превышать интенсивности наиболее близко подходящего по цвету эталона сравнения 3 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН. От 4,5 до 7,0 (25 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Стрептомицин В. Испытание проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля G.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—метанол—толуол 1:1:2.

Испытуемый раствор. В колбу для перегонки вместимостью 50 мл помещают 0,2 г субстанции, растворяют, при энергичном перемешивании в 5 мл свежеприготовленной смеси серная кислота концентрированная—метанол 3:97. Содержимое колбы кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч, охлаждают, промывают холодильник 10 мл метанола, собирая смывы в колбу с раствором, и доводят объём полученного раствора метанолом до 20 мл.

Раствор сравнения. В колбу для перегонки вместимостью 50 мл помещают 36 мг (точная навеска) D-маннозы, растворяют при энергичном перемешивании в 5 мл свежеприготовленной смеси серная кислота концентрированная—метанол 3:97. Содержимое колбы кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч, охлаждают, промывают холодильник 10 мл метанола, переносят количественно полученный раствор в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объём раствора метанолом до метки. 5,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объём раствора метанолом до метки.

Полученный раствор содержит эквивалент 0,03 % раствора стрептомицина В (1 мг D-маннозы соответствует 4,13 мг стрептомицина В).

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Смешивают по 1 мл испытуемого и стандартного растворов.

Реактив для детектирования: Смешивают равные объёмы 1,3-дигидроксинафталина в спирте 96 % раствор 0,2 % и серной кислоты раствор 20 %. Раствор готовится непосредственно перед использованием.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора, 10 мкл стандартного раствора и 10 мкл раствора для проверки пригодности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в (предварительно насыщенную парами растворителей в течение не менее 12 ч) камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования и выдерживают при температуре 110 °С в течение 5 мин. Пластинку охлаждают и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 разделенные зоны адсорбции.

Результат. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции стрептомицина В по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции, полученную на хроматограмме раствора сравнения (не более 3 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 7,0 %.(ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Сушат 1 г (точная навеска) субстанции в вакуумном сушильном шкафу при температуре 60±1 °С и остаточном давлении, не превышающем 0,1 кПа в течение 24 ч.

Метанол. Не более 0,3% (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 12,0 мг метанола и доводят объём раствора до метки.

Хроматографические условия

Колонка | Кварцевая капиллярная 1,75±0,25 × 3±1 мм, покрытая слоем сополимера этилвинилбензол-дивинилбензола, 150–180 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | азот для хроматографии; |  |
Скорость потока | Газ-носитель | 30–40 мл/мин; |
Температура | Колонка | 120 °С – 140 °С, |
| Блок ввода проб и детектор | 170 °С – 190 °С. |

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика, соответствующего метанолу не должна превышать площадь пика на хроматограмме раствора сравнения.

Сульфатная зола. Не более 1,0 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. От 18,0 до 21,5 % в пересчёте на сухое вещество (ОФС «Сульфаты»).

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,25 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. Доводят рН полученного раствора до 11 (потенциометрически) аммиака раствором концентрированным 25 %. К полученному раствору прибавляют 10 мл бария хлорида раствора 0,1 М и около 0,5 мг индикатора фталеинового пурпурного. Избыток бария хлорида раствора 0,1 М титруют натрия эдетата раствором 0,1 М до начала изменения окраски, прибавляют 50 мл спирта 96 % и продолжают титрование до исчезновения фиолетово-голубого окрашивания раствора.

1 мл бария хлорида раствора 0,1 М соответствует 9,606 мг сульфат-ионов.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза: 1,3 мг стрептомицина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь. Срок наблюдения 48 ч.

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,25 ЕЭ на 1 мг стрептомицина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

** Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

##### Количественное определение

Проводят определение в соответствии
с ОФС «Определение антимикробной активности антибиотиков методом диффузии в агар».

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0624 Суксаметония йодид (Suxamethonii iodidum)

Взамен ФС 42-2810-98

##### Определение

2,2'-[Бутандиоилбис(окси)]бис(N,N,N-триметилэтанаминия)дииодид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % суксаметония йодида C14H30I2N2O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 % и хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца суксаметония йодида.

2. Качественная реакция. Растворяют 25 мг субстанции в 1 мл воды, прибавляют 0,1 мл кобальта хлорида раствора 5 % и 0,1 мл калия ферроцианида раствора 5 %; должно появиться устойчивое интенсивное зелёное окрашивание.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на йодиды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 250 до 255 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

pH. От 4,5 до 6,2 (1 % раствор в воде, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Прозрачность раствора. Раствор 0,15 г субстанции в 5 мл воды должен выдерживать сравнение с эталоном 1 (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор 0,3 г субстанции в 10 мл воды должен выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Нанесение проб и хроматографирование производят в защищённом от света месте сразу после приготовления испытуемого раствора и раствора сравнения. Время нанесения проб на пластинку не должно превышать 25 мин.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля для хроматографии.

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют при нагревании 25 г калия дигидрофосфата в 100 мл воды, охлаждают до комнатной температуры.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,125 г субстанции, растворяют в 2 мл воды и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,25 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,125 г субстанции, прибавляют 0,2 мл хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М, выдерживают на водяной бане 1 ч, прибавляют 2 мл воды и доводят объём раствора метанолом до метки.

На линию старта пластинки наносят 8 мкл (100 мкг) испытуемого раствора, 8 мкл (0,5 мкг), 1,6 мкл (0,1 мкг), 0,8 мкл (0,05 мкг) раствора сравнения и 8 мкл (100 мкг) раствор для проверки пригодности хроматографической системы.

Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе до исчезновения следов растворителя, помещают камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе до удаления следов растворителя (около 1 ч), опрыскивают реактивом Драгендорфа и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции 0,8 мкл (0,05 %).

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы должны обнаруживаться чёткие зоны адсорбции субстанции и примеси (примесей).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора помимо зоны адсорбции основного вещества, имеющей красно-оранжевое окрашивание, допускается наличие одной дополнительной зоны адсорбции любой примеси, не превышающей по совокупности величины и интенсивности окраски на хроматограмме раствора сравнения 1,6 мкл, содержащего 0,1 мкг субстанции (не более 0,1 %).

Суммарное содержание примесей, оцененное по совокупности величины и интенсивности окраски их зон адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора в сравнении с зонами адсорбции на хроматограмме раствора сравнения, содержащего 0,5 мкг суксаметония йодида (не более 0,5 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Свободный йод. К 2,5 мл 2 % раствора субстанции в воде прибавляют крахмала раствор 1 %; не должно появиться синее окрашивание.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 1,25 ЕЭ на 1 мг субстанции суксаметония йодида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 30 мл уксусной кислоты безводной, прибавляют 10 мл ртути (II) ацетата раствора 5 %. Титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до синего окрашивания (индикатор –0,15 мл кристаллического фиолетового раствор 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 27,21 мг суксаметония йодида C14H30I2N2O4.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0574 Суксаметония хлорид дигидрат

Суксаметония хлорид
Suxamethonii chloridum dihydricum

Вводится впервые

##### Определение

2,2'-[Бутандиоилбис(окси)]бис(N,N,N-триметилэтанаминия) дихлорид дигидрат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % суксаметония хлорида C14H30Cl2N2O4 в пересчёте на безводное вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца суксаметония хлорида.

2. Качественная реакция. В 1 мл воды растворяют 25 мг субстанции, прибавляют 0,1 мл кобальта хлорида раствора 1 % и 0,1 мл калия ферроцианида раствора 5,3 %; должно появиться зелёное окрашивание.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. Около 160 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 20 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен выдерживать сравнение с эталоном I (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4,0 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», и доводят объём раствора водой, свободной от углерода диоксида, до метки. Раствор должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 4,0 до 5,0 (0,5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем целлюлозы.

Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота безводная—вода—бутанол 10:40:50. Реактивы смешивают, смесь встряхивают в течение 10 мин, оставляют отстояться, используют верхний слой.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,4 г субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,4 г фармакопейного стандартного образца суксаметония хлорида и 2 мг холина хлорида, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (0,2 мг суксаметония хлорида) и стандартного раствора (0,2 мг суксаметония хлорида и 1 мкг холина хлорида.). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе до исчезновения следов растворителя, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом Драгендорфа и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора должны обнаруживаться две разделённые зоны адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции, находящаяся на уровне зоны адсорбции холина хлорида, по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции холина хлорида на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,5 %).

Вода. От 8,0 до 10,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 1,25 ЕЭ на 1 мг субстанции суксаметония хлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М хлорной кислоты соответствует 18,07 мг суксаметония хлорида C14H30Cl2N2O4.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0575 Сульбактам натрия

Сульбактам
Sulbactamum natricum

Взамен ВФС 42-2326-94

##### Определение

(2S,5R)-3,3-Диметил-4,4,7-триоксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоксилат натрия.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102 % сульбактама натрия C8H10NNaO5S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, умеренно растворим в этилацетате, мало или очень мало растворим в спирте 96 %.

* Легко растворим в разбавленных кислотах.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца сульбактама натрия.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +219 до +233 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 2 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность 1 % раствора субстанции в воде, измеренная при длине волны 430 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать 0,10 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

рН раствора. От 4,5 до 7,2; для стерильной субстанции от 5,2 до 7,2 (5 % раствор в воде, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 2,72 г калия дигидрофосфата, в 800 мл воды и доводят значение рН фосфорной кислотой разведённой 10 % до 4,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 5,44 г калия дигидрофосфата, растворяют в 800 мл воды и доводят значение рН полученного раствора фосфорной кислотой разведённой 10 % до 4,0±0,1. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). ПФА—ацетонитрил 400:600.

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл ацетонитрила и доводят объём раствора буферным раствором до метки.

Испытуемый раствор. В мерной колбе вместимостью 100 мл суспендируют 77 мг (точная навеска) субстанции в 2 мл ацетонитрила, обрабатывают ультразвуковом в течение 5 мин и доводят объём раствора буферным раствором до метки.

Раствор стандартного образца сульбактама. В мерной колбе вместимостью 100 мл суспендируют 70 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца сульбактама в 2 мл ацетонитрила, обрабатывают ультразвуковом в течение 5 мин и доводят объём раствора буферным раствором до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца сульбактама и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор примеси В сульбактама. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 15 мг примеси В сульбактама, растворяют в буферном растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца сульбактама, 1 мл раствора примеси В сульбактама и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для идентификации примесей. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 8 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца сульбактама для идентификации примесей (содержащего примеси А, С, D, E и F) растворяют в 1 мл ацетонитрила, обрабатывают ультразвуковом в течение 5 мин и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А: (2S)-2-амино-3-метил-3-сульфонобутановая кислота.

Примесь В (6-аминопенициллиновая кислота): (2S, 5R,6R)-6-амино- 3,3-диметил-7-оксо-4- тиа-1-азабицикло [3.2.0] гептан-2- карбоновая кислота.

Примесь С (6-бромопенициллсульфоновая кислота): (2S,5R,6R)-6-бромо-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло [3.2.0] гептан-2-карбоновая кислота 4,4- диоксид.

Примесь D (6-бромопенициллиновая кислота): (2S,5R,6R)-6-бромо-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло [3.2.0]гептан—карбоновая кислота.

Примесь Е (6,6-дибромопенициллсульфоновая кислота): (2S,5R)-6,6-дибромо-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло [3.2.0] гептан-2-карбоновая кислота 4,4- диоксид.

Примесь F (6,6-бромопенициллиновая кислота): (2S,5R)- 6,6 –дибромо - 3,3 –диметил – 7 – оксо – 4 – тиа – 1 – азабицикло [3.2.0] гептан – 2 - карбоновая кислота.

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 215 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2,0 | 98 | 2
2,0–9,5 | 98 → 50 | 2 → 50
9,5–12,0 | 50 | 50

Хроматографируют раствор для идентификации примесей, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Сульбактам – 1 (около 3 мин); примесь А – около 0,4; примесь В – около 0,7; примесь С – около 2,3; примесь D – около 3,1; примесь Е – около 3,3; примесь F – около 3,9.

Идентификация примесей. Для идентификации примесей А, С, D, E и F используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу сульбактама для идентификации примесей, и хроматограмму раствора для идентификации примесей. Для идентификации пика примеси В используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси В и сульбактама должно быть не менее 5,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь А – 0,6; примесь В – 0,5; примесь D – 0,5; примесь F – около 0,6.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме стандартного раствора; a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца сульбактама, мл;
P – содержание сульбактама в фармакопейном стандартном образце сульбактама,%;
255,22 – молекулярная масса сульбактама натрия;
233,24 – молекулярная масса сульбактама.

Допустимое содержание примесей:

- примесь А – не более 0,5 %;

- примеси С и Е (каждая) – не более 0,2 %;

- примеси В, D, F (каждая) – не более 0,1 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме стандартного раствора (менее 0,05 %).

N,N-Диметиланилин. Не более 0,002 %. (ОФС «N,N-Диметиланилин»).

2-Этилгексановая кислота. Не более 0,5 % (ОФС «2-Этилгексановая кислота»).

Вода. Не более 1 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3 Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 40 мг сульбактама натрия в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения – 48 ч.

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,17 ЕЭ на 1 мг сульбактама натрия (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца сульбактама и испытуемый раствор.

Содержание сульбактама натрия C8H10NNaO5S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика сульбактама на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика сульбактама на хроматограмме раствора стандартного образца сульбактама;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца сульбактама, мг;
P – содержание сульбактама в фармакопейном стандартном образце сульбактама,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
255,22 – молекулярная масса сульбактама натрия;
233,24 – молекулярная масса сульбактама.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0179 Сульфагуанидин (Sulfaguanidinum)

Взамен ФС.2.1.0179.18

##### Определение

N-(4-Аминобензолсульфонил)гуанидина.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % сульфагуанидина C7H10N4O2S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый мелкокристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в спирте 96 % и ацетоне, очень мало растворим в воде, практически нерастворим в метиленхлориде.

* Растворяется в разбавленных растворах кислот.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца сульфагуанидина.

2. Тонкослойная хроматография. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора Б, полученная в испытании «Родственные примеси», по положению, величине и степени подавления флуоресценции должна соответствовать зоне адсорбции сульфагуанидина на хроматограмме раствора стандартного образца сульфагуанидина (раздел «Родственные примеси»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на амины ароматические первичные (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

4. Качественная реакция. Около 0,1 г субстанции нагревают в сухой пробирке на пламени горелки; должен образоваться плав фиолетово-красного цвета и ощущаться запах аммиака.

##### Испытания

Температура плавления. От 189 до 193 °C (ОФС «Температура плавления», метод 2).

Кислотность. Нагревают 1 г субстанции на водяной бане в течение 5 минут при температуре 70 °С с 50 мл воды. После охлаждения раствор фильтруют. К 25 мл фильтрата прибавляют 3 капли фенолфталеина раствора 0,1 %. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 0,2 мл 0,05 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля GF254.

Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота безводная—метанол—метиленхлорид 10:20:70.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в ацетоне и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 4,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора ацетоном до метки.

Раствор стандартного образца сульфагуанидина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца сульфагуанидина, растворяют в ацетоне и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора Б и доводят объём раствора ацетоном до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора ацетоном до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг (точная навеска) сульфаниламида, растворяют в испытуемом растворе Б и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл (100 мкг) испытуемого раствора А, 10 мкл (20 мкг) испытуемого раствора Б, 10 мкл (20 мкг) раствора стандартного образца сульфагуанидина, 10 мкл (0,5 мкг) раствора сравнения А, 10 мкл (0,25 мкг) раствора сравнения Б, 10 мкл (20 мкг) раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 разделённые зоны адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора А зона адсорбции любой примеси по величине не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %); и зона адсорбции только одной такой примеси может превышать по величине зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения Б (0,25 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 8,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Легко обугливающиеся вещества. Растворяют 0,3 г субстанции в 5 мл серной кислоты концентрированной. Окраска раствора не должна быть интенсивнее эталона В5 или R6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Сульфаты. Не более 0,04 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения используют 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Хлориды».

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,5 г субстанции, растворяют в воде, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют. Доводят 4,0 мл полученного фильтрата водой до 10 мл.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 20 мл смеси вода—хлористоводородная кислота разведённая 8,3 % 10:10, и далее поступают, как указано в ОФС «Нитритометрия». В случае применения внутренних индикаторов используют тропеолин 00 в смеси с метиленовым синим.

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 21,42 мг сульфагуанидина C7H10N4O2S.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0180 Сульфадиметоксин (Sulfadimethoxinum)

Взамен ФС.2.1.0180.18

##### Определение

4-Амино-N-(2,6-диметоксипиримидин-4-ил)бензол-1-сульфонамид.

Содержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % сульфадиметоксина C12H14N4O4S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в спирте 96 %, мало или очень мало растворим в хлороформе, практически нерастворим в воде.

Легко растворяется в хлористоводородной кислоте разведённой и в натрия гидроксида растворе 1 М.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца сульфадиметоксина.

2. Качественная реакция. Раствор 50 мг субстанции в 2 мл хлористоводородной кислоты концентрированной должен давать характерную реакцию на первичные ароматические амины (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 197 до 202 °С (ОФС «Температура плавления»).

Кислотность. Нагревают 1,0 г субстанции на водяной бане при температуре 70 °С в течение 5 мин с 50 мл воды, свободной от углерода диоксида, быстро охлаждают до комнатной температуры и фильтруют. Прибавляют к 25 мл фильтрата 0,2 мл бромтимолового синего раствора 0,04 %. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 0,2 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида.

Родственные соединения. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 6 г натрия дигидрофосфата в 950 мл воды для хроматографирования и доводят рН раствора натрия гидроксида раствором 8,5 % до 7,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Метанол—буферный раствор 250:750.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол—ацетонитрил—буферный раствор 250:350:400.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 25 мл метанола и доводят объём раствора буферным раствором до метки.

Раствор стандартного образца сульфодиметоксина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца сульфодиметоксина, растворяют в 25 мл метанола и доводят объём раствора буферным раствором до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца сульфодиметоксина и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 4 мг фармакопейного стандартного образца сульфодиметоксина для идентификации пиков (содержит примеси А и F), растворяют в 5 мл метанола и доводят объём раствора буферным раствором до метки.

Примечание

Примесь А: 2,6-диметоксипиримидин-4-амин [3289-50-7].

Примесь F: 4-амино-N-(2-гидрокси-6-метоксипиримидин-4-ил)бензол-1-сульфонамид.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, с полярными группами и этиленовыми мостиками, гибридный, эндкепированный, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 100 | 0
10–30 | 100 → 0 | 0 → 100
30–35 | 0 | 100

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Сульфодиметоксин – 1 (около 11 мин); примесь F – около 0,4; примесь А – около 1,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примесей А и F используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу сульфодиметоксина для идентификации примесей.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения отношение сигнал/шум (S/N) для пика сульфодиметоксина должно быть не менее 40.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками сульфодиметоксина и примесью А должно быть не менее 2,5.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) сульфодиметоксина должен быть не более 2,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь А – 1,4; примесь F – 1,7.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме раствора сравнения;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца сульфодиметоксина, мг;
P – содержание сульфодиметкоксина в фармакопейном стандартном образце сульфодиметоксина,%.

Допустимое содержание примесей:

- примеси А и F – не более 0,15 % каждая;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Встряхивают 0,5 г субстанции в течение 3 мин со смесью 0,5 мл азотной кислоты разведённой 16 % и 9,5 мл воды, фильтруют и доводят 4,0 мл фильтрата водой до 10 мл.

Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Встряхивают 1 г субстанции в течение 3 мин со смесью 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и 19,5 мл воды и фильтруют. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,5 г (точная навеска) субстанции в смеси 75 мл воды и 10 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и далее поступают, как указано в ОФС «Нитритометрия». Конец титрования устанавливают по йодкрахмальной бумаге.

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 31,03 мг сульфадиметоксина C12H14N4O4S.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0181 Сульфадимидин (Sulfadimidinum)

Взамен ФС.2.1.0181.18

##### Определение

4-Амино-N-(4,6-диметилпиримидин-2-ил)бензолсульфонамид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % сульфадимидина C12H14N4O2S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или слегка желтоватый порошок.

Растворимость. Растворим в ацетоне, мало растворим в спирте 96 % и, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца сульфадимидина.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на ароматические первичные амины (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

3. Качественная реакция. Взбалтывают 0,1 г субстанции с 3 мл натрия гидроксида раствором 0,1 М в течение 1–2 мин и фильтруют; к фильтрату прибавляют 1 мл меди(II) сульфата раствора 10 %; должен образоваться осадок желтовато-зелёного цвета, быстро переходящий в коричневый (отличие от других сульфамидных препаратов).

4. Качественная реакция. К 0,1 г субстанции прибавляют 1 мл воды и 0,3 мл натрия нитропруссида окисленного раствора; при перемешивании раствора должно появиться фиолетовое окрашивание (отличие от других сульфамидных препаратов).

##### Испытания

Температура плавления. От 197 до 200 °C (ОФС «Температура плавления»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 5 мл натрия гидроксида раствора 1 М должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность. Нагревают 1,25 г субстанции на водяной бане при температуре 70 °С в течение 5 мин с 25 мл воды, свободной от углерода диоксида, быстро охлаждают до комнатной температуры в течении 15 мин и фильтруют. К 20 мл фильтрата прибавляют 0,1 мл бромтимолового синего раствора 0,04 %. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 0,2 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 100 мл воды, добавляют 6 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор Б. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 250 мл аммиака раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Буферный раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 800 мл раствора А, доводят рН раствора раствором Б до 6,50 и доводят объём раствора раствором А до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 100:900.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—буферный раствор 500:500.

Растворитель. Натрия гидроксида раствор 4 %—ацетонитрил—вода 2,5:25:75.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в 41 мл растворителя и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФБ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФБ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца сульфацетамида (примесь Е) и 5 мг фармакопейного стандартного образца сульфагуанидина (примесь С), растворяют в 41 мл растворителя и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь C: N-(4-аминобензолсульфонил)гуанидин [57-67-0].

Примесь D: 4-аминобензолсульфонамид [63-74-1].

Примесь E: N-(4-аминобензолсульфонил)ацетамид [144-80-9].

Примесь G:
4-амино-N-(4,6-диметилпиримидин-2-ил)-2-хлорбензолсульфонамид, или
4-амино-N-(4,6-диметилпиримидин-2-ил)-3-хлорбензолсульфонамид.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,3 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 241 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–25 | 100 | 0
25–35 | 100 → 0 | 0 → 100
35–45 | 0 | 100
45–50 | 0 → 100 | 100 → 0

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Сульфадимидин – 1 (около 20 мин); примесь Е – около 0,13; примесь С – около 0,15; примесь D – около 0,2; примесь G – около 1,7.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примесей Е и С должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пиков каждой из примесей С, D, G не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,3 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,03 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). Взбалтывают 0,5 г субстанции с 20 мл воды в течение 1–2 мин, фильтруют и доводят 4,0 мл фильтрата водой до 10 мл.

Сульфаты. Не более 0,04 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения используют 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Хлориды».

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в смеси 10 мл воды и 20 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, охлаждают до комнатной температуры и титруют в соответствии с ОФС «Нитритометрия». В случае применения внутренних индикаторов используют 0,1 % раствор тропеолина ОО.

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 27,83 мг сульфадимидина C12H14N4O2S.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0038 Сульфаниламид (Sulfanilamidum)

Взамен ФС.2.1.0038.15

##### Определение

4-Аминобензолсульфонамид.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % сульфаниламида C6H8N2O2S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или желтовато-белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в ацетоне, умеренно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в метиленхлориде, мало растворим в воде.

* Растворяется в разбавленных растворах щелочных гидроксидов и минеральных кислот.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца сульфаниламида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 15 мг субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 320 нм (в кювете толщиной 1 см) должен иметь максимумы при 264 нм и 271 нм, минимумы при 241 нм и 268 нм и плечо в области от 257 до 261 нм.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на амины ароматические первичные (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 164 до 167 °С (ОФС «Температура плавления»).

Кислотность. Нагревают 0,8 г субстанции на водяной бане с 40 мл воды, свободной от диоксида углерода. После быстрого охлаждения раствор фильтруют. К 25 мл фильтрата прибавляют 0,1 мл бромтимолового синего раствора 0,1 %. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 0,05 мл 0,05 М раствора натрия гидроксида.

Органические примеси. Растворяют при встряхивании 0,3 г субстанции в 5 мл серной кислоты концентрированной. Окраска полученного раствора должна быть не интенсивнее окраски эталона Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Предварительная подготовка пластинки. Пластинку погружают в камеру с ацетоном, промывают восходящим методом и высушивают на воздухе в течение 20 мин.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 %—метанол—хлороформ 30:90:160.

Растворитель. Аммиака раствор концентрированный 25 %—спирт 96 % 10:90.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сульфаниловой кислоты. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г сульфаниловой кислоты, растворяют в 70 мл растворителя и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,25 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (100 мкг) и раствора сравнения (0,5 мкг) и в одну точку – по 10 мкл испытуемого раствора (100 мкг) и раствора сульфаниловой кислоты (0,5 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме испытуемого раствора и раствора сульфаниловой кислоты, нанесённые в одну точку, должны обнаруживаться 2 разделённые зоны адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по совокупности величины и степени интенсивности флуоресценции не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %). Сумма примесей – не более 0,5 %.

** Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). Встряхивают 1,0 г субстанции с 20 мл воды в течение 1 мин и фильтруют. Для определения 2 мл фильтрата доводят водой до 10 мл.

** Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения используют 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Хлориды».

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом нитритометрии (ОФС «Нитритометрия»).

Для определения используют 0,25 г (точная навеска) субстанции. В случае применения внутренних индикаторов используют тропеолин 00 в смеси с метиленовым синим.

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 17,22 мг сульфаниламида С6Н8N2О2S.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Необходимость включения показателя обусловлена спецификой получения субстанции.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0182 Сульфацетамид натрия моногидрат

Сульфацетамид
Sulfacetamidum natricum monohydricum

Взамен ФС.2.1.0182.18

##### Определение

Ацетил[(4-аминофенил)сульфонил]азанид натрия моногидрат.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % сульфацетамида натрия C8H9N2NaO3S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или желтовато-белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца сульфацетамида натрия.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в фосфатном буферном растворе рН 7,0 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора фосфатным буферным раствором рН 7,0 до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь максимум при 255 нм с удельным показателем поглощения от 660 до 720.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на ароматические первичные амины (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 181 до 185 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Растворяют 1 г субстанции в 10 мл воды, прибавляют 6 мл уксусной кислоты разведённой и фильтруют. Полученный осадок промывают в небольшом количестве воды.

Прозрачность раствора. Раствор 1,25 г субстанции в 25 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном GY4 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 8,0 до 9,5 (раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие сульфацетамид натрия, защищают от света и готовят непосредственно перед применением.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—метанол—вода 10:100:890.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца сульфацетамида натрия. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца сульфацетамида натрия, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют 5 мг фармакопейного стандартного образца сульфацетамида натрия и 5 мг сульфаниламида (примесь А; [63-74-1]) в 1 мл ПФ.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца сульфацетамида натрия и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 125 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 7-кратное от времени удерживания пика сульфацетамида. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца сульфацетамида натрия и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Сульфацетамид – 1 (около 5 мин); примесь А – около 0,5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика сульфацетамида должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и сульфацетамида должно быть не менее 5,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца сульфацетамида натрия:

- фактор асимметрии пика (AS) сульфацетамида должен быть не более 1,5.

Поправочные коэффициенты. Площадь пика примеси А умножается на 0,5.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме раствора стандартного образца сульфацетамида натрия;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца сульфацетамида натрия, мг;
P – содержание сульфацетамида натрия в стандартном образце сульфацетамида натрия,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь А – не более 0,2 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика сульфацетамида на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05%).

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,2 г субстанции в 10 мл воды.

Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Растворяют 0,5 г субстанции в 10 мл воды.

Вода. От 6,0 % до 8,0 %.(ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 1 или 2). Около 1 г субстанции растворяют в 17,5 мл воды, прибавляют 2,5 мл уксусной кислоты разведённой 30 %, взбалтывают в течение 5 мин и выпавший осадок отфильтровывают. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,23 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 10 мл воды, прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и далее поступают, как указано с ОФС «Нитритометрия». В качестве внутреннего индикатора используют нейтрального красного раствор.

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 23,62 мг сульфацетамида натрия C8H9N2NaO3S (в пересчёте на безводное вещество).

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0576 Сульфаэтидол натрия

Сульфаэтидол
Sulfaethidolum natricum

Взамен ГФ Х, ст. 32

##### Определение

[(4-Аминофенил)сульфонил](5-этил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)азанид натрия.

Содержит не менее 99,0 % и не более 102,0 % сульфаэтидола натрия C10H11N4NaO2S2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца сульфаэтидола натрия.

2. Качественная реакция. Растворяют 20 мг субстанции в 2 мл воды, прибавляют 1 мл меди(II) сульфата раствора 10 %; должен образоваться осадок зелёного цвета, постепенно переходящий в чёрный.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на амины ароматические первичные (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 5 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном B9 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Щёлочность. Растворяют 0,2 г субстанции в 10 мл воды, свободной от углерода диоксида, прибавляют 2 капли фенолфталеина. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 0,1 мл 0,05 М раствора хлористоводородной кислоты.

Вода. Не более 11,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Растворяют 0,15 г субстанции в 15 мл воды, прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, встряхивают в течение 3 мин и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,15 г субстанции в 15 мл воды, прибавляют 1 мл азотной кислоты разведённой 16 %, встряхивают в течение 3 мин и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 1 или 2). Растворяют 2 г субстанции растворяют в 17,5 мл воды, прибавляют 2,5 мл уксусной кислоты разведённой 30 % взбалтывают в течение 5 мин и выпавший осадок отфильтровывают. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,4 г (точная навеска) субстанции в смеси 10 мл воды и 20 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и далее поступают, как указано в ОФС «Нитритометрия». В случае применения индикатора используют тропеолин 00 раствор 0,1 %.

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 30,63 мг сульфаэтидола C10H11N4NaO2S2.

##### Хранение

Не требует особых условий.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0577 Суматриптана сукцинат

Суматриптан
Sumatriptani succinas

Вводится впервые

##### Определение

1-{3-[2-(Диметиламино)этил]-1Н-индол-5-ил}-N-метилметансульфонамида бутандиоат.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % суматриптана сукцината C14H21N3O2S·С4Н6О4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, умеренно растворим в метаноле, практически нерастворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанциив области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца суматриптана сукцината.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика суматриптана на хроматограмме раствора стандартного образца суматриптана сукцината (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельный показатель поглощения. Не более 0,10 в максимуме поглощения при длине волны 440 нм в кювете с толщиной слоя 1 см (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 г субстанции, растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

рН. От 4,5 до 5,3 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

1. Примеси А и Н

Буферный раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 771 г аммония ацетата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Буферный раствор—метанол 100:900.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 30 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 3 мг фармакопейного стандартного образца суматриптана для проверки пригодности системы (содержит примеси А и Н) в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до 1 мл.

Примечание

Примесь А:
1-{3-[2-(диметиламино)этил]-2-({[2-(диметиламино)этил]-1H-индол-5-ил}метил)-1H-индол-5-ил}-N-метилметансульфонамид
[545338-89-4].

Примесь Н:
1-{3-[2-(диметиламино)этил]-1-({[2-(диметиламино)этил]-1H-индол-5-ил}метил)-1H-индол-5-ил}-N-метилметансульфонамид
[1391052-59-7].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 282 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 5-кратное от времени удерживания пика суматриптана. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Суматриптан – 1 (около 2 мин); примесь А – около 1,9; примесь Н – около 2,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используют относительное время удерживания соединений, хроматограмма, прилагаемая к фармакопейному стандартному образцу суматриптана для проверки пригодности системы (содержит примеси А и Н) и хроматограмма раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и примеси Н должно быть не менее 3,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси А умножают на 0,6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать шестикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6 %);

- площадь пика примеси Н не должна превышать трёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

2. Другие примеси

Буферный раствор. Растворяют в 750 мл воды 0,970 г дибутиламина, 0,735 г фосфорной кислоты концентрированной и 2,93 г натрия дигидрофосфата безводного, полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл, доводят рН раствора потенциометрически натрия гидроксида раствором 40 % до 6,50 и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 250:750.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 30 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 10 мг фармакопейного стандартного образца суматриптана (содержит примеси В, С, D и Е) в 1,0 мл ПФ.

Примечание

Примесь В:
N-метил-1-{3-[2-(метиламино)этил]-1H-индол-5-ил}-метансульфонамид
[88919-51-1].

Примесь С:
1-[1-(гидроксиметил)-3-[2-(диметиламино)этил]-1H-индол-5-ил]-N-метилметансульфонамид
[1797905-62-4].

Примесь D:
N,N-диметил-2-{5-[(метилсульфамоил)метил]-1H-индол-3-ил }этан-1-амин N-оксид
[212069-94-8].

Примесь Е:
1-[3-(2-аминоэтил)-1H-индол-5-ил]-N-метилметансульфонамид
[88919-22-6].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 282 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 4-кратное от времени удерживания пика суматриптана. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Суматриптан – 1 (около 7 мин); примесь Е – около 0,5; примесь В – около 0,6; примесь D – около 0,7; примесь С – около 0,8.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используется относительное время удерживания соединений, хроматограмму, прилагаемая к фармакопейному стандартному образцу суматриптана (содержит примеси В, С, D и Е) и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси С и суматриптана должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площади пиков каждой из примесей В, С и D не должны превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси Е не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать шестикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 2).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Буферный раствор. Растворяют 2,925 г натрия дигидрофосфата безводного в 600 мл воды, доводят рН полученного раствора потенциометрически раствором натрия гидроксида концентрированного до 6,50, полученный раствор переносят в мерный цилиндр вместимостью 1000 мл, разбавляют водой до 750 мл, прибавляют 250 мл ацетонитрила и перемешивают.

Испытуемый раствор. Помещают 15 мг (точная навеска) субстанции в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в буферном растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца суматриптана сукцината. Помещают 15 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца суматриптана сукцината в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в буферном растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца суматриптана сукцината и испытуемый раствор.

Содержание суматриптана сукцината C14H21N3O2S·С4Н6О4 в субстанции в процентах (Х) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика суматриптана на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика суматриптана на хроматограмме раствора стандартного образца суматриптана сукцината;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца суматриптана сукцината, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание суматриптана сукцината в фармакопейном стандартном образце суматриптана сукцината,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0578 Сунитиниба малат

Сунитиниб
Sunitinibi malas

Вводится впервые

##### Определение

N-[2-(Диэтиламино)этил]-2,4-диметил-5-[(Z)-(2-оксо-5-фтор-1,2-дигидро-3H-индол-3-илиден)метил]-1H-пиррол-3-карбоксамида (2S)-2-гидроксисукцинат (1:1).

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % сунитиниба малата в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Зеленовато-жёлтый или жёлтый, или оранжевый кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в диметилсульфоксиде, очень мало растворим или практически нерастворим в воде, практически нерастворим в ацетонитриле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца сунитиниба малата.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения 0,0005 % раствора субстанции в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М в области длин волн от 200 до 550 нм должен иметь максимумы при 265 нм и 430 нм и минимумы при 250 нм и 320 нм.

##### Испытания

Температура плавления. От 196 до 200 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными, растворы, содержащие сунитиниба малат защищают от воздействия света.

Буферный раствор. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 2 г аммония ацетата, растворяют в 800 мл воды и доводят значение рН до 5,00 уксусной кислотой ледяной. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—этанол—буферный раствор 100:150:750.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Этанол—ацетонитрил 150:850.

Растворитель. Ацетонитрил—буферный раствор 30:70.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 15 мг субстанции, прибавляют 15 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор примеси 3. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3 мг примеси С, прибавляют 30 мл диметилсульфоксида, обрабатывают ультразвуком до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 15 мг субстанции, растворяют в 10 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 0,5 мл раствора примеси С и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А:
N-[2-(диэтиламино)этил]-2,4-диметил-5-[(E)-(2-оксо-5-фтор-1,2-дигидро-3H-индол-3-илиден)метил]-1H-пиррол-3-карбоксамид
[342641-94-5].

Примесь В:
2,4-диметил-5-[(Z)-(2-оксо-5-фтор-1,2-дигидро-3H-индол-3-илиден)метил]-N-[2-(этиламино)этил]-1H-пиррол-3-карбоксамид
[356068-97-8].

Примесь С (сунитиниба амид):
2,4-диметил-5-[(Z)-(2-оксо-5-фтор-1,2-дигидро-3H-индол-3-илиден)метил]-1H-пиррол-3-карбоксамид
[1186651-51-3].

Примесь D:
2,4-диметил-5-[(Z)-(2-оксо-5-фтор-1,2-дигидро-3H-индол-3-илиден)метил]-1H-пиррол-3-карбоновая кислота
[356068-93-4].

Примесь E:
(3Z)-3-](3,5-диметил-1H-пиррол-2-ил)метилтден]-5-фтор-1,3-дигидро-2H-индол-2-он.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Температура образца | 10 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 268 нм; |  |
Объём пробы | 15 мкл; |  |
Время хроматографирования | 52 мин. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2 | 100 | 0
2–30 | 100 → 53 | 0 → 47
30–40 | 53 | 47
40–42 | 53 → 100 | 47 → 0
42–52 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Сунитиниб – 1 (около 16 мин), примесь 1 – около 0,46; примесь 2 – около 0,93; примесь 3 – около 1,23; примесь 4 – около 1,70; примесь 5 – около 2,07.

Проверка пригодности хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика сунитиниба должно быть не менее 10,0.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками сунитиниба и примеси 3 должно быть не менее 5,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) сунитиниба должен быть не более 2,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей А, В, C, D и E не должна превышать 1,5 площади пика сунитиниба на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика сунитиниба на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь пика сунитиниба на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 100 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 53,26 мг сунитиниба малата C22H27FN4O2∙C4H6O5.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0579 Тадалафил (Tadalafilum)

Вводится впервые

##### Определение

(6R,12aR)-6-(1,3-Бензодиоксол-5-ил)-2-метил-2,3,6,7,12,12a-гексагидропиразино[1ʹ,2ʹ:1,6]пиридо[3,4-b]индол-1,4-дион.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % тадалафила C22H19N3O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Легко растворим в диметилсульфоксиде, мало растворим в метиленхлориде, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тадалафила.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика тадалафила на хроматограмме раствора стандартного образца тадалафила (раздел «Родственные примеси. Примеси А, В, С»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +78 до +84 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в диметилсульфоксиде, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Примеси А, В, С

Растворитель. Ацетонитрил—гексан—2-пропанол 20:40:40.

Подвижная фаза (ПФ). Гексан—2-пропанол 50:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца тадалафила. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного образца тадалафила, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в 40 мл растворителя, прибавляют 1 мл тетрабутиламмония гидросида раствора 27 % в метаноле, перемешивают и выдерживают в течение 20 мин, прибавляют 1 мл трифторуксусной кислоты и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и 1,0 мл испытуемого раствора, и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А:
(6R,12аS)-6-(1,3-бензодиоксол-5-ил)-2-метил-2,3,6,7,12,12a- гексагидропиразино[1ʹ,2ʹ:1,6]пиридо[3,4-b]индол-1,4-дион
[171596-27-3].

Примесь В:
(6S,12aS)-6-(1,3-бензодиоксол-5-ил)-2-метил-2,3,6,7,12,12a-гексагидропиразино[1ʹ,2ʹ:1,6]пиридо[3,4-b]индол-1,4-дион
[629652-72-8].

Примесь С:
(6S,12aR)-6-(1,3-бензодиоксол-5-ил)-2-метил-2,3,6,7,12,12a-гексагидропиразино[1ʹ,2ʹ:1,6]пиридо[3,4-b]индол-1,4-дион
[171596-28-4].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель, модифицированный трис(3,5-диметилфенилкарбамоил)амилазой, для хиральной хроматографии 10 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 0,75 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 222 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,2-кратное от времени удерживания пика тадалафила. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Тадалафил – 1 (около 11 мин), примесь A – около 0,8.

Идентификация примесей. Для идентификации примеси А используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и тадалафилом должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать 1,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %).

Другие примеси

Не используют ультразвук для приготовления растворов.

Растворитель. Ацетонитрил—2-пропанол 50:50.

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 900 мл воды и 1,0 мл трифторуксусной кислоты и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг субстанции, растворяют в 50 мл ацетонитрила и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, прибавляют 50 мл ацетонитрила и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 5 мл ацетонитрила и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 4 мг субстанции, растворяют в 50 мл растворителя. Прибавляют 1 мл тетрабутиламмония гидроксида раствор 27 % в метаноле, перемешивают и выдерживают в течение 40 мин, прибавляют 1 мл трифторуксусной кислоты и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора испытуемым раствором до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 285 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–3 | 85 | 15
3–30 | 85 → 5 | 15 → 95
30–33 | 5 | 95

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Тадалафил – 1 (около 16 мин), примеси A и С – около 1,03.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примесей А+С используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примесей А+С и тадалафилом должно быть не менее 3,3.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %). Не учитывают любые пики, обусловленные примесью А и/или С.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 2). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме при температуре 105 °С в течение 3 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—ПФА—45:55.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 50 мл ацетонитрила и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мл полученного раствора, прибавляют 25 мл ацетонитрила и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор стандартного образца тадалафила. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца тадалафила, растворяют в 50 мл ацетонитрила, и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора, прибавляют 25 мл ацетонитрила и доводят объём раствора ПФА до метки.

Хроматографические условия

Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания тадалафила (около 4,5 мин). |

Хроматографируют испытуемый раствор и раствор стандартного образца тадалафила.

Содержание тадалафила C22H19N3O4 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика тадалафила на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика тадалафила на хроматограмме раствора стандартного образца тадалафила;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца тадалафила, мг;
W – потеря в массе при высушивании,%;
P – содержание тадалафила в фармакопейном стандартном образце тадалафила,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0580 Такролимус моногидрат

|Такролимус
Tacrolimusum monohydricum

Вводится впервые

##### Определение

(3S,4R,5S,8R,9E,12S,14S,15R,16S,18R,19R,26aS)-5,19-Дигидрокси-3-{(1E)-1-[(1R,3R,4R)-4-гидрокси-3-метоксициклогексил]проп-1-ен-2-ил}-4,10,12,18-тетраметил-14,16-диметокси-8-(проп-2-ен-1-ил)-3,4,5,6,8,11,12,13,14,15,16,17,18,19,24,25,26,26a-октадекагидро-7H-15,19-эпоксипиридо[2,1-c][1,4]оксаазациклотрикозин-1,7,20,21(23H)-тетраон моногидрат.

Представляет собой вещество, полученное путём роста определённых штаммов Streptomyces tsukubaensis.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % такролимуса C44H69NO12 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в спирте 96 %. Практически нерастворим в воде и гептане.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца такролимуса моногидрата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика такролимуса на хроматограмме раствора стандартного образца такролимуса моногидрата (раздел «количественное определение»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 20,0 мл спирта 96 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном GY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие такролимус, защищают от света и перед использованием выдерживают в течение 3 ч при комнатной температуре.

Раствор А. трет-Бутилметиловый эфир—ацетонитрил 19:81.

Раствор Б. К 1000 мл воды прибавляют 0,4 мл фосфорной кислоты концентрированной и перемешивают.

Подвижная фаза А (ПФА). Раствор А—раствор Б 200:800.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Раствор Б—раствор А 200:800.

Растворитель. Вода—ацетонитрил 30:70.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 3,0 мг фармакопейного стандартного образца такролимуса для проверки пригодности системы (содержит примесь А) в 1,0 мл растворителя.

Примечание

Примесь A:
(3S,4R,5S,8R,9E,12S,14S,15R,16S,18R,19R,26aS)-5,19-дигидрокси-3-{(1E)-1-[(1R,3R,4R)-4-гидрокси-3-метоксициклогексил]проп-1-ен-2-ил}-4,10,12,18-тетраметил-14,16-диметокси-8-этил-3,4,5,6,8,11,12,13,14,15,16,17,18,19,24,25,26,26a-октадекагидро-7H-15,19-эпоксипиридо[2,1-c][1,4]оксаазациклотрикозин-1,7,20,21(23H)-тетраон
[104987-12-4].

Примесь B:
(3S,4R,5S,8R,9E,12S,14S,15S,16S,18R,19R,26aS)-5,19-дигидрокси-3-{(1E)-1-[(1R,3R,4R)-4-гидрокси-3-метоксициклогексил]проп-1-ен-2-ил}-4,10,12,18-тетраметил-14,16-диметокси-8-этил-3,4,5,6,8,11,12,13,14,15,16,17,18,19,24,25,26,26a-октадекагидро-7H-15,19-эпоксипиридо[2,1-c][1,4]оксаазациклотрикозин-1,7,20,21(23H)-тетраон.

Такролимуса таутомер 1:
(3S,4R,5S,8R,9E,12S,14S,15R,16S,18R,26aS)-5,15-дигидрокси-3-{(1E)-1-[(1R,3R,4R)-4-гидрокси-3-метоксициклогексил]проп-1-ен-2-ил}-4,10,12,18-тетраметил-14,16-диметокси-8-(проп-2-ен-1-ил)-3,4,5,6,8,11,12,13,14,15,16,17,18,19,24,25,26,26a-октадекагидро-7H-пиридо[2,1-c][1,4]оксаазациклотрикозин-1,7,19,20,21(23H)-пентаон.

Такролимуса таутомер 2:
(3S,4R,5S,8R,9E,12S,14S,15R,16S,18R,19S,26aS)-5,19-дигидрокси-3-{(1E)-1-[(1R,3R,4R)-4-гидрокси-3-метоксициклогексил]проп-1-ен-2-ил}-4,10,12,18-тетраметил-14,16-диметокси-8-(проп-2-ен-1-ил)-3,4,5,6,8,11,12,13,14,15,16,17,18,19,24,25,26,26a-октадекагидро-7H-15,19-эпоксипиридо[2,1-c][1,4]оксаазациклотрикозин-1,7,20,21(23H)-тетраон
[144490-63-1].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 60 °С; |  |
Температура образца | 4 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–30 | 72 | 28
30–53 | 72 → 15 | 28 → 85

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Такролимус – 1 (около 24 мин); такролимуса таутомер 1 (широкий пик) – около 0,5; примесь B (острый пик) – около 0,5; такролимуса таутомер 2 – около 0,6; примесь A – около 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу такролимуса для проверки пригодности системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси A и такролимуса должно быть не менее 3,0.

Интегрирование: пик примеси В, элюируемый вместе с такролимуса таутомером 1, является пиком-наездником и поэтому должен интегрироваться методом тангенциальной касательной. Важно, чтобы интегрируемая площадь пика такролимуса таутомера 1 сохраняла Гауссову форму.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 1,5-кратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики такролимуса таутомеров 1 и 2 и пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. От 1,5 % до 4,0 %. (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,25 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца такролимуса моногидрата. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца такролимуса моногидрата, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца такролимуса моногидрата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца такролимуса моногидрата относительное стандартное отклонение площади пика такролимуса должно быть не более 2,0 % (6 определений).

Содержание такролимуса C44H69NO12 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 – сумма площадей пиков такролимуса и такролимуса таутомеров 1 и 2 на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – сумма площадей пиков такролимуса и такролимуса таутомеров 1 и 2 на хроматограмме раствора стандартного образца такролимуса моногидрата;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца такролимуса моногидрата, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание такролимуса в фармакопейном стандартном образце такролимуса моногидрата,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0581 Тамоксифена цитрат

Тамоксифен
Tamoxifeni citras

Взамен ВФС 42-2421-94

##### Определение

2-{4-[(1Z)-1,2-Дифенилбут-1-ен-1-ил]фенокси}-N,N-диметилэтан-1-амина 2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоксилат (1:1).

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % тамоксифена цитрата C26H29NO·C6H8O7 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Растворим в метаноле, малорастворим в воде и ацетоне.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тамоксифена цитрата.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах ацетона, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимумы при 237 нм и 275 нм. Отношение значений оптической плотности А237/А275 должно составлять от 1,45 до 1,65.

3. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

- Подвижная фаза (ПФ). Триэтиламин—толуол 10:90.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца тамоксифена цитрата. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца тамоксифена цитрата, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца кломифена цитрата и 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца тамоксифена цитрата, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (5 мкг), раствора стандартного образца тамоксифена цитрата (5 мкг) и раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (по 5 мкг кломифена цитрата и тамоксифена цитрата). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

- Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 разделённые зоны адсорбции.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и степени подавления флуоресценции должна соответствовать зоне адсорбции тамоксифена цитрата на хроматограмме раствора стандартного образца тамоксифена цитрата.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Буферный раствор. Растворяют 0,9 г натрия дигидрофосфата и 4,8 г N, N-диметилоктиламина в 900 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,0±0,1. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 400:600.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 15 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 3 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца тамоксифена цитрата для проверки пригодности системы, содержащего примеси А и F, в 2,0 мл ПФ.

Примечание

Примесь А (E-Изомер):
2-{4-[(1E)-1,2-Дифенилбут-1-ен-1-ил]фенокси}-N,N-диметилэтан-1-амин
[13002-65-8].

Примесь F :
2-{4-[(1Z)-1,2-Дифенилбут-1-ен-1-ил]фенокси}-N-метилэтан-1-амин
[31750-48-8].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 240 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика тамоксифена. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Тамоксифен – 1 (около 20 мин); примесь A – около 0,8; примесь F – около 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A и F используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу тамоксифена цитрата для проверки пригодности системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (Rs) между пиками примесей A и F должно быть не менее 3,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика тамоксифена на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика примеси F не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика тамоксифена на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика тамоксифена на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика тамоксифена на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %). Не учитывают пики, относящиеся к цитрату (время удерживания около 2,5 мин).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 2). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакуум-эксикаторе над фосфора(V) оксидом при температуре около 65 °С и давлении от 1,5 кПа до 2,5 кПа до постоянной массы.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,4 г (точная навеска) субстанции в 75 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 56,36 мг тамоксифена цитрата C26H29NO·C6H8O7.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0582 Тамсулозина гидрохлорид

Тамсулозин
Tamsulosini hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

2-Метокси-5-[(2R)-2-{[2-(2-этоксифенокси)этил]амино}пропил]бензолсульфонамида гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % тамсулозина гидрохлорида C20H28N2O5S·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Легко растворим в муравьиной кислоте, мало растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тамсулозина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 75 мг субстанции, растворяют в воде при нагревании, доводят объём раствора водой до метки. Охлаждают 5 мл полученного раствора на ледяной бане, прибавляют 3 мл азотной кислоты разведённой 12,5 % и перемешивают. Через 30 мин осадок отфильтровывают, фильтрат должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

Удельное вращение. От –17,5 до –20,5 в пересчёте на сухое вещество (0,75 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

1. Энантиомерная чистота

Растворитель. Метанол.

Подвижная фаза (ПФ). Диэтиламин—метанол—этанол безводный—гексан 1:150:200:650.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в 20 мл растворителя, доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца тамсулозина рацемата, растворяют в метаноле, доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь G: 2-2-Метокси-5-[(2S)-2-{[2-(2-этоксифенокси)этил]амино} пропил]бензолсульфонамид [106138-88-9].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель модифицированный трис(3,5-диметилфенилкарбамоил)амилозой для хиральной хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 0,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 225 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Тамсулозин – 1 (около 14 мин), примесь G – около 0,8.

Идентификация примесей. Для идентификации примеси G используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси G и тамсулозином должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси G не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %).

2. Примесь D

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 2000 мл помещают 3 г натрия гидроксида, растворяют в смеси 8,7 мл хлорной кислоты и 1900 мл воды, доводят pH раствора натрия гидроксида раствором 0,5 М до 2,0, доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 2000 мл помещают 1,4 л полученного раствора, доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФ, доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 4 мг фармакопейного стандартного образца тамсулозина примеси D и 4 мг субстанции, растворяют в ПФ, доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь D: 2-Метокси-5-[(2R)-2-{[2-(2-метоксифенокси)этил]амино} пропил]бензолсульфонамид [80223-96-7].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,3 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 225 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика тамсулозина (около 6 мин). |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками тамсулозина и примеси D должно быть не менее 6,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси, пики которых располагаются перед пиком тамсулозина не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %).

Содержание любой из примесей в субстанции, пики которых располагаются перед пиком тамсулозина, в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S - средняя площадь пика примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика тамсулозина на хроматограмме раствора сравнения.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

3. Другие примеси

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 2000 мл помещают 3 г натрия гидроксида, растворяют в смеси 8,7 мл хлорной кислоты и 1900 мл воды, доводят pH раствора натрия гидроксида раствором 0,5 М до 2,0, доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 2000 мл помещают 1,0 л полученного раствора, доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Испытуемый раствор. Готовят в условиях испытания «Родственные примеси. Примесь D».

Раствор сравнения. Готовят в условиях испытания «Родственные примеси. Примесь D».

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 4 мг фармакопейного стандартного образца тамсулозина примеси H и 4 мг субстанции, растворяют в ПФ, доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь H: 2-(2R)-1-(4-Метоксифенил)-N-[(2-этоксифенокси)этил] пропан-2-амин [1329611-47-3].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,3 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 225 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 5-кратное от времени удерживания пика тамсулозина (около 2,5 мин). |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками тамсулозина и примеси Н должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Содержание примесей в субстанции, пики которых располагаются после пика тамсулозина, в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S - средняя площадь пика примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика тамсулозина на хроматограмме раствора сравнения.

- сумма площадей пиков всех примесей, пики которых располагаются перед пиком тамсулозина (примесь D) и пики которых располагаются после пика тамсулозина (другие примеси) не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В коническую колбу вместимостью 250 мл помещают 0,35 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 75 мл смеси уксусный ангидрид—уксусная кислота ледяная 2:3, перемешивают и сразу титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку конца титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 44,50 мг тамсулозина гидрохлорида.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0039 Таурин (Taurinum)

Взамен ФС.2.1.0039.15

##### Определение

2-Аминоэтансульфоновая кислота.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % таурина C2H7NO3S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Растворим в воде и хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М, практически нерастворим в спирте 96 % и хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца таурина.

2. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 10 мл воды. К полученному раствору прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М и 0,06 мл фенолфталеина раствора 1 %; должно появиться малиновое окрашивание, исчезающее при прибавлении к раствору 1 мл раствора формальдегида, предварительно нейтрализованного по фенолфталеину.

3. Качественная реакция. В тигель помещают 50 мг субстанции, растворяют в 1 мл окислительной смеси, содержащей 0,5 г калия нитрата в 25 мл азотной кислоты концентрированной, и озоляют сначала на электрической плитке до прекращения выделения паров, затем в муфельной печи при температуре 600 °С до получения белого остатка. К остатку прибавляют 2 мл воды. Содержимое тигля переносят в пробирку, к полученному раствору прибавляют 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и 0,5 мл бария хлорида раствора 5 %; должен образоваться белый осадок, нерастворимый в разведённых неорганических (минеральных) кислотах.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,4 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

рН раствора. От 4,8 до 5,8 (ОФС «Ионометрия», метод 3). Испытания проводят с раствором субстанции, полученным в испытании «Прозрачность раствора».

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля 60.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиак водный—вода—хлороформ—спирт 96 % 0,5:1,5:2:6.

Испытуемый раствор А. Растворяют 0,4 г (точная навеска) субстанции в 100 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М.

Испытуемый раствор Б. В колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мл испытуемого раствора А, кипятят с обратным холодильником в течение 3 ч и охлаждают до температуры 15–25 ºС.

Растворы стандартного образца этаноламина (А, Б, В). Растворяют 40 мг (точная навеска) этаноламина в 100 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М. Полученный раствор 2,0 мл, 1,0 мл и 0,5 мл доводят до 100 мл хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М (растворы сравнения А, Б и В соответственно).

Реактив для детектирования. Нингидрина раствор 0,2 % в спирте 96%.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора А (40 мкг), раствор стандартного образца этаноламина Б (0,04 мкг), раствор стандартного образца этаноламина В (0,02 мкг), раствор стандартного образца этаноламина А (0,08 мкг) и испытуемого раствора Б. Для проверки пригодности хроматографической системы в одну точку наносят 10 мкл испытуемого раствора А и 10 мкл раствор стандартного образца этаноламина А (смесь для проверки пригодности хроматографической системы).

Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 105–110 °С в течение 2 мин и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствор стандартного образца В должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

На хроматограмме смеси для проверки пригодности хроматографической системы должна обнаруживаться разделённые зоны адсорбции этаноламина и таурина.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора А допускается наличие только одной дополнительной зоны адсорбции, не превышающей по совокупности величины и интенсивности окраски зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца этаноламина Б (не более 0,1 %).

На хроматограмме испытуемого раствора Б допускается наличие только одной дополнительной зоны адсорбции, не превышающей по совокупности величины и интенсивности окраски зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца этаноламина А (не более 0,2 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,2 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1,0 г (точная навеска) субстанции при температуре от 70 до 80 °С.

Хлориды. Не более 0,005 % (ОФС «Хлориды»). Для определения используют раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора».

Сульфаты. Не более 0,025 % (ОФС «Сульфаты»). Для определения используют раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора».

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Железо. Не более 0,003 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Железо» (метод 1), в зольном остатке субстанции. В тигель помещают 1,0 г субстанции нагревают на плитке до получения чёрного остатка, затем прокаливают в муфельной печи при температуре от 700 до 750 °С в течение 30 мин.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,58 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 30 мл воды, прибавляют 5 мл формалина и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с индикатором (0,1 мл фенолфталеина раствора 1 %.) до перехода окраски в слабо-розовую.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида раствора 0,1 М соответствует 12,51 мг таурина C2H7NO3S.

##### Хранение

В плотно закрытой упаковке, в защищённом от света месте.

* Испытание проводят в субстанциях, предназначенных для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0583 Телмисартан (Telmisartanum)

Вводится впервые

##### Определение

4'-[(1,4'-Диметил-2'-пропил-1H,1’H-[2,6'-бибензимдазол]-1-ил)метил] [1,1'-бифенил]-2-карбоновая кислота.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % телмисартана C33H30N4O2 в пересчёте на сухое вещество.

Производителям телмисартана необходимо проводить оценку риска образования N-нитрозаминов и загрязнения ими в процессе производства. При выявлении потенциального риска процесс производства должен быть изменён, чтобы исключить или минимизировать загрязнение.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Умеренно растворим в метиленхлориде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

* Растворяется в натрия гидроксида растворе 1 М.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца телмисартана.

Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах горячего этанола, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

##### Испытания

Цветность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл натрия гидроксида раствора 1 М должен выдерживать сравнение с эталоном Y4 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 2 г калия дигидрофосфата и 3,8 г натрия пентансульфоната моногидрата в 900 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислотой разведённой 10 % до 3,0. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол—ацетонитрил 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг субстанции, прибавляют 5 мл метанола, 0,1 мл натрия гидроксида раствора 1 М, обрабатывают ультразвуком до растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца телмисартана для проверки пригодности хроматографической системы (содержит примеси А, В, С, Е и F) растворяют в 2,0 мл метанола.

Раствор для идентификации пика примеси. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца телмисартана для идентификации пиков (содержит примесь D), прибавляют 5 мл метанола, 0,1 мл натрия гидроксида раствора 1 М, обрабатывают ультразвуком до растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора метанолом до метки.

Примечание

Примесь А:
1,7'-Диметил-2-пропил-1H,1'H-2,5'-бибензимдазол [152628-02-9].

Примесь В:
4'-[(1,7'-Диметил-2'-пропил-1H,1'H-[2,5'-бибензимдазол]-1-ил)метил][1,1'-бифенил]-2-карбоновая кислота [1026353-20-7].

Примесь С:
трет-Бутил{4'-[(1,4'-диметил-2'-пропил-1H,1'H-[2,6'-бибензимдазол]-1-ил)метил][1,1'-бифенил]-2-карбоксилат} [144702-26-1].

Примесь D: неустановленная структура.

Примесь Е:
1-[(2'-Карбокси[1,1'-бифенил]-4-ил)метил]-4-метил-2-пропил-1H-бензимидазол-6-карбоновая кислота [884330-12-5].

Примесь F:
4'-[(1,4'-Диметил-2'-пропил-1H,1'H-[2,6'-бибензимдазол]-1-ил)метил][1,1'-бифенил]-2-карбоксамид [915124-86-6].

Хроматографические условия

Колонка | 125 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм, размер пор 10 нм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–3 | 70 | 30
3–28 | 70 → 20 | 30 → 80

Хроматографируют раствор для идентификации пика примеси, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Телмисартан – 1 (около 15 мин); примесь А – около 0,2; примесь Е – около 0,6; примесь F – около 0,7; примесь В – около 0,9; примесь С – около 1,5; примесь D – около 1,6.

Для идентификации пиков примесей А, В, С, Е и F используются относительное время удерживания соединений, хроматограмма раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмма, прилагаемая к стандартному образцу телмисартана для проверки пригодности хроматографической системы. Для идентификации пика примеси D используются относительное время удерживания соединений, хроматограмма раствора для идентификации пика примеси и хроматограмма, прилагаемая к стандартному образцу телмисартана для идентификации пиков.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси В и телмисартана должно быть не менее 3,0;

- пики примесей должны соответствовать хроматограмме, прилагаемой к фармакопейному стандартному образцу телмисартана для проверки пригодности хроматографической системы.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площади пиков каждой из примесей С и D не должны превышать двукратную площадь пика телмисартана на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площади пиков каждой из примесей А и В не должны превышать
  1,5-кратную площадь пика телмисартана на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика телмисартана на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь пика телмисартана на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади пика телмисартана на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

N-нитрозамины. Определение проводят в соответствии с ОФС «Примеси N-нитрозаминов».

Допустимое содержание примесей:

- N-нитрозодиметиламин (НДМА) – не более 0,03 мкг/г;

- N-нитрозодиэтиламин (НДЭА) – не более 0,03 мкг/г.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,19 г (точная навеска) субстанции в 5 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 75 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 25,73 мг телмисартана C33H30N4O2.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0584 Темозоломид (Temozolomidum)

Вводится впервые

##### Определение

3-Метил-4-оксо-3,4-дигидроимидазо[5,1-d][1,2,3,5]тетразин-8-карбоксамид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % темозоломида C6H6N6O2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. От белого до светло-розового или светло-коричневого с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в диметилформамиде, мало либо очень мало растворим в воде, практически нерастворим в этаноле 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца темозоломида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика темозоломида на хроматограмме раствора стандартного образца темозоломида (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света. Растворы, содержащие темозоломид и его примеси, не подвергают воздействию ультразвука.

Буферный раствор. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 3,2 г натрия гексансульфоната, растворяют в 950 мл воды, прибавляют 20,0 мл уксусной кислоты ледяной и доводят рН раствора уксусной кислотой ледяной до 2,60. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 25:975.

Растворитель. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 3,2 г натрия гексансульфоната, растворяют в 600 мл воды, прибавляют 250,0 мл уксусной кислоты ледяной и доводят рН раствора уксусной кислотой ледяной до 1,80. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца темозоломида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца темозоломида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл раствора стандартного образца темозоломида и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси A. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси A (в виде гидрохлорида [72-40-2]), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси E. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца 2-азагипоксантина моногидрата [7151-03-3], растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца темозоломида, 1,0 мл раствора стандартного образца примеси A, 1,0 мл раствора стандартного образца примеси E и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A: 5-амино-1H-имидазол-4-карбоксамид [360-97-4].

Примесь E (2-азагипоксантин): 3,7-дигидро-4H-имидазо[4,5-d][1,2,3]триазин-4-он [4656-86-4].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °C; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 270 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания основного пика. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Темозоломид – 1 (около 9 мин); примесь E – около 0,5; примесь A – около 1,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей Е и А используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика темозоломида должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками темозоломида и примеси A должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) темозоломида должен быть не более 1,9;

- относительное стандартное отклонение площади пика темозоломида должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь A – 0,4; примесь E – 0,63.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика темозоломида на хроматограмме раствора сравнения;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца темозоломида, мг;
P - содержание темозоломида в фармакопейного стандартном образце темозоломида,%.

Допустимое содержание примесей:

- примеси E – не более 0,2 %;

- примеси A – не более 0,15 %;

- любая другая примесь – не более 0,1%;

- сумма примесей – не более 0,8 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,4 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,75 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора (раздел «Родственные примеси»), и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор фармакопейного стандартного образца темозоломида и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца темозоломида:

- фактор асимметрии пика (AS) темозоломида должен быть не более 1,9;

- относительное стандартное отклонение площади пика темозоломида должно быть не более 1,5 % (6 введений).

Содержание темозоломида C6H6N6O2 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика темозоломида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика темозоломида на хроматограмме раствора стандартного образца темозоломида;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца темозоломида, мг;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание темозоломида в фармакопейного стандартном образце темозоломида,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0585 Тенофовира дизопроксила фумарат

Тенофовир
Tenofoviri disoproxili fumaras

Вводится впервые

##### Определение

Бис({[(пропан-2-илокси)карбонил]окси}метил)[({[(2R)-1-(6-амино-9H-пурин-9-ил)пропан-2-ил]окси}метил)фосфоната] (2E)-бут-2-ендиоат (1:1).

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % тенофовира дизопроксила фумарата C19H30N5O10P·C4H4O4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в диметилформамиде, легко растворим или растворим в метаноле, мало растворим или очень мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика тенофовира дизопроксила на хроматограмме раствора стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Температура плавления. От 114 до 118 °C (ОФС «Температура плавления»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

1. Энантиомерная чистота

Буферный раствор. Растворяют 7,7 г аммония ацетата в 800 мл воды и доводят значение pH аммиака раствором 5 % или уксусной кислотой ледяной до 6,8, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—буферный раствор 150:850.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают около 25,0 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают около 50,0 мг фармакопейного стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси А тенофовира дизопроксила фумарата, растворяют в ПФ, доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и 10 мл раствора стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата, и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,5 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А:
бис({[(пропан-2-илокси)карбонил]окси}метил)[([(2S)-1-(6-амино-9H-пурин-9-ил)пропан-2-ил]окси}метил)фосфонат]
[1280130-08-6].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,0 мм, силикагель модифицированный α1-кислотным гликопротеином для хиральной хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 15 °С; |  |
Температура образца | 4–8 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 260 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 30 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Тенофовира дизопроксил – 1,0 (около 7 мин); примесь A – 1,4.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика тенофовира дизопроксила должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками тенофовира дизопроксила и примеси A должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) тенофовира дизопроксила должен быть не более 2,5.

Допустимое содержание примесей. Содержание примеси А в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- примесь А – не более 1,0 %.

2. Другие примеси

Буферный раствор. Растворяют 1,41 г динатрия гидрофосфата безводного в 800 мл воды и доводят значение pH раствора фосфорной кислотой концентрированной до 5,5, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). 2-Метил-2-пропанол—метанол—буферный раствор 25:275:700.

Подвижная фаза Б (ПФБ). 2-Метил-2-пропанол—метанол—буферный раствор 25:675:300.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают около 5,0 мг фумаровой кислоты, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещаю 10 мг (точная навеска) стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 7,5 мг тенофовира (примесь 1) и 7,5 мг аденина (примесь 2), растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата и доводят объём раствора ПФА до метки.

Примечание

Примесь 1:
({[(2R)-1-(6-амино-9H-пурин-9-ил)пропан-2-ил]окси}метил)фосфоновая кислота [147127-20-6].

Примесь 2: 9H-пурин-6-амин [73-24-5].

Примесь 3:
({[(пропан-2-илокси)карбонил]окси}метил)({[(2R)-1-(6-амино-9H-пурин-9-ил)пропан-2-ил]окси}метил)фосфонат)
[211364-69-1].

Примесь 4:
({[(пропан-2-илокси)карбонил]окси}метил){[(этоксикарбонил)окси]метил}[({[(2R)-1-(6-амино-9H-пурин-9-ил)пропан-2-ил]окси}метил)фосфонат]
[1422284-16-9].

Примесь 5:
(пропан-2-ил)({[(пропан-2-илокси)карбонил]окси}метил)[({[(2R)-1-(6-амино-9H-пурин-9-ил)пропан-2-ил]окси}метил)фосфонат]
[1246812-40-7].

Примесь 6:
бис({[(пропан-2-илокси)карбонил]окси}метил)[({[(2R)-1-(6-{[(пропан-2-илокси)карбонил]амино}-9H-пурин-9-ил)пропан-2-ил]окси}метил)фосфонат]
[1244022-54-5].

Примесь 7:
тетракис({[(пропан-2-илокси)карбонил]окси}метил)метиленбис[азандиил-9H-пурин-6,9-диил(2R)-1,2-пропандиилоксиметилен]бис(фосфонат),
[1093279-76-5].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Температура образца | 4–8 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 260 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2 | 100 | 0
2–30 | 100 → 0 | 0 → 100
30–45 | 0 | 100
45–50 | 0 → 100 | 100 → 0
50–60 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Тенофовира дизопроксил – 1 (около 21 мин); фумаровая кислота – около 0,10; примесь 1 – около 0,12; примесь 2 – около 0,14; примесь 3 – около 0,22; примесь 4 – около 0,78; примесь 5 – около 0,80; примесь 6 – около 1,38; примесь 7 – около 1,76.

Идентификация примесей. Для идентификации пика фумаровой кислоты используют хроматограмму раствора сравнения.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика тенофовира дизопроксила должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примесей 1 и 2 должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата:

- фактор асимметрии пика (AS) тенофовира дизопроксила должен быть не более 2,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь 1 – 0,47; примесь 2 – 0,23; примесь 3 – 0,68; примесь 4 – 1,39; примесь 6 – 1,37.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика тенофовира дизопроксила на хроматограмме раствора стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей;
P – содержание действующего вещества в фармакопейном стандартном образце тенофовира дизопроксила фумарата,%;

Допустимое содержание примесей:

- примесь 3 – не более 1,0 %;

- примесь 5 – не более 0,3 %;

- примеси 1, 2, 4, 6 и 7 – не более 0,15 % каждая;

- любая другая примесь – не более 0,10% каждая;

- сумма примесей – не более 2,0 %.

Не учитывают пики с относительным временем удерживания менее 0,1 от времени удерживания пика тенофовира дизопроксила, пика фумаровой кислоты и пики, площадь которых меньше площади пика тенофовира дизопроксила на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Хлорметилизопропилкарбонат. Не более 0,15 %. Определение проводят методом ГХ (анализ равновесного пара, ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. Во флакон для парофазного анализа помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 5,0 мл бензилового спирта, закрывают и перемешивают до получения раствора.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,2 г (точная навеска) хлорметилизопропилкарбоната, растворяют в бензиловом спирте и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора бензиловым спиртом до метки. Во флакон для парофазного анализа помещают 5,0 мл полученного раствора.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора бензиловым спиртом до метки.

Хроматографические условия

Колонка | длина 30 м; внутренний диаметр 0,53 мм ID, покрытая 3 мкм плёнкой поли[(цианопропил)(фенил)][диметил]силоксана; |
Газ-носитель | азот; |  |
Деление потока | 1:5; |  |
Температура инжектора | 180 °С; |  |
Температура детектора | 260 °С; |  |
Температура колонки | 75 °С в течение 5 мин, нагрев до 150 °С со скоростью 10 °С/мин, нагрев до 230 °С со скоростью 40 °С/мин, 230 °С в течение 5 мин; |  |
Детектор | пламенно-ионизационный. |  |

Условия для парофазного хроматографирования

Объём флакона | 20 мл;
Температура инкубации | 90 °С;
Время инкубации | 20 мин;
Скорость перемешивания | 600 об/мин;
Температура шприца | 105 °С;
Время продувки | 2 мин;
Время хроматографирования | 19,5 мин;
Растворитель (холостой раствор) | бензиловый спирт.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика хлорметилизопропилкарбоната должно составлять не менее 10.

На хроматограмме раствора сравнения относительное стандартное отклонение площади пика хлорметилизопропилкарбоната должно быть не более 15 % (6 введений).

Содержание хлорметилизопропилкарбоната (X) в процентах вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика хлорметилизопропилкарбоната на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика хлорметилизопропилкарбоната на хроматограмме раствора сравнения;
a1 - навеска субстанции, г;
a0 - навеска хлорметилизопропилкарбоната, г.

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

1. Фумаровая кислота. Определение проводят методом титриметрии. (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

- Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 50 мл воды и титруют 0,1 М раствором гидроксида натрия. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

- Параллельно проводят контрольный опыт.

- 1 мл 0,1 М раствора гидроксида натрия соответствует 5,804 мг фумаровой кислоты C4H4O4.

- Содержит не менее 17,5 % и не более 19,0 % фумаровой кислоты в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

2. Тенофовира дизопроксила фумарат. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

- Все растворы, содержащие тенофовира дизопроксил и его примеси, используют свежеприготовленными.

- Буферный раствор. Растворяют 1,0 мл триэтиламина в 500 мл воды и доводят pH раствора фосфорной кислотой концентрированной до 6,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

- Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 450:550.

- Растворитель. Ацетонитрил—вода 5:95.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Температура образца | 4–8 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 260 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 20 мин. |  |

Хроматографируют раствор стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата:

- относительное стандартное отклонение, площади пика тенофовира дизопроксила должно быть не более 2,0 %;

- фактор асимметрии пика (AS) тенофовира дизопроксила должен быть не более 2,0.

Содержание тенофовира дизопроксила фумарата C19H30N5O10P·C4H4O4 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика тенофовира дизопроксила на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика тенофовира дизопроксила на хроматограмме раствора стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца тенофовира дизопроксила фумарата, мг;
P – содержание тенофовира дизопроксила фумарата в фармакопейном стандартном образце тенофовира дизопроксила фумарата,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0183 Теофиллин (Theophyllinum)

Взамен ФС.2.1.0183.18

##### Определение

1,3-Диметил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % теофиллина C7H8N4O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

* Растворяется в растворах щелочей, аммиака и в минеральных кислотах.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца теофиллина.

2. Качественная реакция. К 10 мг субстанции прибавляют 1,0 мл калия гидроксида раствора 36 % и нагревают на водяной бане при 90 °С в течение 3 мин, затем добавляют 1,0 мл сульфаниловой кислоты раствора диазотированного; должно медленно появиться красное окрашивание.

3. Качественная реакция. К 50 мг субстанции прибавляют 0,1 мл водорода пероксида и 0,3 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 %, выпаривают на водяной бане досуха. Остаток смешивают с 0,1 мл раствора аммиака, должно появиться фиолетово-красное окрашивание.

##### Испытания

Температура плавления. От 270 до 274 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1). Субстанцию предварительно высушивают при 100–105 °С до постоянной массы.

Прозрачность раствора. Растворяют 0,5 г субстанции при нагревании в воде, свободной от углерода диоксида, охлаждают и доводят до 75 мл тем же растворителем, раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном В9 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность. Раствор 1 г субстанции в 10 мл нейтрализованного по фенолфталеину спирта 96 % должен окрашиваться в розовый цвет при прибавлении не более 0,1 мл 0,05 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—натрия ацетата раствор 13,6 % в уксусной кислоте растворе 0,5 % 7:93.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 40,0 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца теобромина, растворяют в ПФ, прибавляют 5 мл испытуемого раствора и доводят объём ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мл полученного раствора, и доводят ПФ до метки.

Примечание

Примесь А: 1,3,7-триметил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион [58-08-2].

Примесь В: 3-метил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион [1076-22-8].

Примесь С: N-(4-амино-1,3-диметил-2,6-диоксо-1,2,3,6-татрагидропиримидин-5-ил)формамид [7597-60-6].

Примесь D: N-метил-5-(метиламино)-1H-имидазол-4-карбоксамид [6736-40-9].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 7 мкм; |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 272 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3,5-кратное от времени удерживания основного пика. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Теофиллин – 1 (около 6 мин); примесь С – около 0,3; примесь В – около 0,4; примесь D – около 0,5; примесь A – около 2,5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения разрешение (RS) между пиками теобромина и теофиллина должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А, В, С и D не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);

- площадь пика любой неидентифицированной примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3 А), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 100 мл воды, прибавляют 20 мл серебра нитрата раствор 0,1 М, встряхивают и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до появления синего окрашивания (индикатор –1 мл бромтимолового синего раствор 0,04 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл натрия гидроксида раствор 0,1 М соответствует 18,02 мг теофиллина C7H8N4O2.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0184 Теофиллин моногидрат

Теофиллин
Theophyllinum monohydricum

Взамен ФС.2.1.0184.18

##### Определение

1,3-Диметил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион моногидрат.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % теофиллина C7H8N4O2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

* Растворяется в растворах щелочей, аммиака и в минеральных кислотах.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, предварительно высушенной при температуре 100–105 °C, в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца теофиллина.

2. Качественная реакция. К 10 мг субстанции прибавляют 1,0 мл калия гидроксида раствора 36 % и нагревают на водяной бане при 90 °С в течение 3 мин, затем добавляют 1,0 мл сульфаниловой кислоты раствора диазотированного; должно медленно появиться красное окрашивание.

3. Качественная реакция. К 50 мг субстанции прибавляют 0,1 мл водорода пероксида и 0,3 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 %, выпаривают на водяной бане досуха. Остаток смешивают с 0,1 мл раствора аммиака, должно появиться фиолетово-красное окрашивание.

##### Испытания

Температура плавления. От 270 до 274 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1). Субстанцию предварительно высушивают при 100–105 °С до постоянной массы.

Прозрачность раствора. Растворяют 0,5 г субстанции при нагревании в воде, свободной от углерода диоксида, охлаждают и доводят до 75 мл тем же растворителем, раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном В9 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность. Раствор 1 г субстанции в 10 мл нейтрализованного по фенолфталеину спирта 96 % должен окрашиваться в розовый цвет при прибавлении не более 0,1 мл 0,05 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил – натрия ацетата раствор 13,6 % в уксусной кислоте растворе 0,5 % 7:93.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 40,0 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца теобромина, растворяют в ПФ, прибавляют 5 мл испытуемого раствора и доводят объём ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мл полученного раствора, и доводят ПФ до метки.

Примечание

Примесь А: 1,3,7-триметил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион [58-08-2].

Примесь В: 3-метил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дион [1076-22-8].

Примесь С: N-(4-амино-1,3-диметил-2,6-диоксо-1,2,3,6-татрагидропиримидин-5-ил)формамид [7597-60-6].

Примесь D: N-метил-5-(метиламино)-1H-имидазол-4-карбоксамид [6736-40-9].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 7 мкм; |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 272 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3,5-кратное от времени удерживания основного пика. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Теофиллин – 1 (около 6 мин); примесь С – около 0,3; примесь В – около 0,4; примесь D – около 0,5; примесь A – около 2,5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения разрешение (RS) между пиками теобромина и теофиллина должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей примеси А, В, С и D не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);

- площадь пика любой неидентифицированной примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не менее 8,0 % и не более 9,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 100 мл воды, прибавляют 20 мл серебра нитрата раствор 0,1 М, встряхивают и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до появления синего окрашивания (индикатор – 1 мл бромтимолового синего раствор 0,04 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл натрия гидроксида раствор 0,1 М соответствует 18,02 мг теофиллина C7H8N4O2.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0586 Тербинафина гидрохлорид

Тербинафин
Terbinafini hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

(2E)-N,6,6-Триметил-N-(нафталин-1-илметил)гепт-2-ен-4-ин-1-амина гидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % тербинафина гидрохлорида C21H25N·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Легко растворим в этаноле и метаноле, мало растворим в ацетоне, мало или очень мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тербинафина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл этанола должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от света.

Буферный раствор. Растворяют 2,0 мл триэтиламина в воде, доводят значение рН до 7,5 смесью уксусная кислота ледяная—вода 5:95, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Растворитель А. Ацетонитрил—вода 50:50.

Растворитель Б. Ацетонитрил—метанол 40:60.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор—растворитель Б 300:700.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор—растворитель Б 50:950.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в растворителе А и доводят объём раствора растворителем А до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем А до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем А до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца тербинафина для пригодности системы (содержит примеси В и Е), растворяют в растворителе А и доводят объём раствора растворителем А до метки.

Примечание

Примесь В:
(2Z)-N,6,6-триметил-N-(нафталин-1-илметил)гепт-2-ен-4-ин-1-амин, [78628-81-6].

Примесь Е:
(2E,4E)- 4-(4,4-диметилпент-2-ин-1-илиден)-N1,N5-диметил-N1,N5-бис(нафталин-1-илметил)пент-2-ен-1,5-диамин [934365-23-8].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,0 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0−4 | 100 | 0
4−25 | 100 → 0 | 0 → 100
25−30 | 0 | 100

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Тербинафин – 1 (около 15 мин); примесь В – около 0,9; примесь Е – около 1,7.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей В и Е используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу тербинафина и хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (Rs) между пиками примеси В и тербинафина должно быть не менее 2,0.

Поправочный коэффициент. Для расчёта содержания площадь пика примеси Е умножают на 0,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси В не должна превышать 1,5-кратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика примеси Е не должна превышать 0,5-кратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 50 мл спирта 96 %, прибавляют 5 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают расход титранта между 2 точками перегиба на кривой титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 32,79 мг тербинафина гидрохлорида C21H25N·HCl.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0587 Теризидон (Terizidonum)

Вводится впервые

##### Определение

4,4ʹ-[1,4-Фениленбис(метилиденамино)]ди[(4R)-1,2-оксазолидин-3-он].

Cодержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % теризидона C14H14N4O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком порошок.

Растворимость. Растворим в диметилсульфоксиде, очень мало растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца теризидона.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в натрия гидроксида растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора натрия гидроксида раствором 0,1 М до метки.

- В качестве раствора сравнения используют натрия гидроксида раствор 0,1 М.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 340 нм должен иметь максимум при 280 нм.

##### Испытания

Удельное вращение. От +182,0 до +192,0 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в растворителе, ОФС «Оптическое вращение»).

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,81 г тетраметиламмония гидроксида, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Родственные примеси

1. Циклосерин

Не более 3,0 %. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Нитропруссидный реактив. Натрия нитропруссида раствор 4 %—натрия гидроксида раствор 4 М 1:1.

Срок годности раствора – 8 ч.

Испытуемый раствор. В коническую колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 10 мл воды, предварительно охлаждённой до 0–3 °С, встряхивают в течение 30 секунд и фильтруют, предварительно охладив до 0–3 °С все предметы используемые для фильтрования. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора натрия гидроксида раствором 0,1 М до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора, при постоянном перемешивании прибавляют 25 мл уксусной кислоты раствора 1 М, 10 мл нитропруссидного реактива, доводят объём раствора уксусной кислоты раствором 1 М до метки и встряхивают в течение 20 мин.

Раствор стандартного образца циклосерина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца циклосерина, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, 10 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М, при постоянном перемешивании прибавляют 25 мл уксусной кислоты раствор 1 М, 10 мл нитропруссидного реактива, доводят объём раствора уксусной кислоты раствором 1 М до метки и встряхивают в течение 20 мин.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1 мл воды, 10 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М, при постоянном перемешивании прибавляют 25 мл уксусной кислоты раствора 1 М, 10 мл нитропруссидного реактива, доводят объём раствора уксусной кислоты раствором 1 М до метки и встряхивают в течение 20 мин.

Примечание

Циклосерин: (4R)-4-амино-1,2-оксазолидин-3-он [ 68-41-7].

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора и раствора стандартного образца циклосерина на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 625 нм, в кювете с толщиной слоя 10 мм, по сравнению с раствором сравнения.

Содержание циклосерина в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где А1 – оптическая плотность испытуемого раствора;
А0 – оптическая плотность раствора фармакопейного стандартного образца циклосерина;
а1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца циклосерина, мг;
Р – содержание циклосерина в фармакопейном стандартном образце циклосерина,%;
0,3 – поправочный коэффициент,%.

2. Терефталевый альдегид

Не более 0,1 %. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В коническую колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 25 мл хлороформа, встряхивают в течение 3 мин, фильтруют в мерную колбу вместимостью 100 мл, промывают фильтрат тремя порциями хлороформа по 20 мл и доводят объём раствора хлороформом до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлороформом до метки.

Раствор терефталевого альдегида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг (точная навеска) терефталевого альдегида, растворяют в хлороформе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлороформом до метки.

Примечание

Терефталевый альдегид: Бензол-1,4-карбальдегид [623-27-8].

Контрольный раствор. Навеску теризидона, оставшуюся на фильтре после приготовления испытуемого раствора, высушивают и повторяют все операции, описанные в разделе «Испытуемый раствор».

Измеряют оптическую плотность контрольного раствора, испытуемого раствора и раствора терефталевого альдегида на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 260 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения хлороформ.

Содержание терефталевого альдегида в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где А1 – оптическая плотность испытуемого раствора;
А0 – оптическая плотность раствора терефталевого альдегида;
АК – оптическая плотность контрольного раствора;
а1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска терефталевого альдегида, мг;
Р – содержание терефталевого альдегида в терефталевом альдегиде,%.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 0,1 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 60 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 100 мл смеси диметилформамид—вода 1:1, выдерживают на ультразвуковой бане до полного растворения и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 15,11 мг теризидона C14H14N4O4.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0588 Терифлуномид (Teriflunomidum)

Вводится впервые

##### Определение

(2Z)-3-Гидрокси-N-[4-(трифторметил)фенил]-2-цианобут-2-енамид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % терифлуномида C12H9F3N2O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый мелкокристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в N,N-диметилформамиде, умеренно растворим в ацетоне, мало или очень мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца терифлуномида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 320 нм должен иметь максимумы при 248 нм, 295 нм и минимум при 265 нм.

##### Испытания

Температура плавления. От 221 до 226 °С (с разложением ОФС «Температура плавления», метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 2,74 г калия дигидрофосфата в 550 мл воды, прибавляют 450 мл ацетонитрила и доводят значение рН фосфорной кислотой до 3,5.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца терифлуномида примеси А, растворяют в 200 мл ПФ, прибавляют 25 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А: 4-(трифторметил)анилин [455-14-1].

Примесь В: N-[4-(трифторметил)фенил]-2-цианоацетамид [24522-30-3].

Лефлуномид: 5-метил-N-[4-(трифторметил)фенил]-1,2-оксазол-4-карбоксамид [75706-12-6].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 5-кратное от времени удерживания пика основного вещества. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Терифлуномид – 1 (около 6 мин); примесь А – около 2,0; лефлуномид – около 3,0.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора сравнения и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу терифлуномида для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками терифлуномида и примеси А должно быть не менее 5,0;

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика терифлуномида должно быть не менее 40.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика лефлуномида не должна превышать трёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков примесей, за исключением пика лефлуномида, не должна превышать четырёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,4 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,25 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,025 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,01 %. (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,2 г субстанции в 10 мл воды.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции и платиновый тигель.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 30 мл диметилформамида, титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида в смеси метанола и бензола до перехода жёлтой окраски в синюю (индикатор – 0,1 мл тимолового синего раствор 1 %.) Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида в смеси метанола и бензола соответствует 27 мг терифлуномида C12H9F3N2O2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0682 Тестостерона пропионат

Тестостерон
Testosteroni propionas

Взамен ФС 42-2759-90

C22H32O3 [57-85-2] | М.м. 344,49

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(3-Оксоандрост-4-ен-17β-ил)пропаноат.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % тестостерона пропионата C22H32O3 в пересчёте на сухое вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 %, растворим в растительных маслах, практически нерастворим в воде.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тестостерона пропионата.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения испытуемого раствора, приготовленного для испытания «Количественное определение», в области длин волн от 220 до 300 нм должен иметь максимум при 241 нм.

##### ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 118 до 123 °C (ОФС «Температура плавления»). Используют субстанцию, полученную в испытании «Потеря в массе при высушивании».

Удельное вращение. От +84 до +90 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в спирте 96 %, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл спирта 96 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. Растворяют 50 мг субстанции в 5 мл спирта 70 %, предварительно нейтрализованного до серого окрашивания хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М (индикатор – 0,1 мл смешанного индикатора раствора); полученный раствор должен иметь окраску от серого до серо-фиолетового цвета, которая при прибавлении 50 мкл 0,01 М раствора натрия гидроксида должна перейти в зелёную.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Вода—метанол 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём метанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 2 мг фармакопейного стандартного образца для проверки пригодности системы, содержащего примеси А, В и С, в 5 мл метанола.

Примечание

Примесь А (тестостерона ацетат): (3-оксоандрост-4-ен-17β-ил)ацетат [1045-69-8].

Примесь В (тестостерона изобутират): (3-оксоандрост-4-ен-17β-ил)(2-метилпропаноат) [1169-49-9].

Примесь С (тестостерон): 17β-гидроксиандрост-4-ен-3-он [58-22-0].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки | 25 °С;
Скорость потока | 1,5 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм;
Объём пробы | 20 мкл;
Время хроматографирования | двукратное от времени удерживания пика тестостерона пропионата.

Хроматографируют испытуемый раствор, раствор сравнения и раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Относительное время удерживания соединений. Тестостерона пропионат – 1 (около 8 мин); примесь С – около 0,4; примесь А – около 0,7; примесь В – около 1,4.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу для проверки пригодности системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси В и тестостерона пропионата должно быть не менее 3,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна более чем в 5 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси С не должна более чем в 2 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать семикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,7 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Сушат 0,5 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы при температуре от 100 до 105 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 1,75 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции в спирте 96 % c концентрацией тестостерона пропионата 1 мг/мл.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца тестостерона пропионата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) стандартного образца тестостерона пропионата, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют испытуемый раствор и раствор стандартного образца тестостерона пропионата.

Содержание тестостерона пропионата C22H32O3 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика тестостерона пропионата на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика тестостерона пропионата на хроматограмме раствора стандартного образца тестостерона пропионата;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца тестостерона пропионата, мг;
P – содержание тестостерона пропионата в фармакопейном стандартном образце тестостерона пропионата, %;
W – потеря в массе при высушивании, %.

##### ХРАНЕНИЕ

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0589 Тетраметилтетраазабициклооктандион (Tetramethyltetraazabicyclooctandionum)

Взамен ФС 42-2252-94

##### Определение

1,3,4,6-Тетраметил-3a,6a-дигидроимидазо[4,5-d]имидазол-2,5-дион.

Содержит не менее 99,0 % и не более 102,0 % тетраметилтетраазабициклооктандиона C8H14N4O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойство

Описание. Белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде и хлороформе, растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать рисунку спектра фармакопейного стандартного образца тетраметилтетраазабициклооктандиона.

2. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 1 мл воды, прибавляют 1 мл йода раствора 0,1 М; не должно появляться ни осадка, ни помутнения. При прибавлении 1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и взбалтывании должен образоваться серовато-зелёный кристаллический осадок с металлическим блеском, растворимый в избытке натрия гидроксида раствора 10 %.

3. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 1 мл воды, прибавляют 4 мл натрия гидроксида раствора 30 % и сильно встряхивают в течение 2 мин; должен образоваться белый творожистый осадок.

##### Испытания

Температура плавления. От 225 до 229 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 5,9 до 7,5 (10 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Хлороформ—метанол 10:1.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в хлороформе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,2 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Реактив для детектирования. Фосфорномолибденовой кислоты спиртовой раствор 5 %.

На линию старта пластинки наносят 8 мкл испытуемого раствора (800 мкг), 4 мкл (4 мкг) и 3 мкл (3 мкг) раствора сравнения. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Затем пластинку опрыскивают реактивом для детектирования, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 85–95°С в течение 10 мин и просматривают в УФ свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения (3 мкг) должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора допускается наличие только одной дополнительной зоны адсорбции, не превышающей по совокупности величины и интенсивности флуоресценции зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения (4 мкг) (не более 0,5 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения используют 10 мл испытуемого раствора, полученного в испытаниях «Хлориды».

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3 А), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

В конической колбе вместимостью 500 мл смешивают 25,0 мл 0,1 М раствора церия сульфата, 25 мл серной кислоты разведённой 16 % и прибавляют 10,0 мл испытуемого раствора. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают в течение 3 ч на водяной бане. Промывают холодильник сверху 70 мл воды, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 20,0 мл калия йодида раствора 10 % и выделившийся йод титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата, прибавляя в конце титрования 2 мл крахмала раствора 1 %.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 1,239 мг тетраметилтетраазабициклооктандиона C8H14N4O2.

##### Хранение

Не требует особых условий

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0590 Тетрациклин (Tetracyclinum)

Взамен ФС 42-2672-97

##### Определение

(4S,4aS,5aS,6S,12aS)-3,6,10,12,12a-Пентагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамид.

Cодержит не менее 88,0 % и не более 102,0 % тетрациклина C22H24N2O8 в пересчёте на сухое вещество.

*Субстанция образуется определёнными штаммами Streptomyces aerofaciens или получается другими способами.

##### Свойства

Описание. Жёлтый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен. При хранении на свету темнеет.

Растворимость. Растворим в спирте 96 % и метаноле, очень мало растворим в воде.

* Растворяется в разбавленных растворах кислот и щелочей.

##### Идентификация

1. Тонкослойная хроматография. (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля октадецилсилильного F254.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—метанол—щавелевой кислоты раствор 6,3 %, доведённый до рН 2 аммиака раствором концентрированным 25 % 20:20:60.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца тетрациклина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мг фармакопейного стандартного образца тетрациклина гидрохлорида, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мг фармакопейного стандартного образца тетрациклина гидрохлорида, 5 мг демеклоциклина гидрохлорида и 5 мг окситетрациклина гидрохлорида, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

На линию старта пластинки наносят по 1 мкл испытуемого раствора, раствора стандартного образца тетрациклина гидрохлорида и раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться три чётко разделённые зоны адсорбции.

Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, интенсивности поглощения и величине должна соответствовать зоне адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца тетрациклина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Растворяют 2 мг субстанции в 5 мл серной кислоты концентрированной; должно появиться фиолетово-красное окрашивание. После прибавления 2,5 мл воды окраска должна измениться на жёлтую.

3. Качественная реакция. Растворяют 10,0 мг субстанции в смеси 1,0 мл азотной кислоты разведённой 12,5 % и 5,0 мл воды. Встряхивают и прибавляют 1,0 мл серебра нитрата раствора 1,7 %. Опалесценция полученного раствора не должна превышать опалесценцию смеси 1,0 мл азотной кислоты разведённой 12,5 %, 5,0 мл воды и 1 мл серебра нитрата раствора 1,7 %.

##### Испытания

Удельное вращение от –260 до –280 в пересчёте на сухое вещество (0,5 % раствор субстанции в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты, ОФС «Оптическое вращение»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность испытуемого раствора, измеренная при длине волны 430 нм в кювете с толщиной слоя 1 см (относительно раствора сравнения), в течение 1 ч после приготовления раствора, не должна превышать 0,5 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. Хлористоводородной кислоты раствор 0,01 М.

pH раствора. От 3,0 до 7,0 (1 % суспензия, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы готовят непосредственно перед использованием.

Раствор дикалия гидрофосфата. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 35 г дикалия гидрофосфата, растворяют воде, доводят значение рН фосфорной кислотой разведённой 10 % до 9,00, переносят раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор тетрабутиламмония гидросульфата. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 10 г тетрабутиламмония гидросульфата, растворяют в воде, доводят значение рН натрия гидроксида раствором 8,5 % до 9,00, переносят раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор динатрия эдетата. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 40 г динатрия эдетата дигидрата, растворяют в воде, доводят значение рН натрия гидроксида раствором 8,5 % до 9,00, переносят раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают раствор 80,0 г трет-бутилового спирта в 200 мл воды, прибавляют 100 мл раствора дикалия гидрофосфата, 200 мл раствор тетрабутиламмония гидросульфата, 10 мл раствора динатрия эдетата и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25,0 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца тетрациклина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца тетрациклина гидрохлорида, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси A. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 15 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси A, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси C. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси C, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси D. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 20,0 мл раствора стандартного образца примеси A, 10,0 мл раствора стандартного образца примеси C, 5,0 мл раствора стандартного образца примеси D и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца тетрациклина гидрохлорида, 2,0 мл раствора стандартного образца примеси A, 5,0 мл раствора стандартного образца примеси D и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси C и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М до метки.

Примечание

Примесь А (4-эпитетрациклин):
(4R,4aS,5aS,6S,12aS)-3,6,10,12,12a-пентагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамид
[79-85-6].

Примесь B:
(4S,4aS,5aS,6S,12aS)-2-Ацетил-3,6,10,12,12a-пентагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-4a,5a,6,12a-тетрагидротетрацен-1,11(4H,5H)-дион
[6542-44-5].

Примесь С (ангидротетрациклин):
(4S,4aS,12aS)-3,10,11,12a-тетрагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-1,12-диоксо-1,4,4a,5,12,12a-гексагидротетрацен-2-карбоксамид
[1665-56-1].

Примесь D (4-эпиангидротетрациклин):
(4R,4aS,12aS)-3,10,11,12a-тетрагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-1,12-диоксо-1,4,4a,5,12,12a-гексагидротетрацен-2-карбоксамид
[7518-17-4].

Хроматографические условия

Колонка | 25,0 × 4,6 см, сополимер стирол-дивинилбензола, 8 мкм; |
Температура колонки | 60°С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используются хроматограммы растворов для проверки пригодности и чувствительности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси A (пик 1) и тетрациклина (пик 2) должно быть не менее 2,5;

- разрешение (RS) между пиками тетрациклина (пик 2) и примеси D (пик 3) должно быть не менее 8,0;

- фактор асимметрии пика (AS) тетрациклина должен быть не более 1,25;

- на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для основного пика должно быть не менее 3.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 5,0 %);

- площадь пика примеси B (выходит на хвосте основного пика) не должна превышать 0,4 площади пика примеси A на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0 %);

- площадь пика примеси C не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

- площадь пика примеси D не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Потеря в массе при высушивании

Не более 13,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,5 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 1 мг тетрациклина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь. Срок наблюдения 48 ч.

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,5 ЕЭ/мг тетрациклина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют испытуемый раствор и раствор стандартного образца тетрациклина гидрохлорида.

Содержание тетрациклина C22H24N2O8 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика тетрациклина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика тетрациклина на хроматограмме стандартного раствора А;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца тетрациклина гидрохлорида, мг;
W – потеря в массе при высушивании,%;
P – содержание тетрациклина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце тетрациклина гидрохлорида,%.
0,9241 – коэффициент пересчёта тетрациклина гидрохлорида в тетрациклин.

##### Хранение

В укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0591 Тетрациклина гидрохлорид

Тетрациклин
Tetracyclini hydrochloridum

Взамен ФС 42-2519-97

##### Определение

(4S,4aS,5aS,6S,12aS)-3,6,10,12,12a-Пентагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамида гидрохлорид.

Cодержит не менее 95,0 % и не более 102,0 % тетрациклина гидрохлорида C22H24N2O8·HCl в пересчёте на сухое вещество.

*Субстанция образуется определёнными штаммами Streptomyces aerofaciens или получается другими способами.

##### Свойства

Описание. Жёлтый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим или растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в ацетоне.

* Растворяется в растворах щелочей и карбонатов.

* Водные растворы при стоянии мутнеют вследствие осаждения тетрациклина основания.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тетрациклина гидрохлорида.

2. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля октадецилсилильного F254.

- Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—метанол—щавелевой кислоты раствор 0,5 М, доведённый до рН 2 аммиака раствором концентрированным 25 % 20:20:60.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца тетрациклина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мг фармакопейного стандартного образца тетрациклина гидрохлорида, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мг фармакопейного стандартного образца тетрациклина гидрохлорида, 5 мг демеклоциклина гидрохлорида и 5 мг окситетрациклина гидрохлорида, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 1 мкл испытуемого раствора, раствора стандартного образца тетрациклина гидрохлорида и раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

- Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться три чётко разделённые зоны адсорбции.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, интенсивности поглощения и величине должна соответствовать зоне адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца тетрациклина гидрохлорида.

3. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика тетрациклина на хроматограмме раствора стандартного образца тетрациклина гидрохлорида (раздел «Количественное определение»).

4. Качественная реакция. Растворяют 2 мг субстанции в 5 мл серной кислоты концентрированной; должно появиться фиолетово-красное окрашивание. После прибавления 2,5 мл воды окраска должна измениться на жёлтую.

5. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –240 до –255 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты, ОФС «Оптическое вращение»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность испытуемого раствора, измеренная при длине волны 430 нм в кювете с толщиной слоя 1 см (относительно раствора сравнения), в течение 1 ч после приготовления раствора, не должна превышать 0,5 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. Хлористоводородной кислоты раствор 0,01 М.

pH раствора. От 1,8 до 2,8 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы используют свежеприготовленными.

Раствор дикалия гидрофосфата. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 35 г дикалия гидрофосфата, растворяют в воде, доводят значение рН фосфорной кислотой разведённой 10 % до 9,00, переносят раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор тетрабутиламмония гидросульфата. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 10 г тетрабутиламмония гидросульфата, растворяют в воде, доводят значение рН натрия гидроксида раствором 8,5 % до 9,00, переносят раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор динатрия эдетата. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 40 г динатрия эдетата дигидрата, растворяют в воде, доводят значение рН натрия гидроксида раствором 8,5 % до 9,00, переносят раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают раствор 80,0 г трет-бутилового спирта в 200 мл воды, прибавляют 100 мл раствора дикалия гидрофосфата, 200 мл раствор тетрабутиламмония гидросульфата, 10 мл раствора динатрия эдетата и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца тетрациклина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца тетрациклина гидрохлорида, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси A. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 15 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси A, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси C. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси C, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси D. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 20,0 мл раствора стандартного образца примеси A, 10,0 мл раствора стандартного образца примеси C, 5,0 мл раствора стандартного образца примеси D и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца тетрациклина гидрохлорида, 2,0 мл раствора стандартного образца примеси A, 5,0 мл раствора стандартного образца примеси D и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси C и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М до метки.

Примечание

Примесь A (4-эпитетрациклин):
4R,4aS,5aS,6S,12aS)-3,6,10,12,12a-пентагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-1,11-диоксо-1,4,4a,5,5a,6,11,12a-октагидротетрацен-2-карбоксамид
[79-85-6].

Примесь В (2-ацетил-2-декарбамоилтетрациклин):
(4S,4aS,5aS,6S,12aS)-2-ацетил-3,6,10,12,12a-пентагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-4a,5a,6,12a-тетрагидротетрацен-1,11(4H,5H)-дион
[6542-44-5].

Примесь С (ангидротетрациклин):
(4S,4aS,12aS)-3,10,11,12a-тетрагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-1,12-диоксо-1,4,4a,5,12,12a-гексагидротетрацен-2-карбоксамид
[1665-56-1].

Примесь D (4-эпиангидротетрациклин):
(4R,4aS,12aS)-3,10,11,12a-тетрагидрокси-4-(диметиламино)-6-метил-1,12-диоксо-1,4,4a,5,12,12a-гексагидротетрацен-2-карбоксамид
[7518-17-4].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, сополимер стирол-дивинилбензол, 8 мкм; |
Температура колонки | 60°С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используются хроматограммы растворов для проверки пригодности и чувствительности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси A (пик 1) и тетрациклина (пик 2) должно быть не менее 2,5;

- разрешение (RS) между пиками тетрациклина (пик 2) и примеси D (пик 3) должно быть не менее 8,0:

- фактор асимметрии пика (AS) тетрациклина должен быть не более 1,25;

- на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для основного пика должно быть не менее 3.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 3,0 %);

- площадь пика примеси B (выходит на хвосте основного пика) не должна превышать 0,5 площади пика примеси A на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,5 %);

- площадь пика примеси C не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси D не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 2,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 2). Высушивают в вакууме до постоянной массы 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 60°С и остаточном давлении не превышающем 5 мм рт. ст.

Сульфатная зола. Не более 0,5 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 1 мг тетрациклина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь. Срок наблюдения 48 ч.

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,5 ЕЭ/мг тетрациклина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют испытуемый раствор и раствор стандартного образца тетрациклина гидрохлорида.

Содержание тетрациклина гидрохлорида C22H24N2O8·HCl в субстанции в процентах (Х) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика тетрациклина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика тетрациклина на хроматограмме раствора стандартного образца тетрациклина гидрохлорида;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца тетрациклина гидрохлорида, мг;
W – потеря в массе при высушивании,%;
P – содержание тетрациклина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце тетрациклина гидрохлорида,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0592 Тетризолина гидрохлорид

Тетризолин
Tetryzolini hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

2-[(1RS)-1,2,3,4-Тетрагидронафталин-1-ил]-4,5-дигидро-1H-имидазола гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % тетризолина гидрохлорида C13H16N2·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, спирте 96 % и этаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тетризолина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 10 мл воды, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Растворитель. раствор натрия гидроксида 1 М —метанол 25:75.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А (α-цианотетралин): (1RS)-1,2,3,4-тетрагидронафталин-1-карбонитрил [56536-96-0].

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 25 м × 0,32 мм, покрытая слоем поли(диметил)силоксана, 1 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:40; |  |
Скорость потока | 2,5 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1 мкл. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °C
--- | --- | ---
Колонка | 0–8 | 160
| 8–11 | 160 → 220
| 11–15 | 220
Инжектор | – | 220
Детектор | – | 220

Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Тетризолин – 1 (около 12 мин); примесь A – около 0,5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения отношение сигнал/шум (S/N) для пика тетризолина должен быть не менее 50.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворитель. Уксусная кислота безводная—уксусный ангидрид 3:7.

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 100 мл растворителя и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 23,67 мг тетризолина гидрохлорида C13H16N2·HCl.

##### Хранение

Не требует особых условий.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0187 Тиамазол (Thiamazolum)

Взамен ФС.2.1.0187.18

##### Определение

1-Метил-1,3-дигидро-2H-имидазол-2-тион.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % тиамазола C4H6N2S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или светло-коричневый кристаллический порошок со слабым характерным запахом.

Растворимость. Легко растворим в воде, хлороформе и метиленхлориде, легко растворим или растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тиамазола.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 10 мл серной кислоты раствора 0,28 % и доводят объём раствора серной кислоты раствором 0,28 % до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора серной кислоты раствором 0,28 % до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 нм до 300 нм должен иметь максимумы поглощения при 211 нм и 251 нм.

- Отношение значений оптических плотностей испытуемого раствора А251/А211 должно быть 2,6±0,1.

3. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 1 мл воды, прибавляют 0,1 мл серебра нитрата раствора 2 %; должен образоваться осадок белого цвета, нерастворимый в воде и в избытке азотной кислоты.

4. Качественная реакция. Растворяют 20 мг субстанции в 1 мл воды, прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствор 10 % и взбалтывают. К полученному раствору прибавляют 0,1 мл натрия нитропруссида раствор 1 %; через несколько минут должно появиться жёлтое окрашивание, переходящее в зелёное. После прибавления 1 мл уксусной кислоты окрашивание должно измениться на светло-синее.

##### Испытания

Температура плавления. От 143 до 146 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в хлороформе и доводят объём раствора хлороформом до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, растворяют в хлороформе и доводят объём раствора хлороформом до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлороформом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мг фармакопейного стандартного образца примеси А, 5,0 мг 1-метилимидазола и 5,0 мг фармакопейного стандартного образца примеси С, растворяют в хлороформе и доводят объём раствора хлороформом до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлороформом до метки.

Примечание

Примесь А: N-метил-2,2-диметоксиэтанамин [122-07-6].

Примесь В: 1-метил-1H-имидазол [616-47-7].

Примесь С: 1-метил-2-(метилсульфанил)-1H-имидазол [14486-52-3].

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,25 мм, покрытая слоем поли(диметил)(дифенил)силоксан, деактивированный по отношению к основаниям, 0,5 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Деление потока | 3:20; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1 мкл. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °C
--- | --- | ---
Колонка | 0–2 | 100
| 2–7 | 100 → 250
| 7–22 | 250
Инжектор |  | 150
Детектор |  | 250

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Тиамазол – 1 (около 6,5 мин); примесь А – около 0,3; примесь В – около 0,4; примесь С – около 0,7.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примесей А и В должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей А, В и С не должна превышать площадь пика на хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (не более 0,1 %);

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,2 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,02 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

* Сульфаты. В 10 мл воды растворяют 0,1 г субстанции. Полученный раствор не должен давать реакции на сульфаты.

* Хлориды. Не более 0,02% (ОФС «Хлориды»). Осторожно сжигают и прокаливают 0,1 г субстанции. Остаток растворяют в 10 мл воды и фильтруют в пробирку. Фильтрат должен выдерживать испытание на хлориды.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 75 мл воды, прибавляют 15,0 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида и перемешивают. Прибавляют 30,0 мл 0,1 М раствора серебра нитрата и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с индикатором (бромтимолового синего раствор 0,1 %) до перехода окраски в неисчезающее зелёное окрашивание.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 11,42 мг тиамазола C4H6N2S.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Показатели определяются в зависимости от технологии получения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0188 Тиамина гидрохлорид

Тиамин
Thiamini hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0188.18

##### Определение

3-(4-Амино-2-метилпиримидин-5-ил)метил-5-(2-гидроксиэтил)-4-метил-1,3-тиазол-3-ий хлорида гидрохлорид (1:1).

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % тиамина гидрохлорида С12Н17ClN4OS·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тиамина гидрохлорида.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в воде, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в воде в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимумы при 237 нм и 262 нм.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 1,25 г субстанции в 25 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», должна выдерживать сравнение с эталоном Y7 или GY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН. От 2,7 до 3,4 (2,5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. В химическом стакане вместимостью 1000 мл растворяют 3,764 г натрия гексансульфоната в 900 мл воды, доводят рН раствора до 3,1 фосфорной кислотой концентрированной, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,35 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 15 мл уксусной кислоты раствора 5 % и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют содержимое флакона стандартного образца тиамина, содержащего примеси А, В, С в 1 мл уксусной кислоты раствора 0,75 %.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь А:
(3-(4-Амино-2-метилпиримидин-5-ил)метил-4-метил-5-[(2-сульфонатоокси)этил]-1,3-тиазол-3-ий
[2380-61-2].

Примесь В:
(3-(4-Амино-2-метилпиримидин-5-ил)метил-5-(2-гидроксиэтил)-1,3-тиазол-3-ий
хлорид) [7770-93-6].

Примесь С:
(3-(4-Амино-2-метилпиримидин-5-ил)метил-4-метил-5-(2-хлорэтил]-1,3-тиазол-3-ий
хлорид) [13471-78-8].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 45 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 248 нм; |  |
Объём пробы | 25 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2 | 90 | 10
2–27 | 90–70 | 10–30
27–35 | 70–50 | 30–50
35–42 | 50 | 50

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Тиамин – 1 (около 30 мин); примеси А – около 0,3; примеси В – около 0,9; примеси С – около 1,2.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика тиамина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение ® между пиками примеси В и тиамина должно быть не менее 3,0, между примесью С и тиамином – не менее 2,0.

На хроматограмме раствора сравнения фактор асимметрии пика (AS) тиамина должен быть не более 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,4 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 2,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитываются пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности системы (менее 0,05 %).

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты»). 0,2 г субстанции растворяют в 10 мл воды.

Вода. Не более 5,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,4 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 3,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,11 г (точная навеска) субстанции в 5 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 50 мл уксусного ангидрида и сразу титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Титрование выполняют в течение 2 мин. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 16,86 мг тиамина гидрохлорида С12Н17ClN4OS·HCl.

##### Хранение

В неметаллической таре, в защищённом от света месте.

* Испытание проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0593 Тиаприда гидрохлорид

Тиаприд
Tiapridi hydrochloridum

Взамен ФС 42-3851-99

##### Определение

N-[2-(Диэтиламино)этил]-2-метокси-5-(метансульфонил)бензамида гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % тиаприда гидрохлорида C15H24N2O4S·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко или легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %, умеренно растворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тиаприда гидрохлорида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в 50 мл хлористоводородной кислоты растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 260 до 340 нм должен иметь максимум при 288 нм и минимум при 267 нм.

- В качестве раствора сравнения используют хлористоводородной кислоты раствор 0,01 М.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 5 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным или выдержать сравнение с эталоном BY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН. От 3,5 до 6,0 (10 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

Примесь С. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 %—диоксан—метанол—метиленхлорид 2:10:14:90.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,4 г субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси С. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси С, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для детектирования. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,2 г нингидрина, растворяют в бутаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь С: N,N-диэтилэтан-1,2-диамин [100-36-7].

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (400 мкг) и раствора стандартного образца примеси С (0,4 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают раствором для детектирования, выдерживают при температуре 100 °С в течение 15 мин и просматривают при дневном свете.

Фактор удерживания (Rf). Тиаприд – около 0,6; примесь С – около 0,1.

На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции, находящаяся на уровне зоны адсорбции примеси С, по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца примеси С (не более 0,1 %).

Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). В мерный стакан помещают 5,44 г калия дигидрофосфата и 80 мг натрия октансульфоната, растворяют в 780 мл воды, доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 2,7 и доводят объём раствора до 800 мл водой, прибавляют 150 мл метанола и 50 мл ацетонитрила.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца тиаприда гидрохлорида и 5,0 мг фармакопейного стандартного образца тиаприда N-оксида (примесь D) растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь D:
2-{[2-метокси-5-(метансульфонил)]бензамидо}-N,N-диэтилэтанамин N-оксид [63484-11-7].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 240 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания тиаприда. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения, испытуемый раствор.

Относительные времена удерживания соединений. Тиаприда гидрохлорид – 1 (около 7 мин); примесь D – около 1,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси D используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками тиаприда и примеси D должно быть не менее 4,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика единичной неидентифицированной примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы при температуре 105 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,78 ЕЭ на 1 мг тиаприда гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции c концентрацией 5 мг/мл.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 20 мл уксусной кислоты безводной, прибавляют 20 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 36,49 мг тиаприда гидрохлорида C15H24N2O4S·HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытания проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0594 Тикагрелор (Ticagrelorum)

Вводится впервые

##### Определение

(1S,2S,3S,5R)-3-(2-Гидроксиэтокси)-5-(7-{[(1R,2S)-2-(3,4-дифторфенил) циклопропил]амино}-5-(пропилсульфанил)-3H-[1,2,3]триазоло[4,5 d]пиримидин-3-ил) циклопентан-1,2-диол.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % тикагрелора C23H28F2N6O4S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойство

Описание. Белый или от белого до светло-розового цвета порошок.

Растворимость. Легко растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом в области от 4000 до 400 см–1 или методом нарушенного полного внутреннего отражения в области от 4000 до 650 см–1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тикагрелора.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Примесь 1. Не более 0,0008 %.

Буферный раствор. В химический стакан[line-through]е вместимостью 250 мл помещают 39 г натрия дигидрофосфата дигидрата, растворяют в 200 мл воды, доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной 85 % до 3,0, переносят раствор в мерную колбу вместимостью 250 мл и объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор—ацетонитрил—вода 10:100:890.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор—вода—ацетонитрил 10:290:700.

Растворитель А. Ацетонитрил—вода 50:50.

Растворитель Б. Ацетонитрил—вода 10:90.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,15 г субстанции, прибавляют 10 мл растворителя А, доводят объём раствора водой до метки, перемешивают и центрифугируют при 3500 об/мин в течение 15 мин.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 12 мг фармакопейного стандартного образца примеси 1, растворяют в растворителе Б и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, растворяют в растворителе Б и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь 1:((1R,2S)-2-(3,4-дифторфенил)циклопропан-1-амин [220352-38-5].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 1,8 мкм; |
Температура колонки | 55 °C; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 222 нм; |  |
Объём пробы | 100 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–8 | 94 | 6
8–9 | 94 → 0 | 6 → 100
9–20 | 0 | 100

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Тикагрелор– 1 (около 12 мин); примесь 1– около 0,6.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси 1 должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примеси. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси Е не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы.

Другие примеси

Определение проводят в условиях определения Примеси 1 со следующими изменениями.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 35:65.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 12,5 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца тикагрелора. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 12,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца тикагрелора, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца тикагрелора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь 2:
2-[(1S,2S,3S,4R)-2,3-дигидрокси-4-(7-{[(1R,2S)-2-(3,4-дифторфенил)циклопропил]амино}-5-(пропилсульфанил)-3H-[1,2,3]триазоло[4,5-d]пиримидин-3-ил)циклопентил]окси}этан-1-ол
[274693-26-4].

Примесь 3:
(1S,2S,3S,5R)-3-(2-гидроксиэтокси)-5-(7-{[(1R,2S)-2-(3,4-дифторфенил)циклопропил]амино}-5-(пропилсульфанил)-3H-[1,2,3]триазоло[4,5-d]пиримидин-3-ил)циклопентан-1,2-диол
[1788033-05-5].

Примесь 4:
(1S,2S,3S,5R)-5-[7-амино-5-(пропилсульфанил)-3H-[1,2,3]триазоло[4,5-d]пиримидин-3-ил]-3-(2-гидроксиэтокси)циклопентан-1,2-диол
[1251765-07-7].

Примесь 5:
({2-[(1S,2S,3S,4R)-2,3-Дигидрокси-4-(7-{[(1R,2S)-2-(3,4-дифторфенил)циклопропил]амино}-5-(пропилсульфанил)-3H-[1,2,3]триазоло[4,5-d]пиримидин-3-ил)циклопентил]окси}этил)ацетат
[1616703-93-5].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,0 мм, силикагель фенилсилильный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 40 °C; |  |
Скорость потока | 0,65 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 242 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–40 | 80 → 25 | 20 → 75
40–45 | 25 | 75

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца тикагрелора и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Тикагрелор – 1 (около 23 мин); примесь 4 – около 0,15; примесь 3 – около 1,06; примесь 5 – около 1,23; примесь 2 – около 1,5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика тикагрелора должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора стандартного образца тикагрелора фактор асимметрии пика (AS) тикагрелора должен быть не более 1,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси 4 умножают на 0,5.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- примесь 2 – не более 0,30 %;

- примесь 3 – не более 0,25 %;

- примесь 4 – не более 0,2 %;

- примесь 5 – не более 0,1 %;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 % от суммы площадей всех пиков.

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,6 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Металлы. Определение проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрия (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Испытуемый раствор А. В коническую колбу помещают 0,8 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 2,0 мл серной кислоты концентрированной, нагревают и немедленно прибавляют по каплям водорода пероксид до растворения субстанции (осторожно, вспенивание!). Раствор упаривают, прибавляя дополнительное количество водорода пероксида при потемнении раствора, до объёма около 0,5 мл. Остаток охлаждают, прибавляют 1,0 мл азотной кислоты концентрированной. Полученный раствор количественно переносят водой в мерную колбу вместимостью 200 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора А, прибавляют 0,1 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор платины 20 мкг/мл. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл раствора стандартного образца платины 1000 мкг/мл и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор платины 20 мкг/л. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 мл стандартного раствора платины 20 мкг/мл, прибавляют 0,5 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор платины 40 мкг/л. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,2 мл стандартного раствора платины 20 мкг/мл, прибавляют 0,5 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор платины 60 мкг/л. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,3 мл стандартного раствора платины 20 мкг/мл, прибавляют 0,5 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор ванадия 20 мкг/мл. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл раствора стандартного образца ванадия 1000 мкг/мл и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор ванадия 20 мкг/л. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 мл раствора стандартного образца ванадия 20 мкг/мл, прибавляют 0,5 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор ванадия 100 мкг/л. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл раствора стандартного образца ванадия 20 мкг/мл, прибавляют 0,5 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор ванадия 140 мкг/л. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,7 мл раствора стандартного образца ванадия 20 мкг/мл, прибавляют 0,5 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор молибдена 20 мкг/мл. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл раствора стандартного образца молибдена 1000 мкг/мл и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор молибдена 4 мкг/л. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 0,1 мл стандартного раствора молибдена 20 мкг/мл, прибавляют 2,5 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор молибдена 20 мкг/л. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 мл стандартного раствора молибдена 20 мкг/мл, прибавляют 0,5 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор молибдена 40 мкг/л. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,2 мл стандартного раствора молибдена 20 мкг/мл, прибавляют 0,5 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Контрольный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мл воды, прибавляют 0,5 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Условия испытания

Тип газа | Аргон; |  |
Длина волны | 265,9 нм – для платины; 318,4 нм – для ванадия; 313,3 нм – для молибдена. |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Последовательно определяют абсорбцию каждого раствора относительно азотной кислоты концентрированной при определённой длине волны.

Строят калибровочные графики зависимости атомной абсорбции от концентраций стандартных растворов (мкг/л). Определяют параметры линейной регрессии (ОФС «Статистическая обработка результатов физических, физико-химических и химических испытаний»).

Пригодность системы. Коэффициент корреляции должен быть не менее 0,99.

С помощью уравнений линейной регрессии находят концентрацию платины или ванадия в испытуемом растворе А и молибдена – в испытуемом растворе Б.

Содержание платины и ванадия в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где C – концентрация платины или ванадия в испытуемом растворе А, найденная по калибровочному графику, мкг/л;
a – навеска субстанции, г;
1 000 000 – коэффициент пересчёта г в мкг;
1000 – коэффициент пересчёта л в мл.

Содержание молибдена в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где C – концентрация платины или ванадия в испытуемом растворе, найденная по калибровочному графику, мкг/л;
a – навеска субстанции, г;
1 000 000 – коэффициент пересчёта г в мкг;
1000 – коэффициент пересчёта л в мл.

Допустимое содержание металлов:

- платина – не более 0,0010 %;

- ванадий – не более 0,0025 %;

- молибден – не более 0,0025 %.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Подвижная фаза (ПФ). Буферный раствор—ацетонитрил—вода 10:430:560.

Хроматографические условия

- Время хроматографирования: 9 мин.

Хроматографируют раствор стандартного образца тикагрелора и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца тикагрелора фактор асимметрии пика (AS) тикагрелора должен быть не менее 0,8 и не более 1,5.

Содержание тикагрелора C23H28F2N6O4S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика тикагрелора на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика тикагрелора на хроматограмме раствора стандартного образца тикагрелора;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца тикагрелора, мг;
P – содержание тикагрелора в фармакопейном стандартном образце тикагрелора,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

Не требует особых условий.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0595 Тилорона дигидрохлорид

Тилорон
Tiloroni dihydrochloridum

Взамен ВФС 42-2640-95

##### Определение

2,7-Бис[2-(диэтиламино)этокси]-9H-флуорен-9-она дигидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % тилорона дигидрохлорида C25H34N2O3·2HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Оранжевый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в гексане.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тилорона дигидрохлорид.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика тилорона на хроматограмме раствора стандартного образца тилорона дигидрохлорид (раздел «Родственные примеси»).

3. Качественная реакция. Растворяют 20 мг субстанции в 5 мл воды, прибавляют 0,5 мл аммиака раствора 10 %, 5 мл эфира и взбалтывают. Водный слой должен давать характерную реакцию на хлориды (А) (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

рН раствора. От 4,1 до 5,6 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы должны быть свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 800 мл воды, прибавляют 1 мл трифторуксусной кислоты раствора 50 %, перемешивают и доводят объём раствора водой до метки. Раствор фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 15 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор стандартного образца тилорона дигидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,0 мг фармакопейного стандартного образца тилорона дигидрохлорида, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 75 мг субстанции, растворяют в 10 мл ПФА, прибавляют 1,0 мл водорода пероксида и доводят объём раствора ПФА до метки. В коническую колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мл полученного раствора и выдерживают на водяной бане при температуре от 90 °С до 100 °С в течение 30 мин. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФА до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 270 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–20 | 90 → 75 | 10 → 25
20–23 | 75 | 25
23–24 | 75 → 90 | 25 → 10
24–35 | 90 | 10

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца тилорона дигидрохлорида, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиком тилорона и пиками с относительным временем удерживания 0,9 и 1,3 должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика тилорона должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора сравнения фактор асимметрии пика (AS) тилорона должен быть не более 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,02 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,01 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). В делительной воронке растворяют в 6 мл воды 1,0 г субстанции (точная навеска), прибавляют 2 мл аммиака концентрированного раствора 25 %, 8 мл эфира и встряхивают. После отстаивания водный слой фильтруют в мерную колбу вместимостью 10 мл через фильтр, с размером пор 8–15 мкл, предварительно промытый горячей водой, фильтрат нейтрализуют хлористоводородной кислоты раствором 25 % и доводят объём раствора водой до метки.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 10 мл уксусной кислоты ледяной, прибавляют 5 мл ртути(II) ацетата раствора 5 % и медленно титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до жёлто-коричневого окрашивания (индикатор 0,1 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %) или конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 24,18 мг тилорона дигидрохлорида C25H34N2O3·2HCl.

##### Хранение

В сухом, защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0040 Тимол (Thymolum)

Взамен ФС.2.1.0040.15

##### Определение

5-Метил-2-(пропан-2-ил)фенол.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % тимола С10Н14О в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Бесцветные кристаллы.

Растворимость. Очень легко растворим в спирте 96 %, легко растворим в эфирных и жирных маслах, очень мало растворим в воде.

* Растворяется в разбавленных растворах щелочей.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тимола.

2. Качественная реакция. Растворяют 2 мг субстанции в 1 мл уксусной кислоты ледяной, прибавляют 0,15 мл серной кислоты концентрированной и 0,05 мл азотной кислоты концентрированной; должно появиться голубовато-зелёное окрашивание.

3. Качественная реакция. Растворяют при нагревании на водяной бане 0,2 г субстанции в 2 мл натрия гидроксида раствора 9 % и прибавляют 0,2 мл хлороформа; должна появиться фиолетовое окрашивание.

##### Испытания

Температура плавления. От 48 до 52 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 10 мл натрия гидроксида раствора 8,5 % должен выдерживать сравнение с эталоном IV (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном R6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность. В коническую колбу с притёртой пробкой вместимостью 100 мл помещают 1 г субстанции, прибавляют 20 мл воды, нагревают до полного растворения, охлаждают, закрывают пробкой и встряхивают в течение 1 мин. Затем прибавляют несколько кристаллов субстанции для инициации кристаллизации, энергично встряхивают в течение 1 мин и фильтруют. Прибавляют к 5 мл фильтрата 0,05 мл метилового красного раствора и 0,05 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида. Должно появиться жёлтое окрашивание.

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора для проверки пригодности хроматографической системы и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Хроматографические условия

Колонка | нержавеющая сталь 4000 × 2 мм, заполненная диатомитом для газовой хроматографии, пропитанный смесью подходящей для разделения свободных жирных кислот; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | азот для хроматографии; |  |
Скорость потока | 30 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1 мкл. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура,°С
--- | --- | ---
Колонка | 0–2 | 80
| 2–22 | 80 → 240
| 22–37 | 240
Инжектор |  | 250
Детектор |  | 300

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика тимола должно быть не менее 5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора сумма площадей пиков всех примесей кроме основного, не должна превышать площади пика тимола на хроматограмме раствора
сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Нелетучий остаток. Не более 0,05 %. В металлический или стеклянный бюкс помещают 2,0 г (точная навеска) субстанции, выпаривают на водяной бане и высушивают в сушильном шкафу при температуре от 100 до 105 °С в течение 1 ч до постоянной массы. Масса остатка не должна превышать 1,0 мг.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В мерной колбе вместимостью 100 мл растворяют 0,5 г (точная навеска) субстанции в 5 мл натрия гидроксида раствора 10 %, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают. В колбу с притёртой пробкой помещают 10,0 мл полученного раствора, прибавляют 0,5 г калия бромида, 40 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, 3 капли метилового оранжевого спиртового раствора 0,1 % и при интенсивном встряхивании титруют 0,0167 М раствором калия бромата до исчезновения красного окрашивания (к концу титрования прибавляют 2 капли метилового оранжевого спиртового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,0167 М раствора калия бромата соответствует 3,755 мг тимола С10Н14О.

##### Хранение

В защищённом от света месте, в плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0190 Тимолола малеат

Тимолол
Timololi maleas

Взамен ФС.2.1.0190.18

##### Определение

(2S)-1-(трет-Бутиламино)-3-{[4-(морфолин-4-ил)-1,2,5-тиадиазол-3-ил]окси}пропан-2-ола (2Z)-бут-2-ендиоат (1:1).

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % тимолола малеата C13H24N4O3S·C4H4O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Растворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тимолола малеата.

2. Качественная реакция. Растирают 0,1 г субстанции со смесью 1 мл натрия гидроксида раствора 8,5 % и 3 мл воды и встряхивают с 3 порциями по 5 мл эфира. Добавляют к 0,1 мл водного слоя раствор, содержащий 10 мг резорцина в 3 мл серной кислоты концентрированной, нагревают на водяной бане в течение 15 мин; не должно появляться фиолетово-красного окрашивания. Остаток водного слоя нейтрализуют серной кислотой раствором 9,8 % и прибавляют 1 мл бромной воды. Нагревают на водяной бане в течение 15 мин, затем доводят до кипения и охлаждают. К 0,2 мл полученного раствора прибавляют раствор, содержащий 10 мг резорцина в 3 мл серной кислоты концентрированной и нагревают на водяной бане в течение 15 мин. Должно появиться фиолетово-красное окрашивание. Прибавляют 0,2 мл калия бромида раствора 10 % и нагревают на водяной бане в течение 5 мин. Окрашивание раствора должно измениться на фиолетово-синее.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 25 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным или его окраска должна выдерживать сравнение с эталоном В8 (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

pH раствора. От 3,8 до 4,3 (2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3). Испытание проводят с раствором, полученным в испытании «Прозрачность раствора».

Удельное вращение. От –5,7 до –6,2 в пересчёте на сухое вещество (10 % раствор субстанции в хлористоводородной кислоты растворе 1 М, ОФС «Оптическое вращение»).

Энантиомерная чистота. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Испытание проводят в защищённом от электромагнитного излучения месте.

Смесь растворителей. Метиленхлорид—2-пропанол 10:30.

Подвижная фаза (ПФ). Диэтиламин—2-пропанол—гексан 2:40:960.

Испытуемый раствор. В мерной колбе вместимостью 10 мл растворяют в смеси растворителей 30 мг (точная навеска) субстанции и доводят объём раствора до метки.

Раствор стандартного образца тимолола малеата. В мерной колбе вместимостью 10 мл растворяют в смеси растворителей 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца тимолола малеата и доводят объём раствора до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерной колбе вместимостью 10 мл растворяют в смеси растворителей 3 мг фармакопейного стандартного образца примеси А и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят смесью растворителей до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца тимолола малеата и доводят объём раствора смесью растворителей до метки. Смешивают 1,0 мл полученного раствора с 1,0 мл раствора стандартного образца примеси А.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора смесью растворителей до метки.

Примечание

Примесь А:
((2R)-1-(трет-бутиламино)-3-{[4-(морфолин-4-ил)-1,2,5-тиадиазол-3-ил]окси}пропан-2-ол [26839-76-9]).

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, производное целлюлозы силикагеля для хиральной хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 297 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания основного пика. |

Хроматографируют раствор сравнения, стандартный раствор, раствор стандартного образца тимолола малеата и испытуемый раствор. Примесь А элюируется первой.

Пригодность хроматографической системы:

- на хроматограмме стандартного раствора разрешение ® между пиками примеси А и тимолола малеата должно быть не менее 4,0;

- на хроматограммах испытуемого раствора и раствора стандартного образца тимолола малеата время удерживания тимолола должно быть идентичными.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси А должна быть не более площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля GF254, толщина слоя 0,25 мм.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный—метанол—хлороформ 1:20:80.

Растворитель. Метанол.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,50 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 5,0 мл метанола доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца тимолола малеата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,02 г фармакопейного стандартного образца тимолола малеата, растворяют в 30,0 мл метанола и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мл раствора стандартного образца тимолола малеата и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мл раствора стандартного образца тимолола малеата и доводят объём раствора растворителем до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл раствора стандартного образца тимолола малеата (2 мкг), стандартного раствора А (1 мкг), стандартного раствора Б (05 мкг) и испытуемого раствора (500 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт подвижной фазы пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при 254 нм, помещают на 2 ч в камеру с парами йода, после чего определяют расположение зон адсорбции в дневном свете. Сравнивают посторонние зоны адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора с зонами адсорбции растворов стандартного образца тимолола малеат, стандартного раствора А и стандартного раствора Б.

Пригодность хроматографической системы. Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограммах стандартных растворов А и Б чётко видна зона адсорбции тимолола малеата.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора допускается наличие только одной дополнительной зоны адсорбции, не превышающей по совокупности величины и интенсивности окраски зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца тимолола малеата (не более 0,4 %). Сумма интенсивностей всех посторонних зон адсорбции не должна превышать 1,0 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,35 г (точная навеска) субстанции в 60 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты.

Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 43,25 мг тимолола малеата C13H24N4O3S·C4H4O4.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0191 Тинидазол (Tinidazolum)

Взамен ФС.2.1.0191.18

##### Определение

2-Метил-5-нитро-1-[2-(этансульфонил)этил]-1H-имидазол.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % C8H13N3О4S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Почти белый или бледно-жёлтый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в ацетоне, умеренно растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тинидазола.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания на хроматограмме раствора стандартного образца тинидазола (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. К 10 мг субстанции прибавляют 10 мг цинковой пыли, 0,3 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и 1 мл воды. Нагревают в течение 5 мин в водяной бане и охлаждают. Полученный раствор даёт характерную реакцию на амины ароматические первичные (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 125 до 128 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Опалесценция раствора 1 г субстанции в 20 мл ацетона не должна превышать эталон сравнения I (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—метанол—вода 100:200:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 10 мл метанола и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца тинидазола. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца тинидазола, растворяют в 10 мл метанола и доводят объём раствора ПФ до метки.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси А, 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси В, растворяют в 10 мл метанола и доводят объём раствора ПФ до метки.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца тинидазола, прибавляют 4,0 мл стандартного раствора А и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А: 2-метил-5-нитро-1H-имидазол [696-23-1].

Примесь В: 2-метил-4-нитро-1-[2-(этансульфонил)этил]-1H-имидазол [25459-12-5].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 3,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 320 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика тинидазола. |

Хроматографируют стандартный раствор Б и испытуемый раствор.

Относительные время удерживания соединений. Тинидазол – 1 (около 6 мин); примесь А – около 0,6; примесь B – около 0,7.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примесей А и В должно быть не менее 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади каждого из пиков тинидазола, примесей А и В должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Содержание каждой из примесей А и В в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика каждой из примесей А и В на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика каждой соответствующей примеси на хроматограмме стандартного раствора Б;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца примеси А или В, мг;
P - содержание тинидазола в фармакопейном стандартном образце примеси А или В,%.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика тинидазола на хроматограмме стандартного раствора Б;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца тинидазола, мг;
Р - содержание тинидазола в фармакопейном стандартном образце тинидазола,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь А – не более 0,2 %;

- примесь В – не более 0,2 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,4 %.

Не учитывают пики, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 7).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца тинидазола и испытуемый раствор.

Содержание тинидазола C8H13N3O4S в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика тинидазола на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика тинидазола на хроматограмме раствора стандартного образца тинидазола;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца тинидазола, мг;
P - содержание тинидазола в фармакопейном стандартном образце тинидазола,%;
W - потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0482 Тиоктовая кислота (Acidum thiocticum)

Взамен ФС 42-1918-94

##### Определение

5-[(3RS)-1,2-Дитиолан-3-ил]пентановая кислота.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % тиоктовой кислоты C8H14O2S2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Кристаллический порошок или кристаллы от светло-жёлтого до жёлтого цвета со слабым характерным запахом.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 % и хлороформе, растворим в диметилформамиде, практически нерастворим в воде. При растворении в хлороформе допускается лёгкая опалесценция.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тиоктовой кислоты.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика тиоктовой кислоты на хроматограмме раствора стандартного образца тиоктовой кислоты (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. К 10 мг субстанции прибавляют 1 мл спирта 96 %, 0,5 мл натрия гидроксида раствора 0,5 М, 10 мг натрия боргидрида или цинковой пыли и нагревают в течение 10 мин при 40 °С. Охлаждают, в случае использования цинковой пыли фильтруют, прибавляют 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, 0,2 мл калия феррицианида раствора 5 % и 0,1 мл железа(III) хлорида раствора 3 %; должно появиться синее окрашивание.

##### Испытания

Температура плавления. От 58 до 63 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл натрия гидроксида раствора 0,5 М должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Родственные примеси

1. Примесь В. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Все растворы защищают от света.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 %—вода—этилацетат—пропанол 5:10:40:40.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,2 г субстанции, растворяют в диметилформамиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. Растворяют 20 мг фармакопейного стандартного образца тиоктовой кислоты, содержащей примесь В (α-гидро-ω-гидроксиполи[сульфандиил(3-сульфанил-8-оксооктан-1,8-диил)]), в 1,0 мл диметилформамида (1 % раствор примеси В).

На линию старта пластинки наносят 5 мкл (100 мкг) испытуемого раствора и 5 мкл (1 мкг) стандартного раствора. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат при температуре 50 °С в течение 20 мин, помещают в камеру, насыщенную парами йода, на 30 мин или до появления зон адсорбции и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора должны обнаруживаться 2 разделённые зоны адсорбции примеси В c Rf 0,0 и тиоктовой кислоты с Rf около 0,3.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции, находящаяся на уровне зоны адсорбции примеси В, по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции примеси В на хроматограмме стандартного раствора (не более 1,0 %).

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы, содержащие тиоктовую кислоту, защищают от света.

Буферный раствор. Растворяют 0,7 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,0. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор—метанол 80:410:510.

Растворитель. Растворяют 0,7 г калия дигидрофосфата в 500 мл воды, доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,6. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. Срок годности раствора –24 ч.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца тиоктовой кислоты для проверки пригодности системы, содержащего примесь А (5-[(4RS)-1,2,3-тритиан-4-ил]пентановая кислота [1204245-29-3]), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. Срок годности раствора – 4 ч.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 215 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,5-кратное от времени удерживания пика тиоктовой кислоты. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Тиоктовая кислота – 1 (около 6 мин); примесь А – около 2,2.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика тиоктовой кислоты должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение _(_RS) между пиками тиоктовой кислоты и примеси А должно быть не менее 6,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) тиоктовой кислоты должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика тиоктовой кислоты должно быть не более 5,0% (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику тиоктовой кислоты, должна составлять не менее 1500 теоретических тарелок.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси А умножают на 0,6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика тиоктовой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика тиоктовой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь пика тиоктовой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Меркаптопримеси. Растворяют 0,5 г субстанции в 50 мл спирта 96 %, прибавляют 15 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и титруют 0,1 М раствором йода до появления сине-фиолетового окрашивания (индикатор – 5 мл крахмала раствора 1 %). На титрование должно расходоваться не более 0,5 мл 0,1 М раствора йода.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,2 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 40 °С.

Хлориды. Не более 0,04 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 50 мг субстанции в 10 мл спирта 96 %.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,29 ЕЭ на 1 мг тиоктовой кислоты (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания испытуемый раствор готовят одним из следующих способов:

- 1) 10 мг тиоктовой кислоты растворяют в 1 мл спирта 96 %;

- 2) 1 мг тиоктовой кислоты растворяют в 1 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М.

Коррекцию рН испытуемого раствора осуществляют с помощью буферных растворов.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца тиоктовой кислоты. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца тиоктовой кислоты, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. Раствор хранят не более суток.

Хроматографируют раствор стандартного образца тиоктовой кислоты и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца тиоктовой кислоты:

- фактор асимметрии пика (AS) тиоктовой кислоты должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика тиоктовой кислоты должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику тиоктовой кислоты, должна составлять не менее 5000 теоретических тарелок.

Содержание тиоктовой кислоты C8H14O2S2 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика тиоктовой кислоты на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика тиоктовой кислоты на хроматограмме раствора стандартного образца тиоктовой кислоты;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца тиоктовой кислоты, мг;
W – потеря в массе при высушивании субстанции,%;
P – содержание тиоктовой кислоты в фармакопейном стандартном образце тиоктовой кислоты,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0483 Тиопентал натрия

Тиопентал
Thiopentalum natricum

Взамен ФС 42–2492–87

##### Определение

4,6-Диоксо-5-[(2RS)-пентан-2-ил]-5-этил-1,4,5,6-тетрагидропиридин-2-тиолат натрия (содержит 1:6 (моль/моль) карбоната натрия).

Cодержит не менее 84,0 % и не более 87,0 % тиопентала C11H18N2O2S и не менее 10,2 % и не более 11,2 % натрия Na в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Желтовато-белый порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр тиопентала, полученный в испытании «Температура плавления тиопентала», в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тиопентала.

2. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля GF254.

- Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 %—спирт 96 %—метиленхлорид 5:15:80. В случае расслаивания смеси используют нижний слой.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,10 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

- Раствор стандартного образца тиопентала. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 85 мг фармакопейного стандартного образца тиопентала, растворяют в 10 мл натрия гидроксида раствора 2 М и доводят объём раствора водой до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (10 мкг) и раствора стандартного образца тиопентала (9 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 15 мин, помещают в предварительно насыщенную в течение 20 мин камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры и сразу просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, степени подавления флуоресценции и величине должна соответствовать основной зоне адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца тиопентала.

3. Качественная реакция. Взбалтывают 0,1 г субстанции с 2 мл спирта 96 %, прибавляют 1 каплю кальция хлорида раствора 20 %, 2 капли кобальта нитрата раствора 5 % и 2 капли натрия гидроксида раствора 20 %; должно появиться сине-фиолетовое окрашивание.

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерные реакции А и Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления тиопентала. От 158 до 162 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Растворяют 5,0 г субстанции в 50 мл воды, прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты раствора 10 %, происходит выделение пузырьков. Раствор взбалтывают с 20 мл 1,1-диметилэтилового эфира, отделяют эфирный слой, промывают его 10 мл воды, сушат над натрия сульфатом безводным и фильтруют. Фильтрат выпаривают досуха, и остаток сушат при температуре от 100 до 105 °C. Определяют температуру плавления выделенного осадка.

Прозрачность раствора. Раствор 5 г субстанции в 50 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном GY3 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 10,2 до 11,2 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—фосфорная кислота разведённая 0,1 % 350:650.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца смеси примесей тиопентала, содержащего примеси A, B, C и D, в 1 мл испытуемого раствора.

Примечание

Примесь A:
5-[(2RS)-пентан-2-ил]-2-тиоксо-2,3-дигидропиримидин-4,6(1H,5H)-дион
[29639-67-6].

Примесь B:
5-[(2RS)-пентан-2-ил]-5-этилпиримидин-2,4,6(1H,3H,5H)-дион
[76-74-4].

Примесь C:
5-(пентан-2-ил)-2-тиоксо-5-этил-2,3-дигидропиримидин-4,6(1H,5H)-дион
[87171-21-9].

Примесь D:
2-(карбамотиоилкарбамоил)-3-метил-2-этилгексановая кислота [93227-84-0].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм силикагель октилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 225 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | двукратное от времени удерживания пика тиопентала натрия. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Тиопентал натрия – 1 (около 20 мин); примесь A – около 0,3; примесь B – около 0,4; примесь C – около 0,9; примесь D – около 1,3.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, C и D используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу смеси примесей тиопентала, содержащего примеси A, B, C и D.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примесей A и B должно быть не менее 1,5;

- разрешение (RS) между пиками примеси С и тиопентала должно быть не менее 1,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси B умножается на 1,5.

Допустимое содержание примесей:

- площадь пика примеси C не должна более чем в 6 раз превышать площадь пика тиопентала на хроматограмме раствора сравнения (не более 3,0 %);

- площадь пика примеси B не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика тиопентала на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

- площадь пика примеси D не должна превышать 0,6 площади пика тиопентала на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,2 площади пика тиопентала на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 10 раз превышать площадь пика тиопентала на хроматограмме раствора сравнения (не более 5,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади пика тиопентала на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 2,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 2). Высушивают 0,5 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 100–105 °С и остаточном давлении 0,4 кПа (3 мм. рт. ст.).

Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Растворяют 1,0 г субстанции в 10 мл воды, прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты раствора 8,3 % и, после прекращения выделения газов, фильтруют.

Хлориды. Не более 0,033 % (ОФС «Хлориды»). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 3,0 г субстанции, растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. К 5,0 мл полученного раствора прибавляют 35 мл воды и 10 мл азотной кислоты раствора 16 %. Трижды экстрагируют с помощью 25 мл трет-бутилметилового эфира и отбрасывают верхний слой. Удаляют органический растворитель из нижнего слоя нагреванием на водяной бане.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,35 ЕЭ на 1 мг тиопентала натрия (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

1. Тиопентал

- Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 5 мл воды, прибавляют 2 мл серной кислоты раствора 9,8 % и экстрагируют 4 раза по 10 мл хлороформа. Объединённые экстракты фильтруют, упаривают досуха, остаток растворяют в 30 мл предварительно нейтрализованного диметилформамида и немедленно титруют 0,1 М раствором метилата лития до перехода жёлтой окраски в синюю (индикатор – 0,1 мл тимолового синего метанольного раствора 0,2 %). Предохраняют от действия атмосферного воздуха в течение титрования.

- Параллельно проводят контрольный опыт.

- 1 мл 0,1 М раствора метилата лития соответствует 24,23 мг тиопентала C11H18N2O2S.

2. Натрий

- Растворяют 0,4 г (точная навеска) субстанции в 30 мл воды и титруют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до перехода жёлтой окраски в красную (индикатор – 0,1 мл метилового красного спиртового раствора 0,1 %). Раствор кипятят в течение 2 мин и при необходимости дополнительно титруют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до красной окраски.

- Параллельно проводят контрольный опыт.

- 1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 2,299 мг натрия Na.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0193 Тиоридазина гидрохлорид

Тиоридазин
Thioridazini hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0193.18

##### Определение

10-{2-[(2RS)-1-Метилпиперидин-2-ил]этил}-2-(метилсульфанил)-10H-фенотиазина гидрохлорид.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % тиоридазина гидрохлорида C21H26N2S2·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде и метаноле, растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца тиоридазина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Угол вращения. От –0,10° до +0,10° (5 % раствор субстанции в метаноле при длине кюветы 10 см, ОФС «Оптическое вращение»).

рН раствора. От 4,2 до 5,2 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Подвижная фаза А (ПФА). Триэтиламин—ацетонитрил – вода 2:400:600.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Триэтиламин—ацетонитрил 2:1000.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 22 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца тиоридазина для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси A, B, C, D и E, растворяют в метаноле и доводят тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь А:
10-{2-[(2RS)-1-метилпиперидин-2-ил]этил}-2-метансульфонил-10H-5λ6-фенотиазин-5,5-дион
[100574-22-9].

Примесь В:
10-{2-[(2RS)-1-метилпиперидин-2-ил]этил}-2-метансульфинил-10H-фенотиазин
[5588-33-0].

Примесь С:
10-{2-[(2RS)-1-метилпиперидин-2-ил]этил}-2-(метилсульфанил)-10H-5λ4-фенотиазин-5-он
[7776-05-8].

Примесь D:
10-{2-[(2RS)-1-метилпиперидин-2-ил]этил}-2-метансульфинил-10H-5λ4-фенотиазин-5-он
[53926-89-9].

Примесь E:
10-{2-[(2RS)-1-метилпиперидин-2-ил]этил}-2-метансульфонил-10H-фенотиазин
[14759-06-9].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный, 5 мкм, устойчивый к действию оснований вплоть до рН 11; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 275 нм; |  |
Объём пробы | 25 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 100 | 0
5–35 | 100 → 5 | 0 → 95
35–40 | 5 | 95
40–45 | 5 → 100 | 95 → 0

Хроматографируют испытуемый раствор и растворы сравнения А, Б.

Относительные времена удерживания соединений. Тиоридазин – 1 (около 30 мин), примесь D – около 0,1; примесь A – около 0,3; примесь C – около 0,4; примесь B – около 0,5; примесь E – около 0,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, C, D и E используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу тиоридазина для проверки пригодности хроматографической системы (содержит примеси A, B, C, D и E).

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения Б разрешение ® между пиками примесей С и В должно быть не менее 2,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь A – 1,9; примесь B – 2,4; примесь C – 0,5; примесь D – 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей А, В, С, D, E не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 5 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 50 мл смеси уксусной кислоты безводной и уксусного ангидрида 6:1 и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты.

Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 40,70 мг тиоридазина гидрохлорида C21H26N2S2·HCl.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0484 Тиоуреидоиминометилпиридиния перхлорат (Thioureidoiminomethylpyridinii perchloras)

Вводится впервые

##### Определение

2-(Пиридин-4-илметилиден)гидразин-1-карботиоамида перхлорат.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % тиоуреидоиминометилпиридиния перхлората C7H8N4S·HClO4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Жёлтый или жёлтый с зеленоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в диметилсульфоксиде и диметилформамиде, мало растворим в спирте 60 % и воде.

##### Идентификация

1. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 380 нм должен иметь максимум при 317 нм (раздел «Количественное определение»).

2. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 10 мл воды и прибавляют 1 каплю метиленового синего раствора 0,15 %; должно появиться сине-зелёное окрашивание.

3. Качественная реакция. При сжигании крупинок субстанции на медной проволоке пламя горелки должно окрашиваться в зелёный цвет (хлориды).

##### Испытания

Температура плавления. От 236 до 242 °С (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор уксусной кислоты. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 19 мл уксусной кислоты и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—раствор уксусной кислоты 50:950.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) тиосемикарбазида (гидразин-1-карботиоамид [79-19-6]), растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл стандартного раствора А и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Смешивают 5 мл испытуемого раствора и 5 мл стандартного раствора А.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл стандартного раствора Б и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 246 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика тиоуреидоиминометилпиридиния перхлората. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, стандартный раствор Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Тиоуреидоиминометилпиридиния перхлорат – 1 (около 17 мин); тиосемикарбазид – около 0,8.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика тиосемикарбазида должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками тиосемикарбазида и тиоуреидоиминометилпиридиния перхлората должно быть не менее 2,0;

- фактор асимметрии пика (AS) тиосемикарбазида и тиоуреидоиминометилпиридиния перхлората должен быть не более 2,0 для каждого;

- относительное стандартное отклонение площади каждого из пиков тиосемикарбазида и тиоуреидоиминометилпиридиния перхлората должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание тиосемикарбазида в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика тиосемикарбазида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика тиосемикарбазида на хроматограмме стандартного раствора Б;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска тиосемикарбазида, мг;
P - содержание основного вещества в тиосемикарбазиде,%.

Допустимое содержание примесей. Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- тиосемикарбазид – не более 0,5 %;

- любая другая примесь – не более 0,6 %;

- сумма любых примесей (кроме тиосемикарбазида) – не более 1,0 %;

- сумма всех примесей – не более 1,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 28 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в спирте 60 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 60 % до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 317 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения спирт 60 %.

Содержание тиоуреидоиминометилпиридиния перхлората C7H8N4S·HClO4 в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где А – оптическая плотность испытуемого раствора;
а – навеска субстанции, г;
1019 – удельный показатель поглощения тиоуреидоиминометилпиридиния перхлората ();
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0485 Тобрамицин (Tobramycinum)

Взамен ВФС 42-2011-90

##### Определение

O-3-Амино-3-дезокси-α-D-глюкопиранозил-(1→6)-O-[2,6-диамино-2,3,6-тридезокси-α-D-рибо-гексопиранозил-(1→4)]-2-дезокси-D-стрептамин.

Тобрамицин получают с использованием штаммов Streptomyces tenebrarius или другим способом.

Cодержит не менее 900 мкг на 1 мг тобрамицина C18H37N5O9 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе и эфире.

##### Идентификация

1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика тобрамицина на хроматограмме раствора стандартного образца тобрамицина (раздел «Количественное определение»).

2. ТСХ. (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Растворы используют свежеприготовленными.

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Хлороформ—аммиака раствор концентрированный 25 %—метанол 25:30:60.

- Реактив для детектирования. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 г нингидрина, растворяют в смеси пиридин—бутанол 1:100 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 60 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца тобрамицина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 60 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца тобрамицин, растворяют в 5 мл воды и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Стандартный раствор. Смешивают равные объёмы испытуемого раствора и раствора стандартного образца тобрамицина.

- На линию старта пластинки наносят по 3 мкл испытуемого раствора (18 мкг), раствора стандартного образца тобрамицина (18 мкг) и стандартного раствора (18 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 110 °С в течение 15 мин, опрыскивают реактивом для детектирования и просматривают при дневном свете.

- Результат. Основные зоны адсорбции на хроматограмме испытуемого и стандартного раствора по положению, интенсивности окраски и величине должны соответствовать основным зонам адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца тобрамицина.

3. Качественная реакция. Растворяют 5,0 мг субстанции в 5 мл воды, прибавляют 5 мл раствора нингидрина, нагревают на водяной бане в течение 3 мин; должно появиться фиолетово-синее окрашивание.

- Раствор нингидрина. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,0 г нингидрина, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

##### Испытания

Удельное вращение. От +138 до +148 в пересчёте на безводное вещество (4 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 50 мг субстанции в 1 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 9,0 до 11,0 (10 % раствор в воде, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Растворы используют свежеприготовленными.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Раствор натрия хлорида. Растворяют 29,2 г натрия хлорида в 100 мл воды.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—спирт 96 %—раствор натрия хлорида 20:30:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в 7 мл воды, доводят значение рН до 5,5 серной кислоты раствором 0,5 М и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Реактив для детектирования (А). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мл натрия гипохлорита раствора концентрированного и доводят объём раствора водой до метки.

Реактив для детектирования (Б). Растворяют 1,1 г калия йодида в 60 мл воды, кипятят в течение 15 мин, медленно прибавляют суспензию 1,5 г крахмала растворимого в 10 мл воды, прибавляют 25 мл воды и кипятят в течение 10 мин. Полученный раствор охлаждают до комнатной температуры, переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора водой до метки.

На линию старта пластинки наносят по 1 мкл испытуемого раствора (5 мкг) и раствора сравнения (0,05 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат в потоке горячего воздуха до удаления следов растворителей, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 110 °С в течение 10 мин. Горячую пластинку обрабатывают реактивом для детектирования (А), сушат в потоке холодного воздуха, пока при добавлении капли реактива для детектирования (Б) зона адсорбции, расположенная ниже основной зоны адсорбции, не приобретёт бледно-голубое окрашивание. Затем обрабатывают пластинку реактивом для детектирования (Б) и просматривают в дневном свете. Зона адсорбции, расположенная ниже основной зоны адсорбции, из бледно-голубого окрашивания переходит в голубовато-фиолетовое.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции тобрамицина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Вода. Не более 8,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,3 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,003 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 0,33 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1, или методом 12.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 0,5 мг тобрамицина в 0,5 мл натрия хлорида раствора 0,9 % для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения – 48 ч.

** Бактериальные эндотоксины. Не более 2,0 ЕЭ на 1 мг тобрамицина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 2000 мл помещают 2,0 г трис(гидроксиметил)аминометана, растворяют в 800 мл воды, прибавляют 20 мл серной кислоты раствора 0,5 М, доводят объём раствора ацетонитрилом до метки, охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через фильтр с размером пор 0,2 мкм.

Раствор фтординитробензола. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 г фтординитробензола, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор трис(гидроксиметил)аминометана. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,75 г трис(гидроксиметил)аминометана, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 40,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора диметилсульфоксидом до метки. Срок годности раствора – 4 ч.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 67 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца тобрамицина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 11 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца тобрамицина, прибавляют 0,2 мл серной кислоты раствора 0,5 М, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Дериватизация растворов. В отдельные мерные колбы вместимостью 50 мл помещают по 4,0 мл испытуемого раствора, раствора стандартного образца тобрамицина и воды, прибавляют по 10,0 мл раствора фтординитробензола, по 10,0 мл раствора трис(гидроксиметил)аминометана, перемешивают, герметично закрывают, нагревают на водяной бане при температуре 60 °С в течение 50 мин, вынимают из водяной бани, оставляют на 10 мин, прибавляют ацетонитрил, почти доводя объём растворов до метки, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём растворов ацетонитрилом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 24 мг нафтолбензеина, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора дериватизированным раствором стандартного образца тобрамицина до метки. Раствор используют сразу после приготовления.

Хроматографические условия

Колонка | 300 × 3,9 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 365 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,5-кратное от времени удерживания пика тобрамицина. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и дериватизированные растворы.

Относительные времена удерживания соединений. Тобрамицин – 1 (около 9 мин); нафтолбензеин – около 0,6.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками нафтолбензеина и тобрамицина должно быть не менее 4,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца тобрамицина относительное стандартное отклонение площади пика тобрамицина должно быть не более 2,0 % (6 определений).

Содержание тобрамицина C18H37N5O9 в субстанции в мкг/мг в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика тобрамицина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика тобрамицина на хроматограмме раствора стандартного образца тобрамицина;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца тобрамицина, мкг;
P – содержание тобрамицина в фармакопейном стандартном образце тобрамицина, мкг/мг;
W – содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0486 Тобрамицина сульфат

Тобрамицин
Tobramycini sulfas

Вводится впервые

##### Определение

O-3-Амино-3-дезокси-α-D-глюкопиранозил-(1→6)-O-[2,6-диамино-2,3,6-тридезокси-α-D-рибо-гексопиранозил-(1→4)]-2-дезокси-D-стрептамина сульфат (2:5).

Содержит не менее 634 мкг и не более 739 мкг на 1 мг тобрамицина C18H37N5O9 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика тобрамицина на хроматограмме раствора стандартного образца тобрамицина (раздел «Количественное определение»).

2. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Хлороформ—аммиака раствор концентрированный 25 %—метанол 25:30:60.

- Реактив для детектирования. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 г нингидрина, растворяют в смеси пиридин—бутанол 1:100 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 92 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

- Раствор стандартного образца тобрамицина. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают около 30 мг фармакопейного стандартного образца тобрамицина, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

- Стандартный раствор. Испытуемый раствор—раствор стандартного образца тобрамицина 1:1.

- На линию старта пластинки наносят по 3 мкл испытуемого раствора (18 мкг), раствора стандартного образца тобрамицина (18 мкг) и стандартного раствора (18 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 110 °С в течение 15 мин, обрабатывают раствором для детектирования и просматривают при дневном свете.

- Результат. Основные зоны адсорбции на хроматограмме испытуемого и стандартного раствора по положению, интенсивности окраски и величине должны соответствовать основным зонам адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца тобрамицина.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

pH. От 6,0 до 8,0 (4 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Раствор натрия хлорида. Растворяют 29,2 г натрия хлорида в 100 мл воды.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—спирт 96 %—раствор натрия хлорида 20:30:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в 7 мл воды, доводят значение рН до 5,5 серной кислоты раствором 0,5 М и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Реактив для детектирования (А). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мл натрия гипохлорита раствора концентрированного и доводят объём раствора водой до метки.

Реактив для детектирования (Б). Растворяют 1,1 г калия йодида в 60 мл воды, кипятят в течение 15 мин, медленно прибавляют суспензию 1,5 г крахмала растворимого в 10 мл воды, прибавляют 25 мл воды и кипятят в течение 10 мин. Полученный раствор охлаждают до комнатной температуры, переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора водой до метки.

На линию старта пластинки наносят по 1 мкл испытуемого раствора (5 мкг) и раствора сравнения (0,05 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат в токе горячего воздуха до удаления следов растворителей, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 110 °С в течение 10 мин. Горячую пластинку обрабатывают реактивом для детектирования (А), сушат в потоке холодного воздуха, пока при добавлении капли реактива для детектирования (Б) зона адсорбции, расположенная ниже основной зоны адсорбции, не приобретёт бледно-голубое окрашивание. Затем обрабатывают пластинку реактивом для детектирования (Б) и просматривают в дневном свете. Зона адсорбции расположенная ниже основной зоны адсорбции из бледно-голубого окрашивания переходит в голубовато-фиолетовое.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции тобрамицина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Вода. Не более 7,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 1,0 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 0,5 мг тобрамицина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения – 48 ч.

Бактериальные эндотоксины. Не более 2,0 ЕЭ на 1 мг тобрамицина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 2000 мл помещают 2,0 г трис(гидроксиметил)аминометана, растворяют в 800 мл воды, прибавляют 20 мл серной кислоты раствора 0,5 М, доводят объём раствора ацетонитрилом до метки, охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через фильтр с размером пор 0,2 мкм.

Раствор фтординитробензола. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 г фтординитробензола, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор трис(гидроксиметил)аминометана. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,75 г трис(гидроксиметил)аминометана, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 40,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора диметилсульфоксидом до метки. Срок годности раствора –4 ч.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 67 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца тобрамицина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 11 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца тобрамицина, прибавляют 0,2 мл серной кислоты раствора 0,5 М, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Дериватизация растворов. В отдельные мерные колбы вместимостью 50 мл помещают по 4,0 мл испытуемого раствора, раствора стандартного образца тобрамицина и воды, прибавляют по 10,0 мл раствора фтординитробензола, по 10,0 мл раствора трис(гидроксиметил)аминометана, перемешивают, герметично закрывают, нагревают на водяной бане при температуре 60 °С в течение 50 мин, вынимают из водяной бани, оставляют на 10 мин, прибавляют ацетонитрил, почти доводя объём растворов до метки, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём растворов ацетонитрилом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 24 мг нафтолбензеина, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора дериватизированным раствором стандартного образца тобрамицина до метки. Раствор используют сразу после приготовления.

Хроматографические условия

Колонка | 300 × 3,9 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 км; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 365 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика тобрамицина. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и дериватизированные растворы.

Относительное время удерживания соединений. Тобрамицин – 1 (около 9 мин); нафтолбензеин – около 0,6.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками нафтолбензеина и тобрамицина должно быть не менее 4,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца тобрамицина относительное стандартное отклонение площади пика тобрамицина должно быть не более 2,0 % (6 определений).

Содержание тобрамицина C18H37N5O9 в субстанции в мкг/мг в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика тобрамицина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика тобрамицина на хроматограмме раствора стандартного образца тобрамицина;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца тобрамицина, мкг;
P – содержание тобрамицина в фармакопейном стандартном образце тобрамицина, мкг/мг;
W – содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
1425,4 – молекулярная масса тобрамицина сульфата, 467,5 – молекулярная масса тобрамицина.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0487 Толперизона гидрохлорид

Толперизон
Tolperisoni hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

(2RS)-2-Метил-1-(4-метилфенил)-3-(пиперидин-1-ил)пропан-1-она гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % толперизона гидрохлорида C16H23NO·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок со слабым характерным запахом.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в уксусной кислоте ледяной, легко растворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца толперизона гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Растворяют 0,25 г субстанции в 5 мл воды, свободной от углерода диоксида и прибавляют 0,2 мл йода раствора спиртового 5 %; должен образоваться осадок красно-коричневого цвета.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,5 г субстанции в 5 мл воды, прибавляют 2 мл аммиака раствора 10 % и фильтруют. К 5 мл фильтрата прибавляют 1,5 мл азотной кислоты разведённой 16 %. Полученный раствор должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 167 до 174 °С (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 4,5 до 5,5 (5 % раствор в воде, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Пиперидина гидрохлорид. Не более 0,1 %. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Растворитель. Сероуглерод—триметилпентан 1:3.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,2 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В делительную воронку помещают 5 мл полученного раствора, прибавляют 0,1 мл меди(II) сульфата раствора 5 %, 0,1 мл аммиака раствора концентрированного 25 % и 4,8 мл растворителя. Полученный раствор взбалтывают в течение 30 мин, отстаивают, отделяют слой растворителя, прибавляют при постоянном перемешивании натрия сульфат безводный до прекращения образования его сгустков и фильтруют.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 20 мг пиперидина гидрохлорида, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В делительную воронку помещают 5,0 мл полученного раствора, прибавляют 0,1 мл меди (II) сульфата раствора 5 %, 0,1 мл аммиака раствора концентрированного 25 % и 4,8 мл растворителя. Полученный раствор взбалтывают в течение 30 мин, отстаивают, отделяют слой растворителя, прибавляют при постоянном перемешивании натрия сульфат безводный до прекращения образования его сгустков и фильтруют.

Оптическая плотность испытуемого раствора, измеренная при длине волны 438 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать оптическую плотность стандартного раствора.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы использую свежеприготовленными.

Буферный раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 98 мл лимонной кислоты раствора 0,1 М, 2,0 мл динатрия гидрофосфата раствора 0,2 М и доводят объём раствора водой до метки. Доводят значение рН полученного раствора фосфорной кислотой концентрированной до 2,20.

Срок годности 7 суток при температуре от 2 до 8 °С.

Растворитель. Вода—ацетонитрил 35:65.

Подвижная фаза (ПФ). Буферный раствор—ацетонитрил 350:650. В 1000 мл полученного раствора растворяют 10 г натрия лаурилсульфат и фильтруют.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг предварительно выдержанной при 150 °С в течение 2 ч субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 50 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 260 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика толперизона. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (Rs) между пиками толперизона и ближайшей примесью с площадью более двукратной площади пика толперизона на хроматограмме раствора сравнения должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) толперизона должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика толперизона должно быть не более 1,5 % (6 введений);

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать двукратную площадь пика толперизона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь пика толперизона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее площади пика толперизона на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 1,75 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 20 мл уксусной кислоты ледяной, прибавляют 15 мл ртути(II) ацетата раствора 5 % и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с индикатором (0,1 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %) до перехода окраски в синий цвет.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 28,18 мг толперизона гидрохлорида C16H23NO·HCl.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0488 Топирамат (Topiramatum)

Вводится впервые

##### Определение

[2,3:4,5-Бис-O-(пропан-2,2-диил)-β-D-фруктопираноз-1-ил]сульфамат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % топирамата C12H21NO8S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в метиленхлориде и спирте 96 %, мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца топирамата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика топирамата на хроматограмме раствора стандартного образца топирамата (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От −28,6 до −35,0 в пересчёте на безводное вещество (0,4 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—вода 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1 г субстанции, растворяют в ПФ, при необходимости обрабатывают ультразвуком и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 3 мг фармакопейного стандартного образца фруктозы и 3 мг фармакопейного стандартного образца примеси А (2,3:4,5-бис-O-(пропан-2,2-диил)-β-D-фруктопираноза [20880-92-6], растворяют в испытуемом растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 50 °С; |  |
Температура детектора | 55 °С; |  |
Скорость потока | 0,6 мл/мин; |  |
Детектор | рефрактометрический; |  |
Объём пробы | 50 мкл; |  |
Время хроматографирования | 5-кратное от времени удерживания пика топирамата. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Топирамат – 1 (около 8 мин); фруктоза – около 0,45; примесь А – около 0,9.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси А и топирамата должно быть не менее 1,0;

- фактор асимметрии пика (AS) топирамата должен быть не более 1,2;

- относительное стандартное отклонение площади пика топирамата должно быть не более 2,0 % (6 введений);

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика топирамата должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- примесь А – не более 0,3 %;

- фруктоза – не более 0,3 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаматы и сульфаты. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы используют свежеприготовленными.

Раствор 4-гидроксибензойной кислоты. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,8 г 4-гидроксибензойной кислоты, растворяют в воде для хроматографии и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—раствор 4-гидроксибензойной кислоты 25:975. Доводят значение pH натрия гидроксида раствором 1 М до 9,4.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 60 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 45 мг (точная навеска) натрия сульфата безводного и 30 мг (точная навеска) сульфаминовой кислоты, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, анионообменная смола для хроматографии, 5 мкм; |
Температура детектора | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | кондуктометрический; |  |

Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Сульфат-аниона – 1; сульфамат-аниона – около 0,44.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора относительное стандартное отклонение площадей пиков сульфамат-аниона и сульфат-аниона должно быть не более 15,0 % (6 введений);

Содержание сульфатов в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика сульфат-аниона на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика сульфат-аниона на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска натрия сульфата безводного, мг;
P – содержание натрия сульфата в образце натрия сульфата безводного,%;
96,06 – молекулярная масса сульфат-аниона;
142,04 – молекулярная масса натрия сульфата.

Содержание сульфаматов в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика сульфамат-аниона на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика сульфамат-аниона на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска сульфаминовой кислоты, мг;
P – содержание сульфаминовой кислоты в образце сульфаминовой кислоты,%;
96,09 – молекулярная масса сульфамат-аниона;
97,09 – молекулярная масса сульфаминовой кислоты.

Допустимое содержание примесей:

- сульфаты – не более 0,1 %;

- сульфаматы – не более 0,1 %.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ, при необходимости обрабатывают ультразвуком и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца топирамата. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца топирамата, растворяют в ПФ, при необходимости обрабатывают ультразвуком и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца фруктозы и 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора испытуемым раствором до метки.

Хроматографические условия

- Объём пробы: 20 мкл;

- Время хроматографирования: 3-кратное от времени удерживания пика топирамата.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца топирамата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и топирамата должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора стандартного образца топирамата:

- фактор асимметрии пика (AS) топирамата должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика топирамата должно быть не более 2,0 % (6 введений);

Содержание топирамата C12H21NO8S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика топирамата на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика топирамата на хроматограмме раствора стандартного образца топирамата;
a1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца топирамата, мг;
P – содержание топирамата в стандартном образце топирамата,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте, в герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0489 Трамадола гидрохлорид

Трамадол
Tramadoli hydrochloridum

Взамен ВФС 42-3527-99

##### Определение

rac-(1R,2R)-2-[(Диметиламино)метил]-1-(3-метоксифенил)циклогексан-1-ола гидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % трамадола гидрохлорида C16H25NO2·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, умеренно растворим в изопропаноле, очень мало растворим в ацетоне.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца трамадола гидрохлорида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях». Спектр поглощения 0,008 % раствора субстанции в воде в области длин волн от 230 до 320 нм должен иметь максимум поглощения при длине волны 272 нм и плечо от 276 до 279 нм.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»). Для определения 50 мг субстанции растворяют в 10 мл воды.

##### Испытания

Температура плавления. От 180 до 184 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Угол вращения. От –0,1° до +0,1° (5 % раствор субстанции в воде при длине кюветы 1 дм, ОФС «Оптическое вращение»).

* Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

* Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность. К 10,0 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 0,2 мл метилового красного спиртового раствора 0,1 % и 0,2 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты. Окраска раствора должна измениться с красной на жёлтую при прибавлении не более 0,4 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси

1. Примесь Е. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254, предварительно промытая метанолом.

- Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 32 %—2-пропанол—толуол 1:19:80.

- Испытуемый раствор. Растворяют 0,1 г субстанции в 2 мл метанола.

- Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают

- 25 мг фармакопейного стандартного образца трамадола гидрохлорида, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В 1,0 мл полученного раствора растворяют 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси А трамадола.

- Раствор сравнения Б. Растворяют 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси Е трамадола ((2RS)-2-[(диметиламино)метил]циклогексан-1-он [15409-60-6]) в 5 мл метанола. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (500 мкг трамадола гидрохлорида), раствора сравнения А (по 50 мкг трамадола гидрохлорида и примеси А) и раствора сравнения Б (1 мкг примеси Е). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин и помещают в один желобок двужелобковой камеры таким образом, чтобы слой силикагеля был ориентирован на середину камеры. Другой желобок камеры заполняют аммиака раствором концентрированным 32 %. Через 20 минут в первый желобок помещают ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и помещают на 1 час в камеру, насыщенную парами йода, после чего просматривают в УФ-свете при 254 нм.

- Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения А должны обнаруживаться две чётко разделённые зоны адсорбции.

- Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции, находящаяся на уровне зоны адсорбции примеси Е, по совокупности величины и интенсивности поглощения не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,2 %).

- Примечание – При отсутствии двужелобковой камеры пластинку помещают в обычную камеру с находящимся в ней бюксом с аммиака раствором концентрированным 32 % (около 20 мл) для насыщения. Через 20 мин в камеру осторожно приливают ПФ, отстранив предварительно пластинку, и хроматографируют восходящими способом. Далее поступают, как указано выше.

2. Примесь А и другие. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

- Раствор трифторуксусной кислоты. Смешивают 0,2 мл трифторуксусной кислоты и 100 мл воды.

- Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил – раствор трифторуксусной кислоты 295:703.

- Испытуемый раствор. Помещают 150 мг (точная навеска) субстанции в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

- Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора и доводят ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят ПФ до метки.

- Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А трамадола (rac-(1R,2S)-2-[(диметиламино)метил]-1-(3-метоксифенил)циклогексан-1-ол [2914-77-2], растворяют в 4,0 мл испытуемого раствора и доводят ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 ×4,0 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 оС; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 270 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 4-кратное от времени удерживания трамадола. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания компонентов. Трамадол – 1 (около 5 мин); примесь А – около 0,85.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R) между пиками примеси А и трамадола должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать в 2 раза площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,4 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,02 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,9 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,18 г (точная навеска) субстанции в 25 мл безводной уксусной кислоты, прибавляют 10 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 29,98 мг трамадола гидрохлорида C16H25NO2·HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0490 Транексамовая кислота (Acidum tranexamicum)

Вводится впервые

##### Определение

(1r,4r)-4-(Аминометил)циклогексан-1-карбоновая кислота.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % транексамовой кислоты C8H15NO2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде и уксусной кислоте ледяной, практически нерастворим в спирте 96 % и ацетоне.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца транексамовой кислоты.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 7,0 до 8,0 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 11,0 г натрия дигидрофосфата безводного в 500 мл воды, прибавляют 5 мл триэтиламина, 1,4 г натрия лаурилсульфата, доводят фосфорной кислоты раствором 2 М pH раствора до 2,00, прибавляют 400 мл метанола и доводят объём раствора водой до 1000 мл.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца примеси D (А). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси D (Б). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца примеси D (А) и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца примеси Е. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси Е, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца примеси С, 2,5 мг фармакопейного стандартного образца примеси F, 7,5 мг фармакопейного стандартного образца примеси В, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 1,0 мл раствора стандартного образца примеси D (А) и доводят объём раствора до метки испытуемым раствором.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 6,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь А:
4,4'-[иминобис(метилен)]бис[(1r,4r)-циклогексан-1-карбоновая кислота]
[93940-19-3].

Примесь В:
(1s,4s)-4-(аминометил)циклогексан-1-карбоновая кислота [1197-17-7].

Примесь C:
(4RS)-4-(аминометил)циклогекс-1-ен-1-карбоновая кислота [330838-52-3].

Примесь D: 4-(аминометил)бензойная кислота [56-91-7].

Примесь Е:
(1r,4r)-4-{[(1r,4r)-4-(аминометил)циклогексан-1-карбоксамидо]метил}циклогексан-1-карбоновая кислота
[82755-59-7].

Примесь F:
(1r,4r)-4-(формамидометил)циклогексан-1-карбоновая кислота [1599413-49-6].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,9 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 40 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,5-кратное от времени удерживания пика транексамовой кислоты. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси D (Б), раствор стандартного образца примеси Е, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Транексамовая кислота – 1 (около 10 мин); примесь F – около 0,3; примесь C – около 1,1; примесь D – около 1,2; примесь Е – около 1,3; примесь B – около 1,5.

Идентификация примесей. Хроматограмму раствора стандартного образца примеси D (Б) используют для идентификации пика примеси D; хроматограмму раствора стандартного образца примеси Е используют для идентификации пика примеси Е, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы используют для идентификации пиков примесей В, С и F.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика транексамовой кислоты должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками транексамовой кислоты и примеси C должно быть не менее 2,0;

- разрешение (RS) между пиками примеси C и примеси D должно быть не менее 1,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь B – 1,3; примесь C – 0,4; примесь F – 0,6.

Содержание каждой из примесей С и D в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей C и D на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика примеси D на хроматограмме раствора стандартного образца примеси D (Б);
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца примеси D, мг;
P – содержание примеси D в фармакопейном стандартном образце примеси D,%.

Содержание каждой из примесей E и F в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей E и F на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика примеси E на хроматограмме раствора стандартного образца примеси Е;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца примеси Е, мг;
P – содержание примеси Е в фармакопейном стандартном образце примеси Е,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь В – не более 0,15 %;

- примесь С, D, E, F – не более 0,05 % каждая;

- любая другая примесь – не более 0,05 %;

- сумма примесей – не более 0,2 %.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,03 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,014 % (ОФС «Хлориды»). В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,35 г субстанции, растворяют в воде, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,33 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,14 г (точная навеска) субстанции в 20 мл уксусной кислоты ледяной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с индикатором (0,2 мл фиолетового кристаллического раствора 0,1 %) до перехода окраски в голубовато-зелёную.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 15,72 мг транексамовой кислоты C8H15NO2.

##### Хранение

В плотно закрытой упаковке.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0491 Третиноин (Tretinoinum)

Вводится впервые

##### Определение

(2E,4E,6E,8E)-3,7-Диметил-9-(2,6,6-триметилциклогек-1-ен-1-ил)нона-2,4,6,8-тетраеновая кислота.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % третиноина C20H28O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Жёлтый или светло-оранжевый кристаллический порошок.

* Субстанция чувствительна к воздействию воздуха, тепла и света, особенно в растворе. Все испытания выполняют в месте, защищённом от прямого света, используя свежеприготовленные растворы.

Растворимость. Умеренно растворим в метиленхлориде, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца третиноина.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Все растворы используют свежеприготовленными.

- Растворитель. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М и доводят объём раствора 2-пропанолом до метки.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца третиноина. В мерную колбу вместимость 50 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца третиноина, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 до 400 нм должен соответствовать спектру раствора стандартного образца третиноина.

3. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля GF254.

- Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—ацетон—трет-бутилметиловый эфир—циклогексан 2:4:40:54.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца третиноина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца третиноина, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (5 мкг) и раствора стандартного образца третиноина (5 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и степени подавления флуоресценции должна соответствовать зоне адсорбции третиноина на хроматограмме раствора стандартного образца третиноина.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—вода—метанол 5:225:770.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца изотретиноина ((2Z,4E,6E,8E)-3,7-Диметил-9-(2,6,6-триметилциклогек-1-ен-1-ил)нона-2,4,6,8-тетраеновая кислота [4759-48-2], растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл раствора стандартного образца примеси А [4759-48-2], прибавляют 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора метанолом до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм силикагель октадецилсилильный эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 355 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,2-кратное от времени удерживания пика третиноина. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси А, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Третиноин – 1 (около 35 мин); примесь А – около 0,75.

Идентификация примесей. Хроматограмма раствора стандартного образца примеси А используется для идентификации пика примеси А.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R) между пиками примеси А и третиноина должно быть не менее 5,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) третиноина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика третиноина должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику третиноина, должна составлять не менее 1000 теоретических тарелок.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика третиноина должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,4-кратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Сушат в вакууме до постоянной массы 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 12).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 70 мл ацетона и титруют 0,1 М раствором тетрабутиламмония гидроксида в 2-пропаноле. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора тетрабутиламмония гидроксида в 2-пропаноле соответствует 30,04 мг третиноина C20H28O2.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, под инертным газом в защищённом от света месте.

Содержимое открытой упаковки рекомендуется использовать как можно скорее, а неиспользованную часть необходимо хранить под инертным газом.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0683 Триамцинолон

Триамцинолон
Triamcinolonum

Взамен ФС 42-3115-95

C21H27FO6 [124-94-7] | М.м. 394,43

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

11β,16α,17,21-Тетрагидрокси-9-фторпрегна-1,4-диен-3,20-дион.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 103,0 % триамцинолона C21H27FO6 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Мало растворим в метаноле, практически нерастворим в воде и метиленхлориде.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца триамцинолона.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают досуха, сушат при 60 °C и давлении не более 0,7 кПа и записывают спектры сухих остатков.

2. ТСХ. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»). Все растворы готовят непосредственно перед использованием и защищают от действия света.

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

- Подвижная фаза (ПФ). Добавляют смесь вода—метанол 1,2:8 к смеси эфир—метиленхлорид 15:77.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца триамцинолона. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца триамцинолона, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца дексаметазона, растворяют в растворе стандартного образца триамцинолона и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (5 мкг), раствора стандартного образца триамцинолона (5 мкг) и испытуемого раствора (5 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и немедленно просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

- Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны наблюдаться 2 разделённые зоны адсорбции.

- Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению и величине должна соответствовать зоне адсорбции триамцинолона на хроматограмме раствора стандартного образца триамцинолона.

##### ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 260 до 265 °С (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельное вращение. От +65 до +72 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в диметилформамиде, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Все растворы готовят непосредственно перед использованием и защищают от действия света.

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 525 мл метанола, 400 мл воды, перемешивают и доводят объём раствора водой до метки.

Растворитель. Метанол—вода 1:1.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25,0 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Готовят раствор стандартного образца триамцинолона и стандартного образца триамцинолона примеси С в растворителе с концентрацией 20,0 мкг/мл.

Примечание

Примесь C: 11β,16α,17,21-тетрагидрокси-9-фторпрегна-4-ен-3,20-дион, [337-02-0].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии,5 мкм;
Температура колонки | 25 °C;
Скорость потока | 1,0 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 238 нм;
Объём пробы | 20 мкл;
Время хроматографирования | 4,5-кратное от времени удерживания триамцинолона.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Время удерживания триамцинолона – около 11 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками триамцинолона и примеси С должно быть не менее 1,8.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %), и площадь только двух таких пиков может превышать 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции и платиновый тигель.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Все растворы готовят непосредственно перед использованием и защищают от действия света.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 238 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения спирт 96 %.

Содержание триамцинолона C21H27FO6 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
а - навеска субстанции, г;
389 - удельный показатель поглощения триамцинолона
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.

##### ХРАНЕНИЕ

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0684 Триамцинолона ацетонид

Триамцинолон
Triamcinoloni acetonidum

Взамен ВФС 42-2036-91

C24H31FO6 [76-25-5] | М.м. 434,50

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

11β,21-Дигидрокси-16α,17-[пропан-2,2-диилбис(окси)]-9-фторпрегна-1,4-диен-3,20-дион.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % триамцинолона ацетонидаC24H31FO6в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Умеренно растворим в спирте 96 % и метаноле, практически нерастворим в воде.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия(ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствоватьспектру фармакопейного стандартного образца триамцинолонаацетонида.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатковв диске с калия бромидом или в виде жидкой плёнкив вазелиновом масле.

2. ТСХ. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).Все растворы готовят непосредственно перед использованием и защищают от действия света.

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеляF254.

- Подвижная фаза (ПФ). Добавляютсмесь вода—метанол 1,2:8 к смеси эфир—метиленхлорид 15:77.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образцатриамцинолонаацетонида. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца триамцинолонаацетонида, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают10 мг фармакопейного стандартного образца триамцинолона гексацетонида, растворяют в растворе стандартного образцатриамцинолонаацетонида и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (5 мкг), раствор стандартного образца триамцинолонаацетонида (5 мкг)и испытуемого раствора (5 мкг).Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителейи немедленно просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

- Пригодность хроматографической системы.На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны наблюдаться 2 разделённые зоны адсорбции.

- Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и степени подавления флуоресценции должна соответствовать зоне адсорбции триамцинолона на хроматограмме раствора стандартного образца триамцинолонаацетонида.

3. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика триамцинолонаацетонидана хроматограмме раствора стандартного образца триамцинолона ацетонида (раздел «Количественное определение»).

##### ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От +110 до +117 в пересчёте на безводное вещество (0,5 % раствор субстанции в спирте 96 %, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанциив 10 мл спирта 96 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).Все растворы готовят непосредственно перед использованием и защищают от действия света.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—вода 320:680.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Вода—ацетонитрил 350:650.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25,0 мгсубстанции, растворяют в ПФБ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФБдо метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФБдо метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Готовят раствор фармакопейного стандартного образца триамцинолона ацетонида для проверки пригодности хроматографической системы, содержит примеси B и С, в ПФБс концентрацией 1,0 мг/мл.

Примечание

Примесь В:
11β,21-дигидрокси-16α,17-[пропан-2,2-диилбис(окси)]-9-фторпрегна-1,4,14-триен-3,20-дион,[1260149-96-9].

Примесь С:
11β,21,21-тригидрокси-16α,17-[пропан-2,2-диилбис(окси)]-9-фторпрегна-1,4-диен-3,20-дион,[161740-69-8].

Хроматографическиеусловия

Колонка | 250 × 4,6 мм,силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии,5 мкм;
Температура колонки | 40 °C;
Скорость потока | 1,5 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм;
Объём пробы | 20 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–20 | 100 | 0
20–40 | 100→0 | 0→100

Хроматографируютраствор для проверки разделительной способности хроматографической системы,раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Триамцинолона ацетонида – 1 (около 16 мин); примесь C – около 0,7; примесь B – около 0,8.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей B и C используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу триамцинолона ацетонида для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системыразрешение (RS) между пиками примеси C и Bдолжно быть не менее 2,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси B не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения(не более 0,2 %);

- площадь пика примеси C не должна превышать 1,5-кратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения(не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения(не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышатьпятикратнуюплощадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения(не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее0,5 площадиосновного пика на хроматограмме растворасравнения (менее0,05 %).

Вода. Не более 2,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»).Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы»(метод 3А или 3Б)в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

** Бактериальные эндотоксины. Не более 3,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции в спирте 96 % с концентрацией триамцинолона ацетонида 1 мг/мл. Допускается нагревание не выше 30 °C до полного растворения субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС«Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Подвижная фаза (ПФ). ПФА.

Раствор стандартного образцатриамцинолона ацетонида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска)фармакопейного стандартного образца триамцинолона ацетонида, растворяют в ПФБ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Время хроматографирования: 1,5-кратное от времени удерживания пика триамцинолона ацетонида.

Хроматографируют раствор стандартного образца триамцинолонаацетонида и испытуемый раствор.

Содержание триамцинолона ацетонидаC24H31FO6в процентах в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика триамцинолона ацетонида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика триамцинолона ацетонида на хроматограмме раствора стандартного образца триамцинолона ацетонида;
a1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца триамцинолона ацетонида, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;
P – содержание триамцинолона ацетонида в фармакопейном стандартном образце триамцинолона ацетонида, %.

##### ХРАНЕНИЕ

Взащищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0492 Трибромфенолята висмута и висмута оксида комплекс (Bismuthi tribromphenolatis et bismuthi oxidi complexus)

Взамен ФС 42-2556-88

##### Определение

Бис(2,4,6-трибромфенолят) гидроксид висмута(III)—оксид висмута(III) (1/1).

Cодержит не менее 50,0 % и не более 55,0 % висмута оксида Bi2O3C16H25NO2·HCl.

##### Свойства

Описание. Мелкий аморфный порошок жёлтого цвета со слабым своеобразным запахом.

Растворимость. Практически нерастворим в воде, спирте 96 %, хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца трибромфенолята висмута и висмута оксида комплекса.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на висмут (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

3. Качественная реакция. В пробирку помещают 0,1 г субстанции и взбалтывают с 5 мл натрия гидроксида раствора 10 %, фильтруют. К фильтрату прибавляют хлористоводородную кислоту 25 %; должен образоваться белый хлопьевидный осадок.

##### Испытания

рН. От 5,0 до 8,0 (ОФС «Ионометрия», метод 3).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 г субстанции, растворяют в воде, свободной от углерода диоксида и доводят объём раствора водой до метки.

Свободный трибромфенол. Взбалтывают 0,5 г субстанции с 5 мл спирта 96 % в течение 30 сек и фильтруют. Смешивают 1 мл фильтрата с 15 мл воды; раствор должен оставаться прозрачным в течение 15 мин.

Мышьяк, теллур. В фарфоровый тигель помещают 1 г субстанции, прибавляют 3 мл азотной кислоты, осторожно выпаривают досуха и прокаливают до постоянной массы. Остаток растворяют в 5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 10 %, переносят в колбу и прибавляют 5 мл натрия гипофосфита раствора. Колбу нагревают на кипящей водяной бане в течение 15 мин. Не должно быть ни побурения (As), ни почернения (Te) раствора.

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,5 %. (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают до постоянной массы 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 60 °С.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Помещают 0,3 г (точная навеска) субстанции в круглодонную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 2 мл азотной кислоты, 3 мл хлорной кислоты раствора 30 % и кипятят содержимое колбы до получения объёма жидкости 3,5±0,5 мл. В процессе минерализации допустимо выпадение осадка, растворяющегося при дальнейшем кипячении. Минерализацию считают законченной при условии обесцвечивания раствора и выделения паров хлорной кислоты. Если после охлаждения раствор окрашен, возобновляют минерализацию до получения бесцветного раствора после охлаждения.

Раствор количественно переносят водой в коническую колбу вместимостью 500 мл, прибавляют воды до объёма 300 мл и титруют 0,05 М раствором натрия эдетата до перехода синей или красной окраски в жёлтую (индикатор – 0,5 мл пирокатехинового фиолетового раствора 0,1 % или ксиленолового оранжевого раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 11,65 мг висмута оксида Bi2O3.

##### Хранение

В сухом, защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0493 Тригексифенидила гидрохлорид

Тригексифенидил
Trihexyphenidyli hydrochloridum

Взамен ФС 42-2971-99

##### Определение

(1RS)-3-(Пиперидин-1-ил)-1-фенил-1-циклогексилпропан-1-ола гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % тригексифенидила гидрохлорида C20H31NO·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в спирте 96 % и метиленхлориде, мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тригексифенидила гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 10 мл воды при нагревании до 80 °С. Полученный раствор должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 250 до 252 °С (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельное вращение. От –0,1 до +0,1 в пересчёте на сухое вещество (5 % раствор субстанции в смеси метанола и метиленхлорида 20:80, ОФС «Оптическое вращение»).

рН раствора. От 5,2 до 6,2 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3). Растворяют 0,1 г субстанции в 10 мл воды, свободной от углерода диоксида, при нагревании до 80 °С, охлаждают до комнатной температуры.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Смешивают 300 мл воды и 0,3 мл триэтиламина, доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 4,00 и прибавляют 700 мл ацетонитрила.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси А (3-(пиперидин-1-ил)-1-фенилпропан-1-он [73-63-2]), растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси А и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси А и 1 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика тригексифенидила. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения А, раствор сравнения Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Тригексифенидил – 1 (около 4 мин); примесь А – около 0,7.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика тригексифенидила должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси A и тригексифенидила должно быть не менее 4,0;

- фактор асимметрии пика (АS) примеси А и тригексифенидила должен быть не более 2,0 для каждого;

- относительное стандартное отклонение отношения площади пика тригексифенидила к площади пика примеси А должно быть не более 2,0 % (6 введений);

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,5 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,02 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение=====

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 2 мл муравьиной кислоты, прибавляют 40 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до сине-зелёной окраски (индикатор – 0,2 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 33,79 мг тригексифенидила гидрохлорида C20H31NO·HCl.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0494 Тримебутина малеат

Тримебутин
Trimebutini maleas

Вводится впервые

##### Определение

[(2RS)-2-(Диметиламино)-2-фенилбутил](3,4,5-триметоксибензоата) (2Z)-бут-2-ендиоат (1:1).

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,5 % тримебутина малеата C22H29NO5·C4H4O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в ацетонитриле, умеренно растворим в ацетоне, мало растворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тримебутина малеата.

##### Испытания

Температура плавления. От 131 до 135 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 100 мл ацетона, обработанный ультразвуком, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 3,6 г натрия дигидрофосфата безводного в 900 мл воды и доводят значение рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,0, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Растворяют 0,24 г натрия дигидрофосфата безводного в 180 мл воды, доводят значение рН раствора фосфорной кислотой разведённой 10 % до 2,5, доводят объём раствора водой до 200 мл и прибавляют 50 мл ацетонитрила.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор примеси C. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг примеси C, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца тримебутина для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси D и E, растворяют в 1 мл раствора примеси C.

Примечание

Примесь C: метил(3,4,5-триметоксибензоат) [1916-07-0].

Примесь D:
[(1RS)-1-[(диметиламино)метил]-1-фенилпропил](3,4,5-триметоксибензоат) [92414-09-0].

Примесь E:
[(2RS)-2-(метиламино)-2-фенилбутил](3,4,5-триметоксибензоат) [84333-59-5].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, с полярными группами, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 215 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–3 | 78 | 22
3–6,5 | 78 → 65 | 22 → 35
6,5–15 | 65 → 60 | 35 → 40
15–35 | 60 | 40
35–40 | 60 → 78 | 40 → 22

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Тримебутин – 1 (около 12 мин); малеиновая кислота – около 0,17; примесь E – около 0,9; примесь D – около 1,3; примесь C – около 1,4.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей C, D и E используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу тримебутина для проверки пригодности системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примесей D и C должно быть не менее 1,5;

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси E и тримебутина должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси E не должна более чем в 6 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь пика тримебутина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пик малеиновой кислоты и пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 50,35 мг тримебутина малеата C22H29NO5·C4H4O4.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0496 Тримекаина гидрохлорид

Тримекаин
Trimecaini hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

2-(Диэтиламино)-N-(2,4,6-триметилфенил)ацетамида гидрохлорид.

Содержит не менее 99,5 % и не более 101,0 % тримекаина гидрохлорида C15H24N2O∙HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тримекаина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакция на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 139 до 142 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор субстанции 5 % в воде должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,0 до 6,0 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают микрошприцем 10 мкл дибутиламина и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 100 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор стандартного образца примеси 1. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси 1 и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор стандартного образца примеси 2. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси 2 и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Во флакон помещают 50 мкл раствора стандартного образца примеси 1, 50 мкл раствора стандартного образца примеси 2 и 1,5 мл испытуемого раствора, перемешивают.

Примечание

Примесь 1 (мезидин): триметиланилин [88-05-1].

Примесь 2 (хлорацетилмезидин): N-(2,4,6-триметилфенил)-2-хлорацетамид [3910-51-8].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 2,1 мм, углерод графитированный для хроматографии (1), 3 мкм; |
Температура колонки | 65 °C; |  |
Скорость потока | 0,3 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 208 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл; |  |
Время хроматографирования | 30 мин. |  |

Промывка колонки. Новая колонка или колонка, не прошедшая пригодность хроматографической системы, промывается перед уравновешиванием в две стадии:

- 1) триэтиламина раствором 10 % в метаноле при скорости потока 0,1 мл/мин и температуре 65 °С в течение 24 ч;

- 2) ПФ при скорости потока 0,3 мл/мин и температуре 65 °C в течение 24 ч.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Тримекаин – 1 (около 8,7 мин), примесь 2 – около 0,35; примесь 1 – около 0,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси 2 и примеси 1 должно быть не менее 3,0;

- разрешение (RS) между пиками примеси 1 и тримекаина должно быть не менее 8,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика тримекаина должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- фактор асимметрии пика (AS) тримекаина должен быть не более 2.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- примесь 1 – не более 0,2 %;

- примесь 2 – не более 0,1 %.

- любая другая примесь – не более 0,08 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают примеси, содержание которых менее 0,03 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 4,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 1,0 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 20 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до исчезновения розовой окраски (индикатор – 0,1 мл судана III раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 28,48 мг тримекаина гидрохлорида C15H24N2O∙HCl.

##### Хранение

Не требует особых условий.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0495 Тримекаина гидрохлорид гемигидрат

Тримекаин
Trimecaini hydrochloridum hemihydricum

Взамен ФС 42-2390-92

##### Определение

2-(Диэтиламино)-N-(2,4,6-триметилфенил)ацетамида гидрохлорид гемигидрат.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % тримекаина гидрохлорида C15H24N2O∙HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96 % и хлороформе, почти нерастворим в эфире.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тримекаина гидрохлорида гемигидрата.

2. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 1 мл воды. На предметное стекло наносят 1 каплю полученного раствора, прибавляют по одной капле серной кислоты разведённой 16 % и калия дихромата раствора 5 %, перемешивают; через 5–10 мин по краям должны образоваться кристаллы в виде игл, собранных в пучки.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»). Для определения 20 мг субстанции растворяют в 2 мл воды.

##### Испытания

Температура плавления. От 139 до 142 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 5 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,0 до 5,5 (2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы используют свежеприготовленными или хранят при температуре 4 °С не более суток.

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мл метанола, вносят микрошприцем 10,0 мкл дибутиламина и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают по 10 мг стандартных образцов примесей 1 и 2, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки. К 50 мкл полученного раствора прибавляют 1,5 мл испытуемого раствора.

Примечание

Примесь 1 (мезидин): триметиланилин [88-05-1].

Примесь 2 (хлорацетилмезидин): N-(2,4,6-триметилфенил)-2-хлорацетамид [3910-51-8].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 2,1 мм, углерод графитированный для хроматографии (1), 3 мкм; |
Температура колонки | 65 °C; |  |
Скорость потока | 0,3 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 208 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл; |  |
Время хроматографирования | 30 мин. |  |

Колонку уравновешивают ПФ в течение 10 ч.

Промывка колонки. Новая колонка или не прошедшая пригодность хроматографической системы промывается перед уравновешиванием в две стадии:

- 1) триэтиламина раствором 10 % в метаноле при скорости потока 0,1 мл/мин и температуре 65 °С в течение 24 ч;

- 2) ПФ при скорости потока 0,3 мл/мин и температуре 65 °C в течение 24 ч.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Порядок выхода пиков: примесь 2, примесь 1, тримекаин (около 8 мин).

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используют хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси 2 и примеси 1 должно быть не менее 3;

- фактор асимметрии пика (AS) тримекаина должен быть не более 2;

- относительное стандартное отклонение площади пика тримекаина должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику тримекаина, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- примесь 1 – не более 0,2 %;

- примесь 2 – не более 0,1 %.

- любая другая примесь – не более 0,08 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Потеря в массе при высушивании. Не менее 2,9 % и не более 3,2 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,175 ЕЭ на 1 мг тримекаина гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 1,0 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 20 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до исчезновения розовой окраски (индикатор – 0,1 мл судана III раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 28,48 мг тримекаина гидрохлорида C15H24N2O∙HCl.

##### Хранение

Не требует особых условий.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0497 Тримеперидина гидрохлорид

Тримеперидин
Trimeperidini hydrochloridum

Взамен ФС 42-3680-98

##### Определение

(1,2,5-Триметил-4-фенилпиперидин-4-ил)пропаноата гидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % тримеперидина гидрохлорида C17H25NO2HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, хлороформе и спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца тримеперидина гидрохлорида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 245 до 290 нм должен иметь максимумы при 251 нм, 257 нм и 263 нм.

3. Качественная реакция. К 0,5 мл формальдегида раствора в серной кислоте осторожно по стенкам пробирки приливают 0,5 мл 0,5 % раствора субстанции в хлороформе; на границе соприкосновения двух растворов должно образоваться красное окрашивание в виде кольца.

4. Качественная реакция. К 3 мл 2 % раствора субстанции в воде прибавляют 0,2 мл насыщенного раствора пикриновой кислоты; должен выпадать жёлтый осадок.

5. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 25 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 4,5 до 6,0 (2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Срок годности растворов – 24 ч.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 %—ацетон—бутанол—этилацетат 3,75:10:20:70.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. К 0,1 г субстанции прибавляют 5 мл калия гидроксида раствора спиртового 5 % и кипятят в течение 30 мин. Смесь охлаждают до комнатной температуры, разбавляют 5 мл воды, количественно с 15 мл воды переносят в делительную воронку и экстрагируют 5 мл хлороформа в течение 3 мин. Отделяют нижний (хлороформный) слой.

На линию старта пластинки наносят 10 мкл (100 мкг) испытуемого раствора, 5 мкл (0,5 мкг) и 2 мкл (0,2 мкг) раствора сравнения и 10 мкл раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 30 мин, опрыскивают реактивом Драгендорфа модифицированным и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме 2 мкл раствора сравнения должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 разделённые зоны адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора допускается наличие только одной дополнительной зоны адсорбции, не превышающий по совокупности величины и степени подавления флуоресценции зону адсорбции на хроматограмме 5 мкл раствора сравнения (не более 0,5 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,05 %. (ОФС «Сульфаты», метод 1). В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,4 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 8,75 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 1 мл муравьиной кислоты безводной, прибавляют 20 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с индикатором (0,1 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %) до появления жёлто-зелёной окраски.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 31,19 мг тримеперидина гидрохлорида C17H25NO2HCl.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0498 Триметазидина дигидрохлорид

Триметазидин
Trimetazidini dihydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

1-[(2,3,4-Триметоксифенил)метил]пиперазина дигидрохлорид.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % триметазидина дигидрохлорида C14H22N2O3·2HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко или очень легко растворим в воде, умеренно или мало растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр испытуемого образца в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца триметазидина дигидрохлорида.

2. Качественная реакция. Раствор 25 мг субстанции в 5 мл воды должен давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси

1. Примесь G. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 %—спирт 96 % 20:80.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в 5 мл метанола и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор пиперазина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 22,6 мг пиперазина гексагидрата (около 10 мг пиперазина [110-85-0]), растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора пиперазина и доводят объём раствора метанолом до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (0,1 мг), раствора пиперазина (0,1 мкг пиперазина) и раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (0,05 мкг пиперазина). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, высушивают в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С в течение 30 мин. После охлаждения до комнатной температуры пластинку опрыскивают йодплатината реактивом и просматривают при дневном свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции пиперазина.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции, находящаяся на уровне зоны адсорбции пиперазина, по совокупности интенсивности окраски и величины не должна превышать зону адсорбции пиперазина на хроматограмме раствора пиперазина (не более 0,1 %).

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 2,87 г натрия гептансульфоната в воде и доводят рН раствора фосфорной кислотой разведённой 10 % до 3,00. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Метанол—буферный раствор 357:643.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,2 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца триметазидина для проверки пригодности хроматографической системы, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь А: 1-[(3,4,5-триметоксифенил)метил]пиперазин [52146-35-7].

Примесь В: 1,4-бис[(2,3,4-триметоксифенил)метил]пиперазин [1257-19 – 8].

Примесь С: 2,3,4-триметоксибензальдегид [2103-57-3].

Примесь D: (2,3,4-триметоксифенил)метанол [71989-96-3].

Примесь E: 1-[(2,4,5-триметоксифенил)метил]пиперазин [356083-64-2].

Примесь F: 1-[(2,4,6-триметоксифенил)метил]пиперазин [754147-91-6].

Примесь H: этил{4-[(2,3,4-триметоксифенил)метил]пиперазин-1-карбоксилат} [53531-01-4].

Примесь I: 1-метил-4-[(2,3,4-триметоксифенил)метил]пиперазин [93152-26-2].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 240 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–50 | 95 → 75 | 5 → 25
0–52 | 75 → 95 | 25 → 5

Приводят колонку в состояние равновесия при исходных условиях в течение не менее 1 часа.

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Триметазидин – 1 (около 25 мин), примесь D – около 0,2; примесь C – около 0,4; примесь H – около 0,6; примесь A – около 0,9; примесь I – около 0,9; примесь E – около 0,95; примесь F – около 1,4; примесь B – около 1,8.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси Е и триметазидина должно быть не менее 3,0.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика триметазидина должно быть не менее 10.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь В – 0,55; примесь С – 0,37; примесь F – 0,71.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A, B, C, D, E, F, H и I не должна превышать площадь пика триметазидина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика триметазидина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика триметазидина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2%).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 2,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 100–105 °С и остаточном давлении 15 кПа.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,12 г (точная навеска) субстанции в 50 мл воды, прибавляют 1 мл азотной кислоты концентрированной и титруют 0,1 М раствором серебра нитрата. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 16,96 мг триметазидина дигидрохлорида C14H22N2O3·2HCl.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0499 Трипторелина ацетат

Трипторелин
Triptorelini acetas

Вводится впервые

##### Определение

5-Оксо-L-пролил-L-гистидил-L-триптофил-L-серил-L-тирозил-D-триптофил-L-лейцил-L-аргинил-L-пролилглицинамида ацетат.

Cодержит не менее 95,0 % и не более 105,0 % трипторелина C64H82N18O13 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей и уксусной кислоты вещество.

##### Свойства

Описание. Белого или почти белого со слабым желтоватым оттенком цвета порошок без запаха или со слабым запахом уксусной кислоты.

Растворимость. Легко растворим в воде и в уксусной кислоте ледяной.

##### Идентификация

1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика трипторелина на хроматограмме раствора стандартного образца трипторелина (раздел «Количественное определение»).

2. Аминокислотный состав. Определение проводят в соответствии с ОФС «Аминокислотный анализ» (гидролиз по методу 1, анализ по методу 5). Относительное содержание каждой аминокислоты рассчитывают в мольных долях, принимая за единицу одну седьмую суммарного мольного содержания глутаминовой кислоты, серина, гистидина, глицина, аргинина, тирозина, лейцина, пролина по формуле:

где ni – количество молей соответствующей аминокислоты, мкмоль;
∑n(Glu,His,Gly,Arg,Tyr,Leu,Pro) – сумма мольного содержания глутаминовой кислоты, гистидина, глицина, аргинина, тирозина, лейцина и пролина, мкмоль.

Относительное содержание аминокислот должно быть в следующих пределах: глутаминовая кислота – от 0,90 до 1,10; серин – от 0,70 до 1,10; гистидин – от 0,90 до 1,10; глицин – от 0,90 до 1,10; аргинин – от 0,90 до 1,10; тирозин – от 0,90 до 1,10; лейцин – от 0,90 до 1,10 и пролин – от 0,90 до 1,10.

Удельное вращение. От –65,0 до –75,0 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей и уксусной кислоты вещество (0,5 % раствор субстанции в уксусной кислоты растворе 1 %, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 20 мг субстанции в 10 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 4,0 до 6,0 (0,2 % раствор субстанции, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 7,85 мл фосфорной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки. К 700 мл полученного раствора прибавляют 100 мл ацетонитрила, перемешивают и доводят значение pH триэтиламином до 2,5.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—раствор А 100:900.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца трипторелина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца трипторелина, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор натрия азида. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,0 г натрия азида, растворяют в воде, доводят объём раствора водой до метки, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 10 мин и пропускают через раствор аргона в течение 10 мин.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора раствором натрия азида до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора раствором натрия азида до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг фармакопейного стандартного образца трипторелина ацетата и 5 мг фармакопейного стандартного образца D-Trp-трипторелина, растворяют в 40 мл воды, доводят объём раствора этим же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствором натрия азида до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 42 °С; |  |
Температура образца | 5 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл – раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы; 40 мкл – остальные растворы; |
Время хроматографирования | 40 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Трипторелин – 1 (около 20 мин); примесь D-Pyr-трипторелин – около 0,6; D-Trp-трипторелин – около 0,8.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси D-Trp-трипторелин используют относительное время удерживания соединений.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должен присутствовать пик D-Trp-трипторелина; разрешение (RS) между пиком трипторелина и пиком D-Trp-трипторелина должно быть не менее 3,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика трипторелина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать шестикратную площадь пика трипторелина на хроматограмме раствора сравнения (не более 3,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика трипторелина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 6,0 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют около 20,0 мг (точная навеска) субстанции.

Уксусная кислота. От 4,5 до 12,0 %. (ОФС «Определение уксусной кислоты в синтетических пептидах»).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 90 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца трипторелина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца трипторелина:

- фактор асимметрии пика (AS) трипторелина должен быть не более 2,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика трипторелина должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание трипторелина C64H82N18O13 в субстанции в процентах в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей и уксусной кислоты вещество (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика трипторелина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика трипторелина на хроматограмме раствора стандартного образца трипторелина;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца трипторелина, мг;
W – содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
A – содержание уксусной кислоты в субстанции,%;
P – содержание трипторелина в фармакопейном стандартном образце трипторелина,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте при температуре от 2 до 8 °С.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0196 Трифлуоперазина гидрохлорид

Трифлуоперазин
Trifluoperazini hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0196.18

##### Определение

10-[3-(4-Метилпиперазин-1-ил)пропил]-2-(трифторметил)-10H-фенотиазина гидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % трифлуоперазина гидрохлорида C21H24F3N3S·2HCl в пересчёте на сухое вещество.

Работу с субстанцией следует проводить под тягой в резиновых перчатках. По окончании работы руки нужно вымыть холодной водой, лучше слегка подкисленной, без мыла.

##### Свойства

Описание. От белого до светло-жёлтого цвета кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в спирте 96 %, умеренно растворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца трифлуоперазина гидрохлорида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Растворы защищают от прямых солнечных лучей и используют свежеприготовленными.

- Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и доводят объём раствора до метки.

- Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора А в области длин волн от 280 до 350 нм должен иметь максимум при 305 нм.

- Спектр поглощения испытуемого раствора Б в области длин волн от 230 до 280 нм должен иметь максимум при 255 нм с удельным показателем поглощения около 650.

3. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 10 мл воды, прибавляют 1 мл бромной воды и нагревают до кипения; должно появиться сначала коричневое, а затем бледно-розовое окрашивание.

4. Качественная реакция. Растворяют 0,15 г субстанции в 15 мл воды. К 5 мл раствора прибавляют 1 мл раствора натрия гидроксида раствора 10 % и через 5 мин фильтруют. Фильтрат должен давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора» должен выдерживать сравнение с эталоном BY4 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 1,6 до 2,5 (10 % раствор в воде, свободной от углерода диоксида, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Растворы защищают от прямых солнечных лучей и используют свежеприготовленными.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля GF254.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетон—диэтиламин—циклогексан 10:10:80.

Растворитель. Диэтиламин—метанол 5:95.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,2 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (0,2 мг) и раствора сравнения (1 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения должна наблюдаться чёткая зона адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по совокупности величины и степени интенсивности флуоресценции не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 175 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) высушенной при 100–105 °С до постоянной массы субстанции в 25 мл уксусной кислоты безводной, прибавляют 5 мл ртути(II) ацетата раствора 5 % и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до перехода окраски из фиолетовой в голубовато-зелёную (индикатор – кристаллического фиолетового раствор 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 24,02 мг трифлуоперазина гидрохлорида C21H24F3N3S∙2НС1.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0500 Троксерутин (Troxerutinum)

Вводится впервые

##### Определение

Смесь O-гидроксиэтилпроизводных рутозида, содержащая не менее 80 % 2-[3,4-бис(2-гидроксиэтокси)фенил]-5-гидрокси-7-(2-гидроксиэтокси)-3-\{[6-O-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)-β-D-глюкопиранозил]окси}-4H-1-бензопиран-4-она.

Содержит не менее 95,0 % и не более 105,0 % троксерутина C33H42O19 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. От жёлтого до желтовато-зелёного цвета кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, очень мало растворим или практически нерастворим в спирте 96 %, практически нерастворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца троксерутина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика троксерутина на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы (раздел «Компонентный состав»).

##### Испытания

Компонентный состав. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор натрия дигидрофосфата. Растворяют 15,6 г натрия дигидрофосфата дигидрата в 900 мл воды и доводят значение рН фосфорной кислоты разведённой 10 % раствором до 4,4. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—раствор натрия дигидрофосфата 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца троксерутина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора для проверки пригодности хроматографической системы и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 350 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика основного компонента (трис(гидроксиэтил)рутин). |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Трис(гидроксиэтил)рутин − 1 (около 25 мин); тетракис(гидроксиэтил)рутин − около 0,5; моно(гидроксиэтил)рутин − около 0,8; бис(гидроксиэтил)рутин − около 1,1.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/ν) между пиками бис(гидроксиэтил)рутина и трис(гидроксиэтил)рутина должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для основного пика должно быть не менее 10.

Допустимое содержание компонентов. Содержание каждого из компонентов в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- компонент трис(гидроксиэтил)рутин – не менее 80 %;

- компонент тетракис(гидроксиэтил)рутин – не более 10 %;

- любой другой компонент – не более 5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы.

Потеря в массе при высушивании. Не более 5,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают1 г (точная навеска) субстанции при температуре 105±5 °С в течение 4 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,4 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 350 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения воду.

Содержание троксерутина C33H42O19 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где A – оптическая плотность испытуемого раствора;
250 – удельный показатель поглощения троксерутина ();
a – навеска субстанции, г;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0501 Тропикамид (Tropicamidum)

Вводится впервые

##### Определение

(2RS)-3-Гидрокси-N-(пиридин-4-илметил)-2-фенил-N-этилпропанамид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % тропикамида C17H20N2O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 % и метиленхлориде, мало растворим в воде.

* Растворяется в разбавленной хлористоводородной кислоте.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца тропикамида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь максимум при 254 нм, удельный показатель поглощения при этой длине волны должен составлять от 170 до 190.

3. Качественная реакция. В термостойкую колбу вместимостью 50 мл помещают 9 мл уксусного ангидрида, 1 мл уксусной кислоты ледяной и 0,1 г лимонной кислоты. Содержимое колбы выдерживают при 100 °С при периодическом перемешивании до полного растворения лимонной кислоты. Растворяют 5 мг субстанции в 3 мл полученной смеси и нагревают на водяной бане в течение 5–15 мин; должно появиться красновато-жёлтое окрашивание.

##### Испытания

Температура плавления. От 95 до 100 °C (ОФС «Температура плавления»).

Угол вращения. От –0,1° до +0,1° (10 % раствор субстанции в этаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл спирта 96 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 0,135 г натрия лаурилсульфата и 3,4 мл фосфорной кислоты концентрированной в 950 мл воды и доводят рН раствора натрия гидроксида раствором концентрированным до 3,0. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 270:730.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в 3,0 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг N-(пиридин-4-илметил)-этан-1-амина (примесь А), 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси C и 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в 2 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,5 мл стандартного раствора А и доводят водой до метки.

Стандартный раствор В. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца тропикамида для идентификации пиков, содержащего примесь B, растворяют в 1,0 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. К 1,0 мл стандартного раствора А прибавляют 1,0 мл стандартного раствора В.

Примечание

Примесь A: N-(Пиридин-4-илметил)-этан-1-амин [33403-97-3].

Примесь В: N-(Пиридин-4-илметил)-2-фенил-N-этилпроп-2-енамид [57322-50-6].

Примесь C: 3-Гидрокси-2-фенилпропановая кислота [552-63-6].

Примесь D: Фенилуксусная кислота [103-82-2].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм и 210 нм; |  |
Объём пробы | 15 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика тропикамида. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, стандартные растворы А, Б и В, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Тропикамид – 1 (около 11 мин); примесь C – около 0,4; примесь A – около 0,5; примесь D – около 0,8; примесь B – около 2,3.

Для идентификации пиков примесей A, C и D используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора А. Для идентификации пика примеси B используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора В.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (Rs) между пиками примесей С и A при 210 нм должно быть не менее 2,0;

- разрешение (Rs) между пиками примесей A и D при 210 нм должно быть не менее 2,0;

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь A – 0,8; примесь B – 0,6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A, измеренная при 254 нм, не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика тропикамида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика примеси B, измеренная при 254 нм, не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика тропикамида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика каждой из примесей C и D, измеренная при 210 нм, не должна превышать площадь соответствующего пика на хроматограмме стандартного раствора Б (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси, измеренная при 254 нм, не должна превышать площадь пика тропикамида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей, кроме примесей C и D, измеренная при 254 нм, не должна превышать пятикратную площадь пика тропикамида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых, измеренная при 254 нм, менее 0,5 площади пика тропикамида на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 г субстанции, растворяют при нагревании в 8 мл уксусной кислоты, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Сушат 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 80 °С и остаточном давлении не более 0,7 кПа (5 мм рт. ст.) в течение 4 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 20 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до перехода окраски из оранжевой в зелёную (индикатор – 0,4 мл нафтолбензеина раствора 0,2 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 28,44 мг тропикамида C17H20N2O2.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0502 Трописетрона гидрохлорид

Трописетрон
Tropisetroni hydrochloridum

Взамен ВФС 42-3477-99

##### Определение

[( 1R , 5S ) -8-метил-8-азабицикло [3.2.1] октан-3-ил] 1H- индол-3-карбоксилат.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % трописетрона гидрохлорид C17H21ClN2O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком мелкокристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим или растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96 % и метаноле, очень мало растворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца трописетрона гидрохлорида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 360 нм должен иметь максимумы при 228 нм и 282 нм. Отношение значений оптической плотности А228/А282 должно составлять от 1,3 до 1,4.

3. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 1 мл воды. К 0,5 мл полученного раствора прибавляют 10 мл спирта 96 %. Полученный раствор должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным и выдерживать сравнение с эталоном В7. (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 4,5 до 7,0 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

1. Примесь А. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

- Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор—метанол—метиленхлорид 5:40:60.

- Растворитель. Метанол—метиленхлорид 1:1.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 0,2 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси А ((1R,3r,5S)-8-метил-8-азабицикло[3.2.1]октан-3-ол (тропин) [120-29-6], растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

- Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. К 0,1 мл полученного раствора прибавляют 1,0 мл раствора стандартного образца примеси А.

- На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (400 мкг), раствора стандартного образца примеси А (2 мкг) и раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (по 2 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат в потоке холодного воздуха до удаления следов растворителей. После охлаждения до комнатной температуры пластинку обрабатывают калия йодовисмута раствором (1) и просматривают в видимом свете.

- Пригодность хроматографической системы. Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы чётко видны две зоны адсорбции.

- Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора допускается наличие только одной дополнительной зоны адсорбции не превышающей по величине и интенсивности окраски зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца примеси А (не более 0,5 %).

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

- Подвижная фаза А (ПФА). Триэтиламин—ацетонитрил—вода—метанол 0,3:35:400:565.

- Подвижная фаза Б (ПФБ). Триэтиламин—ацетонитрил—вода—метанол 0,3:100:100:800.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 100 мг субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

- Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси В (1H-индол-3-карбоновая кислота [771-50-6] и 5 мг фармакопейного стандартного образца этилиндол-3-карбоксилата, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–14 | 100 | 0
14–32 | 100 → 0 | 0 → 100
32–36 | 0 | 100
36–37 | 0 → 100 | 100 → 0
37–52 | 100 | 0

Хроматографируют стандартный раствор, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Трописетрон – 1 (около 22 мин); примесь B – около 0,05; этилиндол-3-карбоксилат – около 0,2.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора разрешение (RS) между пиками примеси B и этилиндол-3-карбоксилата должно быть не менее 4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси B не должна превышать площадь пика примеси В на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика трописетрона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика трописетрона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика трописетрона на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

N,N-Диметиланилин. Не более 0,002 % (ОФС «N,N-Диметиланилин»).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,3 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

* Бактериальные эндотоксины. Не более 25, ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в уксусной кислоте безводной, прибавляют 70 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 32,08 мг трописетрона гидрохлорида C17H21ClN2O2.

##### Хранение

Не требует особых условий.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0475 Убидекаренон (Ubidecarenonum)

Взамен ВФС 42-1792-88

##### Определение

2-[(все-E)-3,7,11,15,19,23,27,31,35,39-Декаметилтетраконта-2,6,10,14,18,22,26,30,34,38-декаен-1-ил]-5,6-диметокси-3-метилциклогекса-2,5-диен-1,4-дион.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % убидекаренона C59H90O4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Жёлтый или оранжевый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

* Разлагается и темнеет при действии света.

Растворимость. Легко растворим в гексане, растворим в ацетоне, очень мало растворим в этаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца убидекаренона.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика убидекаренона на хроматограмме раствора стандартного образца убидекаренона (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Температура плавления. От 47 до 49 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1, без предварительного подсушивания).

Родственные примеси

1. Примесь F. Не более 0,5 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от воздействия света.

Подвижная фаза (ПФ). Этилацетат—гексан 30:970.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в гексане и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора гексаном до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца убидекаренона для проверки пригодности хроматографической системы (содержит примесь F) в 1,0 мл гексана.

Примечание

Примесь F (убидекаренон (Z)-изомер):
2-[(2Z,6E,10E,14E,18E,22E,26E,30E,34E)-3,7,11,15,19,23,27,31,35,39-декаметилтетраконта-2,6,10,14,18,22,26,30,34,38-декаен-1-ил]-5,6-диметокси-3-метилциклогекса-2,5-диен-1,4-дион
[65085-29-2].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель для хроматографии, 7 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 275 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,2-кратное от времени удерживания пика убидекаренона. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Убидекаренон – 1 (около 10 мин); примесь F – около 0,85.

Идентификация примесей. Хроматограмма, прилагаемая к стандартному образцу убидекаренона для проверки пригодности хроматографической системы, и хроматограмма раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы используются для идентификации пика примеси F.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси F и убидекаренона должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси F не должна превышать 0,5 площади пика убидекаренона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

2. Примесь D и другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от воздействия света.

Подвижная фаза (ПФ). Этанол—метанол 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в этаноле при нагревании на водяной бане до 50 °С в течение 2 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора этанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора этанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси D (5,6-диметокси-3-метил-2-[(все-E)-3,7,11,15,19,23,27,31,35-нонаметилгексатриаконта-2,6,10,14,18,22,26,30,34-нонаен-1-ил]циклогекса-2,5-диен-1,4-дион (убихинон-9) [303-97-9] в 2,0 мл испытуемого раствора при нагревании на водяной бане до 50 °С в течение 2 мин, охлаждают до комнатной температуры. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора этанолом до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 200 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,7 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 275 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика убидекаренона. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Убидекаренон – 1 (около 14 мин); примесь D – около 0,7.

Идентификация примесей. Хроматограмма, прилагаемая к стандартному образцу примеси D и хроматограмма раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы используются для идентификации пика примеси D.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси D и убидекаренона должно быть не менее 6,5.

Содержание примеси D или любой другой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика примеси D или любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика убидекаренона на хроматограмме раствора сравнения.

Допустимое содержание примесей:

- примесь D – не более 0,3 %;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,6 %.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

Вода. Не более 0,2 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 3 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Примесь D и другие примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца убидекаренона. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца убидекаренона, растворяют в этаноле при нагревании на водяной бане до 50 °С в течение 2 мин, охлаждают до комнатной температуры, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют испытуемый раствор и раствор стандартного образца убидекаренона.

Содержание убидекаренона C59H90O4 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика убидекаренона на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика убидекаренона на хроматограмме раствора стандартного образца убидекаренона;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца убидекаренона, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание убидекаренона в фармакопейном стандартном образце убидекаренона,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте в герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0004 Умифеновира гидрохлорид моногидрат

Умифеновир
Umifenoviri hydrochloridum monohydricum

Взамен ФС.2.1.0004.15

##### Определение

Этил[6-бром-5-гидрокси-4-[(диметиламино)метил]-1-метил-2-[(фенилсульфанил)метил]-1H-индол-3-карбоксилата] гидрохлорид моногидрат.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % умифеновира гидрохлорида C22H25BrN2O3S∙HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. От белого до белого с зеленовато-желтоватым или светлым розовато-коричневым оттенком цвета кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим или мало растворим в хлороформе и спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца умифеновира гидрохлорида.

2. Спектрофотометрия. (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают около 20 мг субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, прибавляют 20 мл спирта 96 %, 10 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области от 210 до 400 нм должен иметь максимумы при 225 нм, 255 нм, 316 нм и минимумы при 244 нм и 284 нм.

3. Качественная реакция. Смешивают в фарфоровом тигле 0,1 г субстанции с 0,5 г смеси для спекания, прокаливают при температуре 700 °С и охлаждают до комнатной температуры. Полученный остаток растворяют в 10 мл воды и фильтруют; 2,0 мл фильтрат должен давать характерную реакцию А на бромиды (для определения используют 2,0 мл фильтрата) (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»). Для определения используют 2,0 мл фильтрата, полученного в испытании «Идентификация 3. Качественная реакция».

5. Качественная реакция. Встряхивают 0,1 г субстанции с 5 мл азотной кислоты разведённой 16 % и фильтруют. Фильтрат должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 1,36 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды, прибавляют 2 мл триэтиламина, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл, доводят объём раствора водой до метки и доводят рН раствора фосфорной кислоты раствором 10 % до 5,00.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 50:950.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—метанол 500:500.

Растворитель. Вода—ацетонитрил 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца умифеновира гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца умифеновира гидрохлорида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси 3. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают около 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси 3, растворяют в 50 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца умифеновира гидрохлорида, 1,0 мл раствора стандартного образца примеси 3 и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь 2:
этил[5-бром-2,7-диметил-8-[(фенилсульфанил)метил]-1,2,3,7-тетрагидро-[1,3]оксазино[5,6-е]индол-9-карбоксилат]
[958450-23-2].

Примесь 3:
этил[6-бром-5-гидрокси-1-метил-2-[(фенилсульфанил)метил]-1H-индол-3-карбоксилат]
[131707-24-9].

Примесь 4:
этил[6,7-дибром-5-гидрокси-4-[(диметиламино)метил]-1-метил-2-[(фенилсульфанил)метил]-1H-индол-3-карбоксилат]
[153633-10-4].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Температура образца | 5 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический 220 нм; |  |
Объём пробы | 15 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–25 | 50 → 10 | 50 → 90
25–35 | 10 | 90
35–45 | 10 → 50 | 90 → 50
45–50 | 50 | 50

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Умифеновир – 1 (около 10 мин); примесь 2 – около 0,70; примесь 3 – около 1,55; примесь 4 – около 1,8.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика умифеновира должно быть не менее 10.

На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками умифеновира и примеси 3 должно быть не менее 2,0;

- фактор асимметрии пика (AS) умифеновира должен быть не более 3,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика умифеновира должно быть не более 10,0 % (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей, площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь 2 – 0,78; примесь 3 – 2,17; примесь 4 – 0,85.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика умифеновира на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца умифеновира гидрохлорида, мг;
P – содержание умифеновира гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце умифеновира гидрохлорида,%.

Допустимое содержание примесей:

- любая примесь – не более 0,3 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика умифеновира на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. От 3,0 % до 4,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,5 г (точная навеска) субстанции в 1 мл муравьиной кислоты, прибавляют 30 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до жёлтого окрашивания (индикатор – 0,5 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 53,19 мг умифеновира гидрохлорида C22H25BrN2O3S∙HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0476 Урапидил (Urapidilum)

Вводится впервые

##### Определение

1,3-Диметил-6-({3-[4-(2-метоксифенил)пиперазин-1-ил]пропил}амино) пиримидин-2,4(1H,3H)-дион.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % урапидила C20H29N5O3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. От белого до почти белого цвета кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в уксусной кислоте безводной, умеренно растворим в спирте 95 %, очень мало растворим или практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца урапидила.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. Готовят раствор субстанции в спирте 95 % с номинальной концентрацией урапидила 10 мкг/мл.

- Раствор стандартного образца урапидила. Готовят раствор фармакопейного стандартного образца урапидила в спирте 95 % с номинальной концентрацией урапидила 10 мкг/мл.

- Спектры поглощения испытуемого раствора и раствора стандартного образца урапидила в области от 200 до 350 нм должны иметь максимум и минимум при одних и тех же длинах волн.

##### Испытания

Температура плавления. От 156 до 161 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Диэтиламин—ацетонитрил—вода 1:300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл переносят 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл приготовленного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси 1. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 15 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси 1 урапидила, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси 2. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 15 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси 2 урапидила, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца урапидила, растворяют в ПФ, прибавляют по 0,5 мл раствора стандартного образца примеси 1 и раствора стандартного образца примеси 2 и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл переносят 3,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и 3,0 мл раствора стандартного образца примеси 1 и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь 1:
6-[[3-[4-(4-метоксифенил)-1-пиперазинил]пропил]амино]-1,3-диметил-2,4(1H,3H)-пиримидиндион
[34661-79-5].

Примесь 2: 1-(2-метоксифенил)-пиперазин [35386-24-4].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 240 нм и 268 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 45 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, стандартный раствор, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Урапидил – 1 (около 8 мин); примесь 2 – около 0,7; примесь 1 – около 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей 1 и 2 используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности системы разрешение (RS) между пиками примеси 1 и урапидила должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора сравнения:

- относительное стандартное отклонение площади пика урапидила должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- фактор асимметрии пика (AS) урапидила должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика урапидила должно быть не менее 10.

Содержание примеси 1 в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси 1 на хроматограмме испытуемого раствора, измеренная при длине волны 268 нм;
S0 – площадь пика примеси 1 на хроматограмме стандартного раствора, измеренная при длине волны 268 нм;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца примеси 1, мг;
P – содержание примеси 1 в фармакопейном стандартном образце примеси 1 урапидила,%.

Содержание примеси 2 в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси 2 на хроматограмме испытуемого раствора, измеренная при длине волны 240 нм;
S0 – площадь пика примеси 2 на хроматограмме стандартного раствора, измеренная при длине волны 240 нм;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца примеси 2, мг;
P – содержание примеси 2 в фармакопейном стандартном образце примеси 2 урапидила,%.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора, измеренная при длине волны 268 нм;
S0 – площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения, измеренная при длине волны 268 нм.

Допустимое содержание примесей:

- примеси 1 и 2 − не более 0,15 % каждая;

- любая другая примесь − не более 0,10 %;

- сумма всех примесей − не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика урапидила на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,03 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,003 %.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 3,0 г субстанции, встряхивают до растворения с 40 мл ацетона и 4,5 мл азотной кислоты 2 М раствора и доводят объём раствора водой до метки, при необходимости фильтруют.

Эталонный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,25 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты, добавляют 40 мл ацетона и 4,5 мл азотной кислоты 2 М раствора и доводят объём раствора водой до метки.

К испытуемому раствору и эталонному раствору добавляют по 1,0 мл серебра нитрата раствора 0,1 М, перемешивают и выдерживают 5 мин в защищённом от света месте. Опалесценция, появившаяся в испытуемом растворе, не должна превышать опалесценцию эталонного раствора.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 2,9 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор препарата c концентрацией 10 мг урапидила в 1 мл 96% этилового спирта. Последующие разведения выполняют с помощью воды для определения бактериальных эндотоксинов (вода для БЭТ).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 70 мг (точная навеска) предварительно высушенной субстанции в 80 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 12,92 мг урапидила C20H29N5O3.

##### Хранение

Не требует особых условий.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0477 Фабомотизола дигидрохлорид

Фабомотизол
Fabomotizoli dihydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

2-[(2-Морфолиноэтил)тио]-5-этоксибензимидазола дигидрохлорид.

Содержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % фабомотизола дигидрохлорида C15H21N3O2S·2HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 75 мг субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 240 до 350 нм должен иметь максимум при 302 нм.

2. Качественная реакция. Растворяют 20 мг субстанции в 5 мл воды, прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 10 %, перемешивают и фильтруют. Фильтрат должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном В7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 2,0 до 3,0 (2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие фабомотизола дигидрохлорид, используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 2,88 г аммония дигидрофосфата в 800 мл воды и доводят значение рН натрия гидроксида раствором 10 % до 7,00. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 10 мл ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг 5-этокси-2-меркаптобензимидазола [55489-15-1], растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 5,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 4 мкм; |
Температура колонки | 25 °C; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Фабомотизол – 1; 5-этокси-2-меркаптобензимидазол – около 0,7.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками 5-этокси-2-меркаптобензимидазола и фабомотизола должно быть не менее 3,0;

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику фабомотизола, должна составлять не менее 4000 теоретических тарелок;

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика фабомотизола на хроматограмме раствора сравнения;
a1 - навеска субстанции, мг;

Допустимое содержание примесей:

- 5-этокси-2-меркаптобензимидазол – не более 0,2 %;

- любая другая примесь – не более 0,2 %;

- сумма примесей – не более 0,4 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика фабомотизола на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,01 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 5,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакуумном сушильном шкафу до постоянной массы при температуре 100–105 °C и остаточном давлении не более 0,7 кПа до постоянной массы.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 17,5 ЕЭ на 1 мг фабомотизола дигидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты безводной, прибавляют 0,5 г ртути(II) ацетата, перемешивают и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 19,017 мг фабомотизола дигидрохлорида C15H21N3O2S·2HCl.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0478 Фавипиравир (Favipiravirum)

Вводится впервые

##### Определение

3-Гидрокси-6-фторпиразин-2-карбоксамид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % фавипиравира C5H4FN3O2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. От белого до светло-жёлтого цвета кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в диметилсульфоксиде, умеренно растворим в метаноле, мало растворим в этаноле, мало растворим или практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца фавипиравира.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика фавипиравира на хроматограмме раствора стандартного образца фавипиравира (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 10 мл метанола должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным или его окраска должна выдерживать сравнение с эталоном Y5 или GY5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 1,36 г калия дигидрофосфата в воде, доводят значение рН до 2,5 фосфорной кислотой концентрированной, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,06 г натрия карбоната безводного, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 80 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком в течение 20 мин (без нагрева), охлаждают до комнатной температуры, доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10 мг субстанции, прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М, перемешивают, нагревают при температуре 60 °C в течение 1 ч, прибавляют 15 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком в течение 20 мин, охлаждают до комнатной температуры, доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 35 °C; |  |
Температура образца | 5 °C; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 225 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–3 | 100 | 0
3–5 | 100 → 80 | 0 → 20
25–35 | 80 | 20
35–35,01 | 80 → 100 | 20 → 0
35,01–45 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Время удерживания соединений. Фавипиравир – около 12 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика фавипиравира должно быть не менее 5.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками продукта деструкции с RRT около 0,74 и фавипиравира должно быть не менее 5,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) фавипиравира должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика фавипиравира должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика фавипиравира на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05%);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать четырехкратную площадь пика фавипиравира на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2%).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,025 %).

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1), методика Б). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,020 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 50 мг фавипиравира в 1 мл диметидсульфоксида. Последующие разведения выполняют с помощью воды для определения бактериальных эндотоксинов (вода для БЭТ).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Подвижная фаза (ПФ). ПФБ—ПФА 70:930.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4,0 мл испытуемого раствора, полученного в испытании «Родственные примеси», доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца фавипиравира. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца фавипиравира, прибавляют 40 мл растворителя, обрабатывают ультразвуком в течение 20 мин (без нагрева), охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Температура колонки | 40 °C; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 322 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл; |  |
Время хроматографирования | 10 мин. |  |

Хроматографируют раствор стандартного образца фавипиравира и испытуемый раствор.

Время удерживания фавипиравира – около 5 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца фавипиравира:

- фактор асимметрии пика (AS) фавипиравира должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика фавипиравира должно быть не более 1,0 % (6 введений);

Содержание фавипиравира C5H4FN3O2 в субстанции в процентах в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика фавипиравира на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика фавипиравира на хроматограмме раствора стандартного образца фавипиравира;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца фавипиравира, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание фавипиравира в фармакопейном стандартном образце фавипиравира,%.

##### Хранение

Не требует особых условий.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0685 Фамотидин

Фамотидин
Famotidinum

Вводится впервые

C8H15N7O2S3 [76824-35-6] | М.м. 337,45

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

3-[({2-[(Диаминометилиден)амино]-1,3-тиазол-4-ил}метил)сульфанил]-N'-сульфамоилпропанимидамид.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % фамотидина C8H15N7O2S3 в пересчёте на сухое вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок или кристаллы.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в уксусной кислоте ледяной, очень мало растворим в воде и этаноле, практически нерастворим в этилацетате.

* Растворяется в разбавленных растворах минеральных кислот.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца фамотидина.

Если спектры различаются, 0,1 г субстанции и 0,1 г фармакопейного стандартного образца фамотидина по отдельности суспендируют с 5 мл воды, нагревают до кипения, охлаждают до комнатной температуры, при необходимости инициируют кристаллизацию стеклянной палочкой, фильтруют, промывают кристаллы 2 мл холодной воды, высушивают при температуре 80 °С в течение 1 ч при остаточном давлении не более 670 Па и записывают спектры сухих остатков.

##### ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность раствора. Растворяют 0,2 г субстанции в 20 мл хлористоводородной кислоты разведённой 5 %, нагревая при необходимости до 40 °С. Полученный раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 1,882 г натрия гексансульфоната в 950 мл воды и доводят рН раствора уксусной кислотой до 3,50. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Метанол—ацетонитрил—буферный раствор 6:94:900.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 12,5 мг субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 0,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для идентификации пиков. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца фамотидина для проверки пригодности системы, содержащего примеси А, В, С, D, F и G, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.

Примечание

Примесь А:
3-[({2-[(диаминометилиден)амино]-1,3-тиазол-4-ил}метил)сульфанил]пропанимидамид [124646-10-2].

Примесь В:
3,5-бис{2-[({2-[(диаминометилиден)амино]-1,3-тиазол-4-ил}метил)сульфанил]этил}-4H-1λ6,2,4,6-тиатриазин-1,1-дион [89268-62-2].

Примесь С:
3-[({2-[(диаминометилиден)амино]-1,3-тиазол-4-ил}метил)сульфанил]-N-сульфамоилпропанамид [106433-44-7].

Примесь D:
3-[({2-[(диаминометилиден)амино]-1,3-тиазол-4-ил}метил)сульфанил]пропанамид [76824-16-3].

Примесь Е:
2,2'-{дисульфандиилбис[метилен(1,3-тиазол-4,2-диил)]}дигуанидин [129083-44-9].

Примесь F:
3-[({2-[(диаминометилиден)амино]-1,3-тиазол-4-ил}метил)сульфанил]пропановая кислота [107880-74-0].

Примесь G:
3-[({2-[(диаминометилиден)амино]-1,3-тиазол-4-ил}метил)сульфанил]-N-цианопропанимидамид [76823-97-7].

Примесь Н:
({2-[(диаминометилиден)амино]-1,3-тиазол-4-ил}метил)карбамимидотиоат [106649-96-1].

Примесь I:
3-[({2-[(диаминометилиден)амино]-1,3-тиазол-4-ил}метил)сульфинил]-N-сульфамоилпропанамид [1020719-36-1].

Примесь J:
метил{3-[({2-[(диаминометилиден)амино]-1,3-тиазол-4-ил}метил)сульфанил]пропаноат} [76824-14-1].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки | 50 °С;
Детектор | спектрофотометрический, 265 нм;
Объём пробы | 20 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,% | Скорость потока, мл/мин
--- | --- | --- | ---
0–23 | 100 → 96 | 0 → 4 | 1
23–27 | 96 | 4 | 1 → 2
27–47 | 96 → 78 | 4 → 22 | 2

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для идентификации пиков, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Фамотидин – 1 (около 21 мин); примесь D – около 1,1; примесь C – около 1,2; примесь G – около 1,4; примесь F – около 1,5; примесь A – около 1,6; примесь B – около 2,0.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси D используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Для идентификации пиков примесей A, B, C, F и G используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу фамотидина для проверки пригодности системы, и хроматограмму раствора для идентификации пиков.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками фамотидина и примеси D должно быть не менее 3,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь A – 1,9; примесь B – 2,5; примесь C – 1,9; примесь F – 1,7; примесь G – 1,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей С и D не должна более чем в 3 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика каждой из примесей A, B, F и G не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать восьмикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,8 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы при температуре 80 °С и остаточном давлении не более 670 Па.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 17,5 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции c концентрацией фамотидина 10 мг в 1 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М. Для проведения анализа исходный раствор разводят буферным раствором и водой для БЭТ.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,12 г (точная навеска) субстанции в 60 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 16,87 мг фамотидина C8H15N7O2S3.

##### ХРАНЕНИЕ

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0479 Феназон (Phenazonum)

Взамен ФС 42-2432-86

##### Определение

1,5-Диметил-2-фенил-1,2-дигидро-3H-пиразол-3-он.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % феназона C11H12N2O в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, в спирте 96 %, легко растворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца феназона.

2. Качественная реакция. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,5 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. К 1 мл полученного раствора прибавляют 4 мл воды, 0,25 мл серной кислоты разведённой 9,8 % и 1 мл натрия нитрита раствора 10 %; должно появиться зелёное окрашивание.

3. Качественная реакция. К 1 мл приготовленного в испытании 2 раствора прибавляют 4 мл воды и 0,5 мл железа(III) хлорида раствора 1,3 %; должно появиться красное окрашивание.

##### Испытания

Температура плавления. От 109 до 113 °C (ОФС «Температура плавления»).

Прозрачность раствора. Раствор, приготовленный в испытании 2 раздела «Идентификация», должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, приготовленный в испытании 2, раздела «Идентификация» должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. К 10 мл раствора, приготовленного в испытании 2 раздела «Идентификация», прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствора 1 %; раствор должен быть бесцветным. Окраска раствора должна стать розовой от прибавления не более 0,2 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида. Прибавляют 0,25 мл 0,05 % раствора метилового красного. Окраска раствора должна стать красной или желтовато-красной от прибавления не более 0,4 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 6,8 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды, прибавляют 2,0 мл триэтиламина, доводят рН раствора натрия гидроксида раствором 10 % до 7,0 и доводят объём раствора тем же растворителем до 1000 мл.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—буферный раствор 430:570.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в ПФ, прибавляют 10 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь A: 5-метил-2-фенил-2,4-дигидро-3H-пиразол-3-он [89-25-8].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 6,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика феназона. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси А, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Феназон – 1,0 (около 13 мин); примесь А – около 0,8.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и феназона должно быть не менее 3,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца примеси А (не более 0,05 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика феназона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать площадь пика феназона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,3 площади пика феназона на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,03 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме при температуре 60±2 °С в течение 6 ч.

Сульфаты. Не более 0,01 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Растворяют 1,0 г субстанции в 10 мл воды.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Для определения используют 4 мл раствора, приготовленного в испытании 2 раздела «Идентификация» и доведённого водой до объёма 10 мл.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с требованиями ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 20 мл воды в колбе с притёртой пробкой вместимостью 250 мл, прибавляют 2 г натрия ацетата, 1 мл уксусной кислоты разведённой 12 % и 25 мл 0,05 М раствора йода. Полученный раствор взбалтывают и выдерживают в защищённом от света месте в течение 30 мин. Прибавляют 25 мл хлороформа и перемешивают до полного растворения осадка. Полученный раствор титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата до слабо-жёлтого окрашивания, прибавляют 1 мл крахмала раствора 1 % и титруют до обесцвечивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Разность объёмов 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует объёму 0,05 М раствора йода, прореагировавшего с феназоном.

Содержание феназона C11H12N2O в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где V1 - объём 0,1 М раствора натрия тиосульфата, израсходованный на титрование в основном опыте, мл;
V0 - объём 0,1 М раствора натрия тиосульфата, израсходованный на титрование в контрольном опыте, мл;
a – навеска субстанции, мг;
K - поправочный коэффициент 0,1 М раствора натрия тиосульфата;
9,412 - количество феназона, мг, соответствующее 1 мл 0,05 М раствора йода, мг/мл;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0198 Фенилбутазон (Phenylbutazonum)

Взамен ФС.2.1.0198.18

##### Определение

4-Бутил-1,2-дифенилпиразолидин-3,5-дион.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % фенилбутазона C19H20N2O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в хлороформе и ацетоне, умеренно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца фенилбутазона.

2. Качественная реакция. К 0,1 г субстанции прибавляют 1 мл уксусной кислоты ледяной и 2 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, нагревают смесь в колбе с обратным холодильником в течение 30 мин, охлаждают, прибавляют 10 мл воды и фильтруют. Добавляют 3 мл натрия нитрита раствора 7 г/л, раствор приобретает жёлтую окраску. К 1,0 мл полученного раствора помещают раствор 10 мг β-нафтола в 5 мл натрия карбоната раствора 1 М. Образуется осадок от коричневато-красного до фиолетово-красного цвета.

##### Испытания

Температура плавления. От 104 до 107 °C (ОФС «Температура плавления»).

Кислотность или щёлочность. В колбу помещают 1 г субстанции, прибавляют 50 мл воды и нагревают полученную взвесь до кипения. Колбу укупоривают, содержимое при встряхивании охлаждают до комнатной температуры и фильтруют. К 25 мл фильтрата прибавляют 0,5 мл фенолфталеина раствора 0,1 %, раствор должен быть бесцветным. Для изменения окраски раствора на розовую должно потребоваться не более 0,5 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида. Прибавляют 0,6 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты и 0,1 мл метилового красного раствора 0,05 %, окраска раствора должна измениться до оранжевой или красной.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 1,36 г натрия ацетата в 950 мл воды и доводят значение рН лимонной кислоты раствором 0,25 М до 5,2, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,2 г субстанции, растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл испытуемого раствора и доводят ацетонитрилом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят до метки тем же растворителем.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца фенилбутазона примеси В и 5 мг 1,2-дифенилгидразина (примесь С), растворяют в ацетонитриле, прибавляют 0,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мг бензидина (примесь Е), растворяют в ацетонитриле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Примечание

Примесь A: (2RS)-2-[(1,2-дифенилгидразинил)карбонил]гексановая кислота [3583-64-0].

Примесь В: 4-бутил-4-гидрокси-1,2-дифенилпиразолидин-3,5-дион [16860-43-8].

Примесь С: 1,2-дифенилгидразин [122-66-7].

Примесь D: 1,2-дифенилдиазен [103-33-3].

Примесь Е: [1,1'-бифенил]-4,4'-диамин [92-87-5].

Хроматографические условия

Колонка | 125 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический: 240 нм (примеси А, В, С и любые другие примеси); 280 нм (примесь Е); |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 70 | 30
10–20 | 70 → 40 | 30 → 60
20–35 | 40 | 60
35–40 | 40 → 70 | 60 → 30

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Фенилбутазон – 1 (около 13 мин); примесь Е – около 0,2; примесь А – около 0,5; примесь В – около 1,2; примесь С – около 1,3; примесь D – около 1,7.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика фенилбутазона должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками фенилбутазона и примеси В должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии (АS) фенилбутазона должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика фенилбутазона должно быть не более 5,0 % (6 введений);

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси С умножают на 0,55.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей А и В не должна более чем в 2,5 раза превышать площадь пика фенилбутазона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,25 %);

- площадь пика примеси С не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика фенилбутазона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси Е не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (не более 0,0005 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика фенилбутазона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика фенилбутазона на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, кроме примеси Е, площадь которых менее 0,25 площади пика фенилбутазона на хроматограмме раствора сравнения (кроме пика примеси Е) (менее 0,025 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 80±5 °С и остаточном давлении 30±10 мм рт. ст.

Хлориды. Не более 0,007 % (ОФС «Хлориды»). Встряхивают 1 г субстанции в течение 5 мин с 30 мл горячей воды и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Сульфаты. Не более 0,01 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения используют 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Хлориды».

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,5 г (точная навеска) субстанции в 25 мл ацетона, прибавляют 0,5 мл бромтимолового синего раствора 0,04 % и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до появления синего окрашивания, устойчивого в течение 15 с.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 30,84 мг фенилбутазона C19H20N2O2.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0199 Фенилсалицилат (Phenylis salicylas)

Взамен ФС.2.1.0199.18

##### Определение

Фенил(2-гидроксибензоат).

Cодержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % фенилсалицилата C13H10O3 в пересчёте на свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый кристаллический порошок или мелкие бесцветные кристаллы со слабым запахом.

Растворимость. Легко растворим в хлороформе, растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца фенилсалицилата.

2. Качественная реакция. Растворяют 20 мг субстанции в 2 мл спирта 96 % и прибавляют 1 каплю железа(III) хлорида раствора 3 %; должно появиться фиолетовое окрашивание.

3. Качественная реакция. К 20 мг субстанции прибавляют 4 капли серной кислоты концентрированной и 2 капли воды; должен ощущаться запах фенола. После прибавления 0,1 мл формалина должно появиться розовое окрашивание.

##### Испытания

Температура плавления. От 41 до 44 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

рН раствора. От 5,6 до 7,0 (2 % раствор субстанции в воде, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Водорастворимые фенолы. Для определения используют 10 мл раствора, полученного в испытании «pH раствора». Раствор не должен окрашиваться от прибавления 1 капли железа(III) хлорида раствора 3 %.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения используют 10 мл раствора, полученного в испытания «pH раствора».

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Для определения используют 10 мл раствора, полученного в испытании «pH раствора».

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 25 мл 0,5 М раствора натрия гидроксида. Колбу нагревают с обратным холодильником, выдерживая в кипящей водяной бане в течение 75±15 мин, до исчезновения маслянистых капель. После охлаждения титруют избыток щёлочи 0,5 М раствором хлористоводородной кислоты до жёлтого окрашивания (индикатор – 1 капля 0,1 % раствора бромкрезолового пурпурного).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,5 М раствора натрия гидроксида соответствует 107,1 мг фенилсалицилата С13Н10О3.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0200 Фенилэфрина гидрохлорид

Фенилэфрин
Phenylephrini hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0200.18

##### Определение

3-[(1R)-1-Гидрокси-2-(метиламино)этил]фенола гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % фенилэфрина гидрохлорида C9H13NO2∙HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца фенилэфрина гидрохлорида.

2. Качественная реакция. Субстанция даёт характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

3. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 1 мл воды, прибавляют 50 мкл меди(II) cульфата раствора 12,5 % и 1 мл натрия гидроксида раствора 20 %; должно появиться фиолетовое окрашивание. Прибавляют 1 мл эфира и встряхивают; верхний слой должен остаться бесцветным.

##### Испытания

Удельное вращение. От –43 до –47 в пересчёте на сухое вещество (2 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 2 г субстанции в 100 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. К 10 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 0,1 мл метилового красного раствора 0,05 % и 0,2 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида. Раствор должен окраситься в жёлтый цвет. Для изменения окраски раствора на красную должно потребоваться не более 0,4 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. В химическом стакане вместимостью 1000 мл растворяют 3,25 г натрия лаурилсульфата в 900 мл воды для хроматографии, доводят рН раствора до 2,8 фосфорной кислотой разведённой 10 %, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 100:900.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор—ацетонитрил 100:900.

Растворитель. ПФБ—ПФА 20:80.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Содержимое упаковки фармакопейного стандартного образца фенилэфрина для идентификации пиков, содержащего примеси С и Е, растворяют в 2,0 мл растворителя.

Примечание

Примесь C: 1-(3-гидроксифенил)-2-(метиламино)этанон [90005-54-2];

Примесь E: 2-[бензил(метил)амино]-1-(3-гидроксифенил)этанон [56917-44-3].

Хроматографические условия

Колонка | 55 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 45 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 215 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА, % | ПФБ, %
--- | --- | ---
0–3 | 93 | 7
3–13 | 93 → 70 | 7 → 30
13–14 | 70 → 93 | 30 → 7

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Фенилэфрин – 1 (около 2,8 мин); примесь С – около 1,3; примесь Е – около 3,6.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей С и Е используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу фенилэфрина для идентификации пиков, содержащему примеси С и Е.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения относительное стандартное отклонение площади пика фенилэфрина должно быть не более 5,0 % (6 введений).

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между высотой пика примеси С над нулевой линией и расстоянием от наиболее низко расположенной точки кривой, отделяющей пик примеси С от пика фенилэфрина, до нулевой линии должно быть не менее 5.

На хроматограмме испытуемого раствора фактор асимметрии основного пика (As) должен быть не более 1,9.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь С – 0,5; примесь Е – 0,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика фенилэфрина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика фенилэфрина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика фенилэфрина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения используют раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора».

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 25 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в смеси 0,5 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты и 80 мл спирта 96 % и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида этанольным потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают объём титранта между двумя точками перегиба на кривой титрования.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида этанольного соответствует 20,37 мг фенилэфрина C9H13NO2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0480 Фенирамина малеат

Фенирамин
Pheniramini maleas

Вводится впервые

##### Определение

(3RS)-N,N-Диметил-3-(пиридин-2-ил)-3-фенилпропан-1-амина (2Z)-бут-2-ендиоат (1:1).

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % фенирамина малеата C16H20N2·C4H4O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый мелкокристаллический порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, очень легко растворим или легко растворим в метаноле, легко растворим в спирте 96 % и метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца фенирамина малеата.

2. Спектрофотометрия_ (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимум при 265 нм, плечо в интервале от 260 до 264 нм. Удельный показатель поглощения в максимуме должен быть от 200 до 220. В качестве раствора сравнения используют хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М.

3. Тонкослойная хроматография_ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля GF254.

- Подвижная фаза (ПФ). Вода—муравьиная кислота безводная—метанол—диизопропиловый эфир 3:7:20:70.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

- Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают около 65 мг малеиновой кислоты, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

- Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают около 0,2 г фармакопейного стандартного образца фенирамина малеата, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (100 мкг), раствор сравнения А (32,5 мкг) и раствора сравнения Б (100 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

- Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения Б должны наблюдаться две чётко разделённых зоны адсорбции.

- Результат. Верхняя зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора должна соответствовать по положению и величине зоне адсорбции на хроматограмме раствора сравнения А. Нижняя зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора должна соответствовать по положению и величине зоне адсорбции на хроматограмме раствора сравнения Б.

##### Испытания

Температура плавления. От 104 до 109 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Угол вращения. От –0,10 ° до +0,10 °, (10 % раствор субстанции, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 25 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 4,5 до 5,5 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаз А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 5,056 г натрия гептансульфоната, растворяют в 900 мл воды, доводят рН раствора фосфорной кислотой до 2,5 и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаз Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Ацетонитрил—ПФА 100:900.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в 10 мл растворителя, при необходимости обрабатывая ультразвуком, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца фенирамина, примеси А и 10 мг 4-бензилпиридина (примесь B), растворяют в 50 мл растворителя, при необходимости обрабатывая ультразвуком, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл стандартного раствора А и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора стандартным раствором А до метки. В мерную колбу вместимостью 10 помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А: 2-Бензилпиридин [101-82-6].

Примесь В: 4-Бензилпиридин [2116-65-6].

Хроматографические условия

Колонка | 300 × 3,9 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 10 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 264 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2 | 90 | 10
2–37 | 90 → 62 | 10 → 38
37–42 | 62 → 90 | 38 → 10

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения, стандартный раствор Б и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Фенирамина – 1 (около 31 мин); малеиновая кислота – около 0,1; примесь А – около 0,9; примесь В – около 0,97.

Для идентификации пиков примесей А и В используют хроматограмму стандартного раствора Б.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси В и фенирамина должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика фенирамина на хроматограмме стандартного раствора Б (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси В не должна более чем в два раза превышать площадь пика фенирамина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика фенирамина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь пика фенирамина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики малеиновой кислоты и пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади пика фенирамина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 2). Высушивают (в вакууме) до постоянной массы 1,0 г (точная навеска) субстанции при температуре 60 °С и остаточном давлении не более 0,7 кПА.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,13 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты ледяной и титруют хлорной кислоты раствором 0,1 М. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл хлорной кислоты раствора 0,1 М соответствует 17,82 мг фенирамина малеата C16H20N2·C4H4O4.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0481 Фенитоин гидрокарбонат натрия

Фенитоин
Phenytoinum hydrogeni natrii carbonas

Взамен ФС 42-2045-99

##### Определение

5,5-Дифенилимидазолидин-2,4-дион—гидрокарбонат натрия.

Субстанция представляет собой смесь фенитоина и натрия гидрокарбоната в соотношении 85:15.

Cодержит не менее 84,0 % и не более 86,0 % фенитоина C15H12N2O2 и не менее 14,0 % и не более 16,0 % натрия гидрокарбоната NaHCO3.

##### Свойства

Описание. Белый кристаллический порошок.

Растворимость. Очень мало растворим в спирте 95 %, практически нерастворим в воде.

* Растворим в 1 % растворах щелочей.

##### Идентификация

1. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в натрия гидроксида растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора натрия гидроксида раствором 0,1 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 до 230 нм должен иметь максимум при 217 нм.

- В качестве раствора сравнения используют натрия гидроксида раствор 0,1 М.

2. Качественная реакция. Взбалтывают 0,1 г субстанции с 10 мл ацетона в течение 2 мин. Нерастворившийся осадок отфильтровывают и оставляют для определения натрия гидрокарбоната. 3 мл фильтрата нейтрализуют натрия гидроксида раствором 0,1 М по тимолфталеину, прибавляют 1 мл серебра нитрата раствора 0,1 М; должен образоваться белый студенистый осадок, растворимый при прибавлении нескольких капель азотной кислоты разведённой 16 %. К полученному раствору прибавляют 15 мл воды; должен образоваться кристаллический осадок.

3. Качественная реакция. Осадок, полученный для определения натрия гидрокарбоната, даёт характерную реакцию А на гидрокарбонаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл натрия гидроксида раствора 1 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

** Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Диоксан—гексан 2:5.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в 2 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М при тщательном перемешивании и доводят объём раствора спиртом 95 % до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора спиртом 95 % до метки.

На линию старта пластинки наносят 40 мкл испытуемого раствора (400 мкг) и 10 мкл раствора сравнения (2 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 10 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме раствора сравнения чётко видна зона адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора допускается наличие одной дополнительной зоны адсорбции с Rf от 0,75 до 0,80, не превышающей по величине основную зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Зону адсорбции на линии старта при оценке не учитывают.

Сульфаты. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Встряхивают 0,15 г субстанции с 14 мл воды и 1 мл хлористоводородной кислоты в течение 1 мин и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). Встряхивают 0,15 г субстанции с 14 мл воды и 1 мл азотной кислоты в течение 1 мин и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Фенитоин

Взбалтывают 0,3 г (точная навеска) субстанции с 10 мл ацетона в течение 3 мин, фильтруют под вакуумом. Осадок обрабатывают ацетоном три раза по 10 мл и фильтруют через тот же фильтр. Фильтр с осадком промывают 10 мл ацетона. Фильтр с осадком помещают в колбу с оставшимся осадком для последующего определения натрия гидрокарбоната. К фильтрату прибавляют 10 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до появления голубого окрашивания (индикатор – 1 мл тимолфталеина раствора 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 25,23 мг фенитоина C15H12N2O2.

Натрия гидрокарбонат

В колбу с осадком, полученным в разделе «Количественное определение. Фенитоин» для определения натрия гидрокарбоната, прибавляют 30 мл воды, растворяют осадок и титруют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты (индикатор – 2 капли метилового оранжевого раствора 0,1 %).

1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 8,4 мг натрия гидрокарбоната NaHCO3.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Перед проведением испытания должна быть проверена разделительная способность хроматографической системы.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0041 Фенобарбитал (Phenobarbitalum)

Взамен ФС.2.1.0041.15

##### Определение

5-Фенил-5-этилпиримидин-2,4,6(1H,3H,5H)-трион.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % фенобарбитала C12H12N2O3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 % и растворах щелочей, умеренно растворим в хлороформе, очень малорастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца фенобарбитала.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции и доводят спиртом 96 % до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят аммония хлорида буферным раствором pH 10,0 до метки.

- Раствор стандартного образца фенобарбитала. В мерную колбу вместимостью 10,0 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца фенобарбитала, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора и раствора стандартного образца в области длин волн от 220 до 280 нм в кювете с толщиной 1 см должны иметь максимум при 240 нм и минимум при 224 нм.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 2 мл спирта 96 %, прибавляют 1 каплю кальция хлорида раствора 20 %, 2 капли кобальта нитрата раствора 5 % и 2 капли натрия гидроксида раствора 20 %; должно появиться сине-фиолетовое окрашивание.

##### Испытания

Температура плавления. От 174 до 179 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,25 г субстанции в 5 мл натрия карбоната раствора 10 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность. В течение 2 мин кипятят 1 г субстанции с 50 мл воды, охлаждают и фильтруют. К 10 мл фильтрата прибавляют 0,15 мл раствора метилового красного спиртового 0,1 %. Должно появиться оранжево-жёлтое окрашивание. Для изменения окраски раствора на жёлтый цвет должно потребоваться не более 0,1 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы используют свежеприготовленными или хранят при температуре 4 °С не более суток.

Подвижная фаза (ПФ). Натрия ацетатный буферный раствор рН 4,5—метанол 60:40.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,125 г субстанции, растворяют в 5 мл метанола и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл испытуемого раствора, прибавляют 20 мл метанола и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 2 мл метанола и доводят объём раствора ПФ до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг каждого из стандартных образцов примеси А и примеси B, растворяют в 2 мл метанола и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 20 мл метанола и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь A:
(5RS)-2,6-диимино-5-фенил-5-этилтетрагидропиримидин-4(1Н)-он
[69125-70-8].

Примесь B:
(5RS)-6-имино-5-фенил-5-этилдигидропиримидин-2,4(1Н,3Н)-дион
[58042-96-9].

Условия хроматографирования

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |
Время хроматографирования | 2,5-кратное от времени удерживания основного пика. |

Хроматографируют стандартный раствор, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Фенобарбитал – 1 (около 14 мин); примесь А – около 0,2; примесь B – около 0,3.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму стандартного раствора и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу фенобарбитала для идентификации примесей.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (Rs) между пиками примеси А и примеси B должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей А и В не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05%).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения используют раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора».

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 5 мл предварительно нейтрализованного по тимолфталеину спирта 96 %, прибавляют 5 мл воды и титруют натрия гидроксида раствором 0,1 М до синей окраски (индикатор – 0,5 мл тимолфталеина раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М соответствует 23,22 мг фенобарбитала C12H12N2O3.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0359 Фенозановая кислота (Acidum phenosanicum)

Вводится впервые

##### Определение

3-(3,5-Ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропановая кислота.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % фенозановой кислоты C17H26O3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 % и хлороформе, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца фенозановой кислоты.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 250 до 300 нм должен иметь максимум при 277 нм с удельным показателем поглощения от 279 до 283 нм. В качестве раствора сравнения используют спирт 96 %.

3. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 3 мл спирта 96 %, прибавляют 2 капли железа(III) хлорида раствора 3 % и 1 каплю калия феррицианида раствора 5 %; должно появиться ярко-синее окрашивание.

##### Испытания

Температура плавления. От 174 до 177 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл спирта 96 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора» должен быть бесцветным или должен выдерживать сравнение с эталоном Y5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Предварительная подготовка пластинки. Хроматографическую камеру насыщают парами ПФ около 40 мин, обкладывая внутренние стенки фильтровальной бумагой, смоченной подвижной фазой (ПФ). Подготовку пластинки проводят непосредственно перед использованием.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 %—спирт 96 %—бензол 0,5:30:30.

Камера с парами йода. В фарфоровый тигель помещают 0,5 г йода, нагревают до температуры 32,5±2,5 °C и помещают в хроматографическую камеру. Насыщение проводят в течение 10 мин.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,4 г субстанции, растворяют в 8 мл спирта 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор салициловой кислоты. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,4 г салициловой кислоты, растворяют в 5 мл спирта 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл испытуемого раствора, 0,5 мл раствора салициловой кислоты и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (200 мкг), раствора сравнения (1 мкг), раствора для проверки пригодности хроматографической системы, раствора для проверки чувствительности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 3 мин, затем помещают в камеру с подвижной фазой и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, пластинку вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 10 мин до удаления следов растворителей и помещают в камеру с парами йода. Время проявления пластинки в йодной камере около 20 мин.

Хроматографическая система считается пригодной, если:

- на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы чётко видно две зоны адсорбции;

- на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы чётко видна зона адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора допускается наличие одной дополнительной зоны адсорбции по совокупности величины и интенсивности окраски не превышающей зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 40 мл спирта 96 % и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с индикатором (5 капель фенолфталеина раствора 1 %) до перехода окраски в розовую.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 27,84 мг фенозановой кислоты C17H26O3.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0360 Феноксиметилпенициллин (Phenoxymethylpenicillinum)

Взамен ФС 42-2579-97

##### Определение

(2S,5R,6R)-3,3-Диметил-7-оксо-6-(2-феноксиацетамидо)-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота.

Феноксиметилпенициллин образуется при росте некоторых штаммов Penicillium notatum или родственных микроорганизмов.

Содержит не менее 95,0 % и не более 102,0 % по сумме процентного содержания феноксиметилпенициллина C16H18N2O5S и 4-гидроксифеноксиметилпенициллина в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Растворим в спирте, очень мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца феноксиметилпенициллина.

2. ТСХ Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254, 2–10 мкм, на алюминиевой подложке.

- Предварительная подготовка пластинки. Пластинку помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт 100 % длины пластинки, её выдерживают в течение 10 мин, вынимают и сушат на воздухе в течение 15 мин. Подготовку пластинки проводят непосредственно перед использованием.

- Подвижная фаза (ПФ). Ацетон—аммония ацетата раствор—уксусная кислота ледяная 30:70:5,0.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в ацетоне и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца феноксиметилпенициллина. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного образца феноксиметилпенициллина, растворяют в ацетоне и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного образца бензилпенициллина калия и 25 мг фармакопейного стандартного образца феноксиметилпенициллина и доводят водой до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 1 мкл испытуемого раствора (5 мкг), раствора стандартного образца феноксиметилпенициллина фумаровой кислоты (5 мкг) и раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (10 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей в потоке тёплого воздуха, помещают в камеру, насыщенную парами йода до появления зон адсорбции, и просматривают сквозь стеклянную подложку при дневном освещении.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца феноксиметилпенициллина.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на формальдегида раствор в серной кислоте (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +190 до +200 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в спирте 96 %, ОФС «Оптическое вращение»).

рН. От 2,4 до 4,0 (0,5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Для приготовления растворов используют подходящую пластиковую посуду. Все растворы хранят при 10 °С не более 42 ч.

Буферный раствор. К 250 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М прибавляют 500 мл воды, доводят значение рН до 6,5 Натрия гидрокарбоната раствором 8,4 %, переносят в мерную колбу вместимостью 1 л и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор—метанол—вода 10:30:60.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор—вода —метанол 5:35:60.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 80,0 мг субстанции, растворяют в буферном растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора буферным раствором до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 2 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца феноксиметилпенициллина для идентификации пиков, содержащего примеси B, D, E, и F, растворяют в буферном растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора буферным раствором до метки.

Примечание

Примесь А (бензилпенициллин):
(2S,5R,6R)-3,3-диметил-7-оксо-6-(2-фенилацетамидо)-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота
[61-33-6].

Примесь B: феноксиуксусная кислота, CAS 122-59-8.

Примесь С (6-аминопенициллановая кислота):
(2S,5R,6R)-6-амино-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота
[551-16-6].

Примесь D (4-гидроксифеноксиметилпенициллин):
(2S,5R,6R)-6-[2-(4-гидроксифенокси)ацетамидо]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота
[20880-67-5].

Примесь E (пеницилловые кислоты феноксиметилпенициллина):
(4S)-2-[карбокси[(2-феноксиацетамидо)метил]-5,5-диметил-1,3-тиазолидин-4-карбоновая кислота.

Примесь F (пенилловые кислоты феноксиметилпенициллина):
(2RS,4S)-5,5-диметил-2-[(2-феноксиацетамидо)метил]-1,3-тиазолидин-4-карбоновая кислота.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 100 Å, 3 мкм; |
Температура колонки | 50 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0−2 | 85 | 15
2−5 | 85 → 70 | 15 → 30
5−17 | 70 → 0 | 30 → 100
17−22 | 0 | 100

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Феноксиметилпенициллин – 1 (около 11 мин); примесь B – около 0,29; примесь D – около 0,38; примесь E – около 0,55 и 0,61; примесь F – около 0,88 и 0,95.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей B, D, E, и F используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу феноксиметилпенициллина для идентификации пиков, и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси F и феноксиметилпенициллина должно быть не менее 3,0.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика феноксиметилпенициллина должно быть не менее 20.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь В – 0,5; примесь Е – 1,3.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площади пиков примеси E (сумма изомеров) и примеси F (сумма эпимеров) не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

- площадь пика примеси В не должна превышать 0,2 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой неидентифицированной примеси не должна превышать 0,15 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- сумма площадей пиков всех примесей, кроме примеси D, не должна превышать трёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 3 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,05 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

4-гидроксифеноксиметилпенициллин (примесь D). Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси».

Для расчёта содержания примеси D умножают площадь пика примеси D на соответствующий поправочный коэффициент – 1,7.

Допустимое содержание примеси D. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площади пика примеси D не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 0,6 мг феноксиметилпенициллина в 0,5 мл фосфатного буферного раствора рН 6,8–7,0. Срок наблюдения – 48 ч.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в буферном растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца феноксиметилпенициллина калиевой соли. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 55,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца феноксиметилпенициллина калиевой соли, растворяют в буферном растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Содержание феноксиметилпенициллина C16H18N2O5S в препарате в процентах (Х) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика феноксиметилпенициллина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика феноксиметилпенициллина на хроматограмме раствора стандартного образца феноксиметилпенициллина калиевой соли;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца феноксиметилпенициллина калиевой соли, мг;
W – содержание воды и остаточных органических растворителей,%;
P – содержание феноксиметилпенициллина калиевой соли в фармакопейном стандартном образце феноксиметилпенициллина калиевой соли,%;
350,39 – молекулярная масса феноксиметилпенициллина;
388,48 – молекулярная масса феноксиметилпенициллина калиевой соли.

Рассчитывают сумму процентного содержания феноксиметилпенициллина и 4-гидроксифеноксиметилпенициллина.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0361 Феноксиэтанол (Phenoxyethanolum)

Вводится впервые

##### Определение

2-Феноксиэтанол.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % феноксиэтанола C8H10O2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Прозрачная, бесцветная, слегка вязкая жидкость.

Растворимость. Мало растворим в воде, смешивается с ацетоном, спиртом 96% и глицерином.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца феноксиэтанола.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора Б должно соответствовать времени удерживания пика феноксиэтанола на хроматограмме раствора стандартного образца феноксиэтанола (Б) (раздел «Количественное определение»).

3. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 80 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мл полученного раствора и доводят водой до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 240 до 350 нм должен иметь максимум при 269 нм и 275 нм. Удельный показатель поглощения в максимуме должен быть при 269 нм: от 95 до 105, и при 275 нм: от 75 до 85. В качестве раствора сравнения используют воду.

##### Испытания

Плотность. От 1,104 до 1,110 г/см3 (ОФС «Плотность», метод 1).

Показатель преломления. От 1,537 до 1,539 (ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)»).

pH раствора. От 5,5 до 7,5 (1 % раствор в воде, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Трифторуксусная кислота—ацетонитрил—вода 1:150:850.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 150:850.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца феноксиэтанола (А). В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,1 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца феноксиэтанола, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца феноксиэтанола (Б). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл раствора стандартного образца феноксиэтанола (А) и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца феноксиэтанола (В). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл раствора стандартного образца феноксиэтанола (Б) и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца фенола (примесь А), растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,4 мл полученного раствора и доводят объём раствора раствором стандартного образца феноксиэтанола (А) до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мл раствора стандартного образца феноксиэтанола (В) и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А: фенол [108-95-2].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 270 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика феноксиэтанола. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца феноксиэтанола (В) и испытуемый раствор А.

Относительное время удерживания соединений. Феноксиэтанол – 1 (около 12 минут), примесь А – около 0,75.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика феноксиэтанола должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и феноксиэтанола должно быть не менее 3,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца феноксиэтанола (В):

- фактор асимметрии пика (AS) феноксиэтанола должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика феноксиэтанола должно быть не более 2,0 % (6 введений);

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора А;
S0 - площадь пика феноксиэтанола на хроматограмме раствора стандартного образца феноксиэтанола (В);
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца феноксиэтанола, мг;
P - содержание феноксиэтанола в фармакопейном стандартном образце феноксиэтанола,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь А – не более 0,1 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,3 %.

Не учитывают пики, содержание каждой из которых менее 0,02 %.

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы, метод 1»). Растворяют 0,5 г субстанции в 10 мл спирта 96 %.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца феноксиэтанола (Б) и испытуемый раствор Б.

Содержание феноксиэтанола C8H10O2 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика феноксиэтанола на хроматограмме испытуемого раствора Б;
S0 – площадь пика феноксиэтанола на хроматограмме раствора стандартного образца феноксиэтанола (Б);
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца феноксиэтанола, мг;
P – содержание феноксиэтанола в фармакопейном стандартном образце феноксиэтанола,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте, в герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0362 Фенотерола гидробромид

Фенотерол
Fenoteroli hydrobromidum

Вводится впервые

##### Определение

rac-5-[(1R)-Гидрокси-2-{[(2R)-1-(4-гидроксифенил)пропан-2-ил]амино}этил]бензол-1,3-диола гидробромид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % фенотерола гидробромида C17H21NO4·HBr в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, очень легко растворим или легко растворим в метаноле, легко растворим в спирте 96 % и метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца фенотерола гидробромида.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на бромиды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 2,0 г субстанции в 50 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 4,2 до 5,2 (4 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Раствор калия дигидрофосфата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,9 г калия дигидрофосфата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор динатрия гидрофосфата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 24 г динатрия гидрофосфата безводного, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Буферный раствор. Смешивают 690 мл раствора динатрия гидрофосфата и 10 мл раствора калия дигидрофосфата, доводят значение рН полученного раствора фосфорной кислотой концентрированной до 8,5.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—буферный раствор 350:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 24 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Содержимое флакона с фармакопейным стандартным образцом для проверки пригодности системы, содержащим примеси А, В и С, растворяют в 1 мл воды.

Примечание

Примесь А:
rac-5-[(1R)-гидрокси-2-{[(2S)-1-(4-гидроксифенил)пропан-2-ил]амино}этил]бензол-1,3-диол
[107878-38-6].

Примесь В:
2-{[(2RS)-(4-гидроксифенил)пропан-2-ил]амино}-1-(3,4-дигидроксифенил)этан-1-он
[1944-11-2].

Примесь С:
rac-5-[(1R)-гидрокси-2-{[(2R)-1-(4-гидроксифенил)пропан-2-ил]амино}этил]бензол-1,3-диол.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 215 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Фенотерол гидробромид – 1 (около 7 мин); примесь А – около 1,3; примесь С – около 2,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу для проверки пригодности системы, содержащему примеси А, В и С, и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси А и фенотерола гидробромида должно быть не менее 3,0;

- разрешение (RS) между пиками примеси В и С должно быть не менее 1,5.

Поправочный коэффициент. Для расчёта содержания площадь пика примеси В умножают на 0,6.

Допустимое содержание примесей:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика фенотерола гидробромида на хроматограмме раствора сравнения А (не более 4,0 %);

- площадь пика примеси С не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика фенотерола гидробромида на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,3 %);

- площадь пика примеси В не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика фенотерола гидробромида на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,2 %);

- площадь пика любой неидентифицированной примеси не должна превышать площадь пика фенотерола гидробромида на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей, кроме А, не должна превышать трёхкратную площадь пика фенотерола гидробромида на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 площади пика фенотерола гидробромида на хроматограмме раствора сравнения Б (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Железо. Не более 0,001 % (ОФС «Железо», метод 2).

Испытуемый раствор. Зольный остаток, полученный после сжигания 1,0 г субстанции (ОФС «Сульфатная зола») растворяют в 2,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % и доводят объём раствора водой до 10 мл.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,6 г (точная навеска) субстанции в 50 мл воды, прибавляют 5,0 мл азотной кислоты разведённой 12,5 %, 25,0 мл серебра нитрата раствора 0,1 М и 2,0 мл железа(III) аммония сульфата раствор 10 %. Полученный раствор титруют аммония тиоцианата раствором 0,1 М до появления оранжевого окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл серебра нитрата раствора 0,1 М соответствует 38,43 мг фенотерола гидробромида C17H21NO4·HBr.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0363 Фенофибрат (Fenofibratum)

Вводится впервые

##### Определение

(Пропан-2-ил){2-метил-2-[4-(4-хлорбензоил)фенокси]пропаноат}.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % фенофибрата C20H21ClO4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический или аморфный порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в метиленхлориде, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца фенофибрата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика фенофибрата на хроматограмме раствора стандартного образца фенофибрата (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Температура плавления. От 79 до 82 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл ацетона должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность. Раствор 1 г субстанции в 50 мл нейтрализованного по фенолфталеину спирта 96 % должен окрашиваться в розовый цвет при прибавлении не более 0,2 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Подвижная фаза (ПФ). Вода, доведённая до pH 2,5 фосфорной кислотой концентрированной—ацетонитрил 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца фенофибрата, 5 мг фармакопейного стандартного образца фенофибрата примеси А, 5 мг фармакопейного стандартного образца фенофибрата примеси В и 10 мг фармакопейного стандартного образца фенофибрата примеси G, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А: (4-гидроксифенил)(4-хлорфенил)метанон [42019-78-3].

Примесь В: 2-метил-2-[4-(4-хлорбензоил)фенокси]пропановая кислота [42017-89-0].

Примесь G: (пропан-2-ил)[2-метил-2-({2-метил-2-[4-(4-хлорбензоил) фенокси]пропаноил}окси)пропаноат] [217636-48-1].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 286 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика фенофибрата. |

Хроматографируют стандартный и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Фенофибрат – 1 (около 10 мин); примесь А – около 0,34; примесь В – около 0,36; примесь G – около 1,35.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В и G используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора разрешение (RS) между пиками примеси А и В должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей А и В не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика каждой из примесей А и В на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,15 %);

- площадь пика примеси G не должна превышать площадь пика примеси G на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика фенофибрата на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика фенофибрата на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика фенофибрата на хроматограмме стандартного раствора (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме при температуре 60 °С.

Сульфаты. Не более 0,01 % (ОФС «Сульфаты», метод 2). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 г субстанции, растворяют в 25 мл воды, нагревают при 50 °С в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Смешивают 2,0 мл фильтрата, полученного в испытании «Сульфаты», с 8 мл воды.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 6).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца фенофибрата. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца фенофибрата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

- Объём пробы: 5 мкл.

Хроматографируют раствор стандартного образца фенофибрата и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца фенофибрата относительное стандартное отклонение площади пика фенофибрата должно быть не более 1,0 % (6 введений).

Содержание фенофибрата C20H21ClO4 в субстанции в пересчёте на сухое вещество (Х) в процентах вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика фенофибрата на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика фенофибрата на хроматограмме раствора стандартного образца фенофибрата;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца фенофибрата, мг;
P – содержание фенофибрата в фармакопейном стандартном образце фенофибрата,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0201 Фенпивериния бромид (Fenpiverinii bromidum)

Взамен ФС.2.1.0201.18

##### Определение

1-(3-Карбамоил-3,3-дифенилпропил)-1-метилпиперидиния бромид.

Содержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % фенпивериния бромида C22H29BrN2O в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде и хлороформе, растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в виде жидкой плёнки, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца фенпивериния бромида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 30 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 240 до 320 нм должен иметь максимумы поглощения при 252 нм и 258 нм, минимумы поглощения при 249 нм и 255 нм и плечо в интервале от 262 до 268 нм. В качестве раствора сравнения используют воду.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным или его окраска должна выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,0 до 6,0 (2 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля G.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—уксусная кислота ледяная—дихлорэтан 10:20:40.

Испытуемый раствор. Растворяют 0,1 г субстанции в 5 мл хлороформа.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора метанолом до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл (200 мкг) испытуемого раствора, 10 мкл (1 мкг) и 6 мкл (0,6 мкг) раствора сравнения. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и опрыскивают реактивом Драгендорфа, сушат на воздухе.

Пригодность хроматографической системы. Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме раствора сравнения (0,6 мкг) чётко видна зона адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции фенпивериния бромида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Результат. Суммарное содержание примесей, оцененное по совокупности величины и интенсивности окраски их зон адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора в сравнении с зонами адсорбции на хроматограммах раствора сравнения, содержащих 1 мкг фенпивериния бромида не должно превышать 0,5 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 2,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 2). Высушивают 0,5 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы при температуре 65 °С (и остаточном давлении 30 мм рт. ст.).

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 50 ЕЭ на 1 мг фенпивериния бромида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции (при нагревании до температуры от 50 до 60 °С, если необходимо) в смеси 40 мл уксусной кислоты ледяной и 10 мл ртути(II) ацетата раствора. Раствор охлаждают и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до перехода окраски из фиолетовой в синюю (индикатор – 0,2 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 41,74 мг фенпивериния бромида C22H29BrN2O.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0364 Финастерид (Finasteridum)

Вводится впервые

##### Определение

N-трет-Бутил-3-оксо-4-аза-5α-андрост-1-ен-17β-карбоксамид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % финастерида C23H36N2O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в хлороформе и спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца финастерида. Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метанола, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика финастерида на хроматограмме раствора стандартного образца финастерида (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +12,0 до +14,0 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворитель. Вода—ацетонитрил 500:500.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—тетрагидрофуран—вода 100:100:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца финастерида для идентификации пиков, содержащего примеси А и С, растворяют в 1 мл растворителя.

Примечание

Примесь А: N-трет-бутил-3-оксо-4-аза-5α -андростан-17β-карбоксамид [98319-24-5].

Примесь С: N-трет-бутил-3-оксо-4-азаандрост-1,5-диен-17β-карбоксамид [1329611-51-9].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 60 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 15 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика финастерида. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Финастерид – 1 (около 28 мин); примесь А – около 0,9; примесь С – около 1,3.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А и С используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу финастерида для идентификации примесей.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси А и финастерида должно быть не менее 5,0.

На хроматограмме раствора сравнения отношение сигнал/шум (S/N) для пика финастерида должно быть не менее 40.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси А умножают на 2,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A и С не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика финастерида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика финастерида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика финастерида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее половины площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 12).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца финастерида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца финастерида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца финастерида и испытуемый раствор.

Содержание финастерида C23H36N2O2 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика финастерида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика финастерида на хроматограмме раствора стандартного образца финастерида;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца финастерида, мг;
W – потеря в массе при высушивании,%;
P – содержание финастерида в фармакопейном стандартном образце финастерида,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0365 Финголимода гидрохлорид

Финголимод
Fingolimodi hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

2-Амино-2-[2-(4-октилфенил)этил]пропан-1,3-диола гидрохлорид.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % финголимода гидрохлорида C19H33NO2·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойство

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в воде и спирте 96 %, практически нерастворим в ацетонитриле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца финголимода гидрохлорида.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах спирта 96 %, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика финголимода гидрохлорида на хроматограмме раствора стандартного образца финголимода гидрохлорида (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

рН раствора. От 3,0 до 5,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 14,04 г натрия перхлората в 950 мл воды и доводят значение рН хлорной кислотой до 2,80, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Метанол—буферный раствор 70:930.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 1,2 мл хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М и доводят объём раствора метанолом до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 28 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 15 мл растворителя и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца финголимода гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 28 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца финголимода гидрохлорида, растворяют в 15 мл растворителя и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца финголимода гидрохлорида в 25 мл воды, прибавляют 2 мл калия перманганата раствора 0,05 М и оставляют на 5 мин. К полученному раствору прибавляют 0,1 мл фосфорной кислоты разведённой 10 %, оставляют на 15 мин, прибавляют 25 мл растворителя и выдерживают 15 мин. Раствор используют свежеприготовленным.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца финголимода гидрохлорида и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 3 мм, силикагель октилсилильный для хроматографии, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 215 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–1 | 70 | 30
1–15 | 70 → 58 | 30 → 42
15–28 | 58 → 5 | 42 → 95
28–30 | 5 | 95
30–30,1 | 5 → 70 | 95 → 30
30,1–35 | 70 | 30

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца финголимода гидрохлорида и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика финголимода должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси с относительным временем удерживания около 0,8 и финголимода должно быть не менее 2,0.

Содержание любой примеси в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика финголимода гидрохлорида на хроматограмме раствора стандартного образца финголимода гидрохлорида;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца финголимода гидрохлорида, мг;
а1 – навеска субстанции, мг;
P – содержание финголимода гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце финголимода гидрохлорида,%.

Допустимое содержание примесей:

- любая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,05 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,7 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 0,1 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 60 °С (и остаточном давлении 0,7 кПа).

Сульфатная зола. Не более 0,3 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. К 0,68 г калия дигидрофосфата прибавляют 5 мл тетрабутиламмония гидроксида раствор 40 % и 5 мл триэтиламина, растворяют в 800 мл воды и доводят значение рН фосфорной кислотой до 2,5, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 100:900.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор—ацетонитрил 200:800.

Растворитель. Ацетонитрил—метанол 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 28 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца финголимода гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 28 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца финголимода гидрохлорида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель фенилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 65 | 35
5–15 | 65 → 63 | 35 → 37
15–20 | 63 → 0 | 37 → 100
20–25 | 0 | 100
25–30 | 0 → 65 | 100 → 35
30–35 | 65 | 35

Хроматографируют раствор стандартного образца финголимода гидрохлорида и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца финголимода гидрохлорида:

- фактор асимметрии пика (As) финголимода должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика финголимода должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание финголимода гидрохлорида C19H33NO2·HCl в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика финголимода гидрохлорида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика финголимода гидрохлорида на хроматограмме раствора стандартного образца финголимода гидрохлорида;
а1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца финголимода гидрохлорида, мг;
P – содержание финголимода гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце финголимода гидрохлорида,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0366 Флувоксамина малеат

Флувоксамин
Fluvoxamini maleas

Вводится впервые

##### Определение

2-[(1E)-{5-Метокси-1-[4-трифторметил)фенил]пентилиден}амино]оксиэтанамин (2Z)-бут-2-ендиоат (1:1).

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % флувоксамина малеата C15H21F3N2O2∙C4H4O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 % и метаноле, умеренно растворим в воде.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца флувоксамина малеата.

##### Испытания

* Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют сразу после приготовления.

Буферный раствор. Растворяют 1,1 г калия дигидрофосфата и 1,9 г натрия пентансульфоната в 900 мл воды, доводят pH раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,0. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 370:630.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси D. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 3 мг фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца флувоксамина для проверки пригодности системы, содержащего примеси A, B, C и F, в 1,0 мл ПФ.

Примечание

Примесь А:
2-{([(1E)1-[4-(трифторометил)фенил]пентилиден]амино)окси}этанамин
[1217216-82-4].

Примесь B:
2-{([(1Z)5-метокси1-[4-(трифторометил)фенил]пентилиден]амино)окси}этанамин

Примесь C:
(2RS)-2-[{2-[{[(1E)-5-метокси-1-[4-(трифторометил)-фенил]пентилиден]амино}окси]этил}амино]бутандиовая
кислота [259526-43-7].

Примесь D: 5-метокси-1-[4-(трифторометил)фенил]пентан-1-он [61718-80-7].

Примесь F:
N-[2-[{[(1E)-5-метокси-1-[4-(трифторометил)фенил]-пентилиден]амино}окси]этан]-1,2-диамин
[1217262-11-7].

Примесь G:
(5E)-5-[(2-аминоэтокси)имино]-5-[4-(трифторометил)-фенил]пентан-1-ол
[192876-02-1].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 234 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 6-кратное от времени удерживания пика флувоксамина. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси D, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Флувоксамин – 1 (около 15 мин); малеиновая кислота – около 0,15; примеси F и G – около 0,5; примесь C – около 0,6; примесь B – около 0,8; примесь A – около 2,5; примесь D – около 5,4.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В, С и F используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу флувоксамина для проверки пригодности системы, и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси F и примеси С должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси B не должна более чем в 5 раз превышать площадь пика флувоксамина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси C не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика флувоксамина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика примеси A не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика флувоксамина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси D не должна превышать площадь пика примеси D на хроматограмме раствора стандартного образца примеси D (не более 0,15 %);

- сумма площадей пиков примесей F и G не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика флувоксамина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика флувоксамина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь пика флувоксамина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пик малеиновой кислоты и пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 80 °С в течение 2 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции и платиновый тигель.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,35 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 43,44 мг флувоксамина малеата C15H21F3N2O2∙C4H4O4.

##### Хранение

Не требует особых условий.

* Если при используемом способе производства возможно образование азиридина, должно быть дополнительно предусмотрено определение этой примеси.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0367 Флударабина фосфат

Флударабин
Fludarabini phosphas

Вводится впервые

##### Определение

9-(5-O-Фосфоно-β-D-арабинофуранозил)-2-фтор-9H-пурин-6-амин.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % флударабина фосфата C10H13FN5O7P в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок. *Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в диметилформамиде, мало растворим в воде, практически нерастворим в этаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца флударабина фосфата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора Б должно соответствовать времени удерживания пика флударабина фосфата на хроматограмме раствора стандартного образца флударабина фосфата (А) (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +10,0 до +14,0 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (ОФС «Оптическое вращение»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 15 мл воды, обрабатывают ультразвуком до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки.

Прозрачность раствора. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Испытуемый раствор. Растворяют 50 мг субстанции в 5 мл диметилформамида, при необходимости обрабатывая ультразвуком.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 2,0 до 4,0 (0,1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Все растворы используют сразу после приготовления.

Допустимое содержание примесей:

- сумма неидентифицированных примесей – не более 0,5 %;

- сумма всех примесей определенных в тестах 1 и 2 – не более 2,0 %.

1. Примеси, элюирующиеся до основного пика

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—калия дигидрофосфата раствор 0,01 М 60:940.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 30 мл ПФ, обрабатывают ультразвуком до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФ до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца флударабина фосфата (А). Помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца флударабина фосфата в мерную колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 30 мл ПФ, обрабатывают ультразвуком до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца флударабина фосфата (Б). В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца флударабина фосфата (А) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца флударабина фосфата, прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М, нагревают на водяной бане при температуре 80 °С в течение 15 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца флударабина фосфата (Б) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А:
6-амино-9-(5-O-фосфоно-β-D-арабинофуранозил)-1,9-дигидро-2H-пурин-2-он
[62314-92-5].

Примесь В: 6-амино-1,7-дигидро-2H-пурин-2-он [3373-53-3].

Примесь С:
9-(3,5-ди-O-фосфоно-β-D-арабинофуранозил)-2-фтор-9H-пурин-6-амин
[548774-53-4].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, совместимый с водной подвижной фазой, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 20 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 260 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 4,5-кратное от времени удерживания пика флударабина фосфата. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца флударабина фосфата (А), раствор стандартного образца флударабина фосфата (Б) и испытуемый раствор А.

Относительное время удерживания соединений. Флударабина фосфат – 1 (около 9 мин); примесь A – около 0,26; примесь B – около 0,34; примесь C – около 0,42.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси C используется хроматограмма раствора стандартного образца флударабина фосфата (А). В случае возникновения затруднений при идентификации пиков примесей А и В хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы при длине волны 292 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика флударабина фосфата должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси А и примеси В должно быть не менее 2,0 (при длине волны 292 нм).

На хроматограмме раствора стандартного образца флударабина фосфата (Б):

- фактор асимметрии пика (As) флударабина фосфата должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика флударабина фосфата должно быть не более 2,0 % (6 определений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь A – 4,0; примесь B – около 2,5; примесь C – 1,9.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора А;
S0 - площадь пика флударабина фосфата на хроматограмме раствора стандартного образца флударабина фосфата (Б);
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца флударабина фосфата, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание флударабина фосфата в фармакопейном стандартном образце флударабина фосфата,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь A – не более 0,8 %;

- примесь C – не более 0,4 %;

- примесь B – не более 0,2 %;

- любой другой примеси – не более 0,1 %.

Не учитывают пики, элюирующиеся после пика флударабина фосфата, и пики менее 0,05 %.

2. Примеси, элюирующиеся после основного пика. Определение проводят в условиях испытания «Родственные примеси. Примеси, элюирующиеся до основного пика» со следующими изменениями.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—калия дигидрофосфата раствор 0,01 М 200:800.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца флударабина для пригодности системы, содержащего примеси D, E и F, прибавляют 7 мл ПФ, обрабатывают ультразвуком до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь D: 2-фтор-7H-пурин-6-амин [700-49-2].

Примесь E: 9-(β-D-арабинофуранозил)-2-фтор-9H-пурин-6-амин [21679-14-1].

Примесь F:
9-(5-O-фосфоно-β-D-арабинофуранозил)-2-этокси-9H-пурин-6-амин [159002-28-5].

Хроматографические условия

- Время хроматографирования: 8-кратное от времени удерживания пика флударабина фосфата.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца флударабина фосфата (Б) и испытуемый раствор А.

Относительное время удерживания соединений. Флударабина фосфат – 1 (около 2,5 мин); примесь D – около 1,5; примесь E – около 1,9; примесь F – около 2,5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика флударабина фосфата должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (Rs) между пиками флударабина фосфата и примеси D должно быть не менее 5,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца флударабина фосфата (Б):

- относительное стандартное отклонение площади пика флударабина фосфата должно быть не более 5,0 % (6 введений);

- фактор асимметрии пика (As) флударабина фосфата должен быть не более 2,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь D – 0,5; примесь E – около 0,6; примесь F – 1,8.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора А;
S0 - площадь пика флударабина фосфата на хроматограмме раствора стандартного образца флударабина фосфата (Б);
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца флударабина фосфата, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание флударабина фосфата в фармакопейном стандартном образце флударабина фосфата,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь E – не более 0,2 %;

- примесь F – не более 0,2 %;

- примесь D – не более 0,15 %;

- любой другой примеси – не более 0,1 %.

Не учитывают пики, элюирующиеся до пика флударабина фосфата, и пики менее 0,05 %.

Вода. Не более 3,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) тонкоизмельчённой субстанции. Перед титрованием субстанцию взбалтывают с 30 мл метанола безводного в течение 30 с.

Натрий. Не более 0,2 %. Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии с пламенной атомизацией (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,5084 г натрия хлорида, предварительно высушенного при 105 °С до постоянной массы, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Контрольный раствор. Вода.

Определяют атомную эмиссию стандартного и испытуемого растворов на линии спектра излучения натрия при длине волны 589,0 нм.

Отклик эмиссии испытуемого раствора не должен превышать отклик эмиссии стандартного раствора.

Фосфаты. Не более 0,1 % (ОФС «Фосфаты»). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Хлориды. Не более 0,2 % (ОФС «Хлориды). Растворяют 10 мг субстанции в 10 мл воды.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 4,0 ЕЭ на 1 мг флударабина фосфата (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Примеси, элюирующиеся до основного пика» со следующими изменениями.

Хроматографические условия

- Время хроматографирования: 18 мин.

Хроматографируют раствор стандартного образца флударабина фосфата (А) и испытуемый раствор Б.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца флударабина фосфата (А):

- фактор асимметрии пика (As) флударабина фосфата должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика флударабина фосфата должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пика флударабина фосфата должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику флударабина фосфата, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

Содержание флударабина фосфата C10H13FN5O7P в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика флударабина фосфата на хроматограмме испытуемого раствора Б;
S0 - площадь пика флударабина фосфата на хроматограмме раствора стандартного образца флударабина фосфата (А);
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца флударабина фосфата, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание флударабина фосфата в фармакопейном стандартном образце флударабина фосфата,%.

##### Хранение

В сухом, защищённом от света месте, при температуре от +2 до +8 °С.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0202 Флуконазол (Fluconazolum)

Взамен ФС.2.1.0202.18

##### Определение

2-(2,4-Дифторфенил)-1,3-бис(1H-1,2,4-триазол-1-ил)пропан-2-ол.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % флуконазола C13H12F2N6O в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм. Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в метаноле, растворим в ацетоне, мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца флуконазола.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец флуконазола растворяют в минимальном объёме метиленхлорида, выпаривают досуха и снимают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимость 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 340 нм должен иметь максимумы при 261 нм, 267 нм и минимум при 265 нм. В качестве раствора сравнения используют спирт 96 %

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10,0 мл метанола должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—аммония формиата раствор 0,01 М 140:860.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,25 г субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для идентификации пика примеси А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца флуконазола для идентификации пика примеси А, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси В. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3 мг фармакопейного стандартного образца примеси В, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси C (А). В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 3 мг фармакопейного стандартного образца примеси С, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси С (Б). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл раствора стандартного образца примеси С (А) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл раствора стандартного образца примеси С (А), прибавляют 1 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А:
(2RS)-2-(2,4-дифторфенил)-1-(1H-1,2,4-триазол-1-ил)-3-(1H-1,2,4-триазол-4-ил)пропан-2-ол
[89429-59-4].

Примесь B:
1,3-бис(1H-1,2,4-триазол-1-ил)-2-[4-(1H-1,2,4-триазол-1-ил)-2-фторфенил]пропан-2-ол)
[871550-15-1].

Примесь C: 1,1'-(1,3-фенилен)ди-1H-1,2,4-триазол [514222-44-7].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 260 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3,5-кратное от времени удерживания пика флуконазола. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор для идентификации пика примеси А, раствор стандартного образца примеси В, раствор стандартного образца примеси С (Б), раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Флуконазол – 1 (около 11 мин); примесь В – около 0,4; примесь А – около 0,5; примесь С – около 0,8.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для идентификации пика примеси А и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу флуконазола для идентификации пика. Для идентификации пика примеси В используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора стандартного образца примеси В. Для идентификации примеси С используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора стандартного образца примеси С (Б).

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси С и флуконазола должно быть не менее 3,0;

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать 0,8 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,4 %);

- площадь пика примеси В не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца примеси В (не более 0,3 %);

- площадь пика примеси С не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца примеси С (Б) (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,2 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 1,2 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,1 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2). Растворяют 2 г субстанции в 20 мл смеси вода—метанол 15:85.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,4 ЕЭ на 1 мг флуконазола (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,12 г (точная навеска) субстанции в 60 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 15,31 мг флуконазола C13H12F2N6O.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0368 Флуоксетина гидрохлорид

Флуоксетин
Fluoxetini hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

(3RS)-N-Метил-3-[4-(трифторметил)фенокси]-3-фенилпропан-1-амина гидрохлорид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % флуоксетина гидрохлорида C17H18F3NO·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в метаноле, умеренно растворим в воде и метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца флуоксетина гидрохлорида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика флуоксетина на хроматограмме раствора стандартного образца флуоксетина гидрохлорида (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Угол вращения. От –0,05 ° до +0,05 ° (2 % раствор субстанции в смеси вода—метанол 15:85, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 2,0 г субстанции в 100 мл смеси вода—метанол 15:85 должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH. От 4,5 до 6,5 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. К 12,5 мл триэтиламина прибавляют 900 мл воды, доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 6,00, переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Растворитель. Метанол—буферный раствор 400:600.

Подвижная фаза А (ПФА). Метанол—буферный раствор 200:800.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси А и 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси В, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси С, растворяют в испытуемом растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора испытуемым раствором до метки.

Примечание

Примесь А: (1RS)-3-(метиламино)-1-фенилпропан-1-ол, [42142-52-9].

Примесь B: N-метил-3-фенилпропан-1-амин [23580-89-4].

Примесь C: (3RS)-N-метил-3-[3-(трифторметил)фенокси]-3-фенилпропан-1-амин [56161-72-9].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 215 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2 | 75 | 25
2–2,1 | 75 → 56 | 25 → 44
2,1–20 | 56 | 44
20–25 | 56 → 75 | 44 → 25

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, стандартный раствор, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Флуоксетин – 1 (около 14 мин); примесь А – около 0,1; примесь B – около 0,2; примесь C – около 0,9.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для пригодности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси С и флуоксетина должно быть не менее 10,0.

Содержание примеси А и примеси В в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси А или В на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика примеси А или В на хроматограмме стандартного раствора соответственно;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца примеси А или В соответственно, мг;
P - содержание примеси А или В в фармакопейном стандартном образце примеси А или В соответственно,%.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика флуоксетина на хроматограмме раствора сравнения.

Допустимое содержание примесей:

- примесь А – не более 0,15 %;

- примесь В – не более 0,10 %;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,3 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее половины площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца флуоксетина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца флуоксетина гидрохлорида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца флуоксетина гидрохлорида и испытуемый раствор.

Содержание флуоксетина гидрохлорида C17H18F3NO·HCl в субстанции в процентах (Х) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь основного пика на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика флуоксетина на хроматограмме раствора стандартного образца флуоксетина гидрохлорида;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца флуоксетина гидрохлорида, мг;
а1 – навеска субстанции, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание флуоксетина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце флуоксетина гидрохлорида,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0369 Флупентиксола дигидрохлорид

Флупентиксол
Flupentixoli dihydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

2-(4-{3-[(EZ)-2-(Трифторметил)-9H-тиоксантен-9-илиден]пропил}пиперазин-1-ил)этанола дигидрохлорид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,5 % флупентиксола дигидрохлорида C23H25F3N2OS·2HCl в пересчёте на сухое вещество.

Содержит не менее 42,0 % и не более 52,0 % (Z)-изомера в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца флупентиксола дигидрохлорида.

2. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. Пластинка со слоем силикагеля F254.

- Подвижная фаза (ПФ). Вода—диэтиламин—метилэтилкетон 1:4:95.

- Реактив для детектирования. Серной кислоты раствор спиртовой 36,6 %.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца флупентиксола дигидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца флупентиксола дигидрохлорида, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 2 мкл раствора стандартного образца флупентиксола дигидрохлорида и испытуемого раствора. Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при 254 нм.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению и величине должна соответствовать основной зоне адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца флупентиксола дигидрохлорида. На обеих хроматограммах может наблюдаться двоение основной зоны адсорбции.

- Пластинку опрыскивают реактивом для детектирования, нагревают при 110 °С в течение 5 мин, охлаждают до комнатной температуры и просматривают в УФ-свете при 365 нм.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и степени подавления флуоресценции должна соответствовать основной зоне адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца флупентиксола дигидрохлорида. На обеих хроматограммах может наблюдаться двоение основной зоны адсорбции.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 5 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность раствора субстанции, полученного в испытании «Прозрачность раствора», измеренная в максимуме поглощения при длине волны 410 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать 0,125 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

pH раствора. От 2,0 до 3,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от действия света и используют сразу после приготовления.

Буферный раствор. Растворяют 6,3 г аммония формиата в 900 мл воды и доводят значение рН аммиака раствором концентрированным 25 % до 8,2, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор—ацетонитрил—вода 58:420:522.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Буферный раствор—ацетонитрил 100:900.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 58 мг субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца флупентиксола для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси А, С, Н и I, растворяют в 1,0 мл ПФА.

Примечание

Примесь А:
9-[3-(диметиламино)пропил]-2-(трифторметил)-9H-тиоксантен-9-ол
[2340-57-0].

Примесь С:
1-{3-[(EZ)-2-(трифторметил)-9H-тиоксантен-9-илиден]пропил}пиперазин.

Примесь Н:
2-{4-[(E)-3-[(9RS)-2-(трифторметил)-9H-тиоксантен-9-ил]проп-2-ен-1-ил]пиперазин-1-ил}этанол
или
2-{4-[(Z)-3-[(9RS)-2-(трифторметил)-9H-тиоксантен-9-ил]проп-2-ен-1-ил]пиперазин-1-ил}этанол.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,3 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–20 | 90 → 85 | 10 → 15
20–50 | 85 → 5 | 15 → 95
50–55 | 5 → 90 | 95 → 10

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. (Z)-Изомер – 1 (около 18 мин); примесь А – около 0,59; примесь Н – около 0,78; примеси С и I –около 0,94; (E)-изомер – около 1,06.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков (Z)-изомера, (E)-изомера, примесей А, С + I и Н используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу флупентиксола для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примесей А и Н должно быть не менее 2,5;

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примесей С + I и (Z)-изомера должно быть не менее 10,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примеси С и I – 2,0; примесь Н – 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси Н не должна более чем в 5 раз превышать суммарную площадь пиков двух изомеров флупентиксола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- сумма площадей пиков примесей С и I не должна более чем в 3 раза превышать суммарную площадь пиков двух изомеров флупентиксола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать суммарную площадь пиков двух изомеров флупентиксола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную суммарную площадь пиков двух изомеров флупентиксола на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,5 от суммы площадей пиков двух изомеров флупентиксола на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 2,0% (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы при температуре 105 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции и платиновый тигель.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Флупентиксола дигидрохлорид. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 30 мл спирта 96 % и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают объём титранта между двумя точками перегиба на кривой титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 50,74 мг флупентиксола дигидрохлорида C23H25F3N2OS·2HCl.

(Z)-изомер. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Вода—аммиака раствор концентрированный 25 %—2-пропанол—гептан 2:4:150:850.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца флупентиксола дигидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца флупентиксола дигидрохлорида, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика (Z)-изомера. |

Хроматографируют раствор стандартного образца флупентиксола дигидрохлорида и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений.(Z)-изомер – 1 (около 6 мин); (E)-изомер – около 1,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков (Z)-изомера и (E)-изомера используют хроматограмму раствора стандартного образца флупентиксола дигидрохлорида и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу флупентиксола дигидрохлорида.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца флупентиксола дигидрохлорида разрешение (RS) между пиками (Z)-изомера и (Е)-изомера должно быть не менее 3,0.

Содержание (Z)-изомера в субстанции в процентах (X) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика (Z)-изомера на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика (Z)-изомера на хроматограмме раствора стандартного образца флупентиксола дигидрохлорида;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца флупентиксола дигидрохлорида, мг;
P – содержание (Z)-изомера в фармакопейном стандартном образце флупентиксола дигидрохлорида,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0370 Флутамид (Flutamidum)

Взамен ФС 42-3004-93

##### Определение

2-Метил-N-[4-нитро-3-(трифторметил)фенил]пропанамид.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % флутамида C11H11F3N2O3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Светло-жёлтый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в ацетоне и спирте 96 %, умеренно растворим в хлороформе, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца флутамида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора Б должно соответствовать времени удерживания пика флутамида на хроматограмме раствора стандартного образца флутамида (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Температура плавления. От 109 до 112 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1, без предварительного подсушивания).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Растворы, содержащие флутамид и его примеси, используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—вода 500:500.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца флутамида. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца флутамида, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца флутамида для проверки пригодности системы, содержащего примеси А, В и С, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём ПФ до метки.

Примечание

Примесь А: 4-нитро-3-(трифторметил)анилин [393-11-3].

Примесь В: N-[4-нитро-3-(трифторметил)фенил]ацетамид [393-12-4].

Примесь С: N-[4-нитро-3-(трифторметил)фенил]пропанамид [13312-12-4].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 240 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания пика флутамида. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор А.

Относительное время удерживания соединений. Флутамид – 1 (около 19 мин); примесь В – около 0,5; примесь А – около 0,6; примесь С – около 0,7.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу флутамида для проверки пригодности системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика флутамида должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение ® между пиками примеси А и примеси В должно быть не менее 2,0.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика флутамида на хроматограмме раствора сравнения;
P – содержание флутамида в фармакопейном стандартном образце флутамида,%.

Допустимое содержание примесей:

- примеси А, В и С – не более 0,2 % каждая;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика флутамида на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (не более 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме при температуре 60 °С в течение 3 ч.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). Взбалтывают 0,3 г субстанции с 27,5 мл воды, прибавляют 2,5 мл азотной кислоты разведённой 16 %, перемешивают и фильтруют.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца флутамида и испытуемый раствор Б.

Содержание флутамида C11H11F3N2O3 в процентах (Х) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика флутамида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика флутамида на хроматограмме раствора стандартного образца флутамида;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца флутамида, мг;
P - содержание флутамида в фармакопейном стандартном образце флутамида,%;
W - потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0353 Флутиказона пропионат

Флутиказон
Fluticasoni propionas

Вводится впервые

##### Определение

(11β-Гидрокси-16α-метил-3-оксо-6α,9-дифтор-17β-{[(фторметил)сульфанил]карбонил}андроста-1,4-диен-17α-ил)пропаноат.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % флутиказона пропионата C25H31F3O5S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в метиленхлориде, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца флутиказона пропионата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика флутиказона пропионата на хроматограмме раствора стандартного образца флутиказона пропионата (Б) (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +32 до +36 в пересчёте на безводное, свободное от органических растворителей вещество (0,5 % раствор субстанции в метиленхлориде, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие флутиказона пропионат и его примеси, используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 800 мл воды, прибавляют 0,5 мл фосфорной кислоты концентрированной, 30 мл метанола и доводят объём раствора до метки водой.

Подвижная фаза Б (ПФБ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 800 мл ацетонитрила, прибавляют 0,5 мл фосфорной кислоты концентрированной, 30 мл метанола и доводят объём раствора до метки ацетонитрилом.

Растворитель. ПФА–ПФБ 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца для идентификации примеси G. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мг фармаклпейного стандартного образца флутиказона пропионата для идентификации примеси G, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца для идентификации примеси С. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца флутиказона пропионата для идентификации примеси С, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мг фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора испытуемым раствором до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь С:
(11β-гидрокси-16α-метил-3-оксо-6α,9-дифтор-17-{[(фторметил)сульфанил]карбонил}андроста-1,4-диен-17α-ил)ацетат
[80474-24-4].

Примесь D:
(11β-гидрокси-16α-метил-3-оксо-6α,9-дифтор-17-[(метилсульфанил)карбонил]андроста-1,4-диен-17α-ил)пропаноат
[73205-13-7].

Примесь G:
(11β-гидрокси-16α-метил-3-оксо-6α,9-дифтор-17-{[(фторметил)сульфанил]карбонил}андроста-1,4-диен-17α-ил)[11,17-дигидрокси-16α-метил-3-оксо-6α,9-дифторандроста-1,4-диен-17β-карбоксилат]
[220589-37-7].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °C; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 239 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2 | 57 | 43
2–42 | 57 → 45 | 43 → 55
42–62 | 45 → 10 | 55 → 90
62–72 | 10 | 90
72–77 | 10 → 57 | 90 → 43

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца для идентификации примеси С, раствор стандартного образца для идентификации примеси G и испытуемый раствор.

Идентификация примесей. Хроматограмма раствора стандартного образца для идентификации примеси G используется для идентификации пика примеси G; хроматограмма раствора стандартного образца для идентификации примеси С используется для идентификации пика примеси С; хроматограмма раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы используется для идентификации пика примеси D.

Относительное время удерживания соединений. Флутиказона пропионат – 1 (около 32 мин); примесь С – около 0,8; примесь D – около 0,95; примесь G – около 1,3.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика флутиказона пропионата должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси D и флутиказона пропионата должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- примесь D – не более 0,3 %;

- примесь G – не более 0,3 %;

- примесь C – не более 0,2 %;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,8 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика флутиказона пропионата на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции, в качестве растворителя – метанол.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 1,15 г аммония дигидрофосфата, растворяют в 900 мл воды, доводят значение pH натрия гидроксида раствором 1 М или фосфорной кислотой разведённой 10 % до 3,5, количественно переносят раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор—метанол 150:350:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры, доводят объём раствора тем же растворителем до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца флутиказона пропионата (А). В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца флутиказона пропионата, растворяют в ПФ, при необходимости обрабатывают ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца флутиказона пропионата (Б). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4,0 мл раствора стандартного образца флутиказона пропионата (А) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1 мг фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 2 мл раствора стандартного образца флутиказона пропионата (А) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии (С18), 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °C; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 239 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика флутиказона пропионата. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца флутиказона пропионата (Б) и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Флутиказона пропионат – 1 (около 6 мин); примесь D – около 1,1.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками флутиказона пропионата и примеси D должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора стандартного образца флутиказона пропионата (Б):

- фактор асимметрии пика (AS) флутиказона пропионата должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика флутиказона пропионата должно быть не более 2 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику флутиказона пропионата, должна составлять не менее 1000 теоретических тарелок.

Содержание флутиказона пропионата C25H31F3O5S в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика флутиказона пропионата на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика флутиказона пропионата на хроматограмме раствора стандартного образца флутиказона пропионата Б;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца флутиказона пропионата, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание флутиказона пропионата в фармакопейном стандартном образце флутиказона пропионата,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0686 Фолиевая кислота

Фолиевая кислота
Acidum folicum

Взамен ВФС 42-2479-95

C19H19N7O6 [59-30-3] | М.м. 441,40

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(2S)-2-(4-{[(2-Амино-4-оксо-1,4-дигидроптеридин-6-ил)метил]амино} бензамидо)пентандиовая кислота.

Cодержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % фолиевой кислоты C19H19N7O6 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. От жёлтого до оранжевого цвета кристаллический порошок. *На свету неустойчив.

Растворимость. Практически нерастворима в воде и cпирте 96 %.

* Растворима в хлористоводородной кислоты горячем растворе 8,3 % и в натрия гидроксида растворе 10 %.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Проводят определения 1–4 или 1–3,5.

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца фолиевой кислоты.

2. ВЭЖХ. Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика фолиевой кислоты на хроматограмме раствора стандартного образца фолиевой кислоты (испытание «Количественное определение»).

3. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения 0,001 % раствора субстанции в 0,1 М растворе натрия гидроксида в области длин волн от 230 до 380 нм должен соответствовать спектру аналогичного раствора фармакопейного стандартного образца фолиевой кислоты и иметь максимумы при длинах волн 256 нм, 283 нм и 365 нм. Отношение оптических плотностей А256/А365 должно составлять от 2,80 до 3,00.

4. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор 25 %—пропанол—спирт 96 % 20:20:60.

- Растворитель. Аммиака раствор 25 %—метанол 2:9.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца фолиевой кислоты. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 12,5 мг фармакопейного стандартного образца фолиевой кислоты, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 2 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца фолиевой кислоты. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 15 мин и просматривают в УФ-свете при длинах волн 254 нм и 365 нм.

- Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, интенсивности поглощения при 254 нм, интенсивности флуоресценции при 365 нм и величине должна соответствовать основной зоне адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца фолиевой кислоты.

5. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 5,0 мл натрия гидроксида растворе 0,1 М, прибавляют 5,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и 1 мл калия перманганата раствора 0,1 %, нагревают на водяной бане при температуре 80–85 °С в течение 3 мин, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют по каплям 0,2 мл водорода пероксида раствора разведённого и фильтруют. Фильтрат имеет голубую флуоресценцию в УФ-свете при длине волны 365 нм.

##### ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От +18 до +22 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в натрия гидроксида растворе 0,1 М, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Буферный раствор. Растворяют 11,16 г калия дигидрофосфата и 5,50 г дикалия гидрофосфата в 800 мл воды и доводят значение pH фосфорной кислотой разведённой 10 % до 6,4, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—буферный раствор 120:880.

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 28,6 г натрия карбоната и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 2,5 мл растворителя и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца фолиевой кислоты. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца фолиевой кислоты, растворяют в 2,5 мл растворителя и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в 1 мл растворителя и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси D. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 4 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси D и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца фолиевой кислоты для идентификации примеси I. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца фолиевой кислоты для идентификации примеси I, растворяют в 1 мл растворителя и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца фолиевой кислоты для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси С, E, G и H, растворяют в 1 мл растворителя и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь A (N-(4-аминобензоил)-L-глутаминовая кислота): (2S)-2-(4-аминобензамидо)пентандиовая кислота [4271-30-1].

Примесь B: 2,5,6-триаминопиримидин-4(1H)-он [1004-75-7].

Примесь C (изофолиевая кислота): (2S)-2-(4-{[(2-амино-4-оксо-1,4-дигидроптеридин-7-ил)метил]амино}бензамидо)пентандиовая кислота [47707-78-8].

Примесь D (птероевая кислота): 4-{[(2-амино-4-оксо-1,4-дигидроптеридин-6-ил)метил]амино}бензойная кислота [119-24-4].

Примесь E (6-птеринилфолиевая кислота): (2S)-2-(4-{бис[(2-амино-4-оксо-1,4-дигидроптеридин-6-ил)метил]амино}бензамидо)пентандиовая кислота [1391068-26-0].

Примесь F: 2-амино-7-(хлорметил)птеридин-4(1H)-он [1391194-56-1].

Примесь G: (2S)-2-{4-[(2-амино-7-метил-4-оксо-1,4-дигидроптеридин-6-ил)амино]бензамидо}пентандиовая кислота [2734707-85-6].

Примесь H: (2S)-2-{4-[(4S)-4-(4-{[(2-амино-4-оксо-1,4-дигидроптеридин-6-ил)метил]амино}бензамидо)-4-карбоксибутанамидо]бензамидо}пентандиовая кислота [2366274-27-1].

Примесь I: неизвестная структура.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 40 мм, силикагель октилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Скорость потока | 0,6 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм;
Объём пробы | 5 мкл;
Время хроматографирования | 3,3-кратное от времени удерживания основного пика.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси А, раствор стандартного образца примеси D, раствор стандартного образца фолиевой кислоты для идентификации примеси I, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Фолиевая кислота – 1 (около 8,5 мин); примесь A – около 0,5; примесь С – около 0,9; примесь Е – около 1,3; примесь D – около 1,5; примесь I – около 2,15; примесь G – около 2,4; примесь H – около 2,5.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используют относительное время удерживания соединений; хроматограмму раствора стандартного образца примеси А (для идентификации примеси А); хроматограмму раствора стандартного образца примеси D (для идентификации примеси D); хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу фолиевой кислоты для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы (для идентификации примесей С, E, G и H), хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу фолиевой кислоты для идентификации примеси I и хроматограмму раствора стандартного образца фолиевой кислоты для идентификации примеси I (для идентификации примеси I).

Пригодность хроматографической системы: на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (Rs) между пиками фолиевой кислоты и примеси Е должно быть не менее 2,0;

- отношение максимум/минимум (p/v) между высотой пика примеси С и высотой нижней точки линии перегиба между пиками примеси С и фолиевой кислотой относительно базовой линии должно быть не менее 1,5.

- отношение максимум/минимум (p/v) между высотой пика примеси G и высотой нижней точки линии перегиба между пиками примеси G и примеси H относительно базовой линии должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна превышать площади пика примеси А на хроматограмме раствора стандартного образца примеси А (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси D не должна более чем в 2 раза превышать площади пика примеси D на хроматограмме раствора стандартного образца примеси D (не более 0,4 %);

- площадь пика каждой из примесей С, E и G не должна более чем в 3 раза превышать площади пика фолиевой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика каждой из примесей H и I не должна более чем в 1,5 раза превышать площади пика фолиевой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площади пика фолиевой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1%);

- сумма площадей пиков всех примесей (кроме примесей А и D) не должна более чем в 12 раз превышать площади пика фолиевой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади пика фолиевой кислоты на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 8,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,15 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют испытуемый раствор и раствор стандартного образца фолиевой кислоты.

Содержание фолиевой кислоты C19H19N7O6 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика фолиевой кислоты на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика фолиевой кислоты на хроматограмме раствора стандартного образца фолиевой кислоты;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца фолиевой кислоты, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;
P – содержание фолиевой кислоты в фармакопейном стандартном образце фолиевой кислоты, %.

##### ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0354 Фонтурацетам (Fonturacetamum)

Вводится впервые

##### Определение

2-[(4RS)-2-Оксо-4-фенилпирролидин-1-ил]ацетамид.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % фонтурацетама C12H14N2O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым или коричневатым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в спирте 96 %, полиэтиленгликоле 400 и хлороформе, мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца фонтурацетама.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,5 г субстанции, растворяют в смеси спирт 96 %—хлористоводородной кислоты раствор 1 М 9:1 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора смесью спирт 96 %—хлористоводородной кислоты раствор 1 М 9:1 до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 до 380 нм должен иметь максимум при 258 нм, минимум при 240 нм и плечо в интервале от 251 до 257 нм.

##### Испытания

Температура плавления. От 130 до 133 °С (ОФС «Температура плавления»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном BY6 или Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 5,5 до 7,5 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Трифторуксусная кислота—вода 1:999.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,2 г субстанции, прибавляют 25 мл воды, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца примеси 3. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца примеси 3, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси 1, 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси 2, растворяют в 20 мл метанола и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 40 мг фармакопейного стандартного образца фонтурацетама, растворяют в 5 мл воды, обрабатывают ультразвуком в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 0,2 мл стандартного раствора и 0,2 мл раствора стандартного образца примеси 3 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,5 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь 1: (4RS)-4-фенилпирролидин-2-он [1198-97-6].

Примесь 2: 2-[(4RS)-2-оксо-4-фенилпирролидин-1-ил]уксусная кислота [67118-34-7].

Примесь 3: (3RS)-4-амино-3-фенилбутановая кислота [1078-21-3].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 260 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–1 | 95 | 5
1–7 | 95 → 92 | 5 → 8
7–20 | 92 → 50 | 8 → 50
20–23 | 50 → 10 | 50 → 90
23–26 | 10 | 90
26–26,1 | 10 → 95 | 90 → 5
26,1–30 | 95 | 5

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Фонтурацетам – 1 (около 13 мин); примесь 3 – около 0,5; примесь 2 – около 1,08; примесь 1 – около 1,12.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика фонтурацетама должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси 3 и фонтурацетама должно быть не менее 10;

- разрешение (RS) между пиками примеси 2 и примеси 1 должно быть не менее 1,5;

- фактор асимметрии пика (AS) примеси 1, примеси 2 и примеси 3 должен быть не более 1,5 для каждого;

- относительное стандартное отклонение площади каждого из пиков примеси 1, примеси 2 и примеси 3 должно быть не более 5,0 % (6 введений);

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси 1 умножают на 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей 1 и 2 не должна превышать площадь пика фонтурацетама на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика примеси 3 не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика фонтурацетама на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика фонтурацетама на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, регистрируемые на хроматограмме ПФ и пики, площадь которых составляет менее 0,25 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,025 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

* Бактериальные эндотоксины. Не более 1,0 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 50 мл воды, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца фонтурацетама. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца фонтурацетама, прибавляют 50 мл воды и выдерживают на ультразвуковой бане в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца фонтурацетама и испытуемый раствор.

Содержание фонтурацетама C12H14N2O2 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика фонтурацетама на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика фонтурацетама на хроматограмме раствора стандартного образца фонтурацетама;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца фонтурацетама, мг;
W – потеря в массе при высушивании,%;
P – содержание фонтурацетама в фармакопейном стандартном образце фонтурацетама,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0356 Формотерола фумарат дигидрат

Формотерол
Formoteroli fumaras dihydricus

Вводится впервые

##### Определение

rac-N-{2-Гидрокси-5-[(1R)-1-гидрокси-2-{[(2R)-1-(4-метоксифенил)пропан-2-ил]амино}этил]фенил}формамида (E)-бут-2-ендиоат (2:1) дигидрат.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % формотерола фумарата (C19H24N2O4)2·C4H4O4 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый или слегка желтоватый порошок.

Растворимость. Растворим в метаноле, мало растворим в воде и 2-пропаноле, практически нерастворим в ацетонитриле.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца формотерола фумарата дигидрата.

##### Испытания

Угол вращения. От –0,10° до +0,10° (1 % раствор субстанции в метаноле при длине кюветы 1 дм, ОФС «Оптическое вращение»).

pH раствора. От 5,5 до 6,5 (0,1 % раствор ОФС «Ионометрия», метод 3).

Испытуемый раствор. Растворяют 20 мг субстанции в 20 мл воды, свободной от диоксида углерода, при нагревании до 40 °С и охлаждают до комнатной температуры.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

1. Примесь I

Растворы, содержащие формотерола фумарат и его примеси, защищают от света и используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 5,3 г трикалия фосфата тригидрата, растворяют в 900 мл воды, доводят рН раствора до 12,00 калия гидроксида раствором 30 % или фосфорной кислотой концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 120:880.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг субстанции, растворяют в воде, при необходимости используя ультразвуковую баню, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца для идентификации примеси I, растворяют в воде, при необходимости используя ультразвуковую баню, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь I:
rac-N-{2-гидрокси-5-[(1R)-1-гидрокси-2-{[(2S)-1-(4-метоксифенил)пропан-2-ил]амино}этил]фенил}формамид
[532414-36-1].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм винилполимер октадецилсилильный для хроматографии; |
Температура колонки | 20 °С; |  |
Скорость потока | 0,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 225 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика формотерола. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Порядок выхода пиков: формотерол, примесь I.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками формотерола и примеси I должно быть не менее 2,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси I не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика формотерола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

2. Другие примеси

Растворы, содержащие формотерола фумарат и его примеси, защищают от света и используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 6,1 г натрия дигидрофосфата моногидрата и 1,03 г динатрия гидрофосфата дигидрата в 900 мл воды, доводят pH раствора до 6,00 кислотой разведённой 10 % или натрия гидроксида раствором 10 % и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Растворяют 3,73 г натрия дигидрофосфата моногидрата в 900 мл воды, прибавляют 0,35 г фосфорной кислоты концентрированной, доводят pH раствора до 3,10 фосфорной кислотой разведённой 10 % или натрия гидроксида раствором 10 % и доводят объём раствора водой до метки.

Растворитель. Ацетонитрил—буферный раствор 16:84.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. Раствор используют в течение 4 ч после приготовления или в течение 24 ч при хранении в защищённом от света месте при температуре 4 °С.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мг стандартного образца формотерола фумарата для проверки пригодности хроматографической системы (содержащего примеси A, B, C, D, E, F и G) растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A:
2-амино-4-(1-гидрокси-2-{[1-(4-метоксифенил)пропан-2-ил]амино}этил)фенол
[150513-24-96].

Примесь B:
N-{2-гидрокси-5-[(1RS)-1-гидрокси-2-{[1-(4-метоксифенил)этил]амино}этил]фенил}формамид
[1224588-66-2].

Примесь C:
N-[2-гидрокси-5-(1-гидрокси-2-{[1-(4-метоксифенил)пропан-2-ил]амино}этил)фенил]ацетамид
[1795135-61-3].

Примесь D:
N-[2-гидрокси-5-(1-гидрокси-2-{метил[1-(4-метоксифенил)пропан-2-ил]амино}этил)фенил]формамид
[1795133-96-8].

Примесь E:
N-[2-гидрокси-5-(1-гидрокси-2-{[1-(3-метил-4-метоксифенил)пропан-2-ил]амино}этил)фенил]формамид
[1616967-26-0].

Примесь F:
N-[2-гидрокси-5-(1-[2-гидрокси-5-(1-гидрокси-2-{[1-(4-метоксифенил)пропан-2-ил]амино}этил)анилино]-2-{[1-(4-метоксифенил)пропан-2-ил]амино}этил)фенил]формамид
[1795129-59-7].

Примесь G: (2RS)-1-(4-метоксифенил)пропан-2-амин [64-13-1].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм силикагель октилсилильный для хроматографии, сферический размер частиц 5 мкм, размер пор 8 нм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 214 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; вводят смесь растворителей до получения воспроизводимого профиля. |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 16 | 84
10–37 | 16 → 70 | 84 → 30

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Формотерол – 1 (около 12 мин); примесь G – около 0,4; примесь A – около 0,5; примесь B – около 0,7; примесь C – около 1,2; примесь D – около 1,3; примесь E – около 1,8; примесь F – около 2,0; примесь Н – около 2,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используется хроматограмма раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмма, прилагаемая к стандартному образцу формотерола фумарата для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси A, B, C, D, E, F и G.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика формотерола должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примесей G и A должно быть не менее 1,5;

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси C и формотерола должно быть не менее 2,5.

На хроматограмме раствора сравнения относительное стандартное отклонение площади пика формотерола должно быть не более 2,0 %
(6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания, площадь пика примеси A умножается на 1,75.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси A не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика формотерола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика каждой из примесей B, C, D и F не должна превышать площадь пика формотерола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 % каждая);

- площадь пика примеси E не должна превышать половину площади пика формотерола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать половину площади пика формотерола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна более чем в 2,5 раза превышать площадь пика формотерола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика формотерола на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. От 4,0 % до 5,0 %. (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,35 г (точная навеска) субстанции в 100 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 40,24 мг формотерола фумарата (C19H24N2O4)2·C4H4O4.

##### Хранение

В плотно закрытой упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0355 Фосфазид (Phosphazidum)

Взамен ВФС 42-3497-99

##### Определение

[β-D-3-Азидо-1-(5-метил-2,4-диоксо-1,2,3,4-тетрагидропиримидин-1-ил)-1,2,3-тридезоксирибофуранозил-5]фосфонат натрия.

Cодержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % фосфазида C10H13N5NaO6P в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком порошок с характерным запахом.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе и гексане.

##### Идентификация

1. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 5 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 нм до 350 нм должен иметь максимум поглощения при 266 нм и минимум поглощения при 234 нм. В качестве раствора сравнения используют воду.

2. Качественная реакция. Растворяют 150 мг субстанции в 2 мл воды. Полученный раствор должен давать характерную реакцию А на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +22 до +28 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 6,5 до 8,5 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Все растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Метанол—аммония ацетата раствор 0,05 М 50:950.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают, 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде, при необходимости выдерживают на ультразвуковой бане в течение 5 мин, не допуская нагревания, и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца фосфазида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца фосфазида, растворяют в воде, при необходимости выдерживают на ультразвуковой бане в течение 5 мин, не допуская нагревания, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца фосфазида и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Предколонка | 4 × 3,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии; |
Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 265 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 90 | 10
5–15 | 90 → 70 | 10 → 30
15–30 | 70 → 0 | 30 → 100
30–35 | 0 | 100
35–40 | 0 → 90 | 100 → 10
40–45 | 90 | 10

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца фосфазида и испытуемый раствор.

** Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика фосфазида должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора стандартного образца фосфазида:

- фактор асимметрии пика (AS) фосфазида должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика фосфазида должно быть не более 2,0 % (6 введений);

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика фосфазида на хроматограмме раствора стандартного образца фосфазида;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца фосфазида, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание фосфазида в фармакопейном стандартном образце фосфазида,%.

Допустимое содержание примесей:

- любая примесь – не более 1,0 %;

- сумма всех примесей – не более 3,0 %.

Вода. Не более 2,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца фосфазида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца фосфазида, растворяют в воде, при необходимости выдерживают на ультразвуковой бане в течение 5 мин, не допуская нагревания, и доводят объём раствора водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

На хроматограмме раствора стандартного образца фосфазида относительное стандартное отклонение площади пика фосфазида должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание фосфазида C10H13N5NaO6P в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика фосфазида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика фосфазида на хроматограмме раствора стандартного образца фосфазида;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца фосфазида, мг;
P – содержание фосфазида в фармакопейном стандартном образце фосфазида,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В сухом, защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Перед проведением испытания должна быть проверена разделительная способность хроматографической системы.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0345 Фосфомицин динатрия

Фосфомицин
Fosfomycini dinatricum

Вводится впервые

##### Определение

[(2R,3S)-3-Метилоксиран-2-ил]фосфонат динатрия.

Фосфомицин динатрия продуцируется некоторыми штаммами Streptomyces fradiae или может быть получен другим способом.

Содержит не менее 95,0 % и не более 101,0 % фосфомицина динатрия C3H5Na2O4P в пересчёте на безводное и свободное от примеси A и остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, умеренно растворим в метаноле, практически нерастворим в спирте 96 % и метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр испытуемого образца в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца фосфомицина динатрия.

2. Качественная реакция

- Хлорной кислоты раствор 25 %. К 45 мл воды прибавляют 25 мл хлорной кислоты и перемешивают.

- Натрия гидрокарбоната насыщенный раствор. К 10,0 г натрия гидрокарбоната прибавляют 100 мл воды и перемешивают.

- Испытуемый раствор. Растворяют 0,1 г субстанции в 3 мл хлорной кислоты растворе 25 %, прибавляют 1,0 мл 0,1 М раствора натрия перйодата, нагревают на водяной бане в течение 30 мин, охлаждают и прибавляют 50 мл воды. Полученный раствор нейтрализуют натрия гидрокарбоната насыщенным раствором и прибавляют 1,0 мл свежеприготовленного калия йодида раствора 40 %.

- Параллельно проводят контрольный опыт.

- Испытуемый раствор должен быть бесцветным, раствор в контрольном опыте должен быть оранжевого или жёлто-оранжевого цвета.

3. Качественная реакция. К 8 мг субстанции прибавляют 2 мл воды, 1 мл хлорной кислоты и 2 мл 0,1 М раствора натрия перйодата, нагревают на водяной бане в течение 10 мин, прибавляют 1 мл аммония молибдата раствора в 15 % серной кислоте и 1 мл аминогидроксинафталинсульфоновой кислоты раствора и оставляют на 30 мин; раствор должен окраситься в синий цвет.

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –13,0 до –15,0 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (5 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»). Определение проводят при длине волны 405 нм, используя ртутную лампу.

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 10 мл воды, свободной от диоксида углерода, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть окрашен не более эталона В9 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 9,0 до 10,5 (5 % раствор в воде, свободной от углерода диоксида, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Примесь А. Не более 1,0 % в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

0,005 М раствор натрия перйодата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мл 0,1 М раствора натрия перйодата и доводят объём раствора водой до метки.

0,0025 М раствор натрия арсенита. В мерную колбу вместимостью 1 л помещают 25 мл 0,1 М раствора натрия арсенита и доводят объём раствора водой до метки.

В колбу с притёртой пробкой помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 100 мл воды, прибавляют 50 мл 0,5 М фталатного буферного раствора рН 6,4 и 5,0 мл 0,005 М раствора натрия перйодата, закрывают, встряхивают и оставляют в защищённом от света месте на 90 мин. Прибавляют 10 мл свежеприготовленного калия йодида раствора 40 %, закрывают колбу и перемешивают в течение 2 мин. Полученный раствор титруют 0,0025 М раствором натрия арсенита до слабо-жёлтой окраски, прибавляют 2 мл крахмала раствора 1 %, содержащего 0,01 % ртути(II) йодида, и медленно титруют до исчезновения синей окраски.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Содержание примеси A в субстанции в процентах в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (Х) вычисляют по формуле:

где V1 - объём 0,0025 М раствора натрия арсенита, израсходованный на титрование испытуемого раствора, мл;
V0 - объём 0,0025 М раствора натрия арсенита, израсходованный на титрование в контрольном опыте, мл;
а1 – навеска субстанции, мг;
K - поправочный коэффициент 0,0025 М раствора натрия арсенита;
0,25 - количество примеси A, мг, соответствующее 1 мл 0,0025 М раствора натрия арсенита, мг/мл;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

Примечание

Примесь A: (2,3-дигидроксипропил)фосфоновая кислота [84954-80-3].

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции и, в качестве растворителя, смесь пиридин—этиленгликоль 1:3.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2). Растворяют 0,5 г субстанции в 10 мл воды.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Препарат должен быть нетоксичным (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 15 мг фосфомицина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно в течение 30 с. Срок наблюдения 48 ч.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,05 ЕЭ на 1 мг фосфомицина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Хлорной кислоты раствор 50 %. К 20 мл воды прибавляют 50мл хлорной кислоты.

В колбу с притёртой пробкой помещают 0,12 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 20 мл 0,1 М раствора натрия перйодата, прибавляют 5 мл хлорной кислоты раствора 50 %, перемешивают. Нагревают на водяной бане при температуре 37 °C в течение 105 мин, прибавляют 50 мл воды и немедленно доводят рН раствора натрия гидрокарбоната насыщенным раствором до 6,40. К полученному раствору прибавляют 10 мл свежеприготовленного калия йодида раствора 40 %, закрывают колбу и перемешивают в течение 2 мин. Полученный раствор титруют 0,1 М раствором натрия арсенита до слабо-жёлтой окраски, прибавляют 2 мл крахмала раствора 1 %, содержащего 0,01 % ртути(II) йодида, и титруют до исчезновения синей окраски.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Содержание фосфомицина динатрия C3H5Na2O4P в процентах в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (Y) вычисляют по формуле:

где V1 - объём 0,1 М раствора натрия арсенита, израсходованный на титрование испытуемого раствора, мл;
V0 - объём 0,1 М раствора натрия арсенита, израсходованный на титрование в контрольном опыте, мл;
а1 – навеска субстанции, мг;
K - поправочный коэффициент 0,1 М раствора натрия арсенита;
9,1 - количество фосфомицина динатрия, мг, соответствующее 1 мл 0,1 М раствора натрия арсенита, мг/мл;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
X – содержание примеси A в субстанции,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной стерильной упаковке в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0346 Фталилсульфатиазол (Phthalylsulfathiazolum)

Взамен ВФС 42-2860-97

##### Определение

2-({4-[(1,3-Тиазол-2-ил)сульфамоил]фенил}карбамоил)бензойная кислота.

Содержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % фталилсульфатиазола C17H13N3O5S2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый со слегка желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в диметилформамиде, мало или очень мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде и хлороформе.

* Легко растворяется в натрия гидроксида растворе 10 % и в натрия карбоната растворе 10 %.

##### Подлинность

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца фталилсульфатиазола.

2. Качественная реакция. Кипятят 50 мг субстанции в течение 1,5±0,5 мин с 2 мл воды и 0,15 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %. Полученный раствор должен давать характерную реакцию на первичные ароматические амины (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

3. Качественная реакция. Смешивают 0,1 г субстанции и 0,5 г резорцина, прибавляют 0,3 мл серной кислоты концентрированной, нагревают на водяной бане до получения однородной массы, охлаждают до комнатной температуры и прибавляют 5 мл натрия гидроксида раствора 10 %. К 0,1 мл полученной смеси прибавляют 25 мл воды; должна появиться интенсивная зелёная флуоресценция, исчезающая при подкислении.

##### Испытания

Температура плавления. От 200 до 203 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

В коническую колбу со шлифом вместимостью 100 мл помещают 2 г субстанции, прибавляют 17 мл натрия гидроксида раствора 10 % и перемешивают. Кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин и охлаждают до комнатной температуры. Прибавляют к полученному раствору 35 мл хлористоводородной кислоты разведённой раствора 8,3 %, встряхивают и фильтруют. Фильтрат нейтрализуют натрия гидроксида раствором 10 % и фильтруют. Полученный осадок количественно переносят при помощи 100 мл воды в коническую колбу вместимостью 200 мл, доводят до кипения, охлаждают до комнатной температуры, перемешивают до образования кристаллов и фильтруют. Осадок высушивают при температуре 100 °С в течение 2 ч.

Прозрачность раствора. Растворяют 0,2 г субстанции в смеси 1,5 мл натрия гидроксида раствора 1 М и 3,5 мл воды. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном ВY5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность. Перемешивают 2 г субстанции с 20 мл воды в течение 30 мин и фильтруют. К 10 мл фильтрата прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствора 0,1 %. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 0,2 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида.

Сульфатиазол и другие первичные ароматические амины. Не более 0,5 %. Определение проводят методом титриметрии.

Взбалтывают 1 г (точная навеска) субстанции в течение 15 мин с 10 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, отстаивают при комнатной температуре и фильтруют. К фильтрату прибавляют 40 мл воды, 0,5 г калия бромида, 0,1 мл тропеолина раствора 00 и 1 каплю метиленового синего раствора. Титруют 0,1 М раствором натрия нитрита, прибавляя по 50 мкл титранта в мин, до образования зелёного окрашивания.

1 мл 0,1 М раствора натрия нитрита соответствует 25,53 мг сульфатиазола C9H9N3O2S2.

Примечание – При отсутствии сульфатиазола от прибавления 50 мкл 0,1 М раствора натрия нитрита появляется голубое окрашивание.

Сульфаты. Не более 0,025 % (ОФС «Сульфаты»). Нагревают 2 г субстанции с 50 мл воды при температуре 70 °С в течение 5 мин, быстро охлаждают до комнатной температуры и фильтруют. Используют 10 мл полученного фильтрата.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Для определения 5,0 мл фильтрата, полученного в испытании «Сульфата», доводят водой до 10 мл.

Потеря в массе при высушивании. Не более 2,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции и платиновый тигель.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 20 мл диметилформамида, нейтрализованного непосредственно перед титрованием по тимоловому синему, и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида в смеси метанола и бензола до появления синего окрашивания (индикатор – 1 капля раствора тимолового синего).

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 20,17 мг фталилсульфатиазола C17H13N3O5S2.

Из полученного процентного содержания фталилсульфатиазола вычитают процентное содержание сульфатиазола и других первичных ароматических аминов, умноженное на 1,58.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0347 Фтивазид моногидрат

Фтивазид
Ftivazidum monohydricum

Взамен ФС 42-3266-96

##### Определение

N'-[(4-Гидрокси-3-метоксифенил)метилиден]пиридин-4-карбогидразида моногидрат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 100,5 % фтивазида C14H13N3O3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Светло-жёлтый или жёлтый мелкокристаллический порошок со слабым запахом ванилина.

Растворимость. Очень мало растворим в спирте 96%, практически нерастворим в воде.

* Растворяется в ледяной уксусной кислоте, в разбавленных растворах минеральных кислот и щелочей.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца фтивазида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в 1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

- Спектр поглощения полученного раствора в области длин волн от 215 до 400 нм должен иметь максимумы при 229 нм, 274 нм и 309 нм, минимумы при 247 нм и 298 нм. В качестве раствора сравнения используют хлористоводородную кислоту раствор 0,1 М.

3. Качественная реакция. К 50 мг субстанции прибавляют 50 мг 2,4-динитрохлорбензола и 3 мл спирта 96 %. Смесь кипятят в течение 2 мин, охлаждают до комнатной температуры и прибавляют 0,1 мл натрия гидроксида раствора 10 %; должно появиться желтовато-бурое окрашивание, усиливающееся при стоянии.

4. Качественная реакция. К 50 мг субстанции прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и нагревают на кипящей водяной бане; должен появиться сильный запах ванилина.

##### Испытания

Родственные примеси

1. Изониазид. Не более 0,1 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие фтивазид и его примеси используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 2,722 г калия дигидрофосфата в 800 мл воды и доводят рН натрия гидроксида раствором 1 М до 6,80. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА, доводят объём раствора тем же растворителем до метки и фильтруют.

Раствор стандартного образца изониазида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца изониазида [54-85-3], растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца изониазида и доводят объём раствора ПФА до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм, содержание углерода 17%; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–6 | 96 | 4
6–17 | 96 → 20 | 4 → 80
17–20 | 20 → 96 | 80 → 4
20–25 | 96 | 4

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца изониазида и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Фтивазид – 1 (около 14 мин); изониазид – около 0,2.

** Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика изониазида должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора стандартного образца изониазида:

- фактор асимметрии пика (AS) изониазида должен быть не более 2;

- относительное стандартное отклонение площади пика изониазида должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Содержание изониазида C6H7N3O в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика изониазида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика изониазида на хроматограмме раствора стандартного образца изониазида;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца изониазида, мг;
P – содержание изониазида в фармакопейном стандартном образце изониазида,%.

2. Ванилин. Качественная реакция.

Встряхивают 0,8 г субстанции с 40 мл воды в течение 2 минут и фильтруют. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 12,5 мл полученного раствора, доводят объём раствора водой до метки и прибавляют 0,2 мл натрия гидроксида раствора 0,05 М и 3 капли фенолфталеина; должно появиться красное окрашивание.

Потеря в массе при высушивании. От 5,0 % до 7,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 0,5 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы при температуре 120 °С.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Встряхивают 0,5 г субстанции в 25 мл воды в течение 5 мин и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Сульфаты», должны выдерживать испытание на хлориды.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 2 мл муравьиной кислоты, прибавляют 30 мл уксусного ангидрида и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до перехода красновато-бурой с зелёной флуоресценцией окраски в зелёную (индикатор – 0,3 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 27,13 мг фтивазида C14H13N3O3.

##### Хранение

В плотно закрытой упаковке.

* Приводится для информации.

** Перед проведением испытания должна быть проверена разделительная способность хроматографической системы.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0348 Фторурацил (Fluorouracilum)

Взамен ФС 42-1085-91

##### Определение

5-Фторпиримидин-2,4(1H,3H)-дион.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % фторурацила C4H3FN2O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в диметилформамиде, умеренно растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца фторурацила.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Спектр поглощения 0,001 % раствора субстанции в хлористоводорой кислоты растворе 0,1 М в области длин волн от 220 до 350 нм должен соответствовать спектру аналогичного раствора фармакопейного стандартного образца фторурацила.

##### Испытания

Удельный показатель поглощения. От 530 до 550 (в максимуме поглощения) при длине волны 266 нм (0,001 % раствор субстанции в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М, ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY7 или Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 4,5 до 5,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

1. Примеси F и G. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—вода—этилацетат 15:15:70.

Растворитель. Метанол—вода 50:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,10 г субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси F. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси F, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси G. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца мочевины, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Примечание

Примесь F: 2-этокси-5-фторпиримидин-4(1H)-он(2-этокси-5-фторурацил) [56177-80-1].

Примесь G: мочевина, (карбамид) [57-13-6].

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (100 мкг), раствора стандартного образца примеси F (0,25 мкг), раствора стандартного образца примеси G (0,2 мкг) и по 5 мкл растворов стандартных образцов примесей F и G в одну точку для проверки пригодности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 10 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат в токе воздуха в течение 15 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм для обнаружения примеси F.

Для обнаружения примеси G пластинку опрыскивают смесью 200 мл диметиламинобензальдегида раствора 1 % в этаноле и 20 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, сушат при температуре 80 °С в течение 3–4 мин и просматривают в видимом свете (примесь G проявляется в виде жёлтого пятна).

Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме нанесённых в одну точку растворов стандартных образцов примесей F и G, после обоих просмотров обнаруживаются две чётко разделённые зоны адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- примесь F: зона адсорбции, находящаяся на уровне основной зоны адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца примеси F, не превосходит последнюю по величине (не более 0,25 %);

- примесь G: зона адсорбции, находящаяся на уровне основной зоны адсорбции на хроматограмме раствора примеси G, не превосходит последнюю по совокупности величины и интенсивности окраски (не более 0,2 %).

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от света и используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Калия дигидрофосфата раствор 0,05 М, доведённый до pH 5,7 калия гидроксида раствором 30 %.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца фторурацила. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца фторурацила и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси A. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси A, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси B. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси B, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси C (А). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси C, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси C (Б). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси C (А) и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор смеси примесей D и E. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца смеси примесей фторурацила (содержащего примеси D и E) растворяют в 1 мл ПФ.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и 1,0 мл раствора стандартного образца примеси C (А) и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь A: пиримидин-2,4,6(1H,3H,5H)-трион [67-52-7].

Примесь B: дигидропиримидин-2,4,5(3H)-трион [496-76-4].

Примесь C: пиримидин-2,4(1H,3H)-дион, CAS [66-22-8].

Примесь D: 5-метоксипиримидин-2,4(1H,3H)-дион [6623-81-0].

Примесь E: 5-хлорпиримидин-2,4(1H,3H)-дион [1820-81-1].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 266 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика фторурацила. |

Хроматографируют испытуемый раствор, раствор стандартного образца фторурацила, растворы стандартных образцов примесей A, B и C, раствор смеси примесей D и E и раствор для проверки пригодности хроматографической системы.

Относительное время удерживания соединений. Фторурацил – 1 (около 6 мин); примесь A – около 0,5; примесь B – около 0,7; примесь C – около 0,9; примесь D – около 1,6; примесь E – около 1,9.

Идентификация примесей. Для идентификации примесей используют хроматограммы растворов стандартных образцов примесей A, B и C (Б), раствора смеси примесей D и E и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу смеси примесей фторурацила (содержащего примеси D и E).

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси C и фторурацила должно быть не менее 2,0;

На хроматограммах растворов стандартных образцов примесей A, B и C (Б):

- фактор асимметрии пиков (AS) каждой из примесей A, B и C должен быть не более 2,0;

- относительные стандартные отклонения площадей пиков примесей A, B и C должны быть не более 5,0 %, соответственно (6 введений).

На хроматограмме раствора стандартного образца фторурацила:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика фторурацила должно быть не менее 30;

- фактор асимметрии пика (AS) фторурацила должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика фторурацила должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь D – 1,5; примесь E – 1,3.

Содержание каждой из примесей A, B и C в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика примеси A, B или C на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика примеси A, B или C на хроматограмме раствора стандартного образца примеси A, B или C (Б), соответственно;
a0 - навеска стандартного образца примеси A, B или C, соответственно, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание примеси A, B или C в стандартном образце примеси A, B или C, соответственно,%.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика фторурацила на хроматограмме раствора стандартного образца фторурацила;
a0 - навеска стандартного образца фторурацила, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P - содержание фторурацила в стандартном образце фторурацила,%.

Допустимое содержание примесей:

- содержание любой из примесей A, B, C, D и E – не более 0,1 %;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее половины площади основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца фторурацила (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 2). Высушивают 0,5 г (точная навеска) субстанции в вакууме над фосфора(V) оксидом при температуре 80 °С в течение 4 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола», платиновый тигель). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,17 ЕЭ на 1 мг фторурацила (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции c концентрацией 1 мг фторурацила в 1 мл воды.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции при слабом нагревании в 80 мл диметилформамида. Раствор охлаждают до температуры 15–25 °С и титруют 0,1 М раствором тетрабутиламмония гидроксида до появления синего окрашивания (индикатор – 0,25 мл тимолового синего раствора 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора тетрабутиламмония гидроксида соответствует 13,01 мг фторурацила C4H3FN2O2.

##### Хранение

В плотно закрытой упаковке, в защищённом от света месте при температуре не выше 25 °С.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0044 Фуксин основной (Fuxinum basicum)

Взамен ФС.2.1.0044.15

##### Определение

Розанилин гидрохлорид (4-[(4-аминофенил)(4-иминоциклогекса-2,5-диен-1-илиден)метил]-2-метиланилина гидрохлорид) и парарозанилин гидрохлорид (4,4'-[(4-иминоциклогекса-2,5-диен-1-илиден)метилен]дианилина гидрохлорид).

Содержит не менее 88,0 % фуксина основного в пересчёте на сухой розанилина гидрохлорид С20H19N3·HCl.

##### Свойства

Описание. Тёмно-зелёные кристаллы или кристаллический порошок с металлическим блеском.

Растворимость. Растворим в воде, спирте 96 % и хлористоводородной кислоте разведённой 8,3 %.

##### Идентификация

1. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Раствор А. Растворяют 0,1 г субстанции в 50 мл воды.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 1,0 мл раствора А и доводят объём раствора водой до метки.

- Спектр испытуемого раствора в области от 380 до 780 нм должен иметь максимум при 543±5 нм. В качестве раствора сравнения используют воду.

2. Качественная реакция. К 2,5 мл раствора А прибавляют 2,5 мл воды и несколько капель хлористоводородной кислоты концентрированной. Через некоторое время раствор должен окраситься в жёлтый цвет (отличие от фуксина кислого).

3. Качественная реакция. К 5 мл раствора А прибавляют несколько капель раствора таниновой кислоты 10 %; должен образоваться красный осадок.

##### Испытания

Потеря в массе при высушивании. Не более 5,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании» способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,3 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Вещества, нерастворимые в спирте. В круглодонную колбу вместимостью 250 мл помещают 1 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 50 мл спирта 96 % и кипятят на водяной бане с обратным холодильником в течение 15 мин. Раствор фильтруют через предварительно взвешенный стеклянный фильтр. Фильтр промывают горячим спиртом 96 % до обесцвечивания стекающей жидкости и высушивают при температуре 105 °С в течение 1 ч. Содержание веществ, нерастворимых в спирте, не должно превышать 1,0 %.

Мышьяк. Не более 0,0008 % (ОФС «Мышьяк, метод 1). Для определения используют 60 мг субстанции.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Смесь растворителей. Хлористоводородная кислота концентрированная—титана(III) хлорида раствор 15 %—вода 40:53:387.

Помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции в герметичную колбу для титрования вместимостью 500 мл, снабжённую газовпускной и газовыпускной трубками, обратным холодильником и бюреткой, прибавляют 175 мл воды и 25 мл натрия тартрата раствора 30 %, помещают в колбу магнитную мешалку с тефлоновым покрытием и нагревают до кипения. В течение 15 мин колбу продувают азотом, предварительно пропущенным через 2 склянки для промывания газа, каждая из которых содержит 500 мл смеси растворителей, к которой добавлено 10 мг сафранина. Продолжая нагревание и продувку азотом, раствор титруют при перемешивании 0,05 M раствором титана(III) хлорида до появления жёлтого окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора титана(III) хлорида соответствует 3,379 мг розанилина гидрохлорида С20H19N3·HCl.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0349 Фуразидин натрия тетрагидрат

Фуразидин
Furazidinum natricum tetrahydricum

Вводится впервые

##### Определение

1-{[3-(5-Нитрофуран-2-ил)проп-2-ен-1-илиден]амино}имидазолидин-2,4-дион натрия тетрагидрат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % фуразидина натрия C10H7N4NaO5 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Оранжевый кристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в воде, очень мало растворим в метаноле и диметилсульфоксиде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца фуразидина натрия.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика фуразидина на хроматограмме раствора стандартного образца фуразидина натрия (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от воздействия света и используют свежеприготовленным.

Муравьиной кислоты раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мл муравьиной кислоты безводной и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Доводят значение pH воды муравьиной кислоты раствором до 3,5.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. ПФА—ацетонитрил 30:70.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца фуразидина натрия и 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси 1 ((2E)-3-(5-нитрофуран-2-ил)проп-2-еналь [52661-56-0]), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 294 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–21 | 80 → 20 | 20 → 80
21–26 | 20 | 80
26–32 | 20 → 80 | 80 → 20

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Фуразидин – 1 (около 7 мин); примесь 1 – около 1,3.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для каждого из пиков фуразидина и примеси 1 должно быть не менее 10.

На хроматограмме стандартного раствора разрешение (RS) между пиками фуразидина и примеси 1 должно быть не менее 5,0.

Содержание примеси 1 в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси 1 на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика примеси 1 на хроматограмме стандартного раствора;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска примеси 1, мг;
P – содержание примеси 1 в фармакопейном стандартном образце примеси 1,%.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика фуразидина на хроматограмме стандартного раствора;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца фуразидина натрия тетрагидрата, мг;
P – содержание фуразидина натрия в фармакопейном стандартном образце фуразидина натрия в пересчёте на безводное вещество,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь 1 – не более 0,1 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика фуразидина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. От 18,0 % до 22,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 12).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, полученного в испытании «Родственные примеси», и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца фуразидина натрия. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца фуразидина натрия, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–15 | 80 → 43 | 20 → 57
15–21 | 43 → 80 | 57 → 20

Хроматографируют раствор стандартного образца фуразидина натрия тетрагидрата и испытуемый раствор.

Содержание фуразидина натрия C10H7N4NaO5 в субстанции в процентах в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика фуразидина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика фуразидина на хроматограмме раствора стандартного образца фуразидина натрия;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца фуразидина натрия, мг;
W1 – содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
W0 – содержание воды в фармакопейном стандартном образце фуразидина натрия,%;
P – содержание фуразидина натрия в фармакопейном стандартном образце фуразидина натрия в пересчёте на безводное вещество,%.

##### Хранение

В сухом, защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0203 Фуразолидон (Furazolidone)

Взамен ФС.2.1.0203.18

##### Определение

3-{[(5-Нитрофуран-2-ил)метилиден]амино}-1,3-оксазолидин-2-он.

Содержит не менее 97,0 % и не более 103,0 % фуразолидона C8H7N3O5 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Жёлтый или жёлтый с зеленоватым оттенком мелкокристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в диметилформамиде, очень мало растворим в ацетоне, практически нерастворим в воде, спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца фуразолидона.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения испытуемого раствора (раздел «Количественное определение») в области длин волн от 230 до 400 нм должен соответствовать спектру раствора стандартного образца фуразолидона.

3. Качественная реакция. Смешивают 50 мг субстанции с 25 мл смеси вода—натрия гидроксида раствор 30 % 4:1 и нагревают; должно появиться коричневое окрашивание.

4. Качественная реакция. Прибавляют 50 мг субстанции к 10 мл свежеприготовленной смеси диметилформамид—калия гидроксида раствор спиртовой 0,5 М 9:1; должно появиться красно-фиолетовое окрашивание, сразу же переходящее в тёмно-синее, а затем в красно-фиолетовое и фиолетовое.

##### Испытания

рН. От 4,5 до 7,0 (ОФС «Ионометрия», метод 3). Встряхивают 1 г субстанции со 100 мл воды в течение 15 минут и фильтруют.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие фуразолидон и его примеси, необходимо защищать от действия света.

Подвижная фаза А (ПФА). Вода, доведённая до рН 2,3 хлорной кислотой.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, прибавляют 25 мл ацетонитрила и 10 мл воды, обрабатывают ультразвуком в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси 1 ([(5-нитрофуран-2-ил)метилен]диацетат [92-55-7]), прибавляют 5 мл ацетонитрила, обрабатывают ультразвуком в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры, доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 50 мг субстанции, 25 мл ацетонитрила и 10 мл воды, обрабатывают ультразвуком в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Детектор 1 | спектрофотометрический, 370 нм (фуразолидон); |  |
Детектор 2 | спектрофотометрический, 305 нм (примесь 1); |  |
Объём пробы | 5 мкл; |  |
Время хроматографирования | 30 мин. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,% | Скорость потока, мл/мин
--- | --- | --- | ---
0–10 | 80 | 20 | 1
10–22 | 80 → 20 | 20 → 80 | 1
22–27 | 20 | 80 | 1
27,01–30 | 20 → 80 | 80 → 20 | 2

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Фуразолидон – 1 (около 7 мин); относительное время удерживания примеси 1 – около 2,6.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками фуразолидона и примеси 1 при длине волны 305 нм, не менее 10,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси 1 не должна превышать площадь пика фуразолидона на хроматограмме раствора сравнения при длине волны 305 нм (не более 1,0 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,1 площади пика фуразолидона на хроматограмме раствора сравнения при длине волны 370 нм (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 1,5 площади пика фуразолидона на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,5 %).

Не учитывают пики, выходящие до 2,5 мин и после 27 мин, а также пики с площадью меньше площади пика фуразолидона на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты»). Для определения используют 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Хлориды».

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Взбалтывают 0,5 г субстанции с 25 мл воды в течение 2 мин и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1 после сжигания 1,0 г субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г субстанции (точная навеска), растворяют в диметилформамиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу объёмом 100 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят водой до метки.

Раствор стандартного образца фуразолидона. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца фуразолидона, растворяют в диметилформамиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу объёмом 100 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят водой до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора и стандартного раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при 367 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения воду.

Содержание фуразолидона C8H7N3O5 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где A1 - оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 - оптическая плотность стандартного раствора;
а1 - навеска субстанции, г;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца фуразолидона, г;
W - потеря в массе при высушивании,%;
P - содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце фуразолидона,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0204 Фуросемид (Furosemidum)

Взамен ФС.2.1.0204.18

##### Определение

5-Сульфамоил-2-[(фуран-2-илметил)амино]-4-хлорбензойная кислота.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % фуросемида С12Н11ClN2O5S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Умеренно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

* Растворяется в разбавленных растворах щелочей.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца фуросемида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в натрия гидроксида растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора натрия гидроксида раствором 0,1 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимумы поглощения при 228 нм, 270 нм и 333 нм. В качестве раствора сравнения используют натрия гидроксида раствор 0,1 М. Отношение значений оптической плотности А270/А228 должно быть от 0,52 до 0,57.

3. Качественная реакция. 0,05 г субстанции растворяют в 2 мл спирта 96 % и прибавляют 25 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М. Колбу накрывают часовым стеклом и нагревают на кипящей водяной бане в течение 15 мин. Раствор охлаждают, прибавляют 15 мл натрия гидроксида раствора 1 М, 3 мл натрия нитрита раствора 0,1 М и выдерживают в течение 3 мин, затем прибавляют 1 мл сульфаминовой кислоты раствор 3 % и 1 мл нафтилэтилендиамина дигидрохлорида водного раствора 0,5 %; должно появиться фиолетово-красное окрашивание.

##### Испытания

Температура плавления. От 204 до 209 °С (с разложением, ОФС «Температура плавления»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,1 г в 10 мл спирта 96 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», должна выдерживать сравнение с эталоном BY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Подвижная фаза (ПФ). 0,2 г калия фосфата дигидрофосфата и 0,25 г цетримида растворяют в 70 мл воды, доводят значение рН аммиака раствором до 7,0 и прибавляют 30 мл пропанола.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1 мл полученного раствора, 1 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А: 5-сульфамоил-4-[(фуран-2-илметил)амино]-2-хлорбензойная кислота [4818-59-1].

Примесь В: 5-сульфамоил-2,4-дихлорбензойная кислота.

Примесь С: 2-амино-5-сульфамоил-4-хлорбензойная кислота.

Примесь D: 5-сульфамоил-2,4-бис[(фуран-2-илметил)амино]бензойная кислота.

Примесь Е: 2,4-дихлорбензойная кислота.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 238 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика фуросемида. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Фуросемид – 1 (около 7,5 мин); примесь С – около 0,5; примесь В – около 0,6; примесь А – около 0,8; примесь Е – около 1,3; примесь D – около 1,5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси А и фуросемида должно быть не менее 4,0;

- фактор асимметрии (АS) пиков фуросемида и примеси А должен быть не более 1,8;

- относительное стандартное отклонение площади каждого из пиков фуросемида и примеси А должно быть не более 5,0 % (6 введений);

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика примеси А на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы (не более 0,25 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в два раза превышать площадь пика примеси А на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,1 площади пика примеси А на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы (менее 0,025 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,03 % (ОФС «Сульфаты»). Для определения используют 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Хлориды».

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). 1 г субстанции встряхивают с 30 мл воды в течение 1 мин и фильтруют. Для определения используют 3 мл фильтрата, разведённого водой до объёма 10 мл.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 1,4 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины») Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 10 мг фуросемида, растворяя сначала в 0,2 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида, а затем доводят общий объём до 1 мл водой для БЭТ.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 20 мл диметилформамида и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют с индикатором (0,2 мл бромтимолового синего раствора 1 % в диметилформамиде) до перехода жёлтой окраски в зелёную.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 33,07 мг фуросемида С12Н11ClN2O5S.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0206 Хлорамбуцил (Chlorambucilum)

Взамен ФС.2.1.0206.18

##### Определение

4-{4-[Бис(2-хлорэтил)амино]фенил}бутановая кислота.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 101,0 % хлорамбуцила C14H19Cl2NO2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца хлорамбуцила.

2. Качественная реакция. В 2 мл спирта 96 % растворяют 50 мг субстанции, прибавляют 0,5 мл серебра нитрата раствора 0,1 М и нагревают в течение 2 мин на кипящей водяной бане; должен выпасть белый творожистый осадок, растворимый в растворе аммиака.

##### Испытания

Температура плавления. От 64 до 68 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Родственные примеси

1. Примесь G. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Испытуемый раствор и растворы сравнения используют свежеприготовленными или хранят при температуре 4–8 °С в защищённом от света месте не более суток.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—трифторуксусной кислоты раствор 1 % 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца хлорамбуцила, содержащего примесь G, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь G:
4-{2-[бис(2-хлорэтил)амино]фенил}бутановая кислота [178481-89-5] или 4-{3-[бис(2-хлорэтил)амино]фенил}бутановая кислота
[134862-11-6].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,9 мм, силикагель фенилсилильный для хроматографии, 4 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 260 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания основного пика. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Хлорамбуцил – 1 (около 11 мин); примесь G – около 1,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси G используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками хлорамбуцила и примеси G должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси G не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,4 %).

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Испытуемый раствор и растворы сравнения используют свежеприготовленными и защищают от света.

Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 1,9 г аммония ацетата в 800 мл воды и доводят значение рН уксусной кислотой до 3,9, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Хлористоводородная кислота 1 %—ацетонитрил 10:90.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца хлорамбуцила для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси B и E, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь В:
4-{4-[(2-хлорэтил)амино]фенил}бутановая кислота [116505-53-4].

Примесь Е:
4-[4-({2-[(4-{4-[бис(2-хлорэтил)амино]фенил}бутаноил)окси]этил}(2-хлорэтил)амино)фенил]бутановая кислота [1988791-13-4].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 3,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 260 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания основного пика. |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 60 | 40
5–15 | 60 → 10 | 40 → 90
15–25 | 10 | 90
25–30 | 10 → 60 | 90 → 40

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Хлорамбуцил – 1 (около 12 мин); примесь В – около 0,5; примесь Е – около 1,4.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей В и Е используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу хлорамбуцила для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси В и хлорамбуцила должно быть не менее 5,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси В не должна более чем в 4 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,4 %);

- площадь пика примеси Е не должна более чем в 6 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). К 0,3 г субстанции прибавляют 15 мл воды, встряхивают до растворения и фильтруют.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 25 мл предварительно нейтрализованного спирта 96 % и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до появления розового окрашивания (индикатор – 0,1 мл фенолфталеина раствора 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 30,42 мг хлорамбуцила C14H19Cl2NO2.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0207 Хлорамфеникол (Chloramphenicolum)

Взамен ФС.2.1.0207.18

##### Определение

N-[(1R,2R)-1,3-Дигидрокси-1-(4-нитрофенил)пропан-2-ил]-2,2-дихлорацетамид.

Cодержит не менее 97,5 % и не более 102,0 % хлорамфеникола C11H12Cl2N2O5 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или серовато-белый, желтовато-белый или белый с зеленовато-жёлтым оттенком кристаллический порошок, тонкие кристаллы или продолговатые пластинки.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 %, растворим в этилацетате, мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца хлорамфеникола.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика хлорамфеникола на хроматограмме раствора стандартного образца хлорамфеникола (раздел «Количественное определение»).

3. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 400 нм должен иметь максимум поглощения при 278 нм и минимум поглощения при 237 нм. В качестве раствора сравнения используют натрия гидроксида раствор 0,1 М

##### Испытания

Температура плавления. От 149 до 153 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельное вращение. От +18 до +21 в пересчёте на сухое вещество (ОФС «Оптическое вращение»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,5 мг субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Удельный показатель поглощения. От 290 до 305 при длине волны 278 нм в пересчёте на сухое вещество (0,002 % раствор в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М, ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл спирта 96 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», не должна превышать эталон сравнения Y5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. Встряхивают в течение 2 мин 0,1 г субстанции с 20 мл воды и прибавляют 0,1 мл бромтимолового синего раствора 0,04 %. Окраска раствора должна измениться от прибавления не более 0,1 мл 0,02 М раствора хлористоводородной кислоты или 0,02 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы готовят непосредственно перед приготовлением.

Буферный раствор. Растворяют 2,0 г натрия гептансульфоната в 900 мл воды, прибавляют 6,8 г калия дигидрофосфата и 5 мл триэтиламина и доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 2,50. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Метанол—буферный раствор 320:680.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в 5 мл метанола и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор стандартного образца примеси В. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 12,5 мг фармакопейного стандартного образца примеси В, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца хлорамфеникола для идентификации примесей, содержащего примесь А, растворяют в 1,0 мл метанола, прибавляют 1,0 мл раствора стандартного образца примеси В и доводят объём раствора ПФА до метки.

Примечание

Примесь А: (1R,2R)-2-амино-1-(4-нитрофенил)пропан-1,3-диол [716-61-0].

Примесь В: 4-нитробензальдегид [555-16-8].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 277 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–13 | 100 | 0
13–25 | 100 → 60 | 0 → 40
25–33 | 60 | 40
33–38 | 60 → 100 | 40 → 0

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Хлорамфеникол – 1 (около 14 мин); примесь А – около 0,7; примесь В – около 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А и В используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу хлорамфеникола для идентификации примесей.

Пригодности хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси В и хлорамфеникола должно быть не менее 2,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси А умножают на 0,7.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать двукратную площадь пика хлорамфеникола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика хлорамфеникола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика хлорамфеникола на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 % от площади пика хлорамфеникола.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Встряхивают в течение 5 мин 0,6 г субстанции с 20 мл воды и 10 мл азотной кислоты концентрированной и фильтруют.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,2 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции концентрацией 10 мг хлорамфеникола в 1 мл 96% этилового спирта.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

* Стерильность. Субстанция должна быть стерильна. В соответствии с ОФС «Стерильность».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями. Растворы готовят непосредственно перед приготовлением.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—буферный раствор 320:680.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 10 мл метанола и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца хлорамфеникола. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца хлорамфеникола, растворяют в 10 мл метанола и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца хлорамфеникола и испытуемый раствор.

Содержание хлорамфеникола C11H12Cl2N2O5 в процентах (Х) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика хлорамфеникола на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика хлорамфеникола на хроматограмме раствора стандартного образца хлорамфеникола;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца хлорамфеникола, мг;
P – содержание хлорамфеникола в фармакопейном стандартном образце хлорамфеникола,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0208 Хлорамфеникола натрия сукцинат

Хлорамфеникол
Chloramphenicoli natrii succinas

Взамен ФС.2.1.0208.18

##### Определение

Смесь 4-[(1R,2R)-3-гидрокси-2-(2,2-дихлорацетамидо)-1-(4-нитрофенил)пропокси]-4-оксобутаноата натрия (1-изомер) и 4-[(2R,3R)-3-гидрокси-2-(2,2-дихлорацетамидо)-3-(4-нитрофенил)пропокси]-4-оксобутаноата натрия (3-изомер) переменного состава.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % хлорамфеникола натрия сукцината C15H15Cl2N2NaO8 в пересчёте на безводное и не содержащее остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или желтовато-белый порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля GF254.

- Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота разведённая 12 %—метанол—хлороформ 1:14:85.

- Испытуемый раствор. Растворяют 20 мг субстанции в 2 мл ацетона.

- Раствор стандартного образца хлорамфеникола натрия сукцината. Растворяют 20 мг фармакопейного стандартного образца хлорамфеникола натрия сукцината в 2 мл ацетона.

- Раствор стандартного образца хлорамфеникола. Растворяют 20 мг фармакопейного стандартного образца хлорамфеникола в 2 мл ацетона.

- На линию старта пластинки наносят по 2 мкл испытуемого раствора (20 мкг), раствора стандартного образца хлорамфеникола натрия сукцината (20 мкг) и раствора стандартного образца хлорамфеникола (20 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

- Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца хлорамфеникола должны обнаруживаться 2 чётко разделённые зоны адсорбции.

- Результат. Две основные зоны адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и цвету флуоресценции должны соответствовать двум основным зонам адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца хлорамфеникола натрия сукцината и должны отличаться по положению от двух основных зон адсорбции на хроматогрармме раствора стандартного образца хлорамфеникола.

2. Качественная реакция. Нагревают на водяной бане 0,1 г субстанции с 5 мл натрия гидроксида раствора 20 %; должно появиться жёлтое окрашивание, переходящее в красно-оранжевое. При дальнейшем нагревании окраска усиливается, выпадает кирпично-красный осадок и выделяется аммиак, обнаруживаемый по запаху и по посинению влажной лакмусовой бумаги.

3. Качественная реакция. В сухую пробирку вносят 5 мг субстанции и 10 мг резорцина, прибавляют 0,1 мл серной кислоты концентрированной и осторожно нагревают над пламенем горелки до тех пор, пока смесь не окрасится в тёмно-коричневый цвет. После охлаждения прибавляют 0,5 мл воды, затем вносят натрия гидроксида раствор 10 % до появления щелочной реакции, после чего доводят объём раствора водой до 20,0 мл; должно наблюдаться образование раствора оранжевого цвета, имеющего интенсивную зелёную флуоресценцию.

4. Качественная реакция. Субстанция дает характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +5,0 до +8,0 в пересчёте на безводное вещество (5 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

** Прозрачность раствора. Раствор 5,0 г субстанции в 100 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

рН. От 6,4 до 7,0 (25 % раствор, ОФС «Ионометрия» метод 3).

Хлорамфеникол и хлорамфеникола динатрия дисукцинат. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Фосфорная кислота разведённая 2 %—метанол—вода 50:400:550.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца хлорамфеникола. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца хлорамфеникола, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём ПФ до метки.

Раствор стандартного образца хлорамфеникола динатрия дисукцината. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг стандартного образца хлорамфеникола динатрия дисукцината, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца хлорамфеникола, 10 мг фармакопейного стандартного образца хлорамфеникола динатрия дисукцината, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, прибавляют 25 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 275 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика хлорамфеникола. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца хлорамфеникола, раствор стандартного образца хлорамфеникола динатрия дисукцината и испытуемый раствор.

Идентификация примесей. Хроматограмма раствора стандартного образца хлорамфеникола используется для идентификации пика хлорамфеникола, хроматограмма раствора стандартного образца хлорамфеникола динатрия дисукцината используется для идентификации примеси хлорамфеникола динатрия дисукцината.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы два пика, соответствующих пикам на хроматограммах раствора стандартного образца хлорамфеникола и раствора стандартного образца хлорамфеникола динатрия дисукцината, должны чётко отделяться от пиков, соответствующих двум основным пикам на хроматограмме испытуемого раствора. При необходимости регулируют содержание метанола в ПФ.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика хлорамфеникола должна быть не более площади основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца хлорамфеникола (не более 2,0 %);

- площадь пика хлорамфеникола динатрия сукцината должна быть не более площади основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца хлорамфеникола динатрия сукцината (не более 2,0 %).

*** Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Встряхивают в течение 1 мин 0,5 г субстанции с 25 мл воды и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

*** Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты»). Для определения используют 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Хлориды».

Вода. Не более 2,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжелые металлы» (метод 3А или 3 Б ) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,2 ЕЭ на 1 мг хлорамфеникола (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

** Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС«Стерильность»).

##### Количественное определение

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 276 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения воду.

Содержание хлорамфеникола натрия сукцината C15H15Cl2N2NaO8 в процентах (Х) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где А – оптическая плотность испытуемого раствора;
a – навеска субстанции, г;
220 – удельный показатель поглощения хлорамфеникола натрия сукцината (А_1см^(1%));
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В герметичной упаковке, защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

*** Необходимость включения показателя зависит от способа получения субстанции.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0209 Хлоропирамина гидрохлорид

Хлоропирамин
Chloropyraminum hydrochloridum

Взамен ФС.2.1.0209.18

##### Определение

N1,N1-Диметил- N2-(пиридин-2-ил)- N2-[(4-хлорфенил)метил]этан-1,2-диамина гидрохлорид (1:1).

Содержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % хлоропирамина гидрохлорида C16H20ClN3·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде и в хлороформе, растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца хлоропирамина гидрохлорида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора субстанции в области длин волн от 200 до 400 нм должен иметь максимум поглощения при 314 нм и минимум поглощения при 263 нм. В качестве раствора сравнения используют хлористоводородной кислоты раствор 0,01 М.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 169 до 173 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», должна выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 5,5 до 7,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Бензол—спирт 96 %—раствор аммиака концентрированный 25 % 80:20:1.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Подготовка пластинки. Пластинку активируют при температуре от 100 до 105 °С в течение 30 мин.

На линию старта пластинки наносят 20 мкл (400 мкг) испытуемого раствора, 40 мкл (4 мкг), 20 мкл (2 мкг) и 10 мкл (1 мкг) раствора сравнения. Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при 254 нм.

Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме раствора сравнения (1 мкг) чётко видна зона адсорбции основного вещества.

Результат. Суммарное содержание примесей, оценённое по величине их зон адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора в сравнении с зонами адсорбции на хроматограмме раствора сравнения (4 мкг) не должно превышать 1 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 8,75 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в смеси 5 мл уксусной кислоты ледяной и 5 мл раствора ртути(II) ацетата и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до появления зелёного окрашивания (индикатор – 0,1 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 16,31 мг хлоропирамина гидрохлорида C16H20ClN3·HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0210 Хлорохина фосфат

Хлорохин
Chloroquini phosphas

Взамен ФС.2.1.0210.18

##### Определение

(4RS)-N4-(7-Хлорхинолин-4-ил)-N1,N1-диэтилпентан-1,4-диамина фосфат (1:2).

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % хлорохина фосфата C18H26ClN3·2H3PO4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96 %, метаноле и хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца хлорохина фосфата.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 210 до 370 нм должен иметь максимумы при 220 нм, 235 нм, 256 нм, 329 нм и 342 нм. Удельный показатель поглощения в максимуме должен быть от 600 до 660, от 350 до 390, от 300 до 330, от 325 до 355 и от 360 до 390. В качестве раствора сравнения используют хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,4 г субстанции в 10 мл воды, прибавляют 2 мл натрия гидроксида раствора 8,5 % и взбалтывают с двумя порциями по 20 мл метиленхлорида; 1 мл водного слоя, нейтрализованного по 0,1 % спиртовому раствору бромтимолового синего концентрированной азотной кислотой, должен давать характерную реакцию А на фосфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

рН раствора. От 3,6 до 4,4 (10 % раствор, ОФС «Ионометрия» метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля GF254.

Подвижная фаза (ПФ). Диэтиламин—циклогексан—хлороформ 10:40:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают около 0,5 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора водой до метки.

На линию старта пластинки наносят по 2 мкл испытуемого раствора (100 мкг), раствора сравнения (1 мкг) и раствора для проверки пригодности хроматографической системы (0,5 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции любой примеси по совокупности величины и степени подавления флуоресценции не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения (не более 1 %); и зона адсорбции только одной такой примеси может превышать по совокупности величины и интенсивности флуоресценции зону адсорбции на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы (0,5 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 2,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Встряхивают 0,5 г субстанции с 25 мл воды в течение 1 мин и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения используют 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Хлориды».

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,46 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 30 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с индикатором – 0,1 мл 0,1 % раствора кристаллического фиолетового – до перехода окраски в зелёную.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 25,79 мг хлорохина фосфата C18H26ClN3·2H3PO4.

##### Хранение

В плотно закрытой упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0211 Хлорпропамид (Chlorpropamidum)

Взамен ФС.2.1.0211.18

##### Определение

N-Пропил-N'-(4-хлорбензолсульфонил)мочевина.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % хлорпропамида C10H13ClN2O3S в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в ацетоне и метиленхлориде, растворим в спирте 96 %, умеренно растворим в хлороформе, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца хлорпропамида.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец по отдельности растворяют в минимальных объёмах метиленхлорида, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора субстанции в области длин волн от 220 до 350 нм должен иметь максимум при 232 нм. Удельный показатель поглощения в максимуме должен быть от 570 до 630. В качестве раствора сравнения используют хлористоводородной кислоты раствор 0,01 М.

3. Качественная реакция. Нагревают 0,1 г субстанции с 0,15 мл натрия гидроксида раствором 10 %; выделяющиеся пары должны окрашивать смоченную водой красную лакмусовую бумагу в синий цвет.

4. Качественная реакция. Смешивают 0,3 г субстанции в фарфоровом тигле с 1,5 г смеси для спекания. Тигель закрывают крышкой и смесь прокаливают на огне. После охлаждения содержимое тигля растворяют в 15 мл горячей воды и фильтруют. 5 мл фильтрата подкисляют азотной кислотой и прибавляют 0,5 мл серебра нитрата раствора 2 %; должен образоваться белый осадок, растворимый в растворе аммиака.

##### Испытания

Температура плавления. От 126 до 130 °С (ОФС «Температура плавления»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 %—циклогексан—метанол—метиленхлорид 11,5:30:50:100.

Смесь растворителей. Хлористоводородная кислота 25 %—вода—калия перманганата раствор 50 г/л 10:10:20.

Реактив для детектирования. Крахмала раствор с калия йодидом.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г субстанции, растворяют в ацетоне и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор 4-хлорбензолсульфонамида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 15 мг 4-хлорбензолсульфонамида, растворяют в ацетоне и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор N,N'-дипропилмочевины. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 15 мг N,N'-дипропилмочевины, растворяют в ацетоне и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,3 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения Б. Смешивают 5 мл раствора сравнения А с 10 мл ацетона.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 100 мг субстанции, 5 мг 4-хлорбензолсульфонамида и 5 мг N,N'-дипропилмочевины, растворяют в ацетоне и доводят объём раствора ацетоном до метки.

Примечание

Примесь А: 4-хлорбензолсульфонамид [98-64-6].

Примесь В: N,N'-дипропилмочевина [623-95-0].

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (250 мкг), раствора 4-хлорбензолсульфонамида (0,75 мкг), раствора N,N'-дипропилмочевины (0,75 мкг), раствора сравнения А (0,75 мкг), раствора сравнения Б (0,25 мкг) и раствора для проверки пригодности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей в потоке холодного воздуха и нагревают при температуре 110 °С в течение 10 мин. В камеру помещают выпарительную чашку, содержащую смесь растворителей, закрывают и выдерживают в течение 15 мин. Горячую пластинку помещают в камеру и выдерживают пластинку в контакте с парами хлора в течение 2 мин. Вынимают пластинку и помещают в поток холодного воздуха до полного удаления паров хлора и пока покрытие пластинки ниже точек нанесения растворов не будет давать синюю окраску с каплей реактива для детектирования. Опрыскивают реактивом для детектирования и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы, должны обнаруживаться три чёткие зоны адсорбции с приблизительными значениями Rf 0,4, 0,6 и 0,9, принадлежащие хлорпропамиду, примеси А и примеси В, соответственно.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- зона адсорбции примеси А по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать соответствующую зону адсорбции на хроматограмме раствора 4-хлорбензолсульфонамида (не более 0,3 %);

- зона адсорбции примеси В по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать соответствующую зону адсорбции на хроматограмме раствора N,N'-дипропилмочевины (не более 0,3 %);

- любая зона адсорбции, кроме основной зоны адсорбции и зон адсорбции примесей А и В, по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать соответствующую зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,3 %);

- не более двух таких зон адсорбции по совокупности величины и интенсивности окраски могут превышать соответствующую зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,1 %).

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). Расторяют 0,3 г субстанции в 30 мл воды и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Сульфаты. Не более 0,1 %. (ОФС «Сульфаты», метод 1). Для определения используют 10 мл фильтрата, полученного в испытании «Хлориды».

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Помещают 0,25 г (точная навеска) субстанции в колбу и растворяют в 50 мл спирта 96 %, предварительно нейтрализованного по фенолфталеину, и прибавляют 25 мл воды. Титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до розового окрашивания.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 27,67 мг хлорпропамида C10H13ClN2O3S.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0338 Хлорпротиксена гидрохлорид

Хлорпротиксен
Chlorprothixeni hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

(Z)-3-(2-Хлор-9H-тиоксантен-9-илиден)-N,N-диметилпропан-1-амина гидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % хлорпротиксена гидрохлорида C18H18ClNS⋅HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в воде и спирте 96 %, мало растворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца хлорпротиксена гидрохлорида.

- Подготовка образцов. Отдельно растворяют 25 мг субстанции и 25 мг фармакопейного стандартного образца хлорпротиксена гидрохлорида в 1 мл воды, прибавляют 0,1 мл натрия гидроксида раствора 8,5 %, встряхивают с 2 мл метиленхлорида, отделяют органический слой, промывают его 0,5 мл воды, выпаривают досуха и высушивают остаток при температуре 45±5 °С.

2. Качественная реакция. Растворяют 20 мг субстанции в 2 мл воды, подкисляют азотной кислотой разведённой 12,5 %, оставляют на 5 мин и центрифугируют. Супернатант должен давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 219 до 221 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор субстанции 1 % в воде, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН. От 4,4 до 5,2 (раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие хлорпротиксена гидрохлорид и его примеси, защищают от света.

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 6,0 г калия дигидрофосфата, 2,9 г натрия лаурилсульфата и 9,0 г тетрабутиламмония бромида, растворяют в смеси метанол—ацетонитрил—вода 5:40:55 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца хлорпротиксена для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси C и F, растворяют в 1,0 мл ПФ.

Примечание

Примесь С:
(Z)-3-(2-хлор-9H-тиоксантен-9-илиден)-N-метилпропан-1-амин [51382-91-3].

Примесь F:
(E)-3-(2-хлор-9H-тиоксантен-9-илиден)-N,N-диметилпропан-1-амин [4546-35-4].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика хлорпротиксена. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Хлорпротиксен – 1 (около 10 мин); примесь С – около 1,25; примесь F – около 1,33.

Для идентификации пиков примесей С и F используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу хлорпротиксена для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками хлорпротиксена и примеси С должно быть не менее 3,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси F не должна более чем в 5 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать восьмикратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,8 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 60 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 9).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в смеси 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М и 50 мл спирта 96 % и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают объём титранта между двумя точками перегиба на кривой титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 35,23 мг хлорпротиксена гидрохлорида C18H18ClNS⋅HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0316 Цетилпиридиния хлорид моногидрат

Цетилпиридиния хлорид
Cetylpyridinii chloridum monohydricum

Взамен ФС 42-1852-82

##### Определение

1-Гексадецилпиридин-1-ий хлорид моногидрат.

Cодержит не менее 96,0 % и не более 101,0 % цетилпиридиния хлорида C21H38ClN в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Слегка мыльный на ощупь. Водный раствор при встряхивании пенится.

Растворимость. Растворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца цетилпиридиния хлорида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика цетилпиридиния на хроматограмме раствора стандартного образца цетилпиридиния хлорида (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Опалесценция раствора 1 г субстанции в 100 мл воды, свободной от углерода диоксида, не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность. К 50 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствора 0,1 %. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 2,5 мл 0,02 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 8,203 г натрия ацетата безводного в воде и доводят значение рН раствора уксусной кислоты раствором 0,1 М до 5,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 450:550.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор пиридина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) пиридина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 1,0 мл раствора пиридина и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель нитрильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика цетилпиридиния. |

Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Цетилпиридиний – 1 (около 14 мин); пиридин – около 0,3.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения разрешение (RS) между пиками пиридина и цетилпиридиния должно быть не менее 3,0.

Содержание пиридина в субстанции (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика пиридина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика пиридина на хроматограмме раствора сравнения;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска пиридина, мг;
P - содержание основного вещества в пиридине,%.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика цетилпиридиния на хроматограмме раствора сравнения.

Допустимое содержание примесей:

- пиридин – не более 0,02 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, кроме пиридина, площадь которых составляет менее 0,5 площади пика цетилпиридиния на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Амины и соли аминов. Определение проводят методом титриметрии. (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворитель. Хлористоводородной кислоты раствор 1 М—метанол 3:97.

Растворяют 5,0 г (точная навеска) субстанции в 20 мл растворителя, прибавляют 100 мл 2-пропанола и титруют в токе азота 0,1 М раствором тетрабутиламмония гидроксида в 2-пропаноле, записывая потенциометрическую кривую титрования до объёма титранта 12,0 мл (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Кривая титрования должна иметь две точки перегиба. Расход титранта между двумя точками перегиба не должен превышать 5,0 мл.

При наличии одной точки перегиба на кривой титрования анализ повторяют, предварительно добавляя в титруемый раствор 3,0 мл 2,5 % раствора диметилдециламина в 2-пропаноле.

Вода. От 4,5 % до 5,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 15,6 г натрия дигидрофосфата дигидрата в воде и доводят значение рН фосфорной кислотой до 3,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 500 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Буферный раствор—метанол 80:920.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 40 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца цетилпиридиния хлорида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца цетилпиридиния хлорида, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика цетилпиридиния. |

Хроматографируют раствор стандартного образца цетилпиридиния хлорида и испытуемый раствор.

Время удерживания соединений. Цетилпиридиний – около 6 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца цетилпиридиния хлорида:

- фактор асимметрии пика (AS) цетилпиридиния должен быть не более 3,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика цетилпиридиния не должно превышать 2,0 % (6 определений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику цетилпиридиния, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

Содержание цетилпиридиния хлорида C21H38ClN в субстанции в процентах в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика цетилпиридиния на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика цетилпиридиния на хроматограмме раствора стандартного образца цетилпиридиния хлорида;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца цетилпиридиния хлорида, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание цетилпиридиния хлорида в фармакопейном стандартном образце цетилпиридиния хлорида,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0687 Цетиризина дигидрохлорид

Цетиризин
Cetirizini dihydrochloridum

Вводится впервые

C21H25ClN2O3·2HCl [83881-52-1] | М.м. 461,81

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(2-{4-[(RS)-Фенил(4-хлорфенил)метил]пиперазин-1-ил}этокси)уксусной кислоты дигидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % цетиризина дигидрохлорида C21H25ClN2O3·2HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, практически нерастворим в ацетоне.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца цетиризина дигидрохлорида.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 20 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 1,2 до 1,8 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Серная кислота разведённая 9,8 %—вода—ацетонитрил 4:66:930.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Содержимое флакона с фармакопейным стандартным образцом цетиризина для идентификации пиков, содержащем примеси B, C, D, E и F, растворяют в 5,0 мл ПФ.

Раствор для идентификации примеси A. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца цетиризина дигидрохлорида и 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси A, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь A: 1-[(RS)-фенил(4-хлорфенил)метил]пиперазин [303-26-4].

Примесь B: {4-[(RS)-фенил(4-хлорфенил)метил]пиперазин-1-ил}уксусная кислота [113740-61-7].

Примесь C: (2-{4-[(RS)-фенил(2-хлорфенил)метил]пиперазин-1-ил}этокси)уксусная кислота [83881-59-8].

Примесь D: 1,4-бис[фенил(4-хлорфенил)метил]пиперазин [346451-15-8].

Примесь E: [2-(2-{4-[(RS)-фенил(4-хлорфенил)метил]пиперазин-1-ил}этокси)этокси]уксусная кислота [682323-77-9].

Примесь F: {2-[4-(дифенилметил)пиперазин-1-ил]этокси}уксусная кислота [83881-53-2].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки | 25 °С;
Скорость потока | 1,0 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм;
Объём пробы | 20 мкл;
Время хроматографирования | 3-кратное времени удерживания пика цетиризина.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для идентификации примеси A, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Цетиризин – 1 (около 18 мин); примесь D – около 0,3; примесь B – около 0,7; примесь C – около 0,8; примесь E – около 1,4; примесь F – около 1,8; примесь A – около 1,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей B, C, D, E и F используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу цетиризина для идентификации пиков. Для идентификации пика примеси А используют хроматограмму раствора для идентификации примеси А.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси C и цетиризина должно быть не менее 5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь A – 0,7; примесь C –1,9; примесь D – 0,6; примесь E – 1,3; примесь F – 1,9.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A, B, C, D, E и F не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в 70 мл смеси вода—ацетон 30:70 и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») по второму перегибу на кривой титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 15,39 мг цетиризина дигидрохлорида C21H25ClN2O3·2HCl.

##### ХРАНЕНИЕ

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0315 Цефазолин натрия

Цефазолин
Cefazolinum natricum

Вводится впервые

##### Определение

(6R,7R)-3-{[(5-Метил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)сульфанил]метил}-8-оксо-7-[2-(1H-тетразол-1-ил)ацетамидо]-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилат натрия.

Cодержит не менее 95,0 % и не более 102,0 % цефазолина натрия C14H13N8NaO4S3 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Полусинтетический антибиотик, производное продукта ферментации.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Очень гигроскопичен. Обладает полиморфизмом.

Растворимость. Легко растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца цефазолина.

- Испытуемый раствор. Растворяют 0,15 г субстанции в 5 мл воды, прибавляют 0,5 мл уксусной кислоты разведённой 12 % и выдерживают на ледяной бане в течение 10 мин. Полученный раствор фильтруют и промывают осадок 2 мл воды. Осадок растворяют в смеси вода—ацетон 1:9, выпаривают на водяной бане почти досуха и сушат в сушильном шкафу при температуре 60 °С в течение 30 мин.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –15 до –24 в пересчёте на безводное вещество (5 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Удельный показатель поглощения. От 260 до 300 в пересчёте на безводное вещество при длине волны 272 нм (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. 2,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора натрия гидрокарбоната раствором 4,2 %.

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 25 мл воды, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», измеренная в кювете с толщиной слоя 1 см в максимуме поглощения при длине волны 430 нм, не должна превышать 0,15 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

рН раствора. От 4,0 до 6,0 (раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Около 14,54 г динатрия гидрофосфата додекагидрата и около 3,53 г калия дигидрофосфата помещают в мерную колбу вместимостью 1000 мл, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в 10 мл натрия гидроксида растворе 0,05 М и выдерживают в течение 30 мин. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФА до метки.

Примечание

Примесь L:
(6R,7S)-3-{[(5-метил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)сульфанил]метил}-8-оксо-7-[2-(1H-тетразол-1-ил)ацетамидо]-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота.

Хроматографические условия

Колонка | 125 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 45 °С; |  |
Скорость потока | 1,2 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 5 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2 | 98 | 2
2–4 | 98 → 85 | 2 → 15
4–10 | 85 → 60 | 15 → 40
10–11,5 | 60 → 35 | 40 → 65
11,5–12 | 35 | 65
12–15 | 35 → 98 | 65 → 2
15–21 | 98 | 2

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Цефазолин – 1 (около 6,5 мин), примесь L – около 1,05.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика цефазолина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками цефазолина и примеси L должно быть не менее 2,0;

- фактор асимметрии пика (AS) цефазолина должен быть не более 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика цефазолина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать 3,5-кратную площадь пика цефазолина на хроматограмме раствора сравнения (не более 3,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика цефазолина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 6,0 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

N,N-Диметиланилин. Не более 0,002 %. (ОФС «N,N-Диметиланилин»).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 40 мг цефазолина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения – 48 ч.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,1 ЕЭ на 1 мг цефазолина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,77 г динатрия гидрофосфата додекагидрата и 1,86 г лимонной кислоты, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—раствор А 100:900.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца цефазолина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца цефазолина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают около 5 мг фармакопейного стандартного образца цефуроксима натрия, растворяют в 10 мл раствора стандартного образца цефазолина и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 270 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца цефазолина натрия и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками цефазолина и цефуроксима должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца цефазолина натрия:

- фактор асимметрии пика (AS) цефазолина должен быть не менее 0,8 и не более 3,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика цефазолина должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание цефазолина натрия C14H13N8NaO4S3 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика цефазолина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика цефазолина на хроматограмме раствора стандартного образца цефазолина;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца цефазолина, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание цефазолина в фармакопейном стандартном образце цефазолина,%;
476,5 – молекулярная масса цефазолина натрия;
454,5 – молекулярная масса цефазолина.

##### Хранение

В сухом, защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0314 Цефепима дигидрохлорид моногидрат

Цефепим
Cefepimi dihydrochloridum monohydricum

Вводится впервые

##### Определение

(6R,7R)-7-[(2Z)-2-(2-Амино-1,3-тиазол-4-ил)-2-(метоксиимино)ацетамидо]-3-[(1-метилпирролидин-1-ий-1-ил)метил]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилата дигидрохлорид моногидрат.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % цефепима дигидрохлорида C19H24N6O5S2·2HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде и метаноле, практически нерастворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца цефепима дигидрохлорида моногидрата.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика цефепима на хроматограмме раствора стандартного образца цефепима дигидрохлорида моногидрата (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +40 до +45 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 2 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y3 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

1. Примесь G. Не более 0,5 %.

Все растворы готовят непосредственно перед использованием.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—азотной кислоты 0,01 М раствор 10:1000. Фильтруют через фильтр с размером пор 0,2 мкм.

Растворитель. Азотной кислоты 0,01 М раствор.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор N-метилпирролидина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,25 г (точная навеска) N-метилпирролидина (примесь G, 1-метилпирролидин [120-94-5]) и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,25 г пирролидина, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. Смешивают 5,0 мл полученного раствора и 5,0 мл раствора N-метилпирролидина.

Хроматографические условия

Колонка | 50 × 4,6 мм, катионообменная смола сильная (протонированная форма), 5 мкм; |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | кондуктометрический; |  |
Объём пробы | 100 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,1-кратное от времени удерживания пика цефепима. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор N-метилпирролидина и испытуемый раствор.

Время удерживания цефепима – около 50 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками пирролидина и примеси G должно быть не менее 3.

На хроматограмме раствора N-метилпирролидина:

- фактор асимметрии пика (AS) примеси G должен быть не более 2,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика примеси G должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Содержание примеси G в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси G на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика N-метилпирролидина на хроматограмме раствора N-метилпирролидина;
а1 – навеска субстанции, г;
а0 – навеска N-метилпирролидина, г;
P – содержание основного вещества в N-метилпирролидине,%.

2. Другие примеси

Все растворы готовят непосредственно перед использованием или хранят при температуре 4–8 °С не более 12 ч.

Буферный раствор. Растворяют 0,68 г калия дигидрофосфата в 900 мл воды и доводят рН раствора калия гидроксида раствором 0,5 М до 5,00. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 100:900.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—буферный раствор 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 70 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки, обрабатывают ультразвуком в течение 30 с и перемешивают в течение 5 мин.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор стандартного образца примеси Е. В мерную колбу вместимость 25 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца примеси Е, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 7 мг фармакопейного стандартного образца цефепима дигидрохлорида моногидрата для проверки пригодности системы, содержащего примеси А, В, F, растворяют в ПФА и доводят объём раствора ПФА до метки.

Примечание

Примесь А:
(6R,7R)-7-[(2E)-2-(2-амино-1,3-тиазол-4-ил)-2-(метоксиимино)ацетамидо]-3-[(1-метилпирролидин-1-ий-1-ил)метил]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилат
[149261-27-8].

Примесь В:
(6R,7R)-7-[(2Z)-2-[(2Z)-2-(2-амино-1,3-тиазол-4-ил)-2-(метоксиимино)ацетамидо]-1,3-тиазол-4-ил]-2-(метоксиимино)ацетамидо]-3-[(1-метилпирролидин-1-ий-1-ил)метил]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилат.

Примесь Е:
(6R,7R)-7-амино-3-[(1-метилпирролидин-1-ий-1-ил)метил]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилат
[103296-32-8].

Примесь F:
(6R,7R)-7-[(6R,7R)-7-[(2Z)-2-(2-амино-1,3-тиазол-4-ил)-2-(метоксиимино)ацетамидо]-3-[(1-метилпирролидин-1-ий-1-ил)метил]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксамидо]-3-[(1-метилпирролидин-1-ий-1-ил)метил]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилат (катион).

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 100 | 0
10–30 | 100 → 50 | 0 → 50
30–35 | 50 | 50
35–36 | 50 → 100 | 50 → 0
36–45 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца примеси Е, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Цефепим – 1 (около 7 мин); примесь E – около 0,4; примесь F – около 0,8; примесь А – около 2,5; примесь B – около 4,1.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В, F используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу цефепима дигидрохлорида моногидрата для проверки пригодности системы. Для идентификации пика примеси Е используют хроматограмму раствора стандартного образца примеси Е.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси F и цефепима должно быть не менее 1,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь А – 1,4, примесь В – 1,4; примесь Е – 1,8.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь пика цефепима на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика каждой из примесей B и F не должна превышать площадь пика цефепима на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси Е не должна превышать 0,5 площади пика цефепима на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

– площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика цефепима на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика цефепима на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,25 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %).

Вода. От 3,0 до 4,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,4 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 20 мг цефепима в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Скорость введения 0,1 мл/с. Срок наблюдения – 48 ч.

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,04 ЕЭ на 1 мг цефепима (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

* Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Подвижная фаза (ПФ). ПФА.

Раствор стандартного образца цефепима дигидрохлорида моногидрата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 70 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца цефепима дигидрохлорида моногидрата, растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки, обрабатывают ультразвуком в течение 30 с и перемешивают в течение 5 мин.

Хроматографические условия

- Время хроматографирования: 1,4-кратное от времени удерживания пика цефепима.

Хроматографируют раствор стандартного образца цефепима дигидрохлорида моногидрата и испытуемый раствор.

Содержание цефепима дигидрохлорида C19H24N6O5S2·2HCl в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика цефепима на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика цефепима на хроматограмме раствора стандартного образца цефепима дигидрохлорида моногидрата;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца цефепима дигидрохлорида моногидрата, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P – содержание цефепима дигидрохлорида в фармакопейном стандартном образце цефепима дигидрохлорида моногидрата,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной стерильной упаковке, в защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0313 Цефокситин натрия

Цефокситин
Cefoxitinum natricum

Вводится впервые

##### Определение

(6R,7S)-3-[(Карбамоилокси)метил]-7-метокси-8-оксо-7-[2-(тиофен-2-ил)ацетамидо]-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилат натрия.

Содержит не менее 95,0 % и не более 102,0 % цефокситина натрия C16H16N3NaO7S2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца цефокситина натрия.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика цефокситина на хроматограмме раствора стандартного образца цефокситина натрия (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А или Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +206 до +214 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество (1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 25 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Окраска раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», не должна превышать интенсивности наиболее близко подходящего по цвету эталона сравнения 5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,2 до 7,0 (10 % раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,0 г калия дигидрофосфата и 1,8 г динатрия гидрофосфата безводного, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 100,0 мл полученного раствора, прибавляют 800 мл воды, доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной или натрия гидроксида раствором 1 М до 7,00±0,05, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 1,0 г аммония формиата, растворяют в 900 мл воды, доводят рН раствора муравьиной кислотой безводной до 2,70±0,05, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в буферном растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора буферным раствором до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения А и доводят объём раствора буферным раствором до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца цефокситина для идентификации пиков, содержащего примеси A, B, E, F, H, I, J и K, растворяют в буферном растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь A:
(6R,7S)-3-(гидроксиметил)-7-метокси-8-оксо-7-[2-(тиофен-2-ил)ацетамидо]-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота, [54333-94-7].

Примесь B:
(2RS,6R,7S)-3-[(карбамоилокси)метил]-7-метокси-8-оксо-7-[2-(тиофен-2-ил)ацетамидо]-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-3-ен-2-карбоновая кислота.

Примесь E:
(6R,7S)-3-[(карбамоилокси)метил]-7-метокси-8-оксо-7-[(2R)-2-метокси-2-(тиофен-2-ил)ацетамидо]-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота [2395025-32-6].

Примесь F:
(6R,7S)-3-[(карбамоилокси)метил]-7-метокси-8-оксо-7-[(2S)-2-метокси-2-(тиофен-2-ил)ацетамидо]-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота [2395025-37-1].

Примесь H:
(6R,7R)-3-[(карбамоилокси)метил]-8-оксо-7-[2-(тиофен-2-ил)ацетамидо]-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота [37051-05-1].

Примесь I:
(6R,7S)-3-[(карбамоилокси)метил]-7-метокси-8-оксо-7-[2-(тиофен-3-ил)ацетамидо]-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота.

Примесь J:
N-[(5aR,6S)-6-метокси-1,7-диоксо-1,4,6,7-тетрагидро-3H,5aH-азето[2,1-b]фуро[3,4-d][1,3]тиазин-6-ил]-2-(тиофен-2-ил)ацетамид (цефокситинлактон) [1422023-33-3].

Примесь K: неизвестная структура.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель фенилсилильный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–5 | 92 | 8
5–50 | 92 → 74 | 8 → 26
50–85 | 74 | 26
85–90 | 74 → 92 | 26 → 8

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения Б, раствор сравнения А и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Цефокситин – 1 (около 26 мин); примесь A – около 0,83; примесь I – около 0,98; примесь H – около 1,06; примесь E или F – около 1,11; примесь E или F и примесь K – около 1,16; примесь B – 1,18; примесь J – 1,66.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей A, B, E+F+K, H, I и J используют хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу цефокситина для идентификации пиков, и хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиком примеси H и одним из пиков примесей E и F должно быть не менее 2,0;

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси I и цефокситина должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси I не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 1,0 %);

- сумма площадей пиков примесей E, F и K не должна превышать 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси H не должна превышать 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси J не должна превышать 0,4 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,4 %);

- площадь пика каждой из примесей A и B не должна превышать 0,2 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 0,2 %);

- площадь пика любой неидентифицированной примеси не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения А (не более 3,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (менее 0,05 %).

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 50 мг цефокситина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения – 48 ч.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,13 ЕЭ на 1 мг цефокситина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—ацетонитрил—вода 10:190:810.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца цефокситина натрия. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца цефокситина натрия, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор 2-(2-тиенил)уксусной кислоты. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 20 мг 2-(2-тиенил)уксусной кислоты, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Смешивают 1,0 мл раствора стандартного образца цефокситина натрия и 5,0 мл раствора 2-(2-тиенил)уксусной кислоты.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 12 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца цефокситина натрия и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками 2-(2-тиенил)уксусной кислоты и цефокситина должно быть не менее 3,5.

Содержание цефокситина натрия C16H16N3NaO7S2 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика цефокситина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика цефокситина на хроматограмме раствора стандартного образца цефокситина натрия;
а1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца цефокситина натрия, мг;
P – содержание цефокситина натрия в фармакопейном стандартном образце цефокситина натрия,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, при температуре не выше 8 °C.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0312 Цефоперазон натрия

Цефоперазон
Cefoperazonum natricum

Вводится впервые

##### Определение

(6R,7R)-7-[(2R)-2-(4-Гидроксифенил)-2-(2,3-диоксо-4-этилпиперазин-1-карбоксамидо)ацетамидо]-3-{[(1-метил-1H-тетразол-5-ил)сульфанил]метил}-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилат натрия.

Cодержит не менее 95,0 % и не более 102,0 % цефоперазона натрия C25H26N9NaO8S2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с жёлтым оттенком порошок.

* Гигроскопичен. Кристаллический порошок проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в метаноле, мало растворим в спирте 96%.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца цефоперазона натрия.

2. ВЭЖХ._ Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика цефоперазона натрия на хроматограмме раствора стандартного образца цефоперазона дигидрата А (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 25 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность раствора субстанции, полученного в испытании «Прозрачность раствора», измеренная в максимуме поглощения при длине волны 430 нм в кювете с толщиной слоя 1 см не должна превышать 0,15 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

рН раствора. От 4,5 до 6,5 (25 % раствор субстанции в воде, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы готовят непосредственно перед использованием.

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 14 мл триэтиламина, 5,7 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Раствор А—уксусной кислоты раствор 1 М—ацетонитрил—вода 2,5:3,5:110:884.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25,0 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца цефоперазона дигидрата А. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца цефоперазона дигидрата, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца цефоперазона дигидрата Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца цефоперазона дигидрата А и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,5-кратное от времени удерживания пика цефоперазона. |

Хроматографируют раствор стандартного образца цефоперазона дигидрата Б, раствор стандартного образца цефоперазона дигидрата А и испытуемый раствор.

Время удерживания соединения. Цефоперазон – около 15 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца цефоперазона дигидрата А:

- фактор асимметрии пика (AS) цефоперазона должен быть не более 1,6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать 1,5 площади пика цефоперазона на хроматограмме раствора стандартного образца цефоперазона дигидрата Б (не более 1,5%);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 4,5 площади пика цефоперазона на хроматограмме раствора стандартного образца цефоперазона дигидрата Б (не более 4,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,1 площади пика цефоперазона на хроматограмме раствора стандартного образца цефоперазона дигидрата Б (менее 0,1 %).

Вода. Не более 5,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1) Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,0005 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А), в зольном остатке, полученном после сжигания 2,0 г субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Ацетон. Не более 2 %. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными и защищают от света.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,35 г ацетона и доводят объём водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл, помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём тем же растворителем до метки.

По 1,0 мл испытуемого раствора помещают в 4 мерные колбы вместимостью 5 мл, в 1 колбе доводят объём водой до метки, во 2 колбу прибавляют 1 мл стандартного раствора и доводят объём раствора водой до метки, в 3 колбу прибавляют 2 мл стандартного раствора и доводят объём раствора водой до метки, в 4 колбу прибавляют 3 мл стандартного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,53 мм, покрытая слоем поли(цианопропилфенил)(6)(метил)(94) силоксана, 3,0 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | азот для хроматографии; |  |
Температура колонки | 40 °С в течение 10 мин. |  |

Для проведения статического парафазного анализа камеру с испытуемым образцом предварительно термостатируют при температуре 110 °С в течение не менее 15 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками основным пиком и пиком ацетона должно быть не менее 1,0;

Строят калибровочный график зависимости площади пика ацетона от его концентрации. Определяют параметры линейной регрессии.

Коэффициент корреляции должен быть не менее 0,95.

С помощью уравнения линейной регрессии находят концентрацию ацетона в испытуемом растворе.

Содержание ацетона в субстанции в процентах от заявленного количества (Х) вычисляют по формуле:

где C – концентрация ацетона в испытуемом растворе, определённая по калибровочному графику, мкг/мл;
а1 – навеска субстанции, мг;
Р – чистота ацетона,%.

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 50 мг цефоперазона натрия в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения 48 ч.

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,55 ЕЭ на 1 мг цефоперазона (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

*** Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца цефоперазона дигидрата А и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца цефоперазона дигидрата А:

- относительное стандартное отклонение площади пика цефопераноза должно быть не более 1,0 % (6 введений).

Содержание цефоперазона натрия C25H26N9NaO8S2 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика цефоперазона на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика цефоперазона на хроматограмме раствора стандартного образца цефоперазона дигидрата А;
a1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца цефоперазона дигидрата, мг;
P – содержание цефоперазона в фармакопейном стандартном образце цефоперазона дигидрата,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
667,65 – молекулярная масса цефоперазона натрия;
645,67 – молекулярная масса цефоперазона.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте, при температуре от 2 до 8 °С.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

*** Проводят для субстанции, которая в процессе производства подвергается стерилизации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0212 Цефотаксим натрия

Цефотаксим
Cefotaximum natricum

Взамен ФС.2.1.0212.18

##### Определение

3-[(ацетилокси)метил]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилат натрия.

Cодержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % цефотаксима натрия C16H16N5NaO7S2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, умеренно растворим в метаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия. (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца цефотаксима натрия.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца цефотаксима натрия (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

Удельное вращение. От +58,0 до +64,0 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 25 мл воды, свободной от диоксида углерода, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей», метод 2). К 10 мл полученного раствора прибавляют 1 мл уксусной кислоты ледяной, раствор должен остаться прозрачным.

Оптическая плотность. Оптическая плотность 10 % раствора субстанции в воде, полученного в испытании «Прозрачность раствора», измеренная при длине волны 430 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать 0,40 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Удельный показатель поглощения. От 360 до 390 (в максимуме поглощения) при длине волны 235 нм в пересчёте на безводное вещество. (0,2 % раствор субстанции в воде, ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

pH раствора. От 4,5 до 6,5 (10 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы субстанции и стандартов используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Раствор динатрия гидрофосфата додекагидрата 7,1 г/л, доведённый фосфорной кислотой концентрированной до рН 6,25.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Растворитель. ПФБ—ПФА 140:860.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл вносят 40 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100,0 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. К 4,0 мл испытуемого раствора прибавляют 1,0 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 %, нагревают при температуре 40 °С в течение 2 ч. К полученному раствору прибавляют 5,0 мл фосфатного буферного раствора рН 6,6 и 1,0 мл натрия гидроксида раствора 8,5 %.

Раствор для идентификации. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 4,0 мг фармакопейного стандартного образца цефотаксима для идентификации, содержащего примеси А, B, C, E и F, растворяют в растворителе, доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А:
(6R,7R)-7-[(2Z)-2-(2-амино-1,3-тиазол-4-ил)-2-(метоксиимино)ацетамидо]-3-метил-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота
[65052-63-3].

Примесь В:
(6R,7R)-7-[(2Z)-2-(2-амино-1,3-тиазол-4-ил)-2-(метоксиимино)ацетамидо]-3-(гидроксиметил)-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота
[66340-28-1].

Примесь С:
(6R,7R)-3-[(ацетилокси)метил]-7-[(2Z)-2-(метоксиимино)-2-(2-формамидо-1,3-тиазол-4-ил)ацетамидо]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота
[66403-32-5].

Примесь Е:
(2Z)-2-(2-амино-1,3-тиазол-4-ил)-N-[(5aR,6R)-1,7-диоксо-1,4,6,7-тетрагидро-3H,5aH-азето[2,1-b]фуро[3,4-d][1,3]тиазин-6-ил]-2-(метоксиимино) ацетамид
[66340-33-8].

Примесь F:
(6R,7R)-7-[(2Z)-2-[2-(\{[(6R,7R)-7-[(2Z)-2-(2-амино-1,3-тизол-4-ил)-2-(метоксиимино)ацетамидо]-2-карбокси-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-3-ил]метил}амино)-1,3-тиазол-4-ил]-2-(метоксиимино)ацетамидо]-3-[(ацетилокси)метил]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота
[175032-97-0].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 0,39 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30°С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 235 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА (%) | ПФБ (%)
--- | --- | ---
0–7 | 86 | 14
7–9 | 86 → 82 | 14 → 18
9–16 | 82 | 18
16–45 | 82 → 60 | 18 → 40
45–50 | 60 | 40
50–55 | 60 → 86 | 40 → 14
55–60 | 86 | 14

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор для идентификации, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительные времена удерживания компонентов. Цефотаксим – 1 (около 13 мин); примесь В – около 0,3; примесь А – около 0,5; примесь Е – около 0,6; примесь С – около 1,9; примесь D – около 2,3; примесь F – около 2,4 .

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, B, C, E и F используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для идентификации, хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу цефотаксима для идентификации.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение ® между пиками цефотаксима и примеси Е должно быть не менее 3,5.

- фактор ассиметрии (AS) пика цефотаксима должен быть не более 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей А, В, С, D, E и F не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,2 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 3,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,05 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Этанол. Не более 1,0 %. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

N,N-Диметиланилин. Не более 0,002 %. Определение проводят методом газовой хроматографии (ОФС «N,N-Диметиланилин»).

2-Этилгексановая кислота. Не более 0,5 % (ОФС «2-Этилгексановая кислота»).

Вода. Не более 3,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 50 мг цефотаксима в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения 48 ч.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,05 ЕЭ на 1 мг цефотаксима (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца цефотаксима натрия. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 8 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца цефотаксима натрия, растворяют в растворителе, и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца цефотаксима натрия и испытуемый раствор.

Содержание цефотаксима натрия C16H16N5NaO7S2 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика цефотаксима на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика цефотаксима на хроматограмме раствора стандартного образца цефотаксима натрия;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца цефотаксима натрия, мг;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание цефотаксима натрия в фармакопейном стандартном образце цефотаксима натрия,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0213 Цефтриаксон натрия

Цефтриаксон
Ceftriaxonum natricum

Взамен ФС.2.1.0213.18

##### Определение

(6R,7R)-7-[(Z)-2-(2-Амино-4-тиазолил)-2-(метоксиимино)ацетамидо]-3-{[(2-метил-6-оксидо-5-оксо-2,5-дигидро-1,2,4-триазин-3-ил)сульфанил] метил}-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилат динатрия гидрат (1:3,5).

Cодержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % цефтриаксона натрия C18H16N8Na2O7S3 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый, почти белый или желтоватый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, умеренно растворим в метаноле, очень мало растворим в этаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца цефтриаксона натрия.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика цефтриаксона натрия на хроматограмме раствора стандартного образца цефтриаксона натрия (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А или Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

Удельное вращение. От –155 до –170 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,6 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y5 или BY5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH. От 6,0 до 8,0 (12 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворитель. Вода—0,067 М фосфатный буферный раствор рН 7,0—цитратный буферный раствор рН 5,0—ацетонитрил 440:55:5:500.

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 2 г тетрадециламмония бромида и 2 г тетрагептиламмония бромида в 1000 мл растворителя.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора ПФ до метки и перемешивают.

Стандартный раствор. Растворяют 5 мг фармакопейного стандартного образца цефтриаксона натрия и 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси А в 100 мл ПФ.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А:
(6R,7R)-7-[(E)-2-(2-амино-4-тиазолил)-2-(метоксиимино) ацетамидо]-3-{[(2-метил-5,6-диоксо-2,5-дигидро-1,2,4-триазин-3-ил) сульфанил]метил}-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота [92143-31-2].

Хроматографические условия

Колонка | 250×4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания основного пика. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор сравнения, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора разрешение ® между пиками цефтриаксона и примеси А цефтриаксона должно быть не менее 3,0.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика цефтриаксона должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать четырёхкратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 4,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,1 %).

Вода. От 8,0 до 11,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

N,N-Диметиланилин. Не более 0,002 % (ОФС «N,N-Диметиланилин»).

2-Этилгексановая кислота. Не более 0,8 % (ОФС «2-Этилгексановая кислота»).

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 30 мг цефтриаксона в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения – 48 ч.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,05 ЕЭ на 1 мг цефтриаксона (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца цефтриаксона натрия. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца цефтриаксона натрия, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца цефтриаксона натрия и испытуемый раствор.

Содержание цефтриаксона натрия C18H16N8Na2O7S3 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика цефтриаксона натрия на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика цефтриаксона натрия на хроматограмме раствора стандартного образца цефтриаксона натрия;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца цефтриаксона натрия, мг;
W - суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
P - содержание цефтриаксона натрия в фармакопейном стандартном образце цефтриаксона натрия,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной стерильной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0688 Цефуроксим натрия

Цефуроксим
Cefuroximum natricum

Вводится впервые

C16H15N4NaO8S [56238-63-2] | М.м. 446,37

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(6R,7R)-3-[(Карбамоилокси)метил]-7-[(2Z)-2-(метоксиимино)-2-(фуран-2-ил)ацетамидо]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоксилат натрия.

Cодержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % цефуроксима натрия в пересчёте на безводное и не содержащее остаточных органических растворителей вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, очень мало растворим в спирте 96 %.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца цефуроксима натрия.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика цефуроксима на хроматограмме раствора стандартного образца цефуроксима натрия (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### ИСПЫТАНИЯ

Удельное вращение. От +59 до +66 в пересчёте на безводное вещество (2 % раствор субстанции в ацетатном буферном растворе рН 4,6, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Опалесценция раствора 2,0 г субстанции в 20 мл воды, свободной от углерода диоксида не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность 10 % раствора субстанции в воде, измеренная при длине волны 450 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать 0,25 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

рН раствора. От 5,5 до 8,5 (1,0 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Испытуемые растворы и растворы стандартного образца используют свежеприготовленными или хранят при температуре 5±3 °С не более суток.

Буферный раствор рН 3,4. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 6,01 г ледяной уксусной кислоты и 0,68 г натрия ацетата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор рН 3,4 10:990.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца цефуроксима натрия. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца цефуроксима натрия, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В водяной бане при температуре 80 °С выдерживают в течение 15 мин 20 мл раствора стандартного образца цефуроксима натрия (образуется примесь A). Охлаждают и сразу хроматографируют.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь А:
(6R,7R)-3-(гидроксиметил)-7-[(2Z)-2-(метоксиимино)-2-(фуран-2-ил)ацетамидо]-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота, [56271-94-4].

Хроматографические условия

Колонка | 125 × 4,6 мм, силикагель гексилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки | 25 °С;
Скорость потока | 1,5 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 273 нм;
Объём пробы | 20 мкл;
Время хроматографирования | 4-кратное от времени удерживания пика цефуроксима.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор А.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение ® между пиками цефуроксима и примеси А должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика цефуроксима на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика цефуроксима на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать трёхкратную площадь пика цефуроксима на хроматограмме раствора сравнения (не более 3,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 площади пика цефуроксима на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 3,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,4 г (точная навеска) субстанции.

N, N-Диметиланилин. Не более 0,002 % (ОФС «N,N-Диметиланилин», метод 2).

2-Этилгексановая кислота. Не более 0,5 % (ОФС «2-Этилгексановая кислота»).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 50 мг цефуроксима натрия в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения 48 ч.

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,06 ЕЭ на 1 мг цефуроксима натрия (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют испытуемый раствор Б и раствор стандартного образца цефуроксима натрия.

Содержание цефуроксима натрия C16H15N4NaO8S в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика цефуроксима на хроматограмме испытуемого раствора Б;
S0 – площадь пика цефуроксима на хроматограмме раствора стандартного образца цефуроксима натрия;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца цефуроксима натрия, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;
P – содержание цефуроксима натрия в фармакопейном стандартном образце цефуроксима натрия, %.

##### ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0317 Циклосерин (Cycloserinum)

Вводится впервые

##### Определение

(4R)-4-Амино-1,2-оксазолидин-3-он.

Cодержит не менее 90 % и не более 101,5 % циклосерина C3H6N2O2 в пересчёте на сухое вещество.

* Циклосерин является аналогом аминокислоты D-аланина с антибиотической и глицинергической активностью широкого спектра действия, продуцируемой Streptomyces garyphalus и Streptomyces orchidaceus, или получаемой путём синтеза.

##### Свойства

Описание. Порошок от белого до светло-жёлтого цвета.

Растворимость. Легко растворим в воде, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика циклосерина на хроматограмме раствора стандартного образца циклосерина (раздел «Количественное определение»).

2. Качественная реакция. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают около 10 мг субстанции, растворяют в натрия гидроксида растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. К 1,0 мл полученного раствора прибавляют 3 мл уксусной кислоты раствора 1 М и 1 мл свежеприготовленной (за час до испытания) смеси натрия нитропруссида раствор 4 %—натрия гидроксида раствор 4 М 1:1; постепенно должно появиться синее окрашивание.

##### Испытания

рН раствора. От 5,5 до 6,5 (10 % раствор, ОФС «Ионометрия, метод 3).

Удельное вращение. От +108 до +114 в пересчёте на сухое вещество (5 % раствор субстанции в натрия гидроксида растворе 2 М, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в натрия гидроксида растворе 0,1 М, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Через 15 мин после приготовления измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 285 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения натрия гидроксида раствор 0,1 М.

Показатель поглощения субстанции (aλ) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
c - концентрация испытуемого раствора, г/л;
l - толщина поглощающего слоя, см.

Допустимое значение: показатель поглощения субстанции не должен превышать 0,80.

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 60 ºС и остаточном давлении не более 0,7 кПа в течение 3 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,5 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от света.

Подвижная фаза (ПФ). Около 0,5 г натрия декансульфоната растворяют в 800 мл воды, прибавляют 50 мл ацетонитрила и 5 мл уксусной кислоты ледяной. При необходимости доводят значение pH натрия гидроксида раствором 1 М до 4,4.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в фосфатном буферном растворе pH 6,8 (4) и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца циклосерина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца циклосерина, растворяют в фосфатном буферном растворе pH 6,8 (4) и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °C; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 219 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания основного пика. |

Хроматографируют раствор стандартного образца циклосерина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца циклосерина:

- фактор асимметрии пика (AS) циклосерина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика циклосерина должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику циклосерина, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

Содержание циклосерина C3H6N2O2 в субстанции в мкг/мг (X) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика циклосерина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика циклосерина на хроматограмме раствора стандартного образца циклосерина;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца циклосерина, мг;
P - содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце циклосерина, мкг/мг;
W - потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0214 Циклофосфамид моногидрат

Циклофосфамид
Cyclophosphamidum monohydricum

Взамен ФС.2.1.0214.18

##### Определение

2-[Бис(2-хлорэтил)амино]-1,3,2λ5-оксазафосфинан-2-он моногидрат.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % циклофосфамида C7H15Cl2N2O2P в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или белые кристаллы.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 % и хлороформе, умеренно растворим или растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца циклофосфамида.

2. Тонкослойная хроматография. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора Б по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции циклофосфамида на хроматограмме раствора стандартного образца циклофосфамида (раздел «Родственные примеси»).

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 10 мл воды и прибавляют 5 мл нитрата серебра раствора 4,25 %; раствор должен остаться прозрачным. Раствор нагревают до кипения; должен образоваться белый осадок, который растворяется в аммиака растворе концентрированном 25 % и вновь осаждаться при добавлении азотной кислоты разведённой 12,5 %.

4. Качественная реакция. Прибавляют к 0,1 г субстанции 3 мл азотной кислоты концентрированной и 1 мл серной кислоты концентрированной и нагревают до обесцвечивания. Полученный раствор охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 10 мл воды, нагревают до 60 °С и прибавляют 10 мл аммония молибдата раствора 10 %; должно появиться ярко-жёлтое окрашивание и через некоторое время выпасть жёлтый осадок.

##### Испытания

Температура плавления. От 47 до 51 °C (ОФС «Температура плавления»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,1 до 7,0 (1 % раствор в воде, ОФС «Ионометрия», метод 3). Определение проводят немедленно после приготовления раствора.

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота безводная—ацетон—вода—метилэтилкетон 2:4:12:80.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора до метки тем же растворителем.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор стандартного образца циклофосфамида. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца циклофосфамида, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора до метки тем же растворителем.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора А (200 мкг), испытуемого раствора Б (20 мкг), раствора стандартного образца циклофосфамида (20 мкг) и раствор сравнения (2 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 110 °С в течение 10 мин.

На дно хроматографической камеры помещают чашку для выпаривания, содержащую калия перманганата раствор 5 %, к которому прибавляют равный объём хлористоводородной кислоты концентрированной. В камеру помещают горячую ТСХ пластинку, закрывают и выдерживают в течение 2 мин. Вынимают пластинку и помещают в поток холодного воздуха для удаления избытка хлора – при нанесении на пластину ниже уровня проб одной капли раствора крахмала с калия йодидом должно появляться лишь бледно-синее окрашивание (следует избегать длительного воздействия холодного воздуха). Опрыскивают раствором крахмала с калия йодидом и выдерживают в течение 5 мин.

Допустимое содержание примесей. Зона адсорбции любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора А по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Зоны адсорбции на линии старта при оценке не учитывают.

Вода. От 5,7 % до 6,9 %. (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,05 % (ОФС «Сульфаты»). В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,5 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Фосфаты. Не более 0,01 % (ОФС «Фосфаты»). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Хлориды. Не более 0,05 % (ОФС «Хлориды»). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл раствора полученного в испытании «Сульфаты» и доводят объём раствора водой до метки.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2). 1,0 г субстанции растворяют в 10 мл воды.

Остаточные органические растворители. В соответствие с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,1 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

* Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)».

Переносят 0,2 г (точная навеска) субстанции в коническую колбу вместимостью 250 мл, растворяют в 4 мл спирта 96 %, прибавляют 20 мл воды и 20 мл 0,5 М спиртового раствора калия гидроксида. Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч, охлаждают и количественно переносят с помощью 20 мл воды в мерную колбу вместимостью 100 мл. Прибавляют 5 мл азотной кислоты разведённой 16 %, 25 мл 0,1 М раствора нитрата серебра и доводят объём раствора водой до метки. Содержимое колбы хорошо перемешивают и фильтруют, отбрасывая первые 20 мл фильтрата. К 50 мл фильтрата прибавляют 10 мл азотной кислоты разведённой 16 %, 5 мл железа(III) аммония сульфата раствора 30 % и титруют 0,1 М раствором аммония тиоцианата до появления красноватой окраски.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора нитрата серебра соответствует 13,05 мг циклофосфамида C7H15Cl2N2O2P.

##### Хранение

В плотно закрытой упаковке в защищённом от света месте при температуре от 2 до 8 °С.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0318 Циластатин натрия

Циластатин
Cilastatinum natricum

Вводится впервые

##### Определение

(Z)-7-[((2R)-2-Амино-2-карбоксиэтил)сульфанил]-2-{[((1S)-2,2-диметилциклопропил)карбонил]амино}гепт-2-еноат натрия.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,5 % циластатина натрия C16H25N2NaO5S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или светло-жёлтый аморфный порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде и метаноле, мало растворим в этаноле, практически нерастворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия_ (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца циластатина натрия.

2. Качественная реакция._ Субстанция должна давать характерную реакцию А на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +41,5 до +44,5 в пересчёте на безводное вещество (ОФС «Оптическое вращение»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,25 г субстанции, растворяют в смеси хлористоводородная кислота концентрированная—метанол 1:120 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Прозрачность раствора. Раствор субстанции 1 % в воде, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 6,5 до 7,5 (раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

1. Примесь D, ацетон и метанол. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помешают 0,5 мл пропанола, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде, прибавляют 2,0 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,0 мл ацетона, 0,5 мл метанола, 0,5 мл мезитилоксида (примесь D) и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора, 2,0 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объём раствора водой до метки (концентрация ацетона около 316 мкг/мл, метанола около 79 мкг/мл; примеси D около 86 мкг/мл).

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная, 30 м × 0,53 мм, покрытая слоем макрогола 20 000, 1 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Скорость потока | 9 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1 мкл; |  |
Температура | Инжектор | 160 °С; |
| Колонка | 50 °С в течение 2,5 мин, подъём 8 °С/мин до 70 °С; выдержка 2,5 мин; |

Хроматографируют стандартный и испытуемый растворы.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где B1 – отношение площади каждого из пиков примеси D, ацетона или метанола к площади пика внутреннего стандарта на хроматограмме испытуемого раствора;
B0 – отношение площади каждого из пиков примеси D, ацетона или метанола к площади пика внутреннего стандарта на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг;
С0 – концентрация примеси D, ацетона, или метанола в стандартном растворе, соответственно, мкг/мл.

Допустимое содержание примесей:

- ацетон – не более 1,0 %;

- метанол – не более 0,5 %;

- примесь D – не более 0,4 %.

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие циластатин натрия и его примеси, готовят непосредственно перед применением.

Подвижная фаза А (ПФА). Фосфатный буферный раствор рН 3,25.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—ПФА 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 32 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы А. В мерную колбу вместимостью 2 мл помещают 3 мг фармакопейного стандартного образца циластатина для проверки пригодности системы 1, содержащий примеси А, В, Е, F, G (эпимер 2) и Н, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы Б. В мерную колбу вместимостью 2 мл помещают 3 мг фармакопейного стандартного образца циластатина для проверки пригодности системы 2, содержащий примеси С и G (эпимер 1), растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для идентификации пика примеси D. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 32 мг мезитилоксида (примесь D), растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь А:
(Z)-7-[(RS)-((2R)-2-амино-2-карбоксиэтил)сульфинил]-2-{[((1S)-2,2-диметилциклопропил)карбонил]амино}гепт-2-еновая кислота.

Примесь В:
(Z)-7-{[(2R)-2-((1RS)-1-метил-3-оксибутил)амино-2-карбоксиэтил]сульфанил}-2-{[((1S)-2,2-диметилциклопропил)карбонил]амино}гепт-2-еновая кислота.

Примесь С:
(Z)-7-{[(2R)-2-((1,1-диметил-3-оксибутил)амино-2-карбоксиэтил]сульфанил}-2-{[((1S)-2,2-диметилциклопропил)карбонил]амино}гепт-2-еновая кислота.

Примесь D (мезитилоксид): 4-метилпент-3-ен-2-он [141-79-7].

Примесь Е:
7-[((2R)-2-амино-2-карбоксиэтил)сульфанил]-2-оксогептановая кислота [1174657-07-8].

Примесь F:
(Z)-7-[((2R)-2-амино-2-карбоксиэтил)сульфанил]-2-[(2,3-диметилбут-3-еноил)амино]гепт-2-еновая кислота.

Примесь G:
€-(2RS)-7-[((2R)-2-амино-2-карбоксиэтил)сульфанил]-2-{[((1S)-2,2-диметилциклопропил)карбонил]амино}гепт-3-еновая кислота.

Примесь Н:
(Z)-7-[(2-аминоэтил)сульфанил]-2-{[((1S)-2,2-диметилциклопропил)карбонил]амино} гепт-2-еновая кислота.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный совместимый с водной подвижной фазой эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 50 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–3 | 100 | 0
3–28 | 100 → 90 | 0 → 10
28–38 | 90 | 10
38–63 | 90 → 50 | 10 → 50
63–78 | 50 → 30 | 50 → 70
78–88 | 30 | 70
88–93 | 30 → 100 | 70 → 0

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы А, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы Б, раствор для идентификации пика примеси D, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Циластатин – 1 (около 50 мин); примесь Е – около 0,20; примесь A (эпимер 1) – около 0,60; примесь А (эпимер 2) – около 0,62; примесь D – около 0,90; примесь F – около 0,98; примесь G (эпимер 1) – около 1,02; примесь G (эпимер 2) – около 1,05; примесь Н – около 1,06; примесь В – около 1,17; примесь С – около 1,23.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А, В, Е, F и G используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы А и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу циластатина для проверки пригодности системы 1. Для идентификации пиков примесей С и G используют хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы Б и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу циластатина для проверки пригодности системы 2.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы А отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси F и циластатина должно быть не менее 10,0.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы Б отношение максимум/минимум (p/v) между пиками циластатина и примеси G (эпимер 1)должно быть не менее 2,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь С – 1,3; примесь Е – 3,3; примесь G (эпимер 1) и примесь G (эпимер 2) – 1,6.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика циластатина на хроматограмме раствора сравнения.

Допустимое содержание примесей:

- примесь А (сумма эпимеров) – не более 0,5 %;

- примесь С – не более 0,4 %;

- примесь Е – не более 0,3 %;

- каждой из примеси B, F, H, G (эпимер 1), G (эпимер 2) – не более 0,1 %;

- любая другая примесь – не более 0,05 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают пик примеси D и пики менее 0,03 %.

Вода. Не более 2,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 6).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,17 ЕЭ на 1 мг циластатина натрия (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в 30 мл метанола, прибавляют 5 мл воды, доводят значение рН хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до 3,0 и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают объём титранта, израсходованный между первой и третьей точками перегиба на кривой титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 19,02 мг циластатина натрия C16H25N2NaO5S.

##### Хранение

В сухом месте при температуре от 2 до 8 °С.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0296 Цинка бисвинилимидазола диацетат (Zinci bisvinylimidazoli diacetas)

Вводится впервые

##### Определение

Диацетат бис(1-этенилимидазол-N3)цинка.

Cодержит не менее 98,5 % цинка бисвинилимидазола диацетата C14H18N4O4Zn в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый со слегка желтоватым оттенком кристаллический порошок с характерным запахом.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96 % и хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца цинка бисвинилимидазола диацетата.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 нм до 280 нм должен иметь максимум поглощения при 225 нм.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на цинк (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на ацетаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

Температура плавления. От 104 до 108 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1). Субстанцию предварительно высушивают в вакуум-эксикаторе при остаточном давлении, не превышающем 10 мм рт. ст., в течение 2 ч.

Прозрачность раствора. Раствор 0,6 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 6,0 до 7,0 (6 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. В химический стакан вместимостью 2000 мл помещают 6,122 г натрия перхлората, растворяют в 1000 мл воды и доводят значение рН полученного раствора хлорной кислотой до 3,00.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 100:900.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 60 мг субстанции, прибавляют 10 мл метанола, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 5 мин, прибавляют 75 мл буферного раствора, вновь выдерживают на ультразвуковой бане в течение 5 мин, охлаждают и доводят объём раствора буферным раствором до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора буферным раствором до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора буферным раствором до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика цинка бисвинилимидазола. |

Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Цинка бисвинилимидазол – 1 (около 4,5 мин); уксусная кислота – около 0,9.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения:

- разрешение (RS) между пиками уксусной кислоты и цинка бисвинилимидазола должно быть не менее 1,5;

- фактор асимметрии пика (AS) цинка бисвинилимидазола должен быть не более 2,5.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика цинка бисвинилимидазола на хроматограмме раствора сравнения;
a – навеска субстанции, мг.

Допустимое содержание примесей:

- любая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,1 %.

Не учитывают пик уксусной кислоты и пики, площадь которых менее 0,1 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,01 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 2). Высушивают 0,5 г (точная навеска) субстанции в вакууме при остаточном давлении 10 мм рт. ст. в течение 2 ч.

Хлориды. Не более 0,01 %. (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,2 г субстанции в 10 мл воды.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 5,8 ЕЭ на 1 мг цинка бисвинилимидазола диацетата (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,4 г (точная навеска) субстанции в смеси 100 мл воды и 5 мл аммония хлорида буферного раствора pH 10,0. Полученный раствор титруют 0,05 М раствором натрия эдетата до появления синего окрашивания (индикатор – 0,2 г эриохрома чёрного Т индикаторной смеси).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 18,59 мг цинка бисвинилимидазола диацетата C14H18N4O4Zn.

##### Хранение

В сухом, защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0319 Циннаризин (Cinnarizinum)

Взамен ФС 42-3513-98

##### Определение

1-(Дифенилметил)-4-[(2E)-3-фенилпроп-2-ен-1-ил]пиперазин.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % циннаризина C26H28N2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в хлороформе, растворим в ацетоне, мало растворим в спирте 96 % и практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца циннаризина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика циннаризина на хроматограмме раствора стандартного образца циннаризина. Определение проводят в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца циннаризина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца циннаризина, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

##### Испытания

Температура плавления. От 118 до 122 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 20 мл метиленхлорида должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. Около 0,5 г субстанции помещают в коническую колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 15 мл воды, перемешивают до получения однородной суспензии и кипятят в течение 2 мин. После охлаждения раствор фильтруют в мерную колбу вместимостью 20 мл и доводят объём раствора водой до метки (раствор А).

К 10 мл раствора А прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствора 0,1 %; розовое окрашивание должно появляться при добавлении не более 0,25 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Аммония ацетата раствор 1,0 %.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Уксусная кислота ледяная—ацетонитрил 2:998.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают около 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 12,5 мг фармакопейного стандартного образца циннаризина, 15 мг фармакопейного стандартного образца флунаризина гидрохлорида, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Примечание

Примесь А: 1-(дифенилметил) пиперазин [841-77-0].

Примесь В: 1-(дифенилметил)-4-[(2Z)-3-фенилпроп-2-ен-1-ил]пиперазин [750512-44-8].

Примесь С:
4-(дифенилметил)-1,1-бис[(2E)-3-фенилпроп-2-ен-1-ил]пиперазин-1-ий хлорид [95062-18-3].

Примесь D:
4-[(1E,5E)-1,6-дифенилгекса-1,5-диен-3-ил]-1-(дифенилметил)пиперазин [1199751-98-8].

Примесь Е: 1,4-бис(дифенилметил)пиперазин [216581-01-0].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 230 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–20 | 75 → 10 | 25 → 90
20–25 | 10 | 90

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Циннаризин – 1 (около 11 мин); примесь А – около 0,4; флунаризин – около 1,05; примесь В – около 1,1; примесь С – около 1,2; примесь D – около 1,6; примесь Е – около 1,8.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками циннаризина и флунаризина должно быть не менее 5,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) циннаризина должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика циннаризина должно быть не более 5,0 % (6 введений);

- эффективности хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику циннаризина должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A, B, С, D, Е не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,25 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,4 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,10 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,2 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 60 °С в течение 4 ч.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 субстанции с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворитель. Уксусная кислота безводная—метилэтилкетон 10:70.

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 50 мл растворителя. Титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до перехода жёлтой окраски в зелёную (индикатор – 0,2 мл нафтолбензеина раствора).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 18,43 мг циннаризина C26H28N2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0215 Ципрофлоксацин (Ciprofloxacinum)

Взамен ФС.2.1.0215.18

##### Определение

4-Оксо-7-(пиперазин-1-ил)-6-фтор-1-циклопропил-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % ципрофлоксацина C17H18FN3O3 в пересчёте сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Почти белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень мало растворим в этаноле и метиленхлориде, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ципрофлоксацина.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Растворяют 0,25 г субстанции в 20 мл хлористоводородной кислоты разведённой 0,37 %. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном GY5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси

1. Примесь А. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—аммиака раствор концентрированный 25 %—метанол—метиленхлорид 10:20:40:40.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимость 5 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси А (фторхинолоновая кислота: 4-оксо-6-фтор-7-хлор-1-циклопропил-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота [86393-33-1]), растворяют в 0,1 мл аммиака растворе 10 % и 90 мл воды и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (50 мкг) и раствора стандартного образца примеси А (0,1 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, выдерживают 15 мин в камере с парами аммиака и помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции примеси А по величине не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца примеси А (не более 0,2 %).

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 2,45 г фосфорной кислоты концентрированной, прибавляют 900 мл воды, доводят значение рН триэтиламином до 3,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 130:870.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца ципрофлоксацина гидрохлорида для идентификации пиков, содержащего примеси B, C, D и E, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь B:
4-оксо-7-(пиперазин-1-ил)-1-циклопропил-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота [93107-11-0].

Примесь C:
7-[(2-аминоэтил)амино]-4-оксо-6-фтор-1-циклопропил-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота [103222-12-4].

Примесь D:
4-оксо-6-(пиперазин-1-ил)-7-хлор-1-циклопропил-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота [133210-96-5].

Примесь Е:
7-(пиперазин-1-ил)-6-фтор-1-циклопропилхинолин-4(1H)-он [105394-83-0].

Примесь F:
6-гидрокси-4-оксо-7-(пиперазин-1-ил)-1-циклопропил-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота [226903-07-7].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 278 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,3-кратное от времени удерживания пика ципрофлоксацина. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ципрофлоксацин – 1 (около 9 мин); примесь E – около 0,4; примесь В – около 0,6; примесь С – около 0,7; примесь D – около 1,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей В, С, D и Е используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу ципрофлоксацина гидрохлорида для идентификации примесей.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примесей В и С должно быть не менее 1,3.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь B – 0,7; примесь С – 0,6; примесь D – 1,4; примесь Е – 6,7.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь каждой из примесей B, С, D и Е не должна превышать площадь пика ципрофлоксацина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика ципрофлоксацина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 2,5 площади пика ципрофлоксацина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,25 площади пика ципрофлоксацина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 120 °С и пониженном давлении до постоянной массы.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 80 мл уксусной кислоты и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствором хлорной кислоты соответствует 33,14 мг ципрофлоксацина C17H18FN3O3.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке. В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0216 Ципрофлоксацина гидрохлорид гидрат

Ципрофлоксацин
Ciprofloxacini hydrochloridum hydricum

Взамен ФС.2.1. 0216.18

##### Определение

4-Оксо-7-(пиперазин-1-ил)-6-фтор-1-циклопропил-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновой кислоты гидрохлорид гидрат.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % ципрофлоксацина гидрохлорида C17H18FN3O3 HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

* Гигроскопичен. Может быть безводным или содержать непостоянное количество воды.

Растворимость. Растворим в воде, мало растворим в метаноле, очень мало растворим в этаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ципрофлоксацина гидрохлорида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика ципрофлоксацина на хроматограмме раствора стандартного образца ципрофлоксацина гидрохлорида (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Растворяют 0,5 г субстанции в 20 мл воды. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном GY5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 3,5 до 4,5 (0,25 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси

1. Примесь А. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—аммиака раствор концентрированный 25 %—метанол—метиленхлорид 10:20:40:40.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимость. 5 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца примеси А (фторхинолоновая кислота: 4-оксо-6-фтор-7-хлор-1-циклопропил-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота [86393-33-1]), растворяют в 0,1 мл аммиака растворе 10 % и 90 мл воды и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора (50 мкг) и раствора стандартного образца примеси А (0,1 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, выдерживают 15 мин в камере с парами аммиака и помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции примеси А по совокупности величины и степени подавления флуоресценции не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца примеси А (не более 0,2 %).

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 2,45 г фосфорной кислоты концентрированной, прибавляют 900 мл воды, доводят значение рН триэтиламином до 3,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 130:870.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца ципрофлоксацина гидрохлорида для идентификации пиков, содержащего примеси B, C, D и E, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь B:
4-оксо-7-(пиперазин-1-ил)-1-циклопропил-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота [93107-11-0].

Примесь C:
7-[(2-аминоэтил)амино]-4-оксо-6-фтор-1-циклопропил-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота [103222-12-4].

Примесь D:
4-оксо-6-(пиперазин-1-ил)-7-хлор-1-циклопропил-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота [133210-96-5].

Примесь Е:
7-(пиперазин-1-ил)-6-фтор-1-циклопропилхинолин-4(1H)-он [105394-83-0].

Примесь F:
6-гидрокси-4-оксо-7-(пиперазин-1-ил)-1-циклопропил-1,4-дигидрохинолин-3-карбоновая кислота [226903-07-7].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 278 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,3-кратное от времени удерживания пика ципрофлоксацина. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ципрофлоксацин – 1 (около 9 мин); примесь E – около 0,4; примесь В – около 0,6; примесь С – около 0,7; примесь D – около 1,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей В, С, D и Е используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу ципрофлоксацина гидрохлорида для идентификации примесей.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примесей В и С должно быть не менее 1,3.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь B – 0,7; примесь С – 0,6; примесь D – 1,4; примесь Е – 6,7.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси Е не должна превышать 1,5 площади пика ципрофлоксацина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика каждой из примесей B, С и D не должна превышать площадь пика ципрофлоксацина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика ципрофлоксацина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать 2,5 площади пика ципрофлоксацина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,25 площади пика ципрофлоксацина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 6,7 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 4).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,25 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

** Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси 2. Другие примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца ципрофлоксацина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ципрофлоксацина гидрохлорида, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

- Объём пробы: 10 мкл.

Хроматографируют раствор стандартного образца ципрофлоксацина гидрохлорида и испытуемый раствор.

Содержание ципрофлоксацина гидрохлорида C17H18FN3O3·HCl в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика ципрофлоксацина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика ципрофлоксацина на хроматограмме раствора стандартного образца ципрофлоксацина гидрохлорида;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца ципрофлоксацина гидрохлорида, мг;
P – содержание ципрофлоксацина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце ципрофлоксацина гидрохлорида,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В герметично закрытой упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0320 Цисплатин (Cisplatinum)

Взамен ФС 42-3061-94

##### Определение

(SP-4-2)-Диамминдихлорплатина(II).

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % цисплатина PtCl2(NH3)2 в пересчёте на сухое вещество.

Цисплатин является высокотоксичным веществом. Необходимо принять меры для исключения возможности его вдыхания или контакта с кожей и слизистыми оболочками.

##### Свойства

Описание. Жёлтый порошок или кристаллы жёлтого или оранжево-жёлтого цвета.

Растворимость. Умеренно растворим в диметилформамиде, мало растворим в воде, практически не растворим в этаноле 96 %.

##### Идентификация

1. ИК−спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца цисплатина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика цисплатина на хроматограмме раствора стандартного образца цисплатина (раздел «Количественное определение»).

3. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Растворы защищают от действия света.

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем целлюлозы для ВЭТСХ.

- Предварительная подготовка пластинки. Пластинку выдерживают при температуре 150 °С в течение 60 мин.

- Подвижная фаза (ПФ). Ацетон—диметилформамид 10:90.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в диметилформамиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора диметилформамидом до метки.

- Раствор стандартного образца цисплатина. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца цисплатина, растворяют в диметилформамиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- На линию старта пластинки наносят 2 мкл испытуемого раствора (4 мкг) и 2 мкл раствора стандартного образца (4 мкг) цисплатина. Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают олова(II) хлорида раствором(2) и просматривают в видимом свете через 1 ч.

- Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции цисплатина на хроматограмме раствора стандартного образца цисплатина.

4. Качественная реакция. В стеклянный бюкс помещают 50 мг субстанции, прибавляют 2 мл натрия гидроксида раствора 8,5 % и выпаривают досуха. Полученный остаток растворяют в смеси 0,5 мл азотной кислоты концентрированной и 1,5 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и выпаривают досуха, остаток должен быть оранжевого цвета. Полученный остаток растворяют в 0,5 мл воды, после прибавления 0,5 мл аммония хлорида раствора 10,7 % должен образоваться жёлтый кристаллический осадок.

##### Испытания

Прозрачность раствора

Раствор А. Раствор 25 мг субстанции в 25 мл натрия хлорида раствора 0,9 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Раствор Б. Раствор 0,2 г субстанции в 10 мл диметилформамида должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор А, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном GY5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,5 до 6,0 (раствор А, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3). Измерение проводят сразу после приготовления раствора.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы защищают от действия света. Не нагревают и не обрабатывают ультразвуком растворы, содержащие платину. Все растворы используют в течение 4 ч.

Подвижная фаза (ПФ). В химическом стакане растворяют 1,08 г натрия октансульфоната, 1,70 г тетрабутиламмония гидросульфата и 2,72 г калия дигидрофосфата в 950 мл воды и доводят значение pH натрия гидроксида раствором 1 М до значения 5,9. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Растворитель. Натрия хлорида раствор 0,9 %.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси А, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси В. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,6 мг фармакопейного стандартного образца примеси В, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мкл испытуемого раствора, 5,0 мл раствора стандартного образца примеси А и 5,0 мл раствора стандартного образца примеси В и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь A: (SP-4-1)-диамминдихлорплатина(II) [14913-33-8].

Примесь B: амминотрихлорплатинат(II) [17632-41-6].

Примесь C: тетрахлорплатинат(II) [13965-91-8].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 4 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 7-кратное от времени удерживания пика цисплатина. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартный раствор, испытуемый раствор и растворитель.

Пик смещения – это последний пик в группе пиков на хроматограмме растворителя.

Относительное время удерживания соединений. Цисплатин – 1 (около 3,8 мин); пик смещения – около 0,5; примесь А – около 0,6; примесь В – около 0,7; цисплатин аквакомплекс – около 1,2.

Для идентификации пика цисплатин аквакомплекса используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора стандартного образца цисплатина (раздел «Количественное определение») и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу цисплатина.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками примесей А и В должно быть не менее 2,5;

- разрешение (RS) между пиком смещения и пиком примеси А должно быть не менее 2,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика примеси А на хроматограмме стандартного раствора (не более 2,0 %);

- площадь пика примеси В не должна превышать площадь пика примеси В на хроматограмме стандартного раствора (не более 1,0 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика цисплатина на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,10 %);

- сумма площадей пиков всех примесей, кроме примесей А и В, не должна более чем в 2,5 раза превышать площадь пика цисплатина на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее площади пика цисплатина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %), пик цисплатин аквакомплекса и пики растворителя.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Серебро. Не более 0,025 %. Определение проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 1).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 15 мл азотной кислоты при нагревании до 80 °С, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки.

Калибровочные растворы. В мерные колбы вместимостью 100 мл помещают серебра стандартный раствор 5 мкг/мл в количествах: 10 мл, 20 мл и 30 мл, прибавляют 50 мл азотной кислоты и доводят объём растворов водой до метки (получают растворы с содержанием серебра соответственно 0,5; 1,0 и 1,5 мкг/мл).

Контрольный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мл азотной кислоты и доводят объём раствора водой до метки.

Условия испытания

Источник излучения | лампа для определения серебра с полым катодом с щелью пропускания 0,5 нм; |
Длина волны | 328 нм; |  |
Атомизация | воздушно—ацетиленовое пламя. |  |

Измеряют поглощение испытуемого, контрольного и калибровочных растворов.

Для каждого раствора проводят не менее 3 измерений. Строят калибровочный график зависимости средних результатов измерений, полученных для калибровочных растворов от их концентрации. Содержание серебра в испытуемом растворе определяют по калибровочному графику.

* Бактериальные эндотоксины. Не более 1,62 ЕЭ на 1 мг цисплатина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца цисплатина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца цисплатина, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

- Объём пробы: 10 мкл.

Хроматографируют раствор стандартного образца цисплатина и испытуемый раствор.

Содержание цисплатина PtCl2(NH3)2 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – сумма площадей пиков цисплатина и цисплатин аквакомплекса на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – сумма площадей пиков цисплатина и цисплатин аквакомплекса на хроматограмме раствора стандартного образца цисплатина;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца цисплатина, мг;
W – потеря в массе при высушивании,%;
P – содержание цисплатина в фармакопейном стандартном образце цисплатина,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0321 Цитиколин натрия

Цитиколин
Citicolinum natricum

Вводится впервые

##### Определение

[2-(Триметиламмонио)этил](\{[(2R,3S,4R,5R)-5-(4-амино-2-оксо-1,2-дигидропиримидин-1-ил)-3,4-дигидроксиоксолан-2-ил]метил]фосфонато]окси)фосфонат натрия.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % цитиколина натрия C14H25N4NaO11P2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белые кристаллы или кристаллический порошок белого цвета.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко или легко растворим в воде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца цитиколина натрия.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика цитиколина на хроматограмме раствора стандартного образца цитиколина натрия (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерные реакции А и Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 2 г субстанции в 16 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH. От 6,0 до 7,5 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие цитиколин натрия и его примеси, используют свежеприготовленными.

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 5 мл тетрабутиламмония гидроксида раствора 40 %, прибавляют 0,5 мл фосфорной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки.

Буферный раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 500 мл раствора А, прибавляют 500 мл калия дигидрофосфата раствора 0,01 М и доводят pH раствора фосфорной кислотой концентрированной до 4,50.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—буферный раствор 50:950.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца цитиколина натрия, 30 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца 5'-цитидиловой кислоты ([(2R,3S,4R,5R)-5-(4-амино-2-оксо-1,2-дигидропиримидин-1-ил)-3,4-дигидроксиоксолан-2-ил]метанфосфоновая кислота [63-37-6]), растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 276 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания основного пика. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Цитиколин– 1 (около 8 мин); 5'-цитидиловая кислота – около 1,7.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика цитиколина должно быть не менее 10.

На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками цитиколина и 5'-цитидиловой кислоты должно быть не менее 8,0;

- фактор асимметрии пика (AS) цитиколина и 5'-цитидиловой кислоты должен быть не более 2,0.

Содержание 5'-цитидиловой кислоты в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика 5'-цитидиловой кислоты на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика 5'-цитидиловой кислоты на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца 5'-цитидиловой кислоты, мг;
P – содержание 5'-цитидиловой кислоты в фармакопейном стандартном образце 5'-цитидиловой кислоты,%.

Содержание любой другой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой другой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика цитиколина на хроматограмме стандартного раствора;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца цитиколина натрия, мг;
P – содержание цитиколина натрия в фармакопейном стандартном образце цитиколина натрия,%.

Допустимое содержание примесей:

- 5'-цитидиловоя кислота – не более 0,2 %;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,7 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее площади пика цитиколина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,02 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 10 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 2).Сушат 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме над фосфора(V) оксидом до постоянной массы при температуре 100 °С и остаточном давлении 3 кПа (20–25 мм. рт. ст.).

** Аммоний. Не более 0,05 % (ОФС «Аммоний»). Растворяют 0,1 г субстанции в 25 мл воды. Для определения используют 10 мл раствора.

** Железо. Не более 0,01 % (ОФС «Железо», метод 2). Растворяют 0,1 г субстанции 10 мл воды.

** Мышьяк. Не более 0,0001 % (ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения используют 0,5 г субстанции.

Фосфаты. Не более 0,1 % (ОФС «Фосфаты»). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Хлориды. Не более 0,05 % (ОФС «Хлориды»). Для определения используют 10 мл раствора полученного в испытании «Аммоний».

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

*** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,175 ЕЭ на 1 мг цитиколина натрия (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

*** Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза 30 мг цитиколина в 0,5 мл раствора натрия хлорида 0,9 % для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения 48 ч.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца цитиколина натрия. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 12,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца цитиколина натрия, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца цитиколина натрия и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца цитиколина натрия:

- фактор асимметрии пика (AS) цитиколина должен быть не более 1,5.

Содержание цитиколина натрия C14H25N4NaO11P2 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика цитиколина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика цитиколина на хроматограмме раствора стандартного образца цитиколина натрия;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца цитиколина натрия, мг;
W – потеря в массе при высушивании,%;
P – содержание цитиколина натрия в фармакопейном стандартном образце цитиколина натрия,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Контроль проводят в субстанции в случае, если субстанция получена методами микробиологического синтеза.

*** Контроль проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0322 Эбастин (Ebastinum)

Вводится впервые

##### Определение

1-(4-трет-Бутилфенил)-4-[4-(дифенилметокси)пиперидин-1-ил]бутан-1-он.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % эбастина C32H39NO2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в метиленхлориде, растворим или умеренно растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца эбастина.

##### Испытания

Температура плавления. От +84 до +87 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1). Субстанцию предварительно высушивают в вакууме над силикагелем безводным в течение 24 ч.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 2,3 г дикалия гидрофосфата тригидрата в воде, доводят значение рН до 5,80 фосфорной кислоты раствором 2 М, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). ПФБ—буферный раствор 350:650.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол—ацетонитрил 200:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 40 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси C и 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси D, растворяют в метаноле, при необходимости обрабатывая ультразвуком в течение не более 1 мин, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора метанолом до метки.

Примечание

Примесь A: дифенилметанол [91-01-0].

Примесь В: 1-(4-трет-бутилфенил)-этан-1-он [943-27-1].

Примесь С: 4-(бензгидрилокси)пиперидин [58258-01-8].

Примесь D:
1-(4-трет-бутилфенил)-4-(4-гидроксипиперидин-1-ил)бутан-1-он [97928-18-2].

Примесь Е:
4-[4-(бензгидрилокси)пиперидин-1-ил]-1-[4-(2-метилбут-2-ил)фенил]бутан-1-он [1312211-93-0].

Примесь F:
транс-4-(бензгидрилокси)-1-[4-(4-трет-бутилфенил)-4-оксобутил]пиперидин N-оксид.

Примесь G:
цис-4-(бензгидрилокси)-1-[4-(4-трет-бутилфенил)-4-оксобутил]пиперидин N-оксид.

Примесь H: [(бензгидрилокси)(фенил)метил]бензол [574-42-5].

Примесь 1: (4-трет-бутилфенил)(циклопропил)метанон [38675-79-5].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 40 °C; |  |
Температура образца | 15 °C; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2 | 100 | 0
2–16 | 100 → 40 | 0 → 60
16–43 | 40 | 60
43–44 | 40 → 100 | 60 → 0
44–49 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Эбастин – 1 (около 19 мин); примесь C – около 0,30; примесь D – около 0,32; примесь A – около 0,42; примесь B – около 0,65; примесь F – около 0,76; примесь 1 – около 0,79; примесь G – около 0,84; примесь E – около 1,13; примесь H – около 1,23.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика эбастина должно быть не менее 20.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси C и примеси D должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора сравнения фактор асимметрии пика (AS) эбастина должен быть не менее 0,8 и не более 1,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь D – 1,6; примесь A – 0,7; примесь H – 0,7.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика эбастина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика эбастина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика эбастина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,01 % (ОФС «Сульфаты», метод 1).

Испытуемый раствор. Суспендируют 2,5 г субстанции в 25 мл азотной кислоты разведённой 12,5 %, кипятят с обратным холодильником в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры и фильтруют.

Хлориды. Не более 0,01 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,2 г субстанции в 10 мл ацетона.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,35 г (точная навеска) субстанции в 50 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования определяют потенциометрически, используя стеклянный индикаторный электрод и хлорсеребряный электрод сравнения (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 46,97 мг эбастина C32H39NO2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0323 Эзетимиб (Ezetimibum)

Вводится впервые

##### Определение

(3R,4S)-4-(4-Гидроксифенил)-3-(S)-3-гидрокси-3-(4-фторфенил)пропил]-1-(4-фторфенил)азетидин-2-он.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % эзетимиба C24H21F2NO3 в пересчёте на безводное и свободное от органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый аморфный или кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в метаноле и этаноле, растворим в ацетонитриле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в минеральном масле, в области от 3800 до 650 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца эзетимиба.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика эзетимиба на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы (раздел «Родственные примеси. Метод 1»).

##### Испытания

Удельное вращение. От −25,0 до −30,0 в пересчёте на безводное вещество (1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Родственные примеси. Сумма примесей – не более 0,9 %.

1. Метод 1. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—вода 450:550.

Растворитель. Смешивают 1 мл уксусной кислоты ледяной в 1000 мл ацетонитрила.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца эзетимиба. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца эзетимиба, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 4 мг фармакопейного стандартного образца эзетимиба для проверки пригодности хроматографической системы (содержит примесь 4 и 7), растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание

Примесь 1:
(3S,4S)-4-(4-гидроксифенил)-3-(3S)-3-гидрокси-3-(4-фторфенил)пропил]-1-(4-фторфенил)азетидин-2-он,
[1593543-07-7].

Примесь 2:
(3R,4R)-4-(4-гидроксифенил)-3-(3R)-3-гидрокси-3-(4-фторфенил)пропил]-1-(4-фторфенил)азетидин-2-он
[1593542-96-1].

Примесь 3:
(3R,4S)-4-(4-гидроксифенил)-3-(3S)-3-гидрокси-3-(4-фторфенил)пропил]-1-фенилазетидин-2-он
[302781-98-2].

Примесь 4:
(3R,4S)-4-(4-гидроксифенил)-3-(3R)-3-гидрокси-3-(4-фторфенил)пропил]-1-(4-фторфенил)азетидин-2-он
[163380-16-3].

Примесь 5:
(3S,4R)-4-(4-гидроксифенил)-3-(3S)-3-гидрокси-3-(4-фторфенил)пропил]-1-(4-фторфенил)азетидин-2-он
[1593543-00-0].

Примесь 6:
(3S,4R)-4-(4-гидроксифенил)-3-(3R)-3-гидрокси-3-(4-фторфенил)пропил]-1-(4-фторфенил)азетидин-2-он
[1376614-99-1].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель модифицированный трис(3,5-диметилфенилкарбомоил)целлюлозой для хиральной хроматографии, 5 мкм (две колонки последовательно соединённые); |
Температура колонки | 5 °С; |  |
Скорость потока | 0,35 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 248 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 1,4-кратное от времени удержания эзетимиба. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца эзетимиба и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Эзетимиб – 1 (около 65 мин); примесь 1 – около 0,76; примесь 2 – около 0,82; примесь 3 – около 0,89; примесь 4 – около 0,93; примесь 5 – около 1,12; примесь 6 – около 1,22.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками эзетимиба и примеси 4 должно быть не менее 1,5;

- фактор асимметрии пика (AS) эзетимиба должен быть не более 1,5;

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику эзетимиба, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

На хроматограмме раствора стандартного образца эзетимиба относительное стандартное отклонение площади пика эзетимиба должно быть не более 10,0 % (6 введений).

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции эзетимиба в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- примесь 1 – не более 0,2 %;

- примесь 2 – не более 0,1 %;

- примесь 4 – не более 0,4 %;

- примесь 5 – не более 0,1 %;

- примесь 6 – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

2. Метод 2. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Вода.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Подвижная фаза В (ПФВ). Метанол.

Растворитель. Уксусная кислота ледяная—метанол—ацетонитрил—вода 0,1:10:27:63.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 2 мл ацетонитрила и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца эзетимиба. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца эзетимиба, растворяют в 2 мл ацетонитрила и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг фармакопейного стандартного образца эзетимиба для проверки пригодности хроматографической системы (содержит примеси 4 и 7), растворяют в 2 мл ацетонитрила и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 1 мл раствора стандартного образца эзетимиба, и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь 7:
(3R,4S)-4-(4-гидроксифенил)-3-(3S)-3-гидрокси-3-(2-фторфенил)пропил]-1-(4-фторфенил)азетидин-2-он
[1798008-25-9].

Примесь 8:
(3R,4S)-4-(4-гидроксифенил)-3-(3S)-3-гидрокси-3-(4-фторфенил)пропил]-1-(3-фторфенил)азетидин-2-он,
[1700622-06-5].

Примесь 9:
(3R,4S)-4-(4-гидроксифенил)-3-3-оксо-3-(4-фторфенил)пропил]-1-(4-фторфенил)азетидин-2-он
[191330-56-0].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель пентафторфенилпропильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | 0–5 мин спектрофотометрический, 215 нм; 5–100 мин спектрофотометрический, 248 нм; |  |
Объём пробы | 60 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,% | ПФВ,%
--- | --- | --- | ---
0–37 | 63 | 27 | 10
37–60 | 63 → 40 | 27 → 50 | 10
60–70 | 40 | 50 | 10
70–80 | 40 → 10 | 50 → 80 | 10
80–90 | 10 | 80 | 10
90–90,1 | 10 → 63 | 80 → 27 | 10
90,1–100 | 63 | 27 | 10

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца эзетимиба и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Эзетимиб – 1 (около 33 мин); примесь 3 – около 0,72; примесь 1 и примесь 2 – около 0,77 (идентифицируются как один пик и количественно определяются в разделе «Родственные примеси. Метод 1»); примесь 7 – около 0,89; примесь 8 – около 1,13; примесь 9 – около 1,42.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси 7 и эзетимиба должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы относительное стандартное отклонение площади пика эзетимиба должно быть не более 10,0 % (6 введений).

На хроматограмме раствора стандартного образца эзетимиба:

- фактор асимметрии пика (AS) эзетимиба должен быть не более 1,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси 9 умножают на 1,5.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции эзетимиба в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- примесь 3 – не более 0,2 %;

- примесь 7 – не более 0,2 %;

- примесь 8 – не более 0,2 %;

- примесь 9 – не более 0,1 %;

- любая другая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,6 %.

Вода. Не более 0,6 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Метод 2» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца эзетимиба и испытуемый раствор.

Содержание эзетимиба C24H21F2NO3 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика эзетимиба на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика эзетимиба на хроматограмме раствора стандартного образца эзетимиба;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца эзетимиба, мг;
P – содержание эзетимиба в фармакопейном стандартном образце эзетимиба,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0324 Эзомепразол натрия

Эзомепразол
Esomeprazolum natricum

Вводится впервые

##### Определение

2-{(S)-[(3,5-Диметил-4-метоксипиридин-2-ил)метил]сульфинил}-5-метокси-1H-бензимидазол-1-ид натрия.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % эзомепразола натрия C17H18N3NaO3S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Аморфный порошок белого или светло-серого цвета.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца эзомепразола натрия.

2. ВЭЖХ. Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика омепразола на хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Угол вращения. От +29,0° до +33,0° (1,0 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 80 мг субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Оптическая плотность. Оптическая плотность раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», измеренная в кювете с толщиной слоя 1 см в максимуме поглощения при длине волны 440 нм, не должна превышать 0,2 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

рН. От 9,5 до 11,5 (0,8 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы, содержащие эзомепразол натрия и омепразол, защищают от света и используют свежеприготовленными.

1. Энантиомерная чистота

Буферный раствор рН 6,0. Растворяют 4,0 г натрия дигидрофосфата безводного, 1,5 г динатрия гидрофосфата безводного в 800 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной или натрия гидроксида раствором 1 М до 6,00. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Буферный раствор рН 11,0. Растворяют 0,73 г трикалия фосфата тригидрата и 3,84 г динатрия гидрофосфата безводного в 800 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной или натрия гидроксида раствором 1 М до 11,0. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор рН 6,0 50:950.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Растворитель. Буферный раствор рН 11,0.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 40 мг субстанции, растворяют в 5 мл метанола и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора растворителем до метки, перемешивают и центрифугируют со скоростью 14 000 об/мин в течение 10 мин.

Раствор стандартного образца R-омепразола. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца омепразола, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в 2 мл метанола и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, 1,0 мл раствора стандартного образца R-омепразола и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 3,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

R-Омепразол:
2-[(R)-(3,5-диметил-4-метоксипиридин-2-ил)метансульфинил]-5-метокси-1H-бензимидазол [119141-89-8].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4 мм, силикагель модифицированный α1-кислотным гликопротеином для хиральной хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 302 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 100 → 85 | 0 → 15
10–20 | 85 | 15
20–20,01 | 85 → 100 | 15 → 0
20,01–30 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительные времена удерживания соединений. Эзомепразол – 1 (около 6 мин); R-омепразол – около 0,76.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками R-омепразола и эзомепразола должно быть не менее 3,0.

На хроматограмме раствора сравнения:

- фактор асимметрии пика (AS) эзомепразола должен быть не более 2,0.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика эзомепразола должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей:

- площадь пика R-омепразола не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,16 %).

2. Другие примеси

Буферный раствор. Растворяют 1,4 г динатрия гидрофосфата безводного в 800 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 7,60. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—буферный раствор 270:730.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 14 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ, при необходимости обрабатывая ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Полученный раствор центрифугируют при 14 000 об/мин в течение 10 мин.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл переносят 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца примеси D омепразола. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мг фармакопейного стандартного образца примеси D омепразола, растворяют в ПФ, при необходимости обрабатывая ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) стандартного образца омепразола, растворяют в 40 мл ПФ, при необходимости обрабатывая ультразвуком, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 5,0 мл раствора стандартного образца примеси D омепразола и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,4 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь D:
2-[(3,5-диметил-4-метоксипиридин-2-ил)метансульфонил]-5-метокси-1H-бензимидазол
[88546-55-8].

Примесь E:
3,5-диметил-4-метокси-2-{[(RS)-5-метокси-1H-бензимидазол-2-сульфинил]метил}пиридин 1-оксид
[176219-04-8].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм силикагель октилсилильный для хроматографии, 3,5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Температура образца | 4 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 40 мкл; |  |
Время хроматографирования | 5-кратное от времени удерживания пика эзомепразола. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для идентификации примесей, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительные времена удерживания соединений. Эзомепразол – 1 (около 10 мин); примесь E – около 0,4; примесь D – около 0,8.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси D используется хроматограмма раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси D и омепразола должно быть не менее 3,0.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика эзомепразола должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей:

- площадь пика каждой из примесей D и E не должна более чем в 1,5 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна более чем в 5 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 5,0 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 0,3 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 4,3 ЕЭ на 1 мг эзомепразола натрия (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») в условиях испытания «Родственные примеси. Другие примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- фактор асимметрии пика (AS) омепразола должен быть не менее 0,9 и не более 2,0.

Содержание эзомепразола натрия C17H18N3NaO3S в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика эзомепразола на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика омепразола на хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца омепразола, мг;
P – содержание омепразола в фармакопейном стандартном образце омепразола,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%;
367,40 – молекулярная масса эзомепразола натрия; 345,42 – молекулярная масса омепразола.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0325 Эмтрицитабин (Emtricitabinum)

Вводится впервые

##### Определение

4-Амино-1-[(2R,5S)-2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]-5-фторпиримидин-2(1H)-он.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % эмтрицитабина C8H10FN3O3S в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый, кристаллический порошок. *Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в воде и в метаноле, практически нерастворим в метиленхлориде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см−1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца эмтрицитабина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца («Родственные примеси»).

##### Испытания

Родственные примеси

1. Энантиомерная чистота

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Диэтиламин—трифторуксусная кислота—метанол—этанол—гексан 1:1:50:150:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 5 мл метанола и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца 1. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца эмтрицитабина, растворяют в 5 мл метанола и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца 2. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца 1 и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 1 мг 5-эпимера эмтрицитабина, растворяют в 1 мл метанола и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора раствором стандартного образца 1 до метки.

Раствор для проверки чувствительности. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл раствора стандартного образца 2 и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Энантиомер эмтрицитабина:
4-амино-1-[(2S,5R)-2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]-5-фторпиримидин-2(1H)-он
[137530-41-7].

Транс-изомеры эмтрицитабина:

5-эпимер – 4-амино-1-[(2R,5R)-2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]-5-фторпиримидин-2(1H)-он
[145986-26-1].

2-эпимер – 4-амино-1-[(2S,5S)-2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]-5-фторпиримидин-2(1H)-он
[145416-34-8].

Хроматографические условия

Колонка | 25,0 × 0,46 см, силикагель модифицированный трис(3,5-диметилфенилкарбамоил)амилозой для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 30 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор для проверки чувствительности, раствор стандартного образца 2, испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Эмтрицитабин – 1 (около 20 мин); энантиомер эмтрицитабина – около 0,54; 5-эпимер эмтрицитабина – около 1,23 и около 1,33.

Пригодность хроматографической системы определяют в соответствии с ОФС «Хроматография» со следующим уточнением. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (R) между пиками эмтрицитабина и 5-эпимера эмтрицитабина должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика эмтрицитабина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора стандартного образца 2:

- фактор асимметрии пика (AS) эмтрицитабина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика эмтрицитабина должно быть не более 5,0 % (6 определений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику эмтрицитабина, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: эмтрицитабина энантиомер – 1,1; 5-эпимер эмтрицитабина – 1,35.

Содержание примесей в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика примеси эмтрицитабина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика эмтрицитабина на хроматограмме стандартного раствора;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца эмтрицитабина, мг;
P - содержание эмтрицитабина в фармакопейном стандартном образце эмтрицитабина,%.

Допустимое содержание примесей. Эмтрицитабина энантиомер – не более 0,3 %, эмтрицитабина 5-эпимер – не более 0,2 %.

2. Другие примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 1,54 г ацетата аммония в 800 мл воды и доводят значение pH ледяной уксусной до 4,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 75 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 50 мл буферного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца эмтрицитабина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца эмтрицитабина, растворяют в буферном растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 30 мг (точная навеска) стандартного образца эмтрицитабина и 30 мг (точная навеска) стандартного образца салициловой кислоты, растворяют в 5 мл ацетонитрила и доводят объём раствора буферным раствором до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл переносят 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора буферным раствором до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 3 мг эмтрицитабина 5-фторурацил-аналога, растворяют в буферном растворе и доводят объём раствора буферным раствором до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствором стандартного образца эмтрицитабина до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Раствор для проверки чувствительности. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл стандартного раствора и доводят объём раствора буферным раствором до метки.

Примечание

Эмтрицитабиновая кислота:
rac-(2R,5S)-5-[4-амино-2-оксо-5-фторпиримидин-1(2H)-ил]-1,3-оксатиолан-2-карбоновая кислота
[1238210-10-0].

Фторцитозин: 4-амино-5-фторпиримидин-2(1H)-он [2022-85-7].

Эмтрицитабина сульфоксид:
4-амино-1-[(2R,3RS,5S)-2-(гидроксиметил)-3-оксо-1,3λ4-оксатиолан-5-ил]-5-фторпиримидин-2(1H)-он
[152128-77-3].

Ламивудин:
4-амино-1-[(2R,5S)-2-(гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]пиримидин-2(1H)-он
[134678-17-4].

Эмтрицитабина 5-фторурацил-аналог:
rel-1-[(2R,5S)-2-(Гидроксиметил)-1,3-оксатиолан-5-ил]-5-фторпиримидин-2,4(1H,3H)-дион
[143790-05-0].

Салициловая кислота: 2-гидроксибензойная кислота [69-72-7].

Эмтрицитабина ментиловый эфир:
[(1R,2S,5R)-5-метил-2-(пропан-2-ил)циклогексан-1-ил][(2R,5S)-5-[4-амино-2-оксо-5-фторпиримидин-1(2H)-ил]-1,3-оксатиолан-2-карбоксилат]
[764659-72-5].

Хроматографические условия

Колонка | 25,0 × 0,46 см, силикагель октадецилсилильный для хроматографии (С18), 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | Буферный раствор,% | Ацетонитрил,%
--- | --- | ---
0–10 | 98 → 80 | 2 → 20
10–20 | 80 → 40 | 20 → 60
20–35 | 40 → 20 | 60 → 80
35–40 | 20 | 80
40–41 | 20 → 98 | 80 → 2
41–50 | 98 | 2

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности, раствор для проверки пригодности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Эмтрицитабин – 1 (около 5–10 мин); фторцитазин – 0,45; эмтрицитабиновая кислота – 0,63; эмтрицитабина сульфоксид – 0,68; ламивудин – 0,87; эмтрицитабина 5-фторурацил-аналог – 1,13; салициловая кислота – 1,44; эмтрицитабина ментиловый эфир – 2,96.

Пригодность хроматографической системы определяют в соответствии с ОФС «Хроматография» со следующим уточнением. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение между пиками эмтрицитабина и эмтрицитабина 5- фторурацил-аналога должно быть не менее 3,0;

- фактор асимметрии пика эмтрицитабина должен быть не более 2,0.

На хроматограмме стандартного раствора:

- относительное стандартное отклонение площади пика эмтрицитабина и площади пика салициловой кислоты должно быть не более 5,0 % (6 определений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: фторцитазин – 0,79; эмтрицитабиновая кислота – 1,02; эмтрицитабина сульфоксид – 1,19; ламивудин – 0,80; эмтрицитабина 5-фторурацил-аналог – 1,18; эмтрицитабина ментиловый эфир – 1,92.

Содержание любой примеси, кроме салициловой кислоты, в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика соответствующей примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика эмтрицитабина на хроматограмме стандартного раствора;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца эмтрицитабина, мг;
P - содержание эмтрицитабина в фармакопейном стандартном образце эмтрицитабина,%.

Содержание салициловой кислоты в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика соответствующей примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика эмтрицитабина на хроматограмме стандартного раствора;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца салициловой кислоты, мг;
P - содержание салициловой кислоты в фармакопейном стандартном образце салициловой кислоты,%.

Допустимое содержание примесей:

- фторцитозин – не более 0,1 %;

- эмтрицитабиновая кислота – не более 0,3 %;

- эмтрицитабина сульфоксид – не более 0,15 %;

- ламивудин – не более 0,2 %;

- эмтрицитабина 5-фторурацил-аналог – не более 0,2 %;

- эмтрицитабина ментиловый эфир – не более 0,1 %;

- салициловая кислота – не более 0,1 %;

- любая неидентифицированная примесь – не более 0,10 %;

- сумма всех примесей – не более 0,6 %.

Не учитывают пики примесей, содержание которых составляет менее 0,05 %.

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции и платиновый тигель.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 1) в зольном остатке, полученном после сжигания 0,5 г субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В коническую колбу вместимостью 100 мл помещают 0,15 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 40 мл уксусной кислоты безводной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты.

Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М хлорной кислоты соответствует 24,73 мг эмтрицитабина C8H10FN3O3S.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0045 Эналаприла малеат

Эналаприл
Enalaprili maleas

Взамен ФС.2.1.0045.15

##### Определение

(2S)-1-[(2S)-2-{[(1S)-3-Фенил-1-(этоксикарбонил)пропил]амино}пропаноил]пирролидин-2-карбоновой кислоты (2Z)-бут-2-ендиоат (1:1).

Содержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % эналаприла малеата С20Н28N2O5⋅С4Н4О4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в метаноле и диметилформамиде, растворим в спирте 96 %, умеренно растворим в воде, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в суспензии с вазелиновым маслом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца эналаприла малеата.

Температура плавления. От 142 до 147 °С (ОФС «Температура плавления»).

Удельное вращение. От –41,0 до –43,5 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

рН. От 2,0 до 3,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор рН 2,5. Растворяют 2,8 г натрия дигидрофосфата в 950 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислотой до 2,50. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Буферный раствор рН 6,8. Растворяют 2,8 г натрия дигидрофосфата растворяют в 950 мл воды и доводят рН раствора натрия гидроксида раствором 9 М до 6,80. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФ А). Ацетонитрил—буферный раствор рН 6,8 50:950.

Подвижная фаза Б (ПФ Б). Буферный раствор рН 6,8—ацетонитрил 340:660.

Растворитель. Ацетонитрил—буферный раствор рН 2,5 50:950.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 30 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают около 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси G. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси G, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для идентификации пиков. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца эналаприла для идентификации пиков, содержащего примеси С и Н, в 1,0 мл растворителя.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 3 мг фармакопейного стандартного образца эналаприла для проверки разделительной способности хроматографической системы, содержащего примесь А, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А:
(2S)-1-[(2S)-2-{[(1R)-3-фенил-1-(этоксикарбонил)пропил]амино}пропаноил]пирролидин-2-карбоновая кислота
[76420-74-1].

Примесь С:
(2S)-1-[(2S)-2-{[(1S)-1-карбокси-3-фенилпропил]амино}пропаноил]пирролидин-2-карбоновая кислота (эналаприлат)
[76420-72-9].

Примесь G:
(2S)-2-{[(1S)-3-циклогексил-1-(этоксикарбонил)пропил]амино}пропановая кислота [460720-14-3].

Примесь Н:
(2S)-1-[(2S)-2-{[(1S)-3-циклогексил-1-(этоксикарбонил)пропил]амино}пропаноил]пирролидин-2-карбоновая кислота
[2055735-10-7].

Хроматографические условия

Колонка | 150 мм × 4,1 мм, сополимер стирол-дивинилбензола, 5 мкм; |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Температура колонки | 70 °С; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 215 нм; |  |
Объём пробы | 50 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФ А,% | ПФ Б,%
--- | --- | ---
0–3 | 95 | 5
3–23 | 95 → 40 | 5 → 60
23–30 | 40 | 60

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для идентификации пиков, раствор стандартного образца примеси G, раствор сравнения, испытуемый раствор А и испытуемый раствор Б.

Относительное время удерживания соединений. Эналаприл – 1 (около 13 мин); малеиновая кислота – около 0,1; примесь С – около 0,2; примесь А – около 1,1; примесь G – около 1,2; примесь Н – около 1,3.

Идентификация примесей. Хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы используют для идентификации пика примеси А, хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу эналаприла для идентификации пиков. Хроматограмму раствора для идентификации пиков используют для идентификации пиков примесей С и Н.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения отношение сигнал/шум (S/N) для пика эналаприла должно быть не менее 40.

На хроматограмме раствора стандартного образца примеси G отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси G должно быть не менее 40.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы отношение максимум/минимум (p/v) между пиками эналаприла и примеси А должно быть не менее 10.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси Н умножают на 2,0.

Содержание примеси G в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примеси G на хроматограмме испытуемого раствора Б;
S0 – площадь пика примеси G на хроматограмме раствора стандартного образца примеси G;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца примеси G, мг;
P – содержание примеси G в фармакопейном стандартном образце примеси G,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь G – не более 0,2 %.

На хроматограмме испытуемого раствора А:

- площадь пика примеси А не должна более чем в 5 раз превышать площадь пика эналаприла на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика примеси Н не должна более чем в 3 раза превышать площадь пика эналаприла на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика примеси С не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика эналаприла на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика эналаприла на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- суммарная площадь пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь пика эналаприла на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пик малеиновой кислоты и пики с площадью менее 0,5 площади пика эналаприла на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании»). Определение проводят одним из методов.

- 1) Сушат 1,0 г (точная навеска) субстанции при температуре 60 °С при остаточном давлении не выше 5 мм рт. ст. в течение 2 ч.

- 2) Сушат 1,0 г (точная навеска) субстанции при температуре от 100 до 105 °С до постоянной массы.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют около 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Около 0,1 г (точная навеска) субстанции растворяют в 50 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») по второму перегибу на кривой титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 16,42 мг эналаприла малеата С20Н28N2O5⋅С4Н4О4.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0217 Эпинефрина гидротартрат

Эпинефрин
Epinephrini hydrogenotartras

Взамен ФС.2.1.0217.18

С9Н13NO3·C4H6O6 [51-42-3] | М.м. 333,29

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

4-[(1R)-1-Гидрокси-2-(метиламино)этил]бензол-1,2-диола (2R,3R)-2,3-дигидроксибутандиоат (1:1).

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % эпинефрина гидротартрата C9H13NO3∙С4Н6O6 в пересчёте на сухое вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или белый с сероватым оттенком или зеленоватым оттенком кристаллический порошок.

* Чувствителен к свету и кислороду воздуха.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало или очень мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр испытуемого образца в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца эпинефрина гидротартрата.

- Испытуемый образец. Растворяют 5 г субстанции в 50 мл натрия метабисульфита раствора 0,5 % и прибавляют раствор аммиака до щелочной реакции по лакмусу. Смесь выдерживают при комнатной температуре не менее 15 мин и фильтруют. Осадок промывают тремя порциями по 10 мл метанола и высушивают при 80 °С.

- Стандартный образец. Растворяют 50 мг фармакопейного стандартного образца эпинефрина гидротартрата в 5 мл натрия метабисульфита раствора 0,5 % и прибавляют аммиака раствор до щелочной реакции по лакмусу. Смесь выдерживают при комнатной температуре не менее 30 мин и фильтруют. Осадок промывают тремя порциями по 10 мл метанола и высушивают при 80 °С.

2. Качественная реакция. Растворяют 5 г субстанции в 50 мл натрия метабисульфита раствора 0,5 % и прибавляют раствор аммиака до щелочной реакции по лакмусу. Смесь выдерживают при комнатной температуре не менее 15 мин и фильтруют. 0,2 мл фильтрата должны давать характерную реакцию А на тартраты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 147 до 152 °С (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельное вращение. Удельное оптическое вращение испытуемого образца должно быть от –50 до –53,5 (2,0 % раствор в 0,5 М растворе хлористоводородной кислоты, ОФС «Оптическое вращение»).

Испытуемый образец. Осадок, полученный в испытании «Идентификация. 2 Качественная реакция», промывают тремя порциями по 10 мл метанола и высушивают при 80 °С.

Определение проводят немедленно после приготовления раствора.

Прозрачность раствора. Опалесценция раствора 1 г субстанции в 20 мл воды не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»). Сравнение проводят немедленно.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном ВY5 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2). Сравнение проводят немедленно.

рН раствора. От 2,8 до 4,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 5 г калия дигидрофосфата и 2,6 г натрия октансульфоната, растворяют в воде (обычно требуется перемешивать не менее 30 мин). Доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 2,8, переносят раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—буферный раствор 5:95.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—буферный раствор 45:55.

Растворитель. Ацетонитрил—буферный раствор 130:870.

Растворы готовят непосредственно перед использованием и защищают от света.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 75 мг субстанции, прибавляют 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и доводят объём растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора, доводят объём раствора растворителем до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём растворителем до метки и перемешивают.

Стандартный раствор А. Содержимое флакона с фармакопейным стандартным образцом эпинефрина смеси примесей (содержит примеси D и E) растворяют в смеси 0,1 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и 0,9 мл растворителя.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 7,5 мг фармакопейного стандартного образца эпинефрина гидротартрата, содержащего примесь А, растворяют в 0,5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и доводят объём растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,5 мг фармакопейного стандартного образца норадреналина тартрата и 1,5 мг адреналона гидрохлорида, растворяют в растворителе, добавляют 1 мл испытуемого раствора и доводят объём растворителем до метки.

Примечание

Примесь А: неизвестная структура.

Примесь В: 4-[(1R)-1-Гидрокси-2-аминоэтил]бензол-1,2-диол (норадреналин) [51-41-2].

Примесь С: 1-(3,4-Дигидроксифенил)-2-(метиламино)этанон [99-45-6].

Примесь D: 4-[(1R)-2-[Бензил(метил)амино]-1-гидрокси]бензол-1,2-диол [317351-40-9].

Примесь Е: 2-[Бензил(метил)амино]-1-(3,4-дигидроксифенил)этанон[36467-25-1].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 3 мкм
Температура колонки | 50 °С
Скорость потока | 2 мл/мин
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм
Объём пробы | 20 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–15 | 92 → 50 | 80 → 50
15–20 | 50 → 92 | 50 → 8
20–25 | 92 | 8

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, стандартный раствор А, стандартный раствор Б, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Эпинефрина гидротартрат – 1 (около 4 мин); примесь В – около 0,8; примесь С – около 1,3; примесь А – около 3,2; примесь D – около 3,3; примесь Е – около 3,7.

Идентификация примесей. Для идентификации примесей D и Е используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму стандартного раствора А и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу эпинефрина смеси примесей; для идентификации примеси А используют относительное время удерживания соединений хроматограмму стандартного раствора Б и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу эпинефрина гидротартрата, содержащему примесь А.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси В и эпинефрина гидротартрата должно быть не менее 3,0;

- фактор асимметрии каждого из пиков (AS) должен быть не более 2,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь D – 0,7; примесь Е – 0,6.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать трёхкратную площадь пика эпинефрина гидротартрата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,3 %);

- площадь пика каждой из примесей В и С не должна превышать двукратную площадь пика эпинефрина гидротартрата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика каждой из примесей D и Е не должна превышать площадь пика эпинефрина гидротартрата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика эпинефрина гидротартрата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать шестикратную площадь пика эпинефрина гидротартрата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,6 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции в вакууме при комнатной температуре в течение 18 часов.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 83,4 ЕЭ на 1 мг эпинефрина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) тонкоизмельчённой субстанции в 50 мл уксусной кислоты ледяной, нагревая при необходимости до 40 °С, и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до голубовато-зелёного окрашивания (индикатор – 0,1 мл кристаллического фиолетового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 33,33 мг эпинефрина гидротартрата C9H13NO3∙С4Н6O6.

##### ХРАНЕНИЕ

В запаянных ампулах или в герметично укупоренной упаковке, предохраняющей от действия света.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.1.0689 Эпирубицина гидрохлорид

Эпирубицин
Epirubicini hydrochloridum

Вводится впервые

C27H29NO11·HCl [56390-09-1] | М.м. 579,98

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(8S,10S)-10-[(3-Амино-2,3,6-тридезокси-α-L-арабино-гексопиранозил)окси]-6,8,11-тригидрокси-8-(гидроксиацетил)-1-метокси-7,8,9,10-тетрагидротетрацен-5,12-диона гидрохлорид.

Полусинтетический продукт из продукта ферментации. Содержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % эпирубицина гидрохлорида C27H29NO11·HCl в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Оранжево-красный порошок.

Растворимость. Растворим в воде и метаноле, мало растворим в этаноле, практически нерастворим в ацетоне.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца эпирубицина гидрохлорида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика эпирубицина на хроматограмме раствора стандартного образца эпирубицина гидрохлорида (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность раствора. Раствор 50 мг субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

pH раствора. От 4,0 до 5,5 (0,5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы после приготовления оставляют на 3 ч до начала испытания.

Раствор натрия лаурилсульфата. Растворяют 3,7 г натрия лаурилсульфата в 950 мл воды, прибавляют 28 мл фосфорной кислоты разведённой и доводят объём раствора водой до 1000 мл.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—ацетонитрил—раствор натрия лаурилсульфата 170:290:540.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мг фармакопейного стандартного образца эпирубицина гидрохлорида и 10,0 мг фармакопейного стандартного образца доксорубицина гидрохлорида (примесь C), растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для идентификации примеси A. Растворяют 10 мг фармакопейного стандартного образца доксорубицина гидрохлорида в смеси 5,0 мл воды и 5,0 мл фосфорной кислоты концентрированной и оставляют стоять в течение 30 мин. Доводят значение рН раствора до 2,6 с помощью натрия гидроксида раствора 2 М, прибавляют 15 мл ацетонитрила и 10 мл метанола.

Примечание

Примесь A (доксорубицинон): (8S,10S)-6,8,10,11-тетрагидрокси-8-(гидроксиацетил)-1-метокси-7,8,9,10-тетрагидротетрацен-5,12-дион [24385-10-2].

Примесь C (доксорубицин): (8S,10S)-10-[(3-амино-2,3,6-тридезокси-α-L-ликсо-гексопиранозил)окси]-6,8,11-тригидрокси-8-(гидроксиацетил)-1-метокси-7,8,9,10-тетрагидротетрацен-5,12-дион [23214-92-8].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель триметилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки | 35 °С;
Скорость потока | 2,5 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм;
Объём пробы | 10 мкл;
Время хроматографирования | 3,5-кратное от времени удерживания основного пика.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор для идентификации примеси A, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Эпирубицин – 1 (около 10 мин); примесь A – около 0,3; примесь C – около 0,8.

Идентификация примесей. Для идентификации примеси А используют хроматограмму раствора для идентификации примеси A (второй по площади пик). Для идентификации примеси С используют хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси C и эпирубицина должно быть не менее 2,0.

Поправочный коэффициент. Для расчёта содержания площади пика примеси A умножают на поправочный коэффициент 0,7.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей A и C не должна превышать площадь пика эпирубицина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать половины площади пика эпирубицина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика эпирубицина на хроматограмме раствора сравнения (не более 2,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,05 площади пика эпирубицина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 4,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС Аномальная токсичность»). Тест-доза – 0,1 мг эпирубицина гидрохлорида в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения 10 сут.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,7 ЕЭ/мг (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Стерильность. Стерильная субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

Микробиологическая чистота. Нестерильная субстанция должна соответствовать ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси».

Раствор стандартного образца эпирубицина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца эпирубицина гидрохлорида, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца эпирубицина гидрохлорида и испытуемый раствор.

Содержание эпирубицина гидрохлорида C27H29NO11·HCl в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика эпирубицина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика эпирубицина на хроматограмме раствора стандартного образца эпирубицина гидрохлорида;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца эпирубицина гидрохлорида, мг;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;
P – содержание эпирубицина гидрохлорида в фармакопейном стандартном образце эпирубицина гидрохлорида, %.

##### ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте, при температуре от 2 до 8 °С. Стерильную субстанцию хранить в стерильной упаковке, защищённой от вскрытия.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0326 Эрдостеин (Erdosteinum)

Вводится впервые

##### Определение

[({[(3RS)-2-Оксотиолан-3-ил]карбамоил}метил)сульфанил]уксусная кислота.

Содержит не менее 98,5 % и не более 101,5 % эрдостеина C8H11NO4S2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый кристаллический порошок со слабым запахом.

Растворимость. Мало растворим в воде и ацетоне, умеренно растворим в метаноле.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца эрдостеина.

2. ВЭЖХ. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг субстанции, прибавляют 3 мл воды, выдерживают на ультразвуковой бане до растворения, охлаждают и доводят объём раствора водой до метки.

- Раствор стандартного образца эрдостеина. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца эрдостеина, прибавляют 3 мл воды, выдерживают на ультразвуковой бане до растворения, охлаждают и доводят объём раствора водой до метки.

- Хроматографируют испытуемый раствор и раствор стандартного образца эрдостеина.

- Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика эрдостеина на хроматограмме раствора стандартного образца эрдостеина.

3. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Спектр поглощения 0,0025 % раствора субстанции в воде в области длин волн от 200 до 350 нм должен иметь максимум при 237 нм и минимум при 222 нм.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мг субстанции, растворяют в воде, обрабатывая ультразвуком, охлаждают и доводят объём раствора водой до метки.

##### Испытания

Температура плавления. От 158 до 162 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 20 мг субстанции в 25 мл воды, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»). Растворы используют свежеприготовленными.

Натрия гидроксида раствор 0,0025 М. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,1 г натрия гидроксида, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Подвижная фаза А. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,0 г триэтиламина, растворяют в воде, доводят объём раствора водой до метки и доводят рН раствора фосфорной кислотой до 2,00.

Подвижная фаза Б. Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг субстанции, прибавляют 70 мл воды, выдерживают на ультразвуковой бане до растворения, охлаждают и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг субстанции, растворяют в 7 мл натрия гидроксида раствора 0,0025 М, доводят объём раствора тем же растворителем до метки и оставляют на 30 мин.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–7 | 90 | 10
7–20 | 90 → 75 | 10 → 25
20–25 | 75 | 25
25–30 | 75 → 90 | 25 → 10
30–45 | 90 | 10

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Время удерживания пика эрдостеина составляет около 5 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками эрдостеина и продукта деградации с относительным временем удерживания около 1,2 должно быть не менее 3.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать 0,35 площади пика эрдостеина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,35 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать площадь пика эрдостеина на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее площади пика эрдостеина на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Триэтиламин. Не более 0,032 %. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 15 мл диметилформамида и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл триэтиламина, растворяют в диметилформамиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора диметилформамидом до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора диметилформамидом до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 2,5 мл стандартного раствора и доводят объём раствора диметилформамидом до метки.

Хроматографические условия

Колонка | капиллярная 30 м × 0,53 мм, покрытая слоем 6 % циано-пропилфенил, 94 % полиметилсилоксана, 3 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | азот; |  |
Деление потока | 1:10; |  |
Скорость потока газа-носителя | 1,5 мл/мин; |  |
Скорость потока воздуха | 400 мл/мин; |  |
Скорость потока водорода | 40 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1 мкл; |  |

Температура | колонка | 0–5 мин | 180 °С;
|  | 5–7 мин | 180–220 °С;
|  | 7–12 мин | 220 °С;
| инжектор | 200 °С; |
| детектор | 275 °С. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика триэтиламина должно составлять не менее 10.

На хроматограмме стандартного раствора:

- фактор асимметрии пика (AS) триэтиламина должен быть не более 2.

Содержание триэтиламина в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика триэтиламина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика триэтиламина на хроматограмме стандартного раствора;
а1 – навеска субстанции, г;
V0 – объём триэтиламина, взятый для приготовления стандартного раствора, мл;
P – содержание основного вещества в триэтиламине,%;
0,727 – плотность триэтиламина, г/мл.

Сульфаты. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 г субстанции, прибавляют 70 мл воды, перемешивают в течение 10 мин, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют.

Хлориды. Не более 0,025 % (ОФС «Хлориды»). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,8 г субстанции, прибавляют 70 мл воды, перемешивают в течение 10 мин, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола» с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В коническую колбу вместимостью 200 мл помещают 0,18 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 100 мл воды, перемешивают при нагревании до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры и титруют натрия гидроксида раствором 0,1 М до перехода окраски от бесцветной к красной (индикатор – три капли фенолфталеина раствора 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М соответствует 24,93 мг эрдостеина C8H11NO4S2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0339 Эритромицин (Erythromycinum)

Взамен ФС 42-3577-98

##### Определение

Смесь антибиотиков-макролидов, продуцируемых штаммом Streptomyces erythreus, основным компонентом является эритромицин A: (3R,4S,5S,6R,7R,9R,11R,12R,13S,14R)-7,12,13-Тригидрокси-4-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-рибо-L-гексопиранозил)окси]-3,5,7,9,11,13-гексаметил-6-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-14-этил-1-оксациклотетрадекан-2,10-дион.

Cодержит не менее 93,0 % и не более 102,0 % суммы эритромицинов A, B и C, из них эритромицинов B и C не более 5 % каждого в пересчёте на безводное и не содержащее остаточных органических растворителей вещество. Содержит не менее 930 мкг/мг и не более 1020 мкг/мг в пересчёте на безводное вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или светло-жёлтый порошок или бесцветные или светло-жёлтые кристаллы.

* Гигроскопичен, проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в этаноле 96 %, растворим в метаноле, мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»).

- Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца эритромицина A.

- Если спектры различаются, по 50 мг субстанции и фармакопейного стандартного образца эритромицина A растворяют отдельно в 1 мл метиленхлорида, упаривают и сушат при температуре 60 °С в течение 3 ч при остаточном давлении не более 0,67 кПа (5 мм. рт. ст.).

- Не учитывают полосы поглощения в области от 1980 до 2050 см–1.

3. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза. Тщательно перемешивают 4 объёма 2-пропанола,
  8 объёмов раствора ацетата аммония раствора 15 %, предварительно доведённого до pH 9,6 аммиака раствором концентрированным 25 %, и 9 объёмов этилацетата. После расслаивания смеси используют верхний слой.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10,0 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора до метки тем же растворителем.

- Раствор стандартного образца эритромицина А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца эритромицина A, растворяют в метаноле и доводят объём раствора до метки тем же растворителем.

- Раствор стандартного образца спирамицина. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца спирамицина, растворяют в метаноле и доводят объём раствора до метки тем же растворителем.

- На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (10 мкг) и растворов стандартных образцов эритромицина А (10 мкг) и спирамицина (5 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают спиртовым сернокислым раствором анисового альдегида, сушат при температуре 110 °С в течение 5 мин и просматривают в видимом свете.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и интенсивности окраски должна соответствовать основной зоне адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца эритромицина А и отличаться по положению и окраске от основной зоны адсорбции на хроматограмме раствора стандартного образца спирамицина.

4. Качественная реакция. К 5,0 мг субстанции прибавляют 5 мл раствора ксантгидрола и нагревают на водяной бане; появляется красное окрашивание.

5. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 5 мл 25 % хлористоводородной кислоты; через 10–20 мин появляется жёлтое окрашивание.

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Смесь растворителей. Метанол—фосфатный буферный раствор pH 7,0 1:3.

Буферный раствор. 35,0 г дикалия гидрофосфата растворяют в 900 мл воды, при необходимости доводят pH до 9,0 2 М фосфорной кислотой, и доводят объём раствора водой до 1000 мл.

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 50 мл буферного раствора, 400 мл воды, 165 мл
2-метил-2-пропанола, 30 мл ацетонитрила и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 40 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в смеси растворителей и доводят объём раствора той же смесью до метки.

Раствор стандартного образца эритромицина A. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 40 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца эритромицина A, растворяют в смеси растворителей и доводят объём раствора той же смесью до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца эритромицина B и 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца эритромицина C, растворяют в смеси растворителей и доводят объём раствора той же смесью до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси B, растворяют в 20 мл стандартного раствора, прибавляют 1,0 мл раствора стандартного образца эритромицина А и доводят объём раствора стандартным раствором до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,0 мл раствора стандартного образца эритромицина A и доводят объём смесью растворителей до метки.

Раствор для идентификации пиков. Распределяют 40 мг фармакопейного стандартного образца эритромицина A по дну бюкса тонким (не более 1 мм) слоем, нагревают при температуре 130 °С в течение 4 ч, охлаждают и растворяют в 10,0 мл смеси растворителей.

Примечание

Эритромицин B:
(3R,4S,5S,6R,7R,9R,11R,12S,13R,14R)-7,12-дигидрокси-4-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-рибо-L-гексопиранозил)окси]-3,5,7,9,11,13-гексаметил-6-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-14-этил-1-оксациклотетрадекан-2,10-дион
[527-75-3].

Эритромицин C:
(3R,4S,5S,6R,7R,9R,11R,12R,13S,14R)-7,12,13-тригидрокси-4-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-α-рибо-L-гексопиранозил)окси]-3,5,7,9,11,13-гексаметил-6-{[(3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-α-D-ксило-гексопиранозил]окси}-14-этил-1-оксациклотетрадекан-2,10-дион
[1675-02-1].

Примесь B:
(3R,4S,5S,6R,7R,9R,11R,12R,13S,14R)-7,12,13-тригидрокси-4-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-рибо-L-гексопиранозил)окси]-3,5,7,9,11,13-гексаметил-6-{[3,4,6-тридезокси-3-(метиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-14-этил-1-оксациклотетрадекан-2,10-дион
[992-62-1].

Примесь E:
(2R,3R,4S,5R,8R,9S,10S,11R,12R)-3,4-дигидрокси-9-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-2,4,8,10,12,14-гексаметил-11-{[3,4,6-тридезокси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]oxy}-5-этил-6,15-диоксабицикло[10.2.1]пентадец-1(14)-ен-7-он
[33396-29-1].

Примесь F:
(2R,3R,6R,7S,8S,9R,10R)-3-[(2R,3R)-2,3-Дигидроксипентан-2-ил]-7-[(2,6-дидезокси-3-C-метил-3-O-метил-α-L-рибо-гексопиранозил)окси]-2,6,8,10,12-пентаметил-9-{[3,4,6-тридезоакси-3-(диметиламино)-β-D-ксило-гексопиранозил]окси}-4,13-диоксабицикло[8.2.1]тридец-1(12)-ен-5-он
[105882-69-7].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, сополимер стирол-дивинилбензола для хроматографии, 8 мкм, размер пор 100 нм; |
Температура колонки | 70 °С (термостатируют также не менее 1/3 предшествующего колонке капилляра); |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 215 нм; |  |
Объём пробы | 100 мкл; |  |
Время хроматографирования | 5-кратное от времени удерживания основного пика. |

Хроматографируют раствор для идентификации пиков, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца эритромицина A, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Эритромицин A – 1 (около 15 мин); примесь E – около 4.3; эритромицин B – около 1,8; примесь F – около 1,5; эритромицин C – около 0,5; примесь B – около 0,45.

Идентификация примесей. Для идентификации эритромицинов B и C и примеси B используют хроматограммы растворов для проверки разделительной способности хроматографической системы и стандартного раствора, примесей E и F – по хроматограмме раствора для идентификации и относительным временам удерживания соединений.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

- разрешение ® между пиками примеси B и эритромицина C должно быть не менее 0,8;

- разрешение ® между пиками примеси B и эритромицина A должно быть не менее 5,5.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания следующих примесей площади пиков умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь E– 0,09; примесь F– 0,15.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика эритромицина A на хроматограмме раствора сравнения (не более 3 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 2,3 раза превышать площадь пика эритромицина A на хроматограмме раствора сравнения (не более 7 %).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,02 площади пика эритромицина A на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,06 %), и пики эритромицинов B и C.

Тиоцианат-ионы. Не более 0,3 %. Определяют методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Все растворы готовят непосредственно перед использованием и защищают от света.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в 20 мл метанола, прибавляют 1,0 мл железа(III) хлорида раствора 9 % и доводят объём раствора метанолом до метки.

Эталонный раствор (готовят в двух повторностях). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,1 г предварительно высушенного при температуре 105 °С в течение 1 ч калия тиоцианата, растворяют в метаноле и доводят объём раствора до метки тем же растворителем. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, прибавляют 1,0 мл 9 % раствора хлорида железа(III) и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл железа(III) хлорида раствора 9 % и доводят объём раствора метанолом до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого и эталонных растворов при длине волны 492 нм относительно раствора сравнения.

Пригодность системы. Система считается пригодной, если отношение S находится в пределах от 0,985 до 1,015:

где A1 и A2 - оптическая плотность эталонных растворов первой и второй повторности, соответственно;
a1 и a2 - навески калия тиоцианата при приготовлении эталонных растворов первой и второй повторности, соответственно, г.

Содержание тиоцианат-ионов в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
a - навеска субстанции, г;
58,08 – относительная молекулярная масса тиоцианат-иона;
97,18 относительная молекулярная масса тиоцианата калия.

Вода. Не более 6,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции и в качестве растворителя раствор имидазола в метаноле 0,1 г/мл.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с
ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

1. ВЭЖХ. Определение проводят в условиях испытания «Родственные примеси».

- Содержание эритромицина A C37H67NO13 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и не содержащее остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

- где S1 – площадь пика эритромицина A на хроматограмме испытуемого раствора;
  S0 – площадь пика эритромицина A на хроматограмме раствора стандартного образца эритромицина A;
  а1 – навеска субстанции, мг;
  а0 – навеска фармакопейного стандартного образца эритромицинаA, мг;
  W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей,%;
  P – содержание эритромицина A в фармакопейном стандартном образце эритромицина A,%.

- Содержание эритромицина B C37H67NO12 и эритромицина C C36H65NO13 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и не содержащее остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

- где S1 – площадь пика эритромицина B или эритромицина C, соответственно, на хроматограмме испытуемого раствора;
  S0 – площадь пика эритромицина B или эритромицина C, соответственно, на хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы;
  а1 – навеска субстанции, мг;
  а0 – навеска фармакопейного стандартного образца эритромицина B или эритромицина C, соответственно, мг;
  W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей,%;
  P – содержание эритромицина B или эритромицина C в фармакопейном стандартном образце эритромицина B или эритромицина C, соответственно,%.

2. Микробиологический метод. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение антимикробной активности антибиотиков методом диффузии в агар».

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0327 Эрлотиниба гидрохлорид

Эрлотиниб
Erlotinibi hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

6,7-Бис(2-метоксиэтокси)-N-(3-этинилфенил)хиназолин-4-амина гидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % эрлотиниба гидрохлорида C22H23N3O4·HCl в пересчёте на безводное и свободное от органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Мало растворим в метаноле и диметилсульфоксиде, практически нерастворим в воде.

* Растворяется в смесях ацетонитрил—вода 1:1, метанол—вода 1:1.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом в области от 4000 до 400 см–1 или методом нарушенного полного внутреннего отражения в области от 4000 до 650 см–1, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца эрлотиниба гидрохлорида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Все растворы используются свежеприготовленными.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

- Раствор стандартного образца эрлотиниба гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца эрлотиниба гидрохлорида, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

- Спектры поглощения испытуемого раствора и раствора стандартного образца эрлотиниба гидрохлорида в области от 220 до 400 нм должны иметь максимумы и минимумы при одних и тех же длинах волн.

3. Качественная реакция. В пробирку помещают 0,18 г субстанции, прибавляют 0,2 г калия дихромата и 1 мл серной кислоты концентрированной. Над полученным раствором помещают полоску фильтровальной бумаги, смоченной дифенилкарбазида раствором; должно наблюдаться фиолетово-красное окрашивание фильтровальной бумаги.

##### Испытания

Температура плавления. От 227 до 230 °C (ОФС «Температура плавления»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы используют свежеприготовленными.

Буферный раствор. Растворяют 1,9 г калия дигидрофосфата в 700 мл воды, прибавляют 1 мл триэтиламина и доводят рН фосфорной кислотой концентрированной до 2,40.

Подвижная фаза А (ПФБ). Метанол—ацетонитрил—буферный раствор 150:200:650.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол—ацетонитрил 150:850.

Растворитель. Метанол—вода 350:650, доводят рН раствора хлористоводородной кислоты раствором 1 М до 2,00.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца эрлотиниба гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца эрлотиниба гидрохлорида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. Переносят 1,0 мл полученного раствора в мерную колбу вместимостью 10 мл и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор примеси 1. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг примеси 1, растворяют в диметилсульфоксиде, при необходимости обрабатывают ультразвуком, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в растворителе, прибавляют 2,0 мл раствора этинилфенилацетамида и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматограрфической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца эрлотиниба гидрохлорида и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь 1(этинилфенилацетамид): N-(3-этинилфенил)ацетамид [70933-58-3].

Примесь 2: 3-этиниланилин [54060-30-9].

Примесь 3: 4,5-бис(2-метоксиэтокси)-2-нитробензонитрил [236750-65-5].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель фенилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Температура образца | 10 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 246 нм; длина волны сравнения 400 нм; |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0-5 | 100 | 0
5-40 | 100 → 75 | 0 → 25
40-50 | 75 → 100 | 25 → 0
50-62 | 100 | 0

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца эрлотиниба гидрохлорида и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Эрлотиниб – 1 (около 16 мин); примесь B – около 0,4; примесь A – около 0,7; примесь C – около 1,6.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика эрлотиниба должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R) между пиками примеси A и эрлотиниба должно быть не менее 5,0.

На хроматограмме раствора стандартного образца эрлотиниба гидрохлорида:

- фактор асимметрии пика (AS) эрлотиниба должен быть не более 2,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика эрлотиниба должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика эрлотиниба на хроматограмме раствора стандартного образца эрлотиниба гидрохлорида;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска стандартного образца эрлотиниба гидрохлорида, мг;
P – содержание эрлотиниба гидрохлорида в стандартном образце эрлотиниба гидрохлорида,%.

Допустимое содержание примесей:

- примеси 1, 2 и 3 – не более 0,15 % каждая;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее площади пика эрлотиниба на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 2). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с
ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с
ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 120 мл уксусной кислоты ледяной, прибавляют 15 мл метанола и 15 мл ртути(II) ацетата раствора 5 % и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты. Конечную точку титрования устанавливают потенциометрически
(ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт, используя 300 мл смеси уксусная кислота ледяная—метанол—ртути(II) ацетата раствор 5 % 8:1:1.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 42,99 мг эрлотиниба гидрохлорида C22H23N3O4·HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0047 Этилбромизовалерианат (Ethylis bromisovaleras)

Взамен ФС.2.1.0047.15

##### Определение

Этил(2-бром-3-метилбутаноат).

Cодержит не менее 98,0 % этилбромизовалерианата С7Н13ВrO2.

##### Свойства

Описание. Бесцветная прозрачная жидкость с характерным эфирным запахом.

Растворимость. Очень легко растворим в спирте 96 %, хлороформе, эфире, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в виде жидкой плёнки, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца этилбромизовалерианата.

2. Качественная реакция. К 5 мл субстанции прибавляют 10 мл натрия гидроксида раствора 10 %, кипятят в течение 10 мин и охлаждают (раствор А). К 2 мл раствора А прибавляют 2 мл воды хлорной или хлорамина раствора 5 %, 1 мл хлороформа, 10 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и энергично встряхивают; хлороформный слой должен окраcиться в оранжевый цвет.

3. Качественная реакция. Фильтруют через бумажный фильтр 5 мл раствора А, подкисляют 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и нагревают; должен появиться запах изовалериановой кислоты.

##### Испытания

Плотность. От 1,275 до 1,282 г/см3 (ОФС «Плотность», метод 1).

Показатель преломления. От 1,449 до 1,450 (ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)»).

Кислотность. Растворяют 1 мл субстанции в 10 мл спирта 96 %, предварительно нейтрализованного по фенолфталеину, и прибавляют 0,05 мл фенолфталеина раствора 1 %. Раствор должен окрашиваться в розовый цвет от прибавления не более 0,2 мл 0,05 М раствора натрия гидроксида.

Нелетучий остаток. Не более 0,1 %. Выпаривают 10 мл субстанции на взвешенном часовом стекле на водяной бане досуха.

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ
(ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. Испытуемая субстанция.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают по 0,1 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца этилбромизовалерианата и фармакопейного стандартного образца этилового эфира изовалериановой кислоты (этил(3-метилбутаноат) [108-64-5]), прибавляют 10 мл спирта 96 %, перемешивают и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор используют свежеприготовленным.

Хроматографические условия

Колонка | из нержавеющей стали 3,0 м × 3 мм, 10 % пропиленгликоль-1,2-адипинат на кизельгуре, 0,15–0,20 мм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Скорость потока | Газ-носитель | 50 мл/мин; |
| Водород | 50 мл/мин; |
| Воздух | 500 мл/мин; |
Температура | Колонка | 75 °С, подъём 6 °С/мин до 185 °С; |
| Детектор | 190 °С; |
| Испаритель | 180 С; |
Объём пробы |  | 0,2–0,3 мкл; |
Время хроматографирования | 1,5-кратное от времени удерживания основного пика. |

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор. При указанных условиях элюирования порядок выхода основных пиков следующий: этиловый эфир изовалериановой кислоты, этилбромизовалерианат.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки хроматографической системы:

- разрешение ® между пиками этилового эфира изовалериановой кислоты и этилбромизовалерианата должно быть не менее 2;

- фактор асимметрии пика этилбромизовалерианата должен быть не более 1,5.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- любая единичная примесь – не более 0,5 %;

- сумма примесей – не более 2 %.

Сульфаты. Взбалтывают 5 мл субстанции в течение 1 мин с 5 мл воды. После расслаивания смеси прибавляют 1 мл бария хлорида раствора 5 %, осторожно перемешивают и выдерживают в течение 15 мин. Не должно наблюдаться опалесценции в верхнем слое.

Хлориды, бромиды. Не более 0,002 % (ОФС «Хлориды»). Встряхивают 2 мл субстанции в течение 1 мин с 18 мл воды и 2 мл азотной кислоты разведённой 16 % и отделяют водный слой. Для определения используют 10 мл водного слоя.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Микробиологическая чистота. В соответствии с
ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 20 мл спирта 96 %, прибавляют 20 мл 1 М раствора натрия гидроксида, кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин, охлаждают и подкисляют азотной кислотой разведённой 12,5 % до кислой реакции по конго. К подкислённому раствору прибавляют 20 мл 0,1 М раствора серебра нитрата, избыток которого титруют 0,1 М раствором аммония тиоцианата до розовато-жёлтого окрашивания (индикатор – 2 мл раствора индикатора квасцов железоаммониевых).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 20,91 мг этилбромизовалерианата С7Н13BrО2.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке в защищённом от света месте при температуре не выше 15 °С.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0046 Этилметилгидроксипиридина сукцинат

Этилметилгидроксипиридин
Ethylmethylhydroxypyridini succinas

Взамен ФС.2.1.0046.15

##### Определение

6-Метил-2-этилпиридин-3-ола бутандиоат (1:1).

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % этилметилгидроксипиридина сукцината C8H11NOC4H6O4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца этилметилгидроксипиридина сукцината.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,01 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 240 до 330 нм должен иметь максимум при 297 нм.

3. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 1 мл воды. К полученному раствору прибавляют 0,1 мл железа(III) хлорида раствора 3 %; должно появиться красное окрашивание, исчезающее при прибавлении серной кислоты разведённой 16 %.

4. Качественная реакция. В сухую пробирку помещают 5 мг субстанции и 10 мг резорцина, прибавляют 0,1 мл серной кислоты концентрированной и осторожно нагревают над пламенем горелки до тех пор, пока смесь не окрасится в тёмно-коричневый цвет. После охлаждения прибавляют 0,5 мл воды, затем натрия гидроксида раствор 10 % до щелочной реакции, после чего доводят объём раствора водой до 20 мл; должно наблюдаться образование раствора оранжевого цвета, имеющего интенсивную зелёную флуоресценцию.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,5 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y6 или ВY6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,0 до 5,0 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 13,7 мл тетраметиламмония гидроксида раствора 25 % в 900 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 7,8, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Буферный раствор готовят непосредственно перед использованием.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил–буферный раствор 133:700.

Все растворы защищают от света.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца этилметилгидроксипиридина сукцината. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца этилметилгидроксипиридина сукцината, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца этилметилгидроксипиридина сукцината, доводят объём раствора ПФ до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В кварцевую ёмкость помещают 1,5[.underline]##0,5 мл полученного раствора и выдерживают на расстоянии 1,0[.underline]##0,5 см от источника УФ-излучения с длиной волны 254 нм мощностью 4 ВТ в течение 60 мин. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мл раствора сравнения и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор янтарной кислоты. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 23 мг янтарной кислоты, растворяют в ПФ и доводят объём раствора до метки тем же растворителем.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, испытуемый раствор – 4-х кратное от времени удерживания пика этилметилгидроксипиридина; раствор сравнения, раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор янтарной кислоты – 1,5-кратное от времени удерживания пика этилметилгидроксипиридина. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения, раствор янтарной кислоты и испытуемый раствор.

Время удерживания этилметилгидроксипиридина – около 6 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиком с относительным временем удерживания около 0,8 и пиком этилметилгидроксипиридина должно быть не менее 2,0.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика этилметилгидроксипиридина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора сравнения:

- относительное стандартное отклонение площади пика этилметилгидроксипиридина должно быть не более 5,0 % (6 введений);

- фактор асимметрии пика (AS) этилметилгидроксипиридина должен быть не менее 0,8 и не более 2,0.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика этилметилгидроксипиридина на хроматограмме раствора сравнения;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца этилметилгидроксипиридина сукцината, мг;
P – содержание этилметилгидроксипиридина сукцината в фармакопейном стандартном образце этилметилгидроксипиридина сукцината,%.

Допустимое содержание примесей:

- любая примесь – не более 0,1 %;

- сумма примесей – не более 0,5 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %) и пик янтарной кислоты.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1, при температуре от 70 до 80 °С). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,43 ЕЭ на 1 мг этилметилгидроксипиридина сукцината (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 50 мг/мл, а затем разводят его не менее чем в 200 раз.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,23 г (точная навеска) субстанции в коническую колбу вместимостью 100 мл, в 30 мл уксусной кислоты ледяной и титруют 0,1 М раствором хлорной кислоты до появления голубовато-зелёного окрашивания (индикатор – 2 капли кристаллического фиолетового раствора 0,1 %) или определяют точку эквивалентности потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлорной кислоты соответствует 25,53 мг этилметилгидроксипиридина сукцината C8H11NOC4H6O4.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0048 Этилпарагидроксибензоат (Ethylis parahydroxybenzoas)

Взамен ФС.2.1.0048.15

##### Определение

Этил(4-гидроксибензоат).

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % этилпарагидроксибензоата C9H10O3.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 % и метаноле, очень мало растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца этилпарагидроксибензоата.

2. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля октадецилсилильного для хроматографии F254.

- Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—вода—метанол 1:30:70.

- Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в ацетоне и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора ацетоном до метки.

- Раствор стандартного образца этилпарагидроксибензоата. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца этилпарагидроксибензоата, растворяют в ацетоне и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг примеси В (раздел Испытания, Родственные примеси), прибавляют 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора ацетоном до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 2 мкл испытуемого раствора Б (2 мкг), раствора стандартного образца этилпарагидроксибензоата (2 мкг) и раствора для проверки пригодности хроматографической системы (по 2 мкг). Пластинку сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при 254 нм.

- Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора проверки пригодности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 разделённые зоны адсорбции.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора Б по положению, величине и степени подавления флуоресценции должна соответствовать зоне адсорбции этилпарагидроксибензоата на хроматограмме раствора стандартного образца этилпарагидроксибензоата.

##### Испытания

Температура плавления. От 115 до 118 °C (ОФС «Температура плавления», метод 1). Субстанцию предварительно высушивают в вакууме над безводным силикагелем в течение 24 ч.

Прозрачность раствора. Раствор 1 г субстанции в 10 мл спирта 96 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном ВY6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность. Растворяют 0,2 г субстанции в 5 мл спирта 96 %, прибавляют 5 мл воды, свободной от углерода диоксида, и 0,1 мл бромкрезолового зелёного (синего) раствора 0,05 %. Окраска раствора должна измениться от прибавления не более 0,1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Калия дигидрофосфата раствор 0,05 М—метанол 350:650.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в 2,5 мл метанола и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор стандартного образца этилпарагидроксибензоата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца этилпарагидроксибензоата, растворяют в 2,5 мл метанола и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1 мл раствора стандартного образца этилпарагидроксибензоата и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца этилпарагидроксибензоата, 5 мг примеси А и 5 мг примеси В, растворяют в ПФ, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь A: 4-гидроксибензойная кислота [99-96-7].

Примесь В (метилпарагидроксибензоат): метил(4-гидроксибензоат) [99-76-3].

Примесь С (пропилпарагидроксибензоат): пропил(4-гидроксибензоат) [94-13-3].

Примесь D (бутилпарагидроксибензоат): бутил(4-гидроксибензоат) [94-26-8].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °C; |  |
Скорость потока | 1,3 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 272 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 4-кратное от времени удерживания пика этилпарагидроксибензоата. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Этилпарагидроксибензоат – 1 (около 3 мин); примесь А – около 0,5; примесь B – около 0,8.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси В и этилпарагидроксибензоата должно быть не менее 2,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси А умножают на 1,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площади пика этилпарагидроксибензоата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площади пика этилпарагидроксибензоата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь пика этилпарагидроксибензоата на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,2 площади пика этилпарагидроксибензоата на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,1 %).

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца этилпарагидроксибензоата и испытуемый раствор.

Содержание этилпарагидроксибензоата C9H10O3 в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика этилпарагидроксибензоата на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика этилпарагидроксибензоата на хроматограмме раствора стандартного образца этилпарагидроксибензоата;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца этилпарагидроксибензоата, мг;
P - содержание этилпарагидроксибензоата в фармакопейном стандартном образце этилпарагидроксибензоата,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0328 Этопозид (Etoposidum)

Вводится впервые

##### Определение

(5R,5aR,8aR,9S)-5-(4-Гидрокси-3,5-диметоксифенил)-9-({4,6-O-[(1R)-этан-1,1-диил]-β-D-глюкопиранозил}окси)-5,8,8a,9-тетрагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-d][1,3]диоксол-6(5aH)-он.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % этопозида в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Умеренно растворим в метаноле, мало растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца этопозида.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика этопозида на хроматограмме раствора стандартного образца этопозида (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. В пробирке растворяют 5 мг субстанции в 5 мл уксусной кислоты ледяной и прибавляют 50 мкл железа(III) хлорида раствора 10,5 %, перемешивают и осторожно прибавляют 2 мл серной кислоты концентрированной, избегая смешивания двух слоёв. Оставляют примерно на 30 мин; на поверхности раздела должно появиться кольцо от розового до красно-коричневого цвета, верхний слой должен быть жёлтым.

##### Испытания

Удельное вращение. От –106 до –114 в пересчёте на безводное вещество (0,5 % раствор субстанции в смеси метанол—метиленхлорид 1:9, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,6 г субстанции в 20 мл смеси метанол—метиленхлорид 1:9 должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y6или BY6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Муравьиная кислота безводная—триэтиламин—вода 1:1:998.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Муравьиная кислота безводная—триэтиламин—ацетонитрил 1:1:998.

Растворитель. ПФА—ПФБ 50:50.

Растворы используют свежеприготовленными.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 40 мг субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Растворяют 4 мг фармакопейного стандартного образца этопозида для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси В, С, D, Е, N и О в 1 мл растворителя.

Примечание

Примесь В:
(5R,5aS,8aR,9S)-5-(4-Гидрокси-3,5-диметоксифенил)-9-({4,6-O-[(1R)-этан-1,1-диил]-β-D-глюкопиранозил}окси)-5,8,8a,9-тетрагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-d][1,3]диоксол-6(5aH)-он
[100007-56-5].

Примесь С:
(5R,5aR,8aR,9S)-5-(4-Гидрокси-3,5-диметоксифенил)-9-({4,6-O-[(1R)-этан-1,1-диил]-α-D-глюкопиранозил}окси)-5,8,8a,9-тетрагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-d][1,3]диоксол-6(5aH)-он
[100007-53-2].

Примесь D:
(5R,5aR,8aR,9S)-5-(4-Гидрокси-3,5-диметоксифенил)-9-(β-D-глюкопиранозилокси)-5,8,8a,9-тетрагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-d][1,3]диоксол-6(5aH)-он
[23363-35-1].

Примесь Е:
(5R,5aR,8aR,9S)-9-Гидрокси-5-(4-гидрокси-3,5-диметоксифенил)-5,8,8a,9-тетрагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-d][1,3]диоксол-6(5aH)-он
[6559-91-7].

Примесь N:
(5R,5aR,8aR,9S)-5-(4-{[(5R,5aR,8aR,9S)-5-(4-Гидрокси-3,5-диметоксифенил)-6-оксо-5,5a,6,8,8a,9-гексагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-d][1,3]диоксол-9-ил]окси}-3,5-диметоксифенил)-9-({4,6-O-[(1R)-этан-1,1-диил]-β-D-глюкопиранозил}окси)-5,8,8a,9-тетрагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-d][1,3]диоксол-6(5aH)-он.

Примесь О:
(5R,5aR,8aR,9S)-5-(4-Гидрокси-3,5-диметоксифенил)-9-({2,3-ди-O-(дихлорацетил)-4,6-O-[(1R)-этан-1,1-диил]-β-L-глюкопиранозил}окси)-5,8,8a,9-тетрагидрофуро[3',4':6,7]нафто[2,3-d][1,3]диоксол-6(5H)-он.

Хроматографические условия

Колонка | 125 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 285 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–7 | 75 | 25
7–23 | 75 → 27 | 25 → 73
23–30 | 27 → 75 | 73 → 25

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Этопозид – 1 (около 5 мин); примесь D – около 0,4; примесь Е – около 0,8; примесь С – около 1,1; примесь В – около 1,2; примесь N – около 3,1; примесь О – около 4,2.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы и хроматограмму, прилагаемую к фармакопейному стандартному образцу этопозида для проверки пригодности системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси С и этопозида должно быть не менее 2,0;

- отношение максимум/минимум (p/v) между пиками примеси В и примеси С должно быть не менее 3,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси О умножают на 1,7.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика каждой из примесей B, С, D, E, N не должна более чем в 2 раза превышать площадь пика этопозида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика примеси О не должна превышать 1,5 площади основного пика этопозида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,15 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика этопозида на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать десятикратную площадь пика этопозида на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика этопозида на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 6,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,25 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,8 ЕЭ на 1 мг этопозида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции в спирте 96 % c концентрацией 10 мг/мл.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объём раствора до метки.

Раствор стандартного образца этопозида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца этопозида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора до метки.

Хроматографируют раствор стандартного образца этопозида и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца этопозида относительное стандартное отклонение площади пика этопозида должно быть не более 1,0 % (6 введений).

Содержание этопозида C29H32O13 в субстанции в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика этопозида на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика этопозида на хроматограмме раствора стандартного образца этопозида;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца этопозида, мг;
P – содержание этопозида в фармакопейном стандартном образце этопозида,%;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытания проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0329 Этосуксимид (Ethosuximidum)

Вводится впервые

##### Определение

(3RS)-3-Метил-3-этилпирролидин-2,5-дион.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % этосуксимида C7H11NO2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок или воскообразное вещество.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Очень легко растворим в спирте 96 % и метиленхлориде, легко растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца этосуксимида.

- Если спектры различаются, испытуемую субстанцию и фармакопейный стандартный образец этосуксимида растворяют по отдельности в метиленхлориде, выпаривают досуха и записывают спектры сухих остатков.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 7 мл спирта 96 %, перемешивают тщательно до растворения и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Ультрафиолетовый спектр 0,1 % раствора субстанции в спирте 96 % в области длин волн от 230 до 300 нм должен иметь максимум поглощения при 248 нм с удельным показателем поглощения от 8 до 9.

##### Испытания

Температура плавления. От 45 до 50 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 25 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей» метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 15,6 г натрия дигидрофосфата дигидрата, растворяют в 900 мл воды, доводят рН раствора фосфорной кислотой концентрированной до 2,00, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл, и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,25 г субстанции, растворяют в ПФА, выдерживают раствор при комнатной температуре не менее 30 мин, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси А. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси А ((2RS)-2-метил-2-этилбутандиовая кислота [631-31-2]), растворяют в ПФА и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца примеси А и доводят объём раствора ПФА до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Смешивают 1,0 мл раствора фармакопейного стандартного образца примеси А и 4,0 мл испытуемого раствора.

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 2,1 мм, кремний органический полимер, совместимый с водной подвижной фазой, октадецилсилильный, эндкепированный, 2,6 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 0,25 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм; |  |
Объём пробы | 3 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 90 | 10
10–11 | 90 → 30 | 10 → 70
11–15 | 30 | 70
15–20 | 30 → 90 | 70 → 10

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения, раствор стандартного образца примеси А и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Этосуксимид – 1 (около 4 мин); примесь A – около 1,7 мин.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму раствора фармакопейного стандартного образца примеси А.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (Rs) между пиками примеси A и этосуксимида должно быть не менее 3,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей не должна превышать двукратную площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,5 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Цианиды. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,1 г лития гидроксида и 85 мг натрия эдетата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор калия цианида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,125 г калия цианида, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г субстанции, растворяют в воде, прибавляют 0,5 мл раствора калия цианида и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 75 × 7,5 мм, анионообменная смола, 10 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 2,0 мл/мин; |  |
Детектор | электрохимический (прямая амперометрия), рабочий электрод – серебро; электрод сравнения – хлорсеребряный, потенциал окисления +0,05 В, чувствительность детектора –20 нА на всю шкалу; |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика цианида. |

Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения отношение максимум/минимум (p/v) между пиками этосуксимида и цианид-иона должно быть не менее 3,0.

Допустимое содержание цианидов. На хроматограмме испытуемого раствора высота пика цианид-иона не должна превышать половины высоты соответствующего пика на хроматограмме раствора сравнения (0,00005 %).

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,12 г (точная навеска) субстанции в 20 мл диметилформамида. Полученный раствор титруют 0,1 М раствором тетрабутиламмония гидроксида. В процессе титрования раствор защищают от атмосферного углекислого газа. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора тетрабутиламмония гидроксида соответствует 14,12 мг этосуксимида C7H11NO2.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0330 Этравирин Etravirinum)

Вводится впервые

##### Определение

4-{[6-Амино-5-бром-2-(4-цианоанилино)пиримидин-4-ил]окси}-3,5-диметилбензонитрил.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % этравирина C20H15BrN6O в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в диметилсульфоксиде и N,N-диметилформамиде, мало растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца этравирина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика этравирина на хроматограмме раствора фармакопейного стандартного образца этравирина (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). В химический стакан вместимостью 1000 мл помещают 3,08 г (точная навеска) ацетата аммония, растворяют в 900 мл воды, доводят значение pH раствора до 6,0 уксусной кислотой, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол—ацетонитрил 500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции этравирина, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор стандартного образца этравирина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца этравирина, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл переносят 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор стандартного образца примеси 5 этравирина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца примеси 5 этравирина, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца этравирина, прибавляют 1,5 мл раствора стандартного образца примеси 5 этравирина и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора стандартного образца этравирина и доводят объём раствора метанолом до метки.

Примечание

Примесь 1:
4-{[6-амино-2-(4-цианоанилино)пиримидин-4-ил]окси}-3,5-диметилбензонитрил
[939431-68-2].

Примесь 2:
4-{[6-хлор-2-(4-цианоанилино)пиримидин-4-ил]окси}-3,5-диметилбензонитрил
[1070377-34-2].

Примесь 3:
4-{[5-бром-6-хлор-2-(4-цианоанилино)пиримидин-4-ил]окси}-3,5-диметилбензонитрил
[269055-76-7].

Примесь 4:
4-{[6-амино-5-бром-2-(4-цианоанилино)пиримидин-4-ил]окси}-3,5-диметилбензамид
[1706943-59-0].

Примесь 5:
4-{[6-амино-5-хлор-2-(4-цианоанилино)пиримидин-4-ил]окси}-3,5-диметилбензонитрил
[269055-19-8].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Детектор | спектрофотометрический, 303 нм; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–30 | 40 → 10 | 60 → 90
30–40 | 10 | 90
40–45 | 10 → 40 | 90 →60
45–50 | 40 | 60

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор стандартного образца этравирина и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Этравирин – 1 (около 12,8 мин); примесь 4 – около 0,39; примесь 1 – около 0,6; примесь 5 – около 0,93; примесь 2 – около 1,4; примесь 3 – около 1,73.

Идентификация примесей. Для идентификации примесей используют относительное время удерживания примесей, хроматограмму раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и хроматограмму раствора стандартного образца этравирина.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиком примеси 5 и пиком этравирина должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (p/v) для пика этравирина должно быть не менее 15.

На хроматограмме раствора стандартного образца этравирина:

- фактор асимметрии пика (As) этравирина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика этравирина должно быть не более 10 % (6 введений).

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси 3 умножают на 1,25.

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика примесина хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика этравирина на хроматограмме раствора стандартного образца этравирина;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца этравирина, мг;
P – содержание этравирина в фармакопейном стандартном образце этравирина,%.

Допустимое содержание примесей:

- примеси 1, 2, 3, 4 и 5 − не более 0,15 % каждая;

- любая другая примесь − не более 0,10 %;

- сумма всех примесей − не более 1,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор стандартного образца этравирина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца этравирина, растворяют в метаноле и доводят объём раствора метанолом до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–25 | 40 → 10 | 60 → 90
25–30 | 10 → 40 | 90 → 60
30–35 | 40 | 60

Хроматографируют раствор стандартного образца этравирина и испытуемый раствор.

Содержание этравирина C20H15BrN6O в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика этравирина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика этравиринана хроматограмме раствора стандартного образца этравирина;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца этравирина, мг;
P – содержание этравирина в фармакопейном стандартном образце этравирина,%;
W – потеря в массе при высушивании субстанции,%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0331 Эфавиренз (Efavirenzum)

Вводится впервые

##### Определение

(4S)-4-(Трифторметил)-6-хлор-4-(циклопропилэтинил)-1,4-дигидро-2H-3,1-бензоксазин-2-он.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % эфавиренза C14H9ClF3NO2 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворим в метаноле и дихлорметане, практически не растворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр предварительно высушенной при 105 °С в течение 30 мин и охлаждённой в эксикаторе субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца эфавиренза.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика эфавиренза на хроматограмме раствора стандартного образца эфавиренза (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Температура плавления. От 136 до 142 °C (ОФС «Температура плавления»).

Удельное вращение. От –89 до –100 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество
(ОФС «Оптическое вращение»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 30 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Энантиомерная чистота. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Этанол—гексан 30:970.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца эфавиренза рацемического, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

(R)-Энантиомерэфавиренза:
(4R)-4-(трифторметил)-6-хлор-4-(циклопропилэтинил)-1,4-дигидро-2H-3,1-бензоксазин-2-он
[154801-74-8].

Хроматографические условия

Колонка 1 | 250 × 4,6 см, силикагель, модифицированный трис-3,5-диметифенилкарбаматом целлюлозы, 10 мкм; |
Колонка 2 (соединена последовательно с колонкой 1) | 250 × 4,6 см, силикагель нитрильный для хроматографии (1), 5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 250 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 30 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. (S)-Энантиомер эфавиренза – 1; (R)-энантиомер эфавиренза – около 0,88.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками (R)-энантиомера эфавиренза и
(S)- энантиомера эфавиренза должно быть не менее 3,0.

Содержание (R)-энантиомера эфавиренза в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования.

Допустимое содержание примесей. (R)-Энантиомер эфавиренза – не более 0,5 %.

Родственные примеси

Метод 1. Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от действия света и используют свежеприготовленными. Используют только свежеоткрытую трифторуксусную кислоту со сроком хранения не более 6 мес. Для приготовления и хранения растворов, содержащих эфавиренз и его примеси, используют посуду из полипропилена.

Подвижная фаза А (ПФА). Трифтоуксусная кислота—метанол—вода 0,5:100:900.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Трифтоуксусная кислота—метанол—вода 0,5:900:100.

Растворитель. Ацетонитрил—вода 50:50.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 65 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 20 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца эфавиренза. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца эфавиренза, прибавляют 30 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 30 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца примеси 2. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,5 мг фармакопейного стандартного образца примеси 2, прибавляют 30 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 30 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25,0 мл раствора стандартного образца эфавиренза, прибавляют 2,0 мл раствора стандартного образца примеси 2 и доводят объём раствора растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 см, силикагель нитрильный для хроматографии (1), 5 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 250 нм; |  |
Объём пробы | 35 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–16 | 60 → 50 | 40 → 50
16–23 | 50 → 35 | 50 → 65
23–28 | 35 → 30 | 65 → 70
28–29 | 30 → 20 | 70 → 80
29–31 | 20 | 80
31–32 | 20 → 60 | 80 → 40
32–40 | 60 | 40

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Относительное время удерживания соединений (RRT) приведено в таблице 1.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси 2 и эфавиренза должно быть не менее 1,2.

На хроматограмме стандартного раствора относительное стандартное отклонение площади пика эфавиренза должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Фактор отклика. Для расчёта содержания площади пиков примесей делятся на соответствующие факторы отклика. Факторы отклика приведены в таблице 1.

Таблица 1. Характеристика родственных примесей эфавиренза
Примесь (cокращённое название) | Химическое название по ИЮПАК | CAS | RRT | Фактор отклика
--- | --- | --- | --- | ---
Примесь 1 (аминоспиртэфавиренза) | (2S)-2-(2-Амино-5-хлорфенил)-1,1,1-трифтор-4-циклопропилбут-3-ин-2-ол | 209414-27-7 | Около 0,48 | 0,26
Примесь 2 (этеновый аналог эфавиренза) | (4S)-4-(Трифторметил)-6-хлор-4-[(E)-циклопропилэтенил]-1,4-дигидро-2H-3,1-бензоксазин-2-он | 440124-96-9 | Около 0,93 | 0,91
Эфавиренз | – | – | 1 | –
Примесь 3 (пент-3-ен-1-ин (транс) эфавиренз) | (4S)-4-[(3E)-Пент-3-ен-1-ин-1-ил]-4-(трифторметил)-6-хлор-1,4-дигидро-2H-3,1-бензоксазин-2-он | – | Около 1,16 | 1,0
Примесь 4 (пент-3-ен-1-ин (цис) эфавиренз) | (4S)-4-[(3Z)-Пент-3-ен-1-ин-1-ил]-4-(трифторметил)-6-хлор-1,4-дигидро-2H-3,1-бензоксазин-2-он | – | Около 1,16 | 1,0
Примесь 5 (пентенеин эфавиренза) | (4S)-4-(3-Метилбут-3-ен-1-ин-1-ил]-4-(трифторметил)-6-хлор-1,4-дигидро-2H-3,1-бензоксазин-2-он | – | Около 1,16 | 1,0
Примесь 6 (пентиновый аналог эфавиренза) | (4S)-4-(Пент-1-ин-1-ил)-4-(трифторметил)-6-хлор-1,4-дигидро-2H-3,1-бензоксазин-2-он | 205755-86-8 | Около 1,2 | 1,0
Примесь 7 (метилэфавиренз) | 4-[(2-Метилциклопропил)этинил]-4-(трифторметил)-6-хлор-1,4-дигидро-2H-3,1-бензоксазин-2-он | 353270-76-5 | Около 1,28 | 1,0
Примесь 8 (аминоспиртметилкарбаматэфавиренза) | Метил(N-{[(2S)-2-гидрокси-1,1,1-трифтор-4-циклопропилбут-3-ин-2-ил]-4-хлорфенил}карбамат) | 211563-40-5 | Около 1,33 | 0,83
Примесь 9 (аналог хинолина) | 4-(Трифторметил)-6-хлор-2-циклопропилхинолин | 391860-73-4 | Около 1,45 | 2,0
Примесь 10 (амноспирт этилкарбамат эфавиренза) | Этил(N-{[(2S)-2-гидрокси-1,1,1-трифтор-4-циклопропилбут-3-ин-2-ил]-4-хлорфенил}карбамат) | 211563-41-6 | Около 1,53 | 0,83
Примесь 11 | (неизвестная структура) | – | Около 1,60 | 1,0
Примесь 12 (амноспирт бис(этоксикарбонил) эфавиренза) | Этил(N-{[(2S)-1,1,1-трифтор-4-циклопропил-2-[(этоксикарбонил)окси]бут-3-ин-2-ил]-4-хлорфенил}карбамат) | – | Около 1,63 | 0,34
Примесь 13 (N-бензилэфавиренз) | (4S)-1-[(4-Метоксифенил)метил]-4-(трифторметил)-6-хлор-4-(циклопропилэтинил)-1,4-дигидро-2H-3,1-бензоксазин-2-он | 174819-21-7 | Около 1,8 | 0,71
Примесь 14 (бензоиламиноспирт эфавиренза) | N-{2-[(2S)-2-Гидрокси-1,1,1-трифтор-4-циклопропилбут-3-ин-2-ил]-4-хлорфенил}-4-метоксибензамид | 353270-77-6 | Около 1,9 | 0,56
Примесь 15 | (неизвестная структура) | – | Около 2,1 | 1,0
Примесь 16 (аналог циклобутенилиндола) | Этил[3-(трифторметил)-5-хлор-2-(циклобут-2-ен-1-ил)-1H-индол-1-карбоксилат] | – | Около 2,18 | 0,48

Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика эфавиренза на хроматограмме стандартного раствора;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца эфавиренза, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P – содержание эфавиренза в фармакопейном стандартном образце эфавиренза,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь 1 – не более 0,15 %;

- примесь 2 – не более 0,40 %;

- примесь 3 – не более 0,10 %;

- примесь 4 – не более 0,10 %;

- примесь 5 – не более 0,10 %;

- примесь 6 – не более 0,15 %;

- примесь 7 – не более 0,10 %;

- примесь 8 – не более 0,10 %;

- примесь 9 – не более 0,10 %;

- примесь 10 – не более 0,10 %;

- примесь 12 – не более 0,10 %;

- примесь 13 – не более 0,25 %;

- примесь 14 – не более 0,15 %;

- примесь 16 – не более 0,10 %;

- любая другая примесь – не более 0,10 %;

- сумма примесей – не более 1,1 %.

Не учитывают пики менее 0,05 %.

Если содержание примеси(ей) с относительным временем удерживания около 1,16 превышает 0,10 %, то выполняют метод 2.

Метод 2. Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от действия света и используют свежеприготовленными. Используют только свежеоткрытую трифторуксусную кислоту со сроком хранения не более 6 мес. Для приготовления и хранения растворов, содержащих эфавиренз и его примеси, используют посуду из полипропилена.

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил—трифторуксусная кислота—вода 400:0,5:600.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил—трифторуксусная кислота—вода 800:0,5:200.

Растворитель. Ацетонитрил—трифторуксусная кислота—вода 55:0,05:45.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 65 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 20 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор стандартного образца эфавиренза. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца эфавиренза, прибавляют 65 мл растворителя, выдерживают на ультразвуковой бане в течение 20 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 см, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 35 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 250 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–40 | 100 → 0 | 0 → 100
40–45 | 0 | 100
45–45,1 | 0 → 100 | 100 → 0
45,1–50 | 100 | 0

Хроматографируют раствор стандартного образца эфавиренза и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Эфавиренз – 1;
пент-3-ен-1-ин (цис) эфавиренз – около 1,10; пент-3-ен-1-ин (транс) эфавиренз – около 1,13; пентенеин эфавиренза – около 1,14.

Фактор отклика. Для расчёта содержания площади пиков примесей делятся на соответствующие факторы отклика: пент-3-ен-1-ин (цис) эфавиренз –1,1; пент-3-ен-1-ин (транс) эфавиренз – около 1,1; пентенеин эфавиренза – около 1,0.

Содержание каждой из трёх примесей в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика эфавиренза на хроматограмме стандартного раствора;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца эфавиренза, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P – содержание эфавиренза в фармакопейном стандартном образце эфавиренза,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь 3 – не более 0,10 %;

- примесь 4 – не более 0,10 %;

- примесь 5 – не более 0,10 %.

Вода. Не более 0,5 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси. Метод 1».

Стандартный раствор. В качестве стандартного раствора используют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы (раздел «Родственные примеси. Метод 1»).

Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками примеси 2 и эфавиренза должно быть не менее 1,2;

- фактор асимметрии пика (AS) эфавиренза должен быть не более 1,8;

- относительное стандартное отклонение площади пика эфавиренза должно быть не более 1,0 % (6 определений).

Содержание эфавиренза C14H9ClF3NO2 в субстанции в процентах (X) в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество вычисляют по формуле:

где Si - площадь пика каждой из примесей на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика эфавиренза на хроматограмме стандартного раствора;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца эфавиренза, мг;
a1 - навеска субстанции, мг;
P – содержание эфавиренза в фармакопейном стандартном образце эфавиренза,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0332 Эфедрина гидрохлорид

Эфедрин
Ephedrini hydrochloridum

Взамен ВФС 42-1545-85

##### Определение

(1R,2S)-2-(Метиламино)-1-фенилпропан-1-ола гидрохлорид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % эфедрина гидрохлорида C10H15NO·HCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Легко растворим в воде, растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца эфедрина гидрохлорида.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 300 нм должен иметь максимумы при 251 нм, 257 нм и 263 нм и минимумы при 253 нм и 261 нм.

3. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 5 мл воды. Полученный раствор должен давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 217 до 220 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Удельное вращение. От −33,5 до −35,5 в пересчёте на сухое вещество (5 % раствор субстанции, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор субстанции 10 % должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. К 10,0 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 0,1 мл метилового красного раствора 0,05 % и 0,2 мл натрия гидроксида раствора 0,01 М; раствор должен быть жёлтым. Окраска раствора должна изменяться на красную при прибавлении не более 0,4 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 11,6 г аммония ацетата в воде и доводят значение pH уксусной кислотой ледяной до 4,00, переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—буферный раствор 60:940.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 75 мг субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 мг фармакопейного стандартного образца эфедрина гидрохлорида, 5 мг фармакопейного стандартного образца примеси В, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А: (1R)-1-гидрокси-1-фенилпропан-2-он [1798-60-3].

Примесь В: (псевдоэфедрин): (1S,2S)-2-(метиламино)-1-фенилпропан-1-ол [90-82-4].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель фенилсилильный для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 257 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2,5-кратное от времени удерживания пика эфедрина. |

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Эфедрин – 1 (около 8 мин); примесь В – около 1,1; примесь А – около 1,4.

Идентификация примесей. Для идентификации пика примеси А используют относительное время удерживания соединений.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками эфедрина и примеси В должно быть не менее 2,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси А умножают на 0,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна превышать площадь пика эфедрина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,2 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать 0,5 площади пика эфедрина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %);

- сумма площадей пиков всех примесей, кроме примеси А, не должна превышать 2,5 площади пика эфедрина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,25 площади пика эфедрина на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,01 % (раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Сульфаты», метод 2).

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 4 ЕЭ на 1 мг эфедрина гидрохлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 50 мл спирта 96 %, прибавляют 5,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование»). Учитывают объём титранта между двумя точками перегиба на кривой титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 20,17 мг эфедрина гидрохлорид C10H15NO·HCl.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0219 Эфир диэтиловый (Aether diaethylicus)

Взамен ФС.2.1.0219.18

##### Определение

1,1'-Оксидиэтан.

##### Свойства

Описание. Прозрачная, бесцветная, летучая, очень подвижная, легко воспламеняющаяся жидкость с характерным запахом.

* Может содержать нелетучий антиоксидант соответствующей концентрации. Разлагается под действием света, тепла, воздуха и влаги с образованием токсичных альдегидов, пероксидов и кетонов.

При проведении испытаний необходимо учитывать следующие отличительные особенности эфира диэтилового:

- пары эфира с воздухом, кислородом и закисью азота образуют в определённых концентрациях взрывчатую смесь;

- при проведении испытаний поблизости не должны находиться источники огня;

- при определении температуры кипения и нелетучего остатка и при перегонке эфир следует предварительно проверить на содержание пероксидов. При обнаружении пероксидов, указанные испытания не проводят.

Растворимость. Растворим в 15 частях воды, смешивается во всех соотношениях со спиртом 96 % и хлороформом, жирными маслами.

##### Испытания

Температурные пределы перегонки. От 34 до 36 °C (ОФС «Температурные пределы перегонки и точка кипения»). Испытание проводят с использованием подходящего нагревательного оборудования с соблюдением осторожности во избежание прямого нагревания выше уровня жидкости.

Кислотность. Взбалтывают 10 мл субстанции с 10 мл воды, свободной от углерода диоксида; на нейтрализацию отделённого водного слоя не должно расходоваться более 80 мкл натрия гидроксида раствора 0,02 М (индикатор –0,1 мл фенолфталеина раствора 0,1 %).

Плотность. От 0,714 до 0,716 г/см3 (ОФС «Плотность», метод 1).

Нелетучий остаток. Не более 20 мг/л. Выпаривают 50,0 мл субстанции в подходящей ёмкости на водяной бане и высушивают при температуре
100–105 °С. Сухой остаток не должен превышать 1 мг.

Вода. Не более 0,2 %. (ОФС «Определение воды). На испытание отбирают 20 мл субстанции.

Альдегиды. В ёмкость подходящей вместимости помещают 10 мл субстанции, добавляют 1 мл калия тетрайодомеркурата щелочного раствора, встряхивают 10 с, и оставляют на 5 мин в защищённом от света месте. Образовавшийся нижний слой может иметь жёлтую или красновато-коричневую опалесценцию, и не должен иметь серую или чёрную опалесценцию.

Пероксиды. В пробирку или цилиндр с притёртой пробкой, вместимостью 25 мл помещают 20 мл субстанции, прибавляют 2 мл калия йодида раствора 10 %, перемешивают и оставляют на 1 ч в защищённом от света месте. Водный слой сравнивают с исходным раствором йодида калия. Не должно наблюдаться появления жёлтого окрашивания ни эфирного, ни водного слоёв.

Посторонний запах. 10 мл субстанции выливают частями на чистую, не имеющую запаха фильтровальную бумагу размером 5 × 5 см и дают испариться на воздухе. После испарения эфира не должно ощущаться постороннего запаха.

##### Хранение

В герметично укупоренных контейнерах, в защищённом от света, прохладном месте, вдали от огня. После вскрытия упаковки качество субстанции может ухудшиться за короткое время.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0220 Эфир диэтиловый для анестезии (Aether anaestheticus)

Взамен ФС.2.1.0220.18

##### Определение

1,1'-Оксидиэтан.

##### Свойства

Описание. Прозрачная, бесцветная, очень подвижная, легко воспламеняющаяся летучая жидкость с характерным запахом.

* Может содержать нелетучий антиоксидант соответствующей концентрации.

При проведении испытаний необходимо учитывать следующие отличительные особенности эфира диэтилового:

- пары эфира с воздухом, кислородом и закисью азота образуют в определённых концентрациях взрывчатую смесь;

- при проведении испытаний поблизости не должны находиться источники огня;

- при определении температуры кипения и нелетучего остатка и при перегонке эфир следует предварительно проверить на содержание пероксидов. При обнаружении пероксидов, указанные испытания не проводят.

Растворимость. Растворим в 15 частях воды, смешивается во всех соотношениях со спиртом 96 % и хлороформом, жирными маслами.

##### Испытания

Температурные пределы перегонки. От 34,0 до 35,0 °C (ОФС «Температурные пределы перегонки и точка кипения»). Испытание проводят с использованием подходящего нагревательного оборудования и с соблюдением острожности во избежании прямого нагревания выше уровня жидкости.

Кислотность. Взбалтывают 10 мл субстанции с 10 мл воды, свободной от углерода диоксида; на нейтрализацию отделённого водного слоя не должно расходоваться более 80 мкл натрия гидроксида раствора 0,02 М (индикатор –0,1 мл фенолфталеина раствора 0,1 %).

Плотность. От 0,714 до 0,716 г/см3 (ОФС «Плотность», метод 1).

Нелетучий остаток. Не более 20 мг/л. В подходящей ёмкости выпаривают на водяной бане 50,0 мл субстанции и высушивают при температуре 100–105 °С. Сухой остаток, не должен превышать 1 мг.

Вода. Не более 0,2 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 20 мл субстанции.

Ацетон и альдегиды. В ёмкость подходящей вместимости помещают 10 мл субстанции, добавляют 1 мл калия тетрайодомеркурата щелочного раствора, встряхивают 10 с и выдерживают в защищённом от света месте в течение 5 мин. Образовавшийся нижний слой может иметь слабую опалесценцию.

Если субстанция не выдерживает испытание (но соответствует испытанию «Пероксиды»), проводят перегонку 40 мл субстанции при температуре не выше 35 °С до остатка 5 мл. Дистиллят собирают и охлаждают на ледяной бане, затем испытание повторяют снова с 10 мл дистиллята.

Пероксиды. В пробирку или цилиндр с притёртой пробкой, вместимостью 25 мл помещают 20 мл субстанции, прибавляют 2 мл калия йодида раствора 10 %, перемешивают и оставляют на 1 ч в защищённом от света месте. Водный слой сравнивают с исходным раствором йодида калия. Не должно наблюдаться появления жёлтого окрашивания ни эфирного, ни водного слоёв.

Посторонний запах. Выливают частями на чистую, не имеющую запаха фильтровальную бумагу размером 5 × 5 см 10 мл субстанции и дают испариться на воздухе. После испарения эфира не должно ощущаться постороннего запаха.

##### Хранение

В герметично укупоренных контейнерах, в защищённом от света, прохладном месте, вдали от огня.

После вскрытия упаковки качество субстанции может ухудшиться за короткое время. Не использовать для анестезии после 24 часов от вскрытия упаковки.

* Приводится для информации.

### 2.2. Фармацевтические субстанции минерального происхождения

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.2.0040 Азота закись, газ сжиженный

Динитрогена оксид
Nitrogenii oxydulati gasum liquefactum

Вводится впервые

##### Определение

Азота закись.

Содержит не менее 98,0 % объёмной доли закиси азота.

Отбор проб. Отбор пробы субстанции из каждого криоцилиндра производят в пробоотборный баллон с помощью трубки из нержавеющей стали.

Баллон продувают, и после появления первых признаков обморожения баллона производят отбор пробы. Отбор проб из пробоотборного баллона, стоящего в вертикальном положении, производят с помощью редуктора или вентиля тонкой регулировки и соединительной трубки по достижении баллоном температуры помещения, в котором производят анализ.

Систему для отбора проб продувают не менее чем 10-кратным объёмом анализируемого газа. Массу отобранной пробы контролируют методом взвешивания. Для измерения объёма используют стеклянные или электронные расходомеры.

Для поглощения определяемых компонентов используют поглотительные сосуды на рис. 1, склянки для промывания проб газа на рис. 2, или установку для отбора проб газа на рис. 3.

Рисунок 1. Поглотительный сосуд | Рисунок 2. Склянка для промывания газов

Рисунок 3. Схема установки для отбора проб газа из пробоотборного баллона: 1 – регулирующий игольчатый вентиль; 2 – увлажнитель газа (сосуд с водой дистиллированной); 3 – устройство заполненное раствором хрома (VI) оксидом; 4 – расходомер; 5, 6 – абсорберы для поглощения азота диоксида; 7 – термометр.

##### Свойства

Описание. Бесцветный сжиженный газ со слабым характерным запахом.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Колбу коническую из термостойкого стекла вместимостью 500–1000 мл продувают испытуемым газом из пробоотборного баллона в течение 3–5 мин, после чего помещают в колбу тлеющую лучину. Лучина должна вспыхнуть ярким пламенем.

2. Качественная реакция. В два поглотительных сосуда на рис. 1, предварительно продутых чистым газом (азотом или анализируемым газом), помещают по 10 мл пирогаллола щелочного раствора. Через раствор первого сосуда пропускают испытуемый газ со скоростью 10 мл/мин в течение 10 мин. Сравнивают интенсивность окраски испытуемого раствора с контрольным раствором. Интенсивность окраски испытуемого раствора в первом сосуде не должна измениться.

##### Испытания

Кислотность или щёлочность

Испытуемый образец. Газообразная фракция из пробоотборного баллона.

В три пронумерованные склянки для промывания газов на рис. 2 наливают по 100 мл воды, свободной от углерода диоксида, и добавляют в каждую из них по 0,2 мл метилового красного спиртового раствора 0,2 %. В склянку № 2 прибавляют 0,2 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М, в склянку № 3–0,4 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М.

Окраска в склянке № 1 должна быть жёлтой, в склянке № 2 – розовой, в склянке № 3 – розово-красной. Через раствор в склянке № 2 пропускают 3000 см3 азота закиси в течение 25–30 мин. Сравнивают окраску раствора в склянке № 2 с окраской растворов в склянках № 1 и № 3.

Щёлочность – сравнивают окраску раствора в склянке № 2 с окраской раствора в склянке № 1. Окраска раствора в склянке № 2 должна сохранять розовый цвет. Изменение окраски индикатора с розовой на жёлтую свидетельствует о наличии оснований.

Кислотность – розовая окраска раствора в склянке № 2 должна быть слабее, чем в склянке № 3. Изменение окраски индикатора с розовой на малиновую свидетельствует о наличии кислот.

Кислоты и основания должны отсутствовать.

Углерода диоксид и углерода монооксид. Не более 0,03 % (300 ppm) и не более 0,0005 % (5 ppm), соответственно. Определение проводят методом реакционной газовой хроматографии.

Испытуемый образец. Газообразная фракция из пробоотборного баллона.

Хроматографические условия

Колонка | насадочная из нержавеющей стали 3 м × 2 мм, сорбент активированный уголь марки AC с последующим гидрированием водородом до метана в реакторе на никелевом катализаторе; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Расход газа-носителя | 20 мл/мин; |  |
Расход водорода | 25 мл/мин; |  |
Расход воздуха | 250 мл/мин; |  |
Скорость потока | 4 мл/мин (30 см/с); |  |
Температура | термостат колонки | 100 °С; |
| реактор (метанатор) | 325 °С; |
| детектор | 200 °С; |
Объём пробы | 1 мкл. |  |

Количественный расчёт выполняют методом абсолютной градуировки с помощью аттестованных газовых смесей.

Градуировка хроматографа. Готовят по две градуировочные смеси углерода монооксида и диоксида в гелии. Каждую приготовленную градуировочную смесь хроматографируют не менее трёх раз, вводя её в хроматограф при помощи крана-дозатора.

Полученная градуировочная зависимость должна быть линейной и характеризует связь между величиной отклика детектора (площадью пика) и объёмной долей определяемого компонента в пробе.

Выполнение измерений. Пробу азота закиси хроматографируют не менее двух раз. Объёмную долю углерода диоксида и монооксида в азота закиси в млн-1 (ppm) рассчитывают автоматически по площади пика. За результат анализа принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных измерений.

Азота оксиды. Не более 0,0002 % (2 ppm) в пересчёте на азота диоксид. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый образец. Газообразная фракция из пробоотборного баллона.

Градуировочный раствор с концентрацией нитрит-иона 0,001 мг/мл. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,0 мл стандартного образца с концентрацией нитрит-иона 1 мг/мл, доводят объём раствора водой до метки, и перемешивают. Раствор используют свежеприготовленный.

Построение градуировочного графика. В мерные колбы вместимостью 25 мл помещают градуировочный раствор с концентрацией нитрит-ионов 0,001 мг/мл в диапазоне от 0,2 до 2,0 мл с интервалом 0,2 мл. В каждую колбу прибавляют раствор Грисса-Илосвая до объёма 15 мл, перемешивают и через 10 мин измеряют оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 530 нм в кюветах с толщиной слоя 20 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор Грисса-Илосвая.

По полученным данным строят градуировочный график, откладывая по оси абсцисс – массу азота диоксида в мкг, а по оси ординат – соответствующие оптические плотности. Периодичность построения градуировочного графика 1 раз в 3 месяца.

Отбор пробы для анализа производят на установке, схема которой приведена на рис. 3. Увлажнитель газа 2 заполняют на 2/3 водой дистиллированной. В устройство 3 для окисления азота оксида до азота диоксида заливают 3 мл хрома оксида (VI) насыщенного водного раствора, который обновляется в процессе работы 1 раз в сутки. В поглотители 5 и 6 заливают по 15 мл раствора Грисса-Илосвая. Установку подключают к баллону с азота закисью через регулирующий игольчатый вентиль (1) и устанавливают расход газа 0,12 л/мин по расходомеру 4, продувают анализируемым газом до абсорберов в течение 10 мин и производят отбор пробы азота закиси. Объём анализируемого газа должен быть не менее 2,5 л.

После отбора пробы газа отключают установку, отсоединяют абсорберы 5 и 6 и анализируют их содержимое. В процессе отбора пробы газа измеряют температуру газа и атмосферное давление. Содержимое первого и второго по ходу газа абсорбера заливают поочерёдно в кювету и измеряют оптические плотности на спектрофотометре при вышеописанных условиях.

Содержание азота оксида в пересчёте на азота диоксид в процентах вычисляют (X) по формуле:

где С1 и С2 – массы нитрит-ионов, найденные по градуировочному графику из первого и второго поглотителей соответственно, мкг;
2 – коэффициент, учитывающий участие в реакции образования красителя только половины азота диоксида;
22,4 – объём, занимаемый 1 молем газа при нормальных условиях, л;
46 – молярная масса азота диоксида, г/моль;
Vo – объём анализируемого газа, приведённый к нормальным условиям, л.

Объём анализируемого газа Vo в л, приведённый к нормальным условиям, вычисляют (Vo) по формуле:

где P – атмосферное давление в помещении отбора пробы, кПа;
V – объём анализируемого газа, л;
t – температура газа в месте отбора пробы, °С;
273 – температура (°К) при нормальных условиях;
101,3 – давление (кПа) при нормальных условиях, л.

Допускается проводить измерения азота оксидов с помощью детекторных (индикаторных) трубок из газовой фазы азота закиси.

Галогениды

Испытуемый образец. Газообразная фракция из пробоотборного баллона.

Через склянку для промывания газов, содержащую 50 мл воды с добавлением 1 мл раствора серебра нитрата 0,1 М, в течение 25–30 мин пропускают 3000 см3 испытуемого газа.

Раствор должен оставаться бесцветным и прозрачным, не должно наблюдаться опалесценции.

Неконденсирующиеся газы (сумма кислорода и азота). Не более 1,8 %. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый образец. Газообразная фракция из пробоотборного баллона.

Хроматографические условия

Колонка | насадочная колонка из нержавеющей стали 2 м × 3 мм, молекулярное сито; |
Детектор | термокондуктометрический; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Скорость потока | Газ-носитель | 30 мл/мин; |
Температура | Колонка | 100 °С; |
| Детектор | 150 °С; |
Объём пробы | 1,0 мл. |  |

Количественный расчёт выполняют методом абсолютной градуировки с помощью аттестованных газовых смесей.

Градуировка хроматографа. Готовят по две градуировочные смеси кислорода в гелии и азота в гелии. Каждую приготовленную градуировочную смесь хроматографируют не менее трёх раз, вводя её в хроматограф при помощи крана-дозатора. Полученная градуировочная зависимость должна быть линейной и характеризует связь между величиной отклика детектора (площади пика) и объёмной долей определяемого компонента в пробе.

Выполнение измерений. Пробу азота закиси хроматографируют не менее двух раз. Объёмная доля кислорода и азота в азота закиси в млн-1 (ppm) рассчитывается автоматически на основе результатов градуировки хроматографа. За результат анализа принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных измерений.

Водяные пары. Не более 0,13 %.

Испытуемый образец. Газообразная фракция из пробоотборного баллона.

Определение объёмной доли водяных паров проводят на гигрометре, предназначенном для измерения точки росы в неагрессивных газовых средах.

Измерение точки росы проводится с помощью сенсора влажности сорбционно-ёмкостного типа. Принцип работы чувствительного элемента точки росы основан на зависимости диэлектрической проницаемости влагочувствительного слоя от влажности окружающей среды. Объёмную долю водяных паров в% (ppm) рассчитывают по таблице из инструкции, прилагаемой к прибору.

##### Количественное определение

Испытуемый образец. Газообразная фракция из пробоотборного баллона.

Определение проводят с использованием инфракрасного анализатора на рис. 4, принцип действия которого основан на методе недисперсионного инфракрасного поглощения.

Рисунок 4. Принципиальная схема газоаналитического анализатора: BV1-BV3 – краны, F1 – фильтр, RT1 – расходомер.

Диапазоны измерений азота закиси в газоанализаторе: 0–100 % и 95–100 %. Калибровку анализатора выполняют в измерительном диапазоне 0…​100 %, используя «нулевой» газообразный азот и поверочную газовую смесь (ПГС) с максимальным (около 100 %) содержанием азота закиси.

Анализ проводят по инструкции, прилагаемой к прибору.

Пробу подают на вход 1, маркированный как «Вход пробы», она поступает в кран BV1 и далее проходит через кран BV3, который установлен в режим подачи пробы. В фильтре F1 подвергается тонкой механической очистке и поступает в расходомер RT1, с помощью которого устанавливают необходимый расход пробы. В анализаторе происходит измерение объёмной доли азота закиси.

При калибровке баллон с ПГС подключают к входу 2 с последующим переводом крана BV3 в калибровочное положение. Далее ПГС проходит через те же агрегаты и подвергается тем же процессам, что и испытуемый газ.

##### Хранение

Вдали от источников отопления и источников открытого огня при температуре от –35 °С до +35 °С.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0045 Аммиака раствор концентрированный

Аммиак
Ammoniae solutio concentrata

Взамен ФС 42-1299-79

NH3 | М.м. 17,03

##### Определение

Аммиак.

Содержит не менее 25,0 % (м/м) и не более 30,0 % (м/м) аммиака NH3.

##### Свойства

Описание. Прозрачная бесцветная летучая жидкость с резким запахом.

* Сильно щелочной.

Растворимость. Смешивается с водой и спиртом 96 %.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. При поднесении к субстанции стеклянной палочки, смоченной хлористоводородной кислотой разведённой 10 %, должен образоваться белый дым.

2. Качественная реакция. К 0,5 мл субстанции прибавляют 5,0 мл воды. Через полученный раствор пропускают воздух. Выходящий воздух подводят к раствору, содержащему 1,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и 0,05 мл метилового красного раствора 0,05 %. Цвет раствора должен меняться с красного на жёлтый. При прибавлении 1,0 мл натрия кобальтинитрита раствора 10 % должен образоваться жёлтый осадок.

##### Испытания

Плотность. От 0,892 до 0,910 г/см3 (ОФС «Плотность», метод 1).

Прозрачность раствора. Раствор 2,0 мл субстанции в 8 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Пиридин и родственные вещества. Не более 0,0002 %. Оптическая плотность субстанции, измеренная при длине волны 252 нм, должна быть не более 0,06. В качестве раствора сравнения используют воду.

Остаток при выпаривании. Не более 20 мг/л. Выпаривают 50 мл субстанции досуха на водяной бане и сушат при температуре 100–105 °C в течение 1 ч. Масса остатка не должна превышать 1 мг.

Восстанавливающие вещества. К 3 мл субстанции прибавляют 5,0 мл воды, 40 мл серной кислоты разведённой 16 % и 0,1 мл калия перманганата раствора 0,1 М, нагревают до кипения. Полученный раствор не должен обесцвечиваться в течение 5 мин.

Железо. Не более 0,000025 % (ОФС «Железо», метод 2). Выпаривают 220 мл субстанции на водяной бане, охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 1,0 мл уксусной кислоты разведённой 12 %, доводят до 20 мл водой (Раствор А). К 4,0 мл полученного раствора прибавляют 6,0 мл воды.

Карбонаты. Не более 0,006 %. В колбу с притёртой пробкой помещают 10 мл субстанции, прибавляют 10 мл воды, 40 мл известковой воды. Полученный раствор должен оставаться прозрачным.

Сульфаты. Не более 0,0005 %. (ОФС «Сульфаты», метод 2). Смешивают 3,0 мл раствора А, приготовленного в испытании «Железо», с 12 мл воды.

Сульфиды. Подкисляют 5,0 г (5,5 мл) субстанции уксусной кислотой разведённой 12 % до слабокислой реакции по индикаторной бумаге, прибавляют 0,1 мл йода раствора 0,05 М и 1 мл крахмала раствора 1 %. Должно образоваться синее окрашивание.

Хлориды. Не более 0,0001 % (ОФС «Хлориды»). Смешивают 3,0 мл раствора А, приготовленного в испытании «Железо», с 8 мл воды.

Тяжёлые металлы. Не более 0,0001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 1). Смешивают 4,0 мл раствора А, приготовленного в испытании «Железо», с 20 мл воды.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В предварительно взвешенную колбу с притёртой пробкой вместимостью 100 мл помещают из бюретки 50 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М, прибавляют 2,0 мл (точный объём) субстанции и снова взвешивают. В качестве индикатора прибавляют 0,1 мл метилового красного спиртового раствора 0,1 %. Полученный раствор титруют 1 М раствором натрия гидроксида до перехода окраски с красной на жёлтую.

1 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М соответствует 17,03 мг аммиака NH3.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0047 Аммония хлорид (Ammonii chloridum)

Взамен ФС 42-1492-86

##### Определение

Хлорид аммония.

Содержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % аммония хлорида NH4Cl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Раствор 0,2 г субстанции в 25 мл воды должен давать характерную реакцию на аммоний (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

2. Качественная реакция. Раствор 0,2 г субстанции в 25 мл воды должен давать характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 25 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,5 до 6,0 (10 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаток после прокаливания. Не более 0,1 %. Помещают 1 г (точная навеска) субстанции во взвешенный фарфоровый тигель, предварительно доведённый до постоянной массы, постепенно нагревают и прокаливают при температуре 500 °С до постоянной массы.

Органические примеси. Растворяют 0,5 г субстанции в 0,5 мл азотной кислоты и упаривают на водяной бане; остаток должен оставаться белым.

Барий. Растворяют 0,5 г субстанции в 10 мл воды, прибавляют 1 мл серной кислоты разведённой 16 %; не должно наблюдаться помутнение раствора в течение 5 мин.

Бромиды и йодиды. Растворяют 1,0 г субстанции в 10 мл воды, прибавляют 0,1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 10 % и 0,05 мл хлорамина раствора 2 %. Через 1 мин к полученному раствору прибавляют 2 мл хлороформа и взбалтывают; слой хлороформа должен оставаться бесцветным.

Железо. Не более 0,002% (ОФС «Железо», метод 1). Растворяют 1,5 г субстанции в 10 мл воды.

Кальций. Не более 0,02 % (ОФС «Кальций», метод 1). Растворяют 1,5 г субстанции в 10 мл воды.

Мышьяк. Не более 0,0001 % (ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения используют 0,5 г субстанции.

Сульфаты. Не более 0,01 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Растворяют 1 г субстанции в 10 мл воды.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 2 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 1). Растворяют 1 г субстанции в 10 мл воды.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в 30 мл воды и титруют 0,1 М раствором серебра нитрата до перехода окраски в оранжево-жёлтую (индикатор – 0,5 мл калия хромата раствора 5 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 5,349 мг аммония хлорида NH4Cl.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0002 Борная кислота (Acidum boricum)

Взамен ФС.2.2.0002.15

##### Определение

Борная кислота.

Содержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % борной кислоты H3BO3.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок, бесцветные блестящие, жирные на ощупь пластинки или белые или почти белые кристаллы.

Растворимость. Легко растворим в кипящей воде и глицерине 85 %, растворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Растворяют 3,3 г субстанции в 80 мл кипящей воды. Раствор охлаждают и доводят объём раствора до 100 мл водой, свободной от углерода диоксида. К 10 мл полученного раствора прибавляют 0,1 мл метилового красного раствора 0,05 %; должно появиться красно-оранжевое окрашивание.

2. Качественная реакция. Растворяют 1,0 г субстанции в 10 мл кипящего спирта 96 %. К 3 мл полученного раствора прибавляют 1 мл серной кислоты концентрированной и перемешивают. При зажигании смесь должна гореть пламенем, окаймлённым зелёным цветом.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор субстанции 3,3 % в воде должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН. От 3,8 до 4,8 (3,3 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Сульфаты. Не более 0,045 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Определение проводят с использованием эталонного раствора, содержащего 9 мл стандартного раствора сульфат-иона (10 мкг/мл) и 1 мл воды. Растворяют 5,0 г субстанции в 20 мл кипящей воды. Раствор охлаждают, доводят объём водой до 25 мл и фильтруют. Доводят 1 мл фильтрата водой до 10 мл.

Тяжёлые металлы. Не более 0,0015 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 1 или 2). Растворяют 5,0 г субстанции в 20 мл кипящей воды. Раствор охлаждают, доводят объём водой до 25 мл и фильтруют. Доводят 5 мл фильтрата водой до 10 мл. Для приготовления эталонного раствора к 3 мл свинца стандартного раствора 5 мкг/мл прибавляют 7 мл воды.

Органические примеси. Субстанция не должна темнеть при красном калении.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 1,0 г (точная навеска) субстанции при нагревании в 100 мл маннитола раствора 20 %, предварительно нейтрализованного по фенолфталеину натрия гидроксида раствором 0,1 М, охлаждают и титруют 1 М раствором натрия гидроксида до перехода окраски в розовую (индикатор – 2 капли фенолфталеина раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 1 М раствора натрия гидроксида соответствует 61,83 мг борной кислоты H3BO3.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0022 Вода для гемодиализа (Aqua ad haemodialysem)

##### Определение

Вода, используемая для разбавления концентрированных растворов для проведения гемодиализа.

##### Производство

Воду для гемодиализа получают путём дистилляции, обратного осмоса, ионного обмена или любым другим подходящим методом из воды, соответствующей нормативным требованиям, установленным к воде питьевой. Воду для гемодиализа производят, хранят и транспортируют в условиях, предотвращающих рост микроорганизмов и исключающих любое другое загрязнение.

Необходимо учитывать возможное присутствие остаточных количеств очистителей воды (например, хлораминов) и летучих галогенированных углеводородов.

Для контроля качества воды для гемодиализа используют следующие методы определения химического состава и/или обнаружения присутствия возможных примесей.

##### Свойства

Описание. Прозрачная, бесцветная жидкость.

##### Испытания

Кислотность или щёлочность. К 10 мл испытуемого образца воды, свежепрокипячённой и охлаждённой в колбе из боросиликатного стекла, прибавляют 0,05 мл метилового красного раствор 0,05 %. Раствор не должен окрашиваться в красный цвет. К 10 мл испытуемого образца прибавляют 0,1 мл бромтимолового синего раствор 0,05 %. Раствор не должен окрашиваться в синий цвет.

Восстанавливающие вещества. К 100 мл испытуемого образца прибавляют 10 мл серной кислоты разведённой 9,8 % и 0,1 мл 0,02 М раствора калия перманганата и кипятят в течение 5 мин. Бледно-розовое окрашивание должно сохраниться.

Свободный хлор. Не более 0,1 ppm.

В пробирку (А) вместимостью 125 мл последовательно помещают 5 мл буферного раствора рН 6,5, 5 мл диэтилфенилендиамина сульфата раствор и 1 г калия йодида. Во вторую пробирку (Б) вместимостью 125 мл помещают последовательно 5 мл буферного раствора рН 6,5 и 5 мл диэтилфенилендиамина сульфата раствор. Одновременно в пробирку А прибавляют 100 мл испытуемого образца, в пробирку Б – раствор сравнения.

Раствор сравнения. К 1 мл раствора 10 мг/л калия йодата прибавляют 1 г калия йодида и 1 мл серной кислоты разведённой 9,8%; выдерживают в течение одной мин, прибавляют 1 мл натрия гидроксида раствора 8,5 % и доводят водой до объёма 100 мл.

Любая окраска в смеси, полученной с испытуемым образцом, не должна быть интенсивнее окраски в смеси, полученной с раствором сравнения.

Хлориды (ОФС «Хлориды», методика 1). Не более 50 ppm.

1 мл испытуемого образца разводят водой до объёма 15 мл.

Фториды (ОФС «Ионометрия, метод 1»). Не более 0,2 ppm.

Испытуемый раствор. Испытуемый образец.

Фторида стандартный раствор 1 мкг/мл. Непосредственно перед использованием фторида стандартный раствор 10 мкг/мл разводят водой в 10 раз.

Растворы сравнения. Разводят 2,0 мл, 4,0 мл и 10,0 мл фторида стандартного раствора 1 мкг/мл, соответственно буферным раствором для регулирования ионной силы (1) до объёма 20,0 мл.

Индикаторный электрод: фторид-селективный.

Электрод сравнения: хлорсеребряный.

Проводят измерение каждого раствора.

Нитраты. Не более 2 ppm.

2 мл испытуемого образца разводят водой, свободной от нитратов, до объёма 100 мл. 5 мл полученного раствора помещают в пробирку, погружённую в ледяную воду, прибавляют 0,4 мл раствора 100 г/л калия хлорида и 0,1 мл дифениламина раствор 0,1 %, а затем по каплям и при встряхивании 5 мл серной кислоты концентрированной. Пробирку помещают на водяную баню при температуре 50 °С. Оставляют на 15 мин. Любая синяя окраска раствора по интенсивности не должна превышать окраску раствора сравнения, приготовленного одновременно и таким же образом с использованием смеси 0,1 мл нитрата стандартного раствора 2 мкг/мл и 4,9 мл воды, свободной от нитратов.

Сульфаты (ОФС «Сульфаты», методика 1). Не более 50 ppm.

3 мл испытуемого образца разводят водой дистиллированной до объёма 15 мл.

Алюминий (ОФС «Алюминий», метод 1). Не более 0,01 ppm.

Испытуемый раствор. К 400 мл испытуемого образца прибавляют 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 и 100 мл воды.

Раствор сравнения. Смешивают 2 мл алюминия стандартного раствора 2 мкг/мл, 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 и 98 мл воды.

Контрольный раствор. Смешивают 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 и 100 мл воды.

Аммоний. Не более 0,2 ppm.

К 20 мл испытуемого образца в плоскодонной прозрачной пробирке прибавляют 1 мл калия тетрайодомеркурата щелочного раствора. Выдерживают в течение пяти мин. Раствор не должен быть окрашен более интенсивно, чем раствор сравнения, приготовленный одновременно и таким же способом из смеси 4 мл аммония стандартного раствора 1 мкг/мл и 16 мл воды, свободной от аммиака. Растворы просматривают вдоль вертикальной оси пробирки.

Кальций. Не более 2 ppm.

Атомно-абсорбционная спектрометрия (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 1).

Испытуемый раствор. Испытуемый образец.

Растворы сравнения. Готовят растворы сравнения (от 1 ppm до 5 ppm), используя кальция стандартный раствор 400 мкг/мл.

Условия испытания:

- источник: кальциевая лампа с полым катодом;

- длина волны: 422,7 нм;

- атомизация: воздушно-ацетиленовое пламя.

Магний. Не более 2 ppm.

Атомно-абсорбционная спектрометрия (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 1).

Испытуемый раствор. 10 мл испытуемого образца разводят водой дистиллированной до объёма 100 мл.

Растворы сравнения. Готовят растворы сравнения (от 0,1 ppm до 0,5 ppm), используя магния стандартный раствор 100 мкг/мл.

Условия испытания:

- источник: магниевая лампа с полым катодом;

- длина волны: 285,2 нм;

- атомизация: воздушно-ацетиленовое пламя.

Ртуть. Не более 0,001 ppm.

Атомно-абсорбционная спектрометрия (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 1).

Испытуемый раствор. Прибавляют 5 мл азотной кислоты концентрированной на литр испытуемого образца. Помещают 20 мл испытуемого образца в колбу из боросиликатного стекла вместимостью 50 мл с притёртой пробкой, прибавляют 1 мл азотной кислоты разведённой 12,5 % и встряхивают. Прибавляют 0,3 мл бромной воды. Закрывают колбу пробкой, встряхивают и нагревают закупоренную колбу при температуре 45 °С в течение 4 ч. Охлаждают. Если раствор не становится жёлтым, прибавляют 0,3 мл бромной воды и снова нагревают при температуре 45 °С в течение 4 ч. Прибавляют 0,5 мл свежеприготовленного раствора 10 г/л гидроксиламина гидрохлорида, встряхивают, выдерживают в течение 20 мин.

Растворы сравнения. Используют свежеприготовленные растворы сравнения (от 0,0005 ppm до 0,002 ppm), полученные разбавлением ртути стандартного раствора 1 мг/мл 5 % (об/об) раствором азотной кислоты разведённой 12,5 %, и подготовленные, как описано для испытуемого раствора.

К объёму раствора, подходящему для используемого прибора, прибавляют 1/5 объёма олова(II) хлорида раствор 8 %. Подключают к атомно-абсорбционному анализатору. Ожидают в течение 20 с и пропускают через прибор поток азота в качестве газа-носителя.

Условия испытания:

- источник: ртутная трубка с полым катодом или газоразрядная лампа;

- длина волны: 253,7 нм;

- атомизация: беспламенная система, в которой ртуть находится в виде холодного пара.

Калий. Не более 2 ppm.

Атомно-эмиссионная спектрометрия (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия, метод 1»).

Испытуемый раствор (а). 50,0 мл испытуемого образца разводят водой дистиллированной до объёма 100 мл. Проводят испытание, используя этот раствор. Если содержание калия превышает 0,75 мг/л, дополнительно разводят испытуемый образец водой дистиллированной.

Испытуемый раствор (б). К 50,0 мл испытуемого образца или, при необходимости, к испытуемому образцу, разбавленному, как описано в приготовлении испытуемого раствора (а) прибавляют 1,25 мл калия стандартного раствора 20 мкг/мл и доводят объём полученного раствора до 100,0 мл водой дистиллированной.

Растворы сравнения. Готовят растворы сравнения (0 ppm; 0,25 ppm; 0,50 ppm; 0,75 ppm; 1 ppm), используя калия стандартный раствор 20 мкг/мл.

Длина волны: 766,5 нм.

Содержание калия в испытуемом образце в миллионных долях (X) вычисляют по формуле:

Натрий. Не более 50 ppm.

Атомно-эмиссионная спектрометрия (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия», метод 1).

Испытуемый раствор. Испытуемый образец. Если содержание натрия превышает 10 мг/л, испытуемый образец разводят водой дистиллированной до концентрации, подходящей для используемого аппарата.

Растворы сравнения. Готовят растворы сравнения (0 ppm; 2,5 ppm; 5,0 ppm; 7,5 ppm; 10 ppm), используя натрия стандартный раствор 200 мкг/мл.

Длина волны: 589 нм.

Цинк. Не более 0,1 ppm.

Атомно-абсорбционная спектрометрия (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия», метод 1): для отбора проб и испытания используют оборудование, не содержащее цинка или не способное выделять цинк в условиях эксплуатации.

Испытуемый раствор. Испытуемый образец.

Растворы сравнения. Готовят растворы сравнения (от 0,05 ppm до 0,15 ppm), используя цинка стандартный раствор 100 мкг/мл.

Условия испытания:

- источник: цинковая лампа с полым катодом;

- длина волны: 213,9 нм;

- атомизация: воздушно-ацетиленовое пламя.

Тяжёлые металлы (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 4). Не более 0,1 ppm.

Испытуемый раствор. Нагревают 200 мл испытуемого образца в стеклянной выпаривательной чашке на водяной бане до уменьшения объёма до 20 мл.

Раствор сравнения. Готовят, используя свинца стандартный раствор 1 мкг/мл.

Микробиологическая чистота. Должна выдерживать следующее требование испытания на микробиологическую чистоту:

- общее число аэробных микроорганизмов – не более 102 КОЕ в 1 г (мл) (ОФС «Микробиологическая чистота»);

- отсутствие Pseudomonas aeruginosa в 100 мл (ОФС «Микробиологическая чистота»).

Бактериальные эндотоксины (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Менее 0,25 МЕ/мл.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0019 Вода для инъекций (Aqua ad iniectabile)

H2O | Mr 18,02

#### Вода для инъекций нефасованная

##### Определение

Вода, используемая для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

##### Производство

Воду для инъекций получают из воды, которая соответствует требованиям качества воды, предназначенной для потребления человеком, или из воды очищенной путём:

- перегонки в аппарате, части которого, контактирующие с водой, изготовлены из нейтрального стекла, кварца или подходящего металла и, который оснащён эффективным устройством для предотвращения захватывания капель;

- или очистки, эквивалентной дистилляции. Подходящим является обратный осмос, который может быть однопроходным или двухпроходным в сочетании с другими подходящими методами, такими как электродеионизация, ультрафильтрация или нанофильтрация.

Для всех методов производства необходимы регулярный мониторинг работы и техническое обслуживание системы. Для обеспечения надлежащего качества воды применяют валидированные процедуры, текущий контроль электропроводности, а также регулярный контроль общего органического углерода подходящим валидированным методом и микробного загрязнения.

Первую порцию воды, полученную в начале работы системы, сбрасывают.

Вода для инъекций хранится и транспортируется в условиях, предотвращающих рост микроорганизмов и исключающих любое другое загрязнение.

Микробиологический мониторинг. Во время производства и последующего хранения применяют соответствующие меры для обеспечения надлежащего контроля и мониторинга количества микроорганизмов. Для обнаружения неблагоприятных тенденций установлено соответствующее предельное допустимое количество микроорганизмов для предупреждающих и корректирующих действий. Предельно допустимое количество аэробных микроорганизмов составляет 10 КОЕ на 100 мл. Время хранения проб должно быть обосновано. Определение проводят методом мембранной фильтрации с использованием не менее 200 мл испытуемого образца, фильтров с номинальным размером пор не более 0,45 мкм и агара R2A. Инкубируют при температуре от 30 °С до 35 °С в течение не менее пяти дней. Для асептического производства, как правило, применяют более строгие уровни тревоги (уровни предупреждения) в рамках микробиологического мониторинга.

Агар R2A

Дрожжевой экстракт | 0,5 г
Протеозный пептон | 0,5 г
Гидролизат казеина | 0,5 г
Глюкоза | 0,5 г
Крахмал растворимый | 0,5 г
Дикалия гидрофосфат | 0,3 г
Магния сульфат безводный | 0,024 г
Натрия пируват | 0,3 г
Агар микробиологический | 15,0 г
Вода очищенная | до 1000 мл

Доводят значение pH таким образом, чтобы после стерилизации оно составляло 7,2 ± 0,2. Стерилизуют, нагревая в автоклаве при температуре 121 °C в течение 15 мин.

Подготовка тест-штаммов. Готовят суспензии тест-штаммов микроорганизмов, выращенных в условиях, указанных в таблице 1, в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота» или используют стандартизированные стабильные суспензии. Выращивают каждый из бактериальных штаммов отдельно. В качестве альтернативы приготовлению и последующему разведению свежей суспензии вегетативных клеток Bacillus spizizenii (Bacillus subtilis), готовят стабильную суспензию спор, а затем соответствующий объём суспензии спор используют для инокуляции. Стабильная суспензия спор может храниться при температуре от 2 °C до 8 °C в течение валидированного периода времени.

Проверка ростовых свойств питательной среды. Тестируют каждую партию готовой среды и каждую партию среды, приготовленную либо из сухой питательной среды, либо из описанных ниже компонентов. Отдельно инокулируют чашки с агаром R2A небольшим количеством (не более 100 КОЕ) микроорганизмов, указанных в таблице 1. Инкубируют в условиях, описанных в таблице 1. Оценку полученного количества микроорганизмов проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Таблица 1. Проверка ростовых свойств агара R2A
Микроорганизм | Приготовление тест штамма | Условия испытания
--- | --- | ---
Pseudomonas aeruginosa, ATCC 9027 NCIMB 8626 CIP 82.118 NBRC 13275 NCTC 12924 ГКПМ 190155 | Соево-казеиновый агар или соево-казеиновый бульон 30–35 °С 18–24 ч. | Агар R2A Не более 100 КОЕ 30–35 °С Не более 3 дней
Bacillus spizizenii (Bacillus subtilis), ATCC 6633 NCIMB 8054 CIP 52.62 NBRC 3134 NCTC 10400 DSM 347 ГКПМ 010011 | Соево-казеиновый агар или соево-казеиновый бульон 30–35 °С 18–24 ч. | Агар R2A Не более 100 КОЕ 30–35 °С Не более 3 дней

Общий органический углерод. Не более 0,5 мг/л (ОФС «Содержание общего органического углерода в воде для фармацевтического применения»).

Электропроводность. Определяют электропроводность автономно или на производственной линии при следующих условиях.

ОБОРУДОВАНИЕ

Кондуктометрическая ячейка:

- электроды из подходящего материала, например нержавеющей стали;

- константа ячейки обычно устанавливается поставщиком и впоследствии проверяется через соответствующие интервалы времени с использованием сертифицированного стандартного раствора с электропроводностью менее 1500 мкСм∙см−1 или путём сравнения с ячейкой, имеющей аттестованную константу ячейки. Константу ячейки считают подтверждённой, если найденное значение находится в пределах 2 % от значения, указанного в сертификате; в противном случае должна быть проведена повторная калибровка.

Кондуктометр. Точность измерения должна быть не менее 0,1 мкСм∙см−1 в низшем диапазоне.

Калибровка системы (кондуктометрической ячейки и кондуктометра). Калибровку проводят с использованием одного или более соответствующих стандартных растворов (ОФС «Электропроводность»). Допустимое отклонение должно составлять не более 3 % от измеренного значения электропроводности + 0,1 мкСм∙см−1.

Калибровка кондуктометра. Калибровку проводят для всех используемых интервалов измерений после отсоединения ячейки электропроводности. Используют сертифицированные резисторы высокой точности или эквивалентные приборы с погрешностью не более 0,1 % от сертифицированного значения.

Если отсоединение кондуктометрической ячейки, вмонтированной в производственную линию, невозможно, калибровка системы может быть выполнена с помощью предварительно откалиброванного прибора для измерения электропроводности с ячейкой электропроводности, расположенной рядом с калибруемой ячейкой в потоке воды.

Измерение температуры. Погрешность ± 2 °C.

МЕТОДИКА

Стадия 1

1. Измеряют электропроводность без температурной компенсации с одновременной регистрацией температуры. Измерение электропроводности с помощью кондуктометров с температурной компенсацией возможно только после соответствующей валидации.

2. Используя таблицу 2, определяют ближайшее значение температуры, не превышающее измеренную температуру. Соответствующее значение электропроводности является предельно допустимым при этой температуре. Не допускается интерполяция в случае, когда значение измеренной температуры отсутствует в таблице 2.

Таблица 2. Предельно допустимые значения электропроводности воды для инъекций в зависимости от температуры
Температура, °С | Электропроводность, мкСм∙см−1 | Температура, °С | Электропроводность, мкСм∙см−1
--- | --- | --- | ---
0 | 0,6 | 55 | 2,1
5 | 0,8 | 60 | 2,2
10 | 0,9 | 65 | 2,4
15 | 1,0 | 70 | 2,5
20 | 1,1 | 75 | 2,7
25 | 1,3 | 80 | 2,7
30 | 1,4 | 85 | 2,7
35 | 1,5 | 90 | 2,7
40 | 1,7 | 95 | 2,9
45 | 1,8 | 100 | 3,1
50 | 1,9 | – | –

3. Если измеренная электропроводность не превышает предельного значения, приведённого в таблице 2, вода для инъекций соответствует требованиям испытания на электропроводность. Если величина электропроводности превышает значение, приведённое в таблице 2, переходят к стадии 2.

Стадия 2

4. В подходящую ёмкость помещают достаточное количество воды для инъекций (100 мл или более). При необходимости регулируют температуру и, поддерживая её от 24 °С до 26 °С, начинают интенсивное перемешивание, периодически наблюдая за электропроводностью. Когда изменение электропроводности (из-за поглощения атмосферного диоксида углерода) будет меньше, чем 0,1 мкСм∙см−1 за 5 мин, фиксируют это значение электропроводности.

5. Если значение электропроводности не более 2,1 мкСм∙см−1, вода для инъекций соответствует требованиям по электропроводности. Если значение электропроводности более 2,1 мкСм∙см−1, переходят к стадии 3.

Стадия 3

6. Испытание выполняют в течение примерно 5 мин после определения электропроводности на шаге 5, поддерживая температуру воды для инъекций от 24 °С до 26 °С. Прибавляют свежеприготовленный насыщенный раствор калия хлорида в ту же пробу (0,3 мл на 100 мл испытуемого образца) и определяют pH с точностью до 0,1.

7. Используя таблицу 3, определяют предельное значение электропроводности при измеренном значении рН на шаге 6. Если измеренная электропроводность на шаге 4 стадии 2 не превышает значения, приведённого в таблице 3, определённого на шаге 6, вода для инъекций соответствует требованиям по электропроводности. Если измеренная электропроводность превышает это значение или рН находится вне диапазона 5,0–7,0, вода для инъекций не соответствует требованиям по электропроводности.

Таблица 3. Предельно допустимые значения электропроводности воды для инъекций в зависимости от рН
рН | Электропроводность, мкСм∙см−1 | рН | Электропроводность, мкСм∙см−1
--- | --- | --- | ---
5,0 | 4,7 | 6,1 | 2,4
5,1 | 4,1 | 6,2 | 2,5
5,2 | 3,6 | 6,3 | 2,4
5,3 | 3,3 | 6,4 | 2,3
5,4 | 3,0 | 6,5 | 2,2
5,5 | 2,8 | 6,6 | 2,1
5,6 | 2,6 | 6,7 | 2,6
5,7 | 2,5 | 6,8 | 3,1
5,8 | 2,4 | 6,9 | 3,8
5,9 | 2,4 | 7,0 | 4,6
6,0 | 2,4 | – | –

##### Свойства

Описание. Бесцветная, прозрачная жидкость.

##### Испытания

Алюминий (ОФС «Алюминий», метод 1). Не более 0,01 ppm. Испытание проводят для воды для инъекций нефасованной, предназначенной для использования в производстве растворов для диализа.

Испытуемый раствор. К 400 мл испытуемого образца прибавляют 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 и 100 мл воды дистиллированной.

Раствор сравнения. Смешивают 2 мл алюминия стандартного раствора 2 мкг/мл, 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 и 98 мл воды дистиллированной.

Контрольный раствор. Смешивают 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 и 100 мл воды дистиллированной.

Бактериальные эндотоксины (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Менее 0,25 МЕ/мл.

#### Вода для инъекций стерильная

##### Определение

Вода, используемая для растворения или разведения субстанций и лекарственных препаратов для парентерального применения.

Вода для инъекций нефасованная, разлитая в подходящие ёмкости, закрытая и стерилизованная нагреванием в условиях, обеспечивающих соответствие препарата испытанию на бактериальные эндотоксины. Не содержит никаких дополнительных веществ.

При визуальной проверке в подходящих условиях раствор должен быть прозрачным и бесцветным.

Каждая ёмкость содержит достаточное количество воды для инъекций, позволяющее набрать номинальный объём.

##### Испытания

Электропроводность. Не более 25 мкСм∙см−1 для ёмкостей номинальным объёмом 10 мл и менее; не более 5 мкСм·см−1 для ёмкостей номинальным объёмом более 10 мл.

Испытание проводят с использованием оборудования и процедуры калибровки, как описано в разделе Вода для инъекций нефасованная, температуру образца поддерживают от 24 °C до 26 °C.

Восстанавливающие вещества. Для ёмкостей номинальным объёмом менее 50 мл: 100 мл испытуемого образца доводят до кипения с 10 мл серной кислоты разведённой 9,8 %, прибавляют 0,4 мл 0,02 М раствора калия перманганата и кипятят в течение 5 мин; бледно-розовое окрашивание должно сохраниться.

Для ёмкостей номинальным объёмом, равным или превышающим 50 мл: 100 мл испытуемого образца доводят до кипения с 10 мл серной кислоты разведённой 9,8 %, прибавляют 0,2 мл 0,02 М раствора калия перманганата и кипятят в течение 5 мин; бледно-розовое окрашивание должно сохраниться.

Алюминий (ОФС «Алюминий», метод 1). Не более 0,01 ppm. Испытание проводят для воды для инъекций стерильной, предназначенной для использования в производстве растворов для диализа.

Испытуемый раствор. К 400 мл испытуемого образца прибавляют 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 и 100 мл воды дистиллированной.

Раствор сравнения. Смешивают 2 мл алюминия стандартного раствора 2 мкг/мл, 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 и 98 мл воды дистиллированной.

Контрольный раствор. Смешивают 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 и 100 мл воды дистиллированной.

Сухой остаток. Не более 4 мг (0,004 %) для ёмкостей номинальным объёмом 10 мл или менее; не более 3 мг (0,003 %) для ёмкостей номинальным объёмом более 10 мл.

Выпаривают 100 мл испытуемого образца досуха на водяной бане и высушивают при температуре от 100°С до 105°С до постоянной массы.

Невидимые механические включения (ОФС «Невидимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения»). Испытуемый образец должен выдерживать испытание метода 1 или метода 3, по необходимости.

Видимые механические включения (ОФС «Видимые механические включения в лекарственных формах для парентерального применения и глазных лекарственных формах»). Должна выдерживать требования испытания на видимые механические включения.

Извлекаемый объём (ОФС «Извлекаемый объём лекарственных форм для парентерального применения»). Не менее номинального.

Стерильность (ОФС «Стерильность»). Испытуемый образец должен выдерживать требования испытания на стерильность.

Бактериальные эндотоксины (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Менее 0,25 МЕ/мл.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0020 Вода очищенная (Aqua purificata)

H2O | Mr 18,02

#### Вода очищенная нефасованная

##### Определение

Вода для производства лекарственных средств, кроме тех, которые должны быть стерильными и апирогенными, если нет другого обоснования.

Для производства лекарственных средств в асептических условиях, воду очищенную необходимо подвергать стерилизации.

##### Производство

Воду очищенную получают путём дистилляции, ионного обмена, обратного осмоса, комбинацией этих методов или любым другим подходящим методом из воды, соответствующей нормативным требованиям, установленным к воде питьевой. Нефасованная очищенная вода хранится и транспортируется в условиях, предотвращающих рост микроорганизмов и исключающих любое другое загрязнение.

Микробиологический мониторинг. Во время производства и последующего хранения применяют соответствующие меры для обеспечения надлежащего контроля и мониторинга количества микроорганизмов. Для обнаружения неблагоприятных тенденций установлено соответствующее предельное допустимое количество микроорганизмов для предупреждающих и корректирующих действий. Предельно допустимое количество аэробных микроорганизмов составляет 100 КОЕ/мл. Время хранения проб должно быть обосновано. Определение проводят методом мембранной фильтрации с использованием подходящего объёма испытуемого образца, фильтров с номинальным размером пор не более 0,45 мкм и агара R2A. Инкубируют при температуре от 30 °С до 35 °С в течение не менее 5 дней.

Агар R2A

Дрожжевой экстракт | 0,5 г
Протеозный пептон | 0,5 г
Гидролизат казеина | 0,5 г
Глюкоза | 0,5 г
Крахмал растворимый | 0,5 г
Дикалия гидрофосфат | 0,3 г
Магния сульфат безводный | 0,024 г
Натрия пируват | 0,3 г
Агар микробиологический | 15,0 г
Вода очищенная | до 1000 мл

Доводят значение pH таким образом, чтобы после стерилизации оно составляло 7,2 ± 0,2. Стерилизуют, нагревая в автоклаве при 121 °C в течение 15 минут.

Подготовка тест-штаммов. Готовят суспензии тест-штаммов микроорганизмов, выращенных в условиях, указанных в таблице 1, в соотвествии с ОФС «Микробиологическая чистота» или используют стандартизированные стабильные суспензии. Выращивают каждый из бактериальных штаммов отдельно. В качестве альтернативы приготовлению и последующему разведению свежей суспензии вегетативных клеток Bacillus spizizenii (Bacillus subtilis), готовят стабильную суспензию спор, а затем соответствующий объём суспензии спор используют для инокуляции. Стабильная суспензия спор может храниться при температуре от 2 °C до 8 °C в течение валидированного периода времени.

Проверка ростовых свойств питательной среды. Тестируют каждую партию готовой среды и каждую партию среды, приготовленную либо из сухой питательной среды, либо из описанных ниже компонентов. Отдельно инокулируют чашки с агаром R2A небольшим количеством (не более 100 КОЕ) микроорганизмов, указанных в таблице 1. Инкубируют в условиях, описанных в таблице 1. Оценку полученного количества микроорганизмов проводят в соотвествии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Таблица 1. Проверка ростовых свойств агара R2A
Микроорганизм | Приготовление тест штамма | Условия испытания
--- | --- | ---
Pseudomonas aeruginosa, ATCC 9027 NCIMB 8626 CIP 82.118 NBRC 13275 NCTC 12924 ГКПМ 190155 | Соево-казеиновый агар или соево-казеиновый бульон 30–35 °С 18–24 ч. | Агар R2A Не более 100 КОЕ 30–35 °С Не более 3 дней
Bacillus spizizenii (Bacillus subtilis), ATCC 6633 NCIMB 8054 CIP 52.62 NBRC 3134 NCTC 10400 DSM 347 ГКПМ 010011 | Соево-казеиновый агар или соево-казеиновый бульон 30–35 °С 18–24 ч. | Агар R2A Не более 100 КОЕ 30–35 °С Не более 3 дней

Использование других питательных сред допустимо при условии их валидации применительно к конкретным системам производства воды очищенной.

Общий органический углерод. Не более 0,5 мг/л (ОФС «Содержание общего органического углерода в воде для фармацевтического применения»).

Допускается проведение альтернативного теста на восстанавливающие вещества: к 100 мл воды очищенной прибавляют 10 мл серной кислоты разведённой 9,8 % и 0,1 мл 0,02 М раствора калия перманганата, кипятят в течение 5 мин; розовое окрашивание должно сохраниться.

Электропроводность. Определяют электропроводность автономно или на производственной линии при следующих условиях.

ОБОРУДОВАНИЕ

Кондуктометрическая ячейка:

- электроды из подходящего материала, такого как нержавеющая сталь;

- константа ячейки обычно устанавливается поставщиком и впоследствии проверяется через соответствующие интервалы времени с использованием сертифицированного стандартного раствора с электропроводностью менее 1500 мкСм·см−1 или путём сравнения с ячейкой, имеющей аттестованную константу ячейки. Константа ячейки считается подтверждённой, если найденное значение находится в пределах 2 % от значения, указанного в сертификате; в противном случае должна быть проведена повторная калибровка.

Кондуктометр. Точность измерения должна быть не менее 0,1 мкСм·см−1 в низшем диапазоне.

Калибровка системы (кондуктометрической ячейки и кондуктометра). Калибровка должна проводиться с использованием одного или более соответствующих стандартных растворов (ОФС «Электропроводность»). Допустимое отклонение должно составлять не более 3 % от измеренного значения электропроводности ± 0,1 мкСм·см−1.

Калибровка кондуктометра. Калибровку проводят для всех используемых интервалов измерений после отсоединения ячейки электропроводности. Используют сертифицированные резисторы высокой точности или эквивалентные приборы с погрешностью не более 0,1 % от сертифицированного значения.

Если отсоединение кондуктометрической ячейки, вмонтированной в производственную линию, невозможно, калибровка системы может быть выполнена с помощью предварительно откалиброванного прибора для измерения электропроводности с ячейкой электропроводности, расположенной рядом с калибруемой ячейкой в потоке воды.

Измерение температуры. Погрешность ± 2 °C.

МЕТОДИКА

Стадия 1

1. Одновременно определяют температуру и электропроводность воды очищенной без температурной компенсации. Измерение электропроводности с помощью кондуктометров с температурной компенсацией возможно только после соответствующей валидации.

2. Используя таблицу 2, определяют ближайшее значение температуры, не превышающее измеренную температуру. Соответствующее значение электропроводности является предельным. Не допускается интерполяция в случае, когда значение измеренной температуры отсутствует в таблице 2.

Таблица 2. Предельно допустимые значения электропроводности воды очищенной в зависимости от температуры
Температура, °С | Электропроводность, мкСм∙см−1 | Температура, °С | Электропроводность, мкСм∙см−1
--- | --- | --- | ---
0 | 0,6 | 55 | 2,1
5 | 0,8 | 60 | 2,2
10 | 0,9 | 65 | 2,4
15 | 1,0 | 70 | 2,5
20 | 1,1 | 75 | 2,7
25 | 1,3 | 80 | 2,7
30 | 1,4 | 85 | 2,7
35 | 1,5 | 90 | 2,7
40 | 1,7 | 95 | 2,9
45 | 1,8 | 100 | 3,1
50 | 1,9 | – | –

3. Если измеренная электропроводность не превышает предельного значения, приведённого в таблице 2, вода очищенная соответствует требованиям по электропроводности. Если величина электропроводности выше табличного значения, переходят к стадии 2.

Стадия 2

4. В подходящую ёмкость помещают достаточное количество воды очищенной и перемешивают. При необходимости регулируют температуру и, поддерживая ее на уровне от 24 °С до 26 °С, начинают интенсивное перемешивание, периодически наблюдая за электропроводностью. Когда изменение электропроводности (из-за поглощения атмосферного диоксида углерода) будет меньше, чем 0,1 мкСм·см−1 за 5 мин, фиксируют это значение электропроводности. На этой стадии допускается измерение электропроводности как с температурной компенсацией до 25 °С, так и без температурной компенсации.

5. Если значение электропроводности не превышает 2,1 мкСм·см−1, вода очищенная соответствует требованиям по электропроводности. Если величина электропроводности превышает 2,1 мкСм·см−1, переходят к стадии 3.

Стадия 3

6. Испытание выполняют в течение примерно 5 минут после определения электропроводности на шаге 5, поддерживая температуру воды очищенной на уровне от 24 °С до 26 °С. Прибавляют свежеприготовленный насыщенный раствор калия хлорида в ту же пробу (0,3 мл на 100 мл испытуемого образца) и определяют pH с точностью до 0,1.

7. По таблице 3 определяют предельное значение электропроводности при измеренном значении pH. Если измеренная на шаге 4 электропроводность не превышает табличного значения, определённого на шаге 6, вода очищенная соответствует требованиям по электропроводности. Если измеренная электропроводность превышает это значение или pH находится вне диапазона 5,0–7,0, вода очищенная не соответствует требованиям по электропроводности.

Таблица 3. Предельно допустимые значения электропроводности воды очищенной в зависимости от рН
рН | Электропроводность, мкСм∙см−1 | рН | Электропроводность, мкСм∙см−1
--- | --- | --- | ---
5,0 | 4,7 | 6,1 | 2,4
5,1 | 4,1 | 6,2 | 2,5
5,2 | 3,6 | 6,3 | 2,4
5,3 | 3,3 | 6,4 | 2,3
5,4 | 3,0 | 6,5 | 2,2
5,5 | 2,8 | 6,6 | 2,1
5,6 | 2,6 | 6,7 | 2,6
5,7 | 2,5 | 6,8 | 3,1
5,8 | 2,4 | 6,9 | 3,8
5,9 | 2,4 | 7,0 | 4,6
6,0 | 2,4 | – | –

Элементные примеси. Если нефасованная очищенная вода не соответствует требованиям по электропроводности, проводится оценка риска в соответствии с ОФС «Элементные примеси». При оценке риска следует учитывать роль воды в производственном процессе, в частности, когда вода используется в процессе, но больше не присутствует в конечном продукте.

##### Свойства

Описание. Бесцветная, прозрачная жидкость.

##### Испытания

Алюминий (ОФС «Алюминий», метод 1). Не более 0,01 ppm. Испытание проводят для воды очищенной нефасованной, предназначенной для использования в производстве растворов для диализа.

Испытуемый раствор. К 400 мл испытуемого образца прибавляют 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 и 100 мл воды дистиллированной.

Раствор сравнения. Смешивают 2 мл алюминия стандартного раствора 2 мкг/мл, 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 и 98 мл воды дистиллированной.

Контрольный раствор. Смешивают 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 и 100 мл воды дистиллированной.

Бактериальные эндотоксины (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Менее 0,25 МЕ/мл. Испытание проводят для воды очищенной нефасованной, предназначенной для использования в производстве растворов для диализа без последующей процедуры удаления бактериальных эндотоксинов.

#### Вода очищенная фасованная

##### Определение

Вода очищенная нефасованная, разлитая и хранящаяся в условиях, обеспечивающих необходимое микробиологическое качество. Не содержит никаких дополнительных веществ.

##### Свойства

Описание. Бесцветная, прозрачная жидкость.

##### Испытания

Вода очищенная фасованная соответствует требованиям испытаний, указанных в разделе «Вода очищенная нефасованная», и следующих дополнительных испытаний.

Электропроводность. Не более 5 мкСм·см−1. Испытание проводят в соответствии с методикой, описанной в разделе «Производство», начиная со стадии 2. Пропуск стадии 1 обусловлен поглощением атмосферного диоксида углерода испытуемой водой очищенной при отборе проб. Поглощение приводит к образованию проводящих ионов (H+ и HCO3-), что может вызывать ложноположительные результаты на стадии 1. Выщелачивание ионов из ёмкостей при хранении также может приводить к недостоверным результатам.

Восстанавливающие вещества. К 100 мл испытуемого образца прибавляют 10 мл серной кислоты разведённой 9,8 % и 0,1 мл 0,02 М раствора калия перманганата, кипятят в течение 5 мин; розовое окрашивание должно сохраниться.

Сухой остаток. Не более 0,001 %. Выпаривают 100 мл испытуемого образца и сушат при температуре от 100 °С до 105 °С до постоянной массы. Масса остатка должна составлять не более 1 мг.

Микробиологическая чистота. Должна выдерживать следующее требование испытания на микробиологическую чистоту: общее число аэробных микроорганизмов – не более 102 КОЕ/мл. Испытание проводят с использованием соево-казеинового агара.

##### Хранение

Воду очищенную фасованную хранят и транспортируют в условиях, предотвращающих рост микроорганизмов и исключающих возможность любой другой контаминации.

##### Маркировка

Указывают, если применимо, что вода очищенная пригодна для производства растворов для диализа.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0005 Водорода пероксид (Hydrogenii peroxidum)

Взамен ФС.2.2.0005.15

##### Определение

Пероксид водорода.

Cодержит не менее 30,0 % и не более 40,0 % водорода пероксида Н2О2.

##### Свойства

Описание. Бесцветная прозрачная жидкость.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. К 1 мл субстанции прибавляют 0,2 мл серной кислоты разведённой 16 % и 0,25 мл калия перманганата раствора 0,02 М; раствор должен постепенно обесцветиться с выделением газа.

2. Качественная реакция. К 0,1 мл субстанции прибавляют 0,2 мл серной кислоты разведённой 16 %, 2 мл эфира, 0,2 мл калия дихромата раствора 5 % и взбалтывают; эфирный слой должен окраситься в синий цвет.

##### Испытания

Кислотность. К 10 мл субстанции прибавляют 100 мл воды и 0,25 мл метилового красного раствора 0,05 %. Цвет раствора должен измениться при прибавлении не более 0,7 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида.

Нелетучий остаток. Не более 0,06 %.

В платиновую чашку, высушенную до постоянной массы, помещают 50 мл воды и 10,0 мл субстанции. После окончания интенсивного разложения водорода пероксида (по прекращению выделения пузырьков газа) чашку помещают на водяную баню, выпаривают досуха и высушивают в сушильном шкафу при температуре 105–110 °С до постоянной массы.

Тяжёлые металлы. Не более 0,005 % (ОФС «Тяжёлые металлы, метод 3А). Для определения 1 мл испытуемого раствора доводят водой до 10 мл.

Испытуемый раствор. К 20 мл субстанции прибавляют 2 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и выпаривают на водяной бане досуха. Остаток доводят водой до 10 мл.

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде, доводят объём раствора тем же растворителем до метки и перемешивают. К 10,0 мл полученного раствора прибавляют 5 мл серной кислоты разведённой 16 % и титруют 0,02 М раствором калия перманганата до слабо розового окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,02 М раствора калия перманганата соответствует 1,701 мг водорода пероксида Н2О2.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте, при температуре не выше 15 °С.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0049 Гелий

Гелий
Helium

Вводится впервые

He [7440-59-7] | А.м. 4,00

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Гелий, газ сжиженный или сжатый.

Содержит не менее 99,98 % (о/о) гелия.

Отбор проб. Сжиженный газ предварительно переводят в газообразное состояние. Отбор проб сжатого газа производят из вертикально расположенного баллона по достижении им температуры помещения, в котором производится анализ.

Пробу гелия из баллона отбирают в прибор для анализа или в пробоотборник специальной конструкции, предназначенный для отбора газов, при помощи редуктора или вентиля тонкой регулировки и соединительной трубки от точки отбора пробы до прибора или пробоотборника. Соединительную трубку и пробоотборник продувают не менее чем 10-кратным объёмом испытуемого образца.

При определении объёмной доли водяных паров должна использоваться соединительная трубка из коррозионностойкой стали с внутренним диаметром не более 4 мм, предварительно высушенная или прокалённая.

##### СВОЙСТВА

Описание. Бесцветный газ без запаха. Не воспламеняется, не поддерживает горение.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Газовая хроматография (ГХ). Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого образца должно соответствовать времени удерживания пика гелия на хроматограмме стандартного образца гелия (раздел «Количественное определение»).

##### ИСПЫТАНИЯ

Углерода монооксид. Не более 0,001 % о/о (10 ppm).

Определение проводят одним из методов 2, 3 или 5 ОФС «Примеси углерода диоксида и углерода оксида в газах медицинских».

ИК-спектрометрия. Определение проводят методом ИК-спектрометрии (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»).

Стандартный газ А (для калибровки нуля). Азот газообразный особой чистоты (с объёмной долей азота не менее 99,999 % и объёмной долей кислорода не более 0,0005 %).

Стандартный газ Б. Смесь (эталонный газ) с содержанием углерода монооксида 10 ppm о/о.

Калибруют аппаратуру и устанавливают подходящую чувствительность с использованием стандартных газов А и Б. Определяют содержание углерода монооксида в испытуемом образце.

Газовая хроматография (ОФС «Газовая хроматография», рис. 1).

Рисунок 1. Схема устройства газового хроматографа для анализа газообразных проб: 1 – испытуемый газ; 2 – регулятор давления; 3 – реометр; 4 – кран-дозатор; 5 – дозирующая петля; 6 – колонка с термостатом; 7 – детектор; 8 – газ-носитель с системой регулирования потока газа; 9 – фильтр-осушитель; 10 – делитель потока газа; 11 – система сбора данных.

Стандартный образец углерода монооксида. Смесь, содержащая 0,001 % (о/о) углерода монооксида.

Хроматографические условия

Колонка | 2 м × 1 мм, углеродное молекулярное сито, 152–178 мкм; |
Детектор | термохимический; |
Газ-носитель | сухой воздух; |
Скорость потока | 10 мл/мин; |
Объём пробы | 250 мкл; |
Температура | колонка | 75 ºС;
| детектор | 75 ºС;
Время хроматографирования | 5 мин. |

Хроматографируют стандартный образец углерода монооксида и испытуемый образец.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного образца углерода монооксида:

- относительное стандартное отклонение площади пика углерода монооксида должно быть не более 10 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пика углерода монооксида должно быть не более 2 % (6 введений).

Содержание углерода монооксида в испытуемом образце в объёмных процентах вычисляют согласно методу внешнего стандарта (ОФС «Хроматография»).

С помощью индикаторной трубки

Определение проводят с помощью индикаторной трубки на углерода монооксид согласно руководству по эксплуатации.

Метан. Не более 0,005 % о/о (50 ppm).

Определение проводят одним из приведённых методов.

ИК-спектрометрия. Определение проводят методом ИК-спектрометрии (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»).

Испытуемый образец должен быть отфильтрован для исключения явлений рассеянного света (фильтр 3 мкм).

Стандартный газ А. Гелий для хроматографии.

Стандартный газ Б. Смесь, содержащая 50 ppm о/о метана в гелии для хроматографии.

Инфракрасный анализатор для газов, как правило, состоит из источника широкополосного инфракрасного излучения, оптического устройства, ячейки (камеры) для образца, детектора, а в некоторых анализаторах – ячейки сравнения. Оптическое устройство может располагаться как до, так и после ячейки с образцом. Оно состоит из одного или нескольких оптических фильтров, через которые пропускается широкополосное излучение. Выбирается оптическое устройство, пригодное для определения метана. Измеряемый световой пучок проходит через ячейку для образца, а в некоторых анализаторах и через ячейку сравнения. При наличии метана в ячейке с образцом происходит поглощение энергии измеряемого светового пучка в соответствии с законом Ламберта-Бера, что приводит к изменению сигнала детектора. Этот измерительный сигнал сравнивается с эталонным сигналом, в результате чего формируется выходной сигнал, зависящий от концентрацией метана. Для определения содержания метана полученный сигнал линеаризуется.

Калибруют аппаратуру и устанавливают подходящую чувствительность с использованием стандартных газов А и Б. Измеряют содержание метана в испытуемом образце.

Газовая хроматография. Определение проводят одновременно с определением углерода монооксида методом газовой хроматографии (ОФС «Газовая хроматография, рис. 1).

Стандартный образец метана. Смесь, содержащая 50 ppm о/о метана.

Порядок выхода пиков: углерода монооксид, метан. Разрешение между данными пиками должно составлять не менее 1,5.

Содержание метана в испытуемом образце в объёмных процентах вычисляют согласно методу внешнего стандарта (ОФС «Хроматография»).

Кислород. Не более 0,005 % о/о (50 ppm).

Определение проводят одним из методов 2 или 4 ОФС «Примесь кислорода в газах медицинских».

Электрохимический анализ

Определение проводят с помощью электрохимического анализатора кислорода, имеющего шкалу детектора в диапазоне 0–100 ppm.

Испытуемый газ проходит через детектирующую ячейку, содержащую водный раствор электролита, обычно калия гидроксида. Присутствие кислорода в испытуемом газе приводит к изменению регистрируемого на выходе из ячейки электрического сигнала, пропорциональному содержанию кислорода.

Калибруют анализатор в соответствии с инструкцией производителя. Пропускают через анализатор испытуемый газ с заданной скоростью потока с помощью подходящего регулятора давления и герметичных металлических трубок до получения постоянных показаний.

Газовая хроматография. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография).

Стандартный образец кислорода. Смесь, содержащая 50 ppm о/о кислорода и 50 ppm о/о азота в гелии.

Хроматографические условия

Колонка | 2 м × 1 мм, молекулярное сито, 149–177 мкм; |
Детектор | детектор по теплопроводности; |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |
Скорость потока | 10 мл/мин; |
Объём пробы | 250 мкл; |
Температура | колонка | 50 ºС;
| детектор | 50 ºС;
Время хроматографирования | 5 мин. |

Порядок выхода пиков: кислород, азот.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного образца:

- разрешение (RS) между пиками должно быть не менее 1,5;

- относительное стандартное отклонение площадей пиков кислорода и азота должно быть не более 10 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пика углерода диоксида должно быть не более 2 % (6 введений).

Содержание кислорода в испытуемом образце в объёмных процентах вычисляют согласно методу внешнего стандарта (ОФС «Хроматография»).

Вода. Не более 0,009 % о/о (90 ppm). Определение проводят в соответствии с ОФС «Вода в газах медицинских» (метод 2 или 3).

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят одним из приведённых методов.

Метод 1. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Стандартный образец гелия. Гелий для хроматографии.

Хроматографические условия

Колонка | 2 м × 4,5 мм, молекулярное сито, 0,5 нм; |
Детектор | детектор по теплопроводности; |
Газ-носитель | аргон для хроматографии; |
Скорость потока | 60 мл/мин; |
Объём образца | 500 мкл; |
Температура | колонка | 50 ºС;
| детектор | 150 ºС.

Хроматографируют стандартный образец гелия и испытуемый образец.

Настраивают объёмы вводимых образцов и условия работы таким образом, чтобы высота пика, соответствующего гелию составляла не менее 35 % от полной шкалы прибора.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного образца гелия фактор асимметрии пика (AS) гелия должен быть не менее 0,6.

Содержание гелия в испытуемом образце в объёмных процентах вычисляют согласно методу внешнего стандарта (ОФС «Хроматография»).

Метод 2. Определение проводят расчётным методом.

Содержание гелия в испытуемом образце в объёмных процентах (X) вычисляют по формуле:

где ΣXi – суммарное содержание примесей углерода монооксида, метана и кислорода, ppm;
XW – вода, ppm.

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Газы медицинские», в сжиженном или сжатом виде.

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0048 Гидразина сульфат (Hydrazini sulfas)

Взамен ФС 42-3744-99

##### Определение

Сульфат гидразина.

Cодержит не менее 99,0 % гидразина сульфата N2H4·H2SO4 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый кристаллический порошок.

Растворимость. Умеренно растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1, снятый в вазелиновом масле, по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гидразина сульфата.

2. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 1 мл воды, прибавляют 2,5 мл диметиламинобензальдегида раствора 2 %; должно появиться оранжево-красное окрашивание.

3. Качественная реакция. Раствор 10 мг субстанции в 1 мл воды должен давать характерную реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Температура плавления. От 248 до 253 °С (с разложением, ОФС «Температура плавления», метод 1).

pH. От 1,3 до 1,7 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы при температуре 120±10 °С.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 50 мг (точная навеска) субстанции при нагревании на водяной бане в 20 мл воды, охлаждают раствор до комнатной температуры, прибавляют 1 г натрия гидрокарбоната и медленно титруют 0,05 М раствором йода до появления жёлтой окраски, не исчезающей в течение 5 мин.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора йода соответствует 3,253 мг гидразина сульфата N2H4·H2SO4.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0054 Вода для инъекций для аптек (Aqua pro injectionibus pro officinis)

H2O | Mr 18,02

##### Определение

Вода для инъекций для аптек – это вода для инъекций, предназначенная для изготовления лекарственных препаратов для парентерального применения и других лекарственных препаратов, когда вода для инъекций используется в качестве растворителя.

#### Вода для инъекций для аптек нефасованная

##### Получение

Вода для инъекций для аптек нефасованная может быть получена из воды, соответствующей всем требованиям к воде, предназначенной для потребления человеком (питьевой воде), или из воды очищенной нефасованной одним из следующих методов:

- методом дистилляции с использованием оборудования, детали которого, контактирующие с водой, изготовлены из нейтрального стекла, кварцевого стекла или подходящего металла и, которое обеспечено эффективным устройством для предотвращения захвата капель;

- методом очистки, эквивалентной дистилляции, например, обратным осмосом, который может быть однопроходным или двухпроходным, в сочетании с другими подходящими методами, такими как электродеионизация, ультрафильтрация или нанофильтрация.

При получении воды для инъекций для аптек необходимо надлежащее содержание и техническое обслуживание оборудования. Первую порцию воды, полученную в начале работы, отбрасывают.

Вода для инъекций стерильная – это вода для инъекций для аптек нефасованная, разлитая в подходящие герметично укупоренные ёмкости, простерилизованная при температуре 120–122 °С под давлением 120 кПа в течение установленного времени, предназначенная, как правило, для лекарственных препаратов для парентерального применения и других стерильных лекарственных препаратов, изготавливаемых в асептических условиях, исключающих финишную стерилизацию лекарственных препаратов в конечной упаковке, а также для растворения или разведения фармацевтических субстанций или лекарственных препаратов с целью получения лекарственных препаратов для парентерального применения. Вода для инъекций стерильная не должна содержать антимикробных консервантов или других веществ.

Ежедневный контроль качества воды для инъекций. Требования к контролю качества воды для инъекций, предназначенной для изготовления лекарственных препаратов, определяются правилами изготовления и отпуска лекарственных препаратов для медицинского применения аптечными организациями, имеющими лицензию на фармацевтическую деятельность, утверждёнными уполномоченным федеральным органом исполнительной власти.

В аптечных организациях полученная вода для инъекций ежедневно из каждого баллона, а при подаче воды по трубопроводу – на каждом рабочем месте, подвергается контролю качества на отсутствие хлоридов, сульфатов, солей кальция и магния, восстанавливающих веществ, углерода диоксида, на содержание солей аммония, также производится контроль значения pH.

##### Свойства

Описание. Бесцветная, прозрачная жидкость.

##### Испытания

рН (ОФС «Ионометрия», метод 3). От 5,0 до 7,0. К 100 мл воды для инъекций прибавляют 0,3 мл калия хлорида насыщенного раствора, погружают электроды прибора в испытуемый раствор и определяют значение рН.

Хлориды. К 10 мл воды для инъекций прибавляют 1 мл азотной кислоты разведённой 12,5 % и 0,2 мл серебра нитрата раствора 1,7 %. В течение не менее 15 мин не должно быть видимых изменений внешнего вида раствора.

Сульфаты. К 10 мл воды для инъекций прибавляют 0,1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % и 0,1 мл бария хлорида раствора 6,1 %. В течение не менее 1 ч не должно быть видимых изменений внешнего вида раствора.

Кальций и магний. К 100 мл воды для инъекций прибавляют 2 мл аммония хлорида буферного раствора рН 10,0, 50 мг эриохрома чёрного Т индикаторной смеси и 0,5 мл 0,01 М раствора натрия эдетата. Должно появиться чисто синее окрашивание.

Восстанавливающие вещества. К 100 мл воды для инъекций прибавляют 10 мл серной кислоты разведённой 9,8 % и 0,1 мл 0,02 М раствора калия перманганата, кипятят в течение 5 мин. Должно сохраниться розовое окрашивание раствора.

Соли аммония. Не более 0,00002% (0,2 ppm). В пробирку помещают 20 мл воды для инъекций, прибавляют 1,0 мл калия тетрайодмеркурата щелочного раствора. Через 5 мин раствор просматривают вдоль вертикальной оси пробирки. Окраска полученного раствора должна быть не интенсивнее окраски раствора сравнения, приготовленного одновременно таким же образом путём прибавления 1,0 мл калия тетрайодомеркурата щелочного раствора к смеси из 4 мл аммония стандартного раствора 1 мкг/мл и 16 мл воды, свободной от аммиака.

Углерода диоксид. Взбалтывают воду для инъекций с равным объёмом кальция гидроксида раствора (известковой воды) в наполненном доверху и хорошо закрытом сосуде. В течение 1 ч не должно наблюдаться помутнение.

#### Ежеквартальный контроль качества воды для инъекций

##### Свойства

Описание. Бесцветная, прозрачная жидкость.

##### Испытания

Общий органический углерод (ОФС «Содержание общего органического углерода в воде для фармацевтического применения»).
Не более 0,5 мг/л.

Электропроводность (ОФС «Электропроводность»).

Испытание проводят автономно или, если применимо, в режиме реального времени.

ОБОРУДОВАНИЕ

Кондуктометрическая ячейка:

- электроды должны быть из подходящего материала, например, из нержавеющей стали;

- константа ячейки обычно устанавливается поставщиком и впоследствии проверяется через соответствующие интервалы времени с использованием сертифицированного стандартного раствора с электропроводностью менее 1500 мкСм·см−1 или путём сравнения с ячейкой, имеющей аттестованную константу ячейки. Константа ячейки считается подтверждённой, если найденное значение находится в пределах 2 % от значения, указанного в сертификате; в противном случае должна быть проведена повторная калибровка.

Кондуктометр: точность измерения должна быть не менее 0,1 мкСм·см−1 в низшем диапазоне.

Калибровка системы (кондуктометрической ячейки и кондуктометра): калибровка должна проводиться с использованием одного или более соответствующих стандартных растворов (ОФС «Электропроводность). Допустимое отклонение должно составлять не более 3 % от измеренного значения электропроводности плюс 0,1 мкСм·см−1.

Калибровку кондуктометра проводят для всех используемых интервалов измерений после отсоединения ячейки электропроводности. Используют сертифицированные резисторы высокой точности или эквивалентные приборы с погрешностью не более 0,1 % от сертифицированного значения.

Если отсоединение кондуктометрической ячейки, вмонтированной в систему получения воды для инъекций, невозможно, то калибровка системы может быть выполнена с помощью предварительно откалиброванного прибора для изменения электропроводности с ячейкой электропроводности, расположенной рядом с калибруемой ячейкой в потоке воды.

Измерение температуры: погрешность ± 2° С.

МЕТОДИКА

Стадия 1

1. Измеряют электропроводность без температурной компенсации с одновременной регистрацией температуры. Измерение электропроводности с помощью кондуктометров с температурной компенсацией возможно только после соответствующей валидации.

2. По таблице 1 находят измеренное значение температуры, не превышающее измеренную температуру. Соответствующее значение электропроводности является предельно допустимым при этой температуре. Не допускается интерполяция, если значение измеренной температуры отсутствует в таблице 1.

Таблица 1. Стадия 1. Предельно допустимые значения электропроводности воды для инъекций в зависимости от температуры (измерение без температурной компенсации)
Температура, ° С | Электропроводность, мкСм·см−1 | Температура, ° С | Электропроводность, мкСм·см−1
--- | --- | --- | ---
0 | 0,6 | 55 | 2,1
5 | 0,8 | 60 | 2,2
10 | 0,9 | 65 | 2,4
15 | 1,0 | 70 | 2,5
20 | 1,1 | 75 | 2,7
25 | 1,3 | 80 | 2,7
30 | 1,4 | 85 | 2,7
35 | 1,5 | 90 | 2,7
40 | 1,7 | 95 | 2,9
45 | 1,8 | 100 | 3,1
50 | 1,9 | – | –

3. Если измеренная электропроводность не превышает предельного значения, указанного в таблице 1, то вода для инъекций соответствует требованиям испытания на электропроводность. Если измеренная электропроводность превышает значение, приведённое в таблице 1, то испытания продолжают в соответствии с требованиями стадии 2.

Стадия 2

4. В подходящую ёмкость помещают достаточное количество воды для инъекций (100 мл или более). Устанавливают температуру и, поддерживая её в пределах от 24 °С до 26 °С, начинают интенсивное перемешивание испытуемого образца, периодически, через каждые 5 мин, наблюдая за электропроводностью. Когда изменение электропроводности (вследствие поглощения атмосферного углерода диоксида) за 5 мин составит менее 0,1 мкСм·см−1, фиксируют это значение электропроводности.

5. Если значение электропроводности не превышает 2,1 мкСм·см−1, то испытуемая вода для инъекций соответствует требованиям по электропроводности. Если значение электропроводности превышает 2,1 мкСм·см−1, то испытания продолжают в соответствии с требованиями стадии 3.

Стадия 3

6. Испытание выполняют в течение приблизительно 5 мин после определения электропроводности в соответствии с пунктом 5 стадии 2, поддерживая температуру воды для инъекций в пределах от 24 °С до 26 °С. Прибавляют свежеприготовленный калия хлорида насыщенный раствор к воде для инъекций (0,3 мл на 100 мл испытуемого образца воды для инъекций) и определяют pH раствора с точностью до 0,1 (ОФС «Ионометрия», метод 3).

7. По таблице 2 определяют предельное значение электропроводности при измеренном, как указано в пункте 6, значении рН. Если измеренное значение электропроводности, как указано в пункте 4 стадии 2, не превышает требуемое значение электропроводности для данного рН, то вода для инъекций соответствует требованиям по электропроводности. Если же измеренная электропроводность превышает это значение или значение рН находится вне диапазона 5,0–7,0, то вода для инъекций не соответствует требованиям по показателю «Электропроводность».

Таблица 2. Стадия 3. Предельно допустимые значения электропроводности в зависимости от значений рН воды для инъекций, находящейся в уравновешенном состоянии с атмосферным давлением и температурой
Значение рН | Электропроводность, мкСм·см−1 | Значение рН | Электропроводность, мкСм·см−1
--- | --- | --- | ---
5,0 | 4,7 | 6,1 | 2,4
5,1 | 4,1 | 6,2 | 2,5
5,2 | 3,6 | 6,3 | 2,4
5,3 | 3,3 | 6,4 | 2,3
5,4 | 3,0 | 6,5 | 2,2
5,5 | 2,8 | 6,6 | 2,1
5,6 | 2,6 | 6,7 | 2,6
5,7 | 2,5 | 6,8 | 3,1
5,8 | 2,4 | 6,9 | 3,8
5,9 | 2,4 | 7,0 | 4,6
6,0 | 2,4 | – | –

Алюминий (ОФС «Алюминий», метод 1). Не более 0,000001 % (0,01 ppm).

Испытание проводят для воды для инъекций, предназначенной для изготовления растворов для диализа.

Испытуемый раствор. К 400 мл испытуемого образца прибавляют 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 и 100 мл воды дистиллированной.

Раствор сравнения. Смешивают 2 мл алюминия стандартного раствора 2 мкг/мл, 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 и 98 мл воды дистиллированной.

Контрольный раствор. Смешивают 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 и 100 мл воды дистиллированной.

Бактериальные эндотоксины (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Менее 0,25 МЕ/мл.

##### Хранение

Воду для инъекций для аптек нефасованную используют сразу после получения или хранят в специальных сборниках не более 24 час; используют в условиях, предотвращающих рост микроорганизмов и исключающих возможность любой другой контаминации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0055 Вода очищенная для аптек (Aqua purificata pro officinis)

H2O | Mr 18,02

##### Определение

Вода очищенная для аптек – это вода очищенная, предназначенная для изготовления нестерильных и стерильных лекарственных препаратов, за исключением лекарственных препаратов для парентерального применения, а также для получения воды для инъекций для аптек.

#### Вода очищенная для аптек нефасованная

##### Получение

Вода очищенная для аптек нефасованная может быть получена методами дистилляции, ионного обмена, обратного осмоса, ультрафильтрации, комбинацией этих методов или любым другим подходящим методом из воды, соответствующей нормативным требованиям, установленным к воде питьевой.

Вода очищенная свежеприготовленная или вода очищенная свежеполученная – это вода очищенная для аптек нефасованная, срок использования которой не превышает 4 часа с момента её получения, предназначенная, как правило, для изготовления концентрированных растворов, экстемпоральных гомеопатических лекарственных препаратов или для других обоснованных случаев.

Вода очищенная стерильная – это вода очищенная для аптек нефасованная, разлитая в подходящие герметично укупоренные ёмкости, простерилизованная при температуре 120–122 °С под давлением 120 кПа в течение установленного времени, предназначенная, как правило, для изготовления стерильных лекарственных препаратов в асептических условиях. Не допускается использование воды очищенной стерильной для изготовления стерильных лекарственных препаратов, предназначенных для парентерального применения. Вода очищенная стерильная не должна содержать антимикробных консервантов или других веществ.

Ежедневный контроль качества воды очищенной. Требования к контролю качества воды очищенной, предназначенной для изготовления лекарственных препаратов, определяются правилами изготовления и отпуска лекарственных препаратов для медицинского применения аптечными организациями, имеющими лицензию на фармацевтическую деятельность, утверждёнными уполномоченным федеральным органом исполнительной власти.

В аптечных организациях полученная вода очищенная ежедневно из каждого баллона, а при подаче воды по трубопроводу – на каждом рабочем месте, подвергается контролю качества на отсутствие хлоридов, сульфатов и солей кальция и магния, также производится контроль значения pH. Вода очищенная, предназначенная для изготовления стерильных растворов, дополнительно проверяется на отсутствие восстанавливающих веществ, углерода диоксида и содержание солей аммония.

##### Свойства

Описание. Бесцветная, прозрачная жидкость.

##### Испытания

рН (ОФС «Ионометрия», метод 3). От 5,0 до 7,0. К 100 мл воды очищенной прибавляют 0,3 мл калия хлорида насыщенного раствора, погружают электроды прибора в испытуемый раствор и определяют значение рН.

Хлориды. К 10 мл воды очищенной прибавляют 1 мл азотной кислоты разведённой 12,5 % и 0,2 мл серебра нитрата раствора 1,7 %. В течение не менее 15 мин не должно быть видимых изменений внешнего вида раствора.

Сульфаты. К 10 мл воды очищенной прибавляют 0,1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % и 0,1 мл бария хлорида раствора 6,1 %. В течение не менее 1 ч не должно быть видимых изменений внешнего вида раствора.

Кальций и магний. К 100 мл воды очищенной прибавляют 2 мл аммония хлорида буферного раствора рН 10,0, 50 мг эриохрома чёрного Т индикаторной смеси и 0,5 мл 0,01 М раствора натрия эдетата. Должно появиться чисто синее окрашивание.

Восстанавливающие вещества. К 100 мл воды очищенной, предназначенной для изготовления стерильных растворов, прибавляют 10 мл серной кислоты разведённой 9,8 % и 0,1 мл 0,02 М раствора калия перманганата, кипятят в течение 5 мин. Должно сохраниться розовое окрашивание раствора.

Соли аммония. Не более 0,00002% (0,2 ppm). В пробирку помещают 20 мл воды воды очищенной, предназначенной для изготовления стерильных растворов, прибавляют 1,0 мл калия тетрайодмеркурата щелочного раствора. Через 5 мин раствор просматривают вдоль вертикальной оси пробирки. Окраска полученного раствора должна быть не интенсивнее окраски раствора сравнения, приготовленного одновременно таким же образом путём прибавления 1,0 мл калия тетрайодомеркурата щелочного раствора к смеси из 4 мл аммония стандартного раствора 1 мкг/мл и 16 мл воды, свободной от аммиака.

Углерода диоксид. Взбалтывают воду очищенную, предназначенную для изготовления стерильных растворов, с равным объёмом кальция гидроксида раствора (известковой воды) в наполненном доверху и хорошо закрытом сосуде. В течение 1 ч не должно наблюдаться помутнение.

#### ЕЖЕКВАРТАЛЬНЫЙ КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА ВОДЫ ОЧИЩЕННОЙ

##### Свойства

Описание. Бесцветная, прозрачная жидкость.

##### Испытания

Общий органический углерод (ОФС «Содержание общего органического углерода в воде для фармацевтического применения»).
Не более 0,5 мг/л.

Допускается взамен данного испытания проводить альтернативный тест на восстанавливающие вещества: к 100 мл испытуемого образца прибавляют 10 мл серной кислоты разведённой 9,8 % и 0,1 мл 0,02 М раствора калия перманганата, кипятят в течение 5 мин; должно сохраниться розовое окрашивание раствора.

Электропроводность (ОФС «Электропроводность»).

Испытание проводят автономно или, если применимо, в режиме реального времени.

ОБОРУДОВАНИЕ

Кондуктометрическая ячейка:

- электроды должны быть из подходящего материала, например, из нержавеющей стали;

- константа ячейки обычно устанавливается поставщиком и впоследствии проверяется через соответствующие интервалы времени с использованием сертифицированного стандартного раствора с электропроводностью менее 1500 мкСм·см−1 или путём сравнения с ячейкой, имеющей аттестованную константу ячейки. Константа ячейки считается подтверждённой, если найденное значение находится в пределах 2 % от значения, указанного в сертификате; в противном случае должна быть проведена повторная калибровка.

Кондуктометр: точность измерения должна быть не менее 0,1 мкСм·см−1 в низшем диапазоне.

Калибровка системы (кондуктометрической ячейки и кондуктометра): калибровка должна проводиться с использованием одного или более соответствующих стандартных растворов
(ОФС «Электропроводность») Допустимое отклонение должно составлять не более 3 % от измеренного значения электропроводности плюс 0,1 мкСм·см−1.

Калибровку кондуктометра проводят для всех используемых интервалов измерений после отсоединения ячейки электропроводности. Используют сертифицированные резисторы высокой точности или эквивалентные приборы с погрешностью не более 0,1 % от сертифицированного значения.

Если отсоединение кондуктометрической ячейки, вмонтированной в систему получения воды, невозможно, то калибровка системы может быть выполнена с помощью предварительно откалиброванного прибора для измерения электропроводности с ячейкой электропроводности, расположенной рядом с калибруемой ячейкой в потоке воды очищенной.

Измерение температуры: погрешность ± 2° С.

МЕТОДИКА

Одновременно определяют температуру и электропроводность воды очищенной без температурной компенсации. Измерение электропроводности с помощью кондуктометров с температурной компенсацией возможно только после соответствующей валидации.

Используя таблицу 1, находят измеренное значение температуры, которое может точно совпадать с табличным или быть ближайшим значением, не превышающим измеренную температуру. Соответствующее значение электропроводности является предельно допустимым.

Вода очищенная соответствует требованиям, если измеренное значение электропроводности при зарегистрированной температуре не превышает предельно допустимого значения, найденного по таблице 1.

Таблица 1. Предельно допустимые значения электропроводности воды очищенной для аптек в зависимости от температуры
Температура, °С | Электропроводность, мкСм∙см−1 | Температура, °С | Электропроводность, мкСм∙см−1
--- | --- | --- | ---
0 | 2,4 | 60 | 8,1
10 | 3,6 | 70 | 9,1
20 | 4,3 | 75 | 9,7
25 | 5,1 | 80 | 9,7
30 | 5,4 | 90 | 9,7
40 | 6,5 | 100 | 10,2
50 | 7,1 | – | –

Для значений температур, не представленных в таблице 1, рассчитывают предельно допустимое значение электропроводности методом интерполяции между ближайшими к полученному наименьшим и наибольшим значениями, приведёнными в таблице 1.

Испытания по показателям «Нитраты» и «Тяжёлые металлы» не проводят, если вода очищенная соответствует требованиям ФС «Вода для инъекций для аптек» по показателю «Электропроводность».

Нитраты. Не более 0,00002 % (0,2 ppm). В пробирку погружённую в ледяную воду, помещают 5 мл испытуемого образца, прибавляют 0,4 мл _ калия хлорида раствора 10 %, 0,1 мл _дифениламина раствора 0,1 % и по каплям при встряхивании 5 мл серной кислоты, свободной от азота. Пробирку переносят на водяную баню, нагретую до температуры 50 °С. Через 15 мин синее окрашивание испытуемого раствора должно быть не интенсивнее окрашивания раствора сравнения, приготовленного одновременно таким же образом с использованием смеси из 4,5 мл воды, свободной от нитратов и 0,5 мл нитрата стандартного раствора 2 мкг/мл.

Тяжёлые металлы (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 4). Не более 0,00001 % (0,1 ppm).

К 200 мл испытуемого образца прибавляют 0,15 мл 0,1 М раствора кислоты азотной и упаривают в стеклянной выпарительной чашке на водяной бане до объёма 20 мл. 12 мл полученного концентрированного раствора должны выдерживать испытание на тяжёлые металлы. Раствор сравнения готовят с использованием 10 мл свинца стандартного раствора 1 мкг/мл, прибавляя к нему 0,075 мл 0,1 М раствора кислоты азотной. Контрольный раствор готовят, прибавляя к нему 0,075 мл 0,1 М раствора кислоты азотной.

Алюминий (ОФС «Алюминий», метод 1). Не более 0,000001 % (0,01 ppm).

Испытание проводят, если вода очищенная предназначена для изготовления растворов для диализа.

Испытуемый раствор. К 400 мл испытуемого образца прибавляют 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 и 100 мл воды дистиллированной.

Раствор сравнения. Смешивают 2 мл алюминия стандартного раствора 2 мкг/мл, 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 и 98 мл воды дистиллированной.

Контрольный раствор. Смешивают 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 и 100 мл воды дистиллированной.

Бактериальные эндотоксины (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Менее 0,25 МЕ/мл.

Испытание проводят для воды очищенной, предназначенной для изготовления растворов для диализа без последующей процедуры удаления бактериальных эндотоксинов.

Микробиологическая чистота. Испытуемый образец должен выдерживать требование испытания на микробиологическую чистоту: общее число аэробных микроорганизмов должно быть не более 102 КОЕ/мл. Испытание проводят с использованием агаризованной среды на основе гидролизата казеина и соевых бобов. Испытания могут проводиться в процессе получения воды очищенной в режиме реального времени или автономно.

##### Хранение

Воду очищенную для аптек нефасованную используют сразу после получения, распределяют (транспортируют) по рабочим местам или хранят в специальных сборниках не более 3 суток; используют в условиях, предотвращающих рост микроорганизмов и исключающих возможность любой другой контаминации.

#### Вода очищенная для аптек фасованная

##### Определение

Вода очищенная фасованная – это вода очищенная для аптек нефасованная, разлитая в подходящие укупоренные ёмкости, хранящаяся в условиях, обеспечивающих необходимое микробиологическое качество. Вода очищенная фасованная не должна содержать никаких дополнительных веществ.

##### Свойства

Описание. Бесцветная, прозрачная жидкость.

##### Испытания

Вода очищенная для аптек фасованная должна выдерживать испытания, указанные для воды очищенной для аптек нефасованной, а также следующие дополнительные испытания.

Кислотность или щёлочность. К 10 мл испытуемого образца, свежепрокипячённого в колбе из боросиликатного стекла и охлаждённого, прибавляют 0,05 мл метилового красного раствора 0,05 %. Раствор не должен окрашиваться в красный цвет.

К 10 мл испытуемого образца прибавляют 0,1 мл бромтимолового синего раствора 0,05%. Раствор не должен окрашиваться в синий цвет.

Восстанавливающие вещества. К 100 мл испытуемого образца прибавляют 10 мл серной кислоты разведённой 9,8 % и 0,1 мл 0,02 М раствора калия перманганата, кипятят в течение 5 мин. Должно сохраниться розовое окрашивание раствора.

Хлориды. К 10 мл испытуемого образца прибавляют 1 мл азотной кислоты разведённой 12,5 % и 0,2 мл серебра нитрата раствора 1,7 %. В течение не менее 15 мин не должно быть видимых изменений внешнего вида раствора.

Сульфаты. К 10 мл испытуемого образца прибавляют 0,1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % и 0,1 мл бария хлорида раствора 6,1 %. В течение не менее 1 ч не должно быть видимых изменений внешнего вида раствора.

Соли аммония. Не более 0,00002 % (0,2 ppm). К 20 мл испытуемого образца прибавляют 1 мл калия тетрайодомеркурата щелочного раствора. Через 5 мин исследуют раствор вдоль вертикальной оси пробирки. Окраска полученного раствора по интенсивности не должна превышать окраску раствора сравнения, приготовленного одновременно таким же образом путём прибавления 1 мл калия тетрайодомеркурата щелочного раствора к смеси из 4 мл аммония стандартного раствора 1 мкг/мл и 16 мл воды, свободной от аммиака.

Кальций и магний. К 100 мл испытуемого образца прибавляют 2 мл аммония хлорида буферного раствора рН 10,0, 50 мг эриохрома чёрного Т индикаторной смеси и 0,5 мл 0,01 М раствора натрия эдетата. Должно появлиться чисто синее окрашивание раствора.

Сухой остаток. Не более 0,001 %. 100 мл испытуемого образца выпаривают досуха на водяной бане и сушат при температуре 100–105 °С до постоянной массы. Масса остатка должна составлять не более 1 мг.

Микробиологическая чистота. Испытуемый образец должен выдерживать требование испытания на микробиологическую чистоту: общее число аэробных микроорганизмов должно быть не более 102 КОЕ/мл.

##### Хранение

Воду очищенную фасованную хранят и транспортируют в условиях, предотвращающих рост микроорганизмов и исключающих возможность любой другой контаминации.

##### Маркировка

Если применимо, указывают, что вода очищенная пригодна для изготовления растворов для диализа.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0007 Йод (Iodum)

Взамен ФС.2.2.0007.15

##### Определение

Йод.

Содержит не менее 99,5 % йода I2.

##### Свойства

Описание. Серовато-чёрные с металлическим блеском пластинки, сростки кристаллов, куски. Летуч при температуре 20 °С. Возгоняется при нагревании, образуя фиолетовые пары.

Растворимость. Растворим в спирте 96 % и хлороформе, очень мало растворим в воде. Растворы в хлороформе фиолетового цвета.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. 0,2 г субстанции нагревают в пробирке; должны образоваться фиолетовые пары, йод конденсируется на стенках.

2. Качественная реакция. 0,5 г субстанции энергично взбалтывают в течение 1 мин с 100 мл воды. Полученный раствор должен окрашиваться в синий цвет при прибавлении 0,05 мл крахмала раствора 1 %. При кипячении окраска исчезает и вновь появляется при охлаждении.

##### Испытания

Йодистый циан. Растирают 0,75 г субстанции в 30 мл воды и фильтруют. Обесцвечивают 10 мл фильтрата сернистой кислоты раствором, прибавляют 50 мкл железа(II) сульфата раствора в серной кислоте, 50 мкл железа(III) хлорида раствора 3 % и 0,5 мл натрия гидроксида раствора 10 %. Смесь нагревают и подкисляют хлористоводородной кислотой разведённой 8,3 %; не должно появляться синее окрашивание.

Хлориды и бромиды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). Растирают 0,5 г субстанции в 20 мл воды и фильтруют. К 10 мл фильтрата прибавляют по каплям раствор сернистой кислоты до обесцвечивания, 1 мл раствора аммиака концентрированного 25 % и 4 мл серебра нитрата раствора 2 %, взбалтывают и фильтруют. Объём фильтрата доводят водой до 25 мл. Для определения используют 10 мл полученного раствора, к которому прибавляют 1,5 мл азотной кислоты.

Нелетучий остаток. Не более 0,05 %. 1 г субстанции нагревают в выпарительной чашке на водяной бане до прекращения выделения фиолетовых паров и сушат при температуре 100−105 °С до постоянной массы.

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В колбу с притёртой пробкой помещают 0,2 г (точная навеска) растёртой субстанции, прибавляют 10 мл калия йодида раствора 10 %, 10 мл воды, 1 мл уксусной кислоты разведённой 12 % и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата до обесцвечивания (индикатор – 1 мл крахмала раствора 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата соответствует 12,69 мг йода I2.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0023 Калия бромид (Kalii bromidum)

Взамен ФС.2.2.0023.18

##### Определение

Калия бромид.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % калия бромида KBr в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Бесцветные или белые кристаллы или мелко-кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде и глицерине, мало растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на бромиды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию В на калий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 10 г субстанции в 100 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора» должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 г субстанции, растворяют в воде, свободной от диоксида углерода, доводят объём раствора тем же растворителем до метки. К 10,0 мл полученного раствора прибавляют 0,1 мл бромтимолового синего раствора 0,05 %. Цвет раствора должен измениться при прибавлении не более 0,5 мл натрия гидроксида раствора 0,01 М или хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М.

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Барий. Растворяют 0,5 г субстанции в 10 мл воды, прибавляют 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и 1 мл калия сульфата раствора 1 %, выдерживают в течение 10 мин; не должно наблюдаться помутнения раствора.

Броматы. К 10 мл исходного раствора, полученного в испытании «Кислотность и щёлочность» прибавляют 1 мл крахмала раствора 0,1 %, 0,1 мл калия йодида раствора 10 % и 0,25 мл серной кислоты раствора 0,5 М. Выдерживают в темноте в течение 5 мин; не должно наблюдаться окрашивание раствора в синий или фиолетовый цвет.

Йодиды. К 5 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 0,15 мл железа(III) хлорида раствора 3 % и 0,15 мл крахмала раствора 1 %, доводят объём раствора водой до 10 мл; не должно наблюдаться окрашивание раствора в синий цвет в течение 10 мин.

Железо. Не более 0,001 % (ОФС «Железо», метод 1). Растворяют 3,0 г субстанции в 10 мл воды.

Магний и щёлочноземельные металлы. Не более 0,02 % в пересчёте на кальций. К 200 мл воды прибавляют 0,1 г гидроксиламина гидрохлорида, 10 мл аммония хлорида буферного раствора рН 10,0, 1 мл цинка сульфата раствора 0,1 М и 15 мг эриохрома чёрного Т индикаторной смеси. Нагревают до температуры 40 °С. Титруют 0,01 М раствором натрия эдетата до перехода окраски из фиолетовой в синюю. К полученному раствору прибавляют 100 мл раствора, содержащего 10,0 г субстанции, и перемешивают. Если цвет раствора изменился на фиолетовый, то его титруют 0,01 М раствором натрия эдетата до появления синего окрашивания. На второе титрование должно пойти не более 5,0 мл 0,01 М раствора натрия эдетата.

Мышьяк. Не более 0,0001 % (ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения используют 0,5 г субстанции.

Сульфаты. Не более 0,01 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём тем же растворителем до метки. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Хлориды. Не более 0,6 %. Помещают 1 г (точная навеска) субстанции в коническую колбу и растворяют в 20 мл азотной кислоты разведённой 12,5 %, прибавляют 5 мл водорода пероксида и нагревают на водяной бане до обесцвечивания раствора. Промывают стенки колбы небольшим количеством воды и продолжают нагревание в течение 15 мин. После охлаждения доводят объём раствора до 50 мл, прибавляют 5,0 мл 0,1 М раствора серебра нитрата, 1 мл дибутилфталата и 5 мл железа(III) аммония сульфата раствора 10 %. Избыток серебра нитрата титруют 0,1 М раствором аммония тиоцианата до красно-коричневого окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 3,545 мг хлорид-иона.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2). Для определения 5,0 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», доводят водой до 10,0 мл.

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в воде, прибавляют 5 мл азотной кислоты разведённой 12,5 %, доводят объём раствора водой до 50 мл и титруют 0,1 М раствором серебра нитрата. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с использованием индикатора (0,1 мл калия хромата раствора 5 %) до оранжево-жёлтого окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 11,90 мг калия бромида КВr.

Содержание калия бромида KBr в субстанции в процентах (Х) с поправкой на содержание хлоридов вычисляют по формуле:

где А – полученное содержание KBr и KCl в пересчёте на KBr,%;
В – содержание хлорид-иона, полученное в испытании «Хлориды»,%.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0008 Калия йодид (Kalii iodidum)

Взамен ФС.2.2.0008.15

##### Определение

Йодид калия.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % калия йодида KI в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Бесцветные или белые кубические кристаллы или белый мелкокристаллический порошок.

Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в глицерине, растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Субстанция даёт характерную реакцию А на йодиды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

2. Качественная реакция. Субстанция даёт характерную реакцию В на калий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

* Прозрачность раствора. Раствор 2 г субстанции в 20 мл воды, свободной от диоксида углерода, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

* Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

Щёлочность. К 12,5 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 0,1 мл 0,05 % раствора бромтимолового синего. Цвет раствора должен измениться от прибавления не более 0,5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М.

Барий. Не более 0,02 %. 0,5 г субстанции растворяют в 10 мл воды, свободной от аммония и диоксида углерода, прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и 1 мл серной кислоты разведённой 16 %; раствор должен оставаться прозрачным в течение 15 мин.

Железо. Не более 0,002 % (ОФС «Железо», метод 2). Растворяют 0,5 г субстанции в 10 мл воды.

Йодноватая кислота, тиосульфаты, сульфиты. Растворяют 0,5 г субстанции в 10 мл свежепрокипячённой и охлаждённой воды, прибавляют по 0,1 мл крахмала раствор 1 % и серной кислоты разведённой 16 %. В течение 30 с не должно появляться синее окрашивание, заметное при рассматривании жидкости по оси пробирки. Синее окрашивание должно появиться от прибавления не более 50 мкл 0,1 М раствора йода.

Мышьяк. Не более 0,0001 % (ОФС «Мышьяк»). Для определения используют 1,0 г субстанции.

Нитраты. К 1 г субстанции прибавляют 5 мл 10 % раствора натрия гидроксида, 0,5 г цинка порошка и 0,5 г железа порошка и нагревают. Выделяющиеся пары не должны вызывать синего окрашивания влажной красной лакмусовой бумаги.

Сульфаты. Не более 0,015 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). В 15 мл воды дистиллированной растворяют 1 г субстанции.

Примечание – Если после прибавления хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % в анализируемом растворе появляется жёлтая окраска, для её обесцвечивания прибавляют 0,05–0,10 мл натрия тиосульфата раствора 0,1 М; равный объём 0,1 М раствора натрия тиосульфата раствора 0,1 М прибавляют в раствор сравнения.

Цианиды. К 0,5 г субстанции растворённой в 5 мл воды, прибавляют 0,25 мл раствора, состоящего из железа(II) сульфата в серной кислоте, 0,1 мл 3 % раствора железа(III) хлорида, 1 мл 10 % раствора натрия гидроксида и нагревают. После подкисления хлористоводородной кислотой разведённой 8,3 % раствор не должен окрашиваться в синий цвет.

Примечание – Приготовление раствора железа(II) сульфата в серной кислоте. Растворяют 3,0 г железа(II) сульфата в смеси 3 мл свежепрокипячённой и охлаждённой воды и 3 мл серной кислоты разведённой 9,8 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3Б). Растворяют 1 г субстанции в 10 мл воды.

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,35 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 30 мл воды, прибавляют 1,5 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и титруют 0,1 М раствором серебра нитрата до перехода окраски осадка от жёлтой к розовой (индикатор – 0,3 мл 0,1 % раствора эозина Н).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 16,60 мг калия йодида KI.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Контроль по показателям качества «Прозрачность раствора», «Цветность раствора» и «Бактериальные эндотоксины» проводят в субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0009 Калия хлорид (Kalii chloridum)

Взамен ФС.2.2.0009.15

##### Определение

Хлорид калия.

Содержит не менее 99,0 % калия хлорида KCl в пересчёте на сухое вещество для субстанции, предназначенной для производства нестерильных лекарственных препаратов.

Содержит не менее 99,5 % калия хлорида KCl в пересчёте на сухое вещество для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

##### Свойства

Описание. Белый кристаллический или гранулированный порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Раствор 10,0 г субстанции в 100 мл воды должен давать характерные реакции на калий и хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

* Прозрачность раствора. Растворяют 10,0 г субстанции в 100 мл воды; полученный раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

* Цветность раствора. Раствор, приготовленный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

Кислотность или щёлочность. Растворяют 10,0 г субстанции в 100 мл воды. К 50 мл полученного раствора прибавляют 0,1 мл 0,05 % раствора бромтимолового синего. Окраска раствора должна измениться от прибавления не более 0,5 мл натрия гидроксида раствора 0,01 М или не более 0,5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М.

Щёлочноземельные металлы и магний. Не более 0,02 % в пересчёте на кальций.

К 200 мл воды прибавляют 0,1 г гидроксиламина гидрохлорида, 10 мл аммония хлорида буферного раствора рН 10,0, 1 мл 0,1 М раствора цинка сульфата и 0,15 г индикаторной смеси эриохрома чёрного Т индикаторная смесь. Нагревают до температуры 40 °С. Титруют 0,01 М раствором натрия эдетата до перехода окраски из фиолетовой в синюю. К полученному раствору прибавляют 100 мл раствора, содержащего 10,0 г субстанции, и перемешивают. Если цвет раствора изменился на фиолетовый, то его титруют 0,01 М раствором натрия эдетата до появления синего окрашивания. На второе титрование должно пойти не более 5 мл 0,01 М раствора натрия эдетата.

Барий. Растворяют 0,1 г субстанции при длительном взбалтывании в 10 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и прибавляют 1 мл насыщенного раствора кальция сульфата. Раствор должен быть прозрачным.

Железо. Не более 0,002 % (ОФС «Железо», метод 2). Растворяют 10,0 г субстанции в 100 мл воды. К 5 мл полученного раствора прибавляют 5 мл воды. Раствор должен выдерживать испытание на железо.

Мышьяк. Не более 0,0001 % (ОФС «Мышьяк»). Для определения используют 1,0 г субстанции и эталонный раствор, содержащий 1 мл стандартного раствора мышьяк-иона (1 мкг/мл).

Сульфаты. Не более 0,03 % (ОФС «Сульфаты», метод 2). Для определения 5 мл раствора, приготовленного в испытании «Прозрачность раствора», доводят водой до 15 мл.

Бромиды. Не более 0,1 %. Растворяют 10,0 г субстанции в 100 мл воды. Помещают 1,0 мл полученного раствора в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объём раствора водой до метки.

К 5,0 мл полученного раствора прибавляют 2,0 мл 1,65 % раствора фенолового красного и 1 мл хлорамина Т раствор 0,01 % и тотчас перемешивают. Точно через 2 мин прибавляют 0,15 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата и доводят объём раствора водой до 10 мл. Определяют оптическую плотность раствора на спектрофотометре в максимуме при 590 нм, используя воду в качестве раствора сравнения.

Оптическая плотность полученного раствора не должна превышать оптическую плотность эталонного раствора, приготовленного таким же образом, но с использованием 5 мл 0,3 % раствора калия бромида вместо испытуемого раствора (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Йодиды. Увлажняют 5 г субстанции по каплям свежеприготовленной смесью, состоящей из 0,15 мл 10 % раствора натрия нитрита, 2 мл 0,5 М раствора серной кислоты, 25 мл 1 % раствора крахмала и 25 мл воды. Через 5 мин увлажнённую субстанцию просматривают при дневном освещении: голубое окрашивание должно отсутствовать.

** Алюминий. Не более 0,0001 % (ОФС «Алюминий»).

Метод 1. Испытуемый раствор. Растворяют 4,0 г субстанции в 100 мл воды и прибавляют 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0.

Эталонный раствор. К 2 мл стандартного раствора алюминий-иона (2 мкг/мл) прибавляют 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 и 98 мл воды.

Контрольный раствор. К 10 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 прибавляют 100 мл воды.

Метод 2. Для определения используют 2,0 г субстанции.

* Натрий. Не более 0,1 %. АЭС или ААС ( ОФС«Атомно-эмиссионная спектрометрия», ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия).

Стандартный раствор 200 мкг/мл натрий-иона. Высушенного 0,5084 г натрия хлорида при температуре 100–105 °С до постоянной массы, помещают в мерную колбу вместимостью 1000 мл, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. Помещают 1,00 г субстанции в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный и испытуемый растворы разводят в соответствии с инструкцией к прибору и проводят определение содержания ионов натрия методом атомной эмиссии (метод прямой калибровки) или атомной абсорбции при 589 нм.

* Аммоний. Не более 0,004 % (ОФС «Аммоний»). Для определения используют раствор 0,5 г субстанции в 10 мл воды.

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3Б). Для определения используют раствор, приготовленный в испытании «Прозрачность раствора».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,12 ЕЭ на 1 мг калия хлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции с концентрацией 5 мг/мл.

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 50 мг (точная навеска) субстанции в 50 мл (при потенциометрическом титровании) или 20 мл воды (при определении конечной точки титрования с помощью индикатора) и титруют 0,1 М раствором серебра нитрата. Конечную точку титрования определяют с индикатором (индикатор – 5 % раствор калия хромата) до перехода окраски в оранжево-жёлтого окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 7,455 мг калия хлорида (KCl).

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Контроль по показателям качества «Прозрачность раствора», «Цветность раствора», «Натрий», «Аммоний» и «Бактериальные эндотоксины» проводят в субстанциях, предназначенных для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

** Контроль по показателю качества «Алюминий» проводят в субстанциях, предназначенных для производства лекарственных препаратов для гемодиализа.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0046 Кальция карбонат (Calcii carbonas)

Взамен ФС 42-2373-93

##### Определение

Карбонат кальция.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 100,5 % кальция карбоната CaCO3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворяется в хлористоводородной кислоте разведённой 8,3 % и азотной кислоте разведённой 16 %, медленно растворяется в уксусной кислоте разведённой 12 % с бурным выделением газа, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Субстанция даёт характерную реакцию А на карбонаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

2. Качественная реакция. Растворяют 0,5 г субстанции в 10 мл уксусной кислоты разведённой 10 %. Полученный раствор даёт характерную реакцию А на кальций (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Вещества, нерастворимые в кислоте. Не более 0,2 %. Растворяют при нагревании 1,0 г субстанции в 9,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, прибавляют 25 мл воды и кипятят в течение 10 мин, охлаждают, прибавляют аммиака раствор 10 % до щелочной реакции. Раствор фильтруют, осадок на фильтре промывают водой до исчезновения реакции на хлориды и озоляют при 500 °С в течение 1 ч.

Потеря в массе при высушивании. Не более 2,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции высушивают до постоянной массы при температуре 200 °С.

Барий. К 10 мл испытуемого раствора прибавляют 1 мл кальция сульфата раствора насыщенного. Раствор должен быть прозрачным в течение не менее 15 мин.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 г субстанции, прибавляют 20 мл уксусной кислоты разведённой 10 %, нагревают на водяной бане до тех пор, пока раствор не станет прозрачным и доводят объём раствора водой до метки.

Железо. Не более 0,02 % (ОФС «Железо», метод 2). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в 5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % и доводят объём раствора водой до метки.

Мышьяк. Не более 0,0004 % (ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения используют 5 мл раствора, полученного в разделе «Тяжёлые металлы».

Сульфаты. Не более 0,25 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 4,0 г субстанции, растворяют в 80 мл уксусной кислоты разведённой 12 %, после прекращения выделения пузырьков углекислого газа кипятят в течение 2 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки, при необходимости фильтруют через стеклянный фильтр. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Хлориды. Не более 0,033 % (ОФС «Хлориды»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,3 г субстанции, прибавляют 20 мл уксусной кислоты разведённой 10 %, нагревают на водяной бане до тех пор, пока раствор не станет прозрачным и доводят объём раствора водой до метки.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 3А). Растворяют 5,0 г субстанции в 80 мл уксусной кислоты разведённой 12 %. После прекращения выделения пузырьков газа кипятят в течение 2 мин. После охлаждения количественно переносят раствор в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объём раствора уксусной кислоты разведённой 12 % и фильтруют.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции в колбу вместимостью 250 мл, растворяют в 1,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, прибавляют 10 мл воды, 10 мл аммиачного буферного раствора и титруют 0,05 М раствором натрия эдетата до появления сине-фиолетового окрашивания (индикатор – 2 мл хромового тёмно-синего раствора).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 5,00 мг кальция карбоната CaCO3.

##### Хранение

В хорошо укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0037 Кислород, газ 93 %

Кислород 93 %
Oxygenium 93 %

Взамен ФС.2.2.0037.22

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Настоящая фармакопейная статья распространяется на кислород 93 %, газ медицинский (газ сжатый), получаемый из воздуха методом короткоцикловой безнагревной адсорбции.

Содержит не менее 90,0 % и не более 96,0 % кислорода О2. Остаток состоит преимущественно из аргона и азота.

##### СВОЙСТВА

Описание. Бесцветный газ без запаха.

Примечание – Определение запаха: осторожно открывают вентиль баллона, получая умеренный ток газа.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Результаты количественного определения должны соответствовать требованию по содержанию.

##### ИСПЫТАНИЯ

Углерода диоксид. Не более 0,03 % (300 ppm).

Метод 1

Определение проводят методом ИК-спектрометрии (ОФС «Спектрометрия в инфракрасной области»).

Стандартный газ А. Кислород.

Стандартный газ Б. Смесь, состоящая из 7 % (о/о) азота и 93 % (о/о) кислорода, содержащая 300 ppm (о/о) углерода диоксида.

Калибруют аппаратуру и устанавливают подходящую чувствительность с использованием стандартных газов А и Б. Измеряют содержание углерода диоксида в испытуемом газе.

Метод 2

Определение проводят с помощью индикаторной трубки на углерода диоксид согласно инструкции изготовителя.

Метод 3

Определение проводят методом газовой хроматографии
«(ОФС «Газовая хроматография», рис. 1)».

Рисунок 1. Схема устройства газового хроматографа для анализа газообразных проб: 1 – анализируемый газ; 2 – регулятор давления; 3 – расходомер; 4 – кран-дозатор; 5 –дозирующая петля; 6 – колонка с термостатом; 7 – детектор; 8 – газ-носитель с системой регулирования потока газа; 9 – фильтр-осушитель; 10 – делитель потока газа; 11 – система сбора данных.

Устройство ввода пробы. Ввод газовой пробы осуществляется с помощью дозирующего устройства газового хроматографа – крана-дозатора для газовых проб (4) с дозирующей петлёй фиксированного объёма (5), имеющего два положения «Отбор» – «Анализ».

Испытуемый образец. Отобранный испытуемый образец без разведений.

Стандартный образец углерода диоксида в кислороде. Поверочная газовая смесь, содержащая около 0,01 % углерода диоксида в кислороде.

Хроматографические условия

Колонка | металлическая или стеклянная 2 м × 1 мм, сополимер дивинилбензол-винилпирролидона, 152–178 мкм; |
Детектор | по теплопроводности; |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |
Скорость потока | 10 мл/мин; |
Объём дозирующей петли | 250 мкл; |
Температура | колонка | 70–80 °С;
| детектор | 70–80 °С;
Время хроматографирования | 5 мин. |

Порядок выхода пиков: суммарный пик кислорода и азота, углерода диоксид.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограммах стандартного образца углерода диоксида:

- разрешение (R) между суммарным пиком кислорода и азота и пиком углерода диоксида должно быть не менее 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика углерода диоксида должно быть не более 10 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пика углерода диоксида должно быть не более 1 % (6 введений).

Содержание углерода диоксида в препарате в объёмных процентах (X1) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика углерода диоксида на хроматограмме испытуемого образца;
S0 – площадь пика углерода диоксида на хроматограмме стандартного образца углерода диоксида;
X0 – концентрация углерода диоксида в стандартном образце углерода диоксида в %.

Углерода монооксид. Не более 0,0005 % (5 ppm).

Метод 1

Определение проводят методом ИК-спектрометрии (ОФС «Спектрометрия в инфракрасной области»).

Стандартный газ А. Кислород.

Стандартный газ Б. Смесь, содержащая 5 ppm (о/о) углерода монооксида в азоте.

Калибруют аппаратуру и устанавливают подходящую чувствительность с использованием стандартных газов А и Б. Измеряют содержание углерода монооксида в испытуемом газе.

Метод 2

Определение проводят с помощью индикаторной трубки на углерода монооксид согласно инструкции изготовителя.

Метод 3

Определение проводят методом газовой хроматографии в условиях испытания «Углерода диоксид», метод 3, со следующими изменениями.

Стандартный образец углерода монооксида в кислороде. Поверочная газовая смесь, содержащая около 0,0005 % углерода монооксида в кислороде.

Порядок выхода пиков: суммарный пик кислорода и азота, углерода монооксид.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограммах стандартного образца углерода монооксида:

- разрешение (R) между суммарным пиком кислорода и азота и пиком углерода монооксида должно быть не менее 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика углерода монооксида должно быть не более 10 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пика углерода монооксида должно быть не более 1 % (6 введений).

Содержание углерода монооксида в препарате в объёмных процентах (X2) вычисляют по формуле:

где S2 – площадь пика углерода монооксида на хроматограмме испытуемого образца;
S0 – площадь пика углерода монооксида на хроматограмме стандартного образца углерода монооксида;
X0 – концентрация углерода монооксида в стандартном образце углерода монооксида, %.

Азота монооксид, азота диоксид (нитрозные газы). Не более 0,0002 % (2 ppm) суммарно.

Метод 1

Определение проводят с помощью хемилюминесцентного анализатора.

Стандартный газ А. Смесь 21 % (о/о) кислорода и 79 % (о/о) азота, содержащая менее 0,05 ppm (о/о) азота монооксида и азота диоксида.

Стандартный газ Б. Смесь, содержащая 2 ppm (о/о) азота диоксида в азоте.

Калибруют аппаратуру и устанавливают подходящую чувствительность с использованием стандартных газов А и Б. Измеряют содержание азота монооксида и азота диоксида в испытуемом газе.

Метод 2

Определение проводят с помощью детекторной трубки на азота монооксид и азота диоксид согласно инструкции изготовителя.

Метод 3

Определение проводят методом газовой хроматографии (ОФС «Газовая хроматография») в условиях испытания «Углерода диоксид».

Устройство ввода пробы. Используют ту же аппаратуру и хроматографические условия, что и в разделе «Углерода диоксид», метод 3.

Испытуемый образец. Отобранный испытуемый образец без разведений.

Стандартный образец углерода монооксида в кислороде. Поверочная газовая смесь, содержащая около 0,0005 % углерода монооксида и 0,0015 % метана в кислороде.

Порядок выхода пиков: кислород, углерода монооксид, метан.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного образца углерода монооксида:

- разрешение ® между пиками кислорода и углерода монооксида должно быть не менее 1,5;

- относительное стандартное отклонение площадей пика углерода монооксида должно быть не более 10 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пика углерода монооксида должно быть не более 2 % (6 введений).

Содержание монооксида углерода в препарате в объёмных процентах (X3) вычисляют по формуле:

где S3 – площадь пика углерода монооксида на хроматограмме испытуемого образца;
S0 – площадь пика углерода монооксида на хроматограмме стандартного образца углерода монооксида;
X0 – концентрация углерода монооксида в стандартном образце углерода диоксида, %.

Серы диоксид. Не более 0,0001 % (1 ppm).

Метод 1

Определение проводят с помощью ультрафиолетового флуоресцентного анализатора.

Аппаратура состоит из следующих компонентов:

- системы, генерирующей ультрафиолетовое излучение с длиной волны 210 нм с помощью ультрафиолетовой лампы, коллиматора и селективного фильтра; луч периодически блокируется прерывателем, вращающимся с высокой скоростью;

- реакционной камеры, через которую проходит испытуемый газ;

- системы, регистрирующей излучение при длине волны 350 нм с помощью селективного фильтра, фотоумножителя и усилителя.

Стандартный газ А. Смесь 7 % (о/о) азота и 93 % (о/о) кислорода.

Стандартный газ Б. Смесь 7 % (о/о) азота и 93 % (о/о) кислорода, содержащая от 0,5 до 2 ppm серы диоксида.

Калибруют аппаратуру и устанавливают подходящую чувствительность с использованием стандартных газов А и Б. Измеряют содержание серы диоксида в испытуемом газе.

Метод 2. Определение проводят с помощью индикаторной трубки на серы диоксид согласно инструкции изготовителя.

Масло. Не более 0,1 мг/м3. Определение проводят с помощью детекторной трубки на масло согласно инструкции изготовителя.

Водяные пары. Не более 0,009 % (90 ppm).

Метод 1. Определение проводят с помощью электролитического гигрометра согласно инструкции изготовителя.

Метод 2. Определение проводят с помощью индикаторной трубки на водяные пары согласно инструкции изготовителя.

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят в соответствии с ОФС «Количественное определение кислорода в лекарственных средствах на основе кислорода медицинского».

##### ХРАНЕНИЕ

Кислород 93 %, получаемый методом короткоцикловой безнагревной адсорбции, обычно используется на месте его производства. Он подаётся непосредственно в трубопровод медицинского газа или хранится в подходящих ёмкостях. Не допускается использование несовместимых с кислородом масел и смазочных материалов.

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0026 Кислород, газ медицинский сжатый

Кислород
Oxygenium liquidum

Взамен ФС.2.2.0026.18

##### Определение

Настоящая фармакопейная статья распространяется на кислород газ медицинский (газ сжатый), получаемый газификацией субстанции кислорода газа медицинского сжиженного или низкотемпературной ректификацией из атмосферного воздуха.

Содержит не менее 99,5% кислорода О2.

Отбор проб. Отбор проб производят из баллона, находящегося в вертикальном положении. Пробу кислорода из баллона отбирают в прибор для анализа или в пробоотборник специальной конструкции, предназначенный для отбора газов, при помощи редуктора или вентиля тонкой регулировки и соединительной трубки от точки отбора пробы до прибора или пробоотборника. Соединительную трубку и пробоотборник продувают не менее чем 10-кратным объёмом испытуемого образца.

##### Свойства

Описание. Бесцветный газ без запаха.

Примечание – Определение запаха: осторожно открывают вентиль баллона, получая умеренный ток газа.

##### Идентификация

Определение проводят методом 1 и одним из предложенных методов (2, 3, 4).

Метод 1

Определение проводят одновременно с количественным определением. Раствор в цилиндрической части поглотительной пипетки окрашивается в синий цвет.

Метод 2

Качественная реакция. Ток испытуемого образца пропускают в течение 15–20 мин через склянку для промывания газов (рис. 1 и 2), содержащую 30–50 мл раствора пирогаллола и 0,1–0,15 мл 10 % раствора калия гидроксида; раствор должен окраситься в тёмно-коричневый цвет.

Раствор пирогаллола. Растворяют 0,5 г пирогаллола в 50 мл воды, свободной от диоксида углерода. Перед растворением через воду пропускают аргон для удаления из среды кислорода.

Рисунок 1. Склянка для промывания газов СН-1. Размеры указаны в миллиметрах. 1 – насадка; 2 – сосуд | Рисунок 2. Склянка для промывания газов СН-2. Размеры указаны в миллиметрах. 1 – насадка; 2 – сосуд.

Метод 3

Газовая хроматография (ОФС «Газовая хроматография»). Определение проводят одновременно с количественным определением (раздел «Количественное определение»). Время удерживания пика кислорода на хроматограмме испытуемого образца должно соответствовать времени удерживания пика кислорода на хроматограмме стандартного образца (поверочной газовой смеси).

Метод 4

Парамагнитный анализ. Определение проводят одновременно с количественным определением (раздел «Количественное определение»). После пропускания испытуемого образца через парамагнитный анализатор должны быть получены постоянные показатели анализатора объёмной доли кислорода.

##### Испытания

Объём содержимого упаковки проверяют с использованием манометра не менее чем на 3 баллонах.

Объём кислорода в баллоне (V) вычисляют по формуле:

где K – коэффициент для определения объёма кислорода в баллоне (см. табл. 1);
Vб – вместимость баллона, л.

Углерода диоксид. Не более 0,01 % (100 ppm).

Метод 1

Определение проводят в склянке для промывания газов (рис. 1 или 2).

Перед началом испытания склянку продувают в течение 1–2 мин испытуемым образцом, который отбирают из баллона через редуктор.

В две одинаковые склянки для промывания газов наливают по 100 мл 5 % раствора бария гидроксида (поглотительный раствор).

Испытуемый раствор. Через раствор в одной из склянок пропускают 1000 см3 кислорода в течение 15–20 мин.

Объём испытуемого образца, пропущенный через поглотительный раствор, измеряют с помощью склянки с тубусом (рис. 3) или прибора для отбора проб газа (рис. 4), присоединённого к короткой трубке склянки (рис. 1 или 2) на выходе газа.

Контрольный раствор. Во вторую склянку прибавляют 1 мл натрия гидрокарбоната раствора 0,04 % и перемешивают.

Опалесценция испытуемого раствора не должна превышать опалесценцию контрольного раствора.

Рисунок 3. Склянка с тубусом. Размеры указаны в миллиметрах. 1 – воронка; 2 – пробка стеклянная; 3 – газоотводная трубка с краном; 4 – склянка; 5 – переходник; 6 – кран нижнего тубуса типа К1Х-40-4,0; 7 – пружина. | Рисунок 4. Прибор для отбора проб газа. Размеры указаны в миллиметрах. 1 – футляр; 2 – пипетка; 3 – склянка; 4 – трубка резиновая; 5 – гребёнка распределительная.

Метод 2

Определение проводят методом ИК-спектрометрии (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»).

Стандартный газ А (для калибровки нуля). Азот газообразный особой чистоты (с объёмной долей азота не менее 99,999 и объёмной долей кислорода не более 0,0005).

Стандартный газ Б. Поверочная газовая смесь (эталонный газ) с содержанием диоксида углерода, содержащая 100 ppm (о/о).

Калибруют аппаратуру и устанавливают подходящую чувствительность с использованием стандартных газов А и Б. Измеряют содержание углерода диоксида испытуемого образца.

Таблица 1. Значение коэффициента К
Температура газа в баллоне, °С | Значение коэффициента К1 при избыточном давлении, МПа (кгс/см3)
--- | ---
13,7 (140) | 14,2 (145) | 14,7 (150) | 15,2 (155) | 15,7 (160) | 16,2 (165) | 16,7 (170) | 17,2 (175) | 17,7 (180) | 18,1 (185) | 18,6 (190) | 19,1 (200) | 19,6 (200) | 20,1 (205) | 20,6 (210)
–50 | 0,232 | 0,242 | 0,251 | 0,260 | 0,269 | 0,278 | 0,280 | 0,296 | 0,303 | 0,311 | 0,319 | 0,327 | 0,335 | 0,342 | 0,349
–40 | 0,212 | 0,221 | 0,229 | 0,236 | 0,245 | 0,253 | 0,260 | 0,269 | 0,275 | 0,284 | 0,290 | 0,298 | 0,305 | 0,312 | 0,319
–35 | 0,203 | 0,211 | 0,219 | 0,226 | 0,234 | 0,242 | 0,249 | 0,257 | 0,264 | 0,272 | 0,278 | 0,286 | 0,293 | 0,299 | 0,306
–30 | 0,195 | 0,202 | 0,211 | 0,217 | 0,225 | 0,232 | 0,239 | 0,248 | 0,253 | 0,261 | 0,267 | 0,274 | 0,281 | 0,288 | 0,294
–25 | 0,188 | 0,195 | 0,202 | 0,209 | 0,217 | 0,223 | 0,230 | 0,238 | 0,243 | 0,251 | 0,257 | 0,264 | 0,270 | 0,277 | 0,283
–20 | 0,182 | 0,188 | 0,195 | 0,202 | 0,209 | 0,215 | 0,222 | 0,229 | 0,235 | 0,242 | 0,248 | 0,255 | 0,261 | 0,267 | 0,273
–15 | 0,176 | 0,182 | 0,189 | 0,196 | 0,202 | 0,208 | 0,215 | 0,221 | 0,227 | 0,234 | 0,240 | 0,246 | 0,252 | 0,258 | 0,263
–10 | 0,171 | 0,177 | 0,183 | 0,189 | 0,195 | 0,202 | 0,208 | 0,214 | 0,220 | 0,226 | 0,232 | 0,238 | 0,244 | 0,250 | 0,255
–5 | 0,165 | 0,172 | 0,178 | 0,184 | 0,190 | 0,195 | 0,202 | 0,207 | 0,213 | 0,219 | 0,225 | 0,231 | 0,236 | 0,242 | 0,247
0 | 0,161 | 0,167 | 0,172 | 0,179 | 0,184 | 0,190 | 0,196 | 0,201 | 0,207 | 0,213 | 0,219 | 0,224 | 0,229 | 0,235 | 0,240
+5 | 0,157 | 0,162 | 0,168 | 0,174 | 0,179 | 0,185 | 0,190 | 0,196 | 0,201 | 0,207 | 0,212 | 0,217 | 0,223 | 0,228 | 0,233
+10 | 0,153 | 0,158 | 0,163 | 0,169 | 0,174 | 0,180 | 0,185 | 0,191 | 0,196 | 0,201 | 0,206 | 0,211 | 0,217 | 0,222 | 0,227
+15 | 0,149 | 0,154 | 0,159 | 0,165 | 0,170 | 0,175 | 0,180 | 0,186 | 0,191 | 0,196 | 0,201 | 0,206 | 0,211 | 0,216 | 0,221
+20 | 0,145 | 0,250 | 0,156 | 0,160 | 0,166 | 0,171 | 0,176 | 0,181 | 0,186 | 0,191 | 0,196 | 0,201 | 0,206 | 0,211 | 0,215
+25 | 0,142 | 0,147 | 0,152 | 0,157 | 0,162 | 0,167 | 0,172 | 0,177 | 0,182 | 0,186 | 0,191 | 0,196 | 0,201 | 0,206 | 0,210
+30 | 0,139 | 0,143 | 0,148 | 0,153 | 0,158 | 0,163 | 0,168 | 0,173 | 0,177 | 0,182 | 0,187 | 0,192 | 0,196 | 0,201 | 0,296
+35 | 0,136 | 0,140 | 0,145 | 0,150 | 0,154 | 0,159 | 0,164 | 0,169 | 0,173 | 0,178 | 0,182 | 0,187 | 0,192 | 0,196 | 0,201
+40 | 0,133 | 0,137 | 0,142 | 0,147 | 0,151 | 0,156 | 0,160 | 0,165 | 0,170 | 0,174 | 0,178 | 0,183 | 0,188 | 0,192 | 0,196
+50 | 0,127 | 0,132 | 0,136 | 0,141 | 0,145 | 0,149 | 0,154 | 0,158 | 0,163 | 0,167 | 0,171 | 0,175 | 0,180 | 0,184 | 0,188

Метод 3

Определение проводят методом газовой хроматографии (ОФС «Газовая хроматография») (Рис. 5).

Рисунок 5. Схема устройства газового хроматографа для анализа газообразных проб. 1 – анализируемый газ; 2 – регулятор давления; 3 – расходомер; 4 – кран-дозатор; 5 – дозирующая петля; 6 – колонка с термостатом; 7 – детектор; 8 – газ-носитель с системой регулирования потока газа; 9 – фильтр-осушитель; 10 – делитель потока газа; 11 – система сбора данных.

Устройство ввода пробы. Ввод газовой пробы осуществляется с помощью дозирующего устройства газового хроматографа – крана-дозатора для газовых проб (4) с дозирующей петлёй фиксированного объёма (5), имеющего два положения «Отбор» – «Анализ».

Испытуемый образец. Отобранный испытуемый образец без разведений.

Стандартный образец углерода диоксида в кислороде. Поверочная газовая смесь, содержащая около 0,01 % углерода диоксида в кислороде.

Хроматографические условия

Колонка | металлическая или стеклянная 2 м × 1 мм, сополимер дивинилбензол-винилпирролидона, 152–178 мкм; |
Детектор | термокондуктометрический; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Скорость потока | 10 мл/мин; |  |
Объём дозирующей петли | 250 мкл; |  |
Температура | колонка | 70–80 °С; |
| детектор | 70–80 °С; |
Время хроматографирования | 5 мин. |  |

Порядок выхода пиков: суммарный пик кислорода и азота, углерода диоксид.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограммах стандартного образца углерода диоксида:

- разрешение (R) между суммарным пиком кислорода и азота и пиком углерода диоксида должно быть не менее 1,5;

- относительное стандартное отклонение площадей пика углерода диоксида должно быть не более 10 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пика углерода диоксида не более 1 % (6 введений).

Содержание углерода диоксида в препарате в объёмных процентах (X1) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика углерода диоксида на хроматограмме испытуемого образца;
S0 – площадь пика углерода диоксида на хроматограмме стандартного образца углерода диоксида;
X0 – концентрация углерода диоксида в стандартном образце углерода диоксида в%.

Метод 4

Определение проводят с помощью индикаторной трубки на углерода диоксид согласно инструкции изготовителя.

Углерода монооксид. Не более 0,0005 % (5 ppm).

Метод 1

Определение проводят при помощи аппаратуры указанной в разделе «Углерода диоксид, метод 1».

Пропускают 2000 см3 испытуемого образца в течение 30–35 мин через склянку, содержащую 100 мл слабо нагретого серебра нитрата аммиачного раствора 5 %. Объём пропущенного испытуемого образца измеряют с помощью газометра или прибора для отбора проб газа, присоединённого к склянке на выходе газа.

Раствор должен оставаться бесцветным и прозрачным.

Метод 2

Определение проводят методом ИК-спектрометрии (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»).

Стандартный газ А. Кислород.

Стандартный газ Б. Смесь, содержащая 5 ppm (о/о) углерода монооксида в азоте.

Калибруют аппаратуру и устанавливают подходящую чувствительность с использованием стандартных газов А и Б. Измеряют содержание углерода монооксида в испытуемом образце.

Метод 3

Определение проводят методом газовой хроматографии (ОФС «Газовая хроматография»), рис. 5.

Устройство ввода пробы. Используют ту же аппаратуру, что и в разделе «Углерода диоксид», метод 2.

Испытуемый образец. Отобранный испытуемый образец без разведений.

Стандартный образец углерода монооксида в кислороде. Поверочная газовая смесь, содержащая около 0,0005 % углерода монооксида и 0,0015 % метана в кислороде.

Хроматографические условия

Колонка | металлическая или стеклянная 2 м × 1 мм, углеродное молекулярное сито, 152–178 мкм; |
Детектор | термохимический; |  |
Газ-носитель | сухой воздух; |  |
Скорость потока | 10 мл/мин; |  |
Объём дозирующей петли | 250 мкл; |  |
Температура | колонка | 70–80 °С; |
| детектор | 70–80 °С; |
Время хроматографирования | 5 мин. |  |

Порядок выхода пиков: кислород, углерода монооксид, метан.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного образца углерода монооксида:

- разрешение ® между пиками кислорода и углерода монооксида должно быть не менее 1,5;

- относительное стандартное отклонение площадей пика углерода монооксида должно быть не более 10 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пика углерода монооксида должно быть не более 2 % (6 введений).

Содержание монооксида углерода в препарате в объёмных процентах (X2) вычисляют по формуле:

где S2 – площадь пика углерода монооксида на хроматограмме испытуемого образца;
S0 – площадь пика углерода монооксида на хроматограмме стандартного образца углерода монооксида;
X0 – концентрация углерода монооксида в стандартном образце углерода диоксида,%.

Метод 4

Определение проводят с помощью индикаторной трубки на углерода диоксид согласно инструкции изготовителя.

Водяные пары. Не более 0,009 % (90 ppm).

Метод 1

Определение проводят, используя приборы для определения влажности газов типа ИВГ-1, рассчитанные на измерение точки росы в диапазоне от минус 80 до 0 °C. Абсолютная погрешность измерения точки росы должна находиться в пределах Δ2,0 °C. Относительная погрешность измерения должна быть не выше 10 % в области измерений от 0 до 20 ppm и не выше 5 % при более высоких концентрациях.

Прибор соединяют с местом отбора пробы трубкой из нержавеющей стали. Устанавливают расход кислорода от 20 до 60 дм3/ч.

Анализ проводят по инструкции, прилагаемой к прибору.

Содержание водяных паров в процентах определяют в соответствии с установившимися показаниями прибора и инструкцией к прибору.

Метод 2

Определение проводят с помощью электролитического гигрометра согласно инструкции изготовителя.

Метод 3

Определение проводят с помощью индикаторной трубки на водяные пары согласно инструкции изготовителя.

* Газообразные кислоты и основания. Для проведения испытания используют ту же аппаратуру, что и в разделе «Углерода диоксид, метод 1».

В три пронумерованные склянки для промывания газов наливают по 100 мл воды, свободной от углерода диоксида, и добавляют в каждую из них по 0,15–0,2 мл метилового красного спиртового раствора 0,2 %. Затем прибавляют к раствору в склянке № 2 0,2 мл хлористоводородной кислоты разведённой 0,037 %, а к раствору в склянке № 3–0,4 мл той же кислоты.

Через раствор в склянке № 2 пропускают 2000 см3 испытуемого образца в течение 30–35 мин.

Розовая окраска раствора в склянке № 2 должна сохраняться, в отличие от раствора в склянке № 1, окрашенного в жёлтый цвет, и должна быть не интенсивнее розовой окраски раствора в склянке № 3.

** Озон и другие газы-окислители. Для проведения испытания используют ту же аппаратуру, что и в разделе «Углерода диоксид. Метод 1».

Пропускают 2000 см3 испытуемого образца в течение 30–35 мин через склянку для промывания газов, содержащую 100 мл свежеприготовленного раствора крахмала с калия йодидом и 0,05 мл уксусной кислоты ледяной.

Полученный раствор должен оставаться бесцветным.

##### Количественное определение

Определение проводят в соответствии с ОФС «Количественное определение кислорода в лекарственных средствах на основе кислорода медицинского».

##### Хранение

В защищённом от воздействия солнечных лучей месте, вдали от огня и источников нагрева при температуре от –50 до +50 °С. Не допускается использование несовместимых с кислородом масел и смазочных материалов.

* Испытание проводят в случае если кислород газ медицинский получен из субстанции, вырабатываемой на установках, оснащённых щелочными декарбонизаторами.

** Испытание проводят в случае, если кислород газ медицинский получен из субстанции, в технологией производства которого предусмотрено образование озона и других газов окислителей.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0027 Кислород, газ медицинский сжиженный

Кислород жидкий
Oxygenium liquidum

Взамен ФС.2.2.0027.18

##### Определение

Настоящая фармакопейная статья распространяется на кислород медицинский жидкий (газ сжиженный), получаемый низкотемпературной ректификацией из атмосферного воздуха.

Кислород, газ медицинский сжиженный, является субстанцией для получения препарата «Кислород, газ медицинский сжатый».

Содержит не менее 99,5 % кислорода О2.

Отбор проб. Перед отбором пробы из криогенного сосуда сливают 1,5±0,5 л субстанции для охлаждения и промывки коммуникаций. Затем в криогенный сосуд наливают 5 л испытуемой субстанции кислорода медицинского жидкого. Из этого объёма отбирают пробы для последующих испытаний.

##### Свойства

Описание. Светло-голубая жидкость без запаха.

Примечание – Определение запаха: после испарения субстанции, отобранной для определения масла, в колбе не должно быть запаха.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Определение проводят одновременно с количественным определением. Раствор в цилиндрической части поглотительной пипетки должен окраситься в синий цвет.

2. Качественная реакция. Заливают 250 мл субстанции в колбу установки для отбора кислорода жидкого (рис. 1). Колба помещена в ящик со шлаковой ватой, охлаждённой кислородом жидким. Колбу закрывают пробкой с двумя отводными трубками. К короткой трубке с зажимом присоединяют через редуктор баллон с азотом газообразным. При открытом зажиме к длинной трубке присоединяют изготовленный из трубы МЗ-М–3×0,5 длиной 500 мм змеевиковый испаритель (рис. 2), который погружён в сосуд с водой, нагретой до 55±5 °С. Прикрывая зажим, регулируют скорость поступления кислорода медицинского жидкого в испаритель.

- Ток испытуемой субстанции пропускают в течение 15–20 мин через склянку для промывания газов, содержащую 30–50 мл раствора пирогаллола и 0,1–0,15 мл калия гидроксида раствора 10 %; раствор должен окраситься в тёмно-коричневый цвет.

- Раствор пирогаллола. Растворяют 0,5 г пирогаллола в 50 мл воды, свободной от углерода диоксида. Перед растворением через воду пропускают аргон для удаления из среды кислорода.

Рисунок 1. Установка для отбора кислорода жидкого 1 – ящик со шлаковой ватой; 2 – колба стеклянная типа К-2 500-34 ТС; 3 – пробка с двумя отводными трубками; 4 – зажим; 5 – змеевиковый испаритель; 6 – сосуд с водой. | Рисунок 2. Змеевиковый испаритель. Размеры указаны в миллиметрах.

##### Испытания

Углерода диоксид. Не более 0,03 % (300 ppm).

Метод 1

Определение проводят в установке для определения углерода диоксида (рис. 3), включающей стеклянный испаритель или колбу типа П-2-500-34 ТС (рис. 4), змеевиковый конденсатор (рис. 5), сосуд Дьюара стеклянный вместимостью 500 мл и абсорбер (рис. 6) или склянку для промывания газов типа СН-1-100 или СН-2-100.

Рисунок 3. Установка для определения углерода диоксида: 1 – зажим; 2 – резиновая трубка; 3 – испаритель; 4 – змеевиковый конденсатор; 5 – сосуд Дьюара с кислородом жидким; 6 – абсорбент.
Рисунок 4. Пробоотборники – испарители. Размеры указаны в миллиметрах. | Рисунок 5. Змеевиковый конденсатор. Размеры указаны в миллиметрах.

0,005 М раствор бария гидроксида. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,75 г бария гидроксида и 0,35 г бария хлорида и растворяют в 250±50 мл горячей воды, свободной от углерода диоксида. Раствор охлаждают, доводят объём раствора водой до метки, перемешивают и фильтруют в токе азота, свободного от углерода диоксида. Раствор должен быть защищён от доступа воздуха.

К короткой трубке испарителя присоединяют змеевиковый конденсатор. По длинной трубке в испаритель вводят газообразный азот и продувают установку в течение 5–10 мин. Затем, не прекращая тока азота, охлаждают испаритель кислородом медицинским жидким, а конденсатор погружают в сосуд Дьюара с кислородом медицинским жидким. Охлаждённую систему продувают в течение 5–10 мин. Затем помещают в испаритель 250 мл испытуемой субстанции и плотно закрывают испаритель и зажим на длинной трубке.

Рисунок 6. Абсорбер. Размеры указаны в миллиметрах.

Испытуемую субстанцию испаряют в течение 1,5–2 ч. При этом конденсатор должен быть полностью погружён в кислород жидкий. Углерода диоксид из испытуемой субстанции испаряется и затем вымораживается в конденсаторе.

После испарения всей жидкости испаритель отогревают до комнатной температуры и, открыв зажим, продувают установку слабым током азота в течение 4–5 мин. Затем, не изменяя скорости тока азота, присоединяют к конденсатору абсорбер, в который предварительно помещают 20 мл 0,005 М раствора бария гидроксида (абсорбер можно заменить тремя склянками для промывания газов, каждая из которых содержит по 20 мл того же раствора).

Не прекращая тока азота, медленно вынимают конденсатор из сосуда Дьюара, отогревают его до комнатной температуры и дополнительно продувают установку азотом в течение 6,5±1,5 мин.

После этого раствор в абсорбере титруют в токе азота 0,01 М хлористоводородной кислоты раствором (индикатор – 0,1–0,15 мл фенолфталеина раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

Содержание углерода диоксида в мл/л кислорода медицинского жидкого (X) вычисляют по формуле:

где V0 – объём хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М, израсходованный на титрование в контрольном опыте, мл;
V1 – объём хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М, израсходованный на титрование остатка 0,005 М раствора бария гидроксида в абсорбере, мл;
0,12 – объём углерода диоксида, эквивалентный 1 мл 0,005 М раствора бария гидроксида, мл;
4 – коэффициент пересчёта результатов анализа на 1 л кислорода медицинского жидкого, равный 1000:250.

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, относительное расхождение между которыми не должно превышать 10 %.

Метод 2

Определение проводят методом ИК-спектрометрии (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»).

Стандартный газ А. Кислород.

Стандартный газ Б. Смесь, состоящая из 7 % (о/о) азота и 93 % (о/о) кислорода, содержащая 300 ppm (о/о) углерода диоксида.

Калибруют аппаратуру и устанавливают подходящую чувствительность с использованием стандартных газов А и Б. Измеряют содержание углерода диоксида в испытуемой субстанции.

Метод 3

Определение проводят с помощью индикаторной трубки на углерода диоксид согласно инструкции изготовителя (ОФС «Азота оксид и азота диоксид в газах медицинских»).

Углерода монооксид. Не более 0,0005 % (5 ppm).

Метод 1

Определение проводят при помощи установки для испарения пробы жидкого кислорода (рис. 7).

Рисунок 7. Установка для испарения пробы жидкого кислорода: 1 – сосуд Дьюара; 2 – пробоотборник; 3 – зажим; 4 – резиновая трубка; 5 – уравнительная склянка.

В охлаждённый пробоотборник (рис. 4) отбирают 7–8 мл субстанции. К пробоотборнику присоединяют уравнительную склянку установки для испарения пробы жидкого кислорода с насыщенным раствором натрия хлорида. Закрыв зажим, испаряют испытуемую субстанцию в газометр, наполненный натрия хлорида насыщенным раствором. После полного испарения пробы открывают зажимы и вытесняют с помощью уравнительной склянки остаток газа из пробоотборника в газометр насыщенным раствором натрия хлорида.

Через 30 мин из газометра отбирают кислород для проведения анализа. Для вытеснения остатка газов в газометр вместо насыщенного раствора натрия хлорида можно использовать чистый газообразный азот. При этом пробоотборник продувают азотом в количестве не более 100 мл.

Анализ проводят в склянке для промывания газов. Пропускают 2000 см3 субстанции в течение 30–35 мин через склянку, содержащую 100 мл слабо нагретого серебра нитрата аммиачного раствора 5 %. Объём пропущенной субстанции измеряют с помощью газометра или прибора для отбора проб газа, присоединённого к склянке на выходе газа.

Раствор должен оставаться бесцветным и прозрачным.

Метод 2

Определение проводят методом ИК-спектрометрии (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»).

Стандартный газ А (для калибровки нуля). Кислород.

Стандартный газ Б. Смесь, содержащая 5 ppm (о/о) углерода монооксида в азоте.

Калибруют аппаратуру и устанавливают подходящую чувствительность с использованием стандартных газов А и Б. Измеряют содержание углерода монооксида в испытуемой субстанции.

Метод 3

Определение проводят с помощью индикаторной трубки на углерода диоксид согласно инструкции изготовителя.

Водяные пары. Не более 0,0067 % (67 ppm) (ОФС «Вода в газах медицинских»).

Метод 1

Определение проводят с помощью электролитического гигрометра согласно инструкции изготовителя.

Метод 2

Определение проводят с помощью индикаторной трубки на водяные пары согласно инструкции изготовителя.

Метод 3

Определение проводят, используя приборы для определения влажности газов типа ИВГ-1, рассчитанные на измерение точки росы в диапазоне от –80 до 0 °C. Абсолютная погрешность измерения точки росы должна находиться в пределах Δ2,0 °C. Относительная погрешность измерения должна быть не выше 10 % в области измерений от 0 до 20 ppm и не выше 5 % при более высоких концентрациях.

Прибор соединяют с местом отбора пробы трубкой из нержавеющей стали. Устанавливают расход кислорода от 20 до 60 дм3/ч.

Анализ проводят по инструкции, прилагаемой к прибору.

Содержание водяных паров в процентах определяют в соответствии с установившимися показаниями прибора и инструкцией к прибору.

* Ацетилен. Определение проводят в установке для определения ацетилена (рис. 8), состоящей из пробоотборника-испарителя (рис. 4), змеевикового конденсатора (рис. 5), двух поглотительных сосудов (рис. 9), сосуда Дьюара для охлаждения конденсатора и ящика со шлаковой ватой.

Рисунок 8. Установка для определения ацетилена: 1 – испаритель; 2 – ящик со шлаковой ватой; 3 – сосуд Дьюара; 4 – змеевиковый конденсатор; 5 – поглотительные сосуды; 6 – зажим; 7 – редуктор; 8 – баллон с азотом
Рисунок 9. Поглотительные сосуды. Размеры указаны в миллиметрах.

Раствор меди(II) сульфата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 34,6 г меди(II) сульфата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор гидроксиламина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 28 г гидроксиламина гидрохлорида, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор желатина. Растворяют 2 г желатина при нагревании в 100 мл воды. Срок годности раствора – 7 сут.

Поглотительный раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 150 мл раствора меди(II) сульфата, прибавляют 23,4 мл аммиака раствора концентрированного 25 % и 230 мл раствора гидроксиламина гидрохлорида. При этом раствор в колбе обесцвечивается. К полученному раствору прибавляют 45 мл раствора желатина, 330 мл спирта 96 % и доводят объём раствора водой до метки. Срок годности раствора – 24 ч.

Испаритель (плоскодонную колбу) помещают в ящик со шлаковой ватой, охлаждённой кислородом жидким или азотом жидким. В случае использования цилиндрического испарителя его обёртывают стеклотканью, которую охлаждают жидким кислородом или жидким азотом.

В испаритель вливают 250 мл субстанции и плотно закрывают испаритель резиновой пробкой с двумя отводными трубками. Короткую отводную трубку присоединяют к змеевиковому конденсатору, длинную трубку с присоединённой к ней резиновой трубкой закрывают зажимом. Конденсатор погружают в сосуд Дьюара с жидким кислородом. Для охлаждения конденсатора используют кислород жидкий, оставшийся после отбора пробы, так как при использовании кислорода с повышенным содержанием азота в змеевике может происходить конденсация кислорода, что недопустимо.

Испытуемую субстанцию испаряют в течение 1,5–2 ч. Ацетилен, содержащийся в испытуемой субстанции, испаряется и, поступая в конденсатор, вымораживается. При испарении необходимо следить, чтобы конденсатор был погружён полностью в испытуемую субстанцию. После испарения всей пробы жидкого кислорода испаритель и конденсатор продувают в течение 8–10 мин медленным током азота (1–2 пузырька в с) для удаления остатка кислорода. При этом азот вводят через длинную трубку испарителя при открытом зажиме.

Затем присоединяют к конденсатору в токе азота последовательно два поглотительных сосуда, в каждый из которых предварительно помещают по 10 мл поглотительного раствора. Второй сосуд является контрольным.

Не прекращая тока азота, вынимают конденсатор из сосуда Дьюара с жидким кислородом и отогревают конденсатор до комнатной температуры. Скорость поступления газа в поглотительные сосуды должна быть не более 1–2 пузырьков в с.

Раствор в контрольном поглотительном сосуде (второй сосуд) не должен окрашиваться; при появлении окраски необходимо уменьшить скорость поступления газа в поглотительные растворы. После отогрева конденсатора до комнатной температуры дополнительно продувают систему медленным током азота в течение 5–8 мин.

Раствор в поглотительном сосуде должен остаться бесцветным, что свидетельствует об отсутствии ацетилена.

* Газообразные кислоты и основания. Для проведения испытания используют ту же аппаратуру, что и в разделе «Углерода монооксид».

В три пронумерованные склянки для промывания газов наливают по 100 мл воды, свободной от углерода диоксида, и добавляют в каждую из них по 0,15–0,2 мл метилового красного спиртового раствора 0,2 %. Затем прибавляют к раствору в склянке №2 0,2 мл хлористоводородной кислоты разведённой 0,037 %, а к раствору в склянке №3 – 0,4 мл той же кислоты.

Через раствор в склянке №2 пропускают 2000 см3 субстанции в течение 30–35 мин.

Розовая окраска раствора в склянке №2 должна сохраняться, в отличие от раствора в склянке №1, окрашенного в жёлтый цвет, и должна быть не интенсивнее розовой окраски раствора в склянке №3.

** Масло. В сухую обезжиренную колбу вливают 1000 мл субстанции. Медленно испаряют кислород и отогревают колбу до комнатной температуры. Вливают в колбу последовательно 2 мл эфира и 2 мл уксусной кислоты ледяной. Смывают масло со дна и стенок колбы эфиром и выливают полученный раствор в пробирку для анализа. К раствору в пробирке прибавляют 5 мл воды. Через 5 мин сравнивают полученный раствор с водой.

Испытуемый раствор должен оставаться прозрачным по сравнению с водой.

*** Озон и другие газы-окислители. Для проведения испытания используют ту же аппаратуру, что и в разделе «Углерода монооксид».

Пропускают 2000 см3 субстанции в течение 30–35 мин через склянку для промывания газов, содержащую 100 мл свежеприготовленного крахмала раствора с калия йодидом и 0,05 мл уксусной кислоты ледяной.

Полученный раствор должен оставаться бесцветным.

##### Количественное определение

Определение проводят в соответствии с ОФС «Количественное определение кислорода в лекарственных средствах на основе кислорода медицинского».

##### Хранение

В защищённом от воздействия солнечных лучей месте, вдали от огня и источников нагрева при температуре от –50 до +50 °С. Не допускается использование несовместимых с кислородом масел и смазочных материалов.

* Испытание проводят для субстанции, вырабатываемой на установках, оснащённых щелочными декарбонизаторами.

** Испытание проводят для субстанции, вырабатываемой на установках, оснащённых поршневыми компрессорами и детандерами со смазкой цилиндров.

*** Испытание проводят для субстанции, в случае, если технологией производства предусмотрено образование озона и других газов-окислителей.

________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0050 Ксенон

Ксенон
Xenonum

Вводится впервые

Xe [7440-63-3] | А.м. 131,29

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Ксенон, газ сжиженный или сжатый.

Содержит не менее 99,99 % (о/о) ксенона.

Отбор проб. Отбор проб сжатого газа для испытаний производят из вертикально расположенного баллона по достижении им температуры помещения, в котором производится анализ.

Пробу ксенона из баллона отбирают в прибор для анализа или в пробоотборник специальной конструкции, предназначенный для отбора газов, при помощи редуктора или вентиля тонкой регулировки и соединительной трубки от точки отбора пробы до прибора или пробоотборника. Соединительную трубку и пробоотборник продувают не менее чем 10-кратным объёмом испытуемого образца.

При определении объёмной доли водяных паров должна использоваться соединительная трубка из коррозионностойкой стали внутренним диаметром не более 4 мм, предварительно высушенная или прокалённая.

##### СВОЙСТВА

Описание. Бесцветный газ без запаха. Не воспламеняется, не поддерживает горение.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Газовая хроматография (ГХ). Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого образца должно соответствовать времени удерживания пика ксенона на хроматограмме стандартного образца ксенона.

Определение проводят по методике 1 или 2.

Методика 1

Стандартный образец ксенона: эталонная смесь, содержащая азот, кислород, криптон, ксенон, метан и углерода диоксид.

Хроматографические условия

Колонка | 3 м × 2 мм, сополимер этилвинилбензол-дивинилбензола, 125–250 мкм; |
Детектор | гелиеворазрядный; |
Газ-носитель | гелий ≥ 99,9999 % (о/о); |
Скорость потока | 30 мл/мин; |
Температура | колонка | 30 °С;
| детектор | 120 °С;
Объём пробы | 2 мл; |
Время хроматографирования | 60 мин. |

Хроматографируют стандартный образец ксенона и испытуемый образец.

Порядок выхода пиков: азот, кислород, криптон, метан, углерода диоксид, ксенон.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме эталонной смеси относительное стандартное отклонение времени удерживания каждого пика должно быть не более 2 % (6 введений).

Методика 2

Стандартный образец ксенона: эталонная смесь, содержащая азот, криптон, ксенон, метан и углерода диоксид, гексафторэтан и тетрафторметан.

Хроматографические условия

Колонка | 9 м × 3,2 мм, Этилстирол, дивинилбензол 200–300 мкм |
Детектор | гелиеворазрядный; |
Газ-носитель | гелий ≥ 99,9999 % (о/о); |
Скорость потока | 15 мл/мин; |
Объём пробы | 1 мл |
Температура | колонка | 40 °С;
| детектор | 60 °С;
Время хроматографирования | 120 мин. |

Хроматографируют стандартный образец ксенона и испытуемый образец.

Порядок выхода пиков: азот, тетрафторметан, метан, криптон, углерода диоксид, гексафторэтан, ксенон.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме эталонной смеси относительное стандартное отклонение времени удерживания каждого пика должно быть не более 2 % (6 введений).

##### ИСПЫТАНИЯ

Углерода диоксид. Не более 0,000004 % (о/о, 0,04 ppm).

Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография», рис. 1).

Рисунок 1. Схема устройства газового хроматографа для анализа газообразных проб: 1 – испытуемый газ; 2 – регулятор давления; 3 – реометр; 4 – кран-дозатор; 5 – дозирующая петля; 6 – колонка с термостатом; 7 – детектор; 8 – газ-носитель с системой регулирования потока газа; 9 – фильтр-осушитель; 10 – делитель потока газа; 11 – система сбора данных.

Стандартный образец углерода диоксида. Смесь, содержащая 0,04 ppm (о/о) углерода диоксида.

Хроматографические условия

Определение проводят по методике 1 или 2.

Методика 1

Колонка | 3 м × 2 мм, сополимер этилвинилбензол-дивинилбензола, 125–250 мкм; |
Детектор | гелий-разрядный; |
Газ-носитель | гелий ≥ 99,9999 % (о/о); |
Скорость потока | 30 мл/мин; |
Температура | колонка | 30 °С;
| детектор | 120 °С;
Объём пробы | 2 мл; |
Время хроматографирования | 5 мин. |

Методика 2

Колонка | 9 м × 3,2 мм, сополимер стирол-дивинилбензола, 200–300 мкм; |
Детектор | гелий-разрядный; |
Газ-носитель | гелий ≥ 99,9999 % (о/о); |
Скорость потока | 15 мл/мин; |
Температура | колонка | 40 °С;
| детектор | 60 °С;
Объём пробы | 1 мл; |
Время хроматографирования | 120 мин. |

Хроматографируют (методики 1 и 2) стандартный образец углерода диоксида и испытуемый образец.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного образца углерода диоксида:

- относительное стандартное отклонение площади пика углерода диоксида должно быть не более 10 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пика углерода диоксида должно быть не более 2 % (6 введений).

Содержание углерода диоксида в испытуемом образце в объёмных процентах вычисляют согласно методу внешнего стандарта (ОФС «Хроматография»).

Метан. Не более 0,000001 % о/о (0,01 ppm).

Определение проводят методом ГХ одновременно с испытанием «Углерода диоксид» по методике 1 или 2 со следующими изменениями.

Стандартный образец метана. Смесь, содержащая 0,01 ppm (о/о) метана.

Хроматографируют стандартный образец метана и испытуемый образец.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного образца метана:

- относительное стандартное отклонение площади пика метана должно быть не более 10 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пика метана должно быть не более 2 % (6 введений).

Содержание метана в испытуемом образце в объёмных процентах вычисляют согласно методу внешнего стандарта (ОФС «Хроматография»).

Азот. Не более 0,000016 % о/о (0,16 ppm).

Определение проводят методом ГХ одновременно с испытанием «Углерода диоксид» по методике 1 или 2 со следующими изменениями.

Стандартный образец азота. Смесь, содержащая 0,16 ppm (о/о) азота.

Хроматографируют стандартный образец азота и испытуемый образец.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного образца азота:

- относительное стандартное отклонение площади пика азота должно быть не более 10 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пика азота должно быть не более 2 % (6 введений).

Содержание азота в испытуемом образце в объёмных процентах вычисляют согласно методу внешнего стандарта (ОФС «Хроматография»).

Кислород. Не более 0,00001 % о/о (0,1 ppm).

Определение проводят методом ГХ по одной из представленных методик.

Методика 1

Определение проводят методом ГХ одновременно с испытанием «Углерода диоксид» по методике 1 со следующими изменениями.

Стандартный образец кислорода. Смесь, содержащая 0,1 ppm (о/о) кислорода.

Хроматографируют стандартный образец кислорода и испытуемый образец.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного образца кислорода:

- относительное стандартное отклонение площади пика кислорода должно быть не более 10 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пика кислорода должно быть не более 2 % (6 введений).

Содержание кислорода в испытуемом образце в объёмных процентах вычисляют согласно методу внешнего стандарта (ОФС «Хроматография»).

Методика 2

Стандартный образец кислорода. Поверочная газовая смесь, содержащая 0,1 ppm (о/о) кислорода.

Хроматографические условия

Колонка | 6 м × 3 мм, молекулярное сито, 200–300 мкм, размер пор – 5 Ǻ; |
Детектор | гелиеворазрядный; |
Газ-носитель | гелий ≥ 99,9999 % (о/о); |
Скорость потока | 15 мл/мин; |
Объём пробы | 1 мл; |
Температура | колонка | 60 °С;
| детектор | 80 °С;
Время хроматографирования | 120 мин. |

Хроматографируют стандартный образец кислорода и испытуемый образец.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного образца кислорода:

- относительное стандартное отклонение площади пика кислорода должно быть не более 10 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пика кислорода должно быть не более 2 % (6 введений).

Содержание кислорода в испытуемом образце в объёмных процентах вычисляют согласно методу внешнего стандарта (ОФС «Хроматография»).

Криптон. Не более 0,000055 % о/о (0,55 ppm).

Определение проводят методом ГХ одновременно с испытанием «Углерода диоксид» по методике 1 или 2 со следующими изменениями.

Стандартный образец криптона. Смесь, содержащая 0,55 ppm (о/о) криптона.

Хроматографируют стандартный образец криптона и испытуемый образец.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного образца криптона:

- относительное стандартное отклонение площади пика криптона должно быть не более 10 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пика криптона должно быть не более 2 % (6 введений).

Содержание криптона в испытуемом образце в объёмных процентах вычисляют согласно методу внешнего стандарта (ОФС «Хроматография»).

Гексафторэтан и тетрафторметан. Не более 0,02 ppm о/о (0,000002 %) для каждого. Определение проводят одним из представленных методов.

ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»)

Инфракрасный анализатор для газов, как правило, состоит из источника широкополосного инфракрасного излучения, оптического устройства, ячейки (камеры) для образца, детектора, а в некоторых анализаторах – ячейки сравнения. Оптическое устройство может располагаться как до, так и после ячейки с образцом. Оно состоит из одного или нескольких оптических фильтров, через которые пропускается широкополосное излучение. Выбирается оптическое устройство, пригодное для определения гексафторэтана и тетрафторметана. Измеряемый световой пучок проходит через ячейку для образца, а в некоторых анализаторах и через ячейку сравнения. При наличии примеси в ячейке с образцом происходит поглощение энергии измеряемого светового пучка в соответствии с законом Ламберта-Бера, что приводит к изменению сигнала детектора. Этот измерительный сигнал сравнивается с эталонным сигналом, в результате чего формируется выходной сигнал, зависящий от концентрации примеси. Для определения содержания примеси полученный сигнал линеаризуется.

Испытуемый образец подают на вход газовой камеры прибора непосредственно с баллона редуктора, откачивают газовую камеру до остаточного давления 0,1 мм. рт. ст., подключают баллон с анализируемым газом и наполняют камеру до атмосферного давления.

Регистрируют ИК-спектр смеси, содержащей гексафторэтан и тетрафторметан при 1246–1248 см−1 и 1284–1286 см−1 соответственно.

Калибруют аппаратуру и устанавливают подходящую чувствительность. Содержание гексафторэтана и тетрафторметана в испытуемом образце в объёмных процентах вычисляют согласно методу внешнего стандарта по формуле:

где S1 и S0 – средние значения площадей пиков на хроматограммах испытуемого и стандартного растворов соответственно;
С1 и С0 – концентрации определяемого вещества в испытуемом и стандартном растворах соответственно.

Газовая хроматография (ОФС «Газовая хроматография»)

Определение проводят методом газовой хроматографии в условиях испытания «Углерода диоксид» по методике 2 со следующими изменениями.

Стандартный образец гексафторэтана и тетрафторметана. Смесь, содержащая по 0,02 ppm (о/о) гексафторэтана и тетрафторметана.

Хроматографируют стандартный образец гексафторэтана и тетрафторметана и испытуемый образец.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного образца гексафторэтана и тетрафторметана:

- относительное стандартное отклонение площади пика гексафторэтана должно быть не более 10 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение площади пика тетрафторметана должно быть не более 10 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пика гексафторэтана должно быть не более 2 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пика тетрафторметана должно быть не более 2 % (6 введений).

Содержание гексафторэтана и тетрафторметана в испытуемом образце в объёмных процентах вычисляют согласно методу внешнего стандарта (ОФС «Хроматография»).

Вода. Не более 0,009 % о/о (90 ppm). Определение проводят в соответствии с ОФС «Вода в газах медицинских» (метод 2 или 3).

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят расчётным методом.

Содержание ксенона в образце в объёмных процентах (\($X$\)) вычисляют по формуле:

где ΣXi – суммарное содержание примесей углерода диоксида, метана, азота, кислорода, криптона, гексафторэтана и тетрафторметана, ppm;
XW – вода, ppm.

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Газы медицинские», в сжиженном или сжатом виде.

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0042 Лития карбонат (Lithii carbonas)

Вводится впервые

##### Определение

Карбонат лития.

Cодержит не менее 98,5 % и не более 100,5 % лития карбоната Li2CO3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый мелкокристаллический порошок.

Растворимость. Мало растворим в воде, практически не растворим в спирте 96 %.

* Растворяется в минеральных кислотах.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Субстанцию смачивают хлористоводородной кислотой концентрированной и вносят в бесцветное пламя; оно должно окрашиваться в красный цвет.

2. Качественная реакция. Растворяют 0,2 г субстанции в 1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и выпаривают на водяной бане досуха; остаток должен растворяться в 3 мл спирта 96 %.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на карбонаты (гидрокарбонаты) (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. В химический стакан вместимостью 100 мл помещают 10 г субстанции, суспендируют в 30 мл воды, растворяют при прибавлении 22 мл азотной кислоты концентрированной и доводят рН натрия гидроксида раствором 8,5 % до 7,00. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объём раствора водой до метки. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Железо. Не более 0,002 % (ОФС «Железо», метод 2). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», и доводят объём раствора водой до метки.

Калий. Не более 0,03 %. Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1 г субстанции, растворяют в 10 мл хлористоводородной кислоты 25 % и доводят объём раствора водой до метки.

Контрольный раствор. Готовят аналогично методике приготовления «Испытуемого раствора», но без навески испытуемой субстанции.

Калибровочные растворы. Готовят серию (не менее 3) калибровочных растворов с использованием калия стандартного раствора 600 мкг/мл (ОФС «Стандартные растворы»).

Измеряют величину эмиссии при длине волны 766,5 нм контрольного, калибровочных и испытуемого растворов. Для каждого раствора проводят не менее 3 измерений. Строят калибровочную кривую зависимости средней величины эмиссии каждого калибровочного раствора от их концентрации. Содержание калия в испытуемом растворе определяют по калибровочному графику.

Кальций. Не более 0,02 % (ОФС «Кальций», метод 2). В мерную колбу вместимостью 15 мл помещают 5,0 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», и доводят объём раствора водой до метки.

Магний и щёлочноземельные металлы. Не более 0,015 % (ОФС «Магний и щёлочноземельные металлы»). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 6,7 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Мышьяк. Не более 0,0002 % (ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения используют 0,25 г субстанции.

Натрий. Не более 0,03 %. Определение проводят методом атомно-эмиссионной спектрометрии (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1 г субстанции, растворяют в 10 мл хлористоводородной кислоты 25 % и доводят объём раствора водой до метки.

Контрольный раствор. Готовят аналогично методике приготовления «Испытуемого раствора», но без навески испытуемой субстанции.

Калибровочные растворы. Готовят серию (не менее 3) калибровочных растворов с использованием натрия стандартного раствора 500 мкг/мл.

Измеряют величину эмиссии при длине волны 589 нм контрольного, калибровочных и испытуемого растворов. Для каждого раствора проводят не менее 3 измерений. Строят калибровочную кривую зависимости средней величины эмиссии каждого калибровочного раствора от их концентрации. Содержание натрия в испытуемом растворе определяют по калибровочному графику.

Сульфаты. Не более 0,02 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,25 г субстанции, растворяют в 5 мл воды и 5 мл хлористоводородной кислоты 25 %. Кипятят в течение 2 мин. Охлаждают до комнатной температуры, нейтрализуют натрия гидроксида раствором 8,5 % и доводят объём раствора водой до метки. Для определения используют 10,0 мл полученного раствора.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», и доводят объём раствора водой до метки.

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают до постоянной массы 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 200 °С.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 1). Используют 10,0 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции в колбу вместимостью 50 мл, растворяют в 25 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты и титруют 1 М раствором натрия гидроксида до перехода окраски в жёлтый (индикатор – 0,25 мл метилового оранжевого спиртовой раствор 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 36,95 мг лития карбоната Li2CO3.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0028 Магния карбонат гидрат

Магния карбонат
Magnesii subcarbonas hydricus

Взамен ФС.2.2.0028.18

##### Определение

Основный или средний гидратированный карбонат магния.

Содержит от 40,0 до 45,0 % магния оксида MgO (М.м. 40,30).

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

Растворимость. Легко растворим в хлористоводородной кислоте разведённой 8,3 % с выделением пузырьков газа и опалесценцией, умеренно растворим в уксусной кислоте разведённой 12 % с выделением пузырьков газа, практически нерастворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на карбонаты (гидрокарбонаты) (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

2. Качественная реакция. Растворяют 15 мг субстанции в 2 мл азотной кислоты разведённой 12,5 % и нейтрализуют натрия гидроксида раствором 8,5 % по бромтимоловому синему. Полученный раствор должен давать характерную реакцию на магний (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Растворимые соли. Не более 1,0 %. Смешивают 2 г субстанции с 100 мл воды и кипятят в течение 5 мин. Горячую суспензию фильтруют через стеклянный фильтр (40) в мерную колбу вместимостью 100 мл, охлаждают и доводят объём раствора водой до метки. Упаривают 50,0 мл полученного раствора досуха и высушивают до постоянной массы при температуре 100–105 °С. Масса остатка не должна превышать 10 мг.

Вещества, нерастворимые в кислоте. Не более 0,05 %. Смешивают 5 г субстанции с 75 мл воды, постепенно прибавляют при перемешивании 10 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, кипятят в течение 5 мин, охлаждают до комнатной температуры. Раствор фильтруют через беззольную фильтровальную бумагу, фильтр промывают водой до исчезновения реакции на хлориды и прокаливают при температуре 600±50 °С до постоянной массы. Масса золы не должна превышать 2,5 мг.

Потеря в массе при высушивании. Не более 4,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Барий. Растворяют при длительном взбалтывании 0,1 г субстанции в 10 мл уксусной кислоты разведённой 12 %, затем прибавляют 1 мл насыщенного раствора кальция сульфата. Раствор должен быть прозрачным.

Железо. Не более 0,005 % (ОФС «Железо», метод 1). Растворяют 0,6 г субстанции в 5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, избыток которой нейтрализуют аммиака раствором концентрированным 25 % по лакмусовой бумаге и доводят объём раствора водой до 10,0 мл.

Кальций. Не более 0,75 % (ОФС «Кальций», метод 1).

Исходный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 г субстанции, растворяют при нагревании в 100 мл уксусной кислоты разведённой 30 %, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 4,0 мл исходного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Карбонаты щелочных металлов. Нагревают до кипения 3 г субстанции в 75 мл свежепрокипячённой воды и тотчас же фильтруют. На нейтрализацию 25 мл фильтрата должно расходоваться не более 0,2 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты (индикатор – 0,1 мл фенолфталеина раствора 1 %).

Мышьяк. Не более 0,0002 % (ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения используют 0,25 г субстанции.

Сульфаты. Не более 0,6 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). Разбавляют 0,5 мл исходного раствора, полученного в испытании «Кальций», водой до объёма 15,0 мл.

Хлориды. Не более 0,05 % (ОФС «Хлориды). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 4,0 мл исходного раствора, полученного в испытании «Кальций», и доводят объём раствора водой до метки.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2). Растворяют при нагревании 5 г субстанции в 50 мл уксусной кислоты разведённой 12 %.

Микробиологическая чистота. В соответствии с
ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 0,6 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 25 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М и доводят объём раствора водой до метки. К 25,0 мл полученного раствора прибавляют 20 мл воды, 10 мл аммония хлорида буферного раствора рН 10,0 и титруют при энергичном перемешивании 0,05 М раствором натрия эдетата до синего окрашивания (индикатор – 3 капли эриохрома чёрного Т).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 2,016 мг магния оксида MgO.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0029 Магния оксид (Magnesii oxidum)

Взамен ФС.2.2.0029.18

##### Определение

Оксид магния.

Cодержит не менее 96,0 % и не более 100,5 % магния оксида MgO в пересчёте на прокалённое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый аморфный порошок.

Растворимость. Растворим в хлористоводородной кислоте разведённой 8,3 % и уксусной кислоте разведённой 30 % со слабым газообразованием, практически нерастворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в смеси 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и 0,5 мл воды; полученный раствор должен давать характерную реакцию на магний (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Растворимые соли. Не более 2,0 %.

Смешивают 2 г субстанции с 75 мл воды и кипятят в течение 5 мин. Горячую суспензию фильтруют через стеклянный фильтр (40), охлаждают и доводят объём раствора водой до 75,0 мл. Упаривают 25,0 мл полученного раствора досуха и высушивают до постоянной массы при температуре 100–105 °С. Масса остатка не должна превышать 8 мг.

Вещества, нерастворимые в кислоте. Не более 0,1 %.

Смешивают 5 г субстанции с 75 мл воды, постепенно прибавляют при перемешивании 10 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, кипятят в течение 5 мин, охлаждают до комнатной температуры. Раствор фильтруют через беззольный фильтр, фильтр промывают водой до исчезновения реакции на хлориды, сушат при комнатной температуре и прокаливают при температуре 600±50 °С. Масса золы не должна превышать 5 мг.

Потеря в массе при прокаливании. Не более 10,0 % (ОФС «Потеря в массе при прокаливании»). Помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции в платиновый тигель и прокаливают при температуре 850±50 °С до постоянной массы.

Железо. Не более 0,1 % (ОФС «Железо», метод 1).

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,3 г субстанции, растворяют в 4 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, избыток которой нейтрализуют аммиака раствором концентрированным 25 % по лакмусовой бумаге, и доводят объём раствора водой до метки.

Кальций. Не более 1,5 % (ОФС «Кальций», метод 1).

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 г субстанции, прибавляют 10 мл воды, 25 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и нагревают до кипения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Карбонаты щелочных металлов. На нейтрализацию 25 мл раствора, полученного в испытании «Растворимые соли», должно расходоваться не более 1,3 мл 0,05 М раствора хлористоводородной кислоты (индикатор – 0,1 мл фенолфталеина раствора 1 %).

Мышьяк. Не более 0,0004 % (ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения используют 0,125 г субстанции.

Сульфаты. Не более 1,0 % (ОФС «Сульфаты», метод 1).

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 г субстанции, прибавляют 10 мл воды, 25 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и нагревают до кипения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Хлориды. Не более 0,15 % (ОФС «Хлориды»).

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,67 г субстанции, прибавляют 10 мл воды, 25 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и нагревают до кипения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Тяжёлые металлы. Не более 0,0025 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2).

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 4 г субстанции, прибавляют 10 мл воды, 25 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и нагревают до кипения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 0,4 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 40 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М и доводят объём раствора водой до метки. К 25,0 мл полученного раствора прибавляют 20 мл воды, 10 мл аммония хлорида буферного раствора рН 10 и титруют при энергичном перемешивании 0,05 М раствором натрия эдетата до синего окрашивания (индикатор – 3 капли эриохрома чёрного Т).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 2,016 мг магния оксида MgO.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0010 Магния сульфат (Magnesii sulfas)

Взамен ФС.2.2.0010.15

##### Определение

Сульфат магния, гептагидрат.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % магния сульфата MgSO4·7H2O.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные призматические кристаллы.

Растворимость. Очень легко растворим в кипящей воде, легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на магний (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 2 г субстанции в 20 мл воды должен быть прозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным или выдерживать сравнение с эталоном В9 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. К 5 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 5 мл воды и 50 мкл фенолфталеина раствора 1 %; раствор должен быть бесцветным. Розовое окрашивание должно появиться от прибавления не более 0,1 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида или 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты.

Потеря в массе при прокаливании. От 40,0 до 52,0 % (ОФС «Потеря в массе при прокаливании»).

Сушат 1 г (точная навеска) субстанции в течение 2,5 ч при температуре от 100 до 105 °С, а затем прокаливают при температуре 600±50 °С до постоянной массы.

Железо. Не более 0,002 % (ОФС «Железо»). Для определения 1,5 г субстанции растворяют в воде и доводят объём раствора водой до 10 мл.

Марганец. Не более 0,004 %.

Растворяют 1,25 г субстанции в 5 мл воды, прибавляют 0,5 мл серной кислоты концентрированной, 0,2 мл 0,1 М раствора серебра нитрата и нагревают до кипения. Прибавляют 2 мл аммония персульфата раствора 20 % и снова нагревают до кипения.

Проводят контрольный опыт с 5 мл воды и теми же реактивами.

Оба раствора охлаждают до комнатной температуры и переносят в одинаковые пробирки. В пробирку с контрольным опытом прибавляют из микробюретки 0,01 М раствор калия перманганата до тех пор, пока окраска не сравняется с окраской испытуемого раствора. Сравнение окрасок проводят на белом фоне по оси пробирок.

1 мл 0,01 М раствора калия перманганата соответствует 0,11 мг марганца.

Если субстанция предназначена для производства лекарственных препаратов для парентерального применения, используют раствор сравнения без прибавления 0,01 М раствора калия перманганата; в такой субстанции марганца не должно быть.

Мышьяк. Не более 0,0002 % (ОФС «Мышьяк»). Для определения используют 0,25 г субстанции.

Хлориды. Не более 0,004 % (ОФС «Хлориды»). К 5 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 5 мл воды.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2). Для определения используют 10 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,07 ЕЭ на 1 мг магния сульфата (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,15 г (точная навеска) субстанции в 50 мл воды, прибавляют 5 мл аммония хлорида буферного раствора pH 10 и титруют при энергичном перемешивании 0,05 М раствором натрия эдетата до появления синего окрашивания (индикатор – 3 капли эриохрома чёрного Т).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 12,32 мг магния сульфата MgSO4∙7H2O.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0030 Мышьяка триоксид (Arsenici trioxidum)

Взамен ФС.2.2.0030.18

##### Определение

Оксид мышьяка(III).

Содержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % мышьяка триоксида As2O3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Тяжёлые белые или почти белые фарфоровидные или стекловидные куски, часто слоистого строения, или белый или почти белый порошок.

Примечание – Для измельчения кусков мышьяка триоксида, их смачивают спиртом 96 %, затем осторожно растирают в фарфоровой ступке, после чего порошок высушивают на воздухе.

Растворимость. Легко растворим в хлористоводородной кислоте 25 % и глицерине, растворим в гидроксида натрия растворе 1 М.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. При медленном нагревании в пробирке под тягой субстанция возгоняется, оседая на стенках пробирки в виде кристаллов.

2. Качественная реакция. Растворяют 20 мг субстанции в 1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 %, прибавляют 4 мл воды и 0,1 мл натрия сульфида раствор в глицерине; должен образоваться жёлтый осадок, растворимый в аммиака растворе 10 %.

3. Качественная реакция. Растворяют 20 мг субстанции в 1 мл хлористоводородной кислоты 25 %, прибавляют 5 мл натрия гипофосфита раствора и выдерживают в течение 15 минут на кипящей водяной бане; должен образоваться чёрный осадок.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Растворяют 1 г субстанции в 10 мл аммиака раствора 10 % при нагревании до 60 °С. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 1).

Сульфиды. Не более 0,002 %. Растворяют 1,0 г субстанции в 10,0 мл натрия гидроксида раствора 8,5 %. Прибавляют 50 мкл свинца(II) ацетата раствора 9,5 %. Окраска испытуемого раствора должна выдерживать сравнение со стандартным раствором, приготовленным одновременно таким же образом с использованием смеси 10,0 мл натрия сульфида раствора 0,015 г/л в натрия гидроксида растворе 8,5 % и 50 мкл свинца(II) ацетата раствора 9,5 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 40 мг (точная навеска) субстанции в смеси 10 мл воды и 10 мл натрия гидроксида раствора 2 М. Прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % и 3 г натрия гидрокарбоната, перемешивают. Прибавляют 1 мл крахмала раствора 1 % и титруют 0,05 М раствором йода.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора йода соответствует 4,946 мг мышьяка триоксида As2O3.

##### Хранение

В плотно закрытой упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0031 Натрия бромид (Natrii bromidum)

Взамен ФС.2.2.0031.18

##### Определение

Бромид натрия.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % натрия бромида NaBr в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или мелкие бесцветные прозрачные или непрозрачные кристаллы.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко или легко растворим в воде, растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на бромиды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Кислотность или щёлочность. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 г субстанции, растворяют в воде, свободной от диоксида углерода, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. К 10,0 мл полученного раствора прибавляют 0,1 мл бромтимолового синего раствора 0,05 %. Окраска раствора должна изменяться при прибавлении не более 0,5 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида или 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты.

Потеря в массе при высушивании. Не более 3,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Барий. Растворяют 0,5 г субстанции в 10 мл воды, прибавляют 0,5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и 1 мл калия сульфата раствора 1 %, выдерживают в течение 10 мин; не должно наблюдаться помутнение раствора.

Броматы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 г субстанции, растворяют в воде, свободной от диоксида углерода, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. К 10 мл полученного раствора прибавляют 1 мл крахмала раствора 0,1 %, 0,1 мл калия йодида раствора 10 % и 0,25 мл серной кислоты раствора 0,5 М. Выдерживают в защищённом от света месте в течение 5 мин. Не должно появляться синей или фиолетовой окраски.

Йодиды. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора, полученного в испытании «Сульфаты», и доводят объём раствора водой до метки. Полученный раствор не должен окрашиваться в синий цвет в течение 10 мин от прибавления 0,15 мл железа(III) хлорида раствора 3 % и 0,1 мл крахмала раствора 1 %.

Железо. Не более 0,001 % (ОФС «Железо», метод 1). Для определения 3 г субстанции растворяют в 10 мл воды.

Магний и щёлочноземельные металлы. Не более 0,02 % в пересчёте на кальций (ОФС «Магний и щёлочноземельные металлы»). Для определения используют 10 г субстанции. Объём израсходованного на титрование 0,01 М раствора натрия эдетата не должен превышать 5,0 мл.

Мышьяк. Не более 0,0001 % (ОФС «Мышьяк»). Для определения используют 0,5 г субстанции.

Сульфаты. Не более 0,01 % (ОФС «Сульфаты»). В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 2 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Хлориды. Не более 0,6 %. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В коническую колбу вместимостью 250 мл помещают 1 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 20 мл азотной кислоты разведённой 12,5 %, прибавляют 5 мл водорода пероксида и нагревают на водяной бане до обесцвечивания раствора. Промывают стенки колбы небольшим количеством воды и продолжают нагревание в течение 15 мин. Охлаждают до комнатной температуры, доводят объём раствора водой до 50 мл, прибавляют 5,0 мл 0,1 М раствора серебра нитрата, 1 мл дибутилфталата и 5 мл железа(III) аммония сульфата раствора 10 %. Избыток серебра нитрата титруют 0,1 М раствором аммония тиоцианата до красно-коричневого окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 3,545 мг хлорид-иона.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл раствора, полученного в испытании «Сульфаты», и доводят объём раствора водой до метки.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в воде, прибавляют 5 мл азотной кислоты разведённой 12,5 %, доводят объём раствора водой до 50 мл и титруют 0,1 М раствором серебра нитрата. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с индикатором (0,1 мл калия хромата раствора 5 %) до оранжево-жёлтого окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 10,29 мг натрия бромида NaBr.

Содержание натрия бромида NaBr в субстанции в процентах (X) с поправкой на содержание хлоридов вычисляют по формуле:

где A – полученное содержание NaBr и NaCl в пересчёте на NaBr,%;
B – содержание хлорид-иона,%;
2,902 – отношение молекулярных масс натрия бромида и хлорид-иона.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0011 Натрия гидрокарбонат (Natrii hydrogenocarbonas)

Взамен ФС.2.2.0011.15

##### Определение

Гидрокарбонат натрия.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % натрия гидрокарбоната NaHCO3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерные реакции А и Б на карбонаты (гидрокарбонаты) (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 5 г субстанции в 100 мл воды, свободной от диоксида углерода, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,25 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Сушат в вакуум-эксикаторе над серной кислотой до постоянной массы 4 г (точная навеска) субстанции.

Аммоний. Не более 0,002 % (ОФС «Аммоний»). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Железо. Не более 0,005 % (ОФС «Железо»). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,6 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Кальций. Не более 0,01 % (ОФС «Кальций»). Суспендируют 1 г субстанции в 10 мл воды. К полученной смеси прибавляют хлористоводородную кислоту концентрированную до нейтральной реакции среды и доводят объём раствора водой до 15 мл.

Карбонаты. Значение рН свежеприготовленного раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», должно быть не более 8,6 (ОФС «Ионометрия», метод 3).

Мышьяк. Не более 0,0002 % (ОФС «Мышьяк»). Для определения используют 0,25 г субстанции.

Сульфаты. Не более 0,015 % (ОФС «Сульфаты»). Суспендируют 1 г субстанции в 10 мл воды. К полученной смеси прибавляют хлористоводородную кислоту концентрированную до нейтральной реакции среды и 1 мл сверх того, и доводят объём раствора водой до 15 мл.

Хлориды. Не более 0,015 % (ОФС «Хлориды»). К 4 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 2 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до 15 мл.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 1). Растворяют 1,0 г субстанции в 10 мл воды.

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,04 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 20 мл воды, свободной от углерода диоксида, и титруют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты (индикатор – 0,1 мл метилового оранжевого спиртового раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 8,401 мг натрия гидрокарбоната NaHCO3.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0032 Натрия йодид (Natrii iodidum)

Взамен ФС.2.2.0032.18

##### Определение

Йодид натрия.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % натрия йодида NaI в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте 96 % и глицерине.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерные реакции на йодиды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерные реакции на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

** Прозрачность раствора. Раствор 2 г субстанции в 20 мл воды, свободной от диоксида углерода, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

** Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Щёлочность. К 12,5 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 0,1 мл бромтимолового синего раствора 0,05 %. Окраска раствора должна измениться при прибавлении не более 0,7 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты.

Потеря в массе при высушивании. Не более 3,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Барий. Растворяют 0,5 г субстанции в 10 мл воды, прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и 1 мл серной кислоты разведённой 16 %. Раствор должен быть прозрачным.

Железо. Не более 0,002 % (ОФС «Железо», метод 2). Растворяют 0,5 г субстанции в 10 мл воды.

Йодноватая кислота, тиосульфаты, сульфиты. Растворяют 0,5 г субстанции в 10 мл свежепрокипячённой воды, прибавляют по 0,1 мл крахмала раствора 1 % и серной кислоты разведённой 16 %; в течение 30 с не должно появляться синее окрашивание, заметное при рассмотрении жидкости по оси пробирки. Синее окрашивание должно появиться при прибавлении не более 0,05 мл 0,1 М раствора йода.

Мышьяк. Не более 0,0001 % (ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения используют 1 г субстанции.

Нитраты. К 1 г субстанции прибавляют 5 мл натрия гидроксида раствора 10 %, 0,5 г цинковых и 0,5 г железных опилок и нагревают. Выделяющиеся пары не должны вызывать посинения влажной красной лакмусовой бумаги.

Сульфаты. Не более 0,015 % (ОФС «Сульфаты», метод 1). В 15 мл воды растворяют 1 г субстанции.

Примечание – Если после прибавления хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % в анализируемом растворе появляется жёлтая окраска, для её обесцвечивания прибавляют 0,05–0,10 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата; равный объём 0,1 М раствора натрия тиосульфата прибавляют в раствор сравнения.

Цианиды. Растворяют 0,5 г субстанции в 5 мл воды, прибавляют 0,25 мл железа(II) сульфата раствора в серной кислоте, 0,1 мл железа(III) хлорида раствора 3 %, 1 мл натрия гидроксида раствора 10 % и нагревают. После подкисления хлористоводородной кислотой разведённой 8,3 % раствор не должен окрашиваться в синий цвет.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 1). Растворяют 1 г субстанции в 10 мл воды.

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,35 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 30 мл воды, прибавляют 1,5 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и титруют 0,1 М раствором серебра нитрата до изменения цвета осадка от жёлтого к розовому (индикатор – 0,3 мл эозина Н раствора 0,1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 14,99 мг натрия йодида NaI.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0012 Натрия тетраборат (Natrii tetraboras)

Взамен ФС.2.2.0012.15

##### Определение

Тетраборат натрия, декагидрат.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 103,0 % натрия тетрабората Na2B4O7·10H2O.

##### Свойства

Описание. Белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

* Выветривается на воздухе.

Растворимость. Очень легко растворим в кипящей воде, легко растворим в глицерине 85 %, растворим в воде, почти нерастворим в спирте.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. К 5 мл 4 % раствора субстанции в воде прибавляют 0,1 мл 0,1 % раствора фенолфталеина; раствор должен окраситься в красный цвет. При прибавлении 5 мл 85 % глицерина раствор должен обесцветиться.

2. Качественная реакция. К 0,2 г субстанции прибавляют 1 мл серной кислоты концентрированной, 3 мл спирта 96 % и перемешивают. При зажигании смесь должна гореть пламенем, окаймлённым зелёным цветом.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерные реакции А и Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Растворяют 4 г субстанции в 100 мл воды, свободной от углерода диоксида. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН. От 9,0 до 9,6 (4 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Аммоний. Не более 0,001 % (ОФС «Аммоний»). Определение проводят с использованием эталонного раствора, содержащего 2 мл стандартного раствора аммоний-иона (2 мкг/мл) и 8 мл воды. Для определения используют 10 мл 4 % раствора субстанции в воде.

Железо. Не более 0,004 % (ОФС «Железо», метод 2).

Испытуемый раствор. К 6 мл 4 % раствора субстанции в воде прибавляют 4 мл воды и перемешивают.

Кальций. Не более 0,01 % (ОФС «Кальций», метод 2). Определение проводят с использованием эталонного раствора, содержащего 6 мл стандартного раствора кальций-иона (10 мкг/мл), 1 мл уксусной кислоты разведённой 12 % и 9 мл воды. Для определения используют 15 мл 4 % раствора субстанции в воде.

Карбонаты. Растворяют 0,25 г субстанции в 5 мл воды и прибавляют 1 мл 3 М раствора хлористоводородной кислоты; не должно наблюдаться выделения пузырьков газа.

Мышьяк. Не более 0,0005 % (ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения используют 0,1 г субстанции.

Сульфаты. Не более 0,005 % (ОФС «Сульфаты», метод 2). Определение проводят с использованием эталонного раствора, содержащего 3 мл стандартного раствора сульфат-иона (10 мкг/мл) и 12 мл воды. Для определения используют 15 мл 4 % раствора субстанции в воде.

Тяжёлые металлы. Не более 0,0025 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2) Для определения используют 10 мл 4 % раствора субстанции в воде.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,5 г (точная навеска) субстанции в 30 мл воды и титруют 0,1 М раствором хлористоводородной кислоты до розово-оранжевого окрашивания (индикатор – 2 капли 0,1 % раствора метилового оранжевого).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты соответствует 19,07 мг натрия тетрабората Na2B4O7·10H2O.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0043 Натрия тиосульфат пентагидрат

Натрия тиосульфат
Natrii thiosulfas pentahydricus

Взамен ФС 42-2871-98

##### Определение

Тиосульфат динатрия, пентагидрат.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 102,0 % натрия тиосульфата пентагидрата Na2S2O3·5H2O.

##### Свойства

Описание. Бесцветные прозрачные кристаллы.

* В тёплом сухом воздухе выветривается, во влажном воздухе расплывается. Растворяется в собственной кристаллизационной воде при температуре около 50 °С.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 2 мл воды, прибавляют 0,2 мл хлористоводородной кислоты 25 %; должно наблюдаться помутнение раствора вследствие выделения серы с одновременным выделением серы диоксида, обнаруживаемого по характерному запаху.

2. Качественная реакция. Растворяют 1 г субстанции в 10 мл воды. К 0,5 мл полученного раствора прибавляют 0,5 мл воды и 2 мл серебра нитрата раствора 0,1 М; должен выпасть осадок белого цвета, быстро переходящего в жёлтый, бурый и затем в чёрный.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г субстанции в 2 мл воды, прибавляют 4 мл йода раствора 0,1 М; раствор должен обесцветиться.

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерные реакции А и Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 3 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Щёлочность. Растворяют 0,5 г субстанции в 5 мл свежепрокипячённой и охлаждённой воды, прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствора 0,1 %; раствор не должен окрашиваться в розовый цвет.

Железо. Не более 0,002 % (ОФС «Железо», метод 1). К 5 мл раствора, полученного в испытании «Тяжёлые металлы», прибавляют 5 мл воды. Полученный раствор должен выдерживать испытание на железо. Окраску испытуемого раствора сравнивают с эталонным раствором в течение первых 2–3 мин, поскольку затем наступает помутнение раствора. В качестве эталонного раствора используют 10 мл железа стандартного раствора 1 мкг/мл.

Кальций. Раствор 1 г субстанции в 10 мл воды не должен давать характерные реакции на кальций (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

Мышьяк и селен. Не должно наблюдаться ни побурения, ни образования бурого осадка (ОФС «Мышьяк», метод 2). В фарфоровую чашку помещают 5 г субстанции, прибавляют 10 мл азотной кислоты и выпаривают на водяной бане досуха. К полученному остатку прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты 25 %, нагревают на водяной бане в течение 20 мин, охлаждают до комнатной температуры и фильтруют.

Сульфиды. Растворяют 1 г субстанции в 10 мл воды; прибавляют 1 каплю аммиака раствора и 1 каплю натрия нитропруссида раствора 5 %; не должно появляться фиолетовое окрашивание.

Сульфиты, сульфаты. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфаты», метод 2). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 г субстанции, растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. К 3,0 мл полученного раствора прибавляют 2 мл калия йодида йодированного раствора и продолжают прибавлять по каплям тот же раствор до появления очень слабого, но устойчивого желтоватого окрашивания. Доводят объём раствора водой до 15 мл.

Хлориды. Не более 0,005 % (ОФС «Хлориды»). В фарфоровой чашке в 15 мл воды растворяют 1 г субстанции, прибавляют 3 мл азотной кислоты и выпаривают на водяной бане досуха. Полученный остаток суспендируют в 25 мл воды и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 1). В коническую колбу вместимостью 100 мл помещают 2 г субстанции, прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и упаривают на водяной бане досуха. К полученному остатку прибавляют 60 мл воды и кипятят до полной коагуляции серы, пока раствор над осадком не станет прозрачным (20–30 мин). Полученный раствор охлаждают до комнатной температуры, фильтруют и упаривают до объёма 20 мл. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,023 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,5 г (точная навеска) субстанции растворяют в 25 мл воды и титруют 0,05 М раствором йода (индикатор – 1,0 мл крахмала раствора 1 %).

1 мл 0,05 М раствора йода соответствует 24,82 мг натрия тиосульфата пентагидрата Na2S2O3∙5Н2O.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0013 Натрия фторид (Natrii fluoridum)

Взамен ФС.2.2.0013.15

##### Определение

Фторид натрия.

Содержит не менее 98,5 % и не более 100,5 % натрия фторида NaF в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Растворим или умеренно растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. К 2 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 0,5 мл кальция хлорида раствора 7,35 %; должен образоваться белый желеобразный осадок, который растворяется при прибавлении 5 мл железа(III) хлорида раствора 10,5 %.

2. Качественная реакция. К 1 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют смесь 0,2 мл ализарина S раствора 0,1 % и 0,2 мл цирконила нитрата раствора 0,1 %; красный цвет раствора должен перейти в жёлтый.

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 100 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Кислотность или щёлочность. Растворяют 2,5 г калия нитрата в 40 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», доводят объём раствора водой до 50 мл, охлаждают до 0 °С и прибавляют 0,2 мл фенолфталеина раствора 0,1 %.

Если раствор бесцветный, должно потребоваться не более 1,0 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида для получения стабильного в течение 15 с розового окрашивания.

Если раствор розовый, на его обесцвечивание должно потребоваться не более 0,25 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты.

Сульфаты. Не более 0,02 %.

Раствор алюминия нитрата. Растворяют 11,15 г алюминия нитрата в 50 мл воды.

Испытуемый раствор. Растворяют 0,25 г субстанции в 10 мл раствора алюминия нитрата. Прибавляют 5 мл воды и 0,6 мл хлористоводородной кислоты 25 %.

Эталонный раствор. К 10 мл раствора алюминия нитрата прибавляют 5 мл сульфата стандартного раствора 10 мкг/мл и 0,6 мл хлористоводородной кислоты 25 %.

К испытуемому и эталонному растворам прибавляют 3 мл бария хлорида раствора 25 %, встряхивают и выдерживают в течение 1 мин. Через 5 мин сравнивают мутность испытуемого и эталонного растворов. Мутность, появившаяся в испытуемом растворе, не должна превышать мутность эталонного раствора.

Фторсиликаты. Раствор, нейтрализованный в результате испытания на кислотность или щёлочность, нагревают до кипения. Горячий раствор титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Не исчезающее розовое окрашивание раствора должно образоваться от прибавления не более 0,75 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида.

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). К 4 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 6 мл воды.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят в соответствии с ОФС «Ионометрия» (метод градуировочного графика) с использованием фторселективного индикаторного электрода.

Примечание – Все растворы, кроме буферного, необходимо хранить в пластмассовой посуде.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 22 мг (точная навеска) субстанции (соответствует около 10 мг фторид-ионов), растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 42 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца натрия фторида, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. 1 мл полученного раствора содержит около 190 мкг фторид-ионов.

Стандартный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 25 мл стандартного раствора А и доводят объём раствора водой до метки. 1 мл полученного раствора содержит около 19 мкг фторид-ионов.

Стандартный раствор В. Помещают 25 мл стандартного раствора Б в мерную колбу вместимостью 250 мл, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают. 1 мл полученного раствора содержит около 1,9 мкг фторид-ионов.

Буферный раствор. Растворяют 5,7 мл уксусной кислоты, 58 г натрия хлорида и 4 г циклогексилендинитрилтетрауксусной кислоты в 500 мл воды, доводят рН натрия гидроксида раствором 20 % до 5,25, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор выдерживают в течение 24 ч.

В отдельные химические стаканы вместимостью 100 мл помещают по 20 мл испытуемого и стандартных растворов А, Б и В. В каждый стакан прибавляют по 20 мл буферного раствора. Каждый раствор перемешивают в течение 2 мин.

В каждый раствор последовательно погружают фторселективный индикаторный электрод и хлорсеребряный электрод сравнения и при перемешивании производят измерение разности потенциалов иономером или рН-метром.

Строят калибровочный график зависимости разности потенциалов от логарифма концентрации фторид-ионов. По графику находят значение логарифма концентрации (lgС) для испытуемого раствора.

Концентрацию фторид-ионов в испытуемом растворе (С) в мкг/мл вычисляют по формуле:

где х = lgС

Содержание натрия фторида в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где С – концентрация фторид-ионов, найденная и рассчитанная по калибровочному графику, мкг/мл;
a1 – навеска субстанции, мг;
1000 – пересчёт мг в мкг;
2,21 – коэффициент пересчёта фторид-ионов в натрия фторид;
P – содержание натрия фторида в фармакопейном стандартном образце натрия фторида,%.

##### Хранение

В хорошо укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0014 Натрия хлорид (Natrii chloridum)

Взамен ФС.2.2.0014.15

##### Определение

Хлорид натрия.

Содержит не менее 99,0 % натрия хлорида NaCl в пересчёте на сухое вещество для субстанции, предназначенной для производства нестерильных лекарственных препаратов.

Содержит не менее 99,5 % натрия хлорида NaCl в пересчёте на сухое вещество для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения и глазных капель.

##### Свойства

Описание. Белый кристаллический порошок или крупинки, или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

Качественная реакция. Раствор 0,1 г субстанции в 2 мл воды должен давать характерную реакцию А на натрий и характерную реакцию А на хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 20 г субстанции в 100 мл воды, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

Кислотность или щёлочность. К 20 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 0,1 мл бромтимолового синего раствора 0,05 %. Окраска раствора должна измениться от прибавления не более 0,5 мл 0,01 М раствора натрия гидроксида или не более 0,5 мл 0,01 М раствора хлористоводородной кислоты.

Алюминий. Не более 0,00002 % (0,2 ppm, ОФС «Алюминий», метод 1 или 2).

Метод 1

Испытуемый раствор. Растворяют 20,0 г субстанции в воде и доводят объём раствора водой до 100,0 мл. Прибавляют 10,0 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0.

Эталонный раствор. К 2,0 мл алюминия стандартного раствора 2 мкг/мл прибавляют 10,0 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 и 98,0 мл воды.

Контрольный раствор. К 10,0 мл ацетатного буферного раствора рН 6,0 прибавляют 100,0 мл воды.

Метод 2

Для определения используют 10,0 г субстанции.

Аммоний. Не более 0,004 % (40 ppm, ОФС «Аммоний»). Растворяют 0,5 г субстанции в воде и доводят объём раствора водой до 10,0 мл воды.

Барий. К 5 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 5 мл воды и 2 мл серной кислоты разведённой 9,8 %. Через 2 ч мутность полученного раствора не должна превышать мутность эталонного раствора, содержащего 5 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», и 7 мл воды.

Бромиды. Не более 0,01 % (100 ppm). Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»)

Испытуемый раствор. К 0,5 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 4 мл воды.

Эталонный раствор. 5,0 мл раствора калия бромида (3,0 мкг/мл).

К испытуемому и эталонному растворам прибавляют по 2,0 мл фенолового красного раствора (3), 1,0 мл хлорамина Т раствора 0,01 % и сразу перемешивают. Точно через 2 мин прибавляют по 0,15 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата, перемешивают, доводят объёмы растворов водой до 10 мл и измеряют оптическую плотность при 590 нм относительно воды.

Оптическая плотность испытуемого раствора не должна превышать оптическую плотность эталонного раствора.

Железо. Не более 0,0002 % (2 ppm, ОФС «Железо», метод 2). Для определения используют раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», а также эталонный раствор, содержащий 4,0 мл железа стандартного раствора 1 мкг/мл и 6,0 мл воды.

Йодиды. Увлажняют 5 г субстанции по каплям свежеприготовленной смесью, состоящей из 0,15 мл 10 % раствора натрия нитрита, 2 мл 0,5 М раствора серной кислоты, 25 мл 1 % раствора крахмала и 25 мл воды. Через 5 мин увлажнённую субстанцию просматривают при дневном освещении – голубое окрашивание должно отсутствовать.

Калий. Не более 0,05 % (500 ppm). Испытание проводят одним из методов: визуальный (метод 1) или методом АЭС или ААС (метод 2).

Метод 1

Испытуемый раствор. Растворяют 0,2 г субстанции в воде и доводят объём раствора водой до 10,0 мл.

Эталонный раствор. К 5,0 мл калия стандартного раствора 20 мкг/мл прибавляют 5,0 мл воды.

К испытуемому и эталонному растворам прибавляют по 2 мл натрия тетрафенилбората раствора 1 %. Через 5 мин опалесценция испытуемого раствора не должна превышать опалесценцию эталонного раствора.

Метод 2

Калия стандартный раствор 600 мкг/мл (ОФС «Стандартные растворы»).

Испытуемый раствор. 1,00 г субстанции помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Разведение стандартного и испытуемого раствора производят в соответствии с инструкцией к прибору и проводят определение содержания ионов калия методом атомной эмиссии (метод прямой калибровки) или атомной абсорбции при длине волны 766,5 нм.

Мышьяк. Не более 0,0001 % (1 ppm, ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения используют 0,5 г субстанции.

Нитриты. К 10 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 10 мл воды и перемешивают. Оптическая плотность полученного раствора, измеренная в кювете с толщиной слоя 10 мм при длине волны 354 нм относительно воды, должна быть не более 0,01 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Сульфаты. Не более 0,02 % (200 ppm, ОФС «Сульфаты», метод 2). Для определения 7,5 мл раствора, приготовленного для испытания «Прозрачность раствора», доводят водой до 30 мл.

Ферроцианиды. К 2,0 г субстанции, растворённой в 6 мл воды, прибавляют 0,5 мл раствора, состоящего из 5 мл железа(III) аммония сульфата раствора 1 % в серной кислоты растворе 0,14 % (о/о) и 95 мл железа(II) сульфата раствора 1 %, и перемешивают; в течение 10 мин не должно появляться синее окрашивание.

Фосфаты. Не более 0,0025 % (25 ppm, ОФС «Фосфаты»). К 2,0 мл раствора, приготовленного для испытания «прозрачность раствора», прибавляют 98,0 мл воды.

Магний и другие щёлочноземельные металлы. Не более 0,01 % (100 ppm) в пересчёте на кальций. К 200 мл воды прибавляют 0,1 г гидроксиламина гидрохлорида, 10 мл аммония хлорида буферного раствора рН 10,0, 1 мл 0,1 М раствора цинка сульфата и 150 мг индикаторной смеси эриохрома чёрного Т. Нагревают до температуры 40 °С. Титруют 0,01 М раствором натрия эдетата до перехода окраски из фиолетовой в синюю. К полученному раствору прибавляют 100 мл водного раствора, содержащего 10,0 г субстанции, и перемешивают. Если цвет раствора изменился на фиолетовый, то его титруют 0,01 М раствором натрия эдетата до появления синего окрашивания. На второе титрование должно пойти не более 2,5 мл 0,01 М раствора натрия эдетата.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,0005 % (5 ppm, ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2). Для определения используют раствор, приготовленный для испытания «Прозрачность раствора».

Бактериальные эндотоксины. Не более 5 ЕЭ на 1 г натрия хлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 50 мг (точная навеска) субстанции (при определении конечной точки титрования потенциометрически) или 0,1 г (точная навеска) субстанции (при определении конечной точки титрования с помощью индикатора) в 50 мл воды и титруют 0,1 M раствором серебра нитрата. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с индикатором – калия хромата раствором 5 %, до перехода окраски в оранжево-жёлтую.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 5,844 мг натрия хлорида NaCl.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0033 Серебра нитрат (Argenti nitras)

Взамен ФС.2.2.0033.18

##### Определение

Нитрат серебра.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % серебра нитрата AgNO3 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные прозрачные кристаллы.

* Под действием света темнеет.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, растворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерные реакции А и Б на серебро (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на нитраты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Кислотность. Растворяют 1 г субстанции в 10 мл воды, прибавляют 50 мкл метилового красного спиртового раствора 0,1 %; должно появиться розовое окрашивание. Для изменения окраски раствора на жёлтую должно потребоваться не более 0,1 мл 0,05 М раствора натрия гидроксида.

Алюминий, висмут, медь, свинец. Растворяют 1 г субстанции в 10 мл аммиака раствора 10 %. Полученный раствор должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2) и прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,2 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,3 г (точная навеска) субстанции в 50 мл воды, прибавляют 5 мл азотной кислоты разведённой 16 % и титруют 0,1 М раствором аммония тиоцианата до перехода окраски в оранжевую (индикатор – 2 мл железа(III) аммония сульфата раствора 10 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора аммония тиоцианата соответствует 16,99 мг серебра нитрата AgNO3.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0044 Смектит диоктаэдрический (Smectitum dioctaedricum)

Вводится впервые

##### Определение

Представляет собой минерал природного происхождения – смесь частиц монтмориллонита и сапонита, очищенную от песка и не набухающих компонентов руды. Состав его представлен различными соединениями, основными из которых являются кремния диоксид, алюминия оксид и магния оксид.

Содержит кремния диоксид не менее 55,0 % и не более 65,0 % в пересчёте на сухое вещество.

Содержит алюминий и магний в соотношении не менее 0,5 и не более 2,8.

##### Свойства

Описание. Почти белый с сероватым или светло-серый с розоватым, или слегка красноватым, или зеленоватым, или желтовато-коричневатым оттенком тонкий порошок.

Растворимость. Практически нерастворим в воде и спирте 96 %.

* При смешивании с водой образует мутную взвесь.

##### Идентификация

Испытуемый образец. Около 1 г субстанции спекают с 2 г натрия карбоната безводного при температуре 800 °С в течение 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, нагревают до закипания, охлаждают до комнатной температуры и фильтруют. Фильтрат помещают в фарфоровый тигель и упаривают досуха на водяной бане.

1. Качественная реакция. Субстанция должна давать реакцию на силикаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»). Для определения используют около 0,25 г испытуемого образца.

2. Качественная реакция. Остаток после проведения качественной реакции 1 растворяют в 5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 % и 10 мл воды, фильтруют через бумажный фильтр или центрифугируют в течение 30 мин при 3000 об/мин. К фильтрату прибавляют аммония хлорида буферный раствор pH 10,0 до образования белого желатинообразного осадка. Смесь фильтруют через бумажный фильтр (фильтрат используют для проведения качественной реакции 3). Полученный осадок растворяют в 2,0 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %. Полученный раствор должен давать характерную реакцию на алюминий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

3. Качественная реакция. Фильтрат, полученный при проведении качественной реакции 2, должен давать характерную реакцию на магний (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

4. Рентгеновская порошковая дифрактометрия. Проводят определение в соответствии с ОФС «Рентгеновская порошковая дифрактометрия», регистрируя дифрактограммы субстанции и определяя значения d-отражения в диапазоне от 1,48 до 1,55 Å. Должен присутствовать пик только в области, соответствующей от 1,492 до 1,504 Å.

##### Испытания

pH. От 8,0 до 10,0 (5 % суспензия в воде, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Кислотонейтрализующая способность. Значение рН должно быть не более 4,0.

Навеску субстанции, содержащую 5,0 г сухого смектита диоктаэдрического, помещают в химический стакан вместимостью 1000 мл, прибавляют 500 мл воды и перемешивают. Устанавливают нулевое время секундомера. При постоянном перемешивании прибавляют порциями по 3,0 мл раствор хлористоводородной кислоты 0,1 М на 5, 65, 125, 185, 245, 305, 365, 425, 485, 545, 605, 665 и 725 секундах и прибавляют 1,0 мл раствора хлористоводородной кислоты 0,1 М на 785 секунде. Определяют pH смеси потенциометрически на 840 секунде.

Свинец. Не более 0,0015 %. Определение проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Хлористоводородная кислота разведённая 10 %. Хлористоводородная кислота концентрированная—вода 1:25.

Испытуемый раствор. В коническую колбу вместимостью 250 мл, содержащую 100 мл хлористоводородной кислоты разведённой 10 %, помещают 10 г (точная навеска) субстанции. Накрывают колбу часовым стеклом и кипятят содержимое в течение 15 мин. После охлаждения до комнатной температуры полученный раствор оставляют для осаждения нерастворённых частиц. Надосадочную жидкость фильтруют через бумажный фильтр в коническую колбу вместимостью 400 мл.

К нерастворённому осадку прибавляют 25 мл горячей воды, перемешивают и оставляют для осаждения нерастворённых частиц. Надосадочную жидкость фильтруют через бумажный фильтр в ту же коническую колбу вместимостью 400 мл. Экстракцию проводят дважды по аналогичной методике. Промывают фильтр 25 мл горячей воды, собирая фильтрат в ту же колбу. Концентрируют объединенные экстракты аккуратным кипячением до объёма около 20 мл.

При выпадении осадка прибавляют 2–3 капли азотной кислоты концентрированной, нагревают до кипения и охлаждают раствор до комнатной температуры. Фильтруют концентрированные экстракты через бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 50 мл. Колбу вместимостью 400 мл ополаскивают водой, промывные воды фильтруют через бумажный фильтр в ту же мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Контрольный раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл прибавляют 5 мл азотной кислоты раствора 32 %, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание – При необходимости все растворы могут быть количественно разведены водой для получения концентраций, пригодных для работы в линейном диапазоне.

Условия испытания

Источник излучения: лампа для определения свинца;
Горелка: однощелевая;
Пламя: ацетилен—воздух;
Длина волны: 284 нм.

Определяют поглощение стандартного и испытуемого растворов, проводя для каждого раствора не менее 3 измерений. В качестве раствора сравнения используют контрольный раствор.

Допустимое содержание свинца. Поглощение испытуемого раствора не должно превышать поглощение свинца стандартного раствора 3 мкг/мл (не более 0,0015 %).

Мышьяк. Не более 0,0003 % (ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения используют 0,17 г субстанции.

Потеря в массе при высушивании. Не более 8,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Адсорбционная способность. Не менее 150 мг метиленового синего на 1 г субстанции в пересчёте на сухое вещество. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Раствор метиленового синего (А). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,5 г (точная навеска) метиленового синего, прибавляют 500 мл фосфатного буферного раствора pH 6,8 (1), нагревают на водяной бане до температуры 58–62 °С, обрабатывают ультразвуком в течение 15 мин. Раствор охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Перед использованием раствор взбалтывают в течение 10 мин.

Раствор метиленового синего (Б). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл раствора метиленового синего (А) и доводят объём раствора фосфатным буферным раствором pH 6,8 (1) до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Испытуемый раствор. В коническую колбу вместимостью 100 мл помещают 80 мг (точная навеска) субстанции, прибавляют 35 мл раствора метиленового синего (А) и перемешивают в течение 20 мин. Суспензию центрифугируют со скоростью 3000 об/мин в течение 15 мин и декантируют надосадочную жидкость. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл надосадочной жидкости и доводят объём раствора фосфатным буферным раствором pH 6,8 (1) до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём фосфатным буферным раствором pH 6,8 (1) до метки.

1. Определение содержания основного вещества в метиленовом синем

В химический стакан вместимостью 100 мл помещают 0,2 г (точная навеска) метиленового синего и растворяют в 40 мл воды, нагретой до 75 °С. Прибавляют 25 мл 0,0167 М раствора калия дихромата, перемешивают и нагревают в течение 5 мин в водяной бане при 75 °С. Охлаждают до комнатной температуры и выпавший осадок отфильтровывают на стеклянном фильтре с размером пор 16–40 мкм. Стакан и фильтр четырежды промывают по 2,5 мл ледяной воды, дожидаясь сбора каждой промывочной порции. К фильтрату с промывными водами прибавляют 150 мл воды, 30 мл серной кислоты разведённой 16 % и 2 г калия йодида, хорошо перемешивают, оставляют на 5 мин и титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата, прибавляя в конце титрования индикатор (2 мл крахмала раствора 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт. 1 мл 0,0167 М раствора калия дихромата соответствует 10,63 мг метиленового синего C16H18ClN3S.

2. Определение коэффициента светопоглощения раствора метиленового синего (Б)

Измеряют оптическую плотность раствора метиленового синего (Б) при длине волны 625 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. В качестве раствора сравнения используют фосфатный буферный раствор pH 6,8 (1).

Коэффициент светопоглощения раствора метиленового синего (Б) рассчитывают по формуле:

где A0 - оптическая плотность раствора метиленового синего (Б);
а0 - навеска метиленового синего, взятая для приготовления раствора метиленового синего А, мг;
P – содержание основного вещества в метиленовом синем,%.

3. Определение адсорбционной активности смектита

Измеряют оптическую плотность раствора метиленового синего (Б) относительно испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 625 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.

Адсорбционную активность субстанции в мг метиленового синего на 1 г субстанции (Х) рассчитывают по формуле:

где ΔA - оптическая плотность раствора метиленового синего (Б) относительно испытуемого раствора;
а – навеска субстанции, г;
K - коэффициент светопоглощения раствора метиленового синего (Б), мл/мг;
W – потеря в массе при высушивании,%.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

1. Кремния диоксид

В фарфоровую чашку помещают 1,0 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 6 мл азотной кислоты концентрированной и 10 мл серной кислоты концентрированной. После окончания реакции (около 1 ч) упаривают досуха на песчаной бане. Охлаждают до комнатной температуры, прибавляют 30 мл серной кислоты разведённой 9,8 %, перемешивают и фильтруют через обеззоленный бумажный фильтр. Промывают осадок трижды по 20 мл горячей воды. Помещают фильтр с осадком в платиновый тигель, осторожно озоляют, прокаливают в муфельной печи при температуре 800 °С в течение 2 ч, охлаждают до комнатной температуры и взвешивают.

Смачивают золу водой, прибавляют 7 мл фтористоводородной кислоты и 7 капель серной кислоты концентрированной; осторожно (избегая сильного вспенивания) выпаривают досуха на плитке, прокаливают в муфельной печи при температуре 800 °С в течение 20 мин, охлаждают до комнатной температуры и взвешивают.

Содержание кремния диоксида SiO2 в субстанции в процентах в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где m1 – масса тигля с содержимым до обработки фтористоводородной кислотой, мг;
m2 – масса тигля с содержимым после обработки фтористоводородной кислотой, мг;
a – навеска субстанции, мг;
W – потеря в массе при высушивании.

2. Алюминий

Определение проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Хлористоводородной кислоты раствор. Хлористоводородная кислота концентрированная—вода 1:1.

Испытуемый раствор А. В платиновый тигель вместимостью 25 мл, содержащий 1,0 г лития метабората безводного, помещают 0,2 г (точная навеска) субстанции и перемешивают. Содержимое тигля медленно нагревают, затем сплавляют в муфельной печи при температуре 1000–1200 °С в течение 15 мин. Тигель охлаждают и помещают в химический стакан вместимостью 100 мл, содержащий 25 мл азотной кислоты разведённой 6 %, прибавляют 50 мл азотной кислоты разведенной 6 %, чтобы заполнить и затопить тигель. В тигель помещают магнит, покрытый фторуглеродной оболочкой, и перемешивают содержимое на магнитной мешалке до полного растворения содержимого тигля. Содержимое стакана и тигля количественно переносят в другой химический стакан вместимостью 250 мл, промывая и удаляя тигель. Нагревают раствор и фильтруют тёплым через бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 200 мл. Стакан (250 мл) промывают водой, присоединяя промывные воды к фильтруемому раствору, доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20,0 мл испытуемого раствора А, прибавляют 20 мл натрия хлорида раствора 1 %, доводят объём раствора водой до метки.

Контрольный раствор А. Готовят аналогично методике приготовления «Испытуемого раствора А», но без добавления навески испытуемой субстанции. Раствор используют свежеприготовленным.

Контрольный раствор Б. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20,0 мл контрольного раствора А, прибавляют 20 мл натрия хлорида раствора 1 % и доводят объём раствора водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Контрольный раствор В. В мерную колбу вместимостью 100 мл прибавляют 20 мл натрия хлорида раствора 1 %.

Калибровочные растворы алюминия. В мерные колбы вместимостью 100 мл помещают алюминия стандартный раствор 1 мг/мл в количествах: 2,0 мл; 5,0 мл и 10,0 мл, прибавляют по 20 мл натрия хлорида раствора 1 %, доводят объёмы растворов до метки водой и перемешивают (получают растворы с содержанием алюминия соответственно 20 мкг/мл; 50 мкг/мл и 100 мкг/мл).

Примечание – При необходимости все растворы могут быть количественно разведены водой для получения концентраций, пригодных для работы в линейном диапазоне.

Условия испытания

Источник излучения: Лампа для определения алюминия; Горелка: однощелевая; Пламя: ацетилен—закись азота; Длина волны: 309 нм.

Определяют поглощение калибровочных растворов, контрольного раствора Б и испытуемого раствора Б. В качестве раствора сравнения используют контрольный раствор В.

Для каждого раствора проводят не менее 3 измерений. Строят калибровочную кривую зависимости средних результатов измерений, полученных для калибровочных растворов от их концентрации. Находят содержание алюминия в испытуемом растворе Б по калибровочному графику.

Содержание алюминия в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где С - содержание алюминия в испытуемом растворе Б, найденное по калибровочному графику, мкг/мл;
С0 - содержание алюминия в контрольном растворе Б, мкг/мл;
а - навеска субстанции, мг;
1000 - коэффициент пересчёта мкг/мл в мг/мл;
P - содержание основного вещества в порошке алюминия,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

3. Магний

Определение проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Лантана(III) хлорида раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают около 88,30 г лантана(III) хлорида, растворяют в 500 мл хлористоводородной кислоты раствора 6 М и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25,0 мл испытуемого раствора А (раздел «Количественное определение. Алюминий») и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, прибавляют 20 мл лантана(III) хлорида раствора и доводят объём водой до метки.

Раствор плацебо. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25,0 мл контрольного раствора А (раздел «Количественное определение. Алюминий») и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, прибавляют 20 мл лантана(III) хлорида раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Контрольный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мл лантана(III) хлорида раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Калибровочные растворы магния. В мерные колбы вместимостью 100 мл помещают магния стандартный раствор 10 мкг/мл в количествах: 5,0 мл; 10,0 мл; 15,0 мл и 20,0 мл, прибавляют в каждую колбу по 20 мл лантана(III) хлорида раствора и доводят объём растворов водой до метки (получают растворы с содержанием магния соответственно 0,5 мкг/мл; 1,0 мкг/мл; 1,5 мкг/мл и 2,0 мкг/мл).

Примечание – При необходимости все растворы могут быть количественно разведены водой для получения концентраций, пригодных для работы в линейном диапазоне.

Условия испытания

Источник излучения: Лампа для определения магния; Горелка: однощелевая; Пламя: ацетилен—воздух; Длина волны: 285 нм.

Определяют поглощение калибровочных растворов, раствора плацебо и испытуемого растворов. В качестве раствора сравнения используют контрольный раствор.

Для каждого раствора проводят не менее 3 измерений. Строят калибровочную кривую зависимости средних результатов измерений, полученных для калибровочных растворов от их концентрации. Содержание магния в испытуемом растворе определяют по калибровочной кривой.

Содержание магния в испытуемом растворе В определяют по калибровочному графику.

Содержание магния в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где С - содержание магния в испытуемом растворе, определенное по калибровочному графику, мкг/мл;
С0 - содержание магния в контрольном растворе, мкг/мл;
а - навеска субстанции, мг;
Р - содержание основного вещества в порошке магния,%;
1000 - коэффициент пересчёта мкг/мл в мг/мл.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.1.0018 Цинка оксид (Zinci oxidum)

Взамен ФС.2.2.0018.15

##### Определение

Cодержит не менее 99,0 % и не более 100,5 % цинка оксида ZnO в пересчёте на прокалённое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком аморфный порошок, свободный от зернистых частиц. Поглощает углерода диоксид воздуха.

Растворимость. Растворяется в разведённых минеральных кислотах, легко растворим в уксусной кислоте 30 %, практически нерастворим в воде и спирте 96 %.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Растворяют 50 мг субстанции в 2 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %, прибавляют 8 мл воды и перемешивают. Полученный раствор должен давать характерные реакции на цинк (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

2. Качественная реакция. При прокаливании субстанция должна окрашиваться в жёлтый цвет, а при охлаждении – снова белеть.

##### Испытания

Щёлочность. Смешивают 1 г субстанции с 10 мл горячей воды, прибавляют 0,1 мл фенолфталеина раствора 1 %. При появлении розового окрашивания на обесцвечивание раствора должно потребоваться не более 0,3 мл 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты.

Карбонаты и нерастворимые примеси. К 0,5 г субстанции прибавляют 5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %; не должны выделяться пузырьки газа. Полученный раствор должен быть прозрачным и бесцветным.

Железо, медь и алюминий. К раствору, полученному в испытании «Карбонаты и нерастворимые примеси», прибавляют 10 мл аммиака раствора 10 %; полученный раствор должен быть бесцветным и прозрачным.

Свинец. Растворяют 2 г субстанции в 25 мл уксусной кислоты разведённой 30 %, прибавляют 0,25 мл калия хромата раствора 5 %. Полученный раствор должен оставаться прозрачным.

Мышьяк. Не более 0,0002 % (ОФС «Мышьяк»). Для определения используют 0,25 г субстанции.

Потеря в массе при прокаливании. Не более 1 %. Прокаливают 1,0 г (точная навеска) субстанции до постоянной массы при температуре 500 °С.

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,7 г (точная навеска) субстанции в 50 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 10,0 мл полученного раствора, нейтрализуют аммиака раствором 10 % в присутствии 0,05 мл метилового красного спиртового раствора 0,1 %, прибавляют 5 мл аммония хлорида буферного раствора pH 10,0, 0,90 мл воды и титруют 0,05 М раствором натрия эдетата до синей окраски (индикатор – 0,1 г индикаторной смеси или 0,3 мл кислотного хром чёрного специального).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 4,069 мг цинка оксида ZnO.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.2.0036 Цинка сульфат гептагидрат

Цинка сульфат
Zinci sulfas heptahydricus

Взамен ФС.2.2.0036.18

##### Определение

Сульфат цинка гептагидрат.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 104,0 % цинка сульфата гептагидрата ZnSO4·7H2O.

Субстанция не предназначена для производства препаратов для парентерального применения.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый мелкокристаллический порошок или бесцветные прозрачные кристаллы.

* На воздухе выветривается.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим или растворим в глицерине, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Раствор 2,5 г субстанции в 50 мл воды должен давать характерные реакции А и Б на цинк (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

2. Качественная реакция. Раствор 2,5 г субстанции в 50 мл воды должен давать характерную реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 2,5 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 4,4 до 5,6 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Железо. Не более 0,01 % (ОФС «Железо», метод 2). В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора» и доводят объём раствора водой до метки. В испытании используют 0,5 мл тиогликолевой кислоты.

Хлориды. Не более 0,03 % (ОФС «Хлориды»). В мерную колбу вместимостью 15 мл помещают 2,0 мл раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора» и доводят объём раствора водой до метки. Для определения используют 10 мл раствора.

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Точную навеску субстанции, соответствующую около 0,3 г цинка сульфата гептагидрата, растворяют в 100 мл воды, прибавляют 5 мл аммония хлорида буферного раствора рН 10,0 и титруют 0,05 М раствором натрия эдетата до синего окрашивания (индикатор – 0,1 мл 0,05 % раствора хромового тёмно-синего).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 14,38 мг цинка сульфата гептагидрата ZnSO4·7H2O.

##### Хранение

В плотно закрытой упаковке.

* Приводится для информации.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0051 Азота закись, газ сжатый

Динитрогена оксид, газ сжатый
Nitrogenii oxydulati gasum compressum

Взамен ФС 42-2926-99

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Настоящая фармакопейная статья распространяется на лекарственный препарат азота закись, газ сжатый для медицинского применения. Препарат должен соответствовать требованиям ОФС «Газы медицинские» и нижеприведённым требованиям.

Содержит не менее 98,0 % о/о динитрогена оксида при отборе проб при температуре 15 °С.

Отбор проб. Отбор проб для испытаний производят из баллона, находящегося в вертикальном положении по достижении баллоном температуры помещения, в котором производится анализ.

Пробу азота закиси из баллона отбирают в прибор для анализа или в пробоотборник специальной конструкции, предназначенный для отбора газов, при помощи редуктора или вентиля тонкой регулировки и соединительной трубки от точки отбора пробы до прибора или пробоотборника. Соединительную трубку и пробоотборник продувают не менее чем 10-кратным объёмом испытуемого образца.

Определение углерода монооксида и углерода диоксида проводят из первой порции газа, выпущенной из баллона. Для поглощения определяемых компонентов из испытуемого газа используют поглотительные сосуды (рис. 1), склянки для промывания проб газа (рис. 2) или установку для отбора проб газа (рис. 3).

Рисунок 1. Поглотительный сосуд | Рисунок 2. Склянка для промывания газов

Рисунок 3. Схема установки для отбора проб газа из пробоотборного баллона: 1 – регулирующий игольчатый вентиль; 2 – увлажнитель газа (сосуд с водой дистиллированной); 3 – устройство заполненное раствором хрома (VI) оксида; 4 – реометр; 5, 6 – абсорберы для поглощения азота диоксида; 7 – термометр.

##### СВОЙСТВА

Описание. Бесцветный газ без запаха или со слабым характерным запахом. Не воспламеняется, поддерживает горение.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ГХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого образца должно соответствовать времени удерживания пика азота закиси на хроматограмме стандартного образца азота закиси (раздел «Количественное определение», метод 1).

2. Качественная реакция. Тлеющая лучина, внесённая в сосуд с азота закисью, вспыхивает ярким пламенем.

3. Качественная реакция. В два поглотительных сосуда (рис. 1), один из которых предварительно продут анализируемым газом или азотом, помещают по 10 мл пирогаллола раствора, приготовленного непосредственно перед испытанием, и сразу закрывают сосуды пробками. Через раствор первого сосуда в течение 10 мин со скоростью 10 мл/мин пропускают испытуемый газ. Сравнивают интенсивность окраски испытуемого и контрольного растворов. Интенсивность окраски испытуемого раствора не должна превышать интенсивность окраски контрольного раствора.

##### ИСПЫТАНИЯ

Углерода монооксид. Не более 0,0005 % о/о (5 ppm).

Определение проводят одним из приведённых методов.

Метод 1. Титриметрия (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Пропускают 50 л испытуемого газа через трубку, заполненную гранулированным йода(V) оксидом перекристаллизованным, которую помещают в глицериновую баню, нагретую до температуры 120±5 °C.

Выделившийся при реакции йод поглощают с помощью 100 мл калия йодида раствора 10 %, к которому прибавлено 5 мл крахмала раствора 1 %. В случае появления синей окраски проводят титрование 0,002 M раствором натрия тиосульфата, 1 мл которого соответствует 0,112 мл углерода монооксида.

Содержание углерода монооксида в испытуемом образце в объёмных процентах (X) вычисляют по формуле:

где V1 – объём 0,002 M раствора натрия тиосульфата, израсходованный на титрование, мл;
V0 – объём испытуемого газа, л, приведённый к нормальным условиям, по формуле:

где Vi – объём пропущенного испытуемого газа, л;
P – атмосферное давление, кПа;
t – температура газа в месте отбора пробы, °С.
273 – нормальная температура, К;
101,3 – нормальное давление, кПа.

K – поправочный коэффициент 0,002 М раствора натрия тиосульфата;
0,112 – количество углерода монооксида, мл, соответствующее 1 мл 0,002 M раствора натрия тиосульфата, мл/мл;
1000 – коэффициент пересчёта л в мл.

Метод 2. Газовая хроматография (ОФС «Газовая хроматография», рис. 4).

Рисунок 4. Схема устройства газового хроматографа для анализа газообразных проб: 1 – испытуемый газ; 2 – регулятор давления; 3 – реометр; 4 – кран-дозатор; 5 –дозирующая петля; 6 – колонка с термостатом; 7 – детектор; 8 – газ-носитель с системой регулирования потока газа; 9 – фильтр-осушитель; 10 – делитель потока газа; 11 – система сбора данных.

Стандартный образец углерода монооксида. Смесь, содержащая 5 ppm о/о углерода монооксида в азота закиси.

Хроматографические условия

Колонка | 2 м × 4 мм, молекулярное сито, 0,5 нм; |
Детектор | пламенно-ионизационный с метанатором; |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |
Скорость потока | 60 мл/мин; |
Температура | колонка | 50 °С;
| детектор | 130 °С;
Объём пробы | 250 мкл; |
Время хроматографирования | 5 мин. |

Хроматографируют стандартный образец углерода монооксида и испытуемый образец.

Содержание углерода монооксида в испытуемом образце в объёмных процентах (XCO) вычисляют согласно методу внешнего стандарта (ОФС «Хроматография») по формуле:

где SCO – площадь пика углерода монооксида на хроматограмме испытуемого образца;
S0 – площадь пика углерода монооксида на хроматограмме стандартного образца углерода монооксида;
C0 – концентрация углерода монооксида в стандартном образце углерода монооксида, %.

Метод 3. Газовая хроматография (ОФС «Газовая хроматография», рис. 4).

Стандартный образец углерода монооксида. Смесь, содержащая 5 ppm о/о углерода монооксида в азота закиси.

Хроматографические условия

Колонка | 2 м × 1 мм, углеродное молекулярное сито, 152–178 мкм; |
Детектор | термохимический; |
Газ-носитель | сухой воздух; |
Скорость потока | 10 мл/мин; |
Температура | колонка | 80 °С;
| детектор | 80 °С;
Объём пробы | 250 мкл; |
Время хроматографирования | 5 мин. |

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного образца углерода монооксида:

- относительное стандартное отклонение площадей пика углерода монооксида должно быть не более 10 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пика углерода монооксида должно быть не более 10 % (6 введений).

Содержание углерода монооксида в препарате в объёмных процентах (XCO) вычисляют согласно методу внешнего стандарта (ОФС «Хроматография») по формуле:

где SCO – площадь пика углерода монооксида на хроматограмме испытуемого образца;
S0 – площадь пика углерода монооксида на хроматограмме стандартного образца углерода монооксида;
C0 – концентрация углерода монооксида в стандартном образце углерода монооксида, %.

Углерода диоксид. Не более 0,03 % о/о (300 ppm).

Метод 1. Газовая хроматография (ОФС «Газовая хроматография», рис. 4).

Стандартный образец углерода диоксида. Смесь, содержащая 300 ppm о/о углерода диоксида в азота закиси.

Хроматографические условия

Колонка | 3,5 м × 2 мм, сополимер этилвинилбензол-дивинилбензола; |
Детектор | детектор по теплопроводности; |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |
Скорость потока | 15 мл/мин; |
Температура | колонка | 40 °С;
| детектор | 90 °С.
Объём пробы | 250 мкл; |
Время хроматографирования | 5 мин. |

Хроматографируют стандартный образец углерода диоксида и испытуемый образец.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного образца углерода диоксида разрешение (RS) между соседними пиками должно быть не менее 0,8.

Содержание углерода диоксида в испытуемом образце в объёмных процентах (XCO2) вычисляют согласно методу внешнего стандарта (ОФС «Хроматография») по формуле:

где SCO2 – площадь пика углерода диоксида на хроматограмме испытуемого образца;
S0 – площадь пика углерода диоксида на хроматограмме стандартного образца углерода диоксида;
C0 – концентрация углерода диоксида в стандартном образце углерода диоксида, %.

Метод 2. Газовая хроматография (ОФС «Газовая хроматография», рис. 4).

Определение проводят одновременно с количественным определением методом 1.

Стандартный образец углерода диоксида. Смесь, содержащая 300 ppm о/о углерода диоксида, 1,8 % суммарно кислорода и азота в закиси азота.

Хроматографические условия

Колонка | 1 м × 1 мм, углеродное молекулярное сито, 149–177 мкм; |
Детектор | детектор по теплопроводности; |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |
Скорость потока | 10 мл/мин; |
Температура | колонка | 80 °С;
| детектор | 80 °С;
Объём пробы | 250 мкл; |
Время хроматографирования | 5 мин. |

Порядок выхода пиков: суммарный неразрешённый пик кислорода, аргона и азота, углерода диоксид, азота закись.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного образца углерода диоксида:

- относительное стандартное отклонение площади пика углерода диоксида должно быть не более 10 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пика углерода диоксида должно быть не более 10 % (6 введений);

- разрешение (RS) между пиками должно быть не менее 0,8.

Содержание углерода диоксида в испытуемом образце в объёмных процентах (XCO2) вычисляют согласно методу внешнего стандарта (ОФС «Хроматография») по формуле:

где SCO2 – площадь пика углерода диоксида на хроматограмме испытуемого образца;
S0 – площадь пика углерода диоксида на хроматограмме стандартного образца углерода диоксида;
C0 – концентрация углерода диоксида в стандартном образце углерода диоксида, %.

Азота монооксид и азота диоксид. Не более 0,0002 % о/о (2 ppm о/о) в пересчёте на азота диоксид NO2.

Определяют одним из приведённых методов.

Метод 1. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Стандартный раствор натрия нитрита. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,5 г натрия нитрита, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём водой до метки. 1 мл полученного раствора содержит 1 мкг азота диоксида. Раствор используют свежеприготовленным.

Для построения калибровочного графика в 10 градуированных пробирок с пришлифованной пробкой вместимостью 25 мл помещают от 0,2 до 2,0 мл с интервалом 0,2 мл стандартного раствора натрия нитрита, в каждую пробирку прибавляют Грисса-Илосвая реактив до объёма 15 мл, перемешивают и через 10 мин измеряют оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 540 нм в кювете с толщиной слоя 20 мм. В качестве раствора сравнения используют Грисса-Илосвая реактив. По полученным данным строят калибровочный график, откладывая по оси абсцисс массу азота диоксида в мкг, а по оси ординат – соответствующие значения оптической плотности.

Отбор пробы для анализа производят на установке, схема которой приведена на рис. 3. Увлажнитель газа 2 заполняют на 2/3 водой дистиллированной. В устройство 3 для окисления азота оксида до азота диоксида заливают 3 мл хрома оксида(VI) насыщенного водного раствора, который обновляется в процессе работы 1 раз в сутки. В абсорберы 5 и 6 заливают по 15 мл раствора Грисса-Илосвая. Установку подключают к баллону с азота закисью через регулирующий игольчатый вентиль 1 и устанавливают расход газа 0,12 л/мин (2 см3/с) по реометру 4, продувают анализируемым газом до абсорберов в течение 10 мин и производят отбор пробы азота закиси. Объём анализируемого газа должен быть не менее 2,5 л.

После отбора пробы газа отключают установку, отсоединяют абсорберы 5 и 6 и анализируют их содержимое. В процессе отбора пробы газа измеряют температуру газа и атмосферное давление. Содержимое первого и второго по ходу газа абсорбера заливают поочерёдно в кювету и измеряют оптические плотности на спектрофотометре при вышеописанных условиях.

По калибровочному графику определяют соответствующее значениям оптической плотности содержание азота диоксида в микрограммах.

Содержание азота оксидов в пересчёте на азота диоксид в процентах вычисляют (X) по формуле:

где m1 и m2 – массы нитрит-ионов, найденные по градуировочному графику из первого и второго поглотителей соответственно, мкг;
2 – стехиометрический коэффициент образования красителя из нитрит-иона;
22,4 – объём, занимаемый 1 молем газа при нормальных условиях, л;
100 – коэффициент пересчёта в проценты;
V0 – объём анализируемого газа, приведённый к нормальным условиям, л;
46 – молярная масса азота диоксида, г/моль;
106 – коэффициент пересчёта г в мкг.

Объём анализируемого газа V_0 в л, приведённый к нормальным условиям, вычисляют (V_0) по формуле:

где P – атмосферное давление в помещении отбора пробы, кПа;
V – объём анализируемого газа, л;
t – температура газа в месте отбора пробы, °С;
273 – температура при нормальных условиях, °К;
101,3 – давление при нормальных условиях, кПа.

Метод 2. Хемилюминесцентный анализ

Стандартный образец азота закиси (А). Азота закись с содержанием основного вещества не менее 99,99 %.

Стандартный образец азота закиси (Б). Смесь, содержащая 2 ppm о/о азота монооксида в азоте.

Калибруют прибор и устанавливают чувствительность, используя стандартные образцы азота закиси (А) и (Б). Измеряют содержание азота монооксида и азота диоксида, отдельно исследуя пробы, отобранные из газообразной фазы и жидкой фазы испытуемого газа. Для корректировки вызванного матричным эффектом азота закиси эффекта тушения отклика анализатора, полученный результат умножают на поправочный коэффициент тушения.

Поправочный коэффициент тушения определяют путём анализа стандартного образца с известной концентрацией азота монооксида в азота закиси и сравнения фактического содержания с содержанием, показанным предварительно откалиброванным анализатором.

Галогениды. Пропускают 3 л испытуемого газа через склянку для промывания газов или цилиндр с 50 мл воды дистиллированной, к которой прибавлен 1,0 мл 0,1 М раствора серебра нитрата. Раствор должен оставаться бесцветным и прозрачным, не должно быть опалесценции.

Неконденсирующиеся газы (сумма кислорода и азота). Не более 1,8 %.

Метод 1. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Стандартный образец неконденсирующихся газов. Смесь, содержащая около 0,9 % кислорода, 0,9 % азота и не менее 98 % азота закиси.

Хроматографические условия

Колонка | 2 м × 1 мм, молекулярное сито, 149–177 мкм; |
Детектор | детектор по теплопроводности; |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |
Скорость потока | 10 мл/мин; |
Температура | колонка | 50 °С;
| детектор | 50 °С;
Объём пробы | 250 мкл; |
Время хроматографирования | 5 мин. |

Порядок выхода пиков: кислород, азот.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного образца неконденсирующихся газов:

- разрешение (RS) между пиками кислорода и азота должно быть не менее 1,5.

- относительное стандартное отклонение площади пика кислорода должно быть не более 10 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение площади пика азота должно быть не более 10 % (6 введений).

Содержание кислорода в испытуемом образце в объёмных процентах (XO2) вычисляют согласно методу внешнего стандарта (ОФС «Хроматография») по формуле:

где SO2 – площадь пика кислорода на хроматограмме испытуемого образца;
S0 – площадь пика кислорода на хроматограмме стандартного образца неконденсирующихся газов;
C0 – концентрация кислорода в стандартном образце неконденсирующихся газов, %.

Содержание азота в испытуемом образце в объёмных процентах (XN2) вычисляют согласно методу внешнего стандарта (ОФС «Хроматография») по формуле:

где SN2 – площадь пика азота на хроматограмме испытуемого образца;
S0 – площадь пика азота на хроматограмме стандартного образца неконденсирующихся газов;
C0 – концентрация азота в стандартном образце неконденсирующихся газов, %.

Содержание неконденсирующихся газов в испытуемом образце в объёмных процентах (XO2+N2) вычисляют по формуле:

где XO2 – концентрация кислорода в испытуемом образце, %;
XN2 – концентрация азота в испытуемом образце, %.

Метод 2. Газовая хроматография (ОФС «Газовая хроматография», рис. 4).

Определение проводят одновременно с количественным определением методом 1.

Стандартный образец неконденсирующихся газов. Cмесь, содержащая 300 ppm о/о углерода диоксида, 1,8 % суммарно кислорода и азота в закиси азота.

Хроматографические условия

Колонка | 1 м × 1 мм, углеродное молекулярное сито, 149–177 мкм; |
Детектор | детектор по теплопроводности; |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |
Скорость потока | 10 мл/мин; |
Температура | колонка | 80 °С;
| детектор | 80 °С;
Объём пробы | 250 мкл; |
Время хроматографирования | 5 мин. |

Порядок выхода пиков: суммарный неразрешённый пик кислорода и азота (неконденсирующихся газов), углерода диоксид, азота закись.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного образца углерода диоксида:

- разрешение (RS) между пиками должно быть не менее 0,8.

- относительное стандартное отклонение площади пика углерода диоксида должно быть не более 10 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пика углерода диоксида должно быть не более 2 % (6 введений).

Содержание неконденсирующихся газов в испытуемом образце в объёмных процентах (XO2+N2) вычисляют согласно методу внешнего стандарта (ОФС «Хроматография») по формуле:

где SO2+N2 – площадь неразрешённого пика кислорода и азота на хроматограмме испытуемого образца;
S0 – площадь неразрешённого пика кислорода и азота на хроматограмме стандартного образца неконденсирующихся газов;
C0 – концентрация суммарно кислорода и азота в стандартном образце неконденсирующихся газов, %.

Вода. Не более 0,009 % о/о (90 ppm). Определение проводят в соответствии с ОФС «Вода в газах медицинских» (метод 2 или 3).

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят одним из приведённых методов.

Метод 1. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Стандартный образец азота закиси. Смесь, содержащая не менее 98 % азота закиси.

Хроматографические условия

Колонка | 1 м × 1 мм, углеродное молекулярное сито, 149–177 мкм; |
Детектор | детектор по теплопроводности; |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |
Скорость потока | 10 мл/мин; |
Температура | колонка | 80 °С;
| детектор | 80 °С;
Объём пробы | 250 мкл; |
Время хроматографирования | 5 мин. |

Порядок выхода пиков: суммарный неразрешённый пик кислорода и азота, углерода диоксид, азота закись.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного образца азота закиси:

- относительное стандартное отклонение площади пика азота закиси должно быть не более 2 % (6 введений);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пика азота закиси должно быть не более 2 % (6 введений).

Содержание азота закиси в испытуемом образце в объёмных процентах (XN2O) вычисляют согласно методу внешнего стандарта (ОФС «Хроматография») по формуле:

где SN2O – площадь пика азота закиси на хроматограмме испытуемого образца;
S0 – площадь пика азота закиси на хроматограмме стандартного образца азота закиси;
C0 – концентрация азота закиси в стандартном образце азота закиси, %.

Метод 2. Определение проводят методом ИК-спектрометрии (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»).

Испытуемый образец должен быть отфильтрован для исключения явлений рассеянного света (фильтр 3 мкм).

Стандартный газ А. Азота закись для хроматографии.

Стандартный газ Б. Смесь, содержащая 5,0 % о/о азота и 95,0 % о/о азота закиси.

Инфракрасный анализатор для газов, как правило, состоит из источника широкополосного инфракрасного излучения, оптического устройства, ячейки (камеры) для образца, детектора, а в некоторых анализаторах – ячейки сравнения. Оптическое устройство может располагаться как до, так и после ячейки с образцом. Оно состоит из одного или нескольких оптических фильтров, через которые пропускается широкополосное излучение. Выбирается оптическое устройство, пригодное для определения азота закиси. Измеряемый световой пучок проходит через ячейку для образца, а в некоторых анализаторах и через ячейку сравнения. В ячейке с образцом происходит поглощение энергии измеряемого светового пучка в соответствии с законом Ламберта-Бера, что приводит к изменению сигнала детектора. Этот измерительный сигнал сравнивается с эталонным сигналом, в результате чего формируется выходной сигнал, зависящий от концентрацией азота закиси. Для определения содержания азота закиси полученный сигнал линеаризуется.

Калибруют аппаратуру и устанавливают подходящую чувствительность с использованием стандартных газов А и Б. Измеряют содержание азота закиси в испытуемом образце.

Метод 3. Определение проводят расчётным методом.

Содержание азота закиси в испытуемом образце в объёмных процентах (X) вычисляют по формуле:

где ΣXi – суммарное содержание примесей углерода монооксида, углерода диоксида, азота монооксида и азота диоксида, неконденсирующихся газов, ppm;
XW – вода, ppm.

##### ХРАНЕНИЕ

В баллонах из углеродистой стали под давлением, с навинчиваемыми колпаками и защитными кольцами. Поверх вентиля надевается металлический или пластмассовый колпак с отверстиями. Баллоны, наполненные азота закисью, должны храниться на крытых площадках или в специальных металлических контейнерах.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0052 Висмута субнитрат

Висмута субнитрат
Bismuthi subnitras

Взамен ФС 42-2374-98

4[Bi(OH)2NO3]·BiO(OH)
H8Bi4N4O20·HBiO2 [1304-85-4] | М.м. 1462,0

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Дигидроксид-нитрат висмута (III)—гидроксид оксидовисмута (III) (4:1).

Cодержит не менее 71,0 % и не более 74,0 % висмута в пересчёте на сухое вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Практически нерастворим в воде и спирте 96 %.

*Растворяется с разложением в азотной кислоте и хлористоводородной кислоте.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерные реакции А и Б на висмут (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

2. Качественная реакция. При прокаливании 0,5 г субстанции выделяются жёлто-коричневые пары, остаток приобретает ярко-жёлтый цвет.

##### ИСПЫТАНИЯ

Кислотность. Встряхивают 1,0 г субстанции с 15 мл воды в течение 10 мин и фильтруют. Для изменения окраски 10 мл фильтрата на розовую должно потребоваться не более 0,5 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида (индикатор – 0,5 мл 1 % раствора фенолфталеина).

Вещества, не осаждаемые аммиаком. Не более 1,0 %. Нагревают 1,0 г субстанции в смеси 2 мл воды и 4 мл азотной кислоты до растворения, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до 20 мл. Прибавляют аммиака раствор концентрированный 25 % до щелочной реакции и фильтруют. Осадок на фильтре промывают водой 2 раза порциями по 5 мл, фильтрат с промывными водами выпаривают на водяной бане досуха. К сухому остатку прибавляют 0,3 мл серной кислоты разведённой 9,8 % и прокаливают. Вес остатка не должен превышать 10 мг.

Потеря в массе при высушивании. Не более 3,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 2 г (точная навеска) субстанции.

Карбонаты. В 3 мл азотной кислоты 1 г субстанции должен растворяться без выделения пузырьков газа.

Медь. Не более 0,005 % (50 ppm). Определение проводят методом ААС (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 2 мл азотной кислоты, свободной от свинца и при необходимости нагревают на водяной бане до полного растворения субстанции. Добавляют 10 мл воды и при встряхивании небольшими порциями 4,5 мл аммиака раствора 10%, свободного от свинца. Охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора водой до метки. Повторно встряхивают и выдерживают до осаждения осадка. Используют прозрачную надосадочную жидкость.

Контрольный раствор готовят аналогично методике приготовления испытуемого раствора, но без субстанции.

Калибровочные растворы меди. Калибровочные растворы готовят соответствующими разведениями меди стандартного раствора 10 мкг/мл азотной кислоты, свободной от свинца раствором 37 % (о/о).

Источник излучения | Лампа для определения меди с полым катодом;
Длина волны | 324,7 нм;
Атомизация | Воздушно-ацетиленовое пламя.

Проводят основную коррекцию, используя дейтериевую лампу.

Определяют значения атомной абсорбции испытуемого раствора и калибровочных растворов. По калибровочной кривой рассчитывают содержание меди в субстанции.

Мышьяк, теллур. Прокаливают 1 г субстанции в фарфоровом тигле при температуре 700 °С до постоянной массы. Остаток растворяют в 5 мл хлористоводородной кислоты 25 % и далее испытание проводят в соответствии с ОФС «Мышьяк» (метод 2, способ А). Не должно быть жёлто-коричневого окрашивания (мышьяк) и почернения (теллур).

Свинец. Не более 0,002 % (20 ppm). Определение проводят методом ААС (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Испытуемый раствор: см. раздел «Медь».

Калибровочные растворы свинца. Калибровочные растворы готовят соответствующими разведениями cвинца стандартного раствора 10 мкг/мл азотной кислоты, свободной от свинца раствором 37 % (о/о).

Источник излучения. Лампа для определения свинца с полым катодом;

Длина волны. 383,3 нм или 217 нм;

Атомизация. Воздушно-ацетиленовое пламя.

Проводят основную коррекцию, используя дейтериевую лампу.

Определяют значения атомной абсорбции испытуемого раствора и калибровочных растворов. По калибровочной кривой рассчитывают содержание свинца в субстанции.

Серебро. Не более 0,0025 % (25 ppm). Определение проводят методом ААС (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Испытуемый раствор: см. раздел «Медь».

Калибровочные растворы серебра. Калибровочные растворы готовят соответствующими разведениями серебра стандартного раствора 100 мкг/мл азотной кислоты, свободной от свинца раствором 37 % (о/о).

Источник излучения. Лампа для определения серебра с полым катодом;

Длина волны. 328,1 нм;

Атомизация. Воздушно-ацетиленовое пламя.

Проводят основную коррекцию, используя дейтериевую лампу.

Определяют значения атомной абсорбции испытуемого раствора и калибровочных растворов. По калибровочной кривой рассчитывают содержание серебра в субстанции.

Соли аммония. При кипячении 1 г субстанции с 5 мл натрия гидроксида раствора 1 М, пары не должны менять цвет увлажнённой красной лакмусовой бумаги на синий.

Сульфаты. К 5 мл испытуемого раствора прибавляют 0,5 мл бария нитрата раствора 5 %; раствор должен остаться прозрачным.

Испытуемый раствор. В 4 мл азотной кислоты концентрированной при нагревании растворяют 3 г субстанции, полученный раствор вливают в 100 мл воды, выпавший осадок отфильтровывают и промывают 2 раза порциями по 5 мл воды. Фильтрат с промывными водами упаривают до объёма 30 мл и фильтруют. К 5 мл полученному фильтрату прибавляют аммиака раствор 10 % до pH 10 по универсальной индикаторной бумаге.

Хлориды. Не более 0,05 % (ОФС «Хлориды»). Растворяют 0,4 г субстанции в 5 мл азотной кислоты и доводят объём раствора водой до 100 мл. Полученный раствор должен выдерживать испытание на хлориды.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) субстанции в 6 мл горячей азотной кислоты, прибавляют 300 мл воды и титруют при взбалтывании 0,05 М раствором натрия эдетата до жёлтого окрашивания (индикатор – 0,25 мл раствора ксиленолового оранжевого или 0,3 мл раствора пирокатехинового фиолетового).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 10,45 мг висмута Bi.

##### ХРАНЕНИЕ

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.2.0053 Висмута трикалия дицитрат

Висмута трикалия дицитрат
Bismuthi trikalii dicitras

Вводится впервые

4C12H13Bi3O17·7C6H5K3O7·3C6H17N3O7 | М.м. 7099

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Ди(2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоксилат) три[гидроксивисмута (III)]–2-гидроксипропан-1,2,3-трикарбоксилат трикалия–2-гидроксипропан -1,2,3-трикарбоксилат триаммония (4:7:3).

Содержит:

- не менее 35,0 % и не более 42,0 % висмута оксида в пересчёте на сухое вещество;

- не менее 11,0 % и не более 13,0 % калия в пересчёте на сухое вещество;

- не менее 41,0 % и не более 48,0 % цитрата в пересчёте на сухое вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый аморфный или кристаллический порошок со слабым запахом аммиака.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко или легко растворим в воде, легко растворим или растворим в хлористоводородной кислоте разведённой 8,3 %, мало растворим или практически нерастворим в спирте 96 %.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию А на висмут (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на калий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

3. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на цитраты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию на аммоний (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### ИСПЫТАНИЯ

pH раствора. От 6,0 до 8,0 (6 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Потеря в массе при высушивании. Не более 8 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Аммиак. От 1,3 до 6,0 % в пересчёте на сухое вещество. Определение проводят методом Кьельдаля (ОФС «Определение азота в органических соединениях методом Кьельдаля»). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Медь. Не более 0,002 % в пересчёте на сухое вещество. Определение проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Растворы готовят непосредственно перед использованием и защищают от света.

Испытуемый раствор. В тигле прокаливают 5,0 г (точная навеска) субстанции при температуре 600 °С в течение 3 ч, после охлаждения до комнатной температуры в тигель постепенно добавляют 10 мл азотной кислоты раствора 7,5 М и растворяют остаток. К смеси прибавляют 100 мл воды и перемешивают. Полученный раствор выпаривают на водяной бане до объёма 15 мл, охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм. Раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объём раствора водой до метки.

Контрольный раствор. Готовят аналогично методике приготовления испытуемого раствора, но без добавления субстанции.

Стандартный раствор меди 1000 мкг/мл. Готовят согласно методике ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия».

Стандартный раствор меди 100 мкг/мл. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл стандартного раствора меди 1000 мкг/мл и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание – Для приготовления стандартного раствора допускается использование готового раствора стандартного образца меди с аттестованным значением концентрации меди в азотной или хлористоводородной кислоте с массовой долей кислоты не менее 1 %.

Калибровочные растворы меди. Стандартный раствор меди 100 мкг/мл разводят хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М до содержания меди 0,2; 1,0; 2,0; 4,0 и 8,0 мкг/мл.

Примечание – При необходимости испытуемый, контрольный и калибровочные растворы могут быть количественно разведены хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М для получения концентраций, пригодных для работы в линейном диапазоне.

Условия испытания

Источник излучения | Лампа для определения меди;
Атомизация | воздушно-ацетиленовое пламя;
Длина волны | 324,7 нм.

Определяют поглощение испытуемого, контрольного и калибровочных растворов. В качестве раствора сравнения используют хлористоводородной кислоты раствор 0,01 М.

Для каждого раствора проводят не менее 3 измерений. Строят калибровочный график зависимости средних результатов измерений калибровочных растворов от их концентрации. Содержание меди в испытуемом растворе определяют по калибровочному графику.

Содержание меди в субстанции в процентах (Х) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где C – содержание меди, определённое по калибровочному графику, мкг/мл;
a – навеска субстанции, г;
P – содержание меди электролитической в стандартном образце, % (при использовании готового раствора стандартного образца Р=100);
W – потеря в массе при высушивании, %.

Мышьяк. В соответствии с ОФС «Мышьяк» (метод 2, способ А). При добавлении натрия гипосульфита не должно наблюдаться ни жёлто-коричневого окрашивания, ни образования жёлто-коричневого осадка.

Испытуемый раствор. В 5 мл хлористоводородной кислоты концентрированной растворяют 1,0 г субстанции.

Нитраты

Железа(II) сульфата раствор 8 %. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 8,0 г железа(II) сульфата, растворяют в 90 мл воды, свободной от углерода диоксида и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

В пробирку помещают 0,5 г субстанции, растворяют в 5 мл воды, осторожно перемешивают с 5 мл серной кислоты концентрированной (в случае выпадения осадка раствор охлаждают и отстаивают), осторожно прибавляют 5 мл железа(II) сульфата раствора 8 % по внутренней стенке пробирки; коричневое кольцо не должно образовываться на поверхности раздела двух слоёв.

Свинец. Не более 0,001 % в пересчёте на сухое вещество. Определение проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Испытуемый раствор. Готовят раствор как указано в разделе «Медь».

Контрольный раствор. Готовят раствор как указано в разделе «Медь».

Стандартный раствор свинца 100 мкг/мл. Готовят согласно методике ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия».

Примечание – Для приготовления стандартного раствора допускается использование готового раствора стандартного образца свинца с аттестованным значением концентрации свинца в азотной или хлористоводородной кислоте с массовой долей кислоты не менее 1 %.

Калибровочные растворы свинца. Стандартный раствор свинца 100 мкг/мл разводят хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М до содержания свинца 0,1; 0,5; 1,0; 1,5 и 2,0 мкг/мл.

Примечание – При необходимости испытуемый, контрольный и калибровочные растворы могут быть количественно разведены хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М для получения концентраций, пригодных для работы в линейном диапазоне.

Условия испытания

Источник излучения | Лампа для определения свинца;
Атомизация | воздушно-ацетиленовое пламя;
Длина волны | 217,0 нм.

Определяют поглощение испытуемого, контрольного и калибровочных растворов. В качестве раствора сравнения используют хлористоводородной кислоты раствор 0,01 М.

Для каждого раствора проводят не менее 3 измерений. Строят калибровочный график зависимости средних результатов измерений калибровочных растворов от их концентрации. Содержание свинца в испытуемом растворе определяют по калибровочному графику.

Содержание свинца в субстанции в процентах (\($X$\)) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где C – содержание свинца, определённое по калибровочному графику, мкг/мл;
a – навеска субстанции, г;
P – содержание свинца в стандартном образце, % (при использовании готового раствора стандартного образца Р=100);
W – потеря в массе при высушивании, %.

Серебро. Не более 0,002 % в пересчёте на сухое вещество. Определение проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Испытуемый раствор. Готовят раствор как указано в разделе «Медь».

Контрольный раствор. Готовят раствор как указано в разделе «Медь».

Стандартный раствор серебра 100 мкг/мл. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,1575 г серебра нитрата, растворяют в азотной кислоты растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Примечание – Для приготовления стандартного раствора допускается использование готового раствора стандартного образца серебра с аттестованным значением концентрации серебра в азотной или хлористоводородной кислоте с массовой долей кислоты не менее 1 %.

Калибровочные растворы серебра. Стандартный раствор серебра 100 мкг/мл разводят азотной кислоты раствором 0,1 М до содержания серебра 0,2; 1,0; 2,0; 4,0 и 8,0 мкг/мл.

Примечание – При необходимости испытуемый, контрольный и калибровочные растворы могут быть количественно разведены азотной кислоты раствором 0,1 М для получения концентраций, пригодных для работы в линейном диапазоне.

Условия испытания

Источник излучения | Лампа для определения серебра;
Атомизация | воздушно-ацетиленовое пламя;
Длина волны | 328,1 нм.

Определяют поглощение испытуемого, контрольного и калибровочных растворов. В качестве раствора сравнения используют азотной кислоты раствор 0,1 М.

Для каждого раствора проводят не менее 3 измерений. Строят калибровочный график зависимости средних результатов измерений калибровочных растворов от их концентрации. Содержание серебра в испытуемом растворе определяют по калибровочному графику.

Содержание серебра в субстанции в процентах (\($X$\)) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где C – содержание серебра, определённое по калибровочному графику, мкг/мл;
a – навеска субстанции, г;
P – содержание серебра в стандартном образце, % (при использовании готового раствора стандартного образца Р=100);
W – потеря в массе при высушивании, %.

Хлориды. Не более 0,1 % (0,2 % раствор в воде, ОФС «Хлориды»).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Висмут. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Комплексонометрическое титрование»). Растворы готовят непосредственно перед использованием и защищают от света.

В 50 мл воды растворяют 0,5 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 3 мл азотной кислоты концентрированной и перемешивают. Титруют медленно 0,05 М раствором натрия эдетата до изменения окраски от красной до жёлтой (индикатор – 50 мг ксиленолового оранжевого).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 10,45 мг висмута.

Калий. Определение проводят методом атомно-абсорбционной спектрометрии (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»). Растворы готовят непосредственно перед использованием и защищают от света.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют при нагревании в 10 мл азотной кислоты концентрированной, охлаждают и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора натрия хлорида раствором 0,1 % до метки.

Стандартный раствор калия 600 мкг/мл. Готовят согласно методике ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия».

Стандартный раствор калия 60 мкг/мл. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл стандартного раствора калия 600 мкг/мл и доводят объём раствора натрия хлорида раствором 0,1 % до метки.

Примечание – Для приготовления стандартного раствора допускается использование готового раствора стандартного образца калия с аттестованным значением концентрации калия в азотной или хлористоводородной кислоте с массовой долей кислоты не менее 1 %.

Калибровочные растворы калия. Стандартный раствор калия 60 мкг/мл разводят натрия хлорида раствором 0,1 % до содержания калия 0,5; 1,0; 1,5; 2,0 и 2,4 мкг/мл.

Примечание – При необходимости испытуемый и калибровочные растворы могут быть количественно разведены натрия хлорида раствором 0,1 % для получения концентраций, пригодных для работы в линейном диапазоне.

Условия испытания

Источник излучения | Лампа для определения калия;
Атомизация | воздушно-ацетиленовое пламя;
Длина волны | 766,5 нм.

Определяют поглощение испытуемого и калибровочных растворов. В качестве раствора сравнения используют натрия хлорида раствор 0,1 %.

Для каждого раствора проводят не менее 3 измерений. Строят калибровочный график зависимости средних результатов измерений калибровочных растворов от их концентрации. Содержание калия в испытуемом растворе определяют по калибровочному графику.

Содержание калия в субстанции в процентах (\($X$\)) в пересчёте на сухое вещество вычисляют по формуле:

где C – содержание калия, определённое по калибровочному графику, мкг/мл;
a – навеска субстанции, г;
P – содержание калия в стандартном образце, % (при использовании готового раствора стандартного образца Р=100);
W – потеря в массе при высушивании, %.

Цитрат. Определение проводят методом титриметрии. Испытуемый раствор используют свежеприготовленным.

Щавелевой кислоты раствор 0,1 М. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,12607 г щавелевой кислоты, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В колбу вместимостью 200 мл помещают 1 г (точная навеска) субстанции, прибавляют при нагревании до температуры 65±10 °С 70 мл натрия гидроксида раствора 1 М и продолжают нагревание в течение 1,5±0,5 ч, охлаждают раствор до комнатной температуры и фильтруют. Осадок промывают 25 мл воды в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

К 25,0 мл испытуемого раствора прибавляют 25 мл воды, 2 мл серной кислоты раствора 50 %, 7 мл 0,02 М раствора калия перманганата и кипятят в течение 5 мин. После охлаждения прибавляют 4 мл щавелевой кислоты раствора 0,1 М и перемешивают до полного растворения осадка. Избыток щавелевой кислоты титруют 0,02 М раствором калия перманганата до устойчивого слабо-розового окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,02 М раствора калия перманганата соответствует 1,2 мг цитрата.

##### ХРАНЕНИЕ

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

### 2.3. Фармацевтические субстанции животного происхождения

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.3.0006 Апротинин (Aprotininum)

Взамен ВФС 42-2175-92*

##### Определение

S5,S55:S14,S38:S30,S51-Трицикло(L-аргинил-L-пролил-L-аспартил-L-фенилаланил-L-цистеинил-L-лейцил-L-глутамил-L-пролил-L-пролил-L-тирозил-L-треонилглицил-L-пролил-L-цистеинил-L-лизил-L-аланил-L-аргинил-L-изолейцил-L-изолейцил-L-аргинил-L-тирозил-L-фенилаланил-L-тирозил-L-аспарагинил-L-аланил-L-лизил-L-аланилглицил-L-лейцил-L-цистеинил-L-глутаминил-L-треонил-L-фенилаланил-L-валил-L-тирозилглицилглицил-L-цистеинил-L-аргинил-L-аланил-L-лизил-L-аргинил-L-аспарагинил-L-аспарагинил-L-фенилаланил-L-лизил-L-серил-L-аланил-L-глутамил-L-аспартил-L-цистеинил-L-метионил-L-аргинил-L-треонил-L-цистеинилглицилглицил-L-аланин).

Содержит не менее 90,0 % и не более 110,0 % заявленной активности апротинина C284H432N84O79S7 на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Растворим в воде и натрия хлорида растворе 0,9 %, практически нерастворим в хлороформе.

##### Идентификация

1. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля 60 F254.

- Подвижная фаза (ПФ). Вода—уксусная кислота ледяная, содержащая 100 г/л натрия ацетата безводного 40:50.

- Испытуемый раствор. Готовят раствор, содержащий 27 000 КИЕ/мл апротинина.

- Раствор стандартного образца апротинина. Фармакопейный стандартный образец апротинина разводят водой до получения раствора с активностью 27 000 КИЕ/мл.

- Реактив для детектирования. Растворяют 0,1 г нингидрина в смеси 6 мл раствора меди(II) хлорида с концентрацией 10 г/л, 21 мл уксусной кислоты ледяной и 70 мл этанола.

- На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора и раствора фармакопейного стандартного образца апротинина. Пластинку с нанесёнными пробами сушат при температуре 60 °С, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования и просматривают в видимом свете.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции апротинина на хроматограмме раствора стандартного образца апротинина.

3. Субстанция должна обладать антитрипсиновой активностью.

- Испытуемый раствор. Готовят раствор, содержащий 27 000 КИЕ/мл апротинина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора буферным раствором рН 7,2 до метки.

- Раствор хлористоводородной кислоты 0,002 М. Разбавляют 2,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М водой до 100,0 мл.

- Раствор стандартного образца трипсина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца трипсина, растворяют в растворе хлористоводородной кислоты 0,002 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Растворитель. Уксусная кислота ледяная—вода—этанол 1:49:50.

- Раствор казеина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,2 г казеина, растворяют в буферном растворе рН 7,2 и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Смешивают 1,0 мл испытуемого раствора с 1,0 мл раствора стандартного образца трипсина, оставляют на 10 мин и прибавляют 1,0 мл раствора казеина. Полученный раствор термостатируют при температуре 35 °С в течение 30 мин, затем охлаждают в ледяной воде и прибавляют 0,5 мл растворителя, встряхивают и оставляют при комнатной температуре на 15 мин. Раствор должен мутнеть.

- Контрольный раствор готовят в тех же условиях, используя буферный раствор рН 7,2 вместо испытуемого раствора. Контрольный раствор не должен мутнеть.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор субстанции, содержащий 27 000 КИЕ/мл, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y7 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 5,0 до 7,0 (раствор субстанции, содержащий 10 000 КИЕ/мл, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Оптическая плотность. Оптическая плотность раствора субстанции, содержащего 5400 КИЕ/мл, измеренная при длине волны 277 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, должна быть не более 0,80 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Родственные примеси

1. Дез-Ала-апротинин и дез-Ала-дез-Гли-апротинин. Определение проводят методом капиллярного зонного электрофореза с процедурой нормализации (ОФС «Капиллярный электрофорез»).

Ведущий электролит. Растворяют 8,21 г калия дигидрофосфата в 400 мл воды и доводят рН раствора фосфорной кислотой до 3,0. Количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 500 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. Готовят раствор субстанции в воде, содержащий не менее 1800 КИЕ/мл.

Раствор стандартного образца апротинина. Готовят раствор фармакопейного стандартного образца апротинина в воде с концентрацией, равной концентрации апротинина в испытуемом растворе.

Примечание

Примесь А: апротинин-(1-56)-пептид.

Примесь В: апротинин-(1-57)-пептид.

Электрофоретические условия

Капилляр | плавленый кварц без покрытия, эффективная длина 45–60 см, внутренний диаметр 75 мкм; |
Температура капилляра | 25 оС; |  |
Прекондиционирование капилляра | 1 мин натрия гидроксида раствор 0,1 М при 5 кПа, 2 мин разделяющий буферный раствор при 5 кПа; |
Детектор | спектрофотометрический, 214 нм; |
Ввод пробы | 3 с 3,5 кПа; |  |
Напряжение | 0,2 кВ/см; |  |
Время анализа | 30 мин. |  |

Относительное время миграции соединений. Апротинин – 1 (около 22 мин); примесь А – около 0,98; примесь В – около 0,99.

Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей А и В используются электрофореграмма раствора стандартного образца апротинина и электрофореграмма, прилагаемая к фармакопейному стандартному образцу апротинина.

Пригодность электрофоретической системы

На электрофореграмме раствора стандартного образца апротинина:

- абсолютное время миграции апротинина должно составлять от 19 до 25 мин;

- разрешение (RS) между пиками примесей А и В должно быть не менее 0,8;

- разрешение (RS) между пиками примеси В и апротинина должно быть не менее 0,5;

- распределение пиков: электрофореграмма испытуемого раствора должна быть качественно и количественно аналогична электрофореграмме раствора стандартного образца апротинина;

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика апротинина должно быть не менее 1000. При необходимости изменяют концентрацию испытуемого раствора для получения пиков достаточной высоты.

На электрофореграмме испытуемого раствора основная зона по положению должна совпадать с положением зоны апротинина на электрофореграмме раствора стандартного образца апротинина.

Допустимое содержание примесей:

- примесь А – не более 8,0 %;

- примесь В – не более 7,5%.

2. Пироглутамил-апротинин и другие. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 3,52 г калия дигидрофосфата и 7,26 г динатрия гидрофосфата гептагидрата, растворяют в 500 мл воды и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза Б (ПФБ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 3,52 г калия дигидрофосфата, 7,26 г динатрия гидрофосфата гептагидрата и 66,07 г аммония сульфата, растворяют в 500 мл воды и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. Готовят раствор субстанции в ПФА, содержащий около 9000 КИЕ/мл.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца апротинина для проверки пригодности хроматографической системы растворяют в 2,0 мл ПФА.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФА до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФА до метки.

Примечание

Примесь С ((5-оксопролил)апротинин):
S6,S56:S15,S39:S31,S52-трицикло(5-оксопролил-L-аргинил-L-пролил-L-аспартил-L-фенилаланил-L-цистеинил-L-лейцил-L-глутамил-L-пролил-L-пролил-L-тирозил-L-треонилглицил-L-пролил-L-цистеинил-L-лизил-L-аланил-L-аргинил-L-изолейцил-L-изолейцил-L-аргинил-L-тирозил-L-фенилаланил-L-тирозил-L-аспарагинил-L-аланил-L-лизил-L-аланилглицил-L-лейцил-L-цистеинил-L-глутаминил-L-треонил-L-фенилаланил-L-валил-L-тирозилглицилглицил-L-цистеинил-L-аргинил-L-аланил-L-лизил-L-аргинил-L-аспарагинил-L-аспарагинил-L-фенилаланил-L-лизил-L-серил-L-аланил-L-глутамил-L-аспартил-L-цистеинил-L-метионил-L-аргинил-L-треонил-L-цистеинилглицилглицил-L-аланин).

Хроматографические условия

Колонка | 75 × 7,5 мм, силикагель для хроматографии, сильный катионит, 10 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Объём пробы | 40 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–21 | 92 → 64 | 8 → 36
21–30 | 64 → 0 | 36 → 100
30–40 | 0 → 92 | 100 → 8

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Апротинин – 1 (17–20 мин); примесь С – около 0,9.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика апротинина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками примеси С и апротинина должно быть не менее 1,5;

- фактор асимметрии пика (AS) апротинина должен быть не более 1,3.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- примесь С ‒ не более 1,0 %;

- любая другая примесь – не более 0,5 %;

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,1 %).

3. Олигомеры апротинина. Определение проводят методом эксклюзионной хроматографии (ОФС «Эксклюзионная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—уксусная кислота—вода 200:200:600.

Испытуемый раствор. Готовят раствор субстанции в воде, содержащий около 9000 КИЕ/мл.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В стеклянный флакон с завинчивающейся крышкой помещают 30 мг субстанции, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 110±5 °С в течение 4 ч, охлаждают. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 18 мг субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | три последовательно соединённые колонки для эксклюзионной хроматографии 300 × 7,8 мм, с диапазоном разделяемых масс, подходящим для разделения апротинина, его димера и олигомеров (например, от 2000 до 80000), 10 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 277 нм; |  |
Объём пробы | 100 мкл; |  |
Время хроматографирования | 40 мин. |  |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматографической системы и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Мономер апротинина – 1 (около 25 мин); димер апротинина – около 0,9.

Идентификация примесей. Для идентификации пика димера апротинина используют хроматограмму раствора для проверки пригодности хроматографической системы.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками димера и мономера апротинина должно быть не менее 1,3;

- фактор асимметрии пика (AS) мономера апротинина должен быть не более 2,5.

Допустимое содержание примесей. Содержание каждой из примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- сумма примесей – не более 1,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,1 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 6,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 2). Для определения 0,1 г (точная навеска) субстанции сушат до постоянной массы не менее 24 ч.

Сульфатная зола. Не более 3,0 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 3600 КИЕ апротинина в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения – 48 ч.

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,877 ЕЭ на 1000 КИЕ апротинина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Гистамин. Не более 0,2 мкг гистамина-основания на 5400 КИЕ апротинина (ОФС «Испытание на гистамин»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Активность апротинина определяют путём измерения ингибирующего действия на раствор трипсина с известной активностью. Ингибирующую активность апротинина рассчитывают как разность между начальным и остаточным значениями активности трипсина.

1800 единиц ингибитора протеаз (ЕИП) ингибирует 50 % ферментной активности 2 микрокаталей трипсина.

Все растворы используют свежеприготовленными.

Испытуемый раствор. Готовят раствор субстанции в 0,0015 М боратном буферном растворе (рН 8,0), содержащий около 3000 КИЕ/мл.

Раствор стандартного образца трипсина. Готовят раствор фармакопейного стандартного образца трипсина с концентрацией 0,8 микрокаталей/мл в 0,001 М растворе хлористоводородной кислоты. Раствор готовят непосредственно перед использованием и хранят на ледяной бане.

Раствор стандартного образца трипсина разбавленный. Разбавляют 0,5 мл раствора стандартного образца трипсина до 10,0 мл 0,0015 М боратным буферным раствором рН 8,0. Полученный раствор выдерживают при температуре 20–25 °С в течение 10 мин, затем помещают на ледяную баню.

Раствор бензоиларгинина этилового эфира гидрохролида 0,69 %. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,345 г (точная навеска) бензоиларгинина этилового эфира гидрохролида, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор трипсина и апротинина. К 4,0 мл раствора стандартного образца трипсина прибавляют 1,0 мл испытуемого раствора, немедленно разбавляют до 40,0 мл 0,0015 М боратным буферным раствором рН 8,0. Полученный раствор выдерживают при температуре (20±5) °С в течение 10 мин, затем помещают на ледяную баню. Раствор используют в течение 6 ч после приготовления.

В ходе проведения испытания в реакторе обеспечивают постоянную атмосферу азота, непрерывное перемешивание и постоянную температуру (25±0,1) °С.

В реактор помещают 9,0 мл 0,0015 М боратного буферного раствора рН 8,0 с температурой 25±0,1 °С, прибавляют 1,0 мл раствора бензоиларгинина этилового эфира гидрохролида 0,69 %, доводят рН раствора 0,1 М раствором натрия гидроксида до 8,0. После того как температура достигнет равновесия при 25±0,1 °С, прибавляют 1,0 мл раствора трипсина и апротинина. Прибавляют 0,1 М раствор натрия гидроксида, поддерживая рН 8,0 и регистрируя расход титранта каждые 30 с. Испытания проводят в течение 6 мин. Определяют ежесекундный расход 0,1 М раствора натрия гидроксида в мл (n1, мл).

В тех же условиях титруют 1,0 мл раствора стандартного образца трипсина разбавленного, определяя ежесекундный расход 0,1 М раствора натрия гидроксида в мл (n2, мл).

Активность субстанции в калликреиновых единицах (КИЕ) на мг (Х) вычисляют по формуле:

где n1 – ежесекундный расход 0,1 М раствора натрия гидроксида, израсходованного на титрование раствора трипсина и апротинина, мл;
n2 – ежесекундный расход 0,1 М раствор натрия гидроксида, израсходованного на титрование раствора стандартного образца трипсина разбавленного, мл.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.3.0007 Гепарин натрия (Heparinum natricum)

Взамен ФС 42-1327-99

##### Определение

Мукополисахарид эфира полисерной кислоты.

Гепарин натрия представляет собой натриевую соль глюкозаминогликана, содержащего сульфатированные и ацетилированные остатки D-глюкозамина, D-глюкуроновой кислоты и L-идуроновой кислоты. При полном гидролизе гепарина натрия образуются D-глюкозамин, D-глюкуроновая кислота, L-идуроновая кислота, уксусная кислота и серная кислота. Гепарин натрия обладает свойством удлинять время свёртывания крови катализируя ингибирование тромбина и фактора Ха антитромбином. Гепарин натрия получают из лёгких крупного рогатого скота или мукозы кишечника свиней. Для получения исходного сырья используют животных, у которых отсутствуют опасные для человека заболевания вирусной, бактериальной, микоплазменной и прионной этиологии.

Анти-IIа активность субстанции должна составлять не менее 180 МЕ/мг (C24H31N2 Na7O35S5)n в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Аморфный порошок белого или почти белого цвета.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде.

##### Идентификация

1. Анти-IIа активность. Проводят определение анти-IIа активности в соответствии с ОФС «Методы количественного определения гепарина» (определение анти-IIа активности НФГ).

2. Активность. Проводят определение анти-Ха активности в соответствии с ОФС «Методы количественного определения гепарина» (определение анти-Ха активности НФГ). Отношение анти-Xa активности к анти-IIа активности, определённой в соответствии с разделом «Количественное определение», должно быть от 0,9 до 1,1.

3. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора А должно соответствовать времени удерживания пика гепарина на хроматограмме стандартного раствора В (раздел «Родственные примеси»).

4. 1H-ЯМР-спектроскопия (ОФС «Спектроскопия ядерного магнитного резонанса»).

- Растворитель. Дейтерия оксид, содержащий 0,02 мг/мл дейтерированного триметилсилилпропионата натрия.

- Примечание – В растворитель может быть добавлен 0,012 мг/мл натрия эдетата дигидрат, если в спектре испытуемого образца или образца сравнения сигнал при 5,22 м.д. меньше 80 % от сигнала при 5,44 м.д.

- Все растворы натрия эдетата дигидрата и натрия тетрадейтеродиметилсилапентаноата хранят в контейнере из полиэтилена высокой плотности.

- Испытуемый раствор. Растворяют 20 мг субстанции в 0,7 мл растворителя.

- Раствор стандартного образца гепарина натрия. Растворяют 20 мг фармакопейного стандартного образца гепарина натрия для ЯМР идентификации в 0,7 мл растворителя.

- Раствор для проверки пригодности системы. Растворяют 0,15 мг стандартного образца избыточно сульфатированного хондроитин сульфата в 1,0 мл раствора сравнения.

- Оборудование. Импульсный ЯМР-спектрометр с рабочей частотой на протонах не менее 300 МГц.

Параметры регистрации 1H ЯМР спектров

Угол поворота импульса | от 30° до 90°; |  |
Время выборки данных | не менее 2 с; |  |
Время задержки между импульсными последовательностями | не менее 4 с; |  |
Ширина спектра | 10–12 м.д. с центром 4,5 м.д.; |  |
Количество накоплений сигнала свободной индукции | не менее 16; |  |
Отношение сигнал/шум для сигнала метильной группы гепарина при 2,04 м.д. | не менее 1000:1; |  |
Температура образца | 20–30 °С. |  |

- Примечание – Спектры испытуемого раствора и раствора фармакопейного стандартного образца гепарина натрия должны записываться без вращения образца и при одинаковой температуре.

- Параметры обработки 1H ЯМР спектров

  - Взвешивающая функция: экспоненциальная;

  - Параметр уширения взвешивающей функции: 0,3 Гц;

  - Референсный сигнал: 0,00 м.д. (ТСП).

- Параметры пригодности системы. На спектре раствора для проверки пригодности хроматографической системы сигналы протонов метильных групп N-ацетильных фрагментов гепарина и гиперсульфатированного хондроитинсульфата должны наблюдаться при 2,05±0,02 и 2,16±0,03 м.д. соответственно.

- Анализ 1H ЯМР спектров

- Спектр испытуемого раствора должен качественно соответствовать спектру раствора стандартного образца гепарина натрия после нормализации обоих спектров с целью уравнивания их по интенсивности. Допускается изменение соотношения интенсивностей некоторых сигналов в области от 3,35 до 4,55 м.д. при сохранении подобия общего вида спектров.

- В спектрах должны присутствовать основные сигналы гепарина натрия (м.д.): 2,04±0,03; 3,27±0,03 (дублет); 4,34±0,03; 5,22±0,03; 5,42±0,03. Допускается появление дополнительного сигнала при 2,08±0,02 (дерматан сульфат).

- В спектрах не должно наблюдаться не идентифицированных сигналов в областях от 0,10 до 2,00 м.д., от 2,10 до 3,10 м.д. и от 5,70 до 8,00 м.д. высотой более 4 % от высоты сигнала при 5,42 м.д. Допускается наличие идентифицированных сигналов протонов остаточных растворителей и других технологических примесей.

5. _Субстанция должна соответствовать требованиям раздела «Натрий».

##### Испытания

Удельное вращение. Не менее +35 в пересчёте на сухое вещество (4 % раствор субстанции в воде, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор, содержащий в 1 мл 5000 МЕ субстанции, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, приготовленный в испытании «Прозрачность раствора» должен выдерживать сравнение с эталоном 5 подходящего цвета (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

рН. От 5,5 до 8,0 (1 % раствор в воде, свободной от углерода диоксида, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Примеси нуклеотидов. Оптическая плотность 0,4 % раствора субстанции в воде, измеренная в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 260 нм, не должна превышать 0,15 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Белок. Не более 0,5 % (в пересчёте на сухое вещество). (ОФС «Определение белка», метод 2 (А)).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде, доводят объём раствора тем же растворителем до метки и перемешивают.

Измеряют оптическую плотность испытуемого и стандартных растворов на спектрофотометре при длине волны 750 нм в кювете с толщиной слоя 5 см.

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,4 г натрия дигидрофосфата дигидрата, растворяют в воде, доводят значение рН фосфорной кислотой разведённой 10 % до 3,0 и доводят объём раствора водой до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Подвижная фаза Б (ПФБ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,40 г натрия дигидрофосфата дигидрата и 140 г натрия перхлората, растворяют в воде, доводят значение рН фосфорной кислотой разведённой 10 % до 3,0 и доводят объём раствора водой до метки; фильтруют и дегазируют. Раствор используют свежеприготовленным.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 50 мг субстанции (точная навеска), растворяют в воде при помощи вихревой мешалки, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают.

Испытуемый раствор Б. Растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в 1,0 мл воды при помощи вихревой мешалки. К 0,5 мл полученного раствора прибавляют 0,25 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М, 50 мкл натрия нитрита раствора 25 % и выдерживают при комнатной температуре в течение 40 мин. Для остановки реакции к полученной смеси прибавляют 0,2 мл натрия гидроксида раствора 1 М.

Раствор стандартного образца гепарина. Растворяют 0,25 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гепарина для физико-химического анализа в 2,0 мл воды при помощи вихревой мешалки.

Стандартный раствор А. К 1,2 мл раствора стандартного образца гепарина для физико-химического анализа прибавляют 0,3 мл фармакопейного стандартного образца дерматана сульфата и гиперсульфатированного хондроитина сульфата (содержит 10 мг/мл дерматана сульфата и 2,5 мг/мл гиперсульфатированного хондроитина сульфата) и гомогенизируют при помощи вихревой мешалки.

Стандартный раствор Б. К 0,5 мл стандартного раствора А прибавляют 0,25 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты, 50 мкл натрия нитрита раствора 25 % и выдерживают при комнатной температуре в течение 40 мин. Для остановки реакции к полученной смеси прибавляют 0,2 мл 1 М раствора натрия гидроксида.

Стандартный раствор В. К 0,1 мл стандартного раствора А прибавляют 0,9 мл воды и гомогенизируют при помощи вихревой мешалки.

Контрольный раствор. К 0,4 мл раствора стандартного образца гепарина для физико-химического анализа прибавляют 0,1 мл воды, перемешивают при помощи вихревой мешалки, далее прибавляют 0,25 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М, 50 мкл натрия нитрита раствора 25 % и выдерживают при комнатной температуре в течение 40 мин. Для остановки реакции к полученной смеси прибавляют 0,2 мл натрия гидроксида раствора 1 М.

Хроматографические условия

Предколонка | 50 × 2,0 мм, анионообменная смола, 13 мкм; |
Колонка | 250 × 2,0 мм, анионообменная смола, 9 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 0,22 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 202 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 75 | 25
10–35 | 75 → 0 | 25 → 100
35–40 | 0 | 100

Колонку уравновешивают в течение не менее 15 мин.

Хроматографируют контрольный раствор, стандартный раствор Б, стандартный раствор В, испытуемый раствор А и испытуемый раствор Б.

Относительное время удерживания соединений. Гепарин – 1 (около 26 мин); дерматана сульфат и хондроитина сульфат − около 0,9; гиперсульфатированный хондроитин сульфат − около 1,3.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме контрольного раствора должен отсутствовать пик с относительным временем удерживания гепарина.

На хроматограмме стандартного раствора Б:

- разрешение (RS) между суммарным пиком дерматана сульфата и хондроитина сульфата и гиперсульфатированного хондроитина должно быть не менее 3,0;

- отношение сигнал/шум (S/N) для суммарного пика дерматана сульфата и хондроитина сульфата должно быть не менее 10,0.

На хроматограмме стандартного раствора В:

- отношение максимум/минимум (p/v) между суммарным пиком дерматана сульфата и хондроитина сульфата и пиком гепарина должно быть не менее 1,3;

- относительное стандартное отклонение площади пика гепарина должно быть не более 5,0 % (6 введений).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора Б:

- площадь суммарного пика дерматана сульфата и хондроитина сульфата не должна превышать площадь соответствующего суммарного пика на хроматограмме стандартного раствора Б (не более 2,0 %);

- сумма площадей пиков любых других примесей не должна превышать более чем в 0,01 раз площади пиков дерматансульфата и хондроитинсульфата на хроматограмме стандартного раствора Б (не более 0,02 %);

- не учитывают пики, которые появляются во время начального изократического шага.

Гиперсульфатированный хондроитин сульфат. Определение проводят в условиях испытания «Подлинность. 1H-ЯМР-спектроскопия».

Анализ 1H ЯМР спектров. В диапазоне 1,5–3,0 м.д. не допускается присутствие характерного для гиперсульфатированного хондроитинсульфата сигнала при 2,16±0,03 м.д.

Азот. От 1,5 до 2,5 % в пересчёте на сухое вещество (ОФС «Определение азота в органических соединениях методом Кьельдаля»). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Натрий. От 9,5 до 13,5 % в пересчёте на сухое вещество. Определение проводят методом ААС (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Раствор цезия хлорида. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,27 г цезия хлорида, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворе цезия хлорида и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Калибровочные растворы натрия. В каждую из трёх мерных колб вместимостью 100 мл помещают по 12,5 мл, 25,0 мл и 37,5 мл раствора натрия 200 мкг/мл (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия») и доводят объём раствора раствором цезия хлорида до метки.

Условия испытания

- Источник излучения: лампа для определения натрия с полым катодом;

- Длина волны: 330,3 нм;

- Атомизация: воздушно-ацетиленовое пламя;

- Расход газа: воздух – 11 л/мин, ацетилен – 2 л/мин.

Определяют значения атомной абсорбции испытуемого раствора и калибровочных растворов. По калибровочной кривой рассчитывают концентрацию натрия в субстанции.

Сульфатная зола. От 30 % до 43 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Потеря в массе при высушивании. Не более 8,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Сушат 1 г (точная навеска) субстанции над фосфора(V) оксидом при температуре 60±2 °С и остаточном давлении не более 0,67 кПа (5 мм рт. ст.) в течение 3 ч.

Тяжёлые металлы. Не более 0,003 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) с использованием 3,0 мл эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

** Бактериальные эндотоксины. Не более 0,01 ЕЭ/МЕ гепарина (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

** Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 100 ME гепарина в 0,5 мл натрия хлорида растворе 0,9 % для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения – 48 ч.

** Стерильность. Субстанция должна быть стерильной (ОФС «Стерильность»).

** Испытание на депрессорные вещества. Субстанция не должна обладать депрессорным действием (ОФС «Испытание на депрессорные вещества»). Тест-доза – 5000 МЕ гепарина в 1,0 мл натрия хлорида раствора 0,9 % для инъекций на 1 кг массы животного.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Анти-IIа активность. Проводят определение анти-IIа активности в соответствии с ОФС «Методы количественного определения гепарина» (определение анти-IIа активности НФГ).

Результаты испытания считаются достоверными, если измеренное значение анти-IIа активности субстанции составляет не менее 90 % и не более 111 % от предполагаемой активности.

Под предполагаемой активностью подразумевают значение активности субстанции, которое используют при расчётах необходимых разбавлений растворов субстанции, используемых при выполнении испытания. В случае невыполнения данного требования необходимо провести повторное испытание со скорректированным соответствующим образом значением предполагаемой активности субстанции и её разведениями.

Доверительный интервал измеренной активности (P = 0,95) должен составлять от 80 % до 125 % от измеренной активности.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке. Если вещество стерильно, контейнер тоже должен быть стерилен.

* Приводится для информации.

** Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.3.0003 Глюкозамина сульфат натрия хлорид

Глюкозамин
Glucosamini sulfas natrii chloridum

Вводится впервые

##### Определение

Бис(2-амино-2-дезокси-β-D-глюкопиранозы) сульфат—хлорид натрия (1:2).

Глюкозамина сульфат натрия хлорид представляет собой субстанцию, производимую из глюкозамина гидрохлорида, выделенного из природных источников или полученного путём ферментации, и натрия сульфата.

Для получения исходного сырья используют животных, у которых отсутствуют опасные для человека заболевания вирусной, бактериальной, микоплазменной и прионной этиологии.

Содержит не менее 98,0 % и не более 102,0 % глюкозамина сульфата натрия хлорида (C6H13NO5)2·H2SO4·2NaCl в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в воде, практически нерастворим в ацетоне.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца глюкозамина сульфата натрия хлорида.

2. Качественная реакция. Субстанция должна давать характерную реакцию Б на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

3. Качественная реакция. Раствор 1 г субстанции в 10 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен давать характерные реакции на сульфаты и хлориды (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От +50,0 до +55,0 в пересчёте на сухое вещество (10 % раствор субстанции в воде, свободной от углерода диоксида, ОФС «Оптическое вращение»). Определение проводят через 3 ч после приготовления раствора субстанции.

Прозрачность раствора. Опалесценция раствора 1 г субстанции в 10 мл воды, свободной от углерода диоксида, не должна превышать эталон сравнения II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

рН раствора. От 3,0 до 5,0 (10 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ
(ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие глюкозамин, его примеси и 2-метилпиразин, используют свежеприготовленными.

Раствор А. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,5 г натрия гептансульфоната, прибавляют 0,5 мл фосфорной кислоты концентрированной и 4 мл калия гидроксида раствора 1 М и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—раствор А 50:1000. Доводят рН раствора фосфорной кислоты концентрированной или калия гидроксида раствором 1 М до 2,60.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,4 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 80 мл ПФ, обрабатывают ультразвуком в течение 10 мин, охлаждают до комнатной температуры и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца 2-метилпиразина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 25 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца 2-метилпиразина, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Растворяют содержимое флакона фармакопейного стандартного образца для проверки пригодности хроматографической системы, содержащего примеси В и С, в 1,0 мл ПФ.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. Смешивают 1,0 мл раствора стандартного образца
2-метилпиразина и 2,0 мл ПФ.

Примечание

Примесь А (N-ацетилглюкозамин): 2-ацетамидо-2-дезокси-D-глюкопираноза [72-87-7].

Примесь В (фруктозазин):
(1R,1′R,2S,2′S,3R,3′R)-1,1′-пиразин-2,5-диилбис(бутан-1,2,3,4-тетраол)
[13185-73-4].

Примесь С (дезоксифруктозазин):
(1R,2S,3R)-1-{5-[(2S,3R)-2,3,4-тригидроксибутил]пиразин-2-ил}бутан-1,2,3,4-тетраол
[17460-13-8].

Примесь Е (5-гидроксиметилфурфурол): 5-(гидроксиметил)фуран-2-карбальдегид [67-47-0].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, эндкепированный, для хроматографии, 3 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 195 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика 2-метилпиразина. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца
2-метилпиразина и испытуемый раствор.

Время удерживания 2-метилпиразина – около 9 мин.

Проверка пригодности хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика
2-метилпиразина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси В и примеси С должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме раствора стандартного образца 2-метилпиразина:

- фактор асимметрии пика (AS) 2-метилпиразина должен быть не более 2,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика 2-метилпиразина должно быть не более 3,0 % (6 введений).

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика 2-метилпиразина на хроматограмме раствора стандартного образца 2-метилпиразина;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца 2-метилпиразина, мг;
Р – содержание 2-метилпиразина в фармакопейном стандартном образце 2-метилпиразина,%;
358,42 – удвоенная молекулярная масса глюкозамина;
573,31 – молекулярная масса глюкозамина сульфата натрия хлорида.

Допустимое содержание примесей:

- любая примесь – не более 0,05 %;

- сумма примесей – не более 0,2 %.

Не учитывают примеси, содержание каждой из которых менее 0,03 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Калий

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,25 г субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

В коническую колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мл испытуемого раствора, доводят рН раствора уксусной кислоты раствором 6 М до 3,00, прибавляют 5 капель натрия кобальтинитрита раствора 20 %; не должно наблюдаться образования осадка.

Мышьяк. Не более 0,0003 % (ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения используют 0,1667 г субстанции.

Сульфатная зола. Не менее 23,5 % и не более 26,0 %. Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

* Бактериальные эндотоксины. Не более 0,87 ЕЭ на 1 мг глюкозамина сульфата натрия хлорида (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

* Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 20 мг глюкозамина сульфата натрия хлорида в 0,2 мл натрия хлорида раствора 0,9 % на мышь, внутривенно. Срок наблюдения – 48 ч.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2 г (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В коническую колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора, прибавляют 40 мл воды, 1,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически, используя стеклянный индикаторный электрод и хлорсеребряный электрод сравнения с двойным электролитическим мостиком, заполненным насыщенным раствором калия нитрата в качестве электролита (ОФС «Потенциометрическое титрование»).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 28,665 мг глюкозамина сульфата натрия хлорида (C6H13NO5)2·H2SO4·2NaCl.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке в защищённом от света месте.

* Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.3.0004 Лизоцима гидрохлорид

Лизоцим
Lysozymi hydrochloridum

Вводится впервые

##### Определение

Пептидогликан N-ацетилмурамоилгидролаза из яичного белка, гидрохлорид.

Лизоцима гидрохлорид является основным пептидом, получаемым из белка куриного яйца, и обладает способностью гидролизовать мукополисахариды. Для получения исходного сырья используют животных, у которых отсутствуют опасные для человека заболевания вирусной, бактериальной и микоплазменной этиологии.

Cодержит не менее 0,9 мг/мг (по активности) лизоцима C616H963N193O182S10 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, практически нерастворим в спирте 95 %.

##### Идентификация

1. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Раствор уксусной кислоты. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 5,78 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора водой до метки.

- Раствор натрия ацетата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 8,2 г натрия ацетата безводного, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Буферный раствор. В мерной колбе вместимостью 1000 мл смешивают 176 мл раствора уксусной кислоты и 824 мл раствора натрия ацетата, доводят значение рН раствором уксусной кислоты или раствором натрия ацетата до 5,40.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг субстанции, растворяют в буферном растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора буферным раствором до метки.

- Раствор стандартного образца лизоцима. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца лизоцима, растворяют в буферном растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём буферным раствором до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 220 до 400 нм должен соответствовать спектру раствора стандартного образца лизоцима.

2. Качественная реакция

- Раствор нингидрина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,2 г нингидрина, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

- Растворяют 10 мг субстанции в 5 мл буферного раствора, прибавляют 1,0 мл раствора нингидрина и нагревают на водяной бане в течение 10 мин; должно появиться сине-фиолетовое окрашивание.

##### Испытания

Прозрачность раствора. Раствор 0,15 г субстанции в 10 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»). При необходимости доводят значение рН хлористоводородной кислотой разведённой 8,3 % до 3,00.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 3,0 до 5,0 (1,5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Азот. От 16,8 до 18,6 %, в пересчёте на сухое вещество
(ОФС «Определение азота в органических соединениях методом Кьельдаля», метод 2). Для определения используют 15 мг (точная навеска) субстанции.

Потеря в массе при высушивании. Не более 8,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают до постоянной массы 0,1 г (точная навеска) субстанции при температуре 105 °С в течение 2 часов.

Сульфатная зола. Не более 2,0 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 5 мг лизоцима гидрохлорида в 0,5 мл воды для инъекций на мышь, внутривенно. Срок наблюдения – 48 ч.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Раствор калия дигидрофосфата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 9,08 г калия дигидрофосфата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор динатрия гидрофосфата. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 2,365 г динатрия гидрофосфата безводного, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Буферный раствор. В мерной колбе вместимостью 1000 мл смешивают 800 мл раствора калия дигидрофосфата и 200 мл раствора динатрия гидрофосфата, при необходимости доводят значение рН раствором калия дигидрофосфата или раствором динатрия гидрофосфата до 6,2.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) в пересчёте на сухое вещество субстанции, растворяют в буферном растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора буферным раствором до метки. Раствор используют свежеприготовленным и хранят при температуре от 2 до 8 °С.

Раствор стандартного образца лизоцима. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг (точная навеска) в пересчёте на сухое вещество фармакопейного стандартного образца лизоцима, растворяют в буферном растворе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Раствор используют свежеприготовленным и хранят при температуре от 2 до 8 °С.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца лизоцима и доводят объём раствора буферным раствором до метки. Раствор используют свежеприготовленным и хранят при температуре от 2 до 8 °С.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл раствора стандартного образца лизоцима и доводят объём раствора буферным раствором до метки. Раствор используют свежеприготовленным и хранят при температуре от 2 до 8 °С.

Раствор субстрата. Готовят раствор лиофилизата клеток Micrococcus lysodeikticus в буферном растворе с концентрацией около 0,3 мг/мл.

В три флакона с завинчивающимися крышками добавляют по 4,0 мл раствора субстрата, предварительно нагретого при 36±1 °С в течение 10 мин, с интервалом в одну минуту прибавляют 0,1 мл испытуемого раствора в первый флакон, 0,1 мл раствора сравнения А во второй флакон и 0,1 мл раствора сравнения Б в третий флакон. Смеси выдерживают в течение ровно 12 мин на водяной бане при 36±1 °С, прибавляют в первый флакон 0,5 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М и перемешивают. С интервалом в одну минуту прибавляют по 0,5 мл хлористоводородной кислоты раствора 1 М во второй и в третий флакон.

Измеряют оптическую плотность полученных растворов на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 640 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве раствора сравнения воду.

Содержание (по активности) лизоцима C616H963N193O182S10 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в мг/мг (Х), вычисляют по формуле:

где А1 – оптическая плотность испытуемого раствора;
А0А – оптическая плотность раствора сравнения А;
А0Б – оптическая плотность раствора сравнения Б;
а1 – навеска субстанции в пересчёте на сухое вещество, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца лизоцима в пересчёте на сухое вещество, мг;
Р – активность фармакопейного стандартного образца лизоцима, мг/мг.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.3.0005 Протамина сульфат (Protamini sulfas)

Взамен ФС 42-1256-79

[9009-65-8]

##### Определение

Сульфаты основных пептидов, извлечённых из сперматозоидов или молоки рыб, обычно видов Salmonidae. Связывается с гепарином в растворе, ингибируя его антикоагулянтную активность; в условиях анализа это связывание приводит к образованию осадка. В расчёте на высушенное вещество 1 мг протамина сульфата осаждает не менее 100 МЕ гепарина.

Содержит не менее 90,0 % и не более 110,0 % протамина сульфата в пересчёте на сухое и свободное от серной кислоты вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок со слабым характерным запахом.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Умеренно растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. Антигепариновая активность. Должна соответствовать требованиям раздела «Количественное определение».

2. ВЭЖХ. Время удерживания четырёх основных пиков (протаминовых пептидов A, B, C, D _) на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пиков (протаминовых пептидов _A, B, C, D), на хроматограмме раствора стандартного образца протамина сульфата (раздел «Родственные примеси»).

- Относительное содержание пептидов A, B, C, D в субстанции рассчитывают методом внутренней нормализации. Содержание пептида А в испытуемом растворе должно составлять от 13 до 18 %; пептида В – от 21 до 28 %; пептида С – от 31 до 38 %; пептида D – от 19 до 24 %.

3. Качественная реакция. К 0,5 мл раствора А, полученного в испытании «Прозрачность раствора», прибавляют 4,5 мл воды, 1,0 мл натрия гидроксида раствора 10 %, 1,0 мл α-нафтола раствора 0,1 % и перемешивают. Смесь охлаждают до 5 °С и прибавляют 0,5 мл натрия гипобромита раствора; должно образоваться красное окрашивание.

4. Качественная реакция. Субстанция должна давать реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### Испытания

Удельное вращение. От –65 до –85 в пересчёте на сухое вещество (1 % раствор субстанции в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Растворяют 0,2 г субстанции в 10 мл воды (раствор А). К 2,5 мл полученного раствора прибавляют 7,5 мл воды. Полученный раствор должен выдерживать сравнение с эталоном II (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном BY6 или Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Оптическая плотность. Оптическая плотность 1,0 % раствора субстанции в воде, измеренная при длине волн от 260 до 280 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать 0,1 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

рН. От 6,0 до 7,5 (1,0 % раствор субстанции, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза А (ПФА). Трифторуксусная кислота—ацетонитрил—вода 1:50:950.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Трифторуксусная кислота—ацетонитрил—вода 1:500:500.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 30 мг субстанции, растворяют в 400 мкл хлористоводородной кислоты 6 М и доводят объём раствора хлористоводородной кислотой 0,01 М до метки.

Раствор стандартного образца протамина сульфата. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 3 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца протамина сульфата, содержащего пептиды А, В, С, D, растворяют в 40 мкл хлористоводородной кислоты раствора 6 М и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1 мл раствора стандартного образца протамина сульфата и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М до метки.

Условия хроматографирования

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, с пористой поверхностью на непористой основе, эндкепированный, для хроматографии, 3,6 мкм; |
Температура колонки | 45 °С; |  |
Скорость потока | 1,5 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 210 нм; |  |
Температура автосамплера | 5 °С; |  |
Объём пробы | 30 мкл; |  |
Время хроматографирования | 25 мин. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–2 | 95 | 5
2–17 | 95 → 80 | 5 → 20
17–17,2 | 80 → 20 | 20 → 80
17,2–20 | 20 | 80

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца протамина сульфата и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Пептид А – 1 (от 9 до 13 мин); пептид В – около 1,05; пептид C – около 1,10; пептид D – около 1,15.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца протамина сульфата:

- должно наблюдаться 4 основных пика (пептиды от А до D), время удерживания которых должны находиться в пределах от 8 до 17 мин;

- разрешение ® между пиками пептида А и пептида B должно быть не менее 2,0; между пиками пептида B и пептида C должно быть не менее 2,0; между пиками пептида C и пептида D должно быть не менее 2,0;

- фактор асимметрии (As) пика пептида А должен быть не более 1,8; пика пептида B – не более 1,5; пика пептида С– не более 2,5; пика пептида D – не более 2,2;

- относительное стандартное отклонение суммы площадей пиков пептидов A, B, C и D – не более 2% (6 введений);

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика пептида А на хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы – не менее 10.

Допустимое содержание примесей. Суммарное содержание примесей в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где SА+SB+SC+SD - сумма площадей пиков пептидов A, B, C и D на хроматограмме испытуемого раствора;
ΣS - сумма площадей всех пиков на хроматограмме испытуемого раствора.

Допустимое суммарное содержание примесей – не более 8,0 %.

При суммарном содержании примесей менее 0,5 % результат испытания указывают как «менее 0,5 %».

Потеря в массе при высушивании. Не более 5,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Азот. От 21,0 до 26,0 %, в пересчёте на сухое вещество (ОФС «Определение азота в органических соединениях методом Кьельдаля, метод 1). Для определения используют 70 мг субстанции и проводят минерализацию в течение 3–4 часов. В качестве титранта используют 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты.

Железо. Не более 0,001 % (ОФС «Железо», метод 2). Растворяют 1,0 г субстанции при нагревании в 10 мл воды.

Сульфаты. Не менее 16 % и не более 24 %, в пересчёте на сухое вещество. В химический стакан помещают 0,15 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 15 мл воды, прибавляют 5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 %, нагревают до кипения и медленно прибавляют к кипящему раствору 10 мл бария хлорида раствора 10 %. Накрывают стакан, нагревают в течение 1 ч на водяной бане и фильтруют. Осадок промывают несколько раз горячей водой, до отрицательной реакции на хлориды, высушивают и прокаливают в предварительно взвешенном тигле при температуре от 550 до 650 °С до постоянной массы.

1,0 г остатка соответствует 0,4117 г сульфатов SO4.

Сульфатная зола. Не более 0,5 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Ртуть. Не более 0,001 %.

Растворитель. Азотная кислота концентрированная—серная кислота концентрированная 1:1.

Испытуемый раствор. В коническую колбу вместимостью 250 мл помещают 2,0 г субстанции, прибавляют 20,0 мл растворителя, кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч, охлаждают и осторожно разбавляют водой. Кипятят до полного исчезновения паров азотной кислоты. Смесь охлаждают и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 200 мл, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют. Переносят 50,0 мл фильтрата в делительную воронку, встряхивают последовательно с небольшими порциями хлороформа до обесцвечивания хлороформного слоя. Отделяют хлороформный слой. К водному слою прибавляют 25,0 мл серной кислоты разведённой 9,8 %, 115,0 мл воды и 10,0 мл гидроксиламина гидрохлорида раствора 20 %. Титруют дитизона раствором 0,0012 %, после каждого прибавления титранта смесь тщательно перемешивают, к концу титрования смесь оставляют для разделения слоёв. Отделяют хлороформный слой и продолжают титровать до появления синевато-зелёного окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Рассчитывают содержание ртути, используя эквивалент в мкг ртути на 1 мл титранта, определённый при установке титра дитизона раствора 0,0012 %.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3Б), в остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 2.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 0,5 мг субстанции в 0,5 мл воды для инъекций на мышь. Срок наблюдения 48 ч.

Бактериальные эндотоксины. Не более 2,33 ЕЭ на 1 мг субстанции (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Антигепариновая активность. Определение проводят методом титриметрии.

Все испытуемые растворы и раствор стандартного образца протамина сульфата готовятся в двух повторностях; для каждого раствора проводится 3 определения.

Испытуемый раствор А. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 15 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор Б. К 10,0 мл испытуемого раствора А прибавляют 5,0 мл воды и перемешивают.

Испытуемый раствор В. К 10,0 мл испытуемого раствора А прибавляют 20,0 мл воды и перемешивают.

Раствор стандартного образца гепарина натрия (титрант). Готовят раствор фармакопейного стандартного образца гепарина натрия в воде с концентрацией гепарина натрия около 170 МЕ/мл.

В кювету помещают 1,5 мл титруемого раствора (испытуемый раствор А; испытуемый раствор Б; испытуемый раствор В), устанавливают подходящую длину волны в видимой области спектра, прибавляют титрант в малых количествах до резкого увеличения абсорбции и записывают объём.

Антигепариновая активность. Количество связанного гепарина натрия в МЕ на 1 мг субстанции (A) вычисляют по формуле:

где Vi – объём титранта, израсходованный на титрование каждого испытуемого раствора, мл;
CТ – концентрация гепарина натрия, МЕ/мл;
Ci – номинальная концентрация протамина сульфата в каждом испытуемом растворе, мг/мл.

Относительное стандартное отклонение антигепариновой активности для каждого испытуемого раствора должно быть не более 5,0 %.

За результат антигепариновой активности принимают среднее значение из 18 определений.

Белок. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Хроматографируют раствор стандартного образца протамина сульфата и испытуемый раствор.

Содержание протамина сульфата в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - среднее значение суммы площадей пиков пептидов A, B, C, D на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - среднее значение суммы площадей пиков пептидов A, B, C, D на хроматограмме раствора стандартного образца протамина сульфата;
a1 - навеска субстанции, мг;
a0 - навеска стандартного образца протамина сульфата, мг;
P - содержание протамина в стандартном образце протамина сульфата, мг;
W - потеря в массе при высушивании,%;
R - содержание сульфатов в субстанции, в%.

##### Хранение

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС 2.3.0002 Эноксапарин натрия (Enoxaparinum natricum)

Вводится впервые

##### Определение

Эноксапарин натрия представляет собой натриевую соль деполимеризованного гепарина, полученную путём щелочного гидролиза бензилового эфира гепарина. Исходный материал, гепарин, получают исключительно из мукозы кишечника свиней. Сырьё для производства поступает из хозяйств от животных, у которых отсутствуют заболевания вирусной, бактериальной, микоплазменной, прионной этиологии, патогенных для человека.

Большинство компонентов имеют остаток 2-O-сульфопираноз-4-енуроновой кислоты на невосстанавливающем конце и 2-N-сульфо-D-глюкозамина на восстанавливающем конце гликозидной цепи, от 15 до 25 % звеньев на восстанавливающем конце – 1,6-ангидро-2-N-сульфо-D-глюкозамин; среднемассовая молекулярная масса – около 4500 (в диапазоне от 3800 до 5000); степень сульфатирования составляет около 2 на дисахаридную единицу.

R | n | содержание,%
--- | --- | ---
| 0-20 | 15-25
* - H | 1-21 | 75-85

Анти-Ха активность должна быть не менее 90 МЕ/мг и не более 125 МЕ/мг в пересчёте на сухое вещество. Анти-IIa активность должна быть не менее 20,0 МЕ/мг и не более 35,0 МЕ/мг в пересчёте на сухое вещество. Отношение анти-Ха активности к анти-IIa активности должно быть не менее 3,3 и не более 5,3.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Очень легко или легко растворим в воде, практически нерастворим в этаноле.

##### Идентификация

1. Активность. Должна соответствовать требованиям раздела «Количественное определение».

2. Активность. Отношение анти-Ха активности к анти-IIa активности должно быть не менее 3,3 и не более 5,3 (раздел «Количественное определение»).

3. 1,6-Ангидропроизводное. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

- Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 0,28 г натрия дигидрофосфата в 950 мл воды и доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной раствором до 3,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

- Подвижная фаза Б (ПФБ). Растворяют 140 г натрия хлората в 950 мл ПФА и доводят значение pH фосфорной кислотой концентрированной раствором до 3,0, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора ПФА до метки.

- Раствор натрия тетрагидробората. Растворяют 12 мг натрия тетрагидробората в 0,4 мл воды с помощью встряхивателя.

- Раствор гепариназы (А). Готовят раствор гепариназы I в фосфатном буферном растворе pH 7,0 с концентрацией 0,4 МЕ/мл. Раствор хранят до использования при −20 °С.

- Раствор гепариназы (Б). Готовят раствор гепариназы II в фосфатно-альбуминовом буферном растворе pH 7,0 с концентрацией 0,4 МЕ/мл. Раствор хранят до использования при −20 °С.

- Раствор гепариназы (В). Готовят раствор гепариназы III в фосфатно-альбуминовом буферном растворе pH 7,0 с концентрацией 0,4 МЕ/мл. Раствор хранят до использования при −20 °С.

- Раствор гепариназы (Г). Смешивают равные объёмы растворов гепариназы А, Б и В.

- Контрольный раствор. Помещают в пробирку 20 мкл воды, 70 мкл ацетатно-альбуминового буферного раствора рН 7,0, 100 мкл раствора гепариназы (Г) и осторожно перемешивают полученную смесь посредством многократного переворачивания пробирки. Выдерживают на водяной бане при 25 °С в течение 48 ч. Смешивают 60 мкл полученного раствора и 10 мкл свежеприготовленного раствора натрия тетрагидробората. Полученный раствор выдерживают при комнатной температуре в течение 4 ч.

- Испытуемый раствор А. Растворяют 20 мг субстанции в 1,0 мл воды.

- Испытуемый раствор Б. К 20 мкл испытуемого раствора А прибавляют 70 мкл ацетатно-альбуминового буферного раствора рН 7,0 и 100 мкл раствора гепариназы (Г). Осторожно перемешивают переворачиванием и выдерживают в водяной бане при 25 °С в течение 48 ч.

- Испытуемый раствор В. К 60 мкл испытуемого раствора Б прибавляют 10 мкл свежеприготовленного раствора натрия тетрагидробората. Перемешивают и выдерживают при комнатной температуре в течение 4 ч.

- Раствор стандартного образца эноксапарина натрия. Растворяют 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца эноксапарина натрия в 1,0 мл воды.

- Стандартный раствор А. К 20 мкл раствора стандартного образца эноксапарина натрия прибавляют 70 мкл ацетатно-альбуминового буферного раствора рН 7,0 и 100 мкл раствора гепариназы (Г). Осторожно перемешивают переворачиванием и выдерживают в водяной бане при 25 °С в течение 48 ч.

- Стандартный раствор Б. К 60 мкл стандартного раствора А прибавляют 10 мкл раствора натрия тетрагидробората. Перемешивают и выдерживают при комнатной температуре в течение 4 ч.

- Примечание

- Срок годности растворов гепариназы А, Б и В – 3 месяца при −20 °С. Испытуемые растворы А и Б, раствор стандартного образца эноксапарина натрия и стандартный раствор А должны готовиться одновременно. Деполимеризованные испытуемые растворы стабильны 1 месяц при −20 °С. Испытуемый раствор В и стандартный раствор Б должны готовиться одновременно.

Хроматографические условия

Колонка | 10 × 4,6 мм, анионообменная смола сильноосновная для хроматографии (1), 5 мкм; |
Температура колонки | 50 °С; |  |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 234 нм; |  |
Объём пробы | 18 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–20 | 97 → 65 | 3 → 35
20–50 | 65 → 0 | 35 → 100
50–60 | 0 | 100

Хроматографируют контрольный раствор, испытуемый раствор В и стандартные растворы А и Б.

Относительное время удерживания соединений и молекулярная масса

Соединение | Относительное время удерживания | Молекулярная масса
--- | --- | ---
Неидентифицированное | <0,20 | 741
Восстановленное △IVA | 0,20 | 401
Неидентифицированное | 0,20–0,46 | 741
Восстановленное △IVA | 0,46 | 461
Неидентифицированное | 0,46–0,48 | 483
Восстановленное △IVA | 0,48 | 503
Неидентифицированное | 0,48–0,52 | 503
1,6-ангидро △IIS | 0,52 | 443
Неидентифицированное | 0,52–0,57 | 503
Восстановленное △IIIA | 0,57 | 503
Неидентифицированное | 0,57–0,66 | 533
Восстановленное △IIS | 0,66 | 563
Неидентифицированное | 0,66–0,76 | 563
Восстановленное △IIIS | 0,76 | 563
Неидентифицированное | 0,76–0,85 | 583
Восстановленное △IA | 0,85 | 605
1,6-ангидро △IS | 0,88 | 545
Неидентифицированное | 0,88–0,97 | 635
Восстановленное △IIA-IVSglu | 0,97 | 1066
Восстановленное △IS | 1 (около 30 мин) | 665
△IS | 1,04 | 665
Неидентифицированное | 1,04–1,10 | 1228
Восстановленное △IIA-IISglu | 1,10 | 1168
Неидентифицированное | 1,10–1,28 | 1228
1,6-ангидро △IS-IS | 1,28 | 1210
Неидентифицированное | >1,28 | 1228

- Примечание

- В зависимости от разрешения колонки, 1,6-ангидро △IIS может элюироваться в виде 2 пиков (формы манозамина и глюкозамина), которые учитываются вместе как 1,6-ангидро △IIS.

- Идентификация дисахаридов. Для идентификации пиков дисахаридов используют относительное время удерживания соединений, хроматограмму стандартного раствора Б и хроматограмму, прилагаемую к стандартному образцу эноксапарина натрия. Для идентификации пиков 1,6-ангидро-производных используют относительное время удерживания соединений и хроматограмму стандартного раствора А.

- Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора А отношение площадей пиков 1,6-ангидро △IS-IS и 1,6-ангидро △IS должно быть не более 1,15.

- На хроматограмме стандартного раствора Б:

  - отношение площадей пиков △IS и восстановленного △IS должно быть не более 0,02;

  - разрешение (RS) между пиками восстановленного △IA и 1,6-ангидро △IS должно быть не менее 1,5.

- Содержание 1,6-ангидро-производных в фармакопейном стандартном образце эноксапарина натрия не должно отклоняться от заявленного более чем на 1,5 %.

- Содержание каждого из 3 основных 1,6-ангидро-производных в процентах (Х) вычисляют по формуле:

- где MW – среднемассовая молекулярная масса эноксапарина (по результатам подраздела 4 раздела «Идентификация»);
  MWX – относительная молекулярная масса производного x;
  AX – площадь пика производного x;
  A1 – площадь пика 1,6-ангидро △IS;
  A2 – площадь пика 1,6-ангидро △IIS;
  A3 – площадь пика 1,6-ангидро △IS-IS.

- Не учитывают пики, присутствующие на хроматограмме контрольного раствора.

- Округляют значение до ближайшей целой единицы.

- Допустимое содержание: От 15 % до 25 % для компонентов, обладающих 1,6-ангидро-структурой на восстанавливающем конце цепи.

4. Среднемассовая молекулярная масса и молекулярно-массовое распределение. Значение должно быть в диапазоне от 3800 до 5000. Содержание фракции со среднемассовой молекулярной массой менее 2000 должно быть в диапазоне от 12,0 % до 20,0 %. Содержание фракции со среднемассовой молекулярной массой от 2000 до 8000 должно быть от 68,0 % до 82,0 %. Содержание фракции со среднемассовой молекулярной массой более 8000 должно быть не более 18,0 %. Определение проводят одним из следующих методов.

- Метод 1. Определение проводят методом эксклюзионной хроматографии (ОФС «Эксклюзионная хроматография»).

- Все растворы используют свежеприготовленными.

- Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 2000 мл помещают 68,9 г лития нитрата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца эноксапарина натрия. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца эноксапарина натрия, растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Калибровочный раствор А. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца эноксапарина натрия для калибровки молекулярных масс (содержит компоненты с молекулярной массой в пике 1400, 2250, 5200 и 11 000) растворяют в 1,0 мл ПФ.

- Калибровочный раствор Б. Содержимое флакона фармакопейного стандартного образца эноксапарина натрия для калибровки молекулярных масс (содержит компоненты с молекулярной массой в пике 1800, 3350 и 7750) растворяют в 1,0 мл ПФ.

Хроматографические условия

Предколонка | 40 × 6 мм, силикагель для эксклюзионной хроматографии (1), 5 мкм, пригодный для разделения белков с молекулярной массой от 15 000 до 100 000; |
Колонка | две последовательно соединённые колонки 300 × 7,8 мм, силикагель для эксклюзионной хроматографии (1), 5 мкм, пригодный для разделения белков с молекулярной массой от 15 000 до 100 000; |
Температура колонки | 20 °С; |  |
Скорость потока | 0,6 мл/мин; |  |
Детектор | рефрактометрический; |  |
Объём пробы | 20 мкл; |  |
Время хроматографирования | 45 мин. |  |

- Хроматографируют калибровочный раствор А, калибровочный раствор Б, раствор стандартного образца эноксапарина натрия и испытуемый раствор.

- Строят калибровочный график зависимости времени удерживания от молекулярных масс калибровочного раствора А и калибровочного раствора Б. Для построения калибровочного графика используют полиномиальную зависимость третьего порядка.

- На хроматограммах раствора стандартного образца эноксапарина натрия и испытуемого раствора рассчитывают общую площадь всех пиков, не учитывая пики солей и растворителя. Определяют значение средней молекулярной массы с точностью до 50.

- Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца эноксапарина натрия значение средней молекулярной массы не должно отличаться от заявленного значения более чем на 150.

- По хроматограмме испытуемого раствора определяют содержание фракции с молекулярной массой менее 2000, процентное содержание эноксапарина натрия с молекулярной массой от 2000 до 8000 и свыше 8000.

- Метод 2. Определение проводят методом эксклюзионной хроматографии (ОФС «Эксклюзионная хроматография»).

- Все растворы используют свежеприготовленными.

- Подвижная фаза (ПФ). Аммония ацетата раствор 0,1 М.

- Испытуемый раствор. Растворяют 20 мг субстанции в 2 мл ПФ.

- Калибровочный раствор. Растворяют 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца для калибровки молекулярных масс низкомолекулярного гепарина (600–18 000) в 2 мл ПФ.

Хроматографические условия

Колонка | 300 × 7,8 мм, силикагель для эксклюзионной хроматографии (1), 5 мкм, пригодный для разделения белков с молекулярной массой от 15 000 до 100 000; |
Температура колонки | 25 °C; |  |
Скорость потока | 0,5 мл/мин; |  |
Детектор | рефрактометрический; |  |
Объём пробы | 25 мкл. |  |

- Хроматографируют калибровочный раствор.

- Рассчитывают общую площадь под кривой хроматограммы путём численного интегрирования по интересующему диапазону, исключая пики соли и растворителя в конце хроматограммы, а также пик со временем удерживания натрия сульфата.

- Рассчитывают площадь под кривой до каждой точки в процентах от общей площади.

- Используя таблицу, прилагаемую к стандартному образцу для калибровки молекулярных масс низкомолекулярного гепарина, определяют те точки хроматограммы, для которых процент от общей площади под кривой наиболее близок к проценту, приведённому в таблице, и присваивают указанную в ней молекулярную массу соответствующему времени удерживания на хроматограмме. Калибровочная кривая для хроматографической системы строится путём подбора подходящей математической зависимости к набору значений времени удерживания и логарифмов молекулярных масс. Рекомендуется использовать полином 3-й степени.

- Хроматографируют испытуемый раствор и интегрируют полученную хроматограмму аналогично калибровочному раствору.

- Вычисляют среднюю молекулярную массу () по формуле:

- где Ri – сигнал детектора для фракции i;
  Mi – относительная молекулярная масса, соответствующая фракции i.

5. 13C-ЯМР-спектроскопия (ОФС «Спектроскопия ядерного магнитного резонанса»).

- Испытуемый раствор. Растворяют 0,2 г субстанции в смеси 0,2 мл дейтерия оксида и 0,8 мл воды и прибавляют 0,05 мл дейтерированного метанола.

- Раствор стандартного образца эноксапарина натрия. Растворяют 0,2 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца эноксапарина натрия в смеси 0,2 мл дейтерия оксида и 0,8 мл воды и прибавляют 0,05 мл дейтерированного метанола.

- Оборудование. Импульсный ЯМР-спектрометр с рабочей частотой не менее 75 МГц для 13C.

- Параметры регистрации 13C ЯМР спектров

  - Угол поворота намагниченности: не менее 30°;

  - Время выборки данных: не менее 1,3 с;

  - Число точек преобразования Фурье: 128 К;

  - Количество накоплений сигнала спада свободной индукции: не менее 5000;

  - Ширина спектра: 250 м.д.;

  - Время задержки между импульсными последовательностями: не менее 1 с;

  - Температура: 25–40 °С;

  - Химический сдвиг сигнала дейтерированного метанола: 50 м.д.

- Анализ 13C-ЯМР-спектров. Спектр испытуемого раствора должен соответствовать спектру раствора стандартного образца эноксапарина натрия.

##### Испытания

Удельный показатель поглощения. От 14,0 до 20,0 (в максимуме поглощения) при длине волны 231 нм в пересчёте на сухое вещество (0,05 % раствор субстанции в хлористоводородной кислоте 0,01 М, ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Прозрачность раствора. Раствор 1,0 г субстанции в 10 мл воды, свободной от углерода диоксида, должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, приготовленный в испытании «Прозрачность раствора» должен выдерживать сравнение с эталоном 6 подходящего цвета (ОФС «Степень окраски жидкостей»).

рН раствора. От 6,2 до 7,7 (раствор, приготовленный в испытании «Прозрачность раствора», ОФС «Ионометрия», метод 3).

Бензиловый спирт. Не более 0,1 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—ацетонитрил—вода 50:150:800.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 г (точная навеска) субстанции, растворяют в 5,0 мл натрия гидроксида 1 М и выдерживают при комнатной температуре в течение 1 ч. Прибавляют 1,0 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца бензилового спирта. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца бензилового спирта, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 25 °С; |  |
Скорость потока | 1 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 256 нм; |  |
Объём пробы | 20 мкл. |  |

Хроматографируют раствор стандартного образца бензилового спирта и испытуемый раствор.

Содержание бензилового спирта в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика бензилового спирта на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика бензилового спирта на хроматограмме раствора стандартного образца бензилового спирта;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска стандартного образца бензилового спирта, мг;
P – содержание бензилового спирта в стандартном образце бензилового спирта,%.

Азот. От 1,5 до 2,5 % в пересчёте на сухое вещество (ОФС «Определение азота в органических соединениях методом Кьельдаля»). Для определения используют 0,1 г (точная навеска) субстанции.

Натрий. От 11,3 до 13,5 % в пересчёте на сухое вещество (ОФС «Атомно-абсорбционная спектроскопия»).

Раствор цезия хлорида. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,27 г цезия хлорида, растворяют в хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. Помещают 50 мг (точная навеска) субстанции в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в растворе цезия хлорида и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартные растворы натрия 25 мкг/мл, 50 мкг/мл и 75 мкг/мл. В три мерные колбы вместимостью 100 мл помещают 1,25 мл, 2,5 мл и 3,75 мл раствора натрия 2000 мкг/мл (ОФС «Атомно-абсорбционная спектроскопия») и доводят объём раствора раствором цезия хлорида до метки.

Измеряют поглощение испытуемого и стандартных растворов при длине волны 330,3 нм с использованием натриевой лампы с полым катодом. Для пламенного метода атомизации рекомендуются следующие условия: расход воздуха – 10 л/мин, расход ацетилена – 2,5 л/мин.

Молярное отношение сульфатных и карбоксилатных групп. Не менее 1,8. Определение проводят методом ионообменной хроматографии (ОФС «Ионообменная хроматография»).

Подвижная фаза. Вода, свободная от углерода диоксида.

Испытуемый раствор. Помещают 0,1 г (точная навеска) субстанции в мерную колбу вместимостью 20 мл, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографические условия

Колонка: 100 × 10 мм, катионообменная смола.

Испытуемый раствор охлаждают до 4 °С и переносят 2,0 мл в предварительно охлаждённую колонку. Промывают колонку ПФ, собирая около 10–15 мл элюата в колбу для титрования, и перемешивают на магнитной мешалке. После достижения постоянного значения электропроводности записывают его и титруют 0,05 М раствором натрия гидроксида, добавляя его порциями по 50 мкл. Через несколько секунд после каждого добавления титранта записывают значение электропроводности и прибавляемого объёма титранта.

Расчёты. По полученным результатам (метод 1 или метод 2) строят кривую зависимости значений электропроводности (ось ординат) от объёма титранта (ось абсцисс). Кривая имеет три линейных участка – начальный наклон, средний небольшой подъём и окончательный подъём. Для каждого из этих участков строят прямые линейной зависимости, используя линейный регрессионный анализ. В точках, где пересекаются первый и второй линейные участки и где пересекаются второй и третий линейные участки проводят перпендикуляры к оси абсцисс. Точка пересечения первого и второго участка соответствует объёму титранта, израсходованного на титрование сульфатных групп (VС), точка пересечения второго и третьего участка соответствует объёму титранта, израсходованного на суммарное титрование сульфатных и карбоксилатных групп (VО).

Молярное отношение (X) сульфатных групп к карбоксилатным группам вычисляют по формуле:

Потеря в массе при высушивании. Не более 10,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 3). Сушат 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 70 °С и остаточном давлении не более 5 мм рт. ст. в течение 6 ч.

Тяжёлые металлы. Не более 0,003 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 6). В 20 мл воды растворяют 1,0 г субстанции. Для приготовления эталонного раствора к 3 мл стандартного раствора свинец-иона 5 мкг/мл прибавляют 7 мл воды.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Бактериальные эндотоксины. Не более 0,01 ЕЭ/МЕ анти-Ха активности (ОФС «Бактериальные эндотоксины»).

Аномальная токсичность. Субстанция должна быть нетоксичной (ОФС «Аномальная токсичность»). Тест-доза – 200 ME анти-Ха активности эноксапарина натрия в 0,5 мл воды на мышь, внутривенно. Срок наблюдения 48 ч.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Испытание на депрессорные вещества. Субстанция не должна обладать депрессорным действием (ОФС «Испытание на депрессорные вещества»). Тест-доза – 5000 МЕ анти-Ха активности в 1 мл натрия хлорида раствора 0,9 % для инъекций на 1 кг массы животного.

##### Количественное определение

Активность. Проводят определение анти-Xа активности и анти-IIа активности в соответствии с ОФС «Методы количественного определения гепарина».

##### Хранение

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

### 2.4. Фармацевтические субстанции растительного происхождения

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.4.0020 Гесперидин (Hesperidinum)

Вводится впервые

##### Определение

(2S)-5-Гидрокси-2-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-7-{[6-O-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)-β-D-глюкопиранозил]окси}-2,3-дигидро-4H-1-бензопиран-4-он.

Cодержит не менее 90,0 % гесперидина C28H34O15 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. От светло-коричневого до светло-жёлтого цвета кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в разбавленных растворах щелочей, очень мало растворим в метаноле, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца гесперидина.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика гесперидина на хроматограмме раствора стандартного образца гесперидина (раздел «Количественное определение»).

##### Испытания

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Растворы, содержащие геспередин, используют свежеприготовленными.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—уксусной кислоты раствор 0,5 % 300:700.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в диметилсульфоксиде и доводят объём раствора диметилсульфоксидом до метки.

Раствор стандартного образца гесперидина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гесперидина, растворяют в диметилсульфоксиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора диметилсульфоксидом до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца гесперидина и 2 мг фармакопейного стандартного образца неогесперидина, растворяют в диметилсульфоксиде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца гесперидина и доводят объём раствора диметилсульфоксидом до метки.

Примечание

Эриоцитрин:
(2S)-5-гидрокси-7-{[6-O-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил) -β-D-глюкопиранозил]окси}-2-(3,4-дигидроксифенил)-2,3-дигидро-4H-1-бензопиран-4-он
[13463-28-0].

Изонарингин нарирутин:
(2S)-5-гидрокси-2-(4-гидроксифенил)-7-{[6-O-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)-β-D-глюкопиранозил]окси}-2,3-дигидро-4H-1-бензопиран-4-он
[14259-46-2].

Реогесперидин:
(2S)-5-гидрокси-2-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-7-{[2-O-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)-β-D-глюкопиранозил]окси}-2,3-дигидро-4H-1-бензопиран-4-он
[13241-33-3].

Диосмин:
5-гидрокси-2-(3-гидрокси-4-метоксифенил)-7-{[6-O-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)-β-D-глюкопиранозил]окси}-4H-1-бензопиран-4-он
[520-27-4].

Нарингенин:
(2S)-5,7-дигидрокси-2-(4-гидроксифенил)-4H-1-бензопиран-4-он [480-41-1].

Дидимин неопонцирин:
(2S)-5-гидрокси-7-{[6-O-(6-дезокси-α-L-маннопиранозил)-β-D-глюкопиранозил]окси}-2-(4-метоксифенил)-2,3-дигидро-4H-1-бензопиран-4-он
[14259-47-3].

Гесперетин:
(2S)-5-гидрокси-2-(4-метоксифенил)-2,3-дигидро-4H-1-бензопиран-4-он [520-33-2].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 3,9 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 4 мкм; |
Температура колонки | 40 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 284 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл; |  |
Время хроматографирования | 5-кратное от времени удерживания пика гесперидина. |

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца гесперидина и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Гесперидин –1 (около 8 мин); эриоцитрин – около 0,4; изонарингин – около 0,7; неогесперидин – около 1,2; диосмин – около 1,5; нарингенин – около 2,6; дидимин – около 3,0; гесперетин – около 3,8.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика гесперидина должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками гесперидина и неогесперидина должно быть не менее 1,9.

На хроматограмме раствора стандартного образца гесперидина:

- фактор асимметрии пика (AS) гесперидина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика геспередина должно быть не более 5,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику гесперидина, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания примесей площади пиков следующих примесей умножают на соответствующие поправочные коэффициенты: диосмин – 1,7; нарингенин – 0,5; гесперетин – 0,5.

Содержание любой примеси в субстанции в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика соответствующей примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика гесперидина на хроматограмме раствора стандартного образца гесперидина;
а1 - навеска субстанции, мг;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца гесперидина, мг;
P - содержание гесперидина в фармакопейном стандартном образце гесперидина,%.

Допустимое содержание примесей:

- примесь изонарингин нарирутина – не более 4,0 %;

- примесь дидимин неопонцирина – не более 3,0 %;

- любая единичная примесь – не более 1,0 %;

- сумма примесей – не более 3,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади основного пика на хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы (менее 0,1 %).

Потеря в массе при высушивании. Не более 5,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,3 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А или 3Б) в зольном остатке, полученном после сжигания 1,0 г субстанции, с использованием эталонного раствора 2.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца гесперидина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гесперидина, растворяют в диметилсульфоксиде и доводят объём раствора диметилсульфоксидом до метки.

Хроматографические условия

Время хроматографирования: 30 мин.

Хроматографируют раствор стандартного образца гесперидина и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца гесперидина:

- фактор асимметрии пика (AS) гесперидина должен быть не более 2,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика гесперидина должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику гесперидина, должна составлять не менее 2000 теоретических тарелок.

Содержание гесперидина C28H34O15 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика гесперидина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика гесперидина на хроматограмме раствора стандартного образца гесперидина;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца гесперидина, мг;
W – потеря в массе при высушивании,%;
P – содержание гесперидина в фармакопейном стандартном образце гесперидина,%.

##### Хранение

В защищённом от света месте.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.4.0018 Глюкопиранозидметилбутенилтригидрокси-флаванол (Glucopyranosidmethylbutenyltrihydroxy-flavanol)

Взамен ВФС 42-1973-90

##### Определение

3,5-Дигидрокси-2-(4-гидроксифенил)-7-(β-D-глюкопиранозилокси)-8-(3-метилбут-2-ен-1-ил)-2,3-дигидро-4H-1-бензопиран-4-он.

Cодержит не менее 96,0 % и не более 102,0 % глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола C26H30O11 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. От белого с сероватым или зеленоватым оттенком до светло-жёлтого с сероватым или зеленоватым оттенком мелкокристаллический порошок со слабым характерным запахом.

Растворимость. Легко растворим в диметилсульфоксиде, практически нерастворим в воде.

* Гигроскопичен.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола.

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 г субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 320 нм должен иметь максимум при 291 нм и минимум при 251 нм.

3. Качественная реакция. Растворяют 10 мг субстанции в 2 мл спирта 96 %, прибавляют 20 мг магния и 0,3 мл хлористоводородной кислоты концентрированной; в течение 1 мин должно появиться окрашивание от красного до красно-фиолетового.

##### Испытания

Родственные примеси. Сумма примесей – не более 4,0 %. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Муравьиная кислота безводная—вода 2:1000.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Муравьиная кислота безводная—ацетонитрил 2:1000.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг фармакопейного стандартного образца глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 мл раствора для проверки пригодности хроматографической системы и доводят объём раствора метанолом до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 290 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–14 | 75 | 25
14–30 | 75 → 40 | 25 → 60
30–31,5 | 40 → 75 | 60 → 25
31,5–34 | 75 | 25

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки пригодности хроматорафической системы и испытуемый раствор.

Время удерживания глюкопиранозидметилбутенилтригидрокси-флаванола – около 13 мин.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- разрешение (RS) между пиками глюкопиранозидметил-бутенилтригидроксифлаванола и ближайшей примеси должно быть не менее 2,0;

- фактор асимметрии пика (AS) глюкопиранозидметил-бутенилтригидроксифлаванола должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлавонола должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола, должна составлять не менее 5000 теоретических тарелок.

Допустимое содержание примесей. Содержание суммы примесей в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»).

Не учитывают пики, площадь которых составляет менее 0,1 % от суммы площадей всех пиков, и пики со временем удерживания от 3 до 24 мин.

Потеря в массе при высушивании. Не более 0,7 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,3 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 3А) в зольном остатке, полученном в испытании «Сульфатная зола», с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС«Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота безводная—ацетонитрил—вода 2:250:748.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца глюкопиранозидметилбутенил-тригидроксифлаванола. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола, растворяют в метаноле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Температура колонки | 30 °С; |  |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |  |
Детектор | спектрофотометрический, 290 нм; |  |
Объём пробы | 10 мкл. |  |

Хроматографируют раствор стандартного образца глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола и испытуемый раствор.

Время удерживания глюкопиранозидметилбутенилтригидрокси-флаванола – около 13 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца глюкопиранозидметилбутенилтригидрокси-флаванола:

- фактор асимметрии пика (AS) глюкопиранозидметил-бутенилтригидроксифлаванола должен быть не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола, должна составлять не менее 5000 теоретических тарелок.

Содержание глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола C26H30O11 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика глюкопиранозидметилбутенилтригидрокси-флаванола на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика глюкопиранозидметилбутенилтригидрокси-флаванола на хроматограмме раствора стандартного образца глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола;
а1 – навеска субстанции, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола, мг;
P – содержание глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола в фармакопейном стандартном образце глюкопиранозид-метилбутенилтригидроксифлаванола,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В сухом, защищённом от света месте.

* Приводится для информации

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.4.0016 Декстрин (Dextrinum)

Вводится впервые

[9004-53-9]

##### Определение

Декстрин представляет собой кукурузный, картофельный или маниоковый крахмал, частично гидролизованный и модифицированный нагреванием с кислотами, щелочами, регуляторами рН или без них.

##### Свойства

Описание. Белый или почти белый легко сыпучий порошок.

Растворимость. Очень легко растворим в кипящей воде с образованием вязкого раствора, медленно растворим в холодной воде, практически нерастворим в спирте 96 %.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Растворяют 1 г вещества в 50 мл воды, кипятят 1 мин и охлаждают. К 1 мл полученного раствора прибавляют 50 мкл йода раствора 0,005 М; должно наблюдаться окрашивание тёмно-синего или красновато-коричневого цвета, исчезающее при нагревании.

2. Качественная реакция. Центрифугируют 5 мл вязкого раствора, полученного в качественной реакции 1. К верхнему слою прибавляют 2 мл натрия гидроксида раствора разведённого 8,5 %, затем по каплям при встряхивании 0,5 мл меди (II) cульфата раствора 12,5 % и кипятят; должен появиться осадок красного цвета.

3. Качественная реакция. Декстрин хорошо растворяется в кипящей воде, образуя вязкий раствор (в отличие от крахмала).

##### Испытания

pH раствора. От 2,0 до 8,0 (диспергируют 5,0 г в 100 мл воды, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Потеря в массе при высушивании. Не более 13,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1,0 г (точная навеска) вещества до постоянной массы при температуре около 130–135 ºС.

Белок. Не более 1,0 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение азота в органических соединениях методом Кьельдаля» (метод 1) со следующими изменениями: используют 10,0 г (точная навеска) вещества и 60 мл серной кислоты концентрированной. Коэффициент пересчёта общего азота составляет 6,25.

Хлориды. Не более 0,2 % (ОФС «Хлориды»). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г вещества, растворяют в 50 мл кипящей воды, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют. Для определения используют 10 мл фильтрата.

Восстанавливающие сахара. Не более 10 % в пересчёте на глюкозу безводную.

В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 2,0 г вещества (в пересчёте на сухое вещество), прибавляют 100 мл воды, встряхивают в течение 30 мин, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют. К 20,0 мл полученного фильтрата прибавляют 10,0 мл медно-тартратного реактива, перемешивают и нагревают на плитке так, чтобы раствор был доведён до кипения в течение 3 мин. Затем кипятят 2 мин и немедленно охлаждают. Прибавляют 5 мл калия йодида раствора 30 %, 10 мл серной кислоты раствора 1 М, перемешивают и сразу же титруют 0,1 М раствора натрия тиосульфата. Конечную точку титрования определяют с помощью индикатора – крахмала раствора 1 %.

Процедуру повторяют, начиная со слов «к 10,0 мл ….», используя вместо фильтрата 20,0 мл глюкозы раствора 0,1 %.

Параллельно проводят контрольный опыт.

Регистрируют VB, VU, VS,

где, VB - объём 0,1 М раствора натрия тиосульфата, израсходованный на титрование в контрольном опыте, мл;
VU - объём 0,1 М раствора натрия тиосульфата, израсходованный на титрование декстрина, мл;
VS - объём 0,1 М раствора натрия тиосульфата, израсходованный на титрование глюкозы безводной, мл.

При этом полученное значение VB–VU не должно превышать VB–VS.

Сульфатная зола. Не более 0,5 % «Сульфатная зола». Для определения используют 1,0 г (точная навеска) вещества.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 6).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Функциональные характеристики

Сыпучесть. В соответствии с ОФС «Сыпучесть порошков».

Распределение частиц по размерам. В соответствии с ОФС «Ситовой анализ» или «Определение распределения частиц по размеру методом лазерной дифракции света».

Кажущаяся (эффективная) вязкость. Испытание проводят, если декстрин применяется в качестве вещества, повышающего вязкость.

От 100 до 350 мПа∙с (ОФС «Вязкость»). Измерение проводят на ротационном вискозиметре (вискозиметр со шпинделем) при скорости вращения цилиндра 100 об/мин.

В химическом стакане готовят 10–50 % суспензию декстрина так, чтобы её вязкость находилась в интервале от 100 до 350 мПа∙с. Общая масса образца и воды должна составлять 600 г вещества. Перемешивают пластмассовой палочкой до получения однородной массы, затем химический стакан помещают на водяную баню при температуре 100±1 оС, вводят в него лопасть мешалки и накрывают крышкой. Перемешивают максимально быстро, начав со скорости 250 об/мин, точно в течение 30 мин. Полученную пасту сразу же переносят в химический стакан, помещённый на водяную баню при температуре 40±1 °С. Перемешивают до тех пор, пока температура содержимого стакана не достигнет 40±1 оС, после чего измеряют кажущуюся вязкость, используя шпиндель № 2 при скорости вращения 100 об/мин.

##### Хранение

В хорошо укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.4.0010 Ксантановая камедь (Xanthani gummi)

Вводится впервые

[11138-66-2]

##### Определение

Высокомолекулярный анионный полисахарид, полученный ферментацией углеводов с помощью культуры Xanthomonas campestris. Состоит из основной цепи остатков D-глюкозы, соединённых по положению β(1→4), с трисахаридными боковыми цепями, чередуемыми ангидроглюкозными звеньями, состоящими из одного звена глюкуроновой кислоты, заключённого между двумя маннозными звеньями. Большинство конечных звеньев содержат остатки пировиноградной кислоты, а маннозное звено, присоединённое к основной цепи, может быть ацетилировано в положении С-6.

Относительная молекулярная масса ксантановой камеди составляет примерно 1·106. Ксантановую камедь получают в виде соли натрия, калия или кальция.

Содержит не менее 1,5 % остатков пировиноградной кислоты C3H3O2 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белый или желтовато-белый сыпучий порошок.

Растворимость. Растворима в воде, с образованием сильновязкого раствора, практически нерастворима в органических растворителях.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. В колбу помещают 1 г испытуемого вещества и суспендируют в 15 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М. Закрывают колбу пробкой, оснащённой ферментационным сосудом, содержащим бария гидроксида раствор 4,73 % и осторожно нагревают в течение 5 мин; в растворе бария гидроксида должно появиться помутнение белого цвета.

2. Качественная реакция. В химический стакан объёмом 400 мл помещают 300 мл воды, нагретой до 80°С, при энергичном перемешивании механической мешалкой в точку максимального перемешивания жидкости прибавляют высушенную смесь из 1,5 г испытуемого образца и 1,5 г камеди бобов рожкового дерева. Перемешивают до получения раствора и продолжают перемешивать в течение не менее 30 мин, не допуская понижения температуры ниже 60 °С. Прекращают перемешивание и оставляют смесь минимум на 2 ч. При охлаждении раствора ниже 40 °С образуется твёрдый каучукообразный гель.

- В контрольном 1 % растворе, приготовленном параллельно, без порошка камеди бобов рожкового дерева, такой гель не должен образовываться.

##### Испытания

pH раствора. От 6,0 до 8,0 (1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

2-пропанол. Не более 0,075 %. Определение проводят методом газовой хроматографии (ОФС «Газовая хроматография»).

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 0,5 г 2-метил-2-пропанола и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В круглодонную колбу вместимостью 1000 мл помещают 200 мл воды, 5,0 г испытуемого образца, 1 мл 1 % эмульсии диметикона в жидком парафине, колбу закрывают и встряхивают в течение 1 ч.

Колбу соединяют с холодильником, отгоняют около 90,0 мл, дистиллята, прибавляют 4,0 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объём раствора водой до 100,0 мл водой.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г 2-пропанола, растворяют в воде и доводят тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 4,0 мл полученного раствора, прибавляют 4,0 мл раствора внутреннего стандарта и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 1,8 м × 4,0 мм, сополимер этилвинилбензол-дивинилбензола, 149–177 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |  |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Скорость потока | 30 мл/мин; |  |
Объём пробы | 5 мкл; |  |
Температура колонки | 165 °C; |  |
Температура инжектора | 200 °C; |  |
Температура детектора | 200°C. |  |

Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания. 2-пропанол – 1; 2-метил-2-пропанол – около 1,5.

Потеря в массе при высушивании. Не более 15,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают до постоянной массы 1,0 г вещества при температуре 105 °С в течение 2,5 ч.

Зола общая. От 6,5 % до 16,0 % (ОФС «Зола общая»).

Тяжёлые металлы. Не более 0,003 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 12) со следующими изменениями. Используют 0,67 г субстанции и платиновый тигель.

Мышьяк. Не более 0,0003 % (ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения используют 0,17 г субстанции.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 120 мг (точная навеска) испытуемого вещества, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 45 мг пировиноградной кислоты, растворяют её в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

В круглодонную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мл испытуемого раствора, прибавляют 20,0 мл 0,1 М хлористоводородной кислоты и взвешивают. Кипятят на водяной бане с обратным холодильником в течение 3 ч. Взвешивают и доводят водой до исходной массы. В делительную воронку, содержащую 1,0 мл динитрофенилгидразина хлористоводородного раствора, помещают 2,0 мл полученного раствора, дают постоять 5 мин и прибавляют 5 мл этилацетата. Встряхивают и дают осесть твёрдым частицам. Далее верхний слой собирают и встряхивают трижды порциями по 5 мл с натрия карбоната раствором 1 М. Затем водные слои объединяют в мерной колбе вместимостью 50 мл и доводят объём раствора до метки натрия карбоната раствором 1 М.

Параллельно аналогичным образом обрабатывают 10 мл раствора сравнения.

Незамедлительно измеряют оптическую плотность испытуемого раствора и раствора сравнения при длине волны 375 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, используя в качестве контрольного раствора натрия карбоната раствор 1 М.

Оптическая плотность испытуемого раствора должна быть не меньше оптической плотности раствора сравнения, что соответствует содержанию остатков пировиноградной кислоты не менее 1,5 %.

##### Хранение

В хорошо укупоренной упаковке.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.4.0019 Ланатозид Ц (Lanatosidum C)

Взамен ФС 42-2261-99

##### Определение

12β,14-Дигидрокси-3β-{[β-D-глюкопиранозил-(1→4)-3-O-ацетил-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил-(1→4)-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил-(1→4)-2,6-дидезокси-β-D-рибо-гексопиранозил]окси}-5β-кард-20(22)-енолид.

Cодержит не менее 97,0 % и не более 102,0 % ланатозида Ц C49H76O20 в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Бесцветные кристаллы или белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Растворим в метаноле, мало и медленно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в воде.

##### Идентификация

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в вазелиновом масле, в области от 4000 до 400 см–1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца ланатозида Ц.

2. ТСХ. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции ланатозида Ц на хроматограмме раствора стандартного образца ланатозида Ц (раздел «Родственные примеси»).

3. Качественная реакция. Растворяют 1 мг субстанции в 1 мл спирта 96 %, прибавляют 1 мл натрия нитропруссида раствора 1 % и 0,1 мл натрия гидроксида раствора 10 %; должно появиться красное окрашивание, которое постепенно исчезает.

4. Качественная реакция

Железа(III) хлорида раствор 0,05 % в уксусной кислоте ледяной. Растворяют 5 мг железа(III) хлорида в 10 мл уксусной кислоты ледяной.

Растворяют 2 мг субстанции в 2 мл железа(III) хлорида растворе 0,05 % в уксусной кислоте ледяной. Полученный раствор осторожно по стенке вливают в пробирку, содержащую 2 мл серной кислоты концентрированной; на границе двух слоёв должно появиться серовато-коричневое или тёмно-коричневое окрашивание; верхний слой постепенно должен окраситься в сине-зелёный или синий цвет.

##### Испытания

Удельное вращение. От +32 до +35 в пересчёте на сухое вещество (2 % раствор субстанции в метаноле, ОФС «Оптическое вращение»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,2 г субстанции в 10 мл метанола должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Срок годности растворов, содержащих ланатозид Ц, не более 3 сут при хранении в плотно закрытой ёмкости в прохладном, защищённом от света месте.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Раствор трихлоруксусной кислоты. Растворяют 25 г трихлоруксусной кислоты в 100 мл спирта 96 %. Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Раствор хлорамина. Растворяют 0,3 г хлорамина в 10 мл воды. Раствор готовят непосредственно перед использованием.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—метанол—хлороформ 1:15:84.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг субстанции растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца ланатозида Ц (А). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 40 мг фармакопейного стандартного образца ланатозида Ц, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца ланатозида Ц (Б). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,5 мл раствора стандартного образца ланатозида Ц (А) и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор стандартного образца ланатозида Ц (В). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца ланатозида Ц (А) и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор стандартного образца ланатозида Ц (Г). В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл раствора стандартного образца ланатозида Ц (А) и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Реактив для детектирования. Раствор хлорамина—раствор трихлоруксусной кислоты 1:20. Раствор готовят непосредственно перед использованием.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора (4 мкг), раствора стандартного образца ланатозида Ц (Б) (0,06 мкг), раствора стандартного образца ланатозида Ц (В) (0,04 мкг) и раствора стандартного образца ланатозида Ц (Г) (0,02 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и дважды хроматографируют восходящим способом. После первого хроматографирования пластинку подсушивают в течение 5 мин на воздухе и вновь хроматографируют в тех же условиях. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 15 мин, опрыскивают реактивом для детектирования, выдерживают при температуре 115 °C в течение 15 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца ланатозида Ц (Г) должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции ланатозида Ц с Rf не менее 0,3 (Rst=1).

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора допускается наличие только трёх дополнительных зон адсорбции с Rst менее 1, каждая из которых по совокупности величины и интенсивности флуоресценции не должна превышать зону адсорбции ланатозида Ц на хроматограмме раствора стандартного образца ланатозида Ц (Б) (не более 1,5 %).

Суммарное содержание примесей, оцененное по совокупности величины и интенсивности флуоресценции их зон адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора в сравнении с зонами адсорбции на хроматограммах раствора стандартного образца ланатозида Ц, содержащих 0,06 мкг, 0,04 мкг и 0,02 мкг ланатозида Ц, должно быть не более 3,5 %.

Потеря в массе при высушивании. Не более 7,5 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 2). Высушивают 0,5 г (точная навеска) субстанции в вакууме до постоянной массы при температуре 100 °С и остаточном давлении не более 8 кПа.

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### Количественное определение

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Пикриновой кислоты щелочной раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мл пикриновой кислоты раствора 1 %, прибавляют 10 мл натрия гидроксида раствора 5 % и доводят объём раствора водой до метки. Раствор хранят в защищённом от света месте не более 2 сут.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки. К 10,0 мл полученного раствора прибавляют 15,0 мл пикриновой кислоты щелочного раствора, перемешивают и выдерживают в защищённом от света месте при комнатной температуре в течение 20 мин.

Раствор стандартного образца ланатозида Ц. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ланатозида Ц, растворяют в спирте 96 % доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки. К 10,0 мл полученного раствора прибавляют 15,0 мл пикриновой кислоты щелочного раствора, перемешивают и выдерживают в защищённом от света месте при комнатной температуре в течение 20 мин.

Раствор сравнения. Спирт 96 %—щелочной раствор пикриновой кислоты 10:15.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора и раствора стандартного образца ланатозида Ц на спектрофотометре при длине волны 484 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Содержание ланатозида Ц C49H76O20 в субстанции в пересчёте на сухое вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:

где A1 – оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 – оптическая плотность раствора стандартного образца ланатозида Ц;
a1 – навеска субстанции, мг;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца ланатозида Ц, мг;
P – содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце ланатозида Ц,%;
W – потеря в массе при высушивании,%.

##### Хранение

В сухом, защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

________________________________________________________________________________________________________________

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.4.0017 Метилцеллюлоза (Methylcellulosum)

Вводится впервые

[9004-67-5]

##### Определение

Метиловый эфир целлюлозы. Частично O-метилированная целлюлоза.

Содержит от 26,0 % до 33,0 % метокси-групп (-OCH3) в пересчёте на сухое вещество.

##### Свойства

Описание. Белого, желтовато-белого или серовато-белого цвета порошок или гранулы.

* Гигроскопичен после высушивания.

Растворимость. Растворим в холодной воде с образованием коллоидного раствора, практически нерастворим в горячей воде, этаноле безводном, ацетоне и толуоле.

##### Идентификация

1. Качественная реакция. Равномерно распределяют 1,0 г испытуемого образца на поверхности 100 мл воды и оставляют на 1–2 мин; должна наблюдаться агрегация порошка на поверхности.

2. Качественная реакция. Равномерно распределяют 1,0 г испытуемого образца в 100 мл кипящей воды и тщательно перемешивают; должна образоваться суспензия нерастворимых частиц. Суспензию охлаждают до 5 °С и тщательно перемешивают; должен образоваться прозрачный или слегка мутный вязкий раствор.

3. Качественная реакция. К 0,1 мл раствора, полученного в испытании «Идентификация 2. Качественная реакция», прибавляют 9 мл смеси серная кислота—вода 9:1, взбалтывают, нагревают на водяной бане в течение 3 мин, немедленно охлаждают во льду, осторожно прибавляют 0,6 мл нингидрина раствора 2 %, взбалтывают и выдерживают при 25 °С; должно появиться красное окрашивание. В течение 100 мин окрашивание не должно перейти в фиолетовое.

4. Качественная реакция. На предметное стекло наносят 2–3 мл раствора, полученного в испытании «Идентификация 2. Качественная реакция»; после испарения воды должна образоваться плотная прозрачная плёнка.

##### Испытания

Температура флокуляции. Не ниже 50 °С.

В химический стакан помещают 50,0 мл раствора, полученного в испытании «Идентификация 2. Качественная реакция», и прибавляют 50,0 мл воды. Опускают в полученный раствор термометр. Перемешивают раствор при нагревании, повышая температуру со скоростью 2–5 °С/мин. Определяют температуру, при которой начинается увеличение мутности.

Прозрачность раствора. Помещают 1 г испытуемого образца в 50 г воды, свободной от углерода диоксида, нагретой до 90 °С. Охлаждают, доводят массу раствора до 100 г водой, свободной от углерода диоксида. Перед проведением испытания полученный раствор выдерживают при 2–8 °С в течение 1 ч. Опалесценция полученного раствора не должна превышать эталон сравнения III (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Вязкость. В соответствии с ОФС «Вязкость».

От 80 % до 120 % от номинального значения для образцов с вязкостью менее 600 мПа∙с, метод 1; от 75 % до 140 % от номинального значения для образцов с вязкостью от 600 мПа∙с и более, метод 2.

Метод 1. Взвешивают количество испытуемого образца, эквивалентное 4,0 г в пересчёте на сухое вещество. Переносят в широкогорлую ёмкость и доводят массу горячей водой (90–99 °С) до 200,0 г. Закрывают ёмкость и перемешивают содержимое со скоростью 400±50 об/мин в течение 10–20 мин до тщательного диспергирования и смачивания частиц. При необходимости соскабливают шпателем с внутренних стенок не диспергированный материал и продолжают перемешивание при охлаждении до температуры ниже 5 °С в течение следующих 20–40 мин. При необходимости доводят массу раствора до 200,0 г холодной водой. При наличии пузырьков воздуха раствор центрифугируют. Шпателем удаляют пену. Определяют кинематическую вязкость (ν) раствора с помощью капиллярного вискозиметра (ОФС «Вязкость»). Определяют плотность (ρ) (ОФС «Плотность», метод 1) и рассчитывают динамическую вязкость (η): η = ρ∙ν.

Метод 2. Взвешивают количество испытуемого образца, эквивалентное 10,0 г в пересчёте на сухое вещество. Переносят в широкогорлую ёмкость и доводят массу горячей водой (90–99 °С) до 500,0 г. Закрывают ёмкость и перемешивают содержимое со скоростью 400±50 об/мин в течение 10–20 мин до тщательного диспергирования и смачивания частиц. При необходимости соскабливают шпателем с внутренних стенок не диспергированный материал и продолжают перемешивание при охлаждении до температуры ниже 5 °С в течение следующих 20–40 мин. При необходимости доводят массу раствора до 500,0 г холодной водой. При наличии пузырьков воздуха раствор центрифугируют. Шпателем удаляют пену. Определяют динамическую вязкость (η) раствора с помощью ротационного вискозиметра со шпинделем с одним цилиндром при температуре 20,0±0,1 °С в условиях, приведённых в табл. 1. Для измерения используют вискозиметр типа Brookfield LV.

Таблица 1. Условия определения динамической вязкости
Номинальная вязкость, мПа∙с | Номер шпинделя | Скорость вращения, об/мин | Поправочный коэффициент
--- | --- | --- | ---
600–1400 | 3 | 60 | 20
1400–3500 | 3 | 12 | 100
3500–9500 | 4 | 60 | 100
9500–99500 | 4 | 6 | 1000
>99500 | 4 | 3 | 2000

Перед измерением шпиндель вращают в течение 2 мин. Между повторными измерениями выдерживают паузы в 2 мин. Определение проводят трижды и рассчитывают среднее арифметическое значение.

pH раствора. От 5,0 до 8,0 (Раствор, полученный в испытании «Вязкость», ОФС «Ионометрия», метод 3). Показание рН-метра считывают после нахождения электрода в растворе в течение 5±0,5 мин.

Сульфатная зола. Не более 1,5 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) испытуемого образца.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 9).

Потеря в массе при высушивании. Не более 5,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) испытуемого образца.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Степень замещения. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Условия испытания

Аппарат |
--- | ---
реакционный флакон | Герметичный флакон, объём 5 мл, высота 50 мм, внешний диаметр 20 мм, внутренний диаметр 13 мм у горлышка; снабжён герметичной пробкой из бутилкаучуковой мембраны, покрытой политетрафторэтиленом; обжимают алюминиевой крышкой или другой уплотнительной системой, обеспечивающей достаточную герметичность;
нагреватель | Нагревательный модуль с квадратным алюминиевым блоком с отверстиями диаметром 20 мм и глубиной 32 мм (подходит для реакционных флаконов); перемешивание производят магнитной мешалкой, установленной в нагревательном модуле, или с помощью возвратно-поступательного встряхивателя, совершающего около 100 циклов/мин.

Испытуемый раствор. В реакционный флакон помещают 65 мг (точная навеска) испытуемого образца, прибавляют 60–100 мг адипиновой кислоты, 2,0 мл раствора внутреннего стандарта и 2,0 мл йодистоводородной кислоты. Герметично закрывают пробкой и взвешивают. Перемешивают содержимое в течение 60 мин при температуре 130±2 °С. Если возвратный шейкер или магнитная мешалка не могут быть использованы, тщательно встряхивайте флакон вручную с 5-минутными интервалами в течение первых 30 мин нагревания. Охлаждают до комнатной температуры и повторно взвешивают. Потеря в массе не должна превышать 26 мг. Используют верхний слой.

Раствор сравнения. В реакционный флакон помещают 60–100 мг адипиновой кислоты, 2,0 мл раствора внутреннего стандарта и 2,0 мл йодистоводородной кислоты, герметично закрывают пробкой и взвешивают. С помощью шприца вводят 45 мкл йодметана, снова взвешивают. Тщательно встряхивают реакционный сосуд и используют верхний слой.

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 3 г октана и доводят объём раствора о-ксилолом до метки.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,53 мм, покрытая слоем поли(диметил)силоксана, 3 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный или определяющий теплопроводность; |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |  |
Деление потока | 1:40; |  |
Скорость потока | 4,3 мл/мин; |  |
Объём пробы | 1–2 мкл. |  |

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °С
--- | --- | ---
Колонка | 0–3 | 50
| 3–8 | 50 → 100
| 8–12,3 | 100 → 250
| 12,3–20,3 | 250
Инжектор |  | 250
Детектор |  | 280

Хроматографируют раствор внутреннего стандарта, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Октан – 1 (около 10 мин); йодметан – около 0,4.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения:

- разрешение (RS) между пиками йодметана и октана должно быть не менее 5,0;

- относительное стандартное отклонение отношения площади пика йодметана к площади пика октана должно быть не более 2,0 % (6 введений).

Содержание метокси-групп -OCH3 в испытуемом образце в пересчёте на сухое вещество в процентах (М) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика йодметана на хроматограмме испытуемого раствора;
S2 – площадь пика внутреннего стандарта на хроматограмме испытуемого раствора;
S3 – площадь пика йодметана на хроматограмме раствора сравнения;
S4 – площадь пика внутреннего стандарта на хроматограмме раствора сравнения;
a1 – навеска йодметана в растворе сравнения, мг;
a – навеска испытуемого образца в пересчете на сухое вещество, мг;
21,86 – эмпирический коэффициент.

##### Функциональные характеристики

Испытания проводят для метилцеллюлозы, применяемой в качестве связующего вещества, повышающего вязкость вещества или плёнкообразователя:

Вязкость. См. выше.

Степень замещения. См. выше.

##### Хранение

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.4.0001 Мяты перечной листьев масло эфирное

Menthae piperitae foliorum oleum aethereum

Взамен ФС.2.4.0001.18

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Эфирное масло, получаемое перегонкой с водяным паром из свежих листьев и надземных частей цветущего растения мяты перечной – Mentha piperita L., сем. яснотковых – Lamiaceae, применяемое для производства лекарственных препаратов.

##### СВОСТВА

Описание. Бесцветная, светло-жёлтая или зеленовато-жёлтая легко подвижная прозрачная жидкость, с характерным запахом.

Растворимость. Легко растворимо в спирте 96 %; 1 объёмная часть субстанции должна растворяться в не более 4 частях спирта 70 % с образованием бесцветного прозрачного раствора.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ГХ. Время удерживания основных пиков на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пиков на хроматограмме стандартного раствора (раздел «Количественное определение»).

##### ИСПЫТАНИЯ

Относительная плотность. От 0,896 до 0,916 (ОФС «Плотность», метод 1 или 4).

Угол вращения. От –10° до –30° (ОФС «Оптическое вращение»).

Показатель преломления. От 1,457 до 1,470 (ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)»).

Спирт этиловый. В соответствии с ОФС «Эфирные масла».

Кислотное число. Не более 1,40 (ОФС «Кислотное число»).

Вода. В соответствии с ОФС «Эфирные масла».

Жирные и минеральные масла, в том числе осмолившиеся вещества. Должны отсутствовать (ОФС «Эфирные масла»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,2 мл субстанции, смешивают с гептаном и доводят объём раствора гептаном до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мкл лимонена, 20 мкл 1,8-цинеола, 40 мкл ментона, 10 мкл ментофурана, 10 мкл (+)-изоментона, 40 мкл ментилацетата, 20 мкл изопулегола, 60 мг левоментола, 20 мкл пулегона, 10 мкл пиперитона и 10 мкл карвона, растворяют в гептане и доводят объём раствора гептаном до метки.

Раствор изопулегола. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мкл изопулегола, растворяют в гептане и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 0,1 мл полученного раствора и доводят объём раствора гептаном до метки.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 60 м × 0,25 мм, покрытая слоем макрогола 20 000, 0,25 мкм;
Детектор | пламенно-ионизационный;
Газ-носитель | гелий для хроматографии;
Деление потока | 1:50;
Скорость потока | 1,5 мл/мин;
Объём пробы | 1 мкл.

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °С
--- | --- | ---
Колонка | 0–10 | 60
| 10–70 | 60 → 180
| 70–75 | 180
Инжектор |  | 200
Детектор |  | 220

Хроматографируют стандартный раствор, раствор изопулегола и испытуемый раствор.

Порядок выхода пиков: лимонен, 1,8-цинеол, ментон, ментофуран,
(+)-изоментон, ментилацетат, изопулегол, левоментол, пулегон, пиперитон, карвон.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками лимонена и 1,8-цинеола должно быть не менее 1,5.

- разрешение (RS) между пиками пиперитона и карвона должно быть не менее 1,5.

Содержание компонентов в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»).

Содержит:

- лимонен – от 1,0 % до 3,5 %;

- 1,8-цинеол – от 3,5 % до 8,0 %;

- ментон – от 14,0 % до 32,0 %;

- ментофуран – от 1,0 % до 8,0 %;

- (+)-изоментон – от 1,5 % до 10,0 %;

- ментилацетат – от 2,8 % до 10,0 %;

- изопулегол – не более 0,2 %;

- ментол – от 30,0 % до 55,0 %;

- пулегон – не более 3,0 %;

- карвон – не более 1,0 %.

Отношение содержания 1,8-цинеола к содержанию лимонена должно быть не менее 2.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,05 площади основного пика на хроматограмме раствора изопулегола (менее 0,05 %).

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Эфирные масла».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.4.0021 Гвоздики душистой бутонов масло эфирное

Syzygii aromatici florum oleum aethereum

Вводится впервые

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Эфирное масло, получаемое перегонкой с водяным паром из бутонов дикорастущих и культивируемых деревьев гвоздики душистой (гвоздичного дерева) – Syzygium aromaticum (L.) Merrill et L.M.Perry (син. Caryophyllus aromaticus L.), сем. миртовых – Myrtaceae, применяемое для производства лекарственных препаратов.

##### СВОЙСТВА

Описание. Жёлтая прозрачная жидкость с характерным запахом.

* Под действием воздуха цвет из жёлтого переходит в коричневый.

Растворимость. Легко растворима в спирте 70 %; растворяется 1 объёмная часть субстанции в не менее 2 частях спирта 70 % с образованием бесцветного прозрачного раствора. Смешивается с метиленхлоридом, толуолом и с жирными и эфирными маслами.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ГХ. Время удерживания пиков на хроматограмме испытуемого раствора должны соответствовать времени удерживания основных пиков на хроматограмме стандартного раствора (раздел «Количественное определение»).

2. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

- Подвижная фаза (ПФ). Толуол.

- Испытуемый раствор. Растворяют 20 мкл субстанции в 2 мл толуола.

- Стандартный раствор. Растворяют 15 мкл эвгенола и 15 мкл ацетилэвгенола в 2 мл толуола.

- Реактив для детектирования. Анисового альдегида раствор уксуснокислый в метаноле.

- На линию старта пластинки полосами длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят 20 мкл испытуемого раствора и 15 мкл стандартного раствора. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную в течение 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

- Результат. На хроматограмме стандартного раствора в средней трети пластинки должна обнаруживаться тёмная зона адсорбции (ацетилэвгенол), над ней тёмная зона адсорбции (эвгенол).

- На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться тёмная зона адсорбции на уровне зоны адсорбции ацетилэвгенола, выше – тёмная зона адсорбции на уровне зоны адсорбции эвгенола; допускается обнаружение других зон адсорбции.

- Пластинку опрыскивают реактивом для детектирования, нагревают при температуре 100–105 °С в течение 5–10 мин и просматривают при дневном свете.

- Результат. На хроматограмме стандартного раствора в средней трети пластинки должна обнаруживаться зона адсорбции фиолетово-синего цвета (ацетилэвгенол), над ней интенсивная зона адсорбции коричневато-фиолетового цвета (эвгенол).

- На хроматограмме испытуемого раствора в нижней трети пластинки должна обнаруживаться зона адсорбции красного цвета, зона адсорбции фиолетово-синего цвета на уровне зоны адсорбции ацетилэвгенола, выше – зона адсорбции коричневато-фиолетового цвета на уровне зоны адсорбции эвгенола, в верхней трети пластинки должна обнаруживаться зона адсорбции красновато-фиолетового цвета (β-кариофиллен); допускается обнаружение других зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Относительная плотность. От 1,030 до 1,063 (ОФС «Плотность», метод 1 или 4).

Угол вращения. От 0° до –2° (ОФС «Оптическое вращение»).

Показатель преломления. От 1,528 до 1,537 (ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)»).

Спирт этиловый. В соответствии с ОФС «Эфирные масла».

Вода. В соответствии с ОФС «Эфирные масла».

Жирные и минеральные масла, в том числе осмолившиеся вещества. Должны отсутствовать (ОФС «Эфирные масла»).

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. В химическую пробирку помещают 0,2 г субстанции и растворяют в 10 г гексана.

Стандартный раствор. В химическую пробирку помещают 7 мг
β-кариофиллена, 80 мг эвгенола и 4 мг ацетилэвгенола и растворяют в 10 г гексана.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 60 м × 0,25 мм, покрытая слоем макрогола 20 000;
Детектор | пламенно-ионизационный;
Газ-носитель | гелий для хроматографии;
Деление потока | 1:100;
Скорость потока | 1,5 мл/мин;
Объём пробы | 1,0 мкл.

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °С
--- | --- | ---
Колонка | 0–8 | 60
| 8–48 | 60 → 180
| 48–53 | 180
Инжектор |  | 270
Детектор |  | 270

Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.

Порядок выхода пиков: β-кариофиллен, эвгенол, ацетилэвгенол.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками эвгенола и ацетилэвгенола должно быть не менее 1,5;

- эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику β-кариофиллена, должна составлять не менее 30 000 теоретических тарелок.

Содержание компонентов в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»).

Содержит:

- β-кариофиллен – от 5,0 % до 14,0 %;

- эвгенол – от 75,0 % до 88,0 %;

- ацетилэвгенол – от 4,0 % до 15,0 %.

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Эфирные масла».

* Приводится для информации.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.4.0022 Аниса обыкновенного плодов масло эфирное

Anisi vulgaris fructuum oleum aethereum

Взамен ГФ IX, ст. 337

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Эфирное масло, получаемое перегонкой с водяным паром из высушенных зрелых плодов аниса обыкновенного (бедренца анисового) – Anisum vulgare Gaertn. (Pimpinella anisum L.), сем. сельдерейных – Apiaceae, применяемое для производства лекарственных препаратов.

##### СВОЙСТВА

Описание. Бесцветная или светло-жёлтая прозрачная жидкость с характерным запахом.

Растворимость. Легко растворимо в спирте 96 %; 1 объёмная часть субстанции должна растворяться в не более 3 частях спирта 90 % с образованием бесцветного прозрачного раствора.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ГХ. Время удерживания пиков на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания основных пиков на хроматограмме стандартного раствора (раздел «Количественное определение»).

2. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

- Подвижная фаза (ПФ). Этилацетат—толуол 7:93.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1 г субстанции, растворяют в толуоле и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Стандартный раствор. В колбу помещают 10 мкл линалоола, 30 мкл анисового альдегида и 200 мкл анетола, растворяют в 15 мл толуола. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 1 мл полученного раствора и доводят объём раствора толуолом до метки.

- Реактив для детектирования. Метил-4-ацетилбензоат.

- На линию старта пластинки полосами длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят по 5 мкл испытуемого раствора и стандартного раствора. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную камеру с ПФ в течение 1 часа и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

- Результат. На хроматограмме стандартного раствора в средней трети пластинки должна обнаруживаться тёмная зона адсорбции (анисовый альдегид), в верхней трети пластинки должна обнаруживаться тёмная зона адсорбции (анетол).

- На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться тёмная зона адсорбции на уровне зоны адсорбции анисового альдегида, над ней тёмная зона адсорбции и интенсивная тёмная зона адсорбции на уровне зоны адсорбции анетола; допускается обнаружение других зон адсорбции.

- Пластинку опрыскивают реактивом для детектирования, выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С в течение 10 мин, просматривают ещё тёплую пластинку при дневном свете и фиксируют результаты разделения в течение не более 5 мин.

- Результат. На хроматограмме стандартного раствора в нижней трети пластинки должна обнаруживаться зона адсорбции серого цвета (линалоол), в средней трети пластинки должна обнаруживаться зона адсорбции жёлтого цвета (анисовый альдегид) и в верхней трети пластинки должна обнаруживаться зона адсорбции коричневого цвета (анетол).

- На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции серого цвета, над ней зона адсорбции серого цвета на уровне зоны адсорбции линалоола, зона адсорбции жёлтого цвета на уровне зоны адсорбции анисового альдегида, над ней зона адсорбции серого цвета, интенсивная зона адсорбции коричневого цвета на уровне зоны адсорбции анетола; допускается обнаружение других зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Относительная плотность. От 0,979 до 0,991 (ОФС «Плотность», метод 1 или 4).

Угол вращения. От +1° до –2° (ОФС «Оптическое вращение»).

Показатель преломления. От 1,552 до 1,561 (ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)»).

Температура затвердевания. От 15 до 19 °С (ОФС «Температура затвердевания»).

Спирт этиловый. В соответствии с ОФС «Эфирные масла».

Вода. В соответствии с ОФС «Эфирные масла».

Жирные и минеральные масла, в том числе осмолившиеся вещества. Должны отсутствовать (ОФС «Эфирные масла»).

Фенхон. Определение проводят методом ГХ в условиях испытания «Количественное определение» со следующими изменениями.

Раствор фенхона. В химическую пробирку помещают 10 мкл фенхона и доводят массу содержимого до 1,2 г гексаном.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 2 мл помещают 400 мкл субстанции и доводят объём раствора гексаном до метки.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 100 мкл раствора фенхона и доводят объём раствора гексаном до метки.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для основного пика должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- фенхон – не более 0,01 %.

Феникулин. Определение проводят методом ГХ в условиях испытания «Количественное определение» со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. Испытуемая субстанция.

Раствор для идентификации. Фармакопейный стандартный образец феникулина для идентификации пика.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В химическую пробирку помещают 10 мг субстанции и доводят массу содержимого до 1 г гексаном. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл полученного раствора и доводят объём раствора гексаном до метки.

Пригодность хроматографической системы

Хроматограмма раствора для проверки чувствительности хроматографической системы совпадает с хроматограммой, прилагаемой к фармакопейному стандартному образцу феникулина для идентификации пика.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для основного пика должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- феникулин – не более 0,01 %.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 1 мл помещают 200 мкл субстанции и доводят объём раствора гексаном до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 1 мл помещают 20 мкл линалоола, 20 мкл эстрагола, 20 мкл α-терпинеола, 60 мкл анетола и 30 мкл анисового альдегида, доводят объём раствора гексаном до метки.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,25 мм, покрытая слоем макрогола 20 000, 0,25 мкм;
Детектор | пламенно-ионизационный;
Газ-носитель | гелий для хроматографии;
Деление потока | 1:100;
Скорость потока | 1,0 мл/мин;
Объём пробы | 0,2 мкл.

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °С
--- | --- | ---
Колонка | 0–5 | 60
| 5–80 | 60 → 210
| 80–95 | 210
Инжектор |  | 200
Детектор |  | 220

Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Транс-анетол − 1 (около 42 мин); линалоол − около 0,67; эстрагол − около 0,82; α-терпинеол − около 0,84; цис-анетол − около 0,9; анисовый альдегид − около 1,2; феникулин − около 1,4; псевдоизоэвгенил-2-метилбутират − около 1,7.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора разрешение (RS) между пиками эстрагола и α-терпинеола должно быть не менее 1,5.

Содержание компонентов в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования, при расчётах не учитывают пик гексана (ОФС «Хроматография»).

Содержит:

- линалоол – не более 1,5 %;

- эстрагол – от 0,5 % до 5,0 %;

- α-терпинеол – не более 1,2 %;

- цис-анетол – от 0,1 % до 0,4 %;

- транс-анетол – от 87 % до 94 %;

- анисовый альдегид – от 0,1 % до 1,4 %;

- псевдоизоэвгенил-2-метилбутират – от 0,3 % до 2,0 %.

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Эфирные масла».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0005 Берёзы листья

Betulae folia

Взамен ФС.2.5.0005.15

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Cобранные в период вегетации, высушенные листья дикорастущих деревьев берёзы повислой (берёзы бородавчатой) – Betula pendula Roth. (Betula verrucosa Ehrh.) и берёзы пушистой – Betula pubescens Ehrh., сем. берёзовых – Betulaceae.

Содержит: не менее 1,5 % суммы флавоноидов в пересчёте на гиперозид в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Листья».

Цельное сырьё. Цельные или частично измельчённые листья, простые, черешковые, без прилистников. Листовые пластины ромбические, треугольные или треугольно-яйцевидные по форме, длиной от 3,0 до 6,5 см, шириной от 2,0 до 5,5 см. Верхушка листа заострённая, основание клиновидное, округлое. Край листовой пластинки дважды остропильчатый, мелкопильчатозубчатый или удвоеннопильчатозубчатый. Жилкование перистое. Листовая пластинка слабо опушённая по всей поверхности с обеих сторон (B. pubescens) или почти голая, с редкими волосками по краю ближе к верхушке и по жилкам с нижней стороны (B. pendula), золотисто-жёлтые блестящие желёзки по всей поверхности с обеих сторон листовой пластинки и на черешке. Цвет листьев с верхней стороны – зелёный, коричневато-зелёный, с нижней стороны – светло-зелёный, серо-зелёный, светлый коричневато-зелёный.

Запах слабый, характерный.

Измельчённое сырьё. Кусочки листовых пластинок различной формы и черешков, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 5 мм.

При рассмотрении под лупой (10×, 16×) видны кусочки листовых пластинок с дважды остропильчатым, мелкопильчатозубчатым или удвоеннопильчатозубчатым краем, с редкими волосками с обеих сторон (B. pubescens) или голые (B. pendula), с золотисто-жёлтыми блестящими желёзками по всей поверхности с обеих сторон; кусочки черешков, редко – веточек с желтовато-белой древесиной и коричневой корой.

Цвет измельчённого сырья от зелёного до коричневато-зелёного со светло-зелёными, серо-зелёными и редкими желтовато-коричневыми, желтовато-белыми или коричневыми вкраплениями.

Запах слабый, характерный.

Порошок. Кусочки листовых пластинок различной формы и черешков, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

При рассмотрении под лупой (10×, 16×) видны кусочки листовых пластинок с мелкопильчатозубчатым или удвоеннопильчатозубчатым краем, с редкими волосками с обеих сторон (B. pubescens) или голые (B. pendula), с золотисто-жёлтыми блестящими желёзками по всей поверхности с обеих сторон; кусочки черешков, редко – веточек с желтовато-белой древесиной и коричневой корой.

Цвет порошка от зелёного до коричневато-зелёного со
светло-зелёными, серо-зелёными и редкими желтовато-коричневыми, желтовато-белыми или коричневыми вкраплениями.

Запах слабый, характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное, измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепарата листа с поверхности должны быть видны клетки эпидермиса верхней стороны листа, состоящие из клеток правильной 4–6-угольной формы с ровными стенками. Клетки эпидермиса нижней стороны листовой пластинки в очертании более извилистые, по размерам сравнимы с клетками верхнего эпидермиса или несколько мельче. Устьица аномоцитного типа. Околоустьичных клеток 4–8, чаще 6. Устьица расположены преимущественно с нижней стороны листовой пластинки. На поперечном срезе должен быть виден двух-, трёхслойный столбчатый мезофилл. В обкладочной паренхиме жилок листовой пластинки локализованы крупные ромбической формы кристаллы и мелкие друзы кальция оксалата.

На эпидермисе должны быть видны крупные щитковидные желёзки, расположенные с обеих сторон листа, чаще по жилкам. Желёзки с крупными бесцветными головками. Головки состоят из большого количества клеток и расположены лучами от центра. Кутикула над головкой мощная, чешуйчатая, нередко отслаивается, обнажая клетки, формирующие головку трихомы. Клетки ножки желёзок, как правило, окрашены пигментом тёмно-коричневого цвета. Кутикула обусловливает глянцевую, слегка шершавую поверхность листа. По жилкам и по краю листовой пластинки встречаются простые одноклеточные волоски с толстыми стенками, расширенным основанием и заострённой верхушкой. Вблизи жилок видны друзы кальция оксалата. Щитковидные желёзки характерного строения и редкие мелкие волоски видны на эпидермисе черешка листа.

Порошок. При рассмотрении микропрепаратов порошка должны быть видны фрагменты: эпидермиса верхней стороны листа, состоящего из клеток правильной 4–6-угольной формы; эпидермиса нижней стороны листа с извилистыми стенками клеток; эпидермиса листа с округлыми устьицами аномоцитного типа; жилок с крупными кристаллами призматической формы и мелкими друзами в обкладочной паренхиме; эпидермиса листа с крупными щитковидными желёзками; жилок и края листа с простыми одноклеточными волосками с толстыми стенками, расширенным основанием и заострённой верхушкой; эпидермиса черешка с щитковидными желёзками и мелкими простыми волосками; а также отдельные отпавшие щитковидные желёзки и простые волоски.

Рисунок 1. Берёзы листья: 1 – фрагмент эпидермиса нижней стороны листа: a – устьица аномоцитного типа, б – желёзка (200×); 2 – фрагмент эпидермиса черешка с мелким простым волоском (200×); 3 – простые толстостенные волоски (200×); 4 – друзы (a) и призматические кристаллы (б) кальция оксалата (200×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ВЭТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота безводная—вода—метилэтилкетон—этилацетат 10:10:30:50.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм.

Помещают 0,5 г измельчённого сырья в коническую колбу вместимостью 50 мл, добавляют 5 мл спирта 96 % и экстрагируют на ультразвуковой бане в течение 15 мин. Полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

Раствор стандартного образца гиперозида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мг гиперозида, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Реактив для детектирования 1. Дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствор 1 % в спирте 96 %.

Реактив для детектирования 2. Макрогола 400 раствор спиртовой 5 %.

На линию старта пластинки полосами длиной 8 мм и шириной 2 мм наносят по 2 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца гиперозида. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную в течение не менее 20 мин камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, выдерживают при температуре 100–105 °С в течение 5 мин. Тёплую пластинку опрыскивают реактивом для детектирования 1, затем опрыскивают реактивом для детектирования 2 и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

Результат. На хроматограмме раствора стандартного образца гиперозида должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией жёлтого, жёлто-зелёного или жёлто-оранжевого цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться: зона адсорбции голубого цвета, над ней зона адсорбции жёлтого, жёлто-зелёного или жёлто-оранжевого цвета на уровне зоны адсорбции гиперозида; выше три зоны адсорбции жёлтого, жёлто-оранжевого, жёлто-коричневого или оранжевого цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 12,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 7,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 2,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм, − не более 5 %.

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 5 мм, – не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, – не более 5 %.

Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, – не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, – не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Другие части растения (ветки, части соцветий). Цельное сырьё, измельченное сырьё: не более 5 %.

Сырьё, изменившее окраску (потемневшее и почерневшее). Цельное сырьё, измельчённое сырьё: не более 5 %.

Органическая примесь. Цельное сырьё, измельчённое сырьё: не более 1 %.

Минеральная примесь. Не более 1 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. Помещают 1,0 г (точная навеска) измельчённого сырья в коническую колбу вместимостью 250 мл с притёртой пробкой, прибавляют 100 мл спирта 50 % и взвешивают с погрешностью ±0,01 г. Колбу с содержимым присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 2 ч.

Полученное извлечение охлаждают до комнатной температуры и взвешивают, при необходимости доводят спиртом 50 % до первоначальной массы, фильтруют через беззольный фильтр.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора, прибавляют 1,0 мл алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 96 % и 1 каплю уксусной кислоты разведённой 30 %, доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора прибавляют, 1 каплю уксусной кислоты разведённой 30 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Исходный раствор стандартного образца гиперозида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,02 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гиперозида, растворяют в 35 мл спирта 70 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца гиперозида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора стандартного образца гиперозида, прибавляют 1 мл алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 96% и 1 каплю уксусной кислоты разведённой 30 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор сравнения стандартного образца гиперозида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора стандартного образца гиперозида, прибавляют 1 каплю уксусной кислоты разведённой 30 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Через 30 мин измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 410 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца гиперозида в тех же условиях относительно раствора сравнения стандартного образца гиперозида.

Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на гиперозид в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A – оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 – оптическая плотность раствора стандартного образца гиперозида;
a – навеска сырья, г;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца гиперозида, г;
P – содержание гиперозида в фармакопейном стандартном образце гиперозида, %;
W – влажность сырья, %.

Допускается содержание суммы флавоноидов вычислять с использованием удельного показателя поглощения комплекса гиперозида с алюминия хлоридом по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
а - навеска сырья, г;
380 - удельный показатель поглощения комплекса гиперозида с алюминия хлоридом при длине волны 410 нм ( );
W - влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0007 Бессмертника песчаного цветки

Helichrysi arenarii flores

Взамен ФС.2.5.0007.15

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Cобранные до распускания цветков и высушенные корзинки дикорастущего многолетнего травянистого растения бессмертника (цмина) песчаного – Helichrysum arenarium (L.) Moench, сем. астровых – Asteraceae.

Содержит не менее 3,0 % суммы флавоноидов в пересчёте на изосалипурпозид в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Цветки».

Цельное сырьё. Щитковидные соцветия, состоящие из 20–35 мелких корзинок, или части этих соцветий, иногда отдельные корзинки и цветки. Корзинки по форме шарообразные или слабо-вытянутые, одиночные или по несколько вместе, диаметром 4–7 мм каждая, с остатками беловойлочных цветоносов (осевых частей соцветия) длиной не более 1 см. Цветки расположены на голом цветоложе и окружены многочисленными неплотно прижатыми листочками обвёртки. Все цветки в корзинке трубчатые обоеполые, с хохолком; отгибы венчика пятизубчатые. Обвёртка корзинки 3–4-рядная, состоит из черепитчато расположенных, лепестковидных, неплотно прижатых, выпуклых листочков лимонно-жёлтого цвета. Листочки обвёртки сухие, плёнчатые, блестящие, неоднородные по форме: наружные – широко ланцетовидные; внутренние – линейные. Все листочки обвёртки с плёнчатым краем и коричневатой или зеленовато-серой полоской посередине. Цветоложе корзинок плоское или слегка выпуклое, мелко-ямчатое. Цветки корзинки, как правило, морфологически различимы и разделяются на срединные и краевые.

Краевые цветки немногочисленные (обычно 5–7), пестичные или обоеполые, с длинной узкой трубкой околоцветника; венчики по форме нитевидные, пятизубчатые, лимонно-жёлтого цвета.

Срединные цветки многочисленные, мелкие, в 1,5–2 раза мельче краевых; обоеполые, трубки их венчиков 5-зубчатые и с 3–4 дополнительными менее выраженными зубцами, обычно жёлтые или оранжевые.

Цвет листочков обвёртки лимонно-жёлтый, иногда с красновато-оранжевыми верхушками, венчиков цветков – лимонно-жёлтый или оранжевый; цветоносов и листьев – серый, зеленовато- или коричневато-серый.

Запах слабый, характерный.

Измельчённое сырьё. Отдельные цветоложа и их кусочки с остатками или цельными листочками обвёртки, отдельные листочки обвёртки, трубчатые цветки и их части, кусочки цветоносов, листьев и стеблей, корзинки одиночные шаровидные, редко по 2–3 вместе, размером до 10 мм.

При рассмотрении измельчённого сырья под лупой (10×, 16×) видны цельные корзинки, отдельные мелкоямчатые цветоложа или их кусочки зеленовато-коричневого цвета; цветоложа с остатками или цельными листочками обвёртки; отдельные плёнчатые листочки обвёртки лимонно-жёлтого цвета с коричневатой или зеленовато-серой полосой по центру в нижней части; трубчатые цветки с пятизубчатым венчиком жёлтого или оранжевого цвета, как правило, без хохолка и завязи; белёсые кусочки многоклеточных волосков хохолка, отдельные завязи коричневого цвета; кусочки опушённых цветоносов, листьев и стеблей беловато- или зеленовато-серого, редко серовато-коричневого цвета; кусочки цветоносов, листьев и стеблей почти голые (волоски удалены при измельчении) от тёмно-коричневого до зеленовато-коричневого цвета; редко встречаются продольно расщеплённые кусочки стеблей с белёсой сердцевиной.

Цвет серовато-жёлтый с лимонно-жёлтыми, оранжевыми, беловато- или зеленовато-серыми, редко серовато-коричневыми, тёмно-коричневыми и зеленовато-коричневыми вкраплениями.

Запах слабый, характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё, измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепаратов с поверхности должны быть видны: листочки обвёртки, мезофилл которых состоит из клеток с утолщёнными пористыми стенками, в суженной части листочка – многочисленные простые бичевидные волоски, состоящие из нескольких коротких клеток основания и одной длинной конечной клетки; эфирномасличные желёзки, овальные, двухрядные, многоярусные, состоящие из 8–12 клеток; слегка вытянутые клетки эпидермиса с устьицами аномоцитного типа; по центру листочка, в мезофилле – многочисленные короткие трахеиды проводящего пучка; отдельные цветки, у которых видна овальная завязь, сплошь покрытая крючкообразно-загнутыми волосками, в основании завязи – кольцо из четырёхугольных клеток с утолщёнными одревесневшими оболочками, на верхушке завязи кольцом расположен хохолок, состоящий из длинных многоклеточных волосков, сросшихся у основания, хохолок часто отломан и встречаются только отдельные волоски или их фрагменты; венчик пятизубчатый трубчатый, клетки эпидермиса внутренней стороны зубцов с сосочковидными выростами и складчатой кутикулой, наружной стороны – с многочисленными желёзками характерного строения; пыльники плёнчатые в количестве 5, пестик с двухлопастным рыльцем; пыльца округлая и округло-трёхгранная шиповатая трёхпоровая с шиповатой экзиной; фрагменты цветоложа незрелого соцветия с многочисленными зачатками трубчатых цветков с желёзками и волосками хохолка; фрагменты цветоложа зрелого соцветия с многочисленными ответвлениями проводящих пучков, окружённые кольцом округло-многоугольных клеток с утолщёнными одревесневшими оболочками (места прикрепления завязей трубчатых цветков); фрагменты листа, клетки эпидермиса которого с нижней стороны с извилистыми, с верхней – с почти прямыми стенками, устьица аномоцитного типа с обеих сторон листа, многочисленные волоски, состоящие из крупного многоклеточного основания и длинной конечной шнуровидной клетки с расширенным основанием, желёзки характерного строения, более многочисленные с нижней стороны листа; фрагменты цветоносов и стеблей, эпидермис которых состоит из продольно-вытянутых клеток и сплошь покрыт волосками характерного строения, встречаются желёзки и устьица; в сердцевине стебля, среди удлинённо-прямоугольных клеток паренхимы, расположены сосудистые пучки, представленные сетчато-лестничными, лестничными и спиральными сосудами.

Рисунок 1. Бессмертника песчаного цветки: 1 – фрагмент эпидермиса лепестка венчика: a – эфирномасличные желёзки, б – сосочковидные выросты (200×); 2 – фрагмент завязи: a – крючкообразно-загнутые волоски, б – кольцо механических клеток (200×); 3 – волоски хохолка (200×); 4 – фрагмент эпидермиса листа: a – устьица аномоцитного типа, б – простой многоклеточный волосок (100×); 5 – фрагмент эпидермиса листа с бичевидными волосками (100×); 6 – лестничные (а) и спиральные (б) сосуды (200×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—спирт 96 %—хлороформ 3:16:26.

Раствор стандартного образца лютеолин-7-глюкозида. Около 10 мг лютеолин-7-глюкозида растворяют в 10 мл спирта 70 % при нагревании.

Реактив для детектирования 1. Дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствор 1 % в спирте 96 %.

Реактив для детектирования 2. Макрогола 400 раствор спиртовой 5 %.

На линию старта пластинки наносят 20 мкл исходного раствора (раздел «Количественное определение») и 10 мкл раствора стандартного образца лютеолина-7-глюкозида. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную в течение 2 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Пластинку опрыскивают реактивом для детектирования 1, затем опрыскивают реактивом для детектирования 2 и выдерживают при температуре 100‑105 °С в течение 3‑5 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

Результат. На хроматограмме раствора стандартного образца лютеолин-7-глюкозида должна обнаруживаться зона адсорбции c флуоресценцией ярко-жёлтого цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться 2–3 зоны адсорбции с флуоресценцией голубого цвета выше линии старта, над ними – зона адсорбции с флуоресценцией жёлто-оранжевого цвета слабой интенсивности; зона адсорбции с флуоресценцией ярко-жёлтого цвета выше уровня зоны адсорбции лютеолин-7-глюкозида, над ней зона адсорбции с флуоресценцией светло-голубого цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 12,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 8,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 4,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, – не более 5 %.

Измельчённое сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, – не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Кусочки стеблей и цветоносов. Не более 10 %.

Соцветия с остатками стеблей длиной свыше 1 см. Цельное сырьё: не более 5 %.

Остатки корзинок (цветолож с обвёртками). Цельное сырьё: не более 5 %.

Сырьё, изменившее окраску (потемневшее и почерневшее). Hе более 3 %.

Органическая примесь. Hе более 0,5 %.

Минеральная примесь. Не более 0,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. Помещают 1,0 г (точная навеска) измельчённого сырья в колбу с притёртой пробкой вместимостью 250 мл, прибавляют 50 мл спирта 70 % и взвешивают с погрешностью ±0,01 г, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 1 ч. Затем содержимое колбы охлаждают, доводят при необходимости содержимое колбы до первоначальной массы, фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл исходного раствора, прибавляют 4 капли алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 96 %, 1 каплю уксусной кислоты разведённой 30 %, доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл исходного раствора, прибавляют 1 каплю уксусной кислоты разведённой 30 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Исходный раствор стандартного образца изосалипурпозида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,025 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца изосалипурпозида, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор стандартного образца изосалипурпозида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора стандартного образца изосалипурпозида, прибавляют 4 капли алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 96 % и 1 каплю уксусной кислоты разведённой 30 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор сравнения стандартного образца изосалипурпозида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл исходного раствора стандартного образца изосалипурпозида, прибавляют 1 каплю уксусной кислоты разведённой 30 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Через 30 мин измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 418 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца изосалипурпозида относительно раствора сравнения стандартного образца изосалипурпозида.

Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на изосалипурпозид в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A – оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 – оптическая плотность раствора стандартного образца изосалипурпозида;
a – навеска сырья, г;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца изосалипурпозида, г;
P – содержание изосалипурпозида в фармакопейном стандартном образце изосалипурпозида, %;
W – влажность сырья, %.

Допускается содержание суммы флавоноидов в пересчёте на изосалипурпозид вычислять с использованием удельного показателя поглощения комплекса изосалипурпозида с алюминия хлоридом по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
а - навеска сырья, г;
500 - удельный показатель поглощения комплекса изосалипурпозида с алюминия хлоридом при длине волны 418 нм ( );
W - влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0057 Аниса обыкновенного плоды

Anisi vulgaris fructus

Взамен ФС.2.5.0057.18

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные зрелые и высушенные плоды культивируемого однолетнего травянистого растения аниса обыкновенного (бедренца анисового) – Anisum vulgare Gaertn. (Pimpinella anisum L.), сем. сельдерейных – Apiaceae.

Содержит не менее 1,5 % эфирного масла в сухом сырье.

##### ИДЕНТИЦИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Плоды».

Цельное сырьё. Плоды – вислоплодники, состоящие из двух не отделённых друг от друга полуплодиков (мерикарпиев), иногда распавшиеся, иногда с плодоножкой. Плоды яйцевидной или обратногрушевидной формы, с боков слегка сплюснутые, к основанию более широкие, к верхушке суженные. На верхушке имеются остатки пятизубчатой чашечки и вздутый надпестичный диск с двумя расходящимися столбиками. Поверхность плода шероховатая. Наружная сторона мерикарпия выпуклая, внутренняя – плоская. Каждый мерикарпий имеет пять слабо выступающих продольных рёбрышек: три из них находятся на выпуклой стороне, два – по бокам. В мерикарпии одно семя, сросшееся с околоплодником. Длина плодов 3–5 мм, ширина 2–3 мм. Цвет плодов желтовато-серый или коричневато-серый. Запах сильный, характерный.

Рисунок 1. Внешний вид аниса обыкновенного плодов

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственных средств растительного происхождения». Раздел «Плоды и семена».

Цельное сырьё. При рассмотрении микропрепаратов поперечного среза плода должен быть виден эпидермис (экзокарпий) околоплодника, имеющий многочисленные одно-, реже двухклеточные, слегка изогнутые бородавчатые волоски. В паренхиме мезокарпия должны быть видны многочисленные (15–35 в одном мерикарпии) эфирномасличные канальцы и 5 мелких проводящих пучков (в рёбрышках). Эндокарпий и семенная кожура плотно срослись и видны в виде жёлто-коричневого слоя деформированных клеток. Эндосперм состоит из многоугольных клеток, заполненных алейроновыми зёрнами, каплями жирного масла и мелкими друзами оксалата кальция.

Рисунок 2. Аниса обыкновенного плоды: 1 – поперечный разрез через ребро (200×); 2 – эфирномасличные канальцы (400×); 3 – поперечный срез: а – эндосперм, б – кожура семени, в – эндокарпий, г – мезокарпий (600×); 4 – экзокарпий (эпидерма с одноклеточными волосками с бородавчатой кутикулой) (600×); 5 – продольный срез: эфирномасличные канальцы (400×); 6 – склереиды мезокарпия (400×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Определение проводят одним из приведённых методов.

1. Тонкослойная хроматография

Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Этилацетат–толуол 5:95.

Испытуемый раствор. В колбу со шлифом вместимостью 100 мл помещают около 1,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, прибавляют 10 мл гексана и встряхивают с помощью шейкера в течение 5 мин. Полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

Раствор стандартного образца транс-анетола. Растворяют 20 мкл транс-анетола в 10 мл гексана.

Реактив для детектирования. Ванилина раствор 1 % в серной кислоте.

На линию старта пластинки в виде полос длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят 20 мкл испытуемого раствора и 5 мкл раствора стандартного образца транс-анетола. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение 30 мин ПФ, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Пластинку опрыскивают реактивом для детектирования, выдерживают при температуре 100–105 °С
в течение 2–3 мин и просматривают при дневном свете.

Результат. На хроматограмме раствора стандартного
образца транс-анетола должна обнаруживаться зона адсорбции от красновато-коричневого до фиолетово-коричневого цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции от красновато-коричневого до фиолетово-коричневого цвета на уровне зоны адсорбции стандартного образца транс-анетола; ниже неё интенсивная зона адсорбции от сине-фиолетового до фиолетово-красного цвета; под ней – две зоны адсорбции от фиолетового до фиолетово-красного цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции.

2. Газовая хроматография

Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Хроматографические условия

Колонка | 30 м × 0,25 мм, капиллярная поли(диметил)(дифенил)силоксан, 0,25 мкм;
Газ-носитель | гелий для хроматографии;
Скорость потока | 0,8 мл/мин;
Детектор | масс-спектрометрический;
Деление потока | 20:1;
Объём пробы | 1 мкл;
Температура колонки, °C | 0–2 мин | 50;
| 2–12 мин | 50 → 150 (10 °С/мин);
| 12–21 мин | 150 → 280 (15 °С/мин);
| 21 мин | 280;
Температура инжектора,°С | 280;
Температура детектора, °С | 280.

Хроматографируют раствор стандартного образца транс-анетола и испытуемый раствор (см. «Тонкослойная хроматография»).

Относительное время удерживания соединений: анисовый альдегид – 1 (около 11,58 мин), анетол – около 1,05.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 12,0 % (сырьё измельчают непосредственно перед определением) (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 10,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 2,5 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Повреждённых, недоразвитых плодов аниса и других частей. Не более 5 %.

Органическая примесь. Не более 2 %.

Минеральная примесь. Не более 1 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение эфирного масла проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания эфирного масла в лекарственном растительном сырье и лекарственных средствах растительного происхождения» (методики 1, 3 или 4, из 10,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, непосредственно перед определением, время перегонки 2 ч).

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0061 Боярышника плоды

Crataegi fructus

Взамен ФС.2.5.0061.18

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в фазу полного созревания и высушенные плоды дикорастущих и культивируемых кустарников или небольших деревьев различных видов боярышника (Crataegus): боярышника кроваво-красного – С. sanguinea (Pall), боярышника сглаженного – C. laevigata (Poir.) DC (боярышника колючего – C. oxyacantha sensu Pojark.), боярышника Королькова – С. korolkowii L., Henry, боярышника жёлтого – С. chlorocarpa Lenne et C. koch (боярышника алтайского – C. altaica (Lond.) Lange), боярышника даурского – С. dahurica Koehne ex Schneid., боярышника однопестичного – С. monogyna Jacq., боярышника германского – С. alemanniensis Cin., боярышника пятипестичного – С. pentagyna Waldst. et Kit., боярышника восточно-балтийского – С. orientobaltica Cin., боярышника отогнуточашелистикового – С. curvisepala Lindm., боярышника курземского – С. × curonica Cin., боярышника даугавского – С. dunensis Cin., сем. розоцветные – Rosaceae.

Содержит не менее 0,04 % суммы флавоноидов в пересчёте на гиперозид в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Плоды».

Цельное сырьё. Плоды яблокообразные, от шаровидной до эллипсоидальной формы, твёрдые, морщинистые, длиной 6–14 мм, шириной 5–11 мм, сверху с кольцевой оторочкой, образованной ссохшимися чашелистиками. В мякоти плода находятся 1–5 деревянистых косточек, имеющих неправильную треугольную, овальную или сжатую с боков форму. Поверхность косточек ямчато-морщинистая или бороздчатая по спинке. Цвет плодов от жёлто-оранжевого и коричневато-красного до тёмно-коричневого или чёрного, иногда с беловатым налётом выкристаллизовавшегося сахара. Запах отсутствует.

Отличительные признаки плодов боярышника различных видов приведены в табл. 1.

Порошок. Смесь частиц околоплодника и косточек плодов, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. Цвет от жёлто-оранжевого и коричневато-красного до коричневого с чёрными и коричневатыми вкраплениями, иногда с беловатым налётом выкристаллизовавшегося сахара. Запах отсутствует.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрении микропрепаратов эпидермиса плода с поверхности должны быть видны 4–6-угольные клетки с равномерно утолщёнными стенками и жёлто-коричневым содержимым; редкие одиночные одноклеточные, слегка извилистые, на концах заострённые, толстостенные волоски. На кусочках оторочки плода встречаются многочисленные одноклеточные волоски со вздутиями, притуплённые у верхушки и расширенные у основания, с тонкими стенками и коричневатым содержимым, волоски часто обломанные. Мякоть плода должна состоять из клеток округлой или овальной формы, содержащих хромопласты оранжево-красного или коричневато-жёлтого цвета, мелкие друзы и призматические кристаллы кальция оксалата. В мякоти плода проходят коллатеральные пучки, встречаются одиночные склереиды, рядом с крупными пучками расположены группы каменистых клеток, кристаллы кальция оксалата местами образуют кристаллоносную обкладку, встречаются одиночные кристаллы кальция оксалата.

Порошок. При рассмотрении микропрепаратов должны быть видны фрагменты эпидермиса плода, состоящего из 4–6-угольных клеток с равномерно утолщёнными стенками и жёлто-коричневым содержимым; фрагменты или целые волоски двух типов: одноклеточные, слегка извилистые, на концах заострённые, толстостенные и одноклеточные, со вздутиями, притупленные у верхушки и расширенные у основания, с тонкими стенками и коричневатым содержимым; фрагменты мякоти плода, состоящей из клеток, содержащих хромопласты оранжево-красного или коричневато-жёлтого цвета, мелкие друзы и призматические кристаллы кальция оксалата; фрагменты мякоти с группами каменистых клеток и одиночными каменистыми клетками.

Таблица 1. Характеристика плодов боярышника
Вид боярышника | Форма плода | Цвет плода | Чашелистики | Размер плода, мм | Цвет мякоти плода | Количество косточек | Форма косточек | Размер косточек, мм
--- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | ---
длина | ширина | длина | ширина
Кроваво-красный | Почти шаровидная или коротко-эллипсоидальная | Тёмно-красный (коричневато-красный) | Продолговато-треугольные, цельные или с 1-2 зубцами с каждой стороны | От 7 до 10 | От 7 до 9 | Желтоватый | (2) 3–4 (5) | Неправильная треугольная, с боков ямчатая | От 5 до 6 | От 3 до 4
Сглаженный | Почти шаровидная или коротко-эллипсоидальная | Коричневато-красный, коричневый или чёрный | Широкотреугольные, отогнутые | От 5 до 9 | От 4 до 9 | То же | 2 (3) | Неправильная, со спинной стороны выпуклая, ребристая, с брюшной – плоская, бороздчатая | От 5 до 7 | От 4 до 6
Королькова | Почти шаровидная, несколько приплюснутая с полюсов | Янтарно-оранжевый (коричневато-оранжевый) | Треугольно-ланцетные, отогнутые | От 10 до 11 | От 7 до 9 | Желтовато-янтарный | 5 | Трёхгранная, на брюшной стороне килеватая, с выпуклой гладкой или слегка бороздчатой спинкой, с боков – неглубоко ямчатая | От 5 до 6 | От 2 до 3
Жёлтый | Почти шаровидная или коротко-эллипсоидальная | Оранжевый (коричневато-оранжевый) | Продолговато-треугольные, цельные или с 1-2 зубцами с каждой стороны | От 7 до 10 | От 7 до 9 | Желтоватый | (2) 3–4 (5) | Неправильная треугольная, с боков ямчатая | От 5 до 6 | От 3 до 4
Даурский | Коротко-эллипсоидальная или почти шаровидная | Коричневато-красный или оранжево-коричневый | Ланцетные, узкие | От 5 до 8 | От 5 до 8 | То же | 3–4 | Трехгранная, с боков сильно сжатая, с брюшной стороны выемчатая | От 4 до 6 | От 2 до 3
Однопестичный | Коротко-эллипсоидальная или округлая | Тёмно-красный (коричневато-красный) | Треугольные, отогнутые | От 5 до 6 | От 4 до 6 | То же | 1 | Округлая | От 3 до 5 | От 3 до 4
Германский | Коротко-эллипсоидальная, к основанию слегка суженная | Тёмно-красный | Ланцето-треугольные, отогнутые | От 6 до 8 | От 5 до 7 | То же | 1 | Эллипсоидная, на спинке едва заметно ямчатая, с брюшной стороны почти плоская, с боковых сторон косточки с глубокими бороздками | От 6 до 7 | От 4 до 5
Пятипестичный | Почти шаровидная или коротко-эллипсоидальная | Чёрный или пурпурно-чёрный с сизым налётом | Широкотреу-гольные с коротким остроконечием, прямостоящие | От 7 до 9 | От 6 до 7 | Красновато-коричневый | 5 (3–4) | Трёхгранная, со спинной стороны слегка бороздчатая, с боков гладкая, с брюшной стороны - килеватые | От 6 до 7 | От 3 до 4
Восточно-балтийский | Коротко-эллипсоидальная, к основанию слегка суженная | Тёмно-красный | Ланцето-треугольные, отогнутые | От 7 до 9 | От 5 до 7 | Желтоватый | 1 | Эллипсоидная, на спинке едва заметно ямчатая, с брюшной стороны почти плоская, с боковых сторон косточки с глубокими бороздками | От 6 до 7 | От 4 до 5
Отогнуточашелистиковый | Продолговато-эллипсоидальнаяная или цилиндрическая | Тёмно-красный, нередко с зелёными пятнышками | Узкие продолговато-ланцетные, оттянутые в длинное остроконечие, отогнутые | От 9 до 13 | От 6 до 10 | Желтовато-оранжевый | 1 | Эллипсоидная, с боков ямчатая, с каждой стороны с одной бороздкой | От 7 до 8 | От 4 до 5
Курземский | Эллипсоидальная или широкоэллипсоидальная | Тёмно-красный | Узкотреуголь-ные, отогнутые | От 8 до 11 | От 6 до 9 | Желтоватый | 1–2 | У двухкосточковых плодов косточка эллипсоидальная, со спинки выпуклая неяснопродольно-бороздчатая на брюшной стороне плоская, ближе к краю с одной довольно глубокой бороздкой; у однокосточковых – косточка эллипсоидная, чуть приплюснутая с боков ближе к краю с каждой стороны с одной довольно глубокой бороздкой | От 5 до 9 | От 4,5 до 6
Даугавский | Продолговато-эллипсоидальная, удлинённая или эллипсоидальная, в нижней части слегка суженная | Тёмно-красный | Ланцетные, заострённые, горизонтально простёртые или приподнято-оттопыренные, иногда отогнутые | От 8 до 11 | От 6 до 7 | Желтоватый | 1 | Эллипсоидальная, на спинке неяснопродольно-бороздчатая, с боков слегка приплюснутая, с каждой стороны (ближе к основанию) с одной бороздкой, на брюшной стороне почти гладкая | От 7 до 9 | От 4 до 5

Рисунок 1. Боярышника плоды: 1 – клетки эпидермиса (200×); 2 – фрагмент мякоти с хромопластами (90×); 3 – группа каменистых клеток (200×); 4 - фрагмент волоска (200×); 5 – друза (a) и кристаллы (б) кальция оксалата (200×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—муравьиная кислота безводная—толуол—ацетон—этилацетат (5:5:10:10:20).

Испытуемый раствор. В колбу со шлифом вместимостью 100 мл помещают 1,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, прибавляют 10 мл спирта 96 %, нагревают с обратным холодильником на водяной бане при температуре 65 °С в течение 5 мин. После охлаждения фильтруют через беззольный фильтр.

Раствор стандартного образца гиперозида. Растворяют 2,5 мг гиперозида в 10 мл спирта 96 %.

Реактив для детектирования 1. Дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствор 1 % в спирте 96 %.

Реактив для детектирования 2. Макрогола 400 раствор спиртовой 5 %.

На линию старта пластинки полосами длиной 10 мм и шириной не более 2 мм наносят 30 мкл испытуемого раствора и рядом 2 мкл раствора стандартного образца гиперозида. Пластинку с нанесёнными пробами сушат в течение 15 мин, помещают в камеру, предварительно насыщенную ПФ в течение не менее 1 ч и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Пластинку опрыскивают реактивом для детектирования 1, сушат, затем обрабатывают реактивом для детектирования 2 и сразу нагревают при температуре 100–105 °С в течение 1‑3 мин, просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

Результат. На хроматограмме раствора стандартного образца гиперозида должна обнаруживаться зона адсорбции жёлтого, зеленовато-жёлтого, жёлто-зелёного или жёлто-оранжевого цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться зона адсорбции жёлтого, зеленовато-жёлтого, жёлто-зелёного или жёлто-оранжевого цвета на уровне зоны адсорбции гиперозида, зона адсорбции светло-синего или синего цвета выше зоны адсорбции гиперозида, допускается обнаружение других зон адсорбции (фенольные соединения).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 14,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 5,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 1,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, – не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, – не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Подгоревшие плоды. Цельное сырьё: не более 2 %.

Плоды недозрелые (коричневато-зелёные). Цельное сырьё: не более 1 %.

Плоды, повреждённые вредителями, дроблёные, отдельные косточки, веточки, плодоножки, в том числе отделённые при анализе. Цельное сырьё: не более 5 %.

Органическая примесь. Цельное сырьё: не более 1 %.

Минеральная примесь. Не более 0,5 %.

Примечание – Плодами, повреждёнными вредителями, считаются те плоды, у которых имеются явные повреждения наружных покровов и мякоти плода вредителями, а именно борозды, ходы, изъеденные участки и т.д.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих через сито с отверстиями размером 2 мм. В колбу со шлифом вместимостью 250 мл помещают 5,0 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 50 мл спирта 96 %, присоединяют к обратному холодильнику, нагревают на водяной бане в течение 1 ч, после охлаждения содержимое колбы фильтруют через беззольный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл. В колбу со шротом прибавляют 30 мл спирта 96 %, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают в течение 1 ч. После охлаждения извлечение фильтруют через тот же фильтр в ту же колбу. В колбу со шротом прибавляют 20 мл спирта 96 %, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают в течение 1 ч. После охлаждения извлечение фильтруют через тот же фильтр в ту же колбу. Объём раствора в колбе доводят спиртом 96 % до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10,0 мл исходного раствора, прибавляют 6 мл алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 96 %, доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10,0 мл исходного раствора, прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора через 40 мин на спектрофотометре при длине волны 410 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на гиперозид в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
а - навеска сырья, г;
380 - удельный показатель поглощения комплекса гиперозида с алюминия хлоридом при длине волны 410 нм ( ));
W - влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0009 Валерианы лекарственной корневища с корнями

Valerianae officinalis rhizomata cum radicibus

Взамен ФС.2.5.0009.15

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные осенью или ранней весной, освобождённые от остатков листьев и стеблей, отмытые от земли и высушенные корневища с корнями многолетнего дикорастущего и культивируемого травянистого растения валерианы лекарственной – Valeriana officinalis L. s. l., сем. валериановых – Valerianaceae.

Содержит:

- цельное сырьё: не менее 0,12 % суммы сесквитерпеновых кислот в пересчёте на валереновую кислоту в сухом сырье;

- измельчённое сырьё, порошок: не менее 0,10 % суммы сесквитерпеновых кислот в пересчёте на валереновую кислоту в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы».

Цельное сырьё. Корневища цельные или разрезанные, длиной до 4 см, толщиной до 3 см, часто с рыхлой или полой с поперечными перегородками сердцевиной. От корневища отходят многочисленные придаточные корни, редко подземные побеги – столоны. Корни гладкие или слегка продольно-морщинистые, ломкие, различной длины, часто отделены от корневища.

Цвет корневищ и корней снаружи желтовато-коричневый, беловато-коричневый, коричневый, тёмно-коричневый, на изломе желтоватый, желтовато-белый, светло-коричневый, коричневый.Запах сильный, характерный.

Измельчённое сырьё. При рассмотрении измельчённого сырья под лупой (10×) видны кусочки корневищ различной формы и цилиндрические кусочки корней с гладкой или слегка продольно-морщинистой поверхностью, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

Цвет кусочков желтовато-, серовато-, беловато-коричневый, коричневый или тёмно-коричневый. Запах сильный, характерный.

Порошок. При рассмотрении порошка под лупой (10×) видны кусочки корней и корневищ различной формы с гладкой или слегка продольно-морщинистой поверхностью, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

Цвет желтовато-коричневый с беловато-коричневыми, желтовато-белыми, светло-коричневыми, коричневыми и тёмно-коричневыми вкраплениями. Запах сильный, характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрениимикропрепаратов поперечного среза корня должен быть виден эпидермис (ризодерма), клетки которого образуют корневые волоски в виде коротких или удлинённых сосочков. Клетки прилегающей гиподермы крупные, часто с каплями эфирного масла. Кора широкая, состоит из однородных округлых паренхимных клеток, заполненных крахмальными зёрнами. Молодые корни имеют первичное строение: в центральном осевом цилиндре видно кольцо эндодермы,состоящей из клеток с утолщёнными радиальными стенками, и группы сосудов. Редко встречаются старые корни с лучистой древесиной (вторичное строение).

На поперечном срезе корневища видна покровная ткань, представленная пробкой. Клетки паренхимы округлые, заполнены крахмальными зёрнами. По периметру нередко видны конусовидные зачатки корней. Открытые коллатеральные сосудисто-волокнистые пучки, часто искривлённые, окружают одним, реже двумя кольцами сердцевину.

В сердцевине располагается группа каменистых клеток, более старые корневища полые.

В препаратах соскоба сухого сырья должны быть видны крахмальные зёрна простые и 2–5-сложные, круглые или неправильной формы, что характерно для корневища.

Измельчённое сырьё, порошок. При рассмотрении «давленого» микропрепарата должны быть видны группы паренхимных клеток, часто с каплями эфирного масла и/или коричневым содержимым; фрагменты ризодермы с корневыми волосками; фрагменты пробки, состоящей из клеток с утолщёнными стенками; фрагменты сосудов с сетчатым, сетчато-лестничным и спиральным типами вторичного утолщения стенок; фрагменты паренхимы с зёрнами крахмала (в растворе глицерина или воде); изредка каменистые клетки.

Рисунок 1. Валерианы лекарственной корневища с корнями: 1 – фрагмент поперечного среза корня первичного строения: а – ризодерма с прилегающей гиподермой, б – центральный осевой цилиндр (40×); 2 – фрагмент поперечного среза корня первичного строения: а – ризодерма с корневыми волосками, б – клетки гиподермы с каплями эфирного масла (200×); 3 – фрагмент поперечного среза корня первичного строения: а – клетки эндодермы, б – группа сосудов (200×); 4 – фрагмент корня: а – корневые волоски ризодермы (200×); 5 – фрагмент поперечного среза корневища: а – сосудистоволокнистый пучок, б – клетки паренхимы с крахмальными зёрнами, в – группа каменистых клеток в центре корневища (200×); 6 – фрагмент поперечного среза корневища: а – группа каменистых клеток (200×), 7 – фрагмент корневища: а – сетчатые сосуды с короткими искривлёнными члениками (200×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»)

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетон—гексан 1:2.

Испытуемый раствор. Около 1,0 г сырья измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, помещают в коническую колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 10 мл спирта 6 % и кипятят с обратным холодильником на водяной бане в течение 10 мин. После охлаждения до комнатной температуры извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

На линию старта пластинки полосами длиной 10 мм и шириной не более 3 мм наносят 20 мкл испытуемого раствора, 5 мкл судана красного G раствора 0,025 % спиртового и 5 мкл флуоресцеина раствора 0,025 % спиртового. Пластинку с нанесёнными пробами сушат при комнатной температуре в течение 5 мин и помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 30 мин и не более 40 мин ПФ, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителейпройдётнеменее 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры и сушат до удаления следов растворителей. Затем пластинку обрабатывают анисового альдегида раствором спиртовым сернокислым (2), выдерживают в сушильном шкафу при 100–105 °С в течение 2–3 мин и просматривают при дневном свете.

На хроматограмме раствора флуоресцеина должна обнаруживаться зона адсорбции светло-жёлтого цвета, на хроматограмме судана красного Gраствора должна обнаруживаться зона адсорбции розово- или фиолетово-красного цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться 2 зоны адсорбции синего или фиолетово-синего цвета, расположенные между зонами адсорбции флуоресцеина (снизу) и судана красного G (сверху) (ацетоксивалереновая и валереновая кислоты); допускается обнаружение других зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 15,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья илекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 14,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 10,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, − не более 5 %.

Измельченное сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, −не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, −не более 5 %.

Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, −не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, − не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Другие части валерианы (остатки стеблей и листьев, в том числе отделённые при анализе), а также старые отмершие корневища. Цельное сырьё, измельчённое сырьё– не более 5 %.

Органическая примесь. Цельное сырьё, измельчённое сырьё – не более 2 %.

Минеральная примесь. Цельное сырьё – не более 3 %, измельчённое сырьё, порошок – не более 2 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Сумма сесквитерпеновых кислот

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Ацетонитрил.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Фосфорная кислота разведённая 0,5 %.

Испытуемый раствор. В колбу со шлифом вместимостью 100 мл помещают 1,5 г (точная навеска) лекарственного растительного сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, прибавляют 50 мл спирта 96 % и кипятят с обратным холодильником на водяной бане в течение 45 мин. После охлаждения полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.Охлаждённое до комнатной температуры извлечение фильтруют через беззольный фильтр в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят спиртом 96 % до метки и тщательно перемешивают. Около 2–3 мл полученного извлечения фильтруютчерез мембранный нейлоновый фильтр (размер пор 0,45 мкм), отбрасывая 1–2 мл фильтрата.

Раствор стандартного образца валереновой кислоты. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,005 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца валереновой кислоты, доводят объём раствора спиртом 96 % до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора спиртом 96 % до метки и перемешивают. Раствор используют без фильтрования.

Хроматографические условия

Колонка | 125 × 4,0 мм, сорбент октадецилсилилсиликагель,5 мкм;
Предколонка | 4 × 4 мм, сорбент октадецилсилилсиликагель, 5 мкм;
Скорость потока | 1 мл/мин;
Температураколонки | комнатная (20±2 °С);
Детектор | спектрофотометрический или диодная матрица;
Длина волны | 220 нм;
Объём вводимой пробы | 10 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА, об.% | ПФБ, об.%
0–5 | 47 | 53
5–7 | 47→50 | 53→50
7–9 | 50 | 50
9–16 | 50→60 | 50→40
16–20 | 60 | 40
20–25 | 60→100 | 40→0
25–30 | 100→47 | 0→53
30–45 | 47 | 53

Хроматографируют раствор стандартного образца валереновой кислоты и испытуемый раствор.

Относительное время удерживание валереновой кислоты – 1 (время удерживания–около 15 мин.), ацетоксивалереновой кислоты – около 0,5.

Пригодность хроматографической системы

- фактор асимметрии пика (AS) для ацетоксивалереновой и валереновой кислот должен быть не более 1,5;

Расчёт содержания суммы сесквитерпеновых кислот проводят методом внешнего стандарта. Обсчёту подлежат основной пик валереновой кислотыи пикацетоксивалереновой кислоты.

Содержаниесуммысесквитерпеновыхкислотвпересчётенавалереновуюкислотув сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S - сумма площадей пиков валереновой и ацетоксивалереновой кислот на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика на хроматограмме раствора стандартного образца валереновой кислоты; а - навеска сырья, г;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца валереновой кислоты, г;
Р - содержание валереновой кислоты в фармакопейном стандартном образце валереновой кислоты, %;
W - влажность сырья, %.

Экстрактивные вещества. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (метод 1, экстрагент – спирт 70 %).

Содержит не менее 25 % экстрактивных веществ, извлекаемых спиртом 70 %, в пересчёте на сухое сырьё.

Примечание – Сумму сесквитерпеновых кислот определяют для сырья, предназначенного для получения лекарственных растительных препаратов (пачки, фильтр-пакеты) и экстракционных лекарственных форм; экстрактивные вещества, извлекаемые спиртом 70 %, определяют для сырья, предназначенного для получения экстракционных лекарственных форм.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0108 Алоэ древовидного листья свежие

Aloes arborescentis folia recentia

Взамен ФС 42-2191-84

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в течение года, свежие листья 2–4 летнего культивируемого суккулентного растения алоэ древовидного – Aloe arborescens Mill., сем. асфоделовых - Asphodelaceae.

Содержат:

- не менее 0,02 % суммы антраценпроизводных в пересчёте на алоэ-эмодин в соке;

- не менее 2,0 % сухого остатка в соке.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Листья».

Цельное сырьё. Листья мечевидные или удлинённо-мечевидные, с верхней стороны вогнутые или слабожелобчатые, с нижней – выпуклые; сочные, длиной от 15 до 45 см, шириной у основания от 2 до 5,5 см, толщиной от 0,7 до 1,5 см, со стеблеобъемлющим плёнчатым влагалищем длиной около 3 см, с ясно выраженным жилкованием. По краю листьев имеются острые зубцы длиной до 5 мм, загнутые к верхушке листа. Листья покрыты тонким, легко стирающимся восковым налётом. Цвет листьев серо-зелёный с синеватым оттенком, зубцов – зеленовато-жёлтый или красноватый.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрении микропрепарата листа с поверхности должны быть видны клетки эпидермиса с верхней стороны листа со слабоизвилистыми, почти прямыми, стенками и более извилистыми – с нижней. Устьица расположены с обеих сторон листа, преимущественно, на нижней, слегка погружённые, с 4-мя околоустьичными клетками эпидермы (тетрацитный тип). На поперечном срезе листьев должно быть видно, что непосредственно под эпидермисом расположен узкий слой хлорофиллоносной паренхимы (хлоренхимы). Среди клеток хлоренхимы видны идиобласты, более или менее вытянутые по оси листа, содержащие рафиды кальция оксалата в виде пучков или отдельных тонких игольчатых кристаллов. Вся внутренняя часть листа состоит из крупных паренхимных клеток со слизистым бесцветным содержимым. На границе хлорофиллоносной и бесцветной паренхимы расположены коллатеральные проводящие пучки, к каждому из которых к периферии примыкает группа из нескольких клеток, отличающихся по структуре от клеток хлоренхимы, иногда с коричневым мелкозернистым содержимым (алоиновые клетки).

Рисунок 1. Алоэ древовидного листья свежие: 1 – верхний эпидермис: а – идиобласт с рафидами кальция оксалата (300×); 2 – нижний эпидермис: а – идиобласт с рафидами кальция оксалата, б – рафиды кальция оксалата, в – сосудисто-волокнистый пучок (200×); 3 – верхний эпидермис: а – рафиды кальция оксалата в виде пучков (600×); 4 – поперечный срез листа: а – сосудисто-волокнистый пучок; б – эпидерма; в – слой хлоренхимы; г – паренхима центральной части мезофилла со слизистым бесцветным содержимым (74×); 5 – поперечный срез листа: а – сосудисто-волокнистый пучок, б – паренхима центральной части мезофилла со слизистым бесцветным содержимым; в – алоиновые клетки (300×).

Определение основных групп биологически активных веществ

1. Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ): вода—метанол—этилацетат 5:5:90.

- Испытуемый раствор. В круглодонную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мл исходного раствора (раздел «Количественное определение»), выпаривают на водяной бане досуха. Сухой остаток растворяют в 2 мл метанола и фильтруют через беззольный фильтр (при необходимости).

- Раствор стандартного образца алоэ-эмодина. В 10 мл метанола растворяют 0,001 г стандартного образца алоэ-эмодина.

- Срок годности раствора 24 часа при хранении в прохладном, защищённом от света месте.

- Реактив для детектирования. Натрия гидроксида спиртовой
  раствор 2 %.

- На линию старта пластинки наносят 10 мкл испытуемого раствора и 30 мкл раствора стандартного образца алоэ-эмодина в виде полос длиной 10 мм и шириной 2 мм. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в предварительно насыщенную в течение 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 30 мин и просматривают при дневном свете.

- Результат

- На хроматограмме раствора стандартного образца алоэ-эмодина должна обнаруживаться зона адсорбции от светло-жёлтого до оранжевого цвета.

- На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции от светло-жёлтого до оранжевого цвета на уровне зоны адсорбции стандартного образца алоэ-эмодина, допускается обнаружение других зон адсорбции.

- Затем пластинку обрабатывают реактивом для детектирования и просматривают при дневном свете.

- Результат

- На хроматограмме раствора стандартного образца алоэ-эмодина должна обнаруживаться зона адсорбции светло-красного или красного цвета.

- На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции светло-красного или красного цвета на уровне зоны адсорбции стандартного образца алоэ-эмодина; допускается обнаружение других зон адсорбции.

2. Качественная реакция. 2 мл сока (раздел «Количественное определение») помещают в делительную воронку, прибавляют 5 мл хлороформа, перемешивают и оставляют до разделения слоёв. Органический слой сливают в пробирку, к нему прибавляют 5 мл аммиака раствора концентрированного 25 %; при взбалтывании аммиачно-водный слой должен окрашиваться в розовый, жёлтый или оранжевый цвет (антраценпроизводные).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не менее 92,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 17,0 % (ОФС «Зола общая»).

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Поломанных листьев. Не более 10 %.

Органическая примесь. Не допускается.

Минеральная примесь. Не более 0,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Сумма антраценпроизводных в соке. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Исходный раствор. Около 0,5 кг сырья измельчают до однородной массы, отжимают и процеживают до получения около 350 мл сока. Полученный сок фильтруют через беззольный фильтр и перемешивают.

В коническую колбу со шлифом вместимостью 250 мл помещают 10,0 мл сока, прибавляют 20 мл воды, 12 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, 1,2 г железа (III) хлорида и нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 1 ч. Раствор охлаждают, количественно переносят с помощью 20 мл воды в делительную воронку вместимостью 250 мл и экстрагируют хлороформом 3 раза по 20 мл.

Объединённые хлороформные извлечения помещают в делительную воронку, промывают водой 2 раза по 10 мл, фильтруют через беззольный фильтр, содержащий 2 г натрия сульфата безводного, в круглодонную колбу и выпаривают на роторном испарителе при температуре не выше 40 °С досуха. Сухой остаток растворяют в 15 мл метанола и количественно переносят, фильтруя через беззольный фильтр, в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл исходного раствора, прибавляют 5 мл магния ацетата раствора метанольного 0,5 %, перемешивают, доводят до метки тем же раствором.

Раствор сравнения. Магния ацетата раствор метанольный 0,5 %.

Оптическую плотность испытуемого раствора измеряют на спектрофотометре при длине волны 512 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Содержание суммы антраценпроизводных в пересчёте на алоэ-эмодин в соке в процентах (X) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
255 - удельный показатель поглощения продуктов реакции алоэ-эмодина с магния ацетатом при 512 нм, ;
a - объём сока, взятого на анализ мл.

Сухой остаток в соке. В соответствии с ОФС «Определение содержания сока в свежем лекарственном растительном сырье», (методика определения сухого остатка в соке).

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0109 Алоэ древовидного побеги свежие

Aloes arborescentis cormi recentes

Взамен ФС 42-987-87

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в течение года, свежие побеги с листьями 2–4 летнего культивируемого суккулентного растения алоэ древовидного – Aloe arborescens Mill., сем. асфоделовых – Asphodelaceae.

Содержат:

- не менее 0,02 % суммы антраценпроизводных в пересчёте на алоэ-эмодин в соке;

- не менее 2,0 % сухого остатка в соке.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Травы».

Цельное сырьё. Верхушки побегов с 3–12 листьями. Листья мечевидные или удлинённо-мечевидные, с верхней стороны вогнутые или слабожелобчатые, с нижней – выпуклые; сочные, длиной от 15 до 45 см, шириной у основания от 2 до 5,5 см, толщиной от 0,7 до 1,5 см, со стеблеобъемлющим плёнчатым влагалищем длиной около 3 см, с ясно выраженным жилкованием. По краю листьев имеются острые зубцы длиной до 5 мм, загнутые к верхушке листа. Листья покрыты тонким, легко стирающимся восковым налётом. Цвет листьев серо-зелёный с синеватым оттенком, зубцов – зеленовато-жёлтый или красноватый. Стебель толщиной до 1,2 см, длиной 3–15 см. Цвет стеблей от светло-зелёного до коричневого. Запах слабый, характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрении микропрепарата листа с поверхности должны быть видны клетки эпидермиса с верхней стороны листа со слабоизвилистыми, почти прямыми, стенками и более извилистыми – с нижней. Устьица расположены с обеих сторон листа, преимущественно на нижней, слегка погружённые, с 4-мя околоустьичными клетками эпидермы (тетрацитный тип).

На поперечном срезе листьев должно быть видно, что непосредственно под эпидермисом расположен узкий слой хлорофиллоносной паренхимы (хлоренхимы). Среди клеток хлоренхимы видны идиобласты, более или менее вытянутые по оси листа, содержащие рафиды кальция оксалата в виде пучков или отдельных тонких игольчатых кристаллов. Вся внутренняя часть листа состоит из крупных паренхимных клеток со слизистым бесцветным содержимым. На границе хлорофиллоносной и бесцветной паренхимы расположены коллатеральные проводящие пучки, к каждому из которых к периферии примыкает группа из нескольких клеток, отличающихся по структуре от клеток хлоренхимы, иногда с коричневым мелкозернистым содержимым (алоиновые клетки).

При рассмотрении микропрепарата на поперечном срезе стебля должно быть видно, что непосредственно под эпидермисом располагается слой клеток колленхимного характера, ближе к периферии находятся слои пластинчатой колленхимы, а глубже – уголковой. Под колленхимой лежит небольшой слой паренхимы первичной коры. Первичная кора содержит ряд вытянутых вдоль клеток с пучками рафид или кристаллов кальция оксалата. На границе колленхимы с паренхимой располагаются в один ряд коллатеральные закрытые проводящие пучки с флоэмой, обращённой к эпидермису. В паренхиме содержится большое количество рафид или кристаллов кальция оксалата и недостаточно сформировавшиеся алоиновые клетки.

Рисунок 1. Алоэ древовидного листья свежие: 1 – верхний эпидермис: а – идиобласт с рафидами кальция оксалата (300×); 2 – нижний эпидермис: а – идиобласт с рафидами кальция оксалата, б – рафиды кальция оксалата, в – сосудисто-волокнистый пучок (200×); 3 – верхний эпидермис: а – рафиды кальция оксалата в виде пучков (600×); 4 – поперечный срез листа: а – сосудисто-волокнистый пучок, б – эпидерма, в – слой хлоренхимы, г – паренхима центральной части мезофилла со слизистым бесцветным содержимым (74×); 5 – поперечный срез листа: а – сосудисто-волокнистый пучок, б – паренхима центральной части мезофилла со слизистым бесцветным содержимым, в – алоиновые клетки (300×).
Рисунок 2. Алоэ древовидного побеги свежие: 1 – поперечный срез побега алоэ древовидного: а – эпидерма, б – колленхима, в – паренхима первичной коры, г – закрытый проводящий пучок, д – крупноклеточная паренхима центрального цилиндра, е – кристаллы (400×); 2 – поперечный срез побега алоэ древовидного: а – эпидерма, г – закрытый проводящий пучок, д – крупноклеточная паренхима центрального цилиндра (200×).
Рисунок 3. Алоэ древовидного побеги свежие: 1 – поперечный срез побега алоэ древовидного: а – пучок рафид кальция оксалата в паренхиме побега (400×); 2 – поперечный срез побега алоэ древовидного: а – кристалл кальция оксалата в паренхиме побега (400×).

Определение основных групп биологически активных веществ

1. Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Вода—метанол—этилацетат 5:5:90.

- Испытуемый раствор. В круглодонную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мл исходного раствора (раздел «Количественное определение»), выпаривают на водяной бане досуха. Сухой остаток растворяют в 2 мл метанола и фильтруют через беззольный фильтр (при необходимости).

- Раствор стандартного образца алоэ-эмодина. В 10 мл метанола растворяют 0,001 г стандартного образца алоэ-эмодина.

- Срок годности раствора 24 часа при хранении в прохладном, защищённом от света месте.

- Реактив для детектирования. Натрия гидроксида спиртовой раствор 2 %.

- На линию старта пластинки наносят 10 мкл испытуемого раствора и 30 мкл раствора стандартного образца алоэ-эмодина в виде полос длиной 10 мм и шириной 2 мм. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в предварительно насыщенную в течение 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 30 мин и просматривают при дневном свете.

- Результат

- На хроматограмме раствора стандартного образца алоэ-эмодина должна обнаруживаться зона адсорбции от светло-жёлтого до оранжевого цвета.

- На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции от светло-жёлтого до оранжевого цвета на уровне зоны адсорбции стандартного образца алоэ-эмодина, допускается обнаружение других зон адсорбции.

- Затем пластинку обрабатывают реактивом для детектирования и просматривают при дневном свете.

- Результат

- На хроматограмме раствора стандартного образца алоэ-эмодина должна обнаруживаться зона адсорбции светло-красного или красного цвета.

- На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции светло-красного или красного цвета на уровне зоны адсорбции стандартного образца алоэ-эмодина; допускается обнаружение других зон адсорбции.

2. Качественная реакция. Помещают 2 мл сока (раздел «Количественное определение») в делительную воронку, прибавляют 5 мл хлороформа, перемешивают и оставляют до разделения слоёв. Органический слой сливают в пробирку, к нему прибавляют 5 мл аммиака раствора концентрированного 25 %; при взбалтывании аммиачно-водный слой должен окрашиваться в розовый, жёлтый или оранжевый цвет (антраценпроизводные).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не менее 92,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 17,0 % (ОФС «Зола общая»).

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Поломанных листьев. Не более 10 %.

Органическая примесь. Не допускается.

Минеральная примесь. Не более 1,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Сумма антраценпроизводных в соке. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Исходный раствор. Около 0,5 кг сырья измельчают до однородной массы, отжимают и процеживают до получения около 350 мл сока. Полученный сок фильтруют через беззольный фильтр и перемешивают.

В коническую колбу со шлифом вместимостью 250 мл помещают 10,0 мл сока, прибавляют 20 мл воды, 12 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, 1,2 г железа (III) хлорида и нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 1 ч. Раствор охлаждают, количественно переносят с помощью 20 мл воды в делительную воронку вместимостью 250 мл и экстрагируют хлороформом 3 раза по 20 мл.

Объединённые хлороформные извлечения помещают в делительную воронку, промывают водой 2 раза по 10 мл, фильтруют через беззольный фильтр, содержащий 2 г натрия сульфата безводного, в круглодонную колбу и выпаривают на роторном испарителе при температуре не выше 40 °С досуха. Сухой остаток растворяют в 15 мл метанола и количественно переносят, фильтруя через беззольный фильтр, в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл исходного раствора, прибавляют 5 мл магния ацетата раствора метанольного 0,5 %, перемешивают, доводят до метки тем же раствором.

Раствор сравнения. Магния ацетата раствор метанольный 0,5 %.

Оптическую плотность испытуемого раствора измеряют на спектрофотометре при длине волны 512 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Содержание суммы антраценпроизводных в пересчёте на алоэ-эмодин в соке в процентах (Х) вычисляют по формуле:

A - оптическая плотность испытуемого раствора;
255 - удельный показатель поглощения продуктов реакции алоэ-эмодина с магния ацетатом при 512 нм, ;
a - объём сока, взятого на анализ мл.

Сухой остаток в соке. В соответствии с ОФС «Определение содержания сока в свежем лекарственном растительном сырье», (методика определения сухого остатка в соке).

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0110 Алтея лекарственного трава

Althaeae officinalis herba

Взамен ВФС 42-1696-87

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в течение месяца от начала цветения, высушенная трава культивируемого многолетнего травянистого растения алтея лекарственного – Althaea officinalis L., сем. мальвовых – Malvaceae.

Содержит не менее 5,0 % суммы полисахаридов в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Травы».

Цельное сырьё. Неодревесневшие побеги с частично осыпавшимися, цельными или изломанными листьями, цветками, бутонами и плодами различной степени развития. Стебли округлые, опушённые, продольно-бороздчатые, длиной до 120 см, толщиной до 8 мм, серовато-зелёного цвета. Листья простые, очерёдные, черешковые, длиной до 15 см; нижние и средние яйцевидные, трёх-пятилопастные, верхние – продолговато-яйцевидные. Верхушка листа заострённая, основание – сердцевидное; край листовой пластинки неравномерно городчато-зубчатый. Жилкование пальчатое. Листовая пластинка с обеих сторон опушённая, серовато-зелёного цвета. Цветки расположены по несколько штук в пазухах верхних и средних листьев и на верхушке стебля, образуя кистевидное соцветие. Цветки правильные, пятичленные. Чашечка двойная, с подчашием из 8–12 линейных, сросшихся у основания листочков; чашелистики широкояйцевидной формы с заострённой верхушкой. Венчик состоит из пяти обратнояйцевидных, неглубоковыямчатых на верхушке лепестков длиной до 2 см. Цвет светло-красный, изредка белый или тёмно-красный. Тычинок, сросшихся нитями в трубочку, – много. Пестик один: сложный с верхней многогнёздной завязью. Плод: дисковидная дробная семянка, состоящая из 15–25 желтовато-серых плодиков, опушённых короткими волосками, диаметром до 7–10 мм. Семена тёмно-коричневые, гладкие, почковидные, длиной 2–2,5 мм. Запах слабый, характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрении микропрепаратов листа с поверхности должны быть видны слабоизвилистые клетки эпидермиса верхней стороны листа, имеющие иногда чётковидные утолщения, и извилистые клетки нижней стороны. Устьица, окружённые 2–4 околоустьичными клетками (аномоцитного или анизоцитного типа), встречаются с обеих сторон листа. Вдоль жилок клетки эпидермиса немного вытянуты, в местах прикрепления волосков образуют розетки. Многочисленные звёздчатые волоски состоят из 1–8 длинных жёстких остроконечных лучей. Основания лучей с пористыми утолщениями, часто одревесневшие. Встречаются железистые волоски на одно-двухклеточной ножке с многоклеточной головкой, состоящей из 2–12 выделительных клеток, расположенных в несколько ярусов по 2–4 клетки в каждом. В мезофилле листа и вдоль жилок многочисленные друзы оксалата кальция. Обнаруживаются пыльцевые зёрна сферической формы с шершавой шиповатой наружной поверхностью.

Рисунок 1. Алтея лекарственного трава: 1 – фрагмент эпидермиса нижней поверхности листа (200×); 2 – устьица (200×); 3 – звёздчатые волоски и друзы оксалата кальция (200×); 4 – железистый волосок (200×); 5 – поперечный срез листа с многочисленными звёздчатыми волосками (40×); 6 – основание лучей звёздчатого волоска (200×); 7 – пыльцевое зерно с шиповатой поверхностью (400×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Качественная реакция

Испытуемый раствор – см. раздел «Количественное определение».

К 5 мл испытуемого раствора прибавляют 5 мл свинца(II) ацетата раствора 10 %; должен выпадать осадок (слизь).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 18,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, не растворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 2,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Стеблей. Не более 60 %.

Плодов. Не более 10 %.

Органическая примесь. Не более 3 %.

Минеральная примесь. Не более 1,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят гравиметрическим методом.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм.

В коническую колбу со шлифом вместимостью 250 мл с обратным холодильником, помещают 10,0 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 80 мл воды и перемешивают на магнитной мешалке при температуре 100–105 °С в течение 1 ч. Извлечение повторяют еще 3 раза порциями по 80 мл и 3 раза порциями по 60 мл каждый раз в течение часа. Каждое водное извлечение центрифугируют со скоростью 4500 об/мин в течение 7 мин и декантируют в мерную колбу вместимостью 500 мл через 5 слоёв марли, вложенных в стеклянную воронку и предварительно промытых водой. Фильтр промывают и доводят объём раствора водой до метки.

В стакан вместимостью 200 мл помещают 50 мл испытуемого раствора, прибавляют 100 мл спирта 96 % и перемешивают, нагревают на водяной бане при температуре около 30 °С в течение 5 мин. Через 30 мин содержимое количественно фильтруют через доведённый до постоянной массы фильтр ПОР 16 диаметром 40 мм под вакуумом при остаточном давлении 13–16 кПа. Осадок промывают 10 мл смеси вода—спирт 96 % (1:2). Фильтр с осадком сушат на воздухе и доводят до постоянной массы в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С.

Содержание полисахаридов в сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

где а - навеска сырья, г;
m1 - масса пустого фильтра, г;
m2 - масса фильтра с навеской, г;
W - влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0111 Амми большой плоды

Ammi majoris fructus

Взамен ФС 42-1996-83

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в период массового созревания на центральных зонтиках, высушенные плоды культивируемого, однолетнего растения амми большой – Аmmi majus L., сем. сельдерейных (зонтичных) – Аpiaceae (Umbelliferae).

Содержит не менее 0,6 % суммы фурокумаринов в пересчёте на ксантотоксин в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Плоды».

Цельное сырьё. Плоды представляют собой вислоплодики, состоящие из двух полуплодиков (мерикарпиев), распадающихся при созревании, продолговато-яйцевидной формы, к основанию более широкие, к верхушке суженные. На верхушке имеются остатки пятизубчатой чашечки и вздутый надпестичный диск. Поверхность плода голая. Наружная сторона мерикарпия выпуклая, внутренняя – плоская с ясно выраженной ложбинкой. Каждый мерикарпий имеет 5 светлых слабо выступающих продольных рёбрышек. Межрёберные пространства выпуклые, похожи на рёбрышки. В мерикарпии одно семя, сросшееся с околоплодником. Длина мерикарпиев 1,5–3,0 мм, ширина 1–2 мм.

Цвет зрелых мерикарпиев красновато-коричневый, ребёр – более светлый; цвет недозрелых плодов зеленовато-коричневый. Запах характерный. Вкус водного извлечения горьковатый, слегка жгучий.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. На поперечном срезе мерикарпия видны перикарпий (околоплодник) и семя. Мерикарпий почковидной формы имеет 5 слабовыраженных рёбер; проводящий пучок фуниколюса чётко выражен. Эпидермис околоплодника (экзокарпий) состоит из одного слоя овальных клеток. В паренхиме мезокарпия в рёбрах видны пять проводящих пучков; в межрёберных пространствах мезокарпий выпуклый полукруглый в очертании, в нём располагаются 6 межрёберных эфирно-масличных канальцев: четыре на выпуклой стороне и два на вогнутой. Канальцы овальные, с 1–2 слоями выстилающих клеток тёмно-коричневого цвета. В полости канальцев иногда заметно зернистое содержимое желтовато-коричневого цвета. Встречаются отдельные мелкие эфирно-масличные канальцы около или внутри проводящих пучков. Эндокарпий и семенная кожура плотно срослись в виде слоя деформированных клеток желтовато-коричневого цвета. Эндосперм состоит из многоугольных клеток, заполненных алейроновыми зёрнами, каплями жирного масла и мелкими друзами оксалата кальция. Мелкие друзы оксалата кальция встречаются также в паренхиме мезокарпия и экзокарпия.

Рисунок 1. Амми большой плоды: 1 – поперечный срез мерикарпия (40×): а – эфирномасличные канальцы, б – проводящие пучки в рёбрышках; 2 – поперечный срез эндосперма (400×): а – многоугольные клетки эндосперма с алейроновыми зёрнами, б – мелкие друзы оксалата кальция, в – капли жирного масла; 3, 4 – поперечный срез мерикарпия (200×): а – эфирномасличный каналец, б – проводящий пучок в рёбрышке, в – сросшиеся эндокарпий и семенная кожура, г – эндосперм.

Определение основных групп биологически активных веществ

1. ВЭЖХ. Время удерживания пика основного вещества на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика ксантотоксина на хроматограмме раствора стандартного образца ксантотоксина (раздел «Количественное определение»).

2. Качественная реакция. К 2,0 мл испытуемого раствора, (раздел «Количественное определение. Сумма фурокумаринов»), прибавляют 1,0 мл калия гидроксида раствора 10 % в спирте 96 %, должно наблюдаться жёлтое окрашивание; затем прибавляют 3 капли диазореактива, должно наблюдаться тёмно-красное окрашивание (фурокумарины).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 10,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 8,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 1,5 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Органическая примесь. Не более 5 %.

Минеральная примесь. Не более 1 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Сумма фурокумаринов. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—уксусной кислоты
раствор 1 % 360:640.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до отсутствия целых плодов. В плоскодонную колбу вместимостью 200 мл помещают 1,0 г (точная навеска) измельчённых плодов, прибавляют 100 мл спирта 80 % и взвешивают с погрешностью ±0,01 г, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 120 мин. Содержимое колбы охлаждают до комнатной температуры и взвешивают, при необходимости доводят спиртом 80 % до первоначальной массы и фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 5 мл фильтрата.

В мерную колбу вместимостью 50 мл количественно переносят 10,0 мл фильтрата, объём раствора доводят спиртом 80 % до метки и перемешивают. Раствор фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.

Раствор стандартного образца ксантотоксина. В мерную колбу вместимостью 100 мл, помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца ксантотоксина, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 80 % до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Примечание

Ксантотоксин: 8-метоксипсорален, 9-метоксифуро[3,2-g][1]бензопиран-7-он [298-81-7].

Бергаптен: 5-метоксипсорален, 4-метоксифуро[3,2-g]бензопиран-7-он [484-20-8].

Изопимпинеллин: 4,9-Диметокси-7H-фуро[3,2-g][1]бензопиран-7-он, 4,9-диметоксифуро[3,2-g]хромен-7-он, 5,8-диметокси-6,7-фуранокумарин, 5,8-диметоксипсорален[482-27-9].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм;
Скорость потока | 1,0 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 301 нм;
Объём пробы | 20 мкл;
Время хроматографирования | 3-кратное от времени удерживания пика ксантотоксина

Хроматографируют раствор стандартного образца ксантотоксина и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Ксантотоксин – 1 (около 14,50 мин); бергаптен – около 1,01; изопимпинеллин – около 1,08.

Пригодность хроматографической системы

- фактор асимметрии ксантотоксина не менее 0,8 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение площади пика ксантотоксина, рассчитанное по 5 повторным хроматограммам, должно составлять не более 2 %.

Содержание суммы фурокумаринов в пересчёте на ксантотоксин в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S – сумма площадей пиков ксантотоксина, бергаптена и изопимпинеллина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика на хроматограмме раствора стандартного образца ксантотоксина; a – навеска сырья, г;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца ксантотоксина, г;
P – содержание ксантотоксина в фармакопейном стандартном образце ксантотоксина, %;
W – влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0112 Амми зубной плоды

Ammi visnagaе fructus

Взамен ФС 42-2098-83

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в период массового созревания и высушенные плоды культивируемого, двулетнего растения амми зубной – Аmmi visnaga L., сем. сельдерейных (зонтичных) – Аpiaceae (Umbelliferae).

Содержит не менее 0,8 % суммы фурокумаринов в пересчёте на келлин в сухом сырьё.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Плоды».

Цельное сырьё. Плод – вислоплодник яйцевидной формы, голый, гладкий, распадающийся на два полуплодика (мерикарпия), с брюшной стороны плоских, со спинной – выпуклых, с одного конца заострённых, с пятью продольными нитевидными рёбрами. Длина зрелого полуплодика около 2 мм, толщина – около 1 мм. Цвет зрелых плодов светло-коричневый или коричневый, рёбра более светлые, цвет недозрелых плодов зеленоватый.

Запах слабый, характерный.

Микроскопические признаки. Цельное сырьё. На поперечном срезе зрелый полуплодик имеет округло-пятиугольную форму с пятью рёбрами. На выпуклой стороне полуплодика видны 5 крупных секреторных каналов, расположенные в рёбрах под проводящими пучками, 4 ложбиночных мелких канала, на плоской стороне – 2 мелких канала. Рёберные каналы с крупной овальной полостью и 12–14 секреторными, частично спавшимися клетками. Ложбиночные каналы снаружи окружены веерообразно расположенными клетками. На границе с эндокарпием расположен ряд клеток тёмно-коричневого цвета с неравномерно утолщённой внутренней оболочкой и крупными порами, благодаря чему они имеют зубчатый вид. Клетки эндосперма с толстыми стенками заполнены алейроновыми зёрнами, каплями жирного масла и мельчайшими друзами оксалата кальция.

Незрелый плод на поперечном разрезе имеет почти пятиугольную форму. В рёберных и ложбиночных каналах хорошо видны секреторные клетки, окружающие полость. Наружная часть мезофилла занята хлоренхимой, внутренняя – крахмалоносной паренхимой.

Зрелые плоды амми зубной отличаются от амми большой плодов наличием рёберных секреторных каналов, отсутствием друз в экзокарпии, более мелкими ложбиночными каналами, тёмно-коричневой окраской семенной оболочки и наличием «зубчатых клеток» на границе с эндокарпием. У незрелых плодов два последних признака отсутствуют.

Рисунок 1. Амми зубной плоды: 1 – поперечный срез плода; 2 – фрагмент поперечного среза: а – эпидермис, б – паренхима, в – секреторный каналец, г – проводящий пучок, д – утолщённые клетки, е – внутренний эпидермис околоподника, ж – семенная кожура, з – эндосперм.

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254

Подвижная фаза (ПФ). Этилацетат—спирт 96 % 9:1.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм.

К 0,5 г сырья, измельчённого до отсутствия цельных плодов, прибавляют 10,0 мл спирта 60 %, экстрагируют с использованием механического шейкера в течение 30 мин. Полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр, затем упаривают на водяной бане досуха. Сухой остаток растворяют в 5,0 мл спирта 60 %.

Раствор стандартного образца келлина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,05 мг стандартного образца келлина, растворяют в спирте 60 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

На линию старта хроматографической пластинки со слоем силикагеля с флуоресцентным индикатором наносят 20 мкл испытуемого раствора и 10 мкл раствора стандартного образца келлина. Пластинку с нанесёнными пробами помещают в хроматографическую камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 1 ч смесью растворителей и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт 80–90 % длины пластинки от линии старта, пластинку вынимают, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Результат. На хроматограмме раствора стандартного образца келлина должна обнаруживаться зона адсорбции фиолетового цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться зоны адсорбции выше и ниже зоны адсорбции стандартного образца келлина фиолетового цвета (фурокумарины).

Затем хроматограмму просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

На хроматограмме раствора стандартного образца келлина должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией серовато-оранжевого цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться: зона адсорбции с флуоресценцией серовато-оранжевого цвета на уровне зоны адсорбции стандартного образца келлина, зоны адсорбции с флуоресценцией яркого светло-голубого и голубого цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции

2. Качественная реакция

Помещают 0,5 г сырья, измельчённого до отсутствия цельных плодов в пробирку, прибавляют 4,0 мл метанола, энергично встряхивают в течение 1 мин и фильтруют. Затем к фильтрату прибавляют 0,2 мл серной кислоты концентрированной; должно наблюдаться жёлтое окрашивание (в случае наличия плодов амми зубной может наблюдаться только мутное
зеленовато-коричневое окрашивание).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 12,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 10,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 6,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Органическая примесь. Не более 2,0 %.

Минеральная примесь. Не более 1,5 %.

Частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,2 мм – не более 1,0 %

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,2 мм. Помещают 0,25 г сырья (точная навеска) в колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 50 мл воды и кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин. К кипящей смеси прибавляют 2,0 мл свинца(II) ацетата раствора 10 % и продолжают кипятить еще 3 мин. Горячую смесь фильтруют на воронке Бюхнера под ваккумом. Колбу и сырьё на фильтре промывают трижды по 30 мл кипящей воды. Фильтрат количественно переносят в стакан вместимостью 250 мл, прибавляют 1 г натрия дигидрофосфата безводного и кипятят еще 3 мин. Горячее извлечение фильтруют непосредственно в делительную воронку. Стакан и фильтр промывают трижды по 30 мл кипящей воды и охлаждают до комнатной температуры. Водное извлечение встряхивают с хлороформом 4 раза по 25 мл. Объединённые хлороформные извлечения промывают 5 мл воды, отделяя воду, фильтруют в колбу вместимостью 200 мл через беззольный фильтр, содержащий 2 г натрия сульфата безводного, предварительно смоченного хлороформом. Фильтр промывают трижды по 10 мл хлороформа, собирая фильтрат в ту же колбу. Хлороформ отгоняют на водяной бане досуха. К сухому остатку прибавляют 80 мл серной кислоты раствора 5 М, растворяют его при осторожном нагревании, затем раствор охлаждают. Раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, объём раствора доводят водой до метки, перемешивают и оставляют на 5–10 мин. Небольшую часть раствора фильтруют через стеклянный фильтр ПОР 40.

Раствор стандартного образца келлина. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 22 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца келлина, растворяют в серной кислоты растворе 5 М, объём раствора доводят тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 20,0 мл полученного раствора, прибавляют 30 мл серной кислоты раствора 5 М. Растворы используют свежеприготовленными.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 465 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения. В качестве раствора сравнения применяют воду. Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца келлина в тех же условиях.

Содержание суммы фурокумаринов в пересчёте на келлин в абсолютно сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где А – оптическая плотность испытуемого раствора;
А0 – оптическая плотность раствора фармакопейного стандартного образца келлина;
a – навеска сырья, г;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца ксантотоксина, г;
W – влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0113 Бархата листья

Phellodendroni folia

Взамен ВФС 42-1972-90

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в июле – августе высушенные листья дикорастущего и культивируемого дерева бархата амурского – Phellodendron amurense Rupr. и его разновидности бархата амурского Лаваля – Phellodendron amurense var. lavallei (Dode) Sprague, сем. рутовых – Rutaceae.

Содержит не менее 1,5 % глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Листья».

Цельное сырьё. Сложные непарноперистые листья с 7–13 частично осыпавшимися листочками, отдельные черешки, листочки. Встречаются кусочки веточек, соцветия и плоды. Листочки черешчатые, ланцетные, продолговато-ланцетные, яйцевидно-эллиптические, с длиннозаострённой верхушкой, в основании клиновидные, цельнокрайние или мелкогородчатые, голые или опушённые. Черешки в сечении округлые, гладкие. Длина сложных листьев 15–25 см, отдельных листочков 8–10 см. Соцветие – раскидистая метельчатая кисть, плоды – шаровидные костянки диаметром около 1 см, с 5 косточками.

Цвет листочков зелёный, светло-зелёный; черешков – зеленовато-коричневый, коричневый, часто с фиолетовым оттенком; кусочков веточек – тёмно-коричневый, красновато-коричневый, серовато-коричневый, со светлыми точками (чечевички); соцветий – коричневый; плодов незрелых – зелёный, зрелых – чёрный. Запах характерный, сильный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрении микропрепаратов листочка с поверхности должны быть видны многоугольные клетки верхнего эпидермиса с прямыми стенками и складчатой кутикулой, стенки клеток местами имеют чётковидные утолщения, устьица отсутствуют. Клетки нижнего эпидермиса со слабоизвилистыми стенками, складчатой кутикулой и многочисленными устьицами. Устьица крупные, овальные, окружены 4–6 (8) околоустьичными клетками (аномоцитный тип). Около устьиц нередко видна лучистая складчатость кутикулы. Волоски простые одно- и многоклеточные, остроконечные, с бородавчатой поверхностью, прямые и изогнутые, иногда смятые, расположены чаще по краю и по жилкам с нижней стороны листочка. Вокруг места прикрепления волосков клетки эпидермиса образуют розетку, при их опадании заметны характерные валики. Встречаются железистые волоски на 1–3-клеточной ножке с овальной многоклеточной головкой, заполненной красновато-коричневым содержимым. Вдоль крупных жилок видны красновато-коричневые включения, друзы и призматические кристаллы кальция оксалата.

Эпидермис черешка представлен многоугольными и слегка вытянутыми клетками с прямыми чётковидноутолщёнными стенками, аномоцитным типом устьиц, простыми и железистыми волосками, аналогичными по строению волоскам листа. На эпидермисе черешка хорошо видны продольно складчатая кутикула и места прикрепления опавших волосков в виде валиков. В клетках паренхимы черешка содержатся друзы и призматические кристаллы кальция оксалата, образующие характерные цепочки.

Рисунок. Бархата листья: 1 – верхний эпидермис листочка (400×); 2 – нижний эпидермис листочка (400×); 3 – лучистая складчатость кутикулы вокруг устьица (400×); 4 – нижняя сторона листочка: а – простые волоски с бородавчатой поверхностью, б – место прикрепления простых волосков; (400×), 5 – включения вдоль жилок (400×); 6 – эпидермис черешка (400×); 7 – железистый волосок (400×); 8 – друзы (400×).

Определение основных групп биологически активных веществ

ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола на хроматограмме раствора фармакопейного стандартного образца глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола (раздел «Количественное определение»).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 12,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 11,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 1,5 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Другие части растения (кусочки веточек, соцветий, плодов). Не более 12 %.

Органическая примесь. Не более 1,5 %.

Минеральная примесь. Не более 1,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Муравьиная кислота безводная—вода 2:1000;

Подвижная фаза Б (ПФБ). Муравьиная кислота безводная—ацетонитрил 2:1000;

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. В коническую колбу вместимостью 250 мл помещают 1,0 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 100 мл спирта 40 %. Колбу закрывают пробкой и взвешивают с точностью до ±0,01 г. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 60 мин с момента закипания растворителя. Далее колбу охлаждают и доводят растворителем до первоначальной массы. Извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

Раствор стандартного образца глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,0360 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола, прибавляют 50 мл спирта 40 %, перемешивают до полного растворения и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
Скорость потока | 1,0 мл/мин; |
Температура колонки | 30 °С; |
Детектор | диодная матрица или спектрофотометрический; |
Длина волны | 290 нм; |
Объём пробы | 10 мкл; |
Время хроматографирования | 24 мин. |

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА, % | ПФБ, %
--- | --- | ---
0–14 | 75 | 25
14–14,5 | 75 → 0 | 25 →100
14,5–16,5 | 0 | 100
16,5–20 | 0 → 75 | 100 → 25
20–24 | 75 | 25

Хроматографируют попеременно раствор стандартного образца глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола:

- относительное стандартное отклонение площади пика глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола должно быть не более 2,0 % (5 введений);

- относительное стандартное отклонение времени удерживания пика глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола должно быть не более 2,0 %;

- фактор асимметрии пика глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола должен быть не более 1,5.

Содержание глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S - площадь пика глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола на хроматограмме испытуемого раствора;
а - навеска сырья, г
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола, г;
S0 - площадь пика глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола на хроматограмме раствора стандартного образца глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола;
P - содержание глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола в фармакопейном стандартном образце глюкопиранозидметилбутенилтригидроксифлаванола, %;
W - влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0114 Диоскореи ниппонской корневища с корнями

Dioscoreae nipponicae rhizomata cum radicibus

Взамен ФС 42-1521-80

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в течение всего вегетационного периода (начиная с конца апреля и до конца ноября), тщательно очищенные от земли, освобождённые от остатков стеблей, разрезанные на куски и высушенные корневища с корнями многолетнего дикорастущего или культивируемого травянистого растения диоскореи ниппонской – Dioscorea nipponica Makino, сем. диоскорейных – Dioscoreaceae.

Содержит не менее 1,0 % диосгенина в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы».

Цельное сырьё. Куски корневищ длиной до 30 см и толщиной до 2 см, простые, цилиндрические, внутри сплошные, слегка изогнутые или перекрученные. Поверхность слабо продольно-морщинистая, с чётко видными остатками отмерших стеблей, покрыта тонким слоем пробки, которая обычно легко отслаивается. От корневищ отходят немногочисленные упругие тонкие корни длиной до 40 см и толщиной около 1 мм. Излом корневищ ровный, белого или светло-жёлтого цвета. Корневища и корни светло-коричневые или желтовато-коричневые, после отслаивания пробки желтовато-коричневые. Запах слабый, характерный.

Измельчённое сырьё. Смесь кусочков корневищ и корней различной формы, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм. Цвет от белого до светло-жёлтого или светло-коричневого. Запах слабый, характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрении микропрепаратов поперечного среза корневища должна быть видна пробка, под ней – узкая полоска коры, состоящая из мелких, тангентально-вытянутых клеток с неодревесневшими оболочками. В крупных клетках коры находятся рафиды кальция оксалата, ориентированные вдоль корневища, одиночные кристаллы кальция оксалата. Эндодерма выражена неясно. Запасающая ткань представлена многоугольными, плотно прилегающими друг к другу клетками паренхимы, состоящими из многогранных или округлых клеток с утолщёнными и ямчатыми стенками и содержащими в большом количестве зёрна крахмала различной формы (простой, неправильной, яйцевидной, продолговатой, неправильной треугольной) и небольшие капли жирного масла. Оболочки клеток одревесневшие с многочисленными окаймлёнными крупными порами. В центральном цилиндре расположены закрытые коллатеральные пучки, по периферии мелкие, слегка радиально вытянутые, ближе к центру крупные, почти округлые в очертании. Стенки сосудов плотные, содержат многочисленные окаймлённые поры. В ксилеме паренхима почти полностью отсутствует.

Измельчённое сырьё. При рассмотрении «давленых» препаратов должны быть видны: фрагменты пробки, представленные многогранными клетками; фрагменты паренхимы, состоящие из многогранных или округлых клеток с утолщёнными и ямчатыми стенками; клетки, содержащие рафиды кальция оксалата и одиночные кристаллы кальция оксалата; сосуды с многочисленными мелкими, плотными и овальными порами; клетки паренхимы, содержащие в большом количестве зёрна крахмала различной формы (простой, неправильной, яйцевидной, продолговатой, неправильной треугольной), имеющие эксцентрические центры наслоения и трещинки.

Рисунок 1. Диоскореи ниппонской корневища с корнями: 1 – поперечный срез корневищ с корнями (63×): а – пробка, б – кора, в – рафиды кальция оксалата, г – запасающая паренхима; 2 – проводящая система (100×): а – ксилема, б – флоэма; 3 – сосуды с многочисленными окаймлёнными порами (400×); 4 – рафиды оксалата кальция (400×); 5 – зёрна крахмала различной формы (400×).

Определение основных групп биологически активных веществ

1. Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ВЭТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Вода—метанол—метиленхлорид 10:50:64.

- Испытуемый раствор. В коническую колбу с пробкой вместимостью 50 мл помещают 0,5 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, прибавляют 5 мл метанола и выдерживают на ультразвуковой бане в течение 10 мин, центрифугируют и используют надосадочную жидкость.

- Стандартный раствор. Растворяют в 1 мл метанола 1 мг эсцина и 1 мг глюкозы.

- Реактив для детектирования. Анисового альдегида раствор уксуснокислый в этаноле.

- На линию старта пластинки полосами длиной 8 мм и шириной не более 2 мм наносят по 8 мкл испытуемого раствора и стандартного раствора. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру, предварительно насыщенную ПФ в течение 1 ч, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80‑90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Затем пластинку опрыскивают реактивом для детектирования, сушат в сушильном шкафу при 100‑105 °С в течение 3 мин и просматривают при дневном свете.

- Результат. На хроматограмме стандартного раствора должны обнаруживаться в средней трети зона адсорбции жёлтого или коричневого цвета (глюкоза) и над ней зона адсорбции фиолетового цвета (эсцин).

- На хроматограмме испытуемого раствора должно обнаруживаться: в нижней трети зона адсорбции жёлтого цвета; в средней трети зона адсорбции светло-коричневого цвета ниже зоны адсорбции глюкозы, на уровне зоны адсорбции глюкозы зона адсорбции жёлто-коричневого цвета, между зонами адсорбции глюкозы и эсцина 2 зоны адсорбции зелёного цвета; в верхней трети 3 зоны адсорбции желтовато-зелёного или зелёного цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика диосгенина на хроматограмме раствора стандартного образца диосгенина (раздел «Количественное определение»).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 12,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 5,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 1,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, − не более 5 %.

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, − не более 5 %, частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, − не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Отшелушившейся пробки и обломков мелких корней. Цельное сырьё: не более 1,5 %.

Органическая примесь. Не более 1,5 %.

Минеральная примесь. Не более 0,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Вода—ацетонитрил 150:850.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм. В круглодонную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 40 мл смеси серная кислота—вода 15:85, нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 3 ч, затем охлаждают и фильтруют. Сырьё на фильтре промывают водой до нейтральной реакции среды. Фильтр с сырьём переносят в колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 80 мл метанола, обрабатывают на ультразвуковой бане в течение 30 мин и фильтруют в мерную колбу вместимостью 100 мл. Фильтр промывают 20 мл метанола, собирая фильтрат в ту же мерную колбу, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца диосгенина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,005 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца диосгенина, растворяют в 20 мл метанола, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мг фармакопейного стандартного образца
(25R)-спирост-5-ен-3-он [20817-62-3], растворяют в растворе стандартного образца диосгенина, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колон ка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный эндкепированный для хроматографии, 5 мкм;
Скорость потока | 1,5 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 205 нм;
Объём пробы | 5 мкл.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца диосгенина и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Диосгенин – 1 (около 8 мин); (25R)-спирост-5-ен-3-он – около 1,25.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками диосгенина и
(25R)-спирост-5-ен-3-она должно быть не менее 1,9.

Содержание диосгенина в сухом сырье в процентах (\($X$\)) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь пика диосгенина на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика диосгенина на хроматограмме раствора стандартного образца диосгенина;
a1 - навеска сырья, г;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца диосгенина, г;
P – содержание диосгенина в фармакопейном стандартном образце диосгенина, %;
W – влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0012 Душицы обыкновенной трава

Origani vulgaris herba

Взамен ФС.2.5.0012.15

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Cобранная во время цветения, высушенная трава многолетнего культивируемого и дикорастущего травянистого растения душицы обыкновенной – Origanum vulgare L., сем. яснотковых – Lamiaceae. Содержит:

- цельное сырьё:не менее 0,1 % эфирного масла в пересчёте на сухое сырьё;

- измельчённое сырьё:не менее 0,08 % эфирного масла в пересчёте на сухое сырьё;

- не менее 0,8 % суммы флавоноидов в пересчёте на лютеолин в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Травы».

Цельное сырьё. Цельные или частично измельчённые цветоносные, олиственные стебли длиной до 20 см. Листья супротивные, черешковые, продолговато-яйцевидные, к верхушке заострённые, мелкозубчатые или почти цельнокрайние длиной 2–4 см, с белёсыми волосками, расположенными, в основном, по жилкам, и коричневатыми блестящими точками (погружённые желёзки), главным образом, с нижней стороны. Стебли четырёхгранные, опушённые или почти голые, вверху разветвлённые. Соцветия щитковидно-метельчатые на концах ветвей, раскидистые, многоцветковые, состоят из компактных или удлинённо-колосовидных полумутовок, на цветоносах видны блестящие мелкие округлые желёзки. Прицветники длиннее чашечки, продолговатые или яйцевидные, острые, без желёзок. Чашечка с треугольно-ланцетовидными зубцами, снаружи с редкими волосками, блестящими округлыми желёзками и торчащими из зева белёсыми волосками, которые растут с внутренней стороны чашечки по линии вдоль оснований зубцов. Цветки длиной 3–5 мм, венчик двугубый, слегка опушённый. Семена мелкие, длиной около 1 мм, округлые с заостренным кончиком.

Цвет листьев сверху – зелёный, иногда с фиолетовым оттенком, снизу − светло-зелёный; стеблей − зелёный, коричневато-зелёный, редко − светло-коричневый, как правило, с фиолетовым оттенком; цвет прицветников − зеленовато-фиолетовый, чашечки − зеленовато-фиолетовый или фиолетовый; венчика − коричневато-розовый, реже коричневый; семян − коричневый или светло-коричневый. Запах характерный.

Измельчённое сырьё. Кусочки стеблей, часто продольно-расщеплённых, листьев, а также отдельные цветки и семена, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

При рассмотрении измельчённого сырья под лупой (10× и др.) видны кусочки стеблей зелёных, коричневато-зелёных или светло-коричневых, часто с фиолетовым оттенком, нередко продольно-расщеплённых с беловатой губчатой сердцевиной; кусочки зелёных листьев с блестящими коричневатыми точками (погружённые желёзки) и белёсыми волосками; цельные зеленовато-фиолетовые или фиолетовые чашечки или их кусочки с желёзками и редкими волосками снаружи и длинными белёсыми волосками на уровне зубцов с внутренней стороны; кусочки коричневого или коричневато-розового венчика с белёсыми волосками; мелкие округлые коричневые или светло-коричневые семена.

Цвет измельчённого сырья зелёный, серовато-зелёный с белыми, коричневыми, фиолетовыми, коричневато-фиолетовыми, беловато-зелёными и розовыми вкраплениями. Запах характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё, измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепаратов с поверхности должны быть видны клетки эпидермиса верхней стороны листа со слабоизвилистыми стенками, нижней стороны листа − с более извилистыми стенками; стенки клеток нередко четковидно-утолщённые. Устьица на обеих сторонах листа окружены 2клетками эпидермиса, смежные стенки которых расположены перпендикулярно устьичной щели (диацитный тип). Волоски 2 типов (простые и головчатые) расположены по всей пластинке листа, в большем количестве – на нижней его стороне. Простые волоски, главным образом, многоклеточные, с бородавчатой поверхностью и утолщёнными стенками (у крупных волосков часто одна или более клеток спавшиеся); головчатые волоски на одноклеточной ножке с овальной одноклеточной головкой. Округлые эфирномасличные желёзки, у которых можно иногда видеть 8 радиально расположенных выделительных клеток, преобладают на нижней стороне листа и находятся в углублении ниже уровня эпидермиса (погружённые), у места прикрепления желёзки эпидермальные клетки образуют розетку, как правило, из 10–16 клеток. Клетки эпидермиса стебля почти многоугольные, вытянутые, волоски и устьица характерного строения, желёзки мелкие, редко встречаются ветвистые многоклеточные волоски. Эпидермис наружной поверхности чашечки с редкими устьицами, многочисленными простыми 2–3-клеточными волосками и крупными желёзками; с внутренней стороны чашечки клетки эпидермиса сильноизвилистые с хорошо заметной складчатостью кутикулы, по всей поверхности – мелкие головчатые волоски, по линии вдоль оснований зубцов расположены длинные многоклеточные волоски с бородавчатой кутикулой; в нижней части чашечки видны сосудистые пучки, окружённые пористыми толстостенными одревесневшими склеренхимными волокнами. Клетки эпидермиса венчика с наружной стороны извилистые, на лопастях видны многоклеточные волоски и редкие непогружённые желёзки; с внутренней стороны лопасти покрыты сосочковидными выростами, среди которых иногда встречаются пальцевидные волоски со штриховатой кутикулой, в средней трети венчика эти волоски многочисленные. В покровной ткани пыльников видны клетки с лучистым утолщением стенок; пыльцевые зёрна – сферические, со слегка бородавчатой экзиной и 6 порами.

Рисунок 1. Душицы обыкновенной трава: 1 – фрагмент чашечки с наружной стороны: а – многоклеточные волоски, просвечивающиеся с внутренней стороны зева, б – многоклеточный волосок с наружной стороны, в – желёзка, г – склеренхимные одревесневшие волокна (40×); 2 – фрагмент эпидермиса верхней стороны листа: а – желёзка, б – головчатый волосок, в – устьица диацитного типа (200×); 3 – фрагмент эпидермиса нижней стороны листа: а – многоклеточный волосок, б – головчатый волосок, в – желёзка, г – устьица диацитного типа (200×); 4 – фрагмент эпидермиса прицветного листа: а – многоклеточный волосок, б– головчатый волосок (200×); 5 – фрагмент чашечки с наружной стороны: а – многоклеточный волосок, б – непогружённая желёзка (200×); 6 – фрагмент эпидермиса листа: а – устьица диацитного типа, б – желёзка с розеткой клеток вокруг, в – простой волосок фрагмента эпидермиса прицветного листа (200×); 7 – фрагмент пыльника: а – сферическая пыльца с шестью порами, б – клетки с лучистым утолщением стенок (200×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Вода–муравьиная кислота безводная–этилацетат–толуол 2:5:20:10.

Испытуемый раствор. В колбу со шлифом вместимостью 100 мл помещают 1,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, прибавляют 10 мл спирта 96 %, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 10 мин. После охлаждения полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

Раствор рутина. Растворяют 0,001 г рутина в10 мл спирта 96 %.

Реактив для детектирования 1. Дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствор 1 % в спирте 96 %.

Реактив для детектирования 2. Макрогола 400 раствор спиртовой 5 %.

На линию старта пластинки в виде полос длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят по 20 мкл испытуемого раствора и раствора рутина. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение 30 мин ПФ, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Пластинку нагревают при температуре 100–105 °С в течение 2–3 мин, еще тёплую обрабатывают последовательно реактивом для детектирования 1, затем реактивом для детектирования 2 и через 30 мин просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

Результат

На хроматограмме раствора рутина должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией жёлто-оранжевого или оранжевого цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией жёлто-оранжевого цвета выше зоны адсорбции рутина (флавоноиды); над ней зона адсорбции синего или фиолетово-синего цвета, еще выше зона адсорбции ярко-голубого или голубого цвета со слабым светло-зелёным оттенком, над ней зона голубовато-синего цвета (фенолкарбоновые кислоты); допускается обнаружение других зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 10,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 5,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, – не более 5 %.

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, – не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, – не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Сырьё, изменившее окраску (потемневшее и почерневшее). Не более 7 %.

Кусочки стеблей и боковых веточек, в том числе отделённые при анализе. Не более 40 %.

Органическая примесь. Не более 1 %.

Минеральная примесь. Не более 1 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Эфирное масло. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания эфирного масла в лекарственном растительном сырье и лекарственных средствах растительного происхождения» (метод 2, из 25,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, время перегонки 2 ч).

Сумма флавоноидов. Определение проводят в соответствии с ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях».

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. В коническую колбу со шлифом вместимостью 250 мл помещают 0,80 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 50,0 мл спирта 60 % и взвешивают с погрешностью ± 0,01 г. Колбу с содержимым присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 1,5 ч. Содержимое колбы охлаждают до комнатной температуры, взвешивают и при необходимости доводят спиртом 60 % до первоначальной массы. Извлечения фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 25 мл фильтрата.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора, прибавляют 3 мл алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 96 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Исходный раствор стандартного образца лютеолина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,01 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца лютеолина, прибавляют 25 мл спирта 96 % и нагревают на водяной бане. Затем раствор охлаждают, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца лютеолина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора стандартного образца лютеолина, прибавляют 3 мл алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 96 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор сравнения стандартного образца лютеолина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора стандартного образца лютеолина, прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты ледяной, доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора, прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты ледяной, доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора через 40 мин на спектрофотометре при длине волны 400 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца лютеолина в аналогичных условиях относительно раствора сравнения стандартного образца лютеолина.

Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на лютеолин в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A – оптическая плотность испытуемого раствора;
Aо – оптическая плотность раствора стандартного образца лютеолина;
a – навеска сырья, г;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца лютеолина, г;
P – содержание основного вещества в фармакопейном стандартном образце лютеолина, %;
W – влажность сырья, %.

Допускается содержание суммы флавоноидов в пересчёте на лютеолин вычислять с использованием удельного показателя поглощения комплекса лютеолина с алюминия хлоридом по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
а - навеска сырья, г;
549 - удельный показатель поглощения комплекса лютеолина с алюминия хлоридом при длине волны 400 нм ( );
W - влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0115 Каланхоэ побеги свежие

Kalanchoes cormi recentеs

Взамен ФС 42-1782-82

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в начале августа или конце октября свежая надземная часть многолетнего дикорастущего или культивируемого суккулентного вечнозелёного травянистого растения каланхоэ Дегремона – Kalanchoe daigremontiana Hamet et Perr., каланхоэ перистого – Kalanchoe pinnata (Lam.) Pers., семейство толстянковые – Crassulaceae.

Содержат не менее 1,2 % суммы органических кислот в пересчёте на яблочную кислоту в соке.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Травы».

Цельное сырьё. Свежесобранная облиственная надземная часть: побеги или их фрагменты, фрагменты листьев и их частей. Стебли сочные, неопушённые, в нижней части цилиндрические, в верхней – четырёхгранные, длиной до 50 см тёмно-зелёного цвета. Нередко на стеблях в узлах имеются придаточные корни. Листья супротивные, длинночерешковые, мясистые, сочные, с верхней стороны тёмно-зелёные, с нижней – светло-зелёные, нередко наблюдаются прожилки красновато-фиолетового цвета. Нижние листья эллиптические или яйцевидные до 20 см длиной и до 16 см шириной, городчатозубчатые; верхние иногда перистые или непарноперистые с 3–5 яйцевидными эллиптическими или удлинённо-эллиптическими городчатозубчатыми листочками. Верхушка листьев закруглённая, основание клиновидное, иногда неравнобокое. Пластинка листа голая, жилкование перистое. По краю листа могут находиться выводковые почки, из которых могут развиваться молодые растения.

Цвет стеблей светло-зелёный или серовато-зелёный; листьев – с верхней стороны зелёный, с нижней – сизо-зелёный. В нижней части стеблей, черешков и оснований жилок листьев наблюдается красновато-фиолетовый оттенок. Запах слабый характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрении микропрепарата листа с поверхности должны быть видны крупные клетки эпидермиса со слабоизвилистыми, почти прямыми стенками и мелкие устьица анизоцитного типа. Под верхним эпидермисом видны крупные многоугольные клетки субэпидермального слоя, образующие под устьицами крупные межклетники.

На микропрепаратах нижней стороны листа должны быть видны крупные клетки эпидермиса со слабоизвилистыми стенками и более многочисленные, но также мелкие устьица.

Рисунок 1. Каланхоэ побеги свежие: 1 – верхний эпидермис листа Каланхоэ перистого (200×); 2 – верхний эпидермис листа Каланхоэ Дегремона (200×); 3 – нижний эпидермис листа Каланхоэ перистого (200×); 4 – нижний эпидермис листа Каланхоэ Дегремона (200×).

Определение основных групп биологически активных веществ

1. Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Вода—уксусная кислота ледяная—этилацетат 10:10:20.

- Испытуемый раствор. В колбу вместимостью 50 мл помещают 1 г измельчённого до однородной массы сырья, прибавляют 10 мл спирта 96 % и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 30 мин. После охлаждения содержимое колбы фильтруют через беззольный фильтр.

- Стандартный раствор. Растворяют 10 мг рутина и 10 мг галловой кислоты в 10 мл спирта 96 %.

- Реактив для детектирования 1. Дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствор 1 % в спирте 96 %.

- Реактив для детектирования 2. Макрогола 400 раствор спиртовой 5 %.

- На линию старта пластинки в виде полос длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят 20 мкл испытуемого раствора и 10 мкл стандартного раствора. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную в течение не менее 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры и сушат до удаления следов растворителей. Затем пластинку последовательно опрыскивают реактивом для детектирования 1 и реактивом для детектирования 2, выдерживают при температуре 100–105 °С в течение 3–5 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

- Результат. На хроматограмме стандартного раствора должны обнаруживаться зоны адсорбции: рутина с флуоресценцией жёлтого или коричневато-жёлтого цвета, а над ней зона адсорбции галловой кислоты с флуоресценцией голубого или светло-синего цвета.

- На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться: зона адсорбции с флуоресценцией жёлтого или коричневато-жёлтого цвета на уровне зоны адсорбции рутина; зона адсорбции с флуоресценцией голубого цвета на уровне зоны адсорбции галловой кислоты; между зонами адсорбции рутина и галловой кислоты – зона адсорбции оранжевого цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции.

2. Качественная реакция 1

- Испытуемый раствор. В колбу вместимостью 50 мл помещают 1 г измельчённого до однородной массы сырья, прибавляют 10 мл спирта 70 % и кипятят в течение 5 мин, охлаждают и фильтруют.

- К 5 мл фильтрата прибавляют несколько капель хлористоводородной кислоты концентрированной и 0,02 г магния или цинка порошка, должно появиться красное окрашивание (флавоноиды).

3. Качественная реакция 2. К 5 мл фильтрата (см. «Качественная реакция 1») прибавляют 20 мл спирта 96 %, образуется хлопьевидный осадок (полисахариды).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 75,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Листья. Не более 70 %.

Минеральная примесь. Не более 0,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Исходный раствор. Около 50 г сырья измельчают до однородной массы, которую отжимают и процеживают до получения около 35 мл сока, фильтруют через беззольный фильтр и перемешивают, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.

Испытуемый раствор. В колбу помещают 2 мл исходного раствора и прибавляют 50 мл воды. Полученный раствор пропускают через колонку с 20 г катионообменной смолы сильной (протонированная форма) со скоростью 1,5–2 мл/мин, колонку промывают 150 мл воды с этой же скоростью. Элюат и промывные воды собирают в коническую колбу вместимостью 250 мл.

Полученный испытуемый раствор титруют натрия гидроксида раствором 0,1 М до синего окрашивания (индикатор – 1 мл бромтимолового синего раствора 0,04 % спиртового).

Параллельно проводят контрольный опыт.

Содержание суммы свободных органических кислот в пересчёте на яблочную кислоту в соке в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где V1 – объём 0,1 М раствора натрия гидроксида, израсходованный на титрование в основном опыте, мл;
V0 – объём 0,1 М раствора натрия гидроксида, израсходованный на титрование в контрольном опыте, мл;
ρ – плотность испытуемого раствора, г/мл;
K – поправочный коэффициент к титру 0,1 М раствора натрия гидроксида;
0,0067 - количество яблочной кислоты, соответствующее 1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида, г.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0116 Клевера трава

Trifolii herba

Вводится впервые

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в фазу цветения и высушенная трава многолетнего травянистого растения дикорастущего клевера лугового (клевера красного) – Trifolium prаtense L. и культивируемого клевера посевного (клевера красного) – Trifolium sativum (Schreb.) Crome, сем. бобовых – Fabaceae.

Содержит:

- не менее 1,0 % суммы флавоноидов в пересчёте на рутин в сухом сырье;

- не менее 20,0 % экстрактивных веществ, извлекаемых спиртом 40 %, в пересчёте на сухое сырьё.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Травы».

Цельное сырьё. Облиственные, цветоносные верхние части растений. Стебли длиной до 30 см. Листья тройчатые, жёсткие. Листочки 2–3 см длиной и 1–1,5 см шириной, обратнояйцевидные, на конце заострённые, по краям мелко или неровно зубчатые с густой сетью боковых утолщённых к краям жилок. Черешки 4–8 см длиной, на большей части своей длины, срастающиеся с прилистниками. Прилистники эллиптические или округлые, в верхней части имеющие свободные шиловидные выросты. Соцветия (головки) округлой формы, состоящие из многочисленных сидячих цветков. Цветки 1,3–1,6 см длиной. Каждый цветок состоит из мотылькового венчика и более короткой волосистой чашечки. Чашечка трубчато-колокольчатая, с пятью узкими прямыми зубцами, из которых нижний более длинный.

Цвет стеблей и листьев серовато-зелёный; прилистники белые с желтоватым оттенком, с сетью зелёных жилок; чашечка светло-зелёная, зеленовато-коричневая, чаще красноватая; венчик от светло-красного до тёмно-красного, иногда розовато-фиолетового цвета. Запах слабый, характерный.

Измельчённое сырьё. Смесь кусочков стеблей, листьев и цветков различной формы, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

Цвет листьев и стеблей серовато-зелёный, цветков – от светло-красного до тёмно-красного, иногда розовато-фиолетового цвета. Запах слабый, характерный.

При рассмотрении под лупой (10×) на обеих поверхностях фрагментов листьев видны редкие, простые, прямые волоски, ориентированные от черешка к верхушке листа. Стебли в нижней части голые, а в области цветоноса густоопушённые.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрении микропрепарата листа с поверхности должны быть видны клетки эпидермиса с прямыми стенками на верхней стороне листа и клетки эпидермиса с извилистыми стенками на нижней стороне листа. Устьица окружены 4 клетками (аномоцитного типа), редкие, преобладающие на нижней стороне листа. На обеих сторонах встречаются одноклеточные волоски, преобладающие на нижней стороне листа, волоски прижаты к поверхности листа. Также встречаются трёхклеточные кроющие волоски и железистые головчатые волоски, располагающиеся в основном вдоль жилки на нижней стороне листа. Базальная клетка волоска крупная шаровидная, а терминальная длинная с гладкой поверхностью и утолщённой стенкой. У основания волосков чётко выделяются 10–12 примыкающих клеток, образующих розетку. В мезофилле листа видны крупные жилки, имеющие кристаллоносную обкладку.

Под эпидермисом находится небольшое кольцо колленхимы. На поперечном срезе стебля должны быть видны бороздки. Внутри каждой бороздки лежит крупный сосудисто-волокнистый пучок с огромной «шапочкой» волокон снаружи флоэмы. Между сосудисто-волокнистыми пучками находится кольцо утолщённой паренхимы. Сердцевина представлена паренхимой.

Клетки эпидермиса чашечки цветка с обеих сторон слегка вытянуты. В клетках паренхимы содержатся многочисленные призматические кристаллы оксалата кальция, образующие кристаллоносную обкладку сосудов. Вход в трубку чашечки изнутри покрыт 3–4 плотными рядами прижатых, толстостенных, прямых одноклеточных волосков с короткой базальной клеткой. Глубже располагаются редко разбросанные, короткие, головчатые волоски с 3–5 клеточной головкой и 2–3 клеточной ножкой. Зубцы чашечки имеют сосочковидные выросты эпидермиса и кристаллоносную обкладку жилки, представленную сростками призматических кристаллов. Встречаются зёрна пыльцы эллиптической, треугольной или субсферической формы, трёхлопастные, с мелкобородавчатой экзиной.

Измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепаратов должны быть видны фрагменты листовой пластинки с обломанными волосками и отдельными терминальными клетками волосков. Эпидермис фрагментов венчика имеет прямостенные клетки со складчатой кутикулой.

Рисунок 1. Клевера трава: 1 – верхний эпидермис листа с устьицами аномоцитного типа (200×); 2 – нижний эпидермис листа с устьицами аномоцитного типа (200×); 3 – волоски листа: а – простой двухклеточный волосок, б – головчатый волосок (200×); 4 – многоклеточные железистые волоски вдоль жилки на нижнем эпидермисе листа (400×); 5 – основание трёхклеточного кроющего волоска на краю листа (400×); 6 – кристаллоносная обкладка вдоль жилки листа (400×); 7 – призматические кристаллы кальция оксалата вдоль жилки чашечки (400×); + 8 – трёхлопастное пыльцевое зерно с мелкобородавчатой экзиной (400×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 %—бутанол—ацетонитрил—хлороформ 0,5:2,5:15:60.

Испытуемый раствор. В фарфоровую чашку помещают 40 мл исходного раствора, полученного в испытании «Количественное определение», и выпаривают до объёма около 5 мл, к остатку прибавляют 5 мл спирта 96 %. Полученный раствор перемешивают, отстаивают в течение 10 мин и фильтруют через беззольный фильтр. К фильтрату прибавляют 5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 10 %, 10 мл воды и нагревают в колбе с обратным холодильником на водяной бане в течение 3 ч. Полученный раствор охлаждают, фильтруют через беззольный фильтр. К фильтрату прибавляют 10 мл воды и извлекают агликоны флавоноидных соединений этилацетатом 3 раза по 10 мл. Извлечения объединяют и упаривают на водяной бане досуха. Сухой остаток растворяют в 5 мл спирта 96 %.

Раствор биоханина А. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 5 мг биоханина А, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

На линию старта пластинки полосами длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят 40 мкл испытуемого раствора и 5 мкл раствора биоханина А. Пластинку с нанесёнными пробами высушивают при температуре около 60 °С в течение 5 мин и помещают в предварительно насыщенную в течение не менее 2–3 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Результат. На хроматограмме раствора биоханина А в нижней трети пластинки должна обнаруживаться тёмная зона гашения.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться две тёмные зоны гашения, над ними тёмная зона гашения на уровне зоны адсорбции биоханина А, выше тёмная зона гашения; допускается обнаружение дополнительных зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 14,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 12,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 2,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, – не более 5 %; измельчённых частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, – не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Почерневшие и потемневшие листья выцветших цветков. Не более 8 %.

Органическая примесь. Не более 5 %.

Минеральная примесь. Не более 1,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Сумма флавоноидов. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с размером отверстий 1 мм. В колбу со шлифом вместимостью 100 мл помещают 1,0 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 30 мл спирта 70 %, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 30 мин. Горячее извлечение процеживают через вату в мерную колбу вместимостью 100 мл. Использованную вату помещают в колбу для экстрагирования. Экстракцию повторяют ещё дважды в описанных выше условиях, фильтруя извлечения в ту же мерную колбу. После охлаждения объём извлечения доводят спиртом 70 % до метки и фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл исходного раствора, прибавляют 10 мл спирта 96 %, 2 мл алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 96 %, выдерживают в течение 10 мин, прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Исходный раствор стандартного образца рутина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,05 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца рутина, растворяют в спирте 96 % при нагревании на водяной бане, охлаждают и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца рутина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора стандартного образца рутина, прибавляют 10 мл спирта 96 %, 2 мл алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 96 %, выдерживают в течение 10 мин, прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки. Раствор используют свежеприготовленным.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл исходного раствора, прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор сравнения стандартного образца рутина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора стандартного образца рутина, прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Через 30 мин измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 410 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца рутина в указанных выше условиях относительно раствора сравнения стандартного образца рутина.

Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на рутин в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A1 – оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 – оптическая плотность раствора стандартного образца рутина;
а1 – навеска сырья, г;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца рутина, г;
P – содержание рутина в фармакопейном стандартном образце рутина, %;
W – влажность сырья, %.

Экстрактивные вещества. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (метод 1, экстрагент – спирт 40 %).

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0117 Конского каштана обыкновенного семена

Aesculi hippocastani semina

Вводится впервые

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Настоящая фармакопейная статья распространяется на собранные, зрелые, освобождённые от околоплодника и высушенные семена дикорастущего или культивируемого дерева конского каштана обыкновенного – Aesculus hippocastanum L., сем. конскокаштановые – Hippocastanaceae.

Содержит:

- не менее 3,0 % суммы тритерпеновых сапонинов в пересчёте на эсцин в сухом сырье.

##### ПОДЛИННОСТЬ

Внешние признаки. Цельное сырьё. Семена неправильной шаровидной формы, слегка сплюснутые, бугристые, нередко плоские с одной стороны, диаметром 2–4 см, покрыты гладкой, жёсткой, блестящей, тёмно-коричневой кожурой с широким матовым пятном округлой формы, светло-коричневого или серого цвета.

Запах отсутствует.

Измельчённое сырьё. Смесь кусочков семян различной формы, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 5 мм. Цвет от светло-коричневого до коричневого с тёмно-коричневыми вкраплениями.

Запах отсутствует.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё, измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепарата семени с поверхности должны быть видны округлые или многоугольные, изредка квадратные или треугольные клетки эпидермиса кожуры с утолщёнными стенками, покрытыми кутикулой, на поперечном срезе они имеют полигональную форму, высота примерно в 3–4 раза превышает ширину. Основная часть семенной кожуры представлена паренхимой, состоящей из толстостенных клеток различной формы, тесно прижатых друг к другу, и ниже губчатая ткань с красно-коричневым содержимым. По направлению к зародышу клетки спадаются, образуя слой сдавленных клеток, в котором расположены проводящие пучки, состоящие из спиральных или кольчатых сосудов. Ниже находится слой крупных продолговатых клеток паренхимы с тонкими стенками. Самый внутренний слой семенной кожуры состоит из деформированных сжатых клеток (остаток эндосперма). Далее располагается эпидермис семядолей, представленный тонким рядом мелких клеток. Паренхима состоит из плотно сомкнутых многоугольных клеток, содержащих крахмальные зёрна и капли жирного масла. Встречаются отдельные крупные крахмальные зёрна неправильно-грушевидной формы и мелкие – простые или двух-трёхсложные.

Рисунок 1. Каштана конского обыкновенного семена: 1 – клетки эпидермиса семенной кожуры (вид с поверхности) (600×); 2 – фрагмент поперечного среза семенной кожуры (600×); 3 – губчатая ткань семенной кожуры с красно-коричневым содержимым (1200×); 4 – фрагмент паренхимы семенной кожуры (300×): а – толстостенные клетки различной формы, б – слой сдавленных клеток с проводящими пучками, в – ряд деформированных клеток внутреннего слоя кожуры; 5 – клетки паренхимы семядолей с каплями жирного масла (600×); + 6 – крахмальные зёрна (1200×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 5 мм. Около 1,0 г измельчённого сырья помещают в коническую колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 10 мл спирта 70 % и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 10 мин. После охлаждения содержимое колбы переносят в центрифужную пробирку и центрифугируют при 4000 об/мин в течение 10 мин, отделяют надосадочную жидкость.

Раствор стандартного образца эсцина. Около 5 мг фармакопейного стандартного образца эсцина (раздел «Количественное определение») растворяют в 1,0 мл метанола и перемешивают.

Серной кислоты раствор. К 28 мл воды осторожно, при перемешивании, прибавляют 72,0 мл серной кислоты концентрированной.

На линию старта хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят 10 мкл испытуемого раствора и 10 мкл раствора стандартного образца эсцина. Пластинку с нанесёнными пробами сушат при комнатной температуре, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 1 ч смесью растворителей бутанол—уксусная кислота ледяная—вода 5:1:4, и хроматографируют восходящим способом. После прохождения фронтом растворителей не менее 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, обрабатывают анисового альдегида раствором уксуснокислым в этаноле, выдерживают при температуре 100–105 °С в течение 5 мин и просматривают при дневном свете.

На хроматограмме раствора стандартного образца эсцина должна обнаруживаться зона адсорбции от серого до голубовато-фиолетового цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции от серого до голубовато-фиолетового цвета на уровне зоны адсорбции стандартного образца эсцина; допускается обнаружение других зон (тритерпеновые сапонины).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 14,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 5,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 2,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Измельчённое сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 5 мм, − не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,25 мм, − не более 5 %.

Допустимые примеси

Другие части каштана (остатки околоплодника, плодоножек). Цельное сырьё – не более 2,5 %.

Дроблёных семян. Цельное сырьё – не более 5,0 %.

Проросших и заплесневевших семян. Цельное сырьё – не более 2,5 %.

Органическая примесь. Цельное сырьё, измельчённое сырьё – не более 1,0 %.

Минеральная примесь. Цельное сырьё, измельчённое сырьё – не более 1,0 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 5 мм. В круглодонную колбу вместимостью 250 мл помещают 1,0 г (точная навеска) измельчённого сырья и прибавляют 100 мл смеси метанол—вода 13:7. Колбу с содержимым взвешивают с погрешностью ±0,01 г и нагревают на водяной бане в течение 30 мин. Извлечение охлаждают, взвешивают, при необходимости доводят массу тем же экстрагентом до первоначальной, перемешивают и фильтруют. В круглодонную колбу помещают 30,0 мл полученного фильтрата и выпаривают под вакуумом досуха. Сухой остаток растворяют в 20 мл хлористоводородной кислоты растворе 0,1 М и количественно с помощью двух порций по 5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М переносят в делительную воронку вместимостью 250 мл. Прибавляют 20 мл пропанола и 50 мл хлороформа, энергично встряхивают в течение 2 мин, затем отделяют хлороформный слой. К оставшемуся раствору прибавляют 50 мл верхнего слоя смеси хлороформ—хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М—пропанол 5:3:2, энергично встряхивают в течение 2 мин, затем отделяют хлороформный слой. Полученные хлороформные извлечения объединяют в круглодонной колбе и выпаривают под вакуумом досуха, остаток растворителя удаляют продуванием воздухом. Сухой остаток промывают двумя порциями по 10 мл эфира, промывной раствор отбрасывают. Фильтр с осадком высушивают под тягой. Круглодонную колбу ополаскивают 10 мл уксусной кислоты ледяной и фильтруют через высушенный фильтр с осадком в мерную колбу вместимостью 50 мл. Процедуру повторяют еще два раза. Объём содержимого колбы доводят уксусной кислотой ледяной до метки и перемешивают.

Испытуемый раствор. В пробирку с притёртой пробкой помещают 1,0 мл исходного раствора, прибавляют 4,0 мл железа(III) хлорида раствора кислого, закрывают пробкой и нагревают на водяной бане при температуре около 60 °С в течение 25 мин, периодически помешивая.

Раствор стандартного образца эсцина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,006 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца эсцина, растворяют в 5 мл уксусной кислоты ледяной, доводят объём раствора до метки тем же растворителем и перемешивают.

Примечание

Эсцина C55H86O24 [11072-93-8].

Раствор используют свежеприготовленным.

Железа(III) хлорида раствор кислый. Около 75 мг железа(III) хлорида растворяют в 50 мл уксусной кислоты ледяной. К полученному раствору осторожно при охлаждении на льду прибавляют 50 мл серной кислоты концентрированной.

Раствор используют свежеприготовленным.

Раствор сравнения. В пробирку с притёртой пробкой помещают 1,0 мл уксусной кислоты ледяной, прибавляют 4,0 мл железа(III) хлорида раствора кислого, закрывают пробкой и нагревают на водяной бане при температуре около 60 °С в течение 25 мин, периодически помешивая.

Оптическую плотность испытуемого раствора измеряют на спектрофотометре при длине волны 540 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения.

Параллельно в аналогичных условиях измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца эсцина, приготовленного аналогично испытуемому раствору.

Содержание суммы тритерпеновых сапонинов в пересчёте на эсцин в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где А − оптическая плотность испытуемого раствора Б;
A0 − оптическая плотность раствора стандартного образца эсцина;
a − навеска сырья, г;
a0 − навеска фармакопейного стандартного образца эсцина, г;
Р − содержание эсцина в фармакопейном стандартном образце эсцина, %;
W − влажность, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0079 Кукурузы столбики с рыльцами

Zeaе maydis styli cum stigmatis

Взамен ФС.2.5.0079.18

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в период созревания початков и высушенные столбики с рыльцами культивируемого однолетнего травянистого растения кукурузы – Zea mays L., сем. мятликовых – Poaceae.

Содержит:

- не менее 0,35 % суммы флавоноидов в пересчёте на лютеолин-7-глюкозид в сухом сырье;

- не менее 15,0 % экстрактивных веществ, извлекаемых спиртом 70 %, в пересчёте на сухое сырьё.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Цветки».

Цельное сырьё. Мягкие шелковистые нити (столбики), собранные пучками или частично перепутанные, на верхушке которых находятся двухлопастные рыльца. Столбики несколько искривлённые, плоские, шириной 0,1–0,15 мм; длиной 0,5–20 см, рыльца короткие, длиной 0,4–3 мм. Часто встречаются столбики без рылец.

Цвет коричневый, коричнево-красный, светло-жёлтый. Запах слабый, характерный.

Измельчённое сырьё. Смесь нитевидных кусочков столбиков и рылец, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм. Цвет коричневый, коричнево-красный, светло-жёлтый. Запах слабый, характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё, измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепаратов столбиков с рыльцами кукурузы с поверхности должны быть видны клетки эпидермиса удлинённой формы с прямыми стенками, редкие простые волоски двух типов: продольноспаянные многоклеточные волоски длиной 0,2–0,8 мм с заострённой или конической верхушкой, состоящие из 2–3 ярусов клеток в длину, и многоклеточные тонкостенные изогнутые волоски.

В паренхиме двух узких сторон столбиков и рылец должны быть два параллельных проводящих пучка с хорошо заметными спиральными, кольчатыми и лестничными сосудами. Рыльца встречаются крайне редко. На рыльце должны быть заметны многоклеточные ворсинки.

Рисунок 1. Кукурузы столбики с рыльцами: 1 – фрагмент столбика. Общий вид: а – продольноспаянный многоклеточный волосок, б – простой многоклеточный тонкостенный изогнутый волосок (40×); 2 – фрагмент столбика: а – клетки эпидермиса удлинённо-прямоугольной формы с прямыми стенками, б – продольноспаянный многоклеточный волосок, в – простой многоклеточный тонкостенный волосок (200×); 3 – спиральные и кольчатые сосуды проводящего пучка (200×); 4 – схема строения основных диагностических признаков кукурузы столбиков с рыльцами: а – участок столбика с ворсинками (50×), б – участок паренхимы с проводящим пучком (100×), в – простые многоклеточные волоски (280×), г – ворсинки (200×), д – сложные волоски (200×), е – клетки эпидермиса со сложными волосками (280×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Вода––муравьиная кислота––этилацетат 16:16:86.

Раствор лютеолин-7-глюкозида. Растворяют 0,01 г лютеолин-7-глюкозида в 10 мл спирта 60 % при нагревании на водяной бане.

Реактив для детектирования. Дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствор 1 % в спирте 96 %.

На линию старта пластинки наносят 20 мкл исходного раствора, полученного в разделе «Количественное определение», и 10 мкл раствора лютеолин-7-глюкозида. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 2 ч ПФ, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Пластинку опрыскивают реактивом для детектирования и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

Результат

На хроматограмме раствора лютеолин-7-глюкозида должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией жёлтого цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должны наблюдаться зона адсорбции с флуоресценцией жёлтого цвета на уровне зоны адсорбции лютеолин-7-глюкозида и зона адсорбции с флуоресценцией жёлтого или жёлто-зелёного цвета выше зоны адсорбции лютеолин-7-глюкозида; допускается обнаружение других зон адсорбции (флавоноиды).

Качественная реакция

Испытуемый раствор. В колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, прибавляют 40 мл горячей воды и нагревают на водяной бане в течение 15 мин, охлаждают и фильтруют.

К 2 мл испытуемого раствора прибавляют несколько капель свинца(II) ацетата раствора 10 %; должно наблюдаться выпадение осадка (сапонины).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 7,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 2,5 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм – не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм – не более 10 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Почерневших столбиков с рыльцами. Цельное сырьё, измельчённое сырьё – не более 3 %.

Органическая примесь. Не более 0,5 %.

Минеральная примесь. Не более 0,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. Сумма флавоноидов. Определение проводят в соответствии с требованиями ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях».

- Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. В коническую колбу вместимостью 250 мл помещают 2,0 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 50,0 мл спирта 60 % и взвешивают с погрешностью ±0,01 г. Колбу с содержимым присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 2 ч. Затем содержимое колбы охлаждают до комнатной температуры и взвешивают, при необходимости доводят спиртом 60 % до первоначальной массы. Содержимое колбы фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора, прибавляют 1 мл алюминия хлорида раствора 3 % в спирте 60 %, 0,1 мл уксусной кислоты разведённой 30 %, доводят объём раствора спиртом 60 % до метки и перемешивают.

- Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора, 0,1 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и доводят объём раствора спиртом 60 % до метки и перемешивают.

- Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора через 40 мин на спектрофотометре при длине волны 405 нм в кюветах с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения.

- Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на лютеолин-7-глюкозид в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
а - навеска сырья;
401 - удельный показатель поглощения комплекса лютеолин-7- глюкозида с алюминия хлоридом при длине волны 405 нм ( );
W - влажность сырья, %.

2. Экстрактивные вещества. В соответствии с ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (метод 1) из навески 1,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, экстрагент – спирт 70 %.

- Примечание – Определение содержания экстрактивных веществ, извлекаемых спиртом 70 %, проводят в сырье, предназначенном для производства экстракционных лекарственных форм (настойки, экстракты спиртовые).

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0118 Леспедецы двухцветной побеги

Lespedezae bicolоris cormi

Взамен ВФС 42-1942-89

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в фазу цветения и высушенные побеги дикорастущего многолетнего кустарника леспедецы двухцветной – Lespedeza bicolor Turcz., сем. бобовых – Fabaceae.

Содержит не менее 0,25 % суммы флавоноидов в пересчёте на лютеолин-7-глюкозид в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Травы».

Цельное сырьё. Верхушки побегов длиной до 30 см, цельные или частично измельчённые листья, бутоны, цветки и незрелые плоды. Стебли округлые, с неясными рёбрами, опушённые прижатыми белыми волосками или голые. Листья длинночерешковые, тройчатые, с мелкими шиловидными прилистниками. Листочки овальные, эллиптические или яйцевидные с коротким шипиком, иногда с выемкой на верхушке, цельнокрайние, длиной до 7 см, шириной до 5 см. Соцветие – метёлка из раскидистых негустых кистей. Цветки мотылькового типа, цветоносы опушённые. Чашечка короткоопушённая, длиной до 4 мм, с 4 долями. Венчик длиной около 10 мм. Плод – боб, длиной до 10 мм, плоский, односемянный, с сетью выступающих жилок.

Цвет стеблей желтовато-зелёный, листьев – сверху зелёный, снизу серовато-зелёный, венчик розовато-фиолетовый с тёмно-фиолетовым концом. Запах слабый, характерный.

Измельчённое сырьё. Смесь кусочков листьев, стеблей, соцветий, незрелых плодов различной формы, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм.

Цвет желтовато-зелёный, серовато-зелёный с розовато-фиолетовыми или тёмно-фиолетовыми вкраплениями. Запах слабый, характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё, измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепарата листа с поверхности должны быть видны многоугольные клетки верхнего эпидермиса с прямыми или слабоизвилистыми стенками, нижнего – с извилистыми стенками. Устьица овальные, окружены 4–5 (реже 2–3) клетками эпидермиса (аномоцитный, реже парацитный тип), преобладают на нижней стороне листа. Волоски немногочисленные, преимущественно по жилкам, в большем числе на нижней стороне. Преобладают простые двухклеточные волоски с гладкой поверхностью, состоящие из округлой базальной клетки и верхней длинной терминальной клетки с утолщёнными стенками и широкой полостью. Редко встречаются простые многоклеточные волоски с удлинёнными или укороченными клетками, иногда с зеленовато-коричневым содержимым, и головчатые с одноклеточной головкой на одно-трёхклеточной ножке. Клетки эпидермиса в местах прикрепления двухклеточных волосков расположены радиально и образуют розетку. Заметны валики – места прикрепления опавших волосков. Главная и крупные боковые жилки имеют кристаллоносную обкладку из призматических кристаллов оксалата кальция и тяжи механических волокон. Губчатая паренхима листа представлена аэренхимой. В губчатой паренхиме листа встречаются секреторные ходы с жёлто-коричневым содержимым.

Рисунок 1. Леспедецы двухцветной побеги: 1 – верхний эпидермис листа с простыми волосками (40×); 2 – нижний эпидермис листа с устьицами аномоцитного типа (200×); 3 – нижний эпидермис листа с простым волоском (200×); 4 – место прикрепления волоска (200×); 5 – кристаллоносная обкладка и кристаллический песок вдоль жилки листа (40×); 6 – призматические кристаллы оксалата кальция (200×); 7 – секреторные ходы (200×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Этилацетат—уксусная кислота ледяная—вода 10:2:2.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. В коническую колбу со шлифом вместимостью 100 мл помещают 1,0 г измельчённого сырья, прибавляют 10 мл спирта 70 % и настаивают в течение 24 ч, после чего фильтруют через беззольный фильтр. Фильтрат упаривают на водяной бане до объёма около 1 мл.

Раствор лютеолина-7-глюкозида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10 мг лютеолина-7-глюкозида, высушенного до постоянной массы, растворяют в спирте 70 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Реактив для детектирования. Алюминия хлорида раствор 5 % в спирте 70 %.

На линию старта пластинки наносят 20 мкл испытуемого раствора и 10 мкл раствора лютеолина-7-глюкозида. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную в течение не менее 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Хроматограмму опрыскивают реактивом для детектирования, нагревают при температуре 100–105 °С в течение 5 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

Результат

На хроматограмме раствора лютеолина-7-глюкозида должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией жёлто-коричневого цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться две зоны адсорбции с флуоресценцией жёлтого цвета, выше две зоны адсорбции с флуоресценцией желтовато-коричневого цвета, над ними зона адсорбции с флуоресценцией желтовато-коричневого цвета на уровне зоны адсорбции лютеолина-7-глюкозида; допускается обнаружение других зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 11,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 7,0 % (ОФС «Зола общая»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм − не более 20 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Стебли толще 3 мм. Цельное сырьё – не более 10 %.

Органическая примесь. Не более 1,5 %.

Минеральная примесь. Не более 0,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Приготовление хроматографической колонки. В стеклянную колонку диаметром 2 см и высотой 50 см с пористым фильтром № 2 помещают ватный тампон, пропитанный водой, после чего помещают 3,0 г полиамида 6 порошка. Промывают колонку водой, оставляя слой воды высотой 3 см.

Растворитель. Вода—1,4-диоксан 1:1.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. В колбу вместимостью 500 мл помещают 3,0 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 300 мл спирта 96 % и экстрагируют при постоянном перемешивании с помощью магнитной мешалки в течение 3 ч. Полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр в колбу вместимостью 500 мл, отбрасывая первые 5 мл. В круглодонную колбу вместимостью 50 мл переносят 10 мл фильтрата, прибавляют 10 мл натрия хлорида раствора 5 %, упаривают до 1/4 первоначального объёма на водяной бане при температуре 80 °С под вакуумом и охлаждают. Охлаждённый остаток количественно переносят на колонку с полиамидным сорбентом, фильтруя его через воронку с небольшим ватным тампоном. Остаток упаренного извлечения смывают со стенок колбы 20 мл воды, предназначенной для промывания колонки. Колонку промывают 80 мл воды со скоростью элюирования не более 4 мл/мин. Водный элюат отбрасывают. По окончании промывки колонки водой уровень жидкости не должен превышать уровня ватного тампона. Затем колонку промывают с той же скоростью 100 мл спирта 70 %, отбрасывая первые 10 мл элюата, последующий элюат собирают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём элюата спиртом 70 % до метки.

Раствор стандартного образца лютеолина-7-глюкозида. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,04 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца лютеолина-7-глюкозида, растворяют в растворителе и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца лютеолина-7-глюкозида, прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора спиртом 70 % до метки.

Раствор сравнения. Промывают подготовленную колонку с полиамида 6 порошком 100 мл воды со скоростью не более 4 мл/мин, водный элюат отбрасывают. Колонку промывают 100 мл спирта 70 %, отбрасывая первые 10 мл, а последующий элюат собирают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора спиртом 70 % до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора и раствора стандартного образца лютеолина-7-глюкозида на спектрофотометре при длине волны 354 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на лютеолин-7-глюкозид в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A – оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 – оптическая плотность раствора стандартного образца лютеолина-7-глюкозида;
а – навеска сырья, г;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца лютеолина-7-глюкозида, г;
P – содержание лютеолин-7-глюкозида в фармакопейном стандартном образце лютеолин-7-глюкозида, %;
W – влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0024 Липы цветки

Tiliae flores

Взамен ФС.2.5.0024.15

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные во время цветения и высушенные соцветия дикорастущих и культивируемых деревьев липы сердцевидной – Tilia cordata Mill. и липы широколистной – Tilia platyphyllos Sсop., сем. липовых– Tiliaceae.

Содержит не менее 0,4 % суммы флавоноидов в пересчёте на кверцетин в сухом сырьё.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Цветки».

Цельное сырьё. Соцветия щитковидные, состоят из 5–15 (у липы сердцевидной) или 2-9 (у липы широколистной) цветков на удлинённых цветоножках, сидящих на общем цветоносе, сросшимся в нижней части с главной жилкой прицветного листа. Цветки правильные, 1–1,5 см в диаметре. Чашечка из 5 продолговато-яйцевидных чашелистиков, густо опушённых по краю и с внутренней стороны. Венчик из 5 свободных яйцевидных лепестков, длиннее чашечки. Тычинки многочисленные, с 2 жёлтыми пыльниками на длинных нитях, сросшихся в 5 пучков. Пестик один с верхней шаровидной завязью, густо покрытой пушистыми волосками. Встречаются цветочные бутоны и незрелые плоды – шаровидные сильно опушённые орешки до 2 мм в диаметре. Прицветный лист плёнчатый, с густой сетью жилок, длиной до 6 см и шириной до 1,5 см, продолговато-эллиптической формы с притуплённой верхушкой, в нижней половине сросшийся по главной жилке с цветоносом. Цвет лепестков беловато-жёлтый, чашелистиков зеленовато- или желтовато-серый, прицветных листьев светло-жёлтый или зеленовато-жёлтый. Запах слабый, характерный.

Измельчённое сырьё. Смесь цветков, цветоножек и кусочков прицветников различной формы, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

При рассмотрении измельчённого сырья под лупой (10× и др.) видны кусочки слегка опушённых прицветных листьев светло-жёлтого, зеленовато-жёлтого или светло-зелёного цвета; чашелистики или их части, густо опушённые (с внутренней стороны и по краю), жёлто-серого, зеленовато-серого, реже светло-коричневого цвета; лепестки яйцевидной формы бело-жёлтого цвета; тычинки, пестик или их части, опушённые, светло-жёлтого цвета; кусочки цветоножек и цветоносов, опушённые, светло-зелёного, зелёного или серо-зелёного цвета; отдельные цветочные бутоны и незрелые сильноопушённые плоды (орешки) светло-зелёного или серо-зелёного цвета.

Цвет лепестков беловато-жёлтый, чашелистиков зеленовато- или желтовато-серый, светло-коричневый, прицветных листьев – светло-жёлтый или зеленовато-жёлтый, светло-зелёный. Запах слабый, характерный.

Порошок. Смесь частиц цветков, цветоножек и прицветников липы различной формы, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

При рассмотрении порошка под лупой (10×, 16×) видны: кусочки слегка опушённых прицветных листьев зелёного, светло-зелёного или зелёно-жёлтого цвета; чашелистики или их части, густо опушённые (с внутренней стороны и по краю), жёлто-серого, зеленовато-серого, реже светло-коричневого цвета; лепестки яйцевидной формы бело-жёлтого цвета; тычинки, пестик или их части, опушённые, светло-жёлтого цвета; кусочки цветоножек и цветоносов, опушённые, светло-зелёного, зелёного или серо-зелёного цвета; отдельные цветочные бутоны и незрелые сильноопушённые плоды (орешки) светло-зелёного или серо-зелёного цвета.

Цвет порошка серовато-зелёный, серовато-жёлтый или светло-коричневый с жёлтыми, тёмно-жёлтыми, коричневыми и тёмно-коричневыми вкраплениями. Запах слабый, характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения». Раздел «Листья».

Цельное сырьё, измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепарата прицветного листа с поверхности, с обеих сторон листа видны сильноизвилистые стенки клеток эпидермиса. Кутикула продольно-морщинистая с обеих сторон. Морщинистость очень сильно выраженная. Устьица только на нижней стороне, овальные, с 4–6 околоустьичными клетками (аномоцитный тип). Жилки сопровождаются вытянутыми клетками с утолщёнными слабоизвилистыми стенками. Вдоль жилок пролегают секреторные ходы, наполненные розовым содержимым. Волоски встречаются преимущественно в средней части прицветного листа, вблизи места срастания его с цветоносом. Волоски 2 типов: головчатые – с многоклеточной овальной головкой на короткой 1-3-клеточной ножке и звёздчато-лучистые, состоящие из 3-8 длинных извилистых клеток, сросшихся основаниями. Мезофилл очень рыхлый, типа аэренхимы, с друзами, реже с призматическими кристаллами кальция оксалата, особенно многочисленными вблизи жилок.

Клетки эпидермиса лепестка прямоугольной формы с прямыми или слабоизвилистыми стенками. Наблюдаются клетки со слизью. Кутикула с верхней стороны слабо выражено штриховатая. В мезофилле располагаются друзы кальция оксалата. Волоски такие же, как на прицветном листе, присутствуют вильчатые волоски, состоящие из 2 извилистых клеток, сросшихся основаниями. Простые волоски встречаются редко с нижней стороны лепестка и по краю лепестка. На верхушке лепестка цветка клетки эпидермиса образуют сосочковидные выросты.

Клетки эпидермиса чашелистика многоугольные с прямыми и слабоизвилистыми стенками, кутикула продольно-морщинистая, устьица на верхней стороне аномоцитного типа. Волоски такие же, как на прицветном листе и, кроме того, у основания чашелистиков с верхней стороны располагаются длинные прямые параллельные волоски, состоящие из 2 параллельных клеток, сросшихся основаниями. В мезофилле располагаются друзы кальция оксалата. На поперечном срезе чашелистика видны крупные полости слизистых клеток.

Пыльца округло-угловатая, гладкая, сплющенная с 3 щелевидными отверстиями.

Эпидермис цветоножки состоит из клеток прямоугольной формы с прямыми стенками без устьиц. В паренхиме содержатся друзы кальция оксалата. Проводящие пучки сопровождаются клетками-идиобластами с коричнево-оранжевым содержимым, механическими волокнами и пористыми толстостенными клетками.

Тычинки и пестик содержат друзы. Пестик опушён волосками, сидящими пучками и выходящими по 2-10 из общего основания. Волоски извилистые тонкостенные.

Порошок. При рассмотрении микропрепарата должны быть видны фрагменты эпидермиса прицветного листа, состоящего из клеток с извилистыми стенками; продольно-морщинистой кутикулы; овальных устьиц аномоцитного типа; головчатых волосков, состоящих из многоклеточной овальной головки на короткой 1-3-клеточной ножке (и без них); звёздчато-лучистых волосков, состоящих из 3-8 извилистых клеток, сросшихся основаниями; мезофилл листа очень рыхлый, типа аэренхимы, содержит друзы кальция оксалата, реже призматические кристаллы кальция оксалата, особенно многочисленные вблизи жилок; фрагменты лепестка с клетками эпидермиса прямоугольной формы с прямыми или слабоизвилистыми стенками, с вильчатыми волосками, состоящими из 2 извилистых клеток, сросшихся у основания (и без них), с просвечивающимися друзами в мезофилле; фрагменты чашелистика с многоугольными клетками эпидермиса с прямыми или извилистыми стенками, продольно-морщинистой кутикулой, с овальными устьицами аномоцитного типа (и без них), со звёздчато-лучистыми волосками, состоящими из 3-8 извилистых клеток, сросшихся основаниями, с вильчатыми волосками, состоящими из 2 извилистых клеток, сросшихся у основания (и без них), с длинными прямыми параллельными волосками, состоящими из 2 параллельных клеток, сросшихся основаниями (и без них); фрагменты цветоножки с эпидермисом, представленным клетками прямоугольной формы с прямыми стенками, с просвечивающимися в паренхиме друзами кальция оксалата, со звёздчато-лучистыми волосками, состоящими из 3-8 извилистых клеток, сросшихся основаниями (и без них), с головчатыми волосками, состоящими из многоклеточной овальной головки на короткой 1-3-клеточной ножке (и без них); фрагменты тычинок, содержащих друзы в паренхиме; фрагменты пестика, содержащего друзы в паренхиме и имеющего на поверхности извилистые тонкостенные волоски, сидящие пучками и выходящие по 2-10 из общего основания; пыльцы округло-угловатой гладкой сплющенной с 3 щелевыми отверстиями.

Рисунок 1.Липы цветки: 1 – звёздчато-лучистый волосок (200×); 2 – головчатые волоски (200×); + 3 – фрагмент верхушки лепестка цветка: a– сосочковидные клетки эпидермиса, б – друзы кальция оксалата (200×); 4 – фрагмент лепестка с идиобластами со слизью (40×); 5 – вильчатые волоски (200×); 6 – аэренхима (200×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография

Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Вода––муравьиная кислота безводная–толуол–этилацетат 8:10:14:60.

Испытуемый раствор. В колбу со шлифом вместимостью 100 мл помещают около 1,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, прибавляют 10 мл спирта 96 %, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение15 мин. После охлаждения, полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

Раствор рутина. Растворяют 5 мг рутина в 10 мл спирта 96 %.

Раствор кофейной кислоты. Растворяют 2 мг кофейной кислоты в 10 мл спирта 96 %.

Реактив для детектирования 1. Дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствор 1 % в спирте 96 %.

Реактив для детектирования 2. Макрогола 400 раствор спиртовой 5 %. На линию старта пластинки в виде полос длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят по 10 мкл раствора рутина, раствора кофейной кислоты, испытуемого раствора. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 10 мин, помещают в камеру, выложенную изнутри фильтровальной бумагой, предварительно насыщенную в течение 1 ч ПФ, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры и сушат до удаления следов растворителей. Пластинку выдерживают при температуре 100–105 °С в течение 5–10 мин, еще тёплую обрабатывают последовательно реактивом для детектирования 1, затем реактивом для детектирования 2 и через 15 мин просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

Результат. На хроматограмме раствора рутина должна обнаруживаться зона адсорбции жёлтого или оранжево-жёлтого цвета.

На хроматограмме раствора кофейной кислоты должна обнаруживаться зона адсорбции голубого цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться: две зоны адсорбции жёлтого или жёлто-оранжевого цвета – на уровне зоны адсорбции рутина и выше неё; зона адсорбции синего или фиолетово-синего цвета на уровне зоны адсорбции кофейной кислоты; допускается обнаружение других зон адсорбции (фенольные соединения).

Качественная реакция

К 10 мл настоя липы цветков (1:20) прибавляют 30 мл спирта 96 % и перемешивают, появляются хлопьевидные сгустки, выпадающие в осадок при стоянии (полисахариды).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 10,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 3,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм, – не более 3 %.

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, – не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, – не более 5 %.

Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, – не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, – не более 5%.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Соцветия с прицветниками и отдельные прицветники, повреждённые вредителями и поражённые ржавчиной. Цельное сырьё: не более 2%.

Изменившие окраску части соцветия (потемневшие и почерневшие). Цельное сырьё, измельчённое сырьё: не более 4%.

Другие части липы (листья и побеги). Цельное сырьё, измельчённое сырьё: не более 1%.

Соцветия, полностью отцветшие, с плодами. Цельное сырьё: не более 2 %.

Осыпь отдельных цветков или соцветий без прицветников. Цельное сырьё: не более 15%.

Органическая примесь. Цельное сырьё, измельчённое сырьё: не более 0,3%.

Минеральная примесь. Не более 0,1 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят в соответствии с ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях».

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. В коническую колбу со шлифом вместимостью 250 мл помещают 1,0 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 20 мл ацетона, 2 мл хлористоводородной кислоты 25 %, 1 мл гексаметилентетрамина раствора 5 г/л. Колбу с содержимым присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 30 мин. Затем охлаждают и фильтруют через вату в мерную колбу вместимостью 100 мл. Вату помещают в колбу с остатками сырья, и повторяют экстракцию.

После охлаждения извлечения фильтруют через вату в ту же мерную колбу и доводят объём раствора ацетоном до метки. В делительную воронку помещают 20,0 мл полученного раствора, прибавляют 20 мл воды и встряхивают с 15 мл этилацетата. Экстракцию повторяют трижды с тем же растворителем порциями по 10 мл. Объединённые этилацетатные слои промывают два раза по 40 мл водой, фильтруют через беззольный фильтр c натрия сульфатом безводным в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объём раствора этилацетатом до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10,0 мл исходного раствора, прибавляют 2 мл алюминия хлорида реактива и доводят объём раствора уксусной кислотой раствором 5 % (о/о) в метаноле до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10,0 мл исходного раствора и доводят объём раствора уксусной кислотой раствором 5 % (о/о) в метаноле до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора через 45 мин на спектрофотометре при длине волны 425 нм в кюветах с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на кверцетин в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
а - навеска сырья, г;
714 - удельный показатель поглощения кверцетина при длине волны 425 нм ( );
W - влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0119 Маклейи трава

Macleayae herba

Взамен ФС 42-2666-89

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в фазу до бутонизации и в фазу бутонизации высушенная трава культивируемого многолетнего растения маклейи сердцевидной – Macleaya cordata (Willd.) R. Br. и маклейи мелкоплодной – Macleaya microcarpa (Maxim.) Fedde., сем. маковых – Papaveraceae.

Содержит не менее 0,5 % суммы алкалоидов в пересчёте на сангвинарин + хелеритрин в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Травы».

Цельное сырьё. Смесь частично измельчённых стеблей, листьев и бутонов. Кусочки стеблей цилиндрической формы, продольно-ребристые, внутри полые, иногда расщеплённые вдоль, длиной до 15 см и диаметром до 1,5 см. Листья сердцевидной формы, 5–7-раздельные, очерёдные, черешковые, сверху голые, снизу слабоопушённые; длиной до 25 см.

Кусочки черешка листа, неправильно цилиндрической, у основания – подковообразной формы, иногда сплюснутые, длиной до 12 см и шириной до 1 см.

Бутоны, цилиндрической (маклейя мелкоплодная) или булавовидной (маклейя сердцевидная) формы, длиной до 0,7 см. Чашелистики обратноланцетовидные, длиной до 0,5 см.

Цвет верхней стороны листьев от коричневато-зелёного до коричневато-жёлтого или серовато-зелёного; нижней – серый ли желтовато-серый; стебли – снаружи от желтовато-серого до коричневато-серого цвета, иногда с восковым налётом; на поперечном разрезе видна желтовато-бурая коровая часть и белая рыхлая сердцевина; черешки листа имеют такой же цвет как и стебли; бутоны желтовато-коричневого цвета. Запах слабый.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрении микропрепаратов листа с поверхности должны быть видны клетки верхнего эпидермиса, имеющие многоугольную форму и почти прямые стенки; клетки нижнего эпидермиса со слабоизвилистыми стенками. Устьица многочисленные, овальной формы, погружённые, с 4–6 околоустьичными клетками (аномоцитный вид), расположены только на нижней стороне листа. Волоски простые, многоклеточные, одно- и многорядные, прямые или слегка изогнутые, иногда с отдельными спавшимися клетками, нередко обломанные, встречаются на нижней стороне листа, чаще по жилкам. В мезофилле листа вдоль жилок проходят млечники с оранжево-коричневым зернистым содержимым.

Клетки эпидермиса стебля и черешка продольно вытянутые с прямыми чётковидноутолщёнными стенками, встречаются устьица аномоцитного типа.

При рассмотрении чашелистиков с внешней и внутренней стороны должны быть видны многоугольные клетки эпидермиса с прямыми стенками. Устьица аномоцитного типа, расположены на чашелистиках с внешней стороны, характерно наличие устьиц разных размеров. В мезофилле содержатся многочисленные друзы кальция оксалата, вдоль жилок расположены млечники с оранжево-коричневым зернистым содержимым.

Рисунок 1. Маклейи трава: 1 – верхний эпидермис листа (400×), 2 – нижний эпидермис листа (400×), 3 – простой многоклеточный однорядный волосок (400×), 4 – простые многоклеточные многорядные волоски (400×), 5 – млечники (400×), 6 – эпидермис черешка (400×), 7 – эпидермис стебля (400×), 8 – эпидермис внутренней стороны чашелистика (400×), 9 – эпидермис внешней стороны чашелистика (400×), 10 – друзы (200×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—петролейный эфир—эфир 6:30:70.

Испытуемый раствор. В колбу со шлифом вместимостью 50 мл помещают 1,0 г сырья, измельчённого до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, смачивают 1 мл аммиака раствора разведённого 3,4 %, тщательно перемешивают, прибавляют 15 мл хлороформа и периодически перемешивают в закрытой колбе в течение 10 мин, затем фильтруют через беззольный фильтр.

Стандартный раствор. Растворяют в 20 мл метанола 5 мг сангвинарина хлорида и 5 мг хелеритрина хлорида.

На линию старта пластинки в виде полос длиной 10 мм, шириной не более 2 мм наносят 20 мкл испытуемого раствора и 10 мкл стандартного раствора. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру, предварительно насыщенную ПФ в течение 1 ч, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80‑90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и сразу просматривают при дневном свете.

Результат. На хроматограмме стандартного раствора должны обнаруживаться: зона адсорбции жёлтого цвета (хелиритрин) и над ней зона адсорбции оранжевого цвета (сангвинарин).

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться: зона адсорбции жёлтого цвета на уровне зоны хелиритрина хлорида и над ней зона адсорбции оранжевого цвета на уровне зоны адсорбции сангвинарина хлорида; допускается обнаружение других зон адсорбции.

Качественная реакция. Помещают в пробирку со шлифом 5 мл испытуемого раствора (см. «Тонкослойная хроматография»), прибавляют 1 мл серной кислоты разведённой 9,8 %, закрывают пробкой и взбалтывают в течение 3 мин; при стоянии в водном слое должен выпадать осадок оранжевого цвета (гидросульфаты сангвинарина и хелеритрина).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 13,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 0,5 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, − не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Стеблей. Не более 40 %.

Органическая примесь. Не более 1 %.

Минеральная примесь. Не более 1 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм.

В колбу со шлифом вместимостью 50 мл помещают 0,5 г (точная навеска) сырья, прибавляют 0,5 мл аммиака раствора концентрированного 25 %, тщательно перемешивают стеклянной палочкой до получения увлажнённой массы. Закрывают колбу пробкой и выдерживают при комнатной температуре в течение 30 мин, затем прибавляют 25 мл хлороформа, закрывают пробкой и выдерживают при комнатной температуре в течение 15 ч. Содержимое колбы перемешивают в течение 15 мин и фильтруют через стеклянный фильтр ПОР-100 под вакуумом в круглодонную колбу вместимостью 50 мл. Коническую колбу и осадок на фильтре промывают хлороформом дважды порциями по 10 мл, объединяя с фильтратом в круглодонной колбе. Экстрагент отгоняют на роторном испарителе при температуре 50 °С досуха.

Сухой остаток растворяют в 1 мл хлороформа, полученный раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл с помощью 15 мл уксусной кислоты раствора 5 %, доводят объём раствора тем же растворителем до метки и перемешивают. Закрывают колбу пробкой и интенсивно встряхивают в течение 1–2 мин. Полученную эмульсию переносят в центрифужные пробирки и центрифугируют при 7000 об/мин в течение 15 мин.

В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл надосадочной жидкости, прибавляют 15 мл уксусной кислоты раствора 5 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. Уксусной кислоты раствор 5 %.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 452 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Содержание суммы алкалоидов в пересчёте на сангвинарин + хелеритрин в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
а - навеска сырья, г;
106 - удельный показатель поглощения сангвинарина + хелеритрина при длине волны 452 нм ( );
W - влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0120 Мальвы лесной цветки

Malvae sylvestris flores

Вводится впервые

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в фазу цветения и высушенные цветки дикорастущего и культивируемого двулетнего травянистого растения мальвы лесной цветки – Malvae sylvestris L., сем. мальвовых – Malvaceae.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Цветки».

Цельное сырьё. Цветки состоят из подчашия с 3 (для дикорастущих растений) или 3–7 (для культивируемых растений) овально-удлинёнными или эллиптически-ланцетовидными листочками, которые короче соответствующих листочков чашечки и располагаются непосредственно под нею; из чашечки с 5 (для дикорастущих растений) или 5–8 (для культивируемых растений) опушёнными треугольными чашелистиками, сросшимися в основании, зелёно-жёлтого цвета; из венчика, который в 3–4 раза длиннее чашечки и состоит из 5 дикорастущих растений или 5–10 (для культивируемых растений) клиновидных надрезанных лепестков розового цвета с тёмными полосками, обратнояйцевидно-клиновидных,
длиной 12–22 мм, на верхушке выемчатых, сросшихся в основании с тычиночной трубкой; из многочисленных тычинок, нити которых срослись в тычиночную трубку, покрытую небольшими звёздообразными волосками и отдельными простыми волосками, которые видны в увеличительное стекло; из многочисленных морщинистых плодолистиков, гладких или иногда опушённых, защищённых тычиночной трубкой и собранных в круг вокруг центрального столбика, заканчивающегося многочисленными нитевидными рыльцами. Запах слабый.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрении микропрепаратов чашелистиков с поверхности должны быть видны клетки эпидермиса с извилистыми стенками. Устьица аномоцитного типа, расположенные с наружной стороны. Многочисленные волоски представлены волосками 2 типов: простыми одноклеточными короткими кроющими, которые могут быть слегка изогнутыми, ветвистыми и длинными толстостенными, расположенными группами от 2 до 6, а также головчатыми железистыми волосками с многоклеточной головкой на одноклеточной ножке. В мезофилле чашелистиков содержатся мелкие друзы кальция оксалата, которые могут располагаться вдоль жилок.

Клетки эпидермиса лепестка удлинённые с волнообразными стенками, более вытянутые у дикорастущих растений и более короткие и широкие у культивируемых растений. Волоски представлены железистыми волосками с многоклеточной булавовидной головкой без ножки, у основания лепестков – толстостенными заострёнными одноклеточными кроющими волосками. В мезофилле лепестка встречаются большие вытянутые слизистые клетки, изредка встречаются мелкие друзы кальция оксалата, сосуды спирального типа.

Пыльца сферическая с шиповатой поверхностью.

Рисунок 1. Мальвы лесной цветки: 1 – фрагмент чашелистика с простыми одноклеточными короткими кроющими волосками (200×); 2 – фрагмент чашелистика с ветвистыми волосками (50×); 3 – фрагмент чашелистика с простыми одноклеточными кроющими волосками, расположенными группами (50×); 4 – головчатый железистый волосок с многоклеточной головкой и одноклеточной ножкой (50×); 5 – фрагмент эпидермиса лепестка с многоклеточным железистым волоском (50×); 6 – слизистые клетки в мезофилле лепестка (50×); + 7 – фрагмент эпидермиса лепестка с толстостенными заострёнными одноклеточными кроющими волосками (50×); 8 – пыльца (100×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—вода—бутанол 15:30:60.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм.

В колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 г измельчённого сырья, прибавляют 10 мл спирта 60 %, встряхивают в течение 15 мин и фильтруют.

Раствор хинальдинового красного. Растворяют 0,005 г хинальдинового красного в 10,0 мл спирта 96 %.

На линию старта пластинки полосами длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят 10 мкл испытуемого раствора и 5 мкл раствора хинальдинового красного. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в предварительно насыщенную в течение не менее 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, и просматривают при дневном свете.

Результат. На хроматограмме раствора хинальдинового красного в верхней части средней трети должна обнаруживаться зона адсорбции оранжево-красного цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора в средней трети ниже зоны адсорбции хинальдинового красного должны обнаруживаться зона адсорбции фиолетового цвета (антоцианы) и под ней зона адсорбции фиолетового цвета (антоцианы); допускается обнаружение других зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 12,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 14,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 2,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Показатель набухания. Не менее 15 (ОФС «Показатель набухания»).

Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,71 мм. Для определения используют 0,2 г измельчённого сырья и 0,5 мл спирта 96 % для смачивания.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0084 Мелиссы лекарственной трава

Melissae officinalis herba

Взамен ФС.2.5.0084.18

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в фазу бутонизации, начала цветения и цветения высушенная трава многолетнего культивируемого травянистого растения мелиссы лекарственной – Melissa officinalis L., сем. яснотковых – Lamiaceae.

Содержит не менее 2,0 % суммы фенольных соединений в пересчёте на розмариновую кислоту в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Травы».

Цельное сырьё. Верхние части стеблей длиной до 35 см с супротивными черешковыми листьями, бутонами или цветками, отдельные листья, цветки, куски стеблей. Листья скрученные, тонкие, яйцевидные с клиновидным основанием, с городчатым краем и перистым жилкованием, слегка опушённые. Стебли четырёхгранные, продольно-желобчатые, слабоопушённые, с рыхлой серовато-белой сердцевиной, толщиной до 3 мм. Цветки и бутоны в ложных мутовках в пазухах верхних листьев. Прицветники эллиптические, заострённые или продолговатые, чашечка двугубая, опушённая, с плоской верхней губой. Венчик 13–15 мм длины, в полтора-два раза длиннее чашечки, двугубый, с плоской двураздельной верхней губой и трёхраздельной нижней. Тычинок 4, две из которых короче двух других.

Листья зелёные, серовато-зелёные, иногда зеленовато-коричневые, стебли от светло-зелёного до зеленовато-серого цвета, на изломе серовато-белые. Венчик желтовато-белый.

Запах слабый, характерный.

Измельчённое сырьё. Смесь кусочков стеблей, листьев, цветков и бутонов различной формы, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

При рассмотрении под лупой (10×; 16×) должны быть видны кусочки листьев зелёного, серовато-зелёного или зеленовато-коричневого цвета; черешков, стеблей серовато-зелёного или светло-зелёного цвета, редко серовато-зелёной или коричневатой чашечки и желтовато-белого венчика; кусочки стеблей часто расщеплены в продольном сечении и имеют желтовато-белую губчатую сердцевину. На фрагментах листовых пластинок заметны многочисленные тёмно-коричневые блестящие округлые образования (эфирномасличные желёзки), беловатые волоски, особенно многочисленные на кусочках мелких молодых листьев.

Цвет от зелёного до зеленовато-коричневого с серовато-зелёными, светло-зелёными, светло-коричневыми, коричневыми, коричневато-белыми, желтовато-белыми вкраплениями.

Запах слабый, характерный.

Порошок. Кусочки стеблей, листьев, цветков и бутонов различной формы, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

Цвет от зелёного до зеленовато-коричневого с серовато-зелёными, светло-зелёными, светло-коричневыми, коричневыми, коричневато-белыми, желтовато-белыми вкраплениями.

Запах слабый, характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё, измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепарата листа с поверхности должны быть видны клетки верхнего эпидермиса, стенки клеток извилистые. Клетки нижнего эпидермиса мельче с более извилистыми стенками. Устьичный комплекс на обеих сторонах листа диацитного типа.

Клетки эпидермиса по жилке вытянутой формы, угловатые, с заметно чётковидноутолщённой клеточной стенкой. На нижней стороне листовой пластинки в небольших углублениях находятся эфирномасличные желёзки. Крупная головка желёзки состоит из 8-ми радиально расположенных выделительных клеток и одноклеточной короткой ножки. Изредка встречаются железистые волоски на короткой ножке, состоящей из одной, реже – трёх клеток. Головка волоска овальная, как правило, состоит из двух клеток.

По поверхности жилок и по краю листа встречаются длинные 3-х и
6-ти клеточные простые волоски. Клетки волосков толстостенные с бородавчатой кутикулой.

Поверхность листа покрыта мелкими одноклеточными сосочковидными волосками, конусовидными по форме, с бородавчатой кутикулой.

По всей поверхности листовой пластинки, вдоль жилок, локализованы длинные железистые волоски. Ножка волоска многоклеточная (2–4 клетки) с гладкой кутикулой. Головка одноклеточная, булавовидной формы, с окрашенным в светло-коричневый цвет протопластом.

При рассмотрении микропрепаратов венчика цветка должны быть видны клетки эпидермиса венчика с сильно извилистыми стенками. Для фрагментов венчика характерны также волоски шлангообразной или пальцевидной формы, 1–3-клеточные, покрытые шероховатой кутикулой, иногда со спавшимися клетками. Железистые волоски на одноклеточной ножке с шаровидной одноклеточной головкой, реже встречаются волоски с шаровидной головкой на длинной 1–3-клеточной ножке.

При рассмотрении «давленого» препарата стебля должны быть видны прямоугольно вытянутые клетки эпидермиса с прямыми стенками и устьица диацитного типа. На поверхности встречаются мелкие одноклеточные сосочковидные и конусовидные волоски с бородавчатой кутикулой, а также головчатые волоски с одноклеточной шаровидной головкой на короткой одноклеточной ножке; толстостенные механические волокна; проводящие пучки представлены спиральными сосудами.

Порошок. При рассмотрении микропрепаратов порошка должны быть видны фрагменты эпидермиса листьев, клетки которого имеют извилистые стенки и устьица диацитного типа; эфирномасличные желёзки округлой формы с 8 (реже 6) радиально расположенными выделительными клетками, многочисленные волоски 2-х типов: простые – от мелких одноклеточных сосочковидных и конусовидных, до очень крупных многоклеточных, как бородавчатых, так и гладкостенных (у крупных волосков часто одна или несколько спавшихся клеток) и головчатые – в большом количестве мелкие с одноклеточной шаровидной головкой на длинной 1–3-клеточной ножке; такие же волоски встречаются на фрагментах чашечки и венчика. Клетки эпидермиса венчика с сильно извилистыми стенками. Для венчика характерны также волоски шлангообразной или пальцеобразной формы,
1–3-клеточные, покрытые штриховатой кутикулой, иногда со спавшимися клетками.

При рассмотрении «давленых» микропрепаратов должны быть видны многочисленные фрагменты листовых пластинок зелёного цвета, жилок листа, длинных кроющих и головчатых волосков.

Рисунок 1. Мелиссы лекарственной трава: 1 – эпидермис листа над жилкой (верхняя сторона листа) (40×); 2 – эпидермис листа пластинки (нижняя сторона листа) (40×); 3 – лист мелиссы: крупная желёзка (400×); 4 – лист мелиссы: мелкий головчатый волосок с двух-клеточной головкой (1000×); 5 – эпидермис нижней стороны листа: диацитное устьице (1000×); 6 – опушение по жилке листовой пластинки: клетки эпидермы над жилкой; 7 – опушение по жилке листа: простой одноклеточный волосок; 8 – опушение по жилке листа: верхушечная клетка простого многоклеточного волоска; 9 – опушение по жилке листа: основание простого многоклеточного волоска; 10 – общий вид железистого волоска (100×); 11 – железистая головка (400×); 12 – клетка основания железистого волоска (400×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—муравьиная кислота безводная—этилацетат 3:3:45.

Испытуемый раствор. В коническую колбу со шлифом вместимостью 50 мл, помещают 1,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, прибавляют 10 мл спирта 96 %, нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 10 мин. После охлаждения полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

Раствор стандартного образца лютеолин-7-глюкозида. Около 5 мг стандартного образца лютеолин-7-глюкозида растворяют в 10 мл спирта 96 %.

Раствор стандартного образца розмариновой кислоты. Около 5 мг стандартного образца розмариновой кислоты растворяют в 10 мл спирта 96 %.

Реактив для детектирования 1. Дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствор 1 % в спирте 96 %.

Реактив для детектирования 2. Макрогола 400 раствор спиртовой 5 %.

На линию старта пластинки наносят 20 мкл испытуемого раствора, 2 мкл раствора стандартного образца лютеолин-7-глюкозида и 5 мкл раствора стандартного образца розмариновой кислоты. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 1 ч ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт около 80–90 % от линии старта пластинки, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей.

Затем выдерживают при 100–105 °С в течение 2 мин и ещё горячую опрыскивают реактивом для детектирования 1, затем сушат в вытяжном шкафу в течение 5 мин и опрыскивают реактивом для детектирования 2. Через 30 мин просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

Результат. На хроматограмме растворов стандартных образцов должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией от жёлтого до жёлто-оранжевого цвета (лютеолин-7-глюкозид); в верхней части пластинки должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией голубого цвета (розмариновая кислота).

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться: зона адсорбции с флуоресценцией от жёлтого до жёлто-оранжевого цвета на уровне зоны адсорбции стандартного образца лютеолин-7-глюкозида; зона адсорбции с флуоресценцией голубого цвета на уровне зоны адсорбции стандартного образца розмариновой кислоты; допускается обнаружение других зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 12,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 12,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, не растворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 3,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, – не более 5 %.

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, − не более 17 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, – не более 5 %.

Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, − не более 10 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм − не более 10 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Стеблей (в том числе отделённых при анализе). Цельное сырьё, измельчённое сырье – не более 50 %.

Органическая примесь. Цельное сырьё, измельчённое сырьё − не более 2 %.

Минеральная примесь. Не более 1 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. Помещают 1,0 г (точная навеска) измельчённого сырья в колбу с притёртой пробкой вместимостью 100 мл, прибавляют 40 мл спирта 70 % и взвешивают с погрешностью ±0,01 г. Колбу с содержимым присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 1 ч. Затем содержимое колбы охлаждают до комнатной температуры и взвешивают, при необходимости доводят спиртом 70 % до первоначальной массы. Содержимое колбы фильтруют через беззольный фильтр.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки. Далее в мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Оптическую плотность испытуемого раствора измеряют на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 1 см при длине волны 326 нм относительно спирта 96 %.

Содержание суммы фенольных соединений в пересчёте на розмариновую кислоту в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
500 - удельный показатель поглощения розмариновой кислоты при длине волны 326 нм, ;
a - навеска сырья, г;
W - влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0121 Облепихи крушиновидной плоды

Hippophaes rhamnoides fructus

Вводится впервые

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные поздним летом или в начале осени зрелые, высушенные плоды многолетнего дикорастущего или культивируемого кустарника или небольшого дерева облепихи крушиновидной – Hippophae rhamnoides L., сем. лоховых – Eleagnaceae.

Содержит:

- не менее 0,04 % суммы каротиноидов в пересчёте на β-каротин в сухом сырье;

- не менее 6,0 % содержания жирного масла в пересчёте на сухое сырьё.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Плоды».

Цельное сырье. Плоды длиной 5–10 мм, диаметром 5–8 мм, продолговатые, сильно сморщенные, в размоченном виде овальные, с одной косточкой, с плодоножкой или без. Мякоть плода образована из цветоложа. Косточка в очертании вытянутая обратнояйцевидная, тёмно-коричневая, поверхность гладкая блестящая, с чётко заметной продольной линией, до 6 мм длиной.

Цвет плодов от жёлтого до жёлтого с коричневатым оттенком. Запах характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрении микропрепарата должны быть видны клетки эпидермиса гипантия многоугольные с прямыми, местами чётковидноутолщёнными стенками. На поверхности эпидермиса встречаются щитковидные волоски различных размеров, а также ножки в виде розетки длинных тонкостенных узких клеток (6–10 клеток), расположенных около центральной округлой клетки, являющихся местом прикрепления щитковидного волоска. На верхушке плода присутствуют звёздчатые волоски, которые состоят из 5 и более длинных узких клеток, сросшихся основаниями.

Наружный слой околоплодника плодов состоит из 1–2 рядов колленхимы, расположенной непосредственно под эпидермисом. Мякоть плода состоит из клеток паренхимы, разнообразных по форме и размерам, часто почти полностью расплывшихся, оставляющих полужидкую массу с включёнными в неё расплывшимся и частично целыми клетками. В паренхиме мякоти обнаруживаются секреторные ходы и проводящие пучки спирального типа, содержащие жирное масло. Каменистые клетки неправильной формы.

Паренхима мякоти ограничивается от косточки тонким плотным мешочком, являющимся стенкой собственно плода, которая заканчивается в верхней части столбиком. Стенка собственно плода состоит из 3 слоёв. Наружный слой состоит из вытянутых клеток с чётковидноутолщёнными стенками, ориентированных поперечно. Очень редко на поверхности наружного слоя встречаются щитковидные волоски (такие же, как на эпидермисе гипантия). Промежуточный слой состоит из тонкостенных изодиаметрических клеток неправильной формы. Внутренний слой склеренхимный, представленный рыхло расположенными пористыми, в основном, продольно вытянутыми, реже разнонаправленными клетками с сильно-утолщёнными стенками. Внутренний слой содержит проводящие пучки, включающие спиральные трахеиды.

Эпидермис кожуры семени состоит из характерных палисадных клеток с неравномерно утолщённой оболочкой. В нижней четверти клетки наблюдается хорошо выраженная полость. За палисадными клетками следует слой мелкоклеточной спавшейся паренхимы. Под ней расположено несколько рядов крупных клеток, за которыми следуют спавшиеся клетки – остаток перисперма. Далее расположены ряд клеток алейронового слоя и мелкоклеточный зародыш с хорошо различимой палисадной тканью в семядолях, пронизанной рядом проводящих пучков. Клетки зародыша богаты маслом и содержат алейроновые зёрна.

Рисунок 1. Облепихи крушиновидной плоды: 1 – эпидермис гипантия с местом прикрепления щитковидного волоска (250×); 2 – щитковидный волосок (125×); 3 – звёздчатые волоски на верхушке плода (100×); 4 – паренхима мякоти (250×); 5 – сосудисто-волокнистый пучок со спиральными трахеидами во внутренних слоях мякоти (250×); 6 – капли жирного масла (125×); 7 – рыхлорасположенные клетки внутреннего слоя плода (250×); 8 – поперечный срез кожуры семени (125×); 9 – эпидермис плода (250×); 10 – полисадные клетки с неравномерно утолщённой оболочкой (250×); 11 – зародыш семени (100×).

Определение основных групп биологически активных веществ

1. Спектрофотометрия. Спектр поглощения испытуемого раствора, приготовленного для количественного определения, в области длин волн от 360 до 600 нм должен иметь максимум при 448±4 нм.

2. Качественная реакция. К 5,0 мл исходного раствора, приготовленного для количественного определения, прибавляют 0,5 мл азотной кислоты концентрированной и кипятят на водяной бане в течение 1 мин; должно наблюдаться окрашивание коричнево-красного цвета (токоферолы).

3. Качественная реакция. К 5,0 мл исходного раствора, приготовленного для количественного определения, прибавляют
   0,05–0,10 мл серной кислоты концентрированной; должно наблюдаться окрашивание тёмно-синего цвета (каротиноиды).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 14,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 4,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 1,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Другие части растения. Не более 1 %.

Органическая примесь. Не более 1 %.

Минеральная примесь. Не более 0,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Зараженность вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Сумма каротиноидов. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. В колбу со шлифом вместимостью 250 мл помещают 2,0 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 100 мл спирта 95 % и взвешивают с погрешностью ±0,01 г. Колбу присоединяют к обратному холодильнику, нагревают на водяной бане в течение 60 мин, периодически встряхивая для смывания частиц сырья со стенок. Затем колбу с содержимым охлаждают до комнатной температуры, взвешивают и при необходимости доводят до первоначальной массы спиртом 95 %. Извлечение фильтруют через беззольный фильтр, смоченный тем же спиртом, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора спиртом 95 % до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 448±4 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно спирта 95 %.

Содержание суммы каротиноидов в пересчете на β-каротин в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A – оптическая плотность испытуемого раствора;
2500 – удельный показатель поглощения -каротина ( );
a – навеска сырья, г;
W – влажность сырья, %.

Масло жирное. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания жирных масел в лекарственном растительном сырье и лекарственных средствах растительного происхождения», метод 1 (навеска сырья – 10,0 г; экстрагент – гексан; величина частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм).

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0088 Ортосифона тычиночного (почечного чая) листья

Orthosiphonis staminei folia

Взамен ФС.2.5.0088.18

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в течение вегетации и высушенные листья и верхушки побегов культивируемого многолетнего травянистого растения ортосифона тычиночного (почечного чая) – Orthosiphon stamineus Benth., сем. яснотковых – Lamiaceae.

Содержит:

- не менее 5,0 % суммы дубильных веществ в пересчёте на танин в сухом сырье;

- не менее 3,0 % органических кислот в пересчёте на яблочную кислоту в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Листья».

Цельное сырьё. Смесь кусков листьев, кусков стеблей и верхушек побегов с верхушечной почкой. Листья изломанные, реже цельные, частично скрученные, короткочерешковые. Пластинка листа ромбовидно-эллиптическая или продолговато-яйцевидная, на верхушке заострённая, у основания клиновидная, в верхней части крупнопильчатая, у основания цельнокрайняя, сверху голая, снизу по жилкам с редкими волосками. По всей пластинке листа встречаются точечные желёзки (под лупой). Стебли четырёхгранные, толщиной до 2,5 мм, длиной до 120 мм. Верхушки побегов с супротивными листьями.

Цвет листьев зелёный, серовато-зелёный или фиолетово-коричневый; стеблей – зеленовато-коричневый, фиолетово-коричневый, на изломе желтовато-белый, цвет жилки красно-фиолетовый. Запах слабый.

Измельчённое сырьё. Кусочки листьев, стеблей и побегов различной формы, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 7 мм. Цвет зелёный, серовато-зелёный, красно-фиолетовый или фиолетово-коричневый. Запах слабый.

Порошок. Кусочки листьев и стеблей различной формы, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

Цвет зелёный, серовато-зелёный с красно-фиолетовыми, фиолетово-коричневыми, зеленовато-коричневыми и коричневыми вкраплениями. Запах слабый.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё, измельченное сырьё. При рассмотрении микропрепаратов листа с поверхности должны быть видны многоугольные клетки эпидермиса с прямыми или слабоизвилистыми стенками – верхняя сторона и с сильноизвилистыми стенками, клетками меньше по размеру – нижняя сторона. Эпидермис стебля состоит из клеток удлинённо-прямоугольной или изодиаметрической формы с прямыми стенками. Устьица присутствуют на обеих сторонах листа, более многочисленные на нижней стороне, и сопровождаются 2–3 околоустьичными клетками (аномоцитный тип или диацитный). Эфирномасличные желёзки состоят из короткой одноклеточной ножки и довольно крупной округлой или округло-четырёхугольной головки (из 4, реже 6–8 клеток), в которой часто обнаруживается коричневое или тёмно-коричневое содержимое. Клетки эпидермиса вокруг места прикрепления желёзки образуют розетку. Встречаются простые и головчатые волоски на обеих сторонах листа. Простые волоски представлены одноклеточными и многоклеточными волосками из 2–7 клеток с бородавчатой поверхностью. По краю листа и по жилкам волоски более крупные. Головчатые волоски состоят из округлой одно-, двухклеточной головки, часто заполненной жёлто-коричневым содержимым, и короткой одноклеточной ножки. Жилки содержат преимущественно лестничные и спиральные сосуды.

Порошок. При рассмотрении микропрепаратов должны быть видны фрагменты эпидермиса из клеток с прямыми слабоизвилистыми или сильноизвилистыми стенками. Фрагменты тканей стеблей, черешков и крупных жилок видны обычно в продольном сечении и характеризуются почти прямостенными клетками и сосудами со спиральным типом вторичного утолщения стенок. Устьица сопровождаются 2 околоустьичными клетками, расположенными перпендикулярно устьичной щели (диацитный тип). Также встречаются устьица, окружённые 2‑3 клетками (аномоцитный тип). Волоски двух типов: головчатые на короткой одноклеточной ножке с одно-, двухклеточной шаровидной головкой и простые одно- и многоклеточные с бородавчатой поверхностью. Эфирномасличные желёзки, по форме округлые или округло-четырёхугольные, состоят из 4 реже 6–8 выделительных клеток.

Рисунок. Ортосифона тычиночного (почечного чая) листья: 1 – фрагмент верхней стороны листа: a – клетки эпидермиса со слабоизвилистыми стенками, b – устьица диацитного типа, c – эфирномасличная желёзка, d – головчатый волосок, e – простой многоклеточный волосок с бородавчатой поверхностью (2-х клеточный волосок) (200×); 2 – фрагмент нижней стороны листа: a – клетки эпидермиса с сильноизвилистыми стенками, b – устьица диацитного типа, c – эфирномасличная желёзка, d – головчатый волосок, e – простой многоклеточный волосок с бородавчатой поверхностью (2-х клеточный волосок) (200×); 3 – фрагмент стебля: a – клетки эпидермиса с прямыми стенками, b – устьица, c – головчатый волосок, d – простой многоклеточный волосок с бородавчатой поверхностью (200×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография

Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ): Муравьиная кислота безводная—этилацетат—хлороформ 5:20:25.

Испытуемый раствор. Около 1,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 5 мл спирта 96 % и нагревают с обратным холодильником на кипящей водяной бане до кипения. После охлаждения полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

Раствор стандартного образца розмариновой кислоты. Около 5 мг розмариновой кислоты растворяют в 10 мл спирта 96 %.

На линию старта пластинки полосами длиной 10 мм и шириной не более 2 мм наносят по 5 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца розмариновой кислоты. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 15 мин, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 1 ч ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт около 80–90 % от линии старта пластинки, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

Результат

На хроматограмме раствора стандартного образца розмариновой кислоты должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией голубого или синего цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должно обнаруживаться: зона адсорбции с флуоресценцией голубого или синего цвета на уровне зоны адсорбции раствора стандартного образца розмариновой кислоты; выше зоны адсорбции раствора стандартного образца розмариновой кислоты зона адсорбции с флуоресценцией голубого или синего цвета; над ней зона адсорбции с флуоресценцией ярко-голубого цвета; над ней зона адсорбции с флуоресценцией голубого или синего цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 12,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 12,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 5,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, − не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, − не более 5 %.

Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, – не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, – не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Листьев почерневших с обеих сторон. Цельное сырьё, измельчённое сырьё – не более 2 %.

Стебли, в том числе, отделённые при анализе. Цельное сырьё – не более 30 %.

Кусочки стеблей. Измельчённое сырьё – не более 30 %.

Органическая примесь. Цельное сырьё, измельчённое сырьё – не более 1 %.

Минеральная примесь. Не более 1 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Дубильные вещества. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания дубильных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных средствах растительного происхождения» (метод 1).

Органические кислоты

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Испытуемый раствор. В колбу вместимостью 250 мл помещают 5,0 г (точная навеска) сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, прибавляют 200 мл воды, тщательно перемешивают и выдерживают на водяной бане в течение 2 ч. Затем извлечение охлаждают, фильтруют через вату в мерную колбу вместимостью 250 мл, доводят объём содержимого колбы водой до метки.

В колбу вместимостью 250 мл помещают 10,0 мл испытуемого раствора, прибавляют 20 мл свежепрокипячённой воды и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до синего окрашивания, не изменяющего цвет в течение 1 мин (индикатор – 1 мл бромтимолового синего раствор 0,1 % спиртовой).

Содержание суммы свободных органических кислот в пересчёте на яблочную кислоту в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где V - объём 0,1 М раствора натрия гидроксида, израсходованный на титрование испытуемого раствора, мл;
а – навеска сырья, г;
0,0067 - количество яблочной кислоты, соответствующее 1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида, г;
W – влажность сырья, %;

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0122 Пассифлоры инкарнатной (Страстоцвета мясо-красного) трава

Passiflorae incarnatae herba

Взамен ФС 42-2784-91

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в фазу цветения и начала плодоношения, высушенная трава культивируемой многолетней травянистой лианы Пассифлоры инкарнатной (Страстоцвета мясо-красного) – Passiflora incarnata L., сем. страстоцветных – Passifloraceae.

Содержит не менее 1,5 % суммы флавоноидов в пересчёте на витексин в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Травы».

Цельное сырьё. Смесь кусков стеблей длиной 50–60 см, листьев, закрученных в спираль усиков, бутонов, незначительного количества цветков и незрелых плодов. Стебли деревянистые, полые, мелкобороздчатые, гладкие или слегка опушённые, диаметром до 8 мм. Листья простые, очерёдные, на длинных черешках, тройчатораздельные с крупной центральной долей, доли эллиптические с заострённой верхушкой и пильчатым краем, с обеих сторон слабоопушённые; с нижней стороны хорошо заметна центральная жилка. Черешки опушены, имеют два тёмных нектарника около листовой пластинки. Усики многочисленные, тонкие, гладкие, круглые, растут в пазухах листьев, на концах закручены в спираль. Бутоны продолговатые, с пятью шиповатыми выростами на верхушке. Цветки одиночные, крупные, пятичленные с двойным околоцветником. Чашелистики ланцетные, кожистые, несущие на верхушке шиповатые выросты. Венчик состоит из пяти вытянутых лепестков с несколькими рядами нитевидных привенчиков, образующих «корону». Плоды обратнояйцевидной формы,
сильно морщинистые, хрупкие, диаметром до 3 см, содержат несколько плоских морщинистых семян.

Цвет стеблей от зелёного до зеленовато-серого или светло-коричневого; листьев – зелёный или зеленовато-коричневый с верхней стороны, серо-зелёный с нижней стороны; венчика – от светло-розового до фиолетового цвета; плодов и семян – от зелёного до светло-коричневого. Запах слабый, характерный.

Измельчённое сырьё. Смесь неоднородных кусочков стеблей, листьев, усиков, бутонов, незначительного количества цветков и незрелых плодов, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм. При рассмотрении под лупой (10×, 16×) должны быть видны кусочки мелкобороздчатых стеблей от зелёного до зеленовато-серого или светло-коричневого цвета; кусочки листовой пластинки с одной стороны – зелёного или зеленовато-коричневого цвета, с другой – серо-зелёного; фрагменты венчика от светло-розового до фиолетового цвета; фрагменты плодов и семян от зелёного до
светло-коричневого цвета.

Цвет сырья от зелёного до серо-зелёного или светло-коричневого цвета с вкраплениями от светло-розового до фиолетового цвета. Запах слабый, характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё, измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепарата листа с поверхности должны быть видны слабоизвилистые клетки эпидермиса верхней стороны листа и извилистые клетки с нижней стороны. Устьица имеются на обеих сторонах листа, в основном с нижней стороны, окружены 3–5 клетками эпидермиса (аномоцитный тип). На верхней стороне встречаются простые одно-, трёх- и пятиклеточные волоски, в месте прикрепления которых эпидермис имеет радиальную складчатость кутикулы, встречаются головчатые волоски на одноклеточной ножке с многоклеточной головкой. На нижней стороне наблюдаются сосочковидные волоски и головчатые волоски на одноклеточной ножке с многоклеточной головкой. Палисадный мезофилл, расположенный под верхним эпидермисом, состоит из 2–3 рядов плотно сомкнутых, прямоугольно-удлинённых клеток. С нижней стороны листа находится губчатый мезофилл, сложенный из рыхло расположенных овальных тонкостенных клеток, между которыми находятся уплощённые межклетники. Средняя жилка листа представлена открытым коллатеральным проводящим пучком, более мелкие боковые жилки имеют закрытые коллатеральные пучки. В клетках мезофилла имеются друзы кальция оксалата, над жилками они располагаются в большом количестве.

Эпидермис стебля состоит из продольно вытянутых, плотно сомкнутых клеток с прямыми стенками. Волоски и устьица на стебле встречаются редко. Под эпидермисом располагается хорошо развитая первичная кора, наружный слой которой представлен двумя рядами уголковой колленхимы. За колленхимой следует 3–4 ряда тонкостенной паренхимы первичной коры. Верхняя часть стебля имеет отчётливое пучковое строение. Основная часть центрального осевого цилиндра представляет собой паренхиму, пронизанную изолированными открытыми коллатеральными проводящими пучками, сосуды сетчатые. Клетки основной паренхимы крупные, овальные, с равномерно утолщёнными клеточными стенками. Центральная часть стебля состоит из крупных, тонкостенных, неспециализированных клеток сердцевинной паренхимы. В базальной части стебля клетки основной паренхимы одревесневают, в центре формируется воздухоносная полость. Устьица располагаются в бороздках, ориентированы главным образом вдоль оси стебля.

Эпидермис усиков образован одним слоем клеток с кутикулой, под которым по периферии располагается 2–3 слоя уголковой колленхимы, за которой следует 3–4 ряда хлоренхимы первичной коры. Сосудистая система представлена 7–9 открытыми коллатеральными проводящими пучками. Проводящие пучки разделены межпучковой паренхимой, которая связывает сердцевину и первичную кору. В базальной части усиков, так же как и у стебля, основная паренхима одревесневает, в центре формируется воздухоносная полость.

Клетки эпидермиса лепестков с сосочковидными выростами, в паренхиме встречаются спиральные сосуды и друзы кальция оксалата. Пыльцевые зёрна с сетчатой экзиной.

Клетки паренхимы плодов с тёмно-коричневым содержимым (флобафены).

Рисунок 1. Пассифлоры инкарнатной трава: 1 – эпидермис верхней стороны листа над палисадной тканью (200×); 2 – эпидермис нижней стороны листа с устьицами аномоцитного типа (200×); 3 – эпидермис нижней стороны листа с простыми волосками вдоль жилки (100×); 4 – одиночный простой волосок (200×); 5 – сетчатые сосуды листа (100×); 6 – друзы кальция оксалата над жилкой с нижней стороны листа (100×); 7 – сетчатые сосуды стебля (200×); 8 – эпидермис лепестка с сосочковидными выростами, спиральными сосудами и друзами кальция оксалата (200×); 9 – пыльца с сетчатой экзиной (400×); 10 – мезокарпий плода с тёмно-коричневым содержимым (200×).

Определение основных групп биологически активных веществ

1. ТСХ. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля (2–10 мкм).

- Подвижная фаза (ПФ). Вода—муравьиная кислота безводная—метилэтилкетон—этилацетат 10:10:30:50.

- Раствор рутина. Около 0,002 г рутина растворяют в 10 мл метанола и перемешивают.

- Раствор гиперозида. Около 0,002 г гиперозида растворяют в 10 мл метанола и перемешивают.

- Испытуемый раствор. В коническую колбу с пробкой вместимостью 50 мл помещают 1,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,3 мм, прибавляют 5 мл метанола и кипятят с обратным холодильником в течение 10 мин. После охлаждения полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.

- Реактив для детектирования 1. Дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствор 1 % в спирте 96 %.

- Реактив для детектирования 2. Макрогола 400 раствор спиртовой 5 %.

- На линию старта хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят по 10 мкл испытуемого раствора, раствора рутина и раствора гиперозида. Пластинку с нанесёнными пробами сушат при комнатной температуре, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 20 мин ПФ, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, выдерживают при температуре 100–105 °С в течение 2–5 мин и обрабатывают реактивом для детектирования 1, затем реактивом для детектирования 2. Просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

- На хроматограмме раствора рутина и раствора гиперозида должна обнаруживаться в нижней трети зона адсорбции с флуоресценцией жёлтого, жёлто-оранжевого или желтовато-коричневого цвета (рутин) и в средней трети зона адсорбции с флуоресценцией жёлтого, жёлто-оранжевого или желтовато-коричневого цвета (гиперозид).

- На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться в нижней трети зоны адсорбции с флуоресценцией жёлтого цвета ниже зоны адсорбции рутина, над ней зона адсорбции с флуоресценцией зёленого цвета; в средней трети зона адсорбции с флуоресценцией жёлтого цвета ниже зоны адсорбции гиперозида, над ней зона адсорбции с флуоресценцией зелёного цвета; в верхней трети зона адсорбции с флуоресценцией коричневато-жёлтого цвета, над ней – зона адсорбции с флуоресценцией зелёного цвета (последние две зоны могут отсутствовать); допускается обнаружение других зон адсорбции (флавоноиды).

- Другие виды пассифлоры. На хроматограмме испытуемого раствора не должны обнаруживаться зоны адсорбции с флуоресценцией зеленовато-жёлтого или оранжево-жёлтого цвета между зоной адсорбции с флуоресценцией зелёного цвета в нижней трети хроматограммы и зоной адсорбции с флуоресценцией жёлтого цвета в средней трети ниже зоны адсорбции гиперозида.

2. Качественная реакция. В колбу вместимостью 100 мл помещают около 2,5 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, прибавляют 30 мл спирта 60 % и 0,5 мл уксусной кислоты ледяной и кипятят с обратным холодильником в течение 10 мин. После охлаждения до комнатной температуры извлечение фильтруют через беззольный фильтр в делительную воронку вместимостью 250 мл, прибавляют 30 мл хлороформа и 2 мл аммиака раствора концентрированного 25 % и взбалтывают 3 мин. После разделения слоёв хлороформный слой фильтруют через предварительно смоченный хлороформом беззольный фильтр, содержащий 1 г натрия сульфата безводного, в круглодонную колбу вместимостью 100 мл. Фильтрат упаривают на роторном испарителе досуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл хлористоводородной кислоты разведённой 8,3 %. Полученный раствор фильтруют в пробирку через беззольный фильтр, предварительно смоченный хлористоводородной кислотой разведённой 8,3 %, добавляют 1 мл реактива Майера. Раствор должен помутнеть и постепенно должен выпасть осадок от светло-жёлтого до жёлто-коричневого цвета (алкалоиды).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 10,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 13,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 2,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, – не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, – не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Незрелые плоды. Цельное сырьё – не более 6 %.

Части стебля. Не более 60 %.

Органическая примесь. Не более 2 %.

Минеральная примесь. Не более 1 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Борной кислоты и щавелевой кислоты раствор в муравьиной кислоте безводной. Растворяют 2,5 г борной кислоты и 2,0 г щавелевой кислоты в 100 мл муравьиной кислоты безводной.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. В круглодонную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,2 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 40 мл спирта 60 % и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 30 мин. После охлаждения фильтруют через ватный тампон в колбу вместимостью 100 мл. Ватный тампон с остатками сырья помещают в ту же круглодонную колбу, прибавляют 40 мл спирта 60 % и снова нагревают в водяной бане с обратным холодильником при температуре 60 °С в течение 10 мин. После охлаждения полученную смесь, объединяя с первым фильтратом, фильтруют через беззольный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл. Круглодонную колбу, колбу вместимостью 100 мл и фильтр ополаскивают спиртом 60 % и прибавляют смывы к полученной смеси в мерной колбе вместимостью 100 мл. Доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Полученный раствор фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 10 мл фильтрата. В круглодонную колбу помещают 5,0 мл фильтрата и выпаривают на роторном испарителе досуха. Сухой остаток количественно переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, используя 10 мл смеси уксусная кислота ледяная—метанол 100:10 и 10 мл борной кислоты и щавелевой кислоты раствора в муравьиной кислоте безводной, доводят объём раствора уксусной кислотой безводной до метки.

Раствор сравнения. В круглодонную колбу помещают 5,0 мл фильтрата, выпаривают на ротационном испарителе досуха. Сухой остаток количественно переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, используя 10 мл смеси уксусная кислота ледяная—метанол 100:10 и 10 мл муравьиной кислоты безводной, доводят объём раствора уксусной кислотой безводной до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора через 30 мин на спектрофотометре при длине волны 401 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения.

Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на витексин в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
а - навеска сырья, г;
628 - удельный показатель поглощения продуктов фотометрической реакции витексина при длине волны 401 нм ( );
W - влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0090 Пастушьей сумки обыкновенной трава

Capsella bursae-pastoris herba

Взамен ФС.2.5.0090.18

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в фазы цветения и начала плодоношения (до побурения плодов) и высушенная надземная часть дикорастущего однолетнего растения пастушьей сумки обыкновенной – Capsella bursa-pastoris (L.) Medik., сем. капустных – Brassicaceae

Содержит не менее 0,5 % суммы флавоноидов в пересчёте на рутин в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Травы».

Цельное сырьё. Облиственные стебли длиной до 40 см, простые или ветвистые, с ребристой поверхностью, голые или в нижней части слабо опушённые, с цветками, бутонами и незрелыми плодами в кистевидных соцветиях, часто с розеткой прикорневых листьев. Прикорневые листья черешковые, продолговато-ланцетные, перистораздельные, с острыми треугольными струговидно-выемчатыми, цельнокрайними или зубчатыми долями; стеблевые – очерёдные, сидячие, продолговато-ланцетные цельнокрайние или выемчато-зубчатые; верхние – почти линейные со стреловидным основанием. Цветки мелкие до 4 мм в диаметре, правильные, раздельнолепестные. Чашечка из 4 продолговато-яйцевидных, зелёных чашелистиков. Венчик из 4 обратнояйцевидных лепестков. Плоды – стручочки, обратно треугольно-сердцевидные, на верхушке слегка выемчатые, сплюснутые, с двумя раскрывающимися створками и с мелкими светло-коричневыми семенами.

Цвет стеблей, листьев и плодов от серовато-зелёного до зелёного, цветков и бутонов – беловатый. Запах слабый.

Измельчённое сырьё. Кусочки листьев, стеблей и соцветий различной формы, отдельные цветки, бутоны, плоды и их части, семена, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

При рассмотрении измельчённого сырья под лупой (10×) и др. видны кусочки листовых пластинок, на нижней и верхней сторонах которых заметны трёх-, шести-, семиконечные волоски, реже– простые крупные заострённые волоски.

Цвет стеблей, листьев и плодов зелёный, цветков – беловатый, семян – светло-коричневый. Запах слабый.

Порошок. Кусочки листьев и стеблей различной формы, отдельные бутоны, части цветков и плодов, семена, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

При рассмотрении порошка под лупой (10×) и др. на нижней и верхней сторонах кусочков листовых пластинок видны трёх-, шести-, семиконечные волоски, реже – простые крупные заострённые волоски. Цвет серовато-зелёный с серовато- или желтовато-белыми, светло-коричневыми вкраплениями. Запах слабый.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрении листа с поверхности должны быть видны мелкие клетки эпидермиса с тонкими стенками, с верхней стороны слабоизвилистые, с нижней – сильноизвилистые. Устьица с обеих сторон, на нижней стороне их больше, мелкие, окружены тремя клетками эпидермиса, из которых одна значительно мельче двух других (анизоцитный тип). На обеих сторонах листа – многочисленные одноклеточные разветвлённые волоски: трёх-, шести-, реже двух-, пяти- или семиконечные с грубобородавчатой поверхностью, лучи волоска прижаты к поверхности листа; простые волоски крупные, конические (с широким основанием и узкой заострённой верхушкой) одно- или многоклеточные, с гладкой или слегка бородавчатой поверхностью.

Рисунок 1. Пастушьей сумки трава: 1 – верхний эпидермис листа: а – устьице анизоцитного типа; б – клетки со слегка извилистыми стенками (40×), 2 – нижний эпидермис листа: а – устьице анизоцитного типа; б – клетки с сильно извилистыми стенками (40×); 3– пятиконечный одноклеточный разветвлённый волосок с грубобородавчатой поверхностью (40×); 4 – трёхконечный одноклеточный разветвлённый волосок с грубобородавчатой поверхностью (40×); 5 – разновидности волосков на поверхности листа пастушьей сумки (200×): а – пятиконечный разветвлённый волосок с грубобородавчатой поверхностью, б – одноклеточный двухконечный волосок, в – одноклеточный трёхконечный волосок, г – простой одноклеточный волосок, д – простой трёхклеточный волосок.
Рисунок 2. Пастушьей сумки трава: 1 – двухконечные волоски с лучами, приподнимающимися над поверхностью листа (40×); 2 – трёхконечные волоски (40×); 3 – розетка клеток при основании волоска (40×); 4 – заострённая верхушка волоска (40×); 5 – гладкая поверхность одноклеточного волоска (40×).

Эпидермис основания лепестка цветка с внешней и внутренней сторон состоит из клеток удлинённой формы с тонкими прямыми стенками. Постепенно к верхушке лепестка они сменяются клетками изодиаметрической формы с сосочковидновытянутой стенкой. Клетки эпидермиса чашелистика с двух сторон имеют удлинённо-вытянутую форму, извилистые стенки и складчатую кутикулу. Встречаются многочисленные устьица анизоцитного типа. Редко обнаруживаются простые одноклеточные волоски с слабобородавчатой поверхностью, толстыми стенками и заострённой верхушкой. В микропрепарате также обнаруживаются округлые пыльцевые зёрна.

Эпидермис створки плода образован клетками удлинённо-вытянутой формы с тонкими слабо извилистыми стенками. Под эпидермисом обнаруживается слой склеренхимных волокон с толстыми пористыми стенками, расположенных перпендикулярно проводящим пучкам.

При рассмотрении «давленого препарата» стебля должны быть хорошо видны клетки эпидермиса удлинённо-прямоугольной формы с прямыми стенками, основные диагностические признаки (тип устьиц, волоски), характерные для пастушьей сумки; проводящие пучки, состоящие из спиральных, кольчатых и сетчатых сосудов.

Измельчённое сырьё, порошок. При исследовании микропрепаратов должны быть видны фрагменты листовой пластинки с эпидермисом, состоящим из клеток со слабо извилистыми и сильно извилистыми стенками и устьицами анизоцитного типа. На некоторых фрагментах должны быть видны простые одноклеточные волоски с широким основанием и узким заострённым концом и гладкой или слабобородавчатой поверхностью, а также волоски разветвлённые одноклеточные, многоконечные (3–7-конечные) с грубобородавчатой поверхностью. Реже встречаются фрагменты с однокле-точными двуконечными (вильчатыми) волосками. В микропрепарате могут встречаться отдельные волоски или их обломки. Кроме того, в микропрепарате обнаруживаются фрагменты цветка (лепестков, тычинок, пестика, чашелистиков, пыльцевые зёрна), плода и стебля. Фрагменты цветков и стебля должны обнаруживать те же диагностические признаки (устьица анизоцитного типа, волоски), что и на фрагменты листа. Фрагменты плода должны быть представлены фрагментами эпидермиса, образованного клетками удлинённо-вытянутой формы с тонкими слабо извилистыми стенками, фрагментами склеренхимных волокон с толстыми пористыми стенками, расположенных перпендикулярно проводящим пучкам.

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография

Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Толуол–петролейный эфир с температурой кипения 40 – 70 °С (1:1).

Раствор стандартного образца витамина К1. Растворяют 20 мг фармакопейного стандартного образца витамина К1 в 25 мл гексана.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. Около 1,0 г измельчённого сырья помещают в колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 10 мл гексана и встряхивают на механическом встряхивателе в течение 1,5 ч. Затем фильтруют через беззольный фильтр, отгоняют растворитель на ротационном испарителе при температуре водяной бани не выше 45 °С до полного удаления органического растворителя. Остаток растворяют в 0,5 мл гексана.

На линию старта пластинки в виде полосы длиной 10 мм и шириной не более 2 мм наносят 50 мкл испытуемого раствора и 5 мкл раствора стандартного образца витамина К1. Пластинку с нанесёнными пробами сушат в вытяжном шкафу в течение 5 мин, помещают в камеру, выложенную изнутри фильтровальной бумагой, предварительно насыщенную в течение 40 мин ПФ, и хроматографируют восходящим способом.

Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей в вытяжном шкафу при комнатной температуре и выдерживают в УФ-свете при длине волны 365 нм в течение 2 мин.

На хроматограмме раствор стандартного образца витамина К1 должна обнаруживаться зона адсорбции от желтовато-зелёного до зеленовато-голубого цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции от желтовато-зелёного до зеленовато-голубого цвета на уровне зоны адсорбции витамина К1; допускается обнаружение других зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 10,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 2,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, – не более 5 %.

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, – не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, – не более 5 %.

Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, – не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, – не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Корни (в том числе отделённые при анализе), части растения, поражённые мучнистой росой, и пожелтевшие листья. Цельное сырьё – не более 3 %.

Органическая примесь. Цельное сырьё, измельчённое сырьё – не более 2 %.

Минеральная примесь. Не более 1 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. В колбу со шлифом вместимостью 100 мл помещают около 2,0 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 50 мл спирта 70 % и взвешивают с точностью ±0,01 г, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 45 мин. После охлаждения до комнатной температуры колбу вновь взвешивают и доводят до первоначальной массы спиртом 70 %. Содержимое колбы фильтруют через беззольный фильтр.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора, прибавляют 1 мл алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 96 %, доводят объём раствора спиртом 70 % до метки.

Раствор сравнения А. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора, доводят объём раствора спиртом 70 % до метки.

Исходный раствор стандартного образца рутина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца рутина, растворяют в спирте 70 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца рутина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора фармакопейного стандартного образца рутина, прибавляют 1 мл алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 96 % и доводят объём раствора спиртом 70 % до метки.

Оптическую плотность испытуемого раствора измеряют через 40 мин на спектрофотометре при длине волны 405 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Параллельно в тех же условиях измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца рутина.

Раствора сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора стандартного образца рутина и доводят объём раствора спиртом 70 % до метки.

Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на рутин в сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 - оптическая плотность раствора стандартного образца рутина;
aо - навеска фармакопейного стандартного образца рутина, г;
а - навеска сырья, г;
Р - содержание рутина в фармакопейном стандартном образце рутина, %;
W - влажность сырья, %.

Допускается вычислять содержание суммы флавоноидов в пересчёте на рутин в абсолютно сухом сырье с использованием удельного показателя поглощения комплекса рутина с алюминия хлоридом по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
220 - удельный показатель поглощения комплекса рутина с алюминия хлоридом при длине волны 405 нм,
а - навеска сырья, г;
W - влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0123 Первоцвета весеннего цветки

Primulae veris flores

Вводится впервые

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в фазу начала цветения, высушенные цветки дикорастущего многолетнего травянистого растения первоцвета весеннего – Primula veris L., сем. первоцветные – Primulaceae.

Содержит не менее 2,6 % суммы флавоноидов в пересчёте на рутин в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Цветки».

Цельное сырьё. Соцветия зонтик, состоят из цветков правильных, обоеполых, диаметром 7–15 мм. Околоцветник двойной, пятичленный; чашечка трубчато-колокольчатая, длиной от 9 до 20 мм, из 5 зубчиков овальной формы, длиной от 2 до 3 мм; серовато-зелёного цвета. Венчик с частично сросшимися пятью лепестками, длиннее чашечки, с воронковидным или колокольчатым отгибом, с пятью красно-жёлтыми пятнами в зеве. Тычинок 5, со свободными и короткими тычиночными нитями. Пестик с верхней завязью, столбик с головчатым или усечённым рыльцем. Цвет жёлтый. Запах характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрении лепестка с поверхности должны быть видны клетки верхнего эпидермиса с сосочковидными выростами, кутикула на вершине сосочков морщинистая; клетки нижнего эпидермиса с извилистыми стенками, местами с сосочковидными выростами, со складчатой кутикулой. Устьица округлые аномоцитного типа, располагаются в основном на нижнем эпидермисе. На эпидермисе лепестка с обеих сторон встречаются головчатые волоски, состоящие из многоклеточной ножки и одноклеточной, иногда удлинённой (грушевидной), головки. Клетки верхнего и нижнего эпидермиса чашелистика с извилистыми (зигзагообразными и зубчатыми) стенками, местами чётковидноутолщёнными. Кутикула продольно-морщинистая вдоль жилок, по краю и у вершины чашелистика. У основания волоска кутикула лучисто-морщинистая. Местами на поверхности чашелистика встречаются сосочковидные выросты. Устьица расположены с нижней стороны, округлые, аномоцитного типа; с верхней стороны устьица встречаются очень редко. С верхней и нижней стороны чашелистика встречаются головчатые волоски с одноклеточной головкой на одно- и многоклеточной ножке. Головчатые волоски расположены в основном по краю чашелистика. Эпидермис цветоножки состоит из вытянутых клеток с прямыми стенками, устьицами аномоцитного типа; кутикула продольно-морщинистая; на поверхности располагаются длинные головчатые волоски с одноклеточной головкой на многоклеточной ножке. Пыльца сферической формы.

Рисунок 1. Первоцвета весеннего цветки: 1 – фрагмент нижнего эпидермиса лепестка со складчатой кутикулой и + устьичным комплексом аномоцитного типа (400×); 2 – фрагмент эпидермиса лепестка с головчатым волоском, состоящим из многоклеточной ножки и одноклеточной удлинённой головки (400×); 3 – фрагмент эпидермиса чашелистика с головчатыми волосками, состоящими из трёхклеточной ножки и грушевидной одноклеточной головки (400×); 4 – пыльца (800×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—метанол—уксусная кислота ледяная—хлороформ 4:6:16:30.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. В колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 г измельчённого сырья, прибавляют 15 мл метанола, экстрагируют на ультразвуковой бане в течение 15 мин. Полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр, упаривают на водяной бане досуха. Сухой остаток растворяют в 1,0 мл метанола.

Раствор стандартного образца рутина. Растворяют 10 мг фармакопейного стандартного образца рутина в 10,0 мл спирта 96 %.

Реактив для детектирования 1. Дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствор 1 % в спирте 96 %.

Реактив для детектирования 2. Макрогола 400 раствор спиртовой 5 %. На линию старта пластинки в виде полос длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят по 5 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца рутина. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную в течение не менее 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Пластинку обрабатывают реактивом для детектирования 1 и сушат, а затем – реактивом для детектирования 2, сразу выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100–105 °С
в течение 1–3 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

Результат. На хроматограмме раствора рутина должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией жёлтого, жёлто-оранжевого или оранжевого цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией жёлтого, жёлто-оранжевого или оранжевого цвета на уровне зоны адсорбции рутина, выше неё зона адсорбции с флуоресценцией жёлтого, жёлто-оранжевого или оранжевого цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 14,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 10,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 2,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. Не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Сырьё, изменившее окраску. Не более 6 %.

Другие части растения (стебли, листья). Не более 4 %.

Органическая примесь. Не более 1 %.

Минеральная примесь. Не более 1 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотомерии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. В колбу вместимостью 100 мл помещают 1 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 40 мл спирта 70 %. Колбу с содержимым присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 30 мин. После охлаждения извлечение фильтруют через беззольный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл. Фильтр переносят в колбу для экстрагирования, прибавляют 40 мл спирта 70 % и повторяют экстрагирование в течение 20 мин. После охлаждения извлечения фильтруют через беззольный фильтр в ту же мерную колбу вместимостью 100 мл. Доводят объём раствора спиртом 70 % до метки и фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая 10 мл фильтрата.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора, прибавляют 10 мл спирта 70 %, 1,0 мл алюминия хлорида раствор 5 % в спирте 96 %, выдерживают в течение 15 мин, прибавляют 1,0 мл уксусной кислоты раствора 1 %, доводят объём раствора спиртом 70 % до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора, 10 мл спирта 70 %, 1,0 мл уксусной кислоты раствора 1 % и доводят объём раствора спиртом 70 % до метки.

Исходный раствор стандартного образца рутина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца рутина, прибавляют 60 мл спирта 70 %, перемешивают при нагревании до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор стандартного образца рутина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора стандартного образца рутина, 1,0 мл алюминия хлорида раствор 5 % в спирте 96 %, выдерживают в течение 15 мин, прибавляют 1,0 мл уксусной кислоты раствора 1 % и доводят объём раствора спиртом 70 % до метки.

Раствор сравнения стандартного образца рутина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора стандартного образца рутина, 1,0 мл уксусной кислоты раствора 1 % и доводят объём раствора спиртом 70 % до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре через 40 мин при длине волны 408±2 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Параллельно измеряют оптическую плотность испытуемого раствора стандартного образца рутина в аналогичных условиях. В качестве раствора сравнения используют раствор сравнения стандартного образца рутина.

Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на рутин в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 - оптическая плотность испытуемого раствора стандартного образца рутина;
а - навеска сырья, г;
а0 - навеска фармакопейного стандартного образца рутина, г;
P - содержание рутина в фармакопейном стандартном образце рутина, %;
W - влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0124 Первоцвета корневища с корнями

Primulaе rhizomata cum radicibus

Вводится впервые

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные ранней весной или осенью, очищенные от остатков надземных частей, отмытые от земли и высушенные корневища с корнями, дикорастущих и культивируемых многолетних травянистых растений первоцвета весеннего – Primula veris L. и первоцвета высокого – Primula elatior Hill., сем. первоцветные – Primulaceae.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы».

Цельное сырьё. Корневища с многочисленными придаточными корнями, иногда с короткими остатками стеблей и листьев. Корневища прямые или слегка изогнутые, длиной до 5 см и толщиной до 4 мм. Корни продольно-бороздчатые, гладкие на изломе, длиной 6–8 см и толщиной около 1 мм. Цвет корневищ серовато-коричневый. Цвет корней от светло-жёлтого до желтовато-белого (первоцвет весенний), от светло-жёлтого до красно-коричневого (первоцвет высокий). Запах слабый, характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрении микропрепарата поперечного среза корневища должна быть видна покровная ткань, представленная однорядной пробкой, клетки которой изодиаметрической формы, бурого цвета и покрыты бородавчатой кутикулой. В корковой паренхиме встречаются как отдельные крупные зеленовато-жёлтые каменистые клетки, так и их группы, идиобласты жёлто-коричневого цвета, простые и сложные крахмальные зёрна разной формы и размеров. Виден слой эндодермы, открытый коллатеральный пучок во вторичной флоэме, далее слой камбия и вторичная ксилема, включающая сетчатые и спиральные сосуды диаметром 4–54 мкм. В сердцевине могут встречаться группы каменистых клеток (первоцвет высокий).

При рассмотрении поперечного среза корня должен быть виден эпидермис (ризодерма), состоящий из неодревесневших клеток. На поверхности ризодермы встречаются одноклеточные корневые простые тупонитевидные волоски (длиной до 335 мкм) и сосочковидные выросты. Корковая паренхима представлена округлыми клетками с утолщёнными стенками, содержащими простые и сложные крахмальные зёрна разной формы и размеров. Корень имеет первичное строение: включает широкую первичную кору, эндодерму и радиальный закрытый сосудисто-волокнистый пучок. Сосуды ксилемы – сетчатые, диаметром 2–54 мкм.

Рисунок 1. Первоцвета корневища с корнями: 1 – поперечный срез корневища: а – каменистые клетки, б – идиобласты, в – эндодерма, г – вторичная флоэма, д – вторичная ксилема, е – сердцевина (40×); 2 – поперечный срез корня: а – ризодерма с простыми корневыми волосками, б – корковая паренхима, в – радиальный закрытый сосудисто-волокнистый пучок (100×); 3 – корковая паренхима (100×); 4 – поперечный срез корня, центральный осевой цилиндр: а – экзодерма, б – вторичная флоэма, в – вторичная ксилема, г – первичная ксилема (100×); 5 – сетчатые и спиральные сосуды (200×); 6 – зёрна крахмала (400×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография») в условиях испытания «Недопустимые примеси (ластовень лекарственный, корни – Vincetoxicum hirundinaria Medik.)» со следующими изменениями.

Реактив для детектирования. Анисового альдегида раствор уксуснокислый в этаноле.

Пластинку опрыскивают реактивом для детектирования, нагревают при температуре 100‑105 °С в течение 5–10 мин и просматривают при дневном свете.

Результат. На хроматограмме раствора стандартного образца эсцина должна обнаруживаться зона адсорбции голубовато-фиолетового цвета на границе между нижней и средней третями пластинки.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться: одна или две зоны адсорбции тёмно-фиолетового цвета ниже зоны адсорбции эсцина; допускается обнаружение других зон адсорбции.

Недопустимые примеси (ластовень лекарственный, корни – Vincetoxicum hirundinaria Medik)

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—вода—бутанол 10:40:50.

Испытуемый раствор. В колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, прибавляют 10 мл спирта 70 % и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 15 мин. После охлаждения содержимое колбы фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.

Раствор стандартного образца эсцина. Растворяют 10 мг эсцина в 1,0 мл спирта 70 %.

На линию старта пластинки в виде полос длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят по 20 мкл испытуемого раствора и раствор стандартного образца эсцина. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру, предварительно насыщенную ПФ в течение 1 ч, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры и сушат до удаления следов растворителей.

Просматривают пластинку в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Результат. На хроматограмме испытуемого раствора и раствора стандартного образца эсцина должна обнаруживаться зона адсорбции эсцина, расположенная на границе между нижней и средней третями пластинки.

Далее просматривают пластинку в УФ-свете при длине волны 365 нм.

Результат. На хроматограмме испытуемого раствора не должны обнаруживаться зоны адсорбции с флуоресценцией светло-синего или зеленоватого цвета ниже зоны адсорбции эсцина на хроматограмме раствора стандартного образца эсцина.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 10,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 9,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 3,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0125 Перца стручкового плоды

Capsici annui fructus

Взамен ФС 42-0161-05

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные зрелые и высушенные плоды однолетнего травянистого культивируемого растения перца стручкового – Capsicum annuum L., сем. паслёновых – Solanaceae.

Содержит не менее 0,4 % суммы капсаициноидов в пересчёте на капсаицин в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Плоды».

Цельное сырье. Плоды длиной до 16 см, шириной до 4 см, конические, иногда слабо изогнутые, обычно с пятизубчатой чашечкой и с короткой плодоножкой. Стенки плодов тонкие, ломкие, снаружи гладкие, блестящие. Внутри плоды полые с перегородками, к которым прикреплены многочисленные плоские почковидные семена. Цвет плодов от оранжево-красного до тёмно-красного; семян – жёлтый; чашечек и плодоножек – коричневато-зелёный.

Запах слабый, характерный.

Измельчённое сырьё. Сырьё исследуют невооруженным глазом или с помощью лупы (10×).

Смесь кусочков плодов, семян, чашелистиков и плодоножек различной формы, проходящих сквозь сито с размером отверстий 7 мм. Цвет от оранжево-красного до тёмно-красного с отдельными жёлтыми и коричневато-зелёными вкраплениями.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное и измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепаратов с поверхности должны быть видны клетки наружного эпидермиса (экзокарпия) плода изодиаметрические, слегка извилистые или многоугольные с утолщёнными пористыми стенками, покрытые толстой кутикулой. Под эпидермисом располагается уголковая колленхима, состоящая из 3–4 рядов уплощённых клеток. Паренхима мякоти (мезокарпий) представлена округлыми тонкостенными клетками, содержащими оранжево-жёлтые хромопласты и оранжевые, жёлто-оранжевые или красно-оранжевые капли жирного масла. Хромопласты и капли жирного масла могут встречаться в эпидермисе и колленхиме. В паренхиме мякоти содержатся кристаллы кальция оксалата и сосудисто-проводящие пучки, представленные мелкими сосудами. Клетки внутреннего эпидермиса (эндокарпия) довольно узкие, вытянутые, с извилистым контуром и жёлтыми утолщёнными стенками. Они могут содержать хромопласты и капли жирного масла, чередующиеся с гигантскими клетками.

Перегородки плода состоят из мелких паренхимных клеток и содержат капли жирного масла.

Эпидермис семенной кожуры состоит из очень крупных клеток с волнистыми неравномерно утолщенными стенками («брыжейкообразное» утолщение), покрытыми тонкой кутикулой, склереиды семенной оболочки имеют U-образное утолщение, эндосперм семени представлен толстостенными клетками.

Чашечка плода представлена эпидермисом с головчатыми волосками, состоящими из одноклеточной ножки и многоклеточной головки с коричневым содержимым; в мезофилле чашечки встречаются клетки с кристаллическим песком кальция оксалата. Для плодоножки характерны тяжи крупных механических волокон с волнистым контуром; клетки основной паренхимы крупные, пористые.

Рисунок. Перца стручкового плоды: 1 – поперечный срез стенки плода: a – кутикула, б – эпидермис, в – колленхима, г – мезокарпий (100×); 2 – многоугольные клетки эпидермиса плода (50×); 3 – эндокарпий плода: а – гигантские клетки, б – клетки с извилистыми стенками (250×); 4 – мезокарпий плода: а – капли жирного масла, б – кристаллы кальция оксалата (250×); 5 – клетки эндокарпия с чётковидноутолщенными стенками (50×), 6 – поперечный срез семени: + а – склереиды с U-образным утолщением, б – толстостенные клетки (100×); 7 – эпидермис семени с волнистыми неравномерно утолщёнными стенками («брыжейкообразное» утолщение) (100×); 8 – эпидермис чашечки плода с головчатым волоском (100×).

Определение основных групп биологически активных веществ

1. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора (см. «Количественное определение») должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца капсаицина. На хроматограмме испытуемого раствора также должны наблюдаться: пик меньшей интенсивности с относительным временем удерживания по отношению к капсаицину 1,3 (дигидрокапсаицин); дополнительные минорные пики с относительным временем удерживания 0,95 (нонивамид) и 0,9 (нордигидрокапсаицин)

2. ТСХ. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Вода—метанол 20:80.

- Реактив для детектирования. 2,6-дихлорхинонхлоримида раствор 0,5 % в метаноле. Растворяют 0,05 г 2,6-дихлорхинониндохлоримида в 10 мл метанола.

- Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. К 0,5 г измельчённого сырья добавляют 5 мл эфира, встряхивают в течение 5 мин. Полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

- Раствор стандартного образца капсаицина. Растворяют 0,002 г фармакопейного стандартного образца капсаицина [404-86-4] в 5 мл эфира.

- Раствор используют свежеприготовленным.

- На линию старта пластинки полосами длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят по 20 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца капсаицина. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в предварительно насыщенную в течение не менее 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт 80–90 % от линии старта, пластинку вынимают из камеры, сушат на воздухе в течение 10 мин и обрабатывают реактивом для детектирования. Пластинку выдерживают над парами аммиака до появления голубых зон адсорбции и просматривают при дневном свете.

- Результат

- На хроматограмме раствора стандартного образца капсаицина должны обнаруживаться зоны адсорбции голубого цвета.

- На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться: зона адсорбции голубого цвета на уровне зоны адсорбции стандартного образца капсаицина и зона адсорбции голубого цвета ниже зоны адсорбции капсаицина; допускается обнаружение других зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 14,0 %. (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 8,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая хлористоводородной кислоте. Не более 1,5 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, − не более 5 %.

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, − не более 10 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, − не более 5%.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Сырьё, изменившее окраску (потемневшее и почерневшее). Не более 2,0 %.

Других частей растений (листьев, стеблей, цветков и бутонов). Не более 3,0 %.

Органическая примесь. Не более 2,0 %.

Минеральная примесь. Не более 1,0 %.

Нонивамид. Не более 5,0 % от суммы капсаициноидов. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») одновременно с испытанием «Количественное определение».

Раствор сравнения А: В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца нонивамида [2444-46-4], прибавляют 20 мл ПФ, перемешивают и доводят объём раствора ПФ до метки.

В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 8,0 мг фармакопейного стандартного образца капсаицина, прибавляют 5 мл полученного раствора нонивамида и 45 мл ПФ, перемешивают и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения Б: В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 8 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца нонивамида, прибавляют 20 мл ПФ, перемешивают и доводят объём раствора ПФ до метки.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения А разрешение (RS) между пиками нонивамида и капсаицина должно быть не менее 1,5.

Содержание нонивамида от суммы капсаициноидов в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S – площадь пика нонивамида на хроматограмме испытуемого раствора, полученного для количественного определения;
So – площадь пика нонивамида на хроматограмме раствора сравнения Б;
a – навеска сырья, г;
ao – навеска фармакопейного стандартного образца нонивамида, взятая для приготовления раствора сравнения Б, г;
c – содержание суммы капсаициноидов, определённое в количественном определении, %;
W – влажность сырья, г;
P – содержание нонивамида в фармакопейном стандартном образце нонивамида, %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил—фосфорная кислота разведённая 0,1 % 40:60.

Испытуемый раствор. К 2,5 г (точная навеска) измельчённых плодов до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, прибавляют 100 мл метанола, оставляют для настаивания на 30 мин и затем колбу с содержимым обрабатывают ультразвуком в течение 15 мин. Полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объём раствора метанолом до метки.

Раствор стандартного образца капсаицина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,025 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца капсаицина, растворяют в спирте 96 %, доводят объём раствора спиртом 96 % до метки и перемешивают.

Хроматографирование условия

Колонка | 150 × 2,1 мм, сорбент силикагель фенилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм или аналогичная;
Скорость потока | 0,5 мл/мин;
Температура колонки | 30 °С;
Детектор | спектрофотометрический;
Длина волны | 225 нм;
Объём вводимой пробы | 10 мкл;
Время хроматографирования | 30 мин.

Хроматографируют испытуемый раствор и раствор стандартного образца капсаицина.

Относительное время удерживания соединений. Капсаицин – 1; дигидрокапсаицин – около 1,3; нордигидрокапсаицин –около 0,9; нонивамид – около 0,95.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме испытуемого раствора:

- фактор асимметрии пика капсаицина должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;

- относительное стандартное отклонение, рассчитанное по пику капсаицина не должно превышать 2,4 %.

Содержание суммы капсаициноидов в пересчёте на капсаицин и сухое сырьё в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S – сумма площадей пиков капсаицина, дигидрокапсаицина и нордигидрокапсаицина на хроматограмме испытуемого раствора;
So – площадь пика капсаицина на хроматограмме раствора стандартного образца капсаицина;
a – навеска сырья, г;
ao – навеска фармакопейного стандартного образца капсаицина, г;
W – влажность сырья, %;
P – содержание капсаицина в фармакопейном стандартном образце капсаицина, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0031 Пижмы обыкновенной цветки

Tanaceti vulgaris flores

Взамен ФС.2.5.0031.15

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в начале цветения и высушенные соцветия (цветки) дикорастущего многолетнего травянистого растения пижмы обыкновенной –Tanacetum vulgare L.,сем. астровых – Asteraceae.

Содержит не менее 1,25 % суммы флавоноидов в пересчёте на лютеолин-7-глюкозид в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. В соответствии с ОФС «Цветки».

Цельное сырьё. Части сложного щитковидного соцветия и отдельные цветочные корзинки. Корзинки полушаровидной формы с вдавленной серединой, диаметром 6–8 мм, состоят из мелких трубчатых цветков: краевых – пестичных, срединных – обоеполых. Цветоложе голое, неполое, слегка выпуклое, окружено обвёрткой из черепитчато расположенных ланцетных с пленчатым краем листочков. Данные листочки – простые, сидячие, перисто-раздельные, от 0,5 до 1,0 см длиной, при детальном рассмотрении заметно опушённые. Цветоносы бороздчатые, голые, реже слабоопушённые. Цвет цветков жёлтый, листочков обвёртки – коричневато-зелёный, цветоносов− светло-зелёный. Запах характерный.

Измельчённое сырьё. Цельные цветочные корзинки, отдельные трубчатые цветки, цветоложа и кусочки цветоносов, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

При рассмотрении измельчённого сырья под лупой (10×) видны отдельные полушаровидные цветочные корзинки с вдавленной серединой и их части с трубчатыми цветками жёлтого цвета с многорядной черепитчатой обвёрткой; слегка выпуклые отдельные цветоложа и их части.

Цвет измельчённого сырья зеленовато-жёлтый. Запах характерный.

Порошок. Смесь кусочков трубчатых цветков, листочков обвёртки, цветоносов, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

Цвет порошка желтовато-зелёный с жёлтыми, зелёными, коричневато-зелёными, желтовато-серыми вкраплениями, изредка встречаются вкрапления тёмно-коричневого и зеленовато-фиолетового цвета. Запах характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. Измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепарата листочка обвёртки с поверхности должна быть видна центральная жилка, сопровождающаяся секреторными ходами; клетки эпидермиса с наружной стороны листочка крупные, с прямыми или слегка извилистыми стенками, заметна складчатость кутикулы; клетки эпидермиса с внутренней стороны узкие и сильно вытянутые. Эпидермис листочка представляет собой клетки неправильной, изодиаметричной формы с сильно утолщёнными стенками, на нижнем эпидермисе имеются устьица аномоцитного типа. Эпидермис цветоложа представлен округлыми изодиаметричными клетками с тёмным содержимым; устьица и волоски только с наружной стороны листочка обвёртки по центральной жилке и по краю: устьица окружены 4–6 околоустьичными клетками, волоски многоклеточные, бичевидные. Клетки эпидермиса венчика – многоугольные, тонкостенные, некоторые из них имеют чётковидные утолщения. На поверхности цветков имеются эфирномасличные желёзки, расположенные на завязи и у основания трубочки венчика. Желёзки 4-, 6-клеточные, двухрядные, двух-, трёхъярусные. В мезофилле и клетках эпидермиса венчика встречаются друзы кальция оксалата. Эпидермис листочка обвёртки с наружной стороны состоит из крупных клеток с прямыми или слегка извилистыми стенками и со складчатой кутикулой. Клетки эпидермиса с внутренней стороны листочка узкие и сильно вытянутые. При рассмотрении листочков обвёртки с поверхности заметна центральная жилка. Устьица и волоски встречаются только на эпидермисе с наружной стороны листочка. Волоски эпидермиса многоклеточные, бичевидные. Внутренний эпидермис обвёртки представлен крупными клетками с тонкой оболочкой, под ним расположена паренхима в 1–2 слоя крупных тонкостенных клеток. Внутренний эпидермис покрыт выраженной кутикулой. Эпидермис внешней стороны обвертки отличается меньшими размерами клеток, более выраженной кутикулой.

Цветоложе состоит из губчатой паренхимы с большим количеством межклетников. Клетки губчатой паренхимы округлой изодиаметрической формы, практически бесцветны, изредка содержат хромопласты жёлтого цвета. Наружный слой паренхимы цветоложа содержит большое количество мелких сосудистых пучков.

Пыльники тычинок крупные вытянутые, с заострёнными верхушками. Теки пыльников двухгнёздные, заполненные пыльцой жёлтого цвета. Тычиночные нити длинные, бесцветные с заметным проводящим пучком, из 2 спиральных сосудов. Эпидермис тычиночных нитей представлен слабовытянутыми, тонкостенными клетками. Пестик имеет 2 рыльца, поверхность которых неровная, ворсинчатая. Столбик пестика крупный, бесцветный. Паренхима завязи содержит друзы кальция оксалата. На поверхности цветков имеются эфирномасличные желёзки. Желёзки 4-, 6-клеточные, двухрядные, двух-, трёхъярусные. В столбике два проводящих пучка.

Цветонос представляет собой полый стебель пучкового строения. Пучки в кольце закрытые коллатеральные с сильно выраженным слоем склеренхимы. Проводящие элементы представлены спиральными и кольчатыми сосудами.

Порошок. При рассмотрении микропрепарата порошка должны быть видны фрагменты листочков обвёртки с крупными клетками эпидермиса с прямыми или слегка извилистыми стенками, складчатой кутикулой, устьицами аномоцитного типа, многоклеточными, бичевидными волосками (наружная сторона), сосредоточенные главным образом по центральной жилке и по краю, и с узкими, сильно вытянутыми клетками эпидермиса (внешняя сторона); фрагменты эпидермиса нижней части трубки венчика трубчатого цветка, состоящего из тонкостенных изодиаметричных клеток; фрагменты эпидермиса средней части трубки венчика прозенхимной формы; фрагменты эпидермиса трубки венчика с многочисленными железистыми трихомами; фрагменты эпидермиса тычиночных нитей со слабо вытянутыми, тонкостенными клетками; фрагменты эпидермиса с эфирномасличными желёзками 4-, 6-клеточными, двухрядными, двух-, трехъярусными; фрагменты центральной жилки с секреторными ходами; отдельные эфирномасличные желёзки; мелкие друзы кальция оксалата.

Рисунок. Пижмы обыкновенной цветки: 1 – фрагмент эпидермиса листочка обвёртки с устьицами аномоцитного типа и основанием бичевидного волоска (200×); 2 – эфирномасличные желёзки (400×); 3 – секреторный ход с маслянистым содержимым вдоль центральной жилки (200×); 4 – фрагмент бичевидного волоска (200×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота безводная—вода—этилацетат 1:1:8.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. Около 1 г сырья, помещают в коническую колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 20 мл спирта 96 %, нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 15 мин. После охлаждения до комнатной температуры полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.

Реактив для детектирования 1. Дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствор 1 % в спирте 96 %.

Реактив для детектирования 2. Макрогола 400 раствор спиртовой 5 %. На линию старта пластинки наносят 10 мкл испытуемого раствора и 5 мкл раствора А стандартного образца лютеолин-7-глюкозида (раздел «Количественное определение»). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе и помещают в камеру, предварительно насыщенную ПФ в течение 1 ч, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Пластинку опрыскивают раствором для детектирования 1, сушат, затем обрабатывают раствором для детектирования 2, высушивают и просматривают при дневном свете.

Результат. На хроматограмме раствора А стандартного образца лютеолин-7-глюкозида в средней трети пластинки должна обнаруживаться зона адсорбции жёлто-оранжевого цвета.

На хроматограмме испытумого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции от жёлто-оранжевого до коричневато-красного цвета на уровне зоны адсорбции лютеолин-7-глюкозида, чуть ниже неё – зона адсорбции жёлто-оранжевого цвета и выше неё пластинки зона адсорбции жёлто-оранжевого цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции (флавоноиды).

Затем хроматограмму просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

На хроматограмме раствора А стандартного образца лютеолин-7-глюкозида в средней трети пластинки должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией жёлто-оранжевого цвета.

На хроматограмме испытумого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции жёлто-оранжевого цвета; выше неё – голубого или сине-голубого цвета, над ней на уровне зона адсорбции лютеолин-7-глюкозида зона адсорбции жёлто-оранжевого цвета, выше две зоны адсорбции голубого или сине-голубого цвета, и над ней зона адсорбции жёлто-оранжевого цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции (фенольные соединения).

В нижней трети хроматографической пластинки, в средней трети пластинки – зона адсорбции жёлто-оранжевого цвета, чуть выше зона адсорбции жёлто-оранжевого цвета на уровне лютеолин-7-глюкозида, в верхней трети пластинки 2 зоны адсорбции с флуоресценцией голубого или сине-голубого цвета, над ними зона адсорбции жёлто-оранжевого цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции (флавоноиды).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 9,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 4,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм − не более 5 %.

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм − не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм – не более 5 %.

Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм − не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм − не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цветочные корзинки и их части. Цельное сырьё, измельчённое сырьё − не менее 60 %, в том числе корзинки, изменившие окраску (потемневшие и почерневшие) − не более 8 %.

Органическая примесь. Цельное сырьё, измельчённое сырьё − не более 1 %.

Минеральная примесь. Не более 0,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии в соответствии с ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях».

Раствор стандартного образца А. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,01 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца лютеолин-7-глюкозида, растворяют в 15–20 мл спирта 70 % при нагревании на водяной бане. После охлаждения содержимого колбы доводят объём раствора спиртом 70 % до метки.

Раствор стандартного образца Б. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца А, прибавляют 1 мл алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 96 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствора сравнения А. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл раствора стандартного образца А и 0,1 мл уксусной кислоты ледяной и доводят спиртом 96 % до метки.

Исходный раствор. Аналитическую пробу препарата измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм.

В колбу со шлифом вместимостью 250 мл помещают 1,0 г (точная навеска) сырья, прибавляют 50 мл спирта 70 %. Колбу закрывают пробкой и взвешивают с точностью до ± 0,01 г. Колбу присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане (умеренное кипение) в течение 1 ч. Затем колбу охлаждают и взвешивают, при необходимости доводят до первоначальной массы спиртом 70 %. Содержимое колбы фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора, прибавляют 1 мл алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 96 %, доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор сравнения Б. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и 0,1 мл уксусной кислоты ледяной и доводят спиртом 96 % до метки.

Через 40 мин измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 400 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения Б.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца Б лютеолин-7-глюкозида, относительно раствора сравнения А.

Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на лютеолин-7-глюкозида в сухом сырье в процентах(X) вычисляют по формуле:

где А - оптическая плотность испытуемого раствора;
Аo - оптическая плотность раствор стандартного образца лютеолин-7-глюкозида Б;
а - навеска сырья, г;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца лютеолин-7-глюкозида, г;
P - содержание лютеолин-7-глюкозида в фармакопейного стандартного образца лютеолин-7-глюкозида;
W - влажность сырья, %.

Допускается содержание суммы флавоноидов в пересчёте на лютеолин-7-глюкозида вычислять с использованием удельного показателя поглощения комплекса лютеолин-7-глюкозида с алюминия хлоридом по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
а - навеска сырья, г;
365 - удельный показатель поглощения комплекса лютеолин-7-глюкозида с алюминия хлоридом при длине волны 400 нм, равный 365; ( );
W - влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0126 Пиона уклоняющегося корневища и корни

Paeoniae anomalаe rhizomata et radices

Взамен ФС 42-531-98

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в фазу цветения, очищенные от земли, отмытые, разрезанные на куски и высушенные корневища и корни дикорастущего многолетнего травянистого растения пиона уклоняющегося
(марьина корня) – Paeonia anomala L., сем. пионовых – Paeoniaceae.

Содержит не менее 3,5 % суммы иридоидов в пересчёте на пеонифлорин в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы».

Цельное сырьё. Смесь кусков корневищ и корней различной формы, длиной от 1 до 9 см, толщиной от 0,2 до 1,5 см, снаружи продольно морщинистых. На поперечном неровном изломе видны: снаружи тонкий слой перидермы, белый слой коры, резко выступающие желтоватые клиновидные участки древесины и светлые сердцевинные лучи.

Цвет снаружи от желтовато-коричневого до тёмно-коричневого, на изломе – белый или желтовато-белый, по краю иногда слегка красновато-фиолетовый. Запах сильный, характерный.

Измельчённое сырьё. Смесь кусочков корней и корневищ различной формы, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

Цвет светло-коричневый или желтовато-коричневый с более тёмными полосками пробки. Запах сильный, характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрении микропрепарата поперечного среза корня должна быть видна покровная ткань (пробка), представленная
3–7 рядами небольших прямоугольных клеток с утолщениями. Под пробкой находится феллодерма, состоящая из нескольких слоёв крупных тангентально-вытянутых клеток со слегка утолщёнными тангентальными стенками. Кора состоит из округло-овальных клеток с неравномерно утолщёнными оболочками, пронизанными овальными порами. По характеру утолщения оболочек эти клетки близки к колленхиме и представляют собой колленхиматоидные (колленхиматозные) тяжи. В коре встречаются каменистые клетки, располагаются одиночно или группами по 3–7 шт., по форме изодиаметричные или слегка удлинённые, округло-многоугольные с сильно утолщённой слоистой клеточной стенкой, пронизанной порами и сильно одревесневшей. Линия камбия чёткая. Флоэма и ксилема расположены в виде узких радиальных секторов, разделённых широкими сердцевинными лучами. Над флоэмой часто видны участки колленхиматозного утолщения клеток. Клетки флоэмной паренхимы имеют уголковые утолщения оболочек. Ксилема состоит из лестнично-сетчатых, широкополостных, членистых с заметными остатками перфорационных пластин и щелевидными порами клеточных стенок сосудов, расположенных группами и радиальными рядами, примыкающих к ним узких, веретеновидных с сетчатопористыми или пористыми одревесневшими стенками трахеид и древесной паренхимы, клетки которой лишь немного уступают по размеру самым крупным сосудам. Встречаются некоторые сосуды ксилемы с розовым или розово-красным содержимым. В сердцевинных лучах часто встречаются участки клеток с утолщёнными оболочками (в основном утолщены их радиальные стенки), пронизанные овальными порами. Другие механические элементы, кроме колленхиматоидных тяжей, в корне отсутствуют. В клетках паренхимы корня содержатся мелкие крахмальные зёрна различной формы (округлые, овальные, удлинённо-овальные), часто с усечённым концом и едва заметной трещинкой, простые, изредка – двух-трёх сложные, и кристаллы кальция оксалата в виде друз или сростков неопределённой формы и скоплений мелких кристаллов.

Измельчённое сырьё. При рассмотрении «давленого» микропрепарата корня должны быть видны лестнично-сетчатые сосуды, узкие пористосетчатые или пористые трахеиды, колленхиматоидные тяжи с клетками с утолщёнными оболочками, кристаллы кальция оксалата в виде друз, сростков неопределённой формы и скоплений отдельных мелких кристаллов. В соскобе корня (препарат в воде) должны быть видны крахмальные зёрна различной формы.

Рисунок 1. Пиона уклоняющегося корневища и корни: 1 – поперечный срез корня вторичного строения: а – пробка, б – группы каменистых клеток, в – сосуды ксилемы (100×); 2 – продольный срез корня с клетками паренхимы, лестничными сосудами и трахеидами с пористосетчатым утолщением (1000×); 3 – паренхима корня: а – друзы кальция оксалата, б – крахмальные зёрна (окрашены Люголя раствором) (400×).

Определение основных групп биологически активных веществ

1. Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Вода—метанол—хлороформ 3:14:26.

- Испытуемый раствор. В коническую колбу с пробкой вместимостью 50 мл помещают 1,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, прибавляют 10 мл спирта 40 % и нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 30 мин, охлаждают и фильтруют через беззольный фильтр.

- Реактив для детектирования. Серная кислота разведённая 16 % (м/м).

- На линию старта хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят 8 мкл испытуемого раствора. Пластинку с нанесённой пробой помещают в хроматографическую камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 1 часа ПФ, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт 80–90 % от линии старта, пластинку вынимают, сушат до удаления следов растворителей и опрыскивают реактивом для детектирования, нагревают при температуре 80 °С в течение 5 мин и просматривают при дневном свете.

- На хроматограмме испытуемого раствора в верхней трети должна обнаруживаться основная зона адсорбции от розового до фиолетового цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции (иридоиды).

2. Качественная реакция. К 2 мл элюата (раздел «Количественное определение»), прибавляют 2 мл хлористоводородной кислоты 2 % и нагревают в течение 5 мин; должен ощущаться характерный запах. При добавлении к полученному раствору 2 мл железа(III) хлорида раствора 1 % в хлористоводородной кислоте должно наблюдаться окрашивание фиолетового цвета (иридоиды).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 10,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 1,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, − не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,25 мм, − не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Корневищ с остатками стеблей длиной до 3 см. Цельное сырьё: не более 10 %.

Органическая примесь. Не более 0,5 %.

Минеральная примесь. Не более 1 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Железа(III) хлорида раствор 1 % в хлористоводородной кислоте. Помещают 1,0 г железа(III) хлорида в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 90 мл растворе хлористоводородной кислоты 0,1 М, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. В круглодонную колбу вместимостью 250 мл помещают 2,0 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 60 мл спирта 40 % и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 45 мин. После охлаждения содержимое колбы фильтруют через беззольный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл. К остатку в круглодонной колбе прибавляют 40 мл спирта 40 % и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 15 мин. Колбу и остаток на фильтре промывают 5 мл спирта 40 %, доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Через стеклянную колонку диаметром 10 мм, содержащую 5 г алюминия оксида нейтрального для хроматографии, пропускают 10 мл полученного фильтрата. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл полученного элюата, прибавляют 5,0 мл гидроксиламина щелочного раствора 5 % и оставляют на 20 мин. Затем добавляют 10,0 мл раствора кислоты хлористоводородной 1 М, доводят объём раствора железа(III) хлорида раствором 1 % в хлористоводородной кислоте до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл спирта 40 %, 5,0 мл гидроксиламина щелочного раствора 5 %, 10,0 мл раствора кислоты хлористоводородной 1 М, доводят объём раствора железа(III) хлорида раствором 1 % в хлористоводородной кислоте до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 512 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Содержание суммы иридоидов в пересчёте на пеонифлорин в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
а - навеска сырья, г;
16 - удельный показатель поглощения продуктов фотометрической реакции пеонифлорина с железа гидроксиламином при длине волны 512 нм ( );

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0127 Пиона уклоняющегося трава

Paeoniae anomalаe herba

Взамен ФС 42-99-98

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в фазу цветения и высушенная трава дикорастущего многолетнего травянистого растения пиона уклоняющегося
(марьина корня) – Paeonia anomala L., сем. пионовых – Paeoniaceae.

Содержит не менее 2,5 % суммы иридоидов в пересчёте на пеонифлорин в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Травы».

Цельное сырьё. Смесь стеблей, листьев, цветков, бутонов и незрелых плодов различной степени развития. Цельные или частично измельчённые бороздчатые или крупно-ребристые стебли, голые, до 35 см длины, 2 см толщины, внизу с рыхлой сердцевиной, или полые, вверху плотные. Листья рассечённые очерёдные, голые, сильно сморщенные; пластинка листа длиной 3–12 см, в 2–3 раза длиннее черешка. Сегменты листьев глубоко тройчато- или перисто-рассёченные, средние сегменты (конечные дольки) трёхлопастные, боковые – ланцетные, цельнокрайние. По краю сегмента листовая пластинка завёрнута на нижнюю сторону. Цветки крупные, 8–13 см в диаметре, чашечка состоит из 5 зелёных листочков – двух более узких,
7–14 мм шириной, и трёх более широких, 12–21 мм; лепестки обычно в числе 5 и более. Тычинки многочисленные, при основании спаянные в кольцо. Пестиков 3–5 сидящих на диске. Плод состоит из 3–5 листовок.

Цвет стеблей коричневато-зелёный; листьев с верхней стороны тёмно-зелёный, с нижней – светло-зелёный; лепестков – красный или красновато-зеленовато-коричневый. Запах слабый.

Измельчённое сырьё. Смесь кусочков стеблей, листьев, цветков и бутонов, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

Цвет стеблей коричневато-зелёный; листьев тёмно-зелёный и светло-зелёный; лепестков – красный или красновато-зеленовато-коричневый. Запах слабый.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё, измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепарата с поверхности листа (на обеих сторонах) должны быть видны клетки эпидермиса с сильно извилистыми боковыми (антиклинальными) стенками. Устьица только на нижней стороне, многочисленные (почти каждая эпидермальная клетка одновременно примыкает к 2–3 устьицам) овальные или реже – округлые, аномоцитного типа с 4–6 околоустьичными клетками. Клетки верхнего эпидермиса местами имеют чётковидноутолщённые оболочки, особенно часто над жилками и по краю сегментов листа. Край сегмента завёрнут на нижнюю сторону, и
3–5 самых крайних рядов клеток эпидермиса вытянуты в сосочки покрытые складчатой кутикулой. Над главной жилкой сегмента листа с верхней стороны имеются многочисленные короткие волоски, расположенные под острым углом к поверхности листа. Основание волоска слегка расширенное, верхушка суженная, но не заострённая и всегда направлена к верхушке доли листа. Волоски в основном одноклеточные и от материнской клетки перегородкой не отделены. Изредка встречаются двухклеточные волоски. Они имеют довольно толстую оболочку, зернистое содержимое и покрыты продольно-складчатой кутикулой. С нижней стороны листа видно, что губчатая ткань довольно рыхлая, состоит из разветвлённых клеток, образующих крупные межклетники (аэренхиму). В микропрепаратах с верхней стороны листа, в клетках мезофилла, должны быть видны скопления мелких кристаллов кальция оксалата, местами образующих сростки в виде нечётко сформированных друз. В серной кислоты растворе 50 % на месте кристаллов кальция оксалата постепенно образуются тонкие игольчатые кристаллы кальция сульфата (гипс).

Рисунок 1. Пиона уклоняющегося трава: 1 – верхний эпидермис листа: чётковидные утолщения антиклинальных стенок клеточной оболочки; над жилкой эпидермальные клетки вытянутые и покрыты складчатой кутикулой (200×); 2 – нижний эпидермис листа: устьица аномоцитного типа (200×); 3 – верхняя сторона листа: сосочковидные выросты, покрытые складчатой кутикулой (200×); 4 – верхняя сторона листа: одноклеточные волоски над главной жилкой сегмента листа (200×); 5 – аэренхима (200×); 6 – верхняя сторона листа: клетки мезофилла, содержащие кальция оксалат в виде друз и скоплений мелких кристаллов (400×).

Определение основных групп биологически активных веществ

ТСХ. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—метанол—хлороформ 3:14:26.

Испытуемый раствор. В коническую колбу с пробкой вместимостью 50 мл помещают 1,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, прибавляют 10 мл спирта 40 % и нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 30 мин, охлаждают и фильтруют через беззольный фильтр.

Реактив для детектирования. Серная кислота разведённая 16 % (м/м).

На линию старта пластинки наносят 8 мкл испытуемого раствора. Пластинку с нанесённой пробой сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ (предварительно насыщенную, в течение 1 ч), и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт 80–90 % длины пластинки от линии старта, пластинку вынимают, сушат до удаления следов растворителей и опрыскивают реактивом для детектирования, выдерживают при температуре 80 °С в течение 5 мин и просматривают при дневном свете.

На хроматограмме испытуемого раствора в верхней трети должна обнаруживаться основная зона адсорбции от розового до фиолетового цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции (иридоиды).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 7,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 1,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, − не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, − не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Стеблей с остатками корневищ. Цельное сырьё: не более 20 %.

Органическая примесь. Не более 2 %.

Минеральная примесь. Не более 1 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. В круглодонную колбу вместимостью 250 мл помещают 3,0 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 60 мл спирта 40 % и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 45 мин. После охлаждения содержимое колбы фильтруют через беззольный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл. К остатку в круглодонной колбе прибавляют 40 мл спирта 40 % и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 15 мин. Колбу и остаток на фильтре промывают 5 мл спирта 40 %, доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Через стеклянную колонку диаметром 10 мм, содержащую 5 г алюминия оксида нейтрального для хроматографии, пропускают 10 мл полученного фильтрата. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл полученного элюата, прибавляют 5 мл гидроксиламина щелочного раствора 5 % и оставляют на 20 мин. Затем добавляют 10,0 мл 1 М раствора кислоты хлористоводородной, доводят объём раствора железа(III) хлорида раствором 1 % в хлористоводородной кислоте до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл спирта 40 %, 5 мл гидроксиламина щелочного раствора 5 %, 10,0 мл 1 М раствора кислоты хлористоводородной, доводят объём раствора железа(III) хлорида раствором 1 % в хлористоводородной кислоте до метки.

Железа(III) хлорида раствор 1 % в хлористоводородной кислоте. Помещают 1,0 г железа(III) хлорида в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 90 мл 0,1 М растворе хлористоводородной кислоты, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 512 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Содержание суммы иридоидов в пересчёте на пеонифлорин в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
a - навеска сырья, г;
16 - удельный показатель поглощения продуктов фотометрической реакции пеонифлорина с железа гидроксиламином при длине волны 512 нм ( );
W - влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0128 Подорожника ланцетного листья

Рlantaginis lanceolatae folia

Вводится впервые

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Cобранные в начале цветения и высушенные листья дикорастущего и культивируемого многолетнего травянистого растения подорожника ланцетного – Plantago lanceolata L., сем. подорожниковых – Plantaginaceae.

Содержит не менее 1,5 % суммы производных о-дигидроксикоричной кислоты в пересчёте на актеозид в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Листья».

Цельное сырьё. Цельные или частично измельчённые листья и цветоносы (цветочные стрелки). Листья простые, ланцетовидной, удлинённо-ланцетовидной или линейно-ланцетной формы, у основания округлая, с заострённой верхушкой, черешок крылатый, голый, различной длины. Край листа волнистый или слегка зубчатый, жилкование дуговидное (имеет 3, 5 или 7 основных жилок одинаковых по длине и идущих почти параллельно); поверхность листа обычно голая с верхней стороны, нижняя сторона опушена короткими волосками, которые располагаются по жилкам. Длина листьев с черешком до 30 см, ширина до 4 см. Цветоносы (цветочные стрелки) более длинные, чем листья, с диаметром (3–4 мм), имеют глубокие желобки в продольном направлении с 5–7 заметными жилками.

Цвет листовых пластинок от желтовато-зелёного до коричневато-зелёного, цветоносов (цветочных стрелок) коричневато-зелёный. Запах слабый.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрении микропрепаратов с поверхности листа на верхней и нижней стороне должны быть видны клетки эпидермиса многоугольной формы со слабоизвилистыми, равномерно утолщёнными стенками. По краю листовой пластинки клетки эпидермиса вытянуты вдоль листа. Овальные устьица встречаются на обеих сторонах листовой пластинки, но преобладают – на нижней. Устьица на обеих сторонах листа аномоцитного типа, округлые, окружены 2–5 клетками эпидермиса, реже встречаются диацитного типа. Замыкающие клетки устьиц ладьевидной формы. Внутренние стенки устьичных клеток равномерно утолщены. На поверхности листовой пластины встречаются волоски двух типов: простые и головчатые. Простые волоски состоят из 2–3 клеток, длинные, толстостенные, остроконусовидные. Базальные клетки шаровидные, погружены в эпидермис; клетки над базальными – цилиндрические и короткие, их вершина заострённая и вдаётся в основание следующей клетки острым углом, подобно «когтю». Верхние клетки волосков – длинные, часто обломаны, поверхность волосков бороздчатая. Некоторые волоски обломаны полностью и на месте их прикрепления остаётся округлое основание. По всей поверхности с обеих сторон листа встречаются головчатые волоски, состоящие из одноклеточной ножки и шарообразной или овальной многоклеточной головки (5–13 клеток). В месте прикрепления головчатого волоска клетки эпидермиса образуют розетку.

Рисунок 1. Подорожника ланцетного листья: 1 – эпидермис нижней стороны листовой пластинки с устьицами аномоцитного типа (200×); 2 – эпидермис нижней стороны листовой пластинки с устьицами диацитного типа (200×); 3 – головчатые волоски с одноклеточной ножкой и многоклеточной конической головкой (400×); 4 – простые многоклеточные волоски (100×); 5 – «когтевидное» сочленение клеток простого многоклеточного волоска (100×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота безводная — уксусная кислота ледяная — вода — этилацетат 11:11:27:100.

Растворитель. Вода – метанол (30:70).

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм.

В колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 г измельчённого сырья, прибавляют 10 мл растворителя и встряхивают в течение 30 мин. Полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр в мерную колбу вместимостью 25 мл. Колбу ополаскивают 5 мл растворителя и фильтруют в ту же мерную колбу. Процедуру повторяют ещё раз. Объединённые фильтраты в мерной колбе доводят растворителем до метки.

Стандартный раствор. 1 мг аукубина и 1 мг актеозида растворяют в 1 мл растворителя.

На линию старта пластинки полосами длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят по 10 мкл испытуемого раствора и стандартного раствора. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в предварительно насыщенную в течение не менее 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, выдерживают в сушильном шкафу при 120 °С в течение 5–10 мин и просматривают при дневном свете.

Результат. На хроматограмме стандартного раствора должна обнаруживаться зона адсорбции синего цвета (аукубин) и над ней зона адсорбции жёлтого цвета (актеозид).

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться зона адсорбции синего цвета на уровне зоны адсорбции аукубина и над ней зона адсорбции жёлтого цвета на уровне зоны адсорбции актеозида; допускается обнаружение других зон адсорбции.

Затем пластинку просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

На хроматограмме стандартного раствора должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией красновато-коричневого цвета (аукубин).

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией красновато-коричневого цвета на уровне зоны адсорбции аукубина, ниже зоны адсорбции аукубина не должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией синего цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 10,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 14,0 % (ОФС «Зола общая»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, − не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Листья и их кусочки, изменившие окраску (пожелтевшие, потемневшие и почерневшие). Цельное сырьё: не более 5 %.

Органическая примесь. Цельное сырьё: не более 1 %.

Минеральная примесь. Цельное сырьё: не более 1 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Раствор натрия нитрита и натрия молибдата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10 г натрия нитрита и 10 г натрия молибдата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. В коническую колбу вместимостью 250 мл помещают 1,0 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 90 мл спирта 50 %. Колбу с содержимым присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 30 мин. После охлаждения извлечение фильтруют через беззольный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл. Коническую колбу ополаскивают 10 мл спирта 50 %, полученное извлечение фильтруют в ту же мерную колбу. Объединённые извлечения в мерной колбе доводят спиртом 50 % до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл исходного раствора, прибавляют 2 мл 0,5 М раствора хлористоводородной кислоты, 2 мл раствора натрия нитрита и натрия молибдата и 2 мл натрия гидроксида раствора 8,5 %, доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл исходного раствора, прибавляют 2 мл 0,5 М раствора хлористоводородной кислоты, 2 мл натрия гидроксида раствора 8,5 % и доводят объём раствора водой до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 525 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Содержание суммы производных о-дигидроксикоричной кислоты в пересчёте на актеозид в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
а - навеска сырья, г;
185 - удельный показатель поглощения продуктов фотометрической реакции актеозида при длине волны 525 нм ( );
W - влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0034 Пустырника трава

Leonuri herba

Взамен ФС.2.5.0034.15

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в фазу начала цветения и высушенная трава дикорастущего и культивируемого травянистого растения пустырника пятилопастного – Leonurus quinquelobatus Gilib. и пустырника сердечного (пустырника обыкновенного) – Leonurus cardiacaL. (L. cardiaca, L. subsp. villosus (Desf.) Jav.), сем. яснотковых – Lamiaceae.

Содержит:

- не менее 0,2 % суммы флавоноидов в пересчёте на рутин в сухом сырье;

- не менее 15 % экстрактивных веществ, извлекаемых спиртом 70 % в пересчёте на сухое сырьё.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Травы».

Цельное сырьё. Верхние части стеблей, длиной до 40 см с цветками и листьями, могут встречаться отдельные листья, цветки, части соцветий и стеблей. Стебель четырёхгранный, опушённый, или опушение только по рёбрам, полый, толщиной до 0,5 см. Листья супротивные, нижние – трёх-, пятилопастные или раздельные, в соцветиях – трёхлопастные или ланцетовидные, зубчатые или цельнокрайние с клиновидным основанием, длиной до 14 см, шириной до 10 см. Соцветия колосовидные, прерванные; цветки и бутоны собраны в мутовки по 10–20 в пазухах листьев. Чашечка трубчато-колокольчатая с 5 шиловидно-заострёнными зубцами, коническая, колючая. Венчик длиной до 0,12 см, двугубый, длиннее чашечки, верхняя губа цельнокрайняя, нижняя – трёхлопастная; тычинок 4; завязь нижняя. Стебли, листья, чашечки цветков опушены волосками.

Цвет стеблей с зеленовато-серой, серовато-зелёной, коричневато-зелёной поверхностью, листьев – зелёный, тёмно-зелёный, серовато-зелёный, чашелистиков – зелёный, венчиков – серый, серовато-розовый или розовато-фиолетовый. Запах слабый.

Измельчённое сырьё. Кусочки стеблей, листьев, соцветий, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

При рассмотрении измельчённого сырья под лупой (10×) видны кусочки стебля, четырёхгранного или (чаще) расщеплённого с опушённой (для пустырника сердечного слабоопушённой) зеленовато-серой, серовато-зелёной, коричневато-зелёной поверхностью; кусочки листьев – зелёные, тёмно-зелёные, серовато-зелёные, сильно опушённые; цветки или их части: чашечка трубчато-колокольчатая, опушённая, с колючими зубцами, венчик двугубый серый, серовато-розовый или розовато-фиолетовый, опушённый снаружи.

Цвет измельчённого сырья серовато-зелёный, коричневато-зелёный с беловатыми, коричневатыми и тёмно-зелёными вкраплениями. Запах слабый.

Порошок. Кусочки стеблей, цветоносов, листьев и соцветий, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

При рассмотрении порошка под лупой (10×) видны кусочки серовато-зелёного стебля, опушённого волосками с поверхности и беловатого или желтовато-белого на изломе; зелёные частицы опушённых листьев и чашечки, фрагменты опушённого серовато-розового или розово-фиолетового венчика.

Цвет порошка от серовато-зелёного до коричневато-зелёного с многочисленными беловатыми, желтовато-белыми, серовато-белыми, розово-фиолетовыми и серовато-розовыми вкраплениями. Запах слабый.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё, измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепаратов листа с поверхности с обеих сторон должны быть видны клетки эпидермиса с тонкими извилистыми боковыми стенками. Многочисленные устьица присутствуют на нижней стороне и сопровождаются 3–4 (редко 2) околоустьичными клетками (аномоцитный тип). На обеих сторонах листа встречаются многочисленные простые многоклеточные волоски с бородавчатой поверхностью, состоящие из 2–5 клеток, расширенные в местах сочленения, и редкие простые одноклеточные волоски, а также головчатые волоски на одно-, двухклеточной короткой ножке с округлой головкой, состоящей из 1–2 клеток. Преимущественно на нижней стороне листа расположены эфирномасличные желёзки, состоящие из 4–6 (реже 8) выделительных клеток на короткой ножке.

Венчик цветка с внешней стороны густо покрыт волосками. Эпидермис верхней губы венчика состоит из клеток удлинённой формы (внешняя сторона) и более мелких клеток изодиаметрической формы (внутренняя сторона) с извилистыми стенками. На внешней стороне верхней губы находятся волоски, простые одноклеточные и многоклеточные, состоящие из 2–6 (реже 8) клеток, с бородавчатой поверхностью, а также головчатые волоски. Присутствуют эфирномасличные желёзки. Большое количество простых одноклеточных и многоклеточных бородавчатых волосков обнаруживается по краю верхней губы. С внутренней стороны встречаются редкие простые одноклеточные и многоклеточные волоски, состоящие из 2–4 клеток, а также головчатые волоски. Эпидермис лопастей нижней губы венчика состоит из клеток изодиаметрической формы с прямыми стенками. На внешней стороне волоски простые одноклеточные, часто изогнутые, многоклеточные – из 2–3 клеток, головчатые волоски и эфирномасличные желёзки. Волоски на внутренней стороне преимущественно простые одноклеточные с бородавчатой поверхностью и головчатые. Около края и по краю нижней губы с обеих сторон волосков и желёзок не обнаруживается. В мезофилле присутствуют мелкие друзы кальция оксалата. Клетки эпидермиса трубки венчика с обеих сторон имеют удлинённую или изодиаметрическую форму и прямые стенки. На внешней стороне трубки представлены простые одноклеточные и многоклеточные волоски, состоящие из 2–3 клеток, часто изогнутых, а также головчатые волоски. Обнаруживаются эфирномасличные желёзки. На внутренней стороне трубки в верхней части присутствуют редкие простые волоски, состоящие из 1–2 клеток, а также головчатые волоски и эфирномасличные желёзки, а в центральной части – значительное количество простых одноклеточных, часто изогнутых тонкостенных волосков.

Клетки эпидермиса чашелистика с 2 сторон имеют удлинённо-вытянутую или изодиаметрическую форму с извилистыми или слабо извилистыми стенками. На внешней стороне присутствуют устьица аномоцитного типа и множество волосков, простых одноклеточных и многоклеточных с бородавчатой поверхностью, а также головчатые волоски. Простые многоклеточные волоски состоят из 2–6 клеток и в значительном количестве обнаруживаются на верхушке чашелистика и по краю зубца; в основании, а также в центральной части и по ходу жилок присутствует большое количество механических волокон. На внутренней стороне чашелистика встречаются волоски, простые бородавчатые одноклеточные и многоклеточные, состоящие из 2–5 клеток, а также головчатые волоски и эфирномасличные желёзки. Пыльца округлая, трёхгранная гладкая трёхбороздная.

При рассмотрении «давленого» микропрепарата препарата цветоножки и стебля хорошо видны клетки эпидермиса изодиаметрической или удлинённо-прямоугольной формы с прямыми стенками; обнаруживаются основные диагностические признаки (тип устьичного аппарата, волоски, эфирномасличные желёзки), характерные для листа пустырника; в состав проводящих пучков входят спиральные, лестничные и сетчатые сосуды.

Порошок. В порошке видны фрагменты эпидермиса с устьицами, простыми одноклеточными и многоклеточными волосками с бородавчатой поверхностью; эфирномасличные желёзки, состоящие из 4–6 выделительных клеток и одноклеточной ножки; пыльца округлая, трёхгранная гладкая трёхбороздная. Обнаруживаются также фрагменты стебля и цветка, содержащие основные диагностические признаки (тип устьичного аппарата, волоски, желёзки), характерные для листа пустырника.

Рисунок 1. Пустырника трава: 1 – фрагмент эпидермиса (нижняя сторона) с извилистыми стенками, устьицами аномоцитного типа, эфирномасличной желёзкой (200×); 2 – простой многоклеточный бородавчатый волосок и головчатый волосок (200×); 3 – фрагмент трубки венчика цветка с простыми одноклеточными тонкостенными волосками (200×); 4 – фрагмент верхней губы венчика цветка: а – простой одноклеточный грубобородавчатый волосок (200×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»)

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—уксусная кислота ледяная—этилацетат 5:10:30.

Раствор стандартного образца аукубина. Около 5 мг аукубина растворяют в 5 мл спирта 96 %.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм.

В колбу вместимостью 100 мл помещают 1 г измельчённого сырья, прибавляют 10 мл спирта 50 %, нагревают с обратным холодильником в водяной бане при температуре 60 °С в течение 30 мин или обрабатывают в УЗ-ванне в течение 15 мин. После охлаждения полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

Реактив для детектирования. Растворяют 0,5 г диметиламинобензальдегида в 50 мл смеси хлористоводородная кислота концентрированная—спирт 96 % 1:4.

На линию старта пластинки в виде полос длиной 10 мм, шириной не более 2 мм наносят 20 мкл испытуемого раствора и 5 мкл раствора стандартного образца аукубина. Пластинку с нанесёнными образцами сушат в течение 10 мин, помещают в камеру, предварительно насыщенную ПФ в течение не менее 40 мин и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, обрабатывают реактивом для детектирования, нагревают при 100–105 °С в течение 10 мин до появления пятен и просматривают при дневном свете.

На хроматограмме раствора стандартного образца аукубина должна обнаруживаться зона адсорбции синего или серо-синего цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться зоны адсорбции синего или серо-синего цвета ниже и выше зоны адсорбции стандартного образца аукубина; возможно обнаружение дополнительных зон адсорбции серо-синего цвета на уровне зоны стандартного образца аукубина; допускается обнаружение других зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 12,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 6,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3,0 мм, − не более 5 %.

Измельчённое сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, − не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, – не более 5 %.

Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, − не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, − не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Сырьё, изменившее окраску (потемневшее и почерневшее). Цельное сырьё, измельчённое сырьё − не более 7 %.

Стебли. Цельное сырьё − не более 46 %.

Кусочки стеблей. Измельчённое сырьё − не более 46 %.

Органическая примесь. Цельное сырьё, измельчённое сырьё − не более 3 %.

Минеральная примесь. Не более 1,0 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Сумма флавоноидов. В соответствии с ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях».

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. В коническую колбу вместимостью 250 мл помещают 2,5 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 50 мл спирта 70 %, взвешивают с погрешностью ±0,01 г, колбу закрывают пробкой и оставляют на 1 ч. Затем колбу соединяют с обратным холодильником, нагревают на водяной бане, поддерживая слабое кипение в течение 1 ч. Затем колбу охлаждают до комнатной температуры, взвешивают, при необходимости доводят её содержимое до первоначальной массы спиртом 70 %. Содержимое колбы фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 25 мл фильтрата.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл исходного раствора, прибавляют 5 мл алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 96 %, доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл исходного раствора и 0,1 мл уксусной кислоты ледяной и доводят спиртом 96 % до метки.

Через 30 мин измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 410 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения.

Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на рутин в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
а - навеска сырья, г;
260 - удельный показатель поглощения комплекса рутина с алюминия хлоридом при длине волны 410 нм, 260 ( );
W - влажность сырья, %.

Экстрактивные вещества. В соответствии с ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (методика 1: из навески 1,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, экстрагент спирт 70 %).

Примечание – Определение суммы флавоноидов в пересчёте на рутин определяют для сырья, предназначенного для получения лекарственных растительных препаратов (пачки, фильтр-пакеты) и экстракционных лекарственных форм (настойки, экстракты спиртовые); экстрактивные вещества, извлекаемые спиртом 70 %, определяют для сырья, предназначенного для получения экстракционных лекарственных форм (настойки, экстракты спиртовые).

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0093 Рябины обыкновенной плоды

Sorbi aucupariae fructus

Взамен ФС.2.5.0093.18

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в период полного созревания и высушенные плоды дикорастущего и культивируемого дерева (реже кустарника) рябины обыкновенной – Sorbus aucuparia L., сем. розоцветных − Rosaceae.

Содержат не менее 3,2 % суммы органических кислот в пересчёте на яблочную кислоту в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Плоды».

Цельное сырьё. Плоды яблокообразные, одиночные или слипшиеся по несколько штук, 2–5-гнёздные, округлые или овально-округлые; с блестящей, реже матовой, сильно морщинистой поверхностью, в поперечнике до 9 мм, на верхушке с остающейся чашечкой из пяти малозаметных смыкающихся зубчиков. В мякоти плода находятся от 2 до 7 слегка серповидно-изогнутых, продолговатых с острыми концами, гладких семян красновато-коричневого цвета.

Цвет плодов от красновато или желтовато-оранжевого до коричневато-красного, иногда с беловатым налётом выкристаллизовавшегося сахара. Запах слабый, характерный.

При рассмотрении под лупой (10×) на поперечном срезе плода видно 2–5 семенных гнезд. Стенки гнёзд хрящевые, твёрдые, сросшиеся с мякотью. Внутри каждого гнезда находятся 1–2 семени с твёрдой семенной кожурой красновато-коричневого цвета и семенным ядром белого цвета. Мякоть плода рыхлая, мясистая, сверху покрыта кожицей.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрении «давленого» микропрепарата плода должны быть видны фрагменты эпидермиса, состоящего из
округло-многоугольных клеток с толстыми пористыми, реже с чётковидноутолщёнными стенками и хромопластами оранжево-жёлтого цвета в виде капель; фрагменты эпидермиса по краю остатков чашелистиков с устьицами аномоцитного типа и многоклеточными булавовидными или сосочковидными выростами, а также с одноклеточными длинными, тонкостенными, слегка извилистыми волосками. Мякоть плода состоит из тонкостенных паренхимных клеток различной формы с многочисленными хромопластами оранжево-жёлтого цвета. В ней встречаются одиночные или группы каменистых клеток, друзы кальция оксалата. В составе проводящих пучков встречаются спиральные сосуды, как правило, в сопровождении укороченных или удлинённых склереид, и, редко, призматических кристаллов кальция оксалата.

Рисунок. Рябины обыкновенной плоды: 1 – фрагмент эпидермиса плода: а – округло-многоугольные клетки с пористыми стенками, б – клетки с многочисленными оранжево-жёлтыми хромопластами (200×); 2 – фрагмент эпидермиса плода по краю остатков чашелистиков: многоугольные клетки [а], устьица [б] (200×); 3 – фрагмент эпидермиса плода по краю остатков чашелистиков: а – многоклеточные сосочковидные выросты, б – одноклеточные волоски (200×); 4 – фрагмент мякоти плода: а – клетки паренхимы с оранжево-жёлтым содержимым (400×); 5 – фрагмент мезокарпия плода: а – спиральные сосуды, б – склереиды, в – друзы кальция оксалата, г – каменистая клетка (200×); 6 – фрагмент мезокарпия плода: а – призматические кристаллы кальция оксалата (400×).

Определение основных групп биологически активных веществ

1. ТСХ. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ВЭТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота—гексан—этилацетат—толуол 1:40:40:60.

- Испытуемый раствор. В колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 г сырья, измельчённого до однородной массы, прибавляют 5 мл спирта 96 % и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 5 мин. После охлаждения содержимое колбы фильтруют через беззольный фильтр.

- Реактив для детектирования. Анисового альдегида раствор спиртовой сернокислый (2).

- На линию пластинки полосами длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят 2 мкл испытуемого раствора и 2 мкл судана красного G раствора 0,025 % спиртового. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру предварительно насыщенную ПФ в течение 40 мин и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры и сушат до удаления следов растворителей. Затем пластинку опрыскивают реактивом для детектирования, нагревают при температуре 100‑105 °С в течение 2–3 мин и просматривают при дневном свете.

- Результат. На хроматограмме судана красного G раствора 0,025 % спиртового должна обнаруживаться зона адсорбции розового, розово-красного или красного цвета.

- На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться 2 зоны адсорбции сине-фиолетового или фиолетового цвета выше зоны адсорбции судана красного G раствора 0,025 % спиртового и 2 зоны адсорбции сине-фиолетового или фиолетового цвета ниже зоны адсорбции судана красного G раствора 0,025 % спиртового, допускается обнаружение зоны адсорбции синего цвета ниже этих зон (липофильные вещества); допускается обнаружение других зон адсорбции.

2. Качественная реакция. В колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 г плодов, измельчённых до однородной массы, прибавляют 30 мл спирта 70 % и нагревают на водяной бане при температуре 50 °С в течение 15 мин. Извлечение охлаждают, фильтруют через беззольный фильтр и упаривают на водяной бане до 1 мл. К полученному извлечению прибавляют 1 мл спирта 96 %, 0,1 г магния порошка и 1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной; должно наблюдаться постепенное образование окрашивания розово-красного цвета (флавоноиды).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 18,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 5,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 2,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Недозрелые плоды (светло-жёлтые, жёлтые). Hе более 2 %.

Почерневшие и подгоревшие плоды. Hе более 3 %.

Плоды с плодоножками с длиной более 10 мм. Не более 3 %.

Другие части растения (плодоножки, веточки, листья). Не более 0,5 %.

Органическая примесь. Не более 0,5 %.

Минеральная примесь. Не более 0,2 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до однородной массы. В колбу вместимостью 250 мл помещают 5,0 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 200 мл воды, тщательно перемешивают и выдерживают на водяной бане в течение 2 ч. Затем извлечение охлаждают, фильтруют через вату в мерную колбу вместимостью 250 мл, доводят объём содержимого колбы водой до метки.

В колбу вместимостью 500 мл помещают 25,0 мл испытуемого раствора, прибавляют 200 мл свежепрокипячённой воды и титруют натрия гидроксида раствором 0,1 М до синего окрашивания, не изменяющего цвет в течение 1 мин (индикатор – 1 мл бромтимолового синего раствор 0,1 % спиртовой).

Содержание суммы свободных органических кислот в пересчёте на яблочную кислоту в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где V - объём 0,1 М раствора натрия гидроксида, израсходованный на титрование испытуемого раствора, мл;
а – навеска сырья, г;
0,0067 - количество яблочной кислоты, соответствующее 1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида, г;
W – влажность сырья, %;

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0129 Сабельника болотного корневища с корнями

Comari palustris rhizomata cum radicibus

Вводится впервые

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные осенью (до отмирания надземной части), очищенные от земли, зелёных стеблей и листьев, разрезанные на куски и высушенные корневища с корнями многолетнего дикорастущего полукустарничка сабельника болотного – Comarum palustre L. сем. розоцветные – Rosaceae.

Содержит не менее 10,0 % суммы полифенольных соединений в пересчёте на (+)-катехин в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы».

Цельное сырьё. Куски корневищ или смесь кусков корневищ с корнями, укоренившихся стеблей с корнями и корней. Корневища и укоренившиеся стебли длиной до 30 см, диаметром от 0,3 до 0,7 см с чётко выраженными узлами, горизонтальные, прямые или слегка изогнутые, иногда разветвлённые, с довольно длинными междоузлиями. Поверхность корневищ продольно-морщинистая, матовая; укоренившихся стеблей – блестящая, с участками, лишёнными первичной коры. На узлах видны светло-коричневые или серовато-коричневые остатки стеблеобъемлющих черешков листьев длиной до 5 см или от узлов во все стороны отходят тонкие нитевидные корни длиной до 10 см. Корни многочисленные, переплетённые, иногда единичные, упругие. В центре корневищ и стеблей имеется полость, вследствие разрушения сердцевины, реже она заполнена губчато-волокнистой светло-коричневой сердцевинной паренхимой. Цвет корневищ и укоренившихся стеблей от светло-коричневого до тёмно-коричневого, почти чёрного, излом неровный, желтовато-белый, иногда зеленоватый; корней – снаружи от светло-коричневого до тёмно-коричневого цвета, иногда с беловатыми участками, из-за отслоившейся коры, на изломе – желтовато-белые. Запах слабый.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения», раздел «Корни, корневища, клубни, луковицы, клубнелуковицы».

Цельное сырьё. При рассмотрении микропрепарата корневища и укоренившегося стебля должно быть видно вторичное непучковое строение; на поперечном срезе корневища в перидерме хорошо заметны клетки пробки, располагающиеся 7–8 радиальными рядами; за перидермой следуют вторичная кора, зона камбия и широкий слой древесины с заметно выраженными осенними и весенними элементами вторичной ксилемы; вторичная кора представлена вторичной и остатками первичной флоэмы. За узким кольцом камбия следует древесина, которая состоит из широких и узких сосудов, трахеид и древесной паренхимы. Сердцевинные лучи узкие, однорядные. На поперечном срезе укоренившегося стебля должны быть видны узкий слой перидермы, первичная кора, состоящая из клеток паренхимы с крупными межклетниками (аэренхима), иногда заметных клеток колленхимы и эндодермы. В клетках первичной коры иногда встречаются крупные друзы кальция оксалата.

Перимедулярная зона сердцевины корневища и укоренившегося стебля состоит из толстостенных клеток, примыкающих к ксилеме. К центру паренхимные клетки сердцевины крупнее, их оболочки тоньше, они окрашены в серо-коричневый цвет, местами разорваны, в самом центре сердцевины клетки в основном разрушены: корневище полое, а стебли сохраняют больше неразрушенных клеток сердцевинной паренхимы.

На поперечном срезе корня должны быть видны широкая кора и древесина, радиус которой соизмерим с зоной коры. В коре преобладает перидерма. Пробка представлена несколькими чередующимися слоями, образующими концентрические пояса из тёмноокрашенных (суберинизированных) и более светлых (несуберинизированных) клеток, имеющих прямоугольную форму и толстые стенки. Сосуды древесины разного диаметра, расположены беспорядочно, сердцевинные лучи слабо выражены.

Рисунок 1. Сабельника болотного корневища с корнями: 1 – поперечный срез корневища (400×): а – пробка, б – зона камбия, в – сосуды древесины, г – паренхимные клетки перимедулярной зоны сердцевины; 2 – поперечный срез корня (200×): а – суберинизированные клетки пробки, б – несуберинизированные клетки пробки, в – флоэма, г – сосуды ксилемы.

Определение основных групп биологически активных веществ

ТСХ. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—метанол—хлороформ 3:14:26.

Испытуемый раствор. В коническую колбу со шлифом вместимостью 50 мл, помещают 1,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм, прибавляют 15 мл спирта 50 %, нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 30 мин. После охлаждения полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

Раствор стандартного образца (+)-катехина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,001 г (+)-катехина, растворяют в спирту 50 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Реактив для детектирования. Железа (III) хлорида спиртовой раствор 1 %.

На линию старта пластинки в виде полос длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят по 10 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца (+)-катехина. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают, в предварительно насыщенную в течение 30 мин, камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80 – 90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования и просматривают при дневном свете.

Результат. На хроматограмме раствора стандартного образца (+)-катехина должна обнаруживаться зона адсорбции серо-зелёного цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться зона адсорбции серо-зелёного цвета на уровне зоны адсорбции раствора стандартного образца (+)-катехина, 3 зоны адсорбции серо-голубого цвета ниже уровня зоны адсорбции раствора стандартного образца (+)-катехина; допускается обнаружение других зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 6,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 2,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, − не более 3 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Другие части растения (зелёные стебли, черешки, листовые пластинки, соцветия, плоды), в т.ч. отделённых при анализе. Не более 12 %.

Органическая примесь. Не более 3 %.

Минеральная примесь. Не более 1 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Раствор спирта 50 % подкислённого. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мл спирта 50 %, прибавляют 1,0 мл хлористоводородной кислоты 1 %, объём раствора доводят спиртом 50 % до метки.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм. Помещают 1,0 г (точная навеска) измельчённого сырья в коническую колбу вместимостью 250 мл с притёртой пробкой, прибавляют 50 мл спирта 50 % и взвешивают с точностью ±0,01 г. Колбу с содержимым присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 1 ч. Полученное извлечение охлаждают до комнатной температуры и взвешивают, при необходимости доводят спиртом 50 % до первоначальной массы, фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 10 мл фильтрата. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,5 мл фильтрата, прибавляют 10 мл спирта 50 % подкислённого, доводят объём раствора спиртом 50 % подкислённым до метки.

Раствор сравнения. Раствор спирта 50 % подкислённого.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 279 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, относительно раствора сравнения.

Содержание суммы полифенольных соединений в пересчёте
на (+)-катехин в сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
а - навеска сырья, г;
144 - удельный показатель поглощения ({plus])-катехина в растворе спирта 50 % подкислённого при длине волны 279 нм ( );
W - влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0130 Софоры японской плоды

Sophorae japonicae fructus

Взамен ФС 42-452-72

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные зрелые и высушенные плоды культивируемого дерева софоры японской – Sophora japonica L., сем. бобовых– Fabaceae.

Содержит не менее 8,0 % суммы фенольных соединений в пересчёте на генистеин в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Плоды».

Цельное сырьё. Плоды – бобы, нераскрывающиеся, приплюснуто-цилиндрические, чётковидные, многосеменные. Длина плодов до 10 см, ширина 0,5–1 см. Семена овальные, гладкие, до 1 см длиной и шириной
0,4–0,7 см, большая часть семян недоразвита.

Цвет плодов (околоплодника) зеленовато-коричневый с хорошо заметным швом светло-жёлтого цвета; семян – тёмно-коричневый или почти чёрный. Запах отсутствует.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрении микропрепаратов эпидермиса околоплодника с поверхности должны быть видны многоугольные клетки наружной стороны и с прямыми или слабоизвилистыми стенками с внутренней стороны. Устьица расположены только на наружной стороне эпидермиса околоплодника, погружённые, овальные или округлые, окружены несколькими клетками удлинённой формы, образующими характерную розетку, устьичный комплекс парацитного типа. Мякоть околоплодника представлена рыхлой паренхимой, состоящей из крупных, тонкостенных клеток. В паренхиме встречаются мелкие проводящие пучки, состоящие из кольчатых сосудов, кристаллы и друзы кальция оксалата разного размера.

При рассмотрении микропрепаратов поперечного среза семенной кожуры должно быть видно трёхслойное строение. Наружный слой состоит из одного ряда склеренхимных клеток, вытянутых перпендикулярно поверхности семени; второй («палисадный») слой – из одного ряда клеток с сильно утолщёнными стенками и прямоугольными просветами, расположенными перпендикулярно кожуре семени; третий слой образован клетками колленхимы удлинённой формы с равномерно утолщёнными стенками, расположенными длинными осями параллельно кожуре семени; ниже расположен слой паренхимы с клетками со слизью. Клетки связаны между собой тонкими выростами, образующими большие межклетники.

Рисунок 1. Софоры японской плоды: 1 – клетки наружного эпидермиса околоплодника (400×); 2 – паренхима околоплодника (400×); 3 – клетки паренхимы околоплодника с друзами кальция оксалата (400×); 4 – проводящие пучки и кристаллы кальция оксалата (200×); 5 – поперечный срез семенной кожуры: а – наружный слой склеренхимы; б – палисадный слой; в – слой колленхимы (200×); 6 – клетки паренхимы семени со слизью (400×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота безводная–вода–метанол–этилацетат 2:5:13:80.

Испытуемый раствор. В колбу со шлифом вместимостью 250 мл помещают около 1,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, прибавляют 50 мл спирта 70 %, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 1 ч. После охлаждения полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

Раствор стандартного образца софорикозида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают около 0,01 г фармакопейного стандартного образца софорикозида, прибавляют 10 мл спирта 70 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

На линию старта пластинки в виде полос длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят 5 мкл испытуемого раствора и 10 мкл раствора стандартного образца софорикозида. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение 1 ч ПФ, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Результат. На хроматограмме раствора стандартного образца софорикозида должна обнаруживаться тёмная зона адсорбции.

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться тёмная зона адсорбции на уровне зоны адсорбции софорикозида и ниже её три тёмные зоны адсорбции; допускается обнаружение других зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 14,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 3,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 1,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Почерневшие и незрелые плоды. Не более 10 %.

Стебли и листья. Не более 3 %.

Органическая примесь. Не более 0,5 %.

Минеральная примесь. Не более 1 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Раствор стандартного образца генистеина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,01 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца генистеина, прибавляют 20 мл спирта 70 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора спиртом 70 % до метки.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. В коническую колбу со шлифом вместимостью 250 мл помещают 1 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 100 мл спирта 70 % и взвешивают с погрешностью ±0,01 г. Колбу с содержимым присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 1 ч. Содержимое колбы охлаждают до комнатной температуры, взвешивают и при необходимости доводят спиртом 70 % до первоначальной массы. Извлечение фильтруют через беззольный фильтр. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,2 мл фильтрата и доводят объём раствора спиртом 70 % до метки.

Раствор сравнения. Спирт 70 %.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 260 нм в кюветах с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца генистеина в аналогичных условиях относительно раствора сравнения.

Содержание суммы фенольных соединений в пересчёте на генистеин в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A – оптическая плотность испытуемого раствора;
Aо – оптическая плотность раствора стандартного образца генистеина;
a – навеска сырья, г;
ао – навеска фармакопейного стандартного образца генистеина, г;
P – содержание генистеина в фармакопейном стандартном образце генистеина, %;
W – влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0095 Сушеницы топяной трава

Gnaphalii uliginosi herba

Взамен ФС.2.5.0095.18

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в начале цветения и высушенная трава с корнями дикорастущего однолетнего травянистого растения сушеницы топяной – Gnaphalium uliginosum L. s. l., сем. астровых – Asteraceae.

Содержит не менее 0,2 % суммы флавоноидов в пересчёте на гнафалозид А в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Травы» и ОФС «Корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы».

Цельное сырьё. Цельные или частично измельчённые олиственные стебли длиной до 30 см с серовато-белым войлочным опушением. Корни тонкие, стержневые, ветвистые. Стебли тонкие, цилиндрические, обычно от основания распростёрто-ветвистые. Листья длиной 0,5–3,5 см, шириной
0,1–0,4 см, очерёдные, короткочерешковые, линейно-продолговатые, с туповатой верхушкой и выдающейся срединной жилкой. Соцветие состоит обычно из нескольких яйцевидных мелких корзинок длиной 0,3–0,4 см, плотно скученных клубочками на верхушках побегов и окружённых лучисторасходящимися листьями, превышающими клубочки соцветий. Обвёртка корзинки состоит из 2–3 рядов черепитчато-расположенных тёмно-бурых листочков; наружные листочки яйцевидные, при основании войлочные, в верхней половине голые, блестящие; внутренние – продолговато-яйцевидные, заострённые, голые. Цветки мелкие, желтоватые, трубчатые, пятизубчатые. Плоды – семянки с хохолком из 10 отдельных волосков. Корни стержневые, ветвистые.

Цвет зеленовато-серый. Запах слабый.

Измельчённое сырьё. Кусочки стеблей, листьев, соцветий, корней, а также отдельные цветки, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

Цвет зеленовато-серый. Запах слабый.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё, измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепаратов листа с поверхности должны быть видны клетки эпидермиса, с обеих сторон более или менее вытянутые по длине листа. Клетки эпидермиса верхней стороны листа должны быть со слабоизвилистыми стенками, с нижней стороны листа – с сильноизвилистыми стенками. Клетки в основном прямоугольной формы, у основания и вершины листа вытянутые. Нижний эпидермис с извилистыми и сильноизвилистыми стенками, у основания и вершины листа клетки вытянуты и имеют более ровные стенки. Кутикула ровная. Устьица крупные, овально-округлые, погружённые, окружены 4–5 клетками эпидермиса и ориентированы по длине листа (аномоцитный тип), должны встречаться редко; на нижней стороне их значительно больше.

На поперечных и продольных срезах должны быть видны утолщённые наружные и внутренние стенки эпидермальных клеток. Открытые коллатеральные сосудисто-волокнистые пучки расположены по кругу с небольшими межпучковыми зонами, в которых межпучковая паренхима склерифицирована. Склеренхимные волокна в виде «шапочек» должны быть расположены над пучками, а также имеются в ксилеме. Сосуды спиральные и точечные должны быть представлены небольшими радиальными тяжами группами по 2–4. Кора должна быть отделена от центрального осевого цилиндра рядом клеток эндодермы. Сердцевина должна быть заполнена крупными паренхимными клетками. Волоски стебля аналогичны волоскам листа.

Эпидермис обвёртки корзинки должен состоять из вытянутых прямоугольных клеток с ровными стенками и редко встречающихся аномоцитных устьиц. Кутикула ровная. Волоски должны быть такими же, как волоски листа, но головчатые волоски более крупные, насчитывающие до четырёх клеток в высоту. Хохолок семени должен состоять из многочисленных пучковых многоклеточных волосков. Пыльца округлая шиповатая трёхпоровая.

Рисунок 1. Сушеницы топяной листья: А – верхний эпидермис (250×). Б – нижний эпидермис (250×). В – поперечный срез (125×). 1 – простые волоски; 2 – головчатые волоски; 3 – клетки эпидермиса; 4 – устьица; 5 – флоэма; 6 – ксилема; 7 – губчатая паренхима.
Рисунок 2. Сушеницы топяной стебель (поперечный срез (125×)): 1 – простые волоски; 2 – головчатые волоски; 3 – клетки эпидермиса; 4 – эндодерма; 5 – флоэма; 6 – сосуды; 7 – камбий; 8 – склеренхимные волокна; 9 – склерифицированная межпучковая паренхима; 10 – паренхима сердцевины.
Рисунок 3. Сушеницы топяной стебель: А – продольный срез (125×). Б – срез с поверхности (150×). В – схема расположения сосудисто-волокнистых пучков на поперечном срезе. 1 – простые волоски; 2 – головчатые волоски; 3 – клетки эпидермиса; 4 – эндодерма; 5 – флоэма; 6 – сосуды; 7 – камбий; + 8 – склеренхимные волокна; 9 – паренхима сердцевины; 10 – устьица; Фл – флоэма; Кс – ксилема.
Рисунок 4. Сушеницы топяной цветки: А – эпидермис обвёртки корзинки. Б – волоски летучки семянки. 1 – головчатые волоски, 2 – простые волоски.

Определение основных групп биологически активных веществ

1. ТСХ. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Вода—муравьиная кислота—толуол—этилацетат 2:5:10:20.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу с притёртой пробкой вместимостью 100 мл помещают 1,0 г измельчённого до однородной массы сырья, прибавляют 10 мл спирта 70 %, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 30 мин. Затем содержимое колбы охлаждают и фильтруют через беззольный фильтр.

- Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг кверцетина-3-глюкозида, 5 мг кофейной кислоты и 5 мг хлорогеновой кислоты и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Реактив для детектирования 1. Дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствор 1 % в спирте 96 %.

- Реактив для детектирования 2. Макрогола 400 раствор спиртовой 5 %.

- На линию старта пластинки наносят 10 мкл испытуемого раствора и 5 мкл стандартного раствора. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную в течение не менее 30 мин камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Хроматограмму опрыскивают реактивом для детектирования 1, сушат, затем опрыскивают реактивом для детектирования 2, нагревают при температуре 100–105 °С в течение 3–5 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

- Результат

- На хроматограмме стандартного раствора в нижней трети пластинки должна обнаруживаться зона адсорбции от голубого до сине-голубого цвета (хлорогеновая кислота), в средней трети пластинки должна обнаруживаться зона адсорбции от оранжевого до жёлто-оранжевого цвета (кверцетин-3-глюкозид) и в верхней трети пластинки должна обнаруживаться зона адсорбции от голубого до сине-голубого цвета (кофейная кислота).

- На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции от голубого до сине-голубого цвета на уровне зоны адсорбции хлорогеновой кислоты, зона адсорбции от оранжевого до жёлто-оранжевого цвета на уровне зоны адсорбции кверцетин-3-глюкозида и зона адсорбции от голубого до сине-голубого цвета на уровне зоны адсорбции кофейной кислоты; допускается обнаружение других зон адсорбции (фенольные соединения).

2. Спектрофотометрия (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 200 до 400 нм в кювете толщиной 1 см должен иметь максимумы при 287±3 нм и 330±3 нм (раздел «Количественное определение»).

3. Качественная реакция. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 г сырья и прибавляют 10 мл спирта 96 %, соединяют с обратным холодильником и нагревают на водяной бане в течение 10 мин с момента закипания спирта в колбе. После охлаждения до комнатной температуры полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

- В две одинаковые пробирки помещают по 2 мл полученного фильтрата, затем в одну из пробирок добавляют 0,5 мл алюминия хлорида спиртового раствора 2 % (испытуемый раствор), а во вторую – 0,5 мл спирта 96 % (раствор сравнения). Через 20 мин в обе пробирки прибавляют по 10 мл воды и просматривают на белом фоне. Анализируемый раствор должен иметь жёлтый цвет и по интенсивности окраски заметно превосходить раствор сравнения (флавоноиды).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 20,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 10,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм – не более 5 %.

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм – не более 10 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,315 мм – не более 10 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Органическая примесь. Не более 2 %.

Минеральная примесь. Не более 2 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Сумма флавоноидов. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Подготовка колонки. В химический стакан вместимостью 50 мл помещают 1,5 г порошка полиамида для колоночной хроматографии, заливают 30 мл воды, затем выливают через воронку диаметром 3,5 см в колонку шириной 1,2 см и высотой 25 см, в нижнюю часть которой помещают небольшой ватный тампон, предварительно смоченный водой. Колонку заполняют при открытом кране. Элюирование проводят со скоростью 4 мл/мин.

Раствор калия бихромата. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,03 г (точная навеска) калия бихромата, высушенного до постоянной массы, растворяют в серной кислоты растворе 5 мМ, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Элюат. Аналитическую пробу сырья измельчают до получения однородной массы. Помещают 5,0 г (точная навеска) измельчённого сырья в патрон из фильтровальной бумаги и экстрагируют спиртом 96 % в аппарате Сокслета с экстрактором вместимостью 150 мл на водяной бане в течение 5 ч (20–25 сливов). Извлечение в круглодонной колбе вместимостью 100 мл упаривают по частям на водяной бане досуха. К сухому остатку в колбе прибавляют 5,0 мл натрия хлорида раствора 10 %, нагревают на водяной бане в течение 2 мин, растирая осадок стеклянной палочкой до растворения. После охлаждения раствор количественно переносят на колонку с полиамидным сорбентом. Операцию проводят два раза. Слив производят через воронку с ватным тампоном, предварительно смоченным водой.

Колонку промывают 10 мл воды, затем убирают ватный тампон и промывают колонку ещё 20 мл воды. Водный элюат отбрасывают. Флавоноиды элюируют 50 мл спирта 96 % со скоростью 4 мл/мин. Когда тёмно-жёлтая зона (в УФ-свете) подойдёт к нижней части сорбента, элюат собирают в мерную колбу вместимостью 50 мл. Объём извлечения доводят спиртом 96 % до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл полученного элюата, объём раствора доводят спиртом 96 % до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 338 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно спирта 96 %.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора калия бихромата. В качестве раствора сравнения используют серной кислоты раствор 5 мМ.

Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на гнафалозид А в сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

где A – оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 – оптическая плотность раствора калия бихромата;
a0 – навеска калия бихромата, г;
a – навеска сырья, г;
0,2020 – коэффициент пересчёта калия бихромата на гнафалозид А;
1,03 – поправочный коэффициент на неполное элюирование гнафалозида А с полиамидного сорбента;
W – влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0099 Толокнянки обыкновенной листья

Arctostaphylos uvae-ursi folia

Взамен ФС.2.5.0099.18

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные весной до и в начале цветения или осенью с начала созревания плодов до появления снежного покрова, высушенные листья дикорастущего вечнозелёного кустарничка толокнянки обыкновенной – Arctostaphylos uva-ursi (L.) Spreng., семейства вересковых– Ericaceae.

Содержит:

- не менее 7,0 % суммы фенологликозидов в пересчёте на арбутин в сухом сырье (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»);

- или не менее 7,0 % арбутина в пересчёте на сухое сырьё (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Листья».

Цельное сырьё. Смесь цельных или частично измельчённых листьев. Листья мелкие, кожистые, ломкие, обратно-яйцевидной или удлинённо-овальной формы, иногда с небольшой выемкой, на верхушке закруглённые, к основанию клиновидно-суженные, с очень коротким черешком. Длина листьев 1–2,2 см, ширина 0,5–1,2 см. Жилкование сетчатое. При рассмотрении под лупой (10× и др.) на верхней поверхности листа жилки заметно вдавлены. Черешки листьев в поперечном сечении округло-треугольной формы.

Листья с верхней стороны тёмно-зелёные, блестящие, с нижней стороны немного светлее, матовые, голые. Запах отсутствует.

Измельчённое сырьё. Кусочки листьев различной формы и черешков, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 3 мм. При рассмотрении под лупой (10×) видны кусочки листьев различной формы, на верхней поверхности жилки вдавлены; кусочки черешков, редко-тонких стеблей.

Цвет от светло-зелёного до тёмно-зелёного с коричневато-зелёными, светло-коричневыми, коричневыми, редко фиолетовыми и желтовато-белыми вкраплениями. Запах отсутствует.

Порошок. Кусочки листьев и черешков, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. При рассмотрении под лупой (10×) видны кусочки листьев с вдавленными жилками на верхней поверхности листа; кусочки черешков, редко-тонких стеблей.

Цвет от светло-зелёного до тёмно-зелёного с коричневато-зелёными, светло-коричневыми, коричневыми, редко фиолетовыми и желтовато-белыми вкраплениями. Запах отсутствует.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё, измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепарата листа с поверхности должны быть видны: многоугольные клетки верхнего и нижнего эпидермиса с прямыми и довольно толстыми стенками; устьица крупные, округлые, с широко раскрытой устьичной щелью, окружены 8 (5–9) клетками эпидермиса (аномоцитный тип), расположенные на нижнем эпидермисе; вдоль крупных жилок располагаются кристаллы оксалата кальция в виде призм, их сростков и друз.

Волоски редкие, изогнутые, 2–3-клеточные, встречаются у основания листа и на черешке.

Клетки эпидермиса черешка толстостенные, прозенхимной формы. Эпидермис опушён многочисленными 2–3 клеточными волосками. Под эпидермисом в три-четыре слоя залегает колленхима.

Проводящая система черешка представлена одним крупным коллатеральным пучком, расположенным в центре.

Порошок. При рассмотрении микропрепарата порошка должны быть видны фрагменты многоугольных клеток эпидермиса с прямыми и довольно толстыми стенками, устьица с 8 (5–9) околоустьичными клетками, с широко раскрытой устьичной щелью (аномоцитный тип); фрагменты волосков простых, слегка изогнутых, 2–3-клеточных. На фрагментах листьев в мезофилле должны быть видны редкие одиночные кристаллы оксалата кальция в виде призм, их сростков и друз. В микропрепарате также обнаруживаются фрагменты черешка листа.

Рисунок. Толокнянки обыкновенной листья: 1 – фрагмент верхнего эпидермиса листа (400×); 2 – фрагмент нижнего эпидермиса листа с устьицами (аномоцитный тип) (400×); 3 – фрагмент эпидермиса листа вдоль жилки с кристаллами оксалата кальция в виде призм (400×); 4 – фрагмент мезофилла листа с кристаллами оксалата кальция в виде призм, их сростков и друз (400×); 5 – поперечный срез листа (100×); 6 – поперечный срез черешка (40×);7 – фрагмент эпидермиса черешка (400×); 8 – фрагмент эпидермиса черешка с 2-клеточным изогнутым волоском (400×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Вода––муравьиная кислота безводная––этилацетат 6:6:88.

Испытуемый раствор. Полученного для количественного определения арбутина 10 мл исходного раствора пропускают через колонку с алюминия оксидом нейтральным для хроматографии и используют для хроматографирования.

Раствор стандартного образца арбутина. Растворяют 10 мг арбутина в 10 мл спирта 70 % при нагревании на водяной бане.

Реактив для детектирования. Фосфорномолибденовой кислоты спиртовой раствор 10 %.

На линию старта пластинки полосами длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят 60 мкл испытуемого раствора и 10 мкл раствора стандартного образца арбутина. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение 30 мин ПФ, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Пластинку опрыскивают реактивом для детектирования, выдерживают при температуре 100–105 °С в течение 3–10 мин и просматривают при дневном свете.

Результат

На хроматограмме раствора стандартного образца арбутина должна обнаруживаться зона адсорбции синего цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции синего цвета на уровне или чуть ниже зоны адсорбции арбутина и над ней зона адсорбции синего цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 12,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 4,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 2,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм, – не более 2 %.

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм, – не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, – не более 5 %.

Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, – не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, – не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Сырьё, изменившее окраску (листья, потемневшие с обеих сторон). Цельное сырьё – не более 3 %.

Другие части растения (веточки, плоды). Цельное сырьё – не более 4 %.

Органическая примесь. Цельное сырьё, измельчённое сырьё – не более 0,5 %.

Минеральная примесь. Не более 0,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят одним из приведённых методов.

1. Сумма фенологликозидов в пересчёте на арбутин._ Определение проводят в соответствии с ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»

- Раствор стандартного образца арбутина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца арбутина, прибавляют 80 мл спирта 70 % и нагревают на водяной бане до полного растворения. Затем раствор охлаждают, доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 7,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора спиртом 70 % до метки.

- Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. В коническую колбу со шлифом вместимостью 250 мл помещают 0,5 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 100 мл спирта 70 % и взвешивают с погрешностью ±0,01 г. Колбу с содержимым присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 45 мин, периодически встряхивая для смывания частиц сырья со стенок. Содержимое колбы охлаждают до комнатной температуры, взвешивают и при необходимости доводят спиртом 70 % до первоначальной массы. Извлечение фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.

- Испытуемый раствор. Пропускают через стеклянную хроматографическую колонку диаметром 1,5 см и высотой 25 см, заполненную 3,0 г алюминия оксида нейтрального для хроматографии
  (L 40/250 мкм), предварительно промытую 5 мл спирта 70 %, 3,0 мл исходного раствора. Далее раствор элюируют 15 мл спирта 70 % и элюат собирают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объём раствора спиртом 70 % до метки.

- Раствор сравнения. Спирт 70 %, который предварительно пропускают через колонку с алюминия оксидом нейтральным для хроматографии.

- Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 285 нм в кюветах с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения.

- Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца арбутина в аналогичных условиях относительно раствора сравнения.

- Содержание суммы фенологликозидов в пересчёте на арбутин в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

- где A – оптическая плотность испытуемого раствора;
  Aо – оптическая плотность раствора стандартного образца арбутина;
  a – навеска сырья, г;
  ао – навеска фармакопейного стандартного образца арбутина, г;
  P – содержание арбутина в фармакопейном стандартном образце арбутина, %;
  W – влажность сырья, %.

- Допускается содержание суммы фенологликозидов в пересчёте на арбутин в сухом сырье вычислять с использованием удельного показателя поглощения по формуле:

- где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
  а - навеска сырья, г;
  72 - удельный показатель поглощения арбутина при длине волны 285 нм
  W - влажность сырья, %.

2. Арбутин. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

- Подвижная фаза (ПФ). Метанол—вода 10:90.

- Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. В коническую колбу со шлифом вместимостью 100 мл помещают 0,8 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 20 мл воды. Колбу с содержимым присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 30 мин. Затем охлаждают и фильтруют через вату в мерную колбу вместимостью 50 мл. Вату помещают в колбу с остатками сырья, прибавляют 20 мл воды и нагревают на водяной бане в течение 30 мин. После охлаждения извлечения фильтруют через вату в ту же мерную колбу и доводят объём раствора водой до метки. Содержимое мерной колбы фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.

- Раствор стандартного образца арбутина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 0,05 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца арбутина, прибавляют 30 мл ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мг гидрохинона, растворяют в 5 мл ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, прибавляют 2,5 мл раствора стандартного образца арбутина и доводят объём раствора ПФ до метки.

- Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4 мм, силикагель октадецилсилильный, деактивированный по отношению к основаниям, для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки | 25 °С;
Скорость потока | 1,2 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 280 нм;
Объём пробы | 20 мкл

- Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца арбутина и испытуемый раствор.

- Пригодность хроматографической системы

- На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:

  - разрешение (RS) между пиками арбутина и гидрохинона должно быть не менее 4,0.

- Содержание арбутина в пересчёте на сухое сырьё в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика арбутина на хроматограмме испытуемого раствора;
Sо – площадь пика арбутина на хроматограмме раствора стандартного образца арбутина;
a – навеска сырья, г;
ао – навеска фармакопейного стандартного образца арбутина, г;
P – содержание арбутина в фармакопейном стандартном образце арбутина, %;
W – влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0101 Тысячелистника обыкновенного трава

Achilleae millefolii herba

Взамен ФС.2.5.0101.18

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в фазу цветения, высушенная трава дикорастущего и культивируемого многолетнего травянистого растения тысячелистника обыкновенного – Achillea millefolium L., сем. астровых – Asteraceae.

Содержит:

- не менее 0,4 % суммы флавоноидов в пересчёте на лютеолин в сухом сырье;

- цельное сырьё: не менее 0,1 % эфирного масла в пересчёте на сухое сырьё;

- измельчённое сырьё: не менее 0,08 % эфирного масла в пересчёте на сухое сырьё.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Травы».

Цельное сырьё. Цельные или частично измельчённые цветоносные побеги. Стебли округлые, опушённые, с очерёдными листьями, длиной до 15 см. Листья длиной до 10 см, шириной до 3 см, продолговатые, дважды-перисторассечённые на ланцетные или линейные доли. Корзинки продолговато-яйцевидные, длиной 3‑4 мм, шириной 1,5‑3 мм, в щитковидных соцветиях или одиночные. Обвёртки их из черепитчатых продолговато-яйцевидных листочков с перепончатыми коричневатыми краями. Цветоложе корзинок с плёнчатыми прицветниками. Краевые цветки язычковые пестичные, срединные – трубчатые обоеполые.

Цвет стеблей и листьев серовато-зелёный, реже – красновато-зелёный; краевых цветков – белый, реже розовый, срединных – жёлтый или серовато-жёлтый; листочков обвёртки – серовато-коричневый. Запах слабый, характерный.

Измельчённое сырье. Смесь кусочков листьев, стеблей, цветочных корзинок и отдельных цветков, проходящая сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

При рассмотрении под лупой (10× и др.) должны быть видны серовато-зелёные кусочки листьев, рассечённых на узкие линейные доли; кусочки округлых стеблей серовато-зелёного или красновато-зелёного цвета; цельные продолговато-яйцевидные корзинки или их фрагменты; отдельные трубчатые и язычковые цветки и их фрагменты белого, бело-розового, жёлтого или серовато-жёлтого цвета; кусочки листочков обвёртки корзинок серовато-коричневого цвета.

Цвет от серовато-зелёного до желтовато-зелёного с желтовато-белыми, светло-зелёными, белыми, красновато-зелёными и серовато-коричневыми вкраплениями. Запах слабый, характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё, измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепаратов листа должны быть видны фрагменты с эпидермисом из удлинённых клеток с извилистыми стенками и складчатой кутикулой, устьицами аномоцитного типа с 4‑5 околоустьичными клетками и многочисленными простыми волосками, состоящими из 4‑7 коротких тонкостенных клеток, лежащих в основании, и очень длинной конечной, слегка извилистой клетки с узкой нитевидной полостью, часто обломанной, эфирномасличные желёзки овальной формы с поперечной перегородкой, состоящие из 8 (6) выделительных клеток, расположенных в 2 ряда и 3-4 яруса, жилки сопровождаются секреторными ходами с желтовато-коричневым зернистым или маслянистым содержимым; трубчатые и язычковые цветки или их фрагменты с эпидермисом из клеток с извилистыми стенками или сосочковидными выростами (бугорчатый эпидермис), эфирномасличными желёзками, волосками, мелкими друзами кальция оксалата; фрагменты листочков обвёртки, состоящие из узких удлинённых клеток с утолщёнными пористыми стенками и секреторным ходом вдоль центральной жилки; фрагменты стебля с теми же диагностическими признаками, что и у листьев (тип устьичного комплекса, волоски, желёзки); шиповатые пыльцевые зёрна.

Рисунок 1. Тысячелистника обыкновенного трава: 1 – фрагмент эпидермиса листа: a – устьица аномоцитного типа, б – складчатость кутикулы (200×); 2 – фрагмент эпидермиса с эфирномасличными желёзками (100×); 3 – фрагмент венчика трубчатого цветка с двухрядными эфирномасличными желёзками (200×); 4 – фрагмент эпидермиса язычкового цветка с сосочковидными выростами (200×); 5 – фрагмент эпидермиса листа: a – многоклеточные основания простых волосков, б – складчатость кутикулы (200×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Этилацетат—толуол 5:95.

Испытуемый раствор. В коническую колбу с пробкой вместимостью 100 мл помещают 2 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, прибавляют 10 мл этилацетата и выдерживают на ультразвуковой бане в течение 15 мин. После охлаждения полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

Раствор стандартного образца судана III. Растворяют 1 мг cудана III в 10 мл спирта 96 %.

Реактив для детектирования. Анисового альдегида раствор спиртовой сернокислый (2).

На линию старта пластинки полосами длиной 10 мм, шириной не более 3 мм наносят 40 мкл испытуемого раствора и параллельно 3 мкл раствора cудана III. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 5 мин, помещают в предварительно насыщенную в течение 30 мин камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80‑90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Затем пластинку опрыскивают реактивом для детектирования, нагревают при температуре 100‑105 °С в течение 2–5 мин и сразу просматривают при дневном свете.

Результат. На хроматограмме раствора стандартного образца cудана III должна обнаруживаться зона адсорбции синего или сине-фиолетового цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должно обнаруживаться не менее четырёх зон адсорбции фиолетового, сине-фиолетового или фиолетово-синего цвета: две зоны ниже уровня зоны адсорбции cудана III и две зоны выше уровня зоны адсорбции cудана III; допускается обнаружение других зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 15,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 3,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, − не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, − не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Стебли толще 3 мм. Цельное сырьё: не более 3 %.

Сырьё, изменившее окраску (тёмно-коричневое и почерневшее). Не более 1 %.

Органическая примесь. Не более 1,5 %.

Минеральная примесь. Не более 1 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. Сумма флавоноидов. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. В колбу со шлифом вместимостью 250 мл помещают 1,5 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 50 мл спирта 96 %, содержащего 1 % хлористоводородной кислоты концентрированной, колбу взвешивают с погрешностью ±0,01 г, нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 1,5 ч. Полученное извлечение охлаждают и взвешивают, при необходимости доводят спиртом 96 % до первоначальной массы, фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора, прибавляют 3,0 мл алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 96 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

- Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора через 40 мин на спектрофотометре при длине волны 400 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

- Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на лютеолин в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

- где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
  а - навеска сырья, г;
  549 - удельный показатель поглощения комплекса лютеолина с алюминия хлоридом при длине волны 400 нм
  W - влажность сырья, %.

2. Эфирное масло. В соответствии с ОФС «Определение содержания эфирного масла в лекарственном растительном сырье и лекарственных средствах растительного происхождения» (метод 3, из 20,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, объём воды ‑ 400 мл, время перегонки 2 ч).

- Примечания – Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на лютеолин определяют в сырье, предназначенном для получения лекарственных растительных препаратов, экстракционных лекарственных форм (экстракты спиртовые).

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0131 Фасоли обыкновенной плодов створки

Phaseoli vulgaris fructuum valvae

Взамен ФС 42-2942-93

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Высушенные створки зрелых плодов культивируемого однолетнего растения фасоли обыкновенной сортов со светло-жёлтой и жёлтой окраской бобов – Phaseolus vulgaris L., сем. бобовых – Fabaceae.

Содержит:

- не менее 0,06 % суммы флавоноидов в пересчёте на рутин в сухом сырье;

- не менее 15 % экстрактивных веществ, извлекаемых водой, в пересчёте на сухое сырьё.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Плоды».

Цельное сырьё. Створки плодов удлинённые, часто спиралевидно скрученные, соединённые попарно плодоножкой или одиночные, частично изломанные, желобчатые или прямые. На верхушке створок клювик различной формы (прямой, когтевидный, улиткообразный), длиной до 1,5 см. По брюшной и спинной стороне створок проходит выпуклый сосудистый пучок. Внешняя поверхность створок гладкая, иногда слегка морщинистая, матовая, от светло-жёлтого до жёлтого цвета, изредка с пятнистостью или штриховатостью коричневого или фиолетового цвета. Внутренняя поверхность створок блестящая, белая или желтовато-белая, покрыта тонкой шелушащейся плёнкой белого цвета. Длина створок до 19 см, ширина до 2 см. Плодоножка длиной до 4 см, голая, слегка ребристая с коричневым кольцевым валиком у основания створок.

Цвет желтовато-белый, светло-жёлтый или жёлтый. Изредка видны полоски или пятна коричневого или фиолетового цвета. Запах слабый, характерный.

Измельчённое сырьё. Смесь кусочков створок плодов различной формы с гладкой или слегка морщинистой поверхностью, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

Цвет желтовато-белый или светло-жёлтый с коричневыми и фиолетовыми вкраплениями. Запах слабый, характерный.

Порошок. Смесь частиц створок плодов различной формы, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

Цвет желтовато-белый или светло-жёлтый с коричневыми и фиолетовыми вкраплениями. Запах слабый, характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств природного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрении микропрепарата экзокарпия створок плодов с наружной поверхности должны быть видны клетки эпидермиса изодиаметрической формы с тонкими прямыми стенками и хорошо выраженной радиальной складчатостью кутикулы вокруг устьиц и мест прикрепления волосков. Устьица многочисленные, разнонаправленные, окружены 2–6 околоустьичными клетками (аномоцитного типа). Волоски простые и головчатые. Головчатые волоски состоят из короткой одноклеточной ножки и овальной одноклеточной головки. Простые волоски 1–3 клеточные, базальная клетка короткая, верхушечная, как правило, с загнутым кончиком или заострённая. Многочисленные места прикрепления опавших волосков в виде лучистых валиков, около которых основные клетки эпидермиса располагаются в виде розетки из 4–14 клеток.

В мезокарпии, непосредственно под экзокарпием, расположены
в 2-3 слоя веретеновидные клетки с сильно утолщёнными неодревесневшими стенками. Паренхима представляет собой клетки с чётковидно утолщёнными стенками, заполнена крахмальными зёрнами различной величины. Клетки внутреннего слоя мезокарпия, прилегающего к эндокарпию, содержат призматические кристаллы с диагональным рубчиком.

Внутренняя поверхность створок плодов – эндокарпий (пергаментный слой), состоит из нескольких рядов длинных, узких одревесневших склеренхимных волокон с пористыми стенками.

Внутренний эпидермис (тонкая белая плёнка, которая обычно отшелушивается) состоит из клеток с прямыми стенками.

Измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепарата должны быть видны фрагменты экзокарпия створок плодов с тонкими прямыми стенками клеток и хорошо выраженной радиальной складчатостью кутикулы вокруг места прикрепления оснований опавших волосков и устьиц, часто с подлежащим слоем склеренхимных веретеновидных волокон с сильно утолщёнными неодревесневшими стенками (иногда встречаются склеренхимные волокна без экзокарпия), фрагменты паренхимных клеток с чётковидно утолщёнными стенками, заполненные крахмальными зёрнами различной величины, часто видны проводящие пучки с кристаллоносной обкладкой.

Порошок. При рассмотрении микропрепарата должны быть видны клетки эпидермиса экзокарпия створок с наружной поверхности изодиаметрической формы с тонкими прямыми стенками и хорошо выраженной радиальной складчатостью кутикулы вокруг устьиц и мест прикрепления оснований волосков. Устьица многочисленные, разнонаправленные, окружены 2–6 околоустьичными клетками (аномоцитный тип). Волоски простые и головчатые. Простые состоят
из 1–3 клеток; базальная клетка короткая, конечная – заострённая и, как правило, с загнутым кончиком. Места прикрепления простых волосков в виде лучистых валиков. Головчатые волоски состоят из короткой одноклеточной ножки и овальной одноклеточной головки. В мезокарпии встречаются веретеновидные клетки с сильно утолщёнными неодревесневшими стенками и призматические кристаллы с диагональным рубчиком. Встречаются склеренхимные волокна с пористыми стенками.

Рисунок 1. Фасоли обыкновенной плодов створки: 1 – фрагмент эпидермиса экзокарпия: а – головчатый волосок (200×), 2 – фрагмент эпидермиса экзокарпия с устьицами: б – складчатость кутикулы (200×), 3 – фрагмент эпидермиса экзокарпия с простым волоском (200×), 4 – призматические кристаллы с диагональным рубчиком (400×).

Определение основных групп биологически активных веществ Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля, на алюминиевой подложке.

Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота безводная—вода—этилацетат 15:20:65.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. Помещают 2,0 г измельчённого сырья в колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 10 мл спирта 96 %, нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 10 мин. После охлаждения полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

Раствор рутина. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг рутина, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Реактив для детектирования 1. Дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствор 1 % в спирте 96 %.

Реактив для детектирования 2. Макрогола 400 раствор спиртовой 5 %.

На линию старта пластинки наносят 50 мкл испытуемого раствора и 2 мкл раствора рутина. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную в течение 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт
около 80 – 90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры и сушат до удаления следов растворителей. Хроматограмму опрыскивают реактивом для детектирования 1, сушат, затем обрабатывают раствором для детектирования 2, нагревают при температуре 105–110 °С в течение 3–5 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

Результат. На хроматограмме раствора рутина должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией от жёлтого до жёлто-оранжевого цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией голубого цвета, над ней зона адсорбции с флуоресценцией от жёлтого до жёлто-оранжевого цвета на уровне зоны адсорбции рутина, выше зона адсорбции с флуоресценцией от жёлтого до жёлто-оранжевого цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 15,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 10,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 0,8 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, − не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, − не более 5 %.

Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, − не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, − не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Почерневшие с обеих сторон створки плодов. Цельное сырьё: не более 8 %.

Другие части растения. Цельное сырьё: не более 3 %.

Органическая примесь. Цельное сырьё, измельчённое сырьё: не более 2 %.

Минеральная примесь. Не более 0,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Сумма флавоноидов. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с размером отверстий 2 мм. Помещают 2,0 г (точная навеска) измельчённого сырья в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 50 мл спирта 70 %. Колбу взвешивают с погрешностью ±0,01 г, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 2 часов. Затем колбу охлаждают, взвешивают и при необходимости доводят до первоначальной массы спиртом 70 %. После раствор фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 10 мл фильтрата.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10,0 мл исходного раствора, прибавляют 5 мл алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 70 % и доводят объём раствора до метки спиртом 70 %.

Исходный раствор стандартного образца рутина. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,05 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца рутина, растворяют при нагревании на водяной бане в спирте 70 %, охлаждают и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор стандартного образца рутина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 5 мл алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 70 % и 0,1 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора спиртом 70 % до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 10,0 мл исходного раствора, прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора спиртом 70 % до метки.

Раствор сравнения стандартного образца рутина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 1,0 мл исходного раствора стандартного образца рутина, прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и доводят объём раствора спиртом 70 % до метки.

Через 40 минут измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 408 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Параллельно измеряют оптическую плотность испытуемого раствора стандартного образца рутина в таких же условиях.

Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на рутин в сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

где A1 – оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 – оптическая плотность испытуемого раствора стандартного образца гиперозида;
a – навеска сырья, г;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца рутина, г;
Р – содержание рутина в фармакопейном стандартном образце рутина, %;
W – влажность сырья, %.

Допускается содержание суммы флавоноидов вычислять с использованием удельного показателя поглощения комплекса рутина с хлоридом алюминия в спирте 70 % по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
а - навеска сырья, г;
248 - удельный показатель поглощения комплекса рутина с алюминия хлоридом
W - влажность сырья, %.

Экстрактивные вещества. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (метод 1, навеска сырья – 1,0 г, экстрагент – вода).

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0102 Фенхеля обыкновенного плоды

Foeniculi vulgaris fructus

Взамен ФС.2.5.0102.18

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные зрелые и высушенные плоды культивируемого двухлетнего и многолетнего травянистого растения фенхеля обыкновенного – Foeniculum vulgare Mill., сем. сельдерейных – Apiaceae.

Содержит не менее 3,0 % эфирного масла в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Плоды».

Цельное сырьё. Плоды – вислоплодники, распадающиеся на два полуплодика (мерикарпия). Мерикарпий продолговатой, почти цилиндрической формы, голый. На верхушке имеются остатки пятизубчатой чашечки и надпестичный диск с двумя расходящимися столбиками. Наружная сторона мерикарпия выпуклая, внутренняя – плоская. Каждый мерикарпий с пятью сильно выступающими продольными рёбрышками: три из них находятся на выпуклой стороне и два более развитых – по бокам. Семя в мерикарпии одно, сросшееся с околоплодником. Длина плодов 4–10 мм, ширина 1,5–4 мм. Цвет плодов зеленовато-коричневый, коричневый. Запах сильный, характерный.

Рисунок 1. Внешний вид фенхеля обыкновенного плодов

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения». Раздел «Плоды».

Цельное сырьё. При рассмотрении микропрепарата на поперечном срезе мерикарпия должен быть виден эпидермис (экзокарпий), состоящий из одного слоя овальных клеток. В мезокарпии рёбрышек проходят проводящие пучки, окружённые овальными или округлыми клетками с сетчатым утолщением. Между рёбрышками расположены крупные эфирномасличные канальцы: с наружной стороны мерикарпия их 4, с внутренней – 2. Эфирномасличные канальцы окружены слоем клеток с коричневыми оболочками. Эндокарпий плотно сросшийся с семенной кожурой, желтовато-коричневого цвета. Клетки эндосперма семени заполнены алейроновыми зёрнами, каплями жирного масла и мелкими друзами кальция оксалата.

Рисунок 2. Фенхеля обыкновенного плоды: 1 – поперечный разрез полуплодика (56×); 2 – ребро полуподика: а – сетчатые клетки; б – сосудисто-волокнистый пучок, в – трахеиды; г – мезокарпий (200×); 3 – поперечный разрез полуплодика: а – экзокарпий, б – мезокарпий, в – эфирномасличный каналец, г – эндокарпий, д – эндосперм семени (400×); 4 – ребро полуплодика: сетчатые клетки (300×); 5 – сетчатые клетки (400×); 6 – эпидермис (600×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Определение проводят одним из приведённых методов.

1. Тонкослойная хроматография

- Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»)

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Этилацетат––толуол 5:95.

- Раствор стандартного образца транс-анетола. Растворяют 20 мкл транс-анетола в 10 мл гексана.

- Испытуемый раствор. В колбу со шлифом вместимостью 100 мл помещают около 1,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, прибавляют 10 мл гексана, и встряхивают с помощью шейкера в течение 5 мин. Полученное извлечения фильтруют через беззольный фильтр.

- Реактив для детектирования. Ванилина раствор 1 % в серной кислоте.

- На линию старта пластинки в виде полос длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят 20 мкл испытуемого раствора и 5 мкл раствора стандартного образца транс-анетола. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение 30 мин ПФ, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Пластинку опрыскивают реактивом для детектирования, выдерживают при температуре 100–105 °С в течение 2–3 мин и просматривают при дневном свете.

- Результат. На хроматограмме раствора стандартного образца транс-анетола должна обнаруживаться зона адсорбции от красновато-коричневого до фиолетово-коричневого цвета.

- На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции от красновато-коричневого до фиолетово-коричневого цвета на уровне зоны адсорбции стандартного образца транс-анетола; ниже её интенсивная зона адсорбции от сине-фиолетового до фиолетово-красного цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции.

2. Газовая хроматография

- Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

- Хроматографические условия

Колонка | 30 м × 0,25 мм, капиллярная поли(диметил)(дифенил)силоксан, 0,25 мкм; |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |
Скорость потока | 0,8 мл/мин; |
Детектор | масс-спектрометрический; |
Деление потока | 20:1; |
Объём пробы | 1 мкл; |
Температура колонки, °C | 0–2 мин | 50;
| 2–12 мин | 50 → 150 (10 °С/мин);
| 12–21 мин | 150 → 280 (15 °С/мин);
| 21 мин | 280;
Температура инжектора, °С | 280; |
Температура детектора, °С | 280. |

- Хроматографируют раствор стандартного образца транс-анетола и испытуемый раствор (см. «Тонкослойная хроматография»).

- Относительное время удерживания соединений: фенхон – 1 (около 9,1 мин), анетол – около 1,32.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 14,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 10,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 1,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Повреждённых, недоразвитых плодов фенхеля и других частей. Не более 1 %.

Органическая примесь. Не более 1,6 %.

Минеральная примесь. Не более 0,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение эфирного масла проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания эфирного масла в лекарственном растительном сырье и лекарственных средствах растительного происхождения» (методики 1, 3 или 4, из 15,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, непосредственно перед определением, время перегонки 4 ч.)

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0045 Хвоща полевого трава

Еquiseti arvensis herba

Взамен ФС.2.5.0045.15

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в течение лета и высушенные надземные вегетативные побеги многолетнего травянистого дикорастущего растения хвоща полевого – Equisetum arvense L., сем. хвощевых – Equisetaceae.

Содержит не менее 0,3 % суммы флавоноидов в пересчёте на изокверцитрозид в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Травы».

Цельное сырьё. Цельные и частично измельчённые стебли длиной до 30 см, жёсткие, членистые, бороздчатые, с 6–18 продольными рёбрышками, почти от основания мутовчато-ветвистые, с полыми междоузлиями и утолщениями в узлах. Ветви неразветвлённые, членистые, косо вверх направленные, 4–5-гранные, без полости. Влагалища стеблей цилиндрические, длиной 4–8 мм, с треугольно-ланцетными, тёмно-коричневыми, белоокаймлёнными по краю зубцами, спаянными по 2–3. Влагалища веточек зелёные с 4–5 коричневатыми длиннооттянутыми зубчиками. При обрывании ветвей на стебле удерживаются только первые короткие членики.

Цвет серовато-зелёный. Запах слабый.

Измельчённое сырьё. Кусочки стеблей и ветвей частично с узлами и влагалищами, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

При рассмотрении под лупой (10×) видны кусочки ветвей, четырёх–пятиребристых, без полости на срезе, без листовых влагалищ, иногда с влагалищами или с их остатками. Отдельно встречаются целые влагалища и их части. Влагалища стеблей – зубчатые трубочки, серовато-зелёные, коричневые и тёмно-коричневые со спаянными по 2–3 треугольно-ланцетными коричневыми зубцами; влагалища ветвей – серовато-зелёные с длиннозаострёнными зубцами, светло-коричневыми, зелёными или зелёными со светло-коричневой каймой. Реже встречаются кусочки стебля (междоузлия и узлы) в поперечном и продольном сечении. Кусочки стебля в поперечном сечении ребристо-бороздчатые с центральной крупной полостью и мелкими полостями (под бороздами).

В продольном сечении кусочки стебля (междоузлия), с одной стороны – ребристые серовато-зелёные, с другой – гладкие, слегка продольно-слоистые, блестящие светло-жёлтые. Кусочки стебля, соответствующие узлам, с одним или несколькими мелкими коричневыми влагалищами ветвей. При рассматривании полости узла может быть видна перегородка или её остаток.

При рассмотрении под лупой (10× и др.) видна поверхность кусочков ветвей, стеблей, влагалищ серовато-зелёного цвета, покрытая мелкими беловатыми сосочками. Гребни рёбер с беловатыми зубчатыми выростами. На большинстве кусочков, у основания рёбер вдоль бороздок, расположены 2–3 (реже 1–4) ряда более крупных, чем сосочки, беловатых образований с лучистой складчатостью поверхности – устьица. Замыкающие клетки устьиц расположены на уровне клеток эпидермиса. Кусочки стеблей в продольном сечении, с одной стороны – ребристые, зелёные, с беловатыми зубчатыми гребнями, с другой – продольно-слоистые, светло-жёлтые, блестящие. На поперечном сечении кусочков стебля, в коре под бороздками, видны полости.

Цвет серовато-зелёный, желтовато-зелёный со светло-жёлтыми и коричневыми вкраплениями. Запах слабый.

Порошок. Кусочки стеблей, ветвей, влагалищ, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

При рассмотрении под лупой (10× и др.) видны мелкие беловатые сосочки. Вдоль бороздок расположены 2–3 (реже 1–4) ряда более крупных, чем сосочки, беловатых образований с лучистой складчатостью поверхности – устьица. Замыкающие клетки устьиц расположены на уровне клеток эпидермиса. Кусочки ветвей в поперечном сечении с 4–5 рёбрами, без полости. Гребни рёбер с зубчатыми выростами. Видны отдельные зубцы (редуцированные листья) стеблевых влагалищ, треугольно-ланцетные плоские, спаянные или неспаянные, коричневые.

Цвет порошка серовато-зелёный с желтоватыми, беловатыми и коричневатыми вкраплениями. Запах слабый.

Примечание – К другим видам хвощей, встречающимся в сырье как примесь, относят:

- а) Хвощ лесной (Equisetum sylvaticum L.) имеет нежёсткий стебель с вторично ветвящимися, отклонёнными вниз, тонкими ветвями. В верхней части стебля на рёбрах под лупой (10× и др.) заметны 2 ряда роговидных выростов (шипиков). Зубцы влагалищ на стебле сросшиеся и в сырье легко обламываются. Веточки с 3–5 рёбрами. На верхушках встречаются тупые колоски.

- б) Хвощ луговой (Equisetum pratense L.) имеет ветви с почти горизонтальным расположением, дуговидно книзу отогнутые. Зубцы влагалищ неспаянные. На верхушках стеблей могут быть тупые колоски. В верхней части стебля по рёбрам видны множественные, острые конусовидные выросты (сосочки), хорошо заметные под лупой (10× и др.). Веточки с 3 рёбрами.

- в) Хвощ речной (синонимы: топяной, приречный) (Equisetum fluviatile L.) имеет мощный стебель толщиной около 0,5 см и высотой от 20 до 150 см. На верхушках стеблей встречаются тупые колоски. При рассмотрении под лупой (10× и др.) видно, что ветви очень короткие, малочисленные или отсутствуют, влагалища с многочисленными зубцами (от 18 до 20).

- г) Хвощ болотный (Equisetum palustre L.). На верхушке стеблей могут быть тупые колоски. При рассмотрении под лупой (10× и др.) видно, что стеблевые влагалища с неспаянными, снабжёнными широкой белой каймой зубцами, влагалища ветвей на стебле чёрного цвета. При отрывании ветвей на стебле удерживаются не только влагалища, но и первые членики. Поверхность стеблей и ветвей поперечно-морщинистая.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё, измельчённое сырьё. При рассмотрении с поверхности эпидермиса стебля, ветвей, листовых влагалищ и зубцов (редуцированных листьев) должны быть видны клетки на рёбрах, сильно удлинённые (вытянутые по оси роста) с утолщёнными прямыми или слегка извилистыми, пористыми стенками. Клетки в бороздках короче, их длинные стенки извилистые (угловато и округло зазубренные), пористые. На коротких стенках (стыках) клеток эпидермиса, расположенных на вершине рёбер (гребнях), видны выросты, имеющие (с поверхности) вид спаренных кружочков с ясно выраженной перегородкой. При рассмотрении выростов сбоку видно, что на стеблях зубцы иногда сглаженные (закруглённые), на ветвях зубцы наклонные, острые, перегороженные. На поверхности клеток эпидермиса рёбер также имеются многочисленные мелкие сосочковидные выросты. Устьица расположены в основании рёбер обычно в 2–3 ряда (реже в 4 или 1 ряд) и сопровождают бороздку. Они слегка погружённые, с характерной лучистой складчатостью кутикулы. У зубцов с наружной стороны над жилкой расположен ряд парных устьиц, иногда с внутренней стороны, на верхушке над жилкой имеется крупное устьице (гидатода).

На поперечном срезе стебля под эпидермисом в рёбрах и в бороздках должны быть видны участки округлых клеток с утолщёнными стенками (колленхима).

Клетки паренхимы округлые, тонкостенные, наружный слой хлорофиллоносный (хлоренхима) образует сплошное кольцо, внутренний – рыхлый, в нём под бороздками располагаются крупные полости. Проводящие пучки закрытые (без камбия), расположены в 1 ряд под рёбрами, отделены от коры слабозаметной эндодермой и имеют небольшую полость. Центральная часть стебля (междоузлия) полая. На поперечном и продольном срезах стебля в области узла видна разделительная перегородка центральной полости соседних междоузлий. На продольных срезах стебля видны тяжи механической ткани (колленхима), расположенной в рёбрах и бороздках. Клетки колленхимы узкие, длинные с пропитанной кремнезёмом стенкой. Сосуды древесины междоузлий с кольчатым утолщением стенок по длине равны междоузлию. Флоэма состоит из ситовидных элементов и паренхимы. В узлах, по сравнению с междоузлиями, возрастает количество ксилемы. Сосуды здесь короткие, почти изодиаметрические с сетчатыми, пористыми (простыми или окаймлёнными порами) стенками.

Порошок. При рассмотрении микропрепаратов порошка должны быть видны кусочки, чаще в продольном и реже в поперечном сечении, ветвей, стеблей, влагалищ и зубцов. Клетки эпидермиса с сильно удлинёнными, прямыми или слегка извилистыми, утолщёнными, пористыми стенками или с удлинёнными, сильноизвилистыми, пористыми стенками. На коротких стенках (стыках) клеток эпидермиса, соответствующих гребням, видны выросты, с поверхности имеющие вид спаренных кружочков, при рассмотрении сбоку они закруглённые или зубчатые с ясно выраженной перегородкой. Поверхность большинства клеток с мелкими сосочковидными выростами. Должны быть видны фрагменты эпидермиса со слегка погружёнными устьицами, имеющими характерную лучистую складчатость кутикулы. На некоторых кусочках устьица частично разрушены или вместо них видны овальные отверстия. На кусочках ветвей продольного сечения, соответствующих наружной поверхности, видны эпидермис с зубчатыми и сосочковидными выростами и устьица с лучистой складчатостью. На кусочках ветвей продольного сечения, соответствующих внутренней части, видна рыхлая сердцевина с клетками, содержащими хлорофилл, по краям могут быть видны зубчатые и мелкие сосочковидные выросты или выпуклые с лучистой складчатостью устьица. Видны части влагалищ и зубцов с центральной жилкой, над которой располагаются парами по всей длине жилки, устьица с лучистой складчатостью. На верхушках зубцов иногда видны крупные устьица.

На кусочках продольного сечения стебля видны группы сосудов ксилемы с различным утолщением стенок (спиралевидным, кольчатым, сетчатым, реже пористым).

Рисунок 1. Хвоща полевого трава: 1 – фрагмент эпидермиса членика веточки: а – сильноизвилистые стенки эпидермиса, б – устьица в бороздках между рёбрами в 2–3 ряда от центральной ложбинки, в – рёбра с выростами (вид сверху) (40×); 2 – фрагмент эпидермиса членика веточки: а – рёбра с выростами (вид сверху), б – устьице (200×); 3 – фрагмент эпидермиса членика веточки: а – рёбра с выростами (вид сбоку) (200×); 4 – фрагмент эпидермиса членика веточки: а – рёбра с выростами (вид сверху); б – устьица; в – сосочкообразные выросты эпидермиса (вид сверху) (200×).

Примечания – К другим видам хвощей, встречающимся в сырье как примесь, относят:

- а) Хвощ лесной (Equisetum sylvaticum L.) при рассмотрении под микроскопом эпидермиса стебля с поверхности в бороздках видны один (два) ряда устьиц. Рёбра гладкие, но местами по краям заметны крупные выросты в виде зубцов или сосочков. Стенки клеток рёбер ветвей слабоволнистые.

Рисунок 2. Хвоща лесного трава. Фрагмент эпидермиса членика веточки: а – устьица, расположенные в 2 ряда, б – выросты на рёбрах (200×).

- б) Хвощ луговой (Equisetum pratense L.) при рассмотрении под микроскопом видно, что выросты на эпидермисе рёбрышек расположены в несколько рядов. В бороздках один, реже два ряда устьиц. Стенки клеток рёбер ветвей слегка волнистые. На стеблях имеются поперечные кольчатые выросты.

- в) Хвощ речной (топяной, приречный) (Equisetum fluviatile L.) При рассмотрении эпидермиса стебля под микроскопом с поверхности видны гладкие рёбра, чередующиеся с широкими бороздами, несущими до 12 рядов устьиц в ширину. По краю рёбер видны зубцы.

- г) Хвощ болотный (Equisetum palustre L.) при рассмотрении под микроскопом эпидермиса стебля и ветвей с поверхности видны устьица, расположенные несколькими рядами. Рёбра стеблей и ветвей несут заострённые зубцы. На поперечном срезе ветвей имеется центральная полость, у стебля отсутствует колленхима в бороздках.

Рисунок 3. Хвоща болотного трава: 1 – фрагмент эпидермиса членика веточки: а – ребро с многочисленными выростами в виде кружочков, расположенных группами поперёк ребра, б – устьица (200×); 2 – фрагмент эпидермиса членика веточки: а – ребро с волнистыми выростами (вид сбоку), б – устьица (200×); 3 – фрагмент эпидермиса членика веточки: а – устьица в 7 рядов в бороздках между рёбрами; б – многочисленные выросты в виде кружочков (вид сверху) (200×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ВЭТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота безводная—уксусная кислота ледяная—вода—этилацетат 7,5:7,5:18:67.

Раствор стандартного образца кофейной кислоты. Растворяют 1 мг кофейной кислоты в 20 мл спирта 96 %.

Раствор стандартного образца рутина. Растворяют 2,5 мг рутина в 20 мл спирта 96 %.

Испытуемый раствор. В круглодонную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, прибавляют 10 мл метанола и нагревают на водяной бане при температуре 60 °С в течение 10 мин, периодически встряхивая. После охлаждения фильтруют через беззольный фильтр.

Реактив для детектирования 1. Дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствор 1 % в спирте 96 %.

Реактив для детектирования 2. Макрогола 400 раствор спиртовой 5 %.

На линию старта пластинки полосами длиной 8 мм и шириной 2 мм наносят 5 мкл испытуемого раствора и по 5 мкл раствора стандартного образца кофейной кислоты и раствора стандартного образца рутина в одну полосу. Пластинку с нанесёнными пробами сушат, помещают в предварительно насыщенную в течение не менее 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, нагревают при температуре 100–105 °С в течение 3–5 мин. Затем ещё тёплую пластинку последовательно опрыскивают реактивом для детектирования 1 и реактивом для детектирования 2, сушат до удаления следов растворителей и через 10 мин просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

Результат. На хроматограмме растворов стандартных образцов кофейной кислоты и рутина должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией жёлтого, зелёно-жёлтого или оранжевого цвета (рутин) и над ней зона адсорбции с флуоресценцией от голубого до зеленовато-синего цвета (кофейная кислота).

На хроматограмме испытуемого раствора между зоной адсорбции раствора стандартного образца рутина и раствора стандартного образца кофейной кислоты должны обнаруживаться следующие зоны: две зоны адсорбции с флуоресценцией от голубого до зеленовато-синего цвета, над ними зона адсорбции с флуоресценцией оранжевого цвета и над ней две зоны адсорбции с флуоресценцией от голубого до зеленовато-синего цвета; выше или на уровне зоны адсорбции раствора стандартного образца кофейной кислоты должны обнаруживаться одна или две зоны адсорбции с флуоресценцией красного цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции (фенольные соединения).

Примечание – Другие виды хвоща

На хроматограмме испытуемого раствора не должны обнаруживаться две зоны адсорбции с флуоресценцией светло-зелёного или жёлто-зелёного цвета непосредственно над линией старта.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не менее 12,0 % и не более 27,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не менее 3,0 % и не более 15,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм, − не более 5 %.

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, − не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, − не более 5 %.

Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм − не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, − не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Другие части растения (корневища, корни). Цельное сырьё, измельчённое сырьё: не более 1 %.

Органическая примесь. Цельное сырьё, измельчённое сырьё: не более 1 %.

Минеральная примесь. Не более 0,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Сумма флавоноидов. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих через сито с отверстиями размером 1 мм. В круглодонную колбу со шлифом вместимостью 250 мл помещают 0,5 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 60 мл смеси
хлористоводородной кислоты разведённой 10 %—спирта 96 % 2:28. Колбу с содержимым присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане в течение 120 мин, периодически встряхивая для смывания частиц сырья со стенок. После охлаждения полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл, так чтобы частицы сырья не попали на фильтр. Фильтр после фильтрации помещают в колбу для экстрагирования, добавляют 40 мл смеси хлористоводородной кислоты разведённой 10 %—спирта 96 % 2:28, присоединяют к обратному холодильнику и проводят вторую экстракцию при нагревании на водяной бане в течение 60 мин. После охлаждения извлечение фильтруют в ту же мерную колбу. Объём раствора доводят спиртом 96 % до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл исходного раствора, прибавляют 4 мл алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 96 %, 0,15 мл хлористоводородной кислоты разведённой 10 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл исходного раствора, прибавляют 0,15 мл хлористоводородной кислоты разведённой 10 % и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора через 30 мин на спектрофотометре при длине волны 415 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на изокверцитрозид в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
a - навеска сырья, г;
316 - удельный показатель поглощения комплекса изокверцитрозида с алюминия хлоридом при длине волны 415 нм
W - влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0132 Цимицифуги даурской корневища с корнями

Cimicifugae dahuricae rhizomata cum radicibus

Взамен ФС 42-527-72

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные осенью с начала созревания семян до конца вегетации и высушенные корневища с корнями многолетнего дикорастущего травянистого растения цимицифуги даурской – Cimicifuga dahurica (Turcz.) Maxim., семейства лютиковых – Ranunculaceae.

Содержит не менее 3,0 % суммы тритерпеновых гликозидов в пересчёте на 27-деоксиактеин в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Корни, корневища, луковицы, клубни, клубнелуковицы».

Цельное сырьё. Корневища горизонтальные, слегка коленчато-изогнутые, внутри часто полые, длиной 5–20 см, толщиной 1–2,5 см, поверхность корневища слегка морщинистая. На верхней стороне корневища имеются остатки полых стеблей, от нижней стороны корневища отходят корни; корни шнуровидные, ломкие.

Цвет корневищ и корней тёмно-коричневый, излом желтоватый. Запах характерный, слабый.

Измельчённое сырьё. Смесь кусочков корневищ различной формы и шнуровидных корней, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм. Цвет от светло-жёлтого до тёмно-коричневого. Запах характерный, слабый.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё, измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепарата поперечного среза корневища должна быть видна покровная ткань, представленная пробкой, состоящей из 5–6 рядов клеток. Клетки коровой паренхимы слегка тангентально вытянуты. Во вторичной коре хорошо различаются участки флоэмы, над которыми располагаются большие группы лубяных волокон с толстыми стенками. Линия камбия хорошо выражена. Древесина состоит из радиально расположенных рядов паренхимных клеток с утолщёнными стенками и сосудов, лежащих одиночно или группами по 2–4. За счёт чередования тёмных участков древесины со светлыми многорядными сердцевинными лучами наблюдается лучистое строение. В центре корневища обычно имеется полость.

При рассмотрении поперечного среза корня должен быть виден эпидермис. Кора отделена от центрального цилиндра хорошо выраженной, тёмноокрашенной эндодермой. Паренхимные клетки коры округлые, крупнее, чем у корневища, и тангентально вытянуты. Ксилема разделена 4 многорядными сердцевинными лучами, состоящими из округлых клеток. Паренхимные клетки ксилемы с утолщёнными стенками, сосуды располагаются одиночно, реже группами по 2–3. Флоэма отделена от ксилемы слабо выраженным камбием.

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Этилацетат—вода—бутанол 12,5:25:50.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. В коническую колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 г измельчённого сырья, прибавляют 10 мл спирта 50 % и перемешивают на магнитной мешалке в течение 1 ч. Полученное извлечение центрифугируют при скорости 7500 об/мин в течение 5 мин, затем фильтруют через беззольный фильтр.

Раствор сравнения. В 5 мл метанола растворяют 1 мг стандартного образца эсцина и 1 мг стандартного образца 27-деоксиактеина и перемешивают.

Реактив для детектирования. Анисового альдегида раствор уксуснокислый в метаноле.

На линию старта пластинки полосами длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят 10 мкл испытуемого раствора и 5 мкл раствора сравнения. Пластинку с нанесёнными пробами сушат при комнатной температуре в течение 5 мин, помещают в предварительно насыщенную в течение 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, обрабатывают реактивом для детектирования, выдерживают при температуре 100–105 °С в течение 5 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

Результат. На хроматограмме раствора сравнения должны обнаруживаться: зона адсорбции с флуоресценцией серовато-синего цвета (эсцин) и над ней зона адсорбции с флуоресценцией фиолетового или тёмно-фиолетового цвета (27-деоксиактеин).

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией серовато-синего цвета на уровне зоны адсорбции стандартного образца эсцина и зона адсорбции с флуоресценцией фиолетового или тёмно-фиолетового цвета на уровне зоны адсорбции стандартного образца 27-деоксиактеина (тритерпеновые гликозиды); допускается обнаружение других зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 10,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 4,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, − не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, − не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Корневищ с неотделёнными остатками оснований стеблей длиной до 2 см. Цельное сырьё – не более 5 %.

Органическая примесь. Не более 1 %.

Минеральная примесь. Не более 2 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Кислотный реагент. В фарфоровый стакан помещают 50,0 мл уксусной кислоты безводной, осторожно при перемешивании прибавляют 50,0 мл серной кислоты концентрированной и выдерживают в течение 1 ч при комнатной температуре. Срок годности раствора 2 ч.

Подготовка концентрирующего патрона (с октадецилсилил силикагелем (С18), 50 мкм, 500 мг/3 мл). Концентрирующий патрон последовательно промывают 4 мл метанола, затем 4 мл воды. При этом, после каждой промывки поверх слоя сорбента колонки должен оставаться слой элюента около 1 мм; сорбент патрона не должен быть сухим.

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. В коническую колбу со шлифом вместимостью 100 мл помещают 1,5 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 30,0 мл спирта 50 % и нагревают на водяной бане при температуре 70±5 °С в течение 30 мин при постоянном перемешивании. Полученное извлечение фильтруют через вату в мерную колбу вместимостью 100 мл. Вату помещают в колбу для экстрагирования. Экстракцию повторяют ещё дважды, фильтруя извлечение в ту же мерную колбу. После охлаждения объём раствора доводят спиртом 50 % до метки и перемешивают. Полученный раствор центрифугируют со скоростью 7500 об/мин в течение 10 мин, затем фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 10 мл.

Испытуемый раствор. В фарфоровую чашку помещают 20,0 мл исходного раствора и упаривают на водяной бане при температуре не выше 65 °С досуха. Сухой остаток растворяют в 10,0 мл спирта 50 %. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора спиртом 30 % до метки, перемешивают и фильтруют через беззольный фильтр. Затем 1,0 мл фильтрата пропускают через предварительно подготовленный концентрирующий патрон. По окончании элюирования патрон промывают 6,0 мл свежеприготовленной смеси растворителей вода—метанол 9:1.

Сорбированные на патроне вещества элюируют 6,0 мл свежеприготовленной смесью растворителей хлороформ—метанол 75:25. Элюат собирают в фарфоровую чашку и упаривают на водяной бане при температуре не выше 65 °С досуха. Сухой остаток растворяют в 8,0 мл уксусной кислоты безводной. В коническую колбу вместимостью 25,0 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и прибавляют 5,0 мл кислотного реагента. Выдерживают в жидкостном термостате в течение 25 мин при температуре 60±1 °С, охлаждают до комнатной температуры.

Раствор сравнения. В коническую колбу помещают 5,0 мл уксусной кислоты безводной и 5,0 мл кислотного реагента. Перед измерением оптической плотности раствор выдерживают при температуре 60±1 °С в течение 25 мин и охлаждают до комнатной температуры.

Оптическую плотность испытуемого раствора измеряют на спектрофотометре при длине волны 460 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Содержание суммы тритерпеновых гликозидов в пересчёте на
27–деоксиактеин в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где А − оптическая плотность испытуемого раствора;
а − навеска сырья, г;
87,7 − удельный показатель поглощения продукта реакции 27-деоксиактеина с кислотным реагентом при длине волны 460 нм
W − влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0133 Черники обыкновенной побеги

Vaccinii myrtilli cormi

Взамен ФС 42-2948-93

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные до окончания плодоношения и высушенные верхушки побегов многолетнего дикорастущего кустарника черники обыкновенной – Vaccinium myrtillus L., сем. вересковых – Еricaceae.

Содержит:

- не менее 3,5 % дубильных веществ в пересчёте на сухое сырьё;

- не менее 0,7 % суммы флавоноидов в пересчёте на гиперозид в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Травы».

Цельное сырье. Цельные или частично измельчённые верхушки побегов длиной не более 150 мм, отдельные листья и стебли (веточки), изредка бутоны, цветки и плоды. Листья очередные, голые, короткочерешковые, тонкие, хрупкие, блестящие, с перистым жилкованием, яйцевидные или эллиптические, в основании округлые или слабосердцевидные, на верхушке острые, иногда притуплённые, с мягким шипиком, по краю мелкопильчатые, длиной до 30 мм, шириной до 20 мм. Стебли простые или ветвистые, остроребристые, голые. Цветки (бутоны), одиночные поникающие, расположены в пазухах листьев; венчик зеленовато-белый с красноватым оттенком, кувшинчато-шаровидный с 4–5 зубчиками, чашечка без зубчиков, тычинок 8–10. Плоды – ягоды, бесформенные, морщинистые, диаметром до 6 мм. На верхушке виден остаток чашечки, которая окружает вздутый диск.

Цвет листьев и стеблей светло-зелёный, зелёный, коричневато-зелёный; плодов – чёрный, светло- или тёмно-коричневый. Запах слабый характерный.

Измельчённое сырье. Смесь кусочков листьев, стеблей, изредка бутонов, цветков и плодов различной формы, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 5 мм.

Цвет листьев светло-зелёный, зелёный, коричневато-зелёный, цвет стеблей снаружи светло-зелёный, зелёный, коричневато-зелёный, иногда встречаются фрагменты стеблей в продольном сечении, имеющие беловато-жёлтую внутреннюю поверхность. Цвет плодов – чёрный, светло- или тёмно-коричневый. Запах слабый характерный.

Порошок. Смесь кусочков стеблей, листьев, бутонов, цветков и плодов, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

Цвет от светло-зелёного до зелёного и коричневато-зелёного с многочисленными беловато-жёлтыми вкраплениями. Запах слабый характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырье, измельчённое сырье. При рассмотрении микропрепаратов листа с поверхности должны быть видны клетки верхнего и нижнего эпидермиса с тонкими извилистыми стенками. Устьица мелкие, окружены 4–6 околоустьичными клетками (аномоцитный тип), расположены в основном на нижней стороне листовой пластинки, на верхней отсутствуют или встречаются единично. На верхней стороне листа по жилкам видны некрупные, одноклеточные, прямые или слегка изогнутые толстостенные волоски с грубобородавчатой поверхностью. На обеих сторонах листа по жилкам и на краевых зубцах встречаются булавовидные желёзки с многоклеточной двурядной ножкой и овальной многоклеточной головкой с содержимым коричневого цвета. Верхушка листа заканчивается небольшим, закруглённым выступом – шипиком-гидатодой с водяными устьицами. Вдоль жилок с нижней стороны листа встречается кристаллоносная обкладка. С обеих сторон листа наблюдается складчатость кутикулы, особенно по крупным жилкам.

При рассмотрении микропрепаратов поперечного среза стебля должно быть видно, что срез неправильный, трёх- или четырехгранный, с вытянутыми ребристыми углами. Клетки эпидермиса мелкие, прямоугольные, тонкостенные, практически одинаковые по размерам, покрыты толстой кутикулой. Встречаются редкие одноклеточные игловидные волоски. Колленхима представляет собой 1–3 слоя плотно сложенных паренхимных клеток. Паренхима первичной коры имеет хорошо развитую сеть межклетников. В клетках паренхимы наблюдаются многочисленные хлоропласты, встречаются включения в виде крупных призматических кристаллов оксалата кальция. Механические элементы в первичной коре представлены волокнами, которые окружают практически сплошным кольцом флоэмную часть стебля. Флоэма граничит с камбием. Древесина рассеянно-сосудистого типа с цепочками из однорядных сердцевинных лучей. Сердцевина состоит из крупных клеток паренхимы с лигнифицированными сильно утолщёнными стенками. Клетки сердцевины содержат большое количество крахмальных зёрен.

Порошок. При рассмотрении микропрепарата должны быть видны фрагменты эпидермиса листьев с извилистыми тонкостенными клетками и устьицами аномоцитного типа. По жилкам, а также на фрагментах края листа часто встречаются булавовидные желёзки с многоклеточной двурядной ножкой и овальной многоклеточной головкой с содержимым коричневого цвета. На верхней стороне листа по жилкам видны грубобородавчатые, толстостенные одноклеточные прямые или изогнутые волоски. Иногда наблюдается складчатость кутикулы, часто встречаются фрагменты жилок с кристаллоносной обкладкой. На фрагментах эпидермиса стебля можно увидеть прямоугольные клетки с прямыми боковыми стенками и устьицами с 6 сопровождающими клетками (аномоцитный тип), у каждой замыкающей клетки сбоку имеется по две узкие клетки, параллельные щели. Встречаются одноклеточные игловидные волоски и реже булавовидные желёзки. В поперечном сечении стебля видны клетки эпидермиса с толстым слоем кутикулы.

Рисунок 1. Черники обыкновенной побеги: 1 – фрагмент эпидермиса с нижней стороны листа (200×); 2 – одноклеточные толстостеные грубобородавчатые волоски и места их прикрепления, складчатость кутикулы (200×); 3 – фрагмент эпидермиса над жилкой с верхней стороны листа со складчатостью кутикулы, чётковидная утолщённость клеток эпидермиса (200×); 4 – булавовидная желёзка (200×); 5 – кристаллоносная обкладка фрагмента листа (200×).

Определение основных групп биологически активных веществ

1. ТСХ. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота безводная—вода—этилацетат 8:10:80.

- Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с размером отверстий 2 мм. Около 1,0 г измельчённого сырья помещают в колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 10 мл спирта 70 %, нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 15 мин. После охлаждения полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

- Раствор стандартного образца рутина. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5 мг рутина, растворяют в спирте 96 % при нагревании на водяной бане и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца гиперозида. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 5 мг гиперозида, растворяют в спирте 96 % при нагревании на водяной бане и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Реактив для детектирования 1. Дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствор 1 % в спирте 96 %.

- Реактив для детектирования 2. Макрогола 400 раствор спиртовой 5 %.

- На линию старта пластинки полосами длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят 10 мкл испытуемого раствора и по 5 мкл раствора рутина и раствора гиперозида. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную в течение не менее 30 мин камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры и сушат до удаления следов растворителей. Хроматограмму нагревают при температуре 100–105 °С в течение 1–3 мин. Тёплую пластинку опрыскивают реактивом для детектирования 1, сушат, затем опрыскивают реактивом для детектирования 2 и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

- Результат

- На хроматограмме раствора рутина и гиперозида должна обнаруживаться зона адсорбции жёлтого, жёлто-оранжевого или жёлто-коричневого цвета (рутин) и над ней зона адсорбции жёлтого, жёлто-оранжевого или жёлто-коричневого цвета (гиперозид).

- На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться над линией старта зона адсорбции голубого цвета, 2 зоны адсорбции жёлтого, жёлто-оранжевого или жёлто-коричневого цвета – чуть ниже и выше зоны адсорбции рутина, яркая жёлто-оранжевая зона адсорбции чуть ниже зоны адсорбции гиперозида и менее выраженная жёлто-оранжевая зона адсорбции на уровне зоны адсорбции гиперозида, 3 зоны адсорбции жёлтого, жёлто-оранжевого, жёлто-коричневого или коричневато-оранжевого цвета выше зоны адсорбции гиперозида, над ними зона адсорбции голубого или синего цвета; допускается наличие других зон адсорбции.

2. Качественная реакция

- Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с размером отверстий 1 мм. Около 0,5 г измельчённого сырья кипятят с 10 мл воды в течение 3 мин и после охлаждения фильтруют.

- К 3 мл фильтрата прибавляют 3 капли железа(III) аммония сульфата раствора 30 %; должно наблюдаться чёрно-синее окрашивание (дубильные вещества).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 13,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 4,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 0,6 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Измельчённое сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 5 мм − не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм − не более 5 %.

Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм − не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм − не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Почерневших листьев. Цельное сырьё, измельчённое сырьё: не более 3,5 %.

Стеблей, в том числе отделённых при анализе. Цельное сырьё: не более 70 %.

Органическая примесь. Цельное сырьё, измельчённое сырьё: не более 2 %.

Минеральная примесь. Цельное сырьё, измельчённое сырьё, порошок: не более 0,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Сумма флавоноидов. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с размером отверстий 1 мм. Около 1,0 г (точная навеска) измельчённого сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляют 150 мл спирта 70 %, присоединяют к обратному холодильнику и кипятят на водяной бане в течение 30 мин, периодически встряхивая колбу для смывания частиц сырья со стенок. Колбу с содержимым охлаждают, затем извлечение фильтруют через беззольный фильтр, смоченный спиртом 70 %, в мерную колбу вместимостью 200 мл. Фильтр помещают в колбу для экстрагирования и экстракцию 50 мл спирта 70 % повторяют ещё один раз в течение 30 мин, охлаждают и фильтруют в ту же мерную колбу. Объём извлечений доводят спиртом 70 % до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл исходного раствора, прибавляют 5 мл алюминия хлорида раствора 4 % в спирте 96 %, 0,1 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Исходный раствор стандартного образца гиперозида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 0,005 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца гиперозида, прибавляют 20 мл спирта 96 % и нагревают на водяной бане до полного растворения. Затем раствор охлаждают, доводят его объём спиртом 96 % до метки.

Раствор стандартного образца гиперозида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл исходного раствора стандартного образца гиперозида, прибавляют 5 мл алюминия хлорида раствора 4 % в спирте 96 %, 0,1 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор сравнения испытуемого раствора. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл исходного раствора, прибавляют 0,1 мл уксусной кислоты ледяной и доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор сравнения стандартного образца гиперозида. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл исходного раствора стандартного образца гиперозида и 0,1 мл уксусной кислоты ледяной, доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора через 40 мин на спектрофотометре при длине волны 410 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца гиперозида относительно раствора сравнения стандартного образца гиперозида.

Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на гиперозид и сухое сырьё в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A – оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 – оптическая плотность раствора стандартного образца гиперозида;
a – навеска сырья, г;
a0 – навеска фармакопейного стандартного образца гиперозида, г;
Р – содержание гиперозида в фармакопейном стандартном образце гиперозида, %;
W – влажность сырья, %.

Допускается содержание суммы флавоноидов вычислять с использованием удельного показателя поглощения комплекса гиперозида с хлоридом алюминия в спирте 96 % по формуле:

где A – оптическая плотность испытуемого раствора;
380 – удельный показатель поглощения комплекса гиперозида с алюминия хлоридом в спирте 96 %
a – навеска сырья, г;
W – влажность сырья, %.

Дубильные вещества. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания дубильных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных средствах растительного происхождения» (метод 1; навеска сырья 1,0 г, измельчённого до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм; экстрагент – вода.)

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0105 Чистотела большого трава

Chelidonii majoris herba

Взамен ФС.2.5.0105.18

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранная в фазу цветения высушенная трава дикорастущего и культивируемого многолетнего травянистого растения чистотела большого – Chelidonium majus L., сем. маковых – Papaveraceae.

Содержит не менее 0,6 % суммы алкалоидов в пересчёте на хелидонин в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Травы».

Цельное сырьё. Цельные или частично измельчённые олиственные стебли с бутонами, цветками и плодами разной степени зрелости, кусочки стеблей, бутоны, листья, цветки и плоды. Стебли слегка ребристые, иногда вверху ветвистые, в междоузлиях полые, слабоопушённые, около 3–7 мм в диаметре, длиной до 50 см. Листья очерёдные, черешковые, в очертании широкоэллиптические, пластинки непарноперисторассечённые с 3–4 парами городчатолопастных сегментов, с верхней стороны голые, с нижней стороны опушённые. Бутоны обратнояйцевидные с двумя опушёнными чашелистиками. Цветки по 4–8 в пазушных зонтиковидных соцветиях на цветоносах, удлиняющихся в период плодоношения. Венчик из 4 обратнояйцевидных лепестков, тычинок много. Плод – продолговатая, стручковидная, двустворчатая коробочка. Семена многочисленные, мелкие, яйцевидные с ямчатой поверхностью (под лупой), с мясистым белым придатком.

Цвет: стеблей – серовато-зелёный, зеленовато-жёлтый, желтовато-коричневый, зеленовато-коричневый и желтовато-зелёный с жёлтыми, коричневыми и чёрными вкраплениями; листьев с верхней стороны – коричневато-зелёный, зеленовато-коричневый или зелёный, с нижней стороны – светло-зелёный, зеленовато-серый или серовато-зелёный, бутонов – желтовато-зелёный, цветков – ярко-жёлтый или тёмно-жёлтый, плодов – серовато-зелёный или коричневый, семян – от тёмно-коричневого до чёрного. Запах характерный.

Измельчённое сырьё. Кусочки листьев, стеблей, бутонов, цветков, плодов различной формы и семян, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

При просмотре под лупой (10× и др.) должны быть видны: кусочки листьев коричневато-зелёного или зелёного цвета с верхней стороны, светло-зелёного, серовато-зелёного цвета с нижней стороны; также встречаются кусочки стеблей слегка ребристые, серовато-зелёного, зеленовато-жёлтого, желтовато-коричневого или желтовато-зелёного цвета; фрагменты цветков жёлтого или темно-жёлтого цвета; кусочки створок плодов серовато-зелёного или коричневого цвета; семена от тёмно-коричневого до чёрного цвета, мелкие, яйцевидные с ямчатой поверхностью.

Цвет от серовато-зелёного до зеленовато-коричневого с жёлтыми, коричневыми и чёрными вкраплениями. Запах характерный.

Порошок. Смесь частиц листьев, стеблей, бутонов, цветков, плодов и семян различной формы, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

При просмотре под лупой (10× и др.) видны: кусочки листьев коричневато-зелёного, зелёного, светло-зелёного, зеленовато-серого цвета; кусочки стеблей серовато-зелёного, зеленовато-жёлтого, желтовато-коричневого или желтовато-зелёного цвета; фрагменты лепестков жёлтого или тёмно-жёлтого цвета; кусочки створок плодов серовато-зелёного или коричневого цвета; семена от тёмно-коричневого до чёрного цвета, мелкие, яйцевидные с ямчатой поверхностью.

Цвет от серовато-зелёного до зеленовато-коричневого с жёлто-зелёными, жёлтыми вкраплениями, реже – с беловатыми, коричневыми и чёрными вкраплениями. Запах характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё, измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепарата листа с поверхности должны быть видны клетки эпидермиса с извилистыми стенками. Устьица только на нижней стороне листа с 4–7 околоустьичными клетками (аномоцитный тип). На нижней стороне листа по жилкам встречаются редкие, длинные простые волоски с тонкими стенками, часто оборванные, состоящие из 7–20 клеток, иногда перекрученные или с отдельными спавшимися члениками. На верхушках городчатых зубцов при схождении жилок расположена гидатода с сосочковидным эпидермисом
и 2–5 крупными водяными устьицами. Клетки губчатой паренхимы с крупными межклетниками (аэренхима) и с крупными водяными устьицами. Жилки сопровождаются млечными трубками с тёмно-коричневым зернистым содержимым (после кипячения в щёлочи).

При рассмотрении микропрепаратов лепестков с поверхности должны быть видны продольно вытянутые клетки эпидермиса с жёлто-коричневым содержимым, имеющие с наружной и внутренней стороны прямые или слабоизвилистые стенки. В мезофилле лепестка вдоль сосудов встречаются призматические кристаллы оксалата кальция.

Клетки эпидермиса чашелистиков и цветоножек продольно вытянутые и имеют прямые или слабоизвилистые стенки. Устьица аномоцитного типа, крупные, расположенные на чашелистиках с наружной стороны. На поверхности чашелистиков и цветоножек имеются многочисленные длинные простые волоски, характерные для сырья чистотела, и их фрагменты. В основании чашелистиков жилки сопровождаются млечными трубками с тёмно-коричневым зернистым содержимым. Пыльца округлая, шиповатая.

При рассмотрении «давленого» микропрепарата стебля должны быть видны продольно вытянутые клетки эпидермиса с прямыми стенками, устьица аномоцитного типа, на поверхности встречаются редкие, длинные простые волоски с тонкими стенками, часто оборванные. Паренхима характеризуется клетками вытянутой формы, наличием крахмальных зёрен, механических волокон, сосудов спирального, лестничного, сетчатого и кольчатого типа.

Порошок. При рассмотрении микропрепарата должны быть видны фрагменты клеток эпидермиса листа с извилистыми стенками. На фрагментах нижней стороны листа и наружной стороне чашелистиков обнаруживаются устьица аномоцитного типа. Во фрагментах эпидермиса лепестков имеется жёлто-коричневое содержимое. На некоторых фрагментах нижней стороны листа и чашелистиков встречаются редкие, длинные простые волоски с тонкими стенками, часто оборванные, состоящие из 7–20 клеток, иногда перекрученные или с отдельными спавшимися члениками, и их фрагменты. Фрагменты клеток губчатой паренхимы с крупными межклетниками (аэренхима). В мезофилле фрагментов встречаются млечные трубки вдоль жилок с тёмно-коричневым содержимым, механические волокна. Проводящие пучки представлены спиральными, лестничными, сетчатыми и кольчатыми сосудами.

Рисунок. Чистотела большого трава: 1 – фрагмент эпидермиса листа (нижняя сторона): a – устьице аномоцитного типа (200×); 2 – сосочковидный эпидермис верхушки городчатого зубчика листа (200×); 3 – фрагмент лепестка: a – клетки эпидермиса с прямыми стенками, b – жёлто-коричневое содержимое (200×); 4 – фрагмент эпидермиса листа с многоклеточными волосками (a) и млечные трубки с тёмно-коричневым зернистым содержимым (b) (40×); 5 – фрагмент лепестка: призматические кристаллы оксалата кальция, расположенные вдоль сосудов (400×); 6 – фрагмент листа: a – млечные трубки с тёмно-коричневым зернистым содержимым, b – клетки губчатой паренхимы с крупными межклетниками (аэренхима) (200×); 7 – фрагмент стебля: a – сосуды спирального типа, b – сосуды кольчатого типа (200×).

Определение основных групп биологически активных веществ

1. ТСХ. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Муравьиная кислота безводная—вода—пропанол 1:9:90

- Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. Помещают 0,4 г измельчённого сырья в колбу вместимостью 250 мл, прибавляют 50 мл уксусной кислоты разведённой 12 % и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 30 мин при периодическом перемешивании. После охлаждения раствор фильтруют через беззольный фильтр в делительную воронку вместимостью 250 мл, к фильтрату прибавляют аммиака раствор концентрированный 25 % до pH 9,0 и встряхивают с 30 мл метиленхлорида. После разделения органическую фазу (нижний слой) фильтруют через беззольный фильтр с 5 г натрия сульфата безводного в круглодонную колбу вместимостью 100 мл и выпаривают на роторном испарителе в вакууме при температуре 40 °С досуха. Сухой остаток растворяют в 5 мл метанола.

- Раствор сравнения. Около 2 мг метилового красного и около 2 мг папаверина гидрохлорида растворяют в 10 мл спирта 96 %.

- Реактив для детектирования 1. Реактив Драгендорфа.

- Реактив для детектирования 2. Натрия нитрита раствор 10 %.

- На линию старта пластинки в виде полос длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят 10 мкл испытуемого раствора и 10 мкл раствора сравнения. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную в течение 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат на воздухе до удаления следов растворителей. Пластинку обрабатывают реактивом для детектирования 1 и высушивают, затем обрабатывают реактивом для детектирования 2, высушивают и просматривают при дневном свете.

- Результат

- На хроматограмме раствора сравнения должны обнаруживаться в нижней трети пластинки зона адсорбции серо-коричневого или коричневого цвета (папаверина гидрохлорид) и в верхней трети пластинки зона адсорбции красного цвета (метиловый красный).

- На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться в средней трети пластинки две интенсивные зоны адсорбции коричневого цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции.

1. Качественные реакции

   - 1. Измельчённое сырьё или порошок равномерно рассыпают на листе чёрного цвета и рассматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм. Должны наблюдаться частицы с флуоресценцией жёлтого или зеленовато-жёлтого цвета (соответствует изломам черешков листьев и внутренней поверхности стеблей; обусловлена наличием алкалоидов) и с флуоресценцией сине-голубого цвета (соответствует поверхности листьев и стеблей; обусловлена наличием кутикулы).

   - 2. Около 2,0 г измельчённого сырья или порошка помещают в колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 2 мл аммиака раствора 10 %, тщательно перемешивают, прибавляют 20 мл дихлорэтана, настаивают в течение 10 мин при периодическом встряхивании в закрытой колбе и фильтруют через беззольный фильтр. Затем 10 мл фильтрата помещают в пробирку с притёртой пробкой, прибавляют 1 мл серной кислоты разведённой 9,8 % и встряхивают в течение 3 мин; должно наблюдаться жёлто-оранжевое окрашивание верхнего слоя и хлопьевидные сгустки в нём (алкалоиды).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 14,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 15,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 2,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм − не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм − не более 5 %.

Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм − не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм − не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Сырьё, изменившее окраску (потемневшее, почерневшее). Цельное сырьё – не более 3 %.

Органическая примесь. Цельное сырьё, измельчённое сырьё: не более 1 %.

Минеральная примесь. Не более 0,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. В колбу со шлифом вместимостью 500 мл помещают 0,75 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 200 мл уксусной кислоты разведённой 12 % и нагревают в водяной бане 30 мин при периодическом перемешивании. После охлаждения содержимое колбы с помощью уксусной кислоты разведённой 12 % количественно переносят в мерную колбу вместимостью 250 мл, доводят объём раствора тем же растворителем до метки, перемешивают и фильтруют через беззольный фильтр, отбрасывая первые 20 мл фильтрата.

В делительную воронку вместимостью 250 мл переносят 25,0 мл фильтрата, в которую затем последовательно добавляют 6 мл аммиака раствора концентрированного 25 % и 100 мл метиленхлорида и встряхивают в течение 30 мин. После расслоения нижний (органический) слой отделяют. В круглодонную колбу вместимостью 100 мл помещают 50,0 мл органического слоя и выпаривают при температуре 40 °С на роторном испарителе в вакууме досуха. Сухой остаток растворяют в 2–3 мл спирта 96 %, слегка нагревая колбу в горячей воде, переносят раствор в мерную колбу вместимостью 25 мл. Ополаскивают круглодонную колбу 2 раза по 10 мл серной кислоты разведённой 9,8 % и переносят в ту же мерную колбу, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл исходного раствора, прибавляют 5 мл хромотроповой кислоты натриевой соли раствора 1,0 % сернокислого, закрывают пробкой и тщательно перемешивают. Доводят объём раствора серной кислотой концентрированной до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мл серной кислоты разведённой 9,8 % и 5 мл хромотроповой кислоты натриевой соли раствора 1,0 % сернокислого. Колбу закрывают пробкой и тщательно перемешивают и доводят объём раствора серной кислотой концентрированной до метки.

Оба раствора помещают в водяную баню на 20 мин. Затем охлаждают до комнатной температуры и, при необходимости, доводят объём раствора серной кислотой концентрированной до метки.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 570 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Содержание суммы алкалоидов в пересчёте на хелидонин в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
933 - удельный показатель поглощения продуктов реакции хелидонина с хромотроповой кислотой при длине волны 570 нм,
a - навеска сырья, г;
W - влажность сырья, %.

Примечание: В случае завышенного содержания суммы алкалоидов (в пересчёте на хелидонин, в%) расчёт количества лекарственного растительного сырья, необходимого для производства лекарственного препарата следует проводить по формуле, приведённой в ОФС «Лекарственное растительное сырьё. Фармацевтические субстанции растительного происхождения».

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0051 Шалфея лекарственного листья

Salviae officinalis folia

Взамен ФС.2.5.0051.15

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в течение лета, высушенные и обмолоченные листья культивируемого полукустарника шалфея лекарственного – Salvia officinalis L., сем. яснотковых – Lamiaceae.

Содержит:

- не менее 0,8 % эфирного масла в пересчёте на сухое сырьё;

- не менее 4,5 % дубильных веществ в пересчёте на танин в сухом сырье;

- не менее 30 % экстрактивных веществ, извлекаемых спиртом 50 %, в пересчёте на сухое сырьё.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Листья».

Цельное сырьё. Цельные или частично измельчённые листья размером от 1 до 35 мм с черешком или без черешка с небольшим количеством других частей растения (кусочки стеблей, цветков с цветоножками и без них). Поверхность листьев равномерно-морщинистая или мелкоячеистая с густой сетью жилок, сильно вдавленных сверху и выступающих снизу; покрыта длинными волосками, особенно с нижней стороны. Край листа мелкогородчатый. Черешок цилиндрической формы, опушённый, серовато-зелёный или серебристо-белый. Кусочки стеблей четырёхгранные, опушённые; цветки с двугубой опушённой чашечкой и двугубым сине-фиолетовым венчиком. Редко встречаются округлые гладкие чёрные или чёрно-коричневые семена.

Цвет листьев – зелёный, серовато-зелёный, зеленовато-серый или серебристо-белый; чашечки – светло-коричневый, зеленовато-коричневый, часто с красновато-фиолетовым оттенком; венчика – сине-фиолетовый или фиолетово-коричневый. Запах характерный.

Измельчённое сырьё. Кусочки листьев с кусочками листовых черешков, с небольшим количеством кусочков стеблей, реже цветков с цветоножками и без них, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

При рассмотрении измельчённого сырья под лупой (10× и др.) видны кусочки листьев с многочисленными волосками, особенно с нижней стороны; кусочки стеблей, более или менее опушённые, зеленовато-серые, зеленовато-коричневые, светло-коричневые, часто желтовато-белые (эпидермис отделён при измельчении), нередко продольно-расщеплённые с белой губчатой сердцевиной; цельные светло-коричневые, зеленовато-коричневые, часто с красновато-фиолетовым оттенком чашечки или их кусочки с многочисленными железками на поверхности; кусочки сине-фиолетового или фиолетово-коричневого венчика; округлые гладкие чёрные или чёрно-коричневые семена.

Цвет измельчённого сырья серовато-зелёный, зеленовато-серый или серебристо-белый с зеленовато-коричневыми, светло-коричневыми, желтовато-белыми, белыми, красновато-фиолетовыми и редкими коричневыми вкраплениями. Запах характерный.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрении листа с поверхности видны клетки верхнего эпидермиса, которые имеют многоугольную форму со слабоизвилистыми стенками, клетки нижнего эпидермиса также многоугольной формы, более извилистостенные. Устьица расположены, главным образом, на нижней стороне листа, окружены 2 околоустьичными клетками, расположенными перпендикулярно устьичной щели (диацитный тип). Над жилкой клетки эпидермиса вытянутые, их стенки почти прямые. Эфирномасличные желёзки располагаются с обеих сторон листовой пластинки, округлой формы, с просвечивающейся ножкой и трудно различимыми, радиально расходящимися 6–8 выделительными клетками, заполненными бесцветным или желтоватым эфирным маслом. Волоски простые и головчатые. Простые волоски многочисленные. Головчатые волоски мелкие, состоят из короткой 1–3-клеточной ножки и шаровидной 1–2-клеточной головки, лучше заметны по краю и по жилке листа.

Клетки эпидермиса черешка прозенхимной формы. Эпидермис опушён многочисленными простыми и головчатыми волосками. Простые волоски многоклеточные. Головчатые волоски состоят из короткой 1–3-клеточной ножки и шаровидной одноклеточной головки. По эпидермису черешка встречаются эфирномасличные желёзки округлой формы, с просвечивающейся ножкой и трудно различимыми, радиально расходящимися 6–8 выделительными клетками и бесцветными или желтоватыми каплями эфирного масла. Механическая ткань на поперечном срезе представлена уголковой колленхимой, расположенной в 1–3 слоя под эпидермисом, в ушках – в 3–5 слоёв. Проводящая система представлена 3 закрытыми коллатеральными пучками, наиболее крупный из них располагается в центре черешка и 2 более мелких – в боковых выростах. Центральный пучок окружает нечётко выраженный слой эндодермы.

Измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепаратов видны фрагменты листовой пластинки с многоугольными слабоизвилистыми эпидермальными клетками (верхний эпидермис) и многоугольными извилистостенными эпидермальными клетками (нижний эпидермис); с устьицами диацитного типа, расположенными чаще на нижней стороне листовой пластинки. Встречаются фрагменты листа и черешка с простыми и головчатыми волосками, с эфирномасличными желёзками.

Многочисленные волоски 2 типов: простые многоклеточные, нижние клетки их (чаще 2–4) короткие, со значительно утолщёнными стенками, верхняя клетка длинная, изогнутая, с тонкими стенками, и головчатые – мелкие, с короткой 1–3-клеточной ножкой и шаровидной 1–2-клеточной головкой. Эфирномасличные желёзки округлой формы с просвечивающейся ножкой и трудно различимыми, радиально расходящимися 6–8 выделительными клетками, заполненными бесцветным или желтоватым эфирным маслом.

Рисунок. Шалфея лекарственного листья: 1 – фрагмент верхнего эпидермиса листа с простыми волосками (300×), 2 – фрагмент верхнего эпидермиса листа с простыми и головчатыми волосками (600×), 3 – фрагмент нижнего эпидермиса листа с простыми волосками, устьицами диацитного типа (300×), 4 – фрагмент нижнего эпидермиса листа с эфирномасличными желёзками (вид сверху) (300×), 5 – фрагмент эпидермиса вдоль жилки листа (300×), 6 – фрагмент края листа с простыми волосками (120×), 7 – поперечный срез черешка листа (80×), 8 – фрагмент эпидермиса черешка листа с головчатыми волосками (200×), 9 – фрагмент эпидермиса черешка листа с простыми волосками и эфирномасличной желёзкой (200×).

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ): этилацетат—толуол 7:93.

Раствор стандартного образца цинеола. Около 100 мг цинеола растворяют в 10 мл спирта 70 %. Раствор используют свежеприготовленным.

Испытуемый раствор. Раствор 1 части масла эфирного шалфея лекарственного листьев, полученного в разделе «Количественное определение», в 10 частях спирта 96 % 1:20.

Реактив для детектирования. Ванилина раствор 1 % в спирте 96 % и серной кислоты раствор спиртовой 10 % смешивают в равных частях. Раствор используют свежеприготовленным.

На линию старта пластинки наносят 5 мкл испытуемого раствора и 10 мкл раствора стандартного образца цинеола. Пластинку с нанесёнными пробами сушат, помещают в камеру с ПФ (без предварительного насыщения) и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования. Пластинку выдерживают при температуре 100 оС в течение 5 мин и просматривают при дневном свете.

Результат. На хроматограмме раствора стандартного образца цинеола должна обнаруживаться зона адсорбции синего цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться: зона адсорбции синего цвета на уровне зоны адсорбции раствора стандартного образца цинеола, под ней зона адсорбции фиолетового или сине-фиолетового цвета, ниже одна или две зоны адсорбции синего или сине-фиолетового цвета; выше уровня зоны адсорбции раствора стандартного образца цинеола две зоны адсорбции красно-фиолетового или красно-коричневого цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции (терпеноиды).

Качественная реакция. К 3 мл испытуемого раствора (раздел «Количественное определение. Определение дубильных веществ») прибавляют 0,1 мл железа(III) аммония сульфата раствора 10 %; раствор должен окраситься в чёрно-зелёный цвет (дубильные вещества).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 14,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 12,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 3,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, − не более 5 %.

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, − не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, − не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Изменившие окраску (потемневшие и почерневшие) кусочки листьев. Не более 5 %.

Другие части растения (цветки и кусочки стеблей и семена). Не более 13 %.

Органическая примесь. Не более 3 %.

Минеральная примесь. Не более 0,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Эфирное масло. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания эфирного масла в лекарственном растительном сырье и лекарственных средствах растительного происхождения» (методика 1 или 2, навеска сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм − 30,0 г, объём воды – 400 мл; время перегонки − 2 ч.)

Дубильные вещества. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания дубильных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных средствах растительного происхождения» (метод 1).

Экстрактивные вещества. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (экстрагент – спирт 50 %).

Примечание – Определение эфирного масла и дубильных веществ проводят для сырья, предназначенного для производства лекарственных растительных препаратов (пачки); определение эфирного масла проводят в сырьё, предназначенном для получения эфирного масла; определение экстрактивных веществ, извлекаемых спиртом 50 %, проводят для сырья, предназначенного для производства экстрактов.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0106 Шиповника плоды

Rosae fructus

Взамен ФС.2.5.0106.18

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные в период полного созревания и высушенные плоды дикорастущих и культивируемых кустарников различных видов шиповника (розы) – Rosa: шиповника майского (шиповника коричного) – R. majalis Herrm. (R. cinnamomea L.); шиповника иглистого – R. acicularis Lindl.; шиповника даурского – R. davurica Pall.; шиповника Беггера – R. beggeriana Schrenk.; шиповника Федченко – R. fedtschenkoana Regel.; шиповника морщинистого – R. rugosa Thunb. и других видов шиповника, сем. розоцветных – Rosaceae.

Содержит:

- не менее 0,2 % аскорбиновой кислоты в сухом сырье;

- не менее 300 мг% суммы каротиноидов в пересчёте на β-каротин в сухом сырье;

- не менее 0,4 % суммы флавоноидов в пересчёте на рутин в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Плоды».

Цельное сырьё. Цельные, очищенные от чашелистиков и плодоножек ложные плоды разнообразной формы: от шаровидной, яйцевидной или овальной до сильно вытянутой веретеновидной. Длина плодов – 0,7–3 см, диаметр 0,6–1,7 см. На верхушке плода имеется небольшое круглое отверстие или пятиугольная площадка. Плоды состоят из разросшегося мясистого, при созревании сочного цветоложа (гипантия) и заключённых в его полости многочисленных плодиков – орешков. Стенки высушенных плодов твёрдые, хрупкие, наружная поверхность блестящая, реже матовая, более или менее морщинистая. Внутри плоды обильно выстланы длинными, очень жёсткими щетинистыми волосками. Орешки мелкие, продолговатые, со слабо выраженными гранями.

Цвет плодов от оранжево-красного до коричневато-красного, орешков – светло-жёлтый, иногда коричневатый. Запах отсутствует.

Измельчённое сырьё. Смесь кусочков гипантия различной формы, с одной стороны морщинистых, с другой – покрытых жёсткими щетинистыми волосками, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм; мелкие, твёрдые, продолговатые орешки, слегка сдавленные с боков со слабо выраженными гранями, или их кусочки; изредка встречаются части чашелистиков и плодоножек.

Цвет гипантия от оранжево-красного до коричневато-красного, красно-коричневого и красно-чёрного; цвет орешков от светло-жёлтого до коричневато-жёлтого, цвет чашелистиков и плодоножек от серо-зелёного до коричневато-зелёного и тёмно-коричневого. Запах отсутствует.

Порошок. Смесь частиц гипантия, орешков и изредка частей чашелистиков и плодоножек, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

Цвет смеси от светло-жёлтого, оранжево-жёлтого, оранжево-красного, серо-зелёного, коричневато-зелёного до коричневого. Запах отсутствует.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрении микропрепарата плодов должны быть видны: наружный слой эпидермиса гипантия (плода) в виде светло-жёлтых пластов, состоящих из многоугольных клеток с прямыми неодинаково утолщёнными (так называемого окончатого типа), местами чётковидноутолщёнными стенками, редкими устьицами; мякоть плода, состоящая из тонкостенных паренхимных клеток, содержащих оранжево-красные хромопласты с каротиноидами и многочисленными друзами кальция оксалата; околоплодник орешка, состоящий из групп или пластов, реже одиночных каменистых клеток с сильно утолщёнными пористыми оболочками; многочисленные крупные одноклеточные волоски (или их фрагменты) двух типов – очень крупные прямые с толстыми стенками и узкой полостью и более мелкие, слегка извилистые с широкой полостью; проводящие пучки со спиральными сосудами.

Рисунок. Шиповника плоды: 1 – клетки наружного эпидермиса (200×); 2 – паренхима гипантия («давленый» микропрепарат). Клетки паренхимы с глыбками каротиноидов (200×); 3 – паренхима гипантия («давленый» микропрепарат): а – проводящие пучки; б – друзы оксалата кальция (200×); 4 – внутренний эпидермис гипантия с поверхности. Клетки мезофилла с друзами (100×); 5 – внутренний эпидермис гипантия с поверхности: а – простые волоски, б – места прикрепления простых волосков, в – просвечивающиеся друзы оксалата кальция (100×); 6 – фрагмент околоплодника орешка. Каменистые клетки. (200×).

Измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепарата измельчённых плодов должны быть видны фрагменты наружного эпидермиса гипантия в виде светло-жёлтых пластов, состоящие из многоугольных клеток с прямыми, неодинаково утолщёнными стенками (окончатый тип) и редкими устьицами; обрывки мякоти гипантия из тонкостенных паренхимных клеток, содержащие оранжево-красные хромопласты и многочисленные друзы оксалата кальция, многочисленные крупные одноклеточные волоски (или их обломки) двух типов: очень крупные прямые с толстыми стенками и узкой полостью и мелкие извилистые с широкой полостью; обрывки проводящих пучков со спиральными сосудами. Должны быть видны фрагменты околоплодника орешка, состоящие из групп или пластов, реже одиночных каменистых клеток с сильно утолщёнными пористыми оболочками.

Порошок. При рассмотрении микропрепарата порошка плодов должны быть видны фрагменты наружного эпидермиса гипантия в виде светло-жёлтых пластов, состоящие из многоугольных клеток (окончатый тип) с прямыми, неодинаково утолщёнными стенками. Также встречаются фрагменты мякоти гипантия, состоящие из тонкостенных паренхимных клеток, содержащих оранжево-красные хромопласты и многочисленные друзы оксалата кальция. Обнаруживаются многочисленные крупные одноклеточные волоски, обрывки проводящих пучков со спиральными сосудами. В препаратах порошка должны быть видны фрагменты околоплодника орешка с каменистыми клетками.

Определение основных групп биологически активных веществ

Определение содержания основных групп биологичнски активных веществ проводят одним из приведённых методов.

1. Тонкослойная хроматография

- Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—этилацетат 20:80.

- Раствор стандартного образца аскорбиновой кислоты. Около 1,2 мг фармакопейного стандартного образца аскорбиновой кислоты растворяют в 5 мл натрия метабисульфита раствора 0,1 %. Срок годности раствора 3–5 ч.

- Испытуемый раствор. Около 2,0 г сырья измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм, помещают в колбу вместимостью 50 мл, добавляют 10 мл воды, настаивают в течение
  1–2 ч при комнатной температуре и фильтруют через беззольный фильтр.

- Реактив для детектирования. Растворяют 0,22 г 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия в 500 мл свежепрокипячённой и охлаждённой воды при энергичном взбалтывании (для растворения навески раствор оставляют на 10–12 часов). Раствор фильтруют в мерную колбу вместимостью 1000 мл, доводят объём раствора водой до метки и перемешивают.

- На линию старта пластинки полосами длиной 10 мм и шириной не более 3 мм наносят 10 мкл испытуемого раствора и 5 мкл раствора стандартного образца аскорбиновой кислоты. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную камеру с ПФ в течение 30 мин и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей в течение 5 мин. Затем пластинку обрабатывают реактивом для детектирования и просматривают при дневном свете.

- Результат

- На хроматограмме раствора стандартного образца аскорбиновой кислоты должна обнаруживаться зона адсорбции белого цвета на розовом фоне.

- На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции белого цвета на розовом фоне на уровне зоны адсорбции стандартного образца аскорбиновой кислоты; допускается обнаружение других зон адсорбции.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика аскорбиновой кислоты на хроматограмме раствора стандартного образца аскорбиновой кислоты (раздел «Количественное определение»).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 15,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 7,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 3,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: частиц плодов, в том числе орешков, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм – не более 3 %.

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, – не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,2 мм, – не более 5 %.

Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, – не более 8 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм – не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Другие части шиповника (кусочки веточек, чашелистиков и плодоножек). Цельное сырьё – не более 2 %.

Части гипантия. Цельное сырьё – не более 20 %.

Плоды пригоревшие, повреждённые вредителями и болезнями. Цельное сырьё – не более 1 %.

Примечание – К пригоревшим и повреждённым плодам относят плоды, имеющие не менее 25 % повреждения поверхности.

Органическая примесь (посторонних плодов и веточек). Цельное сырьё, измельчённое сырьё – не более 0,5 %.

Минеральная примесь. Не более 0,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Аскорбиновая кислота

Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Приготовление испытуемого и стандартного растворов проводят в защищённом от света месте с использованием мерных колб тёмного стекла. Готовые растворы немедленно переносят в виалы для светочувствительных образцов и помещают в термостат автосамплера.

Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 3,4 г калия дигидрофосфата, растворяют в 950 мл воды, доводят рН раствора до 3,0±0,05 фосфорной кислотой концентрированной, доводят объём раствора водой до метки и фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.

Подвижная фаза Б (ПФБ) Ацетонитрил.

Щавелевой кислоты раствор 0,01 М. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,26 г щавелевой кислоты, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1,0 мм. В мерную колбу тёмного стекла вместимостью 250 мл помещают 2,5 г (точная навеска) измельчённого сырья и прибавляют 100 мл щавелевой кислоты раствора 0,01 М. Полученный раствор встряхивают на орбитальном шейкере в течение 20 мин, затем центрифугируют со скоростью 5000 об/мин в течение 5 мин. Надосадочную жидкость фильтруют через мембранный фильтр из регенерированной целлюлозы (размер пор 0,45 мкм), отбрасывая первые
1–2 мл фильтрата.

Раствор стандартного образца аскорбиновой кислоты. В мерную колбу тёмного стекла вместимостью 50 мл помещают 0,01 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца аскорбиновой кислоты, растворяют в щавелевой кислоты растворе 0,01 М, доводят объём раствора до метки тем же растворителем. В мерную колбу тёмного стекла вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Хроматографические условия

Колонка | Размер 250 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, 5 мкм.
Температура колонки | 30 °С;
Температура термостата автосаплера | 4 °С;
Скорость потока | 1,0 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический или диодная матрица, 244 нм;
Объём пробы | 10 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0 | 100 | 0
8 | 100 | 0
10 | 50 | 50
17 | 50 | 50
19 | 100 | 0
25 | 100 | 0

Хроматографируют раствор стандартного образца аскорбиновой кислоты и испытуемый раствор.

Время удерживания пиков: аскорбиновой кислоты – от 4 до 6 мин; щавелевой кислоты – около 2,7 мин.

Проверка пригодности хроматографической системы. На хроматограмме раствора стандартного образца аскорбиновой кислоты:

- разрешение между пиками щавелевой кислоты и аскорбиновой кислоты должно быть не менее 5,0;

- относительное стандартное отклонение площади пика аскорбиновой кислоты должно быть не более 2,0 % (6 введений);

- фактор асимметрии пика аскорбиновой кислоты должен быть не менее 0,8 и не более 1,5.

Содержание аскорбиновой кислоты в сухом сырье в% (Х) вычисляют по формуле:

где S - площадь пика аскорбиновой кислоты на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 - площадь пика аскорбиновой кислоты на хроматограмме раствора стандартного образца аскорбиновой кислоты;
a - навеска сырья, г;
a0 - навеска фармакопейного стандартного образца аскорбиновой кислоты, г;
Р – содержание аскорбиновой кислоты в фармакопейном стандартном образце аскорбиновой кислоты, %;
W - влажность сырья, %.

Сумма каротиноидов в пересчёте на β-каротин

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. Помещают 2,0 г (точная навеска) измельчённого сырья в колбу со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляют 20 мл гексана и перемешивают в течение 20 мин с помощью механического шейкера. Полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр, смоченный гексаном, в коническую колбу вместимостью 250 мл. Извлечение повторяют еще дважды с 20 мл гексана, фильтруя через тот же беззольный фильтр в ту же колбу.

В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 мл объединённого фильтрата, доводят объём раствора тем же растворителем до метки и перемешивают.

В случае получения интенсивно окрашенного извлечения перед измерением оптической плотности его дополнительно разводят, используя гексан.

Раствор сравнения. Гексан.

Оптическую плотность испытуемого раствора измеряют на спектрофотометре при длине волны 450 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Содержание суммы каротиноидов в пересчёте на β-каротин в сухом сырье в мг% (X) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
2592 - удельный показатель поглощения β-каротина в гексане при длине волны 450 нм
a - навеска сырья, г;
W - влажность сырья, %;
10 - содержание β-каротина в 1 мл 1 % раствора в гексане, мг.

Сумма флавоноидов в пересчёте на рутин

Исходный раствор стандартного образца рутина. Растворяют 0,05 г (точная навеска) фармакопейного стандартного образца рутина, предварительно высушенного при температуре 130–135 °С в течение 3 ч, в 85 мл спирта 96 % в колбе вместимостью 100 мл при нагревании на водяной бане, охлаждают, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор стандартного образца рутина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл исходного раствора стандартного образца рутина, прибавляют 2 мл алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 96 %, 0,1 мл уксусной кислоты разведённой 30 %, доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор сравнения стандартного образца рутина. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл исходного раствора стандартного образца рутина, 0,1 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и доводят спиртом 96 % до метки.

Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. Помещают 3,0 г (точная навеска) измельчённого сырья в колбу со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляют 80 мл спирта 70 %, присоединяют к обратному холодильнику, нагревают на водяной бане в течение 45 мин, после охлаждения содержимое колбы фильтруют через беззольный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл, объём раствора в колбе доводят спиртом 70 % до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл исходного раствора, прибавляют 2 мл алюминия хлорида раствора 2 % в спирте 96 %, 0,1 мл уксусной кислоты разведённой 30 %, доводят объём раствора спиртом 96 % до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2,0 мл исходного раствора, 0,1 мл уксусной кислоты разведённой 30 % и доводят спиртом 96 % до метки.

Оптическую плотность испытуемого раствора измеряют на спектрофотометре при длине волны 415 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно раствора сравнения.

Параллельно измеряют оптическую плотность испытуемого раствора стандартного образца рутина в аналогичных условиях.

Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на рутин в сухом сырье в% (Х) вычисляют по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
AO - оптическая плотность раствора стандартного образца рутина;
a - навеска сырья, г;
аO – навеска фармакопейного стандартного образца рутина, г;
W - влажность сырья, %;
P - содержание рутина в фармакопейном стандартном образце рутина, %.

Допускается содержание суммы флавоноидов в пересчёте на рутин вычислять с использованием удельного показателя поглощения комплекса рутина с алюминия хлоридом по формуле:

где A - оптическая плотность испытуемого раствора;
248 - удельный показатель поглощения комплекса рутина с алюминия хлоридом при длине волны 415 нм,
a - навеска сырья, г;
W - влажность сырья, %.

Примечания

1. Содержание аскорбиновой кислоты определяют в сырье, предназначенном для производства лекарственных растительных препаратов в форме выпуска: пачки, фильтр-пакеты.

2. Содержание суммы каротиноидов в пересчёте на β-каротин определяют в сырье, предназначенном для производства масла жирного.

3. Содержание суммы флавоноидов в пересчёте на рутин определяют в сырье, предназначенном для производства препарата «Шиповника плодов экстракт жидкий, сироп».

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0134 Шиповника плоды низковитаминные

Rosae fructus hypovitaminosus

Взамен ФС 42-3312-96

Собранные в период полного созревания и высушенные плоды дикорастущих и культивируемых кустарников различных низковитаминных видов шиповника (розы) – Rosa: шиповника собачьего – R. canina L., шиповника щитконосного – R. corymbifera Borkh., шиповника яркоцветкового – R. floribunda Stev., шиповника кокандского – R. kokanica (Regel) Regel ex Juz., шиповника песколюбивого – R. psammophila Chrhshan., шиповника войлочного – R. tomentosa Smith., шиповника зангезурского – R. zangezura P.Jarosch и других, сем. розоцветных – Rosaceae.

Содержит не менее 2,6 % органических кислот в пересчёте на яблочную кислоту в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Плоды».

Цельное сырьё. Цельные, очищенные от чашелистиков и плодоножек ложные плоды разнообразной формы: от шаровидной, яйцевидной или овальной до сильно вытянутой веретеновидной; длина плодов – 0,8–2,5 см, диаметр 0,7–1,7 см. На верхушке плода имеется небольшое круглое отверстие или пятиугольная площадка. Плоды состоят из разросшегося мясистого, при созревании сочного цветоложа (гипантия) и заключённых в его полости многочисленных плодиков – орешков. Стенки высушенных плодов твёрдые, хрупкие, наружная поверхность блестящая, реже матовая, более или менее морщинистая. Внутри плоды обильно выстланы длинными, очень жёсткими щетинистыми волосками. Орешки мелкие, продолговатые, со слабо выраженными гранями.

Цвет плодов от оранжево-красного до коричневато-красного, тёмно-коричневого, орешков – светло-жёлтый, иногда коричневатый. Запах отсутствует.

Измельчённое сырье. Смесь кусочков гипантия различной формы, с одной стороны морщинистые, с другой – покрытые жёсткими щетинистыми волосками; мелкие, твёрдые, продолговатые цельные или частично измельчённые орешки, слегка сдавленные с боков со слабо выраженными гранями; изредка встречаются части чашелистиков и плодоножек, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

Цвет кусочков от оранжево-красного до коричневато-красного, красно-коричневого и красно-чёрного; цвет орешков от светло-жёлтого до коричневато-жёлтого. Запах отсутствует.

Порошок. Смесь частиц гипантия, орешков и изредка частей чашелистиков и плодоножек, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

Цвет смеси от светло-жёлтого, оранжево-жёлтого, оранжево-красного, серо-зелёного, коричневато-зелёного до коричневого. Запах отсутствует.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное сырьё. При рассмотрении микропрепарата плодов должны быть видны: наружный слой эпидермиса гипантия в виде светло-жёлтых пластов, состоящих из многоугольных клеток с прямыми неодинаково утолщёнными (окончатого типа), местами чётковидноутолщёнными стенками, редкими устьицами аномоцитного типа; мякоть плода, состоящая из тонкостенных паренхимных клеток, содержащих оранжево-красные хромопласты с каротиноидами и многочисленные друзы оксалата кальция; в паренхиме встречаются многочисленные проводящие пучки со спиральными сосудами. Внутренний эпидермис гипантия состоит из многоугольных клеток с прямыми, местами чётковидноутолщёнными стенками и редко встречающимися устьицами аномоцитного типа. На поверхности внутреннего эпидермиса встречаются многочисленные длинные одноклеточные волоски (или их обломки) двух типов: очень крупные прямые с толстой стенкой и узкой полостью и более мелкие, слегка извилистые с широкой полостью. Околоплодник орешка состоит из групп или пластов, реже одиночных каменистых клеток с сильно утолщёнными волосками; проводящих пучков со спиральными сосудами.

Рисунок 1. Шиповника плоды низковитаминные: 1 – фрагмент наружного эпидермиса гипантия (плода), состоящего из многоугольных клеток с прямыми неодинаково утолщёнными, местами чётковидноутолщёнными стенками, и с устьичным комплексом аномоцитного типа (200×); 2 – тонкостенные паренхимные клетки, содержащие оранжево-красные хлоропласты (200×); 3 – паренхима с кристаллами и друзами оксалата кальция (200×); 4 – фрагмент внутреннего эпидермиса гипантия, состоящего из многоугольных клеток с прямыми, местами чётковидноутолщёнными стенками (200×); 5 – одиночная каменистая клетка (200×); 6 – простой одноклеточный волосок (40×).

Измельчённое сырье. При рассмотрении микропрепарата измельчённых плодов должны быть видны фрагменты наружного эпидермиса гипантия в виде светло-жёлтых пластов, состоящие из многоугольных клеток с прямыми, неодинаково утолщёнными стенками (окончатый тип), местами чётковидноутолщёнными стенками и редкими устьицами; обрывки мякоти гипантия из тонкостенных паренхимных клеток, содержащие оранжево-красные хромопласты и многочисленные друзы оксалата кальция, многочисленные крупные одноклеточные волоски (или их обломки) двух типов: очень крупные прямые с толстыми стенками и узкой полостью и более мелкие, слегка извилистые с широкой полостью; обрывки проводящих пучков со спиральными сосудами. Должны быть видны фрагменты околоплодника орешка, состоящие из групп или пластов, реже одиночных каменистых клеток с сильно утолщёнными пористыми оболочками.

Порошок. При рассмотрении микропрепарата порошка плодов должны быть видны фрагменты наружного эпидермиса гипантия в виде светло-жёлтых пластов, состоящие из многоугольных клеток (окончатый тип) с прямыми, неодинаково утолщёнными стенками, местами чётковидноутолщёнными стенками и редкими устьицами. Также встречаются фрагменты мякоти гипантия, состоящие из тонкостенных паренхимных клеток, содержащих оранжево-красные хромопласты и многочисленные друзы оксалата кальция. Обнаруживаются многочисленные крупные одноклеточные волоски, обрывки проводящих пучков со спиральными сосудами. В препаратах порошка должны быть видны фрагменты околоплодника орешка с каменистыми клетками.

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—муравьиная кислота безводная—этилацетат 5:10:85.

Испытуемый раствор. В колбу вместимостью 100 мл помещают около 2,0 г сырья измельчённого до однородной массы, прибавляют 10 мл спирта 70 %, нагревают на водяной бане в течение 30 мин, охлаждают и фильтруют через беззольный фильтр.

Полученный раствор упаривают до 0,5–1,0 мл и вместе с возможной взвесью твёрдых частиц вносят в концентрирующий патрон для твёрдофазной экстракции с сорбентом (С18, 100 мг/1 мл), (предварительно кондиционированный последовательно 2 мл спирта 96 % и 3 мл воды). Затем патрон промывают 5 мл воды со скоростью около 2 мл/мин. На стадии кондиционирования и очистки следят за тем, чтобы воздух не попадал в слой сорбента (сорбент все это время должен оставаться смоченным растворителем). После промывки водой патрон продувают воздухом, прокачивая его через патрон шприцом (объёмом 5 мл) 5–10 раз. Затем смывают фенольные соединения 4 мл спирта 70 % со скоростью 2 мл/мин. Полученный раствор упаривают до 1 мл.

Раствор стандартного образца гиперозида. Около 1 мг гиперозида растворяют в 2 мл спирта 96 %.

Реактив для детектирования 1. Дифенилборной кислоты аминоэтилового эфира раствор 1 % в спирте 96 %.

Реактив для детектирования 2. Макрогола 400 раствор спиртовой 5 %.

На линию старта пластинки в виде полос длиной 10 мм и шириной не более 3 мм наносят 60 мкл испытуемого раствора и 2 мкл раствора стандартного образца гиперозида. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе в течение 10 мин, помещают в предварительно насыщенную в течение 30 мин камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Затем пластинку нагревают при температуре 100–105 оС в течение 5–10 мин ещё тёплую опрыскивают последовательно реактивом для детектирования 1 и реактивом для детектирования 2. Через 15 мин просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм. (При необходимости пластинку подогревают при температуре 100–105 оС в течение 2–3 мин).

Результат

На хроматограмме раствора стандартного образца гиперозида должна обнаруживаться зона адсорбции жёлтого или оранжево-жёлтого цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться зоны адсорбции: зона зеленовато-жёлтого, жёлтого или оранжево-жёлтого цвета на уровне зоны адсорбции стандартного образца гиперозида; зона жёлтого или зеленовато-жёлтого цвета выше уровня зоны адсорбции стандартного образца гиперозида; над ней зона адсорбции зелёного или жёлто-зелёного цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции.

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 15,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 7,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 3,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Цельное сырьё: измельчённых частиц плодов, в том числе орешков, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм, не более 3 %.

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, – не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,2 мм, – не более 5 %.

Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, – не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм – не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Другие части шиповника (кусочки веточек, чашелистиков и плодоножек). Цельное сырьё – не более 5 %.

Плоды пригоревшие, повреждённые вредителями и болезнями. Цельное сырьё – не более 1 %.

Примечание – К пригоревшим и повреждённым плодам относят плоды, имеющие не менее 25 % повреждения поверхности.

Органическая примесь (посторонних плодов и веточек). Цельное сырьё, измельчённое сырьё – не более 0,5 %.

Минеральная примесь. Не более 0,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. В соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Органические кислоты. Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1,0 мм. В колбу вместимостью 250 мл помещают 25,0 г (точная навеска) сырья, прибавляют 200 мл воды и нагревают на водяной бане в течение 2 ч. Затем охлаждают, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 250 мл, доводят объём содержимого колбы водой до метки.

В колбу для титрования вместимостью 500 мл переносят 10,0 мл извлечения, прибавляют 200–300 мл свежекипячёной воды, 1 мл фенолфталеина раствора 1 %, 2 мл метиленового синего спиртового раствора 0,1 % и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до появления в пене фиолетово-красного окрашивания.

Содержание суммы свободных органических кислот в пересчёте на яблочную кислоту в сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

где 0,0067 - количество яблочной кислоты, соответствующее 1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида, г;
V - объём 0,1 М раствора натрия гидроксида, пошедшего на титрование, мл;
a - навеска сырья, г;
W - влажность сырья, %.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.5.0107 Эвкалипта прутовидного листья

Eucalypti viminalis folia

Взамен ФС.2.5.0107.18

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Собранные поздней осенью, зимой или ранней весной и высушенные листья культивируемого дерева эвкалипта прутовидного – Eucalyptus viminalis Labill., сем. Миртовых – Myrtaceae.

Содержит:

цельное сырьё:

- не менее 1,0 % эфирного масла в пересчёте на сухое сырьё;

- не менее 2,0 % суммы фенолальдегидов в пересчёте на эвкалимин в сухом сырье;

измельчённое сырьё:

- не менее 0,8 % эфирного масла в пересчёте на сухое сырьё;

- не менее 2,0 % суммы фенолальдегидов в пересчёте на эвкалимин в сухом сырье.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Внешние признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Листья».

Цельное сырьё. Смесь двух типов листьев: листья старых ветвей – черешковые от узколанцентных до серповидно-изогнутых, остроконечные, плотные, длиной 4–27 см, шириной 0,5–5 см; листья молодых ветвей – сидячие с округлым основанием или с короткими черешками (длина черешков от 0,6 до 1,5 см, форма черешка на поперечном сечении овальная с адаксиальной стороны немного сплюснутая), удлинённо-яйцевидной формы, на верхушке заострённые, длиной 3,5–11 см, шириной 0,7–4 см. Встречаются листья, имеющие переходящую форму от удлинённо-яйцевидной до ланцетной. Листья голые с цельным, ровным или волнистым краем с многочисленными точками, просвечивающимися в проходящем ярком свете (вместилища с эфирным маслом).

Цвет листьев от светло-зелёного до серовато-зелёного, иногда с фиолетовым оттенком и слабым сизоватым налётом.

Запах характерный, усиливающийся при растирании.

Измельчённое сырьё. Смесь кусочков листьев различной формы, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 5 мм.

Цвет кусочков листьев от светло-зелёного до серовато-зелёного, иногда с фиолетовым оттенком и слабым сизоватым налётом.

Запах характерный, усиливающийся при растирании.

Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

Цельное, измельчённое сырьё. При рассмотрении микропрепаратов листа с поверхности должны быть видны фрагменты листа или его эпидермиса, состоящего из многоугольных клеток, покрытых толстым слоем кутикулы, выступающим в виде бугорков; устьица погружены в мезофилл; часто встречаются круглые пробковые пятна коричневого цвета; в мезофилле – округлые или овальные крупные схизогенные эфирномасличные вместилища с 1–2 слоями выделительных клеток; жилки с кристаллоносной обкладкой, состоящей как из призматических кристаллов, так и из друз оксалата кальция, в клетках мезофилла также встречаются друзы оксалата кальция.

При рассмотрении микропрепаратов черешка должны быть видны клетки эпидермиса мелкие, стенки которых сильно утолщены и кутинизированы. В коровой паренхиме по окружности под эпидермой расположены округлые вместилища разного размера с каплями эфирного масла жёлто-оранжевого цвета. Проводящие элементы, которые собраны в один крупный закрытый коллатеральный пучок, окружённые склеренхимными волокнами. В тканях флоэмы наблюдается значительное количество призматических монокристаллов.

Рисунок 1. Эвкалипта прутовидного листья: 1 – поперечный срез листа: фрагмент с пробковым пятном на поверхности листа (100×); 2 – поперечный срез листа: колленхима края листа (400×); 3 – верхний эпидермис с пробковым пятном на поверхности (100×); 4 – верхний эпидермис с просвечивающим под эпидермисом эфирномасличным вместилищем (400×); 5 – верхний эпидермис с устьицами (400×); 6 – нижний эпидермис с устьицами (400×); 7 – нижний эпидермис центральной жилки (400×); 8 – кристаллоносная обкладка жилки (400×); 9 – фрагмент коровой части черешка (поперечный срез) (100×); 10 – фрагмент поперечного среза листа с эфирномасличным вместилищем с каплей эфирного масла (400×).

Определение основных групп биологически активных веществ

1. Тонкослойная хроматография. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»)

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Этилацетат—толуол 10:90.

- Реактив для детектирования. Анисового альдегида раствор спиртовой сернокислый (2).

- Испытуемый раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. В колбу вместимостью 100 мл помещают 2,0 г измельчённого сырья, прибавляют 10 мл толуола и взбалтывают в течение 10 мин, затем полученное извлечение фильтруют через беззольный фильтр.

- На линию старта пластинки полосами длиной 10 мм и шириной не более 2 мм наносят 5 мкл испытуемого раствора и 3 мкл судана красного G раствора 0,025 %.

- Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру, выложенную изнутри фильтровальной бумагой, предварительно насыщенную в течение 1 ч ПФ и хроматографируют восходящим способом.

- Когда фронт растворителей пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей, опрыскивают реактивом для детектирования, выдерживают при 100–105 °С в течение 3–5 мин и сразу просматривают при дневном свете.

- Результат. На хроматограмме судана красного G раствора 0,025 % должна обнаруживаться зона адсорбции красного цвета.

- На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться две зоны адсорбции от красновато-фиолетового до фиолетового цвета, одна ниже зоны адсорбции судана красного G раствора 0,025 % спиртового и другая выше зоны адсорбции судана красного G раствора 0,025 % спиртового. Допускается обнаружение зоны адсорбции тёмного цвета на линии старта и других зон адсорбции.

2. Качественная реакция. Выпаривают 10,0 мл исходного раствора (см. раздел «Количественное определение», сумма фенолальдегидов) в фарфоровой чашке на водяной бане досуха, к сухому остатку прибавляют от 3 до 5 капель свежеприготовленного ванилина раствора 1 % в серной кислоте. Должно наблюдаться красно-коричневое окрашивание (терпеноиды).

##### ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Не более 14,0 % (ОФС «Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения»).

Зола общая. Не более 5,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 2,0 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Измельчённость сырья. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Измельчённое сырьё: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 5 мм, не более 5 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, не более 5 %.

Допустимые примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Определение подлинности, измельчённости и содержания примесей в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Сырьё, изменившее окраску (потемневшее и почерневшее). Не более 3 %.

Другие части растения (веточек, бутонов, плодов). Не более 2 %.

Органическая примесь. Не более 0,5 %.

Минеральная примесь. Не более 0,5 %.

Тяжёлые металлы и мышьяк. В соответствии с ОФС «Определение содержания тяжёлых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Заражённость вредителями запасов. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Определение степени заражённости лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов вредителями запасов».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. Эфирное масло. Определение содержания эфирного масла проводят в соответствии с ОФС «Определение содержания эфирного масла в лекарственном растительном сырье и лекарственных средствах растительного происхождения» (метод 1 или 2, из 10,0 г сырья, измельчённого до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, время перегонки 1 ч).

2. Сумма фенолальдегидов. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Исходный раствор. Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. В коническую колбу со шлифом вместимостью 250 мл помещают 1 г (точная навеска) измельчённого сырья, прибавляют 100 мл спирта 80 %, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на водяной бане при температуре от 70 до 80 °С в течение 1 ч., периодически перемешивая. Охлаждают до комнатной температуры, фильтруют через беззольный фильтр, который промывают 5 мл спирта 80 %.

- В делительную воронку вместимостью 200 мл количественно переносят полученный раствор, добавляют 20 мл гексана и взбалтывают, после расслоения гексановую фазу отделяют в сухую мерную колбу вместимостью 50 мл, извлечение повторно экстрагируют два раза порциями по 20 мл и 10 мл гексана, отделяют гексановые фазы, объединяют их с первой фракцией в мерной колбе, доводят объём раствора гексаном до метки.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1,0 мл исходного раствора и доводят объём раствора гексаном до метки.

- Оптическую плотность исходного раствора измеряют на спектрофотометре при длине волны 278 нм в кювете с толщиной слоя 1 см относительно гексана.

- Содержание суммы фенолальдегидов в пересчёте на эвкалимин в сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

- где A – оптическая плотность испытуемого раствора;
  а – навеска сырья, г;
  417 – удельный показатель поглощения эвкалимина при длине волны 278 нм,
  W – влажность сырья,%.

Примечания

1. Содержание эфирного масла определяют в сырьё, предназначенном для получения водных, водно-спиртовых и спиртовых извлечений.

2. Содержание суммы фенолальдегидов в пересчёте на эвкалимин определяют в сырьё, предназначенном для получения водно-спиртовых, спиртовых извлечений.

##### УПАКОВКА, МАРКИРОВКА И ПЕРЕВОЗКА

В соответствии с ОФС «Упаковка, маркировка и перевозка лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

### 2.7. Вспомогательные вещества

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.7.0001 Агар

Agar [9002-18-0]

Вводится впервые

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Cмесь полисахаридов агарозы и агаропектина, получаемая из водорослей Gelidium cartilagineum (L.) Gaillon (сем. Gelidiaceae), Gracilaria confervoides (L.) Greville (сем. Sphaerococcaceae) и родственных им красных водорослей (класс Rhodophyceae) путём обработки горячей водой. После чего экстракт фильтруют в горячем виде, концентрируют и сушат.

##### СВОЙСТВА

Описание. Бесцветный или светло-жёлтый порошок, или скомканные полоски шириной 2–5 м, или жёсткие чешуйки. Становятся более ломкими при высыхании. Без запаха или со слабым запахом.

* Растворим в кипящей воде, нерастворим в холодной воде.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

- Микропрепараты окрашивают йода раствором 0,005 М.

- Полоски или чешуйки частично окрашиваются в коричневато-фиолетовый цвет. При рассмотрении микропрепарата (100×) должны быть видны многочисленные мелкие, бесцветные, яйцевидные или округлые зёрна на аморфном фоне; иногда могут присутствовать коричневые, круглые или яйцевидные споры с сетчатой поверхностью размером до 60 мкм.

- При необходимости препарат измельчают до порошка. При рассмотрении микропрепарата порошка должны быть видны угловатые фрагменты с многочисленными зёрнами, подобными тем, которые видны в полосах и чешуйках, часть фрагментов окрашивается в коричневато-фиолетовый цвет.

2. Качественная реакция. Растворяют при нагревании 0,1 г вещества в 50 мл воды, охлаждают, далее к 1 мл слизи осторожно прибавляют 3 мл воды так, чтобы образовались два не смешивающихся слоя, прибавляют 0,1 мл йода раствора 0,05 М; на границе слоёв должно появиться тёмное коричневато-фиолетовое окрашивание, после смешивания переходящее в светло-жёлтое.

3. Качественная реакция. К 5 мл слизи (полученной в качественной реакции 1) прибавляют 0,5 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и нагревают на водяной бане в течение 30 мин, прибавляют 1 мл бария хлорида раствора 6,1 %; в течение 30 мин должно образоваться белое помутнение.

4. Качественная реакция. В колбу помещают 0,5 г вещества, прибавляют 50 мл воды и нагревают на водяной бане до полного растворения. При охлаждении раствора до температуры от 35 °С до 30 °С должен образоваться гель. Далее гель нагревают, для определения его устойчивости к расплавлению при температуре до 80 °С; он не должен расплавляться.

##### ИСПЫТАНИЯ

Показатель набухания. Не менее 10 и в пределах 10 % от значения, указанного на этикетке, определённого для порошкообразного растительного средства (ОФС «Показатель набухания»).

Желатин. К 1,0 г вещества прибавляют 100 мл воды и нагревают на водяной бане до растворения, охлаждают до 50 °С. К 5 мл полученного раствора прибавляют 5 мл пикриновой кислоты раствора 1 %; в течение 10 мин не должно наблюдаться помутнения.

Крахмал. В колбу помещают 0,1 г вещества, прибавляют 100 мл воды и кипятят. После охлаждения добавляют йода раствор 0,05 М; раствор не должен давать синей окраски.

Нерастворимые примеси. Не более 1,0 %.

В колбу помещают 5,0 г вещества, прибавляют 100 мл воды и 14 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 %. Кипятят на медленном огне 15 мин при частом помешивании. Горячий раствор фильтруют через высушенный до постоянной массы, тарированный фильтр из пористого стекла (ПОР 160), промывают горячей водой и высушивают при 100–105 °С. Остаток должен весить не более 50 мг.

Потеря в массе при высушивании. Не более 20,0 %. (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Высушивают 1 г (точная навеска) вещества до постоянной массы при температуре 105 °С.

Зола общая. Не более 5,0 % (ОФС «Зола общая»).

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Не более 0,5 % (ОФС «Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте»).

Мышьяк. Не более 0,0003 % (ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения используют 0,17 г вещества.

Тяжёлые металлы. Не более 0,004 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжёлые металлы» (метод 12).

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

##### ХРАНЕНИЕ

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.7.0002 Апельсина горького цветков масло эфирное

Citri aurantii florum oleum aethereum

Вводится впервые

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Эфирное масло, получаемое перегонкой с водяным паром из свежих цветков апельсина горького – Citrus aurantium L., сем. рутовых – Rutaceae, применяемое для производства лекарственных препаратов.

##### СВОЙСТВА

Описание. Светло-жёлтая или тёмно-жёлтая прозрачная жидкость с характерным запахом.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

- Время удерживания основных пиков на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пиков на хроматограмме стандартного раствора (раздел «Количественное определение»).

2. ТСХ. (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

- Подвижная фаза (ПФ). Этилацетат—толуол 15:85.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 0,1 г субстанции, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2 мкл метилантранилата, 10 мкл линалила ацетата, 20 мкл линалоола и 5 мг бергаптена, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Реактив для детектирования. Анисового альдегида раствор уксуснокислый в метаноле.

- На линию старта пластинки полосами длинной 10 мм и шириной 2 мм наносят по 10 мкл испытуемого раствора и стандартного раствора. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

- Результат. На хроматограмме стандартного раствора в средней трети пластинки должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией зеленовато-жёлтого цвета (бергаптен), над ней зона адсорбции с флуоресценцией синего цвета (метилантранилат).

- На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией голубого цвета (метилантранилат); допускается обнаружение других зон адсорбции кроме зоны адсорбции на уровне зоны адсорбции бергаптена (Раздел «Бергаптен»).

- Пластинку опрыскивают раствором для детектирования, нагревают при температуре 100–105 °С в течение 10 мин и просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

- Результат. На хроматограмме стандартного раствора в средней трети пластинки должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией зеленовато-жёлтого цвета (бергаптен), над ней зона адсорбции с флуоресценцией коричневато-красного цвета (линалоол), выше зона адсорбции с флуоресценцией синего цвета (метилантранилат). В верхней трети пластинки должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией коричневато-красного цвета (линалила ацетат).

- На хроматограмме испытуемого раствора в нижней трети пластинки должны обнаруживаться несколько зон адсорбции с флуоресценцией синего или коричневато-красного цвета, зона адсорбции с флуоресценцией коричневато-красного цвета на уровне зоны адсорбции линалоола, над ней зона адсорбции с флуоресценцией коричневато-красного цвета, зона адсорбции с флуоресценцией голубого цвета на уровне зоны адсорбции метилантранилата, зона адсорбции с флуоресценцией коричневато-красного цвета на уровне зоны адсорбции линалила ацетата, выше зона адсорбции с флуоресценцией коричневого цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции кроме зоны адсорбции на уровне зоны адсорбции бергаптена (Раздел «Бергаптен»).

##### ИСПЫТАНИЯ

Относительная плотность. От 0,863 до 0,880 (ОФС «Плотность», метод 1 или 4).

Угол вращения. От +1,5° до +11,5° (ОФС «Оптическое вращение»).

Показатель преломления. От 1,464 до 1,474 (ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)»).

Бергаптен. Определение проводят методом ТСХ в условиях испытания «Подлинность».

Результат. На хроматограмме испытуемого раствора до и после обработки реактивом для детектирования не должна обнаруживаться зона адсорбции на уровне зоны адсорбции бергаптена.

Спирт этиловый. В соответствии с ОФС «Эфирные масла».

Кислотное число. Не более 2,0 (ОФС «Кислотное число»).

Вода. В соответствии с ОФС «Эфирные масла».

Жирные и минеральные масла, в том числе осмолившиеся вещества. Должны отсутствовать (ОФС «Эфирные масла»).

Энантиомерная чистота. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг субстанции, растворяют в пентане и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мкл линалоола, добавляют к нему 10 мкл линалила ацетата и доводят объём раствора пентаном до метки.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 25 м × 0,25 мм, покрытая слоем силикагеля β-циклодекстриновым для хроматографии, 0,25 мкм;
Детектор | пламенно-ионизационный;
Газ-носитель | гелий для хроматографии;
Деление потока | 1:30;
Скорость потока | 1,3 мл/мин;
Объём пробы | 1 мкл.

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °С
--- | --- | ---
Колонка | 0–65 | 50 → 180
Инжектор |  | 230
Детектор |  | 230

Хроматографируют стандартный раствор и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора:

- разрешение (RS) между пиками (R)(-)-линалоола (1-ый пик) и (S)(+)-линалоола (2-ой пик) должно быть не менее 5,5;

- разрешение (RS) между пиками (R)(-)-линалила ацетата (3-ий пик) и (S)(+)-линалила ацетата (4-ый пик) должно быть не менее 2,7.

Содержание указанных (S)-энантиомеров в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:

где S1 - площадь соответствующего (S)-энантиомера;
S2 - площадь соответствующего ®-энантиомера.

Допустимое содержание примесей:

- (S)(+)-линалоол – не более 30,0 %;

- (S)(+)-линалила ацетат – не более 5,0 %.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Раствор метилантранилата. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мкл метилантранилата и доводят объём раствора гептаном до метки.

Испытуемый раствор. Испытуемая субстанция.

Стандартный раствор. В химическую пробирку помещают 20 мкл
β-пинена, 5 мг сабинена, 40 мкл лимонена, 40 мкл линалоола, 20 мкл линалила ацетата, 5 мг α-терпинеола, 5 мкл нерилацетата, 5 мкл гераниола ацетата, 5 мкл транс-неролидола, 5 мкл метилантранилата и 5 мкл транс,транс-фарнезола, растворяют в 2 мл гептана.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 60 м × 0,25 мм, покрытая слоем макрогола 20 000, 0,25 мкм;
Детектор | пламенно-ионизационный;
Газ-носитель | гелий для хроматографии;
Деление потока | 1:100;
Скорость потока | 1,5 мл/мин;
Объём пробы | 0,2 мкл.

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °С
--- | --- | ---
Колонка | 0–4 | 75
| 4–42,8 | 75 → 230
| 42,8–63 | 230
Инжектор |  | 270
Детектор |  | 270

Хроматографируют стандартный раствор, раствор метилантранилата и испытуемый раствор.

Порядок выхода пиков: β-пинен, сабинен, лимонен, линалоол, линалила ацетат, α-терпинеол, нерилацетат, гераниола ацетат, транс-неролидол, метилантранилат, транс,транс-фарнезола.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме стандартного раствора разрешение (RS) между пиками β-пинена и сабинена должно быть не менее 1,5.

Содержание компонентов в субстанции в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»).

Содержит:

- β-пинен – от 7,0 % до 17,0 %;

- лимонен – от 9,0 % до 18,0 %;

- линалоол – от 28,0 % до 44,0 %;

- линалила ацетат – от 2,0 % до 15,0 %;

- α-терпинеол – от 2,0 % до 5,5 %;

- нерилацетат – не более 2,5 %;

- гераниола ацетат – от 1,0 % до 5,0 %;

- транс-неролидол – от 1,0 % до 5,0 %;

- метилантранилат – от 0,1 % до 1,0 %;

- транс,транс-фарнезол – от 0,8 % до 4,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,05 площади основного пика на хроматограмме раствора метилантранилата (менее 0,05 %).

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Эфирные масла».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.7.0003 Воск пчелиный белый

Cera alba

Вводится впервые

[8012-89-3]

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Данная фармакопейная статья распространяется на воск пчелиный белый (cera alba).

Воск пчелиный белый получают путём отбеливания воска пчелиного жёлтого.

Растворимость. Практически нерастворим в воде.

* Растворим в жирных и эфирных маслах, частично растворим в горячем спирте 90 %.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белые или желтовато-белые кусочки или пластинки, полупрозрачные в тонком слое, разлом мелкозернистый, матовый и некристаллический, при нагревании в руке становится мягким и податливым, со слабым характерным запахом.

##### ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 61 до 66 °С (ОФС «Температура плавления», метод 4).

Воск плавят, нагревая на водяной бане, выливают на стеклянную пластину и выдерживают до застывания в полутвёрдую массу. Наполняют металлическую чашечку, вдавливая широкую часть в воск, и повторяют процедуру до тех пор, пока воск не начнёт выталкиваться из узкого отверстия. Избыток удаляют шпателем и сразу же вставляют термометр. Вытесненный воск удаляют. Выдерживают при комнатной температуре не менее 12 ч и затем определяют температуру плавления.

Кислотное число. От 17,0 до 24,0.

Испытуемый раствор. В коническую колбу со шлифом вместимостью 250 мл с обратным холодильником помещают 2,0 г (точная навеска) испытуемого образца, прибавляют 40 мл ксилола и несколько стеклянных шариков. Нагревают до растворения испытуемого образца, прибавляют 20 мл спирта 96 %.

Титруют полученный горячий испытуемый раствор 0,5 М раствором калия гидроксида спиртовым до перехода окраски в красную, устойчивую не менее 10 с (индикатор – 0,5 мл фенолфталеина раствора 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

Кислотное число (IA) вычисляют по формуле:

где V1 – объём 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового, израсходованный на титрование, мл;
V0 - объём 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового, израсходованный на титрование в контрольном опыте, мл;
a - навеска испытуемого образца, г;
28,06 - количество калия гидроксида, соответствующее 1 мл 0,5 М калия гидроксида, мг.

Эфирное число. От 70 до 80 (ОФС «Эфирное число», метод 1).

Число омыления. От 87 до 104 (ОФС «Число омыления»).

Испытуемый раствор. В коническую колбу со шлифом вместимостью 250 мл с обратным холодильником помещают 2,0 г (точная навеска) испытуемого образца, прибавляют 30 мл смеси из равных объёмов спирта 96 % и ксилола и несколько стеклянных шариков. Нагревают до растворения испытуемого образца. Прибавляют 25,0 мл 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового и нагревают с обратным холодильником в течение 3 ч.

Во время титрования раствор несколько раз повторно доводят до кипения.

Церезин, парафины и некоторые другие воски. В круглодонную колбу со шлифом вместимостью 100 мл помещают 3,0 г испытуемого образца, прибавляют 30 мл раствора калия гидроксида в спирте 96 %, свободном от альдегидов, 40 г/л и осторожно кипятят с обратным холодильником в течение 2 ч. Холодильник отсоединяют и сразу же вставляют термометр. Колбу помещают в водяную баню с температурой 80 °C и выдерживают до охлаждения при постоянном перемешивании. Выше температуры 65 °C не должно образовываться осадка, раствор может слегка опалесцировать. Раствор может помутнеть, образоваться осадок, начиная с температуры 65 °C. Раствор должен быть мутным при температуре 59 °С.

Глицерин и другие многоатомные спирты. Не более 0,5 % в пересчёте на глицерин.

Испытуемый раствор. В коническую колбу со шлифом вместимостью 250 мл помещают 0,20 г испытуемого образца, прибавляют 10 мл калия гидроксида раствора спиртового 3 % и нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 30 мин. Прибавляют 50 мл серной кислоты раствора 1 М, охлаждают и фильтруют. Колбу и фильтр промывают серной кислоты раствором 1 М. Фильтрат и промывную жидкость объединяют и доводят серной кислотой раствором 1 М до объёма 100,0 мл.

Стандартный раствор глицерина 10 мкг/мл. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл глицерина и доводят объём раствора серной кислоты раствором 1 М до метки.

В пробирку помещают 1,0 мл испытуемого раствора, прибавляют 0,5 мл натрия перйодата раствора, перемешивают и выдерживают в течение 5 мин. Прибавляют 1,0 мл фуксина обесцвеченного раствора 0,1 % и перемешивают. Любой осадок должен исчезнуть. Пробирку помещают в стакан с водой, нагретой до температуры 40 °C. Производят наблюдение в процессе охлаждения в течение 10–15 мин.

Фиолетово-синяя окраска раствора не должна быть интенсивнее такой же окраски 1 мл стандартного раствора глицерина 10 мкг/мл.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### ХРАНЕНИЕ

В хорошо укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.7.0004 Воск пчелиный жёлтый

Cera flava

Вводится впервые

[8012-89-3]

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Данная фармакопейная статья распространяется на воск пчелиный жёлтый (cera flava).

Воск пчелиный жёлтый – продукт жизнедеятельности пчёл Apis cerana Fabr. или Apis mellifera L., сем. пчелиные – Apidae, полученный при расплавлении (горячей водой, паром и др.) стенок медовых сот и очищенный от посторонних веществ.

Растворимость. Практически нерастворим в воде.

* Растворим в жирных и эфирных маслах, частично растворим в горячем спирте 90 %.

##### СВОЙСТВА

Описание. Жёлтые или светло-коричневые кусочки или пластинки, разлом мелкозернистый, матовый и некристаллический, при нагревании в руке становится мягким и податливым, со слабым характерным запахом.

##### ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 61 до 66 °С (ОФС «Температура плавления», метод 4).

Воск плавят, нагревая на водяной бане, выливают на стеклянную пластину и выдерживают до застывания в полутвёрдую массу. Наполняют металлическую чашечку, вдавливая широкую часть в воск, и повторяют процедуру до тех пор, пока воск не начнёт выталкиваться из узкого отверстия. Избыток удаляют шпателем и сразу же вставляют термометр. Вытесненный воск удаляют. Выдерживают при комнатной температуре не менее 12 ч и затем определяют температуру плавления.

Кислотное число. От 17,0 до 22,0.

Испытуемый раствор. В коническую колбу со шлифом вместимостью 250 мл с обратным холодильником помещают 2,0 г (точная навеска) испытуемого образца, прибавляют 40 мл ксилола и несколько стеклянных шариков. Нагревают до растворения испытуемого образца, прибавляют 20 мл спирта 96 %.

Титруют полученный горячий испытуемый раствор 0,5 М раствором калия гидроксида спиртовым до перехода окраски в красную, устойчивую не менее 10 с (индикатор – 0,5 мл фенолфталеина раствора 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

Кислотное число (IA) вычисляют по формуле:

где V1 – объём 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового, израсходованный на титрование, мл;
V0 - объём 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового, израсходованный на титрование в контрольном опыте, мл;
а - навеска испытуемого образца, г;
28,06 - количество калия гидроксида, соответствующее 1 мл 0,5 М калия гидроксида, мг.

Эфирное число. От 70 до 80 (ОФС «Эфирное число», метод 1).

Число омыления. От 87 до 102 (ОФС «Число омыления»).

Испытуемый раствор. В коническую колбу со шлифом вместимостью 250 мл с обратным холодильником помещают 2,0 г (точная навеска) испытуемого образца, прибавляют 30 мл смеси из равных объёмов спирта 96 % и ксилола и несколько стеклянных шариков. Нагревают до растворения испытуемого образца. Прибавляют 25,0 мл 0,5 М раствора калия гидроксида спиртового и нагревают с обратным холодильником в течение 3 ч.

Во время титрования раствор несколько раз повторно доводят до кипения.

Церезин, парафины и некоторые другие воски. В круглодонную колбу со шлифом вместимостью 100 мл помещают 3,0 г испытуемого образца, прибавляют 30 мл раствора калия гидроксида в спирте 96 %, свободном от альдегидов, 40 г/л и осторожно кипятят с обратным холодильником в течение 2 ч. Холодильник отсоединяют и сразу же вставляют термометр. Колбу помещают в водяную баню с температурой 80 °C и выдерживают до охлаждения при постоянном перемешивании. Выше температуры 65 °C не должно образовываться осадка, раствор может слегка опалесцировать. Раствор может помутнеть, образоваться осадок, начиная с температуры 65 °C. Раствор должен быть мутным при температуре 59 °С.

Глицерин и другие многоатомные спирты. Не более 0,5 % в пересчёте на глицерин.

Испытуемый раствор. В коническую колбу со шлифом вместимостью 250 мл помещают 0,20 г испытуемого образца, прибавляют 10 мл калия гидроксида раствора спиртового 3 % и нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 30 мин. Прибавляют 50 мл серной кислоты раствора 1 М, охлаждают и фильтруют. Колбу и фильтр промывают серной кислоты раствором 1 М. Фильтрат и промывную жидкость объединяют и доводят серной кислотой раствором 1 М до объёма 100,0 мл.

Стандартный раствор глицерина 10 мкг/мл. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл глицерина и доводят объём раствора серной кислоты раствором 1 М до метки.

В пробирку помещают 1,0 мл испытуемого раствора, прибавляют 0,5 мл натрия перйодата раствора, перемешивают и выдерживают в течение 5 мин. Прибавляют 1,0 мл фуксина обесцвеченного раствора 0,1 % и перемешивают. Любой осадок должен исчезнуть. Пробирку помещают в стакан с водой, нагретой до температуры 40 °C. Производят наблюдение в процессе охлаждения в течение 10–15 мин.

Фиолетово-синяя окраска раствора не должна быть интенсивнее такой же окраски 1 мл стандартного раствора глицерина 10 мкг/мл.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### ХРАНЕНИЕ

В хорошо укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.7.0005 Какао настоящего семян масло жирное

Какао масло
Theobromatis сacao seminum oleum pingue

Взамен ФС.3.4.0010.18

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Масло жирное, получаемое путём прессования поджаренных и очищенных от кожуры семян культивируемого дерева какао настоящего (шоколадного дерева) – Theobroma cacao L., сем. Стеркулиевых – Sterculiaceae.

##### СВОЙСТВА

Описание. Плотная однородная масса желтовато-белого цвета со слабым характерным запахом, хрупкая при температуре ниже 25 °С.

* Проявляет полиморфизм.

Растворимость. Легко растворимо в эфире, в кипящем этаноле и петролейном эфире, мало растворимо в этаноле 96 %.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

ГХ. Время удерживания пиков на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания основных пиков на хроматограмме калибровочной смеси веществ (раздел «Количественное определение»).

##### ИСПЫТАНИЯ

Относительная плотность. Около 0,895 при 40 °С (ОФС «Плотность», метод 2).

Температура плавления. От 31 до 35 °С (ОФС «Температура плавления», метод 2).

В химический стакан помещают 10 г испытуемого образца и расплавляют при 55 °С, помещают на водяную баню. Расплавленный испытуемый образец охлаждают до температуры 25 °С при постоянном перемешивании до получения пастообразной консистенции, избегая попадания пузырьков воздуха.

Испытуемый образец выдерживают на водяной бане при температуре от 32 ° до 33 °С до тех пор, пока он не достигнет температуры водяной бани и не приобретёт консистенцию жидкого крема (около 30 мин).

Испытуемый образец переливают в другой стакан и дают массе застыть при комнатной температуре в течение не менее 2 ч.

Вводят вещество в капилляры и выдерживают при 2–8 °С не менее 48 ч.

Показатель преломления. От 1,454 до 1,459 при температуре 40 °С (ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)».

Кислотное число. Не более 4,0 (ОФС «Кислотное число»).

Число омыления. От 188 до 198 (2,5 г испытуемого образца) (ОФС «Число омыления»).

Йодное число. От 32 до 38 (ОФС «Йодное число», метод 1).

Пероксидное число. Не более 3,0. В соответствии с требованиями ОФС «Пероксидное число» (метод 1).

Крахмала раствор 1 %, содержащий 0,01 % ртути (II) йодида, прибавляют перед началом титрования.

Неомыляемые вещества. Не более 0,35 % (ОФС «Масла жирные растительные»).

Посторонние жирные масла. Раствор 1 г испытуемого образца в 3 мл эфира должен оставаться при комнатной температуре прозрачным в течение 24 ч.

Летучие вещества. Не более 0,15 % (ОФС «Масла жирные растительные»).

Парафин, воск, смоляные и минеральные масла. В соответствии с ОФС «Масла жирные растительные».

Альдегиды. В соответствии с ОФС «Масла жирные растительные».

Белки. В соответствии с ОФС «Масла жирные растительные».

Мыла. В соответствии с ОФС «Масла жирные растительные».

Щелочные примеси

Смесь растворителей. В мерную колбу вместимостью 500 мл помещают 15 мл воды и доводят объём раствора ацетоном до метки, затем добавляют 2,5 мл бромфенолового синего раствора 0,1 % водно-спиртового. При появлении синего или жёлтого цвета раствора, нейтрализуют его хлористоводородной кислоты раствором 0,01 М или натрия гидроксида раствором 0,01 М соответственно, чтобы получить раствор зелёного цвета.

Расплавляют 50 г испытуемого образца при температуре около 50 °С и тщательно перемешивают. В коническую колбу вместимостью 150 мл помещают 10,0 г расплавленного испытуемого образца и добавляют 50 мл смеси растворителей. Энергично перемешивают и оставляют до разделения на два слоя. Для изменения цвета верхнего слоя на жёлтый должно израсходоваться не более 2 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М, окраска должна сохраняться после интенсивного перемешивания.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 1 или 2).

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Состав жирных кислот. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Определение состава жирных кислот в маслах жирных растительных и жирах», методика 3, **табл. 1) со следующими изменениями.

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,32 мм, покрытая слоем макрогола 20 000, 0,25 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |
Газ-носитель | гелий для хроматографии; |
Деление потока | 1:50; |
Скорость потока | Газ-носитель | 1,3 мл/мин;
Объём пробы | 0,5 мкл. |

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °C
--- | --- | ---
Колонка | 0–15 | 70 → 205
| 15–25 | 205
| 25–27,5 | 205 → 230
| 27,5–50 | 230
Инжектор |  | 250
Детектор |  | 250

Состав жирных кислот испытуемого образца:

- лауриновая кислота – не более 0,5 %;

- миристиновая кислота – не более 0,5 %;

- пальмитиновая кислота – от 24,0 % до 31,0 %;

- стеариновая кислота – от 30,0 % до 38,0 %;

- олеиновая кислота – от 31,0 % до 38,0 %;

- линолевая кислота – не более 4,5 %;

- арахиновая кислота – не более 1,5 %.

##### ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте при температуре от 8 до 15 °С.

* Приводится для информации.

** Используют смесь веществ, применяемых для калибровки.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.7.0006 Крахмал картофельный

Solani amylum

Взамен ГФ IX ст. 35

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Крахмал картофельный, получаемый экстракцией из клубней паслёна клубненосного – Solanum tuberosum L. сем. паслёновых – Solanaceae.

##### СВОЙСТВА

Описание. Очень мелкий белый или почти белый порошок, который скрипит при нажатии между пальцами.

Растворимость. Практически не растворим в холодной воде и спирте 96 %.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. Микроскопические признаки. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

- При рассмотрении микропрепарата в смеси глицерин—вода (1:1) должны быть видны зёрна неправильной, овальной или грушевидной формы, размером 30–100 мкм, иногда больше 100 мкм, или округлой,
  размером 10–35 мкм. Могут встречаться сложные зёрна, состоящие
  из 2–4 зёрнышек. Овальные и грушевидные зёрна имеют эксцентрические центры наслоения, а округлые зёрна – нецентрированные или слегка эксцентрические центры наслоения. На всех зёрнах хорошо видна концентрическая слоистость. При рассмотрении между ортогонально ориентированными поляризующими пластинами или призмами на зёрнах присутствует отчётливый чёрный крестик на центре наслоения.

Рисунок. Крахмал картофельный: 1 – яйцеобразное зерно крахмала с поверхности (400×), 2 – сложное зерно крахмала (400×).

2. Качественная реакция. Суспендируют 1 г субстанции с 50 мл воды, кипятят 1 мин и охлаждают. Должен образовываться густой опалесцирующий клейстер.

3. Качественная реакция. К 1 мл клейстера, полученного при определении подлинности (2), добавляют 0,05 мл йода раствора 0,005 М. Должно появляться окрашивание от оранжево-красного до тёмно-синего, исчезающее при нагревании.

##### ИСПЫТАНИЯ

pH раствора. От 5,0 до 8,0 (ОФС «Ионометрия», метод 3).

Испытуемый раствор. К 5,0 г субстанции прибавляют 25,0 мл воды, свободной от углерода диоксида, перемешивают в течение 1 мин и оставляют на 15 мин.

Посторонние примеси. Определение проводят в соответствии с ОФС «Микроскопический и микрохимический анализ лекарственного растительного сырья и лекарственных средств растительного происхождения».

При рассмотрении микропрепарата в смеси глицерин—вода (1:1) должны обнаруживаться не более чем следовые количества фрагментов тканей клубней паслёна клубненосного. Присутствие зёрен крахмала другого происхождения не допускается.

Окисляющие вещества. Не более 0,002 % в пересчёте на перекись водорода Н2О2.

Испытуемый раствор. В колбу вместимостью 250 мл помещают 4,0 г (точная навеска) субстанции, прибавляют 50 мл воды, перемешивают в течение 5 мин. Содержимое колбы переносят в пробирку и центрифугируют при 1500 об/мин в течение 3 мин. Для определения используют прозрачную надосадочную жидкость.

К 30,0 мл надосадочной жидкости прибавляют 1 мл уксусной кислоты ледяной, 0,75±0,25 г калия йодида, выдерживают в колбе с притёртой пробкой в защищённом от света месте в течение 25–30 мин. Титруют 0,002 М раствором натрия тиосульфата до исчезновения окраски, используя в качестве индикатора 1,0 мл крахмала раствор 1 %, содержащий 0,01 % ртути (II) йодида. Должно быть израсходовано не более 1,4 мл 0,002 М раствора тиосульфата натрия. Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,002 М раствора натрия тиосульфата соответствует 34 мкг окисляющих веществ в пересчёте на перекись водорода Н2O2.

Cеры диоксид. Не более 0,005 % (ОФС «Серы диоксид во вспомогательных веществах», метод 1).

Железо. Не более 0,001 % (ОФС «Железо», метод 2).

Испытуемый раствор. Навеску субстанции массой 1,5 г встряхивают с 15 мл кислоты хлористоводородной разведённой 7,3 %, фильтруют. Фильтрат должен выдерживать испытание на железо.

Потеря в массе при высушивании. Не более 20,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Сушат 1 г (точная навеска) субстанции при температуре 130 °С в течение 90 мин.

Сульфатная зола. Не более 0,6 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г субстанции.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### ХРАНЕНИЕ

В хорошо укупоренной упаковке.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.7.0007 Натрия лаурилсульфат

Natrii laurilsulfas

Вводится впервые

C12H25NaO4S [151-21-3] | М.м. 288,38

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Смесь натрия алкилсульфатов, состоящая в основном
из додецил-1-сульфата натрия C12H25NaO4S.

Содержит не менее 85,0 % натрия алкилсульфатов в пересчёте на натрия лаурилсульфат C12H25NaO4S.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или светло жёлтый порошок или кристаллы.

Растворимость. Легко растворим в воде, образуя опалесцирующий раствор, и мало растворим в спирте 96 %.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца натрия лаурилсульфата.

2. Качественная реакция. В платиновый или кварцевый тигель помещают 2,5 г испытуемого образца, прибавляют 2 мл серной кислоты раствора 48 %. Нагревают на водяной бане, затем осторожно постепенно повышают температуру. Тигель помещают в муфельную печь и прокаливают при температуре 600±50°С до тех пор, пока не исчезнут чёрные частицы. После охлаждения прибавляют несколько капель серной кислоты раствора 1 М, снова нагревают и прокаливают. Прибавляют несколько капель аммония карбоната раствора 10 %, выпаривают досуха и прокаливают. Затем охлаждают, растворяют остаток в 50 мл воды и перемешивают. К 2 мл полученного раствора прибавляют 4 мл калия пироантимоната раствора, при необходимости потирают внутренние стенки пробирки стеклянной палочкой; должен образоваться белый кристаллический осадок.

3. Качественная реакция. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 г испытуемого образца, прибавляют воду, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Полученный раствор подкисляют хлористоводородной кислотой концентрированной, кипятят в течение 20 мин; не должен образоваться осадок. После прибавления бария хлорида раствора 12 % должен образоваться белый осадок.

4. Качественная реакция. Растворяют 0,1 г испытуемого образца в 10 мл воды и встряхивают; образуется обильная пена.

##### ИСПЫТАНИЯ

Щёлочность. К 1 г субстанции прибавляют 100 мл воды, свободной от углерода диоксида, прибавляют 0,1 мл фенолового красного раствора 0,1 %. Раствор должен окрашиваться в красный цвет при прибавлении не более 0,5 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М.

Неэтерифицированные спирты. Не более 4,0 %.

Растворяют 10 г испытуемого образца в 100 мл воды, прибавляют 100 мл спирта 96 % и встряхивают раствор трижды с петролейным эфиром порциями по 50 мл, при необходимости для разделения слоёв прибавляют натрия хлорид. Объединённые органические слои трижды промывают водой порциями по 50 мл каждая, фильтруют через беззольный фильтр с натрия сульфата безводного и выпаривают на водяной бане. Остаток нагревают при температуре 105 °С в течение 30 мин и охлаждают. Масса остатка не должна превышать 0,4 г.

Натрия хлорид и натрия сульфат. Суммарное содержание
не более 8,0 %.

Натрия хлорид. Растворяют 5,0 г субстанции в 50 мл воды, прибавляют азотную кислоту разведённую 12,5 % по каплям до нейтральной реакции, прибавляют 2,0 мл калия хромата раствора 5 % и титруют 0,1 мл раствором серебра нитрата до перехода окраски от светло-жёлтой в коричневато-жёлтую.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 5,844 мг NaCl.

Натрия сульфат*.* Растворяют 0,5 г субстанции в 20 мл воды, при необходимости слегка подогревая, затем прибавляют 1 мл раствора дитизона 0,5 г/л в ацетоне. Если раствор красного цвета, прибавляют по каплям 1 М раствор азотной кислоты до голубовато-зелёной окраски. Прибавляют 2,0 мл дихлоруксусной кислоты раствора и 80 мл ацетона. Титруют 0,01 М раствором свинца нитрата до появления стойкого фиолетово-красного или оранжево-красного цвета.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,01 М раствора свинца нитрата соответствует 1,420 мг Na2SO4.

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 1,15 г (точная навеска) испытуемого образца, растворяют в 100 мл воды, при необходимости подогревая, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. К 20,0 мл полученного раствора прибавляют 15 мл метиленхлорида, 10 мл димидия бромида и сульфанового синего смешанного раствора и титруют 0,004 М раствором бензэтония хлорида, энергично встряхивая и позволяя слоям разделиться после прибавления каждой порции титранта, до полного исчезновения розового окрашивания метиленхлоридного слоя и получения серовато-синего цвета.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,004 М раствор бензэтония хлорида соответствует 1,154 мг натрия алкилсульфатов в пересчёте на C12H25NaO4S.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.7.0008 Натрия метабисульфит

Natrii metabisulfis

Вводится впервые

Na2S2O5 [7681-57-4] | М.м. 190,11

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Дисульфит динатрия.

Cодержит не менее 95,0 % и не более 100,5 % натрия метабисульфита.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Легко растворим в воде, мало растворим в спирте 96 %.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 г испытуемого образца, растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

1. Качественная реакция. К 0,4 мл калия йодида йодированного раствора прибавляют 8 мл воды и 1 мл смеси испытуемый раствор—вода 1:10. Раствор должен быть бесцветным и давать характерную реакцию на сульфаты (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

2. Качественная реакция. Испытуемый раствор должен давать характерную реакцию А на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность раствора. Испытуемый раствор, полученный в испытании «Идентификация», должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Испытуемый раствор, полученный в испытании «Идентификация», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 3,5 до 5,0 (5 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Железо. Не более 0,002 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Железо» (метод 2) с использованием испытуемого раствора, полученного в испытании «Идентификация».

Мышьяк. Не более 0,0005 % (ОФС «Мышьяк», метод 1). Для определения смешивают в чашке 0,2 г испытуемого образца с 2 мл воды. Прибавляют по каплям 1,5 мл азотной кислоты концентрированной, выпаривают смесь на водяной бане досуха и нагревают над пламенем до прекращения выделения паров. Полученный остаток количественно переносят с помощью 25 мл воды в колбу.

Тиосульфаты. К 5 мл испытуемого раствора, полученного в испытании «Идентификация», прибавляют 5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 %. Раствор должен быть прозрачным в течение 15 мин (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 4). Помещают в кварцевый тигель 20 мл испытуемого раствора, прибавляют 10 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и выпаривают досуха. Полученный остаток растворяют в 19 мл воды и прибавляют 1 мл раствора 40 г/л натрия фторида.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,2 г (точная навеска) испытуемого образца в 50,0 мл 0,05 М раствора йода, прибавляют 5 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % и избыток йода титруют 0,1 М раствором натрия тиосульфата (индикатор – 1 мл крахмала раствор 1 %, содержащий 0,01 % ртути(II) йодида), добавляя индикатор в конце титрования.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,05 М раствора йода соответствует 4,753 мг натрия метабисульфита Na2S2O5.

##### ХРАНЕНИЕ

В защищённом от света месте, доверху заполненной, хорошо укупоренной упаковке, при температуре не выше 30 °С.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.7.0009 Натрия пропилпарагидроксибензоат

Propylis parahydroxybenzoas natricus

Взамен ФС.2.1.0028.15

С10Н11NaО3 [35285-69-9] | М.м. 202,18

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

4-(Пропоксикарбонил)фенолят натрия.

Содержит не менее 94 % и не более 102,0 % натрия пропилпарагидроксибензоата С10Н11NaО3 в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

* Гигроскопичен.

Растворимость. Легко растворим в воде, умеренно растворим в спирте 96 %, практически нерастворим в метиленхлориде.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр осадка, полученного в разделе «Температура плавления», по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца пропилпарагидроксибензоата.

2. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля октадецилсилильного F254.

- Подвижная фаза (ПФ). Уксусная кислота ледяная—вода—метанол 1:30:70.

- Испытуемый раствор А. Растворяют 0,1 г испытуемого образца в 10 мл воды, немедленно прибавляют 2 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и встряхивают с 50 мл 1,1-диметилэтилметилового эфира. Выпаривают эфирный слой досуха и остаток растворяют в 10 мл ацетона.

- Испытуемый раствор Б. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора до метки.

- Раствор стандартного образца пропилпарагидроксибензоата. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца пропилпарагидроксибензоата, растворяют в ацетоне и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг фармакопейного стандартного образца этилпарагидроксибензоата, растворяют в 1 мл испытуемого раствора А и доводят объём раствора ацетоном до метки.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора Б (5 мкг), раствора стандартного образца пропилпарагидроксибензоата (5 мкг) и раствора для проверки пригодности хроматографической системы (5 мкг). Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную в течение не менее 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

- Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 разделённые зоны адсорбции.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора Б по положению и величине должна соответствовать зоне адсорбции пропилпарагидроксибензоата на хроматограмме раствора стандартного образца пропилпарагидроксибензоата.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,5 г испытуемого образца в 50 мл воды, прибавляют 5 мл хлористоводородной кислоты 25 %, фильтруют, промывают осадок на фильтре водой и высушивают под вакуумом при температуре 80 °С в течение 2 ч. Температура плавления осадка от 96 до 99 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

4. Качественная реакция. Добавляют к 1 мл испытуемого раствора, полученного в разделе «Прозрачность раствора», 1 мл воды. Раствор должен давать характерную реакцию А на натрий (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

##### ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность раствора. Испытуемый раствор сразу же после приготовления должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 г испытуемого образца, растворяют в воде, свободной от углерода диоксида, и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Цветность раствора. Испытуемый раствор, полученный в разделе «Прозрачность раствора» сразу же после приготовления должен выдерживать сравнение с эталоном ВY6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH раствора. От 9,5 до 10,5 (0,1 % раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Калия дигидрофосфата раствор 0,05 М—метанол 350:650.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) испытуемого образца, растворяют в 2,5 мл метанола и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 1,0 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца этилпарагидроксибензоата (примесь С), 5 мг (точная навеска)
4-гидроксибензойной кислоты (примесь А), растворяют в ПФ и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А: 4-гидроксибензойная кислота [99-96-7].

Примесь С (этилпарагидроксибензоат): этил(4-гидроксибензоат) [120-47-8].

Хроматографические условия

Колонка | 150 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм;
Скорость потока | 1,3 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 272 нм;
Объём пробы | 10 мкл;
Время хроматографирования | 2,5-кратное от времени удерживания пика пропилпарагидроксибензоата.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Пропилпарагидроксибензоат – 1 (около 4,5 мин); примесь А – около 0,3; примесь С – около 0,7.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками примеси С и пропилпарагидроксибензоата должно быть не менее 5,0.

Поправочные коэффициенты. Для расчёта содержания площадь пика примеси А умножают на 1,4.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- площадь пика примеси А не должна более чем в 8 раз превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 4,0 %);

- площадь пика любой другой примеси не должна превышать площадь пика пропилпарагидроксибензоата на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 %);

- сумма площадей пиков всех примесей (кроме примеси А) не должна превышать двукратную площадь пика пропилпарагидроксибензоата на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0 %).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,2 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,1 %).

Вода. Не более 5,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 0,5 г (точная навеска) испытуемого образца.

Сульфаты. Не более 0,03 % (ОФС «Сульфаты», метод 2). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 25 мл испытуемого раствора, полученного в разделе «Прозрачность раствора», прибавляют 5 мл воды и 10 мл хлористоводородной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки, встряхивают и фильтруют. К 10 мл фильтрата прибавляют 5 мл воды.

Хлориды. Не более 0,035 % (ОФС «Хлориды»).

Эталонный раствор. К 7 мл хлорида стандартного раствора 2 мкг/мл прибавляют 3 мл воды.

В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10 мл испытуемого раствора, полученного в разделе «Прозрачность раствора», прибавляют 30 мл воды, 1 мл азотной кислоты концентрированной и доводят объём раствора водой до метки, встряхивают и фильтруют. К 2 мл фильтрата прибавляют 8 мл воды.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001% (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 6).

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Родственные примеси» со следующими изменениями.

Раствор стандартного образца пропилпарагидроксибензоата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 50 мг (точная навеска) фармакопейного стандартного образца пропилпарагидроксибензоата, растворяют в 2,5 метанола и доводят объём раствора ПФ до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора ПФ до метки.

Хроматографируют испытуемый раствор и раствор стандартного образца пропилпарагидроксибензоата.

Содержание натрия пропилпарагидроксибензоата С10Н11NaО3 в испытуемом образце в пересчёте на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (\($X$\)) вычисляют по формуле:

где S1 – площадь пика пропилпарагидроксибензоата на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 – площадь пика пропилпарагидроксибензоата на хроматограмме раствора стандартного образца пропилпарагидроксибензоата;
а1 – навеска испытуемого образца, мг;
а0 – навеска фармакопейного стандартного образца пропилпарагидроксибензоата, мг;
P – содержание пропилпарагидроксибензоата в фармакопейном стандартном образце пропилпарагидроксибензоата, %;
W – суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %;
202,18 – молекулярная масса натрия пропилпарагидроксибензоата;
180,20 молекулярная масса пропилпарагидроксибензоата.

##### ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.7.0010 Сахарин

Saccharinum

Взамен ФС 42-1826-82

C7H5NO3S [81-07-2] | М.м. 183,18

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1H-1λ6,2-Бензотиазол-1,1,3(2H)-трион.

Cодержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % сахарина в пересчёте на сухое вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Умеренно растворим в кипящей воде и в спирте 96 %, мало растворим в холодной воде.

* Растворяется в разбавленных растворах щелочей и карбонатов.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца сахарина.

2. Качественная реакция. Насыщенный раствор, приготовленный без нагревания, окрашивает синюю лакмусовую бумагу в красный цвет.

3. Качественная реакция. Смешивают 10 мг субстанции и 10 мг резорцина, прибавляют 0,25 мл серной кислоты концентрированной и осторожно нагревают над пламенем горелки до тех пор, пока смесь не окраситься в тёмно-зелёный цвет. После охлаждения к окрашенной смеси прибавляют 10 мл воды и натрия гидроксида раствора 10 % до щелочной реакции; должна появиться интенсивная зелёная флуоресценция.

4. Качественная реакция. К 0,2 г субстанции прибавляют 1,5 мл натрия гидроксида раствора 10 %, выпаривают досуха и сухой остаток осторожно нагревают до плавления, избегая обугливания. После охлаждения, полученную массу растворяют в 5 мл воды, прибавляют хлористоводородную кислоту разведённую 7,3 % до слабокислой реакции и фильтруют при необходимости. К фильтрату прибавляют 0,2 мл железа(III) хлорида раствор 1,3 %; должно появиться фиолетовое окрашивание.

##### ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 226 до 230 °С (ОФС «Температура плавления», метод 1).

Прозрачность раствора. Испытуемый раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5,0 г субстанции, прибавляют 20 мл натрия ацетата раствора 20 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

о- и п-Толуолсульфонамид. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Раствор внутреннего стандарта. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мг кофеина, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 г субстанции и суспендируют в 20,0 мл воды, затем растворяют в 5–6 мл натрия гидроксида раствора концентрированного, при необходимости доводят рН раствора до 7–8 1 М раствором натрия гидроксида или 1 М раствором хлористоводородной кислоты, и доводят объём раствора водой до метки. Полученный раствор количественно переносят в делительную воронку, колбу ополаскивают метиленхлоридом и встряхивают четыре раза с метиленхлоридом порциями по 50 мл. Объединённые нижние слои метиленхлорида высушивают над безводным натрия сульфатом и фильтруют; фильтр и натрия сульфат промывают 10 мл метиленхлорида. Объединяют все метиленхлоридные экстракты, выпаривают на водяной бане почти досуха при температуре не выше 40 °С, сухой остаток количественно переносят с помощью малого количества метиленхлорида в пробирку вместимостью 10 мл, выпаривают досуха в потоке азота и растворяют сухой остаток в 1,0 мл раствора внутреннего стандарта.

Контрольный раствор. Выпаривают 200 мл метиленхлорида на водяной бане при температуре не выше 40 °С досуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл метиленхлорида.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) о-толуолсульфонамида, 20 мг (точная навеска) п-толуолсульфонамида, растворяют в метиленхлориде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. Выпаривают досуха в потоке азота 5,0 мл полученного раствора и сухой остаток растворяют в 1,0 мл раствора внутреннего стандарта.

Хроматографические условия

Колонка | капиллярная, 10 м × 0,53 мм, покрытая слоем поли(фенил)(50)[диметил](50)силоксан, 2 мкм; |
Детектор | пламенно-ионизационный; |
Газ-носитель | азот для хроматографии; |
Скорость потока | 10 мл/мин; |
Деление потока | 1:2; |
Объём пробы | 1 мкл; |
Температура | Инжектор | 250 °C
| Колонка | 180 °C
| Детектор | 250 °C

Хроматографируют стандартный раствор, контрольный раствор, испытуемый раствор.

Порядок выхода пиков: о-толуолсульфонамид, п-толуолсульфонамид, кофеин.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме стандартного раствора разрешение (RS) между пиками о-толуолсульфонамида и п-толуолсульфонамида должно быть не менее 1,5.

На хроматограмме контрольного раствора не должно наблюдаться пиков с такими же временами удерживания, как у внутреннего стандарта, о-толуолсульфонамида и п-толуолсульфонамида.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

- отношение площади пика о-толуолсульфонамида к площади пика внутреннего стандарта не должно превышать отношение площади пика
  о-толуолсульфонамида к площади пика внутреннего стандарта на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,001 %);

- отношение площади пика п-толуолсульфонамида к площади пика внутреннего стандарта не должно превышать отношение площади пика
  п-толуолсульфонамида к площади пика внутреннего стандарта на хроматограмме стандартного раствора (не более 0,001 %).

Легко обугливающиеся вещества. К 0,2 г субстанции прибавляют 5 мл серной кислоты концентрированной и выдерживают при 48–50 °С в течение 10 мин. Окраска полученного раствора не должна превышать окраски раствора, состоящего из 0,1 мл красного раствора, 0,1 мл голубого раствора, 0,4 мл жёлтого раствора (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 1) и 4,4 мл воды.

Потеря в массе при высушивании. Не более 1,0 % (ОФС «Потеря в массе при высушивании», способ 1). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Тяжёлые металлы. Не более 0,002 % (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 4). В мерную колбу вместимостью 20 мл помещают 10,0 мл испытуемого раствора, полученного в испытании «Прозрачность раствора» и доводят водой до метки.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,5 г (точная навеска) субстанции в 40 мл спирта 96 %, прибавляют 40 мл воды и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида (индикатор – фенолфталеина раствор 1 %).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 18,32 мг сахарина C7H5NO3S.

##### ХРАНЕНИЕ

В плотно укупоренной упаковке.

* Приводится для информации.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.7.0011 Сорбиновая кислота

Сорбиновая кислота
Acidum sorbicum

Взамен ФС.2.1.0035.15

C6H8O2 [110-44-1] | М.м. 112,13

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

(2Е,4Е)-Гекса-2,4-диеновая кислота.

Содержит не менее 99,0 % и не более 101,0 % сорбиновой кислоты C6H8O2 в пересчёте на безводное вещество.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в спирте 96 %, мало растворим в воде.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца сорбиновой кислоты.

2. Спектрофотометрия. (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 250 мл помещают 50 мг испытуемого образца, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 200 мл помещают 2,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

- Спектр поглощения испытуемого раствора в области длин волн от 230 до 350 нм должен иметь максимум при 264 нм.

3. Качественная реакция. К 1 мл 5 % раствора испытуемого образца прибавляют 2 мл йода раствора 0,1 М; раствор должен стать бесцветным.

##### ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления. От 132 до 136 °С (ОФС «Температура плавления»).

Прозрачность раствора. Растворяют 1,25 г испытуемого образца в 25 мл спирта 96 %. Раствор должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Испытуемый раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Альдегиды. Не более 0,15 % в пересчёте на ацетальдегид.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 г (точная навеска) испытуемого образца, растворяют в 80 мл смеси, состоящей из 30 мл воды и 50 мл 2-пропанола, доводят рН раствора до 4,0 хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М или натрия гидроксида раствором 0,1 М и доводят объём раствора водой до метки.

Эталонный раствор. К 1,5 мл стандартного раствора ацетальдегида (100 мкг/мл) (ОФС «Стандартные растворы») прибавляют 4 мл 2-пропанола и 4,5 мл воды.

К 10 мл испытуемого раствора и эталонного раствора прибавляют по 1 мл фуксина обесцвеченного раствора 0,1 %. Через 30 мин окраска испытуемого раствора должна быть не интенсивнее окраски эталонного раствора.

Вода. Не более 1,0 % (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют 2,0 г (точная навеска) испытуемого образца.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1,0 г (точная навеска) испытуемого образца.

Тяжёлые металлы. Не более 0,001% (ОФС «Тяжёлые металлы», метод 2).

Испытуемый раствор. Испытуемый раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», 12 мл.

Эталонный раствор. К 5 мл свинца стандартного раствора 1 мкг/мл (ОФС «Стандартные растворы») прибавляют 5 мл спирта 96 % и 2 мл испытуемого раствора.

Контрольный раствор. К 10 мл спирта 96 % прибавляют 2 мл испытуемого раствора.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,1 г (точная навеска) испытуемого образца в 20 мл спирта 96 % и титруют полученный раствор 0,1 М раствором натрия гидроксида. Конечную точку титрования определяют потенциометрически (ОФС «Потенциометрическое титрование») или с индикатором (4 капли фенолфталеина раствора 0,1 %) до перехода окраски в розовую.

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 11,21 мг сорбиновой кислоты C6H8O2.

##### ХРАНЕНИЕ

В плотно укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.7.0012 Эвгенол

Eugenolum

Вводится впервые

C10H12O2 [97-53-0] | М.м. 164,20

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

2-Метокси-4-(проп-2-ен-1-ил)фенол.

##### СВОЙСТВА

Описание. Бесцветная или светло-жёлтая прозрачная жидкость с сильным характерным запахом.

* Темнеет на воздухе.

Растворимость. Легко растворим в спирте 70 %, практически нерастворим в воде и глицерине.

* Смешивается со спиртом 96 %, уксусной кислотой ледяной, метиленхлоридом и жирными и эфирными маслами.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр вещества по положению полос поглощения должен соответствовать спектру фармакопейного стандартного образца эвгенола.

2. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография».

- Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля F254.

- Подвижная фаза (ПФ). Этилацетат—толуол 10:90.

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мкл вещества, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Раствор стандартного образца эвгенола. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 50 мкл фармакопейного стандартного образца эвгенола, растворяют в спирте 96 % и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

- Реактив для детектирования. Анисового альдегида раствор уксуснокислый в метаноле.

- На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора и раствора стандартного образца эвгенола. Пластинку с нанесёнными пробами сушат в токе холодного воздуха, помещают в предварительно насыщенную в течение 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат в токе холодного воздуха до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и степени подавления флуоресценции должна соответствовать зоне адсорбции эвгенола на хроматограмме раствора стандартного образца эвгенола.

- Пластинку опрыскивают реактивом для детектирования, нагревают при температуре 100–105 °С в течение 10 мин и просматривают при дневном свете.

- Результат. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и окраске должна соответствовать зоне адсорбции эвгенола на хроматограмме раствора стандартного образца эвгенола.

3. Качественная реакция. Растворяют 0,05 мл вещества в 2 мл спирта 96 %, прибавляют 0,1 мл железа(III) хлорида раствора 10,5 %; должно образоваться тёмно-зелёное окрашивание, через 10 мин переходящее в желтовато-зелёное.

##### ИСПЫТАНИЯ

Относительная плотность. От 1,064 до 1,070 (ОФС «Плотность», метод 1 или 4).

Показатель преломления. От 1,540 до 1,542 (ОФС «Показатель преломления (индекс рефракции)»).

Димерные и олигомерные соединения

Оптическая плотность 1 % раствора вещества в этаноле безводном, измеренная при длине волны 330 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, не должна превышать 0,25 (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Родственные примеси. Определение проводят методом ГХ (ОФС «Газовая хроматография»).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 1 г вещества, растворяют в этаноле безводном и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора этанолом безводным до метки.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 50 мг ванилина (примесь H), растворяют в 1 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора этанолом безводным до метки.

Примечание

Примесь А (β-кариофиллен): (1R,4E,9S)-4,11,11-триметил-8-метилиденбицикло7.2.0]ундец-4-ен [87-44-5].

Примесь В (α-гумулен, α-кариофиллен): (1Е,4E,8Е)-2,6,6,9-тетраметилциклоундека-1,4,8-триен [6753-98-6].

Примесь С (β-кариофиллена оксид, β-кариофиллена эпоксид): (1R,4R,6R,10S)-4,12,12-триметил-9-метилиден-5-оксатрицикло[8.2.0.04,6]додекан [1139-30-6].

Примесь D: 4-(проп-2-ен-1-ил)фенол [501-92-8].

Примесь Е (эвгенола метиловый эфир, метилэвгенол): 1,2-диметокси-4-(проп-2-ен-1-ил)бензол [93-15-2].

Примесь F (цис-изоэвгенол): 2-метокси-4-[(1Z)-проп-1-ен-1-ил]фенол [5912-86-7].

Примесь G (транс-изоэвгенол): 2-метокси-4-[(1Е)-проп-1-ен-1-ил]фенол [5932-68-3].

Примесь Н (ванилин): 4-гидрокси-3-метоксибензальдегид [121-33-5].

Примесь I (ацетилэвгенол): [2-метокси-4-(проп-2-ен-1-ил)фенил]ацетат [93-28-7].

Примесь J: 1-(4-гидрокси-3-метоксифенил)проп-2-ен-1-он [2983-65-5].

Примесь К (транс-конифериловый альдегид): (2Е)-3-(4-гидрокси-3-метоксифенил)проп-2-еналь [20649-42-7].

Примесь L (дегидродиизоэвгенол): 4-[3-метил-5-(проп-2-ен-1-ил)-2,3-дигидро-1-бензофуран-2-ил]-2-метоксифенол.

Примесь М (дeгидродиэвгенол): 3,3′-диметокси-5,5′-ди(проп-2-ен-1-ил)[1,1′-бифенил]-2,2′-диол [4433-08-3].

Примесь Р: толуол [108-88-3].

Хроматографические условия

Колонка | кварцевая капиллярная 30 м × 0,25 мм, покрытая слоем поли(фенил)(50)[диметил](50)силоксана, 0,25 мкм;
Детектор | пламенно-ионизационный;
Газ-носитель | гелий для хроматографии;
Деление потока | 1:40;
Скорость потока | 1,0 мл/мин;
Объём пробы | 1 мкл.

Температурная программа

| Время, мин | Температура, °С
--- | --- | ---
Колонка | 0–2 | 80
| 2–27 | 80 → 280
| 27–47 | 280
Инжектор |  | 250
Детектор |  | 280

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы относительное время удерживания примеси H должно быть не менее 1,1.

Допустимое содержание примесей. Содержание примесей в веществе в процентах вычисляют согласно методу нормирования (ОФС «Хроматография»):

- любая другая примесь – не более 0,5 %;

- сумма примесей с относительным временем удерживания более 2,0 – не более 1,0 %;

- сумма всех примесей – не более 3,0 %.

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,05 площади эвгенола на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05 %).

Углеводороды

Растворяют 1 мл вещества в 5 мл натрия гидроксида раствора 8,5 %, помещают в колбу с притёртой крышкой, прибавляют 30 мл воды и сразу же исследуют. Раствор должен быть прозрачным, жёлтого цвета (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Сульфатная зола. Не более 0,1 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) вещества.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### ХРАНЕНИЕ

В герметично укупоренной упаковке, в защищённом от света месте.

* Приводится для информации

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.2.7.0013 Эдетиновая кислота

Эдетовая кислота
Аcidum еdeticum

Вводится впервые

С10Н16N2О8 [60-00-4] | М.м. 292,24

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

2,2′,2′′,2′′′-(Этан-1,2-диилдинитрило)тетрауксусная кислота.

Cодержит не менее 98,0 % и не более 101,0 % эдетиновой кислоты С10Н16N2О8.

##### СВОЙСТВА

Описание. Белый или почти белый порошок или бесцветные кристаллы.

Растворимость. Практически нерастворим в воде и спирте 96 %.

* Растворяется в разбавленных растворах щелочей.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в средней инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции по положению полос поглощения должен соответствовать спектру образца сравнения.

- Субстанцию предварительно высушивают при температуре 100–105 °С в течение 2 ч.

- Образец сравнения. Растворяют 0,25 г натрия эдетата в 5 мл воды, добавляют 1,0 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 %, фильтруют, остаток промывают 2 порциями по 5 мл воды и сушат при температуре 100–105 °С в течение 2 ч.

2. Качественная реакция

- Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 г субстанции, растворяют в 20,0 мл натрия гидроксида растворе 8,5 % и доводят объём раствора водой до метки.

- К 5 мл воды прибавляют 0,1 мл аммония тиоцианата раствора 7,6 % и 0,1 мл железа(III) хлорида раствора 10,5 %, перемешивают. Раствор окрашивается в красный цвет. К полученному раствору прибавляют 0,5 мл испытуемого раствора, раствор должен окраситься в жёлтый цвет.

3. Качественная реакция. К 10,0 мл субстанции, полученного в испытании «Идентификация 2. Качественная реакция», прибавляют 0,5 мл кальция хлорида раствора 7,35 %, подщелачивают по лакмусовой бумаге красной аммиака раствором 2 М и добавляют 3,0 мл аммония оксалата раствора 4 %; не должен образовываться осадок.

##### ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность раствора. Испытуемый раствор, полученный в испытании «Идентификация 2. Качественная реакция», должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень опалесценции (мутности) жидкостей»).

Цветность раствора. Испытуемый раствор, полученный в испытании «Идентификация 2. Качественная реакция», должен быть бесцветным (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

Примесь А. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Все растворы защищают от света.

Подвижная фаза (ПФ). В мерной колбе вместимостью 1000 мл растворяют 50 мг железа(III) сульфата пентагидрата в 50 мл серной кислоты раствора 0,5 М и добавляют 750 мл воды для хроматографии. Доводят значение рН натрия гидроксида раствором 1 М или серной кислоты раствором 0,5 М до 1,5, прибавляют 20 мл этиленгликоля и доводят объём раствора водой для хроматографии до метки.

Растворитель. В мерной колбе вместимостью 1000 мл растворяют 10,0 г железа(III) сульфата пентагидрата в 20 мл серной кислоты раствора 0,5 М и добавляют 780 мл воды. Доводят значение рН натрия гидроксида раствором 1 М до 2,0 и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. В мерной колбе вместимостью 25 мл растворяют 0,1 г (точная навеска) субстанции в 1,0 мл натрия гидроксида растворе 1 М и доводят объём раствора растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерной колбе вместимостью 100 мл растворяют 40 мг нитрилотриуксусной кислоты (примесь А) в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. Переносят 1,0 мл полученного раствора в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 0,1 мл испытуемого раствора и доводят объём раствора растворителем до метки.

Примечание

Примесь А: 2,2′,2′′-нитрилотриуксусная кислота [139-13-9].

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, углерод графитированный для хроматографии (1), 5 мкм;
Скорость потока | 1,0 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 273 нм;
Объём пробы | 20 мкл;
Время удерживания | 4-кратное время удерживания комплекса железа с примесью А.

Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор.

Время удерживания соединений. Комплекс железа с примесью А – 1 (около 5 мин), комплекс железа с эдетиновой кислотой – 2.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения:

- разрешение (RS) между пиками комплекса железа с примесью А и комплекса железа с эдетиновой кислотой должно быть не менее 7,0;

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика комплекса железа с примесью А должно быть не менее 50.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика комплекса железа с примесью А не должна превышать площадь пика комплекса железа с примесью А на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 %).

Хлориды. Не более 0,02 % (ОФС «Хлориды»). К 4,0 мл испытуемого раствора, полученного в испытании «Идентификация 2. Качественная реакция», прибавляют 8 мл азотной кислоты концентрированной и перемешивают в течение 10 мин. Образовавшийся осадок фильтруют и промывают фильтр водой в мерную колбу вместимостью 20 мл, доводят объём раствора водой до метки.

Сульфатная зола. Не более 0,2 % (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют 1 г (точная навеска) субстанции.

Железо. Не более 0,008 % (ОФС «Железо», метод 2).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 2,5 мл субстанции, полученного в испытании «Идентификация 2. Качественная реакция», доводят объём раствора водой до метки. К полученному раствору перед добавлением тиогликолевой кислоты прибавляют 0,25 г кальция хлорида и оставляют на 5 мин.

К эталонному раствору прибавляют 0,25 г кальция хлорида.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

##### КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Определение проводят методом титриметрии (ОФС «Титриметрия (титриметрические методы анализа)»).

Растворяют 0,25 г (точная навеска) субстанции в 2,0 мл натрия гидроксида раствора 8,5 %, доводят объём раствора водой до 300 мл, прибавляют 2 г гексаметилентетрамина и 2 мл хлористоводородной кислоты разведённой 7,3 % и титруют 0,1 М раствором цинка сульфата. Конечную точку титрования определяют с индикатором (50 мг ксиленолового оранжевого индикаторной смеси).

Параллельно проводят контрольный опыт.

1 мл 0,1 М раствором цинка сульфата соответствует 29,22 мг эдетиновой кислоты С10Н16N2О8.

##### ХРАНЕНИЕ

В защищённом от света месте.

* Приводится для информации.

## 3. Лекарственные препараты

### 3.5. Радиофармацевтические лекарственные препараты

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.3.5.0001 Аммоний (13N), раствор для инъекций

Аммоний (13N), раствор для инъекций
Ammoniae (13N) solutio pro injectionibus

Вводится впервые

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Стерильный раствор [13N]аммония.

Содержит не менее 90,0 % и не более 110,0 % от заявленной активности азота-13 на дату и время, указанные на этикетке.

##### СВОЙСТВА

Описание. Прозрачная бесцветная жидкость.

Период полураспада. (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. Гамма-спектрометрия (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). На гамма-спектре испытуемого раствора наиболее интенсивный пик гамма-излучения должен соответствовать значению энергии 0,511 МэВ, при достаточной эффективности детектора может наблюдаться суммарный пик с энергией 1,022 МэВ.

2. Период полураспада (раздел «Радионуклидная чистота»).

3. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на радиохроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме стандартного раствора аммиака (раздел «Радиохимическая чистота»).

##### ИСПЫТАНИЯ

pH. От 5,5 до 8,5 (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

Алюминий. Не более 0,0002 % (2 ppm).

Допускается выпуск препарата к применению до завершения испытания.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 мл испытуемого препарата и доводят водой до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 мл алюминия стандартного раствора 2 мкг/мл и доводят объём раствора водой до метки.

В одну из двух пробирок с внутренним диаметром около 12 мм помещают 1 мл ацетатного буферного раствора рН 4,6 и 2 мл испытуемого раствора, в другую пробирку помещают 1 мл ацетатного буферного раствора pH 4,6 и 2 мл стандартного раствора, прибавляют в обе пробирки по 0,05 мл хромазурола S раствора 1 %

Через 3 мин окраска испытуемого раствора не должна быть интенсивней окраски стандартного раствора.

Испытание применяется, если наличие указанных веществ обусловлено технологией получения.

##### РАДИОНУКЛИДНАЯ ЧИСТОТА

Допускается выпуск препарата к применению до завершения испытаний.

Период полураспада. От 9 до 11 мин. (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

Гамма-излучающие примеси. Не более 1,0 % от общей активности. Определение проводят методом гамма-спектрометрии (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»).

Образец препарата выдерживают в течение 2 ч и определяют гамма-спектр на наличие радионуклидных примесей, которые следует, по возможности, идентифицировать и количественно определить.

##### РАДИОХИМИЧЕСКАЯ ЧИСТОТА

[13N]Аммоний. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Допускается выпуск препарата к применению до завершения испытания.

Подвижная фаза (ПФ). Азотной кислоты раствор 0,002 М.

Испытуемый раствор. Препарат.

Стандартный раствор аммиака. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл аммиака раствора 2 М и доводят объём раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка | 40 × 4,0 мм, катионообменная смола, 10 мкм;
Температура колонки | 20–30 °С;
Скорость потока | 2,0 мл/мин;
Детекторы | радиоактивности и кондуктометрический;
Объём пробы | 20 мкл.

Хроматографируют стандартный раствор аммиака и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы

Время удерживания основного пика на радиохроматограмме испытуемого раствора, полученной с использованием детектора радиоактивности, должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме стандартного раствора аммиака, полученной с использованием кондуктометрического детектора.

Допустимое содержание:

- [13N]аммоний – не менее 99,0 % общей активности, обусловленной азотом-13.

Стерильность. Испытуемый раствор должен быть стерильным (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»). Допускается выпуск препарата к применению до завершения испытания.

Бактериальные эндотоксины. Менее 175/V МЕ/мл, где V – объём, соответствующий максимальной рекомендованной дозе в миллилитрах (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»). Допускается выпуск препарата к применению до завершения испытания.

##### АКТИВНОСТЬ ИЛИ ОБЪЁМНАЯ АКТИВНОСТЬ

Определение проводят в соответствии с ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

##### МАРКИРОВКА

На этикетке упаковки, помимо данных в соответствии с ОФС Радиофармацевтические лекарственные препараты», указывают: «Для диагностических целей».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.3.5.0002 Галлия (68Ga) хлорид, раствор для радиоактивных меток

Галлия (68Ga) хлорид, раствор для радиоактивных меток
Gallii (68Ga) chloridi solutio ad radio-signandum

Вводится впервые

68GaCl3 | М.м. 174,29

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Раствор, содержащий галлий-68 в форме трихлорида [68Ga]галлия в разведённой хлористоводородной кислоте.

Содержит не менее 90,0 % и не более 110,0 % от заявленной активности галлия-68 на дату и время, указанные на этикетке.

Может содержать ацетон.

Должна быть предусмотрена процедура по снижению уровня
германия-68 ниже 0,001 %, от общей активности.

##### СВОЙСТВА

Описание. Прозрачная бесцветная жидкость.

Период полураспада (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. Гамма-спектрометрия (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). На гамма-спектре испытуемого раствора основные пики гамма-излучения галлия-68 должны соответствовать значениям энергии 0,511 МэВ и 1,077 МэВ. Могут наблюдаться: суммарный пик при 1,022 МэВ и пик при 1,883 МэВ.

2. Период полураспада. От 62 до 74 мин (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

3. pH (раздел «Испытания»).

4. Ионообменная жидкостная колоночная хроматография (ОФС «Хроматография»). К объёму испытуемого раствора, выбранному между 20 мкл и 100 мкл так, чтобы обеспечить измерение активности с достаточной точностью, прибавляют 1,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,01 М. Наносят полученный раствор на колонку, содержащую катионообменную смолу сильно-кислотную (протонированную форму), продавливают через колонку 5 мл воздуха и собирают элюат. Определяют активность элюата (А1). Пропускают через колонку 1,0 мл хлористоводородной кислоты раствор 0,1 М. С помощью подходящего детектора (дозкалибратора) определяют активность элюата (А2). Пропускают через колонку 1,0 мл смеси хлористоводородная кислота концентрированная—ацетон 2:98, продавливают через колонку 5 мл воздуха и собирают элюат. Определяют относительную активность элюата (А3) и остаточную активность колонки (А4).

- Относительную активность элюата \($A3$\) в процентах вычисляют по формуле:

- Относительная активность элюата \($A3$\) должна быть не менее 90 % общей активности, нанесённой на колонку.

5. Качественная реакция. К 0,1 мл серебра нитрата раствора 0,1 М прибавляют 50 мкл испытуемого раствора для радиоактивных меток. Должен образоваться белый осадок.

##### ИСПЫТАНИЯ

pH. Не более 2,0 (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

Железо. Не более 10 мкг/ГБк. Определение проводят методом ААС (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Испытуемый раствор. Разбавляют испытуемый раствор для радиоактивных меток азотной кислоты 0,05 М раствором до активности 2,5 МБк/мл.

Калибровочные растворы. Разводят железа стандартный раствор 20 мкг/мл азотной кислоты 0,05 М раствором.

Раствор модификатора. Магния нитрата раствор 14 г/л.

Условия испытания

Источник излучения | лампа с полым катодом для определения железа;
Длина волны | 248,3 нм;
Атомизация | графитовая печь, газ – аргон;
Вводимый объём | 20 мкл испытуемого и калибровочных растворов и 1 мкл раствора модификатора;
Температура инжектора | 20 °С.

Программа печи

Стадия | Конечная температура, °С | Время нарастания, с | Время удерживания, с | Скорость потока газа, мл/мин
--- | --- | --- | --- | ---
Высушивание | 110 | 1 | 30 | 250
Высушивание | 130 | 15 | 30 | 250
Пиролиз | 1400 | 10 | 20 | 250
Атомизация | 2100 | 0 | 5 | 0
Очистка | 2450 | 1 | 3 | 250

Допускается выпуск раствора к применению до завершения испытания.

Цинк. Не более 10 мкг/ГБк. Определение проводят методом ААС (ОФС «Атомно-абсорбционная спектрометрия»).

Испытуемый раствор. Разбавляют испытуемый раствор для радиоактивных меток азотной кислоты 0,05 М раствором до активности 50 МБк/мл.

Калибровочные растворы. Разводят цинка стандартный раствор 10 мкг/мл азотной кислоты 0,05 М раствором.

Условия испытания

Источник излучения | лампа с полым катодом для определения цинка;
Длина волны | 213,9 нм;
Атомизация | воздушно-ацетиленовое пламя.

Допускается выпуск раствора к применению до завершения испытания.

##### РАДИОНУКЛИДНАЯ ЧИСТОТА

Галлий-68. Не менее 99,9 % от общей активности. Определение проводят методом гамма-спектрометрии (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»).

На гамма-спектре испытуемого раствора, пики гамма-излучения соответствующие значениям энергии, отличными от 0,511 МэВ, 1,077 МэВ, 1,022 МэВ и 1,883 МэВ, должны составлять не более 0,1 % от общей активности.

Германий-68 и другие гамма-излучающие примеси. Не более 0,001 % от общей активности. Испытание применяется, если наличие указанных веществ обусловлено технологией получения. Допускается выпуск раствора к применению до завершения испытания. Определение проводят методом гамма-спектрометрии (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»).

Определяют количества галлия-68, германия-68 и других радионуклидных примесей с периодом полураспада более 5 ч. Для количественного определения выдерживают испытуемый раствор в течение не менее 48 ч для снижения галлия-68 до необходимого уровня, позволяющего определить примеси.

Примечание

Примесь A (германий-68): [68Ge]германий [15756-77-1].

##### РАДИОХИМИЧЕСКАЯ ЧИСТОТА

[68Ga]Галлий(III)-ион. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля, стекловолокнистая подложка.

Подвижная фаза (ПФ). Аммония ацетат раствор 1,0 М—метанол 50:50.

Испытуемый раствор. Разбавляют испытуемый раствор для радиоактивных меток до подходящей концентрации хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М.

Стандартный раствор А. К 0,2 мл испытуемого раствора прибавляют 0,3 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М. Используют в течение 30 мин после приготовления.

Стандартный раствор Б. К 1,0 мл испытуемого раствора прибавляют 1,0 мл пентетовой кислоты раствора 10 г/л в натрия гидроксида растворе 0,1 М. Используют в течение 30 мин после приготовления.

На линии старта двух разных пластинок наносят по 5 мкл испытуемого и стандартных растворов А и Б. Пластинки с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную в течение 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт не менее 10 см от линии старта, их вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и определяют распределение активности с помощью подходящего детектора.

Фактор удерживания. [68Ga]галлий(III)-ион – не более 0,2.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме стандартного раствора А фактор удерживания основного пика должен быть не более 0,1.

На хроматограмме стандартного раствора Б фактор удерживания основного пика должен быть не более 0,7.

Допустимое содержание:

- [68Ga]галлий(III)-ион – не менее 95,0 % от общей активности обусловленной галлием-68.

Стерильность. Испытуемый раствор должен быть стерильным, если он предназначен для применения в производстве или изготовлении парентеральных лекарственных препаратов без последующей стерилизации. (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»). Допускается выпуск раствора к применению до завершения испытания.

Бактериальные эндотоксины. Менее 175/V МЕ/мл, где V − максимальная рекомендуемая доза (максимальный рекомендуемый объём) в миллилитрах, если раствор предназначен для применения в производстве или изготовлении парентеральных лекарственных препаратов без последующего удаления бактериальных эндотоксинов (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»). Допускается выпуск раствора к применению до завершения испытания.

##### АКТИВНОСТЬ ИЛИ ОБЪЁМНАЯ АКТИВНОСТЬ

Определение проводят в соответствии с ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

##### МАРКИРОВКА

На этикетке упаковки, помимо данных в соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты», указывают:

- «Не является лекарственным препаратом. Предназначен для приготовления/изготовления радиофармацевтических лекарственных препаратов»;

- максимально допустимый для приготовления разовой объём дозы;

- концентрацию ацетона или других органических растворителей, если применимо;

- концентрацию хлористоводородной кислоты, если применимо.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.3.5.0003 Йобенгуан (123I), раствор для инъекций

Йобенгуан (123I), раствор для инъекций
Iobenguani (123I) solutio pro injectionibus

Взамен ВФС 42-3669-00

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Стерильный раствор N-[(3-[123I]иодфенил)метил]гуанидина или его солей.

Содержит не менее 90,0 % и не более 110,0 % от заявленной активности йода-123 на дату и время, указанные на этикетке.

Может содержать подходящий буферный раствор, подходящий катализатор присоединения радиоактивной метки, например, ионы меди, подходящий стабилизатор, например, аскорбиновую кислоту и консерванты.

Удельная активность. Не менее 10 ГБк йода-123 в грамме йобенгуана основания.

Период полураспада (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»)

##### СВОЙСТВА

Описание. Прозрачная бесцветная или слегка желтоватая жидкость.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. Гамма-спектрометрия (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). На гамма-спектре испытуемого раствора основной пик гамма-излучения йода-123 должен соответствовать значению энергии 0,159 МэВ.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на радиохроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика на хроматограмме раствора стандартного образца йобенгуана сульфата (раздел «Радиохимическая чистота»).

##### ИСПЫТАНИЯ

pH. От 3,5 до 8,0 (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

Удельная активность. Рассчитывается на основе результатов, полученных в испытании «Радиохимическая чистота». Содержание йобенгуана сульфата определяют по площадям пиков, соответствующих йобенгуану на хроматограммах испытуемого раствора и раствора стандартного образца йобенгуана сульфата. Рассчитывают концентрацию в пересчёте на основание йобенгуана, с учётом поправочного коэффициента 0,85 (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

##### РАДИОНУКЛИДНАЯ ЧИСТОТА

Радионуклиды, отличные от йода-123. Не более 0,35 % от общей активности. Определение проводят методом гамма-спектрометрии и рентгеновской спектрометрии. (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). Допускается выпуск препарата к применению до завершения испытания.

Определяются относительные количества присутствующих йода-125, теллура-121 и других радионуклидных примесей. Для их определения испытуемый препарат выдерживают в течение достаточного времени, чтобы йод-123 распался до уровня, позволяющего обнаружить радионуклидные примеси. Не должны обнаруживаться радионуклиды с периодом полураспада, превышающим период полураспада йода-125.

Примечание

Примесь B (йод-125): [125I]иод.

Примесь C (теллур-121): [121Te]теллур.

##### РАДИОХИМИЧЕСКАЯ ЧИСТОТА

[123I]Йобенгуан. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Раствор аммония нитрата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 4,0 г аммония нитрата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Подвижная фаза (ПФ). Раствор аммония нитрата—аммиака раствор 2 М—метанол 40:80:1080.

Испытуемый раствор. Препарат.

Раствор стандартного образца йобенгуана сульфата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 10,0 мг стандартного образца йобенгуана сульфата, растворяют в 25,0 мл ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Раствор натрия йодида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г натрия йодида, растворяют в ПФ и доводят объём раствора ПФ до метки.

Примечание

Примесь А: [123I]иодид [69239-56-1].

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки | 25 °С;
Скорость потока | 1,0 мл/мин;
Детектор | подходящий детектор для определения радиоактивности и спектрофотометрический, 254 нм, оснащённый проточной ячейкой;
Объём пробы | 10 мкл.

Хроматографируют раствор натрия йодида, раствор стандартного образца йобенгуана сульфата и испытуемый раствор.

Допустимое содержание:

- [123I]йобенгуан – не менее 95,0 % от общей активности, обусловленной йодом-123;

- примесь А – не более 4,0 % от общей активности, обусловленной йодом-123;

- другие примеси – не более 1,0 % от общей активности, обусловленной йодом-123.

Стерильность. Препарат должен быть стерильным (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»). Допускается выпуск препарата к применению до завершения испытания.

Бактериальные эндотоксины. Менее 175/V МЕ/мл, где V − максимальная рекомендуемая доза (максимальный рекомендуемый объём) в миллилитрах (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

##### АКТИВНОСТЬ ИЛИ ОБЪЁМНАЯ АКТИВНОСТЬ

Определение проводят в соответствии с ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

##### МАРКИРОВКА

На этикетке упаковки, помимо данных в соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты», указывают удельную активность выраженную в ГБк йода-123 на грамм основания йобенгуана.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.3.5.0004 Лютеций (177Lu), раствор для радиоактивных меток

Лютеций (177Lu), раствор для радиоактивных меток
Lutetii (177Lu) solutio ad radio-signandum

Вводится впервые

177Lu3+ | М.м. 176,94

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Раствор, содержащий лютеций-177 в форме [177Lu]лютеций(III)-иона в разведённой хлористоводородной кислоте.

Содержит не менее 90,0 % и не более 110,0 % от заявленной активности лютеция-177 на дату и время, указанные на этикетке.

##### СВОЙСТВА

Описание. Прозрачная бесцветная жидкость.

Период полураспада. (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. Гамма-спектрометрия (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). На гамма-спектре испытуемого раствора основной пик гамма-излучения лютеция-177 должен соответствовать значению энергии 0,208 МэВ. Допускается пик с энергией 0,113 МэВ.

2. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»). На радиохроматограмме испытуемого раствора фактор удерживания (Rf) основного пика должен составлять от 0,4 до 0,7 (раздел «Радиохимическая чистота»).

##### ИСПЫТАНИЯ

pH. От 1,0 до 2,0 (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

Лютеций. Определение проводят методом АЭС-ИСП (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой») для получения данных об удельной активности.

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 4,83 г азотной кислоты, свободной от тяжёлых металлов, доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор. Лютеция стандартный раствор 20 мкг/мл.

Испытуемый раствор. Лютеция (177Lu) раствор для радиоактивных меток разводят растворителем до объёмной активности около 50 МБк/мл.

Калибровочные растворы. Готовят калибровочные растворы путём разведения стандартного раствора растворителем.

Длина волны. 261,542 нм.

Медь. Не более 1,0 мкг/ГБк. Определение проводят методом АЭС-ИСП (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой»).

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 4,83 г азотной кислоты, свободной от тяжёлых металлов, доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор. Меди стандартный раствор 10 мкг/мл.

Испытуемый раствор. Лютеция (177Lu) раствор для радиоактивных меток разводят растворителем до объёмной активности около 50 МБк/мл.

Калибровочные растворы. Готовят калибровочные растворы путём разведения стандартного раствора растворителем.

Длина волны. 327,393 нм.

Железо. Не более 0,5 мкг/ГБк. Определение проводят
методом АЭС-ИСП (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой»).

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 4,83 г азотной кислоты, свободной от тяжёлых металлов, доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор. Железа стандартный раствор 20 мкг/мл.

Испытуемый раствор. Лютеция (177Lu) раствор для радиоактивных меток разводят растворителем до объёмной активности около 50 МБк/мл.

Калибровочные растворы. Готовят калибровочные растворы путём разведения стандартного раствора растворителем.

Длина волны. 238,204 нм.

Свинец. Не более 0,5 мкг/ГБк. Определение проводят
методом АЭС-ИСП (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой»).

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 4,83 г азотной кислоты, свободной от тяжёлых металлов, доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор. Свинца стандартный раствор 10 мкг/мл.

Испытуемый раствор. Лютеция (177Lu) раствор для радиоактивных меток разводят растворителем до объёмной активности около 50 МБк/мл.

Калибровочные растворы. Готовят калибровочные растворы путём разведения стандартного раствора растворителем.

Длина волны. 220,353 нм.

Цинк. Не более 1,0 мкг/ГБк. Определение проводят методом АЭС-ИСП (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия с индуктивно-связанной плазмой»).

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 4,83 г азотной кислоты, свободной от тяжёлых металлов, доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор. Цинка стандартный раствор 10 мкг/мл.

Испытуемый раствор. Лютеция (177Lu) раствор для радиоактивных меток разводят растворителем до объёмной активности около 50 МБк/мл.

Калибровочные растворы. Готовят калибровочные растворы путём разведения стандартного раствора растворителем.

Длина волны. 213,855 нм.

##### РАДИОНУКЛИДНАЯ ЧИСТОТА

Лютеций-177. Не менее 99,9 % от общей активности. Определение проводят методом гамма-спектрометрии (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). Определяют относительное содержание примеси А, примеси B и других присутствующих радионуклидных примесей.

Допустимое содержание радионуклидных примесей:

- общая активность примеси B должна быть не более 0,1 %;

- общая активность примеси A должна быть не более 0,07 %;

- общая активность радионуклидных примесей отличных от
  примесей А и В должна быть не более 0,01 %.

Примечание

Примесь А (лютеций-177m): [177mLu]лютеций [378765-68-5].

Примесь В (иттербий-175): [175Yb]иттербий [14041-44-2].

##### РАДИОХИМИЧЕСКАЯ ЧИСТОТА

[177Lu]лютеций(III)-ион. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка из стекловолокна со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Натрия хлорида раствор 0,9 %, доведённый до рН 2,30 хлористоводородной кислоты раствором 2 М.

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,1 г пентетовой кислоты, растворяют в натрия гидроксида растворе 0,1 М и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. Лютеция (177Lu) раствор для радиоактивных меток.

Раствор сравнения. Смешивают 1 мл испытуемого раствора и 0,4 мл растворителя.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора и раствора сравнения. Пластинку с нанесёнными пробами, сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей в токе холодного воздуха.

Детектирование. Используют подходящий детектор для определения распределения активности.

На радиохроматограмме испытуемого раствора фактор
удерживания (Rf):

- [177Lu]лютеций(III)-иона – от 0,4 до 0,7;

- [177Lu]лютеция пентетата – минимум 0,9.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения должны обнаруживаться две разделённые зоны адсорбции.

Допустимое содержание:

- [177Lu]лютеций(III)-ион: не менее 99,0 % от общей активности, обусловленной лютецием-177.

Стерильность. Испытуемый раствор должен быть стерильным (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»), если раствор предназначен для применения в производстве или изготовлении парентеральных лекарственных препаратов без последующей стерилизации. Допускается выпуск раствора к применению до завершения испытания

Бактериальные эндотоксины. Менее 175/V МЕ/мл, где V − максимальная рекомендуемая доза (максимальный рекомендуемый объём) в миллилитрах (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»), если раствор предназначен для применения в производстве или изготовлении парентеральных лекарственных препаратов без последующего удаления бактериальных эндотоксинов.

##### АКТИВНОСТЬ ИЛИ ОБЪЁМНАЯ АКТИВНОСТЬ

Определение проводят в соответствии с ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

##### МАРКИРОВКА

На этикетке упаковки, помимо данных в соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты», указывают: «Не является лекарственным препаратом. Предназначен для приготовления/изготовления радиофармацевтических лекарственных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.3.5.0005 Натрия йодид (123I), раствор для инъекций

Натрия йодид (123I), раствор для инъекций

Natrii iodidi (123I) solutio pro injectionibus

Взамен ФС 42-3886-99

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Стерильный раствор, содержащий йод-123 в виде [123I]иодида натрия.

Cодержит не менее 90,0 % и не более 110,0 % от заявленной активности йода-123 на дату и время, указанные на этикетке.

Может содержать натрия тиосульфат или другой подходящий восстановитель. Может содержать подходящие буферные растворы.

Йод-123 получают протонным облучением ксенона, обогащённого ксеноном-124 (не менее 98 %), с последующим распадом непосредственно образовавшегося ксенона-123, и распадом цезия-123. Йодид-носитель не добавляется.

##### СВОЙСТВА

Описание. Прозрачная бесцветная жидкость.

Период полураспада. (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. Гамма-спектрометрия. (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). На гамма-спектре препарата основной пик
   гамма-излучения йода-123 должен соответствовать значению энергии 0,159 МэВ, который сопровождается пиком с энергией 0,027 МэВ.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на радиохроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика йодид-иона на хроматограмме раствора калия йодида (раздел «Радиохимическая чистота»).

##### ИСПЫТАНИЯ

pH. От 7,0 до 7,5 (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

##### РАДИОНУКЛИДНАЯ ЧИСТОТА

Йод-123. Не менее 99,65 % от общей активности. Определение проводят методом гамма-спектрометрии (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). Допускается выпуск препарата к применению до завершения испытания.

Определяются относительные количества присутствующих йода-123, йода-125, теллура-121 и других радионуклидных примесей. Для определения теллура-121 и йода-125 препарат выдерживают в течение достаточного времени, чтобы йод-123 распался до уровня, позволяющего обнаружить радионуклидные примеси. Не должны обнаруживаться радионуклиды с периодом полураспада, превышающим период полураспада йода-125.

##### РАДИОХИМИЧЕСКАЯ ЧИСТОТА

[123I]Йодид. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 5,85 г натрия хлорида в 1000 мл воды, прибавляют 0,65 мл октиламина, доводят значение рН фосфорной кислотой разведённой 10 % до 7,0, прибавляют 50 мл ацетонитрила и перемешивают полученный раствор.

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г калия йодида, 0,2 г калия йодата и 1,0 г натрия гидрокарбоната, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. Смешивают равные объёмы растворителя и препарата. При необходимости препарат предварительно разводят натрия гидроксида раствором 0,05 М до подходящей активности.

Раствор калия йодида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,62 мг калия йодида, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,45 мг калия йодата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. Смешивают равные объёмы полученного раствора и раствора калия йодида.

Примечание

Примесь А: [123I]иодат-ион.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки | 20–30 °С;
Скорость потока | 1,5 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм и детектор радиоактивности, соединённые последовательно;
Объём пробы | 20 мкл;
Время хроматографирования | 12 мин.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор калия йодида и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Йодид-ион – 1 (около 5 мин); йодат-ион – от 0,2 до 0,3.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы, полученной с использованием спектрофотометрического детектора, разрешение (RS) между пиками йодат-иона и йодид-иона должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание:

- [123I]йодид – не менее 95,0 % от общей активности.

Стерильность. Препарат должен быть стерильным (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»). Допускается выпуск препарата к применению до завершения испытания.

##### АКТИВНОСТЬ ИЛИ ОБЪЁМНАЯ АКТИВНОСТЬ

Определение проводят в соответствии с ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

##### МАРКИРОВКА

На этикетке упаковки, помимо данных в соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты», указывают содержание вспомогательных веществ.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.3.5.0006 Натрия йодид (123I), раствор для радиоактивных меток

Натрия йодид (123I), раствор для радиоактивных меток
Natrii iodidi (123I) solutio ad radio-signandum

Взамен ФС 42-2710-96

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Сильнощелочной раствор, содержащий йод-123 в виде [123I]иодида натрия.

Содержит не менее 90,0 % и не более 110,0 % от заявленной активности йода-123 на дату и время, указанные на этикетке.

Йод-123 получают протонным облучением ксенона, обогащённого
ксеноном-124 с последующим распадом непосредственно образовавшегося ксенона-123, и распадом цезия-123. Йодид-носитель или восстановители не добавляются.

##### СВОЙСТВА

Описание. Прозрачная бесцветная жидкость.

Период полураспада (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. Гамма-спектрометрия (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). На гамма-спектре испытуемого раствора основной пик гамма-излучения йода-123 должен соответствовать значению энергии 0,159 МэВ, который сопровождается пиком с энергией 0,027 МэВ.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на радиохроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика йодид-йона на хроматограмме раствора калия йодида (раздел «Радиохимическая чистота»).

##### ИСПЫТАНИЯ

pH. Более 10 (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

##### РАДИОНУКЛИДНАЯ ЧИСТОТА

Йод-123. Не менее 99,7 % от общей активности. Определение проводят методом гамма-спектрометрии (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). Допускается выпуск раствора к применению до завершения испытания.

Определяются относительные количества присутствующих йода-123, йода-125, теллура-121 и других радионуклидных примесей. Для определения теллура-121 и йода-125 испытуемый раствор выдерживают в течение достаточного времени, чтобы йод-123 распался до уровня, позволяющего обнаружить радионуклидные примеси. Не должны обнаруживаться радионуклиды с периодом полураспада превышающим период полураспада йода-125.

Примечание

Примесь А (йод-125): [125I]иод [17144-19-3]

Примесь В (теллур-121): [121Te]теллур[14304-79-1].

##### РАДИОХИМИЧЕСКАЯ ЧИСТОТА

[123I]Йодид. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 5,85 г натрия хлорида в 1000 мл воды, прибавляют 0,65 мл октиламина, доводят значение рН фосфорной кислотой разведённой 10 % до 7,0, прибавляют 50 мл ацетонитрила и перемешивают полученный раствор.

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г калия йодида, 0,2 г калия йодата и 1,0 г натрия гидрокарбоната, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. Смешивают равные объёмы растворителя и раствора для радиоактивных меток. При необходимости раствор для радиоактивных меток предварительно разводят натрия гидроксида раствором 0,05 М до подходящей активности.

Раствор калия йодида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг калия йодида, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг калия йодата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. Смешивают равные объёмы полученного раствора и раствора калия йодида.

Примечание

Примесь С: [123I]иодат-ион.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки | 20–30 °С;
Скорость потока | 1,5 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм и детектор радиоактивности, соединённые последовательно;
Объём пробы | 20 мкл;
Время хроматографирования | 12 мин.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор калия йодида и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Йодид-ион – 1 (около 5 мин); йодат-ион – от 0,2 до 0,3.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы, полученной с использованием спектрофотометрического детектора, разрешение (RS) между пиками йодат-иона и йодид-иона должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание:

- [123I]йодид – не менее 95,0 % от общей активности.

Стерильность. Испытуемый раствор должен быть стерильным, если раствор предназначен для применения в производстве или изготовлении парентеральных лекарственных препаратов без последующей стерилизации (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»). Допускается выпуск раствора к применению до завершения испытания.

Бактериальные эндотоксины. Менее 175/V МЕ/мл, где V − максимальная рекомендуемая доза (максимальный рекомендуемый объём) в миллилитрах (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»), если раствор предназначен для применения в производстве или изготовлении парентеральных лекарственных препаратов без последующего удаления бактериальных эндотоксинов. Допускается выпуск раствора к применению до завершения испытания.

##### АКТИВНОСТЬ ИЛИ ОБЪЁМНАЯ АКТИВНОСТЬ

Определение проводят в соответствии с ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

##### МАРКИРОВКА

На этикетке упаковки, помимо данных в соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты», указывают:

- метод получения йода-123;

- наличие и количество вспомогательных веществ (при их наличии);

- «Не является лекарственным препаратом. Предназначен для приготовления/изготовления радиофармацевтических лекарственных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.3.5.0007 Натрия йодид (131I), раствор для инъекций

Натрия йодид (131I), раствор для инъекций
Natrii iodidi (131I) solutio pro injectionibus

Взамен ФС 42-2690-96

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Стерильный раствор, содержащий йод-131 в виде [131I]иодида натрия.

Содержит не менее 90,0 % и не более 110,0 % от заявленной активности йода-131 на дату и время, указанные на этикетке.

Может содержать подходящий буферный раствор, натрия тиосульфат или другой подходящий восстановитель.

Йод-131 получают нейтронным облучением теллура или путём химического выделения из продуктов деления урана.

##### СВОЙСТВА

Описание. Прозрачная бесцветная жидкость.

Период полураспада (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. Гамма-спектрометрия. (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). На гамма-спектре испытуемого раствора основной пик гамма-излучения йода-131 должен соответствовать значению энергии 0,365 МэВ.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на радиохроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика йодид-иона на хроматограмме раствора калия йодида (раздел «Радиохимическая чистота»).

##### ИСПЫТАНИЯ

pH. От 6,0 до 10,0 (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

Йодид. Не более 20 мкг в V, где V − максимальная рекомендуемая доза (максимальный рекомендуемый объём, используемый для приготовления одной дозы для пациента, в миллилитрах). Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 5,85 г натрия хлорида в 1000 мл воды, прибавляют 0,65 мл октиламина, доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 7,0, прибавляют 50 мл ацетонитрила и перемешивают полученный раствор.

Испытуемый раствор. Препарат.

Раствор калия йодида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,62 мг калия йодида, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и разводят водой до V максимальной рекомендуемой дозы в мл.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,45 мг калия йодата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и разводят водой до V максимальной рекомендуемой дозы в мл. Смешивают равные объёмы полученного раствора и раствора калия йодида.

Контрольный раствор. Раствор, содержащий по 2 мг/мл каждого из компонентов, кроме йодида.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки | 20–30 °С;
Скорость потока | 1,5 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм и детектор радиоактивности, подключённые последовательно;
Объём пробы | 20 мкл;
Время хроматографирования | 2,4-кратное от времени удерживания пика иодида.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор калия йодида, контрольный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Йодид-ион – 1 (около 5 мин); йодат-ион – от 0,2 до 0,3.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками йодат-иона и йодид-иона должно быть не менее 2,0. На хроматограмме контрольного раствора ни один из пиков не должен соответствовать времени удерживания, аналогичному времени удерживания йодид-иона.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора (спектрофотометрический детектор) площадь основного пика не должна превышать площадь пика йодид-иона на хроматограмме раствора калия йодида.

##### РАДИОНУКЛИДНАЯ ЧИСТОТА

Йод-131. Не менее 99,9 % от общей активности. Определение проводят методом гамма-спектрометрии (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). Определяются относительные количества присутствующих йода-130, йода-133, йода-135 и других радионуклидных примесей.

Примечание

Примесь A: [131I]иодат-ион.

Примесь В (йод-130): [130I]иод [14914-02-4].

Примесь C (йод-133): [133I]иод [14834-67-4].

Примесь D (йод-135): [135I]иод [14834-68-5].

Теллур и селен–75. Относительное содержание примесей теллура (121mTe, 121Te,123mTe, 125mTe,127mTe, 127Te,129m Te, 129Te) и селена-75 должно быть не более 0,01 % от активности йода-131 на дату и время, указанные на этикетке.

##### РАДИОХИМИЧЕСКАЯ ЧИСТОТА

Определение проводят одним из приведенных методов.

Метод 1. [131I]Йодид. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Йодид» со следующими изменениями.

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г калия йодида, 0,2 г калия йодата и 1,0 г натрия гидрокарбоната, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. Смешивают равные объёмы растворителя и препарата, предварительно разведенного натрия гидроксида раствором 0,05 М до подходящей активности.

Хроматографируют испытуемый раствор и раствор калия йодида. Измеряют распределение активности [131I]йодид-иона с помощью подходящего детектора.

Допустимое содержание:

- [131I]йодид: не менее 95,0% от общей активности.

Метод 2. [131I]Йодид. Определение проводят методом электрофореза (ОФС «Электрофорез»).

Бумага. Бумага для хроматографии.

Буферный раствор. В химическом стакане растворяют 3,30 г калия дигидрофосфата и 15,11 г динатрия гидрофосфата додекагидрата в воде, доводят значение рН до 7,00, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки

Испытуемый раствор. Препарат без разведения или разведённый водой до подходящей активности.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 г натрия гидрокарбоната, растворяют в воде, прибавляют 0,1 г калия йодида, 0,2 г калия йодата и доводят объём раствора водой до метки, перемешивают.

На линию старта полоски наносят 10 мкл стандартного раствора и после высушивания пятна на воздухе, в ту же точку, 5–10 мкл испытуемого раствора. После просушивания на воздухе полоску помещают в разделительную камеру прибора для электрофореза, содержащую буферный раствор в электродных секциях, стартовой линией в сторону катода, увлажняют буферным раствором, прибор закрывают, включают источник питания (градиент потенциала 16 В/см). Разделение проводят при охлаждении камеры в течение 50 мин. После проведения электрофореза полоску извлекают из камеры, высушивают в вытяжном шкафу при комнатной температуре. Измеряют распределение активности от всей электрофореграммы с помощью подходящего детектора.

Допустимое содержание:

- [131I]йодид: не менее 95,0 % от общей активности.

Стерильность. Испытуемый препарат должен быть стерильным (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»). Допускается выпуск препарата к применению до завершения испытания.

##### АКТИВНОСТЬ ИЛИ ОБЪЁМНАЯ АКТИВНОСТЬ

Определение проводят в соответствии с ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.3.5.0008 Натрия йодид (131I), раствор для приёма внутрь

Натрия йодид (131I), раствор для приёма внутрь
Natrii iodidi (131I) solutio peroralis

Вводится впервые

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Раствор, содержащий йод-131 в виде [131I]иодида натрия.

Содержит не менее 90,0 % и не более 110,0 % от заявленной активности йода-131 на дату и время, указанные на этикетке.

Может содержать подходящий буферный раствор, тиосульфат натрия или другой подходящий восстановитель.

Йод-131 получают нейтронным облучением теллура или путём химического выделения из продуктов деления урана.

##### СВОЙСТВА

Описание. Прозрачная бесцветная жидкость.

* Период полураспада (*ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. Гамма-спектрометрия (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). На гамма-спектре испытуемого раствора основной пик гамма-излучения йода-131 должен соответствовать значению энергии 0,365 МэВ.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на радиохроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика йодид-иона на хроматограмме раствора калия йодида (раздел «Радиохимическая чистота»).

##### ИСПЫТАНИЯ

pH. От 7,0 до 10,0 (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

Йодид. Не более 20 мкг в V, где V − максимальная рекомендуемая доза (максимальный рекомендуемый объём, используемый для приготовления одной дозы для пациента, в миллилитрах). Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 5,85 г натрия хлорида в 1000 мл воды, прибавляют 0,65 мл октиламина, доводят значение рН фосфорной кислотой концентрированной до 7,0, прибавляют 50 мл ацетонитрила и перемешивают полученный раствор.

Испытуемый раствор. Препарат.

Раствор калия йодида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,62 мг калия йодида, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и разводят водой до V максимальной рекомендуемой дозы в мл.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,45 мг калия йодата, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и разводят
водой до V максимальной рекомендуемой дозы в мл. Смешивают равные объёмы полученного раствора и раствора калия йодида.

Контрольный раствор. Раствор, содержащий по 2 мг/мл каждого из компонентов, кроме йодида.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки | 20–30 °С;
Скорость потока | 1,5 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 220 нм и детектор радиоактивности, подключённые последовательно;
Объём пробы | 20 мкл;
Время хроматографирования | 2,4-кратное от времени удерживания пика иодида.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор калия йодида, контрольный раствор и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Йодид-ион – 1 (около 5 мин); йодат-ион – от 0,2 до 0,3.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками йодат-иона и йодид-иона должно быть не менее 2,0. На хроматограмме контрольного раствора ни один из пиков не должен соответствовать времени удерживания, соответствующему времени удерживания йодид-иона.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора (спектрофотометрический детектор) площадь основного пика не должна превышать площадь соответствующего пика йодид-иона на хроматограмме раствора калия йодида.

##### РАДИОНУКЛИДНАЯ ЧИСТОТА

Йод-131. Не менее 99,9 % от общей активности. Определение проводят методом гамма-спектрометрии (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). Определяются относительные количества присутствующих йода-130, йода-133, йода-135 и других радионуклидных примесей.

Примечание

Примесь A: [131I]иодат-ион.

Примесь В (йод-130): [130I]иод [14914-02-4].

Примесь C (йод-133): [133I]иод [14834-67-4].

Примесь D (йод-135): [135I]иод [14834-68-5].

##### РАДИОХИМИЧЕСКАЯ ЧИСТОТА

Определение проводят одним из приведённых методов.

Метод 1. [131I]Йодид. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Йодид» со следующими изменениями.

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г калия йодида, 0,2 г калия йодата и 1,0 г натрия гидрокарбоната, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. Смешивают равные объёмы растворителя и препарата, предварительно разведённого натрия гидроксида раствором 0,05 М до подходящей активности.

Хроматографируют испытуемый раствор и раствор калия йодида. Измеряют распределение активности [131I]йодид-иона с помощью подходящего детектора.

Допустимое содержание:

- [131I]йодид: не менее 95,0 % от общей активности.

Метод 2. [131I]Йодид. Определение проводят методом электрофореза (ОФС «Электрофорез»).

Бумага. Бумага для хроматографии.

Буферный раствор. В химическом стакане растворяют 3,30 г калия дигидрофосфата и 15,11 г динатрия гидрофосфата додекагидрата в воде, доводят значение рН до 7,00, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. Препарат без разведения или разведённый водой до подходящей активности.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 г натрия гидрокарбоната, растворяют в воде, прибавляют 0,1 г калия йодида, 0,2 г калия йодата и доводят объём раствора водой до метки, перемешивают.

На линию старта полоски наносят 10 мкл стандартного раствора и после высушивания пятна на воздухе, в ту же точку, 5–10 мкл испытуемого раствора. После просушивания на воздухе полоску помещают в разделительную камеру прибора для электрофореза, содержащую буферный раствор в электродных секциях, стартовой линией в сторону катода, увлажняют буферным раствором, прибор закрывают, включают источник питания (градиент потенциала 16 В/см). Разделение проводят при охлаждении камеры в течение 50 мин. После проведения электрофореза полоску извлекают из камеры, высушивают в вытяжном шкафу при комнатной температуре. Измеряют распределение активности от всей электрофореграммы с помощью подходящего детектора.

Допустимое содержание:

- [131I]йодид: не менее 95,0 % от общей активности.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

##### АКТИВНОСТЬ ИЛИ ОБЪЁМНАЯ АКТИВНОСТЬ

Определение проводят в соответствии с ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.3.5.0009 Натрия йодид (131I), раствор для радиоактивных меток

Натрия йодид (131I), раствор для радиоактивных меток
Natrii iodidi (131I) solutio ad radio-signandum

Взамен ФС 42-2679-96

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Сильнощелочной раствор, содержащий йод-131 в виде [131I]иодида натрия.

Содержит не менее 90,0 % и не более 110,0 % от заявленной активности йода-131 на дату и время, указанные на этикетке.

Йод-131 получают нейтронным облучением теллура, или путём химического выделения из продуктов деления урана.

Не содержит восстановителей.

##### СВОЙСТВА

Описание. Прозрачная бесцветная жидкость.

Период полураспада (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. Гамма-спектрометрия (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). На гамма-спектре испытуемого раствора основной пик гамма-излучения йода-131 должен соответствовать значению энергии 0,365 МэВ.

2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на радиохроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика йодид-иона на хроматограмме раствора калия йодида (раздел «Радиохимическая чистота»).

##### ИСПЫТАНИЯ

pH. От 8,0 до 12,0 (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

РАДИОНУКЛИДНАЯ ЧИСТОТА

Йод-131. Не менее 99,9 % от общей активности. Определение проводят методом гамма-спектрометрии (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). Определяются относительные количества присутствующих йода-130, йода-131, йода-133, йода-135 и других радионуклидных примесей.

##### РАДИОХИМИЧЕСКАЯ ЧИСТОТА

Определение проводят одним из приведённых методов.

Метод 1. [131I]Йодид. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Растворяют 5,85 г натрия хлорида в 1000 мл воды, прибавляют 0,65 мл октиламина, доводят значение рН фосфорной кислотой разведённой 10 % до 7,0, прибавляют 50 мл ацетонитрила и перемешивают полученный раствор.

Растворитель. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 г калия йодида, 0,2 г калия йодата и 1,0 г натрия гидрокарбоната, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки.

Испытуемый раствор. Смешивают равные объёмы растворителя и раствора для радиоактивных меток, при необходимости предварительно разведённого натрия гидроксида раствором 0,05 М до подходящей активности.

Раствор калия йодида. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 10 мг калия йодида, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 20 мг калия йодата, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. Смешивают равные объёмы полученного раствора и раствора сравнения.

Примечание

Примесь А: [131I]иодат-ион.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки | 20–30 °С;
Скорость потока | 1,5 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический детектор 220 нм и детектор радиоактивности, соединённые последовательно;
Объём пробы | 20 мкл;
Время хроматографирования | 12 мин.

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор калия йодида и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Йодид-ион – 1 (около 5 мин); йодат-ион – около 0,2–0,3.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками йодат-иона и йодид-иона должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание:

- [131I]йодид: не менее 95,0 % от общей активности.

Метод 2. [131I]Йодид. Определение проводят методом электрофореза (ОФС «Электрофорез»).

Бумага. Бумага для хроматографии.

Буферный раствор. В химическом стакане растворяют 3,30 г калия дигидрофосфата и 15,11 г динатрия гидрофосфата додекагидрата в воде, доводят значение рН до 7,00, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки.

Испытуемый раствор. Раствор для радиоактивных меток без разведения или предварительно разведённый водой до подходящей активности.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 г натрия гидрокарбоната, растворяют в воде, прибавляют 0,1 г калия йодида, 0,2 г калия йодата и доводят объём раствора водой до метки, перемешивают.

На линию старта полоски наносят 10 мкл стандартного раствора и после высушивания пятна на воздухе, в ту же точку, 5–10 мкл испытуемого раствора. После просушивания на воздухе полоску помещают в разделительную камеру прибора для электрофореза, содержащую буферный раствор в электродных секциях, стартовой линией в сторону катода, увлажняют буферным раствором, прибор закрывают, включают источник питания (градиент потенциала 16 В/см). Разделение проводят при охлаждении камеры в течение 50 мин. После проведения электрофореза полоску извлекают из камеры и высушивают в вытяжном шкафу при комнатной температуре. Измеряют распределение активности от всей электрофореграммы с помощью подходящего детектора.

Допустимое содержание:

- [131I]йодид: не менее 95,0 % от общей активности.

Стерильность. Испытуемый раствор должен быть стерильным, если раствор предназначен для применения в производстве или изготовлении парентеральных лекарственных препаратов без последующей стерилизации (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»). Допускается выпуск раствора к применению до завершения испытания.

Бактериальные эндотоксины. Менее 175/V МЕ/мл, где V − максимальная рекомендуемая доза (максимальный рекомендуемый объём) в миллилитрах, если раствор предназначен для применения в производстве или изготовлении парентеральных лекарственных препаратов без последующего удаления бактериальных эндотоксинов (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»). Допускается выпуск раствора к применению до завершения испытания.

##### АКТИВНОСТЬ ИЛИ ОБЪЁМНАЯ АКТИВНОСТЬ

Определение проводят в соответствии с ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

##### МАРКИРОВКА

На этикетке упаковки, помимо данных в соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты», указывают:

- метод получения йода-131;

- наличие и количество вспомогательных веществ, при наличии;

- «Не является лекарственным препаратом. Предназначен для приготовления/изготовления радиофармацевтических лекарственных препаратов».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.3.5.0010 Натрия йодогиппурат (131I), раствор для инъекций

Натрия йодогиппурат (131I), раствор для инъекций
Natrii iodohippuratis (131I) solutio pro injectionibus

Взамен ФС 42-2018-97

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Стерильный раствор (2-[131I]иодбензамидо)ацетата натрия.

Содержит не менее 90,0 % и не более 110,0 % от заявленной активности йода-131, на дату и время, указанные на этикетке.

Может содержать подходящий буферный раствор и подходящий антимикробный консервант, например, бензиловый спирт.

Удельная активность: От 0,74 ГБк до 7,4 ГБк йода-131 на грамм натрия 2-йодогиппурата.

##### СВОЙСТВА

Описание. Прозрачная бесцветная или слегка желтоватая жидкость.

Период полураспада. (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. Гамма-спектрометрия (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). На гамма-спектре испытуемого раствора основной пик гамма-излучения йода-131 должен соответствовать значению энергии 0,365 МэВ.

2. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»). Фактор удерживания основного пика на радиохроматограмме испытуемого раствора должен соответствовать фактору удерживания пика 2-йодгиппуровой кислоты на хроматограмме стандартного раствора (раздел «Радиохимическая чистота. Метод 1. 2-[131I]йодгиппуровая кислота»).

##### ИСПЫТАНИЯ

pH. От 5,5 до 8,5 (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

##### РАДИОНУКЛИДНАЯ ЧИСТОТА

Йод-131. Не менее 99,9 % от общей активности. Определение проводят методом гамма-спектрометрии (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). Определяют относительные количества йода-131, йода-133, йода-135 и других присутствующих примесей радионуклидов.

##### РАДИОХИМИЧЕСКАЯ ЧИСТОТА

Метод 1. 2-[131I]Йодгиппуровая кислота. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля GF254.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—уксусная кислота ледяная—бутанол—толуол 1:4:20:80.

Испытуемый раствор. Растворяют 1,0 г калия йодида в 10 мл воды, прибавляют 1 объёмную часть этого раствора к 10 объёмным частям испытуемого препарата и используют в течение 10 мин после перемешивания. При необходимости смешивают со стандартным раствором для получения радиоактивной концентрации, достаточной для метода детекции, например, 3,7 МБк/мл.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 40 мг 2-йодбензойной кислоты и 40 мг 2-йодгиппуровой кислоты, растворяют в 4 мл натрия гидроксида раствора 0,1 М, прибавляют 10 мг калия йодида и доводят объём раствора водой до метки.

Примечание

Примесь А (йод-133): [133I]иод [14834-67-4].

Примесь В (йод-135): [135I]иод [14834-68-5].

Примесь С (2-[131I]йодбензойная кислота): 2-[131I]иодбензойная кислота.

Примесь D ([131I]йодид): [131I]иодид [14914-30-8]

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого и стандартного растворов. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную в течение 1 ч камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 12 см от линии старта (около 75 мин), её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм и с помощью подходящего детектора определяют распределение радиоактивности.

На хроматограмме стандартного раствора должна наблюдаться зона адсорбции 2-йодгиппуровой кислоты и, ближе к фронту ПФ, зона адсорбции примеси С; зона адсорбции примеси D остаётся ближе к точке нанесения.

Допустимое содержание:

- 2-[131I]йодгиппуровая кислота – не менее 97,0 % от общей активности йода-131;

- примесь С – не более 2,0 % от общей активности йода-131;

- примесь D – не более 2,0 % от общей активности йода-131.

Метод 2. Натрия [131I]йодогиппурат. Определение проводят методом бумажной хроматографии (ОФС «Хроматография на бумаге»).

Полоска бумаги. Бумага для хроматографии.

Предварительная подготовка бумаги. Полоску бумаги погружают во вспомогательный раствор и высушивают на воздухе.

Подвижная фаза (ПФ). В делительную воронку вместимостью 250 мл помещают 50 мл бензола, 50 мл уксусной кислоты и 25 мл воды, встряхивают в течение 5 минут. Через несколько минут фазы разделяют на верхнюю и нижнюю, сливают в разные колбы.

Испытуемый раствор. Препарат без разведения или разведённый водой до подходящей объёмной активности.

Вспомогательный раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 2,6 г натрия тиосульфата и 0,01 г натрия карбоната безводного, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 10,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до метки. Используют свежеприготовленный раствор.

Внутреннюю поверхность камеры по ширине на три четверти выкладывают фильтровальной бумагой. Камеру закрывают крышкой, к днищу которой присоединена лодочка. Смесь нижней фазы и 10,0 мл верхней фазы ПФ заливают в хроматографическую камеру, смочив фильтровальную бумагу указанной смесью. Перед проведением хроматографирования за 1 час в лодочку камеры наливают верхнюю фазу ПФ.

На линию старта двух подготовленных полосок наносят по 5–10 мкл испытуемого раствора. Полоски с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в предварительно насыщенную в течение 12 ч камеру с ПФ, опустив концы в лодочку и хроматографируют около 50 мин. После окончания процесса хроматограммы подсушивают до удаления следов растворителей и измеряют распределение активности от всей электрофореграммы с помощью подходящего детектора.

Допустимое содержание:

- натрия [131I]йодогиппурат: не менее 97,0 % от общей активности
  йода-131.

Стерильность. Испытуемый препарат должен быть стерильным (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»). Допускается выпуск препарата к применению до завершения испытания.

##### АКТИВНОСТЬ ИЛИ ОБЪЁМНАЯ АКТИВНОСТЬ

Определение проводят в соответствии с ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты». В защищённом от света месте.

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.3.5.0011 Натрия пертехнетат (99mTc), раствор для инъекций

Натрия пертехнетат (99mTc), раствор для инъекций
Natrii pertechnetatis (99mTc) solutio pro injectionibus

Вводится впервые

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Стерильный изотонический раствор, содержащий технеций-99м в виде [99mTc]пертехнетат-иона.

Содержит не менее 90,0 % и не более 110,0 % от заявленной активности технеция-99м на дату и время, указанные на этикетке.

Технеций-99м в форме пертехнетат-иона, получают из молибдена-99, экстрагированного из продуктов распада урана.

##### СВОЙСТВА

Описание. Прозрачная бесцветная жидкость.

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. Гамма-спектрометрия (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). На гамма-спектре испытуемого раствора основной пик гамма-излучения должен соответствовать значению энергии 0,141 МэВ.

2. Период полураспада (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

##### ИСПЫТАНИЯ

pH. От 4,0 до 8,0 (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

Метилэтилкетон. Не более 0,5 мг/мл. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотомерия в ультрафиолетовой и видимой областях»).

Испытуемый раствор. В пробирку с притёртой пробкой вместимостью 5 мл помещают 0,5 мл препарата, 2,5 мл натрия хлорида раствора 0,9 %, 0,2 мл натрия гидроксида раствора 30 %, 0,5 мл реактива и перемешивают.

Раствор стандартного образца метилэтилкетона. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 6,2 мл фармакопейного стандартного образца метилэтилкетона, доводят объём раствора натрия хлорида раствором 0,9 % до метки и перемешивают. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, доводят объём раствора натрия хлорида раствором 0,9 % до метки и перемешивают. В пробирку с притёртой пробкой вместимостью 5 мл помещают 0,5 мл полученного раствора, 2,5 мл натрия хлорида раствора 0,9 %, 0,2 мл натрия гидроксида раствора 30 %, 0,5 мл реактива и перемешивают.

Приготовление реактива. В конической колбе вместимостью 100 мл растворяют 0,38 г 4-Аминобензойной кислоты в 25 мл хлористоводородной кислоты разведённой. К 10 мл полученного раствора прибавляют 1,0 мл натрия нитрита раствора 10 % и перемешивают. Реактив используют свежеприготовленным.

Раствор сравнения. В колбу помещают 3,0 мл натрия хлорида раствора 0,9 %, 0,2 мл натрия гидроксида раствора 30 % 0,5 мл реактива и перемешивают.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора и раствора стандартного образца метилэтилкетона на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 525 нм в кювете с толщиной слоя 1 см, относительно раствора сравнения.

Оптическая плотность испытуемого раствора не должна превышать оптическую плотность стандартного раствора метилэтилкетона.

Испытание применяется, если наличие указанных веществ обусловлено технологией синтеза.

Алюминий. Не более 5,0 мкг/мл (0,0005 %).

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 2,0 мл препарата и доводят объём раствора водой до метки.

Стандартный раствор. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 2,0 мл алюминия стандартного раствора 2 мкг/мл и доводят объём раствора водой до метки.

В одну из двух пробирок с внутренним диаметром около 12 мм помещают 1 мл ацетатного буферного раствора рН 4,6 и 2 мл испытуемого раствора, в другую пробирку помещают 1 мл ацетатного буферного раствора pH 4,6 и 2 мл стандартного раствора, прибавляют в обе пробирки по 0,05 мл раствора хромазурола 1 %.

Через 3 мин окраска испытуемого раствора не должна быть интенсивней окраски стандартного раствора.

Испытание применяется, если наличие указанных веществ обусловлено технологией синтеза. Допускается выпуск лекарственного препарата к применению до завершения испытания.

##### РАДИОНУКЛИДНАЯ ЧИСТОТА

1. Предварительное испытание

- Гамма-спектрометрия. (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»).

- Испытуемый раствор. Объём препарата с активностью технеция-99м 37 МБк.

- Раствор примеси А. Объём раствора примеси А, полученный из продуктов деления урана с активностью 37 МБк.

- Снимают гамма-спектр испытуемого раствора и стандартного раствора используя сцинтилляционный детектор на основе кристалла натрия йодида, помещая свинцовую пластину толщиной 5–6 мм между испытуемыми образцами и детектором, или другого подходящего детектора со свинцовой защитой.

- На гамма-спектре испытуемого раствора площадь пика, соответствующая квантам с энергией 0,740 МэВ, не превышает площадь основного пика на гамма-спектре раствора примеси А (менее 0,1 %).

2. Количественная оценка

- Испытуемый раствор. Испытуемый раствор из предварительного испытания оставляют на время достаточное для распада технеция-99м до уровня, позволяющего определение радионуклидных примесей.

- Раствор сравнения. Стандартный раствор примеси А.

- Снимают гамма-спектр испытуемого раствора. Все измерения проводят с учётом даты и времени применения.

- Допустимое содержание примесей

- Примесь А. Не более 0,1 % от общей активности.

- Другие примеси с гамма-излучением. Не более 0,01 % от общей активности.

- Примечание

- Примесь А (молибден-99): [99Mo]молибден [14119-15-4].

##### РАДИОХИМИЧЕСКАЯ ЧИСТОТА

Определение проводится одним из следующих методов.

Метод 1. [99mTc]Пертехнетат-ион. Определение проводят методом хроматографии на бумаге (ОФС «Хроматография на бумаге»).

Бумага. Бумага для хроматографии.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—метанол 20:80.

Испытуемый раствор. Препарат разводят водой до подходящей активности.

На линию старта полоски наносят 5 мкл испытуемого раствора. Полоску с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ, хроматографируют нисходящим способом в течение 2 ч, вынимают из камеры и сушат на воздухе до удаления следов растворителей. Используют подходящий детектор для определения распределения активности.

Фактор удерживания (Rf). [99mTc]пертехнетат-иона − около 0,6.

Допустимое содержание:

- [99mTc]пертехнетат-ион: не менее 95,0 % общей активности, технеция-99м.

Метод 2. [99mTc]Пертехнетат-ион. Определение проводят методом электрофореза (ОФС «Электрофорез»).

Бумага. Бумага для хроматографии.

Буферный раствор. В химическом стакане растворяют 3,30 г калия дигидрофосфата и 15,11 г динатрия гидрофосфата додекагидрата в воде, доводят значение рН до 7,00, количественно переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объём раствора водой до метки

Испытуемый раствор. Препарат без разведения или разведённый водой до подходящей активности.

На линию старта полоски наносят по 5–10 мкл испытуемого раствора. После просушивания на воздухе полоску помещают в разделительную камеру прибора для электрофореза, содержащую буферный раствор в электродных секциях, стартовой линией в сторону катода, увлажняют буферным раствором, прибор закрывают, включают источник питания (градиент потенциала 16 В/см). Разделение проводят при охлаждении камеры в течение 50 мин. После проведения электрофореза полоску извлекают из камеры, высушивают в вытяжном шкафу при комнатной температуре. Измеряют распределение активности от всей электрофореграммы с помощью подходящего детектора.

Допустимое содержание:

- [99mTc]пертехнетат-ион: не менее 95,0 % общей активности, технеция-99м.

Стерильность. Препарат должен быть стерильным (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»). Допускается выпуск препарата к применению до завершения испытания.

##### АКТИВНОСТЬ ИЛИ ОБЪЁМНАЯ АКТИВНОСТЬ

Определение проводят в соответствии с ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.3.5.0012 Стронция (89Sr) хлорид, раствор для инъекций

Стронция (89Sr) хлорид, раствор для инъекций
Strontii (89Sr) chloridi solutio pro injectionibus

Взамен ВФС 42-3307-99

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Стерильный раствор дихлорида [89Sr]стронция.

Содержит не менее 90,0 % и не более 110,0 % от заявленной активности стронция-89, на дату и время, указанные на этикетке.

Удельная активность: не менее 1,8 МБк стронция-89 на миллиграмм стронция.

Стронций: от 6,0 мг/мл до 12,5 мг/мл.

##### СВОЙСТВА

Описание. Прозрачная бесцветная жидкость.

Период полураспада (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. Гамма-спектрометрия (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). На гамма-спектре испытуемого раствора основной пик гамма-излучения должен соответствовать 0,909 МэВ и обусловлен короткоживущим дочерним радионуклидом иттрием-89м (образующимся при 0,01 % распадов), находящимся в равновесии со стронцием-89.

2. Качественная реакция. К 0,1 мл испытуемого препарата прибавляют 1,0 мл свежеприготовленного натрия родизоната раствора 0,1 %, перемешивают, через 1 мин должен образоваться красновато-коричневый осадок.

3. Качественная реакция. К 0,1 мл серебра нитрата раствора 0,1 М прибавляют 50 мкл испытуемого препарата, должен образоваться белый осадок.

##### ИСПЫТАНИЯ

pH. От 4,0 до 7,5 (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

Примечание – Испытания на алюминий, железо и свинец могут быть проведены одновременно с испытанием на стронций, в ином случае стандартные растворы готовят с такими же содержанием стронция, что и в испытуемом растворе.

Алюминий. Не более 2 мкг/мл. Определение проводят методом АЭС (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия»).

Испытуемый раствор. Разбавляют 0,2 мл испытуемого препарата азотной кислотой разведённой 12,5 % до подходящего объёма.

Cтандартный раствор. Разводят алюминия стандартный раствор 10 мкг/мл азотной кислотой разведённой 12,5 %.

Железо. Не более 5 мкг/мл. Определение проводят методом АЭС (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия»).

Испытуемый раствор. Разбавляют 0,2 мл испытуемого препарата азотной кислотой разведённой 12,5 % до подходящего объёма.

Стандартный раствор. Разводят железа стандартный раствор 20 мкг/мл азотной кислотой разведённой 12,5 %.

Свинец. Не более 5 мкг/мл. Определение проводят методом АЭС (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия»).

Испытуемый раствор. Разбавляют 0,2 мл препарата азотной кислотой разведённой 12,5 % до подходящего объёма.

Cтандартный раствор. Разводят свинца стандартный раствор 10 мкг/мл азотной кислотой разведённой 12,5 %.

Стронций. От 6,0 мг/мл до 12,5 мг/мл. Определение проводят методом АЭС (ОФС «Атомно-эмиссионная спектрометрия»).

Испытуемый раствор. Разбавляют 0,2 мл препарата азотной кислотой разведённой 12,5 % до подходящего объёма.

Cтандартный раствор. Разводят стронция стандартный раствор 10 мг/мл азотной кислотой разведённой 12,5 %.

##### РАДИОНУКЛИДНАЯ ЧИСТОТА

Общее содержание гамма-излучающих примесей, отличных от стронция-89 не более 0,6%.

Гамма-излучающие примеси, отличные от иттрия-89м. Не более 0,4 % от общей активности. Определение проводят методом гамма- и рентгеновской спектрометрии (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»).

Бета-излучающие примеси. Определение проводят методом бета-спектрометрии. (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»).

Испытуемый раствор. Препарат.

Выпаривают досуха 100 мкл испытуемого раствора в терморадиационной сушилке. Растворяют полученный остаток в 2 мл бромистоводородной кислоты концентрированной, выпаривают досуха и растворяют остаток в 2 мл бромистоводородной кислоты разведённой 0,79 %.

Помещают полученный раствор в колонку диаметром 5–6 мм, заполненную примерно 2 мл катионообменной смолы (100–250 мкм), предварительно промытой бромистоводородной кислотой
разведённой 0,79 % и промывают колонку тем же растворителем
до сбора 10 мл элюата в контейнер, содержащий 50 мкл натрия сульфата безводного 15 г/л в хлористоводородной кислоты растворе 1 М. В сцинтилляционный флакон вносят нужный объём жидкого сцинтилляционного коктейля, 1,0 мл воды, 0,1 мл натрия сульфата безводного 15 г/л в хлористоводородной кислоты растворе 1 М и 100 мкл элюата. Встряхивают до образования прозрачного раствора. Измеряют распределение активности, используя подходящий сцинтилляционный детектор. Принимая во внимание восстановительную эффективность при разделении, эффективность подсчёта и радиоактивный распад, определяют радиоактивную концентрацию примесей A и B в образце и, следовательно, сумму бета-излучающих примесей в процентах в испытуемом препарате.

Допустимое содержание примесей:

- примеси А и В: не более 0,2 % от общей активности.

Примечание

Примесь А (сера-35): [35S]сера [15117-53-0].

Примесь В (фосфор-32): [32P]фосфор [14596-37-3].

Стерильность. Препарат должен быть стерильным (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

##### АКТИВНОСТЬ ИЛИ ОБЪЁМНАЯ АКТИВНОСТЬ

Определение проводят в соответствии с ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.3.5.0013 Флудезоксиглюкоза (18F), раствор для инъекций

Флудезоксиглюкоза (18F), раствор для инъекций
Fludeoxyglucosi (18F) solutio pro injectionibus

Вводится впервые

C6H1118FO5 | М.м. 181,15

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Стерильный раствор, содержащий 2-дезокси-2-[18F]фтор-D-глюкопиранозу (2-дезокси-2-[18F]фтор-D-глюкозу).

Содержит не менее 90,0 % и не более 110,0 % от заявленной активности фтора-18 на дату и время, указанные на этикетке.

##### СВОЙСТВА

Описание. Прозрачная бесцветная жидкость.

Период полураспада (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. Гамма-спектрометрия (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). На гамма-спектре испытуемого раствора основной пик гамма-излучения фтора-18 должен соответствовать значению энергии 0,511 МэВ. При достаточной эффективности детектора может наблюдаться суммарный пик с энергией 1,022 МэВ.

2. Период полураспада. От 105 до 115 мин (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»). Определяют период полураспада тремя измерениями активности в одной геометрии образца с подходящим временным интервалом.

3. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на радиохроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика 2-фтор-2-дезокси-D-глюкозы на хроматограмме раствора сравнения (раздел «Радиохимическая чистота», метод 1).

##### ИСПЫТАНИЯ

pH. От 4,5 до 8,5 (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

Примесь А. Не более 0,5 мг/V, где V − максимальная рекомендуемая доза (максимальный рекомендуемый объём). Испытание применяется, если наличие указанных веществ обусловлено технологией синтеза. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография») одновременно с испытанием раздел «Радиохимическая чистота» метод 1, со следующими изменениями.

Испытуемый раствор. Препарат.

Раствор сравнения. Готовят раствор примеси А (2-дезокси-2-хлор-D-глюкопираноза [25581-35-5]) с концентрацией 0,5 мг/V.

Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений: [18F]флудезоксиглюкоза – 1 (около 12 мин); примесь A – около 1,1.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения:

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси А должно быть не менее 10.

- фактор асимметрии пика (AS) должен быть не более 1,8;

- разрешение (RS) между пиками должно быть не менее 1,5.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора, полученной с помощью детектора, подходящего для обнаружения углеводов, площадь пика примеси А не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения, полученной с помощью того же детектора.

Примесь B. Не более 2,2 мг/V, где V − максимальная рекомендуемая доза (максимальный рекомендуемый объём). Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»). Испытание применяется, если наличие указанных веществ обусловлено технологией синтеза.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля для испытания на аминополиэфиры.

Испытуемый раствор. Препарат.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 11,0 мг примеси В (аминополиэфир, 4,7,13,16,21,24-гексаокса-1,10-диазабицикло[8.8.8]гексакозан [23978-09-8]), растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до V максимальной рекомендуемой дозы в мл.

Реактив для детектирования: йодплатинат реактив.

На пластинку наносят по 2,5 мкл испытуемого раствора и раствора сравнения. Пластинку с нанесенными пробами через 1 мин опрыскивают реактивом для детектирования, сушат на воздухе и просматривают в видимом свете. Пятна сравнивают визуально. Для проявления пятен допускается использовать камеру, насыщенную парами йода, в данном случае пластинку помещают в неё на не менее чем 10 мин.

Интенсивность окраски центральной части зоны адсорбции испытуемого раствора не должна превышать интенсивность окраски центральной части зоны адсорбции раствора сравнения.

Примесь С. Не более 2,6 мг/V, где V − максимальная рекомендуемая доза (максимальный рекомендуемый объём). Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Испытание применяется, если наличие указанных веществ обусловлено технологией синтеза.

Подвижная фаза (ПФ). В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 0,238 г толуолсульфоновой кислоты, растворяют в 250 мл воды и доводят объём раствора ацетонитрилом до метки.

Испытуемый раствор. Препарат.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают

0,40 г примеси С (тетрабутиламмоний, N,N,N-трибутилбутан-1-аминий [10549-76-5]), растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В мерную колбу вместимостью 5 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до V максимальной рекомендуемой дозы в мл.

Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 80 мг примеси С, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. Смешивают 1,0 мл полученного раствора и 24,0 мл воды.

Хроматографические условия

Колонка | 100 × 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный для хроматографии, 3 мкм;
Температура колонки | 25 °С;
Скорость потока | 0,6 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 254 нм;
Объём пробы | 20 мкл;
Время хроматографирования | 2-кратное от времени удерживания пика примеси С.

Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Примесь С – около 3,3 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:

- фактор асимметрии пика (AS) примеси С должен быть не более 1,8;

- отношение сигнал/шум (S/N) для пика примеси С должно быть не менее 10.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора площадь пика примеси С не должна превышать площадь пика примеси С на хроматограмме раствора сравнения.

Примесь D. Не более 0,02 мг/V, где V − максимальная рекомендуемая доза (максимальный рекомендуемый объём). Определение проводят методом спектрофотомерии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»). Испытание применяется, если наличие указанных веществ обусловлено технологией синтеза.

Испытуемый раствор. Препарат.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг примеси D (4-(4-метилпиперидин-1-ил)пиридин [80965-30-6]), растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. В пробирку помещают 0,1 мл полученного раствора и доводят объём раствора водой до V максимальной рекомендуемой дозы в мл.

Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора и раствора сравнения на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 263 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.

Оптическая плотность испытуемого раствора не должна превышать оптическую плотность раствора сравнения.

##### РАДИОНУКЛИДНАЯ ЧИСТОТА

Фтор-18. Не менее 99,9 % от общей активности.

1. Гамма-спектрометрия. Суммарная площадь пиков на гамма-спектре, несоответствующих квантам с энергией 0,511 МэВ или 1,022 МэВ, не должна превышать 0,1 % от общей активности (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»).

2. Гамма-спектрометрия. Радионуклидные примеси не должны превышать 0,1 % от общей активности. (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). Определяют радионуклидные примеси с периодом полураспада более 2 часов. Для этого препарат оставляют минимум на 24 часа, после чего записывают гамма-спектр. Допускается выпуск препарата к применению до завершения испытания.

##### РАДИОХИМИЧЕСКАЯ ЧИСТОТА

Определение проводят одним из приведённых методов.

Метод 1. ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Натрия гидроксида раствор 0,1 М.

Подвижную фазу защищают от воздуха.

Испытуемый раствор. Препарат.

Раствор сравнения. Готовят раствор 2-фтор-2-дезокси-D-глюкозы с концентрацией 0,5 мг/V.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,0 мм, анионообменная смола сильноосновная для хроматографии, 10 мкм;
Скорость потока | 1,0 мл/мин;
Температура колонки | 15–25 °С;
Детектор | подходящий для обнаружения углеводов в заданном диапазоне концентраций (например, амперометрический детектор и детектор радиоактивности, соединённые последовательно);
Объём пробы | 20 мкл.

Хроматографируют раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений: [18F]флудезоксиглюкоза – около 12 мин.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения: отношение сигнал/шум (S/N) для пика 2-фтор-2-дезокси-D-глюкозы должно быть не менее 10.

Время удерживания [18F]флудезоксиглюкозы на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания примеси 2-фтор-2-дезокси-D-глюкозы на хроматограмме раствора сравнения, с учётом объёма внутренних коммуникаций системы при сравнении времён удерживания, полученных с разных детекторов.

Допустимое содержание

На хроматограмме испытуемого раствора активность [18F]флудезоксиглюкозы должна быть не менее 95,0 % от общей активности.

Метод 2. ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Вода—ацетонитрил 5:95.

Испытуемый раствор. Препарат.

Раствор сравнения. Растворяют 30 мг 1,2,3,4-тетра-O-ацетил-β-D-глюкопиранозы при осторожном нагревании и 20 мг глюкозы безводной в 1,0 мл воды.

На линию старта пластинки наносят по 5 мкл испытуемого раствора и раствора сравнения. Пластинку с нанесёнными пробами высушивают на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Определяют распределение активности с помощью подходящего детектора.

Пригодность хроматографической системы. На радиохроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться две чёткие разделенные зоны адсорбции в следующей последовательности по возрастанию Rf: [18F]фторид − фактор удерживания около 0; [18F]флудезоксиглюкоза и
2-дезокси-2-[18F]фтор-D-манноза − фактор удержания около 0,45. Также могут наблюдаться частично или полностью ацетилированные производные [18F]флудезоксиглюкозы и 2-дезокси-2-[18F]фтор-D-маннозы − около
0,80–0,95.

Факторы удерживания указанных веществ должны быть подтверждены во время валидации.

Допустимое содержание

На хроматограмме испытуемого раствора:

- фтор-18 в форме [18F]флудезоксиглюкозы и 2-дезокси-2-[18F]фтор-D-маннозы: 95,0 % от общей активности фтора-18.

- суммарная активность фтора-18 в форме частично или полностью ацетилированных производных [18F]флудезоксиглюкозы и 2-дезокси-2-[18F]фтор-D-маннозы не должна превышать 5,0 % от общей активности
  фтора-18.

Примечание

Примесь Е: [18F]фторид [67862-54-8].

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

Стерильность. Препарат должен быть стерильным (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»). Допускается выпуск препарата к применению до завершения испытания.

Бактериальные эндотоксины. Менее 175/V МЕ/мл, где V − максимальная рекомендуемая доза (максимальный рекомендуемый объём) в миллилитрах (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»). Допускается выпуск препарата к применению до завершения испытания.

##### АКТИВНОСТЬ ИЛИ ОБЪЁМНАЯ АКТИВНОСТЬ.

В соответствии с ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

_____________________________________________________________________________________________ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

#### ФС.3.5.0014 Фторэтил-L-тирозин (18F), раствор для инъекций

Фторэтил-L-тирозин (18F), раствор для инъекций
Fluoroethy-L-tyrosini (18F) solutio pro injectionibus

Вводится впервые

C11H1418FNO3 [178433-03-9] | М.м. 226,23

##### ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Стерильный раствор, содержащий (2S)-2-амино-3-[4-(2-[18F]фторэтокси)фенил]пропановую кислоту (O-(2-[18F]фторэтил)-L-тирозин, [18F]ФЭТ).

Содержит не менее 90,0 % и не более 110,0 % от заявленной активности фтора-18 на дату и время, указанные на этикетке.

Содержит не более 0,1 мг фторэтил-L-тирозина на максимальную рекомендуемую дозу в мл.

Может содержать подходящий буферный раствор.

##### СВОЙСТВА

Описание. Прозрачная бесцветная или слегка желтоватая жидкость.

Период полураспада (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

##### ИДЕНТИФИКАЦИЯ

1. Гамма-спектрометрия. (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»). На гамма-спектре испытуемого раствора основной пик гамма-излучения фтора-18 должен соответствовать значению энергии 0,511 МэВ, также может наблюдаться суммарный пик с энергией 1,022 МэВ.

2. Период полураспада. От 105 до 115 мин (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

3. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на радиохроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика фторэтил-L-тирозина на хроматограмме раствора фторэтил-L-тирозина гидрохлорида (раздел «Радиохимическая чистота»).

##### ИСПЫТАНИЯ

pH. От 4,5 до 8,5 (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»).

Примесь А. Не более 2,2 мг/V, где V − максимальная рекомендуемая доза (максимальный рекомендуемый объём) в миллилитрах.

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля для теста на аминополиэфир.

Йодплатината реактив. Смешивают 2,5 мл хлорплатиновой кислоты

5 % раствора, 22,5 мл калия йодида раствора 10 % и 50,0 мл воды. Раствор хранят в защищённом от света месте при температуре 2–8 °С.

Предварительная подготовка пластинки. Пластинку погружают в йодплатината реактив на 5–10 с и высушивают при комнатной температуре в течение 12 ч в защищённом от света месте.

Испытуемый раствор. Смешивают 100 мкл препарата и 400 мкл воды.

Раствор примеси А. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 11,0 мг примеси А (аминополиэфир, 4,7,13,16,21,24-гексаокса-1,10-диазабицикло[8.8.8]гексакозан [23978-09-8]), растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки. Разбавляют 1,0 мл полученного раствора водой до объёма V, соответствующего максимально рекомендуемой дозе в мл.

Раствор сравнения. Вода.

На пластинку наносят по 2,5 мкл испытуемого раствора, раствора примеси А, раствора сравнения и в одну точку – 2,5 мкл испытуемого раствора и 2,5 мкл раствора примеси А. Визуально сравнивают зоны адсорбции через 1 мин после нанесения.

Пригодность системы:

- зона адсорбции, образовавшаяся после нанесения растворов в одну точку, должна соответствовать по внешнему виду зоне адсорбции раствора примеси А, которая характеризуется наличием и числом концентрических кругов. Внутренний тёмный слой (интенсивность его окраски пропорциональна концентрации примеси А) может быть окружён синевато-чёрным кольцом, над которым расположено более светлое кольцо, окружённое периферическим тёмным кольцом;

- зона адсорбции раствора сравнения имеет более размытое, по сравнению с предыдущим описанием, внутреннее кольцо коричневато-розового цвета без чёткой границы между ним и окружающей его более светлой зоной;

- зона адсорбции раствора примеси А чётко отличается от зоны адсорбции раствора сравнения.

Допустимое содержание примесей. Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме раствора примеси А.

Примесь В. Не более 2,6 мг/V, где V − максимальная рекомендуемая доза (максимальный рекомендуемый объём) в миллилитрах. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля.

Подвижная фаза (ПФ). Аммиака раствор концентрированный 25 %—метанол 100:900.

Растворитель. Этанол—вода 100:900.

Испытуемый раствор. Препарат.

Раствор примеси В. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,86 г примеси В (тетрабутиламмоний, N,N,N-трибутилбутан-1-аминий [10549-76-5]), растворяют в растворителе и доводят объём раствора растворителем до метки. Разбавляют 1,0 мл полученного раствора растворителем до объёма V, соответствующего максимально рекомендуемой дозе в мл.

На линию старта пластинки наносят по 2 мкл испытуемого раствора и раствора примеси В. Пластинку с нанесёнными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, сушат при температуре 50 °С не более 30 с, помещают в камеру, насыщенную парами йода, на 1 мин и просматривают в видимом свете.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора примеси В должна обнаруживаться чёткая зона адсорбции.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора зона адсорбции, находящаяся на уровне зоны адсорбции примеси В, по совокупности величины и интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции примеси В на хроматограмме раствора тетрабутиламмония гидроксида.

Фторэтил-L-тирозин и родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза А (ПФА). Вода, защищённая от воздействия атмосферы на протяжении хроматографирования.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил для хроматографии.

Испытуемый раствор. Препарат.

Раствор фторэтил-L-тирозина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 11,6 мг фторэтил-L-тирозина гидрохлорида, растворяют в воде и доводят объём раствора водой до метки.

Раствор сравнения. Разбавляют 1,0 мл раствора фторэтил-L-тирозина гидрохлорида водой до объёма V, соответствующего максимально рекомендуемой дозе в мл.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 5 мг 3,4-диметокси-L-фенилаланина, растворяют в воде и доводят объём раствора тем же растворителем до метки. К 1,0 мл полученного раствора прибавляют 1,0 мл раствора фторэтил-L-тирозина гидрохлорида.

Хроматографические условия

Колонка | 250 × 4,6 мм, кремнийорганический полимер, аморфный, октадецилсилильный с полярными мостиками, эндкепированный, 5 мкм;
Температура колонки | 25 °С;
Скорость потока | 1,0 мл/мин;
Детектор | спектрофотометрический, 225 нм, соединённый с детектором для определения радиоактивности;
Объём пробы | 20 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин | ПФА,% | ПФБ,%
--- | --- | ---
0–10 | 90 | 10
10–20 | 90 → 5 | 10 → 95
20–30 | 5 | 95
30–40 | 5 → 90 | 95 → 10

Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Относительное время удерживания соединений. Фторэтил-L-тирозин – 1 (около 6 мин); 3,4-диметокси-L-фенилаланин – около 0,8.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками 3,4-диметокси-L-фенилаланина и фторэтил-L-тирозина должно быть не менее 2,0.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора, полученной с использованием спектрофотометрического детектора:

- площадь пика фторэтил-L-тирозина не должна превышать площадь пика фторэтил-L-тирозина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 мг/V);

- площадь пика любой примеси не должна превышать площадь пика фторэтил-L-тирозина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,1 мг/V);

- сумма площадей пиков фторэтил-L-тирозина и всех примесей не должна превышать пятикратную площадь пика фторэтил-L-тирозина на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5 мг/V).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,3 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,03 мг/V).

Спирт этиловый. Не более 10,0 % о/о и не более 2,5 г в расчёте на одно введение с учётом плотности 0,790 г/мл (ОФС «Определение спирта этилового в лекарственных средствах»).

##### РАДИОНУКЛИДНАЯ ЧИСТОТА

Фтор-18. Не менее 99,9 % от общей активности. Определение проводят методом гамма-спектрометрии (ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности»).

1. Сумма площадей пиков на гамма-спектре, не соответствующих квантам с энергией 0,511 МэВ или 1,022 МэВ, не должна превышать 0,1 % от общей активности.

2. Радионуклидные примеси не должны превышать 0,1 % от общей активности. Допускается выпуск препарата к применению до завершения испытания. Определяют фтор-18 и радионуклидные примеси с периодом полураспада более 2 ч. Для этого препарат оставляют минимум на 24 ч, после чего записывают гамма-спектр.

##### РАДИОХИМИЧЕСКАЯ ЧИСТОТА

[18F]Фторэтил-L-тирозин. Определение проводят методом ВЭЖХ в условиях испытания «Фторэтил-L-тирозин и родственные примеси». При необходимости испытуемый раствор разбавляют водой до концентрации, пригодной для работы детектора радиоактивности. Исследуют хроматограмму, полученную с использованием детектора по радиоактивности, и выделяют пик [18F]фторэтил-L-тирозина путём сравнения с хроматограммой раствора сравнения, полученной с использованием спектрофотометрического детектора.

Допустимое содержание:

- [18F]фторэтил-L-тирозин – не менее 95,0% от общей активности обусловленной фтором-18;

Примеси С и D. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля октадецилсилильного для хиральных разделений.

Подвижная фаза (ПФ). Метанол—метиленхлорид 10:90.

Испытуемый раствор. Препарат.

Раствор фторэтил-L-тирозина гидрохлорида. Растворяют 1 мг фторэтил-L-тирозина гидрохлорида в 2,0 мл метанола.

Раствор фторэтил-D-тирозина гидрохлорида. Растворяют 1 мг фторэтил-D-тирозина гидрохлорида (нерадиоактивный аналог примеси С) в 2,0 мл метанола.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. Смешивают 1,0 мл раствора фторэтил-L-тирозина гидрохлорида и 1,0 мл раствора фторэтил-D-тирозина гидрохлорида.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 1 мл помещают 20 мкл испытуемого раствора и доводят объём раствора метанолом до метки.

Реактив для детектирования. Нингидрина раствор 0,2 % в спирте 96 %.

Примечание

Примесь С ([18F]фторэтил-D-тирозин): (2R)-2-амино-3-[4-(2-[18F]фторэтокси)фенил]пропановая кислота [223463-88-5].

Примесь D: [18F]фторид [67862-54-8].

На линию старта пластинки наносят по 2 мкл испытуемого раствора, раствора фторэтил-L-тирозина гидрохлорида (1 мкг), раствора фторэтил-D-тирозина гидрохлорида (1 мкг) и раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы. Пластинку с нанесёнными пробами сушат в потоке воздуха, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдёт около 80–90 % длины пластинки от линии старта, её вынимают из камеры, опрыскивают реактивом для детектирования, выдерживают при температуре 60 °С в течение 10 мин и определяют распределение активности с использованием подходящего детектора.

На хроматограмму испытуемого раствора наносят 2 мкл раствора сравнения в место, соответствующее фактору удерживания фторэтил-D-тирозина, определённому по хроматограмме раствора фторэтил-D-тирозина гидрохлорида, и определяют распределение активности с использованием подходящего детектора.

Факторы удерживания (Rf). Примесь D – около 0; примесь С – около 0,2; [18F]фторэтил-L-тирозин – около 0,5.

Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы должны обнаруживаться 2 разделённые зоны адсорбции.

На радиохроматограмме испытуемого раствора после второго нанесения должны обнаруживаться 2 разделённые зоны адсорбции со значениями Rf, соответствующими примеси С и [18F]фторэтил-L-тирозина.

Допустимое содержание примесей определяют по радиохроматограмме испытуемого раствора после первого нанесения:

- [18F]фторэтил-L-тирозин – не менее 95,0 % от общей активности обусловленной фтором-18;

- сумма примесей C и D – не более 5,0 % от общей активности обусловленной фтором-18.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители». Допускается выпуск препарата к применению до завершения испытания.

Стерильность. Препарат должен быть стерильным (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»). Допускается выпуск препарата к применению до завершения испытания.

Бактериальные эндотоксины. Менее 175/V МЕ/мл, где V − максимальная рекомендуемая доза (максимальный рекомендуемый объём) в миллилитрах (ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты»). Допускается выпуск препарата к применению до завершения испытания.

##### АКТИВНОСТЬ ИЛИ ОБЪЁМНАЯ АКТИВНОСТЬ

Определение проводят в соответствии с ОФС «Обнаружение и измерение радиоактивности».

##### ХРАНЕНИЕ

В соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты».

##### МАРКИРОВКА

На этикетке вторичной упаковки, помимо данных в соответствии с ОФС «Радиофармацевтические лекарственные препараты», указывают наименование каждого вспомогательного вещества и процентное содержание спирта этилового в препарате.

1. размеры приведены в мм, допустимые отклонения, при отсутствии указаний, по ISO 2768-mk
1. В 1995 г. 20-я Генеральная Конференция по мерам и весам (Резолюция 8) постановила исключить класс дополнительных единиц в СИ, а входившие в него радиан и стерадиан рассматривать как безразмерные производные единицы, наименования и обозначения которых могут быть использованы при необходимости в выражениях для других производных единиц СИ. Определения единиц СИ, основанные на наборе из семи определяющих констант, приняты в 2018 г. 26-й Генеральной Конференцией по мерам и весам (Резолюция 1) и вступили в силу с 20 мая 2019 г.
2. Используют полистирольную плёнку (например, толщиной 76 мкм), гранулы или стержень.
3. Не применимо в связи с выходом за пределы диапазона детектора.
4. Фармакопейный стандартный образец парацетамола для квалификации оборудования, представляющий собой моноклинальную форму I.
5. Циклогексан Р.
6. размеры приведены в мм, если нет других указаний
8. см. рис. 6
9. включая уплотнительное кольцо
10. относительно центра ступени